RS55710B1 - Derivati piridina kao inhibitori kinaze rearanžirane tokom transfekcije (ret) - Google Patents

Derivati piridina kao inhibitori kinaze rearanžirane tokom transfekcije (ret)

Info

Publication number
RS55710B1
RS55710B1 RS20170177A RSP20170177A RS55710B1 RS 55710 B1 RS55710 B1 RS 55710B1 RS 20170177 A RS20170177 A RS 20170177A RS P20170177 A RSP20170177 A RS P20170177A RS 55710 B1 RS55710 B1 RS 55710B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
alkyl
ethoxy
fluorophenyl
acetamide
trifluoromethyl
Prior art date
Application number
RS20170177A
Other languages
English (en)
Inventor
Hilary Schenck Eidam
Michael P Demartino
Zhen Gong
Amy Huiping Guan
Kaushik Raha
Chengde Wu
Haiying Yang
Haiyu Yu
Zhiliu Zhang
Mui Cheung
Original Assignee
Glaxosmithkline Ip Dev Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Glaxosmithkline Ip Dev Ltd filed Critical Glaxosmithkline Ip Dev Ltd
Publication of RS55710B1 publication Critical patent/RS55710B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/06—Anti-spasmodics, e.g. drugs for colics, esophagic dyskinesia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D213/00—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/02—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D213/04—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D213/60—Heterocyclic compounds containing six-membered rings, not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom and three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D213/62—Oxygen or sulfur atoms
    • C07D213/69—Two or more oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Pyridine Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Description

