PL235369B1 - Sposób wytwarzania żeli chitozanowych formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych - Google Patents
Sposób wytwarzania żeli chitozanowych formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych Download PDFInfo
- Publication number
- PL235369B1 PL235369B1 PL424971A PL42497118A PL235369B1 PL 235369 B1 PL235369 B1 PL 235369B1 PL 424971 A PL424971 A PL 424971A PL 42497118 A PL42497118 A PL 42497118A PL 235369 B1 PL235369 B1 PL 235369B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- chitosan
- solution
- uridine
- aqueous solution
- human body
- Prior art date
Links
Landscapes
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Abstract
Przedmiotem zgłoszenia jest sposób wytwarzania żeli chitozanowych, formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na skafoldy iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych, który polega na wprowadzeniu do schłodzonego do temperatury 4°C roztworu wodnego octanu, chlorku, mleczanu chitozanu, sporządzonego z chitozanu o stopniu deacetylacji powyżej 70% i o masie cząsteczkowej 500 - 700 kDa, kroplami schłodzonego także do temperatury 4°C roztworu wodnego soli disodowej 5'-monofosforanu urydyny, zmieszaniu składników i odpowietrzeniu w temperaturze 4°C w czasie 24 godzin powstałego zolu przechodzącego w postać żelu w temperaturze ciała ludzkiego. Do roztworu soli chitozanu, przed wprowadzeniem roztworu soli 5'-monofosforanu urydyny, wprowadza się także środki wspomagające regenerację nerwów, jak kobalamina, kwas liponowy, tlenek grafenu.
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania żeli chitozanowych formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych.
Żele chitozanowe formujące się pod wpływem temperatury są atrakcyjnym materiałem, który może być wykorzystany jako rusztowanie do hodowli komórek nerwowych. Zainteresowanie tego typu rusztowaniami wynika z faktu, że przejście fazowe z zolu w żel następuje w fizjologicznej temperaturze ciała ludzkiego, co umożliwia wprowadzenie rusztowania w trudnodostępne miejsca drogą iniekcji.
Znane są sposoby wytwarzania hydrożeli chitozanowych przeznaczonych na rusztowania do regeneracji nerwów.
Z czasopisma Biomaterials, 138, 2017, 91-107 znane są żele do regeneracji nerwów, wytworzone z octanu chitozanu, formujące się w atmosferze amoniaku (po dokładnym odmyciu).
Znane jest stosowanie do regeneracji nerwów:
- tub - rurek, na przykład silikonowych wypełnionych kolagenem z chitozanem (czasopismo Injury July 2013 Volume 44, Issue 7, Pages 941-946),
- rurek z kwasu polimlekowego (D, L-Laktyd-Co-Glikolid) z przędzą chitozanową lub z rdzeniem z gąbki chitozanowej (czasopismo Journal of Oral and Maxillofacial Surgery, 74, Issue 11).
W opisie patentowym PL 228106 ujawniono sposób wytwarzania biodegradowalnych rurek polimerowych z wypełnieniem, przeznaczonych zwłaszcza do regeneracji nerwów obwodowych, stanowiących rurki z polimeru biodegradowalnego wypełnione hydrożelem polisacharydowym, polegający na wprowadzeniu do rurki polimerowej roztworu polisacharydu lub polisacharydów, jak karboksymetylochitozan, karboksymetyloceluloza lub ich mieszaniny bądź żelu fizycznego tego polisacharydu lub polisacharydów, a następnie poddaniu wypełnionej rurki sieciowaniu w drodze napromienienia promieniowaniem jonizującym.
Z czasopisma Procedia Engineering, 59, 2013, 226-232 znane są także żele do regeneracji rdzenia kręgowego, formujące się w temperaturze ciała ludzkiego, wytwarzane z mleczanu chitozanu z udziałem β-glicerofosforanu sodu.
