PL237565B1 - Sposób wykrywania porodu przedwczesnego - Google Patents
Sposób wykrywania porodu przedwczesnego Download PDFInfo
- Publication number
- PL237565B1 PL237565B1 PL419784A PL41978416A PL237565B1 PL 237565 B1 PL237565 B1 PL 237565B1 PL 419784 A PL419784 A PL 419784A PL 41978416 A PL41978416 A PL 41978416A PL 237565 B1 PL237565 B1 PL 237565B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- acid
- metabolites
- preterm labor
- premature
- biomarkers
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 29
- 239000002207 metabolite Substances 0.000 title claims abstract description 27
- 239000000090 biomarker Substances 0.000 title abstract description 11
- 206010036595 Premature delivery Diseases 0.000 title description 4
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 claims abstract description 12
- 210000002966 serum Anatomy 0.000 claims abstract description 5
- 208000006399 Premature Obstetric Labor Diseases 0.000 claims description 25
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 claims description 11
- 210000002381 plasma Anatomy 0.000 claims description 10
- 230000002028 premature Effects 0.000 claims description 7
- WHBMMWSBFZVSSR-UHFFFAOYSA-N 3-hydroxybutyric acid Chemical compound CC(O)CC(O)=O WHBMMWSBFZVSSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 6
- 210000004369 blood Anatomy 0.000 claims description 6
- 239000008280 blood Substances 0.000 claims description 6
- 210000001124 body fluid Anatomy 0.000 claims description 6
- 239000010839 body fluid Substances 0.000 claims description 6
- 230000008602 contraction Effects 0.000 claims description 6
- 150000003408 sphingolipids Chemical class 0.000 claims description 5
- POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N dodecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCC(O)=O POULHZVOKOAJMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- JJWZFUFNJNGKAF-UHFFFAOYSA-N hexacosanedioic acid Chemical compound OC(=O)CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O JJWZFUFNJNGKAF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- SECPZKHBENQXJG-FPLPWBNLSA-N palmitoleic acid Chemical compound CCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O SECPZKHBENQXJG-FPLPWBNLSA-N 0.000 claims description 4
- LLZPQHOZAQNDCM-PKTZIBPZSA-N phosphatidylserine O-18:0/0:0 Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCCCOC[C@@H](O)COP(O)(=O)OC[C@H](N)C(O)=O LLZPQHOZAQNDCM-PKTZIBPZSA-N 0.000 claims description 4
- AFENDNXGAFYKQO-VKHMYHEASA-N (S)-2-hydroxybutyric acid Chemical compound CC[C@H](O)C(O)=O AFENDNXGAFYKQO-VKHMYHEASA-N 0.000 claims description 3
- YNNQTVPKSXTDCK-SABUVIKOSA-N 1-deoxysphinga-6Z,9Z,12Z,15Z-tetraenine Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/C\C=C/CC[C@@H](O)[C@H](C)N YNNQTVPKSXTDCK-SABUVIKOSA-N 0.000 claims description 3
- NYHNVHGFPZAZGA-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxyhexanoic acid Chemical compound CCCCC(O)C(O)=O NYHNVHGFPZAZGA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- ISAVYTVYFVQUDY-UHFFFAOYSA-N 4-tert-Octylphenol Chemical compound CC(C)(C)CC(C)(C)C1=CC=C(O)C=C1 ISAVYTVYFVQUDY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 claims description 3
- YNNQTVPKSXTDCK-UHFFFAOYSA-N obscuraminol A Natural products CCC=CCC=CCC=CCC=CCCC(O)C(C)N YNNQTVPKSXTDCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 3
- PZVYDNWEQXJZPQ-IYAOGOEGSA-N (4E,8E,10E-d18:3)sphingosine Chemical compound CCCCCCC\C=C\C=C\CC\C=C\[C@@H](O)[C@@H](N)CO PZVYDNWEQXJZPQ-IYAOGOEGSA-N 0.000 claims description 2
- GHCZAUBVMUEKKP-NHIHLBCISA-N 2-[[(4R)-4-[(3R,5S,7S,10S,13R,17R)-3,7-Dihydroxy-10,13-dimethyl-2,3,4,5,6,7,8,9,11,12,14,15,16,17-tetradecahydro-1H-cyclopenta[a]phenanthren-17-yl]pentanoyl]amino]acetic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)C1C2C2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 GHCZAUBVMUEKKP-NHIHLBCISA-N 0.000 claims description 2
- JYZJYKOZGGEXSX-UHFFFAOYSA-N 2-hydroxymyristic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC(O)C(O)=O JYZJYKOZGGEXSX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- PIGOPELHGLPKLL-YFKPBYRVSA-N 3-(pyrazol-1-yl)-L-alanine Chemical compound [O-]C(=O)[C@@H]([NH3+])CN1C=CC=N1 PIGOPELHGLPKLL-YFKPBYRVSA-N 0.000 claims description 2
- LNAVIIOBBICBIS-NBRVCOCJSA-N CCCCCCCCCCCCCCC\C=C\C=C\C(O)=O Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCC\C=C\C=C\C(O)=O LNAVIIOBBICBIS-NBRVCOCJSA-N 0.000 claims description 2
- AZRMIMGGEACCGU-HZJYTTRNSA-N CPA(18:2(9Z,12Z)/0:0) Chemical compound CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(=O)OCC1COP(O)(=O)O1 AZRMIMGGEACCGU-HZJYTTRNSA-N 0.000 claims description 2
- PEVJDMWZXLRJSP-LFPPQAFFSA-N Crucigasterin 277 Chemical compound CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CC\C=C\C[C@@H](O)[C@H](C)N PEVJDMWZXLRJSP-LFPPQAFFSA-N 0.000 claims description 2
- PEVJDMWZXLRJSP-UHFFFAOYSA-N Crucigasterin 277 Natural products CCC=CCC=CCC=CCCC=CCC(O)C(C)N PEVJDMWZXLRJSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000005639 Lauric acid Substances 0.000 claims description 2
- 235000021319 Palmitoleic acid Nutrition 0.000 claims description 2
- 206010067726 Shortened cervix Diseases 0.000 claims description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 2
- SECPZKHBENQXJG-UHFFFAOYSA-N cis-palmitoleic acid Natural products CCCCCCC=CCCCCCCCC(O)=O SECPZKHBENQXJG-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 claims description 2
- GHCZAUBVMUEKKP-GYPHWSFCSA-N glycochenodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1C[C@H]2O)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)CC1 GHCZAUBVMUEKKP-GYPHWSFCSA-N 0.000 claims description 2
- WVULKSPCQVQLCU-BUXLTGKBSA-N glycodeoxycholic acid Chemical compound C([C@H]1CC2)[C@H](O)CC[C@]1(C)[C@@H]1[C@@H]2[C@@H]2CC[C@H]([C@@H](CCC(=O)NCC(O)=O)C)[C@@]2(C)[C@@H](O)C1 WVULKSPCQVQLCU-BUXLTGKBSA-N 0.000 claims description 2
