PT674902E - Composições para melhorar a resposta imunitária - Google Patents
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Description
ΡΕ0674902 1 DESCRIÇÃO "COMPOSIÇÕES PARA MELHORAR A RESPOSTA IMUNITÁRIA"
Sabe-se que é possível melhorar a recuperação de uma função imunitária deficiente ou suprimida por meio de dieta. Exemplos típicos de dietas imunoestimuladoras são dietas completas (ou seja, dietas que forneçam essencialmente tudo o que é necessário em termos de a energia, aminoácidos, vitaminas, minerais e oligoelementos) compreendendo arginina, ARN, ácidos gordos poli-insaturados ómega-3 e ómega-6 (AGPls).
As grandes cirurgias afectam o sistema de resposta imunitária e aumentam o risco de infecçâo pós-operatória em pacientes que foram submetidos a cirurgia.
Seria agora uma vantagem se fosse possível preparar, por meio de dieta, o sistema imunitário de um paciente indicado para cirurgia, de modo a que a sua resposta imunitária e/ou resistência às infecções fosse melhorada quando submetido a cirurgia.
Foi agora descoberto que é possível melhorar a resposta imunitária e/ou resistência às infecções no contexto de uma cirurgia, administrando aos pacientes antes da cirurgia um suplemento dietético que inclui uma 2 ΡΕ0674902 quantidade imunoestimuladora eficaz de agregados de (a) ácidos gordos poli-insaturados ómega-3 (AGPIs ómega-3), (b) L-arginina ou L-ornitina e (c) ácidos gordos poli-insaturados ómega-6 (AGPIs ómega-6). A melhoria na resposta imunitária e o aumento da resistência às infecções no contexto de uma cirurgia após o tratamento pré-operatório podem ser ilustrados por meio de testes.
Exemplos de testes apropriados para indicarem que o efeito desejado foi obtido incluem, entre outros, a determinação do conteúdo de ácido docosahexaenóico (DHA) e ácido eicosapentaenóico (EPA) no soro sanguíneo e em tecidos, tais como o tecido do fígado, a mucosa intestinal e o tecido tumoral no dia da operação, determinação de parâmetros característicos para a actividade dos neutró-filos, determinação de parâmetros indicativos da activação das células do sistema imunitário, e similares.
Os resultados são comparados com resultados obtidos após o tratamento de pacientes com um suplemento padrão. Um efeito favorável é indicado se, por exemplo, o conteúdo de lípidos DHA e/ou EPA no soro é aumentado Um aumento de LTB 5 e uma diminuição de LTB 4 e LTC 4 após cirurgia indicam que a actividade dos neutrófilos é melhorada. A activação das células do sistema imunitário após a cirurgia é ilustrada, entre outros, por uma diminuição reduzida de IL-Ια (um activador das células ΡΕ0674902 imunitárias), uma diminuição reduzida nas células T activadas (tal como estabelecido por determinação de CD 3 e HLA-DR), uma diminuição reduzida nas células T supressoras diferenciadas (tal como estabelecido por determinação de CD 8) e uma diminuição reduzida nas células NK. As experiências sugerem que o efeito desejado pode ser obtido após o tratamento pré-operatório de pacientes com componentes (a), (b) e (c) .
Assim, a invenção proporciona o uso de (a) ácidos gordos poli-insaturados ómega-3, e (b) L-arginina ou L-ornitina na forma de um sal ou aminoácido livre, ou uma sua mistura, e (c) ácidos gordos poli-insaturados ómega-6, no fabrico de uma dieta pré-operatória imunoesti-muladora para estimulação pós-operatória do sistema imunitário de pacientes submetidos a cirurgia, por meio do qual a dieta proporciona uma dosagem diária de 2 a 5 g do componente (a), 7,5 a 20 g do componente (b) e 1,5 a 5 g do componente (c).
