RS55191B1

RS55191B1 - Soli sulfonske kiseline imidazola supstituisanih heterociklilamidom

Info

Publication number: RS55191B1
Application number: RS20160793A
Authority: RS
Inventors: Wilfried Schwab; Guido Schiffer; Kurt Voegtli; Andreas Kyas; Gerd Osswald
Original assignee: Aicuris Anti-Infective Cures Gmbh
Priority date: 2011-09-14
Filing date: 2012-09-12
Publication date: 2017-01-31
Also published as: CN103889973A; JP6193860B2; WO2013037812A1; MX2014002921A; SMT201600353B; PL2755964T3; HUE030091T2; CN103889973B; US20140315924A1; PH12014500577A1; DE102011113749A1; CA2848806C; AU2012307449B2; KR20140075711A; AU2012307449A8; EP2755964A1; SG11201400653PA; PT2755964T; ES2593268T3; AU2012307449B8

Description

[0001]Ovaj pronalazak se odnosi na soli metansulfonske kiseline jedinjenja formule

u kojoj

R<1>predstavlja metil, etil. butil ili ciklopropilmetil,

R~predstavlja fenil. gde je fenil supstituisan supstituentom koji je odabran iz

grupe koju čine trifluorometoksi i difluorometoksi. a

R<3>predstavlja vodonik. metil. hlor. metoksi ili trifluorometil.

[0002] Pronazak se dalje odnosi na metod za njihovo dobijanje, odgovarajuće lekove i navedene soli metansulfonske kiseline i farmaceutska sredstva za tečenje i/ili sprečavanje oboljenja, naročito za upotrebu kao antivirusna sredstva, naročito protiv citomegalovirusa.

[0003] Jedinjenja formule (I) su poznata iz, npr., WO 2006/089664 i razvio ih je podnosilac ove prijave kao obećavajuće kandidate za antivirusno efektivne supstance, naročito za borbu protiv infekcija humanim citomegalovirusom (HCMV). Tokom razvoja je, meutim, pokazano da supstance u vodenim rastvaračima, kao i u jako polarnim rastvaračima pokazuju neadekvatnu rastvorljivost. Problemi u vezi rastvorljivosti su dalje pojačani time što jedinjenja ispoljavaju i neadekvatnu rastvorljivost u uslovima koji postoje u stomaku čoveka (približno 0.1 M HCl, pH~1), u kojima se može pretpostavitiin . siluformiranje HC1 soli.

[0004] Predmet pronalaska je. prema tome, da se opišu soli koje ispoljavaju znatno poboljšanu rastvorljivost u poređenju sa slobodnom bazom jedinjenja formule (I). Dalje, ove soli bi trebalo da budu i stabilne tokom dugog vremena u uobičajenim uslovima skladištenja. Konkretno, jedinjenja ne bi trebalo da ispoljavaju povećanu higroskopnost. Takođe, soli bi u prisustvu razblaženog rastvora HCl trebalo da budu polako pretvarane u HCl so da bi se obezbedilo što je brže i ravnomernije oslobađanje čak i u uslovima koji su prisutni u stomaku čoveka.

[0005] Iznenađujuće, otkriveno je da organske soli sulfonske kiseline jedinjenja formule (I) ispoljavaju superiornu rastvorljivost u poređenju sa slobodnom bazom, kao i sa širokim spektrom drugih soli jedinjenja formule (I). Dalje, ove soli pokazuju i dugoročnu stabilnost koja je neophodna za upotrebu u lekovima. Pored toga, pokazano je da soli prema pronalasku ispoljavaju i visoku i ravnomernu rastvorljivost u uslovima koji odgovaraju onima u stomaku čoveka.

[0006] Predmeti pronalaska su soli jedinjenja formule (I) sa metansulfonskom kiselinom.

[0007] U okviru ovog pronalaska, soH organskih sulfonskih kiselina su adukti reakcije jedinjenja formule (I) sa organskom sulfonskom kiselinom. U vezi sa tim, jedinjenja formule (I) i organske sultonske kiseline mogu biti prisutne u bilo kom odnosu. U ovom slučaju, poželjno je da odnos bude u cei im brojevima (npr.. 1 : I. i : 2. 1 : 3. 3 : 1. 2 : 1). Ove soli se mogu proizvoditi direktnom reakcijom jedinjenja formule (I) sa organskom sulfonskom kiselinom ili proizvodnjom soli druge kiseline jedinjenja formule (I). posle čega sledi izmena jona suprotnog naelektrisanja.

[0008] U okviru ovog otkrića, o onim oblicima jedinjenja u skladu sa otkrićem koji formiraju kompleks koordinacijom sa molekulima rastvarača se govori kao o sol vati ma. Hidrati su poseban vid sol vata. u kojima se koordinacija vrši sa vodom.

[0009] U okviru ovog pronalaska, dimesilatne soli se naročito poželjne.

[0010] U okviru ovog pronalaska, poželjna je so sledeće formule:

[00111 U okviru ovog pronalaska, naročito je poželjan kristalni N-(l-metil-2-{[4-(5-metilpiridin-2-il)piperazin-l-il]-karbonil}-l^-imidazoI-4-il)-N'-[4-tiinuorometoksifenil]urea dimesilat, koji ima karakteristične pikove na približno 6,37, 11,77, 12,56. 17,17, 18.81, 20,34, 21,47, 23,04, 35.46 stepeni 2-teta u XRD difraktogramu praha.

[0012] U okviru ovog pronalaska, još je poželjan kristalni N-(l-metil-2-j[4-(5-metilpiridin-2-il)piperazin-l -il]-karbonil J -1 //-imidazol-4-il)-N"-|4-irifluorometoksi-fenil]urea dimesilat, koji ima XRD difraktogram praha kao sto je prikazan na SI. 1.

[0013] Soli prema pronalasku se uopšteno dobijaju reakcijom jedinjenja formule (I) sa metansultonskom kiselinom u rastvaraču.

[0014] Moguće je proizvoditi soli u skladu sa ovim otkrićem i reakcijom kisele soli jedinjenja formule (I), koja nije so organske sulfonske kiseline, sa izvorom sulfonatnih anjona organske sulfonske kiseline u rastvaraču.

[0015] U ovom drugom slučaju izvor sulfonatnih anjona može biti organska sulfonska kiselina ili so organske sulfonske kiseline.

[0016] Predmet otkrića je, prema tome i metod za đobijanje soli organske sulfonske kiseline i jedinjenja formule (I), koji obuhvata reakciju jedinjenja formule (I) ili soli jedinjenja formule (I). koje nisu kisele soli organske sulfonske kiseline, sa organskom sulfonskom kiselinom ili izvorom organskih sulfonatnih anjona u rastvaraču. [0017|Poželjno je da rastvarao bude odabran na takav način da nudi dobru ravnotežu između rastvorljivosti jedinjenja formule (I) ili soli jedinjenja formule (I), koje nisu soli sulfonske kiseline i organske sulfonske kiseline ili izvora sulfonatnih anjona. Poželjno je da soli prema pronalasku budu što slabije rastvorijive u rastvaraču koji se koristi. Po želji, soli prema pronalasku se mogu. međutim i staložiti dodavanjem suprotnog rastvarača.

[0018JPrimeri rastvarača koji se koriste za proizvodnju soli prema pronalasku uključuju sledeće: naime, alkohole, kao što su metanol. etanol. n-propanol izopropanol i butanoi: etre. kao što su dietil etar. metil-/<?/r-butil etar, 1,2-dimetoksietan, dioksan ili tetrahidrofuran; ugljovodonike. kao što je benzen ili toluen: ili druge rastvarače. kao što je aceton, etil acetat, metil etil keton, metil izobutil keton. acetonilril, heptan, đimetil sulfoksid ili dimelilformamiđ.

[0019]Po želji, za taloženje soli prema pronalasku, dodaje se suprotan rastvarač. Primeri takvih suprotnih rastvarača uključuju sledeće: naime, vodu i alkohole, kao što je metanol, etanol ili propanol.

[0020]Soli koje se ovako dobijaju prema pronalasku se, po želji, mogu dalje obrađivati, npr., rekristalisati ili mikronizovati, da bi se njihove fizičke osobine još više prilagodile primeni.

