PT100619B

PT100619B - Composicoes farmaceuticas

Info

Publication number: PT100619B
Application number: PT100619A
Authority: PT
Inventors: Martin Keith Ellis; Sven Torvald Lindstedt; Edward Alan Lock; Maj Elisabeth Holme Markstedt; Linda Carol Mutter; Michael Paul Prisbylla
Original assignee: Zeneca Ltd
Priority date: 1991-06-24
Filing date: 1992-06-24
Publication date: 1999-07-30
Also published as: NO304923B1; DK0591275T3; NO934798D0; NL300198I2; EP0591275A1; GR3029841T3; CA2072047A1; AU1986092A; NO2017045I1; EP0591275B1; DE122005000032I1; NL300198I1; DE69228813T2; NO934798L; LU91180I2; ATE178207T1; AU672361B2; PT100619A; DE122005000032I2; NO2005018I1

Description

Descrição referente à patente de invenção de IMPERIAL CHEMICAL INDUSTRIES PLC, britânica, industrial e comercial, com sede em Imperial Chemical House, Millbank, London SW1P 3JF, Inglaterra, (inventores s Martin Keith Ellis, residente na Grã-Bretanha, Torvald Lindstedt, residente na Suécia, Edward Alan Lock, residente na Grã-Bretanha, Maj Elisabeth Holme Markstedt, residente na Suécia, Linda Carol Mutter e Michael Paul Prisbylla, residentes nos E.U.A,,) para: COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS CONTENDO S-(2-NITRO-4—TRIFLUROMETIL-BENZOIL)-1.3-CICLOHEXANODIONA.

Âmbito Técnico

A presente invenção refere-se a composições farmacêuticas e, mais particularmente, refere-se a composições compreendendo como ingrediente activo um composto que inibe a enzima piruvato de U-hidroxifenilo dioxigenase (HPPD). As composições são valiosas, por exemplo, no tratamento de problemas e doenças em que a intervenção nas sequências metabólicas catalizadas em parte pela HPPD é desejável, por exemplo, na condição conhecida como tirosinemia (tipo i).

Antecedentes da Invenção

A tirosinemia hereditária (tipo i) e um

J.M.

— 1 x erro de nascença do metabolismo* Os pacientes sofrem de sintomas em multi-órgãos e podem desenvolver uma deficiência grave do fígado numa idade muito nova, ou mais progressivamente uma doença do fígado que leva à cirrose nodular e ao desenvolvimento do carcinoma hepático primário. Podem também ocorrer danos aos rins e aos órgãos que produzem sangue, A morte ocorre geral mente antes da idade dos 20 anos, mas alguns pacientes atingiram idades superiores. Alguns pacientes desenvolvem sintomas característicos de porfiria aguda com episódios de dores abdomi nais agudas e uma paresis generalizada, A secreção de ácido 5aminolevulínico (um precursor das porfirinas) é elevada. Um epi. sódio porfírico pode ser a causa da morte. Não há alteração da inteligência ou da função do sistema nervoso central, A incidên cia na Suécia é de cerca de 1 em cada 100 000 nascimentos. Contudo em algumas regiões do Canadá a incidência é superior, por exemplo, na área do Lac-St Jean do Quebec, é de cerca de 1 em 1 800 nascimentos,

A doença deve o nome à descoberta inicial de elevadas concentrações de tirosina no sangue e à excreção de ácidos fenólicos na urina. Originalmente pensou-se que o defeito da enzima principal era uma deficiência de HPPD, enzima que é responsável pela catálise da conversão do piruvato de 4-hidroxifenilo (produto principal da acção da tirosina amino transferase) para homogentisato. Contudo, foi notado que os pacientes com uma actividade residual considerável desta enzima tinham uma forma mais severa da doença.

Os pacientes com tirosinemia hereditária (tipo l) fazem a excreção de acetoacetato de succinilo e succinilacetona bem como do ácido 5-aminolevulínico. A concentração no plasma de ef-fetoproteína é frequentemente elevada e uma diminuição dramática nesta proteína pode indicar o desenvolvimento do cancro do fígado. 0 acetoacetato de succinilo pode ser formado a partir do acetoacetato de fumarilo, que é normalmente hidrolisado pela enzima de acetoacetase de fumarilo e também do acetoacetato de maleilo (produto da acção de homogentisato de

1,2-dioxigenase em homogentisato). Com base na excreção do acetoacetato de succinilo e da succinilacetona por pacientes com =

tirosinemia hereditária (tipo i), Lindstedt e colaboradores (Proc. Natl. Acad. Sei,, 1977, 74« 4641-4645) concluíram que o defeito principal da doença é uma deficiência na enzima de acetoacetase de fumarilo.

