RS50806B - Supstituisani piroli, farmaceutski oblici koji ih sadrže, metod za njihovo dobijanje i njihova upotreba - Google Patents

Supstituisani piroli, farmaceutski oblici koji ih sadrže, metod za njihovo dobijanje i njihova upotreba

Info

Publication number
RS50806B
RS50806B RSP-2009/0128A RSP20090128A RS50806B RS 50806 B RS50806 B RS 50806B RS P20090128 A RSP20090128 A RS P20090128A RS 50806 B RS50806 B RS 50806B
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
phenyl
carboxamide
pyrrole
acetylamino
fluoro
Prior art date
Application number
RSP-2009/0128A
Other languages
English (en)
Inventor
Baptiste Ronan
Michel Tabart
Catherine Souaille
Fabrice Viviani
Eric Bacque
Jean-Philippe Lettalec
Pascal Desmazeau
Original Assignee
Aventis Pharma S.A.
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=35478244&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS50806(B) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Aventis Pharma S.A. filed Critical Aventis Pharma S.A.
Publication of RS50806B publication Critical patent/RS50806B/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/30—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D207/34—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom having two double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

Proizvod koji odgovara formuli (I) koja sledi :Formula (I)u kojoj :1) Ar-L-A je:u kojoj su svaki X1, X2, X3 i X4 nezavisno izabrani izmedju N i CH, u kom je A izabran izmedju fenila, pirazolila i izoksazolila eventualno supstituisanih2) L je NH-CO-NH,3) Ra je H,4) R1 je H,5) R2 i R5 nezavisno izabrani iz grupe konstituisane od: H, halogen, R'2, OR'2, NHR'2, NHCOR2, NHCONHR'2, NHSO2R'2 u kom je svaki R'2 izabran iz grupe konstituisane od H,alkil, alkilen, alkinil, aril, hetroaril, cikloalkil, heterocikl, supstituisani alkil, supstituisani alkilen, supstituisani alkinil, supstiutisani aril, supstituisani heteroaril, supstituisanicikloalkil, supstituisanim heterocikl.Prijava sadrži još 8 zavisnih patentnih zahteva.

