PL 439344 A1 2/17 Preparat przeciwbakteryjny z biomasy opadlych lisci drzew i sposób jego wytwarzania Przedmiotem wynalazku jest preparat przeciwhakteryjny z biomasy opadlych lisci wybranych gatunków drzew (pochodzenia naturalnego) przeznaczony do zastosowania do leczenia infekcji bakteryjnych, zwlaszcza infekcji bakteryjnych wywolanych przez bakterie z rodzaju Staphylococcus, u ludzi i zwierzat, oraz sposób jego wytwarzania. Przez tysiace lat rosliny lecznicze odgrywaly znaczaca role w leczeniu wielu schorze11, w tym chorób zakaznych. Niektóre naturalnie wystepujace zwiazki chemiczne sluzyly jako podstawa do opracowywania duzego odsetka klinicznie sprawdzonych leków. Wspólczesna medycyna wykorzystuje rosliny, które sa bogate w wiele róznych metabolitów wtórnych, takich jak garhniki, terpenoidy, alkaloidy i flawonoidy, o potwierdzonych badaniami wlasciwosciach przeciwdrobnoustrojowych. Stosowanie i wyszukiwanie leków i suplementów diety pochodzacych z roslin do leczenia chorób zakaznych, czy infekcji jest takze ohecnie punktem zainteresowania srodowiska medycznego. Choroby zakazne pozostaja istotna przyczyna zachorowalnosci i umieralnosci na calym swiecie. Pomimo znacznych postepów w mikrobiologii i wirnsologii tudziez mozliwosci kontroli drobnoustrojów, epidemii wywolanych przez patogeny lekooporne i nieznane wczesniej patogeny chorobotwórcze stanowia ogromne zagrozenie dla globalnego zdrowia publicznego. Te negatywne tendencje zdrowotne wymagaja globalnej inicjatywy na rzecz opracowania nowych strategii zapobiegania i leczenia chorób zakaznych, w tym przy wykorzystaniu produktów naturalnych. Od czasu pojawienia sie antybiotyków syntetycznych na samym poczatku XX wieku, stosowanie pochodnych roslinnych jako srodków przeciwdrobnoustrojowych stalo sie mniej popularne. Pojawiaja sie jednak powody, dla których zainteresowanie przeciwdrobnoustrojowa aktywnoscia ekstraktów roslinnych wzrasta. Istotna kwestia jest zjawisko opornosci bakterii na stosowane antybiotyki oraz rosnaca swiadomosc opinii publicznej dotyczaca nadmiernego naduzywania tradycyjnych antybiotyków. Ponadto, wiele osób jest zainteresowanych wieksza autonomia w zakresie opieki medycznej. PL 439344 A1 3/17 Zwiazki roslinne mozna nabyc bez recepty od dostawców ziól w sklepach z naturalnymi produktami spozywczymi. Do tej pory przebadano tysiace gatunków roslin pod katem ich aktywnosci wobec róznych szczepów bakterii in vitro, a wiele roslin leczniczych vvykazuje aktywnosc przeciwko szerokiej gamie hakte1ii Gram-dodatnich i Gram-ujemnych. Rosliny lecznicze oferuja znaczny potencjal do opracowania nowych terapii przeciwbakteryjnych i terapii wspomagajacych antybiotykoterapie. Znane jest takze stosowanie tzw. ,,naturalnych antybiotyków" ziolowych lub roslinnych, wsród któ1ych znajdujemy produkty spozywcze codziennego uzytku, którym tradycja ludowa przypisuje wlasciwosci antybakteryjne czy przeciwutleniajace. Przed pojawieniem sie na rynku antybiotyków to wlasnie tego typu produkty byly stosowane do zwalczania chorób. Mozemy do nich zaliczyc: czosnek, miód, olejek z oregano, imbir, zurawine, kurkume, czy chrzan. Obecnie wymienione produkty stosowane sa jako srodki wspomagajace, towarzyszace innym lekom w celu zwiekszenia odpornosci, glównie podczas sezonowych dolegliwosci takich jak przeziebienia, katar