A interrelação bioquímica dos produtos do metabolismo da tirosina é apresentado para informação no Esquema 1 anexo a esta descrição, Â succinilacetona é um inibidor potente da porfobilinogénio sintase que cataliza a formação de porfobilinogénio a partir do ácido 5-aminolevulínico na via biossintética hemática. Isto proporciona uma explicação para a excreção elevada do ácido 5-aminolevulínico e sintomas porfíricos.

tratamento principal da tirosinemia he reditária (tipo i) é baseado na restrição da absorção dietética de tirosina. Isto não é normalmente eficaz para evitar o resultado fatal da doença. A transplantação do fígado pode ser efectuada em alguns pacientes produzindo algumas melhorias da doença. Contudo, dado que a degradação da tirosina ocorre no fígado e nos rins, a transplantação do fígado pode não evitar o desenvolvimento do dano severo ao rim frequentemente associado com a tirosinemia (tipo i). Desta forma, existe uma necessidade contínua de um sistema eficaz para o tratamento das doenças e condições relacionadas como por exemplo a tirosinemia (tipo l).

Foi agora descoberto (e este facto constitui a base da invenção) que o composto 2-(2-nitro-4-trifluorometilbenzoil)-l,3-ciclohexanodiona é um inibidor da actividade catalítica da enzima HPPD e pode ser útil no tratamento das doen ças em que os produtos da acção de HPPD estão envolvidos, por exemplo no tratamento da tirosinemia (tipo i).

Descrição da Invenção

De acordo com a invenção é proporcionada uma composição farmacêutica compreendendo com o ingrediente activo o composto 2-(2-nitro-4-trifluorometilbenzoil)-l,3-ciclohe xanodiona (de agora em diante referido como o Composto”), ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em associação com um di• luente ou veículo farmaceuticamente aceitável.

= 3 =

Deve notax*-se que o Composto pode existir numa ou mais formas tautoméricas, uma das quais é a representada pela fórmula I:

e cujas formas são facilmente interconvertíveis por tautomerismo de ceto-enol· Deve entender-se que a invenção inclui a utilização do Composto em qualquer destas for mas tautoméricas ou numa mistura delas.

Composto é ácido e forma facilmente sais com uma grande variedade de bases. Os sais particularmente adequados do Composto recomendáveis para a utilização como ingredientes activos em composições farmacêuticas de acordo com a invenção incluem, por exemplo, os sais de adição de base farmaceuticamente aceitáveis, por exemplo, sais de metais alcalinos (como por exemplo de potássio ou de sódio), de metais alcalino-terrosos (como por exemplo de cálcio ou de magnésio) e sais de amónio, e sais formados com bases orgânicas que dão origem a catiões fisiologicamente aceitáveis (como por exemplo os sais formados com metilamina, dimetilamina, trimetilamina, piperidina e morfilina).

Composto pode ser obtido por processos convencionais da química orgânica já conhecidos para a produção de materiais estruturalmente análogos. Assim, por exemplo, o

Composto pode ser convenientemente obtido por reacção do cloreto de 2-nitro-4-trifluorometilbenzoilo com ciclohexano-1,3-diona na presença de acetona cianidrina e de uma base adequada como por exemplo a trietilamina, tal como é ilustrado no Exemplo = 4 = a seguir apresentado, 0 cloreto de 2-nitro-4-trifluorometilbenzoilo de partida pode ele próprio ser obtido a partir do ácido benzóico correspondente, por exemplo por reacção com cloreto de tionilo ou cloreto de oxalilo tal como e mencionado em Reagents for Organic Synthesis. (j, Wiley and Sons, 1967; editores: Fieser L.F, e Fieser M,; Vol 1, págs. 767-769) e é geralmente utilizado sem purificação especial. De forma semelhante, o ácido 2-nitro-4-trifluorometilbenzóico pode ser obtido, por exemplo, da forma descrita por Haupstein e col, em J. Amer» Chem. Soc. , 195^·, 76, 1051, ou por qualquer dos processos gerais descritos em The Chemistry of Carboxylic Acida and Esters (j Wiley and Sons, 1969; editor: S. Patai) e Survey of Organic Synthesis, (j, Wiley and Sons, 1970} C.A, Buehler e D.F. Pearson)·

