PL240128B1 - Sposób sterylizacji pożywki bakteryjnej - Google Patents
Sposób sterylizacji pożywki bakteryjnej Download PDFInfo
- Publication number
- PL240128B1 PL240128B1 PL430991A PL43099119A PL240128B1 PL 240128 B1 PL240128 B1 PL 240128B1 PL 430991 A PL430991 A PL 430991A PL 43099119 A PL43099119 A PL 43099119A PL 240128 B1 PL240128 B1 PL 240128B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- medium
- sterilization
- bacteria
- conditions
- bacterial
- Prior art date
Links
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 title claims description 26
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 title claims description 24
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 16
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 title claims description 10
- 239000005862 Whey Substances 0.000 claims description 9
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 claims description 9
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 claims description 9
- 230000008569 process Effects 0.000 claims description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims description 5
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 claims description 4
- 235000020183 skimmed milk Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 claims description 4
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 25
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 11
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 7
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 6
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 6
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N lactic acid Chemical compound CC(O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 5
- 244000005700 microbiome Species 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 3
- 240000001046 Lactobacillus acidophilus Species 0.000 description 3
- 235000013956 Lactobacillus acidophilus Nutrition 0.000 description 3
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 3
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 3
- 239000004310 lactic acid Substances 0.000 description 3
- 235000014655 lactic acid Nutrition 0.000 description 3
- 229940039695 lactobacillus acidophilus Drugs 0.000 description 3
- 239000006041 probiotic Substances 0.000 description 3
- 230000000529 probiotic effect Effects 0.000 description 3
- 235000018291 probiotics Nutrition 0.000 description 3
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 2
- 241000186660 Lactobacillus Species 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 2
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 2
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 2
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 2
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 2
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 2
- 238000011160 research Methods 0.000 description 2
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 2
- 239000006152 selective media Substances 0.000 description 2
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Chemical compound O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241001079698 Bacillus cereus ATCC 10876 Species 0.000 description 1
- 241000193403 Clostridium Species 0.000 description 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 1
- 241000588921 Enterobacteriaceae Species 0.000 description 1
- 241001360526 Escherichia coli ATCC 25922 Species 0.000 description 1
- 241001354013 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis Species 0.000 description 1
- 241000191967 Staphylococcus aureus Species 0.000 description 1
- 235000011054 acetic acid Nutrition 0.000 description 1
- 230000002411 adverse Effects 0.000 description 1
- 241001148470 aerobic bacillus Species 0.000 description 1
- 230000002225 anti-radical effect Effects 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 239000012531 culture fluid Substances 0.000 description 1
- 238000012136 culture method Methods 0.000 description 1
- 238000012258 culturing Methods 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 1
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 229940039696 lactobacillus Drugs 0.000 description 1
- 230000002045 lasting effect Effects 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 1
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 1
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 1
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000006872 mrs medium Substances 0.000 description 1
- PGSADBUBUOPOJS-UHFFFAOYSA-N neutral red Chemical compound Cl.C1=C(C)C(N)=CC2=NC3=CC(N(C)C)=CC=C3N=C21 PGSADBUBUOPOJS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 1
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 1
- 238000007747 plating Methods 0.000 description 1
- 239000013630 prepared media Substances 0.000 description 1
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 238000013207 serial dilution Methods 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- DJIKQWNNMSCYPY-UHFFFAOYSA-M sodium;3,9-diethyltridecan-6-yl sulfate Chemical compound [Na+].CCCCC(CC)CCC(OS([O-])(=O)=O)CCC(CC)CC DJIKQWNNMSCYPY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 238000010561 standard procedure Methods 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 238000010998 test method Methods 0.000 description 1
- 241001148471 unidentified anaerobic bacterium Species 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Dairy Products (AREA)
Description
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku jest sposób sterylizacji pożywki bakteryjnej, w szczególności pożywki do hodowli bakterii z rodzaju LAB (ang. Lactic acid bacteria - bakterii fermentacji mlekowej).
Stale rosnące zainteresowanie żywnością prozdrowotną, w tym produktami spożywczymi zawierającymi bakterie probiotyczne jest powodem, dla którego prowadzone są badania mające na celu wyselekcjonowanie szczepów bakterii użytecznych w procesach technologicznych w przemyśle spożywczym. Do probiotycznych szczepów bakteryjnych zaliczyć można bakterie z grupy LAB, które są szeroko wykorzystywane w przemyśle spożywczym do produkcji i przetwórstwa produktów mlekopochodnych, jak również do fermentacji produktów pochodzenia roślinnego. Probiotyczne szczepy bakterii fermentacji mlekowej, do których należą m.in. bakterie z rodzaju Lactobacillus, zdolne są do przeprowadzania fermentacji sacharydów, w wyniku której powstają bardzo pożądane w przemyśle spożywczym związki takie jak: kwas mlekowy, kwas octowy, witaminy z grupy B, NKT o między innymi właściwościach konserwujących czy antyrodnikowych.