- 230000000984 immunochemical effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000004885 tandem mass spectrometry Methods 0.000 claims description 2
- TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N tetradecanoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCC[14C](O)=O TUNFSRHWOTWDNC-HKGQFRNVSA-N 0.000 claims description 2
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 claims description 2
- GHCZAUBVMUEKKP-UHFFFAOYSA-N ursodeoxycholic acid glycine-conjugate Natural products OC1CC2CC(O)CCC2(C)C2C1C1CCC(C(CCC(=O)NCC(O)=O)C)C1(C)CC2 GHCZAUBVMUEKKP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 claims 1
- 208000005107 Premature Birth Diseases 0.000 abstract description 3
- 206010036590 Premature baby Diseases 0.000 abstract 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 7
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 7
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 6
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 5
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 5
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 5
- 238000004422 calculation algorithm Methods 0.000 description 4
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 4
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 4
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N methanoic acid Natural products OC=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 4
- 206010056254 Intrauterine infection Diseases 0.000 description 3
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 3
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 3
- 238000004895 liquid chromatography mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 238000004949 mass spectrometry Methods 0.000 description 3
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 3
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 3
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 3
- OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 4-(3-methoxyphenyl)aniline Chemical compound COC1=CC=CC(C=2C=CC(N)=CC=2)=C1 OSWFIVFLDKOXQC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 2
- 239000012472 biological sample Substances 0.000 description 2
- 230000008859 change Effects 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N creatinine Chemical compound CN1CC(=O)NC1=N DDRJAANPRJIHGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000002790 cross-validation Methods 0.000 description 2
- 238000011161 development Methods 0.000 description 2
- 238000003745 diagnosis Methods 0.000 description 2
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N dimethylselenoniopropionate Natural products CCC(O)=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000132 electrospray ionisation Methods 0.000 description 2
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 2
- 230000001605 fetal effect Effects 0.000 description 2
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 2
- 235000019253 formic acid Nutrition 0.000 description 2
- 206010024378 leukocytosis Diseases 0.000 description 2
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N methyl cyanide Natural products CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000007170 pathology Effects 0.000 description 2
- 238000011458 pharmacological treatment Methods 0.000 description 2
- 230000010287 polarization Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- -1 procalcitonia Proteins 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 2
- 238000007619 statistical method Methods 0.000 description 2
- 230000009885 systemic effect Effects 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WWUZIQQURGPMPG-UHFFFAOYSA-N (-)-D-erythro-Sphingosine Natural products CCCCCCCCCCCCCC=CC(O)C(N)CO WWUZIQQURGPMPG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XVULBTBTFGYVRC-FFADBYAMSA-N (1r,2r,8as)-1-[(3r)-3-hydroxy-3-methylpent-4-en-1-yl]-2,5,5,8a-tetramethyldecahydronaphthalen-2-ol Chemical compound CC1(C)CCC[C@]2(C)[C@@H](CC[C@](O)(C)C=C)[C@](C)(O)CCC21 XVULBTBTFGYVRC-FFADBYAMSA-N 0.000 description 1
- GJDPGFHVEKFXEZ-SQIWNDBBSA-N (2e,4e)-n-(2-hydroxy-2-methylpropyl)tetradeca-2,4-dienamide Chemical compound CCCCCCCCC\C=C\C=C\C(=O)NCC(C)(C)O GJDPGFHVEKFXEZ-SQIWNDBBSA-N 0.000 description 1
- ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 1,3-dicyclohexylurea Chemical compound C1CCCCC1NC(=O)NC1CCCCC1 ADFXKUOMJKEIND-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RNNZTHKVAQBLJZ-UHFFFAOYSA-N 2-heptan-3-yl-4,4,6-trimethyl-1,3-dioxane Chemical compound CCCCC(CC)C1OC(C)CC(C)(C)O1 RNNZTHKVAQBLJZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- NBDTZVVEDLDLSG-UHFFFAOYSA-N 4,6,6-trimethylheptan-2-yl acetate Chemical compound CC(C)(C)CC(C)CC(C)OC(C)=O NBDTZVVEDLDLSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108010074051 C-Reactive Protein Proteins 0.000 description 1
- 102100032752 C-reactive protein Human genes 0.000 description 1
- YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N C16 ceramide Natural products CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@@H](CO)[C@H](O)C=CCCCCCCCCCCCCC YDNKGFDKKRUKPY-JHOUSYSJSA-N 0.000 description 1
- 102000000905 Cadherin Human genes 0.000 description 1
- 108050007957 Cadherin Proteins 0.000 description 1
- 238000009007 Diagnostic Kit Methods 0.000 description 1
- 206010070538 Gestational hypertension Diseases 0.000 description 1
- 201000005624 HELLP Syndrome Diseases 0.000 description 1
- 206010061218 Inflammation Diseases 0.000 description 1
- 102000004889 Interleukin-6 Human genes 0.000 description 1
- 108090001005 Interleukin-6 Proteins 0.000 description 1
- 238000000585 Mann–Whitney U test Methods 0.000 description 1
- 208000034702 Multiple pregnancies Diseases 0.000 description 1
- YDNKGFDKKRUKPY-TURZORIXSA-N N-hexadecanoylsphingosine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)N[C@@H](CO)[C@H](O)\C=C\CCCCCCCCCCCCC YDNKGFDKKRUKPY-TURZORIXSA-N 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- 208000005347 Pregnancy-Induced Hypertension Diseases 0.000 description 1
