PL235212B1 - Nowe pochodne sulforafanu, sposób ich wytwarzania i zastosowanie - Google Patents
Nowe pochodne sulforafanu, sposób ich wytwarzania i zastosowanie Download PDFInfo
- Publication number
- PL235212B1 PL235212B1 PL421672A PL42167217A PL235212B1 PL 235212 B1 PL235212 B1 PL 235212B1 PL 421672 A PL421672 A PL 421672A PL 42167217 A PL42167217 A PL 42167217A PL 235212 B1 PL235212 B1 PL 235212B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- alkyl
- formula
- polyfluoroaryl
- isothiocyanato
- fluoro
- Prior art date
Links
- SUVMJBTUFCVSAD-UHFFFAOYSA-N sulforaphane Chemical class CS(=O)CCCCN=C=S SUVMJBTUFCVSAD-UHFFFAOYSA-N 0.000 title claims abstract description 15
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title abstract description 4
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 14
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims abstract description 13
- 150000003462 sulfoxides Chemical class 0.000 claims abstract description 10
- 125000000217 alkyl group Chemical group 0.000 claims abstract description 8
- 150000004763 sulfides Chemical class 0.000 claims abstract description 4
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 claims abstract 2
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 claims abstract 2
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract 2
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 18
- 125000001153 fluoro group Chemical group F* 0.000 claims description 16
- ZWZVWGITAAIFPS-UHFFFAOYSA-N thiophosgene Chemical compound ClC(Cl)=S ZWZVWGITAAIFPS-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- NHQDETIJWKXCTC-UHFFFAOYSA-N 3-chloroperbenzoic acid Chemical compound OOC(=O)C1=CC=CC(Cl)=C1 NHQDETIJWKXCTC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 239000002243 precursor Substances 0.000 claims description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 claims description 4
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 claims description 4
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 claims description 2
- 210000005170 neoplastic cell Anatomy 0.000 claims description 2
- 125000005360 alkyl sulfoxide group Chemical group 0.000 claims 2
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 claims 1
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 claims 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 claims 1
- 150000004843 oxaziridines Chemical class 0.000 claims 1
- 239000007800 oxidant agent Substances 0.000 claims 1
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-M periodate Chemical compound [O-]I(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 claims 1
- SUVMJBTUFCVSAD-JTQLQIEISA-N 4-Methylsulfinylbutyl isothiocyanate Natural products C[S@](=O)CCCCN=C=S SUVMJBTUFCVSAD-JTQLQIEISA-N 0.000 abstract description 3
- HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 8-[3-(1-cyclopropylpyrazol-4-yl)-1H-pyrazolo[4,3-d]pyrimidin-5-yl]-3-methyl-3,8-diazabicyclo[3.2.1]octan-2-one Chemical class C1(CC1)N1N=CC(=C1)C1=NNC2=C1N=C(N=C2)N1C2C(N(CC1CC2)C)=O HBAQYPYDRFILMT-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 3
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 abstract description 3
- 229960005559 sulforaphane Drugs 0.000 abstract description 3
- 235000015487 sulforaphane Nutrition 0.000 abstract description 3
- QSLPNSWXUQHVLP-UHFFFAOYSA-N $l^{1}-sulfanylmethane Chemical compound [S]C QSLPNSWXUQHVLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract description 2
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 abstract description 2
- 229930014626 natural product Natural products 0.000 abstract description 2
- 239000002254 cytotoxic agent Substances 0.000 abstract 1
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 abstract 1
- 231100000599 cytotoxic agent Toxicity 0.000 abstract 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 abstract 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 abstract 1
- 230000000771 oncological effect Effects 0.000 abstract 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 35
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 14
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N hexane Substances CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 8
- NNPPMTNAJDCUHE-UHFFFAOYSA-N isobutane Chemical compound CC(C)C NNPPMTNAJDCUHE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N methanol Substances OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 238000002330 electrospray ionisation mass spectrometry Methods 0.000 description 6
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 6
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 6
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 5
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 5
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 5
- YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N Dichloromethane Chemical compound ClCCl YMWUJEATGCHHMB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L Magnesium sulfate Chemical compound [Mg+2].[O-][S+2]([O-])([O-])[O-] CSNNHWWHGAXBCP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 239000001282 iso-butane Substances 0.000 description 4
- 125000002023 trifluoromethyl group Chemical group FC(F)(F)* 0.000 description 4
- UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N Sulphide Chemical compound [S-2] UCKMPCXJQFINFW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 3
- 229940125904 compound 1 Drugs 0.000 description 3
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 3
- 102000028416 insulin-like growth factor binding Human genes 0.000 description 3
- 108091022911 insulin-like growth factor binding Proteins 0.000 description 3
- 239000012074 organic phase Substances 0.000 description 3
- 239000000047 product Substances 0.000 description 3
- XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N Argon Chemical compound [Ar] XKRFYHLGVUSROY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000009024 Epidermal Growth Factor Human genes 0.000 description 2
- 101000814380 Homo sapiens Protein Wnt-7b Proteins 0.000 description 2
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 2
- 102100039470 Protein Wnt-7b Human genes 0.000 description 2
- UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M Sodium bicarbonate Chemical compound [Na+].OC([O-])=O UIIMBOGNXHQVGW-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 102000009618 Transforming Growth Factors Human genes 0.000 description 2
- 108010009583 Transforming Growth Factors Proteins 0.000 description 2
- 102000004142 Trypsin Human genes 0.000 description 2
- 108090000631 Trypsin Proteins 0.000 description 2
- 238000002835 absorbance Methods 0.000 description 2
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 2
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 2
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 2
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 2
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 2
- 201000008274 breast adenocarcinoma Diseases 0.000 description 2
- SPWVRYZQLGQKGK-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;hexane Chemical compound ClCCl.CCCCCC SPWVRYZQLGQKGK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940011871 estrogen Drugs 0.000 description 2
- 239000000262 estrogen Substances 0.000 description 2
- 102000015694 estrogen receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010038795 estrogen receptors Proteins 0.000 description 2
