RO122992B1 - Utilizarea de perete celular (mcc) de mycobacterium phlei pentru tratamentul cancerului de vezică urinară - Google Patents
Utilizarea de perete celular (mcc) de mycobacterium phlei pentru tratamentul cancerului de vezică urinară Download PDFInfo
- Publication number
- RO122992B1 RO122992B1 ROA200000832A RO200000832A RO122992B1 RO 122992 B1 RO122992 B1 RO 122992B1 RO A200000832 A ROA200000832 A RO A200000832A RO 200000832 A RO200000832 A RO 200000832A RO 122992 B1 RO122992 B1 RO 122992B1
- Authority
- RO
- Romania
- Prior art keywords
- mcc
- dna
- bladder cancer
- cells
- cell wall
- Prior art date
Links
- 206010005003 Bladder cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 50
- 208000007097 Urinary Bladder Neoplasms Diseases 0.000 title claims abstract description 49
- 201000005112 urinary bladder cancer Diseases 0.000 title claims abstract description 49
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 title claims abstract description 25
- 241000187481 Mycobacterium phlei Species 0.000 title abstract description 132
- 229940055036 mycobacterium phlei Drugs 0.000 title abstract description 110
- 239000003814 drug Substances 0.000 claims abstract description 14
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 claims description 71
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 16
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 claims description 7
- 229940079593 drug Drugs 0.000 claims description 7
- 230000006882 induction of apoptosis Effects 0.000 claims description 7
- 230000002159 abnormal effect Effects 0.000 claims description 4
- 230000009702 cancer cell proliferation Effects 0.000 claims description 4
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 claims description 3
- 230000004044 response Effects 0.000 claims description 3
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 27
- 230000006907 apoptotic process Effects 0.000 description 20
- 241000282414 Homo sapiens Species 0.000 description 15
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 14
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 12
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 12
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 11
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 11
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 10
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 10
- 102000007260 Deoxyribonuclease I Human genes 0.000 description 9
- 108010008532 Deoxyribonuclease I Proteins 0.000 description 9
- 238000000034 method Methods 0.000 description 9
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 9
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 8
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 7
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 7
- 239000000969 carrier Substances 0.000 description 7
- 238000013467 fragmentation Methods 0.000 description 7
- 238000006062 fragmentation reaction Methods 0.000 description 7
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 6
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 6
- 230000001464 adherent effect Effects 0.000 description 6
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 6
- 239000002158 endotoxin Substances 0.000 description 6
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 6
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 6
- 108020000946 Bacterial DNA Proteins 0.000 description 5
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 5
- 244000309466 calf Species 0.000 description 5
- 229940127089 cytotoxic agent Drugs 0.000 description 5
- LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I dipotassium trisodium dihydrogen phosphate hydrogen phosphate dichloride Chemical compound P(=O)(O)(O)[O-].[K+].P(=O)(O)([O-])[O-].[Na+].[Na+].[Cl-].[K+].[Cl-].[Na+] LOKCTEFSRHRXRJ-UHFFFAOYSA-I 0.000 description 5
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 5
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 5
- 239000002953 phosphate buffered saline Substances 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 5
- 210000001541 thymus gland Anatomy 0.000 description 5
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 4
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 4
- 231100000673 dose–response relationship Toxicity 0.000 description 4
- 230000006698 induction Effects 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 4
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 4
- 241000252203 Clupea harengus Species 0.000 description 3
- 102000053602 DNA Human genes 0.000 description 3
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000186359 Mycobacterium Species 0.000 description 3
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 3
- 239000008365 aqueous carrier Substances 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000004663 cell proliferation Effects 0.000 description 3
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 3
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 3
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 3
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 3
- 235000019514 herring Nutrition 0.000 description 3
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 3
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 3
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 3
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 3
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N (2S,3S,4S,5R,6R)-6-[(2S,3R,4R,5S,6R)-3-Acetamido-2-[(2S,3S,4R,5R,6R)-6-[(2R,3R,4R,5S,6R)-3-acetamido-2,5-dihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-2-carboxy-4,5-dihydroxyoxan-3-yl]oxy-5-hydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-4-yl]oxy-3,4,5-trihydroxyoxane-2-carboxylic acid Chemical compound CC(=O)N[C@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O3)C(O)=O)O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@@H](C(O)=O)O1 KIUKXJAPPMFGSW-DNGZLQJQSA-N 0.000 description 2
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 2
- 208000005615 Interstitial Cystitis Diseases 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000186366 Mycobacterium bovis Species 0.000 description 2
- 239000007983 Tris buffer Substances 0.000 description 2
- 229920004890 Triton X-100 Polymers 0.000 description 2
- 239000013504 Triton X-100 Substances 0.000 description 2
- 239000002671 adjuvant Substances 0.000 description 2
- 239000007900 aqueous suspension Substances 0.000 description 2
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 description 2
- 239000003183 carcinogenic agent Substances 0.000 description 2
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 2
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 2
- 229940094991 herring sperm dna Drugs 0.000 description 2
- 229920002674 hyaluronan Polymers 0.000 description 2
- 229960003160 hyaluronic acid Drugs 0.000 description 2
- 230000003308 immunostimulating effect Effects 0.000 description 2
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 2
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 239000002480 mineral oil Substances 0.000 description 2
- 235000010446 mineral oil Nutrition 0.000 description 2
- 231100000324 minimal toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 2
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 2
- 210000001616 monocyte Anatomy 0.000 description 2
- 230000035407 negative regulation of cell proliferation Effects 0.000 description 2
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 2
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 description 2
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 description 2
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 2
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 2
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 2
- UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N triformin Chemical compound O=COCC(OC=O)COC=O UFTFJSFQGQCHQW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 201000008827 tuberculosis Diseases 0.000 description 2
- 229960005486 vaccine Drugs 0.000 description 2
- QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 2-amino-2-(hydroxymethyl)propane-1,3-diol;hydron;chloride Chemical compound Cl.OCC(N)(CO)CO QKNYBSVHEMOAJP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000193830 Bacillus <bacterium> Species 0.000 description 1
- 241000588807 Bordetella Species 0.000 description 1
- 201000009030 Carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 206010057248 Cell death Diseases 0.000 description 1
- 241000186216 Corynebacterium Species 0.000 description 1
- 102000004127 Cytokines Human genes 0.000 description 1
- 108090000695 Cytokines Proteins 0.000 description 1
- 206010059866 Drug resistance Diseases 0.000 description 1
- 238000002965 ELISA Methods 0.000 description 1
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 1
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 1
- 241000588722 Escherichia Species 0.000 description 1
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 1
- 241000186394 Eubacterium Species 0.000 description 1
- 229930186217 Glycolipid Natural products 0.000 description 1
- 241000282412 Homo Species 0.000 description 1
- 239000012480 LAL reagent Substances 0.000 description 1
- 241000186781 Listeria Species 0.000 description 1
- WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N Lithium Chemical compound [Li] WHXSMMKQMYFTQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000124008 Mammalia Species 0.000 description 1
- 229930192392 Mitomycin Natural products 0.000 description 1
- MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N Muraminsaeure Natural products OC(=O)C(C)OC1C(N)C(O)OC(CO)C1O MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000186367 Mycobacterium avium Species 0.000 description 1
- 241000186365 Mycobacterium fortuitum Species 0.000 description 1
- 241000187480 Mycobacterium smegmatis Species 0.000 description 1
- NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N Mytomycin Chemical compound C1N2C(C(C(C)=C(N)C3=O)=O)=C3[C@@H](COC(N)=O)[C@@]2(OC)[C@@H]2[C@H]1N2 NWIBSHFKIJFRCO-WUDYKRTCSA-N 0.000 description 1
- 241000187654 Nocardia Species 0.000 description 1
- 241000187678 Nocardia asteroides Species 0.000 description 1
- 235000019482 Palm oil Nutrition 0.000 description 1
- 108010013639 Peptidoglycan Proteins 0.000 description 1
- 206010037660 Pyrexia Diseases 0.000 description 1
- 241000316848 Rhodococcus <scale insect> Species 0.000 description 1
- 241000187563 Rhodococcus ruber Species 0.000 description 1
- 206010040047 Sepsis Diseases 0.000 description 1
- 244000062793 Sorghum vulgare Species 0.000 description 1
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000001594 aberrant effect Effects 0.000 description 1
- 238000009825 accumulation Methods 0.000 description 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 230000004913 activation Effects 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 239000000427 antigen Substances 0.000 description 1
- 102000036639 antigens Human genes 0.000 description 1
- 108091007433 antigens Proteins 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 239000012298 atmosphere Substances 0.000 description 1
- 238000001574 biopsy Methods 0.000 description 1
- 201000001531 bladder carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000003443 bladder cell Anatomy 0.000 description 1
- -1 but not limited to Substances 0.000 description 1
- 239000000828 canola oil Substances 0.000 description 1
- 235000019519 canola oil Nutrition 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 230000030833 cell death Effects 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 210000003855 cell nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 108091092356 cellular DNA Proteins 0.000 description 1
- 230000005889 cellular cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 1
- 230000000973 chemotherapeutic effect Effects 0.000 description 1
- 229960004316 cisplatin Drugs 0.000 description 1
- DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L cisplatin Chemical compound N[Pt](N)(Cl)Cl DQLATGHUWYMOKM-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 230000000536 complexating effect Effects 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 230000002596 correlated effect Effects 0.000 description 1
- 230000000875 corresponding effect Effects 0.000 description 1
- 210000004748 cultured cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000009089 cytolysis Effects 0.000 description 1
- 230000001086 cytosolic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000433 cytotoxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000001472 cytotoxic effect Effects 0.000 description 1
- 230000034994 death Effects 0.000 description 1
- 230000007812 deficiency Effects 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 1
- 238000002296 dynamic light scattering Methods 0.000 description 1
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 1
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 1
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 1
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 1
- 239000003797 essential amino acid Substances 0.000 description 1
- 235000020776 essential amino acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 1
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 1
- 230000005847 immunogenicity Effects 0.000 description 1
- 229960001438 immunostimulant agent Drugs 0.000 description 1
- 239000003022 immunostimulating agent Substances 0.000 description 1
- 230000002779 inactivation Effects 0.000 description 1
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 1
- 230000019734 interleukin-12 production Effects 0.000 description 1
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 1
- 230000002601 intratumoral effect Effects 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 231100001231 less toxic Toxicity 0.000 description 1
- 239000002960 lipid emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 229910052744 lithium Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000007774 longterm Effects 0.000 description 1
- 210000002540 macrophage Anatomy 0.000 description 1
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 1
- 239000004530 micro-emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000011859 microparticle Substances 0.000 description 1
- 239000004005 microsphere Substances 0.000 description 1
- 235000019713 millet Nutrition 0.000 description 1
- 230000003547 miosis Effects 0.000 description 1
- 229960004857 mitomycin Drugs 0.000 description 1
- 230000004660 morphological change Effects 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 239000007908 nanoemulsion Substances 0.000 description 1
- 239000002105 nanoparticle Substances 0.000 description 1
- 239000002077 nanosphere Substances 0.000 description 1
- 229920005615 natural polymer Polymers 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 210000004940 nucleus Anatomy 0.000 description 1
- 239000007764 o/w emulsion Substances 0.000 description 1
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 1
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 1
- 229940127084 other anti-cancer agent Drugs 0.000 description 1
- 239000002540 palm oil Substances 0.000 description 1
- 206010033675 panniculitis Diseases 0.000 description 1
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 1
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 1
- WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N phosphatidylcholine Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(=O)OC[C@H](COP([O-])(=O)OCC[N+](C)(C)C)OC(=O)CCCCCCCC=CCCCCCCCC WTJKGGKOPKCXLL-RRHRGVEJSA-N 0.000 description 1
- 235000020777 polyunsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000010837 poor prognosis Methods 0.000 description 1
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 1
- 230000035935 pregnancy Effects 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 1
- 238000001799 protein solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000007925 protein solubilization Effects 0.000 description 1
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 1
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 1
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 1
- 230000005855 radiation Effects 0.000 description 1
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 1
- 229920006395 saturated elastomer Polymers 0.000 description 1
- 150000004671 saturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 235000003441 saturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 238000004062 sedimentation Methods 0.000 description 1
- 206010040400 serum sickness Diseases 0.000 description 1
- 238000005063 solubilization Methods 0.000 description 1
- 230000007928 solubilization Effects 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000004936 stimulating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000638 stimulation Effects 0.000 description 1
- 210000004304 subcutaneous tissue Anatomy 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 239000000375 suspending agent Substances 0.000 description 1
- 238000013268 sustained release Methods 0.000 description 1
- 239000012730 sustained-release form Substances 0.000 description 1
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 description 1
- 229920001059 synthetic polymer Polymers 0.000 description 1
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 1
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 1
- 230000004797 therapeutic response Effects 0.000 description 1
- 239000002562 thickening agent Substances 0.000 description 1
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 1
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 1
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 1
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 1
- LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N tris Chemical compound OCC(N)(CO)CO LENZDBCJOHFCAS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 208000010576 undifferentiated carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 208000010570 urinary bladder carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000001635 urinary tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 1
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 1
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 1
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 1
- 230000003442 weekly effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/711—Natural deoxyribonucleic acids, i.e. containing only 2'-deoxyriboses attached to adenine, guanine, cytosine or thymine and having 3'-5' phosphodiester links
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
- A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
- A61K47/69—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the conjugate being characterised by physical or galenical forms, e.g. emulsion, particle, inclusion complex, stent or kit
- A61K47/6901—Conjugates being cells, cell fragments, viruses, ghosts, red blood cells or viral vectors
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
- A61P13/10—Drugs for disorders of the urinary system of the bladder
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Virology (AREA)
- Urology & Nephrology (AREA)
- Hematology (AREA)
- Cell Biology (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
Abstract
Invenţia se referă la utilizarea peretelui celular de Mycobacterium Phlei deproteinizat şi delipidat, pentru fabricarea unui medicament destinat cancerului de vezică urinară.
Description
Invenția se referă la utilizarea de perete celular (MCC) de Mycobacterium phlei deproteinizat delipidat, pentru fabricarea unui medicament pentru tratamentul cancerului de vezică urinară, destinat industriei farmaceutice.
