PL234670B1 - Zastosowanie wyciągu z liści miłorzębu japońskiego Ginkgo biloba - Google Patents
Zastosowanie wyciągu z liści miłorzębu japońskiego Ginkgo biloba Download PDFInfo
- Publication number
- PL234670B1 PL234670B1 PL423496A PL42349617A PL234670B1 PL 234670 B1 PL234670 B1 PL 234670B1 PL 423496 A PL423496 A PL 423496A PL 42349617 A PL42349617 A PL 42349617A PL 234670 B1 PL234670 B1 PL 234670B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- egb
- hhv
- extract
- viruses
- cells
- Prior art date
Links
- 239000000284 extract Substances 0.000 title claims description 32
- 244000194101 Ginkgo biloba Species 0.000 title claims description 10
- 241000700588 Human alphaherpesvirus 1 Species 0.000 claims description 34
- 241000701074 Human alphaherpesvirus 2 Species 0.000 claims description 33
- 241000700605 Viruses Species 0.000 claims description 33
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 12
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 10
- 235000008100 Ginkgo biloba Nutrition 0.000 claims description 8
- MOLPUWBMSBJXER-YDGSQGCISA-N bilobalide Chemical compound O([C@H]1OC2=O)C(=O)[C@H](O)[C@@]11[C@@](C(C)(C)C)(O)C[C@H]3[C@@]21CC(=O)O3 MOLPUWBMSBJXER-YDGSQGCISA-N 0.000 claims description 7
- 208000001688 Herpes Genitalis Diseases 0.000 claims description 5
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 claims description 5
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 claims description 5
- 201000004946 genital herpes Diseases 0.000 claims description 5
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 5
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 claims description 4
- YXHVCZZLWZYHSA-UHFFFAOYSA-N (Z)-6-[8-pentadecenyl]salicylic acid Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCC1=CC=CC(O)=C1C(O)=O YXHVCZZLWZYHSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 208000004898 Herpes Labialis Diseases 0.000 claims description 3
- 208000029433 Herpesviridae infectious disease Diseases 0.000 claims description 3
- 206010067152 Oral herpes Diseases 0.000 claims description 3
- 210000004877 mucosa Anatomy 0.000 claims description 3
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 claims description 3
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 claims description 3
- 238000011200 topical administration Methods 0.000 claims description 3
- YXHVCZZLWZYHSA-FPLPWBNLSA-N Ginkgoic acid Chemical compound CCCCCC\C=C/CCCCCCCC1=CC=CC(O)=C1C(O)=O YXHVCZZLWZYHSA-FPLPWBNLSA-N 0.000 claims description 2
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 claims description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 32
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 18
- 230000000120 cytopathologic effect Effects 0.000 description 14
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 14
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 13
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 13
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 13
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 13
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 10
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 10
- 230000003253 viricidal effect Effects 0.000 description 10
- 108091003079 Bovine Serum Albumin Proteins 0.000 description 9
- 239000006144 Dulbecco’s modified Eagle's medium Substances 0.000 description 9
- 239000012091 fetal bovine serum Substances 0.000 description 9
- 241001529453 unidentified herpesvirus Species 0.000 description 9
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 8
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 description 8
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 description 8
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 7
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 7
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 5
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 5
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 5
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 5
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 5
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 4
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 4
- 230000029812 viral genome replication Effects 0.000 description 4
- 229960004150 aciclovir Drugs 0.000 description 3
- MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N aciclovir Chemical compound N1C(N)=NC(=O)C2=C1N(COCCO)C=N2 MKUXAQIIEYXACX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- -1 biflavones Chemical class 0.000 description 3
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 3
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 3
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 3
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 description 3
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 3
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 3
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 3
- 108090000288 Glycoproteins Proteins 0.000 description 2
- 102000003886 Glycoproteins Human genes 0.000 description 2
- 241000700586 Herpesviridae Species 0.000 description 2
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 2
- ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N L-glutamine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(N)=O ZDXPYRJPNDTMRX-VKHMYHEASA-N 0.000 description 2
- IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N N-Heptane Chemical compound CCCCCCC IMNFDUFMRHMDMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- UCTWMZQNUQWSLP-UHFFFAOYSA-N adrenaline Chemical compound CNCC(O)C1=CC=C(O)C(O)=C1 UCTWMZQNUQWSLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 210000004204 blood vessel Anatomy 0.000 description 2
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 2
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 2
- 210000003169 central nervous system Anatomy 0.000 description 2
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 2
- VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N dopamine Chemical compound NCCC1=CC=C(O)C(O)=C1 VYFYYTLLBUKUHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 description 2
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 229940106580 ginkgo biloba leaf extract Drugs 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 2
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 230000007420 reactivation Effects 0.000 description 2
- 206010040882 skin lesion Diseases 0.000 description 2
- 231100000444 skin lesion Toxicity 0.000 description 2
- 239000011550 stock solution Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 2
