RS49576B

RS49576B - Novi derivati peptida

Info

Publication number: RS49576B
Application number: YUP-336/94A
Authority: RS
Inventors: Karl Thomas ANTONSSON; Ruth Elvy BYLUND; Nils David GUSTAFSSON; Nils Olov Ingemar NILSSON
Original assignee: Astra Zeneca A.B.,
Priority date: 1993-06-03
Filing date: 1994-06-03
Publication date: 2007-04-10
Also published as: CN1178905C; FI119812B; JP3205558B2; IL123996A; HU9503445D0; HRP940311B1; IS4166A; CN1278530A; HU226825B1; KR100339456B1; US5602253A; US20050222395A1; ATE200783T1; GR3036258T3; NO2004009I1; IL109634A; EP0701568B1; CA2162900A1; AU6986994A; LT3768B

Description

OBLAST TEHNIKE NA KOJU SE

PRONALAZAK ODNOSI

Ovaj se pronalazak odnosi na nove konkurentne inhibitore tripsinskih serinskih proteaza, posebno trombina i kininogenaza kao što je kalikrein, na njihovu sintezu, farmaceutske, preparate koji sadrže jedinjenja kao aktivne sastojke, kao i na primenu jedinjenja kao trombinskih inhibitora*! antikoagulanata i kao inhibitora zapaljenja. Pronalazak se takođe odnosi na novu primenu jedinjenja kao polaznih materijala kod sinteze nekog inhibitora serinske proteaze. Pored toga pronalazak se odnosi i na nove struk-turne fragmente kod inhibitora serinske proteaze.

Koagulacija je ključni proces koji se javlja i kod he-mostaze (tj. sprečavanja gubitka krvi iz oštećenog krvnog suda) i kod tromboze (tj. patološkog začepljenja krvnog suda ugruškom krvi). Koagulacija je rezultat kompleksnog niza enzimskih reakcija, pri čemu je jedan od završnih stupnjeva pretvaranje proenzima protrombina u aktivni enzim trombin.

Trombin ima glavnu ulogu kod koagulacije. On aktivira trombocite, pretvara fibrinogen u fibrinske monomere, koji sponta-no polimerizuju u vlakna, i aktivira faktor XIII, koji opet ukr-šteno povezuje polimer sa nerastvorljivim fibrinom. Trombin dalje aktivira faktor V i faktor VIII u jednoj prinudnoj reakciji povratne veze. Od inhibitora trombina se očekuje da budu efikasni antikoagulanti tako što će inhibirati trombocite, obrazovanje fibrina

i stabilizaciju fibrina. Time što će inhibirati mehanizam prinudne povratne veze, očekuje se da će ostvariti inhibiranje na samom po-četku niza događaja koji vode do koagulacije i tromboze.

Kininogenaze su serinske proteaze koje deluju na kini-nogene da proizvedu kinine (bradikinin, kalidin i Met-Lys-bradikinin). Plazmeni kalikrein, tkivni kalikrein i triptaza mast-ćelija predstavljaju važne kininogenaze.

Kinini (bradikinin, kalidin) uglavnom su povezani sa zapaljenjima. Tako, na primer, aktivni zapaljenski proces je pove-zan sa povećanom propustijivošću krvnih sudova koja dovodi do isticanja plazme u tkivo. Nastali eksudat plazme sadrži sve prote-inske sisteme iz krvotoka. Kininogeni izvedeni iz plazme će neiz-bežno međusobno delovati sa raznim kalikreinima, obrazujući nepre-kidno kinine sve dok se odvija aktivni proces isticanja plazme. Isticanje plazme odvija se nezavisno od mehanizama koji su povezani sa zapaljenjem, bilo da je to alergija, infekcija ili drugi činioci (Persson et. al., Editorial, Thorax, 1992, 47:993-1000). Zbog toga je isticanje (eksudacija) plazme svojstveno za mnoga oboljenja uključujući astmu, rinitis, običan nazeb i zapaljenska stomačna oboljenja. Posebno će kod alergija biti ispuštana triptaza mast-ćelija (Salomonsson i dr., Am. Rev. Respir. Dis., 1992, 146:1535-1542) da bi doprinela obrazovanju kinina i drugih patoge-nih pojava kod astme, rinitisa i crevnih oboljenja.

Kinini su biološki veoma aktivne materije koje deluju na glatke mišiće, na lučenja, koje imaju neurogenično dejstvo, i čije delovanje može produžavati zapaljenjske procese uključujući aktiviranje fosfolipaze Ag i povećanje propustijivosti krvnih sudova. Ovo poslednje delovanje može izazvati zatvoren krug kada kinini stvaraju uslove za generisanje više kinina itd.

Tkivni kalikrein čepa prvenstveno kininogen male molekulske mase da bi proizveo kalidin, a plazmeni kalikrein oslobađa bradikinin iz kininogena velike molekulske mase.

Trombinske inhibitore na bazi sekvence amino kiselina oko mesta cepanja za fibrinogenskiAaniz prvi put su opisali Blomb ck i dr. J. Clin. Lab. Invest. 24, suppl 107, 59 (1969) koji su ukazali da je sekvenca Phe-Val-Arg (P9-P2-P1, tu naznačena kao P3-P2-P1 sekvenca) najbolji inhibitor.

U US 4,246,078 S. Bajusz i dr. opisali se trombinski inhibitor H-DPhe-Pro-Agm, jedan dipeptidni derivat sa jednim aminoalkil gvanidinom u Pl-položaju.

Trombinski inhibitori na bazi peptidnih derivata sa jednim cikličnim aminoalkil gvanidinom, na primer 3-aminometil-l-amidinopiperidin, u Pl-položaju prikazani su u EP-A2-0,468,231.

U EP-A2-0,185,390 prikazali su Bajus i dr. da zamena agmatina jednim arginin aldehidom daje trombinski inhibitor mnogo veće moći.

Inhibitori kalkreina na bazi amino kiselinske sekvence oko mesta cepanja Arg-Ser poznati su od ranije.

Arginin hlormetil ketone H-DPro-Phe-Arg-CH2Cl i H-D Phe-Phe-Arg-CH Cl kao inhibitore plazmenog kalikreina naznačili su

2 Kettner i Shaw u Biochemistry 1978, 17:4778-4784 i u Meth. Enzym. 1981, 80:826-842.

Isto tako su objavili Fareed i dr. u . Ann. N. Y. Acad. Sci. 1981, 370:765-784 da su estri i amidi koji sadrže H-DPro-Phe-Arg sekvencu inhibitori plazmenog kalikreina.

Inhibitori serinske proteaze koji se zasnivaju na elek-trofilnim ketonima umesto na aldehidima u Pl-položaju, opisani su u sledeći patentnim dokumentima: EP-A2-0,195-212 opisuje peptidll a-keto estre i amide. EP-Al-0,362,002 opisuje fluoralkilamidne ketone i EP-A2-0,364,344 opisuje a, ^,S-triketo jedinjenja koja imaju različita svojstva inhibiranja peptidaza.

Inhibitori tripsinskih serinskih proteaza, kao što su trombin i kalikrein, na bazi C-završnih derivata borne kiseline arginina i izotiouronijumskih analoga istog prikazani su u EP-A2-0,293,881.

W0 92/04371 opisuje inhibitore kininogenaze, na pr. inhibitore kalikreina na bazi derivata arginina.

EP-Al-0,530,167 opisuje a-alkoksi ketonske derivate arginina kao trombinske inhibitore.

Jedan je cilj prikazanog pronalaska da se ostvare inhibitori tripsinske serinske proteaze, posebno protiv koagulantna i protivzapaljenska jedinjenja sa konkurentnim inhibitorskim delovanjem prema njihovom enzimu, tj. koja izazivaju reverzibilnu inhi-biciju. Tačnije, antikoagulanti za profilaksu i za lečenje trombo-embolijskih oboljenja kao što je venska tromboza, plućna embolija, arterijska tromboza, posebno Infarkt miokarda i cerebralna tromboza, opšta hiperkoagulabilna stanja i lokalna hiperkolaguabiIna stanja, na primer posle angioplaštije i operacija sa ugradnjom srčanih bajpasa, i za druge situacije gde se veruje da trombin ima neku ulogu, kao, na primer, Alchajmerova bolest, kao i za inhibiranje kininogenaza radi lečenja zapaljenskih poremećaja, na primer astme, rinitisa, koprivnjače, zapaljenskih trbušnih oboljenja i artritisa. Sledeći je cilj da se dobiju inhibitori koji se mogu davati oralno i koji selektivno inhibiraju trombin a ne i ostale serinske proteaze. Sledeći je cilj pronalaska da se dobiju inhibitori kininogenaze koji se mogu davati oralno, rektalno, lokalno, na primer preko kože, ili kroz disajne puteve.

Prema pronalasku je utvrđeno da su jedinjenja opšte formule I, bilo kao takva ili u obliku fiziološki prihvatljivih soli, i uključujući stereoizomere, moćni inhibitori serinskih proteaza, naročito trombina, i kininogenaza kao što je kalikrein:

gde:

A<1>predstavlja strukturni fragment formule Ha, Ilb, IIc, Ud ili He :

pri čemu:

k je ceo broj 0, 1, 2, 3 ili 4,

m je ceo broj i,.2, 3 ili 4,

q je ceo broj 0, 1, 2 ili 3,

R<1>predstavlja H, jednu alki Inu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova

atoma, ili R<11>00C-alkil-, gde alki Ina grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i eventualno je supstituisana u alfa položaju u odnosu na karbonilnu grupu, a alfa supstituent je jedna grupa R -{ CR^) -

gde je p 0, 1 ili 2, R<17>je metil, fenil, 0H, COOR<12>, CONHR<12>, gde je R<12>H ili jedna alki Ina grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, a RU je H ili jedna alki Ina grupa koja ima 1 do 6 ugljenikovih atoma,

ili

R<1>predstavlja Ph(4-C00R<12>)-CH2>gde je R<12>kako je napred defini-

sano,

ili

l 13

R predstavi ja . R -NH-CO-alki 1-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i eventualno^alfa supstituirana preiiiackarbonilu jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma i gde je

R 13 H ili neka alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma ili

12 12

-CRMIOOR , gde jeR kako je napred definisano,

ili

R<1>predstavlja R<12>OOC-CH2-0OC-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i eventualno je alfa supstituisana prema karbonilu jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma i gde je

12

R kako je napred definisano,

ili

R<1>predstavlja R<14>S0 -, Ph(4-C00R12)-S0 -. Ph(3-C00R12)-S0 -,

2 2 2 Ph(2-C00R<12>)-S02-, gde je R<12>kako je napred definisano a R<14>je

jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, ili R1 predstavlja -C0-R<15>, pri čemu je R<1S>jedna alkilna grupa koja

ima 1-4 ugljenikova atoma,

ili

1 1S 15

R predstavlja -CO-OR , gde je R kako je napred definisano,

ili

R<1>predstavlja -CO-(CH 2 ) p-COOR12, gde je R<12>kako je napred definisano, a p je ceo broj 0, 1 ili 2,

ili

R<1>predstavlja -CHP0(0R<16>)2, -CH^H ili -CH2-(5-( lH)-tetrazolil) gde je R<16>, pojedinačno kod svakog javljanja, H, metil ili etil,

R<2>predstavlja H ili jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma ili R<21>00C-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 uglje-nikovaatoma, i gdeje R21 H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma,

R<3>predstavlja jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, a alkilna grupa može i ne mora da nosi jedan ili više atoma fluora,

ili

R<3>predstavlja jednu ciklopentilnu, cikloheksilnu ili fenilnu grupu koja može ili ne mora da bude supstituisana jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, ili

— ' 31

R predstavlja jednu fenilnu grupu supstituisanu jednom OR grupom, gde je R<31>H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma a k je 0, 1,

ili

R<3>predstavlja jednu 1-naftilnu ili 2-naftilnu grupu, a k je 0, 1, ili

R<3>predstavlja jednu cis- ili trans-dekalinsku grupu, a k je 0, 1, ili

R<3>predstavlja 4-piridil, 3-pirolidil ili 3-indolil koji može ili

31 31

ne mora biti supstituisan jednom OR grupom, gde je R kako je napred definisan, a k je 0, 1,

ili

R 3 predstavlja Si(Me)3ili CH(R 32 ), gde je R 32 jedna cikloheksiIna ili jedna fenilna grupa,

R<4>predstavlja H, jednu alkilnu grupu koja: ima 1 do 4 ugljenikova atoma, jednu cikloheksilnu ili jednu fenilnu grupu,

A<2>predstavlja jedan strukturni fragment formule lila, 11 lb ili IIIc

i

pri čemu:

p je ceo broj 0, 1 ili 2,

m je ceo broj 1,2,3 ili 4,

Y predstavlja jednu metilensku grupu,

ili

Y predstavlja jednu etilensku grupu a stvoreni petočlani prsten može i ne mora da nosi jedan ili dva atoma fluora, jednu hidroksi grupu ili jednu okso grupu u položaju 4, ili može i ne mora da bude nezasićena,

ili

Y predstavlja -CH -0-, CH -S-. CH2-S0-,safunkcijom heteroatoma

. u položaju 4,

ili

Y predstavlja jednu n-propilensku grupu,astvoreni šestočlani prsten može i ne mora, da ima u položaju 5 jedan atom fluora, jednu hidroksi grupu ili jednu okso grupu, da ima dva atoma fluora u jednom od položaja 4 ili 5 ili da bude nezasićen u položaju 4 i 5, ili da ima u položaju 4 jednu alkilnu grupu sa 1 do 4 ugljeai-kova atoma,

ili

Y predstavlja -CH -0-CH -, CH -S-CH , -CH -SO-CH -,

22222 2

ili

Y predstavlj ° a -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2-,

R 3 je kako je napred definisan,

R<5>predstavlja H ili jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma,

ili

R<S>predstavlja -(CH2)g-C00R<S1>, gde je p jednako 0, 1 ili 2, a R je H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do-4 ugljenikova-atoma,

n je jedan ceo broj 0, 1, 2, 3 ili 4,

B predstavljajedan tstrukturnifragment formule IVa, IVb, IVd ili

IVd

pri čemu je

r ceo broj 0 ili 1,

X<1>predstavlja CH2>NH ili je izostavljen,

X<2>predstavljaCH^NH ili C=NH,

X<3>predstavlja NH, C=NH, N-C(NH)-NH2, CH-C(NH)-NH2, CH-NH-C(NH)-NH ili CH-CH -C(NH)-NH_,

2 2 2

X<4>predstavlja CH2 ili NH,

Preporučljive su kombinacije X , X , X X i r:

X<1>, X21 X4 su CH , X<3>je CH-C(NH)-NH a r je 0, 1,

2 2

ili

X<1>, X<2>i X<4>su CH2>X<3>je N-C(NH)-NH2a r je 0, 1,

ili

X<1>i X<3>su NH, X<2>je C=NH. X<4>je CH , a r je 0, 1

ili

X<1>1 X<4>su CH , X<2>je C=NH, X<3>je NH i r je 0, 1,

ili .

X<1>je CH2> X<2>i X<4>su NH, X<3>je C=NH, a r je 1,

ili

X1, X2 i X4 su CH , X3 je CH-NH-C(NH)-NH , a r je 0, 1, ili X<1>je izostavljen, X2 i X4 su CH . X<3>je CH-C(NH)-NH a r Je 0, ili "

X<1>je izostavljen. X<2>i X<4>su CH2, X<3>je N-C(NH)-NH2>a r je 0,

Posebno preporučljive kombinacije X , X , X , X i r jesu:

X<1>, X<2>i X<4>su CH , X<3>je CH-C(NH)-NH a r je 0, 1,

* 2 2

ili

X<1>, X<2>i X<4>su CH , X<3>je N-C(NH)-NH a r je 0, 1,

2 2

ili

X<1>je izostavljen, X<2>i X<4>su CH^ X<3>je N-C(NH)-NH2>a r je 0,

X<1>i X<3>su NH, X<2>je C=NH, X<4>je CH2>a r je 0, 1

ili

X<S>predstavlja C(NH)-NH2ili NH-C(NH)-NH2,

R g je H ili jedna alkilna grupa koja ima 1-4 ugljenikova atoma,

X predstavlja CH ili N,

Jedinjenja formule I koja imaju S-konfiguraciju na A<2>amino kiselini preporučljiva su, od tih jedinjenja su posebno preporučljiva ona jedinjenja koja imaju R-konfiguraciju na A<1>amino kiselini.

U ovom kontekstu pojam "alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma" može označavati pravi ili račvasti niz, ukoliko nije drugačije naznačeno. Alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikovih atoma može biti metil, etil, n-propil, i-propil, n-butil, i-butil, s-butil i t-butil.

U ovom kontekstu pojam "alkilna grupa koja ima 1 do 6 ugljenikovih atoma" može označavati pravi ili račvasti niz, ukoliko nije drugačije naznačeno. Alkilna grupa koja ima 1 do 6 ugljenikovih atoma može biti metil, etil, n-propil, i-propil, n-butil, i-butil, s-butil i t-butil, n-pentil, i-pentil, t-pentil, neo-pentil, n-heksil ili i-heksil. Kada se pominje nezasićenost, misli se na ugljenik-ugljenik dvostruku vezu.

Talasaste linije na ugljenikovom atomu u karboni Inim grupama u formulama Ha, Ilb, IIc, Ud, Ile, lila, Illb, IIIc, na atomu azota u formulama lila, IIlb, IIIc i na ugljenikovom atomu u prstenastom sistemu u formulama IVa, IVb, IVc, IVd označavaju položaj veze fragmenta.

Skraćenice su prikazane na kraju ovog opisa.

Prema pronalasku je utvrđeno da su Jedinjenja opšte formule Ia, bilo kao takva ili u obliku fiziološki prihvatljivih soli, i uključujući stereoizomere, moćni inhibitori trombina:

gde:

A<1>predstavlja strukturni fragment formule Ha, Ilb, IIc ili Ild, preporučljivo Ha ili Ilb,

pri čemu:

k je ceo broj 0, 1, 2, 3 ili 4, preporučljivo 0, 1.

q je ceo broj 0, 1, 2 ili 3, preporučljivo 1,

R<1>predstavlja Jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, R1100C-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova

atoma i eventualno je supstituisana u položaju koji je alfa za karbonilnu grupu, a alfa supstituent je jedna grupa R17-(CH2) - gde je p 0, 1 ili 2, R<17>je metil, fenil, 0H, COOR<12>,CONHR<12>, gde je R 12H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, a R<11>je H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 6 ugljenikovih atoma,

ili

R<1>predstavlja Ph(4-C00R<12>)-CH2>gde je R<12>kako je napred definisano,

ili

R<1>predstavlja R13-NH-CO-alki. 1-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma, i eventualno je alfa supstituisana prema karbonilu jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma i gde je R<13>H ili neka alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma ili •

-CHC00R<12>, gde je R<12>kako je napred definisano,

ili

R<1>predstavlja R<12>OOC-CH?-00C-alki1-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i eventualno je alfa supstituisana prema karbonilu jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma i gde je R 12 kako je napred definisano,

ili

R<1>predstavlja R<14>S0,-, PhU-COOR<12>)-^-, Ph( 3-C00R12)-SC\

12 12 14 Ph(2-C00R }-S0 gde je R kako je napred definisano a R je

jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma,

ili

1 15 15

R predstavlja -CO-R , pri čemu je R jedna alkilna grupa koja

ima 1-4 ugljenikova atoma,

ili

R<1>predstavlja -C0-0R15, gde je R<15>kako je napred definisano, ili

R predstavlja -CO-(CH 2 ) p-COOR", gde je R kako je napred defi-

nisano, a p je ceo broj 0, 1 ili 2,

ili

R<1>predstavlja -CHPOtOR18) , -CH SO H ili -CH-(5-(lH)-tetrazol-2 2 2 3 2

il) gde je R 16, pojedinačno kod svakog javljanja, H, metil ili etil,

Poželjno je da R1 predstavlja RX100C-alki 1-, gde

alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma a Ru je H.

R 2 predstavlja H ili jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljeni-

kova atoma ili R 21OOC-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 uglje-

nikova atoma, i gde je R<21>H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma,

R 3 predstavla jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova ato-

ma, a alkilna grupa može i ne mora da nosi jedan ili više atoma fluora,

ili

R<3>predstavlja jednu 1-naftilnu ili 2-naftilnu grupu, a k je 0, 1, ili

R<3>predstavlja jednu cis- ili trans-dekalinsku grupu, a k je 0, 1, ili

R<4>predstavlja jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, jednu cikloheksilnu ili jednu fenilnu grupu, preporučljivo jednu cikloheksilnu ili jednu fenilnu grupu,

A 2 predstavlja jedan strukturni fragment formule lila, 11 lb ili IIIc, preporučljivo lila, pri čemu:

p je ceo broj 0, 1 ili 2,

m je ceo broj 1, 2, 3 ili 4, preporučljivo 2, 3,

Y predstavlja jednu metilensku grupu,

ili

Y predstavlja -CHg-O-, CH2-S-, CH^SO-, <. sa funkcijom heteroatoma

u položaju 4,

ili

Y predstavlja jednu n-propi lensku grupu,astvoreni šestočlani prsten može i ne mora, da ima u položaju 5 jedan atom fluora, jednu hidroksi grupu ili jednu okso grupu, da ima dva atoma fluora u jednom od polo'žaja 4 ili 5 ili da bude nezasićen u položaju 4 i 5, ili da ima u položaju 4 jednu alkilnu grupu sa 1 do 4 ugljenikova atoma,

ili

Y predstavlja -CH -O-CH -, CH -S-CH -CH -SO-CH -,

tLb <£• ^£t Cm

ili

Y predstavlja -CH2-CH2-CH2-CH2-,

R<3>predstavlja jednu alkilnu grupu koja ima 1-4 ugljenikova atoma, ili •

R predstavlja jednu Si(Me)3 grupu,

R predstavlja H ili jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, preporučljivo H ili jednu metilnu grupu,

ili

R<s>predstavlja -(<CH>2)s-COOR<S1>, gde jejednako 0, 1 ili 2, a R<S1>je H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova

51

atoma, preporučljivo da je p jednako 0 a R jednako H,

n je jedan ceo broj 0, 1, 2, 3 ili 4, preporučljivo 1, 2, 3,

B predstavlja jedan strukturni fragment formule IVa, IVb, IVd ili IVd, preporučljivo IVa ili IVb

pri čemu

X<1>, X<2>. X<3>, X<4>, X<3>1 X su kako su napred definisani, r ceo broj 0 ili 1,

R<6>je H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, preporučljivo H,

Preporučljive su kombinacije X<1>, X<2>, X<3>X<4>i r:

X<1>, X<2>i X<4>su CH2, X<3>je CH-C(NH)-NHz a r je 0, 1,

ili

X<1>, X<2>i X<4>su CH2> X<3>je N-C(NH)-NH"2 a r je 0, 1,

ili

X<1>i X3 su NH, X2 je C=NH, X4 je CH2, a r je 0, 1

ili

X<1>i X<4>su CH2, X<2>je C=NH, X<3>je NH i r je 0, 1,

ili

X<1>je CH 2, X<2>i X* su NH, X<3>je C*NH, a r je 1,

ili

X<1>, X<2>i X4 su CH , X<3>je CH-NH-C(NH)-NH , a r je 0 ili 1,

Ili

X<1>je izostavljen, X<2>i X<*>su CH.X<3>je CH-C(NH)-NH . a r Je 0, Ili

X1 je izostavljen, X<2>1 X* su CH , X<3>Je N-C(NH)-NH , a r Je 0,

Posebno preporučljive kombinacije X1, X<2>, X<3>, X* i r Jesu:

X<1>je izostavljen, X2 I X* su CH,, X<3>je N-C(NH)-NH2, a r Je 0, ili

X<1>, X<2>! X<*>su CH 2 , X<3>Je CH-C(NH)-NH 2 a r Je 0 ili 1,

ili

X1 i X3 su NH, X<2>Je C=NH, X<*>Je 'CH 2, a r Je 1

ili

X<5>predstavlja C(NH)-NH2ili NH-C(NH)-NH2, preporučljivo' C(NH)-NH2

X<6>predstavlja CH ili N,

Prema jednom preporučljivom izvođenju, pronalazak se odnosi na jedinjenja formule Ia,

gde:

A1 predstavlja strukturni fragment formule Ha,

pri čemu;

k Je 0 ili 1,

R<1>predstavlja ROOC-alkll-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma, posebno metilen, etilen, a RU Je H,

2

R predstavlja H,

R 3 predstavlja jednu cikloheksilnu grupu,

A 2 predstavlja jedan strukturni fragment formule lila,

pri čemu:

Y predstavlja jednu metilensku grupu, jednu etilensku grupu, ili jednu m-propilensku grupu a ostvareni šestočlani prsten može ili ne mora da ima u položaju 4 jednu, alkilnu grupu sa 1 do 4 ugljenikova atoma, preporučljivo je da Y predstavlja metilen, etilen,

s

R predstavlja H,

B predstavlja strukturni fragment formule IVa,

gde:

X<1>je izostavljen, X<2>i X<*>su CH , X<3>je N-C(NH)-NH , a r je 0,

2 2

a n je 1 ili 2,

X<1>i X<3>su NH, X<2>je C=NH, X<4>je CH2, a r je 1 i n je 2,

ili .

X<1>, X<2>i X<*>su CH2, X<3>je CH-C(NH)-NH2 a r je 0 ili 1,

ili

X<1>, X<2>i X<4>su CH2, X<3>je N-C(NH)-NH2>r je 0 ili 1 a n je 1 ili 2, ili

Posebno su preporučljiva jedinjenja gde B predstavlja strukturni fragment formule IVb, gde:

X<5>predstavlja C(NH)-NH2> X<6>je H, a n = 1.

Preporučljiva jedinjenja prema pronalasku Jesu: H00C-CR~2- {R) Cgl-Aze-Pab

H00C-CH 2 -CH 2-(R) Cgl-Aze-Pab

H00C-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab

H00C-CH2-CH2-(R) Cg 1-Pro-Pab

22

(H00C-CH2)-(R) Cg 1-Pro-Pab

H-(R)Cgl-Pic-Pab

H00C-CH2-(R, S) CH( C00H) - (R)Cgl-Pic-Pab

H-(R)Cha-Aze-Pab

HOOC-CH -(R)Cha-Aze-Pab

2

HOOC-CH^(R, S)CH(C00H)-(R)Cha-Aze-Pab

H00C-CH2-(RorS)CH(C00H)-(R)Cha-Aze-Pab/a

HOOC-CH 2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/b

HOOC-CH -CH -(R)Cha-Aze-Pab

2 2

HOOC-CH -NH-CO-CH -(R)Cha-Aze-Pab

2 2

H-(R)Cha-Pro-Pab

HOOC-CH -(R)Cha-Pro-Pab

2 HOOC-CH 2-(Me)(R)Cha-Pro-PabHOOC-CH -CH -(R)Cha-Pro-Pab

■2.2 HOOC-CH -NH -(Me)(R)Cha-Pro-Pab

2 2

HOOC-CH 2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/a HOOC-CH 2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/b HOOC-CH -NH-CO-CH -(R) Cha-Pro-Pab

2 2

EtOOC-CH -CH -CH -(R)Cha-Pro-Pab

2 2 2

Ph(4-COOH)-SO 2-(R)Cha-Pro-Pab H-(R)Cha-Pic-Pab

HOOC-CH -(R)Cha-Pic-Pab

2 HOOC-CH 2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/a HOOC-CH 2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/b HOOC-CH -CH -(R)Cha-Pic-Pab

2 2

HOOC-CO-(R)Cha-Pi c-Pab HOOC-CH 2-CO- (R) Cha-Pi c-Pab Me-OOC-CH -CO-(R)Cha-Pic-Pab

2

H N-CO-CH -(R)Cha-Pic-Pab 2 2 Boc-R)Cha-Pic-Pab Ac-(R)Cha-Pic-Pab

Me-SO 2-(R)Cha-Pic-Pab H-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R,S)betaP i c-Pab HOOC-CH 2-(R)Cha-Val-Pab

HOOC-CH -CH -(R)Cha-Val-Pab

2 2

H-(R)Hoc-Aze-Pab

HOOC-CH -CH -(R)Hoc-Aze-Pab

2 2

HOOC-CH2-(R, S)CH(COOH)-(R)Hoc-Pro-Pab HOOC-CH 2-(R)Hoc-Pic-Pab (HOOC-CH 2)-(R)Hoc-Pic-Pab H00C-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab H00C-CH2-CH2- (R) Pro (3- (S) Ph) -Pro-Pab HOOC-CH -CH -(R)Tic-Pro-Pab

2 2

H00C-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig H00C-CH2-(R)Cg1-Pro-P i g

H-(R)Cha-Aze-Pig

H00C-CH2-(R) Cgl-Aze-Pac

H-(R)Cha-Pro-Pac

H-(R)Cgl-Ile-Pab H-(R)Cgl-Aze-Pab HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab MeOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab

.EtOOC-CH - (R) Cg 1 -Aze-Pab

■"BuOOC-CH- (R)Cgl-Aze-Pab

"HeKOOC-CH -(R)Cgl-Aze-Pab

2 i H-(R)Cgl-Pro-Pac

HOOC-CH 2-(R)Cha-Pro-Pac

HOOC-CH 2 -CH 2-(R)Cgl-Pro-Pac

HOOC-CH -CH -(R)Cha-Aze-Pac

2 2

HOOC-CH2-(R)Cha-Aze-Pig

H00C-CH2-(R)Cha-Pro-Pig HOOC-CH -CH -(R)Cha-Pro-Pig

2 2

(H00C-CH2)-CR)Cgl-Pro-Pig

HOOC-CH -CH (HOOC-CH )-(R)Cha-Pro-Pig

2 2 2

HOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R,S)Itp HOOC-CH 2-(R)Cha-Aze-(R,S)Itp H-(R)Cha-Pic-(R,S)Itp

HOOC-CH 2-(R)Cha-Pic-(R,S)Itp H-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig

H00C-CH2-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig H-(R)Cha-Pro-(R,S)Hig

H-(R)Cgl-Aze-Rig

H00C-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig

HOOC-CH 2-(R)Cha-Pro-Rig

HOOC-CH 2 -CH 2-(R)Cha-Aze-Rig

HOOC-CH 2-(R)Cha-Pro-(SHtp

H-(R)Cha-Pro-(R,S)Nig

H-(R)Cha-Pro-Mig

H-(R)Cha-Pro-Dig

H-(R)Cha-Aze-Dig

Danas su posebno preporučljiva sledeća jedinjenja formule Ia:

HOOC-CH -(R)Cgl-Aze-Pab

2

HOOC-CH -CH -(R)Cha-Aze-Pab

2 2

HOOC-CH -(R)Cha-Pro-Pab

2

HOOC-CH-CH-(R) Cha-Pro-Pab

HOOC-CH 2-(R)Cha-Pic-Pab HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig

EtOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab

HOOC-CH -(R)Cha-Pro-Pac

2 H00C-CH2-(R)Cha-Pro-Pig

U napred navedenim tabelama jedinjenja, slova /a i /b odnose se na u suštini čisti stereoizomer kod ugljenikovog atoma označenog "RorS". Stereoizomer može biti identifikovan za svako jedinjenje u delu ovog opisa gde su prikazani eksperimenti. "R,S" se odnosi na smešu stereoizomera.

Prema pronalasku je utvrđeno da su jedinjenja opšte formule lb, bilo kao takva ili u obliku fiziološki prihvatljivih soli, i uključujući stereoizomere, moćni inhibitori kinogenaza:

gde:

A<1>predstavlja strukturni fragment formule Ha, Ilb ili Ile, pre-poručljivo Ha ili Ilb :

pri čemu:

k je ceo broj 0, 1, 2, 3 ili 4, preporučljivo 0, 1,

q je ceo broj 0, 1, 2 ili 3, preporučljivo 1,

R<1>predstavlja H, jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, ili R<11>00C-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i eventualno je supstituisana u položaju koji je alfa za karboni Inu grupu, a alfa supstituent je jedna grupa R17-(CH 2 ) p-gde je p 0, 1 ili 2, R<17>je metil, fenil, 0H, COOR<12>, CONHR<12>, gdeje R 12 H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, a R<11>je H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 6 ugljenikovih atoma,

ili

R<1>predstavlja Ph(4-C00R<12>)-CH2", gde je R<12>H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma,

ili.'. .. ' ' ?

R<1>predstavlja R<13->NH-C0-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i eventualno je supstituisan alfa za karbonil jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma i gde je R 13 H ili neka alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma ili

12 12

-CH2C00R , gde je R kako je napred definisano,

ili

R<1>predstavlja R<12>OOC-CH2-OOC-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i eventualno je supstituisan alfa za karbonil jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma i gde je 12

R kako je napred definisano,

ili

R<1>predstavljaR<14>S02-, Ph(4-C00R<12>)-S02", Ph(3-C00R<12>)-S02-, Ph(2-C00R<12>)-S02-, gde jeR<12>kako je napred definisano a R<14>jejedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma,

ili

R<1>predstavlja -C0-R15, pri čemu je R<1S>jedna alkilna grupa koja ima 1-4 ugljenikova atoma,

ili

1 15 1S

R predstavlja -CO-OR , gde je R kako je napred definisano,

ili

R<1>predstavlja -CO-(CH 2 ) p-COOR12, gde je R<12>kako je napred def i-nisano, a p je 0, 1 ili 2,

ili

R 1 preds1t6 avlja -CHPOCOR 1R) 2 , -CH 2 SO 3 H ili -CH2-(5-(lH)-tetrazolil) gde je R , pojedinačno kod svakog javljanja, H, metil ili etil,

R 2 predstavlja H ili jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma ili R<21>00C-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma, i gde je R 21 H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma,

R 3 predstavlja jednu alkilnu grupu koja ima 1 - 4 ugljenikova atoma, a alkilna grupa može i ne mora da nosi jedan ili više atoma

fluora, ili

R predstavlja jednu ciklopentilnu, cikloheksilnu ili fenilnu grupu koja može ili ne mora da bude supstituisana jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma,

ili

R 3 predstavlja jednu fenilnu grupu supstituisanu jednom OR 31 grupom, gde je R<31>H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma a k je 0, 1,

ili

R<3>predstavlja jednu 1-naftilnu ili 2-naftilnu grupu, a k je 0, 1, ili

R<3>predstavlja jednu cis- ili trans-dekalinsku grupu, a k je 0, 1, ili

R 3 predstavlja 4-piridil, 3-pirolidil ili 3-indolil koji može ili

31 31

ili

R 3 predstavlja Si(Me) ili CH(R 32 ), gde je R 32 jedna cikloheksilna ili jedna fenilna grupa,

R predstavlja H, Jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, jednu cikloheksilnu ili jednu fenilnu grupu, poželjno H,

A 2 predstavlja jedan strukturni fragment formule lila, IIlb ili IIIc, preporučljivo Illb

pri čemu:

p je ceo broj 0, 1 ili 2,

m je ceo broj 1, 2, 3 ili 4, preporučljivo 2, 3,

R 3 je kako je napred definisan,

n je jedan ceo broj 0, 1, 2, 3 ili 4, prporučljivo 1, 2, 3,

B predstavlja jedan strukturni fragment formule IVa, IVb, IVd ili IVd, preporučljivo IVa ili IVb,

pri čemu

XtX } X , X su kako su napred definisani,

R g je H ili jedna alkilna grupa koja ima 1-4 ugljenikova atoma, preporučljivo H ili neka metilna grupa,

r ceo broj 0 ili 1,

Preporučljive su kombinacije X , X , X X i r:

X<1>, X<2>i X<4>su CH2, X<3>je CH-C(NH)-NR"2 a r je 0 ili 1,

ili

X<1>, X<2>i X<4>su CH2, X<3>je N-C(NH)-NH a r je 0 ili 1,

ili

. X<1>i X<3>su NH, X<2>je C=NH, X<4>je CH2, a r je 0 ili 1

ili

Xi X<4>su CH2, X<2>je C=NH, X<3>je NH i r je 0 ili 1,

ili

X<1>je CH2, X<2>i X<4>su NH, X<3>je C=NH, a r je 1,

ili

X<1>, X<2>i X<4>su CH2>X<3>je CH-NH-C(NH)-NH2, a r je 0 ili 1,

ili

X<1>je izostavljen, X<2>i X<4>su CH 2 , X<3>je CH-C(NH)-NH 2, a r je 0, ili

X<1>je izostavljen, X<2>i X<4>su CH 2 , X<3>je N-C(NH)-NH 2, a r je 0,

Posebno preporučljive kombinacije X « , X 2 , X 3 , X 4 i r jesu:

X<1>, X<2>i X<4>su CH2, X<3>je CH-C(NH)-NH2a r je 1,

ili

X<1>, X<2>i X<4>su CH X<3>je N-C(NH)-NH a r je 1,

2 2

X<S>predstavlja C(NH)-NH2ili NH-C(NH)-NH2> poželjno C(NH)-NH2>

X<6>predstavlja CH ili N,

Preporučljiva jedinjenja prema pronalasku su:

H-(R)Pro-Phe-Pab

HOOC-CH -(R)Pro-Phe-Pab

2

H-(R)Phe-Phe-Pab

H00C-C0-(R)Phe-Phe-Pab

HOOC-CH -(R)Phe-Phe-Pab

2

H-(R)Cha-Phe-Pab

HOOC-CH -(R)Cha-Phe-Pab

2

H-(R)Phe-Cha-Pab

HOOC-CH 2-(R)Phe-Cha-Pab

H-(R)Cha-Cha-Pab

HOOC-CH 2-(R)Cha-Cha-Pab

Pored toga, utvrđeno je da su jedinjenja opšte formule

V, bilo kao takva, bilo u obliku fiziološki prihvatljivih soli, i uključujući stereoizomere, moćni inhibitori serinskih proteaza, naročito trombina i kininogenaza kao što je kalikrein posle oralnog i parenteralnog davanja:

A<1>predstavlja strukturni fragment formule Ha, Ilb, IIc, Ild ili Ile :

pri čemu:

k je ceo broj 0, 1, 2, 3 ili 4,

m je ceo broj 1, 2, 3 ili 4,

q je ceo.broj 0, 1, 2 ili 3,

R1 predstavlja RU00C-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i eventualno je supstituisana u položaju koji je alfa za karboni Inu grupu, a alfa supstituent je jedna grupa R17-(CH ) - gde je p 0, 1 ili 2, R<17>je COOR<12>, CONHR<12>, gde je

2 p

R<12>H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, a Ru je H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 6 ugljenikovih atoma, ili jedna benzilna grupa,

R<1>predstavlja Ph(4-C00R<12>)-CR"2, gde je R<12>kako je napred definisano, ili

R<1>predstavlja R -NH-CO-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i eventualno je supstituisan alfa za karbonil jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma i gde je R<13>H ili neka alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma ili

-CH2C00R<12>, gde je R<12>kako je napred definisano,

ili

R<1>predstavlja R^<O>OC-CR^-OOC-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i eventualno je supstituisan alfa za karbonil jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma i gde je

12

R kako je napred definisano,

ili

R<1>predstavlja R14S02-, Ph(4-C00R12)-S02~, Ph(3-C00R12)-S02~, Ph(2-C00R<12>)-S02-, gde jeR<12>kako je napred definisano a RU je jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma,

ili

R<1>predstavlja -CO-R<15>, pri čemu je R<15>jedna alkilna grupa koja ima 1-4 ugljenikova atoma,

ili

1 15 1S

R predstavlja -C0-0R , gde je R kako je napred definisano, ili R 1 predstavlja -C0-(CH 2 ) p-COOR 12 , gde je R 12 kako je napred definisano, a p je ceo broj 0, 1 ili 2,

ili

R<2>predstavlja H ili jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma ili R<21>O0C-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma, i gde je R 21 H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma ili jedna benzilna grupa,

ili

R<3>predstavlja jednu ciklopentilnu, cikloheksilnu ili fenilnu grupu koja može ili ne mora da bude supstituisana jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma,

ili

3 31

R predstavlja jednu fenilnu grupu supstituisanu jednom OR grupom, gde je R 31 H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma a k je 0, 1,

ili

3

R predstavlja jednu 1-naftilnu ili 2-naftilnu grupu, a k je 0, 1, ili

R 3 predstavlja jednu cis- ili trans-dekalinsku grupu, a k je 0, 1, ili

R 3 predstavlja 4-piridil, 3-pirolidil ili 3-indolil koji može ili ne mora biti supstituisan jednom OR 31 grupom, gde Je R 31 kako je napred definisan, a k je 0, 1,

ili

R predstavlja Si(Me)3ili CH(R ), gde je RM jedna cikloheksilna ili jedna fenilna grupa,

R 4 predstavlja H, jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, jednu cikloheksilnu ili jednu fenilnu grupu,

A 2, B i n su definisani kako su napred opisani pod formulom I,

D je Z ili (Z)2> gde Z predstavlja jednu benziloksikarbonilsku grupu.

Benziloksikarbonilska grupa (Z ili (Z)g) će se vezati za amidinski ili gvanidinski azot koji se nalazi u B.

Preporučljive i posebno preporučljive kombinacije su

iste kao one napred opisane u vezi sa formulom I.

Pored toga je utvrđeno da su jedinjenja opšte formule Va, bilo kao takva, bilo u obliku prihvatljivih soli, i uklju-čujući stereoizomere, moćni inhibitori trombina posle oralnog ili parenteralnog davanja :

gde: A<1>predstavlja strukturni fragment formule Ha, Ilb, IIc, Ud ili Ile, preporučljivo Ha ili Ilb :

pri čemu:

k Je ceo broj 0, 1, 2, 3 ili 4, preporučljivo 0, 1,

q je ceo broj 0, 1, 2 ili 3, preporučljivo 1,

R<1>predstavlja R1100C-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i eventualno je supstituisana u položaju koji je alfa za karboni Inu grupu, a alfa supstituent je jedna grupa R17-(CHz) - gde je p 0, 1 ili 2, R<17>je OH, COOR<12>, CONHR<12>, gde 12 P

je R H, jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma ili jedna benzilna grupa, a R<11>je H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 6 ugljenikovih atoma, ili ili jedna benzilna grupa,

ili

R<1>predstavlja Ph(4-C00R12)-CR"2, gde jeR<12>kako je napred definisano,

ili

12 12

-CH^COOR , gde je R kako je napred definisano,

ili

R<1>predstavlja R1200C-CH2-00C-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i eventualno je supstituisan alfa za karbonil jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma i gde je R 12 kako je napred definisano,

ili ?

R<1>predstavlja R<14>S0-, Ph(4-C00R<12>)-S02-, Ph(3-C00R<12>)-S02", 12 2 12 14 Ph(2-C00R )-S0 -, gde je R kako je napred definisano a R je jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma,

ili .

R<1>predstavlja -C0-R15, pri čemu je R1S jedna alkilna grupa koja ima 1-4 ugljenikova atoma,

ili ' ' .. ?

R 1 predstavlja -CO-OR 1B , gde je R 1S kako je napred definisano,

ili

R 1 predstavlja -CO-(CH 2 ) p-COOR 12 , gde je R 12 kako je napred definisano, a p je ceo broj 0, 1 ili 2,

ili

R<1>preporučljivo predstavlja R<n>00C-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma, a R<n>Je kako je definisan napred,

R<3>predstavlja jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, a alkilna grupa mo2e i ne mora da nosi jedan ili više atoma fluora,

ili

R 3 predstavlja jednu ciklopentilnu, cikloheksilnu ili fenilnu grupu koja može ili ne mora da bude supstituisana jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma,

ili

R 3 predstavlja jednu 1-naftilnu ili 2-naftilnu grupu, a k je 0, 1, ili

R 3 predstavlja jednu cis- ili trans-dekalinsku grupu, a k je 0, 1,

ili

R3 predstavlja Si(Me) ili CH(R<32>), gde je R<32>jedna ciki oheks i Ina ili jedna fenilna grupa,

R<4>predstavlja H, jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, jednu cikloheksilnu ili jednu fenilnu grupu, preporučljivo jednu cikloheksilnu ili jednu fenilnu grupu,

A<2>, B i n su definisani kako su napred opisani pod formulom Ia,

D je Z ili (Z)2,

Z predstavlja jednu benzilokslkarbonilsku grupu.

Preporučljivi celi brojevi, grupe ili kombinacije i posebno preporučljive kombinacije su iste kao one ranije opisane za formulu Ia, ali RU je H, jedna alkilna grupa koja ima 1 do 6 ugljenikovih atoma ili jedna benzilna grupa.

Preporučljiva jedinjenja koja sadrže formulu Va su:

BnOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)

BnOOC-CH -CH -(R)Cgl-Aze-Pab(Z)

22

BnOOC-CH 2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)

BnOOC-CH -CH -(R)Cgl-Pro-Pab(Z)

22

(BnOOC-CHz) - (R)Cg1-Pro-Pab(Z)

22

BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cgl-Pi c-Pab(Z)

BnOOC-CH 2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)

BnOOC-CH2- (R, S) CH (COOBn) - (R) Cha-Aze-Pab (Z)

BnOOC-CH 2-(RorS)CH(COOBn) (R)Cha-Aze-Pab(Z)/a

BnOOC-CH 2-(RorS)SH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/b

BnOOC-CH -CH -(R)Cha-Aze-Pab(Z)

22

BnOOC-CH -NH-CO-CH -(R)Cha-Aze-Pab(Z) *

2 2

BnOOC-CH 2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)

Bn00C-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)

BnOOC-CH -CH -(R)Cha-Pro-Pab(Z)

2 2

BnOOC-CH 2 -CH 2- (Me) (R)Cha-Pro-Pab(Z)

Bn00C-CH2-(R, S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)

BnOOC-CH -NH-CO-CH -(R)Cha-Pro-Pab(Z)

2 2

Ph (4-COOH)-S02- (R) Cha-Pro-Pab( Z) Boc-CR)Cha-Pic-Pab(Z) BnOOC-CH 2-(R)Cha-Pic-Pab(Z) BnOOC-CH 2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pic-Pab(Z) BnOOC-CH-CH-(R)Cha-Pic-Pab(Z)

2 2

EtOOC-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)

MeOOC-CH -CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z)

2 H N-CO-CH -CR)Cha-Pic-Pab(Z)

2 -2

Ac-(R)Cha-Pic-Pab(Z)

Me-SO -(R)Cha-Pic-Pab(Z)

2 BnOOC-CH -(R)Cha-Val-Pab(Z)

2 BnOOC-CH -CH -(R)Cha-(R,S)Val-Pab(Z)

2 2

BnOOC-CH -CH -(R)Hoc-Aze-Pab(Z)

2 2 BnOOC-CH 2-(R, S)CH(COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z) BnOOC-CH 2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)

(BnOOC-CH ) -(R)Hoc-Pic-Pab(Z)

2 2 BnOOC-CH -(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)

2 BnOOC-CH -CH -(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)

2 .2

BnOOC-CH -CH -(R)Tic-Pro-Pab(Z)

2 2 BnOOC-CH -CH -(R)Cgl-Aze-Pig(Z) 2 2 2 BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z) BnOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pac(Z) BnOOC-(R,S)CH(me)-(R)Cha-Pro-Pab(Z) MeOOC-CHz-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) EtOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) "BuDOC-CH -(R)Cg1-Aze-Pab(Z) ^ eKOOC- CE^- (R)Cgl-Aze-Pab(Z) BnOOC-CH 2-(R)Cha-Pro-Pac(Z) BnOOC-CH 2 -CH 2-(R)Cgl-Pro-Pac(Z) BnOOC-CH -CH -(R)Cha-Aze-Pac(Z) 2 2

BnOOC-CH 2-(R)Cha-Aze-Pig(Z) BnOOC-CH 2-(R)Cha-Pro-Pig(Z) BnOOC-CH -CH -(R)Cha-Pro-Pig(Z)

2 2

(BnOOC-CH ) -(R)Cgl-Pro-Pig(Z)

2 2

BnOOC-CH 2 -CH 2 (BnOOC-CH 2)-(R)Cha-Pro-Pig(Z) BnOOC-CH 2-(R)Cha-Pic-(R,S)Itp(Z)

BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig(Z)

BnOOC-CHz-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)

BnOOC-CH^ (R)Cha-Pro-Ri g (Z)

BnOOC-CH-CH - (R) Cha-Aze-Rig(Z)

Posebno su preporučljiva jedinjenja:

BnOOC-CHz-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) •

BnOOC-CH -(R)Cha-Pro-Pab(Z)

2 BnOOC-CH -(R)Cha-Pic-Pab(Z)

2

BnOOC-CH-{R)Cgl-Pro-Pig(Z)

Et00C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)

BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z) Bn00C-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)

Pored toga, utvrđeno je da su jedinjenja opšte formule Vb, bilo kao takva, bilo u obliku fiziološki prihvatljivih soli, i uključujući stereoizomere, moćni inhibitori kalikreina posle oralnog i parenteralnog davanja:

gde:

A<1>predstavlja strukturni fragment formule Ha, Ilb ili Ile, poželjno Ha ili Ilb :

pri čemu:

k je ceo broj 0, 1, 2, 3 ili 4, preporučljivo 0, 1,

q je ceo broj 0, 1, 2 ili 3, preporučljivo 1

R<1>predstavlja R<11>00C-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i eventualno je supstituisana u položaju koji je alfa za karboni Inu grupu, a alfa supstituent je jedna grupa R17-(CH ) - gde je p 0, 1 ili 2, R<17>je COOR<12>, CONHR<12>, gde je R 12 H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, a RU je H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 6 ugljenikovih atoma, ili jedna benzilna grupa,

ili

R<1>predstavlja Ph(4-C00R1<:)-CH2, gde je R<*>" kako je napred definisano

ili

R<1>predstavlja R13-NH-C0-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma 1 eventualno je supstituisan alfa za karbonil jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma i gde je R<13>H ili neka alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma ili

-CH COOR 15* , gde je R 12 kako Je napred definisano,

2

ili

R<1>predstavlja R<12>00C-CH2-00C-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i eventualno je supstituisan alfa za karbonil jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma i gde je 12

R kako je napred definisano,

ili1

R<1>predstavlja R^SOg-, Ph(4-C00R<12>)-S02-, Ph(3-C00R<12>)-SC>2-,

?12 Ph(2-C00R12)-S0 -, gde je R<12>kako je napred definisano a R<14>je jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma,

ili

1 15 15

R predstavlja -CO-R , pri čemu je R jedna alkilna grupa koja ima 1-4 ugljenikova atoma,

ili

1 15 15

R predstavlja -CO-OR , gde je R kako je napred definisano,

ili

R<1>predstavlja -CO-(CH 2 ) p-COOR12, gde je R<12>kako je napred def i-nisano, a p je ceo broj 0, 1 ili 2,

ili

R2 predstavlja H ili jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma ili R 21OOC-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma, i gde je R 21 H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma ili jedna benzilna grupa,

R 3 predstavlja jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, a alkilna grupa može i ne mora da nosi jedan ili više atoma fluora,

ili

o 31

R predstavlja jednu fenilnu grupu supstltuisami jednom OR grupom, gde je R 31 H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma a k je 0, 1,

ili

R<3>predstavlja jednu 1-naftilnu ili 2-naftilnu grupu, a k je 0, 1, ili

R<3>predstavlja jednu cis- ili trans-dekalinsku grupu, a k je 0, 1, ili

R3 predstavlja 4-piridil, 3-pirolidil ili 3-indolil koji može ili

31 31

ili R<3>predstavlja Si(Me) 3 ili CHCR<32>), gde je R<32>jedna cikloheksilna ili jedna fenilna grupa,

R predstavlja H, jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, jednu cikloheksilnu ili jednu fenilnu grupu,

A 2, B i n su definisani kako je napred opisano pod formulom lb,

D predstavlja Z ili (Z)2-

Preporučljivi cei i brojevi, grupe ili kombinacije i posebno preporučljive kombinacije su iste kao one ranije opisane za formulu lb, ali RU je H, jedna alkilna grupa koja ima 1 do 6 ugljenikovih atoma ili jedna benzilna grupa.

Preporučljiva jedinjenja koja sadrže formulu Vb su: Boc-(R)Pro-Phe-Pab(Z)

Bn00C-CH2- (R)Pro-Phe-Pab(Z)

Boe-(R)Phe-Phe-Pab(Z)

MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z)

BnOOC-CH 2-(R)Phe-Phe-Pab(Z)

Kod jednog drugog izvođenja pronalazak se odnosi na novu primenu jedinjenja formule

kao početnog materijala kod sinteze jednog peptidnog inhibitora serinske proteaze, a posebno kod sinteze peptidnih inhibitora trombina ili inhibitora kininogenaza. Može se koristiti kao takvo ili da ima amiđinsku grupu bilo jednostruko ili dvostruko zaštiće-nu kod atoma azota nekom zaštitnom grupom kao što je benziloksi karbonil. Zaštita derivata amidina se vrši postupcima poznatim za amidinska jedinjenja. Ovo će se jedinjenje ovde nazivati "l-amidin-4-aminometilbenzol" ili "H-Pab". Jedinjenje je ranije opisano u, između ostalih, Biochem/ Pharm, vol 23. str, 2247-2256.

Strukturni fragment formule

nije, međutim, ranije opisan kao strukturni element u nekom farmaceutski aktivnom jedinjenju, posebno u nekom peptičkom jedinjenju. Fragmet predstavlja vredan inhibitor serinske proteaze, a posebno kao trombinski inhibitor ili inhibitor kininogenaze.

Kod jednog sledećeg izvođenja, pronalazak se odnosi na novu primenu jedinjenja formule

kao polaznog materijala kod sinteze jednog trombinskog inhibitora. Jedinjenje može da ima amidinsku grupu jednostruko ili dvostruko zaštićenu kod atoma azota nekom zaštitnom grupom kao što je benziloksi karbonil. Zaštita amidinskih derivata vrši se postupcima poznatim za amidinska jedinjenja. Ovo jedinjenje se dalje naziva "l-amidin-4-aminometil cikloheksan" ili "H-Pac". Jedinjenje je ranije objavljeno u DE 2748295. Strukturni fragment formule nije, međutim, ranije naznačen kao vredan strukturni element u nekom trombinskom ihhibitoru. Kod jednog sledećeg izvođenja, pronalazak se odnosi na novo jedinjenje formule

i na primenu ovog jedinjenja kao polaznog materijala kod sinteze nekog inhibitora serinske proteaze, posebno nekog trombinskog inhibitora ili inhibitora kininogenaze. Jedinjenje može da ima amidinsku grupu jednostruko ili dvostruko zaštićenu kod atoma azota nekom zaštitnom grupom kao što je benziloksi karbonil. Zaštita amidinskih derivata vrši se postupcima poznatim za amidinska jedinjenja. Ovo jedinjenje se dalje naziva "4-aminoetil-l-amidin piperidin" ili "H-Rig".

Strukturni fragment formule

nije, međutim, ranije naznačen kao strukturni element u nekom far-maceutski aktivnom jedinjenju, naročito nekom peptičkom jedinjenju. Fragment predstavlja vredan inhibitor serinske proteaze, a posebno kao trombinski inhibitor ili inhibitor kininogenaze. Kod jednog sledećeg izvođenja, pronalazak se odnosi na novo jedinjenje formule

i na primenu ovog jedinjenja kao polaznog materijala kod sinteze jednog ihibitora serinske proteaze, posebno nekog trombinskog inhibitora ili inhibitora kininogenaze. Jedinjenje može da ima amidinsku grupu jednostruko ili dvostruko zaštićenu kod atoma azota nekom zaštitnom grupom kao što je benziloksi karbonil. Zaštita amidinskih derivata vrši se postupcima poznatim za amidinska jedinjenja. Ovo jedinjenje se dalje naziva "1,3-diaza-2-imino-4-aminoetil cikloheksan" ili "H-Itp".