Z opisu zgłoszenia patentowego CN 101979104 A znane są rusztowania chitozanowe przeznaczone do leczenia urazowych uszkodzeń mózgu, zawierające komórki macierzyste, w postaci porowatych rusztowań z chitozanu wytworzonych metodą liofilizacji w niskiej temperaturze.
Znane jest wytwarzanie hydrożeli chitozanowych, których przejście z zolu w żel następuje w fizjologicznej temperaturze ciała ludzkiego, z niskolepkich roztworów soli chitozanu, przy użyciu beta glicerofosforanu sodu (Na-3-GP), alkoholu poliwinylowego oraz kwaśnego węglanu sodu (czasopisma: Chenite '2004, Carbohyd Polymers doi: 10.1016/j.carbpol.015), International Journal of Pharmaceutics 414:6-15.
Znane jest również wytwarzanie hydrożeli chitozanowych, których przejście z zolu w żel następuje w fizjologicznej temperaturze ciała ludzkiego, metodą enzymatyczną w wyniku obecności w roztworze soli chitozanowych mocznika i ureazy (czasopismo Carbohydrate Polymers doi: 10.1016/j. carbpol.2005.12.010).
Z czasopisma Nucleosides Nucleotides Nucleic Acids. 2016; 35(3):114-29. doi: 10.1080/15257770.2015.1114132 znane jest wytwarzanie żeli chitozanowych z pochodnymi urydyny (oUrd) i monofosforanu urydyny (oUMP) połączonymi z aldehydem glutarowym, ale są to żele nie wykazujące zdolności przejścia z zolu w żel pod wpływem temperatury.
W opisie patentowym PL 219576 ujawniono sposób wytwarzania termowrażliwego hydrożelu chitozanowego zawierającego wapń i fosfor, przeznaczonego na materiał na rusztowania, także wszczepialny, polegający na tym, że roztwór wodny soli chitozanu, chlorku, octanu, mleczanu, glutaminianu lub mrówczanu chitozanu, otrzymany z chitozanu o stopniu deacetylacji powyżej 70%, o temperaturze poniżej 10°C łączy się w trakcie intensywnego mieszania z roztworem wodnym soli wapnia (chlorku, azotanu lub fosforanu wapnia), także o temperaturze poniżej 10°C i następnie z roztworem wodnym α, β lub a, β-glicerofosforanu, po czym odpowietrza i wytworzony żel odmywa się w wodzie lub w buforze o pH powyżej 6, o temperaturze powyżej 30°C bądź też schłodzony roztwór wodny soli chitozanu łączy się ze schłodzonym roztworem wodnym glicerofosforanu, odpowietrza i otrzymany żel po odmyciu w wodzie lub buforze umieszcza się w roztworze wodnym soli wapnia, po czym odmywa buforem o pH powyżej 6.
PL 235 369 B1
W opisie zgłoszenia patentowego P. 423822 ujawniono sposób wytwarzania termoodwracalnych żeli chitozanowych przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli osteoblastów, polegający na tym, że do schłodzonego do temperatury 4°C roztworu wodnego octanu chitozanu, o stężeniu 1-2%, otrzymanego z chitozanu o masie cząsteczkowej 500 000-700 000, wprowadza się kroplami schłodzony do temperatury 4°C roztwór wodny β-glicerofosforanu wapnia o stężeniu 15-30%, po czym całość miesza się, odpowietrza w temperaturze poniżej 10°C w czasie 24 godzin, a powstała w wyniku tego mieszanina w postaci zolu wykazuje zdolność żelowania w temperaturze 37°C. Roztwór octanu chitozanu sporządza się z chitozanu o stopniu deacetylacji 80-90%.
