RS55377B1 - Derivati tetrahidro-hinazolinona kao inhibitori tank-a i parp-a - Google Patents

Derivati tetrahidro-hinazolinona kao inhibitori tank-a i parp-a

Info

Publication number
RS55377B1
RS55377B1 RS20160507A RSP20160507A RS55377B1 RS 55377 B1 RS55377 B1 RS 55377B1 RS 20160507 A RS20160507 A RS 20160507A RS P20160507 A RSP20160507 A RS P20160507A RS 55377 B1 RS55377 B1 RS 55377B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
compounds
formula
pharmaceutically acceptable
tetrahydro
compound
Prior art date
Application number
RS20160507A
Other languages
English (en)
Inventor
Hans-Peter Buchstaller
Chirstina Esdar
Birgitta Leuthner
Original Assignee
Merck Patent Gmbh
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=47628092&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS55377(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Merck Patent Gmbh filed Critical Merck Patent Gmbh
Publication of RS55377B1 publication Critical patent/RS55377B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/70—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D239/72—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines
    • C07D239/95—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines with hetero atoms directly attached in positions 2 and 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

OPŠTE INFORMACIJE O PRONALASKU
Predmet pronalaska bio je da se pronađu nova jedinjenja koja imaju vredna svojstva, i to ona koja će moći da se koriste za pripremu medikamenata.
Ovaj pronalazak vezan je za derivate tetrahidro-hinazolina koji inhibišu aktivnost tankiraza (TANK) i poli(ADP-riboza)polimeraze PARP-1. Jedinjenja u okviru ovog pronalaska korisna su, dakle, u tečenju oboljenja kao Što su kancer. multipla skleroza, kardiovaskularne bolesti, povrede centralnog nervnog sistema i razne vrste upala. Ovaj pronalazak predstavlja i metode za dobijanje ovih jedinjenja, farmaceutske sastave koji obuhvataju ova jedinjenja, kao i jedinjenja koja se primenjuju kao deo metoda lečenja oboljenja pomoću farmaceutskih sastava koji obuhvataju ova jedinjenja.
Jedarni enzim poli(ADP-riboza) polimeraza-1 (PARP-1) pripada porodici enzima PARP. Sve veća porodica enzima sastoji se od PARP-ova i obuhvata na primer: PARP-1, PARP-2, PARP-3 i Vault-PARP; i tankiraza (TANK-ova), kao što su na primer: TANK-1 i TANK-2. PARP je poznat i kao poli(adenosin 5'-difosfo-riboza) polimeraza ili PARS (poIi(ADP-riboza) sintetaza).
Reklo bi se da je TANK-1 neophodan za polimerizaciju poli(ADP-riboze) vezane za deobno vreteno. Poli(ADP-ribozil)aciono dejstvo TANK-1 moglo bi biti ključno za tačno formiranje i očuvanje bipolarnosti vretena. Uz to, utvrđeno je da je PARP dejstvo koje ima TANK-1 neophodno za normalnu separaciju telomera pre anafaze. Interferencija sa PARP dejstvom tankiraze dovodi do aberantne mitoze, Što može prouzrokovati preiazni zastoj ćelijskog ciklusa, verovatno usled aktivacije kontrolne tačke, nakon čega dolazi do ćelijske smrti. Očekuje se da bi inhibicija tankiraze mogla imati citotoksično dejstvo kod proliferantnih tumorskih ćelija (VVO 2008/107478).
Inhibitore PARP opisali su M. Rutoet al.u „Nature Revievvs", tom 10. 293-301 u vezi sa kliničkim studijama kancera (tabela 2, strana 298).
Prema radu Horvata i Saba („Drug News Perspect" 20(3), april 2007, 171-181), najnovije studije pokazale su da PARP inhibitori podstiču smrt ćelija kancera pre svega zato što interferiraju sa procesima popravke DNK na raznim nivoima. Novije studije pokazale su takođe da PARP inhibitori inhibišu angiogenezu, inhibišući ekspresiju faktora rasta ili proliferativne odgovore ćelija indukovane faktorom rasta. Ovi nalazi mogli bi biti od značaja i kada je reč o načinu antikanceroznog delovanja PARP inhibitorain vivo.
Studija koju su sproveli Tentoriet al.(„Eur. J. Cancer") pokazala je da PARP inhibitori zaustavljaju vaskulami endotelni faktor rasta (VEGF) ili placentarnu migraciju indukovanu faktorom rasta, te sprečavaju formiranje mreža od tubula u ćelijskim sistemima i onemogućavaju angiogenezuin vivo.Studijom je takođe utvrđena deficijencija angiogeneze indukovane faktorom rasta kod PARP-1 nokaut miševa. Rezultati ove studije pružaju dokaze koji ukazuju da se protiv angiogeneze može delovati ciljanjem PARP-a. na osnovu čega dolazimo do novih terapeutskih implikacija koje PARP inhibitori mogu imati u lečenju kancera.
Poznato je da defekti kod očuvanih signalnih puteva igraju ključnu ulogu u nastanku i ponašanju gotovo svih vrsta kancera (E.A. Firon, ..Cancer Cei<I>"tom 16, izd. 5, 2009. 366-368). VVnt put je meta u antikanceroznoj terapiji. Ključna osobina Wnt puta jeste regulisana proteoliza (degradacija) p-katenina pomoću p-katenin destruktivnog kompleksa. Proteini kao što su WTX. A PC ili Aksin učestvuju u degradacionom procesu. Pravilna degradacija P-katenina važna je kako bi se izbegla nepravilna aktivacija VVnt puta, što je uočeno kod mnogih kancera. Tankiraze inhibišu aktivnost Aksina i, samim tim, inhibišu degradaciju P-katenina. Dakle, inhibitori tankiraze pojačavaju degradaciju<p->katenina. Rad nedavno objavljen u zborniku „Nature" ne donosi samo nova značajna zapažanja kada je reč o proteinima koji regulišu VVnt signalizaciju, već i pruža dodatnu podršku pristupu antagonizacije nivoa p-katenina i njegove lokalizacije pomoću malih molekula (Huanget al.,2009; „Nature", tom 461, 614-620). Jedinjenje XAV939 inhibiše rast DLD-l ćelija kancera, Autori su ustanovili da XAC 9393 blokira akumulaciju<p->katenina stimulisanu preko VVnt, i to tako što se vrednosti proteina AKSIN 1 i AKSIN2 povećavaju. U kasnijem radu, autori su utvrdili da XAV939 reguliše nivo AKSINA preko inhibicije tankiraze 1 i 2 (TNKSI i TNKS2) koje pripadaju proteinskoj porodici poli(ADP-riboza) polimeraza (PARP) (S.J. Hsiaoet al ...Biochimie90". 2008. 83-92).
Ustanovljeno je da jedinjenja koja su deo pronalaska i njihove soli imaju veoma vredna farmakološka svojstva, a tolerancija na njih je dobra.
Ovaj pronalazak konkretno odnosi se na jedinjenja predstavljena formulom I u skladu sa zahtevom 1 koja inhibišu tankirazu I i 2, zatim na sastave koji obuhvataju ova jedinjenja i procese za njihovu primenu u lečenju oboljenja i poremećaja indukovanih TANK-ovima.
Jedinjenja predstavljena formulom I u skladu sa zahtevom I mogu se takođe koristiti i za izolovanje i ispitivanje aktivnosti ili ekspresije TANK-ova. Uz to, posebno su pogodna za primenu u okviru dijagnostičkih metoda namenjenih oboljenjima povezanih sa neregulisanom ili poremećenom aktivnošću TANK-ova.
Domaćin ili pacijent može biti član bilo koje vrste sisara. na primer primata, a posebno ljudi: zatim glodara, uključujući miševe, pacove i hrčke: zečeva, konja, krava, pasa, mačaka itd. Životinjski modeli su od značaja za eksperimentalna ispitivanja i koriste se kao model oboljenja kod ljudi.
Podložnost određene ćelije tretmanu jedinjenjima koja su deo pronalaska može se utvrditiin vitrotestovima. Obično se ćelijska kultura kombinuje sa jedinjenjem koje je deo pronalaska pri raznim koncentracijama tokom određenog perioda dovoljnog da aktivni agensi, kao što je anti IgM. indukuju ćelijski odgovor u vidu ekspresije površinskog makera. a to je obično od oko jednog sata do jedne nedelje. Testoviin vitromogu se izvoditi uz upotrebu uzgojenih ćelija dobijenih od krvi ili od uzorka niopsije. Količina eksprimovanog površinskog markera utvrđuje se pomoću protočne citometrije korišćenjern specifičnih antitela koja prepoznaju marker.
Doza varira u zavisnosti od konkretnog jedinjenja koje sc koristi, zatim oboljenja, stanja pacijenta itd. Terapeutska doza uglavnom je dovoljna da značajno redukuje neželjenu ćelijsku populaciju u ciljnom tkivu, pri čemu je stanje pacijenta očuvano. Sa tretmanom se nastavlja dok se ne postigne značajna redukcija, na primer bar 50% redukcije opterećenosti ćelijama i može se nastaviti sve dok u telu suštinski više ne mogu da se detektuju neželjene ćelije.
PRETHODNIPRONALASCI
Ostali derivati tetrahidro-hinazolina sa modularnim dejstvom na histaminski H4 receptor opisani su u WO 2011/078143.
Ostali derivati tetrahidro-hinazolina sa antitumornim dejstvom opisani su u WO 2006/094604.
WO2008/l07478 predstavlja derivate hinolinona kao inhibitore PARP-a i TANK-a.
Sinteze drugih derivata tetrahidro-hinazolina opisuju Sekivacl al.u „Chem. Pharm. Buli."29(4)^948-954 (1981).
REZIMEPRONALASKA
Pronalazak se odnosi na pojedinačna jedinjenja u skladu sa zahtevom I koja su obuhvaćena formulom 1
gde
U predstavlja CH2 iliCHR2.
V predstavlja CH2. CHR* ili CO.
W predstavlja NR1 ili CR3R6,
ili predstavlja NH. ukoliko U ili V predstavljaju CHR".
R<1>predstavlja Ar, Hel" COA, COAr<1>, COHet, CO(Clb)nNR4R\
(CH2)nHet, (CHjJnCONHAr, (CH2)nCONHHet. (CH2)nCONR<4>R<5>.
(CH2),,OH, (CH2)nOA ili (CH2)nNR<4>R\
R<2>predstavlja A, Ar<1>. Hal. CN, COA, COOH, COOA. CONR4R\
S02NR4R\ (CH2)nOH ili (CH2)nNR4R5.
R<3>predstavljaH, OH ili OA,
R4, R? svaki, nezavisno jedan od drugog, predstavlja H ili A.
R<f>>predstavlja A ili Ar<1>,
Ar predstavlja fenil, koji je mono-, di- ili trisupstituisan sa Hal, A.
0(CH2)pC\c. Alk. (CI]2)nOH. <CH2M >A. (Cll2),1COOH, (CH2)nCOOA. S(0)mA, fenoksi. benziloksi. (CH2)nNH2, (CH^NHA. (CH2)nNA2.
(CH2)„CN. N02. (CH^CONlh. (CH2)nCONHA. (CH.-)nCONA.. SOjNH:. S02NHA, S02NA2. NIICONH2, (CH2)nNHCOA.
(CH2)nNHCOAIk, NHCOCU=CH(CH2)pNA2. Cl IO. COA, SO3I I, 0(CH2)pNH2, 0(CH2)pNHCOOA. 0(CH2)pNHA. 0(CH2)PNA2. NH(CH2)PNH2. NIKCH;)PNHCOOA. NH(CH2)rNHA. NIl(CH2),,NA2. NHCOHet<3>, COHeC. (Cl l;)„Het3. 0{CH2)„Het<3>i/ili
0(CH2)nCH(0H)(CH2),
Ar<1>predstavlja fenil. koji nije supstituisan ili je mono-. di- ili trisupstituisan sa Hal. A. ~(CH2)„OI L (Čf l2)„0A. (CH2)riCOOH, (CH2)nCOOA. S<0)„,A. fenoksi, benziloksi, (CH2)„NH2, (CH2)nNHA. (CH2)„NA2, (CH2)nCN. NO2, (CH2)nCONH2, (CH2)„CONHA. (CH2)„CONA2. ŠO2NH2. SO2NHA,
S02NA2, NHCONH2, (CI l2)nNI ICOA, CI IO. COA i/ili SOjI I.
Het predstavlja mono- ili biciklični zasićeni, nezasićeni ili aromatični heterocikl sa I do 4 N. 0 i/ili S atoma, koji može biti mono-, di-, tri- ili tetrasupstituisan sa Hal. A. (CH2)„Het<3>. OHet<3>. NH(CH2)rHet<3>.
(CH2)„COOH, (CH2)nCOOA. fenilom, benzilom, CHO. COA. (CH2)nNH2.
(CH2)nNHA, (CH2)„NA2, CN, (CH2),,OH, (CH2)„OA.
(CH2)pCH(OH){CH2)pOH, (CH2)pCH(OH)(CH2)pOA, NH(CH2)PNH2.
NHSO2A, NAS02A, SO2A, (CH2)nCONR*'R5. (CH2),,S02NR<4>R<5>i/ili =0, Het<3>predstavlja mono- ili biciklični zasićeni, nezasićeni ili aromatični heterocikl sa I do 4 N, O i/ili S atoma, koji može biti nesupstituisan ili mono-, di-, tri- ili tetrasupstituisan sa A. Hal. (CH2)nNH2, {CH2)»NHA.
(CH2)„NA2. (CH2)nOH. (CH2)„OA. COOA, Ar3 i/ili=0.
A predstavlja nerazgranat ili razgranat alki I sa 1-10 C atoma, kod kojeg 1-7
H atoma mogu biti zamenjeni sa F i/ili Cl i/ili kod kojeg jedna ili dve nesusedne CH2grupe mogu biti zamenjene sa O, NH, S. SO, S02i/ili sa
CH=CH grupom,
Cyc predstavlja cikloalkil sa 3-7 C atoma.
Alk predstavlja alkenil ili alkinil sa 2. 3, 4. 5 ili 6 C atoma.
Ar<3>predstavlja fenil. koji nije supstituisan ili je mono-. di- ili trisupstituisan sa
Hal i/ili A,
Hal predstavlja F, Cl. Br ili I.
m predstavlja 0, 1 ili 2,
n predstavlja 0. I, 2, 3 ili 4.
p predstavlja 1. 2, 3 ili 4.
i na njegove farmaceutski upotrebljive solvate. soli. tautomere i stereoizomere. uključujući i njegove smeše u svim razmerama.
Predmet ovog pronalaska odnosi se na definiciju/.ahleva: svi navodi koji su izvan okvira zahteva služe isključivo u informativne svrhe.
Pronalazak se odnosi i na optički aktivne oblike (stereoizomere), enantiomere, racemate, diastereomere i hidrate i solvate ovih jedinjenja.
Pronalazak se odnosi na jedinjenja predstavljena formulom I u skladu sa zahtevom 1 i na njihove tautomere sa formulom la
Uz to, otkriveni su i farmaceutski prihvatljivi derivati jedinjenja predstavljenih formulom I u skladu sa zahtevom 1.
Termin sol vati jedinjenja predstavlja adukcije inertnih molekula rastvarača na jedinjenja koja se formiraju zahvaljujući uzajamnoj privlačnoj sili. Solvati su. na primer. mono- ili dihidrati ili alkoksidi.
Podrazumeva se da se pronalazak odnosi i na solvate soli. Termin farmaceutski prihvatljivi derivati predstavlja, na primer, soli jedinjenja koja su deo pronalaska.
Izrazom ..delotvorna količina" označava se ona količina medikamenta ili farmaceutski aktivnog sastojka koja u tkivu, sistemu ili kod životinje ili čoveka dovodi do biološkog ili zdravstvenog odgovora koji se traži ili očekuje, na primer. od strane istraživača ili lekara.
Shodno tome, izrazom „terapeutski delotvorna količina"označava se ona količina koja, u poređenju sa subjektom koji tu količinu nije dobio, ima za posledicu sledeće: unapređeni tretman, zaceljenje, prevenciju ili nestanak oboljenja, sindroma, stanja, tegobe, poremećaja ili neželjenih dejstava ili ograničenje napretka bolesti, tegobe ili poremećaja.
Izraz „terapeutski delotvorna količina" obuhvata i količine koje su delotvorne u poboljšanju normalnih fizioloških funkcija.
Pronalazak obuhvata i korišćenje smeša jedinjenja predstavljenih formulom I u skladu sa zahtevom 1, na primer smeša dvaju diastereomera. na primer u razmeri 1:1, \ :2. 1:3. 1:4, 1:5, 1:10. 1:100 ili 1:1000. U ovom slučaju, posebno požel jne jesu smeše stereoizomernih jedinjenja.
Termin „lautomeri" odnosi se na izomerne oblike jedinjenja koji su u ravnoteži. Koncentracije izomernih oblika zavise od sredine u kojoj se jedinjenje nalazi i mogu se razlikovati u zavisnosti od toga da li je, na primer, jedinjenje u čvrstom stanju ili je u organskom ili vodenom rastvoru.
Pronalazak se odnosi na jedinjenja predstavljena formulom I u skladu sa zahtevom 1 i njihove soli, kao i na proces dobijanja jedinjenja predstavljenih formulom I u skladu sa zahtevom I i njihovih farmaceutski korisnih soli, solvata, tautomera i stereoizomera, koje karakteriše reakcija jedinjenja predstavljenog formulom II
i jedinjenja predstavljenog formulom III
gde U. V i W imaju značenja opisana pod zahtevom I.
i/ili je
baza ili kiselina formule I pretvorena u jednu od njenih soli.
Prethodno i u nastavku, radikali U. V i W imaju značenja navedena za formulu I, osim ukoliko nije drugačije naznačeno.
A označava alkil, koji može biti nerazgranal (linearan) ili razgranat, a može imati 1, 2. 3. 4, 5, 6. 7, 8, 9 ili 10 C atoma. Poželjno je da A bude metil, zatim etil. propil. izopropil, butil, izobutil, sec-butil ili tert-butil, takođe i pentil. I-, 2- ili 3-metilbutil, 1,1-, 1.2- ili 2.2-dimetilpropil. 1-etil-propil. heksil. I-, 2-, 3- ili 4-metilpentil, 1,1-. 1.2-, 1.3-, 2,2-, 2,3-ili 3,3-dimetilbutii. 1- ili 2-etilbutil. 1-etil-l-metilpropil. 1-etil-2-metilpropil, 1.1,2- ili 1,2,2-lrimetilpropil, a poželjno je da bude i, na primer, trifluorometil.
Vrlo je poželjno da A označava alkil sa 1,2, 3, 4, 5 ili 6 C atoma, i to metil, etil, propil. izopropil, butil, izobutil, sec-butil, tert-butil. pentil. heksil, trifluorometil. pentafluoroetil ili 1,1.1 -tri fl uoroet i I.
Pored toga, poželjno je da A bude i CH;(K Ih. CH2CH2OH. CH2NHCH2ili NHCH2CU3.
Cyc predstavlja cikloalkil sa 3-7 C atoma, poželjno ciklopropil. ciklobutil, ciklopentil. cikloheksil ili cikloheptil.
Alk predstavlja nerazgranat ili razgranat alkenil ili alkinil sa 2. 3, 4. 5 ili 6 C atoma, poželjno izopropenil, prop-2-inil, vinil ili alil.
U predstavlja poželjno CH2.
V predstavlja poželjnoC\ h-
VV predstavlja poželjno NR' ili NH. ukoliko U ili V predstavljaju CHR<2.>
VV posebno poželjno predstavlja NR<1>.
R<2>predstavlja poželjno A. Ar', CONR<4>R<5>ili (CH2)nOI I.
R<4>predstavlja poželjno H, metil, etil, propil ili butil.
R<5>predstavlja poželjno H. metil, etil, propil ili butil.
