PL237050B1 - Sposób otrzymywania preparatu biologicznego pochodzenia grzybicznego przyspieszającego degradację tworzyw polimerowych oraz preparat biologiczny - Google Patents

Sposób otrzymywania preparatu biologicznego pochodzenia grzybicznego przyspieszającego degradację tworzyw polimerowych oraz preparat biologiczny Download PDF

Info

Publication number
PL237050B1
PL237050B1 PL427073A PL42707318A PL237050B1 PL 237050 B1 PL237050 B1 PL 237050B1 PL 427073 A PL427073 A PL 427073A PL 42707318 A PL42707318 A PL 42707318A PL 237050 B1 PL237050 B1 PL 237050B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
biological preparation
suspension
degradation
fungal origin
pet
Prior art date
Application number
PL427073A
Other languages
English (en)
Other versions
PL427073A1 (pl
Inventor
Grażyna Barbara Dąbrowska
Zuzanna Znajewska
Ewa Olewnik-Kruszkowska
Grażyna Monika Szczepańska
Original Assignee
Univ Mikolaja Kopernika
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Univ Mikolaja Kopernika filed Critical Univ Mikolaja Kopernika
Priority to PL427073A priority Critical patent/PL237050B1/pl
Publication of PL427073A1 publication Critical patent/PL427073A1/pl
Publication of PL237050B1 publication Critical patent/PL237050B1/pl

Links

Classifications

    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12NMICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N11/00Carrier-bound or immobilised enzymes; Carrier-bound or immobilised microbial cells; Preparation thereof
    • C12N11/02Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier
    • C12N11/04Enzymes or microbial cells immobilised on or in an organic carrier entrapped within the carrier, e.g. gel or hollow fibres
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B09DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
    • B09BDISPOSAL OF SOLID WASTE NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • B09B3/00Destroying solid waste or transforming solid waste into something useful or harmless
    • BPERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
    • B09DISPOSAL OF SOLID WASTE; RECLAMATION OF CONTAMINATED SOIL
    • B09BDISPOSAL OF SOLID WASTE NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • B09B5/00Operations not covered by a single other subclass or by a single other group in this subclass

Landscapes

  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Environmental & Geological Engineering (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Dispersion Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Immobilizing And Processing Of Enzymes And Microorganisms (AREA)

Abstract

Przedmiotem zgłoszenia jest sposób otrzymywania preparatu biologicznego pochodzenia grzybicznego przyspieszający degradację tworzyw polimerowych charakteryzujący się tym, że przygotowuje się zawiesinę spor grzyba Trichoderma viride 3333 z czystej korzystnie czternastodniowej kultury grzyba prowadzonej w zakresie temperatur od 20°C do 25°C, po czym grzybnię przenosi się na filtr o wielkości por 22 - 25 µm i przepłukuje sterylną wodą, aż do uzyskania zawiesiny o gęstości spor w zakresie od 106 do 108/ml, a następnie zawiesinę spor miesza się z roztworem alginianu sodu korzystnie 0,7% i wkrapla do roztworu CaCl2 w zakresie 2 - 3,5%. Przedmiotem zgłoszenia jest także preparat biologiczny pochodzenia grzybicznego. Biopreparat ten przygotowuje się z mikrokapsułek alginianowych zawierających spory grzyba w ilości od 106 do 108/ml poprzez zmieszanie z 3% chlorkiem wapnia w stosunku 2: 1.

