RS55779B1 - Jedinjenja bis(fluoroalkil)-1,4-benzodiazepinona kao notch inhibitori - Google Patents

Jedinjenja bis(fluoroalkil)-1,4-benzodiazepinona kao notch inhibitori

Info

Publication number
RS55779B1
RS55779B1 RS20170259A RSP20170259A RS55779B1 RS 55779 B1 RS55779 B1 RS 55779B1 RS 20170259 A RS20170259 A RS 20170259A RS P20170259 A RSP20170259 A RS P20170259A RS 55779 B1 RS55779 B1 RS 55779B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
trifluoropropyl
dihydro
oxo
benzodiazepine
succinamide
Prior art date
Application number
RS20170259A
Other languages
English (en)
Inventor
Ashvinikumar V Gavai
George V Delucca
Daniel O'malley
Patrice Gill
Claude A Quesnelle
Brian E Fink
Yufen Zhao
Francis Y Lee
Original Assignee
Bristol Myers Squibb Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=49263506&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS55779(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Bristol Myers Squibb Co filed Critical Bristol Myers Squibb Co
Publication of RS55779B1 publication Critical patent/RS55779B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D243/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D243/06—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms having the nitrogen atoms in positions 1 and 4
    • C07D243/10—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms having the nitrogen atoms in positions 1 and 4 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D243/14—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines
    • C07D243/16—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines substituted in position 5 by aryl radicals
    • C07D243/18—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines substituted in position 5 by aryl radicals substituted in position 2 by nitrogen, oxygen or sulfur atoms
    • C07D243/24—Oxygen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/13—Amines
    • A61K31/135—Amines having aromatic rings, e.g. ketamine, nortriptyline
    • A61K31/138—Aryloxyalkylamines, e.g. propranolol, tamoxifen, phenoxybenzamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/337—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin having four-membered rings, e.g. taxol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/55—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole
    • A61K31/551—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having seven-membered rings, e.g. azelastine, pentylenetetrazole having two nitrogen atoms, e.g. dilazep
    • A61K31/5513—1,4-Benzodiazepines, e.g. diazepam or clozapine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/555—Heterocyclic compounds containing heavy metals, e.g. hemin, hematin, melarsoprol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/56—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids
    • A61K31/57—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone
    • A61K31/573—Compounds containing cyclopenta[a]hydrophenanthrene ring systems; Derivatives thereof, e.g. steroids substituted in position 17 beta by a chain of two carbon atoms, e.g. pregnane or progesterone substituted in position 21, e.g. cortisone, dexamethasone, prednisone or aldosterone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/675—Phosphorus compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pyridoxal phosphate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0012—Galenical forms characterised by the site of application
    • A61K9/0019—Injectable compositions; Intramuscular, intravenous, arterial, subcutaneous administration; Compositions to be administered through the skin in an invasive manner
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/0087—Galenical forms not covered by A61K9/02 - A61K9/7023
    • A61K9/0095—Drinks; Beverages; Syrups; Compositions for reconstitution thereof, e.g. powders or tablets to be dispersed in a glass of water; Veterinary drenches
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/08—Solutions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D243/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D243/06—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms having the nitrogen atoms in positions 1 and 4
    • C07D243/10—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms having the nitrogen atoms in positions 1 and 4 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D243/14—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines
    • C07D243/16—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines substituted in position 5 by aryl radicals
    • C07D243/18—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines substituted in position 5 by aryl radicals substituted in position 2 by nitrogen, oxygen or sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D243/00—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D243/06—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms having the nitrogen atoms in positions 1 and 4
    • C07D243/10—Heterocyclic compounds containing seven-membered rings having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms having the nitrogen atoms in positions 1 and 4 condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D243/14—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines
    • C07D243/16—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines substituted in position 5 by aryl radicals
    • C07D243/18—1,4-Benzodiazepines; Hydrogenated 1,4-benzodiazepines substituted in position 5 by aryl radicals substituted in position 2 by nitrogen, oxygen or sulfur atoms
    • C07D243/24—Oxygen atoms
    • C07D243/26—Preparation from compounds already containing the benzodiazepine skeleton
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F7/00—Compounds containing elements of Groups 4 or 14 of the Periodic Table
    • C07F7/02—Silicon compounds
    • C07F7/08—Compounds having one or more C—Si linkages
    • C07F7/18—Compounds having one or more C—Si linkages as well as one or more C—O—Si linkages
    • C07F7/1804—Compounds having Si-O-C linkages
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/06—Phosphorus compounds without P—C bonds
    • C07F9/08—Esters of oxyacids of phosphorus
    • C07F9/09—Esters of phosphoric acids
    • C07F9/12—Esters of phosphoric acids with hydroxyaryl compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/28—Phosphorus compounds with one or more P—C bonds
    • C07F9/38—Phosphonic acids [RP(=O)(OH)2]; Thiophosphonic acids ; [RP(=X1)(X2H)2(X1, X2 are each independently O, S or Se)]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07F—ACYCLIC, CARBOCYCLIC OR HETEROCYCLIC COMPOUNDS CONTAINING ELEMENTS OTHER THAN CARBON, HYDROGEN, HALOGEN, OXYGEN, NITROGEN, SULFUR, SELENIUM OR TELLURIUM
    • C07F9/00—Compounds containing elements of Groups 5 or 15 of the Periodic Table
    • C07F9/02—Phosphorus compounds
    • C07F9/547—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom
    • C07F9/645—Heterocyclic compounds, e.g. containing phosphorus as a ring hetero atom having two nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/62—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being a protein, peptide or polyamino acid
    • A61K47/64—Drug-peptide, drug-protein or drug-polyamino acid conjugates, i.e. the modifying agent being a peptide, protein or polyamino acid which is covalently bonded or complexed to a therapeutically active agent
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K9/00—Medicinal preparations characterised by special physical form
    • A61K9/48—Preparations in capsules, e.g. of gelatin, of chocolate
    • A61K9/4841—Filling excipients; Inactive ingredients
    • A61K9/4866—Organic macromolecular compounds

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Heterocyclic Compounds Containing Sulfur Atoms (AREA)