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 2
- ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 2-Butanone Chemical compound CCC(C)=O ZWEHNKRNPOVVGH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 1
- VWFCHDSQECPREK-LURJTMIESA-N Cidofovir Chemical compound NC=1C=CN(C[C@@H](CO)OCP(O)(O)=O)C(=O)N=1 VWFCHDSQECPREK-LURJTMIESA-N 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 101710121417 Envelope glycoprotein Proteins 0.000 description 1
- 239000009429 Ginkgo biloba extract Substances 0.000 description 1
- 206010020751 Hypersensitivity Diseases 0.000 description 1
- 206010021143 Hypoxia Diseases 0.000 description 1
- XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N IDUR Chemical compound C1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C(I)=C1 XQFRJNBWHJMXHO-RRKCRQDMSA-N 0.000 description 1
- 229930182816 L-glutamine Natural products 0.000 description 1
- 208000019693 Lung disease Diseases 0.000 description 1
- 206010058467 Lung neoplasm malignant Diseases 0.000 description 1
- 201000009906 Meningitis Diseases 0.000 description 1
- 238000000342 Monte Carlo simulation Methods 0.000 description 1
- 206010029155 Nephropathy toxic Diseases 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 239000004793 Polystyrene Substances 0.000 description 1
- 102100021696 Syncytin-1 Human genes 0.000 description 1
- 238000011053 TCID50 method Methods 0.000 description 1
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 description 1
- 108010003533 Viral Envelope Proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 1
- 230000007815 allergy Effects 0.000 description 1
- 239000003443 antiviral agent Substances 0.000 description 1
- 210000000436 anus Anatomy 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 230000036772 blood pressure Effects 0.000 description 1
- 210000005013 brain tissue Anatomy 0.000 description 1
- 210000000748 cardiovascular system Anatomy 0.000 description 1
- 150000001765 catechin Chemical class 0.000 description 1
- ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N catechin Natural products OC1Cc2cc(O)cc(O)c2OC1c3ccc(O)c(O)c3 ADRVNXBAWSRFAJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000005487 catechin Nutrition 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 238000012054 celltiter-glo Methods 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000003727 cerebral blood flow Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229960000724 cidofovir Drugs 0.000 description 1
- 230000004087 circulation Effects 0.000 description 1
- 229920002770 condensed tannin Polymers 0.000 description 1
- 239000006071 cream Substances 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 231100000263 cytotoxicity test Toxicity 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 229930004069 diterpene Natural products 0.000 description 1
- 229960003638 dopamine Drugs 0.000 description 1
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- 206010014599 encephalitis Diseases 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 229930003939 flavanonol Natural products 0.000 description 1
- 150000002210 flavanonols Chemical class 0.000 description 1
- 150000002213 flavones Chemical class 0.000 description 1
- HVQAJTFOCKOKIN-UHFFFAOYSA-N flavonol Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C(O)=C1C1=CC=CC=C1 HVQAJTFOCKOKIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000002216 flavonol derivatives Chemical class 0.000 description 1
- 235000011957 flavonols Nutrition 0.000 description 1
- 229940068052 ginkgo biloba extract Drugs 0.000 description 1
- 235000020686 ginkgo biloba extract Nutrition 0.000 description 1
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 description 1
- 208000019622 heart disease Diseases 0.000 description 1
- 230000007954 hypoxia Effects 0.000 description 1
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 1
- 230000000415 inactivating effect Effects 0.000 description 1
- 208000014674 injury Diseases 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 208000028867 ischemia Diseases 0.000 description 1
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 1
- 238000002796 luminescence method Methods 0.000 description 1
- 201000005202 lung cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000020816 lung neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000012423 maintenance Methods 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 1
- 210000004779 membrane envelope Anatomy 0.000 description 1
- 238000000386 microscopy Methods 0.000 description 1
- 230000007694 nephrotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000417 nephrotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 210000000653 nervous system Anatomy 0.000 description 1
- 231100000065 noncytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000005985 organic acids Nutrition 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 230000035515 penetration Effects 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 230000002093 peripheral effect Effects 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- 239000002831 pharmacologic agent Substances 0.000 description 1
- 229920002223 polystyrene Polymers 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 230000001681 protective effect Effects 0.000 description 1
- 238000011002 quantification Methods 0.000 description 1
- 239000002994 raw material Substances 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 description 1
- 239000002356 single layer Substances 0.000 description 1
- 208000010110 spontaneous platelet aggregation Diseases 0.000 description 1
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 1
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 230000000699 topical effect Effects 0.000 description 1
- 230000008733 trauma Effects 0.000 description 1
- 210000000427 trigeminal ganglion Anatomy 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
- 230000008478 viral entry into host cell Effects 0.000 description 1
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 1
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
Landscapes
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Description
Opis wynalazku
Wynalazek dotyczy przeciwwirusowej aktywności pełnego ekstraktu z liści miłorzębu japońskiego (Ginkgo biloba, EGb) względem wirusów opryszczki, zwłaszcza wirusa opryszczki wargowej HHV-1 (Human herpesvirus 1) oraz wirusa opryszczki narządów płciowych HHV-2 (Human herpesvirus 2). Dzięki temu wynalazek może znaleźć zastosowanie w leczeniu zmian skórnych, czyli hamowaniu replikacji wirusów w przebiegu chorób wywołanych tymi wirusami.
