RS56729B1

RS56729B1 - Tečni sastav za biološku zaštitu biljaka, postupak njegove proizvodnje i primene

Info

Publication number: RS56729B1
Application number: RS20171272A
Authority: RS
Inventors: Peter Lüth
Original assignee: Bayer Cropscience Biologics Gmbh
Priority date: 2011-05-27
Filing date: 2012-05-18
Publication date: 2018-03-30
Also published as: MA35135B1; BR112013030521B1; MX350520B; CR20130627A; ES2653207T3; HUE037607T2; DE102012010012A1; BR112013030521A2; GT201300298A; WO2012163322A1; EP2713718A1; US20140212387A1; JP2014516042A; MX2013013825A; HRP20171918T1; PL2713718T3; ZA201309681B; EP2713718B1; US9788551B2

Description

Pozadina

[0001] Pronalazak se odnosi na tečni sastav za biološku kontrolu štetočina koji se može skladištiti i koji se sastoji od suspenzije rastvorljive u vodi koja sadrži spore gljiva, gljivične konidije, hlamidospore ili gljivične sklerocije ili njihovu smešu i trisiloksan modifikovan polieterom, postupak za njegovu pripremu i njegovu upotrebu. Područje primene je poljoprivreda i šumarstvo, uključujući hortikulturu, voćarstvo i kultivaciju ukrasnih biljaka i stvaranje i održavanje travnjaka. Posebno je pronalazak namenjen biološkoj zaštiti biljaka, biološkom jačanju biljaka i biološkom poboljšanju zemljišta.

Upotreba sastava na bazi mikroskopskih gljiva ili drugih mikroorganizama, omogućava biološke zaštite useva i time preventivnu ili kurativnu kontrolu bolesti i štetočina jer su ovi patogeni i štetočine usmereni ekološkim aktivnim principima.

Ostali mikroorganizmi, kao što su Trichoderma spp., Pythium oligandrum, Bacillus spp., Pseudomonas spp. i Streptomyces spp., sposobni su da izazovu odgovore kod biljaka koje rezultuju povećanom otpornošću na patogene ili druge stresore, kao što su suvoća, loša ishrana, nepovoljan pH ili visok nivo soli u zemljištu.

[0002] Još neki drugi mikroorganizmi kao što su Trichoderma spp., Penicillium biliii, Azotobacter spp., Azotomonas spp., Azospirillum spp. i Rhizobium spp. dovode do poboljšanja raspoloživosti hranljivih materija u zemljištu ili direktno na korenu biljke.

[0003] Takvi sastavi su ekološki prihvatljivi i koriste prirodne regulatorne mehanizme koji su evoluirali u toku prirodne evolucije.

Iz literature su poznate različite formulacije ili sastavi gde su gljivični mikroorganizmi agensi u biološkim pesticidima, biološkim agensima za ojačavanje biljaka i biološkim đubrivima. Tako, mikroorganizmi npr. formulisani kao granulati koji se mogu raspršavati vodom (VG), prahovi koji se mogu raspršavati u vodi (VP), disperzije ulja (OD) ili koncentrati suspenzije (SC) (Anonymus, 2005).

[0004] Formulacija mora osigurati da proizvodi imaju dobru trajnost. To znači da bi mikroorganizmi trebali održavati svoju vitalnost što je duže moguće čak i pri visokim temperaturama.

[0005] Proizvodi treba da održavaju dobru rastvorljivost/rastvorljivosti u vodi, tako da primena može da bude nanošenje prskanjem ili pomoću sistema za navodnjavanje, a mikroorganizmi (npr. spore gljiva ili bakterijske ćelije) se mogu distribuirati na biljku, štetnig organizam ili na zemljište. U tom kontekstu je posebno važno da mikroorganizmi u vodenim suspenzijama nisu grupisani zajedno, već da se javljaju pojedinačno (npr. gljivične spore ili bakterijske ćelije plutaju odvojene jedne od drugih u suspenziji). Prisustvo agregata u korišćenoj vodenoj suspenziji može da izazove začepljenje prskalica ili da dovede do nehomogene distribucije biološki aktivne supstance u zemljištu ili biljci ili štetnom organizmu, što negativno utiče na efikasnost proizvoda.

