PL242021B1 - Związki, pochodne lucyferyny, sposób ich wytwarzania i ich zastosowanie - Google Patents

Związki, pochodne lucyferyny, sposób ich wytwarzania i ich zastosowanie Download PDF

Info

Publication number
PL242021B1
PL242021B1 PL437029A PL43702921A PL242021B1 PL 242021 B1 PL242021 B1 PL 242021B1 PL 437029 A PL437029 A PL 437029A PL 43702921 A PL43702921 A PL 43702921A PL 242021 B1 PL242021 B1 PL 242021B1
Authority
PL
Poland
Prior art keywords
formula
weight
parts
nitroxyl
compounds
Prior art date
Application number
PL437029A
Other languages
English (en)
Other versions
PL437029A1 (pl
Inventor
Marcin Szala
Aleksandra Grzelakowska
Jolanta Kolińska
Radosław Podsiadły
Julia Modrzejewska
Original Assignee
Politechnika Lodzka
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Politechnika Lodzka filed Critical Politechnika Lodzka
Priority to PL437029A priority Critical patent/PL242021B1/pl
Publication of PL437029A1 publication Critical patent/PL437029A1/pl
Publication of PL242021B1 publication Critical patent/PL242021B1/pl

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K11/00—Luminescent materials, e.g. electroluminescent or chemiluminescent
    • C09K11/06—Luminescent materials, e.g. electroluminescent or chemiluminescent containing organic luminescent materials
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N21/00—Investigating or analysing materials by the use of optical means, i.e. using sub-millimetre waves, infrared, visible or ultraviolet light
    • G01N21/75—Systems in which material is subjected to a chemical reaction, the progress or the result of the reaction being investigated
    • G01N21/76—Chemiluminescence; Bioluminescence
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C09—DYES; PAINTS; POLISHES; NATURAL RESINS; ADHESIVES; COMPOSITIONS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; APPLICATIONS OF MATERIALS NOT OTHERWISE PROVIDED FOR
    • C09K—MATERIALS FOR MISCELLANEOUS APPLICATIONS, NOT PROVIDED FOR ELSEWHERE
    • C09K2211/00—Chemical nature of organic luminescent or tenebrescent compounds
    • C09K2211/10—Non-macromolecular compounds
    • C09K2211/1018—Heterocyclic compounds
    • C09K2211/1025—Heterocyclic compounds characterised by ligands
    • C09K2211/1029—Heterocyclic compounds characterised by ligands containing one nitrogen atom as the heteroatom
    • C09K2211/1037—Heterocyclic compounds characterised by ligands containing one nitrogen atom as the heteroatom with sulfur

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Plasma & Fusion (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Materials Engineering (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Investigating Or Analysing Materials By The Use Of Chemical Reactions (AREA)

Abstract

Przedmiotem wynalazku są nowe związki, pochodne lucyferyny, o wzorze 1, w którym R<sup>1</sup> oznacza grupę alkilową o liczbie atomów węgla od 1 — 6 w postaci łańcucha prostego, rozgałęzionego lub cykloalkilowego, a R<sup>2</sup> oznacza atom wodoru, fluoru, chloru, bromu lub jodu. Przedmiotem wynalazku jest także sposób otrzymywania tych związków oraz ich zastosowanie.