As composições da invenção podem apresentar-se em várias formas convencionais bem conhecidas dos especialistas farmacêuticos e que são especialmente adaptadas para objectivos farmacêuticos isto é para a administração ao homem e a outros animais de sangue quente. Assim, elas podem apresentar-se numa forma adequada para a utilização oral (por exemplo comprimidos, lozangos, cápsulas macias ou duras, suspensões aquosas ou oleosas, emulsões, pós dispersáveis ou grânulos dispersáveis, xaropes ou elixires), para a administração parentórica (por exemplo como solução aquosa ou oleosa esterilizada para o doseamento intravenoso, subcutâneo, intramuscular ou intravascular) , ou para o doseamento rectal sob a forma de um supositório.

As composições da invenção podem ser obtidas por procedimentos convencionais utilizando os excipientes farmacêuticos convencionais, bem conhecidos. Assim, as composições dirigidas à utilização oral, conterão normalmente, por exemplo, pelo menos um ou mais agentes corantes, edulcorantes, aromatizantes e/ou conservantes e podem apresentar-se sob a forma de cápsulas de gelatina dura em que o ingrediente activo é misturado com um diluente sólido inerte, por exemplo, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio ou caulino. As composições para a utilização oral podem também ter a forma de cápsulas de gelatina « 5 ·

macias em que o ingrediente activo é misturado com a água ou com um óleo como por exemplo o óleo de amendoim, parafina líqui da ou azeite»

Os excipientes farmaceuticamente aceitáveis adequados para a utilização como formulações para comprimidos incluem, por exemplo, diluentes inertes como por exemplo a lactose, carbonato de sódio, fosfato de cálcio ou carbonato de cálcio, agentes de granulação e de desintegração como por exemplo o amido de milho, ou o ácido algxnico; agentes de ligação como por exemplo gelatina ou amido; agentes lubrificantes como por exemplo estearato de magnésio, ácido esteárico ou talco; agentes conservantes como por exemplo o g-hidroxibenzoato de etilo ou de propilo, e anti-oxidantes, como por exemplo o ácido ascórbico. As composições para comprimidos podem ser não revestidas ou serem revestidas quer para modificar a sua desintegração e absorção posterior do ingrediente activo dentro do sistema gastro-intestinal, ou para aumentar a sua estabilidade e/ou aparência, em qualquer dos casos, utilizando agentes de revestimento convencionais e procedimentos bem conhecidos»

Às suspensões aquosas conterão geralmente o ingrediente activo numa forma finamente pulverizada em associação com um ou mais agentes de suspensão farmaceuticamente aceitáveis como por exemplo a carboxilmetilcelulose de sódioj metilcelulose, hxdroxxpropilmetxlcelulose, alginato de sódio, polivinilpirrolidona, goma de tragacanto e goma de acácia, agen tes de dispersão ou molhantes como por exemplo a lecitina ou os produtos de condensação de um óxido de alquileno com ácidos gordos (por exemplo estearato de polioxietileno), ou produtos de condensação do óxido de etileno com álcoois alifáticos de cadeia longa, por exemplo heptadecaetilenooxicetanol, ou produtos de condensação do óxido de etileno com ésteres parciais derivados de ácidos gordos e um hexitol como por exemplo monooleato de polioxietileno sorbitol, ou produtos de condensação do óxido de etileno com ésteres parciais derivados de ácidos gordos e de anidridos de hexitol, por exemplo o molooleato de polietileno sorbitano. As suspensões aquosas também conterão tipicamente um ou mais conservantes (como por exemplo o g-hidrg xibenzoato de etilo ou de propilo, anti-oxidantes (como por exemplo o ácido ascórbico), agentes corantes, geralmente em con junto com um agente aromatizante e/ou edulcorante (como por exemplo a sacarose, sacarina ou aspartame).

As suspensões oleosas podem ser formuladas por suspensão do ingrediente activo num óleo vegetal (como por exemplo óleo de amendoim, azeite, óleo de sésamo ou óleo de coco) ou num óleo mineral (como por exemplo a parafina líquida). As suspensões oleosas podem também conter um agente espessante como por exemplo cera de abelhas, parafina dura ou álcool cetílico. Podem ser adicionados agentes edulcorantes como por exemplo os acima referidos, e agentes aromatizantes para proporcionar uma composição oral agradável. Estas composições podem ser conservadas pela adição de um antioxidante como por exemplo o ácido ascórbico.

