RS49996B - POSTUPAK ZA DOBIJANJE INHIBITORA HMG-CoA REDUKTAZE VISOKE ČISTOĆE - Google Patents
POSTUPAK ZA DOBIJANJE INHIBITORA HMG-CoA REDUKTAZE VISOKE ČISTOĆEInfo
- Publication number
- RS49996B RS49996B YUP-818/00A YU81800A RS49996B RS 49996 B RS49996 B RS 49996B YU 81800 A YU81800 A YU 81800A RS 49996 B RS49996 B RS 49996B
- Authority
- RS
- Serbia
- Prior art keywords
- mobile phase
- hmg
- coa reductase
- reductase inhibitor
- column
- Prior art date
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/33—Heterocyclic compounds
- A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
- A61K31/35—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom
- A61K31/351—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having six-membered rings with one oxygen as the only ring hetero atom not condensed with another ring
-
- B—PERFORMING OPERATIONS; TRANSPORTING
- B01—PHYSICAL OR CHEMICAL PROCESSES OR APPARATUS IN GENERAL
- B01D—SEPARATION
- B01D15/00—Separating processes involving the treatment of liquids with solid sorbents; Apparatus therefor
- B01D15/08—Selective adsorption, e.g. chromatography
- B01D15/42—Selective adsorption, e.g. chromatography characterised by the development mode, e.g. by displacement or by elution
- B01D15/422—Displacement mode
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
- A61P3/06—Antihyperlipidemics
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07C—ACYCLIC OR CARBOCYCLIC COMPOUNDS
- C07C67/00—Preparation of carboxylic acid esters
- C07C67/48—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives
- C07C67/52—Separation; Purification; Stabilisation; Use of additives by change in the physical state, e.g. crystallisation
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Public Health (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Obesity (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Hematology (AREA)
- Analytical Chemistry (AREA)
- Crystallography & Structural Chemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Pyrane Compounds (AREA)
- Enzymes And Modification Thereof (AREA)
- Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Treatment Of Liquids With Adsorbents In General (AREA)
- Indole Compounds (AREA)
- Pyrrole Compounds (AREA)
- Medicines Containing Plant Substances (AREA)
Abstract
Postupak za dobijanje inhibitora HMG-CoA reduktaze, naznačen time, što jedan od koraka u postupku prečišćavanja sirovih inhibitora HMG-CoA reduktaze, uključuje istiskivačku hromatografiju koja obuhvata upotrebu istiskivača za istiskivanje inhibitora HMG-CoA reduktaze što proizvodi inhibitor HMG-CoA reduktaze sa HPLC čistoćom koja premašuje 99.7%. Prijava ima 23 zahteva.
Description
Oblast tehnike
Lovastatin, pravastatin, simvastatin, mevastatin, atorvastatin, njihovi derivati i analozi poznati su kao inhibitori HMG-CoA reduktaze i upotrebljavaju se kao antiMperholestcrolernijski agensi. Najveći broj njih se proizvodi fermentacijom, upotrebom mikroorganizama različitih vrsta, određenih kao vrste koje pripadajuAspcrgillus, Monascus, Nocardia, AmicoMopsis, MucorihPcnicilUum genus,neki se dobij aju tretmanom proizvoda fermentacije korišćenjem metoda hemijske sinteze ili su proizvodi totalne hemijske sinteze.
Čistoća aktivnog sastojka je važan faktor u proizvodnji bezbednog i delotvornog farmaceutskog preparata naročito, ukoliko se farmaceutski proizvod mora koristiti tokom lcčnja ih prevencije visokog plazmatskog holesterola, zasnovanih na dužem vremenskom periodu. Akumulacija nečistoća iz farmaceutskih preparata niže čistoće može prouzrokovati brojne sporedne efekte u toku lečenja.
Ovaj pronalazak se odnosi na novi industrijski postupak za izolovanje inhibitora HMG-CoA reduktaze upotrebom takozvane, istiskivačke hromatografije. Upotreba pronalaska omogućava dobij anje inhibitora HMG-CoA reduktaze visoke čistoće, u visokim prinosima, sa niskim troškovima proizvodnje i pogodnim ekološkim balansom.
Stan je tehnike
Postupci za izolaciju i prečišćavanje antimperholesterolemijskih agenasa, koji su prikazani u ranijim patentima obuhvataju različite kombinacije metoda ekstrakcije, hromatografije, laktonizacije i kristalizacije. Čistoća konačnog proizvoda, dobijenog ovim postupcima u skladu je sa USP standardima, ali su prinosi željenog proizvoda relativno mali. Uz to, oni zahtevaju i velike količine organskih rastvarača i zamašnu opremu primerenu tim količinama.
Postupak izolacije, prikazan u WO 92/16276 obezbeđuje rastvor za dobijanje inhibitora HMG-Co*A. reduktaze sa čistoćom većom od 99.5 % kada se koristi mdustrijska HPLC (tečna hromatografija pod visokim pritiskom) oprema. Prema WO 92/16276, sirov inhibitor HMG-CoA reduktaze, sa čistoćom od > 85% se rastvara u organskom rastvaraču ili rastvoru organskog rastvarača i vode. Mcšavina se zatim puferujc da bi pH bio između 2 i 9 i postavlja se na HPLC kolonu. Nakon što je sakupljen pik inhibitora HMG-CoA reduktaze koji nas zanima, deo rastvarača se uklanja i dodaje se voda ili alternativno, uklanjaju se đve trećine smeše rastvarača, a inhibitor HMG-CoA reduktaze iskristališe. Na kraju, čistoća proizvoda dobijenog ovim postupkom je najmanje 99.5 %, sa prinosom od oko 90 %.
Metoda izložena u WO 92/16276 omogućuje dobijanje iiihibitora HMG-CoA reduktaze visoke čistoće, sa relativno visokim prinosima, nedostatak metode sa konvencionalnim hromatografskim kolonama su relativno male količine supstanec za punjenje po HPLC koloni. Mali uzorci kojima se puni kolona, takođe, su u vezi sa povećanim brojem ponavljanja izolacionih operacija, koje se izvodi da bi sc dobile dovoljne količine željene supstance i kao posledica toga, velika količina upotrebljenih rastvarača ima za rezultat veće troškove proizvodnje.
