RS56731B1 - Pirimidopirimidinoni korisni kao inhibitori wee-1 kinaze - Google Patents

Pirimidopirimidinoni korisni kao inhibitori wee-1 kinaze

Info

Publication number
RS56731B1
RS56731B1 RS20171338A RSP20171338A RS56731B1 RS 56731 B1 RS56731 B1 RS 56731B1 RS 20171338 A RS20171338 A RS 20171338A RS P20171338 A RSP20171338 A RS P20171338A RS 56731 B1 RS56731 B1 RS 56731B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
methyl
amino
pyrimidin
dihydropyrimido
dichlorophenyl
Prior art date
Application number
RS20171338A
Other languages
English (en)
Inventor
Timothy Harrison
Graham Trevitt
Peter Robin Hewitt
Colin Roderick O'dowd
Frank Burkamp
Andrew John Wilkinson
Steven D Shepherd
Hugues Miel
Original Assignee
Almac Discovery Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Almac Discovery Ltd filed Critical Almac Discovery Ltd
Publication of RS56731B1 publication Critical patent/RS56731B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D475/00—Heterocyclic compounds containing pteridine ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/12—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D487/14—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D519/00—Heterocyclic compounds containing more than one system of two or more relevant hetero rings condensed among themselves or condensed with a common carbocyclic ring system not provided for in groups C07D453/00 or C07D455/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Opis
[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenja koja su korisna kao inhibitori aktivnosti Wee-1 kinaze. Predmetni pronalazak se takođe odnosi na farmaceutske kompozicije koje sadrže ova jedinjenja i na ova jedinjenja za upotrebu u lečenju kancera.
OSNOVA PRONALASKA
[0002] Ćelije su kontinirano izlagane na dnevnoj bazi, rezultujući u višestrukim lezijama koje se formiraju u DNK. Lezije, ako nisu popravljene, mogu da dovedu do mutacija ili ćelijske smrti, na taj način postoje složene mreže za prenos signala koje osiguravaju da su lezije detektovane i popravljene da bi se održavala celovitost DNK. Detekcija oštećenja DNK započinje seriju događaja koji su ključni u održavanju genoma. Kontrolne tačke ćelijskog ciklusa su konstruisane tako da zaustave ćelijski ciklus i omoguće popravku lezije pre omogućavanja da ćelija nastavi mitozu. Identifikovane su dve ključne kontrolne tačke, jedna na kraju G1 faze i druga u G2, funkcionišući u tandemu tako da osiguraju da su lezije identifikovane i popravljene. Kod 50% humanih kancera G1 kontrolna tačka je nefunkcionalna zbog mutacija u tumor supresor genu p53. Međutim, G2 kontrolna tačka je retko mutirana i često je nađeno da je aktivirana u ćelijama kancera. Ćelije kancera koriste ovo kako bi obezbedile rezistenciju na modalitete lečenja, uključujući sredstva i zračenje koji oštećuju DNK.
[0003] Tri kinaze su identifikovane kao ključni regulatori G2 kontrolne tačke, naime Chk1, Chk2 i Wee-1. Inhibitori za ove kinaze se trenutno procenjuju u kliničkim ispitivanjima.
[0004] Wee-1 je jedarna titrozin kinaza koja negativno reguliše ulazak u mitozu na G2/M kontrolnoj tački katalizom fosforilacije cdc2 / ciklin B kinaznog kompleksa. Fosforilacija se javlja na tirozin-15 ostatku i dovodi do inaktivacije cdc2 / ciklin B kompleksa, konačno sprečavajući mitozu. Funkcija Wee-1 je blisko vezana sa onom od Chk1 i Chk2 zbog njihove fosforilacije i inaktivacije cdc25 na serinu-216, kao i objavljene aktivacije Wee-1 sa Chk 1 & 2 (Ashwell et al., 2012, DNA Repair in Cancer Therapy, DOI: 10.1016/B978-0-12-384999-1.10010-1). Wee-1 je nishodno od Chk familije i krucijalna je komponenta kaskade prenosa signala kontrolne tačke jer sprečava da ćelije uđu u mitozu ako su detektovane lezije (Do et al., Cell Cycle 201312 (19) 3159-3164.
[0005] Uobičajeno primenjivana jedinjenja protiv kancera indukuju oštećenje DNK, uključujući anti-metabolite, sredstva od platine, inhibitore topoizomeraze i alkilujuća sredstva. Međutim, njihova efikasnost je ograničena zbog prekomerne toksičnosti, rezistencije i nedostatka tumorske selektivnosti. Jedinjenja koja funkcionišu u kombinaciji sa ovim sredstvima za selektivno sprečavanje popravke DNK u ćelijama tumora bila bi ekstremno korisna. Kako je tumor supresor gen p53 uobičajeno mutiran u tumorskim ćelijskim linijama, primena inhibitora Wee-1 kinaze, koja ukida G2 kontrolnu tačku, može dovesti do povećane osetljivosti na sredstva koja oštećuju DNK. Potencijal za ovo je objavljen, jer je utišavanje aktivnosti Wee-1 bilo dovoljno da senzitizuje HeLa ćelije na doksorubicin zbog ukidanja zaustavljanja G2. Nasuprot tome, u normalnom epitelu dojke zahvaljujući potpuno kompetentnom p53 proteinu, uklanjanje funkcije Wee-1 imalo je mali dodatni efekat u poređenju sa samim doksorubicinom (Wang et al., 2004, Cancer Biology and Therapy, 3(3), 305-313).
[0006] Objavljeno je da su ćelijske linije koje sadrže mutacije u tumor supresor genu p53 imale povećanu osetljivost na sredstva koja oštećuju DNK kada su koprimenjivani sa malim molekulima inhibitorima Wee-1. Sinergistička in vitro i in vivo efikasnost je objavljena kada su mali molekuli inhibitori kombinovani sa gemcitabinom, 5-fluorouracilom, karboplatinom, cisplatinom (Hirai et al 2010, Cancer Biology & Therapy 9:7, 514-522), citarabinom (Tibes et al., 2012, Blood, 119(12), 2863-2872), inhibitorima Chk-1 (Carrasa et al., 2012 Cell Cycle 1:11(13):2507-2517), (Russell et al., 2013 Cancer Res. 15; 73 (2) 776-784) i inhibitorima Src (Cozzi et al., 2012, Cell Cycle 11(5), 1-11). Apoptotička efikasnost jednog sredstva, nezavisno od p53 statusa, objavljena je u ćelijskim linijama sarkoma i u uzorcima sarkoma dobijenim od pacijenta (Kreahling et al., 2012, Mol. Cancer Ther., 11(1), 174-182) i efikasnost je demonstrirana u panelu ćelijskih linija kancera in vivo (Guertin et al., 2013 Mol Cancer Ther, 12 (2) 141-151).
[0007] Poznato je da zračenje povećava fosforilaciju Tyr15 i Thr14 ostataka cdc2, dovodeći do fenotipa koji je rezistentan na zračenje. Inhibicija aktivnosti Wee-1 malim molekulima inhibitorima (Wang et al., 2004, Cancer Biology and Therapy 3(3), 305-313), (Caretti et al., 2013 Mol Cancer Ther.12 (2) 141-150) dovodi do redukcije u fosforilaciji i radiosenzitizaciji, pri čemu je efekat izraženiji u p53 mutantnim ćelijskim linijama.
[0008] Objavljeno je da je prekomerna ekspresija Wee-1 u korelaciji sa slabim kliničkim ishodom (Magnusson et al., 2012 PLoS One 7; (6)e38254), ukazujući na to da on može imati značajnu ulogu kao biomarker i kao ciljana terapija.
[0009] Jedinjenja koja imaju inhibitorni efekat na kinazu, na primer inhibitorni efekat na Wee-1 kinazu, su opisana u WO 2007/126122, US 2010/0063024, EP 2,213,673, WO 2008/133866, US 2007/0254892, WO 2012/161812, WO 2013/126656, US 2013/0102590, WO 2013/059485 i WO 2013/013031.
[0010] WO 2010/067886, WO 2010/067888, US 2011/0135601, EP 2,168,966, WO 2005/090344, US 2009/0048277 i Bioorg. Med. Chem. Lett., 2005, 15, 1931-1935 opisuju različita jedinjenja kao što su derivati dihidropirimidopirimidina i piridopirimidinona koji imaju inhibitorni efekat na kinazu. Naročito, navedeno je da jedinjenja iz WO 2005/090344 pokazuju aktivnost kao inhibitori protein kinaze, naročito inhibitori Src familije tirozin kinaze. Navedeno je da su jedinjenja opisana u Bioorg. Med. Chem. Lett., 2005, 15, p1931-1935 10-100-puta potentniji inhibitori c-Src nego Wee-1, i varijacija supstituenata na 6-fenil prstenu ne menja izrazito ovu preferenciju. Navedeno je da su 5-alkil supstituisani analozi generalno Wee-1 selektivni, ali na štetu potencije vezivanja.
