PL230472B1 - Zastosowanie medyczne N-podstawionych pochodnych 3-am ino-4- fenylo-5- okso-pirazolinokarboksamidu do wytwarzania leku - Google Patents
Zastosowanie medyczne N-podstawionych pochodnych 3-am ino-4- fenylo-5- okso-pirazolinokarboksamidu do wytwarzania lekuInfo
- Publication number
- PL230472B1 PL230472B1 PL414926A PL41492615A PL230472B1 PL 230472 B1 PL230472 B1 PL 230472B1 PL 414926 A PL414926 A PL 414926A PL 41492615 A PL41492615 A PL 41492615A PL 230472 B1 PL230472 B1 PL 230472B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- phenyl
- amino
- substituted
- pyrazolinecarboxamide
- oxo
- Prior art date
Links
- 239000003814 drug Substances 0.000 title description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title description 2
- 229940053202 antiepileptics carboxamide derivative Drugs 0.000 title 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims description 32
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 claims description 10
- 125000001637 1-naphthyl group Chemical group [H]C1=C([H])C([H])=C2C(*)=C([H])C([H])=C([H])C2=C1[H] 0.000 claims description 5
- 125000000113 cyclohexyl group Chemical group [H]C1([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])(*)C([H])([H])C1([H])[H] 0.000 claims description 5
- 125000004108 n-butyl group Chemical group [H]C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])C([H])([H])* 0.000 claims description 5
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 5
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims description 4
- 125000001424 substituent group Chemical group 0.000 claims description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 25
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 21
- 241000187480 Mycobacterium smegmatis Species 0.000 description 15
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 14
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 12
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- AEUTYOVWOVBAKS-UWVGGRQHSA-N ethambutol Chemical compound CC[C@@H](CO)NCCN[C@@H](CC)CO AEUTYOVWOVBAKS-UWVGGRQHSA-N 0.000 description 10
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 10
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 9
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 8
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 8
- 229960005206 pyrazinamide Drugs 0.000 description 8
- IPEHBUMCGVEMRF-UHFFFAOYSA-N pyrazinecarboxamide Chemical compound NC(=O)C1=CN=CC=N1 IPEHBUMCGVEMRF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 7
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 7
- 229960000285 ethambutol Drugs 0.000 description 7
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 7
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 7
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000000034 method Methods 0.000 description 6
- 229960001225 rifampicin Drugs 0.000 description 6
- JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N rifampicin Chemical compound O([C@](C1=O)(C)O/C=C/[C@@H]([C@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)\C=C\C=C(C)/C(=O)NC=2C(O)=C3C([O-])=C4C)C)OC)C4=C1C3=C(O)C=2\C=N\N1CC[NH+](C)CC1 JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N 0.000 description 6
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 6
- 241000327728 Mycobacterium bovis AN5 Species 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 229960003350 isoniazid Drugs 0.000 description 5
- QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N isoniazide Chemical compound NNC(=O)C1=CC=NC=C1 QRXWMOHMRWLFEY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 4
- -1 N-substituted 3-amino-5-hydroxy-4-phenyl-1H -pyrazole-1-carboxamides Chemical class 0.000 description 4
- 230000002365 anti-tubercular Effects 0.000 description 4
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 4
- 238000003113 dilution method Methods 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- LLLORLAKWZEARK-UHFFFAOYSA-N 5-amino-N-butyl-3-oxo-4-phenyl-1H-pyrazole-2-carboxamide Chemical compound C(CCC)NC(=O)N1NC(=C(C1=O)C1=CC=CC=C1)N LLLORLAKWZEARK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000186366 Mycobacterium bovis Species 0.000 description 3
- 241000187479 Mycobacterium tuberculosis Species 0.000 description 3
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 3
- VEQOALNAAJBPNY-UHFFFAOYSA-N antipyrine Chemical compound CN1C(C)=CC(=O)N1C1=CC=CC=C1 VEQOALNAAJBPNY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 3
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 230000009036 growth inhibition Effects 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 2
- 230000001355 anti-mycobacterial effect Effects 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 2