Description

Przedmiotem wynalazku są nowe związki, pochodne lucyferyny, sposób ich otrzymywania oraz zastosowanie.
Lucyferyny jest to grupa związków chemicznych obecnych w organizmach żywych, zdolnych do emitowania światła na drodze bioluminescencji.
Z czasopism: Journal of the American Chemical Society, 2015, 137 (24), 7592-7595, Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2006, 16 (2), 331-337, European Journal of Medicinal Chemistry, 2015, 94, 140-148, Chemistry - A European Journal, 2016, 22 (27), 9330-9337, Chemical Communications, 2018, 54 (14), 1774-1777 znane są pochodne estru metylowego lucyferyny, o wzorze a
gdzie R1 oznacza grupę hydroksylową lub metoksylową, a także sposób ich otrzymywania polegający na reakcji lucyferyny z pirydyną oraz DCC (A/,A/-dicykloheksylokarbodiimidem) w metanolu w temperaturze pokojowej w czasie 3 godzin w atmosferze gazu obojętnego, lub też na reakcji lucyferyny z TMSCHN2 (trimetylosililodiazometanem) w mieszaninie toluen/metanol 1 :7 v/v w temperaturze pokojowej w czasie 2 godzin.
Z czasopisma Angewandte Chemie - International Edition, 2014, 53 (48), 13059-13063 znane są pochodne estrowe lucyferyny, o wzorze b
wzór b w którym R1 oznacza grupę metylową lub etylową.
Z opisu zgłoszenia patentowego WO2014/162157 A1 znane są związki, pochodne lucyferyny, o wzorze c
wzór c w którym R1 oznacza atom wodoru lub podstawioną grupę alkilową, R2 oznacza podstawioną grupę hydroksylową, podstawioną grupę aminową, podstawioną grupę tiolową, podstawioną grupę alkilową lub podstawioną grupę arylową, R3 oznacza grupę karboksylową lub grupę karboksylową podstawioną łańcuchem C1-6 alkilowym, M oznacza atom tlenu lub atom siarki lub grupę NR4, w której R4 oznacza atom wodoru, podstawioną grupę alkilową, podstawioną grupę alkenylową, podstawioną grupę arylową, podstawioną grupę heteroarylową lub podstawioną grupę heterocykliczną, X oznacza podstawioną grupę alkenylenową, podstawioną grupę alkinylenową, podstawioną grupę arylową lub ich kombinację grupy alkilenokarbonylowej, n oznacza 0, 1, 2, 3, V i Y oznaczają niezależne od siebie CR5 lub atom azotu, W i Z oznaczają niezależne od siebie CR7, atom siarki lub atom tlenu, R5 oznacza atom wodoru,
PL 242021 Β1 podstawioną grupę hydroksylową, podstawioną grupę aminową lub podstawioną grupę alkilową, R7 oznacza atom wodoru, podstawioną grupę alkilową lub podstawioną grupę arylową.
Nitroksyl (HNO), według terminologii IUPAC azanon, jest jednym z przedstawicieli reaktywnych form azotu. Powstajejako produkt jednoelektronowej redukcji NO*.
W celu detekcji nitroksylu w układach biologicznych stosuje się próbniki z odpowiednią grupą reaktywną. W ostatnim czasie jednym z takich ugrupowań są pochodne z grupą merkaptooctową.
Znane są próbniki fluorescencyjne do oznaczania nitroksylu, takie jak pochodne kumaryny (czasopismo Journal of the American Chemical Society, 2017, 139 (51), 18476-18479), opis zgłoszenia patentowego US2020/0140452) oraz pochodne fluoresceiny (czasopismo Journal of the American Chemical Society, 2017, 139 (51), 18476-18479, opis zgłoszenia patentowego US2020/0140452).
Celem wynalazku jest otrzymanie nowych związków - pochodnych lucyferyny, przeznaczonych do detekcji fluorescencyjnej nitroksylu (HNO).
Przedmiotem wynalazku są związki, pochodne lucyferyny, o wzorze 1
w którym R1 oznacza grupę alkilową o liczbie atomów węgla od 1-6 w postaci łańcucha prostego, rozgałęzionego lub cykloalkilowego, a R2 oznacza atom wodom, fluoru, chloru, bromu lub jodu.
Sposób otrzymywania związków o wzorze 1, określonych powyżej, według wynalazku polega na tym, że ester metylowy pochodnej lucyferyny, o wzorze 2
