PT2004657E - Derivados de imidazole condensados como inibidores de aldosterona sintase - Google Patents

Description

ΡΕ2004657 1 DESCRIÇÃO "DERIVADOS DE IMIDAZOLE CONDENSADOS COMO INIBIDORES DE ALDOSTERONA SINTASE"

CAMPO DA INVENÇÃO A invenção refere-se a novos compostos hetero-cíclicos, a processos para a preparação dos compostos, aos produtos farmacêuticos que os contêm, e à sua utilização como substâncias farmacêuticas activas, especialmente como inibidores de aldosterona sintase.

DESCRIÇÃO PORMENORIZADA DA INVENÇÃO 0 documento WO 2005/118581 Al e em parte no documento WO 2005/118557 Al descrevem derivados de tetra-hidro-imidazo[1,5-a]piridina como inibidores de aldosterona sintase. A presente invenção refere-se em primeiro lugar a compostos de fórmula geral

2 ΡΕ2004657 em que R é deutério, halogéneo ou hidrogénio; R1 é aril-C0-C4-alquilo ou heterociclil-C0-C4-alquilo, radicais esses que podem estar substituídos por 1-4 Ci-Cg alcoxi, Ci-Cg alcoxicarbonilo, C4-C8 alquilo, C0-C8 alquilcarbonilo, C4-Cg alquilsulfonilo, arilo opcionalmente substituído, aril-C0-C4 alcoxicarbonilo, ciano, halogéneo, heterociclilo opcionalmente substituído, hidroxilo, nitro, óxido, oxo, tri-C4-C4 alquilsililo, trifluorometoxi ou trifluorometilo;

R 2 é a) deutério, halogéneo, hidroxilo, ciano ou hidrogénio; ou b) C2—Cg alcenilo, C2-C8 alcinilo, Ci-C8 alcoxi, C4-C4 alcoxicarbonil-Ci-C4 alquilo, C4-C8 alquilo, C0-C4 alquilcarbonilo, aril-Co-C4 alquilo, carboxi-Ci-C4 alquilo, C3—C8 cicloalquilo ou heterociclil-C0-C4 alquilo, radicais estes que podem estar substituídos por 1-4 Ci-Cg alcoxi, Ci-Cg alcoxicarbonilo, Ci-C8 alquilo, Co-C8 alquilcarbonilo, Ci-C8 alquilsulfonilo, arilo opcionalmente substituído, aril-Co-C4 alcoxicarbonilo, ciano, halogéneo, heterociclilo opcionalmente substituído, hidroxilo, nitro, óxido, oxo, tri-Ci-C4 alquilsililo, trifluorometoxi ou trifluoro-metilo; 3 ΡΕ2004657 R3 é Ci-Cs alquilo; Q é oxigénio ou enxofre; m representa um número 0, 1 ou 2; n é um número 0, 1 ou 2; e os seus sais, preferencialmente sais farmaceuticamente aceitáveis, em que R1 não é arilo substituído com Ci-C8 alquilo se R2 é hidrogénio. O termo arilo representa um hidrocarboneto aromático mono-, bi- ou tricíclico de acordo com a regra de Huckel que compreende geralmente 6-14, preferencialmente 6-10, átomos de carbono e é, por exemplo, fenilo, naftilo, e.g. 1- ou 2-naftilo ou antracenilo. É preferido arilo com 6-10 átomos de carbono, em particular fenilo ou 1- ou 2-naftilo. Os referidos radicais pode estar não substituídos ou substituídos uma ou mais vezes, e.g. uma ou duas vezes, caso em que os substituintes podem estar em qualquer posição, por exemplo, na posição o, m ou p do radical fenilo ou na posição 3 ou 4 do radical 1- ou 2-naftilo e também pode estar presente uma pluralidade de substituintes 4 ΡΕ2004657 iguais ou diferentes. Exemplos de substituintes em radicais arilo ou nos radicais preferidos fenilo ou naftilo são: C4-C8 alcoxi, Ci-C8 alcoxicarbonilo, Ci-C8 alquilo, C0-C8 alquilcarbonilo, Ci-C8 alquilsulfonilo, arilo opcionalmente substituído, aril-C0-C4 alcoxicarbonilo, ciano, halogéneo, heterociclilo opcionalmente substituído, hidroxilo, nitro, tri-Ci-C4 alquilsililo, trifluorometoxi ou trifluorometilo.

Aril-Co-C4 alquilo é, por exemplo, fenilo, naftilo ou benzilo. 0 termo heterociclilo significa um sistema em anel monociclico, saturado, parcialmente saturado ou insaturado, com 4-8 membros, particularmente preferencialmente com 5 membros, um sistema em anel biciclico saturado, parcialmente saturado ou insaturado com 7-12 membros, particularmente preferencialmente com 9-10 membros, e também um sistema em anel tricíclico parcialmente saturado ou insaturado com 9-12 membros que compreende um átomo de N, O ou S em pelo menos um dos anéis, sendo possível que um átomo de N, O ou S adicional esteja presente num anel. Os referidos radicais podem estar não substituídos ou substituídos uma ou mais vezes, e.g. uma ou duas vezes, e também pode estar presente uma pluralidade de substituintes iguais ou diferentes. Exemplos de substituintes de radicais heterociclilo são: C4-C8 alcoxi, C4-C8 alcoxicarbonilo, Ci-C8 alquilo, C0-C8 alquilcarbonilo, C4-C8 alquilsulfonilo, arilo opcionalmente substituído, aril-C0-C4 alcoxicarbonilo, ciano, halogéneo, heterociclilo opcionalmente substituído, 5 ΡΕ2004657 hidroxilo, nitro, óxido, oxo, tri-Ci-C4 alquilsililo, tri-fluorometoxi ou trifluorometilo.

Heterociclil-Co-C4 alquilo saturado é, por exemplo, azepanilo, azetidinilo, aziridinilo, 3, 4-di-hidroxi-pirrolidinilo, 2,6-dimetilmorfolinilo, 3,5-dimetilmorfoli-nilo, dioxanilo, [1,4]dioxepanilo, dioxolanilo, 4,4-dioxo-tiomorfolinilo, ditianilo, ditiolanilo, 2-hidroximetil-pirrolidinilo, 4-hidroxi-piperidinilo, 3-hidroxipirrolidi-nilo, 4-metilpiperazinilo, 1-metilpiperidinilo, 1-metil-pirrolidinilo, morfolinilo, oxatianilo, oxepanilo, 2-oxo-azepanilo, 2-oxo-imidazolidinilo, 2-oxo-oxazolidinilo, 2-oxo-piperidinilo, 4-oxo-piperidinilo, 2-oxo-pirrolidinilo, 2-oxo-tetra-hidro- pirimidinilo, 4-oxo-tiomorfolinilo, piperazinilo, piperidinilo, pirrolidinilo, tetra-hidro-furanilo, tetra-hidropiranilo, tetra-hidrotiofenilo, tetra-hidrotiopiranilo, tiepanilo ou tiomorfolinilo.

Heterociclil-C0-C4-alquilo bicíclico parcialmente saturado é por exemplo 3,4-di-hidro-2H-benzo[1,4]oxazinilo, 4,5,6,7-tetra-hidrobenzofuranilo ou 4,5,6,7-tetra-hidroben-zotiazolilo.

Heterociclil-Co-C4-alquilo bicíclico insaturado é, por exemplo, benzofuranilo, benzoimidazolilo, benzo-[d]isotiazolilo, benzo[d]isoxazolilo, benzo[b]tiofenilo, quinolinilo, imidazo[1,5-a]piridinilo, indazolilo, indolilo ou isoquinolinilo. 6 ΡΕ2004657

Heterociclil-Co-C4-alquilo monocíclico insaturado é, por exemplo, imidazolilo, oxazolilo, piridilo, pirro-lilo, tetrazolilo, tiazolilo ou tiofenilo. C2-C8 alcenilo é, por exemplo, etenilo, prope-nilo, isopropenilo, butenilo, isobutenilo, butenilo secundário, butenilo terciário, ou um grupo pentenilo, hexenilo ou heptenilo. C2—C8 alcinilo é, por exemplo, etinilo, propini-lo, butinilo, ou um grupo pentinilo, hexinilo ou heptinilo.

Ci-C8 alcoxi é por exemplo C1-C5 alcoxi tal como metoxi, etoxi, propoxi, isopropoxi, butoxi, isobutoxi, butoxi secundário, butoxi terciário ou pentoxi, mas também pode ser um grupo hexoxi ou heptoxi.

Ci-Cs alcoxicarbonilo é preferencialmente C1-C4 alcoxicarbonilo tal como metoxicarbonilo, etoxicarbonilo, propoxicarbonilo, isopropoxicarbonilo, butoxicarbonilo, isobutoxicarbonilo, butoxicarbonilo secundário ou butoxicarbonilo terciário. C1-C4 alcoxicarbonil-Ci-C4 alquilo é por exemplo metoxicarbonilmetilo ou etoxicarbonilmetilo, 2-metoxicar-boniletilo ou 2-etoxicarboniletilo, 3-metoxicarbonilpropilo ou 3-etoxicarbonilpropilo ou 4-etoxicarbonilbutilo.