[0021]Imidazoli supstituisani heterociklilamiđom koji se koriste za dobijanje soli prema pronalasku su poznati i mogu se dobiti, npr., prema metodu koji je opisan u WO 2006/089664.

[0022]Konkretno, proizvodnja imidazola supstituisanih heterociklilamiđom za upotrebu se vrši reagovanjem jedinjenja formule

u kojoj

suR<1>i R<2>kao što su definisani gore, a

R"<1>predstavlja metil ili etil,

u prvom stupnju sa bazom, a u drugom stupnju sa jedinjenjima formule

u kojoj

je R"' kao što je đefmisan gore,

u prisustvu reagenasa za dehidriranje.

[0023)Reakcija se u prvom stupnju izvodi u opštem slučaju u inertnim rastvaračima, poželjno u opsegu temperature od 0°C dok se refluks rastvarača dešava na normalnom pritisku.

[0024J Baze su, na primer. hidroksidi alkalnih metala kao stoje natrij um hidroksid. litijum hidroksid ili kalijum hidroksid ili karbonati alkalnih metala kao što je eezijum karbonat, natrijum karbonat ili kalijum karbonat. U ovom slučaju, poželjan je natrij um hidroksid.

[0025] Inertni rastvarači su, na primer. halogenovani ugljovodonici. kao što je metilen hlorid, trihlorometan. tetrahlorometan. trihloroetan. tetrahloroetan. 1.2-tlihloroetan ih trihloroetilen; etri, kao što je dietil etar. metil-/erobutil etar. 1,2-dimetoksietan. dioksan. tetrahidrofuran. glikol dimetil etar ili dietilen glikol dimelil etar; alkoholi, kao što je metanol. etanol, n-propanol izopropanol. n-butanol ili /trc-butanol; ugljovodonici, kao što je benzen, ksilen. toluen. heksan. cikloheksan ili frakcije sirove nafte; ili drugi rastvarači. kao što je dimetilformamid. dimetilacetamid. dimetil sulfoksid. acetonitril ili piridin ili smese rastvarača sa vodom. Kao rastvarao, poželjna je smesa etanola i vode.

[0026] Reakcija se u drugom stupnju vrši u opštem slučaju u inertnim rastvaračima, opciono. u prisustvu baze. poželjno u opsegu temperature od -70°C do 40°C na normalnom pritisku.

[0027] Kao reagensi za dehidriranje. u vezi sa ovim. pogodni su. na primer. karbodiimidi, kao što je. npr.. A',A'-dietil-. A'. A;'-dipropil-. AOV'-diisopropil-. A<;>,;V'-đicik!oheksil-karbodiimid.A'-(3-dimetilaminoizopropir)-A<r->etilkarbodiimid-hidrohlorid (EDC). A-cikloheksilkarbodiimid-A''-propiloksimelil-polistiren (PS-karbodiimid); ili karbonilna jedinjenja. kao što je karbonil diimidazol; ili 1.2-oksazolium jedinjenja. kao stoje 2-etil-5-lenil-l .2-oksazo!ijum-3-sulfat ili 2-/e/x,-butil-5-metil-izoksazolium-perhlorat; ili acilamino jedinjenja, kao što je 2-etoksi-l-etoksikarbonil-1.2-dihidrokinolin ili anhidrid propanfosfonske kiseline ili izobutil hloroformat ili bis-(2-okso-3-oksazolidinil)fosfori! hlorid ili benzotriazoliloksi-tri(dimetilamino)fosfonijum heksafluorofosfat ili0-(benzotriazol-1 -\\)- N, N, N', N '-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (HBTU), 2-(2-okso-1 -{2H)-piridil)-1,1,3,3-tetrametiluronijum tetrafluoroborat (TPTU) ili0-(7-azabenzotriazol-l -\\)- N. N, N\ N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (HATU) ili 1-hidroksi-benzotriazol (HOBt) iii benzotriazol-l-iloksitris(dimetilammo)fosfonijum heksafluorofosfat (BOP) ili smese ovih poslednjih. sa bazama.

[00281 Baze su. na primer. karbonati alkalnih metala, kao što je. npr.. natrijum karbonat ili kalijum karbonat ili kalijum bikarbonat; ili organske baze. kao što su trialkilamini. npr.. trietilamin, A'-metilmorfolin. A-metilpiperidin. 4-dimetilaminopiridin ili diizopropiletilamin ili DBU. DBN ili piridin; N-metilmorfolin je poželjan.

[0029] Poželjno, kondenzacija anhidridom propanefosfonske kiseline (T3P) se izvodi u prisustvu A'-metilmorfolina (NMK4).

[0030] Inertni rastvarači su. na primer. halogenovani ugljovodonici. kao sto je metilen hlorid, trihlorometan, tetrahlorometan. trihloroetan, tetrahloroetan, 1.2-dihloroetan ili trihloroetilen; etri, kao što je dietil etar. metil-terc-butil etar, 1,2-dimetoksietan. dioksan. tetrahidrofuran. glikol dimetil etar ili dietilen glikol dimelil etar; ugljovodonici. kao što je benzen, ksilen. toluen, heksan, cikloheksan ili frakcije sirove nafte; ili drugi rastvarači, kao što je etil acetat. aceton, dimetilformamid, dimetilacetamid. 2-butanon. dimetil suifoksid, acetonitril ili piridin, u slučaju rastvarača koji se slabo mešaju sa vodom i smese istih sa vodom; poželjan je dimetilformamid.

[0031] Jedinjenja formule (II) su poznata ili se mogu dobiti iz jedinjenja formule ( IV)

u kojoj

su R1 i R4 kao što su definisani gore.

koje u prvom stupnju reaguje sa redukeionim sredstvom, a u drugom stupnju, u prisustvu derivata karbonske kiseline, sa jedinjenjima formule

H2N-R<2>(V)

u kojoj

je R^ kao što je đefinisan gore.

ili u drugom stupnju reaguje sa jedinjenjima formule

u kojoj

je R" kao što je defirusan gore.

[0032] U ovom slučaju, reakcija se odvija u prvom stupnju uopšteno u inertnim rastvaračima, poželjno u opsegu temperature od ()°C dok se refluks rastvarača dešava na normalnom pritisku do 3 bara.

[0033] Redukciona sredstva su. na primer. paladijum na aktivnom uglju i vodonik, mravlja kiselina/trietilamin/ na aktivnom uglju, cink. cink/hlorovodonična kiselina, gvožđe, gvožde/hlorovodonična kiselina, gvožđe(II) sulfat/hlorovodonična kiselina, natrijum sulfid, natrijum disulfid, natrijum ditionit. amonijum polisulfid, natrijum borohidrid/nikl hlorid, kalaj dihlorid, titanijum trihlorid ili Raney nikl i vodeni rastvor hidrazina; nikl i vodeni rastvor hidrazina. paladijum na aktivnom uglju i vodonik ili mravlja kiselina/trietilamin/ paladijum na aktivnom uglju su poželjni.

[0034] Inertni rastvarači su. na primer. etri. kao što je dietil etar, metil-Zf/r-butil etar, 1,2-dimetoksietan, dioksan. tetrahidrofuran. glikol dimetil etar ili dietilen glikol dimetil etar: alkoholi, kao što je metanol. etanol. n-propanol izopropanol, n-butanol ili te/'c-butano!; ugljovodonici, kao što je benzen. ksilen. toluen. heksan, cikloheksan ili frakcije sirove nafte; ili drugi rastvarači. kao što je dimetilformamid. dimetilacetamid, acetonitril ili piridin. u slučaju rastvarača koji se slabo mešaju sa vodom i smese istih sa vodom. Kao rastvarači, poželjni su metanol, etanol izopropanol ili u slučaju Ranev nikla i vodenog rastvora hidrazina. poželjan je tetrahidrofuran.

[0035] U drugom stupnju, u skladu sa prvom varijantom, reakcija se uopšteno odvija u inertnim rastvaračima. poželjno u opsegu temperature od sobne temperature pa do 40°C na normalnom pritisku.

[0036] Derivati karbonske kiseline su. na primer. N.N-karbonildiimidazol. fosgen. difosgen, trifosgen, fenil hloroformijat ili 4-nitrofenilestar hloroformne kiseline; poželjan je N.N-karbonildiimidazol.