- 239000003085 diluting agent Substances 0.000 description 2
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 2
- 229940072185 drug for treatment of tuberculosis Drugs 0.000 description 2
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 2
- 230000002147 killing effect Effects 0.000 description 2
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 description 2
- 229960005222 phenazone Drugs 0.000 description 2
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 2
- 150000003217 pyrazoles Chemical class 0.000 description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 2
- WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N (E)-8-Octadecenoic acid Natural products CCCCCCCCCC=CCCCCCCC(O)=O WRIDQFICGBMAFQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XBYRMPXUBGMOJC-UHFFFAOYSA-N 1,2-dihydropyrazol-3-one Chemical class OC=1C=CNN=1 XBYRMPXUBGMOJC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PPVUWDCETZMPLT-UHFFFAOYSA-N 1,3-dihydropyrazole-2-carboxamide Chemical compound NC(=O)N1CC=CN1 PPVUWDCETZMPLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDQNKCYCTYYMAA-UHFFFAOYSA-N 1-isocyanatonaphthalene Chemical compound C1=CC=C2C(N=C=O)=CC=CC2=C1 BDQNKCYCTYYMAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 20:1omega9c fatty acid Natural products CCCCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O LQJBNNIYVWPHFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 125000000972 4,5-dimethylthiazol-2-yl group Chemical group [H]C([H])([H])C1=C(N=C(*)S1)C([H])([H])[H] 0.000 description 1
- UWLNYWRDLHLLJS-UHFFFAOYSA-N 5-amino-3-oxo-4-phenyl-1H-pyrazole-2-carboxamide Chemical class NC=1NN(C(C=1C1=CC=CC=C1)=O)C(=O)N UWLNYWRDLHLLJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KSQZOXHARKGLMA-UHFFFAOYSA-N 5-amino-N-cyclohexyl-3-oxo-4-phenyl-1H-pyrazole-2-carboxamide Chemical compound C1(CCCCC1)NC(=O)N1NC(=C(C1=O)C1=CC=CC=C1)N KSQZOXHARKGLMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MUPZARZXFUWDCZ-UHFFFAOYSA-N 5-amino-N-naphthalen-1-yl-3-oxo-4-phenyl-1H-pyrazole-2-carboxamide Chemical compound Nc1[nH]n(C(=O)Nc2cccc3ccccc23)c(=O)c1-c1ccccc1 MUPZARZXFUWDCZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 9-Heptadecensaeure Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O QSBYPNXLFMSGKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 1
- RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N Aminoantipyrine Natural products CN1C(C)=C(N)C(=O)N1C1=CC=CC=C1 RLFWWDJHLFCNIJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RMMXTBMQSGEXHJ-UHFFFAOYSA-N Aminophenazone Chemical compound O=C1C(N(C)C)=C(C)N(C)N1C1=CC=CC=C1 RMMXTBMQSGEXHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 1
- 241000459479 Capsula Species 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- 206010011224 Cough Diseases 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 1
- 206010018498 Goitre Diseases 0.000 description 1
- 241001467553 Mycobacterium africanum Species 0.000 description 1
- 241000187919 Mycobacterium microti Species 0.000 description 1
- 241001302239 Mycobacterium tuberculosis complex Species 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N Oleic acid Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005642 Oleic acid Substances 0.000 description 1
- 206010034133 Pathogen resistance Diseases 0.000 description 1
- 208000035415 Reinfection Diseases 0.000 description 1
- KGTSLTYUUFWZNW-PPJQWWMSSA-N [(7S,9E,11S,12R,13S,14R,15R,16R,17S,18S,19E,21Z)-2,15,17,27,29-pentahydroxy-11-methoxy-3,7,12,14,16,18,22-heptamethyl-26-[(E)-(4-methylpiperazin-1-yl)iminomethyl]-6,23-dioxo-8,30-dioxa-24-azatetracyclo[23.3.1.14,7.05,28]triaconta-1(29),2,4,9,19,21,25,27-octaen-13-yl] acetate pyridine-4-carbohydrazide Chemical compound NNC(=O)c1ccncc1.CO[C@H]1\C=C\O[C@@]2(C)Oc3c(C2=O)c2c(O)c(\C=N\N4CCN(C)CC4)c(NC(=O)\C(C)=C/C=C/[C@H](C)[C@H](O)[C@@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)[C@H](OC(C)=O)[C@@H]1C)c(O)c2c(O)c3C KGTSLTYUUFWZNW-PPJQWWMSSA-N 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 239000000443 aerosol Substances 0.000 description 1
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 1
- 229960000212 aminophenazone Drugs 0.000 description 1
- 229960003022 amoxicillin Drugs 0.000 description 1
- LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N amoxicillin Chemical compound C1([C@@H](N)C(=O)N[C@H]2[C@H]3SC([C@@H](N3C2=O)C(O)=O)(C)C)=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-NJBDSQKTSA-N 0.000 description 1
- 230000000202 analgesic effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000001754 anti-pyretic effect Effects 0.000 description 1
- 239000012984 antibiotic solution Substances 0.000 description 1