[0006] Posebno, mikroorganizam koji se mora potopiti u zemlju da bi u potpunosti izvršio svoje dejstvo (npr. za kontrolu nematoda, insekata tla i patogenih materija), gubi dejstvo u slučaju prisustva većih agregata u suspenziji primene kada se gornji slojevi tla filtriraju kroz strukturu tla.

[0007] Različiti mikroorganizmi ili organi mikroorganizama, naročito gljivične konidije iz roda Beauveria, Isaria, Nomuraea, Meterhizium, Paecilomyces i Penicillium su vodootporni. Ova osobina mikroorganizama delimično komplikuje njihovu primenu. Teško je da se suspenduju u vodi, slabo su raspoređeni na površini biljaka ili štetnih insekata, i teško se sipaju u zemljište.

Nedostatak nekih praškova koji se mogu raspršavati u vodi jeste da je teško sprečiti ispuštanje prašine kada se koriste, što može dovesti do kontaminacije korisnika ili okoline. Mnogi mikrobiološki preparati sadrže samo malu količinu svog aktivnog agensa zbog svoje formulacije. Dakle, postoje preparati koji sadrže samo 1 x 10<7>ili 1 x 10<8>živih gljivičnih konidija po gramu. Uz odgovarajući dobar efekat minimalne stope primene, što je u mnogim slučajevima 1 x 10<11>ili 1 x 10<12>i više gljivičnih konidija po hektaru, niske koncentracije aktivnog sastojka u sastavima uzrokuju visoke troškove (proizvodnja, skladištenje, transport i troškovi primene).

[0008] Živi mikroorganizmi se razlikuju od hemijski sintetizovanih lekova, između ostalog, u pogledu izdržljivosti, pošto nisu stabilni u konvencionalnim rastvaračima. Ako su izloženi nepovoljnim uslovima, oni gube svoju sposobnost klijanja i ulaska. Ovo se dešava tokom produženog skladištenja, inkubacije na višim temperaturama, kontakta sa hemijskim supstancama.

[0009] Moore et al. (Biocontrol Science and Technology 1995, pp.193-199) opisuju skladištenje konidija metarhazijuma u mineralnom ulju i raznim biljnim uljima. Stabilnost skladištenja varira sa prirodom ulja i može biti pozitivno i negativno zahvaćena prisustvom antioksidanata. Pronalazak stoga ima zadatak da razvije tečnost za pripremu koja sadrži štetne gljive, gljivične konidije, hlamidospore ili gljivične sklerocije ili njihove smeše.

Trebalo bi da može dugo vremena da se čuva (najmanje 12 meseci) uz malo tehničkih napora i uz održavanje svoje vitalnosti i agresivnosti na relativno visokoj temperaturi. Dalje, treba da bude dobro suspendovan u vodi i dobro raspoređen u biljku, ciljani organizam ili zemljište. Priprema tečnosti treba takođe biti visoko koncentrisana.

[0010] Predmetni pronalazak je izveden prema patentnim zahtevima 1, 3, 13 i 15. Dalje poželjne varijante, aspekti i detalji pronalaska će postati očigledni iz zavisnih patentnih zahteva, opisa i primera.

[0011] Polazna tačka pronalaska je iznenađujući zaključak da interferencija živih mikroorganizama ili njihovih organa trisiloksanu modifikovanom polieterom dovodi do takvog tečnog sastava. Dalje je iznenađujuće otkriveno da se pri mešanju trisiloksan modifikovanog polietera suspendovani živi mikroorganizmi zadržavaju vitalnost. Još je naročito iznenađujuće što suspendovani živi mikroorganizmi zadržavaju vitalnost tokom 12 meseci skladištenja. Takođe je bilo izuzetno iznenađujuće što se gljivične spore mogu suspendovati u 100% trisiloksanu modifikovanom polieterom, a da ne umru. Čak je i više iznenađujuće, rok upotrebe spora se čak poboljšao suspenzijom u trisiloksanu modifikovanom polieterom.

[0012] Suspenzija gljivičnih spora, gljivičnih konidija, hlamidospora ili gljivičnih sklerocija ili njihova mešavina u trisiloksanu modifikovanom polieterom proizvodi disperzioni koncentrat (DC). U ovom slučaju, tečni sastav pronalaska karakteriše se suspenzijom koja se sastoji od gljivičnih spora, gljivičnih konidija, hlamidospora ili gljivičnih sklerocija i trisiloksana modifikovanog polieterom.

