PL241129B1 - Szczepy bakteriofagów specyficzne wobec bakterii należących do rodzaju Salmonella oraz ich zastosowanie do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych - Google Patents
Szczepy bakteriofagów specyficzne wobec bakterii należących do rodzaju Salmonella oraz ich zastosowanie do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych Download PDFInfo
- Publication number
- PL241129B1 PL241129B1 PL430168A PL43016819A PL241129B1 PL 241129 B1 PL241129 B1 PL 241129B1 PL 430168 A PL430168 A PL 430168A PL 43016819 A PL43016819 A PL 43016819A PL 241129 B1 PL241129 B1 PL 241129B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- salmonella
- preparations
- bacteriophage
- bacteriophage strain
- use according
- Prior art date
Links
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 title claims abstract description 52
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title claims abstract description 25
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 title claims abstract description 19
- 241000607142 Salmonella Species 0.000 title claims abstract description 19
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 title claims abstract description 14
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 title claims abstract description 7
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 claims abstract description 7
- 241001138501 Salmonella enterica Species 0.000 claims description 24
- 241001354013 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Enteritidis Species 0.000 claims description 18
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims description 14
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 claims description 10
- 230000002101 lytic effect Effects 0.000 claims description 10
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 9
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 7
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 claims description 5
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 5
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 claims description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 claims description 4
- 206010039438 Salmonella Infections Diseases 0.000 claims description 3
- 238000001066 phage therapy Methods 0.000 claims description 3
- 206010039447 salmonellosis Diseases 0.000 claims description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 2
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 2
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 claims description 2
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 claims description 2
- 241000293869 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Typhimurium Species 0.000 claims description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 claims description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 claims description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 claims description 2
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 2
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N lysine Chemical compound NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 2
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 claims description 2
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 claims description 2
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 claims description 2
- 210000002845 virion Anatomy 0.000 claims description 2
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 claims 2
- 241000210651 Enterobacteria phage 1 Species 0.000 claims 1
- 241000282898 Sus scrofa Species 0.000 claims 1
- 238000012512 characterization method Methods 0.000 claims 1
- 230000000813 microbial effect Effects 0.000 claims 1
- 238000007781 pre-processing Methods 0.000 claims 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims 1
- 238000011552 rat model Methods 0.000 claims 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims 1
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 3
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 15
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 12
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 11
- 238000010790 dilution Methods 0.000 description 8
- 239000012895 dilution Substances 0.000 description 8
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 8
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 7
- 239000010865 sewage Substances 0.000 description 7
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 7
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 description 6
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 6
- 241000271566 Aves Species 0.000 description 4
- 208000035143 Bacterial infection Diseases 0.000 description 4
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 4
- 241000607132 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Gallinarum Species 0.000 description 4
- 241001135257 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Senftenberg Species 0.000 description 4
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 4
- 208000022362 bacterial infectious disease Diseases 0.000 description 4
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 4
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 4
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 4
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 4
- 208000035472 Zoonoses Diseases 0.000 description 3
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 description 3
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 3
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 3
- 244000052616 bacterial pathogen Species 0.000 description 3
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 3
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 3
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 3
- 206010048282 zoonosis Diseases 0.000 description 3
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 2
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 2
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 2
- MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N ciprofloxacin Chemical compound C12=CC(N3CCNCC3)=C(F)C=C2C(=O)C(C(=O)O)=CN1C1CC1 MYSWGUAQZAJSOK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000036541 health Effects 0.000 description 2
- 230000008520 organization Effects 0.000 description 2
- 230000005180 public health Effects 0.000 description 2
- 241000894007 species Species 0.000 description 2
- 108010078777 Colistin Proteins 0.000 description 1
- 241000588921 Enterobacteriaceae Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 1
- 241000283984 Rodentia Species 0.000 description 1
- 241001355132 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Chester Species 0.000 description 1
- 241001437646 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Stanley Species 0.000 description 1
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- 229940126575 aminoglycoside Drugs 0.000 description 1
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000002512 chemotherapy Methods 0.000 description 1
- 229960003405 ciprofloxacin Drugs 0.000 description 1
- 229960003346 colistin Drugs 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 229940124307 fluoroquinolone Drugs 0.000 description 1
- 210000005260 human cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 1
- 244000005706 microflora Species 0.000 description 1
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 1
- JORAUNFTUVJTNG-BSTBCYLQSA-N n-[(2s)-4-amino-1-[[(2s,3r)-1-[[(2s)-4-amino-1-oxo-1-[[(3s,6s,9s,12s,15r,18s,21s)-6,9,18-tris(2-aminoethyl)-3-[(1r)-1-hydroxyethyl]-12,15-bis(2-methylpropyl)-2,5,8,11,14,17,20-heptaoxo-1,4,7,10,13,16,19-heptazacyclotricos-21-yl]amino]butan-2-yl]amino]-3-h Chemical compound CC(C)CCCCC(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)CN[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]1CCNC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCN)NC1=O.CCC(C)CCCCC(=O)N[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)CN[C@@H](CCN)C(=O)N[C@H]1CCNC(=O)[C@H]([C@@H](C)O)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CCN)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CCN)NC1=O JORAUNFTUVJTNG-BSTBCYLQSA-N 0.000 description 1
- 229960000210 nalidixic acid Drugs 0.000 description 1
- MHWLWQUZZRMNGJ-UHFFFAOYSA-N nalidixic acid Chemical compound C1=C(C)N=C2N(CC)C=C(C(O)=O)C(=O)C2=C1 MHWLWQUZZRMNGJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 108700010839 phage proteins Proteins 0.000 description 1
- XDJYMJULXQKGMM-UHFFFAOYSA-N polymyxin E1 Natural products CCC(C)CCCCC(=O)NC(CCN)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)NC(CCN)C(=O)NC1CCNC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CCN)NC1=O XDJYMJULXQKGMM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KNIWPHSUTGNZST-UHFFFAOYSA-N polymyxin E2 Natural products CC(C)CCCCC(=O)NC(CCN)C(=O)NC(C(C)O)C(=O)NC(CCN)C(=O)NC1CCNC(=O)C(C(C)O)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CCN)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CC(C)C)NC(=O)C(CCN)NC1=O KNIWPHSUTGNZST-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000013613 poultry product Nutrition 0.000 description 1
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 description 1
- 239000000047 product Substances 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 229940040944 tetracyclines Drugs 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 238000007669 thermal treatment Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N7/00—Viruses; Bacteriophages; Compositions thereof; Preparation or purification thereof
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K35/00—Medicinal preparations containing materials or reaction products thereof with undetermined constitution
- A61K35/66—Microorganisms or materials therefrom
- A61K35/76—Viruses; Subviral particles; Bacteriophages
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2795/00—Bacteriophages
- C12N2795/00011—Details
- C12N2795/10011—Details dsDNA Bacteriophages
- C12N2795/10311—Siphoviridae
- C12N2795/10321—Viruses as such, e.g. new isolates, mutants or their genomic sequences
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2795/00—Bacteriophages
- C12N2795/00011—Details
- C12N2795/10011—Details dsDNA Bacteriophages
- C12N2795/10311—Siphoviridae
- C12N2795/10332—Use of virus as therapeutic agent, other than vaccine, e.g. as cytolytic agent
-
- Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
- Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
- Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
- Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
- Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Zoology (AREA)
- Virology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Mycology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Public Health (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Immunology (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Abstract
Wynalazek dotyczy nowego szczepu bakteriofaga specyficznego wobec bakterii należących do gatunku Salmonella, wybranego ze szczepów zdeponowanych w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerami depozytowymi: F/00114, F/00115, F/00116, F00117, F/00118. Wynalazek dotyczy także zastosowanie szczepu bakteriofaga, wybranego ze szczepów zdeponowanych w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod wskazanymi numerami, do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych, służących do zwalczania bakterii Salmonella.
Description
PL 241 129 B1
Opis wynalazku
Przedmiotem wynalazku są szczepy bakteriofagów specyficzne wobec bakterii należących do rodzaju Salmonella, o potencjale technologicznym do wytwarzania preparatów zwalczających bakterie patogenne, zwłaszcza Salmonella enterica ssp. enterica.
Za jedną z głównych przyczyn chorób odzwierzęcych, których źródłem jest żywność, uznawane są bakterie z rodzaju Salmonella (Scientific report of EFSA and ECDC, 2017). Należące do rodziny Enterobacteriaceae pałeczki Salmonella enterica są przyczyną zachorowań ludzi i zwierząt na całym świecie, do których dochodzi najczęściej po spożyciu skażonych produktów żywnościowych, spośród których najważniejszymi obok jaj, są mięso drobiowe i przetwory drobiarskie surowe, bądź poddane niewystarczającej obróbce termicznej [1; 2; 3].
