PT2297162E

PT2297162E - Compostos

Info

Publication number: PT2297162E
Application number: PT09719113T
Authority: PT
Inventors: Martin Quibell; John Paul Watts; Sean Flinn Nicholas
Original assignee: Amura Therapeutics Ltd
Priority date: 2008-03-13
Filing date: 2009-03-11
Publication date: 2012-11-27
Also published as: US20110009385A1; EP2297162A1; HRP20120898T1; US8008290B2; GB0804702D0; WO2009112839A1; PL2297162T3; ES2393050T3; SI2297162T1; CY1113340T1; JP2011518120A; DK2297162T3; EP2297162B1

Description

1

DESCRIÇÃO "COMPOSTOS" A presente invenção refere-se a compostos que são inibidores de proteinases de cisteína, composições farmacêuticas contendo os referidos compostos e sua utilização em terapia. Mais especificamente, a invenção refere-se a compostos que são inibidores duplos de catepsina S e catepsina K, as quais são proteinases de cisteina do clã CA. Tais compostos são particularmente úteis para o tratamento terapêutico in vivo de doenças nas quais está implicada a participação de catepsina S e catepsina K.

ANTECEDENTES À INVENÇÃO

As proteinases formam um grupo substancial de moléculas biológicas que até à data constituem aproximadamente 2% de todos os produtos de genes identificados após análise de vários programas de sequenciação de genoma concluídos. As proteinases evoluíram para participar numa gama muito grande de processos biológicos, mediando o seu efeito através da dissociação de ligações amida peptídicas dentro da miríade de proteínas encontradas na natureza. Esta ação hidrolítica é realizada reconhecendo inicialmente, e depois ligando-se a superfícies eletrónicas tridimensionais particulares exibidas por uma proteína, que alinham a ligação para dissociação exatamente no sítio catalítico da proteinase. A hidrólise catalítica inicia-se então através de ataque nucleófilo da ligação amida a ser dissociada quer através de uma cadeia lateral de aminoácido da própria proteinase, quer através da ação de uma água molécula que está ligada e é ativada pela proteinase. As proteinases nas quais o nucleófilo atacante é a cadeia lateral tiol de um 2 resíduo de Cys são conhecidas como proteinases de cisteína. A classificação geral de 'proteinase de cisteína' contém muitos membros presentes numa grande gama de organismos desde vírus, bactérias, protozoários, plantas e fungos até aos mamíferos.

As catepsinas S e K e, na realidade, muitas outras proteinases cruciais de mamíferos pertencem à família CAC1 do tipo papaína (ver Barrett, A.J et al, in 'Handbook of Proteolytic Enzymes, Eds. Barrett, A. J., Rawlings, N. D., e Woessner, J. F. Publ. Academic Press, 1998, para uma discussão aprofundada).

Até à data, as proteinases de cisteína têm sido classificadas em cinco clãs, CA, CB, CC, CD e CE (Barrett, A. J. et al, 1998) . A proteinase do fruto tropical papaia 'papaína' constitui a base do clã CA, o qual contém atualmente mais de 80 entradas distintas e completas em várias bases de dados de sequências, sendo esperadas muitas mais a partir dos atuais esforços de sequenciação do genoma. As proteinases do clã CA / família Cl foram implicadas num sem-número de papéis de manutenção e processos patológicos. Por exemplo, as proteinases humanas tais como catepsina K (osteoporose, osteoartrite), catepsina S (esclerose múltipla, artrite reumatoide, distúrbios autoimunes), catepsina L (metástases), catepsina B (metástases, artrite), catepsina F (processamento de antigénio), catepsina V (seleção de células T), dipeptidil-peptidase I (ativação da proteinase de serina de granulócitos) ou proteinases parasitárias tais como falcipaína (parasita da malária Plasmodium falciparum) e cruzipaína (infeção por Trypanosoma cruzi) . 3

Existe atualmente uma grande necessidade não satisfeita de medicações seguras administradas por via oral para o tratamento de doenças inflamatórias tais como artrite reumatoide, osteoartrite, doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD) e doença cardiovascular, que apresentam dano e remodelação significativos da matriz extracelular (ECM). A destruição da ECM é provocada pela proteólise dos seus constituintes de elastina, colagénio e proteoglicano, os quais proporcionam estrutura, elasticidade e resistência à tração a materiais tais como cartilagem, osso, pulmão e tecido vascular. As enzimas proteoliticas catepsina S e catepsina K são reguladas positivamente sob condições inflamatórias e têm sido implicadas na degradação de componentes da ECM.

As catepsinas K e S encontram-se sobreexpressadas em sinóvia reumatoide e osteoartritica e foi demonstrado que degradam o colagénio tipo-I e tipo-II, bem como o agrecano (um componente de proteoglicano de multidominio da cartilagem articular) respetivamente (ver Hou, W.S. et al., Arthritis & rheumatism, 46(3). 663-674, 2002; Hou, W.S. et al., Biol Chem, 384. 891-897, 2003 & Yasuda, Y. et al., Adv Drug Del Rev, 57. 973-993, 2005 e referências aqui citadas). Além disso, ratos transgénicos que sobreexpressam catepsina K apresentam desenvolvimento espontâneo de sinovite e degenerescência da cartilagem (ver Morko, J. et al., Arthritis & rheumatism, 52(12). 3713-3717, 2005). Sabe-se também que a catepsina S desempenha um papel na auto-apresentação de antigénio na artrite reumatoide, ajudando a preparar o sistema imunitário para atacar tecidos do próprio organismo em articulações suscetíveis (por exemplo, ver Podolin, P.L., et al., Inflamm Res, 50:S159,2001). 4

Além da destruição da cartilagem articular, as catepsina S e catepsina K demonstram atividade elastinolitica potente e estão envolvidas num grande espetro de condições patológicas associadas a degradação da elastina, tais como COPD e doença cardiovascular. Ambas as enzimas são prontamente segregadas por macrófagos e células do músculo liso e foi demonstrado que degradam as elastinas da aorta e tecido pulmonar de bovino. Além disso, num modelo murideo de COPD/enfisema, induzida por IL-13, foi demonstrado que as Catepsinas S e K estavam presentes no tecido pulmonar doente e em macrófagos infiltrantes e os sintomas de doença foram abolidos por inibidores da proteinase de cisteina (ver Wolters, P.J. e Chapman, H.A., Respir Res, 1. 170-177, 2000; Novinec, M. et al., J Biol Chem, 282(11). 7893-7902, 2007; Zheng, T. et al., J Clin Invest, 106. 1081-1093, 2000) . As catepsinas S e K também são responsáveis pelo danos no tecido vascular associados à doença cardiovascular crónica e lesão vascular. Em modelos murideos de aterosclerose, a Catepsina S foi encontrada em abundância em placas ateroscleróticas (segregada a partir de macrófagos infiltrantes) e induz rutura da placa (ver Rodgers, K.J. et al., Arterioscler Thromb Vasc Biol, 26(4):851-856, 2006). A catepsina K e catepsina S foram associadas a remodelação vascular e originando danos na ECM durante o desenvolvimento de aterosclerose e formação de neointima induzida por lesão vascular (ver Cheng, X.W. et al., Am J Pathol, 164(1). 243-251, 2004). Enquanto ambas as enzimas estão envolvidas no crescimento e rutura de aneurismas aórticos abdominais (ver Abdul-Hussien, H. et al., Am J Pathol, 170(3). 809-817, 2007).

Assim, a inibição de catepsinas K e S oferecem uma abordagem atrativa para prevenir a destruição de tecido subjacente que ocorre em doenças inflamatórias crónicas 5 tais como artrite reumatoide, osteoartrite, COPD e doença cardiovascular.

Na técnica anterior, o desenvolvimento de inibidores da proteinase de cisteina para utilização humana foi recentemente uma área de atividade intensa (por exemplo ver Deaton, D. N. e Kumar, S., Prog. Med. Chem. 42, 245-375, 2004; Bromme, D. e Kaleta, J., Curr. Pharm. Des., 8, 1639- 1658, 2002; Kim, W. e Kang, K., Expert Opin. Ther. Patents, 12 (3) , 419-432, 2 0 02; Leung-Toung, R. et al. Curr. Med.

Chem., 9, 979-1002, 2002; Lecaille, F. et al., Chem. Rev., 102, 4459-4488, 2002; Hernandez, A. A. e Roush, W. R., Curr. Opin. Chem. Biol., 6, 459-465, 2002; Link, J.O. e Zipfel, S. Curr. Opin. Drug Discov. Dev., 9(4), 471-482, 2006). Considerando os membros da família CAC1, foi colocado um ênfase particular no desenvolvimento de inibidores de catepsinas humanas, principalmente de catepsina K (osteoporose) e catepsina S (distúrbios autoimunes) através da utilização de nitrilos peptídicos e peptidomiméticos ligados covalentemente mas reversíveis (por exemplo, ver Bekkali, Y. et al, Bioorg. Med. Chem. Lett., 17(9), 2465-2469, 2007; WO-A-07137738, WO-A-07003056), cetonas peptídicas e peptidomiméticas lineares e cíclicas (por exemplo, ver Veber, D. F. e Thompson, S. K., Curr. Opin. Drug Discovery Dev., 3(4), 362-369, 2000; WO-A-02057270, WO-A-04007501, WO-A-06064286, WO-A-05066180, WO-A-0069855), ceto-heterociclos (por exemplo, ver Palmer, J. T. et al, Bioorg. Med. Chem. Lett., 16(11), 2909-2914, 2006, WO-A-04000838), α-cetoamidas (por exemplo, ver WO-A-06102243), cianoamidas (WO-A-01077073, WO-A-01068645) e arilnitrilos (por exemplo, ver WO-A-07080191, WO-A-07039470, WO-A-06018284, WO-A-05121106, WO-A-04000843) . A inibição de proteases CAC1 por compostos não ligados covalentemente foi extensivamente descrita na literatura. 6

Foi colocada uma ênfase particular na inibição de catepsina K e catepsina S por arilaminoetilamidas (por exemplo, ver Altmann, E., et al, J. Med. Chem., 45(12), 2352-2354, 2002; Chatterjee, A.K. et al, Bioorg. Med. Chem. Lett., 17(10), 2899-2903, 2007; US-20050113356, US-20050107368, US-20050118568) e pirazoles ou piperidinas substituídos (por exemplo, ver Wei, J., et al, Bioorg. Med. Chem. Lett., 17(20), 5525-5528, 2007; US-2007117785, US-2003073672, WO-A-02020013).

Assim, a extensa técnica anterior descreve inibidores in vitro potentes de catepsina S ou catepsina K e inibidores que apresentam eficácia num grande número de modelos animais de doença. No entanto, uma vez que estas enzimas parecem atuar em série e estão ambas presentes em muitas doenças inflamatórias crónicas, um único composto possuindo atividade inibidora dupla seria uma vantagem clara. Presentemente não existem inibidores duplos terapêuticos humanos de catepsina K e S.

Recentemente, Quibell, M. (WO-A-02057270) descreveu um novo motivo para a inibição geral de proteinases CAC1 com base numa cetona cis-5,5-bicíclica (1).

Com base neste motivo foram descobertos inibidores muito potentes e seletivos de catepsina K (ver WO-A-0807109, WO-A-0807103, WO-A-0807130, WO-A-0807114, WO-A-0807127, WO-A-0807107, WO-A-0807112) . Os atuais inventores encontraram 7 agora uma pequena classe de 6-(S)-clorotetra-hidrofuro[3,2-b]pirrol-3-onas que exibem inibição dupla potente contra as catepsinas S e K humanas.

EXPOSIÇÃO DA INVENÇÃO

Um primeiro aspeto da invenção refere-se a um composto de fórmula (I), ou um seu sal ou hidrato f armaceuticamente aceitável,

em que: R3 é selecionado de ciclopentilo e ciclo-hexilo; R9 é selecionado dos seguintes:

ιΛΛΛΛ

em que : Χι, X2, X3, X4, X14 , X15, Xi6 e X20 São, cada, independentemente selecionados de: CH, C- (alquilo-Ci-6) , C- (alcoxilo-Ci-6) , C-halo e N; de tal forma que um máximo de dois de Χι, X2, X3, X4, X14,

Xis, Χίε e X2o são selecionados de N, C-halo e C- (alcoxilo-

Ci-6) ; X5, Χβ, X7 e Χθ são, cada, independentemente selecionados de: CH, C- (alquilo-Ci-g) , C- (alcoxilo-Ci-g) , C-halo, N e C-OH; de tal forma que um máximo de um de X5, Xe, X7 e Xj é N, C-halo, C-OH ou C- (alcoxilo-Ci-6) ; X9 e X12 são, cada, independentemente selecionados de: CH, C- (alquilo-Ci-6) , C- (alcoxilo-Ci-6) , C-halo e N; 9 Χίο e Χιι são, cada, independentemente selecionados de: CH, C- (alquilo-Ci-6) , C- (alcoxilo-Ci-6) , C-halo, N e Rio; X19 é selecionado de: CH, C-(alquilo-Ci-6) , C-(alcoxilo-Ci-6) , C-C(0)NH2, C- C (O) NH (alquilo-Ci-6) , C-C (O) N (alquilo-Ci_6) 2, C-halo e N; X18 é selecionado de: CH, C- (alquilo-Ci_6) , C- (alcoxilo-Ci_6) , C-NH2, C-N (alquilo-Ci-g) 2, C-NH (alquilo-Ci_6) , C-NHC (O) alquilo-Ci_6, C-halo e N; ou quando X19 é CH, C- (alquilo-Ci-6) ou C-halo então Xis pode ser adicionalmente selecionado de C-C(0)NH2 e C- C (O) N (alquilo-Ci-6) 2; X13 e X17 são, cada, independentemente selecionados de: O, S, NH e N- (alquilo-Ci-6) ; X22 e X24 são, cada, independentemente selecionados de: CH2, CH-(alquilo-Ci-g) , 0, S, NH, NMe e }C=0; X23 é selecionado de: CH2, CH-(alquilo-Ci-6) , C- (alquilo-Ci_6) 2, NH e NMe; ou quando X22 ou X24 são outros que não )C=0 então X23 pode ser adicionalmente )C=0 ou )S(0)2; X25 é selecionado de: 0, S, NH e N (alquilo-Ci-6) ; X26, X27, X28 e X29 são, cada, independentemente selecionados de: CH, C- (alquilo-Ci-6) , C- (alcoxilo-Ci-6) , C-OH, C-halo e N; de tal forma que um máximo de dois de X26, X27, X28 θ X29 são selecionados de C- (alcoxilo-Ci-6) , C-OH, C-halo e N; 10 X3o é selecionado de: CH2, CH2CH2, NH, NMe, O, S e }C=0; X3i é selecionado de: CH2, NH e NMe; ou quando X30 é outro que não )C=0, O ou S então X31 pode ser adicionalmente )C=0 ou O; X32 é selecionado de: CH2, CH2CH2, NH, NMe e >C=0; X33 é selecionado de: CH2, NH e NMe; ou quando X32 é outro que não )C=0 então X33 pode ser adicionalmente )C=0 ou O; X34 é selecionado de: NH e NMe;

Rio é selecionado de:

em que: 11 Τχ, Τ2, Τ3 e Τ4 são, cada, independentemente selecionados de: CH, C-(alquilo-Ci-6) , C-(alcoxilo-Ci-6) , C-NH2, C-NH (alquilo-Ci_6) , C-N (alquilo-Ci-6) 2/ C-halo e N; de tal forma que um máximo de um de T4, T2, T3 e T4 é C- (alcoxilo-Ci-6) , C-NH2, C-NH (alquilo-Ci_6) , C-N (alquilo-Ci-6) 2 ou C-halo; T5 é selecionado de: O, S, NH e N (alquilo-Ci_6) ; T6, T7, T8, T9 e Tio são, cada, independentemente selecionados de: CH, C-(alquilo-Ci_6) , C-(alcoxilo-Ci-6) , C-NH2, C-NH (alquilo-Ci-6) , C-N (alquilo-Ci-6) 2, C-halo e N; de tal forma que um máximo de dois de T6, T7, T8, T9 e T10 são selecionados de C-(alcoxilo-Ci-6) , C-NH2, C-NH (alquilo-Ci-δ) , C-N (alquilo-Ci-6) 2/ C-halo e N;

Tu é selecionado de: CH2, NH e N (alquilo-Ci-ε) ; Τχ2 é selecionado de: CH2, NH, N (alquilo-Ci-6) e )C=0; T13 e T14 são, cada, independentemente selecionados de: CH, C-(alquilo-Ci-6) e C-halo; T15 é selecionado de: 0, NH e N (alquilo-Ci-6) ;

Ti6 é selecionado de: CH2 e )C=0; 12 ou Rio é selecionado de: H, alquilo-Ci-6, OH, alcoxilo-Ci-6, N02, halo, CN, C(0)NH2, C (O) NH (alquilo-Ci-6) , C (0) N (alquilo-Ci-6) 2/ C (0) NH (cicloalquilo-C3-6) , S(0)2NH2, S (0) 2 (alquilo-Ci-6) , S (0) 2NH (alquilo-Ci-6) , S (0) 2N (alquilo-Ci-ê) 2, S (0) 2NH (cicloalquilo-C3-6) e (CH2) n-NRnR12; em que n é 0 ou 1; e R11 é selecionado de alquilo-Ci-6, C (0) alquilo-Ci-6, C (0) (cicloalquilo-C3_6) , C (0) (arilo) , C(0)NH2, C (0) NH (alquilo-Ci-6) , C (0) N (alquilo-Ci_6) 2, C (0) NH (cicloalquilo-C3_6) , C (0) 0 (alquilo-Ci-6) r C (0) 0 (cicloalquilo-C3_6) , C (0) 0 (arilo) , S (0) 2 (alquilo-Ch-6) , S (0) 2 (cicloalquilo-C3_6) , S(0)2NH2, S (0) 2NH (alquilo-Ci-6) , S (0) 2N (alquilo-Ci_6) 2, S (0) 2NH (cicloalquilo-C3_6) e S(0)2(arilo) ; e R12 é selecionado de H e alquilo-Ci-6· R13 é selecionado de: C (0) NH2, C (0)NH (alquilo-Ci-e) , C (0) N (alquilo-Ci_6) 2, C (0) NH (cicloalquilo-C3_6) , S(0)2NH2, S (0) 2 (alquilo-Ci-6) r S (0) 2NH (alquilo-Ci-δ) , S (0) 2N (alquilo-Ci-δ) 2, S (0) 2NH (cicloalquilo-C3-6) e (CH2) n-NR14R15; em que n é 0 ou 1; e R14 é selecionado de H, alquilo-Ci-6, C (0) alquilo-Ci-6, C(0) (cicloalquilo-C3-6) , C (0) (arilo), C(0)NH2, C (0) NH (alquilo-Ch-e) , C (0) N (alquilo-Ci_6) 2, C (0) NH (cicloalquilo-C3-6), C(0)0(alquilo-Ci-6), C (0) 0 (cicloalquilo-C3_6) , C (0) 0 (arilo) , S (0) 2 (alquilo-Ci-6) t S (0) 2 (cicloalquilo-C3-6) , S(0)2NH S (0) 2NH (alquilo-Ci_6) , 13 S (0) 2N (alquilo-Ci_6) 2/ S (0) 2NH (cicloalquilo-C3_6) e S(0)2(arilo) ; e R15 é selecionado de H e alquilo-Ci-6 ·

Os compostos de fórmula (I) exibem potência dupla surpreendentemente alta para as catepsinas S e K humanas.

Um segundo aspeto da invenção refere-se a uma composição farmacêutica ou veterinária compreendendo um composto de fórmula (I) e um diluente, excipiente e/ou veiculo farmaceuticamente aceitável ou veterinariamente aceitável.

Um terceiro aspeto da invenção refere-se a um processo para preparar uma composição farmacêutica ou veterinária como definida acima, compreendendo o referido processo misturar um composto da invenção com um diluente, excipiente e/ou veiculo farmaceuticamente aceitável ou veterinariamente aceitável.

Um quarto aspeto da invenção refere-se a compostos de fórmula (I) para serem utilizados em medicina.

Um quinto aspeto da invenção refere-se à utilização de um composto de fórmula (I) na preparação de um medicamento para o tratamento de uma doença selecionada de artrite reumatoide, osteoartrite, doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD), aterosclerose, doenças cardiovasculares que apresentam dano e remodelação significativos da matriz extracelular (ECM) e dor crónica.

Um sexto aspeto da invenção refere-se a um método de inibição de catepsina S e catepsina K numa célula, compreendendo o referido método pôr em contacto a referida célula com um composto de fórmula (I). 14

Um sétimo aspeto da invenção refere-se a um método de inibição de catepsina S e catepsina K num individuo, compreendendo o referido método administrar ao individuo uma quantidade farmacologicamente eficaz de um composto de fórmula (I).

Um oitavo aspeto da invenção refere-se a um método de tratamento de uma doença selecionada de artrite reumatoide, osteoartrite, doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD), aterosclerose, doenças cardiovasculares que apresentam dano e remodelação significativos da matriz extracelular (ECM) e dor crónica, num individuo, compreendendo o referido método administrar ao individuo uma quantidade farmacologicamente eficaz de um composto de fórmula (I).

Um nono aspeto da invenção refere-se à utilização de um composto de acordo com a invenção num ensaio para identificar outros compostos candidatos capazes de inibir uma ou mais proteinases de cisteina.

Um décimo aspeto da invenção refere-se à utilização de um composto de fórmula (I) na validação de uma proteinase de cisteina conhecida ou putativa como um alvo terapêutico.

Um décimo primeiro aspeto da invenção refere-se a um processo de preparação de um composto de fórmula (I).

Um décimo segundo aspeto da invenção refere-se a um composto de fórmula (I) para o tratamento de uma doença selecionada de artrite reumatoide, osteoartrite, doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD), aterosclerose, doenças cardiovasculares que apresentam dano e remodelação significativos da matriz extracelular (ECM) e dor crónica. 15

DESCRIÇÃO DETALHADA 0 termo 'alquilo' como aqui aplicado inclui cadeias de carbono alifáticas de cadeia linear e ramificada estáveis que podem estar opcionalmente substituídas. Os exemplos preferidos incluem metilo, etilo, n-propilo, isopropilo, n-butilo, isobutilo, t-butilo, pentilo, isopentilo, hexilo, heptilo e quaisquer isómeros simples destes. Os substituintes adequados incluem, por exemplo, um ou mais grupos alcoxilo Ci_6, OH, COOH, COOMe, NH2, NMe2, NHMe, N02, CN e/ou CF3. Adicionalmente, quando o grupo alquilo contém dois ou mais átomos de carbono contíguos, pode estar presente um grupo alceno (-CH=CH-) ou grupo alcino (-C^c-) . Além disso, o grupo alquilo pode conter opcionalmente, por exemplo, um ou mais heteroátomos para dar éteres, tioéteres, sulfonas, sulfonamidas, aminas substituídas, amidinas, guanidinas, ácidos carboxílicos, carboxamidas. Se o heteroátomo estiver localizado numa extremidade da cadeia, então ele está apropriadamente substituído com um ou dois átomos de hidrogénio. Por exemplo, o grupo CH3-CH2-0-CH2-CH2- é definido dentro de 'alquilo' como um alquilo C4 que contém um heteroátomo posicionado no centro enquanto que o grupo CH3-CH2-CH2-CH2- é definido dentro de 'alquilo' como um alquilo C4 não substituído. Preferencialmente, o grupo alquilo é um grupo alquilo Ci_6, mais preferencialmente um grupo Ci-4. 0 termo 'cicloalquilo' como aqui aplicado refere-se a um grupo alquilo cíclico (isto é, um anel carbocíclico), o qual pode estar substituído (mono- ou poli-) ou não substituído. Os substituintes adequados incluem, por exemplo, um ou mais grupos alquilo Ci_6, alcoxilo Ci_6, OH, COOH, COOMe, NH2, NMe2, NHMe, N02, CN, CF3 e/ou halo. Preferencialmente, o grupo cicloalquilo é um cicloalquilo- 16 C3-6/ ainda mais preferencialmente um grupo cicloalquilo C3-4. Os exemplos incluem ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclo-hexilo e semelhantes. Além disso, o próprio anel carbociclico pode conter opcionalmente, por exemplo, um ou mais heteroátomos para dar um grupo heterocicloalquilo tal como tetra-hidrofurano, pirrolidina, piperidina, piperazina ou morfolina. 0 termo 'alquiloxilo' refere-se ao grupo 'O-alquilo' ou '0-cicloalquilo', em que alquilo e cicloalquilo são como definidos acima. 'Halogéneo' ou 'halo' como aqui aplicado abrange F, Cl, Br, I. 0 termo 'haloalquilo' refere-se a um grupo alquilo como definido acima substituído com um ou mais átomos de halogéneo.