[0037] Inertni rastvarači su. na primer. halogenovani ugljovodonici. kao stoje metilen hlorid. trihlorometan. tetrahlorometan. trihloroetan. tetrahloroetan. 1.2-dihIoroetan ili trihloroetilen; etri. kao što je dietil etar, metih/trobutil etar. 1,2-dimeloksietan. dioksan. tetrahidrofuran. glikol dimetil etar ili dietilen glikol dimetil etar; ugljovodonici, kao što je benzen, ksilen. toluen. heksan. cikloheksan ili frakcije sirove nafte; ili drugi rastvarači. kao što je etil acetat, aceton, dimetilformamid. dimetilacetamid. 2-butanon. dimetil sulfoksid. acetonitril ili piridin i u slučaju rastvarača koji se slabo mešaju sa vodom i smese istih sa vodom; poželjan je dimetil sulfoksid.

[0038]U drugom stupnju, prema drugoj varijanti, reakcija se odvija uopšteno u inertnim rastvaračima. opciono u prisustvu baze. poželjno u opsegu temperature od sobne temperature dok se refluks rastvarača dešava na normalnom pritisku.

[0039] Inertni rastvarači su, na primer. halogenovani ugljovodonici, kao što je metilen hlorid, trihlorometan, tetrahlorometan. trihloroetan. tetrahloroetan. 1.2-dihloroetan ili trihloroetilen; etri, kao sto je dietil etar. metil-ferf-butil etar. 1,2-dimetoksietan, dioksan. tetrahidrofuran. glikol dimetil etar ili dietilen glikol dimetil etar; ugljovodonici. kao što je benzen, ksilen. toluen. heksan. cikloheksan ili frakcije sirove nafte: ili drugi rastvarači, kao što je etil acetat. aceton, dimetilformamid. dimetilacetamid. 2-bulanon. dimetil sulfoksid. acetonitril ili piridin; poželjan je tetrahidrofuran ili metilen hlorid.

[0040]Baze su, na primer, karbonati alkalnih metala kao što je cezijum karbonat, natrijum karbonat ili kalijum karbonat ili kalijimWerr-butanolat ili druge baze kao što je natrijum hidrid, DBU, trietilamin ili diizopropiletilamin, poželjno trietilamin.

[0041]Jedinjenja formule (IV) su poznata ili se mogu dobiti iz jedinjenja formule

u kojoj

su R<1>i R<4>kao što su definisani gore,

koja reaguju sa pušljivom azotnom kiselinom, koncentrovanom azotnom kiselinom, smesom kiselina za nitriranje ili drugim odnosima mešanja sumporne i azotne kiseline, opciono u anhidridu sirćetne kiseline kao rastvarača. poželjno u opsegu temperature od sobne temperature pa do 60°C na normalnom pritisku.

[0042] Jedinjenja formula (III). (IV). (V). (VII) su poznata ili se mogu sintetisati iz odgovarajućih reaktanata prema poznatim metodi ma.

[0043]Proizvodnja imidazola supstituisanih heterociklilamiđom koji se koriste za proizvodnju soli prema pronalasku je objašnjena sa više detalja kroz primer u diagramu sinteze niže. U vezi sa ovim, diagram sinteze se definiše čisto kao primer i ni na koji način nije ograničavajući.

Dijagram sinteze:

[0044I

[0045]Soli prema pronalasku ispoljavaju antivirusno dejstvo u odnosu na predstavnike grupe Herpes viridae (virusi herpesa), prenstveno u odnosu na citomegaloviruse (CMV), naročito u odnosu na humane citomegaloviruse (HCMV). Oni su time pogodni za lečenje i/ili sprečavanje oboljenja, primarno infekcija virusima, naročito ovde pomenutim virusima i infektivnih oboljenja nastalih kao rezultat. Ovde. virusna infekcija je definisana i kao infekcija virusom i kao oboljenje izazvano infekcijom virusom.

[0046] Soli prema pronalasku se mogu koristili na osnovu njihovih posebnih osobina za proizvodnju farmaceutskih sredstava koja su pogodna za agents that are suitable for sprečavanje i/ili lečenje oboljenja, naročito virusnih infekcija.

[0047| Kao tipovi indikacija, mogu se pomenuti sledeći:

1) lečenje i sprečavanje HCMV infekcija u pacijentima sa SIDOM (retinitis. pneumonitis, gastrointestinalne infekcije): 2) lečenje i sprečavanje citomegalovirusnih infekcija kod pacijenata sa transplantima kostne srži i organa, koji često razviju životno ugrožava juće verzije HCMV pneumonitis, HCMV eneefalitis, kao i gastrointestine i sistemske HCMV infekcije:

3) lečenje i sprečavanje infekcija kod novorođenčadi i male dece:

4) lečenje akutne HCMV infekcije kod trudnih žena; 5) lečenje HCMV infekcije kod pacijenata sa imunosupresijom. sa kancerom i na terapiji kancera.

[0048] Lečenje HCMV-pozitivnih pacijenata sa kancerom u cilju smanjenja napredovanja tumora posredovanih HCMV-om (cf. J. Cinatl. et al..FEMS Mkrohiology Reviews2004,28,59-77). [0049)Soli prema pronalasku se poželjno koriste za proizvodnju farmaceutskih sredstava koja su pogodna za sprečavanje i/ili lečenje infekcija predstavnikom grupellerpcsviridcif.naročito citomegalovirusom, pogotovo humanim cilomegalovirusom.

[0050] Na osnovu njihovih farmakoloških osobina, soli prema pronalasku se mogu koristiti same i. ako je neophodno, mogu se koristiti i u kombinaciji sa drugim aktivnom sastojcima, naročito antivirusnim aktivnom sastojcima kao što su, na primer. valganciklovir. ganciklovir. valaciklovir. aciklovir. foskarnet, cidofovir i srodni derivati, za lečenje i/ili sprečavanje virusnih infekcija, naročito HCMV infekcija.

[0051] Još jedan predmet ovog otkrića je upotreba soli prema pronalasku u metodu za lečenje i/ili sprečavanje oboljenja, poželjno virusnih infekcija, naročito infekcija humanim citomegalovirusom (HCMV) ili nekim drugim predstavnikom grupeHcrpesvirickie.

[0052| Još jedan predmet ovog otkrića je upotreba soli prema pronalasku za lečenje i/ili sprečavanje oboljenja, naročito gore pomenutih oboljenja.

[0053] Još jedan predmet ovog pronalaska su soli prema pronalasku za primenu u postupku lečenja i/ili sprečavanja oboljenja, naročito gore pomenutih oboljenja.

[0054] Još jedan predmet ovog otkrića je metod za lečenje i/ili sprečavanje obol jenja, naročito gore pomenutih oboljenja, uz upotrebu antivirusno efektivne količine soli prema pronalasku.

[0055] Soli prema pronalasku mogu da imaju sistemski i/ili lokalni efekat. U tu svrhu, one se mogu davati na pogodan način, kao što je sledećim sredstvima, npr., oralno, parenteralno, pulmonalno, nazalno, sublingvalno. lingvalno. bukalno. rektalno. dermalno, transđermalno. konjunktivno, otički ili kao implant ili stent.

[0056] Za ove puteve administracije, soli prema pronalasku se mogu davati u pogodnim obi ic i ma adm i n i strac ij e.

[0057] Za oralno davanje, oblici administracije koji isporučuju soli prema pronalasku na brzo delujući i/ili modifikovan način i koji sadrže jedinjenja prema pronalasku u kristalnom i/ili amorfnom i/ili rastvorenom vidu, kao što su. npr.. tablete (neobložene ili obložene tablete, na primer, sa oblogom koja je otporna na gastrićne sokove ili je sporo rastvarajuća ili nerastvorljiva. koja kontroliše oslobađanje jedinjenja prema pronalasku), tablete ili filmovi/vafle koje se brzo rastvaraju u usnoj duplji, filmovi/1 iofilizati, kapsule (na primer. tvrde ili meke želatinske kapsule), obložene tablete, granulati, peleti. prahovi, emulzije, suspenzije, aerosoli ili rastvori, su pogodni prema stanju u struci.

[0058] Parenteralna administracija se može vršiti zaobišavši korak resorpcije (npr. intravenozno intraarterijalno intrakardijalno intraspinalno ili intralumbalno) ili uključivši resorpciju (npr., intramuskulamo. subkutano intrakutano, perkutano ili intraperitonealno). Za parenteralnu administraciju, npr., preparati za injekciju i infuziju u vidu rastvora, suspenzija, emulzija, liofilizata ili sterilnih prahova su pogodni kao oblici administracije.