Description

Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób wytwarzania preparatu biologicznego pochodzenia grzybicznego przyspieszającego degradację tworzyw polimerowych oraz preparat biologiczny pochodzenia grzybicznego powodujący zachodzenie zmian degradacyjnych w celu przyspieszenia rozpadu tworzyw sztucznych i ich usunięcia ze środowiska.
Wzrastające zapotrzebowanie na wyroby z tworzyw sztucznych przyczyniło się do znacznego wzrostu ilości odpadów polimerowych składowanych na wysypiskach miejskich, które niekorzystnie oddziałują na środowisko oraz zdrowie zwierząt i ludzi. W środowisku składowane są zarówno tworzywa uznawane za niebiodegradowalne, takie jak: poli(tereftalan etylenu) (PET), polietylen (PE) i biodegradowalne: polikaprolakton (PCL), polilaktyd (PLA). Poważnym problemem są opakowania jednorazowe, stanowiące około 8% masy wszystkich odpadów komunalnych. Pomimo małego ciężaru właściwego, zajmują one około 30% objętości wszystkich odpadów. Do odpadów należą przede wszystkim butelki wykonane z poli(tereftalanu etylenu) (PET), torby jednorazowe, torebki śniadaniowe i folie wykonane z polietylenu (PE), polipropylenu (PP), polilaktydu (PLA) lub polikaprolaktonu (PCL) wykorzystywane do pakowania żywności i innych przedmiotów. W celu zapobiegania gromadzeniu się odpadów z tworzyw sztucznych na wysypiskach miejskich podejmowane są działania takie jak recykling, który w Polsce jest wciąż mało wydajny ze względu na problem z prawidłową segregacją śmieci. Innym sposobem usuwania tworzyw polimerowych ze środowiska jest ich spalanie lub dodawanie do węgla w procesie koksowania. Powoduje to kolejne zagrożenia dla środowiska, ze względu na uwalnianie toksycznych związków (np. tlenku węgla, nitrozwiązków, nienasyconych związków organicznych). Metody te wciąż są niewystarczająco skuteczne, a problemy dotyczące składowania oraz gospodarowania odpadami miejskimi wymagają nowych rozwiązań.
Jednym z takich sposobów jest biologiczna degradacja, która jest atrakcyjną alternatywą dla innych metod usuwania odpadów. Jest to często proces tańszy, potencjalnie bardziej wydajny i niewytwarzający zanieczyszczeń wtórnych. Istotnym czynnikiem wpływającym na czas biodegradacji tworzyw sztucznych jest obecność i aktywność biologiczna organizmów żywych, wśród których największą rolę odgrywają mikroorganizmy: bakterie i grzyby. Mikroorganizmy biorące udział w biodegradacji mogą wykorzystywać materiały polimerowe jako źródło węgla. W tym celu selekcjonuje się mikroorganizmy pod względem ich zdolności do produkcji enzymów, dlatego ważna jest wiedza dotycząca aktywności metabolicznej mikroorganizmów.
Znanych jest z publikacji naukowych wiele szczepów bakterii i grzybów zdolnych do biodegradacji tworzyw sztucznych. Należą do nich grzyby z rodzajów: Aspergillus, Fusarium, Chaetomium, Peacilomyces, Mucor, Cryptococcus, Rhizopus, Penicillium (Kannahi i Thamizhmarai 2018), Pseudozyma japonica (Abdel-Motaal i in. 2014), Rhizopus delemar (Tsuji i Miyauchi 2001) oraz Clitocybe i Laccaria laccata przyspieszające zachodzenie zmian biodegradacyjnych na PET, PCL i PLA (Janczak i in. 2018). Z kolei grzyby z rodzajów: Aspergillus, Trichoderma, Fusarium i Alternaria degradują poliuretan w glebie (Araceli i in. 2017). H. Tsuji, S. Miyauchi: Poly(L-lactide). VI. Effects of crys-tallinity on enzymatic hydrolysis of poly(L-lactide) without free amorphous region. Polym. Degrad. Stab. 2001,71: 415; M. Kannahi, T. Thamizhmarai: Biodegradation of plastic by Aspergillus sp. Int. J Trend. Sci. Res. Develop. 2018, 2: 683; L.P. Abdel-Motaal, M.A. El-Sayed, S.A. El-Zayat, S.I. Ito: Biodegradation of poly (s-caprolactone) (PCL) film and foam plastic by Pseudozyma japonica sp. nov., a novel cutinolytic ustilaginomycetous yeast species. 3Biotech. 2014, 4: 507; K. Janczak, K. Hrynkiewicz, Z. Znajewska, G. Dąbrowska: Use of rhizosphere microorganisms in the biodegradation of PLA and PET polymers in compost soil. Int. Biodeterior. Biodegradation 2018, 130: 65-75; L. Araceli, A. Arguello, R. Rodrifuez-Herrera, G. Gutierrez-Sanchez, A. Escamilla, C. Aguilar: Lungal biodegradation of rigid polyurethane. Quim. Nova 2017, 8: 885.