czy ból gardla. Infekcje bakteryjne sa jednym z powazniejszych problemów ludzkosci, który dotyka szczególnie regiony slabo rozwiniete i stanowi istotny czynnik obnizajacy jakosc zycia i zwiekszajacy smiertelnosc. Powszechne, czesto nieuzasadnione stosowanie antybiotyków poglebia ten problem. Pojawiaja sie coraz to nowe szczepy bakterii oporne na stosowane medykamenty, co dodatkowo komplikuje walke z infekcjami. Problem antybiotykoodpornych szczepów bakterii jest aktualnie bardzo szeroko omawiany w srodowisku naukowym, instytucjach leczniczych oraz w mediach publicznych. Istnieje dobrze uzasadniona opinia, ze na obecnym etapie rozwoju medycyny w krótkim czasie moze wyniknac powazny problem z wynalezieniem skutecznego srodka bakteriobójczego pochodzenia syntetycznego pozwalajacego na prowadzenie bezpiecznej kuracji pacjentów, odkazania szpitali oraz leczenia zwierzat. Stad tez istnieje nieustajace zapotrzebowanie na alternatywne produkty, szczególnie pochodzenia naturalnego. Bakterie z rodziny Staphylococcus sa uwazane za jedne z najbardziej powszechnych i zarazem niebezpiecznych bakterii. Drobnoustroje te moga powodowac kilkadziesiat róznych chorób, poczawszy od chorób skóry oraz ukladu oddechowego, konczac na uszkodzeniu ukladu nerwowego i sepsie. PL 439344 A1 4/17 Wykorzystanie praktyczne roslin lub tez ich czesci w celach medycznych lub technicznych jest powszechnie znane. Zostalo ono równiez obiektem ochrony wlasnosci intelektualnej. Znane jest zastosowanie lisci roslin jako naturalnego surowca w róznego rodzaju zastosowaniach. i tak z opisu CN 105668684 A znane jest zastosowanie lisci feniksa jako adsorbentu antybiotyku i/lub zanieczyszcze11 organicznych w sciekach. Liscie te nie wymagaja szczególnej obróbki, co powoduje, ze latwo oddziela sie je od zbiornika wodnego, a w procesie adsorpcji nie powstaja zadne wtórne zanieczyszczenia. Z innego opisu wynalazku DE I 0345343 znany jest ekstrakt z lisci bluszczu o dzialaniu przeciwzapalnym. Produkt bedacy przedmiotem niniejszego wynalazku jako preparat z biomasy opadlych lisci idealnie wpisuje sie w ten aktualny trend, stanowiac skuteczne narzedzie w walce z infekcjami bakteryjnymi. Ze wzgledu na unikalne, nietypowe zródlo surowca jakim jest odpadowa biomasa opadlych lisci, powoduje. ze przedmiotowy produkt wykazuje przewage nad innymi naturalnymi preparatami antybakteryjnymi. Uzyskane wyniki badan w przedmiotowym wynalazku wskazuja na mozliwosc zastosowania preparatu otrzymanego z biomasy opadlych lisci wybranych gatunków drzew jako srodka przeciwbakteryjnego. Proponowany srodek bakteriobójczy pochodzenia naturalnego cechuje sie ,vysoka aktywnoscia przeciwbakteryjna. Istotnym jest zastosowanie do jego produkcji latwo dostepnych w duzych ilosciach surowców naturalnych, które do tej pory nie znalazly szerokiego zastosowanie praktycznego i byly zwyczajowo traktowane jako odpady. Badania prowadzone przez zespól twórców koncentrowaly sie wokól pozyskiwania nowych substancji pochodzenia naturalnego o aktywnosci przeciwbakteryjnej. Jednym ze zródel takich substancji okazaly sie zebrane opadle liscie z drzew dwóch gatunków, Topoli bialej (Populus alba) i Olchy czarnej (Alnus glutinosa). Celem przedmiotowego wynalazku jest stworzenie preparatu z biomasy opadlych lisci Topoli bialej i Olchy czarnej do stosowania