[0059] Za ostale metode administracije, pogodni su, npr.. oblici leka za inhalaciju (npr., prahovi za inhalaciju, nebulizeri), kapi za nos. rastvori za nos, sprejevi za nos: tablete koje se daju lingvalno, sub lingvalno ili bukalno; filmovi/vafle ili kapsule, supozitorije. preparati za uši ili oči. vaginalne kapsule, vodene suspenzije (losioni. smese za mućkanje), lipofilne suspenzije, pomade. kremovi. transdermalni terapijski sistemi, mleko. paste. pene. raspršeni prahovi implanti ili stentovi.

[0060] Soli prema pronalasku se mogu pretvoriti u navedene forme administracije. Ovo se može uraditi na način koji je poznat u struci, mešanjem sa inertnim, netoksičnim, farmaceutski pogodnim adjuvantima. Ovi ađjuvanti uključuju i.a., nosače (na primer. mikrokristalnu celulozu, laktozu, manitoi). rastvarače (npr.. tečni polietilen glikoli), emulzifikatori i agensi za dispergovanje ili agensi za kvašenje (na primer. natrijum dodecil sulfat, polioksisorbitanoleat), veziva (na primer. polivinilpirolidon), sintetičke i prirodne polimere (na primer, albumin). stabilizatore (npr.. antioksidanse kao što je. na primer. askorbinska kiselina), boje (npr.. neorganski pigmenti, kao što su. na primer. oksidi gvozda) i korektive ukusa i/ili mirisa.

[00611U okviru ovog pronalaska, poželjan je farmaceutski agens koji ima 5 do 12.5 mg/ml soli prema pronalasku. 50 do 150 mg/ml bidroksipropil-P-ciklodekstrina, 0.5 do 2.0 mg/m] natrijum acetata, kao i vodu i. po želji, druge farmaceutski neškodljive adjuvante.

| 0062| Ostali predmeti ovog pronalaska su farmaceutski agensi koji sadrže bar jednu so prema pronalasku, obično zajedno sa jednim ili više inertnih, netoksičnih, farmaceutski pogodnih adjuvanata. kao i njihova upotreba u gore pomenute svrhe.

[0063] Uopšteno, pokazalo se korisnim, u slučaju intravenozne administracije, da se daju količine, u odnosu na čist aktivan sastojak, od približno 0.001 do 10 mg/kg, poželjno približno 0,01 do 5 mg/kg telesne težine, da bi se postigli efektivni rezultati. U slučaju oralne administracije, mera je obično približno 0,01 do 25 mg/kg. poželjno 0.1 do 10 mg/kg telesne težine.

[0064] Ipak, opciono može biti neophodno da se odstupi od gore pomenutih količina, specifično zasnovanih na telesnoj težini, metodu davanja individualnom ponašanju u odnosu na aktivan sastojak, tipu preparata i vremena ili intervala u kojima se vrši davanje. Dakle, u nekim slučajevima, može biti dovoljno da se prođe sa manje od gore pomenute minimalne količine, dok u drugim slučajevima mora da se prede gore pomenuta gornja granica. U slučaju administracije većih količina, može biti poželjno da se one rasporede u nekoliko pojedinačnih davanja tokom dana.

[0065| Pronazak će u daljem tekstu biti objašnjen sa više detalja kroz primere izvođenja, kao i pozivanjem na prateći crtež. Ovde:

SI. 1 pokazuje XRD difraktogram praha soli iz Primera 1.

[0066]Procenti u sledećim testovima i primerimasu, ako nije naznačeno drukčije,

težinski procenti, delovi su težinski delovi. Informacije o odnosima rastvarača. odnosima razblaženja i koncentracijama rastvora tečnost/ tečnost se u svim slučajevima odnose na zapreminu.

Primeri

{0067] Skraćenice koje sukorišćene:

Ex. Primer

TI C hromatografija tankog sloja

DMF N, ,'V-dimetilfbrmamid

DMSO dimetil sulfoksid

d. Th. teorijski

EI ionizacija elektronskim bombardovanjem (u MS)

ESI jonizacija elektrosprcjem (u MS)

h sat

HPLC tečna hromatografija visokih performansi na visokom pritisku

LC-MS tečna hromatografija-masena spektroskopija

MS masena spektroskopija

NMR spektroskopija nuklearnom rezonancom

RP-HPLC HPLC reverzne faze

RT sobna temperatura

R, retenciono vreme (u HPLC)

TBTU(>-(benzotriazol-1 -i 1 )- N. N. N'.,V -tetrameti luroni jumtetrafluoroborat

THF tetrahidrofuran

Metodi HPLC- i LC- MS:

10068] Metod 1 ( LC- MS) : Instrument: Micromass Cmattro LCZ sa HPLC Agilent Series 1100; kolona: Phenomenex Synergi 2p Hydro-RP Mercury 20 mm x 4 mm; eluent A: 1 1 vode + 0,5 ml 50% mravlje kiseline, eluent B: 1 1 acetonitrila + 0.5 ml 50% mravlje kiseline; gradijent: 0.0 min 90% A -> 2,5 min 30% A -» 3,0 min 5% A -> 4,5 min 5% A; protok: 0.0 min 1 ml/min, 2,5 min/3,0 min/4,5 min 2 ml/min; peć: 50°C; UV detekcija: 208-400 nm.

[0069] Metod 2 ( LC- MS) : Instrument: Micromass Platform LCZ vvith HPLC Agilent Series 1100; kolona: Phenomenex Svnergi 2p. FIydro-RP Mercurv 20 mm x 4 mm; eluent A: 1 1 vode + 0,5 ml of 50% mravlje kiseline, eluent B: 1 1 acetonitrila + 0.5 ml 50% mravlje kiseline; gradijent: 0.0 min 90% A -> 2.5 min 30% A- >3.0 min 5% A -+ 4.5 min 5% A: protok: 0.0 min 1 ml/min. 2,5 min/3,0 min/4.5 min 2 ml/min; peć: 50°C: UV detekcija: 210 nm.

[0070] Metod 3 ( LC- MS) : Uređaj tipa MS: Micromass ZQ: Device tvpe HPLC: Vodaš Albance 2795; kolona: Phenomenex Svnergi 2p. Hydro-RP Mercury 20 mm x 4 mm; eluent A: 1 1 vode + 0,5 mi 50% mravlje kiseline, eluent B: 1 1 acetonitrila + 0,5 ml 50% mravlje kiseline; gradijent: 0.0 min 90% A -> 2.5 min 30% A -> 3.0 min 5% A -> 4.5 min 5% A: protok: 0.0 min 1 ml/min, 2,5 min/3.0 min/4.5 min 2 ml/min: peć: 50°C: UV detekcija: 210 nm.

[0071] Metod 4 ( LC- MS) : Uređaj tipa MS: Micromass ZO: uređaj tipa HPLC: HP 1100 Series; UV DAD; kolona: Phenomenex Synergi 2u Hydro-RP Mercury 20 mm x 4 mm; Eluent A: 1 1 vode + 0,5 ml 50% mravlje kiseline, eluent B: 1 I acetonitrila + 0.5 ml 50% mravlje kiseline; gradijent: 0.0 min 90% A -> 2,5 min 30% Ah> 3.0 min 5% A —? 4,5 min 5% A; protok: 0,0 min 1 ml/min. 2.5 min/3.0 min/4.5 min 2 ml/min; peć: 50°C; UV detekcija: 210 nm.

[0072] Metod 5 ( Analitička HPLC) : Kolona: Kromasil 100 RP-18. 60 mm x 2,1 mm, 3.5Lim; eluent A: voda + 0,5% perhloma kiselina (70%), eluent B: acetonitril; gradijent: 0 min 2% B. 0.5 min 2% B. 4.5 min 90% B. 9 min 90% B. 9.2 min 2% B. 10 min 2% B: protok: 0.75 ml/min: temperatura kolone: 30°C: detekcija: UV 210 nm.