w którym R1 oznacza grupę alkilową o liczbie atomów węgla 1-6 w postaci łańcucha prostego, rozgałęzionego lub cykloalkilowego, zaś R2 oznacza atom wodoru, fluoru, chloru, bromu lub jodu, poddaje się reakcji z roztworem kwasu 2-metylo-2-(trifenylo-X4-sulfanylo)propionowego o wzorze 3
wzór 3 w bezwodnym dichlorometanie, stosując 1 część wagową związku o wzorze 2 / 1 część wagową kwasu o wzorze 3 rozpuszczonego w bezwodnym dichlorometanie, po czym dodaje się chlorowodorek A/-(3-dimetyloaminopropylo)-A/’-etylokarbodiimidu (chlorowodorek EDC) oraz 4-(dimetyloamino)pirydynę (DMAP), stosując EDC i DMAP w ilościach odpowiednio 2,0-6,0 części wagowych i 0,2-0,6 części wagowych / 1 część wagową związku o wzorze 2 i całość miesza w temperaturze pokojowej w czasie 2-16 godzin w atmosferze argonu. Następnie całość przemywa się trzykrotnie nasyconym wodnym roztworem chlorku sodu, fazę organiczną suszy za pomocą siarczanu magnezu(VI) i po odparowaniu do sucha pozostałość rozpuszcza się w chloroformie, stosując 0,2-2,0 części Wagowych chloroformu / 1 część wagową związku o wzorze 2, dodaje kwas trifluorooctowy oraz trietylosilan w ilościach odpowiednio 5,0-20,0 części wagowych i 5,0-10,0 części wagowych / 1 część wagową związku o wzorze 2 i miesza całość w temperaturze pokojowej w czasie 1-3 godziny. Po odparowaniu pozostałości rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem, surowe produkty oczyszcza się, stosując chromatografię kolumnową, w której fazę ruchomą stanowi mieszanina dichlorometanu i metanolu o stosunku objętościowym składników 30 : 1 ν/ν.
Zastosowanie według wynalazku polega na tym, że związki o wzorze 1, określone powyżej, stosuje się jako fluorescencyjne próbniki do selektywnej detekcji nitroksylu (HNO). Zastosowanie związków określonych powyżej jako próbników do detekcji nitroksylu polega na tym, że związki te poddaje się reakcji z substancję badaną na obecność nitroksylu, zawierającą 0,03-100% masowych nitroksylu w stosunku do masy próbnika, w środowisku mieszaniny acetonitrylu i 0,1 M wodnego roztworu buforu fosforanowego o pH 5,7-9,0 użytych w stosunku objętościowym 1 : 9 ν/ν, w czasie inkubacji co najmniej 30 minut, po czym identyfikuje się produkt tej reakcji i zidentyfikowanie produktu jako produktu utlenienia próbnika nitroksylem czyli estru D-lucyferyny oznacza, że badana substancja stanowi lub zawiera nitroksyl.
Związki o wzorze 1 reagują stechiometrycznie z nitroksylem i dlatego są znacznie lepszymi próbnikami do detekcji nitroksylu niż stosowane dotychczas do tego celu próbniki. Związki o wzorze 1 umożliwiają detekcję nitroksylu obok reagentów z grupy obejmującej nadtlenek wodoru, kwas chlorowy(I), nadtlenoazotyn, anion wodorosiarczkowy, anion siarczkowy, anion azotanowy(III), anion siarczanowy(IV), L-cysteina, glutation.
Przedmiot wynalazku ilustrują poniższe przykłady z powołaniem się na rysunek, na którym fig. 1 przedstawiono chromatogramy oraz wykresy zmian stężenia próbników stosowanych w przykładzie III, potwierdzające powstanie produktów utlenienia tych próbników nitroksylem, fig. 2 ilustruje zmiany intensywności fluorescencji przy długości fali 542 nm i długości fali 546 nm próbników stosowanych w przykładzie IV po dodaniu nitroksylu, zaś fig. 3 ilustruje wykres relatywnej intensywności fluorescencji, przy długości fali 542 nm i długości fali 546 nm próbników stosowanych w przykładzie V po dodaniu nitroksylu, w obecności odpowiednio nadtlenku wodoru, nadtlenoazotynu, kwasu chlorowego(I), wodorosiarczku sodu, siarczku sodu, azotanu(III) sodu, siarczanu(IV) sodu, hydroksyloaminy, L-cysteiny, glutationu.
Części podane w przykładach oznaczają części wagowe.