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- WDQPAMHFFCXSNU-BGABXYSRSA-N clofazimine Chemical compound C12=CC=CC=C2N=C2C=C(NC=3C=CC(Cl)=CC=3)C(=N/C(C)C)/C=C2N1C1=CC=C(Cl)C=C1 WDQPAMHFFCXSNU-BGABXYSRSA-N 0.000 description 1
- 229960004287 clofazimine Drugs 0.000 description 1
- 238000004737 colorimetric analysis Methods 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- KQWGXHWJMSMDJJ-UHFFFAOYSA-N cyclohexyl isocyanate Chemical compound O=C=NC1CCCCC1 KQWGXHWJMSMDJJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 230000008260 defense mechanism Effects 0.000 description 1
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 1
- 210000003527 eukaryotic cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 201000003872 goiter Diseases 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000005802 health problem Effects 0.000 description 1
- 229940083761 high-ceiling diuretics pyrazolone derivative Drugs 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N isooleic acid Natural products CCCCCCCC=CCCCCCCCCC(O)=O QXJSBBXBKPUZAA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- QZIQJVCYUQZDIR-UHFFFAOYSA-N mechlorethamine hydrochloride Chemical compound Cl.ClCCN(C)CCCl QZIQJVCYUQZDIR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003340 mental effect Effects 0.000 description 1
- 230000004060 metabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000036457 multidrug resistance Effects 0.000 description 1
- 230000009670 mycobacterial growth Effects 0.000 description 1
- HNHVTXYLRVGMHD-UHFFFAOYSA-N n-butyl isocyanate Chemical compound CCCCN=C=O HNHVTXYLRVGMHD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002547 new drug Substances 0.000 description 1
- 229940021182 non-steroidal anti-inflammatory drug Drugs 0.000 description 1
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 1
- QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N octafluoropropane Chemical compound FC(F)(F)C(F)(F)C(F)(F)F QYSGYZVSCZSLHT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N oleic acid Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O ZQPPMHVWECSIRJ-KTKRTIGZSA-N 0.000 description 1
- 230000003287 optical effect Effects 0.000 description 1
- LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N p-Hydroxyampicillin Natural products O=C1N2C(C(O)=O)C(C)(C)SC2C1NC(=O)C(N)C1=CC=C(O)C=C1 LSQZJLSUYDQPKJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 230000008569 process Effects 0.000 description 1
- JEXVQSWXXUJEMA-UHFFFAOYSA-N pyrazol-3-one Chemical class O=C1C=CN=N1 JEXVQSWXXUJEMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000008261 resistance mechanism Effects 0.000 description 1
- 210000002345 respiratory system Anatomy 0.000 description 1
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 1
- 150000003384 small molecules Chemical class 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 1
- 239000000814 tuberculostatic agent Substances 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000003313 weakening effect Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest nowe zastosowanie medyczne /V-podstawionych pochodnych 3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamidu o wzorze I, gdzie R oznacza cykloheksyl, 1-naftyl, n-butyl, jako substancji do wytwarzania leku przeznaczonego do profilaktyki i leczenia gruźlicy.
Znane ze stanu techniki pochodne pirazolonów należą do niesteroidowych leków przeciwzapalnych jak: Phenazone, Antipyrinum, Analgesine, Aminophenazone, Pyramidonum. Charakteryzują się one działaniem przeciwzapalnym, przeciwbólowym i przeciwgorączkowym (Zejc i inni, Chemia Leków, 2004, 198-204). Substancje o aktywności będącej przedmiotem wynalazku można otrzymać z wykorzystaniem sposobu ujawnionego w patencie PL 213 589 oraz w publikacji Pitucha M. et al (Synthesis, structure and antibacterial evaluation of some N-substituted 3-amino-5-hydroxy-4-phenyl-1H-pyrazole-1-carboxamides, Pitucha M., Kosikowska U., Mazur L., Malm A. Medicinal Chemistry, 2011,7, 697-703).
Gruźlica należy do najgroźniejszych chorób współczesności, której czynnikiem etiologicznym jest kompleks Mycobacterium tuberculosis (M. tuberculosis, M. bovis, M. africanum, M. microti). Prątek gruźlicy przenoszony jest drogą powietrzną przez cząsteczki aerozolu wydzielane podczas kaszlu, kichania lub podczas mówienia osoby chorej z zakażeniem zlokalizowanym w drogach oddechowych. Część notowanych zakażeń to reinfekcje (0,9% ogółu zachorowań), do których dochodzi na skutek osłabienia układu odpornościowego gospodarza. W warunkach szpitalnych istnieje możliwość zakażenia prątkiem gruźlicy, zwłaszcza wówczas, gdy chory prątkujący zostanie umieszczony w jednej sali z innymi pacjentami.