W aspekcie zdrowia publicznego, dodatkowym zagrożeniem jest narastająca oporność szczepów bakteryjnych na różne grupy chemioterapeutyków. Światowa Organizacja Zdrowia (WHO) uznała lekooporność drobnoustrojów za jedno z największych zagrożeń dla dotychczasowych osiągnięć medycyny oraz dla życia publicznego [4]. Nadużywanie antybiotyków lub ich niewłaściwe stosowanie, zarówno w medycynie ludzkiej jak i weterynarii, jest jedną z głównych przyczyn pojawienia się opornych szczepów. Sytuacja ta stwarza problem w doborze efektywnej terapii antybakteryjnej zarówno u zwierząt, jak i u ludzi. Dodatkowo, szczepy oporne mogą być transmitowane, poprzez żywność pochodzenia zwierzęcego, na ludzi. Warto podkreślić, że w produkcji drobiarskiej oraz medycynie ludzkiej wykorz ystywane są te same grupy chemioterapeutyków (fluorochinolony, tetracykliny, aminoglikozydy), co dodatkowo stwarza zagrożenie dla zdrowia publicznego. Wśród szczepów Salmonella ssp. izolowanych od ludzi i zwierząt odnotowano wysoki odsetek szczepów wieloopornych [5]. Najwyższy odsetek opornych na ciprofloksacynę i kwas nalidyksowy szczepów Salmonella spp., stwierdzono wśród izolatów pochodzących z mięsa kurcząt rzeźnych, odpowiednio 42,6% i 39,7%. Dodatkowo, od kurcząt rzeźnych, niosek towarowych oraz indyków rzeźnych, izolowano szczepy Salmonella enterica i E. coli oporne na kolistynę, lek „ostatniej szansy” stosowany w medycynie ludzkiej w przypadku trudno leczących się infekcji. Zwiększająca się liczba bakteryjnych szczepów opornych stanowi zagrożenie rozprzestrzeniania się tych zarazków i wzrostu infekcji bakteryjnych trudnych do wyleczenia. Powszechność występowania na całym świecie chorób odzwierzęcych powodowanych przez bakterie patogenne, w tym szczepy wielooporne, pochodzących z żywności, wskazuje na istotę poszukiwania alternatywnych metod jej zabezpieczenia, a działania prewencyjne należy wprowadzić już na etapie hodowli zwierząt. Z kolei, niepowodzenia antybiotykoterapii i chemioterapii jako następstwo pojawienia się szczepów bakteryjnych o wysokiej oporności, a nawet szczepów niewrażliwych na stosowane dotąd leki, zmusza do poszukiwań innych metod zapobiegania i leczenia infekcji bakteryjnych. Wśród alternatywnych wobec antybiotyków i chemioterapeutyków sposobów zwalczania tego typu infekcji, w tym zakażeń szczepami wieloopornymi, w medycynie ludzkiej i weterynarii, coraz częściej wymienia się terapię z użyciem bakteriofagów [6; 7].
Bakteriofagi (fagi) są wirusami specyficznymi w stosunku do bakterii i używane są do ich zwalczania od momentu odkrycia na początku XX wieku. Niedługo po odkryciu tych bytów biologicznych, bakteriofagi stały się kluczowym środkiem w walce z patogenami. Wynalezienie penicyliny i gwałtowny rozwój antybiotykoterapii sprawiły, że leczenie bakteriofagami zostało prawie całkowicie zastąpione leczeniem z użyciem antybiotyków, szczególnie w zachodniej Europie i Stanach Zjednoczonych. Wobec narastającego problemu lekooporności bakterii i kryzysu antybiotykoterapii, poszukiwanie skutecznych środków przeciwbakteryjnych stało się jednym z głównych obszarów badań współczesnej biotechnologii i medycyny, a jako jedną z najbardziej atrakcyjnych alternatyw do leczenia antybiotykami wskazywana jest terapia bakteriofagami. Bakteriofagi infekują komórkę bakteryjną, namnażają się w niej, a następnie powodują jej rozpad i uwalnianie wirusów potomnych. Co ciekawe, charakteryzują się zdolnością do namnażania tylko w miejscu infekcji, gdzie zlokalizowane są bakterie wrażliwe na konkretnego wirusa. W momencie gdy wszystkie komórki bakteryjne zostaną zainfekowane, cała populacja zostaje wyeliminowana, a wraz z nią wirus, który traci swego gospodarza. Innymi cechami przyczyniającymi się do faktu, że bakteriofagi są doskonałym środkiem do walki z zakażeniami bakteryjnymi, jest niska toksyczność, brak interakcji z komórkami ludzkimi i zwierzęcymi, brak powiązania z opornością na antybiotyki oraz istnienie różnych form aplikacji jako terapeutyków [8]. Bakteriofagi charakteryzują się wysoką specyficznością w stosunku do gospodarza, co w praktyce oznacza, że są zdolne zakażać pojedynczy gatunek bakterii lub nawet serotyp występujący w ramach gatunku [9] i pozostają obojętne dla pozostałej mikroflory.
PL 241 129 B1
Dostępne dane literaturowe na temat bakteriofagów specyficznych względem pałeczek Salmonella enterica ssp. enterica wskazują na efektywne działanie bakteriofagów w terapii i prewencji zakażeń tymi bakteriami u drobiu [10; 11; 12; z3], gryzoni [14; 15; 16], trzody chlewnej [17], a nawet ludzi [18].
Celem wynalazku było uzyskanie preparatów fagowych, które mogłyby być skutecznie wykorzystane do zapobiegania zakażeniom bakteryjnym jak i w leczeniu infekcji powodowanych przez pałeczki Salmonella, zarówno u ludzi jak i u zwierząt.