Ar predstavlja poželjno o-, m- ili p-tolil, o-, m- ili p-etilfenil.0-. m- ili p-propilfenil. o-, m- ili p-izopropilfenil, o-, m- ili p-tert-butilfenil. o-. m- ili p-hidroksifenil.0-, m- ili p-nitrofenil, o-. m- ili p-aminofenil, o-, m- ili p-(N-nietilamino)fenil, o-, m- ili p-(N-metilaminokarbonil)-fenil, o-, m- ili p-metoksifenil. o-, m- ili p-etoksifenil.0-, m- ili p-etoksikarbonilfenil.0-, m- ili p-(N,N-dirnetilamino)fenil. o-, m- ili p-(N,N-dimetilaminokarboniljfenil. o-, m- ili p-fiuorofenil. o-. m- ili p-bromofenil. o-, m- ili p-hlorofenil, o-, m- ili p-(metilsulfonamido)-feniI.0-. m- ili p-(melilsulfonil)fenil,0-, m- ili p-cijanofenil.0-, m- ili p-karboksifenil, o-, m- ili p-metoksikarbonilfenil, o-, m- ili p-formilfenil. o-, m- ili p-acetilfenil, o-. m- ili p-aminosulfonilfenil,0-, m- ili p-|2-(morfolin-4-il)etoksi]fenil. o-, m- ili p-[3-(N.N-dietil-amino)propoksijfenil. dalje poželjno 2.3-, 2.4-, 2.5-, 2,6-, 3.4- ili 3.5-difluorofeml. 2.3-. 2.4-. 2.5-. 2.6-. 3.4- ili 3.5-đihlorofenil. 2,3-, 2.4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- ili 3,5-dibromofenil. 2.4- ili 2.5-dinitrofenil. 2.5- ili 3.4-dimetoksifenil. 3-nitro-4-hlorofenil. 3-ainino-4-hloro-, 2-amino-3-hloro. 2-amino-4-hloro, 2-amino-5-hloro ili 2-amino-6-hlorofenil. 2-nitro-4-N.N-dimetilamino- ili 3-nitro-4-N.N-dimetilaminofenil, 2.3-diaminofenil. 2.3,4-. 2,3.5-. 2.3.6-. 2.4.6- ili 3.4.5-trihlorofenil, 2,4.6-trimetoksifenil. 2-hidroksi-3,5-dihlorofenil. p-jodofenil. 3.6-dihloro-4-aminofenil, 4-fluoro-3-hlorofenil. 2-fluoro-4-bromofenil. 2.5-difluoro-4-bromofenil. 3-bromo-6-meloksifenil. 3-hloro-6-metoksifenil. 3-hloro-4-acetamidofenil, 3-fluoro-4-rnetoksifenil. 3-amino-6-metilfenil. 3-hloro-4-acetamidofenil ili 2.5-dimetil-4-hiorofenil.
Ar poželjno predstavlja i fenil, koji je mono-, di- ili trisupstituisan sa Hal. (CH2)„OH, (CI-bjnOA. (CH2)r>CN. (CH2)nCONH2, (CH^CONHA i/ili (CH2)nCONA2.
Ar<1>predstavlja poželjno fenil.
Ar<3>predstavlja poželjno fenil.
Bez obzira na druge supstitucije, Het poželjno predstavlja 2- ili 3-furil, 2- ili 3-tienil. I-. 2- ili 3-pirolil. 1-, 2-. 4- ili 5-imiđazolil, 1-, 3-, 4- ili 5-pirazolil, 2-, 4- ili 5- oksazolil, 3-, 4- ili 5-izoksazoIil. 2-, 4- ili 5-tiazolil. 3-, 4- ili 5-izotiazolil. 2-, 3- ili 4-piridil. 2-. 4-, 5-ili 6-pirimidinil. takođe poželjno predstavlja 1,2.3-tiazol-l-. -4- ili -5-il. 1,2,4-tiazol-l-. -3- ili -5-il, 1- ili 5-tetrazolii, 1.2,3-oksadiazol-4- ili -5-il. l,2.4-oksadiazol-3- ili -5-il. l,3,4-tiadiazol-2- ili -5-il, l,2,4-tiadiazol-3- ili -5-il. l.2,3-tiadiazol-4- ili -5-il. 3- ili 4-piridazinil, pirazinil. I-, 2-, 3-. 4-, 5-. 6- ili 7-indolil, 4- ili 5-izoindolil, indazolil. !-. 2-, 4- ili 5-benzimidazolil, i-, 3-, 4-, 5-. 6- ili 7-benzopirazolil. 2-, 4-. 5-, 6- ili 7-benzoksazolil, 3-, 4-, 5-, 6- ili 7-benzizoksazolil, 2-, 4-, 5-. 6- ili 7-benzotiazolil, 2-, 4-, 5- , 6- ili 7-benzizotiazolil. 4-. 5-. 6- ili 7-benz-2,l,3-oksadiazolil, 2-, 3-. 4-, 5-, 6-, 7- ili 8-hinolil. I-, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- ili 8-izohinolil, 3-, 4-, 5-, 6-, 7- ili 8-cinolinil, 2-, 4-, 5-, 6-, 7-ili 8-hinazoliniI, 5- ili 6-hinoksalinil, 2-. 3, 5-, 6-, 7- ili 8-2H-benzo-l,4-oksazinil. dalje je poželjno l.3-benzodioksol-5-il. 1,4-benzodioksan-6-il. 2.1.3-benzotiadiazol-4. -5-il ili 2.1,3-benzoksadiazol-5-il, azabiciklo-f3.2.1 ]oktil ili dibenzofuranil.
Heterociklični radikali takođe mogu biti delimično ili u potpunosti hidrogenovani. Bez obzira na druge supstitucije, Het premalome može poželjno da predstavlja i 2.3-dihidro-2-, -3-, -4- ili -5-furil, 2,5-dihidro-2-, -3-, -4- ili -5-furil, tetra-hidro-2- ili -3-furil, 1.3-dioksolan-4-il.letrahidro-2- ili -3-tienil. 2.3-dihidro-l-. -2-, -3-, -4- ili -5-pirolil, 2,5-dihidro-1-. -2-, -3-, -4- ili -5-pirolil. i-. 2- ili 3-pirolidinil. tetrahidro-l-. -2- ili -4-imidazolil, 2.3-dihidro-l-, -2-, -3-, -4- ili -5-pirazolil, tetrahidro-l-, -3- ili -4-pirazolil, 1,4-dihidro-l-, -2-, -3- ili -4-piridil. 1.2,3.4-tetrahidro-l-. -2-, -3-, -4-, -5- ili -6-piridil, 1-, 2-, 3- ili 4-piperidinil. 2-, 3- ili 4-morfolinil.letrahidro-2-, -3- ili -4- piranil. 1.4-dioksanil, 1.3-dioksan-2-. -4- ili -5-il. heksahidro-1-, -3- ili -4-piridazinii, heksahidro-1-. -2-, -4- ili - 5-pirimidinil, I-, 2- ili 3-piperazinil. 1,2,3,4-tetrahidro-1-, -2-, -3-, -4-, -5-. -6-. -7- ili -8-hinolil, 1,2.3,4-tetrahidro-l-, -2-, -3. -4-. -5-, -6-. -7- ili -8-izohinolil, 2-, 3-, 5-, 6-. 7- ili 8- 3.4-dihidro-2H-benzo-l,4-oksazinil. dalje su poželjni 2.3-metilendioksifenil, 3.4-metilendioksifenil, 2,3-etilendioksifenil, 3,4-etilendioksifenil. 3.4-(difluorometilendioksi)fenil, 2,3-dihidrobenzofuran-5- ili -6-il. 2,3-(2-oksometilendioksijfenil ili takođe 3.4-dihidro-2H-1.5-benzodioksepin-6- ili -7-ii. dalje 2.3-dihidrobenzofuranil, 2.3-dihidro-2-oksofuranil. 3,4-dihidro-2-okso-1 H-hinazolinil. 2.3-dihidrobenzoksazolil. 2-okso-2,3-dihidrobenzoksazolil. 2.3-đihidrobenziinidazoIil, 1,3-dihidroindol. 2-okso-1.3-dihidroindol ili 2-okso-2,3-dihidrobenzimidazolil.
Het poželjno predstavlja piperidinil. piperazinil. pirolidinil, morfolinil. dihidro-pirazolil. dihidro-piridil, dihidropiranil. furil, ticnil. pirolil, imidazolil. pirazolil. oksazolil. izoksazolil. tiazolil, izotiazolil. piridil. pirimidinil. triazolil. tetrazolil, oksadiazolil. tiadiazolil. piridazinil. pirazinil, hinolil, izohinolil. benzimidazolil. benzoiriazolil. inđolil. benzo-1.3-dioksolil. 2.3-dihidro-benzo[ 1.4]dioksinil. indazolil ili benzoliadiazolil. od kojih je svaki nesupstiluisan ili je mono-. di- ili trisupstituisan sa (CH2)nOH, (CH2)nOA.
(CH2)nCONR<J>R<5>.(CH2)„S02NR<4>R<5>i/ili O
Bez obzira na druge supstitucije. Het3 predstavlja poželjno 2- ili 3-furil, 2- ili 3-tienil. I-. 2- ili 3-pirolil. I-. 2-. 4- ili 5-imidazolil. I-, 3-. 4- ili 5-pirazolil. 2-. 4- ili 5-oksazolil. 3-, 4- ili 5-izoksazolil, 2-, 4- ili 5-tiazolil, 3-. 4- ili 5-izoliazolil, 2-, 3- ili 4-piridl. 2-, 4-, 5- ili 6-pirimidinil, dalje su poželjni 1,2,3-tirazol-l-. -4- ili -5-il, 1.2,4-triazol-l-, -3- ili -5-il, 1-ili 5-tetrazolil, 1.2,3-oksadiazol-4- ili -5-il. 1,2.4-oksadiazol-3- ili -5-il. 1,3.4-tiadiazol-2-ili -5-il, l.2,4-tiadiazol-3- ili -5-il. l.2,3-tiadiazol-4- ili -5-il, 3- ili 4-piridazinil, pirazinil. I-, 2-, 3-, 4-, 5-, 6- ili 7-indolil, 4- ili 5-izoindolil, indazolil. 1-. 2-. 4- ili 5-benzimidazolil. I-. 3-. 4-, 5-, 6- ili 7-benzopirazolil. 2-. 4-, 5-. 6- ili 7-benzoksazolil. 3-. 4-. 5-. 6- ili 7-benzizoksazolil, 2-, 4-, 5-, 6- ili 7-benzotiazolil. 2-, 4-, 5-, 6- ili 7-benzizotiazolii. 4-. 5-. 6- ili 7-benz-2,l,3-oksadiazolil, 2-. 3-, 4-, 5-, 6-, 7- ili 8-hinolil, I-. 3-. 4-. 5-. 6-, 7- ili 8-izohinolil. 3-, 4-, 5-, 6-. 7- ili 8-cinolinil, 2-, 4-, 5-, 6-. 7- ili 8-hinazolinil, 5- ili 6-hinoksalinil, 2-, 3-, 5-, 6-. 7- ili 8-2H-benzo-l.4-oksaz.inil, dalje su poželjni 1,3-benzodioksol-5-il, l,4-benzodioksan-6-il. 2.1,3-benzotiađiazol-4-. -5-il ili 2,1.3-benzoksadiazol-5-il, azabiciklo-|3.2.1]oktil ili dibenzofuranil. Heterociklični radikaii mogu biti delimično ili u potpunosti hidrogenovani. Bez obzira na druge supstitucije. Het samim tim može da predstavlja poželjno 2,3-dihidro-2-, -3-, -4- ili -5-furil, 2,5-dihidro-2-, -3-, -4- ili -5-furil, tetrahidro-2- ili -3-furil. 1,3-dioksolan-4-il, tetrahidro-2- ili -3-tienil, 2,3-dihidro-l-. -2-, -3-, -4- ili -5-pirolil, 2,5-dihidro-l-, -2-, -3-, -4- ili -5-pirolil, 1-, 2- ili 3-pirolidinil, tetrahidro-l-, -2- ili -4-imidazoliI. 2,3-dihidro-l-, -2-, -3-, -4- ili -5-pirazolil. tetrahidro-l-. -3- ili -4-pirazolil. 1,4-dihidro-l-. -2-, -3- ili -4-piridil. 1,2,3.4-tetrahidro-l-, -2-, -3-, -4-. -5- ili -6-piridil, I-. 2-, 3- ili 4-piperidinil. 2-, 3-ili 4-morfolinil, tetrahidro-2-, -3- ili -4-piranil, 1,4-dioksanil, 1,3-dioksan-2-, -4- ili -5-il. heksahidro-l-, -3- ili -4-piridazinil. heksahidro-l-. -2-, -4- ili -5-pirimidinii. 1-. 2- ili 3-piperazinil, 1,2,3,4-tetrahidro-l-, -2-, -3-, -4-. -5-. -6-. -7- ili -8-hinolil, 1,2.3.4-tetrahiđro-1-, -2-, -3-, -4-. -5-, -6-, -7- ili -8-izohinolil. 2-, 3-. 5-. 6-, 7- ili 8- 3.4-dihidro-2H-benzo-1.4- oksazinil, dalje su poželjni 2,3-metilendioksifenil. 3,4-metilendioksifenil. 2,3-etilendioksifenil, 3,4-etilendioksifenil, 3,4-(difluorometilendioksi)fenil. 2,3-dihidrobenzofuran-5- ili -6-il, 2,3-(2-oksometilendioksi)fenil ili isto tako 3,4-dihidro-2H-1.5- benzodioksepin-6- ili -7-il, dalje su poželjni 2,3-dihidrobenzofuranil. 2,3-dihidro-2-oksofuranil, 3,4-dihidro-2-okso-l //-hinazolinil, 2.3-dihidrobenzoksazolil. 2-okso-2.3-dihidrobenzoksazolil. 2.3-dihidrobenzimidazolil. 1,3-dihidroindoI. 2-okso-l.3-dihidroindol ili 2-okso-2,3-dihidrobenzimidazolil.
Het<3>predstavlja poželjno piperidinil, piperazinil, pirolidinil, morfolinil. 2,3-dihidro-pirazolil. 1,2-dihidro-piridil, furil. tienil. pirolil. imidazolil. pirazolil. oksazolil, izoksazolil. tiazolil, izotiazolil. piridil, pirimidinil, triazolil, 4.5-dihidro-l II-[l,2,4]triazolil, tetrazolil, oksadiazolil, tiadiazolil,letrahidro-benzotiofenil. piridazinil ili pirazinil. od kojih je svaki nesupstituisan ili mono-, di-. tri- ili tetrasupstituisan sa A.
(CH2)nOH. (CH2)nOA i/ili=0.
Hal predstavlja poželjno F. Cl ili Br. ali i I. a posebno poželjno je da predstavlja F ili Cl.
U okviru kompletnog pronalaska, svi radikaii koji se javljaju više od jedanput mogu biti istovetni ili različiti, tj. nezavisni su jedan od drugog.
Jedinjenja predstavljena formulom 1 mogu imati jedan ili više hiralnih centara i stoga mogu da se jave u raznim stereoizomemim oblicima. Formula 1 obuhvata sve ove oblike.
Jedinjenja predstavljena formulom I kao i osnovni materijali za njihovo dobijanje takođe se dobijaju poznatim metodama, opisanim u literaturi (na primer u standardnim radovima, kat) šio je rad Houben-VVevI, Methođen dei organischen Chemie |Metode u organskoj herniji], Georg-Thieme-Verlag. Štutgarl). preciznije pod reaktivnim uslovima koji su poznati i odgovarajući za pomenute reakcije. Upotrebljivi mogu biti i oblici koji su poznati, a ovde nisu detaljnije pomenuti.
Osnovna jedinjenja za formule II i III opšte su poznata. Međutim, ukoliko je reč o novim jedinjenjima, ona se mogu dobiti već poznatim metodama.
Poželjno je da se jedinjenja predstavljena formulom 1 dobijaju reagovanjem prvenstveno jedinjenja predstavljenog formulom II sa jedinjenjeni predstavljenim formulom III.
U zavisnosti od uslova u kojima se reakcija odvija, njeno trajanje može biti između nekoliko minuta i 14 dana, a temperatura reakcije može ići od -I0°C do I80T. obično je između 30°C i 170°C. dok je najuobičajenija temperatura od oko 60°C do oko 160°C.
Primeri pogodnih inertnih rastvarača su ugljovodonici, kao heksan. petrolej etar. benzen. toluen ili ksilen; hlorovani ugljovodonici. kao trihloroetilen. 1,2-dihloroetan. ugljenik-tetrahlorid, hloroform ili dihlorometan; alkoholi, kao metanol. etanol, izopropanol, n-propanol, n-butanoi ili tert-butanol; etri, kao dietil etar. diizopropil etar. tetrahidrofuran (THF) ili dioksan; glikol etri, kao etilen glikol monometil ili monoetil etar. etilen glikol dimelil etar (diglim); ketoni. kao aceton ili butanom amidi, kao acelamid, dimetilacetamid ili dimetilformamid (DMF): nitrili, kao acetonitril; sulfoksidi, kao dimetil sulfoksid (DMSO); ugljenik-disulfid; karboksilne kiseline, kao mravlja ili sirćetna kiselina; azotna jedinjenja, kao nitrometan ili nitrobenzen: estri. kao etil acetat ili smeše navedenih rastvarača.
Posebna prednost daje se izoamilakoholu.
Slobodne aminogrupe mogu dodatno biti acilisane na konvencionalni način pomoću acil hlorida ili anhidrida ili alkilisane pomoću nesupstituisanog ili supstituisanog alkil halida, poželjno u inertnom rastvaraću, kao stoje dihlorometan ili lili- i/ili u prisustvu baze, kao trietilamin ili piridin, i to na temperaturama između -60° i +30°.
Farmaceutske soli i drugi oblici
Pomenuta jedinjenja koja su deo pronalaska mogu se koristiti u njihovom krajnjem obliku koji nije so. Sa druge strane, ovaj pronalazak obuhvata i primenu jedinjenja u obliku njihovih farmaceutski prihvatljivih soli. koje se mogu dobiti od raznih organskih i neorganskih kiselina i baza prema procedurama poznatim u okviru struke. Farmaceutski prihvatljivi oblici soli dobijene od jedinjenja predstavljenih fonnulom I u skladu sa zahtevom I većim delom se dobijaju konvencionalnim metodama. Ukoliko jedinjenje predstavljeno formulom I u skladu sa zahtevom I sadrži karboksilnu grupu, jedna od njemu odgovarajućih soli može se dobiti reakcijom jedinjenja sa odgovarajućom bazom kako bi se dobila odgovarajuća bazno adirana so. Te baze mogu biti. na primer. hidroksidi alkalnih metala; hidroksidi zemnoalkalnih metala, kao što jc barijum hidroksid i kalcijum hidroksid; alkoksidi alkalnih metala, na primer kalijum etoksid i natrijum propoksid: kao i razne organske baze, piperidin. dietanolamin i N-melilglutamin. Aluminijumske soli jedinjenja predstavljenih formulom I u skladu sa zahtevom I takođe su obuhvaćene. Kada je reč o određenim jedinjenjima predstavljenim formulom I u skladu sa zahtevom 1, kiselo adirane soli mogu se dobiti tretiranjem tih jedinjenja farmaceutski prihvatljivim organskim i neorganskim kiselinama, kao što su. na primer. vodonični halidi. odnosno vodonik-hlorid. vodonik-bromid ili vodonik-jodid, zatim druge mineralne kiseline i njima pripadajuće soli. kao Što su sulfati, nitrati ili fosfati i si., pa alkilni i monoarilni sulfonati i druge organske kiseline i njihove soli. kao što je acetat. trifluoroacetat, tartarat, maleat. sukcinat. citrat, benzoat, salicilat, askorbat i si. Prema tome, farmaceutski prihvatljive kiselo adirane soli jedinjenja predstavljenih formulom I u skladu sa zahtevom 1 obuhvataju sledeće: acetat, adipat. alginat. arginat. aspartat. benzoat. benzensulfonat (bezilat). bisulfat. bisulfit. bromid. butirat. kamforat. kamforsulfonat, kaprilat, hlorid, hiorobenzoat, citrat, ciklopentanpropionat. diglukonat. dihidrogenfosfat, dinitrobenzoat, dodekilsulfat. etansulfonat, fumarat. galaktarat (od galaktarinske kiseline), galakturonat, glukoheptanoat, glukonat. glutamat. glicerofosfat. hemisukcinal. hemisulfat, heptanoat, heksanoat. hipurat. hidrohlorid. hidrobromid, hidrojodid. 2-hidroksietansulfonat, jodid, izetionat, izobutirat, laktat. laktobionat, malat. maleat, malonat, mandelat, metafosfat, metansulfonat. metilbenzoat. monohidrogenfosfat. 2-naftalensulfonat, nikotinat. nitrat, oksalat, oleat. palmoat. pektinat. persulfat. fenilacelal. 3-fenilpropionat. fosfat, fosfonat. ftalat. pored ostalih.
Uz to, bazne soli jedinjenja keja su deo pronalaska obuhvataju sledeće: aluminijtimove. amonijumske, kalcijumove, bakarne. gvožđe(III). gvožđe(U). litijumove, magnezijumove, mangan(III), mangan(ll), kalijumove. natrijumove i cinkove soli. pored ostalih. Od gorenavedenih soli. prednost se daje amonijumskim, zatim alkalnometalnim solima natrijuma i kalijuma i zemnoalkalnometalnim solima kalcijuma i magnezijuma. Soli jedinjenja predstavljenih formulom I u skladu sa zahtevom I koje su dobijene od farmaceutski prihvatljivih organskih netoksičnih baza obuhvataju soli primarnih, sekundarnih i tercijarnih amina, supstituisanih amina. uključujući i supstituisane amine i cikloamine koji se javljaju u prirodi, zatim tu su bazni jonski izmenjivači u vidu smola, kao na primer arginin, betain, kofein, hloroprokain, holin, N,N'-dibenziletilendiamin (benzatin), dicikloheksilamin, dietanolamin, dietilamin, 2-dietilaminoetanol. 2-dimetilaminoetanol, etanolamin, etilendiamin, N-etilmorfolin, N-etilpiperidin. glukamin, glukozamin, histidin, hidrabamin. izopropilamin, lidokain. lizin, meglumin, N-metil-D-glukamin, morfolin. piperazin, piperidin. poliaminske smole, prokain, purini, teobromin. trietanolamin. trietilamin, trimetilamin. tripropilamin i tris(hidroksimetil)metilamin (trometamin), pored ostalih.
Jedinjenja koja su deo ovog pronalaska i koja sadrže bazne azotne grupe mogu biti podvrgnuta kvaternizaciji pomoću agenasa kao što su (G-O)alkil halidi, na primer metil, etil, izopropil i tert-butil hlorid. bromid i jodid: di(C'i-C4)alkil sulfati, na primer dimetil, dietil i diamil sulfat; (Go-Cis)alkil halidi, na primer dekil, dodekil, lauril, miristil i stearil hlorid, bromid i jodid i aril(Ci-Ci)a!kil halidi. na primer benz.il hlorid i fenetil bromid. Kako jedinjenja rastvorljiva u vodi tako i ona rastvorijiva u ulju. a koja su deo ovog pronalaska, mogu se dobiti pomoću ovih soli.