Os pós e grânulos dispersáveis adequados para a preparação de uma suspensão aquosa pela adição de água contêm geralmente o ingrediente activo em associação com um agen te dispersante ou molhante, agente de suspensão e um ou mais con servantes. Os agentes dispersantes ou molhantes e os agentes de suspensão, adequados são exemplificados pelos já acima menciona dos. Estarão também geralmente presentes excipientes farmaceuticamente aceitáveis adicionais como por exemplo agentes edulcoran te*, aromatizantes e corantes.

As composições farmacêuticas da invenção podem também apresentar-se sob a forma de emulsões de óleo em água. A fase oleosa pode ser um óleo vegetal, como por exemplo o azeite ou o óleo de amendoim, ou de um óleo mineral como por exemplo a parafina líquida ou uma mistura de qualquer deles. Os agentes emulsionantes adequados podem ser, por exemplo, gomas de ocorrência natural tais como goma de acácia ou goma de tragacanto, fosfatidos de ocorrência natural tais como soja, lecitina, ou ésteres ou ésteres parciais derivados de ácidos gordos e anidridos de hexitol (por exemplo monooleato de sorbitano) e produtos de condensação dos referidos ésteres parciais com óxido de etileno como por exemplo monooleato de polioxietileno sor = 7 = bitano. As emulsões podem também conter agentes edulcorantes, aromatizantes e conservantes.

Os xaropes e elixires podem ser formulados com agentes edulcorantes como por exemplo o glicerol, propileno glicol, sorbitol, aspartame ou sacarose, e podem também conter um agente demulcente, conservante, aromatizante e/ou corante.

As composições farmacêuticas podem também ter a forma de uma suspensão aquosa ou oleosa injectável esterilizada, que pode ser formulada de acordo com procedimentos conhe eidos utilizando um ou mais agentes dispersantes ou molhantes e agentes de dispersão, adequados, que já foram acima mencionados. Uma composição injectável esterilizada pode também ser uma solução ou suspensão injectável esterilizada num diluente ou solvente não tóxico parentericamente aceitável, por exemplo uma solução em 1,3-butanodiol.

As composições para supositórios podem ser preparadas misturando o ingrediente activo com um excipiente não irritante adequado que é sólido à temperatura ambiente mas que é líquido à temperatura rectal e que portanto se fundirá no recto para libertar o medicamento. Os excipientes adequados incluem por exemplo, manteiga de coco e polietilenoglicóis.

A quantidade de ingrediente activo que é combinada com um ou mais excipientes para produzir uma forma simples de dosagem variará necessariamente com o hospedeiro tratado e a via particular de administração. Por exemplo, uma formulação adequada para administração oral a seres humanos conterá geralmente por exemplo de 0,5 mg a 200 mg de ingrediente activo com uma quantidade adequada e conveniente de excipientes que variarão tipicamente de cerca de 10 a cerca de 9^$> em peso da composição total. As formas de unidade de dosagem conterão geralmen te de cerca de 1 mg a cerca de 400 mg de um ingrediente activo. Contudo, será facilmente compreendido que pode ser necessário variar a dose do ingrediente activo administrado de acordo com a prática médica conhecida de modo a ter em conta a natureza e a severidade da condição ou doença em tratamento, qualquer terapia alternativa, e a idade, peso e sexo do paciente que recebe o tra tamento

De acordo com um outro aspecto da invenção, é proporcionado um método de tratamento de um problema ou doença que afecte um animal de sangue quente como por exemplo o homem em que seja desejável a intervenção nas sequências metabólicas catalisadas em parte pela enzima HPPD, por administração de uma quantidade eficaz do Composto (tal como atrás definido) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável. Por exemplo, é proporcionado o tratamento da doença conhecida como tiroainemia (tipo i) pela administração dos Compostos ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável, de acordo com um aspecto particular da invenção.

Como um outro aspecto particular da invenção, é proporcionada a utilização do Composto (tal como atrás definido) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável, no fabrico de um medicamento humano ou veterinário para o tratamento de uma doença ou problema que afecte um animal de sangue quente como por exemplo o homem em que seja desejável a intervenção nas sequências metabólicas catalizadas em parte pela enzima HPPD. Um desses problemas ou doenças é o que é conhecido como tirosinemia (tipo i).

