RS56053B1 - Proizvod za regulaciju zdravlja biljaka, postupak za dobijanje navedenog proizvoda i njegova upotreba - Google Patents

Description

Opis

Oblast pronalaska

[0001] Pronalazak se odnosi na oblast proizvoda za upotrebu u poljoprivredi. Posebno, pronalazak se odnosi na upotrebu i dobijanje proizvoda za regulaciju zdravlja biljaka, koji je efikasan protiv stresa koji je izazavan biotičkim i abiotičkim faktorima, i na isti način promoviše generalno povedanje u vegetaciji i zdravlju useva.

Stanje pronalaska

[0002] Trenutno postoji velika zabrinutost za dovoljnu dostupnost hrane za svetsku populaciju koja se nalazi u porastu. Cilj je jasan: poljoprivredna proizvodnja de morati da se udvostruči do 2050 godine da bi se zadovoljile potrebe za hranom svetske populacije.

[0003] Agrohemijska industrija je učinila velike napore da uvede nove proizvode na tržište za kontrolu štetočina, bolesti i korova, ali je nivo konkurentnosti ovih biotičkih stresnih faktora i dalje visok, što ograničava količinu i kvalitet useva. Uvođenjem na tržište novog fitosanitarnog proizvoda uključuje dugi i naročito skupi postupak. Neophodni zahtevi koji se tiču toksikoloških istraživanja, eko- toksikoloških istraživanja, istraživanja koja se tiču faktora uticija na sredinu, istraživanja ostataka, itd., ograničavaju kapacitet kompanija da razviju nove aktivne supstance.

[0004] Pored značaja negativnog uticaja biotičkog faktora stresa na poljoprivrednu proivodnju, iz globalne perspektive ograničavajuda uloga faktora koji dovode do abiotičkog stresa je još važnija. Faktori kao što su suša, salinitet, kiselost, niske i visoke temperature, vodeni stres, UV zračenja, teški metali, itd., dovode do toga da su skoro sva kultivisana područja pod sub-optimalnim uslovima za rast biljaka, čak i kod zemalja koje imaju razvijenu poljoprivredu.

[0005] Cilj globalnog poboljšanja uslova (CE) mora da bude važan deo upravljanja za integrisanu zaštitu biljaka. U tom smislu, predloženi su novi fitosanitarni proizvodi koji su efikasni za kontrolu i biotičkog i abiotičkog stresa.

[0006] Organski proizvodi na bazi bakra su skoro predloženi kao alternativa za neorganske proizvode na bazi bakra koji imaju ogroman uticaj na životnu sredinu. Organski proizvod na bazi bakra je stoga opisan za kontrolu patogena biljaka i zasniva se na kombinaciji monomernih i polimernih kompleksa bakra kao što su pektinati ili poligalakturonati (ES 2231015 B1). Pomenuti proizvod, međutim, ima smanjenu fizičkohemijsku stabilnost što prouzrokuje obrazovanje čvrstih supstanci u suspenziji i stoga njegovu smanjenu poljoprivrednu efikasnost. Takođe postoje proizvodi koji sadrže bakar heptaglukonat (Hydromix, Alibio Biomix, Dabquel mix, itd.) sintetičkog porekla na tržištu, stoga u njihovom procesu sinteze oni uključuju inertnu materiju koja kasnije prelazi u konačnu formulaciju istih.

[0007] Sa druge strane, dokument ES 2303809B2 opisuje kompoziciju koja sadrži smešu bakar monoglukonata i bakar monogalakturonata kao aktivnog sastojka. Čak iako je pomenuta kompozicija efikasnija u odnosu na biljne patogene i neškodljivija u odnosu na prethodnu, sadrži jone bakra koji precipitiraju u prisustvu glukonata i galakturonata, tako da je smanjena količina rastvorljivog bakra, i stoga njegova prava efikasnost.

[0008] Sa druge strane, različita jedinjenja koja osnažuju biljke za povedanje bujnosti useva i zdravlja tako da imaju više uravnotežen rast, bolje razvijaju i prozvode, i dalje pojačavaju njihove odbrane za kontrolu štetočina i bolesti su poznati u oblasti tehnike. Ova jedinjenja za osnaživanje biljaka, ili biostimulansi, su obično prirodnog porekla i dobijeni su od patogena ili od biljnog materijala, kao što su amino kiseline, glikozidi, proteini, ekstrakti alge, itd. Stoga, na primer, ekstrakti algi se koriste da poboljšaju rast mandarine i pomorandže (Fornes et al., 2002, "Effect of a seaweed extract on the productivity of ’de Nules’ clementine mandarin and Navelina orange", Botanica Marina 45:486-489) ili rast paprike (Arthur et al., 2003, "Effect of a seaweed concentrate on the growth and yield of three varieties of Capsicum annum, South African Journal of Botany 69, 207-211).

[0009] Navedeni pronalazači su otkrili jedinjenje za zaštitu biljaka na bazi oligogalakturonata niske molekulske težine koji su esterifikovani sa rastvorljivim solima prelaznih metala koji se odabiraju od Zn, Mn, Fe, Mo i Co, koji ne uključuje bakar i indukuje i pokrede odbrambene mehanizme kod biljaka protiv oštedenja koja su prouzrokovana patogenima (biotički stres) i raznim nepovoljnim faktorima koji prouzrokuju abiotički stres. Ova kompozicija dalje povedava bujnost tretiranih biljaka i zdravlje.

[0010] Različite kompozicije koje obuhvataju smešu oligomera galakturonske kiseline su opisane u oblasti tehnike DE 69808262 T2 JPH05168490; CN102630673; SUMIN LEE ET AL (Plant Physiology, 21, 147-152 (1999)) "Oligogalactoronic Acid and Chitosan reduce stomatal aperture by inducing the evolution of reactive osygen species from guard cells of tomato and Commelina communis 1"; PAUL D BISHOP ET AL: (J. Biol. Chemistry, 259, 13172-13177 (1984)) "Isolation and characterization of the proteinase inhibitor-inducing factor from tomato leaves. Identity and activity of poly-and oligogalacturonide fragments"; CAMEJO D ET AL: (Biologia Plantarum, 56, 537-544 (2012)) "Oligogalactornides stimulate antioxidant system in alfalfa roots’) ali nijedna od njih ne navodi ili predlaže ove oligomere galakturonske kiseline da budu esterifikovane sa prelaznim metalom.

[0011] US5952308 opisuju jestive kompozicije koje obuhvataju prehrambeni proizod i agens koji promoviše mineralnu apsorpciju koji obuhvata oligogalakturonsku kiselinu, koja po potrebi sadrži mineral. GB 1 553 749 prikazuje farmaceutske kompozicije koje se zasnivaju na kompleksima poligalakturonske kiseline i metalnog katjona da se poboljša i poveda apsorpcija esencijalnih elemenata. Oba dokumenta se odnose na kompozicije koje su namenjene za ljudsku upotrebu, ali pre ovog pronalaska, nije postojao bilo koji nagoveštaj koji sugeriše uspešnu upotrebu ovih preparata kao agrohemikalija.

[0012] U ovom kontekstu, kompozicija za upotrebu u pronalasku mora da razmatra proizvod koji reguliše zdravlje biljaka, stoga je njen doprinos ključan u postizanju ciljeva takozvane "Druge zelene revolucije", koja ima za cilj da udvostruči proizvodnju hrane od sada do godine 2050.

Cilj pronalaska

[0013] Stoga, cilj predmetnog pronalaska je da se obezbedi kompozicija za poljoprivrednu upotrebu koja obuhvata aktivni sastojak koji sadrži smešu oligomera galakturonske kiseline, pri čemu broj jedinica galakturonske kiseline ima opseg između 1 i 10.