Description

Predmetni pronalazak se generalno odnosi na jedinjenja benzodiazepinona koja su korisna kao Notch inhibitori. Pronalazak se dalje odnosi na farmaceutske kompozicije koje sadrže barem jedno jedinjenje koje je prema pronalasku korisno za lečenje stanja koja su vezana za Notch put, kao što su kancer i druge proliferativne bolesti.
Notch signalni put je obuhvaćen raznim ćelijskim procesima, kao što je specifikacija ćelijske sudbine, diferencijacija, proliferacija, apoptoza, i angiogeneza. (Brav, Nature Revievvs Molecular Cell Biologv, 7:678-689 (2006); Foritini, Developmental Cell 16:633-647 (2009)). Notch proteini su heterodimerni transmembranski molekuli koji jednom prolaze kroz membranu. Notch familija uključuje 4 receptora, NOTCH 1-4, koji postaju aktivirani nakon vezivanja liganada iz DSL familije (Delta-like 1, 3, 4 i Jagged 1 i 2).
Aktivacija i sazrevanje NOTCH zahteva seriju koraka obrade, uključujući korak proteolitičkog sečenja posredovan gama sekretazom, multiproteinskim kompleksom koji sadrži Presenilin 1 ili Presenilin 2, nikastrin, AF1, i PEN2. Jednom kada je NOTCH isečen, NOTCH unutarćelijski domen (NICD) se oslobađa se iz membrane. Oslobođeni NICD se translocira u jedro, gde funkcioniše kao transkripcioni aktivator u saglasnosti sa članovima CSL familije (RBPSUH, "supresor ćelavosti", i LAG1). NOTCH ciljani geni uključuju članove HES familije, kao što je HES-1. HES-1 funkcioniše kao transkripcioni represor gena kao što su HERP1 (takođe poznat kao HEY2), HERP2 (takođe poznat kao HEY1), i HATH1 (takođe poznat kao ATOH1).
Aberantna aktivacija Notch puta doprinosi tumorogenezi. Aktivacija Notch signalizacije povezana je sa patogenezom različitih solidnih tumora uključujući jajnika, pankreasa, kao i raka dojke i hematoloških tumora kao što su leukemije, limfomi i multipli mijelomi. Uloga Notch inhibitora i njegova korist u lečenju različitih čvrstih tumora opisana je u Miele, L. et al, Current Kancer Drug Targets, 6:313-323 (2006); Bolos, V. et al, Endocrine Reviews, 28:339-363 (2007); Shih, I-M. et al., Kancer Research, 67:1879-1882 (2007); Yamaguchi, N. et al, Kancer Research, 68:1881-1888 (2008); Miele, L., Expert Review Anti-kancer Therapv, 8:1197-1201 (2008); Purow, B., Current Farmaceutical Biotechnologv, 10:154-160 (2009); Nefedova, Y. et al., Drug Resistance Updati, 11:210-218 (2008); Dufraine, J. et al., Oncogene, 27:5132-5137 (2008); i Jun, H.T. et al., Drug Development Research, 69:319-328 (2008).
Ostaje potreba za jedinjenjima koja su korisna kao Notch inhibitori i koja imaju dovoljnu metaboličku stabilnost da obezbede efikasan nivo izlaganja leku. Dalje, ostaje potreba za jedinjenjima koja su korisna kao Notch inhibitori koja mogu da budu administrirana pacijentu oralno ili intravenski.
Američki patent br. 7,053,084 BI stavlja na uvid javnosti sukcinoilamino benzodiazepinsko jedinjenje koje je korisno za lečenje neuroloških bolesti kao što je Alchajmerova bolest. Referenca stavlja na uvid javnosti da ova sukcinoilamino benzodiazepinska jedinjenja inhibiraju aktivnost gama sekretaze i obradu prekursora amiloidnog proteina koji je povezan sa formiranjem naslaga amiloidnog proteina.
Podnosioci su pronašli potentna jedinjenja koje imaju aktivnost kao Notch inhibitori i imaju dovoljnu metaboličku stabilnost da obezbede efikasan nivo izlaganja leku nakon intravenske ili oralne primene. Ova jedinjenja su obezbeđena kako bi bila korisna kao lekovi sa željenom stabilnošću, biodostupnošću, terapijskim indeksom i toksičnim vrednostima koje u važne za njihovu lekovitost.
REZIME PRONALASKA
Predmetni pronalazak ispunjava gore pomenutu potrebu tako što obezbeđuje bis(fluoroalkil) 1,4-benzodiazepinonska jedinjenja koja su korisna kao selektivni inhibitori Notch signalnog puta, uključujući i prolekove istog koji su ovde identifikovani.
Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje i farmaceutske kompozicije koje sadrže farmaceutski prihvatljiv nosač; i barem jedno jedinjenje Formule (I).
Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (1) za upotrebu u lečenju bolesti ili poremećaja povezanih sa aktivnošću Notch receptora kod sisarskih pacijenata.
Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje procese i intermedijere za pripremu jedinjenja Formule (I).
Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenja Formule (I) za upotrebu u lečenju.
Predmetni pronalazak takođe stavlja na uvid javnosti jedinjenja Formule (I) za proizvodnju medikamenata za lečenje kancera.
Jedinjenja Formule (I) i kompozicije koje sadrže jedinjenja mogu biti korišćena u lečenju, prevenciji ili izlečenju različitih stanja koja su povezana sa Notch receptorom. Farmaceutske kompozicije koje sadrže ova jedinjenja su korisna za lečenje, prevenciju ili usporavanje napretka bolesti ili poremećaja u različitim terapijskim oblastima, kao što je kancer.
Ove i druge karakteristike pronalaska će biti navedene u proširenoj formi u nastavku predmetne objave.
KRATAK OPIS NACRTA
Pronalazak je ilustrovan pozivanjem na prateće nacrte opisane niže
SL. 1 prikazuje antitumorsku efikasnost Primera 1 protiv TALL1 humane T-ćelijske akutne limfoblastične anemije. Doziran oralno u danima označenim sa (f); PO, QDxlO. Svaki simbol predstavlja srednju vrednost tumorskog opterećenja grupe od 8 miševa. (•) Kontrola; (0) Primer 1, 0.625 mg/kg/adm; (■) Primer 1, 1.25 mg/kg/adm; (□) Primer 1, 2.5 mg/kg/adm; (▲) Primer 1,10 mg/kg.
SL. 2 prikazuje antitumorsku efikasnost Primera 1 na MDA-MB-157 humanom karcinomu dojke. Doziran oralno u danima označenim sa (f); PO, BIDxl5 (10 dana na; 2 dana bez; 5 dana na). Svaki simbol predstavlja srednju vrednost tumorskog opterećenja grupe od 8 miševa. (•) kontrola; (♦) Primer 1, 2.5 mg/kg/adm, BID; (□) Primer 1, 5 mg/kg/adm, BID;
(A) Primer 1, 7.5 mg/kg/adm, BID.
SL. 3 prikazuje antitumorsku efikasnost Primera 1 na MDA-MB-157 humanom
karcinomu dojke. Doziran oralno u danima označenim sa (|); PO, QDxl5 (10 dana na; 2 dana bez; 5 dana na). Svaki simbol predstavlja srednju vrednost tumorskog opterećenja grupe od 8 miševa. (•) kontrola; (0) Primer 1, 5 mg/kg/adm, QD; (A) Primer 1,10 mg/kg/adm, QD; (□) Primer 1, 20 mg/kg/adm, QD.
SL. 4 prikazuje antitumorsku efikasnost Primera 3 protiv TALL1 humane T-ćelijske akutne limfoblastične anemije. Doziran oralno u danima označenim sa (|); PO, QDxl0. Svaki simbol predstavlja srednju vrednost tumorskog opterećenja grupe od 8 miševa. (•) Kontrola; (0) Primer 1, 0.625 mg/kg/adm; (■) Primer 1, 1.25 mg/kg/adm; (□) Primer 1, 2.5 mg/kg/adm;
(A) Primer 1,10 mg/kg.
SL. 5 prikazuje antitumorsku efikasnost Primera 1 na HCC-1599 humani trostruko negativni karcinom dojke sa Notch 1 translokacijom. Doziran oralno u danima označenim sa (|); PO, QDxl5 (10 dana na; 2 dana bez; 5 dana na). Svaki simbol predstavlja srednju vrednost tumorskog opterećenja grupe od 8 miševa. (•) kontrola; (♦) Primer 1, 5 mg/kg/adm, QD; (□) Primer 1, 10 mg/kg/adm, QD; (▲) Primer 1, 20 mg/kg/adm, QD.
SL. 6 prikazuje sinergističku antitumorsku efikasnost kombinovane hemoterapije sa Primerom 1 paklitakselomna MDA-MB-468 humani karcinom dojke. Svaki simbol predstavlja srednju vrednost tumorskog opterećenja grupe od 8 miševa. (•) kontrola; (♦) Paklitaksel, 12 mg/kg/adm, Q7D x 3, IV; (□) Primer 1,2.5 mg/kg/adm, PO, BID x 15 (10 dana na; 2 dana bez;
5 dana na);(■)Primer 1, 5 mg/kg/adm, PO, BID x 15 (10 dana na; 2 dana bez; 5 dana na); (A) Kombinacija Paklitaksel-a i Primera 1, 2.5 mg/kg/adm; (A) Kombinacija Paklitaksel-a i Primera 1, 5 mg/kg/adm
DETALJAN OPIS
Prvi aspekt predmetnog pronalaska obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I)
i/ili barem jednu so istog, gde:
Ri je -CH2CH2CF3;
Pv2 je -CH2CH2CF3ili -CH2CH2CH2CF3;
RsjeH, -CH3, ili Rx;
R4jeHiliRy;
Rx je -CH2OC(0)CH(CH3)NH2, -CH2OC(0)CH(NH2)CH(CH3)2, -CH2OC(0)CH((C
H(CH.02)NHC(O)CH(NH2)CH(CH3)2,
Ry je -SCH2CH(NH2)C(0)OH, -SCH2CH(NH2)C(0)OCH3, ili SCH2CH(NH2)C(0)OC(CH3)3;
Prsten A je fenil ili piridinil;
svaki Raje nezavisno Cl, Ci-3alkil, -CH2OH -CF3, ciklopropil, -OCH3, i/ili - O(ciklopropil);
svaki Rb je nezavisno F, Cl, -CH3, -CH2OH, -CF3, ciklopropil, i/ili -OCH3;
yje nula, 1, ili 2; i
z je nula, 1, ili 2;
pod uslovom daje Prsten A fenil i z je nula, onda je y 1 ili 2 i barem jedan Ra je C1-3 alkil, -CF3, ciklopropil, ili -O(ciklopropil);
pod uslovom da R3je Rxonda R4je H; i
pod uslovom da R4je Ry onda R3je H ili -CH3.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) kod kog R3 je H ili -CH3; R4 je H; i Ri, R2, Prsten A, Ra, Rb, y, i z su definisani u prvom aspektu. Ovaj prikaz uključuje jedinjenja Formule (II) kod kojih R3je H i R4 je H: i jedinjenja Formule (III) kod kojih R3 je -CH3i R4 je H:
Jedinjenja Formule (II) i Formule (III) su korisna kao selektivni inhibitori Notch signalnog puta
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jednu so istog kod kog bilo (i) R3je Rxi R4je H; ili (ii) R4je Ry i R3je H ili -CH3; i Ri, R2, Prsten A, Ra, Rb, Rx, Ry, y, i z su definisani u prvom aspektu. Ovaj prikaz uključuje jedinjenja Formule (IV) kod kojih R3 je Rx i R4 je H: i jedinjenja Formule (V) kod kojih R4 je Ry i R3 je H ili -CH3:
Jedinjenja ovog prikaza su korisna kao prolekovi jedinjenja Formule (II) i Formule (III).
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (IV) i/ili barem jednu so istog, kod kog R3je Rxi R4je H; i Ri, R2, Rx, Prsten A, Ra, Rb, y, i z su definisani u prvom aspektu. Uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih Prsten A je fenil. Jedinjenja ovog prikaza su korisna kao prolekovi jedinjenja Formule (II) i Formule (III).
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (V) i/ili barem jednu so istog, kod kog R4je Ry i R3je H ili -CH3; i Ri, R2, Ry, Prsten A, Ra, Rb, y, i z su definisani u prvom aspektu. Uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R3je H i Prsten A je fenil. Takođe uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R3 je -CH3i Prsten A je fenil. Jedinjenja ovog prikaza su korisna kao prolekovi jedinjenja Formule (II) i Formule (III).
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jednu so istog, kod kog Prsten A je fenil; i Ri, R2, R3, R4, Rx, Ry, Ra, Rb, y, i z su definisani u prvom aspektu. Uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R3je H. Takođe uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R3je H i z je 1 ili 2.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I), gde Prsten A je fenil; R3je H ili CH3; R4je H; i Ri, R2, Ra, Rb, y, i z su definisani u prvom aspektu. Uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R3je H. Takođe uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R3 je H i z je 1 ili 2.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jednu so istog, kod kog R2je -CH2CH2CF3i Ri, R3, R4, Prsten A, Rx, Ry, Ra, Rb, y, i z su definisani u prvom aspektu. Uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih Prsten A je fenil. Takođe uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih z je 1 ili 2.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jednu so istog, kod kog R2is -CH2CH2CH2CF3i Ri, R3, R4, Prsten A, Ra, Rb, y, i z su definisani u prvom aspektu. Uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih Prsten A is fenil. Takođe uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih z je 1 ili 2.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jednu so istog, kod kog Prsten A je piridinil; i Ri, R2, R3, R4, Ra, Rb, y, i z su definisani u prvom aspektu. Uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R3je H. Takođe uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R3je H i z je 1 ili 2.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jednu so istog, kod kog R2 je -CH2CH2CF3; Prsten A je fenil; Rais C1-3alkil ili -CH2OH; svaki Rb je nezavisno F i/ili Cl; y je 1; z je 1 ili 2; i Ri, R3, i R4su definisani u prvom aspektu.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jednu so istog, kod kog y je 1, z je 1 ili 2, i Ri, R2, R3, R4, Prsten A, Ra, i Rbsu definisani u prvom aspektu. Uključena u prikaz su i jedinjenja kod kojih Prsten A je fenil. Takođe uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih Prsten A je fenil i z je 1.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem so istog, koje ima strukturu:
gde:
Ri je -CH2CH2CF3;
R2 je -CH2CH2CF3ili -CH2CH2CFI2CF3;
R3jeH, -CH3, ili Rx;
R4jeHiliRy;
Rx je: -CH2OC(0)CH(CH3)NH2, -CH2OC(0)CH(NH2)CH(CH3)2, -CH2OC(0)CH((C H(CH3)2)NHC(0)CH(NH2)CH(CH3)2,
Ry je: -SCH2CH(NH2)C(0)OH, -SCH2CH(NH2)C(0)OCH3, ili SCH2CH(NH2)C(0)OC(CH3)3;
Raje Cl, -CH3, -CH(CH3)2, -CH2OH, -CF3, ciklopropil, -OCH3, ili -O(ciklopropil); svaki Rb je nezavisno F, Cl, -CH2OH, -CF3, ciklopropil, i/ili -OCH3;
yje nula ili 1;
z je nula, 1, ili 2;
pod uslovom da z je nula, onda y je 1 i Raje -CH3, -CH2OH, -CF3, ciklopropil, ili - O(ciklopropil). Uključena u prikaz su i jedinjenja kod kojih y je 1; i z je nula, 1, ili 2. Takođe uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih y je 1 i z je 1.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem so istog, koje ima strukturu:
kod kog Ri, R2, R3, R4, Ra, i Rbsu definisani u prvom aspektu. Uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih Ra je Cl, -CH2OH, ili Ci-3alkil i Rb je F, Cl, -CH3, -CF3, ciklopropil, ili -OCH3. Takođe uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih Raje metil i Rb je F, Cl, ili CF3.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem so istog, koje ima strukturu:
kod kog Raje C1-3alkil; Rbje F ili Cl; i Ri, R2, R3, i R4su definisani u prvom aspektu. Uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R2 je -CH2CH2CF3. Takođe uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R2 je -CH2CH2CF3, Raje metil, i Rb je F ili Cl.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem so istog, koje ima strukturu:
kod kog y je nula i Ri, R2, R3, R4, i Rbsu definisani u prvom aspektu. Uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih Rb je -CH3, -CH2OH, ili -OCH3. Takođe uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R3je H ili -CH3i R4is H.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jednu so istog, koje ima strukturu:
kod kog R3i R4su definisani u prvom aspektu. Uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R3je H ili -CH3i R4 je H.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jednu so istog, koje ima strukturu:
kod kog R3 je H, -CH3, ili Rx, gde Rx je definisano u prvom aspektu. Takođe uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R3je Rx.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jednu so istog, koje ima strukturu:
kod kog R3je H ili -CH3, i Ry je definisano u prvom aspektu. Uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R3 je H. Takođe uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R3je -CH3.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jednu so istog, koje ima strukturu:
kod kog Raje -CH3ili -CH2OH; R3je H ili -CH3, i Ry je definisano u prvom aspektu. Uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R3je H. Takođe uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R3je -CH3.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili so istog, koje ima strukturu:
i
kod kog R3je H ili Rx; R4je H ili Ry; pod uslovom da R3je Rxonda R4je H; i pod uslovom da R4 je Ry onda R3je H; i gde Rxi Ry su definisani u prvom aspektu.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) koje ima strukturu:
gdeR3jeHili -CH3.
Jedan prikaz obezbeđuje jedinjenje Formule (I) koje ima strukturu:
Jedan prikaz obezbeđuje jedinjenje Formule (I) koje ima strukturu: ili jedinjenje Formule (I) koje ima strukturu:
ili bilo koju smešu dva jedinjenja.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili so istog, koje ima strukturu:
kod kog Rx je definisano u prvom aspektu.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili so istog, koje ima strukturu:
kod kog R3je H ili -CH3; i Ry je definisano u prvom aspektu.
Jedan prikaz obezbeđuje kompoziciju koja sadrži (i) barem jedno jedinjenje Formule (I) koje ima strukturu: i/ili so istog; (ii) jedinjenje Formule (I) koje ima strukturu:
ili (iii) smešu (i) i (ii); gde R3je H ili Rx; R4je H ili Ry; pod uslovom da R3je Rxonda R4je H; i pod uslovom da R4je Ry onda R3je H; i gde Rxi Ry su definisani u prvom aspektu.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili so istog, koje ima strukturu:
kod kog R3je H ili Rx; R4je H ili Ry; pod uslovom da R3je Rxonda R4je H; i pod uslovom da R4je Ry onda R3je H; i gde Rxi Ry su definisani u prvom aspektu. Uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R3je H ili -CH3; i R4 je H. Takođe uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R3je H i R4je H.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jednu so istog, kod kog Ri, R2, R3, R4, Prsten A, Ra, Rb, y, i z su definisani u prvom aspektu i pod uslovom da Prsten A je fenil i z je nula, onda y je 1 ili 2 barem jedan Raje metil, izopropil, -CH2OH, ciklopropil, i/ili -O(ciklopropil).
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jednu so istog, kod kog R3je H; i Ri, R2, R4, Ra, Rb, y, i z su definisani u prvom aspektu. Uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R3je deuterijum (D) ili tricijum (T). Takođe uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R2 je -CH2CH2CF3.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedinjenje Formule (I) i/ili barem jednu so istog, kod kog R3je -CH3; i Ri, R2, R4, Ra, Rb, y, i z su definisani u prvom aspektu. R3uključuje metil grupe kod kojih je jedan ili više atoma vodonika u izotopski zamenjeni sa deuterijumom (D) i/ili tricijumom (T). U jednom primeru ovog prikaza, R3je -CD3. Takođe uključena u ovaj prikaz su i jedinjenja kod kojih R2 je -CH2CH2CF3.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jednu so istog, gde Ri, R2, R3, R4, Prsten A, Ra, Rb, y, i z su definisani u prvom aspektu, pod uslovom da jedinjenje Formule (I) ili so istog nije:
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) gde R3je H ili -CH3; R4 je H; Ri, R2, Prsten A, Ra, Rb, y, i z su definisani u prvom aspektu, pod uslovom da jedinjenje Formule (I) nije:
Jedan prikaz obezbeđuje jedinjenje Formule (I) izabrano od: (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (1); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-hlorofenil)-9-etil-2-okso-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (2); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-hlorofenil)-9-izopropil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (3); (2R,3S)-N-(9-hloro-5-(3,4-dimetilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,33-trifluoropropil)sukcinarnida (4); (2R,3 S)-N-(9-hloro-5-(3,5 -dimetilfenil)-2-okso-2,3 -dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3 -il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (5); (2R,3S)-N-((3S)-9-etil-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3 -il)-2,3 -bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (6); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-hlorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (7); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-hlorofenil)-9-metil-2-okso-23-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (8); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-metilfenil)-2-okso-9-(trifluorometil)-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (9); (2R,3S)-N-((3S)-9-hloro-5-(3,5-dimetilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (10); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-metilfenil)-2-okso-9-(trifluorometil)-2,3-dihidro-m-l,4-benzodiazepin-3^
(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (11); (2R,3S)-N-((3S)-9-izopropil-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (12); (2R,3S)-N-((3S)-9-izopropil-2-okso-5-fenil-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (13); (2R,3S)-N-((3S)-9-(ciklopropiloksi)-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida(14); (2R,3S)-N-((3S)-9-(ciklopropiloksi)-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l ,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (15); (2R,3S)-N-((3S)-9-(ciklopropiloksi)-2-okso-5-fenil-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (16); (2R,3S)-N-((3S)-9-hloro-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (17); (2R,3S)-N-((3S)-9-metil-2-okso-5-(3-(trifluorometil)fenil)-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (18); (2R,3S)-N-((3S)-9-(ciklopropiloksi)-2-okso-5-fenil-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (19); (2R,3S)-N-((3 S)-9-metil-2-okso-5 -(3 -(trifluorometil)fenil)-2,3 -dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3 -il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (20); (2R,3S)-N-((3S)-9-hloro-5-(2-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinarnida (21); (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-lfuorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-
2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (22); (2R,3S)-N-((3S)-9-metil-2-okso-5-fenil-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-23-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (23); (2R,3S)-N-((3S)-9-ciklopropil-2-okso-5-fenil-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (24); (2R,3S)-N-((3S)-9-hloro-5-(3-ciklopropilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (25); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-hlorofenil)-9-metoksi-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (26); (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-hlorofenil)-9-metoksi-2-okso-2,3-dihidro-IH-1,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (27); (2R,3S)-N-((3S)-9-hloro-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (28); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-metilfenil)-9-metoksi-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(33,3-trifluoropropil)sukcinarnida (29); (2R3S)-N-((3S)-5-(4-(hidroksimetil)fenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2.3- bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (30); (2R,3S)-N-((3S)-5-(2-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (31); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (32); (2R,3S)-N-((3S)-9-metoksi-2-okso-5-(5-(trifluorometil)-2-piridinil)-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-23-bis(33,3-trifluoropropil)sukcinamida (33); (2R,3S)-N-((3S)-5-(5-hloro-2-piridinil)-9-metoksi-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (34); (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-metoksifenil)-2-okso-2,3-dihidro-1H-l ,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (35); (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-1.4- benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (36); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-fluorofenil)-9-(hidroksimetil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamida (37); ((3S)-3-(((2R,3S)-3-karbamoil-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-l-il)metil L-valinata (38); ((3S)-3-(((2R,3S)-3-karbamoil-6,6,6-trifluoro-2-(333-tnfluoropropil)heksanoil)amm^ 1,4-benzodiazepin-l-il)metil L-alaninata (39); S-(((2S,3R)-6,6,6-trifluoro-3-(((3S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-23-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)karbamoil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-L-cisteina (40); terc-butil S-(((2S,3R)-6,6,6-trifluoro-3-(((3S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)karbamoil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-L-cisteinata (41); metil S-(((2S,3R)-6,6,6-trifluoro-3-
(((3S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-L-cisteinata (42); ((3S)-3-(((2R,3S)-3-karbamoil-6,6,6-1xilfuoro-2-(3,33-trifluoropropil)heksanoil)amino)-5-(3-fluorofenil)-9-meri 2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-l-il)metil (4-(fosfonooksi)fenil)acetata (43); ((3S)-3-(((2R3S)-3-karbamoil-6,6,6-trilfuoro-2-(33,3-trifluoropropil)heksanoil)arnino)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-1 -il)metil L-valil-L-valinata (44); i soli istog.
Jedan prikaz obezbeđuje jedinjenje Formule (I) izabrano između: (2R,3S)-N-((3S)-5-(3 -fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3 -dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3 -il)-2,3 -bis(3,3,3 - trifluoropropil)sukcinamida (1); ((3S)-3-(((2R,3S)-3-karbamoil-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-l-il)metil L-valinata (38); ((3S)-3-(((2R,3S)-3-karbamoil-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3 -trifluoropropil)heksanoil)amino)-5-(3 -fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3 -dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-l-il)metil L-alaninata (39); S-(((2S,3R)-6,6,6-trifluoro-3-(((3S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)karbamoil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-L-cisteina (40);terc-butilS-(((2S,3R)-6,6,6-trifluoro-3-(((3S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)karbamoil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-L-cisteinata (41); metil S-(((2S,3R)-6,6,6-trifluoro-3-(((3S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)karbamoil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-L-cisteinata (42); ((3S)-3-(((2R,3S)-3-karbamoil-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-l-il)metil (4-(fosfonooksi)fenil)acetata (43); ((3S)-3-(((2R,3S)-3-karbamoil-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-1 -il)metil L-valil-L-valinata (44); i soli istog.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) kod kog R3 je H ili -CH3; i R4je H; gde jedinjenje Formule (I) ima vrednost metaboličkog polu-života od barem 45 minuta kako je mereno esejom za polu-život humane metaboličke stabilnosti koji je ovde opisan.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) kod kog R3 je H ili -CH3; i R4je H; gde jedinjenje Formule (I) ima vrednost metaboličkog polu-života od barem 60 minuta kako je mereno esejom za polu-život humane metaboličke stabilnosti koji je ovde opisan.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) kod kog R3is H ili -CH3; i R4is H; gde jedinjenje Formule (I) ima vrednost metaboličkog polu-života od barem 70 minuta kako je mereno esejom za polu-život humane metaboličke stabilnosti koji je ovde opisan.
Predmetni pronalazak obuhvata sve kombinacije aspekata i/ili prikaza pronalaska koje su ovde zabeležene. Podrazumeva se da bilo koji i svi prikazi predmetnog pronalaska mogu biti uzeti zajedno sa bilo kojim drugim prikazom ili prikazima kako bi se opisali dodatni prikazi. Takođe se podrazumeva da je svaki pojedinačni element prikaza namenjen da se kombinuje sa bilo kojim drugim ili svim elementima iz bilo kog prikaza kako bi se opisao dodatni prikaz.
DEFINICIJE
Karakteristike i prednosti pronalaska mogu lakše razumeti oni koji su obični prosečni poznavaoci oblasti nakon što pročitaju sledeći detaljan opis. Važno je ceniti da su određene karakteristike pronalaska, u cilju jasnoće, opisane prethodno i u daljem tekstu u kontekstu odvojenih prikaza, i mogu se takođe kombinovati da formiraju jedan prikaz. Obrnuto, različite karakteristike pronalaska koje su, u cilju kratkoće, opisane u kontekstu pojedinačnih prikaza mogu takođe biti kombinovane kako bi se formirale pod-kombinacije istih. Prikazi koji su ovde identifikovani kao primerni ili poželjni namenjeni su da budu ilustrativni i neograničavajući.
Osim ako ovde nije drugačije specifično navedeno, reference navedene u jednini mogu takođe da uključe i množinu. Na primer „neodređeni član, kojim se definiše imenica u jednini (neki, nekakav, jedan - ,,a" ili ,,an")" može da se odnosi bilo na jedan ili na jedan ili više.
Osim ako nije drugačije naznačeno, bilo koji heteroatom sa nesparenom (nepotpunom) valencom pretpostavlja se da ima dovoljno atoma vodonika kako bi spario (upotpunio) sve valence.
Definicije koje su ovde navedene imaju prednost nad definicijama koje su navedene u bilo kom drugom patentu, patentnoj prijavi i/ili objavi patentne prijave koja je ovde uključena kao referenca.
Izlistane niže u tekstu su definicije različitih termina koji su korišćeni kako bi se opisao predmetni pronalazak. Ove definicije se odnose na pojmove onako kako se koriste u specifikacijama (osim ako nisu drugačije ograničeni u specifičnim primerima) bilo pojedinačno ili kao deo veće grupe.
Kroz specifikacije, grupe i supstituenti istih mogu biti izabrane od strane prosečnog poznavaoca oblasti kako bi se dobili stabilni ostaci i jedinjenja.
Termin „halo" i „halogen", kako se ovde koriste odnose se na F, Cl, Br, ili I.
Termin „alkil" kako se ovde koristi, odnosi se i na razgranate i na linearne lance zasićenih alifatičnih ugljovodinčnih grupa, koje sadrže na primer od 1 do 12 ugljenikovih atoma, od 1 do 6 ugljenikovih atoma i od 1 do 4 ugljenikova atoma. Primeri alkil grupa uključuju ali nisu ograničeni na, metil (Me), etil (Et), propil{ npr.,n-propil i /-propil), butil{ npr,,n-butil, z'-butil, sec-butil, i/-butil), i pentil{ npr.,n-pentil, izopentil, neopentil), n-heksil, 2-metilpentil, 2-etilbutil, 3-metilpentil, i 4-metilpentil. Kada se broj pojavljuje u indeksu nakon simbola ,,C", indeks definiše sa većom specifičnošću broj atoma ugljenika koje određena grupa može da sadrži. Na primer „C1-3alkil" označava linearne i razgranate alkil grupe sa jednim do tri atoma ugljenika.
Fraza „farmaceutski prihvatljiv" se ovde primenjuje da se odnosi na jedinjenja, materijale, kompozicije i/ili dozne forme koje su u okviru medicinske procene, korisne za primenu u kontaktu sa tkivima ljudi i životinja bez preterane toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora ili drugih problema ili komplikacija, srazmerno razumnom odnosu korist/rizik.
Jedinjenja Formule (I) mogu da formiraju soli koje su takođe u okviru predmetnog pronalaska. Osim ako nije drugačije naznačeno, referenca na jedinjenje iz pronalaska podrazumeva referencu na jednu ili više soli istog. Termin ,,so(li)" označava kisele i/ili bazne soli nastale sa neorganskim i/ili organskim kiselinama i bazama. Dodatno, termin ,,so(li)" može da uključuje cviter jone (unutrašnje soli), npr. kada jedinjenje Formule (I) sadrži i bazni ostatak kao što je amin ili piridinski ili imidazolov prsten, i kiseli ostatak kao što je karboksilna kiselina. Farmaceutski prihvatljive (tj. netoksične, fiziološki prihvatljive) soli su poželjne, kao što su na primer soli prihvatljivih metala i amina kod kojih katjon ne doprinosi značajno toksičnosti ili biološkoj aktivnosti soli. Međutim, druge soli mogu biti korisne, npr. u koracima izolovanja ili prečišćavanja koji mogu da se primenjuju tokom pripreme i stoga su razmatrane u okviru predmetnog pronalaska. Soli jedinjenja Formule (T) mogu da se formiraju, na primer reagovanjem jedinjenja Formule (I) sa količinom kiseline ili baze, kao što je ekvivalentna količina, u medijumu kakav je onaj u kome so precipitira ili u vodenom medijumu praćeno liofilizacijom.
Primerne kisele adicione soli uključuju acetate (kao što su oni formirani sa sirćetnom kiselinom ili trihalosirćetnom kiselinom, na primer, trifluorosirćetnom kiselinom), adipate, alginate, askorbate, aspartate, benzoate, benzenesulfonate, bisulfate, borate, butirate, citrate, kamforate, kamforsulfonate, ciklopentanpropionate, diglukonate, dodecilsulfate, etansulfonate, fumarate, glukoheptanoate, glicerofosfate, hemisulfate, heptanoate, heksanoate, hidrohloride (formirani sa hlorovodoničnom kiselinom), hidrobromide (formirani sa bromovodoničnom kiselinom), hidrojodide, maleate (formirani sa maleinskom kielinom), 2-hidroksietansulfonate, laktate, metansulfonate (formirani sa metansulfonskom kiselinom), 2-naftalensulfonate, nikotinate, nitrate, oksalate, pektinate, persulfate, 3-fenilpropionate, fosfate, pikrate, pivalate, propionate, salicilate, sukcinate, sulfate (kao što su oni formirani sa sumpornom kiselinom), sulfonate (kao što su oni ovde pomenuti), tartarate, tiocijanate, toluensulfonate kao što su tozilati, undekanoati, i slični.
Primerne bazne soli uključuju amonijum soli, soli alkalnih metala kao što su natrijumove, litijumove, i kalijumove soli; soli zemno-alkalnih metala kao što su kalcijumove i magnezijumove soli; barijumove, cinkove, i aluminijumove soli; soli sa organskim bazama (na primer, organskim aminima) kao što su trialkilamini kao što su trietilamin, prokain, dibenzilamin, N-benzil-P-fenetilamin, 1-efenamin, A^Af'-dibenziletilendiamin, dehidroabietilamin, N-etilpiperidin, benzilamin, dicikloheksilamin ili slični farmaceutski prihvatljivi amini i soli sa amino kiselinama kao što su arginin, lizin i slične. Bazne grupe koje sadrže azot mogu da postanu kvatenerne sa agensima kao što su niži alkil halidi (npr., metil, etil, propil, i butil hloridi, bromidi i jodidi), dialkil sulfati (npr., dimetil, dietil, dibutil, i diamil sulfati), dugolančani halidi( npr.,decil, lauril, miristil i stearil hloridi, bromidi i jodidi), aralkil halidi (npr., benzil i fenetil bromidi), i drugi. Poželjne soli uključuju monohidrohloridne, hidrogensulfatne, metansulfonatne, fosfatne ili nitratne soli.
Jedinjenja Formule (I) mogu biti obezbeđena kao amorfne čvrste supstance ili kristalne čvrste supstance. Liofilizacija može da se koristi kako bi se obezbedila jedinjenja Formule (I) kao čvrsta supstanca.
Trebalo bi dalje razumeti da solvati (npr. hidrati) jedinjenja Formule (I) su takođe u okviru domena predmetnog pronalaska. Termin „solvat" podrazumeva fizičku asocijaciju jedinjenja Formule (I) sa jednim ili više molekula rastvarača, bilo organskog ili neorganskog. Ova fizička asocijacija uključuje i vodonično vezivanje. U određenim slučajevima rastvarač će biti sposoban za izolovanje, na primer kada su jedan ili više molekula rastvarača inkorporirani u kristalnu rešetku kristalne čvrste supstance. „Solvat" obuhvata i fazu-rastvora i odvojive solvate. Primerni solvati uključuju hidrate, etanolate, metanolate, izopropanolate, acetonitrilne solvate, i etil acetatne solvate. Metode za solvataciju su poznate u oblasti.
Bilo koje jedinjenje koje može biti obrađenoin vivotako da se dobije bioaktivni agens( tj., jedinjenje Formule(I)) je prolek. Jedinjenja Formule (I) kod kojih bilo R3 je Rx ili R4 je Ry su korisni kao prolekovi jedinjenja Formule (I) kod kojih R3 je H ili -CH3i R4 je H.
Različite forme prolekova su poznate u oblasti i opisane u:
a) Wermuth, CG. et al., The Practice of Medicinal Chemistrv, Chapter 31, Academic Press (1996); b) Bundgaard, H. ed., Design of Prodrugs, Elsevier (1985); c) Bundgaard, H., Chapter 5, "Design and Application of Prodrugs", Krosgaard-Larsen,
P. et al., eds., A Textbook of Drug Design and Development, pp. 113-191, Hanvood Academic
Publishers (1991); and
d) Testa, B. et al, Hydrolysis in Drug and Prodrug Metabolizam, Wiley-VCH (2003).
Dodatno, jedinjenja Formule (I), nakon njihove pripreme, mogu biti izolovana i
prečišćena kako bi se dobila kompozicija koja sadrži količinu po masi jednaku ili veću od 99% jedinjenja Formule (I) („suštinski čisto") koje se potom koristi ili formuliše kako je ovde opisano. Takva „suštinski čista" jedinjenja Formule (I) su takođe razmatrana kao deo predmetnog pronalaska.
„Stabilno jedinjenje" i „stabilna struktura" imaju za cilj da ukažu jedinjenje koje je dovoljno robusno da preživi izolovanje iz reakcione smeše do korisnog stepena čistoće, kao i formulisanje u efikasni terapijski agens. Predmetni pronalazak ima za cilj da prikaže stabilna jedinjenja.
„Terapijski efikasna količina" ima za cilj da uključi količinu jedinjenja iz predmetnog pronalaska kao samo ili količinu u kombinaciji sa jedinjenjima iz tvrdnji ili količinu jedinjenja iz predmetnog pronalaska u kombinaciji sa drugim aktivnim sastojcima efikasnim kao
inhibitori NOTCH receptora ili efikasnim u lečenju ili prevenciji proliferativnih bolesti kao što je kancer.
Kako se ovde koristi „lečenje" ili „tretman" pokriva lečenje stanja bolesti kod sisara posebno ljudi i uključuje (a) prevenciju javljanja stanja bolesti kod sisara, posebno kada je taj sisar predisponiran na stanje bolesti ali još uvek nije dijagnostifikovano da je ima; (b) inhibiranje stanja bolesti, tj. zaustavljanje njenog razvoja; i/ili (c) olakšanje stanja bolesti, tj. izazivanje regresije stanja bolesti.
Jedinjenja predmetnog pronalaska imaju za cilj da uključe sve izotope atoma koji se javljaju u predmetnim jedinjenjima. Izotopi uključuju one atome koji imaju isti atomski broj ali različit maseni broj. Putem opšteg primera i bez ograničenje izotopi vodonika uključuju deuterijum (D) i tricijum (T). Izotopi ugljenika uključuju<13>C i<14>C. Izotopski obeležena jedinjenja iz pronalaska mogu generalno biti pripremljena konvencionalnim tehnikama koje su poznate prosečnim poznavaocima oblasti ili procesima koji su analogni onima ovde opisanim, koristeći odgovarajuće izotopski obeležene reagensi umesto neobeleženih koji se inače koriste.
Jedinjenja u saglasnosti sa Formulom (I) i/ili soli istih mogu da se primenjuju bilo kojim načinom koji je pogodan za stanje koje se leči, koji može da zavisi od potrebe za tretmanom specifičnog mesta ili količinom jedinjenja Formule (I) koja treba da se dostavi.
Takođe obuhvaćena ovim pronalaskom je klasa farmaceutskih kompozicija koja sadrži jedinjenje Formule (I) i/ili so istog; i jedan ili više netoksičnih, farmaceutski prihvatljivih nosača i/ili diluenasa i ili adjuvanasa (ovde kolektivno nazvanih „nosač") i, ako je poželjno druge aktivne sastojke. Jedinjenja Formule (I) mogu da se primenjuju bilo kojim pogodim putem, poželjno u formi farmaceutske kompozicije prilagođene za dati put i u dozi koja je delotvorna za namenjeno lečenje. Jedinjenja i kompozicije iz predmetnog pronalaska mogu na primer da budu administrirana oralno, mukozno, ili parenteralno uključujući intravenski, intraperitonealno, subkutano, intramuskularno i intrasternalno u doznim jedinicama formulacija koje sadrže konvencionalne farmaceutski prihvatljive nosače, adjuvanse i transportere. Na primer, farmaceutski nosač može da sadrži mešavinu manitola ili laktoze i miktokristalne celuloze. Smeša može da sadrži dodatne komponente kao što su lubrikantni agensi, npr., magnezijum stearat i agensi za dezintegrisanje kao što je krospovidon. Mešavina nosača može biti spakovana u želatinsku kapsulu ili komprimirana kao tableta. Farmaceutska kompozicija može na primer, biti primenjena u oralnoj doznoj formi ili kao infuzija.
Za oralnu administraciju, farmaceutska kompozicija može biti u formi, na primer
tablete, kapsule, tečne kapsule, suspenzije ili tečnosti. Farmaceutska kompozicija se poželjno pravi u formi dozne jedinice koja sadrži određenu količinu aktivnog sastojka. Na primer, farmaceutska kompozicija može biti obezbeđena kao tableta ili kapsula koja sadrži količinu aktivnog sastojka od 1 do 2000 mg, poželjno od 1 do 500 mg, i još poželjnije od 5 do 150 mg. Pogodna dnevna doza za čoveka ili drugog sisara može široko da varira zavisno od stanja pacijenta i drugih faktora, ali može da se odredi rutinskim metodama.
Bilo koja ovde razmatrana farmaceutska kompozicija može, na primer, biti dostavljena oralno putem bilo kojih prihvatljivih i pogodnih oralnih preparata. Primerni oralni preparati uključuju, ali nisu ograničeni na, na primer, tablete, pastile, lozenge, vodene i uljane suspenzije, disperzione praškove ili granule, emulzije, tvrde i meke kapsule, tečne kapsule, sirupe i eliksire. Farmaceutska kompozicija namenjena za oralnu primenu može biti pripremljena prema bilo kojoj metodi, poznatoj u oblasti, za proizvodnju farmaceutskih kompozicija namenjenih za oralnu primenu. U cilju obezbeđivanja farmaceutski ukusnog preparata, farmaceutska kompozicija shodno predmetnom pronalasku može da sadrži barem jedan agens izabran između agenasa za zaslađivanje, agenasa za davanje ukusa, agensa za bojenje, demulcenasa, antioksidanasa i agenasa za prezervaciju.
Tableta, na primer, može biti pripremljena mešanjem barem jednog jedinjenja Formule (I) sa barem jednim netoksičnim farmaceutski prihvatljivim ekscipijensom pogodnim za proizvodnju tableta. Primerni ekscipijensi uključuju ali nisu ograničeni na, na primer, inertne diluense, kao što su, na primer, kalcijum karbonat, natrijum karbonat, laktoza, kalcijum fosfat, i natrijum fosfat; agensi za granulaciju i dezintegraciju, kao što su, na primer, mikrokristalna celuloza, natrijum kroskarmeloza, kukuruzni škrob, i alginska kiselina; agensi za vezivanje, kao što su, na primer, škrob, želatin, polivinil-pirolidon, i akacija; i agensi za lubrikaciju, kao što su, na primer, magnezijum stearat, stearinska kiselina, i talk. Dodatno, tableta može biti nepremazana ili premazana upotrebom poznatih tehnika kako bi se maskirao ružan ukus leka neprijatnog ukusa, kako bi se odložila dezintegracija ili apsorpcija aktivnog sastojka u gastrointestinalnom traktu čime bi se održao efekat aktivnog sastojka duži vremenski period. Primerni vodorastvorni materijali za maskiranje ukusa uključuju, ali nisu ograničeni na, hidroksipropil-metilcelulozu i hidroksipropil-celulozu. Primerni materijali za vremensko odlaganje uključuju, ali nisu ograničeni na, etil celulozu i celulozu acetat butirat.
Čvrste želatinske kapsule mogu, na primer, biti pripremljene mešanjem barem jednog jedinjenja Formule (I) sa barem jednim inertnim čvrstim diluensom, kao što je, na primer, kalcijum karbonat; kalcijum fosfat; i kaolin.
Meke želatinske kapsule mogu, na primer, biti pripremljene mešanjem barem jednog jedinjenja Formule (I) sa barem jednim nosačem rastvornim u vodi, kao što je, na primer, polietilen glikol; barem jedanim uljanim medijumom, kao što je, na primer, ulje kikirikija, tečni parafin i maslinovo ulje.
Vodena suspenzija može biti pripremljena, na primer, mešanjem barem jednog jedinjenja Formule (I) sa barem jednim ekscipijensom pogodnim za proizvodnju vodene suspenzije. Primerni ekscipijensi pogodni za proizvodnju vodene suspenzije, uključuju, ali nisu ograničeni na, na primer, agensi za suspendovanje, kao što su, na primer, natrijum karboksimetilceluloza, metilceluloza, hidroksipropilmetilceluloza, natrijum alginat, alginska kiselina, polivinil-pirolidon, guma tragakan, i guma arabika; agensi za disperziju ili kvašenje, kao što su, na primer, fosfatidi koji se prirodno javljaju, npr., lecitini; kondenzacioni proizvodi alkilen oksida sa masnim kiselinama, kao što su, na primer, polioksietilen stearat; kondenzacioni proizvodi etilen oksida sa dugolančanim alifatičnim alkoholima, kao što su, na primer heptadekaetilen-oksicetanol; kondenzacioni proizvodi etilen oksida sa parcijalnim estrima dobij enim od masnih kiselina i heksitola, kao što su, na primer, polioksietilen sorbitol monooleate; i kondenzacioni proizvodi etilen oksida sa parcijalnim estrima dobijenim od masnih kiselina i heksitol anhidrida, kao što su, na primer, polietilen sorbitan monooleate. Vodena suspenzija može takođe da sadrži barem jedan prezervativ, kao što je, na primer, etil i n-propil p-hidroksibenzoat; barem jedan agens za bojenje; barem jedan agens za ukus; i/ili barem jedan zaslađujući agens, uključujući ali bez ograničenja na, na primer, saharozu, saharin, i aspartam.
Uljane suspenzije mogu, na primer, biti pripremljene suspendovanjem barem jednog jedinjenja Formule (I) u bilo biljnom ulju, kao što je, na primer, ulje kikirikija; maslinovo ulje; susamovo ulje; i kokosovo ulje; ili u mineralnom ulju, kao što je, na primer, tečni parafin. Uljana suspenzija može takođe da sadrži barem jedan agens za zgušnjavanje, kao što je, na primer, pčelinji vosak; čvrsti parafin; i cetil alkohol. U cilju obezbeđivanja ukusne uljane suspenzije, barem jedan od agenasa za zaslađivanje prethodno opisan u tekstu, i/ili barem jedan agens za davanje ukusa može biti dodat u uljanu suspenziju. Uljana suspenzija može dalje da sadrži barem jedan prezervativ, uključujući, bez ograničavanja na, na primer, antioksidans, kao što je, na primer, butilovani hidroksianizol, i alfa-tokoferol.
Disperzni praško vi i granule mogu, na primer, biti pripremljena mešanjem barem jednog jedinjenja Formule (I) sa barem jednim agensom za dispergovanje i/ili kvašenje; barem jednim agensom za suspendovanje; i/ili barem jednim prezervativom. Pogodni agens za dispergovanje, agens za kvašenje i agens za suspendovanje su već prethodno opisani. Primerni prezervativi uključuju, ali nisu ograničeni na, na primer, anti-oksidanse, npr., askorbinsku kiselinu. Dodatno, disperzni praškovi i granule mogu takođe da sadrže barem jedan ekscipijens, uključujući, bez ograničavanja na, na primer, agensi za zaslađivanje; agensi za davanje ukusa; agensi za bojenje.
Emulzija barem jednog jedinjenja Formule (I) može, na primer, biti pripremljena kao emulzija ulja-u-vodi. Uljana faza emulzije sadrži jedinjenja Formule (I) može biti konstituisana od poznatih sastojaka na poznat način. Uljana faza može biti obezbeđena od, ali nije ograničena na, na primer, biljnog ulje, kao što je, na primer, maslinovo ulje i kikiriki ulje; mineralnog ulje, kao što je, na primer, tečni parafin; i mešavine istih. Iako faza može da obuhvata samo emulgator, može da obuhvata i mešavinu barem jednog emulgatora sa mašću ili uljem ili i sa mašću i sa uljem. Pogodni emulgatori uključuju, ali nisu ograničeni na, na primer, fosfatide koji se prirodno javljaju, npr., sojin lecitin; estre ili delimične estre dobijene od masnih kiselina i heksitol anhidrida, kao što je, na primer, sorbitan monooleate; i kondenzacioni proizvodi delimičnih estara sa etilen oksidom, kao što je, na primer, polioksietilen sorbitan monooleate. Poželjno, hidrofilni emulgator je uključen zajedno sa lipofilnim emulgatorom koji se ponaša kao stabilizator. Takođe je poželjno da uključuje i ulje i mast. Zajedno emulgator(i) sa ili bez stabilizatora čine takozvani emulgujući vosak i vosak zajedno sa uljem i mašću čini takozvanu emulgujuću bazu masti koja formira uljanu dipergovanu fazu formulacije kreme. Emulzija može takođe da sadrži zaslađivač, agens za davanje ukusa, prezervativ, i/ili antikosidans. Emulgatori i stabilizatori emulzija pogodni za upotrebu u formulaciji predmetnog pronalaska uključuju Tween 60, Span 80, cetostearil alkohol, miristil alkohol, gliceril monostearat, natrijum lauril sulfat, gliceril distearat sam ili sa voskom, ili druge materijale poznate u oblasti.
Jedinjenja Formule (I) mogu, na primer, takođe biti dostavljena intravenski subkutano i/ili intramuskularno preko farmaceutski prihvatljive i pogodne injektabilne forme. Primerne injektabilne forme uključuju, ali nisu ograničene na, na primer, sterilne vodene rastvore koje sadrže prihvatljive nosače i rastvore, kao što su, na primer, voda, Ringerov rastvor, i izotonični rastvor natrijum hlorida; sterilne ulje-u-vodi mikroemulzije; i vodene ili uljane suspenzije.
Formulacije za parentrealnu primenu mogu biti u formi vodenih ili nevodenih sterilnih izotoničnih rastvora ili suspenzija za injektovanje. Ovi rastvori i suspenzije mogu biti pripremljeni od sterilnih praškova ili granula korišćenjem jednog ili više nosača ili diluenasa pomenutih za upotrebu u formulacijama za oralnu administraciju ili korišćenj em drugih pogodnih agensa za dispergovanje ili kvašenje i agenasa za suspendovanje. Jedinjenja mogu biti rastvorena u vodi, polietilen glikolu, propilen glikolu, etanolu, kukuruznom ulju, ulju semena pamuka, ulju kikirikija, susamovom ulje, benzil alkoholu, natrijum hloridu, tragakan gumi, i/ili različitim puferima. Drugi adjuvansi i načini primene su opšte poznati u oblasti farmacije. Aktivni sastojci mogu biti administrirani injekcijom kao kompozicije sa pogodnim nosačima uključujući slani rastvor, dekstrozu, ili vodu, ili sa ciklodekstrinom( tj.,CAPTISOL®), ko-rastvaračakom solubilizacijom( tj.,propilen glikol) ili micelarnom solubilizacijom( tj.,Tween 80).
Sterilni injektabilni preparat može takođe biti sterilni injektabilni rastvor ili suspenzija u netoksičnom parenteralno prihvatljivom diluensu ili rastvaraču, na primer kao rastvor u 1,3-butandiolu. Među prihvatljivim nosačima i rastvaračima koji mogu biti upotrebljeni su voda, Ringerov rastvor i izotonični rastvor natrijum hlorida. Dodatno, sterilna, fiksirana ulja su konvencionalno korišćena kao rastvarači ili medijumi za suspendovanje. U ovu svrhu bilo koje blago fiksirano ulje može biti upotrebljeno, uključujući i sintetičke mono- ili digliceride. Dodatno, masne kiseline kao što je oleinska kiselina nalaze upotrebu u preparatima za injektovanje.
Sterilna injektabilna mikromeluzija ulja-u-vodi može, na primer, biti pripremljena 1) rastvaranjem barem jednog jedinjenja Formule (I) u uljanoj fazi, kao što je, na primer, mešavina ulja soje i sojinog lecitina; 2) kombinovanjem uljane faze koja sadrži Formulu (I) sa mešavinom vode i glicerola i; 3) obradom kombinacije tako da se formira mikroemulzija.