Această cerere încorporează, prin referință și revendicări, întregul avantaj al cererii provizorii US 60/075.111 înregistrată în 18 februarie 1998.
Prezenta invenție cuprinde un complex de acid dezoxiribonucleic micobacterian (ADN-B) - perete celular micobacterian (BCC) în care ADN-B este conservat și complexat pe peretele celular bacterian, astfel încât BCC este eficient în tratarea cancerului de vezică. Mai precis, prezenta invenție cuprinde un complex de ADN de Mycobacterium phlei (M. phlei) (ADN-M) - perete celular de M. phlei (MCC) în care ADN-M este conservat și complexat pe peretele celular al M. phlei astfel încât MCC este eficient în inhibarea proliferării și în inducerea apoptozei celulelor de cancer de vezică.
Cancerul este o acumulare de celule atipice într-o rețea aberantă, care poate fi rezultatul unui exces de proliferare al unei insuficiențe a apoptozei sau a unei combinații a celor două. Apoptoza poate fi inițiată de liganzii care se leagă de receptori de pe suprafața celulei (Muzio și col., Cell, 85: 817-827, 1996). Mutațiile acestor receptori pot duce la o dereglare a apoptozei. Apoptoza poate fi, de asemenea, indusă de proteine intracelulare, care include, dar nu se limitează numai la regulatori p53/p21 (Levine A., Cell, 88: 323-331, 1997). Pierderea funcționalității p53/p21 este corelată cu agresivitatea într-o varietate de cancere (Fisher D., Cell, 78: 529-542, 1994). Agenții chimioterapeutici, pentru efectul lor terapeutic, se bazează în principal pe inducerea apoptozei în celulele canceroase. Rezistența la medicamente, care diminuează eficiența agenților chimioterapeutici, conduce direct sau indirect la reducerea apoptozei și este în general asociată cu o prognoză slabă într-o varietate de cancere.
Cancerul de vezică este, în particular, dificil de tratat cu succes (Lamm și col., Journal ofUrology, 153:1444-1450,1995). Preparatele de origine bacteriană, folosite pentru tratarea cancerului de vezică, includ, dar nu sunt limitate numai la bacilul Calmette-Guerin (BCG) (Pryor și col., British Journal of Cancer, 71: 801-807, 1995) și Regressin® (Bioniche, Inc. London, Ontario, Canada), un extract de perete celular micobaterian (MCWE) fiind formulat ca o emulsie de ulei mineral (brevet U.S. 4,744,984; Chin și col., Journal of Urology, 150: 1189-1193, 1996).
BCG nu induce apoptoza direct (Sasaki și col., Urology internațional, 59: 142-148, 1997). Mai degrabă, BCG stimulează celulele sistemului imunitar pentru a produce molecule bioactive, cum ar fi, dar nu se limitează numai la citokinele și tipuri de molecule reactive la oxigen (Kudoh și col., British Journal of Urology, 80S2:40,1997) care apoi induc apoptoza și citoliza.
Se crede că MCWE, care este compus în principal din peptidoglican și glicolipide ce conțin N-acetilmuramil-L-alanil-D-izoglutaminăși derivați de acid micolic(Chin și col., Journal of Urology, 156: 1189-1193, 1996), stimulează sistemul imunitar prin activarea reacțiilor mediate de macrofag și monocit (Teware și col., Veterinary Parasitology, 62:223-230,1996).
Avantajele terapeutice obținute folosind BCG și MCWE sunt variabile și inconsistente, și par să depindă de metoda de preparare și de metoda de eliberare și de variabilitate a imunogenicității și stabilității preparatului rezultat. Mai mult, BCG viu poate provoca efecte secundare serioase, care includ, dar nu se limitează numai la febră, sindromuri tip boala serului, infecții granulomatoase, sepsis și chiar moarte (Lamm și col., Journal ofUrology, 147: 596-600, 1992).
Alți agenți anteriori, cu acțiune împotriva cancerului de vezică, s-au dovedit, de asemenea, mai mult decât nepotriviți pentru aplicații clinice. Muiți dintre acești agenți sunt ineficienji sau toxici, au efecte secundare semnificative, au, ca urmare, dezvoltarea rezistenței
RO 122992 Β1 la medicamente sau imunosenzibilizare și produc slăbirea organismelor pacienților. Mai mult, 1 mulți dintre acești agenți depind, pentru eficiența lor, de receptorii de suprafață ai ligandului sau de p53/p21. 3
Prin urmare, există o cerință pentru un agent terapeutic nou, care să inhibe proliferarea și să inducă apoptoza celulelor cancerului de vezică. Acest agent terapeutic trebuie 5 să fie util ca agent cu acțiune împotriva celulelor de cancer de vezică și ca adjuvant al altor agenți împotriva celulelor de cancer de vezică. Prin adjuvant se înțelege că acesta este util 7 împreună cu alți agenți cu acțiune împotriva celulelor cancerului de vezică, pentru a crește eficiența tratamentului. Mai mult, un asemenea agent terapeutic trebuie să fie simplu și reia- 9 tiv ieftin de preparat, activitatea lui trebuie să fie reproductibilă de la o preparare la alta, activitatea lui trebuie să rămână stabilă în timp, iar efectele sale asupra celulelor cancerului 11 de vezică trebui să fie atinse cu regimuri de dozare care să fie asociate cu o toxicitate minimă. 13
WO 99/07383 relatează despre o compoziție și o metodă utilizate pentru reglarea proliferării celulare și a celulelor moarte într-un organism multicelular. în particular, descrie 15 o compoziție ce cuprinde un ADN bacterian (AND-B) și un prim purtător acceptabil farmaceutic, în care AND-B bacterian induce un răspuns în celule unui animal. în particular, 17 prezenta invenție dezvăluie o compoziție care cuprinde un ADN micobacterian (AND-M) și un prim purtător acceptabil farmaceutic, în care AND-M inhibă proliferarea celulară la un 19 animal, induce apoptoza în celulele de răspuns și stimulează celulele corespunzătoare ale sistemului imunitar la un animal, pentru a produce molecule bioactive. 21
US 5,888,986 se referă la o metodă de tratament a vezicii urinare și a structurii asociate utilizând acidul hialuronic. Metoda de tratament a cistitei interstițiale cuprinde instila- 23 rea directă în vezica urinară și în structurile asociate ale mamiferelor având cistită interstițială, cu soluții conținând acid hialuronic având greutatea moleculară mai jos de 2 x 105 25
Daltons, la concentrație eficientă.
Problema tehnică propusă spre rezolvare de prezenta cerere constă în tratamentul 27 cancerului de vezică urinară.
Soluția constă în utilizarea peretelui celular de Mycobacterium phlei (MCC) 29 deproteinizat și delipidat, pentru fabricarea unui medicament destinat tratamentului cancerului de vezică urinară. 31
Obiectul prezentei invenții constă în utilizarea de perete celular (MCC) de Mycobacterium p/7/e/deproteinizat delipidat, pentru fabricarea unui medicament pentru trata- 33 mentul cancerului de vezică urinară la un animal, inclusiv la omul care are cancer de vezică urinară. 35
Avantajele utilizării prezentei invenții decurg din faptul că medicamentul fabricat, utilizând perete celular (MCC) de Mycobacterium phlei deproteinizat delipidat, poate fi 37 preparat în cantități mari, are activitate reproductibilă, este stabil în timp și este puțin toxic, previne, elimină și inhibă eficient cancerul de vezică, prin inducerea apoptozei în celulele 39 cancerului de vezică, singur sau împreună cu alți agenți cu activitate similară.