Według WHO każdego roku odnotowuje się 8-9 min przypadków tej choroby, z czego 2,5 min kończy się śmiercią. Choroba jest przenoszona przez chorych na osoby zdrowe. U osób zdrowych bakterie są wychwytywane i niszczone przez mechanizmy obronne. Jednakże, jeśli te mechanizmy działają zbyt wolno lub są niewydolne, lub jeśli ilość bakterii jest bardzo duża, mogą one namnażać się i powodować chorobę. Szczególnie narażone są na chorobę osoby przeżywające silny stres psychiczny, źle odżywione i prowadzące niehigieniczny tryb życia. Mimo rozwiniętej profilaktyki i stosowania nowoczesnych i skutecznych leków, gruźlica nadal stanowi duży problem zdrowotny na świecie i w Polsce. Zachorowania na gruźlicę stwierdza się 2-krotnie częściej u mężczyzn niż kobiet, częściej u mieszkańców wsi niż miast. Ryzyko zachorowania wzrasta wraz z wiekiem i jest 30-krotnie wyższe u osób powyżej 65 lat w porównaniu z dziećmi. Narastającym i poważnym problemem w leczeniu chorych na gruźlicę jest powstawanie oporności prątków na leki przeciwprątkowe. W Polsce w 2008 roku zarejestrowano 188 przypadków oporności bakterii na co najmniej 1 lek przeciwprątkowy oraz 55 chorych z lekoopornością wielolekową (tj. co najmniej na Izoniazyd i Rifampicynę). W 2009 roku wg danych GUS-u w Polsce zmarło 743 chorych na gruźlicę.
Mimo szerokiej gamy chemioterapeutyków (Fluorocinolonu, Rifambutyny, Klofazyminy, Amoksycyliny, Pirazynamidu oraz Etambutolu) choroba ta wciąż pozostaje ogromnym problemem współczesnej medycyny. Osłona komórek prątków wyróżnia je spośród drobnoustrojów. Składa się na nią błona cytoplazmatyczna, ściana komórkowa i zewnętrzna otoczka (capsula), a unikalna struktura mykobakteryjnej ściany komórkowej chroni komórkę przed otoczeniem i stanowi trudną do pokonania barierę dla leków. Problem stanowi zdolność prątków do zwalniania metabolizmu i przeżycia w tkankach w stanie uśpienia (prątki drzemiące, dormanty) i wole tempo wzrostu. Prątki z łatwością wytwarzają mechanizmy opornościowe na leki stosowane w terapii. Konieczne jest więc poszukiwanie nowych leków. Niestety przez ostatnie czterdzieści lat nie odkryto żadnych substancji o nowym mechanizmie działania, których aktywność przeciwprątkowa pozwoliłaby na ich wykorzystanie w terapii.
Nieoczekiwanie okazało się, że określone /V-podstawione-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamidu związki będące przedmiotem wynalazku wykazują aktywność wobec wirulentnego szczepu Mycobacterium bovis AN5, jak również awirulentnych szczepów Mycobacterium smegmatis, Mycobacterium Hs/Ra. Aktywność związków według wynalazku wobec wirulentnego szczepu Mycobacterium bovis AN5, jak również wobec szczepów modelowych dla Mycobacterium tuberculosis, tj. awirulentnych szczepów Mycobacterium smegmatis, Mycobacterium Hs/Ra świadczy o tym, że związki te mogą mieć zastosowanie w leczeniu gruźlicy.
PL 230 472 Β1
Przedmiotem wynalazku jest nowe zastosowanie medyczne związków o wzorze ogólnym I:
(i) w którym R oznacza podstawnik wybrany z grupy obejmującej cykloheksyl, 1 -naftyl, n-butyl, w leczeniu i profilaktyce gruźlicy.
Związki o wzorze (I) według wynalazku, to związki o małej masie cząsteczkowej, które zdolne są do przenikania przez błonę komórkową drobnoustroju i działania na prątki. Uzyskane wyniki dowiodły, że grupa pochodnych pirazolinonu o wzorze (I) (gdzie R ma podane wyżej znaczenie) wywiera wpływ na hamowanie namnażania wirulentnego szczepu Mycobacterium bovis AN5, jak również awirulentnych szczepów Mycobacterium smegmatis, Mycobacterium Hs/Ra, i grupa tych związków może być zastosowana jako substancja aktywna do wytwarzania preparatów przeciwgruźliczych.
Pochodne pirazolu o wzorze (I) hamują wzrost prątków w stężeniach MIC porównywalnych do stężeń testowanych antybiotyków wzorcowych (Izoniazyd, Rifampicyna, Etambutol). Jest to szczególnie istotne w świetle narastającego zjawiska lekooporności Mycobacterium na stosowane w terapii leki. Uzyskane wyniki świadczą o silnych właściwościach bójczych badanych związków względem mycobakterii. Skuteczność powyższych substancji w tak niskich stężeniach stanowi potencjalną perspektywę zastosowania ich w lecznictwie. W świetle uzyskanych wyników ważne jest, że Λ/-(1 -naftylo)-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamid (R4) okazał się nietoksyczny wobec komórek eukariotycznych. Ocenę cytotoksyczności związku określano na podstawie pomiaru żywotności komórek linii Vero, wykonanego metodą kolorymetryczną z użyciem MTT (3-(4,5-dimetylotiazol-2-yl)-2,5-difenylobromek tetrazolu) i opisano w publikacji Pitucha i inni (Synthesis, structure and antibacterial evaluation of some M-substituted 3-amino-5-hydroxy-4-phenyl-1H-pyrazole-1-carboxamides, Pitucha M., Kosikowska U., Mazur L., Malm A. Medicinal Chemistry, 2011, 7, 697-703). Dodatkowo synteza związków o wzorze (I) jest jednoetapowa, ekonomiczna i wydajna, co ma istotne znaczenie w przypadku komercjalizacji wynalazku wg patentu.