Como aqui utilizado, o termo 'arilo' refere-se a um anel monociclico de 5 ou 6 membros estável que é insaturado. 0 grupo arilo pode incluir opcionalmente um ou mais heteroátomos selecionados de 0, N e S. Além disso, o grupo arilo pode estar opcionalmente substituído, por exemplo, com um ou mais grupos alquilo C1-6, alcoxilo C1-6, OH, COOH, COOMe, NH2, NMe2, NHMe, N02, CN, CF3 e/ou halo. Mais preferencialmente, o grupo arilo pode estar opcionalmente substituído com um ou mais grupos Me, OMe, OEt, OiPr, N02, Cl ou F. 0 termo 'aralquilo' como aqui aplicado inclui um grupo alquilo como definido acima em associação com um grupo arilo. 0 grupo arilo pode ser um anel aromático, por exemplo, um anel monociclico de 5 ou 6 membros estável ou 17 um anel biciclico de 9 ou 10 membros estável que é insaturado. O grupo arilo pode compreender opcionalmente um ou mais heteroátomos selecionados de O, N e S. Além disso, o grupo arilo pode estar opcionalmente substituído, por exemplo, com um ou mais grupos alquilo Ci_6, alcoxilo Ci_6, OH, COOH, COOMe, NH2, NMe2, NHMe, N02, CN, CF3 e/ou halo. Preferencialmente, o grupo aralquilo é um grupo alquil-Ci-s-arilo-C5_io, ainda mais preferencialmente um grupo alquil-Ci-g-fenilo. Ainda mais preferencialmente, o grupo alquil-arilo é selecionado de CH2Ph e CH2OCH2Ph. A presente invenção inclui todos os sais, hidratos e solvatos, dos compostos desta invenção. O termo "composto" pretende incluir todos esses sais, hidratos e solvatos, a menos que o contexto exija o contrário.

Em particular, o especialista aperceber-se-á que o grupo cetona do núcleo biciclico dos compostos de fórmula (I) pode existir em formas alternativas tais como o hidrato (como se mostra abaixo), e a invenção estende-se a todas essas formas alternativas.

Hidrato

As abreviaturas e símbolos geralmente utilizados nas técnicas de péptidos e química são aqui utilizados para descrever os compostos da presente invenção, seguindo as diretrizes gerais apresentadas pela IUPAC-IUB Joint 18

Commission on Biochemical Nomenclature como descrito em Eur. J. Biochem., 158, 9-, 1984. Os compostos de fórmula (I) e os intermediários e materiais de partida utilizados na sua preparação são designados de acordo com as regras de nomenclatura IUPAC em que os grupos caracteristicos têm prioridade decrescente de citação como o grupo de principio.

Numa forma de realização preferida da invenção: R3 é selecionado de ciclopentilo ou ciclo-hexilo; R9 é selecionado dos seguintes:

em que: 19 Χι Χ2, Χ3/ Χ4, Χΐ4/ Χΐ5/ Χίε e Χ20 são, cada, independentemente selecionados de: CH, C- (alquilo-Ci-6) , C- (alcoxilo-Ci_6) , C-halo e N; de tal forma que um máximo de dois de Χι, X2, X3, X4, X14, Xis, Χίε e X2o são selecionados de N, C-halo e C- (alcoxilo-Ci-δ) ; X5, X6, X7 e X8 são, cada, independentemente selecionados de: CH, C- (alquilo-Ci-6) , C- (alcoxilo-Ci_6) , C-halo, N e C-OH; de tal forma que um máximo de um de X5, Xe, X7 e Xs é N, C-halo, C-OH ou C- (alcoxilo-Ci_6) ;

Xg e X12 são, cada, independentemente selecionados de: CH, C- (alquilo-Ci-6) , C- (alcoxilo-Ci-6) , C-halo e N; X10 e X11 são, cada, independentemente selecionados de: CH, C- (alquilo-Ci-6) , C- (alcoxilo-Ci_6) , C-halo, N e Ri0; X19 é selecionado de: CH, C-(alquilo-Ci-6) , C-(alcoxilo-Ci-6) , C-C(0)NH2, C- C (0) NH (alquilo-Ci_6) , C-C (0) N (alquilo-Ci_6) 2, C-halo e N;

Xis é selecionado de: CH, C- (alquilo-Ci-6) , C- (alcoxilo-Ci-6) , C-NH2, C-N (alquilo-Ci-6)2, C-NH (alquilo-Ci-6) , C-NHC (0) alquilo-Ci-6, C-halo e N; ou quando X19 é CH, C- (alquilo-Ci_6) ou C-halo então Xi8 pode ser adicionalmente selecionado de C-C(0)NH2 e C- C (0) N (alquilo-Ci-6) 2; X13 e X17 são, cada, independentemente selecionados de: 0, S, NH e N-(alquilo-Ci-g) ; X22 e X24 são, cada, independentemente selecionados de: 20 CH2, CH- (alquilo-Ci-6) , O, S, NH e )C=0; X23 é selecionado de: CH2, CH-(alquilo-Ci-6) , C- (alquilo-Ci_6) 2 e NH; ou quando X22 ou X24 são outros que não )C=0 então X23 pode ser adicionalmente )C=0; X25 é selecionado de: O, S, NH e N (alquilo-Ci-6) ; X261 X271 X28 e X29 são, cada, independentemente selecionados de: CH, C- (alquilo-Ci-6) , C- (alcoxilo-Ci-6) , C-halo e N; de tal forma que um máximo de dois de X26, X27, X28 e X29 são selecionados de C- (alcoxilo-Ci_6) , C-halo e N;

Rio é selecionado de:

em que:

Ti, T2, T3 e T4 são, cada, independentemente selecionados de: CH, C-(alquilo-Ci_6) , C-(alcoxilo-Ci_6) , C-NH2, C-NH (alquilo-Ci-6) , C-N (alquilo-Ci-6) 2, C-halo e N; 21 de tal forma que um máximo de um de Tlr T2, T3 e T4 é C-(alcoxilo-Ci-6) , C-NH2, C-NH (alquilo-Ci_6) , C-N (alquilo-Ci-6) 2 ou C-halo; T5 é selecionado de: 0, S, NH e N (alquilo-Ci-6) ; T6, T7, T8, T9 e Tio são, cada, independentemente selecionados de: CH, C-(alquilo-Ci-e) , C- (alcoxilo-Ci_6) , C-NH2, C-NH (alquilo-Ci_6) , C-N (alquilo-Ci-6) 2/ C-halo e N; de tal forma que um máximo de dois de T6, T7, T8, T9 e Ti0 são selecionados de C-(alcoxilo-Ci-6) , C-NH2, C-NH (alquilo-Ci_6) , C-N (alquilo-Ci_6) 2, C-halo e N;

Tu é selecionado de: CH2, NH e N (alquilo-Ci-6) ; T12 é selecionado de: CH2, NH, N (alquilo-Ci_6) e )C=0; T13 e T14 são, cada, independentemente selecionados de: CH, C-(alquilo-Ci-6) e C-halo; T15 é selecionado de: 0, NH e N (alquilo-Ci-6) ; T16 é selecionado de: CH2 e )C=0; ou Rio é selecionado de: H, alquilo-Ci-6, OH, alcoxilo-Ci-6, N02, halo, CN, C(0)NH2, C (0)NH (alquilo-Ci-6) , C (0) N (alquilo-Ci-e) 2, e (CH2) n-NR11R12; 22 em que n é 0 ou 1 e R11 é selecionado de H, alquilo-Ci-6, acetilo, C(0)NH2, C (0) N (alquilo-Ci-6) 2: e R12 é selecionado de H e alquilo-Ci-6 ·

Numa forma de realização preferida da invenção: R3 é selecionado de ciclopentilo ou ciclo-hexilo;

Xi, X2, X3, X4, X14, X15, Xi6 e X2o são independentemente selecionados de: CH, CMe, C-OMe, C-F, C-Cl e N: de tal forma que um máximo de dois de X2, X2, X3, X4, X14,

Xis, Χίε e X2o são escolhidos como N ou C-Cl ou C-OMe; X5, Xe, X7 e Xs são independentemente selecionados de: CH, CMe, C-OMe, C-F, C-Cl, N e OH; de tal forma que um máximo de um de X5, Xe, X7 e Xs é escolhido como N ou C-Cl ou C-OH ou C-OMe;

Xg e Xi2 são independentemente selecionados de: CH, CMe, C-OMe, C-F, C-Cl e N; X10 e X11 são independentemente selecionados de: CH, CMe, C-OMe, C-F, C-Cl, N e R10; X19 é selecionado de: CH, CMe, C-OMe, C-C(0)NH2, C-C(0)NMe2, C-F, C-Cl e N;

Xis é selecionado de: CH, CMe, C-OMe, C-NH2, C-NMe2, C-NHMe, C-NHC(0)Me, C-F, C-C1 e N; ou quando X19 é CH, CMe ou C-F então Xis pode ser adicionalmente selecionado de C-C(0)NH2 e C-C(0)NMe2; X13 e X17 são independentemente selecionados de: 23 0, S, ΝΗ e NMe. X22 e X24 são independentemente selecionados de: CH2, CHMe, 0, S, NH, NMe e >C=0; X23 é selecionado de CH2, CHMe, CMe2, NH e NMe; ou quando X22 ou X24 são outros que não )C=0 então X23 pode ser adicionalmente )C=0 ou >S(0)2; X25 é selecionado de: 0, S, NH e NMe; X26, X27, X28 e X29 são independentemente selecionados de: CH, CMe, C-OMe, C-F, C-Cl, C-Br e N; de tal forma que um máximo de dois de X26, X27, X28 e X29 são escolhidos como C-OMe, C-Cl, C-Br e N; X30 é selecionado de: CH2, CH2CH2, NH, NMe, 0, S e }C=0; X31 é selecionado de: CH2, NH e NMe; ou quando X30 é outro que não )C=0, 0 ou S então X31 pode ser adicionalmente )C=0 ou 0; X32 é selecionado de: CH2, NH, NMe e }C=0; X33 é selecionado de: CH2, NH e NMe; ou quando X32 é outro que não )C=0 então X33 pode ser adicionalmente )C=0 ou 0; 24 Χ34 é selecionado de: NH e NMe; Τι, T2, T3 e T4 são independentemente selecionados de: CH, CMe, C-OMe 0 1 2 ISO C-NHMe, C-NMe2 , C-F, C-Cl e N; de tal forma que um máximo de um de Ti, T2, T3 e T4 é escolhido como C-OMe, C-NH2, C-NHMe, C-NMe2, C-F e C- Cl; T5 é selecionado de: 0, S, NH e NMe. T6, T7, T8í T9 e Tio são independentemente selecionados de: CH, CMe, C-OMe, C-NH2, C-NHMe, C-NMe2, C-F, C-Cl e N; de tal forma que um máximo de dois de T6, T7, T8, T9 e T10 são escolhidos como C-OMe, C-NH2, C-NHMe, C-NMe2, C-F, C-Cl e N;

Tu é selecionado de: CH2, NH e NMe; T12 é selecionado de: CH2, NH, NMe e )C=0; T13 e T14 são independentemente selecionados de: CH, CMe, C-F e C-Cl; T15 é selecionado de: 0, NH e NMe; T16 é selecionado de: CH2 e }C=0; ou Rio é selecionado de: 25 H, Me, OH, OMe, OEt, OiPr, N02, F, Cl, Br, CN, C(0)NH2, C (O) NHMe, C (O) NMe2, e (CH2) n_NR11R12; em que n = 0 ou 1 e R11 é selecionado de H, Me, acetilo, C(0)NH2, C(0)NMe2; e R12 é selecionado de H e Me;

Ri3 é selecionado de: C(0)NH2, C (0) NHMe, C(0)N(Me)2, C (0) NH (ciclopropilo) , S(0)2NH S (0) 2 (Me) , S (0) 2NH (Me) , S(0)2N(Me)2, S (0) 2NH (ciclopropilo) e (CH2)n-NR14R15; em que n é 0 ou 1 ; e R14 é selecionado de H, Me, C(0)Me, C(0)Et, C (0) (ciclopropilo) , C (0) Ph, C(0)NH2, C(0)NH(Me), C (0) 0 (Me) , S(0)2(Me), S(0) 2N (Me)2, C (0) N (Me) 2, C(0)NH (ciclopropilo), C(0)0(ciclopropilo), C(0)0Ph, S (0) 2 (ciclopropilo) , S(0)2NH2, S(0)2NH(Me), S (0) 2NH(ciclopropilo) e S(0)2Ph; e R15 é selecionado de H e Me.

Numa forma de realização preferida, R3 é ciclopentilo. Noutra forma de realização preferida, R3 é ciclo-hexilo.

Numa forma de realização preferida, o composto da invenção é de fórmula Ia de tal forma que a unidade central de aminoácido é derivada de ácido (S)-2-amino-2-ciclo-hexilacético (CAS 14328-51-9) . 26

(Ia) em que R9 é como definido acima.

Noutra forma de realização preferida, o composto da invenção é de fórmula Ib de tal forma que a unidade central de aminoácido é derivada de ácido (S)-2-amino-2-ciclopentilacético (CAS 2521-84-8).

(Ib) em que R9 é como definido acima.

Numa forma de realização preferida, R9 é selecionado de:

27

em que Xi, X2, X3, x4, Xs, Xe, X7, X co x9, Xio, Xn, Xl3, Xl4 Xis, - Xl6/ Xl7 , Xl8, Xl95 X22 , X23, X24 , X25, X30, r X31, X34, Rio e R: são como definidos acima.

Numa forma de realização preferida R9 é selecionado de:

em que Xi, X2, X3, X4, X7, X10, X17, Xis, X19, X22, X24, X25, X30, X31, Rio e R14 são como definidos acima.

Numa forma de realização preferida, Rio é selecionado de:

28 em que Ti, T2, T3, T4, T6, T7, T8, T9 e T10 são como definidos acima.

Numa forma de realização ainda mais preferida, Rio é:

y em que um, dois ou três de Τι, T2, T3 e T4 são N e os restantes são CH ou CMe.

Noutra forma de realização preferida, R4q é selecionado de:

em que um de T6, T7, T8, T9 e T10 é N e os restantes são CH ou C-F. é selecionado de:

Numa forma de realização preferida R9

29

θϊΐΐ C[U0 3.2ΓΪ10/ Χ2 r X3 r Xl8/ Xl9/ X22 / X24/ X30 O X31 SdO COITTO definidos acima e; R14 é selecionado de C(0)Me, C(0)Et, C (0) (ciclopropilo) , C(0)NH2, C(0)NH(Me), C(0)N(Me)2, C (0) NH (ciclopropilo) , C(0)0(Me), C(0)0(ciclopropilo), S(0)2(Me), S (0) 2 (ciclopropilo) , S(0)2NH2, S(0)2NH(Me), S(0)2N(Me)2, S (0) 2NH(ciclopropilo) e S(0)2Ph.

Numa forma de realização muito preferida, R9 é selecionado de:

30

31

Numa forma de realização particularmente preferida, R9 é selecionado de:

32

Η

Num forma de realização muito preferida, o composto da invenção é selecionado dos seguintes: N- ((S)-2-((3aS,6S,6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-dlpirrol-4(5H, 6H,6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)nicotinamida N- ((S)-2-((3aS,6S,6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-dlpirrol-4(5H, 6H,6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil) -3-(1H-tetrazol-l-il)benzamida 33 Ν-((5)-2-((3a5, 65, 6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-jb]pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclo-hexil-2-oxoetil)isonicotinamida N- ((5) -2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-jb]pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclo-hexil-2-oxoetil) -3-fluorobenzamida N-((5) -2-((3a5, 65, 6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-jb]pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclo-hexil-2-oxoetil) -3- (1H-imidaol-l-il)benzamida N-((S)-2-((3aS,6S, 6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-blpirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-3-(2-metil-lH-imidazol-l-il)benzamida N-((S)-2-((3aS,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-25-furo[3,2-blpirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)benzamida N- ((5)-2-((3aS,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2 — b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-3-(piridin-3-il)benzamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b\pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)benzo[d]tiazole-6-carboxamida N-((5)-2-((3aS,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2— jb]pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclo-hexil-2-oxoetil) -3- (5, 6-di-hidroimidazo [2,l-jb]tiazol-3-il)benzamida N-((5) -2-((3a5, 65, 6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-jb]pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclo-hexil-2-oxoetil) -1H-indole-5-carboxamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2 — jb]pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclo-hexil-2-oxoetil) -3- (1H-pirazol-4-il)benzamida N- ( (S)-2- ( (3aS,6S,6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-3-(1H-pirazol-3-il)benzamida 34 Ν-((5)-2-((3aS,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H,6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-1H-benzo[d][1,2,3]triazole-6-carboxamida 2-Amino-N-((5)-2-((3a5,65,6a5-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-jb]pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) - il) - l-ciclo-hexil-2-oxoetil)benzo[d]tiazole-6-carboxamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-blpirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-1H-indazole-6-carboxamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)- 6-cloro-3-oxodi-hidro-2ff-furo[3,2 — b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)oxazole-5-carboxamida N- ( (5) -2 - ( (3a5, 65, 6a5) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2íí-furo [3,2 — b]pirrol-4(5H, 6H,6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil) -2,3- dioxo-1,2,3,4-tetra-hidroquinoxalina-6-carboxamida N- ( (5) -2 - ( (3aS, 65, 6a5) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2íí-furo [3,2 — b]pirrol-4(5H, 6H,6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-2-oxo- 1,2,3,4-tetra-hidroquinolina-6-carboxamida N-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2- b]pirrol-4(5Hr 6H,6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil) -2- oxoindolina-5-carboxamida N-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-d]pirrol-4(5ϋ,6H, 6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-2-oxoindolina-6-carboxamida 4-Acetamido-N-((5)-2-((3a5,65,6a5-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-jb]pirrol-4 (5ϋ, 6H, 6aH) - il) - l-ciclo-hexil-2-oxoetil)benzamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-blpirrol-4(5ϋ, 6H, 6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil) -4-(ciclopropanocarboxamido)benzamida iV- ( (5) -2- ( (3aS, 65, 6a5-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-b]pirrol-4(5H, 6H,6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil) -4-(metilsulfonamido)benzamida 35 Ν-((5)-2-((3aS,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-blpirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclo-hexil-2-oxoetil) -2-oxo- 2.3- di-hidro-líí-benzo [d] imidazole-5-carboxamida N-((5) -2-((3a5,65,6a5-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-blpirrol-4(5H, 6H,6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-2-oxo- 2.3- di-hidrobenzo[d]tiazole-6-carboxamida N- ((5)2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-blpirrol-4(5H, 6H,6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-2-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-lH-benzo[b]azepina-7-carboxamida N- ( (5) -2 - ( (3aS, 65, 6aS) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2íí-furo [3,2 — blpirrol-4(5H, 6H,6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-3-oxo- 3.4- di-hidro-2H-benzo[b] [1,4]oxazina-7-carboxamida N- ( (5) -2 - ( (3a5, 65, 6a5) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2i7-furo [3,2 — blpirrol-4(5H, 6H,6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)nicotinamida N- ( (5)-2-( (3aS, 65, 6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2i7-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H,6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-3-(1H-tetrazol-l-il)benzamida N-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-blpirrol-4(5Hr 6H,6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)isonicotinamida N-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-blpirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-3-fluorobenzamida N-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4-(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-3- (1H-imidazol-l-il)benzamida N-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil) -3-(2-metil-lH-imidazol-l-il)benzamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-jblpirrol-4 (5 H, 6 H, 6a H) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil) benzamida 36 Ν-((5)-2-((3aS,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-blpirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil) -3-(piridin-3-il)benzamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-blpirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)benzo[d]tiazole-6-carboxamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-blpirrol-4(5H, 6H,6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-3-(5,6-di-hidroimidazo[2,1-b]tiazol-3-il)benzamida N- ( (5) -2 - ( (3a5, 65, 6a5) - 6-cloro-3-oxodi-hidro-2ff-furo [3,2-jblpirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil) -1H-indole-5-carboxamida N- ( (5) -2 - ( (3a5, 65, 6a5) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2íí-furo [3,2 — b]pirrol-4(5H, 6H,6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-3-(1H-pirazol-4-il)benzamida N- ( (5) -2 - ( (3aS, 65, 6a5) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2íí-furo [3,2 — jblpirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil) -3- (1H-pirazol-3-il)benzamida N- ((5)-2-((3a5,6a5,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-jblpirrol-4 (5H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil) -1H-benzo[d][1,2,3]triazole-6-carboxamida 2-Amino-N-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-ίηΓθ[3,2-ώ]ρίΓΓθ1-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)benzo[d]tiazole-6-carboxamida N-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-blpirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-1H-indazole-6-carboxamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-blpirrol-4(5H, 6H,6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)oxazole-5-carboxamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-dlpirrol-4(5H, 6H,6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-2,3-dioxo-1,2,3,4-tetra-hidroquinoxalina-6-carboxamida 37 Ν-((5) -2-((3aS, 65, 6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2ff-furo[3,2-jb]pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil) -2-oxo- 1.2.3.4- tetra-hidroquinolina-6-carboxamida N- ((5)-2-((3aS,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2ff-furo[3,2-b]pirrol-4 (5Η, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil) -2-oxoindolina-5-carboxamida N- ((S)-2-((3aS,6S,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5Η, 6H, 6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-2-oxoindolina-6-carboxamida 4-Acetamido-í7- ( (5) -2- ( (3aS, 6S, 6a5) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H,6,6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)benzamida N- ( (S) -2 - ( (3aS, 65, 6a5) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2íí-furo [3,2-b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-4-(ciclopropanocarboxamido)benzamida N-((S)- 2-((3aS,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5#, 6H, 6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-4-(metilsulfonamido)benzamida i\(-( (5)-2-( (3a5, 65, 6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2íí-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-2-oxo- 2.3- di-hidro-lH-benzo[d]imidazole-5-carboxamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H,6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazole-6-carboxamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-2-oxo- 2.3.4.5- tetra-hidro-lH-benzo[b]azepina-7-carboxamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil) -3-oxo- 3.4- di-hidro-2H-benzo[b] 1,4]oxazina-7-carboxamida

Numa forma de realização particularmente preferida, o composto da invenção é selecionado dos Exemplos 1-39 descritos abaixo. 38

Ainda mais preferencialmente, o composto da invenção é selecionado dos Exemplos 2, 3, 4, 5, 6, 9, 10, 12, 14, 15, 16, 17 e 18-39 descritos abaixo.

COMPOSIÇÕES FARMACÊUTICAS

Um outro aspeto da invenção refere-se a uma composição farmacêutica compreendendo um composto da invenção misturado com um ou mais diluentes, excipientes ou veículos farmaceuticamente aceitáveis. Também podem estar presentes outros materiais ativos, consoante possa ser considerado apropriado ou aconselhável para a doença ou condição a ser tratada ou prevenida.

Ainda que os compostos da presente invenção (incluindo seus sais farmaceuticamente aceitáveis, ésteres e solvatos farmaceuticamente aceitáveis) possam ser administrados sozinhos, eles serão geralmente administrados misturados com um veículo, excipiente ou diluente farmacêutico, particularmente para terapia humana. As composições farmacêuticas podem ser para utilização humana ou animal em medicina humana e veterinária.

Exemplos de tais excipientes adequados para as várias formas diferentes de composições farmacêuticas aqui descritas podem ser encontrados no "Handbook of Pharmaceutical Excipients, 2nd Edition, (1994), Editado por A Wade e PJ Weller. O veículo, ou, se estiver presente mais do que um, cada um dos veículos, tem de ser aceitável no sentido de ser compatível com os outros ingredientes da formulação e não prejudiciais para o recetor. 39

Os veículos ou diluentes aceitáveis para utilização terapêutica são bem conhecidos na técnica farmacêutica, e são descritos, por exemplo, em Remington's Pharmaceutical Sciences, Mack Publishing Co. (A. R Gennaro edit. 1985).

Os exemplos de veículos adequados incluem lactose, amido, glucose, metilcelulose, estearato de magnésio, manitol, sorbitol e semelhantes. Os exemplos de diluentes adequados incluem etanol, glicerol e água. A escolha do veículo, excipiente ou diluente farmacêutico pode ser selecionada com respeito à via de administração pretendida e prática farmacêutica corrente. As composições farmacêuticas podem compreender como, ou para além do, veículo, excipiente ou diluente qualquer/quaisquer aglutinante (s), lubrificante (s), agente (s) de suspensão, agente (s) de revestimento, solubilizante (s) adequado(s).

Os exemplos de aglutinantes adequados incluem amido, gelatina, açúcares naturais tais como glucose, lactose anidra, lactose fluida, beta-lactose, edulcorantes de milho, gomas naturais e sintéticas, tais como goma-arábica, tragacanta ou alginato de sódio, carboximetilcelulose e polietileno glicol.

Os exemplos de lubrificantes adequados incluem oleato de sódio, estearato de sódio, estearato de magnésio, benzoato de sódio, acetato de sódio, cloreto de sódio e semelhantes.

Podem ser proporcionados conservantes, estabilizantes, corantes e até mesmo aromatizantes na composição farmacêutica. Os exemplos de conservantes incluem benzoato de sódio, ácido sórbico e ésteres de ácido p- 40 hidroxibenzóico. Podem também ser utilizados antioxidantes e agentes de suspensão.

De acordo com um outro aspeto da invenção, é proporcionado um processo para a preparação de uma composição farmacêutica ou veterinária como descrita acima, compreendendo o processo colocar o(s) composto(s) ativo(s) em associação com o veiculo, por exemplo por mistura.

Em geral, as formulações são preparadas colocando em associação uniforme e intima o agente ativo com veiculos liquidos ou veiculos sólidos finamente divididos ou ambos, e em seguida modelando o produto, se for necessário. A invenção estende-se aos métodos de preparação de uma composição farmacêutica compreendendo colocar um composto de fórmula geral (I) em combinação ou associação com um transportador ou veiculo farmaceuticamente ou veterinariamente aceitável.

SAIS/ÉSTERES

Os compostos da invenção podem estar presentes como sais, em particular sais farmaceuticamente e veterinariamente aceitáveis.