Description

[0001]Ovaj pronalazak se odnosi na nova hemijska jedinjenja, naročito na nove supstituisane pirole, jedinjenja koja ih sadrže i njihovu upotrebu kao iekova.
[0002]Posebno, pronalazak se bavi novim specifičnim pirolima predstavljajući jedno anti-kancerogeno dejstvo modulacijom aktivnosti proteina, naročito kinaza.
[0003]Poznata je, prema patentnoj prijavi publikovanoj pod brojem V7O02/079193, upotreba
pirola, kako je navedeno, kao anti-kancerogena. Takva jedinjenja su supstituisani piroli u poziciji 2 sa jednom grupom izabranom između NH2, N02, halogena, CONH2, H ili CN i u poziciji 4 sa jednim pirimidinom koji je supstituisan jednom grupom aminofenil. Nijedan od navedenih pirmidina nije supstituisan jednom grupom uree.
[0004]Za sada je, većina komercijalnih jedinjenja korišcenih u hemoterapiji problematična zbog
sekundarnih efekata i tolerancije kod pacijenata. Ti efekti bi mogli biti ograničeni, do određene mere, kad bi upotrebljeni lekovi selektivno delovali na kancerogene ćelije, isključujući zdrave ćelije. Jedno od mogućih resenja za smanjenje neželjenih efekata hemoterapije bi moglo biti korišćenje lekova koji deluju na metaboličke puteve ili konstitutivne elemente tih puteva, čije
dejstvo bi jače bilo izraženo u kancerogenim ćelijama, dok se kod zdravih ćelija ne bi ni malo
izražavalo.
[0005] Proteini kinaze su jedna familija enzima koja katalizuje fosforilaciju grupa hidroksi
specifičnih ostataka proteina kao što su ostaci tirozin, serin ili treonin. Takve fosforilacije mogu,
u velikoj meri, promeniti funkciju proteina ; takođe proteini kinaza imaju veliku ulogu pri
regulaciji velikog broja ćelijskih procesa, uključujući naročito, metabolizam, ćelijsku
proliferaciju, ćelijsku diferencijaciju, ćelijsku migraciju ili ćelijsko preživljavanje. Između
različitih ćelijskih funkcija u kojima je uključen protein kinaza, određeni procesi predstavljaju
atraktivne mete za lečenje kancerogenih bolesti kao i drugih oboljenja.
[0006] Takođe, jedan od predmeta ovog pronalaska je predktganje jedinjenja koja pokazuju
jednu antikancerogenu aktivnost i naročito su aktivni u odnosu na kinaze. Između kinaza za koje
se istražuje podešavanje aktivnosti, FAK, KDR i Tie2 su najpoželjniji.
[0007] Ovi proizvodi odgovaraju formuli (I) koja sledi:
u kojoj: 1) A i Ar su nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od : aril, hereoaril, heterocikl, supstituisani aril, supstituisani heteroaril, supstituisani heterocikl, cikloalkil, supstituisani cikloalkil; 2) L je izabran iz grupe koja se sastoji od : MH, CO-NH, NH-CO, NH-S02, S02NH, NH-CH2,
CH2-NH, CH2-CO-NH, NH-CO-CH2, NH-CHr-CO, CO-CH2-NH, NH-CO-NH, NH-CS-NH, NH-CO-O, O-CO-NH, CHr-NH-CO-NH, NH-CO-NH-~CH2, NH-CO-CHr-CO-NH;
3) Raje izabran iz grupe koja se sastoji od H, alkil i cikloalkil.
4) Rl je izabran iz grupe koja se sastoji od : H, R, COR, S02R, u kojoj je R izabran između H, OR'U, NR"sR"6, (Cl-C6)alkil, cikloalkil, heterocikl, supstituisani heterocikl, aril, supstituisani aril, heteroaril, supstituisani heteroaril, u kojoj je R"4 izabran izmedju H, fenil, alkil i u kojoj suR"5 i R"6 nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji odH,R, OR'U, (Cl-C6)alkil, cikloalkil,heterocikl, supstituisani heterocikl, aril, supstituisani aril, heteroaril, supstituisani heteroaril, ili su R"5 i R"6 vezani izmedju sebe da bi se formirali jedan zasićeni prsten od 5 do 8 članova koji sadrži od 0 do 3 heteroatoma izabranih izmedju O, S i N;5) R2 i R5 su nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od: H, halogen, R'2, CN, 0(R'2),
OC(0)(R'2), OC(0)N(R'2)(R'3), 0S0(02)(R'2), N(R'2XR'3), N=C(R'2)(R'3), N(R<*>2)C(0)(R'3),
N(R'2)C(Q)0(R'3), N(R,4)C(0)N(R,2)(R,3), N(R'4)C(S)N(R'2)(R'3), N(R'2)S(02)(R'3),
C(0)(R'2), C(0)0(R'2), C(0)N(R'2)(R'3), C(=N(R'3))(R'2), C(=N(OR'3))(R'2), S(R'2),
S(0)(R'2), S(Oz)(R,2), S(( h) 0(R'2), S(C>2)N (R'2) )(R'3); gde su svaki R'2, R'3, R'4 nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od H, alkil, alkilen, alkinil, arilm, hetereoaril, cikloalkil, heterocikl, supstituisani alkil, supstituisani alkilen, supstituisani alkinil, supstituisani aril, supstituisani heteroaril, supstituisani cikloalkil, supstituisani heterocikl; gde kad su R'2 i R'3 svaki drugačiji od H, a simultano prisutni na R2 ili R3, mogu biti povezani izmedju sebe da bi se formirao jedan prsten koji sadrži od 0 do 3 heteroatoma izabranih između O, S i N.
[0008]Željeni proizvodi iz formule (I) odgovaraju definiciji koja sledi:
u kojoj :
1) A i Ar su kao što je prethodno definisano;
2) Rije H:
3) L je izabran iz grupe konstituisane sa:NHCO, NH-CO-NH, NH, NHSOz, NHCO-CHj-CONH;
4) Raje izabran izmedju H i metil.
5) R2 i R5 su kao što je prethodno definisano.
[0009] U proizvodima formule (I), Ar-L-A su pre svega:
u kojoj su svaki XI, X2, X3 i X4 nezavisno izabrani izmedju N i C-R'S, gde je R'S identično definisan kao R2.
|0010]Supstituenti R'5 izabrani iz grupe koja se sastoji od, H, F, Cl, metal, NH2, OMe, OCF3, i CONH2, su poželjni.
[0011]Poželjni supstituenti R2 i R5 su nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od: H, halogen, R'2, OR'2, NHR'2, NHCOR'2, NHCONHR'2, NHSOjR'2. Poželjno je da R2 i R5 su H.
[0012]Poželjni supstituent Raje H.
[0013]Poželjni supstituenti L-A su izabrani izmedju NH-CO-NH-A i NH-SOr-A.
[0014]Kombinacija L-A je naročito efikasna kad L-A je NHCONH-A.
[0015]Proizvodi u skladu sa pronalaskom imaju, naročito, jedan supstituent A koji je izabran iz grupe koja se sastoji od fenu, piridil, pirimidil, tienil, furil, pirolil, oksazolil, tiazolil, izoksazolil, izotiazolil, pirazolil, imidazolil, indolil, indazolil, benzimidazolil, benzoksazolil i benzotiazolil; koji su eventualno supstituisani.
[0016]Na način koji je najpoželjniji, A je izabran izmedju fenil, pirazolil i izoksazolil ; eventualno supstituisanih.
[0017]Supstituent A je vrlo povoljno supstituisan jednim prvim supstituentom izabranim iz grupe koja se sastoji od alkil, alkilen, alkinil, aril, hetereoaril, O-alkil, O-Aril, O-hetereoaril, S-alkil, S-Aril, S-hetereoaril, od kojih je svaki eventualno supstituisan sa jednim supstituentom koji je izabran između (Cl-C3)alkil, halogen, 0-(Cl-C3)alkil.
[0018]Supstituent A je povoljno supstituisan sa drugim supstituentom izabranim iz grupe koja se sastoji od F, Cl, Br, J, OH, SH, SO3M, COOM, CN, NO2CON(R8)(R9), N(R8)CO(R9), (Cl-C3)alkil-OH, (CI-C3)alkilN(R8)(R9), (Cl-C3)alkiKR10), (Cl-<:3)alkil-COOH, N(R8)(R9); u kom su R8 i R9 nezavisno izabrani izmedju H, (Cl-C3)alkil, (Cl-C3)alkil halogen, (Cl - C3)alkilOH, (Cl-<:3)alkilNH2, (Cl-C3)alkilCOOM, (Cl-C3)alkilS03M; u kom su R8 i R9 simultano različiti od H, mogu biti povezani da bi se formirao jedan prsten od 5 do 7 članova koji sadrže od 0 do 3 heteroatoma ; gde M je H ili jedan katjon alkalnog metala izabran izmedju Li, Na, i K; i u komRIOje H ili jedan nearomatični heterocikl eventualno supstituisan, koji sadrži 2 do 7 atoma ugljenika, i 1 do 3 heteroatoma izabranih izmedju N, O i S.
[0019]Posebno poželjni supstituenti A su izabrani izmedju fenila, pirazolila i izoksazolila ; drugim rečima, supstituenti A mogu biti supstiutisani halogenom, (Cl-C4)alkilom, (Cl-C3)alkil halogenom, 0-(Cl-C4)alkilom, i S-<C1-C4) alkilom, 0-<Cl-C4)alkil halogenom, S (C1-C4) alkil halogenom. Kad je A di-supstituisan, dva supstituenta od A mogu formirati jedan prsten od 5 do 7 članova koji sadrže od 0 do 3 heteroatoma.
Proizvodi iz primera 1 do 41 su predmet ovog pronalaska
[0020]Jedan proizvod u skladu sa pronalaskom mogao bi se predstaviti u obliku :
1) ne-hiralnom, ili
2) racemskom, ili
3) obogaćen sa jednim stereoizomerom, ili
4) obogaćen sa jednim enantiomerom;
i mogao bi eventualno biti salifikovan.
[0021| Jedan proizvod u skladu sa pronalaskom mogao bi se upotrebiti za proizvodnju leka
korisnog za lečenje jednog patološkog stanja, naročito kancera.
[0022] Ovaj pronalazak takodje se odnosi na terapeutske smeše koje sadrže jedan proizvod
prema pronalasku, u kombinaciji sa jednim ekscipijentom farmaceutski prihvatljivim, shodno
izabranom načinu davanja. Farmaceutski oblici mogu biti u čvrstom, tečnom obliku, ili kao
lipozomi.
[0023] Kao čvrste oblike možemo navesti praškove, kapsule, tablete. U oralne forme se takodje
mogu uključiti čvrsti oblici zaštićeni prevlakama od kisele sredine u stomaku. Kao nosači koji se
koriste za čvrste oblike posebno se koriste mineralni mediji kao što su fosfati, karbonati, ili
organski mediji kao što su laktoza, celuloza, škrob ili polimeri. Tečni oblici su sačinjeni od
rastvora, suspenzija ili disperzija. Oni sadrže kao disperzivni medij bilo vodu, bilo organski
rastvarač (etanol, NMP ili dr.) ili mešavine tenzioaktivnih agenasairastvarača ili
kompleksirajućih agenasa i rastvarača.
[0024] Tečne forme bi, prvenstveno, bile pripremljene za inekcije, i kao takve bile prihvatljive za
odgovarajuću primenu.
[002S] Prihvatljivi načini davanja jedinjenja putem inekcije obuhvataju intavenozno davanje,
intra-peirtonealno, intra-muskularno, potkožno, intravenozni načinje najprihvatljiviji u praksi.
[0026] Praktičar prilagodjava dozu davanja jedinjenja iz ovog pronalaska, prema načinu davanja
i stanja u kom se nalazi pacijent.
(0027] Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu biti davana samostalno ili u smeši sa drugim anti-kancerogenima. Izmedju mogućih asocijacija mogu se navesti:•Alkilujući agensi naročito ciklofosfamid, melfalan, ifosfamid, hlorambucil, busulfan, tiotepa, prednimustin, karmustin, lomustin, semustin, steptozotocin, dekarbazin, temozolomid, prokarbazin i eksametilmelamin
•derivati platine kao, naročito, cisplatina, karboplatina ili oksaliplatina
•antibiotski agensi, kao naročito, bleomicin, mitomicin i daktinomicin
•agens antimikrotubula kao, naročito, vinblastin, vinkristin, vindezin, vinorelbin, taksoidi
(paklitaksel i doketaksel)
•antraciklini kao, naročito, doksorubicin, daunorubicin, darubicin, epirubicin, mitoksantron, lozoksantron•inhibitori topizomeraza grupe I i II kao što su etopozid, tentpozid, amsakrin, irinotekan, topotekan i tomudeks
•fluorpirimidini kao što su 5-fluorouracil, UFT, floksuridin
•analozi citidina kao što su 5-azacitidin, citarabin, gemcitabin, 6-merkaptomurin, 6-tioguanin
•analozi adenozina kao što su pentostatin, citarabin, ili fosfat fludarabin
•metotreksat i folna kiselina
• enzimi i jedinjenja kao što su L-asparaginaza, hidroksiuree, trans-retinoidna kiselina, suramin, deksrazoksan, amifostin, erceptin, kao i estrogeni i androgeni hormoni • antivaskularni agensi kao što su derivati kombretastatina, npr., CA4P, halkoni ili kolhicini, npr., ZD6126, i njihovih prelekovi.
10028]Podjednako je moguća asocijacija jedinjenja iz ovog pronalaska sa tretmanom zračenja. Ovi tretmani mogu biti primenjeni simultano, odvojeno ili sekvencijalno. Praktičar će prilagodiiti tečenje u zavisnosti od bolesti koja se leči.
[0029]Proizvodi iz pronalaska su korisni kao agensi inhibitori jedne reakcije katalizovane kinazom. FAK, KDR, i Tie2 su kinaze za koje su proizvodi pronalaska posebno korisni kao inhibitori.
[0030]Dole su navedeni razlozi zbog kojih su ove kinaze izabrane:
FAK
FAK je jedna citoplazmična tirozin kinaza koja ima važnu ulogu u pretvaranju transmitovanog signala od strane integrina, grupe heterodimeričkih receptora ćelijske adhezije. FAK i integrini su rasporedjeni u perimembranskim strukturama pod nazivom plakovi adhezije. Pokazano je, u brojnim ćelijskim oblicima da su aktivnost FAK kao i njegova fosforilacija na ostatke tirozina i naročito njegova auta fosforilacija na tirozin 397 zavisne od vezivanja integrina za njihove ekstracelulrne ligande, i tako su indukovani tokom ćelijske adhezije [Komberg L., i al. J Điol. Chem. 267 (33) : 23439-442. (1992)]. Autofosforilacija na tirozinu 397 FAK predstavlja mesto vezivanja za jednu drugu tirozin kinazu, Src, preko svog domena SH2 [Schaller i al. Mol. Cell. Biol. 14 : 1680-1688. 1994.; Xing i al. Mol. Cei. Biol. 5 : 413-421.1994.]. Znači, Src može da fosforiše FAK na tirozinu 925, uključujući takodje protein adapter Grb2 i indukujući u odredjenim ćelijama aktivaciju staze ras i MAP Kinaze uključene u kontrolu ćelijske proliferacije [Schlaepher i al. Nature; 372: 786-791. 1994.; Schlaepher i al. Prog. Biophv. Mol. Biol. 71: 435-478. 1999.; Schlaepher i Huntler, J. Biol. Chem. 272: 13189-13195. 1997.]
Aktivacija FAK može takodje podstaći staze signalizacije jun NH2-terminal kinaza (JNK) i
rezultirati progresijom ćelija prema fazi Gl ćelijskog prstena [Oktay i al. J. Cell. Biol. 145: 1461-1469. 1999.] Fosfatidilinozitol-3-OH kinaza(PI3 kinaza) se povezuje takodje za FAK na tirozinu 397 i ova interakcija bi se mogla pokazati neophodnom pri aktivaciji P13 kinaza [Chen i Guan, Proc. Nat. Acad. Sci. USA. 91: 10148-10152. 1994.; Lmg i al. J. Cell. Biochem. 73: 533-544. 1999.] Kompleks FAK/Src fosforiluje različite supstrate kao Sto su paksilin i pl30CAS u fibroblastima [Vuori i al. Mol. Cell. Biol. 16: 2606-2613.1996.].
Rezultati brojnih proučavanja podržavaju hipotezu da bi inhibitori FAK mogli biti korisni u lečenju kancera. Proučavanja sugerišu da bi FAK mogao imati važno mesto u proliferaciji i/ili ćelijskom preživljavanjuin vitro.Naprimer, u ćelijama CHO, odredjeni autori su demonstrirali kako surekspresija pl25FAK vodi ujedno ubrzavanje tranzicije Gl u S, sugerišući da pl25FAK promoviše ćelijsku profileraciju [Zhao J. -H i al. J. Cell. Biol. 143: 1997-2008. 1998.]. Drugi autori su pokazali da ćelije tumora lečene sa oligonukleotidima anti-sens FAK gube svoju adheziju i ulaze u apoptozu (Xu i al. Cell.Growth. Differ. 4: 413-418. 1996.). Takodje je dokazano da FAK promoviše migraciju ćelijain vitro.Dakle, ftbroplastni deficijenti za ekspresiju FAK («nokaut» miša za FAK) predstavljaju jednu zaobljenu morfologiju, za nedostatke ćelijske migracije u odgovoru na znake hemiotaktika i njegovih grešaka koji su suzbijeni jednom re-ekspresijom FAK [DJ. Sieg i al. J. Cell. Science. 112 2677-91. 1999.]. Re-ekspresija domena C-terminalnog FAK-a (FRNK) blokira u celosti prilepljene ćelije i redukuje ćelijsku migracijuin vitro[Richardson A. i Parsons J. T. Nature. 380: 538-540, 1996.]. Re-ekspresija FAK u ćelijama CHO, COS, ili u astrocitomima humanim favorizuje migraciju ćelija. Upotreba FAK u promociji prolifileracije i migracije ćelija u mnogobrojnim tipovima ćelijain
vitro,sugeriše potencijalnu ulogu FAK u malignim procesima. Jedna nedavna studija je uspešno
pokazala povećanje prolifileracije ćelija tumorain vivoposle indukcije ekspresije FAK u ćelije
humanog astrocitoma [Cary. L. A. i al. J. Cell. Sci. 109: 1787-94. 1996; VVang D i al. J. Cell.
Sci. 113: 4221-4230. 2000.]. Štaviše, imunohistohemijske studije iz humane biopsije su pokazale da je FAK bio pre-ekspresivan kod kancera prostate, krvi, tiroidne žlezde, debelog
creva, melanoma, velikog mozga i pluća, nivo ekspresije FAK je bila u direktnoj korelaciji sa
tumorima koji predstavljaju najagresivniji fenotip [Weiner TM, i al. Lancet. 342(8878): 1024-1025. 1993; Owens i al. Cancer Research. 55:2752-2755. 1995; Maung. K. i al. Oncogene. 18:6824-6828.1999; Wang D i al. J. Cell. Sci. 113:4221-4230. 2000.].
KDR
KDR (Kinase insert Đomain Receptor) takodje pod nazivom VEGF-92 (Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 2), biva izražen jedino u endotelnim ćelijama. Taj receptor se vezuje za faktor angiogenog ukrštanja VEGF, i takodje ukazuje medijatoru na jedan transdukcionalni
signal u pravcu aktivacije svog unutarćelijskog domena kinaza. Direktna inhibicija aktivnosti
kinaza VEGF-R2 omogućava redukciju fenomena angiogeneze uz prisustvo eksogena VEGF (Vascular Endothelial Growth Factor : faktor vaskulamog endotelnog rasta) (Strawn i al. Cancer Research, 1996., vol. 56, str. 3540-3545). Ovaj proces je pokazan uz pomoći mutanata VEGF-
R2 (Millauer i al. Cancer Research, 1996, vol. 56 str. 1615-1620). Receptor VEGF-R2 izgleda nema nijednu drugu funkciju kod odraslih, sem one koja je spojena sa aktivnošću angiogeneze. Prema tome, jedan selektivni inhibitor aktivnosti kinaza VEGF-R2 ne bi pokazivao visok nivo toksičnosti.
Štaviše, od te glavne uloge u angiogenom dinamičkom procesu, nedavni rezultati ukazuju na to da je ekspresija VEGF doprinela preživljavanju ćelija tumora posle hemijskih- i radio-terapija, naglašavajući potencijalnu sinergiju inhibitora KDR sa drugim agensima (Lee i al. Cancer Research, 2000, vol. 60, str. 5565-5570).
Tie2
Tie—2 (TEK) je član jedne grupe receptora tirozin kinaza, specifično endotelijalnih ćelija.Tie2 jeprvi receptor u aktivnosti tirozin kinaza, koji je istovremeno poznat i kao agonista (angiopoietin 1 ili Angl), koji stimuliše autofosforilaciju receptora i signalizaciju ćelija [S. Davies i al. (1996) Cell 87, 1161-1169] i antagonista (angiopoietin 2 ili Ang2) [P. C. Maisonpierre i al. (1997) Science 277, 55-60]. Angl može sinergizovati sa VEGF u poslednjim stadijumima neo-angiogeneze [Asahara T. Circ. Res. (1998) 233-240]. Iskustva knock-out-a (nokauta) i transgeničnih manipulacija ekspresije Tie2 ili Angl izvedenih na životinjamakoji prikazujugreške vaskularizacije [D. J. Dumont i al (1994) Genes Dev. 8, 1897-1909 i C. Suri (1996) Cell 87, 1171-1180]. Veza Angl za svog receptora vodi u autofosforilaciju domena kinaza Tie2 koji je esencijenalan za neovaskularizaciju, isto kao za regrutovanje i interakciju krvnih sudova sa pericitima i ćelijama glatkih mišića ; ove pojave doprinose sazrevanju i stabilnosti novoformiranih krvnih sudova [P. C. Maisonpierre i al (1997) Science 277, 55-60]. Lin et al
(1997) J. Clin. Invest. 100, 8: 2072-2078/Lin. P. (1998) PNAS 95, 8829-8834, su pokazali jednu inhibiciju rasta i vaskularizacije tumora, kao i smanjenje metastaza na plućima, adenvirusnih infekcija ili infekcija preko inekcije, iz vanćelijskog domena Tie2 (Tek) na ksenografskim modelima zdravih tumora i melanoma.
Inhibitori Tie2 se mogu upotrebiti u situacijama gde se jedna neovaskularizacija odvija na neodgovarajući način (naprimer, dijabetska retinopatija, hronična upala, psorijaza, sarkom Kaposi, hronična neovaskularizacija uzrokovana makularnom degeneracijom, reumatični artritis, infantilni hemoangiom i kanceri).
Definicije
[0031]Pojam « halogen >> odgovara jednom elementu izabranom izmedju F, CI, Br i J.