Sterilna vodena ili uljana suspenzija može biti pripremljena u saglasnosti sa metodama koje su već poznate u oblasti. Na primer, sterilni vodeni rastvor ili suspenzija može biti pripremljen sa netoksičnim parenteralno-prihvatljivim diluensom ili rastvaračem, kao što je, na primer, 1,3-butan diol; i sterilna uljana suspenzija može biti pripremljena sa sterilnim netoksičnim prihvatljivim rastvaračem ili medijumom za suspendovanje, kao što su, na primer, sterilna fiksna ulja, npr., sintetički mono- ili digliceridi; i masnim kiselinama, kao što je, na primer, oleinska kiselina.
Farmaceutski prihvatljivi nosači, adjuvansi, i transporteri koji mogu da se koriste u farmaceutskim kompozicijama predmetnog pronalaska uključuju, ali nisu ograničeni na, jonske izmenjivače, aluminijum, aluminijum stearat, lecitin, samo-emulgujuće sisteme za dostavu lekova (SEDDS) kao što su d-alfa-tokoferol polietilenglikol 1000 sukcinat, surfaktante korišćene u farmaceutskim doznim formama kao što su Tween-ovi, polietoksilovano ulje ricinusa kao što je CREMOFOR® surfaktant (BASF), ili druge slične polimerne matrikse za dostavu, serumske proteine, kao što je humani serum albumin, puferske supstance kao što su fosfati, glicin, sorbinska kiselina, kalijum sorbat, delimične mešavine glicerida sa zasićenim biljnim masnim kiselinama, vodu, soli ili elektrolite, kao što su protamin sulfat, dinatrijum hidrogen fosfat, kalijum hidrogen fosfat, natrijum hlorid, cinkove soli, koloidnu siliku, magnezijum trisilikat, polivinil pirolidon, supstance bazirane na celulozi, polietilen glikol, natrijum karboksimetilceluloza, poliakrilate, voskove, polietilen-polioksipropilen-blok polimere, polietilen glikol i lanolin (vunena mast). Ciklodekstrini kao što su alfa-, beta-, and gama-ciklodekstrin, ili hemijski modifikovani derivati kao što su hidroksialkilciklodekstrini, uključujući 2- i 3-hidroksipropil-ciklodekstrine, ili druge solubilizovane derivate mogu takođe povoljno biti upotrebljeni kako bi se poboljšala dostava ovde opisanih jedinjenja Formule (I).
Farmaceutski aktivna jedinjenja predmetnog pronalaska mogu biti obrađena u saglasju sa konvencionalnim metodama farmacije kako bi se proizvela medicinska sredstva za administraciju pacijentima, uključujući ljude i druge sisare. Farmaceutske kompozicije mogu biti podvrgnute konvencionalnim farmaceutskim operacijama kao što je sterilizacija i/ili mogu sadržati konvencionalne adjuvanse, kao što su prezervativi, stabilizatori, agensi za kvašenje, emulgatori, puferi itd. Tablete i pilule dodatno mogu biti pripremljene sa enteričnim premazima. Takve kompozicije mogu takođe sadržati adjuvanse kao što su agensi za kvašenje, zaslađivanje i parfimisanje.
Količine jedinjenja koje se administriraju u dozni režim za lečenje stanja bolesti sa jedinjenjima i/ili kompozicijama predmetnog pronalaska zavise od više faktora uključujući godine, težinu, pol, medicinsko stanje subjekta, tip bolesti, ozbiljnost bolesti, put i učestalost administracije i konkretno jedinjenje koje se primenjuje. Stoga, dozni režim može široko da varira, ali može da se utvrdi rutinski korišćenj em standardnih metoda. Dnevna doza od oko 0,001 do 100 mg/kg telesne mase, poželjno između 0,005 i oko 50 mg/kg telesne mase i najpoželjnije između oko 0,01 do 10 mg/kg telesne mase može biti prihvatljiva. Dnevna doza može da se administrira u jednoj do četiri doze dnevno.
U terapijske svrhe, aktivna jedinjenja predmetnog pronalaska se obično kombinuju sa jednim ili više adjuvanasa koji odgovara naznačenom putu administracije. Ako se administriraju oralno, jedinjenja mogu biti pomešana sa laktozom, saharozom, škrobom u prahu, celuloznim estrima alkanskih kiselina, alkil estrima celuloze, talkom, stearinskom kiselinom, magnezijum stearatom, magnezijum oksidom, natrijumovim i kalcijumovim solima fosforne i sumporne kiseline, želatinom, guma arabikom, natrijum alginatom, polivinilpirolidonom, i/ili polivinil alkoholom, i potom tabletirana ili enkapsulirana za pogodnu primenu. Takve kapsule ili tablete mogu da sadrže formulacije za kontrolisano otpuštanje koje mogu biti obezbeđene u disperziji aktivnog jedinjenja u hidroksipropilmetil celulozi.
Farmaceutske kompozicije predmetnog pronalaska sadrže barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jednu so istog, i opciono dodatne agensi izabrane između bilo kog farmaceutski prihvatljivog nosača, adjuvansa i transportera. Rezervne kompozicije predmetnog pronalaska sadrže ovde opisano jedinjenje Formule (I), ili prolek istog ovde identifikovan i farmaceutski prihvatljiv nosač, adjuvans ili transporter.
KORISNOST
Jedinjenja Formule (I) su korisna za lečenje kancera, na primer, kancera zavisnih od Notch aktivacije. Notch aktivacija je dovedena u vezu sa patogenezom raznih čvrstih tumora uključujući jajnika, pankreasa kao i kancera dojke i hematoloških tumora kao što su leukemije, limfomi i multipli mijelomi.
U jednom prikazu, jedinjenje Formule (I) i/ili a so istog se koristi za tretman kancera kod sisara koji za tim ima potrebu. Ovaj prikaz može da se koristi za lečenje različitih kancera, uključujući, bez ograničavanja na, kancer bešike, kancer dojke, kolorektalni kancer, kancer želuca, kancer glave i vrata, kancer bubrega, kancer jetre, kancer pluća uključujući nemikrocelularni kancer pluća (NSCLC), kancer jajnika, kancer pankreasa, kancer žučne kese, kancer prostate, kancer štitne žlezde, osteosarkom, rabdomiosarkom, maligni fibrozni histiocitom (MFH), fibrosarkom, glioblastome/astrocitome, neuroblastom, melanom, akutnu limfoblastičnu leukemiju T ćelija i mezoteliom. Na primer, ovaj prikaz se koristi za lečenje kancera dojke, kacera debelog creva ili kancera pankreasa. Poželjno sisar je čovek. Na primer, terapijski efikasna količina za tretman kancera može da se administrira u predmetnom prikazu. Ovaj prikaz uključuje administraciju jedinjenja koje ima strukturu:
i/ili barem jednu so istog. Putevi administracije iz predmetnog prikaza uključuju parenteralnu administraciju i oralnu administraciju.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog se koristi za lečenje kancera kod sisara koji za tim ima potrebu, gde je navedeni kancer kolorektalni kancer. Poželjno, sisar je čovek. Na primer, terapijski efikasna količina za tretman kancera može da se administrira u predmetnom prikazu. Putevi administracije iz predmetnog prikaza uključuju parenteralnu administraciju i oralnu administraciju.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog se koristi za lečenje kancera kod sisara koji za tim ima potrebu, gde je navedeni kancer trostruko negativni kancer dojke. Poželjno, sisar je čovek. Na primer, terapijski efikasna količina za tretman kancera može da se administrira u predmetnom prikazu. Putevi administracije iz predmetnog prikaza uključuju parenteralnu administraciju i oralnu administraciju.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog se koristi za lečenje kancera kod sisara koji za tim ima potrebu, gde navedeni kancer ima translokaciju barem jedanog od Notch receptora. Na primer, humani trostruko negativni kancer dojke HCC-1599 ima Notch 1 translokaciju.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog se koristi za lečenje kancera kod sisara koji za tim ima potrebu, gde je navedeni kancer nemikrocelularni kancer pluća. Poželjno, sisar je čovek. Na primer, terapijski efikasna količina za tretman kancera može da se administrira u predmetnom prikazu. Putevi administracije iz predmetnog prikaza uključuju parenteralnu administraciju i oralnu administraciju.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog se koristi za lečenje kancera kod sisara koji za tim ima potrebu, gde je navedeni kancer rak pankreasa. Poželjno, sisar je čovek. Na primer, terapijski efikasna količina za tretman kancera može da se administrira u predmetnom prikazu. Putevi administracije iz predmetnog prikaza uključuju parenteralnu administraciju i oralnu administraciju.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog se koristi za lečenje kancera kod sisara koji za tim ima potrebu, gde je navedeni kancer rak jajnika. Poželjno, sisar je čovek. Na primer, terapijski efikasna količina za tretman kancera može da se administrira u predmetnom prikazu. Putevi administracije iz predmetnog prikaza uključuju parenteralnu administraciju i oralnu administraciju.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog se koristi za lečenje kancera kod sisara koji za tim ima potrebu, gde je navedeni kancer melanom. Poželjno, sisar je čovek. Na primer, terapijski efikasna količina za tretman kancera može da se administrira u predmetnom prikazu. Putevi administracije iz predmetnog prikaza uključuju parenteralnu administraciju i oralnu administraciju.
Upotreba barem jednog jedinjenja Formule (I) i/ili barem jedne soli istog, u proizvodnji medikamenta za tretman kancera stavlja se na uvid javnosti. Poželjno, u predmetnom prikazu kanceri koji su predmet lečenja uključuju jedan ili više kancera bešike, kancera dojke, kolorektalnog kancera, kancera želuca, kancera glave i vrata, kancera bubrega, kancera jetre, kancera pluća uključujući nemikrocelularni kancer pluća (NSCLC), kancera jajnika, kancera pankreasa, kancera žučne kese, kancera prostate, kancera štitne žlezde, osteosarkoma, rabdomiosarkoma, malignog fibroznog histiocitoma (MFH), fibrosarkoma, glioblastoma/astrocitoma, neuroblastoma, melanoma, akutne limfoblastične leukemije T ćelija i mezotelioma. Pogodni medikamenti iz predmetnog prikaza uključuju medikamente za parenteralnu administraciju, kao što su, na primer, rastvori i suspenzije i medikamente za oralnu administraciju, kao što su, na primer, tablete, kapsule, rastvori, i suspenzije.
Jedan prikaz obezbeđuje barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jednu so istog, za upotrebu u lečenju kancera. U predmetnom prikazu, kanceri koji su predmet lečenja uključuju jedan ili više kancera bešike, kancera dojke, kolorektalnog kancera, kancera želuca, kancera glave i vrata, kancera bubrega, kancera jetre, kancera pluća uključujući nemikrocelularni kancer pluća (NSCLC), kancera jajnika, kancera pankreasa, kancera žučne kese, kancera prostate, kancera štitne žlezde, osteosarkoma, rabdomiosarkoma, malignog fibroznog histiocitoma (MFH), fibrosarkoma, glioblastoma/astrocitoma, neuroblastoma, melanoma, akutne limfoblastične leukemije T ćelija i mezotelioma.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog se koristi za tretman kancera kod sisara gde je kancer zavisan od Notch aktivacije. Ovaj prikaz može da se koristi za tretman različitih kancera, uključujući, bez ograničavanja na, kancer bešike, kancer dojke, kolorektalni kancer, kancer želuca, kancer glave i vrata, kancer bubrega, kancer jetre, kancer pluća uključujući nemikrocelularni kancer pluća (NSCLC), kancer jajnika, kancer pankreasa, kancer žučne kese, kancer prostate, kancer štitne žlezde, osteosarkom, rabdomiosarkom, maligni fibrozni histiocitom (MFH), fibrosarkom, glioblastome/astrocitome, neuroblastom, melanom, akutnu limfoblastičnu leukemiju T ćelija i mezoteliom. Poželjno, ovaj prikaz se koristi za tretman kancera dojke, kancera debelog creva ili kancera pankreasa. Poželjno, sisar je čovek. Na primer, terapijski efikasna količina za tretman kancera može da se administrira u predmetnom prikazu. Pogodni putevi administracije iz predmetnog prikaza uključuju parenteralnu administraciju i oralnu administraciju.
U tretmanu kancera, kombinacija hemoterapijskih agenasa i/ili drugih tretmana (npr, lečenje zračenjem) je često korisna. Drugi (ili treći) agens može da ima sličan ili različit mehanizam dejstva u odnosu na prvi terapijski agens. Na primer, kombinacija lekova može da se koristi gde dva ili više lekova koji se administriraju deluje na različite načine ili u različitim fazama ćelijskog ciklusa i/ili gde dva ili više lekova nemaju preklapajuće toksičnosti ili neželjena dejstva, i/ili gde je kombinacija lekova pokazala efikasnost u tretmanu posebnog stanja bolesti koju manifestuje pacijent.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog; ijedan ili više dodatnih antikancerskih lekova se koristi za tretman kancera.
Fraza „dodatni antikancerski agens" odnosi se na lek izabran između jednog ili više sledećih: alkilujući agensi (uključujući azotne iperite, alkil sulfonate, nitrozouree, derivate etilenimina, i triazene); anti-angiogenike (uključujući matriks metaloproteinazne inhibitore); antimetabolite (uključujući adenozin deaminazne inhibitore, antagoniste folne kiseline, purinske analoge, i pirimidinske analoge); antibiotike ili antitela (uključujući monoklonska antitela, CTLA-4 antitela, antracikline); aromatazne inhibitore; modifikatore odgovora ćelijskog ciklusa; enzime; inhibitore farnezil-protein transferaze; hormonske i anti hormonske agense i steroide (uključujući sintetičke analoge, glukokortikoide, estrogene/anti-estrogene[ npr.,SERMs], androgene/anti-androgene, progestine, agoniste progesteronskog receptora, i agoniste i antagoniste oslobađanja luteinizirajućeg hormona [LHRH]); sistemske modulatore faktora rasta sličnih insulinu(IGF)/receptora faktora rasta sličnih insulinu (IGFR) (uključujući IGFR1 inhibitore); inhibitore integrinske-signalizacije; kinazne inhibitore (uključujući multi-kinazne inhibitore i/ili inhibitore Src kinaze ili nihibitore Src/abl, ciklin zavisne kinaze [CDK] , panHer, Her-1 i Her-2 antitela, VEGF inhibitore, uključujući anti-VEGF antitela, EGFR inhibitore, inhibitore mitogen-aktiviranog proteina [MAP], MET inhibitore, MEK inhibitore, Aurora kinazne inhibitore, PDGF inhibitore, i druge tirozin kinazne inhibitore ili serin/treonin kinazne inhibitore; agense koji remete mikrotubule, kao što su ekteinascidini ili njihovi analozi i derivati; agense koji stabilizuju mikrotubule kao što su taksani, i epotiloni koji se prirodno javljaju i njihovi sintetički i semi-sintetički analozi; agense koji vezuju, destabilizuju mikrotubule (uključujući vinka alkaloide); topoizomerazne inhibitore; prenil-protein transferazne inhibitore; koordinativne komplekse platine; inhibitore signalne transdukcije; i druge agense korišćene kao anti-kancerske i citotoksične agense kao što su modifikatori biološkog odgovora, faktori rasta i imunomodulatori.
Shodno tome, jedinjenja iz predmetnog pronalaska mogu da se administriraju u kombinaciji sa drugim anti-kancerskim tretmanima korisnim za tretman kancera ili drugih proliferativnih bolesti. Predmetni pronalazak dodatno stavlja na uvid javnosti upotrebu barem jednog jedinjenja Formule (I) i/ili barem jedne soli istog za pripremu lekova za tretman kancera, i/ili obuhvata pakovanje jedinjenja Formule (I) u kome je zajedno sa instrukcijama da se jedinjenje koristi u kombinaciji sa drugim anti-kancerskim ili citotoksičnim agensima i tretmanima za lečenje kancera. Predmetni pronalazak dodatno obuhvata kombinaciju barem jednog jedinjenja Formule (I) i/ili barem jedne soli istog; barem jedanog dodatnog agensa u obliku kompleta,npr.,gde su oni spakovani zajedno ili smešteni u odvojene pakete kako bi bili prodati kao komplet, ili gde su spakovani kako bi bili zajedno formulisani.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog; dasatinib i opciono, jedan ili više dodatnih antikancerskih agenasa se koristi za lečenje kancera.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog; paklitaksel i opciono, jedan ili više dodatnih antikancerskih agenasa se koristi za lečenje kancera.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog; tamoxifen i opciono, jedan ili više dodatnih antikancerskih agenasa se koristi za lečenje kancera.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog; glukokortikoid i opciono, jedan ili više dodatnih antikancerskih agenasa se koristi za lečenje kancera. Primer pogodnog glukokortikoida je deksametazon.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog; karboplatina i opciono, jedan ili više dodatnih antikancerskih agenasa se koristi za lečenje kancera.
Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu biti formulisana ili ko-administrirana sa drugim terapijskim agensima koji su odabrani zbog posebne koristi u rešavanju sporednih efekata povezanih sa gorepomenutim stanjima. Na primer, jedinjenja predmetnog pronalaska mogu biti formulisana sa agensima koji sprečavaju mučninu, hipersenzitivnost i iritaciju želuca, što su antiemetici, i Hi i H2antihistaminici.
U jednom prikazu, obezbeđene su farmaceutske kompozicije koje sadrže barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jednu so istog; jedan ili više agenasa odabranih između kinaznih inhibitornih agenasa (mali molekul, polipeptid, i antitelo), imunosupresiva, antikancerskih agenasa, anti-viralnih agenasa, antiinflamatornih agenasa, antifungalnih agenasa, antibiotika, ili jedinjenja protiv vaskularne hiperproliferacije; i bilo koji farmaceutski prihvatljiv nosač, adjuvans ili transporter.
Navedeni drugi terapijski agensi, kada se koriste u kombinaciji sa jedinjenjima iz predmetnog pronalaska mogu da se koriste, na primer, u onim količinama koje su naznačene u, J>hysicians' Desk Reference"(PDR) ili kao drugačije određeno od strane prosečnog poznavaoca oblasti. U metodama predmetnog pronalaska, takav drugi terapijski agens(i) može biti administriran pre nego, u isto vreme sa ili nakon administracije jedinjenja iz predmetnog pronalaska.
Specifični dozni nivoi i učestalost doziranja za bilo kog određenog subjekta, mogu da variraju i generalno zavise brojnih faktora, uključujući, bez ograničavanja na, na primer, biodostupnost specifičnog jedinjenja Formule (I) u primenjenoj formi, metaboličke stabilnosti i dužine dejstva specifičnog jedinjenja Formule (T), vrste, telesne mase, opšteg zdravstvenog stanja, pola, dijete subjekta, načina i vremena administracije, brzine ekskrecije, kombinacije lekova i ozbiljnosti određenog stanja. Na primer, dnevna doza od oko 0.001 do 100 mg/kg telesne mase, poželjno između oko 0.005 i oko 50 mg/kg telesne mase i najpoželjnije između oko 0.01 do 10 mg/kg telesne mase, može da bude prikladno. Dnevna doza može da se administrira u jednoj do četiri doze dnevno.
Administracija može da bude neprekidna, tj., svaki dan ili sa prekidima. Termin „naizmeničan" ili „naizmenično" kako se ovde koristi označava zaustavljanje i počinjanje u bilo pravilnim ili nepravilnim intervalima. Na primer, naizmenična administracija uključuje administraciju jedan do šest dana nedeljno; administraciju u ciklusima (npr., dnevna administracija od dve do osam nedelja praćena periodom odmora u kome nema administracije do jedne nedelje); ili administraciju naizmeničnim danima.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog neprekidno se administrira pacijentu kome je isto potrebno, jednom ili više puta dnevno. Na primer, terapijski efikasna količina jedinjenja Formule (I) se administrira pacijentu koje je isto potrebno, jednom ili više puta dnevno uzastopnim danima.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog naizmenično se administrira pacijentu kome je isto potrebno, jednom ili više puta dnevno. Na primer, terapijski efikasna količina jedinjenja Formule (I) se administrira pacijentu koje je isto potrebno, jednom ili više puta dnevno prema naizmeničnom rasporedu.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog se administrira kontinuirano pacijentu kome je isto potrebno, jednom ili više puta dnevno neprekidno danima praćeno jednim ili više dana bez administracije. Poželjno, terapijski efikasna količina jedinjenja Formule (I) se primenjuje. Primeri neprekidnog doziranja sa odmorom od leka su: 7 dana lečenja praćeno sa 7 dana bez tretmana; 14 dana lečenja praćeno sa 7 dana bez tretmana; i 7 dana lečenja praćeno sa 14 dana bez tretmana. Ciklus tretman/bez tretmana može da se primeni više puta ako je potrebno da bi se lečio pacijent.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog se administrira pacijentu kome je isto potrebno, prema naizmeničnom doznom rasporedu. Naizmenični dozni rasporedi su ponavljajući rasporedi koji uključuju dane kod kojih pacijent prima jedinjenje Formule (I) i dane kod kojih pacijent ne prima jedinjenje Formule (I). Primeri naizmeničnih doznih rasporeda su: doziranje četiri dana svake nedelje tri uzastopne nedelje praćeno nedeljom bez doziranja, i ponavljanje u intervalu od četiri nedelje; doziranje pet dana svake nedelje dve uzastopne nedelje praćeno nedeljom bez doziranja, i ponavljanje u intervalu od tri nedelje i doziranje četiri dana nedeljno jednu nedelju praćeno sa dve nedelje bez doziranja, i ponavljanje u intervalu od tri nedelje. Poželjno, terapijski efikasna količina jedinjenja Formule (I) se administrira.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog se administrira jednog dana, praćeno sa 6 dana odmora, ponovljeno po nedeljnom rasporedu.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog se administrira jednog dana, praćeno sa 6 dana odmora, ponovljeno po nedeljnom rasporedu tokom 1 do 4 nedelje, i potom praćeno jednom nedeljom za odmor. Na primer, jedinjenje Formule (I) se administrira jednog dana, praćeno sa 6 dana odmora tokom 3 nedelje, i potom praćeno jednom nedeljom odmora. Ovaj ciklus od četiri nedelje se ponavlja jednom ili više puta.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (1) i/ili barem jedna so istog se administrira dva uzastopna dana, praćeno sa 5 dana odmora ponovljeno po nedeljnom rasporedu.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog se administrira tri uzastopna dana praćeno sa četiri dana odmora ponovljeno po nedeljnom rasporedu.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (1) i/ili barem jedna so istog se administrira jedan dan, praćeno sa 10 do 13 dana odmora.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog se administrira jednom svakog dana (QD). Ovaj prikaz uključuje oralnu administraciju jednom dnevno.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog se administrira dva puta svakog dana (BID). Ovaj prikaz uključuje oralnu administraciju dva puta dnevno.
U jednom prikazu, barem jedno jedinjenje Formule (I) i/ili barem jedna so istog se administrira naizmeničnim danima: jedan dan na praćeno jednim danom odmora. Ovaj dvodnevni ciklus može da se ponavlja jednom ili više puta.
METODE PRIPREME
Jedinjenja iz predmetnog pronalaska mogu biti pripremljena na broj načina koji su dobro poznati prosečnom poznavaocu oblasti organskih sinteza. Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu biti sintetisana korišćenj em metoda koje su opisane niže u tekstu, zajedno sa sintetičkim metodama poznatim u oblasti sintetičke organske hernije ili varijacijama istih kako to podrazumevaju prosečni poznavaoci oblasti. Poželjne metode uključuju, ali nisu ograničene na, one opisane niže u tekstu. Sve reference koje su ovde citirane su u celosti inkorporirane na osnovu reference.
Jedinjenja iz predmetnog pronalaska mogu biti pripremljena korišćenj em reakcija i tehnika koje su opisane u ovom delu. Reakcije se izvode u rastvaračima koji su pogodni za reagense i materijale koji se koriste i koje su pogodne za transformacije koje se izvode. Takođe, u opisu sintetičkih metoda niže u tekstu, podrazumeva se da su svi predloženi reakcioni uslovi, uključujući izbor rastvarača, reakcionu atmosferu, reakcionu temperaturu, trajanje eksperimenta i radnu proceduru izabrani tako da budu standardni uslovi za datu reakciju, što lako treba da prepozna prosečni poznavalac oblasti. Podrazumeva se od strane prosečnog poznavaoca oblasti organske sinteze da funkcionalnost prisutna na različitim delovima molekula mora da bude kompatibilna sa predloženim reagensima i reakcijama. Takva ograničenja na supstituente koji su kompatibilni sa reakcionim uslovima će biti očigledna prosečnom poznavaocu oblasti i tada alternativne metode moraju da se koriste. Ovo će ponekad zahtevati procenu da se izmeni redosled sintetičkih koraka ili da se odabere posebna procesna šema u odnosu na neku drugu kako bi se dobilo željeno jedinjenje iz predmetnog pronalaska. Biće takođe prepoznato da je još jedan veliki faktor u planiranju sintetičkog puta u ovoj oblasti i razuman izbor zaštitne grupe koja se koristi za zaštitu reaktivnih funkcionalnih grupa prisutnih na jedinjenjima opisanim u ovom pronalasku. Merodavan iskaz koji opisuje mnoge alternative obučenom praktičaru je Greene et al. (Protective Grupe in Organvc Svnthesis, Third Edition, Wiley and Sons (1999)).
Jedinjenja Formule (I) mogu biti pripremljena na osnovu reference na metode koje su ilustrovane u Šemama koje slede. Kako je tamo pokazano krajnji proizvod je jedinjenje koje ima istu strukturnu formulu kao što je Formula (I). Podrazumevaće se da bilo koje jedinjenje Formule (I) može biti proizvedeno šemama izborom pogodnih reagenasa sa odgovarajućom supstitucijom. Rastvarači, temperature, pritisci i drugi reakcioni uslovi mogu jednostavno odabrani od strane prosečnog poznavaoca obesti. Konstituenti jedinjenja su onakvi kako su definisani ovde ili negde drugo u specifikacijama.
Sinteza jedinjenja Formule (I) može biti sumirana korišćenj em metoda sumiranih u šemama 1 do 7.
Priprema benzodiazepinona (iv) može da se postigne mnoštvom metoda koje su poznate prosečnom poznavaocu oblasti. Na primer, kako je prikazano u Semi 1, odgovarajuće supstituisan 2-aminobenzofenon (i) (na primer, iz Walsh, D.A., Svnthesis, 677 (1980); i referenci koje su ovde citirane ili drugih metoda koje su poznate prosečnom poznavaocu oblasti) može da se kupluje sa zaštitnim glicinskim derivatom (ii) (PG = zaštitna grupa, na primer PG = CBz, videti Katritzkv, A.R. et al., Org. Chem., 55:2206-2214 (1990)), tretiran reagensom kao što je amonijak i podvrgnut kristalizaciji kako bi se dobio benzodiazepinon (iii), prema procedurama koje su navedene u literaturi (na primer Sherrill, R.G. et al., J. Org. Chem., 60:730 (1995); ili na druge načine koji su poznati prosečnom poznavaocu oblasti). Rezultujuća racemska smeša može da se razdvoji (korišćenjem procedura koje su poznate prosečnom poznavaocu oblasti) kako bi se dobili pojedinačni enantiomeri ili može da se koristi kao racemat. Takođe, ako R3je H, (iii) može biti, na primer, tretirano reagensom kao što je Mel i baza kao što je K2CO3u rastvaraču kao što je DMF kako bi se R3pripremio kao metil.
Korak 2: Deptorekcija (iii) može da se postigne na više način koji su poznati prosečnom poznavaocu oblasti. Na primer, sa PG = CBz, Jedinjenje (iii) može biti tretirano reagensom kao što je HBr u rastvaraču kao što je AcOH. Jedinjenje (iv) može da se koristi kao racemat. Alternativno, jedinjenje (iv) može biti podvrgnuto enantiomernom razdvajanju korišćenjem standardnih metoda (npr., hiralne preparativne hromatografije).
Jedinjenje (xii) iz Šeme 2 može biti pripremljeno prema sintetičkoj sekvenci koja je istaknuta u Semi 2.
Korak 1: Kiselina (v) može da se prevede u jedinjenje (vii) na više načina poznatih prosečnom poznavaocu oblasti. Na primer, tretman kiseline (v) sa reagensom kao što je oksalil hlorid u rastvaraču kao što je DCM daje hlorid kiseline (vi). Jedinjenje (vi) može biti tretirano sa oksazolidinonom (a) pod standardnim uslovima kako bi obezbedilo jedinjenje (vii) (Evans, D.A. et al., J. Am. Chem Soc, 112:4011 (1990)).
Korak 2: Drugi korak Šeme 2 se postiže tretiranjem jedinjenja (vii) sa bazom kao što je natrijum bis(trimetilsilil)-amid ili litijum diizopropil amid u rastvaraču kao što je THF na niskoj temperaturi kao što je -78 °C pod inertnom atmosferom. Rezultujući enolat od (vii) je tretiran reagensom kao što jeferc-butil bromoacetat kako bi obezbedio jedinjenje (viii, Ry = /-Butil).
Korak 3: Prevođenje jedinjenja (viii) u (ix) može da se postigne tretiranjem jedinjenja (viii) sa vodonik peroksidom i litijum hidroksidom na odgovarajućoj temperaturi korišćenjem mešavine rastvarača kao što je THF/voda.
Korak 4: Jedinjenje (ix) može biti prevedeno u mešavinu jedinjenja (x) i jedinjenja (xi) generisanjem enolata (ix) sa bazom kao što je LDA u rastvaraču kao što je THF na niskoj temperaturi kao što je -78 °C pod inertnom atmosferom i dalji tretman sa reagensom (R2-LG) koji poseduje odgovarajuću odlazeću grupu( npr.,LG = triflat). Dobijena mešavina diastereomera (x/xi) može biti korišćena u daljim sintetičkim koracima.
Korak 5: Alternativno, mešavina (x/xi) može biti podvrgnuta uslovima epimerizacije, na primer tretmanom sa LDA i dietilaluminijum hloridom praćeno kvenčovanjem sa metanolom ili sirćetnom kiselinom kako bi se obogatio željeni diastereomer. Dobijena diastereomerno obogaćena smeša jedinjenja (x/xi) može potom da se koristi u daljim sintetičkim koracima ili smeša diastereomera može po želji da se razdvoji, primenom odgovarajućih uslova kao što je preparativna HPLC, preparativna hiralna HPLC ili hromatografija na silika gelu, i dobijeni čisti željeni diastereoizomer (xi) se koristi u narednim koracima.
Korak 6: Alternativno, mešavina diastereomernih kiselina (x) i (xi) može biti zaštićena tretmanom sa, na primer, benzil bromidom u prisustvu baze kao što je K2CO3u rastvaraču kao što je DMF. Dobijena mešavina diastereomera može po želji da se razdvoji, primenom odgovarajućih uslova kao što je preparativna HPLC, preparativna hiralna HPLC ili hromatografija na silika gelu, i dobijeno čisto željeno diastereoizomerno jedinjenje (xii) se koristi u narednim koracima.
Korak 7: Poslednji korak Šeme 2 je korak deprotekcije i može da se postigne na više načina poznatih prosečnom poznavaocu oblasti. Na primer, za Rw= benzil ujedinjenju (xii), tretman pod uslovima hidrogenizacije korišćenjem katalizatora kao što je paladijum na ugljeniku u rastvaraču kao što je MeOH pod atmosferom vodonika može da obezbedi jedinjenje (xi) koje kasnije može da se koristi.
Alternativno, jedinjenje (xi) može biti pripremljeno prema redosledu koraka nađenih u Šemi 3.
Korak 1: Prvi korak Šema 3 se postiže prevođenjem jedinjenja (xiii) u estar (xv), primenjujući jedan od više načina poznatih prosečnom poznavaocu oblasti, kao što su tretman sa supstituisanim acetimidatom kao što je jedinjenje (xiv) u prisustvu reagenasa kao što su bor trifluorid eterat na odgovarajućoj temperaturi u rastvaraču kao što je THF.
Korak 2: Kiselina (v) može biti konvertovana u jedinjenje (vi) na više načina poznatih prosečnom poznavaocu oblasti. Na primer, tretman kiseline (v) sa reagensima kao što su oksalil hlorid u rastvaraču kao što je DCM daje hlorid kiseline (vi). Jedinjenje (vi) može biti tretirano sa oksazolidinonom (a) pod standardnim uslovima kako bi dalo jedinjenje (vii) (Evans, D.A. et al., J. Am. Chem Soc, 112:4011 (1990)).
Korak 3: Jedinjenje (vii) može biti konvertovano u mešavinu diastereomera (xvi) na više načina (Baran, P. et al., J. Am. Chem. Soc, 130(34): 111546 (2008)). Na primer, jedinjenje
(xv) se tretira bazom kao što je LDA u rastvaraču kao što je toluen, na niskoj temperaturi kao što su -78 °C pod inertnom atmosferom kao što je N2. Dobijena mešavina se dodaje u rastvor jedinjenja (vii) tretiranih sa litijum hloridom i bazom kao što je LDA u rastvaraču kao što je toluene pod inertnom atmosferom kao što je N2. U dobijenu mešavinu enolatnih jedinjenja (xv) i (vii) dodat je bis(2-etilheksanoiloksi) bakar na niskoj temperaturi kao što je -78 °C pod inertnom atmosferom kao što je N2i zagrejano do sobne temperature kako bi obezbedilo jedinjenje (xvi).
Korak 4: Prevođenje jedinjenja (xvi) do mešavine jedinjenja (x) i jedinjenje (xi) može da se postigne tretiranjem njega sa vodonik peroksidom i litijum hidroksidom na odgovarajućom temperaturi korišćenjem mešavine rastvarača kao što su THF/voda. Dobijena mešavina diastereomera može onda da se koristi u sledećim sintetičkim koracima. Ako je neophodno, dobijena mešavina diastereomera može da se razdvoji u ovoj tački hromatografijom na silika gelu ili preparativnom HPLC.
Korak 5: Alternativno, mešavina (x/xi) može biti podvrgnuta epimerizacionim uslovima, na primer tretmanom sa LDA i dietilaluminijum hloridom praćeno kvenčovanjem sa metanolom ili sirćetnom kiselinom kako bi se obogatio željeni diastereomer. Dobijena diastereomerno obogaćena smeša jedinjenja može potom da se koristi u sledećim sintetičkim koracima ili smeša diastereomera može po želji da se razdvoji, Primenom odgovarajućih uslova kao što su preparativna HPLC, preparativna hiralna HPLC ili hromatografija na silika gelu, i dobijeni čist željeni diastereomer (xi) se koristi u narednim koracima.
Korak 6: Alternativno, mešavina diastereomernih kiselina (x) i (xi) može biti zaštićena tretmanom sa, na primer, benzil bromidom u prisustvu baze kao što je K2CO3u rastvaraču kao što su DMF. Dobijena mešavina diastereomera može po želji da se razdvoji, primenom odgovarajućih uslova kao što je preparativna HPLC, preparativna hiralna HPLC ili hromatografija na silika gelu, i dobijeno čisto željeno diastereoizomerno jedinjenje (xii) može da se koristi u narednim koracima.
Korak 7: Poslednji korak Šeme 3 je korak deprotekcije i može da se postigne na nekoliko načina koji su poznati prosečnom poznavaocu oblasti. Na primer, za Rw= benzil u jedinjenju (xii), tretman pod uslovima za hidrogenizaciju korišćenjem katalizatora kao što je paladijum na ugljeniku u rastvaraču kao što je MeOH pod atmosferom vodonika može da obezbedi jedinjenje (xi) koje kasnije može da se koristi, na primer, u koraku 1 Šeme 4.
Korak 1: Jedinjenje strukture (iv) može biti kupiovano za bilo čisto diastereomerno jedinjenje (xi) ili diatereomernu mešavinu jedinjenja (x/xi) u prisustvu reagenasa za kuplovanje kao što su TBTU i baza kao što je TEA, u rastvaraču kao što je DMF kako bi obezbedilo jedinjenje (xiii) bilo kao diastereomerno čisto jedinjenje ili kao mešavinu diastereoizomera, po potrebi, zavisno od enantiomerne i/ili diastereomerne čistoće vezanih parova. Ova mešavina može da se koristi kao takva u sledećem koraku, ili po želji, može da se prečisti korišćenjem odgovarajuće tehnike za razdvajanje, kao što je hiralna preparativna hromatografija kako bi obezbedilo diastereomerno čista jedinjenja.
Korak 2: Tretman jedinjenja (xiii) sa kiselinom kao što je TFA na odgovarajućoj temperaturi kao što je 0 °C, u rastvaraču kao što je DCM obezbeđuje jedinjenje (xiv) bilo kao diastereomerno čisto jedinjenje ili kao mešavinu diastereoizomera. Ova mešavina može da se koristi kao takva u sledećem koraku, ili po želji, može da se prečisti korišćenjem odgovarajuće tehnike za razdvajanje, kao što je hiralna preparativna hromatografija kako bi obezbedilo diastereomerno čista j edinj enj a.
Korak 3: Prevođenje jedinjenja (xiv) u jedinjenje (xv, R4= H) može da se postigne kuplovanjem jedinjenja (xiv) sa odgovarajućim izvorom amina kao što je amonijum hlorid ili amonijak, karbodiimidom kao što je EDC, HOBT sa bazom kao što je TEA u rastvaraču kao što je DMF. Po potrebi diastereomerna smeša može da se prečisti korišćenjem odgovarajuće tehnike za razdvajanje, kao što je hiralna preparativna hromatografija.
Dodatna jedinjenja predmetnog pronalaska mogu biti pripremljena iz jedinjenja xv (R4= H), prema Semi 5.
Korak 1: Odgovarajuće funkcionalizovana karboksilna kiselina (PG-L-CO2H) ili karboksilatna so (xvi) može da se tretira sa alkilujućim agensom, kao što je hlorometil hlorosulfat, u prisustvu baze, kao što je Na2COs, i kvatenerne amonijum soli, kao što je tetrabutil amonijum sulfat u dvofaznoj smeši vode i odgovarajućeg organskog rastvarača, kao što je DCM na niskoj temperaturi, kao stoje 0 °C, da bi se obezbedilo jedinjenje xvii.
Korak 2: Tretman jedinjenja xv sa jedinjenjem xvii u odgovarajućem rastvaraču, kao što je DCM, u prisustvu baze, kao što je K2CO3obezbeđuje jedinjenje xviii.
Korak 3: Deprotekcija jedinjenja xviii može da se postigne na više načina koji su poznati prosečnom poznavaocu oblasti. Na primer, gde je PG = tBu ili Boe, jedinjenje xviii može biti tretirano reagensom kao što je trifluorosirćetna kiselina u rastvaraču kao što je DCM da bi se obezbedilo jedinjenje xix (-CH20C(0)L = Rx).
Alternativno, jedinjenja xix mogu biti pripremljena kako je opisano u Šemi 6.
Korak 1: Različite metode poznate u oblasti mogu da se koriste za pripremu jedinjenja xix. Na primer, kako je prikazano u Šemi 6, odgovarajuće supstituisan benzodiazepin (xv) može biti tretiran sa haloalkil tioetrom kao što je (hlorometil)(metil)sulfan u prisustvu baze, kao što je cezijum karbonat u odgovarajućem rastvaraču kao što je A^-dimetilformamid (DMF) da bi se obezbedilo jedinjenja Formule xx.
Korak 2: Tretman jedinjenja xx sa reagensom kao što je sulfuril hlorid u prisustvu soli amina, kao što je trietilamonijum hlorid u aprotičnom rastvaraču kao što je dihlorometan (DCM) može da se koristi kako bi izazvalo efekat transformacije u jedinjenje Formule xxi (Hal = hlor).
Korak 3: Jedinjenja Formule xviii može potom biti pripremljeno od jedinjenja xxi tretmanom sa prikladno supstituisanom karboksilnom kiselinom ili karboksilatnom soli u prisustvu baze (kada se kreće od karboksilne kiseline) kao što je kalijum karbonat u aprotičnom rastvaraču kao što je acetonitril ili DMF.
Korak 4: Deprotekcija jedinjenja iv može da se postigne na više načina koji su poznati prosečnom poznavaocu oblasti. Na primer, gde PG = tBu ili Boe, jedinjenje xviii može biti tretirano reagensom kao što je trifluorosirćetna kiselina u rastvaraču kao što je DCM da bi se obezbedilo jedinjenje xix (-CH20C(0)L = Rx).
Priprema prolekova baziranih na sulfenamidu roditeljskog jedinjenja xv prikazano je u Semi 7.
Korak 1: Mešavina srebrne soli, kao što je srebro nitrat i disulfida, kao što jeferc-butil2,2'-disulfandiilbis(etan-2,l-diil)dikarbamat u alkoholnom rastvaraču, kao što je MeOH može biti tretirana jedinjenjem i u prisustvu baze, kao što je trietilamin, da bi se obezbedilo jedinjenje xxii.
Korak 2: Deprotekcija jedinjenja xxii može da se postigne na više načina koji su poznati prosečnom poznavaocu oblasti. Na primer, gde PG = tBu ili Boe, jedinjenje xxii može biti tretirano reagensom kao što je kao što su trifluorosirćetna kiselina u rastvaraču kao što je DCM da bi se obezbedilo jedinjenje xxiii (-S-M = Ry).
PRIMERI
Predmetni pronalazak je dodatno definisan sledećim Primerima. Treba razumeti da su Primeri dati samo radi ilustracije, i osoba koja je prosečni poznavalac oblasti može da konstatuje osnovne karakteristike predmetnog pronalaska i bez udaljavanja od duha i obima istog može da načini razne izmene i modifikacije kako bi prilagodila predmetni pronalazak različitim upotrebama i uslovima. Kao rezultat toga, predmetni pronalazak nije ograničen ilustrativnim primerima koji su izneti u tekstu miže, već je pre definisan patentnim zahtevima koji priloženi.
SKRAĆENICE
ACN acetonitril
AcOH sirćetna kiselina AlMe3trimetil aluminijum aq vodeni Bn benzil
Boe terc-butoksikarbonil B0C2O di-terc-butil dikarbonat CBz benziloksikarbonil DCC 1,3-dicikloheksilkarbodiimid DCM dihlormetan
DIEA diizopropiletilamin DMAP dimetilaminopiridin DME 1,2-dimetoksietan DMF dimetilformamid DMSO dimetil sulfoksid Pd(dppf)2Cl2[1,1 '-/9/.9(difenilfosfino)ferocen]dililorpaladium(I) EDC l-(3-dimetilaminopropil)-3-etilkarbodiimid hidrohlorid Et2AlCl dietil aluminijum hlorid Et3N trietil amin
Et20 dietil etar
EtOH etanol
EtOAc etil acetat
ekvuiv. ekvivalencija(e)
g gram(e)
h ili hr sat(i)
HOBt hidroksibenzotriazol
HPLC tečna hromatografija pod visokim pritiskom iPrOH izopropil alkohol KOtBu kalijumferc-butoksid LCMS tečna hromatografija-masena spektroskopija LDA litijum diizopropilamid LiHMDS litijum bis(trimetilsilil)amid Me metil
Mel metil jodid
MeOH metanol
min minut(i)
mL mililitar(i)
mmol milimolarni MTBE metil/-butil etar NaHMDS natrijum bis(trimetilsilil)amid n-BuLi n-butil litijum NH4OACamonijum acetat NMP N-metilpirolidinon Pd(OAc)2paladijum acetat
RT ili Rt retenciono vreme
sat zasićent- Butercijarni butilf-BuLi ?-butil litijum tBuOH tercijarni butil alkohol tBuOMefcrobutil metil etar TBTU 0-(lH-benzotriazol-l-il)-A^7V,A^A^'-tetrametiluronijum
tetrafluoroborat
TEA trietilamin
TFA trifluorosirćetna kiselina
Tf20 trifluorometilsulfoski anhidrid
THF tetrahidrofuran
Intermedijer S-l: (2R,3S)-3-(ferc-Butoksikarbonil)-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanska kiselina
Intermedijer S-l A: 3,3,3-Trifluoropropil trifluorometansulfonat
U hladan (-25 °C) mešani rastvor 2,6-lutidina (18.38 mL, 158 mmol) u DCM (120 mL) dodavanje Tf20 (24.88 mL, 147 mmol) tokom 3 min, i smeša je mešana 5 min. U reakcionu smešu je dodavan 3,3,3-trifluoropropan-l-ol (12 g, 105 mmol) tokom intervala od 3 min. Nakon 2 hr, reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana 1 hr. Reakciona smeša je koncentrovana na polovinu svoje zapremine, a potom prečišćena direktnim nanošenjem na kolonu silika gela (330g ISCO) i proizvod je eluiran sa DCM da bi se obezbedio Intermedijer S-1A (13.74 g, 53%) kao bezbojno ulje. 'H NMR (400 MHz, CDCh) 8 ppm 4.71 (2 H, t, J= 6.15 Hz), 2.49-2.86 (2 H, m).
Intermedijer S- 1B: (4S)-4-Benzil-3-(5,5,5-trifluoropentanoil)-1,3-oksazolidin-2-on
U mešani rastvor 5,5,5-trifluoropentanske kiseline (14.76 g, 95 mmol) i DMF (0.146 mL) u DCM (50 mL) polako je dodat oksalil hlorid (8.27 mL, 95 mmol). Nakon 2h, smeša je koncentrovana do suvog. Odvojeni sud je zamenjen sa (S)-4-benziloksazolidin-2-on (16.75 g, 95 mmol) u THF (100 mL) i potom ohlađen do -78 °C. U rastvor polako je dodavan n-BuLi
(2.5M, 37.8 mL, 95 mmol) tokom 10 min, mešan 10 min, a potom rastvor gore pomenutog hlorida kiseline u THF (50 mL) polako je dodavan tokom 5 min. Smeša je mešana 30 min, a potom zagrejana do sobne temperature. Reakcija je kvenčovana sa zasićenim vodenim rastvorom NH4CI. Zatim, 10% aq LiCl je dodat u smešu, i smeša je ekstrahovana Et20. Organski sloj je ispran sat aq NaHCOs potom slanim rastvorom, osušen (MgS04) proceđen i koncentrovan do suvog. Ostatak je prečišćen na Si02hromatografiji (ISCO, 330 g u koloni, eluiranje gradijentom od 100% heksana do 100% EtOAc) kako bi se dobio proizvod Intermedijera S-1B; (25.25 g, 85%): 'H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 7.32-7.39 (2 H, m), 7.30 (1 H, d,J=7.05 Hz), 7.18-7.25 (2 H, m), 4.64-4.74 (1 H, m), 4.17-4.27 (2 H, m), 3.31 (1 H,dd,/= 13.35, 3.27 Hz), 3.00-3.11 (2 H, m), 2.79(1 H, dd,J=13.35,9.57 Hz), 2.16-2.28 (2 H, m), 1.93-2.04 (2 H, m).
Intermedijer S-1C: terc-Butil (3R)-3-(((4S)-4-benzil-2-okso-l,3-oksazolidin-3-il)karbonil)-6,6,6-trifluoroheksanoat
U hladan (-78 °C), mešani rastvor Intermedijera S-1B (3.03 g, 9.61 mmol) u THF (20 mL) dodat je NaHMDS (LOM in THF) (10.6 mL, 10.60 mmol) pod atmosferom azota. Nakon 2 sata, terc-butil 2-bromoacetat (5.62 g, 28.8 mmol) je precizno dodat uz pomoć šprica na -78 °C i mešanje je produženo na istoj temperaturi. Nakon 6 sati, reakciona smeša je zagrejana sobne temperature. Reakciona smeša je particionirana između zasićenog NH4CI i EtOAc. Organska faza je odvojena, i vodena faza je ekstrahovana EtOAc (3x). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2S04), proceđeni i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (Teledvne ISCO CombiFlash Rf, 5% to 100%o rastvarača A7B = heksani/EtOAc, REDISEP® Si02120g). Koncentrovanje odgovarajućih frakcija obezbedilo je Intermedijer S-1C (2.79 g, 67.6%) kao bezbojno viskozno ulje: 'H NMR (400 MHz, CDCI3) 8 ppm 7.34 (2 H, d,J=7.30 Hz), 7.24-7.32 (3 H, m), 4.62-4.75(1 H,m, J=10.17,6.89, 3.43, 3.43 Hz), 4.15-4.25 (3 H, m), 3.35(1 H,dd,/= 13.60,3.27 Hz), 2.84 (1 H, dd,J=16.62, 9.57 Hz), 2.75 (1 H, dd,J=13.35, 10.07 Hz), 2.47 (1 H, dd,J =16.62, 4.78 Hz), 2.11-2.23 (2 H, m), 1.90-2.02 (1 H, m), 1.72-1.84 (1 H, m), 1.44 (9 H, s).
Intermedijer S-1D: (2R)-2-(2-terc-Butoksi-2-oksoetil)-5,5,5-trilfuoropentanska kiselina
U hladan (0 °C), mešani rastvor Intermedijera S-1C (2.17 g, 5.05 mmol) u THF (50 mL) i vodi (15 mL) dodat je rastvor LiOH (0.242 g, 10.11 mmol) i H202(2.065 mL, 20.21 mmol) u H20 (2 mL). Nakon 10 min, reakciona smeša je uklonjena iz ledenog kupatila, mešana lh, i potom ohlađena do 0 °C. Zasićeni vodeni NaHC03(25 mL) and zasićeni vodeni Na2s03(25 mL) su dodati u reakcionu smešu, i smeša je mešana 10 min, a potom delimično koncentrovana. Dobijena mešavina je ekstrahovana DCM (2x), ohlađena uz pomoć leda i zakiseljena sa konc. HC1 do pH 3. Mešavina je zasićena čvrstim NaCl, ekstrahovana EtOAc (3x), i osušena preko MgS04, proceđena i koncentrovana do bezbojnog ulje da bi se obezbedio Intermedijer S-1D, 1.2514g, 92%): 'H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 ppm 2.83-2.95 (1 H, m), 2.62-2.74 (1 H, m), 2.45 (1 H, dd,J=16.62, 5.79 Hz), 2.15-2.27 (2 H, m), 1.88-2.00 (1 H, m), 1.75-1.88 (lH,m), 1.45 (9 H, s).
Intermedijer S-l: (2R,3S)-3-(terc-Butoksikarbonil)-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanska kiselina, i Intermedijer S-1E: (2R,3R)-3-(terc-butoksikarbonil)-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanska kiselina
U hladan (-78 °C) mešani rastvor Intermedijera S-1D (5 g, 18.50 mmol) u THF (60 mL) polako je dodavan LDA (22.2 mL, 44.4 mmol, 2.OM) tokom 7 min. Nakon mešanja 2 hr, Intermedijer S-l A (6.38 g, 25.9 mmol) je dodavan u reakcionu smešu tokom 3 min. Nakon 60 min, reakciona smeša je zagrejana to -25 °C (led/MeOH/suvi led) i mešana dodatnih 60 min kada je zasićeni vodeni rastvor NH4CI dodat. Odvojena vodena faza je zakiseljena sa IN HC1 do pH 3, i potom ekstrahovana Et20. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (2x), osušeni preko MgSCU, proceđeni i koncentrovani kako bi obezbedila 1:4 (I1:I1E) smeša (kao je određeno 'H NMR) Intermedijera S-l and Intermedijera S-1E (6.00 g, 89%) kao bledo žuta čvrsta supstanca. 'H NMR (500 MHz, CDCb) 8 ppm 2.81 (1 H, ddd, J = 10.17, 6.32, 3.85 Hz), 2.63-2.76 (1 H, m), 2.02-2.33 (4 H, m), 1.86-1.99 (2 H, m), 1.68-1.85 (2 H, m), 1.47 (9H, s).
U hladan (-78 °C), mešani rastvor mešavine Intermedijera S-l i Intermedijera S-1E (5.97 g, 16.30 mmol) u THF (91 mL) dodat je LDA (19 mL, 38.0 mmol, 2.0M u THF/heksan/etil benzen) u kapima uz mešanje tokom 10 min (unutrašnja temperatura nikada nije prešla -65 °C, J-KEM® sonda u reakcionom rastvoru). Smeša je mešana 15 min, a potom zagrejana do sobne temperature (24 °C vodeno kupatilo), mešana 15 min, i potom ohlađena do -78 °C na 15 min. U reakcionu smešu je dodat Et2AlCl (41 mL, 41.0 mmol, IM u heksanu) špricem (unutrašnja temperatura nikada nije prešla -55 °C), i smeša je mešana 10 min, a potom zagrejana do sobne temperature (24 °C kupatilo) na 15 min i potom nazad na -78 °C na 15 min. U međuvremenu 1000 mL balon sa okruglim dnom je napunjen MeOH (145 mL) i ohlađen do -78 °C. Uz energično mešanje reakciona smeša je prebacivana kanilom tokom 5 min u MeOH. Balon je uklonjen iz kupatila, dodat je led praćeno sporim dodavanjem IN HC1 (147 mL, 147 mmol). Stvaranje gasa je primećeno tokom dodatka HC1. Reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature tokom čega je nastajanje gasa prestalo. Reakciona smeša je razblažena EtOAc (750 mL), zasićena NaCl, i organska faza je odvojena, isprana rastvorom kalijum fluorida (8.52 g, 147 mmol) i IN HC1 (41 mL, 41.0 mmol) u vodi (291 mL), slanim rastvorom (100 mL), i potom osušena (Na2s04), proceđena i koncentrovana pod vakuumom. 'H NMR je pokazao daje proizvod 9:1 mešavina Intermedijera S-l i IntermedijeraS-lE. Obogaćena smeša Intermedijera S-l i Intermedijera S-1E (6.12 g, >99% prinos) je dobijena kao čvrsta supstanca boje tamnog ćilibara: 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 ppm 2.64-2.76 (2 H, m), 2.04-2.35 (4 H, m), 1.88-2.00 (2 H, m), 1.71-1.83 (2 H, m), 1.48 (9 H, s).
Alternativna procedura za proizvodnju Intermedijera S-l:
Intermedijer S-1F: (2R,3S)-1-Benzil 4-terc-butil 2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinat
U mešani rastvor 9:1 obogaćene smeše Intermedijera S-l i Intermedijera S-1E (5.98 g, 16.33 mmol) u DMF (63 mL) dodati su kalijum karbonat (4.06 g, 29.4 mmol) i benzil bromid (2.9 mL, 24.38 mmol), smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena EtOAc (1000 mL), isprana 10% LiCl (3x200 mL), slanim rastvorom (200 mL), osušena (Na2s04), proceđena, koncentrovana, i potom osušena pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na Si02hromatografija korišćenjem gradijenta toluemheksan. Diastereomerno prečišćen Intermedijer S-1F (4.81g, 65%>) je dobijen kao bezbojna čvrsta supstanca: 'H NMR (400 MHz, hloroform-d) 8 7.32-7.43 (m, 5H), 5.19 (d,J=12.10 Hz, IH), 5.15 (d,J=12.10 Hz, IH), 2.71 (dt,J=3.52, 9.20 Hz, IH), 2.61 (dt,J=3.63, 9.63 Hz, IH), 1.96-2.21 (m, 4H), 1.69-1.96 (m, 3H), 1.56-1.67 (m, IH), 1.45 (s, 9H).
Intermedijer S-l: (2R,3S)-3-(terc-Butoksikarbonil)-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanska kiselina
U rastvor Intermedijera S-1F (4.81 g, 10.54 mmol) u MeOH (100 mL) dodat je 10% paladijum na ugljeniku (mokar, Degussa tip, 568.0 mg, 0.534 mmol) u balonu pod pritiskom H2. Sud je pročišćen N2(4x), a potom pročišćen H2(2x), i konačno stavljen pod pritisak od 50 psi i mešan preko noći. Reakcioni sud je oslobođen pritiska i pročišćen azotom. Mešavina je proceđena kroz CELITE®, isprana MeOH potom koncentrovana i osušena pod vakuumom. Intermedijer S-l (3.81 g, 99% prinos)) je dobijen kao bezbojna čvrsta supstanca: 'H NMR (400 MHz, hloroform-d) 8 2.62-2.79 (m, 2H), 2.02-2.40 (m, 4H), 1.87-2.00 (m, 2H), 1.67-1.84 (m, 2H), 1.48 (s, 9H).