Pronalazak je povoljan jer je rok upotrebe biološkog proizvoda za zaštitu bilja značajno poboljšan u odnosu na proizvode iz stanja tehnike. Pronalazak je takođe povoljan jer vodootporni mikroorganizmi ili njihovi delovi mogu biti suspendovani mnogo bolje u čistom trisiloksanu modifikovanom polieterom nego u vodi, tako da neće biti nikakvih umanjenja mikroorganizama kao što je slučaj u vodenom rastvoru. U slučaju rastvora/suspenzije proizvoda u vodi koja se koristi, ova svojstva se zadržavaju tako da raspodela mikroorganizama ili organa mikroorganizama na biljke ili u zemljište može biti ravnomerna. Još jedna prednost pronalaska je u tome što mikroorganizmi ili njihovi delovi, suspendovani u čistom trisiloksanu modifikovanom polieterom, mogu dobro da se pomešaju sa vodom i stoga se mogu proizvesti različite koncentracije za primenu.

[0013] Iz literature je poznato da se, na primer, gljivične spore primenjuju u vodenim suspenzijama koristeći trisiloksan modifikovan polieterom, kako se nalazi, na primer, u proizvodima Silwet ili Break-Thru ((Akbar et al., 2005; Gatarayiha et al., 2010; Legaspi et al., 2000; Wekesa et al., 2005). Ovde, međutim, trisiloksan modifikovan polieterom je samo mešan kako bi se poboljšala primenljivost konidija neposredno pre njihovog korišćenja u vodi ili suspenziji vodene konidije. Trisiloksan modifikovan polieterom služi samo kao ovlaživač i/ili lepak. Upotreba nejonskih surfaktanata je takođe navedena u DE102004011007, ali samo u kontekstu formulacije na bazi ulja, a ne kao čistih tenzida. Trisiloksan modifikovanom polieterom u obliku nejonskih surfaktanata nalaze se u upotrebi za zaštitu bilja, ali za suspenziju sintetičkih hemijskih sastojaka (DE10036003A1, US6117816A). Međutim, do sada nije bilo poznato da se mikroorganizmi ili njihovi organi mogu formulisati u čistom trisiloksanu modifikovanom polieterom i dugo čuvati u vitalnom stanju. Pored toga, biološki agens za zaštitu bilja koji se sastoji od formulacije živih mikroorganizama kao efikasnog agensa u čistom trisiloksanu modifikovanom polieterom još nije poznat.

[0014] Pronalazak se naročito odnosi tečni sastav koji se može skladištiti za biološku kontrolu štetočina koji sadrži suspenziju koja se sastoji od gljivičnih spora, gljivičnih konidija, hlamidospora ili gljivične sklerocije ili njihove mešavine i trisiloksana modifikovanog polieterom.

[0015] Poželjno je da su gljivične spore, gljivične konidija, hlamidospore ili gljivične sklerocije ili njihove mešavine u tečnom sastavu prema pronalasku imaju usmerene protiv specifičnih biljnih patogena sa antagonističkim i/ili hiperparazitskim delovanjem. Dalje je poželjno da gljivične spore, gljivične konidija, hlamidospore ili gljivične sklerocije ili njihove mešavine u vodenom sastavu pronalaska indukuju kao efekat toleranciju na stres ili povećanje hranljive dostupnosti.

[0016] Postoje organi gljiva koji se koriste, što prema pronalasku mogu biti gljivične spore, gljivične konidije, hlamidospore ili gljivične sklerocije ili mešavine gore navedenih organa. Posebno je poželjna upotreba sledećih gljiva sa antagonističkim dejstvom protiv određenih biljnih patogena:

Ampelomyces quisqualis

Beauveria bassiana

Beauveria brongniartii

Clonostachys rosea

Coniothyrium minitans

Gliocladium catenulatum

Isaria spp.

Laetisaria arvalis

Lecanicillium lecanii

Lecanicillium muscarium

Meterhizium anisopliae

Nomuraea rileyi

Paecilomyces lilacinus

Phoma macrostoma

Pythium oligandrum

Talaromyces flavus

Teratosperma oligociadum

Trichoderma spp.