Wynalazek dotyczy nowego szczepu bakteriofagowego specyficznego wobec bakterii należących do rodzaju Salmonella, wybranego ze szczepów zdeponowanych w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerami depozytowymi: F/00114, F/00115, F/00116, F/00117.
Istotą wynalazku jest również szczep bakteriofaga, wybranego ze szczepów zdeponowanych w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerami depozytowymi: F/00114, F/00115, F/00116, F/00117, do zastosowania jako preparat przeciwbakteryjny, służących do zwalczania bakterii Salmonella, korzystnie należących do gatunku Salmonella enterica, zwłaszcza podgatunku Salmonella enterica ssp. enterica.
Korzystnie jest, gdy do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych wykorzystuje się całe wiriony bakteriofaga wirulentnego w preparatach zawierających jednego faga, jak i w postaci mieszaniny, w skład której może wchodzić kilka lub kilkanaście aktywnych bakteriofagów.
Dodatkowo wynalazek dotyczy wykorzystania oczyszczonych fagowych białek, strukturalnych, jak i enzymatycznych, zwłaszcza enzymów litycznych w postaci lizozymu albo endolizyny, albo egzopolisacharydazy.
Korzystnie jest, gdy preparatami przeciwbakteryjnymi, są preparaty służące do leczenia zakażeń wywołanych przez pałeczki Salmonella.
Korzystnie także jest, gdy preparatami przeciwbakteryjnymi, są preparaty służące do zapobiegania zakażeniom wywołanym przez pałeczki Salmonella.
Korzystnie również jest, gdy preparatami przeciwbakteryjnymi, są preparaty służące do eliminowania pałeczek Salmonella z powierzchni biotycznych albo abiotycznych.
Istota wynalazku została zilustrowana poniższymi przykładami wykonania:
P r z y k ł a d 1: Fag Salmonella enterica ssp. enterica UPWr/S1
Bakteriofag wirulentny był izolowany ze ścieków z oczyszczalni w Bolesławcu. Bakteriofaga izolowano bezpośrednio z płynnej próby środowiskowej, którą poddano filtracji przy użyciu filtra o średnicy porów 0,22 μm, a następnie analizowano w teście kroplowym (ang. spot on). W tym celu 18-sto godzinna hodowla bakteryjna szczepu Salmonella enterica ssp. enterica serowar Enteritidis (Salmonella Enteritidis) A41 prowadzona w 5 ml podłoża LB rozprowadzona została po powierzchni szalki Petriego z zestalonym podłożem LB i pozostawiona do wysuszenia powierzchni. Równocześnie przygoto wano szereg rozcieńczeń dziesiętnych filtratu próby środowiskowej, które nakropiono na powierzchnię płytki Petriego z hodowlą Salmonella Enteritidis A41 i inkubowano kolejne 18 godzin w temperaturze 37°C. Po uzyskaniu pozytywnego wyniku, jakim jest całkowita liza bakterii w miejscu nakropienia filtratu i jego rozcieńczeń lub obecność pojedynczych łysinek bakteriofagowych na murawie bakteryjnej, wyprowadzono czysty szczep bakteriofagowy z pojedynczej łysinki, którą pobierano za pomocą sterylnej igły. Igłę umieszczano w 1 ml pożywki LB i inkubowano przez 10 minut z łagodnym wytrząsaniem. Następnie próbkę dodawano do 5 ml 5-cio godzinnej hodowli Salmonella Enteritidis A41 i inkubowano 18 godzin w temperaturze 37°C z wytrząsaniem 180 rpm, wirowano i filtrowano przy użyciu filtra o średnicy 0,22 μm. Tak uzyskany filtrat wykorzystany został do kolejnej izolacji faga z pojedynczej łysinki. Reizolację powtórzono 4 krotnie. W celu charakterystyki faga określono jego spektrum lityczne wobec wybranych izolatów pałeczek Salmonella enterica ssp. enterica, pochodzących z kolekcji szczepów Katedry Epizootiologii z Kliniką Ptaków i Zwierząt Egzotycznych Wydziału Medycyny Weterynaryjnej Uniwersytetu Przyrodniczego we Wrocławiu. Wrażliwość bakterii na faga, analizowano w teście kroplowym. Na 66 przebadanych szczepów Salmonella enterica ssp. enterica, dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 40 szczepów, w tym 28 szczepów należących do serowaru Salmonella Enteritidis, 11 Salmonella Gallinarum i 1 Salmonella Senftenberg.
Szczep bakteriofaga UPWr/S1 został zdeponowany 31-05-2019 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów patentowych. Depozytowi nadano numer F/00114.