Metoda hromatografije istiskivanjem, osnova ovog pronalaska, u suštini sc nc razlikuje od ranije korišćenih hromatografskih metoda.
Hromatografija istiskivanjem se zasiva na kompeticiji komponenti uzorka, postavljenih u koloni za aktivna mesta na stacionarnoj fazi. Pojedinačne komponente uzorka istiskuju jedna drugu poput voza, istiskivač, koji ima veoma visok afinitet za stacionarnu fazu, putujući duž kolone iza ubačenog uzorka, izaziva separaciju komponenti uzorka u jcdnodelne zone, koje se kreću istom brzinom kao istiskivač. Koncentrisanje pojedinačnih komponenti se izvodi istovremeno sa prečišćavanj em.
Princip metode istiskrvacke hi'omatografije je relativno star, budući daje poznat od 1943., ali je u praksu uveden posle 1981. zbog nedostatka kolona za upotrebu (Cs. Horvath et al., J. Chromatogr., 215 (1981) 295; J. Chromatogr., 330 (1985) 1; J. Chromatogr., 440 (1988) 157). Ovi radovi, ovde uvedeni u vidu referenci, opisuju analitičko i preparativno razdvajanje i prečišćavanje biološki aktivnih, peptida i polimiksinskih antibiotika (polipeptidi) korišćenjem revcizno-faznih kolona tečne hromatografije pod visokim pritiskom na način istiskivanja. Za polimiksine su korišćene oktadecil silika gel kolone 250 x 4.6 mm sa veličinom čestica 5 |nm, 10 % acetonitrilom u vodi, kao mobilnom fazom i različitim tehaalknamonijum halogcrtidima, kao istiskivačima.
U novijim istraživanjima u oblasti istiskivačke hromatografije (S. M. Cramcr ct al., Enzymc Microb. Tcchnol., 11 (1989) 74; Prcp. Chromatogr., 1 (1988) 29; J. Chromatogr., 394 (1987) 305; J. Chromatogr., 439 (1988) 341; J. Chromatogr., 454 (1988) 1 (theoretic optimisation); A. Felinger et al., J. Chromatogr., 609 (1992) 35 (theoretic optimisation), svi su radovi ovde uvedeni preko referenci) korišćene su slične kolone; mobilna faza je bio metanol u fosfatnom pufeni, istiskivač je bio 2-(2-t-butoksietoksi)etanol (BEE) u acetonitrilu i natrijum acetatu. Kao uzorci su korišćeni različiti peptidi, proteini i eefalosporin C antibiotik.
US Pat No. 5,043,423 (27.08.1991) i EP 416.416 svaki, pojedinačno, opisuju metodu za prečišćavanje određenih niskomolekadaiTiih (ispod 1000 daltona) peptida (posebno, tuftsrna i njegovih sintetskih derivata) istiskivačkoni jon-izmenjivačkom hromatografijom u kojoj stacionarna faza koja se koristi je katjon-izmenjivačka smola, transportni rastvarač je voda ili razblaženi rastvori raznih jakih kiselina, a upotrebljeni istiskivač je trietilentetramonijum so u različitim koncentracijama. U još neobjavljenoj US patentnoj prijavi 08/875,422, opisana je upotreba istiskivačke hromatografije za izolaciju i prečišćavanje vankomicina.
Rcšenje tehničkog problema
Ponekad je teško dobiti aktivnu supstancu visoke čistoće u velikoj meri, budući da su mnoge tehnologije, koje su prrmenjive za laboratorijske razmere nedovoljno ekonomične za širok opseg proizvodnih operacija da bi opravdale svoju primenu, ili ne zadovoljavaju kriterijume zaštite čovekove sredine. Gornje činjenice primoravaju industriju da istražuje nove tehnologije, koje ćc obezbediti i visoko kvalitetan proizvod i ekonomski i ekološki prihvatljivu proizvodnju.
Ovaj pronalazak razrešava probleme postupka, poznate iz ranijih patenata i druge literature, tako što obezbeđuje dobijanje čistog inJhibitora HMG-CoA reduktaze, a uz to, postupak prečišćavanjaper sene oduzima mnogo vremena, obezbeđujući visoke prinose korišćenjem male količine rastvarača. Postupak je u skladu sa prirodnom sredinom; pored toga, nije zahtevan u odnosu na prostor i energiju, omogućujući, na taj način, ekonomičan širok opseg proizvodnje.
Opis pronalaska
Ovaj pronalazak obezbeđuje postupak »a prečišćavanje inhibitora HMG-CoA reduktaze, korišćenjem istiskivačke hromatografije. To jest, barem jedan od koraka u procesu prečišćavanja sirovog inhibitora HMG-CoA reduktaze uključuje istiskivačku hromatografiju,
Inhibitor HMG-CoA reduktaze koji treba da se prečisti odabran je, na primer, iz grupe, koja se sastoji od mevastatina, pravastatina, lovastatina, simvastatina, fluvastatina i atorv as tatina. Izabrani inhibitor može biti u obliku laktona ih u obliku kiseline ih njene soli da bi bio prečišćen sredstvima istiskivačke hromatografije.
Istiskivačka hromatografija, karakteristična za postupak iz ovog pronalaska, poželjno uključuje sledcće korake;
a) kondicioniranje hromatografske kolone sa pogodnom mobilnom fazom, b) ubacivanje sirovog inhibitora HMG-CoA reduktaze, rastvorenog u mobilnoj fazi, c) uvođenje istiskivača - sredstva za istiskivanje inhibitora HMG-CoA reduktaze iz kolone, i d) dobijanje prečišćenog inhibitora HMG-CoA reduktaze.
Prečišćeni inhibitor HMG-CoA reduktaze se poželjno dobija
dl) sakupljanjem frakcija i
d2) ispitivanjem frakcija analitičkom HPLC i spajanjem frakcija u
zavisnosti od kvaliteta čistoće.
Nakon dobijanja prečišćenog inhibitora HMG-CoA reduktaze, hromatografska kolona se može regenerisati ispiranjem kolone sa smešom alkohol/voda kako bi se eluirao istiskivač.