Sposób wytwarzania żeli chitozanowych, formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych, polegający na wprowadzeniu do, schłodzonego do temperatury 4°C, roztworu wodnego octanu, chlorku, mleczanu chitozanu, sporządzonego z chitozanu o stopniu deacetylacji powyżej 70% i o masie cząsteczkowej 500 000-700 000 kroplami schłodzonego także do temperatury 4°C roztworu wodnego pochodnej kwasu fosforowego, zmieszaniu składników i odpowietrzeniu w temperaturze 4°C w czasie 24 godzin powstałego zolu wykazującego zdolność żelowania w temperaturze ciała ludzkiego, według wynalazku charakteryzuje się tym, że stosuje się roztwór wodny soli chitozanu o stężeniu 2-5% wagowych oraz jako roztwór wodny pochodnej kwasu fosforowego roztwór wodny soli disodowej 5'-monofosforanu urydyny o stężeniu 80-100% wagowych używając 1-2 ml roztworu soli disodowej 5'-monofosforanu urydyny na 16 ml roztworu soli chitozanu, przy czym do roztworu soli chitozanu, przed wprowadzeniem roztworu soli 5'-monofosforanu urydyny, wprowadza się także środki wspomagające regenerację nerwów, jak kobalamina w ilości 30-70 ąg/ml roztworu soli chitozanu, kwas liponowy w ilości 0,005-0,015 g/ml roztworu soli chitozanu, tlenek grafenu w ilości 0,002-0,003 mg/ml roztworu soli chitozanu. Mieszanina roztworu soli chitozanu z roztworem soli disodowej 5'-monofosforanu urydyny, w postaci zolu wykazuje zdolność żelowania w temperaturze 35-40°C. Roztwory soli chitozanu sporządza się z chitozanu o stopniu deacetylacji 75-90%.
Sposobem według wynalazku otrzymuje się żele chitozanowe formujące się pod wpływem temperatury ciała ludzkiego. Istotne jest, że środek neutralizujący czyli monofosforan urydyny jest jednocześnie środkiem wspomagającym regenerację nerwów.
Dodatkowo żele otrzymane sposobem według wynalazku zawierają również inne środki wspomagające regeneracje nerwów.
Sposób według wynalazku ilustrują poniższe przykłady.
P r z y k ł a d 1
200 mg chitozanu o stopniu deacetylacji DD=78% i masie cząsteczkowej MW=680 000 rozpuszczono w 20 ml 0,1 M roztworu wodnego kwasu octowego i pozostawiono na 24 godziny w temperaturze pokojowej w celu całkowitego rozpuszczenia polisacharydu, po czym dodano roztwór 500 ąg kobaltoaminy w 1 ml wody destylowanej. Uzyskany roztwór schładzano w ciągu 2-óch godzin do temperatury 4°C. Następnie przygotowano roztwór 0,7 g soli disodowej 5'-monofosforanu urydyny w 1 ml wody destylowanej i uzyskaną zawiesinę schładzano w ciągu 2 godzin do temperatury 4°C, po czym wprowadzano kropla po kropli do schłodzonego roztworu octanu chitozanu. Po dokładnym wymieszaniu całości przygotowaną próbkę pozostawiono w warunkach chłodniczych w temperaturze 4°C w czasie 24 godzin w celu całkowitego pozbycia się pęcherzy powietrznych.
Otrzymana mieszanina roztworu soli chitozanu z roztworem soli disodowej 5’-monofosforanu urydyny miała postać zolu, który w temperaturze 37°C przybrał postać żelu. Powstały żel posiadał strukturę amorficzną, porowatość powyżej 94%, pory o rozmiarach rzędu 20 ąm.
P r z y k ł a d 2
400 mg chitozanu o stopniu deacetylacji DD=90% i masie cząsteczkowej MW=520 000 rozpuszczono w 18 ml 0,1 M roztworu wodnego kwasu solnego i pozostawiono na 24 godziny w temperaturze pokojowej w celu całkowitego rozpuszczenia polisacharydu, następnie dodano 2 ml roztworu tlenku grafenu (GO) o stężeniu 1 mg/ml. Uzyskany roztwór schładzano w ciągu 2 godzin do temperatury 4°C. Następnie przygotowano roztwór 1 g soli disodowej 5'-monofosforanu urydyny w 3 ml wody destylowanej i uzyskaną zawiesinę schładzano w ciągu 2 godzin do temperatury 4°C, po czym wprowadzano kropla po kropli do schłodzonego roztworu octanu chitozanu z GO. Po dokładnym wymieszaniu całości przygotowana próbkę pozostawiono w temperaturze 4°C w czasie 24 godzin w celu całkowitego pozbycia się pęcherzy powietrznych.