Verticillium biguttafum

[0017] Kao pečurke, koje poboljšavaju raspoloživost hranljivih materija u zemljištu ili povećavaju otpornost biljaka na stresne faktore (takođe patogene i štetočine), prednost se daje upotrebi:

Penicillium bilaii, Trichodermaspp. kao i svim vrstama koje se mogu klasifikovati u grupu mikorizalnih gljiva.

[0018] Dalje je prema pronalasku poželjan tečni sastav u kom je mikrobiološki agens mešavina navedenih gljivičnih organa ili smeša bilo koja dva od ovih mikroorganizama. Tečni preparat prema pronalasku se priprema na sledeći način:

Biološki aktivni mikroorganizam je kultivisan na odgovarajućem hranljivom medijumu postupcima poznatim metodama per se, kao što je potopljena fermentacija ili čvrsta fermentacija. Prateći kulturu, mikroorganizam ili njegovi poželjno korišćeni organi, odvojeni su od podloge za kulturu. U određenoj varijanti, rastući medijum pokriven mikroorganizmom (posebno u slučaju upotrebe supstrata čvrste kulture) prethodno se osuši. U drugom slučaju, mikroorganizam ili njegovi poželjni organi se koriste nakon razdvajanja od podloge kulture, i suše se korišćenjem sušenja sa zamrzavanjem. Posle razdvajanja i opcionog sušenja, mikroorganizam ili njegovi poželjno korišćeni organi suspendovani su u trisiloksanu modifikovanom polieterom. Poželjno je trisiloksan

Propilenglikol n-butil eter (PnB), CAS br.29387-86-8 (5131-66-8)

Dipropilen glikol n-butil eter (DPnB), CAS No.29911-28-2 (35884-42-5) Dipropilen glikol metil eter acetat (DPMA), CAS No.88917-22-0

Tripropilen glikol metil eter (TPM), CAS No.25498-49-1 i 20324-33-8

Propilen glikol metil eter (PM), CAS No.107-98-2

Propilen glikol metil eter acetat (PMA), CAS br No 108-65-6

Dipropilen glikol metil eter (DPM), CAS No.34590-94-8

Tripropilen glikol monometil eter

Posebno poželjan je trisiloksan modifikovan polieterom Break-Thru, a najpoželjniji je trisiloksan modifikovan polieterom S240, CAS No.134180-76-0, sa hemijskim nazivom Oksiran, metil-, polimer sa oksiranom, mono(3-(1,3,3,3-tetrametil-1-((trimetilsilil)oksi)disilokanil)propil)etera.

[0019] Ukoliko je potrebno, posle kultivacije, pre odvajanja mikroorganizma ili njegovih poželjno korišćenih organa, vrši se tretman podloge kulture supstrata odgovarajućim raspršivanjem ili nakon sušenja pogodnim postupkom mlevenja. Odvajanje mikroorganizma ili njegovih poželjno korišćenih organa zatim sledi poznatim postupcima, kao što su skrining, filtracija, razdvajanje vazduhom, pretakanje ili centrifugiranje.

[0020] Prema tečnom sastavu koji se koristi kao biološki agens za zaštitu biljaka, agens za jačanje biljaka ili biološki agens za zemljište, pri čemu je razblažen, ako je potrebno, u zavisnosti od nameravane primene sa vodom na koncentraciju za primenu. Sastav se može mešati ili natopiti u zemljište, naneti direktno na biljku ili se koristiti za tretman semena.

[0021] Stoga, sastav sa konidijom Paecilomyces lilacinus može se koristiti kao efikasan agens za biološku kontrolu parazitskih nematoda biljaka. Kada se koriste spore Talaromyces flavus, preparat se može koristiti za kontrolu Verticillium dahilae, patogena koji izaziva ekonomski važno uvenuće pamuka. Kada se koriste spore Nomuraea rileyi, sastav može da se koristi za kontrolu različitih štetnih vrsta gusenica dnevnih leptira, kao Helicoverpa armigera i Spodoptera exigua. Korišćenje sastava koristeći konidije Penicillium bilaii povećava dostupnost mineralnog fosfora u zemljištu.