[0032]Pojam « alkil » odgovara jednom ugljenvodoničnom supstituentu zasićenom linearnom ili razgranatom, koji sadrži od 1 do 12 atoma ugljenika. Supstituenti metil, etil, propil, 1-metiietil, butil, 1-metilpropil, 2-metilpropil, 1,1-dimetiletil, pentil, 1-metilbutil, 2-metilbutil, 3-metilbutil, 1,1-dimetilpropil, 1,2-dimetilpropil, 2,2-dimetilpropil, 1-etilpropil, heksil, 1-metilpentil, 2-metilpentil, 1—etilbutil, 2-etiIbutil, 3,3-dimetiIbutil, heptil, 1-etilpentil, oktil, nonil, decil, undecil, i dodecil su primeri za alkil supstituente.
[0033]Pojam «alkilen» odgovara jednom ugljenvodoničnom linearnom ili razgranatom supstituentu sa jednostrukim ili višestrukim nezasićenjem, koji sadrži od 2 do 12 atoma ugljenika. Supstituenti etilenil, 1-metiletilenil, prop-l-enil, prop-2-enil, Z-l-metilprop-l-enil, E-l-metilprop-l-enil, Z-l,2-dimetil-prop-I-enil, E-l,2-dimetil-prop-l-enil, but-l,3-dienil, l-metilidenil-prop-2-enil, Z-2-metilbut-l,3-dienil, E-2-metilbut-l,3-dienil, 2-metil—1-mcti-Iidenilprop-2-enil, undek-l-enil i undek-10-enil su primeri za alkilen supstituente.
[0034|Pojam « alkinil » odgovara jednom ugljenvodoničnom linearnom ili razgranatom supstituentu koji ima najmanje dva nezasićenja, nošena susednim parom atoma ugljenika, koji sadrži od 2 do 12 atoma ugljenika. Supstituenti etinil; prop-I-inil, prop-2-inil; i but-l-inil su primeri za alkinil supstituente.
[0035]Pojam « aril » odgovara jednom aromatičnom mono- ili policikličnom supstituentu koji sadrži od 6 do 14 atoma ugljenika. Supstituenti fenil, naft-l-il ; naft-2-il ; antracen-9-il ; l,2,3,4-tetrahidronaft-5-il,; i l,2,3,4-tetrahidronaft-6-il, su primeri za aril supstituente.
[0036]Pojam « heteroaril » odgovara jednom heteroaromatičnom mono- ili policikličnom supstituentu koji sadrži od 1 do 13 atoma ugljenika i od1do4heteroatoma. Supstituenti pirol-1-il; piroI-2-il; pirol-3-il; furil; tienil; imidazolil; oksazolil; tiazolil; izoksazolil; izotiazotil ; 1,2,4-triazolil; oksadiazolil; tiadiazolil; tetrazolil; piridil; pirimidil; pirazinil; 1,3,5-triazinil ; indolil ; benzo[b]furil ; benzo[b]tienil ; indazolil ; benzimidazolil ; azaindolil ; hinoleil ; izohinoleil; karbazolil; i akridil su primeri za heteroaril supstituente.
[0037]Pojam « heteroatom » ovde odgovara jednom atomu bar divalentnom, različitom od ugljenika. N; O; S: i Se su primeri za heteroatome.
[0038]Pojam « cikloalkil » odgovara jednom ugljovodoničnom cikličnom zasićenom ilidelimičnonezasićenomsupstituentu kojiima od 3do 12atomaugljenika.Supstituenti ciklopropil; ciklobutil; ciklopentil; ciklopentenil; ciklopentadienil; cikloheksil; cikloheksenil; cikloheptil; biciklo[2.2.1]heptil; ciklooktil; biciklo[2.2.2]oktiI; adamantil; i perhidronaftil su primeri cikloalkil supstituenata. — [0039]- Pojam « heterocikl » odgovara jednom ugljovodoničnom cikličnom zasićenom ili delimično nezasićenom supstituentu koji ima od 1 do 13 atoma ugljenika i od 1 do 4 heteroatoma. Pre svega, ugljovodoničnii ciklični zasićeni ili delimično nezasićeni supstituent, monocikličan koji sadrži 4 do 5 atoma ugljenika i 1 do 3 heteroatoma.
[0040]Pojam « supstituisan » odgovara jednom ili više supstituenata različitim od H, na primer
halogen; alkil; aril; heteroaril; cikloalkil; heterociklil; alkilen; alkinil; OH; O-alkil; O-alkilcn, O-aril; O-heteroaril; NH2; NH-alkil; NH-aril; NH-heteroaril; N-alkil-alkil; SH; S-alkil; S-aril;
S(Oj)H; S(C>2)-alkil; S(02)-aril; S03SQ3-alkilS03aril; CHO; C(0)-*lkiI; C(0)-aril; C(0)OH;
C(0)OH; C(0)G)-alkil; C(0)0-aril; OC(0)-alki1; OC(0)-aril; C(0)NH2; C(0)NH-alkil, C(0)NH-ariIu; NHCHO; NHC(0)-alkil; NHC(0)-aril; NH-cikloalkil; NH-heterocikl.
[0041]Pored toga, ovaj pronalazak ima za predmet metode pripreme proizvoda iz formule (I).
Prema pronalasku proizvodi mogu biti pripremljeni počevši od konvencionalnih metoda organske hernije. Dole navedene šeme 1, 2, 3 i 4 su ilustracija metoda korišćenih za pripremu primera koji se odnose na supstituisane pirole. Kao takve, one ne mogu ograničiti obim ovog pronalaska, u odnosu na metode pripremanja jedinjenja iz prijave.
[0042]Za ljude iz struke se podrazumeva, da, za sprovodjenje prethodno opisanih metoda prema pronalasku, može biti neophodno uvodjenje zaštitnih grupa na funkcije amino, karboksi i alkoholne da bi se izbegle sekundarne reakcije. Ove grupe su takve da dozvoljavaju eliminaciju bez uticaja na ostatak molekula. Kao primere za zaštitne grupe funkcije amino, mogu se navesti karbamat terc-butila koji može biti regenerisan u sredini trifluorsirćetne kiseline ili jodotrimetilsilana, acetil, koji može biti regenerisan u kiseloj sredini (hlorhidrična kiselina na primer). Kao primere za zaštitne grupe funkcije karboksi, mogu se navesti estri (metoksimetilestar, benzilestar, naprimer). Kao primere za zaštitne grupe funkcije alkoholne mogu se navesti estri (benzoilester na primer) koji mogu biti regenerisani u kiseloj sredini ili kataličkom hidrogenacijom. Ostale korisne zaštitne grupe su opisane kod T. W. GREENE et coll.
u Protective Groups in Organic Svnthesis, treće izdanje, 1999, Wiley-Interscience.
Jedinjenja iz formule (I) su izolovana i mogu biti prečišćena poznatim uobičajenim metodama, na primer kristalizacijom, hromatografijom ili ekstrakcijom.
Enantiomeri, diastereoizomeri jedinjenja formule (I) čine podjednako deo pronalaska. Jedinjenja formule (I) koja sadrže bazni ostatak mogu eventualno biti transformisana u adicione soli mineralnih ili organskih kiselina, delovanjem jedne takve kiseline u jednm rasrvaraču, na primer organskom, kao što su jedan alkohol, jedan keton, jedan etar, ili jedan hlorovani rastvarač.
Jedinjenja iz formule (I) koja nose kiseli ostatak mogu eventualno biti transformisana u metalne soli ili adicione soli sa azotnim bazama prema metodama poznatim samim po sebi. Ove soli se mogu dobiti delovanjem jedne metalne baze (alkalne ili zemnoalkalne npr.), amonijaka, jednog amina ili jedne soli amina na jedno jedinjenje formule (I) u jednom rasrvaraču. Formirana so je izdvojena uobičajenim metodama.
Ove soli podjednako čine deo pronalaska.
Kad jedan proizvod prema pronalasku ima najmanje jednu funkciju slobodne baze, farmaceutski prihvatljive soli mogu biti pripremljene reakcijom izmedju datog proizvoda i jedne mineralne ili organske kiseline. Farmaceutski prihvatljive soli uključuju hloride, nitrate, sulfate, hidrogensulfate, pirosulfate, bisulfate, sulfite, bisulfite, fosfate, monohidrogenfosfate, dihidrogenfosfate, metafosfate, pirofosfate, acetate, propionate, akrilate, 4-hidroksibutirate, kaprilate, kaproate, đekanoate, oksalate, malonate, sukcinate, glutarate, adipate, pimelate, maleate, fumarate, citrate, tartarate, laktate, fenilacetate, mandelate, sebakate, suberate, benzoate, ftalate, metansulfonate, p-toluen sulfonate, propansulfonate, ksilensulfonate, salicilate, cinamate, glutamate, aspartate, glukuronate, galakturonate.
Kad jedan proizvod prema pronalasku sadrži najmanje jednu funkciji slobodne kiseline, farmaceutski prihvatljive soli mogu biti pripremljene reakcijom izmedju datog proizvoda i jedne mineralne ili organske baze. Baze farmaceutski prihvatljive uključuju hidrokside katjona alkalnih metala ili zemnoalkalnih, kao što su Li, Na, K, Mg, Ca, jedinjenja baznih amina kao što su amonijak, arginin, histidin, piperidin, morfolin, piperazin, trietilamin.
(0043]Pronalazak je podjednako opisan u sledećim primerima, kao ilustracija pronalaska.
(0044(Analize LC/MS su realizovane na jednom uredjaju Micromass model LCT koji je povezan sa jednim uredjajem HP 1100. Veliki broj proizvoda je meren pomoću jednog diodnog detektora sa HP G1315A u opsegu talasa od 200-600 nm i jednog detektora sa disperzijom svetlosti Sedex 65. Snimanje spektra masa Mascni spektri je realizovana u jednom opsegu od 180 do 800. Podaci su analizirani upotrebom softvera Micromass MassLynx. Separacija je postignuta na jednoj koloni Hvpersil BDS Cl8, 3um (50 x 4.6mm), uz eluiranje sa jednim
linearnim gradijentom od S do 90% acetonitrila koji sadrži 0.05% (v/v) trifuoracetne kiseline (TFA) u vodi koja sadrži 0.05% (v/v) TFA u 3.5 mn sa protokom 1 mL/mn. Totalno vreme analize, uključujući i i period reekvilibracije kolone, je 7 mn. Spektri MS su realizovani putem elektrospreja (ES<+>) na jednom uredjaju Platform II (Micromass). Glavni posmatrani joni su opisani.
Tačke topljenja su izmerene u kapilaru najednom uredjaju Mettler FP62, opsega 30°C do 300°C, sa porastom od 2°C ti minuti.
Prečišćavanje sa LC/ MS:
[0045]Proizvodi mogu biti pročišćeni sa LC/MS uz upotrebu jednog sistema VVaters FrakcijeLynx sastavljenog od jedne pumpe gradijenta VVaters modele 600, jedne pumpe regeneratora VVaters modele 515, jedne pumpe za razredjivanje VVaters Reagent Manager, jedne auto-injektora VVaters modele 2700, dva ventila Rheodvne modele LabPro, jednog diodnog detektora VVaters modele 996, jednog spektrometra masa VVaters modele ZMD, i jednog kolektora frakcija Gilson modele 204. Sistem je kontrolisan putem softvera VVaters FractionLynx. Separacija je bila izvedena naizmenično na dve kolone VVaters Symmetry (Cig, 5uM, 19x50mm, kataloška referenca 186000210), jedna kolona je bila u podvrgnuta regeneraciji sa smešom voda/acetonitril 95/5 (v/v) koja sadrži 0.07% (v/v) trifuoracetne kiseline, dok je druga kolona bila u toku separacije. Eluiranje kolona je sprovedena uz upotrebu jednog linearnog gradijenta od 5 do 95% acetonitrila koji sadrži 0.007% (v/v) trifluoracetne kiseline u vodi koja sadrži 0.007% (v/v) trifluoracetne kiseline, protoka 10 mL/mn. Po izlasku kolone iz separacije, hiljaditi deo eluenta je izdvojen sa LC Packing Accurate, rastvoren u metil alkoholu protoka od 0.5 mL/mn i poslat prema detektoru, od toga je 75% usmereno prema detektoru sa diodama i 25% prema masenom spektrometru. Ostatak eluenta (999/1000) se šalje prema kolektoru frakcija gde se fluks odstranjuje sve dok se ne detektuje masa proizvoda preko logicel Fractional Lynx. Molekulske formule očekivanog proizvoda se dobijaju na logicel FractionalLynx koji odražava sakupljeni proizvod kada signal detektovane mase odgovara jonu [M+H]<+>i /ili [M+Na]<+.>U pojedinim slučajevima, u zavisnosti od rezultata LC/MS analitičkih, kada intenzitet nekog jona odgovara [M+2H]" je detektovan, vrednost koja odgovara polovini molekulske mase izračunate (MW/2) se takođe izračunava preko logicel FractionLynx. Pod tim uslovima, pokazuje se pik i kada je signal mase jona [M+2H]++ i/ili [M+Na+HJ^detektovan. Proizvodi su sakupljani u epruvetu sa mat staklom. Nakon sakupljanja, rastvarači su uparavani u centrifugalnoj sušnici Savant AES 2000 ili Genevac HT8 i masa proizvoda je određivana merenjem epruvete nakon uparavanja rastvarača.
Analize El- CI: direktno uvođenje (DCI = depo uzorka na filamentu)
[0046] Spektometar mase Finnigan SSQ7000; maseni domen m/z= 29-900; energija elektrona 70eV; temperatura izvora 70 °C; gas reaktanta CI amonijak; EI = jonizacija dovođenjem elektrona; CI = jonizacija hemijska.
Analize elektrospreja: (elektrosprej pozitivan : ES<+>; elektrosprej : ES")
Kuplovanje LC-MS-DAD-ELSD:
Metod A
. - MS . : VVaters-MieromassPlatform II; LC : Agilent HP 1100; colone Hypersyil GOLD Thermo
C18;3 x50 mm,3um; eluent: gradijent Voda (sa mravljom kiselinom 0,1%+acetonitril na7min; protok=0,8 ml/mn; UV: DAD( k= 200 -400nm).
MetodB
MS:VVaters-Mieromass QTOF-2; Agilna HP 1100; kolona Hvpersil GOLD Thermo Cl8; 3x50
mm,3nm; eluent gradijent Voda (sa mravljom kiselinom 0,1%)+acetonitril na7mn; protok=
0.9 ml/mn; UV: DAD (X. = 200-400 nm)
MetodC
MS:VVaters-Mieromass ZQ;LCj_AgilnaHP 100; kolona XBRIDGE Waters Cl8;3x 50 mm,
2.5;eluent: gradijent Voda (sa mravljom kiselinom 0,1%)+acetonitrilna 7mn; protok =1.1 ml/mn; UV:DAD( X =254 nm).
NMR spektar IH od 400 MHz na spektrometru BRUKER AVANCE DRX-400 ili od 300 MHz
na spektrometru BRUKER AVANCE DPX-300sahemijskim pomeranjem(5u ppm)- u
rasrvaraču dimetiIsulfoksidu-d6 (DMSO-d6) referenca od 2,50 ppm na temperaturi od 303 K.
Primer 1
[00471 4-{ 4-[3-(2-Fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH -pirol-3-karboksamid
(0048]U 0,017 g (84,48 mmol) 4-(4-amino-feral)-l H-pirol-3-karboksamida u suspenziji sa 27 cm<3>tetrahidrofurana, doda se na temperature od oko 20 °C, u atmosferi argona, 0,012 cm<3>2-fluoro-5-trifluorometil-fenil izocijanata i 0,012 cm<3>trietilamina. Nakon 20 sati mešanja na temperaturi od oko 20 °C, reakciona smeša se koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7
kPa) kako bi se dobio ostatak koji se prečisti fleš hromatografijom [eluent:etil acetat
/dihlorometan(95/5u zapreminama)]. Nakon koncentrovanja frakcija pod smanjenim pritiskom, dobija se žuti ostatak koji se meša u 5 cm<3>dihlorometana i zatim filtrira i suši do suva pod
smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobilo 22 mg 4-{4-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-l H-pirol-3-karboksamida, u obliku bež čvrste supstance; N.M.R. 1 H (300 MHz, (CD3)SO, - 5 u ppm): od 6,57 do 7,02 (m veoma istaknuto: 2H); 6,85 (t veliko, J = 2,5 Hz: 1 H) ; 7,29 (t veliko, J -= 2,5 Hz : 1 H); od 7,33 do 7,43 (m : 5H) ; 7,49 (dd, J = 10,5 i 8,5 Hz : IH);
8,60 (dd, J=7,5 i 2,5 Hz: 1 H); 9,31 (s veliko: 1 H) ; 9,58 (s veliko: 1 H); 11,2 (s veliko: IH);
IE: m/z = 406 (M<4>), m/z=205 (CgHjNOE,<4>), m/z=179 (CvH+NF*<4>) pik baze, ES+: m/z = 407
(MH<+>).
[0049]4-(4-amino-fenil)-l H-piroi-3-karboksamid može se dobiti na siedeći način:Suspenzija od 0,07 g (0,304 mmol) etil 4-(4-amino-fenil)-l H-pirol-3-karboksilata u 10 cm<3>
vodenog rastvora amonijaka od 22% se zagreva u autoklavu na temperature od oko 80 °C u trajanju od 84 sati. Nakon prestnka zagrevanja i zatim povratka na sobnu temperature i atmosferski pritisak, reakciona smeša se koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobila oranž čvrsta supstanca koja se par fleš hromatografijom [eluent: dihlorometan / metanol / acetonitril (98/1 /l u zapreminama)]. Nakon koncentrovanja frakcija pod smanjenim
pritiskom, dobija se ostatak koji se meša u 10 cm<3>dietil etra, filtrira i suši do suva pod
smanjenimpritiskom (2,7 kPa), kako bi se dobilo 0,02 g 4-(4-amino-feniI)-1 H-pirol-3-
karboksamida, u obliku čvrste supstance boje kestena; IE: m/z=201 (M<+>) pik baze, m/z= 185
(M - NH2<+>), m/z= 157 (M - CONH2<+>).
[0050] Etil 4-(4-amino-fenil)-lH-piroI-3-karboksilat se može dobiti na sledeći način: U suspenziju od 0,02 g (0,188 mmol) paladijuma na ugljeniku od 10% u 15 cm<3>metanola, doda
se na temperature od oko 20 °C, 0,2g (0,769 mmol) etil 4-(4-nitro-fenil)-l H-pirol-3-
karboksilata. Nakon 20 sati hidrogenovanja na autoklavu pod 3 bara vodonika na temperature od
oko 25 °C, reakciona smeša se filtrira, katalizator se ispere 3 puta sap o 5 cm<3>metanola, zatim se
filtrat koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa), kako bi se dobio ostatak koji se
meša u 10 cm<3>etil etra i zatim se filtrira i suši pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se
dobilo 0,079 g etil 4-(4-amino-feniI)-lH-pirol-3-karboksilata, u obliku čvrste supstance boje
kestena; IE: m/z = 230 OOpik baze, m/z= 202 (M-CzlV), m/z= 157 (M - CjHsO*).
[0051] Etil 4-(4-nitro-fenil)-l H-pirol-3-karboksilat može se dobiti na sledeći način
U suspenziju od 0,512 g (12,8 mmol) natrijum hidrida od 60% u mineralnom ulju u 20 cm<3>
dietil etra, doda se kap po kap, na temperaturi od oko 20 °C, u atmosferi argona, smeša od 2,212
g (10 mmol) etil 4-nitrocinamata i 1,991 g (10,2 mmol) tosil-metil izocijanata u rastvoru od 18
cm<3>dimetilsulfoksida i 36 cm<3>dietil etra. Nakon 1 sata mešanja na refluksu, reakciona smeša se
preuzme sa smešom od 70 cm<3>vode, 20 cm<3>zasićenog vodenog rastvora natrijum hlorida i 100
cm<3>etil acetata. Vodena faza se ekstrahuje sa 50 cm<3>dietil etra i 2 puta sa po 75 cm<3>
dihlorometana. Sve organske faze se spoje, suše sa natrijum sulfatom anhidrovanim, filtriraju i
koncentruju do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobilo crno ulje koje se
preuzme sa smešom 75 cm3 vode i 50 cm<3>etil acetata. Vodena faza se ekstrahuje 2 puta sa po 50 cm<3>etil acetate. Sve organske faze se spoje, suše sa natrijum sulfatom anhidrovanim, filtriraju i koncentruju do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobilo 2,82 g crne čvrste supstance koja se fleš hromatografijom [eluent : cikloheksan / etil acetat (3/2 u zapreminama)]. Nakon koncentrovanja frakcija pod smanjenim pritiskom, dobija se 1,48 g oranž čvrste supstance koja se prečisti fleš hromatografijom [eluent : dihloro-metan]. Nakon koncentrovanja frakcija pod smanjenim pritiskom, dobija se 0,78 g etil 4-(4-nitro-fenil)-l H-pirol-3-karboksilata, u obliku žute čvrste supstance; IE: m/z=260 (M<+>.) pik baze, m/z=215 (M - C2H5O+), m/z=169 (215-N02).
Primer2
l-Acetil-2-amino-4-{4-[3-(2-fluoro-5-trifluoro karboksamid: [0053J U 0,06 g (0,115 mmol) 2-amino-3-karbamoil-4-{4-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-pirrol-l-karboksilat terc-butila u rastvoru smeše od 1,2 cm<3>dioksana i 1,2 cm<3>metanola, doda se na temperature od oko 20 °C, u atmosferi argona, 0,575 cm<3>rastvora hlorovodonične kiseline 4M u dioksanu. Nakon 15 sati mešanja na temperaturi od oko 50 °C, reakciona smeša se koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa), kako bi se dobio hlorhidrat 2-amino-3-karbamoil-4- {4-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido)-fenil}-I H-pirol ... koji se preuzme sa 2,5 cm<3>etil acetata.. Doda se na temperature od oko 20 °C, u atmosferi argona, 0,01 cm<3>trietilamina i 0,013 cm<3>anhidrovane sirćetne kiseline. Nakon 1 sata mešanja na temperature od oko 20 °C, doda se katalitička količina DMAP i nastavi sa mešanjem u trajanju od 30 minuta. Reakciona smeša se razblaži sa 5 cm<3>etil etra. Organsk afaza se ispere 2 puta sap o 5 cm<3>vode. Sve vodene faze se spoje i ekstrahuju sa po 5 cm<3>etil acetata. Sve organske faze se spoje, isperu sa po 5 cm<3>zasićenog vodenog rastvora natrijum hlorida, suše sa magnezijum sulfatom anhidrovanim, filtriraju i koncentruju do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobilo 0,054 g ostatka koji se prečisti fleš hromatografijom [eluent: dihlorometan /metanol (98/2 u zapreminama)). Nakon koncentrovanja frakcija pod smanjenim pritiskom, dobija se 0,010 g l-acetil-2-amino4-{4-[3K2-lfuoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido)-fenil}-l H-pirol-3-karboksamid, u obliku žute čvrste supstance; N.M.R. IH (300 MHz, (CD3)2S0, - 6 u ppm): 2,14 (s: 3H) ; od 5,20 do 6,10 (m istaknuto: IH); 6,40 (d, J = 2,0 Hz: IH); od 6,70 do 7,60 (m istaknuto: 1 H); 7,30 (d veliko, J = 8,5 Hz: 2H); 7,38 (mt: IH); od 7,45 do 7,54 (m: 3H); 8,62 (dd, J = 7,5 i 2,5 Hz: IH); 8,92 (s veliko: IH); 9,25 (s veliko: 1 H); 10,7 (s veliko: 1 H); 11,4 (s veliko: 1H); ES+: m/z = 464 (MH<4>).