Alternativna procedura za proizvodnju Intermedijera S-l:
Intermedijer S-l: (2R,3S)-3-(terc-Butoksikarbonil)-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3- trifluoropropil)heksanska kiselina
Intermedijer S-l kao smeša sa Intermedijerom S-1E je pripremljen prema proceduri sličnoj onoj prethodno opisanoj od Intermedijera a S-1D da bi se obezbedila 1:2.2 mešavina Intermedijera S-l i Intermedijera S-1E (8.60 g, 23.48 mmol), koja je obogaćena korišćenjem LDA (2.0 M rastvor u THF, etil benzena i heptana, 28.2 mL, 56.4 mmol) i dietil aluminijum hlorida (1.0 M rastvor u heksanu, 59 mL, 59.0 mmol) u THF (91 mL). Nakon obrade kako je prethodno opisana, pronađeno je da je dobijeni ostatak 13.2:1 (na 'H NMR) mešavina Intermedijera S-l and Intermedijera S-1E, koja je tretirana na sledeći način: Sirovi materijal je rastvoren u MTBE (43 mL). Heksani (26 mL) su polako dodati u reakcionu smešu uz održavanje temperature ispod 30 °C. Reakciona smeša je mešana 10 min. Potom,terc-butilamin (2.7 mL, 1.1 ekv) je polako dodavan tokom perioda od 20 minuta uz održavanje temperature ispod 30 °C. Primećeno je daje ovo dodavanje egzotermno. Reakciona smeša je mešana 2 hr ispod 30 °C i potom proceđena. Čvrsti materijal je ispran 5:3 MTBE: heksan (80 mL), i filtrat je koncentrovan i ostavljen. Profitirana čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu (300 mL), isprana IN HC1 (lOOmL), i organski sloj je ispran slanim rastvorom (100 mL x 2), potom koncentrovana pod sniženim pritiskom ispod 45 °C da bi se obezbedio Intermedijer S-l (5.46 g, 64%).
Druga alternativna procedura za pripremu Intermedijera S-l:
Intermedijer S-1G: terc-Butil 5,5,5-trifluoropentanoat
U mešani rastvor 5,5,5-trifluoropentanske kiseline (5 g, 32.0 mmol) u THF (30 mL) i heksana (30 mL) na 0 °C, dodat je terc-butil 2,2,2-trihloroacetimidat (11.46 mL, 64.1 mmol). Smeša je mešana 15 min na 0 °C. Boron trifluorid eterat (0.406 mL, 3.20 mmol) je dodat and reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature preko noći. U bistru reakcionu smešu dodat je čvrsti NaHCCb(5 g) i mešano je 30 min. Mešavina je proceđena kroz MgSCUi isprana heksanima (200 mL). Rastvor je ostavljen da stoji 45 min, i rezultujući čvrst materijal je uklonjen filtracijom na istom MgSCMfilteru ponovo, ispran heksanima (100 mL) i koncentrovan pod sniženim pritiskom bez grejanja. Zapremina je smanjena na oko 30 mL, proceđena kroz čist sinterovan levak, isprana heksanom (5 mL), potom koncentrovana pod sniženim pritiskom bez grejanja. Rezultujuće čisto ulje je proceđeno kroz 0.45um najlonski membranski filter disk kako bi obezbedio Intermedijer S-1G (6.6 g, 31.4 mmol 98% prinos) kao bezbojno ulje: 'H NMR (400 MHz, CDCls) 5 ppm 1.38 (s, 9 H) 1.74-1.83 (m, 2 H) 2.00-2.13 (m, 2 H) 2.24 (t, J= 7.28 Hz, 2 H).
Intermedijer S-1H: (4S)-4-(Propan-2-il)-3-(5,5,5-trifluoropentanoil)-l,3-oksazolidin-2-on
U mešani rastvor 5,5,5-trifluoropentanske kiseline (5.04 g, 32.3 mmol) u DCM (50 mL) i DMF (3 kapi) dodavanje oksalil hlorid (3.4 mL, 38.8 mmol) u kapima tokom 5 min. Rastvor je mešan dok nije smirilo stvaranje balona. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom kako bi se dobilo bledo žuto ulje. U odvojeni balon napunjen rastvorom (4S)-4-(propan-2-il)-l,3-oksazolidin-2-ona (4.18 g, 32.4 mmol) u THF (100 mL) na -78 °C dodat je n-BuLi (2.5M u heksanu) (13.0 mL, 32.5 mmol) u kapima uz pomoć šprica tokom 5 min. Nakon mešanja 10 min, gore pomenuti hlorid kiseline, rastvoren u THF (20 mL), je dodavan kanilom tokom 15 min. Reakciona smeša je zagrejana do 0 °C, a potom je zagrejana do sobne temperature kako se i kupatilo zagrevalo i mešana je preko noći. U reakcionu smešu je dodat zasićen NH4CI, i smeša je ekstrahovana EtOAc (2x). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2s04), proceđeni i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom (Teledvne ISCO CombiFlash Rf, 5%> do 60%> rastvarača A/B = heksani/EtOAc, REDISEP® Si02120g). Koncentrovanje odgovarajućih frakcija obezbedilo je Intermedijer S-1H (7.39 g, 86%) kao bezbojno ulje:<>>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 ppm 4.44 (1 H, dt,J=8.31, 3.53 Hz), 4.30 (1 H, t,J=8.69 Hz), 4.23 (1 H, dd,J =9.06, 3.02 Hz), 2.98-3.08 (2 H, m), 2.32-2.44 (1 H, m, /= 13.91, 7.02, 7.02, 4.03 Hz), 2.13-2.25 (2 H, m), 1.88-2.00 (2 H, m), 0.93 (3 H, d, / = 7.05 Hz), 0.88 (3 H, d, / = 6.80 Hz).
Intermedijer S-l 1: (2S,3R)-etrc-Butil 6,6,6-trifluoro-3-((S)-4-izopropil-2-oksooksazolidine-3-karbonil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoat, i Intermedijer S-l J: (2R,3R)-terc-Butil 6,6,6-trifluoro-3-((S)-4-izopropil-2-oksooksazolidine-3-karbonil)-2-(3,3,3-triftuiliopropil)heksanoat
U hladan (-78 °C), mešani rastvor diizopropilamina (5.3 mL, 37.2 mmol) u THF (59 mL) pod atmosferom azota dodat je n-BuLi (2.5M u heksanu) (14.7 mL, 36.8 mmol). Smeša je zagrevana do 0 °C kako bi se dobio 0.5M rastvor LDA. Odvojeni sud je napunjen Intermedijerom S-1H (2.45 g, 9.17 mmol). Materijal je azeotropiran dva puta benzenom (RotoVap ulaz za vazduh je opremljen ulazom za azot kako bi se kompletno isključila vlaga), a potom je dodat toluen (15.3 mL). Rastvor je dodat u sud koji sadrži suv litijum hlorid (1.96 g, 46.2 mmol). U rezultujuću smešu, ohlađenu do -78 °C, dodat je rastvor LDA (21.0 mL, 10.5 mmol) i mešavina je mešana na -78 °C tokom 10 min, potom zagrevana do 0 °C tokom 10 min., i potom ohlađena do -78 °C. U odvojeni reakcioni sud koji sadrži Intermedijer S-1G (3.41 g, 16.07 mmol), takođe azeotropiran dva puta sa benzenom, je dodat toluen (15.3 mL), ohlađen do -78 °C i dodat je LDA (37.0 mL, 18.5 mmol). Rezultujući rastvor mešanje na -78 °C tokom 25 min. U ovom trenutku enolat dobijen iz estra je prebačen kanilom u rastvor oksazolidinon enolata i mešan na -78 °C dodatnih 5 min, u tom trenutku septum je uklonjen i čvrsti praškasti bis(2-etilheksanoiloksi)bakar (9.02 g, 25.8 mmol) je brzo dodat u reakcioni sud i septum je zamenjen. Sud je momentalno uklonjen iz ledenog kupatila i uronjen u toplo vodeno kupatilo (40 °C) sa brzim mešanjem uz istovremenu promenu boje iz početne tirkizne do braon. Reakciona smeša je mešana 20 min, sipana u 5% vodeni NH4OH (360 mL) i ekstrahovana EtOAc (2x). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2s04), proceđeni i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (Teledvne ISCO CombiFlash Rf, 0% do 60% rastvarača A/B = heksani/EtOAc, REDISEP® Si02120g). Koncentrovanje odgovarajućih frakcija obezbedilo je mešavinu Intermedijera S-II i Intermedijera S-1J (2.87 g, 66%) kao bledo žuto viskozno ulje. 'H NMR je pokazao daje proizvod 1.6:1 mešavina diastereomera S-1LS-1J što je određeno integracijom multipleta na 2.74 i 2.84 ppm: 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 ppm 4.43-4.54 (2 H, m), 4.23-4.35 (5 H, m), 4.01 (1 H, ddd,J=9.54, 6.27, 3.51 Hz), 2.84 (1 H, ddd,J=9.41, 7.28, 3.64 Hz), 2.74 (1 H, ddd,J=10.29, 6.27, 4.02 Hz), 2.37-2.48 (2 H, m,J=10.38, 6.98, 6.98, 3.51, 3.51 Hz), 2.20-2.37 (3 H, m), 1.92-2.20 (8 H, m), 1.64-1.91 (5 H, m), 1.47 (18 H, s), 0.88-0.98 (12 H, m).
Intermedijer S-l: (2R,3S)-3-(terc-Butoksikarbonil)-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanska kiselina, i Intermedijer S-1E: (2R,3R)-3-(fcrc-Butoksikarbonil)-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trilfuoropropil)heksanska kiselina
U hladan (0 °C), mešani rastvor Intermedijera S-1I i Intermedijera S-1J (4.54 g, 9.51 mmol) u THF (140 mL) i vodi (42 mL) redom su dodavani vodonik peroksid (30% u vodi)
(10.3 g, 91 mmol) i LiOH (685.3 mg, 28.6 mmol). Smeša je mešana 1 hr. U ovom trenutku reakcioni sud je sklonjen iz ledenog kupatila i potom mešan 1.5 hr. U reakciona smešu dodat je zasićen NaHCCb(45 mL) i zasićen NaisCb (15 mL), i potom je smeša delimično koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni sirovi rastvor je ekstrahovana DCM (3x). Vodena faza je zakiseljena do pH~l-2 sa IN HC1, ekstrahovana DCM (3x) i potom EtOAc (lx). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni (NaisO/i), proceđeni i koncentrovani pod sniženim pritiskom kako bi se obezbedila smeša Intermedijera S-l i S-1E (3.00 g, 86%) kao bezbojno ulje: 'H NMR (400 MHz, CDCb) 8 ppm 2.76-2.84 (1 H, m, diastereomer 2), 2.64-2.76 (3 H, m), 2.04-2.35 (8 H, m), 1.88-2.00 (4 H, m), 1.71-1.83 (4 H, m), 1.48 (9 H, s, diastereomer 1), 1.46 (9 H, s, diastereomer 2); 'H NM je pokazao 1.7:1 smešu S-1E:S-1F integracijom pikova za/-butil grupu.
Intermedijer S-l: (2R,3S)-3-(terc-Butoksikarbonil)-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanska kiselina, i Intermedijer S-1F: (2R,3R)-3-(/erc-Butoksikarbonil)-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanska kiselina
U hladan (-78 °C) mešani rastvor diizopropilamina (1.7 mL, 11.93 mmol) u THF (19 mL) pod atmosferom azota dodat je n-BuLi (2.5M u heksanima) (4.8 mL, 12.00 mmol). Smeša je mešana 5 min i potom zagrejana do 0 °C. U odvojenom sudu, u hladan (-78 °C) mešani rastvor mešavine Intermedijera S-l i S-1E (1.99 g, 5.43 mmol) u THF (18 mL) dodat je kroz kanilu prethodno pripremljen rastvor LDA polako tokom 25 min. Smeša je mešana 15 min, potom zagrevan do sobne temperature (stavljen u vodeno kupatilo na 24 °C) tokom 15 min, i potom ponovo ohlađena do -78 °C tokom 15 min. U reakcionu smešu je dodat Et2AlCl (IM in heksanu) (11.4 mL, 11.40 mmol) uz pomoć šprica. Smeša je mešana 10 min, zagrevana do sobne temperature tokom 15 min i potom hlađena do -78 °C tokom 15 min. Metanol (25 mL) je brzo dodat, mešano je energično dok se grejalo do sobne temperature, potom koncentrovano do ~ 1/4 početne zapremine. Mešavina je rastvorena u EtOAc i isprana IN HC1 (50 mL) i ledom (75 g). Vodena faza je odvojena i ekstrahovana EtOAc (2x). Kombinovani organski slojevi su isprani mešavinom KF (2.85g u 75 mL vodi) i IN HC1 (13 mL) [dobijeni rastvor pH 3-4], potom slanim rastvorom, osušen (Na2s04), proceđen i koncentrovan pod sniženim pritiskom kako bi se dobila 9:1 (S-LS-1E) obogaćena diastereomerna mešavina (kako je određeno 'H NMR) Intermedijera S-l i Intermedijera S-1E (2.13 g, >99%) kao bledo žuto viskozno ulje: 'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 ppm 2.64-2.76 (2 H, m), 2.04-2.35 (4 H, m), 1.88-2.00 (2 H, m), 1.71-1.83 (2 H,m), 1.48 (9 H, s).
Intermedijer S-2: (2R,3S)-3-(ferc-Butoksikarbonil)-6,6,6-trifluoro-2-(3-fluoropropil)heksanska kiselina Intermedijer S-2: (2R,3S)-3-(terc-Butoksikarbonil)-7,7,7-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heptanska kiselina, i Intermedijer S-2A: (2R,3R)-3-(terc-Butoksikarbonil)-7,7,7-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heptanska kiselina
U hladan (-78 °C), mešani rastvor Intermedijera S-1D (1.72 g, 6.36 mmol) u THF (30 mL) polako je dodavan LDA (7.32 mL, 14.6 mmol) tokom 7 min. Nakon mešanja 1 h, 4,4,4-trifluorobutiltrifluorometansulfonat (2.11 g, 8.11 mmol) je dodavan u reakcionu smešu tokom 2 min. Nakon 15 min, reakciona smeša je zagrejana do -25 °C (led/MeOH/suvi led) tokom lh, i potom ohlađena do -78 °C. Nakon 80 min, reakcija je kvenčovana sa zasićenim vodenim NH4CI rastvor (10 mL). Reakciona smeša je dalje razblažena slanim rastvorom i rastvor je podešen do pH 3 sa IN HC1. Vodeni sloj je ekstrahovan etrom. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušen anhidrovanim magnezijum sulfatom, i koncentrovan pod sniženim pritiskom kako bi obezbedila mešavina Intermedijera S-2 i S-2A (2.29 g, 95%) kao bezbojno ulje. 'H NMR (400MHz, hloroform-d) 8 2.83-2.7 (m, IH), 2.64 (ddd,J=9.9, 6.7, 3.6 Hz, IH), 2.32-2.03 (m, 5H), 1.98-1.70 (m, 3H), 1.69-1.52 (m, 3H), 1.50-1.42 (m, 9H). 'H NMR je pokazao 1:4.5 smešu (S-2:S-2A) diastereomera integracijom pikovat- Q\ xgrupe.
Intermedijer S-2: (2R,3S)-3-(terc-Butoksikarbonil)-7,7,7-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heptanska kiselina, i Intermedijer S-2A: (2R,3R)-3-(tere-Butoksikarbonil)-7,7,7-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heptanska kiselina
Mešavina Intermedijera S-2 i Intermedijera S-2A (2.29 g, 6.02 mmol) je rastvorena u THF (38 mL) kako bi se dobio bezbojan rastvor koji je ohlađen do -78 °C. Potom, LDA (7.23 mL, 14.5 mmol) (2.OM u heptanu/THF/etilbenzenu) polako je dodavana u reakcionu smešu tokom 3 min. Nakon mešanja 15 min, reakciona smeša je stavljena u vodeno kupatilo sobne temperature. Nakon 15 min reakciona smeša je stavljena nazad u -78 °C kupatilo i potom dietilaluminijum hlorid (14.5 mL, 14.5 mmol) (IM u heksanu) je dodavan polako tokom 5 min. Reakciona smeša je mešana na -78 °C. Nakon 15 min, reakciona smeša je ostavljena u vodeno kupatilo sobne temperature tokom 10 min, i potom ohlađena nazad na -78 °C. Nakon 15 min, reakcija je kvenčovana sa MeOH (30.0 mL, 741 mmol), uklonjena iz -78 °C kupatila i koncentrovana. U reakcionu smešu je dodat led i HC1 (60.8 mL, 60.8 mmol) i dobijena mešavina je ekstrahovana EtOAc (2x 200 mL). Organki sloj je ispran kalijum fluoridom (3.50g, 60.3 mmol) u 55 mL H2O i 17.0 mL IN HC1. Organski slojevi su osušeni anhidrovanim magnezijum sulfatom i koncentrovani pod sniženim pritiskom kako bi obezbedila obogaćena smeša Intermedijera S-2 i Intermedijera S-2A (2.25g, 98% prinos) kao bledo žuto ulje. 'H NMR (400MHz, hloroform-d) 8 2.83-2.75 (m, IH), 2.64 (ddd,J=9.9, 6.7, 3.6 Hz, IH), 2.32-2.03 (m, 5H), 1.98-1.70 (m, 3H), 1.69-1.52 (m, 3H), 1.50-1.42 (m, 9H). 'HNMRpokazao 9:1 odnos u korist željenog diastereomernog Intermedijera S-2.
Intermedijer S-2B: (2R,3S)-1 -Benzil 4-terc-butil 2,3-bis(4,4,4-trilfuorobutil)sukcinat
U mešanu 9:1 mešavinu Intermedijera S-2 i Intermedijera S-2A (2.24 g, 5.89 mmoL) i kalijum karbonata (1.60 g, 11.58 mmoL) u DMF (30 mL) dodat je benzil bromide (1.20 mL, 10.1 mmoL)). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 19h. Reakciona smeša je razblažena etil acetatom (400 mL) i isprana 10% LiCl rastvorom (3 x 100 mL), slanim rastvorom (50 mL), potom osušena anhidrovanim magnezijum sulfatom, proceđena i koncentrovan do suvog pod vakuumom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (Teledvne ISCO CombiFlash 0% to 100%> rastvarač A/B = heksan/EtOAc, REDISEP® Si02220 g, detekcija 254 nm, i praćenje na 220 nm). Koncentrovanje odgovarajućih frakcija obezbedilo je Intermedijer S-2B (1.59 g, 57.5%). HPLC: RT = 3.863 min (CHROMOLITH® SpeedROD kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol tokom 4 minuta koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje at 220 nm), 'H NMR (400MHz, hloroform-d) 8 7.40-7.34 (m, 5H), 5.17 (d,J=1.8 Hz, 2H), 2.73-2.64 (m, IH), 2.55 (td,J=10.0, 3.9 Hz, IH), 2.16-1.82 (m, 5H), 1.79-1.57 (m, 3H), 1.53-1.49 (m, IH), 1.45 (s, 9H), 1.37-1.24 (m, IH).
Intermedijer S-2: (2R,3S)-3-(terc-Butoksikarbonil)-6,6,6-trifluoro-2-(4,4,4-trifluorobutil)heksanska kiselina
U mešani rastvor Intermedijera S-2B (1.59 g, 3.37 mmoL) u MeOH (10 mL) i EtOAc (10 mL) pod azotom dodat je 10% Pd/C (510 mg). Atmosfera je zamenjena vodonikom i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2.5 h. Paladijumski katalizator je odvojen filtracijom kroz 4 uM polikarbonatni film i ispran MeOH. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom kako bi se dobio Intermedijer S-2 (1.28 g, 99%). 'H NMR (400MHz, hloroform-d) 8 2.76-2.67 (m, IH), 2.65-2.56 (m, IH), 2.33-2.21 (m, IH), 2.17-2.08 (m, 3H), 1.93 (dtd,J=14.5, 9.9, 5.2 Hz, IH), 1.84-1.74 (m, 2H), 1.70-1.52 (m, 3H), 1.48 (s, 9H).
Intermedijer A-l: (2-Amino-3-metilfenil)(3-fluorofenil)metanon
Intermedijer A-l A: 2-Amino-N-metoksi-N,3-dimetilbenzamid
U balon sa okruglim dnom od 1 L dodata je 2-amino-3-metilbenzoeva kiselina (11.2 g, 74.1 mmol) i N,0-dimetilhidroksilamin hidrohlorid (14.45 g, 148 mmol) u DCM (500 mL) kako bi se dobila bledo braon suspenzija. Reakciona smeša je tretirana Et3N (35 mL), HOBT (11.35 g, 74.1 mmol) i EDC( 14.20 g, 74.1 mmol) i potom mešana na sobnoj temperaturi tokom 24 sata. Smeša je potom isprana 10%> LiCl, i zakiseljena sa IN HC1. Organski sloj je ispiran po redu sa 10%) LiCl i aq NaHC03. Organski sloj je obezbojen ugljem, proceđen i filtrat je osušen preko MgSO/uSmeša je proceđena i koncentrovana kako bi se dobilo 13.22 g (92% prinos) Intermedijer A-1A. MS(ES):mlz =195.1 [M+H<+>]; HPLC: RT = 1.118 min. (H20/MeOH sa TFA, CHROMOLITH® ODS S5 4.6 x 50 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm);
'H NMR (500MHz, hloroform-d) 8 7.22 (dd,J=7.8, 0.8 Hz, IH), 7.12-7.06 (m, IH), 6.63 (t, /= 7.5 Hz, IH), 4.63 (br. s., 2H), 3.61 (s, 3H), 3.34 (s, 3H), 2.17 (s, 3H).
Intermedijer A-l: (2-Amino-3-metilfenil)(3-fluorofenil)metanon
U balonu sa okruglim dnom od 500 mL, rastvor l-fluoro-3-jodobenzena (13.61 mL, 116 mmol) u THF (120 mL) je ohlađen u -78 °C kupatilu. Rastvor n-BuLi, (2.5M u heksanu, 46.3 mL, 116 mmol) je dodavan u kapima tokom 10 minuta. Rastvor je mešan na -78 °C tokom 30 minuta i potom tretiran sa rastvorom Intermedijera A-1A (6.43 g, 33.1 mmol) u THF (30 mL). Nakon 1.5 sata, reakciona smeša je dodata u mešavinu leda i IN HC1 (149 mL, 149 mmol), a reakcioni sud je ispran sa THF (5 ml) i kombinovan sa vodenom mešavinom. Dobijena mešavina je razblažena 10% aq LiCl i pH je podešena na 4 sa IN NaOH. Smeša je potom ekstrahovana Et20, isprana slanim rastvorom, osušena preko MgS04, proceđena i koncentrovana. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (220g ISCO) eluiranje gradijentom od 10% EtOAc/heksan do 30%> EtOAc/heksan da bi se obezbedio Intermedijer A-l (7.11 g, 94% prinos) kao ulje. MS(ES):mlz =230.1 [M+H<+>]; HPLC: RT = 2.820 min Čistoća = 99%. (H20/MeOH sa TFA, CHROMOLITH® ODS S5 4.6 x 50 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm).
Jedinjenja data niže u Tabeli 1 (Intermedijeri A-2 do A-9) su pripremljeni prema opštim sintetičkim procedurama opisanim za Intermedijer A-l, korišćenjem odgovarajućeg anilina i organometalnog reagensa.
Intermedijer A-10: (2-Amino-3-izopropilfenil)(3-hlorofenil)metanon
2-Izopropilanilin (3 mL, 21.19 mmol) je dodavan u kapima u rastvor trihloroborana (IMu dihlorometanu) (23.31 mL, 23.31 mmol) i dihloretana (50 mL) na 0 °C i smeša je mešana 10 min. Potom, 3-hlorobenzonitril (5.83 g, 42.4 mmol), praćeno aluminijum trihloridom (3.11 g, 23.31 mmol) su dodati i smeša je mešana na 0 °C tokom 25 minuta. Ledeno kupatilo je uklonjeno i smeša je zagrevana na 75 °C preko noći. Smeša je potom ohlađena do sobne temperature. Potom, 6N HC1 (60 mL, 10 ekv) je dodat i smeša je zagrejana na 75 °C. Nakon 4 hr, 12N HC1 (10 mL) je dodat i zagrevanje je nastavljeno preko noći na 75 °C. Smeša je ohlađena do sobne temperature, prebačena u erlenmajer sud, razblažena etil acetatom, ohlađena do 0 °C, a pH je pažljivo podignuto do 10 sa 50% vodenim NaOH. Dobijena mešavina je ekstrahovana etil acetatom (4X). Etil acetatni ekstrakti su kombinovani, isprani slanim rastvorom, osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, proceđeni i koncentrovani kako bi se dobilo bisto ulje boje ćilibara. Ulje je suspendovano u minimumu heptana i prečišćeno na „ISCO companion" sistemu za hromatografiju (220 g silika kertridž, eluiranje sa 0-20% etil acetat/heptan, 150 mL/min) kako bi obezbedio Intermedijer A-10 (2.85 g, 10.41 mmol, 49. 1% prinos). HPLC RT = 3.876 min 10/90 to 90/10 (MeOH/H2O/0.1%TFA, Waters Sunfire C18 3.5um, 2.1x30mm, lmL/min, 4 min gradijent, talasna dužina = 254 nm); MS(ES):mlz = 274[M+H<+>]; 'HNMR (400MHz, hloroform-d) 8 7.63 (t, J = 1.7 Hz, IH), 7.55-7.48 (m, 2H), 7.44-7.29 (m, 3H), 6.65 (t, J = 7.7 Hz, IH), 6.43 (br. s., 2H), 3.11-2.87 (m, IH), 1.34 (d, J = 6.8 Hz, 6H).
Jedinjenja data niže u Tabeli 2 (Intermedijeri A-11 do A-14) su pripremljeni prema opštim sintetičkim procedurama opisanim za Intermedijer A-10, korišćenjem odgovarajućeg anilina i aril nitrila, dobijenih metodama koje su poznate prosečnom poznavaocu oblasti.
<1>MeOH/H2O/0.1%TFA, Waters Sunfire C18 3.5li, 2.1x30mm, lmL/min, 4 min gradijent, talasna dužina = 254 nm.
Intermedijer A-l5: (2-Amino-3-ciklopropoksifenil)(m-tolil)metanon
Intermedijer A-15A: 3-Hidroksi-2-nitrobenzoeva kiselina
U sud od 250 mL dodati su 3-hloro-2-nitrobenzoeva kiselina (10 g, 49.6 mmol) i rastvor kalijum hidroksida (40 g, 727 mmol) u vodi (70 mL). Gusta smeša je zagrevana na refluksu tokom 12 sati. Rastvor je ohlađen na ledu i pažljivo mu je pH snižena do pH 3 koncentrovanom HC1. Vodena smeša je ekstrahovana EtOAc (3x). Organski slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvorom, osušeni natrijum sulfatom i koncentrovani pod vakuumom. Smeša sirovog proizvoda je rastvorena u dihlorometanu i dobijeni žuti precipitat je proceđen da bi se obezbedio Intermedijer A-15A (6 g, 32.8 mmol, 66.0% prinos). HPLC: RT = 0.85 min (H20/MeOH sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 2.1 x 30 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm); MS(ES):mlz= 206 [M+Na]<+>; 'H NMR (400MHz, hloroform-d) 8 7.56-7.35 (m, IH), 7.23 (dd, i = 1. 9, 1.5 Hz, IH).
Intermedijer A-15B: Metil 3-hidroksi-2-nitrobenzoat
U sud od 100 mL koji sadrži MeOH (60 mL) na 0 °C polako je dodavan tionil hlorid (9.96 mL, 137 mmol). Rastvor je mešan na 0 °C tokom 30 minuta, a potom je dodat Intermedijer A-15A (10 g, 54.6 mmol). Reakcioni rastvor je zagrevan uz refluks tokom 6 hr. Reakciona smeša je koncentrovana do suvog kako bi se dobio svetio žuti talog. Smeša sirovog proizvoda je prečišćena hromatografijom na silika gelu (0% to 100% of EtOAC/heptan tokom 15 minuta, 80 g kolona) dajući željeni proizvod (10.2 g, 95% prinos). HPLC: RT = 1.75 min (H20/MeOH sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 2.1 x 30 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm); MS(ES):mlz =220 [M+Na]<+>; 'H NMR (400MHz, hloroform-d) 8 7.60 (dd, J = 8.5, 7.4 Hz, IH), 7.33-7.22 (m, 5H), 7.10 (dd, J = 7.5, 1.3 Hz, IH), 3.96 (s, 3H).
Intermedijer A-l5C: Metil 2-nitro-3-(viniloksi)benzoat
Smeša bakar (II) acetata (11.98 g, 65.9 mmol) i dihlorometana (80 mL) je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 minuta, pre dodatka 2,4,6-trivinil-1,3,5,2,4,6-trioksatriborinanskog jedinjenja:piridina (1:1) (10.63 g, 44.2 mmol, 0.67 ekv), Intermedijera A-15B (13 g, 65.9 mmol), piridina (26.7 mL, 330 mmol), i molekulskih sita (1 g). Rezultujuća duboko plava smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 dana, sa reakcionom smešom koja je bila otvorena ka vazduhu. Reakciona smeša proceđena kroz podlogu CELITE® i isprana dihlorometanom. Filtrat je ispran 3M vodenim amonijum acetatom (2x), vodom, slanim rastvorom, i potom osušen i koncentrovan pod vakuumom. Smeša sirovog proizvoda je prečišćena hromatografijom na silika gelu (0% do 20% EtOAC/DCM tokom 15 minuta, 120 g kolona) kako bi dala Intermedijer A-15C (7.42 g, 33.2 mmol, 50.4% prinos). HPLC: RT = 2.487 min (H20/MeOH sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 2.1 x 30 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm); MS(ES):mlz= 246 [M+Na]<+>; 'H NMR (400MHz, hloroform-d) 8 7.77 (dd, J = 7.8, 1.2 Hz, IH), 7.55 (t, J = 8.1 Hz, IH), 7.3 (dd, J = 8.4, 1.3 Hz, IH), 6.61 (dd, J = 13.6, 5.9 Hz, IH), 4.95 (dd, J = 13.6, 2.4 Hz, IH), 4.69 (dd, J = 5.9, 2.4 Hz, IH), 3.93 (s, 3H), 1.56 (s, IH), 0.03 (s, IH).
Intermedijer A-l5D: Metil 3-ciklopropoksi-2-nitrobenzoat
Rastvor 2,2,2-trihlorosirćetne kiseline (16.30 g, 100 mmol) u dihlorometanu (100 mL) polako je dodavan uz pomoć levka sa kapalicom u rastvor dietilcinka (IM heksani, 100 mL, 100 mmol) na -10 °C pod atmosferom azota. Reakciona smeša je mešana 10 min, a potom je dijodometan (8 mL, 100 mmol) dodavan u kapima uz pomoć šprica, i reakciona smeša je mešana 10 min. Rastvor Intermedijera A-15C (7.42 g, 33.2 mmol) u dihlorometanu (20 mL) je dodavan polako uz pomoć levka sa kapalicom. Rastvor je zagrejan do sobne temperature preko noći. Reakciona smeša je potom ohlađena do 0 °C i kvenčovana sa IM HC1. Reakciona smeša je prebačena u levak za odvajanje i vodeni sloj je ekstrahovana dihlorometanom (3x). Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim natrijum bikarbonatom, vodom i slanim rastvorom, osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, proceđeni i koncentrovani. Smeša sirovog proizvoda je prečišćena hromatografijom na silika gelu (0% of EtOAC/heptan tokom 15 minuta, 220 g kolona) kako bi obezbedio Intermedijer A-15D (4.7 g, 19.81 mmol, 60.0% prinos). HPLC: RT = 2.66 min (H20/MeOH sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 2.1 x 30 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm); MS(ES):mlz =260 [M+Na]<+>; 'H NMR (400MHz, hloroform-d) 8 7.68-7.57 (m, 2H), 7.57-7.41 (m, IH), 4.03-3.82 (m, 4H), 0.94-0.78 (m, 4H).
Intermedijer A-15E: 3-Ciklopropoksi-2-nitrobenzoeva kiselina
Rastvor Intermedijera A-15D (4.7 g, 19.81 mmol) u THF (30 mL) i MeOH (30 mL) tretiranje rastvorom litijum hidroksida (2.88 g, 120 mmol) u vodi (15 mL, 833 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Organski rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom. Dobijena vodena gusta smeša je razblažena vodom, zakiseljena IM HC1 i ekstrahovana etil acetatom (3X). Ekstrakti su kombinovani i isprani slanim rastvorom, osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, proceđeni i koncentrovani kako bi obezbedio Intermedijer A-15E (4.35 g, 19.8 mmol, 98% prinos). HPLC: RT = 2.186 min (H20/MeOH sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 2.1 x 30 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm); MS(ES):mlz= 246 [M+Na]<+>; 'H NMR (400MHz, hloroform-d) 8 7.76 (dd, J = 7.7, 1.8 Hz, IH), 7.68-7.46 (m, 2H), 4.02 (tt, J = 6.0, 2.9 Hz, IH), 1.00-0.52 (m, 4H).
Intermedijer A-15F: 2-Amino-3-ciklopropoksibenzoeva kiselina
Smeša Intermedijera A-15E (420 mg, 1.882 mmol), cinka (1230 mg, 18.82 mmol), i amonijum hloriad (1007 mg, 18.82 mmol) u etanolu (10 mL) i vodi (5 mL) mešanaje na sobnoj temperaturi tokom 5 minuta. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom, a potom reakciona smeša je razblažena vodom. Smeša je zakiseljena i potom ekstrahovana DCM (2X). Kombinovani organski slojevi su osušeni Na2s04, i koncentrovan kako bi dali Intermedijer A-15F kao tamno ulje. HPLC: RT = 1.96 min (H20/MeOH sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 2.1 x 30 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm); MS(ES):mlz =194.12 [M+H]<+>; 'H NMR (400MHz, metanol-d4) 8 7.67-7.43 (m, IH), 7.23 (dd, /= 7.9, 1.1 Hz, IH), 6.62 (s, IH), 3.82 (s, IH), 0.82-0.63 (m, 4H).
Intermedijer A-l5G: 8-Ciklopropoksi-2-metil-4H-benzo[d][ 1,3]oksazin-4-on
Rastvor Intermedijera A-l5F (1 g, 5.18 mmol) anhidrida sirćetne kiseline (4.88 ml, 51.8 mmol) zagrevan je na 140 °C tokom 1 sata. Reakciona smeša je ohlađena and koncentrovanapod vakuumom,a ostatak je razblažen toluenom and koncentrovan da bi se obezbedio Intermedijer A-15G. HPLC: RT = 1.22 min (H20/MeOH sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 2.1 x 30 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm); MS(ES):mlz= 218.12 [M+H]<+>; 'H NMR (400MHz, hloroform-d) 8 7.82 (dd,/ =7.9, 1.3 Hz, IH), 7.71 (dd,/=8.1, 1.3 Hz, IH), 7.55-7.37 (m, IH), 4.02-3.75 (m, IH), 2.52 (s, 3H), 1.08-0.74 (m, 4H).
Intermedijer A-l5H: N-(2-Ciklopropoksi-6-(3-metilbenzoil)fenil)acetamid
Rastvor Intermedijera A-15G (1 g, 4.60 mmol) u etru (5 mL) i toluenu (10 mL) ohlađen je do -10 °C (metanol/led), Rastvor m-tolilmagnezijum bromida (5.06 mL, 5.06 mmol) dodavanje u kapima tokom perioda od 10 minuta. Nakon što je završena adicija, sud je sklonjen iz ledenog kupatila i mešan na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h. Rastvor je potom ohlađen do - 10 °C i 40 mL IN HC1 je dodato. Smeša je razblažena etil acetatom (50 mL). Organska faza je isprana 0.5 M NaOH, onda sa vodom, potom je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je korišćen kakav jeste u sledećoj reakciji. HPLC: RT = 2.808 min (H?0/MeOH sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 2.1 x 30 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm); MS(ES):mlz= 310.05
[M+H]<+>.
Intermedijer A-l5: (2-Amino-3-ciklopropoksifenil)(m-tolil)metanon
Rastvor Intermedijera A-15H (495 mg, 1.6 mmol) u etanolu (10 mL) i 6N HC1 (5 mL) zagrevan je na 90 °C tokom 4.5 sata. Reakciona smeša je koncentrovana i potom sa 10 mL vode, i ekstrahovana etil acetatom (3X50 mL). Skupljene organske faze su isprane IN natrijum hidroksidom, osušene Na2s04i koncentrovane pod vakuumom. Smeša sirovog proizvoda je prečišćena hromatografijom na silika gelu (0% do 100% EtOAC/heptan tokom 10 minuta, 12 g kolona) da bi se izolovao Intermedijer A-15 (250 mg, 0.935 mmol, 58.4%> prinos) kao žuto ulje. HPLC: RT = 3.58 min (H20/MeOH sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 2.1 x 30 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm); MS(ES):mlz =268.02 [M+H]<+>.
Jedinjenja data niže u Tabeli 3 (Intermedijeri A-16 do A-17) su pripremljeni prema opštim sintetičkim procedurama opisanim za Intermedijer A-15, korišćenjem odgovarajućeg anilina i organometalnog reagensa, dobijenih metodama koje su poznate prosečnom poznavaocu oblasti.
Intermedijer A-18: (2-Amino-3-hlorofenil)(m-tolil)metanon Intermedijer A-18A: (3-Hloro-2-nitrofenil)(m-tolil)metanon
Rastvor 3-hloro-2-nitrobenzoeve kiseline (2.5 g, 12.40 mmol) u tetrahidrofuranu (50 mL) tretiran je oksalil hloridom (1.194 mL, 13.64 mmol) praćeno DMF (0.096 mL, 1.240 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 hr. Nakon hlađenja do 0 °C, IM rastvor m-tolilmagnezijum bromida (24.81 mL, 24.81 mmol) je dodat. Nakon 1 hrjoš jedna porcija m-tolilmagnezijum bromida (24.81 mL, 24.81 mmol) je dodata. Nakon 1 sata, reakciona smeša je particionirana između etil acetat (200 mL) i IN HC1 (150 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (2x100 mL). Kombinovane organske su osušen Na2s04, proceđene i koncentrovane. Sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom (Teledvne ISCO CombiFlash Rf, 0% do 100% rastvarača A/B = etil acetat/heptan, REDISEP® Si02120g) kako bi obezbedio Intermedijer A-18A (0.700 g, 21 %). 'H NMR (400MHz, DMSO-d6) 8 8.04 (dd,7=8.1, 1.1 Hz, IH),7.82(t, 7=7.9 Hz, IH), 7.71 (dd, 7=7.7, 1.1 Hz, IH), 7.66-7.54 (m, 3H), 7.52-7.46 (m, IH), 2.40 (s, 3H).
Intermedij er A-18:
Smeša Intermedijera A-18A (0.710 g, 2.58 mmol) u THF (7.5 mL), etanolu (14.75 mL) i vodi (3.7 mL) tretirana je sa zasićenim vodenim amonijum hlorid (4 mL) i gvožđem u prahu (0.647 g, 11.59 mmol). Smeša je zagrevana do 100 °C uz mešanje. Nakon 2 sata, reakciona smeša je proceđena kroz CELITE® i filtrat je particioniran između etil acetata (100 mL) i sat aq NaHC03(75 mL). Vodeni sloj je ekstrahovana etil acetatom (1x50 mL). Kombinovane organske faze su osušene Na2s04, proceđene i koncentrovane. Sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom (Teledvne ISCO CombiFlash Rf, 0% do 100% rastvarača A/B = etil acetat/heptan, REDISEP® Si0224g) kako bi obezbedio Intermedijer A-18 (0.417 g, 66%). 'H NMR (400MHz, DMSO-d6) 8 7.56 (dd,7 =7.8, 1.4 Hz, IH), 7.47-7.35 (m, 4H), 7.31 (dd,7 =8.0, 1.4 Hz, IH), 7.01 (s, 2H), 6.61 (t,7 =7.9 Hz, IH), 2.39 (s, 3H).
Intermedijer A-19: (2-Amino-3-metoksifenil)(m-tolil)metanon
Intermedijer A-19 je pripremljen od 3-metoksi-2-nitrobenzoeve kiseline prema opštoj sintetičkoj proceduri opisanoj za Intermedijer A-18. HPLC RT = 2.21 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire Cl8 3.5um, 2.1x30mm, gradijent = 2 min, talasna dužina = 220 nm). [M+H+] = 246.
Intermedijer A-20: (2-Amino-3-hlorofenil)(o-tolil)metanon
Intermedijer A-20A: 7-Hloro-3-hidroksi-3-(o-tolil)indolin-2-on
U balonu sa okruglim dnom od 100 mL, rastvor 7-hloroindolin-2,3-diona (lg, 5.51 mmol) u THF (10 mL) je ohlađen u ledeno/vodenom kupatilu. Rastvor o-tolilmagnezijum bromida (2M, 5.51 mL, 11.01 mmol) je dodat, i reakciona smeša je uklonjena iz ledenog kupatila i zagrejana do sobne temperature. Nakon 1 sata, reakciona smeša je kvenčovana sa zasićenim vodenim NH4CI i ekstrahovana EtOAc. Organski sloj je osušen preko MgS04, proceđen i koncentrovan kako bi dao Intermedijer A-20A. MS(ES):mlz =272 [M-H ]; HPLC: RT = 2.478 min (H20/MeOH sa TFA, CHROMOLITH® ODS S5 4.6 x 50 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm).
Intermedijer A-20:
U balonu sa okruglim dnom od 250 mL, rastvor kalijum ferocijanida (5.28g, 14.33 mmol), NaHC03(1.25g, 14.88mmol) i NaOH (0.22g, 5.51mmol) u vodi (45 mL) je zagrejan na 100 °C. Nakon 30 min, rastvor Intermedijera A-20A (1.5g, 5.51 mmol) u THF (2 mL) je dodavan u kapima tokom 5 min perioda i reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 17 sati, i potom ohlađena do sobne temperature. Smeša je razblažena zasićenim vodenim NaHC03i ekstrahovana EtOAc. Organski sloj tretiran je aktivnim ugljem, osušen preko MgS04, proceđen i koncentrovan kako bi dao Intermedijer A-20 (1.208 g, 89%). MS(ES):mlz =246 [M+H<+>]; HPLC: RT = 3.208 min (H20/MeOH sa TFA, CHROMOLITH® ODS S5 4.6 x 50 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm). 'H NMR (500MHz, DMSO-d6) 5 7.55 (dd,/=7.6, 1.5 Hz, IH), 7.48-7.37 (m, 3H), 7.33 (d,/ =7.5 Hz, IH), 7.29 (t,J=7.5 Hz, IH), 7.22(dd,J=7.6, 1.2Hz, IH), 7.05(dd, .7=8.2, 1.5Hz, IH), 6.54(t, .7=7.9Hz, IH), 2.16 (s, 3H).
Jedinjenja data niže u Tabeli 4 (Intermedijeri A-21 do A-22) pripremljeni su prema opštoj sintetičkoj proceduri dopisanoj za Intermedijer A-20 korišćenjem odgovarajućeg isatina i organometalnog reagensa.
Intermedijer A-23: (2-Aminofenil)(m-tolil)metanon
U balon sa okruglim dnom od 250 mL napunjen magnezijumom (0.947 g, 39.0 mmol) i dietil etrom (50.0 ml) dodate su 2 kapi dibromoetana. Reakciona smeša je zagrevana do 60 °C tokom 5 min i potom sklonjena sa toplote. Potom, l-bromo-3-metilbenzen (5 g, 29.2 mmol) u dietil etru (50 ml) je polako dodat u porcijama dok nije postignut refluks. Preostali bromid dodavan u kapima kako bi se održao refluks. Nakon dodatka, reakciona smeša je refluktovana 3 hr. Potom, 2-aminobenzonitril (1.151 g, 9.74 mmol) u dietil etru (50.0 ml) je dodavan polako tokom 10 min. Dobijena mešavina je refluktovana preko noći. Zapremina reakciona smeše smanjena je na 1/3 i 100 g lomljenog leda i 50 ml 6N HC1 su dodati uz mešanje. Nakon 3 hr na sobnoj temperaturi, pH je podešen do pH 8 sa 5N NaOH i reakcija je razblažena sat NaHCCb(50 mL). Dve faze su odvojene i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (2x200 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko MgSCM, proceđeni i koncentrovani. Sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom (Teledvne ISCO CombiFlash Rf, 0% do 70% rastvarača A/B = etil acetat/heptan, REDISEP® Si0280g) kako bi obezbedio Intermedijer A-23 (1.84 g, 89%). 'H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 7.44-7.23 (m, 6H), 7.08 (br. s., 2H), 6.86 (d,J=8.1 Hz, IH), 6.50 (t, /= 7.5 Hz, IH), 2.38 (s, 3H).
Jedinjenja data niže u Tabeli 5 (Intermedijeri A-24 do A-27) pripremljena su prema opštoj sintetičkoj proceduri dopisanoj za Intermedijer A-23, korišćenjem odgovarajućeg aril halida i aril nitrila.
Intermedijer A-28: (2-Amino-3-metoksifenil)(5-(trifluorometil)piridin-2-il)metanon
U hladan (-23 °C), mešani rastvor terc-butil 2-metoksifenilkarbamata (443.3 mg, 1.986 mmol) u etru (5 mL) pod N2dodat je/-BuLi (2.6 mL, 4.42 mmol). Reakciona smeša je mešana 2 h, i potom ohlađena do -78 °C. U reakcionu smešu je dodat rastvor metil 5-(trifluorometil)pikolinat (501.3 mg, 2.44 mmol) u etru (10 mL) u kapima uz pomoć kanile tokom 5 min. Nakon 2h, reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature, mešana dodatni sat i potom je reakcija kvenčovana dodatkom vode uz energično mešanje. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, organska faza je odvojena, isprana sa zasićenim NaCl potom osušena (Na2sO/0, proceđena i koncentrovana kako bi dala čvrstu žutu supstancu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (Teledvne ISCO CombiFlash Rf, 0% do 100% rastvarača A/B = heksan/EtOAc, REDISEP® Si0240g) kako bi se dobio Intermedijer A-28A (546.8 mg, 69.5% prinos)) kao čvrsta žuta supstanca: 'H NMR (400 MHz, hloroform-d) 8 ppm 8.83-8.88 (1 H, m), 8.24 (1 H, d,J=8.4 Hz), 8.07 (1 H, dd,J=8.4, 1.8 Hz), 7.25 (1 H, d, /= 1.5 Hz), 7.18-7.24 (1 H, m), 7.09 (1 H, dd,J=8.0, 1.7 Hz), 6.95 (1 H, s), 3.93 (3 H, s), 1.25 (9 H, s).
U mešani rastvor Intermedijera A-28A (545 mg, 1.375 mmol) u DCM (15 mL) dodata je TFA (0.106 mL, 1.375 mmol). Nakon 2h, reakciona smeša je razblažena toluenom (30 mL) i potom koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (Teledvne ISCO CombiFlash Rf, 0% do 20% rastvarača A/B = DCM/MeOH, REDISEP® Si0240g, naneto kao DCM rastvor) kako bi obezbedio kao proizvod Intermedijer A-28 (376.8 mg, 93% prinos)): 'H NMR (400 MHz, hloroform-d) 8 ppm 8.94-8.99 (1 H, m), 8.11 (1 H, dt,J=8.1, 1.1 Hz), 7.86
(1 H, d,J=8.1 Hz), 7.17 (1 H,dd, J=8.4,1.1 Hz), 6.89(1 H, dd, J=7.9, 1.1 Hz), 6.55 (1 H,
m, J= 16.1 Hz), 3.92 (3 H, s).
Intermedijer A-29: (2-Amino-3-metoksifenil)(5-hloropiridin-2-il)metanon
Intermedijer A-28A:terc- Butil(2-(5-hloropikolinoil)-6-metoksifenil)karbamat
U hladan (-23 °C), mešani rastvor terc-butil 2-metoksifenilkarbamata (548 mg, 2.454 mmol) u etru (6 mL) pod N2dodat je/-BuLi (3.2 mL, 5.44 mmol). Nakon mešanja 2.5h, reakciona smeša je ohlađena do -78 °C. U reakcionu smešu je dodat rastvor etil 5-hloropikolinata (564.5 mg, 3.04 mmol) u etru (12 mL) u kapima uz pomoć kanile tokom 5 min. Reakciona smeša je mešana 60 min, a potom zagrejana do sobne temperature. Nakon 1.5h, u reakcionu smešu je dodata H2O uz energično mešanje. Reakciona smeša je razblažena EtOAc, i organska faza je odvojena, isprana sa zasićenim NaCl potom osušena (Na2sO/0, proceđena i koncentrovana kako bi dala kao proizvod Intermedijer A-29A (511.5 mg, 57.4% prinos)) kao čvrstu žutu supstancu: 'H NMR (400 MHz, hloroform-d) 5 ppm 8.55 (1 H, dd, /= 2.3, 0.6 Hz), 8.08 (1 H, dd,J=8.4, 0.7 Hz), 7.80 (1 H, dd,J=8.4, 2.4 Hz), 7.16-7.25 (2 H, m), 7.06 (1 H, dd,J=7.5, 2.2 Hz), 6.90 (1 H, s), 3.92 (3 H, s), 1.28 (9 H, s).
Intermedijer A-29:
U mešani rastvor Intermedij era A-29 A (511.5 mg, 1.410 mmol) u DCM (14 mL) dodata je TFA (14 mL, 182 mmol). Nakon 60 min, reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom, ponovo rastvorena u DCM, isprana zasićenim NaHC03, osušena (MgS04), proceđena i koncentrovana kako bi se obezbedio Intermedijer A-29 (402.1 mg, 100% prinos)) kao čvrsta supstanca boje ćilibara: HPLC RT = 2.763 min. (Waters Sunfire Cl8 2.5 um 2.1x 30mm, MeOH/H20/TFA, 4min gradijent, talasna dužina = 254 nm), 'H NMR (400 MHz, hloroform-d) 5 ppm 8.66 (1 H, dd, J = 2.4, 0.7 Hz), 7.85 (1 H, dd, J = 8.4, 2.4 Hz), 7.75 (1 H, dd, /= 8.4, 0.7 Hz), 7.25 (1 H, dd, /= 8.4, 1.1 Hz), 6.89 (1 H, dd,J=7.7, 1.1 Hz), 6.55 (1 H, dd,J=8.3,
7.8 Hz), 4.74 (2 H, br. s.), 3.91 (3 H, s). MS(ES):mlz =263 [M+H<+>].
Intermedijer B-l: (S)-3-Amino-5-(3-fluorofenil)-9-metil-lH-benzo[e][l,4]diazepin-2(3H)-on
Intermedijer B-1A: (S)-Benzil (5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-benzo[e][l,4]diazepin-3-il)karbamat
U balon sa okruglim dnom od 1 L, rastvor 2-(lH-benzo[d][l,2,3]triazol-l-il)-2-((fenoksikarbonil)amino)sirćetne kiseline (J. Org. Chem., 55:2206-2214 (1990)) (19.37 g, 62.0 mmol) u THF (135 mL) je ohlađen u ledeno/vodenom kupatilu i tretiran sa oksalil hloridom (5.43 mL, 62.0 mmol) i 4 kapi DMF. Reakciona smeša je mešana 4 sata. Potom, je dodat rastvor Intermedijera A-l (7.11 g, 31.0 mmol) u THF (35 mL) i rezultujući rastvor je uklonjen iz ledeno/vodenog kupatila i mešan na sobnoj temperaturi tokom 1.5 sata. Smeša je potom tretirana rastvorom amonijaka, (7M in MeOH) (19.94 mL, 140 mmol). Nakon 15 min, još jedna porcija amonijaka, (7M in MeOH) (19.94 mL, 140 mmol) je dodata i dobijena mešavina je zapečaćena pod N2i mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je potom koncentrovana do~l/2 zapremine i potom razblažena sa AcOH (63 mL) i mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sata. Reakciona smeša je potom koncentrovana, i ostatak je razblažen sa 500 mL vode kako bi se dobio precipitat. Heksan i Et20 su dodati i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata kako bi se formirala narandžasta čvrsta supstanca. Et20 je uklonjen pod strujom azota i vodeni sloj je dekantovan. Talog je smrvljen sa 40 mL iPrOH i mešan na sobnoj temperaturi kako bi se dobio beli precipitat. Čvrsta supstanca je proceđena i isprana iPrOH, potom osušena na filteru pod strujom azota kako bi dala racemski Intermedijer B-1A (5.4 g, 41.7% prinos).
Racemski Intermedijer B-1A (5.9 g, 14.3 mmol) je razdvojen koristeći Hiralne SFC uslove opisane u tekstu niže. Željeni stereoizomer je sakupljen kao drugi pik u elucionom redosledu: Instrument: Berger SFC MGIII, Kolona: CHIRALPAK® IC 25 x 3 cm, 5 cm; kolona temp: 45 °C; Mobilna faza: CCh/MeOH (45/55); Brzina protoka: 160 mL/min; Detekcija na 220 nm.
Nakon uparavanja rastvarača, Intermedijer B-1A (2.73 g, 46% prinos) je dobijen kao čvrsta bela supstanca. HPLC: RT = 3.075 min. (H20/MeOH sa TFA, CHROMOLITH® ODS S5 4.6 x 50 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm). Hiralna HPLC RT: 8.661 min (AD, 60% (EtOH/MeOH)/heptan) > 99%ee. MS(ES):mlz= 418.3 [M+H<+>];'H NMR (500MHz, DMSO-de) 8 10.21 (s, IH), 8.38 (d,J=8.3 Hz, IH), 7.57-7.47 (m, 2H), 7.41-7.29 (m, 8H), 7.25-7.17 (m, 2H), 5.10-5.04 (m, 3H), 2.42 (s, 3H).
Intermedijer B-l: (S)-3-Amino-5-(3-fluorofenil)-9-metil-lH-benzo[e][l,4]diazepin-2(3H)-on.
U balon sa okruglim dnom od 100 mL, rastvor Intermedijera B-l A (2.73 g, 6.54 mmol) u sirćetnoj kiselini (12 mL) tretiranje sa HBr, 33% u HOAc (10.76 mL, 65.4 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Rastvor je razblažen Et20 kako bi dao žuti precipitat. Čvrsta žuta supstanca je proceđena i isprana Et20 pod azotom. Čvrsta supstanca je prebačena u balon sa okruglim dnom od 100 mL i voda je dodata (nastao je beli precipitat). Gusta smeša je polako napravljena baznom sa zasićenim NaHC03. Dobijeni lepljivi precipitat je ekstrahovan EtOAc. Organski sloj je ispran vodom, osušen MgS04, i potom proceđen i koncentrovan do suvog kako bi se dobio Intermedijer B-l (1.68 g, 91% prinos) kao bela penasta čvrsta supstanca. MS(ES):mlz =284.2 [M+H<+>]; HPLC: RT = 1.72 min (H20/MeOH sa TFA, CHROMOLITH® ODS S5 4.6 x 50 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm).<>>H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 10.01 (br. s., IH), 7.56-7.44 (m, 2H), 7.41-7.26 (m, 3H), 7.22-7.11 (m, 2H), 4.24 (s, IH), 2.55 (br. s., 2H), 2.41 (s, 3H).
Jedinjenja data niže u Tabeli 6 (Intermedijeri B-2 to B-3) pripremljena su prema opštoj sintetičkoj proceduri dopisanoj za Intermedijer B-l, koristeći kao polazne materijale Intermedijere A-10 i Intermedijer A-4, redom.
Inteimedijer B-4: (S)-3-Amino-9-metil-5-fenil-lH-benzo[e][l,4]diazepin-2(3H)-on
Intermedijer B-4A: (S)-Benzil (9-metil-2-okso-5-fenil-2,3-dihidro-lH-benzo[e][l,4]diazepin-3-il)karbamat
Smeša 2-( 1 H-benzo[d] [ 1,2,3 ]triazol-1 -il)-2-(((benziloksi)karbonil) amino)sirćetne kiseline (5.50 g, 16.87 mmol) je suspendovana u THF (40.9 mL) i ohlađena do 0 °C. Oksalil hlorid (1.477 ml, 16.87 mmol) je dodat praćeno dodatkom 50 uL DMF. Primećeno je stvaranje gasa. Nakon 2 h, rastvor Intermedijera A-9 (1.62 g, 7.67 mmol) i N-metilmorfolina (2.53 ml, 23.00 mmol) u THF (20 mL) je dodat, i reakciona smeša je puštena da se polako zagreje. Nakon 3.5 h, amonijak (7 M in MeOH) (21.29 ml, 149 mmol) je dodat i reakciona smeša puštena da se meša na sobnoj temperaturi preko noći. U ovu smešu dodato je 5 mL 7M amonijaka i reakciona smeša je mešana 5 sati. Smeša je potom razblažena sa EtOAc, isprana H2O, 1 M NaOH, i slanim rastvorom. Organski sloj je koncentrovan i potom suspendovan u sirćetnoj kiselini (15.34 ml) i amonijum acetat (2.96 g, 38.3 mmol) je dodat. Nakon 4.5 sata, H2O je dodata kako bi se precipitirao proizvod. Precipitat je sakupljen filtracijom, ispran vodom, i osušen na vazduhu da bi se obezbedio Intermedijer B-4A (2.48 g, 81 %). HPLC: RT = 1.01 min (H20/CH3CN sa TFA, BEH Cl8 1.75um, 2.1x50mm, gradijent = 2 min, talasna dužina = 220 nm); MS(ES):mlz =400.3 [M+H]<+>.
Racemski Intermedijer B-4A (10.8 g, 27.0 mmol) je razdvojen koristeći Hiralne SFC uslove opisane u tekstu niže. Željeni stereoizomer je sakupljen kao prvi pik u elucionom redosledu: Instrument: Berger SFC MGIII, Kolona: OJ-H 25 X 3cm, 5cm; kolona temp: 45 °C; Mobilna faza: C02/MeOH (70/30); Brzina protoka: 200 mL/min; Detekcija na 220 nm. Nakon uparavanja rastvarača, Intermedijer B-4A (2.67 g, 6.68 mmol) je dobijen kao čvrsta bela supstanca. HPLC: RT = 2.761 min (H20/MeOH sa TFA, CHROMOLITH® SpeedROD 4.6 x 50 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm). MS(ES):mlz =400.3 [M+H]<+>.
Intermedijer B-4:
Rastvor Intermedijera B-4A (2.6 g, 6.51 mmol) u 33% HBr u HOAc (10.71 ml, 65.1 mmol) mešan je na sobnoj temperaturi tokom 2h. Dietil etar je dodat, i rezultujuća čvrsta žuta supstanca je sakupljena filtracijom i isprana sa etrom. Higroskopna čvrsta supstanca je rastvorena u MeOH, koncentrovana i osušena pod vakuumom da bi se obezbedio Intermedijer B-4 (2.59 g, 93%>). HPLC: RT = 1.433 min (H20/MeOH sa TFA, CHROMOLITH® SpeedROD 4.6 x 50 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm). MS(ES):mlz= 266.0
[M+H]<+>.
Intermedijer B-5: 3-Amino-5-(4-(((/erc-butildimetilsilil)oksi)metil)fenil)-lH-benzo[e][l,4]diazepin-2(3H)-on Intermedijer B-5A: Benzil (5-(4-(((/erc-butildimetilsilil)oksi)metil)fenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-benzo[e] [ 1,4]diazepin-3-il)karbamat
U balon sa okruglim dnom od 100 mL, suspenzija 2-(lH-benzo[d][l,2,3]triazol-l-il)-2-(benziloksikarbonilamino)sirćetne kiseline (0.952 g, 2.92 mmol) i Intermedijera A-27 (.83 g, 2.430 mmol) u DCM (20 mL) tretirana je sa rastvorom DCC (0.602 g, 2.92 mmol) u DCM (5 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom preko noći. U reakcionu smešu je dodat zasićen NaiCCb(25 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom lh. Suspenzija je proceđena, slojevi su odvojeni i organska faza je koncentrovana do suvog. Sirova reakciona smeša je razblažena MeOH (10 mL) i 2N amonijak u metanola (14.58 mL, 29.2 mmol) je dodat. Reakciona smeša je potom mešana na sobnoj temperaturi preko noći. AcOH (13.91 mL, 243 mmol) je potom direktno dodat u reakcionu smešu i smešaje mešana na sobnoj temperaturi pod azotom tokom 72 hr. pH reakcije je podešena do pH 12 zasićenim NaHC03. Reakciona smešaje particionirana između DCM (100 mL) i slanog rastvora (50 mL). Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan DCM (2x50 mL). Kombinovane organske faze su osušene sa Na2s04, proceđene i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom (Teledvne ISCO CombiFlash Rf, 0% do 75% rastvarača A/B = etil acetat/heptan, REDISEP® S1O280g). Koncentrovanje odgovarajućih frakcija obezbedilo je uzorak koji je ponovo prečišćen fleš hromatografijom (Teledvne ISCO CombiFlash Rf, 0% do 60% rastvarača A/B = etil acetat/heptan, REDISEP® Si0240g). Koncentrovanje odgovarajućih frakcija obezbedilo je Intermedijer B-5A (0.368 g, 29%). LC/MS RT = 2.472 min 10/90 do 90/10 (MeOH/H2O/0.1%TFA, Waters Sunfire C18 3.5um, 2.1x30mm, lmL/min, 2 min gradijent, talasna dužina = 220 nm); MS(ES):mlz =530 [M+l]; 'H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 10.84 (s, IH), 8.39 (d,J=8.6 Hz, IH), 7.64( t, J=7.7 Hz, IH), 7.50-7.43 (m, IH), 7.43-7.28 (m, 10H), 7.29-7.21 (m, IH), 5.09 (s, IH), 5.05 (d,/=8.4 Hz, IH), 4.98 (s, IH), 4.78 (s, 2H), 0.95-0.88 (m, 9H), 0.13-0.03 (m, 6H).
Intermedijer B-5:
Rastvor Intermedijera B-5A (330 mg, 0.623 mmol) u etil acetatu (20 mL) tretiranje sa 20% Pd/C (50%o voda) (200 mg, 0.623 mmol) kako bi dao suspenziju. Reakciona smeša je pročišćena 3 puta sa vakuumom i azotom, a potom pročišćena 3 puta sa vakuumom i. vodonikom. Smeša je mešana pod atmosferom vodonika tokom 4 hr. Reakciona smeša je proceđena na CELITE® i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se obezbedio Intermedijer B-5 (0.190 g, 77%). HPLC: RT = 2.0.3 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 2.Ix30mm, gradijent = 2 min, talasna dužina = 220 nm). LC/MS: M+H = 396; 'H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 10.66 (br. s., IH), 7.59 (ddd, /= 8.3, 7.1, 1.5 Hz, IH), 7.49-7.43 (m, 2H), 7.41-7.34 (m, 2H), 7.30-7.24 (m, 3H), 7.24-7.17 (m, IH), 4.77 (s, IH), 4.71 (s, IH), 4.24 (s, 2H), 0.94-0.91 (m, 9H), 0.10 (s, 6H).
Jedinjenja data niže u Tabeli 7 (Intermedijeri B-6 to B-26) pripremljeni su prema opštoj sintetičkoj proceduri dopisanoj za Intermedijer B-l i Intermedijere B-4 do B-5, korišćenjem naznačenog polaznog materijala.
Intermedijer B-28: 3-Amino-9-ciklopropil-5-fenil-lH-benzo[e][l,4]diazepin-2(3H)-on Intermedijer B-28A: Benzil (9-bromo-2-okso-5-fenil-2,3-dihidro-lH-benzo[e][l,4]diazepin-3-il)karbamat
Intermedijer B-28A je pripremljen od Intermedijera A-22 prema opštim procedurama koje su date za Intermedijer B-l. HPLC: RT = 2.048 min (H20/MeOH sa TFA, Ascentis Express C18 2.7um, 2.1x50mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm); MS(ES):mlz =464 [M+H<+>].
Intermedijer B-28B: Benzil (9-ciklopropil-2-okso-5-fenil-2,3-dihidro-lH-benzo[e][l,4]diazepin-3-il)karbamat