Szczep Trichoderma viride użyty w wynalazku należy do grzybów z rodzaju Trichoderma spp. występujących w glebach na różnych szerokościach geograficznych, o dużych zdolnościach adaptacyjnych do otoczenia. Grzyby te charakteryzują się bardzo szybkim tempem wzrostu, obfitym zarodnikowaniem oraz zdolnością do wytwarzania enzymów hydrolitycznych. Obecność w glebie tych grzybów jest uwarunkowana czynnikami abiotycznymi, takimi jak: pH gleby, wilgotność, czy temperatura. Grzyby T. viride zdolne są do stymulowania wzrostu roślin jednoliściennych (sorgo, Sorgo bicolor) i dwuliściennych (rzepak, Brassica napus L.), a także wykazują antagonizm względem patogenów, co hamuje ich rozwój i dodatkowo chroni rośliny przed chorobami.
PL 237 050 B1
Alginiany ekstrahowane są z różnych gatunków glonów. Przykładowo alginian otrzymywany z Macrocystis pyrifera i Ascophylllum sp. bogaty jest w kwas mannuronowy. Tworzy on żele elastyczne, choć łatwo ulega deformacji. Z kolei alginian pochodzący z glonu Laminaria hyperborea charakteryzuje się dużą zawartością kwasu guluronowego. Związek ten ma tendencję do formowania sztywnych i kruchych żeli, które ulegają synerezie, tzn. kurczeniu się żelu z wydzieleniem wody (Neau i in. 1993). Alginian zawierający kwas guluronowy wykazuje większe powinowactwo do jonów wapnia niż do innych jonów, np. jonów sodu, w szerokim zakresie ich wzajemnych, względnych stężeń (Braccini i in. 1999). Kapsułkowanie jest wykorzystywane na szeroką skalę w wielu gałęziach przemysłu, m.in. w farmaceutycznym, kosmetycznym, chemicznym i medycynie, w systemach kontrolowanego uwalniania substancji czynnych (np. enzymów, leków) i konstruowaniu sztucznych organów (Jankowski 1996). Alginian wapnia jest powszechnie stosowany do unieruchamiania, najczęściej w postaci pełnych kulek żelowych. Wynika to z faktu, że jest to łatwa i tania procedura tworzenia żelu, która pozwala na unieruchamianie materiału w warunkach dogodnych i nietoksycznych (Palmieri i in. 1994). I.I. Braccini, R.P. Grasso, S. Perez: Conformational and configurational features of acidic polysaccharides and their interactions with calcium ions: a molecular modeling investigation. Carbohydr. Res. 1999, 317: 119-130; S.H. Neau, S.R. Goskonda, S.M. Upadrashta, C.A. Thies, S.I. Tripp: Encapsulation of a volatile oil by ionic gelation of alginate. Am. J. Pharm. Educ. 1993, 53: 126-129; T. Jankowski: Biohybrydowe sztuczne narządy w terapii chorób układowych. Biotechnologia 1999, 44: 45-58; G. Palmieri G.P. Giardina, B. Desiderio, L. Marzullo, M. Giamberini, G. Sannia: A new enzyme immobilization procedure using copper alginate gel: Application to a fungal phenol oxidase. Enzyme Microb. Technol. 1994, 16: 151-158.
Sposób według wynalazku polega na przygotowaniu zawiesiny spor grzyba Trichoderma viride 3333 z czystej korzystnie dwutygodniowej kultury grzyba prowadzonej w zakresie temperatur od 20°C do 25°C, po czym grzybnię przenosi się na filtr o wielkości por 22-25 μm i przepłukuje sterylną wodą, tak aby uzyskać zawiesinę o gęstości spor w zakresie od 106 do 108 ml. Następnie zawiesina spor mieszana jest z roztworem alginianu sodu korzystnie 0,7% i przenoszona do roztworu CaCl2 o stężeniu 2-3,5% poprzez wkraplanie. Etap unieruchamiania spor w alginianie wapnia zapobiega ich nadmiernemu rozprzestrzenianiu się w powietrzu i utrzymywaniu stałej ilości spor w mikrokapsułce. Biopreparat w postaci mikrokapsułek jest stosowany w dawce 1,5-3,0 kg/ha w miejscach kompostowania tworzyw sztucznych lub rozsiewany urządzeniem do rozsiewania nawozów sztucznych na powierzchni gleby zanieczyszczonej tworzywami sztucznymi, tj. składowiska odpadów miejskich czy nielegalne wysypiska w środowisku naturalnym.
Przedmiotem wynalazku jest także preparat biologiczny pochodzenia grzybicznego charakteryzujący się tym, że zawiera spory czystej kultury grzyba Trichoderma viride 3333 w zakresie od 106 do 108 i 3% chlorku wapnia, korzystnie w proporcji 2:1. Preparat i umieszczany jest w mikrokapsułkach.
Wynalazek został ujawniony w poniższych przykładach wykonania.
P r z y k ł a d 1. Kultura grzyba T. viride 3333 przechowywana w stokach agarowych w temperaturze 4°C, przenoszona jest na podłoże mikrobiologiczne stałe PDA (Potato Dextrose Agar, Difco) przeznaczone do hodowli grzybów strzępkowych i inkubowana w 22°C przez 14 dni. Zawiesinę spor uzyskuje się poprzez przepłukanie grzybni T. viride 3333 100 ml wody na filtrze Miracloth (Millipore Corp., USA). Zawiesinę o gęstości 106 spor/ml ustala się z wykorzystaniem komory Thoma. Została ona wykorzystana do eksperymentów prowadzonych w warunkach laboratoryjnych i w glebie. Następnie zawiesina spor była wymieszana z 0,7% roztworem alginianu sodu i wkroplona do 3% roztworu CaCl2. Tak wytworzony preparat umieszcza się w mikrokapsułkach znanymi powszechnie metodami. Otrzymany preparat składa się z mikrokapsułek alginianowych zawierających 106 spor czystej kultury grzyba Trichoderma viride 3333 i 3% chlorku wapnia, zawartych w preparacie w stosunku dwie objętości mikrokapsułek ze sporami grzyba i jedna objętość 3% chlorku wapnia. Preparat umieszczono w mikrokapsułce.