Strukturni fragment formule

nije, međutim, ranije naznačen kao strukturni element u nekom farmaceutski aktivnom jedinjenju, naročito nekom peptičkom jedinjenju. Fragment predstavlja vredan inhibitor serinske proteaze, a posebno kao trombinski inhibitor ili inhibitor kininogenaze.

Kod jednog sledećeg izvođenja, pronalazak se odnosi na nova jedinjenja formule

pri čemu n je 1 ili 2

s je 0 ili 1,

i na primenu ovih jedinjenja kao polaznog materijala kod sinteze jednog inhibitora serinske proteaze, posebno nekog trombinskog inhibitora ili inhibitora kininogenaze. Jedinjenje može da ima amidinsku grupu jednostruko ili dvostruko zaštićenu kod atoma azota nekom zaštitnom grupom kao što je benziloksi karbonil. Zaštita amidinskih derivata vrši se postupcima poznatim za amidinska jedinjenja. Ova se jedinjenja nazivaju:

l-amidin-3-aminometil pirolidin ili "H-Nlg" kada je n jednako 1 a s je 1 l-amidin-3-aminoetil pirolidin ili "H-Hig" kada je n jednako 2 a s je 1 ? 3-aminometil-l-amidin azetidin ili "H-Mig" kada je n jednako 1 a s je 0

3-aminoetil-l-amidin azetidin ili "H-Dig" kada je n jednako 2 a s je 0.

Strukturni fragment formule

Sledeće izvođenje pronalaska su nova jedinjenja koja imaju amidinsku grupu, jednostruku ili dvostruko zaštićenu kod atoma azota jednom benziloksi karboni Inom grupom, pri čemu su primeri tih jedinjenja: 4-aminometil-l-(N-benziloksikarbonilamidin)benzol (H-Pab(Z)), 4-ami nomet i 1-1-(N, N' -di(benz i1oks ikarboni1}ami d i n)benzo1 (H-Pab(Z)?), 4-aminometil-l-(N-benziioksikarbonilamidin)cikloheksan (H-Pac(Z)), 4-aminometil-l-(N,N'-di(benziloksikarbonil)amidin)cikloheksan

(H-Pac(Z)2), 4-aminometil-l-(N-benziloksikarbonilamidin piperidin (H-Rig(Z)),

4-aminometil-l-N,N'-di(benziloksikarbonil)amidin piperidin (H-Rig(Z)z), (3RS)-l-(N-benziloksikarbonilamidin)-3-aminometi 1 pirolidin (H-Nig(Z)),

(3RS)-l-(N,N'-di(benziloksikarbonil)amidin)-3-aminometil pirolidin (H-Nig(Z)2),

C3RS)-l-(N-benziloksikarbonilamidin)-3-aminoetil pirolidin (H-Hig(Z)),

(3RS)-1-(N, N'-di(benziloksikarboni1)amidin)-3-aminoet i 1 pirolidin (H-Hig(Z)2),

3-aminometil-l-(N-benziloksikarbonilamidin) azetidin (H-Mig(Z)), 3-aminometil-l-(N,N'-di(benziloksikarbonil)amidin) azetidin (H-Mig(Z)2),

3-aminoetil-l-'(N-benziloksikarbonilamidin) azetidin (H-Dig(Z)), 3-aminoeti 1-1-(N,N'-di(benziloksikarboni1)amidin) azetidin (H-Dig(Z)2),

Ova se jedinjenja koriste kao polazni materijali kod pripremanja peptidnih derivata prema pronalasku formula I, Ia, lb, V, Va i Vb.

Medicinska 1 farmaceutska primena

Pronalazak takođe daje preparate i postupke za lečenje, u ljudskom ili životinjskom organizmu, stanja kod kojih se zahteva inhibicija trombina i kod fizioloških poremećaja, naročito zapaljenskih oboljenja.

Jedinjenja za inhibiranje trombina prema pronalasku treba da su korisna, naročito kod životinja, uključujući i čoveka, kod lećenja ili profilakse tromboze i hiperkoagulabilnosti u krvi i tkivima. Od njih se takođe očekuje da budu korisna u situacijama kada postoji nepoželjni višak trombina bez znakova hiperkoagulabilnosti, kao, na primer, kod Alchajmerove bolesti i pankreatiti-sa. Oboljenjska stanja kod kojih ova jedinjenja imaju potencijalnu upotrebu, kod lečenja i/ili profilakse, obuhvataju vensku trombozu i plućnu emboliju, arterijsku trombozu, kao što je infarkt miokarda, nestabilna angina, moždani udar izazvan trombozom i tromboza perifernih arterija i sistemska embolija obično iz srčane pretko-more u toku arterijske fibrilacije, ili iz leve srčane komore posle infarkta miokarada sa rupturom. dalje se od ovih jedinjenja očekuje primena u profilaksi aterosklerotskih oboljenja kao što je oboljenje koronarnih arterija, oboljenje cerebralnih arterija i oboljenje perifernih arterija. Dalje se od ovih jedinjenja očekuje da imaju sinergističko protivtrombsko delovanje kada se kombinuju sa ma kojim antitrombskim sredstvom sa različitim mehanizmom delo-vanja, kao što je antitrobocitno sredstvo acetilsalicilna kiselina. Dalje se očekuje od ovih jedinjenja da budu korisna zajedno sa tromboliticima kod trombskih oboljenja, posebno infarkta miokarda. Dalje se od ovih jedinjenja očekuje primena kod sprečavanja pono-vnog začepljenja posle trombolize, perkutane transiuminalne angio-plastije (PTCA) i operacija ugrađivanja srčanih bajpasa. Zatim se od ovih jedinjenja očekuje primena kod sprečavanja ponovne tromboze nakon mikro-hirurških zahvata i vaskularne hirurgije uopšte. Dalje se predviđa primena ovih jedinjenja u lečenju i sprečavanju rasprostranjene intravaskularne koagulacije izazvane bakterijama, višestrukim traumama, trovanjem ili nekim drugim mehanizmom. Dalje se predviđa primena ovih jedinjenja kod antikoagulantnih interven-cija kada je krv u dodiru sa stranim površinama u telu, kao kod vaskularnlh presađivanja, otklanjanja oštećenja krvnih sudova, kod vaskularnih katetera, mehaničkih ili bioloških proteza ili bilo koje druge medicinske naprave. Pored toga, predviđa se primena ovih jedinjenja kod antikoagulantne obrade kada je krv u dodiru sa medicinskim napravama izvan tela, kao kod kardiovaskularne hirurgije kada se koristi mašina koja zamenjuje rad srca i pluća, ili kod hemodijalize.

Sledeća predviđena upotreba antikoagulantskih jedinjenja prema pronalasku jeste kod ispiranja katetera i mehaničkih na-prava koje se koriste kod pacijenata in vivo, i kao antikoagulanata za čuvanje krvi, plazme i drugih proizvoda od krvi in vitro.

Jedinjenja prema pronalasku koja sprečavaju zapaljenja predviđena su da se koriste posebno kod životinja, uključujući i čoveka, za lečenje ili sprečavanje zapaljenjskih oboljenja kao što su astma, rinitis, pankreatitis, koprivnjača, zapaljenjska crevna oboljenja i artritis. Efikasna količina jedinjenja koja suzbijaju kininogenaze, sa ili bez fiziološki prihvatljivog nosača ili raz-ređivača, može se koristiti posebno ili u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvima.

Jedinjenja sprečaju delovanje kalikreina procenjeno pomoću hromogenskih podloga prema poznatim procedurama. Protivza-paljenjsko delovanje ovih jedinjenja može se, na primer, proučava-ti preko njihovog suzbijanja eksudativnih zapaljenjskih procesa, izazvanih alergenima, kod mukoze disajnih puteva ili mukoze creva.

Farmaceutski preparat i

Jedinjenja prema pronalasku normalno će se davati oralno, rektalno, dermalno, nazalno, trahealno, bronhialno, parenter-nalno ili preko disajnih puteva, u vidu farmaceutskih preparata koji sadrže aktivni sastojak bilo kao slobodnu bazu, bilo kao ne-organsku aditivnu so kiselina, na primer hidrohlorid, hidrobromid, sulfat, hidrosulfat, nitrat, laktat, acetat, citrat, benzoat, suk-cinat, tartrat, trifluiracetat i slično, u nekom farmaceutski pri-hvatljivom obliku doziranja. U zavisnosti od poremećaja i pacijen-ta koji se leči, kao i od načina davanja, preparati se mogu davati u različitim dozama.

Oblik doziranja može biti čvrst, polučvrst ili tečan preparat, pripremljen inače poznatim tehnologijama. Obično će aktivna materija sačinjavati između 0,1 i 99% mas. preparata, tač-nije, između 0,1 i 50% mas. za preparate namenjene za parenteralno davanje i između 0,2 i 757. mas. za preparate pogodne za oralno davanje.

Pogodne dnevne doze jedinjenja prema pronalasku kod le-čenja ljudi obično su oko 0,001-100 mg/kg telesne mase kod peroralnog davanja i 0,001-50 mg/kg telesne mase kod parenteralnog davanja.

Pripremanje

Sledeći je predmet pronalaska način pripremanja jecu-njenja. Jedinjenja formule I i V mogu se pripremiti postupcima koji obuhvataju povezivanje jednog N-završno" zaštićenog dipeptida ili aminokiseline, kada se koristi jedna N-završna amino kiselina, dodaje se naknadno i druga amino kiselina, koristeći standardne postupke, u jedinjenje

gde je n ceo broj 0, 1, 2, 3 ili 4, X je B ili B-D, gde je B kako je definisano u formuli I, a D je kako je definisano u formuli V kao takvo, ili ima gvanidinski ili amidinske atome azota bilo jednostruko, bilo dvostruko zaštićene jednom aminskom zaštitnom grupom kao što je jedna benziloksi karbonilna, tert-butiloksi karbonilna, ili p-toluolsulfonilska grupa, ili je X jedna grupa koja se može pretvoriti u B posle čega se uklanja zaštitna grupa (grupe) ili uklanjanje zaštite sa N-završnog azota posle čega sledi alkilacija N-završnog azota i, ako se želi, uklanjanje zaštite poznatim postupcima,' i ako se želi obrazovanje jedne fiziološki prihva-tljive soli, a u onim slučajevima kada se reakcijom dobi ja smeša stereoizomera, ovi se eventualno razdvajaju standardnim tehnikama hromatograf i je ili rekristal izaći je, pa ako se želi, izdvaja se jedan pojedinačan stereoizomer.

Tačnije, jedinjenja formule I ili V mogu se pripremati bilo kojim od sledećih postupaka:

Postupak Ia

Vezivanjem jednog N-završno zaštićenog dipeptida, biranog od A 1 i A 2 u formulama I i V i pripremanog standardnim peptid-nim vezivanjem, sa jednim jedinjenjem

koristeći standardno peptidno vezivanje, prikazano u formuli pri čemu Je n kako je definisano u formuli I, W* je jedna N-završna amino zaštitna grupa, kao što je tert-butiloksi karbonil i benziloksi karbonil, a Q<*>je -C(NH)-NH2>-CCNnVnH-M2, -C(NH)-NH-N<2>, -NH-C(NH)^NH2, -NH-C(NH)-NH-W<2>, -NtV^J-CtNHj-NH-M<2>ili -NH-CCNN^-NH-M2, gde je N<2>jedna aminska zaštitna grupa kao što je tert-butiloksi karbonil ili benziloksi karbonil, ili jeQ<1>-CN, -CO-NH ili -CS-NH , gde je grupa postepeno pretvorena u amidinsku 2 2 i grupu (na primer uzimajući Q = -C(NH)-NH2) inače poznatim postupcima, pri čemu je V/2 kako je napred definisano, gde je aminska grupa postupno pretvorena u jednu gvanidinsku grupu (uzimajući Q<1>= -NH-C(NH)-NH2), posle uklanjanja zaštite vA-grupe kada je Q<*>jednako -NH-VJ2 (u ovom slučaju mora V<2>biti ortogonalno na U<1>}, inače poznatim postupcima. Konačna jedinjenja mogu biti načinjena na bilo koji od sledećih načina, u zavisnosti od prirode korišćenih Q* -grupa: Uklanjanje zaštitne grupe (grupa) (kada je Q<*>jednako -C(NH)-NH2, -CtNV^-NH-H2, -C(NH)-NH-W<2>, -NH-C(NH)-NH2> -NH-C(NH)-NH-wV -N(V/2)-C(NH)-NH-Vi2 ili -NH-CtNU^-NH-H2), ili selektivnim uklanjanjem zaštite W<1->grupe (na primer kada je Q<*>jednako C(NW<2>)-NH-W<2>, -CtNm-NH-H2, -NH-C(NH)-NH-W<2>, Nd^-CCMD-NH-N2 ili -NH-CfNU<2>)-NH-V/<2>(U<2>u ovom slučaju mora biti ortogonalno na Vf1) praćeno alkilacijom N-završnog azota inače poznatim postupcima i, ako se želi, uklanjanjem zaštite poznatim postupcima.

Postupak lb

Vezivanje jedne N-završno zaštićene amino kiseline, izabrane od A<2>u formuli I ili Vi pripremljene standardnim postupcima, sa jedinjenjem formule

koristeći standardno peptidno vezivanje, prikazano u formuli

gde su n,W*i Q* kako su napred definisani, praćeno uklanjanjem zaštite W<1->grupe i vezivanjem sa N-završnom amino kiselinom, u nekom zaštićenom obliku, čime se dobija zaštićeni peptid opisan u Postupku Ia. Sinteza do završnih peptlda nastavlja se prema Postupku Ia.

Postupak Ha

Vezivanjem jednog N-završno zaštićenog dipeptida, biranog od A<1>i A<2>u formulama I i V i pripremanog standardnim peptid-nim vezivanjem, sa jednim Jedinjenjem

koristeći standardno peptidno vezivanje, prikazano u formuli pri čemu je n kako je definisano u formuli I, W je jedna N-završna amino zaštitna grupa, kao što je tert-butiloksi karbonil i benziloksi karbonil, a 0,1 je -C(NH)-NH"2, -CCNVtVnh-V/<2>, -C(NH)-NH-W<2>, -NH-C(NH)-NH2, -NH-C(NH)-NH-V/2, -N(W<2>)-C(NH)-NH-W<2>ili -NH-C(NW<2>)-NH-W<2>, gde je U<2>jedna aminska zaštitna grupa kao što je tert-butiloksi karbonil ili benziloksi karbonil, ili je Q<*>-CN, -C0-NH2 ili -CS-NH2> gde je grupa postepeno pretvorena u amidinsku grupu (na primer uzimajući Q1 = -C(NH)-NH2) inače poznatim postupcima, ili je O<1>NH ili NH-V/<2>, pri čemu je V<T>kako je napred definisano, gde je aminska grupa postupno pretvorena u jednu gvanidinsku grupu (uzimajući Q*= -NH-C(NH)-NH2), posle uklanjanja zaštite V^-grupe kada je C}1 jednako -NH-V/<2>(u ovom slučaju mora V/2 biti ortogonalno na V/1), inače poznatim postupcima. Konačna jedinjenja mogu biti načinjena na bilo koji od sledećih načina, u zavisnosti od prirode korišćenih Q<1->grupa: Uklanjanje zaštitne grupe (grupa) (kada je (J1 jednako -C(NH)-NH2> -CtNV/^-NH-V/<2>, -C(NH)-NH-W<2>, -NH-C(NH) -NH , -NH-C (NH) -NH-V/2, -N(W<2>)-C(NH)-NH-W<2>ili -NH-C (NV/2)-NH-V/2), ili selektivnim uklanja-1 12.2 njem zaštite W -grupe (na primer kada je Q jednako C(NW )-NH-V<T>, -C(NH)-NH-W<2>, -NH-C (NH)-NH-V/2, N(W<2>)-C(NH)-NH-W<2>ili -NH-C(NW<2>)-NH-V/2 (V/2 u ovom slučaju mora biti ortogonalno na V/1) praćeno alkilacijom N-završnog azota inače poznatim postupcima i, ako se želi, uklanjanjem zaštite poznatim postupcima.

Po stupak Ilb

Vezivanje jedne N-završno zaštićene amino kiseline, izabrane od A 2 u formuli I ili V i pripremljene standardnim postupcima, sa jedinjenjem formule

koristeći standardno peptidno vezivanje, prikazano u formuli

gde su n, V/1 i Q* kako su napred definisani, praćeno uklanjanjem zaštite W<1->grupe i vezivanjem sa N-završnom amino kiselinom, u nekom zaštićenom obliku, čime se dobija zaštićeni peptid opisan u Postupku Ha. Sinteza do završnih peptida nastavlja se prema Postupku Ha.

Postupak I Ha

koristeći standardno peptidno vezivanje, prikazano u formuli pri čemu je n kako je definisano u formuli I a r je 0,1 kada su X<1>, X<2>i X<4>jednaki CE^, ili je r jednako 0 kada su X<2>i X<4>jednaki CR"2 a X<1>je izostavljeno, V/1 je jedna N-završna amino zaštitna grupa, kao što je tert-butiloksi karbonil i benziloksi karbonil, a Q<2>je -C(NH)rNH , -CtN^-NH-V/<2>, ili -C(NH)- NH-V/2, gde je V/<2>jedna aminska zaštitna grupa kao što je tert-butiloksi karbonil ili benziloksi karbonil, ili je Q<2>jednako V/2 gde je aminska grupa postupno , posle uklanjanja zaštite V^-grupe (u ovom slučaju mora V/2 biti ortogonalno na V/1), pretvorena u jednu gvanidinsku grupu inače poznatim postupcima (uzimajući da je Q jednako --C(NH)-NH 2, CtNV/VNH-V/2 ili C(NH)-NH-W<2>). Konačna jedinjenja mogu biti načinjena na bilo koji od sledećih načina, u zavisnosti od prirode korišćene Q -grupe: Uklanjanje zaštitne grupe (grupa) (kada je Q jednako -C(NH)-NH2, -C(NW<2>)-NH-W<2>ili-CfNM-NH-N2), ili selektivnim uklanjanjem zaštite V^-grupe (na primer kada je Q<2>jednako C (NV/2)-NH-V/2, -CfNHj-NH-V/<2>, V/2 u ovom slučaju mora biti ortogonalno • na V/1) praćeno alkilacijom N-završnog azota inače poznatim postupcima i, ako se želi, uklanjanjem zaštite poznatim postupcima.

Postupak IIlb

Vezivanje jedne N-završno zaštićene amino kiseline, izabrane od A 2 u formuli I ili V i pripremljene standardnim postupcima, sa jedinjenjem formule koristeći standardno peptidno vezivanje, prikazano u formuli

12 4 1 2

gde su n, r, X , X i X , W i Q kako su napred definisani, pra-ćeno uklanjanjem zaštite W<1->grupe i vezivanjem sa N-završnom amino kiselinom, u nekom zaštićenom obliku, čime se dobija zaštićeni peptid opisan u Postupku I Ha. Sinteza do završnih peptida nastavlja se prema Postupku I Ha.

Postupak IVa

koristeći standardno peptidno vezivanje, prikazano u formuli

pri čemu je n kako je definisano u formuli I, W<*>je jedna N-završna amino zaštitna grupa, kao što je tert-butiloksi karbonil i benziloksi karbonil, a W 3 je jedna aminska zaštitna grupa kao što je aril sulfonil, tert-butiloksi karbonil ili benziloksi karbonil. Konačna jedinjenja mogu biti načinjena na bilo koji od sledećih načina: Uklanjanjem zaštitne grupe (grupa), ili selektiv-11 3 nim uklanjanjem zaštite W -grupe (W mora biti ortogonalno na W ) praćeno alkilacijom N-završnog azota i, ako se želi, uklanjanjem zaštite.

Postupak IVb

koristeći standardno peptidno vezivanje, prikazano u formuli

gde su n, W 1 i W 3 kako su napred definisani, praćeno uklanjanjem zaštite W -grupe (W mora biti ortogonalno na U<3>) i vezivanjem sa N-završnom amino kiselinom, u nekom zaštićenom obliku, čime se dobija zaštićeni peptid opisan u Postupku IVa. Sinteza do završnih peptida nastavlja se prema Postupku IVa.

Opšte eksperimentalne procedure

Maseni spektri su zapisivani na Finnigan MAT TSQ 700 trostruko četvoropolnom masenom spektrometru opremljenom dodirnom površinom obrađenom električnim raspršivanjem.

<*>H NMR i<13>C NMR merenja vršena su na BRUKER AC-P 300 i na BRUKER AM 500 spektrometru, pri čemu prvi radi na<1>H frekvenciji od 500,14 MHz i na<13>C frekvenciji od 125,76 MHz, a drugi na<1>H i<13>C frekvencijama od 300,13 MHz, odnosno 75,46 MHz.

Uzorci su bili oko 10-50 mg rastvorenih u 0,6 ml nekog od sledećih rastvarača: CDC1 3 (izotopska čistoća > 99,95%), D2O (izotopska čistoća >99,8%) ili DMSO-d 6(izotopska čistoća >99,8%). Svi su rastvarači nabavljeni kod Dr. Glaser AG, Basel.

1 13

Hi C vrednosti hemijskog pomeranja u CDCl^ i CD OD

porede se sa tetrametilsilanom kao spoljnim standardom.<1>H hemijska pomeranja u D 0 su u odnosu na natrijumovu so 3-(trimetilsi-lil)-d4~propionske kiseline a<13>C hemijska pomeranja u D20 su u

odnosu na 1,4-dioksan (67,3 ppm), oba kao spoljni standardi. Baž-darenje nekim spoljnim standardom može u nekim slučajevima izazvati manje razlike pomeranja u poređenju sa nekim unutrašnjim standardom, ali je razlika kod<1>H hemijskog pomeranja manja od 0,2 ppm a kod<13>C manja od 0, 1 ppm.

<1>H NMR spektar peptidnih sekvenci koje sadrže prolin ili "prolinu sličan" ostatak često pokazuju dve grupe rezonanci. To odgovara postojanju dva -doprinoseća konformera u odnosu na rotaciju oko amidne veze, pri čemu je prolin N-deo amidne veze. Konformeri su nazvani cis i trans. Kod naših jedinjenja sekvence (R)Cha-Aze, (R)Cha-pro i (R)Cha-Pic često dovode do cis-trans rav-noteže s jednim konformerom kao preovlađujućim konformerom (>90%). U ovim slučajevima se prijavljuju<X>H hemijska pomeranja samo većeg rotamera. Samo u slučajevima kada su signali manjeg rotamera jasno izdvojeni, zabeleženi su u NMR dokumentaciji. Isti kriterijum važi za NH-signale u CDCl^, tj. samo u slučajevima kada su signali jasno izdvojeni oni su zabeleženi u NMR-dokumentaciji. To znači da je broj protona zabeleženih za neke od međuproizvoda manji od broja protona koji se očekuje prema hemijskoj formuli.

Tankoslojna hromatografija je izvođena na komercijalnim staklenim ili aluminijumskim pločicama prevučenim Merc Silicagel 60F . Vizualizaćija je bila izvedena kombinacijom UV-osvet1java-nja, praćenog prskanjem rastvorom pripremljenim mešanjem 372 ml EtOH (95%), 13,8 ml koncentrovane ^SO^, 4,2 ml koncentrovane sirćetne kiseline i 10,2 ml p-metoksi benzaldehida ili reagensa fosfomolibdenske kiseline (5-10 % mas. u EtOH(95%)) i zagrevanjem.

Impulsna hromatografija vršena je na Merck Si lica gel 60 (40-63 mm, 230-400 meša) pod pritiskom vazduha.

Povrat no fazna visokokvalitetna tečna hromatografija (u primerima naznačena kao RPLC) vršena je na V/aters M-590 instrumen-tu opremljenom trima povratno faznim Kromasil 100,C8 stubovima (Eka-Nobel) koji su imali različite dimenzije za analitičku (4,6 mm x 250 mm), polupripremnu (1" x 250 mm) i pripremnu (2" x 500) hromatografiju, sa detektovanjem pri 226 nm.

Sušenje zamrzavanjem vršeno je na jednom aparatu Ley-bold-Heraeus, model GT 2.

Pripremanje polaznih materijala

Boc-(R)Pgl-OH

Pripremljen na isti način kako je opisano za Boc-(R)Cha-OH (videti niže) od H-(R)Pgl-OH.

Boc-(R)Cha-OH

Rastvoru H-(R)Cha-OH, 21,55 g (125,8 mmol), u 130 ml 1 M NaOH i 65 ml THF, dodano je 30 g (137,5 mmol) (Boc^O i smeša je mešana 4,5 časa na sobnoj temperaturi. THF je isparen i dodato je još 150 ml vode. Alkalna vodena faza isprana je dva puta EtOAc-om, zatim okiseljena sa 2 M KHSO^ i ekstrahovana pomoću 3 x 150 ml EtOAc. Kombinovana organska faza isprana je sodom, slanim rastvorom i sušena (Na^O^). Isparavanje rastvarača dalo je 30,9 g (90,5%) nazivnog jedinjenja u vidu bele čvrste materije.

Boc-(R)Hop-0H

Pripremljeno istim postupkom kao za Boc-Cha-OH, polazeći od H-(R)Hop-0H.

<1>H-NMR (300 MHz, CDC1 ): 5 1,45 (s, 9H), 2,0 (m, IH), 2,22 (m,IH), 2,75 (bt, 2H), 4,36 (bs, IH), 5,05 (bs, IH), 7,15-7,33 (m, 5h).

4-(tert-butiloksikarbonilaminometil) piridin

Rastvoru 10,81 g (100 mmol) 4-aminometil piridina u 100 ml THF dodano je 24 g (110 mmol) BocC^O rastvorenog u 70 ml THF, na 10°C u toku 20 min. Rastvor je ostavljen da dostigne sobnu temperaturu i mešan je u toku 4 časa ( u toku reakcije je obrazovan talog a mulj je postao crven). Rastvarač je uklonjen a ostatak je rastvoren u EtOAc i filtriran kroz silika gel. Isparavanje rastvarača dalo je nazivno jedinjenje kao crveno ulje koje je kristalisalo nakon što je odstojalo. Sirov proizvod je korišćen bez daljeg prečišćavanja.

<J>H-NMR (300 MHz, CDCl^:51,45 (s, 9H), 4,32 (d, 2H), 5,05 (bs, IH (NH)), 7,2 (d, 2H), 8,55 (d, 2H)

4-aminometil-1 -(N-benziloksikarbonilamidin)-benzol (H-Pab(Z))

(i) 4-cijanobenzi1 azid

Rastvor 20,23 g (0,31 mol) natrijum azida u 40 ml vode dodan je u 49,15 g (251 mmol) 4-cijanobenzi1 bromida u 200 ml DMF na temperaturi okolne sredine. Krenula je egzotermna reakcija i posle 1,5 h reagujuća smeša razblažena je sa 200 ml toluola (pažnja: da bi se izbeglo izdvajanje potencijalno eksplozivnih azidnih jedinjenja, savetuje se da se toluol doda reagujućoj smeši pre dodavanja vode) i 500 ml vode. Vodena faza je ekstrahovana pomoću dodatnih 2x250 ml vode i slanog rastvora i konačno sušena (MgSO 4) i filtrirana. Rastvor je kao takav korišćen u sledećoj fazi.

<1>H-NMR (300 MHz, CDClg): 5 4,4 (s,2H), 7,4 (d, 2H), 7,7 (d, 2H).

(ii) 4-amidin benzi1 azid

Hlorovodonik je uduvavan u smešu 250 ml apsolutnog etanola i rastvora iz faze (i) (približno 200 ml) iznad -5°C, sve do zasićenja. Držanje na 8°C u toku 24 h i isparavanje najvećeg dela rastvarača praćeno taloženjem dodavanjem bezvodnog etra, dalo je bele krista-le koji su izolovani filtriranjem i rastvoreni u 1,8 1 alkoholnog rastvora amonijaka. Posle 48 h najveći deo rastvarača je uklonjen i dodano je 200 ml 3,75 M NaOH rastvora nakon čega se 4-amidin benzil azid istaložio u vidu bezbojnih kristala. Kristali su izolovani filtriranjem. U ovom trenutku prinos 4-amidin benzil azida bio je 22,5 g (ukupno 51°/.).

Eti 1imidatobenzi1 azid hidrohlorid:

'H-NMR (300 MHz, CTHDD):S1,6 (t, 3H), 4,5 (s, 2H), 4,65 (q, 2H), 4,8 (br s, 2H), 7,6 (d, 2H), 8,1 (d, 2H).

4-amidin benzil azid:

<a>H-NMR (300 MHz, CDC1 ): 4,4 (s, 2H), 5,7 (br s, 3H), 7,3 (d, 2H), 7,6 (d, 2H).

<13>C-NMR(125 MHz, CDC1 ): amidin ugljenik:8165,5.

(iii) 4-(benziloksikarbonilamidin) benzil azid

Kristali iz (ii) rastvoreni su u 500 ml metilen hlorida i dobijeni rastvor je sušen (K2C03), filtriran, pa je dodano 27 ml (194 mmol) trietil amina. 25 ml benzil hlorformijata lagano je dodavano mešanom rastvoru dok je reagujuća smeša hlađena u ledenom kupatilu. Posle 30 minuta dodano je sledećih 2 ml benzil hlorformijata i mešanje je nastavljeno sledećih 30 min. Potom je dodavana voda i vodena je faza podešena na pH 7 dodavanjem 2M HC1. Organska faza je sušena (MgSO^) a rastvarač je uklonjen u vakuumu. Konačno je 4-(benziloksikarbonilamidin) benzi azid izdvojen u vidu bezbojnih kristala iz etar/metilen hlorid/heksana.

<1>H-NMR (300 MHz, CDC1 ):S4,4 (s, 2H), 5,3 (s,2H), 6,3-7,0 (br s, IH), 7,3-7,4 (m, 5H), 7,7 (d, 2H), 7,9(d, 2H), 9,3-9,6 (br s, IH).

<13>C-NMR (125 MHz, CDCl^: amidin ugljenik: 5 167,5.

(iv) 4-aminometi 1-1-(N-benziloksikarbonilamidin)-benzol (H-Pab(Z))

26,3 g (100 mmol) trifenilfosfina dodano je na sobnoj temperaturi 4-(benziloksikarbonilamidin) benzil azidu iz faze (iii) rastvore-nom u 160 ml THF. Posle 16 h dodano je dopunskih 6,6 g (25 mmol) trifenilfosfina i rastvor je ostavljen da stoji 4 h pre no što je rastvarač uklonjen u vakuumu. Ostatak je rastvoren u metilen hloridu i ekstrahovan 2M HC1. Vodena faza je isprana metilen hlori-dom i etrom a zatim olužena rastvorom 3.75M natrijum hidroksida. Ekstrahovanje metilen hloridom praćeno sušenjem (K2C03) i uklanjanje rastvarača u vakuumu dalo je 20 g (ukupan prinos počev od ci-janobenzil bromida je 28%) žutog ulja koje se stvrdnulo nakon što je odstajalo.

<1>H-NMR (500 MHz, CDC1 ): 1,2-2,2 (br s, 2H), 3,8 (s, 2H), 5,2 (s, 2H), 7,2-7,35 (m, 5H), 7,4 (d, 2H), 7,8 (d,2H), 9,1-9,6 (br s.lH).

<13>C-NMR (125 MHz, CDC13}: amidin i karbonil ugljenici: 5 164,6 i 168,17.

H-Pig(Z)2

(i) 4-(tert-butiloksikarboni1-aminometi 1) piperidin

Rastvoru 17,7 g 4-tert-butiloksikarbonilaminometil piridina u 125 ml MeOH dodana su 2 g 5% Rh/Al 2 0 3 i smeša je preko noći hidrogenizovana na 0,34 MPa. H-NMR je pokazao da je hidrogenizacija bila nepotpuna. Zbog toga je katalizator isfiltriran a rastvarač uklonjen u vakuumu, a ostatak je rastvoren u 100 ml sirćetne kiseline, pa su dodana 2 g 5% Rh/Al 2 0 3 i smeša je hidrogenizovana 4 dana na 0,34 MPa. Katalizator je isfiltriran a najveći deo sirćetne kiseline je uklonjen pod vakuumom. Posle dodavanja 50 ml vode ostatku, smeša je olužena 5 M NaOH, a vodena faza je ekstrahovana pomoću 1 x 200 i 1 x 100 ml CH2C12. Kombinovana organska faza je isprana u 25 ml vode i sušena (MgSO ). Isparavanje rastvarača dalo je 17,2 mrkog ulja koje je rastvoreno u 50 ml dietil etra. Dodavanje 200 ml pentana dalo je talog koji je isfiltriran da bi se dobilo 7,7 g mrkog praška. Isparavanjem matičnog rastvora dobijeno je 7 g belog ulja. Mrki prašak je rastvoren u 100 ml EtOAc i organska faza je isprana u 1 x 50 ml i 1 x 25 ml 1 M KHSO . Kombi-

4

novana kisela faza je olužena 2 M NaOH i ekstrahovana pomoću 1 x 200 + 1 x 75 ml EtOAc. Kombinovana organska faza je sušena i isparena da bi dala 5,2 g nazivnog jedinjenja u vidu belog praška.

Obrada na isti način belog ulja dobijenog iz matičnog rastvora dala je dodatna 3,4 g proizvoda'. Ukupni prinos 40%.

<1>H-NMR (500 MHz, CDC13, smeša dva rotamera, 3:1): glavni rotamer:

51,11 (dq, 2H) 1,44 (s, 9H), 1,49-1,60 (m, IH), 1,63-1,70 (m,2H), 2,58 (dt, 2H), 2,93-3,03 (m, 2H), 3,07 (m,2H), 4,75 (bi, IH (NH)).

Izdvojeni signali nastali od manjeg rotamera javljali su se kod61,21 (dq) i 1,91 (dt).

(ii) Boc-Pig(Z)2'

Rastvoru 2 g (9,33 mmol) 4-(tert-butiloksikarbonil-aminmetil) piperidina u 60 ml CHgCN dodano je 3,34 g (9,33 mmol) N.N'-di(benzil-oksikarboniDmetilizotiokarbamida i smeša je mešana 22 h na 60 »C. Rastvarač je isparen a ostatak Je rastvoren u EtOAc. Organska faza je isprana, redom, u 2 x 20 ml IM KHS04>1.x 20 ml vode, 1 x 20 ml slanog rastvora i sušena (MgS04). Isparavanje ras-tvarača, praćeno impulsnom hromatografijom, koristeći petroleum etar/EtOAc (1/1) kao sredstvo za ispiranje, dalo je 2,43 g (50%) željenog proizvoda.

<1>H-NMR (500 MHz, CĐC13): neki signali, naročito u piperidinskom prstenu, selektivno su prošireni usled nekog procesa međumolekul-ske zamene. To je posebno izraženo kod 2-i 6-CH2grupa piperidinskog prstena, koje imaju jedan širok maksimum u opsegu od 3,7 do 4,5 ppm.81,19-1,31 (m, 2H), 1,43 (s, 9H), 1,63-1,80 (m,3H), 2,66-3,05 (m, 4H), 3,7-4,5 (bs, 2H), 4,65 (bt, IH (NH)), 5,13 (s, 4H), 7,2-7.4 (m, 10H), 10,5 (bs, IH (NH)).

(iii) H-Pig(Z)2

Rastvor 163 mg (0,31 mmol) Boc-Pig(Z)2u 5 ml EtOAc zasićenog HCl(g)-om mešan je na temmperaturi okolne sredine 3 časa i 30 minuta. Rastvarač je isparen i ostatak je rastvoren u 30 ml CH2C12. Organska faza je isprana u 5 ml 2 M NaOH, 1 x 5 ml vode, 1 x 5 ml slanog rastora I sušena (MgSO ). Isparavanje rastvarača da-lo je 100 mg (76%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (500 MHz, ,CTJC13): neki signali, naročito u piperidinskom prstenu, selektivno su prošireni usled nekog procesa međumolekul-ske zamene. To je posebno izraženo kod 2- i 6-CH2grupa piperidinskog prstena, koje imaju Jedan širok maksimum u opsegu od 3,7 do 4.5 ppm.

5 1,18-1,37 (m, 2H), 1,46-1.63 (s, IH), 1,68-1,83 (m, 2H), 2,57

(d, 2H), 2,86-3,03 (m, 2H), 3,7-4,5 (bs, 2H), 5,13 (s, 4H), 7,2-7,4 (m, 10H).

4-ami nometil-l-(N-benzi1oksi karboni1amidin)-c i kloheksan (H-Pac(Z) x 2HC1)

(i) N-[N-4-(benziloksikarbonil)amidin benzil] tert-butil karbamat

1,466 g (6,7 mmol) (Boc)20 dodano je uz mešanje ledenohladnom rastvoru 1,81 g (6,4 mmol) 4-(benziloksikarbonil) amidin benzil amina i 1 ml (7,1 mmol) trietil amina u 25 ml metilen hlorida. Nakon 20 dodano je još metilen hlorida i smeša je isprana 5% sirćetnom kiselinom i 10% rastvorom natrijum karbonata. Sušenje (magnezijum sulfat) i uklanjanje rastvarača u vakuumu ostavilo je ostatak koji se mogao rekristalisati iz metilen hlorida/heksana. Prinos je bio 1,66 g (68%).

(ii) N-[N-4-amidin benzil]tert-butil karbamat

Smeša 1,60 g (4,2 mmol) N-|"4-(benziloksikarbonil)amidin benzil] tert-butil karbamata, 5 ml sirćetne kiseline i 160 mg 10% paladi-juma na drvenom uglju u 50 ml etanola mešana je u azotnoj atmosferi 2 h. Katalizator je uklonjen filtriranjem kroz celit a rastva— rač je uklonjen u vakuumu da bi se dobio acetat nazivnog jedinjenja u merljivoj količini.

(iii) N-[4-amidin cikloheksil metil] tert-butil karbamat

17 mmol acetata N-("4-amidin benzil]tert-butil karbamata hidrogeni- : zovano je u 100 ml metanola u prisustvu 863 mg 5% rodijuma na aluminijum oksidu na 3,4 MPa u toku 20 h. Katalizator je uklonjen filtriranjem a rastvarač je uklonjen u vakuumu. Ostatak je rastvoren u vodi i rastvor je olužen natrijum hidroksidom. Potonje ekstrahovanje metilen hloridom, sušenje kombinovanih organskih faza (kalijum karbonat) i uklanjanje rastvarača u vakuumu dalo je 3,8 g (87%) nazivnog jedinjenja.

(iv) N-|"N-4-(benziloksikarbonil)amidin cikloheksil metil] tert-butil karbamat

1,25 ml (8,8 mmol) benzil hlorof ormi jata dodano je na 0°C u mešani rastvor 2,04 g (8 mmol) N-|~4-amidin cikloheksil]tert-butil karbamata, 1,23 ml (,8 mmol) trietil amina i 197 mg DMAP u 40 ml metilen hlorida. Posle 10 minuta reagujuća smeša • je razblažena metilen hloridom i ekstrahovana vodom razblaženom sirćetnom kiselinom i rastvorom natrijumhidrdkarbonata. Organska faza je naneta na stub silicijum dioksida i potonje izdvajanje metilen hloridom koji je sadržavao povećavane količine etil acetata dalo je 2,49 g ((0%) nazivnog jedinjenja.

(v) 4-aminometil-l-(N-benziloksi karbonilamidin)-cikloheksan (H-Pac(Z) x 2HC1)

Hlorovodonik je propušten kroz rastvor 2 g (5,1 mmol) N-^-(benzi Ikarboni 1 )amidin cikloheksil metil]tert-butil karbamata u 40 ml etil acetata. Posle 10 minuta dodan je metanol i nakon uklanjanja dela rastvarača u vakuumu, kristalisan je dihidrohlorid nazivnog Jedinjenja.

4-aminometil-l-CN-benziloksi karbonilamiđin) piperidin (H-Pig(Z) x HC1)

(i) 4-(N-tert-but i loksikarboni laminomat i l)-l-(N-benzi loksikabonil-amisin) piperidin (Boc-Pig(Z))

7,8 g (36,4 mmol) 4-(N-tert-butiloksikarbonilaminometil) piperidina i 8,98 g (40 mmol) N-benziloksikarbonil-S-metilisotiokarbamida pomešano je u 25 ml etanola. Smeša je zagrevana na 60-70«Cu toku 6 h i ostavljena na sobnoj temperaturi dva dana. Rastvarač je isparen i ostatak je rastvoren u CH^Cl^ Organski sloj je ispran dva puta u 0,3 M KHSO^ i jednom u slanom rastvoru. Kombinovan organski sloj je sušen (Na^O^), filtriran i isparen. Sirov proizvod je prečišćen impulsnom hromatografijom koristeći stepenast gradijent CH^C^/MeOH (100/0, 97/3. 95/5, 90/10) kao sredstva za ispiranje da bi se dobilo 5,22 g (37%) nazivnog jedinjenja.

(ii) H-Pig(Z) x HC1 (4-aminometil-l-(N-benziloksi karbonilamidin)

piperidin

5,22 g (13,5 mmol) Boc-Pig(Z) rastvoreno je u 100 mL etil acetata zasićenog Hcl(g). Smeša je puštena da odstoji jedan Čas a potom je isparena. Ostatak je rastvoren u vodi i ispran smešom dietiletra i etil acetata. Vodeni sloj je sušen zamrzavanjem da bi dao 4,0 g (91*/.) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (D20, 300 MHz): 5 1,40-1,60 (m, 2H), 2,05 (bd, 2H), 2,19 (m, IH), 3,07 (d, 2H), 3,34 (bt, 2H), 4,08 (bd, 2H), 5,40 (s, 2H), 7,5-7,63 (m, 5H)

MS m/z 291 (M<+>+l)

4-aminoetil-l-benziloksikarbonilamidin piperidin (H-Rig(Z))

(i) l-benziloksikarbonilamidin-4-hldroksietilpiperidin

Smeša 6,2 g (0,020 mol) 4-hidroksietil piperidina i 3,6 g (0,028 mol) N-benziloksikarbonil-S-metil izotiokarbamida u 50 ml aceto-ni trola refluksovana je preko noći. Isparavanje i impulsna hromatograf i ja na silika gelu etil acetatom dalo je 3,5 g (41%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (300 MHz, CDC13): 5 1,1-1,85 (m, 7H), 2,83 (bt, 2H), 4,70 (bt, 2H), 4,18 (bd, 2H), 5,12 (s, 2H), 6,9-7,2 (m, 2H), 7,2-7,5 (m, 5H).

(ii) 1-beziloksikarbonilamidin-4-mesiloksieti 1 piperidin

Ledeno rashlađenom rastvoru 3,50 g (0,0115 mol) 1-benziloksi-karbonilamidin-4 hidroksietil piperidina, 1,15 g (0,0115 mol) trietil amina u 40 ml metilen hlorida i 10 ml tetrahidrofurana dodano je ukapavanjem 1,30 g (0,115 mol) mesil hlorida. Reagujuća smeša je mešana 1 čas. Smeša je sipana u vodu i organski sloj Je zadržan. Vodeni sloj je ekstrahovan metilen hloridom i kombinovani organski slojevi su isprani vodom, sušeni (Na2S04) i ispareni. Proizvod je korišćen bez daljeg prečišćavanja u sledećoj fazi. Prinos: 4,4 g (100%).

VNMR (500 MHz, CDClg)61,15-1,30 (m, 2H), 1,65-1,8 (m, 5H), 2,84 (bt, 2H), 3,01 (s, 3H), 4,20 (bd, 2H), 4,27 (2, 2H), 5,12 (s, 2H), 7,1-7,5 (m,7H).

(iii) 4-azidoetil-l-benziloksikarbonilamiđin piperidin

U 100 ml metilformamida rastvoreno je 4,4 g (0,0115 mol) sirovog l-benziloksikarbonilamidin-4-mesiloksietil piperidina i dodano 4,5 g (0,069 mol) natrijum azida. Smeša je grejana 2,5 časa na 100«C. Potom je sipana u vodu i ekstrahovana etil acetatom tri puta. Kombinovana organska faza je isprana vodom, sušena (Na^O^) i isparena. Ostatak je izložen impulsnoj hromatografiji na si lika gelu, koristeći etil acetat/heptan 1/1 kao sredstvo za ispiranje. Prinos: 3,0 g (79%).

<4>H-NMR (500 MHz, CDC1 3) 5 l,20(dq, 2H), 1,5-1,8 (m,-5H), 2,85 (dt, 2H), 3,35 (t, 2H), 4,22 (bd, 2H), 5,13 (s, 2H), - 6,9-7,2 (b, 2H), 7,2-7,45 (m, 5H).

(iv) 4-aminoeti1-1-benziloksikarbonilamidino piperidin (H-Rig(Z))

U30ml vode dodano je 0,40 g 10% Pd/C. Natrijum borhidrid, 1,0 g (0,031 mol), rastvoren je u 30 ml vode i dodavan je pažljivo u me-šan i ledeno ohlađen mulj Pd/C i vode. 4-azidoetil-l-benziloksikarbonilamidino piperidin, 2,9 g (8,8 mmol) rastvoreno je u 80 ml tetrahidrofurana i taj je rastvor dodavan ukapavanjem u pomenuti ledeno ohlađen vodeni mulj. Posle 4 h mešanja na sobnoj temperaturi, smeša je ponovo ledeno ohlađena i dodano je 30 ml 2M HC1. Sme-ša je filtrirana kroz celit a celit je ispran dodatnom vodom. Tetrahidrofuran je isparen a vodena je faza isprana etil acetatom. Vodena faza je olužena pomoću 2 M NaOH i tri puta ekstrahovana metilen hloridom. Kombinovana organska faza je isprana vodom, sušena (Na^O^) i isparena. Proizvod je korišćen u sledećoj bez daljeg prečišćavanja.

<l>H-NMR (500 MHz, CDC13) 3 1,2-1,5 (m, 6H), 1,55-1,65 (m, IH), 1,73 (bd, 2H), 2,72 (b, 2H), 2,81(dt, 2H), 4,20 (bd, 2H), 5,12 (s, 2H), 6,9-7,2 (b, 2H), 7,2-5,5 (m, 5H).

(3RS)-l-(N-benziloksikarbonilamidin)-3-aminimetil pirolidin

<m>

(H-(R.S)Nig(Z))

(i) (3RS)-3-hiđroksimetil pirolidin

16,4 g (0,0857 mol) (3RS)-benzil-3-hidroksimetil pirolidina (vide-

ti napred H-(R,S)Hig(Z) (i)) pomešano je sa 1,5 g Pd/C (10%), 5 ml vode i 150 ml etanola i smeša je hidrogenizovana preko noći na 0,26 MPa. Nakon filtriranja kroz "hyflo" filtar i isparavanja rastvarača,<1>H-NMR je pokazala da reakcija nije dovršena. Nastavljena hidrogenizacija na 0,26 MPa sa 1,6 g Pd/C (10%) u 5ml vode/ 150 ml etanola u toku tri dana dovršila je redukciju. Filtriranje kroz "hyflo" filtar i isparavanje rastvarača dalo je proizvod u raerljivoj količini.

(ii) (3RS)-l-(N-benziloksikarbonilamidin)-3-hidroksimetil pirolidin

1,01 g (0,01 mol) (3RS)-3-hidroksimetil pirolidina i 2,29 g (0,011 mol) N-benziloksikarboni1-0-metilizokarbamida rastvoreno je (amin nije mnogo rastvorijiv) u toluolu i zagrejano do 60°C u toku tri časa, a potom mešano preko noći na sobnoj temperaturi. Smeša je isparena i 1H-NMR je pokazala da reakcija nije dovršena. Zbog toga je smeša rastvorena u 15 ml acetonitrila i zagrevana do 60«Cu toku 3 časa i mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je isparen i smeša je rastvorena u CH2C12, jednom isprana vodom, sušena (Na^O^), filtrirana i isparena. Sirov proizvod je prečišćen impulsnom hromatografijom koristeći CH Cl /MeOH 95/5 kao

»2 z

sredstvo za ispiranje da bi se dobilo 0,70 g (25%) proizvoda.

MS m/z 278 (M<+>+l)

(iii) (3RS)-l-(N-benziloksikarbonilamidin)-3-mesiloksimetil pirolidin

0,7 g (2,53 mmol) (3RS)-i-(N-benziloksikarbonilamidin)-3-hidroksimetil pirolidina i 0,70 ml (5,05 mmol) trietilamina rastvoreno je u 15 ml dietil etra/CH 2 Cl 2 1/1 i smeša je rashlađena na 0°C. 0,25 ml (3,29 mmol) metansulfonil hlorida u 3 ml dietil etra lagano je dodavano i reagujuća smeša je mešana 3 časa na 0«C. Rastvarač je isparen i ostatak je rastvoren u etil acetatu i ekstrahovan rastvorom 0,3 M KHSO . Vodeni sloj je jednom ispran u CH Cl . Vo-4 2 2

deni sloj je neutralisan rastvorom 10 M NaOH i dva puta ekstrahovan pomoću CH2C12. Kombinovan organski sloj je sušen (Na2S04), filtriran i isparen da bi se dobilo 0,450 g (50%) nazivnog jedinjenja.

(iv) (3RS)-l-(N-benziloksikarbonilamidin)-3-azidometil pirolidin

0,450 g (1,27 mmol) (3RS)-l-(N-benziloksikarbonilamidin)-3-mesil-oksimetil pirolidina i 0,124 g (1,9 mmol) natrijum azida rastvoreno je u 10 ml dimetilformamida i zagrejano do 60 C u toku četiri časa i potom mešano preko noći na sobnoj temperaturi. Dodana je voda i smeša je dva puta ekstrahovana toluol/etil acetatom 2/1. Kombinovan organski sloj je sušen (Na SO ), filtriran i

2 4

isparen. Sirov proizvod je prečišćen impulsnpm hromatografijom koristeći CH2Cl2/MeOH 95/5 kao sredstvo za ispiranje da bi se dobilo 0,262 g (68%) proizvoda.

MS m/z 303 (M<+>+l)

(v) (3RS)-l-(N-benzilokslkarbonilamidin)-3-aminometil pirolidin

(H-(RS)Nig(Z))

Pomešano je 32 mg Pd/C i 2,6 ml H 0 pa je propuštena blaga struja azota. Dodano je 98 mg NaBH^ u 2,6 ml H"20 posle čega je lagano dodano 262 mg (0,87 mmol) (3RS)-l-(N-benziloksikarbonilamidin)-3-mesiloksimetil pirolidina rastvorenog u 7 ml MeOH. Smeša je pušte-na da odstoji jedan čas. Dodano je 5 ml IM HC1 i smeša je profil-trirana kroz "hyflo" filtar. Organski rastvarač je isparen pod sniženim pritiskom, a preostali vodeni sloj je jednom ispran etil acetatom, olužen rastvorom NaOH i nekoliko puta ekstrahovan pomoću CH Cl . Kombinovan organski sloj je sušen (Na SO ), filtriran i

2 2 2 4

isparen da bi se dobilo 130 mg (54%) proizvoda.

MS m/z 277 (M<+>+l)

(3RS)-l-(N-benziloksikarbonilamiđin)-3-aminoetil pirolidin (H-(R,S)Hig(Z))

(1) (3RS)-l-benzil-3-hidroksimetil pirolidin

25,2 g (0,163 mol) (3RS)-l-benzil-2-okso-4-metoksikarbonil pirolidina lagano je dodavano u mulj 6,22 g litijum aluminijum hidrida u 160 ml dietil etra pod argonskom atmosferom. Smeša je mešana preko noći a potom jedan čas grejana na temperaturi refluksovanja. Rea-gujuća smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i dodano je 0,2 g Na^O^, a posle čega je lagano dodano, po navedenom redosledu, 6 ml vode, 18 ml rastvora 3,75 M NaOH i 6 ml vode. Mulj je osušen od viška vode pomoću Na^O^/celita, filtriran i isparen da bi se dobilo 20,3 g proizvoda

VNMR (CDC1 , 300 MHz): 5 1,64-1,77 (m, IH), 1,93-2,07 (m, IH), 2,27-2,40(m, 2H), 2,51 (dd, IH), 2,62 (dd, IH), 2,82 (m, IH), 3,52 (dd, IH), 3,59 (s, 2H), 3,67 (dd, IH), 7,15-7,40 (m, 5H).

(ii) (3RS)-l-benzil-3-hlormetil pirolidin

U refluksovanl rastvor 15,3 g (0,08 mol) (3RS)-l-benzil-3-hidroksimetil pirolidina u 220 ml CHC13lagano je dodavan rastvor 330 ml tionil hlorida u 60 ml CHC13i refluksovanje-je nastavljeno u toku još jednog časa. Smeša je isparena i ostatak je rastvoren u vodi. Vodeni sloj je ispran etil acetatom i potom olužen rastvorom 0,2 M NaOH. Vodeni sloj je tri puta ekstrahovan etil acetatom, pa je kombinovan organski sloj sušen (Na^SOj, filtriran i isparen da bi se dobio proizvod u merljivoj količini (16,8 g).

VNMR (CDCl , 300 MHz):51,55 (m, IH), 2,05 (m, IH), 2,38 (dd, IH), 2,48-2,64 (m, 3H; zbog toga 2,58 (t, 2H)), 2,73 (dd, IH), 3/51 (d, 2H), 3,60 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 5H).

(iii) (3RS)-l-benzil-3-cijanometil pirolidin

16,8 g (0,08 mol) (3RS)-l-benzil-3-hlormetil pirolidina i 5,88 g (0,12 mol) natrijum cijanida rastvoreno je u 250 ml dimetil sulfoksida. Smeša je mešana na 60»C u toku dva dana a na sobnoj temperaturi nedelju dana. Dodana je voda i smeša je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Kombinovan organski sloj je ispran slanim rastvorom, sušen (Na 2 S0 4), filtriran i isparen da bi se dobilo 14,7 g (92*/.) proizvoda.

<*>H-NMR (CDCl , 300 MHz): 5 1,55 (m, IH), 2,13 (m, IH), 2,35 (dd,

3 IH), 2,42 (t, 2H), 2,44-2,59 (m, 2H), 2,65 (m, IH), 2,73 (dd, IH), 3,61(s, 2H), 7,2-7,4 (m, 5H).

(iv) (3RS)-benzil-3-aminoetil pirolidin

14.7 g (0,0734 mol) (3RS)-1-benzi1-3-cijanometil pirolidina rastvorenog u 220 ml dietil etra lagano je dodavano u mulj 2,94 g litijum aluminijum hidrida u 74 ml dietil etra pod argonskom atmosferom. Smeša je mešana preko noći i smeši je dodano 6 ml vode, 18 ml rastvora 3,75 M NaOH i 6 ml vode. Mulj je osušen od viška vode pomoću Na^O^/celita, filtriran vakuumom i isparen da bi se dobilo 14,84 g (99%) proizvoda.

VNMR (CDC13, 300 MHz): 5 1,41 (m, IH), 1,51 (q, 2H), 1,90-2,10 (m, 2H; zbog toga 2,05 (dd, IH), 2,18 (m, IH), 2,43 (m, IH), 2,55-2,73 (m, 3H), 2,80 (vidljivo t, IH), 3,58 (vidljivo d, 2H), 7,15-7,4 (m, 5H).

(v) (3RS)-1-benzi1-3-(N-tert-butiloksikarbonilaminoeti 1) piro1 idin

Smeši 14,84 g (0,0762 mol) (3RS)-l-benzil-3-aminoetil pirolidina, 72,6 ml rastvora IM NaOH, 76 ml vode i 145 ml THF dodano je 17,44 g (0,08 mol) di-tert-butil bikarbonata i smeša je mešana preko noći. Rastvor je koncentrovan i ekstrahovan tri puta etil acetatom. Kombinovan organski sloj. je ispran slanim rastvorom, sušen (Na^O^), filtriran i isparen. Sirov proizvod je prečišćen impulsnom hromatografijom koristeći stepenast gradijentCU^ Cl^/MeOH (95/5, 90/10) kao sredstvo za ispiranje da bi se dobilo 14,69 g (80%) proizvoda.

<1>H-NMR (CDCl 3, 300 MHz): 6 1,25-1,65 (m, 12H; zbog toga 1,40 (s, 9H), 1,90-2,25 (m, 3H), 2,46 (m, IH), 2,65 (m, IH), 2,80 (vidljivo t, IH), 3,09 (s, 2H), 3,59 (s, 2H), 7,15-7,35 (m, 5H).

