RO127000A2 - Complex bioactiv de acizi triterpenici, procedeu de obţinere şi produse medicamentoase - Google Patents
Complex bioactiv de acizi triterpenici, procedeu de obţinere şi produse medicamentoase Download PDFInfo
- Publication number
- RO127000A2 RO127000A2 ROA201000578A RO201000578A RO127000A2 RO 127000 A2 RO127000 A2 RO 127000A2 RO A201000578 A ROA201000578 A RO A201000578A RO 201000578 A RO201000578 A RO 201000578A RO 127000 A2 RO127000 A2 RO 127000A2
- Authority
- RO
- Romania
- Prior art keywords
- acids
- triterpenic
- acid
- triterpenic acids
- complex
- Prior art date
Links
- 239000002253 acid Substances 0.000 title claims abstract description 204
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 title claims abstract description 81
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 61
- 230000008569 process Effects 0.000 title claims abstract description 34
- -1 triterpene acids Chemical class 0.000 title claims abstract description 5
- 229940126601 medicinal product Drugs 0.000 title claims description 19
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title description 10
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 claims abstract description 149
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 77
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 66
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 54
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 47
- 238000000605 extraction Methods 0.000 claims abstract description 43
- 235000019441 ethanol Nutrition 0.000 claims abstract description 38
- 229940096998 ursolic acid Drugs 0.000 claims abstract description 34
- PLSAJKYPRJGMHO-UHFFFAOYSA-N ursolic acid Natural products CC1CCC2(CCC3(C)C(C=CC4C5(C)CCC(O)C(C)(C)C5CCC34C)C2C1C)C(=O)O PLSAJKYPRJGMHO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 34
- WCGUUGGRBIKTOS-GPOJBZKASA-N (3beta)-3-hydroxyurs-12-en-28-oic acid Chemical compound C1C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CC[C@@H](C)[C@H](C)[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C WCGUUGGRBIKTOS-GPOJBZKASA-N 0.000 claims abstract description 33
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 claims abstract description 17
- 238000002803 maceration Methods 0.000 claims abstract description 9
- 241001072909 Salvia Species 0.000 claims abstract 4
- 239000000725 suspension Substances 0.000 claims description 45
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 43
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 32
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 claims description 29
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 29
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 28
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 24
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 claims description 22
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 claims description 22
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 claims description 21
- 238000004090 dissolution Methods 0.000 claims description 21
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims description 21
- 239000002994 raw material Substances 0.000 claims description 21
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims description 21
- 239000002904 solvent Substances 0.000 claims description 19
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 17
- 230000001143 conditioned effect Effects 0.000 claims description 16
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 claims description 16
- 230000002792 vascular Effects 0.000 claims description 16
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 15
- 239000011877 solvent mixture Substances 0.000 claims description 15
- 238000003756 stirring Methods 0.000 claims description 15
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 14
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 14
- GXWUEMSASMVWKO-GNLHUFSQSA-N (4as,6ar,6as,6br,10s,12ar,14br)-10-[(2s,3r,4s,5s)-4,5-dihydroxy-3-[(2r,3r,4s,5s,6r)-3,4,5-trihydroxy-6-(hydroxymethyl)oxan-2-yl]oxyoxan-2-yl]oxy-2,2,6a,6b,9,9,12a-heptamethyl-1,3,4,5,6,6a,7,8,8a,10,11,12,13,14b-tetradecahydropicene-4a-carboxylic acid Chemical compound O([C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)CO[C@H]1O[C@H]1CC[C@]2(C)[C@H]3CC=C4[C@@]([C@@]3(CCC2C1(C)C)C)(C)CC[C@]1(CCC(C[C@@H]14)(C)C)C(O)=O)[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GXWUEMSASMVWKO-GNLHUFSQSA-N 0.000 claims description 12
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 claims description 12
- 102000008186 Collagen Human genes 0.000 claims description 11
- 108010035532 Collagen Proteins 0.000 claims description 11
- 229920001436 collagen Polymers 0.000 claims description 11
- 230000003750 conditioning effect Effects 0.000 claims description 10
- 230000002500 effect on skin Effects 0.000 claims description 10
- 238000011282 treatment Methods 0.000 claims description 10
- 201000010099 disease Diseases 0.000 claims description 9
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 claims description 9
- 230000002480 immunoprotective effect Effects 0.000 claims description 9
- 239000013543 active substance Substances 0.000 claims description 8
- 235000013311 vegetables Nutrition 0.000 claims description 8
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 claims description 7
- 239000002775 capsule Substances 0.000 claims description 7
- 201000002816 chronic venous insufficiency Diseases 0.000 claims description 7
- 230000007850 degeneration Effects 0.000 claims description 7
- 230000002443 hepatoprotective effect Effects 0.000 claims description 7
- 201000002282 venous insufficiency Diseases 0.000 claims description 7
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 claims description 6
- 230000003143 atherosclerotic effect Effects 0.000 claims description 6
- 239000006071 cream Substances 0.000 claims description 6
- 206010012601 diabetes mellitus Diseases 0.000 claims description 6
- 208000011580 syndromic disease Diseases 0.000 claims description 6
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 claims description 5
- 239000000824 cytostatic agent Substances 0.000 claims description 5
- 230000001085 cytostatic effect Effects 0.000 claims description 5
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims description 5
- 239000000499 gel Substances 0.000 claims description 5
- 230000002218 hypoglycaemic effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000001506 immunosuppresive effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000002757 inflammatory effect Effects 0.000 claims description 5
- 230000001172 regenerating effect Effects 0.000 claims description 5
- 239000000829 suppository Substances 0.000 claims description 5
- 230000001228 trophic effect Effects 0.000 claims description 5
- 208000014139 Retinal vascular disease Diseases 0.000 claims description 4
- 230000032683 aging Effects 0.000 claims description 4
- 231100000334 hepatotoxic Toxicity 0.000 claims description 4
- 230000003082 hepatotoxic effect Effects 0.000 claims description 4
- 241000894007 species Species 0.000 claims description 4
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims description 4
- 206010048591 Post thrombotic syndrome Diseases 0.000 claims description 3
- 230000002411 adverse Effects 0.000 claims description 3
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 claims description 3
- 238000009109 curative therapy Methods 0.000 claims description 3
- 230000000055 hyoplipidemic effect Effects 0.000 claims description 3
- 230000022558 protein metabolic process Effects 0.000 claims description 3
- 230000001823 pruritic effect Effects 0.000 claims description 3
- 208000017520 skin disease Diseases 0.000 claims description 3
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 claims description 3
- 208000030159 metabolic disease Diseases 0.000 claims description 2
- 230000002503 metabolic effect Effects 0.000 claims description 2
- 230000003449 preventive effect Effects 0.000 claims description 2
- 238000009117 preventive therapy Methods 0.000 claims description 2
- 239000012264 purified product Substances 0.000 claims description 2
- WCGUUGGRBIKTOS-GPOJBZKASA-M (1s,2r,4as,6ar,6as,6br,8ar,10s,12ar,14bs)-10-hydroxy-1,2,6a,6b,9,9,12a-heptamethyl-2,3,4,5,6,6a,7,8,8a,10,11,12,13,14b-tetradecahydro-1h-picene-4a-carboxylate Chemical compound C1C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C([O-])=O)CC[C@@H](C)[C@H](C)[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C WCGUUGGRBIKTOS-GPOJBZKASA-M 0.000 claims 2
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 claims 1
- 230000023852 carbohydrate metabolic process Effects 0.000 claims 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 claims 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 claims 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 claims 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 claims 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 claims 1
- 230000004054 inflammatory process Effects 0.000 claims 1
- 230000037356 lipid metabolism Effects 0.000 claims 1
- 238000005507 spraying Methods 0.000 claims 1
- 238000003828 vacuum filtration Methods 0.000 claims 1
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 abstract description 17
- 239000000284 extract Substances 0.000 abstract description 13
- 238000012545 processing Methods 0.000 abstract description 6
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 abstract description 3
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 abstract description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 47
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 19
- MIJYXULNPSFWEK-GTOFXWBISA-N 3beta-hydroxyolean-12-en-28-oic acid Chemical compound C1C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CCC(C)(C)C[C@H]5C4=CC[C@@H]3[C@]21C MIJYXULNPSFWEK-GTOFXWBISA-N 0.000 description 16
- JKLISIRFYWXLQG-UHFFFAOYSA-N Epioleonolsaeure Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C)(C)CC5C4CCC3C21C JKLISIRFYWXLQG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- YBRJHZPWOMJYKQ-UHFFFAOYSA-N Oleanolic acid Natural products CC1(C)CC2C3=CCC4C5(C)CCC(O)C(C)(C)C5CCC4(C)C3(C)CCC2(C1)C(=O)O YBRJHZPWOMJYKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- MIJYXULNPSFWEK-UHFFFAOYSA-N Oleanolinsaeure Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C)(C)CC5C4=CCC3C21C MIJYXULNPSFWEK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 229940100243 oleanolic acid Drugs 0.000 description 16
- HZLWUYJLOIAQFC-UHFFFAOYSA-N prosapogenin PS-A Natural products C12CC(C)(C)CCC2(C(O)=O)CCC(C2(CCC3C4(C)C)C)(C)C1=CCC2C3(C)CCC4OC1OCC(O)C(O)C1O HZLWUYJLOIAQFC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 16
- 240000007164 Salvia officinalis Species 0.000 description 13
- 235000002020 sage Nutrition 0.000 description 11
- 244000025254 Cannabis sativa Species 0.000 description 10
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 10
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 10
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 9
- VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N n-Hexane Chemical compound CCCCCC VLKZOEOYAKHREP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 9
- 150000002887 oleanolic acids Chemical class 0.000 description 9
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 9
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 8
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 8
- 201000004681 Psoriasis Diseases 0.000 description 7
- 235000015872 dietary supplement Nutrition 0.000 description 7
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 7
- 150000003675 ursolic acids Chemical class 0.000 description 7
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N Propylene glycol Chemical compound CC(O)CO DNIAPMSPPWPWGF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 244000114218 Salvia fruticosa Species 0.000 description 6
- 235000006293 Salvia fruticosa Nutrition 0.000 description 6
- 235000002912 Salvia officinalis Nutrition 0.000 description 6
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 6
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 6
- 239000002674 ointment Substances 0.000 description 6
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 6
- RPACBEVZENYWOL-XFULWGLBSA-M sodium;(2r)-2-[6-(4-chlorophenoxy)hexyl]oxirane-2-carboxylate Chemical compound [Na+].C=1C=C(Cl)C=CC=1OCCCCCC[C@]1(C(=O)[O-])CO1 RPACBEVZENYWOL-XFULWGLBSA-M 0.000 description 6
- 210000001519 tissue Anatomy 0.000 description 6
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 6
- 235000017276 Salvia Nutrition 0.000 description 5
- 244000258095 Salvia lavandulifolia Species 0.000 description 5
- 235000001500 Salvia lavandulifolia Nutrition 0.000 description 5
- 201000011510 cancer Diseases 0.000 description 5
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 5
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 5
- HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N Chloroform Chemical compound ClC(Cl)Cl HEDRZPFGACZZDS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- QGJZLNKBHJESQX-FZFNOLFKSA-N betulinic acid Chemical class C1C[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]2CC[C@@]3(C)[C@]4(C)CC[C@@]5(C(O)=O)CC[C@@H](C(=C)C)[C@@H]5[C@H]4CC[C@@H]3[C@]21C QGJZLNKBHJESQX-FZFNOLFKSA-N 0.000 description 4
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 4
- 239000012043 crude product Substances 0.000 description 4
- 235000011187 glycerol Nutrition 0.000 description 4
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 4
- 208000006454 hepatitis Diseases 0.000 description 4
- BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N hexadecan-1-ol Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCCO BXWNKGSJHAJOGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L magnesium stearate Substances [Mg+2].CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC([O-])=O HQKMJHAJHXVSDF-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 4
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 4
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 4
- 239000007921 spray Substances 0.000 description 4
- CXBDYQVECUFKRK-UHFFFAOYSA-N 1-methoxybutane Chemical compound CCCCOC CXBDYQVECUFKRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QGJZLNKBHJESQX-UHFFFAOYSA-N 3-Epi-Betulin-Saeure Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C QGJZLNKBHJESQX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CLOUCVRNYSHRCF-UHFFFAOYSA-N 3beta-Hydroxy-20(29)-Lupen-3,27-oic acid Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C(O)=O)CCC5(C)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C CLOUCVRNYSHRCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 235000004507 Abies alba Nutrition 0.000 description 3
- 244000101408 Abies amabilis Species 0.000 description 3
- 235000014081 Abies amabilis Nutrition 0.000 description 3
- 235000017894 Abies grandis Nutrition 0.000 description 3
- 229910002012 Aerosil® Inorganic materials 0.000 description 3
- DIZWSDNSTNAYHK-XGWVBXMLSA-N Betulinic acid Natural products CC(=C)[C@@H]1C[C@H]([C@H]2CC[C@]3(C)[C@H](CC[C@@H]4[C@@]5(C)CC[C@H](O)C(C)(C)[C@@H]5CC[C@@]34C)[C@@H]12)C(=O)O DIZWSDNSTNAYHK-XGWVBXMLSA-N 0.000 description 3
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 201000009053 Neurodermatitis Diseases 0.000 description 3
- 240000007817 Olea europaea Species 0.000 description 3
- 244000182022 Salvia sclarea Species 0.000 description 3
- 235000002911 Salvia sclarea Nutrition 0.000 description 3
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 230000000767 anti-ulcer Effects 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 description 3
- PZXJOHSZQAEJFE-UHFFFAOYSA-N dihydrobetulinic acid Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C(O)=O)CCC(C(C)C)C5C4CCC3C21C PZXJOHSZQAEJFE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229940088679 drug related substance Drugs 0.000 description 3
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 3
- 230000006872 improvement Effects 0.000 description 3
- 229960001021 lactose monohydrate Drugs 0.000 description 3
- 235000019359 magnesium stearate Nutrition 0.000 description 3
- 239000004292 methyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 3
- 235000010270 methyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 3
- MQYXUWHLBZFQQO-UHFFFAOYSA-N nepehinol Natural products C1CC(O)C(C)(C)C2CCC3(C)C4(C)CCC5(C)CCC(C(=C)C)C5C4CCC3C21C MQYXUWHLBZFQQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 230000002980 postoperative effect Effects 0.000 description 3
- 239000003755 preservative agent Substances 0.000 description 3
- 239000004405 propyl p-hydroxybenzoate Substances 0.000 description 3