Ci-C8 alquilo pode ser de cadeia linear ou 7 ΡΕ2004657 ramificada e/ou ligado em ponte e é por exemplo metilo, etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, butilo secundário, butilo terciário, ou um grupo pentilo, hexilo ou heptilo. C0-C8 alquilcarbonilo ou de preferência C0-C4 alquilcarbonilo é por exemplo formilo, acetilo, propionilo, propilcarbonilo, isopropilcarbonilo, butilcarbonilo, isobu-tilcarbonilo, butilcarbonilo secundário ou butilcarbonilo terciário.

Carboxi-Ci-C4 alquilo é, por exemplo, carboxi-metilo, 2-carboxietilo, 2- ou 3-carboxipropilo, 2-carboxi-2-metilpropilo, 2-carboxi-2-etilbutilo, ou 4-carboxibutilo, em particular carboximetilo. C3-C8 cicloalquilo é preferencialmente cicloal-quilo com 3, 5 ou 6 membros, tal como ciclopropilo, ciclo-pentilo, ciclo-hexilo.

Halogéneo é por exemplo, flúor, cloro, bromo ou iodo.

Os grupos de compostos mencionados a seguir não são para ser considerados como fechados; pelo contrário, parte destes grupos de compostos podem ser substituídos uns pelos outros ou pelas definições apresentadas acima, ou ser omitidos, de um modo significativo, e.g. para substituir definições gerais por definições mais especificas. As 8 ΡΕ2004657 definições mencionadas aplicam-se no âmbito dos princípios gerais da química, tais como, por exemplo, as valências usuais dos átomos. R é de preferência hidrogénio ou deutério. R1 é de preferência arilo, muito particularmente, de preferência fenilo mono-, di-, ou tri-substituído ou naftilo mono-, di- ou tri-substituído, ou heterociclilo, muito particularmente de preferência benzofuranilo, benzo-[b]tiofenilo, benzoimidazolilo, benzo[d]isotiazolilo, benzo [d] isoxazolilo, benzo [b]tiofenilo, imidazolilo, indazoli-lo, indolilo, oxazolilo, piridilo, pirrolilo, tiazolilo ou tiofenilo, opcionalmente mono-, di- ou tri-substituídos. R2 é preferencialmente Ci-C8 alcoxi, hidroxilo, Ci-Cg alquilo, aril-C0-C4 alquilo opcionalmente substituído, deutério, halogéneo, ciano ou hidrogénio. R3 é preferencialmente C1-C4 alquilo. n é preferencialmente um número 0 ou 1. n é particularmente preferencialmente o número 1.

Os substituintes preferidos para arilo ou heterociclilo são Ci-C8 alcoxi, Ci-C8 alquilo, Ci-C8 alquilcarbonilo, Ci-C8 alquilsulfonilo, arilo opcionalmente substituído, ciano, halogéneo, heterociclilo opcionalmente substituído, nitro, óxido, trifluorometilo, trifluorometoxi 9 ΡΕ2004657 ou trimetilsilanilo. Os substituintes muito particularmente preferidos para arilo ou heterociclilo são acetilo, bromo, cloro, ciano, flúor, metanossulfonilo, metoxi, nitro, oxazolilo, óxido, fenilo opcionalmente substituído, tetra-zolilo opcionalmente substituído, tiazolilo opcionalmente substituído ou tiofenilo opcionalmente substituído. É também preferido que R1 seja um substituinte heterociclilo insaturado mono-, di - ou tri-substituído, em que os substituintes são preferencialmente seleccionados do grupo que consiste em Ci-Cg alquilo, Ci-Cg alcoxi, Ci-C8 alcoxicarbonilo, Co-Cs alquilcarbonilo, Ci-C8 alquilsul-fonilo, arilo opcionalmente substituído, aril-C0-C4 alcoxicarbonilo, ciano, halogéneo, heterociclilo opcionalmente substituído, hidroxilo, nitro, óxido, oxo, tri-Ci-C4 al-quilsililo, trifluorometoxi e trifluorometilo.

Os compostos particularmente preferidos de fórmula (I) são os de fórmula geral (Ia) e os seus sais, de preferência os seus sais farmaceuticamente aceitáveis

em que R, R1, R2, R3, Q, m e n têm os significados indicados acima para os compostos de fórmula (I), e em que se aplicam as preferências referidas acima. * designa um átomo de carbono assimétrico. 10 ΡΕ2004657

Os compostos de fórmula (I) ou (Ia) que possuem pelo menos um átomo de carbono assimétrico podem existir na forma de enantiómeros opticamente puros, misturas de enan-tiómeros, ou racematos. Os compostos que têm um segundo átomo de carbono assimétrico podem existir na forma de diastereómeros opticamente puros, misturas de diaste-reómeros, racematos diastereoméricos, misturas de racematos diastereoméricos, ou compostos meso. A invenção abrange todas estas formas. As misturas de enantiómeros, racematos, misturas de diastereómeros, racematos diastereoméricos ou misturas de racematos diastereoméricos podem ser separadas por métodos convencionais, tais como por resolução de racematos, cromatografia em coluna, cromatografia em camada fina, HPLC e outras semelhantes.

Os compostos de fórmula (la) têm pelo menos um átomo de carbono assimétrico, que está marcado com Um composto de fórmula (Ia) é para ser entendido como um composto que tem uma configuração especifica em torno do átomo de carbono assimétrico designado. Se for utilizado um método de síntese que conduz a compostos racémicos, a resolução do racemato é feita de acordo com métodos convencionais, tais como através de uma coluna de HPLC quiral. Os compostos de fórmula (Ia) tal como descritos na presente invenção apresentam uma actividade inibidora acentuada de aldosterona sintase e/ou ΙΙ-β-hidroxilase e uma baixa actividade inibidora de aromatase. A referida 11 ΡΕ2004657 actividade inibidora de aromatase pode, como conhecido pelo perito na matéria e tal como descrito adiante, ser confortavelmente determinada utilizando o estojo ("kit") comercial de inibição da enzima Cypl9, de preferência o estojo ("kit") de inibição de alta produtividade de Cypl9/metoxi-4-trifluorometil-cumarina (MFC) (Becton Dickinson Bioscien-ces, San José, CA, EUA), como descrito a seguir. No estojo ("kit") de inibição acima referido, os compostos de fórmula (ia) têm uma actividade que é pelo menos 10 vezes inferior de preferência 20 vezes inferior, mas mais preferencialmente 40 vezes mais baixa do que os compostos de fórmula (la) com a configuração oposta em torno do átomo de carbono assimétrico marcado com uma menor inibição da acti vidade corresponde a um maior valor da IC50.

Inibição de CYP19:

Exemplo número Valor da IC50 [nM] 24 2769,0 antípoda de 24 7,1 A expressão "sais farmaceuticamente aceitáveis" engloba sais com ácidos orgânicos ou inorgânicos, tais como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ácido nítrico, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, ácido cítrico, ácido fórmico, ácido maleico, ácido acético, ácido succínico, ácido tartárico, ácido metanossulfónico, ácido p-toluenossul-fónico e outros semelhantes. Os sais dos compostos que 12 ΡΕ2004657 contêm grupos formadores de sais são, em particular, sais de adição de ácidos, sais com bases ou então, se apropriado, se estiverem presentes dois ou mais grupos formadores de sais, são sais mistos ou sais internos.

Os compostos de fórmula (I) ou (Ia) podem ser preparados de um modo análogo aos processos de preparação descritos per se na literatura pela JP63145286 (Esquema).

Os pormenores das variantes de preparação específicas podem ser encontrados nos exemplos.

Os compostos de fórmula (I) ou (la) também podem ser preparados em forma opticamente pura. A separação em antípodas é possível por métodos conhecidos per se, quer, de preferência, numa fase precoce da síntese, por formação de um sal com um ácido opticamente activo tal como, por exemplo, ácido (+) ou (-)-mandélico e separação dos sais diastereoméricos por cristalização fraccionada, ou, preferencialmente, numa fase mais tardia, por derivatização com um componente auxiliar quiral, tal como, por exemplo, cloreto de (+)- ou (-)-canfanilo e separação dos produtos diastereoméricos por cromatografia e/ou cristalização e clivagem subsequente da ligação ao auxiliar quiral. Os sais 13 ΡΕ2004657 diastereoméricos puros e derivados podem ser analisados para determinar a configuração absoluta do composto presente, usando métodos espectroscópicos habituais, representando a espectroscopia de raios X de cristal único um método particularmente apropriado.