[0014] Drugi cilj predmetnog pronalaska je da se obezbedi postupak za dobijanje pomenute kompozicije.

[0015] Još jedan cilj predmetnog pronalaska je takođe da se obezbedi postupak za indukovanje odgovora na biotički stres i/ili za indukovanje odgovora na biotički stres kod biljaka koje su pogodne za kultivaciju, kao i za indukovanje i stimulaciju njihove samostalne odbrane i/ili za povedanje njihove bujnosti i zdravlja, što obuhvata primenu pomenute kompozicije na biljke koje su pogodne za kultivaciju.

Opisi i slike

[0016]

Slika 1 pokazuje izgled 6 nedelja starih biljaka Arabidopsis thaliana koje su izložene vodenom stresu i tretirane svaka za 15 dana nakon 15 dana starosti sa kompozicijom koja sadrži oligomere galakturonske kiseline iz pronalaska (AM), kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska koja je esterifikovana sa Zn/Mn (SVL-303) i uporednu kompoziciju oligomera galakturonske kiseline pronalaska esterifikovanom sa Cu (SVL-081).

Slika 2 pokazuje izgled listova biljke paprike 4,5 meseci starosti koja je izložena vodenom stresu 13 dana nakon tretmana sa kompozicijom oligomera galaturonske kiseline pronalaska (AM), kompozicijom bakar sulfata pentahidrata (primenjen u istim dozama Cu kao SVL-081), kompozicija oligomera galakturonske kiseline pronalaska koja je esterifikovana sa Zn/Mn (SVL-303) i uporedna kompozicija oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa Cu (SVL-081).

Slika 3 pokazuje izgled listova biljke paprike 4,5 meseci starosti koja je izložena vodenom stresu i tretirana svakih 15 dana nakon 21 dana starosti sa kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska (AM), kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska koja je esterifikovana sa Zn/Mn (SVL-303) uporedna kompozicija oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa Cu (SVL-081).

Slika 4 pokazuje masu i težinu biljaka paprike 4,5 meseci starosti koji su izloženi vodenom stresu i tretirani svakih 15 dana nakon 21 dana starosti sa kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska (AM), kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska koja je esterifikovana sa Zn/Mn (SVL-303) uporedna kompozicija oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa Cu (SVL-081). N=1.

Slika 5 pokazuje procenat gubitka vode u listovima biljaka paprike 4,5 meseci starosti koji su izloženi vodenom stresu i tretirane 15 dana nakon 21 dan starosti sa kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska (AM), kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska koja je esterifikovana sa Zn/Mn (SVL-303) i uporedna kompozicija oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa Cu (SVL-081). N=10.

Slika 6 pokazuje srednju vrednost procenata biljaka paradajza pogođenim hladnim vremenskim uslovima kod biljaka koje nisu tretirane (T1) i kod biljaka koje su izložene tretmanu sa uporednom kompozicija oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa Cu (T2-SVL-081), sa kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Zn/Mn (T3-SVL-303), sa kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Fe (T4-SVL-320), i sa proizvodom koji indukuje odbrane odbrane od stresa u oblasti tehnike(T5).

Slika 7 pokazuje srednju vrednost procenata biljaka paradajza pogođenim hladnim vremenskim uslovima u odnosu na uzorak koji je izložen tretmanu sa uporednom kompozicijom oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa Cu (T2-SVL-081), sa kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Zn/Mn (T3-SVL-303), sa kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Fe (T4-SVL-320), i sa proizvodom koji indukuje odbrane od stresa u oblasti tehnike (T5).

Slika 8 pokazuje srednji broj listova koji su inficirani sa Phytophthora infestans kod netretiranih biljaka paradajza (T1) i kod biljaka paradajza koje su izložene tretmanu sa uporednom kompozicijom oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa Cu (T2-SVL-081), sa kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Zn/Mn (T3-SVL-303), sa kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Fe (T4-SVL-320), i sa proizvodom koji indukuje odbrane od stresa u oblasti tehnike (T5).

Slika 9 pokazuje srednji broj biljaka koje su inficirane sa Phytophthora infestans kod netretiranih biljaka paradajza (T1) i kod biljaka paradajza koje su izložene tretmanu sa uporednom kompozicijom oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa Cu (T2-SVL-081), sa kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Zn/Mn (T3-SVL-303), sa kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Fe (T4-SVL-320), i sa proizvodom koji indukuje odbrane od stresa u oblasti tehnike (T5).

Slika 10 pokazuje srednji broj biljaka koje su inficirane sa Phytophthora infestans kod netretiranih biljaka paradajza (T1) i kod biljaka paradajza koje su izložene tretmanu sa uporednom kompozicijom oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa Cu (T2-SVL-081), sa kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Zn/Mn (T3-SVL-303), sa kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Fe (T4-SVL-320), i sa proizvodom koji indukuje odbrane od stresa u oblasti tehnike (T5).

Slika 11 pokazuje srednji broj biljaka koje su ubijene od strane Phytophthora infestans kod netretiranih biljaka paradajza (T1) i kod biljaka paradajza koje su izložene tretmanu sa uporednom kompozicijom oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa Cu (T2-SVL-081), sa kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Zn/Mn (T3-SVL-303), sa kompozicijom oligomera galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Fe (T4-SVL-320), i sa proizvodom koji indukuje odbrane od stresa u oblasti tehnike (T5).

Detaljni opis pronalaska

[0017] Predmetni pronalazak obezbeđuje kompoziciju za poljoprivrednu upotrebu, u daljem tekstu "kompozicije koje se upotrebljavaju u pronalasku", obuhvataju aktivni sastojak koji se sastoji iz smeše oligomera galakturonske kiseline, pri čemu broj jedinica galakturonske kiseline ima opseg između 1 i 10.

[0018] U kontekstu pronalaska, termin "smeša oligomera galakturonske kiseline, pri čemu broj jedinica galakturonske kieline ima opseg između 1 i 10" se odnosi na smešu koja se dobija od nekih ili svih navedenih: monomera, dimera, trimera, tetramera, itd., do dekamera, galakturonske kiseline.

[0019] U posebnom izvođenju, kompozicija koja se koristi u pronalasku, aktivni sastojak se sastoji iz smeše oligomera galakturonske kiseline, pri čemu broj jedinica galakturonske kiseline ima opseg između 1 i 8. U drugom posebnom izvođenju, kompozicija koja se koristi u pronalasku, aktivni sastojak se sastoji iz smeše oligomera galakturonske kiseline, pri čemu broj jedinica galakturonske kiseline ima opseg između 4 i 8. U poželjnom izvođenju kompozicija pronalaska, aktivni sastojak se sastoji iz smeše oligomera galakturonske kiseline, pri čemu broj jedinica galakturonske kiseline ima opseg između 1 i 4.

[0020] U drugom posebnom izvođenju, kompozicija koja se koristi u pronalasku, obuhvata 0,1-10% masenih aktivnog sastojka u odnosu na ukupnu masu kompozicije. U poželjnom izvođenju, kompozicija obuhvata 0,5-5% masenih aktivnog sastojka u odnosu na ukupnu masu kompozicije. U još poželjnijem izvođenju, kompozicija obuhvata 2% masenih aktivnog sastojka u odnosu na ukupnu masu kompozicije.