Tečni preparat prema pronalasku ima dug rok trajanja na sobnoj temperaturi i potpuno je rastvorljiv u vodi, gde je efektivni mikrobni agens suspendovan u rastvoru vode i trisiloksana modifikovanog polieterom.

Stoga, nakon 12-omesečnog čuvanja sastava na sobnoj temperaturi može se utvrditi vitalnost konidija P. lilacinus od 92,3%. Efekat leka je još uvek bio dovoljan da značajno smanji populaciju nematoda Meloidogyne ingognita u zemljištu. To čini sastav idealnim za komercijalnu upotrebu.

Skladištenje i transport sastava vrši se isključivanjem vazduha u bocama, vrećama, kanisterima ili bubnjevima.

Primena je jednostavna zahvaljujući dobroj rastvorljivosti sastava u vodi i rezultat je dobrog suspendovanja mikroorganizma ili njegovih poželjno korišćenih organa u tečnosti za prskanje i može se izvesti pomoću prskanja ili injekcijom u sistem navodnjavanja, što je uniformna raspodela aktivnog agensa u zemljištu, obezbeđeni na biljci ili na štetnim organizmima koji se kontrolišu. Ukratko, utvrđeno je da se sastav prema pronalasku odlikuje lako upravljivim skladištenjem na sobnoj temperaturi, lakim transportom, lakoćom proizvodnje i primene.

[0022] U nastavku, pronalazak će biti detaljnije obrazložen primerima izvođenja.

Primer 1

[0023] Gljiva Paecilomyces lilacinus je kultivisana na pogodnoj čvrstoj podlozi pod sterilnim uslovima. Posle kulture, supstrat kulture je osušen sa konidijom gljiva koja je pričvršćena na nju.

[0024] Konidija je zatim odvojena od podloge za suvu kulturu korišćenjem separacije vazduha i filtracije. U ovom trenutku sadržala je rezidualnu vlagu od 8,3%.80 g suvog konidijskog praha, koji je imao koncentraciju od 2,8 × 10<11>konidija po gramu, suspendovan je u 100 ml trisiloksana modifikovanog polieterom, komercijalnim preparatom Break-Thru S240. Dobijeni tečni sastav sadrži 1,41 x 10<11>konidija po mililitru i 1,37 x 10<11>živih konidija po mililitru. Ovo odgovara koncentraciji živih konidija u tečnom sastavu od 97,24%.

[0025] Tečni sastav je inkubiran na sobnoj temperaturi (20-22°C), pri čemu je klijanje konidija Paecilomyces lilacinusa određeno u mesečnim intervalima. Da bi se ispitala sposobnost klijanja, uzorci su uzeti redovno, pomešani sa vodom u razmeri od 1:10.000, inkubirani u ovoj smeši tokom 5 sati i prošireni sa 0,1 ml na pogodnom agarskom medijumu. Agar ploče su zatim inkubirane 24 sata na 25°C, a zatim su ispitivane pod mikroskopom. Broj proklijalih konidija, koje su jasno prepoznatljive formiranjem cevi klijanja, određen je i upoređen sa brojem ne-proklijalih konidija. Rezultati brojanja prikazani su u sledećoj tabeli.

Tabela 1: Stabilnost skladištenja tečne formulacije konidija

Primer 2

[0026] Uz pomoć eksperimentalnih posuda, ispitivan je efekat tečnog sastava pripremljen na osnovu Paecilomyces lilacinus na populaciju korena nematode (Metoidogyne incognita) u zemljištu kao i simptomi izazvanih nematoda na paradajz korena.

[0027] To je bio tečni preparat korišćen kao u Primeru 1 sa tačno 1 x 10<11>živih gljivičnih konidija po mililitru. Sve posude su napunjene sa 1000 ml tla i inokulisane sa po 5000 jaja i larvama Metoidogyne ingognita. U tu svrhu, izbušene su rupe u zemlji u koje je Nemododen suspenzija pipetirana. Primena tečnog sastava obavljena je dan nakon inokulacije. Za tu svrhu, 10 mililitara tečnog preparata pomešano je u 10 litara vode. Od konvencionalne suspenzije 10 ml je primenjeno po posudi. Nakon toga, posude su zalivane sve dok zemljište nije zasićeno. Korišćena količina odgovara količini tečnog preparata od 0,01 ml po posudi ili koncentraciji konidija od 1 x 10<9>konidija po posudu.