Otrzymana mieszanina roztworu soli chitozanu z roztworem soli disodowej 5'-monofosforano urydyny miała postać zolu, który w temperaturze 37°C przybrał postać żelu. Powstały żel posiadał strukturę
PL 235 369 B1 amorficzną, porowatość powyżej 94%, pory o rozmiarach rzędu 5 pm i charakteryzował się przewodnictwem 37 mS.
P r z y k ł a d 3
209 mg chitozanu o stopniu deacetylacji DD=80% i masie cząsteczkowej MW=700 000 rozpuszczono w 20 ml 0,1 M roztworu wodnego kwasu mlekowego, następnie dodano 0,1 g kwasu liponowego i całość pozostawiono na 24 godzin w temperaturze pokojowej w celu całkowitego rozpuszczenia polisacharydu. Uzyskany roztwór mleczanu chitozanu schładzano w ciągu 2 godzin do temperatury 4°C, po czym wprowadzano do niego, kropla po kropli, roztwór 2 g soli disodowej 5'-monofosforanu urydyny w 3 ml wody destylowanej. Po dokładnym wymieszaniu całości przygotowaną próbkę pozostawiono w temperaturze 4°C w ciągu 24 godzin w celu całkowitego pozbycia się pęcherzy powietrznych.
Otrzymana mieszanina roztworu soli chitozanu z roztworem soli disodowej 5'-monofosforanu urydyny miała postać zolu, który w temperaturze 37°C przybrał postać żelu. Powstały żel posiadał strukturę amorficzną, porowatość powyżej 94%, pory o rozmiarach rzędu 10 pm i charakteryzował się przewodnictwem 22 mS.
Claims (4)
1. Sposób wytwarzania żeli chitozanowych, formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych, polegający na wprowadzeniu do, schłodzonego do temperatury 4°C, roztworu wodnego octanu, chlorku, mleczanu chitozanu, sporządzonego z chitozanu o stopniu deacetylacji powyżej 70% i o masie cząsteczkowej 500 000-700 000 kroplami schłodzonego także do temperatury 4°C roztworu wodnego pochodnej kwasu fosforowego, zmieszaniu składników i odpowietrzeniu w temperaturze 4°C w czasie 24 godzin powstałego zolu przechodzącego w postać żelu w temperaturze ciała ludzkiego, znamienny tym, że stosuje się roztwór wodny soli chitozanu o stężeniu 2-5% wagowych oraz jako roztwór wodny pochodnej kwasu fosforowego roztwór wodny soli disodowej 5'-monofosforanu urydyny o stężeniu 80-100% wagowych, używając 1-2 ml roztworu soli sodowej 5'-monofosforanu urydyny na 16 ml roztworu chitozanu, przy czym do roztworu soli chitozanu, przed wprowadzeniem roztworu soli 5'-monofosforanu urydyny, wprowadza się także środki wspomagające regenerację nerwów, jak kobalamina, kwas liponowy, tlenek grafenu.
2. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że mieszanina roztworu soli chitozanu z roztworem soli disodowej 5'-monofosforanu urydyny, w postaci zolu przechodzi w postać żelu w temperaturze 35-40°C.
3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że kobalaminę stosuje się w ilości 30-70 pg/ml roztworu soli chitozanu, kwas liponowy w ilości 0,005-0,015 g/ml roztworu soli chitozanu, tlenek grafenu w ilości 0,002-0,003 mg/ml roztworu soli chitozanu.
4. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że roztwory soli chitozanu sporządza się z chitozanu o stopniu deacetylacji 75-90%.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL424971A PL235369B1 (pl) | 2018-03-20 | 2018-03-20 | Sposób wytwarzania żeli chitozanowych formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL424971A PL235369B1 (pl) | 2018-03-20 | 2018-03-20 | Sposób wytwarzania żeli chitozanowych formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL424971A1 PL424971A1 (pl) | 2019-09-23 |
| PL235369B1 true PL235369B1 (pl) | 2020-06-29 |
Family
ID=67979742
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL424971A PL235369B1 (pl) | 2018-03-20 | 2018-03-20 | Sposób wytwarzania żeli chitozanowych formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL235369B1 (pl) |
Family Cites Families (2)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PL219576B1 (pl) * | 2010-11-22 | 2015-05-29 | Politechnika Łódzka | Sposób wytwarzania termowrażliwego hydrożelu chitozanowego zawierającego wapń i fosfor |
| CN104983672B (zh) * | 2015-06-26 | 2017-11-14 | 青岛大学 | 一种温敏溶胶的制备方法 |
-
2018
- 2018-03-20 PL PL424971A patent/PL235369B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL424971A1 (pl) | 2019-09-23 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP3634748B2 (ja) | イオン性ポリサッカライドゲルの温度制御ｐＨ依存性形成 | |
| JP4981451B2 (ja) | リン酸カルシウム材料、コラーゲンおよびグリコサミノグリカンを含む複合生体材料 | |
| KR101666792B1 (ko) | 핵산 및 키토산을 포함하는 온도감응성 하이드로겔 조성물 | |
| CN102380128B (zh) | 羟基磷灰石、透明质酸钠和魔芋葡甘聚糖复合材料及其制备方法 | |
| CN109432505B (zh) | 一种3d打印构建的多孔级复合医用凝胶支架及其制备方法 | |
| KR19980033188A (ko) | 용매 건조된 다당류 스폰지 | |
| BRPI0708422A2 (pt) | Método para formar um compósito, compósito, métodos para promover a proliferação celular no compósito, para inibir a proliferação celular e para recuperar células do compósito, uso de um compósito, e , métodos para fixar um compósito a um tecido, para remover o crescimento celular, para induzir a geleificação in situ dentro dos poros de uma espuma de alginato, para prevenir a adesão de tecido a tecido adjacene e para formar uma espuma absorvente seca | |
| JP2009529926A5 (pl) | ||
| CN101322857B (zh) | 一种复合骨组织工程多孔支架材料及其制备方法 | |
| CN103690994B (zh) | 一种海藻酸盐/羟基磷灰石水凝胶材料及其制备方法 | |
| KR20130027470A (ko) | 키토산 알기네이트 하이드로겔 비드에서의 세포 배양 | |
| CN107099042A (zh) | 一种温敏型可注射水凝胶的制备方法 | |
| Joy et al. | Hydrogels based on carrageenan | |
| JP2015527125A5 (pl) | ||
| KR20080078279A (ko) | 생체고분자와 생체세라믹의 이종복합체 및 그 제조 방법 | |
| CN101928355B (zh) | 一种氨基化海藻酸及其制备方法 | |
| PL235369B1 (pl) | Sposób wytwarzania żeli chitozanowych formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych | |
| ES2217496T3 (es) | Proceso para producir acido hialuronico reticulado. | |
| CN116854949A (zh) | 一种温敏性水凝胶的制备方法 | |
| CN105254913B (zh) | 一种表面兼有抗菌性和生物相容性的聚酯材料及制备与应用 | |
| PL243349B1 (pl) | Sposób wytwarzania żeli chitozanowych formujących się w temperaturze ciała ludzkiego, przeznaczonych na rusztowania iniekcyjne do hodowli komórek nerwowych | |
| CN111298199B (zh) | 一种骨科临时植入体及其制备方法 | |
| CN114621465B (zh) | 一种胶原蛋白水凝胶及其制备方法 | |
| JP2004283439A (ja) | 有機−無機ハイブリッド体の製法 | |
| JPH0677598B2 (ja) | リン酸カルシウム系硬化体の製造用複合組成物及び硬化体の製造方法 |