RS20060263A - Derivati bengamida, postupak za njihovu proizvodnju i njihova primena za lečenje bolesti raka - Google Patents
Derivati bengamida, postupak za njihovu proizvodnju i njihova primena za lečenje bolesti rakaInfo
- Publication number
- RS20060263A RS20060263A YUP-2006/0263A YUP20060263A RS20060263A RS 20060263 A RS20060263 A RS 20060263A YU P20060263 A YUP20060263 A YU P20060263A RS 20060263 A RS20060263 A RS 20060263A
- Authority
- RS
- Serbia
- Prior art keywords
- formula
- compound
- denotes
- defined according
- bengamide
- Prior art date
Links
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D223/02—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
- C07D223/06—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D223/08—Oxygen atoms
- C07D223/10—Oxygen atoms attached in position 2
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
- A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P35/00—Antineoplastic agents
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
- C07D223/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom
- C07D223/02—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings
- C07D223/06—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having one nitrogen atom as the only ring hetero atom not condensed with other rings with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
- C07D223/12—Nitrogen atoms not forming part of a nitro radical
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P17/00—Preparation of heterocyclic carbon compounds with only O, N, S, Se or Te as ring hetero atoms
- C12P17/10—Nitrogen as only ring hetero atom
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Zoology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Virology (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
- Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
Abstract
Ovaj pronalazak obuhvata derivate bengamida, koji nastaju u toku fermentacije mikroorganizma Myxococcus virescens ST200611 (DSM 15898), njihovu primenu za lečenje bolesti raka, lekove koji sadrže derivate bengamida, jedan postupak za proizvodnju bengamida formule (V), kao i mikro organizam Myxococcus virescens ST200611 (DSM 15898).
Description
Derivati bengamida, postupak za njihovu<p>rćizV<o>đn^t<f>iiijihova primena za
lečenje bolesti raka
Rak je najčešća bolest ljudi i životinja sa smrtnim ishodom, koja je prouzrokovana nekontrolisanim rastom sopstvenih ćelija tela. Rak je zajedničko ime za nastajanje zloćudnih oteklina (malignoma), od neoplazme (tumori odnosno karcinomi) ili maligno degenerisanih kao i smetnji u sazrevanju belih krvnih zrnaca (leukemija, rak krvi). Ćelije raka ili tumora nastaju kroz transformaciju ćelija organizma (telesnih ćelija). Zloćudnost ćelija raka se zasniva na autonomji rasta, što znači da imaju sposobnost da se neometano i bez uklapanja u plan rasta organa da se razvijaju (rasu) i infiltriraju u tkivo i rastući razaraju ga. Jedan siguran znak malignosti je nastajanje novih kolonija u organizmu daleko od primarnog tumora (pojava metastaza) hematogenim i limfogenim širenjem ćelija tumora. Rak spada u najčešće uzroke smrti ljudi i stoga postoji velika potreba za metodama i sredstvima za izlečenje ili lečenje malignig degeneracija.
Mogućnosti terapije malignih tumora obuhvataju, pored - ako je to moguće radikalnog - operativnog uklanjanja tumora, radiološku terapiju sa rcntgcnskim zračenjem, a-, p- y-zracima, imunoterapiju i hemoterapiju. Imunoterapija je za sada primenjiva samo u ograničenom obimu. Pod hemoterapijom tumora podrazumeva se davanje otrova za ćelije (citostatika) za obradu tumora i preostalih tumornih ćelija, najčešće posle lokalnih hirurških obrada ili posle zračenja. Ove supstance napadaju specifično u određenim fazama deobu ćelija, tako da tkivo sa velikim udelom ćelija koje se dele, kao što su to brzo rastuće tkivo tumora, su osetljivije na reagovanje ovakvih supstanci. Za primenu dolaze u obzir alkilovana jednjenja, kao što su na primer ciklofosfamid, antimetaboliti, kao Methotrexat, alkaloidi, kao Vincristin i antibiotici, kao stoje Daunomvcin ili Adriamvcin. Sve ove supstance imaju velike nedostatke koji se manifestuju u jako zastupljenim sporednim dejstvima, tako da smrt bolesnika biva samo odložena, a nikako sprečena. Osim toga dolazi kod degenerisanih ćelia do rezistencije u odnosu na prmenjena sredstva, pa korišćeni medikamenti više ne deluju citostatički, ali dobro deluju toksično zbog sporednih dejstava. Pored toga pokazalo se da kombinovana, odnosno sekvencijalna primena različitih citostatika po efektu premašuje efikasnost dejstva jednog jedinog citostatika (monoterapija) i tako je moguće da se značajni sporedni efekti pri polihemoterapiji ne adiraju. Iz tih razloga su hitno potrebni nova hemoterapeutska sredstava i ona se traže u ćelom svetu.
Kao prvi primeri bengamida su izolovani Bengamidi A i B, koji su supstituisani na kaprolaktamskom prstenu sa dodekanoilom i to iz morskih sunđeraJaspis cf. Coriacea(familijaCoppatiidae,redChoristida B Astrophorda)(Adamczewski et. al., J. Org. Chem. 1986, 51, 4497 - 4498) i opisani kao biotoksični u odnosu na eukariotske ćelije, crve i bakterije.
Primer za derivate bengamida, kod kojih je dokazana antitumorna aktivnost, su bengamidi E
i njegovi N - metilirani derivati Bengamidi F. Bengamid E ometa proliferaciju ćelija tako da deoba ćelija na restrikcionoj tački Gl/S i u G2/M fazi ciklusa ćelija bivaju zaustavljeni. Bengamid B derivati ometaju proliferaciju ćelija kod MDA-MB-435 ćelija raka dojke. (Kinder et al., J. Med. Chem. 2001, 44, 3692 - 3699).
Poznatim derivatima bengamida je zajedničko da su izolovani iz morskih sunđera vrste Jaspis sp. ili Pachastrissa sp. (Thale et al., J. Org. Chem. 2001, 66, 1733 - 1741).
Pronađeno je da mikroorganizmi sojaMyxococcus virescensST200611 (DSM 15898), može da nagradi nove derivate bengamida, koji u malim koncentracama ometaju proliferaciju ćelija i shodno tome su vrlo pogodni za lečenje i/ili profilaksu bolesti raka.
Podneto otkriće obuhvata jedno jedinjenje formule (I),
u kome
R\označava H ili (Cj-C6)-alkil,
R2označava H ili OH, a
R3označava H ili -C(=0)-(Ci-C6)-alkil,
ili jednu fiziooški podnošljivu so jednog jedinjenja formule (I).
Nezavisno jedan od drugog R^je prvenstveno H ili metil, i R3prvenstveno H.