Gorenavedene farmaceutske soli koje su poželjne obuhvataju acetat, trifluoroacetat, bezilat, citrat. fumarat. glukonat. hemisukcinat. hipurat. hidrohlorid. hidrobromid. izetionat, mandelat. meglumin. nitrat, oleat. fosfonat. pivalat, natrij um fosfat, stearat, sulfat, sulfosalicilat, tartarat, tiomalat. tozilat i trometamin. pored ostalih.
Posebna prednost daje se hidrohloridu. dihiđrohloridu, hidrobromidu. maleatu. mezilatu. fosfatu, sulfatu i sukcinatu.
Kiselo adirane soli baznih jedinjenja predstavljenih formulom I u skladu sa zahtevom I dobijaju se dovođenjem u dodir slobodnobaznog oblika sa dovoljnom količinom željene kiseline, čime se debija so na konvencionalan način. Slobodna baza može se ponovo dobiti spajanjem soli sa bazom i izolovanjem slobodne baze na konvencionalan način. Slobodnobazni oblici razlikuju se u određenom smislu od njima pripadajućih oblika soli kada je reč o određenim fizičkim svojstvima, kao što je rastvorljivost u polarnim rastvaračima; međutim, za potrebe pronalaska može se reći da soli odgovaraju njihovim slobodnobaznim oblicima.
Kao što je pomenuto, farmaceutski prihvatljive bazno adirane soli jedinjenja predstavljenih formulom I u skladu sa zahtevom 1 dobijaju se sa metalima ili aminima. kao što su alkalni i zemnoalkalni metali ili organski amini. Poželjno je da ti metali budu natrijum, kalijum. magnezijum i kalcijum. Poželjno je da organski amini budu N.N'-dibenziletilendiamin, hloroprokain. holin. dietanolamin. etilendiamin, N-metil-D-glukamin i prokain.
Bazno adirane soli kiselih jedinjenja koja su deo pronalaska dobijaju se dovođenjem u dodir slobodnokiselog oblika sa dovoljnom količinom željene baze, čime se dobija so na konvencionalan način. Slobodna kiselina može se ponovo dobiti spajanjem soli sa kiselinom i izolovanjem slobodne kiseline na konvencionalan način. Slobodnokiseli oblici razlikuju se u određenom smislu od njima pripadajućih oblika soli kada je reč o određenim fizičkim svojstvima, kao Što je rastvorljivost u polarnim rastvaračima; međutim, za potrebe pronalaska može se reći da soli odgovaraju njihovim slobodnokiselim oblicima.
Ukoliko jedinjenje koje je deo pronalaska sadrži više od jedne grupe koja ima sposobnost da nagradi farmaceutski prihvatljive soli ove vrste, onda pronalazak obuhvata i višestruke soli. Oblici tipičnih višestrukih soli obuhvataju, na primer. bitartarat. diacetat, difumarat. dimeglumin, difosfat. dinatrijum i trihidrohlorid. pored ostalih.
U skladu sa gore navedenim, može se smatrati da izraz ..farmaceutski prihvatljiva so*' s tim u vezi predstavlja aktivni sastojak koji obuhvata jedinjenje predstavljeno formulom 1 u obliku jedne od njegovih soli, a posebno ukoliko taj oblik soli pruža poboljšana farmakokinetička svojstva aktivnom sastojku u poređenju sa slobodnim oblikom aktivnog sastojka ili bilo kog drugog oblika soli aktivnog sastojka koji se ranije primenjivao. To može biti i prvi put da farmaceutski prihvatljiva so aktivnog sastojka pruži aktivnom sastojku željeno farmakokinetičko svojstvo koje sastojak nije ima ranije, pa će samim tim ona imati pozitivan uticaj na farmakodinamiku tog aktivnog sastojka u pogledu njegove terapeutske efikasnosti u telu.
Izotopi
Podrazumeva se da jedinjenje predstavljeno formulom I u skladu sa zahtevom I obuhvata i njegove izotopski obeiežene oblike. Izotopski obeležen oblik jedinjenja predstavljenog formulom I u skladu sa zahtevom I identičan je tom jedinjenju. osim što je jedan ili više atoma jedinjenja zamenjeno atomom ili atomima čija je atomska masa ili maseni broj drugačiji od atomske mase ili masenog broja atoma koji se obično javlja u prirodi. Primeri izotopa koji se mogu naći u slobodnoj prodaji i koji se poznatim metodama mogu dodati jedinjenju predstavljenom formulom I u skladu sa zahtevom 1 jesu izotopi vodonika. ugljenika. azota. kiseonika. fosfora, fluora i hlora. odnosno<2>H. 'H.<3>C,<l4>C,<l?>N. lsO.,70. "3IP, 12P.35S. I8F i 36CI. Jedinjenje predstavljeno formulom I u skladu sa zahtevom I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so koja sadrži jedan ili više gorepomenutih izotopa i/ili izotopa drugih atoma predstavlja deo ovog pronalaska. Izotopski obeleženo jedinjenje predstavljeno formulom 1 u skladu sa zahtevom I može se upotrebiti na razne korisne načine. Na primer. izotopski obeleženo jedinjenje predstavljeno formulom I u skladu sa zahtevom 1 kome je. primera radi, dodat radioizotop kao<5>I1 ili<l4>C pogodan je za testove medikamenata i/ililikvne distribucije. Ovi radioizotopi. tj. tricijum (<3>H) i ugljenik-14 f"C) posebno su poželjni zbog jednostavnog đobijanja i odlične detekcije. Dodavanje težih izotopa, kao na primer deuterijuma (<2>H), u jedinjenje predstavljeno formulom 1 u skladu sa zahtevom I ima svoje terapeutske prednosti zahvaljujući višoj metaboličkoj stabilnosti ovog izotopski obeleženog jedinjenja. Viša metabolička stabilnost prenosi se direktno na duži poluživotin vivoili na manje doze. što bi u većini okolnosti predstavljalo poželjnu realizaciju ovog pronalaska. Izotopski obeleženo jedinjenje predstavljeno formulom I u skladu sa zahtevom 1 generalno se može dobiti izvođenjem postupaka prikazanih u sinteznim šemama sa odgovarajućim opisom, u delu sa primerima i u delu sa dobijanjem u okviru ovog teksta, i to tako što se izotopski neobeleženi reaktant zamenjuje dostupnim izotopski obeleženim reaktantom.
Deuterijum (<2>H) takođe može biti dodat u jedinjenje predstavljeno formulom I u skladu sa zahtevom I radi manipulisanja oksidativnim metabolizmom jedinjenja preko primarnog kinetičkog izotopskog efekta. Primarni kinetički izotopski efekal je promena brzine hemijske reakcije do koje dolazi razmenom izotopskih jezgara, što je sa druge strane izazvano promenom energija osnovnog stanja neophodnih za formiranje kovalentne veze nakon izotopske razmene. Razmena sa težim izotopom obično rezultuje smanjenjem energije osnovnog stanja hemijske veze. što dovodi do redukcije brzine kod raskidanja veza u sporom stupnju. Ukoliko se raskidanje veza dešava u prevojnom regionu ili oko njega duž koordinate reakcije koja daje više produkata, stope distribucije produkata mogu značajno da budu izmenjene. Radi pojašnjenja, uzmimo da se deuterijum veže za atom ugljenika na nerazmenijivom položaju, razlike u brzini ksi/kr) = 2-7 biće tipične. Ako se ova razlika u brzini uspešno primeni na jedinjenje predstavljeno formulom 1 u skladu sa zahtevom 1 koje je podložno oksidaciji, profil ovog jedinjenjain vivomože drastično da se promeni i da rezultuje poboljšanim farmakokinetičkitn svojstvima.
Prilikom otkrivanja i razvijanja terapeutskih agenasa, stručno lice pokušaće da optimizuje farmakokinetičke parametre, trudeći se da zadrži poželjna svojstvain vitro.Normalno je pretpostaviti da su mnoga jedinjenja sa lošim farmakokinetičkim profilima podložna oksidativnom metabolizmu. Dostupnein vitroprobe sa mikrozomima jetre daju vredne informacije o toku oksidativnog metabolizma ove vrste, što sa druge strane daje prostor za racionalni dizajn deuterisanih jedinjenja predstavljenih formulom 1 u skladu sa zahtevom I, i to sa poboljšanom stabilnošću u vidu otpora na taj oksidativni metabolizam. Značajna poboljšanja time se ostvaruju u farmakokineiičkim profilima jedinjenja predstavljenih formulom I u skladu sa zahtevom I i oni se mogu kvantitativno prikazati u pogledu produženja poluživota//; vivo(t/2), koncentracije pri maksimalnom terapeutskom efektu (Cn,ax). regije ispod krive odgovora na dozu (AUC) i F; a i u smislu smanjenog klirensa. doze i troškova materijala.
U nastavku sledi ilustracija prethodno navedenog: jedinjenje predstavljeno formulom I u skladu sa zahtevom 1 sa potencijalnim višestrukim mestirna napada tokom procesa oksidativnog metabolizma, na primer atomi benzil vodonikovih atoma i atomi vodonika vezani za atome azota, dobija se kao niz analoga kod kojih se razne kombinacije atoma vodonika zamenjuju atomima deuterijuma, tako da neki. većina ili svi atomi vodonika budu zamenjeni atomima deuterijuma. Utvrđivanjem poluživota omogućeno je pouzdano i tačno utvrđivanje u kojoj meri je došlo do povećanja otpora na oksidativni metabolizam. Na taj način, ustanovljeno je da poluživot polaznog jedinjenja može da bude produžen i do 100% kao rezultat ove vrste razmene vodonika sa deuterijumom.
Razmena vodonika sa deuterijumom kod jedinjenja predstavljenog formulom I u skladu sa zahtevom 1 može da se primeni i radi ostvarivanja poželjne modifikacije metabolitskog spektra osnovnog jedinjenja kako bi se neželjeni toksični metaboliti redukovali ili eliminisali. Na primer, ukoliko nastane toksični metabolit raskidanjem oksidativne ugljenovodonične veze (C-H). može se sasvim logično pretpostaviti da će deuterisani analog u velikoj meri umanjiti ili eiiminisati produkciju neželjenog metabolita. Čak i ukoliko određena reakcija oksidacije nije deo sporog stupnja. Više stručnih informacija u vezi sa razmenom vodonika sa deuterijumom dostupno je, na primer. kod Hanclikaet al..Ž. org. hem. 55, 3992-3997. 1990, Rajderaet al../',. org. hem. 52. 3326-3334, 1987. Fostera, Nap. otp. na lekove. 14. 1-40." 1985, Žiletaet al.Biohemija 33(10) 2927-2937. 1994 i Džarmanaet al.Kancerogeneza 16(4), 683-688. 1993.
Pronalazak se takođe odnosi i na medikamente koji obuhvataju najmanje jedno jedinjenje predstavljeno formulom I u skladu sa zahtevom 1 i/ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. solvate i stereoizomere, uključujući i smeše u svim razmerama. kao i ekscipijense i/ili adjuvanse.
Farmaceutski preparati mogu da se daju u obliku dozirnih jedinica koje sadrže prethodno određenu količinu aktivnog sastojka po dozirnoj jedinici. Takva jedinica može da sadrži, na primer. 0.5 mg do 1 g, poželjno 1 mg do 700 mg, a posebno poželjno 5 mg do 100 mg jedinjenja koje je deo pronalaska, u zavisnosti od stanja koje se leči, metoda davanja i starosti, težine i zdravstvenog stanja pacijenta, a farmaceutski preparati mogu da se daju u obliku dozirnih jedinica koje sadrže prethodno određenu količinu aktivnog sastojka po dozirnoj jedinici. Poželjni preparati za dozimu jedinicu jesu oni koje sadrže dnevnu dozu ili deo doze, kako je gore opisano, ili odgovarajući udeo aktivnog sastojka. Uz to, farmaceutski preparati ove vrste mogu se pripremati na osnovu procesa opšte poznatih u farmaceutskoj struci.
Farmaceutski preparati mogu biti prilagođeni za davanje bilo kojim željenim i pogodnim metodom, na primer oralno (uključujući bukalni i sublingvalni metođ), rektalno, nazalno, topikalno (uključujući bukalno, sublingvalno i transdermalno). vaginalno ili parenteralno (uključujući supkutano, intramuskularno. intravenozno ili intradennalno). Ti preparati mogu se pripremati primenom svih procesa poznatih u farmaceutskoj struci, i to. na primer, kombinovanjem aktivnog sastojka sa ekscipijensima ili adjuvansima.
Farmaceutski preparati prilagođeni za oralnu upotrebu mogu se davati kao zasebne jedinice, na primer. u vidu kapsula ili tableta: praškova ili granula; rastvora ili suspenzija u tečnostima koje jesu ili nisu na bazi vode: jestivim penama ili hrani na bazi pene; ili tečnim emulzijama sa uljem u vodi ili sa vodom u ulju.
Tako. na primer. kada je reč o oralnoj primeni u obliku tablete ili kapsule, komponenta aktivnog sastojka može da se kombinuje sa oralnim, netoksičnim i farmaceutski prihvatljivim inertnim ekscipijensom. kao što je. na primer. etanol. glicerol, voda i si. Praškovi se pripremaju usitnjavanjem jedinjenja do odgovarajuće finoće i njegovim mešanjem sa farmaceutskim ekscipijensom koji je na sličan način usitnjen, a to može biti neki od jestivih ugljenih hidrata, kao škrob ili manitol. Aroma, konzervans. disperzant i boja mogu takođe biti prisutni.
Kapsule se proizvode tako što se pripremi praškasta smeša na goreopisan način, a zatim se njom pune oblikovane želatinske školjke. Glidanti i lubrikanli. kao sto je, na primer. visokodisperzivna kremna kiselina, talk, magnezijum stearat. kalcijum stearat ili polietilen glikol u čvrstom obliku, mogu se dodati praškasloj smeši pre postupka punjenja. Dezintegransi ili solubilizatori. kao što su. na primer. agar-agar. kalcijum karbonat ili natrijum karbonat mogu takođe biti dodali kako bi se poboljšala distribucija medikamenta nakon uzimanja kapsule.
Uz to, ukoliko se to traži ili je potrebno, odgovarajući vezivni agensi, lubrikanti i dezintegransi. kao i boje mogu da se dodaju smeši. Odgovarajući vezivni agensi su škrob, želatin. prirodni šećeri kao. na primer. glukoza ili beta-laktoza. zaslađivači dobijeni od kukuruza, prirodne i sintetičke gume kao. na primer. akacija, tragakant ili natrijum alginat, karboksimetilceluloza, polietilen glikol. voskovi i si. Lubrikanti koji se mogu koristiti za pripremu ovih dozirnih oblika jesu natrijum oleat, natrijum stearat. magnezijum stearat, natrijum benzoat, natrijum acetat. natrijum hlorid i si. Dezintegransi obuhvataju. između ostalog, i škrob, metilcelulozu, agar. bentonit. ksantansku gumu i si. Tablete se mogu proizvoditi, na primer, tako što sc pripremi praškasta smeša, zatim se izvrši granulacija i suvo komprimovanje smeše, uz dodavanje lubrikanta i dezintegransa, a zatim se cela smeša komprimuje kako bi se dobile tablete. Praškasta smeša priprema se tako što se pomeša jedinjenje prethodno usitnjeno na odgovarajući način sa razređivačem ili bazom, kao sto je gore opisano, a fakultativno može i sa vezivnim agensom kao. na primer, karboksimetilceluloza, alginat, želatin ili polivinil-pirolidon, zatim sredstvom protiv rastvaranja kao, na primer, parafin, sredstvom za podsticanje apsorpcije kao, na primer. kvaternarna so i/ili apsorberom kao, na primer, bentonit, kaolin ili đikalcijuni fosfat. Granulacija praškaste smeše može se obaviti potapanjem u vezivni agens kao što je, na primer, sirup, pasta od škroba, biljni lepak akadije ili rastvori celuloze ili polimerni materijali, nakon čega se ona pod pritiskom propušta kroz sito. Kao zamena za granulaciju. praškasta smeša može da se propusti i kroz uređaj za tabletiranje. čime se dobijaju grumeni nejednakog oblika, koji se zatim razbijaju radi dobijanja granula. Granulama može da se doda lubrikant, i to stearinska kiselina, stearat, talk ili mineralno ulje, kako bi se sprečilo lepljenje materijala za kalupe za izradu tableta. Smeša sa lubrikantom zatim se komprimuje i dobijaju se tablete. Jedinjenja koja su deo pronalaska mogu da se kombinuju zajedno sa tečnim inertnim ekscipijensom, a zatim direktno komprimuju u tablete, bez granulacije ili suvog komprimovanja. Može se stvoriti providni ili neprovidni zaštitni sloj koji se sastoji šelaka, sloja šećera ili polimera. kao i sjajni sloj od voska. Ovim slojevima mogu biti dodate boje kako bi se razlikovale različite dozirne jedinice.
Tečnosti za oralnu primenu kao, na primer. rastvor, sirupi i eliksiri, mogu biti pripremljene u obliku dozirnih jedinica, tako da određena doza sadrži prethodno utvrđenu količinu jedinjenja. Sirupi mogu da se pripreme rastvaranjem jedinjenja u vodenom rastvoru sa odgovarajućom aromom, dok se eliksiri pripremaju pomoću netoksičnog alkoholnog nosača. Suspenzije mogu da se pripreme disperzijom jedinjenja u netoksičnom nosaču. Takođe je moguće dodati solubilizatore i emulgatore kao što su. na primer, etoksilovani izostearil alkoholi i polioksietilen sorbitol etri, konzervansi. aditivi sa aromom u vidu ulja mente ili prirodni zaslađivači ili saharin. kao i drugi veštački zaslađivači i si.
Preparati za đozirnu jedinicu za oralnu primenu mogu se. po želji, stavljali u mikrokapsule. Preparat može da se pripremi i tako da njegovo oslobađanje bude produženo ili odloženo, i to oblaganjem ili usađivanjem usitnjenog materijala u poliincre. voskove i si.
Jedinjenja predstavljena formulom 1 u skladu sa zahtevom I i njihove soli i solvati mogu se davati i pomoću lipozom.skih sistema, kao što su. na primer. male unilamelarne vezikule, velike unilamelarne vezikule i multilamelame vezikule. Lipozomi mogu da se dobiju od raznih fosfolipida. kao što su, na primer. holesterol. stearilamin ili fosfatidilholini.