Sprawdzona była aktywność metaboliczna T. viride 3333 poprzez analizę zdolność grzyba do hydrolizy karboksymetylocelulozy (CMC), pektyn, białek i tłuszczy w celu oceny potencjału do biodegradacji tworzyw polimerowych. Do eksperymentów wykorzystane były metody opisane szczegółowo w publikacji (Janczak K., Hrynkiewicz K., Znajewska Z., Dąbrowska G. 2018. Journal of Biodeterioration and Biodegradation 130: 65-75). Do obliczenia Współczynnik aktywności metabolicznej szczepu (Wakt) był obliczony według wzoru Wakt = Sh2/ (Sc»t), gdzie Sh - strefa hydrolizy, Sc - średnica kolonii, t - czas inkubacji. Kontrolę stanowił szczep grzyba ISR 10-3 wykazujący badane aktywności enzymatyczne.
Folie do badań o grubości 0,087 mm, były wyznaczone zgodnie z normą PN-ISO4593:1999. Do wytłoczenia folii użyte były granulaty tworzyw: PLA (IngeoTM Biopolymer2003D, Nature Works LLC,
PL 237 050 Β1
USA) i PCL (CapaTM 6800, Perstorp Winning Formulas, UK), PET (SKYPET - L85, Korea) wykorzystując laboratoryjną linię technologiczną wyposażoną w wytłaczarkę jednoślimakową Plasti-Corder PLV 151 (Brabender, Niemcy).
Zdolność grzyba do wzrostu na tworzywach PLA, PCL i PET była badana na podłożu stałym minimalnym zgodnie z normą PN-EN ISO 846, zawierającym wysterylizowane fragmenty folii. Folie polimerowe zostały sterylizowane poprzez płukanie w 70% alkoholu etylowym i poprzez pięciominutową ekspozycję na UV. Do sterylnych kolb zawierających fragment sterylnych folii PLA i PET o wymiarach 3 cm x 3 cm dodawano 15 ml płynnego, minimalnego podłoża hodowlanego oraz 10 μΙ zawiesiny spor T. viride 3333 o gęstości 106 spor/ml. Hodowla była prowadzona przez 6 miesięcy w ciemności w temperaturze 22°C. W celu sprawdzenia obecności grzyba na tworzywach, fragmenty folii z zachowaniem warunków aseptycznych były opłukiwane sterylną wodą i przenoszone do roztworu błękitu laktofenolowego na 5 minut. Po wybarwieniu grzybni, fragmenty folii były opłukiwane sterylną wodą i analizowane z użyciem mikroskopu świetlnego. Eksperyment był wykonany w trzech powtórzeniach.
Fragmenty folii PET i PLA zostały przeanalizowane z wykorzystaniem skaningowej mikroskopii elektronowej (SEM), która pozwoliła na obserwowanie fragmentów grzybni obecnych na badanych polimerach, a także na ocenę zmian powierzchniowych zachodzących w degradowanych materiałach pod wpływem kontaktu z T. viride 3333. Powierzchnię próbek zobrazowano za pomocą skaningowego mikroskopu elektronowego Quanta 3D FEG o zdolności rozdzielczej 1,2 nm, wyposażonego w działo z emisją połową (Schottky FEG). Zakres napięć przyspieszających aparatu wynosił od 200 V do 30 kV. Zdjęcia topografii próbek były otrzymane dzięki użyciu detektora SE. W celu przeprowadzenia analizy z użyciem SEM powierzchnie folii napylono złotem.
W celu sprawdzenia stopnia degradacji tworzywa PET zastosowano spektroskopie w podczerwieni z transformacją Fouriera (FTIR). Widma techniką transmisyjną były wykonane z wykorzystaniem spektrometru Nicolet iS1O firmy Thermo Scientific w zakresie 4000-600 cm'1. Próbki zostały przeskanowane 64 razy z rozdzielczością 4 cm-1. Technika FTIR miała na celu analizę ewentualnych zmian zachodzących w strukturze badanych materiałów wystawionych na działanie czynników degradujących w postaci T. viride 3333. Do analizy folii PET była wykorzystana również różnicowa kalorymetria skaningowa (DSC). Analizy wykonano z wykorzystaniem aparatu Epson Polymer Laboratories. Pomiary wykonywane były w zakresie temperatur: ~25-300°C, z szybkością ogrzewania 10°C/min, w atmosferze azotu. Metoda ta pozwoliła na analizę zmian właściwości termicznych PET pod wpływem czynników degradujących.
W eksperymencie przeprowadzonym w glebie zbadano wpływ T. viride 3333 na szybkość degradacji polikaprolaktonu (PCL). W donicach z glebą ogrodową, uprzednio szczepioną 0,5 ml zawiesiny o gęstości 106 spor/ml, umieszczano folie wysterylizowane w etanolu i świetle UV. Doświadczenie prowadzono w temperaturze 22°C przez sześć miesięcy.
Tabela 1