przeciw infekcjom bakteryjnym. PL 439344 A1 /17 Istote wynalazku stanowi preparat przeciwbakteryjny pochodzenia naturalnego, charakteryzujacy sie tym, ze jako skladnik aktywny zawiera ekstrakt z biomasy opadlych lisci Topoli bialej (Populus alba) i/lub Olchy czarnej (Alnus glutinosa). Preparat ma zastosowanie do leczenia infekcji bakteryjnych, zwlaszcza infekcji bakte1yjnych wywolanych przez bakterie z rodzaju Staphylococcus, u ludzi i zwierzat. Ze wzgledu na potwierdzone w badaniach wybiórcze dzialanie prep~u-at ma w szczególnosci zastosowanie do leczenia infekcji bakte1yjnych wywolanych przez bakterie gatunku Staphylococcus aureus. W zwiazku z brakiem toksycznego dzialania na organizmy zywe, w korzystnym wykonaniu wynalazku preparat jest przeznacLOny do podawania doustnego. W kolejnym wykonaniu wynalazku. preparat jest przeznacLOny do stosowania topowego w postaci masci lub roztworu w tym roztworów micelarnych, emulsji suspensJI. W innym wykonaniu wynalazku, preparat jest przeznaczony do zastosowania jako suplement diety. W jeszcze mnym wykonaniu wynalazku. preparat jest przeznaczony do zastosowania jako kosmeceutyk Korzystnie, wynalazek obejmuje preparat, który jest w postaci suchej pozostalosci po ekstrakcji suchych lisci topoli bialej i/lub olchy czarnej i odparowaniu rozpuszczalnika organicznego zastosowanego w procesie ekstrakcji. Preparat w postaci suchej pozostalosci moze byc podawany per se, na przyklad w kapsulce zelatynowej lub kapsulce z oplatka. Preparat moze tez byc podawany w postaci tabletki, w polaczeniu z dopuszczonymi do stosowania u ludzi substancjami pomocniczymi, takimi jak wypelniacze, substancje wiazace, substancje rozsadzajace, konserwanty, substancje poslizgowe, substancje antyadhezyjne i inne, stosowane w technice sporzadzania leków i znane specjalistom w tej dziedzinie. W innym wykonaniu preparat jest w postaci cieklej, na przyklad eliksiru, syropu lub zawiesiny, zawierajacych, oprócz suchej pozostalosci, ciekly nosnik taki jak woda, PL 439344 A1 6/17 alkohol. luh inny plyn oraz substancje pomocrncze takie jak srodki dyspergujace, emulgatory, konserwanty, substancje smakowe i zapachowe oraz inne niezbedne do uzyskania trwalego preparatu. W korzystnym wykonaniu, preparat zawiera sucha pozostalosc otrzymana z ekstraktu z lisci Topoli bialej w zakresie stezen od 1- 200 µg/tnl. W innym korzystnym ,,,ykonaniu, preparat zawiera sucha pozostalosc otrzymana z ekstraktu z lisci Olchy czarnej w zakresie stezef1 od 1 do- 30 µg/ml. Wynalazek obejmuje ponadto sposób otrzymywania preparatu zdefiniowanego powyzej, który obejmuje: a) suszenie biomasy zebranych lisci w temperaturze 3 7 °C przez trzy dni, b) mielenie suszu do uzyskania drobnego pylu, c) poddanie suszu procesowi ekstrakcji ciaglej seria rozpuszczalników organicznych do uzyskania ekstraktów, d) poddanie poszczególnych ekstraktów procesowi destylacji pod obnizonym cisnieniem w temperaturze nieprzekraczajacej 50°C az do calkowitego usuniecia rozpuszczalnika, e) wyizolowanie stalej pozostalosci, która stanowi wlasciwy preparat odpowiedni do stosowania. W jednym wykonaniu, jako material wyjsciowy w etapie a) stosuje sie liscie topoli bialej. W innym w,ykonaniu, w etapie a) stosuje sie liscie olchy czarnej. Rozpuszczalnik organiczny w etapie c) jest wybrany z grupy obejmujacej