Otkriće se prvenstveno odnosi na jedinjenje formule (I), u kojem
R\označava H ili metil,
R2označava H ili OH, a
R3označavaH.
(Ci-C5)-alkil označava jednu linearnu ili razgranatu alkil grupu sa 6 atoma ugljenika, primera radi metil (Me), etil, n-propil, izo-propil, tert-butil ili n-heksil, a prvenstveno metil.
Otkriće obuhvata nadalje jedno jedinjenje formule (I), naznačeno preko jedinjenja formule (II),
jedno jedinjenje formule (III) i jedno jedinjenje formule (IV)
Prijavljeno otkriće obuhvata nadalje sve očigledne hemijske ekvivalente jedinjenja formule (I) shodno ovome otkriću. Takvi ekvivalenti su jedinjenja, koja pokazuju jednu neznatnu razliku, a imaju isto farmakološko dejstvo ili se pod blagim uslovima mogu prevesti u jedinjenja shodno ovome pronalasku. U naznačene ekvivalente spadaju na primer takođe soli, produkti redukcije, produkti oksidacije, estri, etri, acetali ili amidi jedinjenja formule (I), kao i ekvivalenti koje može jedan stručnjak da proizvede na osnovu standardnih metoda, a pored toga i svi optički antipodi, dijastereomeri i svi stereoizomerne forme.
Ovo otkriće dalje obuhvata jedan postupak za proizvodnju jednog jedinjenja formule (V),
u kome
R\označava H ili (Ci-C6)-alkil,
R2označava H ili OH,
R3označava H ili -C(=0)-(CrC6)-alkil, a
R4označava metil ili etil,
ili jednu fiziološki prihvatljivu so jednog jedinjenja formule (V),
koje je naznačeno time, što
1. se sojMyxococcus virescensST200611 (DSM 15898) ili jedna njegova varijanta i/ili mutanti se fermentiraju pod pogodnim uslovima u jednom medijumu za kultivisanje sve dok se u tome medijumu ne nagomila
jedno ili više jedinjenja formule (V).
2. se jedinjenje formule (V) izoluje iz medijuma za kultivisanje, i
3. se jedinjenje formule (V) u datom slučaju derivatizuje i/ili u datom slučaju prevede u jednu fiziološki prihvatljivu so.
Otkriće (pronalazak) se prvenstveno odnosi na jedan postupak za proizvodnju jednog jedinjenja formule (V), pri čemu je R4 jednako etil. Produkt takvog jednog postupka odgovara jednom jedinjenju formule (I), kao što je gore opisano.
Posebno značajna prednost ima to što se otkriće odnosi na postupak za proizvodnju jednog jedinjenja formule (V), pri čemu nezavisno jedan od drugoga R) označava H ili metil, R3označava H, a R4 označava etil.
Nadalje ovo otkriće obuhvata jedan postupak za proizvodnju jednog jedinjenja formule (II), jednog jedinjenja formule (III), jednog jedinjenja formule (IV), kao i derivate bengamida E i F.
Centri hiralnosti ujedinjenjima formule (I) i (V) mogu, ako nije drugačije naznačeno, da se nalaze u R- ili u S - konfiguraciji. Ovo otkriće obuhvata kako optički čista jedinjenja tako i smeše stereoizomera kao i smeše enantiomera i smeše dijastereomera.
Pod fiziološki prihvatljivim solima jedinjenja formule (I) i (V) podrazumevaju se kako organske tako i neorganske soli, kao što su opisane u Rcmington's Pharmaceutical Sciences (17. izdanje, strana 1418 (1985)). Iz razloga fzičke i hemijske stabilnosti i rastvorljivosti prednost imaju kisele grupe a između ostalih imaju prednost natrijum-, kalijum-, kalcijum- i amonijum soli; za bazne grupe između ostalih prednost imaju soli hloro-vodonične kiseline, sumporne kiseline, fosforne kiseline, ili ugljenične kiseline ili sulfonske kiseline, a između ostalih prednost imaju na primer sirćetna kiselina, limunska kiselina, benzoeva kiselina, fumarna kiselina, vinska kiselina i p-toluensulfonska kiselina.
Medijum za gajenje kulture čini jedan hranljivi rastvor ili jedna čvrsta hranljiva podloga sa najmanje jednim uobičajenim izvorom ugljenika i azota, kao i uobičajenim neorganskim solima. Ako se u medijum za gajenje kulture doda hidroksilizin tada sojMyxococcus virescensST200611 (DSM 15898) pri varenju od hidroksilizina produkuje jedno jedinjenje formule (V) u kome je R2 jednako OH.
Predmet prijavljenog otkrića je stoga jedan postupak za proizvodnju jednog jedinjenja formule (V) kao što je gore opisano, pri čemu je R2 jednako OH, i pri tome medijum za gajenje kulture u stupnju 1 sadrži hidroksilizin.
Prema ovome otkriću može se postupak fermentacije izvoditi u laboratotijskim uslovima (fermentor dimenzija od mililitra do nekoliko litrara), kao i u industrijskim razmerama (fermentor dimenzija reda veličine kubnog metra).
Kao izvor ugljenika za fermentaciju pogodni su ugljeni hidrati koji se lako asimiliraju, kao što su glukoza, laktoza, saharoza ili D-manit, kao i prirodni produkti koji sadrže ugljene hidrate, kao npr. ekstrakt slada ili ekstrakt kvasca. Hranljive materije koje sadrže azot su primera radi aminokiseline; peptidi i proteini kao i njihovi produkti razgradnje, primera radi kazein, peptoni ili triptoni; ekstrakti mesa; ekstrakti kvasca; gluten; mleveno seme, primera radi kukuruz, žito, pasulj, soja ili biljke pamuka; ostaci posle destilacije pri proizvodnji alkohola, mesno brašno; ekstrakt kvasca; amonijumove soli; nitrati. Prednost kao izvori azota imaju jedan ili više sintetski ili biosintetski dobijeni peptidi. Neorganske soli su primera radi hloridi, karbonati, sulfati ili fosfati, koji sadrže alkalne ili zemnoalkalne metale, gvožđe, zink, kobalt mangan. Elementi u tragovima su kobalt i mangan.
Pogodni uslovi za nastajanje bengamida prema ovome pronalasku su kao što sledi: nastajanje bengamida prema ovome pronalasku se odigrava sa prednošću u medijumu za gajenje kultire, koji sadrži 0,05 do 5 %, prioritetno 0,1 do 2,5 % ekstrakta kvasca; 0,2 do 5 %, prioritetno 0,1 do 2 % Casitone; 0,02 do 1,0 %, prioritetno 0,05 do 0,5 % CaCl2x 2H20; 0,02 do 1,5 %, prioritetno 0,05 do 0,7 % MgS04x 7H20 kao i 0,00001 % do 0,001 % Cvanokobalamin. Navodi u procentima se odnose na masu ukupnog hranljivog rastvora.