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 2
- 229940088597 hormone Drugs 0.000 description 2
- 239000005556 hormone Substances 0.000 description 2
- 229910052943 magnesium sulfate Inorganic materials 0.000 description 2
- 235000019341 magnesium sulphate Nutrition 0.000 description 2
- 230000037311 normal skin Effects 0.000 description 2
- 102000003998 progesterone receptors Human genes 0.000 description 2
- 108090000468 progesterone receptors Proteins 0.000 description 2
- 239000007790 solid phase Substances 0.000 description 2
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 2
- 239000012588 trypsin Substances 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 101800003838 Epidermal growth factor Proteins 0.000 description 1
- YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N Fluorine atom Chemical compound [F] YCKRFDGAMUMZLT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010027458 Metastases to lung Diseases 0.000 description 1
- 206010027463 Metastases to pleura Diseases 0.000 description 1
- 208000002151 Pleural effusion Diseases 0.000 description 1
- 230000001093 anti-cancer Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 229910052786 argon Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 230000003833 cell viability Effects 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001419 dependent effect Effects 0.000 description 1
- WGLUMOCWFMKWIL-UHFFFAOYSA-N dichloromethane;methanol Chemical compound OC.ClCCl WGLUMOCWFMKWIL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 229940116977 epidermal growth factor Drugs 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 210000002950 fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 229910052731 fluorine Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011737 fluorine Substances 0.000 description 1
- 210000000265 leukocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- LULAYUGMBFYYEX-UHFFFAOYSA-N metachloroperbenzoic acid Natural products OC(=O)C1=CC=CC(Cl)=C1 LULAYUGMBFYYEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- -1 organofluorine isoselenocyanate analogs Chemical class 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 1
- 210000004927 skin cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000001626 skin fibroblast Anatomy 0.000 description 1
- 235000017557 sodium bicarbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000030 sodium bicarbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N uroanthelone Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)C(=O)N[C@@H](CO)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)C(C)C)[C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1NC=NC=1)NC(=O)[C@H](CCSC)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)CNC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)CNC(=O)[C@H](CC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CS)NC(=O)CNC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC=1C=CC(O)=CC=1)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O)C(C)C)[C@@H](C)CC)C1=CC=C(O)C=C1 VBEQCZHXXJYVRD-GACYYNSASA-N 0.000 description 1
- 230000035899 viability Effects 0.000 description 1
Landscapes
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Przedmiotem zgłoszenia są nowe związki - analogi naturalnego produktu, sulforafanu CH3S(O)(CH2)4NCS, w postaci sulfidów lub sulfoksydów, w tym ich racematów i enancjomerów, ω-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylowych bądź ω-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)alkilowych o wzorze 1, w którym ArF oznacza grupę polifluoroarylową o wzorze C6Hk(CF3)pF5-k-p, gdzie k oznacza liczbę naturalną od 0 do 4, p oznacza liczbę 0, 1 lub 2, x oznacza liczbę 0, 1 lub 2, z oznacza liczbę 0, 1 lub 2, m oznacza liczbę 0 lub 1, a y oznacza liczbę, naturalną od 3 do 6. Zgłoszenie obejmuje też sposób ich wytwarzania. Przedmiotem wynalazku jest również zastosowanie wyżej wymienionych związków jako środków cytostatycznych lub cytotoksycznych wobec komórek nowotworowych oraz ich zastosowanie do wytwarzania farmaceutyków do leczenia chorób onkologicznych lub hematoonkologicznych.
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku są nowe pochodne naturalnego produktu, sulforafanu CH3S(O)(CH2)4NCS, w postaci sulfidów, sulfoksydów, ω-izotiocyjaniano-l-alkilowo-polifluoroarylowych bądź ω-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)alkilowych o wzorze 1, (O)*”
ArF(CHxF2.x)2-S-(CH2)y-N=C=S wzór 1 w którym Arp oznacza grupę polifluoroarylową o wzorze CeHkiCFsJpFs-k-p, gdzie k oznacza liczbę naturalną od 0 do 4, p oznacza liczbę 0, 1 lub 2, x oznacza liczbę 0, 1 lub 2, z oznacza liczbę 0, 1 lub 2, m oznacza liczbę 0 lub 1, a y oznacza liczbę naturalną od 3 do 6, sposób ich wytwarzania i zastosowanie w leczeniu chorób onkologicznych lub hematoonkologicznych.
Pochodne sulforafanu według wynalazku otrzymano poprzez zastąpienie w cząsteczce sulforafanu grupy metylowej, związanej z sulfinylowym atomem siarki, podstawnikami polifluoroarylowymi, bądź polifluoroarylo(fluoro)alkilowymi oraz ewentualnie poprzez zmianę liczby grup metylenowych w łańcuchu łączącym centralny atom siarki z izotiocyjanianowym atomem azotu, a także poprzez zmianę stopnia utlenienia centralnego atomu siarki.
Związki według niniejszego wynalazku nie były dotychczas opisane w literaturze chemicznej.
Nieoczekiwanie, w trakcie badań własnych, okazało się, że uzyskane sposobem według wynalazku nowe połączenia, odznaczają się wzmocnionym działaniem biologicznym i nowymi właściwościami leczniczymi, w szczególności jako środki zwalczające niektóre komórki nowotworowe.
Pochodne sulforafanu, w postaci sulfidów lub sulfoksydów ro-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylowych lub ro-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)-alkilowych, przedstawione wzorem 1, (O)m
ArF(CHxF2.x)z-S-(CH2)y-N=C=S wzór 1 w którym Arp oznacza grupę polifluoroarylową o wzorze CeHkiCFsJpFs-k-p, gdzie k oznacza liczbę naturalną od 0 do 4, p oznacza liczbę 0, 1 lub 2, x oznacza liczbę 0, 1 lub 2, z oznacza liczbę 0, 1 lub 2, m oznacza liczbę 0 lub 1, a y oznacza liczbę naturalną od 3 do 6, w tym sulfidy o wzorze 1 dla m = 0, sulfoksydy ω-izotiocyjaniano-l-alkilowo-polifluoroarylowe o wzorze 1 dla m = 1, z wyłączeniem związku o wzorze 1, gdzie k = 4, m = 1, p = 0, x = 0, y = 4, z = 0.
Sposób wytwarzania pochodnych sulforafanu o wzorze 1, w którym Arp oznacza grupę polifluoroarylową o wzorze CeHkiCFsJpFs-k-p, gdzie k oznacza liczbę naturalną od 0 do 4, p oznacza liczbę 0, 1 lub 2, x oznacza liczbę 0, 1 lub 2, z oznacza liczbę 0, 1 lub 2, m oznacza liczbę 0 lub 1, a y oznacza liczbę naturalną od 3 do 6, według wynalazku polega na tym, że prekursory o wzorze 2 (m = 0 lub m = 1) (O)m II
ArF(CHxF2.x)z-S-(CH2)yNH2 wzór 2 (m=0, 1) poddaje się reakcji z tiofosgenem w obecności wodorotlenku sodu, do otrzymania odpowiedniego sulfidu ω-izotiocyjaniano-l -alkilowo-polifluoroarylowego bądź ω-izotiocyjaniano-l -alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)alkilowego o wzorze 1 (m = 0), który następnie utlenia się za pomocą środka utleniającego,
PL 235 212 Β1 wybranego z grupy obejmującej kwas m-chloroperbenzoesowy (mCPBA), oksazirydyny Davisa, metanadjodan sodu (NalCM) lub nadtlenek wodoru (H2O2), tworząc sulfoksyd ro-izotiocyjaniano-1-alkilowopolifluoroarylowy bądź ro-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)-alkilowy, o wzorze 1 (m = 1), w których ArF, x, z, oraz y mają podane wyżej znaczenie.