weglowodory, chloropochodne, alkohole. etery. estry. lotne kwasy organiczne. Korzystnie, sekwencja rozpuszczalników organicznych w etapie c) stanowi heksan, chloroform, metanol. PL 439344 A1 7/17 Zalety przedmiotowego wynalazku: - wykazuje specyficzna aktywnosc przeciwbakteryjna skierowana na bakterie z rodzaju Gronkowiec (Staphylococcus), wlaczajac w to szczepy kliniczne tego mikroorganizmu, - latwo i w duzych ilosciach dostepny surowiec, - wykorzystanie lisci, które sa biomasa odpadowa, - wysoka skutecznosc, niska toksycznosc, - zgodnosc z zasadami zrównowazonego rozwoju, - pochodzenie naturalne. Okreslenia stosowane powyzej oraz w opisie i zastrzezeniach patentowych, maja nastepujace znaczenie: MIC - minimalne stezenie powodujace zahamowanie wzrostu bakterii. Gronkowiec zlocisty - zamiennie uzywana nazwa Staphylococcus aureus. Pochodzenia naturalnego - oznacza z biomasy opadlych lisci drzew Topoli bialej (Populus alba) i/lub Olchy czarnej (Alnus glutinosa). Patogen - zamiennie drobnoustrój Preparat - oznacza drobny pyl, inaczej mial, inaczej suchy ekstrakt. Opis tabel: Tabela 1 - przedstawia wartosci MIC (µg/ml) testowanych preparatów wobec wybranych gatunków bakterii. Tabela 2 - przedstawia wartosci MIC (µg/ml) testowanych preparatów wobec wybranych gatunków bakterii rodzaju Staphylococcus. Tabela 3 - przedstawia badanie aktywnosci preparatów z lisci na klinicznych izolatach bakterii gronkowca zlocistego. PL 439344 A1 8/17 Wynalazek ilustruja nastepujace przyklady wykonania, nie stanowiace jego ograniczenia. Przyklad 1 Badania byly przeprowadzone na lisciach zebranych z róznych stanowisk w listopadzie 2014 i 2015 (dwa sezony). Zebrane liscie suszono w 37 °C przez trzy dni. Nastepnie susz zmielono uzyskujac drobny pyl (mialu), z którego w procesie ekstrakcji ciaglej seria (sekwencja) rozpuszczalników organicznych wybranych z grupy obejmujacej weglowodory, chloropochodne. alkohole. etery, estry, lotne kwasy organiczne uzyskano ekstrakty. Kou:ystnie, rozpuszczalnik organiczny stanowi heksan (lub frakcja z ropy naftowej o temperaturze wrzenia w zakresie nieprzekraczajacym od 30 do 150 °C). chloroform. metanol. Poszczególne ekstrakty zostaly poddane procesowi destylacji pod obnizonym cisnieniem w temperaturze nieprzekraczajacej 50°C az do calkowitego usuniecia rozpuszczalnika. Otrzymane pozostalosci (preparaty) zostaly wykorzystane w dalszych badaniach biologicznych. W celu okreslenia potencjalu antybakteryjnego, dla kazdego z dwóch preparatów wyznaczono wartosci MIC stosujac standardowa metode mikrorozciei1czen rekomendowana przez Instytut Standardów Klinicznych i Laboratoryjnych (CLSI). Uzyskane wyniki jednoznacznie wskazuja, ze uzyskane przez twórców preparaty najsilniej hamuja wzrost jednego z przebadanych gatunków bakterii, gronkowca zlocistego (Staphylococcus aureus) (Tabela 1 ). Z powodu tak silnej wybiórczosci preparatów, przeprowadzono dalsze badania, ale ograniczono sie tylko do bakterii z rodzaju gronkowiec. Najbardziej podatne na dzialanie preparatów okazaly sie dwa gatunki, Staphylococcus aureus i Staphylococcus auricularis (Tabela 2). PL 439344 A1 9/17 Przyklad 2 Analiza toksykologiczna preparatów z lisci Analiza zostala przeprowadzona na trzech liniach komórek ludzkich (HaCaT, BJ HepG2) oraz na rybkach z gatunku Danio rerio wykorzystanych