- 235000010232 propyl p-hydroxybenzoate Nutrition 0.000 description 3
- 238000011158 quantitative evaluation Methods 0.000 description 3
- 239000001691 salvia sclarea Substances 0.000 description 3
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 3
- 239000000454 talc Substances 0.000 description 3
- 229910052623 talc Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 3
- 150000003626 triacylglycerols Chemical class 0.000 description 3
- 238000002525 ultrasonication Methods 0.000 description 3
- NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N Acrylic acid Chemical compound OC(=O)C=C NIXOWILDQLNWCW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010008909 Chronic Hepatitis Diseases 0.000 description 2
- 208000002260 Keloid Diseases 0.000 description 2
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 2
- VQQRVBOFQXPEAN-UHFFFAOYSA-N Picrinin Natural products C12=CC=CC=C2NC2(O3)C4CC5C(C(=O)OC)C12CC3N4CC5C=C VQQRVBOFQXPEAN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000025747 Rheumatic disease Diseases 0.000 description 2
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 208000025865 Ulcer Diseases 0.000 description 2
- 206010047073 Vascular fragility Diseases 0.000 description 2
- 206010052428 Wound Diseases 0.000 description 2
- 208000027418 Wounds and injury Diseases 0.000 description 2
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 2
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 2
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 2
- 230000001315 anti-hyperlipaemic effect Effects 0.000 description 2
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 2
- 239000002246 antineoplastic agent Substances 0.000 description 2
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 2
- 208000035269 cancer or benign tumor Diseases 0.000 description 2
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 2
- 229960000541 cetyl alcohol Drugs 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 2
- 208000019425 cirrhosis of liver Diseases 0.000 description 2
- BDXYPHKGNUGUFG-WAYFEFRKSA-N deacetyl-deformopicraline Natural products COC(=O)[C@@H]1[C@H]2C[C@@H]3N(CC2=CC)[C@@H]4C[C@]15c6ccccc6N[C@]35O4 BDXYPHKGNUGUFG-WAYFEFRKSA-N 0.000 description 2
- 238000013461 design Methods 0.000 description 2
- 238000002845 discoloration Methods 0.000 description 2
- 238000004945 emulsification Methods 0.000 description 2
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 2
- 230000002124 endocrine Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 238000009472 formulation Methods 0.000 description 2
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 2
- 238000000265 homogenisation Methods 0.000 description 2
- 210000000987 immune system Anatomy 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 2
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 2
- 210000001117 keloid Anatomy 0.000 description 2
- 150000002632 lipids Chemical class 0.000 description 2
- 230000003211 malignant effect Effects 0.000 description 2
- LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N methylparaben Chemical compound COC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 LXCFILQKKLGQFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001728 nano-filtration Methods 0.000 description 2
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 2
- 239000004006 olive oil Substances 0.000 description 2
- 235000008390 olive oil Nutrition 0.000 description 2
- 239000008194 pharmaceutical composition Substances 0.000 description 2
- 239000000546 pharmaceutical excipient Substances 0.000 description 2
- 235000010482 polyoxyethylene sorbitan monooleate Nutrition 0.000 description 2
- 229920000053 polysorbate 80 Polymers 0.000 description 2
- 229920006316 polyvinylpyrrolidine Polymers 0.000 description 2
- QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N propylparaben Chemical compound CCCOC(=O)C1=CC=C(O)C=C1 QELSKZZBTMNZEB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001959 radiotherapy Methods 0.000 description 2
- 239000013049 sediment Substances 0.000 description 2
- 235000019333 sodium laurylsulphate Nutrition 0.000 description 2
- 229940079832 sodium starch glycolate Drugs 0.000 description 2
- 229920003109 sodium starch glycolate Polymers 0.000 description 2
- 239000008109 sodium starch glycolate Substances 0.000 description 2
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 2
- 150000008163 sugars Chemical class 0.000 description 2
- 241000218642 Abies Species 0.000 description 1
- WSVLPVUVIUVCRA-KPKNDVKVSA-N Alpha-lactose monohydrate Chemical compound O.O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O WSVLPVUVIUVCRA-KPKNDVKVSA-N 0.000 description 1
- VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N Ammonium hydroxide Chemical compound [NH4+].[OH-] VHUUQVKOLVNVRT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010006187 Breast cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000026310 Breast neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 241000459479 Capsula Species 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 241000218631 Coniferophyta Species 0.000 description 1
- 229920002261 Corn starch Polymers 0.000 description 1
- 201000004624 Dermatitis Diseases 0.000 description 1
- 244000061508 Eriobotrya japonica Species 0.000 description 1
- 201000008808 Fibrosarcoma Diseases 0.000 description 1
- 102000020897 Formins Human genes 0.000 description 1
- 108091022623 Formins Proteins 0.000 description 1
- 108010002350 Interleukin-2 Proteins 0.000 description 1
- 239000004166 Lanolin Substances 0.000 description 1
- 241000830535 Ligustrum lucidum Species 0.000 description 1
- 241000629412 Ligustrum robustum Species 0.000 description 1
- 229920000168 Microcrystalline cellulose Polymers 0.000 description 1
- 235000002725 Olea europaea Nutrition 0.000 description 1
- 240000002834 Paulownia tomentosa Species 0.000 description 1
- 108091005804 Peptidases Proteins 0.000 description 1
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N Phosphoric acid Chemical compound OP(O)(O)=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002202 Polyethylene glycol Substances 0.000 description 1
- 239000004365 Protease Substances 0.000 description 1
- 102100037486 Reverse transcriptase/ribonuclease H Human genes 0.000 description 1
- 241001529742 Rosmarinus Species 0.000 description 1
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 1
- DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M Sodium laurylsulphate Chemical compound [Na+].CCCCCCCCCCCCOS([O-])(=O)=O DBMJMQXJHONAFJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 239000004141 Sodium laurylsulphate Substances 0.000 description 1
- 238000000944 Soxhlet extraction Methods 0.000 description 1
- 102000001742 Tumor Suppressor Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010040002 Tumor Suppressor Proteins Proteins 0.000 description 1
- 241000736767 Vaccinium Species 0.000 description 1
- 206010046996 Varicose vein Diseases 0.000 description 1
- 240000000038 Ziziphus mauritiana Species 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000012675 alcoholic extract Substances 0.000 description 1
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 1
- 235000011114 ammonium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 230000036436 anti-hiv Effects 0.000 description 1
- 230000003276 anti-hypertensive effect Effects 0.000 description 1
- 230000002622 anti-tumorigenesis Effects 0.000 description 1
- 230000000840 anti-viral effect Effects 0.000 description 1
- 229940034982 antineoplastic agent Drugs 0.000 description 1
- 125000003118 aryl group Chemical group 0.000 description 1
- RTEXIPZMMDUXMR-UHFFFAOYSA-N benzene;ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O.C1=CC=CC=C1 RTEXIPZMMDUXMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MDHYEMXUFSJLGV-UHFFFAOYSA-N beta-phenethyl acetate Natural products CC(=O)OCCC1=CC=CC=C1 MDHYEMXUFSJLGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004061 bleaching Methods 0.000 description 1
- 210000000601 blood cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000000988 bone and bone Anatomy 0.000 description 1
- 210000000481 breast Anatomy 0.000 description 1
- 239000007963 capsule composition Substances 0.000 description 1
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 1
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 1
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000010261 cell growth Effects 0.000 description 1
- 239000003245 coal Substances 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 239000008120 corn starch Substances 0.000 description 1
- 239000000287 crude extract Substances 0.000 description 1
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 1
- 230000003013 cytotoxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000135 cytotoxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000004069 differentiation Effects 0.000 description 1
- 238000007865 diluting Methods 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 230000004064 dysfunction Effects 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 210000002919 epithelial cell Anatomy 0.000 description 1
- 210000003743 erythrocyte Anatomy 0.000 description 1
- 239000012259 ether extract Substances 0.000 description 1
- SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N ethoxyethane;ethyl acetate Chemical compound CCOCC.CCOC(C)=O SRCZQMGIVIYBBJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000003889 eye drop Substances 0.000 description 1
- 229940012356 eye drops Drugs 0.000 description 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 description 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 description 1
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 1
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 1
- 210000001035 gastrointestinal tract Anatomy 0.000 description 1
- 239000007903 gelatin capsule Substances 0.000 description 1
- 125000005456 glyceride group Chemical group 0.000 description 1
- 238000011194 good manufacturing practice Methods 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 230000002489 hematologic effect Effects 0.000 description 1
- LHVVWWADJUJFEH-HKNOZQPISA-N hexadecanoic acid (9Z,12Z)-octadeca-9,12-dienoic acid octadecanoic acid (9Z,12Z,15Z)-octadeca-9,12,15-trienoic acid (Z)-octadec-9-enoic acid Chemical compound CCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCCCCCCCCCCCC(O)=O.CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(O)=O.CCCCC\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O.CC\C=C/C\C=C/C\C=C/CCCCCCCC(O)=O LHVVWWADJUJFEH-HKNOZQPISA-N 0.000 description 1
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 1
- 229960002773 hyaluronidase Drugs 0.000 description 1
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 1
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 1
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 1
- 230000002519 immonomodulatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000009169 immunotherapy Methods 0.000 description 1
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 1
- 230000004968 inflammatory condition Effects 0.000 description 1
- 238000001802 infusion Methods 0.000 description 1
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 1
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 1
- 150000007529 inorganic bases Chemical class 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 210000000936 intestine Anatomy 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 229940039717 lanolin Drugs 0.000 description 1
- 235000019388 lanolin Nutrition 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000006210 lotion Substances 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000002879 macerating effect Effects 0.000 description 1
- 230000036210 malignancy Effects 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 201000001441 melanoma Diseases 0.000 description 1
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 1
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 1
- 229960002216 methylparaben Drugs 0.000 description 1
- 229940016286 microcrystalline cellulose Drugs 0.000 description 1
- 235000019813 microcrystalline cellulose Nutrition 0.000 description 1
- 239000008108 microcrystalline cellulose Substances 0.000 description 1
- 238000000874 microwave-assisted extraction Methods 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 239000003921 oil Substances 0.000 description 1
- 235000019198 oils Nutrition 0.000 description 1
- 150000007524 organic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000007530 organic bases Chemical class 0.000 description 1
- 230000020477 pH reduction Effects 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 235000019271 petrolatum Nutrition 0.000 description 1
- 239000000825 pharmaceutical preparation Substances 0.000 description 1
- 229940127557 pharmaceutical product Drugs 0.000 description 1
- 235000011007 phosphoric acid Nutrition 0.000 description 1
- 238000013379 physicochemical characterization Methods 0.000 description 1
- 229920001223 polyethylene glycol Polymers 0.000 description 1
- 229940068918 polyethylene glycol 400 Drugs 0.000 description 1
- 230000003389 potentiating effect Effects 0.000 description 1
- 230000002335 preservative effect Effects 0.000 description 1
- 238000004393 prognosis Methods 0.000 description 1
- OVARTBFNCCXQKS-UHFFFAOYSA-N propan-2-one;hydrate Chemical compound O.CC(C)=O OVARTBFNCCXQKS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000000069 prophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 238000011321 prophylaxis Methods 0.000 description 1
- 238000004445 quantitative analysis Methods 0.000 description 1
- 238000011084 recovery Methods 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 1
- 238000011160 research Methods 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 230000000552 rheumatic effect Effects 0.000 description 1
- 201000003068 rheumatic fever Diseases 0.000 description 1
- 230000000630 rising effect Effects 0.000 description 1
- RXHIKAIVEMAPRU-JRIGQVHBSA-N sequiterpene Natural products C1=C(C)[C@@H](OC(C)=O)[C@H](O)[C@@]2(O)[C@H](C)CC[C@@H](C(C)=C)[C@H]21 RXHIKAIVEMAPRU-JRIGQVHBSA-N 0.000 description 1
- 239000000741 silica gel Substances 0.000 description 1
- 229910002027 silica gel Inorganic materials 0.000 description 1
- 230000005995 skin dysfunction Effects 0.000 description 1
- 229940080313 sodium starch Drugs 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000002269 spontaneous effect Effects 0.000 description 1
- 206010041823 squamous cell carcinoma Diseases 0.000 description 1
- 210000002784 stomach Anatomy 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 1
- 239000007916 tablet composition Substances 0.000 description 1
- 235000012222 talc Nutrition 0.000 description 1
- 150000003505 terpenes Chemical class 0.000 description 1
- 235000007586 terpenes Nutrition 0.000 description 1
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000009466 transformation Effects 0.000 description 1
- 238000000844 transformation Methods 0.000 description 1
- 150000003648 triterpenes Chemical class 0.000 description 1
- 230000001562 ulcerogenic effect Effects 0.000 description 1
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 description 1
- 238000002604 ultrasonography Methods 0.000 description 1
- 235000021122 unsaturated fatty acids Nutrition 0.000 description 1
- 150000004670 unsaturated fatty acids Chemical class 0.000 description 1
- 208000027185 varicose disease Diseases 0.000 description 1
- 229940099259 vaseline Drugs 0.000 description 1
- 239000003871 white petrolatum Substances 0.000 description 1
Landscapes
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Steroid Compounds (AREA)
Abstract
Invenţia se referă la un complex bioactiv cu acizi triterpenici, utilizat drept componentă bioactivă farmacologică, în terapia umană sau veterinară, precum şi la un procedeu pentru obţinerea acestuia. Complexul conform invenţiei este pe bază de, prezentând structură cristalină, solubilitate îmbunătăţită şi un conţinut de 100% acizi, format din minimum 80% acid ursolic şi maximum 20% amestec constituit din unul sau mai mulţi dintre acizii: oleanoic, hidroxiursolic, hidroxioleanoilic, betulinic şi dehidrobetulinic, în stare liberă sau ca săruri de Na, K sau NH. Procedeul conform invenţiei constă din extragerea, prin macerare dinamică, a plantei Salvia species herba uscată şi pulverizată, cu 5...15% apă structurată cu 85...95% acetonă sau 85...95% alcool etilic de 95°, timp de 8...24 h, la o temperatură de 15...80°C, urmată de prelucrarea, purificarea şi concentrarea extractului şi, eventual, transformarea amestecului de acizi din extract în săruri de Na, K sau NH.