Metodologię według wynalazku ilustrują syntezy związków pokazane na Schemacie 1.
(O)m II ArF(CHxF2.x)z-S-(CH2)yNH2 wzór 2 (m=0) csci2t 5% NaOH, ch2ci2 (O)m II ArF(CHxF2.x)x-S-(CH2)yNH2 wzór 2 (m=1)
CSCI2, 5% NaOH, CH2CI2 (O)m II ArF(CHxF2.x)z-S-(CH2)yN-C-S wzór 1 (m=0) mCPBA, CH2CI2 ► ArF(CHxF2.x)I-S-(CH2)yN-C-S wzór 1 (m=1)
SCHEMAT 1
Prekursory o wzorze 2 otrzymać można według opisanych wcześniej w literaturze metod11-41.
Przedmiot wynalazku ilustrują poniższe przykłady.
Procedura L Procedura ogólna wytwarzania sulfidów ω-izotiocyjaniano-l-alkilowo-polifluoroarylowych bądź ra-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)-alkilowych o wzorze 1 (m = 0).
Do schłodzonego do 0°C roztworu sulfidu ω-amino-l-alkilowo-polifluoroarylowego o wzorze 2 (m = 0) (1.85 mmol) w CHCh (10 ml) wkroplono tiofosgen (CSCI2) (2 mmol), a po chwili wodny roztwór NaOH (6 mmol, 2 ml H2O). Roztwór mieszano przez 1 h utrzymując temperaturę 0°C, a następnie przez noc w temperaturze pokojowej. Po tym czasie rozdzielono warstwy. Fazę wodną ekstrahowano CHCI3 (2x10 ml). Połączone fazy organiczne suszono bezwodnym MgSO4. Odparowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem uzyskując surowy produkt, który oczyszczono za pomocą chromatografii kolumnowej.
Otrzymano w ten sposób odpowiedni czysty sulfid ro-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylowy o wzorze 1 (m = 0).
Przykład I. Sulfid 2’,3’,4’,5’,6’-pentafluorofenylowo-4-izotiocyjaniano-1-butylowy o wzorze 1 (k = 0, p = 0, m = 0, y = 4, z = 0). Wydajność 41 % po oczyszczaniu za pomocą chromatografii kolumnowej, stosując jako eluent układ rozpuszczalników CH2Cl2-heksan w gradiencie.
1H NMR (200 MHz, CDCI3) δ 3.55 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.91 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.99 - 1.58 (m, 4H). 19F NMR (188 MHz, CDCb) δ -131.38 - -132.37 (m), -151.23 - -151.76 (m), -159.65 - -160.19 (m). MS (Cl/izobutan): m/z = 314 [M+H]+.
Przykład II. Sulfid 4’-fluorofenylowo-4-izotiocyjaniano-1-butylowy o wzorze 1 (k = 4, p = 0, m = 0, y = 4, z = 0). Wydajność 37% po oczyszczaniu za pomocą chromatografii kolumnowej, stosując jako eluent układ rozpuszczalników CH2Cl2-heksan w gradiencie.
PL 235 212 Β1 1H NMR (200 MHz, CDCh) δ 7.43 - 7.29 (m, H), 7.06 - 6.92 (m, 2H), 3.53 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.89 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.93 - 1.61 (m, 4H).
1H{19F} (200 MHz, CDCh) δ 7.46 - 7.29 (m, 2H), 7.10 - 6.91 (m, 2H), 3.53 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.89 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 1.97 - 1.61 (m, 4H).
19F NMR (188 MHz, CDCh) δ -114.40 - -114.37 (m).
19F{1H} NMR (188 MHz, CDCh) δ -114.51 (s).
Przykład III. Sulfid 4’-fluorofenylowo-4-izotiocyjaniano-1-pentylowy o wzorze 1 (k = 4, p = 0, m = 0, y = 4, z = 0). Wydajność 37% po oczyszczaniu za pomocą chromatografii kolumnowej, stosując jako eluent układ rozpuszczalników CH2Ch-heksan w gradiencie.
1H NMR (200 MHz, CDCh) δ 7.40 - 7.28 (m, 2H), 7.06 - 6.93 (m, 2H), 3.50 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.87 (t, J = 6.8 Hz, 1H), 1.80 - 1.42 (m, 6H).
1H{19F} NMR (200 MHz, CDCh) δ 7.42 - 7.28 (m, 2H), 7.10 - 6.89 (m, 2H), 3.50 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.87 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 1.85 - 1.40 (m, 6H).
19F NMR (188 MHz, CDCh) δ-114.80 --115.07 (m).
19F NMR (188 MHz, CDCh) δ -114.93 (s).
Przykład IV. Sulfid4’-(trifluorometylo)-2’,3’,5’,6’-tetrafluorofenylowo-4-izotiocyjaniano-1 -butylowy o wzorze 1 (k = 0, p = 1, m = 0, y = 4, z = 0).
Wydajność 25% po oczyszczaniu za pomocą chromatografii kolumnowej, stosując jako eluent układ rozpuszczalników CH2Ch-heksan w gradiencie.
1H NMR (200 MHz, CDCh) δ 3.56 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 3.08 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 2.02 - 1.61 (m, 4H).
13C NMR (126 MHz, CDCh) δ 148.51 - 147.45 (m), 146.27 - 145.78 (m), 145.70 - 144.86 (m), 143.59- 142.55 (m), 131.04 (s), 120.72- 119.52 (m), 44.60 (s), 33.38 (s), 28.64 (s), 26.89 (s).
19F NMR (188 MHz, CDCh) δ -55.66 (t, J = 21.7 Hz), -131.58 - -132.06 (m), -138.98 - -139.84 (m).
MS (El): m/z = 363 [M]+'.
HRMS: m/z obliczono [M]+ C12H8F7NS2 362.99864, znaleziono 362.99773.
Przykład V. Sulfid4’-(trifluorometylo)-2’,3’,5’,6’-tetrafluorofenylowo-5-izotiocyjaniano-1 -pentylowy o wzorze 1 (k = 0, p = 1, m = 0, y = 4, z = 0).