Kultivisanje mikroorganizma se odigrava aerobno, dakle primera radi u tečnosti uz mućkanje ili mešanje u kolbenu za mućkanje ili fermentoru ili na čvrstom medijumu takođe uz uvođenje vazduha ili kiseonika. Može se izvoditi u oblasti temperatura oko 18 do 35 °C, prvenstveno pri oko 20 do 32 °C, a posebno pri 27 do 30 °C. Oblast pH treba da se kreće između 4 i 10, prvenstveno između 6,5 i 7,5. Pod ovim uslovima mikroorganizmi se kultivišu obično u vremenskom intervalu od 2 do 10 dana, prvenstveno u intervalu od 72 do 168 časova. Prednost ima kultivisanje u trajanju od više časova, odnosno prvo se proizvede jedna ili više predkultura u jednoj tečnoj hranljivoj podlozi, koja se zatim prenese - zaseje u stvarni proizvodni medijum, glavna kultura, primera radi u odnosu 1 : 10 do 1 : 100. Predkultura se dobija tako što se na primer soj u obliku vegetetativnih ćelija i/ili tela ploda zaseje u hranljivi rastvor i ostavi da raste od oko 20 do 120 časva, prvenstveno 48 do 96 časova. Vegetativne ćelije i/ili tela ploda mogu se dobiti primera radi ukoliko se jedan rsoj od 1 do 15 dana, prvenstveno 4 do 10 dana, ostavi da se razmnožava na jednoj čvrstoj ili tečnoj hranljivoj podlozi, kao što je primera radi kvasac na agaru.
Izolacija, odnosno prečišćavanje jednog derivata bengamida formule (V) iz medija kulture izvodi se poznatim metodama uz uzmanje u obzir hemijskih, fozičkih i bioloških svojstava prirodnih supstanci. Za testiranje koncentracije dotičnih derivata bengamida u medijumu kulture ili u pojedinim fazama izolacije primenjivana je HPLC, pri čemu se količina nastale supstance određuje poređenjem sa rastvorom za kalibraciju.
U cilju izolovanja tečna hranljiva podloga zajedno sa kulturom ili kultura zajedno sa čvrstim hranljivom podlogom se liofilizira, a zatim se derivati bengamida izdvajaju iz liofilizata ekstrakcijom sa organskim rastvaračima kao što su primera radi metanol ili 2-propanol. Faza organskih rastvarača sadrže prirodne supstance prema ovome pronalasku, koje se u datom slučaju koncentrišu u vakumu i dalje prečišćavaju.
Dalje prečišćavanje jednog ili više jedinjenja prema ovome patentnom zatevu sledi preko hromatografije na prigodnom materijalu, prvenstveno npr. na molekulskim sitima, na silikagelu, aluminijum oksidu na jonskim zmenjivačima ili na adsorbujućim smolama, odnosno na obrnutm fazama (revcrzna faza, RP). Uz pomoć ovih hromatografija razdvajaju se derivati bingamida. Hromatografija derivata bingamida se izvodi sa puferovanim vodenim rastvorima ili smešama vodenih i organskih rastvora.
Pod smešama vodenih i organskih rastvora podrazumevaju se svi organski rastvarači mešljivi sa vodom, prvenstveno metanol, 2-propanol i acetonitril, u oblasti koncentracija od 5 do 95 % rastvarača, prvenstveno od 5 do 40 % rastvarača ili takođe svi puferisani vodeni rastvori, koji su mešljivi sa organskim rastvaračima. Puferi koji se primenjuju su isti kao što su i gore opisani.
Razdvajanje derivata bengamida na osnovu njihove različite polarnosti izvodi se pomoću reverzne fazne hromatografije, primera radi na MCI® (adsorpciona smola firme Mitsubishi, Japan) ili Amberlite XAD® (TOSOHAAS), ili na drugim hidrofobnim materijalima, kao na primer na RP-8- ili RP-18-fazama. Pored toga moguće je razdvajanje izvesti i uz pomoć hromatografije normalne faze, na primer na silikagelu, aluminijum-oksidu ili sličnim nosačima.
Hromatografija derivata bengamida se izvodi sa puferisanim, baznim ili zakišeljenim vodenim rastvorima ili smešama vodenih rastvora sa alkoholima ili drugim, sa vodom mešljivim organskim rastvaračima. U svojstvu organskih rastvarača prednost ima primena acetonitrila i metanola.
Pod puferisanim baznim ili zakišeljenim vodenim rastvorima podrazumeva se npr. voda, fosfatni pufer, amonijum-acetat, limunski pufer, trifluorsirćetna kiselina, amonijak, trietilamin ili sve druge komercijalne, stručnjaku poznate kiseline i baze, prevashodno u koncentracijama do 1 %. Kod puferovanih vodenih rastvora posebnu prednost ima o,l % amonijum-acetat.
Hromatografija se izvodi sa jednim gradijentom koncentracija eluenta, polazeći od 100 % vode, a završavajući sa 100 % rastvaračem, prednost ima korišćenje linearnog gradijenta npr. od 5 do 95 % acetonitrila.
Alternativno se može koristiti i gel - hromatografija ili hromatografija na hidrofobnoj fazi. Gel - hromatografija se izvodi na poliakrilamid- ili kopolimernim gelima, kao što je na primer Biogel-P 2® (Biorad) ili Fraktogel TSK HW 40®
(Merck, Deutschland). Redosled prethodno navedenih hromatografija je obrnut.
Ako su bengamidi prisutni u obliku dijastereomera, mogu se oni razdvojiti poznatim metodama, primera radi preko hiralne kolone.
Derivatiziranje OH grupa u bočnom lancu jedinjenja formule (I) odnosno (V) (R3jednako H) u jednu acil grupu (Rj jednako -C(=0)-(Ci-C6)-alkil) se izvodi prema poznatim metodama (J.March, Advanced Organic Chemistrv, John Wiley & Sons, 4<th>Edition, 1992), primera radi preko reakcije sa jednim anhidridom kiseline. Reakcija sa jednim anhidridom sirćetne kiseline i prevođenje u jedno jedinjenje formule (I) odnosno (V), u kome R3označava -C(=0)-CH3, opisao je primera radi Adamczeski et al., J. Am. Chem. Soc. 1989, 111, 647-654.
Alkilovanje NH - grupe u prstenu kaprolaktama jednog jedinjenja formule (I) ili (V) (R]je jednako H) se izvodi takođe poznatim metodama (J.March, Advanced Organic Chemistrv, John Wiley & Sons, 4 ih Edition, 1992), primera radi preko reakcije sa Me2C03ili Me2S04za proizvodnju odgovarajućih N-metiliranih derivata, ili reakcijom sa (Ci-C6)-alkil-bromidom u prisustvu jedne baze.