Description
Prezenta invenție se referă la un complex bioactiv de acizi triterpenici, ca atare sau sub formă de săruri de Na, K sau NH4, la procedeul de obținere din planta Salvia species, și la produse medicamentoase pe baza acestuia, aplicabile în domenii terapeutice cu largă incidență socială, atât pentru uz uman cât și veterinar.
Complexul bioactiv realizat conform invenției, prezintă un continui de acizi triterpenici de 100%, fiind caracterizat fizico-chimic si farmacotoxicologic. Evaluarea activității specifice și a siguranței la administrare permite utilizarea acestuia drept componentă bioactivă de bază a unor produse medicamentoase de uz intern sau extern, în terapeutica umană și veterinară.
în baza studiilor farmacologice recent publicate, referitoare la acizii triterpenici (în special ursolic și oleanolic) este cunoscut că aceștia, deși izomeri, prezintă unele diferențe structurale ce determină o diferențiere a efectelor farmacologice care, deși sunt în mare parte similare, nu sunt identice. De aceea, în special în cazul preconizării utilizării în terapeutică a unui amestec de acizi triterpenici este foarte important și strict necesar să se cunoască cu precizie proporțiile acestora, deoarece o variabilitate în conținut a amestecului poate determina o variabilitate a activității farmacologice și a biodisponibilitatii produsului [1], [2], [3], [4], [5].
De asemenea, studiile farmacologice realizate pe diferite tipuri de substanțe medicamentoase au aratat relația directa dintre proprietățile fizico-chimice ale principiilor active si activitatea terapeutica, dependenta de viteza de eliberare a substanței active din forma farmaceutica, intensitatea si durata efectelor. Proprietățile fizico-chimice ale substanțelor influențează solubilitatea lor in mediile biologice. Cunoașterea acestui fapt permite prognosticarea comportamentului substanțelor medicamentoase din punct de vedere al biodisponibilitatii, in diferite regiuni ale tractului gastrointestinal. Informațiile oferite de studiile de biodisponibilitate pot determina modificarea formulării produsului finit si a procesului de fabricație a acestuia precum si extinderea indicațiilor terapeutice.
Un factor principal susceptibil de a modifica biodisponibilitatea medicamentului este designul principiului activ reprezentat de forma de cristalizare. Prin modificarea etapelor tehnologice de realizare a substanțelor de interes, structura cristalina a acestora poate fi obtinuta directionat pentru imbunatatirea biodisponibilitatii lor.
JIJL DE STAT PENTRU INVENȚII Șl MĂRCI Cerere de brevet de invenție
C<-2 0 1 0 - 0 0 5 7 8 -0 5 -07- 20W
Analizând procedeele brevetate referitoare la obținerea acizilor triterpenici în stare pură sau în amestec, se constată că acestea sunt prezentate, în majoritate, la nivel de laborator și nu prezintă caracterizarea fizico-chimica complexa pentru produsul obținut (metode analitice de determinare a purității, a structurii cristaline sau amorfa, studii de difracție, IR, etc) Abia în anii recenți s-au publicat brevete de invenție privind obținerea unor bioproduse pe bază de acid ursolic și oleanolic în amestec, sub formă de concentrate de puritate scăzută (30...65%), evaluate analitic prin HPLC sau GC și destinate utilizării sub formă de suplimente nutriționale.
Evaluarea de ansamblu a brevetelor de invenție și a cererilor de brevete recente, care revendică procedee de obținere a acizilor triterpenici (în special ursolic și oleanolic), în stare pură sau în amestec, ca atare sau sub formă de săruri, cu baze anorganice sau organice, conduce la clasificarea lor în funcție de următoarele criterii:
a) sursele de materii prime vegetale:
- frunze și herba, recoltate de la plante din flora spontană sau din culturi, a căror prelucrare conduce la obținerea unor produse purificate, cu aplicații terapeutice;
- deșeuri fructifere, rezultate ca deșeu în industria alimentară, prin prelucrarea cărora se obțin concentrate cu un conținut scăzut de acizi triterpenici (30...65%). utilizabile pentru obținerea unor suplimente nutriționale.
b) produsul finit care constituie obiectivul principal al procedeului brevetat:
- acizi triterpenici în stare pură, ca atare sau sub formă de săruri;
- amestec de acizi triterpenici, trigliceride, zaharuri.etc. obținut cu precădere din deșeuri fructifere.
în continuare sunt prezentate brevetele de invenție și cererile de brevete recente, care prezintă procedee de obținere a acizilor triterpenici (în special ursolic și/sau oleanolic):
- Brevetul de invenție GR 10011738 intitulat „Metodă de separare a acizilor ursolic și oleanolic din frunzele de O/ea europaea, este un procedeu la nivel de laborator, care preconizează extracția frunzelor uscate de O/ea europaea cu alcool etilic 95c, la temperatură ambiantă, timp de 15 zile, precipitarea acizilor triterpenici din extractul alcoolic prin diluarea acestuia cu apă, separarea și uscarea sedimentului, urmat de purificarea sa prin extracții succesive cu eter de petrol. Se prezintă o metodă de analiză prin cromatografie în strat subțire, cu ajutorul căreia se evaluează calitativ sedimentul purificat cu eter de petrol, ca
fiind constituit din acid ursolic, iar extractele de eter de petrol, concentr conțin acid oleanolic.
Λ-2 Ο 1 Ο - Ο 0 5 7 8 - Ο 5 -07- 2010
Nu se menționează evaluarea cantitativă a acizilor ursolic și oleanolic astfel separați, pentru a se putea aprecia puritatea substanțelor și eficiența procedeului de separare.
- Brevetul de invenție US 6740778 intitulat „Metodă de preparare a acidului oleanolic și/sau acidului măslinie”, prezintă o metodă de preparare a acestor acizi ca atare sau sub formă de săruri fiziologic acceptabile, utilizând ca materie primă planta Olea europaea de la care se prelucrează materialul rămas după extracția uleiului de măsline. Ca solvenți de extracție se utilizează solvenți organici hidrofili (alcooli, acetonă) sau lipofili (hexan, chloroform, acetat de etil), iar extractele rezultate conținând acidul oleanolic sau măslinie se purifică prin extracție lichidlichid sau cromatografie pe coloană de silicagel.
Se menționează ca acizii triterpenici astfel obținuți prezintă o puritate de
85...100%. iar sărurile respective prezintă o puritate de minim 90%.
Deși metoda conduce la obținerea unor substanțe de puritate avansata, prezintă dezavantajul unor fluxuri tehnologice greu de aplicat la scara industrială, atât prin metodele de purificare preconizate, cât și prin multitudinea solvenților organici utilizați.
- Brevetul de invenție SU 18186346 intitulat „Metodă de obținere a acidului ursolic”, prezintă un procedeu de obținere a acidului ursolic din deșeurile fructifere de Oxycoccus quadripetelus G, prin extracție cu alcool izopropilic, la temperatura ambiantă, timp de 24 ore, concentrarea extractului alcoolic sub vid la reziduu, care este purificat prin extracții cu eter de petrol și transformări succesive în sare de Na și acid ursolic purificat.
Se menționează o creștere a randamentului de prelucrare și a cantității de substanță obținută, fără a se specifica și puritatea sa.
- Brevetul de invenție RU 2108107, intitulat: „Metodă pentru prepararea unui total biologic activ de săruri ale acizilor triterpenici”, prezintă un procedeu de obținere a acizilor triterpenici din specii de brad alb (Abies sp.), sub formă unui total de săruri de Na ale acizilor triterpenici, care prevede extracția materiei prime vegetale cu amestec de eter de petrol - acetat de etil, concentrarea soluțiilor extractive la reziduu, care este dizolvat în acetat de etil, iar soluția organică este alcalinizată cu soluție 2% NaOH la pH=9, după care extractul apos alcalin, cu pH=7...8 este concentrat sub vid, până la obținerea unui extract sicc sub formă de pulbere, care constituie totalul de acizi triterpenici, ca sare de Nâ<
conținut de 38...45%.
(7^--201 0-00578-0 5 -07- 2010
Nu se specifică structura chimică și denumirea acizilor triterpenici obținuți conform procedeului brevetat dar, din datele de literatură, este cunoscut că speciile de conifere conțin compuși triterpenici cu alte structuri chimice decât cele ale acizilor ursolic și oleanolic.
- Brevetul de invenție RU 2108803 intitulat: „Metodă de preparare a unui total de acizi triterpenici biologic activ” prezintă un procedeu de obținere a unui total de acizi triterpenici din acele de brad alb, prin extracție cu eter metil-butilic, tratarea extractului organic cu agent alcalin (soluție apoasă 2% NaOH), separarea soluției apoase alcaline, acidifierea sa cu soluție HCI 10%, la pH=2 și izolarea produsului finit din soluția acidă prin extracție cu eter metil-butilic.
Ca și în brevetul precedent, nu se specifică denumirea și structura chimică a acizilor triterpenici astfel izolați, menționându-se numai cantitatea de substanță rezultată, fără a se indica și puritatea sa.
- Brevetul de invenție RU 2151139 intitulat: „Metodă de obținere a unui total de acizi triterpenici biologic activ” prezintă un procedeu de extracție a acizilor triterpenici din ace proaspete sau scoarță de brad alb, tratate în prealabil cu abur, apoi extrase cu solvenți organici (eter metil-butilic; amestec: benzen-acetat de etil; amestec: eter de petrol-acetat de etil), urmat de separarea totalului de acizi triterpenici prin tratarea succesivă a extractului organic cu soluții apoase bazice și acide.
Se menționează cantitatea de produs obținut, fără a se specifica denumirea chimică a acizilor triterpenici și puritatea produsului.
în plus, toate cele 3 brevete din Federația Rusă, prezentate, deși se referă la obținerea unui total de acizi triterpenici biologic activ, nu prezintă nici un fel de teste farmacologice care să evidențieze activitatea biologică a produselor obținute în baza cărora să se poată evalua posibilitățile de aplicare în terapeutică.
Un grup de brevete aparținând firmei UNILEVER prezintă diferite procedee de preparare a unor concentrate din deșeuri fructifere, care conțin un amestec de acizi ursolic, oleanolic și alte componente, fiind destinate utilizării ca suplimente nutriționale.
Brevetul de invenție EP 1161879] și cererea de US 2002037882], prezintă 2 procedee de laborator și pilot - care extracția cojilor de mere uscate cu acetonă la reflux (5O...58°C),
brevet prevăd
.‘BIOTEHNOS.
S.a.
ο 1 Ο - Ο Ο 5 7 Β - Ο 5 -07- 2010 soluției extractive la reziduu și cristalizarea acestuia din amestec acetonă-apă 50/50 până la 95/5 (procedeul de laborator) sau din hexan (procedeul pilot).
Se obține un amestec de acid ursolic și oleanolic în proporții variabile, care mai conține și alte componente polare și apolare specifice cojilor de mere. Se prezintă și un procedeu de condiționare a amestecului triterpenic prin asociere cu mono-di-, trigliceride și cu uleiuri ce conțin acizi grași nesaturați, în scopul utilizării ca suplimente nutriționale.
- Brevetul de invenție EP 1250852 și cererea de brevet US 2003049365 prezintă un procedeu de laborator privind obținerea unor concentrate de acizi triterpenici (ursolic și oleanolic), ca atare sau sub formă de săruri, care prevede prelucrarea cojilor de mere în prealabil tratate cu soluții apoase acide (H3PO4) la pH=2 și cu soluții apoase alcaline (Na2CC>3) la pH= 8-12, urmat de extracția cu acetonă la Soxhlet și concentrarea soluției extractive la reziduu sicc, care constituie concentratul de acid ursolic și oleanolic cu un conținut de 30...65% în raportul 4:6, alături de alte componente: zaharuri, gliceride și alți compuși triterpenici.
Se menționează utilizarea concentratelor astfel obținute la prepararea unor suplimente alimentare sub formă de capsule sau alte forme de condiționare.
- Brevetul de invenție CN 1358733 prezintă un procedeu de extracție a acidului ursolic din frunzele plantei Ligustrum lucidum, care include următoarele faze: extracția frunzelor în contracurent cu alcool etilic la reflux, concentrarea extractului la reziduu, care se spală cu apă, se usucă iar extractul uscat se dizolvă în alcool etilic și se decolorează, apoi se concentrează și se diluează cu apă, rezultând un precipitat; se reglează pH-ul suspensiei la 2...2,5, după care precipitatul se separă, se spală cu apă la pH neutru, și se usucă sub vid.
Se menționează obținerea unui extract brut, având drept component principal acidul ursolic, fără a se indica evaluarea cantitativă și puritatea produsului, precum și ceilalți compuși existenți alături de acidul ursolic.
- CN1508149, prezintă o metoda de extracție a totalului de acizi triterpenici din llex kudingcha cu alcool etilic ca solvent printr-un proces de distilare la reflux sau extracție cu microunde, urmata de o serie de etape de separare prin ultrafiltrare, nanofiltrare, cromatografie cu rășini macroporoase si purificare prin decolorare cu cărbune activ si separare utilizând eter sau un acid organic, obținând in/inal un total de acizi triterpenici de concentrație > 95%.