(vi) (3RS)-3-(N-tert-butiloksikarbonilamlnoetil) pirolidin

3,1 g (0,01 mol) (3RS)-l-benzil-3-(N-tert-butiloksikarbonilamino-etil) pirolidina hidrogenizovano je preko noći na 0,28 MPa na 0,6 g Pearlman-ovog katalizatora (Pd(0H)2) u 40 ml etanola. Nakon filtriranja katalizatora kroz celit i isparavanja rastvarača, XH-NMR je pokazao da reakcija nije dovršena. Zbog toga je ponovo dodano 0,6 g Perlman-ovog katalizatora u 40 ml etanola (95%) i smeša je preko noći obrađivana u atmosferi H2na 0,28 MPa. Filtriranje kroz celit i isparavanje rastvarača dalo je proizvod u merljivoj količini (2,18 g).

MS m/z 214 (M<+>+l)

(vii) (3RS)-l-(N-benziloksikarbonilamidin)-3-aminoetil pirolidin

(H-(R,S)Hig(Z))

2,18 g (0,0102 mmol) (3RS)-3-(N-tert-butiloksikarbonilaminoetil) pirolidina i 2,81 g (0,0125 mol) N-benziloksikarboni1-S-metilizo-tiokarbamida rastvoreno je u 30 ml toluola i u toku osam časova zagrejano do 60-70-C, posle čega je smeša jedan dan mešana na sobnoj temperaturi. Dodan je rastvor 0,3 M KHSO^ i vodeni sloj je ispran smešom toluola i etil acetata i ostavljen da odstoji 2 dana, za koje je vreme uklonjena Boe grupa. Kisela vodena faza je pretvorena u baznu 1 ekstrahovana četiri puta u CH Cl . Kombinovan 2 2

organski sloj je sušen (Na^O^), filtriran i isparen da bi se dobilo 2,0 g (51%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (CDCl , 330 K, 300 MHz): S 1,45-1,7 (m, 3H), 2,07 (m, IH),

3

2,26 (m, IH), 2,74 (t, 21H), 3,00 (vidljivo t, IH), 3,45-3,80 (vidljivo q, IH), 5,12 (s, 2H), 6,72 (bs, 2NH), 7,15-7,45 (m, 5H).

(4RS)-l,3-diaza-2-tozilimino-4-aminoetil cikloheksan (H-(R,S)Itp(Ts))

(i) (4RŠ)-l,3-diaza-2-totilimino-4-karboksi cikloheksan

Pripremljen korišćenjem istog postupka koji Je opisan u Journal of Org. Chem., str. 46, 1971.

(ii) (4RS)-l,3-diaza-2-tosilimino-4-hidroksimetil cikloheksan

12,9 g (345 mmol) LiAlH pažljivo Je dodano u hladan mulj (temperatura ledenog kupatila) 9,9 g (33 mmol) (4RS)-l,3-dlaza-2-tozil-imino-4/karboksi cikloheksana u 330 mL bezvodnog THF. Reagujuća smeša je preko noći mešana na sobnoj temperaturi. Reagujuća smeša je dorađena prema Fieser & Fieser-u, na primer dodavanjem 12,9 g vode, 30,7 g 3,75 M NaOH, 12,9 g vode, Na^, CHClz i celita smeši, pa zatim filtrirana. Isparavanje rastvarača dalo je 7,0 g (75%) željenog proizvoda.

MS m/z 284 (M<+>+l)

(iii) (4ARS)-l,3-diaza-2-tozilimino-4-mesiloksimetil cikloheksan

2,9 mL (37,1 mmol) MsCl pažljivo je dodano hladnom (temperatura ledenog kupatila) mulju 7,0 g (24,7 mmol) (4RS)-l,3-diaza-tozil-imino-4-hidroksi cikloheksana u 6,9 mL (49,4 mmol) trietilamlna i 125 mL CH Cl . Voda je dodana na 1 h 15 min, pa je organska vaza izdvojena, sušena (Na 2 S0 4), filtrirana i isparena da bi se dobilo nazivno jedinjenje u merljivoj količini.

MS m/z 3262 (M<+>+l)

(iv) (4RS)-1,3-diaza-2-tozil-imino-4-cljanometil cikloheksan

8,9 g (24,7 mmol) (4RS)-1,3-diaza-2-tozilimino-4-mesiloksimetil cikloheksana i 1,3 g (27,2 mmol) NACN rastvoreno je u 75 mL DSMO. Nakon mešanja na 40°C u toku 60 časova, dodana je naknadna količi-na od 0,31 g (6 mmol). NaCN i rastvor je mešan tri časa na 65°C. Dodano je 150 mL vode i kristali su istaloženi iz rastvora. Isfiltrirani su i sušeni da bi se dobilo 5,4 g (75%) željenog proizvoda.

MS m/z 293 (M++D

(4RS)-1,3-diaza-2-tozilamino-4-aminoetil cikloheksan (H-(R.S)Itp(Ts))

935 mg LiAlH 4 pažljivo je dodano hlađenom (temperatura ledenog kupatila) mulju 2,4 g (8,2 mmol) (4RS)-l,3-diaza-2-tozilimino-4-cijanometil cikloheksana u 90 mL THF. Nakon 2 časa mešanja dodano je 1 g H O, 3 g 3.75M NAOH, 1 g H 0, Na SO , celit i CH Cl . Smeša ° 2 ° 2 2 4 2 2

je filtrirana i rastvarač uklonjen u vakuumu da bi se dobilo 2,2 g (90%) željenog proizvoda.

VNMR (500 MHz, MeOD): 5 1,52-1,71 (m, 3H), 1,88-1,96 (m, IH), 2,37 (s, 3H), 2,64-2,73 (m, 2H), 3,2-3,4 (m, 2H, delimično preklapanje sa signalom rastvarača), 3,44-3,53 (m, IH), 7,28 (d, 2H), 7.71 (d,2H).

(4S)-l,3-diaza-2-tozilamino-4-aminoetil cikloheksan (H-(S)Itp(Ts))

Priprema 'se na isti način kako je opisano za H-(R,S)Itp(Ts) polazeći od optički čiste 2,4-diaminobuterne kiseline.

<1>H-NMR (300,13 MHz, CDCl ): 5 0,97-1,15 (s široko, IH), 1,48-1,69 (m, 3H), 1,84-1,95 (m, IH), 2,37 (s, 3H), 2,68-2,82 (m, IH), 2,86-2,98 (m, IH), 3,22-3,44 (m, 2H), 3,45-3,58 (m, IH), 7,19 (d, 2H), 7.72 (d, 2H)

<13>C-NMR (300,13 MHz, CDC13): 6 gvanidinugljenik 154,05

H-Aze-OEt x Hcl

Pripremljeno na isti način kako je opisano za H-Pic-OEt x HC1 od H-Aze-OH (videti niže).

H-Aze-OMe x Hcl

Pripremljeno prema postupku koji su opisali Seebach D. i dr. u Liebigs Ann. Chem., str. 687, 1990.

H-Pab(z)x HC1

Pripremljeno dodavanjem 1 mol ekvivalenta 5 M Hcl u izopropanolu rastvoru sirovog H-Pab(Z) u EtOH (oko 1 g/10 ml) posle čega se H-Pab(Z) x HC1 trenutno istaloži iz rastvora. Nakon filtriranja je talog dva puta ispran hladnim ErOH i sušen da bi se dobilo nazivno jedinjenje u skoro merljivoj količini.

H-Pic-OEt x HC1

L-pipekolinska kiselina, 4,0 g (0,031 mol), pomešana je sa 100 ml apsolutnog etanola i kroz tu mešavinu je pažljivo uduvavana HCl(g) dok nije ostvaren bistar rastvor. Hlađen je u ledenom kupatilu i dodano je ukapavanjem 17 ml tionil hlorida u toku 15 minuta. Ledeno kupatilo je uklonjeno i smeša je refluksovana 2,5 časa. Rastva-rač je isparen a proizvod je dobijen kao njegova hidrohloridna so u merljivoj količini.

<l>H-NMR (300 MHz, D^): 5 1,33 (t, 3H), 1,8-2,1 (m, 5H), 2,3-2,5 (m, IH), 3,1-3,3 (m, IH), 3,5-3,7 (m, IH), 4,4 (dd, IH), 4,44 (q, 2H).

H-(R.S)betaPic-0Me x HC1

Smeša 2,0 g (15,5 mmol) nipekotinske kiseline u 8 ml metanola rashlađena je u ledenom kupatilu i dodano je 2,76 g (23,2 mmol) tionil hlorida. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 časova. Rastvarač je isparen i ostatak je rastvoren u maloj količini metanola, dodan je dietiletar i H-(R,S)betaPic-0Me x HC1 istaložio se u vidu belih kristala. Kristali, 2,57 g (92%) izdvojeni su filtriranjem.

Boc-(R)Cgl-0H

Boc-(R)-Pgl-0H, 32,6 g (0,13 mol) rastvoren je u 300 ml metanola i dodano je 5 g Rh/Al 0 . Rastvor je hidrogenizovan na 5,2 do 2,8 MPa u toku 3 dana. Posle filtriranja i isparivanja rastvarača, NMR je pokazao prisustvo oko 25% metil estra u nazivnom jedinjenju. Sirov materijal je rastvoren u 500 ml THF i 300 ml vode "i dodano

je 20 g LiOH. Smeša je mešana preko noći i THF je isparen. Preostala vodena faza je okiseljena pomoću KHSO i tri puta ekstrhova-na etil acetatom. Kombinovan organski sloj je ispran vodom, sušen (NazS04) i isparen da bi dao 28,3 g (83%) željenog proizvoda.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl ):80,9-1,7 (m, 20H), 4,0-4,2 (m, IH), 5,2 (d, IH).

Boc-(R)Cgl-0Su

Ledeno hladnom rastvoru 2,01 g (7,81 mmol) Boc-(R)Cgl-0H i 1,83 g (15,6 mmol) HOSu u 25 ml CH.CN dodano je 1,69 g (8,2 mmol) DCC i reagujuća smeša je ostavljena da dostigne sobnu temperaturu. Nakon 3 dana mešanja, nataložen DCU je isfiltriran i rastvarač isparen. Ostatak je rastvoren u EtOCa i organska haza je isprana H20, KHSO^, NaHC03, slanim rastvorom, pa je sušena (Na^O^). Isparavanje rastvarača dalo je nazivno jedinjenje u merljivoj količini.

Boc-(R)Cha-0Su

Boc-(R)Cha-0H (1 ekvival.), HOSu (1,1 ekvival) i DCC ili CME-CDI (1,1 ekvival.) rastvoreno je u acetonitrilu (oko 2,5 ml/mmol kiseline) i mešano na sobnoj temperaturi preko noći. Talog obrazovan u toku reakcije bio je isfiltriran, rastvarač isparen i proizvod su-šen u vakuumu. (Kada je u reakciji korišćen CME-CDI, ostatak je, posle isparavanja CinDN, rastvoren u EtOAc i organska faza je isprana vodom i sušena.) Is'paravanjem rastvarača dobijeno je nazivno jedinjenje.

<1>H-NMR (500 MHz, CDC13>2 rotamera odnosa oko 1:1): 0,85-1,1 (m, 2H), 1,1-1,48 (m, 4H), 1,5-1,98 (m, 16H; zbog toga 1,55 (bs, 9H)), 2,82 (bs, 4H) 4,72 (bs, lh, glavni rotamer), 4,85 (bs, IH, manji).

Boc-(R)Hoc-0H

Boc-(R)Hop-0H (videti napred), 3,2 g (11,46 mmol) rastvoren je u metanolu (75 ml). Dodam je rodijum na aktiviranom aluminijum oksidu (Rh/Al203), 0,5 g, i smeša je mešana 18 h u atmosferi vodonika na 0,41 MPa. Katalizator je isfiltriran kroz "hyflo" filtar i rastvarač isparen, tako da je proizvod dobijen u skoro merljivoj količini.

<1>H-NMR (500 MHz, CDC13): 6 0,90 (m, 2H), 1,08-1,33 (m, 6H), 1,43 (s, 9H), 1,60-1,74 (m, 6H), 1,88 (bs, IH), 4,27 (bs, IH).

Boc-(R)Hoc-0Su

Pripremljeno na isti način kako je opisano za Boc-(R)Cha-0su od Boc-(R)Hoc-0H.

Boe-(R)Pro(3-(S)Ph)-0H

Pripremljeno prema postupku koji su opisali J.Y.L. Chung i dr. , u Journal of Organic Chemistrv, br. 1, str. 270-275, 1990.

Boc-(R)Cgl-Aze-0H

(i) Boc-(R)Cgl-Aze-OMe

Mašanoj smeši 3,86 g (15 mmol) Boc-(R)Cgl-0H, 2,27 g (15 mmol) H-Aze-OMe x HC1 i 2,75 g (22,5 mmol) DMAP u 40 mL O^CN na 5°C, dodano je 3,16 g (16,5 mmol) EDC. Reagujuća smeša je mešana 48h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je isparen i ostatak je rastvoren u 150 ml EtOAc i 20 ml H20..Izdvojen.organski sloj je ispran u 2 x 20 ml 0,5 M KHSO 4 ,;2 x 10 ml NaHC0„ 3 (zasićen■ ), 1 x 10 ml H 2O, 1 x

10 ml slanog rastvora i sušen (MgSO^). Isparavanje rastvarača dalo

je 4,91 g (92%) nazivnog jedinjenja koje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.

<1>H-NMR (500 MHz, CDC13, 0,1 g/ml): glavni rotamer, 0,83-1,35 (m, 5H), 1,38 (s, 9H), 1,47-1,84 (m, 6H), 2,18-2,27 (m, IH), 2,50-2,62 (m, IH), 2,50-2,62 (m, IH), 3,72 (s, 3H), 3,94-4,06 (m, IH), 4,07-4,15 (m, IH), 4,39-4,47 (m, IH), 4,68 (dd, J=9,l, J=5,l, IH), 5,09 (d, J?9,2, IH). Izdvojeni maksimumi manjeg rotamera, 2,27-2,35 (m, IH), 3,77 (s, 3H), 3,80-3,87 (m, IH), 3,88-3,95 (m, IH), 4,92 (d, J=9,2, IH), 5,21 (dd, J09.1, J«5, Ih).

(ii) Boc-(R)Cgl-Aze-0H

Hidroliza Boc-(R)Cgl-Aze-OMe vršena je prema postupku opisanom za Boc-(R)Cna-Pic-OEt (videti niže). Proizvod je iskristalisan iz EtOH/aceton/vode (1/1/3,95), prinos 80%.

<1>H-NMR (500 MHz, CDC13): 6 0,85-1,3 (m, 5H), 1,40 (s, 9H), 1,5-1,9 (m, 6H), 1,95-2,2 (m, 2H), 3,92 (m, IH), 4,09 (m, IH), 4,35 (m, IH), 4,95 (m, IH), 5,16 (bd, IH).

Boc-(R)Cgl-Pic-0H

(i) Boc-(R)Cgl-Pic-Ome

Pivaloil hlorid (1,0 ml, 8,1 mmol) dodan je u rastvor Boc-(R)Cgl-OH (2,086 g, 8,1 mmol) i trietil amina (1,13 ml, 8,1 mmol) u toluolu (25 m) i DMF (5 ml). Potom je dodavana smeša H-Pic-OMe x HC1 (1,46 g, 8,1 mmol) i trietil amina (1,1 ml, 8,1 mmol) u DMF (20 ml) na temperaturi ledemog kupatila. Reagujuća smeša je lagano pu-štena da se zagree do sobne temperature i posle 24 časa razređena je vodom i ekstrahovana toluolom. Posle ispiranja 0,3 M KHSO 4, 10% Na2C03i slanim rastvorom, rastvarač je uklonjen u vakuumu da bise dobilo 2,52 g (81%) bezbojnog ulja koje je koriSćeno bez daljeg prečišćavanja.

<1>H-NMR (500 MHz, CDCl^ 2 rotamera, odnos 5:1):80,8-1,8 (m,25H), 2,25 (d, IH), 2,75 (t, IH, manji rotamer), 3,3 (t, IH), 3,7 (s, 3H), 3,85 (d, IH), 4,3 (t, IH, manji rotamer), 4,5-4,6 (m, IH), 5,25 (d, IH), 5,30 (d, IH).

(ii) Boc-(R)Cgl-Pic-0H

Pripremljeno prema postupku za hidrolizu Boc-(R)Cha-Pic-0Et (videti niže) koristeći proizvod iz prethodne faze (i). Proizvod je iskristalisan iz diizopropil etra i heksana.

<1>H-NMR (500 MHz, CDC13, 2 rotamera, odnos 5:1):80,8-1,8 (m,25H), 2.3 (d, IH), 2,8 (t, IH, manji rotamer), 3,3 (t, IH), 3,9 (d, IH), 4.4 (t, IH, manji rotamer), 4,5-4,6 (m, IH), 5,l(s, IH, manji rotamer), 5,3 (d, IH), 5,40 (d, IH).

Boc-(R)Cgl-Pro-0H

3,59 g (31,24 mmol) L-prolina pomešano je sa 20 ml vode i 1,18 g (29,7 mmol) natrijum hidroksida. Smeši je dodano 2,8 g (7,8 mmol) Boc-(R)Cgl-0Su u 10 ml DMF. Zbog problema rastvorijivosti dodano je naknadno još 30 ml DMF i reagujuća smeša je mešana tri dana. Rastvarač je isparen i dodana je voda. Vodena faza je isprana etilacetatom, okiseljena rastvorom 0,3 M KHSO 4 i tri puta ekstrahovana etil acetatom. Organska faza je jednom isprana vodom i jednom slanim rastvorom, sušena (Na 2 SO 4), filtrirana i isparena da bi se dobilo 2,3 g (83%) proizvoda.

<X>H-NMR (500 MHz, CĐClJ: 8 0,89-2,17 (m, 23H), 2,37 (m, IH), 3,55 (q, IH), 3,90 (bs, IH), 4,28 (t, IH), 4,52 (bs, IH), 5,22 (bs, IH

(NH)).

Boe-(R)Cha-Aze-OH

Pripremljeno na isti način kao što je opisano za Boc-(R)Cha-Pic-OH, polazeći od Boc-(R)Cha-0H i H-Aze-OEt x Hcl (videti niže).

Boc(R)Cha-Pro-OH

H-(S)Pro-OH (680 mmol) rastvoren je u 0,87 M natrijum hidroksidu (750 ml). Boe-(R)Cha-OSu (170 mmol) rastvoren u DNF (375 ml) dodavan je ukapavanjem u toku 20 min. Reagujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 h. Smeša je okiseljena (2M KHSO 4) i tri puta ekstrahovana etil acetatom. Organski slojevi su kombinovani i tri puta isprani vodom i jednom slanim rastvorom. Pošle sušenja na natrijum sulfatu i ispanavanja rastvarača, sirupasto ulje je rastvoreno u dietil etru, rastvarač isparen a proizvod je konačno sušen u vakuumu da bi se dobio Boc-(R)Cha-Pro-OH kao beli prašak u skoro merljivoj količini.

<1>H-NMR (500 MHz, CDCl , smeša dva rotamera 9:1): 5 0,8-1,05 (m,

3

2H), 1,05-1,55 (m, 15H, zbog toga 1,5 (bs, 9H)), 1,55-1,8 (m, 5H), 1,8-2,15 (m,3H), 2,47 (m, IH), 3,48 (m, IH), 3,89 (m, IH), 4,55 (m, 2H), 5,06 (m, IH); Izdvojeni signali od manjeg rotamera javljaju se kod d 2,27 (m), 3,58 (m), 4,33 (m), 5,0 (m).

Boe-(Me)(R)Cha-Pro-OSu

(i) Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OH

Pripremljeno na isti način kako je napred opisano za Boc-(R)Cha-Pro-OH polazeći od Boc-(Me)(R)Cha-OSu i H-Pro-OH.

(ii) Boe-(Me)(R)Cha-Pro-Osu

Pripremljeno na isti način kao što je opisano za Boc-(R)Cha-0Su polazeći od Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OH.

Boc-(R)Cha-Pic-OH

(ia) Boc-(R)Cha-Pic-OEt

Boc-(R)Cha-OH, 6,3 g (0,023 mol), rastvoren je u 150 ml CH2C12. Rastvor je ohlađen u ledenom kupatilu, pa je dodano 6,3 g (0,047 mol) N-hidroksibenzotriazila i 11,2 g (0,0265 mol) CME-CDI. Ledeno je kupatilo uklonjeno posle 15 min, a reagujuća smeša je mešana 4 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je isparen i ostatak je rastvoren u 150 ml DMF i ohlađen u ledenom kupatilu. Dodano je H-Pic-OEt x HC1, 4,1 g (0, 021 mol) i pH podešeno na približno 9 dodavanjem N-metilmorfolina. Ledeno kupatilo je uklonjeno posle 15 min i reagujuća smeša je mešana 3 dana. Rastvarač je. isparen a ostatak je rastvoren u etil acetatu i ispran razblaženim KHSO 4 (vod.), NaHCO 3(vod.) i vodom. Organski sloj je sušen (Na S0 ) i isparen da bi se dobilo 7,7 g (89%) Boc-(R)Cha-Pic-OEt

2 4

koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.

<1>H-NMR (500 MHz, CDC13>2 rotamera, odnos 3:1):50,7-1,0 (b, 2H), 1,1-1,9 (m, 29H, zbog toga 1,28 (t, 3H)), 1,45 (bs, 9H), 2,01 (bd, IH, glavni rotamer), 2,31 (bd, IH), 2,88 (bt, IH, manji), 3,30 (bt, IH, glavni), 3,80 (bd, IH, glavni, (4,15-4,3) (m, 2H), 4,5-4,7 (m, 2H, manji), 4,77 (bq, IH, glavni), 4,90 (bd, IH, manji), 5,28 (bd, IH, glavni), 5,33 (bd, IH, glavni).

(ib) Boc-(R)Cha-Pic-OMe

400 jil (3,23 mmol) pivaloil hlorida dodano je mešanoj smeši 875 mg Boc-(R)Cha-0H i 450 /il (3,23 mmol) trietil amina u 10 ml toluola i 2 ml DMF. Posle 45 minuta smeša 596 mg (3,23 mmol) metil (S)-pipe-kolat hidrohlorida i 463 p.1 (3,23 mmol) trietil amina u 5 ml DMF dodana je dobijenom mulju. Posle 2 h dodano je 100 fil (0,72 mmol) trietil amina, a mešanje je nastavljeno u toku sledećih 18 h. Rea-gujućoj smeši su dodani voda i toluol i organska faza je isprana 0,3 M KHSO , 10% Na CO , slanim rastvorom. Sušenje (MgSO ) i ukla-4 2 3 ■ 4

njanje rastvarača u vakuumu dalo je 1,16 g nazivnog jedinjenja.

(ii) Boc-(R)Cha-Pic-0H

Boc-(R)Cha-Pic-OEt, 5,6 (0,014 mol) pomešano je sa 100 ml THF, 100 ml vode i 7 g LiOH. Smeša je preko noći mešana na sobnoj temperaturi. THF je isparen i vodeni rastvor je okiseljen KHSO^fvod. ) i ekstrahovan tri puta etil acetatom. Kombinovana organska faza je isprana vodom, sušena (NazS04) i isparena da bi dala 4,9 g (94%) Boc-(R)Cha-Pic-0H koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja. Jedinjenje se može iskristalisati iz diizopropil etar/hekasana.

Metil estar obrazovan u opisanom postupku (ib) može se hidrolizo-vati koristeći isti postupak koji je opisan za etil estar u (ii).

<1>H-NMR (500 MHz, CDC13, 2 rotamera, odnos 3,5:1):S0,8-1,1 (m, 2H), 1,1-2,1 (m, 27H, zbog toga 1,43 (s, 9H), glavni rotamer), 1,46 (s, 9H, manji), 2,33 (bd, IH), 2,80 (bt, IH, manji), 3,33 (bt, IH, glavni), 3,85 (bd, IH, glavni), 4,57 (bd, IH, manji), 4,68 (m, IH, manji), 4,77 (bq, IH, glavni), 5,03 (bs, IH, manji), 5,33 (bd, IH, glavni), 5,56 (m, IH, glavni).

Boe-(R)Cha-(R,S)betaPic-OH

(1) Boc-(R)Cha-(R,S)betaPic-OMe

Pivaloil hlorid, 0,9 ml (7,3 mmol), dodan je u rastvor 2 g (7,3 mmol) Boc-(R)Cha-OH i 0,81 ml 87,3 mmol) 4-N-metil morfolina u 20 ml acetonitrila. Posle mešanja u trajanju od 1 h i 30 min, dodano je 1,3 g (7,3 mmol) H-(R,S)betaPic-0Me x HC1 i 1,62 ml (14,6 mol) 4-N-metil morfolina, pa je reagujuća smeša mešana 24 časa. Rastvarač je isparen i ostatak je rastvoren u toluolu i malo dietiletra. Posle ispiranja 0,3 M KHSO^ i rastvorom KHC03, i suše-nja preko Na2S04>rastvarač je uklonjen u vakuumu. Impulsna hromatografija sa heptan/eti 1acetatom (7/3) kao sredstvom za ispiranje dala je 2,4 g (83%) željenog proizvoda.

(ii) Boc-(R)Cha-(R,S)betaPic-OH

2,35 g (5,9 mmol) Boe-(R)Cha-(R,S)betaPic-OMe rastvoreno je na sobnoj temperaturi u 35 ml THF i dodano je 2,1 g LiOH u 35 ml vode. Posle 5 h mešanja, THF je uklonjen u vakuumu. Vodena faza je okiseljena pomoću 2M KHSO 4 i ekstrahovana etil acetatom, sušena preko Na^O^ i isparena da bi se dobilo 2,0 g (89%) proizvoda.

Boe-(R)Cha-Val-OH

(i) Boc-(R)Cha-Val-0Me

3,1 ml (25 mmol) pivaloil hlorida dodano je na temperaturi okolne sredine mešanoj smeši 6,75 g (25 mmol) Boc-(R)Cha-0H i 3,5 ml (25 mmol) trietil amina u 50 ml DMF. Posle 3 časa je dodano 4,16 g (25 mmol) valin metil estar hidrohlorida u 50 ml DMF i 3,5 ml trietil amina. Posle mešanja preko noći, dodano je nekoliko kristala DMAP i reagujuća smeša je zagrejana na 50 C u toku 5 minuta. Rastvarač je uklonjen u vakuumu a ostatku su dodani etar i toluol. Ispiranje 0,3 M KHSO 4 i 10% Na 2 C0 3 , praćeno sušenjem (MgSO 4) i uklanjanjem rastvarača u vakuumu, dalo je ostatak koji je izložen impulsnoj hromatografiji koristeći toluol/etil acetat kao sredstvo za ispiranje. Prinos nazivnog jedinjenja bio je 6,99 g (73%).

(ii) Boc-(R)Cha-Val-0H

Smeša 8,73 g (23 mmol) Boc-(R)Cha-Val-0Me i 5,6 g (230 mmol) litijum hidroksida u 75 ml THF i 75 ml vode, mešana je 4 časa. THF je uklonjen u vakuunu i preostali rastvor je razblažen vodom i ek-trahovan etrom. Okiseljavanje 2 M KHSO 4 i ekstrahovanje etil acetatom, praćeno sušenjem (MgSO 4) i uklanjanjem rastvarača u vakuumu, dalo je 8,15 g (96%) nazivnog jedinjenja.

Boc-(R)Hoc-Aze-OH

(i) Boc-(R)Hoc-Aze-OEt

Na sobnoj temperaturi je rastvoreno 1,0 g (3,5 mmol) Boc-(R)Hoc-0H i 0,95 g (7,0 mmol) HOBt u 15 ml CIH:^. Rastvor je ohlađen u ledenom kupatilu i dodano je 0,77 g (4,0 mmol) EDC. Ledeno kupatilo je uklonjeno i reagujuća smeša je mešana 3 časa na sobnoj temperaturi. Rastvarač je isparen i ostatak je rastvoren u 20 ml DMF. Dodano je 0,58 g (3,5 mmol) H-(R)Aze-0H, a pH je podešeno približno na 9 dodavanjem N-metil morfolina. Reagujuća smeša je mešana jedan dan. Reagujuća smeša je podeljena između vode i toluola. Organska faza je izdvojena i isprana 0,3 M KHSO 4, razbla-ženom KHCO , slanim rastvorom, sušena preko Na SO i isparena.

3 2 4

Impulsna hromatograf i ja (1% EtOH u CH2C12i heptan: EtOAc) dala je 0,35 g (25%) željenog proizvoda.

(ii) Boc-(R)Hoc-Aze-0H

0,65 g (1,6 mmol) Boc-(R)Hoc-Aze-OEt rastvoreno je na sobnoj temperaturi u 10 ml THF i dodano je 0,59 g LiOH u 10 ml vode. Posle 24 časa mešanja, dodana je 2 M KHSO . a THF je uklonjen u vakuumu. Vodena je faza okiseljena dodavanjem još 2 M KHSO 4i ekstrahovana etil acetatom, sušena preko Na 2 SO 4 i isparena da bi se dobilo 0,5 g (85%) nazivnog jedinjenja.

Boc-(R)Hoc-Pro-OH

Pripremljeno na isti način kao što je opisano za Boc-(R)Cha-Pro-0H od Boc-(R)Hoc-0Su.

'H-NMR (500 MHz, CDCy 3 0,80-0,94 (m, 2H), 1,05-1,36 (m, 7H), 1,36-1,48 (bs, 9H), 1,48-1,78 (m, 7H), 1,98-2,14 (m, 2H), 2,34 (m, IH), 3,48 (m, IH), 3,85 (m, IH), 4,43 (m, IH), 4,52 (bd, IH), 5,26 (bd, IH), signali jednog manjeg rotamera javljaju se kod: 5 1,92, 2,25, 3,58, 4,20 i 4,93.

Boc-(R)Hoc-Pic-OH

(i) Boc-(R)Hoc-Pic-OMe

Pripremljen na isti način kako je opisano za Boc-(R)Cha-Pro-OH od Boc-(R)Hoc-OSu.

(ii) Boc-(R)Hoc-Pic-OH

Pripremljen na isti način kako je opisano za Boc-(R)Cha-Pic-OH od Boc-(R)Hoc-Pic-OMe (videti napred).

<1>H-NMR (500 MHz, CDClg) 5 0,82-0,97 (m, 2H), 1,10-1,36 (m, 7H), 1,36-1,50 (bs, 9H), 1,50-1,82 (m, 11H), 2,35 (bt, IH), 3,28 (bt, IH), 3,85 (bd, IH), 4,63 (m, IH), 5,33 (bs, IH), 5,44 (bd, IH), signali jednog manjeg ro.tamera javljaju se kod: 6 1,88, 2,80, 4,25, 4,55 i 4,97.

Boc-(R)Pro-Phe-0H

(i) Boc-(R)Pro-Phe-0Me

Rastvoru 2,0 g (9,29 mmol) Boc-(R)Pro-0H i 0,94 g (9,29 mmol trietil amina u 70 ml toluola/DNF (5/2) dodano je 1,12 g (9,29 mmol) pivaloilhlorida i reagujuća smeša je mešana 30 minuta na sobnoj temperaturi. Reagujuća smeša je ohlađena na 0°C i dodana je smeša 2,0 g (9,29 mmol) H-Phe-OMe i 0,94 g trietil amina u 40 ml DMF, pa je reagujuća smeša mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reagujuća smeša je razblažena toluolom i organska faza je isprana pomoću 3 x 50 ml 0,3 M KHSO 4, 1 x 50 ml vode i sušena (Na2S0^). Isparavanje rastvarača dalo je nazivno jedinjenje u merljivoj količini, koje je korišćeno u sledećoj fazi bez daljeg pre-čišćavanja.

(ii) Boc-(R)Pro-Phe-0H

Smeša 4,0 g (10,6 mmol) Boc-(R)Pro-Phe-0Me i 8,93 g (21,3 mmol) LiOH x H20 u 140 ml vode/THF (1/1) intenzivno je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. THF je isparen a vodena faza je okiseljena 1 M KHSO 4i tri puta ekstrahovana sa po 75 ml EtOAc, Kombinovana organska faza je isprana vodom i sušena (Na 2 S0 4). Filtriranje rastvora i isparavanje rastvarača dalo je ostatak koji je preči-šćen kristalizacijom iz diizopropil etra, da bi se dobilo 2,328 g (60%) nazivnog jedinjenja u vidu kristalne čvrste materije.

Boe-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OH

(i) Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-0Bn

Smeši 1,61 g Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OH, 1,6S g H-Pro-OBn c HC1 i 0,75 g HOBt u 11 mk DMF dodano je 0,84 mL NMM i 2,92 g CME-CDI na sobnoj temperaturi i reagujuća smeša je mešana tri dana. Rastvarač je isparen i ostatak je rastvoren u 300 ml EtOAc. Organska faza je isprana u 2 x 100 mL H 2 0, 2 x lOOmL 1 M KHSO 4, 3 x 100 mL 1 M NaOH, 3 x 100 mL H 2 0 i sušena (MgSO 4). Isparivanje rastvarača dalo je 2,53 g ulja koje je prečišćeno impulsnom hromatograf i jom koristeći CH 2 Cl 2/MeOH (97/3) kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobilo 2,11 g (88%) nazivnog jedinjenja.

(ii) Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-OH

0,94 g Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-0Bn rastvoreno je u 70 ml EtOH i hidrogenisano preko 0,42 g 5% Pd/C u toku 3,5 časova. Filtriranje katalizatora i isparavanje rastvarača dalo je nazivno jedinjenje u vidu belih kristala u merljivoj količini.

Boc-(R)Tic-Pro-OH

Pripremljeno prema postupku koji su opisali P.D. Gesellchen i R. T. Shuman u EP-0,479,489-A2.

BnOOC-CH2-NH-C0-CH2-Br

Rastvoru p-TsOH x H-Gly-0Bn (5 mmol) i trietil amina (5 mmol) u 10 ml CH2C12>dodana je bromsirćetna kiselina (5 mmol) rastvorena u 10 ml CH2C12i dicikloheksil karbodiimid (5 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i filtrirana. Organska faza je dva puta isprana 0,2 M KHSO 4, 0,2 M NaOH, slanim rastvorom i sušena. Isparavanje i impulsna hromatograf i ja (CFK^/MeOH,. 95/5) dali su merljivu količinu željenog jedinjenja.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl^8 3,89(s, 2H), 4,05-4,11 (d, 2H), 5,19 (s,2H), 7,06 (bs, IH), 7,3-7,4 (m, 5H)

Boc-(R)Cgl-Ile-OH

Pripremljeno na isti način kako je opisano za Boc-(R)Cgl-Pro-OH koristeći H-Ile-OH umesto H-Pro-OH, sa prinosom od 91%.

Boc-(R)Phe-Phe-OH

(i) Boc-(R)Phe-Phe-Ome

Boc-(R)Phe-OH (18,8 mmol, nabavljen od Bachem Feinchemicalien AG), Phe-Ome (20,7 mmol) i 4-dimetilaminopiridin (37,7 mmol) rastvoreno je u 30 mL acetonitrila. Rastvor je rashlađen do temperature ledene vode i dodan je l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid hidrohlorid (24,5 mmol). Rashladno kupatilo je uklonjeno i reagujuća smeša Je mešana preko noći. Potom je rastvarač uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u 50 mL etilacetata. Ekstrakcijom organske faze pomoću 50 mL tačno određenih količina 0,5 M kalijumvodoniksulfata, 1 M natrijumbikarbonata i najzad vode a zatim isparavanjem rastvarača dobijeno je 7,5 g Boc-(R)Phe-Phe-Ome (94%) koji je korišćen u sledećoj fazi bez daljeg prečišća-vanja.

(ii) Boc-(R)Phe-Phe-0H

Boc-(R)Phe-Phe-0me (16,4 mmol) rastvoren je u 40 mL tetrahidrofurana i naglo je dodan litijumhidroksid (32,8 mmol) rastvoren u 20 mL vode. Ragujuća smeša je mešana 3,5 časova, a potom je rastvarač uklonjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u 50 mL etilacetata i ekstrahovan 0,5 M kalijumsulfatom (50 mL) a zatim vodom (50 mL). Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom i dobijeno je 8,0 Boc-(R)Phe-Phe-0H (količ.) kao amorfna čvrsta materija.<1>H-NMR (200 MHz, d-CHCl3) 5 7,4-6,7 (m, 10H), 5,7-4,2 (m, 6H), 1,34 (s, 9H).

H0-CH -COOBn

2

Pripremljeno prema postupku koji su opisali Lattes A. i dr. u Buli. Soc. Chim. France., No 11, str. 4018-23, 1971.

Benzil-2-(orto-nitrobenzolsulfoniloksi)acetat (2-N02)Ph-SC^-OCHg-COOBn

1,66 g (10 mmol) benzilglikolata rastvoreno je u 25 ml C^Clg i 25 ml dietlletra. Smeša je hlađena do 0«C 1 dodano je 2,8 ml (20 mmol) trietilamina. Zadržavajući temperaturu na 0»C, dodano je u malim dozama, u trajanju od 15 minuta, 2,44 g (11 mmol) ortonitrobenzolsulfonilhlorida. Mulj se mešan na 0«C 50 minuta a zatim je dodano 20 ml vode i2X30 ml CH Cl . Faze su razdvojene 1 organska faza je isprana u 20 ml IM HC1 i 20 ml H2O, sušena (Na^O^), filtrirana i isparena u vakuumu da bi se dobilo 3,34 g . ostatka koji je podvrgnut impulsnoj hromatografiji, koristeći heptan:EtOAc 2:1 kao sredstvo za ispiranje da bi se dobilo 1,18 g (34%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl 3) 5 4,92 (s, 2H), 5,17 (s, 2H), 7,83 (m, 5H), 7,76 (m,3H), 8,16 (dd, IH).

Benzil-2-(para-nitrobenzolsulfoniloksi)acetat (4-N0 )Ph-S0 -OCH -

£*Cm Cš

COOBn

Pripremljeno na isti način kao što je napred opisano za benzil-2-(orto-nitrobenzolsulfoniloksi)acetat. Konačno jedinjenje je dobijeno u kristalnom obliku isparavanjem rastvarača i dovoljno čisto da se koristi bez daljeg prečišćavanja (prinos 64%).

<1>H-NMR (300 MHz, CDC13): 6 4,79 (s, 2H), 5,13 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 5H), 8,10 (d, 2H), 8,30 (d, 2H).

Tfo-CH2C00Me

10,09 ml (60 mmol) trifluormetansulfonskog anhidrida rastvorenog u CH2C12 dodavano je ukapavanjem u smešu 4,05 ml (50 mmol) metilglikolata i 4,04 ml (50 mmol) plridina u CH2C12(ukupno 62,5 ml) na 0°C, i u toku 1 časa. Nakon ispiranja 0,3 M KHSO 4 i zasiće-nim Na2 CO 3 . sušenja (Na2 SO 4) i filtriranja, isparavanjem rastva-raca u vakuumu dobijeno je 9,94 g (90%) nazivnog jedinjenja.

Tfo-CH2C00Et

Pripremljeno na isti način kako je opisano za Tfo-CH^COOMe polaze-ći od etilglikolata.

Tfo-CH2C00nBu

Pripremljeno na isti način kako je opisano za Tfo-CHgCOOMe polaze-ći od butilglikolata.

Tfo-CRgCOOBn

Pripremljeno na isti način kako je opisano za Tfo-CHgCOOMe polaze-ći od HO-CH COOBn.

2

Tfo-ClL^COO^e«

(i) H0-CH2C00<n>Hex

U 215 mg (2,82 mmol) glikolne kiseline u 12,8 ml CH 3CN dodano je 719 mg (3,39 mmol) 1-heksil jodida i 429 mg (2,82 mol) DBU. Nakon mešanja preko noći i refluksovanja u toku 4 časa, rastvarač je isparen, dodani su etilacetat i 1 M KHSO 4i faze su razdvojene. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, sušen (MgSO 4), filtriran i isparen u vakuumu da bi se dobilo 333 mg (74%) proizvoda.

(ii) Tfo-CH2COO<n>Hex

Pripremljeno na isti način kako je opisano za Tfo-CH2C00Me polaze-ći od H0-CH2C00<n>Hex.

H-Mig(Z) (3-aminoroetil-l-(N-benziloksikarbonilamidin) azetidin(i) 3-aminometil-l-benzhidril azetidin je pripremljen prema literaturi, videti A.g. ANDERSON, Jr., I R. Lok. J.Org.Chem., 37, 3953, 1972.

(i i) 3-(N-tert-butiloksikarbonilaminomet i 1)-1-benzhidri1 azet idin

U 3,50 g 813,9 mmol) 3-aminometil-l-benzhidril azetidina rastvorenog u 45 mL THF dodan je rastvor 0,56 g (11,9 mmol) NaOH u 45 ml H20. Reagujuća smeša je ohlađena do 0°C i dodano je 3,03 g (13,9 mmol) di-tert-butil bikarbonata. Kupatilo za hlađenje je uklonjeno posle nekoliko minuta i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. THF je ispareno a ostatak je ekstrahovan dietil etrom (3 x 45 mL). Kombinovan organski sloj je ispran slanim rastvorom, sušen preko Na^O^ i filtriran. Isparavanjm rastvarača dobijeno je 4,6 g (94%) nazivnog jedinjenja.

(iii) 3-(N-tert-butiloksikarbonilaminometil) azetidin

2,4 g (9,6 mmol) 3-(N-tert-butiloksikarbonilaminometi 1)-l-benzhidril azetidina rastvoreno je u 170 mL MeOH i hidrogenizovano preko 0,30 g Pd(0H)2 na 5 MPa preko noći. Katalizator je isfiltriran a rastvarač isparen. Sirov proizvod je prečišćen impulsnom hromatograf i jom koristeći Me0H/CH2Cl2> 1/9, a zatim MeOH (zasićen sa NH 3 (vod. ))/CH 2 Cl 2, 1/9, kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobilo 1,2 g (67%) nazivnog jedinjenja.

(iv) 3-(N-tert-but i 1oks i karboni 1ami nomet i 1)-1- (N-benz i 1oks i karboni lamidin) azetidin (Boc-Mig(Z))

0,9 g (4,8 mmol) 3 (N-tert-butiloksikarbonilaminometi 1) azetidina i 1,3 g (6,3 mmol) N-benz i loksikarboni 1-0-met i lizokarbamida pome-šano je u 6,5 mL toluola i zagrevano na 70°C u toku 72 časa a onda ostavljeno na sobnoj temperaturi sledeća 72 časa. Posle isparavanja je vršena impulsna hromatografija koristeći EtOAc, a zatim MeOH (zasićen sa NH (vod. ) )/CH Cl , 1/9, kao sredstvo za

3 2 2

ispiranje, da bi se dobilo 0,67 g (38%) nazivnog jedinjenja u vidu belog praška.

(v) 3-aminometil-l-(N-benziloksikarbonilamidino) azetidin (H-Mig(Z))

0,67 g (1,85 mmol) Boc-Mig(Z) rastvoreno je u 10 mL EtOAc zasićenog sa HCl(g) i mešano 10 min na sobnoj temperaturi. Ukapavanjem je dodano 10 mL zasićenog rastvora K0H(vod.). Slojevi su razdvojeni i vodena je faza ekstrahovana EtOAc-om (3x8 mL). Organski slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvorom, sušeni preko Na 2 SO 4 i ispareni, da bi se dobilo 0,43 g (89%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl 3): 5 2,55-2,65 (m, IH), 2,84 (d, 2H), 3,66 (dd, 2H), 4,03 (dd, 2H), 7,07 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 5H).

MS m/z 263(M<+>+l)

(3-aminoetil-l-(N-benziloksikarbonilamidin) azetidin (H-Dig(Z))

(i) 3-karboksilna kiselina-l-benzhidril azetidin pripremljen je prema literaturi, videti A.G. Anderson, Jr. , i R. Lok, J.Org. Chem. , 37, 3953, 1972.

(ii) 3-hidroksimetil-l-benzhidril azetidin

Rastvor 8,7 g (32,5 mmol) 3-karboksilna kiselina-l-benzhidril azetidina u 80 mL bezvodnog THF dodan je u suspenziju 4,9 g (130,2 mmol) LiAlH 4u 30 mL THF na sobnoj temperaturi. Reagujuća smeša je refluksovana 3,5 h. Višak hidridnog reagensa je hidrolizovan pažljivim dodavanjem, uz hlađenje, NH4CKvod. ), želatinozna smeša je filtrirana i filtarski kolać je više puta ispiran u THF. Isparavanjem rastvarača se dobilo 7,1 g (86%) nazivnog jedinjenja u vidu bledožutih kristala.

(iii) 3-metansulfonatmetil-l-benzhidril azetidin

Rastvoru 6,62 g (26,1 mmol) 3-hidroksimetil-2-benzhidril azetidina u 50 mL bezvodnog piridina dodano je 4,50 g (39,2 mol) metansulfoniL hlorida na 0 C. Reagujuća smeša je mešana 1 čas a onda puštena da odstoji u hladnjaku preko noći. Reagujuća smeša je sipana u smešu leda i H20. Talog je sakupljen, ispran vodom i sušen u vakuumu da bi dao 7,75 g (89,5%) nazivnog jedinjenja.

(iv) 3-cijanometil-1-benzhldril azetidin

Rastvoru 7,75 g (23,4 mmol) 3-metansulfonatmetil-l-benzhidril azetidina u 50 mL DMF dodan je rastvor 3,44 g (70,0 mmol) NaCN i 10 mL H20. Smeša je grejana 20 h na 65«C, pa sipana u smešu leda i H20. Talog je sakupljen, ispran vodom i sušen u vakuumu da bi dao 5,7 g (93*/.) nazivnog jedinjenja.

(v) 3-aminoetil-l-benzhidril azetidin

5,7 g (21,7 mmol) 3-cijanometil-l-benzhidril azetidina lagano je dodavano suspenziji 2,9 g (76,0 mmol) LiAlH u 80 mL bezvodnog THF na sobnoj temperaturi. Reagujuća smeša je refluksovana 4 časa. Višak hidridnog reagensa je hidrolizovan pažljivim dodavanjem, uz hlađenje, NH4CKvod. ). Želatinozna smeša je filtrirana i filtarski kolač je ispran više puta u THF. Rastvarač je isparen, ostatak je rastvoren u dietil etru, ispran slanim rastvorom i sušen na Na^O^. Isparavanje rastvarača dalo je 5,0 g (87%) nazivnog jedinjenja.

(vi) 3-(N-tert-butiloksikarbonilaminoetil)-l-benzhidril azetidin

Nazivno jedinjenje je pripremljeno od 3-aminoetil-l-benzhidril azetidina prema postupku za 3-(N-tert-butiloksikarbonilaminometil )-l-ibenzhidril azetidin, uz prinos od 6,5 g (95%).

(vii) 3-(N-tert-butiloksikarbonilaminoetil) azetidin

Nazivno jedinjenje je pripremljeno od 3-(N-tert-butiloksikarboni1-aminoetil)-l-benzhidril azetidina prema postupku za 3-(N-tert-butiloksikarbonilaminometil) azetidin, sa prinosom od 1,2 g (70%).

(vi i i) 3-(N-tert-butiloksikarbonilaminoeti 1)-l-(N-benziloksikarbonilamidin) azetidin (BOc-Dig)Z))

Nazivno jedinjenje je pripremljeno od 3-(N-tert-butiloksikarbonil-aminoetil) azetidina prema postupku za 3-(N-tert-butiloksikarbonilaminometil)-l-(N-benziloksikarbonilamidin) azetidin, sa prinosom od 0,090 g (347.).

(ix) 3-aminoetil-l-(N-benzilkarbonilamidin) azetidin (H-Dig(Z))

0,589 g (1,56 mmol) Boc-Dig(Z) rastvoreno je u 10 mL EtOAc zasićenog sa HCl(g) i mešano 10 min na sobnoj temperaturi. Ukapavanjem je dodano 10 mL zasićenog rastvora K0H(vod.). Slojevi su razdvojeni a vodena faza je ekstrahovana EtAOc-om (3x8 mL), Organski slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvorom, sušeni na Na^O^ i ispareni da bi dali 0,415 g (96%) nazivnog jedinjenja.

VNMR (500 MHz, CDC13): 5 1,60 (dt, 2H), 2,52-2,54 (m, 3H), 3,53 (bs, 2H), 4,0 (bt, 2H), 5,00 (s, 2H), 7,17-7,31 (m, 5H).

Radni primeri

Primer 1

H00C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab

(i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)

Mešanoj smeši 3,40 g (10 mmol) Boc-(R)Cgl-Aze-0H (videti Pripremanje polaznih materijala) i 5,13 g DMAP (42 mmol) u 120 ml CH 3CN dodano je 3,28 g H-Pab(Z) x HC1 (videti Pripremanje polaznih materijala). Posle 2 časa mešanja na sobnoj temperaturi, smeša je ohlađena na -8°C i dodano je 2,01 g (10,5 mmol) EDC. Reagujuća smeša je ostavljena da dostigne sobnu temperaturu a mešanje je nastavljeno dodatnih 47 časova. Rastvarač je isparen a ostatak je rastvoren u 200 ml EtOAc. Organska faza je isprana vodom (1 x 50 ml), 0,5 M KHSO4 , (1 x 50 + 2 x 25 ml), NaHCO 3(zasićen) (2 x 25 ml), vodom (1 x 50 ml) i sušena. Isparavanje rastvarača dalo je 5,21 g (86%) nazivnog jedinjenja.

<X>H-NMR (500 MHz, CDCl^: 5 0,8-1,9 (m, 20H; zbog toga 1,30 (s, 9H)), 2,35-2,6 (m, 2H), 3,74 (bt, IH), 4,10 (m, IH), 4,25-4,4 fm, 2H), 4,45-4,6 {m, IH, rotameri), 4,75-5,0 (m, IH, rotameri), 5,08 (bd, 2H), 5,15 (s, 2H), 7,15-7,35 (m, 5H), 7,41 (d, 2H), 7,77 (d, 2H), 8,21 (m, IH).

(ii) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)

U hladan rastvor (temperatura ledenog kupatila) 18,8 g HCl(g) u 195 ml EtOAc dodano Je 4,69 g<*>7,743 mmol) Boc-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) zajedno sa 40 ml EtOAc. Reagujuća smeša je ostavljena da dostigne sobnu temperaturu i mešana je 30 min. Bistrom rastvoru je dodano 140 ml Et 2O posle čega je obrazovan talog. Reagujuća smeša je ostavljena na sobnoj temperaturi sledeći 1 čas i 40 min. talog je isfiltriran, brzo ispran u 150 ml Et20 i osušen u vakuumu. Talog je rastvoren u 50 ml vode i olužen pomoću 15 ml 2 M NaOH. Alkalna vodena faza je ekstrahovana pomoću CH2C12 (1 x 100 + 1 x 50 ml). Kombinovana organska faza isprana je vodom (1 x 20 ml), slanim rastvorom (1 x 20 ml) i sušena (MgSO 4). Isparavanje rastvarača dalo je 3,44 g (88%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (500 MHz, CDC13): 5 0,8-2,0 (m, 11H), 2,51 (m, IH), 2,67 (m.lH), 3,07 (d, IH), 4,11 (m, IH), 4,18 (m, IH), 4,43 (dd, IH), 4,53 (dd, IH), 4,91 (m, IH), 5,22 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 7H), 7,45 (d, 2H), 8,51 (d, 2H).

(iii) BnOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)

1,13 g (2,2 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z), 0,9 g (2,6 mmol) benzil-2-(orto-nitrobenzolsulfoniloksi)acetata ((2-NO )Ph-S0-0CH-COOBn)

2 2 2

(videti Pripremanje polaznih materijala), 0,99 g (5,6 mmol) KCO i 113 ml CH3CN pomešano je i grejano 3 časa u uljnom kupatilu na 60»C. Rastvarač je isparen u vakuumu. Dodan je EtOAc i smeša je isprana vodom, organska faza je ekstrahovana sa IM KHSO 4, pa je vodena faza isprana u EtOAc. Kisela vodena faza olužena je pomoću 1 N NaOH do pH>8 i ekstrahovana EtOAc-om. Organska faza je isprana vodom, sušena (Na SO ), filtrirana i isparena u vakuumu da bi se

2 4

dobilo 1,17 g ostatka koji je dva puta izlagan impulsnoj hromatograf i ji, koristeći prvo CH2Cl2/MeOH (NH3-zasićeno) 95/5, a

potom dietiletar/MeOH (NH^zasićeno) 9/1, kao sredstva za ispiranje da bi se dobilo 0,525 g (36%) nazivnog jedinjenja.

Vršena je i alkilacija koristeći benzi1-2-(para-nitrobenzolsulfo-niloksi)acetat ((4-N02)Ph-S02-0CH2-C00Bn) (videti Pripremanje polaznih materijal) koristeći isti postupak kao ranije da bi se dobilo nazivno jedinjenje, sa prinosom od 52%.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl ): 5 0,85-2,15 (m, 11H), 2,48 (m, IH), 2,63 (m, IH), 2,88 (d, IH), 3,24 (d, IH), 3,27 (d, IH), 3,95 (m, IH), 4,05 (m, IH), 4,44 (m, IH), 4,55 (m, IH), 4,91 (m, IH), 5,07 (1, 2H), 5,22 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 10H), 7,45 (d, 2H), 7,79 (d, 2H), 8,42 (m, IH).

(iva) H00C-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) x 2 HC1

20 mg (0,031 mmol) Bn00C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) rastvoreno je u 5 ml metanola. Dodano je nekoliko kapi hloroforma i 5% Pd/C i smeša je hidrogenizovana na atmosferskom pritisku u toku 1 časa. Posle filtriranja i isparavanja, proizvod je liofilizovan iz vode da bi se dobilo 11 mg (72%) nazivnog jedinjenja.

VNMR (500 MHz, D20): 5 1,0-2,0 (m, 11H), 2,10 (m, IH), 2,44 (m, IH), 2,82 (m, IH), 3,90 (s, 2H), 4,09 (d, IH), 4,4-4,55 (m, 2H), 4,66 (s, 2H), 5,08 (m, IH), 7,65 (d, 2H), 7,89 (d, 2H).

<13>C-NMR (75,5 MHz, D20): amidinski i karbonilski ugljenici:S167,3, 167,9, 169,9 i 172,4.

(ivb) HOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pab

Bn00C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) rastvoren je u EtOH (99%) i hidrogenizovan na 5% Pd/C 5 časova na atmosferskom pritisku. Filtriranje katalizatora kroz celit i isparavanje rastvarača dalo je prinos nazivnog jedinjenja od 97%.

<1>H-NMR (500 MHz, CB^OD, smeša dva rotamera): glavni rotamer: 5 1,00-1,12 (m, IH), 1,13-1,34 (m, 4H), 1,55-1,70 (m, 3H), 1,73-1,85 (m, 2H), 1,94-2,02 (bd, IH), 2,32-2,42 (m, IH), 2,54-2,64 (m, IH), 2,95-3,10 (AB-sistem plus d, 3H), 4,18-4,25 (bq, IH), 4,28-4,32 (bq, IH), 4,43-4,60 (AB-sistem, 2H), 4,80-4,85 (dd, IH), 7,48-7,54 (d, 2H), 7,66-7,71 (d, 2H).

Izdvojeni signali manjeg rotamera javljaju se kod 8 0,95 (m), 1,43 (m), 2,24 (m), 2,84 (d), 3,96 (m), 4,03 (m), 7,57 (bd), 7,78 (bd).

<13>C-NMR (125 MHz, CD.OD): amidinskl i karbonilski ugljenici: 6 168,0, 173,0, 176,3 i 179,0.

Primer 2

H00C-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x2HC1

(i) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)

Pripremljeno na isti način kako je opisano u Primeru 1 (ii) obra-dom obrazovane soli hidrohlorida bazom da bi se dobila slobodna baza.