OBLASTPRONALASKA
[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjanja koja su inhibitori kinaze rearanžirane tokom transfekcije (RET), na farmaceutske kompozicije koje ih sadrže, na procese za njhovu pripremu, i na njihovu upotrebu u terapiji, zasebno ili u kombinaciji, za normalizaciju gastrointestinalne osetljivosti, pokretljivosti i/ili sekrecije i/ili abdominalnih poremećaja ili bolesti i/ili tretman bolesti povezanih sa disfunkcijom RET ili gde modulacija RET aktivnosti može imati terapeutsku korist uključujući, ali se ne ograničavajući na sve klasifikacije sindroma iritabilnog creva (IBS) uključujući pretežno sa dijarejom, pretežno sa zatvorom ili promenljivom stolicom, funkcionalo nadimanje, funkcionalni zatvor, funkcionalnu dijareju, neodređeni funkcionalni crevni poremećaj, sindrom funkcionalnog abdominalnog bola, hronični zatvor, funkcionalne poremećaje jednjaka, funkcionalne gastroduodenalne poremećaje, funkcionalni anorektalni bol, inflamatornu bolest creva, proliferativne bolesti kao što su nesitnoćelijski kancer pluća, hepatocelularni karcinom, kolorektalni kancer, medularni tiroidni kancer, folikularni tiroidni kancer, anaplastični tiroidni kancer, papilarni tiroidni kancer, tumori mozga, kancer peritonealne duplje, solidni tumori, drugi kanceri pluća, kancer glave i vrata, gliomi, neuroblastomi, Von Hippel-Lindau sindrom i tumori bubrega, kancer dojke, kancer jajovoda, kancer jajnika, kancer ćelija prelaznog tipa, kancer prostate, kancer jednjaka i gastroezofagijalnog spoja, kancer žučne kese i adenokarcinom, i bilo kog maligniteta sa povećanom aktivnošću RET kinaze.
OSNOVA PRONALASKA
[0002] Sindrom iritabilnog creva (IBS) je uobičajena bolest koja pogađa 10-20% pojedinaca u razvijenim zemljama i karkateriše se abnormalnim ponašanjem creva, nadimanjem i visceralnom hipersenzitivnošću (Camilleri, M., N. Engl. J. Med., 2012, 367:1626-1635). Dok je etiologija TBS nepoznata smatra se da je rezultat ili poremećaja između mozga i gastrointestinalnog trakta, poremećaja u mikrobiomu creva ili povećanog zapaljenja. Rezultujuće gastrointestinalne promene utiču na normalan protok u crevima što rezultuje ili u dijareji ili zatvoru. Dodatno kod većine IBS pacijenata senzitizacija perifernog nervnog sistema rezultuje u visceralnoj hipersenzitivnosti ili alodiniji (Keszthelvi, D., Eur. J. Pain, 2012, 16:1444-1454).
[0003]Iako IBS ne menja direktno očekivanu dužinu života ima značajan efekat na kvalitet života pacijenta. Dodatno postoje značajni troškovi za IBS povezano zdravstveno zbrinjavanje i gubitak produktivnosti usled odsustva radnika (Nellesen, D., et al., J. Manag. Care Pharm., 2013,19:755-764). Jedan od najvažnijih simptoma koji veoma utiče na kvalitet života pacijenta sa IBS je visceralni bol (Spiegel, B., et al., Am. J. Gastroenterol., 2008, 103:2536-2543). Molekularne strategije koje inhibiraju IBS povezani visceralni bol bi veoma uticale na kvalitet života pacijenta sa IBS i smanjili povezane troškove.
[0004]Rearanžirana tokom transfekcije (RET) je tirozin kinaza receptora faktora rasta neurona koja se aktivira po vezivanju jednog od četiri neurotrofička faktora neurotrofičkog faktora (GDNF) izvedenog iz glijalne ćelijske linije, neurturina, artemina i persefina u kombinaciji sa ko-receptor GDNF familijom receptora alfa-1, 2, 3, i 4 respektivno (Plaza-Menacho, L, et al., Trends Genet, 2006, 22:627-636). Poznato je da RET ima važnu ulogu u razvoju i preživljavanju aferentnih nociceptora u koži i crevima. RET kinaza "knock-out" miševima nedostaju enterički neuroni i imaju druge anomalije nervnog sistema što sugeriše da je funkcionalni proteinski proizvod RET kinaze neophodan tokom razvića (Taraviras, S. et al., Development, 1999, 126:2785-2797). Dodatno, populacione studije pacijenata sa Hirschsprung-ovom bolešću karakterisanom sa opstrukcijom kolona usled nedostatka normalne inervacije kolona imaju višu proporciju i familijarnih i sporadičnih RET mutacija sa gubitkom funkcije (Butler Tjaden N., et al., Transi. Res., 2013, 162:1-15).
[0005]Slično tome, aberantna aktivnost RET kinaze povezana je sa multiplom endokrinom neoplazijom (MEN 2A i 2B), familijarnim medularnim tiroidnim karcinomom (FMTC), papilarnim tiroidnim karcinomom (PTC) i Hirschsprung-ovom bolešću (HSCR) (Borello, M., et al, Expert Opin. Ther. Targets, 2013, 17:403-419). MEN 2A je sindrom kancera koji je rezultat mutacije u ekstracelularnom cisteinom bogatom domenu RET što dovodi do dimerizacije preko disulfidne veze što uzrokuje konstitutivnu aktivaciju aktivnosti tirozin kinaze (Wells Jr, S., et al, J. Clin. Endocrinol. Metab., 2013, 98:3149-3164). Pojedinci sa ovom mutacijom mogu razviti medularni tiroidni karcinom (MTC), paratiroidnu hiperplaziju, i feohromocitom. MEN 2B je izazvana sa Met918Thr mutacijom u RET koja menja specifičnost tirozin kinaze. MEN 2B je slična MEN 2A, ali bez paratiroidne hiperplazije i takođe dovodi do razvoja brojnih mukozalnih ganglija u usnama, jeziku i intestinalnom traktu. Smatra se da su hromozomski rearanžmani koji povezuju promotor i NH2-terminalne domene nesrodnog gena (ili više njh) sa COOH-terminusom RET kinaze što rezultuje u konstitutivno aktiviranim himernim oblicima receptora (RET/PTC), inicirajući događaji za tumor kod PTC (Viglietto, G. et al, Oncogene, 1995,11:1207-1210). PTC obuhvata oko 80% svih tireoidnih karcinoma. Ovi podaci ukazuju da inhibicija RET može biti atraktivna terapeutska strategija za tretman bola povezanog sa IBS i drugim gastrointestinalnim poremećajima i za tretman kancera sa aktivnošću konstitutivne RET kinaze.
[0006]WO 2008/046802 Al opisuje fenilacetil amid derivate kao inhibitore protein kinaze i njihovu upotrebu u tretmanu bolesti, uključujući različite proliferativne bolesti.
REZIME PRONALASKA
[0007]Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja prema Formuli (I):
gde:
R<1>is vodonik, halogen, (Ci-C6)alkil, halo(Ci-C6)alkil, (C3-C6)cikloalkil, hidroksil, (Ci-C6)alkoksi, halo(Ci-C6)alkoksi, (C3-C6)cikloalkoksi, amino, ((Ci-C6)alkil)amino-, ili ((O-C6)alkil)((Ci-C6)alkil)amino-;
svaki R2 je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od halogena, (Ci-C6)alkil, halo(Ci-C6)alkil, (C3-C6)cikloalkil, cijano, hidroksil, (Ci-C6)alkoksi, halo(Ci-C6)alkoksi, (C3-C6)cikloalkoksi, amino, ((Ci-C6)alkil)amino-, i ((Ci-C6)alkil)((Ci-C6)alkil)amino-;
R<3>je fenil ili 5- ili 6-članog heteroaril, od kojih je svaki izborno supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabranih od halogena, (Ci-C6)alkil, halo(Ci-C6)alkil, (C3-C6)cikloalkil, cijano, 5- ili 6-članog heteroaril, -OR<4>, i -CONR<5>R<6>; gde je pomenuti (Ci-C6)alkil izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (Ci-C4)alkoksi, halo(Ci-C4)alkoksi, ili -NR<5>R<6>; i gde je pomenuti 5- ili 6-člani heteroaril supstituent izborno supstituisan sa halogenom, (Ci-C4)alkil, ili halo(Ci-C4)alkil;
R4 je vodonik, (Ci-C6)alkil, halo(Ci-C6)alkil, (C3-C6)cikloalkil, ili 4- do 6-člani heterocikloalkil; gde je pomenuti (Ci-C6)alkil izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (Ci-C4)alkoksi, halo(Ci-C4)alkoksi, ili -NR<5>R<6>; i gde je pomenuti (C3-C6)cikloalkil izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od (G-C4)alkil, halo(G-C4)alkil, hidroksil, hidroksi(Ci-C4)alkil, (Ci-C4)alkoksi, i halo(Ci-C4)alkoksi; i gde je pomenuti 4- do 6-člani heterocikloalkil izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od (Ci-C4)alkil i halo(G-C4)alkil;
R<5>i R<6>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od vodonika, (Ci-C4)alkil, i halo(Ci-C4)alkil; ili R<5>i R<6>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani predstavljaju 5- ili 6- člani zasićeni prsten, koji izborno sadrži dodatni heteroatom izabran od kiseonika, azota, i sumpora, gde je pomenuti prsten izborno supstituisan sa halogenom, (Ci-C4)alkil, ili halo(Ci-C4)alkil; i
njeO, 1, ili 2;
ili njihove farmaceutski prihvatljive soli.
[0008]Ovaj pronalazak se takođe odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje Formule (I) i farmaceutski prihvatljiv ekscipijent.
[0009]Ovaj pronalazak se takođe odnosi na jedinjenja Formule (I) za upotrebu u terapiji. Ovaj pronalazak se takođe odnosi na jedinjenje Formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u tretmanu sindroma iritabilnog creva. Ovaj pronalazak se takođe odnosi na jedinjenje Formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotebu u tretmanu kancera.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0010]Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I) ili njihove farmaceutski prihvatljive soli kao što je prethodno definisano.
[0011]Ovaj pronalazak se takođe odnosi na jedinjenja Formule (II):
gde: XjeNili CR10; R<1>je vodonik, halogen, (Ci-C6)alkil, halo(Ci-C6)alkil, (C3-C6)cikloalkil, hidroksil, (G-C6)alkoksi, halo(Ci-C6)alkoksi, (C3-C6)cikloalkoksi, amino, ((Ci-C6)alkil)amino-, ili ((G-C6)alkil)((Ci-C6)alkil)amino-; svaki R2 je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od halogena, (Ci-C6)alkil, halo(Ci-C6)alkil, (C3-C6)cikloalkil, cijano, hidroksil, (Ci-C6)alkoksi, halo(Ci-C6)alkoksi, (C3-C6)cikloalkoksi, amino, ((Ci-C6)alkil)amino-, i ((Ci-C6)alkil)((Ci-C6)alkil)amino-; R4 je vodonik, (Ci-C6)alkil, halo(Ci-C6)alkil, (C3-C6)cikloalkil, ili 4- do 6-člani heterocikloalkil; gde je pomenuti (Ci-C6)alkil izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (G-C4)alkoksi, halo(G-C4)alkoksi, ili -NR<5>R<6>; i gde je pomenuti (C3-C6)cikloalkil izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od (G-C4)alkil, halo(G-C4)alkil, hidroksil, hidroksi(G-C4)alkil, (Ci-C4)alkoksi, i halo(G-C4)alkoksi; i gde je pomenuti 4- do 6-člani heterocikloalkil izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od (G-C4)alkil i halo(G-C4)alkil; R<5>i R<6>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od vodonika, (G-C4)alkil, i halo(G-C4)alkil; ili R<5>i R<6>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani predstavljaju 5- ili 6- člani zasićeni prsten, koji izborno sadrži dodatni heteroatom izabran od kiseonika, azota, i sumpora, gde je pomenuti prsten izborno supstituisan sa halogenom, (Ci-C4)alkil, ili halo(Ci-C4)alkil; R7 je vodonik, halogen, ili (Ci-C4)alkoksi; R<8>je vodonik, halogen, (Ci-C6)alkil, halo(G-C6)alkil, (C3-C6)cikloalkil, cijano, 5- ili 6-člani heteroaril, -OR<4>, ili -CONR<5>R<6>; gde je pomenuti (Ci-C6)alkil je izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (Ci-C4)alkoksi, halo(G-C4)alkoksi, ili -NR<5>R<6>; i gde je pomenuti 5- ili 6-člani heteroaril izborno supstituisan sa halogenom, (G-C4)alkil, ili halo(G-C4)alkil;
R9 je vodonik, halogen, ili halo(G-C4)alkil;
R<10>je vodonik, halogen, halo(Ci-C4)alkil, ili 5- ili 6-člani heteroaril, gde je pomenuti 5- ili 6-člani heteroaril izborno supstituisan sa halogenom, (G-C4)alkil, ili halo(G-C4)alkil; i njeO, 1, ili 2;
uz uslov da kada X je CR<10>najmanje jedan odR<7>,R<8>,R<9>, i R10 je vodonik;
ili njihove farmaceutski prihvatljive soli.
[0012] U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I) ili (II) gde R<1>je fluor, hlor, (Ci-C4)alkil, hidroksil, (G-C4)alkoksi, halo(G-C4)alkoksi, (G-C6)cikloalkoksi, amino, ((Ci-C6)alkil)amino-, ili ((G-C6)alkil)((G-C6)alkil)amino-. U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I) ili (II) gde R<1>je (Ci-C4)alkoksi. U specifičnom primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I) ili (II) gde R<1>je etoksi.
[0013] U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I) ili (II) gde n je 1 ili 2 i svaki R<2>je nezavisno halogen. U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I) ili (II) gde nje 1 ili 2 i svaki R2 je fluor.
[0014] U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I) gde R<3>je fenil koji je izborno supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabranih od halogena, (G-C6)alkil, halo(G-C6)alkil, (C3-C6)cikloalkil, cijano, 5- ili 6-članog heteroaril, - OR<4>, i -CONR<5>R<6>; gde pomenuti (Ci-Ce)alkil je izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (Ci-C4)alkoksi, halo(Ci-C4)alkoksi, ili -NR<5>R<6>; i gde pomenuti 5- ili 6-člani heteroaril je izborno supstituisan sa halogenom, (Ci-C4)alkil, ili halo(G-C4)alkil. U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I) gde R<3>je fenil koji je izborno supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabranih od fluora, hlora, (G-C6)alkil, halo(G-C4)alkil, cijano, (G-C4)alkoksi, hidroksi(C2-C4)alkoksi-, (Ci-C4)alkoksi(C2-C4)alkoksi-, amino(C2-C4)alkoksi-, ((Ci.C4)alkil)amino(C2-C4)alkoksi-, ((Ci.C4)alkil)((Ci.C4)alkil)amino(Ci. C4)alkoksi-, i -CONH2; gde pomenuti (G-C6)alkil je izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (Ci-C4)alkoksi, amino, ((Ci-C4)alkil)amino-, ili ((Ci-C4)alkil)((Ci-C4)alkil)amino-. U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I) gde R<3>je fenil koji je izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od (G-C4)alkil i halo(G-C4)alkil; gde pomenuti (G-C4)alkil je izborno supstituisan sa cijano ili hidroksil.
[0015] U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I) gde R<3>je furanil, tienil, pirolil, imidazolil, pirazolil, triazolil, tetrazolil, oksazolil, tiazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksadiazolil, tiadiazolil, piridinil, piridazinil, pirazinil, pirimidinil, ili triazinil, od kojih je svaki izborno supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabranih od halogena, (Ci-C6)alkil, halo(G-C6)alkil, (C3-C6)cikloalkil, cijano, 5- ili 6-članog heteroaril,
-OR<4>, i -CONR<5>R<6>; gde pomenuti (Ci-C6)alkil je izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (G-C4)alkoksi, halo(G-C4)alkoksi, ili -NR<5>R<6>; i gde pomenuti 5- ili 6-člani heteroaril je izborno supstituisan sa halogenom, (G-G)alkil, ili halo(G-C4)alkil. U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I) gde R<3>je furanil, tienil, pirolil, imidazolil, pirazolil, triazolil, tetrazolil, oksazolil, tiazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksadiazolil, tiadiazolil, piridinil, piridazinil, pirazinil, pirimidinil, ili triazinil, od kojih je svaki izborno supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabranih od fluora, hlora, (G-C6)alkil, halo(G-C4)alkil, cijano, (G-C4)alkoksi, hidroksi(C2-C4)alkoksi-, (G-C4)alkoksi(C2-C4)alkoksi-, amino(C2-C4)alkoksi-, ((Ci-C4)alkil)amino(C2-C4)alkoksi-, ((Ci-C4)alkil)((Ci-C4)alkil)amino(C2-
C4)alkoksi-, i -CONH2; gde pomenuti (G-C6)alkil je izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (Ci-C4)alkoksi, amino, ((Ci-C4)alkil)amino-, ili ((Ci-C4)alkil)((Ci-C4)alkil)amino-.
[0016]U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I) gde R<3>je piridinil koji je izborno supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabranih od fluora, hlora, (G-C6)alkil, halo(G-C4)alkil, cijano, (G-C4)alkoksi, hidroksi(C2-C4)alkoksi-, (G-C4)alkoksi(C2-C4)alkoksi-, amino(C2-C4)alkoksi-, ((Ci-C4)alkil)amino(C2-C4)alkoksi-, ((G-C4)alkil)((Ci-C4)alkil)amino(C2-C4)alkoksi-, i -CONH2; gde pomenuti (Ci-C6)alkil je izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (G-C4)alkoksi, amino, ((G-G)alkil)amino-, ili ((G-C4)alkil)((G-C4)alkil)amino-. U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I) gde R<3>je piridinil koji je izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od (G-C4)alkil i halo(G-C4)alkil; gde pomenuti (G-G)alkil je izborno supstituisan sa cijano ili hidroksil.
[0017]U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I) gde R<3>je furanil, tienil, pirolil, imidazolil, pirazolil, triazolil, tetrazolil, oksazolil, tiazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksadiazolil, tiadiazolil, piridinil, piridazinil, pirazinil, pirimidinil, ili triazinil, od kojih je svaki izborno supstituisan sa (G-C4)alkil ili halo(G-G)alkil. U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I) gde R<3>je izoksazolil koji je izborno supstituisan sa (G-G)alkil ili halo(G-C4)alkil.
[0018]U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (II) gde R<7>je vodonik ili halogen. U specifičnom primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (II) gde R<7>je vodonik ili fluor. U specifičnijem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (II) gde R7 je vodonik.
[0019]U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (II) gde R<8>je vodonik, fluor, hlor, (G-C6)alkil, halo(G-C4)alkil, cijano, (G-G)alkoksi, hidroksi(G-C4)alkoksi-, (Cl-Ca)alkoksi(C2-C4)alkoksi-, amino(C2-C4)alkoksi-, ((G C4)alkil)amino(G-C4)alkoksi-, ((Ci-C4)alkil)((Ci-C4)alkil)amino(C2-C4)alkoksi-, ili -CONH2; gde pomenuti (G-C6)alkil je izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (G-G)alkoksi, amino, ((G-G)alkil)amino-, ili ((G-G)alkil)((G-C4)alkil)amino-. U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (II) gde R8 je vodonik ili (G-C6)alkil; gde pomenuti (G-Ce)alkil je izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (G-G)alkoksi, amino, ((G-G)alkil)amino-, ili ((G-G)alkil)((G-G)alkil)amino-. U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (II) gde R8 je (G-G)alkil koji je izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (G-G)alkoksi, amino, ((G-G)alkil)amino-, ili ((G-G)alkil)((G-G)alkil)amino-.
[0020]U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (II) gde R<9>je halo(G-C4)alkil. U specifičnom primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (II) gde R9 je trifluorometil.
[0021]U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (II) gde X je CR<10>i R10 je vodonik, halogen, halo(G-C4)alkil, furanil, tienil, pirolil, imidazolil, pirazolil, triazolil, tetrazolil, oksazolil, tiazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksadiazolil, tiadiazolil, piridinil, piridazinil, pirazinil, pirimidinil, ili triazinil, gde pomenuti furanil, tienil, pirolil, imidazolil, pirazolil, triazolil, tetrazolil, oksazolil, tiazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksadiazolil, tiadiazolil, piridinil, piridazinil, pirazinil, pirimidinil, ili triazinil je izborno supstituisan sa halogenom, (Ci-C4)alkil, ili halo(Ci-C4)alkil. U sledećem primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (II) gde X je CR<10>i R<10>je vodonik, fluor, hlor, ili trifluorometil. U specifičnom primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (II) gde X je CH. U sledećem specifičnom primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (II) gde X je N.
[0022]U posebnom primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (II) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli gde: XjeCH;
R1 je(Ci-C4)alkoksi;
svaki R2 je nezavisno halogen;
R7 je vodonik ili halogen;
R<8>je vodonik, fluor, hlor, (Ci-C6)alkil, halo(G-C4)alkil, cijano, (G-C4)alkoksi, hidroksi(C2-C4)alkoksi-, (Ci-C4)alkoksi(C2-C4)alkoksi-, amino(C2-C4)alkoksi-, ((Ci-C4)alkil)amino(C2-C4)alkoksi-, ((Ci-C4)alkil)((Ci-C4)alkil)amino(C2-C4)alkoksi-, ili -CONH2; gde pomenuti (G-C6)alkil je izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (Ci-G.)alkoksi, amino, ((Ci-G)alkil)amino-, ili ((Ci-C4)alkil)((Ci-C4)alkil)amino-;
R<9>jehalo(G-C4)alkil; i
nje 1 ili 2.
[0023]U posebnom primeru izvođenja, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (II) ili njihove farmaceutski prihvatljive soli gde: XjeN;
R1 je(Ci-C4)alkoksi;
svaki R2 je nezavisno halogen;
R7 je vodonik ili halogen;
R<8>je vodonik, fluor, hlor, (Ci-C6)alkil, halo(G-C4)alkil, cijano, (Ci-C4)alkoksi, hidroksi(C2-C4)alkoksi-, (Ci-C4)alkoksi(C2-C4)alkoksi-, amino(C2-C4)alkoksi-, ((Ci-C4)alkil)amino(C2-C4)alkoksi-, ((Ci-U)alkil)((Ci-U)alkil)amino(Ci-C4)alkoksi-, ili -CONH2; gde pomenuti (Ci-C6)alkil je izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (G-C4)alkoksi, amino, ((Ci-C4)alkil)amino-, ili ((Ci-C4)alkil)((Ci-C4)alkil)amino-;
R9jehalo(Ci-C4)alkil; i
nje 1 ili 2.
[0024]Ovaj pronalazak se takođe odnosi na jedinjenja koja su data primerom u Eksperimentalnom delu.
[0025]Specifična jedinjenja ovog pronalaska uključuju: 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(6-(2-hidroksipropan-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamid; A^-(6-etoksi-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3 -il)-2-fluorofenil)acetamid;
2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<f->(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid;
2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2,3-difluorofenil)-Af-(4-(2-hidroksietoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid;
2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid;
2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-3-fluorofenil)-Ar-(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid;
N-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-3-fluorofenil)acetamid;
2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2,6-difluorofenil)-A<f->(4-(2-hidroksietoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid;
N-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid;
N(6-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid;
2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(3-(4-metil-l//-imidazol-1 -il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid;
Ar-(6-(2-cijanopropan-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid;
2- (4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidro (trifluorometil)fenil)acetamid;
Ar-(6-(cijanometil)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidro^ il)-2-fluorofenil)acetamid;
N-(6-(l-cijanoetil)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid;
A^-(4-hloro-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid;
Af-(4-((dimetilamino)metil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-di^^ 3- il)-2-fluorofenil)acetamid;
N-(3,4-dihlorofenil)-2-(4-(5-eto 2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(5-(l, 1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-il)acetamid;
2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(4-(2-hidroksietoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid;
2- (4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-lfuorofenil)-A^-(4-((4-etilpiperazin-l-il)metil)-3- (trifluorometil)fenil)acetamid;
Ar-(2,5-difluorofenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetami 4- (2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetarnido)-2-(trifluorometil)benzamid;
A^-(2,4-dilfuoro-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-fluorofenil)acetamid;
7V^-(3,5-6/5(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid;
2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-i<V->(2-fluoro-5-(trifluorometil)fenil)acetamid;
2-(4-(4-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3 -il)-2-fluorofenil)-Af-(3 -(1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamid;
2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3 -il)-2-fluorofenil)-Ar-(3 -(1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamid;
2-(4-(4-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(3-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid;
2-(4-(4-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3 -il)-2-fluorofenil)-7V-(5-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-il)acetamid;
2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fl^ 2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamid;
2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-3-fluorofenil)-iV-(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid;
2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(3-(trifluorometil)fenil)acetamid;
2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dmidropiridin-3-il)-2-flu^
(trifluorometil)fenil)acetamid;
2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(3-(3-metil- lH-pirazol-1 -il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid;
A^-(3-(li/-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridm^ 2-fluorofenil)acetamid;
2-(4-(4-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3 -il)-2-fluorofenil)-jV-(6-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-3-il)acetamid;
A^-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid;
2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(3-(2-morpholinoetoksi)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid;
2-(4-(4-etoksi-6-okso-1 ^-dihidropiridin-S-iO^-fluorofeniO-A^-CS-C 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamid;
2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-( 1 -metil-3-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)-l#-pirazol-5-il)acetamid;
2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(3-(l, 1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)-l//-pirazol-5-il)acetamid;
7Vr-(4-(2,2-difluoro-3-hidroksipropil)-3-(1xifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid;
A^-(3-(2i/-tetrazol-5-il)-5-(1xifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropirM^ 2-fluorofenil)acetamid;
2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(3-(l -metil- lif-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid; i
7V-(3-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid;
ili njihove farmaceutski prihvatljive soli.
[0026]Stručnjak prepoznaje da jedinjenja ovog pronalaska mogu imati alterantivna imena kada se koristi drugi softver za imenovanje.
[0027] Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I) ili (II) ili bilo koje od jedinjenja datih u primerima, ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, za upotrebu u terapiji. Naročito, za upotrebu u tretmanu bolesti posredovanih sa RET: sindroma iritabilnog creva (IBS) uključujući pretežno sa dijarejom, pretežno sa zatvorom ili promenljivom stolicom, funkcionalo nadimanje, funkcionalni zatvor, funkcionalnu dijareju, neodređeni funkcionalni crevni poremećaj, sindrom funkcionalnog abdominalnog bola, hronični zatvor, funkcionalne poremećaje jednjaka, funkcionalne gastroduodenalne poremećaje, funkcionalni anorektalni bol, inflamatornu bolest creva, proliferativne bolesti kao što su nesitnoćelijski kancer pluća, hepatocelularni karcinom, kolorektalni kancer, medularni tiroidni kancer, folikularni tiroidni kancer, anaplastični tiroidni kancer, papilarni tiroidni kancer, tumori mozga, kancer peritonealne duplje, solidni tumori, drugi kanceri pluća, kancer glave i vrata, gliomi, neuroblastomi, Von Hippel-Lindau sindrom i tumori bubrega, kancer dojke, kancer jajovoda, kancer jajnika, kancer ćelija prelaznog tipa, kancer prostate, kancer jednjaka i gastroezofagijalnog spoja, kancer žučne kese i adenokarcinom. Naročito, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja Formule (I) ili (II) ili bilo koja jedinjenja data u primerima, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, za upotrebu u tretmanu sindroma iritabilnog creva (IBS) uključujući pretežno sa dijarejom, pretežno sa zatvorom ili promenljivom stolicom, funkcionalo nadimanje, funkcionalni zatvor, funkcionalnu dijareju, neodređeni funkcionalni crevni poremećaj, sindrom funkcionalnog abdominalnog bola, hronični zatvor, funkcionalne poremećaje jednjaka, funkcionalne gastroduodenalne poremećaje, funkcionalni anorektalni bol, inflamatornu bolest creva, proliferativne bolesti kao što su nesitnoćelijski kancer pluća, hepatocelularni karcinom, kolorektalni kancer, medularni tiroidni kancer, folikularni tiroidni kancer, anaplastični tiroidni kancer, papilarni tiroidni kancer, tumori mozga, kancer peritonealne duplje, solidni tumori, drugi kanceri pluća, kancer glave i vrata, gliomi, neuroblastomi, Von Hippel-Lindau sindrom i tumori bubrega, kancer dojke, kancer jajovoda, kancer jajnika, kancer ćelija prelaznog tipa, kancer prostate, kancer jednjaka i gastroezofagijalnog spoja, kancer žučne kese i adenokarcinom.
[0028] Ovaj pronalazak se takođe odnosi na jedinjenja Formula (I) ili (II) ili bilo koja jedinjenja data u primerima, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, za upotrebu kao medikamenta.
[0029] Zbog njihove potencijalne upotrebe u medicini, soli jedinjenja Formule (I) su poželjno farmaceutski prihvatljive. Pogodne farmaceutski prihvatljive soli uključuju one opisane od strane Berge, Bighlev, i Monkhouse, J. Pharm. Sci. (1977) 66, pp 1-19. Soli obuhvaćene terminom "farmaceutski prihvatljive soli" odnose se na netoksične soli jedinjenja ovog pronalaska. Soli opisanih jedinjenja koje sadrže bazni amin ili drugu baznu funkcionalnu grupu mogu se pripremiti bilo kojim pogodnim postupkom poznatim u tehnici, uključujući tretiranje slobodne baze sa neorganskom kiselinom, kao stoje hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, sumporna kiselina, azotna kiselina, fosforna kiselina, i slično, ili sa organskom kiselinom, kao što je sirćetna kiselina, trifluorosirćetna kiselina, maleinska kiselina, ćilibarna kiselina, bademova kiselina, fumarna kiselina, malonska kiselina, pirogrožđana kiselina, oksalna kiselina, glikolna kiselina, salicilna kiselina, piranozidna kiselina, kao što je glukuronska kiselina ili galakturonska kiselina, alfa-hidroksi kiselina, kao što je limunska kiselina ili vinska kiselina, aminokiselina, kao što je asparaginska kiselina ili glutaminska kiselina, aromatična kiselina, kao što je benzojeva kiselina ili cimetna kiselina, sulfonska kiselina, kao što je p-toluensulfonska kiselina, metansulfonska kiselina, etansulfonska kiselina ili slično. Primeri farmaceutski prihvatljivih soli uključuju sulfate, pirosulfate, bisulfate, sulfite, bisulfite, fosfate, hloride, bromide, jodide, acetate, propionate, dekanoate, kaprilate, akrilate, formate, izobutirate, kaproate, heptanoate, propiolate, oksalate, malonate, sukcinate, suberate, sebacate, fumarate, maleate, butin-l,4-dioate, heksin-l,6-dioate, benzoate, hlorobenzoate, metilbenzoate, dinitrobenzoate, hidroksibenzoate, metoksibenzoate, ftalate, fenilacetate, fenilpropionate, fenilbutirate, citrate, laktate, y-hidroksibutirate, glikolate, tartarate, mandelate, i sulfonate, kao što su ksilensulfonati, metansulfonati, propansulfonati, naftalen-l-sulfonati i naftalen-2-sulfonati.
[0030]Soli opisanih jedinjenja koje sadrže karboksilnu kiselinu ili drugu kiselu funkcionalnu grupu mogu se pripremiti reakcijom sa pogodnom bazom. Takva farmaceutski prihvatljiva so može se stvoriti sa bazom koja daje farmaceutski prihvatljiv katjon, što uključuje soli alkalnih metala (naročito natrijuma i kalijuma), soli zemnoalkalnih metala (naročito kalcijuma i magnezijuma), soli aluminijuma i amonijum soli, kao i soli stvorene od fiziološki prihvatljivih organskih baza kao što su trimetilamin, trietilamin, morfolin, piridin, piperidin, pikolin, dicikloheksilamin, A^-dibenziletilenediamin, 2-hidroksietilamin, bis-(2-hidroksietil)amin, tri-(2-hidroksietil)amin, prokain, dibenzilpiperidin, dehidroabietilamin,N, N'-bisdehidroabietilamin, glukamin,A^-metilglukamin, kolidin, holin, hinin, hinolin, i bazne aminokiseline kao što su lizin i arginin.
[0031]Druge soli, koje nisu farmaceutski prihvatljive, mogu biti korisne u pripremi jedinjenja ovog pronalaska i treba smatrati da čine dodatni aspekt pronalaska. Ove soli, kao što je trifluoroacetat, iako same po sebi nisu farmaceutski prihvatljive, mogu biti korisne u pripremi soli korisnih kao intermedijeri za dobijanje jedinjenja pronalaska i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli.
[0032]Ukoliko je jedinjenje pronalaska koje sadrži bazni amin ili drugu baznu funkcionalnu grupu izolovano kao so, odgovarajući oblik slobodne baze tog jedinjenja može se pripremiti sa bilo kojim pogodnim postupkom poznatim u tehnici, uključujući tretman soli sa neorganskom ili organskom bazom, pogodnom neorganskom ili organskom bazom koja ima višu pKa od oblika slobodne baze jedinjenja. Slično tome, ukoliko je jedinjenje pronalaska koje sadrži karboksilnu kiselinu ili drugu kiselu funkcionalnu grupu izolovano kao so, odgovarajući oblik slobodne kiseline tog jedinjenja može se pripremiti sa bilo kojim postupkom poznatim u tehnici, uključujući tretman soli sa neorganskom ili organskom kiselinom, pogodno sa neorganskom ili organskom kiselinom koja ima nižu pKa od oblika slobodne kiseline jedinjenja.
[0033]Kao što je ovde korišćeno, teremin "jedinjenje Formule (I)" ili "jedinjenje Formule (I)" se odnosi na jedno ili više jedinjenja prema Formuli (I). Jedinjenje Formule (I) može postojati u čvrstom ili tečnom obliku. U čvrstom obliku, može postojati u kristalnom ili nekristalnom obliku, ili kao njihova smeša. Stručnjaku će biti jasno da se farmaceutski prihvatljivi solvati mogu formirati za kristalna ili nekristalna jedinjenja. U kristalnim solvatima, molekuli rastvarača su inkorporisani u kristalnu rešetku tokom kristalizacije. Solvati mogu uključivati ne-vodene rastvarače, kao što su, ali ne ograničavajući se na, etanol, izopropanol, DMSO, sirćetnu kiselinu, etanolamin, ili etil acetat, ili mogu uključivati vodu kao rastvarač koji je inkorporisan u kristalnu rešetku. Solvati gde je voda rastvarač inkorporisana u kristalnu rešetku tipično su označeni kao "hidrati." Hidrati uključuju stehiometrijske hidrate kao i kompozicije koje sadrže varijabilne količine vode. Pronalazak uključuje sve takve solvate.
[0034]Stručnjak će dodatno shvatiti da određena jedinjenja pronalaska koja postoje u kristalnom obliku, uključujući njihove različite solvate, mogu pokazivati polimorfizam (tj. sposobnost da se pojavljuju u različitim kristalnim strukturama). Ovi različiti kristalni oblici su tipično poznati kao "polimorfi." Pronalazak uključuje sve takve polimorfe. Polimorfi imaju isti hemijski sastav ali se razlikuju u pakovanju, geometrijskom rasporedu, i drugim opisnim osobinama kristalnog čvrstog stanja. Polimorfi, stoga, mogu imati različite fizičke osobine kao što je oblik, gustina, čvrstoća, deformabilnost, stabilnost, i osobine rastvaranja. Polimorfi tipično pokazuju različite tačke topljenja, IR spektar, i obrasce rentgenske difrakcije praha, koji se mogu koristiti za identifikaciju. Stručnjaku će biti jasno da se različiti polimorfi mogu proizvesti, na primer, promenom ili podešavanjem reakcionih uslova ili reagenasa, korišćenih za stvaranje jedinjenja. Na primer, promene u temperaturi, pritisku, ili rastvaraču mogu rezultovati u polimorfima. Dodatno, jedan polimorf se može spontano konvertovati u drugi polimorf pod određenim uslovima.
[0035]Jedinjenje Formule (I) ili (II) ili njihova so može postojati u stereizomernim oblicima (npr., sadrži jedan ili više asimetričnih atoma ugljenika). Pojedinačni stereoizomeri (enantiomeri i diastereomeri) i njihove smeše uključene su unutar obima ovog pronalaska. Obim ovog pronalaska uključuje smeše stereoizomera kao i prečišćene enantiomere ili enantiomerno/diastereomerno obogaćene smeše.
[0036]Slično tome, podrazumeva se da jedinjenje ili so Formule (I) ili (II) može postojati u tautomernim oblicima različitim od onih prikazanih u formuli i ovi su takođe uključeni unutar obima ovog pronalaska. Na primer, dok su jedinjenja Formule (I) i (II) prikazane da sadrže piridin-2-on deo, odgovarajući 2-hidroksipiridin tautomer je takođe uključen unutar obima ovog pronalaska. Podrazumeva se da ovaj pronalazak uključuje sve kombinacije i subsetove naročitih grupa definisanih ovde.
[0037]Stručnjaku će biti jasno da određeni zaštićeni derivati jedinjenja Formule (I) ili (II), koji se mogu napraviti pre ili nakon finalnog stadijuma deprotekcije, ne moraju posedovati farmakološku aktivnost kao takvu, ali mogu, u određenim slučajevima, biti primenjeni oralno ili parenteralno i nakon toga metabolizovani u telu da bi formirali jedinjenja pronalaska koja su farmakološki aktivna. Takvi derivati mogu stoga biti opisani kao "prolekovi". Dodatno, određena jedinjenja pronalaska mogu delovati kao prolekovi drugih jedinjenja pronalaska. Svi zaštićeni derivati i prolekovi jedinjenja pronalaska uključeni su unutar obima pronalaska.
[0038]Primeri pogodnih pro-lekova za jedinjenja ovog pronalaska su opisani u Drugs of Today, Volume 19, Number 9, 1983, pp 499-538 i in Topics in Chemistrv, Chapter 31, pp 306-316 i in "Design of Prodrugs" od H. Bundgaard, Elsevier, 1985, Chapter 1. Stručnjacima će dalje biti jasno, da se određene grupe, poznate stručnjacima kao "pro-grupe", na primer kao što je opisano od strane H. Bundgaard u "Design of Prodrugs" mogu staviti na određene funkcionalne grupe kada su takve funkcionalne grupe prisutne unutar jedinjenja pronalaska. Poželjne "pro-grupe" za jedinjenja pronalaska uključuju: estar, karbonatni estar, hemi-estar, fosfatni estar, nitro estar, sulfatni estar, sulfoksid, amid, karbamat, azo-, fosfamid, glikozid, etar, acetal, i ketal derivate jedinjenja Formule (I) ili (II).
[0039]Primena jedinjenja pronalaska kao proleka može omogućiti stručnjaku da uradi jedno ili više od sledećeg: (a) modifikuje početak dejstva jedinjenja in vivo; (b) modifikuje trajanje aktivnosti jedinjenja in vivo; (c) modifikuje transport ili distribuciju jedinjenja in vivo; (d) modifikuje rastvorljivost jedinjenja in vivo; i (e) prevaziđe ili prevaziđe sporedni efekat ili drugi problem kod j edinj enj a.
[0040]Predmetni pronalazak takođe uključuje izotopski obeležena jedinjenja, koja su identična onima navedenim u Formuli (I) i sledećim, ali uz činjenicu da je jedan ili više atoma zamenjeno sa atomom koji ima atomsku masu ili maseni broj različit od atomske mase ili masenog broja koji se obično nalazi u prirodi. Primeri izotopa koji se mogu inkorporisati u jedinjenja pronalaska i njihove farmaceutski prihvatljive soli uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, sumpora, fluora, joda, i hlora, kao što su<2>H,<3>H,nC,1<3>C,<14>C,<b>N, 1<7>0,<18>0, 310,32P, 35S, 18F, 36C1, 123I,i125I.
[0041]Jedinjenja ovog pronalaska i farmaceutski prihvatljive soli ovih jedinjenja koji sadrže prethodno pomenute izotope i/ili druge izotope drugih atoma su unutar obima ovog pronalaska. Izotopski-obeležena jedinjenja ovog pronalaska, na primer ona u koja su inkorporisani radioaktivni izotopi kao što su<3>H ili<14>C, korisna su u testovima leka i/ili distribucije u supstratnom tkivu. Tritijumovani, tj.,<3>H, i ugljenik-14, tj., 14C, izotopi su naročito poželjni zbog lakoće primene i detektabilnosti. nC izotopi su naročito korisni u PET (pozitronskoj emisionoj tomografiji), i<125>I izotopi su naročito korisni u SPECT (jednofotonskoj emisionoj kompjuterizovanoj tomografiji), što je sve korisno za vizuelizaciju mozga. Dodatno, supstitucija sa težim izotopima kao što je deuterijum, tj.,<2>H, može dati određene terapeutske prednosti koje su rezultat veće metaboličke stabilnosti, na primer povećanogin vivopolu-života ili smanjene potrebne doze i, stoga, mogu biti poželjni u nekim slučajevima. Izotopski obeležena jedinjenja Formule (I) i sledeća ovog pronalaska mogu se generalno pripremiti izvođenjem procedura opisanih u Šemama i/ili u Primerima u nastavku, supstitucijom ne-izotopski obeleženog reagensa sa lako dostupnim izotopski obeleženim reagensom.
DEFINICIJE
[0042]Termini su korišćeni unutar njihovih prihvaćenih značenja. Namera je da sledeće definicije razjasne, ali ne ograniče, definisane termine.
[0043]Kao što je ovde korišćeno, termin "alkil" predstavlja zasićenu, linearnu, ili granatu ugljovodoničnu grupu. Termin "(Ci-C6)alkil" odnosi se na alkil grupu koja sadrži od 1 do 6 atoma ugljenika. Primeri alkila uključuju, ali nisu ograničeni na metil, etil,/7-propil, izopropil,H-butil, izobutil, s-butil,?-butil, pentil, i heksil.
[0044]Kada je termin "alkil" korišćen u kombinaciji sa drugim supstituentskim grupama, kao što su "halo(Ci-C4)alkil" ili "hidroksi(Ci-C4)alkil", namera je da termin "alkil" obuhvata dvovalentni linearni ili granati ugljovodonični radikal, gde je tačka vezivanja preko alkil grupe. Namera je da termin "halo(Ci-C4)alkil" označava radikal koji ima jedan ili više atoma halogena, koji mogu biti isti ili različiti, najednom ili više atoma ugljenika alkil grupe sadrže od 1 do 4 atoma ugljenika, koji je linearni ili granatu radikal ugljenika. Primeri "halo(Ci-C4)alkil" grupa korisni u ovom pronalasku uključuju, ali nisu ograničeni na, -CF3(trifluorometil), -CCI3 (trihlorometil), 1,1-difluoroetil, 2,2,2-trifluoroetil, i heksafluoroizopropil. Primeri "hidroksi(Ci-C4)alkil" grupa korisnih u ovom pronalasku uključuju, ali nisu ograničeni na, hidroksimetil, hidroksietil, i hidroksiizopropil.
[0045]"Alkoksi" se odnosi na grupu koja sadrži alkil radikal, prethodno definisan, vezan preko linker atoma kiseonika. Termin "(G-C4)alkoksi" se odnosi se linearni ili granati ugljovodonični radikal koji ima najmanje 1 i do 4 atoma ugljenika vezana preko linker atoma kiseonika. Primeri "(Ci-C4)alkoksi" grupa korisnih u ovom pronalasku uključuju, ali nisu ograničeni na, metoksi, etoksi, n-propoksi, izopropoksi, n-butoksi, s-butoksi, izobutoksi, i ć-butoksi.
[0046]Kada je termin "alkoksi" korišćen u kombinaciji sa drugim supstituentskim grupama, kao što su "halo(Ci-C6)alkoksi", "hidroksi(C2-C4)alkoksi", ili "(Ci-C4)alkoksi(C2-C4)alkoksi", namera je da termin "alkoksi" obuhvata dvovalentni linearni ili granati ugljovodonični radikal, gde je mesto vezivanja sa alkil grupom preko linker atoma kiseonika. Termin "halo(G-C6)alkoksi" odnosi se na linearni ili granati ugljovodonični radikal, koji ima najmanje 1 do 6 atoma ugljenika sa jednim ili više atoma halogena, koji mogu biti isti ili različiti, vezani za jedan ili više atoma ugljenika, pri čemu je ovaj radikal vezan preko linker atoma kiseonika. Primeri "halo(G-C6)alkoksi" grupa korisni u ovom pronalasku uključuju, ali nisu ograničeni na, -OCHF2(difluorometoksi), -OCF3(trifluorometoksi), i -OCH(CF3)2(heksafluoroizopropoksi). Primeri "hidroksi(C2-C4)alkoksi" grupa korisnih u ovom pronalasku uključuju, ali nisu ograničeni na, 2-hidroksietoksi i 2-hidroksiizopropoksi. Primeri "(Ci-C4)alkoksi(C2-C4)alkoksi" grupa korisnih u ovom pronalasku uključuju, ali nisu ograničeni na, 2-metoksietoksi, 2-etoksietoksi, 2-izopropoksietoksi, 2-metoksiizopropoksi, i 2-etoksiizopropoksi.
[0047]Kao što je ovde korišćeno, termin "cikloalkil" odnosi se na nearomatični, zasićen, ciklični ugljovodonični prsten koji sadrži naznačen broj atoma ugljenika. Termin "(C3-C6)cikloalkil" odnosi se na nearomatični ciklični ugljovodonični prsten koji sadrži tri do šest ugljenikovih atoma u prstenu. Primeri "(C3-C6)cikloalkil" grupa korisnih u ovom pronalasku uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, i cikloheksil.
[0048]Kao što je ovde korišćeno, termin "cikloalkiloksi-" odnosi se na grupu koja sadrži cikloalkil radikal, prethodno definisan, povezan preko linker atoma kiseonika. Primeri "(C3-C8)cikloalkiloksi-" grupa korisnih u ovom pronalasku uključuju ciklopropiloksi, ciklobutiloksi, ciklopentiloksi, cikloheksiloksi, cikloheptiloksi, i ciklooktiloksi.
[0049]Kao što je ovde korišćeno, "4- do 6-člani heterocikloalkil" predstavlja grupu ili ostatak koji sadrži nearomatični, monovalentni monociklični radikal, koji je zasićen ili delimično nezasićen, koji sadrži 4,5, ili 6 atoma prstena, koji uključuje jedan ili dva heteroatoma izabrana nezavisno od kiseonika, sumpora, i azota. Ilustrativni primeri 4- do 6-članih heterocikloalkil grupa korisnih u ovom pronalasku uključuju, ali nisu ograničeni na azetidinil, oksetanil, pirolidinil, pirazolidinil, pirazolinil, imidazolidinil, imidazolinil, oksazolinil, tiazolinil, tetrahidrofuranil, dihidrofuranil, 1,3-dioksolanil, piperidinil, piperazinil, morfolinil, tiomorfolinil, tetrahidropiranil, dihidropiranil, 1,3-dioksanil, 1,4-dioksanil, 1,3-oksatiolanil, 1,3-oksatianil, 1,3-ditianil, 1,4-oksatiolanil, 1,4-oksatianil, i 1,4-ditianil.
[0050]Kao što je ovde korišćeno, "5- ili 6-člani heteroaril" predstavlja grupu ili ostatak koji sadrži aromatični monovalentni monociklični radikal, koji sadrži 5 ili 6 atoma prstena, uključujući najmanje jedan atom ugljenika i 1 do 4 heteroatoma nezavisno izabranih od azota, kiseonika, i sumpora. Izabrane 5-člane heteroaril grupe sadrže jedan azot, kiseonik, ili sumpor heteroatom prstena, i izborno sadrže 1, 2, ili 3 dodatnih atoma azota prstena. Izabrane 6-člane heteroaril grupe sadrže 1, 2, ili 3 azotovih heteroatoma prstena. Ilustrativni primeri 5- ili 6-članih heteroaril grupa korisnih u ovom pronalasku uključuju, ali nisu ograničeni na furanil, tienil, pirolil, imidazolil, pirazolil, triazolil, tetrazolil, oksazolil, tiazolil, izoksazolil, izotiazolil, oksadiazolil, tiadiazolil, piridinil, piridazinil, pirazinil, pirimidinil, i triazinil.
[0051]Termini "halogen" i "halo" predstavljau hloro, fluoro, bromo, ili jodo supstituente. Namera je da "hidroksi" ili "hidroksil" označava radikal -OH. Kao što je ovde korišćeno, termin "cijano" odnosi se na grupu -CN.
[0052]Kao stoje ovde korišćeno, termin "izborno supstituisan" označava da grupa, kao što je alkil, cikloalkil, fenil, ili heteroaril, može biti nesupstituisana, ili grupa može biti supstituisana sa jednim ili više substituenata kao što je definisano. U slučaju gde grupe mogu biti izabrane od više alternativnih grupa, izabrane grupe mogu biti iste ili različite.
[0053]Termin "nezavisno" označava da gde je više od jednog substituenta izabranih od više mogućih supstituenata, ti supstituenti mogu biti isti ili različiti. Namera je da alternativne definicije za različite grupe i substituentske grupe Formule (I) ili (II) obezbeđene u specifikaciji naročito opisuju svaku vrstu jedinjenja opisanu ovde, pojedinačno, kao i grupe od jedne ili više vrsta jedinjenja. Obim ovog pronalaska uključuje bilo koju kombinaciju ovih grupa i definicije substituentskih grupa.
[0054]"Farmaceutski prihvatljivo" odnosi se na ona jedinjenja, materijale, kompozicije, i dozne oblike koji su, unutar obima racionalne medicinske procene, pogodne za upotrebu u kontaktu sa tkivima ljudi i životinja bez suvišne toksičnosti, iritacije, ili drugog problema ili komplikacije, srazmerno racionalnom odnosu korist/rizik.
[0055]Kao što je ovde korišćeno, termin "farmaceutski prihvatljive soli" odnosi se na soli koje zadržavaju željenu biološku aktivnost predmetnog jedinjenja i pokazuju minimalne neželjene toksikološke efekte. Ove farmaceutski prihvatljive soli mogu se pripremitiin situtokom finalne izolacije i prečišćavanja jedinjenja, ili zasebnom reakcijom prečišćenog jedinjenja u obliku njegove slobodne kiseline ili baze sa pogodnom bazom ili kiselinom, respektivno.
FARMACEUTSKEKOMPOZICIJE
[0056]Pronalazak dodatno obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju (takođe označena kao farmaceutska formulacija) koja sadrži jedinjenje Formule (I) ili (II) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i jedan ili više ekscipijenata (takođe označenih kao nosači i/ili razblaživači u farmaceutskoj tehnici). Ekscipijenti su farmaceutski prihvatljivi u smislu da su kompatibilni sa drugim sastojcima formulacije i nisu štetni za njihovog primaoca (tj., pacijenta).
[0057]Pogodni farmaceutski prihvatljivi ekscipijenti uključuju sledeće tipove ekscipijenata: razblaživače, punioce, vezujuća sredstva, sredstva za raspadanje, lubikante, sredstva za klizanje, sredstva za granulisanje, sredstva za oblaganje, sredstva za vlaženje, rastvarače, ko-rastvarače, sredstva za formiranje suspenzije, sredstva za formiranje emulzije, zaslađivače, aromatizere, sredstva za maskiranje ukusa, boje, sredstva protiv zgrudnjavanja, sredstva za odžavanje vlažnosti, helatirajuća sredstva, plastifikatore, sredstva za povećanje viskoznosti, antioksidante, konzervanse, stabilizatore, surfaktante, i pufere. Stručnjaku će biti jasno da određeni farmaceutski prihvatljivi ekscipijenti mogu imati više od jedne funkcije i mogu imati alternativne funkcije u zavisnosti od toga koliko je ekscipijenta prisutno u formulaciji i koji drugi sastojci su prisutni u formulaciji.
[0058]Stručnjaci poseduju tehničko znanje i veštinu koji im omogućavaju da izaberu pogodne farmaceutski prihvatljive ekscipijente u odgovarajućim količinama za upotrebu u pronalasku. Dodatno, postoje brojni izvori koji su dostupni stručnjacima koji opisuju farmaceutski prihvatljive ekscipijente i mogu biti korisni u izboru pogodnih farmaceutski prihvatljivih ekscipijenata. Primeri uključuju Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Companv), The Handbook of Pharmaceutical Additives (Gower Publishing Limited), i The Handbook of Pharmaceutical Excipients (American Pharmaceutical Association i Pharmaceutical Press).
[0059]Farmaceutske kompozicije pronalaska su pripremljene korišćenjem tehnika i postupaka poznatih stručnjacima. Neki od postupaka koji se obično koriste u tehnici opisani su u Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Companv).
[0060]U skladu sa sledećim aspektom pronalaska obezbeđen je proces za pripremu farmaceutske kompozicije koji sadrži mešanje (domešavanje) jedinjenja Formule (I) ili (II) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, sa najmanje jednim ekscipijentom.
[0061]Farmaceutske kompozicije mogu biti u jediničnom obliku doze koja sadrži prethodno određenu količinu aktivnog sastojka po doznoj jedinici. Takva jedinica može sadržati terapeutski efikasnu dozu jedinjenja Formule (I) ili (II) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili deo terapeutski efikasne doze takav da se mogu primeniti višestruke dozne jedinice u određeno vreme da bi se postigla terapeutski efikasna doza. Poželjene formulacije dozne jedinice su one koje sadrže dnevnu dozu ili sub-dozu, kao što je prethodno navedeno, ili njihove odgovarajuće delove, aktivnog sastojka. Dodatno, takve farmaceutske kompozicije se mogu pripremiti bilo kojim postupcima dobro poznatim u tehnici.
[0062]Farmaceutske kompozicije mogu se prilagoditi za primenu bilo kojim putem, na primer, oralnim (uključujući bukalno i sublingvalno), rektalnim, nazalnim, topikalnim (uključujući bukalno, sublingvalno, ili transdermalo), vaginalnim, ili parenteralnim (uključujući potkožno, intramuskularno, intravenski, ili intradermalno) putevima. Takve kompozicije se mogu pripremiti bilo kojim postupkom poznatim u farmaceutskoj tehnici, na primer, spajanjem aktivnog sastojka sa ekscipijentom (ekscipijentima).
[0063]Kada su prilagođene za oralnu primenu, farmaceutske kompozicije mogu biti u obliku zasebnih jedinica kao što su tablete ili kapsule, praško vi ili granule, rastvori ili suspenzije u vodenim ili ne-vodenim tečnostima, jestive pene ili farmaceutskog krema, ulje-u-vodi tečnih emulzija ili voda-u-ulju tečnih emulzija. Jedinjenje ili njegova so pronalaska ili farmaceutska kompozicija pronalaska može takođe biti inkorporisana u bombonu, keks, i/ili formulacije trake za jezik za primenu kao "brzo rastvarajućeg" leka.
[0064]Na primer, za oralnu primenu u obliku tablete ili kapsule aktivna komponenta leka može se kombinovati sa oralnim, ne-toksičnim farmaceutski prihvatljivim inertnim nosačem kao što je etanol, glicerol, voda, i slično. Praškovi ili granule se pripremaju usitnjavanjem jedinjenja do pogodne fine veličine i mešanj em sa slično usitnj enim farmaceutskim nosačem kao što j e j estivi uglljeni hidrat, kao, na primer, škrob ili manitol. Takođe mogu biti prisutni aromatizeri, konzervansi, sredstva za disperziju i bojenje.
[0065]Kapsule se prave pripremanjem smeše praška, kao što je prethodno opisano, i punjenjem formiranih želatinskih ili neželatinskih obloga. Klizajuća sredstva i lubrikanti kao što su koloidni silicijum dioksid, talk, magnezijum stearat, kalcijum stearat, čvrsti polietilen glikol, mogu se dodati smeši praška pre punjenja. Mogu se dodati sredstva za raspadanje ili sredstva za povećanje rastvorljivosti kao što su agar-agar, kalcijum karbonat, ili natrijum karbonat da se poboljša dostupnost leka kada se proguta kapsula.
[0066] Dodatno, kada je poželjno ili potrebno, u smešu se mogu inkorporisati pogodna vezujuća sredstva, lubrikanti, sredstva za raspadanje, i sredstva za bojenje. Pogodna vezujuća sredstva uključuju škrob, želatin, prirodne šećere, kao što je glukoza ili beta-laktoza, kukuruzne zaslađivače, prirodne i sintetičke gume kao što su akacija, tragantova, natrijum alginat, karboksimetilceluloza, polietilen glikol, voskove, i slično. Lubrikanti korišćeni u ovim doznim oblicima uključuju natrijum oleat, natrijum stearat, magenzijum stearat, natrijum benzoat, natrijum acetat, natrijum hlorid, i slično. Sredstva za raspadanje uključuju, bez ograničenja, škrob, metilcelulozu, agar, bentonit, ksantan gumu, i slično.
[0067] Tablete su formulisane, na primer, pripremanjem smeše praška, granulisanjem ili nabijanjem, dodavanjem lubrikanta i sredstva za raspadanje, i kompresovanjem u tablete. Smeša praška je pripremljena mešanjem jedinjenja, pogodno usitnjenog, sa razblaživačem ili bazom kao što je prethodno opisano, i izborno, sa vezujućim sredstvom kao što je karboksimetilceluloza, i aliginat, želatin, ili polivinil pirolidon, usporivačem rastvora kao što je parafin, sredstvom za ubrzavanje resorpcije kao što je kvatemarna so, i/ili agensom za apsorpciju kao što je bentonit, kaolin, ili dikalcijum fosfat. Smeša praška može se granulisati ovlaživanjem vezujućeg sredstva kao što je sirup, škrobna pasta, acadia mucilage, ili rastvorima celuloznih ili polimernih materijala i propuštanjem kroz sito. Kao alterantiva granulisanju, smeša praška se može propustiti kroz mašinu za tablete, što rezultuje u nesavršeno formiranim grumenima razbijenim u granule. Granule se mogu ovlažiti da bi se sprečilo lepljenje sa bojama za formiranje tableta putem dodavanja stearinske kiseline, stearat soli, talka, ili mineralnog ulja. Navlažena smeša je zatim komprimovana u tablete. Jedinjenje ili so ovog pronalaska može se takođe kombinovati kao slobodno-tekući inertni nosač i komprimovati u tablete direktno bez prolaska kroz korake granulisanja ili nabijanja. Može se obezbediti čist neprovidan zaštitni omotač koji se sastoji od omotača od šelaka, omotača od šećera, ili polimernog materijala, i polirajućeg omotača od voska. Ovim omotačima se mogu dodati boje da bi se razlikovale različite doze.
[0068] Oralne tečnosti kao što su rastvori, sirupi, i eliksiri mogu se pripremiti u obliku jedinične doze tako da data količina sadrži prethodno određenu količinu aktivnog sastojka. Sirupi se mogu pripremiti rastvaranjem jedinjenja ili njegove soli pronalaska u pogodno aromatizovanom tečnom rastvoru, dok su eliksiri pripremljeni upotrebom netoksičnog alkoholnog nosača. Suspenzije se mogu formulisati disperzijom jedinjenja ili soli pronalaska u netoksičnom nosaču. Takođe se mogu dodati sredstva za povećanje rastvorljivosti i sredstva za stvaranje emulzije, kao što su etoksilovani izostearil alkoholi i polioksietilen sorbitol etri, konzervansi, aditivi za aromatizaciju kao što su ulje nane, prirodni zaslađivači, saharin, ili drugi veštački zaslađivači, i slično.
[0069]Gde je pogodno, formulacije dozne jedinice za oralnu primenu mogu biti mikroinkapsulirane. Formulacija se takođe može pripremiti da produži ili zadrži oslobađanje kao, na primer, oblaganjem ili utiskivanjem određenog materijala u polimerima, vosku, ili slično.
[0070]U ovom pronalasku, tablete i kapsule su poželjne za dopremanje farmaceutske kompozicije.
[0071]Kao što je ovde korišćeno, termin "tretman" se odnosi na ublažavanje specifičnog stanja, eliminisanje ili smanjenje jednog ili više simptoma stanja, usporavanja ili eliminacije napredovanja stanja, i sprečavanja ili odlaganja ponovnog pojavljivanja stanja kod prethodno pogođenog ili dijagnostifikovanog pacijenta ili subjekta.
[0072]Ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenje Formule (I) ili (II) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u tretmanu sisara, naročito čoveka, koji pati od sindroma iritabilnog creva (IBS) uključujući pretežno sa dijarejom, pretežno sa zatvorom ili promenljivom stolicom, funkcionalo nadimanje, funkcionalni zatvor, funkcionalnu dijareju, neodređeni funkcionalni crevni poremećaj, sindrom funkcionalnog abdominalnog bola, hronični zatvor, funkcionalne poremećaje jednjaka, funkcionalne gastroduodenalne poremećaje, funkcionalni anorektalni bol, inflamatornu bolest creva, proliferativne bolesti kao što su nesitnoćelijski kancer pluća, hepatocelularni karcinom, kolorektalni kancer, medularni tiroidni kancer, folikularni tiroidni kancer, anaplastični tiroidni kancer, papilarni tiroidni kancer, tumori mozga, kancer peritonealne duplje, solidni tumori, drugi kanceri pluća, kancer glave i vrata, gliomi, neuroblastomi, Von Hippel-Lindau sindrom i tumori bubrega, kancer dojke, kancer jajovoda, kancer jajnika, kancer ćelija prelaznog tipa, kancer prostate, kancer jednjaka i gastroezofagijalnog spoja, kancer žučne kese i adenokarcinom ili njihove kombinacije. Takav tretman sadrži korak primene terapeutski efikasne količine jedinjenja Formule (I) ili (II) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, na pomenutog sisara, naročito čoveka. Tretman može takođe sadržati korak primene terapeutski efikasne količine farmaceutske kompozicije koja sadrži jedinjenje Formule (I) ili (II) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, na pomenutog sisara, naročito čoveka.
[0073]Kao što je ovde korišćeno, termin "efikasna količina" označava količinu leka ili farmaceutskog sredstva koja će izazvati biološki ili medicinski odgovor tkiva, sistema, životinje, ili čoveka koji se traži, na primer, od strane istraživača ili kliničkog lica.
[0074] Termin "terapeutski efikasna količina" označava bilo koju količinu koja, u poređenju sa odgovarajućim subjektom koji nije primio takvu količinu, rezultuje u poboljšanom tretmanu, lečenju, prevenciji, ili ublažavanju bolesti, poremećaja, ili sporednog efekta, ili smanjenja u stopi napredovanja bolesti ili poremećaja. Termin takođe uključuje unutar svog obima količine efikasne da poboljšaju normalnu fiziološku funkciju. Za upotrebu u terapiji, terapeutski efikasne količine jedinjenja Formule (I) ili (II), kao i njihove soli, mogu se primeniti kao sirove hemikalije. Dodatno, aktivni sastojak može biti predstavljen kao farmaceutska kompozicija. Iako je moguće da, za upotrebu u terapiji, terapeutski efikasna količina jedinjenja Formule (I) ili (II) ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, bude primenjena kao sirova hemikalija, tipično je predstavljana kao aktivni sastojak farmaceutske kompozicije ili formulacije.
[0075] Tačna terapeutski efikasna količina jedinjenja ili njegove soli pronalaska zavisiće od brojnih faktora, uključujući, ali se ne ograničavajući na, starost i težinu subjekta (pacijenta) koji se tretira, tačnog poremećaja koji zahteva tretman i njegove težine, prirode farmaceutske fonnulacije/kompozicije, i puta primene, i konačno će zavisiti od odgovornog lekara ili veterinara. Tipično, jedinjenje Formule (I) ili (II) ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, biće data za tretman u opsegu od oko 0.1 do 100 mg/kg telesne težine primaoca (pacijenta, sisara) na dan i češće u opsegu od 0.1 do 10 mg/kg telesne težine na dan. Prihvatljive dnevne doze mogu biti od oko 0.1 do oko 1000 mg/dan, i poželjno od oko 1 do oko 100 mg/dan. Ova količina se može dati u jednoj dozi na dan ili u više (kao što su dve, tri, četiri, pet, ili više) sub-doza na dan tako daje ukupna dnevna doza ista. Efikasna količina njegove soli može se odrediti kao deo efikasne količine jedinjenja Formule (I) ili (II) per se. Trebalo bi da su slične doze odgovarajuće za tretman drugih ovde datih stanja za tretman. Generalno, određivanje odgovarajućeg doziranja lako može odrediti medicinski ili farmaceutski stručnjak.
[0076] Jedinjenja pronalaska mogu se koristiti zasebno ili u kombinaciji sa jednim ili više drugih terapeutskih agenasa. Shodno tome ovaj pronalazak obezbeđuje kombinaciju koja sadrži jedinjenje Formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i jedan ili više drugih terapeutskih agenasa. Takve kombinacije mogu biti predstavljene pojedinačno (gde svaki aktivni sastojak je u zasebnoj kompoziciji) ili su aktivni sastojci predstavljeni u kombinovanoj kompoziciji.
[0077] Ova jedinjenja se mogu kombinovati sa ili ko-primeniti sa drugim terapeutskim agensima, naročito agensima koji mogu poboljšati aktivnost ili vreme raspoređivanja jedinjenja. Kombinovane terapije prema pronalasku sadrže primenu najmanje jednog jedinjenja pronalaska i upotrebu najmanje jednog različitog postupka tretmana. U jednom primeru izvođenja, kombinovane terapije prema pronalasku sadrže primenu najmanje jednog jedinjenja pronalaska i hiruršku terapiju. U jednom primeru izvođenja, kombinovane terapije prema pronalasku sadrže primenu najmanje jednog jedinjenja pronalaska i terapiju zračenjem. U jednom primeru izvođenja pronalaska, kombinovane terapije prema pronalasku sadrže primenu najmanje jednog jedinjenja pronalaska i najmanje jednog sredstva za negu (npr., najmanje jednog anti-emetičkog sredstva). U jednom primeru izvođenja, kombinovane terapije prema ovom pronalasku sadrže primenu najmanje jednog jedinjenja pronalaska i najmanje jednog drugog hemoterapeutskog agensa. U jednom posebnom primeru izvođenja pronalaska, pronalazak sadrži primenu najmanje jednog jedinjenja pronalaska i najmanje jednog anti-neoplastičnog sredstva. U sledećem primeru izovđenja pronalaska, pronalazak sadrži terapeutski režim gde RET inhibitori ovog opisa nisu sami po sebi aktivni ili nisu značajno aktivni, ali kada su kombinovani sa drugom terapijom, koja može ili ne mora biti aktivna kao samostalna terapija, kombinacija obezbeđuje korisni terapeutski ishod.
[0078]Termin "ko-primena" i njegovi izvedeni oblici kao što je ovde korišćeno odnosi se na bilo istovremenu primenu ili bilo koji način zasebne sekvencijalne primene RET inhibirajućeg jedinjenja, kao što je ovde opisano, i dodatnog aktivnog sastojka ili sastojaka, naročito onih poznatih kao korisnih u tretmanu kancera, uključujući hemoterapiju i tretman zračenjem. Termin dodatni aktivni sastojak ili sastojci, kao što je ovde korišćeno, uključuje bilo koje jedinjenje ili terapeutski agens za koji je poznato da ili koji pokazuje pogodnije osobine kada je primenjen na pacijenta kome je potreban tretman kancera. Poželjno, ukoliko primena nije istovremena, jedinjenja se primenjuju u međusobno kratkom vremenskom razmaku. Dodatno, nije važno da li su jedinjenja primenjena u istom doznom obliku, npr. jedno jedinjene može biti primenjeno topikalno i drugo jedinjenje može biti primenjeno oralno.
[0079]Tipično, bilo koje anti-neoplastično sredstvo koje ima aktivnost protiv osetljivog tumora koji se tretira može biti ko-primenjeno u tretmanu naznačenih kancera u ovom pronalasku. Primeri takvih sredstva mogu se naći u Cancer Principles and Practice of Oncologv od V.T. Devita i S. Hellman (editors), 6th edition (Februarv 15, 2001), Lippincott Williams & Wilkins Publishers. Stručnjak će biti u mogućnosti da raspozna koje kombinacije sredstava će biti korisne na osnovu određenih karakteristika lekova i kancera koji su u pitanju. Tipična anti-neoplastična sredstva korisna u ovom pronalasku uključuju, ali nisu ograničeni na, anti-mikrotubulna sredstva kao što su diterpenoidi i vinka alkaloidi; koordinacioni kompleksi platine; alkilujuća sredstva kao što su azotni iperiti, oksazafosforini, alkilsulfonati, nitrozouree, i triazeni; antitbiotička sredstva kao što su antraciklini, aktinomicini i bleomicini; inhibitori topoizomeraze II kao što su epipodofilotoksini; antimetaboliti kao što su analozi purina i pirimidina i anti-folatna jedinjenja; inhibitori topoizomeraze I kao što su kamptotecini; hormoni i hormonski analozi; inhibitori DNK metiltransferaze kao što su azacitidin i decitabin; inhbitori puteva prenosa signala; inhibitori angiogeneze ne-receptorske tirozin kinaze; imunoterapeutska sredstva; proapoptotska sredstva; i inhibitori signalizacije ćelijskog ciklusa.
[0080] Tipično, bilo koje hemoterapeutsko sredstvo koje ima aktivnost protiv osetljive neoplazme koja se tretira može se koristiti u kombinaciji sa jedinjenjima pronalaska, uz uslov daje određeno sredstvo klinički kompatibilno sa terapijom koja koristi jedinjenje pronalaska. Tipična anti-neoplastična sredstva korisna u ovom pronalasku uključuju, ali nisu ograničena na: alkilujuća sredstva, anti-metabolite, antitumorske antibiotike, antimitotička sredstva, analoge nukleozida, inhibitore topoizomerase I i II, hormone i hormonske analoge; retinoide, inhibitore histon deacetilaze; inhibitore puteva prenosa signala uključujući inhibitore ćelijskog rasta ili funkcije faktora rasta, inhibitore angiogeneze, i inhibitore serin/treonin kinaze ili drugih kinaza; ciklin zavisne inhibitore kinaze; antisens terapije i imunoterapeutska sredstva, uključujući monoklonska, vakcine ili druga biološka sredstva.
[0081] Nukleozidni analozi su ona jedinjenja koja su konvertovana u dezoksinukleotid trifosfate i inkorporisani u replicirajuću DNK umesto citozina. DNK metiltransferaze se kovalentno vezuju za modifikovane baze što rezultuje u neaktivnom enzimu i smanjenoj DNK metilaciji. Primeri nukleozidnih analoga uključuju azacitidin i decitabin koji se koriste za tretman mijelodisplastičnog poremećaja. Inhibitori histon deacetilaze (HDAC) uključuju vorinostat, za trertman kožnog T-ćelijskog limfoma. HDACs modifikuju hromatin preko deacetilacije histona. Dodatno, oni imaju različite supstrate uključujući brojne transkripcione faktore i signalne molekule. Drugi HDAC inhibitori su u razvoju.
[0082] Inhibitori puteva prenosa signala su oni inhibitori koji blokiraju ili inhibiraju hemijski proces koji izaziva intracelularnu promenu. Kao što je ovde korišćeno ova promena je proliferacija ćelija ili diferencijacija ili preživljavanje. Inhibitori puteva prenosa signala korisni u ovom pronalasku uključuju, ali nisu ograničeni na, inhibitore receptorskih tirozin kinaza, nereceptorskih tirozin kinaza, blokatore SH2/SH3 domena, serin/treonin kinaza, fosfatidil inozitol-3-OH kinaza, mioinozitol signalizacije i Ras onkogene. Inhibitori puteva prenosa signala mogu se upotrebiti u kombinaciji sa jedinjenjima pronalaska u prethodno opisanim kompozicijama i postupcima.
[0083] Inhibitori angiogeneze receptor kinaze mogu takođe naći primenu u ovom pronalasku. Inhibitori angiogeneze povezani sa VEGFR i TIE-2 su razmatrani prethodno u odnosu na inhibitore prenosa signala (oba su receptorske tirozin kinaze). Drugi inhibitori se mogu koristiti u kombinaciji sa jedinjenjima ovog pronalaska. Na primer, anti-VEGF antitela, koja ne prepoznaju VEGFR (receptorska tirozin kinaza), ali se vezuju za ligand; inhibitori integrina malih molekula (alfav beta3) koji inhibiraju angiogenezu; endostatin i angiostatin (ne-RTK) mogu se takođe pokazati korisnim u kombinaciji sa jedinjenjima pronalaska. Jedan primer VEGFR antitela je bevacizumab (AVASTIN®).
[0084]Nekoliko inhibitora receptora faktora rasta su u razvoju i uključuju antagoniste Uganda, antitela, inhibitore tirozin kinaze, anti-sens oligonukleotide i aptamere. Bilo koji od ovih inhibitora receptora faktora rasta može se upotrebiti u kombinaciji sa jedinjenjima pronalaska u bilo kojim kompozicijama i postupcima/upotrebama opisanim ovde. Trastuzumab (Herceptin®) je primer anti-erbB2 antitela inhibitora funkcije faktora rasta. Primer anti-erbBl antitela inhibitora funkcije faktora rasta je cetuksimab (Erbitux™, C225). Bevacizumab (Avastin®) je primer monoklonskog antitela usmerenog protiv VEGFR. Primeri inhibitora malih molekula receptora epidermalnog faktora rasta uključuju, ali nisu ograničeni na lapatinib (Tvkerb®) i erlotinib (TARCEVA®). Imatinib mezilat (GLEEVEC®) je primer PDGFR inhibitora. Primeri VEGFR inhibitora uključuju pazopanib (Votrient ®), ZD6474, AZD2171, PTK787, sunitinib i sorafenib.
[0085]Anti-mikrotubulna ili anti-mitotička sredstva su fazno specifična sredstva aktivna protiv mikrotubula tumorskih ćelija tokom M ili faze mitoze ćelijskog ciklusa. Primeri anti-mikrotubulnih sredstava uključuju, ali nisu ograničeni na, diterpenoide i vinka alkaloide.
[0086]Diterpenoidi, koji su izvedeni iz prirodnih izvora, su fazno specfični anti-kancer agensi koji deluju u G2/M fazama ćelijskog ciklusa. Veruje se da dipertenoidi stabilizuju (3-tubulin podjedinicu mikrotubula, vezivanjem sa ovim proteinom. Izgleda da je tada razdvajanje proteina inhibirano uz zaustavljanje mitoze i pratećom smrti ćelije. Primeri diterpenoida uključuju, ali nisu ograničeni na, paklitaksel i njegov analog docetaksel.