(λ- 2 0 1 0-0057Β-0 5 -07- 2010
- CN1453289, prezintă un proces de extracție si separare a acidului ursolic din frunzele plantei paulownia prin extracția la reflux cu metanol, filtrare, precipitare, spalare cu acetona si recristalizare de 3 ori cu etanol sau metanol anhidru.
- W02005075614(A1)-prezinta extracția frunzelor de măsline cu hexan, alcool etilic, urmata de operațiile de concentrare, separare pe o coloana de extracție in contracurent bioxid de carbon supercritic.
- CN1557831-prezintă un proces de extracție a acidului ursolic din rozmarin printro extracție Soxhlet, concentrare, dizolvare in etanol, decolorare cu cărbune, cristalizare, filtrare după 3-6 ore obținând cristale de acid ursolic de puritate aprox.90%.
- CN101318985- relateaza o metoda de obținere a acidului ursolic din frunzele plantei loquat cu alcool etilic 95% ca solvent prin ultrasonare, urmata de filtrare prin micromembrana de nanofiltrare, recuperarea etanolului si obținerea acidului ursolic prin amestecare cu miere, sub forma unei creme cu un conținut de acid ursolic >75%.
- CN101538271- prezintă o metoda de extracție simultana a picrininei si a acidului ursolic printr-o extracție din soluție apoasa acida a frunzelor plantei dita supuse ultrasunetelor, extractul obtinut se volatilizează, concentratul se alcalinizeaza si se supune extracției cu cloroform din care prin separare se obține picrinina si acidul ursolic.
- CN101537029- relateaza o metoda de prepararea extractului din pudra de coarne ce se supune hidrolizei cu drojdie; fermentația dureaza 4-8 zile, extractul obtinut se supune ultrasonarii, filtrării si pudra de coarne astfel pregătită se supune extracției cu etanol 75-95% prin ultrasonare, filtrare, concentrare, obtinanad un solid sub forma de solzi ce conțin acid ursolic.
- RO120950 B1- prezintă un procedeu de obținere a unui complex bioactiv de acizi triterpenici de minm 90% , pornind de la materia prima vegetala printr-o serie de etape de extracție cu un amestec de alcool etilic: apa structurata, urmata de concentrare, filtrare, purificare cu cărbune activ, concentrare, precipitare, spalare cu apa distilata, pana la pH neutru, rezultând o pulbere ce reprezintă substanța activa utilizabila la condiționarea unor medicamente de uz intern.
Din datele prezentate mai sus, cu privire la stadiul tehnicii în domeniul obținerii acizilor triterpenici utilizați ca substanța medicamentoasa, prin extracția diferitelor surse de materii prime vegetale, rezultă următoarele
CV2Ο 1 0-00570-Ο 5 -07- 2010
- majoritatea procedeelor referitoare la obținerea acizilor ursolic și oleanolic în stare pură, nu menționează puritatea substanței și evaluarea sa prin metode analitice cantitative (HPLC, GC și altele).
- procedeele care revendică obținerea din deșeuri fructifere a unor concentrate de acizi triterpenici, pe baza de amestec de acid ursolic și oleanolic, deși prezintă evaluarea cantitativă a acestora prin HPLC, prezintă dezavantajul obținerii unor produse cu un conținut scăzut (30...65%), care nu pot fi aplicabile în terapeutică, condiționate ca medicamente, ci numai ca suplimente nutriționale;
- în plus, este cunoscut că deșeurile fructifere prezintă un conținut scăzut în acizi triterpenici (< 0,5%) ceea ce influențează negativ rentabilitatea tehnologiilor la nivel industrial comparativ cu tehnologiile de prelucrare a materiilor prime vegetale uzuale (plante medicinale și aromatice);
- conform procedeului descris din brevetul R0120950 B1, etapa finala de precipitare si spalare cu apa determina obținerea unei substanțe cu structura amorfa, starea amorfa fiind termodinamic instabila, influențează stabilitatea structurii substanței medicamentoase;
- nici unul din procedeele prezentate nu prezintă date tehnologice similare cu procedeul care face obiectul prezentei invenții și nici date farmacologice referitoare la activitatea biologică specifică a amestecului de acizi triterpenici revendicat, în vederea evaluării domeniilor de aplicabilitate terapeutică;
- nu exista brevete si date in literatura de specialitate legate de corelația dintre procedeul de obținere, proprietățile fizico-chimice, si biodisponibilitatea acizilor triterpenici - acid ursolic/acid oleanolic, ca substanța medicamentoasa;
Analiza stadiului tehnicii în domeniul farmacologiei acizilor triterpenici evidențiază că cea mai mare parte a efectelor lor farmacologice a fost demonstrată prin cercetări științifice experimentale ale căror rezultate au fost publicate sub formă de articole sau au făcut obiectul unor cereri de brevet și brevete de invenție.
Astfel, J. Liu prezintă următoarele efecte farmacologice evidențiate la acizii oleanolic și ursolic: antiinflamator, hepatoprotector, antihiperlipidemic, antiulceros, hipoglicemiant, antitumoral, anti HIV, antirriicrobian.
Somova L.l. și colab. evidențiază activitatea cardiovasculară, antihipertensivă, antihiperlipidemică, antiaterosclerotică și antioxidantă a acizilor oleanolic izolați din Olea europeea.
Iar Kuttan G. și colab. menționeză activitatea imunomodulatoare ursolic, oleanolic și glycirrhizic. >
și ursolic acizifcjfcî-^
BIOTEHNOS
ΛΑ·
A·.-,
tv-2 O 1 O - O O 5 7 8 - O 5 -07- 2010
Brevetul de invenție US 4752606 prezintă o compoziție farmaceutică pe bază de acid oleanolic, ca atare sau ca săruri fiziologic acceptabile, condiționată ca tablete și utilizabilă pentru tratarea profilactică sau curativă a diferitelor disfuncții ulcerogene ale stomacului sau intestinelor.
Cererea de brevet de invenție US 10/488682] publicată cu nr.US 2004/0235785 A1 prezintă o compoziție farmaceutică utilizabilă ca supliment dietetic în tratamentul sau prevenirea cancerului cu rol de potențator al agenților antitumorali, utilizați în imunoterapie și oncologie. Conform invenției compoziția are la bază compuși din clasa terpenelor (mono-, di-, tri-, sequiterpene).
Cererea de brevet de invenție JP 05-211065] publicată sub nr.07-048260/1995 prezintă un bioprodus utilizabil ca agent de creștere a celulelor sângelui (eritrocite) pe bază de acid ursolic, administrat în doze zilnice de 1-1000 mg și având un efect de prelungire a vieții în tratamentul prin radioterapie a diferitelor forme de cancer.
Cererile de brevet de invenție EP 1495754 A2 publicată la 12.01.2005 și EP 0943620 A2 publicată pe 22.09.1999, prezintă o metodă și o compoziție pe bază de derivați ai acidului betulinic aplicabilă pentru prevenirea sau inhibarea creșterii tumorilor maligne. Se prezintă o metodă de obținere a acidului betulinic din scoarța tulpinilor plantei Ziziphus mauritiana (fam. Rhamnacaee), studii „in vitro asupra citotoxicității acidului betulinic față de diferite linii celulare canceroase (melanom, fibrosarcom, cancer de sân și de colon, carcinom epidermoid) și rezultatele experimentelor „in vivo” la șoarece, care confirmă calitatea acidului betulinic de agent antineoplazic.
Brevetul de invenție US 5985924 prezintă un nou agent supresor pentru metastaze, cu un grad scăzut de toxicitate, pe bază de acid ursolic, ca atare sau sub formă de săruri, care poate fi administrat pacienților per os sau injectabil, în tratamentul post-operator al diferitelor forme de cancer.
Cererea de brevet de invenție JP 63166195 publicată cu nr.02017121 A/1990 prezintă un medicament de uz extern, utilizabil pentru prevenirea cancerizării celulelor epiteliale ale pielii, pe bază de acid ursolic sau oleanolic, ca atare sau în amestec.
Cererea de brevet de invenție JP 09-199323 publicată cu nr.JP 11-029467/1999 prezintă un produs cu efecte inhibitoare asupra proteazei, pe baza de acid ursolic sau săruri ale sale, aplicabil pentru tratamentul sau prevenirea diferitelor disfuncții ale pielii (dermatite) și condiționat sub formă de unguent, cremă, loțiune și emulsie. Se menționează efectele dermatoprotectoare ale produsului: antioxidante, hidrat^ffe și de înălbire a epidermei.
/ biotehnos ț &.A. ' o, 2 ,
Λ-2 Ο 1 Ο - Ο 0 5 7 8 -Ο 5 -07- 2010
Brevetul de invenție US 4857554 prezintă o metodă pentru tratamentul psoriazisului bazată pe utilizarea zilnică a unui unguent conținând acizii ursolic și oleanolic în raport 3:1, dispersați într-o bază grasă cu lanolină și vaselină. Acțiunea produsului este demonstrată prin experiment clinic timp de 3 săptămâni, care a relevat că formele grave de psoriazis au fost vindecate în proporție de
60...70%.
Din datele prezente cu privire la stadiul tehnicii în domeniul farmacologiei acizilor triterpenici rezultă următoarele:
- toate studiile farmacologice referitoare la activitatea specifică a acestor acizi au fost efectuate separat pentru fiecare acid, evidențiindu-se o multitudine de efecte farmacologice care deși sunt în mare parte similare, nu sunt identice;
- nici unul dintre studiile menționate nu prezintă teste farmacologice efectuate pe amestec de acizi triterpenici, în scopul evidențierii sinergismului și potențării efectelor farmacologice, care pot fi superioare față de cele ale fiecărui component în parte;
- experimentele farmacologice preclinice sau clinice prezentate în cadrul studiilor menționate nu au fost efectuate comparativ pe organisme tinere, adulte sau îmbătrânite, deși este cunoscut faptul că parametrii biochimici și hematologici diferă sensibil în funcție de vârstă care influențează și eficiența terapeutică a medicamentului utilizat.
Problema tehnică pe care o rezolvă prezenta invenție consta in elaborarea unor condiții de procedeu prin care se obține un complex bioactiv cu design specific unui anumit tip de structura cristalina care favorizează solubilitatea acestuia rezultând o îmbunătățire a biodisponibilitatii substanței active. Acest fapt permite la rândul lui la creșterea eficacității produsului si la o potențiala lărgire a ariei terapeutice a medicamentului.
Complexul bioactiv de acizi triterpenici, consta in aceea ca, are un conținut 100% de acizi triterpenici, format din minim 80% acid ursolic si max.20 % acid oleanolic , hidroxiursolic, hidroxioleanolic, betulinic, dehidrobetulinic, obtinut sub forma de acizi in stare libera sau ca săruri de Na, K sau NH4 prin extracție din diferite specii de Salvia, prezentând următoarele efecte farmacologice:
- activitate de bioreglare a metabolismului proteic, glucidic și lipidic, în special asupra organismelor îmbătrânite, cu aplicații în terapia preventivă și curativă a maladiilor metabolice și cardiovasculare cu etiologie aterosclerotică, în special în geriatrie; //
z ^-2010-00578-0 5 -07- 2010
- activitate imunoprotectoare și hepatoprotectoare, de contracarare a efectelor adverse imunosupresoare și hepatotoxice, survenite după tratamentul cu glucocorticosteroizi, citostatice;
- activitate de întârziere a evoluției tumorilor;
- activitate antioxidanta;
- activitate antiinflamatoare locală.
iar procedeul de obținere a complexului bioactiv de acizi triterpenici consta in aceea ca materia prima vegetala uscata si pulverizata, constituita din Salvia species herba, se extrage prin macerare dinamică în raportul 1/15...1/30 m/v, masă vegetală/solvent, cu unul dintre solvenții de extracție reprezentați de amestecurile constituite din: 5...15% apă structurată „I” cu 85...95% acetonă sau cu 85...95% alcool etilic 95c, timp de
8.. .24h, la 15...80°C, rezultând soluția extractivă care in scopul purificării, se trece pe o coloană cromatografică cu cărbune activ granulat cu pH acid, apoi se concentrează sub vid la temperatura de 35...40°C pana la 1/10 ... 1/20 din volumul inițial obtinandu-se o suspensie care se menține timp de 12....24 h la
5.. ..10°C, apoi se filtrează sub vid, substanța obținută după uscare la 105°C, timp de 3 h, constituind complexul bioactiv de acizi triterpenici brut cu un conținut de minim 70%, care in vederea purificării, se dizolvă la reflux- 80°C în raportul 1/100... 1/200 m/v în unul dintre solvenții reprezentați de amestecurile constituite din: 5...10% apă structurată „l”sau „S” cu 90...95% alcool etilic 95c sau cu 90...95% acetonă; soluția obținută se purifică prin adsorbție pe cărbune activ cu pH acid, adaugat in raportul de 0,1....0,3% m/v, se filtrează, se concentrează sub vidla 35....40°C până la 1/10...1/20 din volumul inițial, iar suspensia rezultata se lașa 12...24 h la 5....10°C, se filtrează sub vid, precipitatul obținut se spala cu 0,3....0,5 I apa distilata, pana la pH neutru, se usucă la 105°C minimum 3 h , se pulverizează, obtinandu-se produsul pulverizat cu o concentrație de minim 90% acizi triterpenici care se supune unei cristalizări din alcool etilic, acetona sau acetat de etil prin dizolvare la reflux sub vid, cu ridicarea temperaturii de vapori la 50°.... 60 °C, concentrare sub vid pana la 1/10 -1/20 din volumul inițial, suspensia cristalina obtinuta se răcește pe baie de gheata rapid, sub agitare, se filtrează imediat sub vid si se usucă la 90-110 °C in curent de aer cald, obtinandu-se complexul bioactiv de acizi triterpenici 100% din care acid ursolic min.80% si max. 20 % amestec din acid oleanolic, hidroxiursolic, hidroxioleanolic, betulinic, dehidrobetulinic, rezultând substanța activa pentru produse medicamentoase de uz uman si/sau veterinar, condiționate sub forma de: soluție injectabila sau emulsie perfuzabilâ? tablete ^-2010-00578-0 5 -07- 2010
sau capsule operculate tari si/sau gelatinoase moi, gel, crema sau unguent, soiutie de uz extern sau spray, supozitoare sau ovule.