Wydajność 40% po oczyszczaniu za pomocą chromatografii kolumnowej, stosując jako eluent układ rozpuszczalników CH2Ch-heksan w gradiencie.
F
JL
F 1H NMR (200 MHz, CDCh) δ 3.53 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 3.06 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 1.86 - 1.44 (m, 6H).
13C NMR (126 MHz, CDCh) δ 148.40 - 147.65 (m), 146.40 - 145.59 (m), 145.46 - 145.02 (m), 143.52- 142.77 (m), 130.36 (s), 120.59 (s), 44.96 (s), 33.94 (s), 29.54 (s), 29.27 (s).
19F NMR (188 MHz, CDCh) δ -55.61 (t, J = 21.6 Hz), -131.23 - -132.89 (m), -138.50 - -140.81 (m).
MS (El): m/z = 377 [M]+'.
HRMS: m/z obliczono [M]+ C13H10F7NS2 377.01429, znaleziono 377.01496.
Procedura II. Procedura ogólna wytwarzania sulfoksydów ω-izotiocyjaniano-l-alkilowo-polifluoroarylowych bądź ω-izotiocyjaniano-l -alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)-alkilowych o wzorze 1 (m = 1).
PL 235 212 Β1
Do schłodzonego do -20°C roztworu sulfidu ro-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylowego bądź ro-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)-alkilowego o wzorze 1 (m = 0) (0.8734 mmol) w CH2CI2 (7 ml), powoli wkroplono roztwór kwasu meta-chloroperbenzoesowego (mCPBA) (0.8734 mmol) w CH2CI2 (5 ml), w atmosferze argonu. Roztwór mieszano przez 0,5 h utrzymując temperaturę -20°C, a następnie przez 1 h w temperaturze pokojowej. Mieszaninę przemyto nasyconym wodnym roztworem NaHCCb. Po oddzieleniu, fazę organiczną suszono bezwodnym MgSCM. Odparowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem uzyskując surowy produkt, który oczyszczono za pomocą chromatografii kolumnowej, stosując jako eluent układ rozpuszczalników ChhCb-MeOH w gradiencie. Otrzymano w ten sposób czysty produkt-sulfoksyd ω-izotiocyjaniano-l-alkilowo-polifluoroarylowy bądź ro-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)alkilowy o wzorze 1 (m = 1).
Przykład VI. Sulfoksyd 2’,3’,4’,5’,6’-pentafluorofenylowo-4-izotiocyjaniano-1-butylowy o wzorze 1 (k = 0, p = 0, m = 1, y = 4, z = 0). Wydajność: 75%.
NCS 1H NMR (500 MHz, CDCb) δ 3.61 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.56 - 3.15 (m, 2H), 2.00 - 1.86 (m, 4H). 19F NMR (188 MHz, CDCb) δ -137.73 - -138.23 (m), -144.92 - -145.40 (m), -156.91 - -157.53 (m). MS (Cl/izobutan): m/z = 330 [M+H]+.
Przykład VII. Sulfoksyd 4’-fluorofenylowo-4-izotiocyjaniano-1-butylowy o wzorze 1 (k = 4, p = 0, m = 1, y = 4, z = 0). Wydajność: 86%.
NCS 1H NMR (200 MHz, CDCb) δ 7.67 - 7.56 (m, 2H), 7.29 - 7.18 (m, 3H), 3.55 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 2.81 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 1.99 - 1.66 (m, 4H).
1H{19F} NMR (200 MHz, CDCb) δ 7.69 - 7.53 (m, 2H), 7.32 - 7.17 (m, 3H), 3.55 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 2.81 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.01 - 1.67 (m, 4H).
13C NMR (126 MHz, CDCb) δ 164.45 (d, J = 251.9 Hz), 138.87 (s), 131.07 (s), 126.31 (d, J = 8.9 Hz), 116.81 (d, J = 22.6 Hz), 56.20 (s), 44.65 (s), 28.97 (s), 19.57 (s).
19F NMR (188 MHz, CDCb) δ -107.42 - -107.74 (m).
19F{1 H} NMR (188 MHz, CDCb) δ -107.60 (s).
MS (El): m/z = 257 [M]+\
HRMS: m/z obliczono [M]+ C11H12F1NOS2 257.03444, znaleziono 257.03387.
Przykład VIII. Sulfoksyd 4’-fluorofenylowo-5-izotiocyjaniano-1-pentylowy o wzorze 1 (k = 4, p = 0, m = 1, y = 4, z = 0). Wydajność: 84%.
1H NMR (200 MHz, CDCb) δ 7.71 - 7.54 (m, 2H), 7.30 - 7.16 (m, 2H), 3.52 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.78 (t, J = 7.3 Hz, 2H), 1.95 - 1.39 (m, 6H).
1H{19F} NMR (200 MHz, CDCb) δ 7.70 - 7.51 (m, 2H), 7.26 - 7.18 (m, 2H), 3.52 (t, J = 6.2 Hz, 2H), 2.78 (t, J = 7.4 Hz, 2H), 1.99 - 1.39 (m, 6H).
13C NMR (126 MHz, CDCb) δ 164.38 (d, J = 251.5 Hz), 139.12 (d, J = 2.9 Hz), 130.30 (s), 126.30 (d, J = 8.8 Hz), 116.71 (d, J = 22.5 Hz), 56.95 (s), 44.76 (s), 29.61 (s), 25.77 (s), 21.44 (s).
19F NMR (188 MHz, CDCb) δ -107.70 - -108.05 (m).
19F{1 H} NMR (188 MHz, CDCb) δ -107.84 (s).
MS (El): m/z = 371 [M]+\
PL 235 212 B1
HRMS: m/z obliczono [M]+ C12H14F1NOS2 271.05009, znaleziono 271.04976.
P r z y k ł a d IX. Sulfoksyd 4’-(trifluorometylo)-2’,3’,5’,6’-tetrafIuorofenylowo-4-izotiocyjaniano-1-butylowy o wzorze 1 (k = 0, p = 1, m = 1, y = 4, z = 0). Wydajność: 78%.
1H NMR (200 MHz, CDCI3) δ 3.62 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 3.60 - 3.11 (m, 2H), 2.10 - 1.83 (m, 4H).
19F NMR (188 MHz, CDCI3) δ -55.99 (t, J = 21.9 Hz), -135.55 - -136.28 (m), -136.64 - -137.13 (m). MS (Cl/izobutan): m/z = 381 [M+H]+.