Inhibitori HMG-CoA reduktaze, dobijeni na gore opisani način se zatim izdvajaju iz mobilne faze, u skladu sa metodama, koje su od ranije poznate u struci, na primer, Hofilizacijom, ili poželjnije, kristalizacijom, da bi se dobio oblik laktona, kisclinskt oblik ili njene soli (poželjno soli alkalnih ili zemnoalkalnih metala).
Frakcije, koje pored nečistoća sadrže značajan procenat inhibitora HMG-CoA reduktaze, mogu ponovno biti podvrgnute postupku, što rezultira ukupnim prinosom , koji prelazi 95 %.
Korišćena stacionarna faza je reverzna stacionarna faza, gdc su pogodne prirodne (silika gel sa alkilnim lancima različite dužine) ili sintetske (organski C-18 ili C-8) stacionarne faze. Poželjno, koristi se sintetski ukršteno vezani polimcrni matriks stirena i divinilbenzena. Vchčina čestica stacionarne faze, pogodno je od 3 do 20 um, bolje između 7 i 15 um.
Mobilna faza koja se upotrebljavala je birana od vode, rastvora acetonitril/voda i vodenih rastvora nižih (poželjno Cj-C4) alkohola, puferisanih razblaženih rastvora organskih, halogenizovanih organskih ili neorganskih kiselina, npr., mravlje, sirćetne, propionske, hlorovodoničnc, bome, fosforne, ugljene ih sumporne kiseline sa kanonima alkalnih metala, sa amonijakom ih amimina. Posebno su poželjni voda i vodeni rastvori sa acetonitrilom i naročito sa metanolom ih etanolom, a saržaj organskog rastvarača u vodenim rastvorima poželjno je 80 % ih niži, još poželjnije 45 % ih niži, a naročito 30 % ih niži. Dok se toksični metanol u mobilnoj fazi može zameniti manje toksičnim etanolom, ih može biti, barem delimično zamenjen vodom, sa dobrim rezultatima, uklanjanje štetnih rastvarača je jednostavnije, pa prema tome, ovaj pronalazak predstavlja značajan napredak u poređenju sa premodnim stanjem u struci, sudeći sa ekološkog aspekta.
pH mobilne faze koja se upotrebljava, poželjno je između 4.5 i 10.5, još poželjnije između 6.5 i 8, a posebno oko 7. Brzina protoka mobilne faze kroz kolonu pogodno se podesi tako, da se proteže između 1.5 i 30 ml/( tmn cm<2>), poželjno, između 3 i 15 rnl/(min cm<2>). U trenutku kada se u
hroniatografsku kolonu uvodi istiskivač niešanjern sa mobilnom fazom, brzina protoka se poželjno podesi tako, da se nalazi između 1.5 i 15 m1/( rmn crn<2>), a posebno između 3 i 10 ml/(min cm<2>), budući da veća brzina uzrokuje razblaživanje uzoraka koji se sakupljaju, a takođe i separacija postaje lošija.
Prikladan istiskivač je jedinjenje koje poseduje amfifilnu strukturu, kao što su surfaktanti, deterdženti i slično. Prirneri istiskivača su alkoholi dugog lanca, karboksilne kiseline dugog lanca, amonijum soli dugolančanih alkila, cstri aromatskih dikarboksihhh kiselina, okso- i diokso- alkohoh, pohalkilcn poliglikolni etri, kao što su đietilen glikol morio- (ili di-) ahaletri, poharil ih pohalkilen poilaril etri, kao što je Triton® X-100, itd. Gore pomenuti ''dugi lanac" označava alkilni lanac, koji ima najmanje C4-lanac, poželjno, barem C10-lanac, a još poželjnije barem C14-lanac ih duži.
Koncentracija istiskivača u mobilnoj fazi prikladno je podešena da bude od 1 do 35 %, poželjno od 2 do 20 %, a posebno od 7 do 14 %.
U poželjnom ostvarenju kontrole kvaliteta čistoće u pojeohhačnim frakcijama koje su cluirane sa hromatografske kolone, analitička HPLC metoda, usmerena prema iuhibitorirna HMG-CoA reduktaze koji se analiziraju, može se izvesti na sledeći opisan način.
Uzorak, koji se analizira, razblaži se 100 puta sa mobilnom fazom, koja sadrži 20 mM vodeni rastvor NH4HCO3sa acetonitriloin (odnos acetonitrila se tako podesi da je retencioni faktor analita između 5 i 10). 10 ul ovog uzorka se stavi na Hvpersil ODS kolonu (Hvpersul, Velika Britanija, veličine čestice 3 um, veličina kolone 50 x 4.6 mm) za tečnu liromatografiju pod visokim pritiskom. Kolona se ispere mobilnom fazom, koja ima brzinu protoka od 2 ml/min. Apsorbancija se meri na 235 nm. HPLC čistoća uzorka se izračuna iz odnosa između površina pojeelinačnih pikova u hromatogramu.
Posle završenog hromatografiranja, stacionarna faza se poželjno regeneriše, na prirner, korišćenjem mobilne faze sa 20 do 100 % vodenog rastvora nižeg alkohola.
Pronalazak je ilustrovan, ah ni u kom slučaju ograničen sledećim primerima.
PRIMERI
Prirner 1
Sirova natrijumova so pravastatina (1.0 g, HPLC čistoće 88 %, anaHtički 85 %) rastvorena je u 10 ml mobilne faze A (dcsulovana voda), pH je doteran do 7 sa 0.2 M vodenim rastvorom TNfaOH i izvrši se fntriranjc. Kolona se uravnoteži sa mobilnom fazom A. Uzorak, dobijen na gore opisani način, ubacuje se u Grom-Sil 120-ODS HE kolonu (Grom Analvtic + HPLC GmbH, Nemačka), veličine čestica 11 um, veličina kolone 250 x 10 mm. Kolona je isprana mobilnom fazom B, koja sadrži 7 % dietuenglikol monobutiletra u mobilnoj fazi A, pri brzini protoka od 4.5 ml/min. Apsorbancija je merena na 260 nm, a sakupljaju se 0.5 ml-ske frakcije, sa početnim porastom apsorbancije. Kada se signal smanji, kolona se ispere sa 25 ml 70 % metanola. Dobijene frakcije se analiziraju prethodno opisanom HPLC anahtičkom metodom. Sakupljaju se frakcije sa čistoćom > 99.5 %. U sakupljenim frakcijama (7 ml) HPLC čistoća je bila 99.8 %.