în continuare sunt prezentate fig. 1 ...9, după cum urmează:41
-fig. 1 - inhibarea proliferării celulelor canceroase HT-1376, HT-1197, B-16 F1, ΊΉΡ1, RAW 264.7, Jurkat, HL-60 și HL-60 MX-1 de către MCC. Rezultatele reprezintă valoarea 43 medie ± deviația standard a 3 experimente independente;
-fig. 2-inhibarea proliferării celulelor de cancer de vezică HT-1376, HT-1197, B-1645
F1, THP-1, RAW 26A.7, Jurkat, HL-60 și HL-60 MX-1 de către ADN de M. phlei (2A) ADNMCC (2B), ADN de timus de vițel (2A & 2B) și ADN din spermă de hering (2A & 2B).47
Rezultatele reprezintă valoarea medie ± deviația standard a 3 experimente independente;
RO 122992 Β1
- fig. 3 - inhibarea proliferării celulelor cancerului de vezică la om HT-1197 (3A) și HT1376 (3B) de către MCC și LPS. Rezultatele reprezintă valoarea medie ± deviația standard a 3 experimente independente;
- fig. 4 - inducerea fragmentării ADN în celulele cancerului de vezică la om HT-1197 (4A) și HT-1376 (4B), de către MCC netratat și MCC tratat cu DNAază I și de către hlL-12. Rezultatele arătate sunt pentru unul din trei experimente, fiecare dintre acestea producând rezultate similare;
- fig. 5 - eliberarea de NuMA din celulele cancerului de vezică pentru creșteri ale concentrației MCC. Rezultatele reprezintă valoarea medie ± deviația standard a 3 experimente independente;
- fig. 6 - eliberarea de NuMA din celulele cancerului de vezică la om HT-1197 (6A) și HT-1376 (6B), cu 1 pg/ml MCC sau cu 100 pg/ml MCC în 48 h. Rezultatele reprezintă valoarea medie ± deviația standard a 3 experimente independente;
- fig. 7 - eliberarea de NuMA din celulele cancerului de vezică la om, cu 1 pg/ml de ADN-MCC netratată și ADN-MCC tratată cu DNAază I și MCC. Rezultatele sunt media ± deviația standard a 3 experimente independente;
- fig. 8 - procentul de LDH eliberat de către celulele cancerului de vezică la om HT1197 și HT-1376 ca un indicator al citotoxicității MCC. Rezultatele reprezintă valoarea medie ± deviația standard a 3 experimente independente;
- fig. 9 - stabilitatea MCC pe durata a 6 luni de depozitare.
Prezenta invenție satisface cerințele de mai sus prin furnizarea unei compoziții și a unei metode ce cuprinde un complex de acid dezoxiribonucleic micobacterian (ADN-B) - perete celular micobacterian (BCC) în care ADN-B este conservat și complexat pe peretele celular bacterian astfel încât BCC este eficient în tratarea celulelor cancerului de vezică. Mai precis, prezenta invenție satisface cerințele de mai sus prin furnizarea unui complex ADN de Mycobacterium phlei (M. phlei) (ADN-M) - perete celular de M. phlei (MCC) în care ADN-M este conservat și complexat pe peretele celular M. phlei astfel încât MCC este eficient în inhibarea proliferării și inducerea apoptozei la celulele cancerului de vezică. MCC este simplu și relativ ieftin de preparat, activitatea lui este reproductibilă între preparări, rămâne stabil terapeutic în timp și este eficient la regimuri de dozare care sunt asociate cu toxicitate minimă chiar și la administrări repetate.
Pentru prepararea MCC, M. phlei sunt crescute într-un mediu lichid și recoltate. Celulele de M. phlei sunt scindate, iar componentele solide ale celulelor scindate de M. phlei sunt colectate prin sedimentare centrifugală. Componentele solide sunt deproteinizate, delipidizate și sunt spălate. Sunt utilizați agenți fără DNAază, pentru a minimiza degradarea ADN-M în timpul preparării.
MCC, în combinație cu un purtător acceptabil farmaceutic, se administrează unui animal, inclusiv omului, într-o doză suficientă pentru a preveni, trata și elimina celulele canceroase din vezică. Capacitatea neașteptată și surprinzătoare a MCC de a inhiba proliferarea și de a induce apoptoza la celulele cancerului de vezică include, dar nu se limitează numai la celule p52/p21 anormale și celule rezistente la medicamente, adresându-se unei cerințe neîndeplinite din domeniul medical, și asigură un important avantaj.
MCC este, de asemenea, eficient ca un adjuvant, pentru a îmbunătăți eficiența altor agenți anticancer. Aceștia includ medicamente, imunostimulanți, antigene, anticorpi, vaccinuri, radiație, agenți chimioterapeutici, agenți acizi nucleici, agenți obținuți prin bioinginerie, agenți sintetizați chimic, agenți care au drept țintă moleculele morții celulare pentru activare sau inactivare și agenți care inhibă proliferarea și induc apoptoza în celulele răspunzătoare și nu numai.
RO 122992 Β1
Prezenta invenție cuprinde un complex de acid dezoxiribonucleic bacterian (ADN-B) - 1 perete celular bacterian (DCC), în care ADN-B este conservat și complexat pe peretele celular bacterian astfel încât complexul este eficient în prevenirea, tratarea și eliminarea 3 celulelor canceroase din vezica urinară a unui animal, inclusiv a omului.
Pentru practica prezentei invenții pot fi folosite multe specii bacteriene, incluzând, dar 5 nu numai, specii Coryneform, specii Corynebacterium, specii Rhodococcus, specii Eubacterium, specii Bordetella, specii Escherichia, specii Listeria, specii Nocardia și specii 7 Mycobacterium. De preferință, se folosesc specii Mycobacterium, incluzând, dar nu numai, M. smeqmatis, M. fortuitum, M, kansaasii, M. tuberculosis, M. bovis, M. vacciae, M. avium 9 și M. phlei. Cel mai preferabil se folosesc speciile Mycobacterium M. phlei.
Prin urmare, prezenta invenție cuprinde mai precis un complex de acid dezoxiribo- 11 nucleic M. phlei (ADN-M) - perete celular de M. phlei (MCC), în care ADN-M este conservat și complexat pe peretele celular de M. phlei, astfel încât MCC este eficient în prevenirea, 13 tratarea și eliminarea celulelor canceroase din vezica urinară. în MCC, cantitatea de ADN-M este îmbogățită față de cantitatea de ADN-M dintr-o celulă M. phlei intactă. Mai mult, ADN-M 15 este conservat și este complexat pe peretele celular de M. phlei astfel încât este mult mai accesibil la celulele răspunzătoare decât este ADN-M din celula M. phlei intactă. Deși nu se 17 dorește legarea de ipotezele următoare, se crede că ADN-M sub forma oligonucleotidelor scurte și asocierea lor fizică cu peretele celular M. phlei contribuie la exprimarea optimă a 19 activității terapeutice a MCC.