Jedinjenja predstavljena formulom I u skladu sa zahtevom I i njihove soli i solvati takođe mogu da se unesu preko monoklonalnih antitela kao pojedinačnih nosača za koje se molekuli jedinjenja mogu vezati. Jedinjenja mogu biti kupiovana i sa rastvorljivim polimerima kao ciljanim nosačima medikamenta. Među te polimere ubrajaju se polivinilpirolidon, piran kopolimer. polihidroksipropilmetakrilamidofenoi. polihidroksietilaspartamidofenol ili polietilen oksid polilizin, supstituisan radikalima palmitoila. Jedinjenja se takođe mogu kuplovati sa kategorijom biorazgrađljivih polirnera koji su pogodni za postizanje kontrolisanog ispuštanja medikamenta, i to su na primer polilaktična kiselina, poli-epsilon-kapro-lakton, polihidroksibuterna kiselina, poliortoestri, poliacetali, polidihidroksipirani, policijanoakrilati i unakrsno ukršteni ili amfipatični blok kopolimeri hidrogelova.
Farmaceutski preparati pogodni za transdermalnu aplikaciju mogu se davati u vidu pojedinačnih flastera radi produženog kontakta sa epidermisom subjekta, lako, na primer, aktivni sastojak može iz flastera da se unese u organizam jonloforezom onako kako je opisano u opštim uslovima u Farmaceutskom istraživanju, 3(6). 318 (1986).
Farmaceutska jedinjenja prilagođena za topikalnu primenu mogu biti u obliku masti, krema, suspenzija, losiona, praškova. rastvora, paste, gelova, sprejeva. aerosola ili ulja.
Za tretman oka ili drugih spoljnih tkiva, na primer usta i kože, preparati se primenjuju u vidu topikalne masti ili kreme. Kada je reč o pripremi masti, aktivni sastojak može da se pomeša sa parafinskom kremastorn bazom ili onom koja se može mešati sa vodom. Isto tako, aktivni sastojak može se da se iskoristi za pripremu kreme, i to pomoću kreiraste baze sa uljem u vodi ili sa vodom u ulju.
Farmaceutski preparati prilagođeni za topikalnu primenu kod tretmana oka obuhvataju kapi za oči. kod kojih je aktivni sastojak razređen ili rastvoren pomoću odgovarajućeg nosača, konkretno rastvarača na bazi vode.
Farmaceutski preparati pogodni za topikalnu primenu u ustima obuhvataju lozenge. pastile i tečnosti za usta.
Farmaceutski preparati pogodni za rektalnu primenu mogu se davati u obliku supozitorija ili klistira.
Farmaceutski preparati prilagođeni za nazalnu primenu kod kojih je nosač čvrsta supslanca obuhvataju praškove krupnije finoće sa veličinom čestica između 20-500 mikrona koji se uzimaju udisanjem, tj. brzom inhalacijom kroz nazalne puteve iz posude sa praškom koja se drži blizu nosa. Pogodni preparati za primenu u vidu nazalnog spreja ili kapi za nos sa tečnim nosačem obuhvataju rastvore aktivnog sastojka u vodi ili ulju.
Farmaceutski preparati pogodni za unos inhalacijom obuhvataju fine praškove koji se mogu pakovati kao raspršivači pod pritiskom sa aerosolima. nebulizatorima ili insuflatorima.
Farmaceutski preparati za vaginalnu primenu mogu biti u vidu pesara. tampona, krema, gelova, paste, pene ili spreja.
Farmaceutski preparati za parenteralnu primenu obuhvataju sterilne injekcione rastvore koji jesu ili nisu na bazi vode, sa antioksidansima. puferima. bakteriostaticima i drugim rastvorenim materijama pomoću kojih preparat postaje izotonićan sa krvlju tretiranog subjekta, kao i sterilne suspenzije koji jesu ili nisu na bazi vode i koje mogu sadržati suspenziona sredstva i zgušnjivače. Preparati mogu da budu u pakovanjima sa jednom ili više doza, kao što su na primer zaptivene arnpule i bočice koje se čuvaju u liofllizovanom obliku, tako da je odmah pre upotrebe eventualno potrebno dodati samo tečni sterilni nosač, kao što je voda, na primer, kada se preparat daje u vidu injekcije. Rastvori za injekcije i suspenzije prema receptu mogu se pripremiti od sterilnih praškova. granula ili
tableta.
Nije potrebno posebno napominjati da pored ovih posebno pomenulih konstituenata. preparati mogu sadržati i druge agense koji su poznati i uobičajeni u struci, u zavisnosti od vrste preparata: shodno tome. preparati namenjeni oralnoj primeni. primera radi. mogu sadržati aromu.
Terapeutski delotvorna količina jedinjenja predstavljenog formulom I u skladu sa zahtevom I zavisi od velikog broja faktora, među kojima su, na primer, i starost i težina životinje, tačno stanje zbog koga se primenjuje tretman i njegova ozbiljnost, priroda preparata i metođ davanja, a tu količinu na kraju uvek utvrđuje ordinirajući lekar ili veterinar. Međutim, delotvorna količina jedinjenja koje je deo pronalaska obično se kreće između 0,1 do 100 mg/kg telesne težine subjekta (sisara) dnevno, a tipično se kreće od I do 10 mg/kg telesne težine na dan. Dakle, stvarna dnevna doza za odraslog sisara težine 70 kg obično je između 70 i 700 mg i ona se može davati kao jedna dnevna doza ili podeljena u više delimičnih doza u toku dana (na primer, dve, tri. Četiri, pet ili šest), tako da ukupna dnevna doza bude ista. Delotvorna količina soli ili solvata ili njihovog fiziološki funkcionalnog derivata može se odrediti kao deo delotvorne količine jedinjenja koje je deo pronalaska. Može se uzeti da su slične doze odgovarajuće za lečenje drugih stanja koja su gore pomenuta.
Kombinovani tretman ove vrste može se postići pomoću istovremenog, sukcesivnog ili razdvojenog unosa pojedinih komponenata koje čine tretman. Kombinovani proizvodi ove vrste sadrže jedinjen ja ko ja su deo pronalaska.
Pronalazak se takode odnosi na medikamente koji sadrže bar jedna jedinjenje predstavljeno formulom I u skladu sa zahtevom I i/ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. solvate i stereoizomere, uključujući i njegove smeše u svim razmerama, uz bar još jedan aktivni sastojak medikamenta.
Pronalazak se takođe odnosi na set sa odvojenim pakovanjima koja sadrže:
(a) delotvornu količinu jedinjenja predstavljenog formulom I u skladu sa zahtevom I
i/ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli. solvata i stereoizomera. uključujući i njegove smeše u svim razmerama i
(b) delotvornu količinu dodatnog aktivnog sastojka medikamenta.
Set sadrži odgovarajuće posude, kao što su kutije, pojedinačne bočice, vreće ili ampulc. Set može da se sastoji, na primer. od pojedinačnih ampula. pri čemu svaka sadrži delotvornu količinu jedinjenja predstavljenog formulom I u skladu sa zahtevom 1 i/ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. solvate i stereoizomere. uključujući njegove smeše u svim razmerama. kao i delotvornu količinu aktivnog sastojka medikamenta u razređenom ili liofilizovanom obliku. ..Tretiranje"' kao termin koji se koristi u ovom tekstu znači ublažavanje, u celosti ili delimično, simptoma povezanih sa poremećajem ili oboljenjem, ili usporavanje, odnosno zaustavljanje daljeg napredovanja ili pogoršanja tih simptoma, kao i prevenciju ili profilaksu oboljenja ili poremećaja kod subjekta kod koga postoji rizik od pojave oboljenja ili poremećaja.
Pod terminom „delotvorna količina", kada govorimo o jedinjenju predstavljenom formulom (I) u skladu sa zahtevom i, može se podrazumevati količina neophodna za ublažavanje, u celosti ili delimično, simptoma povezanih sa poremećajem ili oboljenjem, ili usporavanje, odnosno zaustavljanje daljeg napredovanja ili pogoršanja tih simptoma, kao i prevenciju ili profilaksu oboljenja ili poremećaja kod subjekta kod koga postoji rizik od pojave oboljenja ili poremećaja, među kojima su upalni procesi, imunološki poremećaji, kancer ili metabolički poremećaji.
Kod jednog realizovanog oblika, delotvorna količina jedinjenja predstavljenog formulom (I) u skladu sa zahtevom 1 predstavlja onu količinu koja biloin vitroiliin vivodovodi do inhibicije tankiraze u ćeliji. Kod nekih realizovanih oblika, delotvorna količina jedinjenja predstavljenog formulom (I) u skladu sa zahtevom I dovodi do inhibicije tankiraze u ćeliji od 10%. 20%, 30%, 40%, 50%, 60%. 70%, 80%, 90% ili 99% u odnosu na dejstvo tankiraze u netretiranoj ćeliji. Delotvorna količina jedinjenja predstavljenog formulom (I) u skladu sa zahtevom 1, u jednom farmaceutskom sastavu na primer. može biti tolika da se postigne željeni efekat; na primer, od 0.005 mg/kg telesne težine subjekta do 10 mg/kg telesne težine subjekta u dozirnoj jedinici, bilo da je reč o oralnoj ili parenteralnoj primeni.
KORIŠĆENJE
Ova jedinjenja pogodna su za korišćenje u vidu farmaceutskih aktivnih sastojaka kod sisara. a posebno kod ljudi, i to za lečenje kancera. multiple skleroze, kardiovaskularnih oboljenja, povreda centralnog nervnog sistema i raznih vrsta upala.
Ovaj pronalazak obuhvata i primenu jedinjenja predstavljenih formulom I u skladu sa zahtevom 1 i/ili njihovih fiziološki prihvatljivih soli i solvata za pripremu medikamenata za lečenje ili prevenciju kancera, multiple skleroze, kardiovaskularnih oboljenja, povreda centralnog nervnog sistema i raznih vrsta upala.
Primeri upalnih oboljenja su reumatoidni artritis, psorijaza, kontaktni dermatitis. odložena alergijska reakcija i si.
Takođe su obuhvaćene i primene jedinjenja predstavljenih formulom I u skladu sa zahtevom I i/ili njihovih fiziološki prihvatljivih soli i solvata za pripremu medikamenata namenjenih lečenju ili prevenciji oboljenja ili stanja indukovanih dejstvom tankiraze kod sisara, pa se obolelom sisani kome je ova terapija potrebna prema ovom metodu daje terapeutski delotvorna količina jedinjenja koje je deo pronalaska. Terapeulska količina varira u zavisnosti od konkretnog oboljenja i nju može utvrditi stručno lice bez ikakvih problema.
Izraz ..oboljenja ili stanja indukovana dejstvom tankiraze"odnosi se na patološka stanja koja zavise od dejslva jedne ili više tankiraza. Oboljenja povezana sa dejstvom tankiraze jesu kancer. multipla skleroza, kardiovaskularna oboljenja, povrede centralnog nervnog sistema i razni oblici upala.
Ovaj pronalazak posebno se odnosi na jedinjenja predstavljena formulom I u skladu sa zahtevom I i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvate, tautomere i stereoizomere, uključujući i smeše u svim razmerama. radi primene u lečenju oboljenja kod kojih inhibicija, regulacija i/ili modulaciona inhibicija tankiraze ima svoju ulogu.
Ovaj pronalazak posebno se odnosi na jedinjenja predstavljena formulom I u skladu sa zahtevom i i njihove farmaceutski prihvatljive soli. solvate, tautomere i stereoizomere, uključujući i smeše u svim razmerama, radi primene u cilju inhibicije tankiraze.
Ovaj pronalazak posebno se odnosi na jedinjenja predstavljena formulom I u skladu sa zahtevom I i njihove farmaceutski prihvatljive soli, solvate, tautomere i stereoizomere, uključujući i smeše u svim razmerama, radi primene u lečenju kancera, multiple skleroze, kardiovaskularnih oboljenja, povreda centralnog nervnog sistema i raznih vrsta upala.
Ovaj pronalazak posebno se odnosi na jedinjenja koja se primenjuju u okviru metoda lečenja ili prevencije kancera, multiple skleroze, kardiovaskularnih oboljenja, povreda centralnog nervnog sistema i raznih vrsta upala, pri čemu je obuhvaćeno i samo davanje subjektu kome je to potrebno delotvorne količine jedinjenja predstavljenog formulom I u skladu sa zahtevom 1 ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. tautomera. stereoizomera ili solvata.
Još jedan aspekt koji se ovde pominje jeste primena jedinjenja kod metoda inhibicije tankiraze u ćeliji koja eksprimuje pomenutu kinazu, što obuhvata i tretiranje pomenute ćelije delotvornom količinom jedinjenja predstavljenog formulom I u skladu sa zahtevom 1 ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, tautomera. stereoizomera ili solvata.
Reprezentativna upalna stanja kod kojih je korisna primena jedinjenja predstavljenih formulom I u skladu sa zahtevom 1 u lečenju ili prevenciji jesu, između ostalog. ANCA (antineutrofilno citoplazmatsko antitelo) negativni vaskulilis (npr. kada je Syk funkcija povezana sa adhezijom neutrofila. njihovom dijapeđezom i/ili aktivacijom), psorijaza. astma, alergijski rinitis, alergijski konjunktivitis. (ironična koprivnjača, osip. anafilaksa, bronhitis, hronična opstruktivna bolest pluća, cistična fibroza. upalno oboljenje creva. sindrom nervoznog creva, giht. Kronova bolest, mukozni kolitis, ulcerativni kolitis. alergija na crevne antigene (kao glutenska enteropatija). dijabetes (npr. dijabetes tipa I i dijabetes tipa II) i gojaznost. Kada govorimo o nekim realizovanim oblicima, upalno stanje koje može da se tretira jeste dermatološko stanje kao. na primer. psorijaza. koprivnjača, osip, ekcem, skleroderma ili dermatitis. Neki realizovani oblici koriste se za tretman plućnih upalnih stanja kao što su, na primer. astma, bronhitis, hronična opstruktivna bolest pluća (HOBP) ili adultni / akutni respiratorni distres sindrom (ARDS). Drugi realizovani oblici se koriste kod gastrointestinalnih upalnih stanja, kao što su, na primer. upalno oboljenje creva, ulcerativni kolitis, Kronova bolest, idiopatsko upalno oboljenje creva, sindrom nervoznog creva ili spastični kolon.
Reprezentativni oblici kancera kod kojih je korisna primena jedinjenja predstavljenih formulom I u skladu sa zahtevom 1 u lečenju ili prevenciji jesu. između ostalog, kancer glave, vrata. oka. usta, grla. jednjaka, bronhija, larinksa. farinksa. grudi, kostiju, pluća, kolona, rektuma. želuca, prostate, mokraćne bešike. materice, grlića materice, dojke, jajnika, testisa ili drugih reproduktivnih organa, zatim kože. štilaste žlezde. krvi. limfnih čvorova, bubrega, jetre, pankreasa, mozga, centralnog nervnog sistema, čvrsti tumori i tumori ćelija krvi.
Reprezentativna kardiovaskularna oboljenja kod kojih je korisna primena jedinjenja predstavljenih formulom I u skladu sa zahtevom I u lečenju ili prevenciji jesu. između ostalog, restenoza. ateroskleroza i njene posledice kao što su šlog, infarkt miokarda. ishemijska oštećenja srca. pluća, gastrointestinalnih organa, bubrega, jetre, pankreasa, slezine ili mozga.
Ovaj pronalazak odnosi se na jedinjenja koja se primenjuju u okviru metoda lečenja proliferativnih autoimunih, upalnih ili infektivnih oboljenja i poremećaja, što podrazumeva davanje subjektu kome je to potrebno terapeutski delotvorne količine jedinjenja predstavljenog formulom I u skladu sa zahtevom I.
Prednost ovom pronalasku daje se kada je reč o primeni u okviru metoda tretiranja kancera.
Posebna prednost ovom pronalasku daje se kada je reč o primeni jedinjenja u okviru metoda lečenja kancera, pri čemu primena može biti istovremena, sukcesivna ili naizmenična sa primenom još najmanje jednog drugog aktivnog terapijskog agensa.
Otkrivena jedinjenja predstavljena formulom 1 u skladu sa zahtevom I mogu se primenjivati u kombinaciji sa drugim poznatim terapijskim agensima, uključujući antikancerogene agense. U ovom tekstu, termin ..antikancerogeni agens"podrazumeva bilo koju vrstu agensa koji se daje pacijentu obolelom od kancera radi lečenja te bolesti.