Prirner 2
Sirova natrijumova so pravastatina (0.4 g, HPLC čistoće 88 %, analitički 85 %) rastvori se u 5 ml mobilne faze A (dcsulovana voda), pH se dotera do 7 sa 0.2 M vodenim rastvorom NaOH i mtrira. Kolona se uravnoteži sa mobilnom fazom A. Uzorak, dobijen na gore opisani način, ubacuje se u Kromasil 100 C-18 kolonu (EKA Chemicals AB, Švedska), veličine čestica 10 um, vchčina kolone 200 x 10 mm. Kolona se ispere sa mobilnom fazom B, koja sadrži 7 % Triton X-100 u mobilnoj fazi A, pri brzini protoka od 1 ml/min. Apsorbancija je merena na 260 nm, a sakupljaju se 0.5 ml-ske frakcije, sa početnim porastom apsorbancije. Dobijene frakcije se analiziraju prethodno opisanom HPLC analitičkom metodom. Sakupljaju se frakcije sa čistoćom > 99.5 %. U salmpljenirn frakcijama (3 ml) HPLC čistoća je bila 99.7 %.
Prirner 3
0.6 g sirove natrijumove soli pravastatina je rastvoreno u 5 ml destilovane vode. Korišćen je protokol opisan u Primeru 1, sa izuzetkom upotrebijene mobilne faze (30 % vodeni rastvor metanola) i dobijaju se sjedinjene frakcije sa HPLC čistoćom od 99.8 %.
Prirner 4
Metoda, opisana u Primeru 3, je ponovljena pri čemu je koncentracija istiskivača u mobilnoj fazi bila 14 %. U sakupljenim frakcijama, prema kriterijumu opisanom u Primeru 1, HPLC čistoća je bila 99.8 %.
Prirner 5
Pravastatin lakton (0.4 g, HPLC čistoće 85 %) rastvori se u 33 ml mobilne faze A, koja sadrži 45 % metanol. Kolona se uravnoteži sa mobilnom fazom A. Uzorak, dobijen na gore opisani način, ubacuje se u Grom-Sil 120-ODS HE kolonu (Grom Analytic + HPLC GmbH, Nemačka), veličine čestica 11 um, vehčina kolone 250 x 10 mm. Kolona se ispere sa mobilnom fazom B, koja sadrži 2 % dietilenglikoldibutiletar u mobilnoj fazi A, pri brzini protoka od 4.5 ml/nun. Apsorbancija je merena na 260 nm, i sakupljene su 1 ml-ske frakcije, sa početnim porastom apsorbancije. Kada se signal smanji, kolona se ispere sa 25 ml 70 % metanola.
Sakupljaju se frakcije sa čistoćom > 99.5 %. U sakupljenim frakcijama HPLC čistoća je bila 99.7 %.
Prirner 6
Pravastatin lakton (0.3 g, HPLC čistoće 85 %) rastvori se u 80 ml mobilne faze A, koja sadrži 30 % metanol. Kolona se uravnoteži sa mobilnom fazom A. Uzorak, dobijen na gore opisani način, ubacuje se u Licrosphere RP 18 kolonu, veličine čestica 12 jum, veličina kolone 200 x 10 mm. Kolona se ispere sa mobilnom fazom B, koja sadrži 5 % metuenglikolmono-n-heksiletar u mobilnoj fazi A, pri brzini protoka od 4.5 m l/ mi ti. Apsorbancija je izmerena na 235 nm i 1 ml-ske frakcije su sakupljene sa početnim porastom u absorbanciji. Kada je signal opao, kolona je isprana sa 25 ml 90% metanola, Dobijene frakcije su ispitane gore opisanom HPLC analitičkom metodom.
Sakupljene su i sjedinjene farkerje sa čistoćom > 99.5%. U pool-ovanim frakcijama HPLC čistoća je bila 99.8%.
Prirner 7
Lakton pravastatina (0.3 g, HPLC čistoće 85%) je rastvoren u 25 ml mobilne faze A koja sadrži 35% acetonitrila. Kolona je uravnotežena mobilnom fazom A. Licrosphere RP 18 kolona, veličine 200 x 10 mm i sa veličinom čestica 12 jam je napunjena uzorkom, koji je dobijen gore-opisanim načinom. Kolona je isprana mobilnom fazom B, koja je sadržavala 1% metilen<g>likoldibutiletar u mobilnoj fazi A, pri brzini protoka od 4.5 ml/min. Apsorbancija je izmerena na 235 nm, a 1 ml frakcije su sakupljene sa početnim povećanjem u absorbanciji. Kada je signal opao, kolona je isprana sa 25 ml 90% metanola. Dobijene frakcije su ispitane gore opisanom HPLC analitičkom metodom.
Sakupljene su frakcije sa čistoćom<>>99.5%. U sjedinjenrm frakcijama HPLC čistoća je bila 99.8%.
Prirner 8
Metoda, opisana u Primeru 7, je ponovljena, a u kojoj je mobilna faza B bila 0.85% dietilftalat u mobilnoj fazi A.
Sakupljene su frakcije sa čistoćom > 99.5%. U sjedinjenim frakcijama HPLC čistoća je bila 99.8%.
Prirner 9
Lakton simvastatina (0.42 g, HPLC čistoće 87%) je rastvoren u 6 ml 66% acetomtrila i Hdrolizovan sa 1.2 mmol natrijum hidroksida. Acetonitril je uklonjen i pH podešen na 7 razblaženom HjP04. Kolona je uravnotežena mobilnom fazom A, koja sadrži 14% metanola. Grom-Sil 120-ODS HE kolona (Grom Analvtic + HPLC GmbH, Nemačka), veličine 250 x 10 mm i sa veličinom čestica 11 jnm je napunjena uzorkom, koji je dobijen gore-opisanim načinom. Kolona je isprana mobilnom fazom B. koja je sadržavala 6.7% diemenglikolmono-n-heksiletar u mobilnoj fazi A pri brzini protoka od 4.5 ml/min. Apsorbancija je izmerena na 260 nm, a 0.5 ml frakcije su sakupljene sa početnim povećanjem u absorbanciji. Kada je signal opao, kolona je isprana sa 25 ml metanola.