U mešanu smešu Intermedijera B-28A (2.00 g, 4.31 mmol), Pd(dppf)2Cl2(946 mg, 1.29 mmol), kalijum fosfata dibaznog (2.25 g, 12.9 mmol) i estra ciklopropilboronske kiseline metiliminodisirćetne kiseline (1.70 g, 8.61 mmol) u dioksanu (12 mL) pod azotom je dodata voda (3 mL). Reakciona smešaje zagrevana na 85 °C tokom 20 h a potom ohlađena do sobne temperature. Smešaje razblažena EtOAc (40 mL) i proceđena kroz podlogu od silika gela od 1 inča koja je nadslojena podlogom od CELITE® od 1/2 inča. Ovo je dalje eluirano sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i prečišćen fleš hromatografijom (Teledvne ISCO CombiFlash 0% do 17% rastvarača A/B = DCM/aceton, REDISEP® Si02120 g, detekcija na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje odgovarajućih frakcija obezbedilo je Intermedijer B-28B (1.20 g, 65%). HPLC: RT = 3.246 min (CHROMOLITH® SpeedROD kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol tokom 4 minuta koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). MS(ES):mlz =426.1 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, DMSO-d6) 8 10.29 (s, IH), 8.38 (d,J=8.6 Hz, IH), 7.57-7.32 (m, 10H), 7.30 (d,/=7.5 Hz, IH), 7.20 (t, / = 7.6 Hz, IH), 7.11 (d, / = 7.3 Hz, IH), 5.08 (s, 2H), 5.04 (d,J=8.4 Hz, IH), 2.26-2.13 (m, IH), 1.09-0.95 (m, 2H), 0.87-0.78 (m, IH), 0.61-0.52 (m, IH).
Intermedijer B-28:
Intermedijer B-28 je pripremljen od Intermedijera B-28A tretmanom sa 33% HBr/sirćetnom kiselinom prema opštoj proceduri opisanoj za Intermedijer B-l. HPLC: RT = 2.085 min (CHROMOLITH® SpeedROD kolona 4.6 x 50 mm, 10-90%> vodeni metanol tokom 4 minuta koji sadrži 0.1%> TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm). LC/MS: M+H = 292.1. 'H NMR (400MHz, DMSO-d6) 8 10.78 (s, IH), 9.01 (br. s., 3H), 7.65-7.48 (m, 5H), 7.38 (dd,J =7.6, 1.2 Hz, IH), 7.26 (t,J=7.8 Hz, IH), 7.19-7.14 (m, IH), 2.27-2.16 (m, IH), 1.14-0.98 (m, 2H), 0.91-0.80 (m, IH), 0.67-0.56 (m, IH).
Sledeći Intermedijeri (B-29 do B-30) su pripremljeni prema opštim metodama opisanim za Intermedijer B-5 od naznačenog polaznog materijala.
Tabela 8
Intermedijer Struktura Naziv HPLC LC/MS Polazni RT [M+H]<+>materijal (min)<1>
B-29
3-amino-5-(o-tolil)-lH- 1.33 266 A-26 benzo[e] [ 1,4]diazepin-2(3H)-
on
B-30
3-amino-5-(4-metoksifenil)- 1.28 282 A-25 1 H-benzo [e] [ 1,4] diazepin-
2(3H)-on
<1>H2O/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 2.1x30mm, gradijent = 2 min, talasna dužina = 220 nm. Primer 1 (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin- 3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Intermedijer 1 A: (2S,3R)-etrc-Butil 6,6,6-trifluoro-3-(((S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-benzo[e][l,4]diazepin-3-il)karbamoil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoat
U balon sa okruglim dnom od 100 mL, rastvor Intermedijera B-l (1683 mg, 5.94 mmol), Et3N (1.656 mL, 11.88 mmol), i Intermedijera S-l u DMF (20 mL) tretiranje sa o-benzotriazol-l-il-A^TV.^A^'-tetrametiluronium tetrafluoroboratom (3815 mg, 11.88 mmol) i mešano na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Reakciona smešaje razblažena vodom i zasićenim vodenim NaHC03. Nastao je beličasti precipitat i proceđen je i ispran vodom. Dobijena čvrsta supstanca je osušena na filteru pod strujom azota kako bi se dobio Intermedijer 1A (3.7 g, 99% prinos). MS(ES):mlz =632.4[M+H<+>]; HPLC: RT = 3.635 min Čistoća = 98%. (H20/MeOH sa TFA, CHROMOLITH® ODS S5 4.6 x 50 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm).
'H NMR (400MHz, metanol-ck) 5 7.53 (t, J = 4.5 Hz, IH), 7.46-7.30 (m, 3H), 7.28-7.23 (m, IH), 7.23-7.18 (m, 2H), 5.37 (s, IH), 2.88 (td, J = 10.4, 3.4 Hz, IH), 2.60 (td, J = 10.2, 4.1 Hz, IH), 2.54-2.40 (m, IH), 2.47 (s, 3 H), 2.33-2.12 (m, 3H), 1.98-1.69 (m, 4H), 1.51 (s, 9H).
Intermedijer 1B: (2S,3R)-6,6,6-Trifluoro-3-(((S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-benzo[e][l,4]diazepin-3-il)karbamoil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanska kiselina
U balon sa okruglim dnom od 250 mL, rastvor Intermedijera 1A (3.7 g, 5.86 mmol) u DCM (25 mL) tretirana je sa TFA (25 mL) i dobijeni bledo narandžasti rastvor mešan je na sobnoj temperaturi tokom 1.5 sati. Reakciona smešaje potom koncentrovana kako bi se dobio Intermedijer 1B. HPLC: RT = 3.12 min (H20/MeOH sa TFA, CHROMOLITH® ODS S5 4.6 x 50 mm, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220 nm). MS(ES):mlz =576.3 (M+H)<+>. 'H NMR (400MHz, metanol-d4) 5 7.54 (t,J=4.5 Hz, IH), 7.49-7.29 (m, 3H), 7.28-7.15 (m, 3H), 5.38 (br. s., IH), 2.89 (td,J=10.3, 3.7 Hz, IH), 2.67 (td,J=9.9, 4.2 Hz, IH), 2.56-2.38 (m, IH), 2.48 (s, 3 H), 2.34-2.13 (m, 3H), 2.00-1.71 (m, 4H).
Primer 1:
U balon sa okruglim dnom od 250 mL, rastvor Intermedijera 1B (4.04 g, 5.86 mmol) u THF (50 mL) tretiranje sa amonijakom (2M in iPrOH) (26.4 mL, 52.7 mmol), praćeno HOBT (1.795 g, 11.72 mmol) i EDC (2.246 g, 11.72 mmol). Dobijena bela suspenzija mešana je na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena vodom i zasićenim vodenim NaHC03. Dobijena čvrsta supstanca je proceđena, isprana vodom i potom osušena pod strujom azota. Sirovi proizvod je suspendovan u 20 mL iPrOH i mešan na sobnoj temperaturi tokom 20 min i potom proceđen i ispran iPrOH i osušen pod vakuumom kako bi se dobilo 2.83 g čvrste supstance. Čvrsta supstanca je rastvorena u refluksu EtOH(100 mL) i polako tretirana sa 200 mg aktivnog uglja koji je dodat u malim porcijama. Topla smeša je proceđena kroz CELITE® i isprana sa toplim EtOH. Filtrat je redukovan na pola zapremine, ostavljen da se ohladi i nastali beli precipitat je proceđen i ispran sa EtOH kako bi se dobilo 2.57 g bele čvrste supstance. Druga rekristalizacija iz EtOH (70 mL) dala je Primer 1 (2.39 g, 70% prinos) kao belu čvrstu supstancu. HPLC: RT = 10.859 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5jun, 3.0xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz =575.3 [M+H<+>];
'H NMR (400MHz, metanol-cU) 8 7.57-7.50 (m, IH), 7.47-7.30 (m, 3H), 7.29-7.15 (m, 3H), 5.38 (s, IH), 2.85-2.75 (m, IH), 2.59 (td,J=10.5, 4.0 Hz, IH), 2.53-2.41 (m, 4H), 2.31-2.10 (m, 3H), 1.96-1.70 (m, 4H).
Primer 2
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Hlorofenil)-9-etil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3 -bis(3,3,3 -trifluoropropil)sukcinamid
Intermedijer 2A: (2S,3R)-efrc-Butil 3-((5-(3-hlorofenil)-9-etil-2-okso-2,3-dihidro-lH-benzo[e][l,4]diazepin-3-il)karbamoil)-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoat
U rastvor Intermedijera B-7 dihidrobromida (130 mg, 0.273 mmol), Intermedijera S-l (100 mg, 0.273 mmol) i TBTU (105 mg, 0.328 mmol) u DMF (2 mL) je dodat TEA (0.190 mL, 1.367 mmol) u kapima. Smešaje mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 hr. Reakciona smešaje lagano sipana u mešani rastvor vode sa nešto zasićenim NaHCOs. Dobijena smešaje ekstrahovana DCM, isprana 10% LiCl rastvorom, osušena i koncentrovana pod vakuumom. Smeša sirovog proizvoda je prečišćena hromatografijom na silika gelu (ISCO, 0%> do 50%> EtOAC/heptan tokom 10 minuta, korišćenjem 12 g kolone) kako bi se dobio Intermedijer 2A (116 mg, 0.175 mmol, 64.1 % prinos). HPLC RT = 1.20 min H20/CH3CN sa TFA, BEH Cl8 1.75um, 2.Ix50mm, gradijent = 2 min, talasna dužina = 220 nm. MS(ES):mlz =662.3 [M+H<+>].
Intermedijer 2B: (2S,3R)-3-((5-(3-Hlorofenil)-9-etil-2-okso-2,3-dihidro-lH-benzo[e][l,4]diazepin-3-il)karbamoil)-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanska
kiselina
Rastvor Intermedijera 2A (115 mg, 0.174 mmol) u DCM (3 mL) tretiran je sa TFA (0.668 mL, 1.737 mmol). Reakciona smešaje mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata potom koncentrovana do suvog. Sirova smešaje razblažena toluenom i ponovo koncentrovana do suvog da bi se obezbedio Intermedijer 2B (87 mg, 0.144 mmol, 83% prinos). HPLC RT = 3.695 (H2O/CH3CN sa TFA, Waters Sunfire C18 2.1 x 30 mm 3.5 um, 4 min gradijent, detekcija na 220 nm). MS(ES):mlz =606.1 [M+H<+>].
Primer 2:
Rastvor Intermedijera 2B (101 mg, 0.167 mmol), HOBT (77 mg, 0.500 mmol), i EDC (96 mg, 0.500 mmol) u THF (2381 jul) tretiran je sa 2N amonijakom u IPA (583 jul, 1.167 mmol). Reakciona smešaje mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona smešaje potom razblažena sa vodom (5 mL) i ekstrahovana DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni, a potom koncentrovani pod vakuumom. Smeša sirovog proizvoda je prečišćena hromatografijom na silika gelu (ISCO, 0%> do 100% of EtOAC/heptan tokom 15 minuta, korišćenjem 12 g kolone). Nakon odvajanja diastereomera (Berger SFC MGII, Chiral IC, 25 X 3 cm ID, 5um, 92/8 C02/MeOH, 85 mL/min detekcija na 220 nm), dobijen je Primer 2 (38 mg, 38%). HPLC: RT = 9.656 min (H2O/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz =605.1 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-cU) 5 7.70-7.63 (m, IH), 7.61-7.56 (m, IH), 7.55-7.45 (m, 2H), 7.44-7.37 (m, IH), 7.33-7.19 (m, 2H), 5.38 (s, IH), 3.38-3.26 (m, 2H), 3.08-2.88 (m, IH), 2.87-2.70 (m, 2H), 2.69-2.40 (m, 2H), 2.36-2.02 (m, 3H), 2.01-1.69 (m, 3H), 1.34 (t,J =7.5 Hz, 3H).
Sledeći primeri su pripremljeni prema opštim metodama opisanim za Primer 1 i Primer 2.
Primer 3
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Hlorofenil)-9-izopropil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 3 je pripremljen od hiralnog Intermedijer B-2 i Intermedijer S-l prema opštim procedurama prethodno opisanim. Primer 3 je dobijen. HPLC: RT = 10.134 min (H2O/CH3CN sa TFA, Sunfire Cl 8 3.5um, 4.6x150mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254 nm); MS(ES):mlz= 619 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-dO 5 7.67 (m, 2H), 7.48 (m, 2H), 7.42 (m, IH), 7.33 (m, IH), 7.23 (m, IH), 5.38 (s, IH), 3.56-3.38 (m, IH), 2.92-2.74 (m, IH), 2.68-2.42 (m, 2H), 2.38-2.09 (m, 3H), 2.00-1.69 (m, 4H), 1.41 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.29 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
Primer 4
(2R,3S)-N-(9-Hloro-5-(3,4-dimetilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 4 je pripremljen od Intermedijera B-6 i Intermedijera S-2 prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Nakon odvajanja diastereomera hiralnom SFC (Instrument: Berger SFC MGII, Kolona: Chiral IC 25 x 3 cm, 5 um; Mobilna faza: 88/12 C02/MeOH Brzina protoka: 85 mL/min; Detekcija na 220 nm), Primer 4 je dobijen. HPLC: RT = 9.771 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz= 619 [M+H<+>];<*>H NMR (400MHz, metanol-d4) 8 7.76 (dd,J=7.8, 1.7 Hz, IH), 7.39 (s, IH), 7.34-7.15 (m, 4H), 5.35 (s, IH), 2.75 (td,J =10.6, 4.3 Hz, IH), 2.58-2.48 (m, IH), 2.32 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.25-2.05 (m, 3H), 1.86-1.66 (m, 4H), 1.65-1.45 (m, 3H).
Primer 5
(2R,3S)-N-(9-Hloro-5-(3,5-dimetilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trilfuorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 5 je pripremljen od Intermedijera B-27 i Intermedijera S-2 prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Nakon odvajanja diastereomera hiralnom SFC (Instrument: Berger SFC MGII, Kolona: RR Whelk 01 25 x 3 cm, 5 um; Mobilna faza: 85/15 C02/MeOH Brzina protoka: 85 mL/min; Detekcija na 220 nm), Primer 5 je dobijen. HPLC: RT = 9.824 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz= 619 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-d4) 8 7.76 (dd, J= 7.7, 1.8 Hz, IH), 7.32-7.23 (m, 2H), 7.16 (s, 3H), 5.36 (s, IH), 2.81-2.71 (m, IH), 2.53 (d,J=10.3 Hz, IH), 2.31 (s, 6H), 2.24-2.04 (m, 3H), 1.84-1.69 (m, 3H), 1.62-1.47 (m, 3H), 1.29 (s, IH).
Primer 6
(2R,3S)-N-((3S)-9-Etil-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3 -bis(3,3,3 -trifluoropropil)sukcinamid
Primer 6 je pripremljen od Intermedijera B-8 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Odvajanje diastereomera (Berger SFC MGII, CHIRALPAK® IC, 25 X 3 cm ID, 5/um, 92/8 C02/MeOH 85 mL/min detekcija na 220 nm) dalo je Primer 6. HPLC: RT = 9.556 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254 nm); MS(ES):mlz585.2 = [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-cU) 8 7.60-7.52 (m, IH), 7.49-7.43 (m, IH), 7.38-7.16 (m, 5H), 5.37 (s, IH), 3.04-2.89 (m, IH), 2.87-2.71 (m, 2H), 2.68-2.39 (m, 2H), 2.37 (s, 3H), 2.33-2.09 (m, 3H), 1.99-1.65 (m, 4H), 1.34 (t,J=7.5 Hz, 3H). Primer 7 (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Hlorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-tritluiliopropil)sukcinamid
Primer 7 je pripremljen od Intermedijera B-3 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Odvajanje diastereomera preparativnom SFC hromatografijom (Instrument: Berger SFC MGII, Kolona: Chiral OD-H 25 x 3 cm, 5 mm; Mobilna faza: 90/10 C02/MeOH Brzina protoka: 85 mL/min; Detekcija na 220 nm.) dalo je Primer 7. HPLC: RT = 9.328 min (H2O/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 3.0xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz =591.2 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-d4) 5 7.65 (t, 7= 1.9 Hz, IH), 7.59-7.50 (m, 2H), 7.50-7.44 (m, IH), 7.44-7.37 (m, IH), 7.27-7.20 (m, 2H), 5.39 (s, IH), 2.86-2.76 (m, IH), 2.66-2.56 (m, IH), 2.56-2.46 (m, 4H), 2.33-2.14 (m, 3H), 1.95-1.74 (m, 4H).
Primer 8
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Hlorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 8 je pripremljen od Intermedijera B-3 i Intermedijera S-2 prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Odvajanje diastereomera preparativnom SFC hromatografijom (Instrument: Berger SFC MGII, Kolona: Regis Welk-0 R,R 25 x 3 cm, 5 mm; Mobilna faza: 85/15 C02/MeOH Brzina protoka: 85 mL/min; Detekcija na 220 nm.) dalo je Primer 8. HPLC: RT = 9.531 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 3.0xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254 nm); MS(ES):mlz =605.2 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-d4) 5 7.69(d, J=1.8 Hz, IH), 7.58-7.50 (m, 2H), 7.47-7.40 (m, 2H), 7.27-7.19 (m, 2H), 5.37 (s, IH), 2.78( td, J=10.3, 4.0 Hz, IH), 2.60-2.46 (m, 5H), 2.30-2.11 (m, 3H), 1.89-1.71 (m, 3H), 1.67-1.50 (m, 3H).
Primer 9
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Metilfenil)-2-okso-9-(trifluorometil)-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 9 je pripremljen od Intermedijera B-9 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Odvajanje diastereomera preparativnom SFC hromatografijom (Instrument: Berger SFC MGII, Kolona: Chiral OD-H 25 x 3 cm, 5 um; Mobilna faza: 92/8 C02/MeOH Brzina protoka: 85 mL/min; Detekcija na 220 nm.) dalo je Primer 9. HPLC: RT = 9.488 min (H2O/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 3.0xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz= 625.3[M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-aV) 8 8.03 (d,J=6.8 Hz, IH), 7.68-7.62 (m, IH), 7.53-7.45 (m, 2H), 7.40-7.30 (m, 3H), 5.47 (s, IH), 2.82(td, J=10.5, 4.0 Hz, IH), 2.60(td, J= 10.5,3.7 Hz, IH), 2.53-2.41 (m, IH), 2.38 (s, 3H), 2.32-2.14 (m, 3H), 1.99-1.71 (m, 4H).
Primer 10
(2R,3S)-N-((3 S)-9-Hloro-5-(3,5-dimetilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 10 je pripremljen od Intermedijera B-27 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Odvajanje diastereomera hiralnom SFC (Instrument: Berger SFC MGIII, Kolona: CHIRALCEL® OD-H 25 x 3 cm, 5 um; Mobilna faza: 92/18 C02/MeOH Brzina protoka: 150 mL/min; Detekcija na 220 nm) dalo je Primer 10. HPLC: RT = 10.878 min (H2O/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz= 605 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-d4) 8 7.76 (dd, J= 7.7, 1.5 Hz, IH), 7.33-7.23 (m, 2H), 7.15 (s, 3H), 5.39 (s, IH), 2.84-2.75 (m, IH), 2.59 (td, J= 10.3, 4.2 Hz, IH), 2.51-2.39 (m, IH), 2.30 (s, 6H), 2.26-2.12 (m, 3H), 1.95-1.70 (m, 4H).
Primer 11
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Metilfenil)-2-okso-9-(trifluorometil)-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 11 je pripremljen od Intermedijera B-9 i Intermedijera S-2 prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Odvajanje diastereomera preparativnom SFC hromatografijom (Instrument: Berger SFC MGII, Kolona: Chiral OD-H 25 x 3 cm, 5 um; Mobilna faza: 92/8 C02/MeOH Brzina protoka: 85 mL/min; Detekcija na 220 nm) dalo je Primer 11. HPLC: RT = 9.699 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5jun, 3.0xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254 nm); MS(ES):mlz =639.3 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-d4) 8 8.03( d, J=6.8 Hz, IH), 7.67-7.61 (m, IH), 7.52-7.44 (m, 2H), 7.41-7.31 (m, 3H), 5.45 (s, IH), 2.83-2.74 (m, IH), 2.61-2.42 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.35-2.05 (m, 3H), 1.90-1.69 (m, 3H), 1.68-1.48 (m, 3H).
Primer 12
(2R,3S)-N-((3S)-9-Izopropil-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 12 je pripremljen od Intermedijera B-10 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Odvajanje diastereomera (Instrument: Berger SFC MGIII, Kolona: Lux Cell-4, 250 x 30 mm, 5 um; Kolona Temp: 45 °C, Mobilna faza: 88/12 C02/MeOH; Detekcija na 220 nm) dalo je Primer 12. HPLC: RT = 15.924 min (MeOH/H20 sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254); MS(ES):mlz =599 [M+H<+>];<*>H NMR (400MHz, metanol-ck) 5 7.63 (dd, J = 7.7, 1.3 Hz, IH), 7.45 (s, IH), 7.37-7.24 (m, 4H), 7.19 (d, J = 1.5 Hz, IH), 5.36 (s, IH), 3.52-3.37 (m, IH), 2.86-2.74 (m, IH), 2.64-2.42 (m, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.32-2.11 (m, 3H), 1.96-1.69 (m, 4H), 1.39 (d, J = 6.8 Hz, 3H), 1.28 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
Primer 13
(2R,3S)-N-((3S)-9-Izopropil-2-okso-5-fenil-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 13 je pripremljen od Intermedijera B-ll i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Odvajanje diastereomera (Instrument: Berger SFC MGII, Kolona: CHIRALPAK® IC 250 x 30 mm, 5 um; Mobilna faza: 90/10 C02/MeOH Brzina protoka: 85 mL/min; Detekcija na 220 nm) dalo je Primer 13. HPLC: RT = 15.481 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5mm, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254 nm); MS(ES):mlz =586 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-ck) 8 7.70-7.56 (m, 3H), 7.56-7.47 (m, IH), 7.47-7.36 (m, 2H), 7.36-7.25 (m, IH), 7.25-7.12 (m, IH), 5.39 (s, IH), 3.53-3.38 (m, IH), 2.83 (m, IH), 2.70-2.41 (m, 2H), 2.37-2.05 (m, 3H), 2.00-1.69 (m, 4H), 1.40 (d,J =6.6 Hz, 3H), 1.35-1.21 (m, 3H).
Primer 14
(2R,3S)-N-((3S)-9-(Ciklopropiloksi)-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 14 je pripremljen od Intermedijera B-12 i Intermedijera S-2 prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Odvajanje diastereomera (Berger SFC MGII, Chiral AS-H 25 X 3 cm ID, 5um, 80/20 C02/MeOH 85 mL/min, detekcija na 220 nm) dalo je Primer
14. HPLC: RT = 10.064 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254 nm); MS(ES):mlz =627.20 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-d4) 5 7.65-7.56 (m, IH), 7.46-7.39 (m, IH), 7.37-7.16 (m, 4H), 7.00-6.84 (m, IH), 5.37 (s, IH), 4.06-3.91 (m, IH), 2.87-2.68 (m, IH), 2.64-2.44 (m, 2H), 2.37 (s, 3H), 2.32-2.00 (m, 3H), 1.98-1.50 (m, 4H), 1.50-1.22 (m, 2H), 1.05-0.84 (m, 4H). Primer 15 (2R,3S)-N-((3S)-9-(Ciklopropiloksi)-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4- benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 15 je pripremljen od Intermedijera B-12 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Odvajanje diastereomera (Berger SFC MGII, Chiral AS-H 25 X 3 cm ID, 5um, 80/20 C02/MeOH 85 mL/min, detekcija na 220 nm) dalo je Primer 15. HPLC: RT = 9.844 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 ia 254 nm); MS(ES):mlz =613.25 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-d4) 8 7.63-7.58 (m, IH), 7.47-7.39 (m, IH), 7.38-7.20 (m, 4H), 6.98-6.91 (m, IH), 5.40 (s, IH), 4.04-3.94 (m, IH), 2.88-2.75 (m, IH), 2.66-2.55 (m, IH), 2.55-2.39 (m, IH), 2.39-2.33 (m, 2H), 2.32-2.09 (m, 3H), 2.01-1.65 (m, 3H), 1.52-1.23 (m, 3H), 1.03-0.84 (m, 4H).
Primer 16
(2R,3S)-N-((3S)-9-(Ciklopropiloksi)-2-okso-5-fenil-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 16 je pripremljen od Intermedijera B-l3 i Intermedijera S-2 prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Odvajanje diastereomera (Berger SFC MGII, Chiral AS-H 25 X 3 cm ID, 5um, 80/20 C02/MeOH 85 mL/min, detekcija na 220 nm) dalo je Primer 16. HPLC: RT = 9.74 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz =613.2 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-d4) 8 7.64-7.55 (m, 3H), 7.55-7.49 (m, IH), 7.44 (d, J= 7.5 Hz, 2H), 7.26 (s, IH), 6.98-6.91 (m, IH), 5.38 (s, IH), 4.04-3.96 (m, IH), 2.81-2.71 (m, IH), 2.62-2.41 (m, 2H), 2.18 (s, 4H), 1.90-1.68 (m, 3H), 1.68-1.33 (m, 3H), 0.93-0.86 (m, 4H).
Primer 17
(2R,3S)-N-((3S)-9-Hloro-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 17 je pripremljen od Intermedijera B-14 i Intermedijera S-2 prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Čvrsta supstanca je prečišćena preparativnom SFC hromatografijom (Berger SFC MGII, AD-H 250 X 30 mm ID, 5cm, 75/25 CO2/IPA, 150 mL/min) da bi se obezbedilo Primer 17. HPLC: RT = 11.04 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254 nm); MS(ES):mlz =605.3 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 10.45 (s, IH), 9.45 (d,J=6.8 Hz, IH), 7.84 (dd,/= 5.9, 3.3 Hz, IH), 7.62 (br. s., IH), 7.41 (s, IH), 7.38-7.34 (m, 2H), 7.33-7.26 (m, 3H), 7.03 (s, IH), 5.21( d, J=6.8 Hz, IH), 2.79-2.70 (m, IH), 2.69-2.59 (m, IH), 2.46-2.38 (m, IH), 2.34 (s, 3H), 2.31-2.19 (m, 2H), 2.18-2.07 (m, IH), 1.65-1.53 (m, 3H), 1.49-1.41 (m, IH), 1.39-1.29 (m, 2H).
Primer 18
(2R,3S)-N-((3S)-9-Metil-2-okso-5-(3-(trifluorometil)fenil)-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 18 je pripremljen od Intermedijera B-l5 i Intermedijera S-2 prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Odvajanje diastereomera preparativnom SFC hromatografijom (Instrument: Berger SFC MGII, Kolona: Regis Welk-0 R,R 25 x 3 cm, 5 mm; Mobilna faza: 90/10 C02/MeOH Brzina protoka: 85 mL/min; Detekcija na 220 nm.) dalo je Primer 18. HPLC: RT = 9.678 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 3.0xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254 nm); MS(ES):mlz =639.4 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-oU) 8 8.01 (s, IH), 7.83 (d,J=7.7 Hz, IH), 7.77 (d,J=7.7 Hz, IH), 7.68-7.60 (m, IH), 7.57 (d,J=7.0 Hz, IH), 7.28-7.17 (m, 2H), 5.40 (s, IH), 2.79 (td,/= 10.5, 4.0 Hz, IH), 2.62-2.45 (m, 5H), 2.35-2.18 (m, 2H), 2.16-2.03 (m, IH), 1.91-1.70 (m, 3H), 1.69-1.48 (m, 3H).
Primer 19
(2R,3S)-N-((3S)-9-(Ciklopropiloksi)-2-okso-5-fenil-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 19 je pripremljen od Intermedijera B-l3 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Odvajanje diastereomera (Berger SFC MGII, Chiral AS-H 25 X 3 cm ID, 5 um, 80/20 C02/MeOH 85 mL/min, detekcija na 220 nm) dalo je Primer 19. HPLC: RT = 14.967 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254 nm); MS(ES):mlz =599.1 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-04) 8 7.61 (dd, J = 8.1, 1.3 Hz, IH), 7.59-7.54 (m, 2H), 7.54-7.47 (m, IH), 7.47-7.37 (m, 2H), 7.25 (t, J = 8.0 Hz, IH), 6.95 (dd, J = 7.9, 1.1 Hz, IH), 5.41 (s, IH), 4.00 (t, J = 4.4 Hz, IH), 2.82 (d, J = 4.0 Hz, IH), 2.61 (d, J = 3.7 Hz, IH), 2.55-2.38 (m, IH), 2.36-2.11 (m, 3H), 2.07-1.70 (m, 4H), 0.91 (d, J = 4.4 Hz, 4H).
Primer 20
(2R,3S)-N-((3S)-9-Metil-2-okso-5-(3-(trifluorometil)fenil)-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 20 je pripremljen od Intermedijera B-15 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Odvajanje diastereomera preparativnom SFC hromatografijom (Instrument: Berger SFC MGII, Kolona: FENOMENEX® Lux Celuloza 2 25 x 3 cm, 5 um; Mobilna faza: 92/8 C02/MeOH Brzina protoka: 85 mL/min; Detekcija na 220 nm.) dalo je Primer 20. HPLC: RT = 9.483 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire Cl 8 3.5um, 3.0xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz =625.1 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-04) 5 7.97 (s, IH), 7.81 (dd, /= 13.1, 7.8 Hz, 2H), 7.67-7.60 (m, IH), 7.57 (dd,J=6.8, 1.3 Hz, IH), 5.43 (s, IH), 2.83 (td,J=10.5, 4.0 Hz, IH), 2.61 (td, / = 10.3, 3.5 Hz, IH), 2.57-2.46 (m, 4H), 2.32-2.12 (m, 3H), 1.98-1.74 (m, 4H). Primer 21 (2R,3S)-N-((3S)-9-Hloro-5-(2-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 21 je pripremljen od Intermedijera B-l6 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Željeni stereoizomer je sakupljen kao drugi pik u elucionom redosledu korišćenjem SFC hromatografije (Instrument: Berger SFC MGII, Kolona:
Chiral OD-H 25 x 3 cm, 5 mm; Mobilna faza: 85/15 C02/MeOH Brzina protoka: 85 mL/min; Detekcija na 220 nm), da bi se obezbedio Primer 21. HPLC: RT = 11.1 lmin (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz= 591 [M+H<+>]; 'H NMR (500MHz, metanol-dO 8 7.73 (dd,J=8.0, 1.4 Hz, IH), 7.40-7.32 (m, IH), 7.29-7.21 (m, 3H), 7.18 (t,J=7.9 Hz, IH), 7.08 (dd,J=7.9, 1.5 Hz, IH), 5.45 (s, IH), 2.79 (td,J=10.5, 4.0 Hz, IH), 2.59 (td,J=10.4, 3.9 Hz, IH), 2.51-2.38 (m, IH), 2.30-2.08 (m, 3H), 2.04 (s, 3H), 1.94-1.67 (m, 4H). Primer 22 (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-Fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 22 je pripremljen od Intermedijera B-l7 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Odvajanje diastereomera preparativnom SFC hromatografijom (Instrument: Berger SFC MGII, Kolona: Chiral IC 25 x 3 cm, 5 um; Mobilna faza: 92/8 C02/MeOH Brzina protoka: 85 mL/min; Detekcija na 220 nm.) dalo je Primer 22. HPLC: RT = 9.016 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 3.0xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz =575.1 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-oU) 8 7.69-7.60 (m, 2H), 7.53 (dd,J=5.8, 2.5 Hz, IH), 7.24-7.18 (m, 2H), 7.17-7.09 (m, 2H), 5.36 (s, IH), 2.80 (td, /= 10.4, 4.1 Hz, IH), 2.58 (td, /= 10.5, 3.6 Hz, IH), 2.53-2.43 (m, 4H), 2.31-2.11 (m, 3H), 1.95-1.73 (m, 4H).
Primer 23
(2R,3S)-N-((3S)-9-Metil-2-okso-5-fenil-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3 -trifluoropropil)sukcinamid
Primer 23 je pripremljen od Intermedijera B-4 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. HPLC: RT = 7.843 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz= 557.4 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-cU) 8 7.63-7.57 (m, IH), 7.56-7.47 (m, IH), 7.46-7.37 (m, IH), 7.25-7.18 (m, IH), 5.39 (s, IH), 2.82 (td,J=10.5, 4.0 Hz, IH), 2.61 (td,J= 10.5, 3.5 Hz, IH), 2.56-2.40 (m, 4H), 2.36-2.07 (m, 3H), 1.99-1.70 (m, 4H).
Primer 24
(2R,3S)-N-((3S)-9-Ciklopropil-2-okso-5-fenil-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3 -bis(3,3,3 -trifluoropropil)sukcinamid
Primer 24 je pripremljen od Intermedijera B-28 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Čvrsta supstanca je prečišćena preparativnom SFC hromatografijom (Berger SFC MGII, Chiral IC 250 X 30 mm ID, 5um, 85/15 C02/MeOH, 85 mL/min) da bi se obezbedilo Primer 24. HPLC: RT = 11.56 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz =583.2 [M+H<+>];<[>H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 10.28 (s, IH), 9.45 (d,J=7.3 Hz, IH), 7.65 (br. s., IH), 7.56-7.49 (m, 3H), 7.47-7.40 (m, 2H), 7.28 (dd,J =7.7, 1.3 Hz, IH), 7.20 (t,J =7.7 Hz, IH), 7.15-7.08 (m, 2H), 5.24 (d,J=7.3 Hz, IH), 2.81 (td,J=9.8, 5.1 Hz, IH), 2.54 (br. s., IH), 2.31-2.07 (m, 4H), 1.78-1.53 (m, 5H), 1.11-0.96 (m, 2H), 0.84-0.76 (m, IH), 0.71-0.62 (m, IH).
Primer 25
(2R,3S)-N-((3S)-9-Hloro-5-(3-ciklopropilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 25 je pripremljen od Intermedijera B-18 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Odvajanje diastereomera (Instrument: Berger SFC MGII, Chiral IC 25 X 3 cm ID, 5um, 90/10 C02/MeOH, 85 mL/min, detekcija na 220 nm) dalo je Primer 25. HPLC: RT = 8.81 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz =617.0 [M+H<+>];
'H NMR (400MHz, metanol-ck) 8 7.88-7.70 (m, IH), 7.45-7.11 (m, 6H), 5.46-5.31 (m, IH), 2.82 (td,J= 10.4, 4.1 Hz, IH), 2.69-2.40 (m, 2H), 2.36-2.06 (m, 3H), 2.00-1.58 (m, 5H), 1.06-0.94 (m, 2H), 0.80-0.62 (m, 2H).
Primer 26
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Hlorofenil)-9-metoksi-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 26 je pripremljen od Intermedijera B-19 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Čvrsta supstanca je prečišćena preparativnom SFC hromatografijom (Instrument: Berger SFC MGII, AS-H 250 X 30 mm ID, 5um, 82/18 C02/MeOH, 85 mL/min) da bi se obezbedio Primer 26. HPLC: RT = 9.32 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz =607 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-04) 8 10.13 (s, IH), 9.51 (d,J=7.3 Hz, IH), 7.68-7.59 (m, 3H), 7.52-7.45 (m, IH), 7.42-7.32 (m, 2H), 7.30-7.24 (m, IH), 7.13 (s, IH), 6.92 (dd,J=7.9, 1.1 Hz, IH), 5.25 (d,J=7.3 Hz, IH), 3.94 (s, 3H), 2.85-2.75 (m, IH), 2.63-2.54 (m, IH), 2.31-2.09 (m, 4H), 1.75-1.52 (m, 4H).
Primer 27
(2R,3S)-N-((3S)-5-(4-Hlorofenil)-9-metoksi-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 27 je pripremljen od Intermedijera B-20 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Čvrsta supstanca je prečišćena preparativnom SFC hromatografijom (Instrument: Berger SFC MGII, AS-H 250 X 30 mm ID, 5um, 82/18 C02/MeOH, 85 mL/min) da bi se obezbedio Primer 27. HPLC: RT = 9.44 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz= 607 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 10.12 (s, IH), 9.51 (d, /= 7.3 Hz, IH), 7.66 (br. s., IH), 7.58-7.50 (m, 4H), 7.36-7.31 (m, IH), 7.30-7.22 (m, IH), 7.14(s, IH), 6.90 (dd,J=7.8, 1.2 Hz, IH), 5.24 (d,J=7.3 Hz, IH), 3.93 (s, 3H), 2.82-2.74 (m, IH), 2.64-2.55 (m, IH), 2.30-2.08 (m, 4H), 1.76-1.51 (m, 4H).
Primer 28
(2R,3S)-N-((3S)-9-Hloro-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 28 je pripremljen od Intermedijera B-14 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Čvrsta supstanca je prečišćena preparativnom SFC hromatografijom (Instrument: Berger SFC MGII, IC-H 250 X 30 mm ID, 5um, 92/8 C02/MeOH 85 mL/min) da bi se obezbedio Primer 28. HPLC: RT = 9.36 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz =591 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 10.48 (br. s., IH), 9.40 (br. s., IH), 7.87-7.60 (m, 2H), 7.47-7.04 (m, 5H), 5.15 (br. s., IH), 4.15 (dd,J=5.7, 3.3 Hz, IH), 2.81 (td, J= 9.9, 4.8 Hz, IH), 2.40-2.02 (m, 5H), 1.83-1.53 (m, 4H), 1.45-1.18 (m, 3H), 0.98-0.79 (m, 2H).
Primer 29
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Metilfenil)-9-metoksi-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 29 je pripremljen od Intermedijera B-21 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge Cl8, 19 x 250 mm, 5-um čestice; Zaštitna kolona: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, 5-um čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitrikvoda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna fazaB:95:5 acetonitrikvoda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 15-100% B tokom 25 minuta, potom 5-minutno zadržavanje na 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene centrifugalnim uparavanjem. Materijal je dodatno prečišćen preparativnom HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge C18, 19 x 250 mm, 5-um čestice; Zaštitna kolona: Waters XBridge C18,19 x 10 mm, 5-um čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitrikvoda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B:95:5 acetonitrikvoda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 20-55%> B tokom 40 minuta, potom 15-minutno zadržavanje na 55% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene centrifugalnim uparavanjem. Materijal je dodatno prečišćen preparativnom HPLC uz sledeće uslove: Kolona: Waters XBridge Cl8, 19 x 100 mm, 5-um čestice; Zaštitna kolona: Waters XBridge C18, 19 x 10 mm, 5-um čestice; Mobilna faza A: 5:95 acetonitrikvoda sa 10-mM amonijum acetatom; Mobilna faza B:95:5 acetonitrikvoda sa 10-mM amonijum acetatom; Gradijent: 5-100% B tokom 10 minuta, potom 5-minutno zadržavanje 100% B; Protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i osušene centrifugalnim uparavanjem da bi se obezbedio Primer 29. HPLC: RT = 2.38 min (H20/CH3CN sa TFA, SUPELCO® Ascentis Express C18, 4.6 x 50 mm, 2.7um, gradijent = 4 min, talasna dužina = 220); MS(ES):mlz =586 [M+H<+>]; 'H NMR (500MHz, DMSO-de) 8 10.12 (br. s., IH), 9.53 (d,J=7.4 Hz, IH), 7.69 (d, / = 1.5 Hz, IH), 7.43-7.10 (m, 7H), 6.87 (dd,J=7.9, 1.0 Hz, IH), 5.24 (d,J=7.4Hz, IH), 3.93 (s, 3H), 2.80 (td,J=10.0, 4.7 Hz, IH), 2.63-2.54 (m, IH), 2.33 (s, 3H), 2.30-2.09 (m, 3H), 1.78-1.53 (m, 4H).
Primer 30
(2R,3 S)-N-((3 S)-5 -(4-(Hidroksimetil)fenil)-2-okso-2,3 -dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 30 je pripremljen od Intermedijera B-5 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Čvrsta supstanca je prečišćena preparativnom SFC hromatografijom (Instrument: Berger SFC MGII, Lux Celuloza-2 250 X 30 mm ID, 5um, 85/15 C02/MeOH, 85 mL/min) da bi se obezbedio Primer 30. HPLC: RT = 6.91 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz =573 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 10.84 (s, IH), 9.49(d, J=7.3 Hz, IH), 7.70-7.60 (m, 2H), 7.51-7.43 (m, 2H), 7.42-7.36 (m, 2H), 7.36-7.29 (m, 2H), 7.29-7.22 (m, IH), 7.14 (br. s., IH), 5.30 (t,J=5.7 Hz, IH), 5.25 (d, /= 7.5 Hz, IH), 4.57 (d,J=5.7 Hz, 2H), 2.88-2.73 (m, IH), 2.64-2.54 (m, 2H), 2.31-2.00 (m, 3H), 1.85-1.43 (m, 4H).
Primer 31
(2R,3S)-N-((3S)-5-(2-Metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 31 je pripremljen od Intermedijera B-29 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Čvrsta supstanca je prečišćena preparativnom SFC hromatografijom (Instrument: Berger SFC MGII, Lux Celuloza-2 250 X 30 mm ID, 5 um, 90/10 C02/MeOH, 85 mL/min) da bi se obezbedio Primer 31. HPLC: RT = 8.68 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz =557 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 10.94 (br. s., IH), 9.47 (d,J=7.5 Hz, IH), 7.69-7.55 (m, 2H), 7.41-7.21 (m, 4H), 7.20-7.11 (m, 3H), 7.05 (dd, /= 7.9, 1.3 Hz, IH), 5.29 (d, /= 7.5 Hz, IH), 2.78 (td,J=10.0, 4.7 Hz, IH), 2.31-2.07 (m, 3H), 2.02-1.94 (m, 3H), 1.76-1.51 (m, 4H).
Primer 32
(2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bi s(3,3,3 -tri fluoropropi 1) sukci n am i d
Primer 32 je pripremljen od Intermedijera B-22 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Ova čvrsta supstanca je prečišćena preparativnom SFC hromatografijom (Instrument: Berger SFC MGII, FENOMENEX® Lux Celuloza-2 250 X 30 mm ID, 5um, 90/10 C02/MeOH, 85 mL/min) da bi se obezbedio Primer 32. HPLC: RT = 9.35 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent =15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz =557 [M+H<+>];<>>H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 10.84 (s, IH), 9.50 (d,/=7.5 Hz, IH), 7.69-7.61 (m, 2H), 7.40-7.18 (m, 7H), 7.14 (br. s., IH), 5.26
(d,J=7.3 Hz, IH), 2.87-2.75 (m, IH), 2.55 (d,J=2.0 Hz, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.30-2.06 (m, 3H), 1.80-1.50 (m, 4H).
Primer 33
(2R,3S)-N-((3S)-9-Metoksi-2-okso-5-(5-(trifluorometil)-2-piridinil)-2,3-dihidro-lH-1,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-tritluiliopropil)sukcinamid
Primer 33 je pripremljen od Intermedijera B-24 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Nakon odvajanja diastereomera (Instrument: Berger SFC MGII, AS-H 250 X 46 mm ID, 5 um, 80/20 C02/MeOH, 85 mL/min), dobijen je Primer 33. HPLC: RT = 9.364 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz =642 [M+H<+>]; 'H NMR (400 MHz, DMSO-de) 8 ppm 10.19 (1 H, s), 9.58 (1 H,d, J=7.5 Hz), 8.98 (1 H, d, /= 0.9 Hz), 8.40 (1 H, dd,J=8.4, 2.0 Hz), 8.15 (1 H, d,J=8.4 Hz), 7.65 (1 H, br. s.), 7.30 (1 H, dd, /= 8.4, 1.1 Hz), 7.20 (1 H, t,J=8.0 Hz), 7.14 (1 H, br. s.), 6.93 (1 H, dd,J=7.9, 1.1 Hz), 5.35 (1 H, d,J =7.3 Hz), 3.92 (3 H, s), 2.74-2.85 (1 H, m), 2.55-2.65 (1 H, m), 2.05-2.31 (4 H, m), 1.47-1.77 (4 H, m).
Primer 34
(2R,3S)-N-((3S)-5-(5-Hloro-2-piridinil)-9-metoksi-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 34 je pripremljen od Intermedijera B-26 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Ova čvrsta supstanca je prečišćena preparativnom SFC hromatografijom (Instrument: Berger SFC MGII, AS-H 250 X 46 mm ID, 5 um, 75/25 C02/MeOH, 85 mL/min) da bi se obezbedio Primer 34. HPLC: RT = 8.43 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz= 587 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 10.14 (s, IH), 9.55 (d,J=7.5 Hz, IH), 8.68-8.58 (m, IH), 8.11 (dd,J=8.5, 2.5 Hz, IH), 7.99 (d,J=8.6 Hz, IH), 7.66 (br. s., IH), 7.33-7.26 (m, IH), 7.21 (t,J=8.0 Hz, IH), 7.14 (br. s., IH), 6.93 (dd, J= 7.9, 1.1 Hz, IH), 5.30 (d,J=7.3 Hz, IH), 3.92 (s, 3H), 2.84-2.72 (m, IH), 2.65-2.56 (m, IH), 2.31-2.04 (m, 3H), 1.76-1.47 (m, 4H).
Primer 35
(2R,3S)-N-((3S)-5-(4-Metoksifenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3 -bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Primer 35 je pripremljen od Intermedijera B-25 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Diastereomeri su odvojeni Hiralnom HPLC (CHIRALPAK® AD 5cmx50cm lOuM izokratski 30% /-propanol: heptan 100 ml/min) da bi se obezbedio Primer 35. HPLC: RT = 8.68 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz =573 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 10.81 (d,J=6.6 Hz, IH), 9.48 (d,/=5.5 Hz, IH), 7.64 (t,J= 6.4 Hz, IH), 7.46 (dd,J=8.7, 4.1 Hz, 2H), 7.39-7.22 (m, 3H), 7.00 (dd,J=8.8, 3.3 Hz, 2H), 5.22 (dd, / = 9.4, 7.6 Hz, IH), 3.82 (s, 3H), 2.97-2.84 (m, IH), 2.37-2.08 (m, 4H), 1.85-1.55 (m, 4H), 1.43-1.32 (m, 3H). Primer 36 (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-Metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3 -trifluoropropil)sukcinamid Primer 36 je pripremljen od Intermedijera B-23 i Intermedijera S-l prema opštim procedurama koje su prethodno opisane. Diastereomeri su odvojeni Prep Hiralnom HPLC (CHIRALPAK® AD 5cmx50cm lOuM izokratski 20% /-propanokheptan lOOml/min) da bi se obezbedio Primer 36. HPLC: RT = 9.32 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire Cl8 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz =557 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, DMSO-de) 5 10.80 (s, IH), 9.46( d, J=7.5 Hz, IH), 7.70-7.57 (m, 2H), 7.39(d, J=8.1 Hz, 2H), 7.35-7.19 (m, 5H), 7.12 (s, IH), 5.23( d, J =7.3 Hz, IH), 2.84-2.74 (m, IH), 2.36 (s, 3H), 2.27-2.07 (m, 3H), 1.77-1.52 (m, 5H). Primer 37 (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Fluorofenil)-9-(hidroksimetil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid Intermedijer 37A: N-Metoksi-N,3-dimetil-2-nitrobenzamid
U suspenziju 3-metil-2-nitrobenzoeve kiseline (5 g, 27.6 mmol) u DCM (50 mL) je dodat oksalil hlorid (4.83 mL, 55.2 mmol) praćeno sa 2 kapi DMF. Smešaje mešana na sobnoj temperaturi tokom 1.5 h potom koncentrovana i azeotropirana sa DCM/toluenom rezultujući belom čvrstom supstancom koja je sušena pod visokim vakuumom preko noći. U smešu N,0-dimetilhidroksilamina, HC1 (5.38 g, 55.2 mmol) i TEA (11.54 mL, 83 mmol) u DCM (80 mL) na 0 °C polako je dodavan rastvor prethodno pomenutog hlorida kiseline u DCM (20 mL). Reakcija je potom mešana 30 min, i potom kvenčovana sa vodom i ekstrahovana DCM. Organski sloj je odvojen, ispran IN HC1, zasićenim NaHC03i slanim rastvorom i potom osušen i koncentrovan kako bi dao Intermedijer 37A (6.05 g, 98%). HPLC: RT = 1.27 min (CHROMOLITH® SpeedROD kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol tokom 4 minuta koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), 'H NMR (400MHz, hloroform-d) 8 7.52-7.45 (m, IH), 7.42 - 7.35 (m, 2H), 3.48 (br. s., 3H), 3.33 (s, 3H), 2.51 (s, 3H).
Intermedijer 37B: 3-(Bromometil)-N-metoksi-N-metil-2-nitrobenzamid
Smeša Intermedijera 37A (5.5 g, 24.53 mmol), NBS (5.24 g, 29.4 mmol) i benzoil peroksida (0.594 g, 2.453 mmol) u CCU (80 mL) je pročišćena azotom i potom zagrevana na 80 °C tokom 4.5h. Reakciona smešaje ohlađena do sobne temperature i potom kvenčovana sa vodom. Smešaje ekstrahovana DCM i kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim NaHC03i slanim rastvorom i potom osušeni (Na2s04), proceđeni i koncentrovani do suvog. Sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom (Si0280 g kolona, EtOAc/heksan = 0 - 100%) da bi se obezbedio Intermedijer 37B.
Intermedijer 37C: 3-(Hidroksimetil)-N-metoksi-N-metil-2-nitrobenzamid
Smeša Intermedijera 37B (3.7 g, 4.88 mmol) i kalcijum karbonata (2.93 g, 29.3 mmol) u dioksanu (25 mL)/vodi (25 mL) mešana je na refluksu tokom 5h. Smešaje potom ohlađena do sobne temperature, čvrsta supstanca je uklonjena filtracijom i filtrat je ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni (MgS04) proceđeni i koncentrovani do suvog. Sirovi ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (Si0280 g kolona, EtOAc/heksan = 20-100%) da bi se obezbedio Intermedijer 37C (1.079 g, 78%). HPLC: RT = 0.75 min (CHROMOLITH® SpeedROD kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol tokom 4 minuta koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS(ES):mlz= 241.0 [M+H+].
Intermedij er 3 7D: 3-(((terc-Butildimetilsilil)oksi)metil)-N-metoksi-N-metil-2-nitrobenzamid
U rastvor Intermedijera 37C (1.079 g, 4.49 mmol) i TBDMS-C1 (1.016 g, 6.74 mmol) u DMF (4 mL) je dodat imidazol (0.612 g, 8.98 mmol). Smešaje mešana na sobnoj temperaturi tokom lh. Voda je dodata, i smešaje ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani ekstrakti su isprani 10%) LiCl i slanim rastvorom, osušeni MgS04proceđeni i koncentrovani do suvog. Sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom (Si02, 40 g kolona, EtOAc/heksan = 0-30%>) da bi se obezbedio Intermedijer 37D (1.25 g, 79%). HPLC: RT = 3.05 min (CHROMOLITH® SpeedROD kolona 4.6 x 50 mm, 10-90%> vodeni metanol tokom 4 minuta koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS(ES):mlz= 355.0 [M+H<+>]. 'H NMR (400MHz, hloroform-d) 8 7.90( d, J=7.7 Hz, IH), 7.70 - 7.62 (m, IH), 7.47 (d,J=1. 1 Hz, IH), 4.98 (s, 2H), 3.46 (br. s., 3H), 3.36 (br. s., 3H), 0.98 (s, 9H), 0.15 (s, 6H).
Intermedijer 37E: 2-Amino-3-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-N-metoksi-N-metilbenzamid
Smeša Intermedijera 37D (1.25 g, 3.53 mmol) i 10% Pd/C (200 mg, 0.188 mmol) u EtOAc (50 mL) je pročišćena vodonikom. Smešaje potom mešana pod atmosferom vodonika tokom 1.5h. Suspenzija je proceđena, i filtrat je koncentrovan do suvog. Sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom (SiCh24g kolona, EtOAc/heksan = 0-40%) da bi se obezbedio Intermedijer 37E (939 mg, 82%). HPLC: RT = 2.986 min (CHROMOLITH® SpeedROD kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol tokom 4 minuta koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS(ES):mlz =325.2 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, hloroform-d) 5 7.32 (dd,J=7.7, 1.5 Hz, IH), 7.11 (dd,J=7.5, 1.5 Hz, IH), 6.68 - 6.62 (m, IH), 5.21 (br. s., 2H), 4.71 (s, 2H), 3.61 (s, 3H), 3.36 (s, 3H), 0.92 (s, 9H), 0.09 (s, 6H).
Intermedijer 3 7F: (2-Amino-3-(((etrc-butildimetilsilil)oksi)metil)fenil)(3-fluorofenil)metanon
U rastvor 1-fluoro-3-jodobenzena (0.782 mL, 6.66 mmol) u THF (6 mL) na -78 °C je dodat nBuLi (2.5M u heksanu, 2.66 mL, 6.66 mmol) u kapima. Nakon što je adicija završena, smešaje mešana na -78 °C tokom 40 min. Potom je rastvor Intermedijera 37E (540 mg, 1.664 mmol) u THF (2.5 mL) dodat u kapima. Smešaje potom mešana na -78 °C tokom 2h. Dobijena mešavina je sipana u led sa HC1 (7.49 mL, 7.49 mmol) i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani ekstrakti su isprani slanim rastvorom, osušeni i koncentrovani. Sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom (Si0212 g kolona, EtOAc/heksan = 0-15%) da bi se obezbedio Intermedijer 37F (271 mg, 45%) HPLC: RT = 3.70 min (CHROMOLITH® SpeedROD kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol tokom 4 minuta koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS(ES):mlz= 360.4 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, hloroform-d) d 7.49 - 7.33 (m, 4H), 7.27 - 7.20 (m, 2H), 6.84 (br. s., 2H), 6.57 (t, J= 7.6 Hz, IH), 4.77 (s, 2H), 0.95 (s, 9H), 0.13 (s, 6H).
Intermedijer 37G: (Benzil (9-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-5-(3-fluorofenil)-2-okso-2,3-dihidro- lH-benzo[e] [1,4]diazepin-3-il)karbamat
U rastvor 2-(lH-benzo[d][l,2,3]triazol-l-il)-2-(((benziloksi)karbonil)amino)sirćetne kiseline (608 mg, 1.864 mmol) u THF (7 mL) ohlađen na 0 °C dodat je oksalil hlorid (0.157 mL, 1.789 mmol), a potom DMF (0.02 mL). Dobijena mešavina mešana je na 0 °C tokom 1.5 h. Potom su rastvor Intermedijera 37F (268 mg, 0.745 mmol) i 4-metilmorfolina (0.246 mL, 2.236 mmol) u THF (3 mL) polako dodati. Nakon dodatka, reakciona smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana Ih. Potom je dodat 7N amonijak u MeOH (4 mL, 28.0 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dobijena mešavina je koncentrovana i ostatak je tretiran sa EtOAc i vodom. Organski sloj je odvojen, i vodeni sloj je ekstrahovana EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su isprani IN NaOH, zasićenim NaHC03i slanim rastvorom i potom osušeni MgS04proceđeni i koncentrovani. Talog je potom rastvoren u sirćetnoj kiselini (1.5 mL, 26.2 mmol), i tretiran sa amonijum acetatom (287 mg, 3.73 mmol). Smeša je mešana na 40 °C tokom 2h. Reakciona smeša je potom tretirana sa vodom i ekstrahovana EtOAc. Kombinovani ekstrakti su isprani vodom, zasićenim NaHC03, i slanim rastvorom i potom osušeni i koncentrovani. Sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom (Si02, 12g kolona, EtOAc/heksan = 0-40%) da bi se obezbedio Intermedijer 37G (256 mg, 63%). HPLC: RT = 3.61 min (CHROMOLITH® SpeedROD kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol tokom 4 minuta koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS(ES):mlz= 548.5 [M+H<+>].
Intermedijer 37H: 3-Amino-5-(3-fluorofenil)-9-(hidroksimetil)-lH-benzo[e] [ 1,4]diazepin-2(3H)-on
Smeša Intermedijera 37G (255 mg, 0.466 mmol) u 33% HBr u HOAc (1149 ul, 6.98 mmol) mešana je na sobnoj temperaturi tokom lh. Etar je dodat i dobijeni čvrsti precipitat je sakupljen filtracijom i ispran sa etrom. Čvrsta supstanca je rastvorena u MeOH (10 mL) i K2CO3(1.3g) je dodat. Smešaje mešana 40 min. i potom proceđena i koncentrovana do suvog da bi se obezbedio Intermedijer 37H (133 mg). HPLC: RT =1.102 min (CHROMOLITH® SpeedROD kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol tokom 4 minuta koji sadrži 0.1 % TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS(ES):mlz= 300.2 [M+H<+>].
Intermedijer 371: (2S,3R)-etrc-Butil 6,6,6-trifluoro-3-((5-(3-fluorofenil)-9-(hidroksimetil)-2-okso-2,3 -dihidro-1 H-benzo[e] [ 1,4]diazepin-3-il)karbamoil)-2-(3,3,3 - trifluoropropil)heksanoat
U rastvor Intermedijera 37H (130 mg, 0.434 mmol), Intermedijera S-l (159 mg, 0.434 mmol) i TBTU (167 mg, 0.521 mmol) u DMF (1.5 mL) je dodat TEA (0.133 mL, 0.956 mmol). Smešaje mešana na sobnoj temperaturi tokom 45 min. Voda je dodata and čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, isprana vodom, i osušena. Dobijena čvrsta supstanca je prečišćena fleš hromatografijom (Si02,12g kolona, EtOAc/heksan = 0-80%>) da bi se obezbedio Intermedijer 371 (66 mg 23%). HPLC: RT = 3.27 min (CHROMOLITH® SpeedROD kolona 4.6 x 50 mm, 10-90%o vodeni metanol tokom 4 minuta koji sadrži 0.1%> TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS(ES):mlz= 648.3 [M+H<+>].
Intermedijer 37J: (2S,3R)-6,6,6-Trifluoro-3-((5-(3-fluorofenil)-9-(hidroksimetil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-benzo[e][l,4]diazepin-3-il)karbamoil)-2-(3,3,3-trifluoropropil) heksanska kiselina
U rastvor Intermedijera 371 (65 mg, 0.100 mmol) u DCM (2 mL) je dodat TFA (2 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h potom koncentrovana do suvog. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom reverzno-faznom HPLC (vodeni MeOH, koji sadrži 0.1% TFA). Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane do suvog da bi se obezbedio Intermedijer 37J (30 mg, 51%). HPLC: RT = 2.680 min (CHROMOLITH® SpeedROD kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol tokom 4 minuta koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS(ES):mlz =592.3 [M+H<+>].
Primer 37:
U smešu Intermedijera 37J (30 mg, 0.051 mmol), EDC (34.0 mg, 0.178 mmol) i HOBT (27.2 mg, 0.178 mmol) u THF (2 mL) je dodat 2M amonijak u IPA (0.507 mL, 1.014 mmol). Smešaje mešana na sobnoj temperaturi preko noći i potom je koncentrovana. Voda je dodata u talog i smešaje ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su isprani zasićenim NaHC03i slanim rastvorom, i potom osušeni (MgSO/t) i koncentrovani da bi se obezbedilo 30 mg sirovog proizvoda kao smeša dva diastereomera. Diastereomeri su razdvojeni hiralnom SFC (Berger SFC MGII, Chiral ID 25 X 3 cm ID, 5um, 85/15 C02/MeOH, 85 mL/min, detekcija na 220 nm) da bi se obezbedio Primer 37 (10 mg, 35%). HPLC: RT = 7.44 min (H20/CH3CN sa TFA, Xbridge Fenil 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz= 591.2 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, metanol-ck) 8 7.68 - 7.62 (m, IH), 7.46 - 7.39 (m, IH), 7.38 - 7.20 (m, 5H), 5.43 (s, IH), 4.94 - 4.88 (m, IH), 4.80 - 4.73 (m, IH), 2.80 (td,J=10.3, 4.0 Hz, IH), 2.59 (td,J=10.5, 3.7 Hz, IH), 2.54 - 2.39 (m, IH), 2.31-2.10 (m, 3H), 1.96 - 1.70 (m, 4H).