[0011] WO 2013/013031 opisuje piridazino[4,5-d]pirimidin-(6H)-on inhibitore Wee-1 kinaze za koje je navedeno da su korisni za inhibiciju kinaza kao što je Wee-1 i u postupcima za lečenje bolesti kao što je kancer. Jedinjenja iz WO 2013/013031 imaju atom azota na ’3-položaju’ prstena u odnosu na karbonil grupu.
[0012] US 2013/0018045 opisuje različita triciklična-sulfonamidna jedinjenja koja su korisna za inhibiciju kinaza kao što je Wee-1 i postupke za lečenje bolesti kao što je kancer. Jedinjenja iz US 2013/0018045 imaju sulfonamidnu grupu na ’1-položaju’ na prstenu i atomi na ’3- i ’4-položajima’ formiraju deo fuzionisanog aril ili heteroaril prstena ("A").
[0013] Cilj predmetnog pronalaska je prevazići najmanje neke od nedostataka iz stanja tehnike ili obezbediti komercijalno korisnu alternativu za to.
[0014] Dodatni cilj predmetnog pronalaska je obezbediti jedinjenja sa poboljšanom selektivnošću prema Wee-1 kinazi u poređenju sa poznatim jedinjenjima ili kompozicijama.
[0015] Sledeći cilj predmetnog pronalaska je obezbediti jedinjenja sa poboljšanom stabilnošću u humanim mikrozomima, na primer mikrozomima humane jetre, u poređenju sa poznatim jedinjenjima ili kompozicijama.
[0016] Sledeći cilj predmetnog pronalaska je obezbediti jedinjenje koje ima pojačani ili sličan efekat inhibicije kinaze u poređenju sa poznatim jedinjenjima ili kompozicijama.
[0017] Sledeći cilj predmetnog pronalaska je obezbediti jedinjenja koja imaju poboljšanu efikasnost u poređenju sa poznatim jedinjenjima ili kompozicijama.
[0018] Sledeći cilj predmetnog pronalaska je obezbediti jedinjenje koje ima poboljšanu efikasnost i tolerabilnost kada je primenjeno u kombinaciji sa drugim terapijama u poređenju sa poznatim jedinjenjima ili kompozicijama.
[0019] Sledeći cilj predmetnog pronalaska je obezbediti jedinjenje koje ima poboljšanu tolerabilnost u poređenju sa poznatim jedinjenjima ili kompozicijama.
REZIME PREMA PRONALASKU
[0020] U prvom aspektu predmetni pronalazak daje jedinjenje formule (I):
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili N-oksidni derivat, gde:
R1 je izborno supstituisana aril grupa ili izborno supstituisana heteroaril grupa;
R2 i R3 nezavisno su izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, atoma deuterijuma, izborno supstituisane alkil grupe, izborno supstituisane cikloalkil grupe, izborno supstituisane alkoksi grupe, izborno supstituisane amino grupe, izborno supstituisane aril grupe i izborno supstituisane heteroaril grupe; ili R2 , R3 i atom ugljenika za koji su oba vezani, kao uzeti zajedno, formiraju izborno supstituisanu cikloalkil grupu ili izborno supstituisanu heterociklil grupu;
R4 je atom vodonika, izborno supstituisana alkil grupa, izborno supstituisana alkenil grupa, izborno supstituisana aril grupa ili izborno supstituisana heteroaril grupa;
ili R4 i R2 ili R3 i atomi prstena za koje su vezani, kao uzeti zajedno, formiraju izborno supstituisanu heterociklil grupu; i
R5 je izborno supstituisana aril grupa ili izborno supstituisana heteroaril grupa.
[0021] Svaki aspekt ili primer izvođenja kao što je ovde definisan može biti kombinovan sa bilo kojim drugim aspektom (aspektima) ili primerom (primerima) izvođenja, osim ukoliko jasno ne nalaže suprotno. Naročito bilo koja karakteristika naznačena kao poželjna ili povoljna može biti kombinovana sa bilo kojom drugom karakteristikom ili karakteristikama koje su naznačene kao poželjne ili povoljne.
[0022] U drugom aspektu prema predmetnom pronalasku data je farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili N-oksidni derivat, i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijens.
[0023] U trećem aspektu predmetni pronalazak daje jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili N-oksidni derivat, ili farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje formule (I) za upotrebu u terapiji.
[0024] U četvrtom aspektu predmetni pronalazak daje jedinjenje formule (I) za upotrebu kao lek.
[0025] U petom aspektu predmetni pronalazak daje jedinjenje formule (I) za upotrebu u lečenju ili prevenciji kancera.
[0026] Drugi poželjni primeri izvođenja jedinjenja prema pronalasku se javljaju u specifikaciji i naročito u primerima. Naročito su poželjna ona imenovana jedinjenja koja imaju veću aktivnost kao što je testirano. Jedinjenja koja imaju višu aktivnost su poželjnija u odnosu na ona koja imaju nižu aktivnost.
[0027] Pronalazači predmetnog pronalaska su iznenađujuće našli da jedinjenja prema predmetnom pronalasku, koja sadrže sp3 hibridizovani atom ugljenika u fuzionisanom prstenu koji sadrži karbonil, pokazuju poboljšani ili sličan inhibitorni efekat na kinazu u poređenju sa poznatim jedinjenjima ili kompozicijama. Naročito, jedinjenja prema predmetnom pronalasku poželjno pokazuju poboljšani ili sličan inhibitorni efekat na Wee-1 kinazu u poređenju sa poznatim jedinjenjima ili kompozicijama. Ovo je iznenađujuće zbog toga što poznata jedinjenja za koja je navedeno da pokazuju visoku inhibiciju Wee-1 kinaze tipično sadrže planarni sistem prstena sa jednim ili više sp2 hibridizovanih atoma ugljenika i jedan ili više atoma azota, dok jedinjenja prema predmetnom pronalasku sadrže sp3 hibridizovani atom ugljenika u kome je najmanje jedan od supstituenata na sp3 ugljeniku projektovan izvan ravni prstena.
[0028] Pronalazači predmetnog pronalaska su takođe iznenađujuće našli da jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu da pokažu poboljšanu ili sličnu selektivnost prema Wee-1 kinazi u poređenju sa jedinjenjima iz stanja tehnike. Poželjno, naročito, jedinjenja prema pronalasku su selektivna u odnosu na članove Src familije kinaza, na primer LCK (limfocit specifična protein tirozin kinaza) i c-Src.
[0029] Pronalazači predmetnog pronalaska su iznenađujuće našli da jedinjenja kao što su ovde opisana mogu imati bolje fizičkohemijske osobine u poređenju sa onima poznatim u stanju tehnike. Na primer, kinetička rastvorljivost primera prikazanih u daljem tekstu je veća od odgovarajućeg primera za koji se traži zaštita u WO 2013/126656.
[0030] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku takođe mogu imati bolju metaboličku stabilnost u poređenju sa onim poznatim u stanju tehnike. Na primer, intrinzički klirens iz humanih mikrozoma primera prikazanih u daljem tekstu je niži od onog od odgovarajućih jedinjenja za koja je tražena zaštita u WO 2013/126656 i WO 2013/059485.
[0031] Pronalazači predmetnog pronalaska su takođe iznenađujuće našli da jedinjenja prema predmetnom pronalasku takođe mogu da pokažu smanjenu ili sličnu inhibiciju hERG (videti primere), poboljšanu ili sličnu stabilnost mikrozoma humane jetre i smanjenu ili sličnu CVS toksičnost u poređenju sa inhibitorima kinaze iz stanja tehnike.
[0032] Kao što je razmatrano u prethodnom tekstu, bez želje da se vežemo teorijom veruje se da jedinjenja prema predmetnom pronalasku teže da pokažu korisne efekte u prethodnom tekstu koji su posledica, najmanje delimično, prisustva sp3 hibiridizovanog atoma ugljenika kao što je prikazano u formuli (I), to jest, ugljenik za koji su vezani R<2>i R<3>.
[0033] Dodatni faktori koji rezultuju u korisnim efektima razmatranim u prethodnom tekstu, obuhvataju strukturnu vezu između gore navedenog sp3 hibridizovanog atoma ugljenika na ’3-položaju’, karbonil (C=O) grupe, N-R<1>grupe na ’2-položaju’ i N-R<4>grupe na ’4-položaju’.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0034] Osim ukoliko su drugačije ovde definisani, naučni i tehnički termini korišćeni u vezi sa predmetnim pronalaskom imaće značenja koji se obično razumeju od strane stručnjaka iz date oblasti tehnike. Značenje i obim termina bi trebalo da su jasni, međutim, u slučaju bilo koje moguće dvosmislenosti, definicije koje su ovde date imaju prednost u odnosu na bilo koju definiciju iz rečnika ili spoljašnju definiciju.