Os sais são principalmente os sais farmaceutica-mente aceitáveis ou não tóxicos de compostos de fórmula (I) ou (Ia). Esses sais são formados, por exemplo, por compostos de fórmula (I) ou (Ia) contendo um grupo ácido, tal como um grupo carboxilo ou sulfo e são, por exemplo, os seus sais com bases adequadas, tais como sais de metais não tóxicos derivados de metais do grupo Ia, Ib, lia e Ilb da Tabela Periódica dos Elementos, tais como sais de metais alcalinos, especialmente sais de litio, sódio ou potássio, sais de metais alcalino-terrosos, por exemplo sais de magnésio ou cálcio, e também sais de zinco ou sais de amónio, e adicionalmente sais formados com aminas orgânicas, tais como mono-, di-, ou trialquilaminas não substituídas ou substituídas por hidroxilo, especialmente mono-, di-, ou trialquilaminas inferiores, ou com bases de amónio quaternário, e.g. metil-, etil-, dietil- ou trietilamina, mono-, bis ou tris(2-hidroxil-alquil inferior) aminas, tais como etanolamina, dietanolamina ou tri-etanolamina, tris(hidroxilmetil)metilamina ou 2-hidroxil-terc-butilamina, N,N-di-alquil inferior-N- (hidroxi-alquil inferior)amina, tal como N,N-di-N-dimetil-N-(2-hidroxil-etil)amina, ou N-metil-D-glucamina, ou hidróxidos de amónio 14 ΡΕ2004657 quaternário, tal como hidróxido de tetrabutilamónio. Os compostos de fórmula (I) ou (Ia) contendo um grupo básico, tal como um grupo amino, podem formar sais de adição de ácidos, com ácidos inorgânicos adequados, por exemplo, tal como um halogenoácido, tal como ácido clorídrico, ácido bromídrico, ou ácido sulfúrico com a substituição de um ou ambos os protões, ácido fosfórico com substituição de um ou mais protões, ácido ortofosfórico ou ácido metafosfórico, por exemplo, ou ácido pirofosfórico com a substituição de um ou mais protões, ou com ácidos orgânicos carboxílicos, sulfónicos ou fosfónicos ou ácidos sulfâmicos N-substituídos, e.g. ácido acético, ácido propiónico, ácido glicólico, ácido succínico, ácido maleico, ácido hidroxima-leico, ácido metilmaleico, ácido fumárico, ácido málico, ácido tartárico, ácido glucónico, ácido glucárico, ácido glucurónico, ácido cítrico, ácido benzóico, ácido cinâmico, ácido mandélico, ácido salicílico, ácido 4-aminossali-cílico, ácido 2-fenoxibenzóico, ácido 2-acetoxibenzóico, ácido embónico, ácido nicotínico, ácido isonicotínico e também aminoácidos, tais como os α-aminoácidos especificados anteriormente, e também ácido metanossulfónico, ácido etanossulfónico, ácido 2-hidroxietanossulfónico, ácido etano-1,2-dissulfónico, ácido benzenossulfónico, ácido 4-toluenossulfónico, ácido naftaleno-2-sulfónico, 2- ou 3-fosfo-glicerato, 6-fosfato de glucose, ácido N-ciclohexilsulfâmico (para formar ciclamatos), ou com outros compostos orgânicos ácidos, tais como ácido ascórbico. Os 15 ΡΕ2004657 compostos de fórmula (I) ou (Ia) que contém grupos ácidos e básicos também podem formar sais internos. 0 isolamento e a purificação também podem ser realizados utilizando sais farmaceuticamente inadequados.

Os compostos de fórmula (I) ou (la) também incluem os compostos em que um ou mais átomos estão subst-tuídos pelos seus isótopos estáveis, não radioactivos: por exemplo, um átomo de hidrogénio por deutério.

Devido à relação próxima entre um composto livre e um sal do composto, um composto definido nesta invenção também inclui a sua forma de sal, na medida em que isso seja possível e apropriado. A aldosterona é uma hormona esteroidal que é sintetizada nas células da zona glomerular do córtex supra-renal pela enzima aldosterona sintase (CYP11B2). A produção e secreção de aldosterona são reguladas pela hormona adrenocorticotrópica (ACTH), angiotensina li, iões potássio e sódio. A função biológica primária da aldosterona é a regulação do balanço de sais, com a aldosterona a controlar a reabsorção de iões sódio do filtrado renal e a secreção de iões potássio para o filtrado renal. 0 estado de secreção excessiva de aldosterona, também chamado hiperal-dosteronismo, pode conduzir a uma tensão arterial elevada, hipocalémia, alcalose, fraqueza muscular, poliúria, poli- 16 ΡΕ2004657 dipsia, edemas, vasculite, aumento da formação de cola-génio, fibrose e disfunção endotelial.

Os compostos químicos descritos nesta invenção inibem a enzima do citocromo P450 aldosterona sintase (CYP11B2) e podem portanto ser utilizados para tratar estados induzidos por aldosterona. Os compostos descritos podem ser utilizados para a prevenção, retardamento da progressão ou tratamento de estados tais como hipocalemia, hipertensão, insuficiência cardíaca congestiva, insuficiência renal aguda e em particular crónica, restenose cardiovascular, aterosclerose, síndrome metabólica (síndrome x), adiposidade (obesidade), vasculite, hiperaldosteronismo primário e secundário, nefropatia, enfarte do miocárdio, doença cardíaca coronária, formação de colagénio aumentada, fibrose, alterações do tecido vascular e coronário (remodelação alterações) decorrente de tensão arterial elevada, disfunção endotelial, e edemas devidos a cirrose, nefrose e insuficiência cardíaca congestiva. 0 cortisol é uma hormona esteroidal que é sintetizada quase exclusivamente nas células da zona fasciculada do córtex supra-renal pela enzima do citocromo P450 ΙΙ-β-hidroxilase (CYPllBl). A produção de cortisol é regulada por ACTH. A função biológica principal do cortisol é regular a produção e a disponibilização de hidratos de carbono para o cérebro e outros tecidos metabolicamente activos. A produção e secreção aumentadas de cortisol é uma resposta fisiológica normal à tensão e conduz à mobilização 17 ΡΕ2004657 essencial de gorduras, proteínas e hidratos de carbono para cobrir uma maior procura de energia física. A libertação excessiva de cortisol crónica descreve a patologia da síndroma de Cushing. A síndroma de Cushing pode resultar, por um lado, da hipersíntese de cortisol, que pode ser produzido por um tumor adrenocortical, ou por outro lado como consequência de estimulação excessiva do córtex adrenal por ACTH. A primeira forma é referida como hiper-cortisolismo primário, a segunda forma como hipercorti-solismo secundário. Uma secreção excessiva e persistente de cortisol pode também acompanhar uma resposta ao stress, o que pode levar a depressão e a supressão do sistema imunitário.

Os compostos químicos descritos nesta invenção inibem a enzima ΙΙ-β-hidroxilase (CYP11B1) e podem deste modo, devido à inibição da síntese do cortisol, ser utilizados para prevenção, para retardamento da progressão ou tratamento da síndrome de Cushing e também das consequências físicas e mentais da secreção de cortisol excessiva e persistente em estados de stress. A inibição de aldosterona sintase (CYP11B2), bem como de ΙΙ-β-hidroxilase (CypllBl) e aromatase (Cypl9) pelos compostos aqui descritos pode ser medida pelo seguinte ensaio in vitro. A linha celular NCI-H295R foi originalmente derivada de um carcinoma das glândulas suprarrenais e foi 18 ΡΕ2004657 subsequentemente caracterizada na literatura para a secreção de indutível de hormonas esteroidais e a presença de enzimas chave necessários para a esteroidogénese. Estas incluem CypllA (clivagem da cadeia lateral do colesterol), CypllBl (esteróide 11—β -hidroxilase), CypllB2 (aldosterona sintase), Cypl7 (esteróide 17-a-hidroxilase e 17,20 lia-se), Cypl9 (aromatase), Cyp2lB2 (esteróide 21-hidroxilase) e 3β-Η3ϋ (hidroxi-esteróide desidrogenase). As células têm as caracteristicas fisiológicas de células suprarrenais fetais humanas zonalmente indiferenciadas, com a capacidade para produzir as hormonas esteróides de cada uma das três zonas fenotipicamente distintas encontradas no córtex suprarrenal adulto.