Avantajele invenției, comparativ cu stadiul tehnicii sunt următoarele:
- studiile farmacologice preclinice „in vivo”, efectuate asupra complexului bioactiv de acizi triterpenici, au demonstrat ca acesta prezintă o activitate farmacologica superioara fata de cea a fiecărui component separat, datorita unor efecte sinergice de potențare reciproca, utilizate la obținerea unor noi produse medicamentoase;
- preconizează o creștere cu 10 ...15% a randamentului de extracție;
- se realizează un grad crescut de selectivitate a procesului de extracție;
- purificarea complexului bioactiv de acizi triterpenici asigura o puritate avansata a produsului finit (100% acizi triterpenici), precum si o standardizare a conținutului sau in componente;]
- etapa de modelare a structurii fizice a pulberii obținute asigura obținerea complexului bioactiv sub forma cristalina cu imbunatatirea proprietăților legate de procesul de dizolvare, dar cu menținerea unui echilibru intre biodisponibilitate si stabilitate chimica;
- procedeul tehnologic valorifică si alti acizi triterpenici prezenti in soluțiile extractive, care conferă o creștere a biodisponibilității întregului complex;
- complexul bioactiv de acizi triterpenici, prezintă un conținut de 100% standardizat, avand o activitate farmacologică marcată și diversificată, exercitată la nivelul unor funcții vitale și anume: activitate de bioreglare a metabolismului proteic, glucidic și lipidic, în special asupra organismelor îmbătrânite, activitate imunoprotectoare și hepatoprotectoare, de contracarare a efectelor adverse imunosupresoare și hepatotoxice, după tratamentul cu glucocorticosteroizi, citostatice, antivirale și radioterapie; activitate de retardare a evoluției tumorilor; activitate antiinflamatoare locală.
în baza acestor efecte farmacologice, complexul bioactiv de acizi triterpenici, obținut conform invenției, a fost condiționat sub formă de noi produse medicamentoase de uz uman și/sau veterinar precum; capsule, tablete, soluții injectabile, buvabile și de uz extern; colire, spray, gel, cremă, unguent, supozitoare, ovule, destinate unor noi aplicații terapeutice, față de cele cunoscute în prezent.
Procedeul, conform invenției, constă în aceea că, materia primă vegetală uscată și pulverizată, cu 2...4% acizi triterpenici, constituită din Salvia spec/es herba, se extrage prin macerare dinamică în raportul 1/15...1/30 m/v, masa vegetală/soj^ent, c nul dintre solvenții de extracție reprezentați de amestecurile constituite
X. (j. /
ÎL-2 010-0057B-0 5 -07- 2010
apă structurată „I” cu 85...95% acetonă sau cu 85...95% alcool etilic 95c, timp de 8...24 h, la 15...80°C, rezultând soluția extractivă, care în scopul purificării se trece pe o coloană cromatografică cu cărbune activ granulat cu pH acid, apoi se concentrează sub vid, la temperatura de 35...40°C, până la 1 /10.... 1/20 din volumul inițial, obținându-se o suspensie care se menține timp de 12...24 h la 5...10°C, apoi se filtrează sub vid, substanța obținută după uscare la 105°C, timp de 3 h, constituind complexul bioactiv de acizi triterpenici brut cu un conținut de minim 70%. în vederea purificării, produsul brut se dizolvă la reflux - 80° C - în raportul 1/100...1/200 m/v în unul dintre solvenții reprezentați de amestecurile constituite din: 5...10% apă structurată „l cu 90...95% alcool etilic 95c sau cu 90...95% acetonă.
Soluția obținută se purifică prin adsorbție pe cărbune activ cu pH acid, adăugat în raportul 0,1...0,3% m/v, se filtrează, se concentrează sub vid la 35...40°C până la 1/10...1/20 din volumul inițial, suspensia rezultată se lasă 12...24h la 5...10°C, se filtrează sub vid, precipitatul obținut se spală cu 0,3...0,5 I apă distilată, până la pH neutru, se usucă la 105°C minim 3 h și se pulverizează, obtinandu-se produsul pulverizat cu o concentrație de minim 80% acizi triterpenici care se supune unei cristalizări din alcool etilic, acetona sau acetat de etil prin dizolvare la reflux sub vid, cu ridicarea temperaturii de vapori la 50°.... 60 °C, concentrare sub vid pana la 1/10 -1/20 din volumul inițial, suspensia cristalina obtinuta se răcește pe baie de gheata rapid, sub agitare, se filtrează imediat sub vid si se usucă la 90-110 °C in curent de aer cald, obtinandu-se complexul bioactiv de acizi triterpenici 100% din care acid ursolic min.80% si max. 20 % amestec din acid oleanolic, hidroxiursolic, hidroxioleanolic, betulinic, dehidrobetulinic ...
Pentru obținerea complexului de acizi triterpenici sub formă de săruri de Na, K, sau NH4 produsul pulverizat cu o concentrație de minim 80% acizi triterpenici se dizolvă în raportul 1/100...1/200 m/v în amestecul de solvenți cu pH alcalin: 90...95% alcool etilic 95c cu 5...10% apă structurată „S”, care conține și 1% NaOH sau 1% KOH sau 5% NH4OH 25%, urmat de concentrarea soluției rezultate și obținerea complexului bioactiv de acizi triterpenici ca sare de Na, de K sau de NH4, care se supune unei cristalizări din alcool etilic, acetona sau acetat de etil prin dizolvare la reflux sub vid, cu ridicarea temperaturii de vapori la 50°.... 60 °C, concentrare sub vid pana la 1/10 -1/20 din volumul inițial, suspensia cristalina obtinuta se răcește pe baie de gheata rapid, sub agitare, se filtrează imediat sub vid si se usucă la 90-110 °C in curent de aer cald, obtinandu-se complexul bioactiv de acizi triterpenici ca sare de Na, de K s cu un conținut de minim 90%, evaluat și un randament de fază de 95%. f \ Γ'·1 ‘ ;B1OTEHNOS12 0
U, .te
CV 2 0 1 0 - 0 0 5 7 8 -0 5 -07- 2010 în continuare sunt descrise exemplele de realizare a invenției, care se referă la procedeul de obținere a complexului bioactiv de acizi triterpenici și la produsele medicamentoase condiționate.
Exemplul de realizare nr. 1 - Varianta A .Obținerea complexului bioactiv de acizi triterpenici la scara industrială din herba Salvia species (Salvie) kg materie primă vegetală uscată și pulverizată, constituită din herba Salvia species (Salvia officinalis, Salvia lavandulifolia, Salvia triloba,), cu un conținut de 3...4% acizi triterpenici, se extrag cu 500 I solvent de extracție constituit din: 90 volume (450 I) acetonă + 10 volume (50 I) apă structurată „I”, cu pH= 1,8...2,6, prin macerare dinamică, timp de 12 h, la temperatura ambiantă (15...30°C), după care se colectează minim 400 I soluție extractivă care se trece pe o coloană cromatografică cu 2 kg cărbune activ granulat acid, rezultând o soluție extractivă purificată, care se concentrează sub vid la temperatura de 35...40°C, până la volumul de 40 I, obținânduse o suspensie care se menține 24 h la temperatura de 5...10°C, după care se filtrează sub vid, iar precipitatul de pe filtru se usucă la 105°C, timp de 3 h și se pulverizează. Se obțin minim 1200 g pulbere galbenă slab verzuie, care constituie complexul bioactiv de acizi triterpenici brut, cu un conținut de minim 70%.
în scopul purificării produsului se utilizează amestecul de solvenți cu pH acid constituit din 90 volume (108 I) alcool etilic 95c +10 volume (12 I) apă structurată „I”, cu pH = 1,8...2,6, în care se adaugă pentru dizolvare 1200 g pulbere constituită din complexul bioactiv de acizi triterpenici brut (calculându-se pentru 1 g substanță -100 ml amestec de solvenți); suspensia se încălzește la 80°C, timp de 1 h, până la dizolvarea completă a substanței, iar soluția galbenă rezultată se tratează cu 0,1...0,3% m/v cărbune activ acid; suspensia se filtrează, soluția obținută se concentrează sub vid, la temperatura de 35...40°C, până la 1/10 din volumul inițial (12 I), când rezultă o suspensie microcristalină, care se menține 24 h la temperatura de 5...10°C, după care se filtrează sub vid, precipitatul se spală cu 0,5 I apă distilată, până la pH neutru, se usucă la temperatura de 105°C, timp de 3 h și se pulverizează, care constituie complexul de acizi triterpenici, cu un conținut de minim 80%, acesta se supune unei cristalizări din solvenți organici, acetat de etil prin dizolvare la reflux sub vid, cu ridicarea temperaturii de vapori la 50°.... 60 °C, concentrare sub vid pana la 1/10 -1/20 din volumul inițial, suspensia cristalina obtinuta se răcește pe baie de gheata rapid, sub agitare, se filtrează imediat sub vid si se usucă la 90-110 °C in curent de aer cald, obtinandu-se 600 g substanța albă cristalină ce reprezintă complexul bioactiv de triterpenici 100% din care acid ursolic min.80% si max. 20 % amestec/din ăni cy2 C - ο 0 5 7 8 -o -07- 2010 triterpenici, constituiți din unul sau mai mulți dintre acizii: acid oleanolic hidroxiursolic, hidroxioleanolic, betulinic, dehidrobetulinic, ceea ce reprezintă un randament final de minim 50% raportat la conținutul de acizi triterpenici al materiei prime vegetale prelucrate.
Varianta B. 30 kg materie primă vegetală, uscată și pulverizată, constituită din herba Salvia species (Salvia officinalis, Salvia lavandulifolia, Salvia triloba, Salvia sclarea etc.), cu un conținut de 3-4% acizi triterpenici, se extrag cu 500 I solvent de extracție, constituit din: 90 volume (450 I) alcool etilic 95c +10 volume (50 I) apă structurată „I (pH= 1,8 ...2,6), prin macerare dinamică, timp de 12 h, la temperatura ambiantă (15...30°C), după care se colectează minim 400 I soluție extractivă, care se trece pe o coloană cromatografică cu 2 kg cărbune activ granulat acid, rezultând o soluție extractivă purificată, care se concentrează sub vid, la temperatura de 35...40°C, până la volumul de 40 I obținându-se o suspensie care se menține 24 h la temperatura de 5...10°C, după care se filtrează sub vid, iar precipitatul de pe filtru se usucă la 105°C, timp de 3 h și se pulverizează. Se obțin minim 1200 g pulbere galbenă, slab verzuie, care constituie complexul de acizi triterpenici brut, cu un conținut de minim 70%.
Pentru purificarea produsului brut se utilizează amestecul de solvenți cu pH acid, constituit din 90 volume (108 I) acetonă +10 volume (12 I) apă structurată „I” cu un pH=1,8...2,6 în care se adaugă, pentru dizolvare, 1200 g pulbere constituită din complexul brut de acizi triterpenici (calculându-se pentru 1 g substanță - 100 ml amestec de solvenți); suspensia se încălzește la 80°C timp de 1 h, până la dizolvarea completă a substanței, iar soluția galbenă rezultată se tratează cu 0,1...0,3% m/v cărbune activ acid; suspensia se filtrează, soluția obținută se concentrează sub vid, la temperatura de 35...40°C, până la 1/10 din volumul inițial (12 I), când rezultă o suspensie microcristalină, care se menține 24 h la temperatura de 5...10°C pentru finalizarea cristalizării, după care se filtrează sub vid, precipitatul se spală cu 0,5 I apă distilată, până la pH neutru, se usucă la temperatura de 105°C, timp de 3 h se pulverizează acesta constituie complexul de acizi triterpenici purificat cu un conținut de minim 80% care se supune unei cristalizări din solvenți organici, acetat de etil prin dizolvare la reflux sub vid, cu ridicarea temperaturii de vapori la 50°.... 60 °C, concentrare sub vid pana la 1/10 -1/20 din volumul inițial, suspensia cristalina obtinuta se răcește pe baie de gheata rapid, sub agitare, se filtrează imediat sub vid si se usucă la 90-110 °C in curent de aer cald, obtinandu-se 610 g substanța albă cătălină reprezintă complexul bioactiv de acizi triterpenici 100% din care acid ursoli
/
λ-2910-00578-0 5 -07- 2010 max. 19 % amestec din alți acizi triterpenici, constituiți din unul sau mai mulți dintre acizii: acid oleanolic hidroxiursolic, hidroxioleanolic, betulinic, dehidrobetulinic, ceea ce reprezintă un randament final de minim 50% raportat la conținutul de acizi triterpenici al materiei prime vegetale prelucrate.
Exemplul de realizare nr. 2. Obținerea complexului bioactiv de acizi triterpenici sub formă de sare de Na
200 g pulbere complex bioactiv purificat de acizi triterpenici, cu un conținut de minim 80%, obținut conform modului de lucru descris în exemplul de realizare nr. 1 se dizolvă în 20 I (raport 1/100 m/v) amestec de solvenți constituit din: 90 volume (18 I) alcool etilic 95c + 10 volume (2 I) apă structurată „S” (pH = 10...12), care conține 1% NaOH, prin încălzire la reflux (80°C), obținându-se o soluție limpede care se concentrează sub vid la temperatura de 4O...45°C, până la 1/4 din volumul inițial (5 I), rezultând o suspensie microcristalină, care se menține 24 h, la temperatura de
5...10°C, în vederea finalizării cristalizării, după care se filtrează sub vid, precipitatul de pe filtru se spală cu minim 0,1 I apă distilată până la pH neutru, se usucă la temperatura de 105°C timp de 3 h și se pulverizează si se supune unei cristalizări din solvenți organici, acetat de etil prin dizolvare la reflux sub vid, cu ridicarea temperaturii de vapori la 50°.... 60 °C, concentrare sub vid pana la 1/10 -1/20 din volumul inițial, suspensia cristalina obtinuta se răcește pe baie de gheata rapid, sub agitare, se filtrează imediat sub vid si se usucă la 90-110 °C in curent de aer cald, obtinandu-se 180 g substanța albă cristalină ce reprezintă complexul bioactiv de acizi triterpenici sub formă de sare de Na a acizilor ursolic, oleanolic și altor acizi triterpenici constituiți din unul sau mai mulți dintre acizii: hidroxiursolic, hidroxioleanolic, betulinic, dehidrobetulinic, cu un conținut de min 90%, ceea ce reprezintă un randament de fază de 95%.