[0054]2-amino-3-karbamoil-4- {4-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido)-fenil} -pirol-1 - karboksilat terc-butila može se dobiti na sledeći način: U 0,07 g (0,221 mmol) 2-amino-4-(4-amino-fenil)-3-karbamoil-pirol-l-karboksilat terc-butila u rastvoru od 2 cm<3>tetrahidrofurana, doda se na temperaturi od oko 20 °C, u atmosferi argona, 0,125 cm<3>trietilamina i 0,049 cm<3>2-fluoro-5-trif1uorometil-fenil izocijanata. Nakon 4 sata mešanja na temperaturi od oko 20 °C, reakciona smeša se preuzme sa 5 cm<3>dihlorometana. Organska faza se ispere 2 puta sa po 5 cm<3>vode. Sve vodene fazese spoje i ekstrahuju sa 5 cm<3>dihlorometana. Sve organske faze se spoje, isperu sa S cm<3>
zasićenog vodenog rastvora natrijum hlorida, suše sa anhidrovanim magnezijum sulfatom,
filtriraju i koncentruju do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobilo 0,135g
oranž čvrste supstance koja se prečisti fleš hromatografijom [eluent: dihlorometan/metanol
(100/0 do98 12u zapreminama)]. Nakon koncentrovanja frakcija pod smanjenim pritiskom,
dobija se 0,077 g 2-ammo-3-karbamoil-4-{4-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil} -pirol-1 -karboksilata terc -butila u obliku žute čvrste supstance; ES<+>: m/z = 522
(MH<+>).
[0055] 2-amino-4-(4-amino-fenil)-3-karbamoil-pirol-l -karboksilat terc-butila se može dobiti na
sledeći način:
U suspenziju od 0,008 g (0,0076 mmol) paladijuma na ugljeniku od 10% u 12 cm<3>
metanola, doda se na temperaturi od oko 25 °C, 0,075 g (0,216 mmol) 2-amino-3-
karbamoil-4-(4-nitro-fenil>pirol-l -karboksilata terc-butila. Nakon 17 sati hidrogenacije na
autoklavu pod 3 bara vodonika, na temperaturi od oko 25 °C, reakciona smeša se filtrira,
katalizator se ispere 3 puta sap o 5 cm<3>metanola i zatim se filtrate koncentruje do suva pod
smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobilo 0,072 g 2-amino-4(4-amino-fenil)-3-
karbamoil-pirol-1-karboksilata terc-butila, u obliku žute čvrste supstance; N.M.R. IH (400
MHz, (CD3)zSO, -5 u ppm): 1,55 (s: 9H); od 4,80 do 5,35 (m veoma istaknuto: IH); 5,22 (s
veliko: 2H); 6,32 (s.lH); od 6,40 do 6,85 (m veoma istaknuto: IH); 6,60 (d veliko, J=8,5
Hz: 2H); 6,99 (d veliko, J = 8,5 Hz: 2H); 7,01 (s veliko: 2H).
[0056] 2-amino-3-karbamoil-4-(4-nitro-fenil)-piroM -karboksilat terc-butila može se dobiti na
sledeći način:
U 0,11 g (0,447 mmol) 2-amino-4-(4-nitro-fenil)-lH-3-kaihoksamida u suspenziji sa 6 cm<3>
dihlorometana, doda se na temperature od oko 20 °C, u atmosferi argona, 0,075 cm<3>(0,536
mmol) trietilamina i zatim 0,117 g (0,536 mmol) di-tercbutil-dikarbonata. Nakon 2,5 sati
mešanja na temperature od oko 50 °C, doda se 0,09 g (0,412 mmol) di-tercbutil-dikarbonata
i nastavi sa mešanjem na temperature od oko 50 °C u trajanju od 3 sata. Reakciona smeša
se preuzme sa 5 cm<3>dihlormetana. Organska faza se ispere 3 puta sa po 5 cm<3>vode. Sve
vodene faze se spoje i ekstrahuju sa 5 cm<3>dihlorometana. Sve organske faze se spoje, suše sa anhidrovanim magnezijum sulfatom, filtriraju i koncentruju do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobilo 0,28 g ostatka koji se prečisti fleš hromatografijom [eluent: dihlorometan]. Nakon koncentrovanja frakcija pod smanjenim pritiskom, dobija se 0,075 g 2-amino-3-karbamoil-4-(4-nitro-fenil)-pirol-l -karboksilat terc-butila, u obliku
čvrste oranž supstance; N.M.R. IH (300 MHz, (CD3)2SO, -S u ppm): 1,57 (s:9H); od 5,77
do 6,58 (m istaknuto:2H); 6,72 (s: IH); 6,93 (s veliko: 2H); 7,63 (d veliko, J = 8,5 Hz :
2H); 8,23 (d veliko, J=8,5 Hz: 2H).
[0057| 2-amino-4-(4-nitro-fenil)-l H-pirol-3-karboksamid može se dobiti na sledeći
način:
Suspenzija od 0,26 g (1,139 mmol) 2-amino-4-(4-nitro-fenil)-l H-pirol-3-karbonitrila u 5 cm<3>koncentrovane sumporne kiseline, zagreva se na temperature od oko de 80 °C u trajanju od 1 sata. Nakon hlađenja reakcione smeše na temperature od oko 20 °C, izlijemo je na usitnjeni
led I zatim se polako sipa vodeni rastvor natrijum hidroksida 5N dok se ne postigne bazni pH
od oko 10. Reakciona se ekstrahuje 7 puta sa po 10 cm<3>smeše dihlorometan / MeOH (98/2 u
zapreminama).Sve organske faze se spoje, suše sa anhidrovanim magnezijum sulfatom, filtriraju i koncentruju do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa), kako bi se dobilo 0,19 g 2-amino-4-(4-nitro-fenil)-l H-piroI-3-karboksamida, u obliku braon crvene čvrste supstance;
IE: m/z = 246 (M<*>)pik baze, m/z= 229 (M - NH3<+>).
[00581 2-amino-4-(4-mtro-fenil)-lH-pirol-3-karbonitrilmože se dobiti na sledeći način:
U 0,5 g (2,25 mmol) N-[2-(4-nitro-fenil)-2-okso-etil]-acetamida u rastvoru sa 15 cm<3>metanola, doda se na temperaturi od oko 20 °C, u atmosferi argona, 0,223 g (3,375 mmol) malononitrila. Reakciona smeša se ohladi na temperaturu od oko 0 °C zatim se doda 0,5 cm<3>vodenog rastvora od 50% kalijum hidroksida. Nakon 15 minuta mešanja na temperaturi od oko 0 °C, zatim 30 minuta mešanja na temperaturi od oko 65 °C, reakciona smeša se ohladi do temperature od oko 20 °C, zatim se izlije na usitnjeni led i ekstrahuje 7 puta sa po 10 cm<3>dihlorometana. Sve organske faze se spoje, isperu sa 50 cm<3>zasićenog vodenog rastvora natrijum hlorida, suše sa anhidrovanim magnezijum sulfatom, filtriraju i koncentruju do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa), kako bi se dobilo 0,7 g braon čvrste supstance koja se prečisti fleš hromatografijom [eluent: dihlorometan/metanol (100/0 do 95/5 u
zapreminama)]. Nakon koncentrovanja frakcija pod smanjenim pritiskom, dobija se 0,265 g
2-amino-4-(4-nitro-fenil)-l H-pirol-3-karbonitrila, u obliku braon čvrste supstance; IE: m/z = 228 (M+ )pik baze, m/z=182 (M-NO2).
[0059] N-[2-(4-nitro-fenil)-2-okso-etil]-acetamid može se dobiti na sledeći način:U 0,5 g (2,308 mmol) 2-amino-(4-nitrofeniI)-acetofenona suspendovanog u 2 cm<3>vode, doda se na temperaturi od oko 0 °C, u atmosferi argona, 0,435 cm<3>(4,616 mmol) anhidrida sirćetnekiseline, zatim 0,379 g (4,616 mmol) natrijum acetata rastvorenog u 1,5 cm<3>vode.
Nakon ostavljanja da se temperature podigne između 0 °C i 20 °C u trajanju od 1 sata, doda
se 1,5 cm<3>koncentrovane hlorovodonične kiseline do pH-2. reakcione smeše, ekstrahuje 5
puta sa po 10 cm<3>dihlorometana. Sve organske faze se spoje, suše sa anhidrovanim
magnezijum sulfatom, filtrira i koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa), kako
bi se dobilo 0,37 g N-[2-(4-nitor-fenil)-2-okso-etil]-acetamida, u obliku đute čvrste
supstance; ES+: m/z=223 (MH<+>).
Primer 3
[0060]
2-Formilamino-4- {4-[3-(2-fluoor-5-trifluorornetil-fenil)-ureido]-fenil}-1 H-pirol-3-
karboksamid:
U0,125g(0,578 mmol) 2-formilamino-4-(4-amino-fenil)-l H-piroI-3-karboksamida rastvorenog
u 15 cm<3>tetrahidrofurana, dodasena temperaturi od oko23 °C,0,081 cm<3>trietilaminai0,084 cm<3>2-fluoro-5-trifluorometil-fenil izocijanata. Nakon 16satimešanja na tempereaturiod oko 23°C, reakciona smeša se koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa). Ostatakse zatim
razblaži u 50cm<3>etil acetate i zatim ispere2puta sa 50 cm<3>vode i 50 cm<3>zasićenog vodenog
rastvora natrijum hlorida. Organskirastvor se sušisaanhidrovanimmagnezijumsulfatom I
tretira sa crnim 3S, filtrira i koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa), kako bi se dobilo 0,115 g uljaste čvrste supstance koja se prečisti fleš hromatografijom [eluent : dihlorometan / metanol / acetonitril (95/2,5/2,5 u zapreminama)]. Nakon koncentrovanja frakcija
pod smanjenim pritiskom, dobija se 0,016 g 2-formilamino-4-{4-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido)-fenil}-lH-pirol-3-karboksamida u obliku kremaste supstance koja se topi na 169
°C. N.M.R. 1 H (400 MHz, (CD3)2S0,-o u ppm) 5,60 (m istaknuto, IH); 6,41 (s veliko, 1 H);
7,07 (m istaknuto,1H) ; 7,31 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 7,38 (m, 1 H); 7,48 (m delimično maskirano, 1 H); 7,51 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 8,34 (s, 1 H) ; 8,61 (dd, J = 2,5 i 7,5 Hz, IH); 9,07 (s veliko, 1 H); 9,40 (s veliko, IH); 10,85 (m istaknuto, IH); 11,45 (s veliko, 1 H).
2-formilamino-4-(4-amino-fenil)-lH-pirol-3-karboksamid se može dobiti na sledeći način:
U suspenziju od 0,030 g (0,0285 mmol) paladijuma na ugljeniku od 10% u 15 cm<3>metanola,
doda se na temperature od oko 25 °C, 0,23 g (0,834 mmol) 2-formilamino-4-(4-nitro-fenil)-lH-
pirol-3-karboksamid. Nakon 5 sati hidrogenacije u autoklavu pod 2 bara vodonika, na temperaturi od oko 25 °C, reakciona smeša se filtrira, katalizator se ispere 3 puta sa po 5 cm<3>metanola zatim se filtrat koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se
dobilo 0,125 g 2-formiIammo-4-(4-amino-fenil)-l-H-pirol-3-karboksamid, u obliku zelene čvrste
supstance. N.M.R. 1 H (400 MHz, (CD3)2SO, - 5 u ppm) 5,13 (s veliko, 2H); 5,43 (m istaknuto, 1 H); 6,27 (d, J = 2,5 Hz, IH); 6,60 (d, J - 9,0 Hz, 2H); 6,80 (m istaknuto, IH); 6,99 (d, J =
9,0 Hz, 2H) ; 8,34 (d, J=1,5 Hz, IH) ; 10,9 (s veliko, 1 H); 11,25 (s veliko, 1 H)
2-formiIamino-4-( 4~nitro-fenil)-lH-piro]-3-karboksamid može se dobiti na sledeći način:
U rastvor od 0,3 g (1,21 mmol) 2-amino-4-(4-nitro-fenil)-lH-pirol-3-karboksamida u 5 cm<3>
apsolutnog etanola, doda se na temperature od oko 25 °C, rastvor od 2 cm<3>(52,9 mmol) mravlje
kiseline u 5 cm<3>(52,9 mmol) anhidrovane sirćetne kiseline. Nakon 2 sata mešanja na ovoj temperaturi, reakciona smeša se izlije u 100 cm<3>vode. Suspenzija se zatim filtrira. Čvrsti ostatak se ocedi, osuši kako bi se dobilo 0,257 g 2-formilamino-4-(4-nitro-fenil)-lH-pirol-3-karboksamida u obliku zelenog praha. N.M.R. 1 H (400 MHz, (CDs^SO, - 5 u ppm), od 6,22 do 8,53 (m veoma istaknuto, 2H); 6,78 (d, J = 3,0 Hz, 1 H); 7,64 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,19 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,32 (d, J = 1,5 Hz, 1 H); 10,55 (s veliko, 1 H); 11,6 (s veliko, 1 H).
2-amino-4-(4-nitro-fenil)-l H-pirol-3-karboksamid se dobija kao što je opisano u primeru 2:
Primer 4
[0061]
2 -Izobutirilamino-4-{4-[ 3-( 2 -fluoro-5-trifluorometil-fenil)- ureido ]-fenil}-lH-pirol-3-karboksamid: U 0,125 g (0,436 mmol) 2-izobutirilamino~4-(4-amino-fenil)-lH-pirol-3-karboksamida rastvorenog u 15 cm<3>tetrahidrofurana, doda se na temperaturi od oko 25 °C, 0,076 cm<3>(0,436 mmol) 2-fluoro-5-trilfuorometil-fenil izocijanata. Nakon 17 sati mešanja na temperaturi od oko 25 °C, reakciona smeša se koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa). Ostatak se zatim razblaži u 40 cm<3>etil acetata zatim se ispere sa 40 cm3 vode. Organski rastvor se suši sa
anhidrovanim magnezijum sulfatom, filtrira i koncentrujee do suva pod smanjenim pritiskom n...
(2,7 kPa) kako bi se dobio ostatak koji se kristališe u 8 cm<3>smeše cikloheksan / etil acetat (70/30 u zapremianama). Nakon filtriranja i cedjenja, dobija se 0,096 g 2-izobutirilamino-4-{4-f3-(2-fluoro-S-tnfluorometil-fenil)-iircido]-fenil}-lH-piroI-3-karboksamida u obliku čvrste krem supstance koja se topi na 196 °C.IC (KBr), 3472; 3384; 1667; 1594; 1546;1443;1340; 1313; 1198; 1167; 1120; 1070; 937 & 614 cm'<1>. N.M.R. IH (400 MHz, (CDafcSO, - 6 u ppm), 1,17 (d, J = 7,0 Hz, 6H); 2,61 (m, IH); 5,62 (m istaknuto, 1 H); 6,40 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 7,00 (m istaknuto, 1 H); 7,30 (d, J - 9,0 Hz, 2H); 7,39 (m, 1 H); 7,49 (m delimično maskirano, 1 H) ; 7,51 (d, J = 9,0 Hz, 2H) ; 8,62 (dd, J = 2,5 i 7,5 Hz, IH); 8,99 (s veliko, 1 H); 9,32 (s veliko, 1 H); 10,95 (s veliko. IH); 11,45 (s veliko, IH)
2-izobutirilamino-4-( 4-amino-fenil)-lH-pirol-3-karboksamid može se dobiti na sledeći
način:
U suspenziju od 0,047 g (0,0446 mmol) paladijuma na ugljeniku od 10% u 25 cm3 metanola, doda se na temperature od 25 °C, 0,33 g (1,04 mmol) 2-izobutiirlamino-4-(4-nitro-fenil)-lH-pirol-3-karboksamida. Nakon 3,5 sata hidrogenacije u autoklavu pod 2 bara vodonika,natemperature od 25 °C, reakciona smeša se filtrira, katalizator se ispere 3 puta sa po 5 cm<3>metanola i zatim se filtrat koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7kPa)kako bi se dobilo 0,22 g ostatka koji se prečisti fleš hromatografijom [eluent:dihlorometan/metanol / acetonitril(96/2/2u zapreminama)]. Nakon koncentrovanja frakcija pod smanjenim pritiskom, dobija se 0,135 g de 2-izobutirilamino-4-(4-amino-feniI)-l-H-pirol-3-karboksamida, u obliku čvrste supstance boje kestena. N.M.R. IH (400 MHz, (CD3)2S0, -5uppm) 1,16 (d, J = 7,0 Hz, 6H); 2,60 (m, IH); 5,15 (s veliko, 2H); 5,45 (m istaknuto, IH); 6,24 (d, J = 2,0 Hz, IH) ; 6,60 (d, J = 9,0 Hz, 2H) ; 6,94 (m istaknuto, IH); 6,98 (d, J = 9,0
Hz, 2H); 11,05 (s veliko, IH); 11,3 (s veliko, IH).
2-izobutirilamino-4-(4-nitro-fenil)- lH-pirol-3-karboksamid može se dobiti na sledeći
način:
U rastvor od 0,23 g (0,93 mmol) 2-amino-4-(4-nitro-fenil)-l H-pirol-3-karboksamida u 15 cm<3>tetrahidrofurana se doda, na temperaturi od oko 25 °C, 0,260 cm<3>(1,86 mmol) trietilamina i 0,098 cm<3>(0,93 mmol) izobutiril hlorida. Nakon 16 sati mešanja na toj temperaturi, reakciona smeša se koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobio ostatak koji se meša u 60 cm<3>vode i zatim ekstrahuje 2 puta sa po 50 cm<3>etil acetata. Organska faza se suši sa anhidrovanim magnezijum sulfatom, filtrira i koncentrujedosuvapod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bisedobilo 0,35g 2-izobutiriIamino-4-(4-nitro-fenil)-lH-pirol-3-karboksamid u obliku zelenogpraha. N.M.R.1 H (400 MHz, (CĐjfeSO, - 5 u ppm) 15(d,J = 7,0 Hz, 6H) ; 2,64 (m, IH) ; od 6,50 do 8,50 (m veoma istaknuto, 2H); 6,79 (d, J = 2,5 Hz, IH); 7,64 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,19 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 10,45 (s veliko, IH); 11,65 (s veliko, IH).
2-amino-4-(4-nitro-fenil)-lH-pirol-3-karboksamid se dobija kao što je opisano u primeru 2.
Primer5
(0062)
2- Butirilamino-4-{4-[3- (2 -fluoro-5-trilfuorometil-feiul)-ureido]-fenil}-lH-pirol-3-
karboksamid:
U 0,207 g (0,610 mmol) 2-butirilamino-4-(4-amino-fenil)-lH-pirol-3-karboksamida rastvorenog
u 20 cm<3>tetrahidrofurana, doda se na temperature od oko 25 °C, 0,096 cm<3>(0,671 mmol) 2-fluoro-5-trifluoro-metil-fenil izocijanata. Nakon 48 sati mešanja na temperaturi od oko 25 °C,
reakciona smeša se koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa). Ostatak se zatim
rastvori u 40 cm<3>etil acetate i ispere 2 puta sa po 30 cm<3>vode i 30 cm<3>zasićenog vodenog
rastvora natrijum hlorida. Organski rastvor se suši sa anhidrovanim magnezijum sulfatom, filtrira
i koncentrujee do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobio ostatak koji se
prečisti fleš hromatografijom [eluent:dihlorometan/metanol/acetonitril (97/ 1,5/1,5 u
zapreminama)]. Nakon koncentrovanja frakcija pod smanjenim pritiskom, dobija se 0,093 g 2-
butirilamino-4- {4-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-feml)-ureido]-fenil} -1 H-pirol-3-karboksamida u
obliku krem čvrste supstance koja se topi na 219 °C. IC (KBr), 3470; 3387; 1717; 1626; 1593;
1546; 1443; 1341; 1315; 1264; 1193; 1168; 1126; 1070; 820; 614 cm<1>. N.M.R. IH (400 MHz,
(CDjfcSO, -S u ppm) 0,95 (t, J=7,5 Hz, 3H); 1,64 (m, 2H); 2,38 (t, J=7,5 Hz, 2H) ; 5,60 (m
istaknuto, 1 H);6,39 (d, J=2,5 Hz, 1 H) ; 7,05 (m istaknuto, 1 H);7,30 (d, J=9,0 Hz, 2H) ;
7,38 (m, 1 H); 7,49 (m delimično maskirano, 1 H); 7,51 (d, J=9,0 Hz, 2H); 8,61 (dd, J=2,5 i
7,5 Hz, IH); 9,05 (s veliko, IH); 9,38 (s veliko, IH); 10,8 (s veliko, IH); 11,4 (s veliko, IH).
2-butirilamino-4-(4-amino-feniI)-lH-pirol-3-karboksamid može se dobiti na sledeći
način:
U suspenziju od 0,068 g (0,064 mmol) paladijuma na ugljeniku od 10% u 20 cm<3>metanola,
j
doda se na temperaturi od oko 25 °C, 0,195 g (0,61 mmol) 2-butirilamino-4-(4-nitro-fenil)-lH-pirol-3-karboksamida. Nakon 5 sati hidrogenacije na autoklavu pod 2 bara vodonika, na temperaturi od oko 25 °C, reakciona mseša se filtrira, katalizator se ispere 2 puta sa po 10 cm<3>metanola i zatim se filtrat koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobilo 0,207 g 2-butirilamino-4-(4-amino-fenil)-l-H^pirol-3-karboksamida, u obliku čvrste krem supstance. N.M.R. IH (400 MHz, (CD3)2SO, -8 u ppm) 0,94 (t, J = 7,5 Hz, 3H) ; 1,63 (m, 2H) ; 2,37 (t, J = 7,5 Hz, 2H) ; 5,11 (s veliko, 2H) ; od 6,05 do 8,45 (m veoma istaknuto, 2H); 6,24 (d, J = 2,5 Hz, 1 H); 6,60 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 6,99 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 10,8 (s veliko, 1 H) ; 11,3 (s veliko, 1 H) .
2-butirilamino-4-(4-nitro-fenil)-1 H-pirol-3-karboksamid može se dobiti na sledeći način:
U rastvor od 0,20 g (0,81 mmol) 2-amino-4-(4-nitro-fenil)-l H-pirol-3-karboksamida u 25 cm<3>tetrahidorfurana, doda se na temperaturi od oko 25 °C, 0,227 cm<3>(1,62 mmol)trietilamina i 0,085 cm<3>(0,81 mmol) butini hlorida. Nakon 16 sati mešanja na toj temperaturi, reakciona smeša se koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa)kako bi se dobio ostatak koji se meša u 60 cm<3>etil acetate i zatim se ispere 3 puta sa po 20 cm3 vode. Organska faza se suši sa anhidrovanim magnezijum sulfatom, filtrira ikoncentruje pod smanjenim pritiskom, dobija se 0,221g2-butirilamino-4-(4-nitro-fenil)-l H-pirol-3-karboksamida u obliku praha boje kestena. N.M.R. 1 H (400 MHz, (CD3)2SO, -8 u ppm) 0,94 (t J = 7,5 Hz, 3H); 1,63 (m, 2H) ; 2,36 (t, J = 7,5 Hz, 2H) ; od 6,20 do 8,50 (m veoma istaknuto, 2H); 6,79 (d, J = 3,0 Hz, 1 H) ; 7,64 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,18 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 10,3 (s veliko, 1 H); 11,6 (s veliko, 1 H)
2-amino-4-(4-nitr6-fenil)-lH-pirol-3-karboksamid. se dobija kao što je opisano u
primeru 2.
Primer 6
2-(3- Ciklopentil- propionilamino)- 4- {4-[3-(2- fluoro- 5- trifluorometil- fenil)-ureidoj-fenil}- 1 H- pirol- 3-karboksamid: U 0,170 g (0,50 mmol) 2-(3-ciklopentil-propionilamino)-4-(4-aminofenil)-lH-pirol-3-karboksamida rastvorenog u 20 cm<3>de tetrahidrofurana, doda se na temperaturi od oko 25 °C, 0,072 cm<3>(0,50 mmol) 2-fluoro-5-trifluorometiI-fenil izocijanata. Nakon 48 sati mešanja na temperaturi od oko 25°C, reakciona smeša se koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa). Ostatak se zatim razblaži sa 50 cm<3>etil acetate I zatim se ispere sa 50 cm<3>vode i 50 cm<3>zasićenog vodenog rastvora natrijum hlorida. Organski rastvor se suši sa anhidrovanim magnezijum sulfatom, filtrira i koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa), kako bi se dobio ostatak koji se prečisti fleš hromatografijom [eluent : dihlorometan / methanol / acetonitril (95/2,5/2,5 u zapreminama)]. Nakon koncentrovanja frakcija pod smanjenim pritiskom, dobija se 0,048 g 2-(3-ciklopentil-propioniIamino)-4-{4-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-l H-pirol-3-karboksamida u obliku žutog praha koji se topi na 222 °C. IC (KBr), 3470; 3389; 1717; 1633; 1594; 1546; 1443; 1341; 1312; 1194; 1167; 1119; 1070 & 614 em<*>'. N.M.R. IH (400 MHz, (CD3)2SO, - 5 u ppm) 1,11 (m, 2H); od 1,42 do1,68(m, 6H); od 1,71 do 1,85 (m, 3H); 2,40 (t, J 8,0 Hz, 2H); 5,56 (m istaknuto, 1 H) ; 6,39 (d, J = 2,5 Hz, 1 H) ; 7,09 (m istaknuto, IH) ; 7,30 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 7,38 (m, 1 H) ; 7,49 (m delimično maskirano, IH); 7,51 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,62 (dd,J=2,5 i 7,5 Hz, IH); 9,00(s veliko, IH); 9,32 (s veliko, IH); 10,8(s veliko, IH) ; 11,4 (s veliko, 1 H).