- 238000011869 Shapiro-Wilk test Methods 0.000 description 1
- 208000001871 Tachycardia Diseases 0.000 description 1
- 208000036029 Uterine contractions during pregnancy Diseases 0.000 description 1
- 206010046827 Uterine tenderness Diseases 0.000 description 1
- 150000001413 amino acids Chemical group 0.000 description 1
- 210000004381 amniotic fluid Anatomy 0.000 description 1
- 208000007502 anemia Diseases 0.000 description 1
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 1
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 239000003613 bile acid Substances 0.000 description 1
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 1
- 239000012620 biological material Substances 0.000 description 1
- 238000004159 blood analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010241 blood sampling Methods 0.000 description 1
- 230000036760 body temperature Effects 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 210000003756 cervix mucus Anatomy 0.000 description 1
- 210000003679 cervix uteri Anatomy 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 229940109239 creatinine Drugs 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 231100000517 death Toxicity 0.000 description 1
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 description 1
- 238000002405 diagnostic procedure Methods 0.000 description 1
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 230000010339 dilation Effects 0.000 description 1
- 239000000539 dimer Substances 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000013399 early diagnosis Methods 0.000 description 1
- 229940124645 emergency medicine Drugs 0.000 description 1
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 description 1
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 1
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 1
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 210000003608 fece Anatomy 0.000 description 1
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 1
- WPFVBOQKRVRMJB-UHFFFAOYSA-N hydroxycitronellal Chemical compound O=CCC(C)CCCC(C)(C)O WPFVBOQKRVRMJB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000002458 infectious effect Effects 0.000 description 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 description 1
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 1
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 1
- 229940100601 interleukin-6 Drugs 0.000 description 1
- 208000017169 kidney disease Diseases 0.000 description 1
- 238000011005 laboratory method Methods 0.000 description 1
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 1
- 238000007726 management method Methods 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000003550 marker Substances 0.000 description 1
- 239000011159 matrix material Substances 0.000 description 1
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 1
- 238000002705 metabolomic analysis Methods 0.000 description 1
- 230000001431 metabolomic effect Effects 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- 239000006199 nebulizer Substances 0.000 description 1
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 1
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 1
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 238000001543 one-way ANOVA Methods 0.000 description 1
- 229940094443 oxytocics prostaglandins Drugs 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 230000009984 peri-natal effect Effects 0.000 description 1
- 210000005259 peripheral blood Anatomy 0.000 description 1
- 239000011886 peripheral blood Substances 0.000 description 1
- 238000011176 pooling Methods 0.000 description 1
- 208000036335 preeclampsia/eclampsia 1 Diseases 0.000 description 1
- 208000008881 preterm premature rupture of the membranes Diseases 0.000 description 1
- 235000019260 propionic acid Nutrition 0.000 description 1
- 150000003180 prostaglandins Chemical class 0.000 description 1
- 230000006920 protein precipitation Effects 0.000 description 1
- 238000010926 purge Methods 0.000 description 1
- 150000003212 purines Chemical class 0.000 description 1
- 238000004451 qualitative analysis Methods 0.000 description 1
- IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N quinbolone Chemical compound O([C@H]1CC[C@H]2[C@H]3[C@@H]([C@]4(C=CC(=O)C=C4CC3)C)CC[C@@]21C)C1=CCCC1 IUVKMZGDUIUOCP-BTNSXGMBSA-N 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 230000003595 spectral effect Effects 0.000 description 1
- WWUZIQQURGPMPG-KRWOKUGFSA-N sphingosine Chemical compound CCCCCCCCCCCCC\C=C\[C@@H](O)[C@@H](N)CO WWUZIQQURGPMPG-KRWOKUGFSA-N 0.000 description 1
- 150000003431 steroids Chemical class 0.000 description 1
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 1
- 230000006794 tachycardia Effects 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 206010043554 thrombocytopenia Diseases 0.000 description 1
- 201000005060 thrombophlebitis Diseases 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 210000002700 urine Anatomy 0.000 description 1
- 206010046901 vaginal discharge Diseases 0.000 description 1
Landscapes
- Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
Przedmiotem niniejszego zgłoszenia jest zastosowanie metabolitów jako biomarkerów do przewidywania porodu przedwczesnego, oparte na analizie osocza albo surowicy. Przedmiotem zgłoszenia jest również sposób identyfikacji ryzyka wystąpienia porodu przedwczesnego, przy zastosowaniu metabolitów jako biomarkerów.
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem niniejszego wynalazku jest sposób wykrywania porodu przedwczesnego bazujący na pomiarze zawartości i poziomów metabolitów w próbce płynu ustrojowego ciężarnej kobiety wraz ze sprawdzeniem istnienia statystycznych różnic w stężeniu wskazanych metabolitów.