[0035] Kao što su korišćeni u specifikaciji i priloženim patentnim zahtevima, osim ukoliko je naznačeno suprotno, sledeći termini imaju naznačena značenja:
[0036] Termin "alkil grupa" (pojedinačno ili u kombinaciji sa drugim terminom (terminima)) označava pravolančani ili zasićeni ugljovodonični supstituent sa granatim lancem zasićeni ugljovodonični supstituent koji tipično sadrži 1 do 15 atoma ugljenika, kao što je 1 do 10, 1 do 8, 1 do 6, ili 1 do 4 atoma ugljenika. "Cnalkil" grupa označava alifatičnu grupu koja sadrži n atoma ugljenika. Na primer, C1-C10alkil grupa sadrži 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9 ili 10 atoma ugljenika. Vezivanje za alkil grupu se javlja preko atoma ugljenika. Primeri takvih supstituenata obuhvataju metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izobutil, sek-butil, terc-butil, pentil (granati ili negranati), heksil (granati ili negranati), heptil (granati ili negranati), oktil (granati ili negranati), nonil (granati ili negranati), i decil (granati ili negranati).
[0037] Termin "alkenil grupa" (pojedinačno ili u kombinaciji sa drugim terminom (terminima)) označava pravolančani ili ugljovodonični supstituent sa granatim lancem koji sadrži jednu ili više dvogubih veza i tipično 2 do 15 atoma ugljenika; kao što su 2 do 10, 2 do 8, 2 do 6 ili 2 do 4 atoma ugljenika. Primeri takvih supstituenata obuhvataju ezatimil (vinil), 1-propenil, 3-propenil, 1,4-pentadienil, 1,4-butadienil, 1-butenil, 2-butenil, 3-butenil, pentenil i heksenil.
[0038] Termin "alkinil grupa" (pojedinačno ili u kombinaciji sa drugim terminom (terminima)) označava pravolančani ugljovodonični supstituent ili ugljovodonični supstituent sa granatim lancem koji sadrži jednu ili više trogubih veza i tipično 2 do 15 atoma ugljenika; kao što je 2 do 10, 2 do 8, 2 do 6 ili 2 do 4 atoma ugljenika. Primeri takvih supstituenata obuhvataju etinil, 1-propinil, 3-propinil, 1-butinil, 3-butinil i 4-butinil.
[0039] Termin "karbociklil grupa" (pojedinačno ili u kombinaciji sa drugim terminom (terminima)) označava zasićeni ciklični (tj. "cikloalkil"), delimično zasićeni ciklični (tj. "cikloalkenil"), ili potpuno nezasićeni (tj. "aril") ugljovodonični supstituent koji sadrži od 3 do 14 atoma ugljenka u prstenu ("atomi u prstenu" su atomi vezani zajedno tako da formiraju prsten ili prstenove cikličnog supstituenta). Karbociklil može biti struktura od jednog prstena (monocikličan) ili policiklična struktura prstena. Karbociklil može biti struktura od jednog prstena, koja tipično sadrži 3 do 8 atoma u prstenu, tipičnije 3 do 7 atoma u prstenu, i tipičnije 5 do 6 atoma u prstenu. Primeri takvih karbociklila od jednog prstena obuhvataju ciklopropil (ciklopropanil), ciklobutil (ciklobutanil), ciklopentil (ciklopentanil), ciklopentenil, ciklopentadienil, cikloheksil (cikloheksanil), cikloheksenil, cikloheksadienil i fenil. Karbociklil može alternativno biti policikličan (tj., može da sadrži više od jednog prstena). Primeri policikličnih karbociklila obuhvataju premošćene, fuzionisane i spirociklične karbociklile. U spirocikličnom karbociklilu, jedan atom je zajednički za dva različita prstena. Primer spirocikličnog karbociklila je spiropentanil. U premošćenom karbociklilu, prstenovi dele najmanje dva zajednička nesusedna atoma. Primeri premošćenih karbociklila obuhvataju biciklo[2.2.1]heptanil, biciklo[2.2.1]hept-2-enil, i adamantanil. U karbocikličnom sistemu sa fuzionisanim prstenom, dva ili više prstena mogu biti fuzionisani zajedno, tako da dva prstena dele jednu zajedničku vezu. Primeri dva- ili tri-fuzionisana prstena karbociklila obuhvataju naftalenil, tetrahidronaftalenil (tetralinil), indenil, indanil (dihidroindenil), antracenil, fenantrenil i dekalinil.
[0040] Termin "cikloalkil grupa" (pojedinačno ili u kombinaciji sa drugim terminom (terminima)) označava zasićeni ciklični ugljovodonični supstituent koji sadrži 3 do 14 atoma ugljenika u prstenu. Cikloalkil može biti jedan ugljenični prsten, koji tipično sadrži 3 do 8 atoma ugljenika u prstenu i tipičnije 3 do 6 atoma u prstenu. Razume se da je vezivanje za cikloalkil grupu preko atoma prstena cikloalkil grupe. Primeri cikloalkila sa jednim prstenom obuhvataju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil i cikloheksil. Cikloalkil može alternativno biti policikličan ili da sadrži više od jednog prstena. Primeri policikličnih cikloalkila obuhvataju premošćene, fuzionisane i spirociklične karbociklile.
[0041] Termin "aril grupa" (pojedinačno ili u kombinaciji sa drugim terminom (terminima)) označava aromatični karbociklil koji sadrži od 6 do 14 atoma ugljenika u prstenu, ili 3 do 8, 3 do 6 ili 5 do 6 atoma ugljenika u prstenu. Aril može biti monocikličan ili policikličan (tj., može da sadrži više od jednog prstena). U slučaju policikličnih aromatičnih prstenova, samo jedan prsten u policikličnom sistemu je potrebno da bude nezasićen dok preostali prsten (prstenovi) mogu biti zasićeni, delimično zasićeni ili nezasićeni. Vezivanje za aril grupu se javlja preko atoma ugljenika sadržanog u prstenu. Primeri aril grupa obuhvataju fenil, naftil, akridinil, indenil, indanil i tetrahidronaftil.
[0042] Termin "heterociklil grupa" (pojedinačno ili u kombinaciji sa drugim terminom (terminima)) označava zasićenu (tj. "heterocikloalkil"), delimično zasićenu (tj. "heterocikloalkenil"), ili potpuno nezasićenu (tj. "heteroaril") strukturu prstena koja sadrži ukupno 3 do 14 atoma prstena, pri čemu je najmanje jedan od atoma u prstenu heteroatom (tj. kiseonik, azot ili sumpor), pri čemu su preostali atomi u prstenu atomi ugljenika. Heterociklil grupa može, na primer, sa sadrži jedan, dva, tri, četiri ili pet heteroatoma. Vezivanje za heterociklil grupu može da se javi preko atoma ugljenika i/ili jednog ili više heteroatoma koji su sadržani u prstenu. Heterociklil može biti struktura sa jednim prstenom (monociklična) ili policiklična struktura prstena.
[0043] Heterociklil grupa može biti jedan prsten, koji tipično sadrži od 3 do 7 atoma u prstenu, tipičnije od 3 do 6 atoma u prstenu, i čak tipičnije 5 do 6 atoma u prstenu. Primeri heterociklila sa jednim prstenom obuhvataju furanil, dihidrofuranil, tetrahidrofuranil, tiofenil (tiofuranil), dihidrotiofenil, tetrahidrotiofenil, pirolil, pirolinil, pirolidinil, imidazolil, imidazolinil, imidazolidinil, pirazolil, pirazolinil, pirazolidinil, triazolil, tetrazolil, oksazolil, oksazolidinil, izoksazolidinil, izoksazolil, tiazolil, izotiazolil, tiazolinil, izotiazolinil, tiazolidinil, izotiazolidinil, tiodiazolil, oksadiazolil (uključujući 1,2,3-oksadiazolil, 1,2,4-oksadiazolil, 1,2,5-oksadiazolil (furazanil) ili 1,3,4-oksadiazolil), oksatriazolil (uključujući 1,2,3,4-oksatriazolil ili 1,2,3,5-oksatriazolil), dioksazolil (uključujući 1.2.3- dioksazolil, 1,2,4-dioksazolil, 1,3,2-dioksazolil- ili 1,3,4-dioksazolil), oksatiazolil, oksatiolil, oksatiolanil, piranil, dihidropiranil, tiopiranil, tetrahidrotiopiranil, piridinil (azinil), piperidinil, diazinil (uključujući piridazinil (1,2-diazinil), pirimidinil (1,3-diazinil) ili pirazinil (1,4-diazinil)), piperazinil, triazinil (uključujući 1,3,5-triazinil, 1.2.4- triazinil i 1,2,3 -triazinil)), oksazinil (uključujući 1,2-oksazinil, 1,3-oksazinil ili 1,4-oksazinil)), oksatiazinil (uključujući 1,2,3-oksatiazinil, 1,2,4-oksatiazinil, 1,2,5-oksatiazinil ili 1,2,6-oksatiazinil)), oksadiazinil (uključujući 1,2,3-oksadiazinil, 1,2,4-oksadiazinil, 1,4,2-oksadiazinil ili 1,3,5-oksadiazinil)), morfolinil, azepinil, oksepinil, tiepinil, i diazepinil.