P r z y k ł a d 2: Fag Salmonella enterica ssp. enterica UPWr/S3
Bakteriofag wirulentny izolowany ze ścieków z Wrocławskiej Oczyszczalni ścieków Janówek. Bakteriofaga izolowano bezpośrednio z płynnej próby środowiskowej, którą poddano filtracji przy użyciu
PL 241 129 B1 filtra o średnicy porów 0,22 μm, a następnie analizowano w teście kroplowym (ang. spot on). W tym celu 18-sto godzinna hodowla bakteryjna szczepu Salmonella enterica ssp. enterica serowar Enteritidis (Salmonella Enteritidis) A28 prowadzona w 5 ml podłoża LB rozprowadzona została po powierzchni szalki Petriego z zestalonym podłożem LB i pozostawiona do wysuszenia powierzchni. Równocześnie przygotowano szereg rozcieńczeń dziesiętnych filtratu próby środowiskowej, które nakropiono na powierzchnię płytki Petriego z hodowlą Salmonella Enteritidis A28 i inkubowano kolejne 18 godzin w temperaturze 37°C. Po uzyskaniu pozytywnego wyniku, jakim jest całkowita liza bakterii w miejscu nakropienia filtratu i jego rozcieńczeń lub obecność pojedynczych łysinek bakteriofagowych na murawie bakteryjnej, wyprowadzono czysty szczep bakteriofagowy z pojedynczej łysinki, którą pobierano za pomocą sterylnej igły. Igłę umieszczano w 1 ml pożywki LB i inkubowano przez 10 minut z łagodnym wytrząsaniem. Następnie próbkę dodawano do 5 ml 5-cio godzinnej hodowli Salmonella Enteritidis A28 i inkubowano 18 godzin w temperaturze 37°C z wytrząsaniem 180 rpm, wirowano i filtrowano przy użyciu filtra o średnicy 0,22 μm. Tak uzyskany filtrat wykorzystany został do kolejnej izolacji faga z pojedynczej łysinki. Reizolację powtórzono 4 krotnie.
W celu charakterystyki faga określono jego spektrum lityczne wobec wybranych izolatów pałeczek Salmonella enterica ssp. enterica, pochodzących z kolekcji szczepów Katedry Epizootiologii z Kliniką Ptaków i Zwierząt Egzotycznych Wydziału Medycyny Weterynaryjnej Uniwersytetu Przyrodniczego we Wrocławiu. Wrażliwość bakterii na faga, analizowano w teście kroplowym. Na 66 przebadanych szczepów Salmonella enterica ssp. enterica, dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 52 szczepów, w tym 31 szczepów należących do serowaru Salmonella Enteritidis, 10 Salmonella Gallinarum, 8 Salmonella Typhimurium, 1 Salmonella Stanley, 1 Salmonella Chester i 1 Salmonella Senftenberg.
Szczep bakteriofaga UPWr/S3 został zdeponowany 31-05-2019 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów patentowych. Depozytowi nadano numer F/00115.
P r z y k ł a d 3: Fag Salmonella enterica ssp. enterica UPWr/S4
Bakteriofag wirulentny izolowany ze ścieków z Wrocławskiej Oczyszczalni ścieków Janówek. Bakteriofaga izolowano bezpośrednio z płynnej próby środowiskowej, którą poddano filtracji przy użyciu filtra o średnicy porów 0,22 μm, a następnie analizowano w teście kroplowym (ang. spot on). W tym celu 18-sto godzinna hodowla bakteryjna szczepu Salmonella enterica ssp. enterica serowar Enteritidis (Salmonella Enteritidis) A28 prowadzona w 5 ml podłoża LB rozprowadzona została po powierzchni szalki Petriego z zestalonym podłożem LB i pozostawiona do wysuszenia powierzchni. Równocześnie przygotowano szereg rozcieńczeń dziesiętnych filtratu próby środowiskowej, które nakropiono na powierzchnię płytki Petriego z hodowlą Salmonella Enteritidis A28 i inkubowano kolejne 18 godzin w temperaturze 37°C. Po uzyskaniu pozytywnego wyniku, jakim jest całkowita liza bakterii w miejscu nakropienia filtratu i jego rozcieńczeń lub obecność pojedynczych łysinek bakteriofagowych na murawie bakteryjnej, wyprowadzono czysty szczep bakteriofagowy z pojedynczej łysinki, którą pobierano za pomocą sterylnej igły. Igłę umieszczano w 1 ml pożywki LB i inkubowano przez 10 minut z łagodnym wytrząsaniem. Następnie próbkę dodawano do 5 ml 5-cio godzinnej hodowli Salmonella Enteritidis A28 i inkubowano 18 godzin w temperaturze 37°C z wytrząsaniem 180 rpm, wirowano i filtrowano przy użyciu filtra o średnicy 0,22 μm. Tak uzyskany filtrat wykorzystany został do kolejnej izolacji faga z pojedynczej łysinki. Reizolację powtórzono 4 krotnie.