jako model. Badania na komórkach wykazaly, ze testowane preparaty z lisci topoli w zakresie stezen I - 200 µg/ml nie wykazywaly toksycznego dzialania. Preparaty z olchy czarnej nie wykazywaly znaczacego toksycznego wplywu na komórki w zakresie stezen 1 do stezenia 30 µg/ml. Badania na rybach wykazaly, ze preparaty z topoli nie wplywaja na rozwój 1yb w stezeniach nawet do 500 mg/ml. Preparaty z olchy sa natomiast bezpieczne dla ryb w stezeniach do l 00 µg/rnl. Przyklad 3 Badanie aktywnosci preparatów z lisci na klinicznych izolatach bakterii gronkowca zlocistego (staphylococcus aureus) Wynik.i przedstawiono w tabeli 3 W aitosci MIC wyrazone sa w µg/ml, - oznacza brak aktywnosci, preparaty z lisci badano w zakresie steze11 3,9-1 OOO µg/rnl, antybiotyki stosowano w stezeniach 1,9-500 µg/rnl, 0,19-50 µg/ml, 0,01-5 µg/ml. Antybiotyki zastosowano jako kontrole pozytywne. Uzyskane wyniki wskazuja, ze badane preparaty hainuja wzrost badanych izolatów klinicznych. PL 439344 A1 /17 Otrzymany preparat: - ma zastosowanie do leczenia infekcji bakteryjnych u ludzi i zwierzat. W zwiazku z brakiem toksycznego dzialania na organizmy zywe, w korzystnym wykonaniu wynalazku preparat jest przeznaczony do podawania doustnego. - moze tez byc uzyty do stosowania topowego w postaci masc1 lub roztworn w tym roztworów micelarnych, emulsji i suspensji. - moze byc uzyty jako suplement diety lub kosmcccutyk. - preparat w postaci suchej pozostalosci moze byc podawany per se, na przyklad w kapsulce zelatynowej lub kapsulce z oplatka. - preparat moze tez byc podawany w postaci tabletki, w polaczeniu z dopuszczonymi do stosowania u ludzi substancjami pomocniczymi, takimi jak wypelniacze, substancje wiazace, substancje rozsadzajace, konserwanty, substancje poslizgowe, substancje anty adhezyjne i inne, stosowane w technice sporzadzania leków i znane specjalistom w tej dziedzinie. - preparat moze tez byc w postaci cieklej, na przyklad eliksirn, syropu lub zawiesiny, zawierajacych, oprócz suchej pozostalosci, ciekly nosnik taki jak woda, alkohol, lub inny plyn oraz substancje pomocnicze takie jak srodki dyspergujace, emulgatory, konserwanty, substancje smakowe i zapachowe oraz inne niezbedne do uzyskania trwalego preparatu. PL 439344 A1 11/17 Zastrzezenia patentowe 1. Preparat przeciwbakteryjny pochodzenia naturalnego znamienny tym, ze jako skladnik aktywny zawiera ekstrakt z biomasy opadlych lisci topoli bialej(Populus alba) i/lub olchy CLarnej (Alnus glutinosa). 2. Preparat zdefiniowany w zastrzezeniu I do zastosowania do leczenia infekcji bakteryjnych, zwlaszcza infekcji bakteryjnych wywolanych przez bakterie z rodzaju Staplylococcus. u ludzi i zwierzat 3. Preparat wedlug zastrz.2, znamienny tym, ze ma zastosowanie do leczenia infekcji bakteryjnych wywolanych przez bakterie Staphylococcus aureus. 4. Preparat wedlug zastrz.2, znamiennym tym, ze jest przeznaczony do podawania doustnego. . Preparat wedlug zastrz.2, znamienny tym, ze jest przeznaczony do stosowania topowego w postaci masci lub roztworu w tym roztworów micelarnych, emulsji i suspensJ1. 6. Preparat wedlug zastrz. 2, znamienny tym, ze ma zastosowanie jako suplement diety. 7. Preparat wedlug zastrz. 2. znamienny tym, ze ma zastosowanie jako kosmeceutyk. 