[0087]Paklitaksel, 5p,20-epoksi-l,2a,4,7p,10p,13a-heksa-hidroksitaks-ll-en-9-on 4,10-diacetat 2-benzoat 13-estar sa (2i?,35)-7^-benzoil-3-fenilizoserin; je prirodni diterpen proizvod izolovan iz Pacifičke kratkolisna tiseTaxus brevifoliai komercijalno je dostupan kao injektabiljni rastvor TAXOL®. Član je taksenske familije terpena. Prvi put je izolovan 1971 od strane Wani et al. J. Am. Chem, Soc, 93:2325 (1971), koji su okarakterisali njegovu strukturu hemijskim i metodima rentgenske kristalografije. Jedan mehanizam za njegovu aktivnost odnosi se na sposobnost paklitaksela da vezuje tubulin, čime inhibira rast ćelija kancera. Schiff et al, Proc. Natl, Acad, Sci. USA, 77:1561-1565 (1980); Schiff et al., Nature, 277:665-667
(1979); Kumar, J. Biol, Chem, 256: 10435-10441 (1981). Za pregled sinteze i antikancer aktivnost nekih derivata paklitaksela videti: D. G. I. Kingston et al., Studies in Organic Chemistrv vol. 26, entitled "New trends in Natural Products Chemistrv 1986", Attaur-Rahman, P.W. Le Quesne, Eds. (Elsevier, Amsterdam, 1986) pp 219-235.
[0088]Paklitaksel je odobren za kliničku upotrebu u tretmanu refraktornog kancera jajnika u Sjedinjenim Državama (Markman et al., Yale Journal of Biologv and Medicine, 64:583, 1991; McGuire et al., Ann. Intem, Med., 111:273,1989) i za tretman kancera dojke (Holmes et al., J. Nat. Cancer Inst, 83:1797,1991.) To je potencijalni kandidat za tretman neoplazmi u koži (Einzig et. al., Proc. Am. Soc. Clin. Oncol., 20:46) i karcinomima glave i vrata (Forastire et. al., Sem. Oncol., 20:56, 1990). Jedinjenje takođe pokazuje potencijal za tretman bolesti policističnih bubrega (Woo et. al., Nature, 368:750. 1994), kancera pluća i malarije. Tretman pacijenata sa paklitakselom rezultuje u supresiji kostne srži (višestruke ćelijske linije, Ignoff, RJ. et. al, Cancer Chemotherapv Pocket Guide, 1998) povezane sa dužinom trajanja doziranja preko koncentracije praga (50nM) (Kearns, CM. et. al., Seminars in Oncologv, 3(6) p. 16-23, 1995).
[0089]Docetaksel, (2R,3S)-N-karboksi-3-fenilizoserin,N-terc-butil estar, 13-estar sa 5(3-20-epoksi-l,2a,4,7p,10(3,13a-heksahidroksitaks-l l-en-9-on 4-acetat 2-benzoat, trihidrat; je komercijalno dostupan kao injektabilni rastvor kao TAXOTERE®. Docetaksel je indikovan za tretman kancera dojke. Docetaksel je polusintetički derivat paklitakselaq. v.,pripremljen korišćenjem prirodnog prekursora, 10-deacetil-bakatin III, ekstrahovan iz iglice Evropske tise. Dozno limitirajuća toksičnost docetaksela je neutropenija.
[0090]Vinka alkaloidi su fazno specifični anti-neoplastični agensi izvedeni iz biljke zimzelena. Vinka alkaloidi deluju u M fazi (mitoza) ćelijskog ciklusa specifično se vezujući za tubulin. Kao posledica toga, vezani molekul tubulina ne može polimerizovati u mikrotubule. Veruje se daje mitoza zaustavljena u metafazi uz prateću smrt ćelija. Primeri alkaloida uključuju, ali nisu ograničeni na, vinblastin, vinkristin, i vinorelbin.
[0091]Vinblastin, vinkaleukoblastin sulfat, je komercijalno dostupan kao VELBAN® kao injektabilni rastvor. Iako ima moguću indikaciju kao terapija druge linije različitih solidnih tumora, primarno je indikovan u tretmanu kancera testisa i različitih limfoma uključujući Hodgkin-ovu bolest; i limfocitne i histiocitne limfome. Mijelosupresija je dozno limitirajući sporedni efekat vinblastina.
[0092]Vinkristin, vinkaleukoblastin, 22-okso-, sulfat, je komercijalno dostupan kao ONCOVIN® kao injektabilni ratvor. Vinkristin je indikovan za tretman akutnih leukemija i takođe je našao upotrebu u režimima tretmana za Hodgkin-ov i ne-Hodgkin-ov maligni limfom. Alopecija i neurološki efekti su najčešći sporedni efekti vinkristina i do manjeg stepena javljaju se efekti mijelosupresije i gastrointestinalnog mukozitisa.
[0093]Vinorelbin, 3',4'-didehidro -4'-dezoksi-C'-norvinkaleukoblastin [R-(R<*>,R<*>)-2,3-dihidroksibutandioat (l:2)(so)], komercijalno dostupan kao injektabilni rastvor vinorelbin tartarat (NAVELBINE®), je polusintetički vinka alkaloid. Vinorelbin je indikovan kao jedini agens ili u kombinaciji sa drugim hemoterapeutskim agensima, kao što je cisplatin, u tretmanu različitih solidnih tumora, naročito nesitnoćelijskog pluća, uznapredovalog dojke, i hormonski refraktornog kancera prostate. Mijelosupresija je najčešći dozno limitirajući sporedni efekat vinorelbina.
[0094]Koordinacioni kompleksi platine su anti kancer agensi koji nisu vezani za određenu fazu ćelijskog ciklusa, koji interaguju sa DNK. Kompleksi platine ulaze u tumorske ćelije, podležu reakciji sa vodom i formiraju intra- i interlančane unakrsne veze sa DNK izazivajući štetne biološke efekte po tumor. Primeri koordinacionih kompleksa platine uključuju, ali nisu ograničeni na, cisplatin i karboplatin.
[0095]Cisplatin, cis-diamindihloroplatina, je komercijalno dostupan kao PLATINOL® kao injektabilni rastvor. Cisplatin je primarno indikovan u tretmanu metastazirajućih kancera testisa i jajnika i uznapredovalog kancera bešike. Primarni dozno limitirajući sporedni efekti cisplatina su nefrotoksičnost, koja se može kontrolisati hidratacijom i diurezom, i ototoksičnost.
[0096]Karboplatin, platina, diamin [l,l-ciklobutan-dikarboksilat(2-)-0,0'], je komercijalno dostupan kao PARAPLATIN® kao injektabilni rastvor. Karboplatin je primarno indikovan u tretmanu prve i druge linije uznapredovalog kancera jajnika. Supresija kostne srži je dozno limitirajuća toksičnost karboplatina.
[0097]Alkilujući agensi su anti-kancer agensi i jaki elektrofili koji nisu vezani za određenu fazu ćelijskog ciklusa. Tipično, alkilujući agensi formiraju kovalentne veze, alkilacijom, sa DNK preko nukleofilnih delova DNK molekula kao što su fosfat, amino, sulfhidril, hidroksi, karboksil, i imidazol grupe. Takva alkilacija remeti funkciju nukleinske kiseline što vodi smrti ćelije. Primeri alkilujućih agenata uključuju, ali nisu ograničeni na, azotne iperite kao što su ciklofosfamid, melfalan, i hlorambucil; alkil sulfonate kao što je busulfan; nitrozouree kao što je karmustin; i triazene kao što je dakarbazin.
[0098]Ciklofosfamid, 2-[bis(2-hloroetil)amino]tetrahidro-2H-l,3,2-oksazafosforin 2-oksid monohidrat, je komercijalno dostupan kao injektabilni rastvor ili tablete kao CYTOXAN®. Ciklofosfamid je indikovan kao jedini agens ili u kombinaciji sa drugim hemoterapeutskim agentima, u tretmanu malignih limfoma, multiplog mijeloma, i leukemija. Alopecija, mučnina, povraćanje, i leukopenija su najčešći dozno limitirajući sporedni efekti ciklofosfamida.
[0099]Melfalan, 4-[bis(2-hloroetil)amino]-L-fenilalanin, je komercijalno dostupan kao injektabilni rastvor ili tablete kao ALKERAN®. Melfalan je indikovan za palijativni tretman multiplog mijeloma i ne-resektabilnih epitelnih karcinoma jajnika. Supresija kostne srži je najčešći dozno limitirajući efekat melfalana.
[0100]Hlorambucil, 4-[bis(2-hloroetil)amino]benzenbuterna kiselina, je komercijalno dostupan kao LEUKERAN® tablete. Hlorambucil je indikovan za palijativni tretman hronične limfatične leukemije, i malignih limfoma kao što su limfosarkom, džinovski folikularni limfom, i Hodgkin-ova bolest. Supresija kostne srži je najčešći dozno limitirajući sporedni efekat hlorambucila.
[0101]Busulfan, 1,4-butandiol dimetansulfonat, je komercijalno dostupan kao MYLERAN®
TABLETE. Busulfan je indikovan za palijativni tretman hronične mijelogene leukemije. Supresija kostne srži je najčešći dozno limitirajući sporedni efekat busulfana.
[0102]Karmustin, l,3-[bis(2-hloroetil)-l-nitrozourea, je komercijalno dostupan kao liofilizovani materijal kao BiCNU®. Karmustin je indikovan za palijativni tretman kao jedini agens ili u kombinaciji sa drugim agensima za tumore mozga, multipli mijelom, Hodgkin-ovu bolest, i ne-Hodgkin-ove limfome. Odložena mijelosupresija je najčešći dozno limitirajući sporedni efekat karmustina.
[0103]Dakarbazin, 5-(3,3-dimetil-l-triazeno)-imidazol-4-karboksamid, je komercijalno dostupan kao pojedinačne vijalice materijala kao DTIC-Dome®. Dakarbazin je indikovan za tretman metastazirajućih malignih melanoma i u kombinaciji sa drugim agensima za drugu liniju tretmana Hodgkin-ove bolesti. Mučnina, povraćanje, i anoreksija su najčešći dozno limitirajući sporedni efekti dakarbazina.
[0104]Antibiotički anti-neoplastici su agensi koji nisu vezani za određenu fazu ćelijskog ciklusa, koji se vezuju sa ili umeću u DNK. Tipično, takvo dejstvo rezultuje u stabilnim DNK kompleksima ili kidanju lanca, što remeti uobičajenu funkciju nukleinskih kiselina što vodi smrti ćelije. Primeri antibiotičkih anti-neoplastičnih agenasa uključuju, ali nisu ograničeni na, aktinomicine kao što je daktinomicin, antrocikline kao što su daunorubicin i doksorubicin; i bleomicini.
[0105]Daktinomicin, takođe poznat kao Aktinomicin D, je komercijalno dostupan kao injektabilni rastvor kao COSMEGEN®. Daktinomicin je indikovan za tretman Wilm-ovog tumora i rabdomiosarkom. Mučnina, povraćanje, i anoreksija su najčešći dozno limitirajući sporedni efekti daktinomicina.
[0106]Daunorubicin, (8S-cis-)-8-acetil-10-[(3-amino-2,3,6-tridezoksi-a-L-likso-heksopiranozil)oksi] -7,8,9,10-tetrahidro-6,8,11 -trihidroksi-1 -metoksi-5,12 naftacendion hidrohlorid, je komercijalno dostupan kao lipozomalni injektabilni oblik kao DAUNOXOME® ili kao injektabilni kao CERUBIDINE®. Daunorubicin je indikovan za indukciju remisije u tretmanu akutne nelimfocitne leukemije i uznapredovalog Kaposi-jevog sarkoma povezanog sa HIV. Mijelosupresija je najčešći dozno limitirajući sporedni efekat daunorubicina.
[0107]Doksorubicin, (8S, 10S)-10-[(3-amino-2,3,6-tridezoksi-a-L-likso-heksopiranozil)oksi]-8-glikoloil, 7,8,9,10-tetrahidro-6,8,ll-trihidroksi-l-metoksi-5,12 naftacendion hidrohlorid, je komercijalno dostupan kao injektabilni oblik kao RUBEX® ili ADRIAMYCIN RDF®. Doksorubicin je primarno indikovan za tretman akutne limfoblastične leukemije i akutne mijeloblastične leukemije, ali je takođe korisna komponenta u tretmanu nekih solidnih tumora i limfoma. Mijelosupresija je najčešći dozno limitirajući sporedni efekat doksorubicina.
[0108]Bleomicin, smeša citotoksičnih glikopeptidnih antibiotika izolovanih iz sojaStreptomyces verticillus,je komercijalno dostupan kao BLENOXANE®. Bleomicin je indikovan kao palijativni tretman, kao jedini agens ili u kombinaciji sa drugim agensima, karcinoma skvamoznih ćelija, limfoma, i karcinoma testisa. Plućna i kožna toksičnost su najčešći dozno limitirajući sporedni efekti bleomicina.
[0109]Inhibitori topoizomeraze II uključuju, ali nisu ograničeni na, epipodofilotoksine.
[0110]Epipodofilotoksini su fazno specifični anti-neoplastični agensi izvedeni iz biljke mandragore. Epipodofilotoksini tipično utiču na ćelije u S i G2 fazama ćelijskog ciklusa formiranjem tercijarnog kompleksa sa topoizomerazom II i DNK izazivajući prekide DNK lanaca. Prekidi lanca se akumuliraju i sledi smrt ćelije. Primeri epipodofilotoksina uključuju, ali nisu ograničeni na, etopozid i tenipozid.
[0111]Etopozid, 4'-demetil-epipodofilotoksin 9[4,6-0-(R)-etiliden-P-D-glukopiranozid], je komercijalno dostupan kao injektabilni rastvor ili kapsule kao VePESID® i uobičajeno je poznat kao VP-16. Etopozid je indikovan kao jedini agens ili u kombinaciji sa drugim hemoterapeutskim agensima u tretmanu kancera testisa i nesitnoćelijskog kancera pluća. Mijelosupresija je najčešći sporedni efekat etopozida. Incidenca leukopenije je teža od trombocitopenij e.
[0112]Tenipozid, 4'-demetil-epipodofilotoksin 9[4,6-0-(R)-teniliden-P-D-glukopiranozid], je komercijalno dostupan kao injektabilni rastvor kao VUMON® i uobičajeno je poznat kao VM-26. Tenipozid je indikovan kao jedini agens ili u kombinaciji sa drugim hemoterapeutskim agensima u tretmanima akutne leukemije kod dece. Mijelosupresija je najčešći dozno limitirajući sporedni efekat tenipozida. Tenipozid može indukovati i leukopeniju i trombocitopeniju.
[0113]Antimetabolit neoplastični agensi su fazno specifični anti-neoplastični agensi koji deluju u S fazi (sinteza DNK) ćelijskog ciklusa inhibicijom sinteze DNK ili inhibicijom sinteze purinskih ili pirimidinskih baza i time limitirajući sintezu DNK. Kao posledica toga, S faza se ne nastavlja i sledi smrt ćelije. Primeri antimetabolit antineoplastičnih agenasa uključuju, ali nisu ograničeni na, fluorouracil, metotreksat, citarabin, merkaptopurin, tioguanin, i gemcitabin.
[0114] ]5-Fluorouracil, 5-fluoro-2,4- (1H,3H) pirimidindion, je komercijalno dostupan kao fluorouracil. Primena 5-fluorouracila dovodi do inhibicije sinteze timidilata i takođe se ugrađuje i u RNK i u DNK. Tipičan rezultat je smrt ćelije. 5-Fluorouracil je indikovan kao jedini agens ili u kombinaciji sa drugim hemoterapijskim agensima u tretmanu karcinoma dojke, debelog creva, rektuma, želudca i pankreasa. Mijelosupresija i mukozitis su dozno limitirajući sporedni efekti 5-fluorouracila. Drugi fluoropirimidin analozi uključuju 5-fluoro dezoksiuridin (floksuridin) i 5-fluorodezoksiuridin monofosfat.
[0115]Citarabin, 4-amino-l-P-D-arabinofuranozil-2(lH)-pirimidinon, je komercijalno dostupan kao CYTOSAR-U® i uobičajeno je poznat kao Ara-C. Veruje se da citarabin pokazuje specifičnost za fazu ćelijskog ciklusa u S-fazi inhibiranjem elongacije DNK lanca terminalnom inkorporacijom citarabina u rastući DNK lanac. Citarabin je indikovan kao pojedinačni agens ili u kombinaciji sa drugim hemoterapeutskim agensima u tretmanu akutne leukemije. Drugi citidinski analozi uključuju 5-azacitidin i 2',2'-difluorodezoksicitidin (gemcitabin). Citarabin indukuje leukopeniju, trombocitopeniju, i mukozitis.
[0116]Merkaptopurin, l,7-dihidro-6H-purin-6-tion monohidrat, je komercijalno dostupan kao PURINETHOL®. Merkaptopurin pokazuje specifičnost za fazu ćelijskog ciklusa u S-fazi inhibicijom sinteze DNK preko još nepoznatog mehanizma. Merkaptopurin je indikovan kao jedini agens ili u kombinaciji sa drugim hemoterapijskim agensima u tretmanu akutne leukemije. Mijelosupresija i gastrointestinalni mukozitis su očekivani sporedni efekti merkaptopurina u visokim dozama. Koristan analog merkaptopurina je azatioprin.
[0117]Tioguanin, 2-amino-l,7-dihidro-6H-purin-6-tion, je komercijalno dostupan kao TABLOID®, pokazuje specifičnost za fazu ćelijskog ciklusa u S-fazi inhibicijom sinteze DNK preko još nepoznatog mehanizma. Tioguanin je indikovan kao jedini agens ili u kombinaciji sa drugim hemoterapijskim agensima u tretmanu akutne leukemije. Mijelosupresija, uključujući leukopeniju, trombocitopeniju, i anemiju, je najčešći dozno limitirajući sporedni efekat primene tioguanina. Međutim, gastrointestinalni sporedni efekti se dešavaju i mogu biti dozno limitirajući. Drugi analozi purina uključuju pentostatin, eritrohidroksinoniladenin, fludarabin fosfat, i kladribin.
[0118]Gemcitabin, 2'-dezoksi-2',2'-difluorocitidin monohidrohlorid (P-izomer), je komercijalno dostupan kao GEMZAR®. Gemcitabin pokazuje specifičnost za fazu ćelijskog ciklusa u S-fazi blokiranjem napredovanja ćelija preko granice Gl/S. Gemcitabin je indikovan u kombinaciji sa cisplatinom u tretmanu lokalno uznapredovalog nesitnoćelijskog kancera pluća i zasebno u tretmanu lokalno uznapredovalog kancera pankreasa. Mijelosupresija, uključujući leukopeniju, trombocitopeniju, i anemiju, je najčešći dozno limitirajući sporedni efekat primene gemcitabina.
[0119]Metotreksat, N-[4[[(2,4-diamino-6-pteridinil) metil] metilamino] benzoil]-L-glutaminska kiselina, je komercijalno dostupan kao metotreksat natrijum. Metotreksat specifično pokazuje efekte u fazi ćelijskog ciklusa S-fazi inhibicijom sinteze DNK, popravke i/ili replikacije preko inhibicije reduktaze dihidrofolne kiseline koja je neophodna za sintezu purinskih nukleotida i timidilata. Metotreksat je indikovan kao jedini agens ili u kombinaciji sa drugim hemoterapijskim agensima u tretmanu horiokarcinoma, meningealne leukemije, ne-Hodgkin-ovog limfoma, i karcinoma dojke, glave, vrata, jajnika i bešike. Mijelosupresija (leukopenija, trombocitopenija, i anemija) i mukozitis su očekivani sporedni efekti primene metotreksata.
[0120]Kamptotecini, uključujući, kamptotecin i kamptotecin derivate su dostupni ili su u razvoju kao inhibitori Topoizomeraze I. Veruje se daje citotoksična aktivnost kamptotecina povezana sa njihovom inhibitornom aktivnošću prema Topoizomerazi I. Primeri kamptotecina uključuju, ali nisu ograničeni na irinotekan, topotekan, i različite optičke oblike 7-(4-metilpiperazino-metilen)-10,ll-etilendioksi-20-kamptotecina opisane u nastavku.
[0121]Irinotekan HC1, (4S)-4,ll-dietil-4-hidroksi-9-[(4-piperidinopiperidino) karboniloksi]-lH-pirano[3',4',6,7]indolizino[l,2-b]hinolin-3,14(4H,12H)-dion hidrohlorid, je komercijalno dostupan kao injektabilni rastvor CAMPTOSAR®.
[0122]Irinotekan je derivat kamptotecina koji se vezuje, zajedno sa svojim aktivnim metabolitom SN-38, za kompleks topoizomeraze I - DNK. Veruje se da se citotoksičnost dešava kao rezultat nepopravljivih dvolančanih prekida izazvanih interakcijom topoizomeraza I: DNK : irinotekan ili SN-38 tercijarnog kompleksa sa replikacionim enzimima. Irinotekan je indikovan za tretman metastazirajućeg kancera debelog creva ili rektuma. Dozno limitirajući efekti irinotekan HC1 su mijelosupresija, uključujući neutropeniju, i GI efekte, uključujući dijareju.
[0123]Topotekan HC1, (S)-10-[(dimetilamino)metil]-4-etil-4,9-dihidroksi-lH-pirano[3' ,4' ,6,7] indolizino[ 1,2-b]hinolin-3,14-(4H, 12H)-dion monohidrohlorid, j e komercijalno dostupan kao injektabilni rastvor HYCAMTIN®. Topotekan je derivat kamptotecina koji se vezuje za topoizomeraza I - DNK kompleks i sprečava ponovno vezivanje prekida najednom lancu izazvanih sa Topoizomerazom I kao odgovor na torziono naprezanje DNK molekula. Topotekan je indikovan kao druga linija tretmana metastaznih karcinoma jajnika i sitnoćelijskog kancera pluća. Dozno limitirajući sporedni efekat topotekan HC1 je mijelosupresija, primarno neutropenija.
PRIPREMA JEDINJENJA
Generičke šeme sinteze
[0124]Jedinjenja ovog pronalaska mogu se napraviti različitim postupcima, uključujući dobro poznate standardne sintetičke postupke. Ilustrativni opšti sintetički postupci su dati u nastavku i zatim su specifična jedinjenja pronalaska pripremljena u radnim primerima. Stručnjaku će biti jasno da ako je supstituent opisan ovde nije kompatibilan sa sintetičkim postupcima opisanim ovde, supstituent može biti zaštićen sa pogodnom zaštitnom grupom koja je stabilna u reakcionim uslovima. Zaštitna grupa može biti uklonjena u pogodnoj tački u reakcionoj sekvenci da bi se obezbedio željeni intermedijer ili ciljno jedinjenje. U svim šemama opisanim u nastavku, zaštitne grupe za senzitivne ili reaktivne grupe su upotrebljene gde je neophodno u skladu sa opštim principima sintetičke hernije. Zaštitne grupe su manipulisane prema standardnim postupcima organske sinteze (T.W. Green i P.G.M. Wuts, (1991) Protecting Groups in Organic Svnthesis, John Wiley & Sons, uključena na osnovu reference u odnosu na zaštitne grupe). Ove grupe su uklonjene u pogodnom stadijumu sinteze jedinjenja korišćenjem postupaka koji su očigledni stručnjacima. Izbor procesa kao i reakcionih uslova i redosled njihovog izvođenja biće konzistentni sa pripremom jedinjenja ovog pronalaska.
[0125]Sinteza jedinjenja opšte Formule (I) i njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati i soli mogu se dobiti od strane stručnjaka kao što je naznačeno u nastavku na Šemama 1-5. U sledećem opisu, grupe su kao što je prethodno definisano za jedinjenja Formule (I) ukoliko nije drugačije naznačeno. Početni materijali su komercijalno dostupni ili su napravljeni od komercijalno dostupnih početnih materijala korišćenjem postupaka poznatih stručnjacima.
[0126]Jedinjenja Formule (I) mogu se pripremiti kao što je ilustrovano na Semi 1. Odgovarajuće supstituisana kiselina A može se kuplovati sa primarnim aminom pod uslovima za formiranje amidne veze, kao što su HOBt, EDC, i Et3N in DMF, da bi se dobio aril bromid intermedijer B. Intermedijer B se može kuplovati sa boronat estrom intermedijerom C pod uslovima kuplovanja sa paladijumom, kao što je sa PdCi2(dppf) i CS2CO3, da bi se dobio inetermedijerD.Deprotekcija parametoksibenzil (PMB) ili benzil (Bn) ostatka može se postići u prisustvu paladijuma na ugljeniku pod H2atmosferom što rezultuje ujedinjenjima Formule
(I).
[0127]Intermedijer D se takođe može pripremiti kao što je ilustrovano na Šemi 2. Aril bromid B se može pretvoriti u boronat estar pod odgovarajućim uslovima, kao što je sa PdCkCdppf) i KOAc u 1,4-dioksanu, da bi se dobio boronatni estar intermedijer E. Odgovarajuće supstituisan 3-bromopiridin može se zatim kuplovati sa intermedijerom E pod uslovima kuplovanja sa paladijumom, kao što je sa PdCk(dppf) i CS2CO3, da bi se dobio intermedijerD.Uslovi slični onima u šemi 1 mogu dalje transformisati intermedijer D ujedinjenja Formule (I).
[0128]Intermedijer D se takođe može pripremiti kao što je ilustrovano na Šemi 3. Aril bromid F se može pretvoriti u boronat estar pod odgovarajućim uslovima, kao što je sa PdCl2(dppf) i KOAc u 1,4-dioksanu, da bi se dobio boronat estar intermedijera G. Metil estar interemedijer G se može pretvortiti u primarni amid interemedijer H pod baznim uslovima sa amonijakom. Odgovarajuće supstituisan 3-bromopiridin se zatim može kuplovati sa intermedijerom H pod uslovima kuplovanja sa paladijumom, kao što je sa PdCi2(dppf) i CS2CO3, da bi se dobio intermedijer I. Intermedijer I se može dalje transformisati u intermedijer D sa kuplovanjem sa odgovarajuće supstituisanim aril bromidom pod odgovarajućim uslovima, kao što je sa Pd2(dba)3, Xantphos, i CS2CO3u 1,4-dioksanu. Uslovi slični onima u šemi 1 mogu dalje transformisati intermedijer D ujedinjenja Formule (I).
[0129JIntermedijer 1 se može takođe pripremiti kao što je ilustrovano na Šemi 4. Aril bromid intermedijer J može se kuplovati sa supstituisanim piridin boronat estrom pod uslovima kuplovanja sa paladijumom, kao što je sa PdCi2(dppf) i CS2CO3, da bi se dobio intermedijer I. Intermedijer I se može dalje transformisati u jedinjenja Formule (I) kao što je pokazano na Šemama 3 i 1.
Sema 4
[0130]Jedinjenja Formule (I) mogu se takođe pripremiti kao što je ilustrovano na Šemi 5. Odgovarajuće supstituisana kiselina A može se kuplovati sa odgovarajuće supstituisanim piridin-3-il boronat estrom pod uslovima kuplovanja sa paladijumom, kao što je sa PdChCdppf) i CS2CO3, da bi se dobio intermedijer K. Deprotekcija parametoksibenzil (PMB) ili benzil (Bn) ostatka intermedijera K u prisustvu paladijuma na ugljeniku u H2atmosferi daje intermedijer L. Kiselina inetermedijer L se zatim može kuplovati sa odgovarajuće supstituisanim primarnim aminom pod uslovima za formiranje amidne veze, kao što su HOBt, EDC, i Et3N in DMF, da bi se dobila jedinjenja Formule (I).
EKSPERIMENTALNI DEO
[0131]Sledeći primeri ilustruju pronalazak. Nije namera da ovi primeri ograničavaju obim ovog pronalaska, već pre da obezbede uputstva stručnjaku da pripremi i upotrebi jedinjenja, kompozicije, i postupke ovog pronalaska. Dok su naročiti primeri izvođenja ovog pronalaska opisani, stručnjaku će biti jasno da se mogu napraviti različite izmene i modifikacije bez udaljavanja od duha i obima pronalaska. Ukoliko nije drugačije napomenuto, reagensi su komercijalno dostupni ili su pripremljeni prema procedurama u literaturi. Simboli i konvencije korišćeni u opisu procesa, šemama, i primerima su konzistentni sa onima korišćenim u savremenoj naučnoj literaturi, na primer, Journal of the American Chemical Societv ili Journal of Biological Chemistrv.
[0132]U Primerima: Hemijska pomeranja su izražena u delovima po milionu (ppm) jedinica. Konstante kuplovanja (J) su u jedinicama herca (Hz). Obrasci razdvajanja opisuje očigledne multiplicitete i označeni su kao s (singlet), d (dublet), t (triplet), q (kvartet), dd (dupli dublet), dt (dupli triplet), dq (dupli kvartet), m (multiplet), br (široki).
[0133]"Flash" hromatografija na kolonije izvedena na silika gelu.
[0134]Korišćeni programi za nazive su ACDLABs 11.0 Namebatch, ACD IUPAC, ili ChemDraw®.
Skraćenice
[0135]
BH3 DMS bor dimetil sulfid kompleks
B0C2O di-terc-butil dikarbonat
CDCI3 hloroform-J
CD3OD metanol-ć/4
CHCI3hloroform
CS2CO3cezijum karbonat
DCE dihloroetan
DCM dihlorometan
DIBAL-H diizobutilaluminijum hidrid
DIEA diizopropiletilamin
DMF A^-dimetilformamid
DMSO dimetilsulfoksid
EA etil acetat
EDC N-P-dimetilaminopropi^-Af'-etilkarbonat
ES-LCMS elektrosprej tečna hromatografija-masena spektrometrija
Et3N trietilamin
EtOH etanol
g gram(i)
h čas(ovi)
Ehgasoviti vodonik
HATU (^(V-azabenzotriazol-l-i^-TV^A^'^'-tetrametiluronijum
heksafiuorofosfat
HC1 hlorovodonična kiselina
H2O voda
HOBt hidroksibenzotriazol
HPLC tečna hromatografija visoke performanse
H2SO4sumporna kiselina
in vacuopod vakuumom
K2CO3kalijum karbonat
KCN kalijum cijanid
KOAc kalijum acetat
KOH kalijum hidroksid
LAH litijum aluminij um hidrid
LCMS tečna hromatografija-masena spektrometrija
LiOH H2O litijum hidroksid hidrat
m-CPBA meto-hloroperoksibenzojeva kiselina MeCN acetonitril
Mel metil jodid
MeOH metanol
mg miligram(i)
MgSCMmagnezijum sulfat
min minut(i)
mL mililitar(mililitri)
mmol milimol(ovi)
N2gasoviti azot
NaBH4natrijum borhidrid
NaCN natrijum cijanid
Na2C03natrijum karbonat
NaH natrijum hidrid
NaHCCbnatrijum bikarbonat
NaOH natrijum hidroksid
Na2S04natrijum sulfat
Na2S203natrijum tiosulfat
NBS N-bromosukcinimid
n-BuLi n-butil litijum
NH4CI amonijum hlorid
NH4OH amonijum hidroksid
NIS iV-jodosukcinimid
NMR nuklearna magnetna rezonanca
PBr3fosfor tribromid
Pd/C paladijum na ugljeniku
PdCl2(dppf) l,r-ftz'5(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II)
Pd2(dba)3fr7'.?(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0)
PE petroleum etar
PMB/7-metoksibenzil
POCI3fosfor oksihlorid
rt sobna temperatura
SOCb tionil hlorid
TBME terc-butil metil etar
TBS terc-butildimetilsilil
TBSC1ferc-butildimetilsilil hlorid
TFA trifluorosirćetna kiselina
THF tetrahidrofuran
TLC tankoslojna hromatografija
T3P® propilfosfonski anhidrid
Xantphos 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten
Priprema intermedijera
Intermedijer 1: 3-Etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin
[0136]
Korak 1: 3-Bromo-5-etoksipiridin
[0137]
[0138]Rastvor 5-bromopiridin-3-ola (70 g, 402 mmol), K2CO3(111 g, 805 mmol) i jodoetana (69.0 g, 443 mmol) u DMF (700 mL) je mešan u trajanju od 16 časova na 25°C. Zatim je smeša koncentrovana da bi se dobio ostatak koji je ekstrahovan sa DCM (2 x 200 mL), sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se dobio 3-bromo-5-etoksipiridin (53 g, 218 mmol, 54.2% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 8.19-8.17 (m, 2H), 7.60-7.59 (m, IH), 4.13-4.07 (m, 2H), 1.40 (t, / = 7.0 Hz, 3H); ES-LCMSmlz202 (M+H).
Korak 2: 3-Bromo-5-etoksipiridin 1-oksid
[0139]
[0140]U rastvor 3-bromo-5-etoksipiridina (53 g, 262 mmol) u DCM (200 mL) na 0°C lagano je dodavan m-CPBA (67.9 g, 393 mmol) tokom 30 min. Pošto je dobijeni rastvor mešan u trajanju od 15 h, smeša je isprana rastvorom NaS203i ekstrahovana sa DCM (2 x 300 mL), sušena preko Na2S04, filtrirana i organska faza je koncentrovana da bi se dobio 3-bromo-5-etoksipiridin 1-oksid (40 g, 165 mmol, 62.9% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 8.19-8.18 (m, IH), 8.08-8.07 (m, IH), 7.50-7.49 (m, IH), 4.17-4.15 (d,/=8.8 Hz, 2H), 1.43 (t,/ =7.0 Hz, 3H); ES-LCMSmlz217 (M+H).
Korak 3: 5-Bromo-2-hloro-3-etoksipiridin
[0141]
[01421U rastvor 3-bromo-5-etoksipiridin 1-oksida (40 g, 183 mmol) u DCM (200 mL) na 0°C lagano je dodavan POCh (159 mL, 1701 mmol) tokom 30 min. Zatim je dobijeni rastvor zagrevan do 45°C u trajanju od 15 časova. Smeša je koncentrovana i ekstrahovana sa DCM (2 x 200 mL), sušena preko Na2S04, filtrirana i koncentrovana da bi se dobio 5-bromo-2-hloro-3-etoksipiridin (30 g, 60.9 mmol, 33.2% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 8.00-7.99 (d,J= 2.0 Hz, IH), 7.65-7.64 (d,J=2.0 Hz, IH), 4.17-4.12 (m, 2H), 1.44 (t,J=7.0 Hz, 2H); ES-LCMS m/z 235 (M+H).
Korak 4: 5-Bromo-3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)piridin
[0143]
[0144]U smešu (4-metoksifenil)metanola (16.71 g, 121 mmol) u DMF (200 mL) dodat je NaH (3.96 g, 165 mmol) na 0°C. Postoje smeša mešana u trajanju od 30 min, 5-bromo-2-hloro-3-etoksipiridin (26 g, 110 mmol) je dodat u gore navedenu smešu; smeša je mešana u trajanju od 12 časova na 80-90°C. Smeša je ugašena sa H2O (20 mL), ekstrahovana sa DCM (2 x 200 mL), sušena preko Na2S04, filtrirana i koncentrovana da bi se dobio ostatak koji je prečišćen hromatografijom na koloni (10% EA/90% PE, 360 g kolone silika gela). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod TLC (EA/PE = 5:1, Rt = 0.5) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 5-bromo-3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)piridina (36 g, 74.5 mmol, 67.8% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.71( d, J =2.0 Hz, IH), 7.36-7.31 (m, 3H), 6.89-6.87 (m, 2H), 5.27 (s, 2H), 4.05-4.00 (m, 2H) 3.77 (s, 3H), 2.37 (d, / = 7.0 Hz, 3H); ES-LCMSmlz338 (M+H).
Korak 5: 3-Etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin
[0145]
[0146]U rastvor 5-brorno-3-etoksi-2-((4-rnetoksibenzil)oksi)piridina (10 g, 29.6 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(l,3,2-dioksaborolana) (8.26 g, 32.5 mmol) i KOAc (7.25 g, 73.9 mmol) u 1,4-dioksanu (250 mL) mešan pod azotom na 20°C dodat je PdCi2(dppf) (1.082 g, 1.478 mmol) u jednoj porciji. Reakciona smeša je mešana na 100°C u trajanju od 3 časa. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovanin vacuoda bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 10:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 10:1, Rf = 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin (9.2 g, 23.88 mmol, 81.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 5 8.10 (s, IH), 7.42 (d,J =8.8 Hz, 2H), 7.33 (s, IH), 6.88-6.85 (m, 2H), 5.45 (s, 2H), 4.11-4.06 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 1.43 (t,J= 7.0 Hz, 3H), 1.33 (s, 12H); ES-LCMSmlz386.0 (M+H).
Intermedijer 2: 4-(2-(Benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)anilin
[0147]
Korak 1: l-(2-(Benziloksi)etoksi)-4-nitro-2-(trifluorometil)benzen
KII4SI
[0149]U smešu l-fluoro-4-nitro-2-(trifluorometil)benzena (5 g, 23.91 mmol) u DMF (50 mL) dodat je K2CO3(6.61 g, 47.8 mmol) i 2-(benziloksi)etanol (4.00 g, 26.3 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na 110°C u trajanju od 12 časova. LCMS i TLC (PE/EA = 5:1, Rf = 0.4) su pokazali daje reakcija završena. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću kolone silika gela da bi se dobio l-(2-(benziloksi)etoksi)-4-nitro-2-(trifluorometil) benzen (7.1 g, 18.18 mmol, 76.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8.49 (d,J=2.4 Hz, IH), 8.38 (d,J=9.2 Hz, IH), 7.54-7.28 (m, 5H), 7.13 (d, /= 8.4 Hz, IH), 4.56 (s, 2H), 4.36 (t, /= 4.8 Hz, 2H), 3.89 (t,J=3.6 Hz, 2H); ES-LCMSmlz342(M+H).
Korak 2: 4-(2-(Benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)anilin
[0150]
[0151]U smešu l-(2-(benziloksi)etoksi)-4-nitro-2-(trifluorometil)benzena (8.1 g, 23.73 mmol) u MeOH (100 mL) dodat je cink (15.52 g, 237 mmol) i NH4C1 (12.70 g, 237 mmol). Smeša je mešana na 20°C u trajanju od 3 časa. LCMS je pokazala da je reakcija završena. Smeša je filtrirana, i filtrat je koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću kolone silika gela (PE/EA = 5:1, Rf= 0.4) da bi se dobio 4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)anilin (5.1 g, 14.40 mmol, 60.7% prinos). 'H NMR (400 MHz, CDCh) 7.35-7.24 (m, 5H), 6.81 (t, / = 8.4 Hz, 2H), 6.78 (d, / = 2.8 Hz, IH), 4.63 (s, 2H), 4.13 (t, /= 4.8 Hz, 2H), 3.83 (t, / = 3.6 Hz, 2H); ES-LCMSmlz312(M+H).
Intermedijer 3: 4-(3-((terc-Butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)anilin
[0152]
Korak 1: Etil 2, 2-dimetil-3-(2-(trifluorometil)fenil)propanoat
[0153]
[0154]U smešu diizopropilamina (8.00 mL, 57.1 mmol) u THF (300 mL) ohlađenu do 0°C ukapavanjem je dodat «-BuLi (24.60 mL, 61.5 mmol). Smeša je mešana na 0°C u trajanju od 1 časa. Zatim je u smešu ohlađenu do -30°C dodat rastvor etil izobutirata (6.12 g, 52.7 mmol) u THF (2 mL). Smeša je mešana na -30°C u trajanju od 1 časa. U smešu je dodat rastvor 1-(bromometil)-2-(trifluorometil)benzena (10.5 g, 43.9 mmol) u THF (5 mL) na -30°C. Cela smeša je mešana na -30°C u trajanju od 3 časa i zatim mešana na 25°C u trajanju od 12 časova. Smeša je ugašena vodenim rastvorom NH4CI i ekstrahovana sa EA. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 200:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA =10:1, Rf= 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se dobila svetio žuta čvrsta supstanca etil 2,2-dimetil-3-(2-(trifluorometil)fenil)propanoata (10 g, 35.3 mmol, 80.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 5: 7.62 (d, /= 8.0 Hz, IH), 7.41 (t, /= 7.6 Hz, IH), 7.29 (t, /= 7.6 Hz, IH), 7.22 (d, /= 8.0 Hz, IH), 4.17 (q, /= 7.2 Hz, 2H), 3.14 (s, 3H), 1.25 (t, /= 7.2 Hz, 3H), 1.18 (s, 6H); ES-LCMS m/z 275 (M+H).
Korak 2: Etil 2, 2-dimetil-3-(4-nitro-2-(trifluorometil)fenil)propanoat
[0155]
[0156]U rastvor etil 2,2-dimetil-3-(2-(trifluorometil)fenil)propanoata (10 g, 36.5 mmol) u H2SO4(5 mL, 94 mmol) ohlađen do 0°C u porcijama je dodata kalijum nitroperoksi kiselina (4.05 g, 40.1 mmol). Smeša je mešana na 0°C u trajanju od 30 min. Smeša je sipana u led-vodu i ekstrahovana sa DCM. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se dobila žuta čvrsta supstanca etil 2,2-dimetil-3-(4-nitro-2-(trifluorometil)fenil)propanoata (8.5 g, 24.54 mmol, 67.3% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 5: 8.59 (d,J=2.4 Hz, IH), 8.47 (dd, /= 2.4, 8.8 Hz, IH), 7.82 (d,J=8.4 Hz, IH), 5.97-5.83 (m, 2H); ES-LCMS m/z 320 (M+H).
Korak 3: Etil 3-(4-amino-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoat
[0157]
[0158]Reakciona smeša etil 2,2-dimetil-3-(4-nitro-2-(trifluorometil)fenil)propanoata (8.5 g, 26.6 mmol) i Pd/C (0.283 g, 2.66 mmol) u MeOH (50 mL) je hidrogenisana upotrebom H-cube (podešavanja: 50°C, 50 psi, 24 časa). Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 10:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 5:1, Rr= 0.4) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela prijavo bela čvrsta supstanca etil 3-(4-amino-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoata (7 g, 22.42 mmol, 84.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8: 6.98 (d,J=8.4 Hz, IH), 6.91 (d,J=2.4 Hz, IH), 6.71 (dd,J=2.4, 8.4 Hz, IH), 4.15 (q,J=6.8 Hz, 2H), 3.00 (s, 2H), 1.25 (t,J=7.2 Hz, 3H), 1.14 (s, 6H); ES-LCMS m/z 290 (M+H).
Korak 4: 3-(4-Amino-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropan-1 -ol
[0159]
[0160]U smešu etil 3-(4-amino-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoata (2 g, 6.91 mmol) u THF (200 mL) dodat je LAH (0.525 g, 13.83 mmol) u porcijama. Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 10 časova. Smeša je ugašena sa 15% vodenim rastvorom NaOH (10 mL). Smeša je sušena preko Na2S04. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 8:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 2:1, Rf = 0.35) su spojene i koncentrovane da bi se proizvelo svetio žuto ulje 3-(4-amino-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropan-l-ola (1.1 g, 4.45 mmol, 64.4% prinos): 'H NMR (400 MHz, MeOD) 8: 7.17 (d,J=8.4 Hz, IH), 6.98 (d,J= 2.4 Hz, IH), 6.84 (dd,J=2.4, 8.0 Hz, IH), 3.31 (s, 2H), 2.67 (d,J=1.2 Hz, 2H), 0.84 (s, 6H); ES-LCMS m/z 248 (M+H).
Korak 5: 4-(3-((terc-Butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)anilin
[0161]
[0162]U smešu 3-(4-amino-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropan-l-ola (300 mg, 1.213 mmol) u DCM (150 mL) dodat je imidazol (124 mg, 1.820 mmol) i TBSC1 (219 mg, 1.456 mmol). Zatim je smeša mešana na 25°C u trajanju od 5 časova. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 2:1, Rf = 0.5) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 4-(3-((ferobutildimetilsi1il)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)anilina (350 mg, 0.930 mmol, 77.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3C1) 8: 7.14( d, J=8.4 Hz, IH), 6.86 (d, / = 2.8 Hz, IH), 6.70 (dd, /= 2.8, 8.4 Hz, IH), 3.20 (s, 2H), 2.62 (d,J=1.2 Hz, 2H), 0.87 (s, 9H), 0.73 (s, 6H), 0.00 (s, 6H); ES-LCMS m/z 362 (M+H).
Intermedijer 4: 2-(4-Bromo-2-fluorofenil)sirćetna kiselina
[0163]
Korak 1: 2-(4-Bromo-2-fluorofenil)acetonitril
[0164]
[0165]Suspenzija NaCN (2.085 g, 42.5 mmol) u DMF (20 mL) dodata je u rastvor 4-bromo-l-(bromometil)-2-fluorobenzena (5.7 g, 21.27 mmol) u DMF (20 mL). Smeša je mešana na 26°C u trajanju od 10 časova. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHCCb. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Dobijeni 2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetonitril (4.01 g, 18.74 mmol, 88.0% prinos) je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. TLC (PE/EA = 1/1, Rf0.5): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7.24-7.37 (m, 3H), 3.70 (s, 2H).
Korak 2: 2-(4-Bromo-2-fluorofenil)sirćetna kiselina
[0166]
[0167]NaOH (56.2 mL, 112 mmol) dodat je u rastvor 2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetonitrila (4.01 g, 18.74 mmol) u MeOH (30 mL). Smeša je mešana na 100°C u trajanju od 12 časova. Smeša je hlađena do sobne temperature. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHCCb. Spojeni organski ekstrat je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Dobijena 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetna kiselina (4.13 g, 17.72 mmol, 95. 0% prinos) je korišćena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. TLC (PE/EA = 1/1, Rf = 0.4): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7.22-7.31 (m, 2H), 7.13 (t,J=8.05 Hz, IH), 3.67 (s, 2H); ES-LCMS m/z 232.9 (M+H).
Intermedijer 5: 2-(Benziloksi)-4-etoksi-5-jodopiridin
[0168]
Korak 1: 4-Etoksipiridin 1-oksid
[0169]
[0170]U smešu 4-nitropiridin 1-oksida (50 g, 357 mmol) u THF (500 mL) dodat je natrijum etanolat (48.6 g, 714 mmol). Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 16 časova. Reakcioni ostatak je koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (DCM/MeOH = 25:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (DCM/MeOH = 25:1, Rf = 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se dobila tamno crvena čvrsta supstanca 4-etoksipiridin 1-oksida (25 g, 162 mmol, 45.3% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.20-8.18 (m, 2H), 7.11-7.10 (m, 2H), 4.21-4.15 (m, 2H), 1.42( t, J=7.2 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 140.0 (M +H).
Korak 2: 4-Etoksipiridin-2-ol
[0171]
[0172]Smeša 4-etoksipiridin 1-oksida (5 g, 35.9 mmol) u anhidridu sirćetne kiseline (36.7 g, 359 mmol) je zagrevana do refluksa u trajanju od 4 časa. Zatim je rastvarač uklonjenin vacuo,i ostatak je rastvoren u MeOH (25 mL) i H2O (25 mL) i mešan na 25°C u trajanju od 16 časova. Smeša je koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (DCM/MeOH =10:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (DCM/MeOH = 10:1, Rr= 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela tamno žuta čvrsta supstanca 4-etoksipiridin-2-ola (2.5 g, 16.17 mmol, 45.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.28 (d,J= 7.6 Hz, IH), 6.07 (d,J=3. 2,7.2 Hz, IH), 5.86-7.85 (d, / = 2.4 Hz, IH), 4.06-4.01 (m, 2H), 1.38 (t, / = 7.2 Hz, 3H); ES-LCMSmlz140.0 (M +H).
Korak 3: 4-Etoksi-5-jodopiridin-2-ol
[0173]
[0174]U smešu 4-etoksipiridin-2-ola (2.5 g, 17.97 mmol) u DMF (30 mL) dodat je NIS (4.04 g, 17.97 mmol). Smeša je mešana na 80°C u trajanju od 16 časova. Smeša je koncentrovana i prečišćena pomoću preparativne HPLC (MeCN/FhO kao eluenti, kiseli uslovi) da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca 4-etoksi-5-jodopiridin-2-ola (1.2 g, 4.30 mmol, 23.9% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.70(s, IH), 5.92 (s, IH), 4.15-4.10 (m, 2H), 1.48 (t,J= 6.8Hz, 3H); ES-LCMSm/ z265.8 (M+H).
Korak 4: 2-(Benziloksi)-4-etoksi-5-jodopiridin
[0175]
[0176]U smešu 4-etoksi-5-jodopiridin-2-ola (800 mg, 3.02 mmol) u THF (10 mL) dodat je (bromometil)benzen (619 mg, 3.62 mmol) i srebro karbonat (1665 mg, 6.04 mmol). Smeša je mešana na 70°C u trajanju od 16 časova. Reakcioni ostatak je filtriran i filtrat je koncentrovan. Smeša je razblažena sa H2O i ekstrahovana sa DCM. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSCu, filtriran i koncentrovan. Dobijeni 2-(benziloksi)-4-etoksi-5-jodopiridin (800 mg, 1.915 mmol, 63. 4% prinos) je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: 'HNMR (400 MHz, CDCh) 5 8.28 (s, IH), 7.45-7.43 (m, 2H), 7.38-7.36 (m, 3H), 6.22 (s, IH), 5.33 (s, 2H), 4.12-4.07 (m, 2H), 1.48( t, J=6.8 Hz, 3H); ES-LCMSmlz355.9 (M+H).
Intermedijer 6: 5-(l, 1,1 -Trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-amin
[0177]
Korak 1: 5,5,5-Trilfuoro-4,4-dimetil-3-oksopentan nitril
[0178]
[0179]U smešu MeCN (3.32 mL, 97 mmol) u THF (300 mL) ohlađenu do -78°C dodat jen-BuLi (56.4 mL, 141 mmol). Smeša je mešana na -30°C u trajanju od 30 min. Zatim je u smešu ukapavanjem dodat metil 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropanoat (15 g, 88 mmol). Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 10 časova. Smeša je ugašena vodenim rastvorom NH4CI i ekstrahovana sa DCM/MeOH (10:1). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 10:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 5:1, Rf= 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 5,5,5-trifluoro-4,4-dimetil-3-oksopentan nitril (5 g, 27.9 mmol, 31.7% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8: 3.75 (s, 2H), 1.41 (s, 6H).
Korak 2: 5-(l,l,l-Trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-amin
[0180]
[0181]U smešu hidroksilamin hidrohlorida (3.10 g, 44.7 mmol) u H2O (25 mL) ohlađenu do 0°C dodat je NaHC03(3.94 g, 46.9 mmol) da bi se podesila do pH =7.5. Zatim je u smešu dodat rastvor 5,5,5-trifluoro-4,4-dimetil-3-oksopentan nitrila (4 g, 22.33 mmol) u MeOH (25 mL). Smeša je mešana na 65°C u trajanju od 15 časova. Postoje ohlađena, smeša je zakišeljena sakonc.HC1 do pH =1.0 i zatim refluksovana 2 časa. Posle hlađenja, smeša je neutralizovana pomoću 4 M NaOH do pH = 8.0. Smeša je ekstrahovana sa DCM/MeOH (10:1). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 5-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-amin (2 g, 9.06 mmol, 40.6% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 5.78 (s, IH), 3.93 (s., 2H), 1.51 (s, 6H); ES-LCMSmlz195 (M+l).
Intermedijer 7: 3-(4-Metil-l//-imidazol-1 -il)-5-(trifluorometil)anilin
[0182]
Korak 1: 4-Metil-l-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-li<y->imidazol
[0183]
[0184]Suspenzija 4-metil-lif-imidazola (1.178 g, 14.35 mmol) u DMF (15 mL) dodata je u rastvor l-fluoro-3-nitro-5-(trifluorometil)benzena (2 g, 9.56 mmol) u DMF (15 mL). Dodat je CS2CO3(6.23 g, 19.13 mmol) i smeša je mešana na 80°C u trajanju od 8 časova. Smeša je hlađena do sobne temperature i zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHC03. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 5:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod TLC (PE/EA =1:1, Rf = 0.5) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 4-metil-l-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-l//-imidazola (800 mg, 2.95 mmol, 30.8% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.61-8.78 (m, IH), 8.44-8.51 (m, IH), 8.31-8.39 (m, 2H), 7.55 (s, IH), 2.27 (s, 3H); ES-LCMS m/z 272.0 (M+H).
Korak 2: 3-(4-Metil-lif-imidazol-l-il)-5-(trifluorometil)anilin
[0185]
[0186]Suspenzija 4-metil-l-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-l//-imidazola (800 mg, 2.95 mmol) u MeOH (15 mL) dodata je u rastvor Pd/C (8.26 mg, 0.078 mmol) u MeOH (15 mL). Smeša je na 25°C u trajanju od 5 časova pod atmosferom H2. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHCCb. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSCu filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/H20 kao eluenti, bazni uslovi) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 3-(4-metil-lif-imidazol-l-il)-5-(trifluorometil)anilina (321.83 mg, 1.334 mmol, 86.0% prinos). TLC (PE/EA =1:1, Rf=0.3): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.98 (s, IH), 7.24 (s, IH), 7.02-6.76 (m, 3H), 2.31-2.17 (m, 3H); ES-LCMS m/z 242.1 (M+H).
Intermedijer 8: 2-(5-Nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)acetonitril
[0187]
Korak 1: 5-Nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-ol
[0188]
[0189]U ledeno hladan rastvor 3-(trifluorometil)piridin-2-ola (4 g, 24.53 mmol) u H2SO4(26.1 mL, 491 mmol) ukapavanjem je dodata azotna kiselina (1.206 mL, 27.0 mmol). Posle 30 min, ledeno kupatilo je uklonjeno i reakcija je mešana na 26°C u trajanju od 10 časova. Reakciona smeša je dodata u 120 g leda. Dobijeni talog je sakupljen filtracijom, ispran sa dodatnom H2O i sušen na vazduhu da bi se dobila prva serija proizvoda. Sledeći prinos proizvoda je dobijen posle isparavanja ishodne tečnosti do manje od 100 mL, hlađenja na ledenom kupatilu i dodavanja NaOH da bi se podesila do pH = 8. Smeša je ekstrahovana pomoću EA (100 mL). Organski sloj je sušen i koncentrovan da bi se dobio proizvod, koji je spojen sa prvom serijom da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca 5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-ola (2.63 g, 12.64 mmol, 51.5% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8: 8.86 (d, 7= 3.1 Hz, IH), 8.55 (d,J =2.6 Hz, IH); ES-LCMS m/z 209.0 (M+H).
Korak 2: 2-Hloro-5-nitro-3-(trifluorometil)piridin
[01901
[0191]SOCb (18.45 mL, 253 mmol) dodat je u rastvor 5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-ola (2.63 g, 12.64 mmol). Dodat je DMF (1.957 mL, 25.3 mmol) i smeša je bila na 100°C u trajanju od 10 časova. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHCOi. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04filtriran i koncentrovan. Dobijeni 2-hloro-5-nitro-3-(trifluorometil)piridin (2.46 g, 10.86 mmol, 86% prinos) je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. TLC (PE/EA = 5:1, Rf= 0.6): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8: 9.23-9.59 (m, IH), 8.79 (d,J =2.4 Hz, IH).
Korak 3:terc-Butil2-cijano-2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)acetat
[0192]
[0193]U rastvor terc-butil 2-cijanoacetata (523 mg, 3.71 mmol) u THF (15 mL) dodat je K2CO3(854 mg, 6.18 mmol). Zatim je 2-hloro-5-nitro-3-(trifluorometil)piridin (700 mg, 3.09 mmol) dodat u smešu i smeša je na 50°C u trajanju od 10 časova. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHCCb. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSCu, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (DCM/MeOH = 20:1, Rf = 0.4) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca terc-butil 2-cijano-2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)acetata (1 g, 3.02 mmol, 98.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.99 (d,J=2.43 Hz, IH), 8.36 (d,J=2.43 Hz, IH), 3.35 (s, IH), 1.49( d, J=1.54 Hz, 9H); ES-LCMS m/z 276 (M-55).
Korak 4: 2-(5-Nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)acetonitril
[0194]
[0195]U rastvorterc-butil2-cijano-2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)acetata (1.06 g, 3.20 mmol) u MeOH (80 mL) dodat je HC1 (20 mL, 3.20 mmol). Smeša je bila na 70°C u trajanju od 10 časova. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHC03. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSO/t, filtriran i koncentrovan. Dobijeni 2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)acetonitril (402 mg, 1.739 mmol, 54.4% prinos) je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. TLC (PE/EA = 5:1, Rf = 0.6): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 9.56 (d,J=2.21 Hz, IH), 8.63-8.87 (m, IH), 4.20 (br. s., 2H); ES-LCMS m/z 232.0 (M+H).
Intermedijer 9: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetna kiselina
[0196]
Korak 1: 2-(4-(5-Etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-lfuorofenil)sirćetna kiselina
[0197]
[01981Suspenzija 2-(4-bromo-2-fiuorofenil)sirćetne kiseline (300 mg, 1.287 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL) i H2O (1.000 mL) dodata je u rastvor 3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (496 mg, 1.287 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL) i H20 (1.000 mL). Dodati su PdCk(dppf) (94 mg, 0.129 mmol) i Cs2C03 (1049 mg, 3.22 mmol) i smeša je mešana na 110°C u trajanju od 30 min pod mikrotalasnim zračenjem. Smeša je hlađena do sobne temperature i zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHCCb. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 1:1, Rf= 0.5) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (320 mg, 0.778 mmol, 60.4% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.93 (d,J=1.8 Hz, IH), 7.18-7.50 (m, 6H), 6.78-7.00 (m, 2H), 5.28-5.54 (m, 2H), 4.04-4.21 (m, 2H), 3.74-3.84 (m, 3H), 3.30-3.38 (m, 2H), 1.32-1.52 (m, 3H); ES-LCMS m/z 412.0 (M+H).
Korak 2: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetna kiselina
[0199]
[0200]Suspenzija 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (120 mg, 0.292 mmol) u MeOH (10 mL) dodata je u rastvor Pd/C (31.0 mg, 0.292 mmol) u MeOH (10 mL). smeša je mešana pod atmosferom H2na 26°C u trajanju od 2 časa. Zatim je rastvor filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/H20 kao eluenti, kiseli uslovi) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l ,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (80 mg, 0.275 mmol, 94.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.14-7.53 (m, 5H), 4.01-4.21 (m, 2H), 3.60-3.68 (m, 2H), 1.46 (s, 3H); ES-LCMS m/z 292.1 (M+H).
Intermedij er 10: 4-(4-Etil-piperazin-1 -ilmetil)-3 -trifluorometil-fenilamin
[0201]
Korak 1: (4-Amino-2-trifluorometil-fenil)-(4-etil-piperazin-1 -il)-metanon
[0202]
[0203]Smeša 4-amino-2-trifluorometil-benzoeve kiseline (15 g, 73.1 mmol), HOBT (14.56 g, 95 mmol), EDC (16.82 g, 88 mmol), Et3N (20.38 mL, 146 mmol), 1-etil-piperazina (8.35 g, 73.1 mmol) u DCM (200 mL) je mešana na 25°C u trajanju od 2 časa. U smešu je dodat DCM (200 mL) i zatim je isprana sa H20,2 M NaOH (2 x 150 mL) i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se dobila prijavo bela čvrsta supstanca (4-amino-2-trifluorometilfenil)-(4-etil-piperazin-l-il)-metanona (20 g, 65.2 mmol, 89.0%> prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8: 7.07 (d,J=8.0 Hz, IH), 6.92 (d,J=2.4 Hz, IH), 6.79 (dd, /= 2.0, 8.0 Hz, IH), 3.99 (s, 2H), 3.84-3.76 (m, 2H), 3.25-3.23 (m, 2H), 2.50-2.39 (m, 4H), 2.33-2.31 (m, 2H), 1.08 (t,J=7.2 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 302 (M+H).
Korak 2: 4-(4-Etil-piperazin-1 -ilmetil)-3-trifluorometil-fenilamin
[0204]
[0205]U smešu (4-amino-2-trifluorometil-fenil)-(4-etil-piperazin-l-il)-metanona (20 g, 66.4 mmol) u THF (500 mL) ukapavanjem je dodat BH3»DMS (19.91 mL, 199 mmol). Zatim je smeša mešana na 80°C u trajanju od 4 časa. Smeša je ugašena dodavanjem MeOH i zatim koncentrovana. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE:EA = 2:1, Rf= 0.35) da bi se dobila bela čvrsta supstanca 4-(4-etil-piperazin-l-ilmetil)-3-trifluorometilfenilamina (14 g, 46.0 mmol, 69.4% prinos):<>>H NMR (400 MHz, CDCh) 5: 7.48 (d,J=8.4 Hz, IH), 6.91 (d,J=2.8 Hz, IH), 6.79 (dd,J=2.4, 8.4 Hz, IH), 3.76 (s, 2H), 3.53 (s, 2H), 2.45-2.39 (m, 8H), 1.08 (t,J=7.2 Hz, 3H); ES-LCMSm/ z288 (M+H).
Intermedijer 11: 2-(4-(4-Etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetna kiselina
[0206]
Korak 1: 2-Hloro-4-etoksipiridin
[0207]
[0208]U smešu 2-hloro-4-nitropiridina (170 g, 1070 mmol) u THF (2 L) lagano je dodat natrijum etanolat (109.45 g, 1610 mmol) na 0°C. Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 12 časova. LCMS i TLC (PE/EA = 5:1, Rf = 0.6) su pokazale daje reakcija završena. Smeša je filtrirana i većina rastvarača filtrata je uklonjenain vacuo.Ostatak je ekstrahovan sa EA (800 mL x 3), i organski sloj je ispran zasićenim rastvorom NaCl (1 L), sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se dobio sirovi 2-hloro-4-etoksipiridin (157 g, 1.0 mol, 92% prinos) kao čvrsta supstanca: 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 8.15 (d,J=6.0 Hz, IH), 6.99 (d,J=2.0 Hz, IH), 6.91-6.89 (m, IH), 4.16-4.14 (m, 2H), 1.41-1.38 (m, 3H); ES-LCMS m/z 158 (M+H).
Korak 2: 5-Bromo-2-hloro-4-etoksipiridin
[0209]
[0210]2-Hloro-4-etoksipiridin (100 g, 0.63 mol) je lagano dodat u H2S04(500 mL). Zatim je l-bromopirolidin-2,5-dion (124.2 g, 0.70 mol) dodat u gore navedenu smešu na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na 80°C u trajanju od 3 časa. TLC (PE/EA = 10:1, Rr= 0.5) je pokazala daje reakcija završena. Reakciona smeša je sipana u led-vodu (2 L), i ekstrahovana sa EA (1 L x 3). Organski sloj je ispran zasićenim rastvorom Na2C03(1 L x 2), sušen preko Na2S04i koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 60:1-30:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 10:1, Rf = 0.5) su spojene i koncentrovane da bi se proizveo 5-bromo-2-hloro-4-etoksipiridin (60.9 g, 0.26 mol, 40% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.31 (s, IH), 7.14 (s, IH), 4.32-4.10 (m, 2H), 1.58-1.35 (m, 3H); ES-LCMSmlz237 (M+2).
Korak 3: 5-Bromo-4-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)piridin
[0211]
[0212]U smešu 5-bromo-2-hloro-4-etoksipiridina (75 g, 317.1 mmol) u toluenu (500 mL) dodat je (4-metoksifenil)metanol (52.6 g, 380.6 mmol), KOH (35.6 g, 634.3 mmol) i 18-kruna-6 (8.4 g, 31.2 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 120°C u trajanju od 2 časa. Smeša je podeljena između 2-metoksi-2-metilpropana (500 mL) i fiziološkog rastvora (800 mL). Organski sloj je koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću kolone (PE/EA = 10:1, Rf = 0.5) da bi se dobio 5-bromo-4-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)piridin (72.2 g, 221 mmol, 70% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.05 (s, IH), 7.33 (d,J=8.8 Hz, 2H), 6.90-6.84 (m, 2H), 6.38 (s, IH), 5.20 (s, 2H), 4.16-4.05 (m, 2H), 3.77 (s, 3H), 1.43 (q,J=6.8 Hz, 3H); ES-LCMSmlz338 (M+2H).
Korak 4: 2-(4-Bromo-2-fluorofenil)acetonitril
[0213]
[0214]U rastvor 4-bromo-l-(bromometil)-2-fluorobenzena (500 g, 1.87 mol) u EtOH (2.2 L) mešan pod azotom na 20°C dodat je NaCN (93 g, 1.90 mmol) u jednoj porciji. Reakciona smeša je mešana na 60°C u trajanju od 12 časova. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između DCM (2000 mL) i zasićenog rastvora NaHCCb(1800 mL). Sledeća serija je ponovljena upotrebom istog postupka. Zatim su dve serije spojene. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan da bi se dobio 2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetonitril (794 g, 99% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7.38-7.27 (m, 3H), 3.72 (s, 2H).
Korak 5: 2-(4-Bromo-2-fluorofenil)sirćetna kiselina
[0215]
[0216]U rastvor 2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetonitrila (397 g, 1.82 mol) u MeOH (500 mL) mešan pod azotom na 20°C dodat je rastvor NaOH (2.22 L, 2.5M, 5.56 mol) u jednoj porciji. Reakciona smeša je mešana na 80°C u trajanju od 5 časova. Zatim je rastvor koncentrovan i neutralizovan sakonc.HC1 do pH = 5 uz mešanje. Zatim je rastvor ekstrahovan sa EA (1.5 L x 2). Sledeće dve serije su ponovljene upotrebom istog postupka. Zatim su tri serije spojene. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovanin vacuoda bi se dobila čista 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetna kiselina (1200 g, 92% prinos): TLC (PE/EA = 5:1, Rf= 0.2); 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7.24 (br. s., IH), 7.12 (t,J=7.9 Hz, IH), 3.65 (s, 2H).
Korak 6: Metil 2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetat
[0217]
[0218]U rastvor 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (260 g, 1.13 mol) u MeOH (2 L) dodata je H2SO4(30 mL) na sobnoj temperaturi. Rastvor je zagrevan do refluksa preko noći. Zatim je rastvarač koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHCOs. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sledeća serija je ponovljena upotrebom istog postupka. Zatim su dve serije spojene da bi se dobio metil 2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetat (520 g, 94%). TLC (PE/EA = 10:1, Rf = 0.7). 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7.25-7.20 (m, 2H), 7.14 (t,J=8.0 Hz, IH), 3.70 (s, 3H), 3.62 (s, 2H).
Korak 7: Metil 2-(2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetat
[0219]
[0220]U rastvor metil 2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetata (260 g,1.05 mol) i 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(l,3,2-dioksaborolana) (320 g, 1.26 mol) u 1,4-dioksanu (2 L) dodat je KOAc (206 g, 2.10 mol) i PdCh(dppf) (23 g, 0.03 mol) na sobnoj temperaturi. Rastvor je zagrevan do refluksa u trajanju od 4 časa pod N2. Zatim je rastvor filtriran i filtrat je koncentrovanin vacuoda bi se dobio sirovi proizvod. Sledeća serija je ponovljena upotrebom istog postupka. Zatim su dve serije spojene i prečišćene pomoću hromatografije na koloni silika gela (PE/EA = 30:1 do 10:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 10:1, Rf = 0.5) su spojene i koncentrovane da bi se proizveo metil 2-(2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetat (560 g, 90%) kao svetio žuto ulje: 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7.54 (d,J=7.5 Hz, IH), 7.49 (d,J=10.0 Hz, IH), 7.31-7.26 (m, IH), 3.73 (s, 2H), 1.34 (s, 12H), 1.27 (s, 3H); ES-LCMSmlz295.2 (M+H).
Korak 8: Metil 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetat
[0221J
[0222]U rastvor 5-bromo-4-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)piridina (175 g, 519 mmol) u 1,4-dioksanu (1.2 L) i H20 (300 mL) dodat je metil 2-(2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetat (167 g, 569 mmol), PdCi2(dppf) (25 g, 5.19 mmol) i CS2CO3(337 g, 1038 mmol) pod N2. Smeša je refluksovana 2 časa. TLC (PE/EA = 5:1, Rf = 0.3) je pokazala da je reakcija završena. Smeša je podeljena između EA (1 L) i H2O (800 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04i koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (PE/EA = 5:1, Rf= 0.3) da bi se dobio 5-bromo-4-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)piridin (210 g, 0.49 mol, 90% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.94 (s, IH), 7.36 (d,J=8.8 Hz, 2H), 7.32-7.22 (m, 3H), 6.90 (d,J=8.8 Hz, 2H), 6.43 (s, IH), 5.26 (s, 2H), 4.11 (d,J=6.8 Hz, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.72 (s, 2H), 3.70 (s, 3H), 1.36( t, J=7.2 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 426 (M+H).
Korak 9: 2-(4-(4-Etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetna kiselina
[0223]
[0224]U rastvor metil 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetata (210 g, 519 mmol) u THF (500 mL) dodat je rastvor LiOH»H20 (52 g, 1.23 mol) u H2O (700 mL). Smeša je mešana na 60°C u trajanju od 10 časova. TLC (PE/EA = 5:1, Rf= 0.3) je pokazala daje reakcija završena. Smeša je koncentrovana i neutralizovana sa 1.0 M HC1 do pH = 7.0. Zatim je smeša filtrirana, i čvrsta supstanca je isprana vodom i sušenainvacuoda bi se dobila 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetna kiselina (183.3 g, 0.45 mol, 93% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.94 (s, IH), 7.41-7.28 (m, 3H), 7.24 (d,J=9.6 Hz, 2H), 6.91 (d,J=8.8 Hz, 2H), 6.44 (s, IH), 5.26 (s, 2H), 4.11 (q,J=6.8 Hz, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.67 (s, 2H), 1.36 (t,J=7.2 Hz, 3H); ES-LCMS m/ z 412 (M+H).
Intermedijer 12: 2-(4-Bromo-2-fluorofenil)-7V-(3-(l, 1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamid
[0225]
Korak 1: 2-(4-Bromo-2-fluorofenil)acetonitril
[0226]
[0227]Suspenzija NaCN (2.085 g, 42.5 mmol) u DMF (20 mL) dodata je u rastvor 4-bromo-l-(bromometil)-2-fluorobenzena (5.7 g, 21.27 mmol) u DMF (20 mL). Smeša je mešana na 26°C u trajanju od 10 časova. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA (50 mL) i zasićenog rastvora NaHC03(50 mL). Organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom (50 mL), sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan da bi se dobila prijavo bela čvrsta supstanca 2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetonitrila (4.01 g, 18.74 mmol, 88% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7.24-7.37 (m, 3 H), 3.70 (s, 2 H).
Korak 2: 2-(4-Bromo-2-fluorofenil)sirćetna kiselina
[02281
[0229]U rastvor 2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetonitrila (4.01 g, 18.74 mmol) u MeOH (30 mL) dodat je 2 M NaOH (56.2 mL, 112 mmol). Smeša je mešana na 100°C u trajanju od 12 časova. Smeša je zatim hlađena do sobne temperature. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHC03. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan da bi se dobila 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetna kiselina (4.13 g, 17.72 mmol, 95% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7.31-7.22 (m, 2H), 7.13 (t,J=8.05 Hz, IH), 3.67 (s, 2H); ES-LCMSmlz233 (M+H).
Korak 3: 5,5,5-Trifluoro-4,4-dimetil-3-oksopentan nitril
[0230]
[0231]U smešu MeCN (1.086 g, 26.5 mmol) u THF (300 mL) ohlađenu do -78°C dodat jen-BuLi (10.58 mL, 26.5 mmol). Smeša je mešana na -30°C u trajanju od 0.5 časa. Zatim je u smešu ukapavanjem dodat metil 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropanoat (3 g, 17.63 mmol). Smeša je ugašena vodenim rastvorom NH4CI i ekstrahovana sa DCM/MeOH (10:1, 30 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela (PE/EA = 8:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 5:1, Rf = 0.5) su spojene i koncentrovane da bi se proizvelo svetio žuto ulje 5,5,5-trifluoro-4,4-dimetil-3-oksopentanenitrila (1 g, 5.30 mmol, 30% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 3.79 (s, 2H), 1.41 (s, 6H).
Korak 4: 3-(l,l,l-Trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-amin
[0232]
[0233]U smešu 5,5,5-trilfuoro-4,4-dimetil-3-oksopentan nitrila (1 g, 5.58 mmol) i hidroksilamin hidrohlorida (0.407 g, 5.86 mmol) u vodi (30 mL) dodat je NaOH (0.447 g, 11.16 mmol). Zatim je smeša mešana na 100°C u trajanju od 3 časa. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je ekstrahovana sa DCM (50 mL x 3). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-amina (700 mg, 3.39 mmol, 61% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 5.17 (s, IH), 4.41 (s, 2H), 1.49 (s, 6H); ES-LCMSmlz195 (M+H).
Korak 5: 2-(4-Bromo-2-fluorofenil)-AL(3-(l, 1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamid
[0234]
[0235]U smešu 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (360 mg, 1.545 mmol) u DCM (50 mL) dodat je 3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-amin (300 mg, 1.545 mmol), HATU (881 mg, 2.317 mmol) i trietilamin (0.645 mL, 4.63 mmol). Zatim je smeša mešana na 25°C u trajanju od 12 časova. Smeša je isprana fiziološkim rastvorom (50 mL), sušena preko Na2S04, filtrirana i koncentrovana da bi se proizvelo žuto ulje 2-(4-bromo-2-fluorofenil)-7V-(3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamida (600 mg, 1.1 mmol, 71% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 8.09 (d, /= 6.8 Hz, IH), 7.34-7.29 (m, IH), 7.21 (s, IH), 6.64 (d,J=6.8 Hz, IH), 6.43 (s, IH), 3.75 (s, 2H), 1.52 (s, 6H); ES-LCMSmlz409 (M+H).
Priprema jedinjenja prema pronalasku
Primer 1: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(6-(2-hidroksipropan-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamid
[0236]
Korak 1: 2-Hloro-5-nitro-3-(trifluorometil)piridin
[0237]
[0238]U smešu 3-(trifluorometil)piridin-2-ola (2 g, 12.26 mmol) dodata je azotna kiselina (1.644 mL, 36.8 mmol) i H2SO4(12.03 g, 123 mmol) na 0°C. Zatim je smeša mešana na 25°C u trajanju od 16 časova. Smeša je zatim zagrevana do 60°C u trajanju od 5 časova, hlađena i dodata u 150 g leda. Smeša je ekstrahovan sa EA (2 x 100 mL) i isprana sa H2O (100 mL) da bi se dobio organski sloj. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko Na2S04, koncentrovan da bi se proizvela braon čvrsta supstanca 5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-ola (2.2 g, 8.99 mmol, 73.3% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.91 (d, J =2.43 Hz, IH), 9.42 (d,J=2.43 Hz, IH); ES-LCMS m/z 209.0 (M+H).
Korak 2: 2-Hloro-5-nitro-3-(trifluorometil)piridin
[0239]
[0240]U smešu 5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-ola (2 g, 9.61 mmol) dodat je SOCb (21.04 mL, 288 mmol) i DMF (0.074 mL, 0.961 mmol). Zatim je smeša mešana na 80°C u trajanju od 16 časova. Smeša je koncentrovana i ekstrahovana sa EA (2 x 100 mL) i isprana sa H2O (100 mL) da bi se dobio organski sloj. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko Na2S04, koncentrovan da bi se proizvela braon čvrsta supstanca 2-hloro-5-nitro-3-(trifluorometil)piridina (2 g, 5.30 mmol, 55.1% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.91 (d,J=2.43 Hz, IH), 9.42 (d,J=2.43 Hz, IH).
Korak 3: 6-Hloro-5-(trifluorometil)piridin-3-amin
[0241]
[0242]U smešu 2-hloro-5-nitro-3-(trifluorometil)piridina (2 g, 8.83 mmol) u sirćetnoj kiselini (10 mL) dodato je gvožđe (2.465 g, 44.1 mmol) u jednoj porciji. Smeša je mešana na 80°C u trajanju od 15 min. Smeša je filtrirana i koncentrovana i zatim isprana vodenim rastvorom NaOH i ekstrahovana sa EA. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 5:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 8:1, Rf = 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca 6-hloro-5-(trifluorometil)piridin-3-amina (1 g, 4.58 mmol, 51.9% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.06 (s, IH), 7.86 (d,J=8.60 Hz, IH), 7.53 (d, /= 8.60 Hz, IH), 7.46-7.26 (m, 5H), 4.16-4.11 (m, 2H), 3.81 (s, 2H), 1.47 (t,J =6.62 Hz, 3H); ES-LCMSmlz197.0 (M+H).
Korak 4: 1 -(5 - Amino-3 -(trifluorometil)piridin-2-il)etanon
[0243]
[0244]U smešu 6-hloro-5-(trifluorometil)piridin-3-amina (200 mg, 1.018 mmol) u MeOH (3 mL) dodat je 6-hloro-5-(trifluorometil)piridin-3-amin (200 mg, 1.018 mmol), NaHC03(171 mg, 2.035 mmol) i PdCb(dppf) (74.5 mg, 0.102 mmol). Smeša je mešana pod atmosferom N2na 110°C u trajanju od 30 min pod mikrotalasnom. Zatim je reakcioni ostatak filtriran i čvrsta supstanca je isprana pomoću MeOH. Zatim je 6M HC1 dodata je u rastvor, koji je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa i zatim koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 1:1, Rf= 0.6) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca l-(5-amino-3-(trifluorometil)piridin-2-il)etanona (120 mg, 0.500 mmol, 49.1% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.10 (d,J =2.43 Hz, IH), 7.30 (d,J=2.43 Hz, IH), 2.56 (s, 3H); ES-LCMSmlz205.0 (M+H).
Korak 5: A<L>(6-Acetil-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetamid
[0245]
[0246]U smešu 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (125 mg, 0.536 mmol) u DCM (10 mL) dodata je 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetna kiselina (125 mg, 0.536 mmol), EDC (123 mg, 0.644 mmol), HOBt (99 mg, 0.644 mmol) i Et3N (0.150 mL, 1.073 mmol). Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 16 časova. Zatim je reakcioni ostatak koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA =1:1, Rf= 0.6) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca A<L>(6-acetil-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetamida (120 mg, 0.243 mmol, 45.4% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 59.00 ( d, J = 1.5 Hz, IH), 8.60 ( d, J=1.5 Hz,IH), 8.13 (d, 7=2.5 Hz, 2H), 7.33 (s.,IH), 3.85 (s, 2H), 2.66 (s, 3H); ES-LCMSm/ z418.9 (M+H).
Korak 6: 7V-(6-Acetil-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[02471
[0248]U smešu 3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (100 mg, 0.260 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL) i H2O (1 mL) dodat je ./V-(6-acetil - 5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetamid (120 mg, 0.286 mmol), CS2CO3(169 mg, 0.519 mmol) i PdCl2(dppf) (18.99 mg, 0.026 mmol). Smeša je mešana pod atmosferom N2na 110°C u trajanju od 30 min pod mikrotalasnom. Zatim je reakcioni ostatak filtriran i filtrat je koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 1:1, Rf = 0.6) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstancaN-( 6-acetil -5-(trifluorometil)piridm^ fluorofenil)acetamida (100 mg, 0.100 mmol, 38.7% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 9.02 (s, IH), 8.62 (s, IH), 8.13 (d,J=2.0 Hz, 2H), 7.42 (d,J=9.0 Hz, 4H), 7.33 (d, /= 2.5 Hz, 2H), 6.94 (s, IH), 5.39 (s, 2H), 4.15-4.09 (m, 2H), 3.91 (s, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.26 (t, / = 7.0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 598.1 (M+H).