W celu charakterystyki faga określono jego spektrum lityczne wobec wybranych izolatów pałeczek Salmonella enterica ssp. enterica, pochodzących z kolekcji szczepów Katedry Epizootiologii z Kliniką Ptaków i Zwierząt Egzotycznych Wydziału Medycyny Weterynaryjnej Uniwersytetu Przyrodniczego we Wrocławiu. Wrażliwość bakterii na faga, analizowano w teście kroplowym. Na 66 przebadanych szczepów Salmonella enterica ssp. enterica, dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 34 szczepów, w tym 23 szczepów należących do serowaru Salmonella Enteritidis, 10 Salmonella Gallinarum, i 1 Salmonella Senftenberg.
Szczep bakteriofaga UPWr/S4 został zdeponowany 31-05-2019 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów patentowych. Depozytowi nadano numer F/00116.
P r z y k ł a d 4: Fag Salmonella enterica ssp. enterica UPWr/S5
Bakteriofag wirulentny izolowany ze ścieków z Wrocławskiej Oczyszczalni ścieków Janówek. Bakteriofaga izolowano bezpośrednio z płynnej próby środowiskowej, którą poddano filtracji przy użyciu filtra o średnicy porów 0,22 μm, a następnie analizowano w teście kroplowym (ang. spot on). W tym
PL 241 129 B1 celu 18-sto godzinna hodowla bakteryjna szczepu Salmonella enterica ssp. enterica serowar Enteritidis (Salmonella Enteritidis) A36 prowadzona w 5 ml podłoża LB rozprowadzona została po powierzchni szalki Petriego z zestalonym podłożem LB i pozostawiona do wysuszenia powierzchni. Równocześnie przygotowano szereg rozcieńczeń dziesiętnych filtratu próby środowiskowej, które nakropiono na powierzchnię płytki Petriego z hodowlą Salmonella Enteritidis A36 i inkubowano kolejne 18 godzin w temperaturze 37°C. Po uzyskaniu pozytywnego wyniku, jakim jest całkowita liza bakterii w miejscu nakropienia filtratu i jego rozcieńczeń lub obecność pojedynczych łysinek bakteriofagowych na murawie bakteryjnej, wyprowadzono czysty szczep bakteriofagowy z pojedynczej łysinki, którą pobierano za pomocą sterylnej igły. Igłę umieszczano w 1 ml pożywki LB i inkubowano przez 10 minut z łagodnym wytrząsaniem. Następnie próbkę dodawano do 5 ml 5-cio godzinnej hodowli Salmonella Enteritidis A36 i inkubowano 18 godzin w temperaturze 37°C z wytrząsaniem 180 rpm, wirowano i filtrowano przy użyciu filtra o średnicy 0,22 μm. Tak uzyskany filtrat wykorzystany został do kolejnej izolacji faga z pojedynczej łysinki. Reizolację powtórzono 4 krotnie.
W celu charakterystyki faga określono jego spektrum lityczne wobec wybranych izolatów pałeczek Salmonella enterica ssp. enterica, pochodzących z kolekcji szczepów Katedry Epizootiologii z Kliniką Ptaków i Zwierząt Egzotycznych Wydziału Medycyny Weterynaryjnej Uniwersytetu Przyrodniczego we Wrocławiu. Wrażliwość bakterii na faga, analizowano w teście kroplowym. Na 66 przebadanych szczepów Salmonella enterica ssp. enterica, dodatnie reakcje lityczne obserwowano dla 36 szczepów, w tym 25 szczepów należących do serowaru Salmonella Enteritidis, 10 Salmonella Gallinarum, i 1 Salmonella Senftenberg.
Szczep bakteriofaga UPWr/S5 został zdeponowany 31-05-2019 roku w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów posiadającej status międzynarodowego ośrodka depozytowego do celów patentowych. Depozytowi nadano numer F/00117.
Literatura:
1. Corry JEL, Atabay HI. 2001. Poultry as a source of Campylobacter and related organisms. Soc. Appl. Bacteriol. Symp. Ser. 96S-114S. Washington D.C. ASM Press; 2 2000:121-138.
2. Hald T, Vose D, Wegener HC, Koupeev T. 2004. A Bayesian approach to quantify the contribution of animal-food sources to human salmonellosis. Risk Anal. 24, 255-269.
3. Schlundt J, Toyofuku H, Jansen J, Herbst SA.. 2004. Emerging food-borne zoonoses. Rev. Sci. Technol. 23, 513-533.
4. Wold Health Organization. 2014. Antimicrobial Resistance: Global Report on surveillance.
5. EFSA: 2018. Scientific report: The European Union summary report on antimicrobial resistance in zoonotic and indicator bacteria from humans, animals and food in 2016.