Antikancerogeni tretman koji je ovde pomenut može se primenjivati kao jedinstvena terapija ili se. uz jedinjenje koje je deo pronalaska, može kombinovati sa konvencionalnom hirurgijom ili radioterapijom ili hemoterapijom. Hemoterapija može da se sastoji od jedne ili više kategorija antitumorskih agenasa koje su navedene u nastavku: (i) antiproliferativni / antineoplastični / DNK-degenerativni agensi i njihove kombinacije u primeni u okviru medicinske onkologije, kao što su alkilirajući agensi (npr. cis-platin, karboplatin, cikiofosfamid. azotni iperit, melfalan. hloroambucil, busulfan i nitrozoureje); antimetaboliti (na primer, antifolati kao što su fluoropirimidini kao 5-fluorouracil i tegafur. raltitreksed. metotreksat, citozin arabinozid. hidrokiureja i gemcitabin); antitumorski antibiotici (na primer antraciklini. kao adriamicin. bleomicin, doksorubicin. daunomicin. epirubicin. idarubicin, mitomicin-C. daklinomicin i mitramicin): antimitotički agensi (na primer vinka alkaloiđi, kao vinkristin. vinblastin. vindezin i vinorelbin, odnosnolaksoidi. kao taksol i taksoter): inhibitori topoizomeraze (na primer epipodofiloloksini. kao etopozid i tenipozid. amsakrin, topotekan, irinotekan i kamptotecin) i ćelijski diferencijacioni agensi (na primer retinoična kiselina u potpuno trans formi. 13-cis-retinoična kiselina i fenretinid): (ii) citoslatski agensi, kao što su antiestrogeni (na primer tamoksifen. toremifen, raloksifen. droloksifen i jodoksifen). reduktor osetljivosti cstrogenskih receptora (na primer fulvcstrant). antiandrogcni (na primer bikalutamid. tlutamid. nilutamid i ciproteron acetat), I.HRH antagonisti i I.HR1I agonisti (na primer goserelin, leuprorelin i buserelin). progesteroni (na primer megeslrol acetat), inhibitori aromalaze (na primer anastrozol. letrozol. vorazo! i egzemestan) i inhibitori 5a-ređuktaze. kao što je finasterid: (iii) agensi koji inhibišu invaziju ćelija kancera (na primer inhibitori metaloproteinaze, kao marimastat i inhibitori funkcije receptora aktivatora urokinaze i plazminogena); (iv) inhibitori funkcije faktora rasta, na primer, ti inhibitori sadrže anlitela faktora rasta, antitela receptora za faktore rasta (na primer anti-erbb2 antitelo trastuzumab [Herceptin™] i anti-erbbl antitelo cetuksimab [C225]), inhibitori farnezil transferaze. inhibitori tirozin kinaze i inhibitori serin/treonin kinaze, na primer inhibitori porodice epidermalnih faktora rasta (na primer inhibitori tirozin kinaze iz porodice BGFR. kao što su N-(3-hloro-4-fluorofeniI)-7-metoksi-6-(3-morfolinopropoksi) hinazolin-4-amin (gefilinib, AZD1839), N-(3-etinil-fenil)-6,7-bis (2-metoksietoksi) hinazolin-4-amin (erlotinib, OSI-774) i 6-akrilamido-N-(3-hloro-4-fluorofenil)-7-(3-morfolinopropoksi)-hinazolin-4-amin (Cl 1033) ), na primer inhibitori porodice faktora rasta dobijenih od irombocita, kao i inhibitori porodice faktora rasta hepatocita; (v) antiangiogenski agensi, kao što su oni koji inhibišu dejstvo vaskularnog entotelijalnog faktora rasta (na primer antitelo za antivaskularni endotelni ćelijski faktor rasta bevacizumab |Avastin™]. jedinjenja kao ovo koja su prijavljena u međunarodnim zahtevima za prijavu patenata WO 97/22596. WO 97/30035, WO 97/32856 i WO 98/13354) i jedinjenja koja funkcionišu na druge načine (na primer linomid, inhibitori av(33 funkcije integrina i angiostatin); (vi) agensi koji oštećuju krvne sudove, kao kombrelastatin A4 i jedinjenja prijavljena u međunarodnim zahtevima za prijavu patenata VVO 99/02166,
VVO 00/40529, WO 00/41669. WO 01/92224. VVO 02/04434 i WO 02/08213: (vii) antisens terapija, kao na primer ona koja je usmerena na ciljeve pomenute prethodno, kao što je ISIS 2503 i anti-Ras antisens; (viii) genska terapija, koja obuhvata, primera radi, pristup zamene aberantnih gena. kao što su p53 ili aberantni BRCAI ili BRCA2. zatim pristup preko GDEPT (enzimska terapija na bazi prolcka usmerena na gene) u vidu citozin deaminaze, timidin kinaze ili enzima bakterijske nitroreduktaze. kao i pristup pojačavanja pacijentove tolerancije na hemoterapiju ili radioterapiju pomoću
genske terapije za otpornost na više medikamenata i
(ix) imunoterapijski pristup, koji obuhvata, na primer, pristupex vivoiin vivoza povećavanje imunogenosti tumorskih ćeli ja kod pacijenta pomoću transfekcije citokinima, zatim pomoću interleukina 2. interleukina 4 ili stimulišućeg faktora kolonije granulocita i makrofaga. pristup za smanjenje anergije T-ćelija, pristup u okviru koga se primenjuju transfektovani imunociti, kao citokin-transfektovane dendritske ćelije, pristup koji predviđa korišćenje citokin-transfektovanih grupa tumorskih ćelija, kao i pristup u okviru koga se koriste antiidiotipska antitela.
Poželjno je, ali nije isključivo obavezno, da se medikamenti navedeni u tabeli I u nastavku kombinuju sa jedinjenjima predstavljenim formulom 1 u skladu sa zahtevom I.
Otkrivena jedinjenja predstavljena formulom I u skladu sa zahtevom 1 i njihovi farmaceutski prihvatljivi solvati. soli, tautomeri i stereoizomeri. uključujući i njihove smeše u svim razmerama, poželjno je da se primenjuju u kombinaciji sa imunomodulatorima. a posebno sa anti-PDL-l- ili IL-12.
Sledeće skraćenice odnose se na definicije u nastavku:
aq (vodeni), h (sat), g (gram), L (litar), mg (miligram). MHz (megaherc), min. (minut), mm (milimetar), mmol (milimol). mM (milimolarna). m.p. (tačka topljenja), eq (ekvivalent), ml. (mililitar), pl. (mikrolitar). ACN (acetonitril). AcOH (sirćetna kiselina). CDCb (deuterisani hloroform), CD3OD (deuterisani metanol), CH3CN (acetonitril). c-hex (cikloheksan). DCC (dicikloheksil karbodiimid). PCM (dihlorometan), DIC (diizopropil karbodiimid), DIEA (diizopropiletil-amin). DMF (dimetilformamid). DMSO (dimetilsulfoksid), DMSO-d6 (deuterisani dimetilsulfoksid). EDC (l-(3-dimelil-amino-propil)-3-etilkarbodiirnid), ESI (Elektrosprej jonizacija). EtOAc (etil acetat). Et20 (dietil etar), EtOH (etanol), IIATU (dimetilamino-([ I,2.3]triazolo(4.5-b|piridin-3-iloksi)-metilenj-dimetil-amonijum heksafluorofosfat). IIPLC (visokoefikasna tečna hromatografija). i-PrOFl (2-propanol). K2CO3(kalijum karbonat). LC (tečna hromatografija), MeOH (metanol). MgS().: (magnezijum sulfat). MS (masena spektrometrija), MTBF (Metil tert-butil etar). NaHCOj (natrijum bikarbonat). NaBFL (natrijum borhidrid), NMM (N-melil morfolin). NMR (nuklearna magnetna rezonanca). PvBOP (benzotriazol-I-il-oksi-tris-pirolidino-lbsfonijum heksafluorofosfat). RI (sobna temperatura). Rt (vreme retencije), SPE (ekstrakcija čvrstom fazom). TBTU (2-(l-H-benzotriazol-l-ir)-i.l.3,3-tetrametiluromijum tetrafluoroborat). U-A (trietilamin). TFA
(trifluoroacetatna kiselina), TUF (tetrahidrofuran), TLC (tankoslojna hromatografija). UV (ultravioletnoj.
Opis/'/ ; vitroproba
Skraćenice:
GST = glutation-S-transferaza
FRET = fluorescentno-rezonantni energetski transfer
HTRF® = (homogena vreineski razlučiva fluorescencija)
FIEPES = pufer 4-(2-hiđroksietil)-l-piperazin etansulfonske kiseline
DTT = ditiotreitol
BSA = serumski album in goveda
CHAPS = deterdžent
CHAPS = 3-[(3-holamidopropil)dimetilamonio|- l-propansulfonat
Streptavidin-Xlent<S> je konjugat streptavidina-XL665 visokog kvaliteta kud koga su uslovi za kuplovanje optimizovani kako bi se dobio konjugat unapređenih mogućnosti za određene vrste proba, a posebno za one kod kojih je neophodna visoka osetljivost.
Testiranje biohemijske aktivnosti tankiraze 1 i 2: proba auto-poli(ADP)ribozilacije
(autoPARzilacije)
Proba autoparzilacije izvedena je u dva koraka: enzimska reakcija, gde je tankiraza I. odnosno tankiraza 2 obeležena GST-om prenela biotinilovanu ADP-ribozu sa sebe na biotinilovan NAD kao kosupstrat i detekciona reakcija, gde je analiziran vremenski razlučiv FRET između anti-GST-a obeleženog kriptatom vezanog za GST obeleživač enzima i streptavidina obeleženog Xlentom(fi) vezanog za ostatak biotinske parzilacije. Pojava aktivnosti autoparzilacije bila je uočljiva direktno na osnovu porasta u HTRF signalu.
Proba autoparzilacije izvedena kao HTRF® (Cisbio. Kodole. Francuska) proba na 384 udubljenja pomoću Grajnerovih niskozapreminskih nb mikrotitarskih ploča sa 384 udubljenja koje su korišćene za visokoproduktivni skrining. 250 nM tankiraze I obeležene GST-om (1023-1327 aa), odnosno oko 250 nM tankiraze 2 obeležene GST-om (873-1166 aa) i 5 uM bio-NAD (Biolog. Life Science Inst.. Bremen, Nemačka) kao kosupstrat inkubirani su u ukupnoj zaprem ini od 5 uL (50 mM HEPES, 4 mM Mg-hlorida, 0,05% pluronskog F-68. 1.4 mM DTT. 0.5% DMSO. pH 7,7) u odsustvu ili prisustvu testnog jedinjenja (10-struka koncentracija rastvora) u trajanju od 90 minuta na 30°C. Reakcija je zaustavljena dodavanjem 1 uL 50 mM EDTA rastvora. 2 uL detekcionog rastvora (1,6 uM SA-Xlent® (Cisbio. Kodole. Francuska). 7,4 nM Anti-GST-K® (anti-GST obeležen sa Eu, Cisbio. Kodole. Francuska) u 50 mM HEPES-a. 800 mM KF. 0.1% BSA. 20 mM EDTA. 0,1% CHAPS. pH 7.0) dodato je. Nakon inkubacije u trajanju od Ih na sobnoj temperaturi, izmeren je HTRF pomoću Envision multimodalnog čitača (Perkin Elmer LAS Germanv GmbH) pri ekscitacionoj talasnoj dužini od 340 nm (laser) i emisionim talasnim dužinama od 615 nm i 665 nm. Utvrđen je odnos emisionih signala. Potpuna vrednost koja je korišćena dobijena je iz reakcije bez inhibitora. Farmakološka nulta vrednost koja je korišćena dobijena je od XAV-939 (Tocris) u konačnoj koncentraciji od 5 uM. Inhibitome vrednosti (IC50) utvrđene su bilo pomoću programa Symyx Assay F.xplorer® ili CondosseoCR: iz CieneData.
Merenje ćelijske inhibicije tankiraze
Budući daje za tankiraze utvrđeno da moduliraju vrednosti Aksina2 u ćelijama (Huanget al.2009, Nature), porast nivoa Aksina2 očitavan je kako hi se utvrdila ćelijska inhibicija tankiraze u probi koja se bazira na Luminexu.
Ćelije karcinoma kolona ćelijske linije DLDI unesene su na ploče sa 96 udubljenja. i to I,5xl0<4>ćelija po udubljenju. Narednog dana. ćelije su tretirane serijskim rastvorom testnog jedinjenja u sedam koraka u tri iste varijante, pri konačnoj koncentraciji DMSO od 0.3%. Nakon 24 sata, ćelije su lizirane u lizatnom puferu (20 mM Tris/HCI pH 8,0. 150 mM NaCl. 1% NP40, 10% glicerola), a lizati su očišćeni centrifugiranjem kroz filter ploču sa 96 udubljenja (0,65 um). Aksin2 protein izolovan je iz lizata ćelija inkubacijom zajedno sa monoklonalnim anti-Aksin2 antitelom (R&D Systems #MAB6078) koje se vezuje za fluorescentna karboksilna zrnca. Zatim se vezani Aksin2 ciljano detektuje pomoću poliklonalnog anti-Aksin2 antitela (Cell Signaling #2151) i odgovarajućeg PE-fluorescentnog sekundarnog antitela. Količina izolovanog Aksin2 proteina utvrđuje se pomoću mašine Luminex<:00>(Luminex Corporation) u skladu sa uputstvom proizvođača prebrojavanjem 100 događaja po udubljenju. Inhibicija tankiraze testnim jedinjenjima rezultuje višim vrednoslima Aksina2, što jc u direktnoj korelaciji sa porastom detektabilne fluorescencije. Kontrolne ćelije tretirane su samo rastvaračem (neutralni kontrolni uzorak) i sa referentnim tankiraza inhibitorom 1VVR-2 (3E-06 M), što je bio kontrolni uzorak za maksimalni porast vrednosti Aksina2. U cilju analize, dobijeni podaci normalizovani su u odnosu na netretirani kontrolni uzorak sa rastvaračem i obrađeni radi utvrđivanja vrednosti ECs« pomoću softvera Assav Explorer (Accelrvs).
Testiranje biohemijske aktivnosti PARP-1: proba autoparzilacije
Proba autoparzilacije izvedena je u dva koraka: enzimska reakcija, gde je PARP-1 obeležen His-om preneo biotinilovanu ADP-ribozu / ADP-ribozu na sebe sa biotinilovanog NAD / NAD kao kosupstrata i detekciona reakcija, gde je analiziran vremenski razlučiv FRET između anti-His antitela obeleženog kriptatom vezanog za His obeleživač enzima i streptavidina obeleženog Xlentom® vezanog za ostatak biotinske parzilacije. Pojava aktivnosti autoparzilacije bila je uočljiva direktno na osnovu porasta u HTRF signalu.
Proba autoparzilacije izvedena kao HTRF® (Cisbio. Kodole. Francuska) proba na 384 udubljenja pomoću Grajnerovih niskozapreminskih nb mikrotitarskih ploča sa 384 udubljenja. 35 nM PARP-1 obeleženog His-om (ljudski, rekombinantni. Enzo Life Sciences GmbH, Lerah. Nemačka) i smeša 125 nM bio-NAD (Biolog, Life Science Inst., Bremen. Nemačka) i 800 nM NAD kao kosupstrat inkubirani su u ukupnoj zaprem ini od 6 pL (100 mM Tri s/H CL 4 mM Mg-hlorida. 0,01% IGEPAL® CA630. I mM DTT. 0.5% DMSO. pH 8. 13 ng/pl. aktiviranog DNK (BPS Bioscience. San Dijego. SAD)) u odsustvu ili prisustvu testnog jedinjenja (10-struka koncentracija rastvora) u trajanju od 150 minuta na 23°C. Reakcija je zaustavljena dodavanjem 4 uL stop/detekcionog rastvora (70 nM SA-Xlent® (Cisbio. Kodole. Francuska). 2,5 nM Anti-His-K® (anti-His obeležen sa Eu. Cisbio, Kodole, Francuska) u 50 mM HEPES-a, 400 mM KF. 0.1% BSA, 20 mM EDTA. pH 7.0). Nakon inkubacije u trajanju od Ih na sobnoj temperaturi, izmeren je HTRF pomoću Envision multimodalnog čitača (Perkin Elmer LAS German) GmbH) pri ekscitacionoj talasnoj dužini ud 340 nm (laser) i emisionimlalasnim dužinama od 615 nm i 665 nm. Utvrđen je odnos emisionih signala. Potpuna vrednost koja je korišćena dobijena je iz reakcije bez inhibitora. Farmakološka nulta vrednost koja je korišćena dobijena je od Olapariba (Lclabs. Vobum. SAD) u konačnoj koncentraciji od I uM Inhibitome vrednosti (IC50) utvrđene su bilo pomoću programa Symyx Assav ExpIorer® ili Conđosseo® iz Gene Data.
Testiranje biohemijske aktivnosti TNKS 1 i 2: određivanje aktivnosti metodom ELISA
(proba autoparzilacije)
U cilju analize aktivnosti autoparzilacije kod TNKS 1 i 2 određena je aktivnost metodom ELISA: u okviru prvog koraka. TNKS obeležene GST-om uhvaćene su na ploči sa glutationskim premazom. Zatim je urađena proba aktivnosti pomoću biotinilovanog NAD u prisustvu/odsustvu jedinjenja. Tokom enzimske reakcije, TNKS obeležene GST-om prenele su biotinilovanu ADP-ribozu na sebe sa biotinilovanog NAD-a kao kosupstrata. Radi detekcije, dodat je streptavidin-HRP konjugat koji se vezao za biotinilovane TNKS i time se zadržao na pločama. Količina biotinilovanih. odnosno autoparzilovana TNKS detektovana je pomoću luminescentnog supstrata za I1RP. Nivo luminescentnog signala bio je u direktnoj korelaciji sa količinom autoparzilovane TNKS. pa samim tim i sa aktivnošću TNKS.
Određivanje aktivnosti metodom ELISA urađeno jc pomoću mikrotitarskih ploča sa 384 udubljenja i glutationskim premazom (ploča sa glutationskim premazom za brzo zadržavanje. Biocat, Hajdelberg, Nemačka). Ploče su prethodno ekvilibrisane pomoću PBS. Zatim su inkubirane sa 50 uL 20 ng Tnks-I obeležene GST-om (1023-1327 aa. dobijene u laboratoriji) po udubljenju. odnosno Tnks-2 obeležene GST-om (873-1166 aa. dobijene u laboratoriji) u puferu (50 mM HEPES-a. 4 mM Mg-hlorida. 0,05% Pluronskog F-68. 2 mM DTT, pH 7.7) preko noći na 4°C. Ploče su ispirane 3 puta pomoću PBS-Tween-20. Udubljenja su blokirana inkubacijom na sobnoj temperaturi u trajanju od 20 minuta pomoću 50 ul. blokirajućeg pufera (PBS, 0.05% Tween-20. 0,5% BSA). Nakon toga ploče su 3 puta ispirane sa PBS-Tween-20. Enzimska reakcija izvedena je u 50 uE reaktivnog rastvora (50 mM HEPES-a. 4 mM Mg-hlorida, 0,05% Pluronskog F-68. 1.4 mM DTT, 0.5% DMSO. pH 7.7) sa 10 uM bio-NAD (Biolog, Life Science Inst., Bremen. Nemačka) kao kosupstrata u odustvu ili prisustvu testnog jedinjenja (10-struka koncentracija rastvora) u trajanju od I sata na 30°C. Reakcija je zaustavljena ispiranjem 3 puta u PBS-T ween-20. Radi detekcije, dodalo je 50 uL od 20 ng/pL Streptavidina, HRP konjugata (MoBi'Tec, Getingen, Nemačka) u PBS/0,05%Tvveen-20/0,01%BSA i ploče su inkubirane u trajanju od 30 minuta na sobnoj temperaturi. Nakon tri pranja u PBS-Tween-20. dodato je 50uL supstratnog rastvora SuperSignal ELISA za maksimalnu osetljivost (ThermoFischerScientiftc (Pierce), Bon. Nemačka). Nakon jednominutne inkubacije na sobnoj temperaturi, izmereni su luminescentni signali pomoću Envision multirnodalnog čitača (Perkin Elmer LAS pri 700 nm. Potpuna vrednost koja je korišćena dobijena je iz reakcije bez inhibitora. Famiakološka nulta vrednost koja je korišćena dobijena je od XAV-939 (Tocris) u konačnoj koncentraciji od 5 uM. Inhibitome vrednosti (IC50) utvrđene su bilo pomoću programa Symyx Assav Explorer® ili Conđosseo® iz GeneData.
Prethodno i u nastavku teksta, sve temperature navedene su u°C.U primerima koji slede, „konvencionalna obrada"podrazumeva: dodavanje vode po potrebi, prilagodavanje pH vrednosti prema potrebama između 2 i 10. u zavisnosti od konstitucije krajnjeg proizvoda, smeša se ekslrahuje pomoću etil acetata ili dihlorometana, faze se razdvajaju, organska faza se suši nad natrijum sulfatom i evaporiše, a ostatak se prečišćava hromatografski na silikatnom gelu i/ili kristalizacijom. Ref. vrednosti na silikatnom gelu: eluent: etil acetat / metanol 9:1.
Masena spektrometrija (MS): El (elektronska udarna joni/acija) M'
FAB (bombardovanje brzim atomima) (M+H)'
ESI (elektrosprej ionizacija) (M+H)'
APC1-MS {hemijska ionizacija pod atmosferskim pritiskom - masena spektrometrija)
(M+H)'.
Masena spektrometrija (MS): El (elektronska udarna jonizacija) M<+>
FAB (bom bardova nje brzim atomima) (M+H)"
ESI (elektrosprej jonizacija) (M+H)<+>
APCI-MS (hemijska jonizacija pod atmosferskim pritiskom - masena spektrometrija)
(M+H)<+>.