Primer 38
((3S)-3-(((2R,3S)-3-Karbamoil-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-1 -il)metil L-valinat
Intermedijer 38A: (S)-Hlorometil 2-((/erc-butoksikarbonil)amino)-3-metilbutanoat
o
U energično mešanu smešu (S)-2-((/erc-butoksikarbonil)amino)-3-metilbutanske kiseline (4g, 18.41mmol), tetrabutilamonijum hidrogen sulfata (1.25g, 3.68mmol), i Na2C03(9.76g, 92mmol) u DCM 80 (mL) i vode (80 mL), ohlađenu u ledenom/vodenom kupatilu, polako je dodavan hlorometil hlorosulfat (3.8 mL, 36.8 mmol) tokom 4 min. Nakon mešanja u ledenom/vodenom kupatilu tokom 30 min, ledeno kupatilo je uklonjeno i reakciona smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi. Nakon mešanja 16 h na sobnoj temperaturi, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa DCM. Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa DCM i kombinovani organski slojevi su osušeni preko MgSCU, proceđeni i koncentrovani da bi se obezbedio Intermedijer 38A (5.45g). Intermedijer 38B: (S)-((S)-3-((2R,3S)-3-Karbamoil-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanamido)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-benzo[e][l,4]diazepin-l-il)metil2-(( terc-butoksikarbonil)amino)-3-metilbutanoat
U mešanu smešu Primera 1 (400 mg, 0.696 mmol) i K2CO3(289 mg, 2.089 mmol) u DMF (4 mL) polako je dodavan Intermedijer 38A (555 mg, 2.089 mmol) u DMF (3 mL). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 22 h, reakciona smešaje razblažena sa EtOAc i isprana 3 puta sa 10% vodenim rastvorom LiCl. Organski sloj je osušen preko MgS04, proceđen i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom (Teledvne ISCO CombiFlash 20% to 70% rastvarača A/B = heksan/aceton, REDISEP® Si02120 g, detekcija na 254 nm, i praćenje na 220 nm) da bi se obezbedio Intermedijer 38B (213.3 mg, 38.1%). HPLC: RT = 3.428 min (CHROMOLITH® SpeedROD kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol tokom 4 minuta koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS(ES):mlz= 804.5 [M+H<+>].
Primer 38:
U mešanu smešu Intermedijera 38B (213.3 mg, 0.265 mmol) u DCM (6 mL) je dodat 4N HC1 u dioksanu (0.663 mL, 2.65 mmol) na sobnoj temperaturi. Nakon mešanja 1.5h, reakciona smešaje koncentrovana i sirovi materijal je prečišćen preparativnom HPLC (YMC C18, 30x100, 10-90%o vodeni metanol tokom 12 minuta koji sadrži 0.1% TFA, 30 mL/min, detekcija i praćenje na 220 nM). Frakcije koje sadrže proizvode su kombinovane potom koncentrovane liofilizacijom da bi se obezbedio Primer 38 (154mg, 70.3%) kao TFA so. HPLC: RT = 10.854min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz= 704.6[M+H<+>]; 'H NMR (500MHz, DMSO-d6) 5 9.46 (d,J=6.7 Hz, IH), 8.14 (br. s., 3H), 7.72-7.62 (m, 2H), 7.57-7.50 (m, IH), 7.47-7.37 (m, 4H), 7.27 (d, 7=7.8 Hz, IH), 7.13 (s, IH), 6.15 (d,J=10.3 Hz, IH), 5.50 (d,J= 10.3 Hz, IH), 5.38 (d,J= 6. 1Hz, IH), 2.83 (td,J=10.2, 4.3 Hz, IH), 2.45 (s, 4H), 2.29-2.18 (m, IH), 2.17-2.06 (m, 2H), 1.81-1.72 (m, IH), 1.72-1.48 (m, 4H), 0.66 (d,J= 6. 9Hz, 3H), 0.62 (d, 7=6.9 Hz, 3H).
Primer 39
((3S)-3-(((2R,3S)-3-Karbamoil-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-1 -il)metil L-alaninat
Intermedijer 39A: (S)-Hlorometil 2-((/erc-butoksikarbonil)amino)propanoat
U energično mešanu smešu (S)-2-((efrc-butoksikarbonil)amino) propanske kiseline (lg, 5.29mmol), tetrabutilamonijum hidrogen sulfata (0.359g, 1.057mmol), i Na2C03(2.80g, 26.4mmol) u DCM 20 (mL) i vodi (20 mL), koji su ohlađeni u ledenom/vodenom kupatilo, polako je dodavan hlorometil hlorosulfat (1.09 mL, 10.57 mmol) tokom perioda od 4 minuta. Nakon mešanja u ledenom/vodenom kupatilu tokom 30 min, ledeno kupatilo je uklonjeno i reakciona smeša ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi. Nakon mešanja 16 h na sobnoj temperaturi reakciona smešaje razblažena vodom i ekstrahovana DCM. Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan DCM i kombinovani organski slojevi su osušeni preko MgSCU, proceđeni i koncentrovani. Sirovi materijal (1.64 g) je korišćen bez daljeg prečišćavanja.
Primer 39:
Primer 39 je pripremljen od Primera 1 i Intermedijera 39A prema opštoj proceduri prikazanoj za primer 38. HPLC: RT = 7.443min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz= 676 [M+H<+>];
'H NMR (500MHz, DMSO-de) 5 9.45 (d,J=6.7 Hz, IH), 8.17 (br. s., 3H), 7.72-7.63 (m, 2H), 7.58-7.49 (m, IH), 7.48-7.36 (m, 4H), 7.25(d, J=6.9 Hz, IH), 7.14 (br. s., IH), 6.15 (d,J =10.3 Hz, IH), 5.50 (d,J=10.3 Hz, IH), 5.38 (d,J=6.7 Hz, IH), 2.83 (td,J=10.1, 4.2 Hz, IH), 2.45 (s, 3H), 2.29-2.06 (m, 3H), 1.77-1.48 (m, 4H), 0.94 (d,J=7.2 Hz, 3H).
Primer 40
S-(((2S,3R)-6,6,6-Trilfuoro-3-(((3S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)karbamoil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-L-cistein intermedijer 40A: (2R,2'R)-Di-ferobuti1 3,3'-disulfanediilbis(2-((ferc-butoksikarbonil)amino)propanoat)
Suspenzija (2R,2'R)-di-ferc-butil 3,3'-disulfanedilbis(2-aminopropanoat) dihidrohlorida (1.9 g, 4.47 mmol) u DMF (50 mL) na sobnoj temperaturi tretirana je sa TEA (1.556 mL, 11.17 mmol), a potom di-terc-butil dikarbonatom (2.437 g, 11.17 mmol). Smešaje mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je sipana u EtOAc (100 mL) i isprana 0.1N HC1 (2 x 100 mL), praćeno zasićenim vodenim NaHC03(100 mL) i slanim rastvorom (100 mL). Organski sloj je osušen (Na2s04) proceđen i koncentrovan do suvog. Sirovi proizvod je rastvoren u maloj količini DCM i prečišćen fleš hromatografijom (Si02, 0% etil acetat/heksani do 20% etil acetat/heksani, 120 g kolona, 30 min gradijent) da bi se obezbedio Intermedijer 40A (1.65 g, 66.8%). 'H NMR (400MHz, hloroform-d) 8 5.34 (d,/ =5.9 Hz, 2H), 4.46 (d, /= 5.9 Hz, 2H), 3.27-3.07 (m, 4H), 1.49 (s, 18H), 1.46 (s, 18H).
Intermedijer 40B: (R)-terc-Butil 2-((terc-butoksikarbonil)amino)-3-(((2S,3R)-6,6,6-trifluoro-3-(((S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-benzo[e][l,4]diazepin-3-il)karbamoil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanamido)tio)propanoate
Blaga suspenzija srebro nitrata (118 mg, 0.696 mmol) u metanolu (18 mL) tretirana je sa Intermedijerom 40A (385 mg, 0.696 mmol). Reakciona smešaje mešana 30 min i potom su dodati Primer 1 (100 mg, 0.174 mmol) i TEA (97 ul, 0.696 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noći potom koncentrovana do suvog. Sirovi proizvod je rastvoren u maloj količini DCM i prečišćen fleš hromatografijom (SiCh, 0% etil acetat/heksani do 100% etil acetat/heksani, 24 g kolona, 30 min gradijent) da bi se obezbedio Intermedijer 40B (78 mg, 52.7%). HPLC TR = 3.443 min (CHROMOLITH® SpeedROD, 5.0um, 4.6mm x 50mm, 10-90%o vodeni metanol koji sadrži 0.1%> TFA, 4 min gradijent, praćeno na 220 nm). [M+H+] = 850.5.
Primer 40:
Rastvor Intermedijera 40B (78 mg, 0.092 mmol) u DCM (5 mL) na 0 °C tretiranje sa TFA (0.5 mL, 6.49 mmol) i polako zagrevan do sobne temperature. Reakciona smešaje mešana na sobnoj temperaturi preko noći potom koncentrovana do suvog. Sirovi proizvod reakcije je rastvoren u maloj količini MeOH i prečišćen reverzno faznom HPLC (YMC ODS Cl8 5 um 30 x lOOmm, 10-90%) vodeni metanol koji sadrži 0.1%> TFA, 15 mL/min, 30 min gradijent, praćeno na 220 nm). Proizvod (retenciono vreme = 24.980 minuta) je izolovan i liofilizovan do suvog. Dobijena čvrsta supstanca je suspendovana u vodi i tretirana sa 0.1N HC1 (1 mL) na 0 °C. Rastvor je ponovo liofilizovan do suvog da bi se obezbedio Primer 40 kao HC1 so (29 mg, 41.5%). HPLC RT: = 9.328 min (Sunfire C18 3.5um, 3 x 150 mm, 10% 95/5 voda/ACN sa 0.05%>TFA to 100% 5/95 voda/ACN sa 0.05% TFA, 15 minutni gradijent, Brzina protoka = 0.5 mL/min, praćeno na 220 i 254 nm). MS(ES):mlz =694.4 [M+H<+>]. 'H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 10.23 (s, IH), 9.65 (s, IH), 9.52 (d,J=7.5 Hz, IH), 8.44 (br. s., 2H), 7.55 (dd,J= 6.6, 1.5 Hz, IH), 7.51-7.44 (m, IH), 7.42-7.33 (m, 2H), 7.28-7.23 (m, IH), 7.22-7.17 (m, 2H), 5.25( d, J=7.3 Hz, IH), 4.02-3.94 (m, IH), 3.27(dd, J=15.1, 4.1 Hz, IH), 3.02 (dd,/ = 15.1, 8.9 Hz, IH), 2.92 (td,/= 10.6, 3.3 Hz, IH), 2.74-2.65 (m, IH), 2.28-2.11 (m, 4H), 1.85-1.74 (m, IH), 1.73-1.64 (m, IH), 1.64-1.54 (m, IH), 1.48-1.36 (m, IH).
Primer 41
terc-Butil S-(((2S,3R)-6,6,6-trifluoro-3-(((3S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)karbamoil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-L-cisteinat
Rastvor Intermedijera 40B (417 mg, 0.491 mmol) u DCM (20 mL) tretiran je sa TFA (2 mL, 26.0 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi tokom 24 h. Rezultujući rastvor je koncentrovan do suvog. Sirovi proizvod reakcije je rastvoren u maloj količini MeOH i prečišćen reverzno faznom HPLC (YMC ODS Cl 8 5 um 20 x lOOmm, 10-90% vodeni metanol koji sadrži 0.1% TFA, 15 mL/min, 30 min gradijent, praćeno na 220 nm). Proizvod (retenciono vreme = 27.037 minuta) je izolovan i liofilizovan do suvog. Dobijeni materijal je slobodno podešen na bazno sa zasićenim vodenim NaHC03da bi se obezbedio Primer 41 (12 mg, 3.03%). HPLC: RT = 8.726 min (Xbridge Fenil 3.5Lim, 3 x 150 mm, 10% 95/5 voda/ACN sa 0.05%TFA to 100% 5/95 voda/ACN sa 0.05% TFA, 15 minuta gradijent, Brzina protoka =
[Brzina protoka], praćeno na 220 i 254 nm). MS(ES):mlz =750.4.4 [M+H<+>]. 'H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 10.25 (s, IH), 9.62 (s, IH), 9.54 (d, J= 7.3 Hz, IH), 8.46 (br. s., 3H), 7.56 (dd,J=6.6, 1.8 Hz, IH), 7.53-7.45 (m, IH), 7.43-7.33 (m, 2H), 7.29-7.24 (m, IH), 7.23-7.17 (m, 2H), 5.26 (d,J=7.3 Hz, IH), 3.98 (br. s., IH), 3.24 (dd,J=15.0, 4.2 Hz, IH), 3.03 (dd, 7= 15.0, 9.0 Hz, IH), 2.94 (td,J=10.3, 3.4 Hz, IH), 2.76-2.66 (m, IH), 2.48-2.44 (m, IH), 2.29-2.12 (m, 3H), 1.87-1.77 (m, IH), 1.75-1.67 (m, IH), 1.65-1.54 (m, IH), 1.49(d, J =2.2 Hz, IH), 1.46 (s, 9H).
Primer 42
Metil S-(((2S,3R)-6,6,6-trifluoro-3-(((3S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)karbamoil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-L-cisteinat Intermedijer 42A: (R)-Metil 2-((/erc-butoksikarbonil)amino)-3-(((2S,3R)-6,6,6-trifluoro-3-(((S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-benzo[e][l,4]diazepin-3-il)karbamoil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanamido)tio)propanoat
Rastvor srebro nitrata (118 mg, 0.696 mmol) u metanolu (9 mL) tretiranje sa (2R,2'R)-dimetil 3,3'-disulfanediilbis(2-((etrc-butoksikarbonil)amino) propanoatom) (326 mg, 0.696 mmol). Reakciona smešaje mešana 30 minuta i potom su dodati Primer 1 (100 mg, 0.174 mmol) i TEA (0.097 mL, 0.696 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći potom koncentrovana do suvog. Sirovi proizvod je rastvoren u maloj količini CH2CI2i prečišćen fleš hromatografijom (SiCh0% etil acetat/heksani do 80% etil acetat/heksani, 4 g kolona) da bi se obezbedio Intermedijer 42A. (80 mg, 57%). HPLC RT = 3.20 min (CHROMOLITH® SpeedROD, 5.0um, 4.6mm x 50mm, 10-90% vodeni metanol koji sadrži 0.1% TFA, 4 min gradijent, praćeno na 220 nm). MS(ES):mlz= 808.3 [M+H<+>].
Primer 42:
U rastvor Intermedijera 42A (80 mg, 0.099 mmol) u DCM (2 mL) na 0 °C je dodat TFA (0.5 mL). Smešaje mešana 2.5 h tokom zagrevanja do sobne temperature. Reakciona smešaje potom koncentrovana i ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (4 g kolona, 0-8% MeOH/DCM sa 0.1% NH4OH kako bi se dobila čvrsta bela supstanca, koja je dalje tretirana sa etrom kako bi se dobio prečišćen proizvod (29.5 mg, 41%). HPLC RT = 2.570 min (CHROMOLITH® SpeedROD, 5.0um, 4.6mm x 50mm, 10-90% vodeni metanol koji sadrže 0.1% TFA, 4 min gradijent, praćeno na 220 nm). MS(ES):mlz =708.2 [M+H<+>].<*>H NMR (400MHz, metanol-04) 5 7.58-7.52 (m, IH), 7.48-7.32 (m, 3H), 7.30-7.19 (m, 3H), 5.39 (s, IH), 3.75 (s, 3H), 3.63 (dd,7=8.7,4.1 Hz, IH), 3.30-3.24 (m, IH), 2.90 (td,7=10.4, 3.6 Hz, IH), 2.78 (dd,7=14.3, 8.6 Hz, IH), 2.69 (td, J= 10.0, 3.6 Hz, IH), 2.57-2.38 (m, 4H), 2.36-2.06 (m, 3H), 2.05-1.90 (m, IH), 1.89-1.74 (m, 2H), 1.63 (tt,7=12.5, 4.3 Hz, IH).
Primer 43
((3S)-3-(((2R,3S)-3-Karbamoil-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amm^ benzodiazepin-1 -il)metil (4-(fosfonooksi)fenil)acetat Intermedijer 43A: (2R,3S)-3-(Trifluoropropil)-Nl-((S,Z)-1 -(metiltiometil)-2-okso-5-(3 -fluorofenil)-9-metil-2,3 -dihidro-1 H-benzo[e] [ 1,4]diazepin-3-il)metil-2-(3,3,3 - trifluoropropil)sukcinamid
U smešu Primera 1 (278 mg, 0.484 mmol) u DMF (2.75 mL) je dodat Cs2C03(315 mg, 0.968 mmol) i (hlorometil)(metil)sulfan (0.081 mL, 0.919 mmol) pod azotom. Ova smešaje mešana na sobnoj temperaturi tokom 110 min, i potom razblažena sa vodom. Vodeni sloj je ekstrahovan EtOAc. Kombinovani EtOAc ekstrakti su isprani slanim rastvorom. Organski sloj je osušen anhidrovanim magnezijum sulfatom, proceđen i koncentrovan pod sniženim pritiskom kako bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom (Teledvne ISCO CombiFlash 0% do 100% rastvarača A/B = heksan/EtOAc, REDISEP® Si0240 g, detekcija na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje odgovarajućih frakcija obezbedilo je Intermedijer 43A (198 mg, 64.5%). HPLC: RT = 3.205 min (CHROMOLITH® SpeedROD kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol tokom 4 minuta koji sadrži 0.1%> TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS(ES):mlz =635.4 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 9.49 (d, J= 7.3 Hz, IH), 7.63 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.57-7.51 (m, IH), 7.49-7.36 (m, 4H), 7.23 (d,7=7.5 Hz, IH), 7.13 (s, IH), 5.57 (d,7 =14.1 Hz, IH), 5.33 (d,7 =7.0 Hz, IH), 4.38 (d,7 =14.3 Hz, IH), 2.80 (td,7 =9.8, 4.1 Hz, IH), 2.61-2.54 (m, IH), 2.46-2.44 (m, IH), 2.42 (s, 3H), 2.30-2.06 (m, 4H), 1.68 (s, 3H), 1.64-1.48 (m, 3H).
Intermedijer 43B: Metil 2-(4-(di-terc-butoksifosforiloksi)fenil)acetat
Mešani rastvor metil 2-(4-hidroksifenil)acetata (1.80 g, 10.83 mmol) kombinovan je sa lH-tetrazolom u MeCN (65 mL, 10.83 mmol) i potom je dodat di-terc-butil dietilfosforamidit (5.91 g, 23.70 mmol). Reakciona smešaje mešana na sobnoj temperaturi tokom 35 min potom koncentrovana do suvog. Sirovi materijal je rastvoren u 50 mL DCM i 30% H2O2(30 mL) je dodat. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 30 min, smešaje razblažena DCM i isprana vodom, zasićenim NaHC03rastvorom, i potom slanim rastvorom. Organski sloj je koncentrovan i prečišćen fleš hromatografijom (Teledvne ISCO CombiFlash 0%> do 100%> rastvarača A/B = heksan/EtOAc, REDISEP® Si0280 g, detekcija na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje odgovarajućih frakcija dalo je Intermedijer 43B (3.94 g, kvantitativni prinos). 'H NMR (400MHz, hloroform-d) 8 ppm 7.25-7.14 (m, 4H), 3.69 (s, 3H), 3.59 (s, 2H), 1.51 (s, 18H).
Intermedijer 43C: 2-(4-(Di-terc-butoksifosforiloksi)fenil)sirćetna kiselina
U mešani rastvor Intermedijera 43B (0.635 g, 1.772 mmol) u THF (12.0 mL) i vodi (3.00 mL) je dodat litijum hidroksid (0.122 g, 2.14 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 hr i potom su organske faze uklonjene pod sniženim pritiskom. Dobijena mešavina je razblažena sa 10 mL fosfatnog rastvora pH 4. Dobijena mešavina je ekstrahovana EtOAc. Kombinovani EtOAc ekstrakti su isprani slanim rastvorom, osušeni anhidrovanim magnezijum sulfatom, proceđeni i koncentrovani da bi se obezbedio Intermedijer 43C (0.462 g, 76%). 'H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 ppm 12.30 (br. s., IH), 7.25 (d,7 =8.4 Hz, 2H), 7.13-7.03 (m, 2H), 3.55 (s, 2H), 1.44 (s, IH).
Intermedijer 43D: ((S,Z)-3-((R)-2-((S)-l-Amino-3-trifluoro-l-oksopropan-2-il)-5,5,5-trifluoropentanamido)-2-okso-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2,3-dihidro-lH-benzo[e][l,4]diazepin-l-il)metil 2-(4-(di-fcrc-butoksifosforiloksi)fenil)acetat
U mešanu smešu Intermedijera 43A (195 mg, 0.307 mmol) i trietilamin hidrohlorida (85.0 mg, 0.615 mmol) u DCM (3.00 mL) pod azotom je dodat sulfuril hlorid (0.037 mL, 0.461 mmol). Smešaje mešana na sobnoj temperaturi tokom 25 min potom koncentrovana do suvog kako bi se dobila čvrsta žuta supstanca. Intermedijer 43C (221 mg, 0.640 mmol) i CS2CO3(417 mg, 1.281 mmol) su kombinovani u DMF (1.50 mL) na sobnoj temperaturi pod azotom. U ovu smešu je dodat rastvor gore pomenute čvrste žute supstance u DMF (2.00 mL). Dobijena mešavina mešana je na sobnoj temperaturi tokom 148 minuta i potom razblažena sa vodom i EtOAc. Organski sloj je odvojen i ispran 10%) LiCl rastvor'om i potom slanim rastvorom. Organski sloj je osušen anhidrovanim magnezijum sulfatom, proceđen i koncentrovan do suvog. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (Teledvne ISCO CombiFlash 0% do 100%o rastvarača A/B = heksan/EtOAc, REDISEP® Si0224 g, detekcija na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje odgovarajućih frakcija obezbedilo je Intermedijer 43D (152 mg, 53.5%). HPLC: RT = 3.640 min (CHROMOLITH® SpeedROD kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol tokom 4 minuta koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS(ES):mlz= 931.6 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 9.47 (d,7 =6.8 Hz, IH), 7.68-7.60 (m, 2H), 7.54-7.46 (m, IH), 7.44-7.33 (m, 4H), 7.20 (d,7=7.5 Hz, IH), 7.13 (br. s., IH), 6.97-6.91 (m, 2H), 6.87-6.80 (m, 2H), 6.05 (d,7=10.3 Hz, IH), 5.38 (d,7=4.0 Hz, IH), 5.36 (s, IH), 3.22 (t, 7= 1.0 Hz, 2H), 2.81 (dt,7=9.8, 5.0 Hz, IH), 2.45 (d,7=3.3 Hz, IH), 2.41 (s, 3H), 2.30-2.20 (m, IH), 2.18-2.06 (m, 3H), 1.69 (d,7=10.6 Hz, IH), 1.63-1.51 (m, 3H), 1.43 (s, 18H).
Primer 43:
U mešani rastvor Intermedijera 43D (148 mg, 0.159 mmol) u DCM (1.64 mL) dodata je TFA (0.16 mL, 2.077 mmol) na 0 °C. Smešaje mešana na 0 °C tokom 10 min i potom na sobnoj temperaturi tokom 40 min, potom koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se obezbedio Primer 43 (126.6 mg, 94%). HPLC: RT = 9.95 min (H20/CH3CN sa TFA, Sunfire C18 3.5um, 4.6xl50mm, gradijent = 15 min, talasna dužina = 220 i 254nm); MS(ES):mlz =819.5 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, DMSO-de) 5 9.51 (d, .7=5.7 Hz, IH), 7.66 (d, .7 = 7.7 Hz, 2H), 7.54-7.49 (m, IH), 7.48-7.40 (m, 3H), 7.37 (d,J=7.7 Hz, IH), 7.22 (d,J=8.4 Hz, IH), 7.15 (br. s., IH), 6.97 (d,J=8.6 Hz, 2H), 6.84 (d,J=8.4 Hz, 2H), 6.07 (d,J=10.6 Hz, IH), 5.40 (s, IH), 5.38 (s, IH), 3.32-3.15 (m, 2H), 2.83 (br. s., IH), 2.58-2.56 (m, IH), 2.43 (s, 3H), 2.15 (dd,J=19.7, 8.5 Hz, 4H), 2.01 (s, IH), 1.71 (s, 2H), 1.67-1.51 (m, 3H).
Primer 44
((3S)-3-(((2R,3S)-3-Karbamoil-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-1 -il)metil L-valil-L-valinat
Intermedijer 44A: (2R,3S)-3-(Trifluoropropil)-Nl-((S,Z)-l-(metiltiometil)-2-okso-5-(3 -fluorofenil)-9-metil-2,3 -dihidro-1 H-benzo[e] [ 1,4]diazepin-3-il)metil-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
U smešu Primera 1 (278 mg, 0.484 mmol) u DMF (2.75 mL) je dodat Cs2C03(315 mg, 0.968 mmol) i (hlorometil)(metil)sulfan (0.081 mL, 0.919 mmol) pod azotom. Ova smešaje mešana na sobnoj temperaturi tokom 110 min, i potom razblažena sa vodom. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani EtOAc ekstrakti su isprani slanim rastvorom. Organski sloj je osušen anhidrovanim magnezijum sulfatom, proceđen i koncentrovan pod sniženim pritiskom kako bi dao sirovi proizvod. On je prečišćen fleš hromatografijom (Teledvne ISCO CombiFlash 0% to 100% rastvarača A/B = heksan/EtOAc, REDISEP® Si0240 g, detekcija na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje odgovarajućih frakcija obezbedilo je Intermedijer 44A (198 mg, 64.5%). HPLC: RT = 3.205 min (CHROMOLITH® SpeedROD kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol tokom 4 minuta koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS(ES):mlz= 635.4 [M+H<+>]; 'H NMR (400MHz, DMSO-de) 8 9.49 (d,J=7.3 Hz, IH), 7.63 (d,J=8.4 Hz, 2H), 7.57-7.51 (m, IH), 7.49-7.36 (m, 4H), 7.23 (d,J =7.5 Hz, IH), 7.13 (s, IH), 5.57 (d,J=14.1 Hz, IH), 5.33 (d,J=7.0 Hz, IH), 4.38 (d,J=14.3 Hz, IH), 2.80 (td,J=9.8, 4.1 Hz, IH), 2.61-2.54 (m, IH), 2.46-2.44 (m, IH), 2.42 (s, 3H), 2.30-2.06 (m, 4H), 1.68 (s, 3H), 1.64-1.48 (m, 3H).
Intermedijer 44B: (S)-((S)-3-((2R,3S)-3-Karbamoil-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanamido)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-benzo[e][ 1,4]diazepin-1 -il)metil 2-((S)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)-3-metilbutanamido)-3-metilbutanoate
U mešanu smešu Intermedijera 44A (157 mg, 0.247 mmol) i trietilamin hidrohlorida (68.1 mg, 0.495 mmol) u DCM (3.00 mL) pod azotom je dodat sulfuril hlorid (0.030 mL, 0.371 mmol). Smešaje mešana na sobnoj temperaturi tokom 60 min potom koncentrovana do suvog kako bi dala čvrstu žutu supstancu. Ostatak je rastvoren u DMF (2 mL) i dodat u mešanu smešu (S)-2-((S)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)-3-metilbutanamido)-3-metilbutanske kiseline (313 mg, 0.989 mmol) i CS2CO3(403 mg, 1.236 mmol) u DMF (2.0 mL) na sobnoj temperaturi pod azotom. Dobijena mešavina mešana je na sobnoj temperaturi tokom 2.5 hr, potom su dodati voda i zasićen vodeni NaHC03. Nastao je beli precipitat koji je sakupljen filtracijom, ispran vodom i osušen pod vakuumom. Sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom (Teledvne ISCO CombiFlash 20% to 70% rastvarača A/B = heksan/aceton, REDISEP® Si0280 g, detekcija na 254 nM, i praćenje na 220 nM). Koncentrovanje odgovarajućih frakcija obezbedilo je Intermedijer 44B (148.4 mg, 66.5%). HPLC: RT = 3.486 min (CHROMOLITH® SpeedROD kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol tokom 4 minuta koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS(ES):mlz =903.7 [M+H<+>].
Primer 44:
U mešani rastvor Intermedijera 44B (148 mg, 0.164 mmol) u DCM (4.00 mL) pod azotom je dodat 4N HC1 u dioksanu (0.410 mL, 1.639 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 60 min potom koncentrovana do suvog kako bi dala Primer 44 (148 mg, 97%). HPLC: RT = 8.038 min (CHROMOLITH® SpeedROD kolona 4.6 x 50 mm, 10-90% vodeni metanol tokom 4 minuta koji sadrži 0.1% TFA, 4 mL/min, praćenje na 220 nm), MS(ES):mlz =803.6 [M+H<+>];<>>H NMR (500MHz, DMSO-de) 8 9.49 (d,J=6.9 Hz, IH), 8.35
(d,J=7.8 Hz, IH), 8.02 (d,J=4.4 Hz, 3H), 7.69-7.62 (m, 2H), 7.55-7.48 (m, IH), 7.45-7.35 (m, 4H), 7.24 (d,J=6.9 Hz, IH), 7.12 (br. s., IH), 6.03 (d,J=10.3 Hz, IH), 5.41-5.34 (m, 2H), 3.93 (dd,J=7.6, 5.4 Hz, IH), 3.66-3.62 (m, IH), 2.82 (td,J=10.2, 4.3 Hz, IH), 2.43 (s, 4H), 2.29-2.07 (m, 3H), 1.99(dq, J=13.2, 6.8 Hz, IH), 1.76-1.66 (m, 2H), 1.63-1.49 (m, 3H), 0.88 (dd,J=10.0, 6.9 Hz, 6H), 0.61 (d,J=6.9 Hz, 3H), 0.57 (d,J=6.7 Hz, 3H).
Uporedna Jedinjenja 45 do 48
Uporedna Jedinjenja 45 do 48 mogu biti pripremljena prema procedurama opisanim u Američki patent br. 7,053,084 za Primer 8, 12a, 38, i 45a, redom.
Primer 49
Farmaceutska Formulacija koja sadrži (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3 -dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3 -il)-2,3 -bis(3,3,3 -trifluoropropil)sukcinamid
Injekcija proizvedenog leka je formulisana tako da sadrži (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid, Primer 1, kao sterilni rastvor za jednu upotrebu, spreman za korišćenje (RTU) za intravensku (IV) administraciju. Smeša nosača je pripremljena mešanjem 80% v/v polietilen glikola 400 i 20%> v/v vode na sobnoj temperaturi. Primer 1 (0.2 mg/ml) je dodat u pripremljenu smešu nosača. Formulacija je sonifikovana tokom oko 20 minuta dok se Primer 1 nije rastvorio.
Primer 50
Farmaceutska formulacija koja sadrži (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid
Proizvod leka je formulisan tako da sadrži (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid, Primer 1, pogodan za oralnu administraciju kao rastvor ili kapsulu. Oralna Formulacija je sadržala 70%> v/v polietilen glikola 300, 10% v/v etanola, 10%> v/v TPGS, 10%>v/v CREMOFOR® RH40, i Primer 1 (do 4 mg/ml koncentracija leka).
Čvrsti TPGS i CREMOFOR® su prethodno zagrevani kako bi se materijal rastopio. Odgovarajuća količina svakog od ekscipijenasa je potom odmerena i umešana na sobnoj temperaturi. Potreban količina Primera 1 je dodata u pripremljenu smešu nosača. Formulacija je sonifikovana tokom oko 20 minuta dok se Primer 1 nije rastvorio.
Primer 51
Farmaceutska formulacija koja sadrži (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-Fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(33,3-trifluoropropil)sukcinamid
Proizvod leka je formulisan tako da sadrži (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-lfuorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-llH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid, Primer 1, pogodan za oralnu administraciju kao rastvor ili kapsulu. Oralna Formulacija je sadržala 80% v/v polietilen glikola 300, 10% v/v etanola, 10% v/v TPGS, i 1 (do 4 mg/ml koncentracija leka).
Čvrsti TPGS je prethodno zagrevan kako bi se materijal rastopio. Odgovarajuća količina svakog od ekscipijenasa je potom odmerena i umešana na sobnoj temperaturi. Potreban količina Primera 1 je dodato u pripremljenu smešu nosača. Formulacija je sonifikovana tokom oko 20 minuta dok se Primer 1 nije rastvorio
BIOLOŠKI ESEJI
Farmakološke osobine jedinjenja iz predmetnog pronalaska mogu biti potvrđena brojnim biološkim esejima. Primerni biološki eseji, koji slede, izvedeni su sa jedinjenjima iz predmetnog pronalaska.
Esej transaktivacije Notch-CBFl
Esej transaktivacije Notch-CBFl (C-promotor vezujući faktor I) baziran na ćelijama zasniva se na sposobnosti otpuštanih fragmenta Notch intracelularnog domena (NICDs) da deluju kao transkripcioni faktori u sprezi sa CBF1 i drugim nuklearnim faktorima. Luciferazni eseji su korišćeni za meranje antagonizma Notch-CBFl transkripcione aktivnosti. HeLa ćelije cervikalnog kancera su prolazno ko-transfektovane sa pCDNK3.1/Hygro plazmidima koji su sadržali skraćene Notch 1, Notch 2, Notch 3, ili Notch 4 receptore i PGL3 luciferazni reporter vektor koji sadrži 4 kopije CBF1 vezujućeg mesta. Ćelije su potom testirane na Notch-CBFl aktivnost u odsustvu ili prisustvu testiranih jedinjenja. HeLa ćelije, održavane u DMEM (visoka glukoza sa HEPES), IX glutamin/penicilin/streptomicin i 10% fetalnog goveđeg seruma, su prolazno transfektovane u T175 Flasku (4.5 xl0<6>ćelija/flaska) korišćenjem Monster Transfection kompleta (Mirus #MIR2906) prema specifikacijama proizvođača. Tabela 9 označava respektivne DNK količine tokom transfekcija.
Šest sati posle transfekcije, ćelije su tripsinizovane i zasejane u crnu ploču od 384 bunara koja je obložena poli-D-lizinom u gustini 5x10<3>ćelija/bunaru u 95 uL medijuma u kome je rađen esej (DMEM (visoka glukoza sa HEPES), IX glutamin/penicilin/streptomicin, 0.0125% BSA, IX ne-esencijanle amino kiseline). Medijumi za esej (5 uE) koji sadrže testirana jedinjenja u finalnom opsegu koncentracija od 5 uM do 8.4xl0"<5>uM (3-struka serijska razblaženja) su dodati u ćelije i ploče sa ćelijama su inkubirane tokom 18 sati na 37 °C i 5% CO2. Kontrolni bunari su sadržavali DMSO nosač (vrednost totala) ili 0.5 uM malog molekula inhibitora iz kuće (vrednost pozadine). Duplikati su korišćeni za svaki uzorak. Luciferazna aktivnost je merena nakon 20-minutne inkubacije sa 50 ul STEADY-GLO® luciferaznim reagensom prema specifikacijama proizvođača (Promega, Cat. #E2550) i analizirane na Envision čitaču pločica (PerkinElmer, Boston, MA).
Antagonistički efekat jedinjenja je izražavan kao 100 x [1-(srednja vrednost uzorka - srednja vrednost pozadine)/(srednja vrednost ukupne sume - srednja vrednost pozadine)] gde je uzorak luciferazna aktivnost u prisustvu testiranog jedinjenja, pozadina je jednaka luciferaznoj aktivnosti u prisustvu kontrole malog molekula inhibitora i ukupna suma je signal koji je indukovan u bunarima sa DMSO. Podaci su prikazani korišćenjem četvoro-parametarske logističke jednačine za fitovanje i IC50vrednost je definisana kao koncentracija jedinjenja koja je inhibirala 50% luciferazne aktivnosti.
Tabela 10 ispod izlistava Notch 1 i Notch 3 IC50vrednosti za Primere 1-37 iz predmetnog pronalaska i Komparativna Jedinjenja 45-48 merena pNotch-CBFl transaktivacionim esejom koji je opisan u tekstu. U nekim slučajevima vrednost je srednja vrednost više eksperimenata gde je N broj eksperimenata koji je izveden. Jedinjenja iz predmetnog pronalaska, kako je prikazaano za Primere 1-37 pokazana su Notch 1 vrednosti od 12.2 nM ili manje i Notch 3 IC50vrednosti od 15.0 nM ili manje.
Panel metaboličke stabilnosti visoke efikasnosti (HT)
Jedinjenja koja su administrirana parenteralno ulaze u krvotok i prolaze jedan ili više puta kroz jetru. Jedinjenja koja nisu lako metabolisana u jetri mogu da se administriraju u terapijski efikasnim nivoima u plazmi tokom terapijski efikasnih vremenskih perioda.
Oralno administrirana jedinjenja tipično se apsorbuju preko zidova creva u krvotok i prolaze prvi put kroz jetru. Jedinjenja koja nisu lako metabolisana tokom prvog prolaska kroz jetru mogu da budu distribuirana u druge delove tela u terapijski efikasnim količinama.
Esej metaboličke stabilnosti ocenjuje CYP metaboličku stabilnostin vitrokoristeći humane, pacovske, mišije, pseće i/ili majmunske mikrozome nakon deseto-minutne inkubacije. Svako jedinjenje je testirano u duplikatu.
Rezultati ovih eseja su izraženi kao deo roditeljskog jedinjenja koje ostaje u reakcionoj smeši nakon deseto-minutne inkubacije (preostali procenat). Generalno, ovi rezultati se koriste kako bi se ocenilo samo obim CYP-posredovanog ili NADF-zavisnog metabolizma testiranih jedinjenja. Kada se jedinjenje značajno metabolisalo (<40-50% preostalog), to je označavalo visok klirens jedinjenjain vivousled CYP-posredovanog metabolizma. Međutim, ako su jedinjenja pokazivala umeren (50-80%) ili nizak (>85%>) metabolizam u ovimin vitroesejima, visok klirens je ipak bio mogućin vivousled drugačijeg metabolizma i puteva eliminacije.
Rezultat preostalog procenta u ovim esejima je predviđao klirens jedinjenjain vivo,pod pretpostavkom da je CYP-posredovan metabolizam dominantni put eliminacije. U različitim mikozomalnim vrstama, opseg rezultata je približno prikazan u Tabeli 11.
Metode i Materijali
Inkubacija sa mikrozomima jetre
Testirano jedinjenje je dobijeno kao 3.5 mM štok rastvor u 100 postotnom DMSO. Testirano jedinjenje je razblaženo kako bi se napravio a 50 uM acetonitrilni (ACN) rastvor koji je sadržao 1.4% DMSO, koji je potom korišćen 100-struki štok tokom inkubacije sa mikrozomima. Svako jedinjenje je testirano u duplikatu odvojeno na svakoj od tri vrste u test paketu metaboličke stabilnosti-humane, pacovske i mišijem ili kao individualne vrste u paketu metaboličke stabilnosti-pseće ili metaboličke stabilnosti-majmunske. Jedinjenja, NADF, i mikrozomi jetre su kombinovani tokom inkubacije u tri koraka: 1. 152 ul suspenzije mikrozoma jetre, koncentracije proteina od 1.1 mg/ml u 100 mM NaPi, pH 7.4, 5 mM MgCh. puferu, je prethodno zagrejano na 37 °C. 2. 1,7 jal 50 uM jedinjenja (98.6%> ACN, 1.4% DMSO) je dodato u istu epruvetu i pre-inkubirano na 37 °C okom 5 minuta. 3. Reakcija je inicirana dodatkom 17 jal prethodno zagrejanog 10 mM NADF rastvora u lOOmMNaPi, pH 7.4.
Reakcione komponente su dobro izmešane i 75 jal reakcione smeše je momentalno prebačeno u 150 jul rastvora za kvenčovanje (nulta vremenska tačka, To). Reakcije su inkubirane na at 37 °C tokom 5,10,15,30 i 45 minuta i u svakoj vremenskoj tački 75 jal alikvot je prebačen u 170 jal kvenč rastvora. Acetonitril koji sadrži Interni Standard (100 ng/ml), je korišćen kao kvenč rastvor kako bi se zaustavile metaboličke reakcije.
Kvenčovane smeše su centrifugirane na 1500 rpm (~500 X g) u ALLEGRA® X-12 centrifugi, SX4750 rotor (Beckman Coulter Inc., Fullerton, CA) tokom petnaest minuta kako bi se istaložili denaturisani mikrozomi. Zapremina od 90 |al ekstrakta supernatanta, koja sadrži smešu roditeljskog jedinjenja i njegovih metabolita je potom prebačena u odvojenu pločicu od
96 bunara za LC/MS-MS analizu kako bi se odredio procenat roditeljskog jedinjenja koje je preostalo u smeši.
HPLC: Pump-Thermo Surveyor; Autosampler-CTC/LEAP HTS; UV detektor-Thermo Surveyior PDA plus; Kolona-VARIAN® Cl8, 3 um, 2 x 20 mm sa 0.5 um in-line filterom; Mobilna faza tokom pre-analize strukturnog integriteta: (A) 98% voda, 2% acetonitril sa 10 mM amonijum acetatom; (B) 10%> voda, 90% acetonitril sa 10 mM amonijum acetatom; Mobilna faza tokom analize reakcionih uzoraka: (A) 98% voda, 2% acetonitril sa 0.1 % mravlje kiseline; (B) 2% voda, 98% acetonitril sa 0.1 % mravlje kiseline; (C) 0.1% amonijum hidroksid u vodi; (D) 0.1 % amonijum hidroksid u acetonitrilu.
Maseni Spektrometar: Thermo TSQ QUANTUM® Ultra Triple-Quadrapole Mass Spectrometer;
Analiza utoraka-Pre-analiza strukturnog integriteta
Pre-analiza strukturnog integriteta metaboličke stabilnosti je korišćena da bi se ocenila čistoća jedinjenja koja su analizirana. Jedinjenja su dobijena u pločici sa 96-well bunara kao 57 ul 3.5 mM DMSO rastvora. DMSO štok rastvori 3.5 mM jedinjenja razblaženi su 18-puta sa rastvorom koji je sadržao jednake zapremine acetonitrila, izopropanola, i MilliQ-H20. Rezultujući rastvori (200 uM) su analizirani na strukturni integritet korišćenjem LC-UV/MS na Thermo LCQ Deca XP Plus ion trap masenog spektrometra, korišćenjem Waters XBridge C18, 5 um, 2x50 mm kolone sa Vodaš Sentry 2.1 mm zaštitnom kolonom, i LC uslovima koji su opisani u tabeli ispod sa 5 ul injekcijom i brzinom protoka od 1 ml/min. Sakupljeni podaci su oslikavali čistoću na osnovu UV apsorbance na 220 nm. Samo rezultati za jedinjenja sa čistoćom većom od 50%> su ponavljani.
Analiza uzoraka-Inkubirani uzorci
Optimizacija MS/MS uslova je izvođena na Thermo TSQ QUANTUM® triple-quadrapole masenom spektrometru opremljenom sa zagrejanim-elektronsprej (H-EST) izvorom sa automatskom infuzijom kako bi se dobile SRM tranzicije i odgovarajuće vrednosti njihovih sudara. Rastvori jedinjenja u koncentraciji 20 uM u l:lmetanol:vodi su ubačeni pri brzini protoka od 90 uE/min, potom su se kombinovali sa mobilnom fazom pri brzini protoka od 50 uE/min pre nego što su bili ubačeni u izvor. Sva jedinjenja su prvo optimizovana korišćenjem mobilne faze A i B (50% A i 50%> B), i po potrebi, korišćenjem mobilne faze C i D (takođe sa 50:50 sastavom). Optimizovani parametri, uključiv polarnost, SRM tranziciju i energiju sudara su sačuvani u MICROSOFT ACCESS® bazi podataka.
Uslovi za masenu spektrometriju dobijeni iz automatizovane infuzije su korišćeni za analizu inkubiranih uzoraka iz eseja metaboličke stabilnosti. Injekciona zapremina je bila 5 ul i brzina protoka je bila 0.8 ml/min. Gradijent korišćen je prikazan u tabeli ispod. Svi uzorci su injektovani sa gradijentom korišćenjem mobilne faze. Po potrebi (na primer, zbog homatografskih razloga), uzorci su re-injektovani sa istim gradijentom ali korišćenjem mobilne faze C i D. Svi LC-MS/MS analitički parametri su uhvaćeni elektronski u fajlovima sirovih podataka.
Analiza podataka
Integracija pikova je izvedena sa XCALIBUR® softverom. Izračunavanje preostalog procenta je izvedeno poređenjem površine LC-MS/MS pikova uzorana na Tiominuta u odnosu na uzorke na Tominiuta za svako jedinjenje
Kontrola Kvaliteta
Set od tri jedinjenja je testiran pored testiranih jedinjenja na svakoj ploči testa. Podaci su prihvatani i kačeni samo ako su rezultati za ova kontrolna jedinjenja upadali u očekivane opsege koji su prikazani niže.
Panel polu-života metaboličke stabilnosti
Brzina metabolizma i polu-život određenin vitrou humanim ili životinjskim mikrozomima jetre je korišćen za određivanje unutrašnjeg klirensa (CLint) i hepatičkog klirensa (CLh,b) jedinjenja. Ovi parametri su bili korisni tokom predviđanjain vivohumanog klirensa, koji definiše nivo izlaganja lekuin vivo(Obach et al., 1997, 1999).
Esej panela polu-života metaboličke stabilnosti evaluira vremenski tok i brzinu CYP-posredovanog (NADF-zavisnog) metabolizmain vitrona mikrozomima ljudi, pacova, miševa, pasa i majmuna. Vremenski tok se proteže na 45 minutnu inkubaciju i uključuje tačke na 0, 5, 10, 15, 30, i 45 minuta, u kojima je količinina preostalog testiranog jedinjenja merena u smeši Vodič za interpretaciju rezultata
Rezultati eseja za polu-život metaboličke stabilnosti su izraženi kao polu-život (T1/2, min). Generalno, ovi rezultati treba da se koriste samo kako bi se ocenio stepen CYP-posredovanog, ili NADF-zavisnog, metabolizma testiranih jedinjenja. Kada je jedinjenje bilo značajno metabolisano (T1/2< 14 minuta), ovo ukazuje na visok klirensin vivousled CYP-posredovanog metabolizma. Međutim, ako su jedinjenja pokazala umeren (14-70 minuta) ili nizak (>70 minuta) metabolizam u ovimin vitroesejima, visok klirensin vivoje i dalje bio moguć usled drugog metabolizma i puteva eliminacije.
Rezultati ovih eseja su predviđali klirens jedinjenjain vivo,pod pretpostavkom da je CYP-posredovan metabolizam dominantni put eliminacije. U humanim mikrozomima opseg rezultata je bio približan onom kako je prikazano u tabeli:
Metode i Materijali
Mikrozomi jetre su kupljeni od BD-Biosciences (Woburn, MA), anNADF od AppliChem Ine; sve druge hemikalije su nabavljene od Sigma-e.
Inkubacija sa mikrozomima jetre
Testirano jedinjenje je dobijeno kao 3.5 mM štok rastvor u 100 postotnom DMSO. Testirano jedinjenje je razblaženo kako bi se napravio a 50 uM acetonitrilni (ACN) rastvor koji je sadržao 1.4% DMSO, koji je potom korišćen 100-struki štok tokom inkubacije sa mikrozomima. Svako jedinjenje je testirano na humanim, pacovskim, mišjim, psećim i majmunskim mikrozomima jetre. Jedinjenje, NADF i rastvori mikrozoma jetre su kombinovani tokom inkubacije u tri koraka: 1. 450 ul suspenzije mikrozoma jetre, koncentracije proteina od 1.1 mg/ml u 100 mM NaPi, pH 7.4, 5 mM MgCb puferu, je prethodno zagrejano na 37 °C. 2. 5 ul 50 uM jedinjenja (98.6% ACN, 1.4% DMSO) je dodato u istu epruvetu i pre-inkubirano na 37 °C tokom 5 minuta. 3. Reakcija je inicirana dodatkom 50 ul prethodno zagrejanog 10 mM NADF rastvora u lOOmMNaPi, pH 7.4.
Reakcione komponente su dobro izmešane i 65 jul je momentalno prebačeno u 130 ul kvenč/stop rastvora (nulta vremenska tačka, To). Reakcije su inkubirane na at 37 °C tokom 5, 10, 15, 30 i 45 minuta i u svakoj vremenskoj tački 65 ul alikvot je prebačen u 130 ul kvenč rastvora. Acetonitril koji sadrži Interni Standard (100 ng/ml), je korišćen kao kvenč rastvor kako bi se zaustavile metaboličke reakcije.
Kvenčovane smeše su centrifugirane na 1500 rpm (~500 X g) u ALLEGRA® X-12 centrifugi, SX4750 rotor (Beckman Coulter Inc., Fullerton, CA) tokom petnaest minuta kako bi se istaložili denaturisani mikrozomi. Zapremina od 90 ul ekstrakta supernatanta, koja sadrži smešu roditeljskog jedinjenja i njegovih metabolita je potom prebačena u odvojenu pločicu od 96 bunara za LC/MS-MS analizu kako bi se odredio procenat roditeljskog jedinjenja koje je preostalo u smeši.
Instrumentacija za analizu uzoraka
HPLC: Pumpa-Shimadzu LC-20 AD Serija Binarne Pumpe; Autosempler-CTC/LEAP
HTS
Tabela 18 u tekstu niže izlistava vrednost CYP-posredovanog metaboličkog polu-života za Primere 1-37 iz predmetnog pronalaska i Komparativna Jedinjenja 45-48 merena u eseju polu-života humane metaboličke stabilnosti. U nekim slučajevima vrednost je srednja vrednost više eksperimenata gde je N broj eksperimenata koji su izvedeni. Jedinjenja iz predmetnog pronalaska, kako je prikazano za Primere 1-37 imala su vrednost polu-života metaboličke stabilnosti od 31 minuta ili duže. Suprotno tome, Komparativna Jedinjenja 45-48 imala su vrednost polu-života metaboličke stabilnosti od 8 minuta ili manje.
Primerna jedinjenja iz predmetnog pronalaska pokazala su iznenađujuću prednost niskog klirensa usled CYP-posredovanog metabolizma u eseju polu-života humane metaboličke stabilnosti. Jedinjenja predmetnog pronalaska, kako je prikazano za Primere 1-37, imala su metaboličke polu-živote u opsegu od 31 minuta do više od 120 minuta u eseju polu-života humane metaboličke stabilnosti. Suprotno tome, Komparativna Jedinjenja 45-48 su imala metaboličke polu-živote od 8 minuta ili u eseju humane metaboličke stabilnosti. Komparativna Jedinjenja 45-48 su pokazala visok klirens u eseju humane metaboličke stabilnosti, ukazujući da su jedinjenja uklonjena od strane mikrozoma jetre.
Jedinjenja iz predmetnog pronalaska (Primeri 1-37) bila su poređena sa Komparativnim Jedinjenjenjima 45-48 koja su stavljena na uvid javnosti u Američki patent br. 7,456,172, i pokazano je da su posebno korisna. Jedinjenja iz predmetnog pronalaska imala su iznenađujuće korisnu kombinovanu aktivnost kao inhibitori Notch 1 i Notch 3 i superiornu metaboličku stabilnost u mikrozomima jetre. Kako je pokazano u Tabelama 10 i 18, u ponovljenim testovima, Primeri 1-37 iz predmetnog pronalaska imala su Notch 1IC50vrednosti od 12.2 nM ili manje i Notch 3 IC50vrednosti od 15.0 nM ili manje; i polu-živote humane metaboličke stabilnosti od 31 minuta ili duže u eseju polu-života humane metaboličke stabilnosti. Suprotno tome, u sličnim testovima, Komparativna Jedinjenja 45-48 imala su Notch 1 IC50vrednosti u opsegu od 5.1 nM do 64.1 nM i Notch 3 TC50vrednosti u opsegu od 12.5 nM do 74.5 nM; i polu-živote humane metaboličke stabilnosti od 8 minuta ili manje.
Mišiji model humanog tumorskog ksenografta
Svi glodari su dobij eno od Harlan Sprague Dawley Co. (Indianapolis, Indiana), i održavani u atmosferi bez amonijaka u definisanoj koloniji bez patogena. Svi miševi su držani u karantinu otprilike 1 nedelju pre njihove upotrebe za propagaciju tumora i testiranje efikasnosti leka. Miševi su hranjeni hranom i vodom ad libitum. Program za brigu o životinjama Bristol-Myers Squibb Instituta za farmaceutsko istraživanje bio je potpuno akreditovan od strane Američke asocijacije za akreditaciju laboratorije za brigu o životinjama (AAALAC). Svi eksperimenti su izvođeni u skladu sa Bristol-Myers Squibb (BMS) metodama i uputstvima za testiranje na životinjama.
Tumorski ksenograftovi su gajeni i održavani subkutano (SC) u imunokompromitovanim balb/c nu/nu nude ili NOD-SCID miševima (Harlan Sprague Dawley). Tumori su propagirani kao subkutani transplantati u odgovarajućem mišijem soju (Tabela 19) koristeći tumorske fragmente dobij ene od donorskih miševa.
Preklinička hemoterapijska ispitivanja
Broj životinja potreban kako bi se detektovao značajan odgovor sakupljeno je na početku eksperimenta i svakoj je subkutano implantiran tumorski (~20 mg) sa iglom za biopsiju broj 13. Tumori su ostavljeni da rastu do prethodno određenog opsega veličine (tumori izvan ovog opsega su bili isključeni) i životinje su jednako raspoređene u različite tretman i kontrolne grupe. Bilo je tipično 8 miševa po grupi tretmana ili kontrole, sa izuzetkom eksperimenata izvođenih na SAL-IGF (ovo nije uključeno u Tabelu 19) tumorskom modelu, kod kog je tipično bilo 5 miševa po grupi tretmana ili kontrole. Tretman svake životinje baziran je na individualnoj telesnoj masi. Tretirane životinje su proveravane na dnevnoj bazi zbog toksičnosti/smrtnosti povezane sa tretmanom. Svaka grupa životinja je merena pre početka tretmana (Wti) i potom ponovo nakon poslednje doze tretmana (Wt2). Razlika u telesnoj masi (Wt2-Wti) obezbeđuje meru toksičnosti povezane sa tretmanom.
Odgovor tumora je određen merenjem tumora nonijusom dva puta nedeljno, dok tumori nisu dostigli prethodno određenu "ciljanu" veličinu od 0.5 gm ili 1 gm zavisno od tipa tumora. Mase tumora (mg) su procenjene na osnovu formule:
Kriterijum za odgovor tumora se izražava u smislu inhibicije rasta tumora (%TGI). Odlaganje rasta tumora se definiše kao razlika u vremenu (danima) potrebnu da bi tretirani tumori (T) dostigli prethodno definisanu ciljanu veličinu u poređenju sa kontrolnom grupom
(C). U ovu svrhu težina tumora grupe se izražava kao srednja težina tumora (MTW)
Inhibicija rasta tumora se računa prema sledećem:
gde je,
Ct = Srednja vrednost veličine tumora kontrole na kraju tretmana
Co = Srednja vrednost veličine tumora kontrole na početku tretmana
Tt = Srednja vrednost veličine tumora tretirane grupe na kraju tretmana
To = Srednja vrednost veličine tumora tretirane grupe na početku tretmana
Aktivnost se definiše kao postizanje trajne inhibicije rasta tumora od 50% ili više( tj.,TGI > 50%>) ili log ćelijske smrti od 0.5 ili više (LCK > 0.5) za period ekvivalentan najmanje jednom vremenu udvostručavanja tumora i tretman lekom mora biti u periodu ekvivalentnom najmanje dva vremena udvostručavanja tumora.
Odgovor tumora se takođe izražavao u smislu odlaganja rasta tumora (TGD vrednost), definiše se kao razlika u vremenu (danima) potrebna da bi tretirani tumori (T) dostigli prethodno definisanu vrednost u poređenju sa kontrolnom grupom (C).
Kad god je bilo moguće, antitumorska aktivnost je određivana u opsegu doznih nivoa do maksimalne doze koja može da se toleriše (MTD) koja je definisana kao dozni nivo odmah ispod kog je došlo do preterane toksičnosti( tj.,više od jedne smrti). Kada je došlo do smrti, dan smrti je zabeležen. Za tretirane miševe koji su umirali pre nego što su njihovi tumori dostigli ciljanu veličinu smatralo se da su umrli od toksičnosti leka. Nijedan kontrolni miš nije umro pre nego što je tumor dostigao ciljanu veličinu. Tretirane grupe sa više od jedne smrti izazvane toksičnošću leka razmatrane su kao da su imale preterano toksične tretmane i njihovi podaci nisu bili uključeni u evaluaciju antitumorske efikasnosti jedinjenja.
Uticaj potencijalne interakcija toksičnosti leka na tolerabilnost tretmana je važno razmatranje u kombinacionim hemoterapijskim ispitivanjima. Interpretacija kombinovanih terapijskih rezultata mora da se bazira na poređenju antitumorske aktivnosti najboljeg mogućeg odgovora za jedan agens naspram kombinacije u uporedivim tolerisanim dozama. Stoga, terapijski sinergizam je bio definisan kao terapijski efekat postignut sa tolerisanim režimom kombinovanih agenasa koji su premašili optimalni efekat koji se postizao pri bilo kojoj tolerisanoj dozi mono-terapije. Statistička evaluacija podataka izvedena je korišćenjem Gehanovog uopštenog Vilkoksonovog testa. Statistička značajnost je proglašena na P < 0.05.
Administracija lekova
Uin vitrostudijama svi agensi su rastvarani u 100% DMSO i serijski razblaživani u medijumu/10% fetalnom goveđem serumu. Sledeći ekscipijensi su korišćeni tokom administracije Notch inhibitora glodarima: ETOH/TPGS/PEG300 (10:10:80). Notch inhibitori su tipično administrirani oralno po rasporedu od QDxl5, pri čemu se 10 dana daje lek, 2 dana bez leka, pa se 5 dana opet daje lek, iako su i drugi rasporedi takođe bili evaluirani i pokazano je da su bili efikasni. Na primer, dozni režim koji se sastojao od QDxl2, pri čemu se 4 dana daje lek pa se 3 dana ne daje lek, se pokazao kao jednako efikasan kao QDxl5, pri čemu se 10 dana daje lek, 2 dana bez leka, pa se 5 dana opet daje lek. U BID studijama, druga doza je davana 6 do 12 sati nakon prve doze.
In Vivoantitumorska aktivnost
Antitumorska aktivnost Primera 1 oralno administriranog (PO) je evaluirana na humanim tumorskim ksenograftima koji su implantirani miševima. Kako je pokazano na Slikama 1-4, Primer 1 je pokazao antitumorsku aktivnost.
Tabela 20 ispod izlistava anitumorsku aktivnost primera iz ovog pronalaska mereno na mišijem modelu humanog tumorkog ksenografta. Jedinjenja predmetnog pronalaska, kako je prikazano za Primere 1 i 3, pokazala su antitumorsku aktivnost za oralnu administraciju (PO).
Evaluacija proleka: Jedno-dozna farmakokinetika kod pacova.
Muški SPRAGUE DAWLEY® pacovi (250-300g) su korišćeni za farmakokinetičke studije. Pacovi su postili preko noći pre doziranja i hranjeni 4 sata po doziranju. U svakoj studiji grupe životinja (N = 2-3) primile su testirano jedinjenje oralnom gavažom. Uzorci krvi (~0.3 mL) sakupljani su iz vratne vene u tube koje su sadržale K2EDTA u 0.5, 1, 3, 5, 7, i 24 h posle doze. Uzorci plazme dobijeni centrifugiranjem na 4 °C (1500-2000xg), čuvani su na -20 °C do analize LC/MS/MS.
Analiza podataka za farmakokinetički esej
Farmakokinetički parametri su dobijeni ne-kompartmentalnom analizom koncentracije u plazmi (određeno LC/MS/MS) naspram vremenskih podataka (ThermoKinetica Software verzija 5.0). Pik koncentracije (Cmax) i vreme za Cmax5Tmax5zabeleženi su direktno iz eksperimentalnih opservacija. Površina ispod krive od vremena nula do vremena poslednjeg uzrokovanja (AUCo-t) izračunata je korišćenjem kombinacije linearnog i trapezoidnog sumiranja. Ukupni klirens iz plazme (CLTp), zapremina distribucije ravnotežnog stanja (Vss), prividni polu-život eliminacije (ti/2) i glavno vreme zadržavanja (MRT) procenjeni su nakon IV administracije. Procena ti/2napravljena je korišćenjem minimum 3 vremenske tačke sa koncentracijama koje je bilo moguće kvantifikovati. Apsolutna oralna biodostupnost F procenjivana je kao odnos dozno-noramlizovane vrednosti AUC nakon oralne ili IV doze. Izlaganja u plazmi Primera 1 (AUCo-24hili AUCo-7h) nakon administracije proleka poređene su sa izlaganjem nakon administracije Primera 1. Procenjene su relativne biodostupnosti proleka u odnosu na Primer 1 (Tabela 21).