Aktywność metaboliczna (Wact) grzyba T. viride 3333 (A - amylolityczna, PEK - pektynolityczna, PRO - proteolityczna, L - lipolityczna, C - celulolityczna).
Szczep T. viride 3333, wykazuje wszystkie badane aktywności: pektynolityczną, lipolityczną, celulityczną, amylolityczną i proteolityczną ( ukazane na fig. 1). Fig. 1 przedstawia wzrost T. viride 3333 na tworzywach polimerowych w warunkach laboratoryjnych po 3 tygodniach; lewa strona - fragmenty folii bez grzyba (kontrola), prawa strona - fragmenty folii z grzybem. Wyniki wskazują na potencjał tego szczepu grzyba do degradacji tworzyw polimerowych. Barwienie grzybni z użyciem błękitu laktofenolu wykazało na foliach PCL, PLA i PET obecność niebiesko zabarwionych obszarów, świadczących o obecności grzybni T. viride 3333 na tworzywach.
W obecności grzybów rosnących na podłożu minimalnym stwierdzono zmatowienie folii. Fragmenty tworzyw były porośnięte przez T. viride 3333, grzyb intensywnie rozwijał się na brzegach tworzyw,
PL237 050 Β1 gdzie widoczne były zarodniki. Szczep T. viride 3333 był zdolny do wzrostu na foliach PCL, PLA i PET w warunkach laboratoryjnych (fig. 1). Ponadto po sześciu miesiącach inkubacji w glebie, w obecności T viride 3333, stwierdzono całkowity rozpad folii PCL.
Analizy z wykorzystaniem SEM, wykazały obecność grzybni T viride 3333 na tworzywach PLA i PET. Rozwijające się strzępki przylegały do powierzchni obu badanych folii (Fig. 2). Fig. 2 przedstawia analizę SEM fragmentów tworzyw polimerowych po inkubacji w podłożu mikrobiologicznym płynnym, zawierającym T viride 3333 lub nie zawierającym grzyba (kontrola).
Miejsca zakotwiczenia grzyba charakteryzują się znacznie ciemniejszą barwą sugerującą, że grzyb T viride 3333 wydziela m.in. enzymy hydrolityczne, które penetrują powierzchnię polimeru. Jest to szczególnie widoczne w przypadku próbki PET. Świadczy to, że degradowany polimer stanowi źródło węgla (pożywkę) dla rosnącego T viride 3333 (fig. 2).
Na fig. 3 przedstawiono termogramy do PET przed degradacją (PET), po inkubacji z T viride 3333 (PET-3333) oraz po przechowywaniu w pożywce (PET-pożywka).
Tabela 2
Zestawienie właściwości termicznych dla badanych materiałów
Γ~Ύγ0ΒΪώ~~ liii
i PET 80.82 | 137.86 | -26.85 | 248.95 | 37.54
PET- i T T T 77.88 138.01 -30.79 249.09 I 46.92
pożywka
PET-3333 L-______________________________________________
Otrzymane wyniki dowodzą, że PET uległ częściowej degradacji na co wskazuje obniżenie temperatury zeszklenia (Tg) w wyniku plastykującego efektu, powstałych podczas degradacji krótszych łańcuchów polimerowych. Jednakże degradacja nie była na tyle zaawansowana aby obniżyć znacząco masy cząsteczkowe badanych próbek, o czym świadczą niemal niezmienione wartości temperatur krystalizacji (Tc) i topnienia (Tm). Natomiast powstałe krótsze łańcuchy PET pozwoliły na reorganizację struktury polimeru i wzrost entalpii zarówno krystalizacji i topnienia (Tab. 2). Podsumowując wyniki analizy DSC jednoznacznie wskazują na degradację PET zachodzącą pod wpływem T viride 3333.
Porównując widma FTIR-ATR dla badanych materiałów wyraźnie obserwuje się znaczący wzrost intensywności szerokiego pasma w zakresie 3000-3500 cm'1, które należy do grup -OH. Może ono wskazywać na obecność produktów degradacji, wilgoci w próbce i występowanie wiązań wodorowych. Widoczny jest również wzrost pasm przy 2922 i 2851 cm-1 wskazujący na drgania asymetryczne rozciągające wiązań C-H (fig. 4). Fig. 4 przedstawia zestawienie widm FTIR-ATR dla badanych materiałów: PET przed degradacją, PET po inkubacji z T viride 3333 (PET-3333) oraz po przechowywaniu w pożywce (PET-pożywka).
Przykład II. Sposób otrzymywania preparatu biologicznego pochodzenia grzybicznego przyspieszający degradację tworzy polimerowych polega na tym, że przygotowuje się zawiesinę spor grzyba Trichoderma viride 3333 z czystej czternastodniowej kultury grzyba prowadzonej w temperaturze 24°C, po czym grzybnię przenosi się na filtr o wielkości por 24 μm i przepłukuje sterylną wodą, aż do uzyskania zawiesiny o gęstości spor w zakresie 107 spor/ml, a następnie zawiesinę spor miesza się z roztworem 0,7% alginianu sodu i wkrapla 2% roztworu CaCl2. Otrzymaną zawiesinę umieszcza się w mikrokapsułkach. Preparat biologiczny pochodzenia grzybicznego składa się z mikrokapsułek zawierających 107 spor czystej kultury grzyba Trichoderma viride 3333 i 2% chlorku wapnia w proporcji 2:1. Preparat jest w mikrokapsułkach.

