PL226910B1 - Nowy szczep bakterii zrodzaju Enterobacter - Google Patents
Nowy szczep bakterii zrodzaju EnterobacterInfo
- Publication number
- PL226910B1 PL226910B1 PL406515A PL40651513A PL226910B1 PL 226910 B1 PL226910 B1 PL 226910B1 PL 406515 A PL406515 A PL 406515A PL 40651513 A PL40651513 A PL 40651513A PL 226910 B1 PL226910 B1 PL 226910B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- succinic acid
- bacterial strain
- enterobacter
- production
- strain
- Prior art date
Links
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 title claims description 10
- 241000588914 Enterobacter Species 0.000 title description 2
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N succinic acid Chemical compound OC(=O)CCC(O)=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 41
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 36
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 20
- 239000001384 succinic acid Substances 0.000 claims description 19
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 8
- 241000147019 Enterobacter sp. Species 0.000 claims description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 claims description 8
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 239000008103 glucose Substances 0.000 claims description 7
- OWBTYPJTUOEWEK-UHFFFAOYSA-N butane-2,3-diol Chemical compound CC(O)C(C)O OWBTYPJTUOEWEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 6
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims description 6
- 244000005700 microbiome Species 0.000 claims description 5
- 235000013305 food Nutrition 0.000 claims description 2
- 235000011044 succinic acid Nutrition 0.000 description 17
- 229960005137 succinic acid Drugs 0.000 description 17
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 11
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 9
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 7
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 6
- TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L Magnesium chloride Chemical compound [Mg+2].[Cl-].[Cl-] TWRXJAOTZQYOKJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 6
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 6
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 5
- YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N (+)-Biotin Chemical compound N1C(=O)N[C@@H]2[C@H](CCCCC(=O)O)SC[C@@H]21 YBJHBAHKTGYVGT-ZKWXMUAHSA-N 0.000 description 4
- AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N Riboflavin Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-SCRDCRAPSA-N 0.000 description 4
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 4
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 4
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L disodium hydrogen phosphate Chemical compound [Na+].[Na+].OP([O-])([O-])=O BNIILDVGGAEEIG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 229910000397 disodium phosphate Inorganic materials 0.000 description 4
- 235000019800 disodium phosphate Nutrition 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L Calcium chloride Chemical compound [Cl-].[Cl-].[Ca+2] UXVMQQNJUSDDNG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 3
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 3
- KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N butanedioic acid Chemical compound O[14C](=O)CC[14C](O)=O KDYFGRWQOYBRFD-NUQCWPJISA-N 0.000 description 3
- 239000001110 calcium chloride Substances 0.000 description 3
- 235000011148 calcium chloride Nutrition 0.000 description 3
- 229910001628 calcium chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 3
- 239000001095 magnesium carbonate Substances 0.000 description 3
- 235000014380 magnesium carbonate Nutrition 0.000 description 3
- ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L magnesium carbonate Chemical compound [Mg+2].[O-]C([O-])=O ZLNQQNXFFQJAID-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 3
- 229910000021 magnesium carbonate Inorganic materials 0.000 description 3
- 229910001629 magnesium chloride Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 3
- 210000004767 rumen Anatomy 0.000 description 3
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 3
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 2
- PKAUICCNAWQPAU-UHFFFAOYSA-N 2-(4-chloro-2-methylphenoxy)acetic acid;n-methylmethanamine Chemical compound CNC.CC1=CC(Cl)=CC=C1OCC(O)=O PKAUICCNAWQPAU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-M 4-aminobenzoate Chemical compound NC1=CC=C(C([O-])=O)C=C1 ALYNCZNDIQEVRV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 241000948980 Actinobacillus succinogenes Species 0.000 description 2
- 241000195096 Basfia succiniciproducens Species 0.000 description 2
- 239000002028 Biomass Substances 0.000 description 2
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000186226 Corynebacterium glutamicum Species 0.000 description 2
- AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N D-Lyxoflavin Natural products OCC(O)C(O)C(O)CN1C=2C=C(C)C(C)=CC=2N=C2C1=NC(=O)NC2=O AUNGANRZJHBGPY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- -1 D-melibiosis Chemical compound 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N Fumaric acid Chemical compound OC(=O)\C=C\C(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-OWOJBTEDSA-N 0.000 description 2
- PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N Niacin Chemical compound OC(=O)C1=CC=CN=C1 PVNIIMVLHYAWGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000235015 Yarrowia lipolytica Species 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N aldehydo-D-ribose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011138 biotechnological process Methods 0.000 description 2
- 229960002685 biotin Drugs 0.000 description 2