8. Preparat wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze jest w postaci suchej pozostalosci otrzymanej po ekstrakcji lisci topoli bialej i/lub olchy czarnej i odparowaniu ekstraktu. 9. Preparat wedlug zastrz. 8. znamienny tym, ze zawiera sucha pozostalosc otrzymana z ekstraktu z lisci Topoli bialej w zakresie stezen od 1- 200 µg/ml. . Preparat wedlug zastrz. 7, znamienny tym, ze zawiera sucha pozostalosc otrzymana z ekstraktu z lisci Olchy czarnej w zakresie stezen 1- 30 µg/ml. 11. Preparat wedlug zastrz. 1, znamienny tym, ze jest w postaci cieklej. 12. Sposób otrzymywania preparatu zdefiniowanego w zastrzezeniu 1, znamienny tym, ze obejmuje: a) suszenie biomasy zebranych lisci w temperaturze 37°C przez trzy dni, b) mielenie suszu do uzyskania drobnego pylu, PL 439344 A1 12/17 c) poddanie suszu procesow1 ekstrakcji ciaglej sena rozpuszczalników organicznych do uzyskania ekstraktów, d) poddanie poszczególnych ekstraktów procesowi destylacji pod obnizonym cisnieniem w temperaturze nieprzekraczajacej 50°C az do calkowitego usuniecia rozpuszczalnika, e) wyizolowanie stalej pozostalosci, która stanowi wlasciwy preparat odpowiedni do stosowania. 13. Sposób wedlug zastrz. 12. znamienny tym, ze w etapie a) stosuje sie liscie topoli bialej. 14. Sposób wedlug zastrz. 12, znamienny tym, ze w etapie a) stosuje sie liscie olchy czarnej. . Sposób wedlug zastrz. 12. znamienny tym, ze rozpuszczalnik orgamczny w etapie c) jest wybrany z grupy obejmujacej weglowodory, chloropochodne, alkohole. etery. estry. lotne kwasy organiczne. 16. Sposób wedlug zastrz. I 5. znamienny tym, ze rozpuszczalnik orgamczny w etapie c) korzystnie stanowi heksan. chlorofonn i metanol. PL 439344 A1 13/17 Tabela 1. Topola biala Olcha czarna TESTOWANE GATUNKI BAKTERII METANOL CHLOROFORM METANOL CHLOROFORM Staphy!ococcus aureus 15 62.5 31 62.5 Escherichia coli 500 500 500 500 Klebsie/1 apneumoniae 500 500 500 500 Salmonella bongori 500 500 500 500 Enterobacter c/oacae 500 500 500 500 Enterococcus faecalis 500 500 500 500 Proteus vu/garis 500 500 500 500 Pseudomonas aeruginosa 500 500 500 500 PL 439344 A1 14/17 Tabela 2 Topola biala Olcha czarna TESTOWANE GATUNKI STAPHYLOCOCCUS METANOL CHLOROFORM METANOL CHLOROFORM . hyicus 500 125 . intermedius 62,5 125 62.5 250 . warneri 62,5 500 500 125 . caprae 125 250 125 250 . auricularis 31.2 250 62.5 31.2 . pasteuri 250 500 250 250 . sch!eiferi 250 500 125 250 S. aureus 6538 31.2 62.5 31.2 62.5 S. aureus 6538/1 500 500 S. aureus 25923 16 250 31.2 250 PL 439344 A1 /17 ~ ~ - :: - o ..c o Q, ~ ~ ~ - Q, <:.I Q.I ~ ~ = ·= o o o = ..... N N = ..... = ..... ~ ~ ~ <:.I = - ~ ~ = N . ~-. ['1 , <:.I 8 . <:.I o <:.I ..... <:.I ~ i.. ·= Q, ~ e , ... - o Q.I 8 i.. ['1 i.. - o o 8 Q.I o - ~ 0 o = = =-- ~ :E Q.I o ~ = ~ = ~ :: ~ ~ ~ - ~ - z u - Q.I - Q.I ~ ~ ~ ::; ~ 1. - 62.5 3.12 0.15 0.15 0.15 - - - - ') - 0.15 3.12 0,31 0,31 0,15 125 62,5 62.5 62.5 3. - 0.62 3.12 3.12 15.6 0.15 125 62.5 62.5 125 4. - - 62,5 62,5 - 0.62 - - 125 - . - 0.31 3.12 1,56 0,31 0,07 125 62,5 62.5 125 6. - - 3.12 3.12 15.6 0.15 - - - - 7. - 0.07 3.12 0,31 0,15 0,15 62,5 62,5 62,5 62.5 8. - 0.07 3.12 0.15 0.31 0, 15 - 125 125 125 9. - 0.07 15,6 0,62 3,12 0,31 - - - - - - 6.25 0,39 0,15 0,19 125 125 62.5 125 11 - - 31.2 0,31 0,31 O, 19 - - 125 - 12 - - 31,2 3,12 - - - - 125 125 13 - - 62.5 3.12 62.5 - - - - - 14 - 62,5 3.12 0,31 1,56 - - - 125 - - - 3.12 0.15 