Obecnie na świecie kilkanaście tysięcy różnych rodzajów roślin wykorzystywanych jest w celach medycznych ze względu na swoje właściwości terapeutyczne. Wyciągi z liści miłorzębu japońskiego (Ginkgo biloba), dalej określane w skrócie jako „EGb”, należą do najpowszechniejszych fitoterapeutyków na świecie. Liście miłorzębu japońskiego są surowcem leczniczym wykorzystywanym w tradycyjnej medycynie chińskiej od tysięcy lat w leczeniu chorób serca i płuc. Produkty zawierające EGb oraz sam ekstrakt dostępne są także komercyjnie w Stanach Zjednoczonych, Azji i Europie. EGb zawiera ponad 60 bioaktywnych komponentów. Dominujące, farmakologicznie czynne składniki to: flawonoidy (flawony, flawonole i flawanonole, biflawony, katechiny i oligomeryczne proantocyjanidyny), terpenoidy (laktony diterpenowe, bilobalid) oraz kwasy organiczne. Przeważająca część wyciągów z G. biloba zawiera w swoim składzie 24% flawonoidów i 6% terpenoidów. W preparatach handlowych zawartość kwasów ginkgolowych wynosi mniej niż 5 ppm. Potwierdzone naukowo działanie EGb dotyczy korzystnego wpływu na układ nerwowy i sercowo-naczyniowy. Preparaty zawierające EGb wzmacniają ściany naczyń krwionośnych, obniżają ciśnienie krwi, przyczyniają się do zmniejszenia agregacji płytek krwi, alergii oraz reakcji zapalnych. Ponadto EGb stymuluje syntezę dopaminy i adrenaliny oraz działa ochronnie na tkankę mózgową, chroniąc ją przed następstwami niedotlenienia i niedokrwienia. Stosowanie ekstraktu zwiększa obwodowy i mózgowy przepływ krwi poprawiając krążenie w naczyniach krwionośnych.
Wśród licznych danych literaturowych wskazujących na terapeutyczne właściwości wyciągu EGb niewiele informacji dotyczy działania przeciwwirusowego pełnego ekstraktu lub związków chemicznych z niego izolowanych. Ograniczona jest także ilość informacji na temat skutecznego zastosowania EGb w profilaktyce oraz leczeniu chorób wirusowych lub schorzeń, w których reaktywacje latentnych infekcji wirusowych mają wpływ na przebieg choroby. Obecnie na rynku farmaceutycznym znajduje się sporo leków o działaniu przeciwwirusowym jednak skuteczność działania wielu z nich nie jest zadowalająca. Z tego względu już od dawna rekomendowane jest poszukiwanie n owych substancji o takiej aktywności, szczególnie pochodzenia naturalnego jako alternatywa dla komercyjnie stosowanych preparatów syntetycznych. Szczególnie interesujące jest poszukiwanie efektywniejszych i bardziej specyficznych leków o działaniu przeciwwirusowym przeciwko wirusom opryszczki HHV-1 i HHV-2, które dość często rozwijają oporność na intensywnie stosowane preparaty zawierające w składzie substancję aktywną acyklowir (ACV). Także cidofowir, stosowany w przypadku szczepów opornych na ACV, ma swoje ograniczenia w podawaniu ze względu na działanie nefrotoksyczne. Zakażenia wirusami opryszczki typu 1 i 2 należą do najpowszechniejszych na świecie. Pierwotne zakażenie, do którego dochodzi poprzez błonę śluzową lub uszkodzoną skórę, szybko przechodzi w stan latencji w zwojach trójdzielnych (HHV-1) lub lędźwiowo-krzyżowych (HHV-2). Pod wpływem różnych czynników, takich jak np. stres, uraz, osłabienie chorobą bakteryjną, ekspozycja na słońce wirusy mogą się aktywować w miejscu lub okolicy pierwotnego zakażenia wywołując ból oraz bardzo uciążliwe dolegliwości skórne (pęcherze wypełnione płynem surowiczym, w którym znajdują się aktywne wiriony). Zmiany skórne mogą pojawić się także na dłoniach lub odbycie. W skrajnych sytuacjach reaktywacja HHV-1 może prowadzić do groźnych powikłań, takich jak zapalenie mózgu czy zapalenie opon mózgowo-rdzeniowych. Zakażają się także dzieci od matek ciężarnych cierpiących na opryszczkę narządów płciowych, co może spowodować zapalenie ośrodkowego układu nerwowego (OUN). Leczenie zakażeń polega na skróceniu czasu infekcji pierwotnej i przeciwdziałaniu nawrotom zakażenia.
Celem wynalazku jest dostarczenie preparatu o przeciwwirusowej aktywności przeciwko wirusom z rodziny Herpesviridae, w szczególności HHV-1 i HHV-2. Pożądane jest, aby taki preparat nie wykazywał jednocześnie działania toksycznego względem żywych komórek ssaczych, w których namnażają się wirusy.
Przedmiotem wynalazku jest wyciąg z liści miłorzębu japońskiego Ginkgo biloba (EGb) do stosowania w leczeniu lub profilaktyce zakażeń wirusem opryszczki, zwłaszcza wirusem wybranym spośród: HHV-1 i HHV-2.
PL 234 670 B1
Korzystnie, EGb do stosowania według wynalazku charakteryzuje się tym, że zawiera:
- flawonoidy w ilości od 22 do 27% wagowych w suchym ekstrakcie,
- bilobalid w ilości od 2,6 do 3,2% wagowych w suchym ekstrakcie,
- ginkolidy A, B i C w ilości od 2,8 do 3,4% wagowych w suchym ekstrakcie,
- kwas ginkgolowy w ilości nie przekraczającej 5 ppm.
Korzystnie, EGb do stosowania według wynalazku charakteryzuje się tym, że jest stosowany w postaci preparatu farmaceutycznego do podawania miejscowego, zwłaszcza podawania na zainfekowaną lub narażoną na infekcję skórę lub śluzówkę.