[0044] Heterociklil grupa može alternativno biti policiklična (tj., može da sadrži više od jednog prstena). Primeri policikličnih heterociklil grupa obuhvataju premošćene, fuzionisane i spirociklične heterociklil grupe. U spirocikličnoj heterociklil grupi, jedan atom je zajednički za dva različita prstena. U premošćenoj heterociklil grupi, prstenovi dele najmanje dva zajednička nesusedna atoma. U heterociklil grupi sa fuzionisanim prstenom, dva ili više prstenova mogu biti fuzinisani zajedno, tako da dva prstena dele jednu zajedničku vezu. Primeri heterociklil grupa sa fuzionisanim prstenom koje sadrže dva ili tri prstena obuhvataju indolizinil, piranopirolil, 4H-hinolizinil, purinil, naftiridinil, piridopiridinil (uključujući pirido[3,4-b]-piridinil, pirido[3,2-b]-piridinil, ili pirido[4,3-b]-piridinil), i pteridinil. Drugi primeri heterociklil grupa sa fuzionisanim prstenom obuhvataju benzo-fuzionisane heterociklil grupe, kao što su indolil, izoindolil (izobenzazolil, pseudoizoindolil), indoleninil (pseudoindolil), izoindazolil (benzpirazolil), benzazinil (uključujući hinolinil (1-benzazinil) ili izohinolinil (2-benzazinil)), ftalazinil, hinoksalinil, hinazolinil, benzodiazinil (uključujući cinolinil (1,2-benzodiazinil) ili hinazolinil (1,3-benzodiazinil)), benzopiranil (uključujući hromanil ili izohromanil), benzoksazinil (uključujući 1,3,2-benzoksazinil, 1,4,2-benzoksazinil, 2,3,1-benzoksazinil, ili 3,1,4-benzoksazinil), i benzizoksazinil (uključujući 1,2-benzizoksazinil ili 1,4-benzizoksazinil).
[0045] Termin "heterocikloalkil grupa" (pojedinačno ili u kombinaciji sa drugim terminom (terminima)) označava zasićeni heterociklil.
[0046] Termin "heteroaril grupa" (pojedinačno ili u kombinaciji sa drugim terminom (terminima)) označava aromatični heterociklil koji sadrži od 5 do 14 atoma u prstenu. Heteroaril može biti jedan prsten ili 2 ili 3 fuzionisana prstena. Primeri heteroaril supstituenata obuhvataju 6-člane prstenaste supstituente kao što su piridil, pirazil, pirimidinil, piridazinil, i 1,3,5-, 1,2,4- ili 1,2,3-triazinil; 5-člane prstenaste supstituente kao što su imidazil, furanil, tiofenil, pirazolil, oksazolil, izoksazolil, tiazolil, 1,2,3-, 1,2,4-, 1,2,5- ili 1,3,4-oksadiazolil i izotiazolil; 6/5-člane supstituente sa fuzionisanim prstenom kao što su benzotiofuranil, benzizoksazolil, benzoksazolil, purinil, i antranilil; i 6/6-člane fuzionisane prstenove kao što su benzopiranil, hinolinil, izohinolinil, cinolinil, hinazolinil i benzoksazinil.
[0047] Termin "heterociklična grupa koja sadrži azot" označava monocikličnu ili bicikličnu heterociklil grupu koja sadrži najmanje jedan atom azota, u kojoj svaki prsten sadrži od 3 do 7 atoma u prstenu i izborno sadrži, pored atoma azota, nula ili jedan ili dva ili više, istih ili različitih heteroatoma, ali poželjno nula ili jedan heteroatom izabran iz grupe koja se sastoji od atoma kiseonika, atoma azota i atoma sumpora; i heterociklil grupa može biti zasićena (tj. "heterocikloalkil"), delimično zasićena (tj. "heterocikloalkenil"), ili potpuno nezasićena (tj. "heteroaril"). Biciklična heterociklil grupa može imati spiro strukturu od koje dva prstena dele jedan i isti atom u prstenu, ili može imati biciklo strukturu od koje prstenovi dele dva ili više atoma u prstenu. Primeri heterociklil grupa koje sadrže azot obuhvataju, na primer, pirolil grupu, imidazolil grupu, pirazolil grupu, tiazolil grupu, izotiazolil grupu, oksazolil grupu, izoksazolil grupu, triazolil grupu, tetrazolil grupu, oksadiazolil grupu, 1,2,3-tiadiazolil grupu, 1,2,4-tiadiazolil grupu, 1,3,4-tiadiazolil grupu, piridil grupu, pirazinil grupu, pirimidinil grupu, piridazinil grupu, 1,2,4-triazinil grupu, 1,3,5-triazinil grupu, indolil grupu, benzimidazolil grupu, benzoksazolil grupu, benzizoksazolil grupu, benzotiazolil grupu, benzizotiazolil grupu, indazolil grupu, purinil grupu, hinolil grupu, izohinolil grupu, ftalazinil grupu, naftiridinil grupu, hinoksalinil grupu, hinazolinil grupu, cinolinil grupu, pteridinil grupu, pirido[3,2-b]piridil grupu, azetidinil grupu, pirolidinil grupu, dihidro-1,2,4-triazolil grupu, dihidro-1,2,4-oksadiazolil grupu, dihidro-1,3,4-oksadiazolil grupu, dihidro-1,2,4-tiadiazolil grupu, dihidro-1,2,3,5-oksatiadiazolil grupu, piperidinil grupu, piperazinil grupu, dihidropiridil grupu, morfolinil grupu, tiomorfolinil grupu, 2,6-diazaspiro[3.5]nonil grupu, 2,7-diazaspiro[3.5]nonil grupu, 2,7-diazaspiro[4.5]decil grupu, ili2,7-diazabiciklo[3.3.0]oktil grupu, 3,6-diazabiciklo[3.3.0]oktil grupu.
[0048] Heterociklil grupa koja sadrži azot može biti izborno supstituisana ("supstituisana heterociklil grupa koja sadrži azot") sa jednim ili više supstituenata, koji mogu biti isti ili različiti.
[0049] Termin "amino grupa" označava -NH2grupu. Amino grupa može biti izborno supstituisana ("supstituisani amino") sa jednim ili više supstituenata, koji mogu biti isti ili različiti. Supstituenti amino grupe mogu biti, ali bez ograničenja na, alkil, alkenil, alkanoil, aril i/ili heterociklil grupa.
[0050] Termin "amido grupa" oznčava -C(=O)-NR- grupu. Vezivanje može biti preko atoma ugljenika i/ili azota. Na primer, amido grupa može biti vezana kao supstituent samo preko atoma ugljenika, u kom slučaju atom azota ima dve R grupe vezane (-C(=O)-NR2). Amido grupa može biti vezana samo atomom azota, u kom slučaju atom ugljenika ima vezanu R grupu (-NR-C(=O)R.
[0051] Termin "iminil" grupa označava -C(=NR)- grupu. Vezivanje može biti preko atoma ugljenika.
[0052] Grupa "=N-R" označava supstituent azot-R grupu vezanu za drugi atom preko dvogube veze. Na primer, iminil grupa (-C(=NR)- grupa) je za atom azota) vezana preko dvogube veze za atom ugljenika, atom azota je takođe vezan za R grupu preko jednogube veze.
[0053] Termin "alkoksi grupa" označava -O -alkil grupu. Alkoksi grupa može da označava linearne, granate ili ciklične, zasićene ili nezasičene okso-ugljovodonične lance, uključujući, na primer, metoksil, etoksil, propoksil, izopropoksil, butoksil, t-butoksil i pentoksil. Alkoksi grupa može biti izborno supstituisana ("supstituisani alkoksi") sa jednim ili više supstituenata alkoksi grupe.
[0054] Termin "hidroksil" označava -OH grupu.
[0055] Termin "alkanoil grupa" (tj. acil grupa) označava grupu organske kiseline gde -OH karboksil grupe je zamenjen drugim supstituentom. Na taj način, alkanoil grupa može biti predstavljena formulom RC(=O)-, gde R obuhvata, ali bez ograničenja na alkil, aralkil, ili aril grupu, koja zauzvrat može biti izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata. Primeri alkanoil grupa obuhvataju acetil grupu, propionil grupu, butiril grupu, izobutiril grupu, valeril grupu, izovaleril grupu i pivaloil grupu.