Korak 7: 2-(4-(5-Etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(6-(2-hidroksipropan-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamid
[0249]
[0250]U smešu 7V-(6-acetil-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (100 mg, 0.167 mmol) u THF (10 mL) dodat je metilmagnezijum bromid (0.167 mL, 0.502 mmol). Smeša je mešana na 0°C u trajanju od 2 časa pod atmosferom N2. Zatim je smeša dodata u H2O i ekstrahovana sa EA. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (DCM/MeOH = 15:1, Rf = 0.6) da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-AL(6-(2-hidroksipropan-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamida (70 mg, 0.086 mmol, 51.1% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.87 (d, /= 2.0 Hz, IH), 8.45 (d,J =2.0 Hz, IH), 8.09 (d,J =2.4 Hz, IH), 7.94 (d,J =2.0 Hz, IH), 7.44-7.40 (m, 3H), 7.29 (d, /= 2.4 Hz, IH), 6.88 (s, 2H) 6.78 (d, /= 2.4 Hz, IH), 5.35 (s, 2H) ,4.17-4.1 l(m, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 1.59 (s, 6H), 1.41 (t, /= 7.1 Hz, 3H); ESLCMSmlz494.2 (M-PMB+H).
Korak 8: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-AL(6-(2-hidroksipropan-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamid
[0251]
[0252]U smešu 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-<A>L(6-(2-hidroksipropan-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamida (70 mg, 0.114 mmol) u MeOH (10 mL) dodat je Pd/C (7 mg, 0.066 mmol). Smeša je mešana pod atmosferom H2na 25°C u trajanju od 16 časova. Zatim je reakcioni ostatak filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/H20 kao eluenti, bazni uslovi) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-<A>L(6-(2-hidroksipropan-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamida (5.71 mg, 0.011 mmol, 10.9% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 8.90 (s, IH), 8.48 (s, IH), 7.48-7.43 (m, IH), 7.40-7.32 (m, 3H), 7.26 (d,J=2.01 Hz, IH), 4.15 (m, 2H), 3.86 (s, 2H), 1.62 (s, 6H), 1.49 (t,J =7.03 Hz, 3H); ES-LCMSmlz494.2 (M+H).
Primer 2: A^-(6-Etoksi-5-(1xifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid hidrohlorid
[0253]
Korak 1: 2-Hloro-5-nitro-3-(trifluorometil)piridin
[0254]
[0255]U smešu 3-(trifluorometil)piridin-2-ola (2 g, 12.26 mmol) i azotne kiseline (1.644 mL, 36.8 mmol) dodata je H2SO4(12.03 g, 123 mmol) na 0°C. Zatim je smeša mešana na 25°C u trajanju od 16 časova. Smeša je zatim zagrevana do 60°C u trajanju od 5 časova, hlađena i dodata u 150 g leda. Smeša je ekstrahovana sa EA (2 x 100 mL) i isprana sa H2O (100 mL) da bi se dobio organski sloj. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se proizvela braon čvrsta supstanca 5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-ola (2.2 g, 8.99 mmol, 73.3% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.91 (d,J=2.43 Hz, IH), 9.42 (d,J=2.43 Hz, IH); ES-LCMS m/z 209.0 (M+H).
Korak 2: 2-Hloro-5-nitro-3-(trifluorometil)piridin
[0256]
[0257]U smešu 5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-ola (2 g, 9.61 mmol) i SOCI2 (21.04 mL, 288 mmol) dodat je DMF (0.074 mL, 0.961 mmol). Zatim je smeša mešana na 80°C u trajanju od 16 časova. Smeša je koncentrovana i ekstrahovana sa EA (2 x 100 mL) isprana sa H2O (100 mL) da bi se dobio organski sloj. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se proizvela braon čvrsta supstanca 2-hloro-5-nitro-3-(trifluorometil)piridina (2 g, 5.30 mmol, 55.1% prinos): 'HNMR(400 MHz, CD3OD) 8 8.91 (d,J=2.43 Hz, IH), 9.42(d, J=2.43 Hz, IH).
Korak 3: 2-Etoksi-5-nitro-3-(trifluorometil)piridin
[0258]
[0259]U smešu 2-hloro-5-nitro-3-(trifluorometil)piridina (500 mg, 2.207 mmol) u THF (10 mL) dodat je EtOH (0.155 mL, 2.65 mmol) i NaH (132 mg, 3.31 mmol). Zatim je smeša mešana na 0°C u trajanju od 30 min, zatim je zagrevana do sobne temperature i mešana 16 časova. Smeša je dodata u H2O i ekstrahovana sa EA (2 x 50 mL) da bi se dobio organski sloj. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se proizvelo braon ulje 2-etoksi-5-nitro-3-(trifluorometil)piridina (120 mg, 0.457 mmol, 20.7% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 9.27( d, J=2. 5 Hz, IH), 8.75 (d,J=2. 5 Hz, IH), 4.67 (m, 2H), 1.47 (t,J=7.0 Hz, 3H).
Korak 4: 6-Etoksi-5-(trifluorometil)piridin-3-amin
[0260]
[0261]U smešu 2-etoksi-5-nitro-3-(trifluorometil)piridina (120 mg, 0.508 mmol) u EA (10 mL) dodat je kalaj(II) hlorid dihidrat (459 mg, 2.033 mmol). Smeša je mešana na 50°C u trajanju od 16 časova. Zatim je rastvor podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHCCh. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 4:1, Rf= 0.6) da bi se proizvelo svetio žuto ulje 6-etoksi-5-(trifluorometil)piridin-3-amina (80 mg, 0.310 mmol, 61.1% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 6.27 (d, / = 2.5 Hz, IH), 5.86 (d,J= 3.0 Hz, IH), 2.81 (m, 2H), 0.17 (t,J =7.0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 207.1 (M+H).
Korak 5: 2-(4-Bromo-2-fluorofenil)-A<L>(6-etoksi-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamid
[0262]
[0263]U smešu 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (90 mg, 0.386 mmol) u DCM (10 mL) dodat je 6-etoksi-5-(trifluorometil)piridin-3-amin (88 mg, 0.425 mmol), DIEA (0.135 mL, 0.772 mmol) i HATU (220 mg, 0.579 mmol). Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 16 časova. Smeša je razblažena sa H2O i ekstrahovana sa DCM. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSCu, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 1:1, Rf = 0.6) da bi se proizvelo svetio žuto ulje 2-(4-bromo-2-fluorofenil)-A^-(6-etoksi-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamida (120 mg, 0.228 mmol, 59.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.49 (d,J=2.0 Hz, IH), 8.27 (d,J=2.5 Hz, IH), 7.39-7.34 (m, 3H),4.47 (m, 2H), 1.21( t, J=6.5 Hz, 3H);ES-LCMS m/z 421.0 (M+H).
Korak 6: iV-(6-Etoksi-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0264]
[0265]U smešu 3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (100 mg, 0.260 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL) i H2O (1 mL) dodat je 2-(4-bromo-2- fluorofenil)-Ar-(6-etoksi-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamid (120 mg, 0.286 mmol), CS2CO3(169 mg, 0.519 mmol) i PdCl2(dppf) (18.99 mg, 0.026 mmol). Smeša je mešana pod atmosferom N2na 110°C u trajanju od 30 min pod mikrotalasnom. Zatim je reakcioni ostatak filtriran i filtrat je koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE:EA=1:1, Rf = 0.6) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstancaA^-(6-etoksi-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (50 mg, 0.071 mmol, 27.3% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.51 (d,J=2.5 Hz, IH), 8.29(d, J=2.5 Hz, IH), 7.97 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.52-7.35 (m, 6H), 6.93 (d,J=8.5 Hz, 2H), 5.39 (s, 2H), 4.47 (m, 2H), 4.17 (m, 2H), 3.78-3.85 (m, 5H),1.42-1.47 (m, 3H), 1.38-1.42 (m, 3H); ES-LCMSmlz600.1 (M+H).
Korak 7: A<r->(6-Etoksi-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3- il)-2-fluorofenil)acetamid hidrohlorid
[0266]
[0267]U smešu A<r->(6-etoksi-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (40 mg, 0.067 mmol) u DCM (10 mL) dodat je TFA (0.701 mL, 9.10 mmol). Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 2 časa. Zatim je reakcioni ostatak dodat u NaOH (2.5 m, 3 mL) i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/H20 kao eluenti, bazni uslovi) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca A^-(6-etoksi-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid hidrohlorid (15.66 mg, 0.030 mmol, 49.8% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 8.50 (s, IH), 8.29 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.49-7.41 (m, IH), 7.40-7.31 (m, 3H), 7.26 (d,J=2.0 Hz, IH), 4.47 (m, 2H), 4.15 (m, 2H), 3.82 (s, 2H), 1.49 (t,J=7.0 Hz, 3H), 1.40 (t,J=7.0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 480.2 (M+H).
Primer 3: 2-(4-(4-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil) acetamid
[0268]
Korak 1: Etil 3-(4-(2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetamido)-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoat
[0269]
[0270]Etil-3-(4-amino-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoat (200 mg, 0.691 mmol) dodat je u rastvor 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (161 mg, 0.691 mmol), HATU (315 mg, 0.830 mmol) i TEA (0.482 mL, 3.46 mmol) u DCM (5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa, i zatim je rastvor podeljen između DCM i H2O. Spojeni organski ekstrakt je sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne TLC (DCM, Rf = 0.5) da bi se proizvelo svetio žuto ulje etil 3-(4-(2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetamido)-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoata (320 mg, 0.571 mmol, 83.0% prinos): 'H NMR (400 MHz,MeOH-</4)5 7.94 (d,J=1.54 Hz, IH), 7.68 (d,J =8.38 Hz, IH), 7.27-7.36 (m, 2H), 7.22 (d,J=8.38 Hz, IH), 6.90-6.97 (m, IH), 4.09-4.18 (m, 2H), 3.74 (s, 2H), 3.07 (s, 2H), 1.20-1.25 (m, 3H), 1.15 (s, 6H); ES-LCMS m/z 504 (M+H).
Korak 2: Etil 3-(4-(2-(2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetamido)-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoat
[0271]
[0272]PdCb(dppf) (23.21 mg, 0.032 mmol) dodat je u rastvor etil 3-(4-(2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetamido)-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoata (320 mg, 0.635 mmol), KOAc (187 mg, 1.904 mmol) i 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(l,3,2-dioksaborolana) (193 mg, 0.761 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL). Reakciona smeša je mešana na 100°C u trajanju od 8 časova. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i H2O. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 5:1, Rf = 0.6) da bi se proizvelo svetio žuto ulje etil 3-(4-(2-(2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetamido)-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoata (300 mg, 0.490 mmol, 77% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.94 (s, IH), 7.68 (d,J=8.60 Hz, IH), 7.50 (d,J=7.50 Hz, IH), 7.33-7.41 (m, 2H), 7.22 (d,J=8.60 Hz, IH), 4.12-4.15 (m, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.07 (s, 2H), 1.33 (s, 12H), 1.22 (d,J=1.54 Hz, 3H), 1.15 (s, 6H); ES-LCMS m/z 552 (M+H).
Korak 3: Etil 3-(4-(2-(4-(6-(benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamido)-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoat
[0273]
[0274]Reakciona smeša PdCb(dppf) (13.27 mg, 0.018 mmol), 4-(benziloksi)-2-etoksi-l-jodobenzena (0.131 mL, 0.399 mmol), etil 3-(4-(2-(2-lfuoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetamido)-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetil propanoata (0.121 mL, 0.363 mmol) i CS2CO3(355 mg, 1.088 mmol) u H2O (1 mL) i 1,4-dioksanu (3 mL) je mešana na 100°C u trajanju od 2 časa. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između DCM i H2O. Spojeni organski ekstrakt je sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 5:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 2:1, Rf= 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvelo svetio žuto ulje etil 3-(4-(2-(<4>'-(benziloksi)-<2>'-etoksi-3-fluoro-[l,<r->bifenil]-4-il)acetamido)-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoata (100 mg, 0.147 mmol, 40.6% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.93-7.98 (m, 2H), 7.71 (dd, /= 8.49, 1.87 Hz, IH), 7.42-7.46 (m, 2H), 7.32-7.39 (m, 3H), 7.25-7.31 (m, 3H), 7.23 (d,J=8.60 Hz, IH), 6.48 (s, IH), 5.35 (s, 2H), 4.10-4.17 (m, 4H), 3.79 (s, 2H), 3.07 (s, 2H), 2.00 (s, 2H), 1.23 (dd, /= 7.17, 0.88 Hz, 6H), 1.15 (s, 6H); ES-LCMS m/z 653 (M+H).
Korak 4: 2-(4-(6-(Benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil) acetamid
[0275]
[0276]LAH (17.45 mg, 0.460 mmol) dodat je u rastvor etil 3-(4-(2-(4-(6-(benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamido)-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoata (100 mg, 0.153 mmol) u THF (5 mL). Reakciona smeša je mešana na 25°C u trajanju od 1 časa. Reakcija je zatim ekstrahovana sa EA (50 mL), isprana vodom i rastvorom NaOH i sušena preko Na2S04. Spojeni organski ekstrakti su prečišćeni pomoću preparativne TLC (PE/EA = 2:1, Rf= 0.4) da bi se proizvelo svetio žuto ulje 2-(4-(6-(benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<r->(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (20 mg, 0.032 mmol, 20.9% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.94-8.03 (m, 2H) 7.77 (d,J =8.53 Hz, IH) 7.46 (t,J=7.53 Hz, 3H) 7.36-7.43 (m, 3H) 7.27-7.35 (m, 3H) 6.52 (s, IH) 5.38 (s, 2H) 3.83 (s, 2H) 2.81 (s, 2H) 2.03 (s, 4H) 1.40 (t,J=6.78 Hz, 3H) 1.26 (t,J=7.28 Hz, 3H) 0.82-0.90 (m, 6H); ES-LCMS m/z 611 (M+H).
Korak 5: 2-(4-(4-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil) acetamid
[0277]
[0278]Reakciona smeša 2-(4-(6-(benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A'-(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (20 mg, 0.033 mmol) i Pd/C (3.49 mg, 0.033 mmol) u MeOH (3 mL) mešana je na 20°C u trajanju od 20 min pod atmosferom H2. Zatim je rastvor koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/H20 kao eluenti, kiseli uslovi) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida
(11.88 mg, 0.022 mmol, 67.7% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.95 (d,7=1.98 Hz, IH), 7.79 (s, IH), 7.71 (dd, 7= 8.49, 1.87 Hz, IH), 7.40-7.46 (m, 2H), 7.25-7.32 (m, 2H), 6.37 (s, IH), 4.24 (q,J=6.84 Hz, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.35 (br. s., 2H), 2.77 (s, 2H), 1.41 (t,J=6.95 Hz, 3H), 0.83 (s, 6H); ES-LCMSm/ z521 (M+H).
Primer 4: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2,3-difluorofenil)-7V-(4-(2-hidroksietoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0279]
Korak 1: (4-Bromo-2,3-difluorofeni1)metanol
[0280]
[0281]U rastvor 4-bromo-2,3-dilfuorobenzojeve kiseline (650 mg, 2.74 mmol) u THF (5 mL) mešan podN2 na 0°C dodat je BH3*DMS (1.371 mL, 13.71 mmol) u jednoj porciji. Reakciona smeša je mešana na 67°C u trajanju od 2 časa. U rastvor je dodat MeOH (5 mL) na sobnoj temperaturi. Zatim je rastvor mešan na sobnoj temperaturi 30 min. Rastvor je koncentrovanin vacuoda bi se dobio sirovi proizvod. Dobijeni (4-bromo-2,3-difluorofenil)metanol (600 mg, 1.749 mmol, 63.8% prinos) je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. TLC (PE/EA = 2:1, Rf 0.6): 'H NMR (400 mHz, CDCh) 5 7.37-7.28 (m, IH), 7.12 (t,J=7.4 Hz, IH), 4.76 (d,J=5.2 Hz, 2H), 3.70 (s, IH).
Korak 2: l-Bromo-4-(bromometil)-2,3-difluorobenzen
[02821
[0283]U rastvor (4-bromo-2,3-difluorofenil)metanola (500 mg, 2.242 mmol) u DCM (10 mL) mešan pod N2na 0°C dodat je PBr3(0.634 mL, 6.73 mmol) u jednoj porciji. Reakciona smeša je mešana na 10°C u trajanju od 2 časa. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između DCM i zasićenog rastvora NaHC03. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 10:1, Rf0.6) da bi se proizvelo svetio žuto ulje l-bromo-4-(bromometil)-2,3-difluorobenzena (330 mg, 1.154 mmol, 51.5% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7.30 (ddd,J=2.0, 6.0, 8.2 Hz, IH), 7.11-7.03 (m, IH), 4.46 (s, 2H).
Korak 3: 2-(4-Bromo-2,3-difluorofenil)acetonitril
[0284]
[0285]U rastvor l-bromo-4-(bromometil)-2,3-difluorobenzena (330 mg, 1.154 mmol) u EtOH (10 mL) mešan pod N2na 0°C dodat je NaCN (73.5 mg, 1.500 mmol) u jednoj porciji. Reakciona smeša je mešana na 10°C u trajanju od 12 časova. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHCCb. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSO/t, filtriran i koncentrovan. Dobijeni 2-(4-bromo-2,3-difluorofenil)acetonitril je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. TLC (PE/EA = 5:1, Rf 0.6): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7.39 (ddd,J=1.8, 6.1, 8.2 Hz, IH), 7.15 (t,J =6.8 Hz, IH), 3.78 (s, 2H).
Korak 4: 2-(4-Bromo-2,3-dilfuorofenil)sirćetna kiselina
[0286]
[0287]Jedinjenje 2-(4-bromo-2,3-difluorofenil)acetonitril (200 mg, 0.690 mmol) je rastvoreno u H2O (1 mL) i H2SO4(1 mL) na 20°C u jednoj porciji. Reakciona smeša je mešana na 100°C u trajanju od 1 časa. Zatim je rastvor podeljen između EA i H2O. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Dobij ena 2-(4-bromo-2,3-difluorofenil)sirćetna kiselina (180 mg, 0.287 mmol, 41.6% prinos) je korišćena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. TLC (PE/EA = 2:1, Rf0.6): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7.27-7.20 (m, IH), 6.92-6.85 (m, IH), 3.65 (s, 2H); ES-LCMS m/z 250.0 (M+H).
Korak 5: A^-(4-(2-(Benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-brorno-2,3-difluorofenil)acetamid
[0288J
[0289]U rastvor 4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)anilina (20 mg, 0.064 mmol), 2-(4-bromo-2,3-difluorofenil)sirćetne kiseline (48.4 mg, 0.077 mmol) i DIEA (0.034 mL, 0.193 mmol) u DCM (3 mL) mešan pod atmosferom N2na 20°C dodat je HATU (29.3 mg, 0.077 mmol) u jednoj porciji. Reakciona smeša je mešana na 20°C u trajanju od 2 časa. Zatim je rastvor podeljen između DCM i zasićenog rastvora NaHCCb. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko Na^SCu, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 5:1, Rf0.3) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca iV-(4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-bromo-2,3-difluorofenil)acetamida (12 mg, 0.019 mmol, 29.9% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDC13) 8 7.69-7.59 (m, 2H), 7.36-7.24 (m, 6H), 7.05 (t,J= 7.3 Hz, IH), 6.96 (d,J=8.4 Hz, IH), 4.64 (s, 2H), 4.20 (t,J=4.4 Hz, 2H), 3.86 (t,J=4.8 Hz, 2H), 3.71 (s, 2H); ES-LCMS m/z 546.0
(M+H).
Korak 6: 7V-(4-(2-(Benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2,3-difluorofenil)acetamid
[0290]
[0291]U rastvor 3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (8.49 mg, 0.022 mmol), 7V-(4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-bromo-2,3-difluorofenil)acetamida (12 mg, 0.022 mmol) i CS2CO3(17.96 mg, 0.055 mmol) u 1,4-dioksanu (6 mL) i H2O (2 mL) mešan pod atmosferom N2na 20°C dodat je PdCi2(dppf)
(0.807 mg, 1.102 umol) u jednoj porciji. Reakciona posuda je zagrevana na 110°C u trajanju od 3 časa. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHC03. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je pečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 2:1, Rf = 0.6) da bi se proizvela braon čvrsta supstanca A<r->(4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2,3-difluorofenil)acetamida (10 mg, 0.012 mmol, 52.7% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7.82 (d,J=3.0 Hz, IH), 7.66-7.50 (m, 2H), 7.41-7.34 (m, 2H), 7.29-7.07 (m, 8H), 6.95-6.80 (m, 3H), 5.39( d, J=4.9 Hz, 2H), 4.57 (d,J=5.0 Hz, 2H), 4.14 (d,J=4.0 Hz, 2H), 4.09-3.96 (m, 2H), 3.84-3.66 (m, 7H), 1.38 (q,J= 6.4 Hz, 3H); ES-LCMSm/ z723.1 (M+H).
Korak 7: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2,3-difluorofenil)-7V-(4-(2-hidroksietoksi)-3-(trifluorometil)fenil) acetamid
[02921
[0293]U rastvor 7V-(4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2,3-difluorofenil)acetamida (10 mg, 0.014 mmol) u MeOH (3 mL) mešan pod N2na 20°C dodat je Pd/C (0.147 mg, 1.384 umol) u jednoj porciji. Rastvor je mešan pod atmosferom H2. Reakciona smeša je mešana na 10°C u trajanju od 12 časova. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovanin vacuoda bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/H20 kao eluenti, kiseli uslovi) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2,3-difluorofenil)-7V-(4-(2-hidroksi etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (3.17 mg, 6.19 umol, 44.7% prinos). TLC (DCM/MeOH = 5:1, Rf = 0.4): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.88 (d,/=2.4 Hz, IH), 7.75 (dd,J=2.2, 8.8 Hz, IH), 7.37-7.12 (m, 5H), 4.20-4.07 (m, 4H), 3.90 (t,J=5.0 Hz, 2H), 3.85 (s, 2H), 1.48 (t,J=7.0 Hz, 3H); ES-LCMSmlz513.2 (M+H).
Primer 5: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-iV-(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil) acetamid
[0294]
Korak 1: 3-(4-Amino-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dirnetilpropan-l-ol
[0295]
[0296]U smešu 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (6 g, 25.7 mmol) u DCM (50 mL) dodat je etil 3-(4-amino-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoat (7.45 g, 25.7 mmol), HATU (12.73 g, 33.5 mmol) i Et3N (10.74 mL, 77 mmol). Zatim je smeša je mešana na 25°C u trajanju od 12 časova. Smeša je isprana fiziološkim rastvorom i zasićenim rastvorom NaHC03. Organski sloj je sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan da bi se proizvelo žuto ulje etil 3-(4-(2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetamido)-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoata (12 g, 19.99 mmol, 78.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8: 7.94 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.67 (d,J=8.4 Hz, IH), 7.36-7.25 (m, 3H), 7.22 (d,J=8.4 Hz, IH), 4.14 (q,J =7.2 Hz, 2H), 3.73 (s, 2H), 3.07 (s, 2H), 1.22 (t,J =7.2 Hz, 3H), 1.15 (s, 6H); ES-LCMS m/z 504 (M).
Korak 2: Etil 3-(4-(2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamido)-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoat
[0297]
[0298]U smešu 3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (4.58 g, 11.90 mmol) i etil 3-(4-(2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetamido)-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoata (6 g, 11.90 mmol) u H2O (1 mL) i 1,4-dioksana (3 mL) dodat je Cs2C03(7.75 g, 23.79 mmol) i PdCl2(dppf) (0.435 g, 0.595 mmol) podN2. Zatim je smeša mešana i zračena u mikrotalasnoj peći na 120°C u trajanju od 30 min. Smeša je koncentrovana i ekstrahovana sa EA. Spojeni organski slojevi su koncentrovani. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 5:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 2:1, Rf= 0.45) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca etil 3-(4-(2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamido)-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoata (4.5 g, 4.63 mmol, 38.9% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5: 7.98-7.93 (m, 2H), 7.70 (d,J=6.8 Hz, IH), 7.46-7.35 (m, 6H), 7.23 (d,J=8.6 Hz, IH), 6.90 (d, / = 8.6 Hz, 2H), 5.36 (s, 2H), 4.18-4.10 (m, 4H), 3.83-3.75 (m, 5H), 3.09-3.05 (m, 2H), 1.41 (t, /= 7.2 Hz, 3H), 1.24 (d, /= 1.8 Hz, 9H); ES-LCMS m/z 563 (M-120).
Korak 3: 2-(4-(5-Etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0299]
[0300]U smešu etil 3-(4-(2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamido)-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoata (3.5 g, 5.13 mmol) u THF (200 mL) ohlađenu do 0°C dodat je LAH (0.389 g, 10.25 mmol) u porcijama. Smeša je mešana na 0°C u trajanju od 30 min. Smeša je ugašena sa 15% vodenim rastvorom NaOH (10 mL). Smeša je sušena preko Na2S04. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 8:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 2:1, Rf = 0.35) su spojene i koncentrovane da bi se proizvelo svetio žuto ulje 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-AL(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (3 g, 4.21 mmol, 82.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8: 7.93 (d,J=2.0 Hz, 2H), 7.71 (d,J =8.4 Hz, IH), 7.47-7.31 (m, 7H), 6.90 (d,J=8.4 Hz, 2H), 5.35 (s, 2H), 4.17-4.10 (m, 2H), 3.82-3.74 (m, 5H), 3.31-3.30 (m, 2H), 2.77 (s, 2H), 1.41 (t,J=6.8 Hz, 3H), 0.82 (s, 6H); ES-LCMSm/ z635 (M-120).
Korak 4: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-^-(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil) acetamid
[0301]
[0302]Smeša AL(4-(3-((/erc-butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (3 g, 3.97 mmol) i HC1 (4 M u 1,4-dioksanu, 20 mL) je mešana na 25°C u trajanju od 2 časa. Smeša je koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/H20 kao eluenti, kiseli uslovi) dva puta da bi se dobila bela čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<r->(4-(3-liidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (1528.59 mg, 2.94 mmol, 73.9% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8: 7.94 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.74-7.67 (m, IH), 7.44-7.38 (m, 2H), 7.37-7.27 (m, 3H), 7.22( d, J=2.0 Hz, IH), 4.11( q, J=6.8 Hz, 2H), 3.78 (s, 2H), 3.32-3.30 (m, 2H), 2.77 (s, 2H), 1.45 (t,J=6.8 Hz, 3H), 0.82 (s, 6H); ES-LCMSmlz521 (M+l).
Primer 6: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-3-fluorofenil)-A^-(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil) acetamid
[0303]
Korak 1: (4-Bromo-3-fluorofenil)metanol
[0304]
[0305]U rastvor 4-bromo-3-fluorobenzaldehida (10 g, 49.3 mmol) i NaBH4(3.73 g, 99 mmol) u THF (100 mL) ukapavanjem je dodat MeOH (100 mL) na 20°C. Pošto je LCMS analiza pokazala daje početni materijal nestao, rastvarač je uklonjenin vacuo.Ostatak je rastvoren u DCM (200 mL) i ispran sa H2O (60 mL) i fiziološkim rastvorom (60 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se proizvela bela čvrsta supstanca (4-bromo-3-fluorofenil)metanol (9.8 g, 47.7 mmol, 97.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.54 (t,J=7.8 Hz, IH), 7.18 (d,J=9.6 Hz, IH), 7.06 (d,J=7.2 Hz, IH), 4.56 (s, 2H); ES-LCMSmlz188.9 (M-17).
Korak 2: l-Bromo-4-(bromometil)-2-fluorobenzen
[0306]
[0307]U rastvor (4-bromo-3-fluorofenil)metanola (5 g, 24.39 mmol) u DCM (100 mL) ukapavanjem je dodat PBr3(2.76 mL, 29.3 mmol). Dobijena smeša je mešana na 20°C. Pošto je LCMS analiza pokazala daje početni materijal nestao, smeša je podešena do pH = 8 pomoću vodenog rastvora Na2C03. Organski sloj je sušen i koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (PE/EA = 10/1) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca l-bromo-4-(bromometil)-2-fluorobenzen (4.2 g, 14.89 mmol, 61.1% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.57 (d,J=7.6 Hz, IH), 7.28 (d,J=7.2 Hz, IH), 7.16 (d,J=6.4 Hz, IH), 4.53 (s, 2H); ES-LCMSmlz186.9 (M-79).
Korak 3: 2-(4-Bromo-3-fluorofenil)acetonitril
[0308]
[0309JU rastvor l-bromo-4-(bromometil)-2-fluorobenzena (1 g, 3.73 mmol) u EtOH (30 mL) dodat je KCN (0.243 g, 3.73 mmol). Dobijena smeša je mešana na 60°C. Posle 3 časa, LCMS analiza je pokazala daje početni materijal nestao. Rastvarač je uklonjenin vacuo.Ostatak je rastvoren u EA (80 mL) i ispran sa H2O (30 mL) i fiziološkim rastvorom (30 mL). Organski sloj je sušen i koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 10/1) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 2-(4-bromo-3-fluorofenil)acetonitril (0.78 g, 2.96 mmol, 79.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.63 (t,J=7.8 Hz, IH), 7.24 (d,J=9. 2 Hz, IH), 7.12 (d,J=9.6 Hz, IH), 3.92 (s, 2H); ES-LCMS m/z 214.0 (M+H).
Korak 4: 2-(4-Bromo-3-fluorofenil)sirćetna kiselina
[03101
[0311]Rastvor 2-(4-bromo-3-fluorofenil)acetonitrila (0.78 g, 3.64 mmol) u H2SO4(5 mL) i H2O (5 mL) je mešana na 100°C u trajanju od 16 časova. Pošto je LCMS analiza pokazala da je početni materijal nestao, smeša je rastvorena u H2O (20 mL) i ekstrahovana pomoću EA (20 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 2-(4-bromo-3-fluorofenil)sirćetne kiseline (0.7 g, 2.046 mmol, 56. 1% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.53 (t,J=7.8 Hz, IH), 7.16 (dd,J=9.8, 1.9 Hz, IH), 7.02 (d,J= 8.0 Hz, IH), 3.61 (s, 2H).
Korak 5: 2-(4-Bromo-3-fluorofenil)-Af-(4-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0312]
[0313]Rastvor 2-(4-bromo-3-fluorofenil)sirćetne kiseline (50 mg, 0.215 mmol),4-(3-((ferc-butil dimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)anilina (78 mg, 0.215 mmol), DIEA (83 mg, 0.644 mmol), HOBt (49.3 mg, 0.322 mmol) i EDC hidrohlorida (61.7 mg, 0.322 mmol) u DCM (20 mL) je mešan na 20°C u trajanju od 16 časova. Smeša je isprana sa H2O (20 mL) i fiziološkim rastvorom (20 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 3/1) da bi se proizveo 2-(4-bromo-3-fluorofenil)-7V-(4-(3-((rerc-butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid (80 mg, 0.132 mmol, 61.4% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.83 (d,/=2.0 Hz, IH), 7.61 (d,J=6.6 Hz, IH), 7.49 (t,/=7.7 Hz, IH), 7.35 (d,/=8.6 Hz, IH), 7.15 (dd,J=9.7, 1.8 Hz, IH), 7.01 (d,J=6.8 Hz, IH), 3.62 (s, 2H), 2.70 (s, 2H), 2.07 (s, 2H), 0.86 (s, 9H), 0.76-0.69 (m, 6H), 0.05-0.02 (m, 6H); ES-LCMSmlz576.0
(M+H).
Korak 6: A<r->(4-(3-((etrc-Butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-3-fluorofenil)acetamid
[0314]
[0315]Rastvor 2-(4-bromo-3-fluorofenil)-7V-(4-(3-((rerc-butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (80 mg, 0.139 mmol), 3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (53.5 mg, 0.139 mmol), CS2CO3(90 mg, 0.278 mmol), PdCb(dppf) (10.15 mg, 0.014 mmol) u 1,4-dioksanu (9 mL) i H2O (3 mL) je mešan na 110°C u trajanju od 15 min. Pošto je LCMS analiza pokazala da je početni materijal nestao, rastvarač je uklonjenin vacuo.Ostatak je rastvoren u EA (60 mL) i ispran sa H2O (20 mL) i fiziološkim rastvorom (20 mL). Organski sloj je sušen preko Na2SC»4, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 2/1) da bi se proizveo A<r->(4-(3-((/erc-butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-3-fluorofenil)acetamid (100 mg, 0.111 mmol, 80.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.84 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.77 (s, IH), 7.37 (d,/=7.6 Hz, IH), 7.34-7.30 (m, 5H), 7.17-7.15 (m, 2H), 6.83(d, J=8.8 Hz, 2H), 5.27 (s, 2H), 4.04-3.99 (m, 4H), 3.70 (s, 3H), 3.66 (s, 2H), 3.24 (s, 2H), 2.69 (s, 2H), 1.31 (t,J=7.0 Hz, 3H), 0.86 (s, 9H), 0.73 (s, 6H), 0.00 (s, 6H); ES-LCMSmlz755.2 (M+H).
Korak 7: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-3-fluorofenil)-A<r->(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0316]
[0317]Rastvor<y>V-(4-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluoro metil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-3-fluorofenil)acetamida (100 mg, 0.132 mmol) u HC1 (MeOH, 5 mL, 20.00 mmol) mešan je na 20°C. Pošto je LCMS analiza pokazala da je početni materijal nestao, rastvarač je uklonjenin vacuo.Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-3-fluorofenil)-7V-(4-(3-liidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (37.98 mg, 0.073 mmol, 55.1% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 7.94 (d,J=2.2 Hz, IH), 7.70 (dd,J=2.0, 8.4 Hz, IH), 7.51-7.45 (m, IH), 7.45-7.37 (m, 3H), 7.28-7.21 (m, 2H), 4.15 (m, 2H), 3.75 (s, 2H), 3.29 (široki s, 2H), 2.77 (s, 2H), 1.46 (t,J=6.9 Hz, 3H), 0.82 (s, 6H); ES-LCMS m/z 521.2 (M+H).
Primer 7: A<f->(4-Cijano-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-3-fluorofenil)acetamid
[0318]
Korak 1: 2-(4-Bromo-3-fluorofenil)acetat
[0319]
[0320]U rastvor 2-(4-bromo-3-fluorofenil)sirćetne kiseline (500 mg, 2.146 mmol) u MeOH (10 mL, 247 mmol) dodat je sumpor dihlorid (0.232 mL, 3.22 mmol). Dobijena smešaje mešana na 60°C. Posle 3 časa, LCMS analiza je pokazala daje početni materijal nestao i rastvarač je uklonjenin vacuo.Ostatak je rastvoren u DCM (60 mL) i ispran vodenim rastvorom NaHCO}
(20 mL) i fiziološkim rastvorom (20 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se proizvelo žuto ulje metil 2-(4-bromo-3-fluorofenil)acetata (500 mg, 1.774 mmol, 83.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.53(t, J=8.0 Hz, IH), 7.15 (dd, /= 9.8, 1.7 Hz, IH), 7.01 (d, /= 8.2 Hz, IH), 3.75-3.61 (m, 5H); ES-LCMSmlz248.9 (M+H).
Korak 2: Metil 2-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetat
[03211
[0322]Rastvor metil 2-(4-bromo-3-fluorofenil)acetata (0.5 g, 2.024 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(l,3,2-dioksaborolana) (0.617 g, 2.429 mmol), PdCk(dppf) (0.148 g, 0.202 mmol) i KOAc (0.397 g, 4.05 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL) je mešan na 80°C u trajanju od 16 časova. Pošto je LCMS analiza pokazala daje početni materijal nestao, rastvarač je uklonjeninvacuo.Ostatak je rastvoren u EA (60 mL) i filtriran. Filtrat je ispran sa H2O (20 mL) i fiziološkim rastvorom (20 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (PE/EA = 5/1) da bi se proizvelo žuto ulje metil 2-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetata (440 mg, 1.294 mmol, 63.9% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.62 (t,J=7.2 Hz, IH), 7.07 (d,J=8.4 Hz, IH), 6.98 (d,J=10.4 Hz, IH), 3.67 (s, 5H), 1.33 (s, 12H); ES-LCMSm/ z295.1
(M+H).
Korak 3: 2-(3-Fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetamid
[0323]
[0324]Rastvor metil 2-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetata (0.1 g, 0.340 mmol) u amonijaku (MeOH, 10 mL, 160 mmol) mešan je na 20°C u trajanju od 16 časova. Pošto je LCMS analiza pokazala daje početni materijal nestao, rastvarač je uklonjenin vacuoda bi se proizveo 2-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetamid (100 mg, 0.286 mmol, 84.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, DMSO-de) 5 7.56 (t,J=7.2 Hz, IH), 7.14-6.98 (m, 2H), 3.59 (s, 2H), 1.26 (s, 12H); ES-LCMSmlz280.1 (M+H).
Korak 4: 2-(4-(6-(Benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-3-fluorofenil)acetamid
[0325]
[0326]Rastvor 2-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetamida (100 mg, 0.358 mmol), 2-(benziloksi)-4-etoksi-5-jodopiridina (127 mg, 0.358 mmol), PdCi2(dppf)
(26.2 mg, 0.036 mmol) i Cs2C03(233 mg, 0.717 mmol) u 1,4-dioksanu (6 mL) i H20 (2 mL)
je mešan na 110°C u trajanju od 15 min. Postoje LCMS analiza pokazala daje početni materijal nestao, rastvarač je uklonjenin vacuo.Ostatak je rastvoren u EA (40 mL) i ispran sa H2O (20 mL) i fiziološkim rastvorom (20 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 1/1) da bi se proizveo 2-(4-(6-(benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-3-fluorofenil)acetamid (20 mg, 0.358 mmol, 14.8% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.87 (s, IH), 7.56-7.43 (m, 2H), 7.43-7.22 (m, 4H), 7.21-7.11 (m, 2H), 6.50 (s, IH), 5.38 (s, 2H), 4.13 (m, 2H), 3.58 (s, 2H), 1.32 (t,J=6.8 Hz, 3H); ES-LCMSmlz381.1 (M+H).
Korak 5: 2-(4-(6-(Benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-3-fluorofenil)-iV-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0327]
[0328]Rastvor 2-(4-(6-(benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-3-fluorofenil)acetamida (20 mg, 0.053 mmol), 4-bromo-2-(trifluorometil)benzonitrila (13.14 mg, 0.053 mmol), Pd2(dba)3(4.81 mg, 5.26 mmol), Xantphos (3.04 mg, 5.26 mmol) i CS2CO3(34.3 mg, 0.105 mmol) u 1,4-dioksanu (2 mL) je mešan na 120°C u trajanju od 1 časa. Pošto je LCMS analiza pokazala da je početni materijal nestao, rastvarač je uklonjenin vacuo.Ostatak je rastvoren u EA (20 mL) i ispran sa H2O (10 mL) i fiziološkim rastvorom (10 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 2/1) da bi se proizveo 2-(4-(6-(benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-3-fluorofenil)-A<r->(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)acetamid (12 mg, 0.015 mmol, 28.5% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.25 (s, IH), 8.01 (d,J =8.6 Hz, IH), 7.90 (d,J =8.8 Hz, IH), 7.84 (s, IH), 7.59-7.48 (m, IH), 7.43-7.28 (m, 5H), 7.23-7.15 (m, 2H), 6.46 (s, IH), 5.34 (s, 2H), 4.09 (m, 2H), 3.73 (s, 3H), 1.28 (t,/=6.4 Hz, 3H); ES-LCMSmlz550.1 (M+H).
Korak 6: A<L>(4-Cijano-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-3-fluorofenil) acetamid
[0329]
[0330]Rastvor 2-(4-(6-(benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-3-fluorofenil)-A<r->(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (12 mg, 0.022 mmol) i Pd/C (2.324 mg, 0.022 mmol) u MeOH (10 mL) je mešan na 20°C pod atmosferom H2u trajanju od 16 časova. Pošto je LCMS analiza pokazala daje početni materijal nestao, smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvela bela čvrsta supstanca A^-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-3-fluorofenil)acetamida (3.63 mg, 7.90 umol, 36.2% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.23 (s, IH), 8.02-7.95 (m, IH), 7.94-7.88 (m, IH), 7.59 (s, IH), 7.35-7.29 (m, IH), 7.25-7.15 (m, 2H), 6.23 (s, IH), 4.16 (m, 2H), 3.80 (s, 2H), 1.32 (t,J=7.0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 460.1
(M+H).
Primer 8: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2,6-difluorofenil)-7V-(4-(2-hidroksietoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0331]
Korak 1: (4-Bromo-2,6-difluorofenil)metanol
[0332]
[0333]U rastvor 4-bromo-2,6-dilfuorobenzojeve kiseline (5 g, 21.10 mmol) u THF (100 mL) ukapavanjem je dodat BH3*DMS (20.03 mL, 211 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je mešana na 60°C u trajanju od 16 časova. Pošto je LCMS analiza pokazala da je početni materijal nestao, smeša je ugašena sa MeOH. Rastvarač je uklonjenin vacuoda bi se proizvela bela čvrsta supstanca (4-bromo-2,6-difluorofenil)metanola (4.5 g, 20.02 mmol, 95.2% prinos), koja je korišćena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: ES-LCMS m/z 222.1 (M+l).
Korak 2: 5-Bromo-2-(bromometil)-l,3-difluorobenzen
[0334]
[0335]U rastvor (4-bromo-2,6-difluorofenil)metanola (2 g, 8.97 mmol) u DCM (80 mL) dodat je tribromofosfin (2.91 g, 10.76 mmol) na 0°C. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi. Pošto je LCMS analiza pokazala daje početni materijal nestao, smeša je isprana vodenim rastvorom NaHC03(40 mL) i fiziološkim rastvorom (30 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 5/1) da bi se proizvelo bezbojno ulje 5-bromo-2-(bromometil)-l,3-difluorobenzena (1.6 g, 5.48 mmol, 61.2% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.12 (d,J= 6.8 Hz, 2H), 4.47 (s, 2H).
Korak 3: 2-(4-Bromo-2,6-difluorofenil)acetonitril
[0336]
[0337]U rastvor 5-bromo-2-(bromometil)-l,3-difluorobenzena (1.6 g, 5.60 mmol) u DMF (20 mL) dodat je KCN (0.401 g, 6.16 mmol). Dobijena smeša je mešana na 25°C u trajanju od 16 časova. Smeša je rastvorena u H2O (50 mL) i ekstrahovana pomoću EA (50 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen kolonom silika gela (PE/EA = 3/1) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 2-(4-bromo-2,6-difluorofenil)acetonitrila (1.1 g, 2.57 mmol, 45.9% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.39-7.36 (m, 2H), 3.89 (s, 2H).
Korak 4: 2-(4-Bromo-2,6-difluorofenil)sirćetna kiselina
[0338]
[0339]Rastvor 2-(4-bromo-2,6-difluorofenil)acetonitrila (0.5 g, 2.155 mmol) u H2S04(3 mL, 56.3 mmol) i H2O (3 mL, 167 mmol) je mešan na 60°C u trajanju od 16 časova. Pošto je LCMS analiza pokazala da je početni materijal nestao, smeša je rastvorena u H2O (20 mL) i ekstrahovana pomoću EA (2 x 30 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, fdtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 3/1 do 1/1) da bi se proizvela 2-(4-bromo-2,6-difluorofenil)sirćetna kiselina (0.3 g, 0.718 mmol, 33.3% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.13-7.05 (m, 2H), 3.71 (s, 2H).
Korak 5: A^-(4-(2-(Benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-bromo-2,6-difluorofenil)acetamid
[0340]
[0341]U rastvor 2-(4-bromo-2,6-difluorofenil)sirćetne kiseline (0.3 g, 1.195 mmol) u sumpor dihloridu (5 mL, 1.195 mmol) dodat je DMF (9.25 uL, 0.120 mmol). Dobijena smeša je mešana na 60°C. Posle 2 časa, LCMS analiza je pokazala daje početni materijal nestao i rastvarač je uklonjenin vacuoda bi se dobio 2-(4-bromo-2,6-dilfuorofenil)acetil hlorid (0.35 g, 0.832 mmol, 69.6%o prinos). U rastvor 4-(2-(benziloksi) etoksi)-3-(trifluorometil)anilina (0.347 g, 1.113 mmol) i Et3N (0.225 g, 2.227 mmol) in DCM (30 mL) dodat je 2-(4-bromo-2,6-difluorofenil)acetil hlorid (0.3 g, 1.113 mmol). Dobijena smeša je mešana na 25°C. Pošto je LCMS analiza pokazala da je početni materijal nestao, smeša je isprana sa H2O (20 mL) i fiziološkim rastvorom (20 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran, koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 3/1) da bi se dobio A<r->(4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-bromo-2,6-difluorofenil)acetamid (110 mg, 0.196 mmol, 17.6% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.81 (d,J=2.8 Hz, IH), 7.68 (d,J=2.4 Hz, IH), 7.32-7.25 (m, 7H), 7.15 (d,J=8.8 Hz, IH), 4.61 (s, 2H), 4.23 (t,J=4.6 Hz, 2H), 3.84 (t,J=4.6 Hz, 2H), 3.77 (s, 2H); ES-LCMS m/z 546.0 (M+H).
Korak 6: 7<V->(4-(2-(Benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2,6-difluorofenil)acetamid
[0342]
[0343]Rastvor 3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (78 mg, 0.202 mmol), 7V-(4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-bromo-2,6-difluorofenil)acetamida (110 mg, 0.202 mmol), PdCi2(dppf)-DCM adukt (16.50 mg, 0.020 mmol) i CS2CO3(132 mg, 0.404 mmol) u 1,4-dioksanu (6 mL) i H2O (2 mL) je mešan na 110°C u trajanju od 15 min. Pošto je LCMS analiza pokazala daje početni materijal nestao, rastvarač je uklonjenin vacuo.Ostatak je rastvoren u DCM (60 mL) i ispran sa H2O (20 mL) i fiziološkim rastvorom (20 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne TLC (DCM/MeOH = 10/1) da bi se proizveo A<f->(4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil) oksi)piridin-3-il)-2,6-difluorofenil)acetamid (70 mg, 0.071 mmol, 35. 1% prinos):<*>H NMR (400 MHz, CD30D)87.97 (d,J = 2.0Hz, IH), 7.84 (s, IH), 7.71( d, J=11.2 Hz, IH), 7.46 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.39 (d,J=8.6 Hz, 2H), 7.37-7.13 (m, 8H), 6.90 (d,J=8.6 Hz, 2H), 5.39-5.34 (m, 2H), 4.61 (s, 2H), 4.27-4.20 (m, 2H), 4.18-4.10 (m, 2H), 3.86-3.82 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 1.42 (t,J=6.9 Hz, 3H), 1.19 (s, 2H); ES-LCMSm/ z723.2 (M+H).
Korak 7: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2,6-difluorofenil)-A^-(4-(2-hidroksietoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0344]
[0345]Rastvor A<r->(4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2,6-difluorofenil)acetamida (70 mg, 0.097 mmol) i Pd/C (10.31 mg, 0.097 mmol) u MeOH (10 mL) je mešan pod atmosferom H2u trajanju od 16 časova. Pošto je LCMS analiza pokazala da je početni materijal nestao, smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2,6-difluorofenil)-Ar-(4-(2-hidroksietoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (7 mg, 0.014 mmol, 14.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.83 (d,J=2.4 Hz, IH), 7.71 (d,J=6.8 Hz, IH), 7.36(d, J= 2.0 Hz,IH), 7.24(dd, J=3.0, 5.4 Hz, 3H),7.16 (d, J= 9.0 Hz,IH), 4.07-4.20 (m, 4H), 3.87 (t,J=5.0 Hz, 2H), 3.81 (s, 2H), 1.46(t, J=7.06 Hz, 3H); ES-LCMSm/ z513.1
(M+H).
Primer 9: A<f->(4-Cijano-3-(trifluoro-metil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidro-piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0346]
Korak 1: 2-(4-Bromo-2-fluorofenil)acetamid
[0347]
[0348]U rastvor 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (0.1 g, 0.429 mmol) u sumpor dihloridu (5 mL, 0.429 mmol) dodat je DMF (3.32 uL, 0.043 mmol). Dobijena smeša je mešana na 60°C. Posle 2 časa, TLC analiza (PE/EA = 1/1) je pokazala daje početni materijal nestao. Rastvarač je uklonjenin vacuoda bi se dobio 2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetil hlorid (110 mg, 0.416 mmol, 97% prinos). Rastvor 2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetil hlorida (110 mg, 0.437 mmol) u THF (5 mL) dodat je u amonijum hidroksid (10 mL, 257 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0°C. Pošto je LCMS analiza pokazala da je početni materijal nestao, rastvarač je uklonjenin vacuo.Ostatak je rastvoren u EA (50 mL) i ispran sa H2O (10 mL) i fiziološkim rastvorom (10 mL). Organski sloj je sušen i koncentrovan da bi se dobila bela čvrsta supstanca 2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetamida (100 mg, 0.280 mmol, 63. 9% prinos), koja je korišćena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.32-7.30 (m, 2H), 7.24 (t,J=8.2 Hz, IH), 3.54 (s, 2H); ES-LCMS m/z 232.0 (M+H).
Korak 2: 2-(4-(5-Etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0349]
[0350]Rastvor 3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (133 mg, 0.345 mmol), 2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetamida (80 mg, 0.345 mmol), CS2CO3(225 mg, 0.690 mmol) i PdCl2(dppf) (25.2 mg, 0.034 mmol) u 1,4-dioksanu (9 mL) i H2O (3 mL) je mešan na 110°C u trajanju od 15 min. Pošto je LCMS analiza pokazala da je početni materijal nestao, smeša je rastvorena u H2O (20 mL) i ekstrahovana pomoću EA (50 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 3/1) da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (90 mg, 0.219 mmol, 63.6% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 7.93 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.43-7.34 (m, 6H), 6.91-6.89 (m, 2H), 5.35 (s, 2H), 4.16-4.11 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 1.41 (t,J=7.0 Hz, 3H); ES-LCMSm/ z 291.1(M-120).
Korak 3: Ar-(4-Cijano-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)pirM^ 3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0351J
[0352]Rastvor 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetarnida (10 mg, 0.024 mmol), 4-bromo-2-(trifluorometil)benzonitrila (6.09 mg, 0.024 mmol), Pd2(dba)3(2.231 mg, 2.436 umol), Xantphos (1.410 mg, 2.436 umol) i Cs2C03(15.88 mg, 0.049 mmol) u 1,4-dioksanu (1 mL) mešan je na 120°C u trajanju od 1 časa. Pošto je LCMS analiza pokazala daje početni materijal nestao, rastvarač je uklonjenin vacuo.Ostatak je rastvoren u EA (20 mL) i ispran sa H20 (10 mL) i fiziološkim rastvorom (10 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 1/1) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca A<f->(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid (15 mg, 0.013 mmol, 51.4% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.23 (s, IH), 7.98 (m, IH), 7.94-7.90 (m, 2H), 7.44-7.37 (m, 6H), 6.90 (d,J=8.4 Hz, 2H), 5.32 (s, 2H), 4.16-4.11 (m, 2H), 2.85 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 1.41 (t,J=7.2 Hz, 3H); ES-LCMSm/ z460.1 (M-120).
Korak 4: A^-(4-Cijano-3-(trifluoro-metil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l ,6-dihidro-piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0353]
[0354]Rastvor A'-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil) oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (15 mg, 0.026 mmol) u HC1 (MeOH (solvat), 5 mL, 0.026 mmol) je mešana na 20°C. Postoje LCMS analiza pokazala daje početni materijal nestao, rastvarač je uklonjenin vacuo.Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizvela bela čvrsta supstanca A<r->(4-cijano-3-(trifluoro-metil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (3 mg, 6.39 umol, 24.7% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.23 (s, IH), 7.99 (s, IH), 7.91 (d,J=8.4 Hz, IH), 7.41 (m, IH), 7.37-7.34 (m, 3H), 7.29 (d,J=2.0 Hz, IH), 4.17-4.11 (m, 2H), 3.84 (s, 2H), 1.46( t, J=6.8 Hz, 3H); ES-LCMSm/ z460.1 (M+H).
Primer 10: Af-(6-(2-(Dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(4-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid dihidrohlorida
[0355]
Korak 1: 5-Nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-ol
[0356]
[0357]U ledeno hladan rastvor 3-(trifluorometil)piridin-2-ola (5 g, 30.7 mmol) u H2SO4(30 mL, 563 mmol) ukapavanjem je dodata azotna kiselina (1.507 mL, 33.7 mmol). Posle 30 min, ledeno kupatilo je uklonjeno i reakciona smeša je mešana na 25°C u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je zagrevana do 60°C u trajanju od 5 časova, hlađena i dodata u 150 g leda. Dobijeni talog je sakupljen filtracijom, ispran sa dodatnom količinom H2O i sušen na vazduhu da bi se dobila prva serija proizvoda. Sledeći prinos je dobijen posle isparavanja ishodne tečnosti do manje od 100 mL, hlađenja na ledenom kupatilu i dodavanja NaOH da bi se podesio do pH 8. Smeša je ekstrahovana sa EA (100 mL). Organski sloj je sušen i koncentrovan da bi se dobio proizvod, koji je spojen sa prvom serijom da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca 5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-ola (5 g, 24.03 mmol, 78.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.85 (d,J=3.2 Hz, IH), 8.58 (d,/=2.8 Hz, IH).
Korak 2: 2-Hloro-5-nitro-3-(trifluorometil)piridin
[0358]
[0359]U rastvor 5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-ola (1 g, 4.81 mmol) u SOCl2 (10 mL, 137 mmol) dodat je DMF (0.372 mL, 4.81 mmol). Dobijena smeša je mešana na 80°C u trajanju od 16 časova. Pošto je TLC analiza pokazala daje početni materijal nestao, rastvarač je uklonjenin vacuo.Ostatak je rastvoren u DCM (60 mL) i ispran vodenim rastvorom NaHC03(20 mL) i fiziološkim rastvorom (20 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (PE/EA = 20/1) da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca 2-hloro-5-nitro-3-(trifluorometil)piridina (0.8 g, 3.53 mmol, 73.5% prinos):
'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 9.42 (d,J=2. 8Hz, IH), 8.91 (d,J=2.4 Hz, IH).
Korak 3:N,A<L>Dimetil-2-((5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi)etanamin
[0360]
[0361]U rastvor 2-hloro-5-nitro-3-(trifluorometil)piridina (0.5, 2.207 mmol) i 2-(dimetilamino)etanola (0.393 g, 4.41 mmol) u THF (10 mL) dodat je NaH (0.177 g, 4.41 mmol) na 0°C. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi. Posle 5 časova, TLC analiza je pokazala daje početni materijal nestao. Rastvarač je uklonjenin vacuo.Ostatak je rastvoren u DCM (60 mL) i ispran sa H2O (20 mL) i fiziološkim rastvorom (20 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvodje prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (DCM/ MeOH = 20/1) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca A^A^-dimetil-2-((5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi)etanamina (0.5 g, 1.717 mmol, 78.0%> prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 9.25 (d,J=2.4 Hz, IH), 8.74 (d,J=2.4 Hz, IH), 4.73 (t,J=5.4 Hz, 2H), 2.88 (t,J=5.4 Hz, 2H), 2.37 (s, 6H); ES-LCMS m/z 280.0 (M+H).
Korak 4: 6-(2-(Dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorornetil)piridin-3-amin
[0362]
[0363]Rastvor Ar,7V-dimetil-2-((5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)oksi)etanarnina (500 mg, 1.791 mmol) i Pd/C (191 mg, 1.791 mmol) u MeOH (30 mL) mešan je na 20°C pod H2. Pošto je TLC analiza (DCM/MeOH = 20/1) pokazala daje početni materijal nestao, smeša je filtered. Filtrat je koncentrovan da bi se proizvelo ulje 6-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)piridin-3-amina (360 mg, 1.444 mmol, 81.1% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.77 (d,J=2.4 Hz, IH), 7.37 (d,J=3.2 Hz, IH), 4.43 (t,J=5.6 Hz, 2H), 2.78 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 2.35 (s, 6H); ES-LCMS m/z 250.1 (M+H).
Korak 5: 2-(4-Bromo-2-fluorofenil)-A'-(6-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluoro metil)piridin-3-il)acetamid
[0364]
[0365]U rastvor 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (100 mg, 0.429 mmol), 6-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)piridin-3-amina (107 mg, 0.429 mmol) i HATU (245 mg, 0.644 mmol) u DCM (15 mL) dodat je DIEA (0.225 mL, 1.287 mmol). Dobijena smeša je mešana na 20°C u trajanju od 16 časova. Smeša je isprana sa H2O (20 mL) i fiziološkim rastvorom (20 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne TLC (DCM/MeOH = 10/1) da bi se proizvelo braon ulje 2-(4-bromo-2-fluorofenil)-A<f->(6-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamida (130 mg, 0.273 mmol, 63.7% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.51 (d,J=2.0 Hz, IH), 8.29 (d,J=2.4 Hz, IH), 7.38-7.26 (m, 4H), 4.62 (t,J =5.4 Hz, 2H), 3.75 (s, 2H), 3.08 (t,J=5.2 Hz, 2H), 2.56 (s, 6H); ES-LCMS m/z 464.0 (M+H).
Korak 6: Ar-(6-(2-(Dimetilamino)etoksi)-5-(trilfuorometil)piridin-3-il)-2-(2-fluoro-4 tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetamid
[0366J
[0367]Rastvor 2-(4-bromo-2-fluorofenil)-Af-(6-(2-(dirnetilamino)etoksi)-5-(trifluoro metil)piridin-3-il)acetamida (0.1 g, 0.215 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(l,3,2-dioksaborolana) (0.066 g, 0.258 mmol), PdCl2(dppf) (0.016 g, 0.022 mmol) i KOAc (0.042 g, 0.431 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL) je mešan na 80°C u trajanju od 16 časova. Pošto je LCMS analiza pokazala da je početni materijal nestao, rastvarač je uklonjenin vacuo.Ostatak je prečišćen pomoću preparativne TLC (DCM/MeOH = 20/1) da bi se proizveoN-( 6-( 2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetamid (42 mg, 0.076 mmol, 35.4% prinos): 'H NMR (400 MHz,
[0369]Rastvor A^-(6-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetamida (30 mg, 0.059 mmol), 2-(benziloksi)-4-etoksi-5-jodopiridina (20.84 mg, 0.059 mmol), PdCl2(dppf) (42.9 mg, 0.059 mmol) i CS2CO3(19.12 mg, 0.059 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL) i H2O (1 mL) je mešan na 110°C u trajanju od 15 min. Pošto je LCMS analiza pokazala daje početni materijal nestao, rastvarač je uklonjenin vacuo.Ostatak je rastvoren u EA (30 mL) i ispran sa H2O (10 mL) i fiziološkim rastvorom (10 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne TLC (DCM/MeOH =10/1) da bi se proizveo 2-(4-(6-(benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(6-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamid (5 mg, 6.97 mmol, 11.9% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 8.56 (s, IH), 8.33 (d,J= 2.0 Hz, IH), 7.99 (s, IH), 7.48-7.30 (m, 8H), 6.51 (s, IH), 5.38 (s, 2H), 4.64 (t,J=5.2 Hz, 2H), 4.16 (m, 2H), 3.84 (s, 2H), 3.03 (t,J=5.2 Hz, 2H), 2.53 (s, 6H), 1.40 (t,J=7.0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 613.1 (M+H).
Korak 8: A^-(6-(2-(Dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(4-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid dihidrohlorid
[03701
[0371JRastvor 2-(4-(6-(benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A/-(6-(2-(dimetil amino)etoksi)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamida (5 mg, 8.16 umol) i Pd/C (0.869 mg, 8.16 umol) u MeOH (10 mL) je mešan na 20°C pod H2(0.016 mg, 8.16 umol) u trajanju od 16 časova. Pošto je LCMS analiza pokazala daje početni materijal potrošen, smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se dobilo bezbojno ulje A^-(6-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid dihidrohlorida (1 mg, 1.680 mmol, 20.6% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.63 (s, IH), 8.37 (s, IH), 7.62 (d,J=6.4 Hz, IH), 7.46-7.42 (m, IH), 7.31-7.28 (m, 2H), 6.21( d, J=11.8 Hz, IH), 4.23-4.18 (m, 2H), 3.86 (s, 2H), 3.69-3.67 (m, 2H), 3.33 (m, 2H), 3.04 (s, 6H), 1.42 (t,J=7.0 Hz, 3H); ES-LCMSm/ z523.2 (M+H). Primer 11: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-l,6-dihidrop imidazol-1 -il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid hidrohlorid [0372J
[0373]Suspenzija 3-(4-metil-l//-imidazol-l-il)-5-(trifluorometil)anilina (6.63 mg, 0.027 mmol) u DMF (5 mL) dodat je u rastvor 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (8 mg, 0.027 mmol) u DMF (5 mL). Dodati su HOBt (6.31 mg, 0.041 mmol), EDC (7.90 mg, 0.041 mmol) i Et3N (0.011 mL, 0.082 mmol) i smeša je mešana na 50°C u trajanju od 12 časova. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHC03. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/H?0 kao eluenti, kiseli uslovi) da bi se proizvela prljavo bela čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(3-(4-metil-l//-imidazol-1 -il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid hidrohlorida (1.60 mg, 2.90 mmol, 10.6% prinos). TLC (DCM/MeOH = 10:1, Rf=0.3): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8: 9.41 (d,/= 1.54 Hz, IH), 8.37-8.45 (m, IH), 7.96 (s, IH), 7.73-7.88 (m, 2H), 7.18-7.52 (m, 5H), 4.14 (q, /= 7.06 Hz, 2H), 3.87 (s, 2H), 2.43 (s, 3H), 1.46 (t,J=6.95 Hz, 3H); ES-LCMSm/ z515.1 (M+H).
Primer 12: A^-(6-(2-Cijanopropan-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid hidrohlorid
[0374]
Korak 1: 2-Metil-2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)propanenitril
[0375]
[0376]K2CO3(359 mg, 2.60 mmol) dodat je u rastvor 2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)acetonitrila (200 mg, 0.865 mmol) u MeCN (10 mL). Dodat je Mel (3071 mg, 21.63 mmol) i smeša je bila na 40°C u trajanju od 10 časova. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHC03. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 5:1, Rf = 0.5) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 2-metil-2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)propan nitril (129 mg, 0.498 mmol, 57.5% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8: 9.54 (d, J = 2.2 Hz, IH), 8.65 - 9.07 (m, IH), 1.92 (s, 6H); ES-LCMS m/z 260.1 (M+H).
Korak 2: 2-(5-Amino-3-(trifluorometil)piridin-2-il)-2-metilpropan nitril
[0377]
[0378]Kalaj (II) hlorid dihidrat (449 mg, 1.991 mmol) dodat je u rastvor 2-metil-2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)propan nitrila (129 mg, 0.498 mmol) u EA (15 mL). Smeša je bila na 60°C u trajanju od 4 časa. Zatim je rastvor podešen do pH = 8-9 sa 2N NaOH. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/H20 kao eluenti, bazni uslovi) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 2-(5-amino-3-(trifluorometil)piridin-2-il)-2-metilpropan nitrila (46.48 mg, 0.203 mmol, 40.7% prinos). TLC (PE/EA = 1:1, Rf= 0.3): IH NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 8.04-8.17 (m, 1 H), 7.31 (d,J =2.43 Hz, 1 H), 5.97 (s, 2 H), 1.70 (s, 6 H); ES-LCMSmlz230.1 (M+H).
Korak 3: A<L>(6-(2-Cijanopropan-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid hidrohlorid
[0379]
[0380]Suspenzija 2-(5-amino-3-(trifluorometil)piridin-2-il)-2-metilpropan nitrila (13.91 mg, 0.061 mmol) u DMF (5 mL) dodata je u rastvor 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (52 mg, 0.061 mmol) u DMF (5 mL). Dodati su HOBt (13.94 mg, 0.091 mmol), EDC (17.45 mg, 0.091 mmol) i Et3N (0.025 mL, 0.182 mmol) i smeša je bila na 50°C u trajanju od 12 časova. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHC03solution. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/H20 kao eluenti, kiseli uslovi) da bi se proizvela prijavo bela čvrsta supstanca A<L>(6-(2-cijanopropan-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3 -il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid hidrohlorida (8.62 mg, 0.016 mmol, 26. 4% prinos). TLC (DCM/MeOH = 10:1, Rf= 0.3): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8: 8.95 (d,J=2. 2 Hz, IH), 8.56 (d,J=2. 4 Hz, IH), 7.26-7.47 (m, 5H), 4.14 (q,J=7.0 Hz, 2H), 3.81-3.90 (m, 2H), 1.77-1.91 (m, 6H), 1.47 (t,J=6. 9 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 503.1 (M+H).
Primer 13: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(4-(2-hidroksietoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0381]
Korak 1: A<L>(4-(2-(Benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-bromo-2-fluorofenil) acetamid
[0382]
[0383]Suspenzija 4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)anilina (668 mg, 2.146 mmol) u DCM (35 mL) je dodata u rastvor 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (500 mg, 2.146 mmol) u DCM (35 mL). Dodati su HOBt (493 mg, 3.22 mmol), EDC (617 mg, 3.22 mmol) i Et3N (0.897 mL, 6.44 mmol) i smeša je bila na 26°C u trajanju od 3 časa. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHC03. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 10/1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod TLC (PE/EA = 5/1, Rf 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca A<L>(4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetamida (1 g, 1.900 mmol, 89.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.83-7.82 (d,J=2.8 Hz, IH), 7.33-7.24 (m, 10H), 4.83 (s, IH), 4.23-4.21 (m, 2H), 3.84-3.83 (m, 2H), 3.71-3.67 (m, 2H); ES-LCMS m/z 525.9 (M+H).
Korak 2: 7V-(4-(2-(Benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0384]
[0385]Suspenzija A^-(4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetamida (800 mg, 1.520 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL) i H2O (1 mL) dodata je u rastvor 3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (586 mg, 1.520 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL) i H2O (1 mL). Dodati su PdCl2(dppf)
(111 mg, 0.152 mmol) i CS2CO3(990 mg, 3.04 mmol) i smeša je bila na 110°C u trajanju od 30 min pod mikrotalasnom. Smeša je hlađena do sobne temperature. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHCCb. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSCu, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 1/1, Rf= 0.5) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca A<f->(4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (230 mg, 0.326 mmol, 21.5% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.95-7.94 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.90-7.89. (d, /= 2.8 Hz, IH), 7.45-7.38 (m, 6H), 7.37-7.25 (m, 6H), 6.92-6.90 (m, 2H), 5.36 (s, 2H), 4.61 (s, 2H), 4.25-4.24 (m, 2H), 4.23-4.11 (m, 2H), 3.85-3.83 (m, 2H), 3.79-3.77 (m, 2H), 1.45-1.41 (t, .7=4.8 Hz, 3H); ES-LCMSmlz705.1 (M+H).
Korak 3: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<f->(4-(2-hidroksietoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0386]
[0387]Suspenzija 7V-(4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (50 mg, 0.071 mmol) u MeOH (10 mL) dodata je u rastvor Pd/C (15.10 mg, 0.142 mmol) u MeOH (10 mL). Smeša je hidrogenizovana pod atmosferom H2na 26°C u trajanju od 2 časa. Zatim je rastvor filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/H20 kao eluenti, bazni uslovi) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<r->(4-(2-hidroksietoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida
(26.17 mg, 0.053 mmol, 74.6% prinos). TLC (DCM/MeOH = 10/1,Rf=0.4):<>>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.84-7.83 (m, IH), 7.72-7.70(d, J=8.8 Hz, IH), 7.43-7.41 (m, IH), 7.39-7.29 (m, 3H), 7.23-7.22 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.17-7.15 (d,J=9.2 Hz, IH), 4.14-4.11 (m, 4H), 3.88-3.86 (m, 2H), 3.76 (s, 2H), 1.47-1.44 (t,J=7.0 Hz, 3H); ES-LCMSmlz495.0 (M+H).
Primer 14: A^-(6-(Cijanometil)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid hidrohlorid
[0388]
Korak 1: 2-(5-Amino-3-(trifluorometil)piridin-2-il)acetonitril
[0389]
[0390]Suspenzija kalaj(II) hlorid dihidrata (58.6 mg, 0.260 mmol) u EA (60 mL) dodata je u rastvor 2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)acetonitrila (30 mg, 0.130 mmol) u EA (60 mL). Smeša je bila na 50°C u trajanju od 3 časa. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHC03. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSCU, filtriran i koncentrovan. Dobijeni 2-(5-amino-3-(trifluorometil)piridin-2-il)acetonitril (16 mg, 0.080 mmol, 61.3% prinos) je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. TLC (PE/EA= l:l,Rf=0.5): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8: 8.19-8.27 (m, IH), 7.22 (d,J=2.5 Hz, IH), 3.97 (s, 2H); ES-LCMS m/z 202.0 (M+H).
Korak 2: A<r->(6-(Cijanometil)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid hidrohlorid
[03911
[0392JSuspenzija 2-(5-amino-3-(trifluorometil)piridin-2-il)acetonitrila (16.00 mg, 0.080 mmol) u DMF (5 mL) dodata je u rastvor 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (46.33 mg, 0.080 mmol) u DMF (5 mL). Dodati su HOBt (18.27 mg, 0.119 mmol), EDC (22.87 mg, 0.119 mmol) i Et3N (0.033 mL, 0.239 mmol) i smeša je bila na 50°C u trajanju od 12 časova. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHCCh. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSCM, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/H20 kao eluenti, kiseli uslovi) da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca 7V-(6-(cijanometil)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid hidrohlorida (0.96 mg, 1.879 mmol, 2.4% prinos). TLC (DCM/MeOH =
10:1, Rf= 0.3): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5: 8.87-8.96 (m, 1 H), 8.56 (d, J = 2.21 Hz, 1 H), 7.19-7.50 (m, 5 H), 4.08-4.18 (m, 2 H), 3.85 (s, 3 H), 3.58 (s, 2 H), 1.29-1.35 (m, 3 H); ES-LCMS m/z 475.0 (M+H).
Primer 15:A^-(6-(l-Cijanoetil)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid hidrohlorid
[0393]
Korak 1: 2-(5-Nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)propan nitril
[0394]
[0395]K2CO3(359 mg, 2.60 mmol) dodat je u rastvor 2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)acetonitrila (200 mg, 0.865 mmol) u MeCN (10 mL). Dodat je Mel (3071 mg, 21.63 mmol) i smeša je mešana na 40°C u trajanju od 10 časova. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHC03. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSCU, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 5:1, Rf = 0.5) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)propan nitrila (73.6 mg, 0.300 mmol, 34.7% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8: 9.65 (d, J = 2.2 Hz, IH), 9.54 (d, J = 2.2 Hz, IH), 8.86 (d, J = 2.2 Hz, IH), 8.80 (d, J = 2.0 Hz, IH), 4.47 (q, J = 7.1 Hz, IH), 1.92 (s, 2H), 1.78 (d, J = 7.1 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 246.0 (M+H).
Korak 2: 2-(5-Amino-3-(trifluorometil)piridin-2-il)propan nitril
[0396]
[0397]Kalaj (II) hlorid dihidrat (135 mg, 0.600 mmol) dodat je u rastvor 2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)propan nitrila (73.6 mg, 0.300 mmol) u EA (15 mL). Smeša je bila na 50°C u trajanju od 3 časa. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHCCb. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Dobijeni 2-(5-amino-3-(trifluorometil)piridin-2-il)propan nitril (55 mg, 0.256 mmol, 85.0% prinos) je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. TLC (PE/EA = 5:1, Rf=0.5): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 5: 8.25 (s, IH), 7.17 (d, .7=2.2 Hz, IH), 4.15-4.28 (m, IH), 1.66 (d, .7=7.1 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 216.0 (M+H).
Korak 3: A<L>(6-(l-Cijanoetil)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid hidrohlorid
[0398]
[0399]Suspenzija 2-(5-amino-3-(trifluorometil)piridin-2-il)propan nitrila (55.6 mg, 0.258 mmol) u DMF (10 mL) dodata je u rastvor 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (125.4 mg, 0.258 mmol) u DMF (10 mL). Dodati su HATU (147 mg, 0.387 mmol) i DIEA (0.135 mL, 0.775 mmol) i smeša je bila na 50°C u trajanju od 12 časova. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHCCh. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/H20 kao eluenti, kiseli uslovi) da bi se proizvela prijavo bela čvrsta supstanca^V-(6-(l-cijanoetil)-5-
(trifluoro metil)piirdm-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid hidrohlorida (10.59 mg, 0.020 mmol, 7.8% prinos). TLC (DCM/MeOH = 10:1, Rf= 0.3): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8: 8.96 (s, IH), 8.49-8.65 (m, IH), 7.17-7.53 (m, 5H), 4.46 (q,J=7.0 Hz, IH), 4.07-4.20 (m, 2H), 3.86 (s, 2H), 1.67 (d,J=7.1 Hz, 3H), 1.37-1.53 (m, 3H); ES-LCMS m/z 489.1 (M+H).
Primer 16: A^-(4-Hloro-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0400]
[0401]Suspenzija 4-hloro-3-(trifluorometil)anilina (20.14 mg, 0.103 mmol) u DMF (8 mL) dodataje u rastvor 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (30 mg, 0.103 mmol) u DMF (8 mL). Dodati su HOBt (23.66 mg, 0.154 mmol), EDC (29.6 mg, 0.154 mmol) i Et3N (0.043 mL, 0.309 mmol) i smeša je mešana na 50°C u trajanju od 8 časova. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHC03. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/H20 kao eluenti, kiseli uslovi) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca /V-(4-hloro-3-(trifluoro metil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (11.39 mg, 0.024 mmol, 23.6% prinos). TLC (DCM/MeOH = 10:1, Rf= 0.6): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8: 8.10 (s, 1 H), 7.79 (d,J =8.82 Hz, 1H), 7.53 (d,J=8.82 Hz, 1H), 7.37-7.44 (m, 1H), 7.26-7.37 (m, 3H), 7.23 (d,J=1.98 Hz, IH), 4.12 (q,J=7.06 Hz, 2H), 3.80 (s, 2H), 1.46 (t,J=6.95 Hz, 3H); ES-LCMS mlz 469.1 (M+H).