[0021] U drugom posebnom izvođenju, kompozicija koja se koristi u pronalasku, aktivni sastojak se sastoji iz smeše oligomera galakturonske kiseline koji su esterifkovani sa prelaznim metalom koji je odabran od Zn, Mn, Fe, Mo, Co i njihovih smeša, pri čemu broj molekula galakturonske kiseline ima opseg između 1 i 10. U poželjnom izvođenju, aktivni sastojak se sastoji iz smeše oligomera galakturonske kiseline koji su esterifkovani sa prelaznim metalom koji je odabran od Zn, Mn, Fe i njihove smeše, pri čemu broj molekula galakturonske kiseline ima opseg između 1 i 10. U još poželjnijem izvođenju, aktivni sastojak se sastoji iz smeše oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa prelaznim metalom koji je odabran od Fe i smeše Zn i Mn, pri čemu broj molekula galakturonske kiseline ima opseg između 1 i 10.

[0022] Ovi metali su odabrani zbog njihove osobine da podstiču fiziološku aktivaciju. Uloga ovih metala kao fizioloških aktivatora se je široko priznata i opisana u literaturi. Osim toga, za razliku od bakra koji je prethodno korišden, njihovi fitotoksični efekti u koncentracijama koje su predložene su praktično nula jer su rasponi tolerancije vedine gajenih bilajka u odnosu na isti mnogo vede od onih kod bakra.

[0023] U drugom posebnom izvođenju, kompozicije koja se koristi u pronalasku, aktivni sastojak se sastoji iz smeše oligomera galakturonske kiseline koji su esterifkovani sa prelaznim metalom koji je odabran od Zn, Mn, Fe, Mo, Co i njihovih smeša, pri čemu broj molekula galakturonske kiseline ima opseg između 1 i 4. U drugom posebnom izvođenju, kompozicija koja se koristi u pronalasku se sastoji iz smeše oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa sa prelaznim metalom koji je odabran od Zn, Mn, Fe, Mo, Co i njihovih smeša, pri čemu broj molekula galakturonske kiseline ima opseg između 4 i 10. U drugom posebnom izvođenju kompozicija, aktivni sastojak se sastoji iz smeše oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa sa prelaznim metalom koji je odabran od Zn, Mn, Fe, Mo, Co i njihovih smeša, pri čemu broj molekula galakturonske kiseline ima opseg između 4 i 8.

[0024] U poželjnom izvođenju kompozicije koja se koristi u pronalasku, aktivni sastojak se sastoji iz smeše oligomera galakturonske kiseline koji su esterifkovani sa prelaznim metalom koji je odabran od Zn, Mn, Fe i njihovih smeša, pri čemu broj molekula galakturonske kiseline ima opseg između 1 i 4. U drugom posebnom izvođenju, kompozicija koja se koristi u pronalasku se sastoji iz smeše oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa sa prelaznim metalom koji je odabran od Zn, Mn, Fe i njihovih smeša, pri čemu broj molekula galakturonske kiseline ima opseg između 4 i 10. U drugom poželjnom izvođenju kompozicija aktivni sastojak aktivni sastojak se sastoji iz smeše oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa sa prelaznim metalom koji je odabran od Zn, Mn, Fe i njihovih smeša, pri čemu broj molekula galakturonske kiseline ima opseg između 4 i 8.

[0025] U još poželjnijem izvođenju kompozicije koja se koristi u pronalasku, aktivni sastojak se sastoji iz smeše oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa prelaznim metalom koji je odabran od Fe i smeše Zn i Mn, pri čemu broj molekula galakturonske kiseline ima opseg između 1 i 4. U drugom još poželjnijem izvođenju kompozicije aktivni sastojak se sastoji iz smeše oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa prelaznim metalom koji je odabran od Zn i Mn, pri čemu broj molekula galakturonske kiseline ima opseg između 4 i 10. U drugom još poželjnijem izvođenju kompozicije aktivni sastojak se sastoji iz smeše oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa prelaznim metalom koji je odabran od Fe i smeše Zn i Mn, pri čemu broj molekula galakturonske kiseline ima opseg između 4 i 8.

[0026] U drugom posebnom izvođenju, kompozicija koja se koristi u pronalasku obuhvata 0,1-20% masenih metala u odnosu na ukupnu masu kompozicije. U poželjnom izvođenju, kompozicija obuhvata 1-10% masenih metala u odnosu na ukupnu masu kompozicije. U još poželjnijem izvođenju, kompozicija obuhvata 2-8% masenih metala u odnosu na ukupnu masu kompozicije. Stoga, na primer uslučaju upotrebe Fe kao prelaznog metala, kompozicija de poželjno obuhvatiti 2-5% masenih ovog metala, poželjno 3,5%. Na isti način, u slučaju upotrebe smeše Mn i Zn, kompozicija de poželjno sadržati 2-6% masenih od svakog od ovih metala, poželjno 3%.

[0027] Pored prethodno opisanog aktivnog sastojka, kompozicija koa što se koristi u pronalasku može da sadrži druge komponente ili aditive koji olakšavaju njegovu formulaciju za kasniju primenu. Stoga. U drugom posebnom izvođenju kompozicije, kompozicija sadrži iz jednog ili više aditiva koji su poznati stučnjacima u oblasti tehnike kao što su agensi za formiranje kompleksa i stabilizatori, na primer. Stoga,bilo koje jedinjenje sa stabilizujudim osobinama u stanju tehnike kao što je EDTA, urea ili maltodekstrin, na primer, može da se koristi kao stabilizator. Takođe, bilo koje jedinjenje sa osobinama za stvaranje kompleksa u oblasti tehnike, kao što je glukonat, na primer, poželjno natrijum glukonat, može da se koristi kao agens za obrazovanje kompleksa. Glukonat koji se koristi u kompoziciji pronalaska je komercijalno dostupan glukonat koji je doslovno čist sa 99% čistode, za razliku od ranijih patenata ES 2231015 B1 i ES 2303809 B2, i ne dobija se istovremeno sa galakturonatima iz pektina, ved se naknadno dodaju kompoziciji kao aditiv za poboljšanje njene rastvorljivosti i stabilnosti.

[0028] U posebnom izvođenju, kompozicija koja se koristi u pronalasku obuhvata 18-22% masenih glukonata u odnosu na ukupnu masu kompozicije. U poželjnom izvođenju, kompozicija obuhvata 20% masenih glukonata u odnosu na ukupnu masu kompozicije. U drugom posebnom izvođenju, kompozicija obuhvata 0,5-10% masenih EDTA u odnosu na ukupnu masu kompozicije. U drugom posebnom izvođenju, kompozicija obuhvata 1-20% masenih uree u odnosu na ukupnu masu kompozicije. U drugom posebnom izvođenju, kompozicija obuhvata 0,5-10% masenih maltodekstrina u odnosu na ukupnu masu kompozicije. U poželjnom izvođenju, kompozicija obuhvata 4% masenih EDTA u odnosu na ukupnu masu kompozicije. U poželjnom izvođenju, kompozicija obuhvata 10% masenih uree u odnosu na ukupnu masu kompozicije. U poželjnom izvođenju, kompozicija obuhvata 2% masenih maltodekstrina u odnosu na ukupnu masu kompozicije.

[0029] U drugom aspektu, pronalazak obezbeđuje postupak za dobijanje kompozicije pronalaska kao što je opisano gore u tekstu, u daljem tekstu "postupak pronalaska", se sastoji iz slededih koraka:

(a) rastvaranja 10-25% masenih pektina u odnosu na ukupnu masu konačne kompozicije u nižem alkoholu na temperaturi 55-70°C i dodavanje 1-5% jake kiseline po zapremini u odnosu na ukupnu zapreminu krajnje kompozicije;

(b) ceđenje rastvora dobijenog u koraku (a) da se razdvoji tečna frakcija i čvrsti ostatak; i (c) izlaganje tečne frakcije dobijene u koraku (b) frakcionoj destilaciji da se dobije rastvor oligomera galakturonske kiseline pri čemu broj jedinica galakturonske kiseline ima opseg između 1 i 10, i

(d) dodavanje rastvorljive soli prelaznog metala odabranog od Zn, Mn, Fe, Mo, Co i njihovih smeša u rastvor koji se dobije u koraku (c).