Početna Jedinjenja

Primer 1A

l-(ciklopropilmetil)-4-[( {[4-(trifluorometoksi)fenil]aminoJkarbonil)amino]-l/-/-imidazol-2-karboksilna kiselina

[0073]

Stupanj 1

Etil estar l-(ciklopropilmetil)-4-nitro-l//-imidazol-2-karboksilne kiseline

[0074]

[0075J 15 g etil estra (81 mmoi) 4-nitro-l//-imidazol-2- karboksilne kiseline je mešano pod argonom zajedno sa 13.13 g (97.2 mmol) ciklopropil metil bromida i 22.4 g (162 mmol) kalijum karbonata u 165 ml DMF 1 sat na 80°C. Posle hlađenja, reakciona smesa je jednom razblažena vodom i tri puta zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušena preko magnezij um sulfata i koncentrovana uparavanjem na vakuumu. Kristalni ostatak je odmah iskorišćen za sledeću reakciju.

Prinos: 17,59 g (70% teorijskog)

LC-MS (Metod 1): R, = 2.02 min.

MS (ESf): m/z = 240 [M+l-lf

'H-NMR (300 MHz, DMSO-df,): 5 = 8.2 (s, I H), 4.4 (q, 2H), 4,3 (d, 2H), 1,4 (m, 411). 0,55 (q, 211), 0,45 (q, 211) ppm.

Stupanj 2

Elil estar 4-amino-l-(ciklopropi)metil)-]//-iniiclazol-2-kaiboksilne kiseline

[0076]

[0077] 3.89 g (16.26 mmol) etil estra 1-(ciklopropilmetil}-4-nitro-l/y-imidazol-2-karboksilne kiseline je rastvoren u 50 ml THF i mešan sa punim vrhom špatule Raney nikla. Reakciona smesa je hidrogenovana vodonikom u aparatu za hidrogenaciju na sobnoj temperaturi. Katalizator jc odfdtriran i filtra! je koncentrovan uparavanjem na vakuumu. Ostatak uparavanja je odmah iskorišćen za sledeću reakciju.

Prinos: 3,46 g (100% teorijskog)

LC-MS (Metod 2): R, = 1,21 min.

MS (ESf): m/z = 210 [M+H]<+>

'H-NMR (300 MHz, DMSO-d6): 8 = 6,55 (s, IH), 4,55 (s, 2H), 4,2 (q. 2H), 4,1 (d, 2H), 1,25 (tr. 3H). 1.2 (m. IH). 0.5 (q. 2H), 0.3 (q. 2H) ppm.

Stupanj3

Etil estar4-[( {[4-(trifluorometoksi )fenil]amino j karbonil)amino ]-1 -(ciklopropi imetil)-1 H-imiclazol-2-karboksilne kiseline

[0078]

[0079] 7,49g (35.8 mmol) etil estra 4-amino-l-(ciklopropilmetil)-l//-imidazol-2-karboksilne kiseline je pomešan u 18 ml THF pod argonom sa 6 g (35,8 mmol) 4-(triiluorometoksi)fenilisocijanata i mešan 4 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smesa is koncentrovana uparavanjem na vakuumu i proizvod koji je iskristalisan u ovom slučaju je mešan u 40 ml etil acetata i usisan.

Prinos: 11,1 g (82% teorijskog)

LC-MS (Metod 1): R, - 2,66 min.

MS(ESf): m/z=376 [M+! lf

'H-NMR (300 MHz. DMSO-dh): 5 = 9.45 (s. IH). 8.0 (d. IH). 7.35 (s. IH). 7.3 (d.

IH). 7.2 (dd. IH). 4.3 (q. 2H). 4.25 (d. 211). 2.25 (s. 3H). 1.3 (tr. 3H), 1.25 (m. IH). 0.55 (q. 2H). 0.35 (q, 2H)ppm.

Stupanj 4

4-[( {[4-(trifluorometoksi)fenil]amino] karboni! )aminoj-1 -(ciklopropilmetil)-l/-/-imidazol-2-karboksilna kiselina

roosoi

[0081]10,6 g (28,1 mmol) etil estra 4-[({[4-(trifluorometoksi)fenil]amino}-karbonil)amino]-l-(ciklopropilmetil)-l//-imidazol-2-karboksilne kiseline je suspendovano u 158 ml etanola. Dok je hlađen ledom, dodato je 16,4 ml vode i 6 ml (112 mmol) 50% vodenog rastvora natrijum hidroksida. Reakciona smesa je mešana 1 sat na sobnoj temperaturi, a zatim koncentrovana uparavanjem na vakuumu. Ostatak je prebačen u 100 ml izopropanola i mešan sa 100 ml IN hlorovodonične kiseline dok je hlađen ledom. Kristali su usisani i osušeni na vakuumu na 40°C.

Prinos: 9.85 g (100% teorijskog)

LC-MS (Metod 3): R, = 1.74 min.

MS (ESI<+>): m/z = 349 |MH|'

'H-NMR (400 MHz. DMSO-d6): 5 - 9.4 (s. 1H), 8.0 (cl. IH), 7.3 (s, IH). 7.25 (d, IH), 7,2 (dd, IH),4,25 (d, 2H). 2.25 (s, 3H). 1.25 (m. IH), 0,55 (q, 2H). 0,35 (q, 2H) ppm.

Primer 2A

1 -butil-4-[( {[4-(trilfuorometoksi)fenilJamiiio j karbonil)amino]-1 //-imidazol-2-karboksilna kiselina

[0082]

[0083]Dobijanje je urađeno analogno sa Primerom 1 A.

Prinos: 2.05 g (96% teorijskog)

LC-MS (Metod 3): R, = i.96 min.

MS (ESI'"): m/z = 387 [M+H]<+>

1 H-NMR (300 MHz. DMSO-dfi): 5 = 9.0 (s. IH). 8.9 (s. 1H). 7.55 (d, 2H), 7.3 (s. 1H). 7.25 (d. IH). 4.35 (tr, 2H). 1.7 (kvintet. 211). 1.25 (sekstet. 2H). 0.9 (tr. 3H) ppm.

Primer3A

Etil estar l-metil-4-[({[4-(trii1uorometoksi)fenil]amino}karbonil)amino]-l/-/-imidazol-2-karboksilne kiseline

[0084]

[0085]1,22 g (3,61 mmol) etil estra 4-amino-l-metil-1 /■/-imidazo!-2-karboksilne kiseline (sinteza analogna onoj u Primeru 1A, Stupanj 3 ili drukčija, prema Tetrahedron Lett. 2003,44,1607 i literaturi citiranoj tamo) je mešano u 50 ml THF u argonu sa 1,46 g (7.21 mmol) 4-(trifluorometoksi)fenilisocijanata i mešano preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smesa je profil tri rana, filtrat je koncentrovan uparavanjem na vakuumu i prečišćen hromatografijom.

Prinos: 860 mg (62% teorijskog)

LC-MS (Metod 4): R, = 2,41 min.

MS (ESI+): m/z = 373 [M+H] +

'H-NMR (300 MHz. DMSO-d6): ft = 8.98 (bs, 2H), 7.55 (m, 2H). 7.36 (s. IH), 7.29 (m, 2H). 4.28 (q, 2H), 3,91 (s. 3H), 1,30 (t. 3H).

Primer 4A

1 -metil-4-[( {|4-{trifluorometoksi)fenil]amino) karbonil)amino|-1 //-imiđazol-2-karboksilna kiselina

[0086|

[0087] 835 mg (2.13 mmol) etil estra l-metil-4-[({[4-(trinuorometoksi)fenilj-amino}karbonil)amino]-l//-imidazol-2-karboksilne kiseline (Primer 3A) je suspendovano u 5 ml etanola i 12 ml tetrahidroturana. Dok je hlađen ledom, dodato je 2 ml (25 mmol) 50% vođenog rastvora natrijum hiclroksida. Reakciona smesa je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, a zatim je napravljena kiselom pomoću 1N hlorovodonične kiseline dok je hlađena ledom. Rastvor je ekstrahovan dihlorometanom. Organska faza je koncentrovana uparavanjem na vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC.

Prinos: 346 mg (44% teorijskog)

LC-MS (Metod 3): R, = 1.62 min.

MS(ESf<+>): m/z = 345 [M+Hp

1 H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 5 = 9.33 (bs, IH), 8,98 (bs, IH), 7.55 (m. 2H). 7,30 (s. IH), 7.28 (m. 2H). 3.90 (s. 3H). Primer 5A l-etil-4-[({[4-(trifluorometoksi)fenil]amino)karbonil)aminoj-l //-imidazol-2-karboksilic kiselina10088]

[00891 Dobijanje je urađeno analogno sa Primerom 4A.