As células NCI-H295R (American Type Culture Collection, ATCC, Rockville, MD, EUA) são cultivadas em meio F12 Ham de Eagle modificado por Dulbecco (DME/F12) que é suplementado com soro Ultroser SF (Soprachem, Cergy-Saint-Christophe, França), bem como insulina, transferrina, selenite (I-T-S, Becton Dickinson Biosiences, Franklin Lakes, NJ, EUA) e antibióticos, em balões de cultura de células de 75 cm2 a uma temperatura de 37°C e atmosfera humidificada de 95% de ar/5% de C02. As células são subsequentemente transferidas para uma placa de 24 poços e cultivadas na presença de meio DME/F12 que é complementado com 0,1% de albumina de soro de bovino em vez de soro Ultroser SF. A experiência é iniciada pela incubação das células durante 72 horas em meio DME/F12 suplementado com 0,1% de albumina de soro de bovino e os compostos de teste 19 ΡΕ2004657 na presença de agentes estimuladores de células. O composto de teste é adicionado numa gama de concentrações de 0,2 nanomolar a 20 micromolar. A angiotensina II (e.g. numa concentração de 10 ou 100 nanomolar), iões potássio (e.g. a 16 milimolar), forscolina (e.g. a 10 micromolar) ou uma combinação de dois agentes podem servir como agentes estimuladores de células. A secreção celular de aldo-sterona, cortisol, corticosterona e estradiol/estrona para o meio de cultura de células pode ser avaliada quantitativamente com radioimunoensaios disponíveis comercialmente e anticorpos específicos (e.g. Diagnostics Products Corporation, Los Angeles, CA, EUA) de acordo com as instruções do fabricante. O grau de secreção de um esteróide selectivo é utilizado como uma medida da actividade enzimática, respectivamente inibição enzimática, na presença ou ausência de um composto de teste. A actividade inibidora enzimática dependente da dose de um composto é reflectida numa curva de inibição que é caracterizada por um valor da IC50. Os valores da IC50 para compostos de teste activos são gerados por análise de regressão linear simples para estabelecer as curvas de inibição sem ponderação de dados. A curva de inibição é gerada pela adaptação de uma função logística a 4 parâmetros aos dados em bruto das amostras utilizando a abordagem de mínimos quadrados. A função é descrita como se segue: Y = (d-a)/((l + (x/c)*b) + a) 20 ΡΕ2004657 com: a = mínimo b = declive c = IC50 d = máximo x = concentrações de inibidor

Os compostos da presente invenção apresentam nos sistemas de ensaio in vitro aqui descritos actividades inibidoras com valores da IC50 para inibição da síntese de aldosterona que variam de 10”4 a IO”10 mol/L, e valores da IC50 para inibição da síntese do cortisol que variam de 10“4 a 10~10 mol/L.

Adicionalmente, a inibição in vitro da actividade de aromatase dos compostos da presente invenção pode ser demonstrada pela utilização de um estojo ("kit") comercial de inibição da enzima Cypl9. O estojo ("kit") de inibição de Cypl9/metoxi-4-trifluorometil-cumarina (MFC) de alta produtividade (Becton Dickinson Biosciences, San Jose, CA, EUA), por exemplo, está concebido para o rastreio de potenciais inibidores da actividade catalítica de Cypl9 num formato de 96 poços. O estojo ("kit") inclui enzima Cypl9 humana recombinante na forma de supersomas, um substrato fluorescente de P450, um sistema reqenerador de NADPH, um tampão de reacção e um reagente de paragem. O MFC, o substrato fluorogénico, é rapidamente convertido por 21 ΡΕ2004657 supersomas de Cypl9 no produto altamente fluorescente 7-hidroxi-4-trifluorometil cumarina (7-HFC). A realização do ensaio na presença de várias concentrações de compostos inibidores que variam de 0,2 nanomolar a 20 milimolar ocorre de acordo com as instruções do fabricante. A curva de inibição é gerado pelo ajustamento de uma função logística a 4 parâmetros aos dados em bruto das amostras utilizando a abordagem de mínimos quadrados. A função é descrita como se segue: Y = (d-a)/((1 + (x/c)'b) + a) com: a = valores de dados mínimos b = declive C = IC50 d = valores de dados máximos x = concentrações de inibidor A actividade supressora de aldosterona e corticosterona dos compostos aqui descritos pode ser avaliada com o seguinte protocolo in vivo.

Ratos machos adultos Wistar com peso entre 250 e 350 gramas são mantidos nas condições habituais de 12 horas de luz e 12 horas de escuridão a uma temperatura de 23°C ± 2°C. No primeiro dia da experiência, os animais recebem uma ΡΕ2004657 injecção subcutânea de um produto de ACTH em depósito numa dose de 1,0 mg/kg de peso (SYNACTHEN-depot, Novartis, Basileia, CH), 16 horas antes da administração de um composto de teste. Estudos piloto mostraram que esta dose de ACTH aumentou significativamente os niveis plasmáticos de aldosterona e de corticosterona em 5 a 20 vezes ao longo de um periodo de pelo menos 18 horas. Um método alternativo para estimular a secreção de aldosterona consiste em submeter os ratos a uma dieta com baixo teor de sal durante 48 horas e aplicar o diurético furosemida a 10 mg/kg por administração subcutânea ou intraperitoneal de 16 horas, respectivamente 2 horas antes do inicio da experiência. No segundo dia da experiência, os animais são divididos em grupos de teste de 5 animais e submetidos a uma primeira sangria 1 hora antes da administração do composto de teste. Subsequentemente, e 16 horas depois da injecção do produto de ACTH, os animais receberam ou veiculo ou composto de teste dissolvido no veiculo numa gama de doses variável desde 0,02 até 20 mg/kg através de sonda oral. Os animais são sangrados mais duas vezes a partir das veias subcavas sob anestesia com isoflurano 2 e 6 horas após a administração. O sangue é recolhido em tubos tratados com hepa-rina. As amostras de plasma são obtidas por centrifugação e armazenadas a -20°C. Um método alternativo para sangrar animais de forma dependente do tempo consiste na utilização de animais que são cronicamente cateterizados na carótida o que permite a amostragem periódica de até 0,2 mL de sangue utilizando um AccuSampler (DiLab Europa, Lund, Suécia). A amostragem de sangue com o AccuSampler pode ocorrer 1 hora 23 ΡΕ2004657 antes da administração de um composto de teste e 2, 4, 6, 8, 12, 16 e 24 horas depois. As amostras de sangue são anticoaguladas com heparina e centrifugadas. As concentrações de aldosterona e corticosterona nas amostras de plasma podem ser determinadas com um ensaio radioimunológico tal como descrito acima para os sistemas de ensaio in vitro. A supressão selectiva de niveis plasmáticos de esteróides como por exemplo aldosterona em comparação com corticosterona pode servir como uma medida da biodispo-nibilidade in vivo e actividade inibidora enzimática farmacodinâmica dos compostos aqui descritos. A avaliação dos dados pode ocorrer em relação à aplicação de veiculo ou quantitativamente por determinação da área sob a curva (AUC).

Exemplos de supressão de niveis de aldosterona e corticosterona:

Canposto do Exemplo Dose (mg/kg p.o.) Níveis de aldosterona (% de alteração^ às 2 h) Níveis de corticosterona (% de alteração4 às 2 h) 2 4 -56 -22 4 4 -19 -10 18 4 -33 4 19 4 -65 1,7 + As alterações resultantes dos níveis plasmáticos de aldosterona, respecti-vamente corticosterona, por administração oral de um composto de teste são expressos como percentagem (%) de alteração que é definida pela razão de [(nível plasmático de esteróide 2 horas após a administração do composto) - (nível plasmático de esteróide 1 hora antes da administração do composto) a dividir por (nível plasmático de esteróide 1 hora antes da administração do composto). ΡΕ2004657

De modo a atingir os efeitos desejados num doente a ser tratado, os compostos da presente invenção podem ser administrados por via oral ou por via entérica, tal como, por exemplo, por via intravenosa, intraperitoneal, intramuscular, rectal, subcutânea ou então por injecção directa da substância activa localmente em tecidos ou tumores. 0 termo doente abrange espécies de sangue quente e mamíferos, tais como, por exemplo, ser humano, primata, bovino, cão, gato, cavalo, carneiro, murganho, rato e porco. Os compostos podem ser administrados como produto farmacêutico ou ser incorporados num dispositivo de administração que assegura a libertação controlada do composto. A quantidade de substância a ser administrada pode variar ao longo de uma gama ampla e representa cada dose eficaz. Dependendo do doente a ser tratado ou da patologia a ser tratada e modo de administração, a dose da substância eficaz cada dia pode estar entre cerca de 0,005 e 50 miligramas por quilograma de peso corporal, mas está preferencialmente entre cerca de 0,05 e 5 miligramas por quilograma de peso corporal cada dia.

Para administração oral, os compostos podem ser formulados em formas farmacêuticas sólidas ou líquidas, tais como, por exemplo, cápsulas, pílulas, comprimidos, comprimidos revestidos, grânulos, pós, soluções, suspensões ou emulsões. A dose de uma forma farmacêutica sólida pode ser uma cápsula de gelatina dura usual, que pode ser cheio 25 ΡΕ2004657 com ingredientes activos e excipientes tais como lubrificantes e enchimentos, tais como, por exemplo, lactose, sacarose e amido de milho. Outra forma de administração pode ser representada por formação de comprimidos da substância activa da presente invenção. A produção de comprimidos pode ter lugar com excipientes convencionais para comprimidos, tais como, por exemplo, lactose, sacarose, amido de milho, em associação com um aglutinante de goma acácia, amido de milho ou gelatina, desintegrantes tais como fécula de batata ou polivinilpirrolidona reticulada (PVPP) e lubrificantes tais como ácido esteárico ou estearato de magnésio.

Exemplos de excipientes adequados para cápsulas de gelatina mole são óleos vegetais, ceras, gorduras, polióis semi-sólidos e líquidos, etc.