(i i) Bn00C-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)

H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z), 0,19 g (0,38 mmol), i 70 mg (0,43 mmol) benzil akrilata rastvoreno je u 2 ml izopropanola. Smeša je ostavljena da odstoji 6 dana. Impulsna hromatografija, koristeći CH2C12/THF = 8/2 kao sredstvo za ispiranje, dala je 0,12 g (48%) nazivnog jedinjenja.

VNMR (500 MHz, CDC13): 5 0,8-1,9 (m, 10H), 1,95 (bd, IH), 2,4-2,6 (m, 4H), 2,7-2,8 (m, 3H; zbog toga 2,79 (d, IH)), 4,13 (m, IH), 4,37 (dd, IH), 4,60 (dd, IH), 4,97 (dd, IH), 5,09 (dd, 2H), 5,22 (s, 2H), 7,25-7,4 (m, 10H), 7,47 (d, 2H), 7,83 (s, 2H), 8,61 (bt, IH).

(iii) H00C-CHz-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HC1

BnOOC-CH 2 -CH 2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z), 0,10 g (0,15 mmol), rastvoreno je u 10 ml etanola i hidrogenizovano preko 5% Pd/C na atmosferskom pritisku u toku 1 časa. Rastvor je filtriran, isparen i sirov proizvod je prečišćen na EPLC, koristeći CH 3 CN/0,1 M NH 4OAc 1/4). Dobijen proizvod je sušen zamrzavanjem, obrađen viškom koncentrovane HC1 i ponovo sušen zamrzavanjem da bi se dobio 31 mg soli dihidrohlorida.

VNMR (300 MHz, D20): 5 0,8-2,1 (m, 11H), 2,38 (m, IH), 2,7-2,9 (m, 3H), 3,2-3,4 (m, 2H), 3,98 (d, IH), 4,35-4,55 (m, 2H), 4,60(s, 2H), 5,04 (dd, IH), 7,59 (d, 2H), 7,83 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, D20):' amidinski i karbonilski ugljenici: 6 167,2, 167,8, 172,3 i 175,5.

Primer 3

H00C-CH2-(R)Cgl-Pro-Pabx 2HC1

(i) Boc-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)

Boc-(R)Cgl-Pro-OH (videti Pripremanje polaznih materijala), 2,3 g (6,49 mml), DMAP, 2,38 g (19,45 mmol). i H-Pab(Z) (videti Pripremanje polaznih materijala), 1,84 g (6,49 mmol), pomešano je u 30 ml acetonitrila. Smeša je ohlađena na -15°C i dodan je EDC, 1,31 g (6,81 mmol). Pušteno je da temperatura dostigne sobnu temperaturu i smeša je mešana preko noći. Posle isparavanja ostatak je rastvoren u etil acetatu i u rastvoru 0,3 M KHSO 4. Kisela vodena faza je ekstrahovana tri puta etil acetatom. Organska faza je isprana dva puta rastvorom KHSO 4 , dva puta rastvorom NaHCO 3 i jednom slanim rastvorom, sušena (Na^O^), filtrirana i isparena. Sirov proizvod je prečišćen impulsnom hromatografijom koristeći etil acetat kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobilo 1,77 g (44%) proizvoda.

<X>H-NMR (500 MHz, CDClg): 5 0,9-1,49 (m, 14H), 1,5-2,1 (m, 9H), 2,37 (bs, IH), 3,53 (q, IH), 3,94 (bs, IH), 4,02 (m, IH), 4,43 (bs, 2H), 4,65 (d, IH), 5,09 (bs, IH), 5,20 (s, 2H), 7,18-7,4 (m, 5H), 7,45 (d, 2H), 7,62 (bs, IH), 7,81 (m, 2H),

(ii) H(R)Cgl-Pro-Pab(Z)

1,45 g (2,34 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) rastvoreno je u 75 ml etil acetata zasićenog HCl-om. Smeša je puštena odstoji 10 min na sobnoj temperaturi. Rastvarač Je isparen da bi se dobilo 1,3 soli hidrohlorida proizvoda.

<1>H-NMR (300 MHz, D2O): 5 1,0-1,45 (m,5H), 1,58-2,2 (m, 9H), 2,3-2,5 (m, IH), 3,75-3,90 (m, 2H), 4,25 (d, 2H), 4,5-4,66 (m, 3H), 5,49 (s, 2H), 7,45-7,7 (m, 7H), 7,87 (d, 2H).

Amin je dobijen rastvaranjem soli dihidrohlorida u rastvoru 0,1 M NaOH i ekstrahovanjem vodene faze etil acetatom tri puta. Organska faza je isprana jednom slanim rastvorom, sušena (Na^O^), filtrirana i isparena da bi se dobilo 1,19 g (97%) nazivnog jedinjenja.

(iii) BnOOC-CH 2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z)

0,340 g (0,65 mmol) H-(R)Cgl-Pro-PaMZ) pomešano je sa 0,215 g (0,65 mmol) BnOOC-CH^OTf (videti Pripremanje polaznih materijala), 0,299 g (2,17 mmol) K2C03u 4 ml dihlormetana i refluksovano pola časa. Reagujuća smeša je potom mešana preko noći na sobnoj

temperaturi. Reagujuća smeša je razblažena pomoću CH2C12i organski sloj Je jednom ispran vodom i slanim rastvorom, sušen (Na 2 SO 4), filtriran i isparen. Sirov proizvod je prečišćen impulsnom hromatografijom koristeći stepenasti gradijent CH2Cl2/MeOH (97/3, pa zatim 95/5) da bi se dobilo 299 mg smeše dvaju proizvoda prema TLC. Zbog toga je smeša dalje prečišćavana impulsnom hromatografijom koristeći stepenast gradijent etil acetat/toluol (9/1, 93/7, 95/5. 100/0) da bi se dobilo 46 mg (9%) (BnOOC-CH ) - 2 2 (R)Cgl-Pro-Pab(Z) koji se prvi Izdvojio iz stuba, a potom 133 mg (31%) željenog proizvoda BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z).

<1>H-NMR 1300 MHZ, CDCl J: anUOC-U^-lKJCgl-Pro-PabiZJ:60,9-1,3 (m. 5H), 1,4-2,1 (m, 9H). 2,3-2,4 (m, IH), 3,05-(d, 1H9), 3,20-3,27 (AB-sistem sa središtem u 6 3,39, 2H), 3,5-3,6 (m, 2H), 4,29-4,57 (ABX sistem sa središtem u d 4,43, 2H), 4,62 (d, lh), 4,91 (uočljiv singlet, 2H), 5,19 (s, 2H), 6,75 (bs, NH), 7,1-7,5 (m, 12H), 8,7-8,8 (M, 2H+NH), 9,45 (bs, NH)

<1>H-NMR (300 MHz, CDClg): (Bn00C-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z): S 0,68-0,9 (m,, 2H), 1,0-1,3 (m,3H), 1,43 (bd, IH), 1,55-2,0 (m,7H), 5,05 (bd, IH), 2,3-2,4 (m, IH), 3,15 (d, IH), 3,25-3,48 (m, 2H), 3,55-3,79 (AB-sistem sa središtem u d 3,67, 4H), 4,38-4,58 (ABX-sistem sa središtem u d 4,48, 2H), 4,68 (d, IH), 4,82-4,98 (AB-sistem sa središtem u d 4,91. 4H), 6,66 (bs, NH), 7,107,5 (m, 17H), 7,75 (d, 2H), 7,80 (t, NH), 9,37 (bs, NH)

<13>C-NMR (75 MHz, DzO): amidinski i karbonilski ugljenici: 5 164,7, 168,1, 171,5, 172,3 i 172,6.

(iv) HOOC-CH 2-(R)Cgl-Pro-Pab x HC1

i

0,133 g (0,20 mmol) Bn00C-CH2"(R)Cgl-Pro-Pab(Z) pomešano je sa 0,060 g 5% pD/C, 1 ml rastvora IM HC1 i 10 ml etanola. Smeša je obrađena u atmosferi Hg u toku jednog časa. Nakon filtriranja kroz "hyflo" filtar i isparivanja rastvarača, proizvod, sa prinosom 90%, 93 mg, dobijen je iz vode dva puta sušenjem zamrzavanjem.

<1>H-NMR (300 MHz, DO): 5 1,0-1,45 (m,5H), 1,5-2,1 (m, 9H), 2,2-2,4 (m, IH), 3,55-3,85 (m, 4H; zbog toga 3,79 (s, 2h)), 4,23 (s, IH), 4,33-4,57 (m,3H), 7,44 (d, 2H), 7,69 (d, 2H)

<13>C-NMR (75 MHz, D20): amidinski i karbonilski ugljenici: 3 166,9, 167,2, 169,1, 174,5

Primer 4

H00C-CH-CH -(R)Cgl-Pro-Pab x 2 HC1

Cm Cm

(i) BnOOC-CH -CH -(R)Cgl-Pro-Pab(Z)

2 2

0,406 g (0,782 mmol) H-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) (videti Primer 3) rastvoreno je u 3 ml etanola i dodano 132 jil (0,861 mmol) benzilakrilata. Reagujuća smešaje mešana 3 dana na sobnoj temperaturi. Smeša je isparena a sirov proizvod prečišćen impulsnom hromatografijom koristeći stepenasti gradijent CHC1 :MeOH 95/5 i 90.10 kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobilo 0,399 g (75%9 proizvoda.

<1>H-NMR (300 MHz, CDClg):80,8-1,0, 1,0-1,3 (m, 4H), 1,35-2,2 (m, 9H), 2,3-2,6 (m, 4H), 2,65-3.56 (m, IH), 3,05 (d, IH), 3,4-3,6 (m, 2H), 4,25-4,52 (ABC-sistem sa središtem u d 4,40, 2H), 4,64 (dd, IH), 5,05 (s, 2H), 5,20 (s, 2H), 7,2-7,38 (m, 10H), 7,43 (d, 2H), 7,78 (d, 2H)

<13>C-NMR (75 MHz, D20): amidinski i karbonilski ugljenici: 5 164,7, 167,9, 171,3, 172, 7 i 175,4.

(ii) H00C-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pab x 2 HC1

0,261 g (0,383 mmol) BnOOC-CH -CH"2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) pomešano je sa 0,075 g 5% Pd/C, 1 ml rastvora 1 M HC1 i 10 ml etanola. Smeša je hidrogenizovana na atmosferskom pritisku u toku dva časa. Nakon filtriranja kroz "hyflo"-filtar i isparavanja rastvarača, proizvod, 0,196 g (96%) dobijen je iz vode dva puta sušenjem putem zamrzavanja.

<1>H-NMR (300 MHz, DO): 5 1,17-1,40 (m, 5H), 1,60-1,92 (m, 5H), 1,92-2,2 (m, 4H), 2,32-2,48 (m, IH), 2,81 (t, 2H), 3, 11-3,36(ABX 2-sistem sa središtem u 8 3,24, 2H), 3,63-3,90 (m, 2H), 4,25 (d, IH), 4,42-4,63 (m, 3H), 7,54 (d, 2H), 7,78 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, D20): amidinski i karbonilski ugljenici: 5 167,0, 167,30, 174,6, i 174,7.

Primer 5

(H00C-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pabx 2HC1

46 mg (0,056 mmol) (Bn00C-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) (videti Primer 3) mešano je sa 25 mg 5% Pd/C, 0,7 ml rastvora IM HC1 i 7 ml etanola. Smeša je hidrogenizovana na atmosferskom pritisku u toku jednog časa. Katalizator je isfiltriran kroz "hyflo"-filtar a rastvarač isparen. Krajnji proizvod, 25 mg (77%), dobijen je dvostrukim sušenjem putem zamrzavanja.

<1>H-NMR (300 MHz. D20):81,0-1,4 (m, 5H), 1,45-2,2 (m, 9H), 2,25-2,45 (m, IH), 3,53-3,84 (m, 2H), 3,84-4,22 (ABX-sistem sa središtem u84,03, 4H), 4,26 (d, IH)} 4,35-4,6 (m, 3H), 7,53 (d, 2H), 7,77 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, 0,0): amidinski i karbonilski ugljenici:8167,1, 167,3, 170,6, i 174,5.

Primer 6

H-(R)Cgl-Pic-Pabx 2HC1

(i) Boc-(R)Cgl-Pic-PaMZ)

0,478 g (2,49 mmOl) EDC dodano je na -18°C mešanom rastvoru 0,875 g (2,27 mmol) Boc-(R)Cgl-Pic-0H (videti Pripremanje polaznih materijala), 1,22 g (9,97 mmol) DMAP, i 0.706 g (2,49 mmol) H-PAb (Z)

(videti Pripremanje polaznih materijala) u smeši 30 ml acetonitrila i 1 ml DMf. Reagujuća smeša je puštena sa dostigne sobnu temperaturu u toku dva časa a mešanje je nastavljeno u toku 48 h. Rastvarač je uklonjen u vakuumu a ostatak je rastvoren u 50 ml etil acetata. Rastvor je ispran u 15 ml vode, 3 x 15 ml 0,3 M KHSO^, 2 x 15 m-l" rastvora Na2C03 i vode. Uklanjanje rastvarača da-lo je ostatak koji je izložen impulsnoj hromatografiji koristeći etil acetat/heptan 9:1 kao sredstvo za ispiranje. Prinos je bio 0,96 g (64%).

(ii) H-(R)Cgl-Pic-Pab(Z)

Hlorovodonik je produvavan kroz rastvor 0,56 g (0,88 mmol) Boc-(R)Cgl-Pic-Pab(Z) u 25 ml etil acetata. Posle dva minuta kristali su se istaložili iz rastvora. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i dodano je 50 ml etil acetata. Ispiranje rastvorom 2 M natrijum hidroksida (2 x 15 ml) i ekstrahovanje vodene faze etil acetatom (25 ml) praćeno sušenjem (natrijum sulfat) kombinovanih ekstrakta i uklanjanje rastvarača u vakuumu dalo je 0,488 g (95%) željenog proizvoda.

(iii) H-(R)Cgl-Pic-Pab x 2 HC1

Rastvor 98 mg (0,18 mmol) H-(R)Cgl-Pic-Pab(Z) u 5 ml 95% etanola i

1 ml vode mešan je u vodoničnoj atmosferi 4 časa u prisustvu 5% Pd/C. Smeša je filtrirana i dodano je 0,3 ml 1 M hlorovodonične kiseline. Etanol je uklonjen u vakuumu i ostatak je sušen zamrzavanjem da bi se dobilo 70 mg (81%) željenog jedinjenja.

<1>H-NMR (300 MHz, D20):81,00-1,56 (m, 7H), 1,56-1,94 (m, 9H), 2,32 (bd, IH), 3,32-3,45 (m, IH), 3,90 (bd IH), 4,35 (d, IH), 4,50 (s, 2H), 5,10-5,20 (m, IH), 7,53 (d, 2H), 7,76 (d, 2H).

<13>C-NMR(75 MHz, D2O): amidinski i karbonilski ugljenici: 5 167,2, 170,5 i 173.4.

Primer 7

HOOC-CHLj-tR.SlCHtCOOm-tRjCgl-Pic-Pab x 2 HC1

(i) BnOOC-ĆH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cgl-Plc-Pab(Z)

Smeša 350 mg (0,66 mmol) H-(R)Cgl-Pic-Pab (Z) (videti Primer 6) i 233 mg dibenzil maleata u 2,5 ml etanola držana je 4 dana na sobnoj temperaturi. Etanol je uklonjen u vakuumu a ostatak je izložen impulsnoj hromatografiji koristeći etil acetat/heptan 9:1 kao sredstvo za ispiranje da bi se dobilo 0,108 mg proizvoda.

(ii) HOOC-CH 2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cgl-Pic-Pab x 2 HC1

105 mg (0,13 mmpl) BnOOC-CH2~(R, S)CH(COOBn)-(R)Cgl-Pic-Pab(Z) rastvorenog u 5 ml 95% etanola i 1 ml vode hidrogenizovano je 5 časova u prisustvu 5% Pd/C. Dodano je 0,3 ml 1 M hlorovodonične kiseline i smeša je filtrirana a rastvarač je uklonjen u vakuumu. Ostatak je rastvoren u vodi i sušen zamrzavanjem da bi dao 54 mg (73%) željene materije

<1>H-NMR (300 MHz, CD30D, smeša dva diastereomera 5/4): 6 1,10-1,60 (m, 7H), 1,60-2,04 (m, 9H), 2,23-2,42 (m, IH), 3,30-3,42 (m, IH, delimično prikriveno MeOD-maksimumom), 3,71-3,95 (m, IH), 3,98-4,10 (m, IH), 4,40-4,60 (m, 3H), 5,10-5,20 (m, IH), 7,49-7,60 (m, 2H), 7,70-7,81 (m, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, D20): amidinski i karbonilski ugljenici:5167,1, 168,95, 169,6, i 173,1.

MS m/z 516 (M<+>+l)

Primer 8

H-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HC1

(i) Boc-(R)Cha-Aze-Pab(Z)

409 mg (2,13 mmol) EDC dodano je na -18°C mešanoj smeši 0,72 g (2,03 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-OH (videti Pripremanje polaznih materijala), 1,04 g (8,53 mmol) DMAP i 604 mg (2,13 mmol) H-Pab(Z) (videti Pripremanje polaznih materijala) u 20 ml acetonitrila. ReagujuCa smeša Je puštena preko noći da dostigne sobnu temperaturu a potom je rastvarač uklonjen u vakuumu. Ostatak je rastvoren u 40 ml etil acetata i organska faza je potom isprana vodom (10 ml), 0.3M KHS04 (3 x 10 ml), Na^O^NaCl (vod.), i konačno slanim rastvorom (10 ml). Sušenje (Na^O^) i uklanjanje rastvarača u vakuumu dalo je ostatak koji je podvrgnut impulsnoj hromatografiji koristeći etil acetat/metanol 9:1 kao sredstvo za ispiranje da bi se dobilo 645 mg (51%) nazivnog jedinjenja.

(ii) H-(R)Cha-Aze-PabCZ)

Hlorovodonik je produvavan kroz rastvor 640 mg (1,03 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-Pab(Z) u 25 ml etil acetata. Posle nekoliko minuta TCL analiza je pokazala završetak reakcije. Korišćen je vakuum da se ukloni višak hlorovodonika a smeša je potom razblažena do 50 ml etil acetatom. Ispiranje u 2 x 15 ml Na2C03(vod. ) praćeno je ekstrahovanjem vodene faze etil acetatom (15 ml). Kombinovan! organski ekstrakti Isprani su vodom i sušeni (Na^O^) a rastvarač je uklonjen u vakuumu da bi se dobilo 513 mg (96%) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z).

(iii) H-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HC1

76 mg (0,15 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z) rastvoreno u 5 ml 95*/. etanola i 1 ml vode hidrogenizovano je na atmosferskom pritisku u prisustvu 5% Pd/C u toku 4 časa. Uklanjanje katalizatora filtriranjem , dodavanje 0,4 ml IM hlorovodonične kiseline i isparavanje rastvarača u vakuumu dalo je ostatak koji je rastvoren u 2 ml vode. Sušenje zamrzavanjem dalo je 57 mg (85%) proizvoda.

<1>H-NMR (500 MHz, D20, 2 rotamera smeša 3:1): 5 1,02-1,20 (m, 2H), 1,22-1,92 (m, 11H), 2,40-2,50 (m, IH), 2,80-2,90 (m, IH) ,4,25 (bt, IH), 4,40 (dq, IH), 4,53 (dq, IH), 4,65 (s, 2H), 5,05-5,10 (m, IH), 88 (d, 2H).

Hemijska pomeranja izdvojenih signala manjeg rotamera: 5 0,57 (m), 0,85 (m), 2,95 (m), 4,06 (dq), 4,17 (dq), 4,63 (s), 5,33(m), 7,70 (d), 7,93 (d).

<13>C-NMR (125 MHz, D2 O): amidinski i karbonilski ugljen\ici: 5 167,2, 170,4, i 172,8.

Primer 9

H00C-CH2-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HC1

(i) BnOOC-CH 2-(R)Cha-Aze-Pab(Z) 0,119 g (0,52 mmol) benzil bromacetata dodano je smeši 0,27 g (0,52 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z) (videti Primer 8) i 0,158 g (11,14 mml) K 2 CQ 3u 5,-2 ml acetonitrila i zagrevano 1 čas u uljnom kupatilu do 60 C. Rastvarač je uklonjen i dodani su etil acetat i voda. Faze su razdvojene i organska faza je isprana slanim rastvorom i sušena (Na 2 S0 4). Isparavanje u vakuumu dalo je 0,344 g ostatka koji je izložen impulsnoj hromatografiji koristeći etil acetat kao sredstvo za ispiranje, a zatim još jednom koristeći etilacetat: tetrahidrofuran: metanol zasićen sa NH (60:5:2) da bi se dobilo 0,163 g željenog proizvoda.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl 3):60,7-1,0 (m, 2H), 1,05-2,05 (m, 11H), 2,35-2,55 (m, IH), 2,55-2,75 (m, IH), 3,15-3,32 (t, H), 3,95-4,05 (t, 2H), 4,4 i 4,5 (ABX-'sistem, 2H), 4,8-4,95 (m, IH), 5,05 (s, 2H), 5,2 (s, 2H), 7,2-7,5 (m, a2H), 7,7-7,85 (d, 2H), 8,3-8,45 (t,

IH).

C-NMR (75 MHz, CDC13): amidinski i karbonilski ugljenici: 6 164,5, 167,8, 170,7, 171,9 i 175,9.

(ii) HOOC-CH 2-(R)Cha-Aze-Pab x 2 HC1

0,163 g (0,243 mmol) Bn00C-CH2"(R)Cha-Aze-Pab(Z) rastvoreno u 5,5 ml etanola (99,5%) i 0,7 ml hlorovodonika (1 N) hidrogenovano je u prisustvu 0,17 g 5% Pd/C u toku 4 časa. Uklanjanje katalizatora filtriranjem i isparavanje rastvarača, pa zatim rastvaranje u vodi i sušenje zamrzavanjem dalo je 107 mg (85%) nazivnog jedinjenja.

1H-NMR (500 MHz, CTK3D, smeša dva rotamera): glavni rotamer: 5 0,95-1,95 (m, 13H), 2,3-2,4 (m, IH), 2,6-2,75 (m, IH), 3,5-3,75 (m, 2H), 4,05-4,15 (m, IH), 4,15-4,23 (m IH), 4,36-4,43 (m, IH), 4,43-4,5 (m, IH), 4,58-4,65 (m, IH), 4,83-4,88 (m, IH), 7,5-7,6 (m, 2H), 7,73-7,82 (m, 2H).

Izdvojeni signali manjeg rotamera javljaju se kod 5 2,2-2,3 (m), 3,95-4,05 (m), 5,1-5,17 (m), 7,6-7,67 (m).

<13>C-NMR (75 MHz, CIM3D): amidinski i karboni Ini ugljenici: 5 168,2, 169,8, 168,9 i 172,3.

Primer 10

H00C-CH--(R,S)CH(COOH)-(R)Ca-Aze-Pab x 2 Hcl

(i) BnOOC-CH 2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Ca-Aze-Pab(Z)

Smeša 230 mg (0,443 mmol) H-(R)Ca-Aze-Pab(Z) (videti Primer 8) i 144 mg (0m487) dibenzil maleata u 1,5 ml 95% etanola mešana je 5 dana na temperaturi okolne sredine. Posle uklanjanja etanola u vakuumu, ostatak je izložen impulsnoj hromatograflji koristeći etil acetat/ metanol 95/5 kao sredstvo za Ispiranje da bi se dobilo 54 mg (15%) proizvoda.

(ii) HOOC-CH 2-(R,S)CH(COOH)-(R)Ca-Aze-Pab

49 mg (0,06 mmol) BnOOC-CH^(R,S)CH(COOBn)-(R)Ca-Aze-Pab(Z) rastvoreno u 5 ml 95% etanola i 1 ml vode hidrogenovano je u prisustvu 5% Pd/C u toku 4,5 h. Uklanjanje katalizatora filtriranjem i isparavanje rastvarača u vakuumu dalo je ostatak koji je rastvoren u 2 ml vode i 0,2 ml IM hlorovodonične kiseline. Sušenje zamrzavanjem dalo je 32 mg (93%) proizvoda.

<1>H-NMR spektar nazivnog jedinjenja u D20 prikazuje dve grupe jako preklopijenih signala koji nastaju od dva diastereomera. Dodatno izdvojene rezonance manjeg rotamera, koje iznose približno do 15%, takođe se javljaju u spektru.

<1>H-NMR (300 MHz, DO): 5 1,03-2,00 (m, 13H), 2,32-2,53 (m, IH), 2,72-2,96 (m, IH), 3,06-3,28 (m, IH), 4,10-4,55 (m, 4H), 5,00-5,10 (m IH),7,55-7,68 (n. 2H), 7,80-7,94 (m, 2H).

Izdvojeni signali manjeg rotamera javljaju se kod 5 0.60 (m), 0,80 (m), 4,0 (m). 5,24 (m), 5,35 (m).

<13>C-NMR (75 MHz, D20): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 167,2, 169,0, 171,0, 172,3 i 174,1.

Primer 11

H00C-CH2-(RorS)CH(COOH)-Cha-Aze-Pab/a x 2HC1

(i) BnOOC-CH 2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/a

Smeša 2,0 g (3,8491 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z) (videti Primer 8) i 1,37 g dibenzil maleata u 10 ml 95% etanola mešana je 4 dana na temperaturi okolne sredine. Posle uklanjanja etanola u vakuumu, ostatak je izložen impulsnoj hromatografiji koristeći etil acetat/metanol 98/2 kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobilo 1,024 g (32%) BnOOC-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(S). Dva diastereomera su razdvojena pomoću RPLC koristeći (CH3CN/0,1 M NH 4OAc 65/35) kao srestvo za ispiranje. Ovaj diasteromer je prvi izdvojen iz stuba. Posle uklanjanja acetonitrila u vakuumu, vodena faza je tri puta ekstrahovana etil acetatom. Organska faza je jednom isprana vodom, sušena (Na^O^), filtrirana i isparena da bi dala 0, 352 g nazivnog jedinjenja kao čistog stereoizomera.

(ii) HOOC-CH -(RorS)CH(COOH)-Cha-Aze-Pab/a x 2 HC1

2

350 mg (0,43 mmol) Bn00C-CH2-(RorS)CH(C00Bn)-(R)Cha-Aze-Pab(S)

(diastereomer iz prethodne faze (i)) rastvoreno u 15 ml 95% etanola i 3 ml vode hidrogenovano je 4,5 h u prisustvu 5% Pd/C. Uklanjanje katalizatora filtriranjem i isparavanje rastvarača u vakuumu dalo je ostatak koji je rastvoren u 5 ml vode i 1,0 ml IM hlorovodonične kiseline. Sušenje zamrzavanjem dalo je 214 mg (87%) proizvoda kao čistog stereoizomera.

<X>H-NMR (300 MHz, MeOD, smeša dva rotamera): 5 0,85-1,93 (m, 13H), 2,25-2,38 (m, IH), 2,60-2,75 (m, IH), 2,88 (dd, 2H), 3,92 (t, IH), 4,15-4,25 (m, 2H), 4,30-4,43 (m, IH), 4,56 (AB-sistem, 2H), 4,76-4,86 (m IH, delimično zaklonjen signalom rastvarača), 7,59 (d,2H), 7,78 (d, 2H).

Izdvojeni signali manjeg rotamera javljaju se kod 5 0.70, 2,95, 3,82, 4,0, 5,08 i 7,83.

<13>C-NMR (75 MHz, D^O): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 166,9, 168,8, 171,7, 172,3 i 173,8.

Primer 12

H00C-CH2-( RorS)CH( COOH)-(R) Cha-Aze-Pab/b x 2 HC1

(i) BnOOC-CH 2-(RorS)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/b

Nazivno jedinjenje je dobijeno koristeći isti postupak opisan u Primeru 8 za BnOOC-CH 2-(R)Cha-Aze-Pab(Z). Ovaj je stereomer izašao iz stuba posle prvog. Prinos 0,537 g.

(ii) HOOC-CH 2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/b x 2 HC1

530 mg (0,65 mmol) Bn00C-CH2-(RorS)CH(C00Bn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/b, rastvoreno u 15 ml 95% etanola i 3 ml vode, hidrogenovano je u prisustvu 5% Pd/C u toku 5 h. Uklanjanje katalizatora filtriranjem i isparavanje rastvarača u vakuumu dalo je ostatak koji je rastvoren u 6 ml vode i 1 , 1 IM hlorovodonične kiseline. Sušenje zamrzavanjem dalo je 290 mg (78%) proizvoda.

<1>H-NMR (300 MHz, MeOD, smeša dva rotamera): 5 0,86-1,90 (m, 13H), 2,30-2,42 (m, IH), 2,60-2,75 (m, IH), 2,75-2,85 (m, IH), 2,95-3,05 (m, IH), 3,65-3,71 (m, IH), 4,00-4,10 (m, IH), 4,14-4,24 (m, IH), 4,36-4,62 (m, 3H), 4,78- 4,86 (m IH, delimično zaklonjen signalom rastvarača),7,57 (d, 2H), 7,75 (d, 2H).

Izdvojeni signali manjeg rotamera javljaju se kod50.78, 2,92, 3,82, 5,36 i 7,80.

<13>C-NMR (75 MHz, D20): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 166,8, 169.0, 172,0, 172.4 i 175,2.

Primer 13

HOOC-CIL^-CHg-CROCha-Aze-Pab x 2 HC1

(i) BnOOC-CH -CH -(R)Cha-Aze-Pab(S)

2 2

Smeša 182 mg (0,35 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pab(Z) (videti Primer 8) i 62,5 mg (0,385 mmol) benzil akrilata u 1,5 ml 95% etanola mešano je na sobnoj temperaturi 4 dana. Rastvarač je uklonjen u vakuumu a ostatak je izložen impulsnoj hromatografiji koristeći etil acetat/metanol 9:1 kao sredstvo za ispiranje da bi se dobilo 200 mg (84%) nazivnog jedinjenja.

(ii) HOOC-CH -CH -(R)Cha-Aze-Pab x 2 HC1

2 2

195 mg (0,29 mmol) BnOOC-CH 2 -CH 2-(R)Cha-Aze-Pab(Z) rastvoreno u 10 ml 95% etanola i 2 ml vode hidrogenovano je u prisustvu 5% Pd/C u toku 4 h. Uklanjanje katalizatora filtriranjem i isparavanje rastvora u vakuumu dalo je ostatak koji je rastvoren u 2 ml vode i 0,4 ml IM hlorovodonične kiseline. Sušenje zamrzavanjem dalo je 130 mg (86%) proizvoda.

<1>H-NMR (500 MHz, CTK1D): S 0,98-1,27 (m, 2H), 1,30-1,90 (m, 11H), 2,27-2,35 (m, IH), 2,65-2,74 (m, IH), 2,77 (t, 2H), 3,32 (t, 2H), 4,10 (t, IH), 4,17-4,25 (m IH), 4,40-4,49 (m, IH), 4,55 (AB, 2H), 4,83-4,90 (m, IH), 7,58 (t, 2H), 7,77 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, CD OD): amidinski i karbonilni ugljenici:8167,0, 168,9, 172,4 i 174,6.

Primer 14

H00C-CH2-NH-C0-CH2-(R)Cha-Aze-Pabx 2HC1

(i) BnHOOC-CH 2 -NH-CO-CH 2-(R)Cha-Aze-Pab(Z)

Smeša 0,212 g (0,308 mmol) HCR)Cha-Aze-Pab(Z) (videti Primer 8), 0,124 g (0,89 mmol) K2C03i 0,128 g (0,449 mmol) BnOOC-CH2-NH-CO-CH2~Br (.videti Pripremanje polaznih materijala) u 6 ml acetontrila mešana je dva časa na 50 C. Posle ispravanja rastvarača, ostatak je rastvoren u vodi i etil acetatu. Vodeni sloj je dva puta ekstrahovan etil acetatom i kombinovan organski sloj je sušen (Na 2 SO 4), filtriran i isparen. Proizvod je prečišćen impulsnom hromatografijom koristeći stepenasti gradijent etil acetat/tetrahidrofuran (85/15, 4/1, 7/3) da bi se dobilo 0,190 g (64'/.) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl 3): 5 0,75-2,1 (m. 13H), 2,43 (m, IH). 2,56 (d, IH), 2,79 (m, IH), 3,0-3,15 (m, 2H, zbog toga 3,05 (d, IH), 3,89-4,18 (m, 5H), 4,8-4,98 (m, 2H), 5,15 (s, 2H), 5,18 (s, 2H), 7,2-7,47 (m, 12H), 7,72 (t, NH), 7,86 (d, 2H), 8,14 (bs, NH), 8,31 (dd, NH), 9,42 (bs, NH)

<13>C-NMR (75 MHz, D20): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 164,5, 168,7, 169,22, 169,83, 171,7, 175,5.

(ii) HOOC-CH -NH-CO-CH -(R)Cha-Aze-Pab x 2 HC1

2 2

0,19 g (0,26 mmol) BnOOC-CH2-NH-CO-CH2~(R)Cha-Aze-Pab(Z) pomešano je sa 0,075 g 5% Pd/C u 1,5 ml rastvora IN HC1, 3 ml vode i 17 ml etanola, pa je smeša hidrogenovana jedan čas na atmosferskom pritisku. Filtriranje katalizatora, isparavanje rastvarača praćeno sušenjem zamrzavanjem iz vode dalo je 144 mg (7%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (300 MHz, D,0, dva rotamera 4:1): 5 0,88-1,88 (m, 13H), 2,25-2,42 (m, IH), 2,63-2,89 (m, IH), 3,94 (s, 2H), 3,99 (vidljiv dublet, 2H), 4,16 (t, IH), 4,28 (q, IH), 4,41 (q, IH), 4,56 (s, 2H), 4,98 (dd IH), 7,53 (d, 2H), 7,77 (d, 2H).

Izdvojeni signali manjeg rotamera javljaju se kod 6 0,50 (bq), 0,77 (bq), 5,21 (dd), 7,56 (d) i 7,81 (d).

<13>C-NMR (75 MHz, D20): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 166,8, 166.9, 168.6, 172,3 i 173,4.

Izdvojeni signali manjeg rotamera javljaju se kod 5: 166,6, 169,9 i 172,0.

Primer15

H-CR)Ch-Pro-Pab x 2 HC1

(i) Boc-(R)Ch-Pro-Pab(Z)

0,135 ml (1,1 mmol) pivaloil hlorida dodano je na sobnoj temperaturi mešanoj smeši 0,155 ml (1,1 mmol) trietil amina i 405 mg (1,1 mmol) Boc-(R)Ch-Pro-0H (videti Pripremanje polaznih materijala) u 5 ml DMF. Posle 3 h dodano je 340 mg (1,1 mmol) H-Pab(Z)

(videti Pripremanje polaznih materijala) u 5 ml DMF i mešanje nastavljeno preko noći. Reagujuća smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil acetat/toluolom 1:1/ Organska faza je sušena (MgSO 4) i rastvarač je uklonjen u vakuumu a ostatak je izložen impulsnoj hromatografiji koristeći etil kao sredstvo za ispiranje. Prinos je bio 309 mg (49%).

(ii) H-(R)Ch-Pro-Pab(Z)

Hlorovodonik je produvavan kroz rastvor, sve do zasićenja, 1,246 g (2 mmol) Boc-(R)Ch-Pro-Pab(Z) u 20 ml etil acetata na sobnoj tem-.peraturi. Posle 30 minuta dodan je rastvor (10%) natrijum karbonata i organska je faza izdvojena i sušena (K2C03). Agens za sušenje je ispran metilen hloridom a rastvarač je isparen iz kombinovanih organskih faza, da bi se dobilo 1,11 g (100%) nazivnog jedinjenja.

(iii) H-(R)Ch-Pro-Pab x 2 HC1

100 mg (0,19 mmol) H-(R)Ch-Pro-Pab(Z) rastvoreno u 15 ml etanola hidrogenovano je u prisustvu 38 mg 10% Pd/C u roku 1,5 h. Razre-di vanje reagujuće smeše destilisanom vodom 1 uklanjanje katalizatoar filtriranjen, a zatim uklanjanje etanola u vakuumu i sušenje zamrzavanjem dalo je nazivno jedinjenje kao bezbojni pra-

šak. Peptid je konačno pretvoren u dihidrohlorid rastvaranjem u hlorovodoničnoj kiselini pa sušenjem zamrzavanjem da bi se dobilo 90 mg (100%) nazivnog jedinjenja.

<X>H-NMR (300 MHz, 0,0):81,00-2,00 (m, 13H), 2,0-2,3 (m, 3H), 2,3-2,5 (m, IH), 3,6-3,7 (m, IH), 3,8-3,9 (m, IH), 4,3-4,5 (t, IH), 4,5-4,6 (m, 3H), 7,4-7,6 (m, 3H), 7,4-7,6 (m, 3H), 7,6-7,9 (m, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, D20): amidinski i karbonilni ugljenici:8167,2, 167,2, 170,0 i 174,9.

Primer 16

H00C-CH2-(R)Cha-Pro-Pabx2 HC1

(i) BnOOC-CH 2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)

Smeša 268 mg (0,5 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (videti Primer 15), 90 ul (0,55 mmol) benzil bromacetata i 181 mg (1,3 mmol) K2C03 u 2 ml acetonitrila bila je mešana ultrazvukom 2,5 časova na 40 C. Smeša je filtrirana kroz "hyflo" filtar a rastvarač je uklonjen pod vakuumom da bi se dobio ostatak koji je bio izložen impulsnoj hromatografiji koristeći etil acetat kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobilo 194 mg (57%) nazivnog jedinjenja.

H00C-CH -(R)Cha-Pro-Pab x 2 HC1

2

194 mg (0,28 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(Z) rastvoreno u 10 ml etanola hidrogenovano je u prisustvu 77 mg 10% Pd/C u toku 3 h. Reagujuća smeša je razblažena vodom i katalizator je uklonjen filtriranjem. Isparavanje etanola u vakuumu i sušenje zamrzavanjem dalo je beli ostatak. Dodana je hlorovodonična kiselina i dobijen rastvor je konačmo osušen zamrzavanjem da bi se dobilo 11 mg (68%) željenog proizvoda.

<1>H-NMR (300 MHz, D^): 5 1,00-1,2 (m, 2H), 1,2-1,5 (m, 3H), 1,5-2,0 (m, 8H), 2,0-2,3 Cm, 3H), 2,3-2,5 (m, IH), 3,6-3,8 (m, IH), 3,8-4,0 (m, IH), 4,4-4,7 (m, 4H), 7,5-7,7 (d, 2H), 7,7-7,9 (d, 3H).

<13>C-NMR (75 MHz, D20): amidinski i karbonilni ugljenici:S167,1, 168,2, 169,3, 174,6.

Primer 17

H00C-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab

(i) Boc-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)

Rastvoru 0,8 g (1,67 mmol) Boc-(Me)(R)Cha-Pro-OSu (videti Pripremanje polaznih materijala) u 3 ml DMF dodan je rastvor 0,562 g (1,85 mmol) H-Pab(Z) (videti Pripremanje polaznih materijala) u 3 ml DMF, pa je pH dobijenog rastvora podešen na 8-9 N-metilmorfoli-nom, posle čega je rastvor dva dana mešan na sobnoj temperaturi. Rastvor je sipan u vodu a dobijena smeša je ekstrahovana etil acetatom (3 x 25 ml). Organski rastvor je ispran rastvorom IM KHSO 4 , rastvorom 107. NaHCO 3, vodom i slanim rastvorom i sušen (Na^O^). Isparavanje rastvarača dalo je 0,65 g (60%) nazivnog jedinjenja u vidu žućkasto belog praška.

(ii) Me-(R)Cha-Pro-PaMZ)

Rastvor 0,60 g (0,92 mmol) Boc-(Me) (R)Cha-Pro-Pab(Z) u 50 ml EtOH bio je zasićen HCl-om na 0 C, pa je rastvor preko noći ostavljen u hladnjaku. Dobijen rastvor je isparen do suva, a ostatak je rastvoren u rastvoru Na 2 C0 3, ekstrahovan etil acetatom (3 x 25 ml). Ekstrakt je ispran slanim rastvorom i isparen da bi dao 0,4 g (79%) jedinjenja u vidu belog pahuljastog praška.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCy: 5 0,8-1,0 (m, 2H), 1,1-1,4 (m, 5H), 1,4-1,55 (m, IH), 1,6-1,9 (m, 10H), 1,2-2,05 (m, 2H), 2,05-2,2 (m, 2H). 2,19 (s, 3H), 2,4-2,5 (m, IH), 3,28 (dd, IH), 3,41 (q, IH),

3,62 (m, IH), 4,42 (w, 2H), 4,61 (d, IH), 5,2 (s, 2H), 7,2-7,45 (m, 7H), 7,72 (t, NH), 7,79 (d, 2H).

(iii) BnOOC-CH 2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)

Smeša 0,40 g (0,73 mmol) (Me)-(R)Cha-Pro-Pab(Z), 0,17 g BnCOO-CH 2 Br i 0,20 g (2 ekviv. ) K 2 CO 3 (sitnjen u avanu) u 15 ml CH 3CN mešana je na sobnoj temperaturi preko noći. Dobijena smeša je isparena, dodan etil acetat, pa je smeša isprana vodom i slanim rastvorom, sušena (Na SO ) i isparena. Sirov proizvod (0,69 g) izložen je impulsnoj hromatografiji (CH2Cl2/MeOH 10/1) dajući 0,39 g (77%) svetio žutog veoma viskoznog ulja.

HOOC-CH 2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab

Rastvoru 0,39 g (0,56 mmol) Bn00C-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z) u 30 ml EtOH dodano je 0,1 g Pd/C, pa je materija hidrogenovana na atmosferskom pritisku. Rastvor je filtriran i isparen, posle čega je sirupast materijal sušen zamrzavanjem da bi se dobilo 0,25 g (95%) jedinjenja u vidu belog kristalastog praška.

<1>H-NMR (300 MHz, CD OD): S 0,85-1,1 (m, 2H), 1,1-1,4 (m, 6H), 1,5-1,85 (m, 9H), 1,9-2,05 (m, 3H), 2,05-2,15 (m, IH). 2,15-2,3 (m, IH), 2,57 (s, 3H), 3,32 (d, IH), 3,55-3,75 (m, 2H), 3,95-4,1 (m, 2H), 4,35-4,5 (m, 3H), 7,55 (d, 2H), 7,72 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, CTHDD): amidinski i karbonilni ugljenici:<5168,4, 171,5, 174,7, 175,1.

Primer 18

HOOOC-CIL^-CH^R) Cha-Pro-Pab x 2 HC1

(i) BnOOOC-CH -CH -(R)Cha-Pro-Pab(Z)

2 2

Smeša 149 mg (0,28 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (videti Primer 15) i

66 mg (0,4 mmol) benzil akrilata u 1,5 ml etanola držana je na sobnoj temperaturi 36 h. Rastvarao je uklonjen u vakuumu i ostatak je izložen impulsnoj hromatogtafiji koristeći etil acetat kao sredstvo za ispiranje da bi se dobilo 124 mg (64%) željenog proizvoda.

(ii) HOOOC-CH -CH -(R)Cha-Pro-Pab x 2 HC1

2 2

124 mg (0,18 mmol) Bn000C-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab(2) rastvoreno u 10 ml etanola hidrogenovano je 1 h u prisustvu 55 mg 10% Pd/C. Katalizator je uklonjen filtriranjem a rastvarač je uklonjen u vakuumu. Ostatak je rastvoren u hlorovodoničnoj kiselini i dobijeni rastvor je sušen zamrzavanjem da bi se dobilo 87 mg (79%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (300 MHz, D20): 5 1,0-2,0 (m, 13H), 2,0-2,2 (m, 3H). 2,2-2,4 (m, IH), 2,7-2,8 (t, 2H), 3,2-3,3 (m, IH), 3,3-3,4 (m, IH), 3,7-3,9 (m, IH), 4,3-4,6 (m, 2H), 7,6-7,8 (m, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, ^0): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 167,0, 168,3 i 174,6 (dva se ugljenika preklapaju).

Primer 19

H00C-CH2-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab x 2 HC1

(i) BnOOC-CH -CH -(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z)

2 2

Rastvoru 274 mg (0,5 mmol) (Me)-(R)Cha-Pro-PaMZ) (videti Primer 17) u 5 ml EtOH (99%) dodano je 97,3 mg (0,6 mmol) bemzil akrilata i reagujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi. Posle 72 h dodana je naknadna količina od 16,2 mg (0,1 mmol) benzil akrilata i mešanje je nastavljeno sledećih 24 časa. Rastvor je isparen i ostatak je izložen impulsnoj hromatografiji (CH2Cl2/MeOH (NH-zasićen), 95/5) da bi se dobilo 198 mg (56%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (500 MHz, CDC13): 5 0,8-2,0 (nekoliko m, 16H), 2,24-2,33

(m, 2H). 2,38-2,46 (m, IH), 2,67 (t, 2H), 3,32-3,40 (m, 2H), 3,71 (m, 2H), 4,36-4,44 (m, 2H), 4,58 (m, IH), 5,03 (vidljivo s, 2H), 5,20 (s, 2H), 7,25-7,37 (m, 10H), 7,43 (d, 2H), 7,84 (t, IH (NH)), 7,81 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, CD 3OD): amidinski i karbonilni ugljenici:6164,7, 167,9, 171,7, 172,3, 172,6.

(ii) HOOC-CHg-CH^-(Me)(R)Cha-Pro-Pab x 2 HC1

U rastvor 198 mg (0,27 mmol) BnH00C-CH2-CH2-(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z) u 10 ml ErOH i 1 ml IM HC1 dodano je 60 mg 5% Pd/C (koje sadrži 50% mas. H 0) pa je smeša hidrogenovana na atmosferskom pritisku u toku 4 časa. Katalizator je isfiltriran a rastvarač je isparen. Preostalo ulje je rastvoreno u vodi i sušeno zamrzivanjem da bi se dobilo nazivno Jedinjenje u merljivoj količini.

<1>H-NMR (500 MHz, DO): 5 1,08-1,2 (m, 2H), 1,2-1,42 (m,4H), 1,68-1,91 (m, 5H), 1,93-2,08 (m, 2H), 2,09-2,26 (m, 3H). 2,49 (m, IH), 2,95 (m, 2H), 3,03 (s, 3H), 3,60 (vidljivo bs, 2H), 3,82 (m, IH), 3,98 (m, IH), 4,53 (m, IH), 4,61 (m, IH), 4,64 (m, IH), 7,63 (d, 2H), 7,97 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, CTMDD): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 167,2, 167,8, i 174,6.

Primer 20

H00C-CH2-(RorS)CH(C00H)-(R)Cha-Pro-Pab/a x 2 HC1

(i) BnOOC-CH 2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab(Z)

Smeša 0,50 g (0,94 mmol) H-(R)Cha-Pro-PaMZ) (videti primer 15) i 0,28 g (0,93 mmol) dibenzil maleata u 20 ml EtOH držana je na sobnoj temperaturi 5 dana. Isparavanje rastvarača praćeno impulsnom hromatograf i jom koristeći CH2Cl2/MeOH kao sredstvo za ispiranje, dalo 0,15 g (19%) diastereomerne smeše.

<1>H-NMR (500 MHz, CDC13): 5 0,7-2,1 (m, 17H), 2,3-2,4 (m, IH). 2,5-2,8 (m, 2H), 3,2-3,5 (m, 4H), 4,46 (d, IH), 4,65 (bd, IH), 4,81 (d, IH), 4,9-5,1 (m, 3H). 5,20 (s, 2H), 7,1-7,4 (m, 15H), 7,4-7,5 (m, 2H), 7,6/7,8 (m, 3H).

(ii) HOOC-CH 2-(R,S)CH(C00H)-(R)Cha-Pro-Pab/a 2 HC1

Smeša 0,15 g (0,18 mmol) Bn00C-CH2-(R, S)CH(COOBn)-(R)Cha-Pro-Pab(Z) rastvorena je u 5ml etanola i hidrogenovana na 5% Pd/C na atmosferskom pritisku u toku 1 h, da bi se dobilo H00C-CH2-(R, S)-CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab. Dva diastereomera su razdvojena pomoću RPLC koristeći (CH 3 CN/0,1 M NH 4OAc 15/85) kao sredstvo za ispiranje, a potom je sledilo sušenje zamrzavanjem iz HC1. Ovaj se diastereomer prvi izdvojio iz stuba. Prinos 19 mg (18%).

<1>H-NMR (500 MHz, CTHDD): 5 0,98-1,27 (m, 2H), 1,30-1,90 (m, 11H), 2,27-2,35 (m, IH), 2,65-2,74 (m, IH), 2,77 (t, 2H), 3,32 (t, 2H),<1>H-NMR (500 MHz, D20, smeša dva rotamera) glavni rotamer: 5 1,0-2,0 (m, 15H), 2,15 (m, 2H). 2,44 (m, IH), 2,95 (m, 2H), 3,00 (bd, IH), 3,05 (bd, IH), 3,69 (d, IH), 3,97 (bs, IH), 4,5-4,7 (m, 3H), 7,62 (d, 2H), 7,87 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, D^O): amidinski i karbonilni ugljenici:8167,2, 168,3, 173,8, 174,6 i 178,2.

Primer 21

H00C-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/b x 2 HC1

Nazivno jedinjenje je dobijeno koristeći isti postupale kako je opisano u Primeru 20 za H00C-CH2-(R, S)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab. Ovaj je diastereomer izašao iz stuba posle prvog. Prinos 19 mg (18%).

<1>H-NMR (500 MHz, D20, smeša dva rotamera) glavni rotamer: 6 1,0-2,0 (m, 14H), 2,15-2,25 (m, 3H). 2,44 (m, IH), 3,11 (bd, IH), 3,19 (bd, IH), 3,71 (m. IH), 3,92 (m, IH), 4,03 (bs, IH), 4,5-4,7

(m, 3H), 7,58 (d, 2H), 7,84 (d, 2H).

Izdvojeni signali koji nastaju iz manjeg rotamera javljaju se kod:S 7,66(d) i 7,91 (d).

<13>C-NMR (75 MHz, D20): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 167,3, 168,5, i 174,7. Dva se ugljenika verovatno preklapaju.

Primer 22

H00C-CH2-MH-C0-CH2-(R)Cha-Pro-Pab x2HC1

(i) BnOOC-CH 2 -NH-CO-CH 2-(R)Cha-Pro-Pab (Z)

0,246 g (0,460 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (videti Primer 15), 0,140 g (1,01 mmol) K CO i 0,145 g (0,506 mmol) BnOOC-CH -NH-CO-CH -Br

2 3 2 2

(videti Pripremanje polaznih materijala) pomešano je u 6 ml acetonitrila. Smeša je mešana na 50 C u toku 2 h i 30 minuta, rastvarač je isparen a ostatak je podeljen između vode i etil acetata. Slojevi su razdvojeni i vodeni je sloj ekstrahovan još jednom etil acetatom. Kombinovan organski sloj je sušen (Na^O^), filtriran i isparen da bi dao 9,350 g ulja. Sirov proizvod je prečišćen impulsnom hromatografijom koristeći stepenast gradijent CH2Cl2/MeOH 97/3, 95/5, 92,5/7,5 da bi se dobilo 0,227 g (67%) nazivnog jedinjenja.

<13>C-NMR (75 MHz, CDCy: 6 25,0, 26,9, 26,2, 26,4, 26,7, 32,4, 34,2, 34,4, 40,8, 40,9, 42,9, 46,7, 50,5, 58,4, 60,2, 67,0, 67,2, 127,5, 127,8, 128,2, 128,3, 128,4, 128,5, 128,6, 128,6, 134,1, 135,2, 137,0, 142,6, 164,7, 168,9, 169,3, 170,4, 172,2, 175.0.

(ii) HOOC-CH 2 -NH-CO-CH 2-(R)Cha-Pro-Pab x 2 HC1

0,089 g (0,12 mmol) BnOOC-CH-NH-CO-CH-(R)Cha-Pro-Pab(Z) pomešano je sa 30 mg 5% Pd/C i rastvoreno u 10 ml sirćetne kiseline. Smeša je hidrogenovana na atmosferskom pritisku jedan i po čas. Filtriranje katalizatora kroz "hyflo" filtar i sušenje zamrzavanjem

sa 1 ml IN hlorovodonične kiseline dalo je 0,059 g (82%) željenog proizvoda.

<1>H-NMR (300 MHz, D2O): 6 0,9-2,2 (m, 16H), 2,25-2,475 (m, IH), 3,55-3,7 (m, IH), 3,7-4,1 (m, 5H), 4,42 (t, IH), 4,48-4,6 (m, 3H), 7,51 (d, 2H), 7,77 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, D2O): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 168,8, 167,1, 168,2, 173,6, 174,6.

Primer 23

Et00C-CH2-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pab x HOAc

(i) EtOOC-CH=CH-CH 2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)

H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (videti Primer 15) (275 mg, 0,51 mmol) obrađi-vano je pomoću K2C03(141 mg, 1,02 mmol) i BrCH2CH=CHC00Et (108 mg, 0,56 mmol) u CH^N (10 ml) na 20 C u toku 20 h. Rastvarač je isparen, a ostatak je rastvoren u EtOAc (5 ml/H20 (2 ml). Organski sloj je izdvojen, sušen (Na^O^) i koncentrovan, tako da je dobijeno 397 mg ulja koje je prečišćeno impulsnom hromatografijom koristeći EtOAc/heptan, 1/4 kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobilo"252 mg (77%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (500 MHz, CDCIg): 6 0,8-1,05 (m, 2H), 1,1-1,45 (m, 3H), 1,3 (t, 3H), 1,5-1,9 (m,8H), 1,95-2,05 (m, IH), 2,1-2,15 (m, IH), 2,45-2,55 (m, IH), 3,00 i 3,15 (dva d, 2H), 3,35-3,45 (m, 2H), 3,55-3,65 (m, IH), 4,15 (q, 2H), 4,3 (d, IH), 4,6-4,7 (m, 2H), 5,2 (s, 2H), 5,85 (d, IH), 6,75 (dt, IH), 5,3-5,4 (m, 4H), 7,45 (d, 2H), 7,85 (d, 2H).

<13>C-NMR (75,0 MHz, CDCl^: amidinski i karbonilni ugljenici: 5 165,7, 171,2 i 175,7 (dva se maksimuma verovatno preklapaju).

(ii) EtOOC-CH -CH -CH -(R)Cha-Pro-Pab x HOAc

2 2 2

EtOXCH=CHCHz-{R)Cha-Pro-Pab(Z) (250 mg, 0,38 mmol) rastvoren je u etanolu i hlđrogenovan u prisustvu 5% Pd/C za oko 2 h. Uklanjanje katalizatora filtriranjem i Isparavanje rastvarača u vakuumu dalo je, posle prečišćavanja RPLC-om, koristeći (CH 3 CN/0,1 M NH 4OAc) kao sredstvo za ispiranje, 70 mg (36%) željenog proizvoda.

VNMR (500 MHz, CD30D): 6 0,9-1,05 (m, 2H), 1,15-1,55 (m, 5H), 1,25 (t, 3H), 1,6-1,85 (m,7H), 1,95-2,6 (m, 8H), 3,55-3,65 (m, 2H), 3,8 (m, IH), 4.1 iq, 2H), 4,45 (m i d, IH), 4,55 (d, IH), 7,55 i 7,75 (dva d, 4H).

<13>C-NMR (75,0 MHz, CIM3D): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 168,3, 173,2, 174,6 i 174.9.