[0030] Pektin iz koraka pod (a) je pektin hrane iz voda (u osnovi jabuka, breskva i citrusno vode) koji se rastvra u nižem alkoholu. U kontekstu pronalaska, termin "niži alkohol" se odnosi na alkohol sa 1 do 4 ugljenikova atoma, kao što je metanol, etanol ili izopropil alkohol, na primer; poželjno metanol.

[0031] Pomenuti rastvor se priprema na pogodnoj temperaturi prema redosledu 55-70°C i uz mešanje u zatvorenom reaktoru za mešanje ili drugom pogodnom uređaju iz oblasti tehnike. Sledede se dodaje 1-5% po zapremini jake kiseline u odnosu na ukupnu zapreminu krajnje kompozicije. Pomenuta jaka kiselina može da bude hlorovodonična kiselina, fosforna kiselina ili sumporna kiselina, poželjno hlorovodonična kiselina. Mešanje se zatim održava u vremenu koje je neophodno da se dogodi kompletna reakcija, koje de biti u redu od 24 sata. Opisani uslovi visoke temperature, niskog pH i produženog vremena mešanja, dovode do skoro kompletne hidrolize polimera perkina, sa prinosom niske molekularne težine oligomera galakturonske kiseline sa 1 do 10 jedinica galakturonske kiseline.

[0032] Izvođenjem ove rekcije u prisustvu metanola kao nižeg alkohola, na primer, galakturonska kiselina je metilovana, za razliku od klasične sinteze u kojoj se izvodi hidroliza kiseline (Singthong et al., Food Hydrocolloids 19(5): 793-801). Ova razlika može da dovede do povedanja aktivnosti kompozicije pronalaska, iako pronalazak ne nastoji da se pridržava posebno za jednu teoriju. Osim toga, s obzirom da alkohol blokira redukujude krajeve molekula galakturonske kiseline, njihov potencijal za redukovanje metala se smanjuje, što je jasno prednost u slučaju esterifikacije oligomera galakturonske kiseline kompozicije pronalaska sa prelaznim metalom.

[0033] U poželjnom izvođenju, postupak pronalaska u koraku pod (a) dodaje se 14% masenih pektina u odnosu na ukupnu masu krajnje kompozicije se rastvara u metanolu na temperaturi 65°C, i 1,9% po zapremini hlorovodonične kiseline u odnosu na ukupnu zapreminu krajnje kompozicije.

[0034] Ceđenje u koraku pod (b) može da se izvede prema bilo kom pogodnom postupku u oblasti tehnike. Slično frakciona destilacija u korak pod (c) može da se izvede prema bilo kom pogodnom postupku u oblasti tehnike što de odrediti stručnjak iz oblasti tehnike.

[0035] U posebnom izvođenju postupka pronalaska, postupak obuhvata dodatni korak u kojem se rastvor koji se dobija u koraku pod (c) zagreva do isušivanja da se dobije prah oligogalakturonata. U drugom posebnom izvođenju postupka pronalaska, postupak obuhvata drugi dodatni korak gde se rastvorljiva so prelaznog metala odabira od Zn, Mn, Fe, Mo, Co i njihovih smeša i dodaje u vodeni rastvor prethodno dobijenog praha oligogalakturonata da se dobije rastvor oligomera galakturonske kiseline koji je esterifikovan sa prelaznim metalom. U poželjnom izvođenju, prelazni metal se odabira od Zn, Mn, Fe i njihovih smeša. U još poželjnijem izvođenju, prelazni metal se odabira od Fe i smeše od Zn i Mn. Bilo koja so koju stručnjak iz oblasti tehnike smatra pogodnom, može da se koristi kao rastvorljiva so za odabrani prelazni metal. U posebnom izvođenju postupka pronalaska, rastvorljiva so prelaznog metala je sulfat, acetat, hlorid, karbonat ili oksid.

[0036] U postupku pronalaska, postupak obuhvata dodatni korak pod (d) gde se rastvorljiva so prelaznog metala odabira od Zn, Mn, Fe, Mo, Co i njihovih smeša i dodaje u rastvor koji se dobija u koraku pod (c) da se dobije rastvor oligomera galakturonske kiseline koji je esterifikovan sa pomenutim prelaznim metalom. U poželjnom izvođenju, prelazni metal se odabira od Zn, Mn, Fe i njihovih smeša. U još poželjnijem izvođenju, prelazni metal se odabira od Fe i smeše Zn i Mn. Bilo koja so koju stručnjak iz oblasti tehnike smatra pogdnom, može da se koristi kao rastvorljiva so za odabrani prelazni metal. U posebnom izvođenju postupka pronalaska, rastvorljiva so prelaznog metala je sulfat, acetat, hlorid, karbonat ili oksid.

[0037] U drugom posebnom izvođenju postupka pronalaska, postupak obuhvata naknadni korak u kome se aditivi dodaju u dobijenom rastvoru oligomera galakturonske kiseline koja je esterifikovana prelaznim metalom koji je odabran od Zn, Mn, Fe, Mo, Co i njihove smeše, dobijenim prema jednom od dva prethodna paragrafa.

[0038] Kao što je prethodno pomenuto, navedeni aditivi mogu da budu stabilizatori ili sredstva za formiranje kompleksa kao što je EDTA, urea, maltodekstrin ili glukonat, na primer. Stoga u poželjnom izvođenju postupka pronalaska, odabrani aditiv je glukonat, poželjno natrijum glukonat.

[0039] Kada je aditiv koji se dodaje glukonat, joni odabranog prelaznog metala su redukovani do manjeg stepena kompozicijom galakturonata u pronalasku, kao što je prethodno pomenuto, za razliku od jona bakra koji se koriste u drugim patentima koji pripadaju istim autorima koji precipitiraju u vedoj proporciji kao metalni bakar, čime se smanjuje efikasna količina metala koja je dostupna u rastvoru i nastaju problemi koji su vezani za ostatak.

[0040] Kompozicija koja se koristi u pronalasku koja je ovako dobijena de biti primenjenja fertirigacijom ili folijarnim prskanjem u odgovarajudim dozama u zavisnosti od useva, vegetativnog perioda i drugih nespecifičnih okolnosti, čime se postiže sistemsko dejstvo aktivnog sastojka.

[0041] U folijarnom prskanju, neophodna doza kompozicije se rastvara u dovoljnoj količini vode da bi se olakšala jednaka distribucija proizvoda na usevu. Tačna kalibracija opreme koja se koristi za primenu mora biti osigurana.

[0042] Uobičajeni standardi koji se primenjuju u tretmanima fertirigacije se prate u primeni kroz sistem za navodnjavanje.

