RS55814B1 - Derivati makrociklina za tretman proliferativnih bolesti - Google Patents

Derivati makrociklina za tretman proliferativnih bolesti

Info

Publication number
RS55814B1
RS55814B1 RS20170280A RSP20170280A RS55814B1 RS 55814 B1 RS55814 B1 RS 55814B1 RS 20170280 A RS20170280 A RS 20170280A RS P20170280 A RSP20170280 A RS P20170280A RS 55814 B1 RS55814 B1 RS 55814B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
alkyl
hydrogen
compound
group
aryl
Prior art date
Application number
RS20170280A
Other languages
English (en)
Inventor
Simon Bailey
Benjamin Joseph Burke
Michael Raymond Collins
Jingrong Jean Cui
Judith Gail Deal
Robert Louis Hoffman
Qinhua Huang
Ted William Johnson
Robert Steven Kania
John Charles Kath
Phuong Thi Quy Le
Michele Ann Mctigue
Cynthia Louise Palmer
Paul Francis Richardson
Neal William Sach
Original Assignee
Pfizer
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=48142828&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS55814(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Pfizer filed Critical Pfizer
Publication of RS55814B1 publication Critical patent/RS55814B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/08—Bridged systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/08—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D491/18—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D498/18—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D513/18—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D273/00—Heterocyclic compounds containing rings having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D261/00 - C07D271/00
    • C07D273/02—Heterocyclic compounds containing rings having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D261/00 - C07D271/00 having two nitrogen atoms and only one oxygen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