HRMS: m/z obliczono [M]+ C13H10F7NOS2 380.00138, znaleziono 380.00077.
Otrzymaną mieszaninę racemiczną rozdzielono na enancjomery stosując technikę HPLC na chiralnej fazie stałej (Chirobiotic T2; heksan - (1-PrOH:MeOH 50%) 7%).
(+)-1 (k = 0, p = 1, m = 1, y = 4, z = 0) [a]D + 76.3 (c = 0.84, AcOEt), ee = 99.9% (-)-1 (k = 0, p = 1, m = 1, y = 4, z = 0) [a]D - 76.1 (c = 1.52, AcOEt), ee = 99.6%
P r z y k ł a d X. Sulfoksyd 4’-(trifluorometylo)-2’,3’,5’,6’-tetrafIuorofenylowo-5-izotiocyjaniano-1-pentylowy o wzorze 1 (k = 0, p = 1, m = 1, y = 5, z = 0). Wydajność: 89%.
F 1H NMR (200 MHz, CDCb) δ 3.57 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 3.59 - 3.07 (m, 2H), 2.00 - 1.62 (m, 6H).
19F NMR (188 MHz, CDCI3) δ -55.98 (t, J = 21.8 Hz), -135.78 - -136.56 (m), -136.76 - -137.11 (m).
MS (El): m/z = 393 [M]+·
HRMS: m/z obliczono [M]+ C13H10F7NOS2 393.00920, znaleziono 393.00864.
Otrzymaną mieszaninę racemiczną rozdzielono na enancjomery stosując technikę HPLC na chiralnej fazie stałej (Chirobiotic T2; heksan - (1-PrOH:MeOH 50%) 7%).
(+)-1 (k = 0, p = 1, m = 1, y = 5, z = 0) [o.]d + 78.1 (c = 0.97, AcOEt), ee = 99.8% (-)-1 (k = 0, p = 1, m = 1, y = 5, z = 0) [a]D - 65.3 (c = 0.55, AcOEt), ee = 83.6%
Procedura III. Procedura ogólna wytwarzania sulfoksydów m-izotiocyjaniano-1-alkilowopolifluoroarylowych bądź ro-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)-alkilowych o wzorze 1 (m = 1).
Do schłodzonego do 0°C roztworu odpowiedniego sulfoksydu ro-amino-1-alkilowo-polifluoroarylowego bądź ro-amino-1-alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)-alkilowego o wzorze 2 (m = 1) (1.85 mmol) w CHCl3 (10 ml) wkroplono tiofosgen (CSCI2) (2 mmol), a po chwili wodny roztwór NaOH (6 mmol, 2 ml H2O). Roztwór mieszano przez 1 h utrzymując temperaturę 0°C, a następnie przez noc w temperaturze pokojowej. Po tym czasie rozdzielono warstwy. Fazę wodną ekstrahowano CHCI3 (2x10 ml). Połączone fazy organiczne suszono bezwodnym MgSO4. Odparowano rozpuszczalnik pod zmniejszonym ciśnieniem uzyskując surowy produkt, który oczyszczono za pomocą chromatografii kolumnowej, stosując jako eluent układ rozpuszczalników CH2Cl2-MeOH w gradiencie.
Otrzymano w ten sposób czysty produkt - sulfoksyd ro-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylowy oraz ro-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)-alkilowy o wzorze 1 (m = 1).
P r z y k ł a d XI. Sulfoksyd 4’-fluorobenzyIowo-4-izotiocyjaniano-1-butylowy o wzorze 1 (k = 4, p = 0, m = 1, x = 2, y = 4, z = 1). Wydajność: 40%.
1H NMR (200 MHz, CDCb) δ 7.35 - 7.19 (m, 2H), 7.17 - 7.01 (m, 2H), 3.96 (s, 2H), 3.55 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.70 - 2.53 (m, 2H), 2.03 - 1.69 (m, 4H).
1H{19F} NMR (200 MHz, CDCb) δ 7.35 - 7.21 (m, 2H), 7.14 - 6.99 (m, 2H), 3.96 (s, 2H), 3.55 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.68 - 2.49 (m, 2H), 2.02 - 1.70 (m, 4H).
13C NMR (126 MHz, CDCb) δ 162.93 (d, J = 248.0 Hz), 131.83 (d, J = 8.3 Hz), 130.92 (s), 125.48 (d, J = 3.2 Hz), 116.18 (d, J = 21.7 Hz), 57.34 (s), 49.84 (s), 44.72 (s), 29.12 (s), 20.14 (s).
PL 235 212 Β1 19F NMR (188 MHz, CDCb) δ-112.13 --112.48 (m).
19F{1H} NMR (188 MHz, CDCb) δ -112.33 (s).
MS (Cl/izobutan): m/z = 272 [M]+.
Przykład XII. Sulfoksyd3’,5’-di-(trifluorometylo)fenylowo-4-izotiocyjaniano-1 -butylowy o wzorze 1 (k = 3, p = 2, m = 1, y = 4, z = 0). Wydajność: 42%.
cf3 FjCĄ^-ncs o
1H NMR (200 MHz, CDCb) δ 8.09 (s, 2H), 8.01 (s, 1H), 3.59 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.08 - 2.71 (m,2H), 2.19-1.75 (m, 4H).
13C NMR (126 MHz, CDCb) δ 147.43 (s), 133.09 (q, J = 34.3 Hz), 131.52 (s), 125.04 (dt, J = 6.9, 3.3 Hz), 124.40 (d, J = 2.6 Hz), 122.66 (q, J = 273.4 Hz), 56.28 (s), 44.60 (s), 28.86 (s), 19.75 (s).
19F NMR (188 MHz, CDCb) δ -62.23 (s).
MS (Cl): m/z = 376 [M+H]+.
HRMS: m/z obliczono [M]+ C13H11F6NOS2 375.01863, znaleziono 375.01812.
Przykład XIII. Sulfoksyd 3’,5’-di-(trifluorometylo)fenylowo-5-izotiocyjaniano-1-pentylowy o wzorze 1 (k = 3, p = 2, m = 1, y = 5, z = 0). Wydajność: 91%.
1H NMR (200 MHz, CDCb) δ 8.08 (s, 2H), 8.01 (s, 1H), 3.55 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 3.08 - 2.68 (m,2H), 2.12-1.41 (m, 4H).
13C NMR (126 MHz, CDCb) δ 147.79 (s), 133.14 (q, J = 34.2 Hz), 130.70 (s), 125.03 (s), 124.50 (d, J = 2.6 Hz), 122.79 (q, J = 273.45 Hz), 57.11 (s), 44.85 (s), 29.68 (s), 25.82 (s), 21.66 (s).