[0043] Kao što je navedeno, kompozicija može da se koristi kao sredstvo za primenu na listovima biljaka ili kroz navodnjavanje zbog toga što se njen efekat pokazao jednakim mehanizmima stečene hemijske otpornosti i sistemskih i prirodnih procesa odbrane kod biljaka. Ovo znači da nije neophodno da se u potpunosti prekrije drvo pri folijarnoj primeni, čime se na taj način olakšava posao poljoprivrednika. Zaista, s obzirom da se njegov mehanizam delovanja krede kroz biljku, i da je sam proizvod sistemski, masivna primena kao ona koja se koristi za konvencionalne proizvode od bakra, da bi se dobio odgovarajudi rezultat nije potrebna. Osim toga, mogudnost da se koristi u navodnjavanju pored očiglednog komforta primene uvodi vedu sigurnost promenljive, jer nema nikakvog uticaja na korisnu faunu. Kao što brojevi izvršenih testova pokazuju, neželjeni efekti nisu uočeni na korisnim insektima. Rizik za organizme koji nisu ciljni, smatra se beznačajnim. Na isti način, zbog svog specifičnog načina delovanja, potencijal za stvaranje otpornosti je izuzetno nizak. Nasuprot tome, kompozicija prema pronalasku može da bude deo plana za tretman da se ograniči pojavljivanje otpornosti prema specifičnim fungicidima.

[0044] U istom smislu, kompozicija koja se koristi u pronalasku ne pokazuje rizike akumulacije ostataka u usevu ili u proizvodima koji se dobijaju iz useva (ulja, vina...).

[0045] Kompozicija ne pokazuje rizik fitotoksičnosti i nije toksična za one koji je primenjuju. S obzirom na karakteristike formulacije, kompozicija ima veoma povoljan toksikološki profil, što predstavlja jasnu prednost u odnosu na vedinu formulacija koje se koriste kao fungicidi, naročito u proizvodima koji su na bazi bakra.

[0046] Sa druge strane, kompozicija koja se koristi u pronalasku je efikasna za sprečavanje oštedenja koje je prouzrokovano biotičkim faktorima stresa kao što su patogeni po tome što deluje na biljku i u njoj indukuje odbrambene mehanizme protiv patogena. Pomenuta kompozicija takođe pokazuje odličnu efikasnost za sprečavanje oštedenja koja su prouzrokovana brojnim štetnim faktorima koji prouzrokuju abiotički stres kod biljaka. Takođe aktivira mehanizme koji prouzrokuju vegetativni razvoj, stoga dovode do opšteg poboljšanja vegetacije useva i zdravlja. Činjenica da je prirodni proizvod, koji ima vrlo malo, ili skoro nikakav uticaj na životnu sredinu, da je bezbedan za korisnike, životnu sredinu i potrošače, kao što je prethodno navedeno mora dalje da se istakne.

[0047] Ukratko, prednosti kompozicije koja se koristi u pronalasku su sledede:

- To je prirodni proizvod

- Poboljšava generalni kvalitet useva

- Pruža otpornost na zajedno i abiotički i biotički stres

- Ima način delovanja na osnovu efekta pojačivača

- Oštedenje prouzrokovano patogenima je neostvarivo kao rezultat njegove aktivnosti - Siguran je proizvod za korisnike

- Siguran je proizvod za životnu sredinu

- Siguran je proizvod za krajnje potrošače

- Ima jako malo ili nema problema sa ostacima

[0048] Prema tome, u drugom aspektu pronalazak obezbeđuje postupak za indukovanje odgovora na biotički stres kod biljaka koje su spremne za kultivaciju koji obuhvata davanje kompozicije koja je opisana gore u tekstu takvim biljakama pomodi fertirigacija ili folijarnim prskanjem. U posebnom izvođenju, pronalazak obezbeđuje postupak za sprečavanje ili smanjenje oštedenja koje je prouzrokovano patogenima kod biljaka koje su spremne za kultivaciju.

[0049] Kompozicija koja se koristi u pronalasku omogudava ublažavanje oštedenja koja mogu da izazovu bolesti koje su uzrokovane gljivičnim patogenima, oomicetama i bakterijama.

[0050] Kompozicija daje prednost katalizaciji biosinteze polifenola i fitoaleksina, supstanci koje nastaju kao prirodni odbrambeni mehanizmi kod biljaka, koji su toksični za gljivice i bakterije, tako da ograničavaju širenje patogena. Kompozicija deluje, prema tome, kao fungistatik, fungitoksin, i bakteriostatični agens dok u isto vreme obezbeđuje samo-odbranu protiv bolesti koje su gljivičnog iili bakterijskog porekla.

[0051] Pronalazak takođe obezbeđuje postupak za indukovanje odgovora prema abiotičnom stresu kod biljaka koje su spremne za kultivaciju koji obuhvata davanje kompozicije koja je opisana gore u tekstu takvim biljakama pomodi fertirigacija ili folijarnim prskanjem. U posebnom izvođenju, pronalazak obezbeđuje postupak za sprečavanje ili smanjenje oštedenja koje je prouzrokovano sušom, visokim temperaturama, niskim temperaturama, salinitetom, teškim metalima, ultraljubičastim zračenjima, i/ili kiselosti zemljišta. U poželjnom izvođenju, pronalazak obezbeđuje postupak za sprečavanje ili smanjenje oštedenja koje je prouzrokovano sušom, visokim temperaturama i/ili niskim temperaturama.

[0052] Slično, u drugom aspektu pronalaska, obezbeđen je postupak za povedanje viralnosti i zdravlja biljaka koje su spremne za kultivaciju, naznačen time da obuhvata primenu na takvim takvim biljkama kompozicije kao što je gore u tekstu opisano pomodu fertirigacije ili folijarnim prskanjem.

[0053] Kompozicija koja se koristi u pronalasku favorizuje fotosintezu i razvoj tkiva biljaka, tako da biljke useva koje su tetirane pomenutom kompozicijom pokazuju značajno povedanje u vitalnosti zajedno i u odnosu na useve koji nisu tretirani i u odnosu na useve koji su tretirani konvencionalnim proizvodima. Kompozicija može prema tome, da posmatra proizvod za ojačanje koji doprinosi poboljšanju vegetacije useva, indukuje odbrambene odgovore na abiotički stres, koji se prevodi u bujne biljke sa izvanrednim sjajem i bojom. Stoga su više bujnije biljke manje podložne da trpe oštedenje koje je prouzrokovano od stane patogenih infekcija.

[0054] Doza za davanje kao i vremenski intervali između davanja se određuju na osnovu tipa biljke koja se tretira, stresogenog faktora koji se tretira (na primer gljivice, oomicete ili bakterija u pitanju) i tipa davanja (folijarno prskanje ili fertigacija).

[0055] Konačno, kompozicija koja se koristi u pronalasku je veoma stabilna i homogena tako da ne zahteva kontinuirano mešanje u rezervoaru za davanje niti predstavlja bilo kakav rizik od priključivanja mlaznica ili dropera.

[0056] Slededi primeri ilustruju pronalazak i ne treba da se posmetraju kao ograničenje njegovog obima.

PRIMER I

Priprema kompozicija za upotrebu koja sadrži 2% masenih oligomera galakturonske kiseline pronalaska

[0057] 40 g hranljivih pektina iz jabuke su uvedeni u zatvoreni reaktor za mešanje gde je dodato 300 ml metanola i zatim 20 ml 12 M hlorovodonične kiseline. Smeša se održava pod refluksom na temperaturi 65°C u vremenskom periodu od 24 sati. Ni u jednom trenutku nije primedeno da se smeša u potpunosti rastvorila. Smeša je zatim ceđena i na taj način su razdvojena dva dela: rastvorljivi deo i nerastvorljivi deo, koji je uklonjen. Rastvorljivi deo je zatim podvrgnut frakcionoj destilaciji da bi se uklonio metanol koji se nalazi u višku, ostavljajudi na taj način samo rastvorenu frakciju galakturonida, u daljem tekstu AM rastvor.