Exemplos de excipientes adequados para a produção de soluções e xaropes são, água, polióis, sacarose, açúcar invertido, glucose, etc.

Para administração rectal, os compostos podem ser formulados em formas farmacêuticas sólidas ou líquidas tais como, por exemplo, supositórios. Exemplos de excipientes apropriados para supositórios são óleos naturais ou endurecidos, ceras, gorduras, polióis semilíquidos ou líquidos, etc. 26 ΡΕ2004657

Para administração parentérica, os compostos podem ser formulados como dosagem injectável do ingrediente activo num liquido ou suspensão. As preparações normalmente compreendem um solvente estéril fisiologicamente tolerado que pode compreender uma emulsão de água em óleo, com ou sem tensioactivo, e outros excipientes farmaceuticamente aceitáveis. Óleos que podem ser utilizados para essas preparações são parafinas e triglicéridos de origem vegetal, animal ou sintética, tais como, por exemplo, óleo de amendoim, óleo de soja e óleo mineral. As soluções injec-táveis geralmente compreendem veículos líquidos tais como, preferencialmente, água, soro fisiológico, dextrose ou soluções de açúcares relacionadas, etanol e glicóis tais como propileno glicol ou polietileno glicol.

As substâncias podem ser administradas como sistema de penso transdérmico, como injecções de depósito ou implante se a formulação tornar possível a libertação controlada do ingrediente activo. A substância activa pode ser comprimida na forma de grânulos ou de cilindros estreitos e ser administrada subcutaneamente ou intramuscularmente como injecções de depósito ou implante.

Os produtos farmacêuticos podem adicionalmente compreender também conservantes, solubilizantes, substâncias que aumentam a viscosidade, estabilizadores, agentes molhantes, emulsionantes, edulcorantes, corantes, agentes aromatizantes, sais para alterar a pressão osmótica, 27 ΡΕ2004657 tampões, agentes de revestimento ou anti-oxidantes. Também podem compreender outras substâncias terapeuticamente valiosas.

Os compostos da invenção aqui descritos possibilitam os seguintes métodos de utilização: - como associação terapêutica na forma de um produto ou de um estojo ("kit") que é constituído por componentes individuais que consistem num composto aqui descrito, em forma livre ou como um sal farmaceuticamente aceitável, e pelo menos uma forma farmacêutica cujo ingrediente activo tem um efeito hipotensor, inotrópico, antidiabético, de redução da obesidade ou hipolipidémico, que podem ser utilizados simultaneamente ou sequencialmente. 0 produto e o estojo ("kit") podem compreender instruções para utilização. como método para utilização combinada, tal como, por exemplo, em simultâneo ou em sucessão sequencial, de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto aqui descrito, em forma livre ou de sal farmaceuticamente aceitável, e de um segundo ingrediente activo com efeito hipotensor, inotrópico, antidiabético, de redução da obesidade ou hipolipidémico.

Os compostos aqui descritos e os seus sais 28 ΡΕ2004657 farmaceuticamente aceitáveis podem ser utilizados em associação com (i) Um ou mais ingredientes activos hipotensores, tais como por exemplo: inibidores de renina como aliskiren; bloqueadores dos receptores de angiotensina II tais como candesartan, irbesartan, olmesa-rtan, losartan, valsartan, telmisartan etc.; inibidores de ACE tais como quinapril, ramipril, trandolapril, lisinopril, capto-pril, enalapril, etc.; antagonistas do cálcio tais como nifedipina, nicardipina, verapamil, isradipina, nimodipi-na, amlodipina, felodipina, nisoldipina, diltiazem, fendilina, flunarizina, per-hexe-lina, galopamil, etc.; diuréticos como hidroclorotiazida, clorotia-zida, acetazolamida, amilorido, bumetanide, benzotiazida, ácido etacrínico, furosemida, indacrinona, metolazona, triamtereno, clor-talidona, etc.; 29 ΡΕ2004657 bloqueadores dos receptores de aldosterona, como espironolactona, eplerenona; bloqueadores de receptores de endotelina como bosentan; inibidores de fosfodiesterases como a amri-nona, sildenafil; vasodilatadores directos como di-hidralazina, minoxidil, pinacidil, diazóxido, nitroprus-siato, flosequinan, etc.; bloqueadores de receptores α e β tais como fentolamina, fenoxibenzamina, prazosina, dexazosina, terazosina, carvedilol, atenolol, metoprolol, nadolol, propranolol, timolol, carteolol, etc.; inibidores de endopeptidases neutras (NEP); simpatolíticos como metildopa, clonidina, guanabenz, reserpina (ii) um ou mais agentes que têm actividade inotrópica, como por exemplo: glicosidos cardíacos como digoxina; 30 ΡΕ2004657 estimuladores de receptores β como dobuta-mina; hormona tiróide como tiroxina (iii) um ou mais agentes que têm actividade antidiabética, como por exemplo: - insulinas como insulina aspart, insulina huma na, insulina lispro, insulina glargine e ainda derivados de insulina de actuação rápida, média e longa e associações sensibilizadores de insulina como rosiglita-zona, pioglitazona; sulfonilureias como glimepiride, clorpropa-mida, glipizide, gliburide, etc.; biguanidas como metformina; - inibidores de glucosidase como acarbose, mi- glitol; meglitinides como repaglinida, nateglinide; (iv) um ou mais ingredientes de redução da obesidade, como por exemplo: ΡΕ2004657 31 inibidores de lipase como orlistat; supressores do apetite como sibutramina, fentermina; (v) um ou mais ingredientes hipolipidémicos, como por exemplo, inibidores de HMG-CoA redutase como lovasta-tina, fluvastatina, pravastatina, atorvasta-tina, simvastatina, rosuvastatina etc.; derivados de fibrato, como fenofibrato, gem-fibrozilo etc.; ingredientes activos de ligação de ácidos biliares como colestipol, colestiramina, colesevelam; inibidores de absorção de colesterol como ezetimibe; ácido nicotinico como niacina e outros agentes que são adequados para o tratamento de tensão arterial elevada, insuficiência cardíaca ou doenças vasculares associadas a diabetes e doenças renais, tais como insuficiência renal aguda ou crónica, em seres humanos 32 ΡΕ2004657 e animais. Essas associações podem ser utilizadas separadamente ou em produtos que compreendem uma pluralidade de componentes.

Os compostos aqui descritos e os seus sais farmaceuticamente aceitáveis podem, adicionalmente, ser utilizados em associação com (i) um sistema de teste de diagnóstico que permite a determinação quantitativa do nível de aldosterona no plasma (PAC, concentração de aldosterona no plasma) (ii) um sistema de teste de diagnóstico que permita a determinação quantitativa do nível de renina no plasma (PRC, concentração de renina no plasma) (iii) um sistema de teste de diagnóstico que permita a determinação quantitativa da actividade de renina no plasma (PRA, actividade de renina no plasma) (iv) um sistema de teste de diagnóstico que permita a determinação quantitativa do nível de aldoste-rona/renina no plasma (ARC, concentração de renina e aldosterona) (v) um sistema de teste de diagnóstico que permita a determinação quantitativa da actividade de aldosterona/renina no plasma (ARR, razão da actividade de aldosterona para renina) 33 ΡΕ2004657 (vi) um sistema de teste de diagnóstico que permita a determinação quantitativa do nivel de cortisol no plasma (PCC, concentração de cortisol no plasma)

Essas associações de diagnóstico-terapêutica podem ser utilizadas separadamente ou em produtos que compreendem uma pluralidade de componentes.

EXEMPLOS

Os exemplos seguintes ilustram a presente invenção. Todas as temperaturas são indicadas em graus Celsius, as pressões em mbar. Salvo indicação em contrário, as reacções foram realizadas à temperatura ambiente. A abreviatura "Rf = xx (A)" significa, por exemplo, que o Rf determinado no sistema de solventes A tem o valor xx. A proporção dos solventes para um outro é sempre expressa em fracções em volume. Os nomes químicos de produtos finais e intermediários foram gerados com a ajuda do programa Autonom 2000 (Nomenclatura Automática).

Gradiente de HPLC em Hypersil BDS C-18 (5 pm) ; coluna: 4 x 125 mm: 90% de água*/10% de acetonitrilo* até 0% de água/100% de acetonitrilo* em 5 minutos +2,5 minutos (1,5 ml/min).

As abreviaturas utilizadas são como se segue: 34 ΡΕ2004657

Rf razão entre a distância percorrida por uma substância e a distância do eluente desde o ponto de partida em cromatografia de camada fina

Rt tempo de retenção de uma substância em HPLC (em minutos) p.f. ponto de fusão (temperatura)

35 ΡΕ2004657

Exemplo 1 4- (5,6-Di-hidro-8H-imidazo[5,1-c] [1,41oxazin-8-il) benzonitrilo

Uma solução de 1,20 mmol de metanossulfonato de 2-[ (4-cianofenil)-(3H-imidazol-4-il)metoxi]etilo em 10 mL de acetonitrilo é aquecida a refluxo durante 24 horas. A 36 ΡΕ2004657 mistura reaccional é arrefecida até à temperatura ambiente e evaporada. 0 composto em epígrafe é obtido na forma de um sólido branco do resíduo por cromatografia "flash" (Si02 60F). Rf = 0,14 (diclorometano-amoníaco 2M em etanol 95:5); Rt = 4,29.