m.p. = tačka topljenja
Podaci vezani za HPLC navedeni u primerima koji slede (uz navedeno vretne retencije) dobijeni su na sledeći način:
P: HPLC metod:
gradijent: 5.5 min. protok: 2,75 ml/min. od 99:1 do 0:100 za H20 / acetonitril voda + TFA (0,01% vol.); acetonitril + TFA (0.01% vol.)
Kolona: Chromolith SpeedROD
RP 18e 50-4,6
talasna dužina: 220 nm
Instrument Merck Hitachi La Chrome
N: HPLC metod:
gradijent: 5,5 min, protok: 2,75 ml/min. od 90:10 do 0:100 za il;<) / acetonitril voda + TFA (0,01% vol.); acetonitril + TFA (0,01% vol.)
Kolona: Chromolith SpeedROD RP I8e 50-4,6
talasna dužina: 220 nm
Instrument Merck Hitachi La Chrome
'H NMR zabeležen je na spektrometru Bruker DPX-3()0. DRX-400 ili AVN-400. na osnovu rezidualnog signala deuterisanog rastvarača u internim referentnim vrednostima. Hemijska pomeranja (8) dobijena su u vrednosti ppm (delovi na milion) u odnosu na rezidualni signal rastvarača (5 = 2,49 ppm u '! 1 NMR kod DMSO-dh). Dobijeni podaci od 'H NMR beleže se na sledeći način: hemijsko pomeranje (multiplicitet, konstante kuplovanja i broj atoma vodonika). Skraćenice za multiplicitet su sledeće: s (singlet), d (dublet), t (triplet). q (kvartet), m (multipiet), br (široki).
Mikrotalasna hernija izvodi se na jednomodnom mikrotalasnom reaktoru EmrvsTM Optimiser koji je proizveden u Personal Chemistrv.
Primer I. I. I
2- metilsulfanil- 5, 6. 7, 8- tetrahidrohinazolin- 4- ilamin
Smeša N-cijano-S-metilsotioureje (10 g; 86.84 mrnol). cikloheksanona (90,7 ml; 868,37 mmol) i pirolidina (0,36 ml; 4,34 mmola) meša se pri temperaturi od 150°C u trajanju od 30 minuta, a zatim se bledožuta reaktivna smeša mešta još 60h na I50°C. Reaktivna smeša se evaporiše do suvog ostatka. Ostatak se rastvara u MeOH i prečišćava hromatografski na koloni Combiflash Companion sa RP18ec silikatnim gelom; prinos: 5.09 g (27%). ulje (čistoća: 88%).
Primer 1. 1
2- metilsulfanil- 5, 6, 7, 8- tetrahidro- 3H- hinazolin- 4- on
2-meiilsulfanil-5,6.7,8-tetrahidrohinazolin-4-ilamin (5,09 g; 23,145 mmol), 3-metil-l-nitrozooksibutan (11,6 ml; 86,79 mmol) i trifluoroacetatna kiselina (23,2 ml; 300,89 mmol) rastvaraju se u hloroformu (300 ml); bledožuti rastvor zagreva se na 60°C i meša se 2h. Reaktivna smeša se razređuje dihlorometanom i ekstrahuje se uz pomoć 10% K2CO3. Vodena faza se odvaja i ponovo se vrši ekstrakcija pomoću dihlorometana. nakon čega se dodaje NaCl i smeša se ponovo ekstrahuje uz pomoć etil acetata. Kombinovane organske faze suše se nad Na2S04, filtriraju se i evaporišu. Sirov proizvod dobijen na ovaj način adsorbuje se pomoću sorbenta i prečišćava hromatografski na koloni Combiflash Companion XL sa SISO silikatnim gelom. Nakon evaporacije frakcija produkta, vrši se trituracija kristalnog ostatka uz pomoć dietil etra, zatim se sukciono filtriranje i sušenjein vacuo;prinos: 2,0 g (57%). kristali.
Primer I
2-| 4-( 4- fluorofenil) piperazin- l- ill- 5. 6. 7. 8- tetrahidro- 3M- hinazolin- 4- on
(..A6")
2-metilsulfanil-5.6.7.8-tetrahidro-3H-hinazolin-4-on (100 mg; 0.51 mmol)1l-(4-fluorofeni!)piperazin (91,8 uL; 0,51 mmol) rastvaraju se u izoamil alkoholu (I ml), a zatim se vrši iradijacija smeše pod mikrotalasima (CEM Discover) na 150°C u trajanju od 2h sa mešanjem. Formirani kristali se sukciono filtriraju, temeljno ispiraju etanolom i dietil etrom i sukciono filtriraju. Sirovi proizvod dobijen na ovaj način ponovo sc ispira toplim etanolom i dietil etrom, sukciono filtrira i sušiin vacuona 50°C; prinos: 86 mg (50%). kristali;
1I I NMR {400 MHz, DMSO-d6) 8 [ppm] 11,09 (bs. IH), 7.13 - 6,92 (m, 411), 3.73 - 3.61 (m, 4H). 3.15 - 3.03 (m. 4H). 2.42 - 2.35 (m, 2H). 2.29 - 2,20 (m. 2H). 1,73 - 1,54 (m. 4H).
Primer 2
2-| 4-( 3- lfuorofenir) piperazin- l- in- 5. 6, 7, 8- tetrahidro- 3l- l- hinazolin- 4- on
(..A5")
2-melilsulfanil-5,6.7,8-tetrahidro-3H-hinazolin-4-on (100 mg; 0.51 mmol) i l-(3-fluorofenil)piperazin (82,6 uL; 0,51 mmol) reaguju u izoamil alkoholu (1 mi) u skladu sa procedurom za Primer I i obrađuju se; prinos: 54 mg (32%). kristali;
'H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 [ppm] 11,0 (bs, IH), 7,28 - 7,16 (m, IH), 6,84 - 6,72 (m, 2H), 6,60 - 6.50 (m. IH), 3,70 - 3.62 (m, 4H). 3,26 - 3.18 (m, 4H), 2,43 - 2,35 (m, 2H), 2,28-2,19 (m,2H), 1,73 - 1,56 (m.4H).
Primer 3 ( referentni)
2-[ 4-( 3- metoksifenil) piperazin- l- in- 5. 6. 7. 8- tetrahidro- 3H- hinazolin- 4- on
(„A7")
2-metilsulfanil-5.6,7,8-tetrahidro-3H-hinazolin-4-on (100 mg: 0.51 mmol). l-(3-metoksifenil)piperazin hidrohlorid (116,5 mg; 0,51 mmol) i trietilamin (141,3 pL; 1.02 mmol) reaguju u izoamil alkoholu (I ml) u skladu sa procedurom za Primer 1 (vreme reakcije 4h) i obrađuju se; prinos: 79 mg (45%). kristali: lH NMR (400 MHz,~DMSO-d6) 8 [ppm] 11.13 (bs. III). 7.17 - 7.05 (m. IH). 6.58 - 6,52 (m. IH). 6,48(t, J= 2,3 Hz, IH), 6,42 - 6,36 (m. IH), 3.76 - 3,69 (s, 3H). 3.71 3,61 (m, 4H), 3.21 - 3.09 (m, 4H). 2.43 2.33 (m, 211), 2,31 - 2.18 (m. 2H), 1.73 1.54 (m. 411).
Primer 4
2- r4-( 4- hlorofenil) piperazin- l- il1- 5. 6. 7. 8- tetrahidro- 3H- hinazolin- 4- on
(,A8")
2-meiilsulfanil-5,6.7,8-tetrahidro-3H-hinazolin-4-on (100 mg; 0,51 mmol) i I-(4-hlorofenil)piperaziri (100,2 mg; 0,51 mmol) reaguju u izoamil alkoholu (I ml) u skladu sa procedurom za Primer I i obraduju se; prinos: 83 mg (47%). kristali: 'H NMR (500 MHz. DMSO-d6)<*>5 [ppm] 1 1.14 (bs, IH). 7.29 - 7.19 (m, 2H), 7,04 - 6.91 (m. 2H), 3,75 - 3,58 (m. 4H), 3,23 - 3.11 (ni. 4H). 2.43 - 2.32 (m, 2H), 2,31 - 2.18 (m,2H). 1,72- 1.56 (m, 4H).
Primer 5
2-[ 4-( 2- hlorofenil) piperazin- l- il]- 5, 6. 7. 8- tetrahidro- 3H- hinazolin- 4- oii
(.,A9")
2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetrahidro-3H-hinazolin-4-on (100 mg; 0,51 mmol) i l-(2-hlorofenil)piperazin (84,9 pL; 0,51 mmol) reaguju u izoamil alkoholu (I ml) u skladu sa procedurom za Primer I i obrađuju se; prinos: 65 mg (37%). kristali: 'H NMR (500 MHz. DMSO-de.) 5 [ppm] 11,12 (bs, IH). 7,42 (dd, ./ = 7.9. 1,6 Hz, 111), 7,35 - 7,26 (m, IH), 7,23 - 7,13 (m, III). 7,1 I - 7.01 (m. IH), 3,78 3.63 (m, 4H). 3.06 -2,95 (m. 4H). 2,43 - 2,33 (m, 2H). 2.32 - 2,20 (m. 211). 1.74 - 1.57 (m. 4H).
Primer 6
2-[ 4-( 3- hlorofenil) piperazin- l - in- 5, 6. 7, 8- tetrahidro- 3H- hinazolin- 4- on
CAll")
2-metilsulfanil-5.6,7,8-tetrahidro-3H-hinazolin-4-on (100 mg: 0.51 mmol). i-(3-hlorofeniljpiperazin hidrohlorid (118.8 mg: 0,51 mmol) i trietilamin (141,3 uL; 1,02 mmol) reaguju u izoamil alkoholu (I ml) u skladu sa procedurom za Primer I (vreme reakcije 4h) i obrađuju se: prinos: 5 I mg (29%>). kristali;
'H NMR (400 MHz. DMSO-4) 5 [ppm] 11.13 {bs, IH). 7.29 - 7.14 (m, IH), 7,04 - 6,87 (m. 2H), 6,86 - 6,74 (m, IH), 3.77 - 3,56 (m. 4H), 3,26 - 3.13 (m. 3H). 2.43 - 2.32 (m. 2H). 2,30 - 2.17 (in, 2H). 1,76 - 1.49 (m. 4H).
Primer 7 ( referentni)
2-| 4-( 2- metoksifenil) piperazin- l- il|- 5, 6, 7, 8- tetrahidro- 3H- hinazolin- 4- on
{.A 12")
2-metilsulfanil-5,6,7,84etrahidro-3H-hinazolin-4-on (100 mg; 0,51 mmol) i l-{2-metoksifenil)piperazin (98 mg; 0,51 mmol) reaguju u izoamil alkoholu (I ml) u skladu sa procedurom za Primer I (vreme reakcije 4h) i obrađuju se: prinos: 52 mg (30%), kristali;
'H NMR (400 MHz, DMSO-de) 5 [ppm] 11,07 (bs.' IH), 7,03 - 6,83 (m, 4H), 3.79 (s. 3H), 3,70 - 3,61 (m, 4H), 3,01 - 2.92 (m. 4H). 2.42 - 2.33 (m, 211), 2,30 - 2.20 (m. 211). 1,73 - 1.56 (m,4H).
Primer 8
2-{ 4- tert- butilpiperazin- l- il)- 5, 617, 8- tetrahidro- 3H4iinazolin- 4- on (..A 13")
2-metilsulfanil-5,6.7,8-tetrahidro-3H-hinazolin-4-on (100 mg; 0.51 mmol) i l-tert-butilpiperazin (72.5 mg; 0,51 mmol) reaguju u izoamil alkoholu (1 ml) u skladu sa procedurom za Primer I i obrađuju se: prinos: 42 mg (28%). kristali:
Primer 9
2-| 4-( piperidin- 1 - karbonippiperazin- 1 - il]- 5. 6, 7. 8- tetrahidor- 3H- hinazoiin- 4- on (..A 15")
2-metilsuIfanil-5,6,7,84etrahidro-3H-hinazolin-4-on (100 mg; 0,51 mmol) i piperazin-l-ilpiperiđin-i-ilmetanon (100,5 mg; 0.51 mmol) reaguju u izoamil alkoholu (I ml) u skladu sa procedurom za Primer 1. Nakon reakcije od 4h. piperazin-l-ilpiperidin-1-ilmetanon (50,3 mg; 0,26 mmol) i izoamil alkohol (0,5 ml) ponovo se dodaju, a zatim se ponovo vrši iradijacija smeše pod mikrotalasima u trajanju od 4h. Kristali dobijeni nakon konvencionalne obrade rastvaraju se u acetonitrilu i vodi. a zatim se suše zamrzavanjem; prinos: 17 mg (9%), kristali;
Ml NMR (500 MHz, DMSO-d*) 5 [ppm] 3,81 - 3.74 (m, 4H), 3,36 - 3,29 (m, 4H), 3,25 - 3,15 (m. 411). 2,67 - 2,61 (m, 211), 2,38 - 2,31 (m. 2H). 1.81 - 1.67 (m, 4H), 1,63 - 1,47 (m, 611).
Primer 10
2-[ 4-( 6- hidroksipiridin- 2- il) piperazin- l- il]- 5. 6. 7. 8- tetrahidro- 3H4iinazolin- 4- on (,.A 16")
2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetrahidro-3H-hinazolin-4-on (100 mg; 0,51 mmol) i 6-piperazin-1- ilpiridin-2-ol (91,3 mg; 0,51 mmol) reaguju u izoamil alkoholu (I ml) u skladu sa procedurom za Primer 9 i obrađuju se. Sirovi proizvod dobijen nakon konvencionalne obrade prečišćava se kolonskom hromatografijom. zatim se vrši trituracija u dietil etru. sukciona ftltracija i sušenje; prinos: 17 mg (10%), kristali;
'H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 8 [ppm] 11.04 (bs. IH). 10,38 (bs, IH), 7.43 - 7,28 (m.
IH), 6,21 - 6,05 (m, IH). 5.88 (d, ,/= 7.9 Hz, IH), 3,67 3.57 (m. 4H), 3,50 3.37 (m. 4H), 2,43 - 2,33 (m. 2H), 2.29 - 2.! 7 (m. 2H). 1.72 - 1.56 (m. 4H).
Primer 11 ( referentni)
2- ( 4- benzoilpiperazin- l- il)- 5. 6. 7. 8- tetrahidro- 3H- hinazolin- 4- on (..A 17")
2-metilsulfanil-5,6,7,8-letrahidro-3H-hmazolin-4-on (100 mg; 0.51 mmol). fenilpiperazin-l-ilmetanon hidrohlorid (115.5 mg; 0.51 mmol) i trietilamin (141.3 pL: 1,02 mmol) reaguju u izoamil alkoholu (I ml) u skladu sa procedurom za Primer 9 (vreme reakcije 6h) i obrađuju se. Kristali dobijeni nakon prečišćavanja kolonskom hromatografijom rastvaraju se u acetonitrilu i vodi. a zatim se suše zamrzavanjem; prinos: 47 mg (27%), kristali;
'H NMR (400 MHz DMSO-dh) 6 [ppmj 1 i. 12 (bs. IH). 7.52 - 7,36 (m, 5H). 3,84 - 3,32 (m. 8H), 2,43 - 2,31 (m, 2H), 2,31 ~2.l6(m. 2H). 1.74- 1.54 (m.4H).
Primer 12
N- piridin- 2- il- 2-| 4-( 4- okso- 3, 4, 5, 6, 7, 84^ eksahidrohinazolin- 2- il) piperazin- l- il1- acetamid
(,.AI8")
2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetrahidro-3H-hinazolin-4-on (100 mg; 0.51 mmol). N-(2-piridil)-2-(piperazin-l-il)acetamid<*>3HCI<*>2H20 (279,5 mg; 0.76 mmol) i trietilamin (282,5 u.L; 2,04 mmol) reaguju u izoamil alkoholu (2 ml) u skladu sa procedurom za Primer 9 (vreme reakcije 8h) i obrađuju se. Dobijeni kristali rastvaraju se u acetonitrilu i vodi. a zatim se suše zamrzavanjem; prinos: 19 mg (10%). kristali;
'H NMR (500 MHz. DMSO-d6) 5 [ppmM j1.06 (bs. IH), 9.97 (bs, IH), 8.36 - 8.28 (m.
IH). 8,09 (d,,/ = 8,3 Hz. IH), 7,85 - 7.74 (m, IH), 7,16 - 7,07 (m. IH). 3.65 - 3.53 (m. 4H). 3,23 (s, 2H), 2,61 - 2.54 (m. 4H). 2.40 - 2.31 (m. 2H). 2.27 - 2.19 (m. 2H). 1.72 - 1,53 (m, 4H).
Primer 13
2-( 4- acetilpiperazin- l- il)- 5, 6, 7. 8- tetrahidro- 3H- hinazolin- 4- on (,.A 19"")
2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetrahidro-3H4iinazolin-4-on {100 mg; 0,51 mmol) i N-acetilpiperazin (98 mg; 0,76 mmol) reaguju u izoamil alkoholu (1 ml) u skladu sa procedurom za Primer 1 ( vreme reakcije 8h) i obraduju sc. Sirovi proizvod koji je dobijen na ovaj način prečišćava se kolonskom hromatografijom; prinos: 12 mg (8%), kristali; 'H NMR (500 MHz, DMSO-d6) 5 [ppm] 11.11 (bs. IH), 3.61 - 3.40 (m, 8H), 2,41 - 2.32 (m, 2H), 2,28- 2,20 (m. 2H). 2.02 (s, 3H), 1,70 - 1.57 (m. 4H). Primer 14 2-[ 4-( morfolin- 4- karbonil) piperazin- l- ill- 5, 6. 7. 8- tetrahidro- 3H- hinazolin- 4- on („A20")
2-metilsulfanil-5,6,7.8-tetrahidro-3H-hinazoiin-4-on (100 mg: 0,51 mmol) i morfolid piperazinokarboksilne kiseline (152,3 mg; 0.76 mmol) reaguju u izoamil alkoholu (1,5 ml) u skladu sa procedurom za Primer 1 (vreme reakcije 8h) i obrađuju se. Dobijeni kristali se rastvaraju u acetonitrilu i vodi i suše se zamrzavanjem: prinos: 38 mg (21%). kristali;
Ml NMR (500 MHz, DMSO-d6) 8 [ppm] 11,11 (bs, I H). 3.66 - 3.45 (m, 8H). 3,24 - 3,07 (m, 8H), 2.42-2,32 (m, 2H). 2.31 - 2.17 (m. 2H). 1.74 - 1.54 (m. 411).
Primer 15
2- r4-{ 4- okso- 3. 4, 5. 6. 7. 8- heksahidrohinazolin- 2- il) piperazin- l- in- N- piridin- 3- ilacetamid
(..A23")
2-metilsulfanil-5,6,7,8-letrahidro-3H-hinazolin-4-on (100 mg; 0,51 mmol), N-(3-piridil)-2-(piperazin-l-il)acetamid<*>3HCI (251,9 mg; 0.76 mmol) i trietilamin (282,5 uL; 2,04 mmol) reaguju u izoamil alkoholu (2 ml) u skladu sa procedurom za Primer I (vreme reakcije 4h) i obrađuju se.
Primer 16
2-( 4- trit1uorometilpiperidin- l- ir)- 5, 6, 7, 8- tetrahidro- 3H4iinazolin- 4- on („A 10")
2-metilsulfanil-5,6,7,8-tetrahidro-3H-hinazolin-4-on (100 mg; 0,51 mmol). 4-trifluorometilpiperidin<*>HC1 (97 mg; 0.51 mmol) i trietilamin (141,3 uL: 1.02 mmol) reaguju u izoamil alkoholu (I ml) u skladu sa procedurom za Primer 1 (vreme reakcije 4h) i obrađuju se. Sirovi proizvod koji je dobijen na ovaj način prečišćava se kolonskom hromatografijom; prinos: 43 mg (28%); kristali; 'H NMR (400 MHz, DMSO-d6) S [ppmj 11,06 (bs, 111), 4,38 (d, ./= 12,5 Hz, 211), 2.94 - 2,73 (m, 2H). 2.67 - 2,45 (m, 1H). 2.43 - 2,30 (m. 2H). 2.30 - 2.17 (m. 2H). 1.81 (d../ = 12,7 Hz, 2H), 1.74- 1,52 (m, 411), 1,46 - 1.24 (m, 211). Primer 17 2- j4-( 4- metoksifenil)- 3- oksopiperazin- l- ir|- 5. 6, 7, 8- tetrahidro- 3H- hinazolin- 4- on (..A 14'")
2-metilsulfanil-5,6.7,8-tetrahidro-3H-hinazolin-4-on (100 mg; 0.51 mmol) i l-(4-metoksifenil)piperazin-2-on (105 mg; 0,51 mmol) reaguju u izoamil alkoholu (1 ml) u skladu sa procedurom za Primer I (vreme reakcije 4h) i obrađuju se. Sirovi proizvod koji je dobijen na ovaj način prečišćava se kolonskom hromatografijom; prinos: 8 mg (4%); kristali;
HPLC metod P; R'f /min. 2,87.
Analogno tome, dobijena su sledeća jedinjenja:
Farmakološki podaci
Jedinjenja prikazana u tabeli 2 posebno su poželjna jedinjenja koja su deo pronalaska.
Sledeći primeri odnose se na medikamente:
Primer A: bočice sa injekcionim rastvorom
Rastvor sa lOOg aktivnog sastojka sa formulom i u skladu sa zahtevom I i 5g dmatrijum hidrogenfosfata u 3 I bidestilovane vode prilagođava se pomoću 2 N hidrohlorne kiseline tako da pH vrednost bude 6.5, zatim se sterilno filtrira, uliva u injekcione bočice, liofilizuje u sterilnim uslovima i zaptivene u sterilnim uslovima. Svaka injekciona bočica sadrži 5mg aktivnog sastojka.
Primer B: supozitorije
Smeša 20g aktivnog sastojka sa formulom 1 u skladu sa zahtevom I i 100 grama soj inog lecitina i 1400 g kakao putera se istopi, izlije u kalupe i ostavi da se ohladi. Svaka supozitorija sadrži 20 mg aktivnog sastojka.
Primer C: rastvor
Rastvor se priprema od Ig aktivnog sastojka sa formulom I u skladu sa zahtevom 1, 9,38 g NarhPOj'2 H20, 28,48 g Na2HPO.i 12 H20 i 0,1 g benzalkonijum hlorida u 940 ml bidestilovane vode. pH vrednost se prilagođava tako da bude 6.8, a rastvor se priprema do 1 I i steriliše se iradijacijom. Ovaj rastvor može se koristiti u vidu kapi za oči.
Primer D: mast
500 mg aktivnog sastojka sa formulom I u skladu sa zahtevom I meša se sa 99.5 g vazelina u sterilnim uslovima.
Primer E: tablete
Smeša od lkg aktivnog sastojka sa formulom I u skladu sa zahtevom 1, 4kg laktoze, 1,2kg krompirovog škroba, 0,2kg talka i OJ kg magnezijum stearata komprimuje se na konvencionalan način radi dobijanja tableta od kojih svaka sadrži 10 mg aktivnog sastojka.
Primer F: dražeje
Tablete se komprimuju analogno prema primeni H. a zatim se oblažu na konvencionalan način premazom od saharoze. krompirovog škroba, talka, tragakanta i boje.
Primer G: kapsule
2kg aktivnog sastojka sa formulom I u skladu sa zahtevom 1 unosi se u čvrste želatinske kapsule na konvencionalan način tako da svaka od kapsula sadrži 20 mg aktivnog sastojka.
Primer H: ampule
Rastovor lkg aktivnog sastojka sa formulom I u skladu sa zahtevom 1 u 60 1 bidestilovane vode filtrira se u sterilnim uslovima, uliva u ampule, liofilizuje u sterilnim uslovima i ampula se u sterilnim uslovima zaptiva. Svaka ampula sadrži lOmg aktivnog sastojka.