PRIMER II

Priprema kompozicije koja sadrži oligomere galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Fe koja ima Fe sadržaj u vrednosti od 3,5 % masenih

[0058] Rastvor oligomera galakturonske kiseline se priprema kao što je navedeno u primeru I. Zatim se dodaje 19,5 % masenih Fe sulfata na temperaturi od 25°C pod uslovima mešanja u vremenskom periodu od 2 sata dok se u potpupnosti ne rastvori. Zatim se dobija rastvor oligogalakturonata gvožđem se zatim dobija i dodaje se 20% komercijalno dostupnog natrijum glukonata da se dobije SVL-320 rastvor.

PRIMER III

Priprema kompozcije koja sadrži oligomere galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Mn i Zn koja ima Mn sadržaj u vrednosti od 3% masenih i Zn sadržaj u vrednosti od 3% masenih

[0059] Rastvor oligomera galakturonske kiseline se priprema kao što je navedeno u primeru I. Zatim se dodaje 9.5% masenih Mn sulfata i 13.7% masenih Zn sulfata na temperaturi od 25°C pod uslovima mešanja u vremenskom periodu od 4 sata dok se u potpupnosti ne rastvori. Zatim se dobija rastvor oligogalakturonata mangana i cinka, i dodaje se 20% komercijalno dostupnog natrijum glukonata da se dobije SVL-303 rastvor.

PRIMER 1

Efekat kompozicija koje se dobijaju u primerima I i III na vegetativni razvoj i vodeni stres kod Arabidopsis thaliana i biljaka paprike. Istaživanje toksičnosti.

[0060] Ovo istraživanje je sprovedeno u odeljenju za Fiziologiju biljaka u IVIA Istraživačkom centru (Departamento de Fisiología Vegetal del Centro de Investigacíon IVIA) u Valensiji.

Biljni materijal:

[0061]

- Biljke Arabidopsis thaliana starosti 1 i 2 meseca.

- Biljke paprike starosti 4,5 meseca, koje su gajene u hladu u kudi u vremenskom periodu od dva meseca a kasnije su premeštene na zagrejane oblasti (između 18 i 25°C).

Testovi se sprovode:

[0062] Doza 3 ml/I, pH= 4,5-5,0, testiranih kompozicija se primenjuje pomodu folijarnog prskanja svakih 15 dana.

[0063] Radi poređenja, kompozicija oligomera galakturonske kiseline koji su esterifikovani sa Cu sa sadržajem bakra u vrednosti od 5,5% masenih se priprema prema postupku koji je sličan onom koji se koristi u primerima II i III, ali upotrebom bakar sulfata, i dodaje se 20% komercijalno dostupni natrijum glukonat da se dobije SVL-081 rastvor.

[0064] Sledede kompozicije su stoga testirane:

- AM rastvor,

- SVL-303 rastvor i

- SVL-081 rastvor.

[0065] Zajedno i biljke paprike i Arabidopsis thaliana biljke su izložene vodenom stresu odstranjivanjem navodnjavanja. Simptomi su primedeni 25 dana nakon početka stresa.

[0066] Procenjeni su slededi parametri:

- Procenat vode u listu (%)

- Masa dela u vazduhu (g)

- Visina biljke (cm)

Osmotski pritisak

[0067] Izgled biljaka Arabidopsis thaliana koje su 6 meseci stare, tretirane svakih 15 dana nakon 15 dana starosti sa AM rastvorom, SVL-303 rastvorom i SVL-081 rastvorom, kao što je uočeno. Izgled listova biljaka paprike 4,5 meseci stare 13 dana nakon prethodno naznačnenog tretmana sa AM rastvorom, bakar sulfatom rastvorom pentahidrata (primenjen u dozama istog Cu kao SVL-081), SVL-303 rastvor i SVL-081 rastvor se slično uočava.

[0068] Kao što može da se vidi na slikama 1 i 2, davanje oligomera galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Cu (SVL-081) prouzrokuje folijarno oštedenje i kod biljaka Arabidopsis thaliana i kod biljaka paprike, i rastvor bakar sulfata pentahidrata (CuSO4·5H2O) prouzrokuje manji rast biljaka i manji sjaj listova. Međutim, niti primena oligomera galakturonske kiseline pronalaska (AM), niti primena oligomera galakturonske kiseline pronalaska koji su estrifikovani sa Zn/Mn (SVL-303) pokazuje folijarno oštedenje.

Efekat na vegetativni razvoj

Visina

[0069] Meri se visina i izgled biljaka paprike starosti 4,5, koje su tretirane svakih 15 dana nakon 21 dana starosti sa AM rastvorom, SVL-303 rastvorom i SVL-081 rastvorom, kao što je uočeno. Isprekidana linija označava visinu od 34 cm.

[0070] Kao što može da se vidi na slici 3, tretman sa oligomerima galakturonske kiseline (AM) stimulisao je rast biljaka u vedoj meri, što je dovelo do viših biljaka. Redosled tretmana u odnosu na efekat viših ili kradih biljaka je bio:

AM > SVL-303 > SVL-081.

Biomasa

[0071] Merena je masa biljaka paprike starosti 4,5 meseca, koje su tretirane svakih 15 dana nakon 21 dana starosti sa AM rastvorom, SVL-303 rastvorom i SVL-081 rastvorom,.

[0072] Kao što može da se vidi na slici 4 (N=1), čak iako su uočene velike razlike u visini biljaka koje su tretirane sa oligomerima galakturonske kiseline pronalaska (AM) i sa oligomerima galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Zn/Mn (SVL-303), nisu uočene značajne razlike u masi vazdušnog dela kod tretiranih biljaka.

Efekat na vodeni stres

[0073] Meren je procenat gubitka vode u listovima kod biljaka paprike starosti 4,5 meseci, koje su tretirane svakih 15 dana nakon 21 dana starosti sa AM rastvorom, SVL-303 rastvorom i SVL-081 rastvorom.

[0074] Kao što može da se vidi na slici 5 (N= 10), biljke koje su tretirane oligomerima galakturonske kiseline pronalaska (AM) i sa oligomerima galakturonske kiseline pronalaska koji suesterifikovani sa Zn/Mn (SVL-303) bolje mogu da izdrže vodeni stres zbog aklimatizacije.

[0075] Međutim, kompozicija oligomera galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa bakrom (SVL-081) pokazuju negativnu sinergiju.

[0076] Redosled od vedim ka manjim simptomima stresa, koji su kvantifikovani kao procenat gubitka vode u listovima, je slededa:

SVL-081 >SVL-303=AM.

[0077] Vedina biljaka koje se nalaze pod stresom sazrevaju ranije. Biljke koje su tretirane sa SVL-081 su imale zrele (crvene) paprike, do su biljke koje su tretirane sa AM and SVL-303 imale cvetove i/ili malo nezrelo plod.

[0078] Stoga može da se zaključi da kompozicija pronalaska favorizuje povedanje otpornosti na vodeni stres (abiotički stres).

PRIMER 2

Procena efekata kompozicije koja se dobija u primerima II i III na usev paradajza

[0079] Test je sprovela kompanija SICOP, koja je zvanično priznata od strane Ministarstva poljoprivrede Španije kao nadležne u vođenju Zvanično priznatog testiranja (Ensayos Oficialmente Reconocidos) (EOR 50/03) prema Kraljevskom Dekretu (Real Decreto) 2163/1994. Osmišljavanje eksperimenata, prikupljanje podataka, rezultat analiza i završni izveštaj su svi urađeni prema "Dobroj eksperimentalnoj praksi". Rad na terenu je sproveden pre svega u skladu sa "Dobrom poljoprivrednom praksom", prema EPPO smernicama, sa nekim specifičnim podešavanjima u skladu sa ciljevima istraživanja.