Izolovani soj mikroorganizmaMyxococcus virescensST200611 je deponovan u Nemačkoj zbirci mikroorganizama i kultura ćelija GmbH (DSMZ), Mascheroder Weg 1B, 38124 Braunschweig, Deutschland, prema pravilima Budimpeštanskog ugovora od 11.09.2003 i nalazi se pod sledećim brojem: DSM 15898.
Vegetativne ćelije soja DSM 15898 imaju štapićast oblik karakterističan zaMyxococcus virescens.Na čvrstoj hranljivoj podlozi stvarajuMyxococcus virescensST200611 (DSM 15898) oranž-žute plodove, koji sadrže okrugle Myxo-spore.
Umesto sojaMyxococcus virescensST200611 (DSM 15898) mogu se koristiti i njihovi mutanti i/ili varijante, koji sintetizuju jedno ili više jedinjenja prema ovome pronalasku.
Jedan mutant je mikroorganizam, u kome su modifikovani jedan ili više gena genoma, pri čemu gen ili geni ostaju kao funkcionalni ili nasledni i koji su odgovorni za sposobnost organizma da sintetizuje jedinjenja prema ovome otkriću.
Takvi mutanti mogu da se dobiju na opšte poznate načine fizičkim sredstvima, primera radi ozračivanjem npr. ultravioletnim zracima ili rentgenskim zracima, ili hemijskim sredstvima, kao na primer etilmetan-sulfonatom (EMS); 2-hidroksi-4-metoksi-benzofenonom (MOB) ili N-metil-N'-nitro-N.nitrozogvanidinom (MNNG), ili kao što je to opisano Brock et al. u "Biology of Microorganism", Prentice Hali, strana 238-247 (1984).
Jedna varijanta je i fenotip mikroorganizma. Mikroorganizmi imaju sposobnost da se prilagode okolini i stoga pokazuju izrazitu fiziološku fleksibilnost. Pri fenotipskom prilagođavanju su sve ćelije mikroorganizma uvrnute (u obliku heliksa). Pri čemu način promene nije genetski uslovljen i pri izmeni uslova je reverzibilan (H.Stolp, Microbial ecologv: organizmus, habitats, activities.Cambridge Universitv Press, Cambridge, GB, strana 180, 1988).
Izdvajanje mutanata i/ili varijanti koje sintetizuju jedno ili više jedinjenja prema ovome otkriću, izvodi se po sledećoj šemi: - liofilizacija fermentacionog medijuma;
- ekstrakcija liofilizata sa jednim organskim rastvaračem,
- ekstrakcija jedinjenja iz filtrata kulture sa čvrstom fazom,
- analitika sa HPLC, DC ili preko testiranja biološke aktivnosti.
Opisani uslovi fermentacije važe zaMyxococcus virescensST200611 (DSM 15898) kao i za njegove mutante i/ili varijante.
Predmet podnetog pronalaska je nadalje i primenaMyxococcus virescensST200611 (DSM 15898) ili jednog mutanta i/ili varijante za proizvodnju jednog jedinjenja formule (V), a naročito jedinjenja formule (IV), ili jedne njihove fiziološki podnošljive soli, kao što je gore pisano.
Za dokaz ometanja proliferacije ćelija koristi se jedan test, koji se zasniva na određivanju intracelularne ATP - koncentracije. Mogu se primeniti poznate tumor-ćelijske linije, kao što su primera radi Hep-G2i Colo205. U ovome testu kao mera broja živih ćelija služi ATP-sadržaj metabolički aktivnih ćelija u jednoj reakciji luciferaze.
Jedinjenja formule (II) - (IV) se koriste u testu u pojedinačnim dozama od 0,3 - 40 uM i zavisnost od doze data je kao vrednost TC50, pri čemu (IIA) i (IIB) označavaju dijastereomere jedinjenja formule (II):
Predmet otkrića je stoga nadalje i primena jedinjenja formule (I) ili jedne fiziološki podnošljive soli istog, kao leka u humanoj medicini i veterini, naročito za lečenje i/ili profilaksu bolesti raka. Prvenstveno se otkriće odnosi na primenu jednog jedinjenja formule (I) ili njegove fiziološki podnošljive soli za lečenje raka dojke, raka creva, raka želudca, raka jetre, tumora na mozgu, tumora jajnika, raka jednjaka, raka bubrega, karcinoma ćelija mišića, a naročito karcinoma mišića glave i vrata.
Ovo otkriće nadalje se odnosi na jedan lek koji sadrži najmanje jedno jedinjenje formule (I) ili jednu njegovu fiziološki prihvatljivu so, pri čemu jedinjenje ili jedinjenja formule (I) mogu se kao takva pripremati u masi (čista) ili prioritetno u smeši sa jednim ili više uobičajenih farmakološki prihvatljivih nosača ili pomoćnih supstanci - aditiva.
Jedinjenja prema ovome otkriću su u čvrstom stanju ili u rastvoru u pH oblasti od 2 do 9, a najčešće 5 do 7, stabilna i mogu se stoga pripremati u uobičajenim galenskim formulacijama.
Lekovi prema ovome otkriću mogu na primer pri tome da budu primenjivani oralno ili parenteralno, ali je principijelno moguća i rektalna primena. Pogodne čvrste ili tečne galenske formulacije su primera radi u obliku granulata, praha, tableta, dražea, (mikro) kapsula, čepića, sirupa, emulzija, suspenzija, aerozola, kapi ili rastvora u ampulama za davanje injekcijom, kao i preparati sa produženim doziranjem aktivne komponente, pri čijoj proizvodnji se koriste uobičajeni farmakološki prihvatljivi nosači ili aditivi, kao što su sredstva za razaranje, sredstva za vezivanje, sredstva za presvlačenje, geliranje, bubrenje, klizna sredstva, sredstva za podmazivanje, sredstva za podešavanje ukusa, zaslađivači, ili posrednici rastvarana. Primenu nalaze takođe primera radi magnezijum-karbonat, titan-dioksid, laktoza, manit i drugi šećeri, talk, kazein, želatin, škrob, vitamini, celuloza i njeni derivati, životinjska i biljna ulja, polietilenglikol i rastvarači kao što su sterilisana voda, alkoholi, glicerin i viševalentni alkoholi.
U datom slučaju mogu se jedinične doze za oralnu upotrebu pripremti u obliku mikro kapsula da bi se pomerilo otpuštanje leka ili produžilo na jedan veći vremenski interval, kao na primer presvlačenjem ili ugradnjom - inkapsuliranjem aktivne komponente u formirane čestice odgovarajućeg polimera, voskova ili sličnih materijala.