Sakupljene su frakcije sa čistoćom > 99.5%. U sjedmjemin frakcijama HPLC čistoća je bila 99.8%.
Prirner 10
Lakton simvastatina (0.5 g, HPLC čistoće 87%) je rastvoren u 20 ml mobilne faze koja sadrži 70% metanol. Kolona je uravnotežena mobilnom fazom A. Grom-Sil 120-ODS HE kolona (Grom Analvtic + HPLC GmbH, Nemačka), veličine 250 x 10 mm i sa veličinom čestica 11 |xm je napunjena uzorkom, koji je dobijen gore-opisanim načinom. Kolona je isprana mobilnom fazom B, koja je sadržavala 3% dekanoične kiseline u mobilnoj fazi A pri brzini protoka od 4.5 ml/mi n. Apsorbancija je izmerena na 260 nm, a 0.75 ml frakcije su sakupljene sa pc^etnim povećanjem u absorbanciji. Kada je signal opao, kolona je isprana sa 25 ml metanola. Dobijene frakcije su ispitane ovde gore opisanom metodom. Sakupljene su frakcije sa čistoćom > 99.5%. U sjedmjenim frakcijama HPLC čistoća je bila 99.7%.
Prirner 11
Lakton simvastatina (0.5 g, HPLC čistoće 87%) je rastvoren u 20 ml mobilne faze koja sadrži 60% acetonitril. Kolona je uravnotežena mobilnom fazom A. Grom-Sil 120-ODS HE kolona (Grom Analvtic + HPLC GmbH, Nemačka), veličine 250 x 10 mm i sa veličinom čestica 11juin je napunjena uzorkom, koji je dobijen gore-opisanim načinom. Kolona je isprana mobilnom fazom B, koja je sadržavala 2% tetrakis(decil)amomjum bromida u mobilnoj fazi A, pri brzini protoka od 4.5 ml/min. Apsorbancija je izmerena na 260 nm, a 1 ml frakcije su sakupljene sa početnim povećanjem u absorbanciji. Kada je signal opao, kolona je isprana sa 25 ml metanola.
Sakupljene su frakcije sa čistoćom > 99.5%. U sjedmjenim frakcijama HPLC čistoća je bila 99.8%,
Prirner 12
Lakton lovastatina (0.5 g, HPLC čistoće 87%) je rastvoren u 60 ml 75% metanola. Kolona je uravnotežena mobilnom fazom A, koja je sadržavala 70% metanol. Grom-Sil 120-ODS HE kolona (Grom Analvuc + HPLC GmbH, Nemačka), veličine 250 x 10 mm i sa veličinom čestica 11 um je napunjena uzorkom, koji je dobijen gore-opisanim načinom. Kolona je isprana mobilnom fazom B. koja je sadržavala 70% metanola i 4.5% dekanoične ldselinc u mobilnoj fazi A, pri brzini protoka od 6 ml/min. Apsorbancija je izmerena na 260 nm, a 1 ml-ske frakcije su sakupljene sa početnim povećanjem u absorbanciji. Kada je signal opao, kolona je isprana sa 25 ml metanola. Dobijene frakcije su ispitane gore opisanom HPLC analitičkom metodom.
Sakupljene su frakcije sa čistoćom > 99.5%. U sjedinjenim frakcijama HPLC čistoća je bila 99.9%.
Prirner 13
Lakton lovastatina (0.42 g, HPLC čistoće 87%) je rastvoren u 8 ml 50% acetomtrila i hidrolizovan sa 1.5 mmol natrijum hidroksida. Acetonitril je uklonjen i pH je podešen na 7 sa razblaženom H3P04. Kolona je uravnotežena mobilnom fazom A, koja sadrži 14% metanola. Grom-Sil 120-ODS HE kolona (Grom Analytic + HPLC GmbH, Nemačka), veličine 250 x 10 mm i sa veličinom čestica 11 um je napunjena uzorkom, koji je dobijen gore-opisanim načinom. Kolona je isprana mobilnom fazom B, koja je sadržavala 6.7% memenglikolmono-n-h.eksiletar u mobilnoj fazi A pri brzini protoka od 1 ml/min. Apsorbancija je izmerena na 260 nm, a 0.25 ml-ske frakcije su sakupljene sa početnim povećanjem u absorbanciji. Kada je signal opao, kolona je isprana sa 25 ml metanola.
Dobijenc frakcije su ispitane metodom opisanom u primeru 9, Sakupljene su frakcije sa čistoćom > 99.5%. U sjedmjenim frakcijama HPLC čistoća je bila 99.8%.
Prirner 14
Lakton mevastatina (0.5 g, HPLC čistoće 85%) je rastvoren u 150 ml mobilne faze A koja sadrži 70% metanol. Kolona je uravnotežena mobilnom fazom A. Grom-Sil 120-ODS HE kolona (Grom Analvtic + HPLC GmbH, Nemačka), veEčine 250 x 10 mm i sa veličinom Čestica 11 jmn je napunjena uzorkom, koji je dobijen gore-opisanim načinom. Kolona je isprana mobilnom fazom B, koja je sadržavala 4.5% dekanoične kiseline u mobilnoj fazi A, pri brzini protoka od 6 ml'min. Apsorbancija je izmerena na 260 nm, a 1 ml-ske frakcije su sakupljene sa početnim povećanjem u absorbanciji. Kada je signal opao, kolona je isprana sa 25 ml metanola.
Dobijene frakcije su ispitane gore opisanom HPLC analitičkom metodom.
Sakupljene su frakcije sa čistoćom > 99.5%. U sjedmjenim frakcijama HPLC čistoća je bila 99.8%.