A actividade dos compostos com a fórmula I na inibição das acçães catalíticas da enzima HPPD pode ser avaliada no laboratório utilizando um ou mais procedimentos convencionais.

Um desses procedimentos envolve a monitoração do consumo do oxigénio da enzima do fígado do rato na presença do seu substrato que é o piruvato de 4-hidroxifenilo. Um ensaio típico de acordo com este procedimento utiliza um eléctrodo de oxigénio ou um tampão de fosfato de sódio 0,2 M a pH 7,2 (3,8 ml) num reactor a 37° C. São em seguida adicionados ascorbato (com uma concentração final de aproximadamente 7 pM) e citosol de fígado de rato (105 000 x g sobrenadante - cerca de 0,2 ml, equivalente a 5 mg de proteína). Após equilíbrio a 37° 0 durante 3 a 5 minutos, a reacção enzimática é iniciada . pela adição do substrato, piruvato de 4-hidroxifenilo (com uma = 9 =

concentração final de cerca de 200 p£í)« Pode ser avaliada uma substância de ensaio neste teste quer por incubação com a enzima durante cerca de 5 minutos antes de se iniciar a reacção com o substrato quer por injecção do ingrediente activo de ensaio no reactor em conjunto com o substrato.

Alternativamente, pode ser realizado um ensaio com base no descrito por Lindstedt e colaboradores (Methods in Enzimology. 1987» 142. 139-142 e 143-148) que envol ve a monitoração dos efeitos de uma substância de ensaio na libertação de ^COg a partir de (l-^\3)piruvato de 4-hidroxifenilo utilizando citosol de fígado de rato ou humano como fonte de enzima.

Tipicamente, o Composto, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, revelou uma inibição significativa da enzima num dos ensaios acima referidos (isto é uma inibição superior a 30$ da absorção de oxigénio e/ou superior a 30$ na \

libertação de COg) ^{a concen}^^raÇ^^es ίθθ ^{nM ou} inferiores. 0 Composto não é em geral particularmente tóxico para animais de sangue quente* Assim ele não revela efeitos tóxicos significativos ou outros efeitos adversos quando administrado a macacos rhesus num período de 90 dias a uma dose oral diária de 100 mg/kg.

Na utilização terapêutica, pensa-se que uma composição de acordo com a invenção deve ser administrada de modo a que seja recebida uma dose do Composto (ou de uma quantidade equivalente de um seu sal farmaceuticamente aceitável) que está geralmente na gama de 0,01 a 10 mg/kg por dia (e de preferência na gama geral de 0,05 a 5 mg/kg por dia) dados, se necessário, em doses divididas. Pode também ser desejável a dosagem intermitente do Composto (ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável). Para além da avaliação da condição global do paciente, os efeitos da administração do Composto ou de um seu sal podem ser monitorados por ensaios clínicos convencionais químicos e de sangue para avaliar os efeitos nos níveis de metabólitos da tirosina e na actividade da sintase de porfobilinogénio, por exemplo, como mencionado nos Exemplos anexos.

=

A utilidade do Composto ou de um seu sal no tratamento de um problema ou de uma doença que afecte um animal de sangue quente como por exemplo o homem em que a intervenção nas sequências metabólicas catalisadas pelo menos em parte pela enzima HPPD é desejável, pode ser demonstrada em ensaios de intervenção terapêuticos convencionais, em que se mostra uma melhoria dos parâmetros clínicos e bioquímicos. Assim, a utilidade no tratamento da tirosinemia (tipo i) pode ser avaliada, por exemplo, por monitoração durante um período de vários meses de um ou mais marcadores bioquímicos de doença. Por exemplo, estes marcadores incluem tipicamente a c^-fetoproteína e outros indicadores convencionais da disfunção do fígado. Além disso, a melhoria na actividade da sintase de porfobilinogénio e/ou a redução nos valores urinários do ácido 5-aminolevulínico São marcadores particularmente bons da eficiência clínica inicial.É proporcionado um procedimento clínico ilustrativo nos exemplos anexos,