Przykłady
Związki /V-podstawione-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamidu według wynalazku można otrzymać w znany, w stanie techniki, sposób, zgodnie z procesem syntezy według publikacji Pitucha M. et al. (Synthesis, structure and antibacterial evaluation of some M-substituted 3-amino-5-hydroxy-4-phenyl-1H-pyrazole-1-carboxamides, Pitucha M., Kosikowska U., Mazur L., Malm A. Medicinal Chemistry, 2011, 7, 697-703). I tak związki oznaczone w poniższych przykładach jako R3, R4 i R8 uzyskano w przeprowadzonej w środowisku bezwodnego acetonitrylu reakcji hydrazydu kwasu 1-fenylocyjanooctowego odpowiednio z:
izocyjanianem cykloheksylu, uzyskując związek dalej oznaczony w przykładach jako R3, izocyjanianem 1 -naftylu, uzyskując związek dalej oznaczony w przykładach jako R4, oraz izocyjanianem n-butylu, uzyskując związek dalej oznaczony w przykładach jako R8.
R3 w poniższych przykładach oznacza zatem /V-cykloheksylo-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamid, R4 w poniższych przykładach to /V-(1-naftylo)-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamid, zaś R8 w poniższych przykładach to /V-butylo-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamid.
Przykład 1
Wpływ obecności związków /V-podstawionych-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamidu na namnażanie Mycobacterium smegmatis oraz Mycobacterium Hs/Ra określony metodą rozcieńczeń w porównaniu ze streptomycyną, jako antybiotykiem wzorcowym.
Do badań biologicznych wykorzystano zw. R4 (A/-(1-naftylo)-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamid) oraz R8 (/V-butylo-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamid).
Dla każdej z badanych substancji przygotowano szereg 7 probówek z wyjałowionym podłożem Mu llerHinton Broth OXOID LTD (Anglia). Sześć z nich zawierało po 4 ml bulionu, a jedna 8 ml płynnego podłoża.
PL 230 472 Β1
Aby uzyskać kolejne rozcieńczenia badanej substancji, z probówki pobrano za pomocą pipety 409,6 ml bulionu i wprowadzono równoważną objętość roztworu badanej substancji w DMSO o stężeniu 20 mg/ml. Tym sposobem stężenie badanej substancji wynosiło 1024 μΙ/ml. Następnie zawartość wymieszano i sterylnie przeniesiono 4 ml bulionu z badaną substancją do kolejnej probówki. Procedurę powtarzano dla kolejnych probówek. Tym sposobem uzyskano następujące rozcieńczenia analizowanej substancji: 1024, 512, 256, 128,64,32 μΙ/ml. Następnym punktem analizy było wprowadzenie do każdej z 7 probówek po 10 μΙ zawiesiny bakterii, której zmętnienie wynosiło ok. 0,5 McFarlanda. Kontrolę stanowiła probówka, zawierająca 4 ml pożywki wyłącznie z zawiesiną bakterii. Analogicznie postępowano chcąc uzyskać szeregi niższych stężeń. Wyniki odczytywano po 24 godzinnej inkubacji w temperaturze 37°C. Ocenie poddawano zmętnienie bulionu w 6 probówkach. Odniesienie stanowiła probówka z kontrolą, zawierająca 4 ml bulionu, inokulowanego taką samą ilością bakterii. Wartość MIC wyznaczało najniższe stężenie substancji, przy którym nie obserwowaliśmy zmętnienia, tylko przejrzyste podłoże. Jako antybiotyku wzorcowego użyto streptomycyny.
W badaniach dotyczących aktywności przeciwgruźliczej związków /V-podstawionych-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamidu wykazano po raz pierwszy, że związki będące przedmiotem wynalazku hamowały namnażanie Mycobacterium smegmatis oraz M.HjrRa (Tabela 1). Uzyskane i przedstawione w tabeli 1 wyniki świadczą o wyjątkowej skuteczności przeciwprątkowej badanych związków, a otrzymane wartości MIC dla tych substancji są zbliżone do MIC antybiotyku wzorcowego (Streptomycyny).
Tabela 1
Wpływ związków A/-podstawionych-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamidu na namnażanie Mycobacterium smegmatis oraz M.H37Ra określony metodą rozcieńczeń
| Związek badany/antybiotyk | MIC (pg/ml) | |
| M. smegmatis | M.HsrRa | |
| R3 | 16 | 32___________ |
| R4 | 8 | 8 |
| R8 | 64 | 32 |
| Streptomycyna (kontrola) | >64 | >128 |
Przykład 2
Wpływ obecności związków /V-podstawionych-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamidu na namnażanie Mycobacterium smegmatis oraz Mycobacterium H37Ra określony metodą rozcieńczeń w porównaniu z Izoniazydem, Rifampicyną, Etambutolem oraz Pyrazynamidem jako antybiotykami wzorcowymi.