Polje pronalaska
[0001]Ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja formule (I) i njihove farmaceutski prihvatljive soli, na farmaceutske kompozicije koje uključuju ova jedinjenja i na njihovu upotrebu. Jedinjenja i soli iz ovog pronalaska inhibiraju anaplastičnu limfoma kinazu (ALK) i korisna su za lečenje ili poboljšanje abnormalnih poremećaja proliferativnih ćelija, kao što je kancer.
Poreklo pronalaska
[0002]Anaplastična limfoma kinaza (ALK) je član superfamilije receptora tirozin kinaze i na nivou sekvence amino kiseline je najčvršće povezana sa članovima kao što su Ros-1, leukocit tirozin kinaza, receptori insulina i cMet (receptor hepatičnog faktora rasta) (Kostić M i sardnici, Genome Biologv, 2002, 3,1-12). Kao i svi članovi ove familije gena, poseduje domen ekstracelularnog vezivanja Uganda, spajajuću sekvencu transmembrane i katalitički region/domen signalizacije intracelularne kinaze. Identitet Uganda signalizacije za ALK još uvek nije objašnjen i u literaturi su predloženi različiti mehanizmi (Stoica G.E. i saradnici, J. Biol. Chem., 2001, 276, 16772-16779; Stoica G.E. i saradnici, J. Biol. Chem., 2002, 277, 35990-35999; Mewng K. i saradnici, PNAS, 2000, 97, 2603-2608; Perez-Pinera P. i saradnici, J. Biol. Chem., 2007, 282, 28683-28690). Stimulacija ALK dovodi do kaskade intracelularne signalizacije preko fosfolipaze-C, PBKinaze i STAT3 (između drugih proteina signalizacije)
(Turner S.D. i saradnici, Cell Signal, 2007, 19, 740-747).
[0003]ALK se u velikom broju pojavljuje u nervnom sistemu u razvoju (Iwahara T. i saradnici, Oncogene, 1997, 14, 439-449). Ta velika zastupljenost ima tendenciju da se smanji kod odraslih životinja, mada se njeno pojavljivanje zadržava u određenim regionima mozga, kičmene moždine i oka (Vernersson E. i saradnici, Gene Expression Patterns, 2006, 6, 448-461).
[0004]ALK ima važnu ulogu u onkologiji (Webb T.R. i saradnici, Expert Reviews in Anticancer Therapv, 2009 9 331-355). Pokazano je da i tačke mutacije u celoj dužini ALK enzima koje dovode do aktivacije enzima a takođe i povećanje u pojavljivanju čitave dužine enzima, dovode do neuroblastoma. Pored toga, takođe je pokazano da fuzija ALK sa drugim proteinima zbog genetičkih slučajeva trnslokacije dovodi do aktivacije domena kinaze povezanog sa kancerom. Brojne ovakve ALK translokacije koje dovode do fuzija gena su viđene u limfomima, a preovlađujuća je nukleofosmin NPM-ALK fuzija nađena u limfomima anaplastičnih velikih ćelija. ALK fuzija sa EML4 dovodi do himeričnih proteina (EML4-ALK) za koje se smatra da su odgovorni za 3-5% adenokarcinoma ne-malih ćelija pluća (NSCLC) (Soda M. i saradnici, Nature, 2007, 448, 561-567).
[0005]Crizotinib je potentni dvostruki inhibitor tirozin kinaze (TKI) koji je usmeren na c-Met i ALK a nedavno je našao primenu u tretmanu NSCLC pacijenata kod kojih postoji slučaj EML4-ALK fuzije (Kwak i saradnici, New Eng. J. of Med., 2010, 363, 18, 1693-1703). Crizotinib je otkriven u PCT publikaciji broj WO 2006/021884 i United States patentu broj 7,858,643. Zabeležena je stečena rezistencija na terapiju crizotinibom a pripisana je LI 196M i Cl 156Y mutaciji u proteinima EL4-ALK fuzije (Choi Y.L. i saradnici, N. Engl. J. Med., 2010, 363, 18, 1734-1739). Kako terapija krizotinibom postaje sve pristupačnija za pacijente kod kojih postoji slučaj fuzije EML4-ALK gena, čini se da će LI 196M i Cl 156Y mutacije a verovatno i druge mutacije imati mnogo važniju ulogu u stečenoj rezistenciji na terapiju krizotinibom. Videti, na primer, Morris i saradnici, United States Patent Publication Number 2011/0256546, koja opisuje druge rezistentne mutacije na ALK inhibitoru do kojih dolazi u domenu ALK kinaze povezanom sa fuzijom gena NPM-ALK.
[0006]U skladu sa tim, postoji potreba za ALK inhibitorima i EML4-ALK inhibitorima koji imaju odgovarajući farmakološki profil, na primer, u smislu potencije, selektivnosti, farmakokinetike, sposobnost da prođu barijeru krvnih sudova mozga i trajanja delovanja. Još preciznije, postoji potreba za ALK inhibitorima koji inhibiraju protein EML4-ALK fuzije koji ima LI 196M i/ili Cl 156Y mutaciju. U tom smislu, ovaj pronalazak se odnosi na nove ALK inhibitore.
Kratak sadržaj pronalaska
[0007]Ovaj pronalazak obezbeđuje, delom, nova jedinjenja i njihove farmaceutski prihvatljive soli koje mogu da moduliraju aktivnost ALK i/ili EML4-ALK, čime postižu biološke funkcije, uključujući ali bez ograničenja na, inhibiciju proliferacije ćelija i invazivnosti ćelija, inhibiciju metastaza, uključujući apoptoze ili inhibiciju angiogeneze. Takođe su obezbeđene farmaceutske kompozicije i medikamenti koji uključuju jedinjenja ili soli iz pronalaska, same ili u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvima ili palijativnim sredstvima. Ovaj pronalazak takođe obezbeđuje, delom, postupke za izradu novih jedinjenja, njihovih soli i kompozicija i postupke za njihovu upotrebu.
[0008] Jasno je da svako otelotvorenje koje ovde opisuje inventivna jedinjenja može da se primeni samo ili u kombinaciji sa bilo kojim drugim otelotvorenjem koje opisuje inventivna jedinjenja pod uslovom da ta otelotvorenja nisu međusobno suprotstavljena
[0009] Pronalazak obezbeđuje jedinjenje formule (I)
Pri čemu:
X je izabran iz grupe koja sadrži -(CR5R6)qO(CR<5>R<6>)r-, -(CR<5>R<6>)qN(R<1>)(CR<5>R<6>)r-, -(CR<5>R<6>)qC(0)N(R<1>)(CR<5>R<6>)r- i -(CR^^NCR^CfPKCR^V;
Y i Z su svaki nezavisno N ili CH, uz uslov da kada je Y = N, Z je CH a kada je Z = N, Y je
CH;
A je prsten izabran od C6-C12aril i 5-6 članog heteroaril prstena;
R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Cć alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 člani heteroaliciklil i 5-6 člani heteroaril, pri čemu svaki vodonik na navedenom Ci-Cć alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 članom heteroalicikličnom i 5-6 članom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH.2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -NO2, -CN,
-OR<9>, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(0)OR<9>, -C(=NR<9>)NR9R1<0>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>; svaki R<2>je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži halogen, Ci-Cć alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 člani heteroaliciklil, 5-6 člani heteroaril, -S(0)tR<7>, -S(0)2NR7R<8>, -S(0)2OR<7>, -NO2, -(CR<5>R<6>)qNR<7>R<8>, -N(CR<5>R<6>)(CR<5>R<6>)qNR<7>R<8>, -OR<7>, -0(CR5R<6>)(CR<5>R<6>)qOR<7>, -0(CR<5>R<6>)(CR<5>R<6>)qR<7>, -CN, -C(0)R<7>, -OC(0)R<7>, -0(CR<5>R<6>)qR<7>, -NR<7>C(0)R<8>, -(CR<5>R<6>)qC(0)OR7,-(CR<5>R<6>)qNR<7>R<8>, -C(=NR<7>)NR<7>R<8>, -NR<7>C(0)NR<7>R<8>, -NR<7>S(0)2R<8>i -(CR<5>R<6>)qC(0)NR<7>R<8>;pri čemu svaki vodonik na navedenom Ci-C6alkil, C2-Cć alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 članom heteroaliciklil i 5-6 članom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH.2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -N02, -OR<9>, -CN, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(0)OR<9>, -C(=NR<9>)NR<9>R<10>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>; R<3>i R<4>su svaki nezavisno izabrani od vodonika, Ci-Cć alkil i C3-C6cikloalkil grupe, pri čemu svaki vodonik na Ci-Cć alkil i C3-C6cikloalkil grupi može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH.2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -N02, -CN, -OR<9>, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(O) OR<9>, -C(=NR<9>)NR9R1<0>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>; svaki R<5>i R6 je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Cć alkil, C2-C6alkenil, C2-Cć alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 člani heteroaliciklil, 5-6 člani heteroaril, -OH, -NH.2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -N02, -CN, -OR<9>, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(O) OR<9>, -C(=NR<9>)NR9R1<0>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>i -C(0)NR<9>R<10>; pri čemu svaki vodonik na navedenom Ci-Cć alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, Cć-Cn aril, 3-12 članom heteroaliciklil i 5-6 članom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH.2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -NO2, -CN, -OR<9>, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(O) OR<9>, -C(=NR<9>)NR<9>R<10>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>; svaki R<7>i R<8>je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Cć alkil, C2-C6alkenil, C2-Cć alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 člani heteroaliciklil i 5-6 člani heteroaril, pri čemu svaki vodonik na navedenom Ci-Cćalkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 članom heteroaliciklil i 5-6 članom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH-2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -N02, -OR<9>, -CN, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(0)OR<9>, -C(=NR<9>)NR<9>R<10>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>;
svaki R<9>i R10 je nezavisno izabran od vodonika, C1-C6alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 članog heteroaliciklil i 5-6 članog heteroaril prstena;
m je 0, 1,2 ili 3;
nje 0, 1, 2 ili 3;
pjeO, 1,2, 3 ili 4;
svaki q je nezavisno 0, 1, 2 ili 3;
svaki r je nezavisno 0, 1, 2 ili 3; i
svaki t je nezavisno 0, 1 ili 2;
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0010]U jednom otelotvorenju ovog aspekta, Y je N. U narednom otelotvorenju ovog aspekta, Z je N. U narednom aspektu ovog otelotvorenja, Y je CH i Z je CH.
[0011]U narednom otelotvorenju ovog aspekta, X je -(CR5R6)qO(CR5R6)r- U nekim od ovih otelotvorenja, kada je X -(CR<5>R6)qO(CR<5>R<6>)r-, m je 0 i nje 3. U nekom drugom od ovih otelotvorenja, mjelinje2.U nekom drugom od ovih otelotvorenja, mje2injel.U nekom drugom od ovih otelotvorenja, m je 3 i nje 0. U još nekim drugim od ovih otelotvorenja, mje3 inje3.U nekom drugom od ovih otelotvorenja, mje2inje2.U nekim narednim od ovih otelotvorenja, mje 1 inje l.U nekom drugom od ovih otelotvorenja, m je 0, nje 3, qje 0 i r je 0. U još nekim drugim od ovih otelotvorenja, mje 1, nje 2, q je 0 i r je 0. U nekom drugom od ovih otelotvorenja, mje 2, nje 1, q je 0 i r je 0. U još nekim drugim od ovih otelotvorenja, mje 3, nje 0, qje 0 i r je 0.
[0012]U narednom otelotvorenju ovog aspekta, X je izabran iz grupe koja sadrži
-(CR^V^KCR^r, -(CR<5>R<6>)qC(0)N(R<1>)(CR<5>R<6>)r- i
-(CR^^NtR^CtOKCR^V. U jednom od otelotvorenja ovog aspekta, X je -(CR<5>R<6>)qN(R<1>)(CR<5>R<6>)r-. U narednom ovakvom otelotvorenju ovog aspekta, X je -(CR<5>R<6>)qC(0)N(R<1>)(CR<5>R<6>)r-, U narednom ovakvom otelotvorenju ovog aspekta, X je
-(CR<5>R<6>)qN(R<1>)C(0)(CR<5>R<6>)r-.
[0013]U narednom otelotvorenju ovog aspekta, X je -(CR5R6)qN(Rl)(CR5R6)r- U nekim od ovih otelotvorenja, kada je X -(CR<5>R<6>)qN(R<l>)(CR<5>R<6>)r-, mje 0 i nje 3. U nekom drugom od ovih otelotvorenja, mje 1 inje2.U nekom drugom od ovih otelotvorenja, mje2injel.U nekom drugom od ovih otelotvorenja, mje 3 i nje 0. U još nekim drugim od ovih otelotvorenja, mje3 inje3.U nekom drugom od ovih otelotvorenja, mje2inje2.U nekim narednim od ovih otelotvorenja, mje 1 inje 1. U nekom drugom od ovih otelotvorenja, mje 0, nje 3, qje 0 i r je 0. U još nekim drugim od ovih otelotvorenja, mje 1, nje 2, q je 0 i r je 0. U nekom drugom od ovih otelotvorenja, mje 2, nje 1, q je 0 i r je 0. U još nekim drugim od ovih otelotvorenja, mje 3, nje 0, qje 0 i r je 0. U nekom drugom od ovih otelotvorenja, mje 1, nje I,qje0irje0.
[0014]U narednom otelotvorenju ovog aspekta, X je -(CR<5>R<6>)qC(0)N(R<1>)(CR<5>R<6>)r-. U nekim od ovih otelotvorenja, kada je X -(CR<5>R<6>)qC(0)N(R<1>)(CR<5>R<6>>-, mje 0 i nje 2. U nekom drugom od ovih otelotvorenja, mje 0 i nje 1. U još nekim drugim od ovih otelotvorenja, mje 2 i nje 0. U nekim narednim od ovih otelotvorenja, mje2inje2.U nekom drugom od ovih otelotvorenja, mje 0, nje 2, q je 0 i r je 0. U još nekim drugim od ovih otelotvorenja, mje 0, nje 1, q je 0 i r je 0. U nekom drugom od ovih otelotvorenja, mje 2, nje 0, qje 0 i r je 0.
[0015] U narednom otelotvorenju ovog aspekta, X je -(CR<5>R<6>)qN(R<1>)C(0)(CR<5>R<5>)r-. U nekim od ovih otelotvorenja, kada je X -(CR5R6)qN(R<1>)C(0)(CR<5>R<6>)r-, mje 0 i nje 2. U nekom drugom od ovih otelotvorenja, mje 0 i nje 1. U još nekim drugim od ovih otelotvorenja, mje 2 i nje 0. U nekom drugom od ovih otelotvorenja, mje 0, nje 2, q je 0 i r je 0. U još nekim drugim od ovih otelotvorenja, mje 0, nje 1, qje 0 i r je 0. U nekom drugom od ovih otelotvorenja, mje 2, nje 0, qje 0 i r je 0.
[0016]U narednom otelotvorenju ovog aspekta, R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Cć alkil i C3-C6cikloalkil, pri čemu svaki vodonik na navedenoj Ci-Cć alkil i C3-C6cikloalkil grupi može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH2, -S(0)rR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -N02, -CN,-OR<9>, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(0)OR<9>, -C(=NR<9>)NR<9>R<10>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>. U narednom otelotvorenju ovog aspekta, R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Cć alkil i C3-C6cikloalkil.
[0017] U narednom otelotvorenju ovog aspekta, R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Cć alkil i C3-C6cikloalkil. U specifičnim otelotvorenjima, R<1>je vodonik, metil, etil ili ciklopropil grupa. U nekim otelotvorenjima, R<1>je vodonik. U drugim otelotvorenjima, R<1>je metil grupa. U drugim otelotvorenjima, R<1>je etil grupa. U drugim otelotvorenjima, R<1>je ciklopropil grupa.
[0018]U narednom otelotvorenju ovog aspekta, svaki R2 je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži Ci-C6alkil, C3-C6cikloalkil, -S(0)tR<7>, -S(0)2NR<7>R<8>, -OR<7>,-0(CR<5>R<6>)(CR<5>R<6>)qOR<7>,
-0(CR<5>R<6>)(CR5R6)qR<7>i -CN; pri čemu svaki vodonik na navedenoj Ci-C6alkil i C3-C6
cikloalkil grupi može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -NO2, -OR<9>, -CN, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>,
-C(0)OR<9>, -C(=NR<9>)NR9R1<0>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>.
[0019]U narednom otelotvorenju ovog aspekta, svaki R2 je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži Ci-C6 alkil, C3-C6cikloalkil, -S(0)tR<7>, -S(0)2NR<7>R<8>, -OR<7>,-0(CR<5>R<6>)(CR<5>R6)qOR<7>,
-0(CR<5>R<6>)(CR<5>R<6>)qR<7>i - CN.
[0020]U narednom otelotvorenju ovog aspekta, A je prsten izabran od fenil, piridin, triazin, pirazol, imidazol, tiazol, izotiazol, oksazol i izoksazol prstena.
[0021]U narednom otelotvorenju ovog aspekta, A je prsten izabran iz grupe koj sadrži fenil, piridin, pirimidin, piridazin, pirazin, triazin, pirazol, imidazol, triazol, tetrazol, tiazol, izotiazol, oksazol i izoksazol prsten.
[0022]U narednom otelotvorenju ovog aspekta, R<3>i R<4>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i Ci-Cć alkil grupu. U čestim otelotvorenjima, R<3>i R<4>su svaki nezavisno vodonik ili metil grupa. U nekim od ovih otelotvorenja, svaki od R<3>i R4 je vodonik. U nekom drugom od ovih otelotvorenja, jedan od R<3>i R4 je vodonik a drugi je metil grupa.
[0023]Pojedina preferirana otelotvorenja formule (I), ili njene farmaceutski prihvatljive soli, imaju jednu, dve ili više od narednih preferiranih karakteristika, koje mogu da se jave u kombinaciji do nivoa da nisu međusobno u suprotnosti: X je -(CR<5>R<6>)qO(CR<5>R<6>)r-, pri čemu je svaki odR<5>i R<6>H; mje 0; i nje 0;
X je -(CR^cjN^KCR^r-, pri čemu je svaki od R<5>iR<6>H;mje 0; i nje 0;
X je -(CR5R<6>)qC(0)N(R<1>)(CR<5>R<6>)r-, pri čemu je svaki odR<5>i R<6>H, mje 0 i nje 0;
<q>je 1 irje 1;
qje0irje 1;
Y i Z su svaki CH;
YjeNiZjeCH;
R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Cć alkil i C3-C6cikloalkil grupu;
R<1>je vodonik, metil, etil ili ciklopropil grupa;
R<1>je metil grupa;
A je C6-C12aril ili 5-12 člani heteroaril prsten izabran iz grupe koja sadrži fenil, piridin, pirimidin, piridazin, pirazin, triazin, pirazol, imidazol, triazol, tetrazol, tiazol, izotiazol, oksazol i izoksazol;
A je C6-C12aril ili 5-12 člani heteroaril prsten kao što su fenil, pirazol, imidazol, triazol, tiazol, izotiazol, oksazol i izoksazol;
A je C6-C12aril ili 5-12 člani heteroaril prsten kao što su fenil, pirazol, triazol, izotiazol i izoksazol;
A je pirazol prsten;
pjeO, 1 ili 2;
R2 je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži Ci-Cć alkil, C3-C6cikloalkil, -S(0)tR ,
-S(0)2NR<7>R<8>, -OR<7>, -0(CR<5>R<6>)(CR<5>R<6>)qOR<7>, -0(CR<5>R<6>)(CR<5>R<6>)qR<7>i - CN; R<3>i R<4>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i Ci-Cć alkil grupu; R<3>i R<4>su svaki nezavisno vodonik ili metil grupa; jedan od R<3>i R<4>je vodonik a drugi je metil grupa; R<5>i R<6>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i Ci-Cć alkil grupu; R<5>i R<6>su svaki nezavisno vodonik ili metil grupa; svaki odR5 i R6 je vodonik; R<7>i R<8>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i Ci-Cć alkil grupu; pri čemu svaki vodonik na navedenoj Ci-Cć alkil grupi može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -N02,-OR<9>, -CN, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(0)OR<9>, -C(=NR<9>)NR9R1<0>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>;
svaki R<9>i R10 je nezavisno izabran od vodonika, C1-C6alkil i C3-C6cikloalkil grupe.
[0024] U narednom aspektu, pronalazak obezbeđuje jedinjenje formule (V)
pri čemu:
A je prsten izabran od C6-C12aril i 5-6 članog heteroaril prstena; R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Cć alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 člani heteroaliciklil i 5-6 člani heteroaril prsten, pri čemu svaki vodonik na navedenom C1-C6 alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 članom heteroaliciklil i 5-6 članom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH.2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -N02, -CN, -OR<9>, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(0)OR<9>, -C(=NR<9>)NR9R1<0>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S( 0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>; svaki R<2>je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži halogen, Ci-Cć alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, Cć-Cn aril, 3-12 člani heteroaliciklil, 5-6 člani heteroaril prsten, -S(0)tR<7>, -S(0)2NR7R<8>, -S(0)2OR<7>, -N02, -(CR<5>R<6>)qNR<7>R<8>, -N(CR<5>R<6>)(CR<5>R<6>)qNR<7>R<8>, -OR<7>, -0(CR5R<6>)(CR<5>R<6>)qOR<7>, -0(CR<5>R<6>)(CR<5>R<6>)qR<7>, -CN, -C(0)R<7>, -OC(0)R<7>, -0(CR<5>R<6>)qR<7>, -NR<7>C(0)R<8>, -(CR<5>R<6>)qC(0)OR<7>, -(CR<5>R<6>)qNR<7>R<8>, -C(=NR<7>)NR<7>R<8>, -NR<7>C(0)NR<7>R<8>,-NR<7>S(0)2R<8>i -(CR<5>R<6>)qC(0)NR<7>R<8>;pri čemu svaki vodonik na navedenom Ci-Cćalkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 članom heteroaliciklil i 5-6 članom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH.2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -N02, -OR<9>, -CN, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(0)OR<9>, -C(=NR<9>)NR9R1<0>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>; R<3>i R<4>su svaki nezavisno izabrani od vodonika, Ci-Cć alkil i C3-C6cikloalkil grupe, pri čemu svaki vodonik na Ci-Cć alkil i C3-C6cikloalkil grupi može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH.2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -N02, -CN, -OR<9>, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(O) OR<9>, -C(=NR<9>)NR9R1<0>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>; svaki R<5>i R6 je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Cć alkil, C2-C6alkenil, C2-Cć alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 člani heteroaliciklil, 5-6 člani heteroaril prsten, -OH, -NH.2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -N02, -CN, -OR<9>, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(0)OR<9>, -C(=NR<9>)NR9R1<0>, -R<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>i -C(0)NR<9>R<10>; pri čemu svaki vodonik na navedenom Ci-Cć alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 članom heteroaliciklil i 5-6 članom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -N02, -CN, -OR<9>, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(O) OR<9>, -C(=NR<9>)NR<9>R<10>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>; svaki R<7>i R<8>je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci- Ce alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 člani heteroaliciklil i 5-6 člani heteroaril prsten, pri čemu svaki vodonik na navedenom C1-C6alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 članom heteroaliciklil i 5-6 članom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -NO2, -OR<9>, -CN, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(0)OR<9>, -C(=NR<9>)NR<9>R<10>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>;
svaki R<9>i R10 je nezavisno izabran od vodonika, C1-C6alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-Cecikloalkil, C6-C12aril, 3-12 članog heteroaliciklil i 5-6 članog heteroaril prstena; pjeO, 1,2,3 ili 4;
svaki q je nezavisno 0, 1, 2 ili 3; i
svaki t je nezavisno 0, 1 ili 2;
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0025]U jednom otelotvorenju ovog aspekta, R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, C1-Cć alkil i C3-C6cikloalkil, pri čemu svaki vodonik na navedenom Ci- Ce alkil i C3-C6cikloalkil može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH2, -S(0)rR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -NO2, -CN, -OR<9>, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(0)OR<9>, -C(=NR<9>)NR<9>R<10>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>. U narednom otelotvorenju ovog aspekta, R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Cć alkil i C3-C6cikloalkil grupu.
[0026]U narednom otelotvorenju ovog aspekta, R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Cć alkil i C3-C6cikloalkil grupu. U specifičnim otelotvorenjima, R<1>je vodonik, metil, etil ili ciklopropil grupa. U nekim otelotvorenjima, R<1>je vodonik. U drugim otelotvorenjima, R<1>je metil grupa. U drugim otelotvorenjima, R<1>je etil grupa. U drugim otelotvorenjima, R<1>je ciklopropil grupa.
[0027] U narednom otelotvorenju ovog aspekta, svaki R<2>je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži Ci-C6alkil, C3-C6cikloalkil, -S(0)tR<7>, -S(0)2NR<7>R<8>, -OR<7>,-0(CR<5>R<6>)(CR<5>R<6>)qOR<7>, -0(CR<5>R<6>)(CR<5>R6)qR<7>i -CN; pri čemu svaki vodonik na navedenoj Ci-C6alkil i C3-C6cikloalkil grupi može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -N02, -OR<9>, -CN, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(0)OR<9>, -C(=NR<9>)NR<9>R<10>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>. U narednom otelotvorenju ovog aspekta, R2 je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži Ci-Cć alkil, C3-C6cikloalkil, -S(0)tR<7>, -S(0)2NR<7>R<8>, -OR<7>,-0(CR<5>R<6>)(CR<5>R6)qOR<7>,-0(CR<5>R<6>)(CR<5>R<6>)qR<7>i - CN. U nekim od ovih otelotvorenja, R<3>i R<4>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i Ci-Cć alkil grupu.
[0028]U narednom otelotvorenju ovog aspekta, R<3>i R<4>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i Ci-Cć alkil grupu. U čestim otelotvorenjima, R<3>i R<4>su svaki nezavisno vodonik ili metil grupa. U nekim od ovih otelotvorenja, svaki od R<3>i R4 je vodonik. U nekom drugom od ovih otelotvorenja, jedan od R<3>i R4 je vodonik a drugi je metil grupa.
[0029]U narednom otelotvorenju ovog aspekta, A je prsten izabran iz grupe koja sadrži fenil, piridin, pirimidin, piridazin, pirazin, triazin, pirazol, imidazol, triazol, tetrazol, tiazol, izotiazol, oksazol i izoksazol. U specifičnim otelotvorenjima ovog aspekta, A je prsten izabran iz grupe koja sadrži specifične prstenove navedene kao odgovarajuće za prethodno data jedinjenja CD.
[0030]U narednom otelotvorenju ovog aspekta, A je prsten izabran od fenil, piridin, triazin, pirazol, imidazol, tiazol, izotiazol, oksazol i izoksazol prstena. U nekim od ovih otelotvorenja, R<3>i R<4>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i C1-C6alkil grupu.
[0031]U narednom otelotvorenju ovog aspekta, A je prsten izabran iz grupe koja sadrži fenil, piridin, pirimidin, piridazin, pirazin, triazin, pirazol, imidazol, triazol, tetrazol, tiazol, izotiazol, oksazol i izoksazol prsten. U nekim od ovih otelotvorenja, R<3>i R<4>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i Ci-Cć alkil grupu.
[0032] U narednom otelotvorenju ovog aspekta, A je prsten izabran iz grupe koja sadrži fenil, piridin, pirimidin, piridazin, pirazin, triazin, pirazol, imidazol, triazol, tetrazol, tiazol, izotiazol, oksazol i izoksazol prsten; svaki R<2>je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži Ci-Cć alkil, C3-C6cikloalkil, -S(0)tR<7>, -S(0)2NR<7>R<8>, -OR<7>,-0(CR<5>R<6>)(CR<5>R<6>)qOR<7>, -0(CR<5>R<6>)(CR<5>R6)qR<7>i -CN; i R<3>i R<4>susvaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i Ci- Ce alkil grupu.
[0033] U narednom aspektu, pronalazak obezbeđuje jedinjenje formule (VI)
pri čemu:
A je prsten izabran od C6-C12aril i 5-6 članog heteroaril prstena; R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Cć alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 člani heteroaliciklil i 5-6 člani heteroaril prsten, pri čemu svaki vodonik na navedenom C1-C6 alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 članom heteroaliciklil i 5-6 članom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH.2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -N02, -CN, -OR<9>, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(0)OR<9>, -C(=NR<9>)NR9R1<0>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>; svaki R<2>je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži halogen, Ci-Cć alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 člani heteroaliciklil, 5-6 člani heteroaril, -S(0)tR<7>, -S(0)2NR7R<8>, -S(0)2OR<7>, -NO2, -(CR<5>R<6>)qNR<7>R<8>, -N(CR<5>R<6>)(CR<5>R<6>)qNR<7>R<8>, -OR<7>, -0(CR<5>R<6>)(CR<5>R<6>)qOR<7>, -0(CR<5>R<6>)(CR<5>R<6>)qR<7>, -CN, -C(0)R<7>, -OC(0)R<7>, -0(CR<5>R<6>)qR<7>, -NR<7>C(0)R<8>, -(CR<5>R<6>)qC(0)OR<7>, -(CR<5>R<6>)qNR<7>R<8>, -C(=NR<7>)NR<7>R<8>, -NR<7>C(0)NR<7>R<8>, -NR<7>S(0)<2>R<8>i -(CR<5>R<6>)qC(0)NR<7>R<8>;pri čemu svaki vodonik na navedenom Ci-C6alkil, C2-Cć alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 članom heteroaliciklil i 5-6 članom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH.2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -N02, -OR<9>, -CN, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(0)OR<9>, -C(=NR<9>)NR9R1<0>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>; R<3>i R<4>su svaki nezavisno izabrani od vodonika, Ci-Cć alkil i C3-C6cikloalkil grupe, pri čemu svaki vodonik na Ci-Cć alkil i C3-C6cikloalkil grupi može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH.2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -N02, -CN, -OR<9>, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(O) OR<9>, -C(=NR<9>)NR9R1<0>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>; svaki R<5>i R6 je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Cć alkil, C2-C6alkenil, C2-Cć alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-Ci2aril, 3-12 člani heteroaliciklil, 5-6 člani heteroaril, -OH, -NH.2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -N02, -CN, -OR<9>, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(0)OR<9>, -C(=NR<9>)NR9R1<0>, -R<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>i -C(0)NR<9>R<10>; pri čemu svaki vodonik na navedenom Ci-Cć alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-Ci2aril, 3-12 članom heteroaliciklil i 5-6 članom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH-2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -N02, -CN, -OR<9>, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(O) OR<9>, -C(=NR<9>)NR<9>R<10>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>; svaki R<7>i R<8>je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Cć alkil, C2-C6alkenil, C2-Cć alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-Ci2aril, 3-12 člani heteroaliciklil i 5-6 člani heteroaril, pri čemu svaki vodonik na navedenom C1-C6alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-C6cikloalkil, C6-Ci2aril, 3-12 članom heteroaliciklil i 5-6 članom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH-2, -S(0)tR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -NO2, -OR<9>, -CN, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(0)OR<9>, -C(=NR<9>)NR<9>R<10>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>;
svaki R<9>i R10 je nezavisno izabran od vodonika, C1-C6alkil, C2-C6alkenil, C2-C6alkinil, C3-Cć cikloalkil, C6-C12aril, 3-12 članog heteroaliciklil i 5-6 članog heteroaril prstena; pjeO, 1,2, 3 ili 4;
svaki qje nezavisno 0, 1, 2 ili 3; i
svaki t je nezavisno 0, 1 ili 2;
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0034] U jednom otelotvorenju ovog aspekta, R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Cć alkil i C3-C6cikloalkil, pri čemu svaki vodonik na navedenoj C1-C6alkil i C3-C6cikloalkil grupi može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH2, -S(0)rR<9>, -S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -NO2, -CN,-OR<9>, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(0)OR<9>, -C(=NR<9>)NR<9>R<10>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>. U narednom otelotvorenju ovog aspekta, R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Cć alkil i C3-C6cikloalkil grupu.
[0035] U narednom otelotvorenju ovog aspekta, R<1>je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, C1-C6alkil i C3-C6cikloalkil grupu. U specifičnim otelotvorenjima, R<1>je vodonik, metil, etil ili ciklopropil grupa. U nekim otelotvorenjima, R<1>je vodonik. U drugim otelotvorenjima, R<1>je metil grupa. U drugim otelotvorenjima, R<1>je etil grupa. U drugim otelotvorenjima, R<1>je ciklopropil grupa.
[0036] U narednom otelotvorenju ovog aspekta, svaki R<2>je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži Ci-C6 alkil, C3-C6 cikloalkil, -S(0)tR<7>, -S(0)2NR<7>R<8>, -OR<7>, -0(CR5R<6>)(CR<5>R<6>)qOR<7>, -0(CR<5>R6)(CR<5>R<6>)qR<7>i -CN; pri čemu svaki vodonik na navedenoj Ci-Cć alkil i C3-C6cikloalkil grupi može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH2, -S(0)tR<9>,-S(0)2NR<9>R<10>, -S(0)2OR<9>, -N02, -OR<9>, -CN, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<9>C(0)R<10>, -C(0)OR<9>, -C(=NR<9>)NR<9>R<10>, -NR<9>C(0)NR<9>R<10>, -NR<9>S(0)2R<10>ili -C(0)NR<9>R<10>. U narednom otelotvorenju ovog aspekta, svaki R<2>je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži Ci-C6alkil, C3-C6 cikloalkil, -S(0)tR<7>, -S(0)2NR<7>R<8>, -OR<7>, -OCCR^KCR^cjOR<1>, -0(CR<5>R<6>)(CR<5>R6)qR<7>i - CN.U nekim od ovih otelotvorenja, R<3>i R<4>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i C1-C6alkil grupu.
[0037] U narednom otelotvorenju ovog aspekta, R<3>i R<4>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i Ci-Cć alkil grupu. U čestim otelotvorenjima, R<3>i R<4>su svaki nezavisno vodonik ili metil grupa. U nekim od ovih otelotvorenja, svaki od R<3>i R4 je vodonik. U nekom drugom od ovih otelotvorenja, jedan od R<3>i R4 je vodonik a drugi je metil grupa.
[0038] U narednom otelotvorenju ovog aspekta, A je prsten izabran od fenil, piridin, triazin, pirazol, imidazol, tiazol, izotiazol, oksazol i izoksazol prstena. U narednom otelotvorenju ovog aspekta, R<3>i R<4>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i Ci-Cć alkil grupu.
[0039] U narednom otelotvorenju ovog aspekta, A je prsten izabran iz grupe koja sadrži fenil, piridin, pirimidin, piridazin, pirazin, triazin, pirazol, imidazol, triazol, tetrazol, tiazol, izotiazol, oksazol i izoksazol. U specifičnim otelotvorenjima ovog aspekta, A je prsten izabran iz grupe koja sadrži specifične prstenove navedene kao odgovarajuće za prethodno data jedinjenja formule <D.
[0040] U narednom otelotvorenju ovog aspekta, A je prsten izabran od fenil, piridin, triazin, pirazol, imidazol, tiazol, izotiazol, oksazol i izoksazol prstena. U nekim od ovih otelotvorenja, R<3>i R<4>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i Ci-Cć alkil grupu.
[0041]U narednom otelotvorenju ovog aspekta, A je prsten izabran iz grupe koja sadrži fenil, piridin, pirimidin, piridazin, pirazin, triazin, pirazol, imidazol, triazol, tetrazol, tiazol, izotiazol, oksazol i izoksazol. U nekim od ovih otelotvorenja, R<3>i R<4>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i C1-C6alkil grupu.
[0042]U narednom otelotvorenju ovog aspekta, A je prsten izabran iz grupe koja sadrži fenil, piridin, pirimidin, piridazin, pirazin, triazin, pirazol, imidazol, triazol, tetrazol, tiazol, izotiazol, oksazol i izoksazol; svaki R2 je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži Ci-Cć alkil, C3-C6cikloalkil, -S(0)tR<7>, -S(0)2NR<7>R<8>, -OR<7>,-0(CR<5>R<6>)(CR<5>R<6>)qOR<7>, -0(CR5R<6>)(CR<5>R6)qR<7>i -CN; a R<3>i R<4>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži vodonik i C1-C6alkil grupu.
[0043]Ovo otkriće se odnosi na jedinjenja iz Primera 1 do Primera 137, ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so i na jedinjenje izabrano iz grupe koja sadrži: (5tf )-8-amino-3-fluoro-5,17-dimetil-13-(metilsulfonil)-16,17-dihidro-7,11 -
(meteno)dibenzo[g,/] [1,4,10]oksadiazaciklotetradecin-18(5//)-on;
(10^)-7-amino-12-fluoro-2,10,16-trimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2^-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-/z] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitril; (1 Qft)-7-amino-l 2-fiuoro-3-metoksi-10,16-dimetil-16,17-dihidro-8,4-(meteno)izotiazolo[4,3-h][2,5,11 Jbenzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-on;
7- amino-12-fluoro-2,16-dimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2#-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-/z] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitril; 8- amino-3-fluoro-17-metil-13-(metilsulfonil)-16,17-dihidro-7,11-
(meteno)dibenzo[g,/J [1,4,10]oksadiazaciklotetradecin-18(5//)-on;
7- amino-12-fluoro-1,3,16-trimetil-16,17-dihidro- l//-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-
h][2,5,11 Jbenzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-on;
#-amino-3-fluoro-17-metil-16,17-dihidro-7,11 -
(meteno)dibenzo[g,/J [1,4,1 OJoksadiazaciklotetradecin-18(5//)-on;
8- amino-3-fiuoro-5,17-dimetil-16,17-dihidro-7,11 -(meteno)dibenzo[g,/J [1,4,10]-oksadiazaciklotetradecin-18(5//)-on;
7-amino-16-etil-12-fluoro-1,3,10-trimetil-16,17-dihidro-1 H-8,4-(meteno)pirazolo [4,3-
h][ 2,5,11 Jbenzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-on;
7-amino-16-ciklopropil-12-fluoro-1,3,10-trimetil-16,17-dihidro-1 H-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-h][ 2,5,11 ]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-on;
7-amino-12-fluoro-1,3,10,16-tetrametil-16,17-dihidro- l//-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-
h][ 2,5,11 Jbenzoksadiazaciklotetradecin-15(10//J-on;
7-amino-3 -ciklopropil-12 -fluoro-2,10,16-trimetil-16,17-dihidro-2//-8,4-(meteno)pirazolo [4,3 -h][2,5,11 Jbenzoksadiazaciklotetradecin-15(10/7)-on;
7-amino-3-ciklopropil-12-fluoro-1,10,16-trimetil-l 6,17-dihidro-l//-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-h][ 2,5,11 Jbenzoksadiazaciklotetradecin-15(10/7)-on;
7-amino- 12-fluoro-3-metoksi-2,10,16-trimetil-16,17-dihidro-2/7-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-h][ 2,5,11 Jbenzoksadiazaciklotetradecin-15(10/7)-on;
7-amino-12-fluoro-3-metoksi-1,10,16-trimetil-16,17-dihidro- l//-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-
h][ 2,5,11 Jbenzoksadiazaciklotetradecin-15(10/7)-on;
7-amino-10-etil-12-fluoro-3-metoksi-1,16-dimetil-16,17-dihidro-1/7-8,4-(meteno)pirazolo [4,3 - h][ 2, 5,11 Jbenzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-on; 7-amino-10-ciklopropil-12-fluoro-3-metoksi-1,16-dimetil-16,17-dihidro-1/7-8,4-(meteno)pirazolo [4,3 - h] [ 2,5,11Jbenzoksadiazaciklotetradecin-15(10/7)-on; (107?)-7-amino-3 -etil-12-fluoro-10,16-dimetil-16,17-dihidro-3/7-8,4-(meteno)pirazolo [3,4-
h] [ 2,5,11Jbenzoksadiazaciklotetradecin-15(10/7)-on;
7- amino-12-fluoro-l,3,10,16-tetrametil-16,17-dihidro-lH-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-
h][2,5,11 Jbenzoksadiazaciklotetradecin-15(10/7)-on;
8- amino-13-fluoro-4-metoksi-11,17-dimetil-17,18-dihidro-9,5-(azeno)pirido[3,4-
h] [2,5,11 Jbenzoksadiazaciklotetradecin-16(1 l/7)-on;
7-amino-12-fluoro-2,10,16-trimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2//-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-/z] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitril; (117?)-8-amino-13-fluoro-4-metoksi-l 1,17-dimetil-17,18-dihidro-9,5-(meteno)pirido[3,4-
h][ 2,5,11 Jbenzoksadiazaciklotetradecin-16(1 l/7)-on;
(5/?)-3-fluoro-5,17-dimetil-13-(metilsulfonil)-5,16,17,18-tetrahidro-7,ll-(meteno)dibenzo[g,/][ 1,4,10]oksadiazaciklotetradecin-8-amin;
(107?)-7-amino-l 2-fluoro-2,10,16-trimetil-10,15,16,17-tetrahidro-2//-4,8-(meteno)pirazolo[4,3-/z] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitril; 12-fluoro-3-metil-3,16,17,18-tetrahidro-10/7-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-e] [ 1,12,9]benzodioksazaciklopentadecin-7-amin;
12-fluoro-3-metil-l,16,17,18-tetrahidro-10/7-8,4-(meteno)pirazolo[3,4-e] [ 1,12,9]benzodioksazaciklopentadecin-7-amin;
7-amino-12-fluoro-2,16,17,18-tetrahidro-10//-8,4-(meteno)pirazolo[3,4-e][l,12,9]benzodioksazaciklopentadecin-3-karbonitril;
7-amino-12-fluoro-16,17-dihidro- IH, 10//-8,4-(meteno)pirazolo[3,4-d][l,ll,8]benzodioksazaciklotetradecin-3-karbonitril; i
(1 Off)-7-amino-12-fluoro-10,16-dimetil-3-propil-16,17-dihidro-3//-8,4-(meteno)[ 1,2,3]triazolo[4,3-/z] [2,5,11 Jbenzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-on;
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
[0044]U narednom aspektu, pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja uključuje ovde opisano jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljiv nosač ili ekscipijent. U nekim otelotvorenjima, farmaceutska kompozicija uključuje dva ili više farmceutski prihvatljivih nosača i/ili ekscipijenata.
[0045]U narednom aspektu, pronalazak obezbeđuje ovde opisano jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu kao medikament. U jednom otelotvorenju, medikament je za upotrebu u tretmanu nenormalnog rasta ćelija kod sisara. U čestim otelotvorenjima, nenormalni rast ćelija je kancer. U jednom otelotvorenju, medikament je za upotrebu u tretmanu nenoramalnog rasta ćelija u kome je uključena ALK kod sisara. U narednom otelotvorenju, medikament je za upotrebu u tretmanu nenormalnog rasta ćelija u kome je uključen protein EML4-ALK fuzije kod sisara. U nekim od ovih otelotvorenja, protein EML4-ALK fuzije ima najmanje jednu mutaciju. U jednom otelotvorenju, mutacija je LI 196M. U narednom otelotvorenju, mutacija je Cl 156Y.
[0046]U jednom otelotvorenju, pronalazak obezbeđuje ovde opisano jedinjenje formule (I),
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u tretmanu nenormalnog rasta ćelija kod sisara. U čestim otelotvorenjima, nenormalni rast ćelija je kancer. U jednom otelotvorenju, u nenormalni rast ćelija je uključena ALK. U narednom otelotvorenju, u nenormalni rast ćelija je uključen protein EML4-ALK fuzije. U nekim od ovih otelotvorenja, protein EML4-ALK fuzije ima najmanje jednu mutaciju. U jednom otelotvorenju, mutacija je L1196M. U narednom otelotvorenju, mutacija je Cl 156Y.
[0047]Otkriće takođe obezbeđuje terapeutske postupke i upotrebe koje uključuju primenu jedinjenja iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, same ili u kombinaciji sa drugim terapeutskim ili palijativnim sredstvom na sisani kome je potreban takav tretman. U preferiranom otelotvorenju, sisari su ljudi. U drugim otelotvorenjima, sisari su psi ili mačke.
[0048]U jednom aspektu, otkriće obezbeđuje postupak za tretman nenormalnog rasta ćelija kod sisara koji uključuje primenu na sisaru terapeutski efektivne količine jedinjenja iz pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.
[0049]U narednom aspektu, otkriće obezbeđuje postupak za tretman nenormalnog rasta ćelija kod sisara koji uključuje primenu na sisaru određene količine jedinjenja iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u kombinaciji sa određenom količinom anti-tumornog sredstva, pri čemu su količine zajedno efikasne u lečenju navedenog nenormalnog rasta ćelija. U nekim otelotvorenjima, anti-tumorno sredstvo je izabrano iz grupe koja sadrži inhibitore mitoze, sredstva za alkilaciju, anti-metabolite, interkalatne antibiotike, inhibitore faktora rasta, zračenje, inhibitore ćelijskog ciklusa, enzime, inhibitore topoizomeraze, modifikatore biološkog odgovora, antitela, citotoksine, anti-hormone i antiandrogene.
[0050]U jednom otelotvorenju, otkriće obezbeđuje postupak za tretman nenormalnog rasta ćelija kod sisara koji uključuje primenu na tom sisaru terapeutski efektivne količine ovde opisanog jedinjenja formule (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. U čestim otelotvorenjima, nenormalni rast ćelija je kancer. U jednom otelotvorenju, u nenormalni rast ćelija je uključena ALK. U narednom otelotvorenju, u nenormalni rast ćelija je uključen protein EML4-ALK fuzije. U nekim od ovih otelotvorenja, protein EML4-ALK fuzije ima najmanje jednu mutaciju. U jednom otelotvorenju, mutacija je LI 196M. U narednom otelotvorenju, mutacija je C1156Y.
[0051]U narednom aspektu, otkriće obezbeđuje postupak za tretman poremećaja u koji je uključena ALK kod sisara koji obuhvata primenu na sisaru jedinjenja iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u količini koja je efikasna za lečenje navedenog poremećaja.
[0052]Jedinjenja i soli iz ovog pronalaska inhibiraju prirodni oblik ALK i/ili određene mutantne oblike ALK, uključujući proteine EML4-ALK fuzije, uključujući proteine EML4-ALK fuzije koji imaju najmanje jednu mutaciju. U jednom otelotvorenju, mutacija je LI 196M. U jednom otelotvorenju, mutacija je Cl 156Y.
[0053]U jednom otelotvorenju, otkriće obezbeđuje postupak za lečenje nenormalne proliferacije ćelija kod sisara, koji ukljuuje primenu na tom sisaru terapeutski efektivne količine jedinjenja iz pronalaska ili njegove farmacetuski prihvatljive soli. U nekim od ovih otelotvorenja, nenormalna proliferacija ćelija je kancer. U jednom otelotvorenju, u kancer je uključena ALK. U narednom otelotvorenju, u kancer je uključen protein EML4-ALK fuzije. U nekim narednim od ovih otelotvorenja, protein EML4-ALK fuzije ima najmanje jednu mutaciju. U jednom ovakvom otelotvorenju, mutacija je LI 196M. U narednom ovakvom otelotvorenju, mutacija je C1156Y.
[0054]U narednom aspektu, pronalazak obezbeđuje ovde opisano jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upoatrebu u tretmanu nenormalnog rasta ćelija kod sisara. U narednom aspektu, pronalazak obezbeđuje upotrebu ovde opisanog jedinjenja formule (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, za proizvodnju medikamenta za tretman nenormalnog rasta ćelija kod sisara.
[0055]U još jednom aspektu, pronalazak obezbeđuje upotrebu ovde opisanog jedinjenja formule (I), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, za izradu medikamenta za tretman nenormalnog rasta ćelije.
[0056]U čestim otelotvorenjima ovde opisanih postupaka i upotrebe, nenormalni rast ćelija je kancer. U nekim otelotvorenjima, kancer je izabran od kancera pluća, kancera kostiju, kancera pankreasa, kancera kože, kancera glave ili vrata, kutanozne ili intraokularne melanome, kancera materice, kancera jajnika, kancera rektuma, kancera analnog regiona, kancera želuca, kancera debelog creva, kancera dojke, karcinoma jajovoda, karcinoma endometrijuma, karcinoma grlića materice, karcinoma vagine, karcinoma vulve, Hočkinsove bolesti, kancera jednjaka, kancera tankog creva, kancera endokrinog sistema, kancera tiroidne žlezde, kancera paratiroidne žlezde, kancera nadbubrežne žlezde, sarkoma mekog tkiva, kancera uretera, kancera penisa, kancera prostate, hronične ili akutne leukemije, limfocitnog limfoma, kancera bešike, kancera bubrega ili uretera, karcinoma bubrežnih ćelija, karcinoma bubrežnih čašica, neoplazmi centralnog nervnog sistema (CNS), primarnog limfoma CNS, tumora kičmene moždine, glioma baze mozga, adenoma hipofize i njihovih kombinacija
[0057] U narednom otelotvorenju, kancer je izabran iz grupe koja sadrži kancer ne-malih ćelija pluća (NSCLC), karcinom ljuspastih ćelija, hormon-refraktorni kancer prostate, karcinom papilarnih ćelija bubrega, kolorektalni adenokarcinom, neuroblastome, anaplastičnu limfomu velikih ćelija (ALCL) i kancer želuca.
[0058]U nekim otelotvorenjima, ovde opisani postupci dalje uključuju primenu na sisaru određene količine anti-kancerogenog terapeutskog sredstva ili palijativnog sredstva, pri čemu su te količine zajedno efikasne u lečenju navedenog nenormalnog rastva ćelija. U nekim od ovih otelotvorenja, jedno ili više anti-kancerogenih terapeutskih sredstava je izabrano od anti-tumornih sredstava, anti-angiogenetskih sredstava, inhibitora transdukcije signala i antiproliferativnih sredstava, pri čemu su količine zajedno efiksne u lečenju navedenog nenormlnog rasta ćelija.
[0059]U drugim otelotvorenjima, ovde opisana upotreba uključuje upotrebu ovde opisanog jedinjenja formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u kombinaciji sa jednom ili više supstanci izabranih od anti-tumornih sredstava, anti-angiogenetskih sredstava, inhibitora transdukcije signala i antiproliferativnih sredstava.
[0060]U nekim otelotvorenjima, ovde opisani medikamenti su prilagođeni za upotrebu u kombinaciji sa jednom ili više supstanci izabranih od anti-tumornih sredstava, anti-angio genetskih sredstav, inhibitora transdukcije signala i antiproliferativnih sredstava.
[0061]Svako od otelotvorenja ovde opisanih jedinjenja iz ovog pronalaska može da se kombinuje sa jednim ili više ovde opisanih jedinjenja iz ovog pronalaska bez suprodstavljanja sa otelotvorenjem(ima) sa kojima se kombinuje. Pored toga, svako od otelotvorenja koje opisuje pronalazak u svom okviru, predviđa farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja iz pronalaska. U skladu sa tim, izraz "ili njegova farmaceutski prihvatljiva so" je implicitna u opisu svih ovde opisanih jedinjenja.
Kratak opis crteža
[0062]Slika 1: Kristalna struktura Primera 1 određena X-zracima koja pokazuje apsolutnu stereohemiju R konfiguracije za jedinjenje iz Primera 1.
Detaljan opis pronalaska
[0063]Ovaj pronalazak može jasnije da se razume na osnovu niže datog detaljnog opisa preferiranih otelotvorenja pronalaska i primera koji su dati. Jasno je da se ovde koristi terminologija samo u svrhu opisa specifičnih otelotvorenja i ne treba da bude ograničavajuća. Dalje treba da se razume da ukoliko nije ovde posebno definisano, terminologija koja se ovde koristi ima svoje uobičajeno značenje kako je poznato u relevantnoj tehnici.
[0064]Kako se ovde koristi, jedinični oblik uključuje i množinu, ukoliko nije drugačije navedeno. Na primer, supstituent obuhvata jedan ili više supstituenata.
[0065]"Alkil" se odnosi na zasićeni, monovalentni alifatični ugljovodonični radikal koji uključuje grupe ravnog ili račvastog lanca sa navedenim brojem atoma ugljenika. Alkil supstituenti obično sadrže 1 do 20 atoma ugljenika ("C1-C20alkil"), preferirano 1 do 12 atoma ugijenika ("C1-C12alkil"), još poželjnije 1 do 8 atoma ugljenika ("Ci-Cs alkil"), ili 1 do 6 atoma ugijenika ("Ci-Cć alkil"), ili 1 do 4 atoma ugijenika ("C1-C4alkil"). U primere alkil grupa spadaju metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izo-butil, terc-butil, n-pentil, izopentil, neopentil, n-heksil, n-heptil, n-oktil i slično. Alkil grupe mogu da budu supstituisane ili nesupstituisane. Posebno, ukoliko nije drugačije navedeno, alkil grupe mogu da budu supstituisane sa jednom ili više halo grupa, sve do ukupnog broja atoma vodonika prisutnih na alkil radikalu. Prema tome, C1-C4alkil uključuje halogenizovane alkil grupe, na primer, trifluorometil ili difluoroetil (to jest, CF3i -CH2CHF2).
[0066]Kako se ovde koristi, "C1-C6alkil" označava grupu ravnog ili račvastog lanca koja sadrži 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 atoma ugijenika. Ovo se takođe odnosi i ako imaju supstituente ili su oni supstituenti drugih radikala, na primer, u 0-(Ci-C6)alkil radikalima. Primeri pogodnih Ci-Cć alkil radikala su metil, etil, «-propil, z'zo-propil, «-butil, z'zo-butil, sec-butil, terc-butil, n-pentil, sec-pentil, neopentil, n-heksil, sec-heksil i slično. Primeri odgovarajućih 0-(Ci-C6)alkil radikala su metoksi, etoksi, «-propiloksi, izo-propiloksi, «-butiloksi,izo-butiloksi, sec-butiloksi i terc-butiloksi, n-pentiloksi, neopentiloksi, heksiloksi i slično.
[0067]Ukoliko su alkil grupe ovde opisane kao opciono supstituisane, mogu da budu supstituisane sa jednom ili više supstituent grupa koje su nezavisno izabrane, ukoliko nije drugačije navedeno. Ukupan broj supstituent grupa može da bude jednak sa ukupnim brojem atoma vodonika na alkil radikalu, do nivoa dokle ovakva supstitucija ima hemijskog smisla. Opciono supstituisane alkil grupe obično sadrže od 1 do 6 opcionih supstituenata, ponekad 1 do 5 opcionih supstituenata, preferirano od 1 do 4 opciona supstituenta, ili još poželjnije, od 1 do 3 opciona supstituenta.
[0068]U opcione supstituent grupe pogodne za alkil grupu spadaju, ali bez ograničenja na, C3-C8cikloalkil, 3-12 člani heterociklil, C6-C12aril i 5-12 člani heteroaril, halo, =0 (okso), =S (tiono), =N-CN, =N-OR<x>, =NR<X>, -CN, -C(0)R<x>, -C02R<x>, -C(0)NR<x>R<y>, -SR<X>, -SOR<x>, -S02R<x>-S02NR<x>R<y>, -NO2, -NR<x>R<y>, -NR<x>C(0)R<y>, -NR<x>C(0)NR<x>R<y>, -NR<x>C(0)OR<x>, -NR<x>S02R<y>, -NR<x>S02NR<x>R<y>, -OR<x>, -OC(0)R<x>i -OC(0)NR<x>R<y>; pri čemu je svaki R<x>i R<y>nezavisno H, Ci-Cs alkil, Ci-Cs acil, Ci-Cs alkenil, Ci-Cs alkinil, C3-Cg cikloalkil, 3-12 člani heterociklil, Cć-Ci2aril, ili 5-12 člani heteroaril prsten, ili R<x>i R<y>mogu da budu uzeti zajedno sa atomom N za koji su vezani da formiraju 3-12 člani heterociklil ili 5-12 člani heteroaril prsten, koji svaki opciono sadrži 1, 2 ili 3 dodatna heteroatoma izabrana od O, N i S; svaki R<x>i Ry je opciono supstituisan sa 1 do 3 supstituenta nezavisno izabrana iz grupe koja sadrži halo, =0, =S, =N-CN, =N-OR', =NR\ -CN, -C(0)R', -C02R', -C(0)NR'2, -SR', -SOR', -S02R', -S02NR'2, -NO2, -NR'2, -NR'C(0)R', -NR'C(0)NR'2, -NR'C(0)OR', -NR'S02R', -NR'S02NR'2, -OR', -OC(0)R' i -OC(0)NR'2, pri čemu je svaki R' nezavisno H, Ci-C8alkil, Ci-C8acil, Ci-Csalkenil, Ci-Csalkinil, C3-C8cikloalkil, 3-12 člani heterociklil, C6-C12aril, ili C5-C12heteroaril grupa; i pri čemu je svaka navedena C3-C8cikloalkil, 3-12 člana heterociklil, C6-C12aril i 5-12 člana heteroaril grupa opciono supstituisana kako je ovde dalje definisano.
[0069]Uobičajene supstituent grupe na alkil radikalu uključuju halo, -OH, C1-C4alkoksi, -O-C6-C12aril, -CN, =0, -COOR<x>, -OC(0)R<x>, -C(0)NR<x>R<y>, -NR<x>C(0)R<y>, -NR<x>R<y>, C3-C8cikloalkil, C6-C12aril, 5-12 člani heteroaril i 3-12 člani heterociklil; pri čemu je svaki R<x>i R<y>nezavisno H ili C1-C4alkil grupa, ili R<x>i R<y>mogu da budu uzeti zajedno sa atomom N za koji su vezani da formiraju 3-12 člani heterociklil ili 5-12 člani heteroaril prsten, koji svaki opciono sadrži 1, 2 ili 3 dodatna heteroatoma izabrana od O, N i S; pri čemu je svaki navedeni C3-C8cikloalkil, Cć-Cn aril, 5-12 člani heteroaril i 3-12 člani heterociklil prsten opciono supstituisan sa 1 do 3 supstituenta nezavisno izabrana iz grupe koja sadrži halo, -OH, =0, Ci-C4alkil, C1-C4alkoksi, Ci-C6haloalkil, Ci-C6hidroksialkil, C1-C4alkoksi-Ci-C6alkil, -CN,
-NH2, -NH(Ci-C4 alkil) i -N(Ci-C4 alkil)2 grupu.
[0070] U nekim otelotvorenjima, alkil radikal je opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata a preferirano sa 1 do 3 supstituenta, koji su nezavisno izabrani iz grupe koja sadrži halo, -OH, C1-C4alkoksi, -0-C6-Ci2aril, -CN, =0, -COOR<x>, -OC(0)R<x>, -C(0)NR<x>R<y>, -NR<x>C(0)R<y>, -NR<x>R<y>, C3-Cscikloalkil, C6-Ci2aril, 5-12-člani heteroaril i 3-12 člani heterociklil prsten; gde je svaki R<x>i R<y>nezavisno H ili C1-C4alkil grupa, ili R<x>i R<y>mogu da budu uzeti zajedno sa atomom azota za koji su vezani da formiraju 3-12 člani heterociklil ili 5-12-člani heteroaril prsten, koji svaki opciono sadrži 1, 2 ili 3 dodatna heteroatoma izabrana od O, N i S; a svaki navedeni C3-C8cikloalkil, C6-C12aril, 5-12-člani heteroaril i 3-12 člani heterociklil prstenje opciono supstituisan sa 1 do 3 supstituenta nezavisno izabrana iz grupe koja sadrži halo, -OH, =0, C1-C4alkil, C1-C4alkoksi, Ci-Cć haloalkil, Ci-Cć hidroksialkil, Ci-C4alkoksi-Ci-C6alkil, -CN, -NH2, -NH(Ci-C4alkil) i -N(Ci-C4alkil)2grupu.
[0071]U drugim otelotvorenjima, alkil radikal je opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata a preferirano sa 1 do 3 supstituenta nezavisno izabrana iz grupe koja sadrži halo, -OH, C1-C4alkoksi, -CN, -NR<x>R<y>, C3-C8cikloalkil, 3-12 člani heterociklil, C6-Ci2aril i 5-12 člani heteroaril prsten; pri čemu je svaki R<x>i R<y>nezavisno H ili C1-C4alkil grupa, ili R<x>i R<y>mogu da budu uzeti zajedno sa atomom N za koji su vezani da formiraju 3-12 člani heterociklil ili 5-12-člani heteroaril prsten, koji svaki opciono sadrži 1, 2 ili 3 dodatna heteroatoma izabrana od O, N i S; i pri čemu je svaki navedeni cikloalkil, heterociklil, aril ili heteroaril prsten opciono supstituisan sa 1 do 3 supstituenta nezavisno izabrana iz grupe koja sadrži halo, -OH, =0, C1-C4alkil, C1-C4alkoksi, Ci-Cćhaloalkil, Ci-Cćhidroksialkil, C1-C4alkoksi-Ci-C6alkil, -CN, -NH2, -NH(Ci-C4alkil) i -N(Ci-C4alkil)2grupu.
[0072]U nekim slučajevima, supstituisane alkil grupe mogu da budu posebno imenovane u odnosu na supstituent grupu. Na primer, "haloalkil" se odnosi na alkil grupu koja ima navedeni broj atoma ugijenika i koja je supstituisana sa jednim ili više halo supstituentom, a obično sadrži 1-6 atoma ugijenika i 1, 2 ili 3 halo atoma (to jest, "C1-C6haloalkil"). Prema tome, Ci-Cć haloalkil grupa uključuje trifluorometil (-CF3) i difluorometil (-CF2H).
[0073]Slično tome, "hidroksialkil" se odnosi na alkil grupu koja ima određeni broj atoma ugijenika i koja je supstituisana sa jednim ili više hidroksi supstituenata i obično sadrži 1-6 atoma ugijenika i 1, 2 ili 3 hidroksi grupe (to jest, "Ci-Cć hidroksialkil"). Prema tome, Ci-Cć hidroksialkil uključuje hidroksimetil (-CH2OH) i 2-hidroksietil (-CH2CH2OH).
[0074]"Alkoksialkil" se odnosi na alkil grupu koja ima određeni broj atoma ugijenika i koja je supstituisana sa jednim ili više alkoksi supstituenata. Alkoksialkil grupe obično sadrže 1-6 atoma ugijenika u alkil delu i supstituisane su sa 1, 2 ili 3 C1-C4alkiloksi supstituenata. Ove grupe su ponekad ovde opisane kao C1-C4alkiloksi-Ci-Cć alkil.
[0075]"Aminoalkil" se odnosi na alkil grupu koja ima određeni broj atoma ugijenika i koja je supstituisana sa jednom ili više supstituisanih ili nesupstituisanih amino grupa, a takve grupe su ovde dalje definisane. Aminoalkil grupe obično sadrže 1-6 atoma ugljenika u alkil delu i supstituisane su sa 1, 2 ili 3 amino supstituenta. Prema tome, C1-C6aminoalkil grupa uključuje, na primer, aminometil (-CH2NH2), 7V,A^-dimetilamino-etil (-CH2CH2N(CH3)2), 3-(A^-ciklopropilamino)propil (-CH2CH2CH2NH-<c>Pr) i JV-pirolidiniletil (-CH2CH2-N-pirolidinil).
[0076]"Alkenil" se odnosi na alkil grupu, kako je ovde definisano, koja sadrži najmanje dva atoma ugijenika i najmanje jednu ugljenik-ugljenik dvostruku vezu. Uobičajeno, alkenil grupe imaju 2 do 20 atoma ugijenika ("C2-C20alkenil"), preferirano 2 do 12 atoma ugijenika ("C2-C12alkenil"), još poželjnije 2 do 8 atoma ugljenika ("Ci-Cs alkenil"), ili 2 do 6 atoma ugijenika ("C2-C6alkenil"), ili 2 do 4 atoma ugijenika ("C2-C4alkenil"). Reprezentativni primeri uključuju, ali bez ograničenja na, etenil, 1-propenil, 2-propenil, 1-, 2-, ili 3-butenil i slično. "C2-C6alkenil" označava grupu ravnog ili račvastog lanca koja sadrži 1 do 6 atoma ugijenika i najmanje jednu dvostruku vezu između dva sp<2>hibridna atoma ugljenika. Ovo se takođe odnosi i na slučaj kada imaju supstituente ili su one supstituent! na drugim radikalima, na primer, u 0-(Ci-C6)alkenil radikalima. Primeri odgovarajućih Ci-Cć alkil radikala sun-propenil, z'zo-propenil, «-butenil, z'zo-butenil, n-pentenil, sec-pentenil, n-heksenil, sec-heksenil i slično. Alkenil grupe mogu da budu nesupstituisane ili supstituisane sa istim grupama kako je ovde opisano u slučaju alkil grupe.
[0077] "Alkinil" se odnosi na alkil grupu, kako je ovde definisano, koja sadrži najmanje dva atoma ugijenika i najmanje jednu ugljenik-ugljenik trostruku vezu. Alkinil grupe imaju 2 do 20 atoma ugijenika ("C2-C20alkinil"), preferirano 2 do 12 atoma ugijenika ("C2-C12alkinil"), još poželjnije 2 do 8 atoma ugijenika ("Ci-Cs alkinil"), ili 2 do 6 atoma ugijenika ("C2-C6alkinil"), ili 2 do 4 atoma ugijenika ("C2-C4alkinil"). Reprezentativni primeri uključuju, ali bez ograničenja na, etenil, 1-propinil, 2-propinil, 1-, 2-, ili 3-butinil i slično. Alkinil grupe mogu da budu nesupstituisane ili supstituisane sa istim grupama kako je ovde opisano za alkil grupu. "C2-C6alkinil" označava grupu ravnog ili račvastog lanca koja sadrži 1 do 6 atoma ugijenika i najmanje jednu trostruku vezu između dva sp hibridna atoma ugijenika. Ovo se takođe odnosi i na slučaj da imaju supstituente ili da su one supstituenti na drugim radikalima, na primer u 0-(Ci-C6)alkinil radikalima. Primeri odgovarajućih Ci-Cć alkinil radikala su propinil, butinil, pentinil, heksinil i slično.
[0078] "Alkilen", kako se ovde koristi, se odnosi na dvovalentnu hidrokarbil grupu koja ima određeni broj atoma ugijenika koji mogu zajedno da vežu dve druge grupe. Ponekad se to odnosi na -(CH2)n- gde je n 1-8 a preferirano nje 1-4. Kako je navedeno, alkilen može takođe da bude supstituisan sa drugim grupama a može da uključi jedan ili više stepeni nezasićenosti (to jest, alkenilen ili alkinilen radikal) ili prstenove. Otvorene valence alkilena ne moraju da budu na suprotnim krajevima lanca. Prema tome, -CH(Me) - i -C(Me)2- su takođe obuhvaćeni okvirom nazhiva 'alkileni', kao i ciklične grupe kao što je ciklopropan-l,l-diil i nezasićene grupe kao što su etilen (-CH=CH-) ili propilen (-CH2-CH=CH-). Kada je alkilen grupa opisana kao opciono supstituisana, supstituenti su obuhvaćeni supstituentima koji su uobičajeno prisutni na alkil grupama kako je ovde opisano.
[0079] "Heteroalkilen" se odnosi na alkilen grupu, kako je prethodno opisano, gde je jedan ili više ne-graničnih atoma ugijenika alkilen lanca zamenjeno sa -N(R)-, -O- ili -S(0)q-, gde je R = H ili C1-C4alkil grupa a q je 0-2. Na primer, grupa -0-(CH2)i_4-je 'G2-C5'-heteroalkilen grupa, gde je jedan od atoma ugijenika odgovarajuće alkilen grupe zamenjen sa O.
[0080]"Alkoksi" se odnosi na monovalentnu -O-alkil grupu, pri čemu alkil deo ima određeni broj atoma ugijenika. Alkoksi grupe obično sadrže 1 do 8 atoma ugijenika ("Ci-Cs alkoksi"), ili 1 do 6 atoma ugljenika ("Ci-Cć alkoksi"), ili 1 do 4 atoma ugijenika ("C1-C4alkoksi"). Na primer, C1-C4alkoksi ulkjučuje -OCH3, -OCH2CH3, -OCH(CH3)2, -OC(CH3)3i slično. Ove grupe mogu takođe ovde da budu označene kao metoksi, etoksi, izopropoksi, terc-butiloksi, itd. Alkoksi grupe mogu da budu nesupstituisane ili supstituisane na alkil delu istim grupama kako je ovde opisano za alkil grupu. Posebno, alkoksi grupe mogu da budu supstituisane sa jednom ili više halo grupa, do ukupnog broja atoma vodonika prisutnih na alkil delu. Prema tome, C1-C4alkoksi uključuje halogenizovane alkoksi grupe, na primer, trifluorometoksi i 2,2-difluoroetoksi (to jest, -OCF3i -OCH2CHF2).
[0081]Slično tome, "tioalkoksi" se odnosi na monovalentnu S-alkil grupu, pri čemu alkil deo ima određeni broj atoma ugijenika i može opciono da bude supstituisana na alkil delu istim grupama kako je ovde opisano za alkil grupu. Na primer, C1-C4tioalkoksi uključuje -SCH3i - SCH2CH3.
[0082]"Halogen" ili "halo" se odnosi na fluor, hlor, brom i jod (F, Cl, Br, I). Preferirano, halo se odnosi na fluor ili hlor (F ili CI).
[0083]"Heteroaril" ili "heteroaromatični" se odnosi na monociklični ili spojeni biciklični ili policiklični sistem prstenova koji imaju dobro poznate karakteristike aromatičnosti i sadrže određeni broj atoma u prstenu i uključuju najmanje jedan heteroatom izabran od N, O i S kao član prstena u aromatičnom prstenu. Uvođenje heteroatoma dozvoljava aromatičnost u 5-članim prstenovima kao i u 6-članim prstenovima. Uobičajeno, heteroaril grupe sadrže 5 do 20 atoma u prstenu ("5-20 člani heteroaril"), preferirano 5 do 14 atoma u prstenu ("5-14 člani heteroaril") i još poželjnije 5 do 12 atoma u prstenu ("5-12 člani heteroaril") ili 5 do 6 atoma u prstenu ("5-6 članom heteroaril"). Heteroaril prstenovi su vezani za osnovnu molekulu preko atoma prstena heteroaromatičnog prstena, tako da se sačuva aromatičnost. Prema tome, 6-člani heteroaril prstenovi mogu da budu vezani za osnovnu molekulu preko C atoma prstena, dok 5-člani heteroaril prstenovi mogu da budu vezani za osnovnu molekulu preko C ili N atoma prstena. Heteroaril grupa može da bude nesupstituisana ili supstituisana kako je ovde dalje opisano. Kako se ovde koristi, "5-6 člani heteroaril" se odnosi na monocikličnu grupu od 5 do 6 atoma u prstenu koja sadrži jedan, dva ili tri heteroatoma u prstenu izabranih od N, O i S, a preostali atomi prstena su C i, pored toga, koja ima potpuno konjugovani sistem pi-elektrona. Supstituenti na susednim atomima 5- ili 6-članog heteroaril prstena mogu da se kombinuju da formiraju spojeni 5- ili 6-člani karbociklični prsten opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata, kao što su okso, Ci-Cć alkil, hidroksil, amino i halogen, ili spojeni 5- ili 6-člani heterociklični prsten koji sadrži jedan, dva ili tri heteroatoma prstena izabrana odN, O i S(0)p (gde je p je 0, 1 ili 2) opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata, kao što su okso, Ci-Cć alkil, hidroksil, amino i halogen. Farmaceutski prihvatljiv heteroaril je onaj koji je dovoljno stabilan da se veže za jedinjenje iz pronalaska formuliše u farmaceutsku kompoziciju i nakon toga primeni na pacijentu kome je potrebno.
[0084]Primeri 5-članih heteroaril prstenova koji sadrže 1, 2 ili 3 heteroatoma nezavisno izabranih od O, N i S, uključuju pirolil, tienil, furanil, pirazolil, imidazolil, oksazolil,
izoksazolil, tiazolil, izotiazolil, triazolil, tetrazolil, oksadiazolil i tiadiazolil. Preferirani 6-člani heteroaril prstenovi sadrže 1 ili 2 atoma azota. Primeri 6-članih heteroaril prstenova su piridil, piridazinil, pirimidinil i pirazinil. Primeri spojenih heteroaril prstenova uključuju benzofuran, benzotiofen, indol, benzimidazol, indazol, hinolin, izohinolin, purin, triazin, naftiridin i karbazol.
[0085] Primeri uobičajenih monocikličnih heteroaril grupa uključuju, ali bez ograničenja na:
[0086]Primeri 6-članih heteroaril grupa koji imaju susedne atome prstena koji formiraju spojeni heterociklični prsten ili karbociklični prsten uključuju, ali bez ograničenja na
[0087]Ilustrativni primeri spojenog prstena heteroaril grupa uključuju, ali bez ograničenja na:
[0088]Nazivi "heteroaliciklični", "heterociklil" ili "heterociklični" mogu ovde da se koriste u istom značenju i odnose se na alifatični, zasićeni ili delimično nezasićeni sistem prstenova koji sadrži određeni broj atoma u prstenu, uključujući najmanje jedan heteroatom izabran od N, O i S kao član prstena, pri čemu je heterociklični prsten vezan za osnovnu molekulu preko atoma prstena, koji može da bude C ili N. Heteroaliciklični prstenovi mogu da budu spojeni sa jednim ili više drugih heteroalicikličnih ili karbocikličnih prstenova, pri čemu spojeni prstenovi mogu da budu zasićeni, delimično nezasićeni ili aromatični. Preferirano, heteroaliciklični prstenovi sadrže 1 do 4 heteroatoma izabrana od N, O i S kao članove prstena, a još poželjnije 1 do 2 heteroatoma prstena, pod uslovom da ovi heteroaliciklični prstenovi ne sadrže dva atoma kiseonika jedan do drugog. Heteroaliciklične grupe mogu da budu nesupstituisane ili supstituisane sa istim grupama koje su ovde opisane kao pogodne za alkil, aril ili heteroaril grupu. Pored toga, N atomi prstena mogu da budu opciono supstituisani sa grupama pogodnim za amino grupu, na primer, alkil, acil, karbamoil, sulfonil supstituentima, itd., a S atomi prstena mogu da budu opciono supstituisani sa jednom ili dve okso grupe (to jest, S(0)p, gde je p 0, 1 ili 2). U preferirane heteroaliciklične grupe spadaju 3-12 člane heteroaliciklične grupe u skladu sa ovde datom definicijom. Kako se ovde koristi, "3-12 člani heteroaliciklil" se odnosi na monocikličnu ili bicikličnu grupu koja ima 3 do 12 atoma prstena, gde su jedan, dva, tri ili četiri atoma prstena heteroatomi izabrani od N, O i S(0)p (gde je p 0, 1, 2) a preostali atomi prstena su C. Prsten može takođe da ima jednu ili više dvostrukih veza. Međutim, prsten nema potpuno konjugovani sistem pi-elektrona. Supstituenti na atomima ugijenika dva prstena mogu da se kombinuju da formiraju 5- ili 6-člani premošteni prsten koji je ili karbociklični ili heteroaliciklični i sadrži jedan, dva ili tri heteroatoma prstena izabranih odN, O i S(0)p (gde je p 0, 1 ili 2). Heteroaliciklična grupa je opciono supstituisana sa okso, hidroksinoml, amino, Ci-C6-alkil grupom i slično.
[0089] Primeri odgovarajućih delimično nezasićenih heteroalicikličnih grupa uključuju, ali bez ograničenja na:
[0090]Primeri odgovarajućih zasićenih heteroalicikličnih grupa uključuju, ali bez ograničenja na:
[0091]U čestim otelotvorenjima, heteroaliciklične grupe sadrže 3 do 12 članova prstena,
uključujući i ugljenik i neugljenične heteroatome, a preferirano 4-6 članova prstena. U nekim preferiranim otelotvorenjima, supstituent grupe koje imaju 3-12 člane heteroaliciklične grupe su izabrane od azetidinil, pirolidinil, piperidinil, piperazinil, morfolinil i tiomorfolinil prstena, koji svaki može da bude opciono supstituisan sve dok supstitucija ima hemijskog smisla.
[0092]Jasno je da su obično ne više od dva atoma N, O ili S vezana po redu, izuzev kada je okso grupa vezana za N ili S da formira nitro ili sulfonil grupu, ili u slučaju nekih heteroaromatičnih prstenova, kao što su triazin, triazol, tetrazol, oksadiazol, tiadiazol i slično.
[0093]Naziv "heterociklilalkil" može da se koristi da opiše heterocikličnu grupu određene veličine koja je vezana za osnovnu molekulu preko alkilen linkera određene dužine. Obično, ove grupe sadrže opciono supstituisani 3-12 člani heterociklil vezan za osnovnu molekulu preko C1-C4alkilen linkera. Kada je to naznačeno, ove grupe mogu da budu opciono supstituisane na alkilen delu nekim grupama koje su ovde opisane kao pogodne za alkil grupe a na heterocikličnom delu sa grupama opisanim kao pogodnim za heterociklične prstenove.
[0094]Kako se ovde koristi, "C6-C12aril" se odnosi na sve ugljenike monocikličnih grupa i spojenih policikličnih grupa u prsten sa 6 do 12 atoma ugljenika koji imaju potpuno konjugovani sistem pi-elektrona. Primeri alil grupa su fenil i naftalenil. Aril grupa može da bude supstituisana ili nesupstituisana. Supstituenti na susednim atomima ugijenika prstena Cć-C12aril prstena mogu da se kombinuju da formira 5- ili 6-člani karbociklični prsten opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata, kao što su okso, Ci-Cć alkil, hidroksil, amino i halogen, ili 5- ili 6-člani heterociklični prsten koji sadrži jedan, dva ili tri heteroatoma prstena izabrana odN, O i S(0)p (gde je p 0, 1 ili 2) opciono supstituisan sa jednim ili više supstituenata, kao što su okso, Ci-Cć alkil, hidroksil, amino i halogen. Primeri aril grupa, bez ograničenja, uključuju fenil, bifenil, naftil, antracenil, fenantrenil, indanil, indenil i tetrahidronaftil. Aril grupa može da bude nesupstituisana ili supstituisana, kako je ovde dalje opisano. Dodatni primeri Cć-Cio aril prstena koji imaju dva atoma ugijenika prstena koji formiraju spojeni heterociklični ili karbociklični prsten uključuju, ali bez ograničenja na:
[0095]Aril, heteroaril i heteroaliciklični delovi ovde opisani kao opciono supstituisani, mogu da budu supstituisani sa jednom ili više grupa supstituenata koji su nezavisno izabrani, ukoliko nije drugačije navedeno. Ukupan broj supstituent grupa može da bude jednak ukupnom broju atoma vodonika na aril, heteroaril ili heterociklil delu, sve dok takva supstitucija ima hemijskog smisla a aromatičnost se održava u slučaju aril i heteroaril prstenova. Opciono supstitusane aril, heteroaril ili heterociklil grupe obično sadrže od 1 do 5 opcionih supstituenata, ponekad 1 do 4 opcionih supstituenata, preferirno 1 do 3 opciona supstituenta, ili još poželjnije, od 1 do 2 opciona supstituenta.
[0096]Kako se ovde koristi "arilen" se odnosi na dvovalentni radikal dobijen od aromatičnog ugljovodonika ukljanjanjem atoma vodonika sa svakog od dva atoma ugijenika jezgra. U čestim otelotvorenjima, arilen prstenje 1,2-disupstituisani ili 1,3-disupstituisani arilen. Aril prsten arilen dela može da bude opciono supstituisan na položajima otvorene valence sa grupama pogodnim za aril prsten, sve dok ovakva supstitucija ima smisla. Preferirano, arilen prstenje C6-C12arilen prsten, na primer 1,2-fenilen ili 1,3-fenilen deo.
[0097] Slično tome, "heteroarilen", kako se ovde koristi, se odnosi na dvovalentni radikal dobijen od heteroaromatičnog prstena uklanjanjem atoma vodonika sa svakog od dva atoma ugijenika ili azotajezgra. U čestim otelotvorenjima, heteroarilen prstenje 1,2-disupstituisani ili 1,3-disupstituisani heteroarilen. Heteroaril prsten heteroarilen dela je opciono supstituisan sa grupama pogodnim za heteroaril prsten, sve dok takva supstitucija ima smisla. Preferirano, heteroarilen prstenje 5-12 člani heteroarilen prsten, još poželjnije 5-6 člani heteroarilen prsten, od kojih svaki može opciono da bude supstituisan.
[0098]Opcione supstituent grupe pogodne za aril, heteroaril i heteroaliciklične prstenove uključuju, ali bez ograničenja na: Ci-Cs alkil, Ci-Cs alkenil, Ci-Cg alkinil, C3-C8cikloalkil, 3-12 člani heterociklil, C6-Ci2aril i 5-12 člani heteroaril; i halo, =0, -CN, -C(0)R<x>, -C02R<x>, -C(0)NR<x>R<y>, - SR<X>, -SOR<x>, -S02R<x>-S02NR<x>R<y>, -N02, -NR<x>R<y>, -NR<x>C(0)R<y>, -NR<x>C(0)NR<x>R<y>, -NR<x>C(0)OR<x>, -NR<x>S02R<y>, -NR<x>S02NR<x>R<y>, -OR<x>, -OC(0)R<x>i -OC(0)NR<x>R<y>; pri čemu je svaki R<x>i R<y>nezavisno H, Ci-C8alkil, Ci-C8acil, Ci-C8alkenil, Ci-C8alkinil, C3-C8cikloalkil, 3-12 člani heterociklil, C6-Ci2aril, ili 5-12 člani heteroaril, ili R<x>i R<y>mogu da budu uzeti zajedno sa N atomom za koji su vezani da formiraju 3-12 člani heterociklil ili 5-12 člani heteroaril prsten, koji svaki opciono sadrži 1, 2 ili 3 dodatna heteroatoma izabrana od O, N i S; svaki R<x>i Ry je opciono supstituisan sa 1 do 3 supstituenta nezavisno izabrana iz grupe koja sadrži halo, =0, =S, =N-CN, =N-OR', =NR', -CN, -C(0)R', -CO2R', -C(0)NR'2, -SR', -SOR', -SO2R', -S02NR'2, -N02, -NR'2, -NR'C(0)R', -NR'C(0)NR'2, -NR'C(0)OR', -NR'S02R', -NR'S02NR'2, -OR', -OC(0)R' i -OC(0)NR'2, pri čemu je svaki R' nezavisno H, Ci-C8alkil, Ci-C8acil, Ci-Cs alkenil, Ci-C8alkinil, C3-C8cikloalkil, 3-12 člani heterociklil, C6-Ci2aril, ili 5-12 člani heteroaril prsten; a svaki navedeni Ci-C8alkil, Ci-C8alkenil, Ci-C8alkinil, C3-C8cikloalkil, 3-12 člani heterociklil, C6-Ci2aril i 5-12-člani heteroaril prstenje opciono supstituisan kako je ovde dalje definisano.
[0099]U tipičnim otelotvorenjima, opciona supstitucija na aril, heteroaril i heteroalicikličnim prstenovima uključuje jedan ili više supstituenata a preferirano 1 do 3 supstituenta, nezavisno izabrana iz grupe koja sadrži halo, Ci-Cs alkil, -OH, Ci-C8alkoksi, -CN, =0, -(0)R<X>,
-COOR<x>, -OC(0)R<x>, -C(0)NR<x>R<y>, -NR<x>C(0)R<y>, -SR<X>, -SOR<x>, -S02R<x>-S02NR<x>R<y>,
-NO2, -NR<x>R<y>, -NR<x>C(0)R<y>, -NR<x>C(0)NR<x>R<y>, -NR<x>C(0)OR<y>-NR<x>S02R<y>, -NR<x>S02NR<x>R<y>, -OC(0)R<x>,-OC(0)NR<x>R<y>, C3-C8cikloalkil, 3-12 člani heterociklil, C6-Ci2aril, 5-12 člani heteroaril, -0-(C3-C8cikloalkil), -0-(3-12 člani heterociklil), -0-(C6-Ci2aril) i -0-(5-12 člani heteroaril); pri čemu je svaki R<x>i R<y>nezavisno H ili C1-C4alkil grupa, ili R<x>i R<y>mogu da budu uzeti zajedno sa N za koji su vezani da formiraju 3-12 člani heterociklil ili 5-12-člani heteroaril prsten, koji svaki opciono sadrži 1, 2 ili 3 dodatna heteroatoma izabrana od O, N i S; i pri čemu je svaki navedeni Ci-Cs alkil, Ci-C8alkoksi, C3-C8cikloalkil, 3-12 člani heterociklil, C6-Ci2aril, 5-12 člani heteroaril, -0-(C3-C8cikloalkil), -0-(3-12 člani heterociklil), -0-(C6-Ci2aril) i -0-(5-12 člani heteroaril) koji je opisan kao opcioni supstituent ili je deo R<x>ili R<y>opciono supstituisan sa 1 do 3 supstituenta nezavisno izabrana iz grupe koja sadrži halo, -OH, =0, C1-C4alkil, C1-C4alkoksi, Ci-Cć haloalkil, Ci-Cć
hidroksialkil, C1-C4alkoksi-Ci-C6alkil, -CN, -NH2, -NH(Ci-C4alkil), -N(Ci-C4alkil)2iN-pirolidinil.
[0100]"Cikloalkil" se odnosi na alifatični, zasićeni ili delimično nezasićeni karbociklični sistem prstenova koji sadrži određeni broj atoma ugijenika, koji može da bude monociklični, premošteni ili spojeni biciklični ili policiklični sistem prstenova koji je vezan za osnovnu molekulu preko atoma ugijenika cikloalkil prstena. Uobičajeno, cikloalkil grupe pronalaska sadrže 3 do 12 atoma ugijenika ("C3-Ci2cikloalkil"), preferirano 3 do 8 atoma ugljenika ("C3-C8cikloalkil"). Reprezentativni primeri uključuju, na primer, ciklopropan, ciklobutan, ciklopentan, ciklopenten, cikloheksan, cikloheksen, cikloheksadien, cikloheptan, cikloheptatrien, adamantan i slično. Cikloalkil grupe mogu da budu nesupstituisane ili supstituisane sa istim grupama koje su ovde opisane kao pogodne za alkil grupu. Kako se ovde koristi, "C3-C6cikloalkil" se odnosi na sve ugljenične, monociklične ili policiklične grupe spojenih prstenova sa 3 do 6 atoma ugijenika.
[0101]"Cikloalkilalkil" može da se koristi da opiše cikloalkil prsten, obično C3-C8cikloalkil, koji je vezan za osnovnu molekulu preko alkilen linkera, obično C1-C4alkilena. Cikloalkilalkil grupe su opisane ukupnim brojem atoma ugijenika u karbocikličnom prstenu i linkeru i obično sadrže od 4-12 atoma ugljenika ("C4-Ci2cikloalkilalkil"). Prema tome, ciklopropilmetil grupa je C4-cikloalkilalkil grupa a cikloheksiletil je Cs-cikloalkilalkil. Cikloalkilalkil grupe mogu da budu nesupstituisane ili supstituisane na cikloalkil i/ili alkilen delovima istim grupama koje su ovde opisane kao pogodne za alkil grupu.
[0102]Kako je ovde opisano "arilalkil" grupa se odnosi na aril grupu koja je vezana za osnovnu molekulu preko alkilen ili sličnog linkera. Arilalkil grupe su opisane ukupnim brojem atoma ugijenika u prstenu i linkeru. Prema tome, benzil grupa je C7-arilalkil grupa a feniletilje Cs-arilalkil. Uobičajeno, arilalkil grupe sadrže 7-16 atoma ugijenika ("C7-C16arilalkil"), pri čemu aril deo sadrži 6-12 atoma ugljenika a alkilen deo sadrži 1-4 atoma ugijenika. Ove grupe mogu takođe da se predstave kao -C1-C4alkilen-C6-Ci2aril.
[0103]Kako je prethodno opisano, "heteroarilalkil" se odnosi na heteroaril grupu koja je vezana za osnovnu molekulu preko alkilen linkera a od "arilalkil" se razlikuje po tome što je najmanje jedan atom prstena aromatičnog dela heteroatom izabran odN, O i S. Heteroarilalkil grupe su ovde ponekad opisane u skladu sa ukupnim brojem atoma različitih od vodonika (to jest, C, N, S i O atoma) u kombinaciji prstena i linkera, izuzev supstituent grupa. Prema tome, na primer, piridinilmetil može da bude označen kao "C7"-heteroarilalkil. Uobičajeno, nesupstituisane heteroarilalkil grupe sadrže 6-20 atoma različitih od vodonika (uključujući C, N, S i O atome), pri čemu heteroaril deo obično sadrži 5-12 atoma a alkilen deo obično sadrži 1-4 atoma ugijenika. Ove grupe mogu takođe da se predstave kao -C1-C4alkilen-5-12 člani heteroaril.
[0104]Slično tome, "arilalkoksi" i "heteroarilalkoksi" se odnosi na aril i heteroaril grupe vezane za osnovnu molekulu preko heteroalkilen linkera (to jest, -O-alkilen-), pri čemu su grupe opisane prema ukupnom broju atoma različitih od vodonika (to jest, C, N, S i O atoma) zajedno u prstenu i linkeru. Prema tome, -0-CH2-fenil i -0-CH2-piridinil grupe su označene kao C8-arilalkoksi i Cs-heteroarilalkoksi grupe, tim redom.
[0105]Kada je arilalkil, arilalkoksi, heteroarilalkil ili heteroairlalkoksi grupa opisana kao opciono supstituisana, supstituenti mogu da budu ili na delu dvovalentnog linkera ili na delu aril ili heteroaril grupe. Supstituenti opciono prisutni na alkilen ili heteroalkilen delu su isti kao supstituenti prethodno generalno opisani za alkil ili alkoksi grupe, dok su supstituenti opciono prisutni na aril ili heteroaril delu isti kao što je prethodno generalno opisano za aril ili heteroaril grupe.
[0106]"Hidroksi" se odnosi na -OH grupu.
[0107]"Aciloksi" se odnosi na monovalentnu -OC(0)alkil grupu, pri čemu alkil deo ima određeni broj atoma ugljenika (obično Ci-Cs, preferirano C1-C6ili C1-C4) i može da bude opciono supstituisan sa grupama pogodnim za alkil. Prema tome, C1-C4aciloksi uključuje neki -OC(0)Ci-C4alkil supstituent, na primer, -OC(0)CH3.
[0108]"Acilamino" se odnosi na monovalentnu grupu, -NHC(0)alkil ili -NRC(0)alkil, pri čemu alkil deo ima određeni broj atoma ugijenika (obično Ci-Cs, preferirano Ci-Cć ili C1-C4) i može da bude opciono supstituisan sa grupama pogodnim za alkil. Prema tome, C1-C4acilamino uključuje -NHC(0)Ci-C4alkil supstituent, na primer, -NHC(0)CH3.
[0109]"Ariloksi" ili "heteroariloksi" se odnosi na opciono supstituisane -O-aril ili -O-heteroaril grupe, u svakom slučaju kada su aril i heteroaril kako je ovde dalje definisano.
[0110]"Arilamino" ili "heteroairlamino" se odnosi na opciono supstituisane -NH-aril, -NR-aril, -NH-heteroaril ili -NR-heteroaril grupe, u svakom slučaju kada su aril i heteroaril kako je ovde dalje definisano a R predstavlja supstituent pogodan za amin, na primer, alkil, acil, karbamoil ili sulfonil grupu, ili slično.
[0111]"Cijano" se odnosi na -C=N grupu.
[0112]"Nesupstituisana amino" se odnosi na -NH2grupu. Kada je amino grupa opisana kao supstituisana ili opciono supstituisana, naziv uključuje grupe koje imaju oblik -NR<x>R<y>, gde je svaki R<x>i R<y>nezavisno H, alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, heterociklil, acil, tioacil, aril, heteroaril, cikloalkilalkil, arilalkil ili heteroarilalkil grupa, u svakom slučaju u kome imaju određeni broj atoma i opciono su supstituisane kako je ovde opisano. Na primer, "alkilamino" se odnosi na -NR<x>R<y>grupu, pri čemu je jedan od R<x>i R<y>alkil deo a drugi je H a "dialkilamino" se odnosi na -NR<x>R<y>grupu pri čemu su oba od R<x>i R<y>alkil delovi, gde alkil delovi imaju navedeni broj atoma ugijenika (na primer, -NH-C1-C4alkil ili -N(Ci-C4alkil)2). Obično, alkil supstituenti na aminima imaju 1 do 8 atoma ugijenika, preferirano 1 do 6 atoma ugijenika, ili još poželjnije 1 do 4 atoma ugijenika. Naziv takođe uključuje oblike u kojima su R<x>i R<y>uzeti zajedno sa N atomom za koji su vezani da formiraju 3 do 12 člani heterociklil ili 5-12 člani heteroaril prsten koji svaki posebno može da bude opciono supstituisan kako je ovde opisano za heterociklil i heteroaril prstenove i koji može da sadrži 1 do 3 dodatna heteroatoma izabrana od N, O i S kao članove prstena, pod uslovom da takvi prstenovi ne sadrže dva susedna atoma kiseonika.
[0113]"Opciono" ili "po izboru" znači da po redu opisani slučajevi ili okolnosti mogu ali ne moraju da se dese, a opis uključuje situacije kada se slučaj ili okolnost i dese, i situacije u kojima ih nema.
[0114]Nazivi "opciono supstituisan" i "supstituisan" i "nesupstituisan" mogu da se koriste kao sinonimi da pokažu da određena grupa koja je opisana može da nema supstituente koji nisu vodonik (to jest, nesupstituisana) ili grupa može da ima jedan ili više supstituenata koji nisu vodonik (to jest supstituisana). Ukoliko nije drugačije navedeno, ukupan broj sustituenata koji mogu da budu prisutni je jednak broju H atoma prisutnih na nesupstituisanom obliku grupe koja je opisana, do nivoa kada takva supstitucija ima hemijskog smisla. Kada je opcioni supstituent vezan preko dvostruke veze, kao što je okso (=0) supstituent, grupa zauzima dve raspoložive valence, tako daje broj drugih supstituenata koji mogu da se uvedu smanjen za dva. U slučaju kada su opcioni supstituenti nezavisno izabrani sa liste alternativa, izabrane grupe mogu da budu iste ili različite.
[0115]"Farmaceutska kompozicija" se odnosi na smešu jednog ili više ovde opisanog jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, njegovog solvata, hidrata ili proleka kao aktivnog sastojka i najmanje jednog farmaceutski prihvatljivog nosača ili ekscipijenta. Namena farmaceutske kompozicije je da omogući primenu jedinjenja na sisaru.
[0116]U jednom aspektu, pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja uključuje ovde opisano jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljiv nosač ili ekscipijent. U nekim otelotvorenjima, farmaceutska kompozicija uključuje dva ili više farmaceutski prihvatljivih nosača i/ili ekscipijenta.
[0117] U nekim otelotvorenjima, farmaceutska kompozicija dalje uključuje najmanje jedno dodatno anti-kancerogeno terapeutsko sredstvo ili palijativno sredstvo. U nekim od ovih otelotvorenja, najmanje jedno dodatno medicinsko ili farmaceutsko sredstvo je anti-kancerogeno sredstvo kako je niže opisano. U nekim od ovih otelotvorenja, kombinacija obezbeđuje dodatni, više od dodatnog ili sinergistički anti-kancerogeni efekat. U nekim od ovih otelotvorenja, jedno ili više dodatnih antikancerogenih terapeutskih sredstava je izabrano iz grupe koja sadrži anti-tumorna sredstva, sredstva protiv angiogeneze, inhibitore transdukcije signala i antiproliferativna sredstva.
[0118] U jednom aspektu, otkriće obezbeđuje postupak za tretman nenormalnog rasta ćelija kod sisara koji uključuje primenu na sisaru terapeutski efektivne količine jedinjenja iz pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.
[0119] U narednom aspektu, otkriće obezbeđuje postupak za tretman nenormalnog rasta ćelija kod sisara koji uključuje primenu na sisaru određene količine jedinjenja iz pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u kombinaciji sa određenom količinom anti-tumornog sredstva, pri čemu su te količine zajedno efikasne u lečenju navedenog nenormalnog rasta ćelija. U nekim otelotvorenjima, anti-tumorno sredstvo je izabrano iz grupe koja sadrži inhibitore mitoze, sredstva za alkilaciju, anti-metabolite, interkalatne antibiotike, inhibitore faktora rasta, zračenje, inhibitore ćelijskog ciklusa, enzime, inhibitore topoizomeraze, modifikatore biološkog odgovora, antitela, citotoksine, anti-hormone i anti-androgene.
[0120] U čestim otelotvorenjima ovde datih postupaka, nenormalni rast ćelija je kancer. U nekim otelotvorenjima, postupci obezbeđuju rezultat u jednom ili više od sledećih efekata: (1) inhibiciju proliferacije ćelije kancera; (2) inhibicije invazije ćelije kancera; (3) indukciju apoptoze ćelije kancera; (4) inhibiciju metastaza ćelija kancera; ili (5) inhibiciju angiogeneze.
[0121] U narednom aspektu, otkriće obezbeđuje postupak za tretman poremećaja u kojima je uključen ALK ili protein EML4-ALK fuzije kod sisara, koji uključuje primenu na sisaru jedinjenja iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u količini koja je efikasna za lečenje navedenog poremećaja. U nekim od ovih otelotvorenja, protein EML4-ALK fuzije ima najmanje jednu mutaciju.
[0122] Kako se ovde koristi, naziv "sisar" se odnosi na ljude ili životinje koje pripadaju klasi sisara. Još preciznije, naziv sisar uključuje ljude, domaće životinje i životinje na farmi, eksperimentalne životinje, životinje u zoo vrtu, sportske i životinje za pratnju, kao što su kućni ljubimci i druge domaće životinje, uključujući ali bez ograničenja na, goveda, ovce, lasice, svinje, konje, zečeve, koze, pse, mačke i slično. U čestim otelotvorenjima, sisari su ljudi. U nekim otelotvorenjima, naziv "subjekt" može da se koristi da označi ljude. U nekim drugim otelotvorenjima, sisar je pas ili mačka.
[0123]Proteini ALK fuzije od posebnog interesa za ovaj pronalazak su mutirani oblici EML4-ALK. Od posebnog interesa su jedinjenja sposobna da inhibiraju LI 196M mutant proteina EML4-ALK fuzije i Cl 156Y mutant proteina EML4-ALK fuzije.
[0124]Ovde obezbeđena jedinjenja, kompozicije i postupci su korisni za tretman kancera uključujući, ali bez ograničenja na, kancere cirkulatornog sistema, respiratornog trakta, gastrointestinalnog sistema, genitourinarnog trakta, jetre, kostiju, nervnog sistema, reproduktivnog sistema, hematološkog sistema, usne duplje, kože, nadbubrežnih žlezda, uključujući vezivna i meka tkiva, retroperitoneum i peritoneum, oči, intraokularne melanome, i pripojene organe, dojke, glave i/ili vrata, analnog regiona, tireoidee, paratireoidee, nadbubrežne žlezde i drugih endokrinih žlezda i sličnih struktura, sekundarne i ne-specifične maligne neoplazme limfnih čvorića, sekundarne maligne neoplazme respiratornog i digestivnog sistema i sekundarne maligne neoplaze na drugim mestima.
[0125]Još preciznije, primeri kancera kada se ovde koriste u vezi sa ovim pronalaskom uključuju kancer izabran od kancera pluća, preferirano karcinoma ne malih ćelija pluća (NSCLC), limfoma, preferirano anaplastičnih limfoma velikih ćelija, neuroblastoma ili kancera mekog tkiva kao što je inflamatorni miofibroblastični tumor.
[0126]Ukoliko nije drugačije navedeno, sve što je ovde navedeno za inventivna jedinjenja odnosi se i na njihove soli, solvate i hidrate i na solvate i hidrate njihovih soli, uključujući njihove polimorfne stereoizomerne i izotopno obeležene verzije.
[0127]Jedinjenja iz pronalaska mogu da egzistiraju u obliku farmaceutski prihvatljivih soli, kao što su, na primer soli jedinjenja čije su formule ovde date nastale dodatkom kiseline i baze. Kako se ovde koristi, naziv "farmaceutski prihvatljiva so" se odnosi na one soli koje zadržavaju biološku efikasnost i osobine osnovnog jedinjenja. Izraz "farmaceutski prihvatljiva so(li)", kako se ovde koristi, ukoliko nije drugačije navedeno, uključuje soli kiselih ili baznih grupa koje mogu da budu prisutne ujedinjenjima čije su formule ovde otkrivene.
[0128]Na primer, jedinjenja iz pronalaska koja su u osnovi bzna su sposobna da formiraju veliki borj različitih soli sa različitim neorganskim i organskim kiselinama. Mada ovakve soli moraju da budu farmaceutski prihvatljive za primenu na sisarima u praksi je često poželjnije da se iz reaktivne smeše prvo izoluje jedinjenje iz ovog pronalaska kao farmaceutski neprihvatljiva so, a nakon toga se jednostavno ponovo konvertuje ujedinjenje u obliku slobodne baze tretmanom sa alkalnim reagensom a nakon toga se ova slobodna baza konvertuje u farmaceutski prihvatljivu so dodatkom kiseline. Soli nastale dodatkom kiseline u bazna jedinjenja ovog pronalaska mogu da se izrade tretiranjem baznog jedinjenja sa potpuno ekvivalentnom količinom izabrane mineralne ili organske kiseline u medijumu organskog rastvarača ili u odgovarajućem organskom rastvaraču kao što su metanol ili etanol. Nakon uparavanja rastvarača, dobija se željena čvrsta so. Željena kisela so može tkođe da se precipitira iz rastvora slobodne baze u organskom rastvaraču dodavanajem u rastvor odgovarajuće mineralne ili organske kiseline.
[0129]Kiseline koje mogu da se koriste za izradu farmaceutski prihvatljivih soli dodatkom kiseline ovakvih baznih jedinjenja su one koje grade ne-toksične soli dodatkom kiseline, to jest, soli koje sadrže farmakološki prihvatljive anjone kao što su hidrohlorid, hidrobromid, hidrojodid, nitrat, sulfat, bisulfat, fosfat, kiseli fosfat, izonikotinat, acetat, laktat, salicilat, citrat, kiseli citrat, tartarat, pantotenat, bitartarat, askorbat, sukcinat, maleat, gentisinat, fumarat, glukonat, glukuronat, saharat, format, benzoat, glutamat, metansulfonat, etansulfonat, benzensulfonat, p toluensulfonat i pamoat [to jest, l,l'-metilen-bis-(2-hidroksi-3-naftoat)] soli.
[0130]Primeri soli uključuju, ali bez ogrničenja na, acetatne, akrilatne, benzensulfonatne, benzoatne (kao što su hlorbenzoatne, metilbenzoatne, dinitrobenzoatne, hidroksibenzoatne i metoksibenzoatne), bikarbonatne, bisulfatne, bisulfitne, bitartaratne, boratne, bromidne, butin-1,4-dioatne, kalcijum edetatne, kamsilatne, karbonatne, hloridne, kaproatne, kaprilatne, klavulanatne, citratne, dekanoatne, dihidrohloridne, dihidrogenfosfatne, edetatne, edisilatne, estolatne, esilatne, etilsukcinatne, formatne, fumaratne, gluceptatne, glukonatne, glutamatne, glikolatne, glikolilarsanilatne, heptanoatne, heksan-l,6-dioatne, heksilrezorcinatne, hidrabamintne, hidrobromidne, hidrohloridne, y-hidroksibutiratne, jodidne, izobutiratne, izotionatne, laktatne, laktobionatne, lauratne, malatne, maleatne, malonatne, mandelatne, mesilatne, metafosfatne, metan-sulfonatne, metilsulfatne, monohidrogenfosfatne, mukatne, napsilatne, naftalen-1 -sulfonatne, naftalen-2-sulfonatne, nitrat, oleatne, oksalatne, pamoatne (embonatne), palmitatne, pantotenatne, fenilacetatne, fenilbutiratne, fenilpropionatne, ftalatne, fosfatne/difosfatne, poligalakturonatne, propansulfonatne, propionatne, propiolatne, pirofosfatne, pirosulfatne, salicilatne, stearatne, subacetatne, suberatne, sukcinatne, sulfatne, sulfonatne, sulfitne, tanatne, tartaratne, teoklatne, tosilatne, trietiodatne i valeratne soli.
[0131]Ilustrativni primeri odgovarajućih soli uključuju organske soli dobijene od amino kiselina kao što su glicin i arginin, amonijak, primarni, sekundarni i tercijerni amini i ciklični amini kao što su piperidin, morfolin i piperazin i neorganske soli dobij ene od natrijuma, kalcijuma, kalijuma, magnezijuma, mangana, gvožđa, bakra, cinka, aluminijuma i litijuma.
[0132] Jedinjenja iz pronalaska koja imaju bazni deo, kao što je amino grupa, mogu, pored kiselina koje su prethodno navedene, da formiraju farmaceutski prihvatljive soli sa različitim amino kiselinama.
[0133] Ona jedinjenja iz pronalaska koja su po prirodi kisela, sposobna su da formiraju bazne soli sa različitim farmakološki prihvatljivim katjonima. U primere ovakvih soli spadju soli alkalnih metala ili soli zemno-alkalnih metala, a posebno soli natrijuma i kalijuma. Sve ove soli se izrađuju uobičajenim tehnikama. Hemijske baze koje se koriste kao reagensi za izradu farmaceutski prihvatljivih baznih soli iz ovog pronalaska su one koje grade ne-toksične bazne soli sa kiselim jedinjenjima iz pronalaska. Ove soli mogu da se izrade bilo kojim odgovarajućim postupkom, na primer, tretmanom slobodne kiseline sa neorganskom ili organskom bazom, kao što su amin (primarni, sekundarni i tercijerni), hidroksid alkalnog metala ili hidroksid zemno alkalnog metala ili slično. Ove soli mogu takođe da se izrade tretiranjem odgovarajućih kiselih jedinjenja sa vodenim rastvorom koji sadrži željene farmakološki prihvatljive katjone, a nakon toga uparavanjem dobijenog rastvora do sušenja, preferirano pod sniženim pritiskom. Alternativno, mogu takođe da se izrade mešanjem slabije alkalnih rastvora kiselih jedinjenja i alkoksida željenog alkalnog metala, a nakon toga uparavanjem dobijenog rastvora do sušenja, na isti način kao prethodno. U drugom slučaju, preferirano se uzimaju stehiometrijske količne reagenasa kako bi se osigurala potpuna reakcija i maksimum prinosa željenog finalnog produkta.
[0134] Hemijske baze koje mogu da se koriste kao reagensi za izradu farmaceutski prihvatljivih baznih soli jedinjenja iz pronalaska koja su po prirodi kisela su one koje grade netoksične bazne soli sa tim jedinjenj ima. U ovakve netoksične bazne soli spadaju, ali bez ograničenja na, one koje su dobijene od takvih farmakološki prihvatljivih katjona kao što su katj oni alkalnih metala (na primer, kalijum i natrijum) i katj oni zemno alkalnih metala (na primer, kalcijum i magnezijum), amonijak ili soli nastale dodatkom amina rastvorljivih u vodi kao što je N-metilglukamin-(meglumin) i niži alkanolammonium i druge bazne soli farmaceutski prihvatljivih organskih amina.
[0135] Takođe mogu da se formiraju hemisoli kiselina i baza, na primer, hemisulfatne i hemikalcijumove soli.
[0136] Za pregled odgovarajućih soli, videti "Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use", Stahl i Wermuth (Wiley-VCH, Weinheim, Germanv, 2002).
[0137] Soli iz ovog pronalaska mogu da se izrade u skladu sa postupcima poznatim stručnjacima sa iskustvom u tehnici. Farmaceutski prihvatljiva so inventivnih jedinjenja može lako da se izradi mešanjem rastvora jedinjenja i željene kiseline ili baze, po potrebi. So može da precipitira iz rastvora i može da se izdvoji filtriranjem ili može da se obnovi uparavanjem rastvarača. Stepen jonizacije soli može da varira od potpuno jonizovane do skoro nejonizovane.
[0138] Stručnjak sa iskustvom u tehnici će da zna da jedinjenja iz pronalaska u obliku slobodne baze koja imaju baznu funkcionalnu grupu mogu da se konvertuju u soli nastale dodavanjem kiseline tretiranjem sa odgovarajućom kiselinom u stehiometrijskom višku. Soli jedinjenja iz pronalaska nastale dodatkom kiseline mogu da se ponovo konvertuju u odgovarajuću slobodnu bazu tretiranjem sa odgovarajućom bazom kao što su kalijum karbonat ili natrij um hidroksid, u stehiometrijskom višku, obično u prisustvu vodenog rastvarača i na temperaturi između približno 0°C i 100°C. Oblik slobodne baze može da se izdvoji uobičajenim načinima kao što je ekstrakcija sa organskim rastvaračem. Pored toga, soli jedinjenja iz pronalaska nastale dodatkom kiseline mogu da se zamene korišćenjem prednosti različite rastvorljivosti soli, isparljivosti ili aciditeta kiselina, ili tretiranjem sa odgovarajućom smolom izmenjivača jona. Na primer, izmena može da se postigne reakcijom soli jedinjenja iz pronalaska sa malim stehiometrijskim viškom kiseline manje pK nego što je ima komponenta početne soli. Ova konverzija se obično izvodi na temperaturi između približno 0°C i tačke ključanja rastvarača koji se koristi kao medijum za proceduru. Slične izmene su moguće sa solima nastalim dodatkom baze, obično preko oblika slobodne baze kao međufaze.
[0139] Farmaceutski prihvaljive soli jedinjenja iz pronalaska mogu da se izrade jednim ili više od sledećih postupaka: (i) reakcijom jedinjenja iz pronalaska sa željenom kiselinom ili bazom; (ii) uklanjanjem kiselo- ili bazno-labilne zaštitne grupe sa odgovarajućeg prekursora jedinjenja iz pronalaska ili otvaranjem prstena odgovarajućeg cikličnog prekursora, na primer, laktona ili laktama, korišćenjem željene kiseline ili baze; ili (iii) konverzijom jedne soli jedinjenja iz pronalaska u drugu, reakcijom sa odgovarajućom kiselinom ili bazom ili pomoću odgovarajuće kolone jonskih izmenjivača.
[0140] Sve tri reakcije se obično izvode u rastvoru. Dobijena so može da precipitira i da se izdvoji filtriranjem ili može ponovo da nastane uparavanjem rastvarača. Stepen jonizacije u nastloj soli može da varira od potpuno jonizovane do skoro ne-jonizovane.
[0141]Jedinjenja iz pronalaska mogu da egzistiraju i u nesolvatnom i u solvatnom obliku. Kada su rastvarač ili voda čvrsto vezani, kompleks će da ima dobro definisanu stehiometriju nezavisnu od vlažnosti. Međutim, kada su rastvarač ili voda slabo vezani, kao u kanalnim solvatima i higroskopnim jedinjenjima, sadržaj vode/rastvarač će da zavisi od vlage i uslova sušenja. U ovakvim slučajevima, uobičajena je ne-stehiometrija. Naziv 'solvat' se ovde koristi da opiše molekularni kompleks koji uključuje jedinjenje iz pronalaska i molekule jednog ili više farmaceutski prihvatljivih rastvarača, na primer, etanola. Naziv 'hidrat' se koristi kada je rastvarač voda. Farmaceutski prihvatljivi solvati u skladu sa pronalaskom uključuju hidrate i solvate pri čemu rastvarač za kristalizaciju može da bude izotopno supstituisan, na primer, D20, d6-aceton, d6-DMSO.
[0142]Jedinjenja iz pronalaska mogu da formiraju komplekse kao što su klatrati, inkluzioni kompleksi lek-domaćin, pri čemu, za razliku od prethodno pomenutih solvata, lek i domaćin su prisutni u stehiometrijskoj ili ne-stehiometrijskoj količini. Takođe su uključeni kompleksi leka koji sadrži dve ili više organskih i/ili neorganskih komponenti koje mogu da budu u stehiometrijskim ili ne-stehiometrijskim količinama. Nastali kompleksi mogu da budu jonizovani, delimično jonizovani ili nejonizovani. Za pregled ovakvih kompleksa, videti Haleblian, J. Pharm. Sci.,1975, 64 (8): 1269-1288, otkriće koje je ovde u celini inkorporirano kao referenca.
[0143]U daljem tekstu, sve reference za jedinjenja iz pronalaska uključuju reference za njihove soli i solvate.
[0144]Jedinjenja iz pronalaska uključuju jedinjenja iz pronalaska kako je ovde prethodno definisano, uključujući sve njihove polimorfne i kristlne oblike i njihove izomere (uključujući optičke, geometrijske i tautomerne izomere) kako je ovde dalje definisano i izotopno-obeležena jedinjenja iz pronalaska.
[0145]Jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da formiraju prolekove. Prema tome, neki derivati jedinjenja iz pronalaska koji sami mogu da imaju malu ili da nemaju farmakološku aktivnost, mogu, kada se primene na pacijentu, da se konvertuju u inventivna jedinjenja, na primer hidrolitičkim cepanjem. Ovakvi derivati su označeni kao 'prolekovi'. Više informacija0upotrebi prolekova može da se nađe u 'Pro-drugs as Novel Deliverv Svstems, Vol. 14, ACS Svmposium Series (T. Higuchi and W. Stella) i 'Bioreversible Carriers in Drug Design', Pergamon Press, 1987 (ed. E B Roche, American Pharmaceutical Association), otkrićima koja su ovde u celini inkorporirana kao reference.
[0146]Prolekovi mogu na primer, da se produkuju zamenom odgovarajućih funkcionalnih grupa prisutnih u inventivnim jedinjenj ima sa pojedinim radikalima poznatim stručnjaku sa iskustvom u tehnici kao 'pro-radikali' kako je opisano, na primer, u "Design of Prodrugs" autora H Bundgaard (Elsevier, 1985), otkrićima koja su ovde u celini inkorporirana kao reference.
[0147]Neki neograničavajući primeri prolekova u skladu sa pronalaskom obuhvataju: (i) kada jedinjenje sadrži karboksilnu funkcionalnu grupu (-COOH), njegov estar, na primer, zamenom vodonika sa (Ci-C8)alkil grupom; (ii) kada jedinjenje sadrži alkoholnu funkcionalnu grupu (-OH), njegov etar, na primer, zamenom vodonika sa (Ci-C6)alkanoiloksimetil grupom; i
(iii) kada jedinjenje sadrži primarnu ili sekundarnu amino funkcionalnu grupu (-NH2ili
- NHR gde je R ^ H), njegov amid, na primer, zamenom jednog ili oba vodonika sa odgovarajućom metabolički labilnom grupom kao što su amid, karbamat, urea, fosfonat, sulfonat, itd.
[0148]Drugi primeri zamenjenih grupa u skladu sa gore datim primerima i primerima drugih tipova prolekova mogu da se nađu u prethodno datim referencama.
[0149]Konačno, neka inventivna jedinjenja mogu sama da delujukao prolekovi drugih inventivnih j edinj enj a.
[0150]Takođe su otkriveni metaboliti jedinjenja iz pronalaska, to jest, jedinjenja koja se formirajuin vivonakon primene leka. U neke primere metabolita spadaju: (i) kada jedinjenje iz pronalaska sadrži metil grupu, njegov hidroksimeteil derivat (-CH3
-» -CH2OH):
(ii) kada jedinjenje iz pronalaska sadrži alkoksi grupu, njegov hidroksi derivat (-OR —> -OH); (iii) kada jedinjenje iz pronalaska sadrži tercijernu amino grupu, njegov sekundarni amino derivat (-NR<*>R<2>-»-NHR<1>ili -NHR<2>); (iv) kada jedinjenje iz pronalaska sadrži sekundarnu amino grupu, njegov primarni derivat (-NHR1 -»-NH2); (v) kada jedinjenje iz pronalaska sadrži fenil deo, njegov fenol derivat (-Ph —> -PhOH); i (vi) kada jedinjenje iz pronalaska sadrži amidnu grupu, njegov derivat u obliku karboksilne kiseline (-CONH2-» COOH).
[0151]Jedinjenja formule (I) koja su ovde data mogu da imaju asimetrične atome ugljenika. Ugljenik-ugljenik veze jedinjenja iz pronalaska mogu ovde da budu označene pomoću pune linije ( ), punog klina(—*■*),ili isprekidanog klina ( <M). Upotreba pune linije za opis veza na asimetričnim atomima ugljenika treba da označi da su uključeni svi mogući stereoizomeri (na primer specifični enantiomeri, racematne smeše, itd.) na tom atomu ugijenika. Korišćenje ili punog ili isprekidanog klina za opis veza na asimetričnim atomima ugijenika treba da znači daje uključen samo pokazani stereoizomer. Moguće je da jedinjenja iz pronalaska mogu da sadrže više od jednog asimetričnog atoma ugijenika. U takvim jedinjenjima, korišćenje pune linije za označavanje veza na asimetričnim atomima ugijenika treba da označi da su uključeni svi mogući stereoizomeri. Na primer, ukoliko nije drugačije navedeno, to pokazuje da jedinjenja iz pronalaska mogu da egzistiraju kao enantiomeri i diastereomeri ili kao njihovi racemati i smeše. Korišćenje pune linije za označavanje veza na jednom ili više asimetričnih atoma ugijenika ujedinjenju iz pronalaska i korišćenje punog ili isprekidanog klina za označavanje veza na drugim asimetričnim atomima ugijenika u istom jedinjenju treba da označi daje prisutna smeša diastereomera.
[0152] Jedinjenja iz pronalaska koja sadrže jedan ili više asimetričnih atoma ugijenika mogu da egzistiraju u obliku dva ili više stereoizomera, kao što su racemati, enantiomeri ili
diastereomeri. Stereoizomeri jedinjenja koja imaju ovde date formule mogu da obuhvate cis i trans izomere, optičke izomere kao što su (R) i (S) enantiomeri, diastereomere, geometrijske izomere, rotacione izomere, atropizomere, konformacione izomere i sve tautomere jedinjenja iz pronalaska, uključujući jedinjenja koja ispoljavaju više od jednog tipa izomerizma; i njihove smeše (kao što su racemati i diastereomerni parovi). Takođe su obuhvaćene soli nastale dodatkom kiseline ili dodatkom baze, pri čemu je kaunterjon optički aktivan, na primer, d-laktat ili 1-lizin, ili racemati, na primer, dl-tartarat ili dl-arginin.
[0153] Kada bilo koji racemat kristališe, moguća su dva različita tipa kristala. Prvi tip je racematno jedinjenje (pravi racemat) u skladu sa prethodnim, pri čemu se stvara jedan homogeni oblik kristala koji sadrži oba enantiomera u ekvimolarnim količinama. Drugi tip je racematna smeša ili konglomerat, pri čemu se stvaraju dva oblika kristala u ekvimoalrnim količinama od kojih svaki uključuju pojedinačni enantiomer.
[0154] Jedinjenja iz pronalaska mogu da ispolje fenomen tautomerizma i strukturnog izomerizma. Na primer, jedinjenja mogu da egzistiraju u nekoliko tautomernih oblika, uključujući oblik enola i imina i keto i enamin oblik i njihove geometrijske izomere i smeše. Svi ovi tautomerni oblici su obuhvaćeni okvirom jedinjenja iz pronalaska. Tautomeri egzistiraju kao smeša tautomernih oblika u rastvoru. U čvrstom obliku, obično je predominantan jedan tautomer. Čak i kada jedan tautomer može da se opiše, ovaj pronalazak obuhvata sve tautomere jedinjenja koja imaju ovde date formule.
[0155] Pored toga, neka jedinjenja iz pronalaska mogu da formiraju atropizomere ( na primer, supstituisane biarile). Atropizomeri su konformacioni stereoizomeri koji se javljaju kada je sprečena ili veoma usporena rotacija oko jednostruke veze u molekuli kao rezultat sterne interakcije sa drugim delovima molekule i kada su supstituenti na oba kraja jednostruke veze nesimetrični. Interkonverzija atropizomera je dovoljno spora da dozvoli razdvajanje i izdvajanje pod prethodno određenim uslovima. Energetska barijera za termalnu racemizaciju može da se utvrdi steričnom preprekom slobodne rotacije jedne ili više veza koje formiraju asimetrične ose.
[0156] Kada jedinjenje iz pronalaska sadrži alkenil ili alkenilen grupu, mogući su geometrijskicis/ trans(ili Z/E) izomeri. Cis/trans izomeri mogu da se razdvoje uobičajenim tehnikama koje su dobro poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici, na primer, hromatografijom i frakcionom kristalizacijom.
[0157] Uobičajene tehnike za izradu/izdvajanje pojedinačnih enantiomera uključuju asimetrične sinteze iz pogodnih optički čistih prekursora ili rezoluciju racemata (ili racemata soli ili derivata) koristeći, na primer, asimetričnu visoko efikasnu tečnu hromatografiju
(HPLC).
[0158] Alternativno, racemat (ili racematni prekursor) može da reaguje sa pogodnim optički aktivnim jedinjenj em, na primer, alkoholom, ili, u slučaju kada jedinjenje sadrži kiseli ili bazni deo, sa kiselinom ili bazom kao što su vinska kiselina ili 1-feniletilamin. Dobijena diastereomerna smeša može da se razdvoji hromatografijom i/ili frakcionom kristalizacijom a jedan ili oba diastereomera konvertuju u odgovarajući čist enantiomer(e) načinom koji je dobro poznat stručnjaku sa iskustvom u tehnici.
[0159] Asimetrična jedinjenja iz pronalaska (i njihovi asimetrični prekursori) mogu da se dobiju u enantiomerno obogaćenom obliku koristeći hromatografiju, obično HPLC, na asimetričnoj smoli sa mobilnom fazom koja se sastoji od ugljovodonika, obično heptana ili heksana, koja sadrži od 0 do 50% izopropanola, obično od 2 do 20% i od 0 do 5% alkilamina, obično 0.1% dietilamina. Koncentracijom eluata se dobija obogaćena smeša.
[0160] Stereoizomerni konglomerati mogu da se razdvoje uobičajenim tehnikama poznatim stručnjaku sa iskustvom u tehnici, videti, na primer, "Stereochemistrv of Organic Jedinjenjes" by E L Eliel (Wiley, New York, 1994), čije je otkriće ovde u celini inkorporirano kao referenca.
[0161]Kako se ovde koristi, "enantiomerno čisto" opisuje jedinjenje koje je prisutno kao pojedinačni enantiomer i koje je opisano kroz enantiomerne viškove (e.e.). Preferirano, kada je jedinjenje prisutno kao enantiomer, enantiomer se nalazi u obliku enantiomernog viška većeg od ili jednakog sa približno 80%, još poželjnije kao enantiomerni višak veći od ili jednak sa približno 90%, čak još poželjnije kao enantiomerni višak veći od ili jednak sa približno 95%, čak još poželjnije kao enantiomerni višak veći od ili jednak sa približno 98%, najpoželjnije, kao enantiomerni višak veći od ili jednak sa približno 99%. Slično tome, kako se ovde koristi "diastereomerno čist", opisuje jedinjenje koje je prisutno kao diastereomer a koje je opisano kroz diastereomerni višak (d.e.). Preferirano, kada je jedinjenje prisutno kao diastereomer, diastereomer je prisutan kao diastereomerni višak veći od ili jednak sa približno 80%, još poželjnije, kao diastereomerni višak veći od ili jednak sa približno 90%, čak još poželjnije, kao diastereomerni višak veći od ili jednak sa približno 95%, čak još poželjnije, kao diastereomerni višak veći od ili jednak sa približno 98%, najpoželjnije, kao diastereomerni višak veći od ili jednak sa približno 99%.
[0162] Ovaj pronalazak takođe obuhvata izotopno obeležena jedinjenja koja su identična sa jedinjenjima navedenim u jednoj od datih formula, ali se razlikuju zbog činjenice da je jedan od atoma zamenjen sa atomom koji ima atomsku masu ili maseni broj različit od atomske mase ili masenog broja koji se obično nalazi u prirodi.
[0163] Izotopno obeležena jedinjenja iz pronalaska mogu generalno da se izrade uobičajenim tehnikama poznatim stručnjaku sa iskustvom u tehnici ili procesima analognim sa ovde opisanim procesima, korišćenjem odgovarajuće izotopno obeleženog reagensa umesto neobeleženog reagensa koji se inače koristi.
[0164] Primeri izotopa koji mogu da se inkorporiraju u jedinjenja iz pronalaska obuhvataju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, fluora i hlora, kao što su, ali bez ograničenja na,2H,3H,<13>C,<14>C, 1<5>N,<18>0, 1<7>0,31P, 3<2>P,<35>S,<18>F i 3<6>C1. Neka izotopno obeležena jedinjenja iz pronalaska, na primer ona u kojima su inkorporirani radioaktivni izotopi kao što su<3>H i<14>C su korisna u lekovima i/ili u ispitivanju distribucije substrata tkiva. Tricijum, to jest,<3>H i ugljenik-14, to jest,<14>C, izotopi su posebno preferirani zbog svoje jednostavne izrade i detektabilnosti. Osim toga, supstitucijom sa težim izotopima, kao što je deuterijum, to jest,<2>H, mogu da se postignu izvesne terapeutske prednosti kao rezultat veće metaboličke stabilnosti, na primer, povećanje poluživotain vivoili smanjenje potrebnih doza i, stoga, mogu da budu preferirana u nekim okolnostima. Izotopno obeležena jedinjenja iz pronalaska mogu generalno da se izrade po procedurama koje su otkrivene u Semama i/ili u niže datim Primerima i Izradama, supstitucijom neizotopno obeleženog reagensa sa izotopno obeleženim reagensom. U farmaceutski prihvatljive solvate u skladu sa pronalaskom spadaju oni u kojima rastvarač za kristalizaciju može da bude izotopno supstituisan, na primer, D2O, d6-aceton, d6-DMSO.
[0165] Jedinjenja iz pronalaska namenjena za farmaceutsku upotrebu mogu da se primene kao kristalni ili amorfni produkti ili njihove smeše. Mogu da se dobiju, na primer, u obliku čvrstih pločica, praškova ili filmova postupcima kao što su precipitacija, kristalizacija, sušenje zamrzavanjem, sušenje raspršivanjem ili evaporativno sušenje. U ovu svrhu mogu da se koriste sušenja mikrotalasima ili talasnom frekvencijom.
Terapeutski postupci i upotrebe
[0166]Pronalazak dalje obezbeđuje terapeutske postupke i upotrebe koji uključuju primenu jedinjenja iz pronalaska, ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, samih ili u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvima ili palijativnim sredstvima.
[0167] U jednom aspektu, otkriće obezbeđuje postupak za tretman nenormalnog rasta ćelija kod sisara koji uključuje primenu na sisaru terapeutski efektivne količine jedinjenja iz pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.
[0168]U narednom aspektu, otkriće obezbeđuje postupak za tretman nenormalnog rasta ćelija kod sisara koji uključuje primenu na sisaru određene količine jedinjenja iz pronalaska, njegove farmaceutski prihvatljive soli, u kombinaciji sa nekom količinom anti-tumornog sredstva, pri čemu su količine zajedno efikasne u lečenju navedenog nenormalnog rasta ćelija. U nekim od ovih otelotvorenja, anti-tumorno sredstvo je izabrano iz grupe koja sadrži inhibitore mitoze, alkilirajuća sredstva, anti-metabolite, interkalatne antibiotike, inhibitore faktora rasta, zračenje, inhibitore ćelijskog ciklusa, enzime, inhibitore topoizomeraze, modifikatore biološkog odgovora, antitela, citotoksine, anti-hormone i antiandrogene.
[0169]Jedinjenja iz pronalaska uključuju ovde opisano jedinjenje formule (I), uključujući formule (V) i (VI), ili farmaceutski prihvatljivu so bilo kog od njih.
[0170] U narednom aspektu, otkriće obezbeđuje postupak za tretman nenormalnog rasta ćelija kod sisara koji uključuje primenu na sisaru određene količine jedinjenja iz pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli koja je efikasna u lečenju nenormalnog rasta ćelije.
[0171] U još jednom aspektu, otkriće obezbeđuje postupak za inhibiciju proliferacije ćelija kancera kod sisara, koji uključuje primenu na sisaru jedinjenja iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u količini efikasnoj za inhibiciju proliferacije ćelija.
[0172] U narednom aspektu, otkriće obezbeđuje postupak za inhibiciju invazivnosti ćelije kancera kod sisara, koji uključuje primenu na sisaru jedinjenja iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u količini efikasnoj za inhibiciju invazivnosti ćelija.
[0173] U narednom aspektu, otkriće obezbeđuje postupak za indukciju apoptoza u ćelijama kancera kod sisara, koji uključuje primenu na sisaru jedinjenja iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli u količini efikasnoj da indukuje apoptoze.
[0174] U daljem aspektu, otkriće obezbeđuje postupak za indukciju apoptoza kod sisara, koji uključuje primenu na sisaru terapeutski efektivne količine jedinjenja koje ima jednu od ovde opisanih formula ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.
[0175] U čestim otelotvorenjima ovde datih postupaka, nenormalni rast ćelija je kancer, pri čemu je kancer je izabran od kancera bazalnih ćelija, kancera meduloblastoma, kancera jetre, rabdomiosarkoma, kancera pluća, kancera kostiju, kancera pankreasa, kancera kože, kancera glave ili vrata, kutanozne ili intraokularne melanome, kancera materice, kancera jajnika, kancera rektuma, kancera analnog regiona, kancera želuca, kancera debelog creva, kancera dojke, karcinoma jajovoda, karcinoma materice, karcinoma grlića materice, karcinoma vagine, karcinoma vulve, Hočkinsove bolesti, kancera jednjaka, kancera tankog creva, kancera endokrinog sistema, kancera tiroidne žlezde, kancera paratiroidne žlezde, kancera nadbubrežne žlezde, sarkoma mekog tkiva, kancera uretera, kancera penisa, kancera prostate, hronične ili akutne leukemije, limfocitnog limfoma, kancera bešike, kancera bubrega ili uretera, karcinoma bubrežnih ćelija, karcinoma bubrežne čašice, neoplazmi centralnog nervnog sistema (CNS), primarnog limfoma CNS, tumora kičmene moždine, glioma baze mozga, adenoma hipofize ili kombinacije jednog ili više od prethodnih kancera.
[0176] Jedinjenja iz poronalaska, njihove farmaceutski prihvatljive soli i/ili izdvojeni oblici ili njihove kompozicije su važna farmaceutski aktivna jedinjenja koja su pogodna za terapiju brojnih poremećaja u kojima je uključen ALK receptor i/ili protein ALK fuzije, na primer, EML4-ALK, ili u kojima inhibicija aktivnosti ALK može da indukuje korist, posebno kod kancera.
[0177] Naredni aspekt pronalaska se odnosi na jedinjenje iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, izdvojenih oblika ili njihovih kompozicija, za upotrebu kao medikamenta a posebno za upotrebu u tretmanu bolesti u kojima inhibicija aktivnosti ALK i/ili proteina ALK fuzije, na primer, EML4-ALK, može da indukuje korist, kao što je kod kancera.
[0178] U još jednom aspektu, ovaj pronalazak se takođe odnosi na upotrebu jedinjenja iz pronalaska ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, izdvojenih oblika ili njihovih kompozicija, za proizvodnju leka koji ima ALK inhibitornu aktivnost za tretman bolesti i/ili stanja u kojima je uključena ALK, posebno bolesti i/ili stanja koja su prethodno navedena.
[0179] Naredni aspekt ovog pronalaska se takođe odnosi na upotrebu jedinjenja iz pronalaska ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli ili kompozicija, za proizvodnju leka koji ima EML4-ALK inhibitornu aktivnost za tretman bolesti i/ili stanja u kojima je uključena EML4-ALK, posebno bolesti i/ili stanja koja su prethodno navedena.
[0180]Jedinjenja iz poronalaska, njihove farmaceutski prihvatljive soli i/ili izdvojeni oblici ili njihove kompozicije su vredna farmaceutski aktivna jedinjenja koja su pogodna za tretman bola, uključujući akutni bol; hronični bol; neuropatični bol; inflamatorni bol (uključujući, na primer, bol kod osteoartritisa, bol kod reumatoidnog artritisa); visceralni bol; nociceptivni bol, uključujći bol nakon operacije; i tipove više vrsta bola u koje su uključeni bol viscere, gastrointestinalnog trakta, kranijalnih struktura, mišićno-koštanog sistema, kičme, urogenitalnog sistema, kardiovaskularnog sistema i CNS, uključujući kancerogeni bol i bol leđa i orofacijalni bol.
[0181]Naredni aspekt pronalaska se odnosi na jedinjenje iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili njegove kompozicije, za upotrebu kao medikamenta a posebno za upotrebu u tretmanu bola, uključujući akutni bol; hronični bol; neuropatični bol; inflamatorni bol (uključujući, na primer, bol kod osteoartritisa, bol kod reumatoidnog artritisa); visceralni bol; nociceptivni bol, uključujći bol nakon operacije; i tipove više vrsta bola u koje su uključeni bol viscere, gastrointestinalnog trakta, kranijalnih struktura, mišićno-koštanog sistema, kičme, urogenitalnog sistema, kardiovaskularnog sistema i CNS, uključujući kancerogeni bol i bol leđa i orofacijalni bol.
[0182]Još jedan aspekt ovog pronalaska se takođe odnosi na upotrebu jedinjena iz pronalaska ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, izdvojenih oblika ili njihovih kompozicija za proizvodnju leka za tretman prethodno navedenih bolesti i/ili stanja.
[0183]Kao posledica, otkriće obezbeđuje postupak za lečenje sisara, uključujući ljude, sa terapeutski efektivnom količinom jedinjenja iz pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, izdvojenog oblika ili njihove farmaceutske kompozicije. Još preciznije, otkriće obezbeđuje postupak za tretman kancera u kojima učestvuje ALK kod sisara, uključujući ljude, posebno kancera koji su prethodno navedeni, koji uključuje primenu na određenom sisaru terapeutski efektivne količine jedinjenja iz pronalaska, njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i/ili izdvojenih obika ili njegove farmaceutske kompozicije.
[0184]Naredni aspekt ovog otkrića od posebnog interesa se odnosi na postupak za tretman kancera pluća kod ljudi kojima je takav tretman potreban, koji uključuje primenu na tom čoveku određene količne jedinjenja iz pronalaska u kombinaciji sa jednim ili više (preferirano jedan do tri) anti-kancerogenih sredstava izabranih iz grupe koja sadrži kapecitabin, bevacizumab, gemcitabin, docetaksel, paklitaksel, premetreksed dinatrijum, erlotinib, gefitinib, vinorelbin, irinotekan, etopozid, vinblastine i karboplatin, pri čemu je količina aktivnog sredstva zajedno sa količinama kombinacije antikancerogenih sredstava efikasna u lečenju kancera pluća.
[0185]Preferirano, jedinjenja iz pronalaska su selektivni ALK inhibitori. Preferirano, jedinjenja iz pronalaska su selektivni inhibitori EML4-ALK mutanta LI 196M. Preferirano, jedinjenja iz pronalaska su selektivni inhibitori EML4-ALK mutanta Cl 156Y.
[0186]Kako se ovde koristi, naziv "terapeutski efektivna količina" se odnosi na onu količinu jedinjenja koja se primenjuje a koja će do izvesne mere da olakša jedan ili više simptoma poremećaja koji se tretira. U vezi sa tretmanom kancera, terapeutski efektivna količina se odnosi na onu količinu koja ima efekat na (1) redukciju veličine tumora, (2) inhibiciju (to jest, do izvesne mere usporavanje, preferirano zaustavljanje) metastaza tumora, (3) do izvesnog nivoa inhibiciju (to jest, usporavanje do izvesnog nivoa, preferirano zaustavljanje) rasta tumora ili invazivnosti tumora, i/ili (4) olakšanje do izvesnog nivoa (ili, preferirano, eliminaciju) jednog ili više znakova ili simptoma povezanih sa kancerom.
[0187]Kako se ovde koristi, naziv "lečenje", ukoliko nije drugačije navedeno, znači povraćaj, poboljšanje, ublažavanje, inhibiciju progresa ili prevenciju poremećaja ili stanja na koje se primenjuje ovaj termin, ili jednog ili više simptoma tog poremećaja ili stanja. Kako se ovde koristi, naziv "tretman", ukoliko nije drugačije navedeno, se odnosi na čin lečenja, kako je "lečenje" prethodno definisano. Naziv "lečenje" takođe uključuje adjuvantni i neo-adjuvantni tretman sisara.
[0188]U ovoj prijavi, nazivi "nenormalni rast ćelija" i "hiperproliferativni poremećaj" se koriste kao sinonimi.
[0189]Kako se ovde koristi, "nenormalni rast ćelija", ukoliko nije drugačije navedeno, se odnosi na rast ćelija koji je nezavistan od normalnih regulatornih mehanizama (na primer, gubitak kontakta inhibicije). Nenormalni rast ćelija može da bude benigni (ne kancerogeni) ili maligni (kancerogeni). Ovo obuhvata nenormalni rast: (1) ćelija tumora (tumori) koji rastu ekspresijom ALK ili proteina ALK fuzije, na primer, EML4-ALK; (2) benignih i malignih ćelija drugih proliferativnih bolesti u kojima se javljaju ALK ili protein ALK fuzije; (3) bilo kojih tumora koji rastu nenormalnom aktivacijom ALK ili proteina ALK fuzije; i (4) benignih i malignih ćelija drugih proliferativnih bolesti u kojima dolazi do nenormalne aktivacije ALK ili proteina ALK fuzije.
[0190] Kako se ovde koristi, "kancer" se odnosi na bilo koji malignitet i/ili invazivni rast ili tumor izazvan nenormalnim rastom ćelija, uključujući solidne tumore nazvane po tipu ćelija koje ih formiraju, kancer krvi, koštane srži ili limfnog sistema. U primere solidnih tumora spadaju, ali bez ograničenja na, sarkomi i karcinomi. U primere kancera krvi spadaju, ali bez ograničenja na, leukemije, limfomi i mijeloma. Naziv "kancer" uključuje, ali bez ograničenja na, primarni kancer koji se stvara na specifičnom mestu u organizmu, metastazni kancer koji se širi od mesta sa koga potiče do drugih delova tela, recidiv od početnog primarnog kancera nakon remisije i drugi primarni kancer koji je novi primarni kancer kod osobe sa istorijom prethodnog kancera različitog tipa od novonastalog.
[0191] Jedinjenja iz pronalaska inhibiraju ALK i na taj način su sva prilagođena za terapeutsku upotrebu kao antiproliferativna sredstva (na primer, kancer) ili antitumorna sredstva (na primer, delovanje na solidne tumore) kod sisara, posebno kod ljudi. Posebno, jedinjenja iz pronalaska su korisna u prevenciji i tretmanu različitih hiperproliferativnih poremećaja kod ljudi, uključujući i maligni i benigni nenormalni rast ćelija.
[0192] Jedinjenja, kompozicije i postupci koji su ovde dati su korisni za tretman kancera, uključujući, ali bez ograničenja na, kancere: cirkulatornog sistema, na primer, srca (sarkoma [angiosarkoma, fibrosarkoma, rabdomiosarkoma, liposarkoma], miksoma, rabdomioma, fibroma, U<p>orna i teratoma), mediastinuma i pleure i drugih intratorakalnih organa, vaskularne tumore i tumore povezane sa vaskularnim tkivom; respiratornog trakta, na primer, nosne šupljine i srednjeg uha, nosnih sinusa, laringsa, trahea, bronha i pluća kao što su kancer malih ćelija pluća (SCLC) i kancer ne-malih ćelija pluća (NSCLC), bronhogenični karcinom (skvamozne ćelije, nediferencirane male ćelije, nediferencirane velike ćelije, adenokarcinom), alveolarni (bronhiolarni) karcinom, bronhijalni adenom, sarkom, limfom, hondromatozna hamartoma, mezotelioma; gastrointestinalnog sistema, na primer, jednjaka (karcinom skvamoznih ćelija, adenokarcinom, leiomiosarkom, limfom), želuca (karcinom, limfom, leiomiosarkom), stomaka, pankreasa (duktalni adenoksrcinom, insulinoma, glukagonoma, gastrinoma, karcinoidni tumori, vipoma), tankog creva (adenokarcinom, limfom, karcinoidni tumori, Karpošijev sarkom, leiomijoma, hemangiom, lipoma, neurofibroma, fibroma), debelog creva (adenokarcinom, tubularni adenom, vilozni adenom, hamartom, leiomionam); genitourinarnog trakta, na primer, bubrega (adenokarcinom, Wilm-ov tumor [nefroblastoma], limfoma, leukemija), bešike i/ili uretera (karcinom skvamoznih ćelija, karcinom tranzicionih ćelija, adenokarcinom), prostate (adenokarcinom, sarkom), testisa (seminoma, teratoma, embrionalni karcinom, teratokarcinom, horiokarcinom, sarkom, karcinom interstinalnih ćelija, fibrom, fibroadenom, adenomatoidni tumori, lipoma); jetre, na primer, hepatom (hepatocelularni karcinom), holangiokarcinom, hepatoblastom, angiosarkom, hepatocelularni adenom, hemangiom, endokrini tumori pankreasa (kao što su feohromocitoma, insulinoma, tumor vazoaktivnog intestinalnog peptida, insulinoma, vazoaktivni intestinalni peptidni tumor, tumor insulocita i glukagonoma); kostiju, na primer, osteogenični sarkom (osteosarkoma), fibrosarkoma, maligni fibrozni histiocitom, hondrosarkom, Ewing-ov sarkom, maligni limfom (sarkom retikularnih ćelija), multiple mijeloma, maligni tumor velikih ćelija kordoma, osteohronfroma (koštanohrskavičave egzostoze), benigna kondroma, hondroblastoma, hondromiksofibroma, osteoidna osteoma i tumori osteoma i tumori velikih ćelija; nervnog sistema, na primer, neoplazme centralnog nervnog sistema (CNS), primarna limfoma CNS, kancer lobanje (osteoma, hemangioma, granuloma, ksantoma, deformativni osteitis), kancer moždanica (meningioma, meningiosarkoma, gliomatoze), kancer mozga (astrocitoma, meduloblastoma, glioma, ependimoma, germinoma [pinealoma], višestruka glioblastoma, oligodendroglioma, švanoma, retinoblastoma, kongenitalni tumor), neurofibroma kičmene moždine, meningioma, glioma, sarkoma); reproduktivnog sistema, na primer, ginekološki, uterus (karcinom endometrijuma), cerviksa (cervikalni karcinom, pretumorna displazija cerviksa), ovarijuma (karcinom ovarijuma [serozni cisadenokarcinom, mucinozni cisadenokarcinom, neklasifikovani karcinom], tumori granulo-tekalnih ćelija, tumori Sertoli-Levdig ćelija, disgerminoma, maligna teratoma), vulve (karcinom skvamoznih ćelija, karcinom intraepitelijuma, adenokarcinom, fibrosarkom, melanom), vagine (karcinom bistrih ćelija, karcinom skvamoznih ćelija, botrioidni sarkom (embrionalni rabdomiosarkom), jajovoda (karcinom) i drugih mesta povezanih sa ženskim genitalnim organima, placente, penisa, prostate, testisa i drugih mesta povezanih sa genitalnim organima muškaraca; hematološkog sistema, na primer, krvi (mijeloidna leukemija [akutna i hronična], akutna limfoblastična leukemija, hronična limfocitna leukemija, mijeloproliferativne bolesti, višestruka mijeloma, mijelodisplastični sindrom), Hočkinsova bolest, ne-Hočkinsova limfoma [maligna limfoma]; usne duplje, na primer, usne, jezika, desni, poda usta, nepca i drugih delova usta, parotidne žlezde i drugih delova pljuvačnih žlezda, krajnika, orofaringsa, nazofaringsa,piriformnih sinusa, hipofaringsa i drugih mesta na usnama, usnoj duplji i faringsu; kože, na primer, maligna melanoma, kutanozna melanoma, karcinom bazalnih ćelija, karcinom skvamoznih ćelija, Karpošijev sarkom, displastične nevi mole, lipoma, angioma, dermatofibroma i keloidi;
nadbubrežnih žlezda: neuroblastoma; i
drugih tkiva uključujući vezivno i meko tkivo, retroperitoneum i peritoneum, oči, intraokularni melanom i pripojenih organa, dojke, glave i/ili vrata, analnog regiona, tiroidee, paratiroidee, nadbubrežne žlezde i drugih endokrinih žlezda i povezanih struktura, sekundarne i nespecifične maligne neoplazme limfnih čvorića, sekundarne maligne neoplazme respiratornog i digestivnog sistema i sekundarne maligne neoplazme drugih mesta.
[0193] Još preciznije, primeri kancera kada se ovde koriste u vezi sa ovim pronalaskom uključuju kancer izabran od kancera pluća (NSCLC i SCLC), kancera glave ili vrata, kancera ovarijuma, kancera kolona, kancera rektuma, kancera analnog regiona, kancera želuca, kancera dojke, kancera bubrega ili uretera, karcinoma renalnih ćelija, karcinoma renlnih ćašica, neoplazme centralnog nervnog sistema (CNS), primarni limfom CNS, ne-Hočkinsov limfom, tumore kičmene moždine, ili kombinaciju jednog ili više od ovih kancera.
[0194] Čak još preciznije, primeri kancera kada se ovde koriste u vezi sa ovim pronalaskom uključuju kancer izabran od kancera pluća (NSCLC i SCLC), kancera dojke, kancera ovarijuma, kancera kolona, kancera rektuma, kancera analnog regiona ili kombinaciju jednog ili više od ovih kancera.
[0195] U jednom otelotvorenju ovog pronalaska, ne-kanc ero gena stanja uključuju takva hiperplastična stanja kao što su benigna hiperplazija kože (na primer, psorijaza) i benigna hiperplazija prostate (na primer, BPH).
[0196] U narednom aspektu, otkrića obezbeđuju postupak za inhibiciju proliferacije ćelija, uključujući dovođenje u vezu ćelija sa jedinjenjem iz pronalaska ili njegovom farmaceutski prihvatljivom solju u količini efikasnoj da inhibira proliferaciju ćelija.
[0197] U narednom aspektu, otkrića obezbeđuju postupke za indukciju apoptoze ćelija, uključujući dovođenje u kontakt ćelija sa ovde opisanim jedinjenjem u količini efikasnoj da indukuje apoptozu ćelija.
[0198]"Dovođenje u kontakt" se odnosi na dovođenje jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli iz pronalaska i ćelija u kojima se pojavljuje ALK zajedno na takav način da jedinjenje može da utiče na aktivnost ALK, ili direktno ili indirektno. Kontak može da se izvršiin vitro(to jest, u veštačkoj sredini kao što su, na primer, bez ograničenja, u test kiveti ili u medijumu za kulturu) iliin vivo(to jest, u živom organizmu, kao što su, bez ograničenja, miševi, pacovi ili zečevi.)
[0199]U nekim otelotvorenjima, ćelije su u ćelijskoj liniji, kao što je ćelijska linija kancera. U drugim otelotvorenjima, ćelije su u tkivu ili tumoru a tkivo ili tumor može da bude u sisaru, uključujući ljude.
Dozni oblici i režimi
[0200]Primerna jedinjenja iz pronalaska može da se sprovede bilo kojim postupkom koji omogućava oslobađanje jedinjenja na mestu delovanja. Ovi postupci uključuju oralni način, intraduodenalni način, parenteralnu injekciju (uključujući intravenski, subkutano, intramuskularno, intravaskularno ili infuzijom), topičnu i rektalnu primenu.
[0201]Režimi doziranja mogu da se podese da obezbede optimum željenog odgovora. Na primer, može da se primeni pojedinačna količina, može da se primeni više podeljenih doza u toku vremena ili doza može da bude proporcionalno smanjena ili povećana kako odredi terapeut u toku terapije. Posebna je prednost da se formulišu parenteralne kompozicije u jediničnom doznom obliku zbog lake primene i ujednačenosti doze. Jedinični dozni oblik, kako se ovde koristi, odnosi se na fizički odvojene jedinice koje odgovaraju pojedinačnom doziranju za sisara koji se tretira; svaka jedinica sadrži prethodno određenu količinu aktivnog jedinjenja izračunatu da proizvede željeni terapeutski efekat, zajedno sa potrebnim farmaceutskim nosačem. Specifikacija za jedinične dozne oblike iz pronalaska je određena i direktno zavisi od (a) jedinstvenih karakteristika hemoterapeutskog sredstva i određenog terapeutskog ili profilaktičkog efekta koji treba da se postigne i (b) ograničenja svojstvena u tehnici stvaranja ovog aktivnog jedinjenja za lečenje u smislu osetljivosti pojedinaca.
[0202] Prema tome, stručnjak sa iskustvom će da ceni, na osnovu ovde datog otkrića, daje doza i režim doziranja podešen u skladu sa postupcima koji su dobro poznati u terapeutskoj tehnici. To jest, lako može da se utvrdi maksimalna tolerantna doza i takođe može da se odredi efikasna količina koja obezbeđuje uočljivu terapeutsku korist za pacijenta kao i da se odrede vremenski zahtevi za primenu svakog sredstva kako bi se obezbedila uočljiva terapeutska korist za pacijenta. U skladu sa tim, mada su neke doze i načini primene ovde navedeni, ovi primeri ni na koji način ne ograničavaju dozu i režim primene koji može da se primeni na pacijentu u sprovođenju ovog pronalaska.
[0203] Treba da se napomene da vrednosti doze mogu da variraju u zavisnosti od tipa i ozbiljnosti stanja koje treba da se popravi i može da uključi pojedinačnu ili višestruke doze. Dalje treba da se zna da za svakog određenog sisara treba da se odredi specifični dozni režim u toku vremena u skladu sa pojedinačnim potrebama i profesionalnom procenom osoblja koje primenjuje ili nadgleda primenu kompozicija a opseg doza koji je ovde naveden je samo primer i ne treba da ograniči okvir ili primenu kompozicije za koju se traži zaštita. Na primer, doze mogu da se odrede na osnovu farmakokinetičkih ili farmakodinamičkih parametara koji mogu da obuhvate kliničke efekte kao što su toksični efekti i/ili laboratorijske vrednosti. Prema tome, ovaj pronalazak obuhvata povećanje doze kod pacijenta kako odredi stručnjak sa iskustvom. Određivanje odgovarajućih doza i režima za primenu hemoterapeutskog sredstva je dobro poznato u odgovarajućoj tehnici i razumljivo je da će stručnjak sa iskustvom da prihvati tehnike koje su ovde otkrivene.
[0204]Količina jedinjenja iz pronalaska koje treba da se primeni zavisi od sisara koji se tretira, ozbiljnosti poremećaja ili stanja, brzine primene, rasporeda jedinjenja i odluke ordinirajućeg lekara. Međutim, efektivna doza je u rasponu od približno 0.001 do približno 100 mg po kg telesne težine po danu, preferirano približno 1 do približno 35 mg/kg/dan, u pojedinačnoj ili podeljenim dozama. Za čoveka težine 70 kg, ova količina bi bila od približno 0.05 do približno 7 g/dan, preferirano približno 0.1 do približno 2.5 g/dan. U nekim slučajevima, vrednosti doze ispod najniže granice prethodno navedeng opsega mogu da budu više nego adekvatne, dok u drugim slučajevima mogu da se koriste čak i veće doze bez izazivanja bilo kog neželjenog sporednog efekta, pod uslovom da su ove veće doze prvo podeljene u nekoliko malih doza za primenu u toku dana.
Formulacije i načini primene
[0205] Kako se ovde koristi, "farmaceutski prihvatljiv nosač" se odnosi na nosač ili razblaživač koji ne izaziva značajan nadražaj organizma i ne poništava biološku aktivnost i osobine primenjenog jedinjenja.
[0206] Farmaceutski prihvatljiv nosač može da uključi bilo koji uobičajeni farmaceutski nosač ili ekscipijent. Izbor nosača i/ili ekscipijenta će u velikoj meri da zavisi od faktora kao što su određeni način primene, uticaj ekscipijenta na rastvorljivost i stabilnost i priroda doznog oblika.
[0207] U pogodne farmaceutske nosače spadaju inertni razblaživači ili punioci, voda i različiti organski rastvarači (kao što su hidrati i solvati). Ukoliko se želi, farmaceutske kompozicije mogu da sadrže dodatne sastojke, kao što su korigensi ukusa, vezivna sredstva, ekscipijenti i slično. Prema tome, tablete za oralnu primenu koje sadrže različite ekscipijente, kao što je limunska kiselina, mogu da sadrže i različita sredstva za raspadanje, kao što su škrob, alginatna kiselina i neki kompleksi salicilata i vezivna sredstva kao što su saharoza, želatin i akacija. Primeri ekscipijenata, bez ograničenja, uključuju kalcijum karbonat, kalcijum fosfat, različite šećere i tipove škroba, derivate celuloze, želatin, biljna ulja i polietilen glikole. Pored toga, često su u cilju tabletiranja korisna lubrikantna sredstva, kao što su magnezijum stearat, natrijum lauril sulfat i talk. Čvrste kompozicije sličnog tipa mogu takođe da se upotrebe kao punjenje u čvrstim i mekim želatinskim kapsulama. Prema tome, ne-ograničavajući primeri materijala uključuju laktozu ili mlečni šećer i polietilen glikole velike molekulske težine. Kada su za oralnu primenu poželjne suspenzije ili eliksiri, jedinjenje u njima može da se kombinuje sa različitim sredstvima za zaslađivanje ili korekciju ukusa, sredstvima za bojenje ili bojama i, ukoliko je potrebno, sredstvima za emulgovanje i sredstvima za suspendovanje, zajedno sa razblaživačima kao što su voda, etanol, propilen glikol, glicerin, ili njihove kombinacije.