2-(3-cikIopentil-propionilamino)-4-(4-amino-fenil)-l H-pirol-3-karboksamid može se dobiti na sledeći način:
U suspenziju od 0,055 g (0,0051 mmol) paldijuma na ugljeniku od 10% u 25 cm<3>metanola, doda se na temperaturi od oko de 25 °C, 0,210 g (0,56 mmol) 2-(3-ciklopentil-propionilamino)-4-(4-nitro-fenil)-l-H-pirol-3-karboksamida. Nakon 5 sati hidrogenacije na autoklavu pod 2 bara vodonika, na temperaturi od oko 25 °C, reakciona smeša se filtrira, katalizator se ispere 2 puta sa po 10 cm<3>metanola i zatim se filtrat koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobilo 0,151 g 2-(3-Ciklopentu-propionilamino)-4-(4-amino-fenil)-l-H-pirol-3-karboksamida, u obliku praha braon boje. N.M.R. 1 H (400 MHz, (CD3)2SO, - 8 u ppm) 1,09 (m, 2H); od 1,39 do 1,84 (m, 9H); 2,39 (t, J = 8,0 Hz, 2H); 5,14 (s veliko, 2H) ; od 6,20 do 7,50 (m veoma istaknuto, 2H); 6,23 (d, J = 2,5 Hz, l H); 6,59 (d, J = 8,5 Hz, 2H) ; 6,99 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 10,9 (s veliko, 1 H); 11,3 (s veliko, 1 H). 2-(3-ciklopentil-propionilamino )-4-(4-nitro-fenil)-lH-piroI-3- karboksamid može se dobiti na sledeći način: U rastvor od 0,15 g (0,61 mmol) 2-amino-4-(4-nitro-fenil)-lH-pirol-3-karboksamid u 25 cm<3>tetrahidrofurana se doda, na temperaturi od oko 25 °C, 0,171 cm<3>(1,22 mmol) trietilamina i 0,098 mg (0,61 mmol) hlorida 3-ciklopentil-propionila. Nakon 16 sati mešanja na toj temperaturi, reakciona smeša se koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobio ostatak koji se meša u 40 cm<3>vode i ekstrahuje 3 puta sa 40 cm<3>etil acetata. Organska faza se ispere sa 80 cm<3>zasićenog vodenog rastvora natrijum hlorida, suši sa anhidrovanim magnezijum sulfatom, filtrira i koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobilo 0,218 g 2-(3-Ciklopentil-propionilaminoH-(4-nitro-fenil)-l H-pirol-3-karboksamida u obliku zelenog praha. N.M.RN. 1 H (400 MHz, (CD3>2SO, - 8 u ppm) 1,11 (m, 2H); od 1,42 do 1,65 (m, 6H); od 1,69 do 1,86 (m, 3H); 2,39 (t, J = 8,0 Hz, 2H); od 6.17 do 8,50 (m veoma istaknuto, 2H) ; 6,79 (d, J = 2,5 Hz, IH); 7,63 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8.18 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 10,35 (s veliko, 1 H); 11,6 (s veliko, IH) Le
2-amino-4-(4-nitro-fenil)-l H-pirol-3-karboksamid se dobija kao što je opisano u primeru 2.
Primer 7
[00641
2-( Ciklopropilkarbonilamino)-4- {4-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido ]-fenil}-lH-pirol-3- karboksamid
2-( ciklopropilkarbonilamino)-4-{ 4-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido ]-fenil}-l H-pirol-3-karboksamid može se dobiti kao što je opisano u primeru 4 počevši od 2-amino-4-( 4-nitro-fenil)-lH-pirol-3-karboksamida j ciklopropilkarbonil hlorida. ES+: m/z = 490 (MH<+>).
Primer 8
[0065]
2 -Pivaloilamino-4- {4-[3-(2 - fluoro-5-trifluoromenl-fenil)-ureido ]-fenil}-lH -pirol-3-
karboksamid
2-pivdoilamino^{4-[3^2-fluoro-5-trifluorometjl-fenil)-ureido]-feml}-lH-piro
može se dobiti kao što je opisanouprimeru 4 počevši od 2-amino-4-(4-nitro-fenil)-l H-piroi-3-
karboksamida i pivaloil hlorida ES+: m/l = 506 (MH<+>).
Primer 9
[0066]
2-(2-Dimetilamino- acetilamino)- 4- {4-[3-(2- fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil}-lH- pirol-3-karboksamid
2-(2-dimetilamino-acetilamino )-4- {4-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-fenil} -1H-
pirol-3-karboksamid može se dobiti kao što je opisano u primeru 4 počevši od 2-amino-4-(4-nitro-fenil)-lH-pirol-3-karboksamida i hlorida kiseline dimetilglicina ES+: m/z = 507 (MH<*>).
Primer 10
[0067j
2- Acetilamino-4- {6-[3-(2-fluoro-5- trifluorometil-fenil)-ureido] -piridin-3-il} -1 H-pirol-3- karboksamid: U 0,11 g (0,424 mmol) 2-acetilamino-4-(6-amino-piridin-3-il)-lH-pirol-3-karboksamida
rastvorenogu20 cm<3>tetrahidrofurana, doda se na temperaturi od oko de 23 °C u atmosferi
argona, 0,068 cm<3>(0,466 mmol) 2-fluoro-5-trifluorometil-fenil izocijanata. Nakon 1 sata
mešanja na temperaturi od oko 20 °C, doda se 0,059 cm<3>(0,424 mmol) trietilamina u
reakcionu smešu. Reakciona smeša se zatim meša u trajanju od 18 sati na istoj temperaturi i
zatim se koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa). Ostatak se prečisti fleš
hromatografijom [eluent:gradient dihlorometan/metanol (95/5 u zapreminama) i etil acetat
čisti]. Nakon koncentrovanja frakcija pod smanjenim pritiskom, dobija se 0,013 g, 2-acetilamino-4-{6-[3-(2-fluoro-5-lrifluorometil-fenil)ureido]-piirdin-3-il}-lH-pirol-3-karboksamida u obliku bele čvrste supstance. ES+: m/z=466 (MH<4>).
2-acetiIamino-4-(6-amino-piridin-3-il)-l H-pirol-3-karboksamid može se dobiti na sledeći
način:
U suspenziju od 0,015 g (0,014 minol) paladijuma na ugljeniku od10%u 20 cm<3>metanola, doda se na temperaturi od oko 25 °C, 0,15 g (0,519 mmol) 2-acetilamino-4-(6-nitro-piridin-3-il)-lH-pirol-3-karboksamida. Nakon 2 sata hidrogenacije na autoklavu pod 2 bara vodonikae, na temperaturi od oko 30 °C, reakciona smeša se filtrira, katalizator se ispere 2 puta sa po 2 cm<3>etil etra. Nakon ceđenja i sušenja, dobija se 0,11 g 2-acetilamino-4-(6-amino-piridin-3-il)-l-H-pirol-3-karboksamida, u obliku čvrste supstance boje kestena.N.M.R. 1 H (400 MHz, (CDsfcSO,-6uppm) 2,13 (s, 3H); 6,01 (s veliko, 2H); od 5,50 do8,85 (m veoma istaknuto, 2H); 6,35 (d, J = 2,5 Hz, IH); 6,49 (d, J = 8,5 Hz, IH); 7,36 (dd, J = 2,5 et 8,5 Hz, 1 H) ; 7,87 (d, J = 2,5 Hz, IH) ; 10,65 (s, IH) ; 11,35 (s veliko, IH). 2-acetilamino-4-<6-nitro-piridin-3-il)-lH-pirol-3-karboksamid može se dobitinasledeći način: U rastvor od 0,20 g (0,809 mmol) 2-amino-4-(6-nitro-piridin-3-il)-lH-pirol-3-karboksamida u 40 cm<3>tetrahidrofurana, doda se na temperaturi od oko 20 °C u atmosferi argona, 0,226 cm<3>(1 ,62 mmol) trietilamina i 0,058 cm<3>(0,809 mmol) acetil hlorida. Nakon 3 sata mešanjanatoj temperature, reakciona smeša se koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobio ostatak koji se razblaži u 200 cm<3>etil acetate i zatim se ispere sa 50 cm<3>vode i 50 cm<3>zasićenog vodenog rastvora natrijum hlorida, suši sa anhidrovanim magnezijum sulfatom, filtrira i koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobilo 0,15 g 2-acetilamino-4-(6-nitro-piridin-3-il)-I H-pirol-3-karboksamida u obliku zelenog praha.N.M.R.1 H (400 MHz, (CDsfcSO, - 5 u ppm) 2,11 (s, 3H); 6,90 (m istaknuto, 2H); 6,95 (d, J - 3,0 Hz, 1 H); 8,13 (dd,i= 2,5 i 8,5 Hz, IH); 8,27 (d, J = 8,5 Hz, IH); 8,65 (d, J = 2,5 Hz, IH) ; 10,2 (s,
IH); 11,7(mveliko, IH).
2-aminO'4-(6-nitro-3-piridil)-lH-pirol-3-karboksarnid može se dobiti na sledeći način:
4,5 cm<3>koncentrovane sumporne kiseline doda se u 0,17 g (0,742 mmol) 2-amino-4-(6-nitro-3-piridin-3-il)-lH-pirol-3-karbonitrila na temperaturi od oko 5 °C. Smeša se zagreva na temperaturi od oko 85 °C u trajanju od 1 sata u atmosferi argona. Nakon hlađenja reakcione smeše na 5 °C, ona se izlije na usitnjeni led i 30 cm<3>vode. Ovaj rastvor se izlije u rastvor od 300cm<3>tetrahidrofurana i 15 cm<3>piridina. Nakon 5 minuta mešanja organsk afaza se ispere sa 30 cm<3>zasićenog vodenog rastvora natrijum hlorida i zatim se suši sa anhidrovanim magnezijum sulfatom, filtrira i koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobilo 0,20 g 2-amino-4-{6-nitro-<p>uidin-3'il)-lH-pirol-3-karboksamida, u obliku čvrstesupstance boje kestena.ES+:m/z=*248 (MH<4>).
2-amino-4-(6-nitro-piridin-3-il)-lH-pirol-3-karbonitril može se dobiti na sledeći način:
U 0,050 g (0,224 mmol) N-[2-(6-nitro-piridin-3-il)-2-okso-etil]-acetamida rastvorenog u 5 cm<3>metanola, doda se na temperaturi od oko 20 °C, u atmosferi argona, 0,022 g (0,336 mmol) malononitrila. Reakciona smeša se ohladi do temperature od oko 0 °C zatim se doda 0,1 cm<3>vodenog rastvora 50% kalijum hidroksida. Nakon 15 minuta mešanja na temperaturi od oko 20 °C , zatim 1,15 sati mešanja na temperaturi od oko 65 °C, reakciona smeša se koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa), se razblaži u 50 cm<3>etil acetata. Organska faza se ispere sa 10 cm<3>vode i 10 cm<3>zasićenog vodenog rastvora natrijum hlorida
i zatim se suši sa anhidrovanim magnezijum sulfatom, filtrira i koncentrujee do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobilo 0,043 g 2-amino-4-(6-nitro-piridin-3-il)-l H-pirol-3-karbonitrila u obliku braon čvrste supstance. ES+: m/z = 230 (MH<4>)!
N-[2-(6-nitro-piridin-3"il)-2-okso-etil]-acetamid može še dobiti na sledeći način:
U 1,05 g (4,166 mmol) 2-amino-l-(6-nitro-piridin-3-il)-etanon rastvorenog u 25 cm<3>vode, doda se na temperaturi od oko 5 °C, 1,575 cm<3>(16,66 mmol) anhidrida sirćetne kiseline 1,367 g (16,66 mmol) natrijum acetata u rastvoru od 3 cm<3>vode. Nakon 3 sata mešanja na 5 °C, reakciona smeša se ekstrahuje 3 puta sa po 10 cm<3>etil acetata. Sve organske faze se spoje, isperu sa 30 cm<3>zasićenog vodenog rastvora natrijum hlorida, zatim se suše sa anhidrovanim magnezijum sulfatom, filtrira i koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobilo 0,618 g N-[2-(6-nitro-piridin-3-il)-2-okso-etil]-acetamida, u obliku žute čvrste supstance. N.M.R. 1 H (400 MHz, (CDsfcSO, - 5 u ppm) 1,90 (s, 3H); 4,66 (d, J = 4,5 Hz, 2H) ; 8,37 (t veliko, J = 4,5 Hz, IH); 8,43 (d, J = 8,5 Hz, IH); 8,68 (dd, J = 2,0 et 8,5 Hz, IH); 9,16 (d,J = 2,0Hz, IH).
2- amino-l-(6-nitro-piridin-3-il)-etanon može se dobiti na sledeći način:
U rastvor od 0,975 g (6,954 mmol) heksametilen tetramina u 10 cm<3>hlorobenzena, doda se na temperaturi od oko 20 °C rastvora od 1,549 g (6,322 mmol) 2-bromo-i-(6-nitro-piridin-3-il)-ctanona u 25 cm<3>hlorobenzena. Nakon 1 sata mešanja na toj temperaturi, suspenzija se zagreva
18 sati na 50 °C. Reakciona smeša se zatim ohladi na 5 °C zatim se razblaži sa 200 cm<3>etil etra. Tako dobijem precipitat se filtrira 3 puta sa po 50 cm<3>etil etra etra. Rezultujuća amonijum so se meša u 20 cm<3>etanola i zatim se doda 8 cm<3>hlorovodonične kiseline od 37% na temperature od
oko 20 °C. Rastvor se zatim meša 16 sati na istoj temperaturi. Dobijem precipitat se filtrira,
ispere 3 puta sa po 50 cm<3>vode, ocedi i suši kako bi se dobilo 1,05 g 2-amino-l-(6-nitro-piridin-3- il)-etanona u obliku krem parana. ES+: m/z = 182 (MH+).
2-bromo-l-(6-nitro-piridin-3-il)-etanon može se dobiti na sledeći način:
U rastvor od3,4 g (20,46 mmol) l-(6-nitro-piridin-3-il)-etanona u 60 cm<3>tetrahidrofurana doda se 7,28 g (40,92 mmol) N-bromosukcinimida na temperaturi od oko 20 °C. Nakon 36 sati zagrevanja na refluksu, reakciona smeša se koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) zatim se prečisti fleš hromatografijom [eluent: dihlorometan čist]. Nakon koncentrovanja frakcija pod smanjenim pritiskom, dobija se 1,7 g 2-bromo-l-(6-nitro-piridin-3-il)-etanona u obliku belog praha. ES+: m/z = 246 (MH+).
l-(6-nitro-piridin-3-il)-etanon može se dobiti na sledeći način:
U rastvor od 1,044 g (3,98 mmol) trifenilfosfina u 10 cm<3>toluena doda se na temperaturi od oko 20 °C u atmosferi argona, 1,14 g (1,99 mmol) bis (dibenziliden aceton) paladijuma i 10,1 g (49,75 mmol) 5-bromo-2-nitropiridina. Nakon 15 minuta mešanja na istoj temperaturi, doda se rastvor od 16,9 cm<3>(49,75 mmol) 1-etoksiviniltributiletana u 60 cm<3>toluena. Nakon 15 sati zagrevanja na refluksu, reakciona smeša se ohladi na 20 °C zatim se izlije na 500 cm<3>rastvora hlorovodonične kiseline 1 N i meša 16 sati na istoj temperaturi. Reakciona smeša se zatim ekstrahuje 3 puta sa po 150 cm<3>etil acetata. Organske faze se spoje i zatim isperu sa 300 cm<3>vode, suše sa anhidrovanim magnezijum sulfatom, filtriraju i koncentruju do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa), kako bi se dobio ostatak koji se prečisti fleš hromatografijom [eluent: dihlorometan čist]. Nakon koncentrovanja frakcija pod smanjenim pritiskom, dobija se 3,4 g l-(6-nitro-piridin-3-il)-etanona. N.M.R. 1 H (400 MHz, (CD3)2SO, - 6 u ppm) 2,71 (s, 3H); 8,42 (d, J = 8,5 Hz, 1 H); 8,66(dd,J=2,5 i 8,5 Hz, 1 H); 9,15(d,J =2,5 Hz, 1 H).Primer 11
2-(3-Etil-ureido>4- {4-[3-(2-fluoro-5-trifluoromeul-fenil)-ureido]-ferul} -1 H-pirol-3-karboksamid
U 0,056 g (0,194 mmol) 4-(4-amino-fenil)-2-(3-etil-ureido)-lH-pirol-3-karboksamida u rastvoru
od 20 cm<3>tetrahidrofurana, doda se na temperaturi od oko 25 °C, 0,031 cm<3>(0,0213 mmol) 2-fluoro-5-trifluorometil-fenil izocijanata. Nakon 16 sati mešanja na temperaturi od oko 60 °C,
reakciona smeša se koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa). Ostatak se zatim
razblaži sa 40 cm<3>etil acetate i zatim se ispere 2 puta sa po 30 cm<3>vode. Organski rastvor se suši
sa anhidrovanim magnezijum sulfatom, filtrira i koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom
(2,7 kPa) kako bi se dobio ostatak koji se prečisti fleš hromatografijom [eluent: dihlorometan/
metanol / acetonitril (95/2,5/2,5 u zapreminama)]. Nakon koncentrovanja frakcija pod
smanjenim pritiskom, dobija se 0,021 g 2-(3-etil-ureido)-4-{4-[3-(2-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido ]-fenil}-lH-pirol-3-karboksamida u obliku žute čvrste supstance. ES+: m/z = 494
(MH<4>).
4-(4-amino-fenil)-2-(3-etil-ureido)-lH-pirol-3-karboksamid može se dobiti na sledeći način:
U suspenziju od 0,067 g (0,0636 mmol) paladijuma na ugljeniku od10%u 15 cm<3>metanola,
doda se na temperaturi od oko 25 °C, 0,115 g (0,362 mmol) 4-( 4-nitro-fenil)-2-(3-etil-ureido )-l
H-pirol-3-karboksamida. Nakon 2,5 sata hiđrogenacije na autoklavu pod 2 bara vodonika, na temperaturi od oko 25 °C, reakciona smeša se filtrira, katalizator se ispere 3 puta sap po 5 cm<3>metanola i filtrat se koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobilo 0,056 g 4-(4-amino-fenil)-2-(3-etil-ureido)-lH-pirol-3-karboksamida, u obliku oranž čvrste supstance; ES+: m/z = 289 (MH+).
4-(4-nitro-fenil)-2-(3-etil-ureido)-lH-pirol-3-karboksamid može se dobiti na sledeći način:
U rastvor od 0,2 g (0,81 mmol) 2-amino-4-(4-nitro-fenil)-lH-pirol-3-karboksamidau 15 cm<3>tetrahidrofuranadodase, na temperaturiodoko 25 °C, 0,074 cm<3>(0,891 mmol) etilizocijanata i 0,005 mg (0,040 mmol) dimetilaminopiridina. Nakon 16 sati mešanja na temperaturi od oko 60 °C, reakciona smeša se koncentruje suva pod smanjenim pritiskom (2,7 kPa) kako bi se dobio ostatak koji se meša u 100 cm<3>vode i zatim se ekstrahuje 3 puta sa po 50 cm<3>etil acetata. Organsk afaza se suši sa anhidrovanim magnezijum sulfatom, filtrira i koncentruje do suva pod smanjenim pritiskom (2,7kPa) kakobi se dobio ostatak koji se prečistiflešhromatografijom [eluent: dihlorometan / metanol /acetonitril (95 / 2,5 / 2,5 u zapreminama)]. Nakon koncentrovanjafrakcija podsmanjenim pritiskom, dobija se 0,120 g4-(4-nitro-fenil)-2-(3-etil-ureido)-l H-pirole-3-karboksamida u obliku žutog praha. ES+: m/z = 318(MH<4>).
2-amino-4-(4-nitro-fenil)-IH-pirol-3-kaiboksamid se dobijakaošto je opisano u primeru 2.
Primer 12
[0069]
2-acetilamino-4- {4-[3-(3-lfuoro-5- trifluorometil-feml)-ureido]-fcnil} -1 H-pirol-3-
karboksamid
0,061 cm<3>(0,426 mmol) 3-fluoro~5-trifluoromeul-feiulizocijanat se doda na sobnoj temperaturi u
suspenziju od 100 mg (0,387 mmol) 2-acetilamino-4-(4-amino-feniI)-lH-pirol-3-karboksamida u
5 cm<3>anhidrovanog tetrahidrofurana. Reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi u trajanju
od 24 sati, ohladi u ledenom kupatilu i filtrira na guču. Sakupljena čvrsta supstanca se ispere sa
malo dihlormetana i cikloheksana i suši pod vakuumom. Dobija se 75 mg 2-acetilamino-4-{4-[3-(3-fluoro-5-trifluorometil-fenil)-ureido]-f u obliku čvrste
supstance bež boje.
LCMS (metod A): m/z=464: [M+H]<+>; m/z=447: [M+H]<+>-NH3 (pik baze)
m/z = 462:[M-H]-
Retenciono vreme (min.) = 3,97
2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-lH-pirol-3-karboksamid može se dobiti na sledeći način: 0,15 g
paladijuma na ugljeniku (10%) se doda u suspenziju od 1,36 g (4,72 mmol) 2-acetilamino-4-(4-
? nitro-feml)-lH-pirol-3-karboksarnida u 200 cm<3>metanola. Reakciona smeša se hidrogenizuje
pod 2 bara na 30 °C u trajanju od 6 sati, zatim se reakciona smeša filtrira na celitu, ispere sa
metanolom. Filtrat se upari pod smanjenim pritiskom i dobija se 1,14 g 2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-lH-pirol-3-karboksamida u obliku čvrste supstance boje kestena.
N.M.R. IH (300 MHz, (CD3)2SO d6 - 5 u ppm): 2,13 (s, 3H); 5,13 (s, 2H); 5,45 (m istaknuto,
IH); 6,24 (d, J = 2,5 Hz, IH); 6,59 (d, J = 8,5 Hz, 2H); od 6,90 do 7,10 (m istaknuto, 1 H); 6,99 (d, J = 8,5 Hz, 2H); 10,8 (s, 1 H); 11,25 (s veliko, 1 H).
IE: m/z=258: [M<*>] (pik baze); m/z = 241: [M+H]+ - NH3;m/z =199:241-COCH3
2-acetilamino-4-(4-nitro-fenil)-l H-pirol-3-karboksamid može se dobiti na sledeći način: 0,851 cm3 (11,960 mmol) acetil hlorida se doda na temperaturi sobnoj temperaturi u suspenziju od 2,16 g (8,77 mmol) 2-amino-4-(4-nitro-fenil)-lH-pirol-3-karboksamida u 200 cm<3>tetrahidrofurana suvog pod argonom. Smeša se ohladi u ledenom kupatilu i zatim se doda 3,180 cm3 (22,82 mmol) trietilamina polako na 0 °C. Reakciona smeša se meša na 0 °C u trajanju od 15 minuta, zatimnasobnoj temperaturi u trajanju od 3 sata. Reakciona smeša se preuzme sa etil
acetataom i zatim se organska faza ispere sa vodom i zatim suši sa anhidrovanim magnezijum
sulfatom, filtrira i rastvarač se upari pod smanjenim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti fleš hromatografijom [eluent: dihlorometan / metanol (99/1 u zapreminama)]. Nakon koncentrovanja pod smanjenim pritiskom frakcija koje sadrže željeni proizvod, dobija se 1,23 g 2-acetiIamino-4-(4-nitro-fenil)-lH-piroI-3-karboksamida u obliku čvrste supstance boje kestena.
N.M.R. IH (400 MHz, (CD&SO d6 - 6 u ppm): 2,11 (s, 3H); od 6,50 do 7,20 (m veoma istaknuto, 2H); 6,80 (s, 1 H); 7,63 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 8,18 (d, J = 9,0 Hz, 2H); 10,3 (s veliko,