Przykład I
0,30 części estru metylowego pochodnej lucyferyny o wzorze 2, w którym R1 oznacza grupę metylową, a R2 oznacza atom wodoru, poddano reakcji z 0,30 części kwasu 2-metylo-2-(trifenylo-λ4-sulfanylo)propionowego o wzorze 3 rozpuszczonego w 0,15 częściach bezwodnego dichlorometanu, a następnie dodano 1,80 części chlorowodorku N-(3-dimetyloaminopropylo)-N'-etylokarbodiimidu (chlorowodorek EDC) oraz 0,12 części 4-(dimetyloamino)pirydyny (DMAP) i mieszano w temperaturze pokojowej przez 16 godzin w atmosferze argonu. Następnie całość przemyto trzykrotnie nasyconym wodnym roztworem chlorku sodu, fazę organiczną osuszono za pomocą siarczanu magnezu(VI) i odparowano do sucha. Pozostałość rozpuszczono w 0,15 częściach chloroformu i dodano 6,00 części kwasu trifluorooctowego oraz 3,00 części trietylosilanu i mieszano w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Pozostałości rozpuszczalnika odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszczano, stosując chromatografię kolumnową, w której fazę ruchomą stanowiła mieszanina dichlorometanu i metanolu zmieszanych w stosunku 30 : 1 ν/ν.
Otrzymano 0,20 części związku o wzorze 1, w którym R1 oznaczało grupę metylową, a R2 oznaczało atom wodoru, w postaci jasnożółtego proszku (wydajność 66%) o temperaturze topnienia 71°C.
Widmo 1H NMR otrzymanego związku wykonane w chloroformie-d zawierało następujące sygnały: 3,73 (dd, J = 11,1, 9,7 Hz, 1H, CH2), 3,82 (dd, J = 11,2, 8,9 Hz, 1H, CH2), 3,86 (s, 3H,‘Ch3), 5,39 (t, J = 9,3 Hz, 1H, CH), 7,30 (dd, J = 8,9, 2,3 Hz, 1H, aromatyczny), 7,74 (d, J = 2,2 Hz, 1H, aromatyczny), 8,15 (d, J = 8,9 Hz, 1H, aromatyczny), oraz widmo MS (ESI): [M+H]+ = 397,0354 (100%) w pełni potwierdziły budowę otrzymanego związku.
Przykład II
0,30 części estru metylowego pochodnej lucyferyny o wzorze 2, w którym R1 oznacza grupę metylową, a R2 oznacza atom chloru, poddaje się reakcji z 0,30 części kwasu 2-metylo-2-(trifenylo-λ4-sulfanylo)propionowego o wzorze 3 rozpuszczonego w 0,15 częściach bezwodnego dichlorometanu, a następnie dodano 1,80 części chlorowodorku EDC oraz 0,12 części DMAP i mieszano w temperaturze pokojowej przez 16 godzin w atmosferze argonu. Następnie całość przemyto trzykrotnie nasyconym wodnym roztworem chlorku sodu, fazę organiczną osuszono za pomocą siarczanu magnezu(VI) i odparowano do sucha. Pozostałość rozpuszczono w 0,15 częściach chloroformu i dodano 6,00 części kwasu trifluorooctowego oraz 3,00 części trietylosilanu i całość mieszano w temperaturze pokojowej przez 2 godziny. Pozostałości rozpuszczalnika odparowano pod zmniejszonym ciśnieniem. Surowy produkt oczyszczano, stosując chromatografię kolumnową, w której fazę ruchomą stanowiła mieszanina dichlorometanu i metanolu zmieszanych w stosunku 30 : 1 ν/ν.
Otrzymano 0,20 części związku o wzorze 1, w którym R1 oznaczało grupę metylową, a R2 oznaczało atom chloru, w postaci jasnożółtego proszku (wydajność 67%) o temperaturze topnienia 56°C. Widmo 1H NMR wykonane w chloroformie-d zawierało następujące sygnały: 3,74 (dd, J = 11,2, 9,7 Hz, 1H, CH2), 3,84 (dd, J = 11,2, 8,9 Hz, 1H, CH2), 3,87 (s, 3H, CH3), 5,39 (dd, J = 9,7, 9,0 Hz, 1H, CH), 7,38 (d, J = 8,8 Hz, 1H, aromatyczny), 8,06 (d, J = 8,8 Hz, 1H, aromatyczny), widmo MS (ESI): [M+H]+ = 430,9964 (100%) w pełni potwierdziło budowę otrzymanego związku.
Przykład III