Poród przedwczesny jest główną przyczyną okołoporodowej umieralności niemowląt, powodując od 50 do 95% zgonów noworodków. Odsetek porodów przedwczesnych waha się w granicach od 5 do 12% i od dłuższego czasu pomimo postępu w terapii i diagnostyce pozostaje niezmienny. Mechanizmy leżące u podstaw przedwczesnego wyzwolenia czynności skurczowej macicy, pękania pęcherza płodowego, a w konsekwencji porodu przedwczesnego są do chwili obecnej nie do końca wyjaśnione. Uważa się, że znaczący odsetek porodów przedwczesnych związany jest z subklinicznie przebiegającą infekcją wewnątrzmaciczną, nadmierną produkcją prostaglandyn oraz innych substancji bioaktywnych, które są przyczyną wyzwalania przedwczesnej czynności skurczowej i pękania błon płodowych. Czynniki infekcyjne mają też bezpośredni wpływ na stan pourodzeniowy noworodków, dlatego też istotna jest wczesna diagnostyka i leczenie farmakologiczne pacjentek ciężarnych z grupy ryzyka porodu przedwczesnego.
W stanie techniki znane jest wykorzystanie niektórych biomarkerów do predykcji porodu przedwczesnego. Patent US8697367B2 ujawnia wykorzystanie biomarkerów białkowych w diagnostyce powikłań występujących w macicy, takich jak zakażenie przez płód, mogących prowadzić do porodu przedwczesnego.
Również międzynarodowa publikacja numer WO2014105985A1 oraz amerykańskie zgłoszenie patentowe US20150285816A1 opisują sposoby przewidywania porodu przedwczesnego bazujące na detekcji poziomów wybranych białek we krwi, osoczu lub surowicy ciężarnych kobiet z wykorzystaniem spektrometrii mas.
Europejski patent EP2646554B1 opisuje wykrywanie porodu przedwczesnego za pomocą pomiaru kwasów nukleinowych uwolnionych z komórek we krwi matki.
Sposób ujawniony w międzynarodowej publikacji WO2011022526A1 bazuje na ilościowym pomiarze biomarkerów z dwóch grup. Pierwszą grupę biomarkerów stanowią ujawnione sekwencje aminokwasów, natomiast markerem z drugiej grupy jest wybrane białko.
Międzynarodowa publikacja numer WO2011053666A1 przedstawia sposób predykcji porodu przedwczesnego zasadzający się na wykrywaniu i pomiarze rozpuszczalnej E-kadheryny (SE-CAD) w próbce biologicznej od pacjentki. Dodatkowo sposób może wykorzystywać kolejny biomarker-fibronektynę.
Polskie zgłoszenie patentowe P.408305 opisuje zastosowanie ceramidu C16 jako biomarkera w predykcji porodu przedwczesnego oparte o analizę we krwi.
Inne sposoby wykrywania porodu przedwczesnego na podstawie analizy zawartości biomarkerów w próbkach biologicznych takich jak krew, wydzielina pochwowa, mocz, kał zostały opisane w dokumentach patentowych: US20150285800A1, WO2014152985A1 oraz AU2015200775A1.
Dostępne obecnie biochemiczne markery infekcji jak poziom leukocytozy, białko C-reaktywne, prokalcytonia, czy interleukina-6 są markerami ogólnoustrojowymi. Nie pozwalają one na wcześniejsze wyselekcjonowanie pacjentek z grup ryzyka porodu przedwczesnego z zagrażającą infekcją wewnątrzmaciczną, gdyż ich czułość i swoistość jest zbyt niska. Dlatego też poszukiwane są nowe markery biochemiczne mogące mieć wpływ na wcześniejsze wykrywanie subklinicznej infekcji wewnątrzmacicznej, pozwalające na szybką diagnostykę i leczenie farmakologiczne pacjentek z zagrażającym porodem przedwczesnym. Postępowanie takie może przyczynić do zmniejszenia częstości występowania tej patologii ciąży i do polepszenia stanu noworodków przedwcześnie urodzonych i zmniejszenia ich śmiertelności.
Przedmiot wynalazku jest sposób wykrywania porodu przedwczesnego, charakteryzujący się tym, że obejmuje następujące etapy:
a) dostarcza się próbkę płynu ustrojowego kobiety ciężarnej;
b) mierzy się w płynie ustrojowym kobiety ciężarnej dowolną metodą analityczną zawartość poziom metabolitów wybranych z grupy: kwas laurynowy, kwas mirystynowy, kwas hydroksymirystynowy, kwas palmitoleinowy, kwas heksakozanodiowy, kwas eikozadienowy (C20:2), Sfingolipid Obscuraminol A = (2S,3R,6Z,9Z,12Z,15Z)-2-aminooktadeka-6,9,12,15-tetraen-3ol, Sfingolipid Crucigasterin 277 = (2S,3R,5E,9Z,12Z,15Z)-2-aminooktadeka-5,9,12,15-te
PL 237 565 B1 traen-3-ol,(4E,8E,10E-d18:3) sfingozyna, PS(O-18:0/0:0) = 1-oktadecylo-glicero-3-fosfoseryna, kwas deoksyglikocholowy, kwas chenodeoksyglikocholowy, kwas glikoursodeoksycholowy, kwas 2-hydroksymasłowy oraz kwas 3-hydroksymasłowy, kwas L-2-Amino-3-(1-pirazolilo)propionowy, kwas hydroksykapronowy, 4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenol, N,N'-dicykloheksylomocznik, CPA(18:2(9Z,12Z)/0:0)= 1-linolo-glicero-3-cyklofosforan;
c) sprawdza się istnienie statystycznych różnic w stężeniu wskazanych metabolitów.
Korzystnie zawartość i poziom metabolitów mierzy się w osoczu albo surowicy.
Korzystnie, gdy oznaczenie zawartości wymienionych metabolitów w osoczu albo surowicy może być przeprowadzone za pomocą różnych sposobów laboratoryjnych dobrze znanych w stanie techniki, m.in.: chromatografii cienkowarstwowej, wysokosprawnej chromatografii cieczowej, chromatografii gazowej, metod immunochemicznych oraz szeroko wykorzystywanej w metabolomice tzw. tandemowej spektrometrii masowej.