Metodele de creștere a activității terapeutice a MCC includ, dar nu sunt limitate numai 21 la suplimentarea chimică sau amplificarea prin biotehnologie a secvențelor stimulatoare sau a confirmării de ADN derivat din aceeași specie bacteriană sau din specii diferite și 23 complexarea ADN-M sau MCC pe purtători sintetici sau naturali. Mai mult, MCC poate fi administrat înainte, în același timp sau după alți agenți cu acțiune împotriva cancerului de 25 vezică, pentru a crește eficiența terapeutică.
Compozițiile care cuprind MCC și purtătorul lui acceptabil farmaceutic sunt preparate 27 prin aducerea în contact, în mod uniform și intim, a MCC cu purtători lichizi, solizi sau de ambele tipuri. Purtătorii lichizi includ, dar nu numai, purtători apoși, purtători neapoși sau de 29 ambele tipuri. Purtătorii solizi includ, dar nu numai, purtători biologici, purtători chimici și purtători prelucrați prin biotehnololgii. 31
Printre purtătorii săi acceptabili farmaceutic, MCC poate fi administrat în suspensie apoasă, emulsie de ulei, emulsie apă-în ulei-în apă, lipozomi, microparticule, emulsii 33 specifice situsurilor, emulsii de rezidență îndelungată, emulsii lipicioase, microemulsii, nanoemulsii, microsfere, nanosfere, nanoparticule, minipompe și cu diverși polimeri sintetici 35 sau naturali, care permit eliberarea susținută a MCC. Mai mult, MCC poate fi folosit cu oricare, cu toți sau cu orice combinație de excipienți, indiferent de purtătorul folosit pentru 37 a expune MCC celulelor răspunzătoare. Aceștia includ, dar nu numai, antioxidanți, tampoane și bacteriostatice, și pot include agenți de suspendare și agenți de îngroșare. 39
De preferință, MCC se administrează sub formă de suspensie apoasă. MCC este suspendat într-un purtător acceptabil farmaceutic, cum ar fi, dar nu este limitat numai la, apă 41 fără DNAază, soluție salină sau soluție salină tamponată cu fosfat (PBS), și este emulsionată prin dezintegrare cu ultrasunete. Opțional, amestecul emulsionat este omogenizat prin 43 microfluidizare. De exemplu, MCC liofilizat este suspendat în apă fără DNAază și este dezintegrat cu ultrasunete la o putere de 20%, timp de 5 min (sonicator model W-385, Heat 45 Systems-Ultrasonics Inc). Compoziția dezintegrată cu ultrasunete este omogenizată prin microfluidizare la 15.000-30.000 psi într-o trecere (Model M-110Y; Microfluidics, Newton, 47 MA). Amestecul este ori prelucrat aseptic, ori este sterilizat la final.
RO 122992 Β1
Pentru administrarea într-un purtătorneapos, MCC esteemulsionatcu un ulei mineral sau cu un ulei neutru, cum ar fi, dar nu este limitat numai la, o digliceridă, o trigliceridă, un fosfolipid, un lipid, un ulei și amestecuri ale acestora, în care uleiul conține un amestec adecvat de acizi grași polinesaturați sau saturați. Exemplele includ, dar nu numai, ulei de soia, ulei de canola, ulei de palmier, ulei de măsline și migliol, în care numărul atomilor de carbon din acizii grași sunt între 12 și 22, și în care acizii grași pot fi saturați sau nesaturați. Opțional, lipide sau fosfolipide cu sarcină pot fi suspendate în uleiul neutru. De exemplu, la uleiul de soia cu trigliceride fără DNAază se adaugă fosfatidiIcolinăîntr-un raport de 1 g de fosfolipidă la 20 ml de trigliceridă și este dizolvat sub încălzire ușoară la 50-60°C. Se adaugă mai multe grame de MCC într-un rezervor uscat, autoclavizat, iar soluția de fosfolipidă-trigliceridă se adaugă la o concentrație de 20 ml per 1 g de MCC. Suspensia este incubatătimp de 60 min la 20°C și apoi este amestecată cu PBS fără DNAază, într-un raport de 20 ml suspensie MCC per litru de PBS. Amestecul este emulsionat prin dezintegrare cu ultrasunete la o putere de 20%, timp de 5 min (sonicator model W-385, Heat Systems-Ultrasonics Inc). Opțional, amestecul MCC emulsionat este omogenizat prin microfluidizare la 15.000-30.000 psi într-o trecere (Model M-110Y; Microfluidics). Emulsia de MCC este transferată într-o sticlă cu capac, autoclavizată, pentru depozitare la 4°C.
Mărimea particulelor MCC trebuie să fie optimă pentru recunoașterea și preluarea de către celulele răspunzătoare. De preferință, diametrul mediu al particulelor de MCC este între aproximativ 10 și aproximativ 10.000 nm, mai preferabil între aproximativ 100 și aproximativ 1000 nm, și cel mai preferabil între aproximativ 250 și aproximativ 600 nm.
Conținutul de ADN-M al MCC este de preferință între aproximativ 0,001 și aproximativ 90 mg/100 mg MCC uscat, mai preferabil între 0,01 și aproximativ 40 mg/100 mg MCC uscat, cel mai preferabil între aproximativ 0,1 și aproximativ 30 mg/100 mg MCC uscat. De asemenea, este de preferat ca acest conținut de proteine să fie mai mic de aproximativ 2 mg/100 mg MCC uscat, iar conținutul de acizi grași să fie mai mic decât aproximativ 2 mg/100 mg MCC uscat. în mod surprinzător, s-a descoperit că cel puțin aproximativ 3,6% din greutatea MCC ca substanță uscată este ADN-M extractabil.
MCC și/sau ADN-M sunt administrate într-o cantitate eficientă pentru a induce răspunsul terapeutic în celulele răspunzătoare ale vezicii. Dozarea MCC și/sau a ADN-M administrate va depinde de starea ce se tratează, formularea particulară și alți factori clinici, cum ar fi greutatea și starea celui căruia îi sunt administrate, precum și calea de administrare. De preferință, cantitatea de MCC și/sau ADN-M administrate este de la aproximativ 0,00001 până la aproximativ 100 mg/kg per doză, mai preferabil de la aproximativ 0,0001 până la aproximativ 50 mg/kg per doză și cel mai preferabil de la aproximativ 0,001 până la aproximativ 10 mg/kg per doză.
Căile de administrare includ, dar nu numai, calea orală, cea intravenoasă, intralezională, intratumorală și intravezicală. De preferință, MCC și/sau ADN-M sunt administrate prin instilareîn vezica urinară, prin intermediul unui cateter pentru tractul urinar, dar nu se limitează la acest mod. Alte metode pentru instilarea MCC și/sau ADN-M în vezica urinară sunt cunoscute specialiștilor în domeniu.
Depinzând de calea de administrare, volumul per doză este de preferință aproximativ 0,001 până la aproximativ 100 ml, mai preferabil aproximativ 0,01 până la aproximativ 70 ml și cel mai preferabil aproximativ 0,1 până la aproximativ 40 ml. MCC și/sau ADN-M pot fi administrate într-un tratament cu o singură doză sau în tratamente cu doze multiple, conform unui program și pe o perioadă de timp adecvată bolii care se tratează, stării celui tratat și căii de administrare.