19F NMR (188 MHz, CDCb) δ -62.23 (s).
MS (El): m/z = 389 [M]+'.
HRMS: m/z obliczono [M]+ C14H13F6NOS2 389.03428, znaleziono 389.03395.
BADANIA BIOLOGICZNE
W badaniach biologicznych użyte zostały cztery linie komórkowe: MCF-7, MDA-MB-231 - komórki nowotworowe gruczołów piersiowych, MALME-3M - komórki nowotworowe czerniaka oraz MALME-3 - prawidłowe komórki skóry.
Linia komórkowa MCF-7
Komórki linii MCF-7 są komórkami gruczolakoraka piersi pobranymi z wysięku do opłucnej od 69-letniej kobiety rasy kaukaskiej. Komórki wytwarzają receptory estrogenowe i progesteronowe, w związku z czym są wrażliwe na hormony. Na wzrost komórek wpływać można również za pomocą TNF a oraz cytokreatyny. W komórkach wykryto ekspresję onkogenu WNT7B oraz genu, którego produktem jest IGFBP (insulin-like growth factor binding protein), czyli białko wiążące insulinopodobny czynnik wzrostu. Jest to linia epitelialna, adherentna, szybkorosnąca co ułatwia badania.
Linia komórkowa MDA-MB-231
Linia MDA-MB-231 jest linią szybkorosnącą, adherentną i epitelialną gdyż są to komórki gruczolakoraka piersi pochodzące z przerzutów do opłucnej od kobiety rasy kaukaskiej w wieku 51 lat. Jak wyżej, komórki wykazują ekspresję onkogenu WNT7B a ponadto ekspresję EGF (epidermal growth factor) orazTGF a (transforming growth factor a). W odróżnieniu od linii MCF-7, komórki nie wykazują ekspresji receptorów estrogenowych i progesteronowych więc nie są wrażliwe na leczenie hormonalne.
Linia komórkowa Malme-3M
Komórki MALME-3M to komórki czerniaka, pochodzące z przerzutów do płuc od 43-letniego mężczyzny rasy kaukaskiej. Komórki morfologicznie przypominają fibroblasty, wykazują ekspresję antygenów leukocytarnych: HLA A2, Aw30, B13, B40, DRw7.
PL 235 212 B1
Linia komórkowa MALME-3
Komórki MALME-3 są to prawidłowe fibroblasty skóry pochodzące od tego samego pacjenta co komórki MALME-3M. Są to komórki adherentne, wolnorosnące, co utrudnia ich badanie. Wykazują nadekspresję antygenów: HLA A2, Aw30, B13, B40(+/-), DRw7.
Rozbankowanie komórek
Fiolki z komórkami (ATCC), przechowywane w zbiorniku z ciekłym azotem w temperaturze -196°C wyjęto i szybko rozmrożono. Otrzymany roztwór komórek w DMSO przeniesiono do falkonu z 4 ml pożywki i odwirowano (5 min, 1200 obrotów/min temperatura 25°C). Supernatant wylano w celu usunięcia DMSO a komórki przeniesiono z 10 ml pożywki do butelki i inkubowano w środowisku zawierającym 5% CO2, 95% powietrza w temperaturze 37°C.
Pasażowanie
Po osiągnięciu przez komórki pokrycia dna butelki przekraczającego 75% konieczne było ich przesianie. W tym celu odciągnięto pożywkę z butelki, płukano 5 ml roztworu PBS i po dokładnym jego usunięciu dodano 1,5 ml 0,25% roztworu trypsyny z dodatkiem EDTA. Inkubowano do czasu oderwania się komórek od dna butelki, inaktywowano trypsynę używając 10 ml pożywki. Za pomocą pipety rozmieszano i rozcieńczono przenosząc odpowiednią ilość roztworu komórek do nowej butelki uzupełniając pożywką do 10 ml.
Test żywotności MTT
Po zakończeniu ustalonego czasu inkubacji komórek MCF-7, MDA-MB-231 i MALME-3M ze związkami trwającej 24, 48, 72 godziny, a dla MALME-3 trwającej 72 godziny, z płytek 96-dołkowych odciągnięto pożywkę. Każdy dołek przemyto roztworem PBS w ilości ok. 100 pl, który następnie dokładnie odciągnięto. Dodano po 50 pi MTT (250 pg/ml) i wstawiono na 3 godziny do inkubatora (37°C). Po tym czasie płytki zalano izopropanoiem po 200 pl na każdy dołek, owinięto parafilmem aby zapobiec wyparowaniu odczynnika i odstawiono do lodówki. Następnego dnia odczytywano absorbancję przy λ=570 nm.
Cytotoksyczność wybranych stężeń każdego związku na wszystkich liniach zbadano w co najmniej dwóch niezależnych powtórzeniach zawierających co najmniej 3 powtórzenia zależne (n > 6). Wyniki skorygowano przez odjęcie absorbancji tła. Policzono średnią z pomiarów, odchylenie i błąd standardowy dla wszystkich stężeń. Porównując dane do kontroli, obliczono żywotność komórek inkubowanych z badanymi związkami.
Następnie, za pomocą programu Graphpad Prism 5, oszacowano wartości indeksu IC50 czyli stężenia związków powodujące śmierć 50% komórek. Indeks ten pozwala porównać skale efektu poszczególnych związków między sobą. Indeks ten wyznacza się poprzez dopasowanie krzywej Hill’a (równanie 1) do punktów doświadczalnych:
y=100/(1+10A((loglC50-x)H)) (równanie 1) gdzie:
y - żywotność komórek;
x - logarytm dziesiętny ze stężenia badanego związku;
H - współczynnik Hill’a
Policzone zostały również indeksy selektywności (SI) według równania 2. Indeks ten pozwala określić ile razy silniej dany związek działa na komórki nowotworowe niż na prawidłowe.
SI = (IC50 linii prawidłowej)/(IC50 linii nowotworowej) (równanie 2)
Wartości IC50 [pmol/l] i współczynniki selektywności (SI) badanych związków dla poszczególnych linii komórkowych w zależności od linii komórkowej i/lub czasu inkubacji przedstawiono w Tabeli 1 oraz Tabeli 2.