Claims (7)

  1. I. Jedinjenja izabrana iz grupe
  2. 2. Medikamenti koji sadrže najmanje jedno jedinjenje koje je deo zahteva I i/ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, sol vat. taulomer i stereoizomer. uključujući i njegove smeše u svim razmerama. uz fakultativno prisustvo farmaceutski prihvatljivog nosača, ekscipijensa ili vektora.
  3. 3. Jedinjenja koja su deo zahteva I i njihove farmaceutski prihvatljive soli. solvati, tautomeri i stereoizomeri, uključujući i njihove smeše u svim razmerama. koriste se u lečenju i/ili prevenciji kancera. multiple skleroze, kardiovaskularnih oboljenja, povreda centralnog nervnog sistema i raznih vrsta upala.
  4. 4. Jedinjenja mogu da se koriste prema zahtevu 3 za lečenje i/ili prevenciju oboljenja iz grupe kancera glave, vrata. oka. usta, grla, jednjaka, bronhija, larinksa, farinksa. grudi, kostiju, pluća, kolona, rektuma. želuca, prostate, mokraćne bešike, materice, grlića materice, dojke, jajnika, testisa ili drugih reproduktivnih organa, zatim kože, štitaste žlezde, krvi, limfnih čvorova, bubrega, jetre, pankreasa, mozga, centralnog nervnog sistema, čvrstih tumora i tumora ćelija krvi.
  5. 5. Obuhvaćeni su i medikamenti koji sadrže najmanje jedno jedinjenje koje je deo zahteva I i/ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so. solvat i stereoizomer, uključujući i njegove smeše u svim razmerama. uz još najmanje jedan dodatni aktivni sastojak medikamenta.
  6. 6. Setovi se sastoje od odvojenih pakovanja (a) sa delotvornom količinom jedinjenja u skladu sa zahtevom I i/ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, solvata i stereoizomera. uključujući i njegove smeše u svim razmerama i (b) delotvornom količinom drugog aktivnog sastojka medikamenta.
  7. 7. Obuhvaćeno je i jedinjenje u okviru zahteva I. i to
    2-{4-tert-butil-piperazin-l-il)-5,6,7,8-tetrahidro-3l l-hinazolin-4-on (..A 13") i/ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. solvati. tautomeri i stereoizomeri, uključujući i njegove smeše u svim razmerama.
RS20160507A 2012-02-09 2013-01-14 Derivati tetrahidro-hinazolinona kao inhibitori tank-a i parp-a RS55377B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP12000841 2012-02-09
EP13701703.4A EP2812323B1 (en) 2012-02-09 2013-01-14 Tetrahydro-quinazolinone derivatives as tank and parp inhibitors
PCT/EP2013/000078 WO2013117288A1 (en) 2012-02-09 2013-01-14 Tetrahydro-quinazolinone derivatives as tank and parp inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS55377B1 true RS55377B1 (sr) 2017-03-31