Korzystnie, EGb do stosowania według wynalazku charakteryzuje się tym, że jest stosowany do leczenia miejscowego objawów skórnych występujących w przebiegu opryszczki wargowej lub opryszczki narządów płciowych.
Istotą wynalazku jest wykazanie dla EGb silnej zdolności inaktywacji wirusów HHV-1 i HHV-2. EGb działa bezpośrednio na wirusy inaktywując je/hamując replikację w żywych komórkach. Istotą wynalazku jest zatem możliwość zastosowania/podania miejscowego ekstraktu EGb w leczeniu objawów skórnych zakażenia wymienionymi herpeswirusami. Preparat może być stosowany w dowolnej postaci preparatu farmaceutycznego, zwłaszcza w formie maści, kremu lub roztworu/zawiesiny, nadającego się do podawania miejscowego i zawierającego oprócz EGb odpowiedni farmaceutycznie dopuszczalny nośnik lub zaróbkę.
Korzystnie, stosowany zgodnie z wynalazkiem EGb jest dostępnym komercyjnie ekstraktem z liści miłorzębu japońskiego spełniającym wymogi farmakopealne. Korzystnie EGb działa silnie wirusobójczo na oba wirusy. Korzystnie aktywność wirusobójcza EGb obserwowana jest już po 30 minutach i rośnie wraz z czasem inkubacji (0,5 < 1 < 2 godziny). Korzystnie wraz ze wzrostem czasu ekspozycji wirusów na EGb wzrasta indeks selektywności, co oznacza, że coraz niższe stężenia ekstraktu inaktywują cząstki HHV-1 i HHV-2. Korzystnie EGb w krótszym czasie skuteczniej inaktywuje wiriony HHV-1, podczas gdy dłuższy czas inkubacji pozwala na skuteczniejsze inaktywowanie wirionów HHV-2.
Opisane poniżej przykłady wykonania potwierdzają korzystne właściwości przeciwwirusowe wyciągu EGb.
W doświadczeniach wykorzystano:
1. Wirusy z rodziny Herpesviridae:
• HHV-1 - wirus opryszczki typu 1 (Human herpesvirus 1; szczep MacIntyre; ATTC VR-539) • HHV-2 - wirus opryszczki typu 2 (Human herpesvirus 2; szczep MS, ATTC VR-540)
2. Linię komórkową A549 - linia komórek nabłonkopodobnych ludzkiego raka płuc (ATCC CCL 185). Linia dedykowana do namnażania HHV-1 i HHV-2. Uzyskane miana wirusów na linii wyniosły dla obu wirusów 105 TCIDs0/ml (tissue culture infectious dose; 50% dawka zakaźna dla hodowli komórek, czyli takie rozcieńczenie wirusa, które wywołuje efekt cytopatyczny w 50% zakażonych hodowli komórkowych).
3. Media hodowlane i odczynniki potrzebne do hodowli komórkowych:
• Medium wzrostowe - Dulbecco's Modified Eagle's Medium (DMEM) z dodatkiem 10% płodowej surowicy bydlęcej (fetal bovine serum, FBS) • Medium utrzymujące - DMEM dodatkiem 2% FBS
Media DMEM (Laboratorium Chemii Ogólnej (LChO) IITD PAN) uzupełniono dodatkowo L-glutaminą (2 Mm) (Sigma-Aldrich, Polska), penicyliną oraz streptomycyną (100 μg/ml) (Sigma-Aldrich, Polska). Przed użyciem FBS (Sigma-Aldrich, Polska) inaktywowano w temperaturze 56°C przez 30 minut. Płyny filtrowano na filtrze polistyrenowym 0,22 μm (EMD Millipore™ Steritop™ Sterile Vacuum Bottle-Top Filters).
4. Ekstrakt z miłorzębu japońskiego (Ginkgo biloba, EGb), preparat komercyjny, producent Martin Bauer Group, Finzelberg GmbH & Co. KG, Niemcy, Batch No. 16000375.
Suchy wyciąg z liści miłorzębu japońskiego - Ginkgo biloba (Ginkgonis extractum siccum raffinatum et quantificatum), kolor: jasno żółto-brązowy. Sposób otrzymywania przez producenta oraz skład EGb był zgodny z normą ustaloną w Farmakopei Europejskiej 8.0.
W skrócie, oczyszczony, suchy wyciąg z liści Ginkgo biloba otrzymany został poprzez zastosowanie ekstrakcji z użyciem odpowiedniego rozpuszczalnika organicznego (wybranego z grupy obejmującej: aceton, etanol, 2-butanon, heptan oraz ich mieszanin z wodą), korzystnie poprzez ekstrakcję za pomocą roztworu wodnego acetonu o stężeniu 65% obj., a następnie odparowanie rozpuszczalnika. Stosowany w przykładach wykonania suchy EGb zawierał:
a) flawonoidy (określone jako glikozydy flawonowe) 22-27% wag. w suchym ekstrakcie,
b) bilobalid 2,6-3,2% wag. w suchym ekstrakcie,
PL 234 670 Β1
c) ginkolidy A, B i C 2,8-3,4% wag. w suchym ekstrakcie,
d) kwas ginkgolowy maksymalnie 5 ppm.