Primer 24

Ph(4-C00H)-S02-(R)Cha-Pro-Pabx2 HC1

(i) Ph(4-C0OH)-SO 2-(R)Cha-Pro-Pab(Z)

64 mg (0,32 mmol) 4-hlorsulfonil-benzoJeve kiseline dodano je na temperaturi ledenog kupatila rastvoru 156 mg (0,29 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (videti Primer 15) 1 59 mg (0,58 mmol) trietil amina u 4 ml metilen hlorida. Smeša je lagano puštena da dostigne sobnu temperaturu i posle 24 časa isprana je vodom i sušena (Na 2 S0 4). Uklanjanje rastvarača u vakuumu i prečišćavanje ostatka impulsnim hromatograf1jom koristeći etil acetat/metanol 9:1, pa zatim metilen hlorid/metanol 3:1 kao sredstva za ispiranje dalo je 82 mg (39%) proizvoda.

(ii) Ph(4-C00H)-S0 2-(R)Cha-Pro-Pab x 2 HC1

80 mg (0,11 mmol) Ph(4-C00H)-S02-(R)Cha-Pro-Pab(Z) hidrogenovano na 5% Pd/C u EtOH. Katalizator je isfiltriran, rastvarač isparen a sirov proizvod prečišćen ROLC-om koristeći (CH 3 CN/0,1 M NH 4OAc 1/4) kao sredstvo za ispiranje i konačno pretvoren u so hidrohlorida sušenjem zamrzavanjem iz HC1, što je dalo 21 mg (29%)

proizvoda.

<1>H-NMR (500 MHz, CD 3OD, smeša dva rotamera): 5 0,45-1,82 (m, 13H), 1,90-2,30 (m, 4H), 2,95-4,16 (nekoliko m, ukupno 3H), 4,35-4,68 (m, 3H), 7,54 (d, 2H), 7,74 (d, IH), 7,80 (d, IH), 7,90-8,00 (m, 2H), 8,05-8,22 (m, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, CD 3OD): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 168,4, 173,4, 173,9 i 174,2.

MS m/z 584 (M<+>+l)

Primer 25

H-(R)Cha-Pic-Pab x 2 HC1

(i) Boc-(R)Cha-Pic-PaMZ)

3,57 g (18,6 mmol) EDC dodano je na -15 C smeši 7,11 g (18,6 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-OH (videti Pripremanje polaznih materijala), 9,07 g (74,2 mmol) DMAP i 5,26g (18,6 mmol) H-Pab(Z) (videti Pripremanje polaznih materijala) u 200 ml DMF. Pušteno je da se preko noći temperatura popne do 20 C. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i dodani su toluol i voda. Organska faza je isprana vodom, 1 M KHSO 4, 10% Na 2 C0 3 i slanim rastvorom. Sušenje (MgSO 4) i isparavanje rastvarača u vakuumu dalo je 13,63 g ostatka koji je izložen impulsnoj hromatografiji na silika gelu koristeći etil acetat/ toluol 2:1 kao sredstvo za ispiranje da bi se dobilo 9,5 g (79%) nazivnog jedinjenja.

<J>H-NMR (500 MHz, .CDCl ): 5 0,7-1,0 (m, 2H), 1,0-2,2 (m, 25H), 2,3-2,5 (m, IH) 2,9-3,1 (m, IH), 3,8 (d, IH), 4,3 (dd, IH), 4,4-4,6 (m, 2H), 5,1 (s, 2H), 5,1-5,3 (m, 2H), 7,2-7,3 (m, 5H), 7,35 (d, 2H), 7,4-7,5 (m, IH), 7,75 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, CDClg): amidinski i karbonilni ugljenici: 6 156,8, 164,6, 168,2, 170,0 i 173,4.

(ii) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z)

Hiorovodonik je produvavan kroz rastvor, sve do zasićenja, 9,5 g (14,7 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z) u 100 ml etil acetata na sobnoj temperaturi. Posle 10 minuta dodan je rastvor (10%) Na 2 C0 3 i organska je faza izdvojena i sušena (K2C03) a rastvarač je uklonjen u vakuumu da bi se dobilo nazivno jedinjenje u merljivoj količini.

<1>H-NMR (500 MHz, CD30D): 5 0,85-1,05 (m, 2H), 1,15-1,90 (m, 16H), 2,25-2,35 (m, IH), 3,20-3,30 (m, IH), 3,80-3,90 (d, IH), 3,90-4,0 (m, IH), 4,4-4,5 (dva d, 2H), 4,7 (br s, 5H), 5,15 (s, 2H), 5,20 (m, IH), 7,25-7,45 (m, 7H), 7,85 (d, 2H).

(iii) H-(R)Cha-Pic-Pab x 2 HC1

55 mg (0,1 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) rastvoreno u smeši 5 ml etanola i 0,45 ml IM hlorovodonične kiseline hidrogenovano je u prisustvu 33 mg 10% Pd/C u toku 1,5 h. Uklanjanje katalizatora filtriranjem i isparavanje rastvarača u vakuumu dalo je ostatak koji je izložen RPLC koristeći CH CN/0, 1 M NH OAc kao sredstvo za ispiranje. Prečišćen peptid je konačno pretvoren u so dihidrohlorida rastvaranjem u hlorovodoničnoj kiselini i potonjim sušenjem zamrzavanjem. Prinos je bio 17 mg (35%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (300 MHz, D20, dva rotamera, smeša 3:1): 5 1^0-2,0 (m, 18H), 2,33 (d, IH), 3,4-3,5 (m, IH), 3,8-3,9 (d, IH), 4,4-4,8 (m, 3H), 5,15-5,25 (m, IH), 7,5-7,7 (m, 2H), 7,8-8,0 (m, 2H).

Izdvojeni signali manjeg rotamera javljaju se kod 5: 0,5-0,7 (m) i 3,0-3,1 (m).

<13>C-NMR (75 MHz, H 0): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 167,3, 171,6 i 173,6.

Izdvojeni signali za manji rotamer javljaju se kodS170,6 i 172, 4.

Primer 26

H00C-CH2-(R)Cha-Pic-Pab x2HC1

(i) BnOOC-CH 2-(R)Cha-Pic-Pab

Smeša 742 mg (1,35 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (videti Primer 25), 230 ml (1,45 mmol) benzil bromacetata i 558 mg (4 mmol) K CO u 4 ml acetonitrila obrađivana je ultrazvukom 40 minuta na 40 C. Rastvarač je uklonjen a ostatak je izložen impulsnoj hromatografiji da bi dao 720 mg (77%) željenog proizvoda.

<*>H-NMR (500 MHz, CDC13): 8 0,8-1,0 (m, 2H), 1,1-1,9 (m, 1BH), 2,1-2,4 (brs, 1 ili 2H), 2,4 (d, IH), 3,00 (m, IH), 3,25 (d, IH), 3,45 (d, IH), 3,S5-3,65 (m, IH), 3,7 (m, IH), 4,35 (dd, IH), 4,55 (dd, IH), 4,80 (dva d, 2H), 5,2 (s, 2H), 5,3 (m, IH), 7,2-7,4 (m, 12H), 7,8 (d, 2H).

<13>C-NMR (125,0 MHz, CDC13): amidinski i karbonilni ugljenici: 6 164,5, 167,9, 170,5, 173,4 i 175,5.

(ii) HOOC-CH 2-(R)Cha-Plc-Pab x 2 Hcl

509 mg (0,73 mmol) BnOOC-CH -(R)Cha-Pic-Pab(Z) rastvoreno u 25 ml etanola hidrogenovano je u prisustvu 259 mg 10% Pd/C u toku 4 h. Uklanjanje katalizatora filtriranjem i isparavanje rastvarača u vakuumu dalo je ostatak koji je rastvoren u destillsanoj vodi. Dodana je hlorovodonična kiselina i rastvor je na kraju sušen zamrzavanjem da bi se dobilo 281 mg (79%) nazivnog jedinjenja.

^-NMR (500 MHz, D^O, smesa rotamera 4:1): glavni rotamer:81,0-2,0 (m, 18H), 2.25-2,40 (m, IH), 3,4-3,5 (m, IH), 3,8-3.95 (m, 3H), 4,55-4,55 (dva d, 2H}, 4,30 (dva d, 2H), 5,15 (ra, IH), 7,55-7,75 (m, 2H), 7,8-8,0 Cm, 2H).

<1J>C-NMR ( 225 MHz, DO): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 167,3, 169.9, 170,3, i 173,5.

Izdvojeni signal za manji rotamer javlja se na S 166,9. 169,2 i 172,0.

Primer 27

HOOC-CH Cm-(RorS)CH(C00H1-(R)Cha -Pic-Pab/a x 2 HC1

(i) BnOOC-CH 2-(RorS)CH(C00Bn)-(R)Cha -Pic-Pab(Z)

Smeša 592 mg (1,1 mmol) H-(R)Cha -Pic-Pab(Z) (Videti Primer 25) i 332 mg (1,1 mmol) dibenzil maleata u 1 ml etanola držana je na sobnoj temperaturi nedelju dana. Rastvarač je uklonjen u vakuumu a ostatak je izložen impulsnoj hromatografiji, koristeći metanol/ metilen hlorid kao sredstvo za ispiranje, da bi dao 275 mg (30%) distereomerne smeše.

(ii) HOOC-CH 2-(RorS)CH(C00H)-(R)Cha -Pic-Pab/a x 2 HC1

275 mg Bn00C-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha -Pic-Pab(Z) rastvoreno u 20 ml 95% etanola hidrogenovano je u toku 18 h u prisustvu 75 mg 10% Pd/C. Smeša je filtrirana kroz "hyflo" filtar a rastvarač je uklonjen u vakuumu. Dodavanjem vode i potonjim sušenjem zamrzavanjem dobijeno je 166 mg H00C-CH2"(R, S)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab. Ova dva diastereomera su razdvojeba RPCL-om koristeći (CH3CN/0,1 M NH^OAc 1/4) kao sredstvo za ispiranje, posle čega je vršeno sušenje zamrzavanjem iz HC1. Ovaj se diastereomer prvi izdvojio iz stuba. Prinos 9 mg.

<1>H-NMR (500 MHz, D20, smeša rotamera): 5 1,0-2,0 (m, 18H), 2,25-2,40 (m, IH), 3,0-3,2 (m, 2H), 3,4 (t, IH), 3,8 (d, IH), 4,04 (t, IH), 4,5-4,7 (m, 3H), 5,2 (s, IH), 7,55 (d, 2H), 7,8 (m, 2H).

Izdvojeni signal od manjeg rotamera javlja se na 5 4,0 (t) i 7,7 (d).

Primer 28

H00C-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha -Pic-Pab/b x 2 HC1

Nazivno je jedinjenje dobijeno primenom istog postupka koji je opisan u Primeru 27 na H00C-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab. Ovaj je điastereomer izašao izstuba posle prvog.

<1>H-NMR (500 MHz, D20, smeša rotamera): 5 1,0-2,0 (m, 18H), 2,25-2,40 (m, IH), 3,0-3,2 (m, 2H), 3,5 (t, IH), 3,85 (d, IH), 4,15 (t, IH), 4,5-4,7 (m, 3H). 5,15 (s. IH), 7,55 (d, 2H), 7,8 (dm, 2H).

Izdvojeni signal od manjeg rotamera javlja se na 5 4,35 (s), 7,65 (d) i 7,9 (d).

Primer 29

HO0C-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pabx 2HC1

(i) BnOOC-CH -CH -(R)Cha-Pic-Pab(Z)

2 2

Smeša 851 mg (1,55 mmol) H-(R)Cha -Pic-Pab(Z) (Videti Primer 25) i 269 mg (1,71 mmol) benzil akrilata u 5 ml etanola držana je na sobnoj temperaturi 40 časova. Rastvarač je uklonjen u vakuumu a ostatak je izložen impulsnoj hromatografiji, koristeći metanol/ metilen hlorid kao sredstvo za ispiranje, da bi dao 812 mg (74%) proizvoda.

<X>H-NMR (500 MHz, CDC13): 6 0,8-1,0 (m, 2H), 1,1-1,9 (m, 16H), 2,3-2,5 (m, 3H). 2,6-2,8 (m, 2H), 3,0 (m, IH), 3,5 (m, IH), 3,6-3,7 (m, IH), 4,3 (dd, IH), 4,6 (dd, IH), 4,95-5,05 (dva d, 2H), 5,2 (s, 2H), 5,3 (m, IH), 6,5-6,9 (br s, IH), 7,0-7,1 (m, IH), 7,2-7,5 (m, 12H), 7,75-7,85 (d, 2H), 9,3-9,7 (brs, NH).

(ii) HOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab x 2 HC1

780 mg (1,1 mmol) Bn00C-CH2-CH2-(R)Cha-Pic-Pab(Z) rastvoreno u 25 ml etanola hidrogenovano je u prisustvu 306 mg 15% Pd/C u toku 4 h. Katalizator je uklonjen filtriranjem a rastvarač je uklonjen u vakuumu. Ostatak je rastvoren u hlorovodoničnoj kiselini i

dobijeni rastvor je sužen zamrzavanjem da bi se dobilo 481 mg (78%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (500 MHz, D,0): 8 0,95-1,1 (m, 2H), 1,15-1,9 (m, 16H), 2,2-2,3 (m, IH). 2,7-2,8 (t, 2H), 3,2-3,3 (m, 3H), 3,4-3,5 (m, IH), 3,75-3,85 (m, IH), 4,4-4,6 (m, 3H), 5,15 (m, IH), 7,5-7,6 (m, 2H), 7,8-7,9 (m, 2H), 8,6-8,7 (m, IH).

<13>C-NMR (125 MHz, CD 30): amidinski i karbonilni ugljenici: 8 170,6, 175,9, 179,5, i 183,5.

Primer30

H00C-C0-(R)Cha-Pic-Pab x HOAc

(i) Et00C-C0-(R)Cha-Pic-Pab(Z)

0,12 g etiloksalil hlorida dodano je smeši 0,42 g (0,77 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (videti Primer 25) i 0,21 g (1,5 mmol) K2C03u 10 ml CH3CN na sobnoj temperaturi. Posle 2 časa dodana je sledeća količina od 0,07 g (o,5 mmol) etiloksalil hlorida. Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen u vakuumu a ostatak je rastvoren u CH2C12i ispran vodom. Isparavanje i impulsna hromatografija (toluol/etil acetat 1:2, pa zatim CH2C12: metanol) dali su 0,21 g (42%) proizvoda.

(ii) H00C-C0-(R)Cha-Pic-Pab(Z)

0,21 g (0,32 mmol) Et00C-C0-(R)Cha-Pic-Pab(Z) rastvoreno je u 3 ml THF pa je dodano 0,17 g (4,2 mmol) LiOH rastvoreno u 3 ml vode. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći a onda sipana etil acetat/vodu. Faze su razdvojene i organska faza je ekstrahovana rastvorom KHC0 3. Vodena je faza okiseljena pomoću 0,5M HC1 (pH 1) i ekstrahovana ClKTl^ sušena na Na^O^ i isparena da bi se dobilo 80 mg proizvoda.

(iii) H00C-C0-(R)Cha-Pic-Pab x HOAc

H00C-C0-(R)Cha-Pic-Pab(2) je hidrogenovan na 5% Pd/C u EtOH. Katalizator je isfiltriran a rastvarač isparen. Ostatak je izlo-žen prečišćavanju RPLC-om da bi se dobilo nazivno jedinjenje.

<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d 6): 8 0,8-1,0 (m. 2H), 1.1-1,75 (m, 15H), 1,86-1,94 (m, IH), 2,13-2,2 (m, IH), 3,75-3,81 (ra, IH), 4,32, 4,44 (AB, 2H), 4,71-4,77 (m, IH), 4,98-5,02 (m, IH), 7,41 (d, 2H), 7,75 (d, 2H), 8,1-8,15 (m, IH), 8,22-8,27 (m, IH), 9,32 (široko s), 9,90 (široko s). Signal jednog od protona (3,25) deliraično je zaklonjen signalom rastvarača.

MS m/z 486 (M<+>+l)

Primer 31

HOOC-CIL^-CO- (R) Cha-Pic-Pab

(i) MeOOC-CH 2-C0-(R)Cha-Pi c-Pab(Z)

0,39 g (0,72 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (videti primer 25) i 0,9 g (0m8 mmol) monometilmalonata rastvoreno je u 40 ml CH2C12 pa je dodano 0,16 g (0,8 mmol) DCC. Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Nataložen DCU je uklonjen filtriranjem a filtrat je ispran 0,3M KHSO 4 i rastvorom KHC0 3 i sušen (Na 2 SO 4). Isparavanje rastvarača i potonja impulsna hromatografija uz korišćenje toluol/etil acetata (1/3) kao sredstva za ispiranje dalo je 0.25 g (58%) željenog proizvoda.

(ii) MeOOC-CH 2-CO-(R)Cha-Pic-Pab

90 mg (0,14 mmol) MeOOC-CH2-CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z) rastvoreno je u 10 ml etanola i hidrogenovano u prisustvu 5% Pd/C u toku 5 časova. Uklanjanje katalizatora filtriranjem i isparavanje rastva- rača dalo je 50 mg (70%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (300 MHz,CD^D): 80,85-1,1 (m, 2H), 1,1-1,9 (m, 16H), 2,35-2,45 (m, IH), 3,2-3,4 (m, 3H), 3,7 (s, 3H), 3,95-4,05 (m,

3H), 4,4-4,55 (m, 3H), 5,15-5,25 (m, IH), 7,4-7,55 (m, 2H), 7,7-7,85 (m, 2H).

<l3>C-NMR (75 MHz, CIHDD): amidinski i karbonilni ugljenici: 6 168,2, 168,7, 170,0, 172,4 i 174,6.

MS m/z 514 (M<+>+l)

(iii) HOOC-CH 2-CO-(R)Cha-Pic-Pab

Rastvoru 0,14 g (o,27 mmol) Me00C-CH2-C0-(R)Cha-Pic-Pab u 5 ml metanola dodano je 2 ml 0,5 M NaOH na sobnoj temperaturi. Nakon mešanja u toku 5 časova, dodana je voda i metanol je uklonjen u vakuumu. Vodena faza je sušena zamrzavanjem. Rastvorljiv materijal je ekstrahovan iz nerastvorljivih neorganskih soli apsolutnim etanolom. Preostala čvrsta materija nakon isparavanja etanola bila je suspendovana u vodi i 70 mg (52%) nazivnog jedinjenja izolovano je filtriranjem .

<1>H-NMR (500 MHz, DMSO-d s): 5 0,8-1,0 (m. 2H), 1.0-1,9 (m, 16H), 2,15-2,30 (m, IH), 2,58, 2,86 (AB, 2H), 3,8-3,95 (m, IH), 4,2-4,5 (m 2H), 4,7-4,85 (m, IH), 4,95-5,05 (m, IH), 7,40 (d, 2H), 7,77 (d, 2H), 8,2-8,3 (m, IH), 9,3-9,4 (m, IH), 9,90 (široko s, 3H). Signal jednog od protona (3,21) delimično je zaklonjen signalom rastvarača.

<13>C-NMR (73 MHz, DMSO-d 6): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 165,8, 168,8, 169,9, 172,2 i 172,4.

MS m/z 500 (M<+>+l)

Primer 32

Me00C-H2-C0-(R)Cha-Pic-Pab

Videti prethodni primer 31 (ii).

Primer 33

HgM-CO-CHg-CHg-(R)Cha-Pic-Pab

(i) H N-CO-CH -(R)Cha-PIc-Pab(Z)

2 2

Pokušano alkillranje 455 mg (0,83 mmol) H-(R)Cha-Pic-PaMZ) (videti Primer 25) sa 80 mg (0,86 mmol) hloracetamida u 3 ml acetonitrila u prisustvu 395 mg (2,86 mmol) kalijum karbonata delovanjem ultrazvukom na 40 C pokazalo se kao krajnje usporena reakcija. Čak ni dodavanje 230 mg (2,6 mmol) litijum bromida nije povećalo brzinu reakcije. Međutim, dodavanje litijum jodida i zagrevanje sa delovanjem ultrazvuka dalo je male količine proizvoda, a prema TLC. Dorada dodavanjem vode, ekstrahovanje etil acetat/toluolom, sušenje organske faze (MgSO ) i uklanjanje rastvarača u vakuumu dalo je ostatak koji je izložen impulsnoj hromatografiji, koristeći MeOH/CH2Cl2kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobilo 119 mg (247.) željenog proizvoda.

(ii) H N-C0-CH -CH -(R)Cha-Pic-Pab x 2 HC1

2 2 2

118 mg (0,2 mmol) H N-C0-CH-CH-(R)Cha-Pic-Pab(Z) rastvoreno u 10

2 2 2

ml 957. etanola bilo je hidrogenovano u prisustvu 143 mg 107. Pd/C u toku 2 časa. Smeša je razređena destilisanom vodom i hlorovodo-ničnom kiselinom i filtrirana kroz "hyflo" filtar. Sušenje zamrzavanjem dalo je 26 mg (247.) željenog proizvoda.

<1>H-NMR (300 MHz, CD.OD):S0,9-1,1 (m, 2H), 1.1-1,9 (m, 16H), 2,3 (d, IH), 3,4 (t, IH), 3,6 (AB-sistem, 2H), 3,8 (d, 2H), 4,35 (t IH), 4,5 (s, 2H), 5,2 (s, IH), 7,55 (d, 2H), 7,8 (d, 2H).

Primer 34

Boe-(R)Cha-Pic-Pab

10 mg (0,015 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (videti primer 25) rastvoreno u 5 ml etanola bilo je hidrogenovano u prisustvu 38 mg 10% Pd/C u toku 4 časa. Uklanjanje katalizatora filtriranjem i isparavanje rastvarača u vakuumu, praćeno rastvaranjem ostatka u vodi i sušenje zamrzavanjem, dalo je 7,6 mg (95%) proizvoda.

<1>H-NMR (300 MHz, CTK)D): 5 0,9-1,1 (m, 2H), 1.1-1,9 (m, 16H), 2,4 (d, IH), 3,25 (t, IH), 4,0 (d IH), 4,5 (AB-sistem, 2H), 5,25 (s, IH), 7,45 (d, 2H), 7,75 (d, 2H).

Primer35

Ac-(R)Cha-Pic-Pab x HCL

(i) Ac-(R)Cha-Pic-Pab(Z)

Acetil hlorid, 0,06 g (0,8 mmol) dodan je smeši 0,37 g (0,68 mmol) H-(R)Cha-Pic-PaMZ) (videti Primer 25) i 0,19 g (1,35 mmol) u 10 ml CH3CN na sobnoj temperaturi. Nakon mešanja sledećih 30 minuta na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen u vakuumu. Ostatak je rastvoren u CH2C12 i ispran vodom. Isparavanje i impulsna hromatograf! ja uz korišćenje stepenastog gradijenta CH2Cl2/MeOH 899,9/01, 99,8/02, 99,6/0,4, 00,2/0,8 I 98,4/1,6) dali su 0,24 g (60%) proizvoda.

(ii) Ac-(R)Cha-Pic-Pab x HCL

Ac-(R)Cha-Pic-Pab(Z) je hidrogenovan preko 5% Pd/C na atmosferskom pritisku. Nakon filtriranja katalizatora i isparavanja ras-tvarača,, sirov materijal je izložen prečišćavanju pomoću RPLC, ko-risteći CH3CN/0,1 M NH40Ac (35/65) kao sredstvo za ispiranje. Uklanjanje rastvarača i viška NH40Ac i zatim sušenje zamrzavanjem iz IM HC1 dalo je nazivno jedinjenje.

<1>H-NMR (300 MHz, CD OD): <5 0,85-1,1 (m, 2H), 1,15-20 (m, 19H), 2,35-2,47 (m, IH), 3,2-3,33 (m, IH), 3,95-4,05 (m, IH), 4,46, 4,57 (ABX. 2H), 5,16-5,22 (m, IH), 7,51 (d, 2H), 7,76 (d, 2H), 8,23 (m, IH). Signal jednog od protona bio je potpuno zaglušen signalom rastvarača.

<13>C-NMR (75 MHz, CIM3D): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 168,3, 172,5, 173,8, iVs.l:.

MS m/z 456 (M<+>+l)

Primer 36

Me-S02-(R)Cha-Pic-Pab x HC1

(i) Me-SO 2-(R)Cha-Pic-Pab(Z)

Rastvor 48 mg (0,42 mmol) metansulfonil hlorida u 0,5 ml metilen hlorida dodan je na 0 C mešanom rastvoru 209 mg (0,382 mmol) H-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (videti primer 25) i 0,11 ml (0,763 mmol) trietil amina u 5 ml metilen hlorida. Reagujuća smeša je ostavljena preko noći da dostigne sobnu temperaturu. Pranje vodom, sušenje (Na2S04) i isparivanje rastvarača u vakuumu dalo je ostatak koji je podvrgnut impulsnoj hromatografiji koristeći etil acetat/metanol (95/5) kao sredstvo za ispiranje da bi se dobilo 159 mg (67%) proizvoda.

(ii) Me-SO 2-(R)Cha-Pic-Pab x HC1

150 mg (0,24 mmol) Me-SO 2-(R)Cha-Pic-Pab(Z) rastvoreno u 5 ml 95% etanola i 1 ml vode hidrogenovano je 4 časa u prisustvu 5% Pd/C. Uklanjanje katalizatora filtriranjem, dodavanje 0,2 ml IM hlorovo-donične kiseline i isparavanje rastvarača u vakuumu dalo je ostatak koji je rastvoren u 2 ml vode i sušen zamrzavanjem da bi se dobilo 116 mg (86%) proizvoda.

<X>H-NMR (500 MHz, CD OD):80,90-1,10 (m, 2H), 1,15-1,85 (m, 15H), 1,90 (bd, IH), 2,30 (bd, IH), 2,85 (s, 3H), 3,35 (dt, IH), 3,90 (bd, IH), 4,45 (AB-sistem, 2H), 4,50-4,55 (m, IH), 5,13 (dd, IH), 7,50 (d, 2H), 7,75 (d, 2H).

<13>C-NMR (125 MHz, CT^OD): amidinski i karbonilni ugljenici:8166,8, 173,0, i 174,6.

Primer 37

H-<R)Cha-(R,S)betaPic-Pab x 2 HC1

(i) Boc-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab(Z)

EDC je dodano na -18 C mešanom rastvoru 1,0 g (2,6 mmol) Boc-(R)Cha-(R,S)betaPic-OH (videti Pripremanje polaznih materijala), 1,28 g (10,5 mmol) DMAP, 0,74 g (2,6 mmol) H-Pab-(Z) (videti Pripremanje polaznih materijala) u 35 ml DMF. Reagujuća smeša je ostavljena preko noći da dostigne sobnu temperaturu i potom je rastvarač uklonjen u vakuumu. Ostatak je rastvoren u CH2C12a organski sloj je ispiran uzastopno u 0,3M KHSO^, rastvoru K2C03i slanom rastvoru. Sušenje (NaaS04) i uklanjanje rastvarača dalo je talog koji je podvrgnut impulsnoj hromatografiji koristeći heptan: etil acetat sa 47. metanola kao sredstvo za ispiranje, da bi dao 0,74 g (447.) željenog proizvoda.

(ii) H-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab(Z)

0,68 g (1,05 mmol) Boe-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab(Z) rastvoreno je u etil acetatu zasićenom hlorovodoničnoim kiselinom (HCl(g)). Rastvor je mešan 1 čas na sobnoj temperaturi. Dodana je voda i smeša je olužena pomoću ^CO^. Vodena faza je ekstrahovana etil acetatom. Potom je organska faza isprana vodom i sušena (Na^O^ ). Isparavanjem se dobilo 0,5 g (877.) željenog proizvoda.

(iii) H-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab x 2 HC1

65 mg (0,19 mmol) H-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab(Z) rastvoreno je u 7 ml etanola i hidrogenovano 4 časa u prisustvu 57. Pd/C. Uklanjanje katalizatora filtriranjem, isparavanje rastvarača i sušenje zamrzavanjem iz IM HC1 i vode dalo je 41 mg (71%) proizvoda.

<1>H-NMR (300 MHz, D O, 2 diastereomera 4/5, i rotameri):S0,8-2,16 (m, ), 2,5-2,77 (m,3H), 3,13-3,43 (m,3H), 3.68-3,94 (m, IH), 4,18-4,41 (m,IH), 4,41-4,52 (m,3H), 7,46-7,57 (m,2H), 7,72-7,83 (m,2H).

Primer 38

H00C-CH2-CH2-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab x 2 HC1

(i) BnOOC-CH 2 -CH 2-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab(Z)

0,21 G (0,38 MMOL) H-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab(z) (videti primer 37) rastvoreno je u 2 ml etanola. Dodano je 0,68 g (0,42 mmol) benzil akrilata i smeša je mešana 5 dana. Isparavanje i impulsna hromatografija sa CH2C12 /MeOH (95/5) kao sredstvom za ispiranje dalo je 0,19 g (70%) željenog proizvoda.

(ii) HOOC-CH -CH -(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab x 2 HC1

2 2

170 mg (0,24 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab(Z) rastvoreno je u 10 ml etanola i hidrogenovano 4 časa u prisustvu 5% Pd/C. Uklanjanje katalizatora filtriranjem, isparavanje rastvarača i sušenje zamezavanjem iz IM HC1 i vode dalo je 103 mg (77%) proizvoda.

<1>H-NMR (300 MHz, D20, smeša 2 diastereomera 4/5, i rotameri):S0,92-2,03 (m, H), 2,51-2,78 (m, IH), 3,21-3,52 (m, IH), 3,88-4,01 (m, IH), 4,07-4,3 (m, 2H), 4,4-4,71 (m, 2H), 7,59 (d, 2H), 7,86 (d, 2H).

<13>C-NMR (300,13 MHz, D20, smeša 2 diastereomera 4/5, i rotameri): amidinski i karbonilni ugljenici: 3 167,0, 168,0, 168,1, 175,9, 176,0, 176,3, 176,4 i 178,2.

Primer 39

H00C-CH2-(R)Cha-Val-Pab x 2 HC1

(i) Boc-(R)Cha-Val-PaMZ)

1,77 g (9,2 mmol) EDC dodano je na -12 C smeši 3,41 g (9,2 mmol) Boc-(R)Cha-Val-OH (videti Pripremanje polaznih materijala), 2,61 g (9,2 mmol) H-Pab(Z) (videti Pripremanje polaznih materijala), i

4,5 g (36,8 mmol) DMPA u 50 ml DMF. Reagujuća smeša je ostavljena preko noći da dostigne sobnu temperaturui i posle dorade razređl-vanjem vodom ekstrahovana je toluolom, etrom i etil acetatom. Potonje sušenje (MgSO ) kombinovanih organskih ekstrakta, uklanjanje rastvarača u vakuumu i impulsna hromatograf i ja sa CH2Cl2/MeOH kao sredstvom za ispiranje, dalo je 2,77 g (47%) željenog proizvoda.

(ii) H-(R)Cha-Val-Pab(Z)

Hlorovodonik je produvavan kroz rastvor 2,77 g (4,4 mmol) Boc-(R)Cha-Val-Pab(Z) u 75 ml etil acetata. Posle 15 dodavan je rastvor natrijum karbonata do pH 10 i vodena faza je ekstrahovana etil acetatom. Sušenjem (kalijum karbonat) i uklanjanjem rastvara-ča u vakuumu dalo je 1,8 g (77) H-(R)Cha-Val-Pab(Z).

(iii) BnOOC-CH 2-(R)Cha-Val-Pab(Z)

Smeša 326 mg (0,61 mmol) H-(R)Cha-Val-Pab(Z), 105 ml (0,67 mmol) benzil bromacetata i 252 mg (1,83 mmol) kalijum karbonata u 2 ml acetonitrila obrađivana je ultrazvukom 2,5 h na 40 C, pa je smeša filtrirana i rastvarač uklonjen u vakuumu. Ostatak je prečišćen impulsnom hromatografijom koristeći metanol/metilen hlorid kao sredstvo za ispiranje. Proizvod je konačno kristalisan iz etil acetata da bi se dobilo 124 mg (30%) bezbojnih kristala.

(iv) HOOC-CH 2-(R)Cha-Val-Pab x 2 HC1

124 mg (0,18 mmol) BnOOC-CH,,-(R)Cha-Val-Pab(Z) u 20 ml etanola hidrogenizovano je 2 časa u prisustvu 25 mg 10% Pd/C. Dodano je 10 ml THF i hidrogenacija je nastavljena još 2 ćasa na 50 C. Smeša je filtrirana kroz "hyflo"-filtar a filtarski kolač je ispran razblaženom hlorovodoničnom kiselinom. Organski rastvarači su uklonjeni iz kombinovanih filtrata u vakuumu. Sušenje zamrzavanjem preostalog rastvora dalo je 55 mg (50%) željenog jedinjenja.

<1>H-NMR (500 MHz, DO):80,75-1,9 (m, 12H), 1,5-1,9 (m, 7H), 2,0-2,15 (bs, IH), 3,45 (AB-sistem, 2H), 4,1 (m, 2H), 4,5 (m, 2H),

7,7 (s, 2H), 8,9 (s, IH).

Primer 40

HOOC-CHg-CH^tmCha-Val-Pabx 2HC1

(i) H-(R)Cha-(R,S)Val-Pab(Z)

Nazivno jedinjenje je pripremljeno vezivanjem Boe-(R)Cha-Val-OH sa H-Pab(Z), koristeći pivaloilno vezivanje kako je opisano za Boc-(R)Cha-Pic-OMe (videti Pripremanje polaznih materijala). Došlo je do potpune epimerizacije valina da bi se dobilo Boc-(R)Cha-(R.S)Val-Pab(Z). Boe zaštitna grupa je uklonjena na isti način kako je opisano za Boc-(R)Cha-Val-Pab(Z) (videti Primer 39) da bi se dobilo nazivno jedinjenje.

(ii) BnOOC-CH -CH -(R)Cha-Val-Pab(Z)

2 2

Rastvor 1,007 g (1,9 mmol) H-(R)Cha-(R,S)Val-Pab(Z) i 308 mg (1,9 mmol) benzil akrilata u 3 ml etanola držan je preko noći na 40 C. Rastvarač je uklonjen u vakuumu a ostatak je prečišćen impulsnom hromatografijom koristeći metanol/metilen hlorid (10/90) kao sredstvo za ispiranje da bi se dobilo 1,086 g (827.) nazivnog jedinjenja.

(iii) HOOC-CH -CH -(R)Cha-Val-Pab x 2 HC1

2 2

1,086 g (1,6 mmol) BnOOC-CH"2-CH2-(R)Cha-Val-Pab(Z) hidrogenovano je 2 časa u 25 ml THF i 14 ml =,5 M hlorovodonične kiseline u prisustvu 223 mg 10% Pd/C. Uklanjanje katalizatora filtriranjem kroz celit i uklanjanjem THF u vakuumu, a zatim sušenje zamrzavanjem preostalog vodenog rastvora dalo je ostatak od koga je približno 300 mg podvrgnuto HPLC koristeći 25% acetonitril u 0,1 M amonijum acetatnom puferu kao sredstvo za ispiranje. Izolovane su dve glav-ne frakcije od kojih je druga po redu sadržala nazivno jedinjenje. Izolovano je 67 mg nazivnog jedinjenja u vidu hidrohlorida.

<1>H-NMR (500 MHz, DO): 5 1,0-1,15 (m, 12H), 1,2-1,4 (m, 7H),

1,65-1,9 (m, 7H), 2,15-2,25 (m, IH), 2,85 (t, 2H), 3,15-3,2 (m, IH), 3,3-3,35 (m, (bd, IH), 4,15-4,2 (m, IH), 4,25 (d, IH), 4,55-4,65 (AB-sistem, 2H), 4,50-7,65 (d, 2H), 7,85 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, D20): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 167,0, 169,8, 173,96, i 174,04.

Primer 41

H-(R)Hoc-Aze-Pabx2HC1

(i) Boc-(R)Hoc-Aze-PaMZ)

Pripremljeno na isti način kako je opisano za Boe-(R)Cha-Pic-Pab(Z) (videti Primer 25) zamenom Boc-(R)Cha-Pic-OH sa Boc-(R)Hoc-Aze-OH (videti Pripremanje polaznih materijala). Sirov proizvod je podvrgnut impulsnoj hromatografiji (toluol/EtOAc 1/6) da bi se dobilo 0,32 g (377,) željenog proizvoda.

(ii) H-(R)Hoc-Aze-Pab(Z)

Boc-(R)Hoc-Aze-PaMZ) je obrađen na isti način kako je opisano za Boc-(R)Cha-Pic-PaMZ) u primeru 25 da bi se dobilo 0,23 g (887.) nazivnog jedinjenja.

(iii) H-(R)Hoc-Aze-Pab x 2 HC1

20 mg (0,037 mmol) H-(R)Hoc-Aze-Pab(Z) rastvoreno je u 3 ml etanola i hidrogenovano 4 časa na atmosferskom pritisku u prisustvu 57. Pd/C. Uklanjanje katalizatora filtriranjem, isparavanje rastva-rača i sušenje zamrzavanjem iz IM HC1 dalo je 11 mg (63%) proizvoda.

<1>H-NMR (300,13 MHz, D20, smeša dva rotamera 3:1): glavni rotamer: 5 0,9-2,1 (m, 15H), 2,4-2,6 (m, IH), 2,7-3,0 (m, IH), 4,1-4,3 (m,

IH), 4,35- 4,56 (m, IH), 4,65 (s, 2H), 5,0-5,11 (m, IH), 7,62 (d, 2H), 7,9 (d, 2H). Signal jednog od protona potpuno je zaglušen

H-O-D signalom.

Primer 42

H00C-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pabx 2TFA

(i) BnOOC-CH -CH -(R)Hoc-Aze-Pab(Z)

2 2

0,067 g (0,41 mmol) benzilakrilata dodano je u rastvor 0,2 g (0,37 mmol) H-(R)Hoc-Aze-Pab(Z) (videti Primer 41) u 2 ml etanola (95%) na sobnoj temperaturi. Reagujuća smeša je ostavljena na sobnoj temperaturi sledećih 5 dana. Rastvarač je uklonjen u vakuumi i ostatak je prečišćen impulsnom hromatografijomm (CH"2Cl2/MeOH, 96/ 4) da bi se dobilo 0,16 g (62%) željenog proizvoda.

(ii) H00C-CH -CH -(R)Hoc-Aze-Pab x 2 TFA

2 2

160 mg (0,23 mmol) Bn00C-CH2-CH2-(R)Hoc-Aze-Pab(Z) rastvoreno je u 10 ml etanola i podvrgnuto hidrogenaciji na atmosferskom pritisku u prisustvu 5% Pd/C, u trajanju od 3 časa. Uklanjanje katalizatora filtriranjem, isparavanje rastvarača i sušenje zamrzavanjem iz vode i TFA dali su 120 mg (87%) proizvoda.

<1>H-NMR (300,13 MHz, D20, dva rotamera 3:1): glavni rotamer: 6 0,9-1,9 (m, 13H), 1,94-2,16 (m, 2H), 2,38-2,55 (m, IH), 2,7-2,97 (m, 3H), 3,2-3,44 (m, 2H), 4,16 (m, IH), 4,35- 4,58 (m, 2H), 4,65 (s, 2H), 5,0-5,12 (m, IH), 7,63 (d, 2H), 7,87 (d, 2H).

<13>C-NMR (300,13 MHz, D20): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 167,3, 168,7, 172,5, i 176,6.

Primer 43

H00C-CH2-CR,S)CH(C00H)-(R)Hoc-Pro-Pab x 2 HC1

(i) Boc-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)

Priprema se od Boc-(R)Hoc-Pro-OH (videti Pripremanje polaznih materijala) na isti način kako je opisano za Boc-(R)cHA-Pic-Pab(Z) u Primeru 25. Impulsna hromatografija uz korišćenje etil acetata kao sredstva za ispiranje dala je 0,886 g (58%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl 3): 5 0,7-0,95 (m, 2H), 0,95-2,1 (m, 27H (zbog toga 1,2 (s, 9H)), 2.1-2,4 (m, IH), 3,3-3,5 (m, IH), 3,65-3,95 (m, IH), 4,0-4,2 (m, IH), 4,2-4,45 (m, 2H), 4,45-4,6 (d, IH), 5,15 (vidljivo bs, 2H), 5,2-5,3 (d, IH), 7,1-7,4 (m, 7H), 7,65 (m, IH), 7,7-7,8 (d, 2H), 9,4 (bs, IH).

<13>C-NMR (75 MHz, CDC13): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 156,3, 164,6, 168,1, 171,4, i 172,4.

(ii) H-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)

40 ml etil acetat zasićenog hlorovodonikom dodano je u 0,82 g (1,166 mmol) Boc-(R)Hoc-Pro-Pab(Z) na 0 C. Ostavljeno je da se temperatura podigne do sobne temperature. Reakcija nije bila goto-va posle 1,5 časa, pa je kroz reagujuću smešu produvavan hlorovodonik u trajanju od 5 minuta. Rastvarač je isparen i dodan je etil acetat i zasićen natrijum karbonat, pa su faze razdvojene. Organska faza je isprana slanim rastvorom i sušena (Na^O^) a rastvarač je isparen u vakuumu da bi se dobilo nazivno jedinjenje u skoro merljivoj količini.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl^: 5 0,7-0,95 (m, 2H), 0,95-2,4 (m, 17H), 3,3-3,55 (m, 2H), 3,55-3,7 (m, IH), 4,25-4,45 (m, 2H), 4,5-4,6 (m, IH), 5,15 (s, 2H), 7,15-7,35 (m, 5H), 7,35-7,45 (m, 2H), 7,6-7,7 (m, IH), 7,7-7,85 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, CDCl^): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 156,3, 164,6, 168,1, 171,4, i 172,4.

(iii) Bn00C-CH2-(R,S)CH(C00Bn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z)

U 0,15 g (0,5 mmol) benzil akrilata u 1,5 ml EtOH (99%) dodano je o,273 g (0,498 mmol) H-(R)HOc-Pab(Z) i smeša je mešana 10 dana na sobnoj temperaturi- Rastvarač je uklonjen u vakuumu i ostatak je podvrgnut impulsnoj hromatograf iji, koristeći etil acetat kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobilo 0,103 g (25%) Bn00C-CH2-(R, S) CH (COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z).

VNMR (300 MHz, CDC13):60,75-2,05 U, 18H), 2,3-2,45 (m, IH), 2,45-2,8 (m, 3H), 3,15-3,45 (m, 32H), 3,5-3,65 (m, IH), 4,3-4,5 (m, 2H), 4,55-4,7 (m, IH), 4,8 (s, IH), 4,9-5, Km, 3H), 5,2 (s, 2H), 7,1-7,2 (m, IH), 7,2-7,4 (m, 13H), 7,4-7,45(d, 2H), 7,6-7,8 (m, 3H).

(iv) HOOC-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Hoc-Pro-Pab x 2 HC1

103 mg (0,122 mmol) BnOOC-CR"2-(R,S)CH(C00Bn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z) rastvorenog u 4 ml etanola (99,5%) i 0,3 ml hloroforma hidrogenovano je 2 ćasa u prisustvu 111 mg 5% Pd/C. Uklanjanje katalizatora filtriranjem i isparavanje rastvarača praćeno rastvaranjem u vodi i sušenjem zamrzavanjem pokazalo je da hidrogenacija nije potpuno dovršena. Hidrogenizacija je nastavljena u prisustvu etanola, 1 N HC1 i 5% Pd/C u toku sledećih 5 časova.

Uklanjanje katalizatora filtriranjem i isparavanje rastvarača a zatim rastvaranje u vodi i sušenje zamrzavanjem dalo je nazivno jedinjenje.

<1>H-NMR (500 MHz, CTK)D, smeša dva diastereomera):S0,8-1,0 (m, 2H), 1,1-1,4 (m, 6H), 1,6-1,8 (m, 5H), 1,9-2,15 (m, 5H), 2,25-2,35 (m, IH), 2,9-3,2 (m, 2H), 3,5-3,9 (2m, ukupno IH), 4,15-4,4 (2m, ukupno IH), 4,4- 4,6 (m, 4H), 7,5-7,6 (m, 2H), 7,7-7,85 (m, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, CDCl^: amidinski i karbonilni ugljenici: 6 167,9, 168,2, 168,3, 172,8, 173,6, 174,3 i 174,4. Signali dvaju diastereomera se delimično preklapaju.

Primer44

H00C-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab x 2 HCL

(i) Boc-(R)Hoc-Pic-Pab(Z)

Pripremljen od Boc-(R)Hoc-Pic-0H (videti Pripremanje polaznih materijala) i H-Pab(Z) (videti Pripremanje polaznih materijala= na isti način kako je opisano za Boc-(R)Cha.-Pic-Pab(Z) (videti Primer 25). Impulsna hromatografija, koristeći etil acetat kao sredstvo za ispiranje, dala je 1,3 g (78%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (300 MHz, CĐClJ:50,75-0,95 (m, 2H), 0,95-2,0 (m, 31H (od toga 1,3 (s, 9H)), 2,4-2,5 (m, IH), 3,0-3,1 (m, IH), 3,8 (m, IH), 4,2-4,45 (m, 2H), 4,45- 4,55 (m, 2H), 5,15 (vidljivo bs, 3H), 5,25-5,3 (m, IH), 7,0 (bs, IH), 7,15-7,5 (m, 7H), 7,7-7,85 (m, 2H), 9,45 (bs, IH).

<13>C-NMR (75 MHz, CDClg): amidinski i karbonilni ugljenici: 6 156,6, 164,7, 168,1, 170,0, i 173,0.

(ii) H-(R)Hoc-Pic-Pab)Z)

100 ml etil acetata zasićenih hlorovodonikom dodano je u 1,3 g (1,96 mmol) Boc-(R)Hoc-Pic-Pab(z) na 0 C. Pušteno je da se temperatura podigne do sobne tempeerature. Rastvarač je isparen i dodan je zasićen natrijum karbonat pa su faze razdvojene. Organska faza je isprana slanim rastvorom i sušena (Na^O^) a rastvarač je isparen u vakuumu da bi se dobilo 0,85 g (77,5%) proizvoda.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCIg): 8 0,75-0,95 (m, 2H), 1,25-2,3 (m, 25H), 3,0-3,15 (m, IH), 3,6-3,75 (m, 2H), 4,25-4,4 (m, 2H), 5,15 (vidljivo bs, 3H), 7,05-7,2 (d, 2H), 7,2-7,35 (m, 4H), 7,35-7,4 (m, IH), 7,6-7,8 (m, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, CDC13): amidinski i karbonilni ugljenici:S164,5, 167,9, 170,8, i 175,7.

(iii) BnOOC-CH 2-)R)Hoc-Pic-Pab(Z)

0,171 g (0,748 mmol) benzil bromacetata dodano je u smešu 0,4 g (0,712 mmmol) H-(R)Hoc-Pic-Pab(Z) i 0,217 g (1,57 mmol) K 2 C0 3u 7 ml acetonitrila. Smeša je grejana do 60 C u uljnom kupatilu u toku 1 časa. Rastvarač je uklonjen i dodani su etil acetat i voda. Faze su razdvojene i organska faza je isprana slanim ratsvorom i sušena (Na 2 SO 4). Isparavanje u vakuumu dalo je 0,626 g ostatka koji je izložen impulsnoj hromatografiji, koristeći etil acetat kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobila 2 proizvoda. Prvo jedinjenje izdvojeno iz stuba bilo je (BnOOC-CH^)2(R)Hoc-Pic- Pab(Z) (0,28 g) a drugo po redu izdvojeno jedinjenje bilo je nazivno jedinjenje (0,27 g).

BnOOC-CH 2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z):

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl 3): 5 0,7-0,95 (m, 2H), 1,0-1,75 (m, 18H). 2,3-2,5 (m, 1 ili 2H)), 2,9-3,05 (m. IH), 3,2-3,31 (m, IH), 3,35-3,5(m, 2H), 3,6-3,7 (m, IH), 4,35, 4,55 (ABX sistem, 2H), 5,15 (vidljivo bs, 3H), 5,25-5,3 (m, IH), 7,1-7,45 (m, 12H), 7,7-7,8 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, CDC13): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 164,5, 167,9, 170,5, 173,4, i 175,0.

(iv) H00C-CH 2-(R)Hoc-Pic-Pac x 2 HC1

259 mg (0,365 mmol) BnO0C-CH2-(R)Hoc-Pic-Pab(Z) tastvoreno u 7,8 ml etanola (99,5%) i 1,2 ml horovodonika (IN) hidrogenovano je u prisustvu 280 mg 5% Pd/C u toku 4 h. Uklanjanje katalizatora filtriranjem i isparavanje rastvarača, praćeno rastvaranjem u vodi i sušenjem zamrzavanjem, dalo je 170 mg (83%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCIg): 5 0,4-1,85 (m, 20H), 1,85-2,2 (m, IH), 2,9-3,2 (m, IH), 3,4-3,9 (m, 3H), 4,05-4,3 (m, 2H), 4,3-5,05 (m, 2H), 7,1-7,4 (m, 2H), 7,4-7,7 (m, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, CDC13): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 167,8, 168,6, 169,6, i 172,3.

Primer 45

(H00C-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab x 2 HC1

(i) (HOOC-CH ) -(R)Hoc-Pic-Pab x 2 HC1

2 2

Nazivno jedinjenje je dobijeno alkialcijom H-(R)Hoc-Pic-Pab(Z) kako je napred opisano u primeru 44.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl ):80,7-0,95 (m, 2H), 0,95-1,95 (m, 18H) 2,35-2,5 (m, IH)), 2,9-3,05 (m, IH), 3,2-3,31 (m, IH), 3,5- 3,85 (m, 6H), 4,35-4,55 (m, 2H), 4,9 (2s, 2H), 5,2 (s, 2H), 5,25-5,35 (m, IH), 7,1-7,45 (m, 16H), 7,5-7,65 (ra, IH), 7,7-7,85 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, CDC13): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 164,7, 167,9, 170,5, 172,0, i 172,4.

(ii) (HOOC-CH ) -(R)Hoc-Pic-Pab x 2 HC1

2 2

153 mg (0,178 mmol) (Bn00C-CH2)2~(R)Hoc-Pic-Pab(Z) rastvorenog u 4.5 ml etanola (99,5%) i 0,5 ml hlorovodonika (1 N) hidrogenovano je u prisustvu 150 mg 5% Pd/C. Uklanjanje katalizatora filtriranjem i isparavanje rastvarača, praćeno rastvaranjem u vodi i sušenjem zamrzavanjem, dalo je 109 mg (99%)

(H00C-CH2)2-(R)Hoc-Pic-Pab dihidrohlorida. Ovaj sirov materijal (čistoće 80%) podvrgnut je prečišćavanju pomoću RPLC koristeći OHZN /0,1 M NH4OAc kao sredstvo za ispiranje. Uklanjanje rastva-rača i viška NH"40Ac, praćeno sušenjem zamrzavanjem iz 1 M HC1, dalo je nazivno jedinjenje.

XH-NMR (500 MHz, D20, smeša dva rotamera): glavni rotamer 5: 0,95-2,15 (m, 20H), 2,25-2,35 )m, IH), 3,45-3,55 (m, IH), 3,95-4,25 (m, 5H), 4,6-4,65 (m, 2H), 4,92-5,01 (m, IH), 5,15-5,20 (m, IH), 7,58-7,63 (d, 2H), 7,84-7,89) (d, 2H).

Izdvojeni signali koji potiču od manjeg rotamera javljaju se kod:

5 0,7-0,85 (m), 2,35-3,45 (m), 3,05-3,15 (m), 4,47-4,55 (m), 4,55-4.6 (m), 4,65-4,7 (m), 7,63-7,67 (d), 7,89-7,95 (D).

<13>C-NMR (75 MHz, CDCl 3): amidinski i karbonilni ugljenici: S 168,20, 169,70, 170,20, i 172,71.

Primer 46

H00C-CH2-CR)Pro-(3-(S)Ph)-Pro-Pab x 2HC1

(i) Boe-(R)Pro-(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)

Rastvoru 570 mg (1,5 mmol) Boc-(R)Pro-(3-(S)Ph)-Pro-OH (videti Pripremanje polaznih materijala), 425 mg (1,5 mmol) H-Pab (Z)

(videti Pripremanje polaznih materijala) i 733 mg (6 mmol) DMAP u 25 ml CH 3CN /DMF (1,5/1) dodano je 310 mg (1,62 mmol) EDC i smesa je mešana 23 časa na sobnoj temperaturi. Najveći deo rastvarača je ispario i ostatku je dodano 50 ml vode. Vodena faza je ekstrahovana pomoću 1 x 75 i 2 x 50 ml EtOAc. Kombinovana organska faza je isprana u 1 x 20 + 1 x 10 ml KHSO 4 , 1 x 15 ml NaCO 3(vod.), 3 x 15 ml vode, 1 x 15 ml slanog rastvora i sušena (MgSO 4). Filtriranje i isparavanje rastvarača dalo je 670 mg ulja koje je prečišćeno impulsnom hromatografijom koristeći EtOAc kao sredstvo za ispiranje, što je dalo 529 mg (55%) nazivnog jedinjenja.

<X>H-NMR (300 MHz, CDC13): 6 1,26 (s, 9H), 1,53-1,88 (m, 3H) 2,1-2,31 (m, 3H), 2,52 (q, IH), 3,58-3,77 (m, 4H), 4,31 (d, IH), 4,35 i 4,47 (ABX-sistem, 2H), 4,65 (dd, IH), 5,19 (s, 2H), 7,1-7,37 (m, 10H), 7,42 (d, 2H), 7,81 (d, 2H), 8,0 (t, 1H(NH)).

<13>C-NMR (75 MHz, CDC13): amidinski i karbonilni ugljenici: 6 154,6, 164,6, 168,1, 171,1, i 171,3.

(ii) H-(R)Pro-(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)

529 mg (0,81 mmol) Boc-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z) rastvoreno je u 15 ml EtOAc/Hcl (g, zasićeno) na sobnoj temperaturi mešano 3 časa. Rastvarač je isparen a ostatak je rastvoren u 70 ml CH Cl . 2 2 Organska faza je isprana u 1 x 10 ml 2 M NaOH, 1 x 10 ml vode, 1 x 10 ml slanog rastvora i sušena (MgSO^). Filtriranje i isparavanje rastvarača dalo je 403 mg (90%) nazivnog jedinjenja u vidu belog praška.

1H-NMR (300 MHz, CDClg): 5 1,44-1,57 (m, IH), 1,62-1,86 (m, 2H) 1,96- 2,35 (m, 3H), 2,45 (q, IH), 3,03-3,35 (m, 4H), 3,83 (bd, IH), 4,25- 4,45 (m, 2H), 4,53 (m, IH), 5,19 (s, 2H), 7,16-7,37 (m, 10H), 7,42 (d, 2H), 7,66 (t, IH, (NH)), 7,77 (d, 2H).

13C-NMR . (75 MHz, OĐCl^: amidinski i karbonilni ugljenici: 5 164.4, 167,9, 171,1, i 173,0.

(iii) BnOOC-CH 2-(R)Pro-(3-(S)Ph)-Pro-Pab)Z)

Smeša 200 mg (0,36 mmol) H-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(2), 105 mg (0,' 46 mmol) Br-CH 2 -COOBn i 125 mg (0,90 mmol) K 2 CO 3 u 10 ml CH 2CN zagrevana je do 50 C jedan čas i 30 minuta. Rastvarač je isparen a ostatak je rastvoren u 70 ml EtOAc. Organska faza je isprana vodom (10 ml) i sušena (MgSO 4). Filtriranje i isparavanje rastvarača da-lo je 260 mg ulja. Sirov materijal je prečišćene impulsnom hromatografijom koristeći stepenasti gradijent CH2Cl2/MeOH(NH -zasiće-no) (95/5 pa zatim 9/1), da bi se dobilo 182 mg (72%) nazivnog jedinjenja u vidu bele čvrste materije.

H-NMR (300 MHz, CDC^): 5 1,43-1,82 (m, 3H), 1,96-2,13 (m, IH) 2,14-2,22 (m, IH), 2,26-2,13 (m, 2H), 3,03-3,14 (m, 2H), 3,24-3,51 (m, 4H), 3,83 (d, IH), 4,29- 4,46 (ABX-sistem centriran kod 4,37, 2H), 4,58 (dd, IH), 4,97-5,1 (AB-sistem centriran kod 5,03, 2H), 5,19 (s, 2H), 7,16-7,38 (m, 15H), 7,43 (d, 2H), 7,5-7,8 (m, 3H, jedan NH).