A invenção será agora ilustrada pelos seguintes Exemplos não limitativosí

Exemplo 1 / Este Exemplo descreve um procedimento para a preparação do Composto/

É adicionada gota a gota trietilamina (3,4 ml, 25 mM) a uma solução agitada de cloreto de 2-nitro-4trifluorometilbenzoilo (19 mM; ele próprio obtido por reacção do ácido 2-nitro-4-trifluorometilbenzóico com um excesso de cloreto de oxalilo) e ciclohexano-l,3-diona (19 mM) em diclorometano (100 ml). A mistura é agitada durante uma hora â temperatura ambiente e em seguida é adicionada mais trietilamina (57 mM) e cianohidrina de acetona (0,4 ml). É continuada a agitação durante mais 2,5 horas e em seguida a mistura é lavada muito bem com ácido clorídrico 2 M para remover a trietilamina. A fase orgânica é em seguida extraída muito bem com carbonato de potássio (5$ p/v). Os extratos básicos combinados são em seguida acidificados com ácido clorídrico 2 M e extraídos com éter. Os extractos de éter são lavados com solução saturada de = 11 =

cloreto de sódio, secos (sulfato de magnésio) e o material volá til é removido por evaporação rotativa em vazio. Pode ser assin obtida a 2-(2-nitro-4-trifluorometilbenzoil)-l,3-ciclohexanodiona como um sólido, p.f, 88-84° C (recristalizada de acetato de etilo) possuindo uma microanálise e espectros infravermelhos e ressonância magnética protónica satisfatórios.

Exemplo 2

Ilustram-se a seguir formas de dosagem farmacêuticas representativas contendo o Composto, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável (referido como Ingrediente Activo”) para utilização terapêutica ou profiláctica em seres humanos;

(a) Comprimido I mg/comprimido

Ingrediente Activo ......... .·····..··50

Lactose (Farmacopeia Europeia) ·····.··.«····· 223,75 Croscarmelose de sódio ....................... 6,0

Amido de Milho ....................15,0

Polivinilpirrolidòna (pasta a 5% p/v) .....2,25

Estearato de magnésio .................. 3,0 (b) Comprimido II mg/comprimido

Ingrediente Activo 1,0

Lactose (Farmacopeia Europeia) 93,25

Croscarmelose de sódio ................ 4,0

Amido de Milho (pasta a 5$ p/v) ...........0,75

Estearato de magnésio ·.····.·········.········· 1,0 «

(^c) Cápsula mg/comprimido

Ingrediente Activo ......................... 10

Lactose (Farmacopeia Europeia) 488,5

Estearato de magnésio 1,5

As formulações anteriores podem ser obtidas por procedimentos convencionais bem conhecidos na técnica farmacêutica. Os comprimidos I e II podem, se necessário, serem convenientemente revestidos entericamente por processos convencionais, por exemplo, com revestimento de acetato ftalato de celulose.

Exemplo 3 /~Este Exemplo descreve um procedimento típico para a avaliação clínica de uma composição do Composto em tirosinemia (tipo I,)/.

Foi administrada a pacientes com uma for ma avançada da doença a composição de ensaio (geralmente cerca de 0,2 a 2,0 mg do ingrediente activo por kg de peso corporal) por via oral. Foi tomada uma amostra de sangue diariamente durante 1 semana e em seguida com menos frequência à vontade do médico. Recolheram-se normalmente amostras de urina diariamente. Os indicadores a seguir referidos serão usados para monitorar a resposta à composição de ensaio. 0 tratamento é mantido até 12 horas se for observada uma resposta clinicamente e bioquimicamente satisfatória. Caso contrário, a dose do ingrediente activo administrado será aumentada em porções até cerca de 2 mg/kg por dia. Se alguma indicação adversa acontecer, com base na monitoração bioquímica ou avaliação clínica da dose esta administração será parada imediatamente.

Aos pacientes será aplicada uma dieta restrita em tirosina com o objectivo de manter as concentrações de tirosina no plasma abaixo de 500 pmol/l. Não é de esperar um grande aumento na concentração de tirosina no plasma, mae os valores serão monitorados ao longo da dosagem. Serão monitora• das as operações na excreção dos marcadores bioquímicos a se= 13 = guir mencionados, como por exemplo o acetoacetato de succinilo, succinilacetona e o ácido 5-aminolevulínico, bem como os efeitos na sintase de porfobilinogénio e a concentração de o(-fetoproteína.

Marcadores bioquímicos}

Tirosina e Metionina - estes aminoácidos serão determinados no plasma por meio de uma técnica convencional utilizando um analisador de aminoácidos.

Acetoacetato de succinilo e Succinilacetona - estes compostos são determinados na urina por cromatografia gasosa - espectrometria de massa. A succinilacetona no plasma será determinada medindo a inibição da sintase de porfobilino génio utilizando um ensaio convencional.