Os sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos da invenção incluem os seus sais de adição de ácido ou base adequados. Uma revisão dos sais farmacêuticos adequados pode ser encontrada em Berge et al, J Pharm Sei, 66, 1-19 (1977) . Os sais são preparados, por exemplo, com ácidos inorgânicos fortes tais como ácidos minerais, por exemplo ácidos halidricos tais como cloridrato, bromidrato e iodidrato, ácido sulfúrico, ácido fosfórico, sulfato, bissulfato, hemissulfato, tiocianato, persulfato e ácidos 41 sulfónicos; com ácidos carboxílicos orgânicos fortes, tais como ácidos alcanocarboxilicos de 1 a 4 átomos de carbono os quais estão não substituídos ou substituídos (por exemplo, com halogéneo), tais como ácido acético; com ácidos dicarboxílicos saturados ou insaturados, por exemplo oxálico, malónico, succínico, maleico, fumárico, ftálico ou tetraftálico; com ácidos hidroxicarboxílicos, por exemplo ácido ascórbico, glicólico, láctico, málico, tartárico ou cítrico; com aminoácidos, por exemplo ácido aspártico ou glutâmico; com ácido benzóico; ou com ácidos sulfónicos orgânicos, tais como ácidos alquil-(C1-C4) - ou aril-sulfónicos os quais estão não substituídos ou substituídos (por exemplo, com um halogéneo) tais como ácido metano- ou p-toluenossulfónico. Os sais que não são farmaceuticamente ou veterinariamente aceitáveis podem ser ainda úteis como intermediários.

Os sais preferidos incluem, por exemplo, acetato, trifluoroacetato, lactato, gluconato, citrato, tartrato, maleato, malato, pantotenato, adipato, alginato, aspartato, benzoato, butirato, digluconato, ciclopentanato, gluco-heptanato, glicerofosfato, oxalato, heptanoato, hexanoato, fumarato, nicotinato, palmoato, pectinato, 3-fenilpropionato, picrato, pivalato, propionato, tartrato, lactobionato, pivolato, canforato, undecanoato e succinato, ácidos sulfónicos orgânicos tais como metanossulfonato, etanossulfonato, 2-hidroxietanossulfonato, canforsulfonato, 2-naftalenossulfonato, benzenossulfonato, p-clorobenzenossulfonato e p-toluenossulfonato; e ácidos inorgânicos tais como cloridrato, bromidrato, iodidrato, sulfato, bissulfato, hemissulfato, tiocianato, persulfato, fosfórico e ácidos sulfónicos. 42

ENANTIÓMEROS/TAUTÓMEROS

Em todos os aspetos da presente invenção anteriormente discutidos, a invenção inclui, quando apropriado todos os enantiómeros, diastereoisómeros e tautómeros dos compostos da invenção. 0 especialista na técnica reconhecerá compostos que possuem propriedades óticas (um ou mais átomos de carbono quirais) ou tautoméricas características. Os enantiómeros e/ou tautómeros correspondentes podem ser isolados/preparados por métodos conhecidos na técnica.

Os enantiómeros são caracterizados pela configuração absoluta dos seus centros quirais e descritos pelas regras de sequência R e S de Cahn, Ingold e Prelog. Tais convenções são bem conhecidas na técnica (por exemplo, ver 'Advanced Organic Chemistry', 3rd edition, ed. March, J., John Wiley and Sons, New York, 1985).

Os compostos da invenção contendo um centro quiral podem ser utilizados como uma mistura racémica, uma mistura enantiomericamente enriquecida ou a mistura racémica pode ser separada utilizando técnicas bem conhecidas e um enantiómero particular pode ser utilizado sozinho.

ESTEREOISÓMEROS E ISÓMEROS GEOMÉTRICOS

Alguns dos compostos da invenção podem existir como estereoisómeros e/ou isómeros geométricos - por exemplo eles podem possuir um ou mais centros assimétricos e/ou geométricos e, desse modo, podem existir em duas ou mais formas estereoisoméricas e/ou geométricas. A presente invenção considera a utilização de todos os estereoisómeros e isómeros geométricos particulares daqueles agentes inibidores, e misturas dos mesmos. Os termos utilizados nas 43 reivindicações abrangem estas formas, desde que as referidas formas retenham a atividade funcional apropriada (embora não necessariamente no mesmo grau). A presente invenção inclui também todos as variantes isotópicas adequadas do agente ou um seu sal farmaceuticamente aceitável. Uma variante isotópica de um agente da presente invenção ou um seu sal farmaceuticamente aceitável é definida como aquela em que pelo menos um átomo está substituído por um átomo possuindo o mesmo número atómico mas uma massa atómica diferente da massa atómica geralmente encontrada na natureza. Exemplos de isótopos que podem ser incorporados no agente e seus sais farmaceuticamente aceitáveis incluem isótopos de hidrogénio, carbono, azoto, oxigénio, fósforo, enxofre, flúor e cloro tais como 2H, 3H, 13C, 14C, 15N, 170, 180, 31P, 32P, 35S, 18F e 36C1, respetivamente. Certas variantes isotópicas do agente e seus sais farmaceuticamente aceitáveis, por exemplo, aquelas em que é incorporado um isótopo radioativo tal como 3H ou 14C, são úteis em estudos de distribuição de fármaco e/ou substrato no tecido. Os isótopos tritiados, isto é, 3H, e de carbono-14, isto é, 14C, são particularmente preferidos pela sua facilidade de preparação e detetabilidade. Além disso, a substituição com isótopos tais como deutério, isto é, 2H, podem proporcionar certas vantagens terapêuticas resultantes de maior estabilidade metabólica, por exemplo, maior semivida in vivo ou menores requisitos de dosagem e, por este motivo, pode ser preferida em determinadas circunstâncias. Por exemplo, a invenção inclui compostos de fórmula geral (I) em que qualquer átomo de hidrogénio foi substituído por um átomo de deutério. As variantes isotópicas do agente da presente invenção e seus sais farmaceuticamente aceitáveis desta invenção podem ser geralmente preparados por 44 procedimentos convencionais utilizando variantes isotópicas adequadas de reagentes adequados.

SOLVATOS A presente invenção inclui também formas de solvato dos compostos da presente invenção. Os termos utilizados nas reivindicações abrangem estas formas.

POLIMORFOS A invenção refere-se ainda aos compostos da presente invenção nas suas várias formas cristalinas, formas polimórficas e formas anidras/hidratadas. Está bem estabelecido na indústria farmacêutica que os compostos químicos podem ser isolados em quaisquer dessas formas modificando ligeiramente o método de purificação e ou forma de isolamento dos solventes utilizados na preparação sintética desses compostos.

ENSAIOS

Outro aspeto da invenção refere-se à utilização de um composto da invenção como definido acima num ensaio para identificar outros compostos candidatos que influenciam a atividade de uma proteinase de cisteina, em que o referido ensaio é um ensaio de ligação competitiva compreendendo pôr em contacto um composto da invenção com uma proteinase de cisteina na presença de um substrato conhecido da referida enzima e detetar qualquer alteração na interação entre a referida proteinase de cisteina e o referido substrato conhecido. 45

Preferencialmente, o ensaio é capaz de identificar compostos candidatos que são capazes de inibir uma ou mais proteinases de cisteina CAC1.

Preferencialmente, o composto candidato é gerado por modificação SAR convencional de um composto da invenção.

Como aqui utilizado, o termo "modificação SAR convencional" refere-se a métodos correntes conhecidos na técnica para modificar um dado composto por meio de derivatização química.

Assim, num aspeto, o composto identificado pode atuar como um modelo (por exemplo, uma cadeia molde) para o desenvolvimento de outros compostos. Os compostos utilizados num tal teste podem estar livres em solução, fixados num suporte sólido, suportados numa superfície celular ou localizados intracelularmente. Pode mediar-se a anulação da atividade ou a formação de complexos de ligação entre o composto e o agente a ser testado. 0 ensaio da presente invenção pode ser um rastreio, pelo qual é testado um número de agentes. Num aspeto, o método de ensaio da presente invenção é um rastreio de alto débito.

Esta invenção também considera a utilização de ensaios competitivos de rastreio de fármacos em que anticorpos neutralizantes capazes de ligarem um composto competem especificamente com um composto de ensaio para ligação a um composto.

Outra técnica de rastreio proporciona um rastreio de alto débito (HTS) de agentes possuindo afinidade de ligação 46 adequada às substâncias e baseia-se no método descrito em pormenor em WO 84/03564. É esperado que os métodos de ensaio da presente invenção sejam adequados para o rastreio em pequena e grande escala de compostos de ensaio bem como em ensaios quantitativos.

Um outro aspeto da invenção proporciona um método de deteção da ligação de um ligando a uma proteinase de cisterna, compreendendo o referido método os passos de: (i) pôr em contacto um ligando com proteinase de cisterna na presença de um substrato conhecido da referida enzima; (ii) detetar qualquer alteração na interação entre a referida enzima e o referido substrato conhecido; e em que o referido ligando é um composto da invenção.

Um aspeto da invenção refere-se a um processo compreendendo os passos de: (a) realizar um método de ensaio descrito acima; (b) identificar um ou mais ligandos capazes de se ligar a um dominio de ligação a ligando; e (c) preparar uma quantidade dos referidos um ou mais ligandos.

Outro aspeto da invenção proporciona um processo compreendendo os passos de: (a) realizar um método de ensaio descrito acima; (b) identificar um ou mais ligandos capazes de se ligar a um dominio de ligação a ligando; e (c) preparar uma composição farmacêutica compreendendo os referidos um ou mais ligandos.

Outro aspeto da invenção proporciona um processo compreendendo os passos de: 47 (a) realizar um método de ensaio descrito acima; (b) identificar um ou mais ligandos capazes de se ligar a um domínio de ligação a ligando; (c) modificar os referidos um ou mais ligandos capazes de se ligar a um domínio de ligação a ligando; (d) realizar o método de ensaio descrito acima; (e) opcionalmente preparar uma composição farmacêutica compreendendo os referidos um ou mais ligandos. A invenção também se refere a um ligando identificado pelo método descrito acima.

Ainda outro aspeto da invenção refere-se a uma composição farmacêutica compreendendo um ligando identificado pelo método descrito acima.

Outro aspeto da invenção refere-se à utilização de um ligando identificado pelo método descrito acima na preparação de uma composição farmacêutica para ser utilizada no tratamento de um ou mais distúrbios selecionados de artrite reumatoide, osteoartrite, doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD), aterosclerose, doenças cardiovasculares que apresentam dano e remodelação significativos da matriz extracelular (ECM) e dor crónica.

Os métodos acima podem ser utilizados para selecionar um ligando útil como um inibidor de uma ou mais proteinases de cisteína.

Os compostos de fórmula geral (I) são úteis como ferramentas laboratoriais e como agentes terapêuticos. No laboratório determinados compostos da invenção são úteis para estabelecer se uma proteinase de cisteína conhecida ou descoberta de novo contribui para uma função bioquímica crítica ou pelo menos significativa durante o 48 estabelecimento ou progressão de um estado patológico, um processo geralmente referido como 'validação de alvo'.

De acordo com um outro aspeto da invenção é proporcionado um método de validação de uma proteinase de cisteina conhecida ou putativa como um alvo terapêutico, compreendendo o método: (a) avaliar a ligação in vitro de um composto como descrito acima a uma proteinase de cisteina conhecida ou putativa isolada, proporcionando uma medição da potência; e opcionalmente, um ou mais dos passos de: (b) avaliar a ligação do composto a proteinases homólogas intimamente relacionadas com a alvo e proteinases de manutenção gerais (por exemplo tripsina) para proporcionar uma medição da seletividade; (c) acompanhar um marcador funcional à base de células da atividade de uma proteinase de cisteina particular, na presença do composto; e (d) acompanhar um marcador funcional à base de modelo animal da atividade de uma proteinase de cisteina particular na presença do composto.

Por conseguinte, a invenção proporciona um método de validação de uma proteinase de cisteina conhecida ou putativa como um alvo terapêutico. Abordagens e niveis de complexidade diferentes são apropriados para a inibição e 'validação' eficaz de um alvo particular. No primeiro caso, o método compreende avaliar a ligação in vitro de um composto de fórmula geral (I) a uma proteinase de cisteina conhecida ou putativa isolada, proporcionando uma medição da 'potência'. Uma avaliação adicional da ligação de um composto de fórmula geral (I) a proteinases homólogas intimamente relacionadas com a alvo e proteinases de manutenção gerais (por exemplo tripsina) proporciona uma medição da 'seletividade'. Um segundo nivel de complexidade 49 pode ser avaliado seguindo um marcador funcional à base de células da atividade de uma proteinase de cisterna particular, na presença de um composto de fórmula geral (I). Por exemplo, um 'ensaio de reabsorção de osteoclastos' tem sido utilizado como um sistema de ensaio in vitro secundário à base de células para seguir a atividade da catepsina K e o efeito bioquímica dos inibidores de proteinases (por exemplo, ver WO-A-9850533). Um 'ensaio de ativação de células T de processamento de MHC-II' tem sido utilizado como uma sistema de ensaio in vitro secundário à base de células para seguir a atividade da catepsina S e o efeito bioquímico de inibidores de proteinases (Shi, G-P., et al, Immunity, 10, 197-206, 1999). Quando se investigam infeções virais ou bacterianas um tal marcador pode ser simplesmente uma avaliação funcional da carga virai (por exemplo, contagem de cópias de ARNm) ou bacteriana e uma avaliação do efeito bioquímico de inibidores de proteinase. Um terceiro nível de complexidade pode ser avaliado seguindo um marcador funcional à base de modelo animal da atividade de uma proteinase de cisteína particular, na presença de um composto de fórmula geral (I). Por exemplo, modelos murídeos de infeção por Leishmaniose, infeção por P. vinckei, malária (inibição de falcipaína) e infeção por T. cruzi (cruzipaína), indicam que a inibição de proteinases de cisteína que desempenham um papel chave na propagação do agente patogénico é eficaz na paragem dos sintomas da doença, 'validando' o referido alvo.

Por conseguinte, a invenção estende-se à utilização de um composto de fórmula geral (I) na validação de uma proteinase de cisteína conhecida ou putativa como um alvo terapêutico. 50

ATIVIDADE BIOLÓGICA

Os compostos da presente invenção são estruturalmente distintos da técnica anterior (por exemplo WO-A-02057270; Quibell, M. et al., Bioorg. Med. Chem. 13, 609-625, 2005; Quibell M, et al Bioorg. Med. Chem, 12, 5689-5710, 2004; WO-A-05066180) na medida em que um substituinte 6-(S)-cloro e uma unidade ciclo-hexilglicilo ou ciclopentilglicilo constitui uma parte integrante. Esta associação de caracteristicas proporciona compostos com eficácias duplas surpreendentemente altas para as catepsina S e catepsina K humanas, as quais são propriedades importantes necessárias para o desenvolvimento de uma terapêutica duplo eficaz. Se qualquer uma destas unidades intrínsecas é removido dos compostos de fórmula I, é então observada uma perda surpreendentemente grande na potência e / ou uma perda significativa na seletividade. Na realidade, todos os compostos da presente invenção preparados até à data exibem uma inibição in vitro potente dupla para as catepsina S e catepsina K humanas com Ki < 50 nM. Em contraste, a maioria dos oitenta e dois compostos da técnica anterior detalhados na WO-A-02057270 são inibidores da catepsina S ou da catepsina K e na maior parte dos exemplos, mais de 100 vezes menos potente contra qualquer uma das proteinases. A técnica anterior mais próxima, o composto (38) (ver WO-A-02057270, pg 151), exibe uma melhoria de 65 vezes na potência in vitro contra a catepsina S humana e uma melhoria superior a 114 vezes na potência in vitro contra a catepsina K humana após adição de um substituinte 6 — (S) — cloro e substituição da unidade (S)-ciclo-hexilalanilo por (5)-ciclo-hexilglicilo (EXEMPLO 1). A relação sinérgica surpreendente entre estas duas alterações intrínsecas é claramente observada quando se compara o composto (38) da 51 técnica anterior com os novos compostos (1-2) e EXEMPLO 1. 0 composto (38) da técnica anterior exibe uma melhoria de 2,5 vezes na potência in vitro contra a catepsina S humana e uma melhoria superior a 13 vezes na potência in vitro contra a catepsina K humana após substituição da unidade (S)-ciclo-hexilalanilo por (S)-ciclo-hexilglicilo (Composto 1), proporcionando um inibidor duplo que tem apenas uma potência moderada contra as catepsinas S e K. A adição posterior de um substituinte 6-(S)-fluoro no Composto 1 proporciona uma melhoria de 3,8 vezes na potência in vitro contra catepsina S humana e uma melhoria de 3,2 vezes na potência in vitro contra a catepsina K humana (Composto 2), proporcionando novamente um inibidor duplo que tem apenas uma potência moderada contra as catepsinas S e K. Alternativamente, a adição de um substituinte 6-(S)-cloro no Composto 1 proporciona uma melhoria de 27 vezes na potência in vitro contra a catepsina S humana e uma melhoria de 8,7 vezes na potência in vitro contra a catepsina K humana (EXEMPLO 1) proporcionando um inibidor duplo que tem potência elevada contra as catepsinas S e K. A titulo de outra comparação, considere-se os compostos novos (3-4) e o EXEMPLO 2. A adição de um substituinte 6-(S)-fluoro no composto 3 proporciona uma melhoria de 3,4 vezes na potência in vitro contra a catepsina S humana e uma melhoria de 1,7 vezes na potência in vitro contra a catepsina K humana (Composto 4) , proporcionando um inibidor duplo que tem apenas potência moderada contra as catepsinas S e K. Alternativamente, a adição de um substituinte 6—(S) — cloro no Composto 3 proporciona uma melhoria de 47 vezes na potência in vitro contra a catepsina S humana e uma melhoria de 20,5 vezes na potência in vitro contra a catepsina K humana (EXEMPLO 2), proporcionando um inibidor duplo que tem potência elevada contra as catepsinas S e K. 52

Como uma outra comparação, considere-se o composto novo (5) com os EXEMPLOS 3 e 4. 0 análogo 6- (R) -cloro (composto 5) tem um Ki in vitro de 32nM contra a catepsina S e de 230nM contra a catepsina K. A importância estereoquimica do substituinte 6-(S)-cloro é claramente observada quando se compara o composto (5) com o EXEMPLO 3 que tem um Ki in vitro de l,7nM contra a catepsina S e 23nM contra a catepsina K. Considerando o EXEMPLO 3, a substituição da unidade (S)-ciclo-hexilglicilo pela unidade (S)-ciclopentilglicilo proporciona o EXEMPLO 4 que tem um Ki in vitro de 14,6nM contra a catepsina S e 10,4nM contra a catepsina K. Tanto o EXEMPLO 3 como o 4 são inibidores duplos muito potentes das catepsinas S e K.

Preferencialmente, os compostos exibem inibição dupla in vitro contra as catepsina S e catepsina K humanas com Ki < 50 nM, mais preferencialmente < 25 nM e ainda mais preferencialmente < 10 nM.

UTILIZAÇÃO TERAPÊUTICA

Os compostos de fórmula geral (I) são úteis para o tratamento ou prevenção in vivo de doenças nas quais está implicada a participação de uma proteinase de cisteina.

Preferencialmente, o composto de fórmula geral I é um inibidor duplo de catepsina S e catepsina K. Como aqui utilizado, o termo "duplo para a catepsina S e K" significa que o inibidor é um inibidor potente de ambas as catepsina S e catepsina K. Preferencialmente, o inibidor exibe uma relação de seletividade para as catepsina S e catepsina K relativamente a outras proteinases de cisteneilo CAC1 de mamíferos superior a 2 vezes, mais preferencialmente 53 superior a 5 vezes, mais preferencialmente superior a 10 vezes, ainda mais preferencialmente superior a 25 vezes, ainda mais preferencialmente, superior a 50 vezes ou 100 vezes.

De acordo com um outro aspeto da invenção é proporcionado um composto de fórmula geral (I) para ser utilizado em medicina, especialmente para prevenir ou tratar doenças, nas quais a patologia da doença pode ser modificada inibindo uma proteinase de cisteina.

De acordo com um outro aspeto da invenção é proporcionada a utilização de um composto de fórmula geral (I) na preparação de um medicamento para prevenir ou tratar doenças, nas quais a patologia da doença pode ser modificada inibindo uma proteinase de cisteina.

Certas proteinases de cisteina atuam no processo fisiológico normal de degradação de proteínas em animais, incluindo humanos, por exemplo na degradação de tecido conjuntivo. No entanto, niveis elevados destas enzimas no corpo podem resultar em condições patológicas que conduzem à doença. Assim, as proteinases de cisteina têm sido implicadas em vários estados patológicos, incluindo mas não se limitando a, infeções por Pneumocystis carinii, Trypsanoma cruzi, Trypsanoma brucei brucei e Críthidia fusiculata; bem como na osteoporose, osteoartrite, artrite reumatoide, esclerose múltipla, dor crónica, autoimunidade, esquistossomose, malária, metástase de tumores, leucodistrofia metacromática, distrofia muscular, amiotrofia e semelhantes (ver WO-A-9404172 e EP-A-0603873 e referências ali citadas). Adicionalmente, uma proteinase de cisteina bacteriana segregada de S. Aureus chamada estafilopaina foi implicada como um fator de virulência 54 bacteriana (Potempa, J., et al. J. Biol. Chem, 262(6), 2664-2667, 1998). A invenção é útil na prevenção e/ou tratamento de cada um dos estados patológicos mencionados ou implicados acima. A presente invenção também é útil num método de tratamento ou prevenção de doenças provocadas por niveis patológicos de proteinases de cisterna, particularmente proteinases de cisterna da superfamilia da papaina, métodos esses que compreendem administrar a um animal, particularmente um mamifero, muito particularmente um humano, necessitado do mesmo um composto da presente invenção. Em particular, a presente invenção proporciona métodos de tratamento de doenças nas quais estão implicadas proteinases de cisterna, incluindo infeções por Pneumocystis carinii, Trypsanoma cruzi, Trypsanoma brucei, Leishmaniose mexicana, Clostridium histolyticum, Staphilococcus aureus, virus da febre aftosa e Crithidia fusiculata; bem como na osteoartrite, artrite reumatoide, esclerose múltipla, dor crónica, autoimunidade, esquistossomose, malária, metástase de tumores, leucodistrofia metacromática, distrofia muscular, amiotrofia.

Os inibidores duplos de catepsina S e K são particularmente úteis para o tratamento de artrite reumatoide, osteoartrite, doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD), aterosclerose, doenças cardiovasculares que apresentam dano e remodelação significativos da matriz extracelular (ECM) e dor crónica. Os compostos da invenção são particularmente úteis no tratamento dos distúrbios acima.

As caracteristicas preferidas para cada aspeto da invenção são como para cada outro aspeto mutatis mutandis. 55

ADMINISTRAÇÃO

As composições farmacêuticas da presente invenção podem ser adaptadas para administração retal, nasal, intrabrônquica, tópica (incluindo bucal e sublingual), vaginal ou parentérica (incluindo subcutânea, intramuscular, intravenosa, intra-arterial e intradérmica), intraperitoneal ou intratecal. Preferencialmente a formulação é uma formulação administrada por via oral. As formulações podem ser convenientemente apresentadas na forma de dosagem unitária, isto é, na forma de porções discretas contendo uma dose unitária, ou um múltiplo ou subunidade de uma dose unitária. A titulo de exemplo, as formulações podem estar na forma de comprimidos e de cápsulas de libertação prolongada, e podem ser preparadas por qualquer método bem conhecido na técnica de farmácia.

As formulações para administração oral na presente invenção podem ser apresentadas como: unidades discretas tais como cápsulas, cápsulas de gelatina, gotas, hóstias, pilulas ou comprimidos contendo cada uma quantidade predeterminada do agente ativo; como um pó ou granulado; como uma solução, emulsão ou uma suspensão do agente ativo num liquido aquoso ou num liquido não aquoso; ou como uma emulsão liquida de óleo em água ou uma emulsão liquida de água em óleo; ou como um bolus etc. Preferencialmente, estas composições contêm desde 1 a 250 mg e mais preferencialmente desde 10-100 mg, de ingrediente ativo por dose.

Para composições para administração oral (por exemplo, comprimidos e cápsulas), o termo "veiculo aceitável" inclui veiculos tais como excipientes comuns, por exemplo aglutinantes, por exemplo xarope, goma-arábica, gelatina, sorbitol, tragacanta, polivinilpirrolidona (Povidona), metilcelulose, etilcelulose, carboximetilcelulose sódica, 56 hidroxipropilmetilcelulose, sacarose e amido; enchimentos e veículos, por exemplo amido de milho, gelatina, lactose, sacarose, celulose microcristalina, caulino, manitol, fosfato dicálcico, cloreto de sódio e ácido alginico; e lubrificantes tais como estearato de magnésio, estearato de sódio e outros estearatos metálicos, estearato de glicerol ácido esteárico, fluido de silicone, talco, ceras, óleos e silica coloidal. Podem ser também utilizados aromatizantes tais como hortelã-pimenta, óleo de gaultéria, aromatizante de cereja e semelhantes. Pode ser desejável adicionar um corante para tornar a forma de dosagem prontamente identificável. Os comprimidos também podem ser revestidos por métodos bem conhecidos na técnica.

Um comprimido pode ser preparado por prensagem ou moldagem, opcionalmente com um ou mais ingredientes auxiliares. Os comprimidos prensados podem ser preparados, prensando numa máquina adequada o agente ativo numa forma solta tal como um pó ou granulado, opcionalmente misturado com um aglutinante, lubrificante, diluente inerte, conservante, tensioativo ou dispersante. Os comprimidos moldados podem ser preparados moldando numa máquina adequada uma mistura do composto em pó humedecido com um diluente liquido inerte. Os comprimidos podem ser opcionalmente revestidos ou marcados com incisões e podem ser formulados de modo a proporcionar libertação lenta ou controlada do agente ativo.