Claims (2)

Zastrzeżenia patentowe
1. Sposób otrzymywania preparatu biologicznego pochodzenia grzybicznego przyspieszającego degradację tworzyw polimerowych znamienny tym, że przygotowuje się zawiesinę spor grzyba Trichoderma viride 3333 z czystej korzystnie czternastodniowej kultury grzyba prowa
PL 237 050 Β1 dzonej w zakresie temperatur od 20°C do 25°C, po czym grzybnię przenosi się na filtr o wielkości por 22-25 μm i przepłukuje sterylną wodą, aż do uzyskania zawiesiny o gęstości spor w zakresie od 106 do 108 ml, a następnie zawiesinę spor miesza się z roztworem alginianu sodu korzystnie 0,7% i wkrapla do roztworu CaCb o stężeniu 2-3,5% i tak otrzymaną zawiesinę umieszcza się w mikrokapsułkach.
2. Preparat biologiczny pochodzenia grzybicznego przyspieszający degradację tworzyw polimerowych znamienny tym, że zawiera od 106 do 108 spor czystej kultury grzyba Trichoderma viride 3333 i 3% chlorku wapnia, korzystnie w proporcji 2:1 i jest w mikrokapsułkach.
PL427073A 2018-09-14 2018-09-14 Sposób otrzymywania preparatu biologicznego pochodzenia grzybicznego przyspieszającego degradację tworzyw polimerowych oraz preparat biologiczny PL237050B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL427073A PL237050B1 (pl) 2018-09-14 2018-09-14 Sposób otrzymywania preparatu biologicznego pochodzenia grzybicznego przyspieszającego degradację tworzyw polimerowych oraz preparat biologiczny