<13>C-NMR (75 MHz, CDC13): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 164.5, 167,9, 171,15, 171,2 i 172,7.

(iv) H00C-CH2-(R)Pro-(3-(S)Ph)-Pro-Pab x 2 HC1

0,18 g (0,26 mmol) Bn-OOC-CH2~(R)Pr0(3-(S)Ph)-Pro-Pab (Z) pomešano je sa 0,075 g 5% Pd/C, 1,0 ml rastvora IN HC1, 1 ml vode i 10 ml

etanola, pa je smeša hidrogenovana na atmosferskom pritisku jedan čas. Filtriranje katalizatora kroz "hyflo"-filtar, isparavanje rastvarača, potom dvostruko sušenje zamrzavanjem iz vode, dalo je 129 mg sirovog proizvoda. Sirov proizvod je prečišćen RPLC-om, koristeći stepenast gradijent NH^OAc/CR^CN 4/1 pa 3/1. Isparavanje pa sušenje zamrzavanjem iz vode i rastvora IN HC1, dalo je 70 mg (50%) čistog proizvoda.

<1>H-NMR (300 MHz, D2O): 5 1,42-1,60 (m, IH), 1,65-1,83 (m, IH), 1,83-1,98 (m, IH), 2,03-2,20 (m, 2H), 2,63 (t, 2H), 3,28-3,40 (m, IH), 3,55-3,78 (m, 2H), 3,81-3,96 (AB-sistem centriran kod 5 3,88, 2H), 4,06- 4,19 (m, IH), 4,37-4,61 (AB-sistem centriran kod 5 4,49, 2H), 4,48 (dd, , IH), 4,70 (d, IH), 7,35-7,58 (m, 7H), 7,74 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, CDC13): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 167,02, 167,2, 169,3, i 174,4.

Primer 47

H00C-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab x 2 HC1

(i) BnOOC-CH 2 -CH 2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)

Rastvoru 190 mg (0,34 mmol) H-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z) (videti primer 46) u 7 ml EtOH (99%) dodano je 114 g (0,79 mmol) benzil akrilata i reagujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 časa. Isparavanje rastvarača praćeno impulsnom hromatografijom, koristeći stepenasti gradijentCH2Cl2/MeOH(NH3-zasićen)(95/5 pa 9/1), dalo je 202 mg (83%) nazivnog jedinjenja.

<X>H-NMR (300 MHz, CDC^):81,5-1,71 (m, 2H), 1,74-1,9 (m, IH), 1,9-2,05 (m, IH), 2,2-2,64 (m, 5H), 2,69-2,82 (m, 2H), 2,84-2,96

(m, IH), 3,18-3,48 (m, 4H), 4,28-4,44 (m, 2H), 4,61 (m, IH), • 4,48-5,08 (AB-sistem centriran kod 5,03, 2H), 5,19 (s, 2H), 7,15-7,37 (m, 15H), 7,44 (d, 2H), 7,75-7,85 (m, 3H, jedno 0H).

<13>C-NMR (75 MHz, CDCl ): amidinski i karbonilni ugljenici: 6 164,6, 168,0, 171,2, 172,5 i 172,9.

(ii) HOOC-CH-CH ~(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab x 2 HC1

2 2

0,20 g (0,28 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z) pome-šano je sa 0,075 g 5% Pd/C, 1 ml vode i 10 ml etanola i smeša je hidrogenovana na atmosferskom pritisku u toku jednog časa. Filtriranje katalzatora kroz "hyflo"-filtar, isparavanje rastvarača, a potom sušenje smrzavanjem dva puta iz vode, dalo je 127 mg (79%) nazivnog jedinjenja.

<X>H-NMR (300 MHz, D20): 5 1,44 (m, IH), 1,65-1,9 (m, 2H), 2,0-2,2 (m, 2H), 2,62 (q, 2H), 2,83 (t, 2H), 3,27-3,4 (m, IH), 3,4-3,8 (m, 4H), 4,0- 4,15 (m, IH), 4,35-4,6 (m, 3H), 4,68 (d, IH), 7,35-7,6 (m, 7H), 7,77 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, CDC13): amidinski i karbonilni ugljenici:S166,2, 167,1, 174,1 i 174,2.

Primer 48

HOOC-CH -CH-CR)Tic-Pro-Pabx 2HC1

Ct Ci

(i) Boc-(R)Tic-Pro-Pab(Z)

Pripremljeno na isti način kako je opisano za Boc-(R)Cha-Plc-Pab(Z) (videti Primer 25) koristeći Boc-(R)Tic-Pro-0H (videti Pripremanje polaznih materijala) umesto Boc-(R)Cha-Pic-OH. Impulsna hromatograf ija, uz korišćenje heptan/EtOAc (4/1) pa EtOAc kao sredstava za ispiranje, dala je 425 mg (37%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (500 MHz, CDCl ): 6 1,35 (m, IH), 1,95-2,15 (m, 3H), 2,4 (m, IH), 2,8 (m, IH), 3,3 (m, IH), 3,55 (m, 2H), 4,25-4,4 (dva m, 2H), 4,55-4,7 (dva m, 2H), 7,15-7,5 (m, 10H), 7,85 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, CDC13): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 164,6, 171,5 i 171,6. (dva se maksimuma verovatno preklapaju)

(ii) H-(R)Tic-Pro-PaMZ)

Boc-(R)Tic-Pro-Pab(Z) (379 mg, 0,59 mmol) rastvoreno je u EtOAc zasićenom sa HC18g) i mešano na sobnoj temperaturi. Isparivanjem rastvarača dobijeno je 251 mg (79%) nazivnog jedinjenja u vidu belog praska.

<1>H-NMR (500 MHz, CDCl 3): 8 1,65-2,15 (dva m, 7H), 2,45 (m, IH), 2,75 (m, IH), 2,9 (m,lH), 3,0 (m, IH), 3,25 (m, IH), 3,55 (m, IH), 3,85 (m, IH), 4,35-4,55 (m, 2H), 4,75 (m, IH), 4,9 (s, IH), 5,25 (s, 2H), 6,8-7,45 (nekoliko m, 8H), 7,5 i 7,85 (dva d, 4H).

1 *3C-NMR (75 MHz, CDC13): amidinski i karbonilni ugljenici:8164,5, 171,3 i 172,7. (dva se maksimuma verovatno preklapaju)

(iii) BnOOC-CH 2 -CH 2-(R)Tic-Pro-Pab(Z)

H-(R)Tic-Pro-Pab(Z) (140 mg, 0,26 mmol) obrađeno je benzil akrila-tom (63 mg, 0,39 mmol) u EtOH (1,3 ml) na 20 C u toku 48 časova. Isparavanje rastvarača i impulsna hromatografija, uz korišćenje 50% EtOAc/heptana a potom 10% MeOH/EtOAc kao sredstva za ispira, nje, dalo je 133 mg (73%) željenog proizvoda kao bele čvrste materije.

<1>H-NMR (500 MHz, CDCl^: 5 1,75-2,0 (dva m, 4H), 2,25 (m, IH), 1,4-1,65 (m, 3H), 2,7-2,95 (dva m, 4H), 3,05-3,2 (m, 2H), 3,9 (m. IH), 4,45 (m, 2H), 4,65 (m, IH), 5,1 (dva d, 2H), 5,25 (s, 2H), 6,85-7,45 (m, 12H), 7,5 i 7,9 (dva d, 4H).

<13>C-NMR (75,0 MHz, CDCl^): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 171,5, 171,9 i 172,1. (dva se maksimuma verovatno preklapaju)

(iv) HOOC-CH -CH -(R)Tic-Pro-Pab x 2 HC1

2 2

Bn02C-CHa-CH2-(R)Tic-Pro-Pab(Z) (125 mg, 0,17 mmol) hidrogenovano je preko 5% Pd/C koristeći EtOH/HCl kao rastvarač. Filtriranjers katalizatora i sušenjem zamrzavanjem dobilo se 73 mg (77%) nazivnog jedinjenja u vidu belog praška.

<1>H-NMR (500 MHz, D20): 5 2,1-2,35 (dva m, 3H), 2,6 (m, IH), 2,95-'3,1 (m, 2H), 3,25-3,5 (dva m, 2H), 3,65 (m, 3H), 4,65 (s, 2H), 4,75 (m, IH), 5,85 (s, m), 7,15-7,6 (tri m, 4H), 7,6 i 7,85 (dva d, 4H). -

<13>C-NMR (75 MHz, CDC13): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 166,9, 167,1 i 174,3. (dva se maksimuma verovatno preklapaju)

Primer 49

HOOC-OL^-CH^tlOCgl-Aze-Pig x 2 HC1

(i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2

Smeši 0,623 g (1,83 mmol) Boc-(R)Cgl-Aze-0H (videti Pripremanje polaznih materijala), 0,816 g (1,92 mmol) H-Pig(Z)2(videti Pripremanje polaznih materijala) i 0,89 g (7,3 mmol) DMAP u 10 ml dihlormetana dodano je 0,386 g (1,92 mmol) EDC i smeša je mešana preko noći. Smeša je razblažena i isprana u 0,3 M KHSO 4 i jednom u slanom rastvoru. Organski je sloj sušen (Na 2 SO 4), filtriran i isparen da bi dao 1,4 g sirovog proizvoda. Prečišćavanje impulsnom hromatografijom, koristeći etil acetat kao sredstvo za ispiranje, dalo je 0,3 g (22%) čistog proizvoda.

(ii) H-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2

0,3 g (0,4 mmol) Boc-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2 pomešano je sa 10 ml dihlormetana i 2,5 ml trifluorsirćetne kiseline. Smeša je mešana jedan i po čas. Posle isparavanja rastvarača ostatak je rastvoren u dihlormetanu dva puta ispran rastvorom 0,2 M NaOH. Kombinovani vodeni slojevi su još jednom ekstrahovani dihlormetanom. Kombin-+ van organski sloj je sušen (Na^O^), filtriran i isparen da bi se dobilo 0,24 g ()3%) proizvoda.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl , 339K): S 0,9-1,9 (m, 15H), 1,94 (bd, IH), 2,37-2,52 (m, IH), 2,65-2,8 (m, IH), 2,9-3,8 (m, 3H), 3,20 (t, 2H), 4,05-4,28 (m, 4H), 4,86 (dd, IH), 5,16 (s, 4H), 7,2-7,42 (m,

10H), 7,98 (bs, NH).

(iii) Bn00C-CH2-CH2-(R)Cgl-A2e-Pig(Z)2

0,231 g (0,36 mmol) rastvoreno je u 2 ml etanola i dodano je 61 ul (0,40 mmol) benzilakrilata. Reagujuća smeša je mešana pet dana na sobnoj temperaturi. Smeša je isparena i sirov proizvod je prečišćen impulsnom hromatografijom, koristeći stepenast gradijent CH 2 Cl 2/MeOH (95/5, 90/10), da bi se dobilo 0,218 g (757.) čistog proizvoda.

<1>H-NMR (300 MHz, CDClg, 335K): 5 0,93 (bq, IH), 1,02-1,85 (m, 14H), 1,94 (bd, IH), 2,33-2,5 (m, 3H), 2,58-2,77 (m, 2H), 2,79-3,02 (m, 4H), 3,170 (t, 2H), 4,0-4,25 (m, 4H), 4,86 (dd, IH), 5,11 (s, 2H), 7,2-7,4 (m, 15H), 8,03 (bs, NH), 10,35 (bs, NH).

(iv) HOOC-CH -CH -(R)Cgl-Aze-Pig x 2 HC1

2 2

0,218 g (0,27 mmol) BnO0C-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-Pig(Z)2 pomešano je sa 0,10 g 5% Pd/C, 1 ml rastvora IM HC1, 1 ml vode i 10 ml etanola, pa je smeša hidrogenovana na atmosferskom pritisku u toku jednog časa. Filtriranje katalizatora kroz"hyflo"-filtar, isparavanje, a zatimm sušenje zamrzavanjem dva puta iz vode, dalo je 134 mg (95%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (300 MHz, D20): 5 1,0-1,4 (m, 7H), 1,55-2,05 (m, 9H), 2,22-2,34 (m, IH), 2,61-2,76 (m, IH), 2,88 (t, 2H), 3,08 (bt, 2H), 3,19 (d, 2H), 3,34 (m, 2H), 3,83 (bd, 2H), 3,95 (d, IH), 4,29-4,49 (m, 2H), 4,90 (dd, IH).

<13>C-NMR (75 MHz, DO): amidinski i karbonilni ugljenici: 6 156,4, 167,6, 172,1 i 174,7.

Primer 50

HOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig x 2 HC1

(i) Boc-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2

0,568 g (2,96 mmol) EDC dodano je na -15 C smeši 1 g (2,82 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro-OH (videti Pripremanje polaznih materijala), 1,197 g (2,82 mmol) H-Pig(Z)2 (videti Pripremanje polaznih materijala) i 1,38 g (11,28 mmol) DMAP u acetonitrilu.Pušteno je prko noći da temperatura poraste do sobne temperature. Rastvarač je isparen u vakuumu i dodan je metilenhlorid i 1 M KHSO^. Faze su razdvojene i organska faza je isprana zasićenom NaHC03, vodom i slanim rastvorom, pa su sušenje (Na 2 SO 4) i isparavanje rastvarača dali 2,033 g ostatka koji je izložen impulsnoj hromatografiji, koristeći etilacetat kao sredstvo za ispiranje. To je dalo dva proizvoda: 720 mg (34%) nazivnog jedinjenja koje se prvo Izdvojilo iz stuba, posle čega se izdvojilo 775 mg (44%) Boc-(R)Cgl-Pro-Pig(Z) obrazo-vanog gubitkom jedne od Z-zaštitnih grupa.

^H-NMR (300 MHz, CDC13): Neki signali, naročito u piperidinskom prstenu, selektivno su širi zbog procesa međumolekularske razmene. To je posebno izraženo za 2- i 6-CH2 grupe piperidinskog prstena, koje imaju širok maksimum u opsegu od 3,5 do 4,5 ppm.

S 0,85-2,1 (m, 19H), 2,3-2,45 (m, IH), 2,8-3,2 (m, 4H), 3,45-3,65 (m, manji rotamer), 3,8-3,93 (m, IH), 3,97-4,1 (m, IH), 4,52-4,62 (m, IH), 5,1 (vidljivo bs, 5H), 7,12-7,41 (m, 10H).

<13>C-NMR (75 MHz, D20): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 155,2, 156,3, 171,0 i 172,1.

(ii) H-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2

720 mg (0,946 mmol) Boc-(R)Cgl-PrO-Pig(Z) rastvoreno je i 35 ml TFA/CH2C12, 1/4 i mešano 30 minuta. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i dodani su etilacetat i 2M NaOH. Organski sloj je ispran vodom i slanim rastvorom, sušen (Na^OJ i rastvarač je isparen u vakuumu da bi se dobilo nazivno jedinjenje u merljivoj količini.

H-NMR (300 MHz, CDC13): Neki signali, naročito u piperidinskom prstenu, selektivno su širi zbog procesa međumolekularske razmene. To je posebno izraženo za 2- i 6-CH2 grupe piperidinskog prstena, koje imaju širok maksimum u opsegu od 3,5 do 4,5 ppm. 5 0,8-2,15 (m, 19H), 2,22-2,4 (m, IH), 2,75-2,98 (m, 2H), 2,98-3,18 (m, 2H), 3,18-3,35 (m, IH), 3,35-3,5 (kvart., IH), 3,5-3,7 (m, IH), 4,42-4,58 (d, IH), 5,1 (s, 4H), 7,1-7,5 (m, 10H).

<13>C-NMR (75 MHz, CDC13): amidinski i karbonilni ugljenici: 6 154,96, 171,31 i 174,82.

(iii) BnOOC-CH -(R)Cgl-Pro-Pig(Z)

0,298 g (0,999 mmol) Bn00C-CH2-0Tf (videti Pripremanje polaznih materijala) dodano je smeši 0,64 g (0,999 mmol) H-(R)Cgl-Pro-Pig(Z) 2 i 0,531 g (2,996 mmol) K 2 C0 3 u 6,4 ml acetonitrila i zagrejano do temperature refluksovanja. Posle 1 h 20 min smeša je isprana vodom, sušena (Na^O^) i rastvarač isparen u vakuumu da bi se dobilo 729 mg ostatka koji je iložen impulsnoj hromatografiji uz korišćenje etilacetata kao sredstva za ispiranje. Dobijena su dva proizvoda: 120 mg (Bn00C-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2 koji se prvi izdvojio iz kolone i 142 mg (18%) nazivnog jedinjenja.

<:>H-NMR (300 MHz, CDC13): Neki signali, naročito u piperidinskom prstenu, selektivno su širi zbog procesa međumolekularske razmene. To je posebno izraženo za 2- i 6-CH2grupe piperidinskog prstena, koje imaju širok maksimum u opsegu od 3,5 do 4,6 ppm. 5 0.94-2,27 (m, 19H), 2,28-2,43 (m, IH), 2,8-2,98 (m, 2H), 2,98-3,06 (m, IH), 3,06-3,15 (d, IH), 3,15-3,25 (m, IH), 3,3-3,51 (m, 4H), 4,5-4,6 (d, IH), 5,1 (s, 6H), 7,1-7,6 (m, 15H), 10,52 (bs,

IH).

(iv) H00C-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig x 2 HC1

142 mg (0,176 mmol) BnOOC-CH & -(R)Cgl-Pro-Pig(Z) 2 hidrogenovano je u prisustvu 0,88 ml 1 M hlorovodonične kiseline, 10 ml etanola

(99,5%) i 180 mg 5% Pd/C u toku 2 h. Uklanjanjem katalizatora filtriranjem kroz "hyflo"-filtar, pa isparavanjem rastvarača u vakuumu i sušenjem zamrzavanjem dobilo se 95 mg HOOC-CH^-(R)Cgl-Pro-Pig x 2 Hcl. Ovaj sirovi materijal (čistoća 79%) prečišćen je pomoću RPLC koristeći CH3 CN,0,1 M NH 4OAc 15/85 kao sredstvo za ispiranje. Uklanjanje rastvarača i viška NH^OAc sušenjem zamrzavanjem, prevođenje u so hlorovodonične kiseline rastvaranjem u 1 M hlorovodoničnoj kiselini, pa potom sušenje zamrzavanjem, dalo je nazivno jedinjenje.

<1>H-NMR (500 MHz, D2O): 5 1,1-1,35 (m, 6H), 1,63-2,14 (m, 13H), 2,26-2,36 (m, IH), 3,01-3,23 (m, 4H), 3,49-3,62 (kvart., 2H), 3,62-3,77 (m, 2H), 3,77-3,88 (vidljivo d, 2H), 4,18- 4,32 (d, IH), 4,37-4,5 (m, IH).

Primer51

H-(R)Cha-Aze-Pig x2HC1

(i) H-(R)Cha-Aze-Pig x 2 HC1

Dobro mešanoj smeši 86 mg (0,243 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-OH (videti Pripremanje polaznih materijala), 100 mg (0,236 mmol) H-Pig(Z)2(videti Pripremanje polaznih materijala) I 115 mg (0,944 mmol) DMAP u ml CH3CN dodano je 50 mg (0,260 mmol) EDC i reagujuća smeša je mešana 20 časova na sobnoj temperaturi. Rastvarač je isparen i ostatak je rastvoren u 70 ml EtOAc pa je organska faza isprana u 3 x 5 ml 1 M KHSO 4 , 1 x 5 ml NaHCO 3 , 3 x 5 ml H 20, 1 x 5 ml slanog rastvora i sušen (MgSO^). filtriranje i isparavanje rastvarača da-lo je 141 mg ulja. Sirov proizvod je prečišćen impulsnom hromatograf i jom (36 g Si02), koristeći stepenasti gradijent CH^^/MeOH (97/3 pa 95/5), da bi se dobilo 43 mg (24%) nazivnog jedinjenja.

(ii) H-(R)Cha-Aze-Pig(Z)

2

Hlorovodonik je produvavan kroz smešu 43 mg (0,0565 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-Pig(Z)2u 10 ml etilacetata, u trajanju od 5 minuta. Rastvarač je isparen u vakuumu i dodan je etil acetat i rastvor 0,1 M NaOH. Faze su razdvojene i organska faza je isprana vodom i slanim ratsvorom i sušena (Na^O^). Rastvarač je isparen sa bi se dobilo 38 g proizvoda, koji je izložen impulsnoj hromatografiji koristeći 10% NH3-zasićeni metanol u etil acetatu kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobilo 28 mg željenog proizvoda.

<1>H-NMR (300 MHz, CDC13): Neki signali, naročito u piperidinskom prstenu, selektivno su širi zbog procesa međumolekularske razmene. To je posebno izraženo za 2- i 6-CH2grupe piperidinskog prstena, koje imaju širok maksimum u opsegu od 3,7 do 4,5 ppm. 5 0,75-1,85 (m, 18H), 2,35-2,53 (m, IH), 2,62-2,78 (m, IH), 2,8-3,0 (m, 2H), 3,0-3,28 (m, 2H), 3,28-3,37 (m, IH), 3,97-4,18 (m, 2H), 4,8-4,9 (m, IH), 5,1 (s, 4H), 7,2-7,45 (m, 9H), 8,05-8,15 (m,

IH).

(iii) H-(R)Cha-Aze-Pig x 2 HC1

28 mg (0,042 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pig(Z)2 rastvoreno u 2 ml etanola (99,5%) i 0,13 ml hlorovodonika (1 N) hidrogenovano je u prisustvu 35 mg Pd/C u toku 4 h. Uklanjanje katalizatora filtriranjem i isparavanje rastvarača u vakuumu, pa potom rastvaranje u vodi i sušenje zamrzavanjem dalo je 12 mg (60%)

<1>H-NMR (300 MHz, CDC13): Neki signali, naročito u piperidinskom prstenu, selektivno su širi zbog procesa međumolekulske razmene. To je posebno izraženo za 2- i 6-CH2grupe piperidinskog prstena, koje imaju širok maksimum u opsegu od 3,7 do 4,5 ppm.

<5 0,75-2,1 (m, 18H), 2,2-2,35 (m, IH), 2,62-2,75 (m, IH), 3,0-3,12 (trn, 2H), 3,12-3,23 (d, 2H), 3,85-3,95 (d, 2H), 3,95-4,0 (dd, IH), 4,15-4,23 (m, IH), 4,35-4,42 (m, IH), 4,72-4,78 (m, IH).

<13>ONMR (75 MHz, CD^D): gvanidin: 6 157,6; karbonilni ugljenici: 5 170,0 i 172,6.

Primer 52

H00C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac x 2 HCL

(i) Boc-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)

Rastvoru 0,47 g (1,4 mmol) Boc-(R)Cgl-Aze-OH (videti Pripremanje polaznih materijala), 0,40 g (1,4 mmol) H-Pac(Z) videti Pripremanje polaznih materijala) i 0,65 g (5,5 mmol) DMAP u 5 ml acetonitrila dodano je 0,27 g EDC na 0 C. Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi a potom je razređena etil acetatom. Rastvor je ispran u KHSO^ (vod) i NaHC03>sušen (NagS04), filtriran i isparen. Impulsna hromatografija, uz korišćenje etil acetata, pa etil acetat/metanola 98/2 kao sredstva za ispiranje, dala je 0,25 g (30%) nazivnog jedinjenja kao smešu 1,4-cis- i trans-proizvoda u odnosu na Pac deo molekula.

<1>H-NMR (500 MHz, CĐCl^: 6 0,8-2,0 (m, 29H, od toga 1,45 (s, 9H)), 2,15 i 2,34 (m, IH, izomeri), 2,45-2,7 (m, 2H), 3,0-3,4 (m, 2H), 3,85 (m, IH), 4,14 (m, IH), 4,33 (m, IH), 4,85 (m, IH), 4,98 (m, IH), 5,04 (1, 2H), 7,25-7,45 (m, 5H), 7,8-7,9 (m, IH), 9,2-9,5 (m,

IH).

(ii) H-(R)Cgl-Aze-Pac(Z) x HCL

Boc-(R)Cgl-Aze-Pac(Z), 0,25 g (0,41 mmol) rastvoren je u 100 ml etil acetata i rashlađen u ledenom kupatilu. HC1 (g) je produvavam u toku 5 minuta i rastvarač je isparen.

<a>H-NMR (500 MHz, CDCl^: 5 0,8-2,0 (m, 22H), 2,05-2,35 (m, IH), 2,4-2,55 (m, IH), 2,6-2,75 (m, IH), 3,00 (d, IH), 3,05 i 3,37 (multipleti, 0.6H i 0.4H, izomeri), 3,15-3,3 (m, IH), 4,05-4,2 (m, 2H), 4,88 (dd, IH), 5,11 (s, 2H), 7,2-7,45 (m, 5H), 8,0-8,15 (m,

IH).

(iii) Bn02C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac(Z)

Smeša 0.17 g (0.33 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Pac(Z) x Hcl, o.llg (0,37 mmol) benzil trifliloksiacetata i o, 14 g (1,0 mmol) K C0 u 5 ml

2 3 acetonitrila mešana je na sobnoj temperaturi 3 dana. Sirov materijal je izložen impulsnoj hromatograf i ji' sa EtOAc/CH2Cl2/MeOH 95/ 20/5. Prinos: 70 mg (32%). •<1>H-NMR (500 MHz, CDCl 3): 5 0,85-2,3 (m, 20H), 2,48 (m, IH), 2,63 (m, IH), 2,87 (m, IH), 3,05-3,25 (m, IH), 3,25-3,35 (m, 2H), 3,38 (dd, IH), 3,95 (m, IH), 4,08 (m, IH), 4,88 (m, IH), 5,1-5,2 (m, 4H), 5,9-6,3 (1, 2H), 7,25-7,5 (m, 10H), 8,00 i 8,08 (široki tripleti, IH, izomeri).

(iv) H00C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac x 2 HCL

Bn02C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pac(Z), 70 mg )0,11 mmol), rastvoren je u 5 ml etanola, pa je dodano 5% Pd/C i 0,1 ml koncentrisane HC1. Smeša je hidrogenovana na atmosferskom pritisku u toku 1 časa. Posle filtriranja i isparavanja proizvod je prečišćen pripremnom ROLC koristeći 0, 1 M NH^OAc/O^CN 4/1 kao sredstvo za ispiranje. Nakon promene soli u hidrohlorid i sušenja zamrzavanjem, nazivno jedinjenje je dobijeno kao smeša 45/55 1,4-cis i trans-izomera u odnosu na Pac deo molekula. Prinos: 40 mg (74%).

<1>H-NMR (500 MHz, D,0): 6 1,1-2,1 (m, 20H), 2,32 (m, IH), 2,52 (m, IH), 2,63 (m, IH), 2,72 (m, IH), 3,1-3,3 (m, IH), 3,40 (m, IH), 3,8-3,95 (m, 2H), 4,04 (d, IH), 4-39 (m, IH), 4,93 (m, IH).

<13>C-NMR (125 MHz, D20) amidinski i karbonilni ugljenici: 6 167,7, 172,0, 174,9 i 175,2.

Primer 53

H-(R)Cha-Pro-Pac x 2 HC1

(i) Boc-(R)Cha-Pro-Pac(Z)

211 mg (1,1 mmol) EDC dodano je na 0 C mešanom rastvoru 0,4 g (1,1

mmol) H-Pac(Z) x 2 HC1 (videti Pripremanje polaznih naterijala), 0,4 g (1,1 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (videti Pripremanje polaznih materijala), i 0,55 g DMAP u 7 ml acetonitrila. Reagujuća smeša je mešana na 0 C u toku 1 časa, a na sobnoj temperaturi još 2 časa. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, a ostatak je razblažen etil acetatom i vodom. Organska faza Je isprana sirćetnom kiselinom, vodom i rastvorom natrijumbikarbonata, pa je sušena (MgSO^). Uklanjanjem rastvarača u vakuumu dobijen je ostatak koji je prečišćen impulsnom hromatografijom koristeći etil acetat kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobilo 196 mg (27%) nazivnog jedinjenja.

(ii) H-(R)Cha-Pro-Pac(Z)

Hlorovodonik je produvavan kroz rastvor 196 mg Boc-(R)Cha-Pro-Pac(Z) u 25 ml etil acetata. Posle 10 minuta reagujuića smeša je razblažena metilen hloridom i dodan je rastvor natrijumhidroksida. Vodena faza je ekstrahovana nekoliko puta metilen hloridom i kom-binovane organske faze su sušene (K2C03) pa je rastvarač uklonjen u vakuumu da bi se dobilo 86 mg (52%) nazivnog jedinjenja.

(iii) H-(R)Cha-Pro-Pac x 2 HC1

Nazivno jedinjenje je pripremljeno hidrogenovanjem H-(R)Cha-Pro-Pac(Z) u etanolu u prisustvu 10% Pd/C.

H-NMR (300 MHz,D20;A ca: 1:1 smeša 1,4-cis- i 1,4-trans izomera u Pac delu molekula): 5 1,15-1,3 (q), 1,6-1,85 (m), 1,9-2,0 (m), 2,0-2,1 (d), 2,1-2,15 (m), 2,15-2,2 (m), 2,65-2,7 (m), 2,7-2,8 (m), 2,95-3,0 (d), 3,15-3,2 (d), 5,4 (s), 7,45-7,55 (m).

Primer 54

H-(R)Cgl-Ile-Pab x 2 HC1

(i) Boc-(R)Cgl-Ile-Pab(Z)

Mešanoj smeši 1,33 g (3,6 mmol) Boc-(R)Cgl-Ile-0H (videti Pripremanje polaznih materijala), 1,12 g (3,9 mmol) H-Pab(Z) (videti Pripremanje polaznih materijala) i 1,76 (14,4 mmol) DMAP u 50 ml CH CN/DMF (1/1) dodano je 0,75 g (3,9 mmol) EDC na +5 C. Pušteno

3

je da reagujuća smeša dostigne sobnu temperaturu i ostavljena je da odstoji 60 časova. CH3CN je uklonjeno isparavanjem a ostatak je sipan u 100 ml vode (obrazovan je žuti talog). Smeša je ekstrahovana pomoću 2 x 50 ml EtOAc i kombinovana organska faza je isprana u 2 x 30 ml NaHC03(zasić. ), 2 x 50 ml 0,2 M HC1, 2 x 50 ml slanog rastvora, i sušena (MgSO 4). Posle isparavanja je došla impulsna hromatografija, uz korišćenje CH2C12/THF (85/15) kao sredstva za ispiranje, pa je dobijeno 510 mg (24%) nazivnog jedinjenja.

(ii) H-(R)Cgl-Ile-Pab(Z)

530 mg Boc-(R)Cgl-Ile-Pab(Z) rastvoreno je u 14 ml OUT^/TFA i mešano 2 časa na sobnoj temperaturi. Isparavanje rastvarača, a zatim impulsna hromatograf i ja, koristeći CH^^/MeOH (NH^zasić. )

(95/5) kao sredstvo za ispiranje, dalo je nazivno jedinjenje.

(iii) H-(R)Cgl-Ile-Pab x 2 HC1

75 mg (0,14 mmol) H-(R)Cgl-Ile-Pab (Z) hidrogenovano je preko 10% Pd/C u 5 ml EtOH, koji je sadržao višak HC1 (g) da bi se dobio hidrohlorid, u toku 6 časova i na atmosferskom pritisku. Dodavanjem 2 g aktiviranog drvenog uglja i 20 ml EtOH, a zatim filtriranjem kroz celit, isparavanjem rastvarača i sušenjem zamrzavanjem iz vode, dalo je 50 mg (89%) nazivnog jedinjenja u vidu belog pra-ška.

<1>H-NMR (500 MHz, MeOD): 6 0,90 (t, 3H), 0,94 (d, 3H), 1,1-2,0 (m, 14H), 3,83 (bs, IH), 4,26 (d, IH), 4,50 (m, 2H), 7,57 (bd, 2H), 7,78 (bd, 2H).

Primer 55

H-(R)Cgl-Aze-Pab

Hidrogenovanje 257 mg (5,08 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) (videti primer 1 (ii)) preko 5% Pd/C u 6 ml EtOH/hMD na atmosferskom pritisku i u trajanju od 6 časova, praćeno filtriranjem katalizatora i sušenjem zamrzavanjem iz vode, dalo je 200 mg (89%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (500 MHz, D20): 5 1,0-2,0 (m, 11H), 2,25 (m, IH), 2,70 (m, IH), 3,30 (m, IH), 3,75 (m, IH), 4,30 (m, IH), 4,45 (m, IH), 4,55 (m, 2H), 7,60 (m, 2H), 7,77 (m, 2H).

MS m/z 372 (M<+>+l).

Primer 56

HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Prob-Pab x HOAc

(i) BnOOC- (R, S) CH( Me) - (R) Cha-Prob-Pab(Z)

0,250 g (0,47 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pab(Z) (videti Primer 15), rastvoreno u 5 ml CH2C12> ohlađeno je na -10 C i lagano je dodano 150 mg (0,48 mmol) TfOCH2COOBn (Videti Pripremanje polaznih materijala) rastviorenog u 3 ml CH Cl . Dodano je 200 mg (1,45 mmol) kalijum karbonata i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 časo-va. Smeša je razblažena dodavanjem CH2C12, ekstrahovana vodom i sušena (MgSO^). Ispravanje rastvarača i impulsna hromografija, uz korišćenje CH2Cl2/MeOH 9/1 kao sredstva za ispiranje, dalo je 150 mg (46%) nazivnog jedinjenja.

(ii) HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Prob-Pab x HOAc

150 mg (0,2 mmol) BnOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Prob-Pab(Z) hidrogenizovano je preko 50 mg 5% Pd/C u 20 ml EtOH, na atmosferskom pritisku, u trajanju od 4 časa. Filtriranjem katalizatora, isparavanjem rastvarača, a potom prečišćavanjem pomoću RPLC, kori-steći CH3CN/0,1 M NH^OAc 1/4 kao sredstvo za ispiranje, dalo je 35 mg (37%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (500 MHz, MeOD): 5 1,0 (m, IH), 1,20-1,45 (m, 5H), 1,5 (m, IH), 1,6-1,8 (m, 6H), 2,25 (m, IH), 3,25 (m, IH), 3,5 (m, IH), 3,85 (m, IH), 4,15 (m, IH), 4,35-4,6 (m, 3H), 4,9 (m, delimično zaklonjen HOD linijom, 6H), 7,d (d, 2H),7,75 (d, 2H).

Primer 57

MeOOC-CH -(R)Cgl-Aze-Pabx 2Hcl

(i) MeOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)

0,186 g (0,841 mmol) Tf0-CH2-C00Me (videti Pripremanje polaznih materijala) rastvoreno je u CH2C12i lagano dodano smeši 0,425 g (0,841 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) (videti Primer 1), 0,894 g (5,04 mmol) K CO u CH Cl (ukupno 4,3 ml) na sobnoj temperaturi i

2 3 2 2

mešano je preko noći. Dodano je još CH2C12pa je smeša isprana vodom i slanim rastvorom, sušena, filtrirana i rastvarač je isparen u vakuumu da bi se dobilo 0,51 g ostatka koji je tri puta izlagan impulsnoj hromatografiji na si lika gelu, koristeći prvo CH Cl /THF/MeOH (16/4/1), pa CH Cl /THF(2% NH ) (8/2) i na kraju

2 2 2 2 3

dimetiletar/MeOH (N^-zasić.) kao sredstvo za ispiranje. Dobijeno je 0,324 g (67%) nazivnog jedinjenja.

(ii) MeOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 Hcl

220 mg (0,38 mmol) Me00C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) hidrogenovano je u prisustvu 1,14 ml 1 N HC1, 6,5 ml MeOH i 300 mg Pd/C u toku 2 časa. Uklanjanje katalizatora filtriranjem preko celita i miliporoznog filtra, i potom dvostruko sušenje zamrzavanjem dalo je 178 mg (91%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (500 MHz, D O):81,12-1,4 (m, 5H), 1,68-1,81 (m, 2H), 1,81-1,9 (m, 3H), 1,97-2,1 (m, IH), 2,29-2,4 (m, IH), 2,68-2,8 (m, IH), 3,86 (s, 3H), 4,1 (s, 2H), 4,1-4,5 (d, IH); -4,36-4,42 (t, 2H), 4,59 (s, 2H), 4,99-5,04 (m, IH), 7,65-7,7 (d, 2H), 7,8-7,85 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, MeOD): amidinski i karbonilni ugljenici; 5 146,78, 167,68, 168,15, 172,29.

Primer 58

Et00C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HC1

(i) Et00C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)

0,208 g (0,876 mmol) Tfo-CH2-C00Et (videti Pripremanje polaznih materijala) rastvoreno je u CH2C12i lagano dodano smeši 0,443 g (0,876 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) (videti Primer 1) i 0,931 g (5,26 mmol) K CO u CH Cl (ukupno 4 ml) hlađenoj u ledenom kupatilu.

2 3 2 2

Posle 2 časa je ledeno kupatilo uklonjeno a mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi sledeća 2 časa. Dodano je još CH2C12pa je smeša isprana vodom i slanim rastvorom, sušena, filtrirana a rastvarač je isparen u vakuunu, da bi se dobilo 0,51 g ostatka koji je bio izložen impulsnoj hromatografiji, koristeći dietiletar/MeOH (NH3-zasić. ) kao sredstvo za ispiranje. To je dalo 0,387 g (75%) nazivnog jedinjenja

(ii) EtOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HC1

395 mg (0,668 mmol) Et00C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab (Z) hidrogenovano je u prisustvu 12 ml EtOH (99,5%) i 390 mg Pd/C u toku 5 časova. Uklanjanje katalizatora filtriranjem na celitu i mikroporoznom filtru, zatim isparavanje rastvarača u vakuumu i dvostruko sušenje zamrzavanjem, dalo je 281 mg (88%) Et00C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab. Dodana su 2 ekvivalenta 1 HC1 i trostruko sušenje zamrzavanjem dalo je 288 mg (81%) nazivnog jedinjenja.

^-NMR (500 MHz, D20): 5 1,05-1,48 (m, 8H), 1,6-2.05 (m, 6H), 2,15-2,33 (m, IH), 2,58-2,79 (m, IH), 3,89-4,0 (m, 3H), 4,33-4,44 (m, IH), 4,44-4,66 (m, 2H), 4,91 (m, IH (delimično pokriven H-0-D signalom)), 7,54-7,63 (d, 2H), 7,72-7,84 (d, 2H).

Primer59

"BuOOC-CH^CRjCgl-Aze-Pab x HOAc

(i) nBuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z)

Priprema se na isti način kako je opisano za "HeKOOC-CHj,- (R) Cg 1 - Aze-Pab(Z) (videti Primer 60 (i)) koristeći Tfo-CH2"COOnBu kao sredstvo za alkilaciju. Sirov proizvod je dva puta izložen impulsnoj hromatografiji, prvi put koristeći CH2Cl2/MeOH (95/1) kao sredstvo za ispiranje, a potom CH2Cl2/i-propilalkohol (90/7), da bi se dobilo 324 mg (47%) nazivnog jedinjenja.

(ii) "BuOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x HOAc

Uklanjanje zaštite je izvedeno prema postupku opisanom u Primeru 57 (ii). Sirov materijal je prečišćen na RPLC, koristeći CH3CN (30%) u 0,05 M NH 4 OAc i 0,05 M NH 4OAc kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobilo 100 mg (53%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (300 MHz, MeOD): 5 0,8-2,1 (m, 18H), 2,15-2,37 (m, IH), 2,58-2,8 (m, IH), 3,7-5,0 (m, 10H), 4,88-5,0 (delimično pokriven H-0-D signalom)), 7,46-7,65 (d, 2H), 7,71-7,88 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, MeOD): amidinski i karbonilni ugljenici: 6 146,8, 168,12, 168,2 i 172,2.

Primer 60

"HeKOOC-CH^R) Cgl-Aze-Pabx 2HC1

(i) nHexOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HC1

0,402 g (1,375 mmol) Tf0-CH2-C00<n>Hex (videti Pripremanje polaznih materijala) rastvoreno je u CH2C12i lagano dodano smeši 0,695 g (1,375 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) (videti Primer 1), 1,463 g (8,25 mmol) K2C03 u CH,^ (ukupno 4 ml) na <-10 C. osle 1 časa C02~le-

deno kupatilo je uklonjeno i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi sledećih 45 min. Dodano je još Cti^ Zl^ i smeša je isprana vodom i slanim rastvorom, sušena, filtrirana i rastvarač je isparen u vakuumu da bi se dobilo 0,828 g ostatka, koji je dvaput izložen impulsnoj hromatografiji, prvi put koristeći dietiletar/ MeOH (NH3 -zasić.) (95/5), a potom CH 2 Cl 2 /MeOH (NH 3-zasić. ) (95/5) kao sredstvo za ispiranje. To je dalo 0,42 g (47%) nazivnog jedinjenja.

(ii) "HexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab x 2 HC1

Hidrogenacija 400 mg (0,617 mmol) nHexOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) u prisustvu 12 ml THF i 400 mg Pd/C u toku 1,5 časa nije dovela do potpunog uklanjanja zaštite. Hidrogenacija je završena u roku od 4 časa u prisustvu 1,7 ml 1 N HC1, 12 ml MeOH i 340 mg Pd/C. Uklanjanje katalizatora filtriranjem preko celita i miliporoznog filtra, a zatim isparavanje rastvarača u vakuumu, i dva puta suše-nje zamrzavanjem, dalo je 287 mg (79%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (300 MHz, MeOD): 5 0,8-2,13 (m, 22H), 2,13-2,31 (m, IH), 2,61-2,81 (m, IH), 3,93-4,5 (m, 3H), 4,15-4,37 (m, 3H), 4,37-4,7 (m, 3H), 4,88-5,0 (m, IH delimično pokriven H-0-D signalom)), 7,52-7,69 (d, 2H), 7,75-7,9 (d, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, MeOD): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 146,84, 167,67, 167,84 i 172,17.

Primer 61

H-(R)Cgl-Pro-Pac x 2HC1

(i) Boc-CR)Cgl-Pro-Pac(Z)

377 mg (1,97 mmol) EDC dodano je na 0 C mešanoj smesi 708 'mg (1,95 mmoi) Boc-(R)Cgl-Pro-OH (videti Pripremanje polaznih materijala), 714 mg (2,0 mmol) H-Pac(Z) x 2 HC1 (videti Pripremanje polaznih materijala) i 1,078 g (8,8 mmol) DMAP u 12,5 ml acetonitrila.

Reagujuća smeša je puštena da preko noći dostigne sobnu temperaturu. Rastvaraje uklonjen u vakuumu, i ostatak je prvo prečišćen impulsnom hromatografijom, koristeći 10% metanol u metilen hloridu kao sredstvo za ispiranje, a potom RPLC hromatografijom. Izolovane • su dve frakcije (51 mg i 150 mg) koje su dale MS m/z 626 (M<+>+l).

(ii) H-(R)Cgl-Pro-Pac(Z)

Hlorovodonik je uduvavan u rastvor 141 mg (0,22 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro-Pac(2) u 50 ml etil acetata. Posle 15 minuta dodan je rastvor 10% natrijum karbonata pa Je organska faza izdvojena i sušena (K^CO^. Isparavnje rastvarača dalo je 71 mg (61%) proizvoda.

(iii) H-(R)Cgl-Pro-Pac x 2 HC1

Smeša 71 mg (0,14 mmol) H-(R)Cgl-Pro-Pac(Z) i jedne male kašičice 10" Pd/C u 10 ml etanola hidrogenovana je na sobnoj temperaturi i atmosferskom pritisku u toku 2 časa. Katalizator je uklonjen filtriranjem a rastvarač je uklonjen u vakuumu. Ostatak je rastvoren u 50 ml vode i 0,6 g IM hlorovodonične kiseline. Sušenje zamrzavanjem dalo je 38 mg (58%) nazivnog jedinjenja.

MS m/z 392 (M<+>+l)

Primer 62

H00C-CH2-(R)Cha-Pro-Pac- x HOAc

(i) BnOOC-CH 2-(R)Cha-Pro-Pac(Z)

Smeša 84 mg (0,15 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pac(Z) (videti Primer 53(ii)), jedne kašičice kalijum karbonata i 47 mg TfOCH^COOBn (videti Pripremanje polaznih materijala) u 3 ml metilen hlorida mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Reagujuća smeša je filtrirana i rastvarač je uklonjen u vakuumu da bi se dobio ostatak koji je podvrgnut impulsnoj hromatografiji koristeći etil acetat/metilem hlorid/metanol 95:20:5 kao sredstvo za ispiranje. Izdvojeno je 29 mg željenog proizvoda.

(ii) HOOC-CH 2-(R)Cha-Pro-Pac- x HOAc

Smeša 29 mg BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Pac(Z) i 37 mg 10% Pd-C u 5 ml etanola mešana je 4 časa na sobnoj temperaturi i atmosferskom pritisku. Filtriranje katalizatora i potom uklanjanje rastvarača i prečišćavanje RPLC-om dalo je željeno jedinjenje.

MS m/z= 464 (M<*>+l).

Primer 63

H00C-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac

(i) BnOOC-CH -CH -(R)Cgl-Pro-Pac(Z)

2 2

Rastvor 0,35 g (0,64 mmol) H-(R)Cgl-Pro-Pac(Z) (videti Primer 61(ii)), 124 mg (0,76 mmol) benzil akrilata i 280 p:l (2 mol) trietil amina u 1 ml etanola držan je tri dana na sobnoj temperaturi. Uklanjanje rastvarača i prečišćavanje HPLC-om dalo je 18 mg (4%) nazivnog jedinjenja.

(ii) HOOC-CH -CH -(R)Cgl-Pro-Pac

2 2

Smeša 18 mg BnOOC-CH2-CH2-(R)Cgl-Pro-Pac(Z) ii male kašičice 10% Pd/C hidrogenovana je 2 časa na sobnoj temperaturi i atmosferskom pritisku u EtOH. Filtriranje, potom uklanjanje rastvarača u vakuumu i rastvaranje u vodi i sušenje zamrzavanjem dalo je 7 mg (8%) nazivnog jedinjenja. MS m/z = 464 (M<+>+l).

Primer 64

H0QC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac

(i) Boc-(R)Cha-Aze-Pac(Z)

Rastvor 0,4 g (1,38 mmol) H-Pac(Z) (videti Pripremanje polaznih materijala za H-Pac(Z) x 2 HC1), 0,5 g (1,41 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-0H (videti Pripremanje polaznih materijala) i 0,67 g (5,5 mmol) DMAP u 20 ml acetonitrila, -pomešan je na 0 C sa rastvorom 0,26 g (1,4 mmol) EDC u 15 ml acetonitrila. Reagujuća smeša je držana preko noći na sobnoj temperaturi pa je onda rastvarač uklonjen u vakuumu. Ostatak je podeljen između etil acetata i vode. Vodena faza je još jednom ekstrahovana etil acetatom pa su kpmbinovane organske faze isprane rastvorom natrijum bisulfata, rastvorom natrijum karbonata i slanim rastvorom, i potom sušene (natrijum sulfat). Isparavanje rastvarača dalo je 9,54 g (63%) nazivnog jedinjenja.

(ii) H-(R)Cha-Aze-Pac(Z)

Hlorovodonik je uduvavan u rastvor 0,54 g (0,9 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-Pac(Z) u etil acetatu. Rastvor je držan u hladnjaku preko noći pa je potom rastvarač uklonjen u vakuumu a ostatak je rastvoren u etil acetatu. Rastvor je ispran vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, vodom i slanim rastvorom i sušen (natrijum sulfat). Uklanjanje rastvarača je dalo 0,25 g (77%) proizvoda.

(iii) BnOOC-CH 2 -CH 2-(R)Cha-Aze-Pac(Z)

Rastvor 180 mg (0,33 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pac(Z) i 53 mg (0,33 mmol) benzil akrilata u metanolu držan je 60 časova na sobnoj temperatu+ ri. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i ostatak je rastvoren u etil acetatu. Rastvor je ispran rastvorom kalijum bisulfata i slanim rastvorom. Sušenej (natrijum sulfat) i uklanjanje rastvarača u vakuumu dalo je ostatak koji je prečišćen impulsnom hromatografijom, koristeći 10% metanol u metilen hloridu kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobilo 150 mg (66%) nazivnog jedinjenja.

(iv) H00C-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac x 2 HC1

Smeša 115 mg BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Pac(Z) i 67 mg 10% Pd/C u 10 ml etanola hidrogenovana je 1,5 čas na sobnoj temperaturi i atmosferskom pritisku. Potom je posle filtriranja uklonjen rastvarač u vakuumu, pa je rastvaranje ostatka u vodi i 1,5 ml IM hlorovodonične kiseline dalo rastvor koji je sušen zamrzavanjem da bi se dobilo 30 mg (33%) nazivnog jedinjenja.

MS m/z 464 (M<+>+l).

Primer 65

H00C-CH2-(R)Cha-Aze-Pig x 2 HC1

(i) Boc-(R)Cha-Aze-Pig(2)

0,249 g (1,298 mmol) EDC dodano je na <-15 C smeši 0,473 g (1,236 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-0H (videti Pripremanje polaznih materijala), 0,404 g (1,236 mmol) H-Pig)Z) x HC1 (videti Pripremanje polaznih materijala) i 0,604 g (4,94 mmol) DMAP u 13,5 ml DMF. Pušteno je da temperatura preko noći dostigne sobnu temperaturu. Rastvarač je isparen u vakuumu i dodani su EtOAc i 2M KHSO 4. Faze su razdvojene i organska faza je isprana zasićenim Na 2 C0 % i i slanim rastvorom. Ponavljanje postupka ekstrahovanja, sušenje (Na 2 S0 4), filtriranje i isparavanje rastvarača dalo je 0,612 g ostatka koji je izložen impulsnoj hromatografiji koristeći EtOAc/MeOH 9/1 kao sredstvo za ispiranje. To je dalo 407 mg (53%) nazivnog jedinjenja.

(ii) H-(R)Cha-Aze-Pig(Z)

0,4 g (0,638 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-Pig(Z) rastvoreno je u 24,4 ml TFA/CH2C121.4, mešano 30 minuta na ledenom kupatilu, pa 30 minuta na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen u vakuumu pa su dodani EtOAc i zasićenni Na 2 CO o. Faze su razdvojene i organski sloj je ispran vodom i slanim ratsvorom, sušen (Na S0 ), filtriran

2 4

a rastvarač je isparen u vakuumu, da bi se dobilo 336 mg (100%) nazivnog jedinjenja.

(iii) Bn00C-GH2-(R)Cha-Aze-Pig(Z)

89 ml (0,562 mmol) BnOOC-CR^-Br lagano je dodavano u smešu 0,296 g (0,562 mmol) H-(R)Cha-Aze-Pig(Z) i 0,171 g (1,236 mmol) K CO u 6

2 o

ml CH3CN zagrejanog do 60 C na uljnom kupatilu. Posle 1 časa i 45 minuta, rastvarač je isparen, dodan je EtOAc, pa je smeša isprana vodom, sušena (Na SO ), filtrirana i rastvarač je isparen u vaku-2 4

umu da bi se dobilo 346 mg ostatka koji je izložen impulsnoj hromatografiji koristeći CH2Cl2/THF/MeOH (8/2/1) kao sredstvo za ispiranje. To je dalo 297 mg (78%) nazivnog jedinjenja.

(iv) HOOC-CH 2-(R)Cha-Aze-Pig x 2 HC1

243 mg (0,36 mmol) Bn00C-CH2"(R)Cha-Aze-Pig(Z) hidrogenovano je u prisustvu 1,7 ml 1 N HC1, 10 ml EtOH (99,5%) i 300 mg Pd/C u to-ku 2 časa. Uklanjanje katalizatora filtriranjem na celitu i miliporoznom filtru, a zatim isparavanje rastvarača u vakuumu i dvostruko sušenje zamrzavanjem dalo je 166 mg (88%) nazvnog jedinjenja.

<1>H-NMR (500 MHz, D O): 5 0,6-1,9 (m, 18H), 2,1-2,27 (m, IH), 2,52-2,76 (m, IH), 2,82-3,2 (m, 4H), 3,46-3,61 (m, IH), 3,61-3,81 (m, 2H), 3,81-4,0 (m, 2H), 4,0-4,24 (m, 2H), 4,24-4,4 (m, IH).

Primer 66

H00C-CH2-(R)Cha-Pro-Pigx 2HC1

(i) Boc-(R)Cha-Pro-Pig(Z)

Smeši 0,3495 g (0,95 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-0H (videti Pripremanje polaznih materijala), 0,464 g (3,8 mmol) DMAP, 0,310 g (0,95 mmol) H-Pig(Z) x HC1 (videti Pripremanje polaznih materijala) u 5 ml CH2C12dodanoJe 0.192 g (1 mmol) EDC i smeša je preko noći mešana na sobnoj temperaturi. Smeša je isparena i ostatak je rastvoren u etil acetatu. Orgnaska faza je dva puta isprana 0,3 M KHSO i 4

, jednom slanim rastvorom. Organska faza je sušena (Na 2 S0 4), filtrirana i isparena. Sirov proizvod je prečišćen impulsnom hromatografijom koristeći stepenasti gradijent On^/MeOH (100/0, 97/3, 95/

5, 90/10) kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobilo 307 mg nazivnog jedinjenja.

(ii) H-(R)Cha-Pro-Pig(Z)

0,306 (0,48 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-Pig(Z) rastvoreno je u 30 ml HCL zasićenog etil acetata. Smeša, je puštena da odstoji pola časa. Rastvarač je isparen i ostatak je rastvoren u CRM:^. Organski sloj je dva puta ispran u 0,2 M NaOH. Kombinovani sloj je još jednom ekstrahovan CH2Cl2-om pa je kombinovan organski sloj sušen (Na^O^), filtriran i isparen da bi se dobilo 257 mg (99%) nazivnog jedinjenja.

(iii) Bn00C-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z)

Smeša 0,256 g (0,473 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pig(Z), 0,144 g (1,04 mmol) K2C03i 84 ul (0,521 mmol) benzilbromacetata u 6 ml acetonitrila grejana je na 60 C 2 časa uz mešanje. Rastvarač je isparen a ostatak je rastvoren u CH2C12, jednom ispran vodom a jednom slanim rastvorom, sušen (NazS0 ), filtriran i rastvarač je isparen. Sirovi proizvod je prečišćen impulsnom hromatografijom, koristeći stepenasti gradijent OUn^MeOH (97/3, 95/5, 90/10) kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobilo 0,2 g proizvoda (čistoće 90% prema RPLC). Konačno prečišćavanje je urađeno na jednom hromatronu (Harrison research, model 7924T) na ploči silicijum dioksida debljine 2 mm, u CH2Cl,/MeOH 95/5, što je dalo 0,158 g (48%) či-stog proizvoda.

(iv) H00C-CH2-(R)Cha-Pro-Pig x 2 HC1

0,158 g (0,227 mmol) BnOOC-CH^-(R)Cha-Pro-Pig(Z) pomešano je sa 0,075 g Pd/C, 1,0 ml rastvora IN HC1 i 10 ml etanola. Smeša je hidrogenovana na atmosferskim uslovima jedan čas. Filtriranje kroz celit i isparavanje rastvarača, a zatim dva puta sušenje zamrzavanjem iz vode, dalo je 119 mg (97%) proizvoda.

VNMR (300 MHz,D20): 5 0,95-1,44 (m, 7H), 1,52 (m, IH), 1,60-2,20

(m, 13H), 2,39 (m, IH), 3,07-3,32 (m, 4H), 3,68 (ra, IH), 3,77-4,02 (m, 5H; od toga 3,98 (s, 2H)), 4,44-4,58 (m, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, DO): karbonilni i gvanidinski ugljenici:S156,5, 168,3, 169,6, 174,5.