Ácido g-aminolevulínico - este composto será determinado na urina por meio de um ensaio colorimétrico convencional·

Piruvato de p-hidroxifenilo e acetato de p-hidroxifenilo - estes compostos serão determinados na urina por processos convencionais de cromatografia gasosa.

o/ -fetoproteína - este composto será determinado no plasma por meio de uma técnica de radioimunoensaio convencional.

Sintase de porfobilinogénio - este compos, to será determinado nos eritrócitos utilizando um ensaio colorimétrico convencional.

Análise clínica· hematologia e parâmetros de coagulação - estes parâmetros serão determinados por meio de processos convencionais·

Exemplo 4

2”Este Exemplo descreve a avaliação terapêutica de uma composição preparada de acordo com a invenção/ Paciente 1:

Foi admitido no hospital um paciente femi nino (com a idade de 2 meses) após a observação de problemas com

ligeiras hemorragias no nariz e a observação por parte dos pais do inchamento do abdómen. 0 escrutínio metabólico no hospital diagnosticou a tirosinemia (tipo i) com base na excreção anormal de succinllacetona, acetoacetato de succinilo e ácido 5-aminolevulínico na urina e uma baixa actividade de sintase de porfobilinogénio em eritrócitos. 0 tratamento foi iniciado utilizan do essencialmente o procedimento descrito no Exemplo 2 utilizando uma formulação para cápsulas do Composto (ingrediente activo de 0,08 mg/peso corporal). Este valor foi aumentado para 0,16 mg/kg de peso corporal após quatro dias, em seguida para cerca de 0,4 mg/kg no final dos primeiros 2 meses, sendo a dose dividida em duas porções para administração de manhã e da parte da tarde. A dose foi em seguida aumentada para cerca de 0,6 mg/kg após um tratamento de mais 5 meses. Foram feitas as seguintes observações:

(a) Notou-se um aumento imediato na actividade da sintase de porfobilinogónio em eritrócitos com uma diminuição consequente na expressão do ácido 5-aminolevulínico.

(b) Notou-se uma diminuição imediata na excreção de succinllacetona e acetoacetato de succinilo (de 50 mmol/mol de creatinina até um valor < 1 mmol/mol de creatinina) e uma diminuição imediata semelhante nos valores de succinilacetona no plasma (até ao limite de detecção, após cerca de 30 dias).

(c) A concentração de metionina no plasma que era muito elevada inicialmente diminuiu um pouco com a dieta caindo para valores normais muito rapidamente após o início do tratamento.

(d) A concentração de aminoácidos na urina era muito elevada antes do tratamento e diminuiu (j a 10 vezes) após o tratamento.

(e) Embora a função do fígado tivesse ini cialmente sido comprometida por uma infecção concomitante com citomegalovírus, os marcadores da disfunção do fígado melhoraram progressivamente durante a dosagem por exemplo a concentração no . soro da 0(-fetoproteína diminuiu de 7 200 pg/l para 96 )ig/l· =

(f) A condição clínica global do paciente melhorou acentuadamente durante o período de tratamento permitindo ao paciente ter alta do hospital* Foi continuada a dosa gem.

Paciente 2:

Foi administrado a um paciente masculino (com a idade de 5 anos) uma dose de 0,2 mg/kg de peso corporal de uma formulação para cápsulas do Composto* Durante o período inicial de tratamento de 3 meses a actividade da sintase de porfobilinogénio aumentou para valores normais* De forma semelhante durante o período de tratamento os valores na urina de succinilacetona e de ácido 5-aminolevulínico os valores no soro de succinilacetona e da dl-fetoproteína diminuíram, a última significativamente (de cerca de 900 para 4o pg/l) e a posição clínica do paciente melhorou. Foi continuada a dosagem.

Paciente 38

Foi doseado um paciente masculino (com a idade de 6 anos) a 0,2 mg/kg de peso corporal por meio de uma formulação para cápsulas do Composto. Passados 5 meses, esta dose foi aumentada para 0,6 mg/kg de peso corporal dados em duas doses divididas. Durante este período os valores na urina e no plasma da succinilacetona e os valores na urina do ácido 5-aminolevulínico foram substancialmente diminuídos* De forma semelhante, os valores no soro da o(-fetoproteína baixaram signi ficativamente (de cerca de 900 para 11 jig/1) e a posição clínica do paciente melhorou.