Outras formulações adequadas para administração oral incluem pastilhas compreendendo o agente ativo numa base aromatizada, geralmente sacarose e goma-arábica ou tragacanta; pastilhas compreendendo o agente ativo numa base inerte tal como gelatina e glicerina, ou sacarose e goma-arábica; e colutórios compreendendo o agente ativo num veiculo liquido adequado. 57

Outras formas de administração compreendem soluções ou emulsões que podem ser injetadas por via intravenosa, por via intra-arterial, por via intratecal, por via subcutânea, por via intradérmica, por via intraperitoneal ou por via intramuscular, e as quais são preparadas a partir de soluções estéreis ou esterilizáveis. As formas injetáveis contêm tipicamente entre 10 - 1000 mg, preferencialmente entre 10 - 250 mg, de ingrediente ativo por dose.

As composições farmacêuticas da presente invenção também podem estar na forma de supositórios, pessários, suspensões, emulsões, loção, pomadas, cremes, geles, formulações para pulverização, soluções ou pós para polvilhar.

Um meio alternativo de administração transdérmica é através da utilização de um adesivo cutâneo. Por exemplo, o ingrediente ativo pode ser incorporado num creme consistindo de uma emulsão aquosa de polietileno glicóis ou parafina liquida. O ingrediente ativo também pode ser incorporado, a uma concentração entre 1 e 10% em peso, numa pomada consistindo de uma base de cera branca ou parafina mole branca em conjunto com tais estabilizantes e conservantes, consoante possa ser necessário.

DOSAGEM

Um técnico médio na matéria pode facilmente determinar uma dose apropriada de uma das presentes composições para administrar a um indivíduo, sem experimentação excessiva. Tipicamente, um médico determinará o dosagem efetiva que será mais adequada para um doente particular e dependerá de uma variedade de fatores incluindo a atividade do composto específico utilizado, a estabilidade metabólica e duração 58 da ação desse composto, a idade, peso corporal, saúde geral, género, dieta, modo e tempo de administração, velocidade de excreção, associação de fármacos, a gravidade da condição particular e o individuo sujeito a terapia. As dosagens aqui divulgadas são ilustrativas do caso médio. Evidentemente, podem surgir situações particulares onde são necessárias gamas de dosagem superiores ou inferiores, e essas estão no âmbito desta invenção.

De acordo com esta invenção, uma quantidade eficaz de um composto de fórmula geral (I) pode ser administrada para inibir a proteinase implicada numa condição ou doença particular. Evidentemente, esta quantidade de dosagem será ainda modificada de acordo com o tipo de administração do composto. Por exemplo, para conseguir uma "quantidade eficaz" para terapia aguda é preferida a administração parentérica de um composto de fórmula geral (I). Uma infusão intravenosa do composto em dextrose a 5% em água ou soro fisiológico normal, ou uma formulação semelhante com excipientes adequados, é muito eficaz, embora uma injeção bolus intramuscular também seja útil. Tipicamente, a dose parentérica será de cerca de 0,01 até cerca de 100 mg/kg; preferencialmente entre 0,1 e 20 mg/kg, de uma maneira para manter a concentração de fármaco no plasma a uma concentração eficaz para inibir uma proteinase de cisteina. Os compostos podem ser administrados uma a quatro vezes por dia a um nivel para conseguir uma dose diária total de cerca de 0,4 até cerca de 400 mg/kg/dia. A quantidade exata de um composto inventivo que é terapeuticamente eficaz e a via pela qual esse composto é melhor administrado, é prontamente determinado por um técnico médio na matéria comparando o nivel do agente no sangue à concentração necessária para ter um efeito terapêutico. Os pró-fármacos de compostos da presente invenção podem ser preparados por qualquer método adequado. Para aqueles compostos em que a 59 unidade pró-fármaco é uma funcionalidade cetona, especificamente cetais e/ou hemicetais, a conversão pode ser efetuada de acordo com métodos convencionais.

Os compostos desta invenção também podem ser administrados por via oral ao doente, de uma maneira em que a concentração de fármaco é suficiente para inibir a reabsorção óssea ou para conseguir qualquer outra indicação terapêutica como aqui divulgada. Tipicamente, uma composição farmacêutica contendo o composto é administrada a uma dose oral entre cerca de 0,1 até cerca de 50 mg/kg de uma maneira coerente com a condição do doente. Preferencialmente, a dose oral seria de cerca de 0,5 até cerca de 20 mg/kg. Não são esperados quaisquer efeitos toxicológicos inaceitáveis quando os compostos da presente invenção são administrados de acordo com a presente invenção. Os compostos desta invenção, os quais podem ter boa biodisponibilidade, podem ser testados em um de vários ensaios biológicos para determinar a concentração de um composto que é necessária para ter um determinado efeito farmacológico.

ASSOCIAÇÕES

Numa forma de realização particularmente preferida, o um ou mais compostos da invenção são administrados em associação com um ou mais de outros agentes ativos, por exemplo, fármacos existentes disponíveis no mercado. Nesses casos, os compostos da invenção podem ser administrados consecutivamente, simultaneamente ou sequencialmente com o um ou mais de outros agentes ativos. 60

Os fármacos, em geral, são mais eficazes quando utilizados em associação. Em particular, a terapia de associação é desejável a fim de evitar uma sobreposição de toxicidades importantes, mecanismo de ação e mecanismo(s) de resistência. Além disso, também é desejável administrar a maioria dos fármacos nas suas doses máximas toleradas com intervalos de tempo minimos entre essas doses. As vantagens mais importantes de combinar fármacos quimioterapêuticos são a de que podem promover efeitos aditivos ou possivelmente sinérgicos através de interações bioquimicas e podem também diminuir o aparecimento de resistência.

Associações benéficas podem ser sugeridas estudando a atividade inibidora dos compostos de ensaio com agentes conhecidos ou suspeitos de serem úteis no tratamento de um distúrbio particular. Este procedimento também pode ser utilizado para determinar a ordem de administração dos agentes, isto é, antes, simultaneamente ou após administração. Esse escalonamento pode ser uma caracteristica de todos os agentes ativos aqui identificados.

SÍNTESE

Sintese do Núcleo 5,5-Biciclico

Um aspeto da invenção refere-se a um processo de preparação de um composto de fórmula (I) como definido acima, compreendendo o referido processo a oxidação de um composto de fórmula (II). 61

Qualquer agente oxidante adequado pode ser utilizado para converter o grupo álcool secundário de (II) na cetona (I) correspondente. Os agentes oxidantes adequados serão familiares para o especialista. A titulo de exemplo, a oxidação pode ser realizada via uma reação de periodinano de Dess-Martin [Dess, D.B. et al, J. Org. Chem. 1953, 48, 4155; Dess, D.B. et al, J. Am. Chem. Soc. 1991, 113, 7277], ou via uma oxidação de Swern [Mancuso, A. J. et al, J. Org. Chem. 1978, 43, 2480] . Alternativamente, a oxidação pode ser realizada utilizando S03/piridina/Et3N/DMSO [Parith, J. R. et al, J. Am. Chem. Soc. 1967, 5505; US 3, 444,216, Parith, J. R. et al, ] , P2O5/DMSO ou P2O5/AC2O [Christensen, S. M. et al, Organic Process Research and Development, 2004; 8, 777] . Outros reagentes de oxidação alternativos incluem dimetilsulfóxido ativado [Mancuso, A. J., Swern, D. J., Synthesis, 1981, 165], clorocromato de piridínio [Pianeatelli, G. et al, Synthesis, 1982, 245] e reagente de Jones [Vogel, A, I., Textbook of Organic Chemistry, 6th Edition].

Mais preferencialmente, o processo compreende tratar um composto de fórmula (II) com periodinano de Dess-Martin. Preferencialmente, a reação é realizada utilizando diclorometano como solvente. 62

Numa forma de realização preferida, o processo da invenção compreende o passo de conversão de um composto de fórmula (III) num composto de fórmula (II) através da formação corrente de ligação amida entre R9CONHCH (R3) COOH e o composto de fórmula (III; R5 = H) com um agente de ativação de ácido carboxilico adequado.

em que R5 é um grupo de proteção ou hidrogénio.

Numa forma de realização preferida, o grupo de proteção R5 é selecionado de benziloxicarbonilo, terc-butoxicarbonilo, fluoren-9-ilmetoxicarbonilo, 1-(bifenil-4-il)-1- metiletoxicarbonilo, a,a-dimetil-3,5- dimetoxilbenziloxicarbonilo, p-metoxibenziloxicarbonilo, p-nitrobenziloxicarbonilo, aliloxicarbonilo e tricloroetoxicarbonilo.

Mais preferencialmente, R5 é benziloxicarbonilo, terc-butoxicarbonilo (Boc) ou flouren-9-ilmetoxicarbonilo (Fmoc).

Noutra forma de realização preferida R5 é H.

Numa forma de realização mais preferida o processo da invenção compreende o passo de conversão de um composto de fórmula (IV) num composto de fórmula (III; R5 = H) 63

em que Lg é um grupo de saída tal como tosilato ou mesilato e R5 é como anteriormente definido.

Numa forma de realização ainda mais preferida o processo da invenção compreende o passo de conversão de um composto de fórmula (IVa; R5 = H) num composto de fórmula (Illa) ou um composto de fórmula (IVb; R5 = Cbz) num composto de fórmula (Illb) OTs

HO (IVa)

Cl

(ma) OTs

h6 (TVb)

Cl

HO (iiib)

Para os compostos de fórmulas (Illa) e (Illb) a substituição de tosilato é tipicamente realizada utilizando 64 um excesso de cloreto de lítio em DMF a 130°C. A substituição decorre com inversão da configuração.

Numa forma de realização preferida o processo da invenção compreende o passo de conversão de um composto de fórmula (V) num composto de fórmula (IV)

Mais preferencialmente a ciclização intramolecular do composto (V) é induzida pela remoção do grupo de proteção R5. Preferencialmente, para esta forma de realização, R5 é benziloxicarbonilo (Cbz) e o processo compreende a hidrogenação de um composto de fórmula (V) na presença de um catalisador de paládio.

Numa forma de realização preferida, o processo da invenção compreende o passo de conversão de um composto de fórmula (VI) num composto de fórmula (V) OTs

(VI) OTs

Numa forma de realização preferida, o agente oxidante é mCPBA. 65

Noutra forma de realização preferida, o agente oxidante é um dioxirano. A utilização de dioxiranos como agentes oxidantes está bem documentada na literatura [ver (a) Hodgson, D. M. et al, Synlett, 310 (2002); (b) Adam, W. et al, Acc. Chem. Res. 22, 205, (1989); (c) Yang, D. et al, J. Org. Chem., 60, 3887, (1995); (d) Mello, R. et al, J. Org. Chem., 53, 3890, (1988); (e) Curei, R. et al, Pure & Appl. Chem., 67(5), 811 (1995); (f) Emmons, W. D. et al, J. Amer. Chem. Soc. 89, (1955)].

Preferencialmente, o dioxirano é gerado in situ pela reação de KHSO5 com uma cetona. No entanto, o passo de oxidação também pode ser realizado utilizando um dioxirano isolado, por exemplo uma solução-mãe do dioxirano preparado a partir da acetona.

Mais preferencialmente, o dioxirano é gerado in situ utilizando Oxone®, o qual é um agente oxidante comercialmente disponível contendo KHSO5 como o ingrediente ativo.

Assim, numa forma de realização preferida, o processo reivindicado envolve a epoxidação in situ de um composto de fórmula (VI) utilizando Oxone® (2KHSO5-KHSO4-K2SO4) e uma cetona co-reagente.

Como mencionado acima, o ingrediente ativo de Oxone® é peroximonossulfato de potássio, KHS05 [CAS-RN 10058-23-8], geralmente conhecido como monopersulfato de potássio, o qual está presente como um componente de um sal triplo com a fórmula 2KHS05-KHSCg ‘K^SCq [potássio hidrogénio peroximonossulfato sulfato (5:3:2:2), CAS-RN 70693-62-8; 66 comercialmente disponível de DuPont]. 0 potencial de oxidação de Oxone® é proveniente da sua química de perácido; é o primeiro sal de neutralização do ácido peroximonossulfúrico H2SO5 (também conhecido como ácido de Caro). K+ "0-S (=0)2(-00H)

Monopersulfato de Potássio

Sob condições ligeiramente básicas (pH 7,5-8,0), o persulfato reage com a cetona co-reagente para formar um peróxido cíclico de três membros (um dioxirano) no qual ambos os oxigénios estão ligados ao carbono de carbonilo da cetona. 0 peróxido cíclico assim preparado epoxida em seguida o composto de fórmula VI por transferência específica syn de oxigénio para a ligação alceno.

Preferencialmente, a cetona é de fórmula (XIX)

O

em que Ra e Rb são, cada, independentemente alquilo, arilo, haloalquilo ou haloarilo.

Quando Ra e/ou Rb são alquilo, o grupo alquilo pode ser um grupo alquilo de cadeia linear ou ramificado. Preferencialmente, o grupo alquilo é um grupo alquilo C1-20, mais preferencialmente um C1-15, ainda mais preferencialmente um grupo alquilo C1-12, ainda mais preferencialmente um grupo alquilo C1-8 ou C1-6, mais preferencialmente um grupo alquilo C1-4. Os grupos alquilo particularmente preferidos incluem, por exemplo, metilo, 67 etilo, propilo, isopropilo, butilo, isobutilo, terc-butilo, pentilo e hexilo.

Como aqui utilizado, o termo "haloalquilo" refere-se a um grupo alquilo como descrito acima no qual um ou mais hidrogénios estão substituídos por halo.

Quando Ra e/ou Rb são arilo, o grupo arilo é tipicamente um grupo aromático Ce-12· Exemplos preferidos incluem fenilo e naftilo etc.

Como aqui utilizado, o termo "haloarilo" refere-se a um grupo arilo como descrito acima no qual um ou mais hidrogénios estão substituídos por halo. A titulo de exemplo, a reação de KHS05 (Oxone®) com uma cetona de fórmula XVI formaria um dioxirano de fórmula:

O—O

em que Ra e Rb são como definidos acima.

Mais preferencialmente, Ra e Rb são, cada independentemente alquilo ou haloalquilo.

Num forma de realização muito preferida, pelo menos um de Ra e Rb é um haloalquilo, mais preferencialmente, CF3 ou CF2CF3.

Numa forma de realização preferida, Ra e Rb são, cada independentemente metilo ou trifluorometilo. 68

Numa forma de realização preferida da invenção, a cetona é selecionada de acetona e uma 1,1,1-trifluoroalquilcetona.

Numa forma de realização mais preferida da invenção, a trifluoroalquilcetona é 1,1,1-trifluoroacetona ou 1,1,1-trifluoro-2-butanona, mais preferencialmente 1,1,1- trifluoro-2-butanona.

Numa forma de realização preferida, o processo da invenção compreende o passo de conversão de um composto de fórmula (VII) num composto de fórmula (VI)

Preferencialmente, o processo compreende tratar um composto de fórmula (VII) com cloreto de tosilo em piridina. Alternativamente, o processo compreende tratar um composto de fórmula (VII) com cloreto de tosilo em diclorometano e trietilamina.

Numa forma de realização preferida o processo da invenção compreende o passo de conversão de um composto de fórmula (VIII) num composto de fórmula (VII)

OH '0' R5·

OH W(VTJÍ)

em que W é halogéneo ou tosilo. (VII) 69

Preferencialmente, este passo compreende os passos de: (a) fazer reagir um composto de fórmula (VIII), em que W é halogéneo ou OTs, com amoniaco aquoso e álcool; e (b) converter o produto preparado no passo (a) num composto de fórmula (VII).

Preferencialmente, os passos (a) e (b) do processo acima são um processo num único recipiente.

Num forma de realização particularmente preferida, R5 é benziloxicarbonilo, e o passo (b) compreende tratar a mistura preparada no passo (a) com cloreto de benziloxicarbonilo.

Preferencialmente, W é I, Br ou OTs, mais preferencialmente, Br ou OTs, ainda mais preferencialmente OTs .

Preferencialmente, o álcool é álcool isopropilico ou etanol.

Numa forma de realização preferida da invenção, o referido composto de fórmula VIII é preparado a partir de um composto de fórmula IX

Preferencialmente, o processo referido composto de fórmula IX acima compreende tratar o com metil-lítio. 70

Mais preferencialmente, o composto de fórmula IX é o composto 47 e o composto de fórmula VIII é o composto 14. O tratamento de monobromotosilato 47 com zinco em pó à temperatura ambiente em misturas orgânicas / aquosas (muito preferencialmente uma mistura de isopropanol, tetra-hidrofurano, água, cloreto de amónio) proporciona o álcool 14 respetivamente em alto rendimento. Adicionalmente, a conclusão da conversão num único recipiente dá o álcool VII e com a estereoquímica definida e em alto rendimento.

Começando a partir do açúcar isossorbida comercialmente disponível, a presente invenção também proporciona uma preparação fácil do monobromotosilato 47. Uma preparação muito preferida é mostrada abaixo no Esquema 15 71

Esquema 15: (a) TsCl, trietilamina, DCM, 25°C 50°C, 20h sob Ar; (b) LiBr, DMSO, 110°C -> 120°C, lOh sob AR; (c) Zn, iPrOH, THF, H20, NH4C1, TA, 16h; (d) (i) NH4OH, NH3 em iPrOH, 75°C, 16h; (ii) Cbz-Cl, Na2CC>3, dioxano, água. A isossorbida (43) é convertida no di-tosilato (42) que é obtido após recristalização de metanol em 97% de rendimento. A mono-bromação é efetuada com 2,5eq de brometo de litio em DMSO (ou DMF) com controlo de temperatura 110°C 120°C. O produto brometo é isolado após processamento extrativo e purificação por cromatografia em coluna (74%) ou, atrativo para grande escala, por recristalização de metanol dando uma primeira cultura de 55% mais águas-mães contendo material de boa qualidade que pode ser misturado de lotes de produção e purificado mais tarde. Assim, a preparação de monobromotosilato (47) com estereoquimica definida pelos métodos no Esquema 15 é atrativo para aplicações em grande escala. 0 tratamento de misturas monobromotosilato (47) com zinco em pó à temperatura ambiente em misturas orgânicas / aquosas (muito 72 preferencialmente uma mistura de isopropanol, tetra-hidrofurano, água, cloreto de amónio) proporciona o álcool (14) que é derivatizado como o composto de Cbz (18) através de conversão num único recipiente.

Num forma de realização muito preferida da invenção, o núcleo 6-C1-5,5-biciclico é preparado de acordo com os passos definidos no Esquema 1 abaixo: A funcionalidade álcool de (18) pode ser derivatizada com o para-toluenossulfonato (Ts) dando 4-metilbenzenossulfonato de (R)-2-(benziloxicarbonilamino)-1-((S)-2,5-di-hidrofuran-2-il)etilo (32b), o qual prossegue através do epóxido anti 4-metilbenzenossulfonato de (R)-2-(benziloxicarbonilamino)-1-((15, 25, 55)-3,6-dioxabiciclo[3.1.0]hexan-2-il)etilo (33b). A hidrogenação do tosilato (33b) proporciona a amina livre que sofre ciclização intramolecular para proporcionar o intermediário (74). O intermediário (74) sofre substituição com um excesso de cloreto de lítio em DMF a 130°C, para dar o análogo 6-cloro com inversão da configuração. A proteção uretano da amina secundária do intermediário bicíclico (69), seguida de oxidação a cetona proporciona o intermediário (71) que é particularmente útil para a síntese em fase sólida de compostos de fórmula geral I.

Vantajosamente, a epoxidação para dar o epóxido anti desejado é orientada pela presença do grupo tosilato. 73

(68)

Esquema 1: (a) TsCl, piridina; (b) (i) mCPBA, DCM ou (ii) OXONE®, NaHC03, 1,1,1-trifluoroacetona, CH3CN, H20, Na2.EDTA 0 °C ou (iii) H202 a 30%, CH3CN, MeOH, NaHC03; (c) Pd-C, H2, etanol; (d) LiCl, DMF; 130°C; (e) Cbz-Cl, Na2C03, dioxano, H20; (f) Fmoc-Cl, Na2C03, dioxano, H20; (g) periodinano de Dess-Martin, DCM anidro, TA.

Alternativamente, o intermediário tosilato (74) pode ser protegido com Cbz para dar o análogo protegido (34b) que pode sofrer inversão a cloreto (68) através de tratamento com LiBr em DMF a, tipicamente, 130 °C (Esquema 1).

Sintese de Compostos de Fórmula (I)

Para os especialistas na prática de química orgânica, os compostos de fórmula geral (I) podem ser facilmente sintetizados por um número de estratégias químicas, realizadas em solução ou em fase sólida (ver Atherton, E. e Sheppard, R. C. In 'Solid Phase Peptide Synthesis: A Practical Approach', Oxford University Press, Oxford, Reino 74

Unido 1989, para uma revisão geral dos princípios de síntese em fase sólida), ou uma combinação das mesmas.

Os compostos de fórmula geral (I) podem ser convenientemente considerados como uma combinação de três unidades estruturais (Pl, P2 e P3) que ocupam, respetivamente, os sítios de ligação Sl, S2 e S3 da protease (ver Berger, A e Schechter, I., Philos. Trans. R. Soc. Lond. [Biol.], 257, 249-264, 1970 para uma descrição da designação dos sub-sítios S da enzima e sub-sítios P do substrato nos complexos enzima-substrato ou enzima- inibidor). Os conceitos de Pl, P2 e P3 são aqui utilizados apenas por conveniência e pretende-se que os compostos supramencionados estejam no âmbito da invenção independentemente do modo de ligação.

Cl

Uma unidade estrutural adequadamente protegida e/ou ativada pode ser depois preparada e em seguida ligada quimicamente (acoplada) em conjunto com outras unidades estruturais para proporcionar os compostos de fórmula geral (I).

Os compostos de fórmula (I) podem ser preparados: (1) pela adição por passos de P3 e P2 ao núcleo bicíclico de 6- (S)-clorotetra-hidrofuro[3,2-b]pirrol-3-ona; ou (2) por reação do núcleo bicíclico 6-(S)-clorotetra-hidrofuro[3,2-b]pirrol-3-ona com uma molécula precursora de P3-P2; ou (3) introduzindo o grupo P3-P2 antes da formação do núcleo 75 bicíclico 6- (S) -clorotetra-hidrofuro[3,2-jb] pirrol-3-ona, isto é, antes do passo de oxidação ou antes do passo de ciclização intramolecular.

Deste modo, são possíveis ordens de acoplamento das unidades estruturais alternativas, por exemplo P2 + PI -½ P2-P1 em seguida adição de P3 P3-P2-P1 ou P3 + P2 P3-P2 em seguida adição a PI ^ P3-P2-P1. Em cada uma destas combinações, cada uma das unidades estruturais Pl, P2 ou P3 pode conter funcionalidades alternativas adicionais que são posteriormente transformadas após acoplamento para dar o composto final. Por exemplo, a funcionalidade cetona da unidade estrutural Pl pode ser protegida como um cetal durante acoplamento de unidades estruturais e transformada na cetona final por hidrólise após finalização das reações de acoplamento. Alternativamente, a funcionalidade cetona da unidade estrutural Pl pode ser inicialmente introduzida via um estado de oxidação inferior tal como o álcool correspondente e, após finalização das reações de acoplamento, ser reintroduzida por oxidação do álcool. Alternativamente, a funcionalidade cetona da unidade estrutural Pl pode ser protegida através de uma semi-carbazona adequada para sintese em fase sólida (por exemplo ver WO 02/057270 e referências ali citadas) e após finalização das reações de acoplamento libertadas a partir da fase sólida por reação de acidólise. A ligação química formada por acoplamento das unidades estruturais é uma amida secundária (P3-P2) ou uma amida terciária (P2-P1) que é formada através da reação de um ácido carboxílico ativado com uma amina primária e secundária, respetivamente. Estão disponíveis muitos métodos para a ativação de um ácido carboxílico antes do acoplamento a uma amina e, em princípio, qualquer um destes 76 métodos pode ser aqui utilizado. Os métodos de ativação de ácidos carboxilicos típicos são exemplificados, mas não se restringem, ao método de azida, método de anidrido misto (por exemplo via cloroformato de isobutilo), métodos de carbodiimida (por exemplo via diciclo-hexilcarbodiimida, diisopropilcarbodiimida, l-etil-3-(3'-dimetilamino propil)carbodiimida), método de éster ativado (por exemplo via éster de p-nitrofenilo, éster imido N-hidroxissuccínico, éster de pentafluorofenilo), método de urónio (por exemplo via adição de HBTU, PyBop, BOP) , método de carbonildiimidazole ou via pré-formação de fluoretos de acilo ou cloretos de acilo. Nalguns casos, a reação de acoplamento pode ser melhorada pela adição de um catalisador de ativação adicional tal como 1-hidroxibenzotriazole ou 4-dimetilaminopiridina. Uma descrição geral de técnicas de ativação de ácidos carboxilicos e da utilização de aditivos de ativação pode ser encontrada em Bodanszky, M. 'Principies of Peptide Synthesis', 2nd rev. ed., Springer-Verlag, Berlin, 1993 e referências ali citadas.