Claims (14)

1. Jedinj enj e sa formulom (I): i/ili najmanje jedna so istog, gde: Ri je -CH2CH2CF3; R2 je -CH2CH2CF3ili -CH2CH2CH2CF3; R3jeH, -CH3, ili Rx; R4jeHili Ry; Rx je: -CH2OC(0)CH(CH3)NH2, -CH2OC(0)CH(NH2)CH(CH3)2, CH2OC(0)CH((CH(CH3)2)NHC(0)CH(NH2)CH(CH3)2, Ry je: -SCH2CH(NH2)C(0)OH, -SCH2CH(NH2)C(0)OCH3, ili SCH2CH(NH2)C(0)OC(CH3)3; Prsten A je fenil ili piridinil; svaki Raje nezavisno Cl, C1-3alkil, -CH2OH, -CF3, ciklopropil, -OCH3, i/ili - O(ciklopropil); svaki Rb je nezavisno F, Cl, -CH3, -CH2OH, -CF3, ciklopropil, i/ili -OCH3; y je nula, 1, ili 2; i z je nula, 1, ili 2; pod uslovom da Prsten A je fenil i z je nula, onda y je 1 ili 2 i najmanje jedan Ra je C1-3alkil, -CH2OH, -CF3, ciklopropil, O(ciklopropil); pod uslovom da R3je Rxonda R4je H; i pod uslovom da R4je Ry onda R3je H ili -CH3.
2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 i/ili najmanje jedna so istog, gde: Prsten A je fenil; R3jeH;i z je 1 ili 2.
3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 i/ili najmanje jedna so istog, gde: R2je-CH2CH2CF3; Prsten A je fenil; i z je 1 ili 2.
4. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 i/ili najmanje jedna so istog, gde: R2je-CH2CH2CF3; Prsten A je fenil; Raje C1-3 alkil ili -CH2OH; svaki Rb je nezavisno F i/ili Cl; yje l;i z je 1 ili 2.
5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 4 ima strukturu:
6. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 i/ili najmanje jedna so istog, ima strukturu: gde: R3jeHiliRx; R4jeHiliRy; pod uslovom da ako R3je Rx, onda R4je H; i pod uslovom da ako R4 je Ry, onda R3je H.
7. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ima strukturu:
8. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 je odabrano od: (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (1); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-hlorofenil)-9-etil-2-okso-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (2); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-hlorofenil)-9-izopropil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (3); (2R,3S)-N-(9-hloro-5-(3,4-dimetilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (4); (2R,3S)-N-(9-hloro-5-(3,5-dimetilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinarnid (5); (2R,3S)-N-((3S)-9-etil-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (6); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-hlorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(333-trifluoropropil)sukcinamid (7); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-hlorofenil)-9-metil-2-okso-23-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trilfuorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (8); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-metilfenil)-2-okso-9-(trifluorometil)-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (9); (2R,3S)-N-((3S)-9-hloro-5-(3,5-dimetilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (10); (2R,3 S)-N-((3S)-5-(3-metilfenil)-2-okso-9-(trifluorornetil)-2,3-dihidro- IH-1,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (11); (2R,3S)-N-((3S)-9-izopropil-5-(3 -metilfenil)-2-okso-2,3 -dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3 -il)-2,3 -bis(3,3,3 - trifluoropropil)sukcinamid (12); (2R,3S)-N-((3S)-9-izopropil-2-okso-5-fenil-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (13); (2R,3S)-N-((3S)-9-(ciklopropiloksi)-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (14); (2R,3S)-N-((3S)-9-(ciklopropiloksi)-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3 -dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3 -il)-2,3 -bis(3,3,3 - trifluoropropil)sukcinamid (15); (2R,3S)-N-((3S)-9-(ciklopropiloksi)-2-okso-5-fenil-2,3-dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-il)-3 -(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (16); (2R,3S)-N-((3S)-9-hloro-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (17); (2R,3S)-N-((3S)-9-metil-2-okso-5-(3-(trifluorometil)fenil)-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-3-(4,4,4-trifluorobutil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (18); (2R,3S)-N-((3S)-9-(ciklopropiloksi)-2-okso-5-fenil-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3 -trifluoropropil)sukcinamid (19); (2R,3 S)-N-((3 S)-9-metil-2-okso-5-(3 - (trifluorometil)fenil)-2,3 -dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3 - trifluoropropil)sukcinamid (20); (2R,3S)-N-((3S)-9-hloro-5-(2-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trilfuoropropil)sukcinamid (21); (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3 -dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3 -il)-2,3 -bis(3,3,3 - trifluoropropil)sukcinamid (22); (2R,3S)-N-((3S)-9-metil-2-okso-5-fenil-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (23); (2R,3S)-N-((3S)-9-ciklopropil-2-okso-5-fenil-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (24); (2R,3S)-N-((3S)-9-hloro-5-(3-ciklopropilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-23-bis(33,3-trifluoropropil)sukcinamid (25); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-hlorofenil)-9-metoksi-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (26); (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-hlorofenil)-9-metoksi-2-okso-2,3 -dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3 -il)-2,3 -bis(3,3,3 -trifluoropropil)sukcinamid (27); (2R,3S)-N-((3S)-9-hloro-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (28); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-metilfenil)-9-metoksi-2-okso-2,3 -dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3 -il)-2,3 -bis(3,3,3 -trifluoropropil)sukcinamid (29); (2R3S)-N-((3S)-5-(4-(hidroxymetil)fenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (30); (2R,3S)-N-((3S)-5-(2-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinarnid (31); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (32); (2R,3S)-N-((3S)-9-metoksi-2-okso-5-(5-(trifluorometil)-2-piridinil)-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-23-bis(33,3-trifluoropropil)sukcinamid (33); (2R,3S)-N-((3S)-5-(5-hloro-2-piridinil)-9-metoksi-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (34); (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-metoksifenil)-2-okso-2,3 -dihidro-1H-1,4-benzodiazepin-3 -il)-2,3 -bis(3,3,3 - trifluoropropil)sukcinamid (35); (2R,3S)-N-((3S)-5-(4-metilfenil)-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (36); (2R,3S)-N-((3S)-5-(3-fluorofenil)-9-(hidroxymetil)-2-okso-2,3-dihidro-1H-l ,4-benzodiazepin-3-il)-2,3-bis(3,3,3-trifluoropropil)sukcinamid (37); ((3S)-3-(((2R,3S)-3-karbamoil-6,6,6-trifluoro-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-l-il)metil L-valinat (38); ((3S)-3-(((2R,3S)-3-karbamoil-6,6,6-trifluoro-2-(333-trifluoropropil)heksanoil)amino)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-23-dihidro-lH-l,4 benzodiazepin-l-il)metil L-alaninat (39); S-(((2S,3R)-6,6,6-trifluoro-3-(((3S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-23-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)karbamoil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-L-cistein (40);terc-butilS-(((2S,3R)-6,6,6-trifluoro-3-(((3S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)karbamoil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-L-cisteinat (41); metil S-(((2S,3R)-6,6,6-trifluoro-3-(((3S)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-3-il)karbamoil)-2-(3,3,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-L-cisteinat(42); ((3S)-3-(((2R,3S)-3-karbamoil-6,6,6-trifluoro-2-(3,33-trifluoropropil)heksanoil)amino)-5-(3-fluorofenil)-9-metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-l-il)metil (4-(fosfonooksi)fenil)acetat (43); ((3S)-3-(((2R,3S)-3-karbamoil-6,6,6-trifluoro-2-(33,3-trifluoropropil)heksanoil)amino)-5-(3-fluorofe^ metil-2-okso-2,3-dihidro-lH-l,4-benzodiazepin-l-il)metil L-valil-L-valinat (44); i soli istih.
9. Farmaceutska kompozicija sadrži jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 8 i/ili najmanje jednu so istog; i farmaceutski prihvatljiv nosač.
10. Kompozicij a sadrži: (i) najmanje jedno jedinjenje sa formulom (I) koje ima strukturu: i/ili najmanje jednu so istog; (ii) jedinjenje sa formulom (I) koje ima strukturu: ili(iii) smešu (i) i (ii); gde: R3jeHiliRx; R4jeHiliRy; Rx je: -CH2OC(0)CH(CH3)NH2, -CH2OC(0)CH(NH2)CH(CH3)2, -CH2OC(0)CH((C H(CH3)2)NHC(0)CH(NH2)CH(CH3)2, Ry je: -SCH2CH(NH2)C(0)OH, -SCH2CH(NH2)C(0)OCH3, ili SCH2CH(NH2)C(0)OC(CH3)3; pod uslovom da ako R3je Rxonda R4je H; i pod uslovom da ako R4je Ry, onda R3je H.
11. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 8, ili farmaceutski prihvatljive soli istih, za primenu u terapiji.
12. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 8, ili farmaceutski prihvatljive soli istih, za primenu u lečenju kancera.
13. Jedinjenje koje ima strukturu ili farmaceutski prihvatljive soli istih, za primenu u lečenju kancera.
14. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 8, ili farmaceutski prihvatljive soli istih, za primenu sa jednim ili više dodatnih agenasa odabranih od dasatinib, paklitaksel, tamoksifen, deksametazon, i karboplatin, koji su administrirani redom ili istovremeno, za lečenje kancera.
RS20170259A 2012-09-21 2013-09-20 Jedinjenja bis(fluoroalkil)-1,4-benzodiazepinona kao notch inhibitori RS55779B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261703912P 2012-09-21 2012-09-21
PCT/US2013/060790 WO2014047372A1 (en) 2012-09-21 2013-09-20 Bis(fluoroalkyl)-1,4-benzodiazepinone compounds as notch inhibitors
EP13770806.1A EP2897945B1 (en) 2012-09-21 2013-09-20 Bis(fluoroalkyl)-1,4-benzodiazepinone compounds as notch inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS55779B1 true RS55779B1 (sr) 2017-07-31