Dodatkowo korzystnie próbką płynu ustrojowego jest krew pobrana od pacjentki między 22 a 36 tygodniem ciąży.
Według wynalazku kobieta ciężarna wskazywana jest jako zagrożona porodem przedwczesnym na podstawie przedwczesnej czynności skurczowej tj. co najmniej 2-3 skurcze na 10 minut, skróconej szyjki macicy poniżej 25 mm i/lub przedwczesnego odejścia płynu owodniowego.
Poniżej przedstawiony zostanie przykład wykonania według wynalazku, który jest jedynie zobrazowaniem zastosowania wynalazku i nie ma charakteru ograniczającego.
Pr z y k ł a d
Wykrywanie porodu przedwczesnego sposobem według wynalazku zostało przeprowadzone jak opisano poniżej:
Gromadzenie materiału biologicznego
Próbki osocza były pobierane w 3 polskich ośrodkach o III stopniu referencyjności: Klinika Położnictwa i Ginekologii, Uniwersytet Medyczny w Białymstoku, Instytut Położnictwa i Medycyny Ratunkowej, Uniwersytet w Rzeszowie oraz w Klinice Położnictwa i Patologii Ciąży, Uniwersytet Medyczny w Lublinie.
W badaniu uczestniczyły trzy grupy pacjentek: grupa I - pacjentki, które urodziły przedwcześnie pomiędzy 22 a 36 tygodniem ciąży, a poród miał miejsce do 7 dni od pobrania próbki (n=37), grupa II pacjentki, które urodziły przedwcześnie pomiędzy 22 a 36 tygodniem ciąży, a poród miał miejsce do 7 dni oraz 7 dni po pobraniu próbki (n=57), grupa III - pacjentki na początku porodu pomiędzy 39 a 41 tygodniem ciąży (n=49) oraz grupa IV - pacjentki z objawami porodu przedwczesnego pomiędzy 22 a 36 tygodniem ciąży, które urodziły o czasie (n=26).
Kryteriami wyłączającymi z badania były: ciąża mnoga, nadciśnienie indukowane ciążą, cukrzyca, choroby nerek (kreatynina powyżej 2 mg/dl) oraz inne komplikacje podczas ciąży, takie jak niedokrwistość, małopłytkowość, choroba układowa, zakrzepowe zapalenie żył, podawanie sterydów i antybiotyków w ciągu 72 godzin od pobrania próbek krwi, niewydolność szyjki macicy oraz założony szew szyjkowy i wreszcie kliniczne cechy zapalenia błon płodowych (przynajmniej jedno z wymienionych: podwyższenie temperatury ciała > 37,8°C, tachykardia, tkliwość macicy większa niż przypuszczano, leukocytoza powyżej 18000/ul oraz nieprzyjemny zapach z pochwy).
Wiek ciążowy każdej pacjentki został wyznaczony na podstawie USG z pierwszego trymestru ciąży. Poród przedwczesny został stwierdzony na podstawie regularnej czynności skurczowej skutkującej rozwarciem szyjki macicy (n=30) lub przedwczesnego pęknięcia błon płodowych - pPROM (n=27). PPROM potwierdzono testem Amnisure (Qiagen).
Protokół badania został zatwierdzony przez Komisję Bioetyczną Uniwersytetu Medycznego w Białymstoku. Każdy pacjent po otrzymaniu informacji na temat badania podpisał zgodę na udział w badaniu.
Od każdej pacjentki zostało pobrane 10 ml krwi obwodowej. Krew następnie odwirowano, osocze oddzielono i zamrożono w temperaturze -80°C.
Przygotowanie próbek
Osocze było przechowywane w temperaturze -70°C do czasu analizy. Próbki przygotowano, jak opisano wcześniej z niewielkimi zmianami (1). Pokrótce, wytrącanie białek i metabolitów zostało przeprowadzone po dodaniu jednej objętości osocza do trzech objętości zimnej (temperatura -20°C) mieszaniny metanolu i etanolu (w stosunku 1:1). Następnie próbki zostały intensywnie mieszane przez minutę i pozostawione w lodzie na 5 minut. Osad usunięto przez odwirowanie przy obrotach 16100xg
PL 237 565 B1 w ciągu 20 minut, w temperaturze 4°C, a następnie nadsącz przepuszczono przez filtr nylonowy o średnicy 0,22 pm bezpośrednio do naczynka chromatograficznego z mikrowkładką. Próbki kontrolne (QC) przygotowano przez połączenie równych objętości osocza każdej z 43 próbek z pierwszej partii analitycznej. Próbki QC były niezależnie przygotowane dla 3 poszczególnych partii przy użyciu procedury podobnej jak dla reszty próbek. Próbki QC były analizowane na początku i końcu procesu chromatograficznego oraz co 8 próbek aby zapewnić pomiar nie tylko stabilności i wydajności systemu, ale również sprawdzenie prawidłowości i powtarzalności procesu przygotowania próbek.