Primer 17: A^-(4-((Dimetilamino)metil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3 -il)-2-fluorofenil)acetamid hidrohlorid
[0402]
Korak 1: 7V,7Vr-Dirnetil-4-nitro-2-(trifluorometil)benzamid
[0403]
[0404]U rastvor 4-nitro-2-(trifluorometil)benzoeve kiseline (10 g, 42.5 mmol), dimetilamina (hidrohlorid, 4.51 g, 55.3 mmol) i Et3N (17.78 mL, 128 mmol) u DCM (150 mL) mešan pod azotom na 20°C dodat je HATU (19.41 g, 51.0 mmol) u jednoj porciji. Reakciona smeša je mešana na 20°C u trajanju od 2 časa. Zatim je rastvor podeljen između DCM i zasićenog rastvora NaHC03. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSCU, filtriran i koncentrovan. Dobijeni A</>,A^-dimetil-4-nitro-2-(trifluorometil)benzamid (10 g, 25.2 mmol, 59.2% prinos) je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. TLC (PE/EA = 5:1, Rf0.6): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 8.57 (d,J=1.8 Hz, IH), 8.46 (dd,J =2.0, 8.4 Hz, IH), 7.58 (d, /= 8.4 Hz, IH), 2.79 (s, 6H); ES-LCMSmlz263.0 (M+H).
Korak 2: 4-Amino-A<r>,A<L>dimetil-2-(trifluorometil)benzamid
[0405]
[0406]U rastvor Af-Af-dimetil-4-nitro-2-(trifluorometil)benzamida (10 g, 25.2 mmol) u MeOH (100 mL) mešan pod N2na 20°C dodat je Pd/C (1 g, 9.40 mmol) u jednoj porciji. Reakciona smeša je mešana pod atmosferom H2na 20°C u trajanju od 12 časova. Smeša je filtrirana i fdtrat je koncentrovanin vacuoda bi se dobio željeni proizvod 4-amino-A<r>,A<L>dimetil-2-(trifluorometil)benzamid (8.3 g, 23.59 mmol, 94.0% prinos). TLC (DCM/MeOH = 10:1, Rf= 0.4): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7.07 (d,J=8.2 Hz, IH), 6.90 (s, IH), 6.79 (d,J=8.2 Hz, IH), 3.95 (br. s., 2H), 3.08 (s, 3H), 2.80 (s, 3H); ES-LCMSmlz233.0 (M+H).
Korak 3: 4-((Dimetilamino)metil)-3-(trifluorometil)anilin
[0407]
[0408]U rastvor 4-amino-A/,A/-dimetil-2-(trifluorometil)benzamida (8.3 g, 23.59 mmol) u THF (100 mL) mešan pod atmosferom N2 na 20°C ukapavanjem je dodat BH3»DMS (11.20 mL, 118 mmol). Reakciona smeša je mešana na 80°C u trajanju od 2 časa. U rastvor je dodat MeOH, zatim je koncentrovanin vacuoda bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (DCM/MeOH = 30:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod TLC (DCM/MeOH = 10:1, Rf= 0.4) su spojene i koncentrovane da bi se proizvelo svetio žuto ulje 4-((dimetilamino)metil)-3-(trifluorometil)anilina (4 g, 18.33 mmol, 78.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.99 (d,J=8.0 Hz, IH), 7.73 (s, IH), 7.67 (d, 8.0 Hz, IH), 4.57 (s, 2H), 2.96 (s, 6H); ES-LCMSmlz219.2 (M+H).
Korak 4: 2-(4-Bromo-2-fluorofenil)-A^-(4-((dimetilamino)metil)-3-(trifluorometil)fenii)acetamid
[0409]
[0410]U rastvor 4-((dimetilamino)metil)-3-(trifluorornetil)anilin dihidrohlorida (4 g, 13.74 mmol), 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (3.20 g, 13.74 mmol) i Et3N (9.57 mL, 68.7 mmol) u DCM (100 mL) mešan pod atmosferom N2na 20°C dodati su EDC (2.63 g, 13.74 mmol) i HOBt (2.104 g, 13.74 mmol) u jednoj porciji. Reakciona smeša je mešana na 20°C u trajanju od 2 časa. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHC03. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSO/t, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 3:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 2:1, Rf0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 2-(4-bromo-2-fluorofenil)-iV-(4-((dimetilamino)metil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (5.5 g, 9.14 mmol, 66.5% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 5 7.79 (br. s., 2H), 7.70 (d,J= 5.02 Hz, 2H), 7.30 (br. s., 2H), 3.73 (s, 2H), 3.53 (s, 2H), 2.47 (s, 6H); ES-LCMSmlz435.0 (M+H).
Korak 5:A<f->(4-((Dimetilamino)metil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0411]
[0412]U rastvor 3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (3.52 g, 9.14 mmol), 2-(4-bromo-2-fluorofenil)-7V-(4-((dimetilamino)metil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (5.5 g, 9.14 mmol) i CS2CO3(7.45 g, 22.85 mmol) u 1,4-dioksanu (30 mL) i H2O (10.00 mL) mešan pod atmosferom N2na 20°C dodat je PdCi2(dppf)
(0.334 g, 0.457 mmol) u jednoj porciji. Reakciona posuda je zagrevana u 110°C u trajanju od 3 časa. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i H2O. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSCUfiltriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 1:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod TLC (PE/EA = 1:1, Rf0.3) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela bela čvrsta supstanca A'-(4-((dimetilamino)metil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-
fluorofenil)acetamida (5.8 g, 7.30 mmol, 80.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7.80-7.98 (m, 3H), 7.67 (d,J=8.6 Hz, IH), 7.37-7.47 (m, 3H), 7.26-7.35 (m, 2H), 7.20 (d, /= 2.0 Hz, IH), 6.89 (d, /= 8.6 Hz, 2H), 5.44 (s, 2H), 4.13 (q, /= 7.0 Hz, 2H), 3.75-3.86 (m, 5H), 3.70 (br. s., 2H), 2.35 (br. s., 6H), 1.46 (t,J=7.0 Hz, 3H) ESLCMSmlz612.2 (M+H).
Korak 6: A^-(4-((Dimetilamino)metil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3 -il)-2-fluorofenil)acetamid hidrohlorid
[0413]
[0414]U rastvor A<r->(4-((dimetilamino)metil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (5.8 g, 7.30 mmol) u DCM (50 mL) dodat je HC1 (1,4-dioksan, 5 mL, 20.00 mmol) na sobnoj temperaturu. Rastvor je mešan na 20°C u trajanju od 30 min. Rastvor je koncentrovanin vacuoda bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/HiO kao eluenti, kiseli uslovi) da bi se proizvela prijavo bela čvrsta supstanca A<r->(4-((dimetilamino)metil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid hidrohlorida (1.5 g, 2.78 mmol, 38.1% prinos). TLC (DCM/MeOH = 5:1, Rf= 0.3): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.21 (d, /= 1.4 Hz, IH), 8.04 (d,J= 8.4 Hz, IH), 7.75 (d,J=8.4 Hz, IH), 7.36-7.53 (m, 5H), 4.50 (s, 2H), 4.20 (q,J=7.0 Hz, 2H), 3.87 (s, 2H), 2.95 (s, 6H), 1.50 (t,J=7.0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 492.2 (M+H).
Primer 18: A<r->(3,4-Dihlorofenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0415]
Korak 1: 2-(4-Brorno-2-fluorofenil)-AL(3,4-dihlorofenil)acetamid
[0416]
[0417]U rastvor 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (144 mg, 0.617 mmol), 3,4-dihloroanilina (100 mg, 0.617 mmol) i HATU (704 mg, 1.852 mmol) u DCM (20 mL) ukapavanjem je dodat Et3N (0.258 mL, 1.852 mmol). Smeša je mešana na 20°C pod atmosferom N2u trajanju od 3 časa. Pošto je LCMS analiza pokazala daje početni materijal nestao, rastvarač je uklonjenin vacuo.Zatim je sirovi proizvod rastvoren u DCM i ispran sa H2O i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je isparavan do sušenja da bi se dobio sirovi proizvod koji je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 100/1 do 8/1) da bi se dobio sirovi proizvod 2-(4-bromo-2-fluorofenil)-A<r->(3,4-dihlorofenil)acetamida (190 mg, 0.419 mmol, 67.8% prinos): 'H NMR: (400 MHz, CD3OD) 5 10.25 (br. s, IH), 7.89 (s, IH), 7.44 (s, 2H), 7.28-7.37 (m, 3H), 3.74 (s, 2H); ES-LCMS: m/z 377.9 (M+H).
Korak 2: A<f->(3,4-Dihlorofenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil) acetamid
104181
[0419]U rastvor 2-(4-bromo-2-fluorofenil)-iV-(3,4-dihlorofenil)acetamida (60 mg, 0.159 mmol), 3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (61.3 mg, 0.159 mmol) i Cs2C03(156 mg, 0.477 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL) i H20 (1 mL) dodat je PdCl2(dppf) (11.64 mg, 0.016 mmol) u jednoj porciji. Smeša je mešana na 130°C u mikrotalasnoj u trajanju od 30 min. Pošto je LCMS analiza pokazala da je početni materijal nestao, smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan i isparavan do sušenja da bi se dobio sirovi proizvod koji je rastvoren u DCM i ispran sa H20 i fiziološkim rastvorom. Zatim je sirovi proizvod prečišćen pomoću preparativne TLC (DCM/MeOH = 40/1) da bi se dobio čisti proizvod A<L>(3,4-dihlorofenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (60.0 mg, 0.084 mmol, 52.7% prinos): 'H NMR: (400 MHz, CD3OD) 8 7.95 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.92 (d,J= 1.8 Hz, IH), 7.45 (s, 3H), 7.43-7.37 (m, 5H), 6.91 (d,J=8.6 Hz, 2H), 5.37 (s, 2H), 4.15 (m, 3H), 3.79 (s, 4H), 1.42 (t,J=7.0 Hz, 3H); ES-LCMS:m/ z435 (M-120).
Korak 3: A<L>(3,4-Dihlorofenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil) acetamid
[0420]
[0421]Rastvor 7V-(3,4-dihlorofenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (60 mg, 0.108 mmol) u HC1 (MeOH, 27.0 ul, 0.108 mmol) je mešan na 20°C u trajanju od 1 časa. Pošto je LCMS analiza pokazala da je početni materijal nestao, rastvarač je uklonjenin vacuo.Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se dobio čist proizvodAr-(3,4-dihlorofenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid (14.72 mg, 0.034 mmol, 31.3% prinos): 'H NMR: (400 MHz, CD3OD) 5 7.92 (s, IH), 7.45 (s, 2H), 7.41 (d,J=7.6 Hz, IH), 7.38-7.32 (m, 3H), 7.28-7.25 (m, IH), 7.27 (d,J=2.0 Hz, IH), 4.14 (m, 2H), 3.79 (s, 2H), 1.47 (t,J=7.0 Hz, 3H); ES-LCMS:mlz435.0
(M+H).
Primer 19: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(5-(l, 1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-il)acetamid
[0422]
Korak 1: 2-(4-Bromo-2-fluorofenil)-A<L>(5-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il) izoksazol-3-il)acetamid
[0423]
[0424]U smešu 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (100 mg, 0.429 mmol) u DCM (50 mL) dodat je 5-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-amin (92 mg, 0.472 mmol), HATU (245 mg, 0.644 mmol) i Et3N (0.179 mL, 1.287 mmol). Zatim je smeša mešana na 25°C u trajanju od 12 časova. Smeša je koncentrovana i sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 2:1, Rf= 0.4) da bi se proizvelo žuto ulje 2-(4-bromo-2-fluorofenil)-A<L>(5-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-il)acetamida (50 mg, 0.109 mmol, 25.4% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8: 8.12 (s., IH) 7.35-7.27 (m, 2H) 7.23-7.18 (m, IH) 6.95 (s, IH) 3.72 (s, 2H) 1.55 (s, 6H); ES-LCMS m/z 411 (M+2).
Korak 2: 2-(4-(5-Etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<f->(5-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-il)acetamid
[0425]
[0426]U smešu 3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-l ,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (60 mg, 0.156 mmol), 2-(4-bromo-2-fiuorofenil)-7V-(5-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-il)acetamida (63.7 mg, 0.156 mmol) u H2O (1 mL) i 1,4-dioksanu (3 mL) dodat je CS2CO3(101 mg, 0.311 mmol) i PdCl2(dppf) (11.40 mg, 0.016 mmol) pod atmosferom N2. Zatim je smeša mešana i zračena u mikrotalasnoj peći na 120°C u trajanju od 30 min. Smeša je koncentrovana i ekstrahovana sa EA. Spojene organske materije su koncentrovane i sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 2:1, Rf= 0.5) da bi se dobila žuta čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(5-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-il)acetamida (20 mg, 0.031 mmol, 19.9% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8: 7.97 (d, / = 2.0 Hz, IH), 7.47 (d, / = 2.0 Hz, IH), 7.46-7.37 (m, 5H), 6.97-7.89 (m, 3H), 5.39 (s, 2H), 4.17 (q,J=6.8 Hz, 2H), 3.85 (s, 2H), 3.83-3.79 (m, 3H), 1.60 (s, 6H), 1.45 (t,J=7.0 Hz, 3H); ES-LCMSmlz588 (M+l).
Korak 3: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<r->(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3 -(trifluorometil)fenil) acetamid
[0427]
[04281Smeša 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)<p>iridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(5-(lJ,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazo1-3-i1)acetamida (20 mg, 0.034 mmol) i HC1 (4 M u dioksanu, 20 mL) je mešana na 25°C u trajanju od 2 časa. Smeša je koncentrovana i sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/EkO kao eluenti, kiseli uslovi) da bi se dobila bela čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<r->
(5-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-il)acetamida (7.9 mg, 0.017 mmol, 49.7% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8: 7.42-7.36 (m, IH), 7.35 (s, 2H), 7.29 (d,J=2.2 Hz, IH), 7.22 (d,J=2.2 Hz, IH), 6.87 (s, IH), 4.12 (q,J=7.0 Hz, 2H), 3.81 (s, 2H), 1.56 (s, 6H), 1.46 (t,J=6.8 Hz, 3H); ES-LCMSmlz468 (M+l).
Primer 20: 2-(4-(4-Etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(4-(2-hidroksietoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0429]
Korak 1: A<L>(4-(2-(Benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-bromo-2-fluorofenil) acetamid[04301
[0431]Suspenzija 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (600 mg, 2.57 mmol), EDC (592 mg, 3.09 mmol), HOBt (473 mg, 3.09 mmol), Et3N (1.056 mL, 7.72 mmol) u DCM (10 mL) je mešana u trajanju od 2 časa na sobnoj temperaturi . Smeša je ekstrahovana sa DCM (2 x 50 mL). Organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne TLC da bi se proizveoN-( 4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetamid (450 mg, 0.496 mmol, 19.3% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.83-7.82(d, .7=2.4Hz, IH), 7.71-7.68 (dd,J=8.8, 2.4 Hz, IH), 7.34-7.29 (m, IH), 7.15-7.13 (d,J=8.8 Hz, IH), 4.60 (s, 2H), 4.23 (t,J= 4.8 Hz, 2H) 3.83 (t,J=4.6 Hz, 2H), 3.71 (s, 2H); ES-LCMS m/z 526 (M+H).
Korak 2: 7V-(4-(2-(Benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetamid
[0432]
[0433]Suspenzija A^-(4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-bromo-2-fluorofenil)acetamida (300 mg, 0.570 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(l,3,2-dioksaborolana) (145 mg, 0.570 mmol), PdCl2(dppf) (41.7 mg, 0.057 mmol), KOAc (112 mg, 1.140 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL) zagrevana je do 100°C u trajanju od 120 min pod atmosferom N2. Smeša je koncentrovana da bi se dobio ostatak koji je ekstrahovan sa DCM (20 mL x 2). Zatim je smeša koncentrovana da bi se dobio ostatak koji je ekstrahovan sa DCM (20 mL x 2). Organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne TLC (EA/PE =1:1, Rf= 0.5) da bi se proizveo A<f->(4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetamid (300 mg, 0.314 mmol, 55.1% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.84 (d, .7=2.6 Hz, IH), 7.70 (dd,J=9.0, 2.4 Hz, IH), 7.51 (d,J= 7.5 Hz, IH), 7.42-7.21 (m, 7H), 7.14 (d, .7=9.0 Hz, IH), 4.29-4.19 (m, 2H), 3.89-3.82 (m, 2H), 3.76 (s, 2H), 1.33 (s, 12H); ES-LCMSmlz721 (M+H).
Korak 3: A<f->(4-(2-(Benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-((5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksipiridin-3-il)oksi)-2-fluorofenil)acetamid
[0434]
[0435]Suspenzija 2-(benziloksi)-4-etoksi-5-jodopiridina (80 mg, 0.225 mmol), 7V-(4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetamida (129 mg, 0.225 mmol), PdCl2(dppf) (16.48 mg, 0.023 mmol), CS2CO3(73.4 mg, 0.225 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL) i H2O (1 mL) je zagrevana do 100°C u trajanju od 20 min pod atmosferom N2u mikrotalasnoj. Zatim je smeša koncentrovana da bi se dobio ostatak koji je ekstrahovan sa DCM (20 mL x 2). Organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne TLC (EA/PE = 1:1, Rf= 0.5) da bi se proizveo 2-(4-(6-(benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-2-fluorofenil)-N-(4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid (60 mg, 0.054 mmol, 24.1% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.95 (s., IH), 7.85-7.84 (d,J=2.4 Hz, IH), 7.74-7.71 (dd,J=8.8, 2.4 Hz, IH), 7.44-7.42 (m, 2H), 7.38-7.24 (m, 10H), 7.16-7.14(d, J=8.8 Hz, IH), 6.48 (s, IH), 5.35 (s, 2H), 4.61 (s, 2H), 4.23 (t,J=4.6 Hz, 2H), 4.15-4.10 (m, 3H), 3.84 (t,J=4.6 Hz, 2H), 3.77 (s, 2H), 3.66-3.65 (m, IH), 3.55-3.54 (m, IH), 1.36 (t, .7=7.2 Hz, 3H); ES-LCMSmlz721 (M+H).
Korak4: 2-(4-(4-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(4-(2-hidroksietoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0436]
[0437]Smeša 2<4-(6-(benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<f->(4-(2-(benziloksi)etoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (60 mg, 0.089 mmol), Pd/C (9.46 mg, 0.089 mmol) u MeOH (10 mL) je mešana u trajanju od 16 časova pod atmosferom H2na 25°C. Zatim je smeša fdtrirana i filtrat je koncentrovan da bi se dobio ostatak koji je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizveo 2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<L>(4-(2-hidroksietoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid (17.76 mg, 0.034 mmol, 38.8% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.83 (d,J=2.4 Hz., IH), 7.73-7.70 (m, IH), 7.35-7.29 (m, 2H), 7.42 (s, IH), 7.37 (d,J=8.0 Hz, IH), 7.23-7.21 (m, 2H), 7.17-7.14 (d, / = 4.6 Hz, IH), 6.03 (s, IH), 4.13-4.11 (m, 4H), 3.87 (t,J= 5.0 Hz, 2H), 3.76 (s, 2H), 1.37 (t, J=7.0 Hz, 3H); ES-LCMSmlz495 (M+H).
Primer 21: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(4-((4-etilpiperazin-1 -il)metil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid, dihidrohlorid
[0438]
Korak 1: 2-(4-Bromo-2-fluorofenil)-A'-(4-((4-etilpiperazin-l-il)metil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0439]
[0440]Suspenzija 4-((4-etilpiperazin-l-il)metil)-3-(trifiuorometil)anilina (247 mg, 0.858 mmol) u DCM (35 mL) dodata je u rastvor 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (200 mg, 0.858 mmol) u DCM (35 mL). Dodati su HOBt (197 mg, 1.287 mmol), EDC (247 mg, 1.287 mmol) i Et3N (0.359 mL, 2.57 mmol) i smeša je mešana na 26°C u trajanju od 3 časa. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHC03. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 10/1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod TLC (PE/EA = 5/1, Rf= 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 2-(4-bromo-2-fluorofenil)-A<L>(4-((4-etilpiperazin-l-il)metil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (413 mg, 0.822 mmol, 96.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.98-7.91 (m, IH), 7.79-7.67 (m, 2H), 7.40-7.27 (m, 3H), 3.74 (s, 2H), 3.61 (s, 2H), 2.58-2.39 (m, 11H), 1.09 (s, 4H); ES-LCMS m/z 502.0 (M+H).
Korak 2: 2-(4-(5-Etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(4-((4-etilpiperazin-1 -il)metil)-3 -(trifluorometil)fenil)acetamid
[0441]
[0442]Suspenzija 2-(4-bromo-2-fluorofenil)-<A>L(4-((4-etilpiperazin-l-il)metil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (413 mg, 0.822 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL) i H2O (1 mL) dodat je u rastvor 3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (317 mg, 0.822 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL) i H2O (1 mL). Dodati su PdCl2(dppf) (60.2 mg, 0.082 mmol) i CS2CO3(536 mg, 1.644 mmol) i smeša je bila na 110°C u trajanju od 30 min u mikrotalasnoj. Smeša je hlađena do sobne temperature. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHC03. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 1/1, Rf= 0.5) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(4-((4-etilpiperazin-l-il)metil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (405 mg, 0.595 mmol, 72.4% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.02-7.87 (m, 2H), 7.82-7.64 (m, 2H), 7.60-7.30 (m, 6H), 6.98-6.80 (m, 2H), 5.34 (s, 2H), 4.18-4.04 (m, 2H), 3.84-3.72 (m, 4H), 3.68-3.57 (m, 2H), 2.91-2.38 (m, 10H), 1.47-1.31 (m, 3H), 1.14 (s, 3H); ES-LCMSmlz681.3 (M+H).
Korak 3: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<r->(4-((4-etilpiperazin-1 -il)metil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid dihidrohlorid
[0443]
[0444]Suspenzija 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<r->(4-((4-etilpiperazin-l-il)metil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (400 mg, 0.588 mmol) u MeOH (10 mL) dodata je u rastvor Pd/C (62.5 mg, 0.588 mmol) u MeOH (10 mL). Smeša je hidrogenizovana na 26°C u trajanju od 2 časa. Zatim je rastvor filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/H20 kao eluenti, kiseli uslovi) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<L>(4-((4-etilpiperazin-l-il)metil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida, dihidrohlorida (40.71 mg, 0.064 mmol, 10.9% prinos). TLC (DCM/MeOH = 10/1, Rf= 0.4): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.22 (d,J=1.8 Hz, IH), 8.05 (d,J=8.6 Hz, IH), 7.95 (dd,J=8.6, 1.8 Hz, IH), 7.75-7.61 (m, 2H), 7.55-7.37 (m, 3H), 4.63-4.50 (m, 2H), 4.27 (q,J=6.9 Hz, 2H), 3.96-3.53 (m, 10H), 3.37-3.31 (m, 2H), 1.56-1.45 (m, 3H), 1.39 (t,J=7.3 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 561.1 (M+H).
Primer 22: A<f->(2,5-Difluorofenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil) acetamid
[0445J
i i
Korak 1: 2,5-Difluoroanilin
[0446]
[0447]U rastvor l,4-difiuoro-2-nitrobenzena (500 mg, 3.14 mmol) u MeOH (20 mL) dodat je Pd/C (66.9 mg, 0.629 mmol) u porcijama. Zatim je smeša mešana pod atmosferom H2na 20°C u trajanju od 1 časa. Pošto je TLC (PE/EA=3/1) analiza pokazala daje početni materijal nestao, smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan da bi se dobio željeni proizvod 2,5-difluoroanilin (338 mg, 2.61 mmol, 83% prinos). 'H NMR: (400 MHz, CDCh) 8 6.94-6.88 (m, IH), 6.50-6.46 (m, IH), 6.40-6.31 (m, IH), 3.82 (br. s., 2H).
Korak 2: 2-(4-Bromo-2-fluorofenil)-7V-(2,5-difluorofenil)acetamid
[0448]
[0449]U rastvor 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (180 mg, 0.775 mmol) i 2,5-difluoroanilina (100 mg, 0.775 mmol) u DCM (20 mL) dodat je Et3N (0.324 mL, 2.324 mmol) i HATU (884 mg, 2.324 mmol) u porcijama. Zatim je smeša mešana na 20°C u trajanju od 3 časa. Postoje LCMS analiza pokazala daje početni materijal nestao, rastvarač je uklonjenin vacuo.Sirovi proizvod je rastvoren u DCM i ispran sa H2O i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je isparavan do sušenja. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela (PE/EA 100/1 do 10/1) da bi se dobio 2-(4-bromo-2-fluorofenil)-A^-(2,5-difluorofenil)acetamid (103 mg, 0.276 mmol, 35.6% prinos). 'H NMR: (400 MHz, CD3OD) 8 7.87-7.82 (m, IH), 7.39-7.26 (m, 3H), 7.20-7.13 (m, IH), 6.90-6.82 (m, IH), 3.83 (s, 2H); ES-LCMS: m/z 343.9 (M+H).
Korak 3: A<L>(2,5-Difluorofenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil) acetamid
[0450]
[0451]U rastvor 2-(4-bromo-2-fluorofenil)-7V-(2,5-difluorofenil)acetamida (40 mg, 0.116 mmol), 3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (44.8 mg, 0.116 mmol) i Cs2C03(114 mg, 0.349 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL) i H20 (1 mL) dodat je PdCl2(dppf) (8.51 mg, 0.012 mmol) u jednoj porciji. Zatim je smeša mešana na 110°C u mikrotalasnoj u trajanju od 30 min. Pošto je LCMS analiza pokazala daje početni materijal nestao, smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan i isparavan do sušenja da bi se dobio sirovi proizvod koji je rastvoren u DCM i ispran sa H20 i fiziološkim rastvorom. Zatim je sirovi proizvod prečišćen pomoću preparativne TLC da bi se dobio A<L>(2,5-difluorofenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid (45.0 mg, 0.054 mmol, 46.1% prinos). 'H NMR: (400 MHz, CD3OD) 8 7.96 (d, 7=2.0 Hz, IH), 7.88 (d, 7=9.6 Hz, IH), 7.46 (d, 7=2.0 Hz, IH), 7.36-7.44 (m, 5H), 7.18 (m, IH), 6.91 (d, 7=8.6 Hz, 2H), 6.87 (br. s., IH), 5.37 (s, 2H), 4.15-4.13 (m, 2H), 3.88 (s, 2H), 3.79 (s, 3H), 1.43 (t, 7=7.0 Hz, 3H); ES-LCMS:mlz403.0 (M-120+H).
Korak 4: A<L>(2,5-Difluorofenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil) acetamid
[0452]
[0453]Rastvor 7V-(2,5-difluorofenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-i0 fluorofenil)acetamida (45 mg, 0.086 mmol) u HC1 (MeOH (solvat), 64.6 ul, 0.258 mmol) je mešan na 20°C u trajanju od 1 časa. Pošto je LCMS analiza pokazala daje početni materijal nestao, rastvarač je uklonjenin vacuoda bi se dobio sirovi proizvod koji je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se dobio čisti proizvod A<L>(2,5-difluorofenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid (5.83 mg, 0.014 mmol, 16.8% prinos): 'H NMR: (400 MHz, CD3OD) 8 7.86 (široki s, IH), 7.43-7.37 (m, 5H), 7.20-7.13 (m, IH), 6.86 (t, 7=8.4 Hz, IH), 4.20-4.15 (m, 2H), 3.88 (s, 2H), 1.48 (t, .7=7.0 Hz, 3H); ES-LCMS:mJz403.0
(M+H).
[0454]Primeri 23-26 (Tabela 1) su pripremljeni upotrebom postupaka analognih onima opisanim u Primeru 17, počevši od 3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (intermedijera 1), 2-(4-bromo-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (Intermedijer 4), i različitih anilina.
Primer 27: 2-(4-(4-Etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-^-(3-(l, 1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamid
[0455]
Korak 1: 2-Hloro-4-etoksipiridin
[0456]
[0457]U smešu 2-hloro-4-nitropiridina (20 g, 126 mmol) u THF (200 mL) dodat je natrijum etoksid (25.8 g, 378 mmol) u porcijama. Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 10 časova. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 5:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 5:1, Rf= 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 2-hloro-4-etoksipiridina (13 g, 71.9 mmol, 57% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 6 8.18 (d,J=5.2 Hz, IH), 6.82 (d,J=2.4 Hz, IH), 6.73 (dd,J=2.0, 6.0 Hz, IH), 4.09 (q, J=7.2 Hz, 2H), 1.44 (t,J=7.2 Hz, 3H); ES-LCMSmlz158 (M+H).
Korak 2: 5-Bromo-2-hloro-4-etoksipiridin
[0458]
[0459]U smešu 2-hloro-4-etoksipiridina (13 g, 82 mmol) i H2SO4(40 mL, 750 mmol) dodat je NBS (17.62 g, 99 mmol). Zatim je smeša mešana na 60°C u trajanju od 10 časova. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je sipana u hladnu vodu (300 mL). Smeša je ekstrahovan sa EA (200 mL x 2). Spojeni organski sloj je ispran zasićenim rastvorom NaHCCh (200 mL x2) i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 15:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod TLC (PE/EA = 5:1, Rf = 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca 5-bromo-2-hloro-4-etoksipiridina (8.5 g, 26.3 mmol, 32% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 8.32 (s, IH), 6.79 (s, IH), 4.16 (q,J=6.8 Hz, 2H), 1.50( t, J=6.8 Hz, 3H); ES-LCMSmlz238 (M+3).
Korak 3: 5-Bromo-4-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)piridin
[0460]
[0461]Smeša 5-bromo-2-hloro-4-etoksipiridina (8 g, 33.8 mmol), CS2CO3(33.1 g, 101 mmol) i (4-metoksifenil)metanola (5.37 g, 38.9 mmol) u DMF (100 mL) mešana je na 120°C u trajanju od 12 časova. Smeša je zatim koncentrovana. Ostatak je dodat u DCM (150 mL). Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 8:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod TLC (PE/EA = 5:1, Rf = 0.4) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca 5-bromo-4-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)piridina (5 g, 12.57 mmol, 37% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8: 8.05 (s, IH), 7.32 (d,J=8.8 Hz, IH), 6.84 (d,J=8.4 Hz, IH), 6.17 (s, IH), 5.18 (s, 2H), 4.02 (q,J=6.8 Hz, 2H), 3.74 (s, 3H), 1.40 (t,J=7.2 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 338 (M+H).
Korak 4: 2-(2-Fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-A^-(3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamid
[0462]
[0463]U smešu 4,4,4',4',5,5,5',5'-octametil-2,2'-bi(l,3,2-dioksaborolana) (279 mg, 1.100 mmol) i 2-(4-bromo-2-fluorofenii)-AL(3-(l, 1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamida (300 mg, 0.733 mmol) u 1,4-dioksanu (50 mL) dodat je KOAc (216 mg, 2.2 mmol) i PdCh(dppf) (26.8 mg, 0.037 mmol) pod N?. Zatim je smeša mešana na 100°C u trajanju od 5 časova. Smeša je filtrirana i fdtrat je koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 3:1, Rf=0.5) da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca 2-(2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-7V-(3-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamida (230 mg, 0.403 mmol, 55% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 8.06 (s, IH), 7.63-7.48 (m, 2H), 7.35-7.29 (m, IH), 6.43 (s, IH), 3.84-3.76 (m, 2H), 1.53-1.49 (m, 6H), 1.34 (s, 9H); ES-LCMSmlz:457 (M+H).
Korak 5: 2-(4-(4-Etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3 -il)-2-fIuorofenil)-7V-(3 -(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamid
[0464]
[0465]U smešu 5-bromo-4-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)piridina (74.1 mg, 0.219 mmol) i 2-(2-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-7V-(3-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamida (100 mg, 0.219 mmol) u vodi (1 mL) i 1,4-dioksanu (3 mL) dodat je Cs2C03(143 mg, 0.438 mmol) i PdCl2(dppf) (16.04 mg, 0.022 mmol) pod N2. Zatim je smeša mešana i zračena u mikrotalasnoj peći na 120°C u trajanju od 20 min. Smeša je zatim koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 2:1, Rf= 0.4) da bi se proizvela prijavo bela čvrsta supstanca 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(3 -(1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamida (70 mg, 0.071 mmol, 33% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.40-7.34 (m, 2H), 7.30-7.17 (m, 4H), 6.92-6.88 (m, 2H), 6.45 (s, IH), 6.38( d, J=4.0 Hz, IH), 5.27 (s, 2H), 4.13-4.10 (m, 2H), 3.83-3.82 (m, 2H), 3.79-3.77 (m, 3H), 1.53 (s, 6H), 1.37 (t, / = 6.8 Hz, 3H); ES-LCMSm/ z:588 (M+H).
Korak 6: 2-(4-(4-Etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-AL(3-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamid
[0466]
[0467]Smeša 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamida (70 mg, 0.119 mmol) i TFA (10%> u DCM, 50 mL) je mešana na 25°C u trajanju od 2 časa. Smeša je koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/H20 kao eluenti, bazni uslovi) da bi se dobila bela čvrsta supstanca 2-(4-(4-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-iV-(3-( 1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamida (24.61 mg, 0.051 mmol, 43% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.39-7.32 (m, IH), 7.26-7.18 (m, IH), 6.37 (s, IH), 5.99 (s, IH), 4.10 (q,/=6.8 Hz, 2H), 3.82 (s, 2H), 1.53 (s, 6H), 1.37 (t,J=7. 2 Hz, 3H); ES-LCMS m/z: 468
(M+H).
Primer 28: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(3-(l, 1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamid
[0468]
Korak 1: 3-Bromo-5-etoksipiridin
[0469]
[0470]Rastvor 5-bromopiridin-3-ola (70 g, 402 mmol), K2CO3(111 g, 805 mmol), jodoetana (69.0 g, 443 mmol) u DMF (900 mL) je mešan u trajanju od 16 časova na 25°C. Zatim je smeša koncentrovana i dodata je voda (100 mL), smeša je ekstrahovana sa DCM (400 mL x 2), spojena organska faza je sušena preko Na2SC>4, filtrirana i koncentrovana da bi se dobio 3-bromo-5-etoksipiridin (53 g, 218 mmol, 54% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.19-8.17 (m, 2H), 7.60-7.59 (m, IH), 4.13-4.07 (m, 2H), 1.40 (t,J=7.0 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 202 (M+H).
Korak 2: 3-Bromo-5-etoksipiridin-1-oksid
[0471]
[0472]U rastvor 3-bromo-5-etoksipiridina (53 g, 262 mmol) u DCM (600 mL) na 0°C lagano je dodavanm-CPBA(67.9 g, 393 mmol) tokom 30 min. Pošto je dobijen rastvor mešan u trajanju od 15 časova, smeša je isprana rastvorom Na2S203 i ekstrahovana sa DCM (600 mL x 2). Spojeni organski sloj je ispran zasićenim NaHCC»3 (300 mL), fiziološkim rastvorom (300 mL), sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se dobio 3-bromo-5-etoksipiridin-l-oksid (40 g, 165 mmol, 63% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 8.19-8.18 (m, IH), 8.08-8.07 (m, IH), 7.50-7.49 (m, IH), 4.17-4.15 (d,J=8.8 Hz, 2H), 1.43 (t,J=7.0 Hz, 3H); ES-LCMS m/ z 217 (M+H).
Korak 3: 5-Bromo-2-hloro-3-etoksipiridin
[0473]
[0474]U rastvor 3-bromo-5-etoksipiridin-1-oksida (40 g, 183 mmol) u DCM (200 mL) na 0°C lagano je dodavan POCI3(159 mL, 1701 mmol) tokom 30 min. Zatim je dobijeni rastvor zagrevan do 45°C i mešan u trajanju od 15 časova. Smeša je koncentrovana i podešen je pH = 9-10 sa 10% rastvorom NaOH, ekstrahovana sa DCM (300 mL x 2), sušena preko Na2S04, filtrirana i koncentrovana da bi se dobio sirovi proizvod koji je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela (10% EA:90% PE, 800 g kolone silika gela). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod TLC (EA : PE = 1:5, Rf= 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvelo ulje 5-bromo-2-hloro-3-etoksipiridina (30 g, 60.9 mmol, 33% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 6 8.00-7.99 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.65-7.64 (d,J=2.0 Hz, IH), 4.17-4.12 (m, 2H), 1.44 (t,J=7.0 Hz, 2H); ES-LCMS m/z 235 (M+H).
Korak 4: 5-Bromo-3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)piridin
[0475]
[0476]U smešu (4-metoksifenil)metanola (16.71 g, 121 mmol) u DMF (300 mL) ukapavanjem je dodat NaH (3.96 g, 165 mmol) na 0°C. Pošto je smeša mešana u trajanju od 30 min, 5-bromo-2-hloro-3-etoksipiridin (26 g, 110 mmol) u DMF (100 mL) je dodat u gore navedenu smešu i smeša je mešana u trajanju od 12 časova na 80-90°C. Smeša je ugašena pomoću H2O (20 mL), ekstrahovana sa DCM (400 mL x 2), sušena preko Na2S04, filtrirana i koncentrovana da bi se dobio ostatak koji je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (10% EA: 90% PE, 360 g kolone silika gela). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (EA : PE = 1:5, Rf = 0.5) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 5-bromo-3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)piridina (36 g, 74.5 mmol, 68% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.71 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.36-7.31 (m, 3H), 6.89-6.87 (m, 2H), 5.27 (s, 2H), 4.05-4.00 (m, 2H) 3.77 (s, 3H), 2.37 (d,J=7.0 Hz, 3H); ES-LCMSmlz338 (M+H).
Korak 5: 3-Etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin
[0477]
[0478]U rastvor 5-bromo-3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)piridina (10 g, 29.6 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(l,3,2-dioksaborolana) (8.26 g, 32.5 mmol) i KOAc (7.25 g, 73.9 mmol) u 1,4-dioksanu (250 mL) mešan pod azotom na 20°C dodat je PdCi2(dppf) (1.082 g, 1.478 mmol) u jednoj porciji. Reakciona smeša je mešana na 100°C u trajanju od 3 časa. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovanin vacuoda bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 10:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA =10:1, Rf= 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 3-etoksi-2-((4-metoksi benzil)oksi)-5-
(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (9.2 g, 23.88 mmol, 81% prinos):<!>HNMR (400 MHz, CDCh) 8 8.10 (s, IH), 7.42 (d,J=8.8 Hz, 2H), 7.33 (s, IH), 6.88-6.85 (m, 2H), 5.45 (s, 2H), 4.11-4.06 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 1.43 (t, /= 7.0 Hz, 3H),1.33 (s, 12H); ES-LCMS m/z 386.0 (M+H).
Korak 6: 2-(4-(5-Etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamid
[0479]
[0480]U smešu 3-etoksi-2-((4-metoksibenzil)oksi)-5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (200 mg, 0.519 mmol) i 2-(4-bromo-2-fluorofenil)-7V-(3-( 1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamida (212 mg, 0.519 mmol) u vodi (1 mL) i 1,4-dioksanu (3 mL) dodat je Cs2C03(338 mg, 1.038 mmol) i PdCh(dppf) (38.0 mg, 0.052 mmol) pod N2. Zatim je smeša mešana i zračena u mikrotalasnoj peći na 120°C u trajanju od 20 min. Smeša je zatim koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 2:1, Rf=0.4) da bi se proizvela prijavo bela čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-Af-(3 -(1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamida (100 mg, 0.121 mmol, 23% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.42-7.28 (m, 5H), 7.27-7.21 (m, 2H), 6.92-6.84 (m, 2H), 6.36 (s, IH), 4.50 (s, 2H), 4.11 (d, /= 6.8 Hz, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.79-3.75 (m, 3H), 1.52 (s, 6H), 1.45 (t,J= 7.2 Hz, 3H); ES-LCMS m/z 468 (M-l 19).
Korak 7: 2-(4-(5-Etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(3-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamid
[0481]
[0482]Smeša 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-Af-(3-(l,14-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamida (100 mg, 0.170 mmol) i TFA (10% u DCM, 100 mL) mešana je na 25°C u trajanju od 2 časa. Smeša je zatim koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/H20 kao eluenti, kiseli uslovi) da bi se dobila bela čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamida (28.35 mg, 0.060 mmol, 36% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.45-7.30 (m, 4H), 7.25 (d,J =1.6 Hz, IH), 6.36 (s, IH), 4.12 (q,J =6.8 Hz, 2H), 3.82 (s, 2H), 1.52 (s, 6H), 1.46 (t,J=6.8 Hz, 3H); ES-LCMSm/ z468 (M+H).
Primer 29: 2-(4-(4-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<f->(3-(5-metil-l,3,4-oksadiazol-2-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0483]
Korak 1: Metil 3-nitro-5-(trifluorometil)benzoat
[0484]
[0485]U smešu 3-nitro-5-(trifluorometil)benzoeve kiseline (20 g, 85 mmol) u MeOH (200 mL) ukapavanjem je dodata H2SO4(12 mL, 225 mmol) na 0°C, zatim je smeša mešana u trajanju od 16 časova na 25°C. Zatim je rastvarač koncentrovan i podešen je pH = 9 sa rastvorom NaHC03. Rastvarač je koncentrovan da bi se dobio ostatak koji je ekstrahovan sa DCM (200 mL x 2), sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se proizvelo ulje metil 3-nitro-5-(trifluorometil)benzoata (20 g, 76 mmol, 90% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.99 (s, IH), 8.74 (s, IH), 8.62 (s, IH), 4.01 (s, 3H); ES-LCMS m/z 250 (M+l).
Korak 2: 3-Nitro-5-(trifluorometil)benzohidrazid
[0486]
[0487]Smeša metil 3-nitro-5-(trifluorometil)benzoata (20 g, 80 mmol) i hidrazin hidrata (5.56 mL, 96 mmol) u MeOH (100 mL) je mešana u trajanju od 16 časova na 25°C. Zatim je rastvarač koncentrovan da bi se proizvela prljavo bela čvrsta supstanca 3-nitro-5-(trifluorometil)benzohidrazida (20 g, 72.2 mmol, 90% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.89 (s, IH), 8.65 (s, IH), 8.50 (s, IH); ES-LCMS m/z 250 (M+H).
Korak 3: 2-Metil-5-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-l,3,4-oksadiazol
[0488]
[0489]Smeša 3-nitro-5-(trifluorometil)benzohidrazida (20 g, 80 mmol) u 1,1,1-trietoksietanu (156 g, 963 mmol) je zagrevana do refluksa i mešana 12 časova. Zatim je rastvarač koncentrovan da bi se proizvela crna čvrsta supstanca 2-metil-5-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-l,3,4-oksadiazol (20 g, 65.9 mmol, 82% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 9.04 (s, IH), 8.71 (s, IH), 8.66 (s, IH), 2.67 (s, IH); ES-LCMS m/z 274 (M+H).
Korak 4: 2-Metil-5-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-l,3,4-oksadiazol
[0490]
[0491]Smeša 2-metil-5-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-l,3,4-oksadiazola (20 g, 73.2 mmol) i Pd/C (0.779 g, 7.32 mmol) u MeOH (25 mL) je mešana u trajanju od 12 časova na 35 psi pod atmosferom H2na 25°C. Zatim je smeša filtrirana i filtrat je koncentrovan da bi se dobio ostatak koji je kristalizovan sa MeOH (15 mL) da bi se proizvela siva čvrsta supstanca 3-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)-5-(trifluorometil)anilina (17 g, 66.4 mmol, 91%> prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.46 (s, IH), 7.42 (s, IH), 7.07 (s, IH), 2.61 (s, 3H); ES-LCMSmlz244 (M+H).
Korak 5: 2-(4-(4-Etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<r->(3-(5-metil-l,3,4-oksadiazol-2-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0492]
[0493]U smešu 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (300 mg, 0.729 mmol), 3-(5-metil-l,3,4-oksadiazol-2-il)-5-(trifluorometil)anilina(195 mg, 0.802 mmol) i Et3N (0.203 ml, 1.458 mmol) u DCM (15 ml) dodat je HATU (333 mg, 0.875 mmol) na 25°C. Zatim je smeša mešana u trajanju od 2 časa, smeša je koncentrovana da bi se dobio ostatak koji je ekstrahovan sa DCM (30 mL x 2). Organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom (20 mL), sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću preparativne TLC (DCM : MeOH = 30:1, Rf= 0.7) da bi se proizveo 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(3-(5-metil-l,3,4-oksadiazol-2-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid (60 mg, 0.094 mmol, 13% prinos): 'H NMR (400 MHz, MeOD-</4) 6 8.52 (br. s., IH), 7.99 (br. s., IH), 7.95 (br. s., IH), 7.42-7.39 (m, 2H), 7.30 (d, / = 8.4 Hz, 3H), 6.89 (d,J=8.6 Hz, 3H), 6.52-6.50 (m, IH), 5.11 (br. s., 2H), 4.64-4.62 (m, 2H), 4.31 (d,J=7.1 Hz, 2H), 2.63 (br. s., 3H), 1.38 (t,J=7.1 Hz, 3H); ES-LCMSmlz637 (M+H).
Korak 6: 2-(4-(4-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(3-(5-metil-l,3,4-oksadiazol-2-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0494]
[0495]Smeša 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<f->(3-(5-metil-l,3,4-oksadiazol-2-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamida (60 mg, 0.094 mmol) i Pd/C (10.03 mg, 0.094 mmol) u MeOH (15 mL) je mešana u trajanju od 0.5 časa pod atmosferom H2na 25°C. Zatim je smeša filtrirana i filtrat je koncentrovan da bi se dobio ostatak koji je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se proizveo 2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<r->(3-(5-metil-l,3,4-oksadiazol-2-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid (41.53 mg, 0.079 mmol, 84% prinos): 'H NMR (400 MHz, DMSO-Je) 811.40-11.29 (m, IH), 10.86 (s, IH), 8.50 (s, IH), 8.21 (s, IH), 7.86 (s, IH), 7.40-7.29 (m, 2H), 7.23 (d,J=2.6 Hz, 2H), 5.78 (s, IH), 4.02 (q,J=7.1 Hz, 2H), 3.79 (s, 2H), 2.58 (s, 3H), 1.26 (t, J = 6.9 Hz, 3H); ES-LCMSm/ z517 (M+H).
Primer 30: 2-(4-(4-Etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(5-(l, 1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-il)acetamid
[04961
Korak 1: 5,5,5-Trifluoro-4,4-dimetil-3-oksopentanenitril
[0497]
[0498]U smešu MeCN (13.9 mL, 264 mmol) u THF (500 mL) ohlađenu do -78°C dodat jen-BuLi (106 mL, 264 mmol). Smeša je mešana na -30°C u trajanju od 0.5 časa. Zatim je u smešu ukapavanjem dodat metil 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropanoat (30 g, 176 mmol). Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 10 časova. Smeša je ugašena vodenim rastvorom NH4CI (50 mL), ekstrahovana sa EA (300 mL x 3). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se proizveo sirovi proizvod žutog ulja 5,5,5-trifluoro-4,4-dimetil-3-oksopentanenitrila (22 g, 122.9 mmol, 70% prinos):<*>H NMR (400 MHz, CDCh) 8 3.75 (s, 2H), 1.41 (s, 6H).
Korak 2: 5-(l,l,l-Trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-amin
[0499]
[0500]U smešu hidroksilamin hidrohlorida (23.2 g, 336 mmol) u vodi (300 mL) ohlađenu do 0°C dodat je NaHC03(30 g, 351 mmol) i podešen je pH = 7.5. Zatim je u smešu dodat rastvor 5,5,5-trifluoro-4,4-dimetil-3-oksopentan nitrila (30 g, 167.4 mmol) u MeOH (40 mL). Smeša je mešana na 65°C u trajanju od 15 časova. Posle hlađenja, smeša je zakišeljena sakonc.HC1 do pH = 1 i zatim refluksovana 2 časa. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je neutralizovana sa 4 M NaOH do pH = 8. Smeša je ekstrahovana sa EA (300 mL x 2). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 8:1~3:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod TLC (PE/EA = 2:1, Rf = 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela crvena čvrsta supstanca 5-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-amina (19.5 g, 100.5 mmol, 60% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 5.79 (s, IH), 3.96 (s., 2H), 1.53 (s, 6H); ES-LCMSmlz:195 (M+H).
Korak 3: 2-(4-(4-Etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3 -il)-2-fluorofenil)-Af-(5-( 1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-il)acetamid
[0501]
[0502]U smešu 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (55.1 g, 134 mmol) i 5-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-amina (26 g, 134 mmol) u piridinu (500 mL) ukapavanjem je dodat T3P<®>(137.5 mL, 134 mmol) i mešana je na 25°C u trajanju od 1 časa. Pošto je TLC analiza pokazala daje početni materijal potpuno potrošen, smeša je sipana u mešajuću hladnu vodu (1 L). Smeša je mešana u trajanju od 0.5 časa i zatim ostavljena da odstoji u trajanju od 10 časova. Čvrsta supstanca je filtrirana, isprana sa H2O (200 mL x 3) i TBME (200 mL x 2) i sušenain vacuoda bi se dobila prijavo bela čvrsta supstanca 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3 -il)-2-fluorofenil)-Af-(5-( 1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-il)acetamida (65 g, 100 mmol, 74% prinos): 'HNMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.94 (s, IH), 7.40-7.32 (m, 3H), 7.26( d, J=9.6 Hz, 2H), 6.90 (d,J=8.8 Hz, 3H), 6.43 (s, IH), 5.26 (s, 2H), 4.11 (q,J=7.2 Hz, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 1.56 (s, 6H), 1.35 (t,J=7.2 Hz, 3H); ES-LCMSm/ z:588 (M+H).
Korak 4: 2-(4-(4-Etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Af-(5-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-il)acetamid
[0503]
[0504]U suspenziju 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-lfuorofenil)-7V-(5-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-il)acetamida (100 g, 170 mmol) u DCM (1 L) ukapavanjem je dodat TFA (80 mL, 1077 mmol). Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 2 časa. Smeša je zatim koncentrovana. U ostatak je ukapavanjem dodata H2O (500 mL) i zatim neutralizovana sa zasićenim rastvorom Na2C03da bi se podesio pH = 7.5. Talog je filtriran, ispran sa H2O (350 mL x 3) i sušenin vacuo.U čvrstu supstancu je dodat PE/EA (3:1,zapr. lzapr.,300 mL) i mešana je 0.5 časova. Čvrsta supstanca je filtrirana i isprana sa PE/EA (3:1,zapr. lzapr.,100 mL x 2). Čvrsta supstanca je ponovo rastvorena u DCM/MeOH (20:1,zapr. lzapr.,1.5 L) i zatim koncentrovanain vacuodo minimalne količine rastvarača (oko 150 mL). Čvrsta supstanca je filtrirana, isprana sa CH3CN (50 mL x 2) i sušenain vacuo.Preostala čvrsta supstanca je dodata u EtOH (2.5 L) i zagrevana do 80°C. Pošto je čvrsta supstanca potpuno rastvorena, smeša je koncentrovanain vacuoda bi se dobila bela čvrsta supstanca 2-(4-(4-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-jV-(5-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-il)acetamida (61.4 g, 131 mmol, 77% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.40-7.30 (m, 2H), 7.25-7.18 (m, 2H), 6.88 (s, IH), 5.98 (s, IH), 4.11 (q,/=7.2 Hz, 2H), 3.81 (s, 2H), 1.56 (s, 6H), 1.37 (t,/=7.2 Hz, 3H); ES-LCMSmlz:468 (M+H).
Primer 31: 2-(4-(4-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(6-(l-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamid
[0505]
Korak 1: 5-Nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-ol
[0506]
[0507]U ledeno hladan rastvor 3-(trifluorometil)piridin-2-ola (10 g, 61.3 mmol) u H2SO4(50 mL, 938 mmol), ukapavanjem je dodata azotna kiselina (3.01 ml, 67.4 mmol). Posle 30 min, ledeno kupatilo je uklonjeno i reakcija je mešana na 25°C u trajanju od 72 časa. Reakciona smeša je dodata u led. Dobijeni talog je sakupljen filtracijom, ispran dodatnom vodom i sušen na vazduhu da bi se dobila prva serija proizvoda. Sledeći prinos proizvoda je dobijen posle isparavanja ishodne tečnosti do manje od 100 mL, hlađenja na ledenom kupatilu i dodavanja NaOH da bi se pH podesio do 8. Smeša je ekstrahovana sa EA (100 mL). Organski sloj je sušen i koncentrovan da bi se dobio proizvod, koji je spojen sa prvom serijom da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca 5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-ola (9 g, 39.9 mmol, 65% prinos): 'H NMR
(400 MHz, CD3OD) 8 8.84 (d,J= 2.8 Hz, IH), 8.56 (d,J=2.8 Hz, IH); ES-LCMSmlz:209.0
(M+H).
Korak 2: 2-Hloro-5-nitro-3-(trifiuorometil)piridin
[0508]
[0509]U rastvor 5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-ola (9 g, 43.2 mmol) u SOCb (30 mL, 411 mmol) dodata je katalitička količina DMF (0.033 ml, 0.432 mmol). Smeša je mešana na 80°C preko noći. Pošto je LCMS analiza pokazala da je početni materijal potrošen, rastvarač je uklonjen invacuo.Ostatak je rastvoren u H2O i ekstrahovan sa EA. Organski sloj je ispran vodenim rastvorom NaHC03i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je sušen preko Na2S04i filtriran. Filtrat je koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen hromatografijom na koloni (PE/EA = 10/1) da bi se proizvelo žuto ulje 2-hloro-5-nitro-3-(trifluorometil)piridina (8.5 g, 34.7 mmol, 80% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 9.43 (d,J=2.8 Hz, IH), 8.92 (d,J=2AHz, IH); ES-LCMS m/z: 225.2 (M+H).
Korak 3: terc-Butil 2-cijano-2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)acetat
[0510]
[0511]U rastvor 2-hloro-5-nitro-3-(trifluorometil)piridina (5 g, 22.07 mmol) i K2CO3(6.10 g, 44.1 mmol) u THF (150 mL) dodat je terc-butil 2-cijanoacetat (3.74 g, 26.5 mmol). Dobijena smeša je mešana na 70°C preko noći pod N2. Pošto je TLC analiza (PE/EA = 10/1) pokazala da je početni materijal potrošen, rastvarač je uklonjen invacuo.Ostatak je rastvoren u EA (100 mL) i ispran sa H2O (50 mL) i fiziološkim rastvorom (50 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se proizvela čvrsta supstanca terc-butil 2-cijano-2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)acetata (7 g, 21.13 mmol, 96% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 9.08 (s, IH), 8.59 (br. s., IH), 4.63 (br. s., IH), 1.55 (s, 9H); ES-LCMS m/z: 332.1
(M+H).
Korak 4: 2-(5-Nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)acetonitril
[0512]
[0513]U rastvorterc-butil2-cijano-2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)acetata (7 g, 21.13 mmol) u MeOH (100 mL) dodat je vodeni rastvor HC1 (40 mL, 1316 mmol). Dobijena smeša je mešana na 100°C preko noći. Pošto je TLC analiza (PE/EA = 10/1) pokazala daje početni materijal potrošen, rastvarač je uklonjen invacuo.Ostatak je rastvoren u H2O (50 mL) i ekstrahovan pomoću EA (100 mL). Organski sloj je ispran vodenim rastvorom NaHC03i fiziološkim rastvorom i zatim sušen preko Na2S04. Posle filtracije, filtrat je koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen hromatografijom na koloni (PE/EA = 10/1) da bi se proizvela braon čvrsta supstanca 2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)acetonitrila (4.3 g, 17.77 mmol, 84% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 9.59 (s, IH), 8.88 (d, /= 2.4 Hz, IH), 4.86 (s, 2H); ES-LCMS m/z: 232.1 (M+H).
Korak 5: 2-Metil-2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)propan nitril
[0514]
[0515]U rastvor 2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)acetonitrila (1 g, 4.33 mmol) i CS2CO3(4.23 g, 12.98 mmol) u MeCN (30 mL) dodat je jodometan (3.07 g, 21.63 mmol). Dobijena smeša je mešana na 40°C preko noći u autoklavu. Pošto je LCMS analiza pokazala daje početni materijal potrošen, rastvarač je uklonjenin vacuo.Ostatak je rastvoren u EA (100 mL) i ispran sa H2O (50 mL) i fiziološkim rastvorom (50 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni (PE/EA = 10/1) da bi se proizvelo žuto ulje 2-metil-2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)propan nitrila (0.7 g, 2.70 mmol, 62% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 9.56 (s, IH), 8.93 (d,J=2.8 Hz, IH), 1.90 (s, 6H); ES-LCMS m/z: 260.1 (M+H).
Korak 6: 2-Metil-2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)propanal
[0516]
[0517]U rastvor 2-metil-2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)propan nitrila (700 mg, 2.70 mmol) u DCM (30 mL) dodat je DIBAL-H (5.40 mL, 5.40 mmol) na -50°C. Dobijena smeša je mešana na -50°C u trajanju od 1 časa i lagano zagrevana do sobne temperature. Pošto je LCMS analiza pokazala daje početni materijal potrošen, smeša je ugašena zasićenim NH4CI. Smeša je rastvorena u vodi i ekstrahovana pomoću EA. Organski sloj je sušen i koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen hromatografijom na koloni da bi se proizvelo žuto ulje 2-metil-2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)propanala (200 mg, 0.763 mmol, 28% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 9.67 (s, IH), 9.54 (s, IH), 8.89 (s, IH), 1.56 (s, 6H); ES-LCMS m/z: 263.1 (M+H).
Korak 7: 2-(5-Amino-3-(trifluorometil)piridin-2-il)-2-metilpropan-l-ol
[0518]
[0519]Rastvor 2-metil-2-(5-nitro-3-(trifluorometil)piridin-2-il)propanala (100 mg, 0.381 mmol) i Raney nikla (22.39 mg, 0.381 mmol) u MeOH (30 mL) je mešan na 25°C pod H2preko noći. Pošto je TLC analiza (PE/EA = 5/1) pokazala daje početni materijal potrošen, smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan da bi se dobio 2-(5-amino-3-(trifluoro metil)piridin-2-il)-2-metilpropan-l-ol (60 mg, 0.256 mmol, 67% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.08 (br. s., IH), 7.36 (d, /= 2.8 Hz, IH), 1.31 (s, 6H); ES-LCMS m/z: 235.1 (M+H).
Korak 8: 2-(4-(4-Etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(6-(l-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamid
[0520]
[0521]Rastvor 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (50 mg, 0.122 mmol), 2-(5-amino-3-(trifluorometil)piridin-2-il)-2-metilpropan-l-ola (28.5 mg, 0.122 mmol), HATU (92 mg, 0.243 mmol) i DIEA (0.064 mL, 0.365 mmol) u DCM (10 mL) je mešan na 25°C. Pošto je LCMS analiza pokazala daje početni materijal potrošen, smeša je isprana sa H2O. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom i sušen preko Na2S04i filtriran. Filtrat je koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću preparativne TLC (DCM/MeOH = 20/1) da bi se proizveo 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-jV-(6-(l-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamid (20 mg, 0.032 mmol, 26% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.95 (br. s., IH), 8.50 (s, IH), 7.99 (s, IH), 7.43-7.39 (m, 3H), 7.30-7.24 (m, 2H), 6.95-6.91 (m, 2H), 6.48 (s, IH), 5.30 (s, 2H), 4.16-4.11 (m, 2H), 3.87-3.79 (m, 6H), 1.40-1.38 (m, 9H); ES-LCMS m/z: 628.3 (M+H).
Korak 9: 2-(4-(4-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(6-(l-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamid
[0522]
[0523]Rastvor 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(6-(l-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-5-(trilfuorornetil)piridin-3-il)acetamida (20 mg, 0.032 mmol) u TFA u DCM (5 mL, 3.72 mmol) je mešan na 25°C. Pošto je LCMS analiza pokazala da je početni materijal potrošen, rastvarač je uklonjenin vacuoda bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću preparativne HPLC (pod neutralnim uslovima) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<L>(6-(l-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamida (8.8 mg, 0.017 mmol, 54% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.91 (s, IH), 8.46(d, J=2.0 Hz, IH), 7.40-7.35 (m, 2H), 7.24-7.21 (m, 2H), 5.98 (s, IH), 4.13-4.08 (m, 2H), 3.82 (s, 4H), 1.37 (t,J=7.0 Hz, 9H); ES-LCMS m/z: 508.2 (M+H).
Primer 32: 2-(4-(4-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-3-fluorofenil)-A^-(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0524]
Korak 1: 4-Etoksipiridin 1-oksid[05251
[0526]U smešu 4-nitropiridin 1-oksida (28 g, 200 mmol) u THF (50 mL) dodat je natrijum etanolat (40.8 g, 600 mmol). Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 16 časova. Reakcioni ostatak je koncentrovan i sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (DCM/MeOH = 25:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (DCM/MeOH = 25:1, Rf = 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela tamno crvena čvrsta supstanca 4-etoksipiridin 1-oksida (20 g, 101 mmol, 50% prinos). 'H NMR (400 MHz, MeOH-J4) 8 8.20 (d,J =7.6 Hz, 2H), 7.12 (d,J=7.6 Hz, 2H), 4.18 (q,J= 12Hz, 2H), 1.42 (t,J=6.8 Hz, 3H); ES-LCMS m/z: 140.0 (M+H).
Korak 2: 4-Etoksipiridin-2-ol
[0527]
[0528]Smeša 4-etoksipiridin 1-oksida (20 g, 144 mmol) u Ac20 (200 mL, 7.836 mol) je zagrevana do refluksa u trajanju od 4 časa. Zatim, rastvarač je uklonjenin vacuo,i ostatak je rastvoren u MeOH (50 mL) i vodi (50 mL) i mešan na 25°C u trajanju od 16 časova. Smeša je zatim koncentrovana i sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (DCM/MeOH = 10:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (DCM/MeOH = 10:1, Rf = 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela tamno žuta čvrsta supstanca 4-etoksipiridin-2-ola (17 g, 104 mmol, 72% prinos). 'H NMR (400 MHz, MeOH-c/4) 8 8.20 (d,J= 7. 6Hz,2H), 7.12 (d,J=7.6 Hz, 2H), 4.18 (q,J=7.2 Hz, 2H), 1.42 (t,J=6.8 Hz, 3H); ES-LCMSmlz:140.0 (M+H).
Korak 3: 4-Etoksi-5-jodopiridin-2-ol
[0529]
[0530]U smešu 4-etoksipiridin-2-ola (17 g, 122 mmol) u DMF (125mL) dodat je NIS (27.5 g, 122 mmol). Smeša je mešana na 80°C u trajanju od 16 časova. Smeša je koncentrovana i prečišćena pomoću preparativne HPLC (MeCN/H20 kao eluenti, kiseli uslovi) da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca 4-etoksi-5-jodopiridin-2-ola (4.2 g, 13.47 mmol, 11% prinos). TLC (DCM/MeOH = 10:1, Rf = 0.6): 'H NMR (400 MHz, MeOH-c/4) 8 7.70 (s, IH), 5.91 (s, IH), 4.10 (q,J= 7.2 Hz, 2H), 1.44 (t,J= 6.8 Hz, 3H); ES-LCMSmlz:265.9 (M+H).
Korak 4: 2-(Benziloksi)-4-etoksi-5-jodopiridin
[0531]
[0532]U smešu 4-etoksi-5-jodopiridin-2-ola (3.7 g, 13.96 mmol) u THF (10 mL) dodat je (bromometil)benzen (2.87 g, 16.75 mmol) i srebro karbonat (7.70 g, 27.9 mmol). Smeša je mešana na 70°C u trajanju od 16 časova. Reakcioni ostatak je zatim filtriran i filtrat je koncentrovan. Smeša je razblažena vodom (30 mL) i ekstrahovana sa DCM (30 mL x 2). Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida
(PE/EA = 5:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 5:1, Rf = 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvelo svetio žuto ulje 2-(benziloksi)-4-etoksi-5-jodopiridina (4.2 g, 10.64 mmol, 76% prinos). 'HNMR (400 MHz, MeOH-d4) 5 8.25 (s, IH), 7.47-7.41 (m, 2H), 7.40-7.30 (m, 3H), 6.41 (s, IH), 5.32 (s, 2H), 4.16 (q,J=7.2 Hz, 2H), 1.47 (t,J=12Hz, 3H); ES-LCMSmlz356.0 (M+H).
Korak 5: Metil 2-(4-bromo-3-fluorofenil)acetat
[0533]
[0534]U smešu 2-(4-bromo-3-fluorofenil)sirćetne kiseline (5 g, 21.46 mmol) u MeOH (50 mL) dodatje SOCb (1.879 mL, 25.7 mmol) i DMF (0.166 mL, 2.146 mmol). Zatim je smeša mešana na 80°C u trajanju od 16 časova. Smeša je koncentrovana i ekstrahovana sa EA (100 mL x 2) i isprana sa NaHC03(100 mL) da bi se dobio organski sloj. Spojeni organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se proizvelo braon ulje metil 2-(4-bromo-3-fluorofenil)acetata (5 g, 17.20 mmol, 80% prinos): 'H NMR (400 MHz, MeOH-J4) 5 7.53 (t,/ =7.6 Hz, IH), 7.15 (dd,7 =1.6, 9.6 Hz, IH), 7.04-6.99 (m, IH), 3.67 (s, 3H), 3.65 (s, 2H); ES-LCMSmlz249.0 (M+H+2).
Korak 6: Metil 2-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetat
[0535]
[0536]U smešu metil 2-(4-bromo-3-fluorofenil)acetata (5 g, 20.24 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL) dodatje 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(l,3,2-dioksaborolan) (5.65 g, 22.26 mmol), KOAc (3.97 g, 40.5 mmol) i PdCl2(dppf) (1.481 g, 2.024 mmol). Dobijena suspenzijaje mešana na 110°C u trajanju od 16 časova pod azotom. Smeša je zatim filtrirana i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 5:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 5:1, Rf= 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvelo žuto ulje metil 2-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetata (6 g, 16.32 mmol, 81% prinos): 'H NMR (400 MHz, MeOH-d4)8 7.66-7.58 (m, IH), 7.07 (d,/=7.6 Hz, IH), 6.98 (d,/=10.4 Hz, IH), 3.67 (s, 5H), 1.33 (s, 12H); ES-LCMSmlz 295 A(M+H).
Korak 7: 2-(3-Fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)sirćetna kiselina
[0537]
[0538]U smešu metil 2-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetata (5 g, 17 mmol) u THF (30 mL) i vode (30 mL) dodatje LiOH«H20 (3.57 g, 85 mmol). Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 16 časova. Zatim je reakcioni ostatak koncentrovan, razblažen sa EA (200 mL) i dodatje vodeni rastvor HC1. Organska faza je isprana fiziološkim rastvorom, sušena preko MgS04, filtrirana i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 2:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 2:1, Rf = 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvelo svetio žuto ulje 2-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)sirćetne kiseline (5 g, 14.28 mmol, 84% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.66 (t,J= 6.8 Hz, IH), 7.12 (d,/= 7.6 Hz, IH), 7.03 (d,/=10.0 Hz, IH), 3.66 (s, 2H), 1.37 (s, 12H); ES-LCMSmlz281.1
(M+H).
Korak 8: Etil 2,2-dimetil-3-(2-(trifluorometil)fenil)propanoat
[0539]
[0540]U smešu diizopropilamina (8.00 mL, 57.1 mmol) u THF (300 mL) ohlađenu do 0°C, ukapavanjem je dodat n-BuLi (24.60 mL, 61.5 mmol). Smeša je mešana na 0°C u trajanju od 1 časa. Zatim je smeša hlađena do -30°C i dodatje rastvor etil izobutirata (6.12 g, 52.7 mmol) u THF (2 mL). Smeša je mešana na -30°C u trajanju od 1 časa. U smešu je dodat rastvor 1-(bromometil)-2-(trifluorometil)benzena (10.5 g, 43.9 mmol) u THF (5 mL) na -30°C. Cela smeša je mešana na -30°C u trajanju od 3 časa i zatim mešana na 25°C u trajanju od 12 časova. Smeša je ugašena vodenim rastvorom NH4CI i ekstrahovan sa EA. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgS04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 200:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA =10:1, Rf = 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca etil 2,2-dimetil-3-(2-(trifluorometil)fenil)propanoata (10 g, 35.3 mmol, 80% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8: 7.62 (d,J =8.0 Hz, IH), 7.41 (t,J= 7.6 Hz, IH), 7.29 (t, J = 7.6 Hz, IH), 7.22 (d,J= 8.0 Hz, IH), 4.17( q, J=7.2 Hz, 2H), 3.14 (s, 3H), 1.25(t, J=7.2 Hz, 3H), 1.18 (s,6H); ES-LCMSm/ z275 (M+H).
Korak 9: Etil 2,2-dimetil-3-(4-nitro-2-(trifluorometil)fenil)propanoat
[0541]
[0542]U rastvor etil 2,2-dimetil-3-(2-(trifluorometil)fenil)propanoata (10 g, 36.5 mmol) u H2SO4(5 mL, 94 mmol) ohlađen do 0°C dodata je kalijum nitroperoksi kiselina (4.05 g, 40.1 mmol) u porcijama. Smeša je mešana na 0°C u trajanju od 30 min. Smeša je sipana u led-vodu i zatim ekstrahovana sa DCM (100 mL x 2). Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko NaaSCU, filtriran i koncentrovan da bi se dobila žuta čvrsta supstanca etil 2,2-dimetil-3-(4-nitro-2-(trilfuorometil)fenil)propanoata (8.5 g, 24.54 mmol, 67% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 5: 8.59 (d,J=2.4 Hz, IH), 8.47 (dd,J=2.4, 8.8 Hz, IH), 7.82 (d, / = 8.4 Hz, IH), 5.97-5.83 (m, 2H); ES-LCMSmlz320 (M+H).
Korak 10: Etil 3-(4-amino-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoat
[0543]
[0544]Reakciona smeša etil 2,2-dimetil-3-(4-nitro-2-(trifluorometil)fenil)propanoata (8.5 g, 26.6 mmol) i Pd/C (0.283 g, 2.66 mmol) u MeOH (50 mL) je hidrogenizovana upotrebom H-cube aparata (podešavanja: 50 °C, 50 psi, 24 časa). Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 10:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 5:1, Rf = 0.4) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela prljavo bela čvrsta supstanca etil 3-(4-amino-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoata (7 g, 22.42 mmol, 84%> prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 5 6.98 (d, / = 8.4 Hz, IH), 6.91 (d, /= 2.4 Hz, IH), 6.71 (dd, /= 2.4, 8.4 Hz, IH), 4.15 (q,J=6.8 Hz, 2H), 3.00 (s, 2H), 1.25 (t,J=7.2 Hz, 3H), 1.14 (s, 6H); ES-LCMSm/ z290 (M+H).
Korak 11: 3-(4-Amino-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropan-l-ol
[0545]
[0546]U smešu etil 3-(4-amino-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropanoata (2 g, 6.91 mmol) u THF (200 mL) dodatje LAH (0.525 g, 13.83 mmol) u porcijama. Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 10 časova. Smeša je ugašena sa 15% vodenim rastvorom NaOH (10 mL). Smeša je sušena preko Na2SC»4, filtrirana i filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 8:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 2:1, Rf = 0.35) su spojene i koncentrovane da bi se proizvelo svetio žuto ulje 3-(4-amino-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropan-l-ola (1.1 g, 4.45 mmol, 64% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3C1) 8: 7.17 (d,J= 8.4 Hz, IH), 6.98 (d,J =2.4 Hz, IH), 6.84 (dd,J=2.4, 8.0 Hz, IH), 3.31 (s, 2H), 2.67 (d,J=1.2 Hz, 2H), 0.84 (s, 6H); ES-LCMSm/ z248 (M+H).
Korak 12: 4-(3-((terc-Butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)anilin
[0547]
[0548]U smešu 3-(4-amino-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-dimetilpropan-l-ola (300 mg, 1.213 mmol) u DCM (150 mL) dodatje imidazol (124 mg, 1.820 mmol) i TBSC1 (219 mg, 1.456 mmol). Zatim je smeša mešana na 25°C u trajanju od 5 časova. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 2:1, Rf = 0.5) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 4-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)anilina (350 mg, 0.930 mmol, 77% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8: 7.14 (d,J=8.4 Hz, IH), 6.86 (d,J=2.8 Hz, IH), 6.70 (dd,J=2.8, 8.4 Hz, IH), 3.20 (s, 2H), 2.62 (d,J=1.2 Hz, 2H), 0.87 (s, 9H), 0.73 (s, 6H), 0.00 (s, 6H); ES-LCMSm/ z362 (M+H).
Korak 13: A<L>(4-(3-((etrc-Butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetamid
[0549]
[0550]U rastvor 2-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)sirćetne kiseline (5g, 17.85 mmol) u DCM (100 mL) dodatje 4-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)anilin (7.10 g, 19.64 mmol), DIEA (6.24 mL, 35.7 mmol) i HATU (8.14 g, 21.42 mmol). Rastvor je mešan na 25°C u trajanju od 16 časova. Zatim je reakciona smeša koncentrovana da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela (PE/EA = 8:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod TLC (PE/EA = 8:1, Rf = 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela bela čvrsta supstanca A<L>(4-(3-((/erc-butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetamida (10 g, 12.83 mmol, 72% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.83 (d,/= 2.0 Hz, 2H), 7.35 (d,/=8.8 Hz, 2H), 6.99 (dd,/=4.8, 10.0 Hz, 2H), 3.63 (s, 2H), 3.26 (s, 2H), 2.69 (s, 2H), 1.11 (s, 12H), 0.86 (s, 9H), 0.73 (s, 6H), 0.00 (s, 6H); ES-LCMSmlz624.2
(M+H).
Korak 14: 2-(4-(6-(Benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-3-fluorofenil)-7V-(4-(3-((ter?butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0551]
[0552]U smešu 2-(benziloksi)-4-etoksi-5-jodopiridina (3.2 g, 9.01 mmol) u 1,4-dioksanu (60 mL) i vodi (20 mL) dodat je /V-(4-(3-((/erc-butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(3-fluoro-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)acetamid
(6.18 g, 9.91 mmol), Cs2C03(5.87 g, 18.02 mmol) i PdCl2(dppf) (0.659 g, 0.901 mmol). Smeša je mešana pod azotom na 110°C u trajanju od 16 časova. Zatim je reakcioni ostatak filtriran i filtrat je koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 5:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod TLC (PE/EA = 5:1, Rf= 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvelo svetio žuto ulje2-(4-(6-(benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-3-fluorofenil)-A<r->(4-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (4.2 g, 5.21 mmol, 58% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.96 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.88 (s, IH), 7.75 (d,J =8.4 Hz, IH), 7.47 (d,J=6.0 Hz, 3H), 7.42-7.36 (m, 2H), 7.36-7.30 (m, 2H), 7.27-7.17 (m, 2H), 6.50 (s, IH), 5.38 (s, 2H), 4.16-4.12 (m, 2H), 3.77 (s, 2H), 3.36 (s, 2H), 2.81 (s, 2H), 1.32 (t,J=6.8 Hz, 3H), 0.97 (s, 9H), 0.85 (s, 6H), 0.12 (s, 6H); ES-LCMSm/ z725.2 (M+H).
Korak 15: 2-(4-(6-(Benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-3-fluorofenil)-^-(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3 -(trifluorometil)fenil) acetamid
[0553]
[0554]U smešu2-(4-(6-(benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-3-fluorofenil)-7V-(4-(3-((terc-butildimetilsilil)oksi)-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (4.5 g, 4.83 mmol) u DCM (30 mL) dodatje TFA (4.46 mL, 57.9 mmol). Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 2 časa. Zatim je reakcioni ostatak koncentrovan, dodat u MeCN (50 mL), napravljen baznim sa NH4OH i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA =1:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 1:1, Rf = 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 2-(4-(6-(benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-3-fluorofenil)-A<L>(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (4.2 g, 4.19 mmol, 87% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.97 (s, IH), 7.88 (s, IH), 7.76(d, J=8.4 Hz, IH), 7.51-7.43 (m, 3H), 7.38(t, J=7.2 Hz, 2H), 7.35-7.29 (m, 2H), 7.26-7.16 (m, 2H), 6.50 (s, IH), 5.38 (s, 2H), 4.14-4.11 (m, 2H), 3.77 (s, 2H), 2.80 (s, 2H), 2.03 (s, 2H), 1.32 (t,J=6.8 Hz, 3H), 0.86 (s, 6H); ES-LCMSmlz611.2