Prioritetno se farmaceutski preparati proizvode i pripremaju u jediničnim dozama, pri čemu svaka jedinična doza sadrži jednu određenu dozu jednog ili više jedinjenja derivata bengamida formule (I). Kod čvrstih jediničnih doza, kao što su tablete, kapsule ili supozitorijum, može ova doza da iznosi do 500 mg, prioritetno ipak oko 0,1 do 200 mg, a pri rastvorima za davanje injekcijama u ampulama se ova količina kreće do 200 mg, prioritetno oko 0,5 do 100 mg po danu.
Dnevna doza za davanje zavisi od mase tela, starosti, pola, i stanja sisara. Pod određenim okolnostima mogu dnevne doze da budu manje ili veće od navedenih. Dnevne doze se mogu davati odjedanput u obliku pojedinačnih jediničnih doza ili pak u više manjih jediničnih doza, kao i davanja u više navrata delova pojedinačne doze u određenim vremenskim intervalima.
Lek prema ovome otkriću se proizvodi tako što se jedno ili više jedinjenja formule (1) prema ovome otkriću meša sa jednim ili više uobičajenih nosača ili pomoćnih supstanci i prevdi u oblik pgodan za davanje.
Sledeći primeri treba da bliže objasne ovo otkriće ali bez da na bilo koji način suze širinu ovoga otkrića ili ga ograniče.
Ukoliko se ne daju drugi podaci, navedeni procenti se odnose na masene procente i odnosi mešanja kod tečnosti na zapreminu.
Primer 1: OdlaganjeMyxococcus virescensST200611 (DSM 15898) pri
temperaturi od -135°C
Jedna agar poloča (1 % svežeg pekarskog kvasca, 1 % CaCl2x 2H20, 20 mM HEPES, 0,00005 % Cvanocobalamin, 1,5 % agara, pH 7,2) se zaseje sa sojemMyxococcus virescensST200611 (DSM 15898) i inkubira oko 7 dana pri 30 °C. Ćelije kulture sa površine agara se ostružu pomoću jedne sterilisane špatule i resuspenduju u 0,5 mL Casitone medijuma (1 % Casitone (Difco), 0,15 % MgS04x 7H20, pH 7,0) i odlože (čuvaju) pri -135 °C.
Primer 2. Proizvodnja predkulture u erlenmajerovom kolbenu odMyxococcus
virescensST200611 (DSM 15898)
100 mL hranljivog rastvora (1 % svežeg pekarskog kvasca, 1 % CaCl2x 2H20, 20 mM HEPES, 0,00005 % Cvanocobalamin, pH 7,2) u jednom sterilnom 300 mL
erlenmajerovom kolbenu se zaseje sa sojemMyxococcus virescensST200611 (DSM 15898) i inkubira 4 dana pri temperaturi od 30 °C i 180 o/min na jednoj rotirajućoj mućkalici. 5 mL ove kulture se zatim koristi za proizvodnju glavne kulture.
Primer 3: Proizvodnja jedne tečne glavne kultureMyxococcus virescensST200611
(DSM 15898)
Jedan sterilni erlenmajerov kolben sa 100 mL hranljivog rastvora (0,5 % ekstrakta kvasca, 0,5 % Casitone, 0,1 % CaCl2x 2H20, 0,2 % MgS04x 7H20, 0,00005 % Cvanocobalamin, pH 7,4) se zaseje sa 5 mL jedne predkulture (vidi primer 2) ili jednom sveže nastalom kulturom na jednoj agar ploči (1 % svežeg pekarskog kvasca, 1 % CaCl2x 2H20, 20 mM HEPES, 0,00005 % Cvanocobalamin, pH 7,2 i dodatno 1,5 % agara) i inkubira na jednoj mašini za mućkanje pri 180 o/min pri temperaturi od 30 °C. Maksimalna produkcija bengamida prema ovome otkriću se dostiže posle 72 - 96 časova. Za zasejavanje fermentora od 10 do 200 L dovoljna je jedna 72 - 96 časova stara predkultura (količina za zasejavane 5-10 %) iz istog hranljivog rastvora koo stoje opisano u primeru 2.
Primer 4: Proizvodnja jedne tečne glavne kultureMyxococcus virescensST200611
(DSM 15898) uz prehranjivanje hidroksilizinom za proizvodnju derivata bengamida (IV)
Jedan sterilni erlenmajerov kolben sa 100 mL hranljivog rastvora (0,5 % ekstrakta kvasca, 0,5 % Casitone, 0,1 % CaCl2x 2H20, 0,2 % MgS04x 7H20, 0,00005 % Cvanocobalamin, kao i 1 mM hidroksilizina, pH 7,4) zaseje se sa 5 mL jedne predkulture (vidi primer 2) ili jednom sveže nastalom kulturom na jednoj agar ploči (1 % svežeg pekarskog kvasca, 1 % CaCl2x 2H20, 20 mM HEPES, 0,00005 % Cyanocobalamin-a, pH 7,2 i dodatno 1,5 % agara) i inkubira na jednoj mašini za mućkanje pri 180 o/min pri temperaturi od 30 °C. Maksimalna produkcija derivata bengamida (IV), prema ovome otkriću, se dostiže posle 72 - 96 časova. Analitika sledi pomoću HPLC-MS. Za zasejavanje fermentora od 10 do 200 L dovoljna je jedna 72 - 96 časova stara pretkultura (količina za zasejavanje oko 5 — 10 %) iz istog hranljivog rastvora kao što je opisano u primeru 2.
Primer 5: Proizvodnja derivata bengamida u fermentoru
Fermentori od 10 L i 30 L su korišćeni pod sledećim uslovima:
Regulacija pH vrednosti je uvek izvođena sa 10 % KOH rastvorom, odnosno 10 % H2SO4rastvorom. Višekratnim dodavanjem Clerol FBA 265 (Cogins Deutschland GmbH) bilo je moguće suzbiti nastajanje pene. Maksimalni prinosi su ostvarivani posle 72 do 96 časova.
Primer 6: Izolovanje derivata bengamida (II) i (III), kao i bengamida E i F iz
mućkanihkultura Myxococcus virescensST200611 (DSM 15898)
Posle okončanja fermentacijeMyxococcus virescensST200611 (DSM 15898) čorba kulture iz primera 3 (30 L čorbe kulture) zajedno sa biomasom se liofilizira i liofilizat se ekstrahuje sa metanolom (2x5 L). Metanolski ekstrak se pod vakuumom ugusti do 1,2 L i zatim nanese na jednu pripremljenu kolonu, koja je napunjena sa oko 1,5 litara CHP-20P materijala (MCI® gel, 75-150 u, Mitsubishi Chemical Corporation). Eluirano je sa 95 % - nim metanolom. Protok kolone (120 mL/min) je prihvaćen i pod vakuumom je zapremina smanjena na 1,5 L.