Family

ID=47628092

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20160507A RS55377B1 (sr) 2012-02-09 2013-01-14 Derivati tetrahidro-hinazolinona kao inhibitori tank-a i parp-a

Country Status (31)

Country Link
US (1) US9339503B2 (sr)
EP (1) EP2812323B1 (sr)
JP (1) JP6116592B2 (sr)
KR (1) KR20140121477A (sr)
CN (1) CN104093714B (sr)
AR (1) AR089944A1 (sr)
AU (1) AU2013218357B2 (sr)
BR (1) BR112014019357A8 (sr)
CA (1) CA2863991C (sr)
CL (1) CL2014002097A1 (sr)
CO (1) CO7020919A2 (sr)
DK (1) DK2812323T3 (sr)
EA (1) EA026611B1 (sr)
EC (1) ECSP14017586A (sr)
ES (1) ES2579980T3 (sr)
HR (1) HRP20160735T1 (sr)
HU (1) HUE029717T2 (sr)
IL (1) IL233984A (sr)
MX (1) MX349736B (sr)
NZ (1) NZ630170A (sr)
PE (1) PE20141823A1 (sr)
PH (1) PH12014501581A1 (sr)
PL (1) PL2812323T3 (sr)
PT (1) PT2812323T (sr)
RS (1) RS55377B1 (sr)
SG (1) SG11201404654SA (sr)
SI (1) SI2812323T1 (sr)
TW (1) TWI572593B (sr)
UA (1) UA116627C2 (sr)
WO (1) WO2013117288A1 (sr)
ZA (1) ZA201406579B (sr)

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2013132253A1 (en) 2012-03-07 2013-09-12 Institute Of Cancer Research: Royal Cancer Hospital (The) 3-aryl-5-substituted-isoquinolin-1-one compounds and their therapeutic use
EP2890696A1 (en) 2012-08-29 2015-07-08 Amgen, Inc. Quinazolinone compounds and derivatives thereof
HUE030613T2 (en) 2012-12-31 2017-05-29 Cadila Healthcare Ltd Substituted phthalazin-1 (2H) -one derivatives as selective inhibitors of poly (ADP-ribose) polymerase-1
EP3044221B1 (en) 2013-09-11 2018-02-21 Institute of Cancer Research: Royal Cancer Hospital (The) 3-aryl-5-substituted-isoquinolin-1-one compounds and their therapeutic use
BR112016008994A2 (pt) * 2013-11-07 2017-09-19 Lilly Co Eli Compostos de pirido[2,3-d]pirimidin-4-ona como inibidores de tanquirase
US10316025B2 (en) 2015-06-03 2019-06-11 Sunshine Lake Pharma Co., Ltd. Substituted piperazine compounds and methods of use and use thereof
KR101777475B1 (ko) * 2015-12-08 2017-09-11 에스티팜 주식회사 신규한 디히드로피라노피리미디논 유도체 및 이들의 용도
WO2017156350A1 (en) 2016-03-09 2017-09-14 K-Gen, Inc. Methods of cancer treatment
WO2018003962A1 (ja) 2016-06-30 2018-01-04 国立研究開発法人理化学研究所 新規化合物又はその薬理学的に許容される塩
CN108727302A (zh) * 2017-10-23 2018-11-02 科迈化工股份有限公司 一种环保型n-叔丁基-2-苯并噻唑次磺酰胺（ns）合成工艺
EP3733186B1 (en) 2017-12-27 2024-12-04 Japanese Foundation For Cancer Research Novel dihydroquinazolinone compound or pharmacologically acceptable salt, and cell growth inhibitor
JP7369968B2 (ja) * 2017-12-27 2023-10-27 公益財団法人がん研究会 抗がん剤
AU2019320945C1 (en) 2018-08-16 2021-09-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Fused ring compounds

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB9624482D0 (en) 1995-12-18 1997-01-15 Zeneca Phaema S A Chemical compounds
DE69720965T2 (de) 1996-02-13 2004-02-05 Astrazeneca Ab Chinazolinderivate und deren verwendung als vegf hemmer
NZ331191A (en) 1996-03-05 2000-03-27 Zeneca Ltd 4-anilinoquinazoline derivatives and pharmaceutical compositions thereof
GB9718972D0 (en) 1996-09-25 1997-11-12 Zeneca Ltd Chemical compounds
GB9714249D0 (en) 1997-07-08 1997-09-10 Angiogene Pharm Ltd Vascular damaging agents
GB9900334D0 (en) 1999-01-07 1999-02-24 Angiogene Pharm Ltd Tricylic vascular damaging agents
GB9900752D0 (en) 1999-01-15 1999-03-03 Angiogene Pharm Ltd Benzimidazole vascular damaging agents
AU2001258628A1 (en) 2000-05-31 2001-12-11 Astrazeneca Ab Indole derivatives with vascular damaging activity
MXPA02012903A (es) 2000-07-07 2004-07-30 Angiogene Pharm Ltd Derivados de colquinol como inhibidores de angiogenesis.
MXPA02012905A (es) 2000-07-07 2004-07-30 Angiogene Pharm Ltd Derivados de colquinol como agentes de dano vascular..
AUPR201600A0 (en) * 2000-12-11 2001-01-11 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Quinazolinone derivative
AUPR975601A0 (en) * 2001-12-24 2002-01-31 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Quinazolinone derivatives
AUPS019702A0 (en) * 2002-01-29 2002-02-21 Fujisawa Pharmaceutical Co., Ltd. Condensed heterocyclic compounds
ATE540936T1 (de) * 2004-06-30 2012-01-15 Janssen Pharmaceutica Nv Substituierte 2-alkyl-chinazolinonderivate als parp-hemmer
ES2359931T3 (es) 2005-03-11 2011-05-30 Merck Patent Gmbh Tetrahidro- y dihidroquinazolinonas.
US8299256B2 (en) 2007-03-08 2012-10-30 Janssen Pharmaceutica Nv Quinolinone derivatives as PARP and TANK inhibitors
WO2011078143A1 (ja) 2009-12-22 2011-06-30 塩野義製薬株式会社 ピリミジン誘導体およびそれらを含有する医薬組成物
WO2011111880A1 (ko) * 2010-03-08 2011-09-15 주식회사 메디젠텍 세포핵에서 세포질로의 ｇｓｋ３의 이동을 억제하는 화합물을 함유하는 세포핵에서 세포질로의 gsk3 이동에 의해 발생되는 질환의 치료 또는 예방용 약학적 조성물

Also Published As

Publication number Publication date
TW201336828A (zh) 2013-09-16
SI2812323T1 (sl) 2016-08-31
NZ630170A (en) 2016-03-31
CA2863991C (en) 2020-08-11
CN104093714B (zh) 2016-08-24
SG11201404654SA (en) 2014-09-26
CA2863991A1 (en) 2013-08-15
HUE029717T2 (en) 2017-03-28
AU2013218357A1 (en) 2014-09-25
EP2812323A1 (en) 2014-12-17
ECSP14017586A (es) 2015-09-30
US9339503B2 (en) 2016-05-17
EA026611B1 (ru) 2017-04-28
TWI572593B (zh) 2017-03-01
DK2812323T3 (en) 2016-05-09
HK1202551A1 (zh) 2015-10-02
WO2013117288A8 (en) 2014-07-31
PL2812323T3 (pl) 2016-09-30
PH12014501581B1 (en) 2014-10-08
IL233984A (en) 2017-09-28
MX349736B (es) 2017-08-10
UA116627C2 (uk) 2018-04-25
CO7020919A2 (es) 2014-08-11
US20150025071A1 (en) 2015-01-22
JP6116592B2 (ja) 2017-04-19
PH12014501581A1 (en) 2014-10-08
BR112014019357A2 (sr) 2017-06-20
ZA201406579B (en) 2015-12-23
AU2013218357A8 (en) 2015-01-22
EP2812323B1 (en) 2016-04-06
ES2579980T3 (es) 2016-08-18
AR089944A1 (es) 2014-10-01
CL2014002097A1 (es) 2014-11-07
EA201400879A1 (ru) 2015-01-30
HRP20160735T1 (hr) 2016-07-29
PE20141823A1 (es) 2014-11-29
CN104093714A (zh) 2014-10-08
AU2013218357B2 (en) 2017-01-05
WO2013117288A1 (en) 2013-08-15
PT2812323T (pt) 2016-07-13
BR112014019357A8 (pt) 2017-07-11
MX2014009491A (es) 2014-08-29
KR20140121477A (ko) 2014-10-15
JP2015506965A (ja) 2015-03-05

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RS55377B1 (sr) Derivati tetrahidro-hinazolinona kao inhibitori tank-a i parp-a
JP6333450B2 (ja) （アザ−）イソキノリノン誘導体
ES2694754T3 (es) Derivados novedosos de pirrolidina como inhibidores de MetAP-2
JP5763647B2 (ja) Ｐｉ３キナーゼの阻害のためのピリジニルイミダゾロン誘導体
CN103052627B (zh) 作为fak抑制剂的嘧啶衍生物
AU2013324681B2 (en) Quinazolinone derivatives as PARP inhibitors
HK1210470A1 (en) Hydropyrrolopyrrole derivatives for use as fatty acid synthase inhibitors
WO2012000632A1 (de) Pyrazolochinoline
CN104066734A (zh) 三唑并[4,5-d]嘧啶衍生物
WO2016197078A1 (en) Compounds for the modulation of myc activity
JP6847942B2 (ja) 二環式複素環式誘導体
JP6382964B2 (ja) フタラジン誘導体
CN102292339A (zh) 作为MetAP-2抑制剂的新杂环化合物
ES2547151T3 (es) Derivados de 7-azaindol adecuados para el tratamiento de carcinosis
HK1202551B (en) Tetrahydro-quinazolinone derivatives as tank and parp inhibitors
HK1210777B (en) Quinazolinone derivatives as parp inhibitors
HK1157783A (en) Thiazolyl piperdine derivatives
HK1209106B (en) (aza-)isoquinolinone derivatives