Analiza LCMS osocza
Próbki analizowano za pomocą systemu HPLC (1260 Infinity series, Agilent Technologies, Waldbronn, Germany) składającego się z degazera fazy ruchomej, pompy binarnej, termostatowanego (4°C) automatycznego podajnika próbek, połączonych z detektorem spektrometrii masowej Agilent Technologies QTOF (model 6530). Jako źródło jonów zastosowano jonizację przez elektrorozpylanie (ESI). Próbki (10 pL) wstrzykiwano na termostatowaną (40°C) kolumnę chromatograficzną (Discovery HS C18, 150 mm x 2,1 mm, 3 pm, Supelco) poprzedzoną przedkolumną. System pracował w trybie jonizacji dodatniej i ujemnej przy prędkości przepływu 0,6 ml / min z użyciem rozpuszczalnika A - woda z 0,1% kwasem mrówkowym, i rozpuszczalnikiem B - acetonitryl z 0,1% kwasem mrówkowym. Gradient stężeń rozpuszczalnika przechodził z 25% rozpuszczalnika B do 95% rozpuszczalnika B w ciągu 35 minut, powracał do warunków początkowych w ciągu 1 minuty, następnie przez 9 minut kondycjonowano kolumnę przed kolejnym nastrzykiem. Detektor działał w trybie pełnego skanowania od 50 do 1000 m/z dla trybu dodatniej jonizacji i od 50 do 1100 m/z dla trybu ujemnej jonizacji przy szybkości skanowania 1 skan na sekundę. Dokładne pomiary masy były uzyskane poprzez automatyczną korektę względem mas referencyjnych dostarczanych w sposób ciągły podczas analiz. W trybie polaryzacji dodatniej były zastosowane masy referencyjne m/z 121.0509 (protonowane puryny) oraz m/z 922,0098 (protonowany HP-0921) natomiast w trybie polaryzacji ujemnej masy referencyjne m/z 112,9856 (anion TFA) oraz m/z 1033.9881 (HP-0921). Napięcie kapilarne zostało ustawione na 3000 V dla polaryzacji pozytywnej i 4000V dla polaryzacji negatywnej, a szybkość przepływu gazu w nebulizatorze na 10,5 l/min. Próbki zostały zanalizowane w kolejności losowej w dwóch oddzielnych seriach (najpierw polaryzacja pozytywna, następnie negatywna) podzielonych na trzy partie (bloki analityczne).
Obróbka danych
Powstały zbiór danych został oczyszczony z szumów tła i niezwiązanych jonów przez algorytm Molecular Feature Extraction (MFE) z użyciem oprogramowania Mass Hunter Qualitative Analysis B.05.00 Software (Agilent). Algorytm MFE grupował jony na podstawie ładunku, rozkładu izotopowego i/lub obecności adduktów i dimerów w oparciu o dokładne pomiary masy. Następnie algorytm MFE tworzy listę możliwych związków reprezentowanych przez kompletne dane spektralne uzyskane z analizy TOF. Każdy związek jest scharakteryzowany przez masę, czas retencji oraz intensywność sygnału poszczególnych jonów. Parametry wybrane do obróbki danych przy użyciu algorytmu MFE były podobne do opisanych w innej(2). Granica szumów tła została ustawiona na 500 zliczeń. W celu znalezienia koeluujących adduktów tego samego związku, w ustawieniach ekstrakcji zastosowano następujące addukty: +H, +Na, +K w polaryzacji dodatniej oraz -H, -HCOO w polaryzacji negatywnej, jak również została wzięta pod uwagę utrata cząsteczki wody. W związku z różnicami czasów retencji podczas analizy LC-MS zarejestrowane profile próbek zostały poddane wyrównaniu przy użyciu Mass Profiler Professional (B. 12.1, Agilent Technologies). Następnie wykonano filtrowanie zmiennych celem oczyszczenia matrycy danych z przypadkowych sygnałów i usunięcia metabolitów, których sygnał, czas retencji lub dokładna masa uległy nadmiernemu przesunięciu. Usunięto metabolity, które były obecne w mniej niż 50% próbek QC i ze współczynnikiem zmienności powyżej 30%. Ponadto filtrowanie miało za zadanie wybrać metabolity, które były obecne w co najmniej 90% przedstawicieli każdej z badanych grup. Następnie, intensywność każdej cechy metabolomicznej w każdej próbce została skorygowana względem zmiany sygnału danego metabolitu występującego w próbkach QC danego bloku analitycznego. Następnie przekształcono dane wykonując logarytmowanie intensywności celem uzyskania rozkładu normalnego (MS Excel (Microsoft)). Do kwalifikacji danych i klasyfikacji badanych próbek została przeprowadzona wielowymiarowa analiza statystyczna za pomocą metody częściowych najmniejszych kwadratów (PLS-DA) oraz ortogonalnej PLS-DA (Simca-P+12.0, Umetrics).
PL 237 565 B1
Identyfikacja metabolitów
Identyfikacja związków, które okazały się istotnie zmienne pomiędzy dowolnymi dwoma porównywanymi grupami została przeprowadzona przy użyciu dostępnych publicznie baz danych [METLIN (www.metlin.scripps.edu) HMDB (www.hmdb.ca), LIPIDMAPS (www.lipidmaps. org /)]. Ponadto identyfikacja związków została potwierdzona poprzez analizę LC-MS/MS przy użyciu detektora QTOF (model 6530, Agilent). Analizy MS/MS zostały przeprowadzone w tych samych warunkach chromatograficznych co pierwotna analiza.
Jony były kierowane do komory kolizyjnej na podstawie wcześniej określonej dokładnej masy i czasu retencji, a następnie poddawane były fragmentacji. Porównanie struktury proponowanego związku z otrzymanymi fragmentami umożliwiło potwierdzenie identyfikacji Dla niektórych metabolitów została przeprowadzona dodatkowa identyfikacja przy użyciu komercyjnie dostępnych odczynników (Sigma).
Analiza statystyczna
Mając na celu sprawdzenie istnienia statystycznie istotnych różnic w stężeniu metabolitów (odtąd nazywanych cechami) pomiędzy rozpatrywanymi grupami wykorzystano: (1) dopasowanie modelu jednoczynnikowej analizy wariancji, (2) podejście nieparametryczne z zastosowaniem testu sumy rang Wilcoxona. Wybór metody zależał od spełnienia następujących założeń: jednorodności wariancji (sprawdzana z użyciem testu Levena) oraz normalności rozkładu cechy w grupach (sprawdzana przy pomocy testu Shapiro-Wilka).