Warunki przechowywania: suche miejsce, temperatura pokojowa, ciemna butelka. Rozpuszczalnik: DMSO (Sigma-Aldrich, Polska).
Przykład 1. Wyznaczanie nietoksycznych stężeń EGb względem komórek linii A549
W doświadczeniu wykorzystano jednowarstwowe, 24-godzinne hodowle komórkowe A549 (gęstość 2x105 kom/ml) o konfluencji >90%, prowadzone na płytkach 96-dołkowych. Komórki traktowano wcześniej przygotowanym roztworem EGb o określonych stężeniach 1000, 500, 400, 250, 200, 150, 125, 100, 50 oraz 25 μg/ml. W tym celu sproszkowany wyciąg EGb rozpuszczono w DMSO otrzymując roztwór wyjściowy 20 mg/ml. Całość mieszano dokładnie na vortexie do całkowitego rozpuszczenia. Następnie przygotowywano szereg rozcieńczeń preparatu jak wyżej do kolejnych doświadczeń z wykorzystaniem DMEM 2% FBS. Roztwór końcowy EGb (1 mg/ml), z którego przygotowywano badane stężenia, filtrowano na filtrze celulozowym (Celulose Acetate 0,22 μΠΊ, Millipore Corporation). Końcowe stężenie DMSO w próbach nanoszonych na komórki wynosiło <1%. Świeży roztwór EGb przygotowywano każdorazowo przed przystąpieniem do serii doświadczeń.
Po naniesieniu odpowiednich stężeń EGb hodowle komórkowe A549 inkubowano w inkubatorze w temperaturze 37°C i atmosferze 5% CO2, przez 72 godziny. Kontrolę stanowiły komórki A549 hodowane w płynie hodowlanym DMEM 2% FBS bez dodatku EGb. Po czasie inkubacji dokonywano oceny poziomu cytotoksyczności EGb pod mikroskopem odwróconym. Efekt cytotoksyczny (cytotoxic effect, CTE) określano w skali od 0 do 4 (Tabela 1), gdzie 0 - brak cytotoksycznego efektu, 1 - cytotoksyczność wobec 25% komórek, 2 - cytotoksyczność wobec 50% komórek, 3 - cytotoksyczność wobec 75% komórek oraz 4 - 100% cytotoksyczność wobec komórek linii A549. Doświadczenie wykonano 3-krotnie w dwóch niezależnych powtórzeniach każde.
Tabela 1
Ocena efektu cytotoksycznego (CTE)
| CTE | Cytotoksyczność [%] | Żywotność komórek [%] |
| 0 | 0 | 100 |
| 1 | 25 | 75 |
| 2 | 50 | 50 |
| 3 | 75 | 25 |
| 4 | 100 | 0 |
Ocenę cytotoksyczności EGb względem komórek A549 wykonano także metodą określenia liczby żywych komórek opartą na ilościowym oznaczeniu ATP, który jest wskaźnikiem metabolicznie aktywnych komórek (metoda luminescencyjna, Promega, CellTiter-Glo). Badania wykonano 3-krotnie w dwóch niezależnych powtórzeniach każde. Wyniki zostały podsumowane na figurze 1, na której została przedstawiona żywotność komórek A549 traktowanych EGb (n=6); CC5o=392,7 μg/ml.
WYNIKI:
1) EGb w zakresie stężeń od 400 do 1000 μg/ml wykazuje działanie cytotoksyczne (CTE=3-4) względem komórek A549. W morfologii komórek zaobserwowano syncytia komórkowe oraz lizę większości komórek. Niewielki efekt cytotoksyczny w postaci zmienionej morfologii komórek (komórki lekko obkurczone) zaobserwowano dla stężeń 250 i 200 μg/ml (CTE=1).
2) EGb w zakresie stężeń od 150 do 25 μg/ml jest całkowicie nietoksyczny dla komórek A549 (CTE=0).
3) Na podstawie wyników uzyskanych w teście pomiaru ATP wyznaczono CC50, czyli stężenie ekstraktu toksyczne dla 50% komórek hodowli (cytotoxic concentration), które wynosi 392,7 μg/ml. Test cytotoksyczności wykonano także dla DMSO. Rozpuszczalnik nie wykazywał cytotoksyczności względem komórek A549 w zakresie stężeń wykorzystanych w eksperymentach, czyli <1%.
PL 234 670 Β1
Przykład 2. Aktywność wirusobójcza EGb względem herpeswirusów HHV-1 i HHV-2
W celu określenia właściwości wirusobójczych ekstraktu tj. skuteczności inaktywacji wirusów testowych wykonano badania z wykorzystaniem odpowiednio: HHV-1 o mianie 105 TClDso/ml oraz HHV-2 o mianie 105 TClDso/ml.
Warianty doświadczenia: wirusy inkubowano w temperaturze pokojowej w obecności EGb w zakresie stężeń 500-25 μg/ml lub z samym płynem hodowlanym DMEM 2% FBS (kontrola negatywna) przez:
- 0,5 godziny,
- 1 godzinę,
- 2 godziny.