Prinos: 425 mg (91% teorijskog)

LC-MS (Metod 4): R, = 1.94 min.

MS (ESP): m/z = 359 [M+Hp

'H-NMR (300 MHz, DMSO-df,): 8 = 10.3 (bs. 111), 7.67 (m. 2H). 7.24 (s. IH). 7.20 (m. 2H). 4.45 (q. 2H), 1,33 (l, 3H).

Primer6A

4-[({|4-(difluorometoksi)feni^^ kiselina

[0090|

[0091]Dobi janje je urađeno analogno sa Primerom 4 A.

Prinos: 964 mg (81% teorijskog)

HPLC (Metod 5): R, = 3,57 min.

MS (ESI<+>): m/z = 327 [M+H]'

1 H-NMR (400 MHz, CDCh): 8 = 8.9 (s, IH). 8,8 (s. IH). 7,5 (d, 2H). 7,3 (s, 2H), 7,1 (t, IH), 7,09 (d,2H), 3,9 (s. 3H).

Primer7 A

l-(5-metilpiridin-2-il)piperazin

[0092|

Stupanj 1l-(/t'/r-butiloksikarbonil)-4-(5-metilpiridin-2-il)piperazin[0093|

[0094]U atmosferi argona, 2,50 g (19,6 mmol) 2-metil-5-hloropiridina i 4,38 g (23.5 mmol) N-(/frc-butiloksikarbonil)-piperazina je rastvoreno u 50 ml apsolutnog toluena. Zatim je dodato 2.26 g (23.5 mmol) natrijum-/wr-butilata. 0.37 g (0.59 mmol) BINAP i 0.36 g (0.39 mmol) tris(dibenzilidenaceton)-dipaIadijimia i zagrevano je 12 sati do 70°C. Posle hlađenja, reakciona smesa je pomešana sa dietil etrom. oprana tri puta zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušena na natrijum sulfatu i rastvarač je uklonjen na vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (cikloheksan/eti i acetat 9:1).

[0095] Kao alternativa, može se izvesti reakcija kuplovanja uz upotrebu paladijum-(Il)-aeetata kao katalizatora.

Prinos: 5,27 g (97% teorijskog)

LC-MS (Metod 3): R, = 1.26 min.

MS(ESP): m/z = 278 [M+H]<+>

'll-NMR (300 MI Iz, ('l)CL): 5 = 8.02 (d. IH). 7.34 (dd. IH), 6,59 <d. IH). 3.55 (m. 4H). 3.45 (m. 4H). 2.21 (s. 311). 1.49 (s. 9H).

Stupanj 2

l-(5-metilpiriđin-2-il)piperazin

[0096|

[0097|3,47 g (12,5 mmol) l-(/f/T-butiloksikarbonil)-4-(5-metilpiridin-2-il)piperazina je rastvoreno u 10 ml dioksana i mešano sa 31 ml (125 mmol) vodonik hlorida u dioksanu (4 mol). Ostavljeno je da se mesa 2 sata na sobnoj temperaturi. Zatim je koncentrovano uparavanjem, ostatak je zaalkaljen 1 M rastvorom natrijum hidroksida i ekstrahovan nekoliko puta dihlorometanom. Kombinovane organske faze su osušene na natrijum sulfatu, koncentrovane uparavanjem i osušene na vakuumu.

[0098] Kao alternativa, jedmjenje iz Primera 7A se može izolovati u vidu hidrohloridne soli.

Prinos: 2.18 g (98%, teorijskog)

LC-MS (Metod 4): R, = 0.38 min.

MS(ESP):m/z= 177 [M+Hf

'H-NMR (300 MHz. CDCh): 5 = 8.02 (đ. IH). 7.32 (dd. IH). 6.59 (d. III). 3,45 (m. 4H), 3.00 (m, 4H). 2.20 (s. 311).

Primer8A

N-[ l-metil-2-[(4-piridin-2-il-piperazin-l-il)karbonil]-l /7-imidazol-4-il]-N'-[4-(trifluorometoksi)feniI]urea

[0099]

[0100]1,50 g (4.36 mmol) jedinjenja iz Primera 4A je rastvoreno u 30 ml DMF i pomešano sa 1.82 g (5.66 mmol) 0-(benzotriazol-l-il)-N.N.N".N'-tetrametiluronijum tetrafluoroborata (TBTU) i 266 mg (2.18 mmol) 4-dimetilaminopiridina. Posle dodavanja 925 mg (5.66 mmol) l-(piridin-2-il)-piperazina. ostavljeno je da se meša 4 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smesa je prečišćena pomoću RP-HPLC.

Prinos: 1,79 g (83% teorijskog)

LC-MS (Metod 1): R, = 1.83 min.

MS (ESI<+>): m/z = 490 [M+H]<+>

1 H-NMR (400 MHz, DMSO-d6):6 =8.89 (bs. 2H). 8.12 (d. IH). 7.55 (m, 3H). 7.29 (m. 2H). 7,20 (s, IH). 6.88 (d, 1 H). 6.68 (dd. IH), 4.02 (bs. 211), 3.77 (s. 3H). 3.71 (bs. 2H). 3.58 (bs. 4H).Primer9A N-( 1-metil-2-{ [4-(5-metilpiridin-2-il jpiperazin-1-ii jkarbonil}-1//-imidazol-4-il )-N'-[4-(trifluorometoksi)tenil]urea[01011

[0102]5.6 g (26.14 mmol) jedinjenja iz Primera 7A i 13.22 g (130.7 mmol) N-metilmorfolina je dodato u rastvor 9.0 g (26.14 mmol) jedinjenja iz Primera 4A u 110 ml etil acetata i reakciona smesa je ohlađena do 0°C. 16.63 g (52.26 mmol) anhiđrida propanfosfonske kiseline (T3P) je dodavano u reakcioni rastvor tokom 90 minuta i dobijena suspenzija je mešana još 10 minuta na ovoj temperaturi. Reakciona smesa je zatim zagrevana tokom 60 minuta do 20°C i mešana preko noći na ovoj temperaturi. Neizreagovan T3P je ugašen dodavanjem 45 mi vode i reakciona smesa je mešana još 10 minuta. Zatim su faze razdvojene i organska faza je oprana nekoliko puta vodom (3 x 45 ml), koja je podešena na pH 5. Kombinovane vodene faze su oprane još jedanput etil acetatom i kombinovane organske faze su oprane dvaput 45 ml vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. osušene na natrijum sulfatu i koncentrovane uparavanjem. Sirov proizvod koji je dobijen je rekristalisan iz etanola. posle čega je dobijen krajnji proizvod u vidu bledožute čvrste supstance.

Prinos: 8.42 g {64% teorijskog)

LC-MS (Metod 4): R, = 2.01 min.

MS(ESI<+>): m/z = 504 [M+H]'

'H-NMR (300 MHz. DMS0-d6): 6 = 8.92 (bs. 211). 7.99 (d. IH). 7.54 (m. 2H). 7.42 (dd. IH). 7,28 (m, 2H), 7,20 (s. 1H). 6.80 (d. 1II). 4.00 (bs. 2H). 3.77 (s. 3H). 3.72 (bs. 2H).3,51 (bs.4H), 2.16 (s.3H).

Primer10A

N-(2-{[4-(5-hloropiridin-2-ii)piperaziivl -iljkarbonil}-1-etil-1//-imidazol-4-il)-N'-[4-(trifluorometoksi)fenil]urea

[0103]

[0104]Dobijanje je urađeno analogno sa Primerom 9A iz Primera 5A.

Prinos: 55 mg (68% teorijskog)

LC-MS (Metod 4): Rt= 2.76 min.

MS (ESI+): m/z = 538 [M+H'f

'H-NMR (300 MHz. DMSO-dft): 8 = 8.97 (bs. III). 8.92 (bs. 111). 8,14 (d, IH). 7.65 (dd, IH). 7,54 (m, 2H), 7.28 (m, 2H). 7.24 (s. IH), 6.92 (d. IH). 4.16 (q. 211). 3.97 (bs. 2H), 3.72 (bs. 2H), 3.59 (bs. 4H). 1.32 (t. 3H).