Para a finalidade da invenção, os AGPIs ómega-3 podem encontrar-se na forma de ácido livre ou numa forma apropriada para o fornecimento fisiológico dos AGPIs ómega-3, por exemplo na forma de triglicéridos. Exemplos de AGPIs 4 ΡΕ0674902 ómega-3 particularmente apropriados para uso nas composições da invenção incluem (EPA) e (DHA). Fontes apropriadas desses AGPIs ómega-3 são conhecidas. Estas incluem o óleo de linhaça e óleos de peixe, tais como o óleo de menhadem, o óleo de salmão, o óleo de cavala, o óleo de atum, o óleo de fígado de bacalhau e o óleo de anchova, em particular o óleo de menhadem. A L-arginina e a L-ornitina podem encontrar-se na forma livre ou na forma de um sal, por exemplo um sal com ácido fosfórico, ácido cítrico, ácido tartárico, ácido fumárico, ácido adípico ou ácido láctico. 0 suplemento é administrado numa quantidade de agregado imunoestimuladora durante um período de tempo suficiente para despoletar a resposta imunitária melhorada. A quantidade diária do componente (a), ou seja, AGPIs ómega-3, e do componente (b) a ser proporcionada para se obter o efeito desejado irá depender da duração (dias) do tratamento, e obviamente de outros factores, tais como o paciente específico a ser tratado. 0 suplemento deverá ser administrado de forma vantajosa, por exemplo 3 a 4 vezes por dia, durante um período de 3 dias ou mais, por exemplo de 3 a 6 dias.
Para os adultos, a quantidade total de AGPIs ómega-3 fornecida durante esse período de tratamento não 5 ΡΕ0674902 deverá preferencialmente ser inferior a 15 g; é conveniente que a quantidade total de L-arginina e/ou L-ornitina fornecida pelo componente (b) a adultos durante esse período de tratamento não seja inferior a 60 g. A administração de uma quantidade diária do componente (a) dentro dos parâmetros de 2 a 5 g, em associação com o fornecimento de 7,5 a 20 g de L-arginina e/ou L-ornitina pelo componente (b) será de um modo geral suficiente para se obter o efeito desejado.
Obviamente, podem ser administradas quantidades superiores.
Para a finalidade da invenção, os AGPIs ómega-6 (componente c) podem encontrar-se na forma de ácido livre ou numa forma apropriada para o fornecimento fisiológico dos AGPIs ómega-6, por exemplo na forma de triglicéridos. Exemplos de AGPIs ómega-6 particularmente apropriados para uso de acordo com a invenção incluem o ácido linoleico e o ácido araquidónico (ETA), sendo o ácido linoleico mais preferido. Exemplos de fontes de AGPIs ómega-6 apropriadas são conhecidos da técnica. Estas incluem óleos vegetais. As fontes preferidas de AGPIs ómega-6 são as que têm um conteúdo elevado de ácido linoleico, tais como o óleo de cártamo, o óleo de girassol, o óleo de soja, o óleo de algodão e o óleo de milho.
Para os adultos, a quantidade total de AGPIs 6 ΡΕ0674902 ómega-6 fornecida durante o período de tratamento não deverá preferencialmente ser inferior a 10 g. A administração de uma quantidade diária do componente (c) dentro dos parâmetros de 1,5 a 5,0 g será de um modo geral suficiente para se obter um efeito favorável.
Em geral, será vantajoso usar uma quantidade de componente (a) superior à quantidade do componente (c) empregue.
Para o uso de acordo com o método da invenção, o suplemento poderá e deverá preferencialmente conter outros ingredientes.
Exemplos de ingredientes que têm um efeito favorável na resposta imunitária e/ou resistência ás infecções no contexto de uma cirurgia são as bases pirimidina e purina de nucleótidos, doravante designadas por nucleobases (componente d) .
Além disso, os componentes (a) e (c) podem também ser empregues em misturação com outros ácidos gordos, incluindo AGPIs ómega-9. Uma fonte natural preferida para estas misturas de ácidos gordos são os óleos de peixe. Por questões de sabor e outras, os óleos de peixe serão, nas formas de aplicação oral, preferencialmente usados na forma encapsulada.
Fontes de nucleobases apropriadas para uso na 7 ΡΕ0674902 composição da invenção incluem ou são constituídas por nucleobases naturais, nucleósidos naturais, nucleótidos naturais, ARN, ADN, equivalentes dos mesmos e/ou misturas contendo um ou mais destes compostos.
Nucleobases naturais incluem as purinas adenina e guanina, bem como as pirimidinas citosina, timina e uracilo. Quando a fonte de nucleobases se encontrar na forma de nucleobases livres, será preferencialmente uracilo.
Nucleósidos naturais incluem os nucleósidos de ribose adenosina, guanosina, uridina e citidina e os nucleósidos de desoxirribose desoxiadenosina, desoxiguano-sina, desoxitimidina e desoxicitidina.
Nucleótidos naturais incluem ésteres de fosfato de nucleósidos naturais, tais como os monofosfatos adenilato (AMP), guanilato (GMP), uridilato (UMP), citidi-lato (CMP), desoxitimidilato (dTMP), desoxicitidilato (dCMP) e bifosfatos e trifosfatos de nucleósidos naturais, tais como ADP e ATP. É preferida uma fonte de nucleobases purificada, tal como a levedura. No entanto, podem ser usadas outras fontes, tais como carne e similares.