W wyniku prac mających na celu otrzymanie medium do hodowli bakterii z grupy LAB, alternatywnego wobec standardowo stosowanego medium MRS, twórcy niniejszego wynalazku opracowali pożywkę bakteryjną będącą roztworem wodnym zawierającym w swym składzie 2% (wag./obj.) proszku serwatkowego, 5% (wag./obj.) mleka odtłuszczonego i 1,2% (wag./obj.) ekstraktu drożdży. W celu jednorazowej sterylizacji 1,5 litrowej objętości przedmiotowej pożywki, twórcy z powodzeniem stosowali standardowe ustawienia autoklawu, Ij. 121°C przez okres 15 minut. Próby dokonania jednorazowej sterylizacji tej samej pożywki w objętości 40 litrów (8 butli o objętości 5 litrów każda) w takich samych warunkach jak powyżej, doprowadziły do znacznego obniżenia pH roztworu do wartości w granicach 6,1-6,2 oraz ciemnej barwy roztworu, co wykluczało możliwość jego zastosowania do przygotowania pożywki na bazie serwatki.
W związku z powyższym stwierdzono, iż istnieje uzasadniona potrzeba opracowania sposobu sterylizacji opracowanej przez twórców pożywki do wzrostu bakterii z grupy LAB, który pozwoli na skuteczną, jednorazową, sterylizację objętości 40 litrów przedmiotowej pożywki bez jednoczesnego obniżenia pH roztworu do wartości poniżej 6,2 oraz przyjęcia przez roztwór barwy ciemnej.
Przedmiotem wynalazku jest sposób sterylizacji pożywki bakteryjnej na bazie proszku serwatkowego, mleka odtłuszczonego oraz ekstraktu drożdży polegający na przeprowadzeniu procesu sterylizacji w autoklawie, w temp 110°C przez okres 10 min, przy czym przed sterylizacją ogrzewa się komorę autoklawu do temp 60°C.
Przeprowadzenie sposobu sterylizacji pożywki według wynalazku pozwala na otrzymanie sterylnego roztworu o jasnej barwie i pH zbliżonym do 6,3.
PRZYKŁAD WYKONANIA:
Przykład wykonania 1
W celu weryfikacji efektów sposobu sterylizacji według wynalazku przygotowano 8 butli o objętości 5 litrów każda pożywki będącej roztworem zawierającym 2% proszku serwatkowego (ASM Konarzew), 5% odtłuszczonego mleka w proszku (OSM Czarnków) oraz 1,2% ekstraktu drożdżowego (BTL) rozpuszczonych w wodzie dejonizowanej (przewodnictwo 0,05 pS) o temperaturze pokojowej. Sposób sterylizacji przeprowadzono w autoklawie SYSTEC VX150 warunkach przedstawionych w tabeli 1 poniżej:
Tabela 1. Testowane warunki sterylizacji
| Typ próby | Program/ ustawienie autoklawu | Temperatura początkowa autoklawu | Temp. Sondy w butelce | Czas nagrzewania | Czas Chłodzenia | Czas sterylizacji | Czas cyklu | pH pożywki po sterylizacji |
| 1 | 8 - Płyny (121°C, ster. 15 min) | pokojowa | 19 9°C | 01:12:00 | 01:13:20 | 00:15:00 | 02:45:09 | 6.17 |
| 2 | 8- płyny (lio°cj ster. 10 min) | 60°C | 21.3°C | 01:06:00 | 01:01:05 | 00:10:00 | 02:18:36 | 6.28 |
PL 240 128 B1
W wyniku sterylizacji przeprowadzonej według warunków dla próby nr 1 otrzymany płyn charakteryzował się pH w granicach 6,1-6.2 oraz ciemną barwą, co wykluczało możliwość użycia go do przygotowania pożywki na bazie serwatki. Po zmodyfikowaniu warunków sterylizacji do parametrów przedstawionych powyżej dla próby nr 2 uzyskano znaczącą poprawę właściwości płynu po sterylizacji. Miał on barwę jasną i pH około 6.3, co dowodzi słuszności zaproponowanej modyfikacji.