RO 122992 Β1
Atunci când este administrată la vezica urinară, depinzând de volumul administrat, 1 doza trebuie să rămână în vezică de preferință de la aproximativ 1 min până la aproximativ 8 h, de preferință de la aproximativ 15 min până la aproximativ 4 h, și cel mai preferabil de 3 la aproximativ 30 min până la aproximativ 2 h.
Următoarele 11 exemple vor servi la ilustrarea suplimentară a prezentei invenții, fără 5 a se constitui totuși într-o limitare a acesteia. Dimpotrivă, trebuie înțeles clar că se poate recurge la alte variate alcătuiri, modificări și echivalențe ale acestora, care, după citirea 7 descrierii, le pot apărea specialiștilor în domeniu, fără îndepărtarea de la spiritul prezentei invenții și/sau întinderea revendicărilor anexate. 9
Exemplul 1. Prepararea de MCC din Mycobacterium phlei și purificarea de ADN-M din MCC și din M. phlei 11
MCC a fost preparat din Mycobacterium phlei (M. phlei) (tulpina 110), ADN-M a fost purificat din MCC (ADN-MCC), iar ADN-M a fost purificat din M. phlei (ADN-M. phlei), așa 13 cum este descris în cererea PCT/CA981/00744. Toți reactanții au fost selectați pentru a îmbunătăți conservarea ADN. Dacă nu s-a menționat altfel, MCC, ADN-MCC și ADN-M phlei 15 au fost resuspendate în apă fără DNAază, sau într-un tampon fără DNAază, acceptabil farmaceutic, și emulsionate prin dezintegrare cu ultrasunete. MCC, ADN-MCC și ADN-M. 17 phlei nu au conținut endotoxine, așa cum s-a determinat folosind trusa QCL-1000 de lizat amebocit Limulus (BioWhittaker, Walkersville, MD). 19
Exemplul 2. Prepararea complexului ADN bacterian - perete celular bacterian și a
ADN bacterian din alte specii bacteriene 21
Complexul din perete celular bacterian ADN bacterian (BCC) și ADN bacterian (ADNB) au fost preparate din M. smegmatis, M. fortuitous, Nocardia rubra, Nocardia asteroides, 23 Cornybacterium parvum, M, kansaasii, M. tuberculosis și M. bovis, ca în exemplul 1.
Exemplul 3. Tratament cu DNAază 25
ADN-MCC și MCC, fiecare conținând 1 pg de ADN-M și Regressin© (brevet
U.S. 4.744.984) au fost digerate cu o unitate internațională (IU) de DNAază I fără RNAază 27 (Life Technologies), timp de 1 h, la 25’C, în 20 mM HCI tris, pH de 8,4,2 mM MgCI și 50 mM KCI. DNAaza I a fost inactivată prin adăugarea de EDTA până la o concentrație finală de 29 2,5 mM și încălzire timp de 10 min la 65°C.
Exemplul 4. Celule și reactanfi 31
Celule de cancer de vezică la om HT-1197 și HT-1376 au fost obținute de la
American Type Culture Collection (ATCC, Rockville, MD) și au fost cultivate în MEM 33 suplimentat cu aminoacizi neesențiali și vitamine, și conținând 10% FCS (MEM-FCS) (Gibco Life Science). HT-1197 sunt celule de carcinom anaplastic tranzițional gradul 4 de vezică, 35 dezvoltate de la un mascul uman. Celulele HT-1197 sunt sensibile la agenți chimioterapeutici, cum ar fi, dar nu sunt limitate numai la doxorubicina. HT-1376 sunt celule de carcinom 37 anaplastic tranzițional gradul 3 de vezică, dezvoltate de la o femeie. Celulele HT-1376 sunt p53/p21 anormale și sunt rezistente la agenți chimioterapeutici, cum ar fi cisplatin și 39 mitomicin, dar nu sunt limitate numai la acestea. Celulele BF-16 F1, THP-1, RAW 264.7, Jurkat, #L-60 și HL-60MX-1 au fost obținute de la ATCC și au fost cultivate în mediile 41 recomandate de către ATCC. Dacă nu s-a menționat altfel, celulele au fost cultivate în 6 vase de cultură tisulară, cu fundul plat, la concentrații între 3 x 105 și 106 celule/ml, și au fost 43 menținute la 37°C, într-o atmosferă de 5% CO.
ADN din timus de vițel, ADN din spermă de hering și Escherichia coli Iipopolizaharidă 45 (LPS) au fost obținute de la Sigma Chemical Co. (St Louis, MO). IL-12 (hlL-12) recombinant uman a fost obținut de la R&D Systems (Minneapolis, MN). 47
Exemplul 5. Inhibarea proliferării celulare
Proliferarea celulară a fost determinată folosind reducere cu bromură de dimetiltiazoldifeniltetrazolium (MTT) (Mosman și col., Journal of Tmmunological Methods, 65:55-63, 1983).
Celulele HT-1376, HT-1197, B-16 F1, THP, BAW 264.7, Jurkat, HL-60 și HL-60MX-1 au fost incubate timp de 24 h, cu 0 până la 10 pg de MCC, -ADN-M phlei, ADN-MCC, ADN din spermă de hering și ADN din timus de vițel. MCC (fig. 1), ADN-M. phlei (fig. 2A) și ADNMCC (fig. 2B) au inhibat proliferarea într-un mod dependent de doză. ADN din spermă de hering (fig. 2A și 2B) și ADN din timus de vițel (fig. 2A și 2B) nu au inhibat proliferarea. Celulele HT-1197 (fig. 3A) și HT-1376 (fig. 3B) au fost, de asemenea, incubate timp de 24 h, cu 0 până la 100 pg /ml de MCC și LPS. MCC a inhibat proliferarea într-un mod dependent de doză, în timp ce LPS nu a inhibat proliferarea (fig. 3A și 3B).
MCC și ADN-M inhibă proliferarea celulelor de cancer de vezică la om HT-1197 și p53/p21 anormale, HT-1376 rezistente la medicamente. Mai mult, inhibarea proliferării celulare nu este comună tuturor ADN-urilor (ADN din spermă de hering și ADN din timus de vițel) și nu a rezultat din imunostimulare nespecifică (LPS).
Exemplul 6. Inducerea apoptozei așa cum a indicat fragmentarea ADN
Fragmentarea ADN celular în fragmente de mărimea nucleozomilor este caracteristică celulelor care suferă apoptoză (Newell și col., Nature, 357:286-289, 1990). Pentru a evalua fragmentarea ADN, au fost colectate celule neaderente, prin centrifugare la 200 g, timp de 10 min. Peletele de celule neaderente și restul de celule aderente au fost lizate cu 0,5 ml de tampon litic hipoton (tampon 10 mM tris, 1 mM EDTA, 0,2% Triton X-100, pH 7,5). Celulele lizate au fost centrifugate la 13.000 g, timp de 10 min, iarsupranatanții ce conțineau fragmente de ADN au fost precipitați peste noapte la -20°C, în izopropanol 50% și 0,5 M NaCI. Precipitatele au fost colectate prin centrifugare și au fost analizate prin electroforeză în geluri de 0,7% agaroză, timp de 3 h, la 100 V.