Claims (24)
1. Postupak za dobijanje inhibitora HMG-CoA reduktaze, naznačen time, što jedan od koraka u postupku prečišćavanja sirovih inhibitora HMG-CoA reduktaze, uključuje istiskivačku hromatografiju koja obuhvata upotrebu istiskivača za istiskivanje inhibitora HMG-CoA reduktaze što proizvodi inhibitor HMG-CoA reduktaze sa HPLC čistoćom koja premašuje 99.7%.
2. Postupak kao u patentnom zahtevu 1, naznačen time, što je inhibitor HMG-CoA reduktaze izabran iz grupe koja se sastoji od mevastatina, pravastetina, lovastatina, simvastatina, fluvastatina i atorvastatina.
3. Postupak prema patentnim zahtevima 1 ili 2, nazančen time, što je inhibitor HMG-CoA reduktaze u obliku laktona ili kiseline ili njene soli.
4. Postupak kao u bilo kom od patentnih zahteva 1 do 3, nazančen time, što istiskivačka hromatografija obuhvata sledeće korake: a) kondicioniranje hromatografske kolone mobilnom fazom, b) punjenje inhibitora HMG-CoA reduktaze rastvorenog u mobilnoj fazi c) uvodjenje istiskivača za istiskivanje inhibitora HMG-CoA reduktaze sa kolone, i d) dobijanje prečišćenog inhibitora HMG-CoA reduktaze.
5. Postupak kao u patentnom zahtevu 4, naznačen time, što se prečišćen inhibitor HMG-CoA reduktaze dobija
dl) sakupljanjem frakcija, i
d2j ispitivanjem frakcija analitičkom HPLC i sjedinjavanjem frakcija zavisno od kvaliteta i čistoće.
6. Postupak, kao u patentnim zahtevima 4 ili 5, naznačen time, što istiskivačka hromatografija dalje obuhvata kasniju fazu: e) regeneracije hromatografske kolone njenim ispiranjem mešavinom rastvarača alkohol/ voda da bi se eluirao istiskivač.
7. Postupak kao u patentnom zahtevu 4, naznačen time, što je mobilna faza izabrana iz grupe rastvarača, koja se sastoji od vode, acetonitril/vodenih rastvora ili vodenih rastvora nižih alkohola, kao i puferovanih razblaženih rastvora organskih, halogenovanih organskih ili neorganskih kiselina sa katjonima alkalnih metala, sa amionijakom ili sa aminima.
8. Postupak kao u patentnom zahtevu 7, naznačen time, što je mobilna faza bilo voda, bilo rastvor acetonitril/ voda, bilo vodeni rastvor nižih alkohola.
9. Postupak kao u patentnom zahtevu 4, naznačen time, što je pH upotrebljene mobilne faze izmedju 4.5 i 10.5.
10. Postupak kao u patentnom zahtevu 9, naznačen time, što je pH upotrebljene mobilne faze izmedju 6.5 i 8.
11. Postupak kao u patentnom zahtevu 10, naznačen time, što je pH upotrebljene mobilne faze 7.
12. Postupak kao u patentnom zahtevu 4, naznačen time, što je brzina protoka mobilne faze kroz hromatografsku kolonu izmedju 1.5 i 30 ml/(min cm<2>).
13. Postupak kao u patentnom zahtevu 4, naznačen time, što je brzina protoka mobilna faza/mešavina istiskivača kroz hromatografsku kolonu izmedju 3 i 15 ml/(min cm<2>).
14. Postupak kao u patentnom zahtevu 6, naznačen time, što se stacionarna faza regeneriše sa 20 do 100% vodenim rastvorom nižih alkohola po završenom hromatografisanju.
15. Postupak kao u patentnom zahtevu 4, naznačen time, što je stacionarna faza reverzna faza.
16. Postupak kao u patentnom zahtevu 15, naznačen time, što je stacionarna faza prirodna reverzna faza kao što je silikatni gel sa alkilnim lancima različitih dužina.
17. Postupak kao u patentnom zahtevu 15, naznačen time, što je stacionarna faza ili C-18 ili C-8.
18. Postupak kao u patentnom zahtevu 15, naznačen time, što je stacionarna faza matriks sintetski ukrštenog polimera.
19. Postupak kao u patentnom zahtevu 18, naznačen time, što je unakrsni polimerni matriks kopolimer stirena i divinilbenzena.
20. Postupak kao u patentnom zahtevu 4, naznačen time, što je veličina čestica stacionarne faze izmedju 3 i 20 um.
21. Postupak kao u patentnom zahtevu 20, naznačen time, što je veličina čestica stacionarne faze izmedju 7 i 15 pm.
22. Postupak kao u patentnom zahtevu 4, naznačen time, što se istiskivač bira iz grupe, koja se sastoji od dugočlanih alkohola, dugočlanih karboksilnih kiselina, dugočlanih alkalnih amonijumovih soli, aromatičnih estara dikarboksilnih kiselina, okso- i diokso-alkohola, polialkilen poliglikolnih etara i poliaril ili polialkilen poliarilnih etara.