1 H); 11,6 (s veliko, 1 H).
LCMS (metoda A): m/z - 287 : [M-H]~
Retenciono vreme (min.) = 2,90
2-amino-4-(4-nitro-fenil)-l H-pirol-3-karboksamid može se dobiti kao što je opisano u primeru 2 počevši od 2-amino-4-(4-nitro-fenil)-l H-pirol-3-karbonitrila.
Primer 13
[0070]
2 -acetil amino-4-{4-[3-(3-etil-fenil)-ui^do]-fenil}-lH-piorl-3-kaiboksamid 0,061 cm<3>(0,426 mmol) l-etil-3-izocijanato-benzen se doda na sobnoj temperaturi u suspenziju od100mg (0,387 mmol) 2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-lH-pirol-3-karboksamida u 5 cm<3>tetrahidrofurana anhidrovanog. Reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi u trajanju od 24 sata i zatim se upari do suva pod smanjenim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti fleš hromatografijom [eluent: dihlorometan /metanol (97/3 u zapreminama)]. Nakon koncentrovanja pod smanjenim pritiskom frakcija koje sadrže željeni proizvod, dobija se 107 mg 2-acetilamino-4-{4-[3-(3-etil-feml)-ureido]-fenil}-lH-pirol-3-karboksamida u obliku čvrste supstance boje
kestena.
LCMS (metod A):m/z =406: [M+H]<+>m/z = 389: [M+H]+ - NH3
Retenciono vreme (min.) = 3,67
Primer 14
[0071]
2 -acetilamino-4-{4-[3-(4-fluoro-3-trifluorometil-fenil )-ureido]-fenil}-lH-pirol-3-karboksamid 2-acetilamino-4- {4-[3-(4-fluoro-3-tirfluorornetil-fenil)-ureido]-fenil} -1 H-pirol-3-karboksamid može se dobitikaošto je opisano u primeru 13 počevđi od 4-fluoro-3-(trilfuorometil)fenil izocijanata i 2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-lH-pirol-3-karboksamida. Njegove karakteristike su sledeće: LCMS (metod A): m/z = 464: [M+H]<+>; m/z 447 : [M+H]<+>- NH3 ( pik baze) m/z = 462:[M-H]-Retenciono vreme (min.) = 3,83
Primer 15
[0072]
2 -acetiIamino-4-{4-[3-(3- fluoro-fenil )-ureido ]-fenil}-lH-pirol-3-karboksamid 2-acetilamino-4- {4-[3-(3 -fluoro-fenil)-ureido]-fenil} -1 H-pirol-3-karboksamid može se dobiti
kao stoje opisano u primeru 12 počevši od 3-fluorofenil izocijanata i 2-acetilamino-4-(4-aminofenil)-l H-pirol-3-karboksamida. Njegove karakteristike su sledeće:
LCMS (metod A): m/z = 396 :[M+H]<+>; m/z = 379: [M+H]<+->NH3
Retenciono vreme (min.)=3,42
Primer 16
[0073]
2-acetilamino-4- {4-[3-(4-fluoro-fenil)-ureido]-fenil} -1 H-pirol-3-karboksamid
2-acetilamino-4-{4-[3-(4-lfuoro-f^ može se dobiti
kao stoje opisano u primeru 12 počevši od 4-fluorofenil izocijanata i 2-acetilamino-4-(4-amino-
fenil)-1 H-pirol-3 -karboksamida.
LCMS (metod A): m/z = 396 : [M+H]+; m/z = 379 : [M+H]+ - NH3
Retenciono vreme (min.)=3,42
Primer 17
[0074)
2 -acetilamino-4- {4-[3-(2-fluoro-fenil)- ureido]-fenil}-lH-pirol-3-karboksamid 2-acetilamino-4- {4-[3-(2-fluoro-fenil)-Ureido]-fenil} -1 H-pirol-3-karboksamid može se dobiti kao što je opisano u primeru 12 počevši
od 2-fluorofenil izocijanata i 2-acetilarnino-4-(4-amino-fenil)-lH-pirol-3-karboksamid.baze base) ; m/z = 379: [M+H]<+>- NH3
Retenciono vreme (min.) = 3,70
Primer 18
(0075) 2 -acetilamino-4- {4-[3-(4-difluorometoksi-fenil)-ureido]-fenil)-1H -pirol-3-karboksamid 2-acetilamino-4- {4-[3-(4-difluorometoksi-fenil)-ureido]-fenil}-1 H-pirol-3-karboksamid može se dobiti kao što je opisano u primeru 12 počevši od 4-(difluorometoksi)fenil izocijanata i 2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-lH-pirol-3-karboksamida.
LCMS (metod A) : m/z =444 :[M+H]<+>;m/ z427: [M+H]<+>- NH3
m/z = 442:[M-HV
Retenciono vreme (min.) = 3,51
Primer 19
[0076)
2-acetilamino-4- {4-[3-(3,4-dimetil-fenil)-ureido]-fenil}-1H-pirol-3-karboksamid
2-acetilamino-4-{4-[3-(3,4-dimetil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirol-3-karboksamid može se dobiti
prema metodama opisanim u primeru 12 počevši od 3,4-dimetilfenil izocijanata i 2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-1 H-pirol-3-karboksamida.
LCMS (metod A) : m/z = 406 : [M+H]<+>, m/z = 389 : [M+H]<+>- NH3 m/z = 404 : [M-H]'
Retenciono vreme (min.) = 3,60
Primer 20
[0077J
2 -acetilamino-4- {4-[ 3- (3,4-đimetoksi-fenil)-ureido ]-fenil}-lH-piroI-3-karboksamid 2-acetilamino-4-{4-[3-(3,4-dimetoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirol-3-karboksamid može se dobiti kao što je opisano u primeru 12 počevši od 3,4-dimetoksifenil izocijanata i 2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-1 H-pirol-3 -karboksamida.
LCMS (metod A): m/z = 438: [M+Hf; m/z = 421: [M+H]<+>- NH3
m/z = 436 : [M-H]'
Retenciono vreme (min.) - 2,94
Primer 21
(0078]
2 -acetilamino-4-(4-[ 3->(4-trilfuorometoksi-fenil)-ureido ]-fenil}-lH -pirol-3-karbdksamid 2-acetilamino-4-{4-[3-( 4-trifluorometoksi-fenil)-ureido ]-fenil}-lH-pirol-3-karboksamid može
se dobiti kao stoje opisano u primeru 12 počevši od 4-(trifluorometoksi)fenil izocijanata i 2-
acetilamino-4-(4-amino-fenil)-1 H-pirol-3-karboksamida.
LCMS (metod A): m/z = 462 : [M+H]+; m/z = 445 : [M+H]<+>- NH3
m/z = 460:fM-H]'
Retenciono vreme (min.) = 3,85
Primer 22
[0079]
2 -acetilamino-4- {4-[3-(2,5-dimetoksi-fenil)-ureido]-fenil} - lH-pirol-3-karboksamid 2-acetilamino-4-{4-[3-(2,5-dimetoksi-fenil)-urddo]-fenil}-lH-pirol-3-karboksamidmožese
dobiti kao što je opisano u primeru 13 počevši od 2.5-dimetoksifenil izocijanata i 2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-1 H-pirol-3-karboksamida.
LCMS (metod C): m/z=438:[M+H]<+>m/z = 436:[M-H]-Retenciono vreme (min.) = 3,16
Primer 23
[0080]
2-acetilamino-4-[4-(3-feitil-in^do)-fenil]-lH-pirol-^
2-acetilamino-4-[4-(3-feml-u^^ se dobiti kao što je
opisano u primeru 13 poševši od fenil izocijanata i 2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-lH-pirol-3-
karboksamida.
LCMS (metod C): m/z = 378: [M+H]<+>
m/z = 376:[M-H]-
Retenciono vreme (min.) = 2,97
Primer 24
[0081(
2-acetilamino-4- {4-[3-(2-metoksi-fenil)-ureido ]-feral} - lH-pirol-3-karboksamid 2-acen'lammo^{4-[3-(2-metoksi-feml)-ureido]-feml}-lH-pirol-3-karto može se dobiti
kao što je opisano u primeru 13 počevši od 2-metoksifenil izocijanata i 2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-1 H-pirol-3-karboksamida.
LCMS (metod C): m/z = 408 : [M+H]<+>
m/z = 406: [M-H]"
Retenciono vreme (min.) = 3,16
Primer 25
[0082]
2- AcetilaminD-4-{4-[3-(2 - trifl uorometil-fenil)-ureido } fenil}-lH-pirol-3-karboksamid 2-acetilamino-4-{4-[3-(2-trifluoromeh^-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirol-3^ može se dobiti kao što je opisano u primeru 13 počevši od 2-(trifluorometiI)fenil izocijanata i 2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-1H-pirol-3-karboksamida.
LCMS (metod C): m/z-446: [M+H]<+>
m/z = 444:[M-H]"
Retenciono vreme (min.)=3,32
Primer 26
[0083]
2-acetilamino-4-[4-(3-o-tolil-ureido)-feniI]-1 H-pirol-3-karboksamid
2-acetilamino-4-(4-(3-o-tolil-ureido)-feniI]-lH-pirol-3-karboksamid može se dobiti kao što je opisano u primeru 13 počevši od 2-metilfenil izocijanata i 2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-lH-pirol-3-karboksamida.
LCMS (metod C): m/z = 392 :[M+H]+ m/z = 390: [M-H]"
Retenciono vreme (min.) = 3,07
Primer27
[0084]
2 -acetilamino-4-{4-[3-( 3-metoksi-fenil)-ui^o]-fenil}-lH-pirol-3-karboksamid
2-acetilamino-4-{4-[3-(3-metoksi-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirol-3-karboksamid može se dobiti
kao što je opisano u primeru 13 počevši od 3-metoksifenil izocijanata i 2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-1 H-pirol-3-karboksamida.
LCMS (metod C): m/z=408:[M+HJ+
m/z = 406:[M-H]
Retenciono vreme (min.)=3,01
Primer 28
[0085|
2-acetilamino^-{4-[3-(3-trifluorometiI-feml)-ureido]-fenil}
2-acetilamino-4- {4-[3-(3-trifluorometiI-feml)-ureido]-fenil} -1 H-pirol-3-karboksamid može se
dobiti kao što je opisano u primeru 13 počevši od 3-(trifluorometil)fenil izocijanata i 2-aceulamino-4-(4-amino-fenil)-1 H-pirol-3-karboksamida.
LCMS (metod C): m/z =446:[M+H]<+>
m/z = 444:[M-H]'
Retenciono vreme (min.)=3,54
Primer 29
(0086]
2-acetilamino-4-{4-(3-m-tolil-ureido)-fcnil]-1 H-pirol-3-karboksamid
2-acetilamino-4-[4-(3-m-tolil-ureido)-fenil]-lH-piorl-3-karboksamid može se dobiti kao što je
opisano u primeru 13 počevši od 3-metilfenil izocijanata i 2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-lH-
pirol-3-karboksamida.
LCMS (metod C): m/z = 392 : [M+H]<+>
m/z = 390:[M-HJ-
Retenciono vreme (min.) = 3,20
Primer 30
[00871
2-acetiIannno-4-{4-[3-(4-tirfluorometil-fenil)-ureiđo)-fenil}-lH-pirol-3
2-acetilamino-4-{4-[3-(4-trifluorometil-fenil)-ureido)-fenil}-1 H-pirol-3-karboksamid može se dobiti kao što je opisano u primeru 13 počevši od 4-(trifluorometil)fenil izocijanata i 2-acetilamino-4-(4-amino-feniI)-lH-pirol-3-karboksamida.
LCMS (metod C): m/z =446: [M+Hf
m/z = 444:fM-H]-
Retenciono vreme (min.) = 3,58
Primer 31
|0088]
2-acetilamino-4-[ 4-(3-p-tolil-ureido)-fenil)-1 H-pirol-3-karboksamid
2-acetilamino-4-[4-(3-p-tolil-ureido)-feml)-lH-pirol-3-karboksamid može se dobiti kao što je opisano u primeru 13 počevši od 4-metilfenil izocijanata i 2-acetiIamino-4-( 4-amino-fenil)-1H-pirol-3-karboksamida.
LCMS (metod C): m/z= 392: [M+H]<+>
m/z=390:(M-H)
Retenciono vreme (min.) = 3,19
Primer 32
[0089|
2 -acetilamino-4-{4-[3-(4-hloro-3- trifluorometil-fenil )-ureiđo ]-fenil}-lH -pirol-3-karboksamid
2-acetilamino-4- {4-[3-(4-hlon>3-tirfluorometil-fenil)-ureido]-fenil} -1 H-pirol-3-karboksamid
može se dobiti kao što je opisano u primeru 13 počevši od 4-hloro-3-(trilfuorometil)fenil
izocijanata i 2-acetilamino-4-( 4-amino-fenil)-lH-pirol-3-karboksamida.
LCMS (metod C) : m/z=480: [M+H]<+>
m/z478 = [M-HV
Retenciono vreme (min.)=3,80
Primer 33
[0090)
2-acetilamino-4- {4-[3-(2-hloro-5-tirfluorometil-fenil)-ureido]-fenil} -1 H-pirol-3-karboksamid 2-acetilamino-4-{4-[3-(2-hloro-5- trifluorometil-fenil)-ureido]-feml}-lH-pirol-3-karboksamid može se dobiti kao što je opisano u primeru 13 počevši od 2-hloro-S-(trilfuorometil)fenil izocijanata i 2-acetilamino-4-( 4-amino-fenil)-lH-pjrol-3-karboksamida.
LCMS (metod C): m/z = 480: [M+H]<+>
m/z = 478: [M-HV
Retenciono vreme (min.) = 3,82
Primer 34
[0091]
2-acetilamino-4-{4-[3-(2 -fluoro-3-trifluorornetil-fenil )-ureido]-fenil} -1 H-pirol-3-karboksamid 2-acetilamino-4- {4-[3-(2-flUoor-3-uifluorometil-fenil)-ureido]-fenil} -1 H-piroI-3-karboksamid može se dobiti kao što je opisano u primeru 13 počevši od 2-fluoro-3-(trilfuorometil)fenil izocijanata i 2-acetilarnino-4-(4-amino-fenil)-lH-pirol-3*karboksamida.
LCMS (metod C): m/z =464:[M+H]<+>
m/z = 462:[M-HT
Retenciono vreme (min.) — 3,64
Primer 35
(0092)
2-acetilamino-4- {4-[3-(3-hloro-4-dilfuorornetoksi-fenil)-ureido]-fenil} -1 H-pirol-3-karboksamid
2-acetilamino-4-{4-[3-(3-hIoro-4-difluorometoksi-fe^ može se dobiti kao što je opisano u primeru 13 počevši od 3-hloro-4-(difluorometoksi)fenilizocijanatai 2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-lH-pirol-3-karboksamida.
LCMS (metod C): m/z = 478 : [M+H]<+>
m/z = 476 : [M-H]~
Retenciono vreme (miri.) = 3,52
Primer 36
[0093]
2 -acetilamino-4-{4-[3-( 3,5-dimetoksi-fenil )-ureido ]-fenil}-lH -pirol-3-karboksamid
2-acetiIamino-4-{4-[3-(3,5-dimetoksi-fenil)-ureido]~feniI}-lH-pirol-3-lcarboksamid može se
dobiti kao što je opisano u primeru 13 počevši od 3,5-dimetoksifenil izocijanata i 2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-1 H-pirol-3-karboksamida.
LCMS (metod C) : m/z=438:[M+H]<+>
m/z = 436: [M-H]-
Retenciono vreme (min.) = 3,07
?Primer 37
(0094]
2 -acetilamino-4-{ 4-[3-(3,5-dimetil-fenil)-ureido]-fenil}-lH-pirol-3-karboksaniid 2-acetilamino-4-{4-[3-(3,5-dimetil-fenil)-ure^ može se dobiti kao što je opisano u primeru 13 počevši od 3,5-dimetilfenil izocijanata i 2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-1 H-pirol-3-karboksamida.
LCMS (metod C): m/z =406:[M+H]+
m/z = 404: [M-H]"
Retenciono vreme (min.) = 3,43
Primer 38
[0095]
2-acetilamirK>-4-{4-[3-(2,5-dimetil-fenil )-ureido]-fenil}-lH-pirol-3-karboksamid 2-acetilamino-4-{4-[3-(2,5-dimeitl-fenil)-^ može se dobiti kao što je opisano u primeru 13 počevši od 2,5-dimetiIfenil izocijanata i 2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-1 H-pirol-3-karboksamida.
LCMS (metod C): m/z = 406: [M+H]<+>
m/z = 404: [M-H]-
Retenciono vreme (min.) = 3,29
Primer 39
[0096J
2 -acetilamino-4- {4-[3-(2 - metoksi-5-metil-fenil)- ureido]-fenil}-lH -pirol-3-karboksamid 2-acetilamino-4- {4-[3-(2-metoksi-S-metiI-fenil)-ureido]-fenil} -1 H-pirol-3-karboksamid može se dobiti kao što je opisanoUprimeru 13 počevši od 2-metoksi-5-metilfeniI izocijanata i 2-acetilamino-4-(4-amino-fenil)-1 H-pirol-3-karboksamida.
LCMS (metod C): m/z = 422: [M+H]<+>
m/z = 420: [M-H]'
Retenciono vrema (min.) = 3,38
Primer 40
[00971
2-acetilamino-4- {4-[3-{4-metU-3-trilfuoromeril-fenil)-ureido]-fenil} -1H -pirol-3-karboksamid
2-acetilamino-4-{4-[3-(4-meul-3-trifluo
može se dobiti kao stoje opisano u primeru 13 počevši od 3-(trifluorometil)-4-metilfenil
izocijanata i 2-acetilammo-4-(4-amino-fenil)-lH-pirol-3-karboksamida.
Tačka topljenja = 266 °C.
ES+ : m/z=460 : [M+H]<+>; m/z=482 : [M+Na]<+>
Primer 41
(0098]
2- acetilamino-4-[4- (2,3-dihloro-benzensulfcwiilamino)-feml] 1 H-pirol-3-karboksamid
Suspenzija od 70 mg (0.271 mmol) 2-acetilamim>-4-{4-aminofeiul)*lH-pirol-3-karboksamidai 70 mg (0.285 mmol) 2,3-dihlorobenzensuIfonil hlorida u 1.5 cm<3>piridina se meša na sobnoj temperaturi u trajanju od 24 sata i zatim se reakciona smeša upari do suva pod smanjenim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti fleš hromatografijom [eluent: dihlorometan / metanol (97/3 u zapreminama)]. Nakon koncentrovanja pod smanjenim pritiskom frakcija koje sadrže željeni proizvod, dobija se 22 mg2-acetilamino-4-[4-(2t3-dihloK>-be 3- karboksamida u obliku bež čvrste supstance koja se topi na 265 °C.
ES+: m/z = 469: [M+H]<+>
Određivanje aktivnostijedinjenja- Eksperimentalniprotokol
1. FAK
[0099]lnhibitorska aktivnost jedinjenja na FAK je determinjsana merenjem inhibicije autofosforilacije enzima upotrebom testa rezolutne fluorescencije tokom vremena (HTRF).
[0100]ANDc kompletira FAK humani, na N-terminalnom markiran je za histidin, kloniran u vektoru ekspresije baculovirus pFastBac HTc. Protein je eksprimovan i prečišćen na oko 70% homogenosti.
[0101]Aktivnost kinaza je određivana inkubacijom enzima (6.6ug/ml) sa različitim koncentracijama testiranog jedinjenja u tamponu SOmM Hepes pH=7.2, lOmM MgCh, lOOuM NajVO*, 1S uM ATP tokom 1 sata na 37°C. Enzimska reakcija je prekinuta dodavanjem jednog tampona Hepes pH = 7.0, koji sadrži 0.4 mM KF, 133 mM EDTA, 0.1% BSA i sa uradjenim obeležavanjem, tokom 1 do 2 sata na sobnoj temperaturi, sa dodavanjem, u taj tampon jednog antitela anti-Histidin označen kao XL665 i jednog antitela monoklonalnog fosfspecifičnog tirozina konjugovanog sa europijum kriptatom (Eu-K). Karakteristike dva fluorofora su dostupne kod G. Mathis et al. Anticancer Research 1997., 17, str. 3011-3014. Prenos energije izmedju ekscitovanog europijumskog kriptata prema XL665 akceptoru je proporcionalna stepenu autofosforilacije FAK.
[0102]Specifični dugotrajni signal XL-665 je meren jednim pločastim brojačem Packard Discovery. Svi testovi su sprovedeni u duplikatu i prosečna vrednost iz oba testa je izračunata. Inhibicija aktivnosti autofosforilacije FAK sa jedinjenjima iz pronalaska je izračunata prosečna vrednost duplih testova. Inhibicija aktivnosti autofosforilacije FAK sa jedinjenjima iz pronalaska je izražena u procentima inhibicije u odnosu na jednu kontrolu čija je aktivnost merena u otsustvu testiranog jedinjenja. Za izračunavanje % inhibicije se razmatra srazmera [signal na 66S nm/$ignal na 620nm].
2 KDR
(0103]Efekat inhibitora jedinjenja je odredjen u jednom testu fosforilacije supstrata enzimom KDRin vitro jednomtehnikom scintilacije (ploča 96 otvora, NEN).
Citoplazmični domen humanog enzima KDR je kloniran u formi fuzije GST u vektoru ekspresije bakulovirusa pFastBac. Protein je izražen u ćelijama SF21 i pročišćen na oko 60% homogenosti.
(0104]Aktivnost kinaza KDR je merena u 20 mM MOPS, 10 mM MgC12, 1 mM DTT, 2.5 mM EGTA, 10 mM b-glicerinfosfata, pH « 7.2, uz prisustvo 10 mM MgC12,100 uM Na3Vo4, lmM NaF. 10 ul jedinjenja je dodato u 70 ul tampona kinaze koji sadrži 100 ng enzima KDR na 4°C. Reakcija je pokrenuta dodavanjem 20ul rastvora koji sadrži 20 ug supstrata (fragment SH2-SH3 PLC □ izraženog u formi proteina fuzije GST), 2 uCi □<33>P[ATP] i 2uM ATP hladnog. Posle 1 sata inkubacije na 37 °C, reakcija je zaustavljena dodavanjem 1 zapremine (100 ul) od 200mM EDTA. Tampon inkubacije je izvadjen, a otvori su oprani tri puta sa 300 ul PBS. Radioaktivnost je merena u svakom otvoru uz upotrebu jednog brojača radioaktivnosti Top Count NXT (Packard).
Pozadinski šum je odredjen merenjem radioaktivnosti u četiri različita otvora koji su sadržali radioaktivni ATP i samo supstrat.
Jedna potpuna kontrola aktivnosti je merena u četiri različita otvora koji svi sadrže reaktive (y<33>P-[ATP], KDR i supstrat PLCy), ali u odsustvu jedinjenja.
Inhibicija aktivnosti KDR sa jedinjenjem iz pronalaska je izražena u procentima inhibicije kontrolisane aktivnosti određene u odsustvu jedinjenja.
(6105] Jedinjenje SU5614 (Calbiochem) (luM) je uključen u svaku ploču kao kontrola inhibicije.
3. Tie2
[0106]Kođirajuća sekvenca od Tie2 humanog koja odgovara amino kiselinama iz unutar-ćelijskog domena 776-1124 je generisana sa PCR uz upotrebu cDNA izolovanog iz humane placentekaomodela.Ovasekvenca je uvedena u jedan vektor ekspresijebaculoviruspFastBacGTuformi proteina iz fuzije GST.
Efekat inhibitora molekula je odredjen u jednom testu fosforilacije PLC od Tie2 uz prisustvo GST-Tie2 pročišćenih na otprilike 80% homogenosti. Supstrat je sastavljen od fragmenata SH2-SH3 od PLC izraženoguformi proteina iz fuzije GST.
Aktivnost kinaza Tie2 je merena u tamponu MOPS 20mM pH 7.2, koji sadrži 10 mM MgCl2, 10 mMnCb, lmM DTT, 10 mM glicerofosfata. U jednu ploču sa 96 otvora FlashPlate održavanu na ledu, dodaje se jedna reakciona smeša sastavljena od 70 ul tampona kinaze koji sadrži 100 ng enzima GST-Tie2 po otvoru. Zatim se dodaje 10ul odmolekula koji se testira razblaženog u DMSO u jednoj koncentraciji od10%maksimalno. Za jednu daru koncentraciju svako merenje je vršeno četiri puta.Reakcija jeinicirana dodavanjem 20 ul rastvora koji sadrži 2 ng GST-PLC, 2uM hladnog ATP i 1 uCi d<33>P[ATP]. Posle 1 sata inkubacije na 37 °C, reakcija se prekida dodavanjem 1 zapremine (100 ul) EDTA od 200mM. Posle izdvajanja tampona inkubacije otvori su tri puta operu sa 300 ul PBS. Radioaktivnost je merena najednom MicroBeta 1450 Wallac. Inhibicija aktivnosti Tie2 je izračunata i izražena u procentima inhibicije u odnosu na kontrolisanu aktivnost određenu u odsustvu jedinjenja.