Celulele de cancer de vezică HT-1197 și HT-1376 au fost incubate timp de 48 h cu 1 pg/ml MCC sau cu 1 ng/ml hlL12 (fig. 4). MCC a indus fragmentare semnificativă a ADN la celulele neaderente HT-1197 (fig. 4A, banda 2) și HT-1376 (fig. 4B, banda 2), dar nu și la celulele aderente HT-1197 (fig. 4A, banda 3) și HT-1376 (fig. 4B, banda 3). PBS (fig. 4A și 4B, banda 5), hlL-12 (fig. 4A și 4B, banda 4) și MCC tratat cu DNAază I (fig. 4A și 4B, banda 7) nu au indus fragmentarea ADN la celulele aderente HT-1197 și HT-1376. Celulele netratate (fig. 4A și 4B, banda 1) nu au prezentat fragmentare ADN. S-a utilizat o structură ADN cu 123 baze perechi (Gibco Life Science), pentru a determina greutatea moleculară a fragmentelor ADN de mărimea nucleozomilor (fig. 4A și 4B, banda L).
MCC induce apoptoză la celulele de cancer de vezică HT-1197 și HT-1376, în timp ce MCC tratat cu DNAază I nu induce apoptoză la aceste celule. Acest lucru indică faptul că structura oligonucleotidă intactă a ADN-M este necesară pentru inducerea apoptozei. hlL-12 nu induce apoptoza la celulele HT-1197 și HT-1376.
Exemplul 7. Inducerea apoptozei așa cum este indicat de către aparatul de solubilizare a proteinelor din nucleul miotic (NuMA)
Schimbări morfologice pregnante din nucleele celulelor, provocate de solubilizarea și eliberarea de NuMA, sunt caracteristice apoptozei. Eliberarea de NuMA din celulele cultivate a fost determinată în unități/ml (U/ml), folosind un test ELISA comercial (Calbiochem, Cambridge, MA) (Millerși col., Biotechniques, 15:1042-1047,1993).
Celulele cancerului de vezică HT-1197 și HT-1376, incubate timp de 49 h, cu 0 până la 100 pg/ml MCC, au eliberat NuMAîntr-un mod dependent de doză (fig. 5). Celulele HT-1197 (fig. 6A) și HT-1376 (fig. 6B), incubate cu 1 pg/ml sau cu 100 pg/ml de MCC, timp de 48 h,
RO 122992 Β1 au prezentat o eliberare îmbunătățită de NuMAÎn24 h. Celulele HT-1197, incubate timp de 1 48 h cu MCC sau cu ADN-MCC, au prezentat o eliberare semnificativ mai mare de NuMA cu MCC decât cu ADN-MCC (fig. 7). Tratarea MCC și ADN-MCC cu DNAază I a redus 3 semnificativ eliberarea de NuMA (fig. 7).
Inducerea de către MCC a apoptozei la celulele cancerului de vezică HT-1197 și HT- 5 1376 este dependentă atât de timp, cât și de doză. Deși nu se dorește legarea de către ipotezele următoare, se crede că atât structura de oligonucleotidă a ADN-M, cât și prezentarea 7 ADN-M pe peretele celular de M. phlei este importantă pentru inducerea apoptozei optime.
Exemplul 8. Citotoxicitatea MCC 9
Citotoxicitatea celulară este caracterizată de pierderea integrității membranei plasmatice și eliberarea de enzime citoplasmatice, cum ar fi, dar nu numai, LDH (Phillips și 11 col., Vaccine, 14: 898-904).
Pentru a evalua citotoxicitatea MCC, s-au incubat celule de cancer de vezică la om 13 HT-1197 și HT-1376, timp de 48 h, cu 0 până la 100 pg/ml de MCC sau cu tampon lizat (10 mM tris, 1 mM EDTA, 0,2% Triton X-100, pH 7,5), ca un control total, pentru eliberarea 15 de LDH (Filion și col., Biochim Biopsys Acta, 1329: 345-356,1997). LDH a fost determinat prin evaluare comercială (Sigma-AIdrich). Faptul că MCC nu a fost citotoxic (fig. 8) 17 demonstrează că MCC acționează direct asupra celulelor de cancer de vezică HT-1197 și HT-1376, pentru a inhiba proliferarea și a induce apoptoza. 19
Exemplul 9. Tratamentul cancerului uman de vezicâcu MCC și ADN-MCC la șoareci nu/nu 21
Cancerul uman de vezică (HT-1197) este indus ca o tumoră solidă ectopică în țesuturile subcutanate ale șoarecilor fără păr, atimici imunodeficienți (șoareci nu/nu), iar 23 șoarecii suntîmpărțiți în 5 grupuri. Grupul 1 primește numai purtător. Grupul 2 primește MCC. Grupul 3 primește MCC tratat cu DNAază I. Grupul 4 primește ADN-MCC. Grupul 5 primește 25
ADN-MCC tratat cu DNAază I. Masa canceroasă este cântărită înaintea tratamentului și săptămânal, timp de 4 săptămâni de tratament. Grupul 2 de șoareci prezintă regresie a masei 27 canceroase. Grupurile 1, 3 și 5 de șoareci nu prezintă regresie a masei canceroase.
Exemplul 10. Tratamentul cu MCC a cancerului de vezică la om 29 pacienți cu cancer de vezică ortotopic, de stadiul 3, sunt împărțiți în 2 grupuri. Grupul 1 primește intravezical instilații cu MCC, timp de 8 săptămâni. Grupul 2 primește 31 tratament standard chimioterapeutic. Pacienții din grupul 1 prezintă regresie semnificativă a cancerului de vezică și nu prezintă efecte secundare debilitante. Pacienții din grupul 2 33 prezintă regresie minimă a cancerului de vezică și efecte secundare debilitante semnificative.
Exemplul 11. Stabilitatea MCC 35
MCC la 1 pg/ml a fost depozitat ca o suspensie sterilă în 0,85% w/v NaCI în întuneric, la 4°C, timp de 6 luni. Diametrul mediu al particulelor a fost calculat folosind spectroscopia 37 cu corelare fotonică (N4 Plus, Coulter Electronics Inc.). Suspensia de MCC a fost diluată cu NaCI 0,85% w/v până la o viteză de numărare între 5 x 104 și 106 indicații/s. Diametrul mediu 39 al particulelor a fost calculat în modul de prelucrare a distribuției mărimilor (SDP), folosind următoarele condiții: indexul de refracție a fluidului 1,33; temperatura 20°C, viscozitatea 0,93 41 centipoise, unghiul de măsurare 90,0°, timpul de eșantionare 10,5 ps și timpul de rulare a probei 100 s. Potențial, încărcătura electrică la interfața hidrodinamică dintre particule și 43 solventul vrac a fost măsurată într-un aparat Delsa 440SX (Coulter Electronics), folosind următoarele condiții: curent 0,7 mA, frecvență 500 Hz, temperatura 20’C, indicele de refracție 45 al fluidului 1,33, viscozitatea 0,93 centipoise, constanta dielectrică78,3, conductivitatea 16,7 ms/cm, timp de conectare 2,5 s, timp de deconectare 0,5 s și timpul de rulare a probei 60 s. 47
RO 122992 Β1
Așa cum este arătat în fig. 9, încărcarea MCC și diametrul MCC rămân relativ neschimbate timp de 6 luni de depozitare. Mai mult, stimularea de către MCC a producerii de IL-12 și inducerea apoptozei la monocitele THP-1 rămân neschimbate pe perioada celor 6 luni de depozitare.