Testirane kompozicije

[0080] Proizvod koji indukuje odbranu od stresa u oblasti tehnike, koji se odnosi na mikrobiološki ekstrakti za jačanje biljaka, u daljem tekstu PSME, u obliku vlažnog praha u koncentraciji od 108 CFU/g, se koristi radi poređenja. Isto tako, kompozicija oligomera galakturonske kiesline koji je esterifikovan sa Cu sa sadržajem bakra u vrednosti od 5,5% masenih primera 1 se takođe koristi radi poređenja.

[0081] Stoga se testiraju sledede kompozicije:

- SVL-303 rastvor,

- SVL-320 rastvor

- SVL-081 rastvor i

- PSME

Usev

[0082]

Usev: Paradajz

Botaničko ime: Solanum lycopersicum

Red: Solanales

Familija: Solanaceae

Podfamilija: Solanoideae

Rod: Solanum

Vrsta: S. lycopersicum

Podvrsta: Santa West

Tip: Grafted into Maxifort

Datum presađivanja: 15.09.12

Gustina setve: 1 biljka/m<2>. Obrezane do tri stabljike. Rastojanje između biljaka: 2 x 0.5 m. Vrsta navodnjavanja: Kap po kap navodnjavanje.

Sistem gajenja: Pod plastikom.

Sistem sadnje: Setva u rasadnik i kasnije presađivanje do konačnog terena.

Materijali i postupci

Uslovi istraživanja

[0083] Test je osmišljen pomodu nasumice raspoređenih parcela za testiranje. Četiri ponavljana su sprovedena za svaku teoriju koja se nalazi u protokolu, sa uključenim uzorkom u parcelama za testiranje. Samim tim, test je zasnovan na 20 nezavisnih parcela za testiranje svaka sa 12 m<2>površine.

[0084] Upotrebljeni biljni materijal je kruškasti čeri paradajz, Santa West podvrsta, nakalemljen na Maxifort. Svaka od parcela za testiranje sadrži približno 12 biljaka koje su orezane do tri grane.

[0085] Fertigacija useva je bila ista u svim parcelama.

Karakteristike efekta staklene bašte

[0086] Test je sproveden u stakleniku koji ima galvanizovanu gvozdenu strukturu. To je tip staklenika sa grebenom i brazdom, severo-južne orijentacije. Ukupna površina je 5840 m<2>, sa dimenzijama 80 m u dužini i 73 m u širini. Ventilacija se nalazi sa strana i krovova koji su prekriveni plastikom. Ima 4 metara visine u grebenu i 3.5 metara u jarku.

[0087] Sistem za navodnjavanje koji se koristi u ovom plasteniku je kap po kap, sa 2 ispusta po m<2>i protokom od 3 l/h.

Zemljište: Od ilovače.

Navodnjavanje: Presađene biljke su prvo odmah navodnjavanje nakon sađenja i zatim su navodnjavanje kap po kap svakih 1-2 dana.

Fizički rad: Nijedan. Malo ručnog okopavanja radi uklanjanja korova.

Đubrivo: Ulazi N, P2O5i K2O putem fertigacije za ciklus kultivacije u svim navodnjavanjima. Mikroelement ulazi kroz vodu za navodnjavanje.

Voda: Analiza vode za navodnjavanje

ODREĐIVANJA REZULTATI

pH (20°C) 7,80

Provodljivost(ms/cm) 0,50

MEQ/L MG/L

Kalijum 0,07 2,74

Natrijum 1,05 24,15

Kalcijum 2,51 50,30

Magnezijum 1,78 21,64

Sulfati 1,42 68,16

Hloridi 1,11 39,41

Nitrati 0,06 3,72

Bikarbonati 2,62 159,82

Karbonati 0,00 0,00

S.A.R. 0,72

Održavanje

[0088] Nijedne mere za održavanje nisu primenjene na parcelama za testiranje.

Testirani tretmani

Primene

[0089] Ukupno su napravljene 3 folijarne primene. Ista mehanizacija se koristi u svim primenama. Tip upotrebljene mehanizacije je MARUYAMA motorizovana leđna prskalica sa radnim pritiskom od 5 atmosfera. Zapremina smeše koja se koristi u prvoj primeni je 750 l/ha, u drugoj primeni je 800 l/ha i u tredoj primeni je 875 l/ha.

Metodologija primene

[0090] Posebno su procenjene dve vrste aktivnosti:

- Odgovor useva na efekat koji indukuje otpornost na abiotički stres, posebno otpornost na hladno vreme.

- Odgovor useva na biotički stres koji prouzrokuje patogen Phytophthora infestans, posebno broj inficiranih listova, broj biljaka koje su inficirane po parceli i broj biljaka koje su ubijene po parceli.

Sprovođenje testa

[0091] Na početku testa, ustanovljen je plan koje opisuje akcije koje treba da se izvode u svakom trenutku prema protokolu:

[0092] Test je uspostavljen u važnoj oblasti useva paradajza gde se bolest prirodno pojavljuje za ciklus kultivacije u kome je test sproveden.

[0093] Prema smernicama protokola, test je preventivno počeo 17-og decembra. Ovog datuma usev je bio između stanja 67 i 72 po BBCH skali (7 ili više cvasti sa cvetovima se otvaraju do 2-og vodnog klastera sa 1-im vodem koje dostiže tipičnu veličinu). Druga primena je izvršena 24 decembra, usev je bio između stanja 67 i74 po BBCH skali (7 ili više cvasti sa cvetovima se otvaraju do -og vodnog klastera sa1 -im vodem koje dostiže tipičnu veličinu). Treda primena je izvršena 31 decembra, usev je bio između stanja 72 i 79 po BBCH skali (2-i vodni klaster sa 1-im vodem dostiže tipičnu veličinu do 9 ili više vodnih klastera, sa plodovima koji dostižu tipičnu veličinu.

[0094] Početak bolesti sredinom decembra poklopio se sa vlažnim periodom i temperaturama koje su idealne za početak Phytophthora infestans. Održavanje uslova koji su idealni za bolest je dovelo do sporog napredovanja u uzorku koji su omogudili pravilno izvođenje testa, sa mogudnošdu da se uporedi efekat proizvoda u odnosu na uzorak.

Rezultati

1- Tolerancija prema hladnom vremenu

[0095] U odnosu na boju listova, razlika u uzorku sa tretiranih parcela (ljubičasto lišde sa manje sjajnosti) je uočeno nakon 14 dana od poslednje primene, tako da je druga primena napravljena 21 dana nakon 3-e primene.

[0096] Tabela 1 pokazuje srednju vrednost biljaka koje su pogođene po parceli.

Tabela 1 – Srednji procenat biljaka paradajza koje su pogođene hladnim vremenom i izložene tretmanu sa različitim testiranim rastvorima

[0097] Slika 6 pokazuje ove rezultate, gde može da se vidi da tretman sa oligomerima galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Zn/Mn (T3-SVL-303) ima jasan efekat na listove, pri čemu se uočavaju sjajniji i tamnozeleni listovi, nakon tretmana oligomerima galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Fe (T4-SVL-320).

[0098] Takođe može da se vidi da uzorak ima ljubičasto obojene listove sa manje sjaja i da je mikrobijalni ekstrakt za ojačanje biljaka (T5-PSME) tretman koji se najgore ponaša u odnosu na ostala tri.

[0099] Tabela 2 pokazuje procente biljaka koje su pogođene hladnim vremenom, izmerene u odnosu na uzorak.