Claims (9)

1.Proizvod koji odgovara formuli (I) koja sledi: u kojoj:l)Ar-L-Aje: u kojoj su svaki XI, X2, X3 i X4 nezavisno izabrani izmedju N i CH, u kom je A izabranizmedju fenila, pirazolila i izoksazolila eventualno supstituisanih
2) L je NH-CO-NH,
3) Ra je H,
4) Rl jeH,
5) R2 i R5 nezavisno izabrani iz grupe konstituisane od: H, halogen, R'2, OR'2, NHR'2, NHCOR'2, NHCONHR'2, NHS02R7 u kom je svaki R'2 izabran iz grupe konstituisane od H, alkil, alkilen, alkinil, aril, hetroaril, cikloalkil, heterocikl, supstituisani alkil, supstituisani alkilen, supstituisani alkinil, supstiutisani aril, supstituisani heteroaril, supstituisani cikloalkil, supstituisan im heterocikl.
2. Proizvod prema zahtevu 1, karakterističan po tome što R2 je H.
3. Proizvod prema zahtevu 1, karakterističan po tome što R5 je H.
4. Proizvod prema zahtevu 1, karakterističan po tome što je A supstituisan sa jednim prvim supstituentom izabranom iz grupe koja se sastoji od alkil, halogen alkil, alkilen, alkinil, aril, heteroaril, O-alkil, O-aril, O-heteroaril, S-alkiI, supstituisani S-alkil, S-aril, S-heterocikl, gde je svaki eventualno supstituisan sa jednim supstituentom izabranim izmedju (Cl-C3)alkil, halogen, 0-(Cl-C3)alkil.
5. Proizvod prema bilo kom od zahteva 1 do 4, karakterističan po tomeštoje A supstituisan jednim drugim supstituentom izabranim iz grupe koja se sastoji od F, Cl, Br, J, OH, SH, SO3M, COOM, CN, N02, CON(R8)(R9), N(R8)CO(R9), (Cl-C3)alkil-OH, (Cl -C3)alkiIenN(R8)(R9), (Cl-C3)alkilom-(RIO), (Cl-C3)alkil-COOH, N(R8XR9); gde R8 i R9 su nezavisno izabrani izmedju H, (Cl-C3)alkil, (Cl-C3)haIogen alkil, (Cl-C3)alkilOH, (Cl-C3)alkiINH2, (Cl-C3)alkilaCOOM, (Cl-C3)atkilS03M ; u kom kad su R8 i R9 istovremeno različiti od H, mogu biti vezani kako bi se formirao jedan prsten od 5 do 7 članova koji sadrže od 0 do 3 heteroatoma izabranih izmedju N, O i S; gde M je H ili jedan katjon alkalnog metala izabran izmedju Li, Na i K, i gde RIO je H ili jedan eventualno supstituisan nearomatični hetrocikl koji sadrži od 2 do 7 atoma ugljenika, i od 1 do 3 heteroatoma izabranih izmedju N, O i S.
6.Proizvod prema bilo kom od zahteva 1 do 4, karakterisncaa po tome što se radi o:4"{4-[3^2-Fluor-5-trifluormetil-fe^1-Acetil-2-anuno-4~{4-[3-(2-fluor^ karboksamid,
2- Formilamino-4- {4-[3^2-fluor-5-uifluormetil-fenil)-urddo]ferul }-l H-pirol-3-karboksamid, 2-Izobuuirlamino-^{4^3^2-fluoi^5-tri^ karboksamid, 2-Buturilamino-4~{4-[3-{2-lfuor-5-^ karboksamid, 2-(3^iklopenul-proptonilamino)^ pirol-3-karboksamid, 2-^Ciklopropilkarbonilamino)-^{4^ pirol-3-karboksamid, 2-Pivdoilamino-^{4-[3-(2-fluor-5-trifl^^ karboksamid, 2-(2-Dimetibmin-^etilamino)-^{4-^^ pirol-3-karboksamid,- 2-Acctilamino-4-{643-(2-lfuor-5-trifluormctil-fen karboksamid, 2-^3-Etil-im2iđo)^{443-^2-fwor^ karboksamid, 2-acetilaimno-^{4H[3-(3-fluor-5--trifluormcttl-feniI^ } -1 H-pirol-3-karboksamid, 2-acetilamino-4-{4H£-(3-^l-f^ 2-acetilamtoo-4~{4~[3-(4-lfuor-3-^ karboksamid, 2-acetilamino-4~{4^3-K3-fluor-f^2-acetilammo-4—{4-[3-^4-lfuor-fenil)-iireido)-fem2-ac^ilamirK>^{4-^3-(2-fluor-fen^^ 2-acetilamino-4-{4^3-(4--diflu^^ 2-aceti Iamino-4- (4-^3—(3,4-dimetil-feniI)~ureido]-fenil} -1 H-piro l-3-karboksamid,2-acetilamino-4-{4-[3^3,4-^imetoksi-fenil)-«reido]-fenil}-1 H-pirol-3-karboksamid,2--acetilamino-4-{4-[3-(4Hriflu^^ 2-acetilamino-4-{4^3-(2,5-dimetoksi-fem^ 2-acetiIamino ^-{^"(^^fenil-ureido^fenil]-! H-pirol-3-karboksamid,2-acetilaminc--4-{4-[3-^2-™etokši-feml)-ureido]^fenil}-l H-pirol-3-karboksamid, 2-aceulamino-4-{4-f3-^2-triflux>nn^2-acetilamino-4-{4-(3-o-tolii-ureido)-fenil]-1 H-pirol-3-karboksamid,2-acetilamino-4-{4-{3-(3-metoksi-4em^ 2-acetilamino-4-{4-[3-(3-tirfluorm^ 2-aceulamino-4-{4^3-TO^olil--ureido)-fenil]-lH 2-acetilamino-4- (4-[3-(4-trifluormetil-fenil)- ureidoj-fenil} -1 H-pirol-3-karboksamid, 2-acetilamino-4-[4^3-p-tolil-ura^ 2-^etilamino-4-{4^3^4^1or-3-ri^ karboksamid, 2-aceu4amino-4-{4-[3^2-Mor-5-tri^ karboksamid, 2-acetilamino-^{4-[3-(2-fluor-3-trifl^^ karboksamid, 2-acetilanrino-^{4-[3-(3^ior-4^ifluom karboksamid, 2-acetilamino-4- {4-{3-(3,5-dimetoksi-fenil)-ureido]-feniI}-1 H-pirol-3-karboksamid, 2-acetilamino-4-{4-[3-(3,5--dimetil-fe^^ 2-acetilamino-4-{4^3-(2,5-dim 2-acetilamino—4~{4-[3^2-metok 2-acetilamino-^{4-[3-(4-metil-3Hrifluom karboksamid, 2-acetiIamino-4-[4-{2,3-<lihIor-4j^^
7. Proizvod prema bilo kom od prethodnih zahteva,karakterističan po tomešto jeuobliku : 1) ne-hiralnom, ili 2) racemskom, ili 3) obogaćen sa jednim stereo-izomerom, ili 4) obogaćen sa jednim enantiomerom; i po tome što je eventualno salifikovan.
8. Farmaceutski oblik koji sadrži jedan proizvod prema bilo kom od prethodnih zahteva u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijentom.
9. Upotreba proizvoda prema jednom od prethodnih zahteva od 1 do 8, za dobijanje leka koji se upotrebljava za lečenje kancera.
RSP-2009/0128A 2005-02-10 2006-02-08 Supstituisani piroli, farmaceutski oblici koji ih sadrže, metod za njihovo dobijanje i njihova upotreba RS50806B (sr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
FR0501354A FR2881742B1 (fr) 2005-02-10 2005-02-10 Pyrroles substitues, compositions les contenant, procede de fabrication et utilisation
PCT/FR2006/000286 WO2006084996A1 (fr) 2005-02-10 2006-02-08 Pyrroles substitues compositions les contenant, procede de fabrication et utilisation