Exemplul de realizare nr. 3. Obținerea complexului bioactiv de acizi triterpenici sub formă de sare de K
200 g complex bioactiv purificat de acizi triterpenici, cu un conținut de minim
80%, obținut conform modului de lucru descris în exemplul de realizare nr. 1, se dizolvă în 20 I amestec de solvenți constituit din: 90 volume (18 I) alcool etilic 95c + 10 volume (2 I) apă structurată „S” (pH =10...12), care conține 1% KOH, prin încălzire la reflux (80°C); soluția limpede rezultată se concentrează sub vid la temperatura de 4O...45°C, până la 1/4 din volumul inițial (5 I), rezultând o suspensie microcristalină, care se menține 24 h, la temperatura de 5-10°C, în vederea finalizării cristalizării, după care se filtrează sub vid, precipitatul de pe filtru se spală cu minim 0,1 I apă distilată neutru, se usucă la temperatura de 105°C timp de 3 h, se pulverizează si ă
• BOTEHNOS· (Χ-2 0 1 0-00570-0 5 -07“ 2010 unei cristalizări din solventi organici, acetat de etil prin dizolvare la reflux sub vid, cu ridicarea temperaturii de vapori la 50°.... 60°C, concentrare sub vid pana la 1/10 -1/20 din volumul inițial, suspensia cristalina obtinuta se răcește pe baie de gheata rapid, sub agitare, se filtrează imediat sub vid si se usucă la 90-110 °C in curent de aer cald, obtinandu-se 180 g substanța albă cristalină ce reprezintă complexul bioactiv de acizi triterpenici sub formă de sare de K a acizilor ursolic, oleanolic și altor acizi triterpenici constituiți din unul sau mai mulți dintre acizii: hidroxiursolic, hidroxioleanolic, betulinic, dehidrobetulinic, cu un conținut de min.90%, ceea ce reprezintă un randament de fază de 95%.
Exemplul de realizare nr. 4. Obținerea complexului bioactiv de acizi triterpenici sub formă de sare de NH4
200 g complex bioactiv de acizi triterpenici purificat, cu un conținut de minim 80%, obținut conform modului de lucru descris în exemplul de realizare nr. 1, se dizolvă în 20 I amestec de solvenți constituit din: 90 volume (18 I) alcool etilic 95c + 10 volume (2 I) apă structurată „S” (pH = 10...12), care conține 5% NH4OH 25%, prin încălzire la reflux (80°C); soluția limpede rezultată se concentrează sub vid la temperatura de
40...45°C, până la 1/4 din volumul inițial (5 I), rezultând o suspensie microcristalină, care se menține 24 h, la temperatura de 5...10°C, în vederea finalizării cristalizării, după care se filtrează sub vid, precipitatul de pe filtru se spală cu minim 0,1 I apă distilată până la pH neutru, se usucă la temperatura de 105°C timp de 3 h, se pulverizează si se supune unei cristalizări din solventi organici, acetat de etil prin dizolvare la reflux sub vid, cu ridicarea temperaturii de vapori la 50°.... 60°C, concentrare sub vid pana la 1/10 -1/20 din volumul inițial, suspensia cristalina obtinuta se răcește pe baie de gheata rapid, sub agitare, se filtrează imediat sub vid si se usucă la 90-110 °C in curent de aer cald, obtinandu-se 180 g substanța albă cristalină ce reprezintă complexul bioactiv de acizi triterpenici sub formă de sare de NH4 a acizilor ursolic, oleanolic și altor acizi triterpenici constituiți din unul sau mai mulți dintre acizii: hidroxiursolic, hidroxioleanolic, betulinic, dehidrobetulinic, cu un conținut de minim 90%, ceea ce reprezintă un randament de fază de 95%.
Exemplul de realizare nr. 5 - Varianta A .Obținerea complexului bioactiv de acizi triterpenici la scara industrială din herba Salvia species (Salvie) kg materie primă vegetală uscată și pulverizată, constituită din herba Salvia species (Salvia officinalis, Salvia lavandulifolia, Salvia triloba), cu un conținut de 3...4% acizi triterpenici, se extrag cu 500 I solvent de extracție constituit din: 90 volumeJ45îȚJ)= acetonă + 10 volume (50 I) apă structurată „I”, cu pH= 1,8...2,6, priX/macerare
O 1 O - 0 O 5 7 8 ’ O 5 -07- 2010
dinamică, timp de 12 h, la temperatura ambiantă (15...30°C), după care se colectează minim 400 I soluție extractivă care se trece pe o coloană cromatografică cu 2 kg cărbune activ granulat acid, rezultând o soluție extractivă purificată, care se concentrează sub vid la temperatura de 35...40°C, până la volumul de 40 I, obținânduse o suspensie care se menține 24 h la temperatura de 5...10°C, după care se filtrează sub vid, iar precipitatul de pe filtru se usucă la 105°C, timp de 3 h și se pulverizează. Se obțin minim 1200 g pulbere galbenă slab verzuie, care constituie complexul bioactiv de acizi triterpenici brut, cu un conținut de minim 70%.
în scopul purificării produsului se utilizează amestecul de solvenți cu pH acid constituit din 90 volume (108 I) alcool etilic 95c + 10 volume (12 I) apă structurată „I”, cu pH = 1,8...2,6, în care se adaugă pentru dizolvare 1200 g pulbere constituită din complexul bioactiv de acizi triterpenici brut (calculându-se pentru 1 g substanță -100 ml amestec de solvenți); suspensia se încălzește la 80°C, timp de 1 h, până la dizolvarea completă a substanței, iar soluția galbenă rezultată se tratează cu 0,1...0,3% m/v cărbune activ acid; suspensia se filtrează, soluția obținută se concentrează sub vid, la temperatura de 35...40°C, până la 1/10 din volumul inițial (12 I), când rezultă o suspensie microcristalină, care se menține 24 h la temperatura de 5...10°C, după care se filtrează sub vid, precipitatul se spală cu 0,5 I apă distilată, până la pH neutru, se usucă la temperatura de 105°C, timp de 3 h și se pulverizează, care constituie complexul de acizi triterpenici, cu un conținut de minim 80%, acesta se supune unei cristalizări din solvenți organici, alcool etilic prin dizolvare la reflux sub vid, cu ridicarea temperaturii de vapori la 50°.... 60 °C, concentrare sub vid pana la 1/10 -1/20 din volumul inițial, suspensia cristalina obtinuta se răcește pe baie de gheata rapid, sub agitare, se filtrează imediat sub vid si se usucă la 90-110 °C in curent de aer cald, obtinandu-se 550 g substanța albă cristalină ce reprezintă complexul bioactiv de acizi triterpenici 100% din care acid ursolic min.80% si max. 20 % amestec din alți acizi triterpenici, constituiți din unul sau mai mulți dintre acizii: acid oleanolic hidroxiursolic, hidroxioleanolic, betulinic, dehidrobetulinic, ceea ce reprezintă un randament final de minim 50% raportat la conținutul de acizi triterpenici al materiei prime vegetale prelucrate.
Varianta B. 30 kg materie primă vegetală, uscată și pulverizată, constituită din herba Salvia species (Salvia officinalis, Salvia lavandulifolia, Salvia triloba, Salvia sclarea etc.), cu un conținut de 3-4% acizi triterpenici, se extrag cu 500 I solvent de extracție, constituit din: 90 volume (450 I) alcool etilic 95c + 10 volume (5 structurată „I” (pH= 1,8 ...2,6), prin macerare dinamică, timp de 12 h, la tșfț;
ț i
cv 2 O 1 0 - O O 5 7 8 - O 5 -07- 2010 ambiantă (15...30°C), după care se colectează minim 400 I soluție extractivă, care se trece pe o coloană cromatografică cu 2 kg cărbune activ granulat acid, rezultând o soluție extractivă purificată, care se concentrează sub vid, la temperatura de 35...40°C, până la volumul de 40 l obținându-se o suspensie care se menține 24 h la temperatura de 5...10°C, după care se filtrează sub vid, iar precipitatul de pe filtru se usucă la 105°C, timp de 3 h și se pulverizează. Se obțin minim 1200 g pulbere galbenă, slab verzuie, care constituie complexul de acizi triterpenici brut, cu un conținut de minim 70%.
Pentru purificarea produsului brut se utilizează amestecul de solvenți cu pH acid, constituit din 90 volume (108 I) acetonă + 10 volume (12 I) apă structurată „I” cu un pH=1,8...2,6 în care se adaugă, pentru dizolvare, 1200 g pulbere constituită din complexul brut de acizi triterpenici (calculându-se pentru 1 g substanță - 100 ml amestec de solvenți); suspensia se încălzește la 80°C timp de 1 h, până la dizolvarea completă a substanței, iar soluția galbenă rezultată se tratează cu 0,1...0,3% m/v cărbune activ acid; suspensia se filtrează, soluția obținută se concentrează sub vid, la temperatura de 35...40°C, până la 1/10 din volumul inițial (12 I), când rezultă o suspensie microcristalină, care se menține 24 h la temperatura de 5...10°C pentru finalizarea cristalizării, după care se filtrează sub vid, precipitatul se spală cu 0,5 I apă distilată, până la pH neutru, se usucă la temperatura de 105°C, timp de 3 h se pulverizează acesta constituie complexul de acizi triterpenici purificat cu un conținut de minim 80% care se supune unei cristalizări din solvenți organici, alcool etilic prin dizolvare la reflux sub vid, cu ridicarea temperaturii de vapori la 50°.... 60 °C, concentrare sub vid pana la 1/10 -1/20 din volumul inițial, suspensia cristalina obtinuta se răcește pe baie de gheata rapid, sub agitare, se filtrează imediat sub vid si se usucă la 90-110 °C in curent de aer cald, obtinandu-se 560 g substanța albă cristalină ce reprezintă complexul bioactiv de acizi triterpenici 100% din care acid ursolic min.81% si max. 19 % amestec din alți acizi triterpenici, constituiți din unul sau mai mulți dintre acizii: acid oleanolic hidroxiursolic, hidroxioleanolic, betulinic, dehidrobetulinic, ceea ce reprezintă un randament final de minim 50% raportat la conținutul de acizi triterpenici al materiei prime vegetale prelucrate.
Exemplul de realizare nr. 6 - Varianta A .Obținerea complexului bioactiv de acizi triterpenici la scara industrială din herba Salvia species (Salvie) kg materie primă vegetală uscată și pulverizată, constituită din herba Salvia species (Salvia officinalis, Salvia lavandulifolia, Salvia triloba, etc.), cu 3χ4% acizi triterpenici, se extrag cu 500 I solvent de extracție constituit
^-2 0 1 0 - 0 0 5 7 9 -Q 5 -07- 2010 (450 I) acetonă + 10 volume (50 I) apă structurată „I”, cu pH= 1,8...2,6, prin macerare dinamică, timp de 12 h, la temperatura ambiantă (15...30°C), după care se colectează minim 400 I soluție extractivă care se trece pe o coloană cromatografică cu 2 kg cărbune activ granulat acid, rezultând o soluție extractivă purificată, care se concentrează sub vid la temperatura de 35...40°C, până la volumul de 40 I, obținânduse o suspensie care se menține 24 h la temperatura de 5...10°C, după care se filtrează sub vid, iar precipitatul de pe filtru se usucă la 105°C, timp de 3 h și se pulverizează. Se obțin minim 1200 g pulbere galbenă slab verzuie, care constituie complexul bioactiv de acizi triterpenici brut, cu un conținut de minim 70%.
în scopul purificării produsului se utilizează amestecul de solvenți cu pH acid constituit din 90 volume (108 I) alcool etilic 95c + 10 volume (12 I) apă structurată „I”, cu pH = 1,8...2,6, în care se adaugă pentru dizolvare 1200 g pulbere constituită din complexul bioactiv de acizi triterpenici brut (calculându-se pentru 1 g substanță -100 ml amestec de solvenți); suspensia se încălzește la 80°C, timp de 1 h, până la dizolvarea completă a substanței, iar soluția galbenă rezultată se tratează cu 0,1...0,3% m/v cărbune activ acid; suspensia se filtrează, soluția obținută se concentrează sub vid, la temperatura de 35...40°C, până la 1/10 din volumul inițial (12 I), când rezultă o suspensie microcristalină, care se menține 24 h la temperatura de 5...10°C, după care se filtrează sub vid, precipitatul se spală cu 0,5 I apă distilată, până la pH neutru, se usucă la temperatura de 105°C, timp de 3 h și se pulverizează, care constituie complexul de acizi triterpenici, cu un conținut de minim 80%, acesta se supune unei cristalizări din acetona prin dizolvare la reflux sub vid, cu ridicarea temperaturii de vapori la 50°.... 60 °C, concentrare sub vid pana la 1/10 -1/20 din volumul inițial, suspensia cristalina obtinuta se răcește pe baie de gheata rapid, sub agitare, se filtrează imediat sub vid si se usucă la 90-110 °C in curent de aer cald, obtinandu-se
580 g substanța albă cristalină ce reprezintă complexul bioactiv de acizi triterpenici 100% din care acid ursolic min.80% si max. 20 % amestec din alți acizi triterpenici, constituiți din unul sau mai mulți dintre acizii: acid oleanolic hidroxiursolic, hidroxioleanolic, betulinic, dehidrobetulinic, ceea ce reprezintă un randament final de minim 50% raportat la conținutul de acizi triterpenici al materiei prime vegetale prelucrate.