W tym celu sproszkowany wyciąg EGb rozpuszczono w DMSO otrzymując roztwór wyjściowy 20 mg/ml. Całość mieszano dokładnie na vortexie do całkowitego rozpuszczenia. Następnie przygotowano szereg rozcieńczeń preparatu jak wyżej z wykorzystaniem DMEM 2% FBS. Końcowe stężenie DMSO w próbach wynosiło <1% (stężenie takie nie wykazuje działania wirusobójczego). Roztwór EGb filtrowano na filtrze celulozowym. Świeży roztwór EGb przygotowywano każdorazowo przed przystąpieniem do serii doświadczeń. Kontrolę pozytywną doświadczenia stanowiły wirusy inkubowane w obecności 50% alkoholu etylowego, który działa wirusobójczo. Końcowe stężenie alkoholu na komórkach A549 wynosiło 5% (stężenie nietoksyczne). Kontrolę negatywną stanowiły wirusy inkubowane w DMEM 2% FBS, nie traktowane EGb.
Po odpowiednim czasie inkubacji (0,5; 1 lub 2 h) wirusów ze związkiem oznaczono miano wirusów metodą TCID50 na komórkach linii A549. W mikroskopie odwróconym obserwowano efekty cytopatyczne (cytopathic effects, CPE), czyli zmiany w morfologii komórek pod wpływem replikacji wirusa. CPE oceniono według skali 0-4 (Tabela 2), gdzie: 0 - brak replikacji wirusa; 1 - efekty cytopatyczne obejmujące około 25% hodowli; 2 - efekty cytopatyczne obejmujące około 50% hodowli; 3 - efekty cytopatyczne w 75% hodowli, 4 - efekt cytopatyczny obejmujący 100% hodowli. Wartość CPE=2 była uznawana za graniczną, wyznaczającą TCID50 danego wirusa. Najwyższe rozcieńczenie wirusa, przy którym efekt cytopatyczny wystąpił u około 50% komórek, oznaczano jako 1 TCID50. Każdy wariant doświadczenia wykonano 3-krotnie w dwóch niezależnych powtórzeniach każde.
Tabela 2
Ocena efektu cytopatycznego (CPE)
| CPE | Efekt cytopatyczny w hodowli [% komórek] |
| 0 | 0 |
| 1 | 25 |
| 2 | 50 |
| 3 | 75 |
| 4 | 100 |
Na podstawie uzyskanych wyników oceniono utratę infekcyjności przez wirusy (spadek miana wirusa), czyli skuteczność inaktywacji wirusów przez EGb zgodnie z tabelą poniżej (Tabela 3). Zdolności do bezpośredniej inaktywacji wirusów przez EGb obserwowana jest już po 30 minutach i rośnie wraz z czasem inkubacji (0,5 < 1 < 2 godziny). Ponadto wraz ze wzrostem czasu ekspozycji wirusów na EGb coraz niższe stężenia preparatu działają silnie wirusobójczo. Rezultaty zostały przedstawione na figurach 2 i 3. Na fig. 2 przedstawiony został wpływ EGb na inaktywację HHV-1 (n=6). Natomiast na fig. 3 zaprezentowano wpływ EGb na inaktywację HHV-2 (n=6).
PL 234 670 Β1
Tabela 3
Ocena utraty infekcyjności wirusa wraz ze spadkiem miana określanego metodą TCID (skala logarytmiczna)
| Średni spadek miana wirusa w stosunku do kontroliflogj | Rozcieńczenie [x razy] | Utrata infekcyjności [%] |
| 0 | 1 | 0 |
| 1 | 10 | 90 |
| 2 | 100 | 99 |
| 3 | 1000 | 99,9 |
| 4 | 10000 | 99,99 |
WYNIKI:
1) Wyciąg EGb wykazuje właściwości wirusobójcze (działanie bezpośrednie, inaktywuje wiriony) względem wirusów HHV-1 i HHV-2.
2) Skuteczność inaktywacji cząstek HHV-1 i HHV-2 przez EGb wzrasta wraz z czasem inkubacji od 0,5 h do 2 h. Najlepszy efekt wirusobójczy zaobserwowano dla czasu inkubacji wirusów z EGb wynoszącego 2 h.
3) Wraz z wydłużaniem się czasu inkubacji, coraz niższe stężenia EGb skutecznie inaktywują HHV-1 i HHV-2 (wyższy indeks selektywności, wyniki poniżej).
Przykład 3. Skuteczność inaktywacji HHV-1 i HHV-2 przez EGb
Obliczono także stężenie inaktywujące/hamujące replikację wirusów w 50% w stosunku do kontroli, czyli IC50 (inhibition concentration, IC). W celu oceny aktywności przeciwwirusowej EGb (skuteczności inaktywacji) wyznaczono indeks selektywności (selectivity indeks; SI) według wzoru CC50/IC50 (Tabela 4).
Tabela 4
Aktywność przeciwwirusowa EGb wobec HHV-1 i HHV-2
| HHV-1 | HHV-2 | |||||
| Czas inkubacji z EGb [godziny] | 0,5 | 1 | 2 | 0,5 | 1 | 2 |
| CC50 [pg/ml] | 392,7 | 392,7 | 392,7 | 392,7 | 392,7 | 392,7 |
| IC50 [gg/ml] | 79,1 | 68,2 | 29,6 | 137,3 | 45,5 | 8,1 |
| SI | 5 | 5,7 | 13,2 | 2,8 | 8,6 | 48,6 |
CC50- stężenie ekstraktu toksyczne dla 50% komórek hodowli (cytotoxic concentration)
TC50- stężenie ekstraktu inaktywujące/hamujące replikację wirusa w 50% (inhibition concentration)
SI- CC50/IC50 (selectivity index)
Następnie oceniono różnice w skuteczności inaktywacji/hamowania replikacji HHV-1 lub HHV-2 przez EGb. Analiza statystyczna została oparta na następujących założeniach:
Niech ^tka oznacza różnicę od kontroli dla czasu t,wk- tym eksperymencie, w / - tym powtórzeniu dla stężenia EGb d dla wirusa HHV-1. Niech oznacza średnią z powtórzeń dla stężenia EGb d, 3 fi 1 \ jy 1 w eksperymencie k w czasie inkubacji t. Niech 5 m , x m. Analogicznie dla wirusa HHV-2.