[0208] Farmaceutska kompozicija može, na primer, da bude u obliku pogodnom za oralnu primenu kao što su tablete, kapsule, pilule, praškovi, formulacije sa kontinuiranim oslobađanjem, rastvor suspenzije, za parenteralne injekcije kao sterilan rastvor, suspenzija ili emulzija, za topičnu primenu kao mast ili krema ili za rektalnu primenu kao supozitorija.
[0209] U primere oblika za parenteralnu primenu spadaju rastvori ili suspenzije aktivnih jedinjenja u sterilnim vodenim rastvorima, na primer, vodenom propilen glikola ili rastvoru dekstroze. Ukoliko je potrebno, ovi dozni oblici mogu da budu puferovani na odgovarajući način.
[0210] Farmaceutska kompozicija može da bude u jediničnim doznim oblicima pogodnim za pojedinačnu primenu precizno određenih doza.
[0211] Farmaceutske kompozicije pogodne za oslobađanje jedinjenja iz pronalaska i postupci za njihovu izradu su lako prihvatljivi za stručnjaka sa iskustvom u tehnici. Ovakve kompozicije i postupci za njihovu izradu mogu da se nađu, na primer, u 'Remington's Pharmaceutical Sciences', 19th Edition (Mack Publishing Companv, 1995), otkriću koje je ovde u celini inkorporirano kao referenca.
[0212]Jedinjenja iz pronalaska mogu da se primene oralno. Oralna primena može da uključi gutanje, tako da jedinjenje ulazi u gastrointestinalni trakt ili mogu da se primene bukalna ili sublingvalna primena kojom jedinjenje ulazi u krvotok direktno iz usta.
[0213]U formulacije pogodne za oralnu primenu spadaju čvrste formulacije kao što su
tablete, kapsule koje sadrže čestice, tečnosti ili praškove, lozenge (uključujući punjene tečnošću), gume za žvakanje, multi- i nano-partikulati, geli, čvrsti rastvori, lipozomi, filmovi (uključujući muko-adhezive), ovule, sprejovi i tečne formulacije.
[0214]U tečne formulacije spadaju suspenzije, rastvori, sirupi i eliksiri. Ove formulacije mogu da se koriste kao punioci u mekim i čvrstim kapsulama i obično uključuju nosač, na primer, vodu, etanol, polietilen glikol, propilen glikol, metilcelulozu, ili odgovarajuće ulje i jedan ili više emulgatora i/ili sredstava za suspendovanje. Tečne formulacije mogu takođe da se izrade rekonstitucijom čvrstog oblika, na primer, od saheta.
[0215]Jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se koriste kao brzo-rastvorljivi, brzo-raspadljivi dozni oblici kao što je opisano u Expert Opinion in Therapeutic Patents, 11 (6), 981-986 by Liang and Chen (2001), koje otkriće je ovde u celini inkorporirano kao referenca.
[0216]Za tablete kao dozne oblike, u zavisnosi od doze, lek može da čini 1 mt% do 80 mt% doznog oblika, mnogo češće od 5 mt% do 60 mt% doznog oblika. Pored leka, tablete generalno sadrže sredstvo za raspadanje. Sredstva za raspadanje uključuju natrijum škrob glikolat, natrijum karboksimetil celulozu, kalcijum karboksimetil celulozu, kroskarmelozu natrijum, krospovidon, polivinilpirolidon, metil celulozu, mikrokristalnu celulozu, nižu alkil-susptituisanu hidroksipropil celulozu, škrob, preželatinizirani škrob i natrijum alginat. Generalno, sredstvo za raspadanje predstavlja od 1 mt% do 25 mt%, preferirano od 5 mt% do 20 mt% doznog oblika.
[0217]Vezivna sredstva se generalno koriste da omoguće kohezivne kvalitete formulacije
tableta. U pogodna vezivna sredstva spadaju mikrokristalna celuloza, želatin, šećeri, polietilen glikol, prirodne i sintetičke gume, polivinilpirolidon, preželatinizirani škrob, hidroksipropil celuloza i hidroksipropil metilceluloza. Tablete mogu takođe da sadrže razblaživače kao što su laktoza (monohidratna, monohidratna sušena raspršivanjem, anhidrovana i slično), manitol, ksilitol, dekstroza, saharoza, sorbitol, mikrokristalna celuloza, škrob i dibazni kalcijum fosfat dihidrat.
[0218]Tablete mogu takođe opciono da sadrže površinski aktivna sredstva, kao što su natrijum lauril sulfat i polisorbat 80 i glidanse kao što su silikon dioksid i talk. Kada su prisutna, površinski aktivna sredstva su obično u količinama od 0.2 mt% do 5 mt% težine
tablete a glidansi obično od 0.2 mt% do 1 mt% težine tablete.
[0219]Tablete takođe generalno sadrže lubrikanse kao što su magnezijum stearat, kalcijum stearat, cink stearat, natrijum stearil fumarat i smeše magnezijum stearata i natrijum lauril sulfata. Lubrikansi su generalno prisutni u količinama od 0.25 mt% do 10 mt%, preferirano od 0.5 mt% do 3 mt% težine tablete.
[0220]U ostale uobičajene sastojke spadaju antioksidansi, sredstva za bojenje, sredstva za korigovanje ukusa, konzervansi i sredstva za maskiranje ukusa.
[0221]Primeri tableta sadrže do približno 80 mt% lek, od približno 10 mt% do približno 90 mt% vezivno sredstvo, od približno 0 mt% do približno 85 mt% razblaživač, od približno 2 mt% do približno 10 mt% sredstvo za raspadanje i od približno 0.25 mt% do približno 10 mt% lubrikans.
[0222]Tabletne mešavine mogu da se komprimuju direktno ili u klipovima da se formiraju
tablete. Tabletne mešavine ili delovi mešavina mogu alternativno da se vlažno-, suvo- ili topljenjem granuliraju, tope zamrzavanjem ili ekstrudiraju pre tabletiranja. Finalna formulacija može da uključi jedan ili više slojeva i može da bude obložena ili neobložena ili enkapsulirana.
[0223]Formulacija tableta je detaljno diskutovana u "Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets, Vol. 1", autora H. Lieberman and L. Lachman, Marcel Dekker, N.Y., N.Y., 1980 (ISBN 0-8247-6918-X), koje je otkriće ovde u celini inkorporirano kao referenca.
[0224]Čvrste formulacije za oralnu primenu mogu da se formulišu tako da budu sa trenutnim i/ili modifikovanim oslobađanjem. U formulacije sa modifikovanim oslobađanjem spadaju formulacije sa odloženim, kontinuiranim, pulsnim, kontrolisanim, ciljanim i programiranim oslobađanjem.
[0225]Pogodne formulacije sa modifikovanim oslobađanjem su opisane u U.S. Patentu broj 6,106,864. Detalji drugih pogodnih tehnologija oslobađanja, kao što su visoko energetska disprezija i osmotske i obložene partikule mogu da se nađu u Verma i sardnici, Pharmaceutical Technologv On-line, 25(2), 1-14 (2001). Upotreba guma za žvakanje za postizanje kontrolisanog oslobađanje je opisana u WO 00/35298. Otkrića ovih referenci su ovde inkorporirani u celini kao referenca.
Parenteralna primerna
[0226]Jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se primene direktno u krvotok, u mišić ili u unutrašnji organ. U pogodne načine parenteralne primene spadaju intravenski, intraarterijalni, intraperitonealni, intratekalni, intraventrikularni, intrauretralni, intrasternalni, intrakranijalni, intramuskularni i subkutani. Pogodni uređaji za parenteralnu primenu uključuju injektore sa iglom (uključujući mikro igle), injektore bez igle i infuzione tehnike.
[0227]Parenteralne formulacije su obično vodeni rastvori koji mogu da sadrže ekscipijente kao što su soli, ugljovodonici i sredstva za puferovanje (preferirano do pH od 3 do 9), ali, za neke aplikacije, može da bude mnogo poželjnija formulacija u obliku sterilnog nevodenog rastvora ili suvog oblika koji se koristi u konjukciji sa odgovarajućim vehikulumom kao što je sterilnla apirogena voda.
[0228]Izrada parenteralnih formulacija pod sterilnim uslovima, na primer, liofilizacijom, može jednostavno da se sprovede koristeći standardne farmaceutske tehnike koje su dobro poznate stručnjaku sa iskustvom u tehnici.
[0229]Rastvorljivost jedinjenja iz pronalaska koja se koriste u izradi parenteralnih rastvora može da se poveća upotrebom odgovarajućih tehnika formulisanja, kao što je inkorporiranje sredstava koja pojačavaju rastvorlj ivost.
[0230]Formulacije za parenteralnu primenu mogu da se formulišu da budu za trenutno i/ili modifikovano oslobađanje. U formulacije sa modifikovanim oslobađanjem spadaju odloženo, kontinuirano, pulsirano, kontrolisano, ciljano i programirano oslobađanje. Prema tome, jedinjenja iz pronalaska mogu da budu formulisana kao čvrsta, polu-čvrsta ili tiksotropna tečnost za primenu u obliku implantiranog depoa koji obezbeđuje modifikovano oslobađanje aktivnog jedinjenja. U primere ovakvih formulacija spadaju stentovi obloženi lekom i PGLA mikrosfere.
[0231]Jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se primene topično na kožu ili mukozu, to jest, dermalno ili transdermalno. U tipične formulacije za ovu svrhu spadaju geli, hidrogeli, losioni, rastvori, kreme, masti, praškovi za posipanje, prelivi, pene, filmovi, flasteri, pločice, implanti, sunđeri, gaze, zavoji i mikroemulzije. Takođe mogu da se koriste lipozomi. U uobičajene nosače spadaju alkohol, voda, mineralno ulje, tečni parafin, beli vazelin, glicerin, polietilen glikol i propilen glikol. Mogu da budu inkorporirani pojačivači penetracije, videti, na primer, J Pharm Sci, 88 (10), 955-958 autora Finnin and Morgan (October 1999). Drugi načini topične primene uključuju oslobađanje elektroporacijom, jontoforeze, fonoforeze, sonoforeze i injekcije sa mikro iglom ili injekcije bez igle (na primer, Powderject™, Bioject™, itd.). Otkrića ovih referenci su ovde u celini inkorporirana kao referenca.
[0232] Formulacije za topičnu primenu mogu da se formulišu tako da budu za trenutno i/ili modifikovano oslobađanje. Formulacije sa modifikovanim oslobađanjem uključuju odloženo, kontrolisano, pulsno, kontinuirano, ciljano i programirano oslobađanje.
[0233] Jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se primene intranazalno ili inhalacijom, obično u obliku suvog praška (ili sama ili kao smeša, na primer, suva smeša sa laktozom, ili kao smeša partikula komponente, na primer, smeša sa fosfolipidima kao što je fosfatidilholin) iz enhalera suvog praška ili kao aerosol sprej iz kontejnera pod pritiskom, pumpe, spreja, atomizera (preferirano atomizera koji koristi elektrohidrodinamiku za produkciju fine magle) ili nebulizera sa ili bez upotrebe odgovarajućeg propelanta, kao što su 1,1,1,2-tetrafluoroetan ili 1,1,1,2,3,3,3-heptafluoropropan. Za intranazalnu upotrebu, prašak može da uključi bioathezivno sredstvo, na primer, hitozan ili ciklodekstrin.
[0234] Kontejner pod pritiskom, pumpa, sprej, atomizer ili nebulizer sadrži rastvor ili suspenziju jedinjenja iz pronalaska koji sadrži, na primer, etanol, razblaženi etanol ili pogodno alternativno sredstvo za disperziju, solubilizaciju ili pojačavanje oslobađanja aktivnog sastojka, propelant(e) kao rastvarač i opciono, surfaktant, kao što je sorbitan trioleat, oleinska kiselina ili oligolaktatna kiselina.
[0235] Pre korišćenja u formulaciji suvog praška ili suspenzije, lekoviti produkt se mikronizira do veličine pogodne za oslobađanje inhalacijom (obično manji od 5 mikrona) Ovo može da se postigne bilo kojim odgovarajućim postupkom usitnjavanja, kao što je mlevenje spiralnim mlazom, mlevenje tečnim mlazom kroz kanal, superkritično procesuiranje fluida da se formiraju nanopartikule, homogenizacija pod visokim pritiskom ili sušenje raspršivanjem.
[0236] Kapsule (izrađene, na primer, od želatina ili HPMC), blisteri ili kartridži za upotrebu u inhaleru ili insuflatoru mogu da se formulišu tako da sadrže praškastu smešu jedinjenja iz pronalaska, odgovarajuće praškaste baze kao što su laktoza ili škrob i modifikatora performansi, kao što su 1-leucin, manitol ili magnezijum stearat. Laktoza može da bude anhidrovana ili u obliku monohidrata, preferirano kao monohidratna. U druge pogodne ekscipijente spadaju dekstran, glukoza, maltoza, sorbitol, ksilitol, fruktoza, saharoza i trehaloza.
[0237] Pogodna formulacija u obliku rastvora za upotrebu u atomizeru u kome se koriste elektrohidrodinamičke sile za produkciju fine magle može da sadrži od lug do 20 mg jedinjenja iz pronalaska po aktiviranju a aktivirana zapremina može da varira od 1 uL do 100 uL. Tipična formulacija uključuje jedinjenje iz pronalaska, propilen glikol, sterilnu vodu, etanol i natrijum hlorid. U alternativne rastvarače koji mogu da se koriste umesto propilen glikola spadaju glicerol i polietilen glikol.
[0238] U ove formulacije iz pronalaska namenjene za inhalaciju/intranazalnu primenu mogu da se dodaju odgovarajući korigensi ukusa, kao što su mentol i levomentol, ili zaslađivači, kao što su saharin ili saharin natrijum.
[0239] Formulacije za inhalaciju/intranazalnu primenu mogu da se formulišu tako da budu sa trenutnim i/ili modifikovanim oslobađanjem, koristeći, na primer, poli(DL-mlečnu-koglikolatnu kiselinu (PGLA). Formulacije sa modifikovanim oslobađanjem uključuju odloženo, kontinuirano, pulsno, kontrolisano, ciljano i programirano oslobađanje.
[0240]U slučaju inhalera i aerosola suvog praška, dozna jedinica je određena pomoću ventila koji oslobađa određenu količinu. Jedinice u skladu sa pronalaskom su obično uređene da se primeni odmerena doza ili "puf' koji sadrži traženu količinu jedinjenja iz pronalaska. Ukupna dnevna doza može da se primeni u jednoj dozi ili, mnogo češće, kao podeljene doze u toku dana.
[0241]Jedinjenja iz pronalaska mogu da se primene rektalno ili vaginalno, na primer, u obliku supozitorija, pesara ili klistira. Kakao buter je tradicionalna podloga za supozitorije, ali kao odgovarajuće mogu da se koriste i različite alternativne podloge.
[0242] Formulacije za rektalnu/vaginalnu primenu mogu da se formulišu tako da budu za trenutno i/ili modifikovano oslobađanje. U formulacije sa modifikovanim oslobađanjem spadaju odloženo, kontinuirano, pulsno, kontrolisano, ciljano i programirano oslobađanje.
[0243] Jedinjenja iz pronalaska mogu takođe da se primene direktno na oko ili uho, obično u obliku kapi mikronizirane suspenzije ili rastvora u izotoničnom, pH-podešenom sterilnom rastvoru soli. Druge formulacije pogodne za okularnu i auralnu primenu uključuju masti, biodegradabilne (na primer, apsorptivne gel sunđere, kolagen) i ne-biodegradabilne (na primer, silikon) implante, pločice, sočiva i sisteme partikulata ili vezikula, kao što su niozomi ili lipozomi. Polimer kao što su unakrsno spojena poliakrilna kiselina, polivinilalkohol, hijaluronska kiselina, celulozni polimer, na primer, hidroksipropilmetilceluloza, hidroksietilceluloza ili metil celuloza ili heteropolisaharidni polimer, na primer, gelan guma, mogu da budu inkorporirani zajedno sa konzervansom, kao što je benzalkonium hlorid. Ovakve formulacije mogu takođe da se oslobode jontoforezom.
[0244]Formulacije za okularnu/auralnu primenu mogu da budu formulisane tako da su za trenutno i/ili modifikovano oslobađanje. Formulacije sa modifikovanim oslobađanjem uključuju odloženo, kontinuirano, pulsno, kontrolisano, ciljano i programirano oslobađanje.
Druge tehnologije
[0245]Jedinjenja iz pronalaska mogu da se kombinuju sa rastvorljivim makromolekularnim jedinjenj ima, kao što su ciklodekstrin i njegovi odgovarajući derivati ili polimeri koji sadrže polietilen glikol, kako bi se poboljšala njihova rastvorlj ivost, brzina rastvaranja, maskirao ukus, poboljšala bioraspoloživost i/ili stabilnost, za upotrebu u bilo kom od prethodno pomenutih načina primene.
[0246]Na primer, nađeno je da su kompleksi lek-ciklodekstrin generalno korisni za većinu doznih oblika i načina primene. Mogu da se koriste i inkluzioni i ne-inkluzioni kompleksi. Kao alternativa direktnom kompleksiranju sa lekom, ciklodekstrin može da se koristi kao pomoćni aditiv, to jest kao nosač, razblaživač ili solubilizator. U ovu svrhu su najčešće korišćeni alfa-, beta- i gama-ciklodekstrini, čiji primeri mogu da se nađu u PCT publikacijama broj WO 91/11172, WO 94/02518 i WO 98/55148, čija su otkrića ovde u celini inkorporirana kao referenca.
Doze
[0247]Količina aktivnog jedinjenja koje se primenjuje zavisi od vrste sisara koji se tretira, ozbiljnosti poremećaja ili stanja, brzine primene, raspoloživosti jedinjenja i odluke ordinirajućeg lekara. Međutim, efektivna doza je obično u rasponu od približno 0.001 do približno 100 mg po kg telesne težine po danu, preferirano približno 0.01 do približno 35 mg/kg/danu, u pojedinačnoj ili podeljenim dozama. Za čoveka težine 70 kg, ova količina će da bude približno 0.07 do približno 7000 mg/danu, preferirano približno 0.7 do približno 2500 mg/danu. U nekim slučajevima, vrednosti doza ispod nižeg limita prethodno navedenog opsega mogu da budu više nego adekvatne, dok sa druge strane čak i veće doze mogu da se koriste bez izazivanja bilo kog neželjenog sporednog efekta, jer su ovakve veće doze obično podeljene u više manjih doza za primenu u toku dana. Ukupna dnevna doza može da se primeni u jednoj ili podeljenim dozama i može, po odluci lekara, da odstupi od uobičajenog nivoa koji je ovde dat. Ove doze su date na osnovu prosečnog humanog subjekta čija je telesna težina od približno 65kg do 70kg. Lekar će lako da odredi doze za subjekte čija težina odstupa od ovog opsega, kao što su odojčad i starija populacija.
[0248]Koliko god može da bude poželjno da se primeni kombinacija aktivnih jedinjenja, na primer, u svrhu lečenja određene bolesti ili stanja, u okviru ovog pronalaska je da dve ili više farmaceutskih kompozicija, od kojih najmanje jedna sadrži jedinjenje u skladu sa pronalaskom, mogu da se kombinuju u obliku kita pogodnog za ko-primenu kompozicija. Prema tome, kit iz pronalaska uključuje dve ili više odvojenih farmaceutskih kompozicija, od kojih najmanje jedna sadrži jedinjenje iz pronalaska i način za odvojeno držanje ovih kompozicija, kao što su kontejner, podeljena boca ili podeljena blister folija. Primer ovakvog kita je poznato blister pakovanje koje se koristi za pakovanje tableta, kapsula i slično.
[0249] Kit iz pronalaska je posebno pogodan za primenu različitih doznih oblika, na primer oralnih i parenteralnih, za primenu odvojenih kompozicija u različitim doznim intervalima ili za titraciju odvojenih kompozicija u odnosu jedne prema drugoj. Kao pomoć pri upotrebi, kit obično sadrži uputstvo za primenu a može da obezbedi i podsetnik.
Kombinovana tera<p>ija
[0250] Kako se ovde koristi, naziv "kombinovana terapija" se odnosi na primenu jedinjenja iz pronalaska zajedno sa najmanje jednim dodatnim farmaceutskim ili medicinskim sredstvom (na primer, anti-kancerogenim sredstvom) ili odvojeno ili istovremeno.
[0251] Kako je prethodno naznačeno, jedinjenja iz pronalaska mogu da se koriste u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih anti-kancerogenih sredstava koja su niže opisana. Kada se koristi kombinovana terapija, jedno ili više dodatnih anti-kancerogenih sredstava može da se primeni odvojeno ili istovremeno sa jedinjenjem iz pronalaska. U jednom otelotvorenju, dodatno anti-kancerogeno sredstvo se primenjuje na sisaru (na primer, čoveku) pre primene jedinjenja iz pronalaska. U narednom otelotvorenju, dodatno anti-kancerogeno sredstvo se primenjuje na sisaru nakon primene jedinjenja iz pronalaska. U narednom otelotvorenju, dodatno anti-kancerogeno sredstvo se primenjuje na sisaru (na primer, čoveku) istovremeno sa primenom jedinjenja iz pronalaska.
[0252] Pronalazak se takođe odnosi na farmaceutsku kompoziciju za tretman nenormalnog rasta ćelija kod sisara, uključujući ljude, koja sadrži određenu količinu jedinjenja iz pronalaska, kako je prethodno definisano (uključujući hidrate, solvate i polimorfe tog jedinjenja ili njegovih farmaceutski prihvatljivih soli) u kombinaciji sa jednim ili više (preferirano jedan do tri) anti-kancerogenih sredstava izabranih iz grupe koja sadrži anti-angiogenetska sredstva i inhibitore transdukcije signala i farmaceutski prihvatljiv nosač, pri čemu su količine aktivnog sredstva i kombinacija anti-kancerogenih sredstava, kada se uzmu zajedno, terapeutski efikasne za lečenje navedenog nenormalnog rasta ćelija.
[0253]U jednom otelotvorenju ovog pronalaska, anti-kancerogeno sredstvo koršćeno u konjukciji sa jedinjenjem iz pronalaska i u ovde opisanim farmaceutskim kompozicijama je anti-angiogenetsko sredstvo (na primer, sredstvo koje zaustavlja razvitak novih krvnih sudova u tomorima). U primere anti-angiogenetskih sredstava spadaju, na primer, VEGF inhibitori, VEGFR inhibitori, TIE-2 inhibitori, PDGFR inhibitori, inhibitori angiopoetina, PKCp inhibitori, COX-2 (ciklooksigenaza II) inhibitori, integrini (alfa-v/beta-3), MMP-2 (matriks-metaloprotienaza 2) inhibitori i MMP-9 (matriks-metaloprotienaza 9) inhibitori.
[0254]Preferirana sredstva protiv angiogeneze uključuju sunitinib (Sutent™), bevacizumab (Avastin™), aksitinib (AG 13736), SU 14813 (Pfizer) i AG 13958 (Pfizer).
[0255]U dodatna sredstva protiv angiogeneze spadaju vatalanib (CGP 79787), Sorafenib (Nexavar™), pegaptanib oktanatrijum (Macugen™), vandetanib (Zactima™), PF-0337210 (Pfizer), SU 14843 (Pfizer), AZD 2171 (AstraZeneca), ranibizumab (Lucentis™), Neovastat™ (AE 941), tetratiomolibdat (Coprexa™), AMG 706 (Amgen), VEGF Trap (AVE 0005), CEP 7055 (Sanofi-Aventis), XL 880 (Exelixis), telatinib (BAY 57-9352) i CP-868,596 (Pfizer).
[0256]U ostala sredstva protiv angiogeneze spadaju enzastaurin (LY 317615), midostaurin (CGP 41251), perifozin (KRX 0401), teprenon (Selbex™) i UCN 01 (Kyowa Hakko).
[0257]Drugi primeri sredstava koja mogu da se koriste u konjukciji sa jedinjenjem iz pronalaska i farmaceutskim kompozicijama koje su ovde opisane uključuju celekoksib (Celebrex™), parekoksib (Dvnastat™), derakoksib (SC 59046), lumirakoksib (Preige™), valdekoksib (Bextra™), rofekoksib (Vioxx™), iguratimod(Carera<m>™),IP 751 (Invedus), SC-58125 (Pharmacia) i etorikoksib (Arcoxia™).
[0258]Druga sredstva protiv angiogeneze uključuju eksisulind (Aptosvn™), salsalat (Amigesic™), diflunizal (Dolobid™), ibuprofen (Motrin™), ketoprofen (Orudis™), nabumeton (Relafen™), piroksikam (Feldene™), naproksen (Aleve™, Naprosvn™), diklofenak (Voltaren™), indometacin (Indocin™), sulindak (Clinoril™), tolmetin (Tolectin™), etodolak (Lodine™), ketorolak (Toradol™) i oksaprozin (Davpro™).
[0259]Druga sredstva protiv angiogeneze uključuju ABT 510 (Abbott), apratastat (TMI 005), AZD 8955 (AstraZeneca), inciklinid (Metastat™) i PCK 3145 (Procvon).
[0260]Druga sredstva protiv angiogeneze uključuju acitretin (Neotigason™), plitidepsin (aplidine™), cilengtid (EMD 121974), combretastatin A4 (CA4P), fenretinid (4 HPR), halofuginon (Tempostatin™), Panzem™ (2-metoksiestradiol), PF-03446962 (Pfizer), rebimastat (BMS 275291), katumaksomab (Removab™), lenalidomid (Revlimid™), skvalamin (EVIZON™), talidomid (Thalomid™), Ukrain™ (NSC 631570), Vitaxin™
(MEDI 522) i zoledronsku kiselinu (Zometa™).
[0261]U narednom otelotvorenju, anti-kancerogeno sredstvo je takozvani inhibitor transdukcije signala (na primer, inhibicija načina kojim regulatorne molekule, koje upravljaju fundamentalnim procesima rasta ćelija, diferencijacije i preživljavanja, komuniciraju unutar ćelije). Inhibitori transdukcije signala uključuju male molekule, antitela i nesmislene molekule. U inhibitore transdukcije signala spadaju, na primer, inhibitori kinaze (na primer, inhibitori tirozin kinaze ili inhibitori serin/treonin kinaze) i inhibitori ćelijskog ciklusa. Još preciznije, u inhibitore transdukcije signala spadaju, na primer, inhibitori farnesil protein transferase, EGF inhibitor, ErbB-1 (EGFR), ErbB-2, pan erb, IGF1R inhibitori, MEK, c-Kit inhibitori, FLT-3 inhibitori, K-Ras inhibitori, inhibitori PI3 kinaze, JAK inhibitori, STAT inhibitori, inhibitori Raf kinaze, Akt inhibitori, mTOR inhibitor, inhibitori P70S6 kinaze, inhibitori WNT puteva i inhibitori takozvane multi-ciljane kinaze.
[0262]U preferirane inhibitore transdukcije signala spadaju gefitinib (Iressa™), cetuksimab (Erbitux™), erlotinib (Tarceva™), trastuzumab (Herceptin™), sunitinib (Sutent™), imatinib (Gleevec™) i PD325901 (Pfizer).
[0263]Dodatni primeri inhibitora transdukcije signala koji mogu da se koriste u konjukciji sa jedinjenjem iz pronalaska ili farmaceutskim kompozicijama koje su ovde opisane uključuju BMS 214662 (Bristol-Myers Squibb), Ionafarnib (Sarasar™), pelitreksol (AG 2037), matuzumab (EMD 7200), nimotuzumab (TheraCIM h-R3™), panitumumab (Vectibix™), Vandetanib (Zactima™), pazopanib (SB 786034), ALT 110 (Alteris Therapeutics), BIBW 2992 (Boehringer Ingelheim) i Cervene™ (TP 38).
[0264]Drugi primeri inhibitora transdukcije signala uključuju PF-2341066 (Pfizer), PF-299804 (Pfizer), kanertinib (CI 1033), pertuzumab (Omnitarg™), Lapatinib (Tvcerb™), pelitinib (EKB 569), miltefozin (Miltefosin™), BMS 599626 (Bristol-Myers Squibb), Lapuleucel-T (Neuvenge™), NeuVax™ (E75 kancer vakcine), Osidem™ (IDM 1), mubritinib (TAK-165), CP-724,714 (Pfizer), panitumumab (Vectibix™), lapatinib (Tycerb™), PF-299804 (Pfizer), pelitinib (EKB 569) i pertuzumab (Omnitarg™).
[0265]Drugi primeri inhibitora transdukcije signala uključuju ARRY 142886 (Array Biopharm), everolimus (Certican™), zotarolimus (Endeavor™), temsirolimus (Torisel™), AP 23573 (ARIAD) i VX 680 (Vertex).
[0266]Pored toga, u druge inhibitore transdukcije signala spadaju XL 647 (Exelixis), sorafenib (Nexavar™), LE-AON (Georgetown Universitv) i GI-4000 (Globelmmune).
[0267]U druge inhibitore transdukcije signala spadaju ABT 751 (Abbott), alvocidib (flavopiridol), BMS 387032 (Bristol Myers), EM 1421 (Erimos), indisulam (E 7070), seliciklib (CYC 200), BIO 112 (One Bio), BMS 387032 (Bristol-Myers Squibb), PD 0332991 (Pfizer) i AG 024322 (Pfizer).
[0268]Ovaj proizvod razmatra upotrebu jedinjenja iz pronalaska zajedno sa klasičnim antineoplastičnim sredstvima. U klasična antineoplastična sredstva spadaju, ali se neograničava samo na, hormonalni modulatori kao što su hormonal, anti-hormonal, agonist androgena, antagonist androgena i anti-estrogena terapeutska sredstva, inhibitori histon deacetilaze (HDAC), sredstva za suzbijanje gena ili sredstva za aktiviranje gena, ribonukleaze, proteosomici, inhibitori topoizomeraze I, derivati kamptotecina, inhibitori topoizomeraze II, sredstva za alkilaciju, antimetaboliti, inhibitor poli(ADP-riboza) polimeraze-1 (PARP-1), inhibitori mikrotubulina, antibiotici, vretenasti inhibitori biljnog porekla, jedinjenja na bazi platine, genska terapeutska sredstva, nesmisleni oligonukleotidi, vaskularno ciljajuća sredstva (VTAs) i statini.
[0269]U primere klasičnih antineoplastičnih sredstava za korišćenje u kombinovanoj terapiji sa jedinjenjem iz pronalaska, opciono sa jednim ili više drugih sredstava, spadaju, ali se ne ograničavaju samo na, glukokortikosteroidi, kao što su deksametazon, prednizon, prednizolon, metilprednizolon, hidrokortizon i progestini kao što su medroksiprogesteron, megestrol acetat (Megace), mifepriston (RU-486), selektivni modulatori estrogen receptora (SERMs; kao što su tamoksifen, raloksifen, lasofoksifen, afimoksifen, arzoksifen, bazedoksifen, fispemifen, ormeloksifen, ospemifen, tesmilifen, toremifen, trilostan i CHF 4227 (Cheisi)), selektivni regulatori na dole estrogen receptora (SERD's; kao što su fulvestrant), eksemestan (Aromasin), anastrazol (Arimidx), atamestan, fadrazol, letrazol (Femara), gonadotropin-oslobađajući hormon (GnRH; takođše obično označen kao luteinizirajući hormon-oslobađajući hormon [LHRH]), agonisti kao što su buserelin (Suprefact), goserelin (Zoladex), leuprorelin (Lupron) i triptorelin (Trelstar), abareliks (Plenaxis), bikalutamid (Casodex), ciproteron, flutamid (Eulexin), megestrol, nilutamid (Nilandron) i osateron, dutasterid, epristerid, finasterid, Serenoa repens, PHL 00801, abareliks, goserelin, leuprorelin, triptorelin, bikalutamid, tamoksifen, eksemestan, anastrazol, fadrazol, formestan, letrazol i njihove kombinacije.
[0270]Drugi primeri klasičnih antineoplastičnih sredstava koji se koriste u kombinaciji sa jedinjenjima iz pronalaska uključuju, ali se neograničavaju samo na, suberolanilidnu
hidroksiamitnu kiselinu (SAHA, Merck Inc./Aton Pharmaceuticals), depsiperid (FR<9>01228 ili FK228), G2M-777, MS-275, pivaloiloksimetil butirat i PXD-101; Onconase (ranpirnaza), PS-341 (MLN-341), Velcade (bortezomib), 9-aminokamptotecin, belotekan, BN-80915 (Roche), kamptotecin, diflomotekan, edotekarin, eksatekan (Daiichi), gimatekan, 10-hidroksikamptotecin, irinotekan HC1 (Camptosar), lurtotekan, Oratecin (rubitekan, Supergen), SN-38, topotekan, kamptotecin, 10-hidroksikamptotecin, 9-aminokamptotecin, irinotekan, SN-38, edotekarin, topotekan, aklarubicin, adriamicin, amonafid, amrubicin, anamicin, daunorubicin, doksorubicin, elsamitrucin, epirubicin, etopozid, idarubicin, galarubicin, hidroksikarbamid, nemorubicin, novantron (mitoksantron), pirarubicin, piksantron, prokarbazin, rebekamicin, sobuzoksan, tafiupozid, valrubicin, Zinecard (dexrazoksan), azot mustard N-oksid, ciklofosfamid, AMD-473, altretamin, AP-5280, apazikvon, brostalicin, bendamustin, busulfan, karbokvon, karmustin, hlorambucil, dakarbazin, estramustin, fotemustin, glufosfamid, ifosfamid, KW-2170, lomustin, mafosfamid, mehloretmin, melfalan, mitobronitol, mitolaktol, mitomicin C, mitoksanton, nimustin, ranimustin, temozolomid, tiotepa i jedinjenja za alkilaciju na bazi platine kao što su cisplatin, Paraplatin (karboplatin), eptaplatin, lobaplatin, nedaplatin, Eloksatin (oksaliplatin, Sanofi), streptozocin, satrplatin i njihove kombinacije.
[0271]Pronalazak takođe razmatra upotrebu jedinjenja iz pronalaska zajedno sa inhibitorima dihidrofolat reduktaze (kao što su metotreksat i NeuTrexin (trimetresat glukuronat)), antagonista purina (kao što su 6-merkaptopurin ribozid, merkaptopurin, 6-tiogvanin, kladribin, klofarabin (Clolar), fludarabin, nelarabin i raltitreksed), antagonista pirimidina (kao što su 5-fluorouracil (5-FU), Alimta (premetreksed dinatrijum, LY231514, MTA), kapecitabin (Xeloda™), citozin arabinozid, Gemzar™ (gemcitabin, Eli Lilly), Tegafur (UFT Orzel ili Uforal i uključujući TS-1 kombinaciju tegafura, gimestata i otostata), doksifluridin, karmofur, citarabin (uključujući okfosfat, fosfat stearat, oblike sa kontinuiranim oslobađanjem i lipozomalne oblike), enocitabin, 5-azacitidin (Vidaza), decitabin i etenilcvtidin) i druge metabolite kao što su eflornitin, hidroksiurea, leukovorin, nolatreksed (Thymitaq), triapin, trimetreksat, N-(5-[N-(3,4-dihidro-2-metil-4-oksohinazolin-6-ilmetil)-N-metilamino]-2-tenoil)-L-glutaminske kiseline, AG-014699 (Pfizer Inc.), ABT-472 (Abbott Laboratories), INO-1001 (Inotek Pharmaceuticals), KU-0687 (KuDOS Pharmaceuticals) i GPI 18180 (Guilford Pharm Ine) i njihove kombinacije.
[0272]Drugi primeri klasičnih antineoplastičnih citotoksičnih sredstava za korišćenje u kombinovanoj terapiji sa jedinjenjem iz pronalaska, opciono sa jednim ili više drugih sredstava, uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, Abraxane (Abraxis BioScience, Inc.), Batabulin (Amgen), EPO 906 (Novartis), Vinfiunine (Bristol- Myers Squibb Companv), actinomicin D, bleomicin, mitomicin C, neokarzinostatin (Zinostatin), vinblastin, vinkristin, vindesin, vinorelbin (Navelbine), docetaksel (Taxotere), Ortataxel, paklitaksel (including Taxoprexin DHA/paklitaksel konjugat), cisplatin, karboplatin, Nedaplatin, oksaliplatin (Eloksatin), Satraplatin, Camptosar, kapecitabin (Xeloda), oksaliplatin (Eloksatin), Taksotera alitretinoin, Canfosfamid (Telcvta™), DMXAA (Antizoma), ibandronsku kiselinu, L-asparaginazu, pegaspargazu (Oncaspar™), Efaproxiral (Efaproksin™ - terapija zračenjem)), beksaroten (Targretin™), Tesmilifen (DPPE pojačivač efikasnosti citotoksina)), Theratope™ (Biomira), Tretinoin (Vesanoid™), tirapazamin (Trizaone™), moteksafin gadolinijum (Xcytrin™) Cotara™ (mAb) i NBI-3001 (Protox Therapeutics), poliglutamat-paklitaksel (Xyotax™) i njihove kombinacije.
[0273]Dalji primeri klasičnih antineoplastičnih sredstava za korišćenje u kombinovanoj terapiji sa jedinjenjem iz pronalaska, opciono sa jednim ili više drugih sredstava, uključuju, ali se ne ograničavaju samo na, Advexin (ING 201), TNFerade (GeneVec, jedinjenje koje dovodi do pojavljivanja TNFalfa u odgovoru na radioterapiju), RB94 (Baylor College of Medicine), Genasense (Oblimersen, Genta), Combretastatin A4P (CA4P), Oxi-4503, AVE-8062, ZD-6126, TZT-1027, Atorvastatin (Lipitor, Pfizer Inc.), Provastatin (Pravachol, Bristol-Myers Squibb), Lovastatin (Mevacor, Merck Inc.), Simvastatin (Zocor, Merck Inc.), Fluvastatin (Lescol, Novartis), Cerivastatin (Baycol, Bayer), Rosuvastatin (Crestor, AstraZeneca), Lovostatin, Niacin (Advicor, Kos Pharmaceuticals), Caduet, Lipitor, torcetrapib i njihove kombinacije.
[0274]Naredno otelotvorenje iz ovog otkrića od posebnog interesa se odnosi na postupak za tretman kancera dojke kod ljudi kojima je potreban takav tretman, a koji uključuje primenu na tim ljudima neke količine jedinjenja iz pronalaska u kombinaciji sa jednim ili više (preferirano jednim do tri) anti-kancerogenih sredstava izabranih iz grupe koja sadrži trastuzumab, tamoksifen, docetaksel, paklitaksel, kapecitabin, gemcitabin, vinorelbin, eksemestan, letrazol i anastrazol.
[0275]U jednom otelotvorenju, otkriće obezbeđuje postupak za lečenje kolorektalnog kancera kod sisara, kao što su ljudi kojima je potreban takav tretman, primenom neke količine jedinjenja iz pronalaska u kombinaciji sa jednim ili više (preferirano jednim do tri) anti-kancerogenih sredstva. Primeri određenih anti-kancerogenih sredstava uključuju ona koja se obično koriste u adjuvantnoj hemoterapiji, kao što je FOLFOX, kombinacija 5-fluorouracila (5-FU) ili kapecitabina (Xeloda), leukovorina i oksaliplatina (Eloksatin). U druge primere određenih anti-kancerogenih sredstava spadaju ona koja se obično koriste u hemoterapiji metastatičnih bolesti, kao što su FOLFOX ili FOLFOX u kombinaciji sa bevacizumabom (Avastin); i FOLFIRI, kombinacija 5-FU ili kapecitabina, leukovorina i irinotekana (Camptosar). Drugi primeri uključuju 17DMAG, ABX-EFR, AMG-706, AMT-2003, ANX-510 (CoFactor), aplidin (plitidepsin, Aplidin), Aroplatin, aksitinib (AG13736), AZD-0530, AZD-2171, bacilus Calmette-Guerin (BCG), bevacizumab (Avastin), BIO-117, BIO-145, BMS184476, BMS-275183, BMS-528664, bortezomib (Velcade), C-1311 (Symadex), kantuzumab mertansin, kapecitabin (Xeloda), cetuksimab (Erbitux), klofarabin (Clofarex), CMD-193, kombretastatin, Cotara, CT-2106, CV-247, decitabin (Dacogen), E-7070, E-7820, edotekarin, EMD-273066, enzastaurin (LY-317615)epotilon B (EPO-906), erlotinib (Tarceva), flavopiridol, GCAN-101, gefitinib (Iressa), huA33, huC242-DM4, imatinib (Gleevec), indisulam, ING-1, irinotekan (CPT-11, Camptosar) ISIS 2503, iksabepilon, lapatinib (Tvkerb), mapatumumab (HGS-ETR1), MBT-0206, MEDI-522 (Abregrin), Mitomicin, MK-0457 (VX-680), MLN-8054, NB-1011, NGR-TNF, NV-1020, oblimersen (Genasense, G3139), OncoVex, ONYX 015 (CI-1042), oksaliplatin (Eloksatin), panitumumab (ABX-EGF, Vectibix), pelitinib (EKB-569), pemetreksed (Alimta), PD-325901, PF-0337210, PF-2341066, RAD-001 (Everolimus), RAV-12, Resveratrol, RexinG, S-l (TS-1), seliciklib, SN-38 lipozom, natrijum stiboglukonat (SSG), sorafenib (Nexavar), SU-14813, sunitinib (Sutent), temsirolimus (CCI 779), tetratiomolibdat, talomid, TLK-286 (Telcvta), topotekan (Hvcamtin), trabektedin (Yondelis), vatalanib (PTK-787), vorinostat (SAHA, Zolinza), WX-UK1 i ZYC300, pri čemu su količine aktivnog sredstva zajedno sa količinama kombinovanih anti-kancerogenih sredstava efikasne u lečenju kolorektalnog kancera.
[0276]Naredno otelotvorenje ovog otkrića od posebnog interesa se odnosi na postupak za
tretman karcinoma bubrežnih ćelija kod ljudi kojima je potreban takav tretman, koji uključuje primenu na tim ljudima neke količine jedinjenja iz pronalaska u kombinaciji sa jednim ili više (preferirano jednim do tri) anti-kancerogenih sredstava izabranih iz grupe koja sadrži aksitinib (AG 13736), kapecitabin (Xeloda), interferon alfa, interleukin-2, bevacizumab (Avastin),
gemcitabin (Gemzar), talidomid, cetuksimab (Erbitux), vatalanib (PTK-787), sunitinib (Sutent™), AG-13736, SU-11248, Tarceva, Iressa, Lapatinib i Gleevec, pri čemu su količine
aktivnog sredstva zajedno sa količinama kombinovanih anti-kancerogenih sredstava efikasne u lečenju karcinoma bubrežnih ćelija.
[0277]Naredno otelotvorenje ovog otkrića od posebnog interesa se odnosi na postupak za tretman melanoma kod ljudi kojima je potreban takav tretman, koji uključuje primenu na tim ljudima neke količine jedinjenja iz pronalaska u kombinaciji sa jednim ili više (preferirano jednim do tri) anti-kancerogenih sredstava izabranih iz grupe koja sadrži interferon alfa, interleukin-2, temozolomid (Temodar), docetaksel (Taxotere), paklitaksel, Dakarbazin (DTIC), karmustin takođe poznat kao BCNU), Cisplatin, vinblastin, tamoksifen, PD-325,901, aksitinib (AG 13736), bevacizumab (Avastin), talidomid, sorafanib, vatalanib (PTK-787), sunitinib (Sutent™), CpG-7909, AG-13736, Iressa, Lapatinib i Gleevec, pri čemu su količine aktivnog sredstva zajedno sa količinama kombinovanih anti-kancerogenih sredstava efikasne u lečenju melanoma.
[0278]Naredno otelotvorenje ovog otkrića od posebnog interesa se odnosi na postupak za tretman kancera pluća kod ljudi kojima je potreban takav tretman, koji uključuje primenu na tim ljudima neke količine jedinjenja iz pronalaska u kombinaciji sa jednim ili više (preferirano jednim do tri) anti-kancerogenih sredstava izabranih iz grupe koja sadrži kapecitabin (Xeloda), aksitinib (AG 13736), bevacizumab (Avastin), gemcitabin (Gemzar), docetaksel (Taxotere), paklitaksel, premetreksed dinatrijum (Alimta), Tarceva, Iressa, Vinorelbine, Irinotekan, Etopozid, Vinblastine, sunitinib (Sutent™) i Paraplatin (karboplatin), pri čemu su količine aktivnog sredstva zajedno sa količinama kombinovanih anti-kancerogenih sredstava efikasne u lečenju kancera pluća.
[0279]U skladu sa narednim otelotvorenjem ovog pronalaska, jedinjenja iz pronalaska, ili
njihove farmaceutski prihvatljive soli, ili njihove kompozicije, mogu takođe da se koriste kao kombinacija sa jednim ili više dodatnih terapeutskih sredstava da se ko-primene na pacijentu kako bi se dobili neki posebno željeni terapeutski krajnji rezultati, kao što je tretman bolesti i kancera centralnog nervnog sistema. Drugo i naredno dodatno terapeutsko sredstvo može takođe da bude jedinjenje formule (I) ili njegova farmaceutski prihvaltjiva so ili njegove kompozicije ili može da bude izabrano iz druge grupe terapeutskih sredstava.
[0280]Kako se ovde koristi, nazivi "ko-primena", "ko-primenjena" i "u kombinaciji sa", koji se odnose na jedinjenja iz pronalaska i na jedno ili više drugih terapeutskih sredstava treba da označe, odnose se na i uključuju sledeće: i. istovremenu primenu kombinacije jedinjenja iz pronalaska i terapeutskog sredstva(ava) na pacijentu kome je potreban takav tretman, kada su ove komponente formulisane zajedno u jediničnom doznom obliku koji oslobađa te komponente skoro u potpunosti u isto vreme na tom pacijentu, ii. skoro potpuno istovremenu primenu ovakve kombinacije jedinjenja iz pronalaska i terapeutskog sredstva(ava) na pacijentu kome je potreban takav tretman, kada su ove komponente formulisane odvojeno jedna od druge u različitim doznim oblicima koji se uzimaju skoro potpuno u isto vreme od strane pacijenta, nakon čega se ove komponente oslobađaju u pacijentu skoro potpuno u isto vreme, iii. odvojenu primenu ovakve kombinacije jedinjenja iz pronalaska i terapeutskog sredstva(ava) na pacijentu kome je takav tretman potreban, kada su ove komponente formulisane odvojeno jedna od druge u različitim doznim oblicima koje pacijent uzima jedan za drugim sa značajnim vremenskim intervalom između svake primene, nakon čega se ove komponente oslobađaju u pacijentu skoro u potpunosti u različita vremena; i iv. odvojenu primenu ovakve kombinacije jedinjenja iz pronalaska i terapeutskog sredstva(ava) na pacijentu kome je potreban ovakav tretman, kada su ove komponente formulisane zajedno u jediničnom doznom obliku iz koga se ove komponente oslobađaju na kontrolisan način nakon čega se one primenjuju istovremeno, po redu i/ili preklapajuće u isto i/ili različita vremena od strane pacijenta, pri čemu svaki deo može da se primeni ili istim ili različitim načinom.
Postupci sinteze
[0281]Jedinjenja iz pronalaska mogu da se izrade različitim postupcima sinteze, kako je ovde dalje opisano i ilustrovano. Stručnjak sa iskustvom u tehnici će da razume da su niže dati opšti postupci sinteze reprezentativni i ne treba da budu ograničavajući.
Postupak A
[0282]U opštem procesu sinteze, jedinjenja opšte strukture predstavljena jedinjenjem VI se izrađuju u skladu saPostupkom A.
[0283]Aril halid (I) može da se udvoji sa aril halidom (II) koristeći uslove Suzuki udvajanja, gdein situnastala borna kiselina reaguje sa aril halidom da se dobije jedinjenje (III). Estarska grupa jedinjenja (III) može da se hidrolizuje pomoću odgovarajuće baze, kao što je natrijum hidroksid, da se dobije jedinjenje (IV) a BOC zaštitna grupa može da se ukloni koristeći HC1 ili TFA da se dobije jedinjenje (V). Konačno, formiranje laktama može da se postigne korišćenjem odgovarajućeg reagensa za udvajanje kao što je HATU, da se dobije jedinjenje
(VI).
Postupak B
[0284]U opštem procesu sinteze, jedinjenja opšte strukture predstavljena jedinjenjem (IX) se izrađuju u skladu saPostupkom B.
[0285]U prvoj fazi dvofazne sekvence, regioselektivna karboamidacija aril dihalida(VII)može da se izvrši sa aminom(VIII)u prisustvu ugljen monoksida i odgovarajućeg paladijum katalizatora i baze. U drugoj fazi, Suzuki udvajanje sirovog amida može da se izvrši koristeći dibor pinakol estar i odgovarajući paladijum katalizator i bazu, da se dobije makrociklil
(IX).
Postupak C
[0286]U opštem procesu sinteze, jedinjenja opšte strukture predstavljena jedinjenjem (XI) se izrađuju u skladu saPostupkom C.
[0287]Amid (X) se redukuje pomoću odgovarajućeg redukcionog reagensa, kao što je PhMeSiFh, u prisustvu rutenijum katalizatora, da se dobije jedinjenje (XI).
Postupak D
[0288]U opštem procesu sinteze, jedinjenja opšte strukture predstavljena jedinjenjem(XII)se izrađuju u skladu saPostupkom D.
[0289]Sonagashira unakrsno udvajanje između aril halida(XII)i alkina(XIII)se izvodi u prisustvu odgovarajućih paladijum i bakar katalizatora i baze, da se dobije jedinjenje (XTV). Alkin (XIV) može da se redukuje u atmosferi vodonika u prisustvu odgovarajućeg paladijum katalizatora, da se dobije jedinjenje (XV). Jedinjenje (XV) može da se deprotektuje pomoću odgovarajuće baze kao što je natrijum hidroksid, da se dobije jedinjenje(XVI).Hidroksilna grupa jedinjenja(XVI)može da se konvertuje u reaktivno sredstvo, a nakon toga intramolekularnim premeštanjem pomoću fenoksida da se generišemakrociklil (XVIII).Prema tome,jedinjenje (XVI)može da se tretira sa mesil hloridom u prisustvu baze da se dobije jedinjenje(XVII).Dodavanjem odgovarajuće baze, kao što je natrijum hidrid, u jedinjenje (XVII) dobija se makrociklil (XVIII).
PostupakE
[0290]U opštem procesu sinteze, jedinjenja opšte strukture predstavljena jedinjenjem(XXI)se izrađuju u skladu saPostupkomE.
[0291] Fenol (XIX)može da sc udvoji sajedinjenjem (XVIII)pod Mitsunobu uslovima, da se dobijejedinjenje (XX).U drugoj fazi, intramolekularno Suzuki udvajanje jedinjenja (XX) može da se izvrši pomoću dibor pinakol estra i odgovarajućeg paladijum katalizatora i baze da se dobijemakrociklil(XXI). BOC zaštitna grupajedinjenja (XXI)može da se ukloni pomoću HC1 da se dobijejedinjenje (XXII).
Postupak F
[0292]U opštem procesu sinteze, jedinjenja opšte strukture predstavljena jedinjenjem (XXV) se izrađuju u skladu saPostupkom F.
[0293]Alkil halid može da se konvertuje u alkil azid, a nakon toga se dodavanjem alkina(XXIII)i bakra dobij a jedinjenje (XXIV). 1,4-disupstituisani triazol (XXTV) može da se tretira sa a paladijum katalizatorom da se dobijemakrociklil(XXV).
Postupak G
[0294]U opštem procesu sinteze, jedinjenja opšte strukture predstavljena jedinjenjem(IX)se izrađuju u skladu saPostupkom G.
[0295]U prvoj fazi dvofazne sckvcncc, regioselektivna karboamidacija aril dihalida(VII)može da se izvrši sa aminom(XXVI)u prisustvu ugljen monoksida i odgovarajućeg paladijum katalizatora i baze. U drugoj fazi, reakcija aktivacije C-H na amidu (ili sirovom ili prečišćenom) može da se izvrši pomoću odgovarajućeg paladijum katalizatora i baze, da se dobije makrociklil(IX).
Postupak H
[0296]U opštem procesu sinteze, jedinjenja opšte strukture predstavljena jedinjenjem (XXI) se izrađuju u skladu saPostupkom H.
[0297]U prvoj od trofazne sekvence, formiranje amidne veze između kiseline(XVII)i amina (XVI) može da se izvrši pomoću odgovarajućeg sredstva za udvajanje, kao što je HATU, da se dobije jedinjenje(XVIII).Nukleofilno razmeštanje(XVIII)sa jedinjenjem (XIX) da se dobije jedinjenje (XX) može da se izvrši u prisustvu odgovarajuće baze, kao što je kalijum karbonat. U finalnoj fazi, reakcija aktivacije C-H na amidu (XX) može da se izvrši pomoću odgovarajućeg paladijum katalizatora i baze, da se dobije makrociklil (XXI).
Postupak I
[0298]U opštem procesu sinteze, jedinjenja opšte strukture predstavljena jedinjenjem(XXVII)se izrađuju u skladu saPostupkom I.
[0299]Aril halid (XXII) može da se udvoji sa bornom kiselinom (XXIII) koristeći Suzuki uslove udvajanja, da se dobije jedinjenje (XXIV). BOC zaštitna grupa može da se ukloni pomoću HC1 ili TFA, da se dobije jedinjenje (XXV) a estarska grupa jedinjenja (XXV) može da se hidrolizuje pomoću odgovarajuće baze kao što je natrijum hidroksid, da se dobije jedinjenje(XXVI),Konačno, formiranje laktama može da se postigne upotrebom odgovarajućeg reagensa za udvajanje kao što je HATU, da se dobije jedinjenje(XXVII).
Postupak J
[0300]U opštem procesu sinteze, jedinjenja opšte strukture predstavljena jedinjenjem(XXXIV)se izrađuju u skladu saPostupkom J.
[0301]Regioselektivna hidroboracija alkena(XXVIII)može da se izvrši pomoću pinakol bora i odgovarajućeg katalizatora. Formirane boratne vrste mogu direktno da se udvoje sa aril halidom(XXIX)koristeći uslove Suzuki udvajanja, da se dobije jedinjenje (XXX). Regioselektivna halogenacija jedinjenja (XXX) može da se izvrši pomoću reagensa kao što je NBS, da se dobije jedinjenje (XXXI). Aril halid(XXXI)može da se udvoji sa aril halidom (II) koristeći uslove Suzuki udvajanja, gdein situgenerisana borna kiselina reaguje sa aril halidom da se dobije jedinjenje(XXXII).Estarska grupa jedinjenja(XXXII)može da se hidrolizu]'e pomoću odgovarajuće baze, kao što je natrijum hidroksid, a nakon toga bez prečišćavanja, BOC zaštitna grupa može da se ukloni pomoću HC1 ili TFA da se dobije jedinjenje(XXXIII).Konačno, formiranje laktama može da se postigne korišćenjem odgovarajućeg reagensa za udvajanje kao što je HATU, da se dobije jedinjenje(XXXIV).
Postupak K
[0302]U opštem procesu sinteze, jedinjenja opšte strukture predstavljena jedinjenjem(XXXIX)se izrađuju u skladu saPostupkom K.
[0303]Redukcija estra (XXXV) u alkohol (XXXVI) može da se izvrši sa redukcionim sredstvom kao što je LAH. Formiranje etarske veze između alkohola (XXXVI) i aril halida(XXXVII)može da se izvrši posredstvom baze kao što je NaH. Aril dihalid (XXXVIII) može da se udvoji na intramolekularni način koristeći uslove Suzuki udvajanja, gdein situgenerisana borna kiselina generiše reakciju jednog halida sa drugim halidom u molekuli, da se dobije jedinjenje(XXXIX).
Postupak L
[0304]U opštem procesu sinteze, jedinjenja opšte strukture predstavljena jedinjenjem (XLV) se izrađuju u skladu saPostupkom L.
Postupak M
[0305]U opštem procesu sinteze, jedinjenja opšte strukture predstavljena jedinjenjem(XLIX)se izrađuju u skladu saPostupkom M.
[0306] Simetrični imidazol(XLVI)može da se alkiluje sa benzil halidom(XLVII)u prisustvu odgovarajuće baze kao što je K2CO3. U finalnoj fazi, reakcija aktivacije C-H na amidu(XLVIII)može da se izvrši pomoću odgovarajućeg paladijum katalizatora i baze, da se dobije makrociklil (XLIX).
PostupakN
[0307]U opštem procesu sinteze, jedinjenja opšte strukture predstavljena jedinjenjem( LIT)se izrađuju u skladu saPostupkomN.
[0308]U prvoj fazi dvostepene sekvence, regioselektivna karboamidacija aril dihalida (L)
može da se izvrši sa bicikličnim aminom (LII) u prisustvu ugljen monoksida i odgovarajućeg paladijum katalizatora i baze. U drugoj fazi, reakcija aktivacije C-H na amidu (ili sirovom ili prečišćenom) može da se izvrši korišćenjem odgovarajućeg paladijum katalizatora i baze, da se dobije makrociklil(LII).
Postupak O
[0309]U opštem procesu sinteze, jedinjenja opšte strukture predstavljena jedinjenjem(LVIII)se izrađuju u skladu saPostupkom N. Formiranje amidne veze između kiseline (LIII) i amina (LIV) može da se izvrši pomoću odgovarajućeg sredstva za udvajanje, kao što je HATU. Nakon toga, redukcija funkcionalne grupe acetofenona u alkohol (LV) može da se izvrši pomoću reagensa kao što je NaBFLi. Formiranje etarske veze između (LV) i alkohola (LVI) može da se izvrši po postupku kao što je Mitsunobu reakcija, da se dobije jedinjenje (LVII). Aril dihalid (LVII) može da se udvoji na intramolekularan način koristeći uslove Suzuki udvajanja, gdein situgenerisana borna kiselina generisana najednom halidu reaguje sa drugim halidom u molekuli da se dobije jedinjenje (LVIII).
[0310]Za neke faze ovde prethodno opisanih procesa za izradu jedinjenja iz pronalaska može da bude potrebna zaštita potencijalnih reaktivnih funkcionalnih grupa za koje se ne želi da reaguju i da se nakon toga navedene zaštitne grupe izdvoje. U ovakvim slučajevima, može da se koristi bilo koji kompatibilni zaštitni radikal. Konkretno, mogu da se koriste postupci zaštite i deprotekcije kako su opisali T.W. GREENE (Protective Groups in Organic Svnthesis, A. Wiley-Interscience Publication, 1981) ili P. J. Kocienski (Protecting grupe, Georg Thieme Vcrlag, 1994).
[0311]Sve prethodne reakcije i izrade novih početnih materijala korišćenih u navedenim postupcima su uobičajeni odgovarajući reagensi a uslovi reakcije za njihovo izvođenje ili izradu kao i procedure za izdvajanje traženih produkata su dobro poznati stručnjaku sa iskustvom u tehnici na osnovu referenci iz postojeće literature i ovde datih primera i izrada. Jedinjenja iz pronalaska kao i njihovi međuproizvodi mogu da se prečiste u skladu sa brojnim dobro poznatim postupcima, kao što su kristalizacija ili hromatografija.
Primeri
[0312]Izrade i Primeri koji sledeć ilustruju pronalazak i otkriće. Samo Primeri koji su u okviru ovde datog zahteva 1 ilustruju pronalazak. Svi početni materijali su raspoloživi na tržištu ili su opisani u literaturi. Sve temperature su u °C. Gasna hromatografija na koloni se izvodi sa Merck silika gelom 60 (9385). Hromatografija na tankom sloju (TLC) se izvodi na pločama Merck silika gela 60 (5729). "Rf" predstavlja razdaljinu koju pređe jedinjenje podeljenu sa razdaljinom koju pređe rastvarač od početka TLC ploče. Tačke topljenja su određene pomoću Gallcnkamp MPD350 aparata i nisu korigovanc. NMR se izvodi na Varian-Unity Inova 400 MHz NMR spektrometru ili Varian Mercury 400 MHz NMR spektrometru. Masena spektroskopija se određuje pomoću Finnigan Navigator pojedinačnom četvorokanalnom elektrosprej masenom spektrometru ili Finnigan aQa APCI masenom spektrometru.
[0313] Kada je navedeno da su jedinjenja izrađena na način koji je opisan u prethodnoj Izradi ili Primeru, stručnjak sa iskustvom će da razume da vreme reakcije, broj ekvivalenata reagenas i temperature reakcije mogu da se modifikuju za svaku specifičnu reakciju i da može da bude potrebno ili poželjno da se primene različiti uslovi izrade ili prečišćavanja.
[0314] Pronalazak je ilustrovan niže datim ne-ograničavajućim primerima u kojima se koriste sledeće skraćenice: "Et" znači etil, "Ac" znači acetil, "Me" znači metil, "Ph" znači fenil, "Boe", "BOC", "t-Boc", ili "t-BOC" znači terc-butoksikarbonil, "EtOAc" znači etil acetat, "TEA", "NEt3" ili "Et3N" znači trietilamin, "THF" znači tetrahidrofuran, "MeTHF" znači metiltetrahidrofuran, "MeOH" znači metanol, "DMSO" znači dimetilsulfoksid, "CDCh" znači deuterisani hloroform, "TBME" ili "MTBE" znači metil t-butil etar, "DMF" znači dimetil formamid, "DMAP" znači 4-dimetilaminopiridin, "dppf' znači difenilfosfino ferocen, "DME" znači etilen glikol dimetil etar, "TLC" znači hromatografija na tankom sloju, "SFC" znači superkritična tečna hromatografija, "h", "hr" ili "h" znači sati, "min." ili "minuta" znači minuti, "DCM" ili "CH2CI2" znači metilen hlorid, "Et20" znači dietil etar, "LC-MS" ili "LCMS" znači tečna hromatograifja-masena spektrometrija, "MS" znači masena spektrometrija, "rt" ili "RT" znači sobna temperatura, "NBS" znači N-bromosukcinimid, "MeCN" ili "CH3CN" znači acetonitril, "slani rastvor" znači zasićeni vodeni rastvor natrijum hlorida, "HATU" znači 2-(7-Aza-l H-benzotriazol-l-il)-l,l,3,3-tetrametiluronijum heksafluoro-fosfat, "APCI" znači hemijska jonizacija pod atmosferskim pritiskom, "CD3OD" znači deuterisani metanol, "(CD3)2SO" znači deuterisani dimetil sulfoksid, "5" znači hemijska promena, "d" znači dablet, "DAD" označava detektor sa nizom dioda, g znači gram, "ESCI" znači elektrosprej hemijska jonizacija, "HPLC" znači visoko efikasna tečna hromatografija, "LRMS" znači maseni spektar niske rezolucije, "M" znači molar, "m" znači multiplet, "mg" ili "mgs" znači miligram(i), "MHz" znači mega herc, "mL" znači mililitar, "mL" znači mikrolitar, "mmol" znači milimol, "mol" znači mol, "NMR" znači nuklearna magnetna rezonanca, "q" znači kvartet, "Rt" znači vreme retencije, "s" znači singlet, "t" znači triplet, "TFA" znači trifluorosirćetna kiselina, "SFC" znači superkritična tečna hromatografija, "MeMgBr" znači metil magnezijum bromid, "DMSO-fife" znači deuterisani dimetilsulfoksid, "DiBAL" ili "DIBAL-H" znači diizobutilaluminijum hidrid, "CH3I" znači metil jodid, "ppm" znači delovi po milion, "mCPBA" znači meta-hlorperoksibenzoeva kiselina, "DIPCI" znači P-hlordiizopinokamfenilboran (DIP-Chloride®), "N2" znači azot gas, "Mel" znači metil jodid, "NBS" znači N-bromosukcinimid", "NIS" znači N-jodsukcinimid, "DIAD" znači diizopropilazodikarboksilat, "DCE" znači 1,2-dihloretan, "HOBt" znači hidroksibenzotriazol, "EDC1" znači l-etil-3-(3-dimetilaminopropil) karbodiimid, "CDI" znači 1,1'-karbonildiimidazol, "DMS" znači dimetil sulfid, "DIEA", "DIPEA" ili "Hunig-ova baza" znači A^Af-duzopropiletilamin, "MsCl" znači metansulfonil hlorid, "A1BN" znači azobisizobutironitril, "cataCXium" znači di(l-adamantil)-«-butilfosfin, "HATU" znači 2-(7-Aza-lH-benzotriazol-l-il)-l,l,3,3-tetrametiluronijum heksafluorofosfat, "AgOTf' znači srebrna so trifluorometansulfonske kiseline, "TFAA" znači trifluorosirćetna kiselina, "SCX kertridž" znači kaseta kolone jonskih izmenjivača jakih katjona i "DMAc" znači dimetilacetamid
Izrada sintetičkih međuproizvoda
Izrada (R)-metil 2-(l-((2-amino-5-bromopiridin-3-il)oksi)etil)-4-fluorobenzoata (7).
[0315]
Faza1:
[0316]Rastvor (-)-DIPCI (57.1 g, 178 mmol) u THF (100 ml) se ohladi na -20 do -30 °C. Nakon toga se u kapima doda rastvor jedinjenja 1 (31.3 g, 119 mmol) u THF (100 ml), pomoću levka za dodavanje (30 min dodavanja). Reakcija se ostavi da se zagreje na RT. Nakon 2 h, reakcija se ohladi na -30 °C i doda se nova porcija (-)-DIPCI (38.0 g, 119 mmol). Nakon 30 min, reakcija se ostavi da se zagreje na RT a nakon 1 h rastvarači se uklone pod vakuumom i ostatak se ponovo rastvori u MTBE (200 ml). U reaktivnu smešu se u ledenom kupatilu pomoću levka za dodavanje doda rastvor dietanolamina (31 g, 296 mmol) u smeši etanol/THF (15 ml/30 ml. Uočava se formiranje belog precipitata. Suspenzija se zagreva 2 sata pod refluksom, nakon toga ohladi na sobnu temperaturu, filtrira i osnovni rastvorikoncentruje pod vakuumom.Ostatak se suspenduje u smeši heptan/EtOAc (7:3, 200 ml) i ponovo filtrira. Ovaj postupak se ponavlja sve dok nakon koncentracije tečnosti više ne mogu da se uoče čvrste supstance. Dobijeno žuto ulje se prečisti hromatografijom na koloni (eluent: cikloheksan/EtOAc- 99:1 do 96:4). Dobijeno bezbojno ulje se dalje prečisti rekristalizacijom iz heptana, da se dobije alkoholjedinjenje2 (25 g, 80% prinos, 99% čistoće i 96% ee) u obliku belih kristala.<l>R NMR (400 MHz, CDCh) 5 7.73 (dd, 1 H), 7.32 (dd, 1 H), 6.74 (ddd, 1 H), 4.99 - 5.04 (m, 1 H), 2.01 (d, 1 H), 1.44 (d, 3 H). LCMS-ES: Nema jonizacije, Čistoća
99%. Asimetrična GC (kolona CP-Chirasil-DexnCB): 96% ee; Rt (manje) 17.7 minuta i Rt (veće) 19.4 minuta.
Faza 2:
[0317]Rastvorjedinjenja2 (22 g, 83 mmol) u MTBE (350 mL) se ohladi u ledenom kupatilu i u kapima se doda trietilamin (23 mL, 166 mmol) a nakon toga mesil hlorid (9.6 mL, 124 mmol). Reakcija se nakon toga zagreje na RT i meša 3 h. Reaktivna smeša se filtrira a čvrste supstance isperu sa EtOAc. Osnovne tečnosti se koncentruju pod vakuumom da se dobijejedinjenje 3(35 g, 80% prinos) kao bledo žuto ulje. Ovaj materijal se prenese u narednu fazu bez naknadnog prečišćavanja.<!>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 7.78 (dd, 1 H), 7.24 (dd, 1 H), 6.82 (ddd, 1 H), 2.92 (s, 3 H), 1.64 (d, 3 H). LCMS-ES nema jonizacije.
Faza3:
[0318]Suspenzija Cs2C03(65 g, 201 mmol) ijedinjenja 4(13.3 g, 121 mmol) u CH3-THF (600 mL) i acetonu (300 mL) se meša 30 minuta na RT a nakon toga zagreje na 40 °C pre nego što se u kapima, pomoću levka za dodavanje, doda rastvorjedinjenja3 (34.4 g, 80 mmol) u CH3-THF (300 mL). Dobijena smeša se ostavi da se meša 24 h na 75 - 80 °C. Reakcija se nakon toga filtrira kroz celite sa MTBE, rastvarači se uklone pod vakuumom i ostatak prečisti hromatografijom na koloni silika gela uz eluiranje sa smešom cikloheksan/EtOAc (9:1 do 1:1) da se dobijejedinjenje5 (14.3 g, 39 % prinos, 90% ee) kao bela čvrsta supstanca. Čvrste supstance se nakon toga rekristališu iz smeše heptan/EtOAc da se dobijejedinjenje5 (10.8 g, 37% prinos, 95% ee).<l>RNMR (400 MHz, CDCh) 5 7.38 (dd, 1 H), 7.62 (dd, 1 H), 7.10 (dd, 1 H), 6.75 (ddd, 1 H), 6.44 - 6.51 (m, 2 H), 5.34 - 5.39 (m, 1 H), 4.73 (br s, 2 H), 1.61 (d, 3 H). LCMS-ES m/z 359 [M+H]<+>. HPLC (Chiralpak IC 4.6 x 250 mm): 95% ee; Rt (manje) 10.4 minuta; Rt (veće) 14.7 minuta; eluent: heptan 80%/IPA 20% sa 0.2% DEA, 0.7 mL/min.
Faza 4:
[0319] Jedinjenje5 (20 g, 57 mmol) se rastvori u metanolu (300 mL) i po redu tretira sa trietilaminom (15.4 mL, 113 mmol) i PdCl2(dppf) (4.1 g, 5.7 mmol). Ova smeša se zagreje na 100 °C u toku 16 sati, u atmosferi ugljen monoksida pod pritiskom od 100 psi. LCMS pokazuje daje početni materijal utrošen. Reaktivna smeša se filtrira kroz Celite ploču i filtrat upari do smeđeg ulja. Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela uz eluiranje sa 50% do 75% etil acetata u cikloheksanu, da se dobije čistprodukt6 kao cigla-crvena čvrsta supstanca (13.0 g, 79% prinos).<!>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 1.65 (d, 3 H), 3.94 (s, 3 H), 4.75 (br s, 2 H), 6.32 (q, 1 H), 6.42 (dd, 1 H), 6.61 (dd, 1 H), 7.00 (ddd, 1 H), 7.28 (dd, 1 H), 7.60 (dd, 1 H), 8.03 (dd, 1 H). LCMS ESm/ z291 za [M+H]<+>.
Faza 5:
[0320] Jedinjenje6 (13.0 g, 45 mmol) se rastvori u acetonitrilu (195 mL) i ohladi na <10 °C u ledeno hladnom vodenom kupatilu. U ohlađenu reaktivnu smešu se u kapima doda NBS (7.9 g, 45 mmol) kao rastvor u acetonitrilu (195 mL), prateći unutrašnju temperaturu da se osigura kako ista ne bi prešla 10 °C. Nakon završenog dodavanja, smeša se meša 15 minuta. TLC (1:1 cikloheksan/etil acetat) pokazuje utrošak početnog materijala. Reaktivna smeša upari a ostatak se ponovo rastvori u etil acetatu (400 mL) i ispere sa 2M vodenim rastvorom NaOH (2 x 300 mL) i 10% vodenim rastvorom natrijum tiosulfata (300 mL). Organski ekstrakti se suše preko MgS04i upare da se dobije crveno ulje (17.6 g). Sirovi produkt se prečisti preko silika gela, uz eluiranje sa 10% do 50% etil acetata u cikloheksanu, da se dobijejedinjenje7 (12.0 g, 73% prinos).lK NMR(400 MHz, CDCb) 5 1.65 (d, 3 H), 3.96 (s, 3 H), 4.74 - 4.81 (br s, 2 H), 6.33 (q, 1 H), 6.75 (d, 1 H), 7.03 (ddd, 1 H), 7.25 (dd, 1 H), 7.66 (d, 1 H), 8.06 (dd, 1 H). LCMS ESm/ z369/371 [M+H]<+>. A Chiralpak AD-H (4.6 x 100 mm, 5 mikrona) kolona se eluira sa 10% MeOH (0.1% DEA) u CO2pod pritiskom od 120 bara. Brzinom protoka od 5.0 mL/min se dobija manji izomer uz Rt 0.6 minuta i veći izomer na Rt 0.8 minuta (99% ee). Optička rotacija: [a]d<20>= -92.4 deg (c=1.5, MeOH).
Izrada l-(5-fluoro-2-jodfenil)etil metansulfonata(11).
[0321]
Faza1:
[0322]U rastvorjedinjenja8 (25 g, 0.162 mol) u 2 N rastvoru HC1 (350 mL) se u kapima doda rastvor natrijum nitrita (11.2 g, 0.16 mol) u H2O (150 mL) uz održavanje temperature između 0-5 °C. Nakon završenog dodavanja, smeša se meša 90 minuta na 0-5 °C. Nakon toga se smeša u kapima doda u rastvor kalijum jodida (53 g, 0.32 mol) i bakar (I) jodida (15.2 g, 0.081 mol) u H2O (150 mL), održavajući temperaturu na~5 °C. Nakon završenog dodavanja, smeša se meša 18 sati na sobnoj temperaturi nakon čega TLC (EtOAc) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se filtrira i pogača se suši. Ostatak se razblaži sa MTBE (500 mL), refluksuje 20 minuta i filtrira. Filtrat se koncentruje da se dobijejedinjenje9 kao žuta čvrsta supstanca (30 g, 75% prinos).<J>H NMR (400 MHz, Metanol-^) 5 8.04 - 8.00 (m, 1 H), 7.59 - 7.56 (m, 1 H), 7.08 7.03 (m, 1 H).
Faza 2:
[0323]U rastvorjedinjenja9 (67 g, 0.26 mol) u anhidrovanom THF (500 mL) se na 0 °C, u atmosferi N2, u kapima doda rastvor BH3'SMe2(50.9 mL, 0.51 mol, 1.0 M) u bezvodnom THF (150 mL). Nakon završenog dodavanja, smeša se meša 30 min na 0 °C a nakon toga refluksuje 2 sata. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 1/1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom NH4CI (300 mL). Isparivi sastojci se uklone pod vakuumom a ostatak ekstrahuje sa EtOAc (200 mL x 3). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (200 mL), suše preko Na2S04 i koncentruju da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na silika gelu uz eluiranje sa petrol etar : EtOAc (50/1 do 25/1) da se dobijejedinjenje 10kao bela čvrsta supstanca (55 g, 86% prinos).<*>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.69 - 7.66 (m, 1 H), 7.20 - 7.17 (m, 1 H), 6.72 - 6.67 (m, 1 H), 4.57 (d, 2 H), 1.98 (t, 1 H).
Faza 3:
[0324]Usmešu jedinjenja 10(55 g, 221 mmol) u CHCb (500 mL) se doda Mn02(115 g, 1.33 mol) i smeša se refluksuje 18 sati. TLC (petrol etar: EtOAc =10:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se filtrira i filtrat se koncentruje da se dobijejedinjenje11 kao žuta čvrsta supstanca (50 g, 97% prinos).
Faza 4:
[0325]Urastvor jedinjenja11 (50 g, 200 mmol) u anhidrovanom THF (500 mL) se u kapima, na -60 °C, u atmosferi N2doda CH?MgBr (200 mL, 600 mmol, 3 M rastvor u dietil etru). Kada je dodavanje završeno, smeša se zagreje na sobnu temperaturu i meša još 2 sata. TLC (petrol etar: EtOAc 10:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom NH4CI (300 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (200 mL x 3). Kombinovani organski ekstrakti se isperu sa slanim rastvorom (200 mL), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobijejedinjenje 12kao žuta čvrsta supstanca (50 g, 95% prinos).<l>K NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.69 - 7.64 (m, 1 H), 7.27 - 7.24 (m, 1 H), 6.71 - 6.65 (m, 1 H), 4.96 - 4.94 (m, 1 H), 1.38 (d, 3 H).
Faza 5:
[0326]U izmešanirastvor jedinjenja 12(57 g, 0.213 mol) i TEA (38.5 mL, 0.277 mol) u bezvodnom DCM (1 L) se u kapima doda MsCl (35.7 g, 0.213 mol), održavajući temperaturu na 0 °C. Nakon završenog dodavanja, reaktivna smeša se meša na ovoj temperaturi 30 minuta a nakon toga se smeša ostavi da se zagreje i meša 3 sata na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol/EtOAc 10: 1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se ispere po redu sa 1 N rastvorom HC1 (200 mL x 3), zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(200 mL x 3) i slanim rastvorom (100 mL x 3), suši preko Na2S04i koncentruje pod vakuumom da se dobijejedinjenje 13kao žuto ulje (65 g, 89% prinos).<l>R NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.79 (1 H, dd), 7.24 (1 H, dd), 6.82 (1 H, td), 5.88 (1 H, q), 2.92 (3 H, s), 1.64 (3 H, d).
Izrada metil 2-(l-((2-amino-5-bromopiridin-3-il)oksi)etil)-4-fluorobenzoata (16).
[0327]
Faza 1:
[0328]U izmešanususpenziju jedinjenja 13(57 g, 0.16 mol)i jedinjenja 4(18.1 g, 0.16 mol) u acetonu (1L) se u porcijama, na sobnoj temperaturi, doda CS2CO3(70 g, 0.21 mol). Nakon završenog dodavanja, reaktivna smeša se meša 15 minuta na sobnoj temperaturi a nakon toga meša 18 sati na 45 °C. TLC (smeša petrol/EtOAc=3:l) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se filtrira i filtrat se koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela uz eluiranje sa smešom petrol etar/EtOAc (10:1 do 3:1) da se dobijejedinjenje 14kao smeđa čvrsta supstanca (47 g, 65% prinos).<l>UNMR (400 MHz, CDCI3) S 7.73 - 7.69 (m, 1 H), 7.54 (d, 1 H), 7.03 (dd, 1 H), 6.71 - 6.68 (m, 1 H), 6.44 - 6.37 (m, 2 H), 5.32 - 5.27 (m, 1 H), 4.68 (br s, 2 H), 1.54 (d, 3 H).
Faza 2:
[0329]Postupak opisan u fazi 4 zajedinjenje 6se koristi za izradujedinjenja 15(35.5 g, 93% prinos).<l>R NMR (400 MHz, CDCI3) 5 7.77 (1 H, dd), 7.61 (1 H, d), 7.10 (1 H, dd), 6.75 (1 H, td), 6.51 - 6.44 (2 H, m), 5.36 (1 H, q), 4.75 (2 H, br s), 1.61 (3 H, d).
Faza 3:
[0330]Postupak opisan u fazi 5 zajedinjenje7 se koristi za izradujedinjenja 16(29 g, 66% prinos).<l>K NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.06 (1 H, dd), 7.67 (1 H, d), 7.25 (1 H, dd), 7.03 (1 H, td), 6.75 (1 H, d), 6.33 (1 H, q), 4.76 (2 H, br s), 3.96 (3 H, s), 1.65 (3 H, d). LCMS m/z 181 (fragmenti stirena od cepanja na etarskoj vezi).
Izrada (5)-metil 2-(l-((2-amino-5-bromopiridin-3-il)oksi)etil)-4-fluorobenzoata(17) i(R)-metil 2-(l-((2-amino-5-bromopiridin-3-il)oksi)etil)-4-fluorobenzoata(7).
[0331]
[0332]Jedinjenje 16 (24 g) se rastvori pomoću SFC da se dobije jedinjenje 17 (Pik 1) (10.6 g, 88% prinos) i jedinjenje 7 (Pik 2) (10.2 g, 85% prinos) kao žute čvrste susptance. Chiralpak AD-H (250 x 4.6 mm I.D., 5 mikrona veličina čestice) kolona se eluira sa 5% do 40% etanola (0.05% DEA) u CO2pri brzini protoka od 2.3 mL/min da se dobije Pik 1 u vremenu retencije od 4.1 minuta i Pik 2 u vremenu retencije od 5.8 minuta. Jedinjenje 17 (Pik 1): 99 % ee.<l>R NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.99 (dd, 1 H), 7.60 (d, 1 H), 7.18 (t, 1 H), 6.99 - 6.94 (m, 1 H), 6.68 (d, 1 H), 6.28 - 6.24 (dd, 1 H), 4.69 (s, 2 H), 3.89 (s, 3 H), 1.58 (d, 3 H). LCMSm/ z369/371 [M+H]<+>. [a]d=+108.0 stepeni (c=0.5, MeOH). Jedinjenje 7 (Pik 2): 100% ee.<l>U NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.99 (dd, 1 H), 7.60 (d, 1 H), 7.18 (t, 1 H), 6.99 - 6.95 (m, 1 H), 6.68 (d, 1 H), 6.24 (dd, 1 H), 4.69 (s, 2 H), 3.89 (s, 3 H), 1.58 (d, 3 H). LCMSm/ z369/371 [M+H]<+>. [a]d= -100.0 stepeni (c=0.5, MeOH).
Izrada metil 2-(l-((2-amino-5-bromopiridin-3-il)oksi)propil)-4-fluorobenzoata (23).
[0333]
Faza1:
[0334]U rastvorjedinjenja11 (40 g, 0.16 mol) u bezvodnom THF (400 mL) se na 0 °C u kapima doda EtMgBr (320 mL, 1 M rastvor u THF). Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 2 sata na ovoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc= 10: 1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se na 0 °C neutrališe sa zasićenim rastvorom NH4CI (200 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (300 mL 3 2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (500 mL 3 2), suše preko Na2S04i koncentruju. Ostatak se prečisti pomoću Biotagc (smeša petrol ctar/EtOAc 20:1 do 10:1) da se dobijejedinjenje 19kao svetio žuto ulje (12 g, 27% prinos).<J>HNMR (400 MHz, CDCh) 6 7.67 - 7.64 (m, 1 H), 7.20 - 7.17 (m, 1 H), 6.66 (t, 1 H), 4.72 - 4.70 (m, 1 H), 2.20 (s, 1 H), 1.77 - 1.69 (m, 1 H), 1.61 - 1.52 (m, 1 H), 0.98 (t, 3 H).
Faza 2:
[0335]U izmešanirastvor jedinjenja 19(1 lg, 0.039 mol),jedinjenja 4A(5.5 g, 0.039 mol) i PPh3(14 g, 0.055 mol) u anhidrovanom THF (200 mL) se na 0 °C, u kapima doda DIAD (11 g, 0.055 mol). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 16 sati na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 10: 1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom a ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (smeša petrol etar/EtOAc 10:1 do 3:1) da se dobijejedinjenje 20kao žuta čvrsta supstanca (12 g, 76% prinos).<l>U NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.11 (d, 1 H), 7.83 - 7.81 (m, 1 H), 7.47 - 7.42 (m, 1 H), 7.22 - 7.19 (m, 1 H), 7.09 - 7.07 (m, 1 H), 6.85 - 6.82 (m, 1 H), 5.36 - 5.32 (m, 1 H), 1.88 - 1.85 (m, IH), 1.09 (t, 3 H).
Faza 3:
[0336] Suspenzija jedinjenja 20(12 g, 0.029 mol) i Fe (10 g, 0.18 mol) u metanolu (100 mL) i zasićenom vodenom rastvoru NH4CI (100 mL) se meša 2 sata na 80 °C. TLC (smeša petrol etar/EtOAc=l:l) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se filtrira i filtrat se koncentruje pod vakuumom da se dobije razblaženi rastvor, koji se ekstrahuje sa EtOAc (150 mL x 2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (100 mL), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobijejedinjenje 21kao bledo smeđa čvrsta supstanca (10 g, 92% prinos).<l>KNMR (400 MHz,DMSO-</6)5 7.96 - 7.93 (m, 1 H), 7.50 (d, 1 H), 7.34 (d, 1 H), 7.02 (t, 1 H), 6.59 - 6.57 (m, 1 H), 6.41 - 6.40 (m, 1 H), 5.94 (s, 2 H), 5.24 (t, 1 H), 1.96 - 1.85 (m, 2 H), 1.08 (t, 3 H).
Faza 4:
[0337]Smešajedinjenja 21(10 g, 0.027 mol), Pd(dppf)Cb (2.6 g, 0.0027 mol) i TEA (10 mL, 0.08 mol) u metanolu (250 mL) se zatvori 16 sati u atmosferi CO (2 MPa) na 100 °C. TLC (smeša petrol etar/EtOAc=l:l) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se filtrira i filtrat se koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, (smeša petrol etar/EtOAc od 5:1 do 2:1) da se dobijejedinjenje 22kao bledo žuta čvrsta supstanca (6.5 g, 80% prinos).
Faza 5:
[0338]U izmešani rastvorjedinjenja 22(6.5 g, 0.02 mol) u CH3CN (50 mL) se na 0 °C, u kapima dodaje rastvor NBS (3.8 g, 0.02 mol) u CH3CN (40 mL) u toku 30 minuta. Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 30 minuta na ovoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc =1:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se razblaži sa EtOAc (200 mL), ispere sa zasićenim NaHC03 (100 mL), slanim rastvorom (100 mL), suši preko Na2S04i koncentruje. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni preko silika gela, uz eluiranje sa smešom petrol etar/EtOAc (10:1 do 3:1) da se dobijejedinjenje 23kao bledo žuta čvrsta supstanca (5.8 g, 76% prinos).<l>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.01 - 7.98 (m, 1 H), 7.59 (s, 1 H), 7.12 (d, 1 H), 6.96 - 6.94 (m, 1 H), 6.69 (s, 1 H), 6.09 - 6.06 (m, 1 H), 4.74 (s, 2 H), 3.89 (s, 3 H), 1.88 - 1.82 (m, 2 H), 1.02 - 096 (m, 3 H). LCMSm/ z383/385 [M+H]<+>.Izrada metil 2-(((2-amino-5-bromopiridin-3-il)oksi)(ciklopropil)metil)-4-fluorobenzoata (28).
[0339]
Faza 1:
[0340]Postupak opisan u fazi 1 zajedinjenje 23se koristi za izradujedinjenja 24kao svetio žutog ulja (29 g, 100% prinos).<*>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.68 (dt, 1 H), 7.21 (dd, 1 H), 6.68 (dt, 1 H), 4.45 (d, 1 H), 4.10-4.00 (m, 1 H), 1.97 (s, 1 H), 1.20 - 1.11 (m, 1 H), 0.56 - 0.36 (m, 4 H).
Faza 2:
[0341]Postupak opisan u fazi 2 zajedinjenje 23se koristi za izradujedinjenja 25kao žute čvrste supstance (18 g, 44% prinos).<l>K NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.96 (d, 1 H), 7.74 (dd, 1 H), 7.32 - 7.29 (m, 1 H), 7.16 - 7.07 (m, 2 H), 6.76 - 6.68 (m, 1 H), 5.22 (d, 1 H), 1.38 - 1.19 (m, 1 H), 0.71 -0.56(m, 4 H).
Faza3:
[0342]Postupak opisan u fazi 3 zajedinjenje 23se koristi za izradujedinjenja 26kao bledo smeđe čvrste supstance (15 g, 90% prinos).
Faza 4:
[0343]Postupak opisan u fazi 4za jedinjenje 23se koristi za izradujedinjenja 27kao žuta čvrsta supstanca (10 g, 81% prinos).<l>K NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.98 (q, 1 H), 7.59 (d, 1 H), 7.32 - 7.26 (m, 1 H), 7.03 - 6.99 (m, 1 H), 6.74 - 6.72 (m, 1 H), 6.44 - 6.40 (m, 1 H), 6.04 (d, 1 H), 4.73 (s, 2 H), 3.94 (s, 3 H), 1.35 - 1.28 (m, 1 H), 0.62 - 0.52 (m, 4 H).
Faza 5:
[0344]Postupak opisan u fazi 5 zajedinjenje 23se koristi za izradujedinjenja 28kao bledo žuta čvrsta supstanca (5.3 g, 43% prinos).<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.01 - 7.98 (m, 1 H), 7.49 - 7.45 (m, 2 H), 7.16 - 7.11 (m, 1 H), 6.99 (d, 1 H), 5.90 (q, 1 H), 3.96 (s, 3 H), 1.42 - 1.41 (m, 1 H), 0.69 - 0.68 (m, 1 H), 0.56 - 0.49 (m, 3 H). LCMSm/ z395/397 [M+H]<+>.
Izrada 5-bromo-3-(l-(5-fluoro-2-jodfenil)etoksi)pirazin-2-amina (30).
[0345]
[0346]Urastvor jedinjenja 12(17.8 g, 67.9 mmol) u anhidrovanom THF (350 mL) se na 0 °C, u atmosferi azota doda NaH (2.7 g, 67.9 mmol, 60% u ulju). Smeša se meša još 30 minuta. U gore pomenutu smešu se na 0 °C doda rastvorjedinjenja 29(17.1 g, 67.9 mmol) u anhidrovanom THF (150 mL) i smeša se refluksuje 18 sati. LCMS ukazuje daje utrošeno 90% početnog alkohola. Isparivi sastojci se uklone pod sniženim pritiskom i ostatak se razblaži sa smešom H2O (100 mL) i EtOAc (100 mL). Smeša se filtrira, organski sloj se ukloni a vodeni sloj dalje ekstrahuje sa EtOAc (100 mL x 3). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (100 mL), suše preko Na2S04i koncentruju da se dobije ostatak koji se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa smešom petrol etar : EtOAc (30/1 do 20/1) da se dobijejedinjenje 30kao žuta čvrsta supstanca (11.5 g, 39% prinos).<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.69 - 7.73 (m, 1 H), 7.55 (s, 1 H), 7.04 (d,J=6.8 Hz, 1 H), 6.65 6.71 (m, 1 H), 6.10(q, .7=6.4Hz, 1 H), 4.81 (br s, 2 H), 1.55(d, .7=6.4Hz, 3H). LCMS m/ z438/440
[M+H]<+>.
Izrada metil 2-(((2-amino-5-bromopiridin-3-il)oksi)metil)-4-fluorobenzoata (35).
[0347]
Faza1:
[0348]U ledo hladanrastvor jedinjenja 31(24.3 g, 141 mmol) u DCM (300 mL) se u kapima, u toku 20 minuta, dodaje metanol (100 mL). Reaktivna smeša se nakon toga ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša 2 sata na sobnoj temperaturi. Reakcija se nakon toga koncentruje pod vakuumom a ostatak se rastvori u DCM (200 mL) i nakon toga ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (150 mL). Organski sloj se nakon toga suši preko MgS04, filtrira i koncentruje pod vakuumom da se dobijejedinjenje 32kao bezbojno ulje (19.5 g, 91% prinos).<l>KNMR (400 MHz, CDCb) 5 7.95 (1 H, m), 6.95 - 6.85 (2 H, m), 3.90 (3 H, s), 2.60 (3 H, s). LCMS ES nema jonizacije.
Faza 2:
[0349]Urastvor jedinjenja 32(6.3 g, 41.4 mmol) u DCE (100 mL) se dodaNBS (8.1 g, 46 mmol) a nakon toga katalitička količina benzoil peroksida (200 mg, 0.82 mmol). Reakcija se nakon toga zagreva 8 h na 80 °C. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu i precipitirana čvrsta supstanca se ukloni filtriranjem i ispere sa MTBE. Filtrat se koncentruje pod vakuumom i ostatak se podeli između 2 N rastvora NaOH (150 mL) i MTBE (150 mL). Organski sloj se izdvoji, suši preko MgS04, filtrira i koncentruje da sedobije jedinjenje 33(8.9 g, 87% prinos). 'HNMR (400 MHz, CDCb) 5 8.05 (1 H, m), 7.20 (1 H, m), 7.10 (1 H, m), 4.90 (2 H, s), 3.95 (3 H, s).
Faza 3:
[0350] U jedinjenje 33(15.0 g, 61 mmol) u acetonitrilu (150 mL) se na sobnoj temperaturidoda jedinjenje 34(10.9 g, 58 mmol) a nakon toga cezijum karbonat (23 g, 69 mmol). Smeša se nakon toga zagreva 5 sati na 50 °C a zatim ohladi na sobnu temperaturu. Smeša se nakon toga koncentruju pod vakuumom da se ukloni~80% acetonitrila a zatim se ostatak podeli između vode (400 mL) i etil acetata (400 mL). Dva sloja se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje sa etil acetatom (400 mL). Kombinovane organske supstance se nakon toga koncentruju pod vakuumom da se dobije tamno smeđa čvrsta supstanca. (Napominje se daje vodeni sloj još uvek veoma taman i sadrži nerastvorne čvrste supstance - prinos će verovatno biti umanjen smanjenom rastvorljivišću produkta u organskim rastvaračima). Čvrsti ostatak se nakon toga prevede u suspenziju u MTBE (300 mL) u toku 20 minuta ijedinjenje 35se sakupi kao tamno siva čvrsta supstanca (11.5 g, 52% prinos). Ovaj produkt se nakon toga dalje prečisti hromatografijom na koloni silika gela uz eluiranje sa etil acetatom i cikloheksanom (33% EtOAc do čistog EtOAc) da se dobijejedinjenje 35(9.5 g, 44% prinos) kao beličasta čvrsta supstanca.<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.10 (1 H, m), 7.75 (1 H, s), 7.35 (1 H, m), 7.10 (1 H, m), 7.05 (1 H, s), 5.50 (2 H, s), 4.75 (1 H, br s), 3.90 (3 H, s). LCMS ESm/ z355/357 [M+H]<+>.
Izrada terobutil 2-bromo-4-(metilsulfonil)benzil(metil)karbamata (40).
[0351]
Faza1:
[0352]U izmešanu smešu NBS (12.0 g, 68 mmol) ijedinjenja 36(10.0 g, 58 mmol) se doda koncentrovana sumporna kiselina (50 mL). Rastvor prvo postaje zelen, a nakon toga preovladava bledo žuta boja. Rastvor se meša 16 sati na sobnoj temperaturi. Smeša se pažljivo sipa preko leda (400 mL) a nakon toga ekstrahuje sa etil acetatom (500 mL). Organski sloj se ispere sa 2 M vodenim rastvorom natrijum hidroksida (2x 300 mL), nakon toga se suši preko magnezijum sulfata i upari da se dobijejedinjenje 37kao bela čvrsta supstanca (14.7 g, kvantitativan prinos).<l>HNMR (400 MHz, CDCb) 5 2.48 (s, 3 H), 3.05 (s, 3 H), 7.43 (d, 1 H), 7.77 (dd, 1 H), 8.10 (d, 1 H).
Faza 2:
[0353] Jedinjenje 37(10.0 g, 40 mmol) se rastvori u 1,2-dihloretanu (250 mL), a nakon toga se u malim porcijama dodaju NBS (7.1 g, 40 mmol) i dibenzoil peroksid (970 mg, 4.0 mmol). Nakon 2 sata mešanja na 85 °C, TLC (smeša 8:2 cikloheksan/etil acetat) ukazuje daje skoro potpuno utrošen početni materijal i da se pojavljuju male tačke dibrominovanog materijala. Smeša se ostavi da se ohladi, razblaži do 500 mL sa dihlormetanom i ispere sa vodom (2 x 250 mL). Organski sloj se suši preko MgS04i upari do žutog ulja. Viskozno ulje se ohladi u ledenom kupatilu da se dobije čvrsta supstanca. Trituracijom čvrste supstance sa dietil etrom dobija sejedinjenje 38(4.4 g, 33% prinos).<l>KNMR (400 MHz, CDCb) 5 3.05 (s, 3 H), 4.60 (s, 2 H), 7.66 (d, 1 H), 7.87 (dd, 1 H), 8.15 (d, 1 H). LCMS ES Nema registrovane joniziacije
jedinjenja 11.
Faza 3:
[0354] Jedinjenje 38(4.3 g, 13 mmol) se rastvori u rastvoru metilamina (33% rastvor u etanolu, 100 mL) i meša 16 sati na RT. TLC (etil acetat) i LCMS pokazuju daje početni materijal utrošen i daje dobijen glavni pik produkta. Smeša se upari dojedinjenja 39kao bela čvrsta supstanca (3.7 g, kvantitativan prinos).<*>H NMR (400 MHz, metanol-ć/4) 5 2.49 (s, 3 H), 3.15 (s, 3 H), 3.97 (s, 2 H), 7.71 (d, 1 H), 7.94 (dd, 1 H), 8.16 (d, 1 H). LCMSm/ z278/280 [M+H]<+>.
Faza 4:
[0355] Jedinjenje 39(3.7 g, 13 mmol) se rastvori u dihlormetanu (40 mL) i smeša ohladi na 0 °C. U kapima se doda rastvor di(terc-butil) dikarbonat (3.5 g, 16 mmol) u dihlormetanu (35 mL). Ledeno kupatilo se ukloni i smeša meša 18 sati na sobnoj temperaturi. LCMS i TLC (smeša 1:1 cikloheksan/etil acetat) pokazuju dajejedinjenje 12utrošeno, pa se reakcija razblaži do 150 mL sa dihlormetanom i ispere sa vodom (2 x 100 mL). Organski ekstrakti se suše preko magnezijum sulfata i upare do ulja bledo žute boje. Sirovi produkt se prečisti preko silika gela, uz eluiranje sa gradientom 10% do 20% etil acetat u cikloheksanu, da se dobijejedinjenje 40(2.4 g, 48% prinos).<l>HNMR (400 MHz, metanol-ć/4) 5 1.36 - 1.52 (br, 9 H, t-Bu rotomeri), 2.95 (s, 3 H), 3.15 (s, 3 H), 4.58 (s, 2 H), 7.40 (d, 1 H), 7.95 (d, 1 H), 8.15 (d, 1 H). LCMS ESm/ z378/380 [M+H]<+>.
Izrada terc-butil ((4-bromo-5-cijano-l-metil-lH-pirazol-3-il)metil)-(metil)karbamata(47).
[0356]
Faza1:
[0357]Postupak opisan u fazi 2za jedinjenje 40se koristi za izradujedinjenja 42(4.1 g, 42% prinos). TLC (EtOAc/cikloheksan; 1:10; KMn04): Rf~0.3.<*>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 4.47 (s, 2 H), 4.41 (q, 2 H), 4.15 (s, 3 H), 1.42 (t, 3 H). LCMS ESm/ z324/326/328 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0358]Postupak opisan u fazi 3 zajedinjenje 40se koristi za izradujedinjenja 43(1.8 g, 71% prinos).<l>R NMR (400 MHz, CDCb) 5 4.39 (q, 2 H), 4.14 (s, 3 H), 4.05 (s, 2 H), 2.62 (d, 3 H), 1.41 (t, 3 H). LCMS ESm/ z276/278 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0359] Postupak opisan u fazi 4 za jedinjenje 40 se koristi za izradu jedinjenja 44(1.8 g, 72% prinos).<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 4.48 - 4.44 (m, 2 H), 4.41 (q, 2 H), 4.12 (s, 3 H), 2.82 - 2.79 (m, 3 H), 1.47 (s, 9 H), 1.41 (t, 3 H). LCMS ESmlz376/378 [M+H]<+>i 276/278
[M-BOC]<+>.
Faza 4:
[0360] Jedinjenje 44(4 g, 11 mmol) se rastvori u dioksanu (43 mL). U jednoj porciji se doda natrijum amid (1 g, 27 mmol). Reaktivna smeša se meša 24 h na 100 °C. Nakon ovog vremena, rastvarač se ukloni pod sniženim pritiskom da se dobije bela čvrsta supstanca. Materijal se suspenduje u EtOAc (100 mL) i ispere sa 5% rastvorom limunske kiseline (100 mL). Organska faza se izdvoji i ispere sa vodom (100 mL), suši preko MgS04, filtrira i rastvarač se ukloni pod vakuumom da se dobijejedinjenje 45kao žuta guma (3.1 g, 84% prinos).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 8 4.27 (s, 2 H), 3.92 (s, 3 H), 2.70 (s, 3 H), 1.40 (s, 9 H). LCMS ESmlz348/350 [M+H]<+>i 248/250 [M-BOC]<+>.
Faza 5:
[0361] Jedinjenje 45(3 g, 8.6 mmol) se rastvori u DMF (43 mL, 0.2 M). Doda se HOBt (1.2 g, 8.6 mmol), a nakon toga amonijum hlorid (0.9 g, 17.2 mmol). Nakon toga se doda EDC1 (2.5 g, 13 mmol), a nakon toga TEA (2.4 mL, 17 mmol). Reaktivna smeša se meša na sobnoj temperaturi. Nakon 18h, rastvarač se ukloni pod sniženim pritiskom da se dobije žuto ulje (8.0 g). Ostatak se rastvori u EtOAc (7 5mL). Organska faza se ispere sa NaHC03(zasićeni rastvor, 70 mL) a nakon toga sa slanim rastvorom (100 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko MgS04i rastvarač se ukloni pod vakuumom da se dobijejedinjenje 46kao tamno žuto ulje (2.7 g, 91% prinos). Ovaj materijal se direktno koristi u sledećoj fazi bez naknadnog prečišćavanja.<l>U NMR (400 MHz, CDCb) S 6.74 (br s, 1 H), 5.95 (br s, 1 H), 4.49 (br s, 2 H), 4.16 (s, 3 H), 2.81 (br s, 3 H), 1.47 (s, 9 H). LCMS ESmlz ?>41l?>49[M+H]<+>i 247/249
[M-BOC]<+>.
Faza 6:
[0362] Jedinjenje 46(2.7 g, 7.9 mmol) se rastvori u DCM (80 mL, 0.1 M). Nakon toga se doda TEA (3.3 mL, 23.8 mmol) i reaktivna smeša ohladi na -5 °C. U kapima se u toku 30 min dodaje trifluoroacetatni anhidrid (2.2 mL, 15.8 mmol) u DCM (15 mL). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 1 h na 0 °C. Nakon ovog vremena, rastvarači se uklone pod sniženim pritiskom da se dobije ulje tamno žute boje. Ovaj ostatak se razblaži u DCM (100 mL), ispere sa 5% limunskom kiselinom, zasićenim rastvorom NaHC03 i slanim rastvorom, suši preko MgS04, filtrira i rastvarači se uklone pod vakuumom da se dobije ulje tamno žute boje (2.6 g). Sirovi produkt se prečisti reverzno faznom hromatografijom da se dobijejedinjenje 47kao žuto ulje (2.3 g, 87% prinos).<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 4.46 (br s, 2 H), 4.01 (s, 3 H), 2.83 (br s, 3 H), 1.47 (s, 9 H). LCMS ESmlz331/329 [M+H]<+>i 229/231 [M-BOC]<+>kao bazni j on.
Izradaterobutil((4-bromo-5-metoksiizotiazol-3-il)metil)(metil)karbamata(52).
[0363]
Faza 1:
[0364]Terc-butil nitrit (47.4 g, 0.46 mol) se na 0 °C u toku 2 minuta polako dodaje u izmešanu smešu CuBr2(103 g, 0.46 mol) i CH3CN (900 mL). Nakon 5 minuta mešanja se u čvrstom stanju, u porcijama, u toku 20 minuta doda HC1 sojedinjenja 48(35 g, 0.23 mol). Tokom dodavanja, uočava se blaga egzotermija od 10 °C koja brzo prestaje kada se dodavanjejedinjenja 48završi. Nakon završenog dodavanjajedinjenja 48,reakcija se meša uz lagano zagrevanje na sobnu temperaturu u toku 20 minuta. Polako se dodaje HC1 (razblaženo, 1 M, 2.5 L) uz mešanje (pojavljuje se neko penušanje i izdvajanje NO2gasa). Smeša se ekstrahuje u dietil etru (2 x 800 mL). Kombinovane organske supstance se isperu sa HC1 (aq, 1 M, 2 x 1 L), nakon toga sa slanim rastvorom (1 L), suše preko Na2S04i rastvarač se ukloni pod sniženim pritiskom, da se dobijejedinjenje 49kao žuto/narandžasta čvrsta supstanca (45 g, 76% prinos). TLC: Rf = 0.75 (10% EtOAc u heptanima).<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 2.46 (s, 3 H). LCMS ES nema uočene jonizacije.
Faza 2:
[0365] Smeša jedinjenja 49(45 g, 175 mmol), NBS (47 g, 265 mmol) i di-benzoil peroksida (70% u H20, 9.7 g, 40 mmol) u DCE (400 mL) se meša 12 sati pod refluksom. TLC (10% DCM u heptanima) pokazuje približno 50% početnog materijala (Rf = 0.50) i 50% produkta (Rf = 0.55). Doda se nova porcija NBS (10 g, 56 mmol) i reakcija se meša 6 sati pod refluksom. Nakon hlađenja, smeša se filtrira da se ukloni sukcinimid i filtrat se koncentruje. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, uz eluiranje sa 5% EtOAc u heptanima, da se dobije 50 g nerazdvoive smeše koja se sastoji od početnog materijala49i produkta50i dibromometila sporednog produkta u približnom odnosu od 1 : 2.7 : 1 tim redom. Jedinjenje50se dobija u prinosu od 48%.<J>H NMR (CDCb, 400 MHz) 5 6.77 (s, 1 H, odgovara dibromometil sporednom produktu); 4.59 (s, 2 H, odgovara jedinjenju 31); 2.55 (s, 3 H, odgovara početnom materijalu 30). LCMS ES nema jonizacije.
Faza3:
[0366]Rastvor smeše dobijene iz faze 2 (50 g, izračunato da sadrži 28 g, 83 mmol čistogjedinjenja 31)u THF (20 mL) se polako, na 0 °C u toku 10 minuta dodaje u rastvor CH3NH2(33% u EtOH, 200 mL, 2.1 mol) razblažen sa dodatnim EtOH (200 mL). Nakon završenog dodavanja, reakcija se meša 25 minuta na 0 °C. Reakcija se nakon toga koncentruje pod vakuumom do približno 300 mL zapremine. Doda se etanol (150 mL) i smeša se ponovo koncentruje do približno 300 mL zapremine. Dobijeni rastvor se nakon toga ohladi na 0 °C i u porcijama se u toku 5 minuta dodaje (BOC)20 (33 g, 150 mmol) (izdvaja se C02). Nakon završenog dodavanja smeša se ostavi da se mešana na 20 °C u toku noći. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom a ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, uz eluiranje sa 10% EtOAc u heptanima, da se dobijejedinjenje 51kao krem obojena čvrsta supstanca (32 g, 97% prinos). TLC (Rf = 0.30, 10% EtOAc u heptanima).<*>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 4.50 - 4.60 (m, 2 H), 2.90 - 2.99 (m, 3 H), 1.35 - 1.55 (m, 9 H). LCMS ESmlz287 ES [M-Boc]<+>.
Faza 4:
[0367]Litijum (40 mg, 5.7 mmol) se uz mešanje, pažljivo doda u metanol (6 mL) u reaktivnoj boci opremljenoj sa refiuksnim kondenzatorom. Nakon rastvaranja litijuma, u jednoj porciji
sedoda jedinjenje 51(350 mg, 0.91 mmol), rastvoreno u metanolu (2 mL) i dobijeni rastvor se meša 20 sati na 60 °C. TLC (10% EtOAc u heptanima) pokazuje glavno novo mesto (Rf = 0.20), zajedno sa približno 20%jedinjenja 51(Rf = 0.30) i tragove druga dva produkta (Rf's = 0.25 i početak). Nakon hlađenja, reakcija (sada sadrži suspenziju) se doda u vodu (30 mL) i smeša se ekstrahuje u EtOAc (20 mL). Organski sloj se izdvoji, ispere sa slanim rastvorom (20 mL), suši preko Na2S04i upari. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, uz eluiranje sa 10% EtOAc u heptanima, da se dobijejedinjenje 52kao bledo žuto ulje (150 mg, 48% prinos). TLC: Rf = 0.20 (10% EtOAc u heptanima.<l>RNMR (400 MHz, CDCb) 5 4.40 4.55 (m, 2 H), 4.04 (s, 3 H), 2.85 - 2.95 (m, 3 H), 1.40 1.50 (m, 9 H). LCMS ESm/ z237/239 [M - Boc]<+>.
Izrada terc-butil ((4-bromo-l,3-dimetil-lH-pirazol-5-il)metil)(metil)karbamata(57).
[0368]
Faza1:
[0369]CDI (2.8 g, 17 mmol) se na 20 °C doda u suspenzijujedinjenja 53(2.0 g, 14 mmol) u THF (25 mL). Smeša se nakon toga zagreva 30 minuta na 50 °C, uz mešanje (oslobađanje gasa). Smeša se nakon toga ohladi na -10 °C i u jednoj porciji se doda MeNH2(2 M rastvor u THF, 20 mL, 40.0 mmol). Ledeno kupatilo se ukloni i reakcija se meša 60 minuta na sobnoj temperaturi. Smeša se nakon toga koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silika gela, uz eluiranje sa 100% EtOAc, da se dobijejedinjenje 54(2.0 g, 91% prinos) kao bistro ulje. TLC: Rf = 0.60 (100% EtOAc). 'HNMR (400 MHz, CDCb) 5 2.23 (s, 3 H), 2.93 (d, 3 H), 4.09 (s, 3 H), 6.00 (br s, 1 H), 6.12 (s, 1 H). LCMS ESmlz154 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0370]BH3-DMS (8.0 g, 105 mmol) se polako, na -5 °C, dodaje urastvor jedinjenja 54(2.0 g, 13.0 mmol) u THF. Nakon završenog dodavanja, smeša se meša 3 h na 50 °C, a zatim ohladi i meša na sobnoj temperaturi u toku noći. Reakcija se nakon toga ohladi na 0 °C i polako se dodaje 6 M rastvor HC1 (30 mL) (dolazi do penušanja). Nakon završenog dodavanja, smeša se meša 30 minuta na 70 °C, a zatim ohladi na 0 °C i zaalkališe sa NaOH (30% vodeni rastvor) do pH 13 (pH papir). Smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom da se ukloni THF a nakon toga ekstrahuje u DCM (5 x 40 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko Na2S04i upare da se dobijejedinjenje 55(1.5 g, 83% prinos). TLC: Rf = 0.20 (98% EtOAc i 2% 7 M rastvor NH3 u MeOH).<l>K NMR (400 MHz, CDCb) 5 2.20 (s, 3 H), 2.40 (s, 3 H), 3.68 (s, 2 H), 3.78 (s, 3 H), 5.91 (s, 1 H).
Faza 3:
[0371]Urastvor jedinjenja 55(1.5 g, 10.7 mmol) u DCM (30 mL) se doda (BOC)20 (3.27 g, 15 mmol). Smeša se meša u toku noći, koncentruje pod sniženim pritiskom i ostatak prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa 30-50% EtOAc u cikloheksanu, da se dobijejedinjenje 56(2.0 g, 78% prinos) kao bezbojno ulje. TLC: Rf = 0.50 (1:1 EtOAc/cikloheksan).<l>RNMR (400 MHz, CDCb) 5 1.48 (s, 9 H), 2.20 (s, 3 H), 2.78
(s, 3 H), 3.78 (s, 3 H), 4.61 (s, 2 H), 5.94 (s, 1 H).
Faza 4:
[0372] Jedinjenje 56(2.1 g, 8.8 mmol) se rastvori u acetonitrilu (31 mL), doda se natrijum bikarbonat (0.88 g, 10 mmol) i smeša se ohladi na 0 °C. Doda se NBS (1.6 g, 9.2 mmol) i reaktivna smeša se meša 1 sat na~5 °C. LCMS pokazuje utrošakjedinjenja 56.Reaktivna smeša se zagreje na RT, filtrira i koncentruje pod vakuumom da se dobije žuto ulje. Doda se MTBE, uočava se bela čvrsta supstanca i filtrira. Osnovni rastvori se koncentruju i ponovo se doda MTBE. Formnira se bela čvrsta supstanca koja se filtrira i osnovni rastvori se isperu sa razblaženim vodenim rastvorom natrijum tiosulfata, vodom a nakon toga sa slanim rastvorom. Rastvor se suši preko MgSCh, filtrira i koncentruje pod vakuumom da se dobije jedinjenje 57 kao bela čvrsta supstanca (2.7 g, 95% prinos).<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 4.50 (s, 2 H), 3.79 (s, 3 H), 2.70 (s, 3 H), 2.20 (s, 3 H), 1.45 (s, 9 H). LCMS ESm/ z318/320 [M+H]<+>.
Izrada terobutil 2-bromobenzil(metil)karbamata(59).
[0373]
[0374] Rastvor jedinjenje58 (2.0 g, 10.0 mmol) i Boc20 (2.29 g, 10.5 mmol) u THF (40 mL) se meša 16 sati na RT. Smeša se nakon togakoncentruje pod vakuumom.Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa 10% EtOAc u heptanima i dobija sejedinjenje59 kao bezbojno ulje (2.8 g, 95% prinos).<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.54 (d, 1 H), 7.30 (t, 1 H), 7.13 (m, 2 H), 4.53 (br d, 2 H), 2.87 (br s, 3 H), 1.46 (br d, 9 H).
Izrada terc-butil ((4-bromo-l,3-dimetil-lH-pirazol-5-il)metil)-(ciklopropil)karbamata(63).
[0375]
Faza1:
[0376]Urastvor jedinjenja 60(1.00 g, 8.06 mmol) u DCM (80 mL) se doda ciklopropil amin (0.850 mL, 12 mmol) a nakon toga Ti(0/-Pr)4(4.7 mL, 16 mmol). Rastvor se meša na sobnoj temperaturi u toku noći, nakon toga se doda MeOH (20 mL) a nakon toga u porcijama NaBH4(610 mg, 16 mmol) (razvija se gas). Reakcija se neutrališe sa zasićenim rastvorom NaHC03, uz formiranje belih čvrstih supstanci. Smeša se filtrira kroz celite a nakon toga se osnovni rastvor ekstrahuje sa EtOAc (2x). Kombinovane organske supstance se isperu sa slanim rastvorom, suše preko MgS04, filtriraju i koncentruju da se dobijejedinjenje 61(1.38 g).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 5.88 (s, 1 H), 3.68 - 3.66 (m, 2 H), 3.65 (s, 3 H), 2.57 (br. s., 1 H), 2.07 (s, 3 H), 2.06 - 2.01 (m, 1 H), 0.40 - 0.30 (m, 2 H), 0.25 - 0.18 (m, 2 H).
Faza 2:
[0377] Rastvor jedinjenja 61(1.33 g, 8.06 mmol), DIEA (2.81 mL, 16.1 mmol) i Boc20 (2.64 g, 12.1 mL) u THF (27 mL) se mešaju 2 dana na sobnoj temperaturi. Rastvor se koncentruje i prečisti gasnom hromatografijom uz eluiranje sa smešom heptan/EtOAc (0-50%) da se dobijejedinjenje 62(1.75 g, 82% prinos preko 2 faze).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 5.85 (s, 1 H), 4.34 (s, 2 H), 3.68 (s, 3 H), 2.36 (br s, 1 H), 2.08 (s, 3 H), 1.40 (s, 9 H), 0.68 (d,J=6.0 Hz, 2 H), 0.61 (br s, 2 H).
Faza3:
[0378]Urastvor jedinjenja 62(1.75 g, 6.60 mmol) u DMF (44 mL) se doda NBS (1.2 g, 6.6 mmol). Nakon 1 sat, rastvor se razblaži sa EtOAc, ispere sa 50% zasićenim rastvorom Na2C03(2x) i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje da sedobije jedinjenje 63kao žuta guma (2.14 g, 94% prinos).<l>K NMR (400 MHz, DMSO-rf6) 5 4.45 (s, 2 H), 3.73 (s, 3 H), 2.23 - 2.14 (m, 1 H), 2.09 (s, 3 H), 1.41 (s, 9 H), 0.70 - 0.52 (m, 4 H).
Izradaterc-butil((4-bromo-5-ciklopropil-l-metil-lH-pirazol-3-il)metil)-(metil)karbamata(70).
[0379]
Faza1:
[0380]U rastvorjedinjenja64 (2.9 g, 17.4 mmol) u bezvodnom metanolu (100 mL) se u kapima, na 0 °C, doda SOCb (20 mL). Nakon dodavanja, reaktivni rastvor se meša 48 sati na sobnoj temperaturi. TLC (dihlormetan/metanol 10/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak koji se rastvori sa EtOAc (200 mL). Organski sloj se ispere sa zasićenim rastvorom NaHC03(100 mL x 3), slanim rastvorom (100 mL), suši preko Na2S04i koncentruje pod vakuumom da se dobijejedinjenje 65kao bledo žuto ulje (2.7 g, 85% prinos).<l>K NMR (400 MHz, CDCb) 5 6.63 (s, 1 H), 4.19 (s, 3 H), 4.12 (s, 3 H), 1.99 - 1.92 (m, 1 H), 1.27 - 1.23 (m, 2 H), 0.94 - 0.91 (m, 2 H).
Faza 2:
[0381]U smešu L1AIH4 (0.85 g, 22.5 mmol) u bezvodnom THF (40 mL) se u kapima, na -10~0 °C, dodajedinjenje 65(2.7 g, 15 mmol) u THF (10 mL). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 1/1) pokazuje da je reakcija završena. Reakcija se neutrališe sa 20% vodenim rastvorom NaOH (4 mL). Smeša se filtrira i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela uz eluiranje sa smešom petrol etar/EtOAc (3/1) da se dobijejedinjenje 66kao bela čvrsta supstanca (2.3 g, 87% prinos).
Faza 3:
[0382]Urastvor jedinjenja 66(2.5 g, 16.4 mmol) i Et3N (2.48 g, 24.6 mmol) u bezvodnom DCM (100 mL) se u kapima, na 0 °C, doda MsCl (2.13 g, 18.1 mmol). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 3 sata na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 3/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se ispere sa vodom (100 mL x 3), zasićenim rastvorom NaHCCb(100 mL x 3), slanim rastvorom (100 mL), suši preko Na2S04i koncentruje pod vakuumom da se dobijejedinjenje 67kao crveno ulje (2.5 g, 66% prinos).
Faza 4:
[0383]Urastvor jedinjenja 68(2.8 g, 21.3 mmol) u bezvodnom DMF (40 mL) se na 0 °C, u malim porcijama, dodaNaH (60% u ulju, 0.96 g, 121 mmol). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 1 sat na sobnoj temperaturi. Nakon toga se na 0 °C u anjon u kapima dodaJedinjenje 67(2.5 g, 10.8 mmol) u DMF (10 mL). Dobijena smeša se nakon toga meša na sobnoj temperaturi u toku noći. Pomoću TLC (smeša petrol etar/EtOAc 3/1) nije detektovanojedinjenje 67.Reaktivna smeša se sipa u ledenu vodu (100 mL). Smeša se nakon toga ekstrahuje sa EtOAc (50 mL x 3). Kombinovani organski ekstrakti se isperu sa slanim rastvorom (100 mL), suše preko Na2S04i koncentruju pod sniženim pritiskom. Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa smešom petrol etar/EtOAc (3/1) da se dobijejedinjenje 69kao beličasta čvrsta supstanca (1.3 g, 45% prinos).<l>K NMR (400 MHz, CDCb) 5 6.32 (d, 1 H), 4.30 (s, 2 H), 3.84 (s, 3 H), 2.82 (s, 3 H), 1.62 - 1.54 (m, 1 H), 1.48 (s, 9 H), 0.96-0.94 (m, 2 H), 0.64 - 0.63 (m, 2 H).
Faza 5:
[0384]Urastvor jedinjenja 69(1.2 g, 4.14 mmol) u DCM (50 mL) se na 0 °C polako dodaje NBS (0.77 g, 4.35 mmol). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. Pomoću TLC (smeša petrol etar/EtOAc 3/1) nije detektovanojedinjenje 69(. Reaktivna smeša se ispere sa zasićenim NaHC03(50 mL x 3), slanim rastvorom (100 mL), suši preko Na2S04i koncentruje pod sniženim pritiskom. Sirovi produkt se prečisti hromatografijom na koloni silika gela uz eluiranje sa smešom petrol etar/EtOAc (4/1) da se dobijejedinjenje 70kao bledo žuto ulje (1.3 g, 91% prinos).<J>H NMR (400 MHz, CDC13) 5 4.35 - 4.33 (s, 2 H), 3.79 (s, 3 H), 2.71 (s, 3 H), 1.62 1.54 (m, 1 H), 1.41 (s, 9 H), 0.96 - 0.94 (m, 2 H), 0.80 - 0.78 (m, 2 H).
Izradaterc- buii\((4-bromo-3-ciklopropil-l-metil-lH-pirazol-5-il)metil)(metil)karbamata (76).
[0385]
Faza 1:
[0386]Postupak opisan u fazi 1 zajedinjenje 70se koristi za izradujedinjenja 72.<J>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 6.43 (s, 1 H), 4.05 (s, 3 H), 3.78 (s, 3 H), 1.83-1.81 (m, 1 H), 0.87 - 0.83 (m, 2 H), 0.65 - 0.62 (m, 2 H).
Faza 2:
[0387]Postupak opisan u fazi 2 zajedinjenje 70se koristi za izradujedinjenja 73.<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 5.87 - 5.77 (d, 1 H), 4.53 (s, 3 H), 3.74-3.71 (t, 3 H), 1.83 - 1.77 (m, 3 H), 1.60 (s, 1 H), 0.84 - 0.80 (m, 2 H), 0.61 - 0.57 (m, 2 H).
Faza3:
[0388]Postupak opisan u fazi 2za jedinjenje 70se koristi za izradujedinjenja 74(1.7 g, 65% prinos).
Faza 4:
[0389]Postupak opisanu fazi 4za jedinjenje 70se koristi zaizradu jedinjenja 75(1.6 g, 87% prinos).
Faza 5:
[0390]Postupak opisan u fazi 5 zajedinjenje 70se koristi za izradujedinjenja 76.<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 4.43 (s, 2 H), 4.06 - 4.04 (s, 3 H), 2.66 (s, 3 H), 1.77 - 1.76 (m, 1 H), 1.41 (s, 9 H), 0.83 - 0.79 (m,4H).
Izradaterc-butil((4-bromo-5-metoksi-l-metil-lH-pirazol-3-il)metil)(metil)karbamata (82).
[0391]
Faza 1:
[0392]Postupak opisan u fazi 1 zajedinjenje 70se koristi za izradujedinjenja 78.<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 6.08 (s, 1 H), 3.94 - 3.92 (m, 6 H), 3.75 - 3.72 (m, 3 H).
Faza 2:
[0393]Postupak opisan u fazi 2za jedinjenje 70se koristi za izradujedinjenja 79(0.6 g, 87% prinos).
Faza 3:
[0394]Postupakopisan u fazi 3 zajedinjenje 70se koristi za izradujedinjenja 80.
Faza 4:
[0395]Postupak opisan u fazi 4 zajedinjenje 70se koristi za izradujedinjenja 81.<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 5.47 (s, 1 H), 4.27 (s, 2 H), 3.83 (s, 3 H), 3.57 (s, 3 H), 2.82 (s, 3 H), 1.48 (s,9H).
Faza 5:
[0396]Postupak opisanu fazi 5za jedinjenje 70se koristi zaizradu jedinjenja 82(3.9 g, 79% prinos). LCMSmlz333 [M+H]<+>.
Izradaterc-butil((4-bromo-3-metoksi-l-metil-lH-pirazol-5-il)metil)(metil)-karbamata (91).
[0397]
Faza 1:
[0398] Usmešujedinjenja83(10.7mL,0.067 mol) u 1:1 EtOH/ H20 (120 mL) se polako, na 0 °C, dodajerastvor jedinjenja 84(7.72 g, 0.08 mol) i NaOH (3.2 g, 0.08 mol) u 1:1 EtOH/H20 (40 mL). Rastvor se meša 30 min na 0 °C i 1 sat zagreva na sobnoj temperaturi. Smeša se koncentruje i ostatak se podeli između vode (100 mL) i EtOAc (100 mL). Vodeni sloj se koncentruje da se dobijejedinjenje 85kao smeđe ulje (7.6 g, 62% prinos).
Faza 2:
[0399]Smešajedinjenja 85(7.6 g, 41 mmol) u 1 N rastvoru HC1 (75 mL) se meša 1.5 sat na sobnoj temperaturi. Smeša se ekstrahuje sa DCM (50 mL), vodeni sloj se koncentruje da se dobije ostatak. Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa smešom petrol etar / EtOAc 6:1) da se dobijejedinjenje 86kao bela čvrsta supstanca (2.2 g, 32% prinos).
Faza 3:
[0400] Smeša jedinjenja 86(1.6 g, 9.1 mmol), K2CO3(3.7 g, 27.5 mmol) i metil jodida (6.5 g, 46 mmol) se zagreva 3 sata pod refluksom. TLC (petrol etar / EtOAc = 6:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se filtrira i filtrat se koncentruje da se dobije ostatak. Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa smešom petrol etar / EtOAc (20:1) da se dobijejedinjenje 87kao žuto ulje (1.4 g, 83% prinos).<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 6.18 (s, 1 H), 4.30 (q, 2 H), 4.05 (s, 3 H), 3.83 (s, 3 H), 1.36 (t, 3 H).
Faza 4:
[0401]Postupak opisan u fazi 2za jedinjenje 70se koristi za izradujedinjenja 88(1.0 g, 92% prinos).
Faza 5:
[0402]Postupak opisan u fazi 3za jedinjenje 70se koristi zaizradu jedinjenja 89.
Faza 6:
[0403]Postupak opisanu fazi 4za jedinjenje 70se koristi zaizradu jedinjenja 90(1.5 g, 83% prinos).<l>R NMR (400 MHz, CDCb) 5 5.57 (s, 1 H), 4.36 (s, 2 H), 3.84 (s, 3 H), 3.67 (s, 3 H), 2.77 (s, 3H), 1.47 (s, 9 H).
Faza 7:
[0404]Postupak opisan u fazi 5za jedinjenje 70se koristi zaizradu jedinjenja 91(1.3 g, 83% prinos).<l>U NMR (400 MHz, CDCb) 5 4.47 (s, 2 H), 3.93 (s, 3 H), 3.75 (s, 3 H), 2.73 (s, 3 H), 1.32 (s, 9 H). LCMSm/ z335 [M+H]<+>.
Izrada l-(3-bromo-2-metoksipiridin-4-il)-N-metilmetanamina (98)
[0405]
Faza1:
[0406]Urastvor jedinjenja92 (5.0 g, 29 mmol) u DCM (15 mL) se doda metil trioksorenijum (73 mg, 0.29 mmol) a nakon toga H2O2(50% u vodi, 3.6 mL, 58 mmol). Žuta dvofazna smeša se meša na sobnoj temperaturi u toku noći. Reaktivna smeša se razblaži sa vodom i ekstrahuje sa DCM (2x). Kombinovani organski ekstrakti se isperu sa slanim rastvorom, suše preko MgSCn, filtriraju i koncentruju da se dobijejedinjenje 93kao bela čvrsta supstanca (5.1 g, 93% prinos).<l>RNMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 8.53 (s, 1 H), 8.15 (d,J=6.5 Hz, 1 H), 7.40 (d,J=6.5 Hz, 1 H), 2.35 - 2.27 (m, 3 H).
Faza 2:
[0407] Jedinjenje 93(4.0 g, 21 mmol) se u porcijama, na 0 °C, doda u čist POCb (14 mL) da se dobije suspenzija. Ledeno kupatilo se ukloni i reaktivna smeša se zagreje na 70 °C u toku noći. Najveći deo POCI3se ukloni pod vakuumom. U ostatak se polako dodaje led a nakon toga se pažljivo dodaje 1 N rastvor Na2C03. Kada se oslobađanje CO2završi, rastvor se ekstrahuje sa EtOAc (3x). Kombinovani organski ekstrakti se suše preko MgS04, filtriraju i koncentruju. Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa smešom heptani/EtOAc (0-20%) da se dobijejedinjenje 94kao bela čvrsta supstanca (1.65 g, 38% prinos).<*>HNMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 8.27 (d,J=4.8 Hz, 1 H), 7.42 (d,J=4.8 Hz, 1 H), 2.48 - 2.38 (m, 3 H).
Faza 3:
[0408]U zatovrenu epruvetu se urastvor jedinjenja 94(1.8 g, 8.7 mmol) u MeOH (17 mL) doda NaOMe (25% rastvor u MeOH, 3.1 mL, 13 mmol). Reakcija se zagreva 3 dana na 75 °C. Reaktivna smeša se ohladi na sobnu temperatu, razblaži sa EtOAc, ispere sa zasićenim rastvorom NH4CI i slanim rastvorom, suši preko MgS04, filtrira i koncentruje. Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa smešom heptani/EtOAc (0-15%) da se dobijejedinjenje 95kao bistro ulje (991 mg, 56% prinos).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-g?6) 5 8.00 (d,J=5.0 Hz, 1 H), 6.98 (d,J=4.8 Hz, 1 H), 3.90 (s, 3 H), 2.35 (s, 3H).
Faza 4:
[0409]U rastvorjedinjenja 95(990 mg, 4.9 mmol) u benzenu (33 mL) se doda NBS (870 mg, 4.9 mmol) a nakon toga A1BN (40 mg, 0.25 mmol). Smeša se prenese u uljano kupatilo na 80 °C. Nakon šest sati, reakcija se razblaži sa EtOAc, ispere sa 1 M rastvorom Na2C03i slanim rastvorom, suši preko MgS04, filtrira i koncentruje. Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom uz eluiranje sa smešom heptani/EtOAc (0-10%) da se dobijejedinjenje 96kao ulje (669 mg, 70% čistoće pomoću NMR).<l>U NMR (400 MHz, DMSO-Ć&) 5 8.14 (d,J =5.0 Hz, 1 H), 7.22 (d,J=5.0 Hz, 1 H), 4.68 (s, 2 H), 3.93 (s, 3 H).
Faza 5:
[0410]U rastvorjedinjenja 96(665 mg, 70% čistoće) u THF (12 mL) se doda metil amin (2 M rastvor u THF, 3.5 mL, 6.9 mmol). Nakon 2 sata, doda se B0C2O (1.5 g, 6.9 mmol). Nakon dodatna 2 sata, reakcija se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom i slanim rastvorom, suši preko MgS04, filtrira i koncentruje pod sniženim pritiskom. Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom uz eluiranje sa smešom heptani/EtOAc (0-20%) da se dobijejedinjenje 97kao providna guma (552 mg, 34% preko 2 faze).<l>RNMR (400 MHz,DMSO-</6)5 8.13(d, J =5.0 Hz, 1 H), 6.71 (br s, 1 H), 4.42 (s, 2 H), 3.93 (s, 3 H), 2.87 (s, 3 H), 1.56 - 1.16 (m, 9 H).
Faza 6:
[0411]U ohlađeni (0 °C)rastvor jedinjenja 97(530 mg, 1.6 mmol) u DCM (8.0 mL) se doda HC1 (4 N rastvor u dioksanu, 8 mL). Ledeno kupatilo se ukloni i formira se beli precipitat. Kada se pomoću LCMS pokaže daje reakcija završena, smeša se koncentruje da se dobijejedinjenje 98kao bela čvrsta supstanca (kvantitativno).
Izrada terc-butil ((5-bromo-l-etil-lH-pirazol-4-il)metil)(metil)karbamata (108).
[0412]
Faza 1:
[0413]U izmešanirastvor jedinjenja 99(145 g, 1.1 mol) u CHCh (1.4 L) se na sobnoj temperaturi, u kapima, doda MeCHO (40% u vodi, 500 g, 4.5 mol). Nakon dodavanja, reakcija se meša 24 sata na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc = 1/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se filtrira i filtrat se koncentruje pod vakuumom da se dobijejedinjenje 100kao svetio žuto ulje (160 g, 92% prinos).
Faza 2:
[0414]U izmešanu suspenziju L1AH4(22.5 g, 0.505 mol) u bezvodnom THF (1 L) se u kapima, na -10 °C, doda rastvor jedinjenja100(80 g, 0.505 mol). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc = 3/1) pokazuje daje reakcija smeše završena. Reaktivna smeša se neutrališe sa zasićenim NH4CI (100 mL) na temperaturi ispod 0 °C, EtOAc (500 mL) se sipa u gore pomenutu reakciju i meša 10 minuta. Reaktivna smeša se filtrira i filtrat se ispere sa slanim rastvorom (100 mL x 3), suši preko Na2S04, koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni (na silka gelu uz eluiranje sa smešom petrol etar/EtOAc 20/1-10/1) da se dobijejedinjenje 101kao bezbojno ulje (60 g, 74% prinos).
Faza 3:
[0415]U izmešani rastvorjedinjenja 101(60 g, 0.375 mol) u EtOAc (100 mL) se u kapima, na 0 °C, doda 4 N rastvor HC1 u EtOAc (200 mL). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 10 sati na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc = 3/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se filtrira, pogača se sakupi i suši pod sniženim pritiskom da se dobijejedinjenje 102kao bela čvrsta supstanca (40 g, 80% prinos).
Faza 4:
[0416] Smeša jedinjenja 102(40 g, 0.3 mol)i jedinjenja 103(56 g, 0.33 mol) i TEA (105 mL, 0.76 mol) u EtOH (500 mL) se refluksuje 24 sata. TLC (smeša petrol etar/EtOAc = 3/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak koji se razblaži sa EtOAc (500 mL). Rastvor se ispere sa slanim rastvorom (100 mL x 3), suši preko Na2S04i koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, uz eluiranje sa smešom petrol etar/EtOAc (10/1-3/1) da se dobijejedinjenje 104kao bela čvrsta supstanca (48 g, 88% prinos).
Faza 5:
[0417]U izmešani rastvor terc-butil nitrita (35 mL, 0.31 mol) i CuBr2(56.3 g, 0.252 mol) u CH3CN (1 L) se u kapima, na 0 °C, dodarastvor jedinjenja 104(38 g, 0.21 mol). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 3 sata na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc = 3/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se sipa u 6 N vodeni rastvor HC1 (400 mL) i ekstrahuje sa DCM (200 mL x 3). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (100 mL x 3), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, uz eluiranje sa smešom petrol etar/EtOAc (20/1-1/1) da sedobije jedinjenje 105kao svetio žuto ulje (35 g, 60% prinos).
Faza 6:
[0418]U izmešanirastvor jedinjenja 105(20 g, 81 mmol) u bezvodnom THF (200 mL) se u kapima, na 0 °C, doda smeša BH3/Me2S (1 N, 81 mL, 0.81 mol). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 1 sat na sobnoj temperaturi i nakon toga refluksuje 4 sata. TLC (smeša petrol etar/EtOAc = 3/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se na 0 °C neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom NH4CI (100 mL). Smeša se filtrira i filtrat se ekstrahuje sa EtOAc (100 mL x 3). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (50 mL x 3), suše preko Na2S04 i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, uz eluiranje sa smešom petrol etar/EtOAc (6/1-3/1) da se dobijejedinjenje 106kao svetio žuto ulje (10 g, 62% prinos).
Faza 7:
[0419]U izmešanirastvor jedinjenja 106(10 g, 48.8 mmol) i PPI13 (15.4 g, 58.5 mmol) u bezvodnom DCM (200 mL) se na 0 °C, u kapima, doda rastvor CBr4(19.3 g, 58.8 mmol) u DCM. Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 24 sata na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc = 3/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, uz eluiranje sa smešom petrol etar/EtOAc (50/1-10/1) da se dobijejedinjenje 107kao bela čvrsta supstanca (7.0 g, 54% prinos).
Faza 8:
[0420]Postupak opisan u fazi 4 zajedinjenje 70se koristi za izradujedinjenja 108kao bezbojno ulje (4.8 g, 56% prinos).<l>KNMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.53 (s, 1 H), 4.28 - 4.25 (m, 2 H), 4.23 (d, 2 H), 2.83 (s, 3 H), 1.50 (s, 9 H), 1.44 - 1.38 (m, 3 H). LCMSmlz318/320
[M+H]<+>.
Izrada 4-bromo-l-metil-3-[(metilamino)metil]-l^T-pirazol-5-karbonitrila (109)
[0421]
[0422]Urastvor jedinjenje 47(1.0 g, 3.0 mmol) u DCM (15 mL) se na 0 °C doda 4 N rastvor HC1 u dioksanu (3.8 mL, 15 mmol). Rastvor se ostavi da se meša 3 sata na sobnoj temperaturi, nakon toga koncentruje pod vakuumom da se dobijejedinjenje 109(810 mg, kvantitativno) kao bela čvrsta supstanca.
Izradaterc-butil(3-hidroksi-5-(4-jod-l-metil-lH-pirazol-5-il)piridin-2-il)karbamata
(113).
[0423]
Faza 1:
[0424]U smešujedinjenja 110ijedinjenja 111u MeOH se doda 2 M rastvor CsF u vodi. Kroz smešu se u toku 5 minta propuštaju mehurići azota a nakon se toga doda 1:1 smeša PdCbdppf sa CH2CI2. Reakcija se zagreje na 60 °C u toku noći a zatim razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje. Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom uz eluiranje sa smešom heptani/EtOAc (0-75%). Frakcije koje sadrže traženi produkt se koncentruju i produkt se izdvoji pomoću smeše DCM/Et20 da sedobije jedinjenje 112(960 mg, 45% prinos). lU NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 1.46 (s, 9 H) 3.85 (s, 3 H) 6.44 (s, 1 H) 7.31 (s, 1 H) 7.48 (s, 1 H) 7.99 (s, 1 H) 9.02 (s, 1 H) 10.12 (s, 1
H).
Faza 2:
[0425]Usmešu jedinjenja 112(960 mg, 3.3 mmol) i AgOTf (850 mg, 3.3 mmol) u EtOH (30 mL) se doda rastvor b (0.25 M rastvor u EtOH, 13 mL, 3.31 mmol). Nakon 1 sat, dodaju se nove količine AgOTf (425 mg, 1.66 mmol) i I2(0.25 M rastvoru EtOH, 6.6 mL, 1.66 mmol). Kada LCMS pokaže daje reakcija završena, smeša se filtrira i osnovni rastvor se razblaži sa EtOAc, ispere sa 1 N rastvorom Na2C03, zasićenom smešom Na2S203/voda i slanim rastvorom. Kombinovani vodeni slojevi se neutrališu sa 4 N rastvorom HC1 i ekstrahuju sa DCM (2x). Kombinovani organski ekstrakti se suše (MgS04), filtriraju i koncentruju. Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom na silka gelu, uz eluiranje sa smešom heptani/EtOAc (0-100%) da se dobijejedinjenje 113kao čvrsta supstanca krem boje (800 mg, 58% prinos).<l>R NMR (400 MHz, DMSO-rfe) 5 1.47 (s, 9 H), 3.80 (s, 3 H), 7.25 (d,J=2. 0 Hz,1 H), 7.63 (s, 1 H), 7.89(d,.7=2.0Hz, 1 H), 9.02 (s, 1 H), 10.28 (br s, 1 H).
Izrada (5-fluoro-2-(prop-2-in-l-iloksi)fenil)metanola (117).
[0426]
Faza 1:
[0427]U rastvorjedinjenja 114(2.5 g, 16 mmol) u metanolu (32 mL) se doda sumporna kiselina (2.0 mL, 21 mmol). Rastvor se zagreva pod refluksom u toku noći, ohladi na sobnu temperaturu i koncentruje. Ostatak se rastvori u EtOAc, ispere sa zasićenim rastvorom NaHC03(3x), slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje da se dobijejedinjenje 115kao čvrsta supstanca krem boje (2.1 g, 76% prinos).<l>U NMR (400 MHz, DMSO-fife) § 3.89 (s, 3 H), 7.01(dd, J= 9.1, 4.5 Hz,1 H), 7.40(td, J=8.6,3.2 Hz, 1 H), 7.45 -7.54 (m, 1 H), 10.28 (s, 1 H).
Faza 2:
[0428]Urastvor jedinjenja 115(2.1 g, 12 mmol), propargil alkohola (830 uL, 14 mmol) i trifenilfosfina (4.8 g, 18 mmol) u THF (31 mL) se doda TEA (1.7 mL, 12 mmol) a nakon toga DLAD (3.7 mL, 18 mmol). Rastvor se meša na sobnoj temperaturi u toku noći i koncentruje.
Ostatak se prečisti gasnom hromatografijom uz eluiranje sa smešom heptani/EtOAc ( 0-30%) da se dobijejedinjenje 116kao igličasta čvrsta supstanca (1.4 g, 55% prinos).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 3.51 - 3.64 (m, 1 H), 3.80 (s, 3 H), 4.86(d, J=2.3 Hz, 2 H), 7.25(dd, J =9.1, 4.3 Hz, 1 H), 7.38 - 7.55 (m, 2 H).
Faza3:
[0429]U ohlađeni (-78 °C)rastvor jedinjenja 116(1.4 g, 6.7 mmol) u DCM (34 mL) se u kapima preko špric boce brzinom~1 mL/min doda DiBAL (IM rastvor u heksanu, 18.5 mL, 18.5 mmol). Reakcija se neutrališe sa MeOH (10 mL) na -78 °C. Kupatilo sa suvim ledom se ukloni, nakon toga se doda zasićeni rastvor natrijum kalijum tartarata (40 mL) i reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc (50 mL). Smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi, nakon toga razblaži sa EtOAc, ispere sa slanim rastvorom, suši preko MgS04, filtrira i koncentruje da sedobije jedinjenje 117kao bistro ulje (1.1 g, 94% prinos). lK NMR (400 MHz, DMSO-ofe) 5 3.55 (t,J=2.4 Hz, 1 H), 4.48 (d,J=5.8 Hz, 2 H), 4.79 (d,J=2.3 Hz, 2 H), 5.20 (t,J=5.7 Hz, 1 H), 7.03(dd, J=6.2, 1.6 Hz, 2 H), 7.13 - 7.21 (m, 1 H).
Izrada (2-(but-3-in-l-iloksi)-5-fluorofenil)metanola (120).
[0430]
Faza 1:
[0431]Postupak opisanu fazi 2za jedinjenje 117se koristi zaizradu jedinjenja 119(13 g, 45% prinos).
Faza 2:
[0432]Postupak opisan u fazi 3za jedinjenje 117se koristi zaizradu jedinjenja 120(13 g, 52% prinos).<l>U NMR (400 MHz, DMSO-<&) 5 7.20 - 7.17 (m, 1 H), 7.05 - 6.96 (m, 2 H), 5.20 (t, 1 H), 4.54 (t, 2 H), 4.08 (t, 2 H), 2.90 (t, 1 H), 2.66 - 2.62 (m, 2 H). LCMSm/ z176 [M
Izrada terc-butil estra (3-hidroksi-5-jod-piridin-2-il)-karbaminske kiseline (123)
[0433]
Faza 1:
[0434] Smeša 2-amino-5-jodpiridin-3-ola jedinjenja 121(623 mg, 2.64 mmol), 4-dimetminopiridina (64.5 mg, 0.528 mmol) i Di-terc-butil dikarbonata (1.73g, 7.92 mmol) u DMF (7.5 mL) se meša na RT u toku noći. Smeša se razblaži sa EtOAc, ispere sa zasićenim vodenim rastvorom bikarbonata (2x), slanim rastvorom, suši preko magnezijum sulfata, filtrira i koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti gasnom hromatografijom (ISCO 40g kertridž) koristeći gradijent 0-35% EtOAC/heptan kao eluent da se dobijejedinjenje 122(372 mg, 26.3%) kao guma.<l>R NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 ppm 8.62 (d, J=1.77 Hz, 1 H) 8.36 (d, J=1.77 Hz, 1 H), 1.48 (2, 9H), 1.39 (s, 18 H)
Faza 2:
[0435] Smeša jedinjenja 122(106 mg, 0.98 mmol) i N,N-dietilendiamina (30.6 mL, 0.218 mmol)) u acetonitrilu (1 mL) se meša 5 h na RT. Pomoću LCMS se evidentira da još uvek postoji početni materijal. Doda se još N,N-dietilendiamna (280 uL, 0.198 mmol). Nakon još 1 h mešanja na RT, LCMS pokazuje daje reakcija završena. Smeša se koncentruje do sušenja i ostatak prečisti gasnom hromatografijom koristeći kao eluent gradient 0-50% dihlormetan/heptan da se dobijejedinjenje 123kao bela čvrsta supstanca sa 59% prinosa.<l>H NMR (400 MHz,(DMSO-d6)5 ppm 10.29 (br. s., 1 H), 8.83 (s, 1 H), 8.00 (d, J=1.52 Hz, 1 H), 7.48 (d, J= 1.77 Hz, 1 H), 1.43 (s, 9 H).
Izrada (5-fluoro-2-(pent-4-in-l-iloksi)fenil)metanola (125).
[0436]
Faza 1:
[0437]Postupak opisanu fazi 2za jedinjenje 117se koristi zaizradu jedinjenja 124(10.0 g, 79% prinos).
Faza 2:
[0438]U izmešani rastvor jedinjenja 124 (9.0 g, 38.1 mmol) u bezvodnom THF (180 mL) u atmosferi azota u porcijama, na 0 °C, doda L1BH4(2.1 g, 95.2 mmol). Nakon dodavanja, smeša se meša 5 sati na 50 °C. TLC (smeša petrol etar/EtOAc = 6: 1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se ohladi na 0 °C i u kapima se doda voda (50 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (150 mL 3 2). Kombinovani organski ekstrakti se isperu sa slanim rastvorom (150 mL 3 2), suše preko Na2S04i koncentruju da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (petrol etar / EtOAc = 15:1) da se dobije jedinjenje 125 kao žuto ulje (9.0 g, 100% prinos).<l>K NMR (400 MHz, DMSO-efe) 5 7.22 - 7.19 (m, 1 H), 7.08 - 6.98 (m, 2 H), 5.23 (t, 1 H), 4.55 (t, 2 H), 4.08 (t, 2 H), 2.88 (t, 1 H), 2.40 - 2.38 (m, 2 H), 1.97-1.91 (m, 2 H). LCMSmlz191 [M - OH]<+>.
SFC razdvajanje 5-bromo-3-[l-(5-fluoro-2-jodfenil)etoksi]pirazin-2-amina (30) u 5-bromo-3-[(l//f)-l-(5-fluoro-2-jodfenil)etoksi]pirazin-2-amina (126) i 5-bromo-3-[(lS)-l-(5-fluoro-2-jodfenil)etoksi]pirazin-2-amina (127)
[0439]
[0440] Jedinjenje 30(18 g) se rastvori pomoću SFC da sedobiju jedinjenje 126(Pik 1)
(7.75 g, 86%) ijedinjenje 127(Pik 2) (7.72 g, 85%) kao žute čvrste susptance. Chiralpak AD-H (250 x 4.6 mm I.D., 5 mikrona veličina čestice) kolona se eluira sa 15% metanola u CO2@ 140 bara pri brzini protoka od 3 mL/min da se dobije Pik 1 vreme retencije od 3.76 minuta i Pik 2 vreme retencije od 4.51 minuta.
Jedinjenje 126 (Pik 1):99 % ee.lK NMR(400 MHz, DMSO-</6) 5 7.87(dd, J=5.8, 8.8 Hz, 1 H), 7.61 - 7.54 (m, 2 H), 6.98 (dt,J =3.0, 8.6 Hz, 1 H), 6.71 (s, 2 H), 6.18 - 6.04 (m,l H), 1.53(d, J=6.3 Hz, 1 H). LCMSmlz 4?>1I4?>9[M+H]<+>.
Jedinjenje 127 (Pik 2):> 98% ee.<l>KNMR (400 MHz, DMSO-^e) 5 7.86 (dd,J=5.8, 8.8 Hz, 1 H), 7.62 -7.54 (m, 2 H), 6.97(dt, J=3.1, 8.5 Hz, 1 H), 6.71 (s, 2 H), 6.17-6.04 (m,l H), 1.52 (d,J=6.5 Hz, 3 H). LCMSmlz437/439 [M+H]<+>.
Izrada (3-{[(terc-butoksikarbonil)(metil)amino]metil}-5-cijano-l-metil-lH-pirazol-4-
il)borne kiseline (128)
[0441]
[0442]Urastvor jedinjenja 47(800 mg, 2.43 mmol) u anhidrovanom THF (30 mL) se u kapima, preko pipete, na -78 °C, doda «-BuLi (1.2 mL, 2.5M rastvor u heksanu, 3.2 mmol). Smeša prelazi u narandžastu boju i meša se 30 minuta na -78 °C. U kapima se pomoću levka za dodavanje doda rastvor triizopropil borata (0.85 mL, 3.64 mmol) u THF (5 mL). Dobijena smeša se meša 30 minuta na -78 °C. U kapima se doda 1 N rastvor HC1 (6 mL) i kupatilo za hlađenje se ukloni. Smeša se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu. Smeša se podeli između EtOAc/slani rastvor i ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovane organske supstance se suše (MgS04) i smanje na minimum zapremine da se dobije 738 mg ostatka, koji se prenese u MeOH (17.2 mL) da se dobije 0.14Mrastvor jedinjenja128, koji se koristi bez naknadnog prečišćavanja.
Izrada 4-(metilamino)-5,6-dihidro-4//-pirolo|l,2-b|pirazol-2-karbonitrila(135)
[0443]
Faza1:
[0444] Rastvor jedinjenja 129(284 mg, 1.87 mmol) u MeOH (10 mL) se tretira sa 4 kapi koncentrovane HC1. Reakcija se zagreva 24 sata na 50 °C. Reakcija se koncentruje i podeli između EtOAc i zasićenog vodenog rastvora NaHC03. Reakcija se ekstrahuje sa EtOAc a kombinovane organske supstance se suše (Na2S04) i koncentruju da se dobijejedinjenje 130(273 mg, 88%) kao beličasta čvrsta supstanca. LCMS ESmlz167 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0445]Smešajedinjenja 130(273 mg, 1.64 mmol) u 7M rastvoru NH?u MeOH (5 mL) se zagreva 20 sati na 80 °C u zatvorenoj epruveti. Reakcija se koncentruje do do beličaste čvrste supstance koja se ponovo rastvori u 7M rastvoru NH3u MeOH (5 mL) i zagreva još 60 sati. Reakcija se koncentruje da se dobijejedinjenje 131(276 mg, 100%) kao braonkasta čvrsta supstanca, koja se koristi u sledećoj fazi bez naknadnog prečišćavanja. LCMS ESmlz152
[M+H]<+>.
Faza 3:
[0446]U suspenzijujedinjenja 131(248 mg, 1.64 mmol) u DCM (10 mL) se doda TEA (0.686 mL, 4.92 mmol). Dobijena smeša se ohladi na 0 °C i doda se TFAA (0.456 mL, 3.28 mmol). Nakon 1.5 sat, LCMS pokazuje daje reakcija završena. Reakcija se koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-50% EtOAc/heptan) da se dobije 5,6-dihidro-4H-pirolo[l,2-b]pirazol-2-karbonitril,jedinjenje 132(168 mg, 74%) kao bela čvrsta supstanca.<*>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 6.70 (s, 1 H) 4.13 - 4.21 (m, 2 H) 2.89 (t,J=7.33 Hz, 2 H), 2.53 - 2.62 (m, 2 H).
Faza 4:
[0447] Jedinjenje 132(165 mg, 1.24 mmol), NBS (451 mg, 2.51 mmol) i A1BN (10.2 mg, 0.062 mmol) se kombinuju u DCE (8 mL) i reakcija se zagreva 60 sati na 85 °C. Reakcija se koncentruje da se dobije čvrsta supstanca krem boje. Doda se voda (10 mL) i vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (2x). Organske supstance se suše (Na2S04), koncentruju i prečiste hromatografijom na koloni silika gela (0-30% EtOAc/heptani) da se dobijejedinjenje 133(182 mg, 69%) kao gusto narandžasto ulje.<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 6.59 (s, 1 H) 5.35 (dd,J=6.82, 1.77 Hz, 1 H) 4.35 4.46 (m, 1 H) 4.21 - 4.29 (m, 1 H) 3.28(ddt, J=14.81, 8.32, 8.32 Hz, 1 H) 2.95(ddt, J=14.59, 6.76, 1.96 Hz, 1 H).
Faza 5:
[0448]U ohlađenirastvor jedinjenja 133(182 mg, 0.858 mmol) u THF (8 mL) se doda 2M rastvor NH2CH3 u THF (1.27 mL). Smeša se meša 14 sati na 50 °C. LCMS pokazuje daje završeno -50% reakcije. Doda se još 4 mL 2M rastvora NH2CH3u THF i dobijena smeša se zagreva 16 sati na 50 °C. Reakcija se ostavi da se ohladi, doda se (Boc)20 (281 mg, 1.29 mmol) i reakcija meša 18 sati na sobnoj temperaturi. Reakcija se koncentruje i podeli između vode i EtOAc. Organska faza se izdvoji, suši (Na2S04) i koncentruje da se dobije braon ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-50% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 134(180 mg, 80%) kao bezbojno ulje.<l>UNMR (400 MHz, CDCb) S 6.44(d, J= 0.76 Hz,1 H) 5.53 - 5.82 (m, 1H) 4.33 (ddd, J=11.68, 9.28, 4.55 Hz, 1 H) 4.13 (ddd,J=11.75, 8.72,6.82 Hz,1 H) 2.98 (dtd, J=13.58, 8.94,, 4.67 Hz, 1 H) 2.64 (br. s., 3 H) 2.49 (d,J=5.56Hz, 1 H)1.43 (s, 9 H). LCMS ES mlz 263[M+H]'.
Faza 6:
[0449]Urastvor jedinjenja 134(180 mg, 0.686 mmol) u DCM (2 mL) se doda TFA (2 mL). Reakcija se završi nakon 1 sat. Reakcija se koncentruje da se dobijejedinjenje 135(237 mg) kao gusto žuto ulje, koja se koristi bez naknadnog prečišćavanja. LCMS ESmlz163 [M+H]<+>.
Izrada l-Metil-3-((metilamino)metil)-l^T-pirazol-5-karbonitrila (137)
[0450]
Faza 1:
[0451]Suspenzijajedinjenja 47(118 g, 358 mmol) u «-butanolu (1.20 L) se degasira i prenese u atmosferu azota. Nakon toga se dodaju K2CO3(99.0 g, 716 mmol), trifenilfosfin (18.7 g, 71.3 mmol) i paladijum (II) acetat (4.00 g, 17.8 mmol) i smeša se zagreva 4 sata, da nakon 1 sat dostigne 80°C a nakon 3 sata se refluksuje. Smeša se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu, nakon toga razblaži sa EtOAc (1 L) i ispere sa vodom (1 L) i slanim rastvorom (1 L). Organski sloj se suši (MgS04) i filtrira. Stajanjem u toku noći dobija se mala količina precipitata pa se smeša filtrira a nakon toga koncentruju pod vakuumom da se dobije 117.4 g braon ulja. Prečišćavanjem hromatografijom na koloni silika gela (10-30% EtOAc/heptan) dobija se Boc-zaštićenimeđuproizvod jedinjenje 137Akao žuto ulje (74.8 g, 83.5%). Nečiste frakcije se kombinuju da se dobije 5.98 g žutog ulja koje se dalje prečisti hromatografijom na koloni silika gela uz eluiranje sa 10% EtOAc u heptanu povećavajući polaritet do čistog EtOAc. Na ovaj način se dobija još 3.92 gjedinjenja 137Akao žuto ulje (4.4%).<J>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 6.68 (s, 1 H), 4.38 (s, 2H), 4.01 (s, 3H), 2.84 (s, 3H), 1.47 (s, 9H). LCMS ESmlz251 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0452] Rastvor jedinjenja 137(78.7 g, 314 mmol) u dihlormetanu (400 mL) se ohladi na 0°C u atmosferi azota i u toku 5 minuta se dodaje 4M rastvor HC1 u dioksanu (400 mL, 1.6 mol). Nakon 30 minuta mešanja na 0°C, smeša se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša još 3 sata. Reaktivna smeša se koncentruje do približno 150 mL, ohladi i filtrira i ispere sa TBME 100 mL). Ostatak se suši na vazduhu da se dobijejedinjenje 137kao bezbojna kristalna čvrsta supstanca (56.12 g, 96%).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 9.50 (s, 2H), 7.31 (s, IH), 4.13 (s, 2H), 4.03 (s, 3H), 2.52 (s, 3H). LCMS ESmlz151[M+H]<+>.
IzradaN- [(5-cij ano- 1-metil- l//-pirazol-3-il)metil] -4-fluoro-2-hidr oksi-TV-
metilbenzamida (138)
[0453]
[0454]U rastvor 4-fluoro-2-hidroksibenzoeve kiseline136(500 mg, 3.2 mmol), (5-cijano-l-metil-lH-pirazol-3-il)-Af-metilmetanaminium hlorida137(600 mg, 3.2 mmol) i HATU (1.4 g, 3.5 mmol) u DMF (21 mL) se doda DIEA (2.8 mL, 16 mmol). Nakon 14 sati mcšanja na sobnoj temperaturi, rastvor se koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silika gela uz eluiranje sa smešom heptan/etil acetat (0-75%) da se dobijejedinjenje 138(370 mg,
40%) kao polu-čvrsta supstanca.<l>K NMR (400 MHz, 80 °C, DMSO-</6) 5 10.08 (s, 1 H) 7.19
(m, 1 H) 6.94 (s, 1 H) 6.70 - 6.59 (m, 2 H) 4.52 (s, 2 H) 3.98 (d, J= 0.8 Hz, 3 H) 2.86 (s, 3
H). LCMS APCImlz298 [M+H]<+>.
Izrada l-metil-3-[l-(metilamino)etil]-lH-pirazol-5-karbonitrila (144)
[0455]
Faza 1:
[0456]U izmešanu suspenzijujedinjenja 139(200 mg, 1.3 mmol) i kalijum karbonata (450 mg, 3.26 mmol) u DMF (5 mL) se na sobnoj temperaturi, u kapima, doda metil jodid (456 mg, 3.21 mmol). Posuda se zatvori i smeša se zagreva 1 sat na 50 °C. LCMS ukazuje daje utrošen početni materijal i 2 produkta u odnosu od~3 : 1. Smeša se podeli između EtOAc/slanog rastvora. Vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovane organske supstance se isperu sa vodom (2x), slanim rastvorom (lx), suše preko MgS04i smanje do minimum zapremine. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela koristeći kao eluent gradijent 10-75% EtOAc/heptan. Izdvoje se dva izomera sa glavnim izomeromjedinjenjem 140(146 mg bele čvrste supstance, 62 %) kao bela čvrsta supstanca.<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.32 (s, 1 H) 4.25 (s, 3 H) 3.91 (s, 3 H) 2.59 (s, 3 H). Sporedan regioizomer (49 mg, 21%)<l>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.38 (s, 1 H) 4.24 (s, 3 H) 3.96 (s, 3 H) 2.56 (s, 3 H).
Faza 2:
[0457]Urastvor jedinjenja 140(1.13 g, 6.2 mmol) u metanolu (50 mL) se doda rastvor metilamina (3.8 mL, 2 M rastvor u THF, 7.6 mmol) i ostavi da se meša 20 sati na sobnoj temperaturi. U reaktivnu smeše se doda NaBH4(235 mg, 6.21 mmol). U početku se uočava intenzivno izdvajanje gasa, koje prestaje nakon -30 minuta. LCMS ukazuje daje konverzija u amin završena. U dobijenu smešu se doda (Boc)20 ( 2 g, 9.1 mmol) i smeša se meša 18 sati na sobnoj temperaturi. Smeša se koncentruje do sušenja. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela koristeći kao eluent gradijent 10-75% EtOAc/heptan. Željene frakcije se kombinuju i koncentruju da se dobijejedinjenje 141(1.6 g, -85% čisto) kao ulje. Ovaj materijal se prenese direktno u sledeću fazu bez naknadnog prečišćavanja.<J>H NMR (400 MHz, 80 °C, DMSO-fife) 5 6.67 (s, 1 H) 5.26 (q,J=7.05 Hz, 1 H) 4.05 (s, 3 H) 3.84 (s, 3 H) 2.60 (s,3H)1.43 (d, .7= 7.30 Hz,12 H).
Faza 3:
[0458] Jedinjenje 141(1.6 g, 5.4 mmol) se rastvori u 7M rastvoru amonijaka u metanolu (20 mL). Posuda se zatvori i smeša se zagreva 5 dana na 50 °C. LCMS ukazuje daje konverzija u željeni produkt završena. Smeša se koncentruje da se dobijejedinjenje 142(1.496 g -85% čisto) kao guma. Ovaj materijal se prenese direktno u sledeću fazu bez naknadnog prečišćavanja.<l>KNMR (400 MHz, 80 °C,DMSO-</6)5 7.38 (br. s., 2 H) 6.69 (s, 1 H) 5.26 (q, .7=6.97 Hz, 1 H) 4.01 (s, 3 H) 2.60 (s, 3 H) 1.44 (s, 9 H) 1.41 (d, J=7.05 Hz, 3 H).
Faza 4:
[0459]Ususpenziju jedinjenja 142(1.496g, 5.3 mmol) u dihlormetanu (20 mL) se doda trietilamin (2.2 mL, 15.9 mmol). Dobijena suspenzija se ohladi na -10 °C i u kapima se, u toku 20 minuta, dodaje rastvor trifluorosirćetnog anhidrida (1.5 mL, 10.6 mmol) u dihlormetanu (10 mL). Nakon završenog dodavanja, reaktivna smeša se meša 1 sat na 0 °C. Smeša se podeli između dihlormetana i vodenog rastvora NaHC03. Vodeni sloj se ekstrahuje sa dihlormetanom (2x). Kombinovane organske supstance se isperu sa slanim rastvorom, suše preko MgS04i koncentruju da se dobije tamno žuto ulje. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela koristeći kao eluent gradient 10-75% EtOAc/heptan. Tražene frakcije se koncentruju da se dobijejedinjenje 143(1.026 g, 73%) kao bela čvrsta supstanca.<J>H NMR (400 MHz, 80 °C, DMSO-^e) 8 6.90 (s, 1 H) 5.27 (q, .7=7.13 Hz, 1 H) 3.97 (s, 3 H) 2.61 (s, 3 H) 1.37-1.51 (m, 12 H).
Faza 5:
[0460]Urastvor jedinjenja 143(300 mg, 1.14 mmol) u dihlormetanu (4.5 mL) se doda rastvor HC1 u dioksanu (4M, 4.5 mL). Nakon 1 sat mešanja na sobnoj temperaturi, dobijeni rastvor se smanji do minimum zapremine. Ostatak se koncentruje iz toluena i suši na 50 °C u vakkuumskoj pećnici u toku 1.5 sat da se dobijejedinjenje 144(228 mg, kvantitativno) kao bela čvrsta supstanca. Materijal se prenese direktno u sledeću fazu bez prečišćavanja.<*>H NMR (400 MHz, 80 °C, DMSO-</6) 5 9.39 (br. s., 2 H) 7.30 (s, 1 H) 4.42 (q, .7=6.88 Hz, 1 H) 4.03 (s, 3 H) 2.46 (s, 3 H) 1.59 (d, .7=6.80 Hz, 3 H).
Izradaterobutil[(4-hlor-l,5-naftiridin-3-il)metil]metilkarbamata (153)
[0461]
Faza 1:
[0462]Smešajedinjenja 145(35 g, 0.372 mol) ijedinjenja 146(96.5 g, 0.447 mol) u EtOH (300 mL) se refluksuje u toku noći. TLC (PE/EtOAc 1/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak. Doda se petrol etar (200 mL) a nakon toga se meša 30 minuta na sobnoj temperaturi. Smeša se filtrira da se dobijejedinjenje 147(95 g, 97%) kao beličasta čvrsta supstanca.<*>HNMR (400 MHz, CDCb) 5 11.03-11.00 (d, IH), 8.50-8.41 (m, 3H), 7.49-7.47 (d, IH), 7.34-7.30 (m, IH), 4.35-4.20 (m, 4H), 1.62-1.18 (m, 6H).
Faza 2:
[0463]U refluksovani rastvarač Ph20 (200 mL) se u porcijama dodajedinjenje 147(30 g, 0.113 mol). Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 30 minuta na temperaturi između 250-260 °C. TLC (PE/EtOAc 1/1) pokazuje daje početni materijal u potpunosti utrošen. Reaktivna smeša se ohladi na sobnu temperaturu a nakon toga sipa u EtOAc (200 mL). Smeša se filtrira i vlažna pogača se ispere sa EtOH (50 mL), EtOAc (50 mL) i petrol etrom (50 mL) da se dobijejedinjenje 148(11 g, 45%) kao braon čvrsta supstanca.
Faza 3:
[0464]U suspenzijujedinjenja 148(12 g, 55 mmol) i DMF (5 mL) u DCM (200 mL) se na temperaturi ispod 0 °C u kapima doda oksalil hlorid (20 mL). Nakon dodavanja, dobijena smeša se refluksuje tri sata. TLC (PE/EtOAc 3/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se pažljivo sipa u ledenu vodu. Smeša se koncentruje pod vakuumom da se ukloni DCM. Smeša se ekstrahuje sa MTBE (500 mL x 3). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (100 mL x 2), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel, PE/EtOAc 5/1) da se dobijejedinjenje 149(6 g, 46%) kao žuta čvrsta supstanca.<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 9.26 (s, 1 H), 9.17-9.16 (d, 1 H), 8.49-8.16 (d, IH), 7.81-7.78 (t, IH), 4.56-4.51 (q, 2H), 1.50-1.47 (m, 3H).
Faza 4:
[0465]U rastvorjedinjenja 149(4 g, 16.9 mmol) u bezvodnom THF (100 mL) se u kapima, na temperaturi ispod 0 °C, doda DIBAL-H (101.4 mL, 101.4 mmol, IM rastvor u toluenu). Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 3 sata na ovoj temperaturi. TLC (PE/EtOAc 1/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom Na2S04(100 mL) na temperaturi ispod 0 °C i meša na ovoj temperaturi 30 minuta a nakon toga 30 minuta na sobnoj temperaturi. Smeša se filtrira. Vlažna pogača se ispere sa EtOAc (100 mL x 5). Kombinovani filtrati se isperu sa slanim rastvorom (100 mL), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti kristalizacijom iz DCM (10 mL) da se dobijejedinjenje 150(2.5 g, 75.1%) kao žuta čvrsta supstanca. 'HNMR (400 MHz, CDCb) 5 7.96-7.95 (d, IH), 6.94-6.91 (m, IH), 6.75-6.68 (t, 1 H), 4.51 (s, 2H), 4.42 (s, 2H), 3.79-3.71 (brs, 1 H), 1.70-1.63 (brs, 1 H)
Faza 5:
[0466] Smeša jedinjenja 150 (2.5 g,12.7 mmol) i Mn02 (10 g, 115 mmol) u CHCb (100 mL) se refluksuje u toku noći. TLC (PE/EtOAc 1/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se filtrira i vlažna pogača se ispere sa DCM (20 mL x 5). Kombinovani filtrati se suše preko Na2S04i koncentruje pod vakuumom da se dobijejedinjenje 151(2.1 g, 86%) kao beličasta čvrsta supstanca.<*>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 10.80 (s, IH), 9.45 (s, IH), 9.19-9.11 (m, IH), 8.51-8.44 (m, 1 H), 7.86-7.79 (m, 1 H).
Faza 6:
[0467] Smeša jedinjenja 151 (2.7g, 14.02 mmol), MeNH2.HCl (1.9 g, 28.04 mmol), MgS04(5 g) i Et3N (2.83 g, 158.04 mmol) u metanolu (50 mL) se meša na sobnoj temperaturi u toku noći. U navedenu smešu se nakon toga doda NaBH3CN (2.5 g, 42.06 mmol) a nakon toga meša 4 sata na sobnoj temperaturi. TLC (PE/EtOAc 1/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovojedinjenje 152,koje se koristi u sledećoj fazi bez ikakvog naknadnog prečišćavanja.<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 9.11-9.10 (d, IH), 9.02 (s, IH), 8.46-8.44 (d, 1 H), 7.73-7.70 (m, 1 H), 4.19 (s, 2H), 2.55 (s, 3H).
Faza 7:
[0468]U rastvor sirovogjedinjenja 152(~14.02 mmol) i (Boc)20 (6.1 g, 28.06 mmol) u DCM (100 mL) se na sobnoj temperaturi u kapima doda Et3N (2.86 g, 28.04 mmol) u toku noći. Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 1 sat na sobnoj temperaturi. TLC (PE/EtOAc 3/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (PE/EtOAc 3/1, Rf, 0.15) da se dobijejedinjenje 153(1.7 g, 36% iz dve faze) kao žuta čvrsta supstanca.<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 9.10-9.09 (d, 1 H), 8.88-8.86 (d, 1 H), 8.45-8.43 (d, 1 H), 7.72-7.71 (m, 1 H), 4.87-4.83 (d, 2H), 2.99-2.93 (d, 3H), 1.51-1.47 (d, 9H). LCMSmlz308 [M+H]<+>.
Izrada 3-(bromometil)-l-metil-l//-pirazol-5-karbonitrila (158)
[0469]
Faza1:
[0470] Jedinjenje 154(25.0 g, 124.9 mmol) se rastvori u benzotrifluoridu (300 mL) i na 45 °C se dodaju NBS (31.1 g, 174.9 mmol) i A1BN (0.25 g, 1.53 mmol). Temperatura se nakon toga poveća na 80 °C i zagreva se jedan sat. Doda se nova količina A1BN (0.25 g, 1.53 mmol) i zagrevanje se nastavi u toku noći. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu i rastvarač se ukloni pod vakuumom da se dobije žuta guma. Guma se prenese u DCM (300 mL) a preostale čvrste supstance se uklone filtriranjem. Filtrat se koncentruje i u žuto ulje se doda hladan MeOH. Nakon dva sata stajanja na 0 °C, dobijena bezbojna čvrsta supstanca se sakupi filtriranjem i ispere sa hladnim MeOH (2 x 20 mL). Čvrsta supstanca se nakon toga rekristališe iz metileikloheksana da se dobijejedinjenje155 kao bezbojna čvrsta supstanca (9.4 g, 25% prinos).<l>K NMR (400 MHz, CDCb) 8 4.42 (s, 2H), 4.05 (s, 3H).
Faza 2:
[0471]Jedinjenje155 (16.0 g, 57.36 mmol) se rastvori u dioksanu (200 mL), doda se rastvor Na2C03 (30.4 g, 286.8 mmol) u H2O (200 mL) i dvofazna smeša se zagreva 16 sati na 60 °C. Reaktivna smeša se ohladi na sobnu temperaturu i dioksan se ukloni pod vakuumom. Ostatak se podeli između DCM (150 mL) i slanog rastvora (100 mL) i faze se razdvoje. Vodena faza se ekstrahuje sa DCM (3 x 50 mL) a kombinovani organski ekstrakti se suše preko MgS04i koncentruju da se dobije žuto ulje. Sirovo ulje se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (1:3 EtOAc:heptan do 1:1 EtOAc:heptan) da se dobijejedinjenje 156kao bezbojna čvrsta supstanca (8.60 g, 69% prinos).<l>KNMR (400 MHz, CDCb) 5 4.68 (d,J=6.1 Hz, 2H), 4.04 (s, 3H), 1.99(t, J=6.1 Hz, 1 H).
Faza3:
[0472] Jedinjenje 156(8.60 g, 39.81 mmol) se rastvori u «-butanolu (90 mL) i dodaju se PPh3(2.09 g, 7.97 mmol), Pd(OAc)2(440 mg, 1.96 mol) i K2CO3(11.0 g, 79.6 mmol) i reaktivna smeša zagreva pod refluksom 4 sata. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc (150 mL) i ispere sa zasićenim rastvorom NaHC03(100 mL) i slanim rastvorom (100 mL). Organska faza se suši preko MgS04i koncentruje da se dobije žuto ulje. Sirovo ulje se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (1:1 EtOAc : heptan) da se dobijejedinjenje 157kao bezbojna čvrsta supstanca (3.49 g, 64%).<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 4.68 (d,J=6.1 Hz, 2H), 4.04 (s, 3H), 1.99 (t,J=6.1 Hz, 1 H).
Faza 4:
[0473] Jedinjenje 157(3.47 g, 25.30 mmol) se rastvori u DCM (50 mL) i ohladi na 0 °C. U kapima se doda PBr3(3.12 mL, 32.89 mmol) da se dobije bela suspenzija koja se meša na sobnoj temperaturi u toku noći. Dobijeni rastvor koji sadrži bledo žutu gumu se razblaži sa DCM (30 mL) i neutrališe pažljivim dodavanjem H2O (20 mL) i neutrališe sa zasićenim rastvorom NaHCCb. Faze se razdvoje i vodena faza se ekstrahuje sa DCM (2 x 60 mL). Kombinovani DCM ekstrakti se suše preko MgS04i koncentruju da se dobije žuto ulje. Sirovo ulje se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (1:1 DCM : heptan) da se dobijejedinjenje 158kao bezbojno ulje (2.43 g, 48% prinos).<l>RNMR (400 MHz, CDCh) 5 6.82 (s, 1 H), 4.43 (s, 2H), 4.03 (s, 3H).
Izrada 5-bromo-3-{l-[5-fluoro-2-(l-{[2-(trimetilsilil)etoksi]metil}-l^T-imidazol-2-
il)fenil]etoksi}pirazin-2-amina (166)
[0474]
Faza 1:
[0475]Reakcija se izvodi u 2 serije od po 50 g svaka za dodavanje NaBH4 u porcijama. U ohlađeni (ledeno kupatilo)rastvor jedinjenja 159(100 g, 379 mmol) u THF (800 ml) i MeOH (400 mL), u porcijama se dodaNaBH4(28.7 g, 757 mmol) (2 g svaka) u periodu od 2 sata (uočava se jako oslobađanje gasa). Reakcija se meša 3 sata na sobnoj temperaturi. TLC analiza pokazuje daje reakcija završena. Reakcija se neutrališe sa vodenim rastvorom NH4CI (300 mL). Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (500 mL), organske supstance se izdvoje i ponovo isperu sa NH4CI (300 mL), vodom (lx 300 mL) a nakon toga sa slanim rastvorom (lx 400 mL). Kombinovane organske supstance se suše (MgS04) i rastvarači se uklone pod vakuumom da se dobijejedinjenje 160(104.1 g, kvantitativno) kao bledo žuto ulje.<J>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 7.80(dd, J=8.6, 5.7 Hz, 1 H), 7.31(dd, J=10.4, 3.2 Hz, 1 H), 6.92 (td, J=8.4, 3.2 Hz, 1 H), 5.55 (d,J=4.1 Hz, 1 H), 4.71-4.76 (m, 1 H), 1.26(d, J=6.3 Hz, 3H).
Faza 2:
[0476]Rastvorjedinjenja 160(119.7 g, 450 mmol) u THF (300 mL) se pomoću levka za dodavanje doda u ledeno hladnu suspenziju NaH (60% mt, 19.8 g, 495 mmol) u THF (500
mL) (vreme dodavanja -~1 sat). Doda se 15-crown-5 r (13.3 ml, 67.5 mmol) i reakcija ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu. Nakon 2 sata, doda se rastvor BnBr (51 mL, 427 mmol) u THF (300 mL) (20 min, uočava se mala egzotermija do~40 °C). Reaktivna smeša se ostavi uz mešanje na sobnoj temperaturi u toku noći a nakon toga neutrališe sa NH4CI (200 mL). Smeša se razblaži sa EtOAc (200 mL), organske supstance se razdvoje a nakon toga ponovo isperu
sa NH4CI (200 mL), vodom (300 mL) i zatim sa slanim rastvorom (2x 300 mL). Kombinovane organske supstance se suše (MgS04), rastvarači se uklone pod vakuumom da se dobije narandžasto ulje koje se prečisti hromatografijom na koloni (eluent: heptan/EtOAc - 99:1 do 8:2) da se dobijejedinjenje 161(144.3 g, 90%) kao bezbojna tečnost.<J>H NMR (400 MHz, DMSO-^e) 5 7.87(dd, J=8.7, 5.7 Hz, 1 H), 7.53 - 7.24 (m, 6H), 7.00(td, J=8.5, 3.1 Hz, 1 H), 4.63(qd, J=6.4, 1.5 Hz, 1H), 4.40 (d, J=12.0 Hz, 1H), 4.32 (d, J=11.9 Hz, 1 H), 1.34 (d, J=6.4Hz, 3H).
Faza3:
[0477] Rastvor jedinjenja 161(50 g, 140 mmol) u THF (500 mL) se ohladi na -45 °C (unutrašnja T). Preko levka za dodavanje se doda rastvor?-PrMgCl.LiCl (1.3 M rastvor u THF, 121 mL, 160 mmol) (~20 min period dodavanja), održavajući unutrašnju T reakcije između -40 i -50 °C. Nakon 1 sat mešanja, formira se bela suspenzija. Nakon još 1 sat, doda se rastvor DMF (15.5 mL, 201 mmol) u THF (100 mL) (~30 min dodavanja). Dobijena bistra reaktivna smeša se ostavi da se polako zagreje na sobnu temperaturu. Nakon 16 sati, reakcija se razblaži sa EtOAc (200 mL), ispere sa NH4CI (3x 300 mL) a nakon toga sa slanim rastvorom (2x 400 mL). Kombinovane organske supstance se suše sa MgS04i rastvarači se uklone pod vakuumom da se dobije 2-(l-(benziloksi)etil)-4-fluorobenzaldehid,jedinjenje 162(37.9 g, kvantitativno) kao bledo žuto ulje koje se koristi u narednoj fazi bez naknadnog prečišćavanja.lK NMR(400 MHz, DMSO-</6) 5 10.19 (s, 1 H), 8.02(dd, J=8.6, 5.9 Hz, 1 H), 7.62 - 7.16 (m, 8H), 5.61 - 5.38 (m, 1 H), 4.41 (s, 2H), 1.42(d, J=6.4 Hz, 3H).
Faza 4:
[0478]U ohlađeni (ledeno kupatilo)rastvor jedinjenja 162(38.22 g, 140.3 mmol) u MeOH (100 mL) se doda Glioksal (88.2 mL, 771.6 ml), a nakon togaNaOAc (95.5 g, 701.5 mmol). Nakon 5 min mešanja, doda se 7N rastvor NH3u MeOH (425 mL) i dobijena smeša meša na 0 °C još 10 min a zatim zatvori u autoklavu i zagreva 5 sati na 120 °C. Reakcija se nakon toga ohladi na sobnu temperaturu, rastvarači se uklone pod vakuumom da se dobije crna pasta koja se ponovo rastvori u DCM (600 mL), nakon toga ispere sa smešom 1:1 NH4CI/IM vodeni rastvor HC1 (2x 500 mL) a zatim sa slanim rastvorom (lx 500 mL). Kombinovane organske supstance se suše (MgS04), rastvarači se uklone pod vakuumom i ostatak (adsorbovan na celite) se prečisti hromatografijom na koloni (eluent: heptan/EtOAc - 9:1 do 1:1). Izdvojene braon čvrste supstance se dalje prečiste prevođenjem u suspenziju sa minimalnom količinino EtOAc i nakon toga filtriraju. Nakonsušenja pod vakuumom,jedinjenje 163(16.2 g, 39%) se izdvoji u obliku beličastih čvrstih supstanci.<[>H NMR (400 MHz, DMSO-G?6) 5 12.47 (s, IH), 7.62 (s, IH), 7.40(dd, J=10.4, 2.7 Hz, IH), 7.35 - 7.19 (m, 8H), 5.47 (s, IH), 4.43 - 4.12 (m, 2H), 1.40(d, J=5.1 Hz, 3H). LCMS ESmlz297 [M+H]<+>.
Faza 5:
[0479]NaH (60% mt, 2.23 g, 55.7 mmol) se u porcijama doda u ohlađeni (ledeno kupatilo) rastvorjedinjenja 163(14 g, 47.2 mmol) u THF (250 mL). Smeša se meša 30 minuta a zatim se u kapima doda SEM-C1 (9.28 mL, 55.7 mmol). Dobijena smeša se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu. Nakon 6 sati, reakcija se prenese u ledeno kupatilo, nakon toga neutrališe sporim dodavanjem vode (150 mL) a zatim razblaži sa EtOAc. Faze se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje sa EtOAc (2x 100 mL). Kombinovane organske supstance se suše (MgS04) i rastvarači se uklone pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni (eluent: heptan/EtOAc - 7:3 do 1:1) da se dobijejedinjenje 164(32 g, 70%) kao žuto ulje.<!>H NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 7.36-7.49 (m, 2H), 7.34 - 7.18 (m, 7H), 7.04(d, J=1.3 Hz, 1 H), 5.22 - 5.05 (m, 2H), 4.57(qd, J=6.4, 1.6 Hz, 1 H), 4.37 - 4.12 (m, 2H), 3.54 - 3.38 (m, 2H), 1.33(d, J=6.4 Hz, 3H), 0.85 - 0.63 (m, 2H), -0.08 (s, 9H). LCMS APCImlz427 [M+H]<+>.
Faza 6:
[0480]U izmešanirastvor jedinjenja 164(24 g, 56.3 mmol) u MeOH (375 mL) se doda 20% mt. Pd(OH)2/C (5 g) i dobijena smeša se zagreva na 50 °C u atmosferi H2(30 psi) u toku 6 sati a zatim 16 sati na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se filtrira kroz celite ploču uz ispiranje filtrata sa MeOH. Osnovni rastvori se koncentruje pod vakuumom i dobijeni ostatak se prečisti hromatografijom na koloni (eluent: heptan/EtOAc - 3:1 do 1:1) da se dobijejedinjenje 165(18.19 g, 96%) kao bledo žuto ulje. Ovaj materijal se prenese u narednu fazu bez naknadnog prečišćavanja.<!>H NMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 7.45 (d,J =1.4 Hz, 1 H), 7.44 - 7.37 (m, 2H), 7.16(td, J=8.4, 2.8 Hz,1 H), 7.05 (d, J =1.3 Hz, 1 H), 5.40(d, J=4.5 Hz, 1 H), 4.68-4.74 (m, 1 H), 3.41(dd, J= 9.0, 7.3 Hz, 2H),1.15 (d, 7= 6.4 Hz, 3H), 0.83-0.73 (m, 2H), -0.06 (s, 9H). LCMS APCImlz337 [M+H]<+>.
Faza 7:
[0481] Rastvor jedinjenja 165(18.19 g, 54.06) u THF (200 mL) se ohladi u ledenom kupatilu a zatim se doda NaH (60% mt, 2.59 g, 64.87 mmol) (u 3 porcije). Nakon mešanja u toku 30 minuta, reakcija se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu. Doda se rastvorjedinjenja29 (16.4 g, 64.87 mmol) u THF (50 mL) pomoću levka za dodavanje. Reaktivna smeša se zagreva 16 sati na 60 °C a nakon toga ohladi na sobnu temperaturu. Smeša se razblaži sa EtOAc (300 mL) a nakon toga ispere sa vodom (2x 300 mL). Organske supstance se suše (MgS04) i rastvarači se uklone pod vakuumom da se dobiju sirove čvrste supstance. Sirove supstance se prečiste hromatografijom na koloni silika gela (eluent: heptan/EtOAc - 9:1 do 1:1) da se dobijejedinjenje 166(19.36 g, 70%) kao beličasta čvrsta supstanca.<*>H NMR (400 MHz, DMSO-g?6) 5 7.71 (dd,J =10.3, 2.8 Hz, IH), 7.63 - 7.49 (m, 3H), 7.29 (td,J=8.5, 2.8 Hz,IH), 7.15 (d, J=1.3 Hz, IH), 6.71 (s, 2H), 6.08 - 5.89 (m,IH), 5.32 (d, J=10.9 Hz, 1H), 5.16 (d, J= 10.9 Hz,1 H), 3.66 - 3.48 (m, 2H),1.65 (d, J= 6.4 Hz, 3H), 0.85 (ddd, J =10.1, 6.2, 2.5 Hz, 2H), -0.00 (s, 9H). LCMS APCImlz508/509 [M+H]<+>.
Izrada metil 2-{l-[(2-amino-5-bromopiridin-3-il)oksi]-2-lfuoroetil}-4-fluorobenzoata
(174)
[0482]
Faza 1:
[0483]Urastvor jedinjenja 159(40 g, 0.153 mol) i izopropilamina (36.2 g, 0.613 mol) u bezvodnom THF (500 mL) se u kapima, na 0 °C, doda TiCU (10 mL). Nakon dodavanja, smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 10/1) pokazuje da je reakcija završena. Smeša se filtrira. Filtrat se sipa u 0.5 M rastvor NaOH (500 mL). Organski sloj se izdvoji i vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (200 mL x 3). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (200 mL), suše preko Na2S04i koncentruju da se dobijejedinjenje 167(43 g, 93.5%) kao žuto ulje.
Faza 2:
[0484]Smeša NFS1 (25 g, 79.4 mmol), K2CO3(18.4 g, 132.4 mmol) i 4A molekularnih sita (25 g) u bezvodnoj smeši CH3CN/DMF (250 mL/50 mL) se meša 15 minuta na 0 °C u atmosferi azota. U smešu se dodaJedinjenje 167(20 g, 66.2 mmol). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša dva dana na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc =10: 1) ukazuje daje 90%jedinjenja 167utrošeno. U reaktivnu smešu se na 0 °C doda EtjN (5 mL) i smeša se meša još 15 minuta. Smeša se filtrira. Filtrat se sipa u 0.5 M rastvor NaOH (300 mL). Organski sloj se izdvoji a vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (100 mL x 3). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (100 mL x 3), suše preko Na2S04i koncentruju da se dobijejedinjenje 168(20 g, 95%) kao braon ulje koje se direktno koristi bez naknadnog prečišćavanja.
Faza 3:
[0485]U rastvor jedinjenja168(27.8 g, 86.3 mmol) u smeši CH2CI2/H2O (250 mL/200 mL) se doda koncentrovana HC1 (50 mL). Nakon dodavanja, smeša se refluksuje 1 sat. TLC (petrol etar: EtOAc = 50:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu. Organski sloj se izdvoji i vodeni sloj se ekstrahuje sa CH2CI2(200 mL x 3). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (100 mL), suše preko Na2S04i koncentruju. Ostatak se prečisti reverzno fazno preparativnom HPLC da se dobijejedinjenje 169(13 g, 54%) kao žuta čvrsta supstanca.
Faza 4:
[0486]U rastvorjedinjenja 169(13 g, 45.9 mmol) u MeOH (100 mL) se u porcijama, na 0 °C, doda NaBH4(3.4 g, 91.9 mol). Nakon dodavanja, smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. TLC (petrol etar: EtOAc = 10:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se koncentruje. Ostatak se razblaži sa H2O (100 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (100 mL x 3). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (100 mL x 3), suše preko Na2S04i koncentruju da se dobijejedinjenje 170(13 g, 100%) kao žuto ulje.
Faza 5:
[0487]U izmešanirastvor jedinjenja 170(4.5g, 15.8 mmol),jedinjenja 18(2.23 g, 15.8 mmol) i PPh?(5.59 g, 22 mmol) u anhidrovanom THF (80 mL) se u kapima, na 0 °C, doda DLAD (4.4 g, 0.22 mmol). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 3: 1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom i ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (smeša petrol etar/EtOAc 20:1 do 10:1) da sedobije jedinjenje 171(5 g, 78 %) kao žuta čvrsta supstanca.
Faza 6:
[0488]Suspenzijajedinjenja 171(6 g, 14.7 mmol) i Fe (3.3 g, 59 mmol) u MeOH (80 mL) i zasićeni vodeni rastvor NH4CI (80 mL) se refluksuju 2 sata. TLC (smeša petrol etar/EtOAc = 2:1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se filtrira i filtrat se koncentruje da se dobije razblaženi rastvor, koji se ekstrahuje sa EtOAc (100 mL x 3). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (50 mL), suše preko Na2S04i koncentruju. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela uz eluiranje sa smešom petrol etar/EtOAc 6/1~3/1 da se dobijejedinjenje 172(5 g, 91%) kao žuta čvrsta supstanca.
Faza 7:
[0489] Smeša jedinjenja 172(5 g, 13.3 mmol), Pd(dppf)Cl2(1.15 g, 1.33 mmol) i TEA (2.65g, 26.5 mmol) u metanolu (100 mL) se zatvori u atmosferi CO (4 bara) na 100 °C i ostavi 16 sati. TLC (smeša petrol etar/EtOAc=l:l) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se filtrira i filtrat se koncentruje da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, (smeša petrol etar/EtOAc od 8:1 do 6:1) da se dobijejedinjenje 173(3.5 g, 84%) kao bledo smeđa čvrsta supstanca.
Faza 8:
[0490]U izmešani rastvorjedinjenja 173(3.5 g, 11.3 mmol) u CH3CN (50 mL) se u kapima, na 0 °C, doda rastvor NBS (2 g, 11.3 mmol) u CH3CN (30 mL). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 30 minuta na ovoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc =1:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se razblaži sa EtOAc (200 mL) i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(50 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (50 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (50 mL), suše preko Na2S04 i koncentruju. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (smeša petrol etar/EtOAc 3:1) da se dobijejedinjenje 174(3.5 g, 79 %) kao bledo smeđa čvrsta supstanca.<*>H NMR (400 MHz, CDCI3) 5 8.17-8.22 (m, IH), 7.77 (s, IH), 7.37-7.40 (d, IH), 7.14-7.19 (m, IH), 6.78 (s, 1 H), 6.45-6.51 (m, 1 H), 4.85-4.9 (s, 2H), 4.59-4.76 (m, 2H), 4.01 (s, 3H). LCMSmlz388 [M+Hf.
Izrada metil 2-[(l/f)-l-{[2-amino-5-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-3-il] oksi} etil] -4-fluorobenzoata (175)
[0491]
[0492]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 45se koristi za izradujedinjenja 175.<J>H NMR (600 MHz, DMSO-fife) 5 7.94( dd, J=8.80, 5.87 Hz, 1 H), 7.74 (s, 1 H), 7.68(dd, J=10.56, 2.35 Hz, 1 H), 7.25 (td,J=8.36, 2.64 Hz, 1 H), 6.87 (s, 1 H), 6.36 (s, 2 H), 6.26 (q,J=6.46 Hz, 1 H), 3.91 (s,3H),1.57 (d, J= 5.87 Hz, 3 H),1.21 (d, .7=5.87 Hz, 12 H).
Izrada terobutil [(3-bromoimidazo[l,2-a]piridin-2-il)metil]metilkarbamata (177)
[0493]
[0494]U rastvorjedinjenja 176(0.5g, 2.22 mmol) u MeOH (20 mL) se doda rastvor metil amina (2M rastvor u THF, 1.33 mL, 2.67 mmol ). Dobijena smeša se meša 1 h na RT. U reaktivnu smešu se doda NaBH4(84 mg, 2.22 mmol). Uočava se snažno izdvajanje gasa. Izdvajanje gasa prestaje nakon 30 minuta. LCMS ukazuje daje konverzija u amin završena. Doda se di-terc-butil dikarbonat (735 mg, 3.33mmol) i smeša se meša 18 h na RT. LCMS pokazuje daje završena konverzija u željeni produkt. Rastvor se koncentruje i ostatak se prečisti pomoću Biotage (40+S kertridž) koristeći gradient 10-75% EtOAc/heptan kao eluent da se dobijejedinjenje 177(654 mg, 86.5 %) kao ulje.<l>R NMR na 80°C .<l>R NMR (400 MHz, 80°C, DMSO-fife) 5 ppm 8.21 - 8.44 (m, 1 H), 7.50 7.64 (m, 1 H), 7.27 - 7.43 (m, 1 H), 6.96 - 7.14 (m, 1 H), 4.54 (s, 2 H), 2.86 (s, 3 H), 1.42 (s, 8 H).
Izrada l-(5-metoksi-l,2-tiazol-3-il)-7V-metilmetanamina (178)
[0495]
[0496]U zatvorenoj mikrotalasnoj bočici zapremine 20 ml, rastvor jedinjenja 52 (340 mg, 1.01 mmol), KOAc (297 mg, 3.02 mmol) i Pd(P<t>Bu3)2(52.7 mg, 0.101 mmol) u MeOH (5 mL) se zagreva 45 min na 100 °C pod mikrotalasima. Razblaži se sa EtOAc, ispere sa vodom i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje pod vakuumom. Ostatak se rastvori u DCM (2.50 mL) a nakon toga se doda 4 N rastvor HC1 u dioksanu (2.52 mL, 10.1 mmol). Reakcija se meša na sobnoj temperaturi i koncentruje pod vakuumom da se dobijejedinjenje 178(196 mg, kvantitativno) kao čvrsta supstanca.<l>K NMR (400 MHz, DMSO-^e) 5 9.46 (br. s., 2 H), 6.92 (s, 1 H), 4.15 (s, 2 H), 4.00 (s, 3 H), 2.58 (s, 3 H).
Izrada 3-[(ciklopropilamino)metil]-l-metil-lH-pirazol-5-karbonitrila (181).
[0497]
Faza 1:
[0498]Urastvor jedinjenja 179(1.50 g, 4.22 mmol) u degasiranom MeOH se dodaju KOAc (1.24 g, 3.00 mmol) i Pd(tBu3P)2(220 mg, 0.10 mmol). Smeša se zagreva 1 sat na 120 °C pod mikrotalasima. Reaktivna smeša se filtrira i koncentruje pod vakuumom. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni (0-40% EtOAc/heptani) da se dobijejedinjenje 180(990 mg, 85%) kao bistro ulje.<l>RNMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 6.91 (s, 1 H), 4.31 (s, 2 H), 3.96 (s, 3 H), 2.49 - 2.43 (m, 1 H), 1.39 (s, 9 H), 0.72 - 0.53 (m, 4 H).
Faza 2:
[0499]U rastvorjedinjenja 180(990 mg, 3.58 mmol) u DCM (9 mL) se doda 4 N rastvor HC1 u dioksanu (8.96 mL, 35.8 mmol). Suspenzija se meša 2 sata na sobnoj temperaturi,
nakon toga se reaktivna smeša koncentruju pod vakuumom da se dobijejedinjenje 181(739 mg, 97%) kao bela čvrsta supstanca<J>H NMR (400 MHz, DMSO-ofe) 5 9.72 (br. s., 2 H), 7.33 (s, 1 H), 4.22 (s, 2 H), 4.03 (s, 3 H), 2.66 (tt,J=3.8, 7.4 Hz, 1 H), 0.95 - 0.83 (m, 2 H),0.77 - 0.66 (m, 2 H).
Izradaterc-butil[(4-bromo-5-cijano-l-metil-lH-pirazol-3-il)metil]ciklopropil-
karbamata (183).
[0500]
Faza 1:
[0501]Ciklopropilamin ( 31.07 g, 544 mmol) se razblaži u acetonitrilu (30 ml), nakon toga se doda kalijum karbonat (8.4 g, 61 mmol), a nakon togajedinjenje 155(8.5 g, 279 mmol) rastvoreno u acetonitrilu (30 ml). Reaktivna smeša se meša 18 sati na sobnoj temperaturi. U reaktivnu smešu se dodaju EtOAc (400 ml) i voda (80 ml). Faze se razdvoje a nakon toga se organska faza upari da se ukloni višak ciklopropilamina. U sirovo jedinjenje se dodaju EtOAc (400 ml) i 1 M vodeni rastvor HC1 (80 ml). Vodena faza se podesi na pH 7 sa 1 M vodenim rastvorom NaOH i ekstrahuje sa EtOAc (3<*>400ml). Organske faze se kombinuju, suše preko MgS04, filtriraju i rastvarači se uklone pod sniženim pritiskom da se dobijejedinjenje 182kao bledo žuta čvrsta supstanca (6.95 g, 89% prinos).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 3.99 (s, 3H), 3.68 (s, 2H), 2.05 (tt, IH, J = 6.65, 3.53 Hz), 0.34 (td, 2H, J = 4.06, 6.43 Hz), 0.23 - 0.19 (m, 2H), [M+H]<+>= 257.06 - 258.14 (1/1).
Faza 2:
[0502] Jedinjenje 182(6.95 g, 27.2 mmol, 1 eq.) se rastvori u dihlormetanu (90 ml, 0.3 M), a nakon toga se doda mala porcija Boe anhidrida (5.94 g, 27.2 mmol, 1 eq.). Reaktivna smeša se meša 60 sati na sobnoj temperaturi. Rastvarači se uklone pod vakuumom. Sirovi materijal se kombinuje sa manjom količinom reakcije (792 mg) i prečisti gasnom hromatografijom da se dobijejedinjenje 183kao bela čvrsta supstanca (10.29 g, 96% prinos, 97% čistoće pomoću LCMS).<l>K NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 4.35 (s, 2H), 3.99 (s, 3H), 2.42 (tt, J = 6.6, 4.0 Hz, 1 H), 1.37 (s, 8H), 0.63 (ddt, J = 5.1, 3.4, 2.1 Hz, 4H). [M+H-Boc]= 255.01 - 256.99 (1/1).
Izrada terc-butil((3-bromo-6-metilimidazo[l,2-a]pirimidin-2-il)metil)(metil)-karbamata
(189).
[0503]
Faza 1:
[0504]U rastvorjedinjenja 184(10.0 g, 77.79 mmol) u IMS (100 mL) se doda vodeni rastvor amonijaka (35%, 100 ml). Reaktivna smeša se prenese u zatvoreni cilindar i zagreva 4 h na 200 °C. Reaktivna smeša se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu i koncentruje da se ukloni najveći deo rastvarača i doda se voda (25 mL). Dobijena čvrsta supstanca se filtrira i suši pod vakuumom da se dobije željenojedinjenje 185kao beličasta čvrsta supstanca (7.85 g, 92% prinos).<l>K NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 8.06 (s, 2H), 6.30 (s, 2H), 2.03 (s, 3H).
LCMS mlz 110 [M+H]+.
Faza 2:
[0505]Reakcija se izvodi u dve serije koristeći 1 g i 9.36 gjedinjenja 185a sirovi materijal dobijen iz obe serije se kombinuje za prečišćavanje. U žitku masujedinjenja 185(9.36 g, 85.82 mmol) u bezvodnom THF (250 mL) se dodaju dihloraceton (21.80 g, 171.64 mmol) i molekularna sita od 4A° (25 g). Reaktivna smeša se zagreva 3 dana na 90 °C, nakon toga se reaktivna smeša koncentruje i dobijeni ostatak rastvori u vodi (200 mL). Rastvor se tretira sa čvrstim K2CO3(10 g) i meša 10 min a zatim ekstrahuje sa etil acetatom (3 x 400 mL). Kombinovani ekstrakti etil acetata se isperu sa slanim rastvorom (100 mL) i koncentruju da se dobije sirovi produkt kao gusto braon ulje. Vodena faza se se podvrgne tečnost-tečnost ekstrakciji sa DCM (500 mL) i dobijeni produkt se kombinuje sa sirovim uljem dobijenim ekstrakcijom etil acetata za prečišćavanje. Prečišćavanjem hromatografijom na koloni silika gela, koristeći 0.5% - 1% MeOH u DCM, dobija sejedinjenje 186kao beličasta čvrsta supstanca (4.2 g, 24% prinos).<[>H NMR (400 MHz, hloroform-d) 5 8.44 (d,J=2.4 Hz, 1 H), 8.23 (dd, 7=2.4, 1.2 Hz, 1 H), 7.56( d, J=0.8 Hz, 1 H), 4.79(d, 7=0.8 Hz, 2H), 2.37(d, J =1.1 Hz, 3H). LCMSm/ z182 [M+H]<+>.
Faza3:
[0506]Reakcija se izvodi u dve serije koristeći 2.0 g i 2.2 gjedinjenja 186a sirovi materijal dobijen iz obe serije se kombinuje za prečišćavanje. Urastvor jedinjenja 186(2.0 g, 11.01 mmol) u acetonitrilu (30 mL) se doda NBS (2.14 g, 12.0 mmol) i reakcija meša na sobnoj temperaturi u toku noći. Rastvarač se ukloni pod vakuumom i kombinovani sirovi produkt se rastvori u EtOAc (100 mL). Čvrsta supstanca koja je precipitirala se ukloni filtriranjem i filtrat se upari da se dobije sirovi produkt kao svetio žuta guma. Prečišćavanjem sirove supstance hromatografijom na koloni silika gela koristeći 0.5% MeOH u DCM dobija se čistojedinjenje 187kao beličasta čvrsta supstanca (1.9 g, 32% prinos).<J>H NMR (400 MHz,hloroform-d) 5 8.47 (d, J= 2.4 Hz, 1 H), 8.14 (dd, J= 2.4,1.2 Hz, 1 H), 4.78 (s, 2H), 2.44 (s, 3H). LCMSmlz260/262 [M+H]<+>.
Faza 4:
[0507]U suspenzijujedinjenja 187(1.68 g, 6.45 mmol) u THF (20 mL), zagrejanom na 60 °C, se polako dodaje rastvor metil amina u THF (2M, 53.2 mL, 96.75 mmol) u toku 30 min koristeći špric pumpu. Po završenom dodavanju, reakcija se zagreva 4h na 60 °C. Sirovi produkt dobijen nakon koncentracije reaktivne smeše se prečisti gasnom hromatografijom na koloni silika gela koristeći 10% MeOH u DCM zajedno sa 0.1% do 35% vodenog rastvora amonijaka. Nađeno je da dobijeni produkt sadrži malu količinu neželjenog dimera pa se dalje prečisti reverzno faznom hromatografijom koristeći kao gradient rastvarač CH3CN/H2O. Tako dobijeni produkt je kontaminiran sa nečistoćom u tragovima i opet se prečisti gasnom hromatografijom na koloni silika gela koristeći 4% MeOH u DCM (sadrži 7N rastvor amonijaka) da se dobijejedinjenje 188kao žuta čvrsta supstanca (254 mg, 15% prinos).<J>H NMR (400 MHz, Metanol-^) 5 8.89 - 8.22 (m, 2H), 3.88 (s, 2H), 2.45 (d,J=1.1 Hz, 3H), 2.42 (s, 3H). LCMSmlz255/257 [M+H]<+>.
Faza5:
[0508]Urastvor jedinjenja 188(250 mg, 0.980 mmol), DIEA (0.512 mL, 2.94 mmol) i DMAP (23.9 mg, 0.196 mmol) u DCM (4 mL) se na 0 °C doda (Boc)20 (856 mg, 3.92 mmol). Smeša se meša na RT u toku noći. Smeša se koncentruje i prečisti pomoću ISCO (24g) koristeći 0% - 75% EtOAc/heptani da se dobijejedinjenje 189kao guma (241 mg, 69% prinos).<l>K NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 8.59 (s, 1 H), 8.48 (d, J=2.3 Hz, 1 H), 4.52 (s, 2H), 2.85 (br. s., 3H), 2.37 (s, 3H), 1.39 (d, 7=15.9 Hz, 9H). LCMSm/ z355/357 [M+H]<+>.
Izrada l-[l-(2-{[te/-c-butil(dimetil)silil]oksi}etil)-3-metil-lH-pirazol-5-il]-N-metilmetanamina (195).
[0509]
Faza 1:
[0510]U inertnoj atmosferi na 0 °C (kupatilo led/voda), u suspenziju NaH (60% u mineralnom ulju, 6.44 g, 0.161 mol) (unutrašnja T=4 °C) se doda etilen glikol (10.0 g, 0.161 mol). Unutrašnja temperature nakon dodavanja je 6 °C. Reakcija se meša 45 minuta u kupatilu led/voda (unutrašnja T= 4 °C). U porcijama se u toku 15 minuta dodaje terc-butilhlordimetilsilan (29.121 g, 0.161 mol), održavajući temperaturu ispod 10 °C. Nakon dodavanja terc-butilhlorodimetilsilana, reaktivna smeša se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša 2.5 sata. Reakcija se nakon toga neutrališe dodavanjem zasićenog rastvora NaHCC-3 (250 mL) i vode (100 mL). Smeša se ekstrahuje sa TBME (250 mLx2), kombinovane organske supstance se isperu sa slanim rastvorom (250 mL), suše preko Na2S04, filtriraju i redukuju do sušenja da se dobije žuto ulje. Sirova supstanca se prečisti filtriranjem na ploči silika gela koristeći smešu heptani/EtOAc (gradijent eluacije 95/5 nakon toga 9/1, 8/2, 7/3). Dobijene frakcije se kombinuju i koncentruju do sušenja da se dobijejedinjenje 190kao bezbojno ulje (22.5 g, 79%).<J>H NMR (400 MHz, CDCh) 8 0.00 (s, 6H), 0.82 (s, 9H), 2.00 (t, 1 H), 3.54-3.58 (m, 2H), 3.62-3.64 (m, 2H).
Faza 2:
[0511]U inertnoj atmosferi, u rastvor jedinjenja191(20.00 g, 129.7 mmol), 2-((terc-butildimetilsilil)oksi)etanola190(27.45 g, 155.7 mmol) i trifenilfosfina (40.83 g, 155.7 mmol) u THF (400 mL), ohlađenom na 0 °C, se u kapima, u toku 1 sat, dodaje rastvor DBAD (35.85 g, 155.7 mmol) u THF (200 mL). Nakon 3 sata mešanja na sobnoj temperaturi, doda se 0.1 ekvivlent 2-((terc-butildimetilsilil)oksi)etanola (2.2 g, 12.48 mmol). Reaktivna smeša se meša još 18 sati a nakon toga koncentruje. Dobijeno žuto ulje se triturira sa heptanom (1 L) da se formira bela čvrsta supstanca koja se ukloni filtriranjem. Filtrat se koncentruje i uljani ostatak se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel, 2% do 6% EtOAc u heptanu) da se dobijejedinjenje 192kao bledo žuto ulje (25.47 g, 63%).<l>U NMR (400 MHz, CDCb) S 0.11 (s, 6H), 0.78 (s, 9H), 1.33 (t, 3H), 2.25 (s, 3H), 3.89 (t, 2H), 4.29 (q, 2H), 4.63 (t, 2H), 6.57 (s, 1 H), [MH]+313.
Faza 3:
[0512]U inertnoj atmosferi, urastvor jedinjenja 192(24.8 g, 79.4 mmol) u DCM (600 mL), ohlađenom na -78 °C, se u kapima doda DIBAL-H (1 M rastvor u DCM, 250 mL, 250 mmol). Nakon 1 sat mešanja na - 78 °C, reaktivna smeša se neutrališe sa metanolom (60 mL) a nakon toga zagreje na sobnu temperaturu. Dodaju se voda i slani rastvor da se formira sivi precipitat. Pokušaji da se izvrši ekstrakcija nisu uspeli jer se obe faze teško uočavaju. Reaktivna smeša se nakon toga filtrira preko celite i ispere sa velikom količinom DCM (4 L). Vodeni sloj se izdvoji i organska faza se suši (Na2S04) i koncentruje da se dobijejedinjenje 193kao ulje (20 g) koje se koristi u neizmenjenom obliku u sledećoj fazi.<J>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 0.04 (s, 6H), 0.79 (s, 9H), 2.23 (s, 3H), 3.96 (t, 2H), 4.22 (t, 2H), 4.55 (d, 2H), 5.97 (s, 1 H), [MH]<+>271.
Faza 4:
[0513] U inertnoj atmosferi, u rastvor oksalil hlorida (8.70 mL, 103 mmol) u DCM (188 mL), ohlađenom na - 78 °C, se u toku 30 min dodaje rastvor DMSO (14.4 mL, 205 mmol) u DCM (75 mL). Reaktivna smeša se meša 30 min na - 78°C a nakon toga se u kapima doda rastvorjedinjenja 193(20 g) u DCM (188 mL). Reaktivna smeša se meša 1.25 sati na - 78 °C, a nakon toga se u kapima doda trietilamin (66.0 mL, 474 mmol). Reakcija se zagreje na sobnu temperaturu i doda se voda (600 mL). Faze se razdvoje i vodeni sloj se ekstrahuje sa DCM (3 x 500 mL). Kombinovane organske supstance se suše (Na2S04) i koncentruju. Dobijeni uljani ostatak se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel, 0% do 2% EtOAc u DCM) da se dobijejedinjenje 194kao bledo žuto ulje (8.75 g, 41% iz dve faze).<J>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 0.11 (s, 6H), 0.78 (s, 9H), 2.29 (s, 3H), 3.90 (t, 2H), 4.56 (t, 2H), 6.63 (s, 1 H), 9.80 (s, 1 H), [MH]<+>269.
Faza 5:
[0514] U inertnoj atmosferi,u rastvor jedinjenja 194(11.15 g, 41.54 mmol) i metilamina (33% m/m u EtOH, 14.77 g, 157.22 mmol) u metanolu (280 mL) se u kapima doda sirćetna kiselina (2.50 mL, 41.54 mmol). Reaktivna smeša se meša 1.3 sata na sobnoj temperaturi, ohladi na 0 °C, tretira saNaBH(OAc)3(13.2 g, 62.31 mmol) i nakon toga meša 18 sati na sobnoj temperaturi. Nakon ovog vremena, doda se malo amina (3.90 mg, 41.92 mmol) a nakon 30 minuta doda se NaBH(OAc)3 (8.80 g, 41.5 mmol). Reaktivna smeša se meša još 40 minuta, koncentruje, prenese u EtOAc (375 mL) i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(275 mL) i slanim rastvorom (200 mL). Organski sloj se suši (Na2S04) i koncentruje. Dobijeni uljani ostatak se prečisti hromatografijom na koloni (neutralisani silka gel, 0% do 6% 7N NH3/MeOH u DCM) da se dobijejedinjenje 195(10.3 g, 87%).<l>KNMR (400 MHz, CDCh) 5 0.10 (s, 6H), 0.80 (s, 9H), 1.60 (br, 1 H), 2.20 (s, 3H), 2.42 (s, 3H), 3.71 (s, 2H), 3.92 (t, 2H), 4.11 (t, 2H), 5.88 (s, 1 H), [MH]<+>284.
Izrada l-(4-bromo-3-metoksi-l-metil-l^-pirazol-5-il)-7V-metilmetanamina (196)
[0515] Urastvor jedinjenja 91(1613 mg, 4.826 mmol) u DCM (10 ml) se doda 4N rastvor HC1 u dioksanu (10 ml). Rastvor se ostavi da se meša 2 sata na sobnoj temperaturi, a nakon toga se reaktivna smeša koncentruje da se dobije jedinjenje196(1357 mg, 104%) kao žuta čvrsta supstanca.
Izrada 5-((metilamino)metil)izoksazol-3-karboksamida (200)
[0516]
Faza 1:
[0517]Urastvor jedinjenja 197(800 mg, 7.40 mmol) u DCE (30 mL) se dodaju NBS (2.79 g, 15.5 mmol) i A1BN (60.8 mg, 0.375 mmol). Reakcija se meša na 85 °C u toku noći. Koncentruje se da se dobije čvrsta supstanca krem boje. Doda se voda (20 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (30 mL x 2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL), suše preko Na2S04i koncentruju da se dobijejedinjenje 198(1.44 g, 2.90 mmol) kao beličasta polu-čvrsta supstanca, koja se prenese u narednu fazu bez naknadnog prečišćavanja.
Faza 2:
[0518]Urastvor jedinjenja 198(1.44 g, 2.90 mml) u THF (15 mL), ohlađenom na 0 °C, se doda 2M rastvor NH2CH3u THF (4.36 mL, 8.73 mmol). Smeša se meša 2.5 h na 0 °C. Doda se (Boc)20 (635 mg, 2.91 mmol). Ostavi se da stoji u toku noći na RT. LCMS pokazuje novi pik i početni materijal. Doda se 380 mg (Boc)20. Dobijena smeša se meša 3h na RT. LCMS pokazuje da novi pik raste. Nakon još 2 h, pomoću LCMS nije konstatovan nikakav progres. Doda se 283 mg (Boc)20. Smeša se meša na RT u toku noći. Rastvarač se ukloni pod vakuumom i reakcija podeli između vode i EtOAc (50ml/50ml). Organska faza se izdvoji, suši preko Na2S04i koncentruje. Prečisti se pomoću ISCO sa 0-40% smešom EtOAc/heptan da se dobijejedinjenje 199kao bezbojno ulje (445 mg, 64% prinos).<*>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 1.47 (br. s., 9 H) 2.98 (s, 3 H) 4.60 (br. s., 2 H) 6.56 (br. s., 1 H).
Faza 3:
[0519]Urastvor jedinjenja 199(445 mg, 1.88 mmol) u DCM (5 mL) se u kapima doda 4M rastvor HC1 u dioksanu (5 mL). Pomoću LCMS se konstatuje daje reakcija završena nakon 2 sata. Rekcija se koncentruje i suši u pećnici pod vakuumom na 60°C u toku noći da se dobijejedinjenje 200kao HC1 so u obliku bele čvrste supstance (333 mg, 100% prinos).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 2.59 (s, 3 H) 4.44 (s, 2 H) 7.00 (s, 1 H) 7.90 (br. s., 1 H) 8.21 (br. s., 1 H) 9.77 (br. s., 2 H). LCMSmlz156 [M+H]<+>.
Izrada 5-[(metilamino)metil]-l,2-oksazol-3-karbonitrila (201)
[0520]
[0521]U rastvorjedinjenja 199(850 mg, 2.90 mmol) u DCM (3 mL) se u kapima doda TFA (3 mL, 38.9 mmol). Pomoću LCMS se konstatuje daje reakcija završena nakon 1.5 sati. Reakcija se koncentruje i suši u pećnici pod vakuumom na 60 °C u toku noći da se dobijejedinjenje 201kao braon guma (686 mg, 95% prinos).
Izrada2-{(U?)-l-[(2-amino-5-bromo<p>iridin-3-il)oksi] etil}-4-fluorobenzoevekiseline
(202)
[0522]
[0523]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 41se koristi za izradujedinjenja 202(731 mg, 95%). 'HNMR (400 MHz, DMSO-rfe) 5 13.43 (br. s., 1 H) 7.97 (dd, J=8.59, 6.06 Hz, 1 H) 7.47 - 7.64 (m, 2 H) 7.18 - 7.30 (m, 1 H) 6.87 (s, 1 H) 6.20 - 6.48 (m, 3 H) 1.58 (d, .7=6.32 Hz, 3H).
Izrada terobutil [(4-bromo-5-etil-l,2-oksazol-3-il)metil]metilkarbamata (205).
[0524]
Faza 1
[0525]Ususpenziju jedinjenja 203(1.81 g, 12.9 mmol), TEA (9.10 mL, 64.6 mmol) i DMAP (0.315 g, 2.58 mmol) u ACN (50 mL) se na 0 °C doda di-t-butil-dikarbonat (3.38 g, 15.5 mmol). Reaktivna smeša se ostavi da se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. U reaktivnu smešu se dodaju voda i EtOAc. Vodeni sloj se ekstrahuje 2x sa EtOAc. Organski sloj se ispere sa slanim rastvorom, suši preko Na2S04, filtrira i koncentruje pod vakuumom. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni (2 do 30 % EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 204(2.09 g, 67%) kao bezbojno ulje.<l>RNMR (400 MHz, METANOL-^) 5 1.28 (t, J=7.58 Hz, 3 H) 1.47 (br. s., 9 H) 2.77 (q, J=7.58 Hz, 2 H) 2.88 (s, 3 H) 4.42 (s, 2 H) 6.04 (s, 1 H).
Faza 2:
[0526]U rastvorjedinjenja 204(500 mg, 2.08 mmol) u DMF (2.2 mL) se doda N-bromosukcinimid (444mg, 2.50 mmol). Reaktivna smeša se zagreva 1 sat na 60 °C. U reaktivnu smešu se doda EtOAc (22 mL), a nakon toga ispere sa vodom (1 x 22 mL) i slanim rastvorom (22 mL). Organski sloj se suši preko Na2S04, filtrira i koncentruje pod vakuumom. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni (3% do 30% EtOAc/heptan) da se dobije
jedinjenje 205(441 mg, 66%) kao bezbojno ulje.<J>H NMR (400 MHz, METANOL-^) 5 1.28 (t, J=7.71 Hz, 3 H) 1.48 (s, 4 H) 1.43 (s, 5 H) 2.82 (q, 7=7.66 Hz, 2 H) 2.89 (s, 3 H) 4.50 (s, 2
H).
Sinteza terc-butil ((4-bromo-5-cijano-l-((-2-(trimetilsilil)etoksi)metil)-l^T-pirazol-3-
il)metil)karbamata (Jedinjenje 214)
[0527]
Faza 1:
[0528]U rastvorjedinjenja 206(120 g, 0.779 mol) u piridinu (800 mL) se na sobnoj temperaturi doda AC2O (400 mL) a nakon toga katalitička količina DMAP (13 g, 0.106 mol). Dobijena smeša se meša 12 sati na sobnoj temperaturi. TLC (Petroleum etar/EtOAc = 3:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak, koji se podeli između CH2CI2(1 L) i H2O (200 mL). Organski sloj se izdvoji, ispere sa slanim rastvorom (100 mL), suši preko Na2S04i koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt. Sirovi produkt se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (petrol etar/EtOAc = 10:1) da se dobijejedinjenje 207(90 g, 59%) kao bela čvrsta supstanca.<!>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 6.57 (s, 1 H), 4.40-4.35 (q, 2H), 2.74 (s, 3H), 2.57 (s, 3H), 1.39-1.35 (t, 3H).
Faza 2:
[0529]U suspenzijujedinjenja 207(50 g, 0.255 mol) u H2O (1.5 L) se u kapima, na sobnoj temperaturi, doda Br2(44 g, 0.281 mol). Dobijena smeša se meša 3 sata na sobnoj temperaturi. TLC (petrol etar/EtOAc = 5:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (500 mL x 3). Organski slojevi se kombinuju, isperu sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03 (200 mL), H2O (100 mL) i slanim rastvorom (100 mL), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije sirovi produk koji se prečisti rekristalizacijom iz smeše petrol etar/EtOAc (5:1, 120 mL) da se dobijejedinjenje 208(58 g, 83%) kao žuta čvrsta supstanca.lttNMR (400 MHz, CDCh) 5 4.47-4.42 (q, 2H),
2.77 (s, 3H), 2.63 (s, 3H), 1.44-1.40 (t, 3H).
Faza3:
[0530]U suspenzijujedinjenja 208(56 g, 0.204 mol) u CCU (800 mL) se na sobnoj temperaturi, u atmosferi azota, dodaju NBS (40 g, 0.225 mol) i A1BN (9.6 g). Dobijena smeša se zagreva 3 sata pod refluksom. TLC (petrol etar/EtOAc = 3:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu, nakon toga filtrira i čvrste supstance isperu sa CH2CI2(200 mL). Filtrat se ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(100 mL x 2), H2O (100 mL) i slanim rastvorom (100 mL), suši preko Na2S04i koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se rekristališe iz smeše petrol etar/EtOAc (5:1, 120 mL) da se dobijejedinjenje 209(60 g, 83%) kao žuta čvrsta supstanca.<J>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 4.88 (s, 2H), 4.48-4.42 (q, 2H), 2.80 (s, 3H), 1.45-1.41 (t, 3H).
Faza 4:
[0531]Urastvor jedinjenja 209(59 g, 0.167 mol) u THF (300 mL) se u kapima, na -10 °C, doda CH3NH2u THF (2 N, 419 mL, 0.835 mol). Dobijena smeša se meša 30 minuta na -10 °C. TLC (petrol etar/EtOAc = 3:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se filtrira i filtrat se 20 minuta koncentruje pod vakuumom na 25 °C a nakon toga na višoj temperaturi da se dobije sirovi produkt koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (CH2Ch/MeOH = 100:1-20:1, Rf = 0.3 u CH2Cl2/MeOH = 10:1) da sedobije jedinjenje 210(24 g, 55%) kao žuto ulje.<l>KNMR (400 MHz, CDCh) 5 7.90-7.55 (br, 2H), 6.85 (s, IH), 5.29 (s, 0.62H, rezidualni CH2CI2), 4.36-4.31 (q, 2H), 4.21 (s, 2H), 3.49 (s, 1.56H, rezidualni MeOH), 2.68 (s, 3H), 1.37-1.24 (t, 3H).
Faza 5:
[0532]U rastvorjedinjenja 210(24 g, 0.092 mol) u piridinu (300 mL) se na sobnoj temperaturi dodaju DMAP (5.66 g, 0.046 mol) i B0C2O (29.81 g, 0.138 mol). Dobijena smeša se meša na sobnoj temperaturi u toku noći. TLC (petrol etar/EtOAc = 3:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (petrol etar/EtOAc= 10:1-2:1) da se dobijejedinjenje 211(23 g, 69%) kao žuto ulje.<J>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 4.44-4.38 (m, 4H), 2.91 (s, 3H), 1.49 (s, 9H), 1.25-1.24 (t, 3H).
Faza 6:
[0533]U suspenzijujedinjenja 211(23 g, 0.0637 mol) u anhidrovanom DMF (400 mL) se na sobnoj temperaturi doda CS2CO3(46.8 g, 0.14 mol). Dobijena smeša se meša 30 minuta na sobnoj temperaturi. Nakon 30 minuta, u smešu se doda SEM-C1 (24.39 g, 0.146 mol) s. Dobijena smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. TLC (petrol etar/EtOAc = 3:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se razblaži sa EtOAc (1L) i slanim rastvorom (200 mL). Organski sloj se izdvoji i ispere sa H2O (200 mL x 2), slanim rastvorom (100 mL), suši preko Na2S04i koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (petrol etar/EtOAc = 10:1) da se dobijejedinjenje 212(22 g, 70%) kao žuto ulje. !H NMR (400 MHz, CDCh) 5 5.90-5.76 (s, IH), 4.72-4.65 (m, 2H), 4.47-4.40 (q, 2H), 3.55-3.51 (m, 2H), 2.95-2.76 (m, 3H), 1.49 (s, 9H), 1.43-1.39 (t, 3H), 0.96-0.85 (m, 2H), 0-0.05 (m, 9H).
Faza 7:
[0534]Rastvorjedinjenja 212(22 g, 0.0448 mol) u NH3-MeOH (5 N, 350 mL) se zagreva 12 sati na 60 °C u zatvorenoj epruveti. TLC (petrol etar/EtOAc = 1:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak koji se podeli između CH2CI2(200 mL) i limunske kiseline (2 N, 30 mL). Organski sloj se izdvoji i ispere sa vodenim rastvorom NaHC03(2 N, 30 mL), slanim rastvorom (20 mL), suši preko Na2S04, filtrira i koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (petrol etar/EtOAc = 5:1-3:1) da se dobijejedinjenje 213(17 g, 82%) kao žuto ulje.<l>KNMR (400 MHz, CDCh) 5 6.89 (s, IH), 5.80 (s, IH), 5.75 (s, IH), 4.53-4.48 (m, 2H), 3.62-3.55 (m, 2H), 2.83-2.77 (m, 2H), 1.48 (s, 9H), 0.93-0.87 (m, 2H), 0 (s, 9H).
Faza 8:
[0535]Urastvor jedinjenja 213(16 g, 0.0346 mol) u anhidrovanom CH2CI2(250 mL) se na 0 °C doda Et3N (14.4 mL, 0.104 mol) a nakon toga TFAA (9.6 mL). Dobijena smeša se meša 2 sata na 0 °C. TLC (petrol etar/EtOAc = 3:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se podeli između CH2CI2(150 mL) i limunske kiseline (40 mL, 2 N). Organski sloj se izdvoji, ispere sa vodenim rastvorom NaHC03(2 N, 50 mL), slanim rastvorom (20 mL) i suši preko Na2S04, filtrira i koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (petrol etar/EtOAc = 50:1) da sedobije jedinjenje 214(11.5 g, 74.8%) kao žuto ulje.<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 5.52 (s, 2H), 4.61-4.42 (m, 2H), 3.63-3.51 (m, 2H), 2.83-2.79 (m, 2H), 1.47 (s, 9H), 0.95-0.86 (m, 2H), 0 (s, 9H). LC-MSmlz468 [M+Na]<+>.
Izrada terc-butil {[4-bromo-5-cijano-l-(2,2-difluoroetil)-l//-pirazol-3-
il]metil}metilkarbamata (225)
[0536]
Faza 1
[0537]U bocu zapremine 5 litara opremljenu sa stubnom mešalicom doda se rastvor NaOMe (25% u MeOH, 500 mL, 2.31 mol) u atmosferi N2. U ovo se doda MeOH (1.50 L) a nakon toga se polako, u toku 50 minuta, dodaje rastvor dietil oksalata (337 g, 2.31 mol) u acetonu (168 mL, 2.31 mol) (nakon 35 minuta reakcija postaje čvrsta pa se doda još 500 mL MeOH). Po završenom dodavanju gusta bledo žuta reaktivna smeša se ostavi da stoji na sobnoj temperaturi 2 dana u atmosferi N2. Reakcija se nakon toga ohladi na 0 °C uz mešanje i polako se dodaje koncentrovana 37% HC1 (190 mL, 2.31 mol) a nakon toga se polako, u toku 60 minuta, dodaje hidrazin monohidrat (112 mL, 2.31 mol), održavajući unutrašnju temperaturu reakcije na ispod 20 °C. Reakcija se nakon toga meša na sobnoj temperaturi u toku noći. Reakcija se nakon toga filtrira kroz celite, a ploča se ispere sa MeOH (200 mL). Rastvarač se ukloni do veoma male zapremine i ostatak se podeli između EtOAc (2.5 L) i smeše voda/slani rastvor (2.0 L, 1:1). Organska faza se sakupi a vodena faza se ekstrahuje sa novom količinom EtOAc (500 mL). Kombinovane organske supstance se isperu sa slanim rastvorom 1.0 L), suše preko Na2S04i ispare do sušenja, da se dobijejedinjenje 215(226 g, 70%) kao čvrsta supstanca krem boje.<l>R NMR (400 MHz, hloroform-d) 5 11.64 (s, 1 H), 6.58 (d, J = 0.8 Hz, 1 H), 3.89 (s, 3H), 2.37 (d, J = 0.7 Hz, 3H), [MH]<+>140.99.
Faza 2:
[0538] Smeša jedinjenja 215(30.8 g, 0.22 mol), 2,2-difluoroetil metansulfonata (38.0 g, 0.24 mol) i CS2CO3(94.3 g, 0.29 mol) u DMF (150 mL) se meša 3.5 sata na 80 °C. Nakon hlađenja, reakcija se razblaži sa EtOAc (200 mL) i vodom (800 mL). Organska supstanca se sakupi a vodena faza se ekstrahuje sa EtOAc (2 x 300 mL). Kombinovane organske supstance se isperu sa vodom (500 mL), slanim rastvorom (500 mL), suše (Na2S04) i upare. Prečišćavanjem gasnom hromatografijom (20% do 50% EtOAc u heptanima) dobija sejedinjenje 216(28 g, 62%) ijedinjenje 217(12 g, 26%).Jedinjenje 216:<J>H NMR (400 MHz, hloroform-d) 5 6.64 (s, 1 H), 6.09 (tt, J = 55.9, 4.5 Hz, 1 H), 4.87 (td, J = 13.1, 4.5 Hz, 2H), 3.86 (s, 3H), 2.26 (s, 3H).Jedinjenje 217:<l>R NMR (400 MHz, hloroform-d) 5 6.55 (s, 1 H), 6.09 (tt, J = 55.5, 4.5 Hz, 1 H), 4.41 (td, J = 13.1, 4.5 Hz, 2H), 3.86 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), [MH]<+>205.06.
Faza 3:
[0539]NBS (32.0 g, 180 mmol) se doda urastvor jedinjenja 216(35.0 g, 172 mmol) u DMF (100 mL) i meša 20 h na 20 °C. Dodaju se voda (200 mL) i 2% vodeni rastvor NaHS04(150 mL) i smeša se meša 10 minuta, a nakon toga ekstrahuje u smeši EtOAc/heptani (2:1, 400 mL). Organski sloj se izdvoji i ispere sa slanim rastvorom (200 mL), suši (Na2S04) i upari, da se dobijejedinjenje 218(41 g, 90%) kao ulje.<l>K NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 6.36 (tt, J = 55.0, 3.8 Hz, 1 H), 4.90 (td, J = 14.6, 3.8 Hz, 2H), 3.88 (s, 3H), 2.20 (s, 3H), [MH]<+>283 i 285 (100%).
Faza 4:
[0540] Smeša jedinjenja 218(41 g, 0.145 mol) i 7M rastvora NH3 u MeOH (500 mL) se meša 5 dana na 25 °C. Reaktivna smeša se nakon toga upari da se dobijejedinjenje 219(37 g, 95%) kao bela čvrsta supstanca.<l>KNMR (400 MHz,DMSO-d)5 8.04 (s, 1 H), 7.77 (s, 1 H), 6.31 (tt, J = 55.1, 3.7 Hz, IH), 4.74 (td, J = 15.0, 3.7 Hz, 2H), 2.16 (s, 3H), [MH]" 268 i 270(100%).
Faza 5:
[0541]POCh (74 g, 0.483 mol) se na 25 °C doda urastvor jedinjenja 219(37 g, 0.138 mol) u acetonitrilu (250 mL). Reakcija se nakon toga meša 6 sati pod refluksom. Nakon hlađenja, reakcija se polako sipa u vodu (1000 mL) uz kontrolu egzotermije održavanjem temperature smeše ispod 40 °C dodavanjem leda u vodu ukoliko je potrebno. Nakon 5 minuta mešanja i nakon prestanka egzostermije, smeša se ekstrahuje u smeši EtOAc/heptani (1:1, 500 mL). Organski sloj se izdvoji i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(200 mL), suši (Na2S04) i upari, da se dobijejedinjenje 220(27 g, 78%) kao svetio braon čvrsta supstanca.
'HNMR (400 MHz,DMSO-fife)5 6.43 (tt, J = 53.9, 2.9 Hz, 1 H), 4.81 (td, J = 15.9, 2.8 Hz, 2H), 2.23 (s, 3H).
Faza 6:
[0542] Smeša jedinjenja 220(15 g, 60 mmol), NBS (14.95 g, 84 mmol) i A1BN (492 mg, 3.0 mmol) u benzotrifluoridu (200 mL) se meša 12 sati na 80 °C. Nakon hlađenja, smeša se filtrira kroz kratku ploču silka gela i filter pogača se ispere sa toluenom (20 mL). Filtrat se upari da se dobijejedinjenje 221(9.0 g, 45% prinos) kao bledo žuto ulje. 'H NMR (400 MHz, DMSO-ćfc) 5 6.72 - 6.21 (m, 1 H), 5.03 - 4.72 (m, 2H), 4.64 (s, 2H).
Faza 7:
[0543] Rastvor jedinjenja 221(18 g, 27.4 mmol) u EtOH (50 mL) se na 0 °C, u toku 15 minuta, polako dodaje u rastvor MeNH2(40% u MeOH, 56 mL, 0.55 mol) u novoj količini EtOH (50 mL). Nakon završenog dodavanja reakcija se meša 2 sata na 0 °C. Smeša se nakon toga koncentruje pod vakuumom do približno 50 mL zapremine. EtOH (50 mL) se doda i smeša se ponovo koncentruje pod vakuumom do približno 40 mL zapremine. Doda se 1 M vodeni rastvor HC1 (90 mL), a nakon toga TBME (150 mL) i smeša se energično meša 5 minuta. Vodeni sloj se sakupi i još jedanput ispere sa TBME (100 mL). Vodeni sloj se sakupi i zaalkališe do približno pH 12-13 (pH papir) koristeći koncentrovani vodeni rastvor NH3. Dobijena smeša se ekstrahuje u DCM (3 x 150 mL). Organske supstance se suše (Na2S04) i upare da se dobijejedinjenje 222(6.8 g, 90%) kao bledo bron ulje koje očvrsne stajanjem.<J>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 6.44 (tt, J = 53.8, 2.8 Hz, 1 H), 4.84 (td, J = 15.9, 2.8 Hz, 2H), 3.63 (s, 2H), 2.24 (s, 3H), [MH]<+>279.0 i 281.0 (60%).
Faza 8:
[0544]Di-terc-butil dikarbonat (5.6 g, 25.6 mmol) se na 20 °C, u porcijama (čvrst), u toku 5 minuta, dodaje urastvor jedinjenja 222(6.8 g, 24.4 mmol) u DCM (100 mL). Smeša se nakon toga koncentruju pod vakuumom i ostatak prečisti gasnom hromatografijom (20% EtOAc u heptanu) da se dobijejedinjenje 223(9.24 g, kvantitativno) kao ulje.<*>H NMR (400 MHz, DMSO-ć/e) 8 6.44 (tt, J = 53.7, 2.7 Hz, 1 H), 4.86 (td, J = 16.0, 2.7 Hz, 2H), 4.42 (s, 2H), 2.78 (s, 3H), 1.47 - 1.28 (m, 9H), [MH-Boc]<+>268 i 270 (40%).
Faza9:
[0545]Pd(t-Bu?P)2(240 mg) se u jednoj porciji doda usmešu jedinjenja 223(1.80 g, 4.75 mmol), KOAc (1.39 g, 14.3 mmol) i degasiranog IMS (95% EtOH, 18.0 mL). Smeša se nakon toga 60 minuta meša pod zračenjem mikrotalasima (120 °C). Nakon hlađenja, smeša se koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni (30% EtOAc u heptanima) da se dobijejedinjenje 224(1.25 g, 87%) kao ulje.<l>K NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 7.08 (s, 1 H), 6.42 (tt, J = 54.0, 2.9 Hz, 1 H), 4.80 (td, J = 15.8, 2.9 Hz, 2H), 4.36 (s, 2H), 2.79 (s, 3H), 1.38 (s, 9H), [MH-Boc]+ 201.06.
Faza 10:
[0546]HC1 (4M rastvor u dioksanu, 5.0 mL) se doda u rastvorjedinjenja 224(1.40 g, 4.66 mmol) i smeša se meša na 25 °C u toku noći. Smeša se koncentruje pod vakuumom i ostatak se prevede u suspenziju sa EtOAc (lOmL) i sakupi filtriranjem.Jedinjenje 225(980 mg, 89%) se dobija kao hidrohloridna so (čvrsta supstanca krem boje).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 9.47 (s, 2H), 7.44 (s, 1 H), 6.46 (tt, J = 53.8, 2.8 Hz, 1 H), 4.88 (td, J = 16.0, 2.7 Hz, 2H), 4.18 (s, 2H), 2.54 (s, 3H), [MH]<+>201.11.
Izradaterc-butil{[4-bromo-5-cijano-l-(2,2-difluoroetil)-l//-pirazol-3-il]metil}metilkarbamata (226)
[0547]
[0548]Postupci opisani u fazama 3-10 zajedinjenje 225se koriste za izradujedinjenja 226(30% prinos).<l>RNMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 9.57 (s, 2H), 7.30 (s, IH), 6.47 (tt, J = 54.2, 3.4 Hz, 1 H), 4.96 (td, J = 15.2, 3.4 Hz, 2H), 4.36 (s, 2H), 2.59 (s, 3H), [MH + CH3CN]<+>242.04.
Sinteza terc-butil ((5-cijano-l-oksetan-3-il)-l//-pirazol-3-il)metil)(metil) karbamata
(Jedinjenje 234)
[0549]
Faza1:
[0550] Jedinjenje 227(45.3 g, 0.256 mol) se rastvori u IMS (475 mL) i dodaju se (Boc)20 (58.6 g, 0.269 mol) i Pd(OH)2/C (4.0 g, 9 mt%). Reaktivna smeša se nakon toga meša tri sata na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika (50 psi) a zatim još dva sata zagreva na 50 °C. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reaktivna smeša se filtrira kroz celite, uz eluiranje sa dodatnom količinom UVIS i filtrat se koncentruje da se dobije braon ulje. Veći deo sirovog materijala (43.2 g) se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela (10% do 30% EtOAc u heptanima) da se dobijejedinjenje 228kao žuto ulje (29.5 g, 76% prinos, > 95% čistoće pomoću<J>H NMR).<*>H NMR ukazuje -1:1.1 smešu tautomera.<*>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 4.01 (s, 2H), 3.90 (s, 2H), 2.92 (s, 3H), 2.89 (s, 3H), 2.12 (s, 6H), 1.47 (s, 9H), 1.42 (s, 9H).
Faza 2:
[0551]Rastvor 5.4M NaOMe u MeOH (29.2 mL, 0.157 mol) se razblaži sa novom količinom MeOH (150 mL) i meša na sobnoj temperaturi u atmosferi azota. Kroz levak za ukapavanje se u toku 10 minuta dodajurastvor jedinjenja 228(29.5 g, 0.157 mol) i dietiloksalata (21.3 mL, 0.157 mol) u MeOH (40 mL) i dobijena žuta reaktivna smeša se zagreva na 50 °C. Nakon 3 sata, dodaju se nove količine dietiloksalata (2 mL, 0.015 mol) i rastvora NaOMe (2 mL, 0.011 mol) i zagrevanje nastavi još 30 minuta. Reakcija se ohladi na 5-10 °C i u porcijama se, u toku 10 minuta doda hidrazin monohidrohlorid (10.7 g, 0.157 mol), održavajući temperaturu u ovom opsegu. Reakcija se nakon toga ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša 60 sati. U reaktivnu smešu se dodaju H20 (200 mL) i slan rastvor (100 mL) a zatim se ekstrahuje sa EtOAc (3 x 200 mL). Kombinovani organski ekstrakti se isperu sa slanim rastvorom (100 mL), suše preko MgS04i koncentruju da se dobijejedinjenje 229kao žuto ulje, koje se koristi bez prečišćavanja (43.2 g).<!>H NMR (400 MHz, CDCb) S 6.72 (s, 1 H), 4.47 - 4.32 (m, 2H), 3.91 (s, 3H), 2.86 (s, 3H), 1.47 (s, 9H). LC-MS ES m/z 268 [M+H]<+>.
Faza3:
[0552] Jedinjenje 229(21.1 g, 78.3 mmol) se rastvori u MeOH (60 mL) i doda se 33% vodeni rastvor NH3(100 mL), a zatim se reaktivni rastvor meša na sobnoj temperaturi u toku noći. Zapremina MeOH se smanjuje pod vakuumom, sve dok ne počne da se formira precipitat. Smeša se ostavi da kristališe i precipitat se sakupi filtriranjem, ispere sa H20 (2 x 30 mL) i potpuno se osuši u vakuum pećnici (40 °C, u toku noći) da se dobije tautomerna smeša (-1:1)jedinjenja 230kao beličasta čvrsta supstanca (10.4 g, 53% prinos iz dve faze).<l>K NMR ukazuje na -1:1.2 smešu tautomera.<!>H NMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 13.27 (s, IH), 13.11 (s, IH), 7.91 (s, 1 H), 7.55 -7.33 (m, 2H), 7.15 (s, IH), 6.68 (d, J = 2.0 Hz, 1 H), 6.43 (d, J = 1.9 Hz, IH), 4.37 (s, 2H), 4.30 (s, 2H), 2.79 (s, 3H), 2.75 (s, 3H),1.41 (s, 18H). LC-MS ESm/ z252 [M+H]<+>.
Faza 4:
[0553] Jedinjenje 230(10.5 g, 41.3 mmol) se rastvori u piridinu (105 mL) i polako se kroz levak za ukapavanje dodaje POCh (9.6 mL, 103.2 mmol), održavajući temperaturu na približno 15 °C pomoću led/H20 kupatila za hlađenje. Reaktivna smeša se meša 90 minuta, u toku kog vremena postaje žuta a nakon toga tamno braon boje. U porcijama se smeša nakon toga sipa u H2O (250 mL), održavajući temperaturu na približno 30 °C dodavanjem leda. Kada se hidrolizuje, smeša se ekstrahuje sa EtOAc (3 x 100 mL) i kombinovani organski ekstrakti isperu sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(150 mL) a zatim se suše preko MgS04i koncentruju. Ostatak se azeotropira sa toluenom (3 x 100 mL) a nakon toga sa heptanom (3 x 100 mL) da se ukloni rezidualni piridin i da se dobijejedinjenje 231kao braon guma koja se koristi bez prečišćavanja (9.1 g, >85% čistoće pomoću<*>H NMR).<*>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 6.56 (s, 1 H), 4.31 (s, 2H), 2.89 (s, 3H), 1.48 (s, 9H). LC-MS ESm/ z235 [M+H]<+>.
Faza 5:
[0554] Sirovojedinjenje 231(9.1 g) se rastvori u DMF (85 mL) u atmosferi azota i doda se CS2CO3(37.6 g). Nakon toga se preko levka za ukapavanje polako dodaje rastvor oksetan-3-il trifluorometansulfonata232(9.5 g) u DMF (15 mL), održavajući temperaturu između 15-20 °C Nakon završenog dodavanja, reaktivna smeša se meša 90 minuta a zatim razblaži sa H2O (100 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (3 x 100 mL). Kombinovani organski ekstrakti se isperu sa slanim rastvorom (100 mL), suše preko MgS04i koncentruju da se dobije braon ostatak. Sirovi materijal se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela (1:2 EtOAc:heptani nakon toga 1:1 EtOAc:heptani) da se dobijejedinjenje 233kao žuto ulje (4.00 g, 30% prinos iz dve faze). 'HNMR (400 MHz, DMSO-</6) 8 7.14 - 6.89 (m, 1 H), 5.71 (tt, J = 7.6, 6.0 Hz, 1 H),4.96(t, 7=7.2Hz, 2H), 4.88(t, J=6.5 Hz, 2H), 4.41 (s, 2H),2.81 (s, 3H), 1.47 - 1.34 (m, 9H). Daljom eluacijom se dobija regioizomerni pirazol kao bezbojna čvrsta supstanca (3.28 g, 25% prinos iz dve faze).<l>KNMR (400 MHz, DMSO-rfe) 5 6.93 (s, 1 H), 5.77 (s, 1 H), 4.91 - 4.81 (m, 4H), 4.47 (s, 2H), 2.72 (s, 3H), 1.41 (s, 9H).
Faza 6:
[0555] Jedinjenje 233(0.50 g, 1.71 mmol) se rastvori u DCM (5 mL) i ohladi u ledenom kupatilu u atmosferi azota. Nakon toga se doda TFA (5 mL) i reaktivna smeša se meša dva sata za koje vreme se zagreje na sobnu temperaturu. Reakcija se koncentruje i rezidualni TFA se ukloni iz ostatka ko-evaporacijom sa DCM (2x10 mL) a nakon toga sa toluenom (2x10 mL). TFA sojedinjenja 234se dobija kao žuta guma (0.85 g).<l>R NMR (400 MHz, DMSO-d6)5 9.00 (s, 2H), 7.25 (s, 1 H), 5.78 (tt, J = 7.6, 5.9 Hz, 1 H), 5.00 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 4.89 (t, J = 6.4 Hz, 2H), 4.27 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.61 (t, J = 5.2 Hz, 3H).
Izrada 3-[(metilamino)metil]-l-(propan-2-il)-l/7-pirazol-5-karbonitril hidrohlorida (1:1)
(239)
[0556]
Faza1:
[0557]Di terc-butilazodikarboksilat (6.5 g, 28.2 mmol) se u porcijama (čvrstim), na 0 °C u toku 5 minuta, dodaje urastvor jedinjenja 229(8.0 g, 28.2 mmol), PI13P (7.4 g, 28.2 mmol) i izopropanola (2.55 g, 42.5 mmol) u THF (80 mL). Reakcija se nakon toga meša 2 sata na 0 °C do 20 °C. Reakcija se nakon toga koncentruje i ostatak prečisti gasnom hromatografijom (10% do 40% EtOAc u heptanima) da se dobijejedinjenje 235(7.1 g, 77%).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-g?6) 5 6.63 (d, J = 15.6 Hz, 1 H), 5.36 (hept, J = 6.6 Hz, 1 H), 4.37 - 4.23 (m, 4H),2.76 (s, 3H), 1.39 (t, J = 5.6Hz, 15H), 1.29 (t, J = 7.1 Hz, 3H), [MH]+ 326.12.
Faza 2:
[0558]NaOH (3.4 g, 87.3 mmol) se rastvori u vodi (6.0 mL) i rastvor doda u rastvorjedinjenja 235u MeOH i reakcija se meša 2 sata na 25 °C. Smeša se nakon toga razblaži sa vodom (250 mL) i zakiseli do približno pH 2 (pH papir), koristeći 5% vodeni rastvor NaHS04. Smeša se nakon toga ekstrahuje sa EtOAc (2 x 120 mL). Organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (lOOmL), suše (Na2S04) i upare, da se dobijejedinjenje 236(6.0 g, 92%) kao bela čvrsta supstanca.<l>HNMR (400 MHz, DMSO-rfe) 5 13.26 (s, IH), 6.58 (d, J = 11.4 Hz, IH), 5.42 (hept, J = 6.6 Hz, 1 H), 4.30 (s, 2H), 2.76 (s, 3H), 1.38 (m, 15H), [MH]<+>298.07.
Faza 3:
[0559]Karbonildiimidazol (3.56 g, 22.0 mmol) se na sobnoj temperaturi doda u rastvorjedinjenja 236u DMF (35 mL). Nakon 45 minuta mešanja, reakcija se ohladi na 0 °C i u toku 10 minuta se kroz smešu u mehurićima propušta amonijum gas. Reakcija se nakon toga ostavi da se meša 2 sata na sobnoj temperaturi, a nakon toga razblaži sa vodom (250 mL). Smeša se ekstrahuje u EtOAc (2 x 100 mL). Kombinovane organske supstance se isperu sa slanim rastvorom (200 mL), suše (Na2S04) i upare da se dobijejedinjenje 237(4.9 g, 83%) kao ulje koji stajanjem očvrsne.<J>H NMR (400 MHz, DMSO-</6) 8 7.92 (s, 1 H), 7.44 (s, 1 H), 6.65 (s, 1 H), 5.51 (hept, J = 6.6 Hz, 1 H), 4.38 - 4.24 (m, 2H), 2.76 (s, 3H), 1.40 (d, J = 4.1 Hz, 9H), 1.34 (d, J = 6.6 Hz, 6H), [MH]<+>297.11.
Faza 4:
[0560]Rastvor trifluorosirćetnog anhidrida u DCM (50 mL) se na 0 °C, u toku 10 minuta, polako dodaje u rastvorjedinjenja 237(4.90 g, 16.55 mmol) i Et3N (5.10 g, 50.0 mmol) u DCM (50 mL). Reakcija se meša 60 minuta na 0 °C, a zatim se doda voda (100 mL) i meša 10 minuta. Organski sloj se izdvoji, suši (Na2S04) i upari. Ostatak se prečisti gasnom hromatografijom (20% EtOAc u heptanima), da se dobijejedinjenje 238(3.95 g, 86%) kao bezbojno ulje.<l>K NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 6.95 (d, J = 15.2 Hz, 1 H), 4.72 (hept, J = 6.6 Hz, 1 H), 4.34 (s, 2H), 2.78 (s, 3H), 1.45 (d, J = 6.6 Hz, 6H), 1.43 - 1.34 (m, 9H), [MH-Boc]<+>179.14.
Faza 5:
[0561]HC1 (4M rastvor u dioksanu, 5.0 mL) se doda u rastvorjedinjenja 238(3.90 g, 14.0 mmol) u CH3CN i meša 60 minuta na 50 °C. Nakon hlađenja, reakcija se koncentruje i nakon toga se doda EtOAc (35 mL) i smeša se filtrira da se sakupijedinjenje 239(2.20 g, 88%) kao bela čvrsta supstanca.<l>RNMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 9.49 (s, 2H), 7.34 (s, 1 H), 4.79 (hept, J = 6.6 Hz, IH), 4.16 (s, 2H), 2.53 (s, 3H), 1.47 (d, J = 6.6 Hz, 6H), [MH]<+>179.14.
Izrada 5-bromo-3-[(lJ?)-2-fluoro-l-(5-fluoro-2-jodfenil)etoksi]pirazin-2-amina (241)
[0562]
Faza 1:
[0563] Jedinjenje 170se izdvoji preparativnom SFC da se dobije čistojedinjenje 240(4 g, 50%) kao žuto ulje.<l>K NMR (400 MHz, CDCb): 5 7.75-7.78 (m, IH), 7.34-7.37 (m, IH), 6.79-6.84 (m, IH), 5.17-5.24 (m, IH), 4.57-4.70 (m, IH), 4.17-4.34 (m, IH), 2.652-2.658 (s,
IH).
Faza 2:
[0564]U rastvorjedinjenja 240(3 g, 10.6 mmol) u anhidrovanom THF (100 mL) se na 0 °C u atmosferi N2doda NaH (464 mg, 11.6 mmol, 60% u ulju) i smeša se meša još 30 min. U gore pomenutu smešu se na 0 °C doda rastvorjedinjenja 12(2.141 g, 8.5 mmol) u bezvodnom THF (10 mL) i smeša se refluksuje 10 sati. THF se ukloni pod sniženim pritiskom i ostatak se razblaži sa smešom H2O (100 mL)/EtOAc (100 mL). Smeša se filtrira i filtrat se ekstrahuje sa EtOAc (100 mL x 3). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (100 mL), suše preko Na2S04i koncentruju da se dobije ostatak koji se prečisti na koloni silika gela uz eluiranje sa petrol etar : EtOAc = 60/1~10/1 da se dobijejedinjenje 241(2.6 g, 67%) kao žuta čvrsta supstanca. 'HNMR (400 MHz, CDCb): 5 7.81-7.8 (m, IH), 7.67
(s, 1 H), 7.09-7.12 (d, 1 H), 6.79-6.84(t, 1 H), 6.35-6.42 (q, 1 H), 4.91 (s, 2H), 4.59-4.81 (m, 2H), [M+H]<+>457.8.
Sinteza N-metil-l-(6-metilimidazo[l,2-a]pirimidin-2-il)metanamina(Jedinjenje 246)
[0565]
Faza1:
[0566]Suspenzijajedinjenja 242(50.0 g, 307 mmol) i sveže aktiviranog (ispran kiselinom) Zn (59.8 g, 920 mmol) u vodi (500 mL) se zagreva 3 sata pod refluksom. TLC pokazuje daje SM utrošen. Reaktivna smeša se ohladi na sobnu temperaturu, filtrira kroz celite ploču i ispere sa CH2CI2(500 mL). Faze filtrata se razdvoje i organska faza se ispere sa slanim rastvorom (300 mL), suši preko MgS04, pažljivo filtrira i koncentruje pod vakuumom da se dobijejedinjenje 243kao bež prašak (30.6 g, 78% prinos, 95% čistoće pomoću<J>H NMR).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 8.63 (d,J=0.9 Hz, 2H), 2.27 (t,J=0.8 Hz, 3H).
Faza 2:
[0567] Jedinjenje 243(30.6 g, 239 mmol) se rastvori u etanolu (300 mL) i vodenom rastvoru amonijaka (35%, 300 mL). Rastvor se prenese u reaktivni cilindar i zagreva 6 sati na 200 °C, ohladi na sobnu temperaturu, a nakon toga ostavi otvoreno 72 sata na ovoj temperaturi. Etanol se upari i ponovo se doda vodeni rastvor amonijaka (35%, 200 mL). Rastvor se zagreva 22 sata na 200 °C a nakon toga ohladi na sobnu temperaturu. Smeša se koncentruje pod vakuumom, nakon toga se doda voda (50 mL) i dobijena suspenzija filtrira. Dobijeni bež
prašak se suši 20 sati u vakuum pećnici da se dobije čistojedinjenje 244(16.7 g, 64% prinos,
>95% čistoće pomoću<!>H NMR).<l>R NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 8.07 (s, 2H), 6.33 (s, 2H), 2.03 (s, 3H). LC-MSm/ z109 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0568] Jedinjenje 244(5.0 g, 45.9 mmol) i dihloraceton (29.1 g, 229.3 mmol) se mešaju sa toluenom (1 L). Boca se opremi sa Dean-Stark aparaturom i smeša se zagreva 1 sat na 155 °C (sve dok se refluksujući toluen ne uoči na vrhu Dean-Stark aparature). Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu i dodaju se CH2CI2(500 mL) i silka gel. Dobijena smeša se stavi direktno na vrh kolone za hromatografiju i na ovaj način prečisti (eluenti CH2Ci2/MeOH od 100:0 do 80:20). Frakcije koje sadržejedinjenje 245se kombinuju, koncentruju pod vakuumom i prečiste na SCX-2 koloni. Frakcije koje sadrže očekivanojedinjenje 245se ponovo prečiste hromatografijom na koloni silika gela (eluenti CH2Cb/MeOH od 100:0 do 95:5) da se dobije očekivanojedinjenje 245kao bledo žuto ulje (1.4 g, 16% prinos, 95% čistoće pomoću LC-MS). JH NMR (400 MHz, DMSO-ofe) 5 8.76 (dq, J = 2.3, 1.1 Hz, 1 H), 8.45 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 7.88 (s, 1 H), 4.85 (d, J = 0.6 Hz, 2H), 2.29 (d, J = 1.1 Hz, 3H). LC-MSmlz182/184
[M+H]<+>.
Faza 4:
[0569] Jedinjenje 245(1.4 g, 7.7 mmol) se rastvori u CH2CI2(70 mL) i rastvor se doda u rastvor N-metilamina u smeši MeOH/THF (2 M, 145 mL, MeOH/THF = 1:4). Boca se zatvori i žuti rastvor se meša 24 sata na sobnoj temperaturi. TLC pokazuje daje SM utrošen. U rastvor se u kapima doda rastvor HC1 u dioksanu (1 mL, 4 M). Smeša se koncentruje a nakon toga se doda CH2CI2(10 mL). Dobijena suspenzija se filtrira da se dobije bež čvrsta supstanca koja sadrži hidrohloridnu so oba očekivana amina i N-metil amina. Čvrste supstance se rastvore u MeOH (150 mL) i doda se Amberlvst A-26 (40 mL). Smeša se koncentruje pod vakuumom a nakon toga filtrira. Filtrat se koncentruje da se dobijejedinjenje 246(500 mg, 37% prinos, 99% čistoće pomoću LCMS).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 8.73 (dq,J =2.3, 1.1 Hz, 1 H), 8.35 (d,J=2.4 Hz, 1 H), 7.65 (s, 1 H), 3.73 (d,J=0.8 Hz, 2H), 2.32 (s, 3H), 2.28 (d, J= 1.0 Hz, 3H). LC-MSmlz Ml[M+H]<+>.
Izrada terc-butil-2-bromo-3-cijanobenzil(metil)karbamata (Jedinjenje 252)
[0570]
Faza 1:
[0571]Urastvor jedinjenja 247(15 g, 69.8 mmol) u CH2CI2(100 mL) se na 0 °C dodaju TEA (7.76 g, 76.7 mol) i izo-butilhloroformat (10.4 g, 76.7 mmol). Nakon dodavanja, smeša se meša 30 minuta na 0 °C. TLC (CH2CI2/ MeOH = 10:1) pokazuje daje reakcija završena. Nakon toga se na 0 °C u smešu doda NH3*H20 (27.9 g, 0.28 mol, 35% rastvor u H20). Dobijena smeša se meša 30 minuta na ovoj temperaturi. TLC (petrol etar / EtOAc = 8:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se sipa u ledenu vodu (200 mL). Čvrsta supstanca se filtrira i vlažna pogača se ispere sa H2O (50 mL) i suši da se dobijejedinjenje 248(12 g, 80%) kao bela čvrsta supstanca.<l>R NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 7.70 (brs, 1 H), 7.55 (brs, 1 H), 7.35 (m, 1 H), 7.30 (m, 1 H), 7.15 (m, 1 H), 2.38 (s, 3H).
Faza 2:
[0572]Urastvor jedinjenja 248(12 g, 56.1 mmol) u DMF (100 mL) se na 0 °C, u atmosferi azota, doda rastvor cijanurin hlorida (15.47 g, 84.1 mol) u DMF (50 mL). Nakon dodavanja, smeša se meša na sobnoj temperaturi u toku noći. TLC (petrol etar / EtOAc = 1:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se sipa u vodu (500 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (200 mL x 2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom Na2C03(200 mL x 2), slanim rastvorom (200 mL x 4), suše preko Na2S04i koncentruju da se dobijejedinjenje249(11 g, 100%) kao beličasta čvrsta supstanca.<l>RNMR (400 MHz, CDCh): 5 7.51-7.45 (m, 2H), 7.33-7.29 (m, 1 H), 2.47 (s, 3H).
Faza 3:
[0573]Smeša jedinjenja 249(11 g, 56.1 mmol), NBS (10 g, 56.1 mmol) i BPO (81 mg, 0.34 mmol) u CCU (150 mL) se zagreva pod refluksom u toku noći. TLC (petrol etar / EtOAc = 5:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se filtrira i filtrat se koncentruje. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (petrol etar / EtOAc = 20:1) da se dobijejedinjenje 250(9.6 g, 62%) kao bela čvrsta supstanca.<J>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 7.69-7.67 (d, IH), 7.63-7.61 (d, IH), 7.45-7.41 (t, IH), 4.61 (s, 2H)
Faza 4:
[0574] Urastvor jedinjenja250 (11.9 g, 43.3 mmol) u THF (100 mL) se na -10 °C~0 °C, u atmosferi azota, doda rastvor metilamina (2M rastvor u THF, 215 mL, 0.43 mol). Nakon dodavanja, smeša se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša 2 sata. TLC (petrol etar /EtOAc = 5:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se razblaži sa vodom (200 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (200 mL x 2). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (200 mL), suše preko Na2S04i koncentruju da se dobijejedinjenje 251(8.9 g, 91 %) kao žuta čvrsta supstanca.<l>HNMR (400 MHz, CDCh) 5 7.67-7.65 (d, 1 H), 7.58-7.56 (d, IH), 7.43-7.39 (t, IH), 3.87 (s, 2H), 2.47 (s, 3H).
Faza 5:
[0575] Urastvor jedinjenja251 (8.7 g, 38.6 mmol) u CH2CI2(100 mL) se na sobnoj
temperaturi dodaju TEA (11.7 g, 0.11 mol) i B0C2O (8.9 g, 40.5 mmol). Smeša se meša 3 sata na sobnoj temperaturi. TLC (CH2O2/ MeOH = 10:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (petrol etar / EtOAc = 40:1) da se dobije jedinjenje 252 (10.71 g, 85%) kao bezbojna guma. !H NMR (400 MHz, CDCh) 5 7.58 (m, 1 H), 7.45-7.38 (m, 2H), 4.56-4.50 (m, 2H), 2.93-2.89 (m, 3H), 1.52-1.40 (m, 9H). MSm/ z347 [M+Na]<+>.
Izrada2-{(U?)-l-[(3-amino-6-bromopirazin-2-il)oksi] etil}-4-fluorobenzoeve kiseline
(254)
[0576]
[0577]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 41se koristi za izradujedinjenja 254(0.56 g, 89% prinos).<l>U NMR (400 MHz, DMSO-^6) 5 7.92 (dd, J = 8.7, 6.0 Hz, 1 H), 7.67 (dd, J = 10.5, 2.7 Hz, IH), 7.52 (s, IH), 7.19 (td, J = 8.4, 2.7 Hz, IH), 6.88 (q, J = 6.4 Hz, IH), 6.68 (s, 2H), 1.57 (d, J = 6.3 Hz, 3H), [MH]<+>356.03 (8%) i 357.95 (8%).
Izrada 2-((metilamino)metil)imidazo[l,2-a]piridin-6-karbonitrila (264)
[0578]
Faza 1:
[0579]Smešajedinjenja 255(50 g, 0.329 mmol) i l-hlorpropan-2-ona (448.4 g, 4.87 mol) u EtOH (150 mL) se zagreva 24 sata pod refluksom. TLC (petrol etar/EtOAc = 1:1) pokazuje da je preostalo približno pola odjedinjenja 255.Nakon refluksa u toku još 12 sati se ne uočava promena. Smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak koji se rastvori u CH2CI2(200 mL), ispere sa vodenim rastvorom NaHC03(2 N, 50 mL) i slanim rastvorom (50 mL), suši preko Na2S04i koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (smeša petrol etar/EtOAc = 2:1-1:1) da se dobijejedinjenje 256(18 g, 44%) kao žuta čvrsta supstanca.<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.82 (s, IH), 7.67-7.65 (m, IH), 7.81-7.48 (m, IH), 7.41 (s, IH), 3.94 (s, IH), 2.47 (s, IH)
Faza 2:
[0580]U rastvorjedinjenja 256(16 g, 0.089 mol) u CH3CN (400 mL) se na sobnoj temperaturi doda Br2(15.62 g, 0.098 mol). Dobijena smeša se meša 1 sat na sobnoj temperaturi. TLC (EtOAc) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se razblaži sa CH2CI2(500 mL) a nakon toga ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(100 mL), slanim rastvorom (100 mL), suši preko Na2S04i koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (smeša petrol/CH2Cb = 2:1-1:1) da se dobijejedinjenje257 (15 g, 66%) kao žuta čvrsta supstanca.<l>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 9.02 (s, IH), 8.44-8.42 (m, IH), 8.37-8.34 (m, 1 H), 4.07 (s, 3H), 2.74 (s, 3H).
Faza3:
[0581]Usmešu jedinjenja 257(16 g, 0.0625 mol) i NBS (9.95 g, 0.05625 mol) u CH2CICH2CI (375 mL) se na sobnoj temperaturi, u atmosferi azota, doda A1BN (1.025 g, 0.00625 mol). Dobijena smeša se zagreva 2 sata pod refluksom. TLC (petrol etar/EtOAc = 3:1) pokazuje daje najveći deojedinjenja 257utrošen. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(50 mL), slanim rastvorom (50 mL), suši preko Na2S04i koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (smeša petrol etar/EtOAc = 4:1-1:1) a nakon toga rekristališe iz smeše petrol etar/EtOAc (5:1, 30 mL) da se dobijejedinjenje 258(14 g, 67%) kao žuta čvrsta supstanca.<l>ttNMR (400 MHz, CDCh) 5 8.85-8.75 (m, IH), 7.88-7.80 (m, 1 H), 7.62-7.55 (m, 1 H), 4.67 (s, 2H), 4.00 (s, 3H).
Faza 4:
[0582]Urastvor jedinjenja 258(14 g, 41.92 mmol) u anhidrovanom THF (200 mL) se u toku jednog minuta dodaje metilamin u THF (520 mL, 1.048 mol, 2 M rastvor u THF). Dobijena smeša se meša 1 sat na 0 °C a nakon toga 1 sat na sobnoj temperaturi. TLC (petrol etar/EtOAc = 3:1) pokazuje daje najveći deojedinjenja 258utrošen. Smeša se koncentruje pod vakuumom 20 minuta na 25 °C a nakon toga na višoj temperaturi da se dobije sirovi produkt koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, (smeša petrol etar/EtOAc = l:l~CH2Cl2/MeOH = 50:1) da se dobijejedinjenje 259(8.4 g, 67%) kao žuta čvrsta supstanca. JH NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.85 (m, 1 H), 7.84-7.81 (m, 1 H), 7.60-7.52 (m, 1 H), 4.18-4.15 (s, 2H), 4.00 (s, 3H), 2.65 (s, 3H)
Faza5:
[0583]U suspenzijujedinjenja 259(8.4 g, 28.28 mmol) u CH2CI2(250 mL) se na sobnoj temperaturi dodaju B0C2O (12.5 g, 56.56 mmol) i DMAP (3.47 g, 28.28 mmol). Dobijena smeša se meša 12 sati na sobnoj temperaturi. TLC (C^Ck/MeOH = 20:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (smeša petrol etar/EtOAc= 10:1-5:1) da se dobijejedinjenje 260(7.5 g, 67%) kao žuta čvrsta supstanca.<l>K NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.86 (s, 1 H), 7.80-7.78 (m, 1 H), 7.59-7.56 (m, 1 H), 4.68 (s, 2H), 4.00 (s, 3H), 3.95 (s, 3H), 1.50 (s, 9H)
Faza 6:
[0584]Reakcija se izvodi u serijama od 3 x 1 g:rastvor jedinjenja 260(1 g, 2.519 mmol) u smeši NH3(g)/MeOH (7 N, 70 mL) se zatvori i zagreva 12 sati na 80 °C. TLC (petrol etar/EtOAc =1:1) pokazuje daje reakcija završena. Reakcije se kombinuju i koncentruju pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (smeša petrol etar/EtOAc = 5:1-1:1) da se dobijejedinjenje 261(2.4 g, 83%) kao žuta čvrsta supstanca. JH NMR (400 MHz, Metanol-^) 5 8.90 (s, IH), 7.90-7.82 (m, IH), 7.65-7.55 (m, 1 H), 4.65 (s, 2H), 2.95-2.84 (m, 3H), 1.45 (s, 9H).
Faza7:
[0585]Urastvor jedinjenja 261(2.4 g, 6.28 mmol) u anhidrovanom CH2CI2(50 mL) se na 0 °C doda Et3N (2.6 mL, 18.85 mmol) a nakon toga u kapima TFAA (1.73 mL, 12.57 mmol). Dobijena smeša se meša 2 sata na 0 °C. TLC (petrol etar/EtOAc =1:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak, koji se podeli između CH2CI2(100 mL) i slanog rastvora (20 mL). Organski sloj se izdvoji, ispere sa limunskom kiselinom (1 N, 10 mL), zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(10 mL) i slanim rastvorom (10 mL), suši preko Na2S04i koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (smeša petrol etar/EtOAc = 5:1-1:1) da se dobijejedinjenje 262(2.1 g, 92%) kao žuta čvrsta supstanca.<l>KNMR (400 MHz, CDCb) 5 8.55 (s, IH), 7.68-7.65 (m, IH), 7.35-7.26 (m, IH), 4.66 (s, 2H), 2.93 (s, 3H), 1.47 (s, 9H). LCMS m/z 308 [M-55]<+>.
Faza 8:
[0586]Urastvor jedinjenja 262(0.45 g, 1.23 mmol) u MeOH (80 mL) se na sobnoj temperaturi doda Pd/C (150 mg). Dobijena smeša se tri puta prečisti sa H2i meša 2 sata na sobnoj temperaturi pod pritiskom H2(15 psi). TLC (petrol etar/EtOAc = 3:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se filtrira i ispere sa MeOH (30 mL). Filtrat se koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, (smeša petrol etar/EtOAc = 5:1) da se dobijejedinjenje 263(0.18 g, 51%) kao bela čvrsta supstanca. 'HNMR (400 MHz, Metanol-^) 5 8.52 (s, IH), 7.64-7.50 (m, 2H), 7.27 (s, 1 H), 4.59 (s, 2H), 2.98 (s, 3H), 1.50 (s, 9H).
Faza 9:
[0587]Urastvor jedinjenja 263(0.18 g, 0.627 mmol) u CH2CI2(10 mL) se na sobnoj temperaturi doda HC1 (g)/EtOAc (7 N, 20 mL). Dobijena smeša se meša 12 h na sobnoj temperaturi. Smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobijejedinjenje 264(0.15 g, 100%) kao bela čvrsta supstanca.<l>RNMR (400 MHz, Metanol-d*) 5 9.48 (s, 1 H), 8.48 (s, 1 H), 8.15-8.05 (m, 2H), 4.58 (s, 2H), 2.85 (s, 3H)
Izrada 3-((metilamino)metil)izoksazol-5-karbonitrila (Jedinjenje 272)
[0588]
Faza1:
[0589]U izmešani rastvorjedinjenja 265(52 g, 0.64 mol) u H2O (830 mL) se na sobnoj temperaturi dodaju NH2OH.HCI (50 g, 0.71 mol) iNaOAc (59 g, 0.71 mol). Nakon dodavanja, smeša se meša 1 sat na sobnoj temperaturi. Nakon toga se rastvor ekstrahuje sa MTBE (2 x 500 mL), kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (200 mL x 3), suše preko Na2SCMi koncentruju da se dobije sirovojedinjenje 266(40 g) kao svetio žuto ulje, koje se koristi u sledećoj fazi bez prečišćavanja.
Faza 2:
[0590]U izmešani rastvorjedinjenja 266(40 g, 0.437 mol) u THF (150 mL) se na 0 °C, u kapima, doda etil propiolat (50 mL, 0.5 mol). U gore pomenutu smešu se u kapima, na 0 °C, dodaNaOCl (10%, 1.5 L). Nakon dodavanja, smeša se meša 18 sati na sobnoj temperaturi. Smeša se koncentruje da se ukloni THF i ekstrahuje sa EtOAc (2 x 500 mL). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (200 mL x 3), suše preko Na2S04i koncentruju da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (Rf ~ 0.5, petrol etar/EtOAc = 10:1-5:1) da se dobijejedinjenje 267(11 g, 12.2 %) kao svetio žuta čvrsta supstanca.<*>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.05 (s, 1H), 4.64 (s, 2H), 4.49-4.41 (m, 2H), 11.46-1.43 (t, 3H).
Faza3:
[0591]U izmešani rastvor NH3(g) u MeOH (12N, 100 mL) se na 0 °C dodajedinjenje 267(11 g, 0.058 mol). Nakon dodavanja, smeša se meša 10 minuta na sobnoj temperaturi. TLC (petrol etar/EtOAc =1:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se koncentruje da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silka gela (Rf = 0.2, petrol etar/EtOAc = 1:1-2:1) da se dobijejedinjenje 268(6.5 g, 70 %) kao bela čvrsta supstanca.<l>KNMR (400 MHz, CDCb) 5 7.06 (s, 1 H), 6.2 (s, 1 H), 5.74 (s, 1 H), 4.63 (s, 2H).
Faza 4:
[0592]Ova reakcija se izvodi u serijama od 3 x 2 g. Smešajedinjenja 268(2 g, 13 mmol) i metilamina (2M rastvor u THF, 15 mL) se zagreva 18 sati u zatvorenoj posudi na 110 °C. TLC (EtOAc) pokazuje daje reakcija završena. Reakcije se kombinuju, filtriraju i filtrati se koncentruju da se dobije sirovojedinjenje 269(2.5 g, 43%) kao žuta čvrsta supstanca.<l>H NMR (400 MHz, Metanol-^) 5 7.00 (s, 1 H), 3.89-3.88 (s, 1 H), 2.44 (s, 3H).
Faza 5:
[0593]U izmešanirastvor jedinjenja 269(2.5 g, 16 mmol) i B0C2O (5.2 g, 24 mmol) u bezvodnom THF (30 mL) se na 0 °C doda TEA (3.2 g, 32 mol). Nakon dodavanja, smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc =1:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se koncentruje da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (Rf = 0.46, petrol etar/EtOAc = 3:1) da se dobijejedinjenje 270(2.5 g, 61 %) kao žuto ulje. 'HNMR (400 MHz, CDCb) 5 6.96 (s, 1 H), 6.51 (s, 1 H), 6.02 (s, 1 H), 4.52 (s, 2H), 2.89-2.86 (s, 3H), 1.47 (s, 9H).
Faza 6:
[0594]U izmešanirastvor jedinjenja 270(2.5 g, 10 mmol) i TEA (4.2 mL, 30 mmol) u bezvodnom DCM (30 mL) se na 0 °C, u atmosferi azota, doda TFAA (4.32 g, 20 mol). Nakon dodavanja, smeša se meša 12 sati na 0 °C. TLC (smeša petrol etar/EtOAc =3:1) pokazuje da je reakcija završena. Smeša se ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NaHCCb(50 mL) i slanim rastvorom (50 mL x 2), suši preko Na2S04i koncentruje da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (Rf = 0.4, petrol etar/EtOAc = 10:1) da se dobijejedinjenje 271(1.3 g, 56.5 %) kao svetio žuto ulje.<l>K NMR (400 MHz, CDCb) 5 6.96 (s, 1 H), 4.52 (s, 2H), 2.87 (s, 3H), 1.47 (s, 9H).
Faza 7:
[0595]U izmešanirastvor jedinjenja 271(1.3 g, 5.5 mmol) u EtOAc (2 mL) se na sobnoj
temperaturi doda smeša HC1 (g)/EtOAc (6N, 10 mL). Nakon dodavanja, smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc =1:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se koncentruje da se dobijejedinjenje 272(1 g, 100%) kao hidrohloridna so.<*>H NMR (400 MHz, DMSO-c/e) 5 9.72 (s, 2H), 7.85 (s, IH), 4.43 (s, 2H), 2.63 (s, 3H).
Izrada (l/?)-l-(3,5-difluoro-2-jodfenil)etanola (Jedinjenje 279)
[0596]
Faza 1:
[0597]3,5-difluorobenzoeva kiselina (80 g, 506 mmol) i sumporna kiselina ( 250 ml) se mešaju jedan sat na sobnoj temperaturi. Nakon toga se doda azotna kiselina (90 ml), održavajući unutrašnju temperaturu ispod 45°C sa vodenim kupatilom. Smeša se ostavi na sobnoj temperaturi u toku noći. Reakcija se polako sipa na led i dobijena čvrsta supstanca se filtrira i ispere sa hladnom vodom da se dobijejedinjenje 273kao bela čvrsta supstanca (93.0 g, 91% prinos). Ovaj materijal se prenese u sledeću fazu bez naknadnog prečišćavanja.<J>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 8.01 (ddd, J=10.9, 8.5, 2.8 Hz, 1 H), 7.71 (dt, J=8.4, 2.2 Hz, 1
H).
Faza 2:
[0598] Jedinjenje 273(80 g, 394 mmol) i paladijum na ugljeniku (9 g, 10% mt) u EtOAc (900 ml) se mešaju 4 sata na sobnoj temperaturi u atmosferi H2(50 bar). Reaktivna smeša se filtrira preko ploče silika gela i celite i rastvarač se ukloni pod vakuumom da se dobijejedinjenje 274kao bledo žuta čvrsta supstanca (67.39 g, 99% prinos, -95% čistoće - NMR). Ovaj materijal se prenese u sledeću fazu bez naknadnog prečišćavanja.<J>H NMR (400 MHz, DMSO-^6) 5 7.39 (ddd, J= 11.5, 8.4, 3.0Hz, 1 H), 7.3 (ddd, J=9.6, 3.0, 1.8 Hz, 1 H).
Faza3:
[0599] Jedinjenje 274(53.8 g, 311 mmol) se rastvori u vodenom rastvoru HC1 (2M, 800 ml) i ohladi na 0-5 °C. Natrijum nitrit (21.44 g, 311 mmol) se rastvori u vodi (344 ml) i dodaje se u dati rastvor u toku 15 minuta. Ova smeša se meša 2 sata na 0-5 °C, nakon toga prenese u konusnu bocu i održava hladnom. U novu bocu ogruglog dna se dodaju kalijum jodid (103.25 g, 622 mmol) i bakar jodid (29.61 g, 156mmol) u vodi (344 ml). Ova smeša se ohladi na 0-5°C a nakon toga se polako doda prethodna smeša. Nakon dodavanja, reaktivna smeša se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša 16 sati. Suspenzija se filtrira i dobijena čvrsta supstanca se prevede u žitku masu u etil acetatu (860 ml) u toku 1 sat. Ovaj rastvor se ponovo filtrira i osnovni rastvori se isperu sa natrijum metabisulfatom (10%, 4<*>600ml)) i slanim rastvorom (600ml). Nakon sušenja na MgS04i uklanjanja rastvarača pod vakuumom,Jedinjenje 275se izdvoji kao bledo žuta čvrsta supstanca (55.35 g, 63% prinos, 90% čistoće-NMR).<l>K NMR (400 MHz, CDCh) 5 7.60 (ddd, J=8.5, 2.9, 1.5 Hz, 1 H), 7.07 (J=7.8, 2.8 Hz, 1 H), [M-H+]-282.74.
Faza 4:
[0600]Tionil hlorid (142 ml, 1940 mmol) se dodau jedinjenje 275(55.0 g, 194 mmol) i smeša se zagreva 3.5 sata na 80 °C. Reakcija se nakon toga ohladi na sobnu temperaturu i tionil hlorid se ukloni pod sniženim pritiskom a nakon toga azeotropira sa toluenom.Jedinjenje 276se izdvoji kao narandžasto ulje (56 g, kvantitativno).<!>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 7.6 (ddd, J=8.4, 2.8, 1.4 Hz, 1 H), 7.09 (td, J= 7.7, 2.8 Hz, 1 H), [M+H+]-298.
Faza 5:
[0601]Ova reakcija se izvodi u 7 serija od po 5 gjedinjenje 276u svakoj. Magnezijum hlorid (2.35 g, 24.6 mmol) i dietil malonat (3.95 g, 24.6 mmol) se suspenduju u acetonitrilu (50 ml). Dobijena smeša se ohladi na 0°C, nakon toga se u kapima, na 0°C, doda trietilamin (3.42 ml, 24.6 mmol) i reakcija se meša 45 min na 0 °C. U ovu smešu se na 0 °C brzo doda rastvorjedinjenja 276(5 g, 16.4 mmol) u acetonitrilu (20ml). Rastvor se zagreje na sobnu temperaturu i meša 3 sata. Rastvarači se uklone pod sniženim pritiskom a ostatak se razblaži sa EtOAc (350ml) i razblaženim rastvorom HC1 (1 M, 300 ml). Vodena faza se ispere sa EtOAc (3<*>300 ml), nakon toga se organske faze kombinuju, suše preko MgS04, filtriraju i rastvarači se uklone pod sniženim pritiskom da se dobijejedinjenje 277kao narandžasto ulje (kombinovano sirovo 68.9 g)<J>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 7.49-7.43 (m, IH), 7.22 (ddd, J= 8.5, 2.7, 1.2 Hz, IH), 4.11-3.99 (m, 4H), 1.99 (s, IH), 1.20 (m, 6H); [M-H+]= 424.89, 426.14, 426.92(10/1).
Faza 6:
[0602]Ova reakcija se izvodi u 2 serije koje se kombinuju pre izrade (37.6 g + 31.34 g).Jedinjenje 277(37.6 g, 88.2 mol) i litijum hlorid (3.74 g, 88.2 mmol) se rastvore u DMF (170 ml) i vodi (17 ml) i zagrevaju 4 sata na 100°C. Reakcija se ostavi da se ohladi na RT a nakon toga se dodaju voda (150 ml) i TBME (150 ml). Faze se razdvoje i vodeni sloj se ispere sa TBME (3<*>150 ml). Organske faze se kombinuju i isperu sa vodom (500 ml), suše preko MgS04, filtriraju, a nakon toga upare pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti bezvodnom gasnom hromatografijom (eluent: Hept/EtOAc 98:2 do 9:1) da se dobijejedinjenje 278kao narandžasta čvrsta supstanca (21.34 g, 65% prinos preko 3 faze, 88% čistoće pomoću LCMS).
'HNMR (400 MHz, DMSO-Ć&) 5 7.53-7.51 (m, 1 H), 7.50-7.48 (m, 1 H), 2.57 (s, 3H), [M-F+MeCN]= 293.03, 293.79 (1/10).
Faza 7:
[0603]Rastvor (+)DIP-C1 (17.1 g, 53.2 mmol) u THF(24 ml) se ohladi na -35 °C. Nakon toga se u kapima doda rastvorjedinjenja 278(7.5 g, 26.5 mmol ) u THF (20 ml), održavajući unutrašnju temperaturu reakcije između -35 i -30 °C. Reakcija se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša 12 sati. TLC analiza potvrđuje daje reakcija završena. Rastvarači se uklone pod vakuumom i ostatak se razblaži sa TBME (64.5 ml). Doda se smeša dietanolamina (9.16 g, 87.45 mmol) u smeši etanol/THF (3.75 ml / 7.5 ml). Reaktivna smeša se meša 3 sata pod refluksom, a nakon toga ohladi na sobnu temperaturu i filtrira. Osnovni rastvori se koncentruju pod vakuumom i dobijeni ostatak se prečisti hromatografijom na koloni (eluent: Hep/EtOAc 99:1 do 9:1). Dobijeno bezbojno ulje se dalje prečisti rekristalizacijom iz heptana da se dobijejedinjenje 279kao bela čvrsta supstanca (5.02 g, 67% prinos, 95% čistoće pomoću NMR, 99% ee-asimetrične GC analize). 'HNMR (400 MHz, DMSO-g?6) 5 7.28-7.12 (m, 2H), 5.64 (d, J= 4.2 Hz, 1 H), 4.86 (q, J= 6.4 Hz, 1 H), 1.27 (d, J+ 6.4 Hz, 3H), [M-F+H20-H+]-279.12/280.92 (1:1), HPLC (CP-chiralsildex- CB kolona): 99% ee; Rt(manje)- 18.23 min; Rt(veće)-18.55min; 40 °C do 225 °C po 6 °C po minutu.
Izrada di-terc-butil [(4-bromo-5-cijano-l-metil-l^T-pirazol-3-il)metil]imido-dikarbonata
(Jedinjenje 282)
[0604]
Faza 1:
[0605] Rastvor jedinjenja 280(10 g, 0.21 mol) u NH3(g)/McOH (150 mL) se meša na 45 °C u toku noći u zatvorenoj epruveti. TLC (smeša petrol etar/EtOAc = 3: 1) pokazuje dajejedinjenje 9utrošeno. Reaktivna smeša se koncentruje. Ostatak se rekristališe iz smeše CH2Ch/petrol etar da se dobijejedinjenje 281(6.6 g, 72. 6%) kao bledo smeđa čvrsta supstanca. 'HNMR (400 MHz, DMSO) 5 8.00 (s, 1H),7.82 (s, IH), 4.64 (s, 2H), 3.85 (s, 3H), 1.38 (s, 18H).
Faza 2:
[0606]U smešujedinjenja 281(58 g, 20.5 mol) i Et3N (4.6 g, 45.6 mmol) u bezvodnom CH2CI2(100 mL) se u kapima, na 0~-5 °C doda TFAA (6.4 g, 30.5 mol). Nakon dodavanja, smeša se meša 1.5 sat na 0 °C. TLC (petrol etar: EtOAc = 1:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se razblaži sa CH2CI2(100 mL), ispere sa 5% limunskom kiselinom (50 mL), koncentrovanim NaHC03(50 mL) i slanim rastvorom (50 mL), suši preko natrijum sulfata i koncentruje. Ostatak se prečisti na biotag koloni (smeša petrol etar/EtOAc 6/1, Rf = 0.5) da se dobijejedinjenje 282(5.8 g, 92.2%) kao bela čvrsta supstanca.<*>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 4.797 (s, 2H), 3.988 (s, 3H), 1.481 (s, 18H). LC-MS: m/z za C16H23BrN404 [M+Na]<+>439.2.
Izrada metil 2-{l-[(3-amino-6-bromopirazin-2-il)oksi]etil}-4-fluorobenzoata (283).
[0607]
[0608] Postupak opisan u fazi 1 za Primer 89 se koristi za izradu jedinjenja 283.
Izrada metil 2-{[(3-amino-6-bromopirazin-2-il)oksi]metil)-4-fluorobenzoata (Jedinjenje 287)
[0609]
Faza 1:
[0610] Jedinjenje 284(5.00 g, 18.80mmol) se rastvori u THF (50mL) i ohladi na 0°C u atmosferi azota. Bordimetilsulfid (3.57mL, 37.60mmol) se u kapima, uz mešanje, doda i reaktivna smeša zagreje na sobnu temperaturu. Meša se 16 sati na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se pažljivo neutrališe sipanjem na led i dodavanjem 10% vodenog rastvora K2CO3(50mL). Smeša se ekstrahuje sa DCM (2 x 50mL) i kombinovani organski ekstrakti se suše preko MgSCUi koncentruju pod vakuumom da se dobijejedinjenje 285kao bezbojna čvrsta supstanca (4.80g, 91% prinos).lK NMR(400 MHz, CDCh): S 7.68 (dd, 1 H, J = Hz), 7.19 (dd, 1 H, J = Hz), 6.70 (td, 1 H, J = Hz), 4.57 (d, 2H, J = Hz), 1.95 (t, 1 H, J = Hz).
Faza 2:
[0611]Jedinjenje 285(4.80g, 19.05mmol) se rastvori u bezvodnom THF (80mL) i ohladi na 0°C u atmosferi azota. U porcijama se doda NaH (60% disperzija u mineralnom ulju, 831 mg, 20.77mmol) i smeša meša 30 minuta na sobnoj temperaturi. Ponovo se ohladi na 0°C i doda se rastvor 3,5-dibromopirazin-2-amina (4.38g, 17.31mmol) u THF (40mL). Reaktivna smeša se nakon toga zagreva 18 sati pod refluksom. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, smeša se upari pod vakukumom da se dobije tamno bron ulje. U ovo ulje se doda 10% vodeni rastvor K2CO3(lOOmL) i ekstrahuje sa EtOAc (3 x lOOmL). Kombinovani organski ekstrakti se isperu sa slanim rastvorom (lOOmL), suše preko MgS04i upare pod vakukumom da se dobije bledo mrka čvrsta supstanca. Supstanca se prečisti gasnom hromatografijom uz eluiranje sa smešom DCM:heptani 3:1a nakon toga sa DCM da se dobijejedinjenje 286kao bledo žuta čvrsta supstanca (5.80g, 79% prinos).<*>H NMR (400 MHz, CDCh): 5 7.84 (dd, 1 H, J = 8.7, 5.5 Hz), 7.70 (s, 1 H), 7.21 (dd, 1 H, J = 9.7, 3.0 Hz), 6.84 (td, 1 H, J = 8.3, 3.0 Hz), 5.38 (s, 2H), 4.82 (br. s, 2H); [MH+]-425.80.
Faza 3:
[0612] Jedinjenje 286(5.20g, 12.26mmol) se delimično suspenduje u MeOH (50mL) i doda se THF (25mL) da se rastvori u reaktivnoj kapsuli. Dodaju se DIPEA (10.61mL, 61.30mmol), DPE-Phos (792mg, 12mol%) i Pd(OAc)2(165mg, 6 mol%). Reaktivna kapsula se napuni sa CO (60 psi) i reaktivna smeša zagreva 3 sata na 40°C. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu a nakon toga upari pod vakukumom da se dobije ružičasto-ljubičasta čvrsta supstanca. Ova čvrsta supstanca se triturira u vrućem DCM, a nakon toga ohladi i izdvoji filtriranjem da se dobije žuta čvrsta supstanca u osnovi čistogjedinjenja4 (2.65g, 61% prinos). Filtrat se prečisti gasnom hromatografijom uz eluiranje sa 25-33% EtOAc u heptanima da se dobije još jedinjenja287kao bledo smeđe čvrste supstance (540mg 12% prinos). Dobija se ukupno 3.19g (73% prinos).<l>K NMR (400 MHz, CDCb): 5 8.06 (dd, IH, J = 8.7, 5.9 Hz), 7.69 (s, IH), 7.24 (dd, 1 H, J = 9.9, 2.6 Hz), 7.08 (ddd, 1 H, J = 8.7, 7.8, 2.7 Hz), 5.82 (s, 2H), 4.81 (br. s, 2H), 3.90 (s, 3H), [MH+]-358.02.
Izrada l-(5-etil-l,2-tiazol-3-il)-N-metilmetanamina(293).
[0613]
Faza 1:
[0614]Smeša jedinjenja288(13 g, 73 mmol), A1BN (1.19 g, 7.3 mmol) i NBS (32.5 g, 182.5 mmol) u hloroformu (200 mL) se refluksuje 24 sata u atmosferi azota. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela uz eluiranje sa smešom petrol etar/EtOAc 200/1 da se dobije jedinjenje289(4 g, 21.5%) kao žuto ulje.
Faza 2:
[0615] U izmešani rastvor terc-butil metilkarbamata (2.4 g, 18.7 mmol) u DMF (30 mL) se na 0 °C, u atmosferi azota, doda NaH (0.75 g, 17.8 mmol, 60% u mineralnom ulju). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 1 sat na 0 °C. Jedinjenje289(4 g, 15.6 mmol) se na 0 °C doda u smešu i 16 sati meša na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se razblaži sa H2O
(100 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (100 mL x 3). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (100 mL x 3), suše preko Na2S04i koncentruju. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela uz eluiranje sa smešom petrol etar/ EtOAc 20/1 da se dobijejedinjenje 290(2.5 g, 53.2%) kao žuto ulje.
Faza3:
[0616] Smeša jedinjenja 290(2.5 g, 8.2 mmol), tributil(etenil)stanana (3.7 g, 12.3 mmol) i Pd(PPli3)4 (0.474 g, 0.41 mmol) u bezvodnom toluenu (30 mL) se refluksuje 4 sata u atmosferi azota. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela uz eluiranje sa smešom petrol etar/EtOAc 50/1-10/1 da se dobijejedinjenje 291(1.6 g, 62.5%) kao žuto ulje.
Faza 4:
[0617] Smeša jedinjenja 291(1.6 g, 6.3 mmol) i Pd/C (180 mg) u EtOAc (30 mL) se meša 16 sati na 30 °C u atmosferi vodonika. Reaktivna smeša se filtrira i filtrat se koncentruje pod vakukumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela uz eluiranje sa smešom petrol etar/EtOAc 50/1-10/1 da se dobijejedinjenje 292(1.0 g, 62.1%) kao svetio žuto ulje. 'HNMR (400 MHz, MeOD): 5 6.973 (s, IH), 4.50 (s, 2H), 2.96-3.0 (q, 2H), 2.93-2.91 (t, 3H), 1.53 (s, 9H), 1.35-1.28 (t, 3H) LC-MS: 127144-146-P m/z za C12H20N2O2S [M-boc+H]<+>157.0
Faza 5:
[0618]U rastvorjedinjenja 292(0.42 g, 1.6 mmol) u EtOAc (10 mL) se u kapima doda smeša HC1 (g)/ EtOAc (5 mL) i meša 5 sati na sobnoj temperaturi. Smeša se koncentruje da se dobijejedinjenje 293kao žuta čvrsta supstanca (0.32 g, 100%).<*>H NMR (400 MHz, D20): 5 7.17 (s, 1 H), 4.33 (s, 2H), 2.98-2.92 (q, 2H), 2.77 (s, 3H), 1.32-1.29 (t, 3H).
Izrada terobutil [(4-bromo-3-metoksi-l,2-oksazol-5-il)metil]metilkarbamata (299).
[0619]
Faza 1:
[0620]U rastvor 3-metoksiizoksazol-5-karboksilne kiseline294(7.6g , 53.14mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (80ml) se u kapima, u toku 10 minuta, na 0 °C u atmosferi azota, doda rastvor bor-dimetilsulfid kompleksa (5.18g, 6.47ml, 69.0 mmol) u THF (30ml). Smeša se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu, nakon toga zagreva 2 sata na 60 °C, a zatim ohladi na sobnu temperaturu. Smeša se pažljivo neutrališe dodavanjem 10 ml vode u kapima, meša 10 minuta, nakon toga ekstrahuje sa EtOAc (2 x 80ml), suši preko Na2S04, filtrira i rastvarač se ukloni pod vakuumom da se dobijejedinjenje 295kao bledo žuto ulje (6.0g, 88%). 'HNMR (400 MHz, d6-DMSO): 5 6.087 (s, 1 H), 4.438 (s, 2H), 5.60 (br.s, 1 H), 3.867 (s, 3H), [M+H 130.03].
Faza 2:
[0621]Urastvor jedinjenja 295(411 mg, 3.18 mmol) u dihlormetanu ( 5ml) se na 0 °C, u atmosferi azota, dodaju trifenilfosfin (833mg, 3.18 mmol) i ugljentetrabromid (1.029g, 3.10 mmol) (koji je sveže osušen azeotropiranjem 3 puta sa toluenom). Smeša, koja postaje narandžasta, se meša 1 sat na 0 °C, a nakon toga ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu. Smeša se koncentruje uklanjanjem rastvarača pod vakuumom a nakon toga prečisti gasnom hromatografijom na koloni uz eluiranje sa 3:1 heptan:EtOAc da se dobijejedinjenje 296kao bezbojno ulje (486mg, 81%).<l>RNMR (400 MHz, d6-DMSO): 5 6.350 (s, 1 H), 4.696 (s, 2H), 3.889 (s, 3H, [M+H 192.2 i 194.2].
Faza3:
[0622] Urastvor jedinjenja 296(4.4g, 23 mmol) u anhidrovanom dimetilformamidu (20ml) se na sobnoj temperaturi doda N-bromosukcinimid (4.1g, 23.1 mmol) i smeša zagreva 2 sata
na 45 °C. Zatim se doda N-bromosukcinimid (2.0g, 11.3 mmol) i smeša meša 2 sata na 45 °C. Nakon toga se doda N-bromosukcinimid (1.3g, 7.4 mmol) i smeša meša u toku noći na sobnoj temperaturi. Ponovo se doda N-bromosukcinimid (1. lg, 11.3 mmol) i smeša meša na 45 °C u toku noći. Smeša se koncentruje uklanjanjem rastvarača pod vakuumom, nakon toga ekstrahuje sa EtOAc (2 x lOOml), organski sloj se ispere sa vodom (50ml), slanim rastvorom (20ml), suši preko Na2S04, filtrira i rastvarač se ukloni pod vakuumom. Ostatak se doda u 0.9g nečistog produkta iz druge identične reakcije i prečisti gasnom hromatografijom na koloni uz eluiranje sa 100:0 - 80:20 heptan:EtOAc, da se dobijejedinjenje 297kao bezbojno ulje, koje kasnije stajanje kristališe u bezbojnu čvrstu supstancu (5.66g, 91% - međutim uzimajući u obzir dodati materijal u koloni, izračunati prinos je 78%).<*>H NMR (400 MHz, d6-DMSO): 8 4.72 (s, 2H), 3.98 (s, 3H).
Faza4:
[0623] U 33%rastvor metilamina u etanolu (77ml, 653 mmol) se na 0 °C, u atmosferi azota, u kapima, u toku 10 minuta, dodaje rastvorjedinjenja 297u etanolu (20ml) i smeša se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu u toku noći. Smeša se koncentruje uklanjanjem rastvarača pod vakuumom, nakon toga se doda zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (20 ml), a nakon toga smeša ekstrahuje sa EtOAc (lOOml), suši preko Na2S04, filtrira i rastvarač se ukloni pod vakuumom da se dobijejedinjenje 298kao bledo žuto ulje, 4.5g (93.5%).
'HNMR (400 MHz, d6-DMSO): 5 3.956 (s, 3H), 3.686 (s, 2H), 2.287 (br.s, IH), 2.234 (s, 3H), [M+H 220.95 i 222.95].
Faza5:
[0624]Urastvor jedinjenja 298(4.5g, 20.4 mmol) u dihlormetanu se na sobnoj temperaturi, u atmosferi azota, doda trietilamin (2.12g, 2.92 ml, 21 mmol), a nakon toga se u porcijama u toku 3 minuta dodaje di-terc-butildikarbonat (4.58g, 21 mmol). Uočava se veoma blaga efervescencija. Smeša se meša 3 sata na sobnoj temperaturi u atmosferi azota. Smeša se koncentruje uklanjanjem rastvarača pod vakuumom, azeotropira sa 150ml heptana, nakon toga se ostatak podeli između EtOAc (lOOml) i vode (20ml). Organski sloj se suši preko Na2S04, filtrira i rastvarač se ukloni pod vakuumom da se dobijejedinjenje 299(6g, 92% prinos).
Izrada l-(3-etil-l,2-tiazol-5-il)-7V-metilmetanamina (305).
[0625]
Faza1:
[0626]U rastvorjedinjenja 300(55 g, 0.39mol) u bezvodnom THF (600 mL) se u kapima, na -70 °C, u atmosferi N2doda n-BuLi (157 mL, 0.39 mol, 2.5 M). Nakon dodavanja, smeša se meša 1 sat na -70 °C. Smeša se zagreje na -20 °C i meša 20 min na ovoj temperaturi. Reaktivna smeša se ohladi na -70 °C i preko dvostruke igle prenese u rastvor propanoat anhidrida (61.3 g, 0.47 mol) u bezvodnom THF (400 mL) koji se takođe čuva na -70 °C. Reaktivna smeša se ostavi da se polako zagreje na sobnu temperaturu i meša na sobnoj temperaturi u toku noći. Reaktivna smeša se razblaži sa zasićenim rastvorom NH4CI (500 mL) i EtOAc (500 mL) i razdvoji. Vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (500 mL x 3). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (500 mL), suše preko Na2S04i koncentruju. Ostatak se destiluje pod sniženim pritiskom da se dobijejedinjenje 301(50 g, 65.7%) kao žuto ulje.
Faza 2:
[0627]Usmešu jedinjenja 301(58 g, 0.296 mol) u H20 (1 L) se na 0 °C doda NH2OSO3H (36.78 g, 0.326 mol) i smeša se meša 4 sata na sobnoj temperaturi. U smešu se pažljivo doda NaHCC-3 (27.38 g, 0.326 mol). Nakon toga se doda NaSH (24.86 g, 0.444mol) i smeša se refluksuje u toku noći. TLC (petrol etar: EtOAc = 3:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se filtrira. Filtrat se ekstrahuje sa EtOAc (500 mL x 3). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (500 mL), suše preko Na2S04i koncentruju. Ostatak se prečisti na koloni silka gela uz eluiranje sa smešom petrol etar/ EtOAc 15/1~10/1 da se dobijejedinjenje 302(8 g, 19%) kao braon ulje.
Faza 3:
[0628] Urastvor jedinjenja 302(8 g, 55.9 mmol) i Et3N (16.9 g, 0.168 mol) u bezvodnom CH2CI2(100 mL) se u kapima, na 0 °C, doda MsCl (8.32 g, 72.7 mmol). Nakon dodavanja, smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. TLC (petrol etar: EtOAc = 3:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se razblaži sa EtOAc (250 mL) i filtrira. Filtrat se ispere sa slanim rastvorom (50 mL), suši preko Na2S04i koncentruje da se dobijejedinjenje 303(11 g, 87%) kao tečnost braon boje.
Faza 4:
[0629] U rastvor terc-butil metilkarbamata (11 g, 90.5mmol) u bezvodnom DMF (100 mL) se u porcijama, na 0 °C, u atmosferi N2doda NaH (3.6 g, 90.5 mmol, 60% u ulju). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 30 min na 0 °C.Jedinjenje 303(10 g, 45.2 mmol) se na 0 °C doda u smešu i smeša se meša 4 sata na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se razblaži sa H2O (100 mL)) i ekstrahuje sa EtOAc (100 mL x 3). Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (100 mL x 3), suše preko Na2S04i koncentruju. Ostatak se prečisti preparativnom HPLC pod baznim uslovima da se dobijejedinjenje 304(3 g, 26%) kao žuto ulje.<l>RNMR (400 MHz, CDCb): 5 6.926 (s, IH), 4.626 (s, 2H), 2.94 (s, 3H), 2.84-2.86 (q, 2H), 1.53 (s, 9H), 1.33-1.36 (t, 3H), [M+H]<+>257.
Faza 5:
[0630] U rastvorjedinjenja 304(0.42 g, 1.6 mmol) u EtOAc (10 mL) se u kapima doda smeša HC1 (g)/ EtOAc (5 mL) i meša 8 sati na sobnoj temperaturi. Smeša se koncentruje da se dobijejedinjenje 305(0.32 g, 100%) kao bela čvrsta supstanca.<J>H NMR (400 MHz, D20): 5 7.30 (s, IH), 4.51 (s, 2H), 2.81-2.75 (q, 2H), 2.72 (s, 3H), 1.222-1.18 (t, 3H).
Izrada terobutil [2-(4-bromo-5-metoksipiridin-2-il)etil]metil-karbamata (314).
[0631]
Faza 1:
[0632]KOH (141 g, 2.52 mol) se doda u rastvor 2-metil-3-hidroksi piridina (55.0 g, 0.50 mol) u DMSO (840 mL). Smeša se meša 1 sat na sobnoj temperaturi (KOH nije potpuno rastvoren), a nakon toga se ohladi na 0°C. U kapima se doda Mel (34.6 mL, 0.55 mol) a nakon toga se reakcija meša 18 sati na sobnoj temperaturi. U reaktivnu smešu se polako dodaje voda (1.25 L). Vodena faza se ekstrahuje sa MTBE (3 x 500 mL), nakon toga sa EtOAc (3 x 400 mL). Vodena faza se zasiti sa NaCl, nakon toga ponovo ekstrahuje sa EtOAc (3 x 200 mL). Organske faze se kombinuju, suše preko MgS04, filtriraju i pažljivo koncentruju pod vakuumom (produkt je ispariv). Dobijeno ulje se prečisti hromatografijom na koloni (eluent: heptani:EtOAc od 1:1 do 0:1) da sedobije jedinjenje 306(44.1 g, 71% prinos).<l>K NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 8.14 (d, J = 3.1 Hz, IH), 7.27 (dd, J = 8.5, 3.1 Hz, IH), 7.16 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 3.78 (s, 3H), 2.38 (s, 3H).
Faza 2:
[0633]Urastvor jedinjenja 306(44.1 g, 358 mmol) u DCM (890 mL) se dodaNa2S04(76.2 g, 537 mmol). Smeša se meša 15 min na sobnoj temperaturi, nakon toga se u porcijama doda (egzotermni proces) mCPBA (88.0 g, 358 mmol). Reakcija se meša 20 sati na sobnoj temperaturi. Doda se nova količina mCPBA (8.0 g, 36 mmol) i smeša se meša 3 sata na sobnoj temperaturi. Reakcija se filtrira, nakon toga ispere sa 1 M rastvorom KOH (500 mL). Vodena faza se ekstrahuje sa DCM (3 x 200 mL), nakon toga se organske faze kombinuju, suše preko MgS04, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Dobijeno ulje se rastvori u DCM (600 mL), nakon toga se doda Na2S04(17 g) a zatim mCPBA (8.0 g). Smeša se meša 20 sati na sobnoj temperaturi a nakon toga ispere sa 1 M rastvorom KOH (500 mL). Vodena faza se zasiti sa NaCl i ekstrahuje sa DCM (3 x 300 mL). Organske faze se kombinuju, suše preko MgS04, filtriraju i koncentruju pod vakuumom da se dobijejedinjenje 307kao bela čvrsta supstanca (28.7 g, 56% prinos,).<l>R NMR (400 MHz, DMSO-ofc) 5 8.07 (d, J = 2.4 Hz, 1 H), 7.36 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 6.96 (dd, J = 8.8, 2.5 Hz, 1 H), 3.78 (s, 3H), 2.27 (s, 3H).
Faza 3:
[0634]U silka gel (280 g) se u kapima doda voda (100 mL). Smeša se meša 30 min na RT da se dobije a paperjast prašak. Doda se DCM (420 mL) i smeša se meša da se dobije homogena suspenzija a nakon toga se doda rastvorjedinjenja 307(27.7 g, 199 mmol) u DCM (275 mL). Nakon dobijanja homogene suspenzije, u kapima se, u toku 30 min dodaje rastvor Br2u DCM (1 M, 285 mL, 199 mmol). Smeša se meša 18 sati na sobnoj temperaturi. Dodaju se nove količine silka gela (100 g) i rastvora Br2u DCM (1 M, 142 mL, 100 mmol). Smeša se meša 8 sati na sobnoj temperaturi a nakon toga se dodaju iste količine silka gela i Br2 rastvora. Smeša se meša 18 sati na sobnoj temperaturi a nakon toga filtrira. Ploča silika gela se ispere sa EtOAc (500 mL), nakon toga sa smešom DCM/MeOH (8:2, 400 mL). Osnovne tečnosti se koncentruju pod vakuumom, ponovo rastvore u DCM (500 mL) i ovaj rastvor se ispere sa 10% vodenim rastvorom natrijum metabisulflta (250 mL). Faze se razdvoje. Vodena faza se zasiti sa NaCl, nakon toga pažljivo ekstrahuje sa DCM (8 x 150 mL). Organske faze se kombinuju, suše preko MgS04, filtriraju i koncentruju. Dobijeno ulje se brzo prečisti hromatografijom na koloni (eluenti: EtOAc/MeOH od 15:1 do 8:1). Izdvojene čvrste supstance (27 g, smeša između 4-bromo i 2-bromo piridina -6:4) se suspenduju u EtOAc (100 mL) i trituriraju 1 sat. Čvrsta supstanca se filtrira (beli prašak, 24 g), nakon toga prevede u žitku masu u DCM (100 mL) i meša 2 sata pod refluksom. Suspenzija se ohladi na sobnu temperaturu i čvrsta supstanca se filtrira da se dobijejedinjenje 308.Osnovni rastvori se koncentruju i prevedu u žitku masu u DCM a trituriranje se ponovi da se dobije druga serijajedinjenja 308(beli prašak, 14.9 g, 34% prinos). Preostale izmešane frakcije (8.0 g, 1:1 smeša) se prečiste hromatografijom na koloni (eluenti: EtOAc/Me-OH od 15:1 do 8:1) da se dobije dodatna količinajedinjenja 308kao beli prašak (2.6 g, 6% prinos).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-^e) 5 8.23 (d, J = 2.3 Hz, IH), 7.79 (d, J = 2.6 Hz, 1 H), 3.88 (s, 3H), 2.27 (s, 3H).
Faza 4:
[0635] Jedinjenje 308(2.8 g, 13 mmol) se rastvori u Ac20 (24 mL) i rastvor se zagreva 18 sati na 60°C. Smeša se koncentruje pod vakuumom. Doda se cikloheksan (50 mL) i smeša se koncentruje pod vakuumom. Ovo se ponovi 3 puta. Dobijeno ulje se rastvori u EtOAc (150 mL) i rastvor se ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(100 mL). Faze se razdvoje i vodena faza se ekstrahuje sa EtOAc (2 x 100 mL). Organske faze se kombinuju, suše preko MgS04, filtriraju i koncentruju pod vakuumom da se dobije sirovojedinjenje 309koje se koristi u sledećoj fazi bez naknadnog prečišćavanja (svetio braon kristali, 3.18 g).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 8.36 (s, 1 H), 7.70 (s, 1 H), 5.06 (s, 2H), 3.97 (s, 3H), 2.09 (s, 3H).
Faza 5:
[0636] Jedinjenje 309(3.2 g, 12 mmol) se rastvori u dioksanu (86 mL), nakon toga se doda vodeni rastvor NaOH (2 M, 28 mL). Smeša se meša 18 sati na sobnoj temperaturi. Rastvor se zakiseli sa 1 M vodenim rastvorom HC1 do pH 7. Vodena faza se ekstrahuje sa EtOAc (3 x 150 mL). Organske faze se kombinuju, suše preko MgS04, filtriraju i koncentruju da se dobijejedinjenje 310kao bledo žuto ulje (2.5 g) koje se koristi u sledećoj fazi bez naknadnog prečišćavanja.<l>K NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 8.28 (s, 1 H), 7.64 (s, 1 H), 5.43 (t, J = 6.0 Hz, 1 H), 4.49 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 3.95 (s, 3H).
Faza 6:
[0637] Jedinjenje 310(2.5 g, 12 mmol) se rastvori u DCM (80 mL), nakon toga se doda trietilamin (2.0 mL, 15 mmol) i rastvor se ohladi na 0 °C. U kapima se doda metansulfonil hlorid (1.0 mL, 13 mmol) i smeša se meša 1 sat na 0 °C. U ohlađeni rastvor se pažljivo doda voda (100 mL). Rastvor se ostavi 30 min na sobnoj temperaturi i faze se razdvoje a vodena faza se ekstrahuje sa DCM (2 x 100 mL). Organske faze se kombinuju, suše preko MgS04, filtriraju i koncentruju pod vakuumom (kupatilo sa rotacionim evaporatorom, na RT) da se dobijejedinjenje 311kao smeđe ulje (3.4 g) koje se direktno koristi u sledećoj fazi (uočava se degradacija ukoliko se čuva 24 sata na sobnoj temperaturi).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-dk)5 8.42 (s, 1 H), 7.83 (s, 1 H), 5.23 (s, 2H), 4.00 (s, 3H), 3.27 (s, 3H).
Faza 7:
[0638] Jedinjenje 311(3.4 g, 12 mmol) se rastvori u ACN (8.5 mL) i dodaju se 18-crown-6 (4.8 g, 18 mmol) a nakon toga KCN (1.0 g, 15 mmol). Smeša se zagreva 1.5 sat na 50 °C a nakon toga se ohladi na RT. Doda se vodeni rastvor NaOH (IM, 200 mL). Faze se razdvoje i vodena faza se ekstrahuje sa EtOAc (3x 100 mL). Organske faze se kombinuju, suše preko MgS04, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Dobijeno ulje se prečisti hromatografijom na koloni (eluenti heptan/etOAc od 3:1 do 1:1) da se dobijejedinjenje 312kao bež čvrsta supstanca (2.5 g, 70% prinos preko 4 faze).<l>K NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 8.37 (s, IH), 7.71 (s, IH), 4.13 (s, 2H), 3.97 (s, 3H).
Faza 8:
[0639] Jedinjenje 312(2.0 g, 8.8 mmol) se rastvori u MeOH (135 mL) i doda se NiCl2.6H20 (0.21 g, 0.88 mmol) a nakon toga Boc20 (3.9 g, 18 mmol). Smeša se ohladi na -10 °C, nakon toga se u porcijama, u toku 9, sati dodaje NaBH4(1.0 g, 27 mmol). Doda se dietilentriamin (2 mL) i smeša se meša 18 sati na sobnoj temperaturi. Smeša se koncentruje pod vakuumom, nakon toga se doda EtOAc (100 mL). Rastvor se ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(100 mL). Faze se razdvoje i vodena faza se ekstrahuje sa EtOAc (3x 100 mL). Organske faze se kombinuju, suše preko MgS04, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Dobijeno ulje se prečisti reverzno faznom hromatografijom (eluenti H20/AcCN od 95:5 do 5:95).Jedinjenje 313se dobija kao bezbojno ulje (1.0 g, 35% prinos).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 8.35 (s, 1 H), 7.51 (s, 1 H), 6.85-6.81 (m, 1 H), 3.96 (s, 3H), 3.24-3.20 (m, 2H), 2.80-2.76 (m, 2H), 1.38 (s, 9H).
Faza9:
[0640] Jedinjenje 313 (1.0 g, 3.0 mmol) se rastvori u DMF (135 mL). Rastvor se ohladi na 0°C, nakon toga se u porcijama, u toku 10 min dodaje NaH (60% u ulju, 180 mg, 4.5 mmol). Smeša se meša 1 sat na 0 °C, nakon toga se u kapima, u toku 10 min dodaje Mel (0.19 mL, 3.0 mmol). Smeša se meša 3 sata na sobnoj temperaturi. Rastvor se ponovo ohladi na 0 °C a nakon toga se pažljivo doda H2O (100 mL). Smeša se ekstrahuje sa Et20 (3 x 150 mL). Organske faze se kombinuju, suše preko MgS04, filtriraju i koncentruju. Dobijeno ulje se kombinuje sa dva druga uzorka (počevši od 100 mg svaki) i prečisti hromatografijom na koloni (eluenti heptani/EtOAc od 3:1 do 1:1). Uočava se 10% SM pa se prethodni uzorak rastvori u DMF (30 mL), rastvor se ohladi na 0 °C a nakon toga se u porcijama doda NaH (37 mg, 1.0 mmol). Smeša se meša 1 sat na 0 °C a nakon toga se doda Mel (29 uL, 0.45 mmol). Smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi i nakon toga se ohladi na 0 °C. Pažljivo se doda voda (50 mL) i ekstrahuje sa Et20 (3 x 100 mL). Organske faze se kombinuju, suše preko MgS04, filtriraju i koncentruju da se dobije jedinjenje314kao bledo žuto ulje (920 mg, 75% prinos).<l>K NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 8.28 (s, 1 H), 7.54 (s, 1 H), 3.92 (s, 3H), 3.54-3.36 (m, 2H), 2.84 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.74 (s, 3H), 1.48-1.11 (m, 9H).
Izradaterc- buii\[l-(4-bromo-3-metoksi-l-metil-l//-pirazol-5-il)etil] metilkarbamata
(325).
[0641]
Faza 1:
[0642] Smeša jedinjenja 315(55 mL, 0.35 mol) u smeši 1:1 EtOH/H20 (600 mL) se na 0 °C polako dodaje u rastvor 1,1-dimetilhidrazina (25.74 g, 0.44 mol m/m 40% u vodi) u smeši 1:1 EtOH/FhO (200 mL). Rastvor se meša 30 minuta na 0 °C, nakon toga ostavi 1 h da se zagreje na sobnoj temperaturi. Smeša se koncentruje i ostatak se podeli između vode (300 mL) i EtOAc (300 mL). Vodeni sloj se koncentruje da se dobijejedinjenje 316,koje se direktno koristi u sledećoj fazi.
Faza 2:
[0643]Smešajedinjenja 316u 1 N rastvoru HC1 (200 mL) se meša 1.5 h na sobnoj temperaturi. Smeša se ekstrahuje sa DCM (150 mL), vodeni sloj se koncentruje da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel, petrol etar / EtOAc = 6:1) da se dobijejedinjenje 317(13 g, 21%) kao bela čvrsta supstanca.<!>H NMR (400 MHz, CDCh): 5 6.148 (s, 1 H), 4.34-4.26 (m, 2H), 3.99 (s, 3H), 1.38-1.30 (m, 3H).
Faza 3:
[0644] Smeša jedinjenja 317(4 g, 23.5 mmol), K2CO3(9.7 g, 70.5 mmol) i Mel (16.8 g, 0.11 mol) se zagreva 3 sata pod refluksom. TLC (petrol etar / EtOAc = 6:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se filtrira i filtrat se koncentruje da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel, petrol etar / EtOAc = 20:1) da se dobijejedinjenje 318(3.5g, 81%) kao žuto ulje. !H NMR (400 MHz, CDCh): 5 6.18 (s, IH), 4.34-4.29 (q, 2H), 4.05 (s, 3H), 3.83 (s, 3H), 1.38-1.34 (t, 3H).
Faza 4:
[0645]U smešujedinjenja 318(2 g, 11.5 mmol) u THF (50 mL) se u porcijama, na 0 °C, doda L1AIH4(0.52 g, 13.8 mmol). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša na sobnoj temperaturi u toku noći. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 1/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se neutrališe sa 20% vodenim rastvorom NaOH (4 mL). Smeša se filtrira i filtrat se koncentruje pod vakuumom da se dobijejedinjenje 319(1.7 g, -100 %) kao bezbojno ulje. 'HNMR (400 MHz, CDCh): 5 5.58 (s, IH), 4.55 (s, 2H), 4.83 (s, 3H), 3.65 (s, 3H).
Faza 5:
[0646] Rastvor jedinjenja 319(2 g, 14.3 mmol), Mn02(6.2 g, 71.4 mmol) u bezvodnom THF (50 mL) se zagreva pod refluksom u toku noći. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 6/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se filtrira i filtrat(jedinjenje 320)se direktno koristi u sledećoj fazi.
Faza 6:
[0647]U rastvorjedinjenja 320(-14.3 mmol) u bezvodnom THF (100 mL) se na -50 °C doda MeMgBr (24 mL, 71.4 mmol, 3.OM). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 15 sati na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 6/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se neutrališe sa zasićenim rastvorom NH4CI (20 mL). Smeša se nakon toga ekstrahuje sa EtOAc (100 mL x 3). Kombinovani ekstrakti se isperu sa slanim rastvorom (100 mL x 2), suše preko Na2S04 i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel, smeša petrol etar/EtOAc 10/1) da sedobije jedinjenje 321(1.2g, 55 %) kao žuto ulje.<l>R NMR (400 MHz, CDCh): 5 5.58-5.57 (d, 1 H), 4.84-4.80 (q, 1 H), 3.83 (s, 3H), 3.73-3.72 (d, 3H), 2.03-2.02 (bs, 1 H), 1.55-1.53 (d, 3H).
Faza 7:
[0648]Urastvor jedinjenja 321(1.2 g, 7.6 mmol) i Et3N (1.1 g, 11.4 mmol) u bezvodnom DCM (30 mL) se u kapima, na 0 °C, doda MsCl (1.3 g, 11.4 mmol). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 12 sati na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 1/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se ispere sa slanim rastvorom (20 mL), suši preko Na2S04i koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel, smeša petrol etar/EtOAc 20/1) da sedobije jedinjenje 322(1.2 g, 90 %) kao žuto ulje. 'HNMR (400 MHz, CDCb): 5 5.61 (s, 1 H), 5.04-4.99 (q, 1 H), 3.85 (s, 3H), 3.76 (s, 3H), 1.88-1.86 (d, 3H).
Faza 8:
[0649]Rastvorjedinjenja 322(0.3 g, 1.72 mmol) u rastvoru CH3NH2(20 mL, 2M rastvor u THF ) se zagreva 12 sati na 80 °C u zatvorenoj epruveti. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 6/1) pokazuje daje reakcija završena.Jedinjenje 323se direktno koristi u sledećoj fazi.
Faza 9:
[0650]U smešujedinjenja 323u DCM (20 mL) se dodaju Et3N (347 mg, 3.44 mmol) i (Boc)20 (743 mg, 3.44 mmol) i smeša se meša na sobnoj temperaturi u toku noći. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 6/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se podeli između vode (20 mL) i DCM (50 mL). Izdvojeni organski sloj se ispere sa slanim rastvorom (50 mL), suši preko Na2S04i koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel, smeša petrol etar/EtOAc 20/1) da sedobije jedinjenje 324(300 mg, 64% u dve faze) kao bezbojno ulje.<!>H NMR (400 MHz, CDCh): 5 5.59 (s, 1 H), 5.47 (br, 1 H), 3.83 (s, 3H), 3.62 (s, 3H), 2.54 (s, 3H), 1.48 (s, 9H); LCMS: m/z za C13H23N303 270.3 [M+H]<+>.
Faza 10:
[0651]Urastvor jedinjenja 324(2.1 g, 7.78 mmol) u DCM (20 mL) se na 0 °C, u porcijama, doda NBS (1.46 g, 8.16 mmol). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 6/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se ispere sa zasićenim rastvorom NaHCCb(30 mL x 4), slanim rastvorom (30 mL), suši preko Na2S04i koncentruje pod vakuumom da se dobijejedinjenje 325(2.5 g, 91 %) kao žuto ulje.<l>KNMR (400 MHz, CDCh): 5 5.79 (s, 1 H), 3.92 (s, 3H), 3.68 (s, 3H), 2.70 (s, 3H), 1.66-1.64 (d, 3H), 1.47 (s, 9H).
Izrada 5-bromo-3-[2-fluoro-l-(5-fluoro-2-jodfenil)etoksi]pirazin-2-amina(326).
[0652]
[0653]Postupak opisanu fazi 2za jedinjenje 241se koristi zaizradu jedinjenja 326.
Izrada l-metil-5-[(meitlamino)metil]-l//-pirazol-3-karbonitrila (333).
[0654]
Faza1:
[0655]Hloraceton (207 mL, 2.59 mol) se u kapima, u toku 45 min doda u rastvor DIEA (410 mL, 310 g, 2.40 mol) i N-metilbenzilamina (286 g, 2.36 mol) u acetonitrilu (1500 mL), održavajući temperaturu između 18 i 20°C blagim hlađenjem u kupatilu sa hladnom vodom. Kada je dodavanje završeno, kupatilo za hlađenje se ostavi još 30 min a zatim ukloni. Mešanje se nastavi još 5.5 h, za koje vreme unutrašnja temperatura reakcije poraste za 1 sat do 27°C, rast se zaustavi za 2 sata a nakon toga polako pada. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom do zapremine od približno 1 L, nakon toga ostavi da stoji u toku noći. Kristalni precipitat se ukloni filtriranjem, ispere sa acetonitrilom (50 mL) i filtrat se koncentruje pod vakuumom. Koncentrovani filtrat se prenese u EtOAc (1 L) i filtrira kroz kratku ploču silika gela (1200 mL silka) i ispere sa novom količinom EtOAc (2 x 1 L). Filtrat se koncentruje pod vakuumom da se dobijejedinjenje 327kao narandžasto-braon ulje (374 g, 89%).<l>RNMR (400 MHz, hloroform-d) 5 7.39 - 7.22 (m, 5H), 3.59 (s, 2H), 3.16 (s, 2H), 2.30 (s, 3H),2.14(s, 3H).
Faza 2:
[0656]Paladijum hidroksid na ugljeniku (20%, 36 g) i di-terc-butil dikarbonat (565 g, 2.59 mol) se dodaju u rastvorjedinjenja 327(439 g, 2.48 mol) u etanolu (3.25 L) i smeša se hidrogenizuje na 50°C pod pritiskom H2od 50 psi u toku 8 sati. Zagrevanje se zaustavi i reakcija se ostavi u atmosferi vodonika preko vikenda. Katalizator se ukloni filtriranjem kroz celite, ispere sa metanolom a rastvarač se ukloni pod vakuumom da se dobijejedinjenje 328kao smeđe ulje koje sadrži malu količinu suspendovane čvrste supstance (476.5 g). Ovaj materijal se koristi bez naknadnog prečišćavanja.<*>H NMR (400 MHz, hloroform-d) 2 rotomera 5 4.00 i 3.90 (2 x s, 2H), 2.92 i 2.88 (2 x s, 2H), 2.12 (s, 3H), 1.47 i 1.42 (2 x s, 9H).
Faza3:
[0657]Smeša dietil oksalata (187 mL, 1.38 mol) ijedinjenja 328(258 g, 1.38 mol) u MeOH (200 mL) se u kapima, u toku 30 min dodaje u rastvor NaOMe u MeOH (5.38 M, 257 mL, 1.38 mol) u MeOH (1800 mL). Kada je dodavanje završeno, reakcija se zagreje na 55°C i meša 2 sata. Reakcija se nakon toga zagreva 30 min na 65°C a zatim ohladi na -7°C. Rastvor metilhidrazin hidrohlorida u MeOH (prethodno izrađen dodavanjem koncentrovane HC1 [115 mL, 1.38 mol] u kapima uledeno hladan rastvor metilhidrazina [72.7 mL, 63.6 g, 1.38 mol] u MeOH [100 mL]) se nakon toga doda u kapima tako da se temperatura održava ispod -5°C. Kada je dodavanje završeno, reakcija se ostavi da se polako zagreje na sobnu temperaturu i meša u toku noći. Reaktivna smeša se filtrira i koncentruje pod vakuumom. Braon polu-čvrsta masa se nakon toga prenese u 10% rastvor DCM u heptanu (500 mL + 250 mL da se ispere) filtrira i kominuje sa materijalom iz druge reakcije (207 g terc-butil metil(2-oksopropil)karbamata, 1.10 mol). Kombinovani filtrati se nanesu na vrh bezvodne gasne kolone (3.7 L silka) i kolona se eluira sa smešom heptani/EtOAc (5-25%) da se dobijujedinjenja 329i330(3:1 odnos).Jedinjenje 329:(302 g, 43%).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-^e) 5 6.65 (s, 1 H), 4.30 (s, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.82 (s, 3H), 2.76 (s, 3H), 1.40 (s, 9H).
Faza 4:
[0658] Jedinjenje 330(7.55 g, 26.6 mmol) se rastvori u MeOH (7 mL), nakon toga se doda razblaženi rastvor amonijaka (35%, 70 mL). Rastvor se meša 18 sati na sobnoj temperaturi. Formirana suspenzija se filtrira a izdvojena bela čvrsta supstanca se suši da se dobijejedinjenje 331(3.4 g, 43% prinos). lR NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 7.42 (s, 1 H), 7.17 (s, 1 H), 6.49 (s, 1 H), 4.46 (s, 2H), 3.81 (s, 3H), 2.76 (s, 3H), 1.41 (s, 9H).
Faza 5:
[0659] Jedinjenje 331(3.4 g, 13 mmol) se rastvori u piridinu (34 mL) i rastvor se ohladi na 0°C. U kapima se doda POCh (2.32 mL, 25.4 mmol), održavajući temperaturu ispod 25 °C. Smeša se nakon toga meša još 5 minuta na 0°C a nakon toga 20 minuta na RT. Reakcija se neutrališe sporim dodavanjem vode (200 mL). Temperatura smeše se održava na ispod 30 °C dodavanjem leda. Na kraju dodavanja, smeša se meša 40 minuta na RT a nakon toga ekstrahuje sa EtOAc (3 x 200 mL). Organske faze se kombinuju, isperu sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(200 mL), nakon toga sa slanim rastvorom (200 mL), suše preko MgS04, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Dobijeno braon ulje se prečisti hromatografijom na koloni da se dobijejedinjenje 332kao žuto ulje (2.71 g, 85% prinos).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-^e) 5 6.84 (s, 1 H), 4.49 (s, 2H), 3.87 (s, 3H), 2.77 (s, 3H), 1.40 (s, 9H).
Faza6:
[0660] Jedinjenje 332(2.71 g, 10.8 mmol) se rastvori u DCM (15 mL) i rastvor se ohladi na 0°C. U kapima se doda HC1 (4 M rastvor u dioksanu, 15 mL, 60 mmol) i rastvor se meša 10 minuta na 0°C a nakon toga 3 sata na sobnoj temperaturi. Dobijena suspenzija se koncentruje pod vakuumom sve dok se ne dobije polovina od početne zapremine. Suspenzija se filtrira, čvrste supstance se isperu sa DCM (10 mL) i suše da se dobijejedinjenje 333hidrohlorid kao bela čvrsta supstanca (1.80 g, 90% prinos).<J>H NMR (400 MHz, Metanol-^) 5 6.99 (s, 1 H), 4.42 (s, 2H), 4.03 (s, 3H), 2.81 (s, 3H).
Izrada l-[5-fluoro-2-(pent-4-in-l-iloksi)fenil]etanola(336).
[0661]
Faza 1:
[0662]l-(5-fluoro-2-hidroksifenil)etanon334(5.0 g, 32.5 mmol), K2CO3(8.96 g, 64.9 mmol) i Kl (8.08 g, 48.7 mmol) se izmešaju u DMF (150 mL). Doda se 5-hlorpent-l-in (5.15 mL, 48.7 mmol) i smeša se zagreva 18 sati na 80 °C. LC-MS pokazuje potpunu konverziju. Smeša se ohladi na RT i doda se EtOAc (1 L) a nakon toga ispere sa vodom (6 x 200 mL). Organska faza se suši preko MgS04, filtrira i koncentruje pod vakuumom. Dobijeno ulje se prečisti hromatografijom na koloni (eluenti heptani/EtOAc od 6:1 do 3:1) da se dobijejedinjenje 335kao bledo žuto ulje (6.82 g, 95% prinos, 100% čistoće pomoću LC-MS).<!>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 7.45 - 7.31 (m, 2H), 7.20 (dd, J = 9.1, 4.2 Hz, 1 H), 4.15 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.83 (t, J = 2.7 Hz, 1 H), 2.55 (s, 3H), 2.37 (td, J = 7.1, 2.7 Hz, 2H), 2.10 - 1.85 (m, 2H).
Faza 2:
[0663] Jedinjenje 335(6.62 g, 30.1 mmol) se rastvori u MeOH (120 mL). Rastvor se ohladi na 0 °C i u porcijama se doda NaBH4(1.47 g, 39.1 mmol). Smeša se meša 1 sat na 0 °C i 30 minuta na RT. TLC pokazuje daje reakcija završena. U smešu se plako dodaje voda (300 mL) i smeša ekstrahuje sa EtOAc (2 x 200 mL). Organske faze se kombinuju, suše preko MgS04, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Dobijeno ulje se prečisti hromatografijom na koloni (eluenti heptani/EtOAc od 9:1 do 3:1) da sedobije jedinjenje 336kao bledo žuto ulje (6.04 g, 90% prinos, 97% čistoće pomoću LC-MS). 'HNMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 7.17 (dd, J = 9.7, 3.1 Hz, 1 H), 7.05 6.85 (m, 2H), 5.13 (d, J = 3.9 Hz, 1 H), 4.95 (p, J = 6.2 Hz, 1 H), 4.12 - 3.91 (m, 2H), 2.81 (t, J = 2.7 Hz, 1 H), 2.34 (td, J = 7.1, 2.7 Hz, 2H), 1.96 - 1.84 (m, 2H), 1.26 (d, J = 6.3 Hz, 3H).
Primeri
Izrada (5/f)-8-amino-3-fluoro-5,17-dimetil-13-(metilsulfonil)-16,17-dihidro-7,ll-(meteno)dibenzo|#,/l [l,4,10]oksadiazaciklotetradecin-18(5/7)-ona (Primer 1).
[0664]
Faza1:
[0665]Paladijum (TI) acetat (70 mg, 0.31 mmol) i cataCXium<®>A (221 mg, 0.62 mmol) se zajedno izmešaju u toluenu (2.5 mL, degasiran) i dobijeni rastvor se pipetom, na 50 °C, doda u izmešanirastvor jedinjenja7(1.10 g, 3.1 mmol), bis-pinakolato dibora (1.6 g, 6.2 mmol) i CsF (1.87 g, 12.4 mmol) u smeši MeOH/H20 (4:1, 24 mL, degasiran). Nakon 4 - 5 minuta, boja reakcije postaje tamno smeđa/braon i odjednom se doda rastvorjedinjenja 40(900 mg, 2.4 mmol) u metanolu (5 mL, degasiran). Dobijena smeša se nakon toga meša 3 h pod refluksom, za koje vreme TLC (EtOAc/cikloheksan 6:4) pokazao kompletan utrošak i aril bromida i konvreziju u veći, novi, polarniji deo (Rf = 0.35). Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, smeša se razblaži sa EtOAc (150 mL) i ispere sa vodom (100 mL), nakon toga sa slanim rastvorom (100 mL), suši (Na2S04) i upari. Ostatak se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa smešom 6:4 EtOAc/cikloheksan da se dobijejedinjenje 110kao svetio braon pena (950 mg). TLC: Rf = 0.35 (EtOAc/cikloheksan 6:4). lK NMR (400 MHz, CDCh) 5 8.00 (dd, 1 H, 7 = 9.1, 6.1 Hz), 7.83 - 7.84 (m, 1 H), 7.63 (d, 1 H, 7=2.1 Hz), 7.56 - 7.59 (m, 1 H), 7.34 - 7.37 (m, 1 H), 6.97 - 7.04 (m, 2 H), 6.58-6.61 (m, 1 H), 6.39 - 6.45 (m, 1 H), 4.98 (br s, 2 H), 4.05 - 4.30 (m, 2 H), 3.84 (br s, 3 H), 3.05 (br s, 3 H), 2.54 - 2.68 (m, 3 H), 1.67 (d, 3H,7=6.3 Hz), 1.32-1.51 (m, 9 H). LCMS ESmlz588 [M+H]".
Faza 2:
[0666]Urastvor jedinjenja 337(65% čistoće, 1.1 g, pretpostavljeno 1.2 mmol) u MeOH (25 mL) se doda NaOH (1.2 g, 30 mmol) i smeša se meša na sobnoj temperaturi u toku noći. Reakcija se razblaži sa vodom (60 mL) i ispere sa MTBE (60 mL). Vodeni sloj se nakon toga pažljivo zakiseli sa 1 M vodenim rastvorom HC1 do približno pH 4 (pH papir). U smešu se doda natrijum hlorid (10 g) i smeša se ekstrahuje sa EtOAc (80 mL). Organski sloj se izdvoji, suši (Na2S04) i upari. Ostatak se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela uz eluiranje sa 2% AcOH u EtOAc, da se dobijejedinjenje 338(550 mg, 82% prinos) kao beličasta pena. TLC: Rf = 0.5 (2% AcOH u EtOAc).<l>RNMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.98 (dd, 1 H,7=8.2, 5.8 Hz), 7.88 (dd, 1 H,7=8.0, 1.7 Hz), 7.62 (s, 1 H), 7.40 - 7.44 (m, 2 H), 7.34 (dd, 1 H,7=10.1, 2.7 Hz), 7.05 - 7.09 (m, 1 H), 6.90 - 6.83 (m, 1 H), 6.53 (br s, 1 H), 4.00 - 4.33 (m, 2 H), 3.12 (s, 3 H), 2.55 -2.75 (m, 3 H),1.70 (d, 3 H, 7= 6.55 Hz),1.25 - 1.48 (m, 9 H). LCMS ESm/ z574 [M+H]<+>.
Faza3:
[0667]Rastvor HC1 u dioksanu (4 M, 5.0 mL) se doda u rastvorjedinjenja 338(550 mg, 0.96 mmol) u smeši dioksan/MeOH (4:1, 15 mL) i reakcija se meša na sobnoj temperaturi u toku noći. Reaktivna smeša se nakon toga koncentruje do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak se prenese u MeOH (50 mL), doda se toluen (100 mL) i smeša se nakon toga ponovo upari do sušenja, da se dobijajedinjenje 339kao beličasta čvrsta supstanca (500 mg, pretpostavljeno kvantitativan prinos).lH NMR (400MHz, CD3OD) 5 8.10 (dd, 1H, 7=8.0, 2.0 Hz), 8.06 (dd, 1 H,7=8.9, 5.9 Hz), 7.85 (d, 1 H,7=8.0 Hz), 7.78 (d, 1 H,7=2.0 Hz), 7.56 (d, 1 H,7 =1.7 Hz), 7.48 (dd,1 H, 7 =9.9, 2.7 Hz), 7.26(d, 1 H,7=1.7 Hz), 7.19(dt, 1 H, 7=8.31, 2.85 Hz), 6.70 (q, 1H, J=6.5 Hz), 4.19 (d, 1H, J=14.5 Hz), 4.13 (d, 1 H,/= 14.6 Hz), 3.17 (s, 3 H), 2.61 (s, 3 H), 1.76 (d, 3H, J=6.0 Hz). LCMS ESm/z 474[M+H]<+>.
Faza 4:
[0668] Rastvor jedinjenja 339(500 mg, pretpostavljeno 0.96 mmol) kao HC1 so i DIPEA (2.0 g, 15.5 mmol) u DMF (6.0 mL) i THF (1.0 mL) se u kapima, na 0 °C, u toku 35 minuta dodaje u rastvor HATU (510 mg, 1.34 mmol) u DMF (6.0 mL). Nakon završenog dodavanja, smeša se meša još 60 minuta na 0 °C. Doda se voda (100 mL) i smeša se ekstrahuje sa EtOAc (2x50 mL). Kombinovane organske supstance se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(100 mL), slanim rastvorom (100 mL), suše preko Na2S04i upare. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, uz eluiranje sa 100% EtOAc, da se dobije lepljiva čvrsta supstanca. Čvrste supstance se rastvore u acetonitrilu (2.5 mL) i polako se dodaje MTBE (30 mL) uz dobro mešanje da produkt precipitira. Nakon mešanja u toku 20 minuta, smeša se filtrira iPrimer1 se sakupi kao krem obojena čvrsta supstanca (200 mg, 45% prinos). TLC: Rf = 0.5 (100% EtOAc).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 7.84 - 7.92 (m, 3 H), 7.69 (dd, 1H,J=10.4, 2.8 Hz), 7.51 (d, 1 H,J=2.0 Hz), 7.36 (dd, 1 H,J=8.8, 6.0 Hz), 7.14 (dt, 1H, J=8.4, 2.4 Hz), 7.09 (d, 1 H, 2.0 Hz), 6.13 (s, 2H), 5.71 - 5.67 (m, 1 H), 4.45 (d, 1H, J =13.2 Hz), 4.22 (d, 1H, J=13.2 Hz), 3.29 (s, 3 H), 3.01 (s, 3 H), 1.69 (d, 3 H,J=6.4 Hz). LCMS ESmlz456 [M+H]<+>. KristaliPrimera1 se dobijaju difuzijom pare pentana u rastvor etanola a rezultat toga se sakuplja u struji gasa azota na 120(2) K. Videti Sliku 1.
Izrada (10JR)-7-amino-12-fluoro-2,10,16-trimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2^-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-/i] [2,5,11 ]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer 2).
[0669]
Faza 1:
[0670]Paladijum (II) acetat (53 mg, 0.24 mmol) i cataCXium<®>A (180 mg, 0.5 mmol) se zajedno izmešaju u toluenu (1.5 mL, degasiran) i dobijeni rastvor se na 60 °C pipetom doda u izmešanirastvor jedinjenja7 (0.9 g, 2.4 mmol),jedinjenja 47(1.0 g, 3.0 mmol) bis-pinakolato dibora (0.9 g, 3.6 mmol) i CsF (1.9 g, 12.6 mmol) u smeši MeOH/H20 (9:1, 12 mL, degasiran). Dobijena smeša se nakon toga meša 3 h pod refluksom. Dodaju se nove porcije paladijum (II) acetata (26 mg, 0.12 mmol) i cataCXium® A (90 mg, 0.25 mmol) u toluenu (1.5 mL, degasiran) i žuta reaktivna smeša se meša na 60 °C u toku noći. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, smeša se razblaži sa EtOAc (150 mL) i filtrira kroz celite. Filtrat se ispere sa vodom (100 mL), nakon toga sa slanim rastvorom (100 mL), suši (Na2S04) i upari. Ostatak se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa 1:1 EtOAc/cikloheksan, da se dobijejedinjenje 340kao žuto ulje (570 mg, 43% prinos). TLC (Rf = 0.40, 1:1 EtOAc/cikloheksan).<l>RNMR (400 MHz, CDCb) 5 8.03 (m, 1 H), 7.65 (s, 1 H), 7.27 (dd, 1H,J=9.9, 2.7 Hz), 7.01 (m, 1 H), 6.68 (m, 1 H), 6.40 (m, 1 H), 4.90 (br s, 2 H), 4.20 - 4.30 (m, 2 H), 3.96 (s, 3 H), 3.94 (s, 3 H), 2.55 - 2.85 (m, 3 H), 1.68 (d, 3 H,J=6.6 Hz), 1.24 (s, 9 H). LCMS ESm/ z539 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0671]Urastvor jedinjenja 340(69% čistoće, 0.95 g, pretpostavljeno 1.05 mmol) u MeOH (20 mL) se doda rastvor NaOH (1.0 g, 25 mmol) u vodi (2 mL). Smeša se meša 3.5 sata na 40 °C. Reakcija se razblaži sa vodom (80 mL), koncentruje sa 20 mL da se ukloni MeOH na rotacionom uparivaču i ispere sa MTBE (100 mL). Vodeni sloj se nakon toga pažljivo zakiseli sa 1 M vodenim rastvorom HC1 do približno pH 2 (pH papir). U smešu se doda natrijum hlorid (15 g) i smeša se ekstrahuje sa EtOAc (100 mL). Organski sloj se izdvoji, suši (Na2S04) i upari da se dobijejedinjenje 341kao bledo žuta čvrsta supstanca (480 mg, 87% prinos).<l>K NMR (400 MHz, CD3OD) 5 8.05 (m, 1 H), 7.45 (s, 1 H), 7.37 (dd,l H,J=10.4, 2.8 Hz), 7.10 (dt, 1 H,J=8.5, 2.4 Hz), 6.50 - 6.60 (m, 2 H), 4.05 - 4.30 (m, 2 H), 3.99 (s, 3 H), 2.60 - 2.80 (m, 3 H), 1.72 (d, 3H,/= 6.5 Hz). LCMS ESmlz525 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0672]Rastvor HC1 u dioksanu (4 M, 6.0 mL) se doda u rastvorjedinjenja 341(480 mg, 0.91 mmol) u MeOH (6 mL) i reakcija se meša 2.5 sata na 40 °C. Reaktivna smeša se nakon toga koncentruje do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak se prenese u MeOH (50 mL), doda se acetonitril (100 mL) i smeša se nakon toga ponovo upari do sušenja, da se dobijejedinjenje 342kao beličasta čvrsta supstanca (400 mg, 87% prinos).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8 8.07 (dd, 1 H,J=8.9. 5.9 Hz), 7.51 (d, 1 H,J=1.7 Hz), 7.42 (dd, 1 H,J=9.8, 2.6 Hz), 7.23 (d, 1 H,J=1.6 Hz), 7.16(dt, lH,/=8.5, 2.7 Hz), 6.73(dd, 1 H, J = 11.9, 6.9Hz), 4.22 (d, 1H, J=14.7 Hz), 4.14 (d,20lH,/= 14.7 Hz), 4.07 (s, 3 H), 2.75 (s, 3 H),1.75 (d, 3H,J =5.5 Hz). LCMS ESm/ z425 [M+H]<+>.
Faza 4:
[0673] Rastvor jedinjenja 342(400 mg, pretpostavljeno 0.91 mmol) kao HC1 so i DIPEA (1.17 g, 9.1 mmol) u DMF (5.0 mL) i THF (0.5 mL) se na 0 °C, u toku 30 minuta, u kapima dodaju u rastvor HATU (482 mg, 1.27 mmol) u DMF (10.0 mL). Nakon završenog dodavanja, smeša se meša još 30 minuta na 0 °C. Doda se voda (70 mL) i smeša se ekstrahuje sa EtOAc (2 x 60 mL). Kombinovane organske supstance se isperu sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(2 x 100 mL), slanim rastvorom (100 mL), suše preko Na2S04i upare. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, uz eluiranje sa 70% EtOAc/cikloheksan da se dobije 205mg bledo žutog ostatka (polu čvrst). Čvrste supstance se rastvore u MTBE (7 mL) i polako se dodaje cikloheksan (20 mL), uz dobro mešanje da prdukt precipitira. Nakon 30 minuta mešanja, smeša se filtrira iPrimer2 se sakupi kao bela čvrsta supstanca (110 mg, 29% prinos). TLC (Rf = 0.40, 70% EtOAc u cikloheksanu).<J>H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7.83 (d,\ H, J =2.0 Hz), 7.30 (dd,IH, 7=9.6,2.4Hz), 7.21 (dd,\ H, J= 8.4, 5.6 Hz), 6.99 (dt, 1H,/=8.0, 2.8 Hz), 6.86 (d, 1 H,J= 1.2 Hz), 5.75 - 5.71 (m, 1 H), 4.84 (s, 2 H), 4.45 (d, 1 H,J=14.4 Hz), 4.35 (d, 1 H,J=14.4 Hz), 4.07 (s, 3 H), 3.13 (s, 3 H), 1.79 (d, 3 H,J= 6.4Hz). LCMS ESmlz407 [M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-12-fluoro-3-metoksi-10,16-dimetil-16,17-dihidro-8,4-(meteno)izotiazolo|4,3-/i] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer3).
[0674]
Faza 1:
[0675]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer1 se koristi zaizradu jedinjenja 343(1.3 g, 67% prinos). TLC (Rf = 0.30, 1:1 EtOAc/cikloheksan). 'HNMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 7.95 (m, 1 H), 7.52 (dd, 1H, J=10.4, 3.0 Hz), 7.41 (m, 1 H),7.25 (m, 1 H), 6.60 (m, 1 H), 6.20 (m, 1 H), 6.00 - 6.05 (m, 2 H), 4.00 - 4.25 (m, 2 H), 3.89 (s, 3 H), 3.85 (s, 3 H), 2.70 - 2.78 (m, 3 H), 1.60 (d, 3 H, .7=6.7 Hz), 1.08 -1.38 (m, 9 H). LCMS ES mlz 547 [M+H]'.
Faza 2:
[0676]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer1 se koristi za izradujedinjenja 344(600 mg, 88% prinos). TLC: Rf = 0.25 (EtOAc + 1% AcOH). 'H NMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 7.95 - 8.10 (m, 3 H), 7.50 - 7.60 (m, 2 H), 7.25 (m, 1 H), 6.95 - 7.10 (m, 1 H), 6.52 (m, 1 H), 4.10 - 4.40 (m, 2 H), 3.91 (s, 3 H), 2.50 - 2.75 (m, 3 H), 1.65 (d, 3 H), 1.08 - 1.30 (m, 9 H). LCMS ESmlz533 [M+H]".
Faza 3:
[0677]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimer 1se koristi za izradujedinjenja 345(540 mg, kvantitativan prinos).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 9.29 (br s, 2 H), 8.10 - 8.30 (m, 2 H), 8.03 (dd, 1H, J= 9.4,6.8 Hz), 7.65 (m, 1 H), 7.56(dd, 1 H, J=11.1, 2.6 Hz), 7.28(dt, 1 H, J= 7.9, 2.8 Hz), 7.10 (s, 1 H), 6.52 (q, 1 H,J=6.7 Hz), 4.00 - 4.20 (m, 2 H), 3.94 (s, 3 H), 2.54 - 2.57 (m, 3 H),1.66 (d, 3 H, J= 6.1 Hz). LCMS ES mlz 433 [M+H]+.
Faza 4:
[0678]Postupak opisan u fazi 4 zaPrimer1 se koristi za izraduPrimera3 (130 mg, 29% prinos). TLC (Rf = 0.40, 100% EtOAc).<*>H NMR (400 MHz,DMSO-ofe)5 7.63 (dd, 1 H,J =12.0, 4.0 Hz), 7.50 (d, 1 H,J= 1.6 Hz), 7.42 (dd,l H,J=8.4, 5.6 Hz), 7.13 (dt, 1 H,J=8.4, 2.8 Hz), 6.82 (d, 1 H,J= 1.6 Hz), 5.96 (s, 2 H), 5.66 - 5.62 (m, 1 H),4.31 (d, 1 H,J = 13.5 Hz), 4.18 (d, 1 H, J = 13.5 Hz), 4.05 (s, 3 H), 3.03 (s, 3 H), 1.67 (d,3H,J=6.4 Hz). LCMS ES w/z415 [M+H]".
Izrada 7-amino-12-fluoro-2,16-dimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2/7-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-/i] [2,5,11 ]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer 4).
[0679]
Faza 1:
[0680]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer1 se koristi za izradujedinjenja 346(232 mg, 54% prinos).<l>R NMR (400 MHz, CDCh) 5 8.03 - 8.12 (m, 2 H), 7.69 - 7.75 (m, 1 H), 7.36 (dd, 1 H), 7.07 (td, 1 H), 5.56 (br s, 2 H), 5.07 (br s, 0.2 H), 4.94 (br s, 1.8 H), 4.50 (br s, 2 H), 4.02 (s, 3 H), 3.90 (s, 3 H), 2.71 (br s, 3 H), 1.35 (br s, 9 H). LCMS ESmlz525 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0681]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 1se koristi za izradujedinjenja 347,pri čemu se LiOH koristi umesto NaOH (210 mg, kvantitativan prinos). LCMS ESmlz511 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0682] Jedinjenje 347(210 mg, -0.44 mmol) se rastvori u DCM (6 mL) i doda se TFA (0.12 mL, 1.6 mmol). Smeša se meša 18 sati na RT. Doda se TFA (0.06 mL, 0.8 mmol) i smeša se meša 2 sata na RT. LCMS pokazuje utrošakjedinjenja 347.Reakcija se koncentruje pod vakuumom i dodaju se dietil etar (3 mL) i MTBE (3 mL). Smeša se meša 1 sat na RT i dekantuje. Osnovni rastvori se uklone i dobijene bele čvrste supstance se suše pod vakuumom da se dobijejedinjenje 348(216 mg, kvantitativan prinos).<J>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 8.23 - 8.13 (m, 1 H), 7.66 (br s, 1 H), 7.58 - 7.49 (m, 2 H), 7.26 - 7.18 (m, 1 H), 5.80 5.77 (m,
2 H), 4.30 (s, IH), 4.11 (s, 2 H), 4.05 (s, 1 H), 3.21 (s, 3 H), 2.77 (s, 3 H). LCMS ES m/ z 411
[M+H]<+>.
Faza 4:
[0683]HATU (380 mg, 0.99 mmol) i HOBt (20 mg, cat.) se rastvore u DMF (10 mL). U kapima se u toku 25 minuta dodaje rastvorjedinjenja 348(210 mg,~0.33 mmol) i DIPEA (0.42 mL, 2.31 mmol) u DMF (10 mL). Na kraju dodavanja, LCMS pokazuje utrošak SM. Doda se slani rastvor (100 mL) i ekstrahuje sa etil acetatom (6 x 50 mL). Organske supstance se kombinuju, suše preko MgS04, filtriraju i upare. Prečišćavanjem hromatografijom na koloni silika gela, uz eluiranje sa cikloheksanom i etil acetatom (1:1 do 0:1) dobija sePrimer4 (45 mg, 35% prinos preko 3 faze).<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.84 (d,1 H, J = 1.6Hz), 7.34 (dd, 1 H,J=9.2, 2.4 Hz), 7.22 - 7.27 (m, 1 H), 7.02 (td,1H,J=8.4, 2.8 Hz), 6.84 (d, 1 H, J= 2.0 Hz), 5.49 (dd,IH, J=13.6, 1.6 Hz), 5.23 (d,IH. J=13.6 Hz), 4.88 (br s, 2 H), 4.48 (d, 1 H,J=14.4 Hz), 4.38 (d, 1 H,J= 14.4 Hz), 4.07 (s, 3 H), 3.12 (s, 3 H). LCMS ESmlz393 [M+H]<+>. Analitičko asimetično razdvajanje pomoću SFC se izvodi koristeći Chiralpak OD-H (4.6 mm x 250 mm kolonu, 5 mikrona veličina čestice), uz eluiranje sa 30% MeOH u CO2, zadržavanje na 35 °C i 140 bara. Brzina protoka 3 mL/minut daje Rt(piki) = 4.3 minuta ([a]d<20=>-121.4° (C=0.23, MeOH) i Rt^) = 5.4 minuta ([a]d<20=>103.3° (C=0.23, MeOH).
Primer 4a(Atropizomer pik 1): 91.6% ee.<l>R NMR (600 MHz, DMSO-ć/6) 5 7.45 - 7.63 (3 H, m), 7.17 - 7.27 (1 H, m), 6.77 (1H, s), 6.20 (2 H, br s), 5.29 (1 H, d, J=14.3 Hz), 5.24 (1
H, d,J=13.2 Hz), 4.46 (1 H, d,J=14.2 Hz), 4.23 (1 H, d,J=15.3 Hz), 4.02 (3 H, s), 2.97 (3 H, s).
Primer 4b(Atropizomer pik 2): 89.6% ee.<*>H NMR (600 MHz, DMSO-</6) 5 7.45 - 7.62
(3 H, m), 7.18 - 7.27 (1 H, m), 6.77 (1 H, s), 6.20 (2 H, br s), 5.30 (1 H, d,J=14.3 Hz), 5.24 (1 H,d, J=13.2 Hz), 4.46 (1 H,d, J=14.2 Hz), 4.23 (1 H,d, J=14.2 Hz), 4.02 (3 H, s), 2.97 (3 H, s).
Izrada 8-amino-3-fluoro-17-metil-13-(metilsulfonil)-16,17-dihidro-7,ll-(meteno)dibenzo|#,/l [l,4,10]oksadiazaciklotetradecin-18(5/7)-ona (Primer5).
[0684]
Faza 1:
[0685]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 1se koristi zaizradu jedinjenja 349(312 mg,
68% prinos).<J>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 8.09 (dd, 1 H,J=8.4, 5.8 Hz), 7.89 (dd, 1H,/ =8.0, 1.6 Hz), 7.77 (d, 1H, J =2.0 Hz), 7.63 (br s, 1 H), 7.43 (d, 1H, J =8.4 Hz), 7.39 (br d, 1 H,J=10.0 Hz), 7.08 (dt, lH,/= 8.4, 2.4 Hz), 6.86 - 6.89 (m, 1 H), 5.55 (s, 2 H), 4.92 (br s, 2 H), 4.34 - 4.42 (m, 2 H), 3.89 (s, 3 H), 3.08 (s, 3 H), 2.68 - 2.76 (m, 3 H), 1.38 - 1.47 (m, 9 H). LCMS ESmlz 51' 4[M+H]<+>.
Faza 2:
[0686]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer1 se koristi za izradujedinjenja 350,pri čemu se KOH koristi umesto NaOH (200 mg, 67% prinos).<l>RNMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 8.05 (dd, 1 H,J=8.8, 6.0 Hz), 7.98 (dd, 1 H,J=7.6, 2.0 Hz), 7.78 (d, 1 H,J=2.0 Hz), 7.63 - 7.70 (m, 2 H), 7.46 - 7.50 (m, 2 H), 7.29 (dt, 1 H,J=2.8, 8.4 Hz), 5.65 (s, 2 H), 5.39 - 4.41 (m, 2 H), 3.25 (s, 3 H), 2.66 (br s, 3 H), 1.25 - 1.36 (m, 9 H). LCMS ESmlz560 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0687]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimer4 se koristi za izradujedinjenja351 (170 mg, 91% prinos).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-ofe) 5 9.31 - 9.32 (m, 2 H), 8.02 - 8.09 (m, 3 H), 7.88 (d, 1 H,J=2.0 Hz), 7.70 - 7.73 (m, 2 H), 7.54 (s, 1 H), 7.30 - 7.33 (m,l H), 5.65 (s, 2 H), 4.13 - 4.15 (m, 2 H), 3.30 (s, 3 H), 3.17 (s, 3 H). LCMS ESmlz460 [M+H]<+>.