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL427073A PL237050B1 (pl) 2018-09-14 2018-09-14 Sposób otrzymywania preparatu biologicznego pochodzenia grzybicznego przyspieszającego degradację tworzyw polimerowych oraz preparat biologiczny

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL427073A1 PL427073A1 (pl) 2019-02-25
PL237050B1 true PL237050B1 (pl) 2021-03-08

Family

ID=65431246

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL427073A PL237050B1 (pl) 2018-09-14 2018-09-14 Sposób otrzymywania preparatu biologicznego pochodzenia grzybicznego przyspieszającego degradację tworzyw polimerowych oraz preparat biologiczny

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL237050B1 (pl)

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HRP20240573A1 (hr) * 2024-04-25 2025-11-07 MAKABI AGRITECH d.o.o. Tehnološki postupak proizvodnje i sastav dodataka prihrani i zaštite biljnih kultura temeljnih na sinergističkom djelovanju biočimbenika i kemijskog reagensa

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000037665A1 (en) * 1998-12-22 2000-06-29 The University Of Georgia Research Foundation Method and system for the continuous synthesis of natural products using immobilized fungal spores
CN103949224A (zh) * 2014-04-24 2014-07-30 东华理工大学 一种处理含铀废水的黄绿木霉颗粒吸附剂及其制备与应用

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2000037665A1 (en) * 1998-12-22 2000-06-29 The University Of Georgia Research Foundation Method and system for the continuous synthesis of natural products using immobilized fungal spores
CN103949224A (zh) * 2014-04-24 2014-07-30 东华理工大学 一种处理含铀废水的黄绿木霉颗粒吸附剂及其制备与应用