Para os adultos, a quantidade total de ARN fornecida durante o período de tratamento não deverá prefe- ΡΕ0674902 rencialmente ser inferior a 5 g. A administração de uma quantidade diária de ARN dentro dos parâmetros de 0,7 g a 2 g será em geral suficiente para se obter um efeito favorável. Podem ser usadas quantidades equivalentes de outras fontes de nucleobase. Para a finalidade desta invenção, uma unidade de peso de nucleobases é considerada como sendo equivalente a entre 2,5 e 3,0 unidades de peso de ARN, ADN, nucleósidos ou nucleótidos.
As composições da invenção podem ser formuladas numa forma apropriada para administração parentérica ou entérica. São particularmente apropriadas para uso entérico, por exemplo para administração oral, administração nasal e/ou alimentação por sonda. É conveniente que estas composições sejam administradas na forma de um liquido aquoso. Em conformidade, as composições da invenção apropriadas para administração entérica encontrar-se-ão preferencialmente na forma aquosa ou na forma de um pó, em que o pó será convenientemente adicionado a água antes da utilização. Para uso em alimentação por sonda, a quantidade de água a ser adicionada irá depender, entre outros factores, das necessidades de fluidos do paciente e do seu estado. A composição da invenção pode conter vitaminas, minerais, oligoelementos, bem como fontes adicionais de azoto, hidratos de carbono e ácidos gordos. 9 ΡΕ0674902
De forma conveniente, contém também fibra nutricionalmente aceitável, preferencialmente fibra solúvel. 0 termo fibra solúvel tal como usado aqui refere-se a fibras que essencialmente são passíveis de fermentação no cólon para produzirem ácidos gordos de cadeia curta. Exemplos de fibras solúveis adequadas incluem pectina, goma guar, goma de alfarroba, goma de Xanthan. Podem ser hidrolisadas ou não. Para os adultos, a quantidade total de fibra solúvel por dia encontrar-se-á convenientemente dentro dos parâmetros de 3 a 30 g/dia. A composição da invenção é primariamente destinada a ser usada como suplemento. A quantidade de energia fornecida pela mesma não deverá neste caso ser demasiado excessiva, de forma a não reduzir desnecessariamente o apetite do paciente. O suplemente deverá convenientemente conter fontes de energia em quantidade suficiente para fornecerem entre 2512 e 6279 kJ (60 a 1500 Kcal/dia). As contribuições da fonte de azoto, fonte de hidratos de carbono e fonte de lípidos ao total calórico diário podem variar dentro de parâmetros alargados. Nas composições preferenciais da invenção, a fonte de hidratos de carbono proporciona entre 40 e 70% do total da energia fornecida, e a fonte de azoto e a fonte de ácidos gordos proporcionam cada uma de 15 a 30% do total da energia fornecida pela composição.
Exemplos de fontes de azoto apropriadas incluem proteínas nutricionalmente aceitáveis, tais como casei-natos, ou hidrolisados de proteínas.
Exemplos de fontes de hidratos de carbono apro- 10 ΡΕ0674902 priadas incluem maltodextrinas.
Exemplos de fontes de fornecimento de energia de ácidos gordos incluem fontes de triglicéridos.
Exemplos de vitaminas apropriadas para incorporação na composição da invenção incluem vitamina A, vitamina D, vitamina E, vitamina K, vitamina C, ácido fólico, tiamina, riboflavina, vitamina Be, vitamina B12, niacina, biotina e ácido pantoténico numa forma farmaceuticamente aceitável.
Exemplos de elementos minerais e oligoelementos apropriados para serem incorporados na composição da invenção incluem sódio, potássio, cálcio, fósforo, magnésio, manganésio, cobre, zinco, ferro, selénio, crómio e molibdénio numa forma farmaceuticamente aceitável.
Em particular, as composições da invenção incluirão preferencialmente beta-caroteno (vitamina A) , vitamina E, vitamina C, tiamina, vitamina B12, colina selénio e zinco numa forma farmaceuticamente aceitável. A dieta da invenção é indicada para melhorar o sistema de resposta imunitária de pacientes e actua como dieta pré-operatória. É também indicada para utilização antes de processos operatórios, para melhorar a resistência às 11 ΡΕ0674902 infecções em pacientes que vão ser submetidos a cirurgia. É particularmente indicada para utilização no seguimento de grandes operações, isto é, incluindo quaisquer processos operatórios que requeiram anestesia geral, tais como a cirurgia cardíaca de bypass e a grande cirurgia gastrointestinal superior. A composição da invenção pode ser obtida de forma conhecida per se, por exemplo por misturação dos ingredientes.