W przypadku niespełnienia co najmniej jednego z wymienionych założeń stosowano podejście nieparametryczne. Ze względu na istotę analizy - zjawisko wielokrotnego testowania - otrzymane wartości p-value poddano korekcji z wykorzystaniem procedury FDR kontrolującą odsetek wyników fałszywie pozytywnych. Cechy, których rozkład okazał się statystycznie istotnie różny w porównywanych grupach, poddano dalszej analizie mającej na celu: (1) sprawdzenie ich zdolności predykcyjnej biorąc pod uwagę wszystkie, określone jako istotne, cechy, (2) walidację otrzymanych wyników - potwierdzenie, że przy pomocy danej cechy klasyfikowanie pacjenta nie jest losowe, i.e. zdolność predykcyjna jest statystycznie istotnie wyższa od 50%. Dla każdej ze zidentyfikowanych cech przeprowadzono analizę krzywych ROC, na którą składało się między innymi: (1) określenie optymalnej wartości progowej z zastosowaniem metody Youden’a, (2) konstrukcja przedziału ufności dla pola pod krzywą ROC (AUC) na poziomie ufności 95%, (3) przeprowadzenie nieparametrycznego testu DeLong’a weryfikującego hipotezę zerową zakładającą losową klasyfikację (AUC = 0.5) wobec hipotezy alternatywnej zakładającej, że pole pod krzywą ROC jest statystycznie istotnie większe od 0.5. Obliczenia związane z analizą krzywych ROC wykonane zostały z użyciem procedur będących składowymi pakietu pROC. Jako uzupełnienie analizy krzywych ROC, gdzie analizowano pojedyncze cechy, sprawdzona została zdolność klasyfikacyjna zidentyfikowanych cech traktowanych jako zbiór predyktorów. W tym celu wykorzystano metodę wektorów wspierających (SVM) opartą o radialne funkcje bazowe oraz metodę walidacji krzyżowej leave-one-out. Dodatkowo, brakujące wartości dla poszczególnych cech zostały zastąpione medianami biorąc pod uwagę przynależność obserwacji do klasy. Procesy budowy klasyfikatora, walidacji krzyżowej oraz imputacji zostały przeprowadzone z wykorzystaniem funkcjonalności pakietów e1071 oraz kernlab. Do wszystkich analiz wykorzystano środowisko programistyczne R. Poziom istotności alfa ustalono na poziomie 0.05. W tabeli poniżej wskazano listę metabolitów jako biomarkerów do zastosowania do wykrywania porodu przedwczesnego - wartości p value dla istotnych statystycznie metabolitów różnicujących grupy porodu przedwczesnego i fałszywego porodu przedwczesnego
PL 237 565 Β1
| Nazwa metabolitu | Wzór sumaryczny | % Zmiana - PP vs FP | p-value | Pole pod krzywą ROC-AUC |
| Kwasy tłuszczowe | ||||
| Laurynowy (n,b) | C12H24O2 | 19 | ** | 0,65 |
| Mirystynowy (n,b) | C14H28O2 | 31 | ** | 0,68 |
| Hydroksymirystynowy (n,b) | C14H23O3 | 29 | * | 0,65 |
| Palmitoleinowy (n,a) | C16H30O2 | 66 | *** | 0,71 |
| Heksakozanodiowy (n,b) | CjeHsoCU | -12 | * | 0,62 |
| Eikozadienowy (C20:2) (n,b) | C20H36O2 | 52 | ** | 0,72 |
| Lipidy | ||||
| Sfingolipid: Obscuraminol A = (2S,3R,6Z,9Z,12Z,15Z)-2aminooktadeka-6,9,12,15tetraen-3-ol /Crucigasterin Tli = (2S,3R,5E,9Z,12Z,15Z)-2aminooktadeka-5,9,12,15tetraen-3-ol (p,b) | C18H3iNO | 25 | * | 0,63 |
| (4E,8E,10E-dl8:3)sfingozyna (p.b) | C18H33NO2 | 49 | * * | 0,69 |
| PS(0-18:0/0:0) = 1-oktadecyloglicero-3-fosfoseryna (p,b) | CjaHsoNOsP | -35 | ** | 0,66 |
| Kwasy żółciowe | ||||
| Deoksyglikocholowy (p,b) | C26H43NO5 | -40 | * | 0,64 |
| Chenodeoksyglikocholowy/ Glikoursodeoksycholowy/ (n,b) | C26H43NOs | -40 | * | 0,63 |
| Inne metabolity | ||||
| Kwas 2-hydroksymaslowy / kwas 3-hydroksymasłowy (n,b/a) | C4H8O3 | 58 | * | 0,64 |
| kwas L-2-Amino-3-(lpirazolilo)propionowy (p,b) | CeHgNaOz | -10 | ** | 0,68 |
| kwas hydroksykapronowy (n,b) | C10H2003 | 26 | * | 0,66 |
| 4-(1,1,3,3- tetrametylobutylo)fenol (n,b) | C14H2ZO | -2 | * | 0,63 |
| /V,/V'-dicykloheksylomocznik (p,a) | C13H24N2O | 26 | * | 0,63 |
| CPA(18:2(9Z,12Z)/0:0)= 1- linolo-glicero-3-cyklofosforan | C21H37O6P | -29 | * | 0,63 |
PL 237 565 Β1
| LEGENDA | |
| PP | Poród przedwczesny |
| FP | Fałszywy poród przedwczesny |
| * | p value < 0.05 |
| p value < 0.01 | |
| *** | p value < 0.001 |
| **** | p value < 0.0001 |
| n | Negatywna polaryzacja |
| P | Pozytywna polaryzacja |
| a | Identyfikacja poprzez spektrum widma MS/MS |
| b | Domniemana identyfikacja |
Zastosowanie opisanych metabolitów jako biomarkerów wykrywania porodu przedwczesnego umożliwia opracowanie swoistych testów diagnostycznych jak również zestawów w oparciu o analizę płynów ustrojowych ciężarnej pacjentki. Takie testy mogą być stworzone w oparciu o pojedyncze metabolity, które będą oznaczane za pomocą spektrometrii mas zastosowanej według wynalazku