P r z y k ł a d wykonania 2
W celu przeprowadzenia weryfikacji skuteczności sterylizacji płynu uzyskanego w procesie sterylizacji według warunków dla próby nr 2, przygotowano z zastosowaniem standardowych, znanych specjalistom w dziedzinie, sposobów, szereg płytek z następującymi podłożami mikrobiologicznymi:
• MRS - podłoże wybiórcze do namnażania, hodowli, izolacji oraz określania liczby bakterii mlekowych, szczególnie z rodzaju Lactobacillus, we wszystkich typach materiałów;
• bulion wzbogacony z 2% glukozą - podłoże uniwersalne do hodowli i namnażania mikroorganizmów o podwyższonych wymaganiach pokarmowych w tym testowany na: Salmonella enteritidis ATCC 13076, Escherichia coli ATCC 25922, Staphylococcus aureus ATCC 6538, Bacillus cereus ATCC 10876;
• Miller-Hinton agar - nieselektywne medium dla bakterii tlenowych;
• RCM - półpłynne medium dla bakterii anaerobowych w tym z rodzaju Clostridium;
• VRBG - podłoże z żółcią, czerwienią obojętną, fioletem krystalicznym i glukozą. Podłoże wy- biórcze do izolacji i określania liczby bakterii z rodziny Enterobacteriaceae w produktach żywnościowych;
• E. coli Chromogenie Medium - podłoże chromogenne do wykrywania i różnicowania E. coli i bakterii grupy coli w próbkach wody, żywności i innych z Tergitolem 7, który jest czynnikiem selektywnym hamującym wzrost bakterii Gram-dodatnich i niektórych Gram-ujemnych (Biomaxima)
Płytki testowe przygotowano metodą zalewową i posiewu powierzchniowego pobierając próby z 5 niezależnie przygotowanych cykli sterylizacji pożywki. W żadnym testowanym wariancie, mimo inkubacji trwającej 5 dób nie odnotowano wzrostu kolonii bakteryjnych, co potwierdza skuteczność procesu sterylizacji w zaproponowanych warunkach.
P r z y k ł a d wykonania 3
W celu weryfikacji przydatności pożywki serwatkowej sterylizowanej w ustalonych warunkach w autoklawie SYSTEC VX150 do hodowli szczepu testowego Lactobacillus acidophilus ATCC 4356, dokonano oznaczenia liczebności komórek bakterii testowych - metoda hodowlana (jtk/cm3) - posiew ilościowy (pożywka MRS agar, posiew zalewowy, inkubacja 30°C, 72 h, warunki mikroaerofilne), wykonano według poniżej zamieszczonej procedury badawczej.
Procedura badawcza - pomiar ilości drobnoustrojów:
Na płytki Petriego naniesiono po1 cm3 wybranych kolejnych rozcieńczeń płynu z prowadzoną hodowlą bakterii (przygotowano szereg rozcieńczeń hodowli bakteryjnej w zakresie 10-1 - 10-11, stosując 0,85% NaCl).
Określone podłoże mikrobiologiczne wylano z agarem, przestudzono do temp. 45°C, a roztwory wymieszano na płytce.
Inkubację prowadzono w określonych warunkach optymalnych dla wzrostu wybranych grup drobnoustrojów
Do odczytu wybrano płytki z 2 kolejnych rozcieńczeń, na których wyrosło od 30 do 300 kolonii.
Liczbę drobnoustrojów (L) w 1 cm3 lub 1 g próbki obliczono wg wzoru: C x d / (N1+ 0,1N2) gdzie C - suma kolonii na wszystkich płytkach wybranych do liczenia
N 1 - liczba płytek z pierwszego liczonego rozcieńczenia
N 2 - liczba płytek z drugiego liczonego rozcieńczenia d - wskaźnik rozcieńczenia odpowiadający pierwszemu (najniższemu) liczonemu rozcieńczeniu
PL240 128 Β1
Wyniki:
Tabela 2. Liczebność komórek szczepu Lactobacillus acidophilus w zależności od czasu prowadzenia hodowli na pożywce serwatkowej przygotowanej w oparciu o wyznaczone warunki sterylizacji.