(M+H).
Korak 16: 2-(4-(4-Etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-3-fluorofenil)-A^-(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil) acetamid
[0555]
[0556]U smešu 2-(4-(6-(benziloksi)-4-etoksipiridin-3-il)-3-fluorofenil)-7V-(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (4.2 g, 6.88 mmol) u MeOH (50 mL) dodatje Pd/C (10%, 420 mg). Smeša je mešana pod H2na 25°C u trajanju od 16 časova. Zatim je reakcioni ostatak filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (MeCN/H20 kao eluenti, kiseli uslovi) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-3-fluorofenil)-A^-(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamida (2000.18 mg, 3.84 mmol, 61% prinos). TLC (DCM/MeOH = 10:1, Rf = 0.6): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.94 (s, IH), 7.77-7.68 (m, 2H), 7.42 (d,/ =8.8 Hz, IH), 7.37-7.29 (m, IH), 7.27-7.17 (m, 2H), 6.36 (s., IH), 4.25-4.15 (m, 2H), 3.75 (s, 2H), 2.76 (s, 2H), 1.33 (t,/=6.8 Hz, 3H), 0.82 (s, 6H); ES-LCMSmlz521.2 (M+H).
Primer 33: 2-(4-(4-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(3-(trifluorometil)fenil)acetamid
[05571
Korak 1: 2-(4-(4-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetna kiselina
[0558]
[0559]U rastvor 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (0.5 g, 1.215 mmol) u MeOH (10 mL) mešan pdo azotom na 20°C dodatje Pd/C (0.013 g, 0.122 mmol) u jednoj porciji. Reakciona smeša je reagovala sa H2balonom na 20°C u trajanju od 12 časova. Smeša je filtrirana, i filtrat je koncentrovanin vacuoda bi se dobila sirova 2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetna kiselina (0.4 g, 1.373 mmol). TLC (DCM/MeOH = 10:1, Rf = 0.2): 'H NMR (400 MHz, DMSO-J6) 5 7.32-7.15 (m, 4H), 5.78 (s, IH), 4.01-4.00 (m, 2H), 3.59 (s, 2H), 1.26-1.23 (m, 3H); ES-LCMSmlz292 (M+H).
Korak 2: 2-(4-(4-Etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<L>(3-(trifluorometil)fenii)acetamid
[0560]
[0561]Rastvor 2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (80 mg, 0.275 mmol), 3-(trifluorometil)anilina (44.3 mg, 0.275 mmol), HATU (125 mg, 0.330 mmol) i DIEA (0.048 mL, 0.275 mmol) u DMF (10 mL) mešan je na sobnoj temperaturi u trajanju od 5 časova. Pošto je LCMS analiza pokazala daje početni materijal nestao, reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u DCM i ispran sa H2O i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je isparavan do sušenja da bi se dobio sirovi proizvod koji je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se dobio čist proizvod 2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(3-(trifluorometil)fenil)acetamid (14.56 mg, 0.032 mmol, 12% prinos) kao žuta čvrsta supstanca. 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 8.03 (br. s., IH), 7.77 (d,J=8.2 Hz, IH), 7.69 (s, IH), 7.51 (t, /= 8.0 Hz, IH), 7.46-7.36 (m, 2H), 7.31-7.24 (m, 2H), 6.28 (s, IH), 4.24-4.19 (m, 2H), 3.84 (s, 2H), 1.41( t, J =6.8 Hz, 3H); ES-LCMS:mlz435.1
(M+H).
Primer 34: 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<f->(3-(4-metil-li7-pirazol-1 -il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid hidrohlorid
[0562]
Korak 1: 4-metil-l-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-l//-pirazol
[0563]
[0564]U rastvor l-fluoro-3-nitro-5-(trifluorometil)benzena (500 mg, 2.391 mmol) i K2CO3(496 mg, 3.59 mmol) u DMF (3 mL) dodatje 4-metil-lif-pirazol (196 mg, 2.391 mmol) u jednoj porciji. Zatim je smeša mešana pod N2i zagrevana do 110°C i reagovala je 15 časova. LCMS analiza je pokazala da je početni materijal nestao. Rastvarač je uklonjenin vacuo.Ostatak je rastvoren u DCM (60 mL) i ispran sa H2O (20 mL) i fiziološkim rastvorom (20 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se dobio sirovi materijal koji je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 10/1 do 5/1) da bi se dobio čist proizvod 4-metil-l-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-lif-pirazol (500 mg, 1.678 mmol, 70.2% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8.83 (s, IH), 8.46 (s, IH), 8.35 (s, IH), 8.30 (s, IH), 7.64 (s, IH), 2.18 (s, 3H). ES-LCMS:mlz272.2 (M+H).
Korak 2: 3-(4-metil-l//-pirazol-l-il)-5-(trifluorometil)anihn
[0565]
[0566]U rastvor 4-metil-l-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-l//-pirazola (560 mg, 2.065 mmol) u MeOH (10 mL) dodatje Pd/C (21.98 mg, 0.206 mmol) u jednoj porciji. Zatim je smeša mešana pod H2u trajanju od 12 časova. LCMS analiza je pokazala da je početni materijal nestao. Suspenzija je filtrirana kroz čep od Celite<®>i filter kolač je ispran sa MeOH (2 mL). Spojeni filtrati su koncentrovani do sušenja da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 5/1, Rf= 0.25) da bi se dobio čist proizvod 3-(4-metil-l//-pirazol-l-il)-5-(trifluorometil)anilin (280 mg, 1.158 mmol, 56.1% prinos). 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 7.96 (s, IH), 7.52 (s, IH), 7.15 (s, 2H), 6.82 (s, IH), 2.15 (s, 3H). ES-LCMS:mlz242.1 (M+H).
Korak 3: 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<L>(3-(4-metil-lif-pirazol-1 -il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0567]
[0568] U rastvor 3-(4-metil-l//pirazol-l-il)-5-(tntluorometil)anilina (160 mg, 0.663 mmol)12-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (274 mg, 0.663 mmol) u piridinu (8 mL) dodatje T3P<®>(2111 mg, 3.32 mmol) u porcijama. Zatim je smeša mešana na 16°C u trajanju od 1 časa. LCMS analiza je pokazala daje početni materijal nestao. 10 mL vode je dodato ukapavanjem u reakcioni rastvor i zatim je smeša filtrirana. Filter kolač je ispran vodom (20 mL) i sušenin vacuoda bi se dobio čist proizvod 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-N-(3-(4-metil-l/7-pirazol-l-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid (200 mg, 0.263 mmol, 39.7% prinos). 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8.24 (s, IH), 8.06 (s, IH), 7.96 (d,/=2.0 Hz, IH), 7.87 (s, IH), 7.74 (s, IH), 7.57 (s, IH), 7.48 - 7.42 (m, 3H), 7.40 (d,/=9.0 Hz, 3H), 6.91 (d,J=8.8 Hz, 2H), 5.37 (s, 2H), 4.18-4.13 (m, 2H), 3.86 (s, 2H), 3.79 (s, 3H), 2.16 (s, 3H), 1.43 (t,/=7.0 Hz, 3H). ES-LCMS:mlz635.1 (M+H).
Korak 4: 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(3-(4-metil-l/f-pirazol-1 -il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid hidrohlorid
[0569]
[0570]Rastvor 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-Af-(3 metil- lif-pirazol-l-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamida (160 mg, 0.252 mmol) u TFA (8 mL, 10.38 mmol) mešan je na 16°C u trajanju od 1 časa. LCMS analiza je pokazala daje početni materijal nestao. Rastvarač je uklonjenin vacuo.Zatim je sirovi materijal prečišćen pomoću preparativne HPLC (Instrument: DB /kolona: ASB Ci8 150<*>25mm /pokretna faza A: voda+0.1% HCl/pokretna faza B: MeCN / Stopa protoka: 25 mL/min / Opis gradijentnog profila: 53-83 (B%) da bi se dobio čist proizvod 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-AL(3-(4-metil- lif-pirazol-1 -il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid hidrohlorid (15.92 mg, 0.029 mmol, 11.46% prinos). 'H NMR (400 MHz, MeOD-</4): 8 8.22 (s, IH), 8.05 (s, IH), 7.87 (s, IH), 7.74 (s, IH), 7.57 (s, IH), 7.49 - 7.41 (m, IH), 7.39 - 7.35 (m, 3H), 7.30 (d,J=2.0 Hz, IH), 4.16-4.12 (m, 2H), 3.84 (s, 2H), 2.16 (s, 3H), 1.47 (t,J=7.0 Hz, 3H). ES-LCMS:mlz515.2 (M+H).
Primer 35: 2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(3-(3-metil-l/f-pirazol-1 -il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid hidrohlorid
[0571]
Korak 1: 3-metil-l-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-l//-pirazol
[0572]
[0573]U rastvor l-fluoro-3-nitro-5-(trifluorometil)benzena (500 mg, 2.391 mmol) i K2CO3(496 mg, 3.59 mmol) u DMF (10 mL) dodatje 3-metil-l/f-pirazol (196 mg, 2.391 mmol) u jednoj porciji. Zatim je smeša mešana pod N2zagrevana do 110°C i reagovala u trajanju od 15 časova. LCMS analiza je pokazala daje početni materijal nestao. Rastvarač je uklonjenin vacuoi dobijeni ostatak je rastvoren u DCM (40 mL) i ispran sa H2O (15 mL) i fiziološkim rastvorom (15 mL). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se dobio ostatak koji je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 8/1 do 3/1) da bi se dobio čist proizvod 3-metil-l-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-lif-pirazol (300 mg, 1.007 mmol, 42.1% prinos). 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8.84 (s, IH), 8.47 (s, IH), 8.41 (d,J=2.4 Hz, IH), 8.35 (s, IH), 6.42 (d,J=2.4 Hz, IH), 2.36 (s, 3H). ES-LCMS:mlz272.0 (M+H).
Korak 2: 3-(3-metil-l//-pirazol-l-il)-5-(trifluorometil)anilin
[0574]
[0575]U rastvor 3-metil-l-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-l/f-pirazola (300 mg, 1.106 mmol) u MeOH (10 mL) dodatje Pd/C (11.77 mg, 0.111 mmol) u jednoj porciji. Zatim je smeša mešana pod H2u trajanju od 12 časova. LCMS analiza je pokazala da je početni materijal nestao. Suspenzija je filtrirana kroz čep od Celite® i filter kolač je ispran sa MeOH (2 mL). Spojeni filtrati su koncentrovani do sušenja da bi se dobio sirovi proizvod koji je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 5/1, Rf= 0.35) da bi se dobio čist proizvod 3-(3-metil-l/f-pirazol-l-il)-5-(trifluorometil)anilin (300 mg, 1.045 mmol, 94% prinos). 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 8.05 (d,J=2.4 Hz, IH), 7.18 - 7.12 (m, 2H), 6.82 (s, IH), 6.30 (d,J=2.2 Hz, IH), 2.32 (s, 3H). ES-LCMS:m/ z242.1 (M+H).
Korak 3: 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(3-(3-metil-l//-pirazol-1 -il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0576]
[0577]U rastvor 3-(3-metil-l//pirazol-l-il)-5-(trifluorometil)anilina (250 mg, 1.036 mmol) i 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (429 mg, 1.036 mmol) u piridinu (5 mL) dodatje T3P<®>(3298 mg, 5.18 mmol) u porcijama. Smeša je mešana na 16°C u trajanju od 1 časa. LCMS analiza je pokazala daje početni materijal nestao. 10 mL vode je dodato ukapavanjem u reakcioni rastvor i zatim je smeša filtrirana. Filter kolač je ispran vodom (20 mL) i sušenin vacuoda bi se dobio čist proizvod 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(3-(3-metil-lif-pirazol-l-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid (280 mg, 0.357 mmol, 34.5% prinos). 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 6 8.25 (s, IH), 8.15 (d,J=2.6 Hz, IH), 7.96 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.85 (s, IH), 7.75 (s, IH), 7.50 - 7.43 (m, 3H), 7.41 (d,J=9.0 Hz, 3H), 6.92 (d,J=8.8 Hz, 2H), 6.36 (d,/=2.4 Hz, IH), 5.37 (s, 2H), 4.18-4.13 (m, 2H), 3.86 (s, 2H), 3.79 (s, 3H), 2.34 (s, 3H), 1.43 (t,J =7.0 Hz, 3H). ES-LCMS:m/ z635.1 (M+H).
Korak 4: 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<r->(3-(3-metil-l/7-pirazol-1 -il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid hidrohlorid
[0578]"?""M"?""CF,
[0579]Rastvor 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(3-(3-metil-lif-pirazol-l-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamida (220 mg, 0.347 mmol) u TFA (8 mL, 10.38 mmol) je mešan na 16°C u trajanju od 1 časa. LCMS analiza je pokazala daje početni materijal nestao. Rastvarač je uklonjenin vacuo.Zatim je sirovi materijal prečišćen pomoću preparativne HPLC (Instrument: DB /kolona: ASB Ci8 150<*>25mm /pokretna faza A: voda+0.1% HCl/pokretna faza B: MeCN / Stopa protoka: 25 mL/min / Opis gradijentnog profila: 53-83 (B%) da bi se dobio čist proizvod 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<r->(3-(3-metil-l/f-pirazol-l-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid hidrohlorid (113 mg, 0.197 mmol, 56.8% prinos). 'H NMR (400 MHz, MeOD-t/4): 5 8.24 (s, IH), 8.15 (d,J =2. 2 Hz, IH), 7.85 (s, IH), 7.74 (s, IH), 7.50 - 7.44 (m, 2H), 7.43 - 7.37 (m, 3H), 6.36 (d,J= 2. 2Hz, IH), 4.21-4.16 (m, 2H), 3.85 (s, 2H), 2.34 (s, 3H), 1.48 (t,J=6.8 Hz, 3H). ES-LCMS:mlz515.2 (M+H).
Primer 36: 7V-(3-(l//-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3 -il)-2-fluorofenil)acetamid hidrohlorid
[0580]
N-NH
Hti\
k??A?A?cF?
H
Korak 1: 3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)-5-(trifluorometil)anilin
[0581]
[0582]U smešu 3-bromo-5-(trifluorometil)anilina (1 g, 4.17 mmol) u 1,4-dioksanu (12 mL) dodat je 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(l,3,2-dioksaborolan) (1.164 g, 4.58 mmol), PdCk(dppf) (0.305 g, 0.417 mmol) i Cs2C03(2.71 g, 8.33 mmol). Smeša je mešana na 100°C u trajanju od 2 časa pod N2. Smeša je filtrirana i koncentrovana, koja je prečišćena hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 5:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 2:1, Rf = 0.8) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)-5-(trifluorometil)anilina (800 mg, 2.369 mmol, 56.9% prinos):<*>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.27 (s, IH), 7.23 (s, IH), 7.03 (s, IH), 1.37 (s, 12H). ES-LCMSmlz287.9 (M+H).
Korak 2: terc-butil 4-bromo-lif-pirazol-l-karboksilat
[0583]
[0584]U smešu 4-bromo-lif-pirazola (500 mg, 3.40 mmol) u DCM (10 mL) dodatje Boc20 (0.790 mL, 3.40 mmol) i Et3N (0.948 mL, 6.80 mmol). Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 1 časa. Smeša je koncentrovana da bi se dobio terc-butil 4-bromo-lif-pirazol-l-karboksilat (800 mg, 2.91 mmol, 86%> prinos). TLC (PE/EA = 2:1, Rf = 0.6): 'H NMR (400 MHz, CD3OD)
8 8.31 (s, IH), 7.77 (s, IH), 1.63 (s, 9H). ES-LCMSmlz148.0 (M-Boc+H).
Korak 3: 3-(l//-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)anilin
[0585]
[0586]U smešu 3-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)-5-(trifluorometil)anilina (500 mg, 1.742 mmol) u 1,4-dioksanu (12 mL) i vodi (3 mL) dodatje terc-butil 4-bromo-l/f-pirazol-1-karboksilat (473 mg, 1.916 mmol), PdCl2(dppf) (127 mg, 0.174 mmol) i Cs2C03(1135 mg, 3.48 mmol). Smeša je mešana na 100°C u trajanju od 16 časova pod N2. Smeša je filtrirana i koncentrovana, koja je prečišćena hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA =1:1). Sve fraklcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 1:1, Rf = 0.2) su spojene i koncentrovane. Zatim je ostatak prečišćen pomoću preparativne TLC (DCM/MeOH = 15:1, Rf= 0.6) da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca 3-(l//-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)anilina (8 mg, 0.030 mmol, 1.7% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.93 (s., 2H), 7.08 (s, IH), 7.06 (s, IH), 6.78 (s, IH). ES-LCMSmlz228.1 (M +H).
Korak 4: A^-(3-(lJr/-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0587]
[0588]U smešu 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-lfuorofenil)sirćetne kiseline (15 mg, 0.036 mmol) u piridinu (3 mL) dodati su 3-(lif-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)anilin (8.28 mg, 0.036 mmol) i T3P<®>(EA solvat) (0.5 mL, 0.036 mmol). Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 1 časa. Smeša je dodata u vodu i koncentrovana da bi se dobio Af-(3-(li/pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksiben^ 3-il)-2-fluorofenil)acetamid (50 mg, 0.024 mmol, 66.3% prinos). TLC (DCM/MeOH = 15:1, Rf = 0.5): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.02 (s, IH), 7.82 (s, IH), 7.58 (s, IH), 7.37 (s, 2H), 7.32-7.30 (m, 4H), 7.25-7.23 (m, 2H), 6.89-6.86 (m, 3H), 5.36 (s, 2H), 4.15-4.09 (m, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.77 (s, 3H), 1.46 (t,J= 6.8 Hz, 3H). ES-LCMSmlz621.2 (M+H).
Korak 5: Ar-(3-(l//-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid hidrohlorid
105891
[0590]U smešu A<f->(3-(l/f/pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (50 mg, 0.081 mmol) u DCM (10 mL) dodatje TFA (1 mL, 12.98 mmol). Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 2 časa. Smeša je koncentrovana i dodatje NH4OH (0.5 mL). Zatim je reakcioni ostatak koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne HPLC (kolona: ASB Ci8 150<*>25mm; pokretna faza A: voda+0.1% HC1; pokretna faza B: MeCN; Stopa protoka: 25 mL/min; Opis gradijentnog profila: 40-70 (B%>)) da bi se proizvela prljavo bela čvrsta supstanca A<r->(3-(lif-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid hidrohlorida (6.95 mg, 0.013 mmol, 15.9% prinos): 'HNMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.16 (s, 2H), 8.06 (s, IH), 7.82 (s, IH), 7.62 (s, IH), 7.48-7.42 (m, IH), 7.41-7.34 (m, 3H), 7.33 (s, IH), 4.15(q, J=12 Hz, 2H), 3.84 (s, 2H), 1.46 (t,J=7.2 Hz, 3H). ES-LCMS m/z 501.2 (M+H). TLC (DCM/MeOH = 10:1, Rf=0.2)
Primer 37: 2-(4-(4-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-./V-(6-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-3-il)acetamid hidrohlorid
[0591]
Korak 1:( lE, 4Z)- 7J,7-trifluoro-5-hidroksi-l-metoksi-6,6-dimetilhepta-l,4-dien-3-on
[0592]
[0593]U smešu 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropionske kiseline (10 g, 64.1 mmol) u CHCh (100 mL) ohlađenu do 0°C ukapavanjem je dodat oksalil hlorid (7.29 mL, 83 mmol). Smeša je mešana na 70°C u trajanju od 4 časa. Zatim je smeša koncentrovana. U smešu (£)-4-metoksibut-3-en-2-ona (12.83 g, 128 mmol) u THF (100 mL) ohlađenu do -78°C ukapavanjem je dodat LiHMDS (128 mL, 128 mmol) podN2. Smeša je mešana na -78°C u trajanju od 1 časa. Zatim je u smešu dodat rastvor 3,3,3-trilfuoro-2,2-dimetilpropanoil hlorid u THF (100 mL) na -78°C. Cela smeša je ostavljena da se zagreva do sobne temperature tokom 2 časa i ugašena sa NH4CI (zasićeni vodeni rastvor, 30 mL). THF je uklonjen pod vakuumom. U smešu je dodata H2O (80 mL) i zatim je ekstrahovana sa EA (100 mL x 3). Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom (80 mL), sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 2:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod TLC (PE/EA = 2:1, Rf= 0.5) su spojene da bi se proizvelo prljavo belo ulje (lJ£,,4Z)-7,7,7-trifluoro-5-hidroksi-l-metoksi-6,6-dimetilhepta-l,4-dien-3-ona (1 g, 3.36 mmol, 5.2% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh): 5 15.90 (s, IH), 7.65 (d,J=12.4 Hz, IH), 5.63 (s, IH), 5.33 (d, /= 12.4 Hz, IH), 3.74 (s, 3H), 1.38 (s, 6H). ES-LCMSmlz239.1
(M+H).
Korak 2: 2-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-4if-piran-4-on
[0594]
[0595]U smešu (1^4Z)-7,7,7-trifluoro-5-hidroksi-l-metoksi-6,6-dimetilhepta-l,4-dien-3-ona (1 g, 4.20 mmol) u toluenu (5 mL) dodatje TFA (0.647 mL, 8.40 mmol). Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 16 časova. Zatim je smeša koncentrovana da bi se dobio 2-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-4H-piran-4-on (800 mg, 3.10 mmol, 73.9% prinos). TLC (PE/EA =1:1, Rf=0.2): 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8.12 (d,/=6.0 Hz, IH), 6.53 (d, /= 2.4 Hz, IH), 6.39 (dd,J=2.4, 6.0 Hz, IH), 1.53 (s, 6H). ES-LCMSmlz207.1 (M+H).
Korak 3: 2-(l,l,l l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-4(l//)-on
[0596]
[0597]Smeša 2-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-4if-piran-4-ona (800 mg, 3.88 mmol) u NH4OH (8 mL, 205 mmol) je mešana na 90°C u trajanju od 1 časa. Zatim je smeša koncentrovana, triturisana sa MeOH (20 mL) i filtrirana. Filtrat je koncentrovan i prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (DCM/MeOH = 9:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (DCM/MeOH = 9:1, Rf= 0.2) su spojene i koncentrovane da bi se proizvelo žuto ulje 2-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-4(l//)-ona (700 mg, 2.90 mmol, 74.7% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 7.87 (d, .7=7.2 Hz, IH), 6.70 (d,J=2.4 Hz, IH), 6.54 (dd,J=2.4, 7.2 Hz, IH), 1.60 (s, 6H). ES-LCMS m/z 206.1
(M+H).
Korak 4: 5-nitro-2-(l, 1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-4( lH)- on
[0598]
[0599]U smešu 2-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-4(l//)-ona (300 mg, 1.462 mmol) u H2SO4(8 mL, 150 mmol) dodata je azotna kiselina (3.27 mL, 73.1 mmol). Smeša je mešana na 90°C u trajanju od 15 časova. Zatim je smeša dodata u ledenu vodu i bazifikovana vodenim rastvorom NaOH. Smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan i prečišćen pomoću preparativne TLC (DCM/MeOH = 9:1, Rf = 0.1) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 5-nitro-2-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-4(li7)-ona (100 mg, 0.380 mmol, 26.0% prinos): IH NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8.82 (s, IH), 6.95 (s, IH), 1.64 (s, 6H). ES-LCMSmlz251.1
(M+H).
Korak 5: 4-bromo-5-nitro-2-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin
106001
[0601]U smešu 5-nitro-2-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-4(l//)-ona (100 mg, 0.400 mmol) u DCE (10 mL) dodatje fosforil tribromid (138 mg, 0.480 mmol). Smeša je mešana na 85°C u trajanju od 1 časa. Zatim je smeša dodata u vodeni rastvor NaHC03. Smeša je ekstrahovana sa EA (50 mL x 2). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgS04, filtrirani i koncentrovani da bi se dobio 4-bromo-5-nitro-2-( 1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin (60 mg, 0.096 mmol, 24.0%) prinos). TLC (PE/EA = 10:1, Rf = 0.6): 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8.74 (s, IH), 6.83 (s, IH), 1.54 (s, 6H). ES-LCMS
mlz 312.9 (M+H).
Korak 6: 4-bromo-6-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-3-amin
[0602]
[0603]U smešu 4-bromo-5-nitro-2-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridina (50 mg, 0.160 mmol) u EtOH (10 mL) dodat je kalaj(II) hlorid dihidrat (180 mg, 0.799 mmol). Smeša je mešana na 85°C u trajanju od 16 časova. Zatim je smeša dodata u vodeni rastvor NaHCCb. Smeša je ekstrahovana sa EA (50 mL x 2). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSCU, filtrirani i koncentrovani. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 2:1, Rf= 0.5) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 4-bromo-6-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-3-amina (30 mg, 0.090 mmol, 56.4% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 8.05 (s, IH), 7.58 (s, IH), 1.56 (s, 6H). ES-LCMSmlz283.1 (M+H).
Korak 7: 7V-(4-bromo-6-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-3 -il)-2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0604]
[0605]U smešu 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (30 mg, 0.073 mmol) u piridinu (5 mL) dodat je 4-bromo-6-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-3-amin (20.64 mg, 0.073 mmol) i T3P<®>(EA solvat) (0.5 mL, 0.073 mmol). Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 1 časa. Smeša je koncentrovana i prečišćena pomoću preparativne TLC (DCM/MeOH = 15:1, Rf= 0.6) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 7V-(4-bromo-6-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-3 -il)-2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (30 mg, 0.038 mmol, 51.7% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 8.84 (s, IH), 7.99 (s, IH), 7.90 (s, IH), 7.46 (d,J=7.6 Hz, IH), 7.40 (d,J=8.4 Hz, 2H), 7.33 (d,J=9.6 Hz, 2H), 6.94 (d,J=8.4 Hz, 2H), 6.48 (s, IH), 5.30 (s, 2H), 4.16 (q,J=6.8 Hz, 2H), 3.93 (s, 2H), 3.82 (s, 3H), 1.63 (s, 6H), 1.40 (t,J=7.0 Hz, 3H). ES-LCMSmlz678.0 (M+H+2).
Korak 8: 2-(4-(4-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-jV-(6-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-3 -il)acetamid hidrohlorid
[0606]
[0607]U smešu AL(4-bromo-6-( 1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-3-il)-2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (30 mg, 0.044 mmol) u DCM (10 mL) dodatje Pd/C (4 mg, 0.038 mmol). Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 72 časa pod H2. Smeša je filtrirana i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (kolona: ASB C18 150<*>25mm; pokretna faza A: voda+0.1% HC1; pokretna faza B: MeCN; stopa protoka: 25 mL/min; opis gradijentnog profila: 45-75 (B%)) da bi se proizvela prljavo bela čvrsta supstanca 2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<f->
(6-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-3-il)acetamid hidrohlorida (7.91 mg, 0.015 mmol, 34.6% prinos). TLC (DCM/MeOH = 9:1, Rf=0.2):<>>H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 9.08 (d,J=2.0 Hz, IH), 8.32 (dd,J=2.4, 8.8 Hz, IH), 7.93 (d,J=8.8 Hz, IH), 7.81 (s, IH), 7.44 (t,J=8.0 Hz, IH), 7.34-7.27 (m, 2H), 6.39 (s, IH), 4.25 (q,J=7.2 Hz, 2H), 3.89 (s, 2H), 1.69 (s, 6H), 1.41 (t,J=7.2 Hz, 3H). ES-LCMSmlz478.1 (M+H).
Primer 38: 7V-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0608]
Korak 1: A<L>(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)-piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0609]
[0610]U rastvor 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (1 g, 2.431 mmol) i 4-amino-2-(trifluorometil)benzonitrila (0.452 g, 2.431 mmol) u piridinu (3.93 mL, 48.6 mmol) lagano je dodat T3P<®>(4.64 g, 7.29 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 0.5 časa. Reakcija je ugašena sa H2O (10 mL) i ekstrahovana sa DCM (20 mL x 5). Spojeni organski ekstrakti su sušeni, filtrirani i koncentrovani. Prečišćavanje hromatografijom na koloni (PE/EA=5/1, Rf= 0.6) dalo je Ar-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid (870 mg, 1.351 mmol, 55.6% prinos). 'H NMR (400 MHz, CĐCh- đ) : 8 8.02 (s, IH), 7.98 (s, IH), 7.77(d, J=8.8 Hz, IH), 7.41( d, J= 8.4 Hz, 2H),7.30-7.45 (m, 5H), 6.93 (d, / = 8 Hz, 2H), 6.33 (s, IH), 5.33 (d,J=8 Hz, 2H), 4.09 (q, /= 6.8 Hz, 2H), 3.83 (s, 5H), 1.41 (t,J=6.8 Hz, 3H); LCMS (m/z): 580.0 (M+H).
Korak 2: A<r->(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil) acetamid
[0611]
[0612]U rastvor A<r->(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (870 mg, 1.501 mmol) u DCM (10 mL) dodatje TFA (1.157 mL, 15.01 mmol) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Smeša je bazifikovana sa NH4OH (5 mL, 20%) do pH=8, filtrirana da bi se dobila čvrsta supstanca, koja je isprana sa H2O (5 mL) i sušena da bi se dobio proizvod iV-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid (462.91 mg, 0.973 mmol, 64.8% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 8.24 (s, IH), 7.96-8.05 (m, IH), 7.90-7.96 (m, IH), 7.36-7.40 (m, 2H), 7.20-7.28 (m, 2H), 6.00 (s, IH), 4.12( q, J=7.2 Hz, 2H), 3.85 (s, 2H), 1.38(t, J=7.2 Hz, 3H): LCMS (m/z): 459.9
(M+H).
Primer 39: 2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<f->(3-(2-morfolinoetoksi)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0613]
Korak 1: 4-(2-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenoksi)etil)morfolin
[0614]
[06151Smeša l-fluoro-3-nitro-5-(trifluorometil)benzena (800 mg, 3.83 mmol), 2-morfolinoetanola (552 mg, 4.21 mmol) i K2CO3(1586 mg, 11.48 mmol) u DMF (20 mL) je mešana na 90°C u trajanju od 10 časova. Smeša je koncentrovana. U ostatak je dodat DCM (150 mL) i smeša je mešana u trajanju od 10 min i zatim filtrirana. Filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA = 10:1 ~5:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 5:1, Rf = 0.6) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca 4-(2-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenoksi)etil)morfolin (600 mg, 1.780 mmol, 46.5% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh): 5 8.02 (s, IH), 7.87 (s, IH), 7.43 (s, IH), 4.16 (t,J=5.6 Hz, 2H), 3.72-3.63 (m, 4H), 2.79 (t,J=5.6 Hz, 2H), 2.58-2.47 (m, 4H). ES-LCMSm/ z:321 (M+H).
Korak 2: 3-(2-morfolinoetoksi)-5-(trifluorometil)anilin
[0616]
[0617]U smešu 4-(2-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenoksi)etil)morfolina (600 mg, 1.873 mmol) u MeOH (50 mL) dodatje Pd/C (19.94 mg, 0.187 mmol) pod N2. Smeša je mešana pod H2na 25°C u trajanju od 5 časa. Smeša je filtrirana, i filtrat je koncentrovan da bi se dobilo žuto ulje 3-(2-morfolinoetoksi)-5-(trifluorometil)anilina (500 mg, 1.490 mmol, 80% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh): 5 6.52 (d,J=9.2 Hz, 2H), 6.35 (s, IH), 4.12-4.02 (m, 2H), 3.82 (s, 2H), 3.76-3.66 (m, 4H), 2.78(t, J=5.6 Hz, 2H), 2.57(d, J=4.0 Hz, 4H). ES-LCMSmlz:291 (M+H).
Korak 3: 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-Af-(3-(2-morfolino-etoksi)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0618]
[0619]U smešu 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (70.9 mg, 0.172 mmol) i 3-(2-morfolinoetoksi)-5-(trifluorometil)anilina (50 mg, 0.172 mmol) u piridinu (5 mL) ukapavanjem je dodat T3P<®>(50% in EA, 0.3 mL) i smeša je mešana na 25°C u trajanju od 1 časa. Smeša je ugašena hladnom vodom (20 mL), ekstrahovana sa DCM/MeOH (10:1, zapr./zapr., 20 mL x 3). Organski sloj je sušen preko Na2S04i koncentrovan da bi se dobila prljavo bela čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(3-(2-morfolinoetoksi)-5-(trifluorometil)fenil)acetamida (80 mg, 0.111 mmol, 64.5% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 7.94 (d,J=1.8 Hz, IH), 7.54 (s, IH), 7.48 (s, IH), 7.45-7.35 (m, 6H), 6.95-6.88 (m, 3H), 5.35 (s, 2H), 4.20-4.10 (m, 4H), 3.80 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.73-3.66 (m, 4H), 2.81 (t,J=5.4 Hz, 2H), 2.59 (d,J=4.2 Hz, 4H), 1.41 (t,J=6.8 Hz, 3H). ESLCMSm/ z:684 (M+H).
Korak 4: 2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(3-(2-morfolinoetoksi)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0620]
[0621]Smeša 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-^V-(3-(2-morfolinoetoksi)-5-(trifluorometil)fenil)acetamida (80 mg, 0.117 mmol) i TFA (10 mL, 10% u DCM) je mešana na 25°C u trajanju od 2 časa. Smeša je koncentrovana. U ostatak je dodat NH3(6 mol/L u MeOH, 1 mL) i on je koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne TLC (DCM/MeOH = 15:1, Rf = 0.4) da bi se dobila prljavo bela čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<L>(3-(2-morfolinoetoksi)-5-(trifluorometil)fenil)acetamida (35.72 mg, 0.061 mmol, 51.7% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 6 7.59 (s, IH), 7.46 (s, IH), 7.43-7.37 (m, IH), 7.36-7.30 (m, 2H), 7.29 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.21 (d, /= 2.0 Hz, IH), 6.96 (s, IH), 4.23 (t,J =5.2 Hz, 2H), 4.11 (q,J =6.8 Hz, 2H), 3.79 (s, 2H), 3.78-3.69 (m, 4H), 3.02-3.00 (m, 2H), 2.80-2.79 (m, 4H), 1.45 (t,J=6.8 Hz, 3H). ES-LCMSmlz:564 (M+H).
Primer 40: 2-(4-(4-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(3-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamid
[0622]
Korak 1: 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(3-(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamid
[0623]
[0624]U smešu 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (1.060 g, 2.58 mmol) i 3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-amina (0.5 g, 2.58 mmol) u piridinu (20 mL) ukapavanjem je dodat T3P<®>(50% u EA, 5 mL, 2.58 mmol) i ona je mešana na 25°C u trajanju od 1 časa. Smeša je sipana u mešajuću hladnu vodu (100 mL). Smeša je mešana u trajanju od 0.5 časa i ostavljena da odstoji 10 časova. Dobijena čvrsta supstanca je filtrirana, isprana sa H2O (200 mL x 3) i TBME (200 mL x 2) i sušenain vacuoda bi se dobila prljavo bela čvrsta supstanca 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<r->(3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamida (1.5 g, 2.298 mmol, 89% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 7.96 (s, IH), 7.40-7.32 (m, 3H), 7.28 (d,J=9.6 Hz, 2H), 6.91 (d,J=8.8 Hz, 2H), 6.45 (s, IH), 6.38 (s, IH), 5.27 (s, 2H), 4.12 (q,J =7.2 Hz, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.79 (s, 3H), 1.53 (s, 6H), 1.37 (t,J=6.8 Hz, 3H). ES-LCMSmlz:588 (M+H).
Korak 2: 2-(4-(4-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(3-(1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamid
[0625]
[0626]U suspenziju 2-(4-(4-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<f->(3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamida (1.5 g, 2.55 mmol) u DCM (20 mL) ukapavanjem je dodat TFA (2 mL, 26.9 mmol). Smeša je mešana na 25°C u trajanju od 2 časa. Smeša je zatim koncentrovana. U ostatak je ukapavanjem dodata H2O (50 mL) i zatim neutralizovana sa zasićenim rastvorom NaiCCb da bi se podesio pH = 7.5. Talog je filtriran, ispran sa H2O (50 mL x 3)i sušen in vacuo.U čvrstu supstancu je dodat PE/EA (3:1, zapr./zapr., 30 mL) i ona je mešana u trajanju od 0.5 časa. Čvrsta supstanca je filtrirana, isprana sa PE/EA (3:1, zapr./zapr., 30 mL x 2). Čvrsta supstanca je ponovo rastvorena u DCM/MeOH (20:1, zapr./zapr, 50 mL) i zatim koncentrovanain vacuodo minimalne količine rastvarača (oko 10 mL). Čvrsta supstanca je filtrirana, isprana sa CH3CN (10 mL x 2) i sušenain vacuo.Ostatak je ponovo rastvoren u DCM/MeOH (10:1, zapr./zapr., 50 mL) i koncentrovanin vacuoda bi se dobila bela čvrsta supstanca 2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<L>(3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamida (440 mg, 0.938 mmol, 36.7% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 5 7.39-7.36 (m, IH), 7.36-7.30 (m, IH), 7.25-7.18 (m, 2H), 6.37 (s, IH), 5.99 (s, IH), 4.11 (q, /= 7.2 Hz, 2H), 3.82 (s, 2H), 1.53 (s, 6H), 1.37(t, J =6.8 Hz, 3H). ES-LCMSmlz:468 (M+H); CHN analitički izveštaj: srednja vrednost(%): N: 8.717;C: 55.32; H: 4.672.
Primer 41: 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(l-metil-3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-li7-pirazol-5-il)acetamid hidrohlorid
[0627]
Korak 1: 5,5,5-trifluoro-4,4-dimetil-3-oksopentanenitril
[0628]
[0629]U smešu acetonitrila (3.22 g, 44.1 mmol) u THF (60 mL) na -78°C dodatje «-BuLi (17.63 mL, 44.1 mmol). Smeša je mešana na -30°C u trajanju od 0.5 časa. Zatim je u smešu ukapavanjem dodat metil 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropanoat (5 g, 29.4 mmol). Zatim je smeša mešana u trajanju od još 1 časa. Smeša je ugašena zasićenim rastvorom NH4CI (50 mL) i ekstrahovana sa EA (100 mL x 2). Organski sloj je sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan da bi se proizvelo žuto ulje 5,5,5-trifluoro-4,4-dimetil-3-oksopentan nitrila (3 g, 16.75 mmol, 57.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD): 8 3.75 (s, 2H), 1.40 (s, 6H).
Korak 2: 1 -metil-3-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)- lif-pirazol-5-amin
[0630]
[0631]U smešu 5,5,5-trifluoro-4,4-dimetil-3-oksopentan nitrila (1 g, 5.58 mmol) u EtOH (10 mL) dodatje metilhidrazin (3.33 g, 28.9 mmol) i koncentrovana HC1 (0.5 mL). Zatim je smeša mešana na 100°C u trajanju od 18 časova. Zatim je smeša koncentrovana da bi se dobio ostatak koji je podeljen između DCM (20 mL) i H2O (10 mL) i ekstrahovan sa DCM (20 mL x 2). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko Na2S04, filtrirani i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (40%> EA: 60%> PE, 12 g kolona silicijum dioksida). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (EA : PE = 1:2, Rf = 0.2) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela bela čvrsta supstanca l-metil-3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-17f-pirazol-5-amina (500 mg, 2.293 mmol, 41.1% prinos): 'HNMR (400 MHz, CD3OD): 5 5.48 (s, IH), 3.56 (s, 3H), 1.42 (s, 6H). ES-LCMSmlz208 (M+H).
Korak 3: 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-iV-(l-metil-3-(1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)- lif-pirazol-5-il)acetamid
[0632]
[06331U smešu 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (150 mg, 0.365 mmol), l-metil-3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-lH-pirazol-5-amina (83 mg, 0.401 mmol) u piridinu (3 mL) dodatje T3P<®>(EA solvat) (0.3 mL, 0.365 mmol) na 25°C. Zatim je smeša mešana u trajanju od 2 časa, smeša je koncentrovana da bi se dobio ostatak koji je podeljen između DCM (20 mL) i H2O (10 mL) i ekstrahovan sa DCM (20 mL x 2). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko Na2S04, filtrirani i koncentrovani da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-lfuorofenil)-jV-( 1 -metil-3 -(1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)-l#-pirazol-5-il)acetamida (150 mg, 0.225 mmol, 61.7% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.52 (d,J=4.4 Hz, IH), 7.94 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.44-7.41 (m, 3H), 7.39 (d,J=8.8 Hz, 2H), 6.90 (d,/=8.8 Hz, 2H), 6.27 (s, IH), 5.35 (s, 2H), 4.13 (q, /= 7.1 Hz, 2H), 3.83 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.72-3.67 (m, 3H), 1.47 (s, 6H), 1.41 (t, /= 7.0 Hz, 3H). ES-LCMSm/ z601
(M+H).
Korak 4: 2-(4-(5 -etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3 -il)-2-fluorofenil)-7V-( 1 -metil-3 -(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-1 H-pirazol-5-il)acetamid hidrohlorid
[0634]
[0635]Smeša 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<f->(l-metil-3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-lif-pirazol-5-il)acetamida (150 mg, 0.250 mmol) u TFA1DCM (solvat) (10 mL, 10%) je mešana 0.5 časa na 25°C. Zatim je smeša koncentrovana da bi se dobio ostatak koji je prečišćen pomoću preparativne HPLC (kolona: ASB Ci8 150<*>25mm /pokretna faza A: voda (voda + 0.1%> HCl)/Pokretna faza B: Acetonitril/Gradijent: 37-67(B%>) /Stopa protoka: 25 mL/min/vreme: 15 min) da bi se proizveo 2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-( 1 -metil-3-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)- IH-pirazol-5-il)acetamid hidrohlorid (83.1 mg, 0.160 mmol, 63.9% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.48-7.41 (m, IH), 7.39 (s, IH), 7.37 (d,J=3.5 Hz, IH), 7.33 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.26 (d,/=2.0 Hz, IH), 6.29 (s, IH), 4.15 (q,/=7.0 Hz, 2H), 3.86 (s, 2H), 3.73 (s, 3H), 1.51 (s, 6H), 1.50 - 1.45 (m, 3H). ES-LCMSmlz481 (M+H).
Primer 42: 2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(3-(l, 1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)- l/7-pirazol-5-il)acetamid hidrohlorid
[0636]
Korak 1: 5,5,5-trifluoro-4,4-dimetil-3-oksopentannitril
[0637]
[0638]U smešu acetonitrila (3.22 g, 44.1 mmol) u THF (60 mL) na -78°C dodatje n-BuLi (17.63 mL, 44.1 mmol, 2.5 mol/L). Smeša je mešana na -30°C u trajanju od 0.5 časa. Zatim je u smešu ukapavanjem dodat metil 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropanoat (5 g, 29.4 mmol). Zatim je smeša mešana u trajanju od još 1 časa. Smeša je ugašena zasićenim rastvorom NH4CI (50 mL), ekstrahovana sa EA (100 mL x 2). Organski sloj je sušen preko Na2S04, fdtriran i koncentrovan da bi se proizveo sirovi proizvod kao žuto ulje 5,5,5-trifluoro-4,4-dimetil-3-oksopentan nitrila (3 g, 16.75 mmol, 57.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 3.75 (s, 2H), 1.40 (s., 6H).
Korak 2: 3-(l, 1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)-lif-pirazol-5-amin
[0639]
[0640]U smešu 5,5,5-trifluoro-4,4-dimetil-3-oksopentan nitrila (2 g, 11.16 mmol) u EtOH (10 mL) dodatje hidrazin (1.263 g, 33.5 mmol) i koncentrovana HC1 (0.5 mL). Zatim je smeša mešana na 100°C u trajanju od 18 časova. Zatim je smeša koncentrovana da bi se dobio ostatak koji je podeljen između DCM (20 mL) i H2O (10 mL), i ekstrahovana sa DCM (20 mL x 2). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko Na2S04, filtrirani i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (100% EA, 12 g kolone silicijum dioksida). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod TLC (EA , Rf = 0.3) su spojene i koncentrovane da bi se proizvelo prljavo belo ulje 3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-17/-pirazol-5-amina (500 mg, 2.459 mmol, 22.03% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 5.58 (s, IH), 1.47 (s, 6H). ES-LCMSmlz194 (M+H).
Korak 3: 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3 -il)-2-fluorofenil)-Ar-(3 -(1,1,1-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-lif-pirazol-5-il)acetamid
[0641]
[0642]U smešu 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (100 mg, 0.243 mmol) i 3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-l//-pirazol-5-amina (51.6 mg, 0.267 mmol) u piridinu (3 mL) dodatje T3P<®>(EA solvat) (0.3 mL, 0.243 mmol) na 25°C. Zatim je smeša mešana u trajanju od 2 časa, smeša je koncentrovana da bi se dobio ostatak koji je podeljen između DCM (20 mL) i H2O (10 mL) i ekstrahovana sa DCM (20 mL x 2). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom (20 mL), sušeni preko NaiSCM, filtrirani i koncentrovani da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(3-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)- IH-pirazol-5-il)acetamida (100 mg, 0.102 mmol, 42.1% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 8.52 (d,J =4.2 Hz, IH), 7.93 (d,J =2.0 Hz, IH), 7.48-7.33 (m, 6H), 6.90 (d,J=8.6 Hz, 2H), 5.35 (s, 2H), 4.19-4.09 (m, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.70-3.63 (m, 2H), 1.54-1.36 (m, 9H). ES-LCMSmlz587 (M+H).
Korak 4: 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<L>(3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)- l/7-pirazol-5-il)acetamid hidrohlorid
[0643]
[0644]Smeša 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-lif-pirazol-5-il)acetamida (100 mg, 0.170 mmol) u TFA DCM (solvat) (10 mL, 10%) je mešana u trajanju od 0.5 časa na 25°C. Zatim je smeša koncentrovana da bi se dobio ostatak koji je prečišćen pomoću preparativne HPLC (kolona: ASB C18 150<*>25mm /Pokretna faza A: voda (voda + 0.1% HCl)/Pokretna faza B: Acetonitril/Gradijent:33-63 (B%)/Stopa protoka: 25 mL/min/vreme: 15 min) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(3-(l,l,l-trifluoro-2-metilpropan-2-il)-li7-pirazol-5-il)acetamid hidrohlorida (43.33 mg, 0.084 mmol, 49.2% prinos): 'H NMR (400 MHz, DMSO-^e) § 11.81 (s, IH), 10.68 (s, IH), 7.46-7.28 (m, 5H), 7.11( d, J= 2.0 Hz,IH), 6.41 (s, IH), 4.03( q, J=6.8 Hz, 2H), 3.66 (s, 2H), 1.45 (s, 6H), 1.32 (t,J= 6.9 Hz, 3H). ES-LCMSmlz467 (M+H).
Primer 43: Af-(4-(2,2-difluoro-3-hidroksipropil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0645]
i iKorak 1: Etil 2,2-difluoro-3-(2-(trifluorometil)fenil)propanoat1(16461
[0647]U smešu l-(bromometil)-2-(trifluorometil)benzena (0.5 g, 2.092 mmol) u DMSO (10 mL) dodat je etil 2,2-difluoro-2-jodoacetat (0.410 mL, 2.000 mmol) i bakar (0.439 g, 6.90 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na 20°C u trajanju od 10 časova. Smeša je ekstrahovana sa EA, isprana fiziološkim rastvorom i organski sloj je koncentrovan da bi se dobio etil 2,2-difluoro-3-(2-(trifluorometil)fenil)propanoat (320 mg, 0.981 mmol, 46.9% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD-CI4) 8 7.72 (d,J= 7.8 Hz, IH), 7.60-7.45 (m, 3H), 4.26 (d,J =7.1 Hz, 2H), 3.63 (t,/= 16.9 Hz, 2H), 1.24 (t,J =7. 2 Hz, 3H).
Korak 2: 2,2-Difluoro-3-(4-nitro-2-(trifluorometil)fenil)propanoat
[0648]
[0649]U smešu etil 2,2-difluoro-3-(2-(trifluorometil)fenil)propanoata (250 mg, 0.886 mmol) u H2SO4(5 mL) dodata je kalijum nitoperoksi kiselina (99 mg, 0.974 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na 20°C u trajanju od 2 časa. TLC (PE/EA = 5:1, Rf= 0.6) je pokazala daje reakcija završena. Smeša je sipana u led-vodu. Smeša je ekstrahovana sa EA (10 mL x 3) i isprana vodom. Organski sloj je koncentrovan da bi se dobio etil 2,2-difluoro-3-(4-nitro-2-(trifluorometil)fenil)propanoat (230 mg, 0.643 mmol, 72.6% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD-d4) 8 8.56 (d,J= 2.2 Hz, IH), 8.48 (dd,J=2.4, 8.6 Hz, IH), 7.86 (d,J=8.6 Hz, IH), 4.31 (q,7=7.1 Hz, 2H), 3.80 (t,J=17.0 Hz, 2H), 1.29 (t,J=7.2 Hz, 3H).
Korak 3: Etil 3-(4-amino-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-difluoropropanoat
[0650]
[0651]U smešu etil 2,2-difluoro-3-(4-nitro-2-(trifluorometil)fenil)propanoata (220 mg, 0.672 mmol) u MeOH (lOmL) dodatje Pd/C (71.6 mg, 0.672 mmol) pod N2. Smeša je zatim mešana pod atmosferom H2u trajanju od 1 časa. LCMS i TLC (PE/EA = 5:1, Rf = 0.3) su pokazale da je reakcija završena. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan da bi se dobio etil 3-(4-amino-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-difluoropropanoat (190 mg, 0.573 mmol, 85% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD-d4)8 7.15(s, IH), 6.97 (d, 7 = 2.2 Hz, IH), 6.81(dd, J= 2.1, 8.4 Hz, IH),4.24 (q,J=7.1 Hz, 2H), 3.42 (t,J=16.8 Hz, 2H), 1.24 (t,J=7.1 Hz, 3H). ES-LCMSmlz298
(M+H).
Korak 4: Etil 3-(4-(2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamido)-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-difluoropropanoat
[0652]
[0653]U smešu 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (150 mg, 0.365 mmol) u piridinu (2 mL) dodati su etil 3-(4-amino-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-difluoropropanoat (108 mg, 0.365 mmol) i T3P<®>(EA solvat) (464 mg, 0.729 mmol). Smeša je mešana na 20°C u trajanju od 1 časa. LCMS i TLC (PE/EA = 1:1, Rf = 0.5) su pokazali daje reakcija završena. Smeša je koncentrovana i zatim je prečišćena pomoću TLC (PE/EA = 1:1, Rf=0.5) da bi se dobio etil 3-(4-(2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamido)-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-difluoropropanoat (120 mg, 0.150 mmol, 41.2% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD-d4) 8 8.08-8.02 (m, IH), 7.94 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.78 (s, IH), 7.54-7.33 (m, 7H), 6.90 (d,J= 8.8 Hz, 2H), 5.35 (s, 2H), 4.26 (q,J =7.3 Hz, 2H), 4.13 (q,J=7.1 Hz, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.63-3.52 (m, 2H), 1.41 (t,J=7.1 Hz, 3H), 1.25 (t,J=7.2 Hz, 3H);ES-LCMSm/ z691
(M+H).
Korak 5:A<f->(4-(2,2-difluoro-3-hidroksipropil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0654]
[0655]U smešu etil 3-(4-(2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamido)-2-(trifluorometil)fenil)-2,2-difluoropropanoata (100 mg, 0.145 mmol) u THF (5 mL) dodatje LAH (5.50 mg, 0.145 mmol) na 0°C. Smeša je mešana u trajanju od 1 časa. LCMS i TLC (PE/EA = 1:1, Rf= 0.2) su pokazali daje reakcija završena. Reakcija je ugašena vodom (0.3 mL). Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan da bi se dobio A<L>(4-(2,2-difluoro-3-hidroksipropil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid (80 mg, 0.104 mmol, 71.6% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD-CI4) 8 8.01 (s, IH), 7.94 (d, 7=2.0 Hz, IH), 7.77 (d,J=8.6 Hz, IH), 7.52 (d,J=8.8 Hz, IH), 7.47-7.27 (m, 6H), 6.90 (d,J=8.8 Hz, 2H), 5.35 (s, 2H), 4.22-4.11 (m, 2H), 3.82-3.75 (m, 3H), 3.67 (t,J=13.0 Hz, 2H), 3.47-3.37 (m, 2H), 3.37-3.34 (m, 2H), 1.41 (t,J=7.1 Hz, 3H). ES-LCMSm/ z649 (M+H).
Korak 6: A<f->(4-(2,2-difluoro-3-hidroksipropil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0656]
[0657]Smeša A<f->(4-(2,2-difluoro-3-hidroksipropil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (50 mg, 0.077 mmol) u DCM (5mL) dodatje TFA (0.012 mL, 0.154 mmol). Smeša je mešana na 20°C u trajanju od 1 časa. LCMS je pokazala da je reakcija završena. Smeša je koncentrovana da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću preparativne HPLC (kolona: ASB C18 150<*>25mm; Pokretna faza A: voda + 0.1% HC1; Pokretna faza B: MeCN; Stopa protoka:25mLl/min; opis gradijentnog profila: 26-56 (B%>)) da bi se dobio A^-(4-(2,2-difluoro-3-hidroksipropil)-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
(16.72 mg, 0.032 mmol, 41.0% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD-04) 8 8.01 (s, IH), 7.76 (d,J=8.4 Hz, IH), 7.52 (d,J=8.4 Hz, IH), 7.40 (d,J=7.5 Hz, IH), 7.36-7.26 (m, 3H), 7.23 (s, IH), 4.12 (d,J=7.1 Hz, 2H), 3.80 (s, 2H), 3.68 (t,J=12.8 Hz, 2H), 3.41 (t,J=17 A Hz, 2H), 1.45 (t,J=6.9 Hz, 3H). ES-LCMSm/ z529(M+H).
Primer 44: 7V-(3-(2/f-tetrazol-5-il)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0658]
Korak 1: 3-nitro-5-(trifluorometil)benzoil hlorid
[0659]
[0660]U smešu 3-nitro-5-(trifluorometil)benzojeve kiseline (2 g, 8.51 mmol) u DCM (30mL) dodatje SOCI2(1.242 mL, 17.01 mmol) na 20°C. Smeša je mešana na 20°C u trajanju od 2 časa. TLC (PE/EA = 2:1, Rf = 0.3) je poakzala daje reakcija završena. Smešaje koncentrovana da bi se dobio 3-nitro-5-(trifluorometil)benzoil hlorid (1.8 g, 6.50 mmol, 76 % prinos).
Korak 2: 3-Nitro-5-(trifluorometil)benzamid
[0661]
[0662]U smešu 3-nitro-5-(trifluorometil)benzoil hlorida (1.8 g, 7.10 mmol) u THF (20 mL) dodatje NH4OH (2.96 mL, 21.30 mmol) na 20°C. Smešaje mešana na 20°C u trajanju od 12 časova. LCMS je pokazala da je reakcija završena. Smeša je ekstrahovana sa EA, isprana vodom i koncentrovana da bi se dobio 3-nitro-5-(trifluorometil)benzamid (1.5 g, 5.86 mmol, 83% prinos): 'H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 8.91 (s, IH), 8.62 (br.s, 2H), 8.53 (s, IH), 7.93 (s., IH). ES-LCMSmlz235 (M+H).
Korak 3: 3-Nitro-5-(trifluorometil)benzonitril
[0663]
[0664]U smešu 3-nitro-5-(trifluorometil)benzamida (1.5 g, 6.41 mmol) u DCM (20mL) dodati su Et3N (1.314 mL, 9.61 mmol) i anhidrid trifluorosirćetne kiseline (1.357 mL, 9.61 mmol) na 20°C. Smešaje mešana na 20°C u trajanju od 2 časa. TLC (PE/EA = 3:1, Rf = 0.6) je pokazala da je reakcija završena. Reakcija je koncentrovana da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen hromatografijom na koloni (PE/EA = 3:1, Rf= 0.6) da bi se dobio 3-nitro-5-(trifluorometil)benzonitril (1.2 g, 5.14 mmol, 80% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCb-d) 8 8.71 (s, 2H), 8.24 (s, IH).
Korak 4: 5-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-2if-tetrazol
[06651
[0666]U smešu 3-nitro-5-(trifluorometil)benzonitrila (400 mg, 1.851 mmol) u DMF (20mL) dodatje natrijum azid (361 mg, 5.55 mmol) na sobnoj temperaturi. Smešaje mešana na 120°C preko noći. LCMS je pokazala daje reakcija završean. Reakcija je ugašena vodom. Smešaje ekstrahovana sa EA (20 mL x 3), isprana vodom i koncentrovana da bi se dobio 5-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-2H-tetrazol (220 mg, 0.743 mmol, 40.1% prinos): 'H NMR (400 MHz, DMSO-de) 8 9.03 (s, IH), 8.73 (s, IH), 8.66 (s, IH), 7.92 (s, IH). ES-LCMSmlz260 (M+H).
Korak 5: 3-(2//-tetrazol-5-il)-5-(trifluorometil)anilin
106671
[0668]U smešu 5-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-2/f-tetrazola (220 mg, 0.849 mmol) u MeOH (10 mL) dodat je Pd/C (45.2 mg, 0.424 mmol) pod N2. Smeša je mešana na 20°C pod atmosferom H2u trajanju od 1 časa. LCMS je pokazala da je reakcija završena. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan da bi se dobio 3-(2//-tetrazol-5-il)-5-(trifluorometil)anilin (200 mg, 0.781 mmol, 92% prinos): 'HNMR (400 MHz, METANOL-di) 8 7.96 (s, IH), 7.71 (s, IH), 7.32 (s, IH). ES-LCMS (m/z) 230 (M+H).
Korak 6:7V(3-(2if-tetrazol-5-il)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0669]
[0670]U smešu 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil) sirćetne kiseline (100 mg, 0.243 mmol) u piridinu (10 mL) dodati su 3-(2//-tetrazol-5-il)-5-(trifluorometil)anilin (55.7 mg, 0.243 mmol) i T3P<®>(EA solvat) (220 mg, 0.346 mmol). Smeša je mešana na 20°C u trajanju od 1 časa. LCMS je pokazala daje reakcija završena. Reakcija je ugašena ledom-vodom. Smešaje koncentrovana da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću TLC da bi se dobio A<L>(3-(2/f-tetrazol-5-il)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fiuorofenil) acetamid (75 mg, 0.104 mmol, 42.9% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD-04) 5 8.62 (d,J= 4.4 Hz, 2H), 8.04 (d,J =1.5 Hz, IH), 7.94 (s, IH), 7.61 (dd,J=6.1, 7.8 Hz, 2H), 7.38 (d,J=8.6 Hz, 3H), 6.92-6.85 (m, 3H), 5.35 (s, 2H), 4.15 (d,J=6.8 Hz, 2H), 3.77 (s, 2H), 3.38-3.33 (m, 3H), 1.30-1.18 (m, 3H). ES-LCMSmlz623(M+H).
Korak 7: A^-(3-(2//-tetrazol-5-il)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0671]
[0672]U smešu 7V-(3-(2/f-tetrazol-5-il)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil) oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (30 mg, 0.048 mmol) u DCM (5mL) dodatje TFA (7.42 uL, 0.096 mmol). Smešaje mešana na 20°C u trajanju od 1 časa. LCMS je pokazala daje reakcija završena. Smešaje koncentrovana da bi se dobio sirovi proizvod, koji je prečišćen pomoću preparativne HPLC (kolona: ASB C18 150<*>25mm; Pokretna faza A: voda +0.1% HC1; Pokretna faza B: MeCN; Stopa protoka:25mLl/min; opis gradijentnog profila: 30-66 (B%)) da bi se dobio 7V-(3-(2//-tetrazol-5-il)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid(5.12mg, 10.01 umol, 20.8% prinos): 'HNMR (400 MHz, DMSO-de) 5 11.83 (br. s., IH), 11.33 (s, IH), 10.85 (s, IH), 8.69-8.57 (m, IH), 8.21 (s, IH), 8.01 (s, IH), 7.47 (d,J=11.7 Hz, IH), 7.42-7.27 (m, 3H), 7.12 (br. s., IH), 4.03 (d,J= 6.8 Hz, 2H), 3.79 (s, 2H), 1.31 (t,J=6.8 Hz, 3H). ES-LCMSm/ z503(M+H).
Primer 45:2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(3-(l -metil- IH-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid hidrohlorid
Korak 1: l-Metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)-lif-pirazol
[0674]
[0675]Suspenzija 4-bromo-l-metil- 1/f-pirazola (2 g, 12.42 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(l,3,2-dioksaborolana) (3.47 g, 13.66 mmol), KOAc (2.438 g, 24.84 mmol), PdCb(dppf) (0.909 g, 1.242 mmol) u 1,4-dioksanu (20 mL) zagrevana je do 100°C u trajanju od 5 časova pod atmosferom N2. Smeša je koncentrovana da bi se dobio ostatak koji je ekstrahovan sa DCM (15 mL x 2). Organski ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom (20 mL), sušen preko Na2S04, filtriran i koncentrovan, i zatim je sirovi proizvod prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (10% EA: 90% petrol etar, 4 g kolone silicijum dioksida). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod TLC (EA : petrol etar =1:1, Rf =0.3) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela žuta čvrsta supstanca 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)-lif-pirazola (700 mg, 3.36 mmol, 27.1%> prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7.77 (s, IH), 7.66 (s, IH), 3.92 (s, 3H), 1.32 (s, 12H). ES-LCMSmlz209 (M+H).
Korak 2: l-metil-4-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-l//-pirazol
[0676]
[0677]Suspenzija l-bromo-3-nitro-5-(trifiuorometil)benzena (1 g, 3.70 mmol) u 1,4-dioksanu (12 mL) i vodi (4 mL) dodata je u rastvor l-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)-17f-pirazola (0.771 g, 3.70 mmol) u 1,4-dioksanu (12 mL) i vodi (4 mL). Dodati su PdCb(dppf) (0.271 g, 0.370 mmol) i CS2CO3(2.413 g, 7.41 mmol) i smešaje zagrevana na 100°C u trajanju od 20 min. Smešaje zatim hlađena do sobne temperature. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između EA i zasićenog rastvora NaHCCh. Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgS04, filtrirani i koncentrovani. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silicijum dioksida (PE/EA =1:1). Sve frakcije za koje je pomoću TLC nađeno da sadrže proizvod (PE/EA = 5:1, Rf= 0.3) su spojene i koncentrovane da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca l-metil-4-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-l#-pirazola (300 mg, 1.106 mmol, 29.9% prinos): 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 8.47 (s, IH), 8.31 (s, IH), 7.99 (s, IH), 7.89 (s, IH), 7.81 (s, IH), 4.01 (s, 3H). ESLCMS m/z 272 (M+H).
Korak 3: 3-(l-metil-l//-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)anilin
[0678]
[0679]U suspenziju l-metil-4-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenil)-li/-pirazola (300 mg, 1.106 mmol) u MeOH (10 mL) dodatje Pd/C (118 mg, 1.106 mmol). Smešaje hidrogenizovana na 40 psi na 28°C u trajanju od 12 časova pod atmosferom H2. Zatim je rastvor filtriran i koncentrovan da bi se proizveo 3-(l-metil-l/f-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)anilin (240 mg, 0.995 mmol, 90% prinos). TLC (PE/EA =1:1, Rf = 0.3): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.98 (s, IH), 7.81 (s, IH), 7.16 (d,J=13 Hz, 2H), 6.88 (s, IH), 3.92 (s, 3H). ES-LCMS m/z 242
(M+H).
Korak 4: 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenii)-jV-(3-(1 -metil-17f-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid
[0680]
[0681]U rastvor 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (100 mg, 0.243 mmol) i 3-(l-metil-lif-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)anilina (58.6 mg, 0.243 mmol) u piridinu (2 mL) dodatje T3P<®>(0.5 mL, 0.243 mmol) na 27°C pod N2. Smešaje mešana na 27°C u trajanju od 30 min. LCMS je pokazala da je reakcija završena. Zatim je smeša postavljena u led (5 g). Smeša je koncentrovana da bi se dobio ostatak. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne TLC (DCM/MeOH = 10:1, Rf = 0.6) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(3-(1-metil-l//-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamida (138 mg, 0.217 mmol, 89% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.09-7.93 (m, 2H), 7.87-7.76 (m, 2H), 7.69-7.52 (m, 2H), 7.49-7.33 (m, 4H), 7.23(dd, J=7.8, 16.4 Hz, 2H), 6.91(d, J=1. 9 Hz, IH), 6.72(d, J =8.4 Hz, IH), 5.38-5.15 (m, 2H), 4.15( d, J =7.1 Hz, 2H), 3.94-3.60 (m, 8H), 1.42 (t,J=6.8 Hz, 3H). ES-LCMSmlz635 (M+H). Korak 5: 2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Af-(3-( 1 -metil- 1H-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid hidrohlorid [0682J
[0683]Rastvor TFA (10% u DCM, 10 mL) dodat je u suspenziju 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(3-(l-metil-lif-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamida (138 mg, 0.217 mmol) u DCM (5 mL). Smešaje mešana na 26°C u trajanju od 3 časa. Zatim je rastvor koncentrovan između 40°C i 45°C. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (instrument: DC /kolona: ASB Ci8 150<*>25mm /Pokretna faza A: voda +0.1%> HCl/Pokretna faza B: MeCN / Stopa protoka: 25 mL/min / opis gradijentnog profila: 18-38 (B%>)) da bi se dobila prljavo bela čvrsta supstanca 2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A-(3-( 1 -metil- l//-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid hidrohlorida (31.5 mg, 0.057 mmol, 26.3% prinos). TLC (DCM/MeOH = 10:1, Rf = 0.6): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 8.22 (s, IH), 8.11-8.02 (m, 2H), 7.84 (s, IH), 7.73 (d,/= 2.5 Hz, 2H), 7.60 (s, IH), 7.55-7.43 (m, 3H), 4.30 (q,J= 6.7 Hz, 2H), 4.01 (s, 3H), 3.88 (s, 2H), 1.51 (t,/=7.0 Hz, 3H). ES-LCMSmlz515 (M+H).
Primer 46: A<f->(3-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0684]
Korak 1: Ar,ALdimetil-2-(3-nitro-5-(trilfuorornetil)fenoksi)etanarnin
[0685]
[0686]Suspenzija 2-(dimetilamino)etanola (128 mg, 1.435 mmol) u DMF (5 mL) dodata je u rastvor l-fluoro-3-ni1xo-5-(trifluorometil)benzena (200 mg, 0.956 mmol) u DMF (5 mL). Dodat je K2CO3(264 mg, 1.913 mmol) i smešaje mešana na 80°C u trajanju od 8 časova. Smešaje hlađena do sobne temperature. Zatim je rastvor koncentrovan i podeljen između etil acetata i zasićenog rastvora NaHCCb. Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSCU, filtrirani i koncentrovani. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne TLC (PE/EA = 5:1, Rf = 0.6) da bi se proizvela svetio žuta čvrsta supstancaN, N-dimetil-2-(3-nitro-5-(trifluorometil)fenoksi)etanamina (75 mg, 0.270 mmol, 28.2% prinos): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.22-8.02 (m, 2H), 7.72 (s, IH), 4.43 (t,7=5.1 Hz, 2H), 3.26 (t,J=4.9 Hz, 2H), 2.78-2.60 (m, 6H). ES-LCMSm/ z279 (M+H).
Korak 2: 3-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)anilin
[0687]
[0688]Suspenzija Af,Af-dimetil-2-(3-nitro-5-(trifiuorometil)fenoksi)etanamina (75 mg, 0.270 mmol) u MeOH (5 mL) dodatje u rastvor Pd/C (57.4 mg, 0.539 mmol) u MeOH (5 mL). Smeša je hidrogenizovana na 26°C u trajanju od 3 časa pod atmosferom H2. Zatim je rastvor filtriran i koncentrovan da bi se dobio 3-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)anilin (60.3 mg, 0.243 mmol, 90% prinos). TLC (PE/EA =1:1, Rf = 0.5): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 6.56 (s, IH), 6.48 (s, 2H), 4.24-4.17 (m, 2H), 3.18 (t,J=5.1 Hz, 2H), 2.67 (s, 6H). ES-LCMS m/z 249 (M+H).
Korak 3: A<L>(3-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0689]
[0690]U rastvor 2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)sirćetne kiseline (100 mg, 0.243 mmol) i 3-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)anilina (60.3 mg, 0.243 mmol) u piridinu (2 mL) dodatje T3P<®>(0.5 mL, 0.243 mmol) na 27°C pod N2. Smešaje mešana na 27°C u trajanju od 30 min. LCMS je pokazala da je reakcija završena. Zatim je smeša postavljena u led (10 mg). Talog je filtriran i ponovo rastvoren u DCM (5 mL). Rastvor je ispran vodom (5 mL x 2), i spojeni organski ekstrakti su sušeni preko Na2S04, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je suspendovan u PE/EA (2:1, zapr./zapr., 8 mL) i mešan u trajanju od 10 min. Čvrsta supstanca je filtrirana, i isprana sa PE/EA (2:1, zapr./zapr., 10 mL) i sušenain vacuoda bi se dobila prljavo bela čvrsta supstancaA<r->(3-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (100 mg, 0.156 mmol, 64.1% prinos). TLC (PE/EA = 1:1, Rf = 0.3): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 7.97-7.92 (m, IH), 7.76 (br. s., IH), 7.48-7.37 (m, 7H), 7.04 (s, IH), 6.91( d, J =8.6 Hz, 2H), 5.36 (s, 2H), 4.14 (q,J=7.1 Hz, 4H), 3.86-3.78 (m, 5H), 2.97 (br. s., 8H), 1.42 (t,J=6.9 Hz, 4H). ES-LCMS m/z 642 (M+H).
Korak 4: A<L>(3-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid
[0691J
[0692]U suspenziju A<L>(3-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-((4-metoksibenzil)oksi)piridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamida (100 mg, 0.156 mmol) u MeOH (10 mL) dodatje Pd/C (16.59 mg, 0.156 mmol). Smešaje hidrogenizovana na 26°C u trajanju od 3 časa pod atmosferom H2. Zatim je rastvor filtriran i koncentrovan da bi se dobio ostatak. Sirovi materijal je prečišćen pomoću preparativne HPLC (Instrument: Gilson GX281 /kolona: Gemini 150<*>25mm<*>5um /Pokretna faza A: voda (0.05% rastvor amonijaka)/Pokretna faza B: Acetonitril/Gradijent: 52-82(B%)/Stopa protoka: 25 mL/min/vreme: 10 min) da bi se proizvela bela čvrsta supstanca 7V-(3-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid (41.16 mg, 0.079 mmol, 50.6%> prinos). TLC (DCM/MeOH = 10:1, Rf = 0.4): 'H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.56-7.47 (m, 2H), 7.46-7.39 (m, IH), 7.38-7.29 (m, 3H), 7.24(d, J= 2. 2Hz, IH), 6.96 (s, IH), 4.19-4.09 (m, 4H), 3.80 (s, 2H), 2.81 (t,J=5.3 Hz, 2H), 2.36 (s, 6H), 1.47 (t,J=6.9 Hz, 3H). ES-LCMS m/z 522
(M+H).
Biološke analize
[0693]Jedinjenje prema predmetnom pronalasku je testirano u odnosu na inhibitornu aktivnost na RET kinazu u analizi enzima RET kinaze, mehanističkoj analizi na bazi ćelija i analizi proliferacije na bazi ćelija.
Enzimatska analiza RET kinaze
[0694]Citoplazmatični domen humane RET kinaze (aminokiseline 658-1114 pristupnog broja NP 000314.1) je eksprimiran kao N-terminalni GST-fuzioni protein upotrebom bakulovirusnog ekspresionog sistema. GST-RET je prečišćen upotrebom glutation sefarozne hromatografije. Enzimatska analiza RET kinaze je izvedena u ukupnoj zapremini od 10 uL sa rastućim koncentracijama inhibitora RET kinaze kao singlet u 384-komornom formatu kao što sledi: ploče sa RET inhibitornim jedinjenjem su pripremljene dodavanjem 100 nL inhibitora RET u različitim inhibitorima u 384-komorne ploče. 5 uL/komorici 2X enzimske mešavine (50 mM HEPES (4-(2-hidroksietil)-l-piperazinetansulfonska kiselina); 1 mM CHAPS (3-[(3-holamidopropil)dimetilammonio]-l-propansulfonat); 0.1 mg/mL BSA (goveđi serum albumin); 1 mM DTT (ditiotreitol); 0.2 nM RET kinaze) dodato je u 384-komornu ploču i inkubirano 30 minuta na 23°C. Dodato je 5 uL/komorici 2X supstratne mešavine (50 mM HEPES; 1 mM CHAPS; 0.1 mg/mL BSA; 20 uM adenozin trifosfata; 20 mM MgCh i 1 uM biotinilovanog peptidnog supstrata) i inkubirano 1 čas na 23 °C. 10 uL/komorici 2X stop/detekcione mešavine (50 mM HEPES; 0.1 % BSA; 800 mM kalijum fluorida; 50 mM EDTA (etilendiamintetrasirćetna kiselina); 200 X razblaženje europijum kriptatom obeleženog anti-fosfotirozin antitela; 62.5 nM Streptavidin-XL665) inkubiran 1 čas na 23°C i očitavan na homogenom vremenski razloženom fluorescentnom uređaju za očitavanje. IC50vrednosti su aproksimovane upotrebom GraphPad Prism prema sigmoidnoj krivoj odgovora na dozu.
Mehanistička analiza RET kinaze na bazi ćelija
[0695] Potencija jedinjenja prema pronalasku je testirana u odnosu na njegovu sposobnost da inhibira konstitutivnu fosforilaciju RET kinaze u analizi na bazi ćelija. TT ćelije (ATCC CRL-1803), ćelijska linija medularnog tiroidnog kancera sa aktiviranom RET kinazom, je održavana u posudama od 150 cm<2>u F12 Kaighn-ovoj podlozi, 10% fetusnom telećem serumu, IX Glutamax, IX ne-esencijalnim aminokiselinama, IX Pen/Strep antibioticima na 37°C u 5 % ugljen dioksid. 1.0E5 TT ćelija/komorici je postavljeno u 96-komornu ploču za ćelijsku kulturu i ostavljeno da se prilepi preko noći. TT ćelije su tretirane različitim koncentracijama RET inhibitornih jedinjenja u trajanju od 2 časa na 37°C u 5 % ugljen dioksidu, isprane ledeno hladnim PBS (fosfatno puferisani fiziološki rastvor) i lizirane dodavanjem 200 uL 25 mM Tris HC1 pH 7.5; 2 mM EDTA; 150 mM NaCl; 1 % natrijum dezoksiholat; 1 % Triton X-100; 50 mM natrijum beta glicerofosfat; 1 mM natrijum ortovanadat; IX koktela inhibitora fosfataze #2 (Sigma #P5726); IX koktela inhibitora fosfataze #3 (Sigma #P0044) i IX kompletnog mini koktela inhibitora proteaze bez EDTA (Roche #4693159001), inkubirane na -80°C u trajanju od 10 minuta i otopljene na ledu. 100 uL TT ćelijskog lizata je dodato u 96-komornu ploču preko noći na 4°C koja je obložena preko noći na 4°C sa 1:1,000 razblaženjem zečjeg anti-RET antitela (Cell Signaling #7032) blokiranog sa IX PBS; 0.05 % Tween-20; 1 % goveđim serum albuminom. Ploče su isprane 4X sa 200 uL IX PBS; 0.05 % Tween-20 i zatim je dodato 100 uL razblaženja 1:1,000 anti-fosfotirozin detekcionog antitela (Cell Signaling #7034) i izvršena je inkubacija u trajanju od 1 časa na 37°C. Ploče su isprane 4X sa 200 uL IX PBS; 0.05 % Tween-20 i zatim je dodato 100 uL 1:1,000 razblaženja anti-mišjeg imunoglobulinskog konjugovanog sa peroksidazom rena antitela (Cell Signaling #7034) i inkubirano 30 minuta na 37°C. Ploče su isprane 4X sa 200 uL IX PBS; 0.05 % Tween-20, dodato je 100 uL TMB (3,3',5,5"-tetrametilbenzidin) supstrata (Cell Signaling #7004), izvršena je inkubacija od 10 minuta na 37°C, dodato je 100 uL Stop rastvora (Cell Signaling #7002) i apsorbanca je očitavana na spektrofotometru na 450 nm. IC50vrednosti su aproksimovane upotrebom GraphPad Prism prema sigmoidnoj krivoj odgovora na dozu.
Proliferaciona analiza RET kinaze na bazi ćelija
[0696] Potencija jedinjenja prema pronalasku je testirana u odnosu na njegovu sposobnost da inhibira ćelijskuproliferaciju i ćelijsku vijabilnost. TT ćelije (ATCC CRL-1803), ćelijska linija medularnog tiroidnog kancera sa konstitutivno aktiviranom RET kinazom, je održavana u posudama od 150 cm<2>u F12 Kaighn-ovoj podlozi, 10% fetusnom telećem serumu, IX Glutamax, IX ne-esencijalnih aminokiselina, IX Pen/Strep antibiotika na 37°C u 5 % ugljen dioksida. 6.0E3 TT ćelija/komirici u 50 uL podloge je dodato u u 96-komornoj ploči za kulturu ćelija i ostavljeno da se prilepi preko noći. 50 uL serijski razblaženih RET inhibitornih jedinjenja je dodato u 96-komornu ploču koja sadrži kultivisane TT ćelije i inkubirano na 37°C u 5 % ugljenom dioksidu tokom osam dana. Dodato je 50 uL CellTiter-Glo (Promega #G-7573), sadržaj je mešan 1 minut na mućkalici, a zatim 10 minuta u mraku na 23°C i luminescencija je očitavana pomoću EnVision (PerkinElmer). IC50vrednosti su aproksimirane upotrebom GraphPad Prism prema sigmoidnoj krivoj odgovora na dozu.
Biološki podaci
[0697] Primeri jedinjenja prema predmetnom pronalasku su testirana u jednoj ili više analiza RET opisanih u prethodnom tekstu i nađeno je da su inhibitori RET sa IC50< 10 uM. Podaci za specifične primere testirane u enzimatskim analizama humane RET kinaze su navedeni u daljem tekstu u Tabeli 2 kao što sledi: + = 10 uM > IC50> 500 nM; ++ = 500 nM > IC50> 100 nM; +++ = IC50< 100 nM. Podaci za specifične primere testirane u mehanističkoj analizi na bazi ćelija humane RET kinaze su navedeni u daljem tekstu u Tabeli 3 kao što sledi: + = 10 uM
> IC50> 500 nM; ++ = 500 nM > IC50> 100 nM; +++ = IC50 < 100 nM; ND = nije određeno. Podaci za specifične primere testirane u proliferacionoj analizi na bazi ćelija humane RET kinaze su navedeni u daljem tekstu u Tabeli 4 kao što sledi: + = 10 uM > IC50> 500 nM; ++ = 500 nM > IC50> 100 nM; +++ = IC50 < 100 nM; ND = nije određeno.
In vivomodel hipersenzitivnosti debelogcreva
[0698]Efikasnost inhibitornih jedinjenja RET kinaze može biti procenjena uin vivomodelu hipersenzitivnosti debelog creva (Hoffman, J.M., et al., Gastroenterologv, 2012, 142:844-854).