0 grupo amino α da unidade estrutural de aminoácido P2 é geralmente protegido durante as reações de acoplamento à unidade estrutural PI para evitar a formação de produtos de autocondensação indesejados. A técnica de proteção do amino α é bem conhecida na química de péptidos (por exemplo ver Bodanszky, M. 'Principies of Peptide Synthesis', 2nd rev. ed., Springer-Verlag, Berlin, 1993 e referências ali citadas) e os exemplos de grupos de proteção incluem, mas não se limitam a, 9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc), terc-butoxicarbonilo (Boc), benziloxicarbonilo (Cbz) , aliloxicarbonilo (Alloc) e tricloroetoxicarbonilo (Treoc). 0 grupo Fmoc é particularmente bem adequado para as sínteses em fase sólida (por exemplo, ver Atherton, E.; Sheppard, R. C. in 'Solid Phase Peptide Synthesis: A 77

Practical Approach', IRL Press, Oxford, Reino Unido, 1989), sendo tipicamente removido por tratamento com piperidina em dimetilformamida a 20% v/v ou 1,8-diazabiciclo[5.4.0]undec-7-eno em dimetilformamida a 1% v/v. O grupo Boc é particularmente bem adequado para as sinteses em solução, sendo tipicamente removido por tratamento com misturas à base de ácido trifluoroacético ou HC1 em dioxano ou acetato de etilo. O grupo Cbz também é particularmente bem adequado para as sinteses em solução, sendo tipicamente removido por hidrogenação catalítica com hidrogénio e catálise de paládio ou por tratamento com HBr em ácido acético. Uma vez concluída a sequência de acoplamento, quaisquer grupos de proteção são removidos de qualquer maneira que é ditada pela escolha dos grupos de proteção (para uma descrição geral de grupos de proteção e suas estabilidades e métodos de remoção respetivos, ver Greene, T. W. e Wuts, P. G. M. 'Protective Groups in Organic Synthesis' John Wiley and Sons, New York, 1991 e referências ali).

No exemplo mais simples, toda a parte esquerda de um composto de fórmula geral (I) (isto é, P3-P2) como o ácido carboxílico pode ser preparada em solução por métodos de química orgânica tradicional e acoplada a intermediários cetona, álcool ou cetal tais como os compostos (Ilb), (IIc) e (Hd) . Em seguida, a oxidação do álcool intermediário (por exemplo periodinano de Dess-Martin em DCM) ou a dissociação por acidólise do intermediário cetal proporciona compostos de fórmula geral (I). A via de oxidação de álcool é particularmente útil quando o composto de fórmula geral (I) contém um substituinte que é instável ao ácido trifluoroacético, sendo este o reagente final utilizado em cada uma das sínteses em fase sólida. 78 Η Η Η

(Ilb) (Πο) (Πά)

Exemplos destas táticas de acoplamento diferentes foram anteriormente detalhados (ver (i) Quibell, M. et al., Bioorg. Med. Chem. 13, 609-625, 2005. (ii) Wang, Y. et al., Bioorg. Med. Chem Lett. 15, 1327-1331, 2005) e a via de síntese ótima depende das combinações específicas de substituintes do composto de fórmula geral (I) alvo.

Em mais pormenor, uma estratégia preferida para a síntese de compostos de fórmula geral (I) compreenderia) Preparação de uma unidade estrutural de cetona bicíclica ou álcool bicíclico funcionalizado e protegido de modo apropriado em solução; (b) Ligação da unidade estrutural (a) à fase sólida através de uma unidade de ligação que é estável nas condições de síntese, mas prontamente instável à dissociação no final de uma síntese (ver James, I. W., Tetrahedron, 55 (Report N° 489), 4855-4946, 1999, para exemplos da função da 'unidade de ligação' como aplicada à síntese em fase sólida); (c) Química orgânica em fase sólida (ver Brown, R. D. J.

Chem. Soc., Perkin Trans,l, 19, 3293-3320, 1998), para construir o remanescente da molécula; (d) Dissociação do composto a partir da fase sólida para a solução; e (e) Processamento dissociativo e análise do composto.

Uma segunda estratégia para a síntese de compostos de fórmula geral (I) compreende:- 79 (a) Preparação de uma unidade estrutural intermediária biciclica funcionalizada e protegida de modo apropriado em solução. Os grupos de proteção preferidos para a quimica em solução são os grupos 9-fluorenilmetoxicarbonilo (Fmoc), Να-terc-butoxicarbonilo (Boc), Να-benziloxicarbonilo (Cbz) e Να-aliloxicarbonilo (Alloc). (b) Métodos de quimica orgânica corrente para a conversão da unidade estrutural obtida no passo (a) em compostos de fórmula geral (I).

Como mencionado acima, numa forma de realização preferida da invenção, os compostos de fórmula (I) podem ser preparados utilizando quimica em solução convencional, por exemplo, como descrito em Quibell, M et al, Bioorg. Med. Chem, 13, 609-625, 2005 (ver em particular, Esquemas 3 e 4) . A estratégia em solução é atrativa ao ser capaz de gerar maiores quantidades dos análogos preferidos, tipicamente numa escala de vários grama a vários quilograma.

Numa forma de realização preferida alternativa da invenção, os compostos de fórmula (I) podem ser preparados utilizando quimica em fase sólida convencional, por exemplo, como descrito em Quibell M, et al Bioorg. Med. Chem, 12, 5689-5710, 2004, ver em particular, Esquema 3 e Secção 3.2, e referências ali citadas; e Bioorg. Med. Chem, 13, 609-625, 2005, ver Esquema 5 e Secção 2.2, e referências ali citadas) . A estratégia em fase sólida é atrativa ao ser capaz de gerar muitos milhares de análogos, tipicamente numa escala de 5-100mg, através de metodologias de síntese paralela estabelecidas (por exemplo, ver (a) Bastos, M. ; Maeji, N. J.; Abeles, R. H. Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 92, 6738-6742, 1995). 80 A estratégia de sintese baseia-se na ancoragem reversível da funcionalidade cetona através da ligação de uma unidade de hidrazida utilizando técnicas multipino gerais anteriormente descritas na técnica (Watts J. et al, Bioorg. Med. Chem. 12(11), 2903, 2004; Quibell M., et al, Bioorg.

Med. Chem. 5689-5710, 2004; Grabowksa U. et al, J. Comb.

Chem 2000, 2 (5), 475) .

Os compostos de fórmula (III; R5 = Fmoc) podem ser oxidados à cetona correspondente (por exemplo XVI, Esquema 3) e utilizados numa síntese em fase sólida de moléculas inibidoras (I) . A ligação em fase sólida de um aldeído ou cetona foi anteriormente descrita por uma variedade de métodos (por exemplo, ver (a) James, I. W., 1999, (b) Lee, A., Huang, L., Ellman, J. A., J. Am. Chem. Soc, 121(43), 9907-9914, 1999, (c) Murphy, A. M., et al, J. Am. Chem.

Soc, 114, 3156-3157, 1992). Um método adequado para a ligação reversível de uma funcionalidade alquilcetona é através de uma combinação das químicas anteriormente descritas. A semicarbazida, ácido 4- [[(hidrazinocarbonil)amino]metil]ciclo-hexanocarboxílico. trifluoroacetato (Murphy, A. M., et al, J. Am. Chem. Soc, 114, 3156-3157, 1992), pode ser utilizada como ilustrado no Esquema 3, exemplificada pela ligação da 6-(S)-clorotetra-hidrofuro[3,2-b]pirrol-3-ona protegida com Fmoc (71). 81 81 Fórmula geral (I)

Η CI/, •q

FmO—^ O O (71) (xvm)

Esquema 3: (a) (71) em EtOH a 90% / H20 / l,5eq. de NaOAc / ácido 4-[[(hidrazinocarbonil)amino]metil]ciclo-hexanocarboxílico.trifluoroacetato, 2 h a refluxo, (b) 3eq. construção (XVII) / 3eq HBTU / 3eq HOBt / 6eq NMM, NH2-FASE SÓLIDA, DMF, TA, o/n. (c) piperidina a 20% / DMF, 30min. (d) Gama de químicas para introduzir P3-P2 (e) TFA / H20 (95:5, v/v), TA, 2h. na A construção (XVII) é preparada através da reação da molécula de ligação e a 6-(S)-clorotetra-hidrofuro[3,2-b] pirrol-3-ona (71) submetendo a refluxo em etanol aquoso/acetato de sódio. Técnicas correntes em fase sólida (por exemplo, ver Atherton, E. e Sheppard, R. C., 1989) são utilizadas para ancorar a construção a uma fase sólida funcionalizada com amino através da funcionalidade ácido carboxílico livre de (XVII), proporcionando a construção carregada (XVIII). A construção carregada (XVIII) pode ser feita reagir com uma grande gama de ácidos carboxílicos disponíveis comercialmente ou na literatura, para introduzir a parte esquerda 'P3-P2'. 82

Os ácidos carboxílicos preferidos para a introdução do sintão [R9-CO] são conhecidos na literatura com os seguintes exemplos representativos; ácido furan-2-carboxílico, ácido 5-clorofuran-2-carboxilico, ácido tiofeno-2-carboxílico, ácido 5-clorotiofeno-2-carboxílico, ácido furan-3-carboxílico, ácido 5-clorofuran-3-carboxilico, ácido tiofeno-3-carboxílico, ácido 5-clorotiofeno-3-carboxílico, ácido oxazole-2-carboxílico, ácido oxazole-5-carboxílico, ácido 1,3,4-oxadiazole-2-carboxílico, ácido tiazole-2-carboxílico, ácido tiazole-5-carboxilico, ácido 1,3,4-tiadiazole-2-carboxílico, ácido benzóico, ácido 3-metilbenzóico, ácido 3-clorobenzóico, ácido 3-fluorobenzóico, ácido 3-bromobenzóico, ácido 3-metoxibenzóico, ácido 3-nitrobenzóico, ácido 3,5-difluorobenzóico, ácido nicotinico (CAS 59-67-6), ácido 5-fluoronicotínico, ácido 5-cloronicotínico, ácido 5-metoxinicotínico, ácido 5-nitronicotínico, ácido pirimidina-5-carboxilico (CAS 4595-61-3), ácido isonicotinico, ácido 2-fluoroisonicotinico, ácido 3—(1H— pirrol-l-il)benzóico (CAS 61471-45-2), ácido 3-(lH-pirazol-1-il)benzóico (CAS 264264-33-7), ácido 3-(lH-imidazol-1-il)benzóico (CAS 108035-47-8), ácido 3-(1H-1,2,3-triazol-l-il)benzóico (CAS 335255-82-8), ácido 3-(4H-1,2,4-triazol-4-il)benzóico (CAS 335255-80-6), ácido 3-(1H-1,2,4-triazol-l- ii: >benzóico (CAS 167626-64-4), ácido 3-(lH-tetrazol-1- ii: )benzóico (CAS 204196-80-5), ácido 3-(2H-1,2,3-triazol-2- ii: )benzóico (CAS 90556-58-4), ácido 3-(lH-imidazol-5- íi: )benzóico (CAS 912569-71-2), ácido 3-(lH-imidazol-2- ii: )benzóico (CAS 391668-62-5), ácido 3-(4H-1,2,4-triazol-3- íi: )benzóico (CAS 876715-37-6), ácido 3-(lH-tetrazol-5- íi: )benzóico (CAS 73096-39-6), ácido 3-(lH-pirazol-3- il)benzóico (CAS 850375-11-0), ácido 3-(furan-2-il)benzóico (CAS 35461-99-5), ácido 3- (tiofen-2-il)benzóico (CAS 29886-63-3), ácido 3- (isoxazol-5-il)benzóico (852180-44-0), ácido 3- (isotiazol-5-il)benzóico (CAS 904085-98-9), ácido 3- 83 (oxazol-5-il)benzóico (CAS 252928-82-8), ácido 3-(tiazol-5-il)benzóico (CAS 252928-84-0), ácido 3-(oxazol-2- il)benzóico (CAS 473538-18-0), ácido 3-(tiazol-2- il)benzóico (CAS 847956-27-8), ácido 3-(furan-3-il)benzóico (CAS 168619-07-6), ácido 3-(tiofen-3-il)benzóico (CAS 20608-89-3), ácido 3- (2-metiltiazol-4-il)benzóico (CAS 28077-41-0), ácido 3-(1,2,4-oxadiazol-3-il)benzóico (CAS 912577-30-1), ácido 3-(l-metil-lH-pirazol-3-il)benzóico (CAS 915707-39-0), ácido 3-(2-metil-lH-imidazol-l-il)benzóico (CAS 898289-59-3), ácido 3-(3-metil-l,2,4-oxadiazol-5-il)benzóico (CAS 915707-45-8), ácido 3-(l-metil-lH-pirazol-5-il)benzóico (CAS 628297-55-2), ácido 3-(piridin-4-il)benzóico, ácido 3-(pirimidin-4-il)benzóico, ácido 3-(piridin-3-il)benzóico (CAS 4385-77-7), ácido 3-(pirimidin-5-il)benzóico (CAS 852180-74-6), ácido 3-(piridin-2-il)benzóico (CAS 4467-07-6), ácido 3-(pirimidin-2-il)benzóico (CAS 579476-26-9), ácido benzo[d]tiazole-6-carboxílico (3622-35-3), ácido lH-indole-5-carboxílico (1670-81-1), ácido ΙΗ-benzo[d][1,2,3]triazole-6-carboxílico (23814-12-2), ácido benzo[c][1,2,5]oxadiazole-5-carboxílico (19155-88-5), ácido 6-hidroxipicolínico (19621-92-2), ácido 2,3-dioxo-l, 2,3,4-tetra-hidroquinoxalina-6-carboxílico, ácido 2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolina-6-carboxílico (CAS 70639-77-9), ácido 2-oxoindolina-5-carboxilico (CAS 102359-00-2), ácido 2-oxoindolina-6-carboxílico (CAS 334952-09-9), ácido 2,3-dioxoindolina-5-carboxílico (CAS 25128-32-9), ácido 3-oxo-3,4-di-hidro-2H-benzo[b] [1,4]oxazina-7- carboxílico (CAS 214848-62-1), ácido 4- (metilsulfonamido)benzóico (CAS 7151-76-0), ácido 2-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-lH-benzo[b]azepina-7-carboxilico (CAS 117030-69-0). A presente invenção é ainda descrita a titulo de exemplo. 84

EXEMPLOS

Procedimentos gerais

Os solventes foram adquiridos de ROMIL Ltd, Reino Unido em pureza SpS ou Hi-Dry, salvo indicação em contrário. Os RMN de 3H e RMN de 13C foram obtidos num Bruker DPX400 (frequência de 3H de 400 MHz e frequência de 13C de 100 MHz; sonda QXI) ou Bruker Avance 500MHz, (sonda TXI com ATM) nos solventes indicados. Os desvios quimicos são exprimidos em partes por milhão (δ) e são referenciados aos sinais residuais do solvente. As constantes de acoplamento (J) são exprimidas em Hz. Todos as HPLC analíticas foram obtidos em Phenomenex Júpiter C4, 5 μ, 300 Â, 250 x 4,6 mm, utilizando misturas de solvente A (0,1% ácido trifluoroacético aq (TFA)) e solvente B (90% acetonitrilo / 10% solvente A) em sistemas Agilent automatizados com deteção UV a 215 e / ou 254 nm. Salvo indicação em contrário foi realizado um gradiente de 10 a 90% B em A ao longo de 25 min a 1,5 mL / min para HPLC analítica completo. A análise por HPLC-MS foi realizada num LC/MSD Agilent 1100 series, utilizando sistemas de HPLC Agilent automatizados, com um gradiente de 10 a 90% B em A ao longo de 10 min em Phenomenex Luna Cs, 5μ, 300 Â, 50 x 2,0 mm a 0,6 mL / min. A purificação por HPLC semi-preparativa foi realizada em Phenomenex Júpiter C4, 5μ, 300 Â, 250 x 10 mm, utilizando um gradiente de 10 a 90% B em A ao longo de 25 min a 4 mL / min em sistemas Agilent automatizados com deteção por UV a 215 e / ou 254 nm. A purificação por coluna "flash" foi realizada sobre sílica gel 60 (Merck 9385) ou utilizando colunas de sílica "flash" isolute SPE (Biotage, Hengoed, Reino Unido).

Preparação_de_(R) -2- ((S) -2,5-Di-hidrofuran-2-il) -2- hidroxietilcarbamato de benzilo (18). (i) Preparação de 85 bis(4-metilbenzenossulfonato) de (3 R, 3a S, 6 S, 6aS)-hexa-hidrofuro[3,2-b]furan-3,6-diilo (42). Uma solução, mantida sob agitação, de cloreto de p-toluenossulfonilo (57,4 g, 301 mmol) e isossorbida (43) (20 g, 137 mmol) em piridina (315 mL) foi aquecida a 95°C durante 4,5 horas sob uma atmosfera de árgon, em seguida deixada em repouso à temperatura ambiente durante 16 horas, antes de ser vertida sobre água gelada (1 L) . A fase aquosa foi extraida com diclorometano (2 x 500 mL), em seguida as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com água (2 x 500 mL) , depois secas (Na2SC>4) , filtradas, em seguida reduzidas in vacuo para deixar um óleo viscoso (65,22 g). O óleo foi

cristalizado de metanol quente (350 mL) . O sólido branco foi recolhido por filtração in vacuo, em seguido lavado com metanol (100 mL) e seco in vacuo para obter o ditosilato (42) como um sólido branco (45,87 g, 74%). TLC (Rf = 0,30, AcOEt : heptano 2 : 3) , Pico principal único em HPLC analítica, Tr = 20,219 min., HPLC-MS 455, 1 [M + H]+, 931,2 [ 2M + Na]+, +57,2° (c = 10,2, CHCI3 ); ÕH (500 MHz, ΡΊ 1-1 0 Ω O .) 2,44 (6H, s, CH3) , 3, 68 (1H, dd, J= 9, 80 e 6,4 6 Hz, ch2) , 3, 82-3, 87 (2H, m, ch2) r 3, 94 (1H, d, J= 11,28 Hz, cHz) , 4,46 (1H, d, J = 4 ,44 Hz , CHCHOTs), 4,58 (1H, t, J= 4,74 Hz, CHCHOTs), 4,82-4 ,86 (2H, m, CHOTs) , 7,32 -7,36 (4H, m, CH3CCíí aromático), 7,74-7, 80 (4H, m, OSO2CCH aromático). (ii) Preparação de 4-metilbenzenossulfonato de (3S, 3a S, 6S, 6aS)-6-bromo-hexa-hidrofuro [3,2-Jb] furan-3-ilo (47). Foi adicionado brometo de litio (9,6 g, 110,1 mmol) a uma solução, mantida sob agitação, de ditosilato (42) (20,0 g, 44,05 mmol) em dimetilformamida (100 mL) sob uma atmosfera de árgon. A mistura foi aquecida a 110 °C durante 5 horas, em seguida deixada em repouso à temperatura ambiente durante 3 dias, depois aquecida a 90 °C durante 3,5 horas. 86 A mistura foi diluida com água (250 mL) extraída com éter terc-butilmetílico (4 x 125 mL) em seguida a fase orgânica lavada com água (3 x 125 mL) , solução aquosa saturada de cloreto de sódio (125 mL) , seca (MgSCq) , filtrada e reduzida in vacuo para deixar um óleo castanho (16,8 g) . A cromatografia flash sobre sílica, eluindo com misturas de acetato de etilo : heptano 0 : 100 a 30 : 70 deu o bromotosilato (47) (11,88 g, 74%) como um sólido amarelo pálido. TLC (Rf = 0,20, AcOEt : heptano 1 : 3); pico principal em HPLC analítica, Tr = 18,050 min; HPLC-MS 381,0 / 383, 0 [M + H20 + H]+, 385, 0 / 387,0 [M + Na]+; N# +51,0° (c = 5,0, CHC13) ; δΗ (500 MHz, CDC13) 2,45 (3H, s, CH3) , 3,84 (1H, dd, J= 11,19 e 3,51 Hz, Cff2) , 4,05-4,15 (3H, m, CH2), 4,28 (1H, d, J= 3,40 Hz, CffBr) , 4,78 (1H, d, J= 3,37

Hz, CHCH) , 4,84 (1H, d, J= 3,42 Hz, CffOTs), 4,90 (1H, d, J=

3,37 Hz, CHCH) , 7,36 (2H, d 1, J= 7,98 Hz, CH3CCH aromático), 7,79 (2H, d 1, J= 8,32 Hz, OSO2CCH aromático). (iii) Preparação de 4-metilbenzenossulfonato de (S)-1-((S)~ 2,5-di-hidrofuran-2-il) -2-hidroxietilo_(14) . Foram adicionados cloreto de amónio (20 mg, 0,37 mmol) em seguida zinco em pó (20 mg, 0,31 mmol) a uma solução de bromotosilato (47) (100 mg, 0,28 mmol) em etanol (1,5 mL) sob árgon. A mistura foi agitada durante 16 horas, antes de filtrar a suspensão através de celite in vacuo. O bolo de filtração foi lavado com etanol (20 mL) em seguida o filtrado reduzido in vacuo para deixar um resíduo (111 mg) . A cromatografia flash sobre sílica, eluindo com misturas de acetato de etilo : heptano 20 : 80 a 40 : 60 deu o álcool (14) (53 mg, 68%) como um sólido branco. TLC (Rf = 0,15,

AcOEt : heptano 1 : 2); pico principal em HPLC analítica,

Tr = 12,543 min; HPLC-MS 285, 1 [M + H]+, 302,1, 591,2 [2M +

Na]+ ; Mb -86,8° (c = 5,3, CHC13) ; δΗ (500 MHz, CDC13) 2,12 87 (1Η, s 1, OH), 2,44 (3H, s, aril-Cff3) , 3,77 (2H, d, J = 4,85 Hz, CH2OH) , 4,54-4,58 (3H, m, Cff2OCH), 4, 94-4, 98 (1H, m, CHOTs), 5, 64-5, 67 e 5, 97-6, 00 (2H total, m, CH2CH=CH) , 7,33 (2H, dl, J = 8,23 Hz, CH3CCff aromático), 7,79 (2H, d I, J= 8,31 Hz, 0S02CC H aromático); õc (125 MHz, CDCI3) 21, 660 (CH3), 62,303 (CH2OH) , 75, 940 (OCH2CH=CH) , 82,720 e 85,221 (OCHCHOTs), 124,792, 127,977, 129,479 e 129,749 (OCH2CH=CH e CH aromático), 133,496 (CH0S02C quaternário), 144,973 (CH3C quaternário). (iv) Preparação alternativa de 4-metilbenzenossulfonato de (S)-1-((S)-2,5-di-hidrofuran-2-il)-2-hidroxietilo (14). Uma solução de cloreto de amónio (200 mg, 3,7 mmol) em água (2,5 mL) e em seguida zinco em pó (200 mg, 3,1 mmol) foram adicionados a uma solução de bromotosilato (47) (1 g, 2,75 mmol) em tetra-hidrofurano (10 mL) e propan-2-ol (5 mL) sob árgon. A mistura foi agitada durante 16 horas antes de filtrar a suspensão através de celite in vacuo. O bolo de filtração foi lavado com éter dietilico (20 mL). Foi adicionado ácido clorídrico (1M, 20 mL) ao filtrado, em seguida a fase orgânica foi separada. A camada aquosa foi extraída com éter dietilico (20 mL) , em seguida a fase orgânica combinada foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (20 mL) , depois seca (MgSCh) , filtrada e reduzida in vacuo para deixar um resíduo (1,06 g) . A cromatografia flash sobre sílica, eluindo com misturas de acetato de etilo : heptano 20 : 80 a 50 : 50 deu álcool (14) (528 mg, 68%) como um sólido branco. [**]£“ -82,7° (c = II, 3, CHC13) . (v) Preparação de (R)-2-((S)-2,5-di-hidrofuran-2-il)-2-hidroxietilcarbamato de benzilo (18). Zinco e procedimento em 'Um recipiente'. Uma solução de cloreto de amónio (600 mg, 11,2 mmol) em água (7,5 mL) foi adicionada a uma 88 solução de bromotosilato (47) (3,0 g, 8,26 mmol) em propan-2-ol (15 mL) sob árgon. Foi então adicionado zinco em pó (600 mg, 9,2 mmol) em porções ao longo de 4 minutos e a mistura foi agitada durante 16 horas antes de filtrar a suspensão através de celite in vacuo. O bolo de filtração foi lavado com éter dietilico (60 mL). Foi adicionado ácido clorídrico (1M, 60 mL) ao filtrado, em seguida a fase orgânica separada. A camada aquosa foi extraída com éter dietilico (60 mL), em seguida a fase orgânica combinada foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (60 mL) , depois seca (MgSCh) , filtrada e reduzida in vacuo. O resíduo foi dissolvido em hidróxido de amónio (18 mL) e uma solução de amoníaco em propan-2-ol (12 mL, 2,0M, 24 mmol), em seguida dividido em duas porções iguais e aquecido em tubos selados a 75 °C durante 16 horas. As misturas foram combinadas utilizando metanol, em seguida os solventes foram removidos in vacuo. O resíduo foi submetido a evaporação azeotrópica com éter dietilico (3 x 10 mL) para obter (R)-2-amino-l-((S)-2,5-di-hidrofuran-2-il)etanol que foi utilizado sem mais purificação.