23. Postupak kao u patentnom zahtevu 4, naznačen time, što je koncentracija istiskivača u mobilnoj fazi izmedju 1 i 35%.
24. Postupak kao u patentnom zahtevu 23, naznačen time, što je koncentracija istiskivača u mobilnoj fazi izmedju 2 i 20%.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| SI9800241A SI20072A (sl) | 1998-09-18 | 1998-09-18 | Postopek za pridobivanje inhibitorjev HMG-CoA reduktaze |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| YU81800A YU81800A (sh) | 2003-02-28 |
| RS49996B true RS49996B (sr) | 2008-09-29 |
Family
ID=20432332
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| YUP-818/00A RS49996B (sr) | 1998-09-18 | 1999-09-17 | POSTUPAK ZA DOBIJANJE INHIBITORA HMG-CoA REDUKTAZE VISOKE ČISTOĆE |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6695969B1 (sr) |
| EP (1) | EP1114040B1 (sr) |
| JP (1) | JP3795755B2 (sr) |
| KR (1) | KR100607608B1 (sr) |
| CN (1) | CN1186335C (sr) |
| AT (1) | ATE284396T1 (sr) |
| AU (1) | AU766630B2 (sr) |
| BG (1) | BG64676B1 (sr) |
| CA (1) | CA2343645A1 (sr) |
| DE (1) | DE69922519T2 (sr) |
| HR (1) | HRP20010045B1 (sr) |
| HU (1) | HUP0102997A2 (sr) |
| IL (2) | IL142056A0 (sr) |
| IS (1) | IS2149B (sr) |
| NZ (1) | NZ509582A (sr) |
| PL (1) | PL200336B1 (sr) |
| RO (1) | RO121116B1 (sr) |
| RS (1) | RS49996B (sr) |
| RU (1) | RU2235098C2 (sr) |
| SI (1) | SI20072A (sr) |
| SK (1) | SK285868B6 (sr) |
| WO (1) | WO2000017182A1 (sr) |
Families Citing this family (23)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| SI20305A (sl) * | 1999-08-06 | 2001-02-28 | LEK, tovarna farmacevtskih in kemi�nih izdelkov, d.d. | Kristali natrijeve soli pravastatina |
| US7141602B2 (en) * | 1998-09-18 | 2006-11-28 | Lek Pharmaceuticals D.D. | Process for obtaining HMG-CoA reductase inhibitors of high purity |
| HUP9902352A1 (hu) * | 1999-07-12 | 2000-09-28 | Gyógyszerkutató Intézet Kft. | Eljárás pravasztatin mikrobiológiai előállítására |
| MXPA02005283A (es) * | 1999-11-30 | 2003-10-06 | Biogal Gyogyszergyar | Proceso para recuperar compuestos estatina de un caldo de fermentacion. |
| CZ20021998A3 (cs) * | 1999-12-14 | 2003-02-12 | Biogal Gyogyszergyar Rt. | Nové formy sodné soli pravastatinu |
| PL357533A1 (en) | 2000-03-03 | 2004-07-26 | Plus Chemicals, S.A. | A process for purifying lovastatin and simvastatin with reduced levels of dimeric impurities |
| US20050215636A1 (en) * | 2000-10-05 | 2005-09-29 | Vilmos Keri | Pravastatin sodium substantially free of pravastatin lactone and EPI-pravastatin, and compositions containing same |
| CN1468098A (zh) * | 2000-10-05 | 2004-01-14 | �ݰ¸Ƕ�ҩ������˾ | 基本上无普伐他汀内酯和表普伐他汀的普伐他汀钠和包含普伐他汀钠的组合物 |
| US6936731B2 (en) * | 2000-10-05 | 2005-08-30 | TEVA Gyógyszergyár Részvénytársaság | Pravastatin sodium substantially free of pravastatin lactone and epi-pravastatin, and compositions containing same |
| JP3236282B1 (ja) | 2000-10-16 | 2001-12-10 | 三共株式会社 | プラバスタチンを精製する方法 |
| JP3463875B2 (ja) | 2001-08-06 | 2003-11-05 | 三共株式会社 | プラバスタチンを精製する方法 |
| KR100407758B1 (ko) * | 2001-08-27 | 2003-12-01 | 씨제이 주식회사 | 스타틴의 제조에 있어서 락톤화 방법 |
| JP2003093045A (ja) * | 2001-09-26 | 2003-04-02 | Godo Shusei Co Ltd | 有用変換微生物 |
| KR100435078B1 (ko) * | 2002-02-08 | 2004-06-09 | 종근당바이오 주식회사 | 심바스타틴의 정제방법 |
| JP3463881B2 (ja) | 2002-08-06 | 2003-11-05 | 三共株式会社 | プラバスタチン又はその薬理上許容される塩の単離・精製方法 |
| CA2521276A1 (en) * | 2003-04-01 | 2004-10-14 | Ranbaxy Laboratories Limited | Fermentation process for the preparation of pravastatin |
| US6978908B2 (en) * | 2003-09-15 | 2005-12-27 | Gerber Products Company | Drinking vessel with adjustable handles |
| PL1641447T3 (pl) * | 2003-11-24 | 2009-04-30 | Teva Gyogyszergyar Zartkoerueen Muekoedoe Reszvenytarsasag | Sposób oczyszczania prawastatyny |
| ES2239533B1 (es) * | 2004-03-01 | 2006-12-16 | Ercros Industrial, S.A. | Procedimiento para la obtencion de compactina. |
| KR100923939B1 (ko) * | 2004-09-28 | 2009-10-29 | 테바 파마슈티컬 인더스트리즈 리미티드 | 실질적으로 불순물을 함유하지 않는 아토르바스타틴 칼슘의형태를 제조하는 방법 |
| CN102043030A (zh) * | 2009-10-22 | 2011-05-04 | 北京万全阳光医学技术有限公司 | 一种用高效液相色谱法测定烟酸辛伐他汀缓释片有关物质的方法 |
| CN102621238A (zh) * | 2011-02-01 | 2012-08-01 | 北京北大维信生物科技有限公司 | 一种测定HMG-CoA还原酶抑制剂浓度的方法 |
| CN105985244A (zh) * | 2015-02-04 | 2016-10-05 | 北京北大维信生物科技有限公司 | 化合物、其分离方法、合成方法及用途 |
Family Cites Families (8)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US4231938A (en) | 1979-06-15 | 1980-11-04 | Merck & Co., Inc. | Hypocholesteremic fermentation products and process of preparation |
| SU1319352A1 (ru) * | 1985-01-07 | 1995-09-10 | Ленинградский государственный университет им.А.А.Жданова | Способ очистки препарата гистона н4 из ткани тимуса |
| IT1232311B (it) * | 1989-09-04 | 1992-01-28 | Sclavo Spa | Metodo di purificazione di composti a struttura peptidica o pseudo peptidica a basso peso molecolare. |
| US5202029A (en) * | 1991-03-13 | 1993-04-13 | Caron Kabushiki Kaisha | Process for purification of hmg-coa reductase inhibitors |