Claims (15)

1. Jedinjenje prema formuli (I): u kome: R<1>je vodonik, halogen, (Ci-C6)alkil, halo(Ci-C6)alkil, (C3-C6)cikloalkil, hidroksil, (O-C6)alkoksi, halo(Ci-C6)alkoksi, (C3-C6)cikloalkoksi, amino, ((Ci-C6)alkil)amino- ili ((Ci-C6)alkil)((Ci-C6)alkil)amino-; svaki R<2>je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od halogena, (Ci-C6)alkil, halo(Ci-C6)alkil, (C3-C6)cikloalkil, cijano, hidroksil, (Ci-C6)alkoksi, halo(Ci-C6)alkoksi, (C3-C6)cikloalkoksi, amino, ((Ci-C6)alkil)amino- i ((Ci-C6)alkil)((Ci-C6)alkil)amino-; R<3>je fenil ili 5- ili 6-člani heteroaril, od kojih je svaki izborno supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabrana od halogena, (Ci-C6)alkil, halo(Ci-C6)alkil, (C3-C6)cikloalkil, cijano, 5- ili 6-članog heteroaril, -OR<4>, i -CONR<5>R<6>; pri čemu je navedeni (Ci-C6)alkil izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (Ci-C4)alkoksi, halo(Ci-C4)alkoksi ili -NR<5>R<6>; i pri čemuje navedeni 5- ili 6-člani heteroaril supstituent izborno supstituisan sa halogenom, (C i-C4)alkil ili halo(Ci-C4)alkil; R4 je vodonik, (Ci-C6)alkil, halo(Ci-C6)alkil, (C3-C6)cikloalkil ili 4- do 6-člani heterocikloalkil; pri čemu ej navedeni (Ci-C6)alkil izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (Ci-C4)alkoksi, halo(Ci-C4)alkoksi ili -NR<5>R<6>;ipri čemu je navedeni (C3-C6)cikloalkil izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od (Ci-C4)alkil, halo(Ci-C4)alkil, hidroksil, hidroksi(Ci-C4)alkil, (Ci-C4)alkoksi i halo(Ci-C4)alkoksi; i pri čemu je navedeni 4- do 6-člani heterocikloalkil izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od (Ci-C4)alkil i halo(Ci-C4)alkil; R<5>i R<6>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od vodonika, (Ci-C4)alkil i halo(Ci-C4)alkil; ili R<3>i R<6>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani predstavljaju 5- ili 6-člani zasićeni prsten, koji izborno sadrži dodatni heteroatom izabran od kiseonika, azota i sumpora, pri čemu je navedeni prsten izborno supstituisan sa halogenom, (Ci-C4)alkil ili halo(Ci-C4)alkil; i nje 0, 1 ili 2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
2. Jedinjenje ili farmaceutski prihvatljiva so prema patentnom zahetvu 1 predstavljeno formulom (II): u kome: XjeNili CR10; R<1>je vodonik, halogen, (Ci-C6)alkil, halo(Ci-C6)alkil, (C3-C6)cikloalkil, hidroksil, (Ci-C6)alkoksi, halo(Ci-C6)alkoksi, (C3-C6)cikloalkoksi, amino, ((Ci-C6)alkil)amino- ili ((Ci-C6)alkil)((Ci -C6)alkil)amino-; svaki R<2>je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od halogena, (Ci-C6)alkil, halo(Ci-C6)alkil, (C3-C6)cikloalkil, cijano, hidroksil, (Ci-C6)alkoksi, halo(Ci-C6)alkoksi, (C3-C6)cikloalkoksi, amino, ((Ci-C6)alkil)amino- i ((Ci-C6)alkil)((Ci-C6)alkil)amino-; R4 je vodonik, (Ci-C6)alkil, halo(Ci-C6)alkil, (C3-C6)cikloalkil ili 4- do 6-člani heterocikloalkil; pri čemu je navedeni (Ci-C6)alkil izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (Ci-C4)alkoksi, halo(Ci-C4)alkoksi ili -NR<5>R<6>;i pri čemu je navedeni (C3-C6)cikloalkil izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od (Ci-C4)alkil, halo(Ci-C4)alkil, hidroksil, hidroksi(Ci-C4)alkil, (Ci-C4)alkoksi, i halo(Ci-C4)alkoksi; i pri čemu je navedeni 4- do 6-člani heterocikloalkil izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od (Ci-C4)alkil i halo(Ci-C4)alkil; R<5>i R<6>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od vodonika, (Ci-C4)alkil i halo(G-C4)alkil; ili R<3>i R<6>uzeti zajedno sa azotom za koji su vezani predstavljaju 5- ili 6- člani zasićeni prsten, koji izborno sadrži dodatni heteroatom izabran od kiseonika, azota i sumpora, pri čemu je navedeni prsten izborno supstituisan sa halogenom, (Ci-C4)alkil ili halo(Ci-C4)alkil; R7 je vodonik, halogen ili (Ci-C4)alkoksi; R<8>je vodonik, halogen, (Q-C6)alkil, halo(G-C6)alkil, (C3-C6)cikloalkil, cijano, 5- ili 6-člani heteroaril, -OR<4>, ili -CONR<5>R<6>; pri čemu je navedeni (Ci-C6)alkil izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (G-C4)alkoksi, halo(G-C4)alkoksi ili -NR<5>R<6>; i pri čemu je navedeni 5- ili 6-člani heteroaril izbornos usptituisan sa halogenom, (G-C4)alkil ili halo(G-C4)alkil; R9 je vodonik, halogen ili halo(G-C4)alkil; Rlfi je vodonik, halogen, halo(Ci-C4)alkil, ili 5- ili 6-člani heteroaril, pri čemu je navedeni 5- ili 6-člani heteroaril izborno supstituisan sa halogenom, (Ci-C4)alkil ili halo(Ci-C4)alkil; i nje 0, 1 ili 2; uz uslov da kada je X jednako CR<10>najmanje jedan odR<7>,R<8>,R<9>, i R10 je vodonik.
3. Jedinjenje ili farmaceutski prihvatljiva so prema patentnom zahtevu 2, naznačeno time što R<7>je vodonik ili fluor.
4. Jedinjenje ili farmaceutski prihvatljiva so prema patentnom zahtevu 2 ili patentnom zahtevu 3, naznačeno time što R<8>je vodonik, fluor, hlor, (Ci-C6)alkil, halo(G-C4)alkil, cijano, (G-C4)alkoksi, hidroksi(C2-C4)alkoksi-, (G-G)alkoksi(G-G)alkoksi-, amino(C2-C4)alkoksi-, ((Ci-C4)alkil)amino(C2-C4)alkoksi-, ((Ci-C4)alkil)((Ci-C4)alkil)amino(C2-C4)alkoksi- ili - CONH2; pri čemu je navedeni (G-C6)alkil izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (G-G)alkoksi, amino, ((G-G)alkil)amino- ili ((G-G)alkil)((G-G)alkil)amino-.
5. Jedinjenje ili farmaceutski prihvatljiva so prema patentnom zahtevu 4, naznačeno time što R8 je vodonik ili (G-Q>)alkil; pri čemu je navedeni (G-C6)alkil izborno supstituisan sa cijano, hidroksil, (Ci-C4)alkoksi, amino, ((Ci-C4)alkil)amino- ili ((Ci-C4)alkil)((Ci-C4)alkil)amino-.
6. Jedinjenje ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kom od patentnih zahteva 2-5, naznačeno time što R9 je trifluorometil.
7. Jedinjenje ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kom od patentnih zahteva 2-6, naznačeno time što X je CH.
8. Jedinjenje ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kom od patentnih zahteva 1-7, naznačeno time što R<1>je (Ci-C4)alkoksi.
9. Jedinjenje ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kom od patentnih zahteva 1-8, naznačeno time što nje 1 ili 2 i svaki R<2>je nezavisno halogen.
10.Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 koje je: 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(6-(2-hidroksipropan-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamid; A^-(6-etoksi-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid; 2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A<f->(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid; 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2,3-difluorofenil)-A<f->(4-(2-hidroksietoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid; 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid; 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-3-fluorofenil)-A<r->(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid; A^-(4-cijano-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-3-fluorofenil)acetamid; 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2,6-difluorofenil)-Af-(4-(2-hidroksietoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid; N-^-cijano-S-(trifluorometil^ fluorofenil)acetamid; Ar-(6-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid; 2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-AL(3-(4-metil-l//-imidazol-1 -il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid; A^-(6-(2-cijanopropan-2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid;
2- (4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(4-(2-hidroksietoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid; A^-(6-(cijanometil)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid; A^-(6-(l-cijanoetil)-5-(1xifluorometil)piridin-3-il)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid; A^-(4-hloro-3-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid; Af-(4-((dimetilamino)metil)-3-(trilfuorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3- il)-2-fluorofenil)acetamid; A^-(3,4-dihlorofenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid; 2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(5-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-il)acetamid; 2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(4-(2-hidroksietoksi)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid;
2- (4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-AL(4-((4-etilpiperazin-1 -il)metil)-
3- (trifluorometil)fenil)acetamid; A^-(2,5-dilfuorofenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid;
4- (2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamido)-2-(trifluorometil)benzamid; A^-(2,4-dilfuoro-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid; A^-(3,5-te(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid; 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-7V-(2-fluoro-5-(trifluorometil)fenil)acetamid; 2-(4-(4-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3 -il)-2-fluorofenil)-7V-(3 -(1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamid; 2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(3-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamid; 2-(4-(4-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(3-(5-metil-1,3,4-oksadiazol-2-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid; 2-(4-(4-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3 -i^^-fluorofeniO-A^-CS-C 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-3-il)acetamid; 2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofe^ 2-il)-5-(trifluorometil)piridin-3-il)acetamid; 2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-3-fluorofenil)-A<f->(4-(3-hidroksi-2,2-dimetilpropil)-3-(trifluorometil)fenil)acetamid; 2-(4-(4-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(3-(trifluorometil)fenil)acetamid; 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dmidropiridin-3-il)-2-fluorofem^ (trifluorometil)fenil)acetamid; 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-Ar-(3-(3-metil-l//-pirazol-l-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid; A^-(3-(li/-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridm^ 2-fluorofenil)acetamid; 2-(4-(4-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3 -il)-2-fluorofenil)-7Y-(6-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)piridin-3-il)acetamid; 7V-(4-cij ano-3-(trifluorometil)^^ fluorofenil)acetamid; 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-iV-(3-(2-morfolinoetoksi)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid; 2-(4-(4-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3 -il)-2-fluorofenil)-Af-(3 -(1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)izoksazol-5-il)acetamid; 2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3 -il)-2-fluorofenil)-Ar-( 1 -metil-3-( 1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)-l/f-pirazol-5-il)acetamid; 2-(4-(5-etoksi-6-okso-1,6-dihidropiridin-3 -il)-2-fluorofenil)-A^-(3 -(1,1,1 -trifluoro-2-metilpropan-2-il)-l//-pirazol-5-il)acetamid; Ar-(4-(2,2-difluoro-3-hidroksipropil)-3-(trilfuorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid; A^-(3-(2i/-tetrazol-5-il)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihw^ 2-fluorofenil)acetamid; 2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)-A^-(3-(l -metil- l//-pirazol-4-il)-5-(trifluorometil)fenil)acetamid; ili Ar-(3-(2-(dimetilamino)etoksi)-5-(trifluorometil)fenil)-2-(4-(5-etoksi-6-okso-l,6-dihidropiridin-3-il)-2-fluorofenil)acetamid; ili njihove farmaceutski prihvatljive soli.
11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 koje je: 7 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 11 naznačeno time što je jedinjenje slobodna baza.
13. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje ili farmaceutski prihvatljivu so prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12 i farmaceutski prihvatljiv ekscipijent.
14. Jedinjenje ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12 za upotrebu u terapiji.
15. Jedinjenje ili farmaceutski prihvatljiva so prema bilo kom od patentnih zahteva 1-12 za upotrebu u lečenju sindroma iritabilnog creva.
RS20170177A 2013-03-15 2014-03-14 Derivati piridina kao inhibitori kinaze rearanžirane tokom transfekcije (ret) RS55710B1 (sr)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2013072683 2013-03-15
CN2013090059 2013-12-20
CN2014072449 2014-02-24
EP14713598.2A EP2970191B1 (en) 2013-03-15 2014-03-14 Pyridine derivatives as rearranged during transfection (ret) kinase inhibitors
PCT/IB2014/059817 WO2014141187A1 (en) 2013-03-15 2014-03-14 Pyridine derivatives as rearranged during transfection (ret) kinase inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS55710B1 true RS55710B1 (sr) 2017-07-31