0.15 0,31 - - - - 16 - - 6.25 1,56 7,8 - - - 125 - 17 - - 3.12 1,56 15.6 - - - 125 125 18 - 0,31 3,12 0,31 0,31 0,78 125 125 125 125 19 - - 3,12 0,15 0,31 0,78 125 125 125 125 - - 62,5 0,62 6,25 - - - 125 125 Tabela 3 PL 439344 A1 16/17 al. Niepodleglosci 188/192 00-950 Warszawa, skr. poczt 203 URZAD PATENTOWY RZECZYPOSPOLITEJ POLSKIEJ tel.: (+48) 22 579 05 55 I fax: (+48) 22 579 00 01 e-mail: kontakt@uprp.gov.pl I www.uprp.gov.pl SPRAWOZDANIE O STANIE TECHNIKI ZGLOSZENIA NR P.439344 Klasyfikacja zgloszenia: A61K36/7 6(2006.01 ), A61K36/ 49 (2006.01),A61P31/04(2006.01 ), A23L33/105(2016.01), A61K8/9783 (2017.01) Poszukiwania prowadzone w klasach: A61K36, A61P, A61K8, A23L33 Bazy komputerowe, w których prowadzono poszukiwania: EPOQUENET, bazy UPRP, esp@cenet, Science Direct, internet Kategoria Dokumenty - z podana identyfikacja Odniesienie dokumentu do zastrz. X AMINA CHERIF HAOUAT ET AL "ANTIMYCOBACTERIAL ACTIVITY OF 1 A POPULUS ALBA LEAF EXTRACTS", JOURNAL OF MEDICINAL PLANT 2-16 RESEARCH, VOL. 7(16), PP. 1015-1021, 25 APRIL, 2013 SABINA DAHIJA ET AL. "ANTIMICROBIAL AND CYTOTOXIC ACTIVITY OF X ALNUS GLUTINOSA (L.) GAERTN., A. INCANA (L.) MOENCH, AND A. 1-3 A VIRIDIS (CHAIX) DC. EXTRACTS", JOURNAL OF HEAL TH SC I EN CES 4-16 2016;6(2):1-5 BOUMGHAR NASSIMA ET AL. ,,ANTIMICROBIAL AND ANTIBIOFILM A ACTIVITIES OF PHENOLIC COMPOUNDS EXTRACTED FROM POPULUS 1-16 NIGRA AND POPULUS ALBA BUDS (ALGERIA)", BRAZ. J. PHARM. SCI. 2019;55:E18114 PAGE 1 / 10BRAZILIAN JOURNAL OF PHARMACEUTICAL SCIENCES D Dalszy ciag wykazu dokumentów na nastepnej stronie A - dokument okreslajacy ogólny stan techniki, który nie jest uwazany za posiadajacy szczególne znaczenie, E - dokument stano\\'iacy wczesniejsze zgloszenie lub patent, ale opublikowany w lub po dacie zgloszenia, L - dokument, który moze poddawac w watpliwosc zastrzegane pierwszehstwo(-wa), lub przytoczony w celu ustalenia claty publikacji innego L')'tcnvanego doku1nentu lub z innego szczególnego pcnvoclu, O - dokument odnoszaty sie do ujawnienia ustnego przez zastosowanie, wystawienie lub ujawnienie w inny sposób, r - dokument opublikowany przed data zgloszenia, ale pózniej niz zastrzegana data pierwsze11stwa, T - dokument pózniejszy, opublikowany po dacie zgloszenia lub w dacie pierwszefotwa i niebedacy w konflikcie ze zgloszeniem, ale cytowany w celu zrozumienia rnsad lub teorii lezacych u podstaw \\ynal8zku, X - dokument o szczególnym znaczeniu; zastrzegany wynalazek nie moze byc uwazany za no\\Y lub nie moze byc uwazany za posiadajacy poziom wynalazczy, jezeli ten dokument brany jest pod uwage samodzielnie, y dokument o szczególnym znaczeniu; zastrzegany ,rynalazek nie moze byc uwazany za posiadajacy poziom ,\ynalazczy, jezeli ten dokument zostanie polaczony z jednym lub kilkoma tego typu dokumentami, a takie polaczenie bedzie oczywiste dla znawcy, & - dokument nalezacy do tej samej rodziny patentowej. Sprawozdanie wykonali-a: Beata Chasieniewicz data 23.06.2022r. /-podpisano kwalifikowanym podpisem elektronicznym-/ Pismo wydane w formie dokumentu elektroniczne_go Uwagi do zgloszenia Sprawozdanie zostalo wykonane w oparciu o wersje zastrzezen patentowych z 28.10.2021r. PL 439344 A1 17/17 ZGLOSZENIE NR P.439344 Kontynuacja wvkazu dokumentów Kategoria dokumentu Dokumenty - z podana identyfikacja Odniesienie do zastrz. PL