Os materiais de partida são preparados como se segue: a) Metanossulfonato de 2-[ (4-cianofenil)-(3H-imidazol-4-il)metoxi]etilo 1,44 mmol de diisopropiletilamina e 1,20 mmol de cloreto de metanossulfonilo são adicionados a uma solução de 1,20 mmol de 4-[(2-hidroxietoxi)-(3H-imidazol-4-il)me-til]benzonitrilo em 10 mL de diclorometano a 0°C. A mistura reaccional é agitada a 0°C durante 3 horas, vertida água e extraída com diclorometano. As fases orgânicas combinadas são lavadas com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secas sobre sulfato de sódio e evaporadas. O composto em epígrafe em bruto é utilizado sem purificação adicional no passo seguinte. b) 4-[(2-Hidroxietoxi)-(3H-imidazol-4-il)metil]-benzonitrilo

Adiciona-se 2,45 mmol de boro-hidreto de sódio a uma solução de 1,63 mmol de [(4-ciano-fenil)-1-(tritil-lH-imidazol-4-il)metoxi]acetato de etilo em 10 mL de etanol à 37 ΡΕ2004657 temperatura ambiente. A mistura reaccional é agitada à temperatura ambiente durante 16 horas e depois evaporada. 0 resíduo é retomado em diclorometano e solução aquosa saturada de bicarbonato de sódio, as fases são separadas e a fase aquosa é extraída de novo com diclorometano. As fases orgânicas combinadas são secas com sulfato de sódio e evaporadas. 0 composto em epígrafe é obtido como um sólido branco a partir do resíduo por cromatografia "flash" (Si02 60F). Rf = 0,10 (acetato de etilo-heptano 1:2); Rt = 7,39. c) [ (4-Cianofenil)-(l-tritil-lH-imidazol-4-il)- metoxi]acetato de etilo 5,00 mmol de 4-[hidroxi-(l-tritil-lH-imidazol-4-il)metil]benzonitrilo são adicionados a uma mistura de 6,50 mmol de (dispersão de hidreto de sódio a 60% em parafina) em 20 mL de N, N-dimetilf ormamida a 0°C. A mistura reaccional é agitada a 0°c durante 1 hora e em seguida adiciona-se ácido bromoacético gota a gota. A mistura reaccional é agitada à temperatura ambiente durante 16 horas, vertida em água e extraída com éter terc-butil metílico. As fases orgânicas combinadas são lavadas com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secas com sulfato de sódio e evaporadas. O composto em epígrafe é obtido como um óleo de cor âmbar a partir do resíduo por cromatografia "flash" (Si02 60F) . Rf = 0,42 (acetato de etilo-heptano 1:2); Rt = 8,00. 38 ΡΕ2004657 d) 4-[hidroxi-(l-tritil-lH-imidazol-4-il)metil]-benzonitrilo

Uma solução de 14,80 mmol de 4-iodobenzonitrilo [3058-39-7] em 20 mL de tetra-hidrofurano é arrefecida a -30°C, e adiciona-se 14,80 mmol de cloreto de i-propilmagnésio (2 M em tetra-hidrofurano). A mistura é agitada a -30°C durante 60 minutos e adiciona-se uma solução pré-arrefecida a -30°C de 11,84 mmol de 1-tritil-lH-imidazole-4-carbaldeído [33016-47-6] em 30 mL de tetra-hidrofurano. A mistura é agitada a -30°C durante 30 minutos e em seguida a mistura reaccional é aquecida até à temperatura ambiente e desactivada com solução aquosa saturada de cloreto de amónio. As fases são separadas e a fase aquosa é extraida com acetato de etilo (3x). As fases orgânicas combinadas são lavadas com solução aquosa saturada de cloreto de sódio, secas com sulfato de magnésio e evaporadas. O composto em epígrafe é obtido como um sólido branco a partir do resíduo por meio de recris-talização de acetato de etilo. Rf = 0,23 (CH2C12-NH3 2 M em EtOH 97:3); Rt = 7,32.

Os seguintes compostos são preparados por analogia com o processo descrito no exemplo 1: 3 4-(8-Metil-5,6-di-hidro-8H-imidazo[5,1-c] [1,4]-oxazin-8-il)benzonitrilo partindo de 4-[1-hidroxi-l-(1-tritil-lH-imidazol- 39 ΡΕ2004657 4-il)etil]benzonitrilo. Sólido bege; Rf = 0,26 (diclorome-tano-amoníaco 2 M em etanol 97:3); Rt = 4,54. O material de partida é preparado como se segue: a) 4-[1-Hidroxi-l-(l-tritil-lH-imidazol-4-il)-etil]benzonitrilo 12,98 mmol de solução de brometo de metilmagnésio (3 M em éter dietilico) são adicionados gota a gota a uma solução de 11,80 mmol de 4-(l-tritil-lH-imidazol-4-carbonil)benzonitrilo em 50 mL de tetra-hidrofurano a -30°C. O banho de arrefecimento é retirado e a mistura é agitada à temperatura ambiente durante 1 hora. A mistura reaccional é diluída com 100 mL de diclorometano e adiciona-se 100 mL de solução aquosa saturada de cloreto de amónio. As fases são separadas e a fase aquosa é extraída com diclorometano (lx). As fases orgânicas combinadas são secas sobre sulfato de magnésio e evaporadas. O composto em epígrafe é obtido sem purificação adicional como uma espuma branca a partir do resíduo. Rf = 0,15 (heptano/acetato de etilo 1:1, Rt = 7,40. b) 4-(l-Tritil-lH-imidazol-4-carbonil)benzonitrilo

Uma solução de 27,20 mmol de 4-[hidroxi-(1-tritil-lH-imidazol-4-il)metil]benzonitrilo (Exemplo 1 d) em 100 mL de diclorometano é misturada com 272, 00 mmol de óxido de manganês(IV) e aquecida a refluxo durante 2 horas. 40 ΡΕ2004657 A mistura reaccional é deixada arrefecer e é filtrada através de terra de diatomáceas. A terra de diatomáceas é lavada com 100 mL de diclorometano e as fases orgânicas combinadas são evaporadas. O composto em epígrafe é obtido sem purificação adicional como um sólido branco a partir do residuo. Rf = 0,13 (heptano/acetato de etilo 4:1, Rt = 8,39. 5 4-(5,6-Di-hidro-8H-imidazo[5,1-c][1,4]oxazin-8-il)-2-fluorobenzonitrilo partindo de 2-fluoro-4-iodobenzonitrilo [137553- 42-5]. 7 8-(4-Nitrophenil)-5,6-dihvdro-8H-imidazo[5, Ιο] -[1,4]oxazina partindo de l-iodo-4-nitrobenzeno [636-98-6]. É utilizado tetra-hidrofurano é usada em vez de N, N-dimetilformamida como solvente no passo c 9 8-(4-Metanossulfonilfenil)-5,6-di-hidro-8H-imidazo[5,1-c][1,4]oxazina partindo de l-iodo-4-metanossulfonilbenzeno [64984-08-3]. 41 ΡΕ2004657 10 4- (5,6-Di-hidro-8H-imidazo[5,1-cl] [1,4]oxazin-8-il)-2,6-difluorobenzonitrilo partindo de 2,6-difluoro-4-iodobenzonitrilo [14743-50-3]. 11 4-(5,6-Di-hidro-8H-imidazo[5,1-c][1,4]oxazin- 8-il)-2-metoxibenzonitrilo partindo de 4-iodo-2-metoxibenzonitrilo [677777— 44-5] . 12 8-Benzo [b]tiofen-3-il-5,6-di-hidro-8H-imidazo-[5,1-c] [l,4]oxazina partindo de 3-iodobenzo[b]tiofeno [36748-88-6]. 13 8-(7-Fluorobenzofuran-3-il)-5,6-di-hidro-8H- imidazo[5,1-c][l,4]oxazina partindo de 3-bromo-7-fluorobenzofurano [1288851- 92-3] . 14 8-Piridin-4-il-5,6-di-hidro-8H-imidazo[5,1-c]-[1,4]oxazina partindo de 4-iodopiridina [15854-87-2]. 42 ΡΕ2004657 15 4-(6,6-Dimetil-5,6-dl-hldro-8H-imidazo[5,1-c]-[1,4]oxazin-8-il)benzonitrilo partindo de 2-[(4-cianofenil)-(1-tritil-lH-imida-zol-4-il)metoxi]-2-metilpropionato de etilo.