Uma solução de carbonato de sódio (1,84 g, 17,4 mmol) em água (16 mL) foi adicionada, enquanto se agitava, a uma suspensão de (R)-2-amino-l-((S)-2,5-di-hidrofuran-2-il)etanol (suposto ser 8,26 mmol) em 1,4-dioxano (20 mL). A mistura foi arrefecida até 0 °C, em seguida foi adicionado cloroformato de benzilo (1,77 mL, 12,4 mmol) gota a gota ao longo de 5 minutos. A mistura foi agitada a 0 °C durante 55 minutos, em seguida adicionados diclorometano (75 mL) e água (100 mL) . A fase orgânica foi separada e a aquosa extraída com diclorometano (2 x 50 mL). A fase orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (50 mL) , em seguida seca (Na2SC>4), filtrada e reduzida in vacuo para deixar um resíduo (3,7 g). A cromatografia flash 89 sobre sílica, eluindo com misturas de acetato de etilo : heptano 20 : 80 a 70 : 30 deu o álcool (18) (1,26 g, 58%).

Md -62,0o (c = 5,0, CHC13) .

Preparação de 4-metilbenzenossulfonato de_(R) -2- (benziloxicarbonilamino)-1-((S)-2,5-di-hidrofuran-2-il)etilo 32b). Uma solução de cloreto de p- toluenossulfonilo (368 mg, 2,03 mmol) em piridina (1,5 mL) foi adicionada a álcool (18) (333 mg, 1,27 mmol). A mistura foi agitada a 14 °C durante 16 horas e a 24 °C durante 3,5 horas, em seguida diluída com éter terc-butilmetílico (35 mL) . A camada orgânica foi lavada com água (15 mL) , solução aquosa saturada de cloreto de sódio (15 mL), em seguida seca (MgS04) , filtrada e reduzida in vacuo para deixar um óleo amarelo pálido (0,712 g) . A cromatografia flash sobre sílica, eluindo com misturas de acetato de etilo : heptano 15 : 85 a 30 : 70 deu o tosilato (32b) (429 mg, 81%) como um sólido branco. TLC (Rf = 0,75, AcOEt : heptano 3 : 1), pico principal único em HPLC analítica, Tr = 18,93 min., HPLC-MS 374,2, 418,2 [M + H]+, 857,3 [2M +

Na]+ ; Mt -30,2° (c = 1,326, CHC13) ; δΗ (500 MHz, CDC13) 2,39 (3H, s, aril-Cff3), 3,29-3,37 e 3,53-3,62 (2H total, m, CH2NH) , 4,44-4,50 e 4,52-4,57 (2H total, m, OCff2CH=CH), 4,59-4, 65 (1H, m, OCHCH=CH) , 4,87-4,92 (1H, m, CHOTs), 5,05 (2H, m, OCH2Ph), 5,03 (1H, s 1, NH) , 5, 69-5, 73 e 5,94-5,98

(2H total, m, CH2CH=CH) , 7,28 (2H, d, J= 8,10 Hz, CH3CCH aromático), 7,29-7,37 (5H, CH de fenilo), 7,77 (2H, d, J = 8,10 Hz, 0S02CC H aromático); õc (125 MHz, CDC13) 21,627 (aril-CH3), 41,119 (CH2NHCbz) , 66, 856 (CH2Ph) , 75, 987 (OCH2CH=CH), 82,352 (CHOTs), 85,622 (OCHCH=CH), 124,792, 127,825, 128,027, 128,126, 128,504, 129,357 e 129,537 (OCH2CH=CH e CH aromático), 133,674 (CH0S02C quaternário), 136,348 (Cbz quaternário), 144,941 (CH3C quaternário), 156,273 (Cbz OO) . 90

Estudos de epoxidação com 4-metilbenzenossulfonato de (R) -2-(benziloxicarbonilamino)-1-((S)-2,5-di-hidrofuran-2-il)etilo (32b).

(a) Foi adicionado ácido 3-cloroperbenzóico (97 mg, < 77%, 0,43 iranol) a uma solução, mantida sob agitação, de alceno (32b) (36 mg, 0,086 mmol) em diclorometano (1,5 mL) . A mistura foi agitada durante 20 horas à temperatura ambiente, em seguida foi adicionado ácido 3-cloroperbenzóico (97 mg, < 77%, 0,43 mmol) e a agitação prosseguida durante 1 dia a 24 °C, em seguida diluída com diclorometano (15 mL) . A fase orgânica foi lavada com solução aquosa de hidróxido de sódio (5%, 10 mL) , água (10 mL) , em seguida seca (Na2S04), filtrada e reduzida in vacuo para deixar um resíduo (0,038 mg). A cromatografia flash sobre sílica, eluindo com misturas de acetato de etilo : heptano 10 : 90 a 50 : 50 deu (por ordem de eluição) o epóxido anti (33b) (16 mg, 43%) como um óleo viscoso incolor e sin (9 mg, 24%) como um sólido branco. Dados para o anti (33b); TLC (Rf = 0,50, AcOEt : heptano 1 : 1), pico principal único em HPLC analítica, Tr = 17,999 min., HPLC-MS 434,1 [M + H]+, 456, 1 [M + Na]+, 889, 2 [2M +

Na]+ ; + 25,6° (c = 2,54, CHC13) ; δΗ (500 MHz, CDC13) 2,41 (3H, s, aril-Cí/3) , 3,31-3,38 e 3, 60-3, 66 (2H total, m, CH2NH) , 3,67 (1H, d, J = 10,46 Hz, OCH2CH) , 3,75 e 3,81 (cada 1H, d, J = 2,50 e 2,75 Hz respetivamente, OCH2CHCH) , 3,94 (1H, d, J = 10,57 Hz, OCH2CH) , 4,07 (1H, d, J = 6,90

Hz, OCHCHOTs), 4,60-4,64 (1H, m, CHOTs), 4,97-5,01 (1H t 1, NH) , 5,08 (2H, s 1, CH2Ph) , 7,29-7,37 (7H, CH3CCH aromático e CH de fenilo) , 7,78 (2H, d, J = 8,18 Hz, 0S02CCH aromático); õc (125 MHz, CDC13) 21, 665 (aril-CH3) , 42,054 (CH2NHCbz), 56, 175 e 57,048 (OCH2CHCH) , 67, 031 (CH2Ph) , 67, 672 (OCH2CH) , 76, 732 (OCHCHOTs), 79, 388 (CHOTs),

127,776, 128,108, 128,222, 128,544 e 130,043 (CH aromático), 133,249 (CH0S02C quaternário), 136,192 (Cbz 91 quaternário), 145,487 (CH3C quaternário), 156,224 (Cbz C= 0) . (b) A uma solução de alceno (32b) (262 mg, 0,63 mmol) em acetonitrilo (4 mL) e Na2.EDTA aquoso (4 mL, 0,4 mmol solução) a 0 °C foi adicionada 1,1,1-trifluoroacetona (0,67 mL, 7,54 mmol) via uma seringa pré-arrefecida. A esta solução foi adicionada, em porções, uma mistura de bicarbonato de sódio (0,44 g, 5,28 mmol) e OXONE® (1,20 g, 1,95 mmol) ao longo de um periodo de 55 minutos. A mistura foi agitada durante 2,5 horas, em seguida diluida com água (25 mL) e o produto extraido para diclorometano (2 x 25 mL). As camadas orgânicas combinadas foram lavadas com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (12,5 mL) , em seguida secas (Na2SC>4) , filtradas e reduzidas in vacuo para deixar um residuo (310 mg). A cromatografia flash sobre silica, eluindo com misturas de acetato de etilo : heptano 15 : 85 a 50 : 50 deu anti- (33b) como um óleo viscoso branco (216 mg, 79%).

Preparação de 4-metilbenzenossulfonato de (3 R, 3aR, 6R, 6aS)-3-hidroxi-hexa-hidro-2H-furo[3,2-Jb]pirrol-6-ilo (74) .

Foi adicionado etanol (1,5 mL) gota a gota a uma mistura de paládio a 10% sobre carvão (20 mg) e anti- (33b) (100 mg, 0,25 mmol) sob uma atmosfera de árgon. O árgon foi substituído por hidrogénio, em seguida a suspensão foi agitada durante 4,5 horas antes de filtrar a mistura através de celite in vacuo. O bolo de filtração foi lavado com etanol (10 mL), em seguida os solventes foram removidos in vacuo a partir do filtrado. O resíduo foi submetido a evaporação azeotrópica com tolueno (2x3 mL) para obter 4-metilbenzenossulfonato de (3 R, 3a R, 6R, 6aS)-3-hidroxi-hexa-hidro-2íí-furo [3,2-jb]pirrol-6-ilo (74) o qual foi 92 utilizado sem mais purificação. TLC (Rf = 0,01, AcOEt : heptano 1:1), HPLC-MS 300,1 [M + H]+, 621,2 [2M + Na]+.

Preparação_de_(3R,_3aR,_6R,_6aS) -3-hidroxi-6-

(tosiloxi) tetra-hidro-2fí-furo [3,2 — Jb] pirrole-4 (5ff) -carboxilato de benzilo (34b). Uma solução de carbonato de sódio (6,2 mg, 0,058 mmol) em água (0,15 mL) foi adicionada, enquanto se agitava, a uma solução de aminoálcool (74) em 1,4-dioxano (0,3 mL) . Foi adicionado cloroformato de benzilo (5,9 pL, 0,042 mmol), em seguida a mistura agitada durante 2 horas. Foi adicionada água (5 mL) e o produto extraído para diclorometano (2x5 mL). A camada orgânica foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (5 mL) , em seguida seca (Na2SC>4) , filtrada e reduzida in vacuo para deixar um resíduo (10,6 mg). A cromatografia flash sobre sílica, eluindo com misturas de acetato de etilo : heptano 20 : 80 a 50 : 50 deu o álcool bicíclico (34b) (6,6 mg, 54%) como um sólido branco. TLC (Rf = 0,20, AcOEt : heptano 1:1), pico principal único em HPLC analítica, Tr = 17,32 min., HPLC-MS 434,1 [M + H]+, 889,2 [2M + Na]+; [«li* -25,7° (c = 2,53, CHC13) ; δΗ (500 MHz, CDC13) mistura de rotâmeros principal : secundário 2 : 1; 2,01 (0,33H, s 1, OH secundário), 2,43 (3H, s, aril- CH3) , 2,77 (0, 66H, s 1, OH principal) , 3, 18-3,24 (0,33H, m,

CbzNCH2 secundário), 3, 33-3, 38 (0, 66H, m, CbzNCH2 principal), 3, 79-3, 85 (1H, m, OCH2CHOH) , 3,86-3,91 (1H, m, CbzNCH2) , 3, 92-3, 96 (0,33H, m, OCH2CHOH secundário), 3,96- 4,01 (0, 66H, m, OCH2CHOH principal), 4,13-4,16 (1H, m,

CbzNCH) , 4,35 (0,33H, m, OCH2CHOH secundário), 4,45 (0, 66H, m, OCH2CHOH principal), 4,56 (0,33H, t, J = 4,64 Hz, TsOCHCH, secundário), 4,64 (0,66H, t, J= 4,36 Hz, TsOCHCH, principal), 4,71-4,78 (1H, m, TsOCHCH), 5,06-5,17 (2H, m, CH2Ph) , 7,31-7,38 (7H, m, fenilo CH e CH3CCH aromático), 7,80 (2H, d, J= 8,33 Hz, 0S02CCH aromático); õc (125 MHz, 93 CDC13) 21, 683 (aril-CHs), 47,384 / 47,855 (CbzNCH2) , 67, 636 / 67,717 (CH2Ph), 68,042 / 68, 817 (CbzNCH), 75,525 / 75, 967 (OCH2CHOH) , 75, 967 / 76, 836 (OCH2CHOH) , 76, 068 / 76, 401 (TsOCHCH) , 79,342 / 80,208 (TsOCHCH), 127, 965, 128,107,

128,382, 128,510, 128,605, 128,753, 129,940 e 129,997 (CH aromático), 132,991 (CH0S02C quaternário), 135,779 / 135,869 (Cbz quaternário), 145,319 (CH3C quaternário), 153,862 / 154,751 (Cbz C=0).

Preparação_de_6-Cloro-3-oxotetra-hidro-2lir-furo [3,2- b]pirrole-4(5H)-carboxilato de (3aS, 6S, 6aS)-(9H-fluoren-9-il)metilo (71). Esquema 17 Seguinte. (i) Preparação de (3R, 3aR, 6S, 6aS)-6-Cloro-3-hidroxitetra-hidro-2H-furo [3,2-£>] pirrole-4 (5H) -carboxilato de benzilo (68).

Esquema 17. (a) LiCl, DMF, 130 °C; (b) Pd-C, H2, etanol; (c) Fmoc-Cl, Na2C03, dioxano, H20; (d) periodinano de Dess-

Martin, DCM anidro; (e) LiCl, DMF, 130 °C; fb) Cbz-Cl, Na2C03, dioxano, H20. 94

Foi adicionado cloreto de litio (2,38 g, 56,2 mmol) a uma solução, mantida sob agitação, de (3 R, 3a R, 6 R, 6aS)-3-hidroxi-6- (tosiloxi) tetra-hidro-2.fí-furo [3,2 — Jb] pirrole-4(5H)-carboxilato de benzilo (34b) (2,435g, 5,62 mmol) em dimetilformamida (75 mL) sob uma atmosfera de árgon. A mistura foi aquecida a 130 °C durante 7 horas, em seguida deixada arrefecer até à temperatura ambiente. A mistura foi diluída com diclorometano (100 mL) , em seguida foi adicionada água (50 mL) e a mistura filtrada através de celite (bolo de filtração lavado com diclorometano). 0

filtrado foi separado, em seguida a fase orgânica lavada com água (2 x 50 mL) , em seguida seca (Na2SC>4) , filtrada e reduzida in vacuo para deixar um resíduo (1,54 g). A cromatografia flash sobre sílica, eluindo com misturas de acetato de etilo : heptano 20 : 80 a 60 : 40 deu o álcool (68) (1,28 g, 77%) como um sólido laranja-castanho. TLC (Rf = 0,40, AcOEt : heptano 2:1), pico principal único em HPLC analítica, Tr = 11,47 min., HPLC-MS 298,1 / 300,1 [M + H]+, 617,1 [2M + Na]+ ; -72,8° (c = 2,61, CHC13) ; δΗ (500 MHz, CDCI3) mistura de rotâmeros principal : secundário 2 : 1; 1,78 e 2,24 (aprox. 1H total, cada s 1, O ff), 3,58-3, 63 (1H, m, 1 x CbzNCff2) , 3, 83-3, 88 (2H, m, OCH2CHOH) , 3,91 (0, 66H, d, J= 13,08 Hz, 1 x CbzNCff2, principal), 4,02 (0,33H, J= 13,09 Hz, 1 x CbzNCfí2, secundário), 4,24-4,26 (1H, m, CfíCl) , 4,39-4,42 (0, 66H, m,

CbzNCH secundário e OCH2CfíOH secundário), 4,43 (0, 66H, d, J

= 4,33 Hz, CbzNCfí principal), 4,52 (0, 66H, s 1, OCH2CfíOH principal), 4,72-4,75 (1H, m, CfíCHCl) , 5,11-5,16 (1,66H, m, 2 x Cff2Ph principal e 1 x Cfí2Ph secundário), 5,24 (0,33H, d, J = 12,29 Hz 1 x Cff2Ph secundário), 7,29-7,37 (5H, m, CH de fenilo); δ0 (125 MHz, CDC13) 53,57 / 53,74 (CbzNCH2) , 57,91 / 58,38 (CHC1), 67,53 / 67,58 (CH2Ph), 67,69 / 68,64 (CbzNCH) , 75,06 / 75, 93 (OCH2CHOH) , 75, 12 / 75, 18 95 (OCH2CHOH) , 86, 66 / 87,59 (CHCHC1) , 127,85, 127, 90, 128,24, 128,32, 128,56 e 128,69 (CH aromático), 135,97 / 136,15 (Cbz quaternário), 154,41 / 154, 96 (Cbz C=0) . (ii) (3R, 3a R, 65, 6a5)-6-Cloro-3-hidroxitetra-hidro-2H- furo [3,2-jb] pirrole-4 (5H) -carboxilato de (9H-fluoren-9- il)metilo (70). Foi adicionado etanol (8,5 mL) gota a gota a uma mistura de paládio a 10% sobre carvão (55 mg) e álcool (68) (550 mg, 1,85 mmol) sob uma atmosfera de árgon. O árgon foi substituído por hidrogénio, em seguida a suspensão foi agitada durante 1 hora 35 minutos antes de filtrar a mistura através de celite in vacuo. O bolo de filtração foi lavado com etanol (45 mL) , em seguida os solventes removidos in vacuo a partir do filtrado. O resíduo foi submetido a evaporação azeotrópica com tolueno (3x5 mL) para obter (3 R, 3aRr 65, 6a5)-6-cloro-hexa- hidro-2íf-furo [3,2-b] pirrol-3-ol (69) o qual foi utilizado sem mais purificação.

Foi adicionada, gota a gota ao longo de 15 minutos, enquanto se agitava, uma solução de carbonato de sódio (0,49 g, 4,63 mmol) em água (7,5 mL) seguida de uma solução de cloreto de 9-fluorenilmetoxicarbonilo (0,55 g, 2,13 mmol) em 1,4-dioxano (2,5 mL) a uma solução de aminoálcool (69) em 1,4-dioxano (5 mL) . A mistura foi agitada durante 60 minutos, em seguida foi adicionada água (50 mL) e o produto extraido para diclorometano (3 x 25 mL), em seguida seco (Na2SC>4) , filtrado e reduzido in vacuo para deixar um óleo incolor. A cromatografia flash sobre sílica, eluindo com misturas de acetato de etilo : heptano 10 : 90 a 45 : 55 deu o álcool (70) (623 mg, 87%) como um sólido branco. TLC (Rf = 0,45, AcOEt : heptano 1 : 1), pico principal único em HPLC analítica, Tr = 16,54 min., HPLC-MS 386,1 / 388,1 [M + H]+, 408, 1 / 410, 1 [M + Na]+; [«Ji? -51,9° (c = 96 2,31, CHC13) ; (protão complexo) õc (125 MHz, CDC13) 47,21 / 47,41 (Fmoc CH) , 53,30 / 53,43 (FmocNCH2) , 57,74 / 58,36 (CHC1), 66, 04 / 67,42 (Fmoc CH2) , 67, 87 / 68,52 (FmocNCH), 74, 81 / 75, 09 (OCH2CHOH) , 74, 92 / 75,51 (OCH2CHOH) , 86, 57 / 87,24 (CHCHC1) , 119, 80 / 119, 82 / 120,00 / 120, 64 / 124,55 / 124,63 / 124,90 / 127,04 / 127,08 / 127,40 / 127,51 / 127,78 / 127,80 / 127,87 e 127,91 (aromático CH) , 141,21 / 141,29 / 141,38 / 143,44 / 143,70 / 143,88 e 143,91 (aromático quaternário), 154,13 / 154,79 (Fmoc C=0) . (iii) (3aS, 6S, 6aS)-6-Cloro-3-oxotetra-hidro-2ff-furo[3,2- b] pirrole-4(5H)-carboxilato de (9H-f luoren-9-il) metilo (71). Foi adicionado periodinano de Dess-Martin (1,32 g, 3,11 mmol) a uma solução, mantida sob agitação, de álcool (70) (600 mg, 1,56 mmol) em diclorometano (15 mL) sob uma atmosfera de árgon. A mistura foi agitada durante 19 horas, em seguida diluída com diclorometano (50 mL), depois lavada com uma mistura de bicarbonato de sódio aquoso saturado e solução 0,25M de tiossulfato de sódio (1 : 1, 30 mL) , bicarbonato de sódio aquoso saturado (25 mL), solução aquosa saturada de cloreto de sódio (25 mL), em seguida seca (Na2S04) , filtrada e reduzida in vacuo para obter um sólido branco (935 mg). A cromatografia flash sobre sílica, eluindo com misturas de acetato de etilo : heptano 15 : 85 a 100 : 0 deu a cetona (71) (506 mg, 85%) como um sólido branco contaminado com ácido 2-iodosilbenzóico (< 5%). TLC (Rf = 0,35, AcOEt : heptano 1:1), pico principal único em HPLC analítica, Tr = 15,81 min., HPLC-MS 384,1 / 386,1 [M + H]+, 406, 1 / 408,1 [M + Na]+, 424,1 / 426, 1 [M + H20 + Na]+, 789, 1 / 791,2 [2M + Na]+; [oí]d25,5 -144, 6o (c = 2,18, CHC13) ; δΗ (500 MHz, CDC13) mistura de rotâmeros principal : secundário 0,55 : 0,45; 3, 75-3, 89 (1H, m, 1 x FmocNCH2) , 3, 93-4,03 (1,55H, m, 1 x 0CH2C=0 e 1 x FmocNCH2 principal), 4,12-4,22 (1,45H, m, 1 x 0CH2C=0 e 1 x FmocNCH2 97

secundário), 4,25 (0,55H, t 1, J= 6,72 Hz, Fmoc CH principal), 4,30-4,44 (2,45H, m, CHC1, 1 x FmocNCH2 e Fmoc

CH secundário), 4,45 (0,45H, d, J= 4,46 Hz, FmocNCH secundário), 4,50-4,58 (1,55H, m, 1 x Fmoc CH2 e FmocNCíf principal), 4,85 (0,55H, d, J= 4,44 Hz, CHCHCl principal), 4, 90 (0,45H, d, J= 4,41 Hz, CHCHCl secundário), 7,27-7,76 (8H, CH aromático); õc (125 MHz, CDC13) 47,09 / 47,13 (Fmoc CH) , 53, 43 / 53, 66 (FmocNCH2) , 57,60 / 58,09 (CHC1) , 60,47 /60,87 (FmocNCH), 67,86 / 68,56 (Fmoc CH2) , 70,75 (0CH2C=0), 86, 32 / 87,32 (CHCHCl), 119, 93 / 119, 99 / 120,08 / 124,87 / 124,94 / 125,17 / 125,36 / 127,09 /127,71 e 127,74 (CH aromático), 141,28 / 141,32 / 143,51 / 143,63 e 144,16 (aromático quaternário), 154,88 / 154,94 (Fmoc C=0), 206, 45 / 206, 64 (0CH2C=0) .

Preparação alternativa de (3.R, 3aR, 6S, 6aS) -6-Cloro-3- hidroxitetra-hidro-2H-furo [3,2 —Jb]pirrole-4 (5fl) -carboxilato de benzilo (68). Foi adicionado cloreto de litio (142 mg, 3,34 mmol) a uma solução, mantida sob agitação, de 4-metilbenzenossulfonato de (3 R, 3a R, 6R, 6aS)-3-hidroxi- hexa-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-6-ilo (74) (100 mg, 0,33

mmol) em dimetilf ormamida (3 mL) sob uma atmosfera de árgon. A mistura foi aquecida a 130 °C durante 2,75 horas, em seguida deixada arrefecer até à temperatura ambiente para dar uma solução contendo 6-cloroaminoálcool (69). Uma solução de carbonato de sódio (89 mg, 0,84 mmol) em água (1,5 mL) foi adicionada, seguida de cloroformato de benzilo (0,105 mL, 0,74 mmol). A mistura foi agitada durante 35 minutos, em seguida adicionado diclorometano (10 mL) e água (15 mL) . A fase orgânica foi separada e a fase aquosa extraída com diclorometano (2x5 mL) . A fase orgânica combinada foi lavada com solução aquosa saturada de cloreto de sódio (5 mL) , em seguida seca (Na2SC>4) , filtrada e reduzida in vacuo para deixar um resíduo preto (97 mg) . A 98 cromatografia flash sobre sílica, eluindo com misturas de acetato de etilo : heptano 5 : 95 a 50 : 50 deu 6-cloroálcool (68) (48 mg, 48%) como um óleo amarelo pálido. TLC (Rf = 0,30, AcOEt : heptano 3 : 2), pico principal único em HPLC analítica, Tr = 11,47 min., HPLC-MS 298,0 / 300,0 [M + H]+, 617,1 / 619,1 [2M + Na]+; Nb -76,9o (c = 4,81, CHC13) .

Quimica em Fase Sólida A unidade estrutural de Fmoc-cetona (71) pode ser utilizada numa síntese em fase sólida de inibidores ILUSTRATIVOS (1-39) de fórmula geral I. Os métodos utilizados foram diretamente análogos aos descritos em pormenor em W002057270, utilizando a unidade de ligação à base de trifluoroacetato do ácido 4- { [ (hidrazinocarbonil)amino]metil}ciclo-hexanocarboxílico, lanternas de fase sólida (ex Mimótopos), química Fmoc corrente e dissociação por acidólise seguida de purificação por HPLC semi-preparativa (ver W002057270 pg 124-127 para detalhes genéricos completos). Os compostos novos (1-5) ou o composto da técnica anterior (38) são detalhados para efeitos de comparação e podem ser facilmente preparados pelos métodos gerais detalhados na W002057270 ou W00807127 através da utilização de unidades estruturais de Fmoc-cetona apropriadas (por exemplo, biciclo não substituído na posição 6 (W002057270), composto 19, pg 134; 6(S)-fluoro biciclo (W00807127, composto 63, pg 88); 6(S)-cloro biciclo (W00807127, composto 71, pg 94); 6(R)-cloro biciclo (W00807127, composto 79, pg 98)). As unidades estruturais de Fmoc-cetona são em seguida derivatizadas consoante apropriado com um ácido carboxílico R9-COOH através de técnicas de ativação com urónio correntes. 99

Exemplo 1. N-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-jb]pirrol-4 (5H, 6Η, 6aH) - il) -l-cilohexil-2-oxoetil)benzamida

HPLC-MS Tr = 2,82 min, 405,1/407,1 [M + H]+, 423,2/425,2 [M + H + 18]+.