Faza 4:
[0688] Rastvor jedinjenja351 (527 mg, 1.1 mmol) i DIPEA (2.24 mL, 15.9 mmol) u DMF (9 mL) i THF (1 mL) se na -10 °C, u kapima u toku 10 minuta, dodaje u izmešani rastvor HATU (566 mg, 1.5 mmol) u DMF (9 mL) ohlađen u led/NaCl/MeOH kupatilu. LCMS pokazuje kompletan utrošakjedinjenja 351.Dodaju se voda (30 mL) i EtOAc (30 mL) i smeša zasiti dodavanjem NaCl. Faze se razdvoje i vodeni sloj se ponovo ekstrahuje sa EtOAc (3 x 30 mL). Organski slojevi se kombinuju, suše preko MgS04i rastvarač seukloni pod vakuumom.Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, uz eluiranje sa smešom EtOAc/heptan (8:2 do 1:0 nakon toga EtOAc/MeOH 9:1) da se dobije frakcija koja sadržiPrimer5(110 mg, —70% čistoće ali kontaminirano sa DMF) a mnogo polarnija frkcija (glavna komponenta sirove smeše, 83 mg, bela čvrsta supstanca, [M+H]<+>883) izgleda daje ciklični dimer. Prethodna frakcija se dalje prečisti reverzno faznom hromatografijom da se dobijePrimer5 kao bela čvrsta supstanca (10 mg, 2% prinos).<l>R NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.01 (d, 1H,/=2.0 Hz), 7.92 (dd, 1H,/=8.0, 2.0 Hz), 7.65 (d, 1 H,J=8.0 Hz), 7.59 (d, 1H, J= 2.0 Hz),7.33 (dd, 1 H,J= 9.2,2.8 Hz), 7.21 (dd, 1H, J=8.6, 5.4 Hz), 7.11 (d,1 H, J= 1.6 Hz), 7.00 (dt,1 H, J =8.4, 2.4 Hz), 5.59(dd, 1 H,/=13.6, 2.0 Hz), 5.22(d, 1 H, J =13.6 Hz), 4.84 (br s»2 H). 4.63 (d i H,J- 13.2 Hz), 4,28 (đ, 1 H, J ~ 13.2 Hz), 3J2 (s, 3 H), 3.11 (s(3H),
Izrada 7»amino4;2-fitt0ro-1346^ &][2,541]fre02ofeađ*a£asJ^ (Primer 6),
|0689j
Faza 1:
[0690]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 1se koristi za izradujedinjenja 352(350 mg, 28% prinos).<l>R NMR (400 MHz, CDCh) 5 8.09 (dd, 1 H,/= 8.8, 6.0 Hz), 7.55 (s, 1 H), 7.35 (dd,\ H, J=10.0, 2.8 Hz), 7.06 (td, 1 H,J =8.4, 2.4 Hz), 6.74 (d, 1H, J =1.6 Hz), 5.54 (s, 2 H), 4.81 (s, 2 H), 4.40 (s, 2 H), 3.89 (s, 3 H), 3.79 (s, 3 H), 2.45 (s, 3 H), 2.10 (s, 3 H), 1.45 (s, 9 H). LCMS ESmlz514 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0691]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 1se koristi za izradujedinjenje 353,pri čemu se LiOH koristi umesto NaOH (310 mg, 88% prinos). 'HNMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.90 - 7.85 (m, 1 H), 7.36 (s, 1 H), 7.24 (dd,l H,J=10.0, 2.4 Hz), 6.99 (td, 1 H,J=8.4, 2.4 Hz), 6.87 (s, 1 H), 5.60 (s, 2 H), 4.37 (s, 2 H), 3.75 (s, 3 H), 2.40 (s, 3 H), 2.04 - 2.00 (m, 3 H), 1.42 (s, 9 H). LCMS ESmlz500 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0692]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimer 4se koristi za izradujedinjenja 354(408 mg, kvantitativan prinos).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 8.75 (br s, 2 H), 8.06 (dd, 1 H,J =8.4, 6.0 Hz), 7.67 (dd, 1H,J=10.0, 2.4 Hz), 7.57 (d, 1H,/=1.6 Hz), 7.26 - 7.35 (m, 2 H), 5.65 (s, 2 H), 4.20 (br s, 2 H), 3.86 (s, 3 H), 2.44 (br s, 3 H), 2.05 (s, 3 H). LCMS ESmlz400
[M+H]<+>.
Faza 4:
[0693]Postupak opisan u fazi 4 zaPrimer 4,izvršen na 0 °C, se koristi zaizradu jedinjenja Primer 6(130 mg, 29% prinos).<l>RNMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 7.56 (dd, 1 H,J =9.6, 2.4 Hz), 7.44 - 7.38 (m, 2 H), 7.22 (td, 1 H,J=8.4, 2.8 Hz), 6.73 (d, 1 H,J=1.6 Hz), 5.82 (br s, 2 H), 5.30 (d,1 H, J =13.6 Hz), 5.17 (d,1 H, J =13.6 Hz), 4.65 (d,1 H, J =15.2 Hz), 4.20 (d, 1H,J= 15.2 Hz), 3.89 (s, 3 H), 2.97 (s, 3 H), 2.54 (s, 1 H), 2.22 (s, 3 H). LCMS ESmlz382 [M+H]<+>.
Izrada 8-amino-3-fluoro-17-metil-16,17-dihidro-7,ll-(meteno)dibenzo[#,/]-[l,4,10]oksadiazaciklotetradecin-18(5//)-ona (Primer 7).
[0694]
Faza1:
[0695]U degasiranrastvor jedinjenja 35(350 mg, 0.99 mmol), bis(neopentilglikolato)dibora (289 mg, 1.3 mmol) i KOAc (339 mg, 3.4 mmol) u DMSO (10 mL) se doda Pd(dppf)Cb (80 mg, 0.1 mmol). Dobijena smeša se meša 1 h na 75 °C. LCMS analiza pokazuje da se formira međuproizvod borna kiselina. Nakon hlađenja na RT, dodaju sejedinjenje 59(311 mg, 1.03 mmol), NaHC03(aq) (IM rastvor, 3.0 mL, 3.0 mmol) i dioksan (10 mL). Smeša se degasira, a nakon toga se doda Pd(dppf)Cb (80 mg, 0.1 mmol). Dobijena smeša se meša 2 sata na 80 °C,koncentruje pod vakuumom,dodaju se etil acetat (100 mL) i voda (150 mL) a nakon toga podele. Vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (2 x 100 mL) i kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (400 mL), suše preko MgS04a nakon togakoncentruju pod vakuumom.Prečišćavanjem gasnom hromatografijom na koloni silika gela, uz eluiranje sa 1% MeOH i 10% heptana u DCM, dobija sejedinjenje 355kao žuta čvrsta supstanca (260 mg, 53% prinos).<l>R NMR (400 MHz, CDCh) 5 8.06 (dd, 1 H), 7.66 (s, 1 H), 7.16 - 7.30 (m, 5 H), 7.05 (ddd, 1 H), 6.86 (d, 1 H), 5.53 (s, 2 H), 4.80 (br s, 2H), 4.33 (br s, 2 H), 3.96 (s, 3 H), 2.63 (br d, 3 H), 1.42 (br d, 9 H). LCMS ESmlz440 [M-<t>Bu]<+>.
Faza 2:
[0696]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer1 se koristi za izradu jedinjenja356,pri čemu se LiOH koristi umesto NaOH (123 mg, kvantitativan prinos). LCMS ESmlz482 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0697]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimer1 se koristi za izradujedinjenja 357(36 mg, 47% prinos).<l>KNMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.70 (dd, 1 H), 7.63 (m, 1 H), 7.45 (m, 3 H), 7.32 (m, 2 H), 7.22 (d, 1 H), 7.02 (ddd, 1 H), 5.55 (s, 2 H), 4.08 (s, 2 H), 2.56 (s, 3 H). LCMS ESmlz383 [M+H]<+>.
Faza 4:
[0698]U suspenzijujedinjenja 357(36 mg, 0.09 mmol) u DMF (6 mL) se doda DIPEA (84 mL, 0.48 mmol) a nakon toga HATU (72 mg, 0.19 mmol). Dobijeni rastvor se meša 30 minuta na sobnoj temperaturi. LCMS analiza pokazuje da se formira smeša željenog produkta i dimera (odnos 2:1). Nakonkoncentrovanja pod vakuumom,ostatak se prečisti reverzno faznom preparativnom HPLC (voda/MeCN gradient, 30 min protok), da se dobijePrimer 7kao smeđa čvrsta supstanca (14 mg, 41% prinos).<*>H NMR (400 MHz, CD3OD) 5 7.56 (m, 2 H), 7.37 - 7.45 (m, 5 H), 7.15 (d, 1 H), 7.10 (ddd, 1 H), 5.53 (d, 1 H), 5.24 (d, 1 H), 4.47 (d, 1 H), 4.38 (d, 1 H), 3.10 (s, 3 H). LCMS ESmlz364 [M+H]'.
Izrada 8-amino-3-fluoro-5,17-dimetil-16,17-dihidro-7,ll-(meteno)dibenzo[^,/]-[l,4,10]-oksadiazaciklotetradecin-18(5/7)-ona (Primer 8).
[0699]
Faza1:
[0700]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer7 se koristi za izradujedinjenja 358(820 mg,
53% prinos).<l>R NMR (400 MHz, CDCh) 5 8.01 (dd, 1 H), 7.54 (br s, 1 H), 7.34 - 7.18 (m, 4 H), 7.07 (dd, 1 H), 6.99 (br s, 1 H), 6.62 - 6.49 (m, 1 H), 6.44 - 6.32 (m, 1 H), 4.86 (br s, 2 H), 4.11 - 4.02 (m, 2 H), 3.86 (br s, 3 H), 2.60 - 2.45 (m, 3 H), 1.67 (d, 3 H), 1.55-1.31 (m, 9 H). LCMS ESm/ z510 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0701]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 1se koristi za izradujedinjenja 359,pri čemu se LiOH koristi umesto NaOH (629 mg, kvantitativan prinos). LCMS ESmlz496 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0702]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimer 1se koristi za izradujedinjenja 360(810 mg, kvantitativan prinos). LCMS ESmlz396 [M+H]<+>.
Faza 4:
[0703]Postupak opisan u fazi 4 zaPrimer 7se koristi za izraduPrimera 8(49 mg, 8% prinos).<l>K NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.53 (d, 1 H,J=2.0 Hz), 7.48 - 7.32 (m, 4 H), 7.28(dd,l H, J=10.0,2.8 Hz), 7.17-7.13 (m, 2 H), 6.94 (td,1 H, J = 8.0, 2.4 Hz), 5.83 (qd,1 H,J= 6.0, 2.0 Hz), 4.75 (br s, 2 H), 4.50 (d, 1 H, J =13.2 Hz), 4.16 (d,1 H, J=13.6 Hz), 3.12 (s, 3 H), 1.78 (d, 3 H,J=6.4 Hz). LCMS ESmlz378 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-16-etil-12-lfuoro-l,3,10-trimetil-16,17-dihidro-lH-8,4-(meteno)pirazolo|4,3-/il|2,5,lllbenzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer 9 i
Primer 10).
[0704]
Faza1:
[0705]Urastvor jedinjenja 361(1.0 g, 7.9 mmol) u DMF (53 mL) se doda NBS (1.4 g, 7.9 mmol). Rastvor se meša na sobnoj temperaturi u toku noći a nakon toga koncentruje. U čvrstu supstancu se doda 1 N rastvor Na2C03(10 mL) i smeša se koncentruje da se ukloni voda. Čvrsta supstanca se prevede u žitku masu u smeši DCM/MeOH i filtrira. Osnovni rastvor se koncentruje i prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa smešom DCM/7 N rastvor NH3u MeOH (0-10%) da se dobijejedinjenje 362(749 mg, 46% prinos). JH NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 5.31 (t,/= 5.4 Hz, 1 H), 4.43(d, J=5.3 Hz, 2 H), 3.77 (s, 3 H), 2.08 (s, 3 H).
Faza 2:
[0706]U zatvorenu epruvetu,smeša jedinjenja 16(500 mg, 1.35 mmol),jedinjenja 362(555 mg, 2.03 mmol), dibor pinakol estra (1.38 g, 5.42 mmol) i cezijum fiuorida (1.03 g, 6.77 mmol) u MeOH (9.0 mL) i vodi (0.90 mL) se zagreva na 60 °C i u mehurićima se propušta azot. Doda se rastvor Pd(OAc)2(30 mg, 0.14 mmol) i di(l-adamantil)-«-butilfosfina (100 mg, 0.72 mmol) u toluenu (0.5 mL) i smeša se zagreje na 100 °C. Nakon~6 sati, smeša se ohladi na sobnu temperaturu i razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom i slanim rastvorom, suši preko MgS04, filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa smešom DCM/MeOH (0-9%) da se dobijejedinjenje 363kao žuta guma (433 mg, 77% prinos). LCMS ESmlz415 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0707]Urastvor jedinjenja 363(560 mg, 1.35 mmol) u DCE (13.5 mL) se doda Mn02(1.2 g, 10.0 mmol). Reakcija se zagreva na 50 °C u toku noći. Smeša se filtrira i osnovni rastvor se koncentruje i prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa smešom heptani/EtOAc (0-75%) da se dobijejedinjenje 364(226 mg, 41% prinos preko 2 faze).<l>HNMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 9.40 (s, 1 H), 7.94 (dd,J=5.9, 8.7 Hz, 1 H), 7.55 (dd,J=2.6, 10.4 Hz, 1 H), 7.50 (d,J =1.8 Hz, 1 H), 7.26 (dt,J=2.8, 8.4 Hz, 1 H), 6.71(d,J =1.8 Hz, 1 H), 6.25 (q,J=6.1 20 Hz, 1 H), 6.16 (s, 2 H), 4.00 (s, 3 H), 3.84 (s, 3 H), 1.92 (s, 3 H), 1.62 (d,J=6.3 Hz, 3 H). LCMS ESmlz413 [M+H]<+>.
Faza 4:
[0708]U rastvorjedinjenja 364(226 mg, 0.548 mmol) u DCM (5.5 mL) se doda u etil amin (2 M rastvor u THF, 548 uL, 1.10 mmol) a nakon toga Ti(O<i>Pr)4(642 uL, 2.19 mmol). Nakon 1 sat, dodaju se MeOH (2.0 mL) i NaBH4(104 mg, 2.74 mmol) (gas se razvija). Reakcija se neutrališe sa vodom i formiraju se bela čvrsta supstanca. Smeša se filtrira kroz celite i osnovni rastvor se razblaži sa EtOAc, ispere sa zasićenim rastvorom NH4CI i slanim rastvorom, suši preko MgS04, filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa smešom heptani/EtOAc (0-100%) a nakon toga sa smešom MeOH/DCM (0-10%) da se dobijejedinjenje 365(119 mg, 49% prinos).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-c/6) 5 7.96(dd, .7=6.0, 8.8Hz, 1 H), 7.52(dd,J=2.5, 10.3Hz, 1 H), 7.42 (d,J= 1.8 Hz, 1 H), 7.25 (dt,J=2.8, 8.4 Hz, 1 H), 6.58 (d,J=1.5 Hz, 1 H), 6.22 (q,J=6.0 Hz, 1 H), 5.86 (s, 2 H),
3.86 (s, 3 H), 3.72 (s, 3 H), 3.48 - 3.35 (m, 2 H), 2.32(q, J=7.1 Hz, 2 H), 1.83 (s, 3 H), 1.79 (br s, 1 H), 1.61( d, J=6.3 Hz, 3 H), 0.88(t, J=7.1 Hz, 3 H). LCMS ESm/ z 442[M+H]<+>.
Faza5:
[0709] Urastvor jedinjenja 365(115 mg, 0.26 mmol) u MeOH (520 uL) se doda 15% rastvor NaOH (68 uL, 0.26 mmol). Reakcija se zagreje na 50 °C. Kada se pomoću LCMS oceni daje reakcija završena, koncentruje se da se dobije natrijum sojedinjenja 366(116 mg, 99% prinos).
Faza6:
[0710]U rastvor natrijumove solijedinjenja 366(90 mg, 0.20 mmol) u DMF (13 mL) se doda DIEA (70 mL, 0.40 mmol) a nakon toga 2-hlor-l-metil piridinijum jodid (57 mg, 0.22 mmol). Nakon 30 min reakcija se koncentruje i prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa smešom DCM/MeOH (0-10%) a nakon toga asimetričnim razdvajanjem pomoću SFC se dobijaju oba enantiomera naslovljenog jedinjenja. Analitičko asimetično razdvajanje pomoću SFC se izvodi koristeći Regis Whelk-01( S, S)kolonu (4.6 mm x 100 mm kolonu, 5 mikrona veličina čestice), uz eluiranje sa 30% MeOH u CO2, zadržavanje na 25 °C i 140 bara. Brzinom protoka od 5 mL/min dobija se Rt(piki) = 1.28 minuta i Rt(pik2)= 1.78 minuta.
Primer9 (Pik 1): 3.7 mg, >98% ee, 4.5% prinos. !H NMR (DMSO-fife, 400 MHz) 5 7.59 (dd,
.7=2.5, 10.4Hz, 1 H), 7.37 (s, 1 H), 7.34(dd, J=5.6, 8.4 Hz, 1 H), 7.16(dt, J=2.5, 8.4 Hz, 1 H), 6.83 (s, 1 H), 5.80 (s, 2 H), 5.60 (d,J=6.4 Hz, 1 H), 4.68 (d,J=15.3 Hz, 1 H), 4.07 (d,J=15.5 Hz, 1 H), 3.87 (s, 3 H), 3.37(d, J =6.9 Hz, 1 H), 2.19 (s, 3 H), 1.66(d, J =6.4 Hz, 3 H), 1.02 (t,J=7.0 Hz, 3 H). LCMS ESmlz410 [M+H]<+>.
Primer 10(Pik 2): 4.0 mg, 90% ee, 4.9% prinos.<l>U NMR (DMSO-</6, 400 MHz) S 7.59 (dd,J=2.5, 10.2 Hz, 1 H), 7.37 (s, 1 H), 7.34 (dd,J=5.6, 8.4 Hz, 1 H), 7.16 (d,J= 2.5 Hz, 1 H), 6.83(d, J=1.3 Hz, 1 H), 5.80 (s, 2 H), 5.60(d, J=5.6 Hz, 1 H), 4.68 { dj= 15.3 Hz, 1 H), 4.07(d, J=15.5 Hz, 1 H), 3.87 (s, 3 H), 2.19 (s, 3 H),1.66 (d, J= 6.1 Hz, 3 H),1.02(t, J =7.0 Hz, 3 H). LCMSmlz410 [M+H]<+>.
Sinteza 7-amino-16-ciklopropil-12-lfuoro-l,3,10-trimetil-16,17-dihidro-lH-8,4-(meteno)pirazolo|4,3-^l|2,5,lllbenzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer 11 i
Primer 12).
Faza 1:
[0712]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimere 9i10se koristi zaizradu jedinjenja 367(191 mg).1HNMR(DMSO-^6, 400 MHz) 5 7.89 (dd, .7=5.8, 8.8 Hz,1 H), 7.49(dd, .7=2.4, 10.4Hz, 1 H), 7.32 (s, 1 H), 7.20 (dt,J=2.4, 8.5 Hz, 1 H), 6.49 (s, 1 H), 6.22 (q,J=6.0 Hz, 1 H), 5.89 (s,2H),4.34( d, J=15.9 Hz, 1 H), 4.07 (d,J=15.6 Hz, 1 H), 3.85 (s, 3 H), 3.66 (s, 3 H), 1.87 (s,3H), 1.69 (br. s., IH), 1.61( d, J= 6.3 Hz, 3 H),1.35 (s, 9 H), 0.09 - 0.15 (m, 4 H). LCMS ESm/ z554 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0713]U rastvorjedinjenja 367(191 mg) u DCM (1.7 mL) se doda HC1 (4 N rastvor u dioksanu, 1.7 mL). Razblaži se sa EtOAc, ispere sa zasićenim rastvorom NaHC03(2x) i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje. Rastvor se prečisti gasnom hromatografijom uz eluiranje sa smešom heptani/EtOAc (50-100%), nakon toga sa smešom DCM/MeOH (0-10%) da sedobije jedinjenje 368(104 mg, 67% prinos preko 2 faze).<l>R NMR (DMSO-^6, 400 MHz) 5 7.95 (dd,J=5.8, 8.8 Hz, 1 H), 7.52 (dd,J=2.6, 10.2 Hz, 1 H), 7.44( d, J=1.0 Hz, 1 H), 7.24 (dt, .7=2.8, 8.3 Hz, 1 H), 6.57 (s, 1 H), 6.22(q,J=6.1Hz, 1 H), 5.86 (s, 2 H), 3.85 (s, 3 H), 3.69 (s, 3 H), 3.48 (s, 2 H), 2.40 (br. s., 1 H), 1.82 (s, 4 H), 1.60( d, J=6.3 Hz, 3 H), 0.24 - 0.15 (m, 2 H), 0.11 - 0.04 (m, 2 H). LCMS ESmlz454
[M+H]<+>.
Faza 3:
[0714]Postupak opisan u fazi 5 zaPrimere 9i10se koristi zaizradu jedinjenja 369(105 mg natrijumove so).
Faza 4:
[0715]Postupak opisan u fazi 6 zaPrimere 9i10se koristi za izraduPrimera 11i12.Analitičko asimetično razdvajanje pomoću SFC se izvodi koristeći Regis Whelk-01( S, S)4.6 mm x 100 mm kolonu (5 mikrona veličina čestice) uz eluiranje sa 30% MeOH u CO2zadržavanje na 35 °C i 120 bara. Brzinom protoka od 5 mL/min dobija se Rt(piki)= 1.69 minuta i Rt(pik2) = 2.73 minuta.Primer 11(Pik 2): 1.8 mg; 85% ee, 2% prinos.<*>H NMR (DMSO-de, 400 MHz) 5 7.57 (dd,J= 2.5, 10.4 Hz, 1 H), 7.37 - 7.32 (m, 2 H), 7.13 (dt,J=2.8, 8.4 Hz, 1 H), 6.74 (s, 1 H), 5.80 - 5.75 (m, 2 H), 5.70 - 5.64 (m, 1 H), 4.64 (d,J=15.3 Hz, 1 H), 4.09 (d,J=15.0 Hz, 1 H),
3.91 (s, 3 H), 2.44 - 2.39 (m, 1 H), 2.19 (s, 3 H), 1.65 (d, J= 6.1 Hz, 3 H), 1.10 (br. s, 1 H),
0.97 - 0.91 (m, 1 H), 0.86 - 0.77 (m, 2 H). LCMS ESmlz422 [M+H]<+>.
Primer 12(Pik 1): 2.2 mg; 85% ee, 2% prinos.lttNMR (DMSO-ć/6, 400 MHz) 8 7.57 (d,J =9.7 Hz, 1 H), 7.37 - 7.32 (m, 2 H), 7.13 (t,J=8.4 Hz, 1 H), 6.74 (s, 1 H), 5.77 (s, 2 H), 5.70 - 5.64 (m, 1 H), 4.64(d, J=15.3 Hz, 1 H), 4.09 (d,J=15.5 Hz, 1 H), 3.91 (s, 3 H), 2.44 - 2.39 (m, 1 H),2.19(s, 3H),1.65 ( d, J= 5.8 Hz, 3 H),1.13-1.06 (m, 1 H), 0.98 0.90(m, .7=6.9Hz, 1 H), 0.82 (br s, 2 H). LCMS ESm/ z422 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-12-fluoro-l,3,10,16-tetrametil-16,17-dihidro-1^-8,4-(meteno)pirazolo|4,3-/i]|2,5,ll]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer 13 i
Primer 14).
[0716]
Faza 1:
[0717]Urastvor jedinjenja 57(689 mg, 2.2 mmol)i jedinjenja 16(400 mg, 1.1 mmol) i bis pinakol estar (825 mg, 3.25 mmol) u MeOH (11.6 mL) se doda 1 N rastvor NaOH u vodi (2.2 mL, 2.2 mmol). Reaktivna smeša se prečisti sa azotom. Nakon toga se po redu dodaju Pd(OAc)2(30.3 mg, 0.14 mmol) i di(l-adamantil)-«-butilfosfin (4 mg, 0.14 mmol) i reaktivna smeša se prečisti sa azotom. Reaktivna smeša se zagreje na 80 °C u uljanom kupatilu u toku noći i ohladi na sobnu temperaturu. Reaktivna smeša se filtrira kroz celite ploču i ispere sa MeOH. Dobijeni rastvor se koncentruje i prečisti reverzno faznom hromatografijom da se dobijejedinjenje 370kao ulje (300 mg, 53% prinos). LCMSmlz528 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0718] U jedinjenje 370(50 mg, 0.09 mmol) u THF (3 mL) se na sobnoj temperaturi doda 0.5 mL 38% rastvor HC1. Reaktivna smeša formira dva sloja. Reaktivna smeša se 30 minuta zagreva pod mikrotalasima na 60 °C da se dobijejedinjenje 371.
Faza 3:
[0719] Jedinjenje 371se ohladi na sobnu temperaturu i u reaktivnu smešu se dodaju 50% rastvor NaOH (približno 1.0 mL) do pH -12 i MeOH (3 mL). Nakon 30 min zagrevanja na 60 °C u uljanom kupatilu, reakcija se koncentruje i liofilizira u toku noći da se dobijejedinjenje 372.Pretpostavljeni teoretski prinos je 39 mg.
Faza 4:
[0720]U reaktivna smeša koja sadržijedinjenje 372(39 mg, 0.09 mmol) u anhidrovanom DMF (3 mL) na pH -10 se doda HATU (72 mg, 0.18 mmol) i meša na sobnoj temperaturi. Nakon 4 sata, LCMS reaktivne smeše pokazuje daje završena konverzija u željeni produkt. Reaktivna smeša se razblaži sa MeOH, filtrira kroz celite ploču i koncentruje. Nakon reverzno faznog prečišćavanja koristeći amonijum acetat kao dodatak, željeni produkt se dobija kao čvrsta supstanca (8 mg 22% prinos).<J>H NMR (600 MHz, DMSO-fife) 5 7.59 - 7.63 (m, 1 H), 7.36 - 7.41 (m, 2 H), 7.17 (d,J=2.5 Hz, 1 H), 6.75 (s, 1 H), 5.81 (s, 2 H), 5.50 - 5.64 (m, 1 H), 4.61 (d,J=14.9 Hz, 1 H), 4.08 (d,J=15.2 Hz, 1 H), 3.87 (s, 3 H), 2.98 (s, 3 H), 2.20 (s, 3 H), 1.65 (d,J=6.4 Hz, 3 H). Analitičko asimetično razdvajanje pomoću SFC se izvodi koristeći Chiralcel OD-3 (4.6 mm x 100 mm kolonu, 3 mikrona veličina čestice) uz eluiranje sa 30% MeOH u CO2zadržavanje na 25 °C i 120 bara. Brzinom protoka od 5 mL/min dobija se Rt<Piki) = 0.75 minuta i Rt(Kk2) = 1.3 minuta.Primer 13(Pik 1): 'HNMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 7.62 (dd,J=2.5, 10.3 Hz, 1 H), 7.33 - 7.43 (m, 2 H), 7.15 - 7.23 (m, 1 H), 6.76(d, J=1.5 Hz, 1 H), 5.81 (s, 2 H), 5.60 (brs,1 H), 4.62 (d, J=15.1 Hz,1 H), 4.08 (d, J =15.1 Hz, 1 H), 3.88 (s, 3 H), 2.99 (s, 3 H), 2.21 (s, 3 H), 1.65(d, J=6.0 Hz, 3 H).Primer 14(Pik 2):<*>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 7.57 - 7.65 (m, 1 H), 7.33 - 7.44 (m, 2 H), 7.12 - 7.23 (m, 1 H), 6.76 (s, 1 H), 5.80 (s, 2 H), 5.61 (br. s, 1 H), 4.62(d, J=15.4 Hz, 1 H), 4.09(d, J=15.1 Hz, 1 H), 3.88 (s, 3 H), 2.99 (s, 3 H), 2.21 (s, 3 H), 1.66 (d,J=6.0 Hz, 3
H).
Izrada 7-amino-3-ciklopropil-12-lfuoro-2,10,16-trimetil-16,17-dihidro-2//-8,4-(meteno)pirazolo|4,3-A]|2,5,ll]bcnzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer 15 i
Primer 16).
[0721]
Faza 1:
[0722]Postupak opisan u fazi 1 za Primere 13 i14se koristi za izradujedinjenja 373(380 mg, 43% prinos). LCMSmlz554 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0723] Smeša jedinjenja 373(380 mg, 0.557 mmol) i NaOH (0.55 g, 13.74 mmol) u metanolu (10 mL) i vodi (10 mL) se meša 3 sata na 40 °C. Ništa odjedinjenja 374nije detektovano pomoću LCMS. Reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom i dobijeni ostatak se rastvori u vodi (20 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa MTBE (20 mL). Organski sloj se odbaci i vodeni sloj se zakiseli sa 6 N rastvorom HC1 do pH~5. Smeša se zasiti sa čvrstim NaCl i ekstrahuje sa EtOAc (30 mL x 5). Kombinovani EtOAc slojevi se suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobijejedinjenje 374kao žuta čvrsta supstanca (320 mg, 86% prinos).
LCMSmlz540 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0724] U rastvorjedinjenja 374(320 mg, 0.515 mmol) u metanolu (5 mL) se u kapima doda~4M rastvor HC1 u dioksanu (10 mL). Reaktivna smeša se meša 3 sata na 40 °C. Ništa odjedinjenja 147nije detektovano pomoću LCMS. Reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom i dobijeni ostatak se rastvori u toluenu i koncentruje. Ovo se ponovi dva puta da se dobijejedinjenje375. LCMSmlz440 [M+H]<+>.
Faza 4:
[0725] U rastvor HATU (338 mg, 0.89 mmol) u DMF (70 mL) se u kapima, na 0 °C, dodarastvor jedinjenja 375(0.515 mmol) i DIPEA (1.2 g, 9.5 mmol) u DMF (20 mL). Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 1 sat na 0 °C. Ništa odjedinjenja 374nije detektovano pomoću LCMS. Smeša se sipa u ledenu vodu (50 mL) i vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (40 mL x 5). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL x 5), suše preko Na2S04i koncentruju pod sniženim pritiskom. Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela uz eluiranje sa EtOAc da se dobije čista smešaPrimera 15iPrimera 16kao beličasta čvrsta supstanca (100 mg, 46% prinos). Analitičko asimetrično razdvajanje se izvodi pomoću SFC na Chiralpak AS-H (150 x 4.6 mm I.D., 5 mikrona veličina čestice), uz eluiranje sa 5-40% etanola (0.05% DEA) u CO2. Brzinom protoka od 3 mL/min dobija se Rt(piki) = 3.08 minuta i Rt(pik2) = 3.47 minuta. Racematna smeša se prečisti preparativnom SFC da se dobije pik 1 kao bela čvrsta supstanca (27 mg) i pik 2 kao bela čvrsta supstanca (22 mg).Primer 16(Pik 1): 98% ee.<*>H NMR (400 MHz, Metanol-^) 5 7.42 - 7.39 (m, 2 H), 7.29 (dd, 1 H), 7.00 (dd, 1 H), 6.77 (s, 1 H), 5.63 - 5.58 (m, 1 H), 4.22 (q, 2 H), 3.84 (s, 3 H), 2.99 (s, 3 H), 1.78 - 1.72 (m, 1 H), 1.68 - 1.67 (d, 3 H), 0.98 - 0.94 (m, 1 H), 0.86 - 0.82 (m, 1 H), 0.46 - 0.42 (m, 1 H), 0.28 - 0.24 (m, 1 H). LCMSmlz422 [M+H]<+>.
[0726] Primer 15(Pik 2): 100% ee.<J>H NMR (400 MHz, Metanol-^) 5 7.42 - 7.39 (m, 2 H), 7.29 (dd, 1 H), 7.00 (dd, 1 H), 6.77 (s, 1 H), 5.63 - 5.58 (m, 1 H), 4.22 (q, 2 H), 3.84
(s, 3 H), 2.99 (s, 3 H), 1.78 - 1.72 (m, 1 H), 1.68 - 1.67 (d, 3 H), 0.98 - 0.94 (m, 1 H), 0.86 - 0.82 (m, 1 H), 0.46 - 0.42 (m, 1 H), 0.28 - 0.24 (m, 1 H). LCMSmlz422 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-3-ciklopropil-12-fluoro-l,10,16-trimetil-16,17-dihidro-l^T-8,4-(meteno)pirazolo|4,3-/il|2,5,lllbenzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer 17 i
Primer 18).
[0727]
Faza1:
[0728]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer13 i14se koristi zaizradu jedinjenja 376(495 mg, 33% prinos). LCMSmlz554 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0729]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimer 13i14se koristi zaizradu jedinjenja 377(420 mg, 87% prinos). LCMSmlz540 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0730]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimere 13i14se koristi za izradujedinjenja 378.LCMSmlz439 [M+H]<+>.
Faza 4:
[0731]U rastvor HATU (520 mg, 1.4 mmol) u DMF (100 mL) se u kapima, na 0 °C, dodarastvor jedinjenja 378(0.91 mmol) i DIPEA (1.88 g, 14.6 mmol) u DMF (20 mL). Dobijena smeša se meša 1 sat na 0 °C. Ništa odjedinjenja 378nije detektovano pomoću LCMS. Smeša se sipa u ledenu vodu (50 mL) i vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (40 mL x 5). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL x 5), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom. Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa EtOAc da se dobije smešaPrimera 17iPrimera 18kao tamna čvrsta supstanca (100 mg, 26% prinos). Analitičko asimetrično razdvajanje se izvodi pomoću SFC na Chiralcel (50 x 4.6 mm I.D., 3 mikrona veličina čestice), koji se eluira sa 5-40% metanola (0.05%) DEA) u CO2. Brzinom protoka od 4 mL/min dobija se Rt(piki) = 1.47 min i Rt(pik2) = 1.74 min. Racematna smeša se razdvoji preparativnom SFC da se dobije pik 1 kao bela čvrsta supstanca (30 mg) i pik 2 kao bela čvrsta supstanca (39 mg).Primer 17(Pik 1): 93.7% ee.<*>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 7.76 - 7.75 (m, 1 H), 7.25 (dd, 1 H), 7.10 (dd, 1 H), 693 - 6.90 (m, 1 H), 6.80 (m, 1 H), 5.70 - 5.68 (s, 1 H), 4.54 (s, 2 H), 4.40 (d, 1 H), 4.22 (d, 1 H), 3.85 (s, 3 H), 3.06 (s, 3 H), 1.85 (m, 1 H), 1.70 (d, 3 H), 1.02 - 1.01 (m, 1 H), 0.95 - 0.93 (m, 1 H), 0.81 - 0.79 (m, 1 H), 0.63 (m, 1 H). LCMSmlz422 [M+H]<+>.Primer 18(Pik 2): 94.6% ee.<l>KNMR (400 MHz, CDCh) 5 7.75 (s, 1 H), 7.22 (dd, 1 H), 7.18 (dd, 1 H), 693 - 6.90 (m, 1 H), 6.81 (m, 1 H), 5.70 - 5.68 (s, 1 H), 4.67 (s, 2 H), 4.32 (d, 1 H), 4.26 (d, 1 H), 3.85 (s, 3 H), 3.06 (s, 3 H), 1.85 (m, 1 H), 1.70 (d, 3 H), 1.02 - 1.01 (m, 1 H), 0.95 - 0.93 (m, 1 H), 0.81 - 0.79 (m, 1 H), 0.63 (m, 1 H). LCMSmlz422 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-12-lfuoro-3-metoksi-2,10,16-trimetil-16,17-dihidro-2/T-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-A][2,5,ll]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer 19 i
Primer 20).
[0732]
Faza 1:
[0733]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimere 13i14se koristi za izradujedinjenja 379(1.0 g, 49% prinos). LCMSmlz544 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0734] Postupak opisan u fazi 3 za Primere 13 i14se koristi za izradujedinjenja 380(700 mg, 73% prinos). LCMSmlz540 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0735] Postupak opisan u fazi 3 za Primere 15 i 16 se koristi za izradujedinjenja 381.LCMSmlz430 [M+H]<+>.
Faza 4:
[0736] U rastvor HATU (710 mg, 1.85 mmol) u DMF (30 mL) se u kapima, na 0 °C, doda rastvor jedinjenja 381 (1.32 mmol) i DIPEA (2.7 g, 21.1 mmol) u DMF (30 mL) i THF (6 mL). Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 1 sat na istoj temperaturi. LCMS pokazuje da je reakcija završena. Smeša se sipa u ledenu vodu (100 mL) i vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (60 mL x 5). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom (50 mL x 5), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, uz eluiranje sa smešom DCM/MeOH = 15:1 (Rf = 0.3) da se dobije smešaPrimera19 i Primera20kao žuta čvrsta supstanca (390 mg, 70% prinos). Analitičko asimetrično razdvajanje se izvodi pomoću SFC na Chiralpak AD-3 (150 x 4.6 mm I.D., 3 mikrona veličina čestice), uz eluiranje sa 5-40% metanola (0.05% DEA) u CO2. Rt<piki) = 4.85 minuta i Rt(pik2) = 5.79 minuta. Racematna smeša se razdvoji preparativnom SFC da se dobije Pik 1 kao bela čvrsta supstanca (130 mg) i pik 2 kao bela čvrsta supstanca (128 mg).Primer19(Pik1): 100% ee.<l>RNMR (400 MHz, Metanol-ć/4) 5 7.41 - 7.38 (m, 2 H), 7.30 (dd, 1 H), 7.00 (dd, 1 H), 6.80 (s, 1 H), 5.64 - 5.60 (m, 1 H), 4.26 (d, 1 H), 4.12 (d, 1 H), 3.73 (s, 3 H), 3.56 (s, 3 H), 3.02 (s, 3 H), 1.68 (d, 3 H). LCMSmlz412 [M+H]<+>.Primer 20 (Pik2): 98.2% ee.<!>H NMR (400 MHz, Metanol-^) 5 7.41 - 7.38 (m, 2 H), 7.30 (dd, 1 H), 7.00 (dd, 1 H), 6.80 (s, 1 H), 5.64 - 5.60 (m, 1 H), 4.26 (d, 1 H), 4.12 (d, 1 H), 3.73 (s, 3 H), 3.61 (s, 3 H), 3.02 (s, 3 H), 1.68 (d, 3 H). LCMSmlz412 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-12-lfuoro-3-metoksi-l,10,16-trimetil-16,17-dihidro-l//-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-/j] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer21 i
Primer22).
[0737]
Faza 1:
[0738]Postupak opisan u fazi 1 za Primere 13 i14se koristi za izradujedinjenja 382kao smeđeg ulja (300 mg, 51% prinos). LCMSmlz544 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0739] Postupak opisan u fazi 3 za Primere 13 i 14 se koristi za izradu jedinjenja 383 kao žute čvrste supstance (320 mg, 73% prinos). LCMSmlz529 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0740] Postupak opisan u fazi 2 za Primere 15 i 16 se koristi za izradu jedinjenja 384. LCMSmlz430 [M+H]<+>.
Faza 4:
[0741] U rastvor HATU (280 mg, 0.74 mmol) u DMF (25 mL) se u kapima, na 0 °C, doda rastvor jedinjenja 384 (0.53 mmol) i DIPEA (1.09 g, 8.48 mmol) u DMF (25 mL) i THF (5 mL). Smeša se meša 1 sat na istoj temperaturi. LCMS pokazuje daje reakcija završena. Smeša se sipa u ledenu vodu (100 mL) i vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (60 mL x 5). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom (50 mL x 5), suše preko Na2S04, filtriraju i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti pomoću Biotage (DCM/MeOH = 15:1, Rf=0.3) da se dobije smeša Primera 21 i Primera 22 kao žuta čvrsta supstanca (170 mg, 78%). Analitičko asimetrično razdvajanje se izvodi pomoću SFC na Chiralcel OD-3 (50 x 4.6 mm I.D., 3 mikrona veličina čestice), uz eluiranje sa 5-40% metanola (0.05% DEA) u CO2. Rt(piki) = 1.44 minuta i Rt(pik2) = 1.59 minuta. Racematna smeša se razdvoji preparativnom SFC da se dobije Pik 1 kao bela čvrsta supstanca (62 mg) i Pik 2 kao bela čvrsta supstanca (72 mg).
Primer 21 (Pik 1): 96.6% ee.<!>H NMR (400 MHz, Metanol-^) 5 7.62 (d, 1 H), 7.50
(dd, 1 H), 7.43 (dd, 1 H), 7.16 - 7.11 (m, 1 H), 6.90 (d, 1 H), 5.64 - 5.60 (m, 1 H), 4.84 (d, 1 H), 4.37 (d, 1 H), 3.92 (d, 6 H), 3.17 (s, 3 H), 1.78 (d, 3 H). LCMSmlz412 [M+H]<+>.
Primer 22 (Pik 2): 96.9% ee.<!>H NMR (400 MHz, Metanol-^4) 5 7.61 (d, 1 H), 7.50 (dd, 1 H), 7.42 (dd, 1 H), 7.15 - 7.10 (m, 1 H), 6.90 (d, 1 H), 5.68 - 5.64 (m, 1 H), 4.82 (d, 1 H), 4.36 (d, 1 H), 3.90 (d, 6 H), 3.15 (s, 3 H), 1.78 (d, 3 H). LCMS Wz412 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-l0-etil- 12-fluoro-3-metoksi-l, 16-dimetil-l6,17-dihidro-l/T-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-/j] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer 23 i Primer 24).
[0742]
Faza 1:
[0743]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimere 13i14se koristi za izradujedinjenja 385kao smeđe čvrste susptance (470 mg, 35% prinos).
Faza 2:
[0744]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimere13 i14se koristi za izradujedinjenja 386kao bledo žute čvrste supstance (410 mg, 89% prinos).
Faza 3:
[0745]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimere 15 16se koristi zaizradu jedinjenja 387kao bledo žute čvrste supstance (410 mg, kvantitativno).
Faza4:
[0746]U rastvor HATU (399 mg, 1.05 mmol) u DMF (80 mL) se u kapima, na 0 °C, dodarastvor jedinjenja 387(0.75 mmol) i DIPEA (1.4 g, 11.3 mmol) u DMF (20 mL). Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 1 sat na istoj temperaturi. LCMS pokazuje daje reakcija završena. Smeša se sipa u ledenu vodu (100 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (50 mL x 2). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa H2O (40 mL x 2), slanim rastvorom (40 mL), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti preko Biotage (CH2Cb/MeOH od 15:1 do 10:1) da se dobijuPrimer 23iPrimer 24kao beličasta čvrsta supstanca (220 mg, 69% prinos). Analitičko asimetrično razdvajanje se izvodi pomoću SFC na Chiralcel AD-H (250 x 4.6 mm I.D., 5 mikrona veličina čestice), koja se eluira sa 5-40% etanola (0.05% DEA) u CO2. Brzinom protoka od 2.3 ml/min dobija se Rt(piki) = 7.6 minuta i Rt(pik2) = 8.7 minuta. Racematna smeša se razdvoji preparativnom SFC da se dobije Pik 1 kao beličasta čvrsta supstanca (65 mg) i pik 2 kao beličasta čvrsta supstanca (79 mg).Primer 23(Pik 1): 99.0% ee.<l>KNMR (400 MHz, CDCh) 5 7.82 (s, 1 H), 7.28 (m, 1 H), 7.19 - 7.17 (m, 1 H), 7.01 - 6.98 (m, 1 H), 6.90 (s, 1 H), 5.41 - 5.38 (m, 1 H), 4.76 (m, 2 H), 4.44 (d, 1 H), 4.28 (d, 1 H), 3.93 (s, 3 H), 3.72 (s, 3 H), 3.13 (s, 3 H), 2.26 - 2.16 (m, 1 H), 2.04 - 1.97 (m, 1 H), 1.05 (t, 3 H). LCMSmlz426 [M+H]<+>.Primer 24(Pik 2): 94.4% ee. 'HNMR (400 MHz, CDCh) S 7.79 (s, 1 H), 7.27 (m, 1 H), 7.17 - 7.15 (m, 1 H), 6.94 6.90 (m, 1 H), 6.72 (s, 1 H), 5.35 - 5.32 (m, 1 H), 4.63 (s, 2 H), 4.38 (d, 1 H), 4.21 (d, 1 H), 3.87 (s, 3 H), 3.66 (s, 3 H), 3.08 (s, 3 H), 2.21 - 2.09 (m, 1 H), 1.97 - 1.92 (m, 1 H), 1.02 (t, 3 H). LCMSmlz426 [M+H]'.
Izrada 7-amino-10-ciklopropil-12-fluoro-3-metoksi-l,16-dimetil-16,17-dihidro-l//-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-/j] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer 25 i
Primer 26).
[0747]
Faza 1:
[0748]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimere 13i14se koristi za izradujedinjenja 388kao bledo smeđe čvrste supstance (550 mg, 39% prinos).
Faza 2:
[0749]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimere13 i14se koristi za izradujedinjenja 389kao bledo žute čvrste supstance (482 mg, 90% prinos).
Faza 3:
[0750]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimere13 i14se koristi za izradujedinjenja 390kao bledo žute čvrste supstance (480 mg, kvantitativno).
Faza 4:
[0751]U rastvor HATU (456 mg, 1.2 mmol) u DMF (80 mL) se u kapima, na 0 °C, dodarastvor jedinjenja 390(0.86 mmol) i DIPEA (1.6 g, 12.4 mmol) u DMF (20 mL). Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 1 sat na istoj temperaturi. LCMS pokazuje daje reakcija završena. Smeša se sipa u ledenu vodu (100 mL). Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (60 mL x 2). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa H2O (50 mL x 2), slanim rastvorom (50 mL), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti preko Biotage (CH2Cb/MeOH od 15:1 do 10:1) da se dobije smešaPrimera 25iPrimera 26kao beličasta čvrsta supstanca (240 mg, 64% prinos). Analitičko asimetrično razdvajanje se izvodi pomoću SFC na Chiralcel AD-H (250 x 4.6 mm I.D., 5 mikrona veličina čestice), uz eluiranje sa 5-40% etanola (0.05% DEA) u CO2. Brzinom protoka od 2.3 mL/min dobija se Rt(piki) = 8.1 minuta i Rt(pik2) = 9.1 minuta. Racematna smeša se razdvoji preparativnom SFC da se dobije Pik 1 kao beličasta čvrsta supstanca (75 mg) i Pik 2 kao beličasta čvrsta supstanca (76 mg).Primer 25(Pik 1): 100% ee.<*>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 7.75 (s, 1 H), 7.35 - 7.32 (m, 1 H), 7.16 - 7.12 (m, 1 H), 6.95 - 6.92 (m, 1 H), 6.60 (s, 1 H), 4.65 - 4.61 (m, 3 H), 4.35 (d, 1 H), 4.20 (d, 1 H), 3.86 (s, 3 H), 3.73 (s, 3 H), 3.06 (s, 3 H), 1.41 -1.36 (m, 1 H), 0.85 - 0.82 (m, 2 H), 0.60 - 0.52 (m, 2 H). LCMSmlz438 [M+H]<+>Primer 26(Pik 2): 94.8% ee.<*>H NMR (400 MHz, CDCh) S 7.76 (s, 1 H), 7.34 - 7.32 (m, 1 H), 7.15 - 7.12 (m, 1 H), 6.96 - 6.93 (m, 1 H), 6.61 (s, 1 H), 4.64 - 4.62 (m, 3 H), 4.34 (d, 1 H), 4.20 (d, 1 H), 3.85 (s, 3 H), 3.71 (s, 3 H), 3.04 (s, 3 H), 1.42 - 1.37 (m, 1 H), 0.84 - 0.81 (m, 2 H), 0.61 - 0.53 (m, 2 H). LCMSmlz438 [M+H]'.
Izrada (10JR)-7-amino-3-etil-12-fluoro-10,16-dimetil-16,17-dihidro-3J&-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-/i] [2,5,11 ]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer 27).
[0752]
Faza 1:
[0753]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimere 13i14se koristi za izradujedinjenja 391kao smeđe čvrste susptance (400 mg, 56% prinos). 'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.99 - 7.95 (m, 1 H), 7.45 (s, 1 H), 7.39 (s, 1 H), 7.18 - 7.15 (m, 1 H), 6.94 (d, 1 H), 6.38 (s, 1 H), 6.33 (d, 1 H), 4.93 (s, 2 H), 3.84 (d, 2 H), 3.71 (d, 3 H), 3.69 - 3.67 (m, 2 H), 2.34 (s, 3 H), 1.62 (d, 3 H), 1.36 (s, 9 H), 1.07 (t, 3H).
Faza 2:
[0754]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimere13 i14se koristi za izradujedinjenja 392kao žute čvrste supstance (320 mg, 83% prinos). LCMSmlz514 [M+H]<+>.
Faza3:
[0755]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimere13 i14se koristi za izradujedinjenja 393kao bledo žute čvrste supstance (320 mg, kvantitativno).
Faza 4:
[0756]U rastvor HATU (684 mg, 1.8 mmol) u DMF (60 mL) se u kapima, na 0 °C, dodarastvor jedinjenja 393(0.62 mmol) i DIPEA (2.5 g, 19.2 mmol) u DMF (20 mL). Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 1 sat na sobnoj temperaturi. LCMS pokazuje daje reakcija završena. Smeša se sipa u ledenu vodu (50 mL). Vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (40 mL x 5). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL x 5), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, uz eluiranje sa smešom petrol etar/EtOAc (2:1 — 1:2) da se dobijePrimer 27kao ružičasta čvrsta supstanca (52 mg, 21% prinos).<[>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 7.52 (s, 1 H), 7.48 (d, 1 H), 7.21 (s, 1 H), 7.19 (s, 1 H), 7.10 (d, 1 H), 6.85 (m, 1 H), 5.79 (s, 1 H),4.94 (s, 2 H), 4.19 - 4.16 (m, 2 H), 4.11 (m, 2 H), 3.05 (s, 3 H), 1.72 (d, 3 H), 1.39 (t, 3 H). LCMSmlz396 [M+H]<+>. Analizom asimetričnom hromatografijom koristeći Chiralcel OD-3 (150 3 4.6 mm I.D., 3 mikrona veličina čestice) i uz eluiranje sa metanolom (5% do 40% sa 0.05% DEA) u CO2pri brzini protoka od 2.5mL/min dobija se vreme retencije od 6.23 minuta (100% ee).
Izrada 7-amino-12-fluoro-l,3,10,16-tetrametil-16,17-dihidro-l//-8,4-(azeno)-pirazolo[4,3-A] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-l 5(10//)-ona (Primer 28 i Primer 29).
[0757]
[0758]Urastvor jedinjenja 30(266 mg, 0.607 mmol),jedinjenja 57(166 mg, 0.759) i DIEA (211 mL, 1.21 mmol) u toluenu (60 mL) se doda Pd(PtBu3)2(32 mg, 0.61 mmol). Reaktivna smeša se zagreje na 100 °C u atmosferi CO pod pritiskom od 4 bara u toku noći a nakon toga koncentruje. Ostatak se prenese u MeOH (12 mL) i vodu (1.3 mL) i doda se u bočicu u kojoj se nalaze dibor pinakol estar (771 mg, 3.04 mmol) i CsF (461 mg, 3.04 mmol). Bočica se zatvori i kroz reaktivnu smešu se propuštaju mchurići gasa azota a zatim se doda rastvor Pd(OAc)2 (14 mg, 0.61 mmol) i di( 1-adamantil)-«-butilfosfina (45 mg, 0.12 mmol) u toluenu (0.5 mL). Nakon 30 min zagrevanja na 60 °C, temperatura se poveća na 90 °C u toku 6 sati. Reakcija se ostavi da stoji na sobnoj temperaturi u toku noći a nakon toga se dodaju nova količina Pd(OAc)2(14 mg, 0.61 mmol) i di(l-adamantil)-n-butilfosfina (45 mg, 0.12 mmol) u toluenu (0.5 mL). Nakon 2 sata zagrevanja na 100 °C, reaktivna smeša se ohladi na sobnu temperaturu i filtrira. Osnovni rastvor se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom (2x) i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje. Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom uz eluiranje sa smešom DCM/MeOH (0-8%) a nakon toga na drugoj koloni uz eluiranje sa smešom heptani/EtOAc (50-100%), nakon toga sa smešom DCM/MeOH (0-6%) i konačno asimetričnim razdvajanjem pomoću SFC da se dobiju oba enantiomera naslovljenog jedinjenja. Asimetrično razdvajanje se izvodi pomoću SFC na Chiracel OD-H (4.6 mm x 250 mm, 5 mikrona veličina čestice) koloni, uz eluiranje sa 25% MeOH u CO2uz zadržavanje na 25 °C i 140 bara. Brzinom protoka od 3.0 mL/min dobija se Pik 1 Rt(piki) = 4.23 min ([a]d<20=>-77.1° (C=0.23, MeOH) i Pik 2 Rt^) = 5.60 min ([a]d<20>= +78.6° (C=0.24, MeOH).Primer 28(Pik 1): 14 mg, >99% ee, 6% prinos.<J>H NMR (400 MHz, DMSO-t/6) 5 7.51 (s, 1 H), 7.51 - 7.46 (m,1 H), 7.36 ( dd, J = 5.8, 8.3 Hz,1 H), 7.17( dt, J=2.5, 8.6 Hz, 1 H), 6.29 (s, 2 H), 5.95 - 5.84 (m, 1 H), 4.47 (d,J=14.7 Hz, 1 H), 4.27 (d,J=14.4 Hz, 1 H), 3.87 (s, 3 H), 2.87 (s, 3 H), 2.26 (s, 3 H), 1.62 (d,J=6.6 Hz, 3 H). LCMS ESmlz397 [M+H]<+>.Primer29(Pik 2): 13 mg, 99% ee, 5% prinos.<l>KNMR (400 MHz,DMSO-d)5 7.51 (s, 1 H), 7.49(dd, 7=2.7,10.2 Hz, 1 H), 7.36(dd, 7 =5.7, 8.5 Hz, 1 H), 7.17(dt, 7 =2.5, 8.5 Hz, IH), 6.29 (s, 2 H), 5.95 - 5.82 (m, 1 H), 4.47 (d,7 =14.7 Hz, 1 H), 4.27( d, J=14.4 Hz, 1 H), 3.87 (s, 3 H), 2.87 (s, 3 H), 2.26 (s, 3 H), 1.62 (d,7 =6.6 Hz, 3 H). LCMS ESm/ z397 [M+H]<+>.
Izrada 8-amino-13-fluoro-4-metoksi-ll,17-dimetil-17,18-dihidro-9,5-(azeno)pirido[3,4-h][2,5,ll]benzoksadiazaciklotetradecin-16(ll//)-ona (Primer 30 i Primer 31).
[0759]
[0760]Postupak opisan zaPrimer 28se koristi za izradu Primera 30 i Primera31.Analitičko asimetrično razdvajanje se izvodi pomoću SFC na Chiracel OD-H (4.6 x 250 mm, 5 mikrona veličina čestice), uz eluiranje sa 25% metanola u CO2pod pritiskom od 140 bara. Brzinom protoka od 3.0 mL/min dobija se Rt(piki) = 4.4 minuta i Rt(pik2) = 5.3 minuta.Primer 30(Pik 1): 4 mg; >98% ee, 1% prinos. 'HNMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 8.14 (d, .7=5.3 Hz, 1 H), 7.66 (s, 1 H), 7.63(dd, 7=2.5,10.3 Hz, 1 H), 7.28(dd,7=5.8, 8.6Hz, 1 H), 7.22 (d, 7= 5.3 Hz, 1 H), 7.11(dt, 7= 2.6, 8.5 Hz,1 H), 6.52 (s, 2 H), 6.08 - 5.98 (m, 1 H), 4.20 (d,7= 12.4 Hz,1 H), 4.16 (d,7=12.1 Hz, 1 H), 3.82 (s, 3 H), 2.89 (s, 3 H),
1.65 (d, 7=6.5 Hz, 3 H). LCMS ESmlz410 [M+H]<+>.
Primer 31 (Pik 2): 3 mg, -80% ee, 1% prinos.lK NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 8.14 (d, 7 =5.0 Hz, 1 H), 7.65 (s, 1 H), 7.62 (dd,7=2.6, 10.2 Hz, 1 H), 7.28 (dd,7=5.7, 8.4 Hz, 1 H), 7.22 (d,7= 5.0 Hz, 1 H), 7.15 - 7.06 (m, 1 H), 6.51 (s, 2 H), 6.07 - 5.97 (m,1 H), 4.20 (d, 7 =12.3 Hz, 1 H), 4.16 (d, 7 = 12.4 Hz, 1 H), 3.82 (s, 3 H), 2.88 (s, 3 H),1.65 (d,7= 6.5 Hz, 3H). LCMS ESm/ z410 [M+H]<+>. Sinteza 7-amino-12-fluoro-2,10,16-trimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2^-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-/i][2,5,ll]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitri]a (Primer 32 i Primer 33).
[0761]
[0762]Postupak opisan za Primere28 i 29se koristi za izraduPrimera 32iPrimera 33.Analitičko asimetrično razdvajanje se izvodi pomoću SFC na Regis Whelk-01 (R,R)(4.6 x 250 mm, 5 mikrona veličina čestice), uz eluiranje sa 20% metanola u CO2pod pritiskom od 140 bara. Brzinom protoka od 3.0 mL/min dobija se Rt(piki) = 4.5 minuta i Rt(pik2) = 6.6 minuta.Primer 32(Pik 1): 8 mg; >99% ee, 3% prinos. 'HNMR (400 MHz, DMSO-efe) 5 7.77 (s, 1 H), 7.47 (dd,J=2.8, 10.1 Hz, 1 H), 7.41 (dd,7=5.7, 8.4 Hz, 1 H), 7.16 (dt,J=2.8, 8.6 Hz, 1 H), 6.72 (s, 2 H), 5.97 - 5.81 (m, 1 H), 4.30 (AB q,J=13.9 Hz, 1 H), 4.03 (s, 3 H), 2.89 (s, 3 H), 1.64 (d,J=6.5 Hz, 3 H). LCMSmlz408 [M+H]<+>.Primer 33(Pik 2): 10 mg, 96% ee, 3% prinos.<*>H NMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 7.77 (1 H, s), 7.47(1H, dd, J=10.0, 2.7 Hz), 7.41 (1 H,dd, J=8.3, 5.8 Hz), 7.16 (1H, td, J= 8.5, 2.7Hz), 6.74 (2 H, s), 5.84- 5.98 (1 H, m), 4.31(2 H, AB q, J=13.7 Hz), 4.03 (4 H, s), 2.89 (3 H, s), 1.64 (3 H, d, /= 6.6 Hz). LCMSm/ z408 [M+H]<+>.
Izrada (llJR)-8-amino-13-fluoro-4-metoksi-ll,17-dimetil-17,18-dihidro-9,5-(meteno)pirido[4,3-/i] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-16(ll/f)-ona (Primer 34).
[0763]
Faza 1:
[0764]Urastvor jedinjenja 2(338 mg, 1.27 mmol),jedinjenja 394(200 mg, 1.06 mmol) i trifenil fosfina (333 mg, 1.27 mmol) u THF (11 mL) se doda DIAD (260 uL, 1.27 mmol). Rastvor je tamno braon boje. Nakon 30 minuta na sobnoj temperaturi, LCMS pokazuje najveći deo produkta. Rastvarač se ukloni pod sniženim pritiskom i sirovi produkt se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, uz eluiranje sa 0 - 13% EtOAc-DCM, da se dobijejedinjenje 395kao žuta guma (205 mg, 44% prinos).<l>K NMR (400 MHz, DMSO-afe) 5 7.89(dd, .7= 5.7, 8.7 Hz,1 H), 7.54(d, .7=2.0Hz, 1 H), 7.42(dd,J=3.0,10.1 Hz, 1 H), 6.99 (dt, .7=3.0, 8.6 Hz, 1 H), 6.75 (d, .7=2.0 Hz, 1 H), 6.18 (s, 2 H), 5.45 (q,/=6.1 Hz, 1 H), 1.54 (d,J=6.3 Hz, 3 H). LCMS ESmlz437/439.
Faza 2:
[0765] Smeša jedinjenja 395(200 mg, 0.46 mmol),jedinjenja 98(135 mg, 0.50 mmol), DIEA (0.32 mL, 1.8 mmol) i Pd(P?-Bu3)2(24 mg, 0.05 mmol) u toluenu (42 mL) se zagreje na 85 °C u atmosferi ugljen monoksida pod pritiskom od 4 bara. Nakon 18 sati, reaktivna smeša se koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silika gela, uz eluiranje sa 0-100% EtOAc-heptan da sedobije jedinjenje 396(165 mg, 63% prinos). LCMS ESmlz566/568/571.
Faza 3:
[0766] Smeša jedinjenja 396(165 mg, 0.29 mol), diborpinakol estra(368 mg, 1.45 mmol), natrijum hidroksida (58 mg, 1.45 mmol) i Pd(amphos)Cb (20 mg, 0.03 mmol) u metanolu (10 mL) se degasira i prečisti sa azotom. Smeša se zagreva 18 sati na 100 °C i ohladi na sobnu temperaturu. Sirova reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc i po redu ispere sa vodom i slanim rastvorom. Organski sloj se suši preko MgS04, filtrira i koncentruje pod sniženim pritiskom. Sirovi produkt se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, eluira sa 0-100% EtOAc-heptan a nakon toga prečisti reverzno faznom hromatografijom da se dobijePrimer 34(3 mg, 2% prinos).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-de) 8 8.14 (d,J=5.0 Hz, 1 H), 7.72 (dd,J =2.5, 10.3 Hz, 1 H), 7.44 (d,J=1.8 Hz, 1 H), 7.29 (dd,J=5.7, 8.4 Hz, 1 H), 7.22 (d,J=5.3 Hz, 1 H), 7.09 (dt,J=2.5, 8.4 Hz, 1 H), 6.96 (s, 1 H), 5.95 (s, 2 H), 5.73 - 5.61 (m,J=6.0 Hz, 1 H), 4.26(d, J=12.8 Hz, 1 H), 4.04(d, J=12.8 Hz, 1 H), 3.81 (s, 3 H), 2.99 (s, 3 H), 1.68 (d,J=6.0 Hz, 3 H). LCMS m/z 409 [M+H]<+>.
Izrada (5JK)-3-fluoro-5,17-dimetil-13-(metilsulfonil)-5,16,17,18-tetrahidro-7,ll-(meteno)dibenzo[#,/] [l,4,10]oksadiazaciklotetradecin-8-amina (Primer 35).
[0767]
[0768]U izmešani rastvorPrimera1 (18.2 mg, 0.04 mmol) u bezvodnom dioksanu (4 mL) se doda RU3CO12(4.0 mg, 0.006 mmol) a nakon toga PhMeSiH2(200 uL, 1.6 mmol). Reakcija se meša 18 sati u toku noći na 90 °C. Nakon 18 sati, reakcija se koncentruje do 1 mL i prečisti reverzno faznom preparativnom hromatografijom da se dobijePrimer 35(1 mg, 6% prinos).
<*>H NMR (600 MHz, DMSO-<&) 5 9.5 (m, 1 H), 7.87 (d,J= 2Hz, 1 H), 7.76 (dd,J=8.0, 2.0
Hz, 1 H), 7.56 (m, 1 H), 7.36 (m, 2 H), 7.19 (dd,J=8.3, 6.0 Hz, 1 H), 6.97 (dt,J=8.3, 2.8 Hz, 1 H), 6.08 (br s, 2 H), 6.00 (q,J=6.4 Hz, 1 H), 4.33 (d,J=10.2 Hz, 2 H), 3.17 (s, 2 H), 2.80(d, J=10.2 Hz, 1 H), 2.53 (s, 3 H), 2.35 (s, 3 H), 1.65(d, J=6.4 Hz, 3 H). LCMSmlz442 [M+H]<+>.
Izrada (10JR)-7-amino-12-fluoro-2,10,16-trimetil-10,15,16,17-tetrahidro-2^-4,8-(meteno)pirazolo[4,3-/i] [2,5,ll]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer 36).
[0769]
[0770]Postupak opisan zaPrimer2 se koristi za izradujedinjenja iz Primera 36(3 mg, 8%).<*>H NMR (600 MHz, DMSO-^e) 5 9.64 (m, 1 H), 7.61 (m, 1 H), 7.42 (m, 1 H), 7.24 (m, 1 H), 6.98 (m, 2 H), 6.09 (br s, 2 H), 5.88 (q,J=6.4 Hz, 1 H), 4.33 (d,J=15.5 Hz, 2 H), 3.26 (d,J =15.5 Hz, 2 H), 3.16 (d,J=13.8 Hz, 2 H), 2.94 (d,J=13.8 Hz, 2 H), 3.34 (s, 3 H), 1.65 (d,J =6.4 Hz 3 H). LCMSmlz393 [M+H]<+>.
Sinteza 12-fluoro-3-metil-3,l 6,17,18-tetrahidro- 10/7-8,4-(meteno)pirazolo [4,3-e][l,12,9]benzodioksazaciklopentadecin-7-amina (Primer37).
[0771]
Faza1:
[0772]Krozsmešu jedinjenja 174(270 mg, 0.65 mmol),jedinjenja 117(176 mg, 0.974 mmol), bakar jodida (6 mg, 0.032 mmol), trifenilfosfina (17 mg, 0.065 mmol) i PdCl2(PPh3)2(23 mg, 0.032 mmol) u čistom piperidinu (4.3 mL) se u mehurićima propušta azot a nakon toga se zagreje na 80 °C. Nakon 5 sati, reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc, ispere sa zasićenim rastvorom NH4CI (2x) i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje. Materijal se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa smešom DCM/MeOH (0 - 5%) da sedobije jedinjenje 397.
Faza 2:
[0773]U rastvorjedinjenja 397(0.65 mmol) u EtOH (50 mL) se doda Pd(OH)2(50 mg). Smeša se zagreva 18 h na 50 °C pod pritiskom vodonika od 3-4 bara. Reaktivna smeša se filtrira kroz celite i osnovni rastvor se koncentruje da se dobijejedinjenje 398.
Faza3:
[0774] Jedinjenje 398se rastvori u EtOH (5 mL), nakon toga se doda 15% rastvor NaOH (5 mL) i rastvor zagreje na 85 °C u toku noći. Reakcija se neutrališe sa 1 N rastvorom HC1 i ekstrahuje sa EtOAc (3x). U vodeni sloj se doda zasićeni rastvor NaHC03koji se ekstrahuje sa EtOAc (2x). Kombinovani organski slojevi se suše (MgS04), filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa smešom DCM/MeOH (0-10%) da sedobije jedinjenje 399(82 mg, 34% prinos preko 3 faze).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 1.85 (q,J=6.9 Hz, 2 H), 2.42 - 2.49 (m, 2 H), 3.64 (s, 3 H), 3.87 (t,J=6.2 Hz, 2 H), 4.43 (br s, 2 H), 5.11 (br. s, 1 H), 5.75 (s, 2 H), 6.80 (d,J=1.5 Hz, 1 H), 6.83 (dd,J=9.1, 4.5 Hz, 1 H), 6.89 - 7.00 (m, 1 H), 7.12 (dd,J=9.6, 3.0 Hz, 1 H), 7.33 (s, 1 H), 7.41 (s, 1 H), 9.72 (br s, 1 H). LCMSmlz373 [M+H]<+>.
Faza 4:
[0775]U ohlađeni (0 °C)rastvor jedinjenja 399(80 mg, 0.22 mmol), DMAP (1.3 mg, 0.011 mmol) i piridina (200 uL, 2.5 mmol) u DCM (1.4 mL) se doda rastvor MsCl (17 uL, 0.22 mmol) u DCM (0.5 mL). Nakon 1 sat, reakcija se razblaži sa EtOAc, ispere sa zasićenim rastvorom NH4CI (2x) i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje da se dobijejedinjenje 400(96 mg).
Faza 5:
[0776]Urastvor jedinjenja 400(96 mg, 0.21 mmol) u DMF (4.1 mL) se doda NaH (60% disperzija u mineralnom ulju, 9.1 mg, 0.23 mmol). Reaktivna smeša se zagreva 30 minuta na 50 °C, nakon toga razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa smešom DCM/MeOH (0-10%) da se dobijePrimer 37(27 mg, 37% prinos preko 2 faze).<l>R NMR (400 MHz, DMSO-rfe) 5 2.04 - 2.20 (m, 2 H), 2.65( t, J=6.8 Hz, 2 H), 3.78 (s, 3 H), 3.97 - 4.14 (m, 2 H), 5.22 (s, 2 H), 5.68 (br s, 2 H), 6.99 - 7.16 (m, 2 H), 7.25 - 7.36 (m, 2 H), 7.38 (s, 1 H), 7.65(d,J =1.5 Hz, 1 H). LCMS 355 [M+H]<+>.
Izrada 12-fluoro-3-metil-1,16,17,18-tetrahidro-10//-8,4-(meteno)pirazolo [3,4-e][l,12,9]benzodioksazaciklopentadecin-7-amina (Primer 38).
[0777]
Faza 1:
[0778]U ohlađeni (0 °C)rastvor jedinjenja 401(2.50 g, 15.5 mmol) u DMF (40 mL) se doda NaH (60% disperzija u mineralnom ulju, 745 mg, 18.6 mmol). Nakon 30 min, doda se rastvor A^N-dimetilsulfamoil hlorida (1.67 mL, 15.5 mmol) u DMF (5 mL). Reaktivna smeša se postepeno zagreje na sobnu temperaturu i meša 5 sati. Reakcija se neutrališe sa zasićenim rastvorom NH4CI i razblaži sa EtOAc. Organski sloj se po redu ispere sa vodom, slanim rastvorom, suši preko MgS04, filtrira i koncentruje pod sniženim pritiskom. Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela uz eluiranje sa smešom heptani/EtOAc (0-30%) da se dobijejedinjenje 402kao bela voštana čvrsta supstanca (2.3 g, 54% prinos).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 8.47 (s, 1 H), 2.85 (s, 6 H), 2.23 (s, 3 H).
Faza 2:
[0779]U ohlađeni (-78 °C)rastvor jedinjenja 402(2.3 g, 8.4 mmol) u Et20 (25.5 mL) se u kapima doda fenil litijum (1.8 M rastvor u dibutil etru, 5.2 mL, 9.3 mmol), održavajući unutrašnju temperaturu ispod -65 °C. Formira se beli precipitat i smeša postaje gusta. Smeša se zagreje na 0 °C, meša 30 minuta i ponovo ohladi na -78 °C i doda se rastvor l-hlor-3-jodpropana (2.7 mL, 25.3 mmol) u THF (5.0 mL). Reakcija se zagreje na sobnu temperaturu i meša u toku noći. Rastvor se razblaži sa EtOAc, ispere po redu sa zasićenim rastvorom NH4CI i slanim rastvorom, suši preko MgS04, filtrira i koncentruje pod sniženim pritiskom. Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela uz eluiranje sa smešom heptani/EtOAc (0-20%) da se dobijejedinjenje 403kao bistra guma (2.3 g, 78% prinos).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 3.67 (t,J=6.3 Hz, 2 H), 3.03 - 2.97 (m, 2 H), 2.95 (s, 6 H), 2.20 (s, 3 H), 2.07 - 1.93 (m, 2 H).
Faza 3:
[0780] Smeša jedinjenja 403(1.82 g, 5.28 mmol), kalijum jodida (544 mg, 3.27 mmol) i kalijum acetata (1.04 g, 10.6 mmol) u DMSO (13.2 mL) se zagreva na 80 °C u toku noći. Reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom (2x) i slanim rastvorom, a nakon toga koncentruje da se dobije guma. Ostatak se rastvori u metanolu (26 mL), nakon toga se dodaju voda (870 uL) i K2CO3(737 mg, 5.33 mmol). Nakon 30 minuta, reakcija se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje da se dobijejedinjenje 404kao mutna žuto-narandžasta guma (1.67 g, 97% prinos).<l>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 4.57 (t,J=5.3 Hz, 1 H), 3.47 - 3.37 (m, 2 H), 2.94 (s, 6 H), 2.89 - 2.82 (m, 2 H), 2.19 (s, 3 H), 1.77 - 1.58 (m, 2 H).
Faza 4:
[0781]Urastvor jedinjenja 404(1.1 g, 3.37 mmol),jedinjenja 405(602 mg, 3.54 mmol) i trifenilfosfina (1.11 g, 4.22 mmol) u THF (16.9 mL) se u kapima, veoma polako, u toku 1.5 sat, dodaje DIAD (859 mL, 4.22 mmol). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi u toku noći reakcija se koncentruje i prečisti gasnom hromatografijom uz eluiranje sa smešom heptani/EtOAc (0-30%) da se dobijejedinjenje 406kao bistra guma (1.2 g, 74 % prinos).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 1.91 2.05 (m, 2 H), 2.19 (s, 3 H), 2.95 (s, 6 H), 3.04(dd, J =8.6, 6.8 Hz, 2 H), 3.81 (s, 3 H), 4.04(t, J=5.8 Hz, 2 H), 7.15(dd, J=9.2, 4.4 Hz, 1 H), 7.38 (m, 1 H), 7.44 (dd, 7= 8.8, 3.3 Hz, 1 H).
Faza 5:
[0782]U ohlađeni (-78 °C)rastvor jedinjenja 406(1.2 g, 2.51 mmol) u DCM (12.5 mL) se u kapima doda DiBAL (IM rastvor u heksanu, 6.27 mL, 6.27 mmol). Po završenom dodavanju, reakcija se neutrališe sa metanolom na -78 °C. Ledeno kupatilo se ukloni, doda se zasićeni rastvor natrijum tartarata (5 mL) i boca se napuni sa EtOAc. Kada se formira bistri rastvor, dvofazna smeša se ispere sa vodom i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje da se dobijejedinjenje 407kao bistra guma (1.2 g, 100% prinos).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-de)5 .95 2.05 (m, 2 H), 2.14 - 2.23 (m, 3 H), 2.87 - 2.99 (m, 6 H), 2.98 - 3.09 (m, 2 H), 3.91 - 4.01(m, 2 H), 4.50 ( d, J= 5.8 Hz, 2 H), 5.15 (t, 7=5.7 Hz,1 H), 6.83 -6.92 (m, 1 H), 6.92 - 7.03 (m, 1 H), 7.14 (dd, 7 = 9.6, 3.3 Hz, 1 H).
Faza 6:
[0783]Urastvor jedinjenja 407(660 mg, 1.47),jedinjenja 123(493 mg, 1.47 mmol) i trifenilfosfina (481 mg, 1.83 mmol) u THF (9.8 mL) se u kapima, u toku 1 sat, dodaje DIAD. Nakon 1 sat mešanja na sobnoj temperaturi, rastvor se koncentruje i prečisti gasnom hromatografijom uz eluiranje sa smešom heptani/EtOAc (0-40%) da se dobijejedinjenje 408(660 mg, 60% prinos).<l>R NMR (400 MHz, DMSO-^e) 5 1.40 (s, 9 H), 1.98 - 2.10 (m, 2 H), 2.19 (s, 3 H), 2.96 (s, 6 H), 3.02 - 3.12 (m, 2 H), 4.07 (t,7=5.5 Hz, 2 H), 5.12 (s, 2 H), 6.98 - 7.06 (m, 1 H), 7.13(td, 7 =8.7, 3.3 Hz, 1 H), 7.36(dd, 7 =9.2, 3.2 Hz, 1 H), 7.78 (d, 7=1.8 Hz, 1 H), 8.16 (d,7 =1.8 Hz, 1 H), 9.01 (s, 1 H).
Faza 7:
[0784]Kroz zagrejani (60 °C)rastvor jedinjenja 408(569 mg, 0.740 mmol), dibor pinakol estra (752 mg, 2.96 mmol) i 1 N rastvor cezijum fluorida (3.7 mL) u MeOH (37 mL) se u mehurićima propušta azot. Doda se rastvor bis(di-ferc-butil(4-dimetilaminofenil)fosfin)-dihlorpaladijuma (II) (79 mg, 0.11 mmol) u toluenu (0.5 mL). Smeša se zagreva 30 minuta na 60 °C, nakon toga razblaži sa EtOAc, ispere sa slanim rastvorom (2x), suši (MgS04), filtrira, koncentruje i prečisti gasnom hromatografijom uz eluiranje sa smešom DCM/MeOH (0-6%). Frakcije koje sadrže traženi produkt se koncentruju i dobijene čvrste supstance se prevedu u žitku masu u smeši 25% EtOAc/heptani. Čvrste supstance se sakupe filtriranjem pod vakuumom da se dobijejedinjenje 409kao krem žuta čvrsta supstanca (170 mg, 41% prinos).
'HNMR (400 MHz,DM& O- ek)5 1.46 (s, 9 H), 2.31 (s, 5 H), 2.91 - 3.06 (m, 8 H), 4.19 (br s, 2 H), 5.29 (brs, 2 H), 7.04 - 7.23 (m, 2 H), 7.39(dd, J=8.9, 2.9 Hz, 1 H), 7.69( d, J=1.5 Hz, 1 H), 7.94 (d,J =1.5 Hz, 1 H), 8.85 (s, 1 H).
Faza 8:
[0785]Urastvor jedinjenja 409(170 mg, 0.303 mmol) u dioksanu (3.0 ml) se doda rastvor HC1 (4 N rastvor u dioksanu, 1.52 mL, 6.06 mmol). Doda se metanol (0.5 mL) i rastvor se zagreje na 40 °C. Nakon 4 sata, reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc, ispere sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje. Ostatak se prevede u žitku masu u DCM a čvrste supstance se sakupe filtriranjem pod vakuumom da se dobijePrimer 38kao bela čvrsta supstanca (62 mg, 58% prinos).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 2.19 (s, 5 H), 2.71 - 2.98 (m, 2 H), 4.04 (br s, 2 H), 5.18 (br s, 2 H), 5.56 (s, 2 H), 6.99 - 7.16 (m, 2 H), 7.19 - 7.35 (m, 2 H), 7.48 (s, 1 H), 12.32 (br s, 1 H). LCMSmlz355 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-12-fluoro-2,16,17,18-tetrahidro-10//-8,4-(meteno)pirazolo[3,4-
e] [l,12,9]benzodioksazaciklopentadecin-3-karbonitrila (Primer 39).
[0786]
Faza 1:
[0787]Etil diazoacetat (2.44 mL, 23.5 mmol) ijedinjenje 125(4.45 g, 21.4 mmol) se 2 dana zagrevaju na 100 °C u zatvorenoj epruveti. Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom uz eluiranje sa smešom heptani/EtOAc (0-75%) da se dobijejedinjenje 410kao glavni regioizomerni pirazol (5.0 g, 4:1 smeša regioizomera, 73% prinos).
Faza 2:
[0788] Rastvor jedinjenja 410(5.0 g, 16 mmol) u MeOH (31 mL) se zagreva 1 sat na 60 °C u zatvorenoj epruvete. Doda se amonijum hidroksid i rastvor se zagreva na 60 °C u toku noći. Reaktivna smeša se ohladi na 0 °C i čvrste supstance se sakupe filtriranjem pod vakuumom da se dobije jediničniregioizomer jedinjenje 411(2.7 g, 58% prinos).
Faza 3:
[0789]U ohlađenu (0°C) smešujedinjenja 411(1.50 g, 5.11 mmol) u piridinu (26 mL) se u kapima doda TFAA (2.87 mL, 20.5 mmol). Nakon 1 sat na 0 °C, rastvor se razblaži sa EtOAc, ispere sa zasićenim rastvorom NaHC03(2x), slanim rastvorom, 1 N rastvorom HC1 (2x), slanim rastvorom, suši (Na2S04), filtrira i koncentruje. Ostatak se rastvori u smeši 20% MeOH/DCM i propusti kroz SCX kertridž a osnovni rastvor se koncentruje da se dobijejedinjenje 412 (1.4 g,100% prinos).lR NMR (400 MHz, DMSO-</6) 513.71 (brs, 1 H), 7.14 (dd,<y=>3.1, 9.4 Hz, 1 H), 7.03 - 6.94 (m, 1 H), 6.94 - 6.88 (m, 1 H), 6.76 (s, 1 H), 4.48 (s, 2 H), 3.96 (t,J=6.0 Hz, 2 H), 2.82 (t,J= 1. 1Hz, 2 H), 2.12-1.96 (m, 2 H).
Faza 4:
[0790]Urastvor jedinjenja 412(1.4 g, 5.1 mmol) i cezijum amonijum nitrata (1.95 g, 3.56 mmol) u ACN (45 mL) se doda rastvor joda (904 mg, 3.56 mmol) u ACN (5 mL). Reakcija se zagreje na 60 °C i meša 2 sata. Reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc, ispere sa zasićenim rastvorom Na2S203(2x) i slanim rastvorom, suši (Na2S04), filtrira i koncentruje. Sirovi produkt se prečisti gasnom hromatografijom uz eluiranje sa smešom heptani/EtOAc (0-50%) da se dobijejedinjenje 413(1.2 g, 80% čisto) koje sadrži 20% aldehida.<!>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 7.15(dd, 7=3.1, 9.4 Hz, 1 H), 7.02 - 6.94 (m, 1 H), 6.91 - 6.87 (m, 1 H), 4.50
(s, 2 H), 3.94 (t, J= 5. 9 Hz, 2 H), 2.81 (t, J= 7.6 Hz, 2 H), 2.08 - 1.99 (m, 2 H).
Faza 5:
[0791]Urastvor jedinjenja 413(500 mg, 80% čisto, 1.0 mmol),jedinjenja 123(340 mg, 1.0 mmol) i trifenilfosfina (327 mg, 1.25 mmol) u THF (6.7 mL) se u kapima, u toku 1 sat, dodaje DIAD (254 \ xL, 1.25 mmol). Kada se pomoću LCMS konstatuje daje reakcija završena, rastvor se koncentruje i prečisti gasnom hromatografijom uz eluiranje sa smešom heptani/EtOAc (0 - 50%). Frakcije koje sadrže traženi produkt se koncentruju a čvrste supstance se trituriraju sa Et20 da se dobijejedinjenje 414(125 mg, 17% prinos).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 1.40 (s, 9 H), 1.99 2.15 (m, 2 H), 2.85(t, J= 1. 4Hz, 2 H), 4.02(t, J= 5. 1 Hz, 2 H), 5.12 (s, 2 H), 7.02(dd, J=9.2, 4.4 Hz, 1 H), 7.13 (td,J=8.8, 3.2 Hz, 1 H), 7.35(dd, 7=9.2,3.2 Hz, 1 H), 7.80(d,7= 1. 5 Hz,1 H), 8.15(d, 7=1.5 Hz, 1 H), 9.00 (s, 1 H), 14.14 (brs, 1 H).
Faza 6:
[0792]U zatvorenu bočicu sa smešomjedinjenja 414(120 mg, 0.17 mmol), dibor pinakol estra (212 mg, 0.84 mmol) i cezijum fluorida (127 mg, 0.835 mmol) u MeOH (8.4 mL) i vodi (0.80 mL) se ubacuju mehurići azota. Doda se rastvor bis(di-terc-butil(4-dimetilaminofenil)fosfin)dihlorpaladijuma (II) (18 mg, 0.025 mmol) u toluenu (0.5 mL). Smeša se zagreva 1 sat na 60 °C, nakon toga razblaži sa EtOAc, ispere sa slanim rastvorom (2x), suši (Na2S04), filtrira i koncentruje. Ostatak se rastvori u DCM (1 mL) i doda se HC1 (4 N rastvor u dioksanu, 1 mL, 4.2 mmol). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi u toku noći, reakcija se koncentruje i prečisti gasnom hromatografijom uz eluiranje sa smešom DCM/7 N rastvor NH3MeOH (0-6%). Frakcije koje sadrže traženi produkt se koncentruju a dobijene čvrste susptance se trituriraju sa Et20 da se dobijePrimer 39(20 mg, 33% prinos).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-ć/e) 5 2.23 (br s, 2 H), 3.03 (br s, 2 H), 3.55 - 4.55 (m, 2 H), 5.21 (br s, 2 H), 5.90 (s, 2 H), 7.04 - 7.16 (m, 2 H), 7.30 (dd,7=8.9, 2.4 Hz, 1 H), 7.38 (d,7=2.0 Hz, 1 H), 7.75(d,7=1.8 Hz, 1 H), 13.88 (brs, 1 H). LCMSmlz366 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-12-fluoro-16,17-dihidro-l H,10//-8,4-(meteno)pirazolo-[3,4-d][l,ll,8]benzodioksazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer 40).
[0793]
Faza1:
[0794]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 39se koristi zaizradu jedinjenja 415(1.6 g, 49% prinos).<l>KNMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 1.28 (t,J =7.0 Hz, 3 H), 3.07 (br. s, 2 H), 4.13 - 4.22 (m, 2 H), 4.25 (d,J=6.6 Hz, 2 H), 4.40 (s, 2 H), 4.95 - 5.34 (m, 1 H), 6.63 (br. s, 1 H), 6.89 - 7.06 (m, 2 H), 7.13(dd, J=9.4, 2.6 Hz, 1 H), 13.29 (br s, 1 H).
Faza 2:
[0795]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 39se koristi za izradujedinjenja 416(930 mg, 67% prinos).<l>R NMR (400 MHz, DMSO-ofe) 5 12.97 (br s, 1 H), 7.38 (br s, 1 H), 7.18 - 7.05 (m, 2 H), 7.02 - 6.90 (m, 2 H), 6.49 (s, 1 H), 5.19 (t,J=5.4 Hz, 1 H), 4.41 (d,J=5.0 Hz, 2 H), 4.18 (t,J=6.4 Hz, 2 H), 3.06 (t,J=5.9 Hz, 2 H).
Faza3:
[0796]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimer 39se koristi za izradujedinjenja 417(700 mg, 81% prinos). *H NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 3.10 (t, 7= 6.2 Hz, 2 H), 4.19(t, J=6.3 Hz, 2 H), 4.37 (s, 2 H), 6.82 (s, 1 H), 6.91 7.05 (m, 2 H), 7.13 (dd,J=9.6, 3.0 Hz, 1 H), 13.77 (br s,
IH).
Faza4:
[0797]Postupak opisan u fazi 4 zaPrimer 39se koristi za izradujedinjenja 418(630 mg, 66% prinos).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 3.10 (t, 7= 6.2 Hz, 2 H), 4.20 (t,J=6.2 Hz, 2 H), 4.34 (s, 2 H), 6.91 - 7.05 (m, 2 H), 7.13 (dd,J=9.4, 3.2 Hz, 1 H).
Faza5:
[0798]Postupak opisan u fazi 5 zaPrimer 39se koristi za izradujedinjenja 419(180 mg, 16% prinos). JH NMR (400 MHz, DMSO-c/e) 5 1.41(s, 9 H) 3.16 ( t, J= 6.2 Hz, 2 H) 4.25 (t, J=6.3 Hz, 2 H) 5.00 (s, 2 H) 6.96 - 7.19 (m, 2 H) 7.33 (dd,J=9.3, 3.0 Hz, 1 H) 7.74(d, J =1.8 Hz, 1 H)8.17(d,J= 1.8 Hz, IH) 9.03 (s, 1 H) 14.23 (brs, 1 H).
Faza6:
[0799]Postupak opisan u fazi 6 zaPrimer 39se koristi za izraduPrimera 40(25 mg, 29% prinos).<l>U NMR (400 MHz, DMSO-d6) S 3.06 - 3.17 (m, 2 H), 4.51 (br s, 2 H), 5.19 (br s, 2 H), 5.54 (brs, 2 H), 7.02-7.19 (m, 2 H), 7.37 (dd,J= 9.1, 3.0Hz, 1 H), 7.67(d, J=1.8 Hz, 1 H), 7.86(d, J=1.8 Hz, 1 H), 13.46 (s, 1 H). LCMS ESmlz352 [M+H]<+>.
Izrada (10JR)-7-amino-12-fluoro-10,16-dimetil-3-propil-16,17-dihidro-3^-8,4-(meteno)[l,2,3]triazolo[4,5-/i][2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer 41).
[0800]
Faza 1:
[0801] Jedinjenje 6(7.6 g, 26.2 mmol) se rastvori u DMF (76 mL) da se dobije braon rastvor koji se ohladi na -5 °C u atmosferi azota. U porcijama se doda (7 porcija) A'-jodsukcinimid (5.9 g, 26.2 mmol), bez uočavanja značajnijih egzotermnih reakcija. Nakon zagrevanja na sobnu temperaturu, TLC (50% EtOAc/heptan) pokazuje prisustvojedinjenja 6.Reaktivna smeša se ponovo ohladi na 0 °C i u toku 2.5 h se doda još NIS (5.6 g, 24.9 mmol). Reakcija se neutrališe sa 10% vodenim rastvorom natrijum tiosulfata (50 mL) i zasiti natrijum bikarbonatom (30 mL). Braon smeša se upari do ostatka (ca. 60 mL) koji se podeli između EtOAc (200 mL) i 10% vodenog rastvora natrijum tiosulfata (200 mL). Nakon razdvajanja, organska supstanca se ispere sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (100 mL) a nakon toga sa slanim rastvorom (100 mL). Vodeni sloj se ponovo ekstrahuje sa EtOAc (50 mL). Kombinovani EtOAc slojevi se suše preko MgS04, filtriraju i upare da se dobije braon uljani ostatak (ca. 7 g). Sirovi produkt se adsorbuje na silka gelu i prečisti hromatografijom na koloni (eluent: 20 do 40% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 420kao smeđa čvrsta supstanca (4.0 g, 37% prinos).<l>RNMR (400 MHz, DMSO-ć/e) 5 7.88 (1 H, m), 7.57 (2 H, m), 7.21 (1 H, t), 6.91 (1 H, s), 6.13 (1 H, m), 6.10 (2 H, s), 3.85 (3 H, s), 1.51 (3 H, d). LCMS ESm/ z Ali[M+H]<+>.
Faza 2:
[0802]U rastvorjedinjenja 420(400 mg, 0.961 mmol) u MeOH se doda 2 M rastvor NaOH (1.0 mL, 2.0 mmol). Smeša se meša na sobnoj temperaturi. Nakon 6 sati, pomoću LCMS se konstatuje daje samo —20% reakcije završeno. Doda se nova količina 4 M rastvora NaOH (1.0 mL, 4.0 mmol). Smeša se meša na sobnoj temperaturi. Nakon 11 h, reakcija je završena. Približno 70% rastvarača se ukloni pod sniženim pritiskom a ostatak se podesi na pH =~7 sa 2 N rastvorom HC1. Precipitat se sakupi filtriranjem i ispere sa smešom MeOH/voda da se dobijejedinjenje 421kao čvrsta supstanca (321 mg, 83% prinos).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 51.56 (d, J = 6.3 Hz, 3 H), 6.19 (br s, 2 H), 6.33 (q, J= 6.4 Hz, 1 H), 6.93 (d, J =1.5 Hz, 1 H), 7.23 (td,J =8.5, 2.8 Hz, 1 H), 7.54 (dd,J=10.4, 2.5 Hz, 1 H), 7.61 (d,J=1.8 Hz, 1 H), 7.97 (dd,J=8.7, 5.9 Hz, 1 H), 13.42 (br s, 1 H). LCMS APCImlz403 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0803]Urastvor jedinjenja 421(300 mg, 0.746 mmol), N-metil propargil amina (57 mg, 0.82 mmol) i DIEA (289 mg, 2.24 mmol) u DMF (3 mL) se doda HATU (340 mg, 0.895). Dobijena smeša se meša na sobnoj temperaturi. Nakon 1.5 h, reakcija je samo —15% završena. Reaktivna smeša se zagreje do 55 °C. Nakon 1 h, reakcija je završena. Rastvarač se ukloni pod sniženim pritiskom. Ostatak se razblaži sa EtOAc i ispere sa vodom, zasićenim rastvorom NaHC03i slanim rastvorom. Organski sloj se filtrira, koncentruje i prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela, uz eluiranje sa smešom 3% do 50% EtOAc/heptan da se dobijejedinjenje 422kao svetio braon guma (323 mg, 95% prinos).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 1.54 (d,J=6.3 Hz, 3 H), 2.85 (s, 3 H), 3.07 (s, 1 H), 4.33 - 4.40 (m, 2 H), 5.35 - 5.50 (m, 1 H), 6.12 (s, 1 H), 7.17 - 7.28 (m, 1 H), 7.30 - 7.37 (m, 1 H), 7.50(d, J=8.1 Hz, 1 H), 7.62 (d,J=1.8 Hz, 1 H). LCMS APCImlz454 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0804]U izmešani rastvor 1-bromopropana (0.4 mmol) u DMAc (200 uL) se u kapima doda tetrabutilamonijum azid (0.4 mmol) (200 uL/min) kao rastvoru DMF (400 uL). U ovaj rastvor se nakon toga u kapima (200 uL/min) dodajejedinjenje 422(91 mg, 0.2 mmol) kao rastvor u DMAc (200 uL). Nakon 30 sekundi, deo reakcije (800 uL) se injektuje u uređaj sa protočnim reaktorom i 3 minuta propuša kroz cev kalema bakra na 150 °C. Deo reakcije se nakon toga ohladi i sakupi pomoću kolektora frakcija iniciranog sa UV (280 nm). LCMS analiza ovog segmenta pokazuje prisustvo željenog masenog jona zajedinjenje 423.LCMSmlz539 [M+H]<+>. Rastvarač se ukloni pod čistim N2na temperaturi od 50°C i koristi u sirovom stanju u narednoj fazi.
Faza 4:
[0805] U jedinjenje 423(108 mg, 0.2 mmol) se dodaju bezvodni, degasirani DMAc (3 mL), Pd(OAc)2(0.0021 mmol), cataCXium<®>A (0.0042 mmol), pivalinska kiselina (0.0067 mmol) i KOAc (0.167 mmol) se u zatvorenoj komori, pod kontrolisanim uslovima (<50 ppm O2, <50 ppm H2O). Reaktivna smeša se meša 18 sati na 110 °C. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reaktivna smeša se razblaži sa vodom i EtOAc. Organski sloj se sakupi i ispere sa zasićenim rastvorom NaHC03i vodom. Organski sloj se filtrira i filtrat se koncentruje pod sniženim pritiskom. Sirovi produkt se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, uz eluiranje sa smešom 30-90% EtOAc-heptan da se dobije nečist produkt. Uzorak se ponovo prečisti reverzno faznom hromatografijom da se dobijePrimer 41kao bela čvrsta supstanca (16 mg, 30% prinos).<l>RNMR (400 MHz, DMSO-^e) 5 7.55 - 7.72 (m, 2 H), 7.44 (dd,J =5.7, 8.5 Hz, 1 H), 7.16 (dt,J=2.8, 8.5 Hz, 1 H), 6.77 (s, 1 H), 6.33 (s, 2 H), 5.65(q, J=7.2, 3.6 Hz, 1 H), 4.51( d, J=14.4 Hz, 1 H), 4.29 - 4.43 (m, 2 H), 4.15(d, J=14.7 Hz, 1 H), 2.99 (s, 3H), 1.73 - 1.83 (m,2H),1.67 (d, .7=6.1 Hz, 3 H), 0.78 (t,J=7.3 Hz, 3 H). LCMS APCI
m/ z 412 [M+H]+.
Izrada 12-fluoro-l-metil-l,4,5,6,7,8-heksahidro-14H-16,20-(meteno) pirazolo[4,3-g][l,14,ll]benzodioksazacikloheptadecin-17-amina (Primer 42).
[0806]
Faza1:
[0807]Krozsmešu jedinjenja 113(300 mg, 0.72 mmol),jedinjenja 125(300 mg, 1.4 mmol), bakar jodida (6.9 mg, 0.036 mmol), trifenil fosfina (9.4 mg, 0.036 mmol) i PdCb(PPh3)2(50.5 mg, 0.072 mmol) u smeši DMF (4.81 mL) i piperidina (4.81 mL) se u mehurićima propušta azot a nakon toga se smeša zagreje u uljanom kupatilu na 90 °C. Nakon 4 sata, reakcija se ostavi da se ohladi i razblaži sa etil acetatom. Rastvor se ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NH4CI (3 x), slanim rastvorom i organski deo se suši preko MgS04. Rastvor se filtrira, koncentruje a ostatak se podvrgne hromatografiji na koloni silika gela (50-100% EA/heptan) da se dobijejedinjenje 424(102 mg, 34%) kao bela čvrsta supstanca.<l>KNMR (400 MHz,DMSO-^6)5 12.69 (br. s., 1 H), 8.22 (d, y = 1.77 Hz, 1 H), 7.88 (d, .7=1.77 Hz, 1 H), 7.64 (s, 1 H), 7.12 (dd, .7=9.35, 3.28 Hz, 1 H), 6.90 - 6.99 (m, 1 H), 6.82,(dd, J=8.84, 4.55 Hz, 1 H), 5.12 (br. s., 1 H), 4.45 (br. s., 2 H), 3.96(t, J=6.06 Hz, 2 H), 3.80 (s, 3 H), 1.88 (quin, J= 6.51 Hz, 2 H). LCMSmlz423 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0808] Jedinjenje 424(100 mg, 0.237 mmol) se rastvori u etanolu (0.5 mL) i doda se paladijum hidroksid (25 mg, 20% na ugljeniku). Smeša se ispere sa azotom, a nakon toga podvrgne pritisku vodonika od 3-4 bara. Reakcija se meša i zagreva 12 sati na 60 °C. Reaktivna posuda se ostavi da se ohladi i LCMS pokazuje daje glavni produkt željeno jedinjenje uz prisustvo manje količine etil karbamata. Reakcija se filtrira kroz celite kertridž da se ukloni katalizator i ispere sa metanolom. Filtrat se koncentruje i u ostatak(jedinjenje 425)se dodaju 2N vodeni rastvor NaOH (2 mL) i metanol (0.8 mL). Reakcija se zagreva 4 sata na 90 °C, ostavi da se ohladi i meša još 48 sati. Smeša se razblaži sa EtOAc i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NH4CI. Vodeni rastvor se podesi na pH 6 koristeći 4N rastvor HC1 i dalje ekstrahuje sa EtOAc. Organski sloj se suši preko MgS04, koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-10% MeOH/DCM) da se dobijejedinjenje 426(5mg, 53%) kao bezbojna čvrsta supstanca. 'HNMR (400 MHz, DMSO-</6) 8 9.72 (br. s., 1 H), 7.40(d, J=1.76 Hz, 1 H), 7.31 (s, 1 H), 7.12(dd, J=9.57, 3.27 Hz, 1 H), 6.93 - 7.02 (m, 1 H), 6.83 - 6.92 (m, 1 H), 6.79 (d, .7=1.76 Hz, 1 H), 5.75 (s, 2 H), 5.13 (br. s., 1 H), 4.45 (s, 2 H), 3.88(t,7 =6.42 Hz, 2 H), 3.63 (s, 3 H), 2.31(t, J=7.55 Hz, 2 H), 1.56 - 1.69 (m, 2 H), 1.41-1.56 (m, 2 H), 1.27-1.41 (m, 2 H). LCMSmlz401 [M+H]".
Faza3:
[0809]U ohlađeni rastvorjedinjenja 426u DCM (500 uL) se na 0 °C doda TEA (20.9 uL, 0.15 mmol) i katalitička količina DMAP (0.6 mg), a nakon toga rastvor MsCl (9.7 uL, 0.125 mmol) u DCM (250 uL). Reakcija se ostavi da se polako zagreje na sobnu temperaturu i nakon jedan sat, LCMS ukazuje daje željeni produkt glavna formirana komponenta. Reakcija se razblaži sa DCM i ispere sa vodom. Organske supstance se suše (MgS04), filtriraju i koncentruju. Nakon sušenja u toku noći pod visokim vakuumom,jedinjenje 427(53 mg, 89%) se izdvoji kao svetla penasta čvrsta supstanca, koja se koristi bez prečišćavanja u fazi cikliziacije. LCMSmlz479 [M+H]<+>.
Faza4:
[0810]U rastvorjedinjenja 427(50 mg, 0.1 mmol) u DMF (2.08 mL) se doda NaH (5.6 mg, 0.15 mmol, 60% disperzija). Reakcija se zagreva 3 sata na 50 °C. Doda se nova porcija NaH (5 mg) i reakcija se zagreva još 1 sat. Reakcija se razblaži sa EtOAc, ispere sa smešom zasićeni vodeni rastvor NH4Cl/voda, slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-10% MeOH/DCM) da se dobijePrimer 42(6 mg, 20%) kao žuto-krem čvrsta supstanca.<l>RNMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 h 7.55 (s, 1 H), 7.23 - 7.30 (m, 2 H), 7.02 - 7.10 (m, 1 H), 6.95 - 7.02 (m, 1 H), 6.86 (s, 1 H), 5.77 (br. s., 2 H), 5.26 (s, 2 H), 4.01(t, J=5.41 Hz, 2 H), 3.65 (s, 3 H), 2.30(t, J=6.29 Hz, 2 H),1.68 (m, .7=5.29 Hz, 2 H) 1.41-1.58 (m, 4 H). LCMS APCI mlz 383[M+H]<+>.
Izrada 12-fluoro-3-metil-16,17,18,19-tetrahidro-3H, 10//-8,4-(meteno)-pirazolo [4,3-
/][l,13,10]benzodioksazacikloheksadecin-7-amina (Primer 43)
[0811]
Faza 1:
[0812] Krozsmešu jedinjenja 113(400 mg, 0.96 mmol),jedinjenja 120(233 mg, 1.2 mmol), bakar jodida (9.1 mg, 0.048 mmol), trifenil fosfina (25.2 mg, 0.096 mmol) i PdCb(PPh3)2 (33.7 mg, 0.048 mmol) u piperidnu (6.4 mL) se u mehurićima propušta azot a nakon toga se smeša zagreva u uljanom kupatilu na 90 °C. Nakon 4 sata, reakcija se ostavi da se ohladi i razblaži sa EtOAc. Rastvor se ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NH4CI (3x), slanim rastvorom i organski deo se suši preko MgS04. Rastvor se filtrira, koncentruje i ostatak se podvrgne hromatografiji na koloni silika gela (0-10% MeOH/DCM) da se dobijejedinjenje 428kao gumasta čvrsta supstanca kontaminirana sa viškom piperidina. Ovaj materijal se koristi bez naknadnog prečišćavanja u narednoj fazi.<!>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 9.22 (s, 1 H), 8.06 (d, 7=2.01 Hz, 1 H), 7.64 (s, 1 H) 7.45(d,7=1.76 Hz, 1 H), 7.13 (dd,7=9.32, 2.77 Hz, 1 H), 6.92 - 7.01 (m, 2 H), 5.13 (br. s., 1 H), 4.48 (d,7=2.27 Hz, 2 H), 4.06 (t, 7=6.67 Hz, 2 H), 3.82 (s, 3 H), 2.78 (t,7=6 .55Hz, 2 H). LCMSmlz409
[M+H]<+>.
Faza 2:
[0813] Jedinjenje 428(400 mg, 0.979 mmol) se rastvori u etanolu (9.8 mL) i doda se paladijum hidroksid (40 mg, 20% na ugljeniku). Smeša se ispere sa azotom, a nakon toga podvrgne pritisku vodonika od 3-4 bara. Reakcija se mućka i zagreva 18 sati na 50 °C. Reaktivna posuda se ostavi da se ohladi i LCMS ukazuje daje željeni glavni produkt praćen malom količinom etil karbamata. Reakcija se filtrira kroz celite kertridž da se ukloni katalizator i ispere sa metanolom. Filtrat se koncentruje, rastvori u etanolu (10 mL) i doda se 15% vodeni rastvor NaOH (7.83 mL). Reakcija se zagreva 12 sati na 85 °C i ostavi da se ohladi. Smeša se neutrališe sa 1 N vodenim rastvorom HC1 i ekstrahuje sa EtOAc. Organski sloj se suši preko MgS04, koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-10% MeOH/DCM) da se dobijejedinjenje 430(151 mg, 40%) kao bezbojna čvrsta supstanca.<*>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 9.72 (br. s., 1 H), 7.41 (d,7= 1.76 Hz, 1 H), 7.33 (s, 1 H), 7.12 (dd,7=9.44, 3.15 Hz, 1 H), 6.91 - 7.02 (m, 1 H), 6.85 (dd,7=8.81, 4.53 Hz, 1 H), 6.79(d, 7= 2.01 Hz,1 H), 5.75 (s, 2 H), 5.13 (br. s.,1H), 4.45 (s, 2 H), 3.87 (t,7= 6.04 Hz, 2 H),3.64 (s, 3 H), 2.35(t,7=7.30 Hz, 2 H), 1.47 - 1.74 (m, 4 H). LCMSmlz387 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0814]U ohlađenirastvor jedinjenja 430(150 mg, 0.388 mmol) u DCM (2 mL) se na 0 °C dodaju TEA (65 uL, 0.47 mmol) i katalitička količina DMAP (2-3 mg), a nakon toga rastvor MsCl (30 uL, 0.39 mmol) u DCM (0.5 mL). Reakcija se ostavi da se polako zagreje na sobnu temperaturu. Nakon 2 sata, u reakciju se dodaju piridin (2 mL) i MsCl (15 uL, 0.2 mmol) i ostavi da se meša još 1 sat. Reakcija se razblaži sa EtOAc i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NH4CI i slanim rastvorom. Organske supstance se suše (MgS04), filtriraju i koncentruju. Nakon sušenja u toku noći pod visokim vakuumom,jedinjenje 431(156 mg, 86%), se izdvoji kao narandžasta guma koja se koristi bez prečišćavanja u fazi ciklizacije.
Faza 4:
[0815]Urastvor jedinjenja 431(156 mg, 0.34 mmol) u DMF (2.08 mL) se doda NaH (13.4 mg, 0.34 mmol, 60% disperzija). Reakcija se zagreva 2 sata na 50 °C. Reakcija se razblaži sa EtOAc, ispere sa smešom zasićeni vodeni rastvor NH4Cl/voda, slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-8%> MeOH/DCM) da se dobijePrimer 43(40mg, 32%) kao žuto-krem čvrsta supstanca.<J>H NMR (400 MHz, 80 °C, DMSO-^e) 5 7.50 - 7.57 (m, 2 H), 7.29 - 7.33 (m, 2 H), 7.01 - 7.09 (m, 1 H), 6.92 - 7.00 (m, 1 H), 5.77 (br. s., 2 H), 5.28 (s, 2 H), 4.02 (t,J=5.54 Hz, 2 H), 3.69 (s, 3 H), 2.18 - 2.34 (m, 2 H), 1.71 - 1.89 (m, 4 H). LCMS APCImlz369 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-12-fluoro-A^r/V,3-trimetil-17,18-dihidro-10//-8,4-(meteno)-pirazolo[3,4-e][l,12,9]benzodioksazaciklopentadecin-l(16/7)-sulfonamida (Primer 44)
[0816]
[0817] Jedinjenje 409(30 mg, 0.053 mmol) se rastvori u smeši dioksan/voda (500 mL/50 mL) i zagreva 14 sati na 100 °C. Reakcija se koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-60% EtOAc/DCM), a nakon toga reverzno faznom HPLC da se dobijePrimer 44(13 mmol, 17% - utvrđeno pomoću ELSD analiza DMSO rastvora), koji se direktno podvrgne praćenju.<*>H NMR (600 MHz, DMSO-c/e) 5 h 7.51 (d,J=1.65 Hz, 1 H), 7.37 (dd,J=8.78, 2.74 Hz, 1 H), 7.33 (d, 7=1.65 Hz, 1 H), 7.07 - 7.17 (m, 2 H), 5.85 (s, 2H), 5.22 (s, 2 H), 4.18 (m,J=4.94 Hz, 2 H), 2.96 (s, 6 H), 2.88 (br. s., 2 H), 2.30 (s, 2 H), 2.24 (s, 3 H). LCMS ESmlz462 [M+H]<+>.
Izrada 8-amino-13-fluoro-4-metoksi-ll,17-dimetil-17,18-dihidro-9,5-(meteno)pirido[4,3-
/i][2,5,ll]benzoksadiazaciklotetradecin-16(ll//)-ona (Primer 45)
[0818]
Faza1:
[0819]Smeša bromo početnog materijalajedinjenja 16(1.364 g, 3.70 mmol,),
bis(pinakolato)dibora (1.44 g, 5.54 mmol), KOAc (1.27 g, 12.9 mmol), Pd(dppf)Cb (272 mg, 0.333 mmol) i anhidrovanog DMSO (17 mL) se meša 10 minuta na sobnoj temperaturi da se dobije tamno narandžasta suspenzija. Smeša se nakon toga zagreva 5 sati na 80 °C. U smešu
se doda EtOAc a nakon toga Si-tiol. Suspenzija se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu, uz mešanje. Nakon 30 minuta, smeša se filtrira i čvrste supstance se isperu sa EtOAc. Filtrat (bistar tamno narandžasti) se dalje razblaži sa EtOAc i ispere sa vodom (2x) a nakon toga slanim rastvorom. Vodeni slojevi se ponovo ekstrahuje sa EtOAc (2x). Organski slojevi se kombinuju i isperu sa 1 M rastvorom HC1. Vodeni slojevi se sakupe a nakon toga ohlade na 0 °C i neutrališu sa 10 M rastvorom NaOH (aq) do pH = 7. Suspenzija se nakon toga ekstrahuje sa EtOAc i organski slojevi se kombinuju i isperu sa slanim rastvorom. Organski sloj se nakon toga suši (Na2S04), filtrira i koncentruje da se dobije 1.42 g sirovog materijala kao braon čvrsta supstanca. Materijal se rastvori u minimalnoj količini EtOAc a nakon toga se doda heptan. Formira se precipitat. Smeša se ostavi da stoji 1 sat a nakon toga filtrira i ispere sa heptanom da se dobijejedinjenje 432(702.2 mg, 46%) kao svetio braon čvrsta supstnca.<J>H NMR (600 MHz, DMSO-c/e) 5 7.94 (dd,J=8.80, 5.87 Hz, 1 H), 7.74 (s, 1 H), 7.68 (dd,J =10.56, 2.35 Hz, 1 H), 7.25 (td,J= 8.36, 2.64 Hz, 1 H), 6.87 (s, 1 H), 6.36 (s, 2 H), 6.26(q, J =6.46 Hz, 1 H), 3.91 (s, 3 H), 1.57(d, J=5.87 Hz, 3 H), 1.21( d, J=5.87 Hz, 12 H).
Faza 2:
[0820]U mikrotalasnu bočicu sedodaju jedinjenje 97(100 mg, 0.3 mmol),jedinjenje 432(189 mg, 0.45 mmol), cezijum fluorid (138 mg, 0.91 mmol), cataCXium A (12.9 mg, 0.036 mmol), paladijum acetat (8.1 mg, 0.036 mmol), metanol (3 mL) i voda (0.3 mL). Reaktivna smeša se degasira, bočica se zatvori i zagreva 2 sata na 80 °C. Smeša se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (20-50% EtOAc/heptan, nakon toga 5-10% MeOH/EtOAc) da se dobijejedinjenje 433(82 mg, 50%) kao braon guma.<*>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.96 - 8.10 (m, 2 H), 7.46(d, J=13.64 Hz, 1 H), 7.27 - 7.35 (m, 1 H), 7.00(t, J= 7.33 Hz,1 H), 6.75 (d, J=5.31 Hz, 1 H), 6.51 (br. s., 1 H), 6.30 - 6.37 (m, 1 H), 4.96 (br. s., 2 H), 3.87 (s, 3 H), 3.66 - 3.77 (m, 3 H), 2.53 - 2.68 (m, 3 H), 1.63 - 1.69 (m, 3 H), 1.41 (br. s., 9 H). LCMSmlz541 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0821] Jedinjenje 433(82 mg, 0.15 mmol) se rastvori u THF (1 mL) i MeOH (0.3 mL), a zatim se doda 38% rastvor HC1 (0.1 mL). Reakcija se zagreva 4 sata na 50 °C u uljanom kupatilu. Reakcija se ostavi da se ohladi na sobnu temperaturu i doda se 50% vodeni rastvor NaOH sve dok pH ne dostigne 12 (~0.2 mL). Doda se 0.3 mL MeOH i reakcija zagreva 1 sat na 50 °C. Reakcija se koncentruje i podvrgne liofilizaciji. Čvrsta supstanca se filtrira i ispere sa EtOAc, a nakon toga sa smešom MeOH/CFhCk i filtrati se koncentruju da se dobijejedinjenje 435(126 mg) kao bela čvrsta supstanca, koja se koristi u narednoj fazi bez naknadnog prečišćavanja.
Faza 4:
[0822] Jedinjenje 435(65 mg, 0.15 mmol) se rastvori u DMA (15 mL) i rastvor se ohladi na 0 °C. Doda se DIEA (53 uL, 0.3 mmol), a nakon toga CMPI (43.1 mg, 0.17 mmol) i smeša se meša 30 minuta na 0 °C. Reaktivna smeša se razblaži sa vodom i podvrgne liofilizaciji. Čvrsta supstanca se ispere sa EtOAc i smešom MeOH/CthCh, filtrati se koncentruju i prečiste reverzno faznom HPLC da se dobijePrimer 45(2.38 mg, 4%) kao beličasta čvrsta supstanca. JH NMR (400 MHz, aceton-^) 5 8.03 - 8.15 (m, 1 H), 7.59(dd, J=10.11, 2.53 Hz, 1 H), 7.53 (d,J = 2.02 Hz, 1 H), 7.31(dd, J=8.46, 5.68 Hz, 1 H), 7.19 (s, 1 H), 6.96 - 7.06 (m, 2 H), 5.76 - 5.85 (m, 1 H), 5.47 (s, 1 H), 4.28 (s, 2 H), 3.79 - 3.87 (m, 3 H), 3.06 (s, 3 H), 1.69 - 1.74 (m, 3 H). LCMS APCImlz409 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-12-fluoro-2,16-dimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2^T-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-/i] [2,5,11 ]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer 46)
[0823]
Faza 1:
[0824] Jedinjenje 10(1.89 g, 7.5 mmol),jedinjenje 29(2.28 g, 9 mmol) i cezijum karbonat (6.11 g, 18.7 mmol) se kombinuju u acetonitrilu (75 mL) i zagrevaju 18 sati na 80°C. U slani rastvor se doda sirova suspenzija (400 mL) i dobijene čvrste supstance boje rđe se sakupe filtriranjem i isperu sa vodom. Delimično osušene čvrste supstance rekristlišu iz toplog acetonitrila (-200 mL) da se dobijejedinjenje 436(2.37 g, 75%) kao narandžasta čvrsta supstanca.<l>U NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 7.92 (dd, 1 H), 7.58 - 7.69 (m, 2 H), 7.05 (td,J =8.65, 3.24 Hz, 1 H), 6.69 (s, 2 H), 5.27 (s, 2 H). LCMSmlz423/425 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0825] Jedinjenje 436(450 mg, 1.06 mmol),jedinjenje 137(155 mg, 0.30 mmol), DIEA (0.578 mL, 3.32 mmol) i Pd (PtBu3)2(43.3 mg, 0.083 mmol) se rastvore u toluenu (40 mL) u nerđajućem čeličnom cilindru i zagrevaju 15 sati na 85 °C u atmosferi CO pod pritiskom od 4 bara. Smeša se koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (25-100% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 437(255 mg, 65%) kao žuta čvrsta supstanca.<l>K NMR (400 MHz, 80°C,DMSO-</6)5 ppm 7.64 (s, 1 H), 7.51(dd, J=10.20, 2.64 Hz, 1 H), 7.40(dd, J=8.31, 5.79 Hz, 1 H), 7.15 - 7.32 (m, 1 H), 6.94 (s, 1 H), 6.23 (br. s., 2 H), 5.34 (s, 2 H), 4.13 - 4.83 (m, 2 H), 3.95 (s, 3 H), 2.87 (br. s., 3 H). LCMSmlz 4141416[M+H]<+>.
Faza 3:
[0826] Jedinjenje 437(125 mg, 0.264 mmol), cataCXium A (29.2 mg, 0.079 mmol), paladijum acetat (9 mg, 0.04 mmol), KOAc (130 mg, 1.32 mmol) i pivalinska kiselina (8.1 mg, 0.079 mmol) se u mikrotalasnoj bočici rastvore u DMA (5.29 mL). Bočica se ispere sa azotom i zagreva pod mikrotalasima 1 sat na 150 °C. Smeša se razblaži sa vodom i čvrste supstance uklone filtriranjem. Vodene faze se ekstrahuju sa EtOAc i isperu sa slanim rastvorom. Čvrste supstance se kombinuju sa organskim susptancama i suše preko MgS04. Organske supstance se filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (25-100% 3:1 DCM u heptanima/5% MeOH u EtOAc). Trituriranjem produkta koji sadrži frakcije MTBE dobija sePrimer 46(36 mg, 35%) kao bezbojna čvrsta supstanca kao smeša atropizomera.<l>RNMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 7.80 (s, 1 H), 7.35 - 7.53 (m, 2 H), 7.19 (td,J=8.50, 2.64 Hz, 1 H), 6.75 (s, 2 H), 5.57 (dd,J=12.46, 1.64 Hz, 1 H),5.10( d, J =12.59 Hz, 1 H), 4.23 - 4.50 (m, 2 H), 4.04 (s, 3 H), 2.88 (s, 3 H). LCMS APCImlz394
[M+H]<+>.
[0827]Analitičko asimetično razdvajanje pomoću SFC se izvodi koristeći Chiralpak OD-H (4.6 mm x 250 mm kolonu, 5 mikrona veličina čestice), uz eluiranje sa 30% MeOH u CO2zadržavanje na 35 °C pod pritiskom od 140 bara. Brzinom protoka od 3 mL/minuta dobija se Rt (Pik 1) = 4.85 minuta i Rt (Pik 2) = 5.79 minuta.Primer 46(Atropizomer pik 1): 99% ee.<l>KNMR (400 MHz,DMSO-^e)5 7.79 (s, 1 H), 7.37 - 7.56 (m, 2 H), 7.19 (td,J=8.46, 2.78 Hz, 1 H), 6.77 (s,2H),5.57(dd, J= 12.51, 1.64 Hz,1 H),5.10(d, J= 12.38 Hz,1 H), 4.25 - 4.41 (m, 2 H), 4.04 (s, 3 H), 2.88 (s, 3 H).
[0828] Primer 46(Atropizomer pik 2): 96% ee.<l>RNMR (400 MHz,DMSO-</6)5 ppm 7.79 (s, 1 H), 7.37 - 7.53 (m, 2 H), 7.19(td, J=8.53, 2.65 Hz, 1 H), 6.77 (s, 2 H), 5.57 (dd,J =12.38, 1.52 Hz, 1 H), 5.10 (d,J=12.63 Hz, 1 H), 4.24 - 4.47 (m, 2 H), 4.04 (s, 3 H), 2.88 (s, 3
H).
Izrada (10JR)-7-amino-3-etil-12-fluoro-10,16-dimetil-16,17-dihidro-8,4-(azeno)[l,2]oksazolo[4,3-^1 [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer
47)
[0829]
Faza1:
[0830] Jedinjenje 126 (286 mg, 0.653 mmol), jedinjenje438(115 mg, 0.653 mmol), DIEA (0.455 mL, 2.61 mmol), Pd (PtBu3)2(33.9 mg, 0.05 mmol) se rastvore u toluenu (20 mL) u posudi od nerđajućeg čelika. Reaktor se podvrgne pritisku CO od 4 bara i zagreva 14 sati na 85 °C. Reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom, zasićenim vodenim rastvorom NH4CI i slanim rastvorom. Organske supstance se suše (MgS04) i koncentruju. Ostatak, jedinjenje439se koristi u sledećoj fazi bez naknadnog prečišćavanja.
Faza 2:
[0831] Jedinjenje439(312 mg, 0.653mmol), KOAc (320 mg, 3.26mmol) i pivalinska kiselina (16.8 mg, 0.163 mmol) se kombinuju u DMF (4.35 mL) i rastvor prečisti sa azotom. Nakon toga se dodaju Pd(OAc)2(14.6 mg, 0.065 mmol) i cataCXium A (48.4 mg, 0.131 mmol) i reakcija zagreva 45 minuta na 150 °C pod mikrotalasima. Reakcija se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje. Prečišćavanjem reverzno faznom HPLC dobija sePrimer 47(71 mg, 27%) kao bezbojna
čvrsta supstanca.<*>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.31 7.25 (m, 3 H), 7.08 (dt,J=2.6, 8.2 Hz, 1 H), 6.30 - 6.22 (m, 1 H), 4.57(d, J=13.6 Hz, 1 H),4.41( d, J =13.4 Hz, 1 H), 3.12 (s, 3 H), 3.01 - 2.77 (m, 2 H), 1.84(d, J=6.6 Hz, 3 H), 1.39(t, J=7.6 Hz, 3 H). LCMSAPCI mlz398
[M+H]<+>.
Izrada (10JR)-7-amino-3-etil-12-fluoro-10,16-dimetil-16,17-dihidro-8,4-(azeno)|l,2]oksazolo|4,3-/i][2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer
48)
[0832]
Faza 1:
[0833] Jedinjenje 126(285 mg, 0.650 mmol),jedinjenje 440(115 mg, 0.650 mmol), DIEA (0.453 ml, 2.61 mmol) i Pd(PtBu3)2(33.9 mg, 0.05 mmol) se rastvore u toluenu (20 mL) u posudi od nerđajućeg čelika. Reaktor se podvrgne pritisku CO od 4 bara i zagreva 14 sati na 85 °C. Reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom, zasićenim vodenim rastvorom NH4CI i slanim rastvorom. Organske supstance se suše (MgS04) i koncentruju. Ostatak, jedinjenje441se koristi u sledećoj fazi bez naknadnog prečišćavanja.
Faza 2:
[0834] Jedinjenje 441(311 mg, 0.650 mmol), KOAc (320 mg, 3.26 mmol) i pivalinska kiselina (16.8 mg, 0.163 mmol) se kombinuju u DMF (5 mL) i rastvor prečisti sa azotom. Nakon toga se dodaju Pd(OAc)2(14.6 mg, 0.065 mmol) i cataCXium A (48.6 mg, 0.131 mmol) i reakcija se zagreva 45 minuta na 150°C pod mikrotalasima. Reakcija se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje. Prečišćavanjem reverzno faznom HPLC dobija sePrimer 48(62 mg, 24%) kao bezbojna čvrsta supstanca.<l>KNMR (400 MHz, CDCb) 5 7.66 (s, 1 H), 7.31 - 7.27 (m, 1 H), 7.21 (dd,J= 5.5, 8.4 Hz, 1 H), 7.01(dt, J = 2.6, 8.3 Hz,1 H), 6.16 -6.03 (m, 1 H), 5.01 (br. s., 2 H), 4.67(d, J=14.1 Hz,1 H), 4.33 (d, J=14.1 Hz, 1 H), 3.11 (s, 3 H), 2.95 - 2.75 (m, 2 H),1.76 (d, J= 6.6 Hz, 3 H),1.34 (t,J=7.5 Hz, 3 H). LCMS APCImlz398 [M+H]<+>.
Izrada (10JR)-7-amino-3-etil-12-fluoro-10,16-dimetil-16,17-dihidro-3J&-8,4-(azeno)pirazolo|4,3-/i]|2,5,l l]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer 49)
[0835]
Faza1:
[0836] Jedinjenje 126(314 mg, 0.718 mmol),jedinjenje 442(100 mg, 0.718 mmol), DIEA (0.5 mL, 2.87 mmol) i Pd(P<t>Bu3)2(37.5 mg, 0.072 mmol) se rastvore u toluenu (20 mL) u posudi od nerđajućeg čelika. Reaktor se podvrgne pritisku CO od 4 bara i zagreva 14 sati na 85 °C. Reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom, zasićenim vodenim rastvorom NH4CI i slanim rastvorom. Organske supstance se suše (MgS04) i koncentruju. Ostatak,jedinjenje 443se koristi u sledećoj fazi bez naknadnog prečišćavanja. LCMSmlz 4111419
[M+H]<+>.
Faza 2:
[0837] Jedinjenje 443(258 mg, 0.540 mmol), KOAc (265 mg, 2.7 mmol) i pivalinska kiselina (13.9 mg, 0.135 mmol) se kombinuju u DMF (4 mL) i rastvor prečisti sa azotom. Nakon toga se dodaju Pd(OAc)2(12.1 mg, 0.054 mmol) i cataCXium A (39.9 mg, 0.108 mmol) i reakcija zagreva 30 minuta na 150 °C pod mikrotalasima. Reakcija se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje. Prečišćavanjem reverzno faznom HPLC dobija sePrimer 49(52 mg, 24%) kao bezbojna
čvrsta supstanca.<l>R NMR (400 MHz, DMSO-rfe) 5 7.67 (s, 1 H), 7.60 (s, 1 H), 7.54(dd, 7 =2.6, 10.1 Hz, 1 H), 7.31(dd, 7=5.7, 8.4 Hz,1 H), 7.12(dl, 7=2.6, 8.5Hz, 1 H), 6.75 (s, 2 H), 6.09 - 5.96 (m, 1 H), 4.20 - 4.13 (m, 2 H), 4.13 - 4.04 (m, 2 H), 2.90 (s, 3 H), 1.64(d, J =6.6 Hz, 3 H), 1.33 (t,J= 1. 2Hz, 3H). LCMS APCImlz397 [M+H]<+>.
Izrada (5/f)-8-amino-3-lfuoro-5,19-dimetil-18,19-dihidro-7,ll-(meteno)pirido-[2',l':2,3]imidazo[4,3-/i][2,5,11 ]benzoksadiazaciklotetradecin-20(5//)-ona (Primer 50)
[0838]
Faza 1:
[0839] Smeša jedinjenja 175(355 mg, 0.852 mmol),jedinjenja 177(348 mg, 1.02 mmol) i CsF (388 mg, 2.56 mmol) u MeOH (10 mL) se prečisti sa azotom a zatim se doda PdCi2(dppf).CH2Cl2(35.1 mg, 0.043 mmol). Reakcija se zagreva 1 sat na 120 °C pod mikrotalasima a nakon toga podeli između EtOAc i slanog rastvora. Vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovane organske supstance se isperu sa slanim rastvorom, suše (MgS04) i smanje do minimalne zapremine. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-10% MeOH : 10% vodeni rastvor NH4OH/DCM : EtOAc, 1:1) da se dobijejedinjenje 444(272 mg, 58%) kao bledo narandžasta pena. LCMSmlz550 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0840]U rastvorjedinjenja 444(440 mg, 0.801 mmol) u DCM (4 mL) se doda HC1 (4 mL, 4M rastvor u dioksanu, 20 mmol). Smeša brzo postaje mutna i formira se suspenzija. Reaktivna smeša se meša 4 sata na sobnoj temperaturi a nakon toga izdvoji do sušenja. Ostatak se azeotropira sa MTBE i suši 1 sat u vakuum pećnici na~50 °C da se dobije bledo narandžasta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca se rastvori u MeOH (8 mL) i doda se čvrsti KOH (378 mg, 6.74 mmol). Dobijena suspenzija se meša na 50 °C u toku noći. pH dobijene suspenzije se podesi na 5-6 dodavanjem 6N rastvora HC1 u kapima. Reakcija se filtrira i filtratkoncentruje pod vakuumom.Ostatak se azeotropira sa toluenom da se dobije braon čvrsta supstanca, koja se suši 1 sat pod vakuumom na temperaturi od 50 °C da se dobijejedinjenje 445(401 mg, 89%), koje se koristi bez prečišćavanja.
Faza3:
[0841]U rastvor HATU (439 mg, 1.12 mmol) u smeši DMF /THF (20 mL/4 mL) se na 0 °C, u kapima, dodarastvor jedinjenja 445(348 mg, 0.8 mmol) i DIEA (0.7 mL, 4 mmol) u smeši DMF/THF (20 mL/4 mL). Dodavanje traje 35 minuta. Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 20 minuta na 0 °C. Smeša se sipa u vodeni rastvor NaHC03(400 mL). Smeša se filtrira i filtrat se ekstrahuje sa EtOAc (3x). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa vodom (2x), slanim rastvorom (lx), suše preko MgS04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-10% Metanol/DCM:EtOAc 1:1). Tražene frakcije se koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak, koji se triturira sa MTBE da se dobijePrimer 50(164 mg, 45%) kao beličasta čvrsta supstanca.<l>HNMR (400 MHz, DMSO-g?6) 5 8.52 (d, 1 H), 7.79 (d,J=1.52 Hz, 1 H), 7.59 - 7.70 (m, 2 H), 7.46 (dd,J= 8.59,5.81 Hz, 1 H), 7.28(ddd, J=9.03, 6.76, 1.14 Hz, 1 H), 7.17(td, J= 8.46, 2.78Hz, 1 H), 6.94 (td, J=6.82, 1.01 Hz, 1H), 6.89 (d, J=1.52 Hz, 1 H), 6.18 (s, 2 H), 5.62 - 5.82 (m,1 H),4.47 ( d, J=13.89 Hz, 1H),4.31 (d, J= 13.89 15 Hz,1 H), 3.06 (s, 3 H),1.69 ( d, J =6.32 Hz, 3 H). LCMS APCIm/ z418 [M+H]<+>.
Izrada (10JR)-7-amino-12-fluoro-3-metoksi-10,16-dimetil-16,17-dihidro-8,4-(azeno)[l,2]tiazolo[4,3-/i][2,5,ll]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer 51)
[0842]
Faza1:
[0843] Jedinjenje 126(442 mg, 1.01 mmol),jedinjenje 178(197 mg, 1.01 mmol), DIPEA (0.704 mL, 4.04 mmol) i Pd(PtBu3)2(52.7 mg, 0.101 mmol) se rastvore u toluenu (20 mL) u posudi od nerđajućeg čelika. Reaktor se podvrgne pritisku CO od 4 bara i zagreva 14 sati na 85 °C. Reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom, zasićenim vodenim rastvorom NH4CI i slanim rastvorom. Organske supstance se suše (MgS04) i koncentruju. Ostatak,jedinjenje 446se koristi u sledećoj fazi bez naknadnog prečišćavanja. LCMS APCImlz497
[M+H]<+>.
Faza 2:
[0844] Jedinjenje 446(440 mg, 0.886 mmol), KOAc (435 mg, 4.43 mmol) i pivalinska kiselina (22.9 mg, 0.222 mmol) se kombinuju u DMF (9 mL) i rastvor prečisti sa azotom. Nakon toga se dodaju Pd(OAc)2(20 mg, 0.089 mmol) i cataCXium A (65.4 mg, 0.177 mmol) i reakcija se zagreva 60 minuta na 120 °C pod mikrotalasima. Reakcija se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje. Prečišćavanjem reverzno faznom HPLC dobija sePrimer 51(5.2mg, 2%) kao bezbojna čvrsta supstanca.<J>H NMR (400 MHz, DMSO-^e) 5 7.71 (s, 1 H), 7.51 (dd, 7=2.5, 10.1 Hz,1 H), 7.38 (dd, 7 =5.8, 8.6 Hz, 1 H), 7.14 (dt,7=2.5, 8.6 Hz, 1 H), 6.50 (s, 2 H), 5.99 - 5.85 (m, 1 H), 4.36 (d,7= 12.8 Hz, 1 H), 4.18 (d,7= 12.8 Hz, 1 H), 4.08 (s, 3 H), 2.94 (s, 3 H),1.63 (d,7=6.5 Hz, 3H). LCMS APCImlz416 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-14-fluoro-2,10,16-trimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2^-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-A][2,5,ll]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer 52 i
53)
[0845]
Faza1:
[0846]U ohlađeni (0 °C)rastvor jedinjenja 447(2.5 g, 166 mmol) u 2N vodenom rastvoru HC1 (32 mL) se doda rastvor NaNCh (1.14 g, 16.1 mmol) u vodi (16 mL), održavajući unutrašnju temperaturu na 0-5 °C. Nakon završenog dodavanja, smeša se meša 1.5 sat na 0 °C. Ovaj rastvor se nakon toga u kapima doda (održavajući the unutrašnja T <10 °C) u smešu Kl (5.35 g, 32.2 mmol) i Cul (1.54 g, 8.06 mmol) u vodi (16 mL). Ledeno kupatilo se ukloni i reakcija se meša u toku noći. Smeša se filtrira a dobijene čvrste supstance se prevedu u žitku masu u MTBE i zagrevaju 1 sat na 40 °C. Čvrste supstance se nakon toga ponovo filtriraju i filtrati se koncentruju da se dobijejedinjenje 448(3.86 g, 90%) kao narandžasta čvrsta supstanca. 'HNMR (400 MHz, DMSO-d6) 5h 13.51 (br. s., 1 H), 7.53 - 7.44 (m, 2 H), 7.43 - 7.32 (m, 1 H).
Faza 2:
[0847]U ohlađeni (0 °C)rastvor jedinjenja 448(3.8 g, 14 mmol) u THF (30 mL) se doda BH3Me2S (28.6 mL. IM rastvor u THF, 28.6 mmol). Ledeno kupatilo se ukloni i rastvor se zagreva tri sata na 60 °C. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu i neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom NH4CI. Reakcija se ekstrahuje sa EtOAc (2x) i kombinovani ortganski ekstrakti se isperu sa slanim rastvorom, suše (MgS04), filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-50% EtOAc/heptani) da se dobijejedinjenje 449(1.82 g, 51%) kao bela čvrsta supstanca.<l>RNMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 7.42 (dt,7 =5.9, 7.9 Hz, 1 H), 7.31 (d, .7= 7.6 Hz,1 H), 7.14 (t, J= 8.1 Hz,1 H), 5.53(t, J=5.7 Hz, 1 H), 4.45 (d, J =5.0 Hz, 2 H).
Faza 3:
[0848]Urastvor jedinjenja 449(1.82 g, 7.22 mmol) u CHCb (40 mL) se doda aktivirani Mn02(3.77 g, 43.3 mmol). Smeša se zagreva na 50 °C u toku noći, filtrira kroz filter od stakla i koncentruje da se dobijejedinjenje 450(1.65g, 91%) kao žuta čvrsta supstanca koja se koristi bez naknadnog prečišćavanja.<l>RNMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 10.00 (s, 1 H), 7.66 - 7.61 (m, 1 H), 7.61 - 7.56 (m, 2 H).
Faza 4:
[0849]U ohlađeni (-78 °C)rastvor jedinjenja 450(1.65 g, 6.6 mmol) u THF (33 mL) se doda MeMgBr (6.6 mL, 3 M rastvor u dietil etru, 19.8 mmol). Reakcija se meša 2 sata, neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom NH4CI a nakon toga ekstrahuje sa EtOAc (2x). Organski sloj se suši preko MgS04, filtrira i koncentruje da se dobije narandžasto braon guma. Ovaj ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-25% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 451(330 mg, 19%) kao bela čvrsta supstanca. 'H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 7.45 -7.34 (m,2H),7.13 (dt,J=1.8,7.9 Hz, 125H), 5.49 (d,.7=4.3Hz, 1 H), 4.90-4.81 (m, 1 H), 1.27 (d, .7=6.3 Hz, 3 H).
Faza 5:
[0850]Urastvor jedinjenja 452(302 mg, 1.38 mmol) ijedinjenja 451(333 mg, 1.25 mmol) u THF (6 mL) se doda rastvor PPh3(410 mg, 1.56 mmol) i DIAD (330 mg, 1.56 mmol) u THF (6 mL). Reakcija se meša 12 sati na sobnoj temperaturi, koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-25% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 453(379 mg, 69%) kao bezbojna čvrsta supstanca. Materijal sadrži 10-15% redukovanog DIAD, ali se koristi bez naknadnog prečišćavanja u sledećoj fazi.<*>H NMR (400 MHz, DMSO-ć/ć) 58.29 (d, J= 1.8 Hz, 1 H), 7.87 (d, J=1.8 Hz, 1 H), 7.48(dt, J=5.9, 8.0 Hz, 1 H), 7.30 - 7.23 (m, 2 H), 5.92(q, J=6.3 Hz, 1 H), 1.61(d, J=6.3 Hz, 3 H).
Faza 6:
[0851]Smešajedinjenja 453(379 mg, 0.811 mmol) i gvožđa (453 mg, 8.11 mmol) u smeši AcOH/EtOH (5.4 mL/5.4 mL) se zagreva na 80 °C. Reakcija se završi nakon 1.5 sat, doda se voda i reakcija neutrališe sa čvrstim Na2C03. Reakcija se ekstrahuje sa EtOAc (2x), suši (MgS04), filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-50% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 454(235 mg, 67%) kao bela čvrsta supstanca.<*>H NMR (400 MHz, DMSO-fifc) 5 7.52 (d,J= 2.0 Hz, 1 H), 7.47 - 7.37 (m, 1 H), 7.32 (dd,J =1.5, 7.8 Hz, 1 H), 7.20 (dt,/= 1.5, 8.1 Hz, 1 H), 6.68(d, J=2.0Hz, 1 H), 6.14 (s, 2 H), 5.54 (q,J =6.4 Hz, 1 H), 1.56 (d,J =6.3 Hz, 3 H). LCMSmlz436/438 [M+H]<+>.
Faza 7:
[0852] Jedinjenje 454(230 mg, 0.526 mmol),jedinjenje 137(103 mg, 0.552 mmol), DIEA (0.366 mL, 2.1 mmol) i Pd(P<t>Bu3)2(27.6 mg, 0.053 mmol) se rastvore u toluenu (20 mL) u posudi od nerđajućeg čelika. Reaktor se podvrgne pritisku CO od 4 bara i zagreva 14 sati na 85 °C. Kako reaktivna smeša nije kompletirana, Pd(PtBu3)2(27.6 mg, 0.053 mmol) se ponovo doda i reakcija zagreva još 4 sata na 85 °C u atmosferi CO pod pritiskom od 4 bara. Reakcija se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom, zasićenim vodenim rastvorom NH4CI i slanim rastvorom. Organske supstance se suše (MgS04) i koncentruju. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-75% EtOAc/heptan, nakon toga 0-10% MeOH/DCM) da se dobijejedinjenje 455(198 mg, 57%) kao žuta čvrsta supstanca.
Faza 8:
[0853] Jedinjenje 455(198 mg, 0.406 mmol), KOAc (199 mg, 2.03 mmol) i pivalinska kiselina (10.5 mg, 0.102 mmol) se kombinuju u^-amilalkoholu (6.44 mL) i vodi (7.3 uL). Rastvor se prečisti sa azotom. Nakon toga se dodaju Pd(OAc)2(5.6 mg, 0.025 mmol) i cataCXium A (18.9 mg, 0.0510 mmol) i reakcija zagreva 60 minuta na 150 °C pod mikrotalasima. Reakcija se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-10% MeOH/DCM) da se dobijuPrimeri 52i53kao smeše enantiomera (20 mg, 12%), koje se podvrgnu asimetričnom razdvajanju pomoću SFC da se dobiju oba enantiomera naslovljenog jedinjenja. Analitičko asimetično razdvajanje pomoću SFC se izvodi koristeći Regis Whelk-01( R, R)kolonu (4.6 mm x 250 mm kolonu, 5 mikrona veličina čestice), uz eluiranje sa 20% MeOH u CO2zadržavanje na 25 °C pod pritiskom od 140 bara. Brzinom protoka od 3 mL/min dobija se Rt(piki) = 1.28 minuta i Rt(pik2) = 1.78 minuta.Primer 52(Pik 1): 5.56 mg, >99% ee, 8.3% prinos.<J>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 7.66 - 7.46 (m, 3 H), 7.22 (t,J=8.6 Hz, 1 H), 6.90 (s, 1 H), 6.18 (s, 2 H), 5.55 (q,J=5.9 Hz, 1 H), 4.36 (d, .7=14.1 Hz, 1 H), 4.24 - 4.16 (m, 1 H), 4.04 (s, 3 H), 3.02 (s, 3 H), 1.67(d, J=6.0 Hz, 3 H). LCMS ESmlz407 [M+H]<+>.Primer 53(Pik 2): 5.06 mg, 90% ee, 7.6% prinos.<l>KNMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 7.62 - 7.55 (m, 2 H), 7.54 - 7.47 (m, 1 H), 7.22 (t,J=8.8 Hz, 1 H), 6.90 (s, 1 H), 6.18 (s, 2 H), 5.55(q, J = 6.1Hz, 1H), 4.36 (d, J =14.1 Hz, 1 H), 4.24 - 4.15 (m, 1 H), 4.04 (s, 2 H), 3.02 (s, 2 H), 1.67 (d,J=6.3 Hz, 2 H). LCMS ESmlz407 [M+H]<+>.
Izrada (10JR)-7-amino-16-ciklopropil-12-lfuoro-2,10-dimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2//-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-/i] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-3-
karbonitrila (Primer 54)
[0854]
Faza 1:
[0855] Jedinjenje 126(300 mg, 0.685 mmol),jedinjenje 181(146 mg, 0.685 mmol), DIEA (0.597 mL, 3.42 mmol) i Pd(P<l>Bu3)2(36 mg, 0.069 mmol) se rastvore u toluenu (20 mL) u posudi od nerđajućeg čelika. Reaktor se podvrgne pritisku CO od 4 bara i zagreva 14 sati na 85 °C. Reaktivna smeša se koncentruje i podvrgne hromatografiji na koloni silika gela (0-75% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 456(168 mg, 48%) kao čvrsta supstanca krem boje.<l>KNMR (400 MHz, 80°C, DMSO-rfe) 5 7.63 - 7.50 (m, 2 H), 7.47 - 7.36 (m, 1 H), 7.14 (dt,J =2.8, 8.6 Hz, 1 H), 7.01 (s, 1 H), 6.41 (br. s., 2 H), 6.17(d,J=5.5 Hz, 1 H), 4.74 - 4.48 (m, 2 H), 3.97 (s, 3 H), 2.83 (br. s., 1 H), 1.59( d, J=6.5 Hz, 3 H), 0.57 (br. s., 4 H).
Faza 2:
[0856]Usmešu jedinjenja 456(165 mg), pivalinske kiseline (9.9 mg, 0.096 mmol) i KOAc (158 mg, 1.6mmol) u ć-AmOH (8.68 mL) se doda 1 kap vode i prečisti sa azotom u toku 10 minuta. Dodaju se cataCXium A (35.5 mg, 0.096 mmol) i Pd(OAc)2(10.8 mg, 0.048 mmol) i bočica zagreva 1 sat na 140 °C pod mikrotalasima. Reakcija se koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-100% EtOAc/heptan). Frakcije koje sadrže željeni produkt se prevedu u žitku masu u vodi, filtriraju i suše u pećnici pod vakuumom da se dobijePrimer 54(75 mg, 54%) kao čvrsta supstanca krem boje.<l>KNMR (400 MHz, DMSO-Ć&) 5 7.74 (s, 1 H), 7.47 (dd,7=2.5, 10.1 Hz, 1 H), 7.31(dd,7=5.8, 8.6 Hz,1 H), 7.12(dt,7=2.6,8.5 Hz, 1 H), 6.71 (s, 2 H), 6.16 - 6.05 (m, 1 H), 4.33 - 4.26 (m, 1 H), 4.22 - 4.15 (m, 1 H), 4.02 (s, 3 H), 2.16-2.06 (m, 1 H), 1.66 (d, 7= 6.5 Hz, 3 H), 1.11 -1.00 (m, 1 H), 0.97 - 0.84 (m, 1 H), 0.81 0.71 (m, 1 H), 0.70 - 0.61 (m, 1 H). LCMS APCImlz434 [M+H]<+>.
Izrada (10JR)-7-amino-16-ciklopropil-12-lfuoro-2,10-dimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2//-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-/i] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-3-
karbonitrila (Primer 55)
[0857]
Faza 1:
[0858]Urastvor jedinjenja7 (30 g, 81.3mmol) u DCM (325 mL) se dodaju DIEA (42.5 mL, 244 mmol), DMAP (1.99 g, 16.3 mmol) i (Boc)20 (53.2 g, 244 mmol). Reakcija se meša u toku noći a nakon toga koncentruje. Prečišćavanjem hromatografijom na koloni silika gela (0-25% EtOAc/heptan) dobija sejedinjenje 457(39.3g, 85%) kao viskozna guma.<J>H NMR (400 MHz, 30 °C, DMSO-^6) 8 8.16(d, J=2.0 Hz, 1 H), 8.00(dd, J=5.9, 8.7 Hz, 1 H), 7.53
(d,J= 2.0 Hz, 1 H), 7.35 - 7.25 (m, 2 H), 6.38 -6.26 (m, 1 H), 3.91 (s, 3 H), 1.55 (d,J=6.3 Hz, 3 H), 1.38 (s, 18 H). LCMS APCImlz469 [M - Bocf.
Faza 2:
[0859]Krozsmešu jedinjenja 457(22 g, 39 mmol), bis(pinakolato)dibora (10.8 g, 42.5 mmol) i KOAc (11.4 g, 116 mmol) u toluenu (260 mL) se u toku 30 min u mehurićima propušta azot a nakon toga dodaju cataCXium A (1.43g, 3.86mmol) i Pd(OAc)2(434mg, 1.93mmol). Reakcija se zagreva 16 sati na 100 °C koristeći uljano kupatilo. Reakcija se ostavi da se ohladi i razblaži sa EtOAc. Organski sloj se ispere sa vodom (2x) i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje. Prečišćavanjem hromatografijom na koloni silika gela (0-10% MeOH/DCM) dobija sejedinjenje 458(24.9 g, 99%) kao žuta viskozna guma.<*>H NMR (400 MHz, DMSO-c/e) 5 8.17(d, J=1.3 Hz, 1 H), 8.01(dd, J=6.0, 8.8 Hz, 1 H), 7.92 (s, 1 H), 7.37 (s, 1 H), 7.36 - 7.25 (m, 2 H), 6.38 (q,J= 6.0 Hz, 1 H), 3.92 (s, 3 H), 1.54 (d,J= 6.3 Hz, 3 H), 1.37 (s, 18 H), 1.27(d, J=5.5 Hz, 12 H).
Faza 3:
[0860] Smeša jedinjenja 458(684 mg, 0.887 mmol),jedinjenja 183(315 mg, 0.887 mmol) i cezijum fluorida (404 mg, 2.66 mmol) u smeši toluen/voda (6 mL/0.2 mL) se ispere sa azotom. Doda se PdCh(dppf).CH2Ci2(73 mg, 0.089 mmol) i smeša zagreva 16 sati pod refluksom. Reakcija se ohladi, razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom i slanim rastvorom, suši (MgS04) i koncentruje. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom na koloni silika gela (0-50% EtOAc/heptan) dobija sejedinjenje 459(332 mg, 49%) kao staklasta čvrsta supstanca.<*>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 8.11 (d,.7=2.0Hz, 1 H), 7.98 (dd,.7=5.8,8.8 Hz, 1 H), 7.36(dd, J = 2.8,10.3 Hz,1 H), 7.27 - 7.19 (m, 2 H), 6.35 (q, J= 6.0 Hz,1 H), 4.36 - 4.26 (m, 1 H), 4.18- 4.10 (m, 1 H), 4.01 (s, 3 H), 3.90 (s, 3 H), 2.43 - 2.33 (m, 1 H), 1.61 (d, .7= 6.3 Hz, 3 H), 1.43 (s, 18 H), 1.30 (s, 9 H), 0.61 - 0.35 (m, 4 H).
Faza 4:
[0861]U ohlađeni (0 °C)rastvor jedinjenja 459(330 mg, 0.431 mmol) u DCM (2.16 mL) se doda HC1 (2.16 mL, 4M rastvor u dioksanu, 8.63 mmol). Reakcija se meša 2 sata na sobnoj temperaturi a nakon toga koncentruje. Ostatak se rastvori u MeOH (2 mL) i doda se KOH (0.242 g, 4.31 mmol). Reakcija se zagreva 48 sati na 50 °C. Nakon hlađenja na 0 °C, reakcija se neutrališe sa koncentrovanom HC1. Čvrste supstance se filtriraju i filtrat koncentruje i suši u vakuumskoj pećnici. Ovaj ostatak se rastvori u metanolu, ponovo filtrira, koncentruje i suši da se dobijejedinjenje 460(272 mg, 99%), koje se koristi bez naknadnog prečišćavanja. LCMS APCImlz451 [M+H]<+>.
Faza 5:
[0862]U ohlađeni (0 °C) rastvor HATU (186 mg, 0.474 mmol) u DMF (8.5 mL) se u kapima dodajurastvor jedinjenja 460(200 mg, 0.431 mmol) i DIEA (375 mL, 2.16 mmol) u DMF (8.5 mL). Po završenom dodavanju, reakcija se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša 14 sati. Reakcija se nakon toga koncentruje i ostatak rastvori u EtOAc. Organski sloj se ispere sa zasićenim vodenim rastvorom Na2C03(2x) i slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje. Reakcija se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (25-100% EtOAc/heptan). Frakcije koje sadrže željeni produkt se koncentruju i prevedu u žitku masu u vodi. Čvrste supstance se filtriraju i suše u pećnici pod vakuumom u toku noći da se dobijePrimer 55(11 mg, 6%) kao čvrsta supstanca krem boje.<l>RNMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 7.60(dd, J=2.6, 10.2 Hz,1 H), 7.56 (d, J=1.8 Hz, 1 H), 7.39(dd, J=5.8, 8.6 Hz, 1 H), 7.15 (dt,J=2.5, 8.4Hz, 1 H), 6.74 (d,J=1.3 Hz, 1 H), 6.17 (s, 2 H), 5.86 - 5.70 (m, 1 H), 4.47 (d,J =14.4 Hz, 1 H), 4.06 3.98 (m, 4 H), 2.40 - 2.23 (m, 1 H), 1.69(d, J =6.3 Hz, 3 H), 1.19 - 1.08 (m, 1 H), 0.99 - 0.87 (m, 1 H), 0.79 (td,J=7.2, 14.5 Hz, 1 H), 0.75 - 0.64 (m, 1 H). LCMS APCImlz433 [M+H]<+>.
Izrada (10JR)-7-amino-12-lfuoro-2,10,16-trimetil-16,17-dihidro-2^-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-A] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-l 5(10//)-ona (Primer 56)
[0863]
Faza1:
[0864]Smeša jedinjenja126(8.5 g, 19 mmol),jedinjenja137 (3.69 g, 19.8 mmol), DIEA (13.5 mL, 77.6 mmol) i Pd(PtBu3)2(1.01 g, 1.94 mmol) u toluenu (320 mL) se zagreva 4 sata na 85 °C u atmosferi CO pod pritiskom od 4 bara. Reakcija se ohladi, koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-60% EtOAc/heptan) da se dobije jedinjenje461(8.25 g, 88%) kao bela čvrsta supstanca. LCMS APCImlz488/490 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0865] Jedinjenje 461(10.23 g, 20.95 mmol), KOAc (10.3 g, 105 mmol), cataCXium A (968 mg, 2.62 mmol) i Pd(OAc)2 (294 mg, 1.31 mmol) se kombinuju sa/-amilalkoholom (300 mL) u posudi od nerđajućeg čelika zapremine 500 mL. Reakcija se zatvori i zagreva 16 sati na 120 °C. Reakcija se ostavi da se ohladi i posuda se otvori. Smeša se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom, suši (Na2S04) i rastvarač upari. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (1-6%) MeOH/EtOAc) da se dobijePrimer 56(415 mg, 6%) kao žuta čvrsta supstanca.<l>KNMR (400 MHz, CDCh) 5 7.60 (s, 1 H), 7.55 (s, 1 H), 7.18 - 7.30 (m, 2 H), 6.97 (td,J =8.27, 2.65 Hz, 1 H), 6.07 (dd,J=6.57, 1.77 Hz, 1 H), 4.95 (s, 2 H), 4.60 (d,J =13.39 Hz, 1 H), 4.20(d, J=13.14 Hz, 1 H), 3.91 (s, 3 H), 3.04 (s, 3 H), 1.38(d, J=12.38 Hz, 3 H). LCMS APCIm/ z383 [M+H]<+>.
Izrada (5/?)-8-amino-3-fluoro-5,14,19-trimetil-18,19-dihidro-7,ll-(meteno)-pirimido[2',l':2,3]imidazo[4,5-/i] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-20(5/f)-ona
(Primer 57)
[0866]
Faza 1:
[0867] Jedinjenje 462(489 mg, 0.56 mmol),jedinjenje 189(197 mg, 0.56 mmol) i cezijum fluorid (253 mg, 1.66 mmol) se kombinuju u smeši toluen/voda (3.7 mL/370 uL) i kroz smešu se propušta azot. Doda se PdCh(dppf).CH2Cl2(45.7 mg, 0.056 mmol) i reaktivna smeša refluksuje 14 sati. Reakcija se ostavi da se ohladi, razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom (2x) i slanim rastvorom, suši (MgS04) filtrira i koncentruje. Prečišćavanjem hromatografijom na koloni silika gela (0-100% EtOAc/heptan) dobija sejedinjenje 463(280 mg, 66%) kao viskozna guma.<l>KNMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 8.46 (s, IH), 8.20 (s, 2H), 7.97 (dd,J=6.2, 8.7 Hz, IH), 7.44 7.33 (m, 2H), 7.28 - 7.21 (m, IH), 6.41 - 6.30 (m,lH), 4.45 - 4.25 (m, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.74 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.61(d, 7 =6.3 Hz, 3H), 1.47 (s, 18H), 1.30 (br. s., 9H).
Faza 2:
[0868] Jedinjenje 463(280 mg, 0.37 mmol) se rastvori u DCM (2 mL) i doda se HC1 (2 mL, 4M rastvor u dioksanu, 7.32 mmol). Reakcija se meša 38 sati na sobnoj temperaturi. Reakcija se nakon toga koncentruje, ostatak rastvori u metanolu (2 mL) i doda se KOH (0.205 g, 3.66 mmol). Reakcija se zagreva 6 sati na 60 °C, ohladi i neutrališe sa koncentrovanom HC1. Čvrste supstance se filtriraju i filtrat koncentruje i suši u toku noći u pećnici pod vakuumom da se dobijejedinjenje 307kao narandžasto-braon čvrsta supstanca, koja se koristi bez naknadnog prečišćavanja.
Faza 3:
[0869]U ohlađeni (0°C) rastvor HATU (158 mg, 0.403 mmol) u DMF (7.3 mL) se dodarastvor jedinjenja 464(165 mg, 0.366 mmol) i DIEA (0.319 mL, 1.83 mmolu DMF (7.3 mL). Reakcija se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša 14 sati. Smeša se razblaži sa EtOAc, ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NH4CI (3x), zasićenim vodenim rastvorom Na2C03(3x), slanim rastvorom, suši (MgS04), filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (25-100% EtOAc/heptan nakon toga 0-10% MeOH/DCM) da se dobijePrimer 57(83 mg, 52%) kao žuta čvrsta supstanca.<J>H NMR (400MHz, DMSO-g?6) 5 8.79 (dd, 7 =1.2, 2.1 Hz, 1 H), 8.45(d, 7 =2. 2 Hz, 1 H), 7.82 (d, 7=1.7 Hz, 1 H), 7.66(dd,7=2.6, 10.3Hz, 1H), 7.47(dd, 7= 5.8, 8.5 Hz,1 H), 7.17(dt, 7=2.7, 8.4 Hz, 1 H), 6.88 (d,7=1.6 Hz, 1 H), 6.22 (s, 2H), 5.73 - 5.63 (m, 1 H), 4.50( d, 7= 13.9 Hz, IH), 4.31(d,7=13.8 Hz, 1 H), 3.06 (s, 3H), 2.31 (s, 3H), 1.69 (d, 7=6.2 Hz, 3H). LCMS APCImlz433 [M+H]<+>.
Izrada (10JR)-7-amino-ll-hlor-12-fluoro-l-(2-hidroksietil)-3,10,16-trimetil-16,17-
dihidro-l//-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-/i] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona/(10S)-7-amino-ll-hlor-12fluoro-l-(2-hidroksietil)-3,10,16-trimetil-16,17-dihidro-l^-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-/i][2,5,ll]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10/7)-ona (Primeri 58
i 59)
[0870]
Faza 1:
[0871]Pd(OAc)2(642 mg, 2.86 mmol) se doda u degasiranrastvor jedinjenja 465(4.99 g, 28.61 mmol) i NIS (7.08 g, 31.5 mmol) u DMF (143 mL). Dobijeni rastvor se meša 24 sata na 100 °C. Reakcija se filtrira, razblaži sa EtOAc i kombinovane organske supstance isperu sa vodom (3x), slanim rastvorom (2x) i suše (Na2S04). Rastvor se filtrira, koncentruje a ostatak prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-100% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 466(7.9 g, 91%) kao bela čvrsta supstanca.<J>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 7.74 (dd,J= 4.58, 8.74 Hz, 1 H), 7.00 (t, J= 8.56 Hz, 1 H).
Faza 2:
[0872]Urastvor jedinjenja 466(7.26 g, 24.16 mmol) u bezvodnom THF (100 mL) se u kapima, na 0 °C, u atmosferi azota doda rastvor BH3'SMe2(5.32 mL, 10 M rastvor u THF, 53.2 mmol). Nakon završenog dodavanja, smeša se meša 30 minuta na 0 °C a nakon toga refluksuje u toku noći. Smeša se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom NH4CI i reakcija razblaži sa vodom i ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom, suše (Na2S04) i koncentruju. Reakcija se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-30% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 467(6.7 g, 97%) kao bela čvrsta supstanca.<J>H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7.76 (dd,J=5.07, 8.74 Hz, 1 H), 6.90 (t,J=8.50 Hz, 1 H), 5.00(d, J=6.97 Hz, 2H), 2.11(t, J=7.03 Hz, 1 H).
Faza 3:
[0873]Urastvor jedinjenja 467(6.67 g, 23.35 mmol) u CHCh (60 mL) se doda aktivirani Mn02(135 g, 140 mmol) i reakcija se refluksuje (70 °C) 18 sati. Reakcija nije završena i doda se još porcija Mn02(9 g) i CHCh (5 mL). Reakcija se refluksuje još 12 sati. Reakcija se ohladi, filtrira i čvrste supstance isperu sa DCM. Organske supstance se suše (Na2S04), filtriraju i koncentruju da se dobije žuta čvrsta supstanca. Supstanca se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-20% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 468(4.73 g, 71%) kao žuta čvrsta supstanca.<l>KNMR (400 MHz, CDCh) 5 10.13 (s, IH), 7.91 (dd,J= 4. 77, 8.68Hz, 1 H), 7.07 (t,J=8.44 Hz, 1 H).
Faza 4:
[0874]U rastvorjedinjenja 468(4.72 g, 16.59 mmol) u bezvodnom THF (70 mL) se na 0 °C, u atmosferi azota, doda MeMgBr (6.08 mL, 3M rastvor u dietil etru, 18.3 mmol). Reakcija se meša 10 minuta na 0 °C i ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu. Reakcija se neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom NH4CI i ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovane organske supstance se isperu sa slanim rastvorom, suše (Na2S04), filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-30% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 469(4.8 g, 96%) kao bela čvrsta supstanca.<l>HNMR (400 MHz, CDCh) 5 7.76 (dd,J=5.26, 8.68 Hz, 1 H), 6.81(t, J=8.50 Hz, 1 H), 5.39 (dd, .7=6.97, 8.93 Hz, 1 H), 2.85 (s, 1 H), 1.62 (d, .7=6.85 Hz, 3H).
Faza 5:
[0875]U rastvor alkohola469(4.76 g, 15.85 mmol) u THF (16 mL) se doda NaH (697mg, 17.4 mmol, 60% disperzija). Reakcija se meša 30 minuta a nakon toga se doda pirazin29(3.81 g, 15.1 mmol) kao čvrsta supstanca. Reakcija se meša 4 sata na 55 °C. Reakcija se ostavi da se ohladi, razblaži sa vodom i ekstrahuje sa EtOAc. Organski ekstrakti se suše (Na2S04), filtriraju i koncentruju. Trituriranjem sa dietil etrom se dobijajedinjenje 470(2.8 g, 37%) kao bela čvrsta supstanca. Osnovni rastvori se kombinuju, koncentruju i prečiste hromatografijom na koloni silika gela (0-20% EtOAc/heptan). Trituriranjem produkta koji sadrži frakcije sa dietil etrom dobija se drugi prinosjedinjenja 470(2.7 g, 36%) kao bela čvrsta supstanca.<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 8 7.71-7.86 (m, 1 H), 7.61 (s, IH), 6.82(t, J =8.72 Hz, IH), 6.47-6.60(m, .7 =6.10 Hz, IH), 4.91 (br. s., 2H), 1.80(d, .7 =6.82Hz, 3H).
Faza 6:
[0876] Jedinjenje 470(2.97 g, 6.29 mmol), pirazol 195 (1.87 g, 6.61 mmol), DIEA (4.39 mL, 25.2 mmol) i Pd(PtBu3)2(161 mg, 0.315 mmol) se kombinuju u toluenu (63 mL) u posudi od nerđajućeg čelika. Reakcija se zagreva 16 sati na 85 °C u atmosferi CO pod pritiskom od 4 bara. Posuda se nakon toga ostavi da se ohladi i reakcija filtrira. Filtrat se koncentruje a ostatak se podvrgne hromatografiji na koloni silika gela (0-100% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 471(2.2 g, 53%) kao viskozna guma. LCMS APCImlz655/660 [M+H]<+>.
Faza 7:
[0877]U ledom ohlađenirastvor jedinjenja 471(500 mg, 0.762 mmol) u DMF (15 mL) se doda NBS (137 mg, 0.762 mmol). Nakon 10 minuta, reakcija se razblaži sa EtOAc i zasićenim vodenim rastvorom NaHC03. Organska supstanca se izdvoji, ispere sa vodom, suši (Na2S04), filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-100% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 472(498 mg, 89%) kao svetio žuta čvrsta supstanca. LCMS APCImlz 12, 11140[M+H]<+>.
Faza 8:
[0878]Urastvor jedinjenja 472(400 mg, 0.544 mmol) i bis(pinakolato)dibora (414 mg, 1.63 mmol) u THF (5.5 mL) se doda anhidrovan K2CO3(376 mg, 2.72 mmol). Sistem se ispere sa azotom i nakon toga se doda cataCXium A (50.3 mg, 0.136 mmol) a nakon toga Pd(OAc)2(15.3 mg, 0.068 mmol). Reakcija se ponovo prečisti i meša 7 sati na 80 °C. Reakcija je 50% završena i doda se nova porcija Pd(OAc)2(15.3 mg, 0.068 mmol) a nakon toga prečisti sa azotom. Reakcija se zagreva još 5 sati na 80 °C. Nakon hlađenja, reakcija se filtrira, koncentruje i ostatak se podvrgne hromatografiji na koloni silika gela (0-100% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 473(120 mg, 38%, 80% čistoće) kao žuta guma. Ovaj materijal se direktno koristi u sledećoj fazi. LCMS APCImlz575/578 [M+H]<+>.
Faza 9:
[0879]Urastvor jedinjenja 473(120 mg, 0.209 mmol) u THF (5 mL) se doda TBAF (0.209 mL, IM rastvor u THF, 0.209 mmol). Reakcija se meša 2 sata i koncentruje. Ostatak se razblaži sa DCM, ispere sa vodom, suši (Na2S04) i koncentruje da se dobije 155 mg 80% čistog materijala kao smeša, koja se nakontoga podvrgneasimetričnom razdvajanju pomoću SFC da se dobiju oba enantiomera naslovljenogjedinjenja.Analitičko asimetično razdvajanje pomoću SFC se izvodi koristeći Regis Whelk-01( R, R)kolonu (4.6 mm x 100 mm kolona, 5 mikrona veličina čestice), uz eluiranje sa 40% MeOH u CO2, zadržavanje na 25 °C pod pritiskom od 140 bara. Brzinom protoka od 3 mL/min dobija se Rt(pik i) = 2.62 minuta i Rt(<p>ik2)= 3.61 minuta.Primer 58(Pik 1): 13.7 mg, >99% ee (-), 13% prinos.<l>K NMR (400 MHz, DMSO-de) 5 7.58 (s, 1 H), 7.35-7.48 (m, 2H), 6.20 (s, 2H), 6.08-6.16(m, J=7.00 Hz, 1 H), 4.78-4.89 (m, 1 H), 4.60 (d,J=14.43 Hz, IH), 4.14-4.40 (m, 3H), 3.74-3.81 (m, IH), 3.65-3.73 (m, IH), 2.85 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 1.81 (d,J=6.97 Hz, 3H). LCMS APCImlz461/464 [M+H]<+>.Primer 59(Pik 2): 13.9 mg, 97% ee (+), 13% prinos.<l>KNMR (400 MHz,DMSO-</6)5 7.57 (s, 1 H), 7.35-7.49 (m, 2H), 6.20 (s, 2H), 6.12(q, J=6.72 Hz, 1 H), 4.78-4.91 (m, 1H), 4.60 (d, J =14.43 Hz, 1 H), 4.15-4.38 (m, 3H), 3.73-3.82 (m, 1 H), 3.71(dd, J=4.03, 7.46 Hz, 1 H), 2.84 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 1.81(d, J=6.85 Hz, 3H). LCMS APCImlz461/464 [M+H]<+>.
Izrada (10JR)-7-amino-12-fluoro-2,10,16-trimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2^-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-/i] [2,5,6,1 l]benzoksatriazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer
60)
[0880]
Faza 1:
[0881]U rastvorjedinjenja2 (2.55 g, 9.6 mmol) u THF (50 mL) se na 0 °C doda se NaH (384mg, 9.6mmol, 60% disperzija). Nakon 30 minuta mešanja na 0 °C i stajanja na sobnoj temperaturi da se zagreje, doda se piridazin474(2 g, 9.6 mmol). Tamno braon smeša se nakon toga meša 18 sati na 75 °C. Reaktivna smeša se koncentruje i ostatak prenese u DCM. Organske supstance se filtriraju, koncentruju i ostatak prečisti sa dve hromatogrfije na koloni silika gela (10-100% EtOAc/heptani, a nakon toga 10-75% EtOAc/heptani) da se dobijejedinjenje 475(451 mg, 11%) kao bela čvrsta supstanca.<l>KNMR (400 MHz, DMSO-ofe) 5 7.92 (dd, 1 H) 7.44 (dd, .7=10.11, 3.03 Hz, 1 H) 7.02 (td, .7=8.46, 3.03 Hz, 1 H) 6.62 (s, 2 H) 6.52 (s, 1 H) 5.40 - 5.72 (m, 1 H) 1.57 (d, .7=6.32 Hz, 3 H).
Faza 2:
[0882]Urastvor jedinjenja 475(756 mg, 1.92 mmol) i DIEA (1.27 mL, 7.3 mmol) u toluenu (18 mL) i metanolu (4 mL) u posudi od nerđajućeg čelika se doda Pd(P<l>Bu3)2(47 mg, 0.09 mmol). Reakcija se zagreva 16 sati na 85 °C u atmosferi CO pod pritiskom od 4 bara. Ostatak se koncentruje i podvrgne hromatografiji na koloni silika gela (10-75% EtOAc/heptan). Produkt koji sadrži frakcije se triturira sa MTBE i filtrira. Čvrste supstance se isperu sa toplim MTBE. Uparavanjem filtrata dobijase jedinjenje 476(314 mg, 50%) kao čvrsta braon supstanca.<l>KNMR (400 MHz, DMSO-<&) 5 7.97 (dd, 1 H) 7.59 (dd, 7=10.36, 2.78 Hz, 1 H) 7.30 (td, .7=8.46, 2.78 Hz, 1 H) 6.69 (s, 1 H) 6.63 (s, 2 H) 6.35 (q, .7=5.98 Hz, 1 H) 3.90 (s, 3 H) 1.62 (d, 7=6.32 Hz, 3 H).
Faza3:
[0883]U metanolni rastvorjedinjenja 476(9 mL, 1.3 mmol) se dodajujedinjenje 128(204 mg, 0.626 mmol) i CsF (400 mg, 2.6 mmol). Smeša se nakon toga degasira i doda se Pd-132 (22 mg, 0.031 mmol). Smeša se zagreva 30 minuta na 120 °C pod mikrotalasima. LCMS pokazuje utrošak borne kiseline, ali reakcija nije završena. Dodaju se nove količine rastvora borne kiseline (2 mL, 0.288 mmol), cezijum fluorida (400 mg, 2.6 mmol) i Pd-132 (22 mg, 0.031 mmol) i reakcija zagreva na 120 °C pod mikrotalasima još 30 minuta. Reakcija se podeli između EtOAc/slanog rastvora i vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovane organske supstance se isperu sa slanim rastvorom, suše (MgS04) i koncentruju. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (10-100% EA/heptan a nakon toga 5% MeOH/EtOAc) da se se nakon trituriranja sa MTBE dobijejedinjenje 477(128 mg, 38%) kao čvrsta supstanca slična peni.<l>K NMR (400 MHz, 80°C, DMSO-</6) 5 7.97 (dd, 7=8.69, 5.92 Hz, 1 H) 7.53 (dd, 7=10.32, 2.77 Hz, 1 H) 7.23 (td, 1 H) 6.75 (s, 1 H) 6.39 - 6.54 (m, 1 H) 6.30 (s, 2 H) 4.48 - 4.62 (m, 1 H) 4.36 (d, 7=15.86 Hz, 1 H) 3.98 (s, 3 H) 3.90 (s, 3 H) 2.73 (s, 3 H) 1.69 (d, 7=6.29 Hz, 3 H) 1.26 (s, 9 H).
Faza 4:
[0884]Urastvor jedinjenja 477(155 mg, 0.287 mmol) u DCM (1.5 mL) se doda HC1 (1.5 mL, 4M rastvor u dioksanu, 6 mmol). Reaktivna smeša se meša 1 sat i koncentruje. Ostatak se azeotropira sa MTBE, koncentruje i suši 1 sat na 50 °C u pećnici pod vakuumom. Ostatak se rastvori u MeOH (3 mL) i doda se KOH (136 mg, 2.41 mmol). Reakcija se zagreva 8 sati na 50 °C. Suspenzija se ostavi da se ohladi i neutrališe sa 6N rastvorom HC1. Čvrste supstance se uklone filtriranjem i filtrat koncentruje. Ostatak se azeotropira sa toluenom, koncentruje i suši na 50 °C u pećnici pod vakuumom da se dobijejedinjenje 478(122 mg, 70-80% čistoće pomoću LCMS) kao čvrsta braon supstanca, koja se direktno koristi u sledećoj fazi.
Faza 5:
[0885]U rastvor HATU (158 mg, 0.402 mmol) u DMF (7 mL) se na 0 °C, u kapima, dodarastvor jedinjenja 478(122 mg, 0.287 mmol) i DIEA (0.3 mL, 1 mmol) u smeši DMF/THF (7 mL/1.4 mL). Dodavanje traje 50 minuta. Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 10 minuta na 0 °C. Smeša se nakon toga sipa u zasićeni vodeni rastvor NaHC03 (400 mL) i filtrira. Filtrat se ekstrahuje sa EtOAc (3x) i organske supstance se isperu sa vodom (2x) i slanim rastvorom. Kombinovane organske supstance se suše (MgS04), filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-10% MeOH/DCM:EtOAc 1:1) da se dobijePrimer 60(10 mg, 9%) kao bela čvrsta supstanca.<l>KNMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 7.46 - 7.68 (m, 2 H) 7.15 - 7.31 (m, 1 H) 6.71 (s, 1 H) 6.49 (br. s., 2 H) 5.61 - 5.88 (m, 1 H) 4.50(d, J=14.43 Hz, 1H) 4.29 (d, J=14.55 Hz, 1 H) 4.07 (s, 3 H) 3.00 (s, 3 H) 1.71(d, J =5.75 Hz, 3 H). LCMS APCI m/z 408 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-12-fluoro-2,10,16-trimetil-15-okso-2,9,10,15,16,17-heksahidro-8,4-(meteno)pirazolo[3,4-</] [2,8]benzodiazaciklotetradecin-3-karbonitrila / 7-amino-12-fluoro-2,10,16-trimetil-15-okso-2,9,10,15,16,17-heksahidro-8,4-(meteno)pirazolo[3,4-
*/][2,8]benzodiazaciklotetradecin-3-karboksamida (Primer 61i62)
[0886]
Faza 1:
[0887]Trietilamin (13 mL, 9.44 g, 93.3 mmol), kalijum izopropeniltrifluoroborat (18.0 g, 121.6 mmol) i PdCl2(dppf).CH2Cb (1.38 g, 1.70 mmol) se dodaju urastvor jedinjenja 479
(21.8 g, 93.6 mmol) u «-propanolu (640 mL) i smeša se zagreva 17 sati pod refluksom. TLC analiza (10% 2-butanon u heptanu) pokazuje da ima još početnog materijala i doda se PdCb(dppf).CH2Cl2(0.69 g, 0.84 mmol) i zagrevanje nastavi još 4 sata.
Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, smeša se koncentruje pod vakuumom do -100 mL i razblaži sa EtOAc (400 mL) a zatim ispere sa IM rastvorom HC1 (250 mL) i slanim rastvorom (250 mL). Kombinovani vodeni ispirci se ekstrahuju sa EtOAc (100 mL) i ovo se ispere sa slanim rastvorom (75 mL). Kombinovani organski slojevi se suše (MgS04) i koncentruju pod vakuumom da se dobije tamno bron ulje. Prečišćavanjem hromatografijom na koloni (1500 mL silka gel, 4% EtOAc u heptanu) dobija se željeni produkt (8.63 g, 47%) kao bezbojna tečnost, kontaminirana sa metil 4-fluorobenzoatom (<10%) i smeša željenog produkta i početnog materijala (5.05 g) takođe kontaminirana sa metil 4-fluorobenzoatom. Daljim prečišćavanjem hromatografijom na koloni (500 mL silka gel, 4% EtOAc u heptanu) dobija se još 1.60 g (9%) željenog produkta kontaminiranog sa metil 4-fluorobenzoatom (<10%). Produkt se dalje prečisti Kugelrohr destilacijom, odbaci prethodno (70°C, 4 mmHg) a nakon toga poveća temperatura do 95°C da se dobijejedinjenje 480(95% izdvojeno) koje sadrži <5% metil 4-fluorobenzoata.<*>HNMR (400 MHz, CDCb) 5 7.84 (dd,J=8.7, 5.9 Hz, 1 H) 6.99 (ddd,J=8.6, 8.0, 2.6 Hz, 1 H) 6.93 (dd,J=9.4, 2.6 Hz, IH) 5.12 (p,J=1.6 Hz, IH) 4.85(dq, J=1.8, 0.9 Hz, 1 H) 3.85 (s, 3H) 2.07(t, J=1.2 Hz, 3H). LCMSmlz195 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0888][Ir(l,5-cod)Cl]2(751 mg 1.11 mmol) i DPPB (944 mg 2.21 mmol) se mešaju 5 minuta u THF (100 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi da se dobije bistar žuti rastvor. Doda seJedinjenje 480(8.6 g, 44.28 mmol) u THF (10 mL) i rastvor meša 10 minuta. U kapima se doda pinakolbor (7.95 mL, 53.1 mmol) u THF (20 mL) i mutni žuti rastvor meša 48 sati. Reakcija se koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silka gela (0-100% DCM/heptan) da sedobije jedinjenje 481kao bezbojno ulje (7.2 g, 51%). 'HNMR (400
MHz, CDCb) 5 7.76 (dd, J= 8.68, 6.11 Hz, IH) 7.10 (dd, J= 10.70,2.63 Hz, IH) 6.87 (dt, J=
1.00 Hz, IH) 3.84-3.99(m, 4H)1.29 (d, J=1.00 Hz,3H), 1.13 (d, .7=1.00 Hz,14H). LCMS APCImlz323 [M+H]<+>.
Faza3:
[0889] U jedinjenje 481(5.7 g, 17.69 mmol) i 2-amino-3-brompiridina (6.12 g, 35.40 mmol) u toluenu (300 mL) i vodi (60 mL) se dodaju Pd(OAc)2(248 mg, 1.11 mmol) i cataCXium A
(793 mg, 2.21 mmol) a nakon toga CsF (6.72 g ,44.20 mmol). Dvofazna reaktivna smeša se meša 48 h na 120 °C. LCMS pokazuje samo 20% konverzije u željeni produkt. Reakcija se ohladi i organski sloj ekstrahuje. Vodeni sloj se dalje ekstrahuje sa DCM a kombinovane organske supstance se suše (Na2S04), filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-75% DCM/heptani) da se dobijejedinjenje 482kao smeđe ulje (401 mg, 8%). 'HNMR (400 MHz, CDCh) 5 7.98(dd, J =5.01,1.71 Hz, IH) 7.91(dd, J=8.80, 6.11 Hz, IH) 7.15 - 7.23 (m, 2H) 6.97(ddd, J=8.68, 7.70, 2.57 Hz, IH) 6.58 (dd,J= 7.21,5.01 Hz, 1 H)5.21 (brs.,2H) 4.04-4.17 (m, 1 H) 3.90 (s, 3H)3.01(dd, J=13.88, 4.34 Hz,IH) 2.33 (dd, J=13.88, 11.07 Hz, IH)1.16 (d, J= 6.85 Hz, 3H). LCMS APCI mlz323 [M+H]<+>. LCMS APCImlz289 [M+H]<+>.
Faza 4:
[0890] Jedinjenje 482(720 mg, 2.50 mmol) se meša u DMF (20 mL) u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Doda se NBS (494 mg, 2.75 mmol) i reakcija meša 14 sati. Reakcija se koncentruje i podeli između EtOAc i zasićenog vodenog rastvora NaHC03. Organske supstance se suše (Na2S04), filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-75% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 483kao smeđe ulje (558 mg, 61%).<*>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 8.01 (d,J=2.32 Hz, IH) 7.93 (dd,J= 8.80, 6.11 Hz, IH) 7.33( d, .7=2.32Hz, IH) 7.17 (dd, .7 = 10.39, 2.57 Hz, IH) 6.98(ddd, J=8.68, 7.70, 2.57 Hz, IH) 5.34 (brs.,2H) 4.08 (m,J= 1.50 Hz, IH) 3.91(s, 3H) 3.00 (dd,J =13.94,4.16 Hz,IH) 2.27 (dd, J=13.82, 11.37 Hz, IH)1.17 (d, J = 6.85 Hz, 3H). LCMS APCI mlz366/368 [M+H]<+>.
Faza 5:
[0891] Jedinjenje 483(478 mg, 1.30 mmol),jedinjenje 47(857 mg, 2.60 mmol), bis(pinakolato)dibor (1 g, 3.91 mmol), cezijum fluorid (989 mg, 6.51 mmol) i Pd(P<t>Bu3)2(33.9 mg, 0.065 mmol) se kombinuju u smeši THF/voda (70 mL/7 mL) i smeša degasira sa azotom. Reakcija se zagreva 14 sati na 100 °C. Reakcija se koncentruje i ostatak rastvori u EtOAc. Organski sloj se ispere sa vodom, suši (Na2S04) i koncentruje da se dobije žuto ulje. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-100% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 484kao ulje zlatne boje (495 mg, 71%). LCMS APCImlz537 [M+H]<+>.
Faza 6:
[0892] Jedinjenje 484(495 mg, 0.922 mmol) i natrijum hidroksid (192 mg, 4.80 mmol) se mešaju 10 sati na 40 °C u vodi (4.0 mL) i metanolu (20 mL). Reakcija se koncentruje i zakiseli do pH-5 sa 1 M rastvorom AcOH. Reakcija se ekstrahuje sa EtOAc, suši (Na2S04) i koncentruje da se dobijejedinjenje 485kao smeđa čvrsta supstanca (430 mg 90% - uočeno ca. 10-15% amida kao rezultat hidrolize cijano grupe). LCMS APCImlz523 [M+H]<+>.
Faza 7:
[0893] Jedinjenje 485(430 mg, 0.823 mmol) se meša 2 sata sa 4M rastvorom HC1 u dioksanu (2.06 mL) i DCM (10 mL) na sobnoj temperaturi. Braon rastvor se koncentruje i azeotropira sa toluenom da se dobijejedinjenje 486kao smeđa čvrsta supstanca koja se direktno koristi u sledećoj fazi. LCMS APCImlz423 [M+H]<+>.
Faza 8:
[0894] Rastvor jedinjenja 486(pretpostavljeno 0.823 mmol) kao HC1 so i DIEA (2.30 mL,
13.20 mmol) u DMF (10 mL) se u kapima, na 0 °C, u toku 1 sat, dodaje u rastvor HATU (438 mg, 1.15 mmol) u DMF (15 mL), koristeći špric pumpu. Nakon dodavanja, bistar žuti rastvor se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša 14 sati. Reakcija se koncentruje i doda se voda. Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (3x) a kombinovane organske supstance isperu sa 1 M vodenim rastvorom Na2C03(5x), 10% vodenim rastvorom NH4OH, vodom i slanim rastvorom, suše (Na2S04) i upare da se dobije braon pena. Prečišćavanjem reverznom HPLC dobijaju sePrimer 61(81 mg, 24%) kao bledo žuta čvrsta supstanca iPrimer 62(15 mg, 4%) koji je rezultat hidrolize amida, takođe kao čvrsta supstanca krem boje.
Primer 61(81 mg, 24%)<l>KNMR (400 MHz, CDCh) 5 7.95 (brs, 1 H) 7.39 (dt,J=1.00 Hz, 1 H) 7.28 (dd, .7=1.00 Hz, 1 H) 7.12 (s,l H) 7.02(dt, J=1.00 Hz, IH) 6.11 (b s, 2H) 4.42 (d,J=14.31 Hz,IH) 4.24 (d, J= 1.00 Hz,IH) 4.0 (s, 3H) 3.61 (bs,l H) 2.97 (s, 3H) 2.89 - 2.96 (m, 1H)2.64 ( bd, J=1.00 Hz, IH)1.35 (d, .7=6.48 Hz, 3H). LCMS APCI m/ z 405[M+H]<+>.Primer 62(15 mg, 4%) 'HNMR (400 MHz, CDCh) 5 7.56 - 7.90 (m,3H) 7.24 - 7.40 (m, 2H) 7.08 (s, IH) 6.94 -7.04 (m, IH) 5.81(bs, 2H)4.29(d,J=13.82 Hz, IH) 4.11 (d,J= 13.82 Hz, 1 H) 3.89 (s, 3H) 3.61 (bs, 1 H) 2.87 - 3.07 (m, 4H) 2.56 - 2.75 (m, 2H) 1.35(d, J=6.36 Hz, 3H). LCMS APCImlz423 [M+H]<+>.
68 mgPrimera 61se podvrgne asimetričnom razdvajanju pomoću SFC da se dobiju oba enantiomera naslovljenogjedinjenje.Analitičko asimetrično razdvajanje pomoću SFC se izvodi koristeći Regis Whelk-01( R, R)kolonu (4.6 mm x 100 mm kolona, 5 mikrona veličina čestice), uz eluiranje sa 30% MeOH u CO2, zadržavanje na 140 bara. Brzinom protoka od 3 mL/min dobija se Rt(<p>iki)= 3.46 minuta i Rt(<p>ik2) = 4.76 minuta.
Primer 63(Pik 1): 25.0 mg, >99% ee (-).<!>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 7.95 (brs, 1 H) 7.39(dt, J=1.00 Hz, IH) 7.28(dd, J= 1.00Hz, IH) 7.12 (s,IH) 7.02 (dt, J=1.00 Hz, IH) 6.11(b s, 2H) 4.42 (d,J=14.31 Hz,IH) 4.24 ( d, J=1.00 Hz, IH) 4.0 (s, 3H)3.61 (bs, IH) 2.97 (s, 3H) 2.89 - 2.96 (m, 1 H) 2.64(bd, J=1.00 Hz, IH) 1.35(d, J=6.48 Hz, 3H). LCMS
APCIm/ z405 [M+H]<+>.
Primer 64(Pik 2): 24.8 mg, 98% ee (+).<l>HNMR (400 MHz, CDCh) 5 7.95 (brs, 1 H) 7.39( dt, J=1.00 Hz, IH) 7.28 (dd, .7=1.00 Hz, IH) 7.12 (s,IH) 7.02 ( dt, J=1.00 Hz, IH) 6.11(b s, 2H) 4.42 (d, J=14.31 Hz,IH) 4.24 (d, J=1.00 Hz, IH) 4.0 (s, 3H)3.61 (bs, IH) 2.97 (s, 3H) 2.89 -2.96 (m, 1H) 2.64 (bd, J=1.00 Hz, IH) 1.35(d, .7=6.48Hz, 3H).
LCMS APCImlz405 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-3-metoksi-l,10,16-trimetil-16,17-dihidro-l//-8,4-(meteno)-pirazolo[4,3-
^]pirido[2,3-/][l,4,10]oksadiazaciklotetradecin-15(10^0-ona (Primeri 65 i 66)
[0895]
Faza1:
[0896]Suspenzijajedinjenja 487(965 mg, 5.84 mmol) ijedinjenja 196(580 mg, 5.84 mmol) u DMF (40 mL) se meša u atmosferi azota. Doda se DIEA (3.05 mL, 17.5 mmol) i suspenzija prelazi u gusti gel. Doda se HATU (2890 mg, 7.60 mmol) i reakcija se meša 14 sati. U toku tog vremena, čvrsta supstanca se polako rastvori da se dobije bistar braon rastvor. Reakcija se koncentruje i ostatak rastvori u EtOAc. Organski ekstrakt se ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03i suši (Na2S04). Organske supstance se filtriraju, koncentruju, i ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-4% MeOH/DCM) da se dobijejedinjenje 488kao krem čvrsta supstanca (1400 mg, 63%).<l>U NMR (400 MHz, CDCb) S 8.70 (dd,.7=4.93,1.39 Hz, IH) 8.11(dd,J= 8.08,1.52 Hz, IH) 7.43(dd, J=7.83, 4.80 Hz, IH) 4.87 (m, 2H) 4.80-3.95 (s, 3H) 3.90 (s, 3H) 2.72 (s, 3H) 2.59 (s, 3H). LCMS APCImlz381/383 [M+H]<+>.
Faza 2
[0897]Suspenzijajedinjenja 488(1324 mg, 3.473 mmol) u MeOH (60 mL) se meša na sobnoj temperaturi u atmosferi azota. Doda se NaBH4(144 mg, 3.82 mmol) što dovodi do energičnog izdvajanja gasa i stvaranja bezbojnog bistrog rastvora. Reakcija se meša još 2 sata, koncentruje i ostatak rastvori u DCM. Organska supstanca se ispere sa vodom, suši (Na2S04) i koncentruje da se dobijejedinjenje 489kao bela čvrsta supstanca (1300 mg, 98%). LCMS APCImlz382/385 [M+H]<+>.
Faza 3
[0898] U jedinjenje 489(650 mg, 1.70 mmol) ijedinjenje 123(570 mg, 1.70 mmol) u THF (40 mL) se u atmosferi azota, na sobnoj temperaturi, doda trifenilfosfin (489 mg, 1.87 mmol) a nakon toga u kapima doda rastvor DIAD (0.37 ml, 1.87 mmol) u THF (4 mL) da se dobije žuti rastvor. Reakcija se nakon toga meša 14 sati, koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (50% DCM/EtOAc) da se dobijejedinjenje 490kao bela čvrsta supstanca (1800 mg, 151%). NMR (CDCb) ukazuje daje čvrsta supstanca približno 1:2 smeša traženog produkta i PPli3=0. Prema tome, 1800 mg smeše je ekvivalent sa 1008 mg produkta, prinos 85%. JH NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.55 (dd, .7=4.71, 1.53 Hz,1 H)8.18(d, J=1.83 Hz, 1 H) 7.86(dd, J= 7.95,1.47 Hz, 1 H) 7.37(dd, J=8.07, 4.77 Hz, 1 H) 7.34(d, J=1.71 Hz, 1 H) 5.63(q, J=6.40 Hz, 1 H) 4.80 - 5.02 (m, 2H) 3.97 (s, 3H) 3.87 (s, 3H) 2.86 (s, 3H) 1.74 (d,J=6.36 Hz, 3H) 1.57 (s, 9H). LCMS APCImlz700/703 [M+H]<+>.
Faza 4
[0899]Urastvor jedinjenja 490(1800 mg, teoretski 1.40 mmol) u MeOH (30 mL) se doda 4M rastvor HC1 u dioksanu (3.6 mL) da se dobije rastvor koji se meša 15 sati na sobnoj temperaturi. Reakcija se koncentruje da se dobije lepljiva čvrsta supstanca krem boje. Supstanca se prevede u žitku masu u DCM i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03da se formira slobodna baza. Organske supstance se suše (Na2S04), koncentruju i prečiste hromatografijom na koloni silika gela (0-100% EtOAc/DCM) da se dobijejedinjenje 491kao krem pena (500 mg, 58%).<l>KNMR (400 MHz, CDCb) 5 8.53 (dd,J=4.77, 1.59 Hz, 1 H) 7.86(dd, .7= 8.07,1.47 Hz, 1 H)7.81(d, J=1.71 Hz, 1 H) 7.37(dd, J=7.95, 4.77 Hz, 1 H) 7.05( d, J=1.59 Hz, 1 H) 5.56 (q,J=6.40 Hz, 1 H) 4.80 -5.00 (m, 2H) 4.76 (bs, 1 H) 3.97 (s, 3H) 3.84 - 3.90 (m, 3H) 2.84 (s, 3H) 1.71 (d,J=6.36 Hz, 3H). LCMS APCImlz601/602