[0056] Termin "sulfonil grupa" označava grupu sulfonske kiseline gde je -OH sulfonil grupe zamenjen drugim supstituentom. Na primer, supstituent može biti alkil grupa ("alkilsulfonil grupa"). Alkilsulfonil grupa može biti predstavljena formulom RS(O)2-, gde R je alkil grupa, izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata. Primeri alkilsulfonil grupa obuhvataju metilsulfonil grupu, etilsulfonil grupu, propilsulfonil grupu, izopropilsulfonil grupu, butilsulfonil grupu, sek-butilsulfonil grupu, izobutilsulfonil grupu, terc-butilsulfonil grupu, pentilsulfonil grupu, izopentilsulfonil grupu, heksilsulfonil grupu i izoheksilsulfonil grupu.
[0057] Termin "sulfinil grupa" označava bivalentnu -S(=O) grupu.
[0058] Termin "sulfoksiminil grupa" označava "-S(=O) (=NR) (R) -" grupu.
[0059] Termin "tiomorfolin sulfoksiminil" grupa označava grupu formule (h):
[0060] Termin "okso grupa" označava (=O) grupu, tj. supstituent atom kiseonika vezan za drugi atom preko dvogube veze. Na primer, karbonil grupa (-C(=O)- je atom ugljenika povezan dvogubom vezom za atom kiseonika, tj. okso grupa vezana za atom ugljenika.
[0061] Termin "halo grupa" označava grupu izabranu od hlora, fluora, broma i joda. Poželjno, halo grupa je izabrana od hlora i fluora.
[0062] Alkil, alkenil, alkinil, amino, amido, iminil, alkoksi, karbociklil (uključujući cikloalkil, cikloalkenil i aril), heterociklil (uključujući heterocikloalkil, heterocikloalkenil i heteroaril), sulfonil, sulfinil, sulfoksiminil i heterociklil grupa koja sadrži azot mogu biti izborno supstituisani sa jednim ili više supstituenata, koji mogu biti isti ili različiti. Supstituent može biti vezan preko atoma ugljenika i/ili heteroatoma u alkil, alkenil, alkinil, amino, amido, iminil, alkoksi, karbociklil (uključujući cikloalkil, cikloalkenil i aril), heterociklil (uključujući heterocikloalkil, heterocikloalkenil i heteroaril), sulfonil, sulfinil, sulfoksiminil i heterociklil grupi koja sadrži azot. Termin "supstituent" (ili "radikal") obuhvata, ali bez ograničenja na alkil, supstituisani alkil, aralkil, supstituisani aralkil, alkenil, supstituisani alkenil, alkinil, supstituisani alkinil, halo, cijano, amino, amido, alkilamino, arilamino, karbociklil, cikloalkil, supstituisani cikloalkil, cikloalkenil, supstituisani cikloalkenil, aril, supstituisani aril, nitro, tio, alkanoil, hidroksil, ariloksil, alkoksil, alkiltio, ariltio, aralkiloksil, aralkiltio, karboksil, alkoksikarbonil, okso, alkilsulfonil i arilsulfonil.
[0063] Ako je grupa, na primer alkil grupa, "izborno supstituisana", razume se da grupa ima jedan ili više supstituenata vezanih (supstituisana) ili nema nijedan supstituent vezan (nesupstituisana).
[0064] Radi kompletnosti, takođe je navedeno da određene hemijske formule koje su ovde korišćene definišu delokalizovane sisteme. Ova definicija je poznata u stanju tehnike kao definicija aromatičnosti i može da ukazuje na prisustvo, na primer, mono-, di- ili tri-cikličnog sistema koji sadrži (4n+2) elektrone gde je n ceo broj. Drugim rečima, ovi sistemi mogu da ispoljavaju Hückel aromatičnost.
[0065] U bilo kom aspektu, jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu da poseduju izvestan aspekt stereohemije. Na primer, jedinjenja mogu da poseduju hiralne centre i/ ili ravni i/ ili ose simetrije. Kao takva, jedinjenja mogu biti obezbeđena kao pojedinačni stereoizomeri, pojedinačni diastereomeri, smeše stereoizomera ili kao racemske smeše. Stereoizomeri su poznati u stanju tehnike kao molekuli koji imaju istu molekularnu formulu i redosled vezanih atoma, ali koji se razlikuju u njihovim prostornim orijentacijama njihovih atoma i / ili grupa. Pored toga, jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu da poseduju tautomerizam. Svaki tautomerni oblik je određen tako da spada unutar obima pronalaska.
[0066] Pored toga, opisana su jedinjenja formule (I) koja su obezbeđena kao prolek. Prolekovi su transformisani, generalno in vivo, iz jednog oblika u aktivne oblike lekova koji su ovde opisani. Na primer, prolek može biti formiran zaštitom -N-H grupe za koju je R<3>vezan sa grupom koja se može hidrolizovati koja daje -NH prilikom hidrolize. Alternativo ili dodatno, bilo koja -NH grupa unutar jedinjenja može biti zaštićena kao amid koji se može fiziološki hidrolizovati. Pored toga, biće jasno da elementi koji su ovde opisani mogu biti zajednički izotop ili izotop osim zajedničkog izotopa. Na primer, atom vodonika može biti<1>H, 2H (deuterijum) ili 3H (tricijum). Pored toga, jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu biti obezbeđena u obliku njihovih farmaceutski prihvatljivih soli ili kao kokristali. Na primer, mogu biti obezbeđena jedinjenja koja imaju protonovane grupe amina. Termin "farmaceutski prihvatljiva so" označava jonska jedinjenja formirana dodavanjem kiseline u bazu. Termin označava takve soli koje se smatraju u stanju tehnike kao pogodne za upotrebu u kontaktu sa pacijentom, na primer in vivo i farmaceutski prihvatljive soli su generalno izabrane za njihove netoksične, neiritirajuće karakteristike.
[0067] Termin "kokristal" označava multikomponentni molekularni kristal, koji može da sadrži nejonske interakcije.
[0068] Farmaceutski prihvatljive soli i kokristali mogu biti pripremljeni pomoću jonsko izmenjivačke hromatografije ili reakcijom slobodnog baznog ili kiselog oblika jedinjenja sa stehiometrijskom količinom ili sa viškom željene neorganske ili organske kiseline ili baze koji formiraju so u jednom ili više pogodnih rastvarača, ili mešanjem jedinjenja sa drugim farmaceutski prihvatljivim jedinjenjem sposobnim da formira kokristal.
[0069] Soli koje su poznate u stanju tehnike kao generalno pogodne za upotrebu u kontaktu sa pacijentom obuhvataju soli poreklom od neorganskih i/ili organskih kiselina, uključujući hidrobromid, hidrohlorid, sulfat, bisulfat, nitrat, acetat, oksalat, oleat, palmitat, stearat, laurat, benzoat, laktat, fosfat, tozilat, citrat, maleat, fumarat, sukcinat i tartrat. One mogu da obuhvataju katjone na bazi alkalnih i zemnoalkalnih metala, kao što su natrijum, kalijum, kalcijum i magnezijum, kao i amonijum, tetrametilamonijum, tetraetilamonijum. Dodatna referenca je napravljena na određeni broj literaturnih izvora koji daju pregled pogodnih farmaceutski prihvatljivih soli, na primer the Handbook of pharmaceutical salts published by IUPAC.
[0070] Pored toga, jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu nekad da postoje kao cviter-joni, koji se smatraju delom pronalaska.
[0071] Pronalazači predmetnog pronalaska su otkrili da su jedinjenja prema predmetnom pronalasku korisna u lečenju medicinskih stanja povezanih sa poremećenim ćelijskim rastom, uključujući, ali bez ograničenja na, kancer, naročito kancere povezane sa mutacijama u tumor supresor genu p53.
[0072] Na primer, kanceri obuhvataju kancere srca, kancere pluća, gastrointestinalne kancere, kancere genitourinarnog trakta, kancere jetre, kancere kosti, kancere nervnog sistema, ginekološke kancere, hematološke kancere, kancere kože i kancere nadbubrežne žlezde.
[0073] Na primer, kanceri obuhvataju tumore nadbubrežne žlezde, žučnog kanala, bešike, krvi, kosti i vezivnog tkiva, mozga i centralnog nervnog sistema, dojke, grlića materice, debelog creva i rektuma (kolorektalni), endometrijalne, jednjaka, žučne kese, glave i vrata, Hodgkin-ovog limfoma, hipofaringealne, bubrega, laringealne, leukemije, jetre, pluća, limfom, mediastinalne tumore, melanom (maligni melanom), mezoteliom, multipli mijelom, nazalne šupljine, nazofaringealne, neuroendokrine tumore, ne-Hodgkin-ov limfom, oralne, jednjaka, orofaringealne, jajnika, pankreasa, paranazalnog sinusa, paratiroidne, penisa, tumore hipofize, prostate, pljuvačne žlezde, sarkom, kože, kičme, želudca, testikularne, tiroidne, uretre, materice, vaginalne i vulvarne.