Primer 67

H00C-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig x2HC1

(i) BnOOC-CH -CH -(R)Cha-Pro-Pig(Z)

2 2

0,297 g (0,55 mmol) H-(R)Cha-Pro-Pig(Z) (videti Primer 66(ii)) rastvoreno je u 2 ml etanola i dodano je 90 ul (0,59 mmol) benzilakrilata. Reagujuća smeša mešana je četiri dana na sobnoj temperaturi. Rastvarač je isparen a sirov proizvdo je prečišćen na hromatotronu (Harrison research, model 7924T), koristeći pločicu silicijum dioksida debljine 2 mm sa stepenastim gradijentom CH 2 Cl 2/MeOH (95/5, 90/10) kao sredstvom za ispiranje, da bi se dobilo 0,338 g (87%) nazivnog jedinjenja.

(ii) HOOC-CH -CH -(R)Cha-Pro-Pig x 2 HC1

2 2

0,238 g (0,227 mmol) Bn00C-CH2-CH2-(R)Cha-Prog-Pig(Z) pomešano je sa 0,10 g Pd/C (5%), 1,2 ml rastvora IN HC1 i 15 ml etanola. Smeša je hidrogenovana na atmosferskom pritisku u toku jednog časa. Filtriranje katalitaora kroz celit, isparavanje rastvarača, pa dva puta sušenje zamrzavanjem iz vode, dalo je 178 mg (95%) nazivnog jedinjenja.

VNMR (300 MHz, D20): 5 0,82-1,45 (m, 8H), 1,45-2,15 (m, 13H), 2,29 (m, IH), 2,83 (t, 2H), 2,9-3,4 (m, 6H), 3,57 (bq, IH), 3,67-3,87 (m, 3H), 4,25-4,43 (m, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, D20): karbonilni i gvanidinski ugljenici: 5 156.3, 168,2, 174,3, 174,6.

MS m/z 476 (M<+>+l)

Primer 68

(H00C-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig x 2 HC1

120 mg (0,126 mmol) (Bn00C-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z)2(videti Primer 50(iii)) hidrogenovano je u prisustvu 0,75 ml 1 N HC1, 7 ml EtOH (99,5%) i 150 mg Pd/C u toku 4 časa. UKlanjanje katalizatora filtriranjem na celitu i miliporoznom filtru, kao i isparavanje rastvarača i zatim sušenje zamrzavanjem, dalo je 66 mg (90%)nazivnog jedinjenja.

<a>H-NMR (500 MHz, 0,0): 5 1,05-1,38 (m, 7H), l,53-l,64(m, IH), 1,64-2,14 (m, 11H), 2,27-2,39 (m, IH), 3,03-3,28(m, 4H), 3,58-3,70 (m, IH), 3,7-3,8 (m, IH), 3,8-3,9 (d, 2H), 4,07-4,22 (m, 2H), 4,22-4,35 (m, IH), 4,28-4,5 (m, IH).

<13>C-NMR (75 MHz, D20): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 156,28, 166, 73, 170,14, 174,01.

Primer 69

HOOC-CH -CH-(HOOC-CH )-(R)Cha-Pro-Pigx2 HC1

(i) BnOOC-CH -CH -(BnOOC-CH )-(R)Cha-Pro-Pig(Z)

2 2 2

U hladnu (temperatura ledenog kupatila) smešu 100 mg (0,14 mmol) BnOOC-CH2-CH2-(R)Cha-Pro-Pig(Z) (videti primer 67) i)) i 80 mg (0,57 mmol) kalijum karbonata u 4 ml CH2C12 pažljivo je dodan rastvor rastvor 64 mg (0,21 mmol) Tfo-CH2-C00Bn rastvorenog u 1 ml CH2C12. Reakciona smeša je ostavljena na 0 C 30 minuta pa je puštena da dostigne sobnu temperaturu u toku 2 časa, posle čega je u toku 30 minuta zagrejana na temperaturu refluksovanja, i na kraju je ostavljena preko noći na sobnoj temperaturi. Isparavanje rastvarača, a zatim impulsna hromatografija, uz korišćenje CH 2 Cl 2/ MeOH (97/3) kao sredstva za ispiranje, dalo je 65 mg (54%) naziv-

nog jedinjenja.

(ii) HOOC-CH 2 -CH 2 -(HOOC-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig x 2 HC1

65 mg (0,08 mmol) Bn00C-CH2-CH2-(Bn00C-CH2)-(R)Cha-Pro-Pig(Z) rastvoreno je u 10 ml EtOH/lM HC1 (9/1) i hidrogenovano preko 10% Pd/C u toku 3 časa na atmosferskom pritisku. Filtriranje katalizatora, isparavanje rastvarača i sušenje zamrzavanjem iz vode dalo je 40 mg (97%) nazivnog jedinjenja u vidu belog praška.

<13>C-NMR (125 MHz, MeOD): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 157,5, 167,2, 169,1, 173,7 i 174,1.

Primer 70

HOOC-CH -(R)Cgl-Aze-(R,S)Itp x2HC1

2

(i) Boc-(R)Cgl-Aze-(R,S)Itp(Ts)

Boc-(R)Cgl-Aze-OH (videti Pripremanje polaznih materijala) (400 mg, 1,17 mmol), H-(R,S)Itp(Ts) (videti pripremanje polaznih materijala) (366 mg, 1,23 mmol) i DMAP (286 mg, 2,34 mmol) rastvoreno je CH3CN (6 ml) i rashlađeno na 5 C. Dodano je EDC (236 mg, 1,23 mmol) i dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. OUTN je uklonjeno, a ostatak je rastvoren u MeOO/ EtOAc/H 2 0. Izdvojen organski sloj je isprana u K 2 CO *3 (zasić.), 2 M KHSO, slanom rastvoru i sušen (NaSO). Isparavanje rastvarača

4 2 4

dalo je čvrstu belu materiju, 688 mg (85%).

MS m/z 620 (M<+>+l).

(ii) H-(R)Cgl-Aze-(R,S)Itp(Ts)

Boc-(R)Cgl-Aze-(R,S)Itp(Ts) (500 mg, 08 mmol) rastvoreno je u CH 2 Cl 2 (50 ml) pa je kroz rastvor produvavan HC1 (g) oko 4 minute. Posle 45 minuta, rastvarač je uklonjen isparavanjem i dobijen proizvod je rastvoren u EtOAc/MeOH/H20 i kiseli rastvor je obrađen pomoću 2 M NaOG(vod. ) na pH = 8-9. Organski je sloj izdvojen i sušen (Na^O^). Isparavanje rastvarača je dalo 425 mg (100%) nazivnog jedinjenja u vidu bele čvrste materije,

MS m/z 520 (M<+>+l)

(iii) BnOOC-CH-(R)Cgl-Aze-(R,S)Itp(Ts)

H-(R)Cgl-Aze-(R,S)Itp(Ts) (400 mg, 0,77 mmol), benzil-2-(para-nit-robenzolsulfoniloksi)acetat (videti Pripremanje polaznih materijala) i K 2 CO 3 (235 mg, 1,7 mmol) mešano je u CH 3CN (5 ml) na 45 C. Posle nekoliko časova konverzija je bila svega 25%, pa je zbog to-ga temperatura podignuta na 60 C i dodano je još benzil-2-(para-nitrobenzolsulfoniloksi)acetata. Reagujuća smeša je mešana 48 časova (početni materijal:proizvod/25:63), a potom dorađena. Rastvarač je isparen a ostatku je dodano Et0Ac/H20. Faze su razdvojene i vodena faza je dva puta isprana u EtOAc, pa je potom kombinovana organska faza isprana u K C0 (zasić. ), 2 M KHSO , H 0 2 3 4 2 i sušena (Na^O^). To je dalo, nakon povratnog ekstrahovanja kiselkastog KHSO , oko 340 mg materije, prečišćene pomoću RPLC. Time je dobijeno 34 mg (7%) nazivnog jedinjenja.

MS m/z 668 (M<+>+l).

(iv) H00C-CH2-(R)Cgl-Aze-(R,S)Itp x 2 HC1

Bn00C-CH2-(R)Cgl-Aze-(R,S)Itp(Ts) (34 mg, 0,05 mmol) rastvoreno je u THF (5 ml) a NH (g) je destilovan (40 ml) u reakcioni balon sa hlađenjem suvim ledom. Dodan je Na(g) i pojavila se tamno plava boja. Reagujuća smeša je mešana 5 minuta pre no što je gašena po-moću HOAc (50 ul). Hladnja sa suvim ledom je uklonjen i NH (t.) pušteno da ispari. Ostatku su dodavani H"20 i HOAc do pH = 7. Suše-nje zamrzavanjem i pripremna RPLC dali su nekoliko frakcija koje su analizirane pomoću FAB-MS. Dve frakcije su sadržale željeno jedinjenje, 3 mg (10%) nakon"sušenja zamrzavanjem pomoću 2,2 ekvivalenta 1 M HC1.

MS m/z 424 (M++l).

Primer 71

HOOC-CH2- ( R) Cha-Aze- ( R, SH tp

(i) Boc-(R)Cha-Aze-(R,S)Itp(Ts)

Boc-(R)Cha-Aze-OH (videti Pripremanje polaznih materijala) (169 mg, 0,5 mmol), H-(R,S)Itp(Ts) (videti Pripremanje polaznih materijala) (155 mg, 0,52 mmol), DMAP (122 mg, 1 mmol) rastvoreno je u CH3CN (2,5 ml) i ohlađeno na 5C. Dodano je EDC x HC1 (115 mg, 0.6 mmol) i dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Naknadno je dodano (0,5 ekvivalnta) H-(R,S)Itp(Ts) i EDC posle me-šanja preko noći. Reakciona smeša je mešana još jednu noć i dora-đena kako je opisano za Boc-(R)Cgl-Aze-(R,S)Itp(Ts) u prethodnom slučaju (Primer 70). To je dalo 260 mg sirovog proizvoda. Preči-šćavanje pomoću RPLC dalo je 180 mg (57%) nazivnog jedinjenja.

MS m/z 634 (M++D.

(ii) HOOC-CH 2-(R)Cha-Aze-(R,S)Itp

Boe-(R)Cha-Aze-(R,S)Itp(Ts) (180 mg, 0,28 mmol) rastvoreno je u CH2C12(20 ml) i HCl(g) je produvavan kroz rastvor oko 4 minuta. Polse 45 minuta rastvarač je uklonjen isparavanjem i dobijeni proizvod je rastvoren u CH2C12i ispran u 2 M NaOH do pH = 8-9. Faze su razdvojene i organska faza je sušena (Na2S04) i isparena da bi dala 163 mg (oko 100%).

MS m/z 534 (M<+>+l).

(iii) H-(R)Cha-Aze-(R,S)Itp(Ts)

H-(R)Cha-Aze-(R,S)Itp(Ts) (80 mg, 0,15 mmol), K 2 C0 3 (45 mg, 0,33 mmol) i Br-CH ** COOBn (39 mg, 0,17 mmol) mešano je u CH 3CN (1,5 ml) na 60 u toku 2,5 časa. Rastvarač je isparen, a ostatak je rastvoren u EtOAc/H 20. Faze su razdvojene i organska faza je isprana 10% limunovom kiselinom i sušena (NaaS04). Isparavanje rastvarača dalo je 171 mg sirovog proizvoda koji je prečišćen RPLĆ-om da bi dao 53 mg (52%) nazivnog jedinjenja.

MS m/z 681 (M<+>+l).

(iv) H00C-CH2-(R)Cha-Aze-(R,S)Itp

BnOOC-CH 2-(R)Cha-Aze-(R.S)Itp(Ts) (50 mg, 0,07 mmol) obrađeno je kako je opisano za Bn0OC-CH2-(R)Cgl-Aze-(R,S)Itp(Ts) (videti Primer 70(iv)). To je dalo smešu proizvoda koja je prečišćena pomoću RPLC i dala 12 mg jedne 1:1 smeše nazivnog jedinjenja sa jednim redukovanim oblikom koji se javlja kod mase 439 )m/z).

MS m/z 438 (M<+>+l).

Primer 72

H-{R)Cha-Pic-(R,S)Itp x 2 HC1

(i) Boc-(R)Cha-Pic-(R,S)Itp(Ts)

Na soboj temperaturi su 2,1 g (5,5 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-OH (videti Pripremanje polaznih materijala), 1,0 g (8,2 *mmol) DMAP i 1,7 g (5,8 mmol) H-(R,s)Itp(Ts) (videti Pripremanje polaznih materijala) rastvoreni u 40 mL acetonitrila. Posle nekoliko minuta mešanja dodano je 1,1 g (5,8 mmol) EDC i mešanje je nastavljeno sledećih 60 časova. Rastvarač je uklonjen u vakuumu a ostatak je rastvoren u CHC1 , ispran vodom, 0.3M KHSO i K CO (vod. ) i sušen (Na SO ).

2 2 4 2 3 2 4

Isparavanje rastvarača i filtriranje kroz silika gel dalo je 2,43 g (67%) proizvoda.

MS m/z 661 (M<+>+l)

(ii) Boc-(R)Cha-Pic-(R,S)Itp

2,4 g (3,6 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-(R,S)Itp(Ts) rastvoreno u 15 mL THF i NH (g) kondenzovano je u balonu polse čega je dodan Na. Reakcija je ugašena posle 5 minuta sirćetnom kiselinom pa su NHg i THF ispareni. Ostatak je sušen zamrzavanjem iz vode i prećišćen RPLC-om (CH 3 CN/0,1MNH 4OAc, 6/4) da bi se dobilo 0,93 g (51%) že-ljenog proizvoda.

MS m/z 507 (M++D

(iii) H-(R)Cha-Pic-(R,S)Itp x 2 HC1

Na sobnoj temperaturi je 50 mg (0,099 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-(R,S)Itp rastvoreno u etilacetatu zasićenom GCl(g). Posle 2 časa mešanja, rastvarač je uklonjen u vakuumu. Ostatak je sušen zamrzavanjem iz vode (tri puta) da bi se dobilo 37 mg (74%) želje-nog proizvoda.

MS m/z 407 (M<+>+l).

Primer 73

H00C-CH2-(R)Cha-Pic-(R,S)Itp x 2 HC1

(i) Boc-(R)Cha-Pic-(R,S)Itp(Z)

Na sobnoj temperaturi je rastvoreno 0,84 g (1,66 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-(R, S)Itp (videti Primer 72) u 10 mL CH2C12i 10 mL 0,5 M NaOH. Ukapavanjem je dodano 0,29 mL (1,82 mmol) Z-Cl. Posle 3 časa mešanja, faze su razdvojene i organska faza je isprana vodom i sušena preko Na^O^. Isparavanje i impulsna hromatografi ja (etilacetat/heptan 9/1) dali su 0,5 g (47%) željenog proizvoda.

MS m/z 641 (M<+>+l)

(ii) H-(R)Cha-Pic-(R,S)Itp(Z)

Na sobnoj temperaturi je 0 5 g (0,78 mmol) Boc-(R)Cha-Pic-

(R.S)Itp (Z) rastvoreno u etilacetatu zasićenom HC1. Dodana je vo-da pa je smeša olužena pomoću K 2 CO 3. Faze su razdvojene. Potom je vodena faza ekstrahovana vodom. Zatim je kombinovana organska faza sušena (Na 2 SO 4). Isparavanje rastvarača dalo je 0,3 g (7154) želje-nog proizvoda.

MS m/z 541 (M<+>+l)

(iii) Bn00C-CH2-(R)Cha-Pic-(R,S)Itp(Z)

0,29 g (0,5 mmol) H-(R)Cha-Pic-(R,S)Itp(Z), 0,15 g (1 mmol) K2C03sipano je u 25 mL acetonitrila. Dodano je 154 mg (o,6 mmol) benzi lbromacetata i smeša je mešana 4 časa na 50 C. Isparavanje i prečišćavanje pomoću RPLC (acetonitril:0,IM NH^OAc 70:30) dalo je oko 200 mg željenog proizvoda.

(iv) H00C-CH2-(R)Cha-Pic-(R,S)Itp x 2 HC1

200 mg Bn00C-CH"2-(R)Cha-Pic-(R,S)Itp(Z) rastvoreno je u etanolu. Dodana je mala kašičica 10" Pd na drvenom uglju i smeša je hidrogenizovana 4 časa. Filtriranje kroz "hyflo"-filtar, isparavanje rastvarača i potom sušenje zamrzavanjem iz vode, dalo je 53 mg že-ljenog proizvoda.

<1>H-NMR (300,13 MHz, D20): 5 1,0-2,35 (preklapanje m, 22H), 3,28-3,51 (m, 5H), 3,51-3,64 (m, IH), 3,75-4,03 (m, 3H), 5,03-5,14 (s široko, IH). Signal jednog od protona delimično je zaklonjen H-O-D signalom.

MS m/z 465 (M<+>+l).

Primer 74

H-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig x 2 HCL

(i) Boc-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig(Z)

Smeši 1,0 g (2,95 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro-OH (videti Pripremanje polaznih materijala), 1,44 g (11,8 mmol) DMAP, 1,12 g (3,25 mmol) H-(R, s)Hig(Z) (videti Pripremanje polaznih materijala) u 15 ml CH2C12dodano je 0,62 g (3,2 mmol) EDC i smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je isparen i ostatak je rastvoren u etil acetatu. Kada je organski sloj dva puta ispran rastvorom 0,3 M KHSO 4izdvojeno je ulje iz organskog sloja. Etil acetatni sloj je sušen (Na SO ) i filtriran. Ulje i vodeni sloj su

2 4^

potom ekstrahovani pomoću CH 2 Cl 2 . Organski sloj je sušen (Na 2 SO 4), filtriran i kombinovan sa pomenutom ETOAc fazom. Isparavanjem i prečišćavanjem sirovog proizvoda na hromatronu (Harrison research, model 7924T), koristeći ploču silicijum dioksida debljine 2 mm sa stepenastim gradijentom CH2Cl2/MeOH (97/3, 95/5, 90/10) kao sredstvom za ispiranje, dobijeno je 1,1 g (59°/.) nazivnog jedinjenja.

(ii) H-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig x 2 HCL

81 mg (0,13 mmol) Boe-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig(Z) rastvoreno je u 50 ml etil acetata zasićenog HC1. Smeša je puštena da odstoji jedan čas, pa je isparena, a ostatak je rastvoren u 10 ml etanola. Dodano je 40 mg Pd/C (5%), 1 ml vode i 0,5 ml rastvora 1 M HC1, pa je smeša hidrogenovana na atmosferskom pritisku preko noći. Filtriranje katalizatora hroz celit i isparavanje rastvarača i tri puta suše-nje isparavanjem iz vode, dalo je nazivno jedinjenje sa prinosom od 75%.

<1>H-NMR (D20 , 300 MHz):80,95-1,35 (m, 5H), 1,50-2,45 (m, 15H), 3,02 (bt, IH), 3,1-3,8 (m, 7H), 4,13 (d, IH), 4,38 (bd, IH)<13>C-NMR (D20, 75 MHz): karbonilni i gvanidinski ugljenici: 6 154,8, 168,9, 174,4.

MS m/z 393 (M<+>+l).

Primer 75

H00C-CH2-(R)Cgl-Pro-(R.S)Hig x 2 HC1

(i) H-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig(Z)

1 g (1,6 mmol) Boc-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig(Z) (videti Primer 74(i)) rastvoreno je u 100 ml etil acetata zasićenog HC1, pa je smeša ostavljena da odstoji jedan čas. Smeša je isparena i ostatak je rastvoren u CH Cl . Organski sloj je dva puta ispran rastvorom 0,2 M NaOH, sušen (Na 2 SO 4), filtriran i isparen, da bi dao 0,825 g (98 %) nazivnog jedinjenja.

(i i) BnO0C-CH2-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig(Z)

0,442 g (0,839 mmol) H-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig(Z), 0,256 g (1,85 mmol) K 2 CO 3 i 145 al (0,521 mmol) benzilbromacetata pomešano je u 12 ml THF. Smeša je mešana 1 čas na 40 C, a na sobnoj temperaturi preko noći. Posle isparavanja rastvarača ostatak je rastvoren u CH2C12i ispran jedan put vodom i jedan put slanim rastvorom. Organski sloj je sušen (Na 2 SO 4), filtriran i isparen a sirovi proizvod je preči-šćen na hromatronu (Harrison research, model 7924 T), koristeći ploču silicijum dioksida debljine 2 mm sa stepenastim gradijentom CH2Cl2/MeOH (97/3, 95/5, 90/10) kao sredstvom za ispiranje, dobijeno je 0,165 g (29%) nazivnog jedinjenja.

(iii) H00C-CH2-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig x 2 HC1

0,165 g (0,25 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R, S)Hig(Z) pomešano je sa 0,050 g Pd/C (5%), 0,7 ml rastvora 1 M HC1 i 10 ml etanola. Smeša je hidrogenovana na atnosferskom pritisku u toku četiri časa. Filtriranje katalizatora kroz celit i isparavanje rastvara-ča, pa zatim dva puta sušenje zamrzavanjem iz vode, dalo je 0, 1 g (75%) proizvoda.

VNMR (D20 . 300 MHz): 5 1,05-1,45 (m, 5H), 1,55-2,5 (m, 15H), 3,08 (bt, IH), 3,2-4,05 (m, 9H), 4,13 (d, IH), 4,30 (d, IH), 4,44

(m, IH)

<13>C-NMR (D20, 75 MHz): karbonilni i gvanidinski ugljenici: <5 154,9, 167,2, 169,4, 174,1.

Primer 76

H-(R)Cha-Pro-(R,S)Hig x 2 HC1

(i) Boc-(R)Cha-Pro-(R,S)Hig(Z)

0,72 g (1,95 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (videti Pripremanje polaznih materijala), 0,95 g (7,8 mmol) DMAP, 0,74 g (2,14 mmol) 82% čistog H-(R,S)Hig(Z) (videti Pripremanje polaznih materijala) u 10 ml CH Cl dodano je 0,486 g (2,54 mmol) EDC i smeša je mešana na

2 2

sobnoj temperaturi 3 dana. Smeša je razblažena pomoću CH2C12i isprana vodom, dva puta rastvorom 0.3M KHS04i jednom slanim rastvorom. Organski sloj je sušen (Na SO ), filtriran i isparen a sirovi proizvod je prečišćen impulsnom hromatografijom, koristeći CH2C12/ MeOH 95/5 kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobilo 0,450 g (33%) proizvoda.

(ii) H-(R)Cha-Pro-(R,S)Hig x 2 HC1

50 mg (0,078 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-(R,S)Hig(Z) rastvoreno je u 20 ml etil acetata zasićenog HC1. Smeša je puštena da odstoji jedan čas, isparena i ostatak je rastvoren u 10 ml etanola. Dodano je 20 mg Pd/C (5%) i 0,3 ml rastvora 1 M HC1, pa je smeša hidrogenovana na atmosferskom pritisku u toku dva časa. Filtriranje katalizatora kroz celit i isparavanje rastvarača, pa dva puta sušenje zamrzavanjem iz vode, dalo je 28 mg (76%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (D20, 300 MHz): 5 0,9-1,6 (m, 6H), 1,65-2,5 (m, 16H), 3,09 (t, IH), 3,31 (t, IH), 3,37-3,74 (m, 4H), 3,81 (m, IH), 4,35- 4,47

(m, 2H)

<13>C-NMR (D20, 75 MHz): karbonilni i gvanidinski ugljenici: 5 154,9, 169,8, 174,5.

Primer 77

H-(R)Cgl-Aze-Rig x 2 HC1

(i) Boc-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)

Rastvoru 0,50 g (1,6 mmol) H-Rig(Z) (videti Pripremanje polaznih materijala), 0,59 g (1,6 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-OH (videti Pripremanje polaznih materijala), 0,84 g (6,9 mmol) dimetilaminopiridina u 30 ml acetonitrila i 5 ml dimetilformamida dodano je 0,33 g (1,7 mmol) N-O-dimetilaminopropiD-N'-etilkarbodiimid hidrohlorida. Reagujuća smeša je mešana 3 dana pa je isparena i podeljena između vodenog kalijum bisulfata i metilen hlorida. Metilen hloridni sloj je ispran vodenim natrijum bikarbonatom i vodom, sušen (Na2S04) i isparen. Sirov materijal je filtriran u vakuumu kroz sloj si lika gela sa metilen hlorid/metanolom 9/1 da bi se dobilo 0,78 g (76%) željenog jedinjenja nakon isparavanja.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl 3): 5 0,8-1,9 (m, 27H), 2,4-2,6 (m, 2H), 2,78 (bt, 2H), 3,15-3,4 (m, 2H), 3,80 (bt, IH), 4,0-4,4 (m, 4H), 4,75 (bt, IH), 4,97 (bd, IH), 5,08 (s, 2H), 7,1-7,4 (m, 7H), 7,74 (b,

IH).

(ii) H-(R)Cgl-Aze-Rig(Z) x 2 HC1

Balon u kome je bio Boc-(R)Cgl-Aze-Rig(Z), 0,76 g (1,2 mmol), u 50 ml etil acetata, hlađen je u ledenom kupatilu. Suvi HC1 produvavan je u toku 5 minuta, pa je rastvor isparen da bi se dobilo 0,74 g (100%) dihidrohlorida u vidu belog praška.

<1>H-NMR (300 MHz, MeOD): 5 1,1-2,0 (m, 18H), 2,23 (m, IH), 2,68 (m, IH), 3,15-3,45 (m, 4H), 3,72 (bd, IH), 3,9-4,0 (bd, 2H), 4,27 (m, IH), 4,39 (m, IH), 4,78 (m, IH), 5,30 (s, 2H), 7,3-7,5 (m, 5H).

(iii) H-(R)Cgl-Aze-Rig x 2 HC1

Balon sa rastvorom 20 mg H-(R)Cgl-Aze-Rig(Z) i malom količinom 5% Pd/C hidrogenovan je na atmosferskom pritisku 1 h. Smeša je filtrirana kroz celit i isparena. Ostatak je liofilizovan sa nekoliko kapi koncentrovane HC1 dodane da bi se dobio proizvod. Prinos: 8 mg (52%).

^-NMR (300 MHz, D2O):61,1-2,0 (m, 18H), 2,37 (m, III), 2,75 Cm, IH), 2,75 (m, IH), 3,08 (bt, 2H), 3,39 (bt, 2H), 3,8-4,0 (m, 3H), 4,35-4,5 (m, 2H), 4,90 (m, IH).

<13>C-NMR (75,5 MHz, D20): gvanidinski i karbonilni ugljenici: 6 172,2, 169,4, 156,4.

Primer78

H00C-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig x2HC1

(i) Bn00C-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig(Z)

Smeša 0,20 g (0,33 mmol) H-(R)Cgl-Aze-Rig(Z) (videti Primer 77), 0,13 g kalijum karbonata, 80 mg natrijum jodida, 10 ml tetrahidro-furana i 10 ml acetonitrila grejana je 10 h na 60 C. RastvaraCl su ispareni a sirovi materijal je obrađen impulsnom hromatografijom na silika gelu koristeći metilen hlorid/metanol 92/8 kao sredstvo za ispiranje. Prinos: 0,13 g (58°/.).

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl 3): 6 0,9-2,1 (m, 18H), 2,45 (m, IH), 2,61 (m, IH), 2,81 (m, 2H), 2,88 (d, IH), 3,2-3,5 (m, 4H), 3,94 (m, IH), 4,0-4,25 (m, IH), 4,0-4,25 (m, 3H), 4,85 (m, IH), 5,12 (s, 2H), 5,14 (s, 2H), 6,9-7,2 (b, 2H), 7,2-7,5 (m, 10H), 7,95 (m, lh).

(ii) HOOC-CH,-(R)Cgl-Aze-Rig x 2 HC1

Smeša 0,12 g (0,18 mmol) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig(Z), 5 ml etanola, 3 kapi koncentrovane HC1 1 mala količina 5% Pd/C hidrogenvano je 1 čas na atmosferskom pritisku. Smeša je filtrirana kroz celit i isparena. Ostatak je liofilizovan u vodi da bi se dobilo 91 mg (98%) proizvoda.

1I-NMR (500 MHz, 0,0): 5 1,1-1,9 (m, 17H), 2,00 (m. IH), 2,29 (m,

ti

IH), 2,70 (m, IH), 3,10 (m, 2H), 3,34 (t, 2H), 3,83 (bd, 2H), 3,89 (dd. 2H), 4,0 (d, IH), 4,35 (m, 2H). 4,87 (m, IH).

<13>C-NMR (125,8 MHz, D20): gvanidinski i karbonilni ugljenici: 5 171,8, 169,6, 167,7, 156,3.

Primer 79

HOOC-CKL^-CRjCha-Pro-Rig x 2 HC1

(i) Boc-(R)Cha-Pro-Rig(Z)

Rastvoru 0,25 g (0,82 mmol) 4-aminoeti1-1-benziloksikarbonilamidino piperidin(H-Rig(Z)), (videti Pripremanje polaznih materijala), 0,32 g (0,82 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-0H (videti Pripremanje polaznih materijal), 0,40 g (3,3 mmol) dimetilaminopiridina u 10 ml acetonitrila i 2 ml dimetilformamida, dodano je 0,165 g (0,86 mmol) N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorida. Reagujuća smeša je mešana tri dana, potom isparena i podeljena između vodenog-kalijum bisulfata i metilen hlorida. Metilen hloridni sloj je ispran vodenim natrijum bikarbonatom i vodom, sušen (Na^O^) i isparen. NMR spektar sirovog proizvoda je bio zadovoljavajući, pa je proizvod koji je sadržao malo dimetilformamida korišćen u sledećoj fazi bez daljeg prečišćavanja.

<1>H-NMR (500 MHz, CDC13):80,8-2,2 (m, 32; od toga 1,41 (s, 9H)), 2,34 (m, IH), 2,77 (bt, 2H), 3,10 (m, IH), 3,29 (m, IH), 3,40 (m, IH), 3,83 (m, IH), 4,17 (m, 2H), 4,30 (m, IH), 4,54 (m, IH), 5,07 (m, IH), 5,08 (s, 2H), 7,03 (m, IH), 7,05-7,4 (m, 7H).

(ii) H-(R)Cha-Pro-Rig(Z)

Balon u kome je bio sirovi Boc-(R)Cha-Pro-Rig(Z) u 100 ml etil acetata hlađen je u ledenom kupatilu. Suvi HC1 je produvavan u toku 5 minuta, pa je smeša isparena da bi se uklonio višak HC1. Proizvod je rastvoren u vodi i dva puta ekstrahovan etil acetatom da bi se uklonio dimetilformamid iz prethodne faze. Vodena faza je olužena pomoću NaHCO^vod. ) i dva puta ekstrahovana metilen hloridom. JCombinova organska faza je isprana vodom, sušena(Na 2 S0 i)i isparena. Prinos: 0.37 g (817.) u dva stupnja.

<1>H-NMR (300 MHz, CDC^): 5 0,8-2,4 (m, 24H), 2,82 (bt, 2H), 3,26 (bt, 2H), 3,42 (bq, IH), 3,70 (m, 2H), 4,19 (m, 2H), 4,49 (bd, IH), 5,11 (s, 2H), 6,9-7,5 (m, 8H).

(iii) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-Rig(Z)

Smeša 0,18 g (0,32 mmol) H-(R)Cha-Pro-Rig(Z), viška natrijum karbonata i 10 ml acetonitrila zagrevana je 2 časa na 60 C. Rastvarači su ispareni i sirov materijal je izložen impulsnoj hromatografiJi na silika gelu, koristeći metilen hlorid/metanol 95/5 kao sredstvo za ispiranje. Prinos 0,20 g (88%).

VNMR (300 MHz, CDC13): 5 0,8-2,1 (m, 23H), 2,37 (m, IH), 3,1-3,5 (m, 7H), 4,0-4,2 (m, 2H), 4,54 (m, IH), 5,01 (m, 4H), 6,9-7,5 (m, 13H).

(iv) H00C-CH2-(R)Cha-Pro-Rig x 2 HC1

Smeša 0,15 g (0,21 mmol) Bn00C-CH2-(R)Cha-Pro-Rig(Z), 10 ml etanola, 4 kapi koncentrovane HC1 i male količine 5% Pd/C hidrogenovana je 1 čas na atmosferskom pritisku. Smeša je filtrirana kroz celit i isparena. Ostatak je liofilizovan u vodi da bi se dobilo 95 mg (64%) proizvoda.

<1>H-NMR (500 MHz, MeOD): 5 0,85-2,1 (m, 23H), 2,30 (m, IH), 3,10 (m, 2H), 3,25 (m, IH), 3,35 (m, 2H), 3,54 (m, IH), 3,85-4,0 (m, 3H), 4,03 (d, IH), 4.41 (m, IH), 4,5 (m, IH).

<13>C-NMR (125,8 MHz, D20): gvanidinski i karbonilni ugljenici:8174,0, 168,9, 168,1, 157,5.

Primer 80

H00C-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig x 2 HC1

(i) Boc-(R)Cha-Aze-Rig(Z)

Rastvoru 0,25 g (0,82 mmol) 4-aminoetil-l-benziloksi-karbonilami-dino piperidin (H-Rig(Z)) (videti Pripremanje polaznih materijala), 0,31 g (086 mmol) Boc-(R)Cha-Aze-OH (videti Pripremanje polaznih materijala), 0,40 g (3,3 mmol) dimetilaminopiridina u 10 ml acetonitrila i 2 ml dimetilformamida, dodano je 0,17 g (0,86 mmol) N-(3-dimetilaminopropil)-N'-etilkarbodiimid hidrohlorida. Reaguju-ća smeša je mešana 3 dana, potom isparena i podeljena između vodenog kalijum bisulfata i metilen hlorida. Metilen hloridni sloj je ispran vodenim natrijum bikarbonatom i vodom, sušen (Na^O^) i isparen. Sirov proizvod koji je sadržao malo dimetilformamida korišćen je u sledećem stupnju bez daljeg prečišćavanja.

<1>H-NMR (500 MHz, CDCl^: 5 0,85 (m, IH), 0,97 (m, IH), 1,1-1,75 (m, 26H; od toga 1,41 (s, 9H)), 1,82 (bd, IH), 2,53 (m, 2H), 2,77 (bt, 2H), 3,25 (m, 2H), 4,03 (q, IH), 4,08 (m, lh), 4,18 (m, 2H), 4,29 (m, IH), 4,78 (m, IH), 4,97 (m, IH), 5,09 (s, 2H), 7,1-7,4 (m, 7H), 7,65 (m, IH).

(ii) H-(R)Cha-Aze-Rig(2)

Balon sa sirovim proizvodom Boc-(R)Cha-Aze-Rig(Z) u 100 ml etil acetata hlađen je u ledenom kupatilu. Suvi HC1 je produvavan 5 min i rastvor je isparen da bi se uklonio višak HC1. Proizvod je rastvoren u vodi i dva puta ekstrahovan etil acetatom da bi se uklonio dimetilformamid iz prethodnog stupnja. Vodena je faza olu-žena pomoću NaHCO^vod. ) i dva puta ekstrahovana metilen hloridom. Kombinovana organska faza je isprana vodom, sušena (Na 2 SO 4) i isparena. Prinos: 0,31 g (70%) u dva stupnja.

<1>H-NMR (300 MHz, CDCl^: 5 0,8-1,9 (m, 20H), 2,48 (m, IH), 2,73 (m, IH), 2,85 (m, IH), 3,25 (m, IH), 3,35 (m, 2H), 4,05 (q, IH), 4.1- 4,25 (m, 3h), 4,86 (m. IH), 5,12 (s, 2H), 6,9-7,2 (m, 2H), 7.2- 7,45 (m, 5H), 7,93 (m, IH).

(iii) BnOOC-CH -CH -(R)Cha-Aze-Rig(Z)

2 2

Rastvor 0,31 g (0,57 mmol) H-(R)Cha-Aze-Rig(Z) i 93 mg (0,57 mmol)

benzil akrilata u 5 ml etanola držan je nedelju dana na sobnoj temperaturi. Zatim je isparen i izložen impulsnoj hromatografiji na sillka gelu, koristeći metilen hlorid/metanol 94/6 kao sredstvo za ispiranje. Prinos: 0,20 g (49%).

<1>H-NMR (500 MHz, CDCl^:80,8-1,0 (m, 2H), 1,1-1,8 (m, 18H), 2,48 (m, IH), 2,54 (bt, 2H), 2,68 (m, 2H), 2,81 (bt, 2H), 2,87 (m, IH), 3,20 (m, IH), 3,25 (m, IH), 3,31 (m, IH). 4,04 (q, IH), 4,1-4,2 (m, 3H), 4,84 (dd, IH), 5,05-5,15 (m, 4H), 7,0-7,5 (m, 12H), 8,03 (m, IH).

(iv) H00C-CH2-CH2-(R)Cha-Aze-Rig x 2 HC1

2 2

Nazivno jedinjenje je dobijeno i prečišćeno na isti način kako je opisano u primeru 80 od 0,20 g (0,28 mmol) Bn00c-CH2-CH2~(R)Cha-Aze-Rig(Z). Prinos: 30 mg (19%) soli dihlorida.

<1>H-NMR (500 MHz, CDCl 3): 8 1,0-1,9 (m, 20H), 2,33 (m, IH), 2,70 (m, IH), 2,83 (m, 2H), 3,10 (m, 2H), 3,3-3,4 (m, 4H), 3,85 (bd, 2H), 3,92 (m, rotamer), 4,14 (t, IH), 4,17 (m, rotamer), 4,31 (m, IH), 4,46 (m, IH), 4,89 (m, IH), 5,18 (m, rotamer).

<13>C-NMR (125,8 MHz, D20): gvanidinski i karbonilni ugljenici:8175,4, 171,8, 168,8, 156,3.

Primer 81

H00C-CH2-(R)Cha-Pro-(S)Itp x 2 HC1

(i) H00C-CH 2-(RJCha-Pro-(S)Itp x 2 HC1

Na sobnoj temperaturi je rastvoreno 0,87 g (2,36 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (videti Pripremanje polaznih materijala), 0,78 d (4,74 mmol) DMAP i 0,70 g (2,36 mmol) H-(S)Itp(TS) (videti Pripremanje polaznih materijala) u 12 mL acetonitrila. Posle mešanja od 20 minuta dodano je 0,59 g (3,07 mmol) EDC. Posle 18 časova je u vakuumu uklonjen rastvarač, a ostatak je rastvoren u CH2C12, ispran vodom, limunovom kiselinom (10%), KHCO (vod. ), vodom i sušen na Na^O^. Isparavanje je dalo 1,74 g (>100% prinosa (čistoće oko 60%)) željenog proizvoda, koji je korišćen u sledećem stupnju bez daljeg prečišćavanja.

FAB-MS m/z = 647 (M<*>+l)

(ii) H-(R)Cha-Pro-(S)Itp(Ts)

Boc-zaštitna grupa je uklonjena na isti način kako je opisano za Boc-(R)Cha-Pic-(R,S)Itp(Z) (videti Primer 72(ii)) da bi se dobilo 0,75 g (81%) nazivnog jedinjenja.

FAB-MS m/z = 547 (M<*>+l)

(iii) BnOOC-CH2-(R)Cha-Pro-(S)11 p(Ts)

0,75 g (1,37 mmol) H-(R)Cha-Pro-(S)Itp(Ts), 0,38 g (2,74 mmol) K 2 C0 3 sipano je u 15 mL acetonitrila. Dodano je 0,39 g (1,65 mmol) benzilbromacetata i smeša je mešana 2 časa na 50 C. Isparavanje rastvarača, a zatim impulsna hromatografija, sa korišćenjem etil acetat/metanola 95/5 kao sredstva za Ispiranje, dalo je oko 530 mg željenog proizvoda.

FAB-MS m/z = 695 (M<+>+l)

(iv) H00C-CH 2-(R)Cha-Pro-(S)Itp x 2 HC1

0,53 g (0,76 mmol) Bn00C-CH2"(R)Cha-Pro-(S)Itp(Ts) rastvoreno je u 15 mL THF. NH3(g) je kondenzovano u balon i dodan je Na(m). Reakcija je ugašena nakon 30 minuta sirćetnom kiselinom a NH3i THF su ispareni. Ostatak je sušen zamrzavanjem iz vode i sirov proizvod je prečišćen RPLC-om (acetonitril/0, IM HOAc 15/85), da bi se dobilo 0,25 g (61%) željenog proizvoda posle sušenja zamrzavanjem iz vodenog HC1.

<1>H-NMR (500,13 MHz, D20): 5 0,9-2,09 (preklapanje m, 20H), 2,22-

2,35 (m, IH), 3,2-3,36 (m, 4H), 3,44-3,62 (preklapanje m, 2H), 3,7-3,8 (m, IH), 3,87-3,99 (ra, 2H), 4,33-4,48 (preklapanje m, 2H).

<13>C-NMR (500,13 MHz, D20): gvanidinski ' i karbonilni ugljenici: S 154,3, 168,1, 169,0 i 174,2.

Primer82

H-(R)Cha-Pro-(R.S)Nig x 2 HC1

(i) Boc-(R)Cha-Pro-(R,S)Nig(Z)

174 mg (0,471 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (videti Pripremanje polaznih naterijala), 229 mg (1,87 mmol) DMAP, 130 mg (0,471 mmol) H-(R,S)Nig(Z) (videti Pripremanje polaznih materijala) pomešano je u 2 ml CH2C12 , pa Je dodano 117 mg (0,61 mmol) EDC i smeša je me-šana četiri dana. Smeša je rastvorena CH Cl^-om i isprana vodom, dva puta rastvorom 0,3M KHSO i jednom sianim rastvorom. Organski sloj je sušen (Na 2 SO 4), filtriran i isparen a sirov proizvod je dva puta prečišćen impulsnom hromatografijom, koristeći CH2C12/ MeOH 95/5 kao sredstvo za ispiranje prvi put, i CH2Cl2/MeOH 97/3 kao sredstvo za ispiranje drugi put, da bi se dobilo 0,104 g (35%) nazivnog jedinjenja.

MS m/z 627 (M<+>+l)

(ii) H-(R)Cha-Pro-(R,S)Nig x 2 HC1

10 mg (0,016 mmol) Boe-(R)Cha-Pro-(R, S)Nig(Z) rastvoreno je u 15 ml etil acetata zasićenog HCl-om. Smeša je puštena da odstoji pola časa. Smeša je isparena i ostatak je rastvoren u 6 ml etanola i 8 mg 5% Pd/C (5%), dodano je o, 1 ml rastvora IM HC1 i smeša je hidrogenovana na atmosferskom pritisku jedan i po čas. Posle filtriranja kroz "hyflo"-filtar i isparavanja rastvarača, dobijeno je 4 mg nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (300 MHz, DO): 6 0,9-1,58 (m, 6H), 1,58-2,45 (m, 13H),

2,65 (m, IH), 3,19 (m, IH), 3,34 (d, 2H), 3,4-3,73 (m, 4H), 3,82 (m, IH), 4,34-4,49 (m, 2H).

<13>C-NMR (75 MHz, D20): gvanidinski i karbonilni ugljenici: 5 155,1, 169,9 i 174,8.

Primer 83

H-(R)Pro-Phe-Pabx 2HC1

(i) H-(R)Pro-Phe-Pab x 2 HC1

Smeši 1,2 g (3,31 mmol) Boc-(R)Pro-Phe-OH (videti Pripremanje polaznih materijala) i 1,70 g (13,91 mmol) DMAP u 40 ml CHgCN na sobnoj temperaturi dodano je 0,98 g (3,35 mmol) H-Pab(Z) (videti Pripremanje polaznih materijala) rastvoreno u 1 ml DMF. Najdn 2 časa mešanja, reagujuća smeša je rashlađena na -18 C i po delovima je dodano 0,66 g (3,48 mmol) EDC pa je reagujuća smeša ostavljena da stoji preko noći na sobnoj temperaturi. Rastvarač je isparen a ostatak je rastvoren u 100 ml EtOAc i ispran u 1 x 30 ml vode, 3 x 30 ml 0,3M KHSO , 1 x 30 ml Na C0 , 1 x 30 ml vode i sušen.

4 2 3

Isparavanje rastvarača pa impulsna hromatografija, koristeći CH2Cl2/MeOH (95/5) kao sredstvo za ispiranje, dalo je 0,691 g (38 %) nazivnog jedinjenja.

(ii) H-(R)Pro-Phe-Pab(Z)

0,673 g Boc-(R)Pro-Phe-PaMZ) rastvoreno je u 30 ml EtOAc i rastvor je zasićen u toku nekoliko minuta gasovitim HC1 (iz rastvora se istalozila bela čvrsta materija). Rastvarač i višak HC1 su ispareni i ostatku je dodano 60 ml EtOAc, pa je organska faza isprana u 2 x 20 ml 2M NaOH. Voda od ispiranja je ekstrahovana pomoću 1 x 25 ml EtOAc pa je to kombinovano sa drugom EtOAc-fazom, a kombinovana organska faza je isprana vodom, sušena i isparena, da bi se dobilo 560 mg (98%) željenog proizvoda.

<*>H-NMR (500 MHz, CDC13):8 1,5-1,74(m, 3H), 1,98-2,05 (m, IH),

2,78-2,85 (m, IH) , 2,90-2,963 (m, IH), 3,0-3,2 (ABX-sistem centriran kod 3,1, 2H), 3,62 (dd, IH), 4,3-4,45 (ABX-sistem centriran kod 4,37, 2H), 4,58 (q, IH), 5,22 (s, 2H), 6,96 (bt, IH), 7,1-7,4 (m, 10H), 7,46 (d, 2H), 7,76 (d, 2H), 8,12 (d, IH).

(iii) H-(R)Pro-Phe-Pab x 2 HC1

200 mg H-(R)Pro-Phe-Pab(Z) rastvoreno je u 10 ml 95% EtOH i 2 ml vode, pa je smeša hidrogenovana preko 5% Pd/C na atmosferskom pritisku u toku 5 časova. Filtriranje katalizatora i dodavanje 1 ml IM HC1, a zatim isparavanje i sušenje zamrzavanjem iz vode dalo je nazivno jedinjenje sa prinosom od 88%.

<a>H-NMR (500 MHz, CD 3OD): 5 1,51-1,59 (m, IH), 1,69-1,80 (m, IH), 1,87-1,97 (m, IH),2,19-2,29 (m, IH), 2,90 (dd, IH), 3,30-3,33 (m, 3H, delimično pokriveno maksimumom rastvarača), 4,27 (m, IH), 4,43-4,54 (AB-sistem centriran kod 4,48; 2H), 4,75-4,81 (m, IH), 4,87 (s, 2H), 7,2-7,3 (m, 5H), 7,45 (d, 2H), 7,75 (d, 2H).

<13>C-NMR (125 MHz, D20): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 166,7, 170.1 i 173,4.

Primer 84

H00C-CH2-(R)Pro-Phe-Pab x 2 HC1

(i) BnOOC-CH 2-(R)Pro-Phe-Pab(Z)

U rastvor 244 mg (0,463 mmol) H-(R)Pro-Phe-Pab(Z) (videti Primer 83) i 159,9 mg (1,157 mmol) K,C03 u 8 ml DMF/CH3CN (5/3) dodano je 127.2 mg (0,555 mmol) benzilbrom acetata rastvorenog u 2 ml DMF, pa je smeša meša na 60 C u toku 1,5 h, a na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je isparen a ostatak je rastvoren u 50 ml EtOAc, ispran u 2 x 20 ml vode i sušen (Na^O^). Isparavanje rastvarača, pa impulsna hromatografija, uz korišćenje CH2Cl2/MeOH (9/1) kao sredstva za ispiranje, dalo je 176 mg (56%) nazivnog jedinjenja u vidu bele čvrste materije.

<1>H-NMR (300 MHz, CD30D): 5 1,45-1,80 (m, 3H), 2,06 (m, IH), 2,54 (m, IH), 2,92-3,28 (m, 6H), 4,3-4,5 (ABX-sistem centriran kod 5 = 4,4, 2H), 7,1-7,4 (m, 15H), 7,43 (d, 2H), 7,75 (d, 2H), 7,932 (d,

IH).

(ii) H00C-CH2-(R)Pro-Phe-Pab x 2 HC1

170 mg (0,252 mmol) BnOOC-CH-(R)Pro-Phe-Pab(Z) rastvoreno je u 12 ml EtOH/vode (5/1) i hidrogenovano preko 57. Pd/C u toku 4,5 h. Katalizator je isfiltriran, rastvarač isparen a ostatak sušen zamrzavanjem iz HC1 (vod.), da bi se dobilo nazivno jedinjenje.

<1>H-NMR (500 MHz, CIHDD): 6 1,62 (m, IH), 1,82 (m, IH),2,08 (m, IH), 2,38 (m, IH), 2,90 (dd, IH), 3,25-3,35 (m, 2H, delimično pokriveno maksimumom rastvarača), 3,80 (m, IH), 4,08-4,19 (AB-sistem centriran kod 5 = 4,19, 2H), 4,39 (m, IH), 4,45-4,58 (AB-sistem centriran kod 6 = 4,50, 2H), 4,80 (s, IH), 7,20-7,35 (m, 5H), 7,45 (d, 2H), 7,75 (d, 2H).

<13>C-NMR (125 MHz, n20): amidinski i karbonilni ugljenici: 5 166,8, 169,1, 169,5 i 173,2.

Primer 85

H-(R)Phe-Phe-Pab

(i) Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z)

Boc-(R)Phe-Phe-OH (16,4 mmol) (videti Pripremanje polaznih materijala), Pab(Z)-HCl (10,0 mmol) i 4-dimetilaminopiridin (24,6 mmol) rastvoreno je u 50 mL acetonitrila. Rastvor je rashlađen do temperature ledene vode i dodan je l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkar-bodiimid hidrohlorid (21,3 mmol. Rashladno kupatilo je uklonjeno i reagujuća smeša je mešana preko noći. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom, ostatak rastvoren u 50 mL etilacetata i dobijeni rastvor ekstrahovan pomoću 50 mL vode. Boc-(R)Phe-Phe-Pab(Z) istaložen iz dvofazne smeše filtriran je i ispran vodom da bi se dobilo 8,7 g (78%) nakon sušenja pod vakuumom na 45 C u toku 24 h.<1>H-NMR (200 MHz, d-CHCl3 i d4-CH30H); 5 8,35-7,00(m, 19H), 4,63(t, lh), 4,3-4,1 (m, IH), 3,40-2,70 (m, 6H), 1,30 (s, 9H).

(ii) H-(R)Phe-Phe-Pab(Z)

Boe-(Ft)Phe-Phe-Pab(Z) (10,3 mmol) rastvoren je u 70 mL etilacetata

i dodano je 31 mL 3,3M etilacetat/HCl. Smeša je mešana 4 h, posle čega Je so hidrohlorida H-(R)Phe-Phe-Pab(Z) isfiltrirana i isprana nekolikim dozama etilacetata. So je rastvorena u smeši 50 mL meti-lenhlorida, 50 mL IM kalijum karbonata i oko 5 mL etanola. Organski sloj je sakupljen i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 5,0 g H-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (84%).<1>H-NMR (200 MHz, d6DMSO); 6 9,1 (s, 2H), 8,59 (m, IH), 8,1 (m, IH), 7,90 (d, 2H), 7,4-7,0 (m, 17H), 5,09 (s, 2H), 4,58 (m, IH), 4,31 (m, 2H), 3,1-2,7 (m, 4H).

(iii) H-(R)Phe-Phe-Pab

H-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (0,42 mmol) rastvoreno je u 10 mL tetrahidro-furana i 1 mL vode. Sipan je paladijum na drvenom uglju (42 mg) u rastvor i smeša je hidrogenovana na pritisku vodonika od 3,2 bar u Parr-ovom vibratoru u toku 2 dana. Posle potpunog hidrogenova-nja, smeša je razblažena metanolom i katalizator je isfiltriran. Isparavanje rastvarača dalo je sirov H-(R)Phe-Phe-Pab koji je pre-čišćen hromatografijom na neutralnom aluminijum oksidu (70-230 mesh-a), uz ispiranje metilennhlorid/metanol/amonijumhidroksidom (80:20:2). Prinos: 76 mg nazivnog jedinjenja (41%).<1>H-NMR (200 MHz, d6-DMSO); 5 7,61 (d, 2H), 7,4-7,0 (m, 12H), 4,64 (m, IH), 4,44 (m, 2H), 4,13 (t, IM), 3,1-2,8 (m, 4H).

Primer 86

HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab .

(i) Me00C-C0-(R)Phe-Phe-Pab(Z)

H-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (0,87 mmol) (videti Primer 85(iii)) rastvoreno je u 10 mL tetrahidrofurana. Rastvor je rashlađen na kupatilu ledene vode i dodan je trietilamin (1,73 mmol), pa zatim metiloksa-lilhlorid 0,95 mmol). Rashladno kupatilo je uklonjeno i reagujuća smeša je mešana 18 časova na temperaturi okolne sredine. Reagujuća smeša je razblažena etilacetatom i ekstrahovana vodom. Organska faza je sakupljena i rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da bi se dobilo 0,45 g MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (78%), korišćeno u sledećem stupnju bez daljeg prečišćavanja. TSP-MS nađeno m/z 664

(proračunski za M<+>(C H NO) 664).

37 38 5 7

(ii) H00C-C0-(R)Phe-Phe-Pab(Z)

MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (0,68 mmol) rastvoreno je u 4 mL tetrahidrofurana i 2 mL vode. Dodan je litijumhidroksid (2,6 mmol) i reagujuća smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1,5 čas. Posle potpune hidrogenolize, reagujuća smeša je razblažena vodom (25 mL) i okiseljena dodavanjemm 0,5 mL sirćetne kiseline. Talog je filtriran i ispran vodom u nekoliko navrata, da bi se dobilo 0,40 g sirovog H00C-C0-(R)Phe-Phe-Pab(Z) posle sušenja u vakuumu, na 45 C i u trajanju od 24 h. Sirov proizvod je rastvoren u 10 mL etanola" i 1 mL vode. Rastvor je doveden do temperature refluksovanja i nerastvorljivo nazivno jedinjenje je isfiltrirano, pa je dobijeno 0,23 g H00C-C0-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (41% u dva stupnja).<l>H-NMR (200 MHz, d 6-DMS0);88,62 (m, 2H), 8,41 (d, IH), 7,89 (d, 2H), 7,4-6,9 (m, 17H), 5,10 (s, 2H), 4,54 (m, 2H), 4,34 (m, 2H), 3,2-2,6 (m, 4H).

(iii) H00C-C0-(R)Phe-Phe-Pab

HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (0,20 mmol) rastvoren je u 20 mL tetrahidrofurana i 5 mL vode. U rastvor je sipan paladijum na drvenom uglju (52 mg) i smeša je hidrogenovana na pritisku vodonika od 3,2 bar u Parr-ovom vibratoru u toku 2 dana. Posle potpune hidrogenolize, smeša je razblažena metanolom (40 mL) i katalizator je isfiltriran. Isparavanje rastvarača je dalo 50 mg nazivnog jedinjenja (49%).<:>H-NMR (200 MHz, d8-DMSO); 5 9,2(s), 8,78(d), 8,60(d), 7,91(m), 7,79(d, 2H), 7,35-6,8(m, 12H), 4,6-4,0(m, 4H), 3,0-2,6(m, 4H).

Primer 87

HOOC-CHL^- ( R) Phe-Phe-Pab

(i) BnOOC-CH 2-(R)Phe-Phe-Pab(Z)

H-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (0,87 mmol) (videti Primer 85(ii)) i kalijum karbonat (2,6 mmol) rastvoreni su u 10 mL acetonitrila. Smeši je dodan jodbenzilacetat (0,95 mmol) i rastvor je zagrejan na 30 C i na toj je temperaturi mešan 2 dana. Posle potpune alkilacije, rastvarač je uklonjen a ostatak je rastvoren u 10 mL etilacetata. Rastvor je naglo ekstrahovan vodom (10 mL) i iz sabrane organske faze nazivno je jedinjenje izdvojeno taloženjem. BnOOC-CH^(R)Phe-Phe-Pab(Z) je isfiltrirano i sušeno pod vakuumom, na 45 C u toku 24 časa, da bi se dobilo 177 mg BnOOC-CH -(R)Phe-Phe-Pab(Z) (28%).<X>H-NMR (200 MHz, CDCl ); 6 7,79(d, 2H), 7,5-7, l(m, 22H), 6,55 (t, IH), 5,21(s, 2H), 5,03(s, 2H), 4,64(m, IH), 4,41(m, 2H), 3,3-2,6 (m, 7H).