| Czas fermentacji [h] | Liczebność komórek LAB [jtk/cm3] | szczepu | |
| 40 cmJ | 800cmJ | 5000cmJ | |
| 0 | 106 | 10b | 106 |
| 15 | 7,8 x 10* | 8,2 x 10* | 6,5 x 10* |
| 20 | 4,2 x 10y | 4,5 x 10y | 3,8 x 10y |
| 35 | 2,3 x 10y | 2,5 x 10y | 2,8 x 10y |
Na podstawie uzyskanych wyników stwierdzono, że wyznaczone warunki sterylizacji nie wpływają negatywnie na jakość otrzymywanego podłoża hodowlanego. Prowadząc hodowlę w prezentowanych warunkach, we wszystkich objętościach od 40 do 5000 cm3 przygotowanej pożywki uzyskano porównywalną gęstość hodowli, co stanowiło kryterium w ocenie przydatności pożywki serwatkowej sterylizowanej w ustalonych warunkach w autoklawie SYSTEC VX150 do hodowli szczepu testowego Lactobacillus acidophilus ATCC 4356:
Claims (1)
1 . Sposób sterylizacji w autoklawie pożywki bakteryjnej, zawierającej proszek serwatkowy, mleko odtłuszczone oraz ekstrakt drożdży, znamienny tym, że przed procesem sterylizacji komorę autoklawu nagrzewa się do temp 60°C, a proces sterylizacji przeprowadza się w temp. 110°C przez okres 10 minut.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL430991A PL240128B1 (pl) | 2019-08-29 | 2019-08-29 | Sposób sterylizacji pożywki bakteryjnej |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL430991A PL240128B1 (pl) | 2019-08-29 | 2019-08-29 | Sposób sterylizacji pożywki bakteryjnej |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL430991A1 PL430991A1 (pl) | 2021-03-08 |
| PL240128B1 true PL240128B1 (pl) | 2022-02-21 |
Family
ID=75107777
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL430991A PL240128B1 (pl) | 2019-08-29 | 2019-08-29 | Sposób sterylizacji pożywki bakteryjnej |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL240128B1 (pl) |
-
2019
- 2019-08-29 PL PL430991A patent/PL240128B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL430991A1 (pl) | 2021-03-08 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN104651268B (zh) | 一种植物乳杆菌及其应用 | |
| Goyal et al. | Characterization of the Lactobacillus isolated from different curd samples | |
| Ray | Enumeration of injured indicator bacteria from foods | |
| Putri et al. | Isolation and characterization of lactic acid bacteria from Apis mellifera and their potential as antibacterial using in vitro test against growth of Listeria monocytogenes and Escherichia coli | |
| CN108004177B (zh) | 一种可降解亚硝酸盐的副干酪乳杆菌及其特性研究 | |
| CN113308408A (zh) | 一种产细菌素的肠膜明串珠菌及其应用 | |
| CN109536406A (zh) | 弱后酸化的嗜热链球菌jmcc16、分离纯化方法及应用 | |
| Dhinesh et al. | Microbial pathogens in canned fish collected from Tamil Nadu | |
| Boubekri et al. | Identification of lactic acid bacteria from Algerian traditional cheese, El‐Klila | |
| WILSON et al. | Minimal medium recovery of thermally injured Salmonella senftenberg 4969 | |
| PL240128B1 (pl) | Sposób sterylizacji pożywki bakteryjnej | |
| Sutariya et al. | A Novel Organism Lactobacillus wasatchensis: Growth, Detection, Gassing Defects in Cheese, Control Strategy and Future Research Opportunities: A Review. | |
| Gulmez et al. | Note: Behaviour of Escherichia coli O157: H7, Listeria monocytogenes 4b and Yersinia enterocolitica O3 in pasteurised and non-pasteurised kefir fermented for one or two days | |
| Ikele et al. | Efficacy of Probiotic Lactobacillus casei in Bio-control of Escherichia coli O157: H7 in Nono | |
| Kareem et al. | Safe Hyaluronic Acid Production by Low Cost Agricultural Wastes and Using in Prolonging the Shelf Life of Beef | |
| Sharma et al. | Antimicrobial Activity of Lactic Acid Bacteria Isolated from Traditional Fermented Food | |
| Kamruzzaman et al. | The investigation of probiotic potential of lactic acid bacteria isolated from cow milk. | |
| Dega et al. | Growth of Salmonella typhimurium in skim milk concentrates | |
| El-Etriby | Microbiological study of some cheese and milk powder samples | |
| Izzat et al. | Potential probiotic properties of Lactobacillus sp. isolated from traditional Kurdish yogurt | |
| Zaki | Probiotics’ antibacterial activity on beef and camel minced meat at altered ranges of temperature | |
| Lee et al. | The influence of an extracellular polysaccharide, comprised of colanic acid, on the fate of Escherichia coli O157: H7 during processing and storage of stirred yogurt | |
| Frederick et al. | Evaluation of chemical additives for the separation and recovery of bacteria from food matrices | |
| KR880002178B1 (ko) | 유산균 음료의 제조법 | |
| Roy et al. | Isolation and Characterizations of Probiotics from Bovine (Cow) Milk |