[0074] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku su takođe korisna u pripremi leka koji je koristan u lečenju bolesti opisanih u prethodnom tekstu, naročito kancera. Jedinjenja prema ovom pronalasku mogu biti primenjivana na sisare, uključujući ljude, bilo pojedinačno ili, u kombinaciji sa farmaceutski prihvatljivim nosačima, ekscipijensima ili razblaživačima, u farmaceutskoj kompoziciji, prema standardnoj farmaceutskoj praksi. Jedinjenja mogu biti primenjivana oralno ili parenteralno, uključujući intravenske, intramuskularne, intraperitonealne, subkutane, rektalne i topikalne puteve primene.
[0075] Predmetni pronalazak takođe obuhvata unutar svog obima jedinjenja prema predmetnom pronalasku u kombinaciji sa drugim ili sledećim lekom u lečenju kancera. Drugi ili sledeći lek može biti lek koji je već poznat u stanju tehnike u lečenju kancera.
[0076] Predmetni pronalazak takođe obuhvata jedinjenja prema pronalasku za upotrebu u režimu uključujući korak radioterapije. Radioterapija može biti običan postupak lečenja pomoću rentgenskog zračenja, zračenja γ-zracima, neutronima, zracima α-čestica protona ili elektrona. Koprimena jedinjenja sadržanih u ovom pronalasku može dovesti do potencijacije radijacione terapije, na taj način njihovom klasifikacijom kao radio-senzitizatora.
[0077] Naročito, kanceri često postaju rezistentni na terapiju. Razvoj rezistencije može biti odložen ili prevaziđen primenom kombinacije lekova koja obuhvata jedinjenja prema predmetnom pronalasku na primer kod kancera koji su poznati kao rezistentni na sredstva koja oštećuju DNK ili radioterapiju.
[0078] Na primer, lekovi koji mogu biti korišćeni u kombinaciji sa jedinjenjima prema predmetnom pronalasku mogu ciljno da deluju na isti ili sličan biološki put kao onaj na koji se ciljno delujem jedinjenjima prema predmetnom pronalasku ili mogu da deluju na različit ili nesrodni put.
[0079] U zavisnosti od bolesti koja se leči, različiti partneri za kombinaciju mogu biti koprimenjivani sa jedinjenjima prema predmetnom pronalasku. Drugi aktivni sastojak može da obuhvata, ali bez ograničenja na: alkulujuća sredstva, uključujući ciklofosfamid, ifosfamid, tiotepa, melfalan, hloroetilnitrozoureu i bendamustin; derivate platine, uključujući cisplatin, oksaliplatin, karboplatin i satraplatin; antimitotička sredstva, uključujući alkaloide vinke (vinkristin, vinorelbin i vinblastin), taksane (paklitaksel, docetaksel), epotilone i inhibitore mitotičkih kinaza uključujući aurora i polo kinaze; inhibitore topoizomeraze, uključujući antracikline, epipodofilotoksine, kamptotecin i analoge kamptotecina; antimetabolite, uključujući 5-fluorouracil, kapecitabin, citarabin, gemcitabin, 6-merkaptopurin, 6-tioguanin, fludarabin, metotreksat i premetreksed; inhibitore protein kinaze, uključujući imatinib, gefitinib, sorafenib, sunitinib, erlotinib, dasatinib, i lapatinib; inhibitore proteazoma, uključujući bortezomib; inhibitore histon deacetilaze, uključujući valproat i SAHA; antiangiogene lekove, uključujući bevacizumab; monoklonska antitela, uključujući trastuzumab, rituksimab, alemtuzumab, tositumomab, cetuksimab, panitumumab; konjugate mioklonskih antitela, uključujući Gemtuzumab ozogamicin, Ibritumomab tiuksetan; hormonalne terapije, uključujući antiestrogene (tamoksifen, raloksifen, anastrazol, letrozol, eksamestan) antiandrogene (flutamid, bicalutamid) i analoge ili antagoniste luteinizirajućeg hormona.
[0080] U vezi sa kombinovanom terapijom jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu biti primenjena posebno, uzastopno, istovremeno, podudarno ili mogu biti hronološki raspoređena sa jednim ili više standardnih terapeutika kao što su bilo koji od onih navedenih u prethodnom tekstu.
[0081] Poželjno, predmetni pronalazak daje jedinjenje formule (I):
ili njegovu farmaceustki prihvatljivu so ili N-oksidni derivat, gde:
R1 je izborno supstituisana aril grupa ili izborno supstituisana heteroaril grupa;
R2 i R3 nezavisno su izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, atoma deuterijuma, izborno supstituisane alkil grupe, izborno supstituisane cikloalkil grupe, izborno supstituisane alkoksi grupe, izborno supstituisane amino grupe, izborno supstituisane aril grupe i izborno supstituisane heteroaril grupe; ili R2 , R3 i atom ugljenika za koji su oba vezani, kao uzeti zajedno, formiraju izborno supstituisanu cikloalkil grupu ili izborno supstituisanu heterociklil grupu;
R4 je atom vodonika, izborno supstituisana alkil grupa, izborno supstituisana alkenil grupa, izborno supstituisana aril grupa ili izborno supstituisana heteroaril grupa;
ili R4 i R2 ili R3 i atomi u prstenu za koji su vezani, kao uzeti zajedno, formiraju izborno supstituisanu heterociklil grupu; i
R5 je izborno supstituisana aril grupa ili izborno supstituisana heteroaril grupa.
[0082] Poželjno, R<2>i R<3>nezavisno su izabrani iz grupe koja se sastoji atoma vodonika, atoma deuterijuma, izborno supstituisane alkil grupe, izborno supstituisane cikloalkil grupe, izborno supstituisane alkoksi grupe, izborno supstituisane amino grupe, izborno supstituisane aril grupe i izborno supstituisane heteroaril grupe; i
R4 je atom vodonika, izborno supstituisana alkil grupa, izborno supstituisana alkenil grupa, izborno supstituisana aril grupa ili izborno supstituisana heteroaril grupa;
ili R4 i R2 ili R3 i atomi u prstenu za koje su vezani, kao uzeti zajedno, formiraju izborno supstituisanu heterociklil grupu.
[0083] Alternativno, poželjno, R<2>i R<3>nezavisno su izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, atoma deuterijuma, izborno supstituisane alkil grupe, izborno supstituisane cikloalkil grupe, izborno supstituisane alkoksi grupe, izborno supstituisane amino grupe, izborno supstituisane aril grupe i izborno supstituisane heteroaril grupe; i
R4 je atom vodonika, izborno supstituisana alkil grupa, izborno supstituisana alkenil grupa, izborno supstituisana aril grupa ili izborno supstituisana heteroaril grupa.
[0084] R1 je izborno supstituisana aril grupa ili izborno supstituisana heteroaril grupa. Poželjno, R<1>je supstituisana aril ili supstituisana heteroaril grupa.
[0085] Poželjnije, R<1>je supstituisana aril grupa. Još poželjnije, R<1>je supstituisana šesto- člana aril grupa.
[0086] Poželjno, R<1>je grupa predstavljena formulom (a):
gde R1a i R1b su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, halo grupe, hidroksil grupe, cijano grupe, amino grupe, C1-C6alkil grupa, C1-C6alkoksi grupe i C1-C6alkoksi-C1-C6alkil grupe. Poželjno, R1a i R1b su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika i halo grupe. Poželjnije, R<1a>i R<1b>su svaki nezavisno halo grupa. Još poželjnije, R<1a>i R<1b>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma hlora i atoma fluora.
[0087] Poželjno, R<1>je grupa predstavljena formulom (b):
gde R1a i R1b su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, halo grupe, hidroksil grupe, cijano grupe, amino grupe, C1-C6alkil grupe, C1-C6alkoksi grupe i C1-C6alkoksi-C1-C6alkil grupe. Poželjno, R1a i R1b su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika i halo grupe. Poželjnije, R<1a>i R<1b>su svaki nezavisno halo grupa. Još poželjnije, R<1a>i R<1b>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma hlora i atoma fluora.
[0088] Poželjno, u formuli (a) i /ili (b), R<1a>je atom vodonika, halo grupa, cijano grupa, metil grupa ili metoksi grupa; i R1b je halo grupa.
[0089] Poželjno, u formuli (a) i / ili (b), R<1a>je atom vodonika ili halo grupa; i R<1b>je halo grupa.