Λ-Ι
Dla każdego stężenia EGb w danym czasie ekspozycji wyliczono różnicę rtd = s^td-sH2td.
PL 234 670 Β1
Statystyką testową jest zf -^ria - θ wtedy i tylko jeżeli pomiędzy dwoma wirusami nie ma rf=l różnic. Rozkład tej statystyki wyznaczono metodą Monte Carlo w 10 000 powtórzeniach przy zachodzeniu hipotezy zerowej HO : zt = 0 przeciwko hipotezie alternatywnej postaci HO : zt* 0.
WYNIKI:
1) Preparat EGb wykazuje silne działanie przeciwwirusowe względem wirusów HHV-1 i HHV-2. Najwyższy spadek średniego miana obu wirusów widoczny jest po 2 godzinach inkubacji ze związkiem (najwyższe indeksy selektywności dla obu szczepów).
2) Dla czasu ekspozycji t = 2 h statystyka testowa wyniosła zt=2h = 17,5 co jest wartością leżącą dalej w obszarze odrzucenia HO (p=0,0081) zatem stwierdzamy, że dla HHV-2 mamy wyższe wartości różnicy średniego miana wirusa w stosunku do kontroli niż dla HHV-1. Na Fig. 4 przedstawiona została ocena skuteczności inaktywacji HHV-1 i HHV-2 po czasie ekspozycji na EGb równym 2 h (n=6).
3) Dla czasu ekspozycji t= 1 h statystyka testowa wyniosła zt=th = -10 (p=0,0793) a dla t = 0,5 h zt=o.5h = -8,5 (p=0,068) co oznacza, że przy krótszych czasach ekspozycji HHV1 na EGb mamy wyższe wartości różnicy średniego miana wirusa w stosunku do kontroli niż dla HHV-2.
Podsumowanie:
1. Wyciąg z liści miłorzębu japońskiego Ginkgo biloba (EGb) wykazuje aktywność przeciwwirusową względem wirusów opryszczki pospolitej HHV-1 oraz opryszczki narządów płciowych HHV-2 (bezpośrednio inaktywuje wiriony). Jest także nietoksyczny dla żywych komórek, przy czym stężenia nietoksyczne wobec komórek wykazują aktywność wirusobójczą.
2. EGb obniża miano obu wirusów nawet o 4 log, co oznacza utratę infekcyjności o 99,99%.
3. Krótszy czas inkubacji HHV-1 z EGb wystarcza, aby skuteczniej inaktywować wiriony HHV-1 niż HHV-2. Wraz ze wzrostem czasu inkubacji wirusów z EGb preparat silniej inaktywuje wiriony HHV-2. Wnikanie wirusów opryszczki do komórki jest zależne od glikoprotein gB, gD, gH oraz gL, obecnych w osłonce wirusa, które jednocześnie odgrywają główną rolę w interakcji wirusa z elementami układu odpornościowego gospodarza. Wykonane eksperymenty dowodzą, że inkubacja HHV-1 i HHV-2 z EGb sprawia, iż ekstrakt inaktywuje cząstki wirusów wchodząc prawdopodobnie w interakcje z glikoproteinami osłonkowymi i uniemożliwiając penetrację wirusa do komórki gospodarza. Różnica w skuteczności działania preparatu EGb względem HHV-1 i HHV-2 być może zależy od subtelnych różnic w budowie glikoprotein osłonkowych obu herpeswirusów, pomimo że wykazują one wysoki stopień podobieństwa budowy.
4. Wykazanie aktywności przeciwwirusowej EGb potwierdza możliwość wykorzystania w leczeniu zmian skórnych pojawiających się w przebiegu infekcji herpeswirusami opryszczkowymi, gdzie w pęcherzach obecne są cząstki wirusa. Preparat stosowany miejscowo, zewnętrznie na skórę, w krótkim czasie może skutecznie inaktywować wiriony zapobiegając dalszemu rozwojowi infekcji.
Claims (4)
- Zastrzeżenia patentowe1. Wyciąg z liści miłorzębu japońskiego Ginkgo biloba (EGb) do stosowania w leczeniu lub profilaktyce zakażeń wirusem opryszczki, zwłaszcza wirusem wybranym spośród: HHV-1 i HHV-2.
- 2. EGb do stosowania według zastrz. 1, znamienny tym, że zawiera:flawonoidy w ilości od 22 do 27% wagowych w suchym ekstrakcie, bilobalid w ilości od 2,6 do 3,2% wagowych w suchym ekstrakcie, ginkolidy A, B i C w ilości od 2,8 do 3,4% wagowych w suchym ekstrakcie, kwas ginkgolowy w ilości nie przekraczającej 5 ppm.