PL 235 212 Β1
Tabela 1. Wartości IC50 [μιηοΙ/l] badanych związków dla poszczególnych linii komórkowych w zależności od czasu inkubacji i współczynniki selektywności (SI) wyznaczone po 72 godzinach inkubacji.
| ' Związek 1 (k = 4, p - 0, m = 1. y = 0V przykład | |||||
| | MCF-7 | MDA-MB-231 | MALME-3M | MALME-3 | ||
| IC50 | |||||
| 24h | 9,3 | 10,2 | 11,9 | ||
| 48 h | 6,3 | 6,5 | 10,9 | ||
| 72 h | 4,5 | 3,9 | 10,5 | 23,3 | |
| SI | |||||
| 5,2 | 5,9 | 2,2 | |||
| : Związek 1 | (k = 4, p | = 0.m = i,y = | 5, z = | 0), [Przykład VIII]. | |
| MCF-7 | MDA-MB-231 | MALME-3M | MALME-3 | ||
| IC50 | |||||
| 24h | 5,6 | 7,9 | 10,1 | ||
| 48h | 3,9 | 5,1 | 10,0 | ||
| 72h | 2,7 | 3,3 | 9,3 | 13,7 | |
| SI | |||||
| 5,1 | 4,1 | 1,5 | |||
| Związek 1 (k = 0, p | = l,mi=l,y | = 4,z = | = 0), {Przykład IX] | ||
| MCF-7 | MDA-MB231 | MALME-3M | MALME-3 | ||
| IC50 | |||||
| 24h | 5,8 | 2,3 | 3,7 | ||
| 48h | 1,2 | 0,6 | 2,3 | ||
| 72h | 0,9 | 0,5 | 2,7 | 5,0 | |
| SI | |||||
| 5,7 | ___W]__ | 1,9 | |||
| . Związek 1 (k = 0, p | >=1,m = 1,y | = 5,, z | = 0); (Przykład X] | ||
| MCF-7 | MDA-MB-231 | MALME-3M | MALME-3 | ||
| IC50 | |||||
| 24h | 4,2 | 3,5 | 4,7 | ||
| 48h | 0,8 | 1,1 | 3,8 | ||
| 72h | 0,7 | 1,3 | 4,3 | 8,3 | |
| SI | |||||
| 11,1 | __________6,5______ | 1,9 | |||
| Związek 1(k | = 4, p = 0, m = 1,x = 2, | y=4, | z = 1). | [Prkykfad XI] | |
| MCF-7 | MDA-MB231 | MALME-3M | MALME-3 | ||
| IC50 | |||||
| 24h | 9,8 | 9,4 | 15,6 | ||
| 48h | 8,1 | 5,4 | 13,4 | ||
| 72h | 5,8 | 4,3 | 12,9 | 25,4 | |
| SI | |||||
| 4,4 | 5,9 | 2,0 | |||
| Związek 1 | (k = 3,P | = 2, m = 1,y = | 5, z = | 0) [Przykład XIII] | |
| Linia komórkowa | MCF-7 | MDA-MB231 | MALME-3M | MALME-3 | |
| IC50 | |||||
| 24h | 4,3 | 3,6 | 7,9 | ||
| 48h | 3,3 | 3,1 | 8,1 | ||
| 72h | 2,4 | 2,6 | 10,9 | 7,6 | |
| SI | |||||
| 3,2 | 2,9 | 0,7 |
PL 235 212 Β1
| ‘ V/'1' ZWI^tekSulforafan (SFN) | ||||
| MCF-7 | MDA-MB- 231 | MALME-3M | MALME-3 | |
| ICso | ||||
| 24h | 42,6 | 24,7 | 40,4 | |
| 48h | 12,9 | 19,9 | 32,5 | |
| 72h | 10,5 | 11,3 | 27,3 | 24,9 |
| SI | ||||
| 2,4 | 1,1 | 0,9 |
Tabela 2. Wartości ICso [μιτιοΙ/l] badanych rozdzielonych mieszanin racemicznych związków dla poszczególnych linii komórkowych po 72 godzinach inkubacji.
| Związek | 1 (k = 4, z (+) | 0, p = 1, it = 0); [Przy | 1 = 1,y = kład IX] racemat | 1 (k = 0, p = (+) | 1, m = 1, y [Przykład X] | = 5, z = 0); racemat |
| IC50 (μΜ) MALME-3M | 2,1 | 1,3 | 2,6 | 4,8 | 2,3 | 4,0 |
| ICso (μΜ) MDA-MB-231 | 0,4 | 0,4 | 0,5 | 1,4 | 0,7 | 1,2 |
Literatura:
[1], „New enantiomeric fluorine-containing derivatives of sulforaphane: Synthesis, absolute configurations and biological activity”, P. Kiełbasiński, J. Łuczak, T. Cierpiał, J. Błaszczyk, L. Sieroń, K. Wiktorska, K. Lubelska, M. Milczarek, Z. Chilmonczyk, Eur. J. Med. Chem. 2014, 76, 332-342.
[2], „New organofluorine isoselenocyanate analogs of sulforaphane: synthesis and anticancer activity”, T. Cierpiał, J. Łuczak, M. Kwiatkowska, P. Kiełbasiński, L. Mielczarek, K. Wiktorska, Z. Chilmonczyk, M. Milczarek, K. Karwowska, ChemMedChem, 2016, 11.
[3], „Pochodne sulforafanu, ich prekursory oraz sposób ich wytwarzania”, J. Łuczak, T. Cierpiał, P. Kiełbasiński, PL220620 (B1) 09.10.2012.
[4], „Nowe analogi sulforafanu, ich prekursory, sposób ich wytwarzania, ich zastosowanie oraz postać farmaceutyczna”, T. Cierpiał, P. Kiełbasiński, J. Łuczak, K. Wiktorska, L. Śliwka, Z. Chilmonczyk, M. Milczarek, K. Karwowska, zgłoszenie patentowe P-414576 27.10.2015.
Claims (4)
1. Pochodne sulforafanu, w postaci sulfidów lub sulfoksydów ω-izotiocyjaniano-l -alkilowo-polifluoroarylowych bądź ro-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)alkilowych o wzorze 1, (O^m
ArF(CHxF2.x)z-S-(CH2)y-N=C=S wzór 1 w którym Arp oznacza grupę polifluoroarylową o wzorze CeHkiCFsJpFs-k-p, gdzie k oznacza liczbę naturalną od 0 do 4, p oznacza liczbę 0, 1 lub 2, x oznacza liczbę 0, 1 lub 2, z oznacza liczbę 0, 1 lub 2, m oznacza liczbę 0 lub 1, a y oznacza liczbę naturalną od 3 do 6, w tym sulfidy ω-izotiocyjaniano-l-alkilowo-polifluoroarylowe bądź ro-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)alkilowe o wzorze 1 dla m = 0, sulfoksydy ro-izotiocyjaniano-1-alkilowopolifluoroarylowe bądź ro-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylo-(fluoro)alkilowe o wzorze 1 dla m = 1, z wyłączeniem związku o wzorze 1, gdzie k = 4, m = 1, p = 0, x = 0, y = 4, z = 0.