Do badań biologicznych wykorzystano związki R3 (N-cykloheksylo-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamid), R4 (/V-(1-naftylo)-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamid) oraz R8 (N-butylo-3-amino-4-fenylo-5-okso-5 pirazolinokarboksamid).
Wartości MIC dla badanych substancji i wybranych antybiotyków wyznaczono metodą dwukrotnego rozcieńczania w podłożu płynnym Middlebrook 7H9 (Difco - Becton Dickinson & Company USA) wzbogaconego dodatkiem OADC (zawierającym: NaCI 8,5 g; albuminę wołową 50 g; dekstrozę 20 g; katalazę 0,03 g i kwas olejowy 0,6 ml w 1 I H2O). Efekt hamowania wzrostu prątków określany był wizualnie jako brak zmętnienia w próbce po 48 h inkubacji z testowaną substancją lub antybiotykiem wzorcowym. Do inokulacji pożywek używano zawiesiny bakterii o gęstości optycznej mierzonej przy 550 nm (OD550) oznaczonej numerem 1 w skali McFarlanda. Zmętnienie zawiesiny mierzono przy użyciu nefelometru BD PhoenixSpec firmy Becton Dickinson & Company USA. Wartości MIC badanych związków zestawiono w tabeli nr 2.
Tabela 2
Wartości MIC badanych związków (R3, R4, R8) i antybiotyków 20 wzorcowych (Izoniazyd, Rifampicyna, Etambutol, Pyrazynamid) hamujących wzrost Mycobacterium H37Ra i Mycobacterium smegmatis
| Związek badany/antybiotyk | MIC (pg/ml) | ||
| M. smegmatis | , M.HjrRa | ||
| R3 | 32 | i 32 | |
| R4__________________ | 16 | 8 | |
| R8 | 128 | 64 | |
| izoniazyd_________________ _______ | 64______________ | 32 | |
| Rifampicyna | 16 | 16 | |
| Etambutol | 32 | 16___ ______ | |
| Pyrazynamid | 1250 | 1250 | ____J |
PL 230 472 Β1
Na podstawie wartości MIC wyznaczonych dla badanych substancji można stwierdzić, że pochodne pirazolu R3, R4 i R8 skutecznie hamują wzrost prątków w stężeniach porównywalnych do stężeń testowanych antybiotyków wzorcowych. Wyjątkiem jest Pyrazynamid, który hamuje wzrost bakterii w bardzo wysokich stężeniach, przekraczających 1 mg/ml, co jest zgodne z danymi literaturowymi w odniesieniu do saprofitycznych szczepów mykobakterii.
Przykład 3
Wpływ obecności związków /V-podstawionych-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamidu na namnażanie Mycobacterium bovis AN5 określony metodą rozcieńczeń w porównaniu z Izoniazydem, Rifampicyną, Etambutolem oraz Pyrazynamidem jako antybiotykami wzorcowymi.
Do badań biologicznych wykorzystano związki R3 (/V-cykloheksylo-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamid), R4 (/V-(1-naftylo)-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamid) oraz R8 (/V-butylo-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamid).
W badaniach użyto szczep wzorcowy Mycobacterium bovis AN5. Badanie polegało na przygotowaniu serii próbek z płynnym podłożem wzrostowym dla prątków rozcieńczanym dwukrotnie z zawartością testowanych związków (R3, R4, R8) i antybiotyków wzorcowych (Izoniazyd, Rifampicyna, Etambutol, Pyrazynamid) w stężeniu od 500 μg do 0,007 μg. Antybiotyki przygotowywano w stężeniu wyższym niż stosowane w doświadczeniu, rozpuszczano w sterylnym rozpuszczalniku, dzielono na porcje i przechowywano w temperaturze -20°C. Rozmrożonych porcji nie zamrażano ponownie, ani ponownie nie używano. Następnie do każdej probówki dodawano 100 μΙ zawiesiny danego drobnoustroju z hodowli roboczej o gęstości 0,5 w skali McFarlanda. Kontrole stanowiły hodowle bez posiewu prątków (kontrola podłoża), probówki z posiewem trzymane w temperaturze +4°C (kontrola posiewu), probówki z posiewem bez dodatku antybiotyku (kontrola wzrostu) oraz probówki z najwyższym stosowanym w badaniu stężeniem rozcieńczalnika antybiotyku (kontrola rozcieńczalnika). Całość inkubowano w temperaturze +37°C kontrolując dwukrotnie w ciągu tygodnia pojawienie się wzrostu w hodowli. Wzrost obserwowano w okresie 4 tygodni. Najniższe stężenie antybiotyku, przy którym nie rozwijają się mikroorganizmy wyznaczało wartość MIC. Kryterium wyniku dodatniego stanowiło osiągnięcie gęstości >= 0,5 w skali McFarlanda. Zmętnienie hodowli mierzono w nefelometrze DENSILAMETER, Pliva, LACHEMA. Wyniki badań przedstawiono w tabeli nr 3.