[0028] 7 dana nakon lečenja oko 15 cm visokih biljaka paradajza zasađeno je u posudama. Tretman se u početku ponavljao 3 nedelje nakon sađenja, a zatim u intervalima od 4 nedelje ukupno 3 puta. Procena eksperimenta je sprovedena 14 nedelja nakon sađenja (3 sedmice nakon poslednje primene). Kao kontrola, ispitivana je i netretirana varijanta. Obe varijante, tretirane i netretirane, postavljene su na 8 ponavljanja. Rezultat eksperimenta je prikazan u Tabeli 2.

Tabela 2: Uticaj tečnog sastava, koji se sastoji od konidije Paecilomyces lilacinus suspendovane u trisiloksanu modifikovanom poliesterom Break-Thru S 240, na proliferaciju Meloidogyne incognita kao i simptomi izazvanih nematoda na korenu

Primer 3

[0029] Gljiva Nomuraea rileyi je kultivisana na pogodno čvrstom supstratu pod sterilnim uslovima. Posle kulture, supstrat kulture je sušen konidijom gljiva koja je pričvršćena na nju.

[0030] Konidija je zatim odvojena od podloge za suvu kulturu korišćenjem separacije vazduha i filtracije. Sadržala je u tom trenutku rezidualnu vlagu od 9,2%. Sedam grama suvog konidijskog praha, koji je imao koncentraciju od 8,03 x 10<10>konidija po gramu, suspendovano je u 100 ml trisiloksana modifikovanog propilen gliko n-butil etrom. Dobijeni tečni preparat sadrži 5,62 x 10<9>konidija po mililitru i 5,19 x 10<9>živih konidija po mililitru. Ovo odgovara koncentraciji živih konidija u tečnom sastavu od 92,35%.

[0031] Tečni sastav je inkubiran na sobnoj temperaturi (20-22°C), a klijanje konidija Nomurea rileyi određeno je u mesečnim intervalima. Da bi se ispitala sposobnost klijanja, uzorci su uzeti redovno, pomešani sa vodom u razmeri od 1: 2000, inkubirani u ovoj smeši tokom 5 sati i prošireni sa 0,1 ml na pogodnom agarskom medijumu. Agar ploče su zatim inkubirane 40 sati na 25°C, a zatim su ispitivane pod mikroskopom. Broj proklijalih konidija, koje su jasno prepoznatljivi formiranjem cevi klijanja, određen je i upoređen sa brojem neproklijalih konidija. Rezultati brojanja prikazani su u Tabeli 3.

Tabela 3: Stabilnost skladištenja tečne formulacije konidija

Primer 4

[0032] U laboratorijskom eksperimentu, larve Spodoptera exigua su čuvane koristeći specijalno formulisanu ishranu u malim cevima od pleksiglasa (baza 174mm<2>) na relativnoj vlažnosti od 75% i temperaturi od 26°C /- 2°C .5 dana nakon izleganja (drugi instar), larve su tretirane proizvodom spora prema pronalasku. U tu svrhu je korišćen tečni sastav sa tačno 5 x 10<9>živih gljivičnih konidija po mililitru u trisiloksanom modifikovanom sa triproilen glikol metil etrom. Za pripremu sprej suspenzije 10 ml ili 2 ml ovog tečnog sastava pomešano je u 4 l vode. Iz dobijene suspenzije spora 4 ml se prska na površinu od 100 cm<2>. Ovo odgovara brzini nanošenja smeše za prskanje od 1000 ml ili 200 ml tečnog sastava po hektaru pomešano u oba slučaja sa 400 litara vode po hektaru. Male posude u kojima su inkubirane larve bile su u trenutku nanošenja na površini preko koje je nanet sprej. Procena eksperimenta odvijala se 1, 3 i 7 dana nakon tretmana utvrđivanjem broja mrtvih larvi i određivanjem stepena mortaliteta. Ispitivano je ukupno 10 larvi po posudi i 3 posude po varijanti testa.

Tabela 4: Smrtnost larvi Spodoptera exigua posle tretmana sa tečnim sastavom rastvorenim u vodi, koji se sastoji od konidije gljiva Nomuraea rileyi suspendovanih u trisiloksanu modifikovanom sa tripropilen glikol metil eterom.