PL 235 212 Β1
2. Sposób wytwarzania pochodnych sulforafanu o wzorze 1, w którym Arp oznacza grupę polifluoroarylową o wzorze CeHkiCFsJpFs-k-p, gdzie k oznacza liczbę naturalną od 0 do 4, p oznacza liczbę 0, 1 lub 2, x oznacza liczbę 0, 1 lub 2, z oznacza liczbę 0, 1 lub 2, m oznacza liczbę 0 lub 1, a y oznacza liczbę naturalną od 3 do 6, znamienny tym, że prekursor sulfidu ω-amino-1 -alkilowo-polifluoroarylowego bądź ω-amino-l -alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)alkilowego, o wzorze 2 (m = 0), (O)m II
ArF(CHxF2.x)z-S-(CH2)yNH2 wzór 2 (m=0,1) poddaje się reakcji ztiofosgenem w obecności wodorotlenku sodu, do otrzymania odpowiedniego sulfidu ω-izotiocyjaniano-l-alkilowo-polifluoroarylowego bądź ro-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)alkilowego o wzorze 1 (m = 0), który następnie utlenia się za pomocą środka utleniającego, wybranego z grupy obejmującej kwas m-chloroperbenzoesowy (mCPBA), oksazirydyny Davisa, metanadjodan sodu (NalCM) lub nadtlenek wodoru (H2O2), do utworzenia sulfoksydu ω-izotiocyjaniano-l-alkilowo-polifluoroarylowego bądź ω-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)-alkilowego o wzorze 1 (m = 1), 10 w których Arp, x, z, oraz y mają podane wyżej znaczenie.
3. Sposób według zastrz. 2, znamienny tym, że w celu wytworzenia pochodnych sulforafanu o wzorze 1 (m = 1), prekursor sulfoksydu ω-amino-l-alkilowo-polifluoroarylowego bądź ro-amino-1-alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)alkilowego, o wzorze 2 (m = 1) poddaje się reakcji z tiofosgenem w obecności wodorotlenku sodu, do otrzymania odpowiedniego sulfoksydu ω-izotiocyjaniano-l-alkilowo-polifluoroarylowego bądź ro-izotiocyjaniano-1-alkilowo-polifluoroarylo(fluoro)alkilowego o wzorze 1 (m = 1), w którym Arp, x, z, oraz y mają podane wyżej znaczenie.
4. Związki o wzorze 1 określonym w zastrz. 1, do zastosowania jako leki o właściwościach cytostatycznych lub cytotoksycznych wobec komórek nowotworowych, zwłaszcza przeciw nowotworom sutka (carcinoma mammae) i czerniaka (melanoma malignum).
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL421672A PL235212B1 (pl) | 2017-05-22 | 2017-05-22 | Nowe pochodne sulforafanu, sposób ich wytwarzania i zastosowanie |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL421672A PL235212B1 (pl) | 2017-05-22 | 2017-05-22 | Nowe pochodne sulforafanu, sposób ich wytwarzania i zastosowanie |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL421672A1 PL421672A1 (pl) | 2018-12-03 |
| PL235212B1 true PL235212B1 (pl) | 2020-06-15 |
Family
ID=64460756
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL421672A PL235212B1 (pl) | 2017-05-22 | 2017-05-22 | Nowe pochodne sulforafanu, sposób ich wytwarzania i zastosowanie |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL235212B1 (pl) |
-
2017
- 2017-05-22 PL PL421672A patent/PL235212B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL421672A1 (pl) | 2018-12-03 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| DK164363B (da) | 3,4-disubstituerede 1,2,5-thiadiazol-1-oxider | |
| CN107674076B (zh) | 一类具有抗肿瘤活性的吴茱萸碱拼合氮芥衍生物的制备方法和用途 | |
| EA003360B1 (ru) | Производные мононитрата изосорбида и их использование в качестве сосудорасширяющих агентов с пониженной толерантностью | |
| TW202136231A (zh) | 二磺酸亞甲酯化合物之製造方法 | |
| KR100828449B1 (ko) | 증식성 질환 치료용 α, β-불포화 설폰 | |
| PL235212B1 (pl) | Nowe pochodne sulforafanu, sposób ich wytwarzania i zastosowanie | |
| CN108586302B (zh) | 一种基于亚磺酸钠盐歧化反应制备硫代磺酸酯的合成方法 | |
| Lipin et al. | One-pot synthesis of 2-ylidene-1, 3-dithiolanes | |
| ITUB20151204A1 (it) | Procedimento per la preparazione di enzalutamide | |
| Luo et al. | (Z)-Tetrahydrothiophene and (Z)-tetrahydrothiopyran synthesis through nucleophilic substitution and intramolecular cycloaddition of alkynyl halides and EtOCS 2 K | |
| BR112016018594B1 (pt) | método para produção do derivado de 2-aciliminopiridina | |
| EP0276329B1 (en) | 2,3-diaminoacrylonitrile derivatives | |
| PL235779B1 (pl) | Nowe analogi sulforafanu, ich prekursory, sposób ich wytwarzania oraz zastosowanie | |
| Carey et al. | An x-ray crystallographic structural study of sulfoxides derived from 2-phenyl-1, 3-dithiane | |
| CN118401536B (zh) | 草铵膦或其衍生物的制备方法 | |
| Mól et al. | Synthesis and antiproliferative activity in vitro of novel (2-butynyl) thioquinolines | |
| EP1685098B1 (de) | Ortho-substituierte pentafluorsulfanyl-benzole, verfahren zu ihrer herstellung sowie ihre verwendung ais wertvolle synthese-zwischenstufen | |
| Meini et al. | PSNCBAM-1 analogs: Structural evolutions and allosteric properties at cannabinoid CB1 receptor | |
| IT201800006066A1 (it) | Processo per la preparazione di derivati tiadiazolici | |
| Schachtner et al. | Fused 1, 2‐dithioles. IV. Synthesis and reactions of 1, 2‐dithiole s‐oxides | |
| RU2783164C1 (ru) | Хиральные γ-кетосульфанильные производные пинановой структуры и способ их получения | |
| Kamoshenkova et al. | Reactions of 1, 3, 5-tris (fluorosulfonyl) benzene with some nucleophilic reagents | |
| CN101210010B (zh) | 新型大环多聚二硫醚化合物木榄环六硫醇的合成方法 | |
| US3117973A (en) | Novel thiadiazole compounds | |
| DE3314167C2 (pl) |