Tabela 2 – Procenat biljaka paradajza koje su pogođene hladnim vremenom koje su izložene tretmanu sa različitim testiranim rastvorima u odnosu na uzorak

[0100] Slika 7 pokazuje ove rezultate, gde može da se vidi da tretman sa oligomerima galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Zn/Mn (T3-SVL-303) obezbeđuje biljci vedu toleranciju prema hladnom vremenu zbog toga što boja listova ima intenzivniji sjaj i manje ljubičaste tonove. Tretman sa oligomerima galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Fe (T4-SVL-320) takođe čini biljku rezistentnijom prema hladnoim vremenu, ponaša se na način koji je veoma sličan sa T3-SVL-303. Stoga, pomenute kompozicije promovišu odgovore otpornosti kod biljaka, posebno prvi od njih.

2- Broj listova koji su inficirani patogenom

[0101] Tabela 3 pokazuje evoluciju broja inficiranih listova po parceli prema svakom od tretmana

Tabela 3 – Srednji broj listova inficiranih sa Phytophthora infestans kod biljaka paradajza koje su izložene tretmanu sa različitim testiranim rastvorima

[0102] Slika 8 pokazuje ove rezultate, gde može da se vidi da su najefektivni tretmani oni u kojima su biljke tretirane sa oligomerima galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Zn/Mn (T3-SVL-303) i oligomerima galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Fe (T4-SVL-320).

3- Broj biljaka koje su inficirane po parceli

[0103] Tabela 4 pokazuje evoluciju broja inficiranih biljaka po parceli prema svakom od tretmana.

Tabela 4 – Srednji broj biljaka koje su inficirane sa Phytophthora infestans kod biljaka paradajza koje su izložene tretmanu sa različitim testiranim rastvorima

[0104] Slike 9 i 10 pokazuju ove rezultate, gde može da se vidi da se statistički značajne razlike između tremana uzorka ne pojaljuju u perodu do sedam dana nakon druge primene zbog toga što je studja započeta na preventivni način. Ove statistički značajne razlike između tretmana i uzorka se održavaju do kraja.

[0105] Najbolji odgovor prema patogenu je rastvor sa oligomerima galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Fe (T4-SVL-320). Odgovor biljaka se dešava u vedoj meri, kako se proizvod akumulira postepeno u biljci, pri tom zaustavljajudi bolest. S obzirom na zapažanja na terenu, ovaj tretman sprečava gljivice da prodru kroz kortekst, i infekcija se zadržava na nivou epidermisa.

4- Broj ubijenih biljaka po parceli

[0106] Tabela 5 evoluciju broja biljaka ubijenih po parceli prema svakom od tretmana.

Tabela 5 – Srednji broj biljaka ubijenih sa Phytophthora infestans kod biljaka paradajza koje su izložene tretmanu sa različitim testiranim rastvorima

[0107] Slika 11 pokazuje ove rezultate, gde može da se vidi da rastvor sa oligomerima galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Fe (T4-SVL-320) utiče da biljka razvija odbrambeni mehanizam koji sprečava patogena da prodire i sprečava od davljenja biljke, stoga prouzrokuje nižu stopu smrtnosti kod biljaka.

[0108] Stoga, može da se zaključi da kao odgovor na tip biotičkog stresa koji je prouzrokovan sa Phytophthora infestans, primena rastvora sa oligomerima galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Fe (T4-SVL-320) pokazuje potpuno novi način delovanja u odnosu na konvencionalne fungicide. Primeduje se da biljka razvija odbrambeni mehanizam kao odgovor na delovanje proizvoda, i na taj način sprečava patogen da prodre u korteks, čime se infekcija ograničava na epidermis, i ne može da se širi. Efekat tretmana je kumulativan.

[0109] Što se tiče pokretanja fizioloških odgovora, tretman sa oligomerima galakturonske kiseline pronalaska koji su esterifikovani sa Fe (T4-SVL-320) je tretman koji pokazuje najvede povedanje u biomasi tretiranih biljaka. Svi tretmani su imali efekat na povedanje bujnosti u odnosu na uzorak. Standard koji se odnosi na mikrobijalni ekstrakt za ojačanje biljaka (T5-PSME) ponašao se gore u odnosu na ostale tretmane.

Claims (12)

PATENTNI ZAHTEVI

1. Upotreba kompozicije koja sadrži smešu oligomera galakturonske kiseline koja je esterifikovana sa rastvorljivom soli prelaznog metala koji je odabran iz Zn, Mn, Fe, Mo, Co i njihovih smeša, kako aktivni sastojak, pri čemu broj jedinica galakturonske kiseline ima opseg između 1 i 10, kao agrohemikalija.

2. Upotreba prema zahtevu 1, pri čemu broj molekula galakturonske kiseline ima opseg između 1 i 4.

3. Upotreba prema zahtevu 1, naznačena time, što sadrži 0,1-10% masenih aktivnog sastojka u odnosu na ukupnu masu kompozicije.

4. Upotreba prema zahtevu 3, naznačena time, što sadrži 2% masenih aktivnog sastojka u odnosu na ukupnu masu kompozicije.

5. Upotreba prema zahtevu 1, naznačena time, što sadrži 0,1-20% masenih aktivnog sastojka u odnosu na ukupnu masu kompozicije.

6. Upotreba prema zahtevu 5, naznačena time, što sadrži 2-8% masenih aktivnog sastojka u odnosu na ukupnu masu kompozicije.

7. Postupak za dobijanje agrohemijske kompozicije prema zahtevu 1, naznačen time , što obuhvata korake:

(a) rastvaranje 10-25% masenih pektina u odnosu na ukupnu masu krajnje kompozicije u nižem alkoholu na temperaturi 55-70°C i dodavanje 1-5% po zapremini jake kiseline u odnosu na ukupnu zapreminu krajnje kompozicije; (b) ceđenje rastvora koji se dobija u koraku pod (a) da se razdvoji tečni deo i čvrsti ostatak;

(c) izlaganje tečnog dela koji se dobija u koraku pod (b) frakcionoj destilaciji da se dobije rastvor oligomera galakturonske kiseline pri čemu broj jedinica galakturonske kiseline ima opseg između 1 i 10, i

(d) dodavanje rastvorljive soli prelaznog metala koji je odabran od Zn, Mn, Fe, Mo, Co i njihovih smeša u rastvor koji se dobija u koraku pod (c).

8. Postupak prema zahtevu 7, naznačen time, što u koraku pod (a) 14% masenih pektina u odnosu na ukupnu masu kompozicije se rastvara u metanolu na temperaturi 65°C, i dodato je 1,9% po zapremini hlorovodonične kiseline u odnosu na ukupnu zapreminu krajnje kompozicije.

9. Postupak za indukovanje odgovora prema biotičkom stresu kod biljaka koje su spremne za kultivaciju, naznačen time, što obuhvata davanje takvim biljkama agrohemijske kompozicije prema zahtevima 1-6 pomodu fertirigacija ili folijarnog prskanja.

10. Postupak prema zahtevu 9 za sprečavanje ili smanjenje oštedenja prouzrokovanog patogenima kod biljaka koje su spremne za kultivaciju.

11. Postupak za indukovanje odgovora prema abiotičkom stresu kod biljaka koje su spremne za kultivaciju, naznačen time, što obuhvata davanje takvim biljkama agrohemijske kompozicije prema zahtevima 1-6 pomodu fertirigacija ili folijarnog prskanja.

12. Postupak prema zahtevu 11 za sprečavanje ili smanjenje oštedenja prouzrokovanog sušom, visokim temperaturama i niskim temperaturama.