Primer 11A

N-(2-([4-(4-metoksifenil)piperazin-l-ir]karbonil!-l-metil-l//-imidazol-4-il)-N'-[4-(trifluorometoksi)fenil]urea

[0105]

[0106JPobijanje je urađeno analogno sa Primerom 9A iz Primera 4 A.

Prinos: 35 mg (58% teorijskog)

LC-MS (Metod 3): R, - 2.24 min.

MS(ESf):m/z = 519[M+H]+

'H-NMR (400 MHz, DMSO-dfi): 8 = 8.89 (bs. 2H), 7,53 (m. 211). 7.28 (m, 2H). 7.19 (s. IH), 6.92 (m. 2H), 6,84 (m, 211). 4.05 (bs. 211). 3.75 (m. 5H). 3.69 (s. 311). 3.08 (bs. 411).

Primer 12A

N-[4-(difluorometoksi)fenil]-N'-(l-nietil-2-{[4-(5-nietilpiridin-2-il)piperazin-l-il]-karbonil}-1 //-imidazol-4-il)urea

[0107]

[0108|Dobijanje je urađeno analogno sa Primerom 9A iz Primera 6A.

Prinos: 17 mg (29% teorijskog)

LC-MS (Metod 4): R, = 1.70 min.

MS (ESP): m/z = 486 [M+H]+

'H-NMR (400 MHz, DMSO-dfl): 5 = 8,84 (bs. IH). 8,77 (bs. III). 7.98 (d, IH), 7.47 (m, 2H). 7,42 (dd, IH). 7,18 (s, IH). 7.11 (t. IH). 7.10 (m. 2H). 6,80 (d. III). 4.01 (bs. 2H), 3,77 (s, 3H). 3.71 (bs. 211). 3.50 (bs. 4H). 2.16 (s. 3H).

[0109]Primeri iz Tabele 1 su urađeni analogno sa Primerom 8A.

Oblici

Primer 1

N-( 1 -metil-2- {[4-(5-metilpiridin-2-il)pipcrazin-1 -il |-karbonil j -1 //-imidazol-4-il)-N'-|4-trifluorometoksifeniljurea dimesilat

[0110]

[0111]Sve operacije su izvedene u atmosferi azota. U reakcionom sudu, 3.202 g jedinjenja iz Primera 9A (6,36 mol, 1 ekvivalent) je pomešano sa smesom koja se sastoji od 15 1 THF i 1 1 vode. Dobijena suspenzija je polako zagrevana do 60°C. a zatim mešana 30 minuta na ovoj temperaturi. 1.252 g metansulfonske kiseline (13.03 mol. 2.05 eq.) je dodavano tokom 30 min u žućkast rastvor koji se formirao i koji je zatim inokulisan N-( 1 -metil-2- j [4-(5-metil-piridin-2-il)piperazin-l-il|-karbonilJ-l //-imidazo!-4-il)-N'-[4-lriiluorometoksifeniljurea dimesilalom. Još 30 1 THF je dodavano tokom 2 sata u suspenziju koja se napravila iz kristalnog N-( 1-metil-2-[[4-(5-nietilpiridin-2-il)piperazin-l-i!]-karbonilj-l//-imidazol-4-il)-N"-[4-trifluorometoksifenil]urea dimesilata. Suspenzija je polako ohlađena do 20°C. a zatim mešana još 12 sati na ovoj temperaturi. Kristali koji su formirani su sakupljeni filtracijom na vakuumu i reaktor je zaliven THF-om. a zatim n-heptanom. gde su ove organske faze zatim korišćene za pranje kristala. Konačno, kristali su osušeni na filtru na vakuumu i pod strujom azota. Dobijeno je 4,262 g (prinos: 96.4%, čistoća > 99%) željene dimesilatne soli. 1 H-NMR (400 MHz, DMSO-d6): 5 = 9.07 (s, IH). 8.98 (s. IH). 7.99 (s. IH). 7.92 (d. IH). 7,56 (d, 2H), 7,41 (d. IH). 7.33-7.24 (m. 3H). 4.18 (s. br.. 2H). 3.92-3.69 (m. 911). 2.43-2.39 (s. 6H). 2.25 (s. 3H).

[0112]Rendgenski difraktogram. pokazan na SI. 1. je snimljen pomoću Rigaku MiniFlex XRD spektrometra za prahove.

[0113|Jedinjenja iz Primera 8A. kao i Primera 10A do I5A se mogu analogno pretvoriti u dimesilatne soli.

Studije rastvorljivosti

[0114]Po 20 mg jedinjenja iz Primera 1. kao i citratne. maleatne. sulfatne i tartaratne soli jedinjenja iz Primera 9A. zbog poredenja, kao i hloridne soli jedinjenja iz Primera 9A, koje su dobijene pomoću 1, 2 i 4 ekvivalenta hlorovodonične kiseline, kao i slobodne baze. je odmereno u HPLC čaše, koje su snabdevene magnetnom mešalicom. U svaku je dodato po 1 ml H20 i HPLC čaše su zaptivene. Suspenzije koje su dobijene su mešane preko noći na 25°C. Da bi se procenila količina rastvorene supstance. suspenzije su profiltrirane mikrofilterskom pipetom i dobijeni filtrati su razblaženi 1:4 i analizirani pomoću HPLC. HPLC analiza je urađena na Dionex Luna RP18 (I00A) koloni sledećih dimenzija: 5 Lim 50 x 4.6 mm uz upotrebu izokratske smese acetonitrila i ILO + 0.1% TFA u odnosu 3:7.

[0115]Kao rezultat merenja rastvorljivosti. određene su vrednosti predstavljene u Tabeli 2 niže. |()116|Ove vrcdnosti jasno pokazuju superiornu rastvorljivost soli iz Primera 1 u vodenom medijumu u odnosu na druge soli jedinjenja iz Primera ()A.

Rastvorljivost u simuliranim uslovima stomaka čoveka

[0117JDa bi se odredila rastvorljivost u simuliranim uslovima stomaka čoveka. suspenzije soli iz Primera 1. kao i citratnih i tartratnih soli iz Primera 9A i odgovarajuće slobodne baze u vodenom rastvoru natrijum hlorida (0.2 težinskih %). koja je podešena na pH 1.2 hlorovodoničnom kiselinom, su mešane 5 sati. Uzorci su zatim tretirani kao što je opisano gore i količina slobodne baze u rastvoru je određena pomoću HPLC. Odgovarajuće vrednosti rastvorljivosti u simuliranim uslovima stomaka čoveka su prikazane u Tabeli 3 niže.

[0118]Ova tabela jasno pokazuje znatno bolju rastvorljivost soli prema pronalasku u simuliranim uslovima stomaka čoveka. U vezi sa ovim. treba pomenuti da se. kad se rastvor ostavi da stoji u dužim periodima, može videti novo pojavljivanje suspenzije. Očekuje se da ona potiče od formiranja slabo rastvorljivih hloridnih soli iz Primera 9A. Ovo uočeno formiranje nerastvorljivih hloridnih soli nije uzeto za ozbiljno, međutim, one - prvenstveno kad se koriste u skladu sa Primerom 1 - imaju odloženo pojavljivanje, prema tome. od početka je bio prisutan metastabilan superzasićen rastvor. Ovo je još jedna indikacija prednosti koja se može postići upotrebom soli prema pronalasku za izradu lekova.

Higroskopnost

[01191 Skladištenjem soli iz Primera 1 u čistom vidu u približno 46% relativnoj atmosferskoj vlažnosti i na 24°C. merena je higroskopnost soli prema pronalasku. U ovom slučaju, posle vremena skladištenja od približno 2 dana. so iz Primera 1 je pokazala povećanje težine od manje od 0.11%, što predstavlja higroskopnost koja je prihvatljiva za upotrebu u lekovima.