Przygotowano 7,92 x 10-5 części związku o wzorze 1, w którym R1 oznaczało grupę metylową, a R2 oznaczało atom wodoru, oznaczonego jako próbnik P1 oraz 8,58 x 10-5 części związku o wzorze 1, w którym R1 oznaczało grupę metylową, a R2 oznaczało atom chloru, oznaczonego jako próbnik P2, co stanowiło 20 mM próbnika P1 oraz 20 mM próbnika P2, z których każdy rozpuszczono w 0,15 ml acetonitrylu oraz 1,35 ml 0,1 M wodnego roztworu buforu fosforanowego o pH = 7,4 oraz dodano odpowiednio 4, 8, 12, 16, 20, 30, 40 mM nitroksylu (HNO) jako roztwór soli Angeliego - Na2(N2O3) w 0,1 M wodnym roztworze wodorotlenku sodu. Następnie badano ilość powstającego produktu reakcji próbnika P1 oraz próbnika P2 z nitroksylem, po czasie inkubacji 30 minut, na chromatografie firmy Shimadzu z detektorem DAD (model SPD-M20A), kolumna Kinetex Biphenyl firmy Phenomenex (50 mm x 4,6 mm) o średnicy ziarna 2,6 μm, faza ruchoma: woda + 0,1% TFA - acetonitryl + 0,1% TFA o gradientowym przepływie od 10 do 100% acetonitryl + 0,1% TFA przez 10 minut, ν/ν, szybkość przepływu 1,5 ml/min, objętość pobieranej próbki 10 μl.
Przeprowadzony eksperyment potwierdził powstawanie produktu utlenienia próbnika P1 z nitroksylem, jakim był ester metylowy D-lucyferyny oraz produktu utlenienia próbnika P2 z nitroksylem jakim był ester metylowy 7-chloro-D -lucyferyny, a tym samym potwierdził zastosowanie w/w próbników do detekcji nitroksylu (fig. 1 rysunku).
Przykład IV
Przygotowano 3,96 x 10-5 części związku o wzorze 1, w którym R1 oznaczało grupę metylową, a R2 oznaczało atom wodoru, oznaczonego jako próbnik P1 oraz 4,29 x 10-5 części związku o wzorze 1, w którym R1 oznaczało grupę metylową, a R2 oznaczało atom chloru, oznaczonego jako próbnik P2, co stanowiło 10 mM próbnika P1 i 10 mM próbnika P2, z których każdy rozpuszczono w 0,30 ml acetonitrylu oraz 2,70 ml 0,1 M wodnego roztworu buforu fosforanowego o pH = 7,4 oraz dodano odpowiednio 1, 2, 3, 4, 5, 6, 8, 10, 20, 30, 40, 50 mM HNO jako roztwór soli Angeliego - Na2(N2O3) w 0,1 M wodnym roztworze wodorotlenku sodu. Następnie badano zmiany widma fluorescencji w zależności od ilości dodanego HNO, po czasie inkubacji 30 minut, na spektrofluorymetrze firmy Edinburgh Instruments (model FLS920), zakres rejestracji widma 360-660 nm przy długości wzbudzenia wynoszącym 332 nm dla próbnika P1 oraz zakres rejestracji widma 410-680 nm przy długości wzbudzenia wynoszącym 397 nm dla próbnika P2. Przeprowadzony eksperyment potwierdził zastosowanie próbnika P1 oraz próbnika P2 jako fluorescencyjnej sondy do detekcji HNO (fig. 2 rysunku).
Przykład V
Przygotowano 3,96 x 10-5 części związku o wzorze 1, w którym R1 oznaczało grupę metylową, a R2 oznaczało atom wodoru, oznaczonego jako próbnik P1 oraz 4,29 x 10-5 części związku o wzorze 1, w którym R1 oznaczało grupę metylową, a R2 oznaczało atom chloru, oznaczonego jako próbnik P2, co stanowiło 10 mM próbnika P1 oraz 10 mM próbnika P2, z których każdy rozpuszczono w 0,30 ml acetonitrylu oraz 2,70 ml 0,1 M wodnego roztworu buforu fosforanowego o pH = 7,4 oraz dodano 100 mM odpowiednio nadtlenku wodoru, nadtlenoazotynu, kwasu chlorowego(I), wodorosiarczku sodu, siarczku sodu, azotanu(III) sodu, siarczanu(IV) sodu, hydroksyloaminy lub 500 mM odpowiednio L-cysteiny, glutationu oraz 10 mM HNO jako roztwór soli Angeliego - Na2(N2O3) w 0,1 M wodnym roztworze wodorotlenku sodu, zwanych dalej analitami. Następnie badano zmianę widma fluorescencji w zależności od dodanej ilości analitów, po czasie inkubacji 30 minut, na spektrofluorymetrze firmy Edinburgh Instruments (model FLS920), zakres rejestracji widma 360-660 nm przy długości wzbudzenia wynoszącym
PL 242021 Β1
332 nm dla próbnika P1 oraz zakres rejestracji widma 410-680 nm przy długości wzbudzenia wynoszącym 397 nm dla próbnika P2. Przeprowadzony eksperyment potwierdził selektywność próbnika P1 oraz próbnika P2 jako fluorescencyjnej sondy do detekcji nitroksylu HNO względem innych analitów (fig. 3 rysunku).