Varianta B. 30 kg materie primă vegetală, uscată și pulverizată, constituită din herba Salvia species (Salvia officinalis, Saivia lavandulifolia, Salvia triloba, Salvia sclarea etc.), cu un conținut de 3-4% acizi triterpenici, se extrag cu 500 I sol
extracție, constituit din: 90 volume (450 I) alcool etilic 95c + 10 volume
.. - λ
O apa \\ :biotehnos 4
... s.a. ι f 49 / îl../Λ Z—
Λ-2 Ο 1 Ο - Ο Ο 5 7 8 - Ο 5 -07- 2010 structurată „I” (ρΗ= 1,8 ...2,6), prin macerare dinamică, timp de 12 h, la temperatura ambiantă (15...30°C), după care se colectează minim 400 I soluție extractivă, care se trece pe o coloană cromatografică cu 2 kg cărbune activ granulat acid, rezultând o soluție extractivă purificată, care se concentrează sub vid, la temperatura de 35...40°C, până la volumul de 40 I obținându-se o suspensie care se menține 24 h la temperatura de 5...10°C, după care se filtrează sub vid, iar precipitatul de pe filtru se usucă la 105°C, timp de 3 h și se pulverizează. Se obțin minim 1200 g pulbere galbenă, slab verzuie, care constituie complexul de acizi triterpenici brut, cu un conținut de minim 70%.
Pentru purificarea produsului brut se utilizează amestecul de solvenți cu pH acid, constituit din 90 volume (108 I) acetonă + 10 volume (12 I) apă structurată „I” cu un pH=1,8...2,6 în care se adaugă, pentru dizolvare, 1200 g pulbere constituită din complexul brut de acizi triterpenici (calculându-se pentru 1 g substanță - 100 ml amestec de solvenți); suspensia se încălzește la 80°C timp de 1 h, până la dizolvarea completă a substanței, iar soluția galbenă rezultată se tratează cu 0,1...0,3% m/v cărbune activ acid; suspensia se filtrează, soluția obținută se concentrează sub vid, la temperatura de 35...40°C, până la 1/10 din volumul inițial (12 I), când rezultă o suspensie microcristalină, care se menține 24 h la temperatura de 5...10°C pentru finalizarea cristalizării, după care se filtrează sub vid, precipitatul se spală cu 0,5 I apă distilată, până la pH neutru, se usucă la temperatura de 105°C, timp de 3 h se pulverizează acesta constituie complexul de acizi triterpenici purificat cu un conținut de minim 80% care se supune unei cristalizări din acetona prin dizolvare la reflux sub vid, cu ridicarea temperaturii de vapori la 50°.... 60 °C, concentrare sub vid pana la 1/10 1/20 din volumul inițial, suspensia cristalina obtinuta se răcește pe baie de gheata rapid, sub agitare, se filtrează imediat sub vid si se usucă la 90-110 °C in curent de aer cald, obtinandu-se 590 g substanța albă cristalină ce reprezintă complexul bioactiv de acizi triterpenici 100% din care acid ursolic min.81% si max. 19 % amestec din alți acizi triterpenici, constituiți din unul sau mai mulți dintre acizii: acid oleanolic hidroxiursolic, hidroxioleanolic, betulinic, dehidrobetulinic, ceea ce reprezintă un randament final de minim 50% raportat la conținutul de acizi triterpenici al materiei prime vegetale prelucrate.
(^-2 0 1 0 - 0 0 5 7 0 —
Ο 5 -Ο?- 2010
EXEMPLE DE CONDIȚIONARE A COMPLEXULUI BIOACTIV DE ACIZI TRITERPENICI SUB FORMĂ DE PRODUSE MEDICAMENTOASE în baza rezultatelor testelor farmacologice efectuate, complexul bioactiv de acizi triterpenici ca atare, sau sub formă de săruri de Na, K sau NH4, se poate condiționa sub formă de produse medicamentoase de uz intern sau extern, destinate unor domenii clinice cu largă incidență socială aparținând terapeuticii umane sau veterinare. Produsele medicamentoase descrise în continuare, conform invenției, se administrează în terapeutica umană sau veterinară, pe cale injectabilă, orală sau locală, timp de 1 zi 24 luni, în funcție de evoluția bolii, în doze zilnice de 10-1000 mg/kg. m.c., divizate în 16 prize. Exemplele de formulare prezentate în continuare nu exclud posibilitatea realizării altor formule de condiționare, având în vedere diversitatea și multitudinea excipienților cunoscuți și utilizați în industria farmaceutica.
Exemplul de realizare nr. 7
PRODUS MEDICAMENTOS CONDIȚIONAT SUB FORMĂ DE CAPSULE CONȚINÂND 100 mg COMPLEX BIOACTIV DE ACIZI TRITERPENICI/CAPSULĂ
Formula de condiționare/capsulă:
- complex bioactiv de acizi triterpenici -100% 105 mg
- lactoză monohidrat 150 mg
- glicolat sodic de amidon9,0mg
- polivinilpirolidonă K30 6,5mg
- laurii sulfat de sodiu 2,0mg
- aerosil 1,47mg
- talc 7,25mg
- stearat de magneziu 2,9mg
Modul de preparare: complexul bioactiv de acizi triterpenici se sitează cu excipienții: lactoză monohidrat și aerosil pe o sită de dimensiunea II. Peste amestecul obținut se toarnă o soluție realizată prin dizolvarea polivinilpirolidonei K 30 în alcool etilic, și se omogenizează. Se obțin granule care se usucă la o temperatură de
35...45°C și care se mărunțesc apoi la dimensiunea conferită de sită V; se adaugă glicolatul sodic de amidon, laurilsulfatul de sodiu, talcul și stearatul de magneziu, se omogenizează, iar pulberea astfel obținută se încapsulează în capsule de mărimea 1. Produsul se administrează în doze de 3...6 capsule/zi, timp de 1-24 luni, având
următoarele antiulceros, <r~
\\ /1 // <BIOTEHNOS 2Ls.a.
') efecte farmacologice: antitumoral, imunoprotector, hepatoprptector hipoglicemiant, antiinflamatoZ t0nMaritAA'vu
vascular, în special la nivel coronarian, cu utilizări terapeutice în următoarele maladii:
neoplasm, depletii ale sistemului imunitar, hepatite acute și cronice, ciroză hepatică, boală ulceroasă, diabet, tulburări cardiovasculare cu etiologie aterosclerotica, degenerări ale colagenului vascular, tisular și dermic: psoriazis, neurodermite, radiodermite, sindrom varicos și diferitele manifestări ale insuficienței venoase cronice, afecțiuni vasculare retiniene, aplicabil și în geriatrie pentru prevenirea și încetinirea proceselor de îmbătrânire.
Exemplul de realizare nr. 8
PRODUS MEDICAMENTOS CONDIȚIONAT SUB FORMĂ DE TABLETE CONȚINÂND 100 mg COMPLEX BIOACTIV DE ACIZI TRITERPENICI/TABLETĂ
| Formula de condiționare/tabletă: - complex bioactiv de acizi triterpenici -100% - lactoză monohidrat | 105,00 mg 81,20 mg |
| - celuloză microcristalină | 74,00 mg |
| - amidon de porumb - glicolat sodic de amidon - polividona - stearat de magneziu - aerosil | 16,20 mg 5,00 mg 5,60 mg 2,00 mg 1,00 mg |
| - talc | 5,00 mg |
Modul de preparare: se aplică procedeele uzuale cunoscute de condiționare a produselor farmaceutice de uz intern sub formă de tablete pe instalații la nivel industrial, cu respectarea regulilor de buna practica de fabricație pentru medicamente prevăzute de legislația europeană.
Produsul se administrează în doze de 3...6 tablete/zi, timp de 1...24 luni, având următoarele efecte farmacologice: antitumoral, imunoprotector, hepatoprotector, antiulceros, hipoglicemiant, hipolipidemiant, antiaterosclerotic, antiinflamator, tonifiant vascular, în special la nivel coronarian, cu utilizări terapeutice în următoarele maladii: neoplasm, depletii ale sistemului imunitar, hepatite acute și cronice, ciroză hepatică, boală ulceroasă, diabet, tulburări cardiovasculare cu etiologie aterosclerotica, degenerări ale colagenului vascular, articular și dermic: psoriazis, neurodermite, radiodermite, sindrom varicos și diferitele manifestări ale insuficienței venoase cronice, afecțiuni vasculare retiniene, aplicabil și în geriatrie pentru prevenirea și) etinirea proceselor de îmbătrânire.
r,
^--2 9 1 0-OQ5 7B- Ο 5 -07- 2010
Exemplul de realizare nr. 9
PRODUS MEDICAMENTOS CONDIȚIONAT SUB FORMĂ DE GEL - UZ DERMATOLOGIC CONȚINÂND 1% COMPLEX BIOACTIV DE ACIZI TRITERPENICI - Sare de Na Formula de condiționare:
| complex bioactiv de acizi triterpenici - | sare de Na minim 90% 10,5 g |
| Carbopol 940 | 20 g |
| glicerină | 60 g |
| hidroxid de sodiu soluție 15% | 10g |
| propilen glicol | 60 g |
| p-hidroxibenzoat de metil | Ig |
| p-hidroxibenzoat de propil | 2g |
| apă structurată „I” (pH = 1,8- 2,7) | ad. 1000 g |
Modul de preparare: se prepară masa de gel prin dispersarea a 20 g Carbopol 940 în amestecul format din 60 g glicerină cu 837 g apă structurată „I”, în care se dizolvă în prealabil amestecul de conservanți menționat în formulă. Se agita ușor și se lasă în repaus la 15 ... 25°C, după care se adaugă sub agitare lentă amestecul constituit din 10,5 g complex bioactiv de acizi triterpenici, 60 g propilenglicol și 10 g soluție 15% hidroxid de sodiu, reglându-se pH-ul în jur de 7,0 și continuându-se agitarea pentru o bună omogenizare timp de 30 minute, după care se ambalează în tuburi conținând 50 g/tub.
Produsul conține 1% complex bioactiv de acizi triterpenici - sare de Na și se administrează în doze de 10...30 mg/zi, timp de 1...6 luni, având următoarele efecte farmacologice: trofic și regenerator al colagenului vascular, tisular, articular și dermic, antiinflamator, antihialuroriidazic și antielastazic, cu utilizări terapeutice în următoarele maladii: arsuri, cheloizi post-arsuri și post-operatorii, escare, plăgi atone de diferite etiologii, degenerării ale colagenului dermic, vascular, tisular și articular cum ar fi: afecțiuni benigne și maligne ale pielii, psoriazis, dermatoze inflamatorii și pruriginoase, neurodermite, radiodermite, sindrom varicos și post trombotic, insuficiența venoasă cronică, fragilitate vasculară, stări inflamatorii reumatismale, precum și obezitate diabetică sau endocrină.
Exemplul de realizare nr. 10
PRODUS MEDICAMENTOS CONDIȚIONAT SUB FORMĂ DE CREMĂ
CONȚINÂND 1% COMPLEX BIOACTIV DE ACIZI TRITERPENICI - Sare de Na
Formula de condiționare:
- complex bioactiv de acizi triterpenici - sare de Na minim 90% 10J£îj
r'
W > BIOTEHNO5 · \
S.A. ‘li fi./
Ή
| ^--2 0 1 0 - 0 0 5 7 8 0 5 -07- 2010 | |
| alcool cetilic | 200 g |
| vaselină albă | 200 g |
| glicerină | 120 g |
| Tween 80 | 70 g |
| p-hidroxibenzoat de metil | ig |
| p-hidroxibenzoat de propil | 2g |
| apă structurată „I” (pH = 1,8- 2,7) | ad.1000 g |
Modul de preparare: se dizolvă 10,5 g complex bioactiv de acizi triterpenici - sare de Na, în 120 g glicerină, iar soluția rezultată se incorporează în masa de unguent, obținută prin topirea la 60°C a alcoolului cetilic și vaselinei, urmat de emulsionare prin adăugarea a 70 g Tween 80 și a minim 400 g apă structurată „I” în care s-au dizolvat în prealabil conservanții prevăzuți în formula. Masa de unguent se agită pentru emulsionare și omogenizare, după care se ambalează în tuburi a 50 g.
Produsul se prezintă sub formă de cremă onctuoasă, omogenă, albă, cu absorbție rapidă, conținând 1% complex bioactiv de acizi triterpenici ca sare de Na, și se administrează în doze de 10...30 mg/zi, timp de 1...6 luni, având următoarele efecte farmacologice: trofic și regenerator al colagenului vascular, tisular, articular și dermic, antiinflamator, antihialuronidazic și antielastazic, cu utilizări terapeutice în următoarele maladii: arsuri, cheloizi post-arsuri și post-operatorii, escare, plăgi atone de diferite etiologii, degenerării ale colagenului dermic, vascular, tisular și articular cum ar fi: afecțiuni benigne și maligne ale pielii, psoriazis, dermatoze inflamatorii și pruriginoase, neurodermite, radiodermite, sindrom varicos și post trombotic, insuficiența venoasă cronică, fragilitate vasculară, stări inflamatorii reumatismale, precum și obezitate diabetică sau endocrină.
Exemplul de realizare nr. 11
PRODUS MEDICAMENTOS CONDIȚIONAT SUB FORMĂ DE SUPOZITOARE CONȚINÂND 1% COMPLEX BIOACTIV DE ACIZI TRITERPENICI
| Formula de condiționare: | |
| - complex bioactiv de acizi triterpenici 100% | 1,05 g |
| - polietilenglicol 400 | 5g |
| - para-hidroxibenzoat de metil | 0,1 g |
| - para-hidroxibenzoat de propil | 0,03 g |
| - Suppocire (amestec de trigliceride de semisinteza) | ad. 100 g |
| Modul de preparare: se dizolvă complexul bioactiv de | acizi triterpenici în |
polietilenglicol, prin încălzire la 80°C. Soluția obținută se răcește la 40°C
' II · BIOTEHNOS i(\ * 24.A. ‘ I,
Z' /2.