Os materiais de partida são preparados como se segue: a) 2-[(4-Cianofenil)(l-tritil-lH-imidazol-4-il)-metoxi]-2-metilpropionato de etilo

Adiciona-se 4,00 mmol de diisopropilamina de lítio (2 M em tetra-hidrofurano) a uma solução de 4,00 mmol de 2-[(4-cianofenil)(l-tritil-lH-imidazol-4-il)metoxi]-propionato de etilo em 40 mL de tetra-hidrofurano e 5 mL de triamida hexametilfosfórica (HMPA) a -78°C. A mistura é agitada a -78°C durante 15 minutos e adiciona-se 4,00 mmol de iodeto de metilo. A mistura reaccional é agitada a -78°C durante 30 minutos e aquecida até à temperatura ambiente ao longo de 2 horas. A mistura reaccional é diluída com diclorometano e adiciona-se solução aquosa saturada de cloreto de amónio. As fases são separadas e a fase aquosa é extraída com diclorometano (lx). As fases orgânicas combinadas são secas com sulfato de sódio e evaporadas. O composto em epígrafe é identificado a partir do resíduo com base no Rf por cromatografia "flash" (Si02 60F) . 43 ΡΕ2004657 b) 2-[(4-Cianofenil)(l-tritil-lH-imidazol-4-il)-metoxi]propionato de etilo 0 composto em epígrafe é preparado por analogia com o Exemplo lc partindo de 2-bromopropionato de etilo [535-11-5] e 4-[hidroxi-(l-tritil-lH-imidazol-4-il)metil]-benzonitrilo (Exemplo ld). 17 8-(3,4-Difluorofenil)-5,6-di-hidro-8H-imidazo-[5,1-c][l,4]oxazina partindo de 3,4-difluoro-l-iodobenzeno [64248—58— 4]. Cera branca. 19 3-(5, 6-Di-hidro-8H-imidazo[5,1-c][1,4]oxazin- 8-il)benzonitrilo partindo de 3-iodobenzonitrilo [69113-59-3]. Óleo castanho. Rf = 0,20 (diclorometano-amoníaco 2 M em etanol 97:3); Rt = 4,12. 20 4-(5,6-Di-hidro-8H-imidazo[5,1-c][1,4]oxazin- 8-il)ftalonitrilo partindo de 4-iodoftalonitrilo [69518-17-8]. 21 4-(8-(4-Cianofenil)-5,6-di-hidro-8H-imidazo- [5,1-c][1,4]oxazin-8-il)benzonitrilo partindo de 4-[hidroxi-(4-cyanophenil)(1-tritil 44 ΡΕ2004657 lH-imidazol-4-il)metil]benzonitrilo. Sólido esbranquiçado. Rf = 0,14 (diclorometano-amoníaco 2 M em etanol 97:3); Rt = 5,66.

Os materiais de partida são preparados como se segue: a) 4-[Hidroxi-(4-cianofenil)(1-tritil-lH-imidazol-4-il)metil]benzonitrilo

Faz-se reagir 4-(l-tritil-lH-imidazol-4- carbonil)benzonitrilo (Exemplo 3b) com 4-iodobenzo-nitrilo [3058-39-7] por analogia com o Exemplo ld. O composto em epigrafe é obtido como um sólido branco. Rt = 7,9. 23 4-(5, 6-Di-hidro-8H-imidazo[5,1-c] [1,4]oxazin- 8-il)naftaleno-l-carbonitrilo partindo de 4-iodonaftaleno-l-carbonitrilo [140456-96-8]. Sólido amarelado. Rf = 0,13 (diclorometano-2M amoníaco em etanol 95:5); Rt = 5,49. O seguinte composto é preparado em analogia com o processo descrito nos exemplos 1 e 3: 22 4-(8-Fenil-5,6-di-hidro-8H-imidazo[5,1-c] - [1,4]oxazin-8-il) benzonitrilo partindo de 4- (1 -tritil-1 H-imidazol-4-carbo- 45 ΡΕ2004657 nil) benzonitrilo (exemplo 3b) e fenilo brometo de magnésio [100-58-3]. Sólido esbranquiçado, p.f. Rf = 0,23 (dicloro-metano-2M amoníaco em etanol 97:3); Rt = 5,84.

Exemplo 2 4-(5,6-Di-hidro-8H-imidazo[5,1—c][1,41tiazin-8-il)benzonitrilo O composto em epígrafe é obtido como um sólido branco por analogia com o Exemplo 1 a partir de acetato de [ (4-cianofenil) (l-tritil-lH-imidazol-4-il)metilsulfanil]-etilo. Rf = 0,19 (diclorometano-amoniaco 2 M em etanol 97:3); Rt = 4,74.

Os materiais de partida são preparados como se segue: a) [ (4-Cianofenil)(l-tritil-lH-imidazol-4-il) -metilsulfanil]acetato de etilo 1,80 mmol de cloreto de trifenilmetilo [76-83-5] e 1,92 mmol de diisopropiletilamina são adicionados a uma solução de 1,46 mmol de [(4-cianofenil)(lH-imidazol-4-il) metilsulfanil]acetato de etilo em 20 mL de N,N-dimetil-formamida à temperatura ambiente. A mistura reaccional é agitada à temperatura ambiente durante 16 horas, depois vertida em água gelada e extraída com acetato de etilo. As fases orgânicas combinadas são lavadas com solução aquosa 46 ΡΕ2004657 saturada de cloreto de sódio, secas com sulfato de sódio e evaporadas. 0 composto em epígrafe é obtido como um sólido branco a partir do resíduo por cromatografia "flash" (S1O2 60F). Rf = 0,36 (acetato de etilo-heptano 1:1; Rt = 8,13. b) [(4-Cianofenil)(lH-imidazol-4-il)metilsulfanil]-acetato de etilo

Uma solução de 5,02 mmol de 4-[hidroxi-(lH-imi-dazol-4-il)metil]benzonitrilo e 50,2 mmol de mercapto-acetato de etilo em 10 mL de ácido trifluoroacético é agitada a 70°C durante 24 horas. A mistura reaccional é arrefecida até à temperatura ambiente, vertida em água gelada e neutralizada com solução de hidróxido de sódio 4 Μ. A mistura é extraida com acetato de etilo e as fases orgânicas combinadas são secas com sulfato de sódio e evaporadas. O composto em epigrafe é obtido como um óleo de cor âmbar a partir do residuo por cromatografia flash (SÍO2 60F). Rf = 0,13 (diclorometano-amoníaco 2 M em etanol 97:3); Rt = 5,10. c) 4-[Hidroxi-(lH-imidazol-4-il)-metil]-benzoni-trilo 36,2 mmol de 4-[hidroxi-(l-tritil-lH-imidazol-4-il)metil]benzonitrilo (Exemplo ld) são suspensos em 100 mL de tetra-hidrofurano. Adiciona-se 7,2 mL de ácido clorídrico 6 M à suspensão e a mistura reaccional é aquecida a refluxo durante 16 horas. A mistura reaccional é 47 ΡΕ2004657 arrefecida até à temperatura ambiente e o sólido é separado por filtração. As águas mães são evaporadas e o resíduo é retomado em água, basificado com solução de hidróxido de sódio 4 M e extraído com éter terc-butil metílico. A fase aquosa é evaporada e muito bem seca. 0 produto em bruto é obtido como uma espuma bege que é utilizada sem purificação adicional no passo seguinte. Rt = 3,3.

Os seguintes compostos são preparados por analogia com o processo descrito no Exemplo 2: 4 4-(8-Metil-5,6-di-hidro-8H-imidazo[5,1-c][1,4]— tiazin-8-il)benzonitrilo partindo de 1-(l-tritil-lH-imidazol-4-il)etanona [116795-55-2]. Sólido branco. Rf = 0,29 (diclorometano- amoníaco 2 M em etanol 97:3); Rt = 4,96. 6 4-(5,6-Di-hidro-8H-imidazo[5,1-c][1,4]tiazin-8-il)-2-fluorobenzonitrilo partindo de 2-fluoro-4-iodobenzonitrilo [137553— 42-5] .

Exemplo 8 8-[4-(lH-Tetrazol-5-il)fenil]-5,6-di-hidro-8H-imidazo[5,1-c][1,41]oxazina 3,34 mmol de trimetilsilil azida são adicionados 48 ΡΕ2004657 a uma solução de 0,17 mmol de 4-(5,6-di-hidro-8H- imida-zo[5,1-c] [1,4]oxazin-8-il)benzonitrilo (Exemplo 1) e 0,017 mmol de óxido de dibutilestanho em 4,0 mL de tolueno. A mistura reaccional é aquecida a 125°C de um dia para o outro. É arrefecida até à temperatura ambiente e evaporada. O composto em epígrafe é identificado a partir do resíduo com base do Rf por cromatografia "flash" (Si02 60F) .