Os seguintes exemplos ilustram a invenção:
Exemplo 1 - Na forma de Energia/saqueta: 302,8 Kcal um pó - (1 saqueta - 74 g) Fonte de azoto g 16,7 - caseinatos g (13,0) - L-Arginina g (3,74) Fonte de Ácidos Gordos g 8,3 - ácidos gordos essenciais g (0,94) - AGPIs ómega-6 g (0,74) - AGPIs ómega-3 g (1,00) Fonte de Hidratos de Carbono (Maltodextrinas) g 40,2 Goma arábica g 3,0 Levedura ARN g 0,38 Sódio mg 320 Potássio mg 402 ΡΕ0674902 12 (continuação) Cálcio mg 240 Magnésio mg 80 Fósforo mg 216 Cloreto mg 480 Ferro mg 3, 6 Cobre mg 0,5 Manganésio mg 0,6 Zinco mg 4,5 Fluoreto mg 0,5 Iodo meg 45, 0 Crómio meg 30,0 Molibdénio meg 60,0 Selénio meg 14,0 Vitamina A mg 0,30 Vitamina D meg 2,00 Vitamina E mg 4,00 Vitamina K, meg 20,00 Vitamina Bi mg 0,36 Vitamina B2 mg 0,52 Vitamina B6 mg 0,43 Vitamina B12 meg 1,20 Vitamina C mg 20,00 Biotina meg 30,00 Ácido Fólico meg 60,00 Niacinamida mg 4,8 Ácido Pantoténico mg 2,40 Ácido Cólico mg 80,00 13 ΡΕ0674902
Exemplo 2 Influência de um suporte nutricional oral pré-operatório na composição de ácidos gordos no soro e nas células e nas funções dos neutrófilos de pacientes submetidos a grande cirurgia A composição de ácidos gordos e no soro e as funções dos neutrófilos de quarenta pacientes (idade e níveis médios) internados para grande cirurgia são analisados num estudo duplamente cego controlado por placebos de forma aleatória, 5 dias antes e no dia da cirurgia, bem como 1 e 7 dias após a operação. Os pacientes foram divididos em dois grupos. Um grupo recebeu oralmente uma solução aquosa da composição do Exemplo 1 (numa quantidade média de 4186 kJ (1000 Kcals) por dia; administrada em 3 ou 4 tomas (bebidas) de 1256 kJ (300 Kcals) cada durante os últimos 5 dias que precederam a operação); o outro grupo recebeu uma nutrição isocalórica de controlo (placebo) tendo essencialmente a mesma composição que a do Exemplo 1, excepto em que cada saqueta de placebo de 74 g continha • fonte de azoto g 13,00 (sendo tudo caseinato, sem L-Arginina) • fontes de ácidos gordos g 8,33 - ácidos gordos essenciais g (3,04) - AGPIs ómega-6 g (3,00) - AGPIs ómega-3 g (-) • Hidratos de carbono g (43,94) (doravante referida como Composição Padrão). 14 ΡΕ0674902 (a) Foram feitas biópsias ao fígado, mucosa do intestino delgado e tumor gastrointestinal em todos os pacientes intraoperatoriamente. Estes tecidos e lípidos do soro foram testados quanto à sua composição de ácidos gordos por cromatografia de gás.