Claims

Patentni zahtevi

1. Tečni sastav koji se može čuvati za biološku zaštitu biljaka koji se sastoji od suspenzije rastvorljive u vodi koja sadrži gljivične spore, gljivične konidije, hlamidospore ili gljivične sklerocije ili njihovu smešu i trisiloksan modifikovan polieterom.

2. Tečni sastav prema patentnom zahtevu 1, naznačen time da gljive koje su kao osnova za gljivične spore, gljivične konidije, hlamidospore ili gljivične sklerocije ili same osnovne gljive imaju antagonističko i/ili hiperparazitsko dejstvo usmereno protiv biljnih patogena ili da gljive ili smeša gljiva ima dejstvo indukovanja otpornosti i/ili dejstvo indukovanja tolerancije na stres koje se manifestuje na biljkama ili dejstvo povećanja dostupnosti nutritijenata.

3. Postupak za proizvodnju tečnog sastava prema patentnom zahtevu 1 ili 2, naznačen time da se uzgajane gljive i spore, konidije, hlamidospore ili sklerocije koje se formiraju se zatim suspenduju u trisiloksanu modifikovanom polieterom.

4. Tečni sastav prema patentnom zahtevu 1 ili 2, naznačen time da je trisiloksan modifikovan polieterom BreakThru® S240.

5. Postupak prema patentnom zahtevu 3, naznačen time da je trisiloksan modifikovan polieterom Break-Thru® S240.

6. Postupak prema patentnom zahtevus 3 i 5, naznačen time da su spore, konidije, hlamidospore ili sklerocije obrađene postupcima mlevenja i/ili disperzije.

7. Postupak prema patentnom zahtevu 6, naznačen time da su spore, konidije, hlamidospore ili sklerocije izolovanje nakon obrade prosejavanjem, filtracijom, razdvajanjem vazduha ili centrifugom.

8. Tečni sastav prema bilo kom patentnom zahtevu 1, 2 i 4, naznačen time da se koriste vrste gljiva Ampelomyces quisqualis, Beauveria bassiana, Beauveria brongniartii, Clonostachys rosea, Coniothyrium minitans, Gliocladium catenulatum, Isaria spp., Laetisaria arvalis, Lecanicillium lecanii, Lecanicillium muscarium, Meterhizium anisopliae, Nomurea rileyi, Paecilomyces lilacinus, Phoma macrostoma, Pythium oligandrum, Talaromyces flavus, Teratosperma oligocladum, Trichoderma spp., Verticillium biguttatum.

9. Tečni sastav prema patentnom zahtevu 8, gde je vrsta gljiva Paecilomyces lilacinus.

10. Postupak prema bilo kom patentnom zahtevu 3, 5, 6 i 7, naznačen time da se koriste vrste gljiva Ampelomyces quisqualis, Beauveria bassiana, Beauveria brongniartii, Clonostachys rosea, Coniothyrium minitans, Gliocladium catenulatum, Isaria spp., Laetisaria arvalis, Lecanicillium lecanii, Lecanicillium muscarium, Meterhizium anisopliae, Nomurea rileyi, Paecilomyces lilacinus, Phoma macrostoma, Pythium oligandrum, Talaromyces flavus, Teratosperma oligocladum, Trichoderma spp., Verticillium biguttatum.

11. Postupak prema patentnom zahtevu 10, gde je vrsta gljiva Paecilomyces lilacinus.

12. Tečni sastav prema bilo kom patentnom zahtevu 1, 2, 4, 8 i 9, naznačen time da gljivične spore, gljivične konidije, hlamidospore ili gljivične sklerocije su smeša koja vodi poreklo od različitih gljiva.

13. Primena tečnog sastava prema bilo kom patentnom zahtevu 1, 2, 4, 8, 9 i 12 mešanjem sa zemljištem, primenom u/na biljku, ili tretmanom semena.

14. Primena prema patentnom zahtevu 13, naznačena time da je tečni sastav razblažen sa vodom do željene koncentracije primene, u zavisnosti od namene primene.

15. Primena trisiloksana modifikovanog polieterom kao agens za čuvanje ili suspenziju gljivičnih spora, gljivičnih konidija, hlamidospora ili gljivične sklerocije za biološku zaštitu biljaka.

Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5