Testy przeprowadzone na szczepie M. bovis wykazały działanie hamujące wszystkich badanych substancji. Najmniejszą skuteczność stwierdzono w przypadku substancji R3, dla której wartości MIC wyniosły 31,25 μg/ml i 62,5 μg/ml dla szczepu referencyjnego. Wartości MIC dla substancji R4 i R8 wynosiły 7,812 μg/ml wobec szczepu referencyjnego. Zauważyć należy, że w eksperymencie wykorzystany wzorcowy antybiotyk Pyrazynamid w badanych stężeniach nie wykazywał hamującego działania wobec M. bovis (MIC powyżej 500 ptg/ml).
Przykład 4
Wpływ /V-podstawionych-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamidu na namnażanie Mycobacterium smegmatis oraz Mycobacterium Hs/Ra określony dyfuzyjną metodą studzienkową.
Do badań biologicznych wykorzystano związki R3 (/V-cykloheksylo-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamid), R4 (/V-(1-naftylo)-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamid) oraz R8 (/V-butylo-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamid).
Podłoże przygotowano z firmowego preparatu - Miieller-Hinton agarOXOID LTD (Anglia). W tym celu odważono odpowiednią jego ilość do każdej z 12, przygotowanych wcześniej kolbek Erlenmeyera. Następnie za pomocą cylindra miarowego dodano po 25 ml wody destylowanej i rozpuszczono w niej preparat. Sterylizacje podłoża przeprowadzono w autoklawie w 12°C przez 15 min. Po ochłodzeniu, jałowe podłoże wylano w komorze laminarnej na plastikowe płytki Petriego, tak by uzyskać jego jednakową grubość - 4 mm (25 ml pożywki na płytkę o średnicy 100 mm). Po zestaleniu podłoża płytki przeniesiono do chłodni i przechowywano w temperaturze 2-8°C. Następnie odważono po 5 mg każdej z badanych substancji do sterylnych probówek Eppendorff i rozpuszczono w 1 ml DMSO, tak by ich stężenie wynosiło 5 mg/ml. Jako wzorca użyto roztworu antybiotyku (Streptomycyny), który rozpuszczono w odpowiedniej ilości wody destylowanej.
Z uprzednio przygotowanych hodowli prątków zeskrobano je ezą ze skosów Lówensteina i przeniesiono do płynnych pożywek. Otrzymane zawiesiny bakterii inkubowano przez 24 godziny w temperaturze 37°C. Następnie rozcieńczono je tak, by zmętnienie mierzone za pomocą nefelometru wynosiło w przybliżeniu 0,5 Mcfarlanda. Na wcześniej przygotowane i oznaczone płytki z pożywką Miieller-Hinton agar naniesiono po 200 μΙ każdej zawiesiny i rozprowadzano je równomiernie na całej powierzchni płytek za pomocą jałowych wymazówek. Po ich wyschnięciu, przy użyciu sterylnego tipa o średnicy 0,4 cm,
PL 230 472 Β1 wyciskano w podłożu studzienki. Następnie kolejno każdą z nich napełniono 50 μΙ roztworu badanych substancji. Po 24 godzinnej inkubacji w temperaturze 37°C za pomocą linijki mierzono średnicę uzyskanych stref zahamowania wzrostu drobnoustrojów (Tabela 4).
Tabela 4
Wielkość stref zahamowania wzrostu Mycobacterium smegmatis oraz M.HiTRa pod wpływem /V-podstawionych-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamidu
| Związek badany/antybiotyk | Strefa zahamowania wzrostu (mm) | |
| M. smegmatis | M.H37Ra | |
| R3 | 32 | 20 |
| R4 | 31 | 20 |
| R8 | 29 | 19 |
| Streptomycyna (kontrola) | 11 | 21 ' |
Przeprowadzone badania potwierdziły aktywność A/-podstawionych-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamidu wobec M. smegmatis oraz M.HsrRa. Uzyskane wyniki obrazują wyjątkową skuteczność przeciwprątkową substancji dla których R oznacza cykloheksyl, 1-naftyl, n-butyl. Dla tych substancji wartości MIC są zbliżone do MIC antybiotyku wzorcowego (Streptomycyny). Świadczy to o ich silnych właściwościach bójczych względem mycobakteńi. Skuteczność powyższych substancji w tak niskich stężeniach stanowi potencjalną perspektywę zastosowania ich w lecznictwie.