- 3. EGb do stosowania według zastrz. 1, znamienny tym, że jest stosowany w postaci preparatu farmaceutycznego do podawania miejscowego, zwłaszcza podawania na zainfekowaną lub narażoną na infekcję skórę lub śluzówkę.
- 4. EGb do stosowania według zastrz. 1, znamienny tym, że jest stosowany do leczenia miejscowego objawów skórnych występujących w przebiegu opryszczki wargowej lub opryszczki narządów płciowych.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL423496A PL234670B1 (pl) | 2017-11-18 | 2017-11-18 | Zastosowanie wyciągu z liści miłorzębu japońskiego Ginkgo biloba |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL423496A PL234670B1 (pl) | 2017-11-18 | 2017-11-18 | Zastosowanie wyciągu z liści miłorzębu japońskiego Ginkgo biloba |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL423496A1 PL423496A1 (pl) | 2019-05-20 |
| PL234670B1 true PL234670B1 (pl) | 2020-03-31 |
Family
ID=66519035
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL423496A PL234670B1 (pl) | 2017-11-18 | 2017-11-18 | Zastosowanie wyciągu z liści miłorzębu japońskiego Ginkgo biloba |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL234670B1 (pl) |
Family Cites Families (4)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2754714B1 (fr) * | 1996-10-22 | 1999-01-22 | Roc Sa | Nouvelles utilisations d'extraits de ginkgo biloba pour la preparation de compositions pharmaceutiques,et methode de traitement cosmetique mettant en oeuvre un extrait de ginkgo biloba |
| CN102349935A (zh) * | 2011-08-18 | 2012-02-15 | 王青 | 银杏酚酸在制备治疗性病、妇科病和肛周疾病的外用制剂中的用途 |
| CN102302524A (zh) * | 2011-08-18 | 2012-01-04 | 王青 | 银杏提取物在制备治疗性病、妇科病和肛周疾病的外用制剂中的用途 |
| CN103751105A (zh) * | 2013-09-11 | 2014-04-30 | 王青 | 银杏酚酸纳米脂质体在治疗妇科病和性病中的应用 |
-
2017
- 2017-11-18 PL PL423496A patent/PL234670B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL423496A1 (pl) | 2019-05-20 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Tolo et al. | Anti-viral activity of the extracts of a Kenyan medicinal plant Carissa edulis against herpes simplex virus | |
| Badmaev et al. | Protection of epithelial cells against influenza A virus by a plant derived biological response modifier Ledretan‐96 | |
| Chen et al. | Houttuynia cordata blocks HSV infection through inhibition of NF-κB activation | |
| CN113631176B (zh) | 用于预防和/或治疗由疱疹病毒科引起的病毒感染的含有浆果提取物的制备物 | |
| Sochocka et al. | Hampering herpesviruses HHV-1 and HHV-2 infection by extract of Ginkgo biloba (EGb) and its phytochemical constituents | |
| Malekmohammad et al. | Effective antiviral medicinal plants and biological compounds against central nervous system infections: a mechanistic review | |
| WO2017013568A1 (en) | Anti-herpes composition and anti-herpes pharmaceutical formulation | |
| Ebrahimi et al. | Antiviral effects of Aloe vera (L.) Burm. f. and Ruta graveolens L. extract on acyclovir-resistant herpes simplex virus type 1 | |
| JP5770702B2 (ja) | かぜの予防および治療用組成物 | |
| US6440451B1 (en) | Use of crataegus formulations for prophylaxis and treatment of neoplastic diseases | |
| PL234670B1 (pl) | Zastosowanie wyciągu z liści miłorzębu japońskiego Ginkgo biloba | |
| AU669140B2 (en) | Antiviral activity of extract of cactus | |
| RU2535020C1 (ru) | Фармацевтическая композиция седативного и спазмолитического действия | |
| DE112006002340T5 (de) | Arzneimittel, verwendbar zur Behandlung von Prostatakrebs | |
| JP2011079817A (ja) | 植物抽出物からなるウイルス感染症の予防及び／又は治療用組成物、それらを有効成分とするウイルス感染症の予防及び／又は治療剤、並びにウイルスの細胞への吸着阻害剤 | |
| Vilhelmova-Ilieva et al. | Antiviral Potential of Specially Selected Bulgarian Propolis Ex-Tracts: In Vitro Mechanism of Action Against Structurally Different Viruses | |
| KR102603469B1 (ko) | 퓨리톤을 포함하는 covid-19 살바이러스 조성물 및 그 용도 | |
| JP5173813B2 (ja) | インフルエンザの予防および処置のための薬剤 | |
| Bah et al. | Cytotoxicity of roots methanolic extract of Maytenus senegalensis | |
| CN107648249A (zh) | 去半乳糖替告皂甙在制备防治流感病毒感染的药物中的应用 | |
| KR19990085819A (ko) | 감기의 치료 및 예방 기능을 갖는 항바이러스성 약제 및기능성 식품 | |
| WO2022218238A1 (zh) | 中草药组合物及其食品、清洁剂、保养品及其用于制备冠状病毒治疗药及肠病毒治疗药的用途 | |
| CN117503742A (zh) | Endosidin-2在制备抗病毒药物中的应用 | |
| Fedoreyev et al. | Antiviral activity of histochrome preparation | |
| CN100522189C (zh) | 纳米繁缕总酸广谱抗病毒药物的制备方法、用途及繁缕酸a |