Family

ID=49263506

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20170259A RS55779B1 (sr) 2012-09-21 2013-09-20 Jedinjenja bis(fluoroalkil)-1,4-benzodiazepinona kao notch inhibitori

Country Status (35)

Country Link
US (2) US8999918B2 (sr)
EP (1) EP2897945B1 (sr)
JP (1) JP6165255B2 (sr)
KR (1) KR102155588B1 (sr)
CN (1) CN104703976B (sr)
AR (1) AR093767A1 (sr)
AU (1) AU2013317923B2 (sr)
BR (1) BR112015005817B1 (sr)
CA (1) CA2885574C (sr)
CL (1) CL2015000711A1 (sr)
CO (1) CO7310522A2 (sr)
CY (1) CY1118739T1 (sr)
DK (1) DK2897945T3 (sr)
EA (1) EA027281B1 (sr)
ES (1) ES2617591T3 (sr)
HR (1) HRP20170352T8 (sr)
HU (1) HUE032038T2 (sr)
IL (1) IL237782A (sr)
LT (1) LT2897945T (sr)
MA (1) MA37929B1 (sr)
MX (1) MX367474B (sr)
MY (1) MY185233A (sr)
NZ (1) NZ707171A (sr)
PE (1) PE20150622A1 (sr)
PH (1) PH12015500414A1 (sr)
PL (1) PL2897945T3 (sr)
PT (1) PT2897945T (sr)
RS (1) RS55779B1 (sr)
SG (1) SG11201501573UA (sr)
SI (1) SI2897945T1 (sr)
SM (1) SMT201700153T1 (sr)
TN (1) TN2015000102A1 (sr)
TW (1) TWI614238B (sr)
UY (1) UY35041A (sr)
WO (1) WO2014047372A1 (sr)

Families Citing this family (46)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2897960B1 (en) 2012-09-21 2016-08-03 Bristol-Myers Squibb Company Tricyclic heterocyclic compounds as notch inhibitors
WO2014047369A1 (en) 2012-09-21 2014-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Substituted 1,5-benzodiazepinone compounds
US9242940B2 (en) 2012-09-21 2016-01-26 Bristol-Myers Squibb Company N-substituted bis(fluoroalkyl)-1,4-benzodiazepinone compounds
EP2897947B1 (en) 2012-09-21 2016-10-26 Bristol-Myers Squibb Company Alkyl, fluoroalkyl-1,4-benzodiazepinone compounds
WO2014047397A1 (en) 2012-09-21 2014-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Fluoroalkyl and fluorocycloalkyl 1,4-benzodiazepinone compounds as notch|inhibitors
WO2014047391A1 (en) 2012-09-21 2014-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Prodrugs of 1,4-benzodiazepinone compounds
EP2897954B1 (en) 2012-09-21 2016-10-26 Bristol-Myers Squibb Company Fluoroalkyl-1,4-benzodiazepinone compounds
UA110688C2 (uk) 2012-09-21 2016-01-25 Пфайзер Інк. Біциклічні піридинони
WO2014047370A1 (en) 2012-09-21 2014-03-27 Bristol-Myers Squibb Company Fluoroalkyl dibenzodiazepinone compounds
WO2014165718A1 (en) 2013-04-04 2014-10-09 Bristol-Myers Squibb Company Combination therapy for the treatment of proliferative diseases
MX368391B (es) 2015-02-03 2019-09-30 Pfizer Ciclopropabenzofuranil-piridopirazindionas novedosas.
CA3099479A1 (en) 2018-05-06 2019-11-14 Ayala Pharmaceuticals Inc. Combination compositions comprising bisfluoroalkyl-1,4- benzodiazepinone compounds and methods of use thereof
US20220339162A1 (en) * 2018-05-06 2022-10-27 Ayala Pharmaceuticals Inc. Bisfluoroalkyl-1,4-benzodiazepinone compounds for treating desmoid tumors
WO2019215585A1 (en) * 2018-05-06 2019-11-14 Ayala Pharmaceuticals Inc. Compositions comprising cd20 inhibitors and bisfluoroalkyl-1,4-benzodiazepinone compounds and methods of use thereof
CN118750499A (zh) * 2018-05-15 2024-10-11 艾雅拉制药公司 用于治疗腺样囊性癌的包含双氟烷基-1,4-苯并二氮杂䓬酮化合物的组合物
EP3793563A4 (en) * 2018-05-15 2022-02-23 Bristol-Myers Squibb Company COMPOSITIONS WITH BISFLUOROALKYL-1,4-BENZODIAZEPINONE COMPOUNDS AND METHODS OF USE THEREOF
SG11202011589WA (en) * 2018-05-24 2020-12-30 Ayala Pharmaceuticals Inc Compositions comprising bisfluoroalkyl-1,4-benzodiazepinone compounds and immunotherapeutics and methods of use thereof
TW202034900A (zh) 2018-10-02 2020-10-01 美商頻率醫療公司 有關耳用治療劑之醫藥組成物及方法
KR20220007050A (ko) 2019-04-08 2022-01-18 프리퀀시 테라퓨틱스, 인크. 난청을 치료하기 위한 chir99021과 발프로산의 조합
CA3171651A1 (en) * 2020-02-16 2021-08-19 Ayala Pharmaceuticals Inc. Methods of preparing chiral benzodiazepinone derivatives
MX2023002612A (es) * 2020-09-03 2023-05-16 Bristol Myers Squibb Co Polimorfos de compuestos de bis(fluoroalquilo)-1,4-benzodiazepinon a y usos de los mismos.
CN112142629B (zh) * 2020-10-10 2021-09-14 西北工业大学 3-氨基磺酰基丙氨酸的制备方法
EP4255409A1 (en) 2020-12-07 2023-10-11 Cellestia Biotech AG Pharmaceutical combinations for treating cancer
EP4008324A1 (en) 2020-12-07 2022-06-08 Cellestia Biotech AG Combinations comprising an inhibitor of an anti-apoptotic protein, such as bcl-2, bcl-xl, bclw or mcl-1, and a notch signaling pathway inhibitor for treating cancer
US20240269120A1 (en) 2021-06-02 2024-08-15 Cellestia Biotech Ag Method for Treating an Autoimmune and Inflammatory Disease
WO2023079132A1 (en) 2021-11-08 2023-05-11 Cellestia Biotech Ag Pharmaceutical combinations for treating cancer
EP4223292A1 (en) 2022-02-07 2023-08-09 Cellestia Biotech AG Pharmaceutical combinations for treating cancer
EP4508052A4 (en) * 2022-04-11 2026-04-01 Prism Biolab Co Ltd NEW SEVEN-ELEMENT FUSION-CYCLE COMPOUNDS
WO2024036097A1 (en) 2022-08-12 2024-02-15 Nuvalent, Inc. Heteroaromatic macrocyclic ether compounds and isotopologues thereof
US20260028319A1 (en) * 2022-12-28 2026-01-29 Immunome, Inc. Intermediate salt for the preparation of bis(fluoroalkyl) benzodiazepinone compounds
AU2024265078A1 (en) 2023-05-04 2025-12-11 Revolution Medicines, Inc. Combination therapy for a ras related disease or disorder
IL326136A (en) 2023-08-07 2026-03-01 Revolution Medicines Inc RMC-6291 for use in the treatment of a disease or disorder associated with the RAS protein
WO2025072117A1 (en) 2023-09-25 2025-04-03 Nuvalent, Inc. Heteroaromatic macrocyclic ether compounds and isotopologues thereof
US20250154171A1 (en) 2023-10-12 2025-05-15 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
CN117447393A (zh) * 2023-10-26 2024-01-26 浙江雅辰药物科技股份有限公司 一种瑞马唑仑中间体的制备方法
WO2025171296A1 (en) 2024-02-09 2025-08-14 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
WO2025240847A1 (en) 2024-05-17 2025-11-20 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
US20250375445A1 (en) 2024-06-07 2025-12-11 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras protein-related disease or disorder
WO2025265060A1 (en) 2024-06-21 2025-12-26 Revolution Medicines, Inc. Therapeutic compositions and methods for managing treatment-related effects
WO2026006747A1 (en) 2024-06-28 2026-01-02 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
WO2026015801A1 (en) 2024-07-12 2026-01-15 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras related disease or disorder
WO2026015790A1 (en) 2024-07-12 2026-01-15 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras related disease or disorder
WO2026015796A1 (en) 2024-07-12 2026-01-15 Revolution Medicines, Inc. Methods of treating a ras related disease or disorder
WO2026015825A1 (en) 2024-07-12 2026-01-15 Revolution Medicines, Inc. Use of ras inhibitor for treating pancreatic cancer
WO2026050446A1 (en) 2024-08-29 2026-03-05 Revolution Medicines, Inc. Ras inhibitors
WO2026072904A2 (en) 2024-09-26 2026-04-02 Revolution Medicines, Inc. Compositions and methods for treating lung cancer

Family Cites Families (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5324726A (en) 1989-12-18 1994-06-28 Merck & Co., Inc. Benzodiazepine analogs
JP2000507587A (ja) 1996-04-03 2000-06-20 メルク エンド カンパニー インコーポレーテッド ファルネシルタンパク質トランスフェラーゼ阻害剤
US5852010A (en) 1996-04-03 1998-12-22 Merck & Co., Inc. Inhibitors of farnesyl-protein transferase
US6635632B1 (en) 1996-12-23 2003-10-21 Athena Neurosciences, Inc. Cycloalkyl, lactam, lactone and related compounds, pharmaceutical compositions comprising same, and methods for inhibiting β-amyloid peptide release and/or its synthesis by use of such compounds
HRP990246A2 (en) * 1998-08-07 2000-06-30 Du Pont Pharm Co Succinoylamino benzodiazepines as inhibitors of a beta protein production
NZ525513A (en) 1998-08-07 2004-09-24 Pont Pharmaceuticals Du Succinoylamino lactams as inhibitors of Abeta protein production
US6737038B1 (en) 1998-11-12 2004-05-18 Bristol-Myers Squibb Company Use of small molecule radioligands to discover inhibitors of amyloid-beta peptide production and for diagnostic imaging
AU1618000A (en) * 1998-11-12 2000-05-29 Du Pont Pharmaceuticals Company Use of radioligands to screen inhibitors of amyloid-beta peptide production
EP1313426A2 (en) 1998-12-24 2003-05-28 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Succinoylamino benzodiazepines as inhibitors of a-beta protein production
EP2359831A3 (en) 1999-04-30 2012-02-01 The Regents of the University of Michigan Therapeutic applications of pro-apoptotic benzodiazepines
US6960576B2 (en) 1999-09-13 2005-11-01 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Hydroxyalkanoylaminolactams and related structures as inhibitors of Aβ protein production
US6503902B2 (en) 1999-09-13 2003-01-07 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Hydroxyalkanoylaminolactams and related structures as inhibitors of a β protein production
WO2001027108A1 (en) 1999-10-08 2001-04-19 Bristol-Myers Squibb Pharma Company AMINO LACTAM SULFONAMIDES AS INHIBITORS OF Aβ PROTEIN PRODUCTION
CA2397543A1 (en) 2000-01-24 2001-07-26 Timothy Harrison Gamma-secretase inhibitors
US6525044B2 (en) 2000-02-17 2003-02-25 Bristol-Myers Squibb Company Succinoylamino carbocycles and heterocycles as inhibitors of a-β protein production
US6495540B2 (en) 2000-03-28 2002-12-17 Bristol - Myers Squibb Pharma Company Lactams as inhibitors of A-β protein production
EP1268454A1 (en) 2000-03-31 2003-01-02 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Succinoylamino heterocycles as inhibitors of a-beta protein production
JP2004508289A (ja) 2000-04-03 2004-03-18 デュポン　ファーマシューティカルズ　カンパニー Ａβタンパク質産生の阻害剤としての環状ラクタム
CN1436175A (zh) 2000-04-03 2003-08-13 布里斯托尔-迈尔斯斯奎布药品公司 作为Aβ－蛋白生产抑制剂的环状内酰胺
GB0008710D0 (en) 2000-04-07 2000-05-31 Merck Sharp & Dohme Therapeutic compounds
CA2404273A1 (en) 2000-04-11 2001-10-18 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Substituted lactams as inhibitors of a.beta. protein production
US6878363B2 (en) 2000-05-17 2005-04-12 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Use of small molecule radioligands to discover inhibitors of amyloid-beta peptide production and for diagnostic imaging
GB0012671D0 (en) 2000-05-24 2000-07-19 Merck Sharp & Dohme Therapeutic agents
EP1268450A1 (en) 2000-06-01 2003-01-02 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Lactams substituted by cyclic succinates as inhibitors of a-beta protein production
US7001901B2 (en) 2002-08-27 2006-02-21 Bristol-Myers Squibb Company Tetrazolylpropionamides as inhibitors of Aβ protein production
BR0314595A (pt) * 2002-09-20 2005-08-09 Arrow Therapeutics Ltd Uso de um derivado de benzodiazepina ou um sal farmaceuticamente aceitável deste, inalador ou nebulisador, produto, usos de um produto e de um composto ou sal farmaceuticamente aceitável deste, derivado de benzodiazepina, composto, e, composição farmacêutica
EP1592684B1 (en) 2003-02-04 2008-07-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Malonamide derivatives as gamma-secretase inhibitors
GB0312365D0 (en) 2003-05-30 2003-07-02 Univ Aston Novel 3-substituted-1, 4-benzodiazepines
KR100834177B1 (ko) 2003-09-09 2008-05-30 에프. 호프만-라 로슈 아게 감마-세크리테이즈의 활성을 차단하는 말론아미드 유도체
EP1795198A1 (en) 2005-12-09 2007-06-13 Hubrecht Laboratorium Treatment of Barret's esophagus
MX2010001754A (es) 2007-08-14 2010-05-14 Lilly Co Eli Derivados de azepina como inhibidores de gamma secretasa.
AU2009203776A1 (en) 2008-01-11 2009-07-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Use of a gamma-secretase inhibitor for treating cancer
TWI530489B (zh) * 2011-03-22 2016-04-21 必治妥美雅史谷比公司 雙（氟烷基）－１，４－苯二氮呯酮化合物
US9242940B2 (en) * 2012-09-21 2016-01-26 Bristol-Myers Squibb Company N-substituted bis(fluoroalkyl)-1,4-benzodiazepinone compounds

Also Published As

Publication number Publication date
IL237782A (en) 2017-03-30
US20150166489A1 (en) 2015-06-18
US8999918B2 (en) 2015-04-07
WO2014047372A1 (en) 2014-03-27
AR093767A1 (es) 2015-06-24
JP6165255B2 (ja) 2017-07-19
JP2015530411A (ja) 2015-10-15
EA027281B1 (ru) 2017-07-31
LT2897945T (lt) 2017-03-27
HRP20170352T1 (hr) 2017-05-05
NZ707171A (en) 2018-01-26
PE20150622A1 (es) 2015-05-11
CA2885574A1 (en) 2014-03-27
HRP20170352T8 (hr) 2017-05-19
PH12015500414B1 (en) 2015-04-20
CN104703976A (zh) 2015-06-10
EP2897945B1 (en) 2016-12-21
TWI614238B (zh) 2018-02-11
AU2013317923A1 (en) 2015-05-07
UY35041A (es) 2014-03-31
SI2897945T1 (sl) 2017-03-31
DK2897945T3 (en) 2017-03-27
MX367474B (es) 2019-08-23
EP2897945A1 (en) 2015-07-29
SMT201700153T1 (it) 2017-05-08
EA201590581A1 (ru) 2015-07-30
PL2897945T3 (pl) 2017-06-30
BR112015005817B1 (pt) 2022-10-04
TN2015000102A1 (en) 2016-06-29
AU2013317923B2 (en) 2017-06-29
CY1118739T1 (el) 2017-07-12
CL2015000711A1 (es) 2015-09-04
MA37929A1 (fr) 2018-06-29
KR20150056780A (ko) 2015-05-27
MY185233A (en) 2021-04-30
SG11201501573UA (en) 2015-05-28
MA37929B1 (fr) 2018-09-28
ES2617591T3 (es) 2017-06-19
US20140087992A1 (en) 2014-03-27
TW201418230A (zh) 2014-05-16
MX2015003033A (es) 2015-06-10
BR112015005817A2 (pt) 2017-07-04
PT2897945T (pt) 2017-03-07
HUE032038T2 (en) 2017-09-28
CN104703976B (zh) 2017-03-08
CO7310522A2 (es) 2015-06-30
US9273014B2 (en) 2016-03-01
PH12015500414A1 (en) 2015-04-20
KR102155588B1 (ko) 2020-09-14
CA2885574C (en) 2021-06-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
RS55779B1 (sr) Jedinjenja bis(fluoroalkil)-1,4-benzodiazepinona kao notch inhibitori
CA2830902C (en) Bis(fluoroalkyl)-1,4-benzodiazepinone compounds
US9427442B2 (en) Fluoroalkyl and fluorocycloalkyl 1,4-benzodiazepinone compounds
EP2897941B1 (en) Prodrugs of 1,4-benzodiazepinone compounds
US9242941B2 (en) Alkyl, fluoroalkyl-1,4-benzodiazepinone compounds
WO2014047392A1 (en) Fluoroalkyl-1,4-benzodiazepinone compounds
WO2014047369A1 (en) Substituted 1,5-benzodiazepinone compounds
WO2014047393A9 (en) N-substituted bis(fluoroalkyl)-1,4-benzodiazepinone compounds