Primer 7: Predrazdvajanje derivata bengamida (II) i (III), kao i bengamida E i F
pomoću RP-18 hromatografije
1,5 L rastvora dobijenog u primeru 6 naneto je na jednu Phenomenex Luna® lOu C18 (2) kolonu (veličine: 50 mm x 250 mm) sa predkolonom Luna® 10fi Cl8 (2)
(dimenzija: 21,2 mm x 60 mm) i eluirano sa gradijentom od 5 % do 95 % acetonitrila u vodi preko 60 minuta (0,1 % amonijum-acetat, pH 4,6 podešeno sa sirćetnom kiselinom). Protok je iznosio 150 mL/min, a veličina frakcija 200 mL. Bengamidi su se nalazili u frakcijama 5-9, 10-11 i 12-14.
Primer 8: Prečišćavanje derivata bengamida (II) i (III), kao i bengamida E i F
Pojedine frakcije iz primera 7 su liofilizirane i još jedanput prečišćene pomoću HPLC na jednoj Phenomenex Luna® 10p, C18 (2) koloni (veličine: 21 mm x 250
mm) sa predkolonom XTerra® Prep MS 18 lOp (Waters, dimenzija: 19 x 10 mm). Eluirano je sa gradijentom od 5 % do 40 % acetonitrila u vodi preko 40 minuta (uz dodatak 0,1 % amonijum-acetata, pH 8,8 koe je podešeno sa trietilaminom). Protok kroz kolonu jc iznosio 50 mL/min, i podcljen je u frakcije sa veličinom 7,5 mL. Frakcije 5-9 iz primera 7 sadrže jedinjenje formule (III) i iz njih je posle hromatografiranja i liofilizacije dobij eno 86 mg bengamida E (čistoća > 95 %). Frakcije 10 i 11 iz primera 7 daju posle hromatografije 145 mg bengamida (II)
(čistoće > 95 %, smeša dijastereomera 70/30) i 5 mg bengamida F (čistoće > 95 %). Iz frakcija 12-14 iz primera 7 dobieno je 35 mg bengamida (III) (čistoće >95 %) kao smeše diastereomera u odnosu 75:25. Kod dijastereomera radi se oodgovarajućim C-16 epimerima.
Primer 9: Izolovanje hidroksi - bengamida (IV) iz izmućkane kultureMyxococcus
virescensST200611 (DSM 15898)
Po završetku fermentacijeMyxococcus virescensST200611 (DSM 15898) čorba kulture iz primera 5 (10 L čorbe kulture) je zajedno sa biomasom liofilizirana i liofilizat ekstrahovan (2 x 3 L) sa metanolom. Zapremina metanolskog ekstrakta je u vakuumu redukovana na 400 mL i zatim naneta na pripremljenu kolonu, koja je napunjena sa 0,6 litara CHP - 20P (MCI® gela, 75 - 150 p, Mitsubishi Chemical Corporation). Eluirano je sa 5 %do 95 % metanola u vodi. Protok kroz kolonu (100 mL/min) je prikupljan u frakcije (0,5 minuta po frakciji). Frakcije koje su sadržavale željene derivate (frakcije 45-109) su sastavljene i u vakuumu im je zapremina smanjena na 700 mL.
Primer 10: Prethodno prečišćavanje hidroksi - bengamida (IV) preko RP - 18
hromatografije
Rastvor iz primera 9 zatim je nanet na jednu Phenomenex Luna® lOp Cl 8 (2) kolonu (veličine: 50 mm x 250 mm) sa predkolonom Luna® lOp Cl8 (2)
(dimenzija: 21,2 mm x 60 mm) i eluiran sa gradijentom od 5 % do 40 % acetonitrila u vodi preko 60 minuta (0,1 % amonijum-acetat, pH 8,8 podešeno sa trietilaminom). Protok je iznosio 150 mL/min, a veličina frakcija 225 mL. Frakcija 22 sadrži željene derivate bengamida.
Primer 11: Prečišćavanje hidroksi - bengamida (IV)
Frakcija 22 iz primera 10 je liofilizirana i još jedanput prečišćena pomoću HPLC na jednoj Phenomenex Luna® lOp Cl8 (2) koloni (veličine: 21 mm x 250 mm) sa predkolonom Waters XTerra® Prep MS 18 lOp (dimenzija: 19 x 10 mm). Eluirano je sa gradijentom od 5 % do 95 % acetonitrila u vodi preko 60 minuta (uz dodatak 0,1 % amonijum-acetata, pH 4,6 podešeno sa sirćetnom kiselinom). Protok kroz kolonu je iznosio 50 mL/min, i podeljen je u frakcije sa veličinom 7,5 mL. Frakcije koje sadrže bengamide (frakcije 26-28) su objedinjene i iz njih su odstranjene soli, a zatim su osušene liofilizacijom. Pri tome je dobijeno 7 mg bengamida (IV) kao smeše dijastereomera sa odnosom 75 : 25.
Primer 12: Karakterisanje jedinjenja formule (II)
Bruto formula: Ci8H32N206Molarna masa: 372,47 Smeša dijastereomera: 75 : 25
Primer 13: Karakterisanje jedinjenja formule (III)
Bruto formula: C19H34N206
Molarna masa: 386,49
Smeša dijastereomera: 75 / 25
Primer 14: Karakterisanje jedinjenja formule (IV)
Bruto formula: Ci8H32N207
Molarna masa: 388,46
Smeša dijastereomera: 75 / 25
Primer 15: Karakterisanje bengamida E
Bruto formula: C17H30N2O6Molarna masa: 358,44
Primer 16: Karakterisanje bengamida F
Beruto formula: Ci8H32N20(,
Molarna masa: 372,47
Primer 17: Razdvajanje dijastereomera jedinjenja (II)
Razdvajanje smeše dijastereomera jedinjenja formule(II) iz primera 8 je izvođeno na hiralnoj koloni (AD/H, Daicel, 20 x 200 mm, 0,5 mL protok, mobilna faza:
acetonitril: metanol 4 : 1 + 0,1 % NH4Ac). Optička čistoća je kontrolisana na jednoj analitičkoj AD/H - koloni (Daicel) (4,6 x 250 mm, 30 °C, mobilna faza: acetonitril: metanol 4 : 1 + 0,1 % NH4Ac, 0,75 mL protok, Rt pik 1: 9,9 min Rt pik 2: 10,9 min).