[M+H]<+>.
Faza 5
[0900] Jedinjenje 491(500 mg, 0.832 mmol), bis(pinakolato)dibor (1070 mg, 4.16 mmol), cataCXium A (60 mg, 0.166 mmol), cezijum fiuorid (638 mg, 4.16mmol) i paladijum acetat (19 mg, 0.830mmol) u vodi (20 mL) i metanolu (200 mL) se zagrevaju na 100 °C u toku noći. Reakcija se koncentruje i podeli između vode i EtOAc. Organske supstance se suše (Na2S04) i koncentruju do žutog ulja koji se prečisti preparativno reverzno faznom HPLC da se dobijuPrimer 65iPrimer 66kao beli prašak (43 mg, 13%).<*>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.48(dd,J=4.67,1.39 Hz, 1H) 8.15 (dd, J= 8.08,1.26 Hz, 1 H) 7.43 - 7.54 (m, 2H) 6.75 (d,J = 1.26 Hz, IH) 5.73 (s, 2H) 5.56( d, J =6.32 Hz,IH) 4.59 (# J=15.66Hz, IH) 4.01 (d,J = 15.41 Hz, IH) 3.83 (d,J= 7.58 Hz, 5H) 3.0 (s, 3H) 1.69 (d,J= 6.32 Hz, 3H). LCMS APCImlz395 [M+H]<+>.
[0901]Uzorak od 43 mg se podvrgne asimetričnim razdvajanju pomoću SFC da se dobiju oba enantiomera naslovljenogjedinjenja.Analitičko asimetično razdvajanje pomoću SFC se izvodi koristeći Regis Whelk-01( R, R)kolonu (4.6 mm x 100 mm kolona, 5 mikrona veličina čestice), uz eluiranje sa 30% MeOH u CO2, zadržavanje na 140 bara. Brzinom protoka od 3 mL/min dobija se Rt(pik1) = 5.77 minuta i Rt(pik2) = 7.01 minuta.Primer 65(Pik 1): 12 mg, 99% ee (-).<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.48 (dd,J=4.67, 1.39 Hz, 1 H)8.15 (dd, J=8.08, 1.26 Hz, 1 H) 7.43 - 7.54 (m, 2H) 6.75(d, J=1.26 Hz, IH) 5.73 (s, 2H) 5.56(d,J=6.32 Hz, IH) 4.59(d, J= 15.66Hz, IH)4.01(d, J=15.41 Hz, IH) 3.83 (d,J=7.58 Hz, 5H) 3.0 (s, 3H) 1.69 (d,J=6.32 Hz, 3H). LCMS APCImlz395 [M+H]<+>.Primer 66(Pik 2): 15 mg, 97% ee (+). lU NMR (400 MHz, CDCb) S 8.48(dd, J=4.67, 1.39 Hz, 1 H) 8.15 (dd, .7=8.08, 1.26 Hz, 1 H) 7.43 -7.54 (m, 2H) 6.75(d, J=1.26 Hz, IH) 5.73 (s, 2H) 5.56( d, J = 6.32Hz,IH) 4.59 (d, J=15.66Hz, IH) 4.01(d, J=15.41 Hz, IH) 3.83 (d,J=7.58 Hz, 5H) 3.0 (s, 3H) 1.69 (d,J=6.32 Hz, 3H). LCMS APCImlz395 [M+H]'.
Izrada 7-amino-3-etrc-butil-1,10,16-trimetil-l6,17-dihidro-l//-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-g]pirido[2,3-/][l,4,10]oksadiazaciklotetradecin-15(10«)-ona (Primer 67, 68 i 69)
[0902]
Faza1:
[0903] Jedinjenje 492(2000 mg, 12.03 mmol) u MeOH (50 mL) se meša u atmosferi azota sa 33% metilamina u EtOH (1.80 mL. 5.09 mmol). Doda se anhidrovani MgS04(3000 mg) i reakcija meša još 1.5 sat. Reaktivna boca se ohladi u ledenom kupatilu i doda se NaBH4(546 mg, 14.40 mmol). Reakcija se meša 14 sati, koncentruje i podeli između vode i DCM. Organska supstanca se izdvoji i vodeni sloj dalje ekstrahuje sa DCM (2 x). Kombinovane organske supstance se suše (Na2S04) i koncentruju da se dobijejedinjenje 493kao bezbojno ulje (2100 mg, 96%). LCMS APCImlz182 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0904]U rastvorjedinjenja 493(2100 mg, 11.58 mmol) u dihlormetanu (60 mL) se doda DMAP (283 mg, 2.32 mmol), a nakon toga (Boc)20 (4040 mg, 18.50 mmol) da se dobije žuti rastvor. Reakcija se meša 2 sata na sobnoj temperaturi a nakon toga se rastvarač ukloni pod sniženim pritiskom da se dobije žuto ulje. Reakcija se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-100% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 494kao bezbojno ulje (3000 mg, 92%). *H NMR (400 MHz, CDCb) 5 5.97 (s, 1 H) 4.40 (s, 2H) 3.77 (s, 3H) 2.77 (s, 3H) 1.46 (s, 9H), 1.27 (s, 9H). LCMS APCImlz282 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0905]U rastvorjedinjenja 494(3800 mg, 13.50 mmol) u DCM (50 mL) se doda 4M rastvor HC1 u dioksanu (34 mL, 135 mmol) i reakcija meša 2 sata. U tom trenutku se reakcija zamuti
i doda se MeOH da se dobije bistar žuti rastvor, koji se meša još 2 sata. Reakcija se koncentruje da se dobije čvrsta supstanca krem boje, koja se prevede u žitku masu u heptanima, filtrira i suši da se dobijejedinjenje 495kao čvrsta supstanca (3318 mg, 97%).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 9.32 - 9.49 (m, 1 H) 6.29 - 6.39 (m, 1 H) 4.15 (t, 2H) 3.79-3.83 (m, 3H) 2.54 (t, 3H) 1.17-1.23 (m, 9H). LCMS APCImlz182 [M+H]<+>.
Faza 4:
[0906]U suspenzijujedinjenja 495(965 mg, 5.84 mmol) ijedinjenja 487(1490 mg, 5.84 mmol) u DMF (40 mL) se u atmosferi azota doda DIEA (3.05 mL, 17.5 mmol) da se dobije bistar braon rastvor. Doda se HATU (2890 mg, 7.60 mmol) i reakcija meša 16 sati. Reakcija se koncentruje i ostatak rastvori u EtOAc. Organski sloj se ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03, suši (Na2S04) i koncentruje da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-4% MeOH/DCM) da se dobijejedinjenje 496kao smeđa čvrsta supstanca (1100 mg, 57%).<l>RNMR (400 MHz, CDCb) 5 8.71 (dd,J=4.83, 1.53 Hz, IH) 8.11(dd, J= 7.95,1.59 Hz, IH) 7.44(dd, J=7.89, 4.83 Hz, 1 H) 6.17 (s, 1 H) 4.81 (s, 2H) 3.93 (s, 3H) 2.75 (s, 3H) 2.61 (s, 3H) 1.32 (s, 9H). LCMS APCImlz329 [M+H]<+>.
Faza 5:
[0907]U izmešani rastvorjedinjenja 496(1100 mg, 3.349 mmol) u MeOH (20 mL) se u porcijama u atmosferi azota doda natrijum borohidrid (152 mg, 4.02 mmol). Uočava se energično izdvajanje gasa i reakcija brzo prelazi u žuti rastvor. Reakcija se meša jedan sat, koncentruje i ostatak rastvori u DCM. Organski rastvor se ispere sa vodom, suši (Na2S04) i koncentruje da se dobijejedinjenje 497(1100 mg, 99%).<l>K NMR (400 MHz, CDCh) 5 8.52(dd, 7=4.71,1.65 Hz, 1 H) 7.90(dd,J=7.83, 1.47Hz, 1 H) 7.37(m, J=7.90, 4.70 Hz, IH) 4.88 -4.99 (m, 1 H) 4.82 (q,J=1.00 Hz, 2H) 3.92 (s, 3H) 2.86 (s, 3H) 1.55 (d,J=6.60 Hz, 3H) 1.30 (s, 9H).LCMS APCImlz331 [M+H]<+>.
Faza 6:
[0908]Urastvor jedinjenja 497(1100 mg, 3.329 mmol)i jedinjenja123 (1120 mg, 3.33 mmol) u THF (40 mL) se u atmosferi azota, na sobnoj temperaturi, doda trifenilfosfin (960 mg, 3.66 mmol) a nakon toga se u kapima doda rastvor DIAD (0.72 mL. 3.66 mmol) u THF (5 mL) da se dobije žuti rastvor. Reakcija se meša 20 sati na sobnoj temperaturi, koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (50:50 DCM/EtOAc) da se dobijejedinjenje 498kao žuta čvrsta supstanca (900 mg, 42%).<l>KNMR (400 MHz, CDCh) 5 8.55 (dd,J =4.65, 1.47 Hz,IH) 8.18 (d, J=1.83Hz, IH) 7.85(dd,7=8.01, 1.41 Hz,IH) 7.37 (dd, J =7.95, 4.77 Hz, 1 H) 7.27-7.33 (m, 3 H) 6.14 (s, IH) 5.62 (q,J=6.50 Hz, 1 H) 4.67-5.01 (m, 2H) 3.92 (s, 3H) 2.82-2.89 (m, 3H) 1.75(d, J=6.36 Hz, 3H) 1.57 (s, 9H) 1.29 (s, 9H). LCMS APCIm/ z649 [M+H]<+>.
Faza 7:
[0909]U izmešanirastvor jedinjenja 498(900 mg, 1.39 mmol) u MeOH (30 mL) se doda 4M rastvorom HC1 u dioksanu (3.6 mL) da se dobije žuti rastvor, koji se meša 16 sati na sobnoj temperaturi. Reakcija se koncentruje da se dobije ulje, koje se podeli između DCM i zasićenog vodenog rastvora NaHC03. Organska supstanca se izdvoji i vodeni sloj dalje ekstrahuje sa DCM (3x). Kombinovane organske supstance se suše (Na2S04) i koncentruju da se dobijejedinjenje 499kao pena zlatne boje (700 mg, 92%).<*>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 8.54(dd, J=4.71,1.53Hz, 1 H) 7.85(dd, J=8.07,1.47 Hz, 1 H) 7.80(d, J=1.59 Hz, 1 H) 7.64 -7.72 (m, 2H) 7.03( d, J=1.59 Hz, IH) 6.14 (s, IH) 5.55 (q,J=6.40 Hz,IH) 4.94 ( d, J= 15.16 Hz, 1 H) 4.69-4.82 (m, 3H) 3.92 (s, 3H) 2.85 (s, 3H) 1.71(d, J=6.36 Hz, 3H) 1.29 (s, 9H). LCMS APCIm/ z549 [M+H]<+>.
Faza 8:
[0910] Jedinjenje 499(650 mg, 1.18 mmol) i NBS (234 mg, 1.30 mmol) u DMF (20 mL) se mešaju 1 sat u atmosferi azota. Reakcija se koncentruje i podeli između EtOAc i zasićenog vodenog rastvora NaHC03. Organske supstance se suše (Na2S04) i koncentruju da se dobije braon ulje, koje se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-4% MeOH/DCM) da se dobijejedinjenje 500kao braon pena (411 mg, 55% - LCMS ukazuje daje prisutno dibrom onečišćenje). LCMS APCImlz581/583. [M+H]<+>.
Faza 9:
[0911] Jedinjenje 500(370 mg, 0.590 mmol), bis(pinakolato)dibor (454 mg, 1.77mmol), RuPhos (36 mg, 0.074 mmol) i paladijum acetat (8.3 mg, 0.037 mmol) u IM rastvoru NaOH (3 mL) i metanolu (35 mL) se zagrevaju 14 sati na 100 °C. Reakcija se koncentruje i podeli između vode i EtOAc. Organske supstance se suše (Na2S04) i koncentruju da se dobije žuto ulje, koje se prečisti preparativnom HPLC da se dobijePrimer 67kao bela čvrsta supstanca (55 mg, 22%). !H NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 8.38(dd, J=4.66,1.64 Hz, 1 H) 8.21(dd, J= 8.06,1.51 Hz, 1 H)7.40(dd, J=8.06, 4.53 Hz, 1 H) 7.33 (d, .7=2.01 Hz, 1 H) 6.85(d, J =1.76 Hz, 1 H) 5.72 (q,J=6.30 Hz, H) 5.49 (s, 2H) 4.43 (d,J= 15.36 Hz, IH) 3.97 (d,J =15.11 Hz, 1 H) 3.91 (s, 3H) 2.98 (s, 3H) 1.73(d, J=1.00 Hz,3H) 1.23 (s, 9H). LCMS APCImlz421 [M+H]<+>. 50 mgPrimera 67se podvrgne asimetričnom razdvajanju pomoću SFC da se dobiju oba enantiomera naslovljenogjedinjenja.Analitičko asimetično razdvajanje pomoću SFC se izvodi koristeći Regis Whelk-01( R, R)kolonu (4.6 mm x 100 mm kolona, 5 mikrona veličina čestice), uz eluiranje sa 30% MeOH u CO2, zadržavanje na 140 bara. Brzinom protoka od 3 mL/min dobija se Rt(piki) = 4.87 minuta i Rt(pik2) = 6.99 minuta. Svaki pid se brzo uravnoteži na 90 : 10 smešu atropizomera.Primer 68(Pik 1): 12 mg, 95% ee (-).
'HNMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 8.38 (dd, J= 4.66,1.64 Hz, 1 H) 8.21(dd, J=8.06,1.51 Hz, 1 H) 7.40(dd, J= 8.06,4.53Hz, 1 H) 7.33 (d, .7=2.01 Hz,IH) 6.85 (d, J=1.76 Hz, IH) 5.72(q,J=6.30Hz, H)5.49 (s, 2H) 4.43{ d, J =15.36 Hz,IH) 3.97 { d, J =15.11 Hz, IH) 3.91 (s, 3H) 2.98 (s, 3H) 1.73(d, J=1.00 Hz,3H) 1.23(s, 9H). LCMS APCI mlz421 [M+H]'.Primer 69(Pik 2): 13 mg, 95% ee (+).<l>K NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 8.38 (dd,J= 4.66, 1.64 Hz, 1 H) 8.21(dd, J=8.06, 1.51 Hz, 1 H) 7.40(dd, J=8.06, 4.53 Hz, 1 H) 7.33(d, J =2.01 Hz,IH) 6.85 ( d, J=1.76 Hz, IH) 5.72 (q, .7 = 6.30 Hz, H) 5.49 (s, 2H) 4.43( d, J =15.36 Hz, 1 H)3.97( d, J=15.11 Hz, 1 H)3.91 (s, 3H) 2.98 (s, 3H) 1.73(d, J =
1.00 Hz, 3H) 1.23 (s, 9H). LCMS APCImlz421 [M+H]<+>.
Izrada (lO.RH-amino-l^O^ć-trimetil-lS-okso-lO^S^ć^T-tetrahidro-l^-S^-(azeno)pirazolo[4,3-/i] |2,5,11 ]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer 70)
[0912]
Faza1:
[0913]U ledom ohlađenirastvor jedinjenja 501(1593 mg, 6.422 mmol) u THF (30 mL) u se atmosferi azota doda NaH (282 mg, 7.06 mmol, 60% disperzija) da se dobije bela suspenzija uz veoma sporo izdvajanje gasa. Suspenzija se meša 30 minuta a nakon toga se u kapima dodarastvor jedinjenja 29(1620 mg, 6.42 mmol) u THF (8 mL). Svetio narandžasti rastvor se zagreva 48 sati na 50 °C. Reakcija se koncentruje i podeli između EtOAc i slanog rastvora. Nerastvorne supstance se filtriraju, a organska supstanca se izdvoji i vodeni sloj dalje ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovane organske supstance se suše (Na2S04), koncentruju i ostatak prečisti hromatografijom na koloni silika gela (DCM) da se dobijejedinjenje 502,(R)-5-bromo-3-(l-(2-jodfenil)etoksi)pirazin-2-amin, kao bledo žuto ulje (1000 mg, 37%). LCMS APCImlz419/421 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0914] Smeša jedinjenja 502(1000 mg, 2.381 mmol),jedinjenja 137(692 mg, 3.10mmol), DIEA (1.66 mL 9.52 mmol) i Pd (P<t>Bu3)2(124 mg, 0.238mmol) u toluenu (25 mL) se meša 2 sata na 85 °C u atmosferi CO pod pritiskom od 4 bara. Reakcija se koncentruje da se dobije crveno ulje, koje se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-25% EtOAc/heptan) da sedobije jedinjenje 503,(R)-2-(l-(3-amino-6-bromopirazin-2-iloksi)etil)-N-((5-cijano-l-metil-lH-pirazol-3-il)-metil)-N-metilbenzamid, kao bledo žuto ulje (689 mg, 62%).<*>H NMR (400 MHz, DMSO) 5 7.67(d, J=1.00 Hz, IH) 7.55 (s, 1 H) 7.43(dt, J=1.00 Hz, 1 H) 7.35 (m, 1 H) 7.21-7.29 (m, 1 H) 6.92-7.09 (m, 1 H) 6.28 (bs, 2H) 6.10( q, J=1.00Hz, 1 H) 4.70 (bs, 2H) 3.97 (s, 3H) 2.86 (bs, 3H) 1.61(d, J=6.55 Hz,3H). LCMS APCImlz470/472
[M+H]<+>.
Faza 3:
[0915] Jedinjenje 503(689 mg, 1.46 mmol), KOAc (733 mg, 7.47 mmol) i cataCXium A (163 mg, 0.440mmol) se kombinuju u terc-amilalkoholu (30 ml) i kroz rastvor se propuste mehurići azota pre dodavanja Pd(OAc)2(49 mg, 0.220 mmol). Reakcija se zagreva 3 sata na 120 °C pod mikrotalasima. Reakcija se koncentruje i podeli između vode i EtOAc. Nerastvorne supstance se filtriraju a organske supstance suše (Na2S04) da se dobije sirovi produkt kao žuto ulje, koje se prečisti preparativnom HPLC da se dobije makrociklil kao žuta pena. Ovo se prevede u žitku masu u vodi u toku 30 minuta, nakon toga filtrira, dalje ispere sa vodom i suši pod vakuumom u toku noći da se dobijePrimer 70(185 mg, 32%) kao žuti prašak. 'HNMR (400 MHz, DMSO-^e) 5 7.75 (s, 1 H) 7.65(d, J=7.83Hz, 1 H) 7.39-7.46 (m, 1 H) 7.28-7.34 (m, 2H) 6.73 (bs, 2H) 5.91 (q,J=6.50 Hz, 1 H) 4.38 (d,J=1.00 Hz, 1 H) 4.28(d, J=1.00 Hz, 1 H) 4.03 (s, 3H) 2.90 (s, 3H) 1.65 (d, .7=6.60 Hz, 3H). LCMS APCImlz390 [M+H]<+>.
Izrada (10JR)-7-amino-2,10,16-trimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2^-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-/i] [2,5,11 ]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer 71)
[0916]
Faza 1:
[0917]U ohlađenirastvor jedinjenja 504(1283 mg, 5.172 mmol) i trietilamina (1.44 mL, 10.30 mmol) u DCM (15 mL) se u atmosferi azota polako, u kapima, dodaje metansulfonil hlorid (0.60 mL, 7.76 mmol) da se dobije kremasta suspenzija. Reakcija se ostavi da se zagreje na sobnu temperaturu i meša 15 sati. Reakcija se ispere sa IM vodenim rastvorom HC1 i zasićenim vodenim rastvorom NaHC03. Organske supstance se suše (Na2S04) i koncentruju da se dobijejedinjenje 505kao narandžasto ulje (1704 mg, 100%), koje se direktno koristi u sledećoj fazi bez naknadnog prečišćavanja.
Faza 2:
[0918] Jedinjenje 34(815 mg, 4.31 mmol) ijedinjenje 505(1687 mg, 5.172 mmol) se mešaju 6 sati na 50 °C u acetonu (50 mL) sa cezijum karbonatom (2810 mg, 8.62 mmol). Reakcija se filtrira i čvrste supstance isperu sa acetonom. Filtrat se koncentruje da se dobije tamni ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-25% EtOAc/heptani) da se dobijejedinjenje 506kao narandžasto ulje (1144 mg, 63%). LCMS APCImlz418/420
[M+H]<+>.
Faza 3:
[0919] Smeša jedinjenja 506(1144 mg, 1.60 mmol),jedinjenja 109(447 mg, 1.68 mmol),
DIEA (1.14 mL, 6.55 mmol) i Pd(PtBu3)2(86 mg, 0.164 mmol) u toluenu (20 mL) se zagreva 14 sati na 85°C u atmosferi CO pod pritiskom od 4 bara. Reakcija se koncentruje da se dobije crveno ulje, koje se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-100% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 507kao žuta čvrsta supstanca (770 mg, 86%). HNMR (CDCb) ukazuje na prisustvo rotamera. LCMS APCImlz548/550 [M+H]<+>.
Faza 4:
[0920] Jedinjenje 507(770 mg, 1.40 mmol), bis(pinakolato)dibor (1800 mg, 7.02 mmol), cataCXium A (101 mg, 0.281 mmol), cezijum fluorid (1070 mg 7.02 mmol) i paladijum acetat (32 mg, 0.14 mmol) u vodi (10 mL) i metanolu (100 mL) se zagrevaju na 100 °C u toku noći. Reakcija se nakon toga koncentruje i podeli između vode i EtOAc. Organske supstance se suše (Na2S04) i koncentruju da se dobije žuto ulje, koje se podvrgne hromatografiji na koloni silika gela (0-5% MeOH/DCM) i reverzno faznoj preparativnoj HPLC. Dobijeni materijal se prevede u žitku masu u heptanu, filtrira i suši pod vakuumom da se dobijePrimer 71(43 mg, 13%) kao beli prašak.<!>H NMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 7.72 (d,J=7.81 Hz, 1 H)7.57 (d, .7=2.01 Hz,1 H) 7.44 (dt, J=1.00 Hz, IH) 7.29 - 7.39 (m, 2H) 6.83(d, J =1.76 Hz, 1 H) 6.11 (bs, 2H) 5.59 (q, .7 = 6.30 Hz, IH) 4.45( d, J=14.35 Hz, IH) 4.24 (d,J = 14.10 Hz, IH) 4.03 (s, 3H) 3.00 (s, 3H) 1.69 (d,J=6.29 Hz, 3H). LCMS APCImlz389
[M+H]<+>.
Izrada (10JR)-7-amino-12-fluoro-10,16-dimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-8,4-(azeno)[l,2|oksazolo[4,5-/i| [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karboksamida
(Primer 72)
[0921]
Faza 1:
[0922] U jedinjenje 210(150 mg, 0.342 mmol) u toluenu (lOmL) sedodaju jedinjenje 200(55.7 mg, 0.359 mmol), DIEA (0.238 mL, 1.37 mmol) i Pd(P<t>Bu3)2(17.7 mg, 0.034 mmol). Smeša se zagreva 16 sati u zatvorenoj posudi na 85 °C u atmosferi CO pod pritiskom od 4 bara. Reakcija se koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-40% EtOAc/heptan - dve kolone) da se dobijejedinjenje 508(62 mg, 37%) kao žuta guma. LCMS APCImlz493 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0923] U jedinjenje 508(62.0 mg, 0.13 mmol) u DMA (2.5 mL) se dodaju KOAc (61.8 mg, 0.63 mmol), pivalinska kiselina (3.9 mg, 0.038 mmoL), cataCXium A (14.0 mg, 0.038 mmol) i Pd(OAc)2(4.3 mg, 0.019 mmol). Smeša se ispere sa azotom i nakon toga zagreva 1 sat pod mikrotalasima na 120 °C. U reakciju se doda voda, koja se ekstrahuje sa EtOAc (3x), suši (Na2S04), koncentruje i prečisti reverzno faznom HPLC da se dobijePrimer 72(6.48 mg, 12%) kao bela čvrsta supstanca.<*>H NMR (400 MHz, DMSO-rfe) 5 8.36 (s, 1 H) 8.03 (s, 1 H) 7.73 (s, 1 H) 7.52 (dd,J=10.03, 2.57 Hz, 1 H) 7.41 (dd,J=8.50, 5.69 Hz, 1 H) 7.20 (td,J =8.53,2.63 Hz, 1 H) 6.67 (s,2H)5.89 (dd,.7=6.54,1.77 Hz, 1 H) 4.44 - 4.57 (m, 2 H) 2.96 (s, 3 H)1.65(d, J=6.48 Hz, 3 H). LCMS APCImlz413 [M+H]<+>.
Izrada (10JR)-7-amino-12-fluoro-10,16-dimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-8,4-(azeno)[l,2]oksazolo[4,5-/{] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer
73)
[0924]
Faza 1:
[0925]Urastvor jedinjenja 210(800 mg, 1.83 mmol) u toluenu (50 mL) se dodajujedinjenje 360(686 mg, 2.73 mmol), DIEA (1.27 mL, 7.30 mmol) i Pd(PtBu3)2(95.4 mg, 0.183 mmol). Smeša se zagreva 16 sati u zatvorenoj posudi na 85°C, u atmosferi CO, pod pritiskom od 4 bara. Reakcija se koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-40% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 509(212 mg, 24%) kao žućkasta čvrsta supstanca. LCMS APCImlz476 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0926]U rastvorjedinjenja 509(188 mg, 0.395 mmol) u DMA (7.92 mL) se dodaju KOAc (194 mg, 1.98 mmol), pivalinska kiselina (12.3 mg, 0.119 mmoL), cataCXium A (44.0 mg,0.30 mmol) i Pd(OAc)2(13.2 mg, 0.059 mmol). Nakon ispiranja sa azotom, smeša se zagreva 1 sat pod mikrotalasima na 120 °C. Doda se voda i reakcija ekstrahuje sa EtOAc (3x). Kombinovane organske supstance se suše (Na2S04), koncentruju i prečiste reverzno faznom HPLC da se dobijePrimer 73(32.12 mg, 21%) kao bela čvrsta supstanca. lK NMR (400 MHz, DMSO-g?6) 5 7.89 (s, 1 H) 7.48 (dd,J=10.03, 2.57 Hz, 1 H) 7.43 (dd,J=8.50, 5.69 Hz, 1 H) 7.18-7.25 (m, 1 H) 6.93 (bs., 2 H) 5.85 (dd,J=6.60, 1.59 Hz, 1 H) 4.54 - 4.69 (m, 2 H) 2.94 (s, 3 H) 1.65(d, J=6.48 Hz, 3 H). LCMS ESmlz395 [M+H]<+>.Izrada (9JR)-6-amino-ll-fluoro-9,15-dimetil-14-okso-9,14,15,15a,16,17-heksahidro-7,3-(azeno)-8-oksa-l,5,15,17a-tetraazabenzo[ll,12]ciklotetradeca[l,2,3-^pentalen-2-karbonitrila (Primer 74i75)
[0927]
Faza1:
[0928] U jedinjenje 210(250 mg, 0.571 mmol) u toluenu (20 mL) se dodajujedinjenje 135(140 mg, 0.685 mmol), DIEA (0.398 mL, 2.28 mmol) i Pd(PtBu3)2(29.7 mg, 0.057 mmol). Smeša se zagreva 16 sati u zatvorenoj posudi na 85 °C u atmosferi CO, pod pritiskom od 4 bara. Smeša se koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-70% EtOAc/heptan) da se dobijejedinjenje 510(88 mg, 31%) kao bezbojna guma. LCMS ESmlz500 [M+H]'.
Faza 2:
[0929]Urastvor jedinjenja 510(88 mg, 0.18 mmol) u ć-amil alkoholu (6ml) se dodaju KOAc (86.4 mg, 0.88 mmol), cataCXium A (8.10 mg, 0.022 mmol) i Pd(OAc)2(8.1 mg, 0.022 mmol). Nakon ispiranja sa azotom, smeša se zagreva 1 sat pod mikrotalasima na 140 °C. Reakcija se filtrira i podvrgne asimetričnom razdvajanju pomoću SFC da se dobiju iPrimer 74iPrimer 75.Asimetrično razdvajanje pomoću SFC se izvodi koristeći Chiralcel OD-H kolonu (21.2 mm x 250 mm kolona, 5 mikrona veličina čestice), uz eluiranje sa 34% MeOH u CO2, zadržavanje na 100 bara. Brzinom protoka od 62 mL/min dobija se Rt(Hk i) = 3.11 minuta i Rt(pik2) = 4.80 minuta.Primer 74(Pik 1): 4.97 mg, > 99% ee^H NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.44 (s, 1 H) 7.42 (dd,J= 9.60, 2.53 Hz, 1 H) 7.21 - 7.25 (m, 1 H) 7.06(td, J=8.21, 2.53 Hz, 1 H) 6.83(t, J=8.72 Hz, 1 H) 6.59 - 6.67 (m, 1 H) 5.02 (s, 2 H) 4.39 4.48 (m, 1 H) 4.25 (td,J=10.80, 7.20 Hz, 1 H) 3.06-3.21 (m, 1 H) 2.55 -2.68 (m, 1 H) 2.43 (s, 3 H)1.69 ( d, J= 6.57 Hz, 3 H). LCMSESm/ z420 [M+H]".Primer 75(Pik 2): 7.44 mg, > 99% ee^H NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.31 (s, 1 H) 7.33 (dd,J= 9.60,2.27 Hz, 1 H) 7.17(dd, J=8.46, 5.43 Hz, 1 H) 7.03(td, J=8.21, 2.27 Hz, 1 H) 5.80(d, J= 5.56 Hz,1 H) 5.35(d, J=8.84 Hz, 1 H) 5.07 (s, 2 H) 4.44 - 4.56 (m,1 H) 4.23 ( t, J =10.61 Hz, 1 H) 3.08 (dd,J=14.02, 9.47 Hz, 1 H) 2.94 (s, 3 H) 2.69(dd, J=14.15, 7.58 Hz, 1 H) 1.72 (d,J=6.57 Hz, 3 H). LCMS ESmlz420 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-12-fluoro-2,9,16-trimetil-15-okso-2,15,16,17-tetrahidro-9//-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-/i] [l,5,ll]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primeri 76
i 77)
[0930]
Faza 1:
[0931] Smeša jedinjenja 511(1.0 g, 8.2 mmol) i NBS (1.5 g, 8.6 mmol) u acetonitrilu (16 mL) se zagreva 1 sat pod refluksom. Reakcija se smanji do polovine zapremine i čvrste supstance se sakupe filtriranjem da se dobijejedinjenje 512,2-amino-5-bromopiridin-3-karbaldehid (820 mg, 50%).<l>R NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 9.83 (s, 1 H) 8.31 (d,J=2.5 Hz, 1 H) 8.24(d, J=2.5 Hz, 1 H) 7.68(d, J=2.0 Hz, 2 H).
Faza 2:
[0932]U ohlađenu (-50 °C)smešu jedinjenja 512(1.1 g, 5.4 mmol) u THF (36 mL) se u kapima doda MeMgBr (3 M in Et20, 18 mL, 54 mmol) održavajući T < - 40 °C. Reakcija se meša 1 sat na 50 °C, nakon toga 1 sat na 0 °C a zatim neutrališe sa zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida. Vodeni sloj se ekstrahuje sa Et20 (3x) i kombinovani organski slojevi se suše preko MgSCU, filtriraju i koncentruju. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela uz eluiranje sa smešom DCM/MeOH (0-5%) da se dobijejedinjenje 513,1-(2-amino-5-bromopiridin-3-il)etanol (630 mg, 53%). 'HNMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 7.87 (d, .7=2.5 Hz, 1 H)7.52 (d, .7=2.3 Hz, 1H) 5.95 (s, 2 H) 5.33 (d, .7=4.3 Hz,1 H) 4.75 - 4.63 (m, 1 H) 1.27(d, J=6.5 Hz, 3 H).
Faza 3:
[0933]U ohlađeni (-0 °C)rastvor jedinjenja 513(260 mg, 1.2 mmol) u dihlormetanu (12 mL) se doda tionil hlorid (180 uL, 2.4 mmol). Ledeno kupatilo se ukloni i nakon~4 sata mešanja, rastvor se koncentruje koristeći visoki vakuum. Ostatak se rastvori u kiselom anhidridu i zagreva na 100 °C u toku noći. Rastvor se koncentruje i azeotropira sa toluenom (2x) da se dobijejedinjenje 514,A<r->acetil-A<r->[5-bromo-3-(l-hloretil)piridin-2-il]acetamid, koji se direktno koristi u sledećoj fazi.
Faza 4:
[0934] Smeša jedinjenja 514(~1.2 mmol),jedinjenja 138(350 mg, 1.2 mmol) i kalijum karbonata (830 mg, 6.0 mmol) u acetonitrilu (8.0 mL) se zagreje na 60 °C. Nakon~5 sati, reaktivna smeša se ohladi i razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom i slanim rastvorom, suši preko MgS04, filtrira i koncentruje. Sirovi materijal se prečisti hromatografijom na koloni silika gela uz eluiranje sa smešom heptan/etil acetat (0-100%) da se dobijejedinjenje 515,2-{l-[2-(acetilamino)-5 -bromopiridin-3 -il] etoksi} - N- [(5 -cij ano-1 -metil- 17/-pirazol-3 -il)metil] -4-fluoro-A^-metilbenzamid (170 mg, 27% preko 3 faze).<[>H NMR (400 MHz, 80°C, DMSO-ć/6) 5 10.00 (br. s., 1 H) 8.47 (d,J=2.5 Hz, 1 H) 7.90 (br. s., 1 H) 7.25 (dd,J=6.8, 8.3 Hz, 1 H) 7.07 - 6.84 (m, 2 H) 6.83 - 6.69 (m, 1 H) 5.56 (q,J=6.3 Hz, 1 H) 4.84 - 4.55 (m, 1 H) 4.31 (br. s., 1 H) 3.98 (br. s., 3 H) 2.79 (br. s., 3 H) 2.14 (s, 3 H) 1.50(d, J=6.3 Hz, 3 H). LCMS APCI m/z 529/531 [M+H]<+>.
Faza 5:
[0935]U mikrotalasnu bočicu se sipajujedinjenje 515(120 mg, 0.23 mmol), KOAc (110 mg, 1.10 mmol) i ^mOH (2.3 mL). Kroz smešu se u mehurićima propušta azot a nakon toga se dodaju paladijum (II) acetat (5.2 mg, 0.023 mmol) i cataCXium A (17 mg, 0.045 mmol). Bočica se zatvori i reakcija se zrači 30 min pod mikrotalasima na 150 °C. Reakcija se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom i slanim rastvorom, suši preko MgS04, filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela uz eluiranje sa smešom DCM/MeOH (0-10%) da se dobije zaštićeni međuproizvod. Ostatak se rastvori u MeOH (1.0 mL), nakon toga se doda HC1 (4 N rastvor u dioksanu, 1.0 mL) i rastvor se zagreva na 50 °C u toku noći. Reakcija se razblaži sa EtOAc, ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(2x) i slanim rastvorom, suši preko MgS04, filtrira i koncentruje. Ostatak se prečisti gasnom hromatografijom uz eluiranje sa smešom DCM/MeOH (0-6%) da se dobije smešaPrimera 76iPrimera 77.Asimetrično razdvajanje pomoću SFC se izvodi koristeći Regis Whelk-01( R, R)kolonu (4.6 mm x 100 mm kolona, 5 mikrona veličina čestice), uz eluiranje sa 30% MeOH u CO2, zadržavanje na 140 bara. Brzinom protoka od 3 mL/min dobija se Rt(piki) = 2.68 minuta i Rt(pik2) = 4.65 minuta.
[0936]Primer 76(Pik 1): 10 mg (11%), > 99% ee.<J>H NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 7.93 (d, J=2.5 Hz, 1 H) 7.45 (d, .7=2.3 Hz, 1 H) 7.33(dd, .7=6.9,8.4 Hz, 1 H) 7.21(dd, .7=2.3,11.3 Hz, IH) 6.85 (dt,.7=2.0,8.3 Hz, IH) 6.26 (s, 2H) 5.88 (q, .7=6.5 Hz, IH) 4.30 (d, .7=14.4 Hz, IH) 4.13 (d, .7=14.4 Hz, 1 H) 4.04 (s, 3H) 2.95 (s, 3H) 1.48 (d, .7=6.0 Hz, 3H).LCMS APCIm/ z407 [M+H]<+>.Primer 77(Pik 2): 11 mg (11%),~98% ee.<l>RNMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 7.93(d, .7=2.3Hz, 1 H) 7.45(d, .7=2.3Hz, 1 H) 7.33(dd, .7=6.9, 8.4Hz,1 H) 7.21 (dd, J =2.3, 11.3 Hz, 1 H)6.85 (dt, .7=2.3, 8.3 Hz,1 H) 6.26 (s, 2 H) 5.88 (q,J=6.0 Hz,1 H) 4.30(d, J=14.4 Hz,1 H) 4.13 (d, J=14.4 Hz,1 H) 4.04 (s, 3 H) 2.95 (s, 3 H) 1.48 (d, J= 6.0 Hz,3 H). LCMS APCImlz407 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-12-fluoro-2,16,17-trimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2^-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-/i][2,5,11 ]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primeri 78,
79 i 80)
[0937]
Faza 1:
[0938] Smeša jedinjenja 10[1.89g,~7.5 mmol, (sadrži~25% (5-fluoro-2-bromo-fenil)metanol)],jedinjenja 29(2.28g, 9 mmol) i cezijum karbonata (6.11 g, 18.7 mmol) u acetonitrilu (7 mL) se zagreva 18 sati na 80 °C. U slani rastvor se doda sirova suspenzija (~400mL) i dobijene čvrste supstance boje rđe se sakupe filtriranjem i isperu sa vodom. Delimično osušene čvrste supstance se prenesu u zagrejani acetonitril (~200 mL) i filtriraju da se uklone fine tamne nerastvorne supstance koje se nakon toga odbace. Filtrat se ostavi da stoji na sobnoj temperaturi u toku noći. Nakon stajanja u toku noći, u boci su vidljivi neki kristali. Supernatant se ukloni i koncentruje do sušenja da se dobijejedinjenje 516kao crvenkasta čvrsta supstanca (2.822g), koja se prenese u narednu fazu bez naknadnog prečišćavanja.<l>KNMR (400 MHz,DM& O- ek)5 7.92 (dd, 1 H) 7.58 - 7.69 (m, 2 H) 7.05 (td,J=8.65, 3.24 Hz, 1 H) 6.69 (s, 2 H) 5.27 (s, 2 H).
Faza 2:
[0939] Smeša jedinjenja 516(616 mg,~1.45mmol), jedinjenja 144(228 mg, 1.14 mmol), DIEA (0.792 mL, 4.54 mmol) i Pd(PtBu3)2(59 mg, 0.114 mmol) u toluenu se zagreva u toku noći na 85 - 80 °C, u atmosferi CO pod pritiskom od 4 bara. Smeša se koncentruje i prečisti gasnom hromatografijom koristeći kao eluent gradient 25-100% EtOAc/heptan. Tražene frakcije se koncentruju do sušenja da se dobijejedinjenje 517(233 mg, 42%) kao penasta čvrsta supstanca.<J>H NMR
[0940](400 MHz, 80°C, DMSO-fife) 5 7.64 (s, 1 H), 7.51 (dd,J=10.20, 2.64 Hz, 1 H), 7.35 - 7.46 (m, 1 H), 7.24(td, J=8.62, 2.39 Hz, 1 H), 6.99 (s, 1 H), 6.25 (br. s., 2 H), 5.86 (s, 1 H), 5.35 (s, 2 H), 3.94 (s, 3 H), 2.65 (br. s., 3 H), 1.49(d, J=7.05 Hz, 3 H).
Faza3:
[0941]Urastvor jedinjenja 517(179 mg, 0.367 mmol) u ć-amil alkoholu (10 mL) se dodaju
cataCXium A (40 mg, 0.1 mmol), pivalinska kiselina (11 mg, 0.11 mmol), kalijum acetat (180 mg, 1.8 mmol) i voda (40 mL). Dobijena suspenzija se~5 minuta prska sa mehurićima azota. Nakon toga se doda paladijum acetat (12 mg, 0.055 mmol). Smeša se zatvori aluminijumskim čepom i zagreva 1 sat na 140 °C zračenjem mikrotalasima. LCMS pokazuje željeni produkt kao glavni pik. Smeša se smanji do minimalne zapremine. Ostatak se suspenduje u DCM, filtrira i filtrat koncentruje i prečisti hromatografijom na koloni silika gela koristeći kao eluent gradient 25-100% (EtOAc sadrži 10% MeOH)/heptani). Tražene frakcije se smanje do minimalne zapremine da se dobijePrimer 78(120 mg, 0.294 mmol, 80%) kao bledo žuta čvrsta supstanca.<l>RNMR (400 MHz, DMSO-<&) 5 7.75 (s, 1 H) 7.40 7.60 (m, 2 H) 7.18 (td,J =8.44, 3.02 Hz,1 H) 6.75 (s,2H)5.60 ( dd, J =12.46, 1.64 Hz, 1 H) 5.07 (d,J= 12.09 Hz, 1 H) 4.59 - 4.77 (m, 1 H) 4.04 (s, 3 H) 2.83 (s, 3 H) 1.61 (d,J=6.80 Hz, 3H).
[0942]Asimetrično razdvajanje pomoću SFC se izvodi koristeći Chiralcel OJ-H kolonu (4.6 mm x 250 mm kolona, 5 mikrona veličina čestice), uz eluiranje sa 30% MeOH u CO2, zadržavanje na 140 bara. Brzinom protoka od 3 mL/min dobija se Rt(piki)= 3.67 minuta i Rt<<p>ik2) = 4.97 minuta.Primer 79(Pik 1): 44.9 mg > 99% ee (-).<!>H NMR (600 MHz, DMSO-Ć&) 5 7.72 (s, 1 H) 7.41 - 7.58 (m, 2 H) 7.18 (td,J=8.52, 2.54 Hz, 1 H) 6.78 (s, 2 H) 5.55(d, J=12.46 Hz, 1 H) 5.08( d, J =12.46 Hz, 1 H) 4.64 (q,J=6.87 Hz, 1 H) 4.02 (s, 3 H) 2.81 (s, 3 H)1.59 (d, J= 6.87Hz, 3 H). LCMS APCIm/ z407 [M+H]<+>.Primer 80(Pik 2): 45.2 mg > 99% ee (+).<l>RNMR (600 MHz, DMSO-ć/6) 5 7.72 (s, 1 H) 7.42 - 7.58 (m, 2 H) 7.17 (td,J=8.52, 2.54 Hz, 1 H) 6.78 (s, 2 H) 5.55 (d,J=12.46 Hz, 1 H) 5.08(d, J=12.46 Hz, 1 H) 4.64(q, J=7.04 Hz, 1 H) 4.02 (s, 3 H) 2.81 (s, 3 H) 1.59(d, J =6.87 Hz, 3 H). LCMS APCIm/ z407 [M+H]<+>. Izrada (lO.RVT-amino-S-etil-n-fluoro-lO^ć-dimetil-lć^T-dihidro-S^-(meteno)[l,2]oksazolo[4,3-/i] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer 81)
[0943]
[0944]Urastvor jedinjenja 518(41 mg, 0.3 mmol),jedinjenja 202(70 mg, 0.2 mmol) i DIPEA (76 mg, 3.0 equiv) u DMF (0.8 mL, 0.25 M) se doda HATU (90 mg, 1.2 equiv). Dobijena smeša se meša 1 sat na sobnoj temperaturi. Rastvarač se ukloni pod sniženim pritiskom. Ostatak se razblaži sa EtOAc i ispere sa vodom, zasićenim vodenim rastvorom NaHC03i slanim rastvorom. Koncentriše se i prečisti reverzno fazno preparativnom HPLC da se dobijejedinjenje519 (69 mg, 73%) kao bela čvrsta supstanca. LCMS APCImlz Ali
[M+H]<+>.
Faza 2:
[0945]Urastvor jedinjenja 519(63 mg, 0.13 mmol) i pivalinske kiseline (6 mg, 0.4 equiv) u DMA (2.6 mL) se doda čvrst KOAc (65 mg, 5 equiv.), a nakon toga se u atmosferi argona dodaju Pd(OAc)2(6 mg, 0.20 equiv) i cataCXium A (20 mg, 0.4 equiv). Reakcija se zagreva 65 minuta pod mikrotalasima na 160 °C i prečisti reverzno faznom HPLC da se dobijePrimer 81(3.3mg, 6%) kao bela čvrsta supstanca.<l>K NMR (400 MHz, DMSO-Je) 5 7.63(dd, 7=2.5,10.4 Hz,IH) 7.53 (d, J=1.5 Hz, 1 H) 7.42(dd, J=5.8, 8.6Hz, 1H)7.18 (dt, J= 2.7, 8.4 Hz, IH) 6.69 (s, IH) 6.07 (s, 2H) 5.57 - 5.67 (m, 1 H) 4.57 (d,J=15.2 Hz, 1 H) 4.28(d, J=14.9 Hz, 1 H) 3.02 (s, 3H) 2.69 - 2.85 (m, 2H) 1.66(d, J=6.3 Hz, 3H)1.18 (t, J= 7.5 Hz, 3H). LCMS APCIm/ z397 [M+H]<+>.
Izrada (10JR)-7-amino-3-etil-12-fluoro-10,16-dimetil-16,17-dihidro-8,4-(meteno)[l,2]oksazolo[4,3-/i] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer
82)
[0946]
Faza1:
[0947]Paladijum (II) acetat (82.4 mg, 0.367 mmol) i cataCXium A (271 mg, 0.733 mmol) se zajedno izmešaju u toluenu (3.0 mL, degasiran) i dobijeni rastvor se na 50 °C, pomoću pipete, doda u izmešanirastvor jedinjenja7 (1.35 g, 3.67 mmol), bis-pinakolato dibora (1.86 g, 7.33 mmol) i CsF (2.23 g, 14.7 mmol) u smeši MeOH/H20 (4:1, 25.5 mL, degasiran). Nakon 5 minuta, doda serastvor jedinjenja 205(900 mg, 2.82 mmol) u MeOH (5.8 mL, degasiran). Dobijena smeša se meša na 80°C. Nakon 1.5 sat mešanja, pomoću LCMS analize se proceni daje reakcija završena. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, smeša se razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom, slanim rastvorom, suši preko Na2S04i koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-5% MeOH/DCM) da se dobijejedinjenje 520(1.045 g, 70%).<l>RNMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 7.88 - 7.99 (m, 1H)7.50 (dd,J=10.48,2.65 Hz, 1H) 7.39 ( d, J=1.77 Hz, 1 H) 7.24(td, J=8.46, 2.53 Hz, 1 H) 6.54 (br. s., 1 H) 6.22 (br. s., 1 H) 6.08 (br. s., 2 H) 3.85 (s, 3 H) 2.64 (s, 3 H) 2.43 - 2.48 (m, 2 H) 1.62(d, .7=6.32 Hz, 3 H)1.31 (br. s., 3 H) 1.12 - 1.28 (m, 6 H)1.00 (t, J= 7.58 Hz,3 H). LCMS APCImlz529 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0948]NaOH (1.84 g, 46.1 mmol) u 1mLvode se doda u rastvor jedinjenja 520 (995 mg,1.8 mmol) u MeOH (30 mL) i vodi (3 mL). Reaktivna smeša se meša na sobnoj temperaturi. Nakon 2.5 sata mešanja, reakcija je završena i polako se doda 4M rastvor HC1 u dioksanu (15 mL). Smeša se meša 20 sati na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobije sirovi deprotektovani produkt koji se direktno prenese u fazu ciklizacije bez naknadnog prečišćavanja. U rastvor HATU (1.0 g, 2.56 mmol) u DMF (76 mL) se u kapima, na 0 °C, doda rastvor sirovog produkta i DIEA (5.1 mL, 29.3 mmol) u DMF (76 mL) i THF (7.6 mL). Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 1 sat na 0 °C. Smeša se sipa u ledenu vodu (400 mL) i vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc. Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom, suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (0-10% MeOH/DCM). Nakon prečišćavanja,<19>F NMR ukazuje daje produkt kontaminiran sa PFć-. Produkt sličan lepku se rastvori u EtOAc i ispere sa 10% vodenim rastvorom Na2C03 (3x) a nakon toga se suši preko natrijum sulfata i koncentruje pod sniženim pritiskom da se dobijePrimer 82kao bela čvrsta supstanca (480 mg, 66%). lH NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 7.63(dd, J=10.32, 2.77 Hz, 1 H) 7.47(dd, J=8.56, 5.79 Hz, 1 H) 7.40(d, J=1.76 Hz, 1 H) 7.17(td, J=8.50, 2.64 Hz, 1H) 6.78 (d, J =1.76 Hz, 1 H) 6.03 (s, 2 H) 5.65(dd, J=6.29, 1.76 Hz, 1 H) 4.47 (d,J=14.35 Hz, 1 H) 4.21 (d,J=14.35 Hz, 1 H) 3.01 (s, 3 H) 2.82 - 2.92 (m, 2 H) 1.67 (d,J =6.29 Hz, 3 H) 1.22(t, J=7.55 Hz, 3 H). LCMS APCImlz397 [M+H]<+>.
Izrada (10S)-7-amino-12-fluoro-2,10,16-trimetil-16,17-dihidro-2Jff-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-A] [2,5,11] benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer 83)
[0949]
[0950]Pomoću dvofaznog postupka izPrimera 56,izrađuje sePrimer 83(41.4 mg, 11 %) kao bela čvrsta supstanca.<*>H NMR (600 MHz, DMSO-d6) 5 8.02 (s, 1 H), 7.63 (s, 1 H) 7.44(dd, J= 10.09, 2.63Hz, 1 H) 7.40(dd, J=8.57, 5.53 Hz, 1 H) 7.15(td, J=8.57, 2.76 Hz, 1 H) 6.25 (s, 2 H) 5.74 - 6.04 (m, 1 H) 4.33 (d,J=U 21 Hz, 1 H) 4.18 (d,J=13.27 Hz, 1 H) 3.83 (s, 3 H) 2.87 (s, 3 H) 1.62 (d,J=6.36 Hz, 3 H). LCMS APCImlz383 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-12-fluoro-10-(fluorometil)-2,16-dimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2//-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-A][2,5,ll]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila
(Primeri 84 i 85)
[0951]
Faza 1:
[0952]Urastvor jedinjenja 174(0.7 g, 1.81 mmol),jedinjenja 47(1.22 g, 3.07 mmol) ibis-(pinakolato)dibora (1.38 g, 5.42 mmol) u bezvodnom metanolu (280 mL) se u atmosferi gasa azota, na sobnoj temperaturi, doda NaOH (145 mg, 3.62 mmol) u vodi (10 mL). Nakon što se smeša degasira tri puta sa azotom, dodaju se cataCXium A (68 mg, 0.18 mmol) i Pd(OAc)2
(21 mg, 0.09 mmol). Dobijena smeša se tri puta degasira sa azotom i nakon toga refluksuje 16 sati. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 1/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc (300 mL). Smeša se nakon toga ispere sa slanim rastvorom (2x), suši preko
Na2S04 i koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti preko Biotage (smeša petrol etar/EtOAc =1:1, Rf =0.1) da se dobijejedinjenje 522(0.7 g, 62.8 %) kao čvrsta braon supstanca. LCMSmlz579 [M+Na]<+>
Faza 2:
[0953] Smeša jedinjenja 522(0.5 g, 0.90 mmol) i KOH (0.5 g, 8.99 mmol) u metanolu (20 mL) se zagreva 24 sata na 50 °C. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak. Ostatak se zakiseli sa 1 N rastvorom HC1 do pH~5. Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (3x). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom, suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak, koji se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela (DCM/McOH=25:l, Rf=0.3) da se dobijejedinjenje 523(320 mg, 95.5% čistoće, 62%) kao žuta čvrsta supstanca. LCMSmlz543 [M+H]<+>.
Faza3:
[0954]U izmešanirastvor jedinjenja 523(320 mg, 95% čistoće, 0.56 mmol) u DCM (10 mL) se u kapima, na sobnoj temperaturi, doda~4M rastvor HC1 (g) u dioksanu (2 mL). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 3 sata na sobnoj temperaturi. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovojedinjenje 524,koje se koristi u sledećoj fazi bez naknadnog prečišćavanja. LCMSmlz443
[M+H]<+>.
Faza: 4
[0955]U rastvor HATU (155 mg, 0.4 mmol) u DMF (8 mL) se u kapima, na 0 °C, doda rastvorjedinjenja 424(-0.29 mmol) i DIEA (0.60 g, 4.64 mmol) u bezvodnom DMF (8 mL) i bezvodnom THF (1 mL). Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 1 sat na istoj temperaturi. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. Smeša se sipa u ledenu vodu (30 mL). Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (30 mL x 5). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom (30 mL x 5), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografiji na koloni silika gela (DCM/MeOH = 25:1, Rf=0.3) da se dobije smešaPrimera 84iPrimera 85(80 mg, 52.6%) kao žuta čvrsta supstanca. Asimetrično razdvajanje se izvodi preparativnom SFC na Chiracel OJ-H (50 x 4.6 mm I.D., 3 mikrona veličina čestice) koloni, uz eluiranje sa 5-40% metanola (0.05% DEA) u atmosferi CO pod pritiskom od 140 bara sa brzinom protoka od 4 mL/min. Rt(piki) = 5.93 minuta i Rt(pik2) = 9.28 minuta i dobija se Pik 1 kao bela čvrsta supstanca (33 mg, 27%) i Pik 2 kao bela čvrsta supstanca (30 mg, 20%).
[0956] Primer 84 (Pik 1):100% ee.<l>RNMR (400 MHz, Metanol-dt) 5 7.70 (bs, IH), 7.54-7.48 (m, 2H), 7.22-7.18 (m, IH), 6.98 (s, IH), 5.91-5.90 (m, IH), 5.16-4.98 (m, IH), 4.88-4.84 (m, IH), 4.57-4.53 (d, IH), 4.49-4.48 (d, IH), 4.03 (s, 3H), 3.15 (s, 3H). LCMS ESm/ z425 [M+H]<+>.Primer 85 (Pik2): 100% ee.<l>R NMR (400 MHz, Metanol-ć/4) 5 7.71 (bs, 1 H), 7.54-7.48 (m, 2H), 7.232-7.18 (m, IH), 6.99 (s, IH), 5.92-5.56 (dd, IH), 5.12-4.95 (m, IH), 4.87-4.83 (m, 1 H), 4.53-4.50 (d, 1 H), 4.43-4.40 (d, 1 H), 4.09 (s, 3H), 3.15 (s, 3H). LCMS ESm/ z425 [M+H]".
Izrada 7-amino-12-fluoro-10-(fluorometil)-3-metoksi-l,16-dimetil-16,17-dihidro-l/T-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-A] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-l 5(10//)-ona (Primer
86/Primer 87)
[0957]
Faza1:
[0958]Urastvor jedinjenja 174(0.98 g, 2.5 mmol),jedinjenja 196(1.01 g, 3.03 mmol) i bis(pinakolato)dibora (1.905 g, 7.5 mmol) u metanolu (320 mL) u atmosferi azota, na sobnoj temperaturi se doda NaOH (200 mg, 5 mmol) u vodi (11 mL). Nakon što se smeša degasira tri puta sa azotom, dodaju se cataCXium A (116 mg, 0.325 mmol) i Pd(OAc)2(74 mg, 0.325 mmol). Dobijena smeša se degasira sa azotom tri puta i refluksuje 16 sati. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 1/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc (300 mL). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom (100 mL x 2), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel, smeša petrol etar/EtOAc od 3/1 do 1/1) da se dobijejedinjenje 525(800 mg, 94% čistoće, 56%) kao čvrsta braon supstanca.<l>R NMR (400 MHz, CDCh): 5 8.07-8.03 (dd, IH), 7.53 (s, IH), 7.31-7.28 (dd, IH), 7.03-6.99 (m, IH), 6.55-6.54 (d, IH), 6.53-6.42 (d, 1 H), 6.43-6.37 (dd, 1 H), 4.78 (s, 2H), 4.69-4.65 (m, 2H), 4.20-4.08 (m, 2H), 3.89-3.85 (t, 3H), 3.69 (s, 3H), 3.59 (s, 3H), 2.30 (s, 3H), 1.39 (s, 9H).
Faza 2:
[0959] Smeša jedinjenja 525(800 mg, 1.42 mmol) i NaOH (1.14 g, 28.5 mmol) u metanolu (30 mL) i vodi (10 mL) se meša 18 sati na sobnoj temperaturi. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. MeOH se ukloni pod vakuumom da se dobije ostatak. Ostatak se zakiseli sa 6N rastvorom HC1 do pH~5. Smeša se zasiti sa čvrstim NaCl a nakon toga ekstrahuje sa EtOAc (30 mL x 5). Kombinovani EtOAc slojevi se suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobijejedinjenje 526(700 mg, 89.7%) kao žuta čvrsta supstanca. LCMSmlz514
[M+H]<+>.
Faza3:
[0960]U rastvorjedinjenja 526(700 mg, 1.28 mmol) u dioksanu (5 mL) se u kapima, na sobnoj temperaturi, doda~4M rastvor HC1 (g) u dioksanu (10 mL). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 18 sati na sobnoj temperaturi. TLC (EtOAc) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovojedinjenje 527,koje se koristi u sledećoj fazi bez ikakvog naknadnog prečišćavanja. LCMSmlz448 [M+H]<1>.
Faza 4:
[0961]U rastvor HATU (813mg, 2.14 mmol) u DMF (80 mL) se u kapima, na 0 °C, dodasmeša jedinjenja 527(-636 mg, 1.13 mmol) i DIPEA (3.69 g, 28.6 mmol) u DMF (20 mL). Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 1 sat na sobnoj temperaturi. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. Smeša se sipa u ledenu vodu (50 mL). Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (40 mL x 5). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL x 5), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel, smeša petrol etar/EtOAc 30-70%) da se dobije smeša Primera86iPrimera 87(0.2 g, 36.3%) kao ružičasta čvrsta supstanca. Asimetrično razdvajanje se izvodi preparativnom SFC na Chiracel OD-3 (50 x 4.625mm I.D., 3 mikrona veličina čestice) koloni, uz eluiranje sa 5-40% etanola (0.05% DEA) u CO2sa brzinom protoka od 4 mL/min. Rt(piki) = 1.47 minuta i Rt(pik2) =1.71 minuta da se dobije Pik 1 kao ružičasta čvrsta supstanca (38 mg, 7%) i Pik 2 kao ružičasta čvrsta supstanca (42 mg, 8%).Primer 86 (Pik 1):100% ee. 'HNMR (400 MHz, CDCh) 5 7.87-7.86 (d, 1 H), 7.34-7.31 (dd, 1 H), 7.28-7.25 (m, 1 H), 7.09-7.04 (m, 1 H), 6.81 (s, 1 H), 5.78-5.73 (d, 1 H), 4.91-4.78 (m, 4H), 4.45-4.41 (d, IH), 4.33-4.30 (d, IH), 3.94-3.91 (d, 3H), 3.74 (d, 3H), 3.16 (s, 3H). LCMS ESmlz430 [M+H]<+>.Primer 87 (Pik 2):100% ee.lR NMR(400 MHz, CDCh) 5 7.80 (s, IH), 7.27-7.24 (dd, 1 H), 7.22-7.19 (m, IH), 7.03-7.0 (m, IH), 6.76-6.75 (s, IH), 5.71-5.67 (d, IH), 4.85-4.72 (m, 4H), 4.38-4.35 (d, 1 H), 4.27-4.23 (d, 1 H), 3.89 (s, 3H),.3.81 (s, 3H), 3.09 (s, 3H). LCMS ESmlz430 [M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-12-fluoro-10,16-dimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2^-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-A] [2,5,11 ]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer 88)
[0962]
Faza1:
[0963]U rastvor jedinjenja 7 (600 mg, 1.62 mmol), jedinjenja214(1.08 g, 2.44 mmol) i bis-(pinakolato)dibora (1.23 g, 4.86 mmol) u metanolu (120mL) se dodaju cataCXium A (80 mg, 0.2 mmol) i Pd(OAc)2(50mg, 0.20 mmol). Nakon što se smeša degasira tri puta sa azotom, u atmosferi azota, na sobnoj temperaturi, doda se rastvor NaOH (130 mg, 3.2 mmol) u vodi (10 mL). Dobijena smeša se degasira sa azotom tri puta i nakon toga refluksuje 16 sati. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 3/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc (100 mL x 3). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom (50 mL x 3), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel, smeša petrol etar/EtOAc = 1:1, Rf= 0.3) da se dobijejedinjenje 528(650 mg, 96.8% čistoće, 59%) kao žuta čvrsta supstanca. LCMSmlz655 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0964]U izmešanirastvor jedinjenja 529(350 mg, 96.8% čistoće, 0.55 mmol) u DCM (5 mL) se u kapima, na sobnoj temperaturi, doda~4M rastvor HC1 (g) u dioksanu (5 mL). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. LC-MS pokazuje da je reakcija završena. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovojedinjenje 529,koje se koristi u sledećoj fazi bez ikakvog naknadnog prečišćavanja. LCMSmlz424 [M+H]<+>
Faza 3:
[0965] Smeša jedinjenja 529(-0.47 mmol) i KOH (0.65 g, 11.7 mmol) u metanolu (15 mL) se meša 36 sati na 50 °C. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. MeOH se ukloni pod vakuumom da se dobije ostatak, koji se zakiseli sa 1 N vodenim rastvorom HC1 do pH~6. Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (20 mL x2). Vodeni sloj se liofilizira da se dobije sirovi produkt koji se razblaži sa smešom DCM/MeOH (5:1, 20 mL) i filtrira. Filtrat se koncentruje da se dobijejedinjenje 530(140 mg, 75% čistoće, 54.4%) kao čvrsta braon supstanca. LCMSm/ z Ali[M+H]<+>.
Faza 4:
[0966]U rastvor HATU (137 mg, 0.35 mmol) u DMF (20 mL) se u kapima, na 0 °C, dodarastvor jedinjenja 530(140 mg, 75% čistoće, 0.25 mmol) i DIEA (516 mg, 4 mmol) u DMF (10 mL). Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 1 sat na 0 °C. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. Smeša se sipa u vodu (50 mL). Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (50 mL x 5). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom (40 mL x 5), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (DCM/MeOH =25:1, Rf = 0.3) da se dobije sirovi materijal, koji se dalje prečisti preparativnom SFC (Chiralcel OD-3, 15034.6mm I.D., 3mm. Vreme retencije 6.93 min mobilna faza: metanol (0.05% DEA) u CO2od 5% do 40% brzina protoka: 3mL/min) a nakon toga preparativnom HPLC da se dobijePrimer 88(12 mg, 12%) kao bela čvrsta supstanca. 'HNMR (400 MHz, Metanol-^) 5 7.70 (s, IH), 7.54-7.51 (dd, IH), 7.46-7.42 (m, IH), 7.15-7.11 (m, IH), 6.91 (s, IH), 5.76-5.73 (t, IH), 4.54 (s, 2H), 3.15 (s, 3H), 1.81-1.80 (d, 3H). LCMSmlz392 [M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-12-fluoro-10,16-dimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-lH-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-/i][2,5,11 ]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer 89)
[0967]
Faza 1:
[0968] Smeša jedinjenja 210(1.5 g, 3.42 mmol), DIPEA (1.76 g, 13.68 mmol), DPE-Phos (0.3 g, 0.58 mmol) i Pd(OAc)2(77 mg, 0.34 mmol) u MeOH (50 mL) se meša na 40 °C u atmosferi CO pod pritiskom od 10 bara u toku noći. TLC (petrol etar / EtOAc = 3:1) pokazuje daje reakcija skoro završena. Smeša se filtrira i filtrat se koncentruje. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (petrol etar / EtOAc = 3:1, Rf: 0.5) da se dobijejedinjenje 531(0.76 g, 60%) kao žuta čvrsta supstanca.
Faza 2:
[0969] Urastvor jedinjenja 531(300 mg, 0.81 mmol),jedinjenja 214(541 mg, 1.22 mmol) i bis-(pinakolato)-dibora (617 mg, 2.43 mmol) u metanolu (60mL) se dodaju cataCXium A (40 mg, 0.1053 mmol) i Pd(OAc)2 (25mg, 0.1053 mmol). Nakon što se smeša degasira tri puta sa azotom, doda se rastvor NaOH (65 mg, 1.62 mmol) u vodi (12 mL),u atmosferi azota, na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša se degasira sa azotom tri puta i nakon toga refluksuje 16 sati. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 3/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc (50 mL x 3). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL x 3), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel, smeša petrol etar/EtOAc od 10/1 do 3/1) da se dobijejedinjenje 532(400 mg, 53% čistoće, 40%) kao čvrsta braon supstanca. LCMSmlz655 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0970]U izmešanirastvor jedinjenja 532(400 mg, 53% čistoće, 0.32 mmol) u DCM (2 mL) se u kapima, na sobnoj temperaturi, doda~4M rastvor HC1 (g) u dioksanu (10 mL). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovojedinjenje 533,koje se koristi u sledećoj fazi bez ikakvog naknadnog prečišćavanja. LCMSmlz425 [M+H]<+>.
Faza4:
[0971]Smeša jedinjenja 533(-300 mg) i KOH (0.395 g, 7.0 mmol) u metanolu (15 mL) se meša 36 sati na 50 °C. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. MeOH se ukloni pod vakuumom da se dobije ostatak, koji se zakiseli sa 1 N vodenim rastvorom HC1 do pH~5. Smeša se zasiti sa čvrstim NaCl a nakon toga ekstrahuje sa EtOAc (30 mL x 5). Kombinovani EtOAc slojevi se suše preko Na2S04i koncentruje pod vakuumom da se dobijejedinjenje 534(180 mg, 39.8% čistoće, 53.8%) kao čvrsta braon supstanca. LCMSmlz411 [M+H]<+>.
Faza 5:
[0972] U rastvor HATU (250 mg, 0.66 mmol) u DMF (25 mL) se u kapima, na 0 °C, dodarastvor jedinjenja 534(180 mg, 0.44 mmol) i DIEA (908 mg, 7.04 mmol) u DMF (10 mL). Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 1 sat na sobnoj temperaturi. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. Smeša se sipa u ledenu vodu (50 mL). Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (40 mL x 5). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL x 5), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel, smeša petrol etar/EtOAc 2:1 — 1:2) da se dobijePrimer 89(10.5mg, 15.8%) kao bela čvrsta supstanca. 'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.13 (s, IH), 7.30-7.26 (dd, IH), 7.23-7.20 (m, IH), 7.01-7.00 (m, IH), 6.19-6.14 (m, IH), 5.07 (s, 2H), 4.75-4.72 (d, IH), 4.28-4.25 (d, 1 H), 3.04 (s, 3H), 1.17-1.15 (d, 3H). LCMS ESmlz393
[M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-l-(2,2-difluoroetil)-12-fluoro-10,16-dimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-lH-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-/i] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-3-
karbonitrila (Primer 90)
[0973]
Faza 1:
[0974]Pd(P<t>Bu3)2(97 mg, 0.191 mmol) se doda usmeša jedinjenja 226(450 mg, 1.91 mmol),jedinjenja 210,(R)-5-bromo-3-(l-(5-fluoro-2-jodfenil)etoksi)-pirazin-2-amina (838 mg, 1.91 mmol) i DIEA (1.23 g, 9.55 mmol) u degasiranom toluenu (50 mL) i smeša se meša 18 sati u atmosferi CO (4 bara) na 80 °C. Nakon hlađenja, isparivi sastojci se uklone i ostatak prečisti gasnom hromatografijom na silika gelu (1:1 EtOAc/heptan), da se dobijejedinjenje 535(750 mg, 72%) kao krem obojena pena.<*>H NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 7.64 - 7.08 (m, 5H), 6.75 (s, 2H), 6.51 (tt,J=54.4, 3.5 Hz, 1 H), 5.96 (d,J=6.6 Hz, 1 H), 5.01 - 4.35 (m, 4H), 2.95 (d,J=44.5 Hz, 3H), 1.58 (d,J=6.4 Hz, 3H). LCMSmlz538/540 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0975]Pd(OAc)2(24.0 mg, 0.11 mmol) i cataCXium A (78.0 mg, 0.22 mmol) se dodaju usmešu jedinjenja 535(300 mg, 0.56 mmol), KOAc (274 mg, 2.8 mmol) i degasiranog t-amil alkohola (12.0 mL) u mikrotalasnu bočicu zapremine 20 mL i meša 2.5 sata pod zračenjem mikrotalasima (130 °C). Nakon hlađenja, isparivi sastojci se uklone i ostatak se prečisti hromatografijom na koloni (70% EtOAc u heptanima). Frakcije koje sadrže produkt (Rf = 0.35) se upare (TLC ukazuje da produkt nije čist). Ostatak se ponovo prečisti hromatografijom na koloni (20% aceton u DCM). Frakcije koje sadrže produkt se upare (TLC pokazuje da su još uvek prisutne prateće nečistoće). Ostatak se ponovo prečisti hromatografijom na koloni (70% TBME u heptanima). Frakcije koje sadrže produkt se upare i ostatak se rastvori u MeOH (1.0 mL). Polako se dodaje voda (približno 4 mL) uz mešanje, da produkt precipitira. Rastvarač se pažljivo dekantuje od dobijenih čvrstih supstanci koje se suše pod vakuumom u toku noći da se dobijePrimer 90(28.0 mg, 11% prinos) kao bledo žuti prašak.<*>H NMR (400 MHz,DMSO-fifc)5 7.86 (s, 1 H), 7.48 (dd,J=10.0, 2.6 Hz, 1 H), 7.32(dd, J=8.5, 5.6 Hz, 1 H), 7.23(td, J=8.5, 2.6 Hz, 1 H), 6.76 (s, 2H), 6.66 - 6.32 (m, 1 H), 5.93 - 5.78 (m, 1 H), 5.19 - 4.87 (m, 2H), 4.72 (d,J=14.9 Hz, 1 H), 4.37 (d,J=14.9 Hz, 1 H), 2.86 (s, 3H), 1.64 (d,J=6.6 Hz, 3H). LCMS ESmlz458 [M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-2-(2,2-difluoroetil)-12-fluoro-10,16-dimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2//-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-/i] [2,5,11] benzoksadiazaciklotetradecin-3-
karbonitrila (Primer 91)
[0976]
Faza 1:
[0977]Pd^Bu3)2 (32 mg, 0.064 mmol) se doda usmešu jedinjenja 210,(R)-5-bromo-3-(l-(5-fiuoro-2jodfenil)etoksi)pirazin-2-amina (280 mg, 0.64 mmol),jedinjenja 225(150 mg, 0.64 mmol) i DIEA (413 mg, 3.2 mmol) u degasiranom toluenu (20 mL). Smeša se nakon toga meša 6 sati u atmosferi CO (4 bar) na 80 °C. Smeša se koncentruje i ostatak prečisti hromatografijom na koloni (40% do 75% EtOAc u heptanima), da se dobijejedinjenje 536(270 mg, 78%) kao bledo žuta pena.<l>K NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 .70 - 7.06 (m, 5H), 6.73 (s, 2H), 6.43 (tt,J=54.0, 3.0 Hz, 1 H), 6.04 (d,J=6.5 Hz, 1 H), 4.95 - 4.27 (m, 4H), 2.93 (m, 3H), 1.57 (d,J=6.5 Hz, 3H). LCMSmlz538/540 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0978] Smeša jedinjenja 536(108 mg, 0.20 mmol), Pd(OAc)2(6.60 mg, 0.03 mmol), cataCXium A (21.4 mg, 0.06 mmol), KOAc (98 mg, 1.0 mmol) u degasiranom/-amil alkoholu (7.0 mL) se meša 2 sata pod zračenjem mikrotalasima (120 °C). Nakon hlađenja, smeša se koncentruje, nakon toga prečisti hromatografijom na koloni (1:1 EtOAc/heptani), da se dobijePrimer 91(75 mg, 54%) kao kremprašak. lRNMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 7.78 (s,IH), 7.48 (dd,y=10.1,2.7 Hz, IH), 7.42(dd, J =8.5, 5.7 Hz, IH), 7.17 (td, J= 8.5, 2.7 Hz, IH), 6.83 (s, 2H), 6.49 (tt, J = 53.9, 2.8 Hz, 1 H), 5.91(qd, J=6.5, 1.8 Hz, 1 H), 4.88 (td,J=15.8, 2.8 Hz, 2H), 4.35 (q,J=13.7 Hz, 2H), 2.88 (s, 3H), 1.64( d, J=6.5 Hz, 3H). LCMSm/ z 458 [M+H]+.
Izrada (10R)-7-amino-12-fluoro-10,16-dimetil-15-okso-2-(propan-2-il)-10,15,16,17-tetrahidro-2//-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-/i] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-3-
karbonitrila (Primer92)
[0979]
Faza 1:
[0980]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 91se koristi za izradujedinjenja 537(200 mg, 48%) kao bledo žute pene.<l>KNMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 7.69 - 6.98 (m, 5H), 6.74 (s, 2H), 6.17 - 5.90 (m, 1 H), 4.95 - 4.22 (m, 3H), 2.93 (m, 3H), 1.57(d, J =6.4 Hz, 3H), 1.42 (dd, J = 8.3, 6.6 Hz, 6H). LCMS ESm/ z516/518 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0981]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 91se koristi za izraduPrimera 92(70 mg, 41%) kao krem praška.<l>RNMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 7.77 (s, IH), 7.47(dd, J=10.1, 2.6 Hz, 1 H), 7.40 (dd,J=8.5, 5.7 Hz, 1 H), 7.17 (td,J=8.5, 2.7 Hz, 1 H), 6.75 (s, 2H), 5.90 (qd,J =6.4, 1.9 Hz, 1 H), 4.77(hept, J= 6.7Hz, 1 H),4.41 -4.24 (m, 2H), 2.88 (s, 3H), 1.64(d, J =6.5 Hz, 3H), 1.50 (dd,J =6.6, 1.1 Hz, 6H). LCMS ESm/ z436 [M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-12-fluoro-10,16-dimetil-2-(oksetan-3-il)-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2//-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-/i] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-3-
karbonitrila (Primer93)
[0982]
Faza 1:
[0983]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 91se koristi za izradujedinjenja 538(376 mg, 41%).lH NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.57 (s,1 H), 7.23(dd, J=8.5, 5.5 Hz, 1H), 7.15 (dd, J= 9.7, 2.6 Hz, 1 H), 7.01 (td,J=8.3, 2.6 Hz, 1 H), 6.92 (s, 1 H), 6.10 (q,J =6.4 Hz, 1 H), 5.66 (tt,J=7.7, 6.2 Hz, 1 H), 5.17 - 4.98 (m, 7H), 4.65( d, J=15.0 Hz, 1 H), 3.04 (s, 3H), 1.74 (d,J =6.5 Hz, 3H). LCMS ESm/ z530/532 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0984]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 91se koristi za izraduPrimera 93kao žute čvrste supstance (63 mg, 21% prinos).<l>K NMR (400 MHz, DMSO-d6) 8 7.76 (s, 1 H), 7.48 (dd,J =10.1, 2.7 Hz, IH), 7.43 (dd,J=8.5, 5.7 Hz, IH), 7.18(td, J=8.5, 2.7 Hz, IH), 6.79 (s, 2H), 5.96 - 5.87 (m, 1 H), 5.76 (tt,J=7.5, 6.0 Hz, 1 H), 5.04 - 4.91 (m, 4H), 4.39 (s, 2H), 2.94 (s, 3H), 1.65 (d,J=6.6 Hz, 3H). LCMS ESmlz450 [M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-12-fluoro-10-(fluorometil)-2,16-dimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2//-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-/i] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklo-tetradecin-3-
karbonitrila (Primer 94)
[0985]
Faza 1:
[0986]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 91se koristi za izradujedinjenja 539(0.08 g, 88%) kao žute čvrste supstance.
Faza 2:
[0987]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 91se koristi za izraduPrimera 94(16 mg, 19%) kao bele čvrste supstance (63 mg, 21% prinos). 'HNMR (400 MHz, Metanol-^4) 5 7.94 (s, 1
H), 7.50-7.43 (m, 2H), 7.21-7.17 (m, IH), 6.17-6.11 (m, IH), 5.06-5.01 (m, IH), 4.74-4.71 (m, IH), 4.56-4.53 (d, 1 H), 4.40-4.37 (d, 1 H), 4.14 (s, 3H), 3.05 (s, 3H). LCMS ESmlz426
[M+H]<+>.
Izrada 12-lfuoro-l,14-dimetil-l,4,5,6,7,8-heksahidro-14//-16,20-(meteno)-pirazolo[4,3-g] [1,14,1 l]benzodioksazacikloheptadecin-17-amina (Primer 95) i (llR)-8-amino-13-fluoro-4,ll,17-trimetil-17,18-dihidro-9,5:19,l-di(azeno)pirimido[6,l-h] |2,5,9,13]benzoksatriazacikloheksadecin-16(ll//)-ona (Primer 96)
[0988]
Faza 1:
[0989]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 91se koristi za izradujedinjenja 540(245 mg, 44%) kao bledo žute pene.<l>K NMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 8.72 (dt,J=2.6, 1.3 Hz, IH), 8.63 (s, 1 H), 8.49 - 8.25 (m, 1 H), 7.83 (s, 1 H), 7.69 (s, 1 H), 7.63 - 7.46 (m, 2H), 7.37(dd, J =8.3, 5.8 Hz, 0H), 7.27 - 7.05 (m, 1 H), 6.72 (d,J=7.1 Hz, 2H), 6.09 (t,J=6.5 Hz, 0H), 6.00 (d,J=16.3 Hz, OH), 4.97 - 4.67 (m, IH), 4.45 (t,J= 18.3 Hz, 1 H), 3.06 (s, 2H), 2.93 (s, IH), 2.28(d,J=7.4 Hz, 4H), 1.59(dt, J=5.8, 2.4 Hz, 4H). LCMS ESmlz511/513 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0990] Jedinjenje 540(230 mg, 0.45 mmol) i KOAc (219 mg, 2.23 mmol) se izmešju uterc-amil alkoholu (15 mL). Smeša se degasira (propuštanjem azota u toku 30 minuta), nakon toga se dodaju Pd(OAc)2(20 mg, 0.09 mmol) i cataCXium A (64 mg, 0.18 mmol). Smeša se ponovo degasira a nakon toga zagreva 2 sata pod mikrotalasima na 120 °C. LC-MS sirove smeše pokazuje daje reakcija završena. Smeša se filtrira kroz celite ploču i ispere sa EtOAc (50 mL). Filtrat se ispere sa vodom (100 mL), suši preko MgS04, filtrira i koncentruje pod vakuumom. Dobijeno ulje se prečisti hromatografijom na koloni (eluenti EtOAc/MeOH od 100:0 do 90:10). Dobijeno žuto staklo (čist makrociklil i dalje sadrži EtOAc) se rastvori u MeOH (20 mL) i doda se voda (20 mL). Smeša se koncentruje pod vakuumom a nakon toga suši zamrzavanjem da se dobijePrimer95 kao bledo žuta čvrsta supstanca (82 mg, 43% prinos, 97% čistoće pomoću LC-MS).<l>R NMR (400 MHz, DMSO-^e) 5 8.84 (dd,J=2.5, 1.3 Hz, IH), 8.45(d, J=2. 2 Hz, IH), 7.92 (s, IH), 7.54(dd, J =10.1, 2.7 Hz, 1 H), 7.42(dd, J =8.5, 5.7 Hz, 1 H), 7.17(td, J=8.5, 2.7 Hz, 1 H), 6.75 (s, 2H), 6.18 - 5.92 (m, 1 H), 4.62 - 4.19 (m, 2H), 2.96 (s, 3H), 2.32(d, J=1.1 Hz, 3H), 1.66 (d, J = 6.5 Hz, 3H). LCMS ESmlz 434[M+H]<+>. Izmešane frakcije iz kolone se prečiste reverzno faznom HPLC da se dobijePrimer96 (15 mg, 7%> prinos, 92% čistoće pomoću LC-MS) kao smeša dva konformera, utvrđeno pomoću JH NMR (približno 1:1 smeša). JH NMR (400 MHz, Metanol-dt) 5 8.32(d, J=8.4 Hz, IH), 7.84 (s, 1 H), 7.81 - 7.72 (m, 1 H), 7.61 (dd,J=8.5, 5.7 Hz, 0.5H), 7.48 (dd,J =10.4, 2.7 Hz, 0.5H), 7.38 (dd,J=8.5, 5.5 Hz, 0.5H), 7.34 (s, 0.5H), 7.04 (td,J=8.3, 2.7 Hz, 1 H), 6.86(d, J=6.4 Hz, 0.5H), 6.14(d, J=6.3 Hz, 0.5H), 5.24(dd, J=15.9, 8.5 Hz, 1 H), 4.08 (dd,J=38.3, 15.9 Hz, 1 H), 2.97 (s,1.5H), 2.93 (d,J =1.9 Hz, 1.5H), 2.39 (s, 1.5H), 2.32 (s, 1.5H), 1.63(dd, J=9.0, 6.5 Hz, 1.5H), 1.40(d, .7=6.4Hz,1.5H). LCMS ES m/ z 434
[M+H]<+>.
Izrada (5R)-8-amino-3-fluoro-5,17-dimetil-18-okso-5,16,17,18-tetrahidro-7,ll-(azeno)dibenzo[g,/] [l,4,10]oksadiazaciklotetradecin-12-karbonitrila (Primer 97)
[0991]
Faza 1:
[0992] Urastvor jedinjenja 531(300 mg, 0.81 mmol),jedinjenja 252(393 mg, 1.21 mmol) i bis-(pinakolato)dibora (610 mg, 2.43 mmol) u metanolu (60 mL) se doda catacxium A (38 mg, 0.1053 mmol) a nakon toga se doda Pd(OAc)2(24 mg, 0.1053 mmol). Nakon što se smeša degasira tri puta sa azotom, u gore pomenutu smešu u atmosferi azota, na sobnoj temperaturi doda se rastvor NaOH (65 mg, 1.62 mmol) u vodi (12 mL). Dobijena smeša se degasira sa azotom tri puta i nakon toga refluksuje 16 sati. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 3/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc (50 mL x 3). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL x 2), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel, smeša petrol etar/EtOAc od 10/1 do 5/1) da se dobijejedinjenje 541(400 mg, 80% čistoće, 75%) kao čvrsta braon supstanca. LCMSmlz535 [M+H]<+>.
Faza 2:
[0993]U izmešanirastvor jedinjenja 541(400 mg, 80% čistoće, 0.61 mmol) u DCM (2 mL) se u kapima, na sobnoj temperaturi, doda~4M rastvor HC1 (g) u dioksanu (10 mL). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovojedinjenje 542,koje se koristi u sledećoj fazi bez ikakvog naknadnog prečišćavanja. LCMSmlz435 [M+H]<+>.
Faza 3:
[0994] Smeša jedinjenja 542(-300 mg) i KOH (316 mg, 5.65 mmol) u metanolu (20 mL) se meša 36 sati na sobnoj temperaturi. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. Smeša sekoncentruje pod vakuumom.Ostatak se razblaži sa vodom i podesi na pH~5 sa 0.5N.HC1. Vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (30 mL x 5). Kombinovani EtOAc slojevi se suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobijejedinjenje 543(0.2 g, 69%) kao žuta čvrsta supstanca. LCMSmlz422 [M+H]<+>.
Faza 4:
[0995]U rastvor HATU (271 mg, 0.69) u DMF (60 mL) se u kapima, na 0 °C, doda smeša rastvorajedinjenja 543(200mg, 0.47 mmol) i DIPEA (980 mg, 7.6 mmol) u DMF (10 mL). Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 1 sat na sobnoj temperaturi. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. Smeša se sipa u ledenu vodu (20 mL). Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (40 mL x 5). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL x 5), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak. Ostatak se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel, smeša petrol etar/EtOAc 5:1 —1:1) da se dobijePrimer 97(80.8 mg, 42%) kao bela čvrsta supstanca.<!>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.81-7.78 (m, 2H), 7.67-7.65 (m, 1 H), 7.50-7.47 (m, 1 H), 7.29-7.27 (m, 1 H), 7.18-7.17 (m, 1 H), 6.98-6.94 (m, 1 H), 6.34-6.29 (m, IH), 5.10 (s, 2H), 4.65-4.62 (d, IH), 4.15-4.12 (d, IH), 2.94 (s, 3H), 1.79-1.78 (d, 3H). LCMS ESmlz404 [M+H]<+>.
Izrada (5R)-8-amino-3-fluoro-5,19-dimetil-20-okso-5,18,19,20-tetrahidro-7,ll-(azeno)pirido[2',l':2,3]imidazo[4,5,ll] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-14-
karbonitrila (Primer 98)
[0996]
Faza 1:
[0997] Usmešu jedinjenja 254(0.217 g, 0.611 mmol)i jedinjenja 264(0.15 g, 0.673 mmol) u DMF (20 mL) se na -35 °C dodaju EDC1 (0.176 g, 0.916 mmol), HOBt (0.124 g, 0.916 mmol) i DIPEA (0.394 g, 3.055 mmol). Dobijena smeša se meša 30 min na -30 °C i meša na sobnoj temperaturi u toku noći. TLC (petrol etar/EtOAc = 1:1) pokazuje daje većinajedinjenja 254utrošena. Smeša se razblaži sa EtOAc (50 mL) i thO (10 mL). Organski sloj se izdvoji i vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc (20 mL x 2). Organski slojevi se kombinuju, isperu sa slanim rastvorom (10 mL x 5), suše preko Na2S04, filtriraju i koncentruju pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se prečisti preparativnom TLC da se dobijejedinjenje 544(150 mg, 46%) kao bela čvrsta supstanca.
Faza 2:
[0998] Reakcija se izvodi u tri serije od po 50 mg pod identičnim uslovima. U smešujedinjenja 544(0.05 g, 0.095mmol), cataCXium (4.25 mg, 0.0118 mmol),ć-AmOH(1.94 mg, 0.019 mmol) i KOAc (46.55 mg, 0.475 mmol) u sveže destilovanom DMAc (8 mL) se na sobnoj temperaturi u atmosferi azota doda Pd(OAc)2(2.66 mg, 0.0118 mmol). Dobijena smeša se zatvori i zagreva 12 h na 110 °C. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. Smeša se razblaži sa EtOAc (25 mL) a nakon toga ispere sa slanim rastvorom (5 mL x 4). Organski sloj se izdvoji i suši preko Na2S04, filtrira i koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovi produkt koji se prečisti preparativnom TLC a nakon toga ponovo prečisti reverzno faznom preparativnom HPLC da se dobijePrimer 98(15.4 mg, 12%) kao žuta čvrsta supstanca.<[>H NMR (400 MHz, Metanold4+ D20): 5 9.38-9.37 (m, 1 H), 7.98-7.91 (m, 2H), 7.85-7.80 (m, 1 H), 7.55-7.45 (m, 2H), 7.25-7.15 (m, IH), 6.25-6.15 (m, IH), 4.80-4.75 (m, 2H), 4.60-4.52 (m, IH), 3.15 (s, 3H), 1.84-1.82 (dd, 3H). LCMSmlz444 [M+1J+.
Izrada (10R)-7-amino-12-fluoro-10,16-dimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-8,4-(azeno)|l,2]oksazolo|4,3-/i][2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer
99)
[0999]
Faza 1:
[1000]U izmešanirastvor jedinjenja 254(250 mg, 0.7 mmol),jedinjenja 272(145 mg, 0.7 mmol) i DIPEA (271 mg, 2.1 mmol) u DMF (15 mL) se na -35 °C, u atmosferi N2, dodaju HOBt (143 mg, 1.05 mmol) i EDC1 (135 mg, 1.05 mmol). Nakon dodavanja, smeša se meša 24 sata na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc =1:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se sipa u ledenu vodu (20 mL), ekstrahuje sa EtOAc (20 mL x 5), kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL x 5), suše preko Na2S04i koncentruju da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel. Rf = 0.3, petrol etar/EtOAc = 2:1-1:1) da se dobijejedinjenje 545(210 mg, 63%) kao svetio žuto ulje. 'HNMR (400 MHz, CDCh) 5 7.60 (s, IH), 7.22-7.21 (m, 2H), 7.18 (s, IH), 7.04-7.02 (m, IH), 6.12 (m, IH), 5.02-4.98 (d, 1 H), 4.89 (s, 2H), 4.77-4.74 (d, 2H), 3.04 (s, 3H), 1.74-1.72 (d, 3H).
Faza 2
[1001] Smeša jedinjenja 545(200 mg, 0.42 mmol), KOAc (0.21 g, 2.15 mmol), cataCXium A (18 mg, 0.0504 mmol) i Pd(OAc)2(5.6 mg, 0.025 mmol) uć-AmOH(20 mL) se meša 18 sati na 120 °C. LC-MS polazuje~30% željenogjedinjenja.Smeša se sipa u ledenu vodu (20 mL), ekstrahuje sa EtOAc (30 mL x 5), a kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (5 mL), suše preko Na2S04i koncentruju da se dobije ostatak koji se prečisti reverzno faznom preparativnom HPLC da se dobijePrimer 99(14.1 mg, 9 %) kao bela čvrsta supstanca. 'HNMR (400 MHz, CDCh) 5 8.12 (S, IH), 7.29-7.28 (d, IH), 7.23-7.22 (d, IH), 7.05-7.00 (m, IH), 6.08-6.05 (s, 1 H), 5.24 (s, 2H), 4.7- 4.45 (dd, 2H), 3.08 (s, 3H), 1.78-1.76 (d, 3H). LCMS m/z 395 [M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-12-fluoro-10,16-dimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-8,4-(meteno)[l,2]oksazolo[4,3-/i] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila
(Primer 100)
[1002]
Faza1:
[1003]U izmešanirastvor jedinjenja 202(400 mg, 1.13 mmol),jedinjenja 272(234 mg, 1.13 mmol) i DIPEA (437 mg, 3.4 mmol) u DMF (20 mL) se na -35 °C, u atmosferi N2, dodaju HOBt (230 mg, 1.7 mmol) i EDC1 (219 mg, 1.7 mmol). Nakon dodavanja, smeša se meša 24 sata na sobnoj temperaturi. TLC (smeša petrol etar/EtOAc =1:1) pokazuje daje reakcija završena. Smeša se sipa u ledenu vodu (20 mL), ekstrahuje sa EtOAc (20 mL x 5), a kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL x 5), suše preko Na2S04i koncentruju da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel. Rf =0.2, petrol etar/EtOAc = 2:1-1:1) da se dobijejedinjenje 546(400 mg, 75%) kao svetio žuto ulje.
'H NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.68 (s, IH), 7.26-7.21 (m, 2H), 7.07 (s, IH), 7.04-6.98 (m, IH), 5.50-5.46 (m, 1 H), 4.94-4.91 (d, 1 H), 4.74 (s, 2H), 4.80-4.76 (d, 1 H), 3.14 (s, 3H), 1.66-1.65 (d, 3H).
Faza 2:
[1004] Smeša jedinjenja 546(170 mg, 0.358 mmol), KOAc (0.175 g, 1.8 mmol), cataCXium A (15 mg, 0.043 mmol) i Pd(OAc)2(5 mg, 0.022 mmol) ut- AmOH(20 mL) se meša 18 sati na 120 °C. LC-MS pokazuje~30% željenogjedinjenja.Smeša se sipa u ledenu vodu (20 mL), ekstrahuje sa EtOAc (30 mL x 5), a kombinovani organski slojevi se isperu sa slanim rastvorom (5 mL), suše preko Na2S04i koncentruju da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela ( Rf ~ 0.38, petrol etar/EtOAc =3 : 1) da se dobijePrimer 100(21 mg, 15 %) kao žuta čvrsta supstanca.<*>H NMR (400 MHz, CDCh): S 7.92-7.91 (S, 1 H), 7.32-7.26 (m, 1 H), 7.24-7.23 (d, 1 H), 7.07-7.02 (m, 1 H), 6.84 (s, 1 H), 5.72-5.70 (s, 2H), 4.59 (s, 2H), 3.18 (s, 3H), 1.81-1.79 (d, 3H). LCMSmlz394 [M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-12,14-difluoro-2,10,16-trimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2//-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-/i] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila
(Primer 101)
[1005]
Faza 1:
[1006]Rastvorjedinjenja 279(4.24 g, 14.9 mmol) u bezvodnom THF (24 mL) se u kapima
doda u ohlađenu (0 °C) suspenziju NaH (60% u ulju, 746 mg, 18.6 mmol) u bezvodnom THF (24 mL). Smeša se meša 10 min na 0 °C, nakon toga 30 min na sobnoj temperaturi a zatim se odjednom dodarastvor jedinjenja 29(3.14 g, 12.4 mmol) u bezvodnom THF (24 mL). Smeša se meša 18 sati na 60 °C i nakon toga ohladi na RT. Pažljivo se doda slani rastvor (200 mL) i smeša se ekstrahuje sa EtOAc (3 x 200 mL). Organske faze se kombinuju, suše preko MgS04, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Dobijeno ulje se prečisti hromatografijom na koloni (eluenti: heptani/EtOAc od 98:2 do 75:25). Dobijena lepljiva čvrsta supstanca (4.6 g) se prevede u žitku masu u heptanima (-100 mL) u toku 72 sata. Dobijena suspenzija se filtrira i
čvrsta supstanca se suši pod vakuumom da se dobijejedinjenje 547(2.73 g, 48% prinos, 99% čistoće pomoću LC-MS) kao bež prašak.<l>HNMR (400 MHz, DMSO-<fc) 5 7.59 (s, 1 H), 7.55 - 7.42 (m, 1 H), 7.31 (td,J =8.7, 2.8 Hz, 1 H), 6.75 (s, 2H), 6.23 (q,J=6.5 Hz, 1 H), 1.53 (d,J=6.4 Hz, 3H). LCMSmlz455/457 [M+H]<+>.
Faza 2:
[1007] Jedinjenje 547(2.0 g, 4.4 mmol),jedinjenje 137(HC1 so, 974 mg, 4.4 mmol) i DIEA (3.8 mL, 21.9 mmol) se rastvore u toluenu (127 mL). Doda se Pd(PtBu3)2(224 mg, 0.44 mmol) (reakcija postaje crna) i smeša se zagreva 18 sati na 85 °C u atmosferi CO (4 bara). Smeša se ohladi na RT, filtrira kroz ploču arbocela, ispere sa EtOAc (-100 mL) i osnovni rastvori se koncentruju. Dobijeno ulje se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (eluenti heptani/EtOAc od 4:1 do 1:1) da se dobijejedinjenje 548(460 mg, 21% prinos, 89% čistoće pomoću LC-MS) kao bezbojna čvrsta pena.<l>HNMR (400 MHz, DMSO-</6) 8 7.56 (d,J=1.1 Hz, 1 H), 7.44 (m, 1 H), 7.39 - 7.26 (m, 1 H), 7.03 (s, 1 H), 6.78(d, J=4.1 Hz, 2H), 5.98 (q,J=6.5 Hz,1 H), 4.83 ( d, J =15.0 Hz,IH), 4.62 ( d, J=15.0 Hz,IH), 3.96 ( d, J=1.0 Hz, 3H), 2.90 (s, 3H), 1.59(d, J=6.5 Hz, 2H). LCMSm/ z506/508 [M+H]<+>.
Faza3:
[1008] Rastvor jedinjenja 548(230 mg, 0.45 mmol) uterc-amilalkoholu (9 mL) se degasira (3 ciklusa N2/vakuum) na 100 °C. Dodaju se Pd(OAc)2(15 mg, 0.07 mmol), cataCXium A (49 mg, 0.14 mmol) i KOAc (227 mg, 2.3 mmol) i smeša se degasira (3 ciklusa N2/vakuum) na 100 °C. Smeša se nakon toga zagreva 2 sata pod mikrotalasima na 120 °C. Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu, koncentruje pod vakuumom, doda se DCM (50 mL) i suspenzija filtrira. Osnovni rastvori se koncentruju pod vakuumom i dobijeno ulje se prečisti hromatografijom na koloni (eluenti: heptani/EtOAc od 3:1 do 1:1) da se dobije makrociklil kao bež prašak (102 mg, 53% prinos, 99% čistoće pomoću LC-MS). Ovaj prašak se suspenduje u MeOH (~2 mL) i prevede u žitku masu u toku noći. Suspenzija se filtrira i dobijene bele čvrste supstance se pažljivo suše 6 sati pod vakuumom (0.3 mBar) na 80 °C.Primer 101se dobija kao beli prašak (65 mg, 34% prinos, 100% čistoće pomoću LC-MS).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 7.81 (s, 1 H), 7.38(dd, J=9.6, 2.5 Hz, 1 H), 7.29(td, J=9.3, 2.4 Hz, 1 H), 6.79 (s, 2H), 5.94 - 5.73 (m, 1 H), 4.42 (dd,J=13.8, 1.9 Hz, 1 H), 4.22 (d,J =13.6 Hz, 1 H), 4.04 (s, 3H), 2.90 (s, 3H), 1.63 (d,J=6.5 Hz, 3H). LCMS ESmlz426
[M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-12-fluoro-2,10-dimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2^-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-/i] [2,5,11 ]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer 102)
[1009]
Faza 1:
[1010]Urastvor jedinjenja 531(0.2g, 0.54mol),jedinjenja 282(336 mg, 0.81 mmol) i bis-(pinakolato)dibora (407 g, 1.62 mmol) u metanolu (40mL) se dodaju cataCXium A (25 mg, 0.07 mmol) i Pd(OAc)2(16mg, 0.07 mmol). Nakon što se smeša degasira tri puta sa azotom, u gore pomenutu smešu se na sobnoj temperaturi doda rastvor NaOH (65 mg, 1.62 mmol) u vodi (12 mL) u atmosferi gasa azota. Dobijena smeša se degasira tri puta sa gasom azotom i nakon toga refluksuje 16 sati. TLC (smeša petrol etar/EtOAc 3/1) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc (500 mL x 3). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom (100 mL x 2), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel, smeša petrol etar/EtOAc od 10/1 do 5/1) da sedobije jedinjenje 549(400 mg, 75% čistoće, 89%) kao čvrsta braon supstanca. LCMSmlz648 [M+Na]<+>.
Faza 2:
[1011]U izmešanirastvor jedinjenja 549(400 mg, 75% čistoće, 0.48 mmol) u DCM (2 mL) se u kapima, na sobnoj temperaturi, doda~4M rastvor HC1 (g) u dioksanu (10 mL). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije sirovojedinjenje 550,koje se koristi u sledećoj fazi bez ikakvog naknadnog prečišćavanja. LCMSmlz426 [M+H]<+>.
Faza3:
[1012] Smeša jedinjenja 550(~300 mg) i KOH (316 mg, 5.65 mmol) u metanolu (20 mL) se meša 4 sata na sobnoj temperaturi. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. Smeša se sipa u 0.5N rastvor HC1 (20 mL) i ekstrahuje sa EtOAc (30 mL x 5). Kombinovani EtOAc slojevi se suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni (silka gel, smeša petrol etar/EtOAc od 5/1-1/1) da se dobijePrimer 102(53.5 mg, 28%) kao čvrsta braon supstanca.<l>RNMR (400 MHz, CDCb) 5 7.96 (s, IH), 7.32-7.28 (m, 2H), 7.05-7.00 (m, IH), 6.19-6.14 (m, IH), 5.08 (s, 2H), 4.30-4.26 (d, IH), 4.22-4.18 (d, IH), 3.49 (s, 3H), 2.17 (s, 3H). LCMS m/z 394 [M+H]<+>.
Izrada (HR)-8-amino-13-fluoro-ll,17-dimetil-17,18-dihidro-9,5-(meteno)-[l,5]naftiridino[4,3-/i][2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-16(l l//)-ona (Primer 103)
[1013]
Faza1:
[1014]Urastvor jedinjenja7 (0.3 g, 0.81 mmol),jedinjenja 153(400 mg, 1.29 mmol) i bis-(pinakolatodibor) (618 mg, 2.43 mmol) u metanolu (100 mL) se u atmosferi azota,, na sobnoj temperaturi, dodaju cataCXium A (37.8 mg, 0.105 mmol) i Pd(OAc)2(23.7 mg, 0.105 mmol). Nakon što se smeša degasira tri puta sa azotom, doda se NaOH (64.8 mg, 1.62 mmol) u vodi (12 mL). Dobijena smeša se degasira sa azotom tri puta i nakon toga 3 sata refluksuje. TLC (EtOAc) pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se razblaži sa EtOAc (300 mL). Smeša se nakon toga ispere sa slanim rastvorom (100 mL x 2), suši preko Na2S04i koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (DCM/MeOH 20:1, Rf, 0.41) da se dobijejedinjenje 551(400 mg, 88%) kao čvrsta braon supstanca. LCMSmlz308 [M+Na]<+>.
Faza 2:
[1015]Smešajedinjenja 551(400 mg, 0.71 mmol) i NaOH (0.57 g, 14.2 mmol) u metanolu (15 mL) i vodi (2 mL) se meša 3 sata na 40 °C. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak. Ostatak se rastvori sa vodom (20 mL) i ekstrahuje sa MTBE (20 mL). Vodeni sloj se nakon toga zakiseli sa 6N rastvorom HC1 do pH~5. Smeša se zasiti sa čvrstim NaCl a nakon toga ekstrahuje sa EtOAc (20 mL x 5). Kombinovani EtOAc slojevi se suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobijejedinjenje 552(388 mg, 99%) kao žuta čvrsta supstanca. LCMSmlz548
[M+H]<+>.
Faza 3:
[1016]U rastvorjedinjenja 552(388 mg, 0.7 mmol) u dioksanu (5 mL) se u kapima, na sobnoj temperaturi, doda~4M rastvor HC1 (g) u dioksanu (20 mL). Nakon dodavanja, reaktivna smeša se meša 14 sati na sobnoj temperaturi. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. Reaktivna smeša se koncentruje pod vakuumom da se dobije ostatak, koji se tri puta azeotropira sa toluenom da se dobije sirovojedinjenje 553,koje se koristi u sledećoj fazi bez ikakvog naknadnog prečišćavanja. LCMSmlz448 [M+H]<+>.
Faza 4:
[1017]U rastvor HATU (400 mg, 0.313 mmol) u DMF (60 mL) se u kapima, na 0 °C, dodarastvor jedinjenja 553(-0.7 mmol) i DIEA (1.43 g, 11.2 mmol) u DMF (20 mL). Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 1 sat na ovoj temperaturi. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. Smeša se sipa u ledenu vodu (50 mL). Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (40 mL x 5). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak koji se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (DCM/MeOH 20:1 Rf, 0.27) da se dobijePrimer 103(40 mg, 13%) kao beličasta čvrsta supstanca.<*>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 9.01-9.00 (m, 2H), 8.44-8.42 (d, 1 H), 7.85 (s, 1 H), 7.69-7.67 (m, 1 H), 7.37-7.34 (m, 1 H), 7.24-7.22 (m, 2H), 7.02-6.98 (m, 1 H), 5.90-5.88 (m, 1 H), 4.94 (br s, 2H), 4.67-4.47 (dd, 2H), 3.18 (s, 3H), 1.83-1.81 (d, 3H). LCMSmlz430 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-12-fluoro-2,10-dimetil-2,10,15,17-tetrahidro-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-
/i][2,ll,5]benzodioksazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primeri 104,105 i 106)
[1018]
Faza1:
[1019] Urastvor jedinjenja 283(1.48 g, 3.99 mmol) u DCM (25 mL) se dodaju Et3N (0.84 mL, 5.98 mmol) i DMAP (20 mg, 0.163 mmol), a nakon toga tricil hlorid (1.68 g, 5.98 mmol). Reaktivna smeša se meša 16 sati na sobnoj temperaturi. U reaktivnu smešu se doda nova količina tricil hlorida (0.56g, 1.99 mmol) i meša 16 sati na sobnoj temperaturi. Reaktivna smeša se razblaži sa DCM (20 mL) a nakon toga ekstrahuje sa vodom (10 ml) i slanim rastvorom (10 ml). Organski sloj se ukloni i upari nakon sušenja preko anhidrovanog natrijum sulfata. Dobijena žuta čvrsta supstanca se prečisti gasnom hromatografijom preko silika gela (8% EtOAc u toluenu) da se dobijejedinjenje554 kao bezbojna čvrsta supstanca (1.67 g, 68% prinos).<J>H NMR (400 MHz, CDCh) 8 7.95(dd, J=8.7, 5.8 Hz, 1 H), 7.44 - 7.16 (m, 17H), 7.01(ddd, J=8.7, 7.7, 2.7 Hz, 1 H), 6.89(qd,7=6.4, 1.3 Hz, 1 H), 6.36 (s, 1 H), 3.93 (s, 3H), 1.72(d, J=6.4 Hz, 3H).
Faza 2:
[1020] Jedinjenje 554(1.6 g, 2.60 mmol) se rastvori u bezvodnom THF (15 mL) i ohladi na 0 °C u atmosferi azota. Polako se, u toku 15 minuta, dodaje 1 M rastvor L1AIH4u THF (2.0 mL, 2.0 mmol) i reaktivna smeša meša 5 minuta na 0 °C. Reaktivna smeša se neutrališe pažljivim dodavanjem H2O (1 mL) i meša 10 minuta, a zatim se dodaju EtOAc (40 mL) i MgS04. Soli se izdvoje filtriranjem i filtrat se upari da se dobije bledo žuto ulje, koje se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (heptani/EtOAc, 5:1) da se dobijejedinjenje 555kao bezbojna čvrsta supstanca (1.13 g, 75% prinos).<!>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.38 - 7.20 (m, 16H), 7.09 (dd,J=9.7, 2.7 Hz, 1 H), 6.96 (td,J=8.3, 2.7 Hz, 1 H), 6.42 (s, 1 H), 6.31(qd, J= 6.5,1.6 Hz,1 H), 4.92 (d, J=12.1 Hz, 1 H), 4.68(dd, J=12.3,7.1 Hz, 1 H), 3.01 (d, .7=8.4 Hz, 1 H), 1.70(d, .7=6.5 Hz, 3H). LCMS ES mlz584/586 [M+H]<+>.
Faza3:
[1021]Urastvor jedinjenja 555(1.1 g, 1.189 mmol) u bezvodnom THF (15 mL) se u porcijama, na 0 °C, u toku 3 minuta, polako dodaje NaH (60%, 0.15g, 3.78 mmol). Reakcija se meša 30 minuta na 0 °C a nakon toga se polako doda rastvorjedinjenja 158(0.452 g, 2.26 mmol) u bezvodnom THF (5 mL). Reakcija se ostavi da se meša na sobnoj temperaturi u toku noći. Reaktivna smeša se pažljivo neutrališe sa vodom (10 mL) a nakon toga ekstrahuje sa EtOAc (2 x 20 mL). Organska faza se ukloni, ispere sa vodom (10 mL) i slanim rastvorom (10 mL). Nakon sušenja preko anhidrovanog natrijum sulfata EtOAc ekstrakt se upari. Dobija se sirovi produkt kao svetio žuta guma koja se prečisti hromatografijom na koloni silika gela koristeći 15% aceton u heptanu da se dobijejedinjenje 556kao bezbojna čvrsta supstanca (1.06g, 80% prinos).<l>RNMR (400 MHz, CDCb) 5 7.36 - 7.19 (m, 16H), 7.14 (dd,J=9.8, 2.7 Hz, 1 H), 6.94 (td,J=8.3, 2.7 Hz, 1 H), 6.82 (s, 1 H), 6.32 - 6.22 (m, 1 H), 5.05 (d,J =11.5 Hz, 1 H), 4.65 - 4.42 (m, 3H), 4.03 (s, 3H), 1.64 (d,J=6.5 Hz, 3H).
Faza 4:
[1022]Reakcija se izvodi u dve serije koristećijedinjenje 556(0.5 g, 0.71 mmol). U mikrotalasnu bočicu (20 ml zapremine) sesipaju jedinjenje 556(0.5g, 0.71 mmol), KOAc (0.35g, 3.55 mmol), cataCXium A (0.0763 g, 0.213 mmol) i^-amil alkohol (degasiran, 14.5 ml). Reaktivna smeša se dalje 3 minuta degasira a nakon toga se doda Pd(OAc)2. Bočica se zatvori i 2 sata zrači pod mikrotalasima na 120 °C. Reaktivne smeše se kombinuju, razblaže sa EtOAc (50 ml) i filtriraju kroz celite da se ukloni neorganski deo. Bistar žuti filtrat se ispere sa vodom (2x10 ml), slanim rastvorom (20 ml), suši preko anhidrovanog natrijum sulfata i upari da se dobije sirovi produkt kao žuta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca se prečisti hromatografijom na koloni silika gela koristeći 25% aceton u heptanu da se dobijejedinjenje 557kao svetio žuta čvrsta supstanca (0.483 mg, 54.6% prinos).<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.77 (s, 1 H), 7.42 - 7.19 (m, 17H), 6.94(td, J=8.2, 2.7 Hz, 1 H), 6.72(qd, J= 6.7, 1.7 Hz, 1 H), 6.52 (s, 1 H), 5.35 - 5.23 (m,1 H), 4.48 (d, J=12.6 Hz,1 H), 4.24 (d, J =9.6 Hz, 1 H), 4.11(d, J=9.6 Hz, 1 H), 3.97 (s, 3H), 1.65(d, J=6.7 Hz, 3H). LCMS ESmlz623 [M+H]<+>.
Faza 5:
[1023]Suspenzijajedinjenja 557(0.476 g, 0.76 mmol) u 50% rastvoru AcOH u vodi (20 ml) se zagreva 4h na 80 °C. Reaktivna smeša se ohladi na sobnu temperaturu i razblaži sa vodom (20 ml). Reaktivna smeša se pažljivo neutrališe do slabo baznog pH (pH=8) sporim dodavanjem čvrstog NaHC03u porcijama. Dobijena reaktivna smeša se ekstrahuje sa EtOAc (2x 20ml). Organska faza se ukloni, ispere sa vodom (5 ml) i slanim rastvorom (10 ml). Bistar žuti EtOAc ekstrakt se izdvoji i upari nakon sušenja preko anhidrovanog natrijum sulfata. Dobija se sirovi produkt kao svetio žuta čvrsta supstanca koja se prečisti hromatografijom na koloni silika gela, koristeći 25% aceton u heptanu, da se dobijePrimer 104kao bezbojna čvrsta supstanca (0.183 mg, 63%).<l>KNMR (400 MHz, DMSO-^e) 5 7.84 (s, IH), 7.49 (dd,J =10.2, 2.8 Hz, 1 H), 7.38 (dd,J= 8.4, 5.9 Hz, 1 H), 7.07 (td,J=8.4, 2.8 Hz, 1 H), 6.78 (s, 2H), 6.61 (qd,J=6.7, 1.8 Hz,IH), 5.17 (d, J=12.3 Hz,IH), 4.46 (d, J=12.3 Hz, IH), 4.32(d, J=9. 9 Hz, 1 H), 4.02 (d, 1 H), 3.98 (s, 3H), 1.60(d, J=6.6 Hz, 3H). LCMS ESmlz381
[M+H]<+>.
[1024]Asimetrično razdvajanje se izvodi preparativnom SFC na Whelk-01 (R,R) (250 x 4.6 mm I.D., 3 mikrona veličina čestice) koloni, uz eluiranje sa 20% metanola u atmosferi CO pod pritiskom od 140 bara i brzinom protoka od 3 mL/min. Rt(p;k.i) = 3.77 minuta i Rt(pik.2) = 4.95 minuta. Dobija se Pik 1 kao bela čvrsta supstanca (59 mg, 20%) i Pik 2 kao bela čvrsta supstanca (58 mg, 20%).Primer 105 (Pik1): > 99% ee.<l>K NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 7.84 (s, 1 H), 7.49 (dd,J =10.2, 2.8 Hz, 1 H), 7.38 (dd,J =8.4, 5.9 Hz, 1 H), 7.07 (td,J=8.4, 2.8 Hz, 1 H), 6.78 (s, 2H), 6.61 (qd,J=6.7, 1.8 Hz,IH), 5.17(d, J=12.3 Hz,IH), 4.46 (d,J=12.3 Hz,IH), 4.32 ( d, J =9. 9 Hz, 1 H), 4.02 (d, 1 H), 3.98 (s, 3H), 1.60 (d,J=6.6 Hz, 3H). LCMS APCImlz381
[M+H]<+>.
Primer 106 (Pik 2):~99% ee. 'HNMR (400 MHz, DMSO-</6) 8 7.84 (s, 1 H), 7.49 (dd,J =10.2, 2.8 Hz, 1 H), 7.38(dd, J=8.4, 5.9 Hz, 1 H), 7.07(td, J=8.4, 2.8 Hz, 1 H), 6.78 (s, 2H), 6.61 (qd,J=6.7,1.8Hz,lH), 5.17(d, J=12.3 Hz,IH), 4.46 (d, J=12.3 Hz,IH), 4.32 (d,J =9.9 Hz, 1 H), 4.02 (d, 1 H), 3.98 (s, 3H), 1.60 (d,J =6.6 Hz, 3H). LCMS APCImlz381
Izrada 7-amino-12-fluoro-2-metil-2,10,15,17-tetrahidro-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-
h][2,ll,5]benzodioksazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer 107)
[1025]
Faza 1:
[1026]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 104se koristi za izradujedinjenja 558(1.77 g, 38%) kao žute čvrste supstance.<*>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 8.05 (dd,J=8.7, 5.8 Hz, IH), 7.39 - 7.13 (m, 17H), 7.06 (td,J=8.3, 2.7 Hz, IH), 6.37 (s, 1 H), 5.83 (s, 2H), 3.83 (s, 3H).
Faza 2:
[1027]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 104se koristi za izradujedinjenja 559(0.084 g, 50%) kao bezbojne čvrste supstance (835 mg, 50% prinos).<l>KNMR (400 MHz, CDCb) 5 7.39 (dd,J=8.5, 5.7 Hz, IH), 7.35 (s, 1 H), 7.33 - 7.14 (m, 16H), 7.03 (td,J=8.3, 2.7 Hz, 1 H), 6.44 (s, 1 H), 5.52 (s, 2H), 4.76 (d,J=5.7 Hz, 2H), 2.01 (t,J=5.7 Hz, 1 H). LCMS ESmlz570/572 [M+H]<+>.
Faza 3:
[1028]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimer 104se koristi za izradujedinjenja 560(0.77 g, 76%) kao bezbojne čvrste supstance.<*>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.39 - 7.14 (m, 18H), 7.01 (td,J= 8.3, 2.7 Hz, 1 H), 6.82 (s, 1 H), 6.35 (s, 1 H), 5.48 (s, 2H), 4.64 (s, 2H), 4.51 (s, 2H), 4.00 (s, 3H). LCMS ESmlz689/691 [M+H]<+>.
Faza 4:
[1029]Postupak opisan u fazi 4 zaPrimer 104se koristi za izradujedinjenja 561(0.31 g, 50%) kao žute čvrste supstance. 'NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 7.67 (dd,J=10.2, 2.8 Hz, 1 H), 7.55 (s, IH), 7.47 -7.16 (m, 16H), 7.10(td, J=8.5, 2.8 Hz, IH), 6.19 - 6.06 (m, IH), 5.38 - 5.04 (m, 1 H), 4.52 - 4.38 (m, 1 H), 4.37 - 4.23 (m, 1 H), 4.08 - 3.90 (m, 4H). LCMS ESmlz609 [M+H]<+>.
Faza 5:
[1030]Postupak opisan u fazi 5 zaPrimer 104se koristi za izraduPrimera 107(143 mg, 82%) kao bledo žute čvrste supstance.<*>H NMR (400 MHz,DMSO-fife)5 7.85 (s, IH), 7.48 - 7.39 (m, 2H), 7.13(td, J=8.5, 2.9 Hz, 1 H), 6.82 (s, 2H), 6.23 - 5.95 (m, 1 H), 5.44 - 5.17 (m, 1 H), 5.16 - 4.90 (m, 1 H), 4.61 - 4.21 (m, 2H), 4.00 (s, 3H). LCMS ESmlz 367[M+H]<+>.
Izrada 8-amino-3-fluoro-5,13-dimetil-13,15-dihidro-5/T-7,ll-(azeno)imidazo[l,2-
k]pirazolo[4,3-/i][2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-12-karbonitrila (Referentni
Primeri 108/109)
[1031]
Faza1:
[1032] Jedinjenje 166(1.5 g, 2.96 mmol) se rastvori u DCM (7 mL) a nakon toga se u kapima u ovaj rastvor doda TFA (15 mL). Smeša se meša 20 sati na sobnoj temperaturi (TLC pokazuje punu konverziju). Reakcija se koncentruje pod vakuumom, razblaži sa EtOAc (100 mL) i ispere sa zasićenim vodenim rastvorom NaHC03(100 mL, nakon toga 50 mL). Vodena faza se ekstrahuje sa EtOAc (2 x 50 mL). Organske faze se kombinuju, suše preko MgS04, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Dobijeno ulje se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (eluenti heptani/EtOAc 1:1 do 1:2) da sedobije jedinjenje 562kao čvrsta pena (919 mg, 82% prinos).lK NMR(400 MHz, DMSO-^e) 5 12.42 (s, IH), 7.70(dd, J=10.5, 2.8 Hz, 1 H), 7.62 (dd,J=8.7, 5.7 Hz, IH), 7.49 (s, IH), 7.23 (td,J=8.5, 2.8 Hz, 2H), 7.13 (s, 1 H), 7.03 - 6.90 (m, 1 H), 6.66 (s, 2H), 1.64(d, J=6.3 Hz, 3H).
Faza 2:
[1033] Jedinjenje 562(919 mg, 2.43 mmol),jedinjenje 158(513 mg, 2.56 mmol) i K2CO3(503 mg, 3.64 mmol) se izmešaju u DMF (50 mL). Smeša se meša 20 sati na sobnoj temperaturi (LC-MS pokazuje punu konverziju). Doda se voda (300 mL) i ekstrahuje sa Et20 (5 x 100 mL). Organske faze se kombinuju, suše preko MgS04, filtriraju i koncentruju pod vakuumom. Dobijeno ulje se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (eluenti heptani/EtOAc 1:1 do 0:1).Jedinjenje 563se dobija kao beli prašak (805 mg, 67% prinos).<l>KNMR (400 MHz,DMSO-^e)5 7.66 (dd,J=10.2, 2.8 Hz, IH), 7.53 (s, IH), 7.42 - 7.30 (m, 2H), 7.22 (td,J=8.4, 2.7 Hz, 1 H), 7.07 (d,J=1.3 Hz, 1 H), 6.96 (s, 1 H), 6.69 (s, 2H), 5.85 (q,J=6.3Hz,1 H), 5.14 ( d, J=15.7 Hz, 1 H), 4.98(d, J=15.7 Hz, 1 H), 3.90 (s, 3H), 1.52(d, J=6.4 Hz, 3H). LCMSmlz497/499 [M+H]<+>.
Faza3:
[1034]Identična reakcija se izvodi četiri puta zbog ograničene zapremine mikrotalasnih bočica.Jedinjenje 563(200 mg, 0.4 mmol) se izmeša sa KOAc (197 mg, 2.0 mmol) uterc-amil alkoholu (10 mL). Reakcija se degasira 30 minuta (propuštanjem azota u mehurićima) a nakon toga se dodaju Pd(OAc)2(18 mg, 0.08 mmol) i cataCXium A (58 mg, 0.16 mmol). Reakcija se ponovo degasira 30 minuta, mikrotalasna bočica zatvori i zagreva 2 sata na 120 °C (LC-MS pokazuje 96% od očekivanog produkta). Reakcija se ohladi na sobnu temperaturu, filtrira kroz celite ploču i ispere sa EtOAc (100 mL). Filtrat se ispere sa vodom (50 mL) i slanim rastvorom (50 mL), suši preko MgS04, filtrira i koncentruje pod vakuumom. Dobijeno ulje se kombinuje sa drugim reakcijama i prečisti hromatografijom na koloni silika gela (eluenti heptani/EtOAc od 1:2 do 0:1). SmešaReferentnogPrimera108iReferentnogPrimera109se dobija kao bež prašak (320 mg, 48% prinos),<*>H NMR (400 MHz, DMSO-^e) 5 7.70 (s, 1 H), 7.58 (dd,J=10.0, 2.8 Hz, 1 H), 7.46 (dd,J=8.5, 5.7 Hz, 1 H), 7.24 (td,J =8.5, 2.8 Hz, IH), 7.01 (s, 2H), 6.75 (s, 2H), 5.71 -5.46 (m, 1H), 5.00 ( d, J =14.1 Hz, 1 H), 4.56(d, J=14.1 Hz, 1 H),4.08 (s, 3H),1.66 (d, J= 6.6 Hz, 3H). LCMS mlz Ml [M+H]+.Asimetrično razdvajanje se izvodi pomoću 32mg materijala preparativnom SFC na Whelk-01 (R,R) (250 x 4.6 mm I.D., 3 mikrona veličina čestice) koloni, uz eluiranje sa 30% metanola u atmosferi CO2pod pritiskom od 140 bara sa brzinom protoka od 3 mL/min. Rt(piki) = 3.00 minuta i Rt(pik2) = 3.86 minuta da se dobije Pik 1 kao bela čvrsta supstanca (14.4 mg) i Pik 2 kao bela čvrsta supstanca (14.7 mg).Referentni Primer 108 (Pik 1):> 99% ee. 'HNMR (400 MHz, DMSO-</6) 8 7.71 (s, IH), 7.58 (dd,J=2.6, 9.9 Hz, 1 H), 7.46 (dd,J=5.8, 8.6 Hz, 1 H), 7.24 (dt,J=2.8, 8.6 Hz, 1 H), 7.01 (s, 2H), 6.73 (s, 2H), 5.62 - 5.51 (m, IH), 5.00(d, J=14.1 Hz, IH), 4.56( d, J=13.8 Hz, IH), 4.08 (s, 3H), 1.66 (d,J =6.5 Hz, 3H). LCMS APCIm/ z417 [M+H]<+>.Referentni Primer 109 (Pik 2):- 95% ee.<*>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 7.71 (s, IH), 7.58 (dd, J=2.6, 9.9 Hz, 1 H), 7.46 (dd,J=5.8, 8.6 Hz, 1 H), 7.24 (dt,J=2.6, 8.5 Hz, 1 H), 7.01 (s, 2H), 6.73 (s, 2H), 5.62 - 5.49 (m, IH), 5.00(d, J=14.1 Hz, IH), 4.56( d, J =14.1 Hz, IH), 4.08 (s, 3H), 1.66 (d,J=6.5 Hz, 3H). LCMS APCImlz417 [M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-3-etil-12-fluoro-10,16-dimetil-16,17-dihidro-8,4-(meteno)[l,2]tiazolo[4,3-/i] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer
110)
[1035]
Faza1:
[1036]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 100se koristi za izradujedinjenja 564kao žute čvrste supstance (0.5 g, 63%). LCMSmlz493 [M+H]<+>.
Faza 2:
[1037]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 100se koristi za izradu Primera110kao žute čvrste supstance (16.8 mg, 10%).<l>RNMR (400 MHz, Metanol-^) 5 7.59-7.56 (m, IH), 7.48-7.42 (m, 3H), 7.19-7.14 (m, IH), 5.99-5.98 (d, IH), 4.56-4.47 (m, 2H), 3.18 (s, 3H), 3.09-2.99 (m, 2H), 1.88-1.87 (d, 3H), 1.38-1.35 (t, 3H). LCMSmlz413 [M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-12-fluoro-3-metoksi-10,16-dimetil-16,17-dihidro-8,4-(meteno)[l,2]oksazolo[4,5-h] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer
111)
[1038]
Faza1:
[1039]Urastvor jedinjenja7 (200 mg, 0.54 mmol) u anhidrovanom DMSO (2 mL) se dodaju bis-(pinakolato)dibor (635 mg, 2.5 mmol), Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(40 mg, 0.054 mmol) a nakon toga KOAc (178 mg, 1.82 mmol) i smeša se meša u atmosferi azota i zagreva 1 sat na 80 °C. Smeša se ohladi, doda se EtOAc (40 mL) i filtrira kroz arbocel. Filtrat se ispere sa vodom, nakon toga sa slanim rastvorom, a zatim se organski sloj ekstrahuje sa 1 M vodenim rastvorom HC1 (2x). Vodena faza se ohladi na ledu, neutrališe do pH 7 pažljivim dodavanjem 1 M rastvora NaOH i dobijeni precipitat se ekstrahuje sa EtOAc (2x). Kombinovane organske supstance se suše preko natrijum sulfata, filtriraju i rastvarač se ukloni pod vakuumom. Uljani ostatak se ponovo rastvori u EtOAc (1 mL) i doda se heptan (15 mL) da se formira beličasti precipitat. Rastvarač se ukloni pod vakuumom da se dobije 115 mg (52%)jedinjenja 565.<*>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 7.94 (dd, 1 H), 7.74 (d, 1 H), 7.67 (dd, 1 H), 7.25 (td, 1 H), 6.87 (d, Hz, 1 H), 6.35 (s, 2H), 6.26 (q, 1 H), 3.91 (s, 3H), 1.57 (d, 3H), 1.21 (d, 12H). LCMSmlz335 [M+H]<+>.
Faza 2:
[1040] Rastvor jedinjenja 299(1.26g 3.92 mmol) i kalijum karbonata (811 mg, 5.88 mmol) u dimetoksietanu (20 mL) i vodi (15 mL) se zagreva na 40 °C i degasira propuštanjem azota u mehurićima u toku 20 minuta. U smešu se nakon toga doda rastvorjedinjenja 565(68mg, 0.16 mmol) u degasiranom dimetoksietanu (1 mL) a zatim se doda Pd(PPh3)4. Smeša se meša u atmosferi azota i dalje zagreje do 100 °C. Za to vreme, u intervlima od po 5 minuta, u smešu se još 4 puta dodajejedinjenje 565(68 mg, 0.16 mmol) u degasiranom dimetoksietanu (1 mL) a kada temperatura reakcije dostigne 100 °C, u intervalima od po 5 minuta u smešu se još 7 puta dodajejedinjenje 565(68 mg, 0.16 mmol) u degasiranom dimetoksietanu (1 mL).
(Ukupno 820 mg, 1.96 mmoljedinjenja 565se doda u 12 mL DME). Nakon završenog dodavanja, smeša se meša 1.5 h na 100 °C u atmosferi azota, a nakon toga ohladi. Doda se EtOAc (120 mL), nakon toga se smeša ispere sa vodom (2x 50 mL), suši preko natrijum sulfata, filtrira i rastvarač se ukloni pod vakuumom. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom na koloni silika gela i uz eluiranje sa smešom heptan: EtOAc 100:0 - 30:70 dobija sejedinjenje 566kao bezbojna čvrsta supstanca (750 mg, 73%).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-de)5 8.02 - 7.93 (m, 1 H), 7.57 - 7.46 (m, 2H), 7.25 (td, 1 H), 6.68 (m, 1 H), 6.24 (q, 1 H), 6.13 (s, 2H), 4.59 - 4.12 (m, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.84 (s, 3H), 2.70 (m, 3H)<*>, 1.61(d, J=6.2 Hz, 3H), 1.42-1.08 (m, 9H). LCMSm/ z531 [M+H]<+>.
Faza 3:
[1041]Urastvor jedinjenja 566(1.05 g, 1.98 mmol) u metanolu (25 mL) se na sobnoj temperaturi doda rastvor natrijum hidroksida (1.2 g, 30 mmol) u vodi (3.5 mL) i smeša meša 18 sati na sobnoj temperaturi. U smešu se doda voda (100 mL), a nakon toga se smeša ispere sa TBME (10 mL). Vodeni sloj se podesi na pH 4 pažljivim dodavanjem 1 N rastvora HC1 i formira se precipitat. Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (80 mL), a nakon toga se u vodeni sloj doda natrijum hlorid (20g), koji se dalje ekstrahuje sa EtOAc (80 mL). Kombinovani organski slojevi se suše preko natrijum sulfata, filtriraju i rastvarač se ukloni pod vakuumom da se dobijejedinjenje 567kao bledo žuta čvrsta supstanca (1.02 g, 100%).<l>R NMR (400 MHz, DMSO-^e) 5 7.99 (dd, 1 H), 7.54 - 7.44 (m, 2H), 7.21 (td, 1 H), 6.72 (d, 1 H), 6.37 (q, 1 H), 6.17 (s, 2H), 4.81 - 3.95 (m, 2H), 3.84 (s, 3H), 2.73-2.66 (m, 3H), 1.60 (d, 3H), 1.36 -1.07 (m, 9H). LCMSm/ z517 [M+H]<+>.
Faza 4:
[1042]Urastvor jedinjenja 567(1.02 g, 1.98 mmol) u metanolu (10 mL) i dioksanu (10 mL) se doda 4N rastvor HC1 u dioksanu (6 mL) i smeša se meša 1.5 sat na 45 °C u atmosferi azota. Rastvarač se ukloni pod vakuumom, a nakon toga dalje azeotropira sa dioksanom (2 x 25 mL) da se dobijejedinjenje 568(1.2 g, 100%) kao bledo smeđa čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca se dalje ne prečišćava i prenese se u sledeću reakciju.<*>H NMR (400 MHz, DMSO-de)5 9.67 (s, 2H), 8.28 - 8.18 (m, IH), 8.05 (dd, IH), 7.84 (d, IH), 7.55 (dd, IH), 7.29 (td, IH), 7.10 (d, IH), 6.56 (q, IH), 4.28 (s, 2H), 3.87 (s, 3H), 2.55 (s, 3H), 1.66 (d, 3H). LCMS
mlz Ali [M+H]+.
Faza 5:
[1043]U suspenzijujedinjenja 568(1.1 g, 1.654 mmol zbog nečistoća) u acetonitrilu (1.05 L) se na sobnoj temperaturi doda DIEA (1.92g, 2.59 mL, 14.88 mmol) i smeša se prevede u rastvor. U smešu se doda HATU (660 mg, 1.74 mmol) i smeša se meša 1 sat u atmosferi azota na sobnoj temperaturi. Rastvarač se ukloni pod vakuumom, nakon toga se ostatak ponovo rastvori u EtOAc (200 mL), ispere sa vodom (3 x 40 mL), slanim rastvorom (20 mL), suši preko natrijum sulfata, filtrira i rastvarač se ukloni pod vakuumom. Prečišćavanjem ostatka hromatografijom na koloni silika gela i uz eluiranje sa EtOAc, nakon toga azeotropiranjem frakcija sa heksanom (30 ml), dobija se željeni produkt kao bezbojna čvrsta supstanca.<*>H i<19>F NMR ukazuje na tragove PFćsoli, pa se materijal ponovo rastvori u EtOAc (100 mL), ispere sa 10% vodenim rastvorom Na2C03(3x 40 mL), slanim rastvorom (2 x 20 mL), suši preko natrijum sulfata, filtrira i rastvarač se ukloni pod vakuumom. Nakon toga se ostatak ponovo rastvori u EtOAc (2 mL), doda se heksan (30 mL) i formira se beli precipitat. Rastvarač se ukloni pod vakuumom da se dobijePrimer 111kao bezbojna čvrsta supstanca
(323 mg, 45%).<l>K NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 7.58 (dd,J=10.3, 2.7 Hz, 1 H), 7.55 (d,J =1.8 Hz, 1 H),7.44(dd, J= 8.6,5.7 Hz, 1 H), 7.21(td, J= 8.4, 2.7 Hz, 1 H), 6.67 (d, J=1.8 Hz, 1 H), 6.07 (s, 2H), 5.60 - 5.49 (m, 1 H), 4.52 (d,J=15.2 Hz, 1 H), 4.33 (d,J=15.2 Hz, 1 H), 3.98 (s, 3H), 3.03 (s, 3H), 1.66 (d,J=6.2 Hz, 3H). LCMS ESmlz399 [M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-3-etil-12-fluoro-10,16-dimetil-16,17-dihidro-8,4-(meteno)|l,2]tiazolo|4,5-h][2,5,11]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer
112)
[1044]
Faza1:
[1045]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 100se koristi za izradujedinjenja 569(0.4 g, 58%) kao žute čvrste supstance. LCMS ESmlz493 [M+H]<+>.
Faza 2:
[1046]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 100se koristi za izraduPrimera 112(12.5 mg, 7%) kao bele čvrste supstance.<*>NMR (400 MHz, Metanol-dt) 5 7.60-7.57 (m, IH), 7.46 (s, IH), 7.39-7.36 (m, IH), 7.1-7.09 (d, IH), 7.02-7.01 (d, IH), 5.85-5.84 (d, IH), 4.73-4.52 (m, 2H), 3.22 (s, 3H), 2.91-2.87 (d, 2H), 1.82-1.81 (d, 3H), 1.29-1.26 (t, 3H). LCMS ESmlz413
[M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-12 fluoro-3-metoksi-l,10,16-trimetil-16,17-dihidro-lff-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-/i] [2,5,ll]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10/7)-ona (Primer 113)
[1047]
Faza 1:
[1048]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 86 i Primer 87se koristi za izradujedinjenja 570(1.4 g, 58%) kao braon čvrste supstance.<l>RNMR (400 MHz, CDCh) 5 7.99-7.95 (dd, IH), 7.48 (s, 1 H), 7.21-7.18 (dd, 1 H), 6.94-6.89 (m, 1 H), 6.53-6.52 (d, 1 H), 6.31-6.26 (dd, 1 H), 4.73 (s, 2H), 3.87-3.83 (t, 3H), 3.70 (s, 3H), 3.59 (s, 3H), 2.27 (s, 3H), 1.61-1.57 (t, 3H), 1.39 (s, 9H).
Faza 2:
[1049]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 86iPrimer 87se koristi za izradujedinjenja 571(1.0 g, 83%) kao žute čvrste supstance. LCMS ESmlz530 [M+H]<+>.
Faza 3:
[1050]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimer 86iPrimer 87se koristi za izradujedinjenja 572,koje se direktno koristi u sledećoj fazi. LCMSmlz430 [M+H]<+>.
Faza 4:
[1051]Postupak opisan u fazi 4 zaPrimer 86iPrimer 87se koristi za izraduPrimera 113kao beličaste čvrste supstance (380 mg, 49%).<J>H NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.76 (d, IH), 7.25-7.22 (m, IH), 7.14-7.12 (m, IH), 6.94-6.92 (d, IH), 6.74-6.73 (d, IH), 5.61-5.57 (m, IH), 4.64 (s, 2H), 4.42-4.21 (dd, 2H), 3.87-3.84 (d, 3H), 3.80-3.67 (s, 3H), 3.09 (s, 3H), 1.70-1.69 (d, 3H). LCMS ESmlz412 [M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-12-fluoro-l,10,16-trimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-l^-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-/i][2,5,ll]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer
114)
[1052]
Faza1:
[1053]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 88se koristi zaizradu jedinjenja 573(600 mg, 58%) kao braon čvrste supstance.<l>HNMR (400 MHz, CDCb) 5 8.04-7.99 (m, 1 H), 7.57-7.56 (d, 1 H), 7.24 (s, 1 H), 7.03-6.97 (m, 1 H), 6.63-6.62 (d, 1 H), 6.42-6.40 (m, 1 H), 5.01 (s, 2H), 4.54-4.31 (m, 2H), 3.99-3.95 (d, 3H), 3.94-3.86 (m, 3H), 2.307 (s, 3H), 1.69-1.64 (d, 3H), 1.29 (s, 9H)
Faza 2:
[1054]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 88se koristi zaizradu jedinjenja 574,koje se koristi u sledećoj fazi bez ikakvog naknadnog prečišćavanja. LCMSmlz439 [M+H]<+>.
Faza 3:
[1055]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimer 88se koristi zaizradu jedinjenja 575(320 mg, 75%) kao braon čvrste supstance. LCMSmlz425 [M+H]<+>.
Faza4:
[1056]Postupak opisan u fazi 4 zaPrimer 88se koristi za izraduPrimera 114(24.1 mg, 8%) kao bele čvrste supstance.<l>K NMR (400 MHz, CDCb) 5 7.89 (s, 1 H), 7.33-7.30 (d, 1 H), 7.26-7024 (m, IH), 7.19-7.18 (m, IH), 7.02-7.00 (m, IH), 5.71-5.70 (m, IH), 4.84 (s,
2H), 4.59-4.37 (m, 2H), 4.10 (s, 3H), 3.16 (s, 3H), 1.79-1.64 (d, 3H). LCMSmlz407 [M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-12-fluoro-l,10,16-trimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-l^-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-/i][2,5,ll]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitri]a (Primer 115)
[1057]
Faza 1:
[1058]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 88se koristi zaizradu jedinjenja 577(400 mg, 78%) kao braon čvrste supstance. LCMSmlz562 [M+Na]<1>.
Faza 2:
[1059]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 88se koristi zaizradu jedinjenja 578,koje se koristi u sledećoj fazi bez ikakvog naknadnog prečišćavanja. LCMSmlz440 [M+H]<+>.
Faza 3:
[1060]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimer 88 sekoristi zaizradu jedinjenja 579(300 mg, 65% čistoće, 57%) kao braon čvrste supstance. LCMSmlz426 [M+H]<+>.
Faza 4:
[1061]Postupak opisan u fazi 4 zaPrimer 88 sekoristi za izraduPrimera 115(61.5 mg, 33%) kao bele čvrste supstance. lR NMR (400 MHz, CDCh) 5 8.17 (s, IH), 7.30-7.22 (m, IH), 7.21-7.19 (m, IH), 7.02-6.97 (m, IH), 6.01-5.98 (m, IH), 5.02 (s, 2H), 4.76-4.24 (dd, 2H), 4.08 (s, 3H), 3.02 (s, 3H), 1.76-1.74 (d, 3H). LCMS ESmlz408 [M+H]<+>.
Izrada (lR)-4-amino-19-fluoro-9-metoksi-l,15-dimetil-14,15-dihidro-177-3,7:8,12-di(meteno)-2,5,ll,15-benzoksatriazaciklooctadecin-16(13H)-ona (Primer 116)
[1062]
Faza1:
[1063] Jedinjenje 458(475 mg, 0.77 mmol),jedinjenje 314(280 mg, 0.81 mmol) i CsF (351 mg, 2.3 mmol) se rastvore u smeši toluen/H20 (6.6 mL, 10:1). Rastvor se zagreva na 60 °C i degasira (3 ciklusa N2/vakuum). Doda se Pd(dppf)Ci2.CH2Ci2(69 mg, 0.08 mmol), smeša se degasira (3 ciklusa N2/vakuum) i zagreva 18 sati na 100 °C. Smeša se ohladi na sobnu temperaturu, nakon toga filtrira kroz ploču silika gela a nakon toga ispere sa EtOAc (-100 mL). Faze se razdvoje i vodena faza se ekstrahuje sa EtOAc (2 x 50 mL). Kombinovane organske faze se suše preko MgSCn, filtriraju i koncentruju pod vakuumom da se dobije braon ulje, koje se prečisti hromatografijom na koloni silika gela (eluent heptani/EtOAc od 1:1 do 0:1).Jedinjenje 580se dobija kao narandžasta čvrsta pena (870 mg, 57% prinos).<J>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 8.33 (s, IH), 8.17 (d,J=6.8 Hz, 1 H), 8.05 (dd,J=8.8, 5.7 Hz, 1 H), 7.46 -7.16 (m, 5H), 6.35(d, J=6.3 Hz, 1 H), 3.87 (d, J= 1.1 Hz, 3H), 3.69 (s, 3H), 3.47 (q,J=6.4 Hz, 2H), 2.86 (t,J=6.8 Hz, 2H), 2.76 (s, 2H), 1.57 (d,J =6.2 Hz, 3H), 1.43 (s, 16H), 1.34-0.92 (m, 10//). LCMS ESmlz755 [M+H]<+>.
Faza 2:
[1064] Jedinjenje 580(876 mg, 1.16 mmol) se rastvori u DCM (6 mL) i rastvor se ohladi na 0 °C. U kapima se doda 4 M rastvor HC1 u dioksanu (5.8 mL). Smeša se meša 18 sati na sobnoj temperaturi i nakon toga koncentruje pod vakuumom. HC1 sojedinjenja 581se dobija kao bela čvrsta supstanca (713 mg, 100%) čistoće pomoću LC-MS) i koristi u sledećoj fazi bez naknadnog prečišćavanja.<l>KNMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 9.48-8.90 (m, 2H), 8.38 (d,J =37.4 Hz, 3H), 7.98-7.76 (m, 2H), 7.60 (s, 1 H), 7.48 (dd,J=10.2, 2.6 Hz, 1 H), 7.32 (d,J =1.5 Hz, 1 H), 7.18 (td,J=8.4, 2.6 Hz, 1 H), 6.30 (q,J =6.2 Hz, 1 H), 3.73 (s, 3H), 3.64 (s, 3H), 3.17(d, J=6.3 Hz, 4H), 2.41(t, J=5.2 Hz, 3H), 1.52(d, J=6.1 Hz, 3H). LCMS ESmlz455 [M+H]<+>.
Faza 3:
[1065] Jedinjenje 581(713 mg, 1.16 mmol) i KOH (520 mg, 9.3 mmol) se rastvore u MeOH (12.3 mL) koristeći ultrazvuk. Rastvor se zagreva 5 sati na 50 °C, 18 sati na 40 °C a nakon toga 2 sata na 60 °C. Smeša se ohladi na 0 °C, nakon toga pažljivo zakiseli pomoću
koncentrovane HC1 do pH 4 (formiranje bele čvrste supstance). Suspenzija se filtrira. Osnovni rastvori se koncentruju pod vakuumom da se dobije bež čvrsta supstanca koja se suspenduje u MeOH (5 mL). Čvrste supstance se filtriraju. Osnovni rastvori se koncentruju pod vakuumom da se dobije hidrohloridna sojedinjenja 582kao bledo braon čvrsta supstanca (640 mg).<*>H
NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 9.20 (s, 2H), 8.49 (d,J=22.0 Hz, 4H), 8.05 (dd,J=8.8, 5.9 Hz, 1 H), 7.97(d, J =1.7 Hz, 1 H), 7.75-7.50 (m, 2H), 7.45 (d,J= 1.7 Hz, 1 H), 7.29 (td,J =8.4, 2.7 Hz, 1 H), 6.58 (q,J=6.2 Hz, 1 H), 3.79 (s, 3H), 3.36-3.19 (m, 4H), 2.56 (t,J=5.2 Hz, 3H), 1.67(d, J=6.1 Hz, 3H). LCMS ESmlz441 [M+H]<+>.
Faza 4:
[1066]U ohlađeni rastvor HATU (390 mg, 1.0 mmol) u DMF (12 mL) se u kapima, na 0 °C, u toku 1 sat dodajerastvor jedinjenja 582(450 mg, 0.82 mmol) i DIPEA (0.68 mL, 4.1 mmol) u DMF (21 mL). 10 min po završenom dodavanju, doda se H2O (300 mL) i smeša se ekstrahuje sa EtOAc (6 x 50 mL). Organske faze se kombinuju, suše preko MgS04i prečiste direktno bez koncentrovanja na SCX-2 koloni (10 g, eluenti: EtOAc (iz izrade) nakon toga MeOH smeša MeOH/NH3). Frakcije dobijene eluacijom iz smeše MeOH/NH3se kombinuju, koncentruju pod vakuumom i prečiste hromatografijom na koloni silika gela (eluenti DCM/MeOH od 95:5 do 90:10) da se dobijePrimer 116kao bledo žuta čvrsta supstanca (146 mg, 42% prinos, 90% čistoće pomoću<L>H NMR). Ovaj uzorak se prevede u žitku masu u vodi (2 mL), filtrira, prevede u žitku masu sa TBME (3 mL) a nakon toga se suši.Primer 116se dobija kao bledo žuti prašak (106 mg, 30% prinos preko tri faze).<*>H NMR (400 MHz, Metanol-c/4) 5 8.63 (s, 1 H), 8.53 (s, 1 H), 8.33( d, J=1.6 Hz, 1 H), 8.17 (s, 1 H), 7.34(dd, J= 9.6,2.6 Hz, 1 H), 6.96 (t,J=6.8Hz, 1 H), 6.81(dt, J = 8.9, 4.5 Hz,1 H), 5.66 (q,J=6.4 Hz, 1 H), 4.47(t, J=10.6 Hz, 1 H), 4.09 (s, 3H), 3.93 - 3.65 (m, 2H), 2.84 (s, 3H), 1.65(d, J= 6.4 Hz, 3H). LCMS ESm/ z423 [M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-12-fluoro-10,16-dimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-8,4-(meteno)[l,2]oksazolo[4,5-h] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila
(Primer 117)
[1067]
Faza 1:
[1068]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimer 99se koristi zaizradu jedinjenja 583(400 mg, 73%) kao bezbojnog ulja.<l>RNMR (400 MHz, CDCh) 5 7.72-7.68 (s, 1 H), 7.22-7.20 (m, 2H), 7.08-7.03 (m, 1 H), 6.92 (s, 1 H), 6.55-6.52 (s, 1 H), 5.47-5.42 (m, 1 H), 4.98-4.86 (dd, 2H), 4.75 (s, 2H), 2.88 (s, 3H) 5 1.66-1.64 (d, 3H)
Faza 2:
[1069]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimer 99se koristi za izraduPrimera 117(4.2 mg, 3%) kao bele čvrste supstance.<l>K NMR (400 MHz, Metanol-^) 5 7.79 (s, IH), 7.56-7.59 (d, IH), 7.39-7.49 (d, IH), 7.12-7.21 (m, IH), 6.89 (s, IH), 5.79-5.71 (s, IH), 4.7-4.65 (dd, 2H), 3.21 (s, 3H), 1.72 (s, 3H). LCMS m/z 394 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-12-fluoro-2-metil-2,10,15,17-tetrahidro-8,4-(meteno)pirazolo-[4,3-
h][2,ll,5]benzodioksazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer 118)
[1070]
Faza 1:
[1071]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 104se koristi za izradujedinjenja 584kao beličaste kristalne čvrste supstance (5.23 g).<l>K NMR (400 MHz, CDCb) 5 8.11 (dd,J=8.8, 5.8 Hz, 1 H), 7.43 (dd,7=2.0, 0.9 Hz, 1 H), 7.39 - 7.17 (m, 16H), 7.08 (ddd,J=8.7, 7.6, 2.7 Hz, 1 H), 6.98 (d,J=2.0 Hz, 1 H), 6.36 (s, 1 H), 5.53 (s, 2H), 3.90 (s, 3H). LCMS ESmlz597/599 [M+H]<+>.
Faza 2:
[1072]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 104se koristi za izradujedinjenja 585kao beličaste kristalne čvrste supstance (3.86 g, 87%).<l>K NMR (400 MHz, CDCh) 5 7.43 (d,J =2.0 Hz, IH), 7.36 (dd,J=8.5, 5.6 Hz, 1 H), 7.34 - 7.14 (m, 17H), 7.07 - 6.99 (m, 2H), 6.33 (s, 1 H), 5.21 (s, 2H), 4.70 (d,J=5.6 Hz, 2H). LCMS ESmlz569/571 [M+H]<+>.
Faza 3:
[1073]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimer 104se koristi za izradujedinjenja 586kao bezbojne pene (1.23 g, 90%).<l>RNMR (400 MHz, CDCh) 5 7.42 (dd,J=2.0, 0.9 Hz, 1 H), 7.37 - 7.15 (m, 17H), 7.04 - 6.97 (m, 2H), 6.32 (s, 1 H), 5.20 (s, 2H), 4.59 (s, 2H), 4.49 (s, 2H), 3.99 (s, 3H). LCMS ESm/ z766/768/770 [M+H]<+>.
Faza 4:
[1074]Postupak opisan u fazi 4 zaPrimer 104se koristi za izradujedinjenja 587(206 mg, 21 %) kao žute čvrste supstance.<J>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 8.48 (d,J =1.9 Hz, 1 H), 7.59 (d,J= 1.8 Hz, 1 H), 7.42-7.12 (m, 17H), 6.97(td, J=8.1, 2.7 Hz, 1 H), 6.32 (s, 1 H), 5.60(d,J=13.2 Hz, 1 H), 5.34 - 5.16 (m, 2H), 4.46(d, J=13.2 Hz, IH), 4.29(d, J=10.0 Hz, IH), 4.03(dd, J=12.8, 4.0 Hz, 1 H), 3.95 (s, 3H). LCMS ESmlz608 [M+H]<+>
Faza 5:
[1075]Postupak opisan u fazi 5 zaPrimer 104se koristi za izraduPrimera 118kao bezbojne čvrste supstance (43 mg, 35%). 'HNMR (400 MHz, aceton-^) 5 8.60(d, J=1.8 Hz, IH), 7.80 (d, J = 1.9 Hz, 1 H), 7.50 - 7.43 (m, 2H), 7.05 (td,J=8.4, 2.8 Hz, 1 H), 5.70 (d,J=13.6 Hz, 1 H), 5.61(s, 2H), 5.37 (d, J=12.1 Hz,IH), 5.28 (d, J= 13.1 Hz, IH), 4.58 (d, J=12.3 Hz, IH), 4.46 (d,J =10.6 Hz, 1 H), 4.12 (d,J =10.5 Hz, 1 H), 4.03 (s, 3H). LCMS ESmlz366 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-3-terc-butil-l,10,16-trimetil-l 6,17-dihidro-l//-8,4-(meteno)-pirazolo[4,3-g]pirido[2,3-I][l,4,10]oksadiazaciklotetradecin-15(10/i)-ona (Primer 119 i 120)
[1076]
Faza 1:
[1077]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 104se koristi za izradujedinjenja 588kao bež
čvrste supstance (5.82 g, kvantitativno).<J>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 8.05 (dd, J = 8.8, 5.8 Hz, IH), 7.39 - 7.18 (m, 17H), 7.03 (ddd,J=8.7, 7.6, 2.7 Hz, 1 H), 6.70 (d,J=2.0 Hz, 1 H), 6.38 (s, 1 H), 6.35(q, J=6.4 Hz, 1 H), 3.94 (s, 3H), 1.65(d, J=6.2 Hz, 3H). LCMS ESmlz611/613 [M+H]<+>.
Faza 2:
[1078]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 104se koristi za izradujedinjenja 589kao bezbojne čvrste supstance, u dve serije sa blago različitim čistoćama (5.43 g, 82%).<l>HNMR (400 MHz, CDCh) 5 7.39-7.16 (m, 17H),7.13(dd, J=9.8, 2.7 Hz, 1 H), 6.96(td, J=8.2, 2.7 Hz, 1 H), 6.93 (d,J=2.0 Hz, 1 H), 6.37 (s, 1 H), 5.70 (q,J=6.3 Hz, 1 H), 4.79 (dd,J =12.3,6.1 Hz,1 H),4.70 (dd, J=12.3,5.6 Hz, 1 H), 1.75 - 1.69 (m, 1 H), 1.66(d, .7 =6.3 Hz, 3H). LCMS ESmlz583/585 [M+H]<+>.
Faza 3
[1079] Primer 104se koristi zaizradu jedinjenja 590kao bezbojne čvrste supstance
(5.88 g, 88% prinos). *H NMR (400 MHz, CDCh) 5 7.39 - 7.17 (m, 17H), 7.11 (dd,J=9.7, 2.7 Hz, 1 H), 6.95 (td,J=8.2, 2.7 Hz, 1 H), 6.85 (d,J=2.0 Hz, 1 H), 6.37 (s, 1 H), 5.67 (q,J= 6.3 Hz, 1 H), 4.65 (d,J= 11.3 Hz, 1 H), 4.60 (d,J= 12.1 Hz, 1 H), 4.53 (d,J= 12.1 Hz, 1 H), 4.53(d, J=11.2 Hz, 1 H), 4.01 (s, 3H), 1.62(d, J=6.3 Hz, 3H). LCMS ESmlz778/780/781 [M+H]<+>.
Faza 4:
[1080]Postupak opisan u fazi 4 zaPrimer 104se koristi za izradujedinjenja 591(1.19 g), koje se koristi bez ikakvog naknadnog prečišćavanja. LCMS ESmlz622 [M+H]<+>.
Faza 5:
[1081]Postupak opisan u fazi 5 zaPrimer 104se koristi za izradu smešePrimera 119iPrimera 120kao bezbojne čvrste supstance (185 mg, 15% prinos iz dve faze).<J>H NMR (400MHz, DMSO-fife) 5 8.34 (d, J=1.9 Hz, 1 H), 7.63 (d,/= 1.8 Hz, 1 H), 7.55 (dd,/= 10.5,2.8 Hz, 1 H), 7.38(dd, J= 8.5,6.0 Hz, 1H), 7.08 (td, J= 8.4, 2.8 Hz,1 H), 6.17 (s, 2H), 6.02 -
5.92 (m,IH), 5.24 (d, J=12.0 Hz,IH), 4.49 (d, J=12.1 Hz,IH), 4.45 (d, J=10.7 Hz, IH), 3.97 (s, 3H), 3.92 (d,J=10.7 Hz, 1 H), 1.64 (d,J=6.2 Hz, 3H). LCMS ESmlz380 [M+H]<+>.
[1082]Asimetrično razdvajanje 146mg materijala se izvodi preparativnom SFC na Whelk-01 (R,R) (250 x 4.6 mm I.D., 3 mikrona veličina čestice) koloni, uz eluiranje sa 20% metanola u atmosferi CO2pod pritiskom od 140 bara sa brzinom protoka od 3 mL/min. Rt(pik.i) = 4.51 minuta i Rt(peak2) = 6.00 minuta da se dobije Pik 1 kao bela čvrsta supstanca (58 mg) i Pik 2 kao bela čvrsta supstanca (57 mg). Čvrste supstance dobijene iz oba pika se prevedu u žitku masu u vodi i suše u toku noći u vakuumskoj pećnici.Primer 119 (Pik 1):> 99% ee (47 mg).<l>RNMR (400 MHz, DMSO-ofe) 5 7.63 (s, 1 H) 8.35 (s, 1 H) 7.55 (dd,J=10.39, 2.57 Hz, 1 H) 7.38 (dt,J=2.20 Hz, 1 H) 7.07 (dt,J=2.60 Hz, 1 H) 6.15 (s, 2 H) 5.91 -6.01 (m, 1 H) 5.24(d, J=12.10 Hz, IH) 4.47(dd,J=13.63, 11.68 Hz, 2 H) 3.89 - 4.02 (m, 4 H) 1.65 (d, J=6.11 Hz, 3 H). LCMS APCImlz380 [M+H]<+>.Primer 120 (Pik2):~98% ee (45 mg).<l>R NMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 8.34 (d,J=1.52 Hz, 1 H)7.63 (d,J = 1.52Hz, 1H) 7.55 (dd, J=10.48,2.65 Hz, 1 H) 7.38(dd, J=8.59, 6.06 Hz, IH) 7.07 (dt, J= 2.50 Hz, 1 H)6.15 (s, 2 H) 5.97(m, .7=5.80Hz, 1H) 5.24 (d, J=11.87 Hz, 1 H)4.47 (dd,J= 14.02, 11.49 Hz, 2 H) 3.85 - 4.03 (m, 4 H) 1.65 (d,.7=6.06 Hz, 3 H).LCMS APCImlz380 [M+H]'.
Izrada (10S)-7-amino-12-fluoro-2,10,16-trimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-27/-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-A][2,5,ll]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer
121)
[1083]
Faza 1:
[1084]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 2se koristi za izradujedinjenja 592(800 mg, 51%) kao žute pene.<J>H NMR (400 MHz, CDCh) 5 8.02 (m, 1 H), 7.58 (s, 1 H), 7.23 (m, 1 H), 7.03 (ddd,J=8.7, 7.6, 2.7 Hz, 1 H), 6.88 (m, 1 H), 6.50 (m, 1 H), 6.0 (m, 1 H), 5.48 (m, 1 H), 4.05-4.65 (m, 2H), 3.98 (s, 3H), 3.94 (s, 3H), 2.60-2.80 (m, 4H), 1.70(d, J=6.2 Hz, 3H), 1.25-1.45 (m, 9H). LCMS ES m/z 539 [M+H]".
Faza 2:
[1085]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 2se koristi za izradujedinjenja 593(1060 mg, 77% prinos).<l>R NMR (400 MHz, DMSO-ofe) 5 13.36 (s, 1 H), 7.94 (t,J=6.9 Hz, 1 H), 7.61 - 7.43 (m, 2H), 7.01-7.25 (m, 2H), 6.75 -7.0(m, 2H), 6.47 (m, 1 H), 4.59 - 4.03 (m, 2H), 3.96 (s, 3H), 2.79 -2.51 (m, 2H), 1.62(d, .7=6.2Hz, 3H), 1.34- 1.01 (m, 9H). LCMS ES m/z 525
[M+H]<+>.
[1086] Primer2 se koristi zaizradu jedinjenja 594(910 mg, 98%) kao hidrohloridne soli.lK NMR (400MHz,DMSO-fife)5 13.3 (s, IH), 9.36 - 9.16 (m, 2H), 7.98(dd, J=8.8, 6.0 Hz, 1 H), 7.80 (d,J= 1.7 Hz, 1 H), 7.58(dd, J =10.3, 2.7 Hz, 1 H), 7.26(ddd, J=12.5, 6.6, 3.3 Hz, 2H), 7.20 - 7.07 (m, 2H), 6.54 (q,J=6.2 Hz, 1 H), 4.24 - 4.07 (m, 2H), 4.05 (s, 3H), 2.18 (d,J=90.0 Hz, 2H), 1.64 (d,J=6.2 Hz, 3H). LCMS ESmlz425 [M+H]<+>.
Faza 4:
[1087]Postupak opisan u fazi 4 zaPrimer 2se koristi za izradu smešePrimera 2iPrimera 121kao bele čvrste supstance (570 mg, 72%).<l>KNMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 7.65 - 7.54 (m, 2H), 7.46(dd, J= 8.6,5.7 Hz, 1 H), 7.18(td, J=8.5, 2.7 Hz, 1 H), 6.81(d, J=1.9 Hz, 1 H), 6.19( d, J =3.4 Hz, IH), 5.60(dt, J=6.7, 3.4 Hz, IH), 4.44(d, J=14.4 Hz, IH), 4.19 (d,J=14.4 Hz, 1 H), 4.03 (s, 3H), 2.99 (s, 3H), 1.67(d, J=6.2 Hz, 3H). LCMS ES m/z 407 [M+H]<+>. Asimetrično razdvajanje 570 mg materijala se izvodi preparativnom SFC na Whelk-01 (R,R) (250 x 4.6 mm I.D., 3 mikrona veličina čestice) koloni, uz eluiranje sa 30% metanola u atmosferi CO2pod pritiskom od 140 bara sa brzinom protoka od 3 mL/min. Rt(piki) = 3.06 minuta i Rt(peak2) = 4.38 minuta da se dobije Pik 1 kao bela čvrsta supstanca (263 mg) i Pik 2 kao bela čvrsta supstanca (262 mg).
Primer 2 (Pik1): > 99% ee (263 mg).
Primer 121 (Pik 2):~98% ee (262 mg).<!>H NMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 = 7.63 - 7.55 (m, 2H), 7.46 (dd, J=5.8, 8.6 Hz, IH), 7.17 (dt, J=2.8, 8.4 Hz, IH), 6.81 (d,J=1.5Hz, IH), 6.17 (s,2H), 5.66 - 5.55 (m, 1 H), 4.43 (d, .7=14.6 Hz, 1 H), 4.19 (d, .7=14.4 Hz, 1 H), 4.03 (s, 3H), 2.99 (s, 3H), 1.68 (d, .7=6.3 Hz, 3H). LCMS APCImlz407 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-12-lfuoro-3-metoksi-l,16,17-trimetil-16,17-dihidro-l//-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-h] [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10/7)-ona (Primer 122 i
123)
[1088]
Faza 1:
[1089] Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 86iPrimer 87se koristi za izradujedinjenja595 (500 mg, 33%, Rf = 0.3) kao braon čvrste supstance. LCMSmlz567 [M+Na]<+>.
Faza 2:
[1090] Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 86iPrimer 87se koristi za izradujedinjenja596 (470 mg, 97%) kao bele čvrste supstance. LCMS ESmlz531 [M+H]<+>.
[1091]Primer 86 i Primer 87 se koristi za izradu jedinjenja 597, koje se direktno koristi u sledećoj fazi. LCMSmlz431 [M+H]<+>.
Faza 4:
[1092] Postupak opisan u fazi 4 za Primer 86 i Primer 87 se koristi za izradu smeše Primera 122 i Primera 123 kao beličaste čvrste supstance (190.1 mg, 50% u dve faze).<!>H NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 7.66 (s, 1 H), 7.50-7.44 (m, 2H), 7.20-7.19 (m, 1 H), 6.34 (s, 2H), 5.54-5.51 (d, IH), 5.03-5.00 (d, IH), 4.81-4.79 (d, IH), 3.97 (s, 3H), 3.85 (s, 3H), 3.01 (s, 3H), 1.67-1.65 (d, 3H). LCMSmlz413 [M+H]<+>.
[1093] Asimetrično razdvajanje 70 mg materijala se izvodi preparativnom SFC na Chiralpak AD-H (250 x 4.6 mm I.D., 5 mikrona veličina čestice) koloni, uz eluiranje sa 5-40% etanola (0.05% DEA) u atmosferi CO2pod pritiskom od 140 bara sa brzinom protoka od 4 mL/min. Rt<piki) = 6.93 minuta i Rt(pik2) = 8.52 minuta da se dobije Pik 1 kao bela čvrsta supstanca (9 mg) i Pik 2 kao bela čvrsta supstanca (6 mg). Separacija zahteva dve serije. Svaki pik izdvajanja se uravnoteži na 90 : 10 smeši atropizomera. Primer 122 (Pik 1): > 99% ee.<l>RNMR (400 MHz, Metanol-ć/4) 5 7.79 (s, IH), 7.54-7.51 (m, 2H), 7.16-7.11 (m, IH), 5.68-5.65 (m, IH), 5.07-5.01 (m, 2H), 4.06 (s, 3H), 3.98 (s, 3H), 3.15 (s, 3H), 1.78-1.76 (d, 3H). LCMS APCImlz413 [M+H]<+>. Primer 123 (Pik 2):~98% ee. 'HNMR (400 MHz, Metanol-^4) 5 7.79 (s, 1 H), 7.54-7461 (m, 2H), 7.16-7.11 (m, IH), 5.68-5.65 (m, IH), 5.07-5.02 (m, 2H), 4.06 (s, 3H), 3.98 (s, 3H), 3.15 (s, 3H), 1.78-1.76 (d, 3H). LCMS APCImlz413 [M+H]<+>.
Izrada 7-amino-12-lfuoro-3-metoksi-l,16,17-trimetil-16,17-dihidro-l//-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-/j| [2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-l 5(10//)-ona (Primeri 124, 125 i 126)
[1094]
Faza 1:
[1095]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 90se koristi za izradujedinjenja 598kao bele pene (117 mg, 52%).<l>R NMR (400 MHz, Metanol-^, 2 rotomera) 5 7.63 (dd,J=7.0, 2.1 Hz, 1 H), 7.54 i 7.51 (2 x s, 1 H), 7.50 - 7.30 (m, 3H), 6.98 i 6.79 (2 x s, 1 H), 6.33 (ddd,J =16.1,7.6,2.6 Hz) i 6.29-6.11(m)(l H), 5.04 (d, J=15.0 Hz, 1 H), 4.94-4.65 (m, 2H), 4.57( d, J= 15.0 Hz, 1H), 4.02 i 3.99 (2xs, 3H), 3.17 i 3.01 (2x s, 3H). LCMS ES m/ z488/490
[M+H]<+>
Faza 2:
[1096]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 90se koristi za izraduPrimera 124kao bezbojne čvrste supstance (26 mg, 28%).<*>H NMR (400 MHz, aceton-^) 5 7.90 (s, 1 H), 7.65 (dd,J =7.9, 1.8 Hz, 1 H), 7.48 -7.34 (m, 3H), 6.21(ddd, J=17.7, 8.1,2.3 Hz, 1H), 4.96 (ddd, J =48.6, 10.3,8.2 Hz, IH), 4.71(ddd, J=46.2, 10.3,2.3 Hz, 1 H), 4.53( d, J=13.6 Hz, 1 H), 4.36 (d, J = 13.6 Hz, 1 H), 4.11 (s, 3H), 2.97 (s, 3H). LCMS ESmlz408 [M+H]<+>Asimetrično razdvajanje 23 mg materijala se izvodi preparativnom SFC na Whelk-01 (R,R)
(250 x 4.6 mm I.D., 5 mikrona veličina čestice) koloni, uz eluiranje sa 35% metanola u atmosferi CO2pod pritiskom od 120 bara sa brzinom protoka od 62 mL/min. Rt(piki)= 3.06
minuta i Rt(peak2) = 4.60 minuta da se dobije Pik 1 kao bela čvrsta supstanca (8 mg) i Pik 2 kao bela čvrsta supstanca (8.23 mg).Primer 125 (Pik 1):> 99% ee (-).<l>H NMR (400 MHz, aceton-^) 5 7.90 (s, IH), 7.65(dd, J=7.9, 1.8 Hz, 1 H), 7.48 - 7.34 (m, 3H), 6.21(ddd, J =17.7, 8.1,2.3 Hz, 1 H), 4.96(ddd, J=48.6, 10.3, 8.2 Hz, IH), 4.71(ddd, J= 46.2,10.3,2.3 Hz,IH), 4.53 ( d, J=13.6 Hz,IH), 4.36 (d, J=13.6 Hz, IH), 4.11 (s, 3H), 2.97 (s, 3H).
LCMS ESmlz408 [M+H]<+>
Primer 126 (Pik 2):~98% ee (+).<l>KNMR (400 MHz, aceton-^) 5 7.90 (s, 1 H), 7.65 (dd,J =7.9, 1.8 Hz, 1 H), 7.48 - 7.34 (m, 3H), 6.21(ddd, J=17.7, 8.1, 2.3 Hz, 1 H), 4.96(ddd, J =48.6, 10.3, 8.2 Hz, IH), 4.71 (ddd,J=46.2, 10.3, 2.3 Hz, IH), 4.53 (d,J=13.6 Hz, IH), 4.36 (d, J = 13.6 Hz, 1 H), 4.11 (s, 3H), 2.97 (s, 3H). LCMS ESmlz408 [M+H]<+>
Izrada 7-amino-12-fluoro-3-metoksi-l, 16,17-trimetil-16,17-dihidro-1/7-8,4-(azeno)pirazolo[4,3-A] [2,5,11] benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer 127 i
Primer 128)
[1097]
Faza 1:
[1098]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 90se koristi zaizradu jedinjenja 599kao bele čvrste supstance (723 mg, 60%).<l>RNMR (400 MHz, DMSO-d6) 5 7.75 - 7.65 (m, 1 H), 7.58 (s, 1 H), 7.52 - 7.39 (m, 3H), 7.09 (s, 1 H), 6.84 (s, 2H), 6.20 - 6.00 (m, 1 H), 5.06 - 4.64 (m, 4H), 3.99 (s, 3H), 2.92 (s, 3H). LCMSmlz488/490 [M+H]<+>.
Faza 2:
[1099]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 90se koristi za izradu smešePrimera 127iPrimera 128kao bledo bež čvrstih suptanci (33 mg, 8%).<l>K NMR (400 MHz, DMSO-fife) 5 7.87 (s, 1 H), 7.67 - 7.56 (m, 1 H), 7.53 - 7.35 (m, 3H), 6.79 (s, 2H), 6.01(ddd, J=17.3, 8.3, 2.3 Hz, 1 H), 4.98 (ddd,J=48.3, 10.2, 8.3 Hz, 1 H), 4.76 - 4.53 (m, 2H), 4.36(d, J=14.8 Hz, 1 H), 4.08 (s, 3H), 2.91 (s, 3H). LCMSmlz408 [M+H]<+>.
[1100]Asimetrično razdvajanje 27 mg materijala se izvodi preparativnom SFC na Whelk-01 (R,R) (250 x 4.6 mm I.D., 5 mikrona veličina čestice) koloni, uz eluiranje sa 38% metanola u atmosferi CO2pod pritiskom od 120 bara sa brzinom protoka od 62 mL/min. Rt(piki) = 4.19 minuta i Rt(pik2) = 5.50 minuta da se dobije Pik 1 kao bela čvrsta supstanca (11.99 mg) i Pik 2 kao bela čvrsta supstanca (10.99 mg).Primer 127 (Pik 1):> 99% ee (-).<*>H NMR (400 MHz, DMSO-Ć&) 5 7.87 (s, 1 H), 7.60 (d,J =6.8 Hz, 1 H), 7.50 7.35 (m, 3H), 6.80 (br. s., 2H), 6.01 (dd,J=7.8, 17.4 Hz, 1 H), 5.11-4.84 (m, 1 H), 4.73 - 4.52 (m, 2H), 4.36( d, 7=15.1Hz, 1 H), 4.08 (s, 3H), 2.91 (s, 3H). LCMS APCImlz408 [M+H]<+>Primer 128 (Pik 2):> 99% ee (+).<l>K NMR (400 MHz, DMSO-</6) 5 7.87 (s, IH), 7.60 (d,J= 6.8 Hz, 1 H), 7.50 7.35 (m, 3H), 6.80 (br. s., 2H), 6.01 (dd,J=7.8, 17.4 Hz, 1 H), 5.11 - 4.84 (m, 1 H), 4.73 - 4.52 (m, 2H), 4.36( d, J =15.1 Hz, 1 H), 4.08 (s, 3H), 2.91 (s, 3H).
LCMS APCImlz408 [M+H]<+>
Izrada 12-fluoro-l,14-dimetil-l,4,5,6,7,8-heksahidro-14//-16,20-(meteno)-pirazolo-[4,3
g][1,14,1 l]benzodioksazacikloheptadecin-17-amina (Primer 129/Primer 130/Primer 131)
[1101]
Faza 1:
[1102]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 37se koristi za izradujedinjenja 600kao žutog ulja (709 mg, 96%).<l>KNMR (400 MHz, DMSO-</6) 8 8.05 (d,J=2.0 Hz, 1 H), 7.63 (s, 1 H), 7.45(d, .7 =2.0 Hz, 1 H), 7.16(dd,.7=9.7, 3.3Hz, 1 H), 6.93(td, .7=8.5,3.3 Hz, 1 H), 6.84 (dd,J=9.0, 4.6 Hz, 1 H), 4.94 (q,J=6.3 Hz, 1 H), 3.98 (q,J=5.7 Hz, 2H), 3.82 (s, 3H), 1.91 (p, .7= 6.6 Hz, 2H), 1.61(q,J=6.0, 4.9 Hz,2H), 1.23 (d,J=6.3 Hz, 3H). LCMS mlz504 [M+H]<+>
Faza 2:
[1103]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 37se koristi za izradujedinjenja 601kao žutog ulja (603 mg). Ovo se podvrgne sledećoj fazi bez naknadnog prečišćavanja. LCMSmlz439
[M+H]<+>
Faza 3:
[1104]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimer 37se koristi za izradujedinjenja 602kao bele čvrste supstance (350 mg, 54%).<l>RNMR (400 MHz,DMSO-</6)5 7.40( d, J =1.9 Hz, 1 H), 7.31 (s, 1 H), 7.15(dd, J=9.7, 3.2 Hz, 1 H), 6.95(td, J=8.5, 3.2 Hz, 1 H), 6.88(dd, J= 9.0,4.6 Hz, 1 H), 6.78(d, J=2.0 Hz, 1 H), 5.76 (s, 2H), 5.11 (d, J=4.4 Hz, 1 H), 4.91(p, J=6.0 Hz, 1 H), 3.95 -3.83 (m, 2H), 3.63 (s, 3H), 2.31(t, J=7.4 Hz, 2H),1.72 - 1.60 (m, 2H), 1.48(d, J=7.5 Hz, 2H), 1.38( d, J=7.1 Hz, 2H), 1.21(d, J=6.3 Hz, 3H). LCMS m/z 413 [M+H]<+>
Faza 4:
[1105]Postupak opisan u fazi 4 zaPrimer 37se koristi zaizradu jedinjenja 603kao bezbojnog ulja (233 mg, kvantitativno). ltt NMR (400 MHz, CDCh) 5 7.91 (d,J=2.0 Hz, IH), 7.46 (d,J= 1.9 Hz, 1 H), 7.38 (s, 1 H), 7.12 (dd,J=9.2, 3.1 Hz, 1 H), 6.87 (ddd,J =8.9, 7.9, 3.1 Hz, 1 H), 6.74 (dd,J=8.9, 4.4 Hz, 1 H), 5.25 (s, 2H), 5.05 (q,J=6.4 Hz, 1 H), 4.00 - 3.86 (m, 2H), 3.74 (s, 3H), 3.56 (q,J=7.3 Hz, 2H), 3.28 (s, 3H), 2.39 (h,J =7.3 Hz, 2H), 1.77 (dd,J =14.1, 7.2 Hz, 2H), 1.44 (d,J=6.5 Hz, 3H). LCMSmlz493 [M+H]<+>
Faza 5:
[1106]Postupak opisan u fazi 5 zaPrimer 37se koristi za izraduPrimera 129kao bele čvrste supstance (29 mg, 15%). 'HNMR (400 MHz, CDCh) 8 7.47 - 7.38 (m, 1 H), 7.34 (s, 1 H), 7.03 (dd,J=8.9, 3.1 Hz, 1 H), 6.91 (ddd,J=8.9, 7.9, 3.2 Hz, 1 H), 6.79 (dd,J=9.0, 4.3 Hz, 1 H), 6.54 (d,J= 1.5 Hz, 1 H), 5.73 - 5.65 (m,lH), 4.29 - 4.16 (m, 2H), 3.94-3.84 (m, 2H), 3.76 (s, 3H), 2.64 - 2.43 (m, 1 H), 2.13 - 1.99 (m, 1 H), 1.83 - 1.66 (m, 2H), 1.63(d,J =6.4 Hz, 3H), 1.33 (dd,J=9.7, 5.5 Hz, 2H). LCMSmlz397 [M+H]<+>
[1107]Asimetrično razdvajanje 27 mg materijala se izvodi preparativnom SFC na Chiralpak AD-H (250 x 4.6 mm I.D., 5 mikrona veličina čestice) koloni, uz eluiranje sa 38% metanola u atmosferi CO2pod pritiskom od 140 bara sa brzinom protoka od 3 mL/min. Rt(piki) = 2.37 minuta i Rt(pik2) = 5.70 minuta da se dobije Pik 1 kao bela čvrsta supstanca (4.9 mg) i Pik 2 kao bela čvrsta supstanca (4.9 mg).Primer 130 (Pik 1):> 99% ee (+).<l>KNMR (400 MHz, DMSO-Je) 5 7.56 (s, 1 H), 7.27 (s, 1 H), 7.16 (d,J=8.6 Hz, 1 H), 7.08 - 6.95 (m, 2H), 6.42 (s, 1 H), 6.12 (s, 2H), 5.65 (d,J =6.5Hz, 1 H), 4.25 (br. s., IH), 3.86 (t,J =10.6 Hz, 1 H), 3.66 (s, 3H), 2.48 - 2.27 (m, 2H), 2.12 - 1.93 (m, 2H), 1.82 - 1.44 (m, 6H), 1.34 - 1.20 (m, 1 H). LCMS APCImlz397
[M+H]<+>
Primer 131 (Pik 2):> 99% ee (-).<l>KNMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 7.56 (s, 1 H), 7.27 (s, 1 H), 7.16 (d,J=8.6 Hz, 1 H), 7.08 - 6.95 (m, 2H), 6.42 (s, 1 H), 6.12 (s, 2H), 5.65 (d,J =6.5Hz, 1 H), 4.25 (br. s, 1 H), 3.86 (t,J =10.6 Hz, 1 H), 3.66 (s, 3H), 2.48 - 2.27 (m, 2H), 2.12 - 1.93 (m, 2H), 1.82 - 1.44 (m, 6H), 1.34 - 1.20 (m, 1 H). LCMS APCImlz397 [M+H]<+>
Izrada (10R)-7-amino-12 fluoro-2,10-dimetil-15-okso-10,15,16,17-tetrahidro-2//-8,4-(meteno)pirazolo[4,3-A][2,5,ll]benzoksadiazaciklotetradecin-3-karbonitrila (Primer
132)
[1108]
Faza 1:
[1109]Postupak opisan u fazi 1 zaPrimer 88se koristi za izradujedinjenja 604(340 mg, 52%) kao braon čvrste supstance. LCMSmlz647 [M+Na]<+>
Faza 2:
[1110]Postupak opisan u fazi 2 zaPrimer 88se koristi za izradujedinjenja 605,koje se koristi u sledećoj fazi bez ikakvog naknadnog prečišćavanja. LCMSmlz425 [M+H]<+>
Faza 3:
[1111]Postupak opisan u fazi 3 zaPrimer 88se koristi za izradujedinjenja 606(70 mg, 41%) kao bele čvrste supstance. LCMSmlz411 [M+H]<+>
Faza 4:
[1112]Urastvor jedinjenja 606(70 mg, 0.17 mmol) i DIPEA (33 mg, 0.256 mmol) u DMF (25 mL) se na -35 °C dodaju HOBt (35 mg, 0.256 mmol) i EDC1 (33 mg, 0.256 mmol) u DMF (10 mL). Nakon dodavanja, dobijena smeša se meša 72 sata na 80 °C. LC-MS pokazuje daje reakcija završena. Smeša se sipa u ledenu vodu (50 mL). Smeša se ekstrahuje sa EtOAc (40 mL x 5). Kombinovani EtOAc slojevi se isperu sa slanim rastvorom (20 mL x 5), suše preko Na2S04i koncentruju pod vakuumom da se dobije ostatak. Ostatak se prečisti preparativnom TLC a nakon toga daljim prečišćavanjem reverzno faznom preparativnom HPLC da se dobijePrimer 132(11.5mg, 17%) kao bela čvrsta supstanca. <*>H NMR (400 MHz, Metanol-^ - uzorak je smeša rotomera) 5 7.8-7.75 (m, 1 H), 7.70-7.6 (m, 1 H), 7.32-7.20 (m, 2H), 7.01-7.00 (m, 1 H), 6.39-6.24 (m, 1 H), 5.66-5.64 (d, 1 H), 4.45-4.32 (d, 1 H), 4.05-4.02 (s, 1 H), 1.77-1.75 (d, 3H). LCMSmlz392 [M+H]<+>
Izrada (10R)-7-amino-3-etU-12-nuoro-10,16-dimetil-16,17-dihidro-3H-4,8-(meteno)[l,2,3]triazolo[4,5-h][2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer
133)
[1113]
[1114]Kombinovanjem faze 3 i 4Primera 41po poznatom porotokolu dobija sePrimer 133kao bela čvrsta supstanca (35.47 mg).<!>H NMR (400 MHz, DMSO-ć/e) 5 7.62-7.64 (m, 2 H), 7.44(dd, J=5.7, 8.5 Hz, 1 H), 7.17(dt, J=2.8, 8.5 Hz, 1 H), 6.77 (bs, 1 H), 6.35 (bs, 2 H), 5.65 (q, J=7.2, 3.6 Hz, 1 H), 4.51( d, J =14.4 Hz, 1H), 4.35 -4.46 (m, 2 H), 4.13 (d, J =14.7 Hz, 1 H),2.99 (s, 3 H), 1.67(d, 7=6.1Hz, 3 H), 1.40(t, J=7.4 Hz, 3 H). LCMS APCImlz397 [M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-12-fluoro-10,16-dimetil-3-(2-metilpropil)-16,17-dihidro-3//-8,4-(meteno)| 1,2,3]triazolo|4,5-h]|2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer
134)
[1115]
[1116]Kombinovanjem 3 i 4Primer 41po poznatom porotokolu dobija sePrimer 134kao bela čvrsta supstanca (47.09 mg).<l>RNMR (400 MHz, DMSO-ć/6) 5 7.62 - 7.64 (m, 2 H), 7.43 (dd, J = 5.7, 8.5 Hz, 1 H), 7.16 (dt,J=2.8, 8.5 Hz, 1 H), 6.75 (s, 1 H), 6.33 (s, 2 H), 5.64 (q,J= 12, 3.6 Hz, 1 H), 4.51(d, J =14.4 Hz, 1 H), 4.27 -4.31 (m, 1 H), 4.19 -4.21 (m, 1 H), 4.13( d, J=14.7 Hz, 1 H), 2.98 (s, 3 H), 2.03-2.07 (m, 1 H), 1.65(d, J =6.1 Hz, 3 H), 0.75 (d,J =6.6 Hz, 6 H). LCMS APCImlz425 [M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-3-(ciklobutilmetil)-12-lfuoro-10,16-dimetil-16,17-dihidro-3/T-8,4-(meteno)[l,2,3]triazolo[4,5-h][2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer
135)
[1117]
[1118]Kombinovanjem faze 3 i 4Primera 41po poznatom porotokolu dobija sePrimer 135kao bela čvrsta supstanca (8.3 mg).<l>K NMR (400 MHz,DMSO- ds)5 7.62-7.64 (m, 2 H), 7.43(dd, .7=5.7,8.5 Hz, 1 H), 7.16(dt, J=2.8, 8.5 Hz, 1 H), 6.77 (s, 1 H), 5.65 (q,J=7.2, 3.6 Hz, 1 H),4.51 (d,<y=>14.4 Hz, 1 H), 4.38.4.47 (m, 2 H), 4.14( d, J=14.7 Hz, 1 H), 2.97 (s, 3 H), 2.71 (m, IH), 1.73 - 1.90 (m, 2 H), 1.64-1.73 (m, 7H). LCMS APCI mlz437
[M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-3-ciklobutil-12-fluoro-10,16-dimetil-16,17-dihidro-3/T-8,4-(meteno)[l,2,3]triazolo[4,5-h][2,5,ll]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10//)-ona (Primer
136)
[1119]
[1120]Kombinovanjem faze 3 i 4Primera 41po poznatom porotokolu dobija sePrimer 136kao bela čvrsta supstanca (56.97 mg).<!>H NMR (400 MHz, DMSO-c/6) 5 7.57 - 7.61 (m, 2 H), 7.44 (s, 1 H), 7.38 - 7.40 (m, 1 H), 7.12(dt, J=2.8, 8.5 Hz, 1 H), 6.73 (s, 1 H), 6.31 (s, 2 H), 5.60 (q,J=7.2, 3.6 Hz, 1 H), 5.00 (m, 1 H), 4.47 (d,J=14.4 Hz, 1 H), 4.09 (d,J=14.7 Hz, 1 H), 2.95 (s, 3 H), 2.52 (m, 2 H), 2.65 (m, 1 H), 2.26 (m, 1 H), 1.82 (m, 1 H) 1.62(d, J=6.1 Hz, 3 H), 0.78 (t,J=7.3 Hz, 3 H). LCMS APCImlz423 [M+H]<+>.
Izrada (10R)-7-amino-3-ciklopropil-12-fluoro-10,16-dimetil-16,17-dihidro-3//-8,4-(meteno)[l,2,3]triazolo[4,5-h][2,5,1 l]benzoksadiazaciklotetradecin-15(10/7)-ona (Primer
137)
[1121]
[1122]Kombinovanjem faze 3 i 4Primera 41po poznatom porotokolu dobija sePrimer 137kao bela čvrsta supstanca (11.55 mg).<!>H NMR (400 MHz, DMSO-^e) 5 7.59 - 7.62 (m, 2 H), 7.45(dd, .7=5.7, 8.5Hz, 1 H), 7.16(dt, J=2.8, 8.5 Hz, 1 H), 6.76 (s, 1 H), 6.35 (s, 2 H),
6.01-6.05 (m, 1 H), 5.62(q, J =7.2, 3.6 Hz,1 H), 5.19 (dd, J=1.2, 10.4 Hz, 1 H), 5.13-5.16 (m, 1 H), 4.98 -4.99 (m, 1 H), 4.84 (dd,.7=2.2,18 Hz, 1 H), 4.53(d,J=14.4 Hz, 1 H),4.17 (d,J=14.7 Hz, 1 H), 3.00 (s, 3 H), 1.67 (d,J=6.1 Hz, 3 H). LCMS APCImlz409 [M+H]<+>.
Biološki Primeri
Ispitivanje izvornog oblika ALKiL1196M mutanta ALK enzima
[1123]Inhibicija izvornog oblika ALK i LI 196M mutanta ALK enzima se meri analizom promena mikrofluidne mobilnosti. Reakcije se izvode u zapreminama od 50 uL u pločama sa 96 otvora u kojima se nalaze prethodno aktivirani domen humanog rekombinantnog izvornog oblika (1.3 nM) iliL1196M (0.5 nM) ALK kinaze (amino kiseline 1093-1411), 1.5 uM fosfoakceptor peptida, 5'FAM-KKSRGDYMTMQIG-CONH2 (CPC Scientific, Sunnvvale, CA), test jedinjenje (11-doza 3-puta serijska razblaženja, 2% DMSO finalno) ili samo DMSO, 1 mM DTT, 0.002% Tween-20 i 5 mM MgCl2u 25 mM Hepes, pH 7.1 i započinju se dodavanjem ATP (60 uM finalna koncentracija,~Km nivo) a nakon toga 20-min preinkubacije. Reakcije se inkubiraju 1 h na sobnoj temperaturi, zaustavljaju dodavanjem 0.1M EDTA, pH 8 a stepen reakcija (~ 15-20% konverzije bez inhibitora) se određuje nakon razdvajanja elektroforezom fluorescentno obeleženog peptidnog substrata i fosforilisanog produkta na LabChip EZ Reader II (Caliper Life Sciences, Hopkinton, MA). Pokazano je da su inhibitori ATP-kompetitivni sa kinetičkim i kristalografskim studijama. Ki vrednosti se izračunavaju uvođenjem % konverzije u jednačinu za kompetitivnu inhibiciju koristeći postupak ne-linearne regresije (GraphPad Prism, GraphPad Softvvare, San Diego, CA) i eksperimentalnim merenjem ATP Km= 58 uM za izvorni oblik i 55 uM za LI 196M enzim. ALK enzimi se produkuju interno (bakulovirusna ekspresija) i preaktiviraju auto-fosforilacijom 16 uM ne-aktiviranog enzima u prisustvu 2 mM ATP, 10 mM MgCb i 4 mM DTT u 20 mM Hepes, pH 7.5, na sobnoj temperaturi u toku~1 h,a potpuna fosforilacija (~4 fosfata po molekuli proteina) domena ALK kinaze se potvrđuje Q-TOF masenom spektrometrijom.
Celularni fosfo-ALK (Tyrl604) ELISA test za EML4-ALK:
Ćelijske linije:
[1124]NIH-3T3 EML4-ALK wt vi i NIH-3T3 EML4-ALK vi LI 196M ćelije su humane stabilne ćelijske linije postavljene od strane Pfizer - La Jolla, CA. Ćelije se održavaju u inkubatoru na 37°C sa 5% CO2u DMEM (Invitrogen, Carlsbad, CA) medijumu obogaćenom sa 1% L-glutamina, 1% penicilina i streptomicina, 1 ug/ml puromicina i 10% seruma novo-rođenog govečeta (NCS) u T-75 bocama.
Analiza:
[1125]Ćelije se isperu sa PBS i re-suspenduju u DMEM medijumu obogaćenom sa 0.5% NCS i 1% pen/strep i zaseju u pločama sa 96 otvora u gustini od 20,000 ćelija/otvor/100 ul i inkubiraju u inkubatoru na 37°C i sa 5% CO2. Nakon 20 sati inkubacije, u ploče se doda 100 ul medijuma za ispitivanje (DMEM) u prisustvu označenih koncentracija PF-jedinjenja ili kontrola (DMSO) i inkubira 1 sat u inkubatoru. Nakon toga se medijum ukloni a u otvore se doda pufer za liziranje koji sadrži inhibitore fosfataze i fenilmetansulfonil fluorid (PMSF) i mućkaju 30 minuta na 4 °C da se generišu lizati proteina. Nakon toga, PathScan fosfo-ALK (Tyrl604) hemiluminiscentni sendvič ELISA kit (Cell Signal Technologv Inc., cat # 7020) se koristi za ispitivanje fosforilacije ALK na sledeći način:
[1126]Fosfo-ALK (Tyrl604) zečije antitelo se obloži po mikropločama sa 96 otvora. U ploče obložene antitelom se doda 50 ul lizata ćelija i inkubira 2 sata na sobnoj temperaturi. Nakon energičnog ispiranja sa 0.1 % Tween 20 u PBS da se uklone nevezani materijali, doda se ALK miša mAb da se detektuju vezane fosfo-ALK (Tyrl604) i proteini fosfo-ALK fuzije. Anti-mišji IgG, HRP-vezano antitelo se nakon toga koristi za prepoznavanje granice detekcije antitela. Konačno, doda se hemiluminiscentni reagens i inkubira 10 minuta da se razvije signal. Ploče sa analizama se očitavaju merenjem luminiscencije na Envision čitaču ploča. IC50vrednosti se izračunavaju iz krive koncentracija-odgovor koristeći analitički postupak četiri parametra.
[1127]Dobijene vrednosti za Ki i IC50sa ALK enzimatičkim analizama 1 i 2 i celularnim fosfo-ALK (Tyrl604) ELISA testom za WT EML4-ALK i LI 196M EML4-ALK, prethodno otkriveni, su pokazani u niže datoj tabeli. U niže datoj tabeli, ukoliko za neka jedinjenja nema rezultata, znači da ta jedinjenja nisu testirana po analizama koje su navedene uTabeli 1.
LISTINO SEKVENC1
11128)