Non-Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
MUNIR E. ET AL.: "201803", PLASTIC DEGRADING FUNGI TRICHODERMA VIRIDE AND ASPERGILLUS NOMIUS ISOLATED FRAM LOCAL LANDFILI SOIL IN MEDAN *
VINCEKOVIĆ M. ET AL.: "2017", RELEASE OF TRICHODERMA VIRIDE SPORES FRAM MICRACAPSULES SIMULTANEOUSLY LOADED WITH CHEMICAL AND BIOLOGICAL AGENTS *

Cited By (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HRP20240573A1 (hr) * 2024-04-25 2025-11-07 MAKABI AGRITECH d.o.o. Tehnološki postupak proizvodnje i sastav dodataka prihrani i zaštite biljnih kultura temeljnih na sinergističkom djelovanju biočimbenika i kemijskog reagensa

Also Published As

Publication number Publication date
PL427073A1 (pl) 2019-02-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
Pattanasuttichonlakul et al. Accelerating biodegradation of PLA using microbial consortium from dairy wastewater sludge combined with PLA-degrading bacterium
Jeon et al. Isolation of mesophilic bacterium for biodegradation of polypropylene
Zahra et al. Biodegradation of low-density polyethylene (LDPE) by isolated fungi in solid waste medium
Di Franco et al. Degradation of polycaprolactone/starch blends and composites with sisal fibre
Bonifer et al. Bacillus pumilus B12 degrades polylactic acid and degradation is affected by changing nutrient conditions
Schöpfer et al. Hydrolyzable microplastics in soil—low biodegradation but formation of a specific microbial habitat?
Sikorska et al. Degradability of polylactide and its blend with poly [(R, S)-3-hydroxybutyrate] in industrial composting and compost extract
Jeon et al. Isolation of a thermophilic bacterium capable of low-molecular-weight polyethylene degradation
Yang et al. Dependence of biodegradability of plastics in compost on the shape of specimens
Andrady Assessment of environmental biodegradation of synthetic polymers
Kanwal et al. Screening and characterization of novel lipase producing Bacillus species from agricultural soil with high hydrolytic activity against PBAT poly (butylene adipate co terephthalate) co-polyesters
Sartore et al. Preparation and performance of novel biodegradable polymeric materials based on hydrolyzed proteins for agricultural application
Salehpour et al. Biodegradation and ecotoxicological impact of cellulose nanocomposites in municipal solid waste composting
Calil et al. Comparison of the biodegradation of poly (ε-caprolactone), cellulose acetate and their blends by the Sturm test and selected cultured fungi
Sameshima-Yamashita et al. Pretreatment with an esterase from the yeast Pseudozyma antarctica accelerates biodegradation of plastic mulch film in soil under laboratory conditions
Liu et al. Analysis of biodegradability of three biodegradable mulching films
Badahit Screening of plastic degrading Pseudomonas spp. from soil
Teixeira et al. Investigation of the influence of plasticizers on the biodegradability of cellulose acetate
Liu et al. Biodeterioration of polyethylene by Bacillus cereus and Rhodococcus equi isolated from soil
Negi et al. Studies on biodegradation of LDPE film in the presence of potential bacterial consortia enriched soil
PL237050B1 (pl) Sposób otrzymywania preparatu biologicznego pochodzenia grzybicznego przyspieszającego degradację tworzyw polimerowych oraz preparat biologiczny
Marshall et al. Controlled Delivery of Pesticides through Synthetic Biodegradable Polymer Compositions
Sabei et al. Biodegradation of UV light treated plastic waste using local bacterial isolates
Erofeevskaya et al. Prospects for the use of spore-forming bacteria to combat the destruction of polymeric composite materials
Torres et al. Biodegradative capacity of Bacillus megaterium and Ralstonia solanacearum on biodegradation of P (3HB) films in simulated soil Capacidade biodegradativa de Bacillus Megaterium e Ralstonia solanacearum na biodegradação de filmes de P (3HB) em solo simulado