Claims (4)

1. Związki, pochodne lucyferyny, o wzorze 1
w którym R1 oznacza grupę alkilową o liczbie atomów węgla od 1-6 w postaci łańcucha prostego, rozgałęzionego lub cykloalkilowego, a R2 oznacza atom wodoru, fluoru, chloru, bromu lub jodu.
2. Sposób otrzymywania związków o wzorze 1, określonych w zastrz. 1, znamienny tym, że ester metylowy pochodnej lucyferyny, o wzorze 2
w którym R1 oznacza niezależną od siebie grupę alkilową o liczbie atomów węgla 1-6 w postaci łańcucha prostego, rozgałęzionego lub cykloalkilowego, zaś R2 oznacza atom wodoru, fluoru, chloru, bromu lub jodu, poddaje się reakcji z roztworem kwasu 2-metylo-2-(trifenylo-X4-sulfanylo)propionowego o wzorze 3
h3c ch3 wzór 3 w bezwodnym dichlorometanie, stosując 1 część wagową związku o wzorze 2 /1 część wagową kwasu o wzorze 3 rozpuszczonego w bezwodnym dichlorometanie, po czym dodaje się chlorowodorek A/-(3-dimetyloaminopropylo)-A/’-etylokarbodiimidu (chlorowodorek EDC) oraz 4-(dimetyloamino)pirydynę (DMAP) stosując EDC i DMAP w ilościach odpowiednio 2,0-6,0 części wagowych i 0,2-0,6 części wagowych /1 część wagową związku o wzorze 2 i całość miesza w temperaturze pokojowej w czasie 2-16 godzin w atmosferze argonu, następnie przemywa się trzykrotnie nasyconym wodnym roztworem chlorku sodu, fazę organiczną suszy za pomocą siarczanu magnezu(VI) i po odparowaniu do sucha pozostałość rozpuszcza się w chloroformie, stosując 0,2-2,0 części wagowych chloroformu / 1 część wagową związku o wzorze 2, dodaje kwas trifluorooctowy oraz trietylosilan w ilościach odpowiednio 5,0-20,0 części wagowych i 5,0-10,0 części wagowych / 1 część wagową związku o wzorze 2 i miesza całość w temperaturze pokojowej w czasie 1-3 godziny i po odparowaniu pozostałości rozpuszczalnika pod zmniejszonym ciśnieniem, surowe produkty oczyszcza się, stosując chromatografię kolumnową, w której fazę ruchomą stanowi mieszanina dichlorometanu i metanolu o stosunku objętościowym składników 30 : 1 ν/ν.
3. Zastosowanie związków o wzorze 1, określonych w zastrzeżeniu 1 jako fluorescencyjnych próbników do selektywnej detekcji nitroksylu.
4. Zastosowanie według zastrz. 3, znamienne tym, że związki o wzorze 1 określone w zastrzeżeniu 1, poddaje się reakcji z substancję badaną na obecność nitroksylu, zawierającą 0,03-100% masowych nitroksylu w stosunku do masy próbnika, w środowisku mieszaniny acetonitrylu i 0,1 M wodnego roztworu buforu fosforanowego o pH 5,7-9,0, użytych w stosunku objętościowym 1 : 9 ν/ν w czasie inkubacji co najmniej 30 minut, po czym identyfikuje się produkt tej reakcji i zidentyfikowanie produktu jako produktu utlenienia próbnika nitroksylem czyli estru D-lucyferyny oznacza, że badana substancja stanowi lub zawiera nitroksyl.
PL437029A 2021-02-17 2021-02-17 Związki, pochodne lucyferyny, sposób ich wytwarzania i ich zastosowanie PL242021B1 (pl)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL437029A PL242021B1 (pl) 2021-02-17 2021-02-17 Związki, pochodne lucyferyny, sposób ich wytwarzania i ich zastosowanie