- 235000020958 biotin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011616 biotin Substances 0.000 description 2
- 235000010633 broth Nutrition 0.000 description 2
- 239000006227 byproduct Substances 0.000 description 2
- FAPWYRCQGJNNSJ-UBKPKTQASA-L calcium D-pantothenic acid Chemical compound [Ca+2].OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC([O-])=O.OCC(C)(C)[C@@H](O)C(=O)NCCC([O-])=O FAPWYRCQGJNNSJ-UBKPKTQASA-L 0.000 description 2
- 229960002079 calcium pantothenate Drugs 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 239000010779 crude oil Substances 0.000 description 2
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 2
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 2
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- BJRNKVDFDLYUGJ-RMPHRYRLSA-N hydroquinone O-beta-D-glucopyranoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=C(O)C=C1 BJRNKVDFDLYUGJ-RMPHRYRLSA-N 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-M lipoate Chemical compound [O-]C(=O)CCCCC1CCSS1 AGBQKNBQESQNJD-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 235000019136 lipoic acid Nutrition 0.000 description 2
- HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N meso ribitol Natural products OCC(O)C(O)C(O)CO HEBKCHPVOIAQTA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 description 2
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 2
- 229960003512 nicotinic acid Drugs 0.000 description 2
- 235000001968 nicotinic acid Nutrition 0.000 description 2
- 239000011664 nicotinic acid Substances 0.000 description 2
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 229960002477 riboflavin Drugs 0.000 description 2
- 235000019192 riboflavin Nutrition 0.000 description 2
- 239000002151 riboflavin Substances 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- 229940064235 thiamine 0.5 mg/ml Drugs 0.000 description 2
- 229960002663 thioctic acid Drugs 0.000 description 2
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 2
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 2
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 2
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 2
- 229940033158 vitamin b6 1 mg Drugs 0.000 description 2
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N (S)-malic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- 108020004465 16S ribosomal RNA Proteins 0.000 description 1
- VBUYCZFBVCCYFD-JJYYJPOSSA-N 2-dehydro-D-gluconic acid Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(=O)C(O)=O VBUYCZFBVCCYFD-JJYYJPOSSA-N 0.000 description 1
- PLXMOAALOJOTIY-FPTXNFDTSA-N Aesculin Natural products OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1Oc2cc3C=CC(=O)Oc3cc2O PLXMOAALOJOTIY-FPTXNFDTSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- 108020004513 Bacterial RNA Proteins 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-DCSYEGIMSA-N Beta-Lactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-DCSYEGIMSA-N 0.000 description 1
- 241000283707 Capra Species 0.000 description 1
- WNBCMONIPIJTSB-BGNCJLHMSA-N Cichoriin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1)c1c(O)cc2c(OC(=O)C=C2)c1 WNBCMONIPIJTSB-BGNCJLHMSA-N 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-NGQZWQHPSA-N D-Arabitol Natural products OC[C@H](O)C(O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-NGQZWQHPSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-UHFFFAOYSA-N D-Cellobiose Natural products OCC1OC(OC2C(O)C(O)C(O)OC2CO)C(O)C(O)C1O GUBGYTABKSRVRQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N D-Cellobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-CUHNMECISA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-QWWZWVQMSA-N D-arabinitol Chemical compound OC[C@@H](O)C(O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-QWWZWVQMSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-SVZMEOIVSA-N D-fucopyranose Chemical compound C[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-SOOFDHNKSA-N D-ribopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 1
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 1
- 241001078637 Enterobacter cloacae complex Species 0.000 description 1
- 241000043309 Enterobacter hormaechei Species 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-PQMKYFCFSA-N L-Fucose Natural products C[C@H]1O[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-PQMKYFCFSA-N 0.000 description 1
- SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N L-fucopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-DHVFOXMCSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-OWMBCFKOSA-N L-ribopyranose Chemical compound O[C@H]1COC(O)[C@@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-OWMBCFKOSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N N-acelyl-D-glucosamine Natural products CC(=O)NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O OVRNDRQMDRJTHS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N N-acetyl-beta-D-glucosamine Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O OVRNDRQMDRJTHS-FMDGEEDCSA-N 0.000 description 1
- MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N N-acetylglucosamine Natural products CC(=O)N[C@@H](C=O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO MBLBDJOUHNCFQT-LXGUWJNJSA-N 0.000 description 1
- DKXNBNKWCZZMJT-UHFFFAOYSA-N O4-alpha-D-Mannopyranosyl-D-mannose Natural products O=CC(O)C(O)C(C(O)CO)OC1OC(CO)C(O)C(O)C1O DKXNBNKWCZZMJT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AYRXSINWFIIFAE-UHFFFAOYSA-N O6-alpha-D-Galactopyranosyl-D-galactose Natural products OCC1OC(OCC(O)C(O)C(O)C(O)C=O)C(O)C(O)C1O AYRXSINWFIIFAE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N Salicin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O1)c1c(CO)cccc1 NGFMICBWJRZIBI-JZRPKSSGSA-N 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 1
- 241000029538 [Mannheimia] succiniciproducens Species 0.000 description 1