| US5407050A (en) * | 1991-03-14 | 1995-04-18 | Kabushiki Kaisha Ace Denken | Article control system |
| US5420024A (en) * | 1993-05-11 | 1995-05-30 | Merck & Co., Inc. | Process for synthesis of acylated HMG-CoA reductase inhibitors from a lactone diol precursor using Candida cylindracea |
| US5427686A (en) | 1994-04-05 | 1995-06-27 | Sri International | Process for separating material from mixture using displacement chromatography |
| EP0877089A1 (en) * | 1997-05-07 | 1998-11-11 | Gist-Brocades B.V. | HMG-CoA reductase inhibitor preparation process |
-
1998
- 1998-09-18 SI SI9800241A patent/SI20072A/sl not_active IP Right Cessation
-
1999
- 1999-09-17 RS YUP-818/00A patent/RS49996B/sr unknown
- 1999-09-17 IL IL14205699A patent/IL142056A0/xx active IP Right Grant
- 1999-09-17 SK SK2002-2000A patent/SK285868B6/sk not_active IP Right Cessation
- 1999-09-17 DE DE69922519T patent/DE69922519T2/de not_active Expired - Lifetime
- 1999-09-17 AU AU55284/99A patent/AU766630B2/en not_active Ceased
- 1999-09-17 NZ NZ509582A patent/NZ509582A/en not_active IP Right Cessation
- 1999-09-17 RO ROA200100289A patent/RO121116B1/ro unknown
- 1999-09-17 WO PCT/IB1999/001553 patent/WO2000017182A1/en not_active Ceased
- 1999-09-17 HR HR20010045A patent/HRP20010045B1/xx not_active IP Right Cessation
- 1999-09-17 HU HU0102997A patent/HUP0102997A2/hu unknown
- 1999-09-17 RU RU2001108381/04A patent/RU2235098C2/ru not_active IP Right Cessation
- 1999-09-17 CN CNB998110760A patent/CN1186335C/zh not_active Expired - Fee Related
- 1999-09-17 US US09/720,952 patent/US6695969B1/en not_active Expired - Fee Related
- 1999-09-17 AT AT99941797T patent/ATE284396T1/de active
- 1999-09-17 KR KR1020017000044A patent/KR100607608B1/ko not_active Expired - Fee Related
- 1999-09-17 EP EP99941797A patent/EP1114040B1/en not_active Expired - Lifetime
- 1999-09-17 JP JP2000574092A patent/JP3795755B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 1999-09-17 CA CA002343645A patent/CA2343645A1/en not_active Abandoned
- 1999-09-17 PL PL345883A patent/PL200336B1/pl not_active IP Right Cessation
-
2001
- 2001-03-12 IS IS5886A patent/IS2149B/is unknown
- 2001-03-16 BG BG105348A patent/BG64676B1/bg unknown
- 2001-03-18 IL IL142056A patent/IL142056A/en not_active IP Right Cessation
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| SK285868B6 (sk) | 2007-10-04 |
| RU2235098C2 (ru) | 2004-08-27 |
| HRP20010045A2 (en) | 2001-12-31 |
| PL200336B1 (pl) | 2008-12-31 |
| JP2002526486A (ja) | 2002-08-20 |
| US6695969B1 (en) | 2004-02-24 |
| SK20022000A3 (sk) | 2001-08-06 |
| DE69922519D1 (de) | 2005-01-13 |
| IL142056A0 (en) | 2002-03-10 |
| BG105348A (en) | 2001-11-30 |
| DE69922519T2 (de) | 2005-12-08 |
| JP3795755B2 (ja) | 2006-07-12 |
| CA2343645A1 (en) | 2000-03-30 |
| IL142056A (en) | 2006-08-01 |
| EP1114040B1 (en) | 2004-12-08 |
| WO2000017182A1 (en) | 2000-03-30 |
| HRP20010045B1 (en) | 2005-08-31 |
| CN1186335C (zh) | 2005-01-26 |
| RO121116B1 (ro) | 2006-12-29 |
| IS5886A (is) | 2001-03-12 |
| IS2149B (is) | 2006-10-13 |
| YU81800A (sh) | 2003-02-28 |
| CN1318063A (zh) | 2001-10-17 |
| HUP0102997A2 (hu) | 2001-12-28 |
| AU5528499A (en) | 2000-04-10 |
| SI20072A (sl) | 2000-04-30 |
| NZ509582A (en) | 2003-10-31 |
| EP1114040A1 (en) | 2001-07-11 |
| BG64676B1 (bg) | 2005-11-30 |
| KR20010099584A (ko) | 2001-11-09 |
| PL345883A1 (en) | 2002-01-14 |
| KR100607608B1 (ko) | 2006-08-02 |
| AU766630B2 (en) | 2003-10-23 |
| ATE284396T1 (de) | 2004-12-15 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| RS49996B (sr) | POSTUPAK ZA DOBIJANJE INHIBITORA HMG-CoA REDUKTAZE VISOKE ČISTOĆE | |
| EP1065196B1 (en) | Process of selectively separating and purifying eicosapentaenoic and docosahexaenoic acids or their esters | |
| Koizumi et al. | Separation of cyclic (1→ 2)-β-D-glucans (cyclosophoraoses) produced by Agrobacterium and Rhizobium, and determination of their degree of polymerization by high-performance liquid chromatography | |
| CN110108818B (zh) | 一种高效分离检测苯酞衍生物的高效液相色谱法及其应用 | |
| US7141602B2 (en) | Process for obtaining HMG-CoA reductase inhibitors of high purity | |
| Dihuidi et al. | Quantitative analysis of doxycycline and related substances by high-performance liquid chromatography | |
| KR100470524B1 (ko) | 모에노마이신a의제조방법 | |
| Bishop et al. | High-performance liquid chromatography of amino acids, peptides and proteins: XXI. The application of preparative reversed-phase high-performance liquid chromatography for the purification of a synthetic underivatised peptide | |
| Lewis et al. | A simplified purification method for the analysis of abscisic acid | |
| CN105693679B (zh) | 一种制备高纯度没食子儿茶素gc的方法 | |
| EP3756474B1 (en) | An extract of persea | |
| CZ2001137A3 (cs) | Způsob získání inhibitorů HMG-CoA reduktázy vysoké čistoty | |
| US8471030B2 (en) | Purification of montelukast using simulated moving bed | |
| EP1266905A1 (en) | Process for producing purified erythromycin | |
| MXPA98002979A (en) | Procedure for the preparation of moenomicin |