Claims (3)

  1. I« Jedinjenje formule formule (I) naznačeno time Što: X je izabranugrupe koja sadrži KCR5R*)$0(CR5R6)r, -{CR<S>R^'M(R<1>XCR<S>R<S>V, <CiR5Rfi)qC(0)WlXCRsRs>- i -<CRn*VKRl)C<C>XCR5R*)r; Y i Z su svaki nezavisno N ili CH grupa, uz' uslov đa kada je Y ~; H 2 je CH, a kada je Z ~ N, Y je CH; A je prste« teabra« od Ce-C« aril i 5-6 članog 'heteroaril prstena; R1 je izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Q> alkil, Cj-G* alkenil, Cz-Gs alkiral, Cj-Gseikloaliđl, Cs-C«. aril, 3-12 elani heteroalicikliH .5-6 Člani toeteioaril> pri čemu svaki vodonik na navedenom Ci-Cs alkil, C2-Cs alkenil, Ca-Cs alkinil, Oj-Gć cikloalkil, Gs-C« aril, 3-12 članom hetamlicikličmmi 5-6<p>lanom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH2,~S(0>R<9>t-S(0)2NR%w, -S(0)jOR9, -H02> -CN, -OR*»-C(0>R* -GC(0)R<9>? -NR9C(0)Ri(\ -C(O}OR<9>>-C{-NR<9>)NR<?>R<i0>s~NR<9>C{0}NR<9>R,<a>, -NR9S(O)2.Ri0jii -C(O)NR<*>R<t0>;svaki R2 je nezavisno izabran la grupe koja sadrži halogen, Cj-Cs alkil, C2-G5aikeuiL C2-C0aMnil, Oj-Gscikloalkil, Oj-C« aril, 342 člani heteroaliciklil, 5-6 elant heteroaril,~S(0)tR<7>»-S(G)2NR7R* -S(0>iOR7f-NCb, -(CR<5>R^NR<7>R<S>, -N(CR<S>R<6>)(CR<S>R<*>)„NR<?>R<8>, -OR<7>, -OCCRsR<!XC31sR«XjOR7, -0(CR5R*XCR3R*)1|R7, -CN, -C(0)R<7>, -GC(0)R7, -0(CR<s>R^R<?>, -NR<7>C(0)R<s>, -{CR<5>R<<s>)t!C(0)OR<7>, <ČR5RS)^R?<R>8, -C{-NR<7>)NR<7>R<S>, -NR<7>C(0)NR<7>R<8>>~NR<7>S(0)2R<S>i ~( CR* R% C( Q) mi} R* ; pri čemu svaki vodonik im navedenom Cj-Cj alki!, Cj-Cs alkenil, Gj-Cs alkinil, Ca-Cć cikloalkil, Gs-Cti aril, 3-12 elanom heteroaliciklil i 5-6 članom heteroairl prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, »OH, -NH2, -S(0)iRi>, -S(O)2NR<*>R<!0>, -S(0)20R9 *N02, -OR9, -CN, -C(0)R9, *OC(0)R<9>?-NR^CCOJR'<0>, -C(0)OJR^ -C^NR^NR^R'0, -NR<*>C{0)NR<9>R<i<s>5-NR<9>S(0)2R<!S>iii -C(O)NR<?>R}<0>; R<5>i R<4>su svaki nezavisno izabrani ođ■ vodonika, Cj-Cs alkil i Cs-C<> cikloalkil grupe,pri čemu svaki vodonik naCi-Caalkii i Cs-Cć cikloalkil grupi može- da bude nezavisno opciono supsiituis&n sa halogenom, -QH, -NHj, ~S(0)tRs, -S{<)}2NR<9>R<!e>, -S(052OR^ -NO*, -CM, -OR<9>, -C(0)R<9>, -OC(0}R<9>, -NR<*>C(0)R<w>t-C(0) OR9, ~C{~NRs)NR?R,d,~NR<9>C(0)NR<9>R<!<!>, -NR^O)^0 ili -C(O)NR9R!0;svaki R$ i Rć je nezavisno izabranizgrupe koja sadrži vodonik, CVOs alki!, C2-C5 alkenil, C2-Cc alkinil, C3-C«. cikloalkil,C& Cnaril, 3-12 elani heteroaliciklil, 5-6 člani heteroaril, -OH, -NHa, -S(0),R* -S(0)2.NR%i<!, -S(0)2OR$, -NO* -CN, -OR<9>, -C(0)R<9>, *OC(0)RS, -KR9C(0)R10, -C{0) OR<*>>-C(~NR<*>)NR<9>R<!0>, -NR9C{0)NR9R!e, -NR*S(0)2R18 i -€{0}NR<9>R<R>}; pri čemu svaki vodonik na navedenom Ci-Cs alkil, Cs-Cs alkenil, Cj-Gć alkinil, C3-C5 cikloalkil, Gs-Css aril, 342 članom heteroaliciklil i 5*6 članom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NKfe, -§(0)(R<9>, -S(0)2NR<s>R'°, -SCOvOR<*>. -NO2, -CN, -OR9, .C(0)R<v>,«OC(0)R<*>-NR<$>C(O)R<t0,>~C(0) OR9, -C^HR^NR^l10, •NRsC(0)NR%!6, -NR»S<0)&Rw ili -CCOJNR<9>^<6>; svaki R7 i R* je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Csalkil, Cs-Gs alkenil, Cs-C*alkinil, C3-C* cikloalkil, Cs-Cjs aril, 3*12 elani heteroaliciklil I 5-6 člani heteroariL pri Čemu svaki vodonik na navedenom Ci-C* alkil, Cs-Cs alkenil, C2-G5alkinil, Ca-Cs cikloalkil, CVC-i2 aril, 3-12 članom heteroaliciklil | 5-6 elanom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -011, -NH2, -S(0)iR<9>, «S{0)2NR<9>R<10>, -SCC^OR9,~NQj, -OR* -CN, -C(0)R<9>, -OC(0)R<9>, -NR<*>C(O)l<<i0>.~C(0)OR<9>, ~ C(~ m* JXRV,~NR.<9>C(Q)NR<»>R<!5>, -NR<s>S(0)iR<10>ili -C(0)NR<9>RiS;svaki R* i R<i0>je nezavisno izabra« ođ vodonika, Ct-Gs alkil, C2-G5 alkenil, Ca-Cs alkinil, Cj~C<> cikloalkil, C$-C» aril, 3-12 članog heteroaliciklil i 5-6 Slanog heteroaril prstena; mjeO, 1,21113; nje 0,1,2 ili 3; pje 0,1,2,3 51*4; svaki q je nezavisno GV1,2 iii 3; svaki r je nezavisno 0,1 ,. 2 il\ 3; i svaki i je nezavisno 0,1 iii 2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  2. 2, Jedinjenje u skladu sa patentnim zahievorn 1 formule (V) naznačeno time što; A je prsten izabran od €«*Ćj2 aril i 5-6 članog heteroaril prstena; R<1>je izabranhtgrupe koja sadrži vodonik, Cj«C$ alkil,C2-C3aiketuJ, tVC> alkinil, Cj-Cg cikloalkil, C$-C» aril, 3-12 člani heteroaliciklil 15-6 člani heteroaril prsten, pri čemu svaki vodonik na navedenom Cj-C& alkil, Cj-Cs alkenil, Cj-Ce alkinil, Cs-Cg cikloalkil, Cs-Csi aril, 3-12 elanom heteroaliciklil i 5-6 članom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa- halogenom, -OH, -NHa, -S(0>R<9>, »S(0)aNR^^ .S(0)2OR<9>, -CN, -OR* -C(0)R<s>, -OC(0)R*, -NR9C(0)RJ(>, -C(Q}OR* -C(<«>NR<*>)NR<9>R<,<!>, -NR.sC(0}NR9Rie, -NR<9>S(0)jR<iU>ili -C<O3>IR<9>R<i0>; svaki R2 je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži halogen, C5-C5alkil, C2-C* alkenil, C2-G, alkinil, C-3-C&cikloalkil, C&- C12 aril, 3-12 člani heteroaliciklil, 5-6 člani heteroaril prsten, -SCO)^7, -SCO^NR'R<8>, -S(0)3OR<?>, -N02, -<CRJR<%NR'TR8, -N{CR5Rć)(CRsR6)(}NR7Rg, -OR<7>, ^CR^^CR^O^7.4XCRSR*)(€R%&}<^.7, -CN, -C(0)R<7>, -OC(0)R<7>, -OCCR^6)^7, -NR<7>C(0)R<8>, ~{CR5R e)«C(0)OR7, -(CR^^^NR'R<*>, -C(=NR<7>)NR<7>R<8>t-NR<7>C(0)NR<7>R<s>, -NR7S(0)2RS i <CR*R6),C(0)NR7R*; pri č^mu -svaki; vodonik na navedenom Ci-C* alkil, Cs-Cćaikeml, Oj-Cć alkinil, Cj-Cecikloalkil, Q,~Ci2 ari!, 3-12 članom heteroaliciklil i 5-6 članom heteroaril prsteni) može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NHj, -S(0),1^, -S(0)2NR9R'e, -S(0)2OR<9>, -NOs, -OR<9>, -CN, -C(0)R9 -OC(0)R^ -NR<9>€(0)R<50>, -C(0}OR9, -C(-NR9}NR$R'°4 -NR9C(O)NR9R}0, -NR<9>S(O)2R<i0>ili -C(O)NR<9>R<!0>; R? i R<*>su svaki nezavisno izabrani od vodonika, Cr-C* alkili C3-G5 cikloalkil grupe, pri čem« svaki vodonik na Cj-Cs alkil i Ca-C* cikloalkil grupi može da bude »»atvisao opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH*, -S(0),R9, ^OJaNlAt1* -S(0)aOR<*>, -NO?, *CN>-OR9, -C(0)R9 -OC(0)R9 -NR<9>C(0)R<H>}, -C(0) 0R<S>, *C(~NR<9>)NR%<!0>, -NR<*>C(0)NR9R<!8>3-NR<9>S(0)2R<ls>ili -CCOJNR^R'<8>;svaki R<*>i R* je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci-Cs alkil, Ca-Csalkenil, C2-C* alkinil, Cj-C*cikloalkil, Ce- Cn aril, 3-12 člani heteroaliciklil, 5-6 člani heteroaril prsten, -OH, -NJrfc, -S(0>R* -S{0)2NR<9>R<f*>, -S(0)2.OR9, -NO2, -CN, -OR* -C(G)R* -0C(O)R<*>, -NR<9>C(O)R<!0>, -C(0}OR<9>, -C(^R<9>}NR<9>E<50>, -R<9>C(O)NR<!>,R<i0>,~NR%(0)2R'<0>i -C{0)NR9Rso; pri čemu svaki vodonik na navedenom Ci-C$ aiki^ C2-C6alkenil, Gz-Cs alkinil, Cj-Gs cikloalkil, Cs-Cu aril, 3-12 članom heteroaliciklil i 5-6 članom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -Nf Ij, -S(0)tR9, -SCO^NR'<R>^, -S(Q)2OR<9>t»NOa, «CH -OR<9>, -C(0)R<9>, -OG(0)R<*>*NR<§>C(0)R<!*>«C(0)GR<*>, -CC-NR^NR^R'<0>,~NR<9>C(O)NR<9>R<!0>, -NR^(0)2<R>'<0>ili -C(0)NR^R<10>; svaki R7" i Rs je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Cs-O, alkil, C2-C4 alkenil, CV Gj alkinil, Ca-Gs cikloalkil, C6-G2 aril, 3-12 elani heteroaliciklil 15-6 člani heteroaril prsten, pri čemu svaki vodonik na navedenom C}-C<$ alkil, Ca-Ca alkenil, C2-C4alkinil, Ca*Gscikloalkil, Gs-Cta aril, 3-12 Članom heteroaliciklil i 5-6 članom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH2, -S(0)tR<9>>-S(0)2NR9R!ci, -S(0)20R3, -N02j ~ORl>, -CN, -C(0}R<?>, -OC(0)R9 .NR?C(0)R,fl, -C(0)OR<9>, -C(-NR<9>)NR<s>R<l0>}-NR<9>C(0}NR<9>R<so>, »NR<9>S<0.feR<10>ili~C{O)NR<9>R<i0>; svaki R<9>i R30 je nezavisno izabran od vodonika, Ci~ Ck alkil, C2-G5alkenil, C2-C* alkinil, C3-G» cikloalkil, €<s-C?2 aril, 3-12 članog heteroaliciklil i 5-6 članog heteroaril 'prstena; pjeO, 1,2,3 ili 4; svaki q je nezavisno 0,1,2 ili 3; i svaki t je nezavisno 0,1 ili 2; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  3. 3. Jedinjenje u skladu sa patentnim zabievom I formule (Vi) naznačeno time Što: A je prsten izabran od C&-Ci2aril i 5-6 članog heteroaril prstena; R<!>je Izabran iz grupe koja sadrži vodonik, G$»C&aikil,C?.~ C<>alkenil, Oj-Cs alkinil, Cs-Gs cikloalkil, C**Cu aril, 3-12 člani heteroaliciklil i 5-6 člani heteroaril prsten, pri čemu svaki vodonik na navedenom tVGjalkil, CjrCkalkenil, C2-C5, alklnii, Cs-Cs cikloalkil, d- di aril, 3-1:2 Članom heteroaliciklil i 5-6 članom heteroaril prstenu može đa bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OM, -Nffa,.-SCO)tR<*>, -S(Q)aNlt9Rw) -S(0)2OR9, -NO2, -CN, -OR* -C<O)RVOC(0}R* ~NR9C(0)R}i), -C(030R<9>, ~C<«NR9}NR*R*°, -NR<9>C(O)NR<?>R<i0>, -NR9S(O)zRf0 ih -C(0)NR<9>R<ia>:svaki R2 je nezavisno izabran Iz gmpe koja sadrži halogen, Cj-Qj alkil, Ca-Gj alkenil, CVCs alkinil, Cj-C« cikloalkil, Cs-C« aril, 3-12 elani heteroaliciklil, 5-6 Slani heteroaril, -S(0)5R7? -S(0)2NR<7>R<s>} -S(0}2OR<7>, -NO2, -(CR5R6)t,NR?Rs, -N(CRHl6)(CR5R%NR7Rs,-OR<7>, -OCCR^KCR^^mOR'^OCCR^^JCCR^6^7, -CN, -C(Q)R\ -OC(0)R<7>, ~G(CR?Rć)qR7* -<NR7>C(<G>)R<8>, -(CR5R^C(0)ORT, -(CR^R'^NR'R« -C(-NR7)NR7R6, -NR7C(0)NR7R8, -MR<7>S(0)-R<8>i -(CR<5>R%C(0)NR<7>R<s>; pri Čemu svaki vodonik na navedenom Ci-Cs alkil, CVC(,alkenil, Ca-Cs alkinil, Cj-C<» cikloalkil, Cć-Cis aril, 3-12 elanom heteroaliciklil 15-6 članom heteroaril prstenu može đa bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NH3,~ S( OW\»SCO^R^<0>, S( Oym\ -N02, -OR<9>, -CN, -Ć(0)R* ~OC(0)R9, -NR<9>C(O)R.<!0>, -C(0)OR* ^^R*)NR9R10, .NR9C(0)NR$R,<!, -NRsS<0)2Ri9 ili -C(0)NR<5>R'<8>; R? i R<4>su svaki nezavisno izabrani od vodonika, Ci-Cs alki! i C?'C? cikloalkil .grupe, pri čemu svaki vodonik na CVCs alkil 1CVCscikloalkil grupi može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom,-OH, -NHa, -S(0}R9~S(0)jNR<s>R<iC>, -S(G)2OR<9>, -NO*, -CN, -OR9, -C(0)R<9>,«OC(0)R<9>, -NR<9>C(O)R<i0>>-C(O) OR<9>, -C(*NR9)NR'R'* ~NR9C(0}NR5Riff, -NR?S(0)2R,& ili -CCOJNR'R'<*>; svaki R<s>1R6 je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ct-Cs alki], Cj-C*alkenil, Oj-Ci alkinil, G3-C&cikloalkil, Co-Cia aril, 3-12 člani heteroaliciklil, 5-6 člani heteroaril, -OH, -NHi, -S(0>J<9, -SCO^NR^R<1*>-${0}aOR<9>, -NO<*>, -CN, -OR<9>, -C(Q}R9 -OC(0)R9, >NR*C<0)R50, -C<0)ORs, -C(-NR<9>)NR<9>R'°t-R9C(0}NR9R!9, -NR^CC^R10 i -C(0)NR<9>R<Ki>;pri čemu svaki vodonik na navedenom Ci~C$ alki!, Ca-C$ alkenil, Ca-G> alkinil, Cs-C* cikloalkil, Ca- Ca ari!, 3-12 članom heieroalicikHl i 5-6 članom heteroaril prstenu može da bude nezavisno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, »NHa, rS(0>R*, -S(Q)aNR<9>R<K>>, -S{0)20R9, -N02, -CN, -OR9, -C(0)R<s>, ~OC(Q)R9 -NR<JC(O)Ri0, -C(0) OR<9>, -C(-NR<9>)NR<9>R<13>, -NR^CCONR^10, -NR9S(0)2Rm ili-C^NR^10; svaki R7 i R<*>je nezavisno izabran iz grupe koja sadrži vodonik, Ci«Q alkil, Cz-Gs alkenil, Ca-Cs alkinil, Ć?-G$ cikloalkil, Cs-Cn arsl, 3-12 Člani heteroaliciklil i 5-<5 člani heteroaril, pri čemu svaki vodonik na navedenom Ci-Cs alkil, Ca-C^alkenil, Ga-Cs alkinil, Cs-Cć cikloalkil, Cs-Cia aril, 3-12 članom heteroaliciklil i 5-6 Članom heteroaril prstenu može da bude nezavidno opciono supstituisan sa halogenom, -OH, -NHa, -$(0>R9t -S(0>2NR9RiUt -SCO^OR<*>, -NOa, -OR9, -CN, -C(0)R9, -QG{Q)R*, -NR9C(O)R!0, -C(0)OR9s -C(-NR9)NR9R!0: -NR'^^Ni^R*0, -NR9S(0)2R,() ili -C(0)NR*R'°; svak! R<9>i R10 je nezavisno izabran od vodonika, Gj-Cs alkil, Cj-C« alkenil, C?-C<i alkinil, C3-
RS20170280A 2012-03-06 2013-02-20 Derivati makrociklina za tretman proliferativnih bolesti RS55814B1 (sr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201261607485P 2012-03-06 2012-03-06
US201361759307P 2013-01-31 2013-01-31
PCT/IB2013/051391 WO2013132376A1 (en) 2012-03-06 2013-02-20 Macrocyclic derivatives for the treatment of proliferative diseases
EP13717555.0A EP2822953B9 (en) 2012-03-06 2013-02-20 Macrocyclic derivatives for the treatment of proliferative diseases