(i i) H00C-CH 2-(R)Phe-Phe-Pab

Bn00C-CH2-(R)Phe-Phe-Pab(Z) (0,32 mmol) bio je rastvoren u 30 mL tetrahidrofurana i 3 mL vode/ Paladijum na drvenom uglju (41 mg) sipan je u rastvor i smesa je hidrogenovana pod pritiskom vodonika od 3,2 bar u Parr-ovom vibratoru u toku 2 dana. Posle potpune hidrogenolize, smeša je razblažena vodom (40 mL) i katalizator je isfiltriran. Isparavanje rastvarača dalo je 95 mg nazivnog jedinjenja (59%). TSP-MS nađeno 502 (proračunato za MH+ (C H NO) 28 32 5 4 502).

Primer 88

H-(R)Cha-Pro-Mig

(i) Boc-(R)Cha-Pro-Mig(Z)

Mešanoj smeši 0,344 g (0,93 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-0H (videti Pripremanje polaznih materijala), 0,245 g (0,93 mmol) H-mig(Z) (videti Pripremanje polaznih materijala) i 0,277 g (1,86 mmol) DMAP u 10 mL CH3CN dodano je 0,232 g (1,21 mmol) EDC na -10 C. Reagujuća smeša je puštena da dostigne sobnu temperaturu i ostavljena da stoji 5 dana. Ch^CN je isparen a ostatak je rastvoren u EtOAc i ispran vodom, NaHCt>3 (vod. ) i slanim rastvorom. Organski sloj je sušen preko Na^O^ i isparen. Sirov proizvod je prečišćen impulsnom hromatografijom koristeći jedan gradijent EtOAc/MeOH, 95/5 do 90/10, kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobilo 0,340 g (60%) nazivnog jedinjenja.

(ii) H-(R)Cha-Pro-Mig(Z)

0,34 g (0,55 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-Mig(Z) rastvoreno je u 8 mL EtOAc zasinog HCl(g) i mešano 10 min na sobnoj temperaturi. 10 mL zasićenog rastvora K0H(vod.) dodavano je ukapavanjem. Slojevi su razdvojeni a vodena je faza ekstrahovana u 3x8 mL EtOAc. Organski slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvorom, sušeni preko Na^O^ i ispareni da bi se dobilo 0,286 g (100%) nazivnog jedinjenja.

(iii) B>(R)Cha-Pro-Mig

0,050 g (0,133 mmol) H-(R)Cha-Pro-Mig(Z) rastvoreno je u 3 mL MeOH i hidrogenovano preko 10% Pd/C na atmosferskom pritisku preko no-ći. Rastvor je filtriran kroz celit i rastvarač je isparen da bi se dobilo 0,040 g (80%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (300 MHz, MeOD) : 5 0,92-1,02 (m, 2H), 1,18-1,47 (m, 6H), 1,66-1,73 (m, 4H), 1,85-2,04 (m, 4H), 2,17-2,22 (m, IH), 2,95-2,98 (m, IH), 3,47-3,55 (m, 2H), 3,62-3,65 (m, IH), 3,75-3,78 (m, IH), 3,85-3,89 (m, IH), 4,05-4,12 (m, 3H),4,34-4,37 (m, IH).

Signali od jednog manjeg rotamera javljaju se kod: 5 3,4, 3,7, 4,13-4,16, 4,3.

MS m/z 379 (M<+>+l)

Primer 89

H-(R)Cha-Pro-Dig

(i) Boc-(R)Cha-Pro-Dig(Z)

Mešanoj smeši 0,280 g (0,76 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-OH (videti Pripremanje polaznih materijala), 0,210 g (0,76 mmol) H-Dig(Z) (videti Pripremanje polaznih materijala) i 0,186 g (1,52 mmol) DMAP u 8 mL CH 3CN dodano je 0,189 g (0,99 mmol) EDC na -10 C. Reagujuća smeša je puštena da dostigne sobnu temperaturu i ostavljena je da odstoji 4 dana. OHTN je isparen a ostatak je rastvoren u EtOAc i ispran vodom, NaHC0g (vod.) i slanim rastvorom. Organski sloj je sušen preko Na2S04 i isparen. Sirov proizvod je prečišćen impulsnom hromatografijom, koristeći jedan gradijent EtOAc/MeOH, 95/5 do 90/10, kao sredstvo za ispiranje, da bi se dobilo 0,210 g (44%) nazivnog jedinjenja.

(ii) H-(R)Cha-Pro-Dig

0,210 g (0,33 mmol) Boc-(R)Cha-Pro-Dig(Z) rastvoreno je u 8 mL EtOAc zasićenog HCl(g) i mešano 10 min na sobnoj temperaturi. Ukapavanjem je dodano 8 mL zasićenog rastvora K0H(vod.). Slojevi su razdvojeni a vodena faza je ekstrahovana pomoću 3x8 mL EtOAc. Organski slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvoromm, sušeni preko Na^O^ i ispareni, da bi dali 0,146 g (83%) nazivnog jedinjenja.

(iii) H-(R)Cha-Pro-Dig

0,046 g (0,087 mmol) H-(R)Cha-Pro-Dig(Z) rastvoreno je u 3 mL MeOH i hidrogenovano preko 10% Pd/C na atmosferskom pritisku preko noći. Rastvor je filtriran kroz celit a rastvarač je isparen, da

bi se dobilo 0,040 g (100%) nazivnog jedinjenja.

<1>H-NMR (500 MHz, MeOD) :80,90-1,04 Cm, 2HJ, 1,10-1,4? (m, 6H), 1,66-1,74 (m, 4H), 1,78-2,06 (m, 4H), 2,13-2,21 (m, IH), 2,74-2,83 (m, IH), 3,15-3,29 (m, IH), 3,44-3,57 (m, 2H), 3,65-3,87 (m, 3H), 4,07-4,25 (m, 3H), 4,35-4,39 (m, 2H).

Signali od jednog manjeg rotamera javljaju se kod: 5 4,29-4,32.

MS m/z 393 (M<+>+l)

Primer 90

H-(R)Cha-Aze-Dig

(i) Boc-(R)Cha-Aze-DigfZ)

Nazivno jedinjenje je pripremljeno od Boc-(R)Cha-Aze-0H i H-Dig(Z)

(videti Pripremanje polaznih materijala) prema postupku za Boc-(R)Cha-Pro-Dig(Z), sa prinosom od 0,253 g (54%).

(ii) H-(R)Cha-Aze-Dig(Z)

Nazivno jedinjenje je pripremljeno od Boc-(R)Cha-Aze-Dig(Z) prema postupku za Boc-(R)Cha-Pro-Dig, sa prinosom od 0,210 g (100%).

(iii) H-(R)Cha-Aze-Dig

0,060 g (0,117 mmol) H-(R)Cha-Aze-Dig(Z) rastvoreno je u 3 mL MeOH i hidrogenovano preko 10% Pd/C preko noći. na atmosferskom pritisku. Rastvor Je filtriran kroz celit a rastvarač isparen, da bi se dobilo 0,042 g (95%) nazivnog jedinjenja.

Hl-NMR (500 MHz, MeOD) :80,91-1,02 (m, 2H). 1,18-1,48 (m,6H), 1,66-1,90 (m, 8H)," 2,15-2,17 (m, IH), 2,66268 (m, IH), 2,80-2,83 (m, IH), 3,14-3,29 (m, IH), 3,39 3,44 (m, IH), 3,72-3,80 (m, 2H), 4,01-4,04 (m, IH). 4,14-4,23 (m, 2K), 4,48-4,49 (m, IH), 4,60-

4,64 (m, IH).

Signali od jednog manjeg rotamera javljaju se kod: 5 2,25, 2,6, 4,3, 4,67.

MS m/z 379 (M<+>+l).

Priroeri farmaceutskih preparata

Jedinjenje prema pronalasku može se formulisati u čvrste oblike doziranja za oralno davanje, kao što su obične

tablete, tablete sa oblogom ili modifikovane tablete sa regulisa-nim ispuštanjem. Tečni ili čvrsti-polučvrsti oblici doziranja za rektalno davanje. Liofilizovane supstance ili tečnosti kao emulzi-je ili suspenzije za pareneteralnu upotrebu. Tečni, čvrsti ili polučvrsti oblici doziranja za lokalno davanje.

U aerosolnim kutijama pod pritiskom ili u inhalatorima za suvi prašak, za oralno ili nazalno inhaliranje.

Primer Pl

Aktivni sastojak i laktota su pomešani sa vodenim rastvorom poli-vinil pirolidona. Smeša je sušena i smlevena da bi se obrazovale granule. Potom su pomešani mikrokristalna ceiuza a za njom magnezijum stearat. Potom je smeša komprimovana u mašini -za izradu tableta i dobijeno je 1000 tableta od kojih je svaka sadržala 100 mg aktivne materije.

4,64 (m, IH).

Signali ođ jednog manjeg rotamera javljaju se kod: 5 2,25, 2,6, 4,3, 4,67.

MS m/z 379 (M<+>+l).

Primeri farmaceutskih preparata

tablete, tablete sa oblogom ili modifikovane tablete sa regulisa-nim ispuštanjem. Tečni ili čvrst i-polučvrsti oblici doziranja za rektalno davanje. Liofilizovane supstance ili tečnosti kao emulzi-je ili suspenzije za pareneteralnu upotrebu. Tečni, čvrsti ili polucvrsti oblici doziranja za lokalno davanje.

Primer Pl

Aktivni sastojak i laktota su pomešani sa vodenim rastvorom poli-vinil pirolidona. Smeša je sušena i smlevena da bi se obrazovale granule. Potom su pomešani mikrokristal/na celuza a za njom magnezijum stearat. Potom je smeša komprimovana u mašini - za. izradu tableta i dobijeno je 1000 tableta ođ kojih je svaka sadržala 100 mg aktivne materije.

PrimerP2

Rastvor za parenteral.no davanje

Pripremljen je rastvor od sledećih sastojaka:

natrijum hidroksid za podešavanje pH dodavati do pH 5-7

voda za injekcije do 1000 ml.

Aktivni sastojak i natrijum hlorid su rastvoreni u vodi. pH se po-dešava 2 M NaOH-om do pH 3-9 i rastvor se puni u sterilne ampule.

PrimerP3

Tablete za oralno davanje

1 - 4 se mešaju i dodaje se vodeni rastvor 5. Smeša se suši i me-lje pa se dodaje 6. Smeša se potom komprimuje u mašini za izradu

tableta.

Primer B6

Prašak za inhalator

Aktivno jedinjenje je isitnjeno u mlinu sa mlazom na veličinu čestica pogodnu za inhaliranje (srednji prećnik isitnjenih čestica

<4fim).

100 mg isitnjenog praška je usuto u višedoznl inhalator sa praškom (Turbohaler p). Inhalator je opremljen dozatorom koji ispušta dozu od 1 mg.

Biologija

Određivanjevremena zgrušnjavanja trombina ( TT) :

Humani trombin (T 6769, Sigma Chem Co) u puferskom rastvoru, pH 7,4, 100 ul, i inhibitorski rastvor, 100 ul, inkubiran je jednu minutu. Dodana je normalna čovečja plazma, obrađena citratnim ra-stvaračima, u količini od 100 ul, pa je mereno vreme zgrušnjavanja u jednom automatskom uređaju (KC 10, Amelung).

Vreme zgrušnjavanja u sekundama je naneto u funkciji koncentracije inhibitora, a ICSQTT je određeno interpolacijom.

IC "TT je koncentracija inhibitora koja udvostručuje vreme zgru-šnjavanja trombina kod ćovečje plazme.

Određivanjevremena aktiviranogdelimičnog tromboplastlna ( APTT)

APTT je određeno u sakupljenoj normalnoj čovečjoj plazmi obrađenoj citratnim rastvaračima pomoću reagensa PTT Automateđ 5, koji proizvodi Stago. Plazmi su dodani inhibitori (10 ul rastvora inhibitora na 90 ul plazme) pa je u smeši određen APTT koristeći anali-zator koagulacije KC10 (Amelung) prema uputstvima proizvođača reagensa. Vreme zgrušnjavanja u sekundama naneto je na dijagram u funkciji koncentracije inhibitora u plazmi pa je IC soAPTT određeno i nterpo1ac i jom.

IC APTT je definisano kao koncentracija inhibitora u plazmi koja udvostručuje vreme aktiviranog delimičnog tromboniastina.

Određivanje trombinskog vremena ex vivo

Inhibiranje trombina posle oralnog davanja jedinjenja ispitivano je kod svesnih pacova kojima je dva dana pre opita ugrađen kateter za uzimanje uzoraka krvi iz karotidne arterije. Na dan određen za opit vađeni su uzorci krvi u određenim vremenskim razmacima nakon davanja jedinjenja, i unošeni u plastične epruvete koje su sadrža-le 1 deo rastvora natrijum citrata (0,13 mol po L) i 9 delova krvi. Epruvete su centrifugirarie da bi še dobila krvna plazma bez krvnih pločica. Plazma je korišćena za određevanje trombinskog vremena, kako je opisano u daljem tekstu.

Citratima obrađena pacovska plazma, 100 ul, razblažena je slanim rastvorom, 0,9%, 100 ul, a koagulacija plazme je započeta dodavanjem čovečjeg trombina (T 6769, Sigma Chem Co, SAD) u jednom puferskom rastvoru, pH 7,4, 100 ul. Vreme zgrušnjavanja je mereno u jednom automatskom uređaju (KC10, Amelung, Nemačka).

Određivanje inhibicione konstante K. za plazma kalikrein

Određivanje K. je vršeno postupkom hromogenske podloge a izvođeno je na Cobas Bio centrifugalnom analizatoru koji proizvodi Roche (Bazel, Švajcarska). Zaostala enzimska aktivnost posle inkubacije humanog plazma kalikreina sa raznim koncentracijama ispitnog jedinjenja određena je za tri različite koncentracije podloge (supstrata), a merena je kao promena optičke apsorpcije na 405 nm i 37 C.

Humani plazma kalikrein (E.C.3.21.34, Chromogenix AB, M lndal, Švedska), 250 ul 0,4 nkat/ml u puferu (0,05 mol/l Tris-HCl, pH 7,4, 10,15 podešeno pomoću NaCl) sa goveđim albuminom (cat.br. 810033, ICI Biochemicals Ltd, High Wycombe, Bucks, Velika Britani-ja) inkubirano je 300 s sa 80 ul rastvora ispitnog jedinjenja u 0,15 mol/l NaCl koji je sadržao albumin, 10 g/l. U ovom stupnju je sipano dodatnih 10 ul vode. Zatim je dodano 40 ul kalikreinske podloge (S-2302, Chromogenix AB, 1,25, 2,0 ili 4,0 mmol/1 u vodi) zajedno sa sledećih 20 ul vode, pa su praćene promene apsorpcije.

K. je procenjeno iz Dixon-ovih dijagrama, tj. dijagrama koncentracije inhibitora u funkciji od l/(AA/min), pri čemu podaci za različite koncentracije osnove (supstrata) obrazuju prave linije koje se seku u x = -K^.

SKRAĆENICE

Ac = acetil

aq = vodeni

Aze = azetidin-2-karboksilna kiselina

betaPic = piperidin-3-karboksilna kiselina Boe = tert-but iloksikarboni1

Boc-Dig(Z) = 3-(N-tert-butiloksikarbonil-aminoetil)-l-(N-benziloksikarbonilamldin) azetidin

Boc-Mig(Z) = 3-(N-ter-butiloksikarbonilaminoetil)-l-(N-benziloksikarbonilamidin) azetidin

Boc-Pig(Z) = 4-(N-tert-butiloksikarbonilaminoetil)-l-(N-benziloksikarbonilamidin) piperidin Boc-Pig(Z) 2 = 4-(N-tert-butiloksikarbonilaminoetil)-l-(N,N>-dibenziloksikarbonilamidin) piperidin

Brine - zasićeni rastvor voda/NaCl (slani rastvor)

Bn = benzil

Bu = butil

Cgl = cikloheksil glicin

Cha = 8-cikloheksil alanin

CME-CDI = l-cikloheksil-3-(2-morfolinetil) karbodiimid

meto-p-toluolsulfonat

DBU = l,8-diazobiciklof5.4.0]undec-7-ilen

DCC = dicikloheksil carbodiimid

DCU = dicihloheksil karbamid

DMAP = N,N-dimetil amino piridin

DMF = dimetil formamid

DMSO = dimetil sulfoksid

EDC = l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid

hidrohlorid

Et = etil

EtOAc = etil acetat

EtOH = etanol

Gly = glicin

h = časova

HC1 = hlorovodonična kiselina

Hex = heksi1

HOAc = sirćetna kiselina

HOBt = N-hidroksi benzotriazol

Hoc = homocikloheksil alanin

Hop = homofenil alanin

HOsu = N-hidroksisukcinimid

H-Dig(Z) = 3-aminoetil-l-(N-benziloksikarbonilamidin)

azetidin

H-Dig = 3-aminoetil-l-araidin azetidin

H-(R,S)Hig(Z) = (3RS)-l-(N-benziloksikarbonilamidin)-3-aminoetil pirolidin

H-(R,S)Hig = (3RS)-l-amidin-3-aminoetil pirolidin

H-Hig - l-amidin-3-aminoetil pirolidin

H-(R,S)Itp(Ts) = (4RS)-l,3-diaza-2-tozilimino-4-aminoetilciklo-heksan

H-(R,S)Itp = (4RS)-l,3-diaza-2-imino-4-aminoetilcikloheksan H-(S)Itp(Ts) = (4S)-1,3-diaza-2-tozilimino-4-aminoetilciklo-heksan

H-(S)Itp = (4S)-1,3-diaza-2-imino-4-aminoetilcikloheksan H-Itp = 1,3-diaza-2-imino-4-aminoetilcikloheksan H-Mig(Z) - 3-aminometil-l-(N-benziloksikarbonilamidin)

azetidin

H-Mig = 3-aminometil-l-amidin azetidin

H-(R,S)Nig(Z) = (3RS)-l-(N-benziloksikarbonilamidin)-3-aminometil pirolidin

H-(R,S)Nig = (3RS)-l-amidin-3-aminometil pirolidin

H-Nig = l-amidin-3-aminometil pirolidin

H-Pab = l-amidin-4-aminometil benzol

H-Pab(Z) = 4-aminometil-l-(N-benziloksikarbonilamidin)

benzo1

H-Pac = l-amidin-4-aminometil cikloheksan

H-Pac(Z) = 4-aminometil-l-(N-benziloksikarbonilajnidin)

cikloheksan

H-Pig = 4-aminometil-l-amidin piperidin

H-Pig(Z) = 4-aminometil-l-(N-benziloksikarbonilamidin)

piperidin

H-Pig(Z)2 = 4-aminometil-l-)N,N'-dibenziloksikarbonilami-din) piperidin

H-Rig(Z) = 4-aminoetil-l-benziloksikarbonilamidino

piperidin

H-Rig = 4-aminoetil-l-amidin piperidin

** Me = metil

MeOH = metanol

Mpa = MPa (mega paskal)

Ms = metilsulfonil

NMM = N-metil morfolin

Pd/C = paladijum na drvenom uglju

Pgl = fenil glicin

Phe = fenil alanin

Pic = pipekolinska kiselina

Pro = prolin

RPLC = , suprotnofazna visokokvalitetna hromatografija

sa tečnošću

Tf = trifluormetilsulfonil

TFA = trifluorsirćetna kiselina

THF = tetrahidrofuran

Tic = 1-karboksi-l,2,3,4-tetrahidroizohinolin

Ts = tozil

Val = valin

Z = benzil oksi karbonil

Prefiksi n, s, i i t imaju njihova uobičajena značenja: normalan, izo, sek. i tercijaran. Stereohemija za amino kiseline je (S) ukoliko nije drugačije naznačeno.

SKRAĆENICE (nastavak)

Talasaste linije na azotovom atomu u sledećim formulama označavaju mesto veze fragmenta.

Claims

1. Jedinjenje-opšte formule gde: A<1>predstavlja strukturni fragment formule Ila, Ilb, IIc, Ild ili Ile: pri čemu: k je ceo broj 0, 1, 2, 3 ili 4, m je ceo broj 1, 2, 3 ili 4, q je ceo broj 0, 1, 2 ili 3, R1 predstavlja H, jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, ili Rll0OC-aiki1-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma L eventualno je alfa supstituisana prema 0 karbonilnoj grupi i, a alfa supstituent je jedna grupa R ~(CH2)p- gde je p 0, 1 ili 2, R<17>je metil, fenil, 0H, COOR<12>, CONHR<12>, gde je R 12 H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, a R<11>je H ili jedna alkilna- grupa koja ima 1 do 6 ugljehikovih atoma, ili R<1>predstavlja Ph(4-COOR12)-CH2, gde je R<12>kako je napred definisano , ili R<1>predstavlja R13-NH-C0-alki 1-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i eventualno alfa supstituisan prema karbonilu jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma i gde je R<13>H ili neka alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma ili -CH2C00R 12 , gde je R 12 kako je napred definisano, ili R<1>predstavlja R1200C-CH2-00C-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i eventualno alfa supstituisan prema karbonilu jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma i gde je R 12 kako je napred definisano, ili R<1>predstavlja R<US>02-, Ph(4-C00R<12>)-S02-, Ph(3-C00R<12>)-S02", Ph(2-C00R12)-S02-, gde jeR<12>kako je napred definisano a R<14>je jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, ili 1 1S 15 R predstavlja -CO-R , pri čemu je R jedna alkilna grupa koja ima 1-4 ugljenikova atoma, ili R<1>predstavlja -C0-OR<1S>, gde jeR<15>kako je napred definisano, ili R<1>predstavlja -C0-(CH 2 ) p-COOR12, gde je R<12>kako je napred definisano, a p je ceo broj 0, 1 ili 2, ili R<1>predstavlja -CH PO(0R16) , -CH SO H ili -CH -(5-( lH)-tetrazo-2 2 2 3 2 lil) gde je R 16, pojedinačno kod svakog javljanja, H, metil ili etil, R 2predstavlja H ili jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma ili R 21OOC-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma, i gde je R 21 H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, R<3>predstavlja jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, a alkilna grupa može i ne mora da nosi jedan ili više atoma fluora, ili R<3>predstavlja jednu ciklopentilnu, cikloheksilnu ili fenilnu grupu koja može ili ne mora da bude supstituisana jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, ili 3 31 R predstavlja jednu fenilnu grupu supstituisanu jednom OR grupom, gde je R 31 H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma a k je 0, 1, ili R 3 predstavlja jednu 1-naftilnu ili 2-naftilnu grupu, a k je 0, 1, ili R 3 predstavlja jednu cis- ili trans-dekalinsku grupu, a k je 0, 1, ili R 3 predstavlja 4-piridil, 3-pirolidil ili 3-indolil koji može ili ne mora biti supstituisan jednom OR 31 grupom, gde je R 31 kako je napred definisan, a k je 0, 1, ili R 3 predstavlja Si(Me)3ili CH(R 32 )2 gde je R 32 jedna cikloheksiIna ili jedna feniIna grupa, R 4 predstavlja H, jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, jednu cikloheksilnu ili jednu fenilnu grupu, A 2 predstavlja jedan strukturni fragment formule lila, 11 lb ili IIIc pri čemu: p je ceo broj 0, 1 ili 2, m je ceo broj 1, 2, 3 ili 4, Y predstavlja jednu metilensku grupu, ili Y predstavlja jednu etilensku grupu a stvoreni petočlani prsten može i ne mora da nosi jedan ili dva atoma fluora, jednu hidroksi grupu ili jednu okso grupu u položaju 4, ili može i ne mora da bude nezasićena, ili Y predstavlja -CH -0-, CH2-S-, CH^SO-, sa funkcijom heteroatomaupoložaju 4, ili Y predstavlja jednu n-propilensku grupu, a stvoreni šestočlani prsten može i ne mora, da ima u položaju 5 jedan atom fluora, jednu hidroksi grupu ili jednu okso grupu, da ima dva atoma fluora u jednom od položaja 4 ili 5 ili da bude nezasićen u položaju 4 i 5, ili da ima u položaju 4 jednu alkilnu grupu sa 1 do 4 ugljenikova atoma, ili Y predstavlja -CH -0-CH -, CH -S-CH , -CH -S0-CH -, 2 2 2 2 2 2 ili Y predstavlja -CH -CH -CH -CH -, ^°2 2 2 2 R 3 je kako je napred definisan, R predstavlja H ili jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, ili R<5>predstavlja -(CH^pCOOR51, gde je p jednako 0, 1 ili 2, a R<51>je H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, n je jedan ceo broj 0, 1, 2, 3 ili 4, B predstavlja jedan strukturni fragment formule IVa, IVb, IV G ili IVd pri čemu je r ceo broj 0 ili 1, X<1>predstavlja CK^, NH ili je' izostavljen, X<2>predstavlja CH,,, NH ili C=NH, X<3>predstavlja NH, C=NH, N-C(NH)-NH 2 , CH-C(NH)-NH 2, CH-NH-C(NH)-NH ili CH-CH -C(NH)-NH0,

2 2 2 X<*>predstavlja CH^ ili NH, X<S>predstavlja C(NH)-NH2 X<5>predstavlja CH ili N, R° je H ili jedna alkilna grupa koja ima 1-4 ugljenikova atoma, bilo jedinjenje kao takvo ili njegove izomere ili u obliku fizio-loški prihvatljivih soli.

2. Jedin.ien.ie oDšte formule gde A<1>predstavlja strukturni fragment formule Ha, Ilb, IIc, Ud ili Ile : pri čemu: k je ceo broj 0, 1, 2, 3 ili 4, m je ceo broj 1, 2, 3 ili 4, q je ceo broj 0, 1, 2 ili 3, R<1>predstavlja R1X00C-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i eventualno .alfa supstituisana prema • karboni Inoj grupi .. a alfa supstituent je jedna grupa R1?-(CH ) - gde je p 0, 1 ili 2. R<17>je COOR<12>, CONHR<12>, gde je 12 2 p R H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, ili benzil grupa,aRje H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 6 ugljenikovih atoma, ili jedna benzilna grupa, R<1>predstavlja Ph(4-C00R<12>)-CH2>gde je R<12>kako je napred definisano , ili R<1>predstavlja R<13->NR-C0-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i eventualno je alfa supstituisan prema karbonilu jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma i gde je R 13 H ili neka alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma ili . 12 12 -CH^COOR , gde je R kako je napred definisano, ili R<1>predstavlja R^^OOC-CH^OOC-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do4ugljenikova atoma i eventualno alfa supstituisan prema karbonilu jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma i gde je R<12>kako je napred definisano, ili 1 14 1019 R predstavlja R SO^, Ph(4-C00R )-S02-, Ph(3-C00R )-S0 Ph(2-C00R<12>)-S02~, gde jeR<12>kako je napred definisano a RU je jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, ili R<1>predstavlja -CO-R1 , pri čemu je R<15>jedna alkilna grupa koja ima 1-4 ugljenikova atoma, ili i 1S 1S R predstavlja -CO-OR , gde je R kako je napred definisano, ili R<1>predstavlja -CO-{CH 2 ) p-COOR12, gde je R<12>kako je napred definisano, a p je ceo broj 0, 1 ili 2, ili R<2>predstavlja H ili jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma ili R 21OOC-alkil-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma, i gde je R 21 H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma ili jedna benzilna grupa, R 3 predstavlja jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, a alkilna grupa može i ne mora da nosi jedan ili više atoma fluora, ili R 3 predstavlja jednu ciklopentiInu, cikloheksilnu ili fenilnu grupu koja može ili ne mora da bude supstituisana jednom alkilnom grupom koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, ili R 3 predstavlja jednu fenilnu grupu supstituisanu jednom OR 31 grupom, gde je R 31 H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma a k je 0, 1, ili R 3 predstavlja jednu 1-naftilnu ili 2-naftilnu grupu, a k je 0, 1, ili R predstavlja jednu cis- ili trans-dekalinsku grupu, a k je 0,1, ili R<3>predstavlja 4-piridil, 3-irolidil ili 3-indolil koji može ili 31 31 ne mora biti supstituisan jednom OR grupom, gde je R kako je napred definisan, a k je 0, 1, ili R 3 predstavlja Si(Me)3ili CH(R 32 )^ gde je R 32 jedna cikloheksiIna ili jedna feniIna grupa, R* predstavlja H, jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, jednu cikloheksilnu ili jednu fenilnu grupu, A 2 predstavlja jedan strukturni fragment formule lila, 11 lb ili IIIc, pri čemu: p je ceo broj 0, 1 ili 2, m je ceo broj 1, 2, 3 ili 4, Y predstavlja jednu metilensku grupu, ili Y predstavlja jednu etilensku grupu a stvoreni petoclani prsten može i ne mora da nosi jedan ili dva atoma fluora, jednu hidroksi grupu ili jednu okso grupu u položaju 4, ili može i ne mora da bude nezasićena, ili Y predstavlja -CH-0-, CH -S-, CH -SO-, sa funkcijom hetero-2 2 2 atoma u položaju 4, ili Y predstavlja jednu n-propilensku grupu, a stvoreni šestočlani prsten može i ne mora, da ima u položaju 5 jedan atom fluora, jednu hidroksi grupu ili jednu okso grupu, da ima dva atoma fluora u jednom od položaja 4 ili 5 ili da bude nezasićen u položaju 4 i 5, ili da ima u položaju 4 jednu alkilnu grupu sa 1 do 4 ugljenikova atoma, ili Y r predstavlja -CH 2 -0-CH 2 -, CH 2 -S-CH 2 , -CH 2 -SO-CH 2-, ili Y predstavlj°a -CH 2 -CH 2 -CH 2 -CH 2-, R 3 je kako je napred definisano, R predstavlja H ili jednu alkilnu grupu koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, ili R<s>predstavlja -(CH 2 )P-C00R<S1>, gde je p jednako 0, 1 ili 2, a R<51>je H ili jedna alkilna grupa koja ima 1 do 4 ugljenikova atoma, n je jedan ceo broj 0, 1, 2, 3 ili 4, B predstavlja jedan strukturni fragment formule IVa, IVb, IVcili IVd, pri čemu r je ceo broj 0 ili 1, X<1>predstavlja CH^, NH ili je izostavljen, X<2>predstavljaCK^,NH ili ONH, X<3>predstavlja NH, C=NH, N-C(NH)-NH2, CH-C(NH)~NH2> CH-NH-C(NH)-NH ili CH-CH-C(NH)-NH„,

2 2 2 X<*>predstavlja CH2ili NH, X<S>predstavlja C(NH)-NH2 X<6>predstavlja CH ili N, R je H ili jedna alkilna grupa koja ima 1-4 ugljenikova atoma, D jeZili (Z) 2»* Z je benziloksilcarbonilna grupa koja je vezana za amidino ili gvanidino ažote koji se nalaze u B; bilo koje jedinjenje kao takvo ili njegovi izomeri ili u obliku fiziološki prihvatljivih soli. 3. Jedinjenje prema zahtevu 1 ili 2, naznačeno time, što je A<1>strukturni fragment formule I Ia ili Ilb. 4. Jedinjenje prema jednom ili vise od zahteva 1 dg 3, naznačeno time, što R<1>predstavlja RnOOC-alki 1-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma i R11 je H. 5. Jedinjenje prema jednom ili više prethodnih zahteva 1 do 4, naznačeno time što je A 2 jedan strukturni fragment formule lila.

3. Jedinjenje prema jednom ili više prethodnih zahteva 1 do 4, naznačeno time što je A 2 jedan strukturni fragment formule I Ilb. 7. Jedinjenje prema jednom ili više prethodnih zahteva 1 do 6, naznačeno time, što je B jedan strukturni fragment formule IVa, pri čemu X<1>, X<2>i X<*>su CK^, X<3>jecR**C (NH)-NH2a r je 1, i n je 1. 8. Jedinjenje prema jednom ili više prethodnih zahteva 1 do 6, naznačeno time, što je B jedan strukturni fragment formule IVa, pri čemu X<1>. X<2>i X<*>su CH2, X<3>je N-C(NH)-NH2a r je 0, 1, i n je 1 ili 2. 9. Jedinjenje prema jednom ili više prethodnih zahteva 1 do 6, naznačeno time, što je B jedan strukturni fragment formule Q IVb, pri čemu R je H i n je 1. 10. Jedinjenje prema jednom ili više prethodnih zahteva 1 do 6, naznačeno time, što je B jedan strukturni fragment formule IVa, pri čemu X<1>i X<3>su NH, X<2>je C=NH, X<4>je CH,,, a r je 1, i n je2. 11. Jedinjenje prema jednom ili više prethodnih zahteva 1 do 8, naznačeno time, što je B jedan strukturni fragment formule IVa, pri čemu je X<1>izostavljen, X<2>i X<4>su CH2, X<3>je N-C(NH)-NH2a r je 0 i n je 1 ili 2, 12. Jedinjenje prema zahtevu 1 ili 2, kod koga je n jednako 1 ili 2, A<1>je strukturni fragment formule Ila, pri čemu je k jednako 0 ili 1, R<1>predstavlja RU00C-alki 1-, gde alkilna grupa ima 1 do 4 ugljenikova atoma, R 2 predstavlja H, R 3 predstavlja jednu cikloheksilnu grupu, A 2 predstavlja jedan strukturni fragment formule lila, naznačeno time, što Y predstavlja jednu metilensku grupu, jednu etilensku grupu, ili jednu n-propiiensku grupu, a stvoreni šestočlani prsten može i ne mora, da ima u položaju 4 jednu alkilnu grupu sa 1 do 4 ugljenikova atoma, R 5 predstavlja H, B predstavlja jedan strukturni fragment formule IVa, gde X 1 , X 2i X<4>šu CH 2 , X<3>je CH-C(NH)-NH 2i li N-C(NH)-NH„ ć.ar je 0 ili 1, ili X<1>i X<3>su NH, X<2>je C=NH, X<*>je CH , a r je 1, ili X<1>je izostavljen, X<2>i X<4>su CH2, X<3>je N-C(NH)-NH , a r je 0. 13. Jedinjenje prema zahtevu 1 ili 2, kod koga je n jednako 1, A<1>je strukturni fragment formule Ila, pri čemu je k jednako 0 ili 1, R1 predstavlja RUOOC-alki 1-,- gde alkilna grupa ima 1 do ■ 4 ugljenikova atoma, R 2 predstavlja H, R 3 predstavlja jednu cikloheksilnu grupu, A 2 predstavlja jedan strukturni fragment formule lila, naznačeno time, Sto Y predstavlja jednu metilensku grupu, jednu etilensku grupu, ili Jednu n-propilensku grupu,astvoreni sestočlani prsten može i ne mora, da ima u položaju 4 jednu alkilnu grupu sa 1 do 4 ugljenikova atoma, R predstavlja H, B predstavlja jedan strukturni fragment formule IVb, gde R<6>je H. 14. Jedinjenje birano od HOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pab HOOC-CH -CH -(R)Cgl-Aze-Pab 2 2 HOOC-CH 2-(R)Cgl-Pro-Pab HOOC-CH -CH -(R)Cgl-Pro-Pab 2 2 (HOOC-CH )-(R)Cgl-Pro-Pab 2 2 H-(R)Cgl-Pic-Pab HOOC-CH 2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cgl-P i c-Pab H-(R)Cha-Aze-Pab HOOC-CH -(R)Cha-Aze-Pab 2 HOOC-CH 2-(R,S)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab HOOC-CH 2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/a HOOC-CH 2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Aze-Pab/b HOOC-CH -CH -(R)Cha-Aze-Pab 2 2 HOOC-CH 2 -NH-CO-CH 2-(R)Cha-Aze-Pab H-(R)Cha-Pro-Pab HOOC-CH -(R)Cha-Pro-Pab 2 HOOC-CH -(Me)(R)Cha-Pro-Pab 2 HOCC-CH -CH -(R)Cha-Pro-Pab 2 2 HOOC-CH -C3H -( Me ) (RJCha-Pro-Pab HOOC-CH 2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/a HOCC-CH 2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pro-Pab/b HOOC-CH 2 -NH-CO-CH 2-(R)Cha-Pro-Pab EtOOC-CH -CH -CH -(R)Cha-Pro-Pab 2 2 2 Ph(4-C0OH)-S0 -(R)Cha-Pro-Pab 2 H-(R)Cha-Pic-Pab HOOC-CH 2-(R)Cha-Pic-Pab H00C-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-Pic-Pab/a H00C-CH2-(RorS)CH(COOH)-(R)Cha-P i c-Pab/b HOOC-CH -CH -(R)Cha-Pic-Pab 2 2 H00C-CO-(R)Cha-Pi c-Pab HOOC-CH 2-CO-(R)Cha-Pic-Pab Me-OOC-CH -CO-(R)Cha-Pic-Pab 2 H N-CO-CH -(R)Cha-Pic-Pab 2 2 Boc-(R) Cha-Pic-Pab Ac-(R)Cha-Pic-Pab Me-SO 2-(R)Cha-Pi c-Pab H-(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab HOOC-CH -CH -(R)Cha-(R,S)betaPic-Pab 2 2 HOOC-CH -(R)Cha-Val-Pab 2 HOOC-CH -CH -(R)Cha-Val-Pab 2 2 H-(R)Hoc-Aze-Pab HOOC-CH -CH -(R)Hoc-Aze-Pab 2 2 HO0C-CH2-(R,S)CH(COOH)-(R)Hoc-Pro-Pab HOOC-CH -(R)Hoc-Pic-Pab 2 (H00C-CH2)-(R)Hoc-Pic-Pab HOOC-CH 2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab HOOC-CH -CH -(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab 2 2 HOOC-CH -CH -(R)Tic-Pro-Pab 2 2 H00C-CH2-CH2-(R)Cgl-Aze-P i g H00C-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig H-(R)Cha-Aze-Pig HOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pac H-(R)Cha-Pro-Pac H-(R)Cgl-Ile-Pab H-(R)Cgl-Aze-Pab HOOC-(R,S)CH(Me)-(R)Cha-Pro-Pab MeOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pab EtOOC-CHa-(R)Cgl-Aze-Pab nBu00C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab nHexOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pab H-(R)Cgl-Pro-Pac HOOC-CH -(R)Cha-Pro-Pac 2 HOOC-CH -CH -(R)Cgl-Pro-Pac 2 2 HOOC-CH -CH -(R)Cha-Aze-Pac 2 2 HOOC-CH 2-(R)Cha-Aze-Pig HOOC-CH 2-(R)Cha-Pro-Pig HOOC-CH -CH -(R)Cha-Pro-Pig 2 2 6 (H00C-CH2) j- (R) Cgl -Pro-P i g HOOC-CH -CH (HOOC-CH )-(R)Cha-Pro-Pig 2 2 2 2 H00C-CH2-(R)Cg1-Aze-(R,S)Itp H00C-CH2~(R)Cha-Aze-(R,S)11 p H-(R)Cha-Pic-(R, S)Itp HOOC-CH 2 -(R)Cha-Pic-(R.S)Itp H-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig H00C-CH2-(R)Cgl-Pro-(R, S)Hi g H-(R)Cha-Pro-(R, S)Hig H-(R)Cgl-Aze-Rig H00C-CH2-(R)Cgl-Aze-Rig HOOC-CH 2-(R)Cha-Pro-Rig HOOC-CH -CH -(R)Cha-Aze-Rig 2 2 H00C-CH2-(R)Cha-Pro-(S)Itp H-(R)Cha-Pro-(R,S)Nig H-(R)Cha-Pro-Mig H-(R)Cha-Pro-Dig H-(R)Cha-Aze-Dig bilo jedinjenje kao takvo ili njegovi izomeri ili u obliku fizio-loški prihvatljivih soli. 15. Jedinjenje birano od HOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pab HOOC-CH -CH -(R)Cha-Aze-Pab 2 2 HOOC-CH 2-(R)Cha-Pro-Pab HOOC-CH -CH -(R)Cha-Pro-Pab 2 2 HOOC-CH -(R)Cha-Pic-Pab 2 H00C-CH2-(R)Cgl-Pro-Pig EtOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pab HOOC-CH -(R)Cha-Pro-Pac 2 HOOC-CH -(R)Cha-Pro-Pig 2 bilo Jedinjenje kao takvo ili njegovi izomeri ili u obliku fizio-loški prihvatljivih soli. 16. Jedinjenje birano od BnOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) BnOOC-CH -CH -(R)Cgl-Aze-Pab(Z) 2 2 Bn00C-CH2-(R)Cg1-Pro-Pab(Z) BnOOC-CH -CH -(R)Cgl-Pro-Pab(Z) 2 2 (Bn00C-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pab(Z) Bn00C-CH2-(R,S)CH(C00Bn)-(R)Cgl-Pic-Pab(Z) BnOOC-CH 2-(R)Cha-Aze-Pab(Z) BnOOC-CH 2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z) BnOOC-CH 2-(RorS)CH(COOBn) (R)Cha-Aze-Pab(Z)/a Bn00C-CH2-(RorS £ H(COOBn)-(R)Cha-Aze-Pab(Z)/b BnOOC-CH -CH -(R)Cha-Aze-Pab(Z) 2 2 BnOOC-CH -NH-CO-CH -(R)Cha-Aze-Pab(Z) 2 2 BnOOC-CH 2-(R)Cha-Pro-Pab(Z) BnOOC-CH -(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z) 2 BnOOC-CH -CH -(R)Cha-Pro-Pab(Z) 2 2 BnOOC-CH -CH -(Me)(R)Cha-Pro-Pab(Z) 2 2 Bn00C-CH2-(R, S)CH(COOBn)-(R) Cha-Pro-Pab(Z) BnOOC-CH -NH-CO-CH -(R)Cha-Pro-Pab(Z) 2 2 Ph(4-C00H)-S0 2-(R)Cha-Pro-Pab(Z) Boe-(R)Cha-Pic-Pab(Z) BnOOC-CH 2-(R)Cha-Pic-Pab(Z) Bn00C-CH2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Cha-P i c-Pab(Z) BnOOC-CH -CH -(R)Cha-Pic-Pab(Z) 2 2 EtOOC-CO-(R)Cha-P i c-Pab(Z) MeOOC-CH -CO-(R)Cha-Pic-Pab(Z) 2 H N-CO-CH -(R)Cha-Pic-Pab(Z) 2 2 Ac-(R)Cha-Pic-Pab(Z) Me-SO -(R)Cha-Pic-Pab(Z) 2 BnOOC-CH -(R)Cha-Val-Pab(Z) 2 BnOOC-CH 2 -CH 2-(R)Cha-(R,S)Val-Pab(Z) BnOOC-CH -CH -(R)Hoc-Aze-Pab(Z) 2 2 BnOOC-CH 2-(R,S)CH(COOBn)-(R)Hoc-Pro-Pab(Z) BnOOC-CH -(R)Hoc-Pic-Pab(Z) 2 (BnOOC-CH ) -(R)Hoc-Pic-Pab(Z) 2 2 BnOOC-CH 2-(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z) BnOOC-CH -CH -(R)Pro(3-(S)Ph)-Pro-Pab(Z)' 2 2 BnOOC-CH -CH -(R)Tic-Pro-Pab(Z) 2 2 BnOOC-CH -CH -(R)Cgl-Aze-Pig(Z) 2 2 2 BnOOC-CH -(R)Cgl-Pro-Pig(Z) 2 2 BnOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pac(Z) BnOOC-(R, S)CH(me)-(R)Cha-Pro-Pab(Z) MeOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) EtOOC-CH 2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) nBuOOC-CH -(R)Cgl-Aze-Pab(Z) nHex00C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) BnOOC-CH 2-(R)Cha-Pro-Pac(Z) BnOOC-CH -CH -(R)Cgl-Pro-Pac(Z) 2 2 BnOOC-CH -CH -(R)Cha-Aze-Pac(Z) 2 2 BnOOC-CH 2-(R)Cha-Aze-Pig(Z) BnOOC-CH 2-(R)Cha-Pro-Pig(Z) BnOOC-CH -CH -(R)Cha-Pro-Pig(Z) 2 2 (BnOOC-CH2)2-(R)Cgl-Pro-Pig(Z) BnOOC-CH -CH (BnOOC-CH )-(R)Cha-Pro-Pig(Z) 2 2 2 BnOOC-CH2-(R)Cha-Pi c-(R,S)Itp(Z) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Pro-(R,S)Hig(Z) BnOOC-CH2-(R)Cgl-Aze-Ri g(Z) BnOOC-CH 2-(R)Cha-Pro-Rig(Z) BnOOC-CH -CH -(R)Cha-Aze-Rig(Z) 2 2 bilo jedinjenje kao takvo ili njegovi izomeri ili u obliku fizio-loški prihvatljivih soli. 17. Jedinjenje birano od Bn00C-CH2-(R)Cgl-Aze-Pab(Z) BnOOC-CH 2-(R)Cha-Pro-Pab(Z) BnOOC-CH -(R)Cha-Pic-Pab(Z) 2 BnOOC-CH -(R)Cgl-Pro-Pig(Z) 2 2 Et00C-CH2-(R)Cg1-Aze-Pab(Z) BnOOC-CH 2-(R)Cha-Pro-Pac(Z) Bn00C-CH2-(R)Cha-Pro-P i g(Z) bilo jedinjenje kao takvo ili njegovi izomeri ili u obliku fizio-loški prihvatljivih soli. 18. Jedinjenje birano od H-(R)Pro-Phe-Pab HOOC-CH 2-(R)Pro-Phe-Pab H-(R)Phe-Phe-Pab HOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab HOOC-CH 2-(R)Phe-Phe-Pab bilo jedinjenje kao takvo ili njegovi izomeri ili u obliku fizio-loški prihvatljivih soli. 19. Jedinjenje birano od Boc-(R)Pro-Phe-Pab(Z) BnOOC-CH 2-(R)Pro-Phe-Pab(Z) Boe-(R)Phe-Phe-Pab(Z) MeOOC-CO-(R)Phe-Phe-Pab(Z) BnOOC-CH -(R)Phe-Phe-Pab(Z) 2 bilo jedinjenje kao takvo ili njegovi izomeri ili u obliku fizio-loški prihvatljivih soli. 20. Postupak za pripremanje jedinjenja prma ma kom od zahteva 1 - 19, naznačen time, što obuhvata povezivanje jednog N-završno zaštićenog dipeptida ili aminokiseline, kada se koristi jedna N-završna amino kiselina, dodaje se naknadno i druga amino kiselina, koristeći standardne postupke, u jedinjenje gde je n ceo broj 0, 1, 2, 3 ili 4, X je B ili B-D, gde je B kako ' je definisano u formuli I, a D je kako je definisano u formuli V kao takvo, ili ima gvanidinski ili amidinske atome azota bilo jednostruko, bilo dvostruko zaštićene jednom aminskom zaštitnom gru-pora kao što je jedna benziloksi karboniIna, tert-butiloksi karboni Ina, ili p-toluolsulfonilska grupa, ili je X jedna grupa koja se može pretvoriti u B posle čega se uklanja zaštitna grupa (grupe) ili uklanjanje zaštite sa N-završnog azota posle čega sledi alkilacija N-završnog azota i, ako se želi, uklanjanje zaštite poznatim postupcima, i ako se želi obrazovanje jedne fiziološki prihva-tljive soli, a u onim slučajevima kada se reakcijom dobija smeša stereoizomera, ovi se eventualno razdvajaju standardnim tehnikama hromatografije ili rekristalizacije, pa ako se želi, izdvaja se jedan pojedinačan stereoizomer. 21. Postupak prema zahtevu 20 za pripremanje jednog jedinjenja prema ma kom od zahteva 1-19, naznačen time, što obuhvata: a) (Postupak Ia) Vezivanje jednog N-završno zaštićenog dipeptida, biranog od A 1 i A 2 u formulama I ili V ili koristeći standardno peptidno vezivanje, prikazano u formuli pri čemu je n kako je definisano u formuli I, V/1 je jedna N-završna amino zaštitna grupa, kao što je tert-butiloksi karbonil i benziloksi karbonil, a Q<a>je -C(NH)-NH2> -C(NW<2>)-NH-V<f>\-C(NH)-NH-W<2>, -NH-C.(NH)-NH2, -NH-CtNHJ-NH-U2, -N(W2)-C(NH)-NH-W2 ili -NH-CHNVO-NH-M<2>, gde je V/2 jedna aminska zaštitna grupa kao što je tert-butiloksi karbonil ili benziloksi karbonil, ili je (J1 -CN, -CO-NH ili -CS-NH , gde je grupa postepeno pretvorena u amidinsku 2 1 2 2 2 grupu ili je Q jednako NH2 ili NH-W , pri čemu je W kako je napred definisano, gde je aminska grupa postupno pretvorena u jednu gvanidinsku grupu (uzimajući Q<1>= -NH-C(NH)-NH2), posle uklanjanja zaštite t^-grupe kada je Q<1>jednako -NH-Vf2 (u ovom slu-čaju mora V/2 biti ortogonalno na V<1>), inače poznatim postupcima. ■ b) (Postupak lb) Vezivanje jedne N-završno zaštićene amino kiseline, izabrane od A 2 u formuli I ili V i pripremljene koristeći standardno peptidno vezivanje, prikazano u formuli gde su n, U1 i Cj1 kako su napred definisani, praćeno uklanjanjem zaštite W<1->grupe i vezivanjem sa N-završnom.. amino kiselinom, u nekom zaštićenom obliku, čime se dobija zaštićeni peptid opisan u Postupku Ia, c) (Postupak Ha) Vezivanje jednog N-završno zaštićenog dipeptida, biranog od A 1 i A 2 u formulama I i V koristeći standardno peptidno vezivanje, prikazano u formuli pri čemu je n kako je definisano u formuli I, U<1>je jedna N-zavrSna amino zaštitna grupa, kao što je tert-butiloksi karbonil i benziloksi karbonil, a O,1 je -C(NH)-NH2, -CCNU^-NH-N<2>, -C(NH)-NH-VJ2, -NH-C(NH)-NH 2, -NH-C(NH)-NH-VJ2, -N( vrVcfMD-NH-U2 ili -NH-CtNVT^J-NH-Vi2, gde je VI<2>jedna aminska zaštitna grupa kao što je tert-butiloksi karbonil ili benziloksi karbonil, ili je (J<1>-CN, -C0-NH2 ili -CS-NH2> gde je grupa postepeno pretvorena u amidinsku grupu ili je (J1 jednako NH2 ili NH-Vf2, pri čemu je VT2 kako je napred definisano, gde je aminska grupa postupno pretvorena u jednu gvanidinsku grupu (uzimajući Q<X>= -NH-C(NH)-NH2), posle uklanjanja zaštite V^-grupe kada je (J1 jednako -NH-V/2 (u ovom slučaju mora VT2 biti ortogonalno na V/1), inače poznatim postupcima. d) (Postupak Ilb) Vezivanje jedne N-završno zaštićene amino kiseline, izabrane od A 2 u formuli I ili V koristeći standardno peptidno vezivanje, prikazano u formuli gde su n, W<1>i Ci1 kako su napred definisani, praćeno uklanjanjem zaštite W<1->grupe i vezivanjem sa N-završnom amino kiselinom, u nekom zaštićenom obliku, čime se dobija zaštićeni peptid opisan u Postupku Ha. e) (Postupak lila) Vezivanje jednog N-završno zaštićenog dipeptida, biranog od A 1 i A 2 u formulama I i V koristeći standardno peptidno vezivanje, prikazano u formuli pri čemu je n kako je definisano u formuli I a r je 0 ili 1 kada 1 2 4 2 4 su X , X i X jednaki CH2> ili je r jednako 0 kada su X i X jednaki CE^ a X<1>je izostavljeno, V/1 je jedna N-završna amino zaštitna grupa, kao što je tert-butiloksi karbonil i benziloksi karbonil, a Q<2>je -C(NH)-NH , -C(NVtVnH-W2, ili -C(NH)- NH-V/2, gde je N<2>jedna' aminska zaštitna grupa kao što je tert-butiloksi karbonil ili benziloksi karbonil, ili je Q<2>jednako V/2 gde je aminska grupa postupno , posle uklanjanja zaštite VT^-grupe (u ovom slučaju mora VI<2>biti ortogonalno na V/1), pretvorena u jednu gvanidinsku grupu neko nezaštićeno, N-zastićeno ili N, N*-dvostruko zaštićeno sredstvo za gvanidaciju poznatim postupcima, f) (Postupak Illb) Vezivanje jedne N-završno zaštićene amino kiseline, izabrane od A 2 u formuli I ili V koristeći standardno peptidno vezivanje, prikazano u formuli gde su n, r, X<1>, X<2>i X<*>, U<1>i Q<2>kako su napred definisani, pra-ćeno uklanjanjem zaštite V^-grupe i vezivanjem sa N-završnom amino kiselinom, u nekom zaštićenom obliku, čime se dobija zaštićeni peptid opisan u Postupku lila. g) (Postupak IVa ) Vezivanje jednog N-završno zaštićenog dipeptida, biranog od A 1 i A 2 u formulama I i V koristeći standardno peptidno vezivanje,prikazano u formuli pri čemu je n kako je definisano u formuli I, M<1>je jedna N-završna amino zaštitna grupa, kao što je tert-butiloksi karbonil i benziloksi karbonil, a U<3>je jedna aminska zaštitna grupa kao što je aril sulfonil, tert-butiloksi karbonil ili benziloksi karboni 1. h) (Postupak IVb) Vezivanje jedne N-završno zaštićene amino kiseline, izabrane od A 2 u formuli I ili V koristeći standardno peptidno vezivanje, prikazano u formuli gde su n, Wx i V/<3>kako su napred definisani, praćeno uklanjanjem zaštite W<1->grupe i vezivanjem sa N-završnom amino kiselinom, u nekom zaštićenom obliku, čime se dobija zaštićeni peptid opisan u Postupku IVa^ Konačna jedinjenja mogu biti načinjena na bilo koji od sledećih načina, u zavisnosti od prirode korišćenih Q 1 -ili Q 2-grupa: Uklanjanje zaštitne grupe (grupa) (kada je G;1 jednako -C(NH)-NH2, -CCNV/^-NH-V/2, -CCNHj-NH-N<2>, -NH-C(NH)-NH"2, -NH-C(NH)-NH-V/2, -NCV/^-CfNHJ-NH-V/<2>ili -NH-C(NW<2>)-NH-W<2>), ili selektivnim uklanjanjem zaštite W<1->grupe (na primer kada je Qx ili Q2 jednako C (NV/2)-NH-V/2, -C(NH)-NH-W<2>, -NH-C(NH)-NH-W<2>, Nf<v>rVctNHJ-NH-V/<2>ili -NH-CCNV/2)- NH-V/2 (U<2>u ovom slučaju mora biti ortogonalno na V/1) praćeno alkilacijom N-završnog azota i, ako se želi, uklanjanjem zaštite. 22. Farmaceutski preparat naznačen time, što sadrži jednu delotvomu količinu jednog jedinjenja opisanog u zahtevima 1-19 zajedno sa jednim ili više farmaceutskih nosača. 23.rimena jedinjenja prema ma kom od zahteva 1-5 ili 7-17 kao aktivnog sastojka za izradu farmaceutskog preparata zasuzbijanje trombina u čovećjem ili životinjskom organizmu. 24.Primena jedinjenja prema ma kom od zahteva 1-4 6-10ili 18-19 kao aktivnog sastojka za izradu farmaceutskog preparata za suzbijanje kininogenaze u čovečjem Ili životinjskom organizmu. Nastavak sa prve strane: A<2>predstavlja strukturni fragment formula 3 predstavlja strukturni fragment formula Dalje su opisana nova jedinjenja. nova prir.er.a jedinjenja a posebno novih strukturnih fragmenata kod sinteze farmaceutskih jedinjenja. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5