Primer 18: Merenja proliferacije ćelija na različitim linijama ćelija tumora
Za određivanje proliferacije ćelija primenjene su linije ćelija tumora Hep-G2 (ATCC No. HB-8o65) i COLO 205 (ATCC No. CCL-222). Linije ćelija su sa 1000 ćelija [Hep-G2] odnosno 3500 ćelija [Colo 205] u medijumu kulture inkubirane 4 časa pri 37 °C i u prisustvu 5 % C02. Medijum za Hep-G2: Dulbecco's modified Eagle's medium / Ham's F12-Mix (Gibco); NEAA (10 %; non essential amino acids, Gibco), natrijum-piruvat (1 %, Gibco), L-glutamin (1 %, Gibco), serum fetusa teleta (5 %; PAA).
Medijum za COLO 205: RPM1 1640 (Gibco), L-glutamin (1 % Gibco), HEPES (1 %, Gibco), serum fetusa teleta (10 %; PAA).
Posle 4 časa dodaju se jedinjenja (II), (III), (IV) i bengamid E i F, rastvorena u DMSO/medijumu ćelijske kulture, različito razblažena i inkubiraju se sledeća 72 časa pri temperaturi od 37 °C i u prisustvu 5 % C02. Određivanje sadržaja intracelularnog ATP izvođeno je uz primenu test reagensa CellTiterGlo (Promega).
Rezultati testa proliferacije ćelija opisani su u Tabeli 1.
Claims (16)
1. Jedinjenje formule (I), •.. ,r.n M2
naznačeno time što u njemuR\označava H ili (Ci-C6)-alkil, R/> označava H ili OH, a
R3označava H ili -C(=0)-(Ci-C6)-alkil,
ili jednu njegovu fiziooški prihvatljivu so.
2. Jedinjenje definisano prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, što R\označava H ili metil.
3. Jedinjenje definisano prema jednom od patentnih zahteva 1 ili 2, naznačeno time, što R3označava H.
4. Jedinjenje definisano prema jednom od patentnih zahteva 1 do 3, naznačeno time, što Rjoznačava H ili metil, R2označava H ili OH, a R3označava H.
5. Jedinjenje definisano prema jednom od patentnih zahteva 1 do 4, naznačeno jednim jedinjenjem formule (II)
6. Jedinjenje definisano prema jednom od patentnih zahteva 1 do 4, naznačeno jednim jedinjenjem formule (III)
7. Jedinjenje definisano prema jednom od patentnih zahteva 1 do 4, naznačeno jednim jedinjenj em formule (IV)
8. Primena jedinjenja formule (I) ili njegovih fiziološki prihvatljivih soli, definisanih prema jednom od patentnih zahteva 1 do 7, za proizvodnju jednog leka.
9. Primena jedinjenja formule (I) ili njegove fiziološki prihvatljive soli, definisanih prema jednom od patentnih zahteva 1 do 7, za proizvodnju jednog leka za lečenje i/ili proflaksu bolesti raka.
10. Lek koji sadrži najmanje jedno jedinjenje formule (I) ili njene fiziološki pruhvatljive soli, definisanih prema jednom od patentnih zahteva 1 do 7.
11. Postupak za proizvodnju jedinjenja formule (V),
u komeR\označavaH ili (Ci-Cg)-alkil,
R2označava H ili OH,
R3označava H ili -C(=0)-(CrC6)-alkil, a
R4označava metil ili etil,
ili jednu fiziološki prihvatljivu so jednog jedinjenja formule (V),
naznačenog time što se 1. sojMyxococcus virescensST200611 (DSM 15898) ili jedna njegova varijanta i/ili mutant pod pogodnim uslovima fermentira u jednom medijumu za kultivisanje sve dok se u medijumu za kultivisanje ne nagomila jedno ili više jedinjenja formule (V), 2. jedinjenje formule (V) izoluje iz medij uma za kultivisanje, i 3. jedinjenje formule (V) u datom slučaju derivatizuje i/ili u datom slučaju prevede u jednu fiziološki prihvatljivu so.
12. Postupak, definisan patentnim zahtevom 11, naznačen time, što je R4 jednako etil.
13. Postupak, definisan jednim od patetnih zahteva 11 ili 12, naznačen time, što nezavisno jedan od drugog R( označava H ili metil, R3označava H, a R4označava etil.
14. Postupak, definisan prema jednom od patentnih zahteva 11 do 13, naznačen time, što je R2 jednako OH, i što medijum za kultivisanje sadrži hidroksilizin.
15. MikroorganizamMyxococcus virescensST200611 (DSM 15898).
16. Primenu mikroorganizmaMyxococcus virescensST200611 (DSM 15898) ili jednog mutanta i/ili jedne njegove varijante za proizvodnju jednog jedinjenja formule (V)
naznačenog time što u njemuR\označava H ili (C \ -C6)-alkil,
R2označava H ili OH,
R3označava H ili -C(=0)-(C,-C6)-alkil, a R4označava metil ili etil,
ili jednu njihovu fiziološki prihvatljivu so.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE10349669A DE10349669B3 (de) | 2003-10-24 | 2003-10-24 | Bengamide-Derivate, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung |
| PCT/EP2004/011244 WO2005044803A1 (de) | 2003-10-24 | 2004-10-08 | Bengamide-derivate, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung zur behandlung von krebserkrankungen |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| RS20060263A true RS20060263A (sr) | 2008-09-29 |
Family
ID=34484998
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| YUP-2006/0263A RS20060263A (sr) | 2003-10-24 | 2004-10-08 | Derivati bengamida, postupak za njihovu proizvodnju i njihova primena za lečenje bolesti raka |
Country Status (29)
| Country | Link |
|---|---|
| EP (2) | EP1680405B1 (sr) |
| JP (1) | JP4769190B2 (sr) |
| KR (1) | KR20060120044A (sr) |
| CN (2) | CN101294173A (sr) |
| AR (1) | AR046553A1 (sr) |
| AT (2) | ATE420074T1 (sr) |
| AU (1) | AU2004287561B2 (sr) |
| BR (1) | BRPI0415529A (sr) |
| CA (1) | CA2543003A1 (sr) |
| CL (1) | CL2009000674A1 (sr) |
| CY (1) | CY1110458T1 (sr) |
| DE (3) | DE10349669B3 (sr) |
| DK (1) | DK1680405T3 (sr) |
| ES (1) | ES2320894T3 (sr) |
| HR (1) | HRP20090187T1 (sr) |
| IL (1) | IL174524A (sr) |
| MA (1) | MA28213A1 (sr) |
| ME (1) | MEP33108A (sr) |
| MX (1) | MXPA06004084A (sr) |
| NO (1) | NO20062149L (sr) |
| NZ (1) | NZ546744A (sr) |
| PL (1) | PL1680405T3 (sr) |
| PT (1) | PT1680405E (sr) |
| RS (1) | RS20060263A (sr) |