Trebuie înțeles, desigur, că ceea ce s-a prezentat aici se referă numai la o alcătuire preferată a prezentei invenții și că pot fi făcute numeroase modificări sau schimbări, fără îndepărtarea de la spiritul și întinderea invenției, așa cum este prezentată în revendicările anexate.
Claims (3)
1. Utilizarea de perete celular (MCC) de MycobacteriumpWey deproteinizatdelipidat, 3 pentru fabricarea unui medicament pentru tratamentul cancerului de vezică urinară la un animal, inclusiv la omul care are cancer de vezică urinară. 5
2. Utilizare conform revendicării 1, în care MCC induce răspuns în celulele cancerului de vezică urinară selectat din grupul ce constă din inhibarea proliferării celulelor cancerului 7 de vezică și inducerea apoptozei în cancerul de vezică.
3. Utilizare conform revendicării 2, în care celulele cancerului de vezică urinară sunt 9 rezistente la medicație sau la factorul p 53/21 anormal.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US7511198P | 1998-02-18 | 1998-02-18 | |
| PCT/CA1998/001190 WO1999042113A1 (en) | 1998-02-18 | 1998-12-22 | Composition and method for the treatment of bladder cancer |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RO122992B1 true RO122992B1 (ro) | 2010-06-30 |
Family
ID=22123625
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ROA200000832A RO122992B1 (ro) | 1998-02-18 | 1998-12-22 | Utilizarea de perete celular (mcc) de mycobacterium phlei pentru tratamentul cancerului de vezică urinară |
Country Status (13)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (1) | EP1054680B1 (ro) |
| JP (1) | JP4426097B2 (ro) |
| CN (1) | CN1153576C (ro) |
| AT (1) | ATE290390T1 (ro) |
| AU (1) | AU751667B2 (ro) |
| CA (1) | CA2321296A1 (ro) |
| DE (1) | DE69829316T2 (ro) |
| DK (1) | DK1054680T3 (ro) |
| ES (1) | ES2238780T3 (ro) |
| NZ (1) | NZ506406A (ro) |
| PT (1) | PT1054680E (ro) |
| RO (1) | RO122992B1 (ro) |
| WO (1) | WO1999042113A1 (ro) |
Families Citing this family (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| PT1181304E (pt) | 1999-04-08 | 2008-01-23 | Antisoma Res Ltd | Actividade antiproliferativa de oligonucleótidos ricos em g e método de utilização dos mesmos para ligação a nucleolina |
| WO2001022979A1 (en) * | 1999-09-29 | 2001-04-05 | Bioniche Life Sciences Inc. | Method to disrupt mitochondrial function |
| US7125858B2 (en) | 1999-12-28 | 2006-10-24 | Bioniche Life Sciences Inc. | Hyaluronic acid in the treatment of cancer |
| US20030044352A1 (en) * | 2001-04-24 | 2003-03-06 | Phillips Nigel C. | Method for evaluating the efficacy of treatment with bacterial DNA and bacterial cell walls |
| CN101829154B (zh) * | 2010-04-23 | 2012-12-26 | 广西医科大学第一附属医院 | 防治哮喘的药物组合物的制备方法 |
| WO2012049654A1 (en) | 2010-10-13 | 2012-04-19 | Bioniche Life Sciences, Inc. | Bacterial ribonucleic acid cell wall compositions and methods of making and using them |
| TR201101874A2 (tr) | 2011-02-25 | 2011-08-22 | Leyla A�An Nac�Ye | Yüzeyel mesane tümorü tedavisinde kullanılabilecek mycobacterıum(mikobakteri) brumae hücre duvarı ekstreleri. |
Family Cites Families (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| KR100533576B1 (ko) * | 1997-08-05 | 2005-12-05 | 바이오니취 라이프 사이언시즈 인코포레이티드 | 세포증식 및 세포사멸 조절용 조성물 및 방법 |
-
1998
- 1998-12-22 NZ NZ506406A patent/NZ506406A/xx not_active IP Right Cessation
- 1998-12-22 WO PCT/CA1998/001190 patent/WO1999042113A1/en not_active Ceased
- 1998-12-22 PT PT98962163T patent/PT1054680E/pt unknown
- 1998-12-22 JP JP2000532127A patent/JP4426097B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1998-12-22 CN CNB988136597A patent/CN1153576C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1998-12-22 DK DK98962163T patent/DK1054680T3/da active
- 1998-12-22 AU AU17465/99A patent/AU751667B2/en not_active Ceased
- 1998-12-22 ES ES98962163T patent/ES2238780T3/es not_active Expired - Lifetime
- 1998-12-22 CA CA002321296A patent/CA2321296A1/en not_active Abandoned
- 1998-12-22 AT AT98962163T patent/ATE290390T1/de active
- 1998-12-22 DE DE69829316T patent/DE69829316T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1998-12-22 EP EP98962163A patent/EP1054680B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1998-12-22 RO ROA200000832A patent/RO122992B1/ro unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| ES2238780T3 (es) | 2005-09-01 |
| HK1030887A1 (en) | 2001-05-25 |
| AU1746599A (en) | 1999-09-06 |
| NZ506406A (en) | 2002-11-26 |
| JP4426097B2 (ja) | 2010-03-03 |
| EP1054680B1 (en) | 2005-03-09 |
| ATE290390T1 (de) | 2005-03-15 |
| DE69829316T2 (de) | 2006-04-13 |
| CN1290171A (zh) | 2001-04-04 |
| PT1054680E (pt) | 2005-06-30 |
| CA2321296A1 (en) | 1999-08-26 |
| DK1054680T3 (da) | 2005-06-27 |
| JP2002503697A (ja) | 2002-02-05 |
| CN1153576C (zh) | 2004-06-16 |
| EP1054680A1 (en) | 2000-11-29 |
| DE69829316D1 (de) | 2005-04-14 |
| WO1999042113A1 (en) | 1999-08-26 |
| AU751667B2 (en) | 2002-08-22 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| JP2008208140A (ja) | 細胞増殖および細胞死を調節する組成物および方法 | |
| EP1054680B1 (en) | Treatment of bladder cancer by mycobacterium phlei cell wall | |
| EP1135161B1 (en) | Chemotherapeutic composition and method | |
| MXPA00008142A (en) | Composition and method for the treatment of bladder cancer | |
| HK1030887B (en) | Treatment of bladder cancer by mycobacterium phlei cell wall | |
| EP1165106B1 (en) | Composition and method for inducing apoptosis in prostate cancer cells by m-dna and mcc | |
| JP4488626B2 (ja) | 炎症の治療法 | |
| US20040242524A1 (en) | Chemotherapeutic composition and method | |
| US6794368B1 (en) | Composition and method for inducing apoptosis in prostate cancer cells | |
| MXPA00001272A (en) | Composition and method for regulating cell proliferation and cell death |