[0090] Poželjno, u formuli (a) i /ili (b), R<1a>je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma hlora i atoma fluora; i R1b je atom hlora.
[0091] Poželjno, R<1>je 2-hlorofenil grupa.
[0092] Alternativno, poželjno, R<1>je 2,6-dihlorofenil grupa.
[0093] Alternativno, poželjno, R<1>je 2-hloro-6-fluorofenil grupa.
[0094] Poželjno, R<2>i R<3>nezavisno su izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, atoma deuterijuma, izborno supstituisane alkil grupe, izborno supstituisane cikloalkil grupe, izborno supstituisane alkoksi grupe, izborno supstituisane amino grupe, izborno supstituisane aril grupe i izborno supstituisane heteroaril grupe. Poželjnije, R<2>i R<3>nezavisno su izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, atoma deuterijuma, izborno supstituisane C1-C6ili C1-C3alkil grupe, izborno supstituisane C3-C6cikloalkil grupe, izborno supstituisane C1-C6ili C1-C3alkoksi grupe, izborno supstituisane amino grupe, izborno supstituisane šesto-člane aril grupe i izborno supstituisane pet-do sedmo-člane heteroaril grupe. Još poželjnije, R<2>i R<3>su nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, atoma deuterijuma, izborno supstituisane metil grupe, izborno supstituisane šesto-člane aril grupe i izborno supstituisane pet- do sedmo-člane heteroaril grupe. Još poželjnije, R<2>i R<3>nezavisno su izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, atoma deuterijuma, metil grupe, izborno supstituisane šesto-člane aril grupe i izborno supstituisane pet- do šesto-člane heteroaril grupe.
[0095] Poželjno, R<2>i R<3>je svaki nezavisno atom vodonika.
[0096] Alternativno, poželjno, R<2>i/ili R<3>su/je atom deuterijuma.
[0097] Alternativno, poželjno, R<2>je izabran iz grupe koja se sastoji od izborno supstituisane alkil grupe i izborno supstituisane C3-C6cikloalkil grupe; i R3 je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, izborno supstituisane alkil grupe i izborno supstituisane C3-C6cikloalkil grupe. Poželjnije, R<2>je izborno supstituisana metil grupa; i R<3>je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika i metil grupe. Još poželjnije, R<2>je metil grupa; i R<3>je atom vodonika.
[0098] Alternativno, poželjno, R<2>je izabran iz grupe koja se sastoji od izborno supstituisane šesto-člane aril grupe i izborno supstituisane pet- do sedmo- ili pet- do šesto-člane heteroaril grupe; i R3 je atom vodonika. Poželjnije, R<2>je izabran iz grupe koja se sastoji od izborno supstituisane pirolil grupe, izborno supstituisane pirazolil grupe i izborno supstituisane imidazolil grupe; i R3 je atom vodonika.
[0099] Alternativno, poželjno, R<2>je izabran iz grupe koja se sastoji od izborno supstituisane fenil grupe i izborno supstituisane piridinil grupe; i R3 je atom vodonika. Poželjnije, R<2>je izabran iz grupe koja se sastoji od fenil grupe i piridinil grupe; i R3 je atom vodonika.
[0100] Poželjno, R<4>je atom vodonika, izborno supstituisana C1-C6alkil grupa, izborno supstituisana C1-C6alkenil grupa, izborno supstituisana šesto-člana aril grupa ili izborno supstituisana pet- do sedmo-člana heteroaril grupa.
[0101] Poželjno, R<4>je izborno supstituisana C1-C6alkil grupa. Poželjnije, R4 je izborno supstituisana C1-C3alkil grupa. Još poželjnije, R4 je metil grupa.
[0102] Alternativno, poželjno, R<4>je izborno supstituisana heteroaril grupa. Poželjno, R<4>je izborno supstituisana pet- do sedmo- ili pet- do šesto-člana heteroaril grupa. Poželjnije, R<4>je izabran iz grupe koja se sastoji od izborno supstituisane pirazolil grupe, izborno supstituisane imidazolil grupe, izborno supstituisane triazolil grupe, izborno supstituisane oksazolil grupe, izborno supstituisane tiazolil grupe i izborno supstituisane piridinil grupe.
[0103] Alternativno, R4 i R2 ili R3 i atomi u prstenu za koje su vezani, kao uzeti zajedno, formiraju izborno supstituisanu heterociklil grupu. Poželjno, R<4>i R<2>ili R<3>i atomi u prstenu za koje su vezani, kao uzeti zajedno, formiraju izborno supstituisanu četvoro- do sedmo-članu, ili pet- do sedmo-članu, ili peto- do šesto-članu heterociklil grupu. Još poželjnije, R<4>i R<2>ili R<3>i atomi u prstenu za koje su vezani, kao uzeti zajedno, formiraju izborno supstituisanu petočlanu heterociklil grupu.
[0104] Poželjno, R<4>i R<2>ili R<3>i atomi u prstenu za koje su vezani, kao uzeti zajedno, formiraju izborno supstituisanu heterocikloalkil grupu. Poželjnije, R<4>i R<2>ili R<3>i atomi u prstenu za koje su vezani, kao uzeti zajedno, formiraju izborno supstituisanu četvoro- do sedmo-članu, ili peto- do sedmo-članu, ili peto- do šesto-članu heterocikloalkil grupu. Još poželjnije, R<4>i R<2>ili R<3>i atomi u prstenu za koje su vezani, kao uzeti zajedno, formiraju izborno supstituisanu peto-članu heterocikloalkil grupu.
[0105] Najpoželjnije, heterociklil grupa je pirolidinil grupa, tj. R<4>i R<2>ili R<3>i atomi u prstenu za koje su vezani, kao uzeti zajedno, formiraju izborno supstituisanu pirolidinil grupu.
[0106] Heterociklil/heterocikloalkil grupa može biti supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od hidroksil grupe, C1-C3alkoksi grupe, izborno supstituisane amino grupe, okso grupe i izborno supstituisane C1-C3alkil grupe. U jednom primeru izvođenja, heterociklil/heterocikloalkil grupa je supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od okso grupe i izborno supstituisane C1-C3alkil grupe.
[0107] Poželjno, izborno supstituisana heterocikloalkil grupa je supstituisana pirolidinil grupa.
[0108] Poželjno, R<4>i R<2>i atomi u prstenu za koje su vezani, kao uzeti zajedno, formiraju izborno supstituisanu heterociklil/heterocikloalkil grupu; i R3 je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika i C 2
1-C3alkil grupe. Poželjnije, R4 i R i atomi u prstenu za koje su vezani, kao uzeti zajedno, formiraju izborno supstituisanu četvoro- do sedmo-članu, ili petodo sedmo-članu, ili peto- do šesto-članu heterociklil/heterocikloalkil grupu; i R<3>je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika i metil grupe. Još poželjnije, R<4>i R<2>i atomi u prstenu za koje su vezani, kao uzeti zajedno, formiraju izborno supstituisanu peto-članu heterociklil/heterocikloalkil grupu; i R3 je atom vodonika. Najpoželjniji, izborno supstituisana heterociklil/heterocikloalkil grupa je supstituisana pirolidinil grupa, tj. R4 i R2 i atomi u prstenu za koje su vezani, kao uzeti zajedno, formiraju supstituisanu pirolidinil grupu; i R3 je atom vodonika.
[0109] Poželjno, kada su R<4>i R<2>i atomi u prstenu za koje su vezani, kao uzeti zajedno, formiraju izborno supstituisanu heterociklil/heterocikloalil grupu, R1 je izborno supstituisana alkil grupa ili izborno supstituisana alkenil grupa; i R3 je atom vodonika.
[0110] Poželjno, R<5>je izborno supstituisana šesto-člana aril grupa ili izborno supstituisana peto- do sedmo-člana heteroaril grupa.
[0111] R5 je izborno supstituisana aril grupa ili izborno supstituisana heteroaril grupa. Poželjnije, R<5>je izborno supstituisana šesto-člana aril grupa ili izborno supstituisana peto- do sedmo-člana heteroaril grupa. Još poželjnije, R<5>je izborno supstituisana šesto-člana aril grupa ili izborno supstituisana šesto-člana heteroaril grupa. Još poželjnije, R<5>je supstituisana fenil grupa ili supstituisana piridinil grupa.