- 241000239097 [Mannheimia] succiniciproducens MBEL55E Species 0.000 description 1
- ZHTZUIIMAASMHJ-UHFFFAOYSA-N acetic acid;ethanol;2-hydroxypropanoic acid Chemical compound CCO.CC(O)=O.CC(O)C(O)=O ZHTZUIIMAASMHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- IAJILQKETJEXLJ-RSJOWCBRSA-N aldehydo-D-galacturonic acid Chemical compound O=C[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-RSJOWCBRSA-N 0.000 description 1
- PNNNRSAQSRJVSB-BXKVDMCESA-N aldehydo-L-rhamnose Chemical compound C[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-BXKVDMCESA-N 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N alpha-hydroxysuccinic acid Natural products OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N alpha-salicin Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960000271 arbutin Drugs 0.000 description 1
- 230000000721 bacterilogical effect Effects 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 1
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 1
- 239000007621 bhi medium Substances 0.000 description 1
- 238000010876 biochemical test Methods 0.000 description 1
- 239000003225 biodiesel Substances 0.000 description 1
- 238000013452 biotechnological production Methods 0.000 description 1
- GBUMHZFZOCKJHY-UHFFFAOYSA-N butanedioic acid;butane-2,3-diol Chemical compound CC(O)C(C)O.OC(=O)CCC(O)=O GBUMHZFZOCKJHY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000000747 cardiac effect Effects 0.000 description 1
- 230000002490 cerebral effect Effects 0.000 description 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000013375 chromatographic separation Methods 0.000 description 1
- 239000003245 coal Substances 0.000 description 1
- FDJOLVPMNUYSCM-UVKKECPRSA-L cobalt(3+);[(2r,3s,4r,5s)-5-(5,6-dimethylbenzimidazol-1-yl)-4-hydroxy-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] [(2r)-1-[3-[(2r,3r,4z,7s,9z,12s,13s,14z,17s,18s,19r)-2,13,18-tris(2-amino-2-oxoethyl)-7,12,17-tris(3-amino-3-oxopropyl)-3,5,8,8,13,15,18,19-octamethyl-2,7, Chemical compound [Co+3].N#[C-].C1([C@H](CC(N)=O)[C@@]2(C)CCC(=O)NC[C@@H](C)OP([O-])(=O)O[C@H]3[C@H]([C@H](O[C@@H]3CO)N3C4=CC(C)=C(C)C=C4N=C3)O)[N-]\C2=C(C)/C([C@H](C\2(C)C)CCC(N)=O)=N/C/2=C\C([C@H]([C@@]/2(CC(N)=O)C)CCC(N)=O)=N\C\2=C(C)/C2=N[C@]1(C)[C@@](C)(CC(N)=O)[C@@H]2CCC(N)=O FDJOLVPMNUYSCM-UVKKECPRSA-L 0.000 description 1
- 238000002485 combustion reaction Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 150000001991 dicarboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- XHCADAYNFIFUHF-TVKJYDDYSA-N esculin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC(C(=C1)O)=CC2=C1OC(=O)C=C2 XHCADAYNFIFUHF-TVKJYDDYSA-N 0.000 description 1
- 229940093496 esculin Drugs 0.000 description 1
- AWRMZKLXZLNBBK-UHFFFAOYSA-N esculin Natural products OC1OC(COc2cc3C=CC(=O)Oc3cc2O)C(O)C(O)C1O AWRMZKLXZLNBBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 239000005417 food ingredient Substances 0.000 description 1
- 239000012737 fresh medium Substances 0.000 description 1
- 239000001530 fumaric acid Substances 0.000 description 1
- 235000011087 fumaric acid Nutrition 0.000 description 1
- DLRVVLDZNNYCBX-CQUJWQHSSA-N gentiobiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O1 DLRVVLDZNNYCBX-CQUJWQHSSA-N 0.000 description 1
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 1
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 1
- BJHIKXHVCXFQLS-UYFOZJQFSA-N keto-D-fructose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(=O)CO BJHIKXHVCXFQLS-UYFOZJQFSA-N 0.000 description 1
- 238000007562 laser obscuration time method Methods 0.000 description 1
- 239000001630 malic acid Substances 0.000 description 1
- 235000011090 malic acid Nutrition 0.000 description 1
- 229960002160 maltose Drugs 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- 238000012269 metabolic engineering Methods 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 238000000034 method Methods 0.000 description 1
- 238000009629 microbiological culture Methods 0.000 description 1
- 229950006780 n-acetylglucosamine Drugs 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- BJRNKVDFDLYUGJ-UHFFFAOYSA-N p-hydroxyphenyl beta-D-alloside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1=CC=C(O)C=C1 BJRNKVDFDLYUGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 1
- 229920003023 plastic Polymers 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- HEBKCHPVOIAQTA-ZXFHETKHSA-N ribitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO HEBKCHPVOIAQTA-ZXFHETKHSA-N 0.000 description 1
- 101150090202 rpoB gene Proteins 0.000 description 1
- NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N salicin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=CC=CC=C1CO NGFMICBWJRZIBI-UJPOAAIJSA-N 0.000 description 1
- 229940120668 salicin Drugs 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 238000012358 sourcing Methods 0.000 description 1
- 241000894007 species Species 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229960004793 sucrose Drugs 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N trans-butenedioic acid Natural products OC(=O)C=CC(O)=O VZCYOOQTPOCHFL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- 230000004102 tricarboxylic acid cycle Effects 0.000 description 1
- 229940084592 vitamin b 12 0.01 mg Drugs 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L zinc sulfate Chemical compound [Zn+2].[O-]S([O-])(=O)=O NWONKYPBYAMBJT-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000368 zinc sulfate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011686 zinc sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000009529 zinc sulphate Nutrition 0.000 description 1
Landscapes
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest nowy szczep bakterii z rodzaju Enterobacter oraz jego zastosowanie do produkcji kwasu bursztynowego i 2,3-butanodiolu.