B. Procena fiziološke efektivnosti

[0120]hi vi/ rodejstvo jedinjenja prema pronalasku na replikaciju HCMV (humani citomegalovirus) se može pokazati u antivirusnom testu niže:

Test smanjenja fluorescencije HCMV

[0121] Testirana jedinjenja su korišćena kao 50 millimolarni (mM) rastvori u dimetil sulfoksidu (DMSO). Kao referentna jedinjenja. npr.. Ganciclovir", Foscarnet". Cidofovir" ili si., mogu se koristiti jedinjenja iz Primera 9A. Jedan dan pre početka testa. 1.5 x 10J fibroblasta iz humanog prepucijuma (NHDF ćelijeVležište je zasejano u 200 p! medij uma za ćelijske kulture u ležištima B2-GI1 ploča sa 96 ležišta (crna. sa poluprovidnim dnom). Ležišta na ivičnom položaju svake ploče sa 96 ležišta su napunjena samo sa 200 u! medijuma da bi se izbegli efekti ivice. Na dan testa, medijum za ćelijske kulture je isisan sa ležišta B2 - Gl 1 svake ploče sa 96 ležišta i zamenjen sa 100 tđ suspenzije virusa (mnogostrukost infekcije (MOI): OJ - 0,2). Virus koji je korišćen je rekombinantan HCMV. koji ima integrisanu kasetu za ekspresiju zelenog fluorescentnog proteina (GFP) u genomu virusa (HCMV AD 169 RV-HG. E. M. Borst. K. \Va<g>ner, A. Binz^B. Sodeik i M. Messerle.2008../. Virol.82: 2065-2078). Posle inkubacionog vremena od 2 sata na 37°C i 5% C02. virusni inokulat je isisan i sva ležišta osim ležišta u koloni 3 su napunjena sa 200 pl medij uma za ćelijske kulture. Kolona 2 nije dalje tretirana i služila je kao virusna kontrola. Ležišta u koloni 3 su u svakom slučaju duplog određivanja napunjena sa po 300 pl testirane supstance (razblažene u medijumu za ćelijske kulture). Koncentracija odgovarajuće antivirusne supstance u koloni 3 je~27x koncentracija EC50vrednosti koja je očekivana u svakom slučaju. Testirana supstanca u koloni 3 je razblažena u 8 koraka 1:3 preko ploče sa 96 ležišta tako što je po 100 pl iz svake kolone prebačeno u desnu kolonu i tamo pomcšano sa postojećih 200 u.1 medijuma za ćelijske kulture. Na ovaj način, tri antivirusne supstance su testirane u duplom određivanju. Ploče su inkubirane 7 dana na 37°C75% C02. Zatim su sva ležišta ploče oprana 3x PBS-om (slani rastvor puferisan fosfatom) i napunjena sa po 50Ltl PBS. Zatim je određivan intenzitet GFP svakog ležišta ploče sa 96 ležišta pomoću uređaja za čitanje fluorescencije (FluoBox: Baver Teehnologv Services GmbH; postavka filtra: GFP. Lx 480 nm. Em 520 nm). EC?() anti-HCMV supstance se može odrediti iz ovako dobijenih vrednosti merenja:

[0122]EC50(GFP-RA) = koncentracija supstance u uM koja smanjuje GFP fluorescenciju u inficiranim ćelijama za 50% u poređenju sa nctretiranim virusnim kontrolama.

[0123)Reprezentativniin vitroaktivni podaci jedinjenja prema pronalasku su dati reproduced in Tabeli 4:

Oblici farmaceutskihsastava

[0124]Jedinjenja prema pronalasku se mogu pretvoriliufarmaceutske preparate na sledeći način:

Tableta:

Sastav:

[0125]100 mg jedinjenja iz Primera 1. 50 mg laktoze (monohidrata), 50 mg kukruznog škroba (nativnog), 10 mg polivinilpirolidona (PV<p>25) (BASF Companv, Ludvvigshafen. Germany) i 2 mg magnezijum stearata.

[0126]Težina tablete 212 mg. Prečnik 8 mm. poluprečnik krivine 12 mm.

Proizvodnja:

[0127J Smesa aktivnog sastojka, laktoze i škroba je granulisana 5% rastvorom (m/m) PVP u vodi. Posle sušenja, granulat je mešan sa magnezij um stearatom 5 minuta. Ova smesa je presovana običnom presom za tablete (format tablete videti gore). Upotrebljena je sila presovanja od 15 kN. stoje data vrednost u uputstvu za presovanje.

Suspenzija koja se može davati oralno:

Sastav:

[0128j 1.000 mg jedinjenja iz Primera 1. 1.000 mg etanola (96%). 400 mg Rhodigel-a (ksantan guma od FMC Companv. Pennsvlvania. USA) i 99 g vode.

[0129] 10 ml oralne suspenzije odgovara pojedinačno dozi od 100 mg jedinjenja prema pronalasku.

Proizvodnja:

[0130] Rhodigel je suspendovan u elanolu i aktivan sastojak je dodat u suspenziju. Tokom mešan ja je dodavana voda. Mešano je približno 6 sati dok se nije završilo bubrenje Rhodigel-a.

Rastvor koji se može davati ntravenozno:

Sastav:

[0131] 5,53 g jedinjenja iz Primera I. 1.000 g vode za injekcije, koja sadrži 10 težinskih % hiđroksipropil-p-ciklodekstrina (Aldrich) i 985 mg natrijum acetata.

Proizvodnja:

[0132] Jedinjenje prema pronalasku je rastvoreno u vodi uz mešan je i pll rastvora je podešen natrijum acetatom na približno 3.94. Rastvor je sterilisan fihracijom (prečnik pora 0.22 pm) i dekantovan u toplotno sterilisane balone za infuziju u aseptičkim u uslovima. Ovi su zapečaćeni zatvaračima za infuziju i čvrstim zatvaračima.

Claims

1. So jedinjenja formule u kojoj R<1>predstavlja metil. etil. butil ili ciklopropilmetil. R2 predstavlja fenil, gde je fenil supstituisan supstituentom odabranim iz grupe koja sadrži trifluorometoksi i difluorometoksi, a R' predstavlja vodonik. metil. hlor. metoksi ili trifluorometil. sa metansulfonskom kiselinom.

2. So prema Zahtevu 1.naznačena timeŠto je to dimesilatna so.

3. So prema Zahtevu 2. sa sledećom formulom:

4. So prema bilo kom od Zahteva 1 do 3. koja se odlikuje kristalnim N-(l-metil-2-([4-(5-metilpiridin-2-il)piperazin-l-il]-karbonil j-1 rI-imidazol-4-il)-N'-[4-trifluorometoksifenil]urea dimesilatom. koji se dalje odlikuje time što rendgenski difraktogram praha (XRD) pokazuje karakteristične pikove na 6.37. 11.77. 12.56. 17.17. 18,81. 20.34. 21.47. 23.04, 35,46 stepeni 2-teta kad se snimi pomoću Rigaku MiniFlex rendgenskog spektrometra za prahove (XRD).

5. So prema bilo kom od Zahteva 1 do 4. koja se odlikuje kristalnim N-(l-metil-2-{[4-(5-metilpiridin-2-il)piperazin-l-il]-karbonir}-lH-imidazol-4-il)-N'4t4-triiluorometoksifeniljurea dimesilatom. koji se dalje odlikuje rendgenskim difraktogramom praha (XRD) kao sto je ilustrovano na SI. 1. kad se snimi pomoću Rigaku MiniFlex rendgenskog spektrometra za prahove (XRD).

6. Metod za proizvodnju soli jedinjenja formule (1) prema Zahtevu 1. koji karakterišc reakci ja jedinjenja Formule (I) sa metansulfonskom kiselinom.

7. So prema bilo kom od Zahteva 1 do 5 za upotrebu u metodu za lečenje i/ili profilaksu oboljenja, naročito virusnih infekcija, poželjno infekcija humanim eitomegaiovirusom (HCMV) ili infekcija nekim drugim predstavnikom grupeHerpes viridae.

8. Lek koji sadrži so prema bilo kom od Zahteva 1 do 5 u kombinaciji sa bar jednim inertnim, netoksičnim, farmaceutski pogodnim ekscipijentom.

9. Lek prema Zahtevu 8, naznačentimešto ga karakteriše 5 do 12,5 mg/mL soli prema bilo kom od Zahteva 1 do 5. 50 do 150 mg/mL hidroksipropil-R-ciklodekstrina, 0,5 do 2.0 mg/mL natrijum acetata i voda i. ako je primenjivo. još neki farmaceutski pogodan ekscipijent.

10. Lek prema Zahtevu 8 ili 9 za upotrebu u metodu za lečenje i/ili profilaksu virusnih infekcija, poželjno infekcija humanim eitomegaiovirusom (HCMV) ili infekcija nekim drugim predstavnikom grupeHerpes viridae.