Exemplo 2. N-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2 —jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH-il) -l-ciclo-hexil-2-oxoetil) -3-(lH-tetrazol-l-il)benzamida

HPLC-MS Tr = 2,65 min, 473,2/475,2 [M + H]+, 491,2/493,2 [M + Η + 18 ] +.

Exemplo 3. N-((S)-2-((3aS,6S,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2 — jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) - il) -l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-3-(lH-imidazol-l-il)benzamida

o 100 HPLC-MS Tr = 2,37 min, 471,2/473,2 [M + H]+, 489,2/491,2 [M + Η + 18 ] + .

Exemplo 4. N-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-jb]pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) - il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)-3-(lH-imidazol-l-il)benzamida

HPLC-MS Tr = 2,12 min, 457,1/459, 1 [M + H]+, 475,2/477,2 [M + Η + 18 ] + .

Exemplo 5. N-((S)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2ff-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)benzo[d]tiazole-6-carboxamida

HPLC-MS Tr = 2,68 min, 462,1/464, 1 [M + H]+, 480, 1/482,1 [M + Η + 18 ] + .

Exemplo 6. N-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-3-(5,6-di-hidroimidazo[2,1-b]tiazol-3-il)benzamida 101

HPLC-MS Tr = 2,49 min, 529,2/531,2 [M + H]+, 547,2/549,2 [M + H + 18]+.

Exemplo 7. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2 —jb] pirrol-4 (5H, 6Η, 6oíH) - il) -l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-3-(lH-pirazol-4-il)benzamida

HPLC-MS Tr = 2,75 min, 457,2/459,2 [M + H]+, 475,2/477,2 [M + Η + 18 ] +.

Exemplo 8. N-((S)-2-((3aS,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2 — jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) - il) -l-ciclo-hexil-2-oxoetil) -líí-benzo [d] [1,2,3] triazole-6-carboxamida

HPLC-MS Tr = 2,72 min, 446,2/448,2 [M + H]+, 464,2/466,2 [M + H + 18] + . 102

Exemplo 9. N- ((5')-2-((3a5,65,6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2ff-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6ff, 6aff)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-lff-benzo[d][1,2,3]triazole-6-carboxamida

HPLC-MS Tr = 2,48 min, 432,1/434,1 [M + H]+, 450,1/452,1 [M + Η + 18 ] +.

Exemplo 10. 2-Amino-N- ((5)-2-((3aS,65, 6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H,6H,6aH)-il)-1-ciclo-hexil-2-oxoetil)benzo[d]tiazole-6-carboxamida

[0221] HPLC-MS Tr = 2,10 min, 477,2/479,2 [M + H]+, 495,2/497,2 [Μ + H + 18]+.

Exemplo 11. N- ((5)-2-((3a5,65,6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5Hr 6Hr 6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)oxazole-5-carboxamida

103 HPLC-MS Tr = 2,29 min, 382,1/384,1 [M + H]+, 400,1/402,1 [M + H + 18]+.

Exemplo 12. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2ff-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil) -lH-indazole-6-carboxamida

[0225] HPLC-MS Tr = 2,16 min, 445,2/447,2 [M + H]+, 463,2/465,2 [Μ + H + 18]+.

Exemplo 13. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-3-(lH-pirazol-4-il)benzamida

HPLC-MS Tr = 2,47 min, 457,2/459,2 [M + H]+, 475,2/477,2 [M + H + 18] +.

Exemplo 14. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)nicotinamida 104

HPLC-MS Tr = 2,19 min, 406, 1/408, 1 [M + H]+, 424,2/426, 2 [M + Η + 18 ] +.

Exemplo 15. N- ((S)-2-((3aS,65,6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2 — jb] pirrol-4 (5ff, 6ff, 6aíf) - il) -l-ciclo-hexil-2-oxoetil)isonicotinamida

HPLC-MS Tr = 2,15 min, 406,2/408,1 [M + H]+, 424,2/426,2 [M + H + 18] +.

Exemplo 16. N- ((5)-2-((3a5,6S,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2 — Jb] pirrol-4 (5ff, 6ff, 6aH) -il) -l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-3-fluorobenzamida

HPLC-MS Tr = 2,96 min, 423,2/425,2 [M + H]+, 441,2/443,2 [M + H + 18]+. 105

Exemplo 17. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2ff-furo[3,2-b]pirrol-4(5ff, 6ff, 6aff)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-3-(piridin-3-il)benzamida

HPLC-MS Tr = 2,26 min, 468,2/470,2 [M + H]+, 486,2/488,2 [M + H + 18] + .

Exemplo 18. N- ((S)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-2,3-dioxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinoxalina-6- carboxamida

HPLC-MS Tr = 2,16 min, 489,2/491,2 [M + H]+, 507,2/509,2 [M + Η + 18 ] +.

Exemplo 19. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5ff, 6ff, 6aff)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-2,3-dioxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinoxalina-6-carboxamida

106 HPLC-MS Tr = 1,97 min, 475,2/477,2 [M + H]+, 493,2/495,2 [M + Η + 18 ] + .

Exemplo 20. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2Η-£υΓθ[3,2-1?]ρίΓΓθ1-4 (5H, 6H, 6aH) - il) - l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolina-6-carboxamida

HPLC-MS Tr = 2,04min, 474,2/476,2 [M + H]+ 492,2/494,2 [M + Η + 18 ] +.

Exemplo 21. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2Η-£υΓθ[3,2-1?]ρίΓΓθ1-4 (5H, 6H, 6aH) - il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)-2,3-dioxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinoxalina-6-carboxamida

HPLC-MS Tr = 1,84 min, 460,2/462,2 [M + H]+, 478,2/480,2 [M + Η + 18 ] + .

Exemplo 22. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2Η-£υΓθ[3,2-£?]ρίΓΓθ1-4 (5H, 6H, 6aH) - il) - l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-2-oxoindolina-5-carboxamida 107 ο

HPLC-MS Tr =1,93 min, 460,2/462,2 [M + H]+, 478,2/480,2 [M + Η + 18 ] + .

Exemplo 23. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-jb]pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) - il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)-2-oxoindolina-5-carboxamida

HPLC-MS Tr = 1,58 min, 446,2/448,2 [M + H]+, 464,2/466, 2 [M + Η + 18 ] +.

Exemplo 24. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2ίί-ίυΓθ[3,2-£)]ρίΓΓθ1-4 (5H, 6H, 6aH) - il) - l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-2-oxoindolina-6-carboxamida

O HPLC-MS Tr = 1,98 min, 460,2/462,2 [M + H]+, 478,2/480,2 [M + Η + 18 ] + . 108

Exemplo 25. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-jb]pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) - il) -l-cilopentil-2-oxoetil)-2-oxoindolina-6-carboxamida

HPLC-MS Tr = 1,65 min, 446,2/448,2 [M + H]+, 464,2/466, 2 [M + Η + 18 ] + .

Exemplo 26. 4-Acetamido-N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-οχοάί-ΗίάΓθ-2Η-£υΓθ[3,2-1?]ρίΓΓθ1-4 (5H, 6H, 6aM-il) -1-ciclopentil-2-oxoetil)benzamida

HPLC-MS Tr = 1,92 min, 448,2/450,2 [M + H]+, 466, 2/468,2 [M + Η + 18 ] + .

Exemplo 27. 4-Acetamido-N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-jb]pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) - il) -1-ciclo-hexil-2-oxoetil)benzamida

109 HPLC-MS Tr = 2,05 min, 462,2/464,2 [M + H]+, 480,2/482,2 [M + Η + 18 ] + .

Exemplo 28. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-£>] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) - il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)-4-(ciclopropanocarboxamido)benzamida

HPLC-MS Tr = 2,20 min, 474,2/476, 2 [M + H]+, 492,2/494,2 [M + Η + 18 ] + .

Exemplo 29. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2Η-£υΓθ[3,2-7?]ρίΓΓθ1-4 (5H, 6H, 6aH) - il) - l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-4-(ciclopropanocarboxamido)benzamida

HPLC-MS Tr = 2,35 min, 488,3/490,3 [M + H]+, 506, 3/508,3 [M + Η + 18 ] + .

Exemplo 30. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2íí-furo[3,2-jb]pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) - il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)-4-(metilsulfonamido)benzamida 110

HPLC-MS Tr = 2,01 min, 484,1/486, 1 [M + H]+, 505,2/504,2 [M + Η + 18 ] +.

Exemplo 31. N- ((S)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-b] pirrol-4 (5ff, 6ff, 6aff) -il) -l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-4-(metilsulfonamido)benzamida

HPLC-MS Tr = 2,20 min, 498,2/500,2 [M + H]+, 516,2/518,2 [M + Η + 18 ] +.

Exemplo 32. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-2-oxo-2,3-di-hidro-lH-benzo[d]imidazole-5-carboxamida

HPLC-MS Tr = 1,83 min, 447,1/449, 1 [M + H]+, 465,2/467,2 [M + Η + 18 ] + .

Exemplo 33. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2 — Jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) - il) -l-ciclo-hexil-2- 111 oxoetil)-2-OXO-2,3-di-hidro-lH-benzo[d]imidazole-5-carboxamida

HPLC-MS Tr = 1,94 min, 461,2/463,2 [M + H]+, 479, 2/481,2 [M + Η + 18 ] + .

Exemplo 34. N- ((S)-2-((3aS,6S,6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2íí-furo[3,2-jb]pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) - il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazole-6-carboxamida

HPLC-MS Tr = 2,03 min, 464, 1/466, 1 [M + H]+, 482,2/484,2 [M + Η + 18 ] +.

Exemplos 35 . N- ((S)-2-((3aS,6S,6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2ίί-£υΓθ[3,2-2?]ρίΓΓθ1-4 (5H, 6H, 6aH) - il) - l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-2-oxo-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazole-6-carboxamida

HPLC-MS Tr = 2,22 min, 478, 1/480, 1 [M + H]+, 496, 2/498,2 [M + Η + 18 ] + . 112

Exemplo 36. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2íí-furo[3,2-jb]pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) - il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)-2-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-lH-benzo[b]azepina-7-carboxamida

HPLC-MS Tr = 1,99 min, 474,2/476, 2 [M + H]+, 492,2/494,2 [M + Η + 18 ] + .

Exemplo 37 . N( (5) -2- ( (3a5, 65, 6a5) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2i7-furo[3,2-jb]pirrol-4 (5Hr 6H, 6aH) - il) - l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-2-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-lH-benzo[b]azepina-7-carboxamida

HPLC-MS Tr = 2,13 min, 488,2/490,2 [M + H]+, 506,2/508,2 [M + Η + 18 ] +

Exemplo 38. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2Η-£υΓθ[3,2-1?]ρίΓΓθ1-4 (5H, 6H, 6aH) - il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)-3-OXO-3,4-di-hidro-2H-benzo[b] [1,4]oxazina-7-carboxamida 113

HPLC-MS Tr =1,90 min, 462,2/464,2 [M + H]+, 480,2/482,2 [M + Η + 18 ] + .

Exemplo 39. N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H,6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-3-OXO-3,4-di-hidro-2H-benzo[b][1,4]oxazina-7-carboxamida

HPLC-MS Tr = 2,08 min, 476,2/478,2 [M + H]+, 494,2/496, 2 [M + Η + 18 ] +. Sínteses em solução

Alternativamente, os EXEMPLOS da invenção podem ser preparados por técnicas de química orgânica em solução tradicionais, por exemplo, a partir da unidade estrutural (69) (3R, 3aR, 65, 6aS)-6-cloro-hexa-hidro-2H-furo[3,2- b]pirrol-3-ol (por exemplo, seguindo os métodos gerais detalhados em W008007127, pg 103-107).

Formação do EXEMPLO.sal de cloridrato.

A cetona do EXEMPLO (base livre) (1 mmol) foi dissolvida em acetonitrilo (16,7 mL) e foi adicionado HC1 0,1N 114 padronizado (1,3 eq, 13,0 mL) . A mistura foi congelada e liofilizada para deixar o EXEMPLO.sal de cloridrato como um sólido. EXEMPLO A. Ensaios para a Atividade de Protease de Cisteina

Os compostos desta invenção podem ser testados em um de um número de ensaios bioquímicos da literatura que são concebidos para elucidar as caracteristicas de inibição dos compostos. Os dados destes tipos de ensaios permitem medir e quantificar a potência e as velocidades de reação do composto. Esta informação, sozinha ou em associação com outra informação, permitiria determinar a quantidade de composto necessária para produzir um dado efeito farmacológico.

Medições da Ki de Inibição da Catepsina in vitro

Foram preparadas soluções-mães de substrato ou inibidor a 10 mM em dimetilsulfóxido a 100 % (DMSO) (Rathburns, Glasgow, Reino Unido) e diluidas como apropriadamente necessário. Em todos os casos a concentração de DMSO nos ensaios foi mantida a menos de 1 % (vol./vol.). A constantes de inibição de equilíbrio (K±ss) para cada composto foram medidas sob condições de estado estacionário seguindo a atividade enzimática como uma função da concentração de inibidor. Os valores foram calculados admitindo um comportamento competitivo puro (Cornish-Bowden, A. Fundamentais of enzyme kinetics Portland Press; 1995, 93-128.). A catepsina K recombinante humana (0,25 nM final; B. Turk, Josef, Stefan Institute, Ljubljana, Eslovénia), foi rotineiramente analisada em acetato de sódio 100 mM; pH 5,5 115 contendo EDTA 1 mM, L-cisteína 10 mM e Z-Leu-Arg-AMC 1,8 μΜ ( [S]=KM) . A catepsina S recombinante humana (0,25nM final, Merck, E.coli cat # 219343) foi rotineiramente analisada em Bis Tris Propano lOmM; pH 6,5 contendo EDTA lmM, β mercaptoetanol 5mM, CaCl2 lmM e Boc-Val-leu-Lys-AMC 45μΜ ( [ S ] = Km) (Sigma Chemical Company, Poole, Reino Unido). A catepsina B de figado humano (0,25 nM final; Merck

Biosciences), foi rotineiramente analisada em bis-tris propano 10 mM; pH 6,5 contendo EDTA 1 mM, 2-mercaptoetanol 5 mM, CaCl2 1 mM e Z-Phe-Arg-AMC 60 μΜ ([S]=KM) (Bachem, Weil am Rhein, Alemanha). A catepsina V recombinante humana (0,25 nM final, Merck

Biosciences) foi rotineiramente analisada em acetato de sódio 100 mM; pH 5,5 contendo L-cisteina 10 mM, 0,001% (vol./vol.) de Zwittergent 3-12 (Merck Biosciences) e Z-Leu-Arg-AMC 5 μΜ (KM= 0,5 μΜ) (Amura). A catepsina L de figado humano (0,25 nM final, Athens

Research and Technology, GA, EUA) foi rotineiramente analisada em bis-tris propano 10 mM; pH 6,5 contendo EDTA 1 mM, 2-mercaptoetanol 5 mM, CaCl2 1 mM e Ac-Phe-Arg-AMC 4 μΜ ([S] = KM) (Bachem).

Medição das constantes de ligação macroscópicas aparentes (Michaelis) (KMapp) para os substratos A constante de ligação macroscópica aparente (KMapp) para cada substrato foi calculada a partir da dependência da atividade enzimática como uma função da concentração de substrato. As velocidades observadas foram representadas 116 graficamente nas ordenadas contra a concentração de substrato relacionada nas abcissas e os dados foram ajustados por análise de regressão direta (Prism v 3.02; GraphPad, San Diego, EUA) utilizando a Equação 1 (Cornish-Bowden, A. Fundamentais of enzyme kinetics Portland Press; 1995, 93-128.). V ^ S 1 v = max L^p J /< \ w

Na Equação 1 'ví' é a velocidade inicial observada, 'V^iaXapp' é a atividade máxima observada à concentração de substrato de saturação, 'fLMapp' é a constante de ligação macroscópica aparente (Michaelis) para o substrato, ' [S0] ' é a concentração inicial de substrato.

Medição das constantes de inibição A constante de inibição aparente (K±) para cada composto foi determinada com base em que a inibição era reversivel e ocorria por um mecanismo competitivo puro. Os valores de K± foram calculados, a partir da dependência da atividade enzimática como uma função da concentração de inibidor, por análise de regressão direta (Prism v 3.02) utilizando a Equação 2 (Cornish-Bowden, A., 1995.). (2) v v^app-[S)

Vi

Na Equação 2 'vi' é a atividade residual observada, 1 ymayapp' é a atividade máxima observada (isto é, na ausência de inibidor), 'fCMapp' é a constante de ligação macroscópica aparente (Michaelis) para o substrato, ' [S] ' é a 117 concentração inicial de substrato, ' K±' é a constante de dissociação aparente e '[I]' é a concentração de inibidor.

Em situações em que a constante de dissociação aparente (i?iapp) se aproximou das concentrações de enzima, os valores de Kiapp foram calculados utilizando uma solução quadrática na forma descrita pela Equação 3 (Morrison, J.F. Trends Biochem. Sei., 7, 102-105, 1982; Morrison, J.F. Biochim. Biophys. Acta, 185, 269-286, 1969; Stone, S.R e Hofsteenge, J. Biochemistry, 25, 4622-4628, 1986).

2

(4)

Kr =KX\+[s0yKMopp)

Na Equação 3 'vi' é a atividade residual observada, 'F' é a diferença entre a atividade máxima (isto é, na ausência de inibidor) e a atividade enzimática minima, 'Eq' é a concentração total de enzima, '.Kiapp' £ a constante de dissociação aparente e ' IQ' é a concentração de inibidor. As curvas foram ajustadas por análise de regressão não linear (Prism) utilizando um valor fixo para a concentração de enzima. A Equação 4 foi utilizada para ter em conta a cinética do, em que 'Ki' é a constante de inibição, ' [S0] ' é a concentração inicial de substrato e 'ffMapp' é a constante de ligação macroscópica aparente (Michaelis) para o substrato (Morrison, 1982). A velocidade de segunda ordem da reação do inibidor com a enzima 118

Quando aplicável, a dependência da velocidade de reação observada (kobs) com a concentração para cada composto com a enzima foi analisada determinando a velocidade de inativação da enzima sob condições de pseudo-primeira ordem na presença de substrato (Morrison, J.F., TIBS, 102-105, 1982; Tian, W.X. e Tsou, C.L., Biochemistry, 21, 1028-1032, 1982; Morrison, J.F. e Walsh, C.T., de Meister (Ed.), Advances in Enzymol., 61 201-301, 1988; Tsou, C.L., de Meister (Ed.), Advances in Enzymol., 61, 381-436, 1988;). Os ensaios foram realizados por adição de várias concentrações de inibidor ao tampão de ensaio contendo o substrato. Os ensaios foram iniciados pela adição de enzima à mistura reacional e a alteração de fluorescência seguida ao longo do tempo. Durante o decorrer do ensaio foi consumido menos de 10% do substrato. (5) = Vtí + —-ΙΛ-! + £>

Kbs

As curvas de progresso da atividade de fluorescência foram ajustadas por análise de regressão não linear (Prism) utilizando a Eq. 5 (Morrison, 1969; Morrison, 1982); em que 'F' é a resposta de fluorescência, 't' é tempo, 'v0' é a velocidade inicial, 'vs' é a velocidade de equilíbrio de estado estacionário, ' kobs' é a constante de velocidade de pseudo-primeira ordem observada e 'D' é a interceção ao tempo zero (isto é, o deslocamento da curva nas ordenadas). A constante de velocidade de segunda ordem foi obtida a partir do declive da linha de um gráfico de kobs contra a concentração de inibidor (isto é, k0bS/[I]). A Eq. 6 foi utilizada para corrigir em relação à cinética do substrato, em que ' [S0] 1 é a concentração inicial de substrato e 'KMapp' é a constante de ligação macroscópica aparente (Michaelis) para o substrato. 119 ^inaet κά+Άνκιη αρρ (6)

Os compostos da invenção quando testados pelos ensaios acima descritos exibem atividade inibidora de catepsina K com uma constante inibidora Ki in vitro inferior ou igual a lOOnM.

Incubações de Microssomas Hepáticos:

Os microssomas hepáticos humanos e de ratazana foram adquiridos de BD Gentest (Woburn, MA, EUA) e o sal tetra-sódico do dinucleótido de 2'-fosfato β-nicotinamida adenina reduzido (NADPH) foi adquirido de Sigma-Aldrich (Poole, Dorset, Reino Unido). Todas as incubações de microssomas hepáticos foram realizadas em tampão de fosfato de potássio 50 mM a pH 7,4, com uma concentração de proteína microssomal final de 0,5 mg/mL. Os compostos foram retirados a partir de soluções-mães a 5 mM em DMSO e diluídos em tampão de incubação para dar uma concentração final de 25 μΜ, com uma concentração final de DMSO de 0,5% v/v. Resumidamente, os compostos foram adicionados ao tampão de incubação juntamente com os microssomas hepáticos e incubados a 37°C durante 10 minutos. A reação foi então iniciada pela adição de NADPH, previamente dissolvido em tampão de incubação, para dar uma concentração final de 1 mM e re-incubada a 37°C. Foram retiradas alíquotas aos 2 e 60 minutos e desativadas com um volume igual de acetonitrilo frio. Depois de misturar vigorosamente, a matéria proteica precipitada foi removido por filtração (placas de filtração Multiscreen Solvinert, Millipore, Bedford, MA, EUA) e o filtrado analisado por HPLC de fase inversa com deteção por espetrometria de massa, utilizando 120 a monitorização de um único ião da espécie [M+H] + . O ciclo metabólico foi determinado por comparação das áreas do pico nos cromatogramas iónicos do composto parental aos 2 e 60 minutos e exprimido como a percentagem que permanece à 1 hora.

Incubações de Plasma:

Os plasmas humano e de ratazana foram adquiridos de Innovative Research Inc. (Southfield. MI, EUA) . Os compostos foram retirados a partir de soluções-mães a 5 mM em DMSO e adicionados ao plasma, o qual tinha sido previamente incubado a 37°C, para dar uma concentração final de 25 μΜ e re-incubados. Foram retiradas aliquotas aos 2 e 60 minutos e desativadas com um volume igual de acetonitrilo frio. Depois de misturar vigorosamente, a matéria proteica precipitada foi removido por filtração (placas de filtração Multiscreen Solvinert, Millipore, Bedford, MA, EUA) e o filtrado analisado por HPLC de fase inversa com deteção por espetrometria de massa, utilizando monitorização de um único ião da espécie [M+H] + . O ciclo metabólico foi determinado por comparação das áreas do pico nos cromatogramas iónicos do composto parental aos 2 e 60 minutos e exprimido como a percentagem que permanece à 1 hora.

Determinações de LogD:

As determinações de LogD(PBs) foram realizadas em placas microtitulo de 96 poços utilizando um método de "balão agitado" miniaturizado. Em resumo, os compostos foram retirados a partir de soluções-mães 10 mM em DMSO e adicionados a poços contendo volumes iguais de soro fisiológico tamponado com fosfato (10 mM; pH 7,4) (PBS) e 1-octanol (Sigma-Aldrich, Poole, Dorset, Reino Unido) para 121 dar uma concentração final de 50 μΜ. As placas foram em seguida tapadas e misturadas vigorosamente durante 1 hora num agitador de placas microtítulo, após o que foram deixadas em repouso, permitindo separar as fases de PBS e octanol. A camada de PBS foi analisada por HPLC de fase inversa com deteção por espetrometria de massa, utilizando monitorização de um único ião da espécie [M+H]+. O LogD(PBs) foi determinado por comparação da área do pico no cromatograma iónico do composto na fase de PBS com a de um padrão de 50 μΜ do mesmo composto dissolvido em acetonitrilo/água (50:50) e calculado utilizando a fórmula seguinte:

LogD = Log A UCstd — A UCpbs ~ AUCpbs

Onde AUCstd e AUCpbs são as áreas do pico nos cromatogramas iónicos do padrão e ensaio, respetivamente. As determinações do LogD(PBs) foram também realizadas utilizando PBS a pH6,9 e 5,5 ajustando o pH do tampão antes do começo do ensaio, com HC1 0,1 M. Várias modificações e variantes dos aspetos descritos da invenção serão evidentes para os especialistas na técnica sem que se saia do âmbito e espirito da invenção. Embora a invenção tenha sido descrita em relação a formas de realização especificas preferidas, deve ser entendido que a invenção como reivindicada não deve ser indevidamente limitada a essas formas de realização específicas. Na realidade, várias modificações dos modos de realização da invenção descritos que são óbvias para os especialistas nos campos relevantes estão incluídas no âmbito das reivindicações seguintes. 122

Quadro 1: ILUSTRATIVOS,

Propriedades o composto da biológicas para compostos técnica anterior (38) (WO-A- 02057270, pg 151) e compostos novos 1-5.