^2010-00570-Ο 5 ~07~ 2010
peste masa de Suppocire care a fost încălzită în prealabil la 4O°C. Se adaugă amestecul de conservanți, se omogenizează și se toarnă în formele de supozitoare care cântăresc fiecare 2,5 g.
Produsul conține 25 mg complex bioactiv de acizi triterpenici/supozitor și se poate administra în doze de 50...100 mg/zi, timp de 1...6 luni, având următoarele efecte farmacologice:imunoprotector, antiinflamator, trofic și regenerator al colagenului vascular, tisular și articular, cu utilizări în următoarele maladii: stări imunosupresive, mai ales hepatotoxice, survenite după tratamentul cu glucocorticosteroizi, citostatice, afecțiuni inflamatorii reumatismale, sindrom hemoroidal.
Claims (8)
- REVENDICĂRI1. Complex bioactiv de acizi triterpenici, caracterizat prin aceea ca are o structura cristalina, solubilitate imbunatatita si un continui de acizi de 100 %, format din min 80% acid ursolic si max.20 % amestec constituit din unul sau mai mulți dintre acizii: oleanolic, hidroxiursolic, hidroxioleanolic, betulinic, dehidrobetulinic, obtinut sub forma de acizi in stare libera sau ca săruri de Na, K sau NH4, prin extracția plantei Salvia species prezentând următoarele efecte farmacologice:- activitate de bioreglare a metabolismului proteic, glucidic și lipidic, în special asupra organismelor îmbătrânite, cu aplicații în terapia preventivă și curativă a maladiilor metabolice și cardiovasculare cu etiologie aterosclerotică;- activitate imunoprotectoare și hepatoprotectoare, de contracarare a efectelor adverse imunosupresoare și hepatotoxice, survenite după tratamentul cu glucocorticosteroizi, citostatice;- activitate antioxidanta;- activitate antiinflamatoare locală.
- 2. Complex bioactiv de acizi triterpenici, conform revendicării 1, caracterizat prin aceea că, în scopul creșterii biodisponibilității produsului și solubilității, în unii solvenți de condiționare, se obține și se utilizează și sub formă de săruri de Na, de K sau de NH4, de puritate minim 90%, constituite din: minim 75 % ursolat de Na sau de K sau de NH4, 10...15% oleanolatde Na sau de K sau de NH4 și 4...10% săruri de Na, de K sau de NH4 ale altor acizi triterpenici constituiți din unul sau mai mulți dintre acizii: hidroxiursolic, hidroxioleanolic, betulinic, dehidrobetulinic.
- 3. Procedeu de obținere a complexului bioactiv de acizi triterpenici definit in revendicarea 1 , caracterizat prin aceea ca materia prima vegetala uscata si pulverizata, constituita din Salvia species herba, se extrage prin macerare dinamică în raportul 1/15...1/30 m/v, masă vegetală/solvent, cu unul dintre solvenții de extracție reprezentați de amestecurile constituite din: 5...15% apă structurată „I” cu85...95% acetonă sau cu 85...95% alcool etilic 95c, timp de 8...24h, la 15...80°C, rezultând soluția extractivă care in scopul purificării, se trece pe o coloană cromatografică cu cărbune activ granulat cu pH acid, apoi se concentrează sub vid la temperatura de 35...40°C pana la 1/10 ... 1/20 din volumul inițial obtinandu-se o suspensie care se menține timp de 12....24 h la 5....10°C, apoi se filtrează sub vid, substanța obținută după uscare la 105°C, timp de 3 h, constituind complexul bioactiv de acizi triterpenici brut cu un conținut de minim 70%, care/nCV 2 Ο 1 Ο - Ο 0 5 7 8 - Ο 5 -07- 2010 purificării, se dizolvă la reflux- 80°C în raportul 1/100...1/200 m/v în unul dintre solvenții reprezentați de amestecurile constituite din: 5...10% apă structurată „l”sau „S” cu 90...95% alcool etilic 95c sau cu 90...95% acetonă; soluția obținută se purifică prin adsorbție pe cărbune activ cu pH acid, adaugat in raportul de 0,1....0,3% m/v, se filtrează, se concentrează sub vid la 35....40°C până la 1/10...1/20 din volumul inițial, iar suspensia rezultata se lașa 12...24 h la 5....10°C, se filtrează sub vid, precipitatul obținut se spala cu 0,3....0,5 I apa distilata, pana la pH neutru, se usucă la 105°C minimum 3 h , se pulverizează, obtinandu-se produsul purificat cu o concentrație de minim 90% acizi triterpenici care se supune unei cristalizări din alcool etilic, acetona sau acetat de etil prin dizolvare la reflux sub vid, cu ridicarea temperaturii de vapori la 50°.... 60 °C, concentrare sub vid pana la 1/10 -1/20 din volumul inițial, suspensia cristalina obtinuta se răcește pe baie de gheata rapid, sub agitare, se filtrează imediat sub vid si se usucă la 90-110 °C in curent de aer cald, obtinandu-se complexul bioactiv de acizi triterpenici 100% din care acid ursolic min.80% si max. 20 % amestec din acid oleanolic, hidroxiursolic, hidroxioleanolic, betulinic, dehidrobetulinic.
- 4. Procedeu conform revendicării 3, caracterizat prin aceea că în vederea obținerii complexului bioactiv de acizi triterpenici sub formă de săruri de Na, de K și de NH4, descris la revendicarea 2, complexul bioactiv de acizi triterpenici cristalizat cu un conținut de minim 90% se dizolvă la reflux la 80°C în raportul 1/100...1/200 m/v în amestecul de solvenți cu pH alcalin: 90...95% alcool etilic 95c cu
- 5...10% apă structurată “S”, cu pH=10...12, care conține și 1% NaOH sau 1% KOH sau 5% NH4OH 25%, soluția obținută se concentrează sub vid la 35...40°C până la 1/5...1/10 din volulmul inițial, suspensia rezultată se menține 12...24h la 5...10°C pentru finalizarea cristalizării, urmată de filtrare sub vid, spălarea precipitatului cu 0,1...0,3 I apă distilată până la pH neutru, uscare la 105°C, timp de 3 h și pulverizare, rezultând complexul bioactiv de acizi triterpenici purificat, ca sare de Na sau de K sau de NH4, cu un conținut de minim 90% constituit din: minim 75 % ursolat de Na sau de K sau de NH4, 10... 15% oleanolat de Na sau de K sau de NH4 și 4...10% săruri de Na, de K sau de NH4 ale altor acizi triterpenici constituiți din unul sau mai mulți dintre acizii: hidroxiursolic, hidroxioleanolic betulinic, dehidrobetulinic.Produs conține descris medicamentos de uz uman și/sau veterinar caracterizat prin aceea că, ca substanță farmaceutic activă complexul bioactiv de acizi Jriter la revendicările 1 și 2, condiționat sub formă de capsule oΛ / \ /^-2010-00570-O 5 -07- 2010 și/sau gelatinoase moi ce conțin între 50...100 mg complex bioactiv de acizi triterpenici/capsulă și care se administrează în doze de 3...6 capsule/zi, timp de1...24 luni, având următoarele efecte farmacologice: antiaterosclerotic, tonifiant vascular, în special la nivel coronarian, hipoglicemiant, hipolipidemiant, hepatoprotector, imunoprotector, antioxidant, antiinflamator, cu utilizări terapeutice în următoarele maladii: tulburări cardiovasculare cu etiologie aterosclerotică, diabet, degenerări ale colagenului vascular, tisular și dermic, sindrom varicos și diferitele manifestări ale insuficienței venoase cronice, afecțiuni vasculare retiniene.
- 6. Produs medicamentos caracterizat prin aceea că, conține ca substanță farmaceutic activă complexul bioactiv de acizi triterpenici descris la revendicările 1 și 2, condiționat sub formă de tablete ce conțin între 50...100 mg complex bioactiv de acizi triterpenici/tabletă și care se administrează în doze de 3...6 tablete/zi, timp de1...24 luni, având următoarele efecte farmacologice: antiaterosclerotic, tonifiant vascular, în special la nivel coronarian, hipoglicemiant, hipolipidemiant, hepatoprotector, imunoprotector, antioxidant, antiinflamator, cu utilizări terapeutice în următoarele maladii: tulburări cardiovasculare cu etiologie aterosclerotică, diabet, degenerări ale colagenului vascular, tisular și dermic, sindrom varicos și diferitele manifestări ale insuficienței venoase cronice, afecțiuni vasculare retiniene.
- 7. Produs medicamentos de uz uman și/sau veterinar caracterizat prin aceea că, conține ca substanță farmaceutic activă complexul bioactiv de acizi triterpenici descris la revendicările 1 și 2, condiționat sub formă de gel sau de cremă ce conține 0,1...1% complex bioactiv de acizi triterpenici, ca atare sau sub formă de săruri care se administrează în doza de 10...30 mg/zi, timp de 1...6 luni, având următoarele efecte farmacologice: trofic și regenerator al colagenului vascular, tisular și dermic, antiinflamator, antioxidant, antihialuronidazic și antielastazic, cu utilizări terapeutice în următoarele maladii: degenerări ale colagenului dermic, vascular, tisular cum ar fi, dermatoze inflamatorii și pruriginoase, sindrom varicos și post trombotic, insuficiența venoasă cronică, fragilitate vasculară, stări inflamatorii.
- 8. Produs medicamentos de uz uman și/sau veterinar caracterizat prin aceea că, conține ca substanță farmaceutic activă complexul bioactiv de acizi triterpenici descris la revendicările 1 și 2, condiționat sub formă de supozitoare ce conțin0,5...1% complex bioactiv de acizi triterpenici, care se administrează în doze de50...100 mg/zi, timp de 1...6 luni, având următoarele efecte farmacologice:imunoprotector, antiinflamator, antioxidant, trofic și regenerator al colagenyțuj xice \ .‘BIOTEHNOS :vascular, cu utilizări în următoarele stări imunosupresive, mai ales h ocl o 1 o - o O 5 7 8 - O 5 Ό7- 2010 survenite după tratamentul cu glucocorticosteroizi și citostatice, procese inflamatorii, sindromul hemoroidal.
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ROA201000578A RO127000B1 (ro) | 2010-07-02 | 2010-07-02 | Complex bioactiv de acizi triterpenici, procedeu de obţinere şi produse medicamentoase |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| ROA201000578A RO127000B1 (ro) | 2010-07-02 | 2010-07-02 | Complex bioactiv de acizi triterpenici, procedeu de obţinere şi produse medicamentoase |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RO127000A2 true RO127000A2 (ro) | 2012-01-30 |
| RO127000B1 RO127000B1 (ro) | 2013-12-30 |
Family
ID=45509896
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| ROA201000578A RO127000B1 (ro) | 2010-07-02 | 2010-07-02 | Complex bioactiv de acizi triterpenici, procedeu de obţinere şi produse medicamentoase |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| RO (1) | RO127000B1 (ro) |
-
2010
- 2010-07-02 RO ROA201000578A patent/RO127000B1/ro unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| RO127000B1 (ro) | 2013-12-30 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| Dubey et al. | A multipurpose tree-Moringa oleifera | |
| ES2719958T3 (es) | Composición medicinal de extracto de semilla de Emblica officinalis y método para prepararla | |
| ES2613381T3 (es) | Nuevos extractos de Cynara scolymus, Coffea spp. y Olea Europaea para el tratamiento de síndrome metabólico | |
| US20100298423A1 (en) | Nutraceutical composition from garcinia mangostana | |
| RO120950B1 (ro) | Complex bioactiv de acizi triterpenici, procedeu de obţinere şi produse medicamentoase cu utilizări terapeutice | |
| CN102430090A (zh) | 一种藏药如意珍宝组合物制剂及其制备方法 | |
| JP6656316B2 (ja) | ハマナツメの使用方法、ハマナツメ抽出物の使用方法及び薬物混合物の使用方法 | |
| US10624942B2 (en) | Composition for amelioration of peri- and post-menopausal symptoms and a process for producing the same | |
| JP2016160198A (ja) | 黒生姜含有組成物 | |
| TW201943413A (zh) | 含薑黃酮醇a及／或薑黃酮醇b之組合物 | |
| TWI436787B (zh) | Glutathione production enhancers and pharmaceuticals, foods or cosmetics that promote the production of glutathione | |
| ES2674874T3 (es) | Composición antiinflamatoria | |
| CN101254217A (zh) | 一种红豆杉树可再生部分的提取物的制备方法及该提取物在制备口服抗癌药物中的应用 | |
| EP4349356A1 (en) | Method for the preparation of extracts enriched with saturated, monounsaturated and polyunsaturated long-chain fatty acids from tabebuia impetiginosa (lapacho) | |
| JP2012158540A (ja) | セラミド産生促進剤 | |
| JP5661309B2 (ja) | 抗肥満剤 | |
| KR20160068215A (ko) | 천연 추출물을 함유하는 여드름 개선용 화장료 조성물 | |
| JP6541061B2 (ja) | 時計遺伝子発現促進用組成物 | |
| JP4105498B2 (ja) | アトピー性疾患の症状の予防・緩和に有効な組成物 | |
| CN102961418B (zh) | 一种复方沙棘双嘧片及其制备方法 | |
| KR20110113112A (ko) | 금은화 추출물을 유효성분으로 포함하는 알러지성 질환 및 염증성 질환의 예방 및 치료용 약학 조성물 및 그 제조방법 | |
| KR100670850B1 (ko) | 진교 추출물을 유효성분으로 함유하는 과민성 피부 질환치료제 | |
| RU2445111C1 (ru) | Способ получения масла из семян тыквы, используемого в лечебных, пищевых и косметических целях и биологически активное средство | |
| CN105796637A (zh) | 一种抗乳腺癌的中药组合物及其制备方法与应用 | |
| JP2011111390A (ja) | ホルモン補充療法効果促進剤 |