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PL437029A PL242021B1 (pl) 2021-02-17 2021-02-17 Związki, pochodne lucyferyny, sposób ich wytwarzania i ich zastosowanie

Publications (2)

Publication Number Publication Date
PL437029A1 PL437029A1 (pl) 2022-08-22
PL242021B1 true PL242021B1 (pl) 2023-01-09

Family

ID=83723859

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
PL437029A PL242021B1 (pl) 2021-02-17 2021-02-17 Związki, pochodne lucyferyny, sposób ich wytwarzania i ich zastosowanie

Country Status (1)

Country Link
PL (1) PL242021B1 (pl)

Also Published As

Publication number Publication date
PL437029A1 (pl) 2022-08-22

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US8143069B2 (en) Fluorescent probe and method of measuring hypochlorite ion
Xu et al. A water-soluble BODIPY derivative as a highly selective “Turn-On” fluorescent sensor for H2O2 sensing in vivo
Niu et al. A long-wavelength-emitting fluorescent probe for simultaneous discrimination of H2S/Cys/GSH and its bio-imaging applications
US7964721B2 (en) Ratiometric fluorescent chemosensor for selective detection of Hg (II) ions
US7087766B2 (en) Reagents for the quantitation of active oxygen
Zhang et al. An iminocoumarin benzothiazole-based fluorescent probe for imaging hydrogen sulfide in living cells
JP5228190B2 (ja) パーオキシナイトライト蛍光プローブ
US7524876B2 (en) Luciferin derivatives
Cao et al. A ratiometric fluorescent probe for detection of endogenous and exogenous hydrogen sulfide in living cells
Deng et al. BODIPY based phenylthiourea derivatives as highly selective MeHg+ and Hg2+ ions fluorescent chemodosimeter and its application to bioimaging
Song et al. Investigation of thiolysis of NBD amines for the development of H2S probes and evaluating the stability of NBD dyes
Ismail et al. A julolidine-fused coumarin-NBD dyad for highly selective and sensitive detection of H2S in biological samples
Zhang et al. A ratiometric fluorescent probe for sensitive and selective detection of hydrogen sulfide and its application for bioimaging
EP1069121B1 (en) Reagent for singlet oxygen determination
Wang et al. Novel turn-on fluorescence sensor for detection and imaging of endogenous H2S induced by sodium nitroprusside
Pei et al. Colorimetric and fluorescent determination of sulfide and sulfite with kinetic discrimination
Li et al. A nile red-based near-infrared fluorescent probe for endogenous hydrogen polysulfides in living cells
Zhang et al. A novel fluorescent probe based on the flexible dipicolylamine: Recognizing zinc (II) in aqueous solution and imaging in living cell
Grzelakowska et al. Novel fluorescent probes for L-cysteine based on the xanthone skeleton
Cao et al. A new simple ESIPT-based fluorescent probe for rapid detection of cysteine with high sensitivity and specificity and bioimaging in living cells
KR101359508B1 (ko) 히드라진 선택성을 갖는 화학센서 및 이를 이용한 히드라진 검출방법
Lee et al. Anthracene derivatives bearing sulfur atoms or selenium atoms as fluorescent chemosensors for Cu2+ and Hg2+: different selectivity induced from ligand immobilization onto anthracene
Gu et al. Development of a highly selective H2S fluorescent probe and its application to evaluate CSE inhibitors
Kim et al. Investigation of a sensing approach based on a rapid reduction of azide to selectively measure bioavailability of H2S
CN108863961A (zh) 一种三氮唑类蒽醌衍生物银离子荧光探针及其制备方法和应用