Exemplo 16 8-(4-Fluorofenil)-5,6-di-hidro-8H-imidazo[5, Ιο] [1,4]oxazina 4,33 mmol de mesilato de 8-(4-fluorofenil)-2-tritil-5,6-di-hidro-8H-imidazo[5,1-c][1,4]oxazín-2-io são tomados em 10 mL de ácido acético glacial e a solução é aquecida a 100°C durante 16 horas. A solução reaccional é arrefecida até à temperatura ambiente e vertida em solução de hidróxido de sódio 4 M arrefecida com gelo. A mistura é extraída com diclorometano. As fases orgânicas combinadas são secas com sulfato de sódio e evaporadas. O composto em epígrafe é obtido como um sólido branco a partir do resíduo por cromatografia "flash" (S1O2 60F) e digestão subsequente com éter dietílico. Rf = 0,29 (diclorometano-amoníaco 2 M em etanol 95:5); Rt = 4,42.

Os materiais de partida são preparados como se segue: 49 ΡΕ2004657 a) Mesilato de 8-(4-fluorofenil)-2-tritil-5,6-di-hidro-8H-imidazo[5,1-c][1,4]oxazín-2-io 0 composto em epígrafe é obtido por analogia com o Exemplo 1 a partir de 4-fluoro-l-iodobenzeno [352-34-1] .

Exemplo 18 1-[4-(5,6-Di-hidro-8H-imidazo[5,1-c][1,4]oxazin-8-il)fenil]etanona 3 mmol de solução de brometo de metilmagnésio 3 M em éter dietílico são adicionados a uma solução de 0,97 mmol de 4-(5,6-di-hidro-8H-imidazo[5,1-c][1,4]oxazin-8-il)-N-metoxi-N-metil-benzamida em 10 mL de tetra-hidrofurano absoluto sob árgon. A solução reaccional é agitada à temperatura ambiente durante 4 horas e em seguida vertida em solução aquosa saturada de cloreto de amónio e extraída com éter terc-butil metílico. As fases orgânicas combinadas são secas sobre sulfato de magnésio e evaporadas. O composto em epígrafe é obtido como um sólido bege a partir do resíduo por cromatografia "flash" (Si02 60F) . Rf = 0,19 (diclorometano-amoníaco 2 M em etanol 97:3); Rt = 4,10.

Os materiais de partida são preparados como se segue: 50 ΡΕ2004657 a) 4-(5,6-Di-hidro-8H-imidazo[5,1-c][1,4]oxazin-8-il)-N-metoxi-N-metilbenzamida 9,30 mmol de cloreto de tionilo são adicionados a uma solução de 3,10 mmol de ácido 4-(5,6-di-hidro-8H-imidazo[5,1-c][1,4]oxazin-8-il)benzóico em 5 mL de clorofórmio. A mistura reaccional é aquecida a refluxo durante 3 horas e em seguida evaporada. O resíduo é extraído com tolueno e em seguida retomado em 10 mL de diclorometano. A solução reaccional é arrefecida até 0-5°C e adiciona-se 3,10 mmol de cloridrato de N,0-dimetil-hidroxilamina, seguidos por 15,5 mmol de diisopropil-etilamina. A mistura reaccional é agitada à temperatura ambiente durante 16 horas e filtrada através de Hyflo e o filtrado é evaporado. O composto em epígrafe é obtido como um óleo amarelado a partir do resíduo por cromatografia "flash" (Si02 60F). Rf = 0,13 (diclorometano-amoníaco 2 M em etanol 97:3); Rt = 4,00. b) Ácido 4-(5,6-di-hidro-8H-imidazo[5,1-c] [1,4]- oxazin-8-il)benzóico

Uma solução de 3,10 mmol de 4-(5,6-di-hidro-8H-imidazo[5,1-c] [1,4]oxazin-8-il)benzonitrilo (Exemplo 1) em 5 mL de etanol é misturada com 3,1 mL de solução de hidróxido de sódio 2 Μ. A solução reaccional é aquecida a refluxo durante 24 horas. A mistura reaccional é arrefecida até à temperatura ambiente, neutralizada com ácido clorídrico 2 M e evaporada. O produto em bruto é utilizado sem purificação adicional na fase seguinte. Rt = 3,79. 51 ΡΕ2004657

Exemplo 24 4-(5,6-Di-hidro-8H-imidazo[5,1-c][1,4]oxazin-8-il)benzonitrilo

Claims (10)

1. ΡΕ2004657 1 REIVINDICAÇÕES 1. Composto de fórmula geral

   em que R é deutério, halogéneo ou hidrogénio; R1 é aril-Co-C4-alquilo ou heterociclil-Co-C4-alquilo, radicais esses que podem estar substituídos por 1-4 Ci-Cg alcoxi, Ci-Cg alcoxicarbonilo, Ci-C8 alquilo, C0-C8 alquilcarbonilo, Ci-Cg alquilsulfonilo, arilo opcionalmente substituído, aril-Co-C4 alcoxicarbonilo, ciano, halogéneo, heterociclilo opcionalmente substituído, hidroxilo, nitro, óxido, oxo, tri-Ci-C4 alquilsililo, trifluorometoxi ou trifluorometilo; R 2 é a) deutério, halogéneo, hidroxilo, ciano ou hidrogénio; ou b) C2-C8 alcenilo, C2-C8 alcinilo, Ci-C8 alcoxi, Ci-C4 alcoxicarbonil-Ci-C4 alquilo, Ci-Cg alquilo, C0-C4 alquilcarbonilo, aril-Co-C4 alquilo, carboxi-Ci-C4
2. 2 ΡΕ2004657 alquilo, C3-C8 cicloalquilo ou heterociclil-Co-C4 alquilo, radicais estes que podem estar substituídos por 1-4 Ci-C8 alcoxi, Ci-C8 alcoxicarbonilo, Ci-C8 alquilo, C0-C8 alquilcarbonilo, Ci-C8 alquilsulfonilo, arilo opcionalmente substituído, aril-C0-C4 alcoxicarbonilo, ciano, halogéneo, heterociclilo opcionalmente substituído, hidroxilo, nitro, óxido, oxo, tri-Ci-C4 alquilsililo, trifluorometoxi ou trifluoro-metilo; R1 é Ci-C8 alquilo; Q é oxigénio ou enxofre; m representa um número 0, 1 ou 2; n é um número 0, 1 ou 2; ou um seu sal, preferencialmente um sal farmaceuticamente aceitável, em que R1 não é arilo substituído com Ci-C8 alquilo se R2 é hidrogénio. 1 que corresponde à fórmula geral 2 Composto de acordo com a reivindicação 1, 3 ΡΕ2004657 yj2·

   R' n

   ft m ou um seu sal, de preferência um sal f armaceuticamente aceitável, em que os significados dos substituintes R, R1, R2, R3, Q, m e n são como indicados para os compostos de fórmula (I) de acordo com a reivindicação 1, e * designa um átomo de carbono assimétrico e composto esse que apresenta uma actividade inibidora de aldosterona sintase e/ou 11—β— hidroxilase pelo menos 10 vezes maior, mas preferencialmente 20 vezes maior, ou mais preferencialmente 40 vezes maior, do que o composto de fórmula (Ia) com a configuração oposta em torno do átomo de carbono assimétrico assinalado Η * H
3. 3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou 2, em que R é deutério ou hidrogénio.
4. 4. Composto de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 3, em que R1 é fenilo opcionalmente substituído, naftilo opcionalmente substituído, benzofuranilo, benzo[b]tiofenilo, benzoimidazolilo, benzo[d]isotiazolilo, benzo[d]isoxazolilo, benzo[b]tiofenilo, imidazolilo, inda-zolilo, oxazolilo, piridilo, pirrolilo, tiazolilo ou tiofenilo .
5. 5. Composto de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 4, em que R2 é Ci-C8 alcoxi, hidroxilo, Ci-C8 4 ΡΕ2004657 alquilo, aril-Co-C4 alquilo opcionalmente substituído, deu-tério, halogéneo, ciano ou hidrogénio.
6. 6. Utilização de um composto de fórmula geral (I) ou (la) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 5 para o fabrico de um medicamento.
7. 7. Utilização de um composto de fórmula geral (I) ou (Ia) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 5 para o fabrico de um medicamento humano para a prevenção, para retardamento da progressão ou para o tratamento de estados patológicos que são causados ou parcialmente causados por hiperaldosteronismo.
8. 8. Utilização de um composto de fórmula geral (I) ou (Ia) ou de um seu sal farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 5 para o fabrico de um medicamento humano para a prevenção, para retardamento da progressão ou para o tratamento de estados patológicos que são causados ou parcialmente causados pela libertação excessiva de cortisol.
9. 9. Produto farmacêutico compreendendo um composto de fórmula geral (I) ou (Ia) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 5 e excipientes convencionais. 5 ΡΕ2004657
10. 10. Associação farmacêutica na forma de um produto ou de um estojo ("kit") constituído por componentes individuais que consiste em a) um composto de fórmula geral (I) ou (Ia) ou um seu sal farmaceuticamente aceitável de acordo com qualquer das reivindicações 1 a 5, e b) pelo menos uma forma farmacêutica cujo ingrediente activo tem um efeito hipotensor, um efeito inotrópico um, um efeito metabólico ou um efeito hipolipidémico. Lisboa, 9 de Novembro de 2010