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS55814B1 true RS55814B1 (sr) 2017-08-31

Family

ID=48142828

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20170280A RS55814B1 (sr) 2012-03-06 2013-02-20 Derivati makrociklina za tretman proliferativnih bolesti

Country Status (45)

Country Link
US (2) US8680111B2 (sr)
EP (1) EP2822953B9 (sr)
JP (2) JP5823066B2 (sr)
KR (1) KR101692600B1 (sr)
CN (1) CN104169286B (sr)
AP (1) AP2014007881A0 (sr)
AR (1) AR090230A1 (sr)
AU (1) AU2013229173B2 (sr)
BR (1) BR112014022106B1 (sr)
CA (1) CA2863892C (sr)
CL (1) CL2014002084A1 (sr)
CO (1) CO7061081A2 (sr)
CR (1) CR20140370A (sr)
CY (2) CY1118771T1 (sr)
DK (1) DK2822953T5 (sr)
DO (1) DOP2014000188A (sr)
EA (1) EA026155B9 (sr)
ES (1) ES2621220T3 (sr)
FR (1) FR19C1062I2 (sr)
GE (1) GEP201606560B (sr)
GT (1) GT201400187A (sr)
HR (1) HRP20170287T2 (sr)
HU (2) HUE034118T2 (sr)
IL (1) IL234062A (sr)
LT (2) LT2822953T (sr)
LU (1) LUC00131I2 (sr)
MD (1) MD4590C1 (sr)
ME (1) ME02630B (sr)
MX (1) MX350844B (sr)
MY (1) MY169142A (sr)
NI (1) NI201400102A (sr)
NL (1) NL301006I2 (sr)
NO (1) NO2019034I1 (sr)
NZ (1) NZ627900A (sr)
PE (1) PE20142339A1 (sr)
PH (1) PH12014501992A1 (sr)
PL (1) PL2822953T3 (sr)
PT (1) PT2822953T (sr)
RS (1) RS55814B1 (sr)
SG (1) SG11201404451TA (sr)
SI (1) SI2822953T1 (sr)
TW (1) TWI476199B (sr)
UY (1) UY34657A (sr)
WO (1) WO2013132376A1 (sr)
ZA (1) ZA201406244B (sr)

Families Citing this family (81)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RS56015B1 (sr) 2013-01-31 2017-09-29 Vertex Pharma Piridon amidi kao modulatori natrijumovih kanala
CA2916605C (en) 2013-06-28 2018-04-24 Pfizer Inc. Solid forms of a macrocyclic kinase inhibitor
CN104513253A (zh) 2013-10-01 2015-04-15 南京波尔泰药业科技有限公司 用于治疗增殖性疾病的大环化合物
CA2931550C (en) 2013-12-13 2023-09-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Prodrugs of pyridone amides useful as modulators of sodium channels
ES2933350T3 (es) 2014-01-24 2023-02-06 Turning Point Therapeutics Inc Macrociclos de diarilo como moduladores de proteína quinasas
TWI672141B (zh) 2014-02-20 2019-09-21 美商醫科泰生技 投予ｒｏｓ１突變癌細胞之分子
CN103772272A (zh) * 2014-03-04 2014-05-07 定陶县友帮化工有限公司 2-boc-氨基-3-羟基-5-溴吡啶的合成方法
WO2016026423A1 (en) * 2014-08-20 2016-02-25 Teligene Ltd Substituted macrocycles useful as kinases inhibitors and methods of use thereof
EP3183256A4 (en) * 2014-08-20 2018-05-30 Teligene Ltd. Substituted macrocycles useful as kinases inhibitors and methods of use thereof
KR102569226B1 (ko) * 2014-10-13 2023-08-22 아트린 파마슈티컬스 엘엘씨 운동실조 모세혈관확장증 및 Rad3-관련 (ATR) 단백질 키나제 억제제
CN107207471B (zh) 2014-12-02 2020-06-26 伊尼塔公司 用于治疗神经母细胞瘤的组合
KR102584344B1 (ko) * 2015-01-16 2023-09-27 추가이 세이야쿠 가부시키가이샤 병용 의약
AU2016287568B2 (en) 2015-07-02 2020-08-20 Turning Point Therapeutics, Inc. Chiral diaryl macrocycles as modulators of protein kinases
RU2765181C2 (ru) 2015-07-06 2022-01-26 Тёрнинг Поинт Терапьютикс, Инк. Полиморфная форма диарильного макроцикла
PT3733187T (pt) 2015-07-21 2024-11-08 Turning Point Therapeutics Inc Macrociclo de diarilo quiral e utilização do mesmo no tratamento do cancro
PT3798222T (pt) 2015-07-31 2024-01-22 Pfizer Forma cristalina de base livre de lorlatinib
JP2018529719A (ja) 2015-09-30 2018-10-11 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツングＭｅｒｃｋ Ｐａｔｅｎｔ Ｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ ｍｉｔ ｂｅｓｃｈｒａｅｎｋｔｅｒ Ｈａｆｔｕｎｇ Ａｌｋ陰性がんを処置するためのｐｄ−１系結合アンタゴニストおよびａｌｋ阻害剤の組合せ
AU2016370846B2 (en) 2015-12-18 2022-08-25 Ignyta, Inc. Combinations for the treatment of cancer
WO2017148325A1 (zh) 2016-03-03 2017-09-08 深圳市塔吉瑞生物医药有限公司 一种大环化合物及包含该化合物的组合物
CN105646355A (zh) * 2016-04-07 2016-06-08 戊言医药科技（上海）有限公司 3-(羟甲基)-1-甲基-吡唑-5-甲腈的制备方法
CN105732355A (zh) * 2016-04-07 2016-07-06 戊言医药科技（上海）有限公司 1-(5-氟-2-碘苯基)乙酮的制备方法
US11078215B2 (en) * 2016-04-08 2021-08-03 Pfizer Inc. Crystalline forms of lorlatinib maleate
US10301324B2 (en) 2016-04-12 2019-05-28 Atrin Pharmaceuticals LLC Ataxia telengiectasia and rad3-related (ATR) inhibitors and methods of their use
CN105801603B (zh) * 2016-04-13 2018-10-02 成都倍特药业有限公司 一种具有大环结构的alk抑制剂及其制备方法
US10689400B2 (en) 2016-07-28 2020-06-23 Turning Point Therapeutics, Inc. Macrocycle kinase inhibitors
US11071721B2 (en) * 2016-12-02 2021-07-27 Genentech, Inc. Bicyclic amide compounds and methods of use thereof
WO2018137679A1 (en) * 2017-01-25 2018-08-02 Teligene Ltd Process for the Preparation of (10R) -7- (2-aminoacetyl) amino-12-fluoro-2, 10, 16-trimethyl-15-oxo-10, 15, 16, 17-tetrahydro-2H-8, 4- (metheno) pyrazolo [4, 3-h] [2, 5, 11] -benzoxadiazacyclotetradecine-3-carbonitrile
TWI808958B (zh) 2017-01-25 2023-07-21 美商特普醫葯公司 涉及二芳基巨環化合物之組合療法
EP3625214B1 (en) 2017-05-16 2022-07-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Deuterated pyridone amides and prodrugs thereof as modulators of sodium channels
US11485733B2 (en) 2017-06-30 2022-11-01 Bayer Animal Health Gmbh Azaquinoline derivatives
KR102718538B1 (ko) 2017-07-19 2024-10-21 이그니타, 인코포레이티드 엔트렉티닙을 포함하는 약학적 조성물
CN111182903A (zh) 2017-07-28 2020-05-19 特普医药公司 巨环化合物及其用途
HUE062926T2 (hu) * 2017-10-10 2023-12-28 Pfizer Lorlatinib mint szabad bázis hidrátjának kristályos formája
CN111225662B (zh) 2017-10-17 2022-11-22 伊尼塔公司 药物组合物和剂型
US11179412B2 (en) 2017-12-04 2021-11-23 University of Pittsburgh—of the Commonwealth System of Higher Education Methods of treating conditions involving elevated inflammatory response
LT3728271T (lt) 2017-12-19 2022-12-12 Turning Point Therapeutics, Inc. Makrocikliniai junginiai, skirti ligų gydymui
US11529337B2 (en) 2018-02-12 2022-12-20 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Method of treating pain
WO2019168874A1 (en) 2018-02-27 2019-09-06 The Research Foundation For The State University Of New York Difluoromethoxylation and trifluoromethoxylation compositions and methods for synthesizing same
WO2019209633A1 (en) 2018-04-23 2019-10-31 Pliva Hrvatska D.O.O. Solid state forms of lorlatinib and their preparation
WO2019210835A1 (zh) * 2018-05-04 2019-11-07 正大天晴药业集团股份有限公司 作为蛋白激酶调节剂的二芳基大环化合物
CN108621206B (zh) * 2018-05-07 2020-08-14 昆山国显光电有限公司 手套箱系统以及手套箱系统的保养方法
WO2020059705A1 (ja) * 2018-09-18 2020-03-26 株式会社ヤクルト本社 キノリンカルボキサミド誘導体を用いるがん併用療法
CN109232607A (zh) * 2018-09-20 2019-01-18 沈阳药科大学 劳拉替尼的合成方法
CN109081810A (zh) * 2018-09-20 2018-12-25 沈阳药科大学 1-甲基-3–((甲氨基)甲基)-1h-吡唑-5-腈的合成方法
US12077528B2 (en) 2018-11-28 2024-09-03 Shenzhen Targetrx, Inc. Preparation method for deuterated macrocyclic compound
US20220040324A1 (en) 2018-12-21 2022-02-10 Daiichi Sankyo Company, Limited Combination of antibody-drug conjugate and kinase inhibitor
CN109651397A (zh) * 2019-01-25 2019-04-19 安庆多辉生物科技有限公司 一种劳拉替尼中间体及制备劳拉替尼的方法
CN109651418A (zh) * 2019-01-25 2019-04-19 安庆多辉生物科技有限公司 一种劳拉替尼原料药合成中间体及有机金属钯催化偶联制备劳拉替尼的方法
CN109651398B (zh) * 2019-01-25 2021-07-30 安庆多辉生物科技有限公司 一种合成劳拉替尼的溴代物中间体及催化合成劳拉替尼的方法
CN111499514B (zh) * 2019-01-31 2024-09-20 连云港润众制药有限公司 一种罗沙司他中间体的制备方法
WO2020190827A1 (en) * 2019-03-21 2020-09-24 Merck Sharp & Dohme Corp. Inhibitors of histone deacetylase useful for the treatment or prevention of hiv infection
EP3844166B1 (en) * 2019-05-14 2023-07-12 Teligene Ltd Substituted macrocycles useful as kinase inhibitors
WO2021011345A1 (en) * 2019-07-18 2021-01-21 Pliva Hrvatska D.O.O Crystalline lorlatinib : fumaric acid and solid state form thereof
CN112321604A (zh) * 2019-08-05 2021-02-05 华东理工大学 大环类jak2抑制剂及其应用
CN110483551B (zh) * 2019-08-30 2021-10-22 北京赛思源生物医药技术有限公司 一种劳拉替尼游离碱的晶体
WO2021069571A1 (en) 2019-10-10 2021-04-15 Sandoz Ag Polymorph of lorlatinib
CN112812128B (zh) * 2019-11-18 2024-04-02 正大天晴药业集团股份有限公司 作为alk和ros调节剂的大环化合物
CN112824417A (zh) * 2019-11-21 2021-05-21 上海天慈国际药业有限公司 一种劳拉替尼的制备方法
BR112022010924A2 (pt) 2019-12-06 2022-09-06 Vertex Pharma Tetra-hidrofuranos substituídos como moduladores de canais de sódio
CN111170908B (zh) * 2020-01-09 2021-08-17 北京印刷学院 一种2，4-二甲基-3-甲磺酰基卤苯的合成方法
TW202146017A (zh) 2020-03-05 2021-12-16 美商輝瑞股份有限公司 間變性淋巴瘤激酶抑制劑及周期蛋白依賴型激酶抑制劑之組合
EP4146205A4 (en) 2020-05-05 2024-05-29 Nuvalent, Inc. HETEROAROMATIC MACROCYCLIC ETHERS AS CHEMOTHERAPEUTIC AGENTS
IL297832A (en) * 2020-05-05 2023-01-01 Nuvalent Inc Macrocyclic heteroaromatic chemotherapeutic agents
WO2021233296A1 (zh) * 2020-05-18 2021-11-25 深圳市塔吉瑞生物医药有限公司 大环化合物的固体形式及其制备和用途
EP4178958A4 (en) * 2020-07-10 2024-12-11 Blossomhill Therapeutics, Inc. MACROCYCLES AND THEIR USE
WO2022133037A1 (en) * 2020-12-17 2022-06-23 Blossomhill Therapeutics, Inc. Macrocycles and their use
CN114805371B (zh) * 2021-01-19 2024-05-24 江苏开元药业有限公司 含2-氨基嘧啶大环类化合物及其制备方法和用途
WO2022182845A1 (en) * 2021-02-25 2022-09-01 Blossomhill Therapeutics, Inc. Macrocycles and their use
EP4320153A1 (en) 2021-04-09 2024-02-14 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for the treatment of anaplastic large cell lymphoma
CN115246843A (zh) * 2021-04-26 2022-10-28 苏州东南药业股份有限公司 一类十四元稠环衍生物及其应用
SMT202500481T1 (it) 2021-06-04 2026-01-12 Vertex Pharma N-(idrossialchil(etero)aril)tetraidrofuran carbossammidi come modulatori di canali del sodio
TW202320768A (zh) * 2021-10-01 2023-06-01 美商努法倫特公司 雜芳族大環醚化合物之固體形式、醫藥組成物及製備
CA3244798A1 (en) 2022-02-21 2023-08-24 Universidade Nova De Lisboa COMPOUNDS AND COMPOSITIONS AGAINST NEURODEGENERATIVE DISEASES
EP4230201A1 (en) 2022-02-21 2023-08-23 Universidade Nova De Lisboa Composition for treating neurodegenerative diseases
US20250326769A1 (en) * 2022-10-19 2025-10-23 Nuvalent, Inc. Heteroaromatic macrocyclic ether chemotherapeutic agents
CN115746023B (zh) * 2022-10-27 2024-08-09 复旦大学 一种作为蛋白激酶抑制剂的含吲唑结构的杂环大环化合物及其制备方法
WO2024046512A2 (zh) * 2022-12-01 2024-03-07 中国医药研究开发中心有限公司 含氮大环类化合物及其制备方法和医药用途
WO2024146541A1 (en) * 2023-01-03 2024-07-11 Guangdong Newopp Biopharmaceuticals Co., Ltd. Macrocyclic compounds as usp1 inhibitors
CN120344244A (zh) * 2023-11-15 2025-07-18 深圳市塔吉瑞生物医药有限公司 治疗alk阳性或ros1阳性的非小细胞肺癌的方法
WO2025212729A1 (en) * 2024-04-03 2025-10-09 Blossomhill Therapeutics, Inc. Macrocyclic compounds and their use
WO2026008023A1 (zh) * 2024-07-04 2026-01-08 正大天晴药业集团股份有限公司 哒嗪胺类化合物及其医药用途

Family Cites Families (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5376645A (en) 1990-01-23 1994-12-27 University Of Kansas Derivatives of cyclodextrins exhibiting enhanced aqueous solubility and the use thereof
KR0166088B1 (ko) 1990-01-23 1999-01-15 . 수용해도가 증가된 시클로덱스트린 유도체 및 이의 용도
GB9518953D0 (en) 1995-09-15 1995-11-15 Pfizer Ltd Pharmaceutical formulations
WO2000035296A1 (en) 1996-11-27 2000-06-22 Wm. Wrigley Jr. Company Improved release of medicament active agents from a chewing gum coating
GB9711643D0 (en) 1997-06-05 1997-07-30 Janssen Pharmaceutica Nv Glass thermoplastic systems
DE10239042A1 (de) 2002-08-21 2004-03-04 Schering Ag Makrozyclische Pyrimidine, deren Herstellung und Verwendung als Arzneimittel
DK1603570T5 (da) 2003-02-26 2013-12-09 Sugen Inc Aminoheteroarylforbindelser som proteinkinaseinhibitorer
WO2004078682A2 (en) 2003-03-05 2004-09-16 Irm Llc Cyclic compounds and compositions as protein kinase inhibitors
JO2785B1 (en) * 2003-05-27 2014-03-15 شركة جانسين فارماسوتيكا ان. في Quinazoline derivatives
RU2346996C2 (ru) 2004-06-29 2009-02-20 ЮРОПИЭН НИКЕЛЬ ПиЭлСи Усовершенствованное выщелачивание основных металлов
CA2578370A1 (en) 2004-08-25 2006-03-02 Pfizer Inc. Triazolobenzodiazepines and their use as vasopressin antagonists
ES2355923T3 (es) 2004-08-26 2011-04-01 Pfizer, Inc. Compuestos de aminoheteroarilo sustituidos con pirazol como inhibidores de proteina quinasa.
DE602005020465D1 (de) * 2004-08-26 2010-05-20 Pfizer Enantiomerenreine aminoheteroaryl-verbindungen als proteinkinasehemmer
EP1710246A1 (en) 2005-04-08 2006-10-11 Schering Aktiengesellschaft Sulfoximine-pyrimidine Macrocycles and the salts thereof, a process for making them, and their pharmaceutical use against cancer
PL1959955T3 (pl) 2005-12-05 2011-04-29 Pfizer Prod Inc Sposób traktowania nieprawidłowego wzrostu komórek
DK1963302T3 (da) 2005-12-05 2013-04-02 Pfizer Prod Inc Polymorfer af en C-MET/HGFR-inhibitor
JP2010516680A (ja) 2007-01-19 2010-05-20 エックスカバリー，インコーポレイテッド キナーゼ阻害薬化合物
MX2009008756A (es) 2007-03-01 2009-08-27 Chugai Pharmaceutical Co Ltd Compuesto macrociclico.
AP2009004985A0 (en) * 2007-03-13 2009-10-31 Pfizer Prod Inc Erythromycin-based macrolides
EP2265270A1 (en) * 2008-02-04 2010-12-29 OSI Pharmaceuticals, Inc. 2-aminopyridine kinase inhibitors
EP2274288A2 (en) * 2008-04-24 2011-01-19 Incyte Corporation Macrocyclic compounds and their use as kinase inhibitors
WO2009146802A1 (de) * 2008-06-06 2009-12-10 Sanofi-Aventis Makrocyclische harnstoff- und sulfamidderivate als inhibitoren von tafia
KR20110073500A (ko) * 2008-09-08 2011-06-29 메르크 파텐트 게엠베하 오로라 키나아제 억제제로서 마크로사이클릭 피리미딘
WO2010085597A1 (en) 2009-01-23 2010-07-29 Incyte Corporation Macrocyclic compounds and their use as kinase inhibitors
US20120258993A1 (en) 2009-10-21 2012-10-11 Sigma-Tau Industrie Farmaceutiche Riunite S.P.A. Non-natural macrocyclic amide hdac6 inhibitor compounds and their uses as therapeutic agents
US8383793B2 (en) 2010-04-15 2013-02-26 St. Jude Children's Research Hospital Methods and compositions for the diagnosis and treatment of cancer resistant to anaplastic lymphoma kinase (ALK) kinase inhibitors
US8916593B2 (en) * 2010-05-04 2014-12-23 Pfizer Inc. Alkoxy-substituted 2-aminopyridines as ALK inhibitors
ME03376B (me) * 2010-05-20 2020-01-20 Array Biopharma Inc Makrociklička jedinjenja kао inhibiтori trk kinaze
US8975232B2 (en) 2010-07-29 2015-03-10 President And Fellows Of Harvard College Macrocyclic kinase inhibitors and uses thereof
EP2686323A1 (en) 2011-03-16 2014-01-22 Cephalon, Inc. Macrocyclic compounds as alk, fak and jak2 inhibitors

Also Published As

Publication number Publication date
MX2014010716A (es) 2014-09-22
EA026155B1 (ru) 2017-03-31
PH12014501992B1 (en) 2014-11-24
GT201400187A (es) 2015-10-15
KR20140137414A (ko) 2014-12-02
EP2822953B1 (en) 2017-02-01
AU2013229173B2 (en) 2017-06-01
CY2019033I2 (el) 2019-11-27
NO2019034I1 (no) 2019-08-19
JP2016041709A (ja) 2016-03-31
CR20140370A (es) 2014-08-21
JP6002825B2 (ja) 2016-10-05
FR19C1062I1 (sr) 2019-11-22
HUS1900040I1 (hu) 2019-09-30
PT2822953T (pt) 2017-04-06
HUE034118T2 (en) 2018-01-29
AP2014007881A0 (en) 2014-08-31
PH12014501992A1 (en) 2014-11-24
TW201350484A (zh) 2013-12-16
MY169142A (en) 2019-02-18
NL301006I2 (nl) 2020-04-14
ME02630B (me) 2017-06-20
US20140135339A1 (en) 2014-05-15
WO2013132376A1 (en) 2013-09-12
US8680111B2 (en) 2014-03-25
CA2863892A1 (en) 2013-09-12
ZA201406244B (en) 2015-05-27
NZ627900A (en) 2016-08-26
CO7061081A2 (es) 2014-09-19
PE20142339A1 (es) 2015-01-15
EP2822953A1 (en) 2015-01-14
EP2822953B9 (en) 2017-06-21
DOP2014000188A (es) 2014-11-16
SG11201404451TA (en) 2014-09-26
SI2822953T1 (sl) 2017-04-26
MD4590B1 (ro) 2018-08-31
CY1118771T1 (el) 2017-07-12
HRP20170287T2 (hr) 2017-11-03
CN104169286B (zh) 2016-06-08
LTPA2019519I1 (lt) 2019-11-11
EA026155B9 (ru) 2017-06-30
CA2863892C (en) 2016-08-30
LUC00131I1 (sr) 2019-10-11
MD4590C1 (ro) 2019-03-31
ES2621220T3 (es) 2017-07-03
BR112014022106B1 (pt) 2022-08-02
LTC2822953I2 (lt) 2020-12-28
JP2015510879A (ja) 2015-04-13
CN104169286A (zh) 2014-11-26
HRP20170287T1 (hr) 2017-04-21
GEP201606560B (en) 2016-10-25
DK2822953T3 (en) 2017-04-03
FR19C1062I2 (fr) 2020-09-04
DK2822953T5 (en) 2017-09-11
EA201491394A1 (ru) 2015-05-29
KR101692600B1 (ko) 2017-01-03
TWI476199B (zh) 2015-03-11
UY34657A (es) 2013-10-31
BR112014022106A2 (pt) 2017-07-11
PL2822953T3 (pl) 2017-07-31
US20130252961A1 (en) 2013-09-26
LT2822953T (lt) 2017-04-10
IL234062A (en) 2017-08-31
JP5823066B2 (ja) 2015-11-25
CL2014002084A1 (es) 2014-11-03
CY2019033I1 (el) 2019-11-27
AU2013229173A1 (en) 2014-08-21
MD20140086A2 (ro) 2015-01-31
NI201400102A (es) 2015-03-05
MX350844B (es) 2017-09-22
ES2621220T9 (es) 2017-11-23
LUC00131I2 (sr) 2020-07-16
AR090230A1 (es) 2014-10-29
HK1199247A1 (zh) 2015-06-26
US9133215B2 (en) 2015-09-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2013229173B2 (en) Macrocyclic derivatives for the treatment of proliferative diseases
US10570121B2 (en) Substituted dihydroisoquinolinone compounds
EP3339303B1 (en) Aryl and heteroaryl fused lactams
OA17121A (en) Macrocyclic derivatives for the treatment of proliferative diseases