Obecnie na świecie trwają intensywne badania zmierzające do opracowania efektywnych procesów biotechnologicznych, pozwalających na otrzymywanie ważnych przemysłowo prekursorów do syntez chemicznych z wykorzystaniem odnawialnych surowców zamiast ropy naftowej. Obserwowany trend jest wynikiem kurczenia się światowych zasobów tego kopalnego surowca, jego wysokich i niestabilnych cen jak również uwalniania ogromnych ilości ditlenku węgla do atmosfery podczas spalania ropy naftowej i jej pochodnych. W przypadku zapotrzebowania na energię znanych jest szereg alte rnatywnych źródeł jej pozyskiwania np. energia promieni słonecznych, wiatru czy źródeł geotermalnych. Jeśli chodzi natomiast o produkcję tworzyw sztucznych i innych chemikaliów jedynym racjona l nym sposobem na odejście od surowców kopalnych wydaje się być wykorzystanie wszechobecnej na naszej planecie biomasy roślinnej i surowców odpadowych z jej przetwarzania. Jednym z nich jest glicerol będący produktem ubocznym w technologii biodiesla. Wzrastająca produkcja glicerolu, blisko 10-krotny spadek jego ceny w ostatnich latach sprawia, że jest obecnie tanim i łatwo dostępnym źródłem węgla w procesach biotechnologicznych. W 2004 roku Amerykański Departament do Spraw Energii (DOE) opracował listę 12 najbardziej pożądanych związków chemicznych, dla których należałoby znaleźć alternatywny sposób produkcji (Werpy T, Petersen G. Eds. Top Value Added Chemicals from Biomass. US DoE 2004). Wśród przedstawionych w przytoczonym raporcie związków możemy odnaleźć kwasy dikarboksylowe takie jak kwas bursztynowy, kwas fumarowy czy kwas jabłkowy.
Mikrobiologiczna produkcja kwasu bursztynowego rysuje się jako najbardziej obiecujący sposób jego alternatywnego pozyskiwania. Obecnie znanych jest jedynie kilka mikroorganizmów zdolnych do znaczącej produkcji kwasu bursztynowego będącego w ich przypadku albo końcowym produktem fermentacji albo produktem pośrednim w cyklu Krebsa. Wśród producentów tego kwasu możemy wymienić bakterie Actinobacillus succinogenes (Guettler MV, Rumler D, Jain MK. Actinobacillus succinogenes sp. nov., a novel succinic-acid-producing strain from the bovine rumen. Int J Syst Bacteriol 1999;49:207-16), Anaerobiospirillium succiniciproducens (Lee PC, Lee WG, Kwon S, Lee SY, Chang HN. Succinic acid production by Anaerobiospirillium succiniciproducens: effects of the H2/CO2 supply and glucose concentration. Enzyme Microb Technol 1999;24:549-54), Mannheimia succiniciproducens (Lee PC, Lee SY, Hong SH, Chang HN. Isolation and characterization of new succinic acid producing bacterium, Mannheimia succiniciproducens MBEL 55E, from bovine rumen. Appl Microbiol Biotechnol 2002;58:663-8), Basfia succiniciproducens DD1 (Scholten D, Daegele D. Succinic acid production by a newly isolated bacterium. Biotechnol Lett 2008;30:2143-46) oraz modyfikowane genetycznie Escherichia coli (Vemuri GN, Eiteman MA, Altman E. Succinate production in dual-phase Escherichia coli fermentations depends on the time of transition from aerobic to anaerobic conditions. J Ind Microbiol Biotechnol 2002;28:325-32), Corynebacterium glutamicum (Okino S, Noburyu R, Suda M, Jojima T, Inui M, Yukawa H. An efficient succinic acid production process in a metabolically engineered Corynebacterium glutamicum strain. Appl Microbiol Biotechnol 2008;81:459-64) oraz drożdże Yarrowia lipolytica (Yuzbashev TV, Yuzbasheva EY, Sobolevskaya TI, Laptev IA, Vybornaya TV, Larina AS, Matsui K, Fukui K, Sineoky SP. Production of succinic acid at low pH by a recombinant strain of the aerobic yeast Yarrowia lipolytica. Biotechnol Bioeng 2010;107:673-82) i Saccharomyces cerevisiae (Raab AM, Gebhardt G, Bolotina N, Weuster-Botz D, Lang C. Metabolic engineering of Saccharomyces cerevisiae for the biotechnological production of succinic acid. Metab Eng 2010;12:518-25). Często dużym problemem okazuje się obecność w płynach pofermentacyjnych produktów ubocznych czy też konieczność stosowania bogatych, a co za tym idzie drogich pożywek fermentacyjnych podrażających koszt mikrobiologicznej produkcji kwasu bursztynowego i jego oczyszczania. Z powyższych względów koniecznym jest poszukiwanie nowych mikroorganizmów zdolnych do efektywnej produkcji kwasu bursztynowego wykorzystujących tanie, nie konkurujące ze składnikami żywności, źródła węgla i energii np. glicerol. Obecnie naturalnymi producentami kwasu bursztynowego na glicerolu są Anaerobiospirilium succiniciproducens (Lee i inni, 2001) oraz Basfia succiniciproducens DD1 (Scholten i Daegele, 2008), u których w filtratach pohodowlanych stwierdzono obecność kwasu bursztynowego, lecz w stężeniach zbyt niskich, aby je akceptować w technologii kwasu bursztynowego.