Composto Ki in vi tro (nM) vs Catep S Ki in vi tro (nM) vs Catep K Composto da técnica anterior 38 (WO-A-02057270, pg 151) 555 > 4000 o Composto 1; dentro da técnica anterior (mas não especificamente exemplificado) (Quibell, M. et ai. W002057270). 225 305 Composto 2; composto novo para comparação. 59 95 o a EXEMPLO 1 8,5 35 123

Composto Ki in vi tro (nM) vs Catep S Ki in vi tro (nM) vs Catep K o Composto 3; dentro da técnica anterior (mas não especificamente exemplificado) (Quibell, M. et ai. W002057270). 170 560 a Composto 4; composto novo para comparação. 50 340 Vc4? a EXEMPLO 2 3, 6 27 j* Composto 5; composto novo para comparação. 32 230 O EXEMPLO 3 1,7 23 124

Lisboa, 12 de Novembro de 2012

Claims

1 REIVINDICAÇÕES 1. Composto de fórmula (I), ou um seu sal ou hidrato farmaceuticamente aceitável, Cl

(I) em que: R3 é selecionado de ciclopentilo e ciclo-hexilo; R9 é selecionado dos seguintes:

2

em que: Xi, X2, X3, X4, X14 , X15 , Xi6 e X20 São, cada, independentemente selecionados de: CH, C- (alquilo-Ci-6) , C- (alcoxilo-Ci-6) , C-halo e N; de tal forma que um máximo de dois de Xi, X2, X3, X4, X14, X15, Χίε e X2o são selecionados de N, C-halo e C- (alcoxilo-Ci-6) ; X5, X6, X7 e X8 são, cada, independentemente selecionados de: CH, C- (alquilo-Ci-6) , C- (alcoxilo-Ci-6) , C-halo, N e C-OH; de tal forma que um máximo de um de X5, X6, X7 e X8 é N, C-halo, C-OH ou C- (alcoxilo-Ci-6) ; Xg e X12 são, cada, independentemente selecionados de: CH, C- (alquilo-Ci-6) , C- (alcoxilo-Ci-6) , C-halo e N; X10 e X11 são, cada, independentemente selecionados de: CH, C- (alquilo-Ci-6) , C- (alcoxilo-Ci-6) , C-halo, N e Rio; X19 é selecionado de: CH, C-(alquilo-Ci-6) , C- (alcoxilo-Ci_6) , C-C(0)NH2, C- C (0) NH (alquilo-Ci-6) , C-C (0) N (alquilo-Ci-6) 2, C-halo e N; 3 Xis é selecionado de: CH, C-(alquilo-Ci-6) , C-(alcoxilo-Ci-g) , C-NH2, C-N (alquilo-Ci-6) 2/ C-NH (alquilo-Ci-g) , C-NHC(0)alquilo-Ci_6, C-halo e N; ou quando X39 é CH, C- (alquilo-Ci_6) , ou C-halo então Xis pode ser adicionalmente selecionado de C-C(0)NH2 e C-C (0) N (alquilo-Ci-6) 2; X13 e X17 são, cada, independentemente selecionados de: 0, S, NH e N- (alquilo-Ci-6) ; X22 e X24 são, cada, independentemente selecionados de: CH2, CH-(alquilo-Ci-e) , 0, S, NH, NMe e }C=0; X23 é selecionado de: CH2, CH-(alquilo-Ci-g) , C- (alquilo-Ci-g) 2, NH e NMe; ou quando X22 ou X24 são outros que não )C=0 então X23 pode ser adicionalmente )C=0 ou )S(0)2; X25 é selecionado de: 0, S, NH e N (alquilo-Ci-g) ; X2g, X2 7, X2 8 e X2 9 são, cada, independentemente selecionados de: CH, C- (alquilo-Ci-g) , C- (alcoxilo-Ci-g) , C-OH, C-halo e N; de tal forma que um máximo de dois de X2g, X27 , X28 e X29 são selecionados de C- (alcoxilo-Ci-g) , C-OH, C-halo e N; X3o é selecionado de: CH2, CH2CH2, NH, NMe, 0, S e )C=0; X3i é selecionado de: 4 CH2, NH e NMe ; ou quando X30 é outro que não )C=0, 0 ou S então X31 pode ser adicionalmente )C=0 ou 0; X32 é selecionado de: CH2, CH2CH2, NH, NMe e }C=0; X33 é selecionado de: CH2, NH e NMe; ou quando X32 é outro que não )C=0; então X33 pode ser adicionalmente )C=0 ou 0; X34 é selecionado de: NH e NMe; Rio é selecionado de:

em que: Ti, T2, T3 e T4 são, cada, independentemente selecionados de: CH, C-(alquilo-Ci-6) , C-(alcoxilo-Ci-6) , C-NH2, C- NH (alquilo-C1_6) , C-N (alquilo-C1_6) 2, C-halo e N; 5 de tal forma que um máximo de um de Ti, T2, T3 e T4 é C- (alcoxilo-Ci-6) , C-NH2, C-NH (alquilo-Ci-6) , C-N (alquilo-Ci-6) 2 ou C-halo; T5 é selecionado de: 0, S, NH e N (alquilo-Ci-6) ; T6, T7, T8, T9 e Tio são, cada, independentemente selecionados de: CH, C-(alquilo-Ci-6) , C- (alcoxilo-Ci-6) , C-NH2, C-NH (alquilo-Ci-6) , C-N (alquilo-Ci-6) 2, C-halo e N; de tal forma que um máximo de dois de T6, T7, T8, T9 e Tio são selecionados de C- (alcoxilo-Ci-6) , C-NH2, C-NH (alquilo-Ci_6) , C-N (alquilo-Ci_6) 2, C-halo e N; Tu é selecionado de: CH2, NH e N (alquilo-Ci-6) ; T12 é selecionado de: CH2, NH, N (alquilo-Ci_6) e )C=0; T13 e T14 são, cada, independentemente selecionados de: CH, C-(alquilo-Ci-6) e C-halo; T15 é selecionado de: 0, NH e N (alquilo-Ci-6) ; Ti6 é selecionado de: CH2 e )C=0; ou Rio é selecionado de: H, alquilo-Ci-6, OH, alcoxilo-Ci-6, N02, halo, CN, C(0)NH2, C (0) NH (alquilo-Ci_6) , C (0) N (alquilo-Ci_6) 2, C (0) NH (cicloalquilo-C3_6) , S(0)2NH2, S (0) 2 (alquilo-Ci_6) , 6 S (0) 2NH (alquilo-Ci-6) , S (0) 2N (alquilo-Ci_6) 2, S (0) 2NH (cicloalquilo-C3-6) e (CH2) n-NR11R12; em que n é 0 ou 1; e R11 é selecionado de alquilo-Ci-6, C (0) alquilo-Ci-6, C (0) (cicloalquilo-C3-6) , C (0) (arilo) , C(0)NH2, C (0) NH (alquilo-Ci_6) , C (0) N (alquilo-Ci_6) 2, C (0) NH (cicloalquilo-C3-6) , C (0) 0 (alquilo-Ci_6) , C (0) 0 (cicloalquilo-C3-6) , C (0) 0 (arilo) , S (0) 2 (alquilo-Ci-6) , S (0) 2 (cicloalquilo-C3-6) , S(0)2NH2, S (0) 2NH (alquilo-Ci-6) , S (0) 2N (alquilo-Ci_6) 2, S (0) 2NH (cicloalquilo-C3-6) e S (0) 2 (arilo) ; e R12 é selecionado de H e alquilo-Ci-6· R13 é selecionado de: C(0)NH2, C (0)NH (alquilo-Ci-e) , C (0) N (alquilo-Ci_6) 2, C (0) NH (cicloalquilo-C3-6) , S(0)2NH2, S (0) 2 (alquilo-Ci-6) , S (0) 2NH (alquilo-Ci-6) , S (0) 2N (alquilo-Ci_6) 2, S (0) 2NH (cicloalquilo-C3_6) e (CH2) n-NR14R15; em que n é 0 ou 1; e R14 é selecionado de H, alquilo-Ci_6, C (0) alquilo-Ci_ 6, C(0) (cicloalquilo-C3-6) , C (0) (arilo), C(0)NH2, C (0) NH (alquilo-Ci-ε) , C(0)N(alquilo-Ci_6)2/ C (0) NH (cicloalquilo-C3-6) , C (0) 0 (alquilo-Ci-6) , C (0) 0 (cicloalquilo-C3_6) , C (0) 0 (arilo) , S (0) 2 (alquilo-C1-6) , S (0) 2 (cicloalquilo-C3-6) , S(0)2NH2, S (0) 2NH (alquilo-Ci-6) , S (0) 2N (alquilo-Ci_6) 2, S (0) 2NH (cicloalquilo-C3-6) e S (0) 2 (arilo); e R15 é selecionado de H e alquilo-Ci-6. 7

2. Composto de acordo com a reivindicação 1 em que: R3 é selecionado de ciclopentilo ou ciclo-hexilo; Xi, X2, X3, X4, X14, X15, Χίε e X20 são independentemente selecionados de: CH, CMe, C-OMe, C-F, C-Cl e N: de tal forma que um máximo de dois de Xi, X2, X3, X4, X14, X15, Χίε e X2o são escolhidos como N ou C-Cl ou C-OMe; X5, Xe, X7 e X8 são independentemente selecionados de: CH, CMe, C-OMe, C-F, C-Cl, N e OH; de tal forma que um máximo de um de X5, Xe, X7 e X8 é escolhido como N ou C-Cl ou C-OH ou C-OMe; Xg e X12 são independentemente selecionados de: CH, CMe, C-OMe, C-F, C-Cl e N; X10 e X11 são independentemente selecionados de: CH, CMe, C-OMe, C-F, C-Cl, N e Ri0; X19 é selecionado de: CH, CMe, C-OMe, C-C(0)NH2, C-C(0)NMe2, C-F, C-Cl e N; Xis é selecionado de: CH, CMe, C-OMe, C-NH2, C-NMe2, C-NHMe, C-NHC(0)Me, C-F, C-Cl e N; ou quando X19 é CH, CMe ou C-F então Xi8 pode ser adicionalmente selecionado de C-C(0)NH2 e C-C(0)NMe2,· X13 e X17 são independentemente selecionados de: 0, S, NH e NMe. X22 e X24 são independentemente selecionados de: 8 CH2, CHMe, 0, S, NH, NMe e >C=0; X23 é selecionado de: CH2, CHMe, CMe2, NH e NMe; ou quando X22 ou X24 são outros que não )C=0 então X23 pode ser adicionalmente )C=0 ou )S(0)2; X25 é selecionado de: 0, S, NH e NMe; X26, X2 7, X28 e X29 são independentemente selecionados de: CH, CMe, C-OMe, C-F, C-Cl, C-Br e N; de tal forma que um máximo de dois de X26, X27, X28 e X29 são escolhidos como C-OMe, C-Cl, C-Br e N; X30 é selecionado de: CH2, CH2CH2, NH, NMe, 0, S e }C=0; X3i é selecionado de: CH2, NH e NMe; ou quando X30 é outro que não )C=0, 0 ou S então X31 pode ser adicionalmente )C=0 ou 0; X32 é selecionado de: CH2, NH, NMe e >C=0; X33 é selecionado de: CH2, NH e NMe; ou quando X32 é outro que não )C=0 então X33 pode ser adicionalmente )C=0 ou 0; X34 é selecionado de: 9 NH e NMe; Τι, T2, Τ3 e Τ4 são independentemente selecionados de: CH, CMe, C-OMe, C-NH2, C-NHMe, C-NMe2, C-F, C-Cl e N: de tal forma que um máximo de um de T2, T2, T3 e T4 é escolhido como C-OMe, C-NH2, C-NHMe, C-NMe2, C-F e C-Cl; T5 é selecionado de: 0, S, NH e NMe. T6, T7, T8, T9 e Tio são independentemente selecionados de: CH, CMe, C-OMe, C-NH2, C-NHMe, C-NMe2, C-F, C-Cl e N: de tal forma que um máximo de dois de Te, T7, Tg, Tg e T10 são escolhidos como C-OMe, C-NH2, C-NHMe, C-NMe2, C-F, C-Cl e N; Tu é selecionado de: CH2, NH e NMe; T12 é selecionado de: CH2, NH, NMe e }C=0; T13 e T14 são independentemente selecionados de: CH, CMe, C-F e C-Cl; T15 é selecionado de: 0, NH e NMe; T16 é selecionado de: CH2 e )C=0; ou Rio é selecionado de: 10 H, Me, OH, OMe, OEt, OiPr, N02 F, Cl, Br, CN, C(0)NH2, C (O) NHMe, C (O) NMe2 e (CH2) n-NR11R12 : em que n = 0 ou 1 e R11 é selecionado de H, Me, acetilo, C(0)NH2, C (0) NMe2: e R12 é selecionado de H e Me; Ri3 é selecionado de: C(0)NH2, C (0) NHMe, C(0)N(Me)2, C (0) NH (ciclopropilo) , S(0)2NH2, S (0) 2 (Me) , S (0) 2NH (Me) , S(0)2N(Me)2, S (0) 2NH (ciclopropilo) e (CH2) n-NR14R15; em que n é 0 ou 1; Me, C(0)Et, C(0)NH(Me), C (0) 0 (Me) , S(0)2(Me), S (0) 2N (Me) 2, e R14 é selecionado de H, Me, C (0) C (0) (ciclopropilo), C (0) Ph, C(0)NH2, C(0)N(Me)2, C(0)NH(ciclopropilo), C (0)0 (ciclopropilo), C(0)0Ph, S (0) 2 (ciclopropilo) , S(0)2NH2, S(0)2NH(Me), S (0) 2NH(ciclopropilo) e S(0)2Ph; e R15 é selecionado de H e Me.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 2, o qual é de fórmula Ia,

(Ia) 11 em que R9 é como definido na reivindicação 1.

4. Composto de acordo com a reivindicação 1 ou reivindicação 2, o qual é de fórmula Ib,

em que R9 é como definido na reivindicação 1.

5. Composto de acordo com qualquer reivindicação anterior em que R9 é selecionado de:

em que Xi, X2r X3r X4r X5t Χε, X71 Xs/ X91 Χίο/ X111 X131 Xl 4, X15 r Xl61 Xl71 Xl81 Xl91 X22, X23, X241 X251 X301 X3I t X34, Rio e R13 são como definidos na reivindicação 1. Composto de acordo com qualquer reivindicação anterior em que R9 é selecionado de: 6. 12

em que Χι, X2, X3r Χα/ X71 Χίο/ X17/ Xisr X19r X22/ X24/ X25/ X30/ X31/ Rio e R14 são como definidos na reivindicação 1.

7. Composto de acordo com qualquer reivindicação anterior em que R9 é selecionado de:

13 em que arilo, X2, X3, Xis, X19, X22, X24, X30 e X31 são como definidos na reivindicação 1 e; R14 é selecionado de C(0)Me, C(0)Et, C (0) (ciclopropilo) , C(0)NH2, C(0)NH(Me), C(0)N(Me)2, C (0)NH(ciclopropilo), C(0)0(Me), C (0)0(ciclopropilo), S (0) 2 (Me) , S (0) 2 (ciclopropilo) , S(0)2NH2, S(0)2NH(Me), S (0) 2N(Me)2, S (0)2NH(ciclopropilo) e S(0)2Ph.

8. Composto de acordo com qualquer reivindicação anterior em que R9 é selecionado de:

14

em que X2 e X3 são como definidos na reivindicação 1.

9. Composto de acordo com qualquer reivindicação anterior em que R9 é selecionado de:

15

10. Composto de acordo com qualquer reivindicação anterior que é selecionado dos seguintes: N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2ff-furo[3,2-b]pirrol-4(5Η,6H,6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)nicotinamida 16 Ν-((5) -2-((3a5, 65, 6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -1-ciclo-hexil-oxoetil) -3- (l#-tetrazol-l-il)benzamida N-((5) -2-((3a5, 65, 6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2 —jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -1-ciclo-hexil-oxoetil)isonicotinamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -1-ciclo-hexil-oxoetil)-3-fluorobenzamida N-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -1-ciclo-hexil-oxoetil) -3-(lH-imidazol-l-il)benzamida N- ( (5) -2- ( (3a5, 65, 6a5) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2íí-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -1-ciclo-hexil-oxoetil)-3-(2-metil-lH-imidazol-l-il)benzamida N- ( (5) -2- ( (3a5, 65, 6a5) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2Jí-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -1-ciclo-hexil-oxoetil)benzamida N- ( (5) -2- ( (3a5,65,6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5Hr 6Hr 6aH) -il) -1-ciclo-hexil-oxoetil)-3-(piridin-3-il)benzamida N-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -1-ciclo-hexil-oxoetil)benzo[d] tiazole-6-carboxamida N-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -1-ciclo-hexil-oxoetil) -3- (5, 6-di-hidroimidazo [2,1-jb] tiazol-3-il)benzamida N-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -1-ciclo-hexil-oxoetil)-1H-índole-5-carboxamida N((5)-2-((3a5, 65, 6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -1-ciclo-hexil-oxoetil)-3-(lH-pirazol-4-il)benzamida 17 Ν-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2ff-furo[3,2-b]pirrol-4(5ff,6ff,6aff)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-3-(lff-pirazol-3-il)benzamida N-((5)-2-((3a5, 65, 6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2ff-furo[3,2-b]pirrol-4(5ff, 6ff, 6aff)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-lff-benzo[d][1,2,3]triazole-6-carboxamida 2-Amino-N((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2ff-furo[3,2-b]pirrol-4(5ff,6ff, 6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2 oxoetil)benzo[d]tiazole-6-carboxamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[ 3,2-b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-lH-indazole-6-carboxamida W- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H,6H,6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)oxazole-5-carboxamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H,6aH)-il) -l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-2,3-dioxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinoxalina-6-carboxamida N-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H,6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolina-6-carboxamida N- ( (5)-2-((3aS,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5Η,6H,6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-2-oxoindolina-5-carboxamida N- ((5)-2-((3aS,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H,6H,6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-2-oxoindolina-6-carboxamida 4-Acetamido-i\7- ( (5) -2- ( (3a5, 65, 6a5) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5ff, 6ff, 6aff)-il)-1-ciclo-hexil-2-oxoetil)benzamida 18 Ν-((5) -2-((3a 5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H,6H,6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-4- (ciclopropanocarboxamido)benzamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-b] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) - l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-4-(metilsulfonamido)benzamida N-((5)-2-((3aS,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-b] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) - l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-2-oxo-2,3-di-hidro-ΙΗ-benzo[d]imidazole-5-carboxamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) - l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-2-OXO-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazole-6-carboxamida N- ((5)-2-((3aS,65,6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2 —b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-2-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-lH-benzo[b]azepina 7-carboxamida N- ( (5) -2- ( (3a5, 6S, 6aS) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2íí-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) - l-ciclo-hexil-2-oxoetil)-3-OXO-3,4-di-hidro-2H-benzo[b][1,4]oxazina-7 carboxamida N- ( (5) -2- ( (3a5, 65, 6a5) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2íí-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)nicotinamida W- ( (5) -2- ( (3aS, 65, 6a5) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2i7-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)-3-(lH-tetrazol-l-il)benzamida W-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)isonicotinamida N- ( (5) -2- ( (3a5, 65, 6a5) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2i7-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)-3-fluorobenzamida 19 Ν-((5) -2-((3aS,65,6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H,6H,6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-3-(lfl-imidazol-l-il)benzamida N- ((5)-2-((3aS,65,6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H,6H,6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil) -3- (2-metil-líí-imidazol-l-il) benzamida N-((5) -2-((3aS,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-b] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)benzamida N- ( (5) -2- ( (3aS, 65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)-3-(piridin-3-il)benzamida N- ( (5) -2- ( (3aS, 65, 6aS) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2íí-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)benzo[d]tiazole-6-carboxamida N- ( (5) -2- ( (3a5, 65, 6a5) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2íí-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)-3-(5,6-di-hidroimidazo[2,1-b]tiazol-3-il)benzamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil) -1H-indole-5-carboxamida N- ( (5) -2- ( (3aS, 65, 6aS) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2íí-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil) -3- (lfí-pirazol-4-il) benzamida N-((5) -2-((3aS, 65, 6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)-3- (lH-pirazol-3-il)benzamida N- ((5)-2-((3aS,65,6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5Hr 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil) -lfí-benzo [d] [1,2,3] triazole -6-carboxamida 2-Amino-Al- ( (5) -2- ( (3a5, 65, 6a5) -6-cloro-3-oxodi-hidro-2ϋ-furo [3,2 —jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) - il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)benzo[d]tiazole-6-carboxamida 20 Ν-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2ff-furo [3,2 —jb] pirrol-4 (5ff, 6ff, 6aff) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)-lff-indazole-6-carboxamida N-((5)-2-((3a5,65,6a5-6-cloro-3-oxodi-hidro-2ff-furo [3,2 —jb] pirrol-4 (5ff, 6ff, 6aff) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)oxazole-5-carboxamida N-((5)-2-((3a5,65,6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2ff-furo[3,2-b]pirrol-4(5ff, 6ff, 6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-2,3-dioxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinoxalina-6-carboxamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pyffol-4(5H, 6H,6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-2-oxo-l,2,3,4-tetra-hidroquinolina-6-carboxamida N-((5)-2-((3aS,65,6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-2-oxoindolina-5-carboxamida N-((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH) -il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-2-oxoindolina-6-carboxamida 4-Acetamido-N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H, 6H, 6aH) - il) -1-ciclopentil-2-oxoetil)benzamida N- ((5)-2-((3aS,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H,6H,6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-4-(ciclopropanocarboxamido)benzamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H,6H,6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-4-(metilsulfonamido)benzamida N-((5)-2-((3aS,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H,6H,6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil) -2-OXO-2,3-di-hidro-líí-benzo [d] imidazole-5-carboxamida 21 Ν-((5) -2-((3aS, 65, 6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2-jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)-2-OXO-2,3-di-hidrobenzo[d]tiazole-6-carboxamida N- ((5)-2-((3a5,65,6a5)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo [3,2 — jb] pirrol-4 (5H, 6H, 6aH) -il) -l-ciclopentil-2-oxoetil)-2-oxo-2,3,4,5-tetra-hidro-lH-benzo[b]azepina-7-carboxamida N- ((5)-2-((3aS,65,6aS)-6-cloro-3-oxodi-hidro-2H-furo[3,2-b]pirrol-4(5H,6H,6aH)-il)-l-ciclopentil-2-oxoetil)-3-OXO-3,4-di-hidro-2H-benzo[b][1,4]oxazina-7-carboxamida

11. Composição farmacêutica ou veterinária compreendendo um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10 e um diluente, excipiente e/ou veiculo farmaceuticamente aceitável ou veterinariamente aceitável.

12. Processo para preparar uma composição farmacêutica ou veterinária de acordo com a reivindicação 11, compreendendo o referido processo misturar um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10 com um diluente, excipiente e/ou veiculo farmaceuticamente aceitável ou veterinariamente aceitável.

13. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10 para ser utilizado em medicina.

14. Utilização de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10 num ensaio para identificar outros compostos candidatos capazes de inibir uma ou mais proteinases de cisteina, em que o referido ensaio 22 é um ensaio de ligação competitiva compreendendo pôr em contacto um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10 com uma proteinase de cisteina e detetar qualquer alteração na interação entre o composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10 e a proteinase de cisteina.

15. Método de validação de uma proteinase de cisteina conhecida ou putativa como um alvo terapêutico, compreendendo o método: (a) avaliar a ligação in vitro de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10 a uma proteinase de cisteina conhecida ou putativa isolada, proporcionando uma medição da potência; e opcionalmente, um ou mais dos passos de: (b) avaliar a ligação de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10 a proteinases homólogas intimamente relacionadas com a alvo e proteinases de manutenção gerais (por exemplo tripsina) para proporcionar uma medição da seletividade; (c) seguir uma marcador funcional à base de células da atividade de uma proteinase de cisteina particular na presença de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10; e (d) seguir um marcador funcional à base de modelo animal da atividade de uma proteinase de cisteina particular na presença de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10.

16. Utilização de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10 na validação de uma proteinase de cisteina conhecida ou putativa como um alvo terapêutico. 23

17. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10 para ser utilizado no tratamento de uma doença selecionada de artrite reumatoide, osteoartrite, doença pulmonar obstrutiva crónica (COPD), aterosclerose, doenças cardiovasculares que apresentam dano e remodelação significativos da matriz extracelular (ECM) e dor crónica,

18. Processo de preparação de um composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 10, compreendendo o referido processo tratar um composto de fórmula (II) com um agente oxidante,

em que R3 e R9 são como definidos na reivindicação 1.

19. Processo de acordo com a reivindicação 18 em que o referido composto de fórmula (II) é preparado a partir de um composto de fórmula (III), em que R5 é um grupo de proteção ou hidrogénio, compreendendo o referido processo tratar um composto de fórmula (Illa) (R5 = H) com um composto de fórmula R9CONHCH (R3) COOH 24 Cl

Cl

(II)

20. Processo de acordo com a reivindicação 19 em que o referido composto de fórmula (III) (R5=H) é preparado tratando um composto de fórmula (IV) em que Lg é tosilato com um excesso de cloreto de litio em DMF a 130 °C.

21. Processo de acordo com a reivindicação 20, em que o referido composto de fórmula (IV) é preparado hidrogenando um composto de fórmula (V) , em que R5 é benziloxicarbonilo (Cbz), na presença de um catalisador de paládio. OTS

OTs

(IV) (V) 25

22. Processo de acordo com a reivindicação 21 em que o referido composto de fórmula (V) é preparado tratando um composto de fórmula (VI) com mCPBA ou um dioxirano,

23. Processo de acordo com a reivindicação 22, em que o referido composto de fórmula (V) é preparado tratando um composto de fórmula (VII) com (a) cloreto de tosilo em piridina, ou (b) cloreto de tosilo em diclorometano e trietilamina

24. Processo de acordo com a reivindicação 23 em que o referido composto de fórmula (VII) é preparado pelos passos de: (a) fazer reagir um composto de fórmula (VIII), em que W é halogéneo ou OTs, com amoniaco aquoso e álcool; e (b) converter o produto preparado no passo (a) num composto de fórmula (VII). 26

W(VIII) OH

25. Processo de acordo com a reivindicação 24 em que o referido composto de fórmula (VIII) é preparado tratando um composto de fórmula (IX) com zinco em isopropanol aquoso

Lisboa, 12 de Novembro de 2012