6. Thiel K. 2004. Old dogma, new tricks--21st Century phage therapy. Nat Biotechnol. Jan; 22(1): 31-6.
7. Dixon B. 2004. New dawn for phage therapy. Lancet Infect Dis. Mar; 4(3): 186.
8. Loc-Carrillo C., Abedon ST. 2011. Pros and Cons of Phage Therapy. Bacteriophage 1:
111-114.
9. Ackermann HW, Audurier A, Berthiaume L., Jones LA, Mayo JA, Vidaver AK. 1978. Guidelines for bacteriophage characterization. Adv. Virus Res. 23, 1-24.
10. Nabil NM, Tawakol MM, Hassan HM. 2018. Assessing the impact of bacteriophages in the treatment of Salmonella in broiler chickens. Infection Ecology & Epidemiology, vol. 8, 1539056.
11. Atterbury R, Van Bergen M, Ortiz F, Lovell MA, Harris JA, Boer AD, Wagenaar JA, Allen VM, Barrow PA. 2007. Bacteriophage therapy to reduce Salmonella colonization of broiler chickens, Appl Environ Microbiol, vol. 73 (pg. 4543-9).
12. Bardina C, Spricigo DA, Liagostera M. 2012. Significance of the bacteriophagy treatment Schedule In reducing Salmonella colonization of poultry. Appl. Environ. Microbiol. 78, 6600-6607.
13. Sillankorva SM, Oliverira H, Azeredo J. 2012. Bacteriophages and their role in food safety. Int. J. Microbiol. 2012: 863945.
14. Nikkhahi F, Dallai MMs, Alimohammadi M, Foroushani AR, Rajabi Z, Fardsanei F, Imeni FM, Bonab PT. 2017. Phage therapy: assessment of the efficacy of a bacteriophage
Claims (10)
- PL 241 129 B1 isolated in the treatment of salmonellosis induced by Salmonella enteritidis in mice. Gastroenterol Hepatol Bed Bench 10(2): 131-136.15. Tang F, Zhang P, Zhang Q, Xue F, Ren J, Sun J, Qu Z, Zhuge X, Li D, Wang J, Jiang M, Dai J. 2018. Isolation and characterization of a broad-spectrum phage of multiple drug resistant Salmonella and its therapeutic utility in mice. Microb Pathog. 2019 Jan; 126: 193-198.16. Naughton PJ, Grant G, Spencer RJ, Bardocz S, Pusztai A. 1996. A rat model of infection by Salmonella typhimurium or Salmonella enteritidis. Journal of Applied Bacteriology 81, 651±656.17. Wall SK, Zhang J, Rostagno MH, Ebner P. 2010. D. Phage therapy to reduce preprocessing Salmonella infections in market-weight swine. Appl. Environ. Microbiol. 76, 48-53.18. Abedon ST. 2011. Lysis from without. Bacteriophage 1: 1-4.Zastrzeżenia patentowe1. Szczep bakteriofaga specyficzny wobec bakterii należących do rodzaju Salmonella, wybrany ze szczepów zdeponowanych w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerami depozytowymi: F/00114, F/00115, F/00116, F/00117.
- 2. Szczep bakteriofaga, wybranego ze szczepów zdeponowanych w Polskiej Kolekcji Mikroorganizmów pod numerami depozytowymi: F/00114, F/00115, F/00116, F/00117, do zastosowania jako preparat przeciwbakteryjny, służący do zwalczania bakterii Salmonella.
- 3. Szczep bakteriofaga do zastosowania według zastrz. 2, znamienny tym, że zwalczane bakterie należą do gatunku Salmonella enterica.
- 4. Szczep bakteriofaga do zastosowania według zastrz. 3, znamienny tym, że zwalczane bakterie należą do podgatunku Salmonella enterica ssp. enterica.
- 5. Szczep bakteriofaga do zastosowania według zastrz. 2, znamienny tym, że do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych wykorzystuje się całe wiriony bakteriofaga wirulentnego w preparatach zawierających jednego faga.
- 6. Szczep bakteriofaga do zastosowania według zastrz. 2, znamienny tym, że do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych wykorzystuje się koktajl zawierający kilka lub kilkanaście aktywnych bakteriofagów.
- 7. Szczep bakteriofaga do zastosowania według zastrz. 2, znamienny tym, że do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych wykorzystuje się oczyszczone fagowe białka strukturalne, jak i enzymatyczne, zwłaszcza enzymy lityczne w postaci lizozymu albo endolizyny, albo egzopolisacharydazy.
- 8. Szczep bakteriofaga do zastosowania według zastrz. 2, znamienny tym, że preparatami przeciwbakteryjnymi, są preparaty służące do leczenia zakażeń wywołanych przez pałeczki Salmonella.