Claims (5)
1. Sposób wykrywania porodu przedwczesnego, znamienny tym, że obejmuje następujące etapy:
a) dostarcza się próbkę płynu ustrojowego kobiety ciężarnej;
b) mierzy się w płynie ustrojowym kobiety ciężarnej dowolną metodą analityczną zawartość i poziom metabolitów wybranych z grupy: kwas laurynowy, kwas mirystynowy, kwas hydroksymirystynowy, kwas palmitoleinowy, kwas heksakozanodiowy, kwas eikozadienowy (C20:2), Sfingolipid Obscuraminol A = (2S,3R,6Z,9Z,12Z,15Z)-2-aminooktadeka-6,9,12,15-tetraen-3-ol, Sfingolipid Crucigasterin 277 = (2S,3R,5E,9Z,12Z,15Z)-2-aminooktadeka5,9,12,15-tetraen-3-ol, (4E,8E,10E-d18:3) sfingozyna, PS(0-18:0/0:0) = 1-oktadecylo-glicero-3-fosfoseryna, kwas deoksyglikocholowy, kwas chenodeoksyglikocholowy, kwas glikoursodeoksycholowy, kwas 2-hydroksymasłowy oraz kwas 3-hydroksymasłowy, kwas L-2-amino-3-(1-pirazolilo)propionowy, kwas hydroksykapronowy, 4-(1,1,3,3-tetrametylobutylo)fenol, Λ/,Λ/'-dicykloheksylomocznik, CPA(18:2(9Z,12Z)/0:0)= 1-linolo-glicero-3-cyklofosforan;
c) sprawdza się istnienie statystycznych różnic w stężeniu wskazanych metabolitów.
2. Sposób według zastrzeżenia 1, znamienny tym, że zawartość i poziom metabolitów mierzy się w osoczu albo surowicy.
3. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że metoda analityczna zawartości metabolitów jest wybrana z grupy obejmującej chromatografię cienkowarstwową, wysokosprawną chromatografię cieczową, chromatografię gazową, metodę immunochemiczną, tandemową spektrometrię masową.
4. Sposób według zastrz. 1, znamienny tym, że próbką płynu ustrojowego jest krew pobrana od pacjentki między 22 a 36 tygodniem ciąży.
5. Sposób według któregokolwiek z powyższych zastrzeżeń, znamienny tym, że kobieta ciężarna wskazywana jest jako zagrożona porodem przedwczesnym na podstawie przedwczesnej czynności skurczowej tj. co najmniej 2-3 skurcze na 10 minut, skróconej szyjki macicy poniżej 25 mm i/lub przedwczesnego odejścia płynu owodniowego.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL419784A PL237565B1 (pl) | 2016-12-13 | 2016-12-13 | Sposób wykrywania porodu przedwczesnego |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL419784A PL237565B1 (pl) | 2016-12-13 | 2016-12-13 | Sposób wykrywania porodu przedwczesnego |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL419784A1 PL419784A1 (pl) | 2018-06-18 |
| PL237565B1 true PL237565B1 (pl) | 2021-05-04 |
Family
ID=62553997
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL419784A PL237565B1 (pl) | 2016-12-13 | 2016-12-13 | Sposób wykrywania porodu przedwczesnego |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL237565B1 (pl) |
-
2016
- 2016-12-13 PL PL419784A patent/PL237565B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL419784A1 (pl) | 2018-06-18 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US20240318250A1 (en) | Biomarker pairs for predicting preterm birth | |
| CN103415769B (zh) | 用于妊娠性高血压疾病的生物标志物和参数 | |
| CN111989090A (zh) | 循环微粒的分层自发性早产风险的用途 | |
| WO2008085036A1 (en) | Peptide markers for diagnosis of preeclampsia | |
| US20100029006A1 (en) | Multiplexed diagnostic test for preterm labor | |
| US20150087553A1 (en) | Early trimester screening for early- and late-onset preeclampsia | |
| CN110191963A (zh) | 用于预测由于早产胎膜早破相对于特发性自然分娩所造成的早产的生物标志物 | |
| KR102478045B1 (ko) | 조산 예측을 위한 진단용 단백질 마커 및 진단 방법 | |
| Gupta et al. | Altered proteome profiles in maternal plasma in pregnancies with fetal growth restriction: Haptoglobin α2 isoform as a potential biomarker | |
| CN117954102B (zh) | 一种预测单纯宫缩乏力性产后出血的系统和方法 | |
| KR102216386B1 (ko) | 암의 진단용 조성물 | |
| US20230288398A1 (en) | Systems and Methods for Gestational Age Dating and Applications Thereof | |
| EP4490520A1 (en) | Method for diagnosing endometriosis in a subject | |
| Villas-Boas et al. | Renato T. Souza1, Elizabeth J. McKenzie2, Beatrix Jones2, Jamie V. de Seymour2, Melinda M. Thomas2, Erica Zarate2, Ting Li Han2, Lesley McCowan 2, Karolina Sulek2 | |
| BR112017027528B1 (pt) | Composição, painel, método para determinar a probabilidade de parto prematuro em uma fêmea grávida e método de detecção de ibp4 e shbg em uma fêmea grávida | |
| BR122024018561A2 (pt) | Composição, painel, método para determinar a probabilidade de parto prematuro em uma fêmea grávida e método de detecção de ibp4 e shbg em uma fêmea grávida |