Paciente 4:

Foi doseado um paciente masculino (com a idade de 3 anos) a 0,2 mg/kg de peso corporal de uma formulação para cápsulas do Composto. Passados 5 meses, esta dose foi aumentada para 0,6 mg/kg de peso corporal dada em duas ou três doses divididas. Durante este período, os valores na urina e no plasma da succinilacetona e os valores na urina do ácido 5-aminolevulínico foram substancialmente diminuídos. De forma semelhante, os valores no soro da dl-fetoproteína baixaram signifi= 16 =

cativamente (de cerca de 2000 para 48 pg/1) e a posição clínica do paciente melhorou.

ESQUEMA 1

VIA DA DECOMPOSIÇÃO DA TIRQSINA

Tirosina tirosina ψ aminotransferase

Piruvato de 4hidroxifenilo piruvato de 4· •hidroxifenilo dioxigenase

Homogentisato

VIA DA SÍNTESE DA PORFIRINA

Ácido 5-aminolevulínico homogentisato

1,2-dioxigenase

Porfobilinogénio

Acetoacetato de fumarilo sintase

SÍNTESE HEMÁTICA acetoacetase de y ' fumarilo

DEFICIÊNCIA EM

TIROSINEMIA DE . . . _

Fumarato + Acetoace

TIPO 1 tato

Claims

REIVINDICAÇÕES

- 1# Composição farmacêutica caracterizada por compreender como ingrediente activo o composto 2-(2-nitro-U-trifluorometilbenzoil)-l,3-ciclohexanodiona, ou um sal farmaceuticamente aceitável, em associação com um diluente ou um veículo farmaceuticamente aceitável.

- 2» Composição de acordo com a reivindicação 1 caracterizada por o ingrediente activo ser escolhido de entre um sal de metal alcalino, sal de um metal alcalino-terroso, sal de amónic, e um sal obtido com uma base orgânica que produza um catião fisiologicamente aceitável, do composto 2-(2-nitro-4— -trifluorometilbenzoil)-1,3-ciclohexanodiona.

- 3» -

Composição de acordo com as reivindicações 1 ou 2 caracterizada por se apresentar numa forma adequada para administração oral, parentérica ou rectal.

- 4» -

Composição de acordo com as reivindicações

1 ou 2 caracterizada por se apresentar numa forma agradável para administração oral escolhida de entre comprimidos, losangos, cápsulas duras, cápsulas macias, suspensões aquosas, suspensões oleosas, emulsões, pás dispersáveis, grânulos dispersáveis, xaropes e elixires.

_ 5a _

Composição de acordo com as reivindicações 1 ou 2 caracterizada por se apresentar numa forma adequada para administração parentérica escolhida de entre soluções aquosas e oleosas esterilizadas.

- 6* 2-( 2-Nitro-4-trif luorometilbenzoil) -1,3-ciclohexanodiona, ou um sal farmaceuticamente aceitável, para utilização como agente farmacêutico.

- 7- -
2-(2-Nitro-4-trifluorometilbenzoil)-1,
3-ciclohexanodiona, ou um sal farmaceuticamente aceitável, para utilização como inibidor da actividade catalítica da enzima
4-hidroxifenilpiruvato dioxigenase.

-852-(2-Nitro-4-trifluorometilbenzoil)-1,3-ciclohexanodiona, ou um sal farmaceuticamente aceitável, para utilização como medicamento no tratamento de uma doença em que estão envolvidos ou implicados os produtos da acção da enzima

4-hidroxifenilpiruvato dioxigenase.

- 9» -

Utilização da 2-(2-nitro-4-trifluorometilbenzoil) -1,3-ciclohexanodiona, ou um sal farmaceuticamente acei tável, na preparação de um medicamento para ser utilizado no tratamento de uma doença em que estão envolvidos ou implicados os produtos da acção da enzima 4—hidroxifenilpiruvato dioxigenase.

- 105 -

Utilização da 2-(2-nitro-4-trifluorometilbenzoil) -1,3-ciclohexanodiona, ou um sal farmaceuticamente acei tável, na preparação de um medicamento para ser utilizado no tratamento de uma doença conhecida como tirosinemia (tipo i).

A requerente reivindica a prioridade do pedido britânico apresentado em 24 de Junho de 1991 sob o • 19 =

I μ I

Ν° 911 3622.6 e em 24 de Março de 1992 sob o NS 920 6412.0.