- 9. Szczep bakteriofaga do zastosowania według zastrz. 2, znamienny tym, że preparatami przeciwbakteryjnymi, są preparaty służące do zapobiegania zakażeniom wywołanym przez pałeczki Salmonella.
- 10. Szczep bakteriofaga do zastosowania według zastrz. 2, znamienny tym, że preparatami przeciwbakteryjnymi, są preparaty służące do eliminowania pałeczek Salmonella z powierzchni biotycznych albo abiotycznych.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL430168A PL241129B1 (pl) | 2019-06-07 | 2019-06-07 | Szczepy bakteriofagów specyficzne wobec bakterii należących do rodzaju Salmonella oraz ich zastosowanie do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| PL430168A PL241129B1 (pl) | 2019-06-07 | 2019-06-07 | Szczepy bakteriofagów specyficzne wobec bakterii należących do rodzaju Salmonella oraz ich zastosowanie do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL430168A1 PL430168A1 (pl) | 2020-12-14 |
| PL241129B1 true PL241129B1 (pl) | 2022-08-08 |
Family
ID=73727725
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL430168A PL241129B1 (pl) | 2019-06-07 | 2019-06-07 | Szczepy bakteriofagów specyficzne wobec bakterii należących do rodzaju Salmonella oraz ich zastosowanie do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| PL (1) | PL241129B1 (pl) |
-
2019
- 2019-06-07 PL PL430168A patent/PL241129B1/pl unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| PL430168A1 (pl) | 2020-12-14 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Oliveira et al. | In vivo efficiency evaluation of a phage cocktail in controlling severe colibacillosis in confined conditions and experimental poultry houses | |
| JP5613767B2 (ja) | 新規なバクテリオファージ及びそれを含む抗菌組成物 | |
| Porter et al. | In vitro evaluation of a novel bacteriophage cocktail as a preventative for bovine coliform mastitis | |
| Tao et al. | Characterization of a broad-host-range lytic phage SHWT1 against multidrug-resistant Salmonella and evaluation of its therapeutic efficacy in vitro and in vivo | |
| JP5103531B2 (ja) | 新規バクテリオファージおよびこれを含む抗菌組成物 | |
| Li et al. | Isolation, characterization and application of an alkaline resistant virulent bacteriophage JN01 against Escherichia coli O157: H7 in milk and beef | |
| Islam et al. | Application of a novel phage ZPAH7 for controlling multidrug-resistant Aeromonas hydrophila on lettuce and reducing biofilms | |
| JP5666016B2 (ja) | 新規バクテリオファージ及びそれを含む抗菌組成物 | |
| Kosznik-Kwaśnicka et al. | Efficacy and safety of phage therapy against Salmonella enterica serovars Typhimurium and Enteritidis estimated by using a battery of in vitro tests and the Galleria mellonella animal model | |
| JP2011514802A (ja) | 新規バクテリオファージおよびこれを含む抗菌組成物 | |
| CN111690620B (zh) | 一株魏氏梭菌噬菌体、其噬菌体组合物及其应用 | |
| CN101519651B (zh) | 一种福氏志贺氏菌噬菌体菌株及其应用 | |
| Aprea et al. | The applications of bacteriophages and their lysins as biocontrol agents against the foodborne pathogens Listeria monocytogenes and Campylobacter: An updated look | |
| CN115717126A (zh) | 一种鸭耐药性大肠杆菌噬菌体、其噬菌体组合物及其应用 | |
| KR101206408B1 (ko) | 살모넬라 및 대장균 о157 균주를 동시에 사멸시킬 수 있는 박테리오파지 및 이를 포함하는 세균 사멸용 조성물 | |
| Necel et al. | What, how, and why?–anti-EHEC phages and their application potential in medicine and food industry | |
| WO2013024304A1 (en) | Bacteriophages | |
| Ahmed et al. | Bacteriophage therapy revisited | |
| Sarangi et al. | Isolation, characterization and antibiotic sensitivity test of pathogenic Listeria species in livestock, poultry and farm environment of Odisha. | |
| Chandra et al. | Isolation of a bacteriophage against Salmonella Dublin and determination of its physical resistance under varied in vitro conditions | |
| CN110964700A (zh) | 一株马流产沙门氏菌噬菌体及其应用 | |
| AlShaheeb et al. | Salmonella enterica species isolated from local foodstuff and patients suffering from foodborne illness: Surveillance, antimicrobial resistance and molecular detection | |
| Smirnov et al. | Perspectives of the use of bacteriophages in agriculture, food and processing industries | |
| PL241129B1 (pl) | Szczepy bakteriofagów specyficzne wobec bakterii należących do rodzaju Salmonella oraz ich zastosowanie do wytwarzania preparatów przeciwbakteryjnych | |
| CN115820568B (zh) | 一株鸭疫里默氏杆菌噬菌体pt15、其噬菌体组合物及其应用 |