| RU (1) | RU2357956C2 (sr) |
| SI (1) | SI1680405T1 (sr) |
| UY (1) | UY28574A1 (sr) |
| WO (1) | WO2005044803A1 (sr) |
| ZA (1) | ZA200602231B (sr) |
Families Citing this family (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| FR2878528B1 (fr) | 2004-11-29 | 2008-05-16 | Aventis Pharma Sa | 2-alcoxy-3,4,5-trihydroxy-alkylamides, leur preparation, compositions les contenant et utilisation |
| FR2878525B1 (fr) | 2004-11-29 | 2007-02-23 | Aventis Pharma Sa | Bengamides possedant un cycle caprolactame substitue, procede de preparation, compositions les contenant et utilisation |
| FR2901556A1 (fr) | 2006-05-24 | 2007-11-30 | Sanofi Aventis Sa | Derives de 2-alcoxy-3,4,5-trihydroxy-alkylamide, leur preparation, compositions les contenant et utilisation |
| FR2901555A1 (fr) | 2006-05-24 | 2007-11-30 | Sanofi Aventis Sa | 2-alcoxy-3,4,5-trihydroxy-alkylamide-benzothiazepine, leur preparation, compositions les contenant et utilisation |
| FR2901554B1 (fr) | 2006-05-24 | 2011-04-01 | Sanofi Aventis | 2-alcoxy-3,4,5-trihydroxy-alkylamide-benzazepine, leur preparation, compositions les contenant et utilisation |
Family Cites Families (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| ES2061490T3 (es) * | 1986-04-04 | 1994-12-16 | Sankyo Co | Derivados de perhidrotiazepina y perhidroazepina, su preparacion y uso en terapeutica. |
| CO5140099A1 (es) * | 1998-11-17 | 2002-03-22 | Novartis Ag | Ciertas caprolactamas sustituidas, composiciones farmaceuticas que las contienen, y su uso en el tratamiento de tumores |
| CN1191237C (zh) * | 2000-05-11 | 2005-03-02 | 诺瓦提斯公司 | 取代的己内酰胺碳酸酯与醚和它们作为抗肿瘤剂的用途 |
| JP2004262793A (ja) * | 2003-02-28 | 2004-09-24 | Noyaku Bio Technology Kaihatsu Gijutsu Kenkyu Kumiai | 化合物ｎ−９０１１、その製造法及び用途 |
| BRPI0412843A (pt) * | 2003-07-25 | 2006-09-26 | Novartis Ag | lactamas substituìdas e uso das mesmas como agentes anticáncer |
-
2003
- 2003-10-24 DE DE10349669A patent/DE10349669B3/de not_active Expired - Fee Related
-
2004
- 2004-10-08 SI SI200431054T patent/SI1680405T1/sl unknown
- 2004-10-08 DK DK04765884T patent/DK1680405T3/da active
- 2004-10-08 BR BRPI0415529-7A patent/BRPI0415529A/pt not_active IP Right Cessation
- 2004-10-08 RU RU2006117769/04A patent/RU2357956C2/ru not_active IP Right Cessation
- 2004-10-08 KR KR1020067007889A patent/KR20060120044A/ko not_active Ceased
- 2004-10-08 DE DE502004011536T patent/DE502004011536D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2004-10-08 CN CNA2008100958532A patent/CN101294173A/zh active Pending
- 2004-10-08 HR HR20090187T patent/HRP20090187T1/xx unknown
- 2004-10-08 CN CNB2004800306469A patent/CN100398520C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2004-10-08 EP EP04765884A patent/EP1680405B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2004-10-08 AU AU2004287561A patent/AU2004287561B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2004-10-08 DE DE502004008837T patent/DE502004008837D1/de not_active Expired - Lifetime
- 2004-10-08 PL PL04765884T patent/PL1680405T3/pl unknown
- 2004-10-08 ES ES04765884T patent/ES2320894T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2004-10-08 CA CA002543003A patent/CA2543003A1/en not_active Abandoned
- 2004-10-08 ME MEP-331/08A patent/MEP33108A/xx unknown
- 2004-10-08 PT PT04765884T patent/PT1680405E/pt unknown
- 2004-10-08 NZ NZ546744A patent/NZ546744A/en unknown
- 2004-10-08 JP JP2006535987A patent/JP4769190B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2004-10-08 AT AT04765884T patent/ATE420074T1/de active
- 2004-10-08 RS YUP-2006/0263A patent/RS20060263A/sr unknown
- 2004-10-08 EP EP07007021A patent/EP1873146B1/de not_active Expired - Lifetime
- 2004-10-08 WO PCT/EP2004/011244 patent/WO2005044803A1/de not_active Ceased
- 2004-10-08 AT AT07007021T patent/ATE477244T1/de not_active IP Right Cessation
- 2004-10-08 MX MXPA06004084A patent/MXPA06004084A/es active IP Right Grant
- 2004-10-21 AR ARP040103818A patent/AR046553A1/es not_active Application Discontinuation
- 2004-10-22 UY UY28574A patent/UY28574A1/es unknown
-
2006
- 2006-03-16 ZA ZA200602231A patent/ZA200602231B/en unknown
- 2006-03-23 IL IL174524A patent/IL174524A/en not_active IP Right Cessation
- 2006-04-21 MA MA28955A patent/MA28213A1/fr unknown
- 2006-05-12 NO NO20062149A patent/NO20062149L/no not_active Application Discontinuation
-
2009
- 2009-03-19 CL CL2009000674A patent/CL2009000674A1/es unknown
- 2009-03-23 CY CY20091100336T patent/CY1110458T1/el unknown
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RS20060263A (sr) | Derivati bengamida, postupak za njihovu proizvodnju i njihova primena za lečenje bolesti raka | |
| US7638320B2 (en) | Bengamide derivatives, process for preparing them, and their use | |
| JP2012512224A (ja) | マクロラクトン誘導体、その製造方法、及びがんの処置のためのその使用 | |
| AU2002250997B2 (en) | Use of thiolutin dioxide and its derivatives in the manufacture of a medicament for the treatment of CNS disorders and a process for the preparation thereof | |
| JP5619001B2 (ja) | ストレプトスピロール誘導体 | |
| KR20030084973A (ko) | 칼로포로사이드 유도체, 이의 제조방법 및 이의 용도 | |
| HK1125410A (en) | Bengamide derivatives, method for the production thereof and use thereof for the treatment of cancer | |
| HK1098131B (en) | Bengamide derivatives, method for the production thereof and use thereof for the treatment of cancer | |
| AU2002250997A1 (en) | Use of thiolutin dioxide and its derivatives in the manufacture of a medicament for the treatment of CNS disorders and a process for the preparation thereof |