No grupo com o suplemento da invenção, todos os tecido examinados mostraram um conteúdo de EPA significativamente mais elevado, que foi acompanhado por um aumento na concentração do lípido EPA no soro. TABELA 1 Ácido eicosapentaenóico (EPA) - em peso percentual
Comp. I(1) Comp. S<2) média média fígado 1,26* 0,35 mucosa 1,00* 0,26 tumor 0,76* 0,30 lípidos no soro 2,53* 1,11 (1) após tratamento com a Composição do Exemplo 1 (2) após tratamento com as Composições Padrão definidas acima *p<0,05
Os dados mostram uma modulação significativa da libertação de eicosanóides após o tratamento oral pré-operatório com o suplemento da invenção. Os resultados demonstram que a modulação pré-operatória dos perfis de 15 ΡΕ0674902 ácidos gordos da membrana por manipulação dietética oferece a possibilidade de deslocar a libertação pós-operatória de eicosanóides para componentes com um potencial inflamatório mais baixo. (b) Foram isolados neutrófilos a partir do sangue periférico e estimulados com o ionóforo do cálcio A23187 (7,3 μΜ). A capacidade dos respectivos neutrófilos para gerarem leucotrienos foi analisada por RP-HPLC. Os neutrófilos do grupo tratado com a composição da invenção geraram quantidades de LTB5 significativamente mais elevadas (valores médios de 6,6 ng/1 x 107 células) em comparação com o placebo (2,9 ng/1 no dia da cirurgia (dia 0; p<0,05). Em contraste, a capacidade dos neutrófilos produzirem LTB4 não foi significativamente diferente em ambos os grupos de pacientes no dia da cirurgia e 7 dias após a cirurgia. A libertação de LTB5 por culturas de leucócitos estimuladas por ionóforo de cálcio foi determinada 5 dias antes da operação, no dia da operação e no primeiro e sétimo dias do pós-operatório. O elevado nível de LTB5 manteve-se significativamente melhorado durante sete dias após o fim da suplementação. No grupo com placebo, a libertação de LTB5 manteve-se inalterada.
Na seguinte Tabela, Dia O significa o dia da operação, Dia -5 significa 5 dias antes, Dia 1 significa 1 dia após a operação, etc. 16 ΡΕ0674902 LTB4 (ng/ml) LTB5 (ng/ml)
Dia Comp.I(1) média Comp.S(2) média Comp. I(1) média Comp.S<2) média -5 56,4 56,3 4,02 3,04 0 49,2 48,5 6, 60* 2,86 1 54,7* 77,4 7,32* 2,63 7 39,1 53,0 5,21 4,64 *p<0 , 05 (D após tratamento com a Composição do Exemplo 1 (2) após tratamento com as Composições Padrão tal como definidas acima (c) A determinação das células NK, células supressoras (CD8), células T activadas (CD3) e células IL-la confirma que a imunossupressão pós-operatória é significativamente menos expressa no seguimento do tratamento com a Composição I em comparação com a Composição S (Padrão) - Tabelas III e IV.
Tabela III Células NK (células/ml) Células supressoras CD8 (células/ml)
Dia Média Comp. I Média Comp. S Média Comp. I Média Comp. S -5 233 217 523 548 0 257 229 607 569 1 169* 85 443* 323 7 176 116 506 455 14 200 143 507 507 ΡΕ0674902 17
Tabela IV Células IL-1oí (células/ml) Células T activadas (células/ml)
Dia Média Comp. I Média Comp. S Média Comp. I Média Comp. S -5 216 201 131 166 0 236 219 154 168 1 184* 110 118* 57 7 199 167 146* 69 14 210 218 166* 84 X- Ό A 0,05
Lisboa, 18 de Junho de 2007
Claims (3)
- ΡΕ0674902 1 REIVINDICAÇÕES 1. 0 uso de (a) ácidos gordos poli-insaturados ómega-3, e (b) L-arginina ou L-ornitina na forma de um sal ou aminoácido livre, ou uma sua mistura, e (c) ácidos gordos poli-insaturados ómega-6, no fabrico de uma dieta pré-operatória imunoesti-muladora para estimulação pós-operatória do sistema imunitário de pacientes submetidos a cirurgia, por meio do qual a dieta proporciona uma dosagem diária de 2 a 5 g do componente (a), 7,5 a 20 g do componente (b) e 1,5 a 5 g do componente (c).
- 2. O uso da reivindicação 1, o qual compreende o emprego dos ácidos gordos poli-insaturados ómega-3 (a) na forma de óleo de peixe.
- 3. O uso da reivindicação 1 ou da reivindicação 2, o qual compreende o emprego dos ácidos gordos poli-insaturados ómega-6 (c) na forma de óleo de cártamo, óleo de girassol, óleo de soja, óleo de algodão ou óleo de milho. 2 ΡΕ0674902 4. 0 uso da reivindicação 1 ou da reivindicação 2, o qual compreende o emprego dos ácidos gordos poli-insaturados ómega-3 (a) e dos ácidos gordos poli-insa-turados ómega-6 (c) na forma de óleo de peixe. 5. 0 uso da reivindicação 4, em que o óleo de peixe se encontra na forma encapsulada. 6. 0 uso de qualquer uma das reivindicações 1 a 5, o qual compreende a inclusão de uma quantidade eficaz de uma fonte de nucleobases. Lisboa, 18 de Junho de 2007
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