Family

ID=50390154

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20170177A RS55710B1 (sr) 2013-03-15 2014-03-14 Derivati piridina kao inhibitori kinaze rearanžirane tokom transfekcije (ret)

Country Status (33)

Country Link
US (2) US9382238B2 (sr)
EP (1) EP2970191B1 (sr)
JP (1) JP2016516026A (sr)
CN (1) CN105051027A (sr)
AU (1) AU2014229233B2 (sr)
BR (1) BR112015023618A2 (sr)
CA (1) CA2905627A1 (sr)
CL (1) CL2015002514A1 (sr)
CR (1) CR20150490A (sr)
CY (1) CY1118730T1 (sr)
DK (1) DK2970191T3 (sr)
DO (1) DOP2015000244A (sr)
EA (1) EA029296B1 (sr)
ES (1) ES2616655T3 (sr)
HR (1) HRP20170363T1 (sr)
HU (1) HUE033423T2 (sr)
IL (1) IL241161A0 (sr)
LT (1) LT2970191T (sr)
ME (1) ME02664B (sr)
MX (1) MX2015012286A (sr)
NZ (1) NZ628388A (sr)
PE (1) PE20151538A1 (sr)
PH (1) PH12015502044A1 (sr)
PL (1) PL2970191T3 (sr)
PT (1) PT2970191T (sr)
RS (1) RS55710B1 (sr)
SG (1) SG11201506695UA (sr)
SI (1) SI2970191T1 (sr)
SM (1) SMT201700152T1 (sr)
TW (1) TW201524958A (sr)
UA (1) UA115264C2 (sr)
UY (1) UY35465A (sr)
WO (1) WO2014141187A1 (sr)

Families Citing this family (40)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ME03376B (me) 2010-05-20 2020-01-20 Array Biopharma Inc Makrociklička jedinjenja kао inhibiтori trk kinaze
WO2016038519A1 (en) * 2014-09-08 2016-03-17 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Crystalline forms of 2-(4-(4-ethoxy-6-oxo-1,6-dihydropyridin-3-yl)-2-fluorophenyl)-n-(5-(1,1,1-trifluoro-2-methylpropan-2-yl)isoxazol-3-yl)acetamide
WO2016037578A1 (en) 2014-09-10 2016-03-17 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Novel compounds as rearranged during transfection (ret) inhibitors
WO2016038552A1 (en) * 2014-09-10 2016-03-17 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Pyridone derivatives as rearranged during transfection (ret) kinase inhibitors
WO2016127074A1 (en) 2015-02-06 2016-08-11 Blueprint Medicines Corporation 2-(pyridin-3-yl)-pyrimidine derivatives as ret inhibitors
BR112018000808A2 (pt) 2015-07-16 2018-09-04 Array Biopharma Inc compostos de pirazolo[1,5-a]piridina substituída como inibidores de ret cinase
US10829484B2 (en) 2015-07-28 2020-11-10 Plexxikon Inc. Compounds and methods for kinase modulation, and indications therefor
SI3371171T1 (sl) * 2015-11-02 2024-03-29 Blueprint Medicines Corporation Inhibitorji ret
WO2017145050A1 (en) 2016-02-23 2017-08-31 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited Pyridylpyridone derivative useful as a ret kinase inhibitor in the treatment of ibs and cancer
ES2904615T3 (es) * 2016-03-16 2022-04-05 Plexxikon Inc Compuestos y métodos para la modulación de quinasas e indicaciones al respecto
US10183928B2 (en) 2016-03-17 2019-01-22 Blueprint Medicines Corporation Inhibitors of RET
EP3454886A1 (en) 2016-05-13 2019-03-20 Instituto de Medicina Molecular Methods of treating diseases associated with ilc3 cells
US10227329B2 (en) 2016-07-22 2019-03-12 Blueprint Medicines Corporation Compounds useful for treating disorders related to RET
JP2018052878A (ja) * 2016-09-29 2018-04-05 第一三共株式会社 ピリジン化合物
TWI752098B (zh) 2016-10-10 2022-01-11 美商亞雷生物製藥股份有限公司 作為ret激酶抑制劑之經取代吡唑并[1,5-a]吡啶化合物
TWI704148B (zh) 2016-10-10 2020-09-11 美商亞雷生物製藥股份有限公司 作為ｒｅｔ激酶抑制劑之經取代吡唑并[1,5-a]吡啶化合物
WO2018136663A1 (en) 2017-01-18 2018-07-26 Array Biopharma, Inc. Ret inhibitors
WO2018136661A1 (en) 2017-01-18 2018-07-26 Andrews Steven W SUBSTITUTED PYRAZOLO[1,5-a]PYRAZINE COMPOUNDS AS RET KINASE INHIBITORS
JOP20190213A1 (ar) 2017-03-16 2019-09-16 Array Biopharma Inc مركبات حلقية ضخمة كمثبطات لكيناز ros1
JP2020519672A (ja) 2017-05-15 2020-07-02 ブループリント メディシンズ コーポレイション ＲＥＴ阻害剤とｍＴＯＲＣ１阻害剤との組合せ及び異常なＲＥＴ活性によって媒介されるがんを処置するためのその使用
US10093648B1 (en) * 2017-09-22 2018-10-09 Celgene Corporation Crystalline 4-amino-2-(2,6-dioxopiperidine-3-yl)isoindoline-1,3-dione hemihydrate, compositions and methods of use thereof
TWI876442B (zh) 2017-10-10 2025-03-11 美商絡速藥業公司 6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈之調配物
TWI791053B (zh) 2017-10-10 2023-02-01 美商亞雷生物製藥股份有限公司 6-(2-羥基-2-甲基丙氧基)-4-(6-(6-((6-甲氧基吡啶-3-基)甲基)-3,6-二氮雜雙環[3.1.1]庚-3-基)吡啶-3-基)吡唑并[1,5-a]吡啶-3-甲腈之結晶形式及其醫藥組合物
JP7060694B2 (ja) 2018-01-18 2022-04-26 アレイ バイオファーマ インコーポレイテッド Ｒｅｔキナーゼ阻害剤としての置換ピロロ［２，３－ｄ］ピリミジン化合物
EP3740490A1 (en) 2018-01-18 2020-11-25 Array Biopharma, Inc. Substituted pyrazolo[3,4-d]pyrimidine compounds as ret kinase inhibitors
US11472802B2 (en) 2018-01-18 2022-10-18 Array Biopharma Inc. Substituted pyrazolyl[4,3-c]pyridine compounds as RET kinase inhibitors
PE20210096A1 (es) 2018-04-03 2021-01-12 Blueprint Medicines Corp Inhibidor de ret para uso en tratar cancer que tiene una alteracion de ret
CN109096264B (zh) * 2018-08-28 2019-08-23 山东理工职业学院 Ret抑制剂及其制备方法、组合物和用途
CN112996794A (zh) 2018-09-10 2021-06-18 阿雷生物药品公司 作为ret激酶抑制剂的稠合杂环化合物
CA3137152A1 (en) 2019-04-18 2020-10-22 The Johns Hopkins University Substituted 2-amino-pyrazolyl-[1,2,4]triazolo[1,5a] pyridine derivatives and use thereof
US12565481B2 (en) 2020-02-20 2026-03-03 Guangzhou Baiyunshan Pharmaceutical Holdings Co., Ltd. Baiyunshan Pharmaceutical General Factory 6,7-dimethoxy-3-(pyridin-2-yl)quinoline compounds for inhibiting RET
TWI777509B (zh) * 2020-04-27 2022-09-11 美商美國禮來大藥廠 用於抑制ret激酶之化合物
EP4157829A1 (en) 2020-05-29 2023-04-05 Blueprint Medicines Corporation Solid forms of pralsetinib
TWI786742B (zh) * 2020-07-23 2022-12-11 大陸商深圳晶泰科技有限公司 吡啶酮類化合物及其製備方法和應用
AU2021362678A1 (en) 2020-10-13 2023-05-04 The Johns Hopkins University SUBSTITUTED 4-([1,2,4]TRIAZOLO[1,5-a]PYRIDIN-6-YL)THIOPHENE-2-CARBOXAMIDE DERIVATIVES AND USE THEREOF
AU2021376367C1 (en) 2020-11-06 2025-05-15 Eli Lilly And Company Pyrazole derivatives as ret kinase inhibitors
EP4347645A1 (en) 2021-06-03 2024-04-10 Fundação D. Anna de Sommer Champalimaud e Dr. Carlos Montez Champalimaud Foundation Neuro-mesenchyme units control ilc2 and obesity via a brain-adipose circuit
CN115626880B (zh) * 2022-11-15 2023-11-14 常州大学 3-硝基-5-氰基三氟甲苯的合成方法
CN116925023B (zh) * 2023-07-18 2025-11-21 江苏桐孚高新材料有限公司 2-全氟烷基-4h-吡喃-4-酮衍生物的改进合成方法
EP4650002A1 (en) * 2024-05-15 2025-11-19 Ludwig-Maximilians-Universität Aniline-based modulators of the nuclear receptor tlx (nr2e1)

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2001012189A1 (en) 1999-08-12 2001-02-22 Pharmacia Italia S.P.A. 3(5)-amino-pyrazole derivatives, process for their preparation and their use as antitumor agents
AU2002215053A1 (en) * 2000-11-27 2002-06-24 Pharmacia Italia S.P.A. Phenylacetamido- pyrazole derivatives and their use as antitumor agents
DE10201764A1 (de) 2002-01-18 2003-07-31 Bayer Cropscience Ag Substituierte 4-Aminopyridin-Derivate
US7968574B2 (en) 2004-12-28 2011-06-28 Kinex Pharmaceuticals, Llc Biaryl compositions and methods for modulating a kinase cascade
KR20090064602A (ko) 2006-10-16 2009-06-19 노파르티스 아게 단백질 키나제 억제제로서 유용한 페닐아세트아미드
US8461161B2 (en) * 2006-11-15 2013-06-11 Ym Biosciences Australia Pty Ltd Substituted pyrazines as inhibitors of kinase activity
MX2012001974A (es) 2009-08-19 2012-04-11 Ambit Biosciences Corp Compuestos de biarilo y metodos de uso de los mismos.
JP6097998B2 (ja) 2010-12-16 2017-03-22 ベーリンガー インゲルハイム インターナショナル ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ロイコトリエン生成のビアリールアミドインヒビター
AR095308A1 (es) 2013-03-15 2015-10-07 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Compuesto de 2-piridona, composición farmacéutica que lo comprende y su uso para preparar un medicamento

Also Published As

Publication number Publication date
CL2015002514A1 (es) 2016-02-05
PE20151538A1 (es) 2015-11-18
JP2016516026A (ja) 2016-06-02
IL241161A0 (en) 2015-11-30
ES2616655T3 (es) 2017-06-13
US9382238B2 (en) 2016-07-05
NZ628388A (en) 2016-09-30
SI2970191T1 (sl) 2017-04-26
WO2014141187A1 (en) 2014-09-18
TW201524958A (zh) 2015-07-01
CY1118730T1 (el) 2017-07-12
EA029296B1 (ru) 2018-03-30
EP2970191A1 (en) 2016-01-20
CN105051027A (zh) 2015-11-11
CR20150490A (es) 2015-11-20
SG11201506695UA (en) 2015-09-29
EP2970191B1 (en) 2016-12-21
DOP2015000244A (es) 2015-12-31
PT2970191T (pt) 2017-03-23
DK2970191T3 (en) 2017-03-20
AU2014229233A1 (en) 2015-09-24
UA115264C2 (uk) 2017-10-10
CA2905627A1 (en) 2014-09-18
US9789100B2 (en) 2017-10-17
MX2015012286A (es) 2016-05-31
US20160271123A1 (en) 2016-09-22
AU2014229233B2 (en) 2016-08-11
UY35465A (es) 2014-10-31
SMT201700152T1 (it) 2017-05-08
HUE033423T2 (en) 2017-11-28
HRP20170363T1 (hr) 2017-04-21
ME02664B (me) 2017-06-20
PH12015502044A1 (en) 2016-01-18
LT2970191T (lt) 2017-03-10
US20160002215A1 (en) 2016-01-07
PL2970191T3 (pl) 2017-07-31
BR112015023618A2 (pt) 2017-07-18
EA201591738A1 (ru) 2016-01-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
DK2970191T3 (en) PYRIDINE DERIVATIVES RIGHT (REARRANGED DURING TRANSFECTION) -KINASE INHIBITORS
US8937071B2 (en) Compounds as rearranged during transfection (RET) inhibitors
US10294236B2 (en) Compounds as rearranged during transfection (RET) inhibitors
JP6728447B2 (ja) Ｒｅｔ（ｒｅａｒｒａｎｇｅｄ ｄｕｒｉｎｇ ｔｒａｎｓｆｅｃｔｉｏｎ）キナーゼ阻害剤としてのピリジン誘導体
KR101914321B1 (ko) 아릴- 또는 헤테로아릴-치환된 벤젠 화합물
JP5889875B2 (ja) アザインダゾール
JP5964426B2 (ja) 脂肪酸シンターゼ阻害剤
KR20150130464A (ko) 형질감염 중 재배열 (ret) 키나제 억제제로서의 피리딘 유도체