Uzyskane dyfuzyjną metodą studzienkową strefy zahamowania wzrostu Mycobacterium smegmatis oraz M.HsrRa wobec badanych substancji potwierdziły wcześniejsze wyniki. Na podstawie wykonanej analizy możemy stwierdzić, że związki A/-podstawione-3-amino-4-fenylo-5-okso-pirazolinokarboksamidu według wynalazku wykazały silne działanie przeciwprątkowe, przy czym dla substancji dla których we wzorze ogólnym (I) R oznacza cykloheksyl, 1-naftyl, n-butyl obserwowano zahamowanie wzrostu drobnoustrojów już przy niskich stężeniach.
Claims (1)
- Zastrzeżenie patentowe1. Związek o wzorze ogólnym I:(I) w którym R oznacza podstawnik wybrany z grupy obejmującej cykloheksyl, 1 naftyl, n-butyl, do zastosowania w leczeniu i profilaktyce gruźlicy.Departament Wydawnictw UPRPCena 2,46 zł (w tym 23% VAT)
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL414926A PL230472B1 (pl) | 2015-11-24 | 2015-11-24 | Zastosowanie medyczne N-podstawionych pochodnych 3-am ino-4- fenylo-5- okso-pirazolinokarboksamidu do wytwarzania leku |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL414926A PL230472B1 (pl) | 2015-11-24 | 2015-11-24 | Zastosowanie medyczne N-podstawionych pochodnych 3-am ino-4- fenylo-5- okso-pirazolinokarboksamidu do wytwarzania leku |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL414926A1 PL414926A1 (pl) | 2017-06-05 |
| PL230472B1 true PL230472B1 (pl) | 2018-10-31 |
Family
ID=58793727
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL414926A PL230472B1 (pl) | 2015-11-24 | 2015-11-24 | Zastosowanie medyczne N-podstawionych pochodnych 3-am ino-4- fenylo-5- okso-pirazolinokarboksamidu do wytwarzania leku |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL230472B1 (pl) |
-
2015
- 2015-11-24 PL PL414926A patent/PL230472B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL414926A1 (pl) | 2017-06-05 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Sun et al. | Antituberculosis activity of certain antifungal and antihelmintic drugs | |
| Singher et al. | Distribution of radioactive sulfur in the rat | |
| Borrelli et al. | Antimycobacterial activity of UDP-galactopyranose mutase inhibitors | |
| CN111789831B (zh) | 苯乙肼在制备抗脓肿分枝杆菌感染的药物中的应用 | |
| US4963565A (en) | In vivo treatment of mycobacterial infections with 6-cyclo octylamino-5,8-quinoline quinone | |
| Lam et al. | Antifungal study of substituted 4-pyridylmethylene-4′-aniline Schiff bases | |
| CN109496211B (zh) | 一种抗白色念珠菌的哌嗪类衍生物及其制备方法与应用 | |
| CN111870594B (zh) | 苯乙肼在制备抗偶发分枝杆菌感染的药物中的应用 | |
| KR100854309B1 (ko) | 항미코박테리아성 약제학적 조성물 | |
| PL230472B1 (pl) | Zastosowanie medyczne N-podstawionych pochodnych 3-am ino-4- fenylo-5- okso-pirazolinokarboksamidu do wytwarzania leku | |
| CN119970757A (zh) | 氯化水杨酰苯胺的应用和药物 | |
| CN116808035B (zh) | 199596-05-9作为抗结核化合物的应用 | |
| US20130324598A1 (en) | Treating mycobacterial infection with cu+/++ boosting therapeutics | |
| Hrytsenko et al. | The study of the antimicrobial activity of a soft dosage form with the antiviral effect | |
| CN103120689B (zh) | 一种吡唑类化合物在制备抗结核分枝杆菌药物中的应用 | |
| CN119235858A (zh) | 一种那氟沙星的应用 | |
| CN117122595A (zh) | 吡啶衍生物的用途 | |
| CN120514715B (zh) | 磺胺类化合物的应用、结核分枝杆菌抑制剂、药物组合物及其应用 | |
| RU2683573C1 (ru) | Противотуберкулезное средство на основе n-[4-(4-аминобензсульфанил)-фенил]-2-бензоиламинобензамида, обладающее низкой токсичностью | |
| Gao et al. | A novel benzothiazinethione analogue SKLB-TB1001 displays potent antimycobacterial activities in a series of murine models | |
| CN116808028B (zh) | 一种苯并噻唑衍生化合物作为抗结核化合物的应用 | |
| CN114259501A (zh) | 杀结核菌素在制备脓肿分枝杆菌和/或结核分枝杆菌的抑菌剂中的应用 | |
| CN112920168B (zh) | 一种他匹莫德及其衍生物或其药学上可接受的盐的新用途与结核分枝杆菌抑制剂 | |
| CN103122368B (zh) | 一种喹喔啉类化合物作为抗结核分枝杆菌抑制剂的应用 | |
| Swatko-Ossor et al. | Do new N-substituted 3-amino-4-phenyl-5-oxo-pyrazolinecarboxamide derivatives exhibit antitubercular potential? |