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS50806B true RS50806B (sr) 2010-08-31

Family

ID=35478244

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RSP-2009/0128A RS50806B (sr) 2005-02-10 2006-02-08 Supstituisani piroli, farmaceutski oblici koji ih sadrže, metod za njihovo dobijanje i njihova upotreba

Country Status (36)

Country Link
US (1) US7592365B2 (sr)
EP (1) EP1851198B1 (sr)
JP (1) JP2008530061A (sr)
KR (1) KR20070101317A (sr)
CN (1) CN101115716A (sr)
AR (1) AR052571A1 (sr)
AT (1) ATE419234T1 (sr)
AU (1) AU2006212106A1 (sr)
BR (1) BRPI0606955A2 (sr)
CA (1) CA2596822A1 (sr)
CR (1) CR9231A (sr)
CY (1) CY1108916T1 (sr)
DE (1) DE602006004566D1 (sr)
DK (1) DK1851198T3 (sr)
DO (1) DOP2006000028A (sr)
EA (1) EA013060B1 (sr)
ES (1) ES2319926T3 (sr)
FR (1) FR2881742B1 (sr)
GT (1) GT200600048A (sr)
HR (1) HRP20090158T1 (sr)
IL (1) IL184488A0 (sr)
MA (1) MA29248B1 (sr)
MX (1) MX2007008789A (sr)
MY (1) MY142082A (sr)
NO (1) NO20074528L (sr)
PA (1) PA8661601A1 (sr)
PE (1) PE20061086A1 (sr)
PL (1) PL1851198T3 (sr)
PT (1) PT1851198E (sr)
RS (1) RS50806B (sr)
SI (1) SI1851198T1 (sr)
TN (1) TNSN07241A1 (sr)
TW (1) TW200640858A (sr)
UY (1) UY29371A1 (sr)
WO (1) WO2006084996A1 (sr)
ZA (1) ZA200706157B (sr)

Families Citing this family (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
FR2881426B1 (fr) 2005-02-03 2007-03-30 Aventis Pharma Sa Pyrolles et imidazoles substitues, compositions les contenant, procede de frabrication et utilisation
MX2009004371A (es) 2006-10-23 2009-06-11 Lexicon Pharmaceuticals Inc Proceso para la preparacion de 5-alquil-7h-pirrolo[2,3-d]piri-midi n-2-oles.
TW201111385A (en) 2009-08-27 2011-04-01 Biocryst Pharm Inc Heterocyclic compounds as janus kinase inhibitors
US20120244141A1 (en) 2010-09-28 2012-09-27 Boehringer Ingelheim International Gmbh Stratification of cancer patients for susceptibility to therapy with PTK2 inhibitors
WO2020034988A1 (zh) * 2018-08-14 2020-02-20 江苏豪森药业集团有限公司 凋亡信号调节激酶1抑制剂的盐及其晶型
CA3121202A1 (en) 2018-11-30 2020-06-04 Nuvation Bio Inc. Pyrrole and pyrazole compounds and methods of use thereof

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB0107901D0 (en) * 2001-03-29 2001-05-23 Cyclacel Ltd Anti-cancer compounds
ATE404550T1 (de) * 2001-09-21 2008-08-15 Smithkline Beecham Corp Chemische verbindungen
EP1436265A4 (en) 2001-09-27 2004-12-15 Smithkline Beecham Corp CHEMICALS
US20040138269A1 (en) * 2002-10-11 2004-07-15 Sugen, Inc. Substituted pyrroles as kinase inhibitors
GB0229581D0 (en) * 2002-12-19 2003-01-22 Cyclacel Ltd Use
US7456190B2 (en) * 2003-03-13 2008-11-25 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compositions useful as protein kinase inhibitors
DE10354060A1 (de) * 2003-11-19 2005-06-02 Merck Patent Gmbh Pyrrolderivate
US7183285B2 (en) * 2004-04-29 2007-02-27 Pharmix Corp. Compositions and treatments for inhibiting kinase and/or HMG-CoA reductase
FR2881426B1 (fr) 2005-02-03 2007-03-30 Aventis Pharma Sa Pyrolles et imidazoles substitues, compositions les contenant, procede de frabrication et utilisation

Also Published As

Publication number Publication date
US7592365B2 (en) 2009-09-22
EA013060B1 (ru) 2010-02-26
CR9231A (es) 2007-10-23
PT1851198E (pt) 2009-03-26
PA8661601A1 (es) 2006-09-08
BRPI0606955A2 (pt) 2009-07-28
AU2006212106A1 (en) 2006-08-17
KR20070101317A (ko) 2007-10-16
MA29248B1 (fr) 2008-02-01
HRP20090158T1 (hr) 2009-05-31
EP1851198B1 (fr) 2008-12-31
FR2881742A1 (fr) 2006-08-11
PL1851198T3 (pl) 2009-06-30
TW200640858A (en) 2006-12-01
PE20061086A1 (es) 2006-11-30
IL184488A0 (en) 2007-10-31
CA2596822A1 (fr) 2006-08-17
GT200600048A (es) 2006-07-03
NO20074528L (no) 2007-10-31
CN101115716A (zh) 2008-01-30
UY29371A1 (es) 2006-10-02
ZA200706157B (en) 2008-11-26
CY1108916T1 (el) 2014-07-02
EA200701688A1 (ru) 2007-12-28
SI1851198T1 (sl) 2009-06-30
TNSN07241A1 (en) 2008-11-21
DOP2006000028A (es) 2006-09-15
MY142082A (en) 2010-08-30
EP1851198A1 (fr) 2007-11-07
WO2006084996A1 (fr) 2006-08-17
JP2008530061A (ja) 2008-08-07
ES2319926T3 (es) 2009-05-14
MX2007008789A (es) 2007-09-11
US20080167368A1 (en) 2008-07-10
ATE419234T1 (de) 2009-01-15
AR052571A1 (es) 2007-03-21
DK1851198T3 (da) 2009-05-04
DE602006004566D1 (de) 2009-02-12
FR2881742B1 (fr) 2007-09-07

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US8008322B2 (en) Substituted pyrazolopyridines, compositions containing them, method for the production thereof, and their use
JP5128475B2 (ja) ７−置換アザ−インダゾール、これらを含む組成物、これらの製造方法および使用
US7560571B2 (en) Substituted pyrroles and imidazoles, compositions containing same, manufacturing process therefor and use thereof
US7947706B2 (en) Substituted pyrrolopyridines, compositions containing them, manufacturing process therefor and use thereof
US20070259910A1 (en) Substituted Indoles, Compositions Containing Them, Method for the Production Thereof and Their Use
ES2311120T3 (es) Derivados de glicinamida como inhibidores de quinasa-raf.
US7592365B2 (en) Substituted pyrroles, compositions containing same, method for making same and use thereof
FR2880891A1 (fr) Pyrazolo pyridines substituees, compositions les contenant, procede de fabrication et utilisation
MX2007006764A (es) Indoles sustituidos, composiciones que los contienen, procedimiento de fabricacion y utilizacion.
HK1117153A (en) Substituted pyrroles, compositions containing same, method for making same and use thereof
HK1119431A (en) Substituted pyrroles and imidazoles, compositions containing same, production method thereof and use of same
FR2888579A1 (fr) Pyrazolo pyridines substituees, compositions les contenant, procede de fabrication et utilisation