[0112] Poželjno, R<5>je grupa predstavljena formulom (c):
gde Z je atom azota ili izborno supstituisana metin grupa;
R5a i R5b nezavisno su izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, halo grupe, izborno supstituisane C1-C6alkil grupe, izborno supstituisane C1-C6nitril grupe, izborno supstituisane amino grupe, izborno supstituisane C1-C6alkoksi grupe, izborno supstituisane sulfanil grupe, izborno supstituisane sulfonil grupe, izborno supstituisane sulfoksiminil grupe i izborno supstituisane četvoro- do sedmo-člane heterociklil grupe koja sadrži azot;
pri čemu je izborno supstituisana četvoro- do sedmo-člana heterociklil grupa koja sadrži azot izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranim iz grupe koja se sastoji od halo grupe, izborno supstituisane C1-C6alkil grupe, okso grupe, hidroksil grupe, izborno supstituisane amino grupe i grupe =N-R5g;
ili, u formuli (c), R5a i R5b postoje na susednim atomima u prstenu i R5a i R5b i atomi u prstenu za koje su vezani mogu da formiraju, kao uzeti zajedno, tri- do sedmo-članu cikloalkil grupu ili tro- do sedmo-članu heterociklil grupu, pri čemu su jedan ili dva od atoma u prstenu koji grade tro- do sedmo-članu heterociklil grupu izborno nezavisno zamenjeni atomom kiseonika, atomom azota, grupom -N(R5c)-, sulfinil grupom, sulfonil grupom i sulfoksiminil grupom, pri čemu tri- do sedmo-člana cikloalkil ili tri- do sedmo-člana heterociklil grupa može biti supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo grupe i C1-C6alkil grupe;
ili R5a i R5b i atomi u prstenu za koje su vezani mogu da formiraju, kao uzeti zajedno, spirocikličnu grupu ili biciklličnu grupu formiranu od peto- do sedmo-članog alifatičnog prstena i bilo koji drugi tri- do sedmo-člani alifatični prsten, u kome jedna ili dve ili više metilen grupa koje grade spirocikličnu grupu ili bicikličnu grupu mogu biti svaka nezavisno zamenjene atomom kiseonika, atomom sumpora, sulfinil grupom, sulfonilom, sulfoksiminil grupom, okso grupom ili grupom -N(R5d)-, i spirociklična grupa ili biciklična grupa mogu biti svaka nezavisno supstituisane sa supstituentom izabranim iz grupe koja se sastoji od halo grupe, hidroksil grupe ili C1-C6alkil grupe; gde
R5c, R5d i R5g su svaki nezavisno atom vodonika ili C1-C6alkil grupa izborno supstituisana supstituentom izabranim iz grupe koja se sastoji od halo grupe, hidroksil grupe, cijano grupe, okso grupe, C1-C6alkil grupe, C1-C6alkoksi grupe, amino grupe, supstituisane amino grupe i heterociklil grupe koja sadrži azot.
[0113] Poželjnije, R<5>je grupa predstavljena formulom (d):
R5a i R5b nezavisno su izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, halo grupe, izborno supstituisane C1-C6alkil grupe, izborno supstituisane C1-C6nitril grupe, izborno supstituisane amino grupe, izborno supstituisane C1-C6alkoksi grupe, izborno supstituisane sulfanil grupe, izborno supstituisane sulfonil grupe, izborno supstituisane sulfoksiminil grupe i izborno supstituisane četvoro- do sedmo-člane heterociklil grupe koja sadrži azot;
pri čemu je izborno supstituisana čestvoro- do sedmo-člana heterociklil grupa koja sadrži azot izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo grupe, izborno supstituisane C1-C6alkil grupe, okso grupe, hidroksil grupe, grupe =N-R5g i grupe -Q-N(R5e)R5e’;
R5e, R5e i R5g svaki nezavisno je atom vodonika ili C1-C6alkil grupa, ili, R5e i R5e’ i atom azota za koji su vezani, kao uzeti zajedno, mogu da formiraju izborno supstituisanu šesto-članu heterociklil grupu; i
Q je jednoguba veza ili C1-C3alkil grupa. Poželjno, četvoro- do sedmo-člana heterociklil grupa koja sadrži azot četvoro- do sedmo-članu hetercikloalkil grupu koja sadrži azot.
[0114] Poželjnije, čestvoro- do sedmo-člana heterociklil grupa koja sadrži azot je izabrana iz grupe koja se sastoji od azetidinil grupe, pirolidinil grupe, piperidinil grupe, morfolinil grupe, tiomorfolinil grupe, tiomorfolin-S,S-dioksid grupe, tiomorfolin-S-okso-S-iminil sulfoksiminil grupe i homopiperazinil grupe, od kojih svaka može biti izborno supstituisana.
[0115] Poželjno, R<5a>je C1-C3alkoksi grupa supstituisana sa amino grupom, ili R5a je C1-C3alkil grupa supstituisana sa izborno supstituisanom peto- do sedmo-članom heterociklil grupom, ili R5a je peto- do sedmo-člana heterociklil grupa koja sadrži azot izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od C1-C3alkil grupe i C1-C3alkil grupe supstituisane sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od hidroksil grupe, karboksil grupe, okso grupe i amino grupe; i
R5b je atom vodonika, halo grupa, C1-C3nitril grupa, C1-C3alkoksi grupa ili C1-C3alkil grupa supstituisana sa supstituentom izabranim iz grupe koja se sastoji iz amino grupe i hidroksil grupe.
[0116] Poželjno, R<5a>je heterociklil grupa koja sadrži azot izborno supstituisana sa metil grupom; i
R5b je atom vodonika, metil grupa, metoksi grupa ili metil grupa supstituisana sa hidroksil grupom. Alternativno, poželjno, R<5a>i/ili R<5b>nezavisno su izabrani iz grupe koja se sastoji od izborno supstituisane sulfanil grupe, izborno supstituisane sulfonil grupe, izborno supstituisane sulfoksiminil grupe i izborno supstituisane tiomorfolin sulfoksiminil grupe.
[0117] Poželjnije, R<5a>je izborno supstituisana sulfoksiminil grupa.
[0118] Poželjnije, izborno supstituisana sulfoksiminil grupa je grupa formule (g):
gde R5h je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, izborno supstituisane C1-C6ili C1-C3alkil grupe, izborno supstituisane cijano grupe, izborno supstituisane acil grupe, izborno supstituisane C1-C6ili C1-C3alkoksikarbonil grupe i izborno supstituisane heterociklil grupe; R5i je izabran iz grupe koja se sastoji od izborno supstituisane C1-C6ili C1-C3alkil grupe i izborno supstituisane heterociklil grupe;
ili R5h i R5i i atomi u prstenu za koje su vezani mogu da formiraju, kao uzeti zajedno, peto- do sedmo-članu heterociklil grupu, pri čemu peto- do sedmo-člana heterociklil grupa može biti supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od hidroksil grupe, C1-C6ili C1-C3alkil grupe, izborno supstituisane amino grupe i okso grupe. Poželjno, R5h i/ili R5i je nezavisno C1-C6ili C1-C3alkil grupa izborno supstituisana sa grupom izabranom iz grupe koja se sastoji od hidroksil grupe i izborno supstituisane amino grupe.
[0119] Poželjno, R<5h>je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, izborno supstituisane C1-C6ili C1-C3alkil grupe, izborno supstituisane cijano grupe, izborno supstituisane acil grupe, izborno supstituisane C1-C6ili C1-C3alkoksikarbonil grupe i izborno supstituisane heterociklil grupe; i
R5i je metil grupa.
[0120] Alternativno, poželjno, R<5i>je izabran iz grupe koja se sastoji od izborno supstituisane C1-C6ili C1-C3alkil grupe i izborno supstituisane heterociklil grupe; i R5h je metil grupa.
[0121] Alternativno, poželjno, R<5>je grupa predstavljena formulom (f):
gde R5f je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika i izborno supstituisane C1-C6alkil grupe;
Q5f je izabran iz grupe koja se sastoji od jednogube veze i C1-C3alkil grupe; Y5f je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma azota i C-H grupe (tj. atoma ugljenika vezanog za atom vodonika); i Z5f je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma azota i atoma kiseonika. Poželjnije, R<5f>je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika i izborno supstituisane C1-C4ili C1-C3alkil grupe; Q5f je izabran iz grupe koja se sastoj od jednogube veze i metilen grupe (tj. -C(H)2- grupe); Y5f je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma azota i C-H grupe (tj. atoma ugljenika vezanog za atom vodonika); i Z5f je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma azota i atoma kiseonika. Još poželjnije, R<5f>je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, metil grupe i C1-C3alkil grupe izborno supstituisane sa grupom izabranom iz grupe koja se sastoji od hidroksil grupe i C1-C3alkil grupe; Q5f je izabran iz grupe koja se sastoji od jednogube veze i metilen grupe (tj. -C(H)2- grupe); Y5f je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma azota i C-H grupe (tj. atoma ugljenika vezanog za atom vodonika); i Z5f je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma azota i atoma kiseonika. Najpoželjnije, R<5f>je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, metil grupe i C1-C3alkil grupe izborno supstituisane sa grupom izabranom iz grupe koja se sastoji od hidroksil grupe i C1-C3alkil grupe; Q5f je izabran iz grupe koja se