PL 226 910 B1
Przedmiotem wynalazku jest nowy szczep bakterii Enterobacter sp. LU1 zdeponowany w Międzynarodowej Kolekcji Kultur Drobnoustrojów Przemysłowych Instytutu Biotechnologii Przemysłu Rolno-Spożywczego pod numerem KKP 2050p.
Istotą nowego szczepu jest jego zastosowanie jako szczepu produkcyjnego w procesach mikrobiologicznej produkcji kwasu bursztynowego na płynnej pożywce bakteryjnej zawierającej glicerol jako źródło węgla.
Istotą nowego szczepu jest także jego zastosowanie jako szczepu produkcyjnego w procesach mikrobiologicznej produkcji 2,3-butanodiolu na płynnej pożywce bakteryjnej zawierającej glukozę jako źródło węgla.
Szczep bakterii Enterobacter sp. LU1 nr KKP 2050p posiada następującą sekwencję nukleotydową regionu DNA kodującego 16S rRNA, którego sekwencja określa przynależność rodzajową bakterii:
CGGTAACAGGAAGCAGCTTGCTGCTTCGCTGACGAGTGGCGGACGGGTGAGTAATGTCTG
GGAAACTGCCTGATGGAGGGGGATAACTACTGGAAACGGTAGCTAATACCGCATAACGTC
GCAAGACCAAAGAGGGGGACCTTCGGGCCTCTTGCCATCGGATGTGCCCAGATGGGATTA
GCTAGTAGGTGGGGTAACGGCTCACCTAGGCGACGATCCCTAGCTGGTCTGAGAGGATGA
CCAGCCACACTGGAACTGAGACACGGTCCAGACTCCTACGGGAGGCAGCAGTGGGGAATA
TTGCACAATGGGCGCAAGCCTGATGCAGCCATGCCGCGTGTATGAAGAAGGCCTTCGGGT
TGTAAAGTACTTTCAGCGGGGAGGAAGGCGATAAGGTTAATAACCTTGTCGATTGACGTT
ACCCGCAGAAGAAGCACCGGCTAACTCCGTGCCAGCAGCCGCGGTAATACGGAGGGTGCA
AGCGTTAATCGGAATTACTGGGCGTAAAGCGCACGCAGGCGGTCTGTCAAGTCGGATGTG
AAATCCCCGGGCTCAACCTGGGAACTGCATTCGAAACTGGCAGGCTAGAGTCTTGTAGAG
GGGGGTAGAATTCCAGGTGTAGCGGTGAAATGCGTAGAGATCTGGAGGAATACCGGTGGC
GAAGGCGGCCCCCTGGACAAAGACTGACGCTCAGGTGCGAAAGCGTGGGGAGCAAACAGG
ATTAGATACCCTGGTAGTCCACGCCGTAAACGATGTCGACTTGGAGGTTGTGCCCTTGAG
GCGTGGCTTCCGGAGCTAACGCGTTAAGTCGACCGCCTGGGGAGTACGGCCGCAAGGTTA
AAACTCAAATGAATTGACGGGGGCCCGCACAAGCGGTGGAGCATGTGGTTTAATTCGATG
CAACGCGAAGAACCTTACCTACTCTTGACATCCAGAGAACTTTCCAGAGATGGATTGGTG
CCTTCGGGAACTCTGAGACAGGTGCTGCATGGCTGTCGTCAGCTCGTGTTGTGAAATGTT
GGGTTAAGTCCCGCAACGAGCGCAACCCTTATCCTTTGTTGCCAGCGGTTAGGCCGGGAA
CTCAAAGGAGACTGCCAGTGATAAACTGGAGGAAGGTGGGGATGACGTCAAGTCATCATG
GCCCTTACGAGTAGGGCTACACACGTGCTACAATGGCGCATACAAAGAGAAGCGACCTCG
CGAGAGCAAGCGGACCTCATAAAGTGCGTCGTAGTCCGGATTGGAGTCTGCAACTCGACT
CCATGAAGTCGGAATCGCTAGTAATCGTGGATCAGAATGCCACGGTGAATACGTTCCCGG
GCCTTGTACACACCGCCCGTCACACCATGGGAGTGGGTTGCAAAAGAAGTAGGTAGCTTA
ACCTTCGGGAGGGCGCTTACCACTTTGTGATTCATGACTGGGG
PL 226 910 B1
Przynależność taksonomiczna nowego szczepu do grupy gatunków kompleksu Enterobacter cloacae określona była w oparciu o zastosowanie biochemicznych testów API 20E. Sekwencjonowanie genu rpoB oraz testy API 50 CH pozwalają stwierdzić największe podobieństwo taksonomiczne do gatunku Enterobacter hormaechei subsp. Steigerwaltii. Sekwencja nukleotydowa regionu DNA kodującego podjednostkę β bakteryjnej polimerazy RNA przedstawia się następująco:
GTCTCTGGGCGATCTGGATACCCTGATGCCTCAGGATATGATTAACGCGAAGCCGATTTC
TGCGGCAGTGAAAGAGTTCTTCGGTTCCAGCCAGCTGTCTCAGTTCATGGACCAGAACAA
CCCGCTGTCTGAGATCACGCACAAACGTCGTATCTCCGCACTCGGCCCAGGCGGTCTGAC
CCGTGAACGCGCAGGCTTTGAAGTTCGAGACGTACACCCGACTCACTACGGTCGCGTATG
TCCAATCGAAACGCCTGAAGGTCCAAACATCGGTCTGATCAACTCCCTGTCCGTGTACGC
ACAGACGAACGAATACGGTTTCCTCGAGACCCCGTATCGTAAAGTGACCGACGGTGTTGT
TACTGACGAAATTCATTACCTGTCTGCTATTGAAGAAGGCAACTACGTTATCGCTCAGGC
GAACTCCAACCTGGATGACGAAGGCCACTTTGTAGAAGATCTGGTTACCTGCCGTAGCAA
AGGCGAATCCAGCTTGTTCAGCCGCGACCAGGTTGACTACATGGACGTATCCACCCAGCA
GGTGGTATCCGTCGGTGCGTCCCTGATCCCGTTCCTGGAACACGATGACGCCAACCGTGC
ATTGATGGGTGCGAACATGCAACGTCAGGCCGTTCCAACTCTGCGTGCTGATAAGCCGCT
GGTTGGTACCGGTATGGAACGTGCTGTTGCCGTTGACTCTGGTGTTACAGCAGTTGCTAA
GCGTGGCGGTACCGTTCAGTACGTTGACGCATCCCGTATCGTTATCAAAGTTAACGAAGA
CGAGATGTATCCGGGCGAAGCGGGTATCGACATCTACAACCTGACCAAATACACCCGTTC
TAACCAGAACACCTGTATCAACCAGATGCCATGTGTGTCTCTGGGTGAGCCAGTTGAGCG
CGGCGACGTGCTGGCAGACGGTCCGTCCACCGACCTCGGTGAACTGGCGCTCGGTCAGAA
CATGCGCGTAGC
Testy API 50 CH pozwoliły również na stwierdzenie zdolności fermentacyjnych nowego szczepu względem następujących sacharydów i ich pochodnych: glicerolu, D-arabinozy, L-arabinozy, D-rybozy, D-ksylozy, D-adonitolu, D-galaktozy, D-glukozy, D-fruktozy, D-mannozy, L-ramnozy, D-mannitolu, D-sorbitolu, Metylo-aD-glukopironazydu, N-acetyloglukozaminy, arbutyny, eskuliny (słaba reakcja), salicyny, D-celobiozy, D-maltozy, D-laktozy, D-melibiozy, D-sacharozy, D-trehalozy, D-rafmozy, gencjobiozy, D-fukozy, L-fukozy, D-arabitolu, 2-ketoglukonianu potasu.
Nowo wyizolowane bakterie mają kształt pałeczek gram ujemnych o długości 1 pm, nie wytwarzają przetrwalników.
Nowy szczep charakteryzuje się zdolnością do produkcji kwasu bursztynowego na pożywce gdzie źródłem węgla jest glicerol. Kwas bursztynowy, w stężeniu ok. 2 g/l jest w tym przypadku głównym produktem fermentacji. Dodatkowym produktem przemian metabolicznych jest kwas octowy obecny w nieznacznej ilości ok. 0,4 g/l. Ewentualna obecność innych produktów przemiany materii jest na poziomie niższym niż ich próg wykrywalności w stosowanej standardowo w takich przypadkach metodzie analizy HPLC z wykorzystaniem detektora RI.
Nowy szczep posiada też zdolność do produkcji 2,3-butanodiolu na pożywce gdzie źródłem węgla jest glukoza. W tym przypadku 2,3-butanodiol jest jednym z wielu produktów fermentacji.
Szczep według wynalazku wyizolowano z treści żwacza kozy używając do tego dziesiętnych rozcieńczeń analizowanej treści wykonanych w roztworze PBS (0,145 M NaCl, 0,01 M Na2HPO4). Uzyskane rozcieńczenia wysiewano na pożywki do izolacji. W skład używanej pożywki wchodziły w g/l: glicerol 20; kwas galakturonowy 10; ekstrakt drożdżowy 10; Na2HPO4 x 12H2O 0,78; NaH2HPO4
PL 226 910 B1 x H2O 1,16; MgCl2 x 6H2O 0,2; CaCl2 0,15; NaCl 1; MgCO3 15; agar bakteriologiczny 15. Pojedyncze kolonie wyrosłe na płytkach po 48 godzinach beztlenowej inkubacji w 37°C przesiewano w sposób redukcyjny na świeże pożywki trzykrotnie, w celu oczyszczenia wyizolowanych bakterii. Następnie oczyszczony izolat hodowano przez 48 godzin w bulionie mózgowo-sercowym (pożywka BHI: glukoza 2 g/l; wyciąg mózgowo-sercowy 17,5 g/l; pepton 10 g/l; Na2HPO4 2,5 g/l; NaCl 5 g/l; pH 7,2). Po zakończeniu hodowli szczep zabezpieczano w 20% glicerolu i przechowywano w temperaturze -80°C.
P R Z Y K Ł A D 1
Szczep Enterobacter sp. LU1 hodowano na podłożu płynnym o następującym składzie w g/l: glicerol 20; ekstrakt drożdżowy 10; Na2HPO4 x 12H2O 0,78; NaH2HPO4 x H2O 1,16; MgCl2 x 6 H2O 0,2; CaCl2 0,15; NaCl 1; MgCO3 15; w temperaturze 37°C, z wytrząsaniem 160 obr./min., w szczelnie pozamykanych butelkach iniekcyjnych o pojemności 20 ml. Przy zaszczepieniu mikroorganizmu dodawano również do pożywki 2 μΐ roztworu witamin (witamina B12 0,01 mg/ml, biotyna 0,2 mg/ml, tiamina 0,5 mg/ml, ryboflawina 0,5 mg/ml, niacyna 0,5 mg/ml, pantotenian wapnia 0,5 mg/ml, p-aminobenzoesan 0,5 mg/ml, witamina B6 1 mg/ml, kwas liponowy 0,5 mg/ml). Po 96 godzinach wyhodowane komórki oddzielono od podłoża poprzez wirowanie (5 min. 7800 x g, 4°C), powstały w ten sposób nadsącz rozcieńczano dwukrotnie, a następnie odbiałczano za pomocą soli Carreza (sól I - 15% r-r K4[Fe(CN)]6 x 3H2O; sól II - 30% r-r ZnSO4 x 7H2O). Tak przygotowaną próbkę analizowano na obecność produktów fermentacji przy pomocy HPLC, stosując kolumnę dla kwasów organicznych Aminex HPX-87H oraz refractive index detektor (Knauer). Elucję prowadzono za pomocą 30 mM kwasu siarkowego, w temperaturze 42°C, przy prędkości przepływu eluentu 0,3 ml/min, stwierdzając obecność kwasu bursztynowego w ilości 2,19 g/l. Dokładne wyniki badania przedstawiono w Tabeli.
P R Z Y K Ł A D II
Szczep Enterobacter sp. LU1 hodowano na podłożu płynnym o następującym składzie w g/l: glukoza 20; ekstrakt drożdżowy 10; Na2HPO4 x 12H2O 0,78; NaH2HPO4 x H2O 1,16; MgCl2 x 6 H2O 0,2; CaCl2 0,15; NaCl 1; MgCO3 15; w temperaturze 37°C w szczelnie pozamykanych butelkach iniekcyjnych o pojemności 20 ml. Przy zaszczepieniu mikroorganizmu dodawano również do pożywki 2 μl roztworu witamin (witamina B12 0,01 mg/ml, biotyna 0,2 mg/ml, tiamina 0,5 mg/ml, ryboflawina 0,5 mg/ml, niacyna 0,5 mg/ml, pantotenian wapnia 0,5 mg/ml, p-aminobenzoesan 0,5 mg/ml, witamina B6 1 mg/ml, kwas liponowy 0,5 mg/ml). Po 96 godzinach wyhodowane komórki oddzielono od podłoża poprzez wirowanie, a powstały w ten sposób nadsącz rozcieńczano dwukrotnie, a następnie odbiałczano za pomocą soli Carreza (sól I - 15% r-r K4[Fe(CN)]6 x 3 H2O; sól II - 30% r-r ZnSO4 x 7 H2O). Tak przygotowaną próbkę analizowano na obecność produktów fermentacji stwierdzając obecność 2,3-butanodiolu w ilości 4,06 g/l. Dokładne wyniki badania przedstawiono w Tabeli. Rozdział chromatograficzny odbiałczonego płynu pofermentacyjnego prowadzono na kolumnie Aminex HPX-87H w temperaturze 42°C i przy przepływie 0,3 ml/min. Zastosowanym eluentem był 30 mM kwas siarkowy.
T a b e l a. Produkty metabolizmu szczepu Enterobacter sp. LU1
| Przykład (źródło węgla) | Produkcja | |||||
| Kwasu bursztynowego | 2,3- -butanediolu | Kwasu mrówkowego | Kwasu octowego | Kwasu mlekowego | Etanolu | |
| [g/l] | [g/l] | [g/l] | [g/l] | [g/l] | [g/l] | |
| I (Glicerol) | 2,19 | - | - | 0,46 | - | - |
| II (Glukoza) | 0,69 | 4,06 | 1,5 | 1,34 | 1,21 | 1,76 |
Claims (3)
- Zastrzeżenia patentowe1. Nowy szczep bakterii Enterobacter sp. LU1 zdeponowany w Międzynarodowej Kolekcji Kultur Drobnoustrojów Przemysłowych Instytutu Biotechnologii Przemysłu Rolno-Spożywczego pod numerem KKP 2050p.
- 2. Zastosowanie szczepu bakterii Enterobacter sp. LU1 nr KKP 2050p w procesach mikrobiologicznej produkcji kwasu bursztynowego na płynnej pożywce bakteryjnej zawierającej glicerol jako źródło węgla.
- 3. Zastosowanie szczepu bakterii Enterobacter sp. LU1 nr KKP 2050p w procesach mikrobiologicznej produkcji kwasu bursztynowego oraz 2,3-butanodiolu na płynnej pożywce bakteryjnej zawierającej glukozę jako źródło węgla.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL406515A PL226910B1 (pl) | 2013-12-13 | 2013-12-13 | Nowy szczep bakterii zrodzaju Enterobacter |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL406515A PL226910B1 (pl) | 2013-12-13 | 2013-12-13 | Nowy szczep bakterii zrodzaju Enterobacter |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL406515A1 PL406515A1 (pl) | 2015-06-22 |
| PL226910B1 true PL226910B1 (pl) | 2017-09-29 |
Family
ID=53396735
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL406515A PL226910B1 (pl) | 2013-12-13 | 2013-12-13 | Nowy szczep bakterii zrodzaju Enterobacter |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL226910B1 (pl) |
-
2013
- 2013-12-13 PL PL406515A patent/PL226910B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL406515A1 (pl) | 2015-06-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Xu et al. | Efficient production of L-lactic acid using co-feeding strategy based on cane molasses/glucose carbon sources | |
| Liu et al. | Economical succinic acid production from cane molasses by Actinobacillus succinogenes | |
| Niu et al. | Characteristics of fermentative hydrogen production with Klebsiella pneumoniae ECU-15 isolated from anaerobic sewage sludge | |
| US9631211B2 (en) | Bacterial strain and fermentative process for producing succinic acid | |
| Tashiro et al. | A novel production process for optically pure L-lactic acid from kitchen refuse using a bacterial consortium at high temperatures | |
| US9273331B2 (en) | Process for producing 3-hydroxybutyric acid or salt thereof | |
| Timbuntam et al. | Lactic acid production from sugar-cane juice by a newly isolated Lactobacillus sp. | |
| CN104946576B (zh) | 大肠杆菌基因工程菌及其构建方法和在生产丙酮酸中的应用 | |
| Xia et al. | Economical production of poly (ε-l-lysine) and poly (l-diaminopropionic acid) using cane molasses and hydrolysate of streptomyces cells by Streptomyces albulus PD-1 | |
| CN104593442A (zh) | 一种重组大肠杆菌高密度培养生产四氢嘧啶的方法 | |
| CN103409485A (zh) | 一种通过流加有机氮源提高腺苷发酵产量的方法 | |
| Wang et al. | Isolation, characterization and evolution of a new thermophilic Bacillus licheniformis for lactic acid production in mineral salts medium | |
| Wang et al. | Impact of carbon and nitrogen sources on hydrogen production by a newly isolated Clostridium butyricum W5 | |
| Suzuki et al. | Ethanol production from glycerol-containing biodiesel waste by Klebsiella variicola shows maximum productivity under alkaline conditions | |
| Wittlich et al. | Conversion of glycerol to 1, 3-propanediol by a newly isolated thermophilic strain | |
| Khiyami et al. | Polyhydroxyalkanoates production via Bacillus plastic composite support (PCS) biofilm and date palm syrup | |
| Wang et al. | Two‐stage fermentation optimization for poly‐3‐hydroxybutyrate production from methanol by a new Methylobacterium isolate from oil fields | |
| Chekroud et al. | Valorisation of date fruits by-products for the production of biopolymer polyhydroxybutyrate (PHB) using the bacterial strain Bacillus paramycoides | |
| CN106834177B (zh) | 一株瘤胃菌及其应用 | |
| Divyashree et al. | Extractability of polyhydroxyalkanoate synthesized by Bacillus flexus cultivated in organic and inorganic nutrient media | |
| CN103937733B (zh) | 一株利用蔗糖产丁二酸基因工程菌株及其发酵生产丁二酸的方法 | |
| KR101366398B1 (ko) | 신규 크렙시엘라 뉴모니애 ｊ２ｂ 균주 및 이를 이용한 3-하이드록시프로피온산을 생산하는 재조합 균주 | |
| PL226910B1 (pl) | Nowy szczep bakterii zrodzaju Enterobacter | |
| Hniman et al. | Community analysis of thermophilic hydrogen-producing consortia enriched from Thailand hot spring with mixed xylose and glucose | |
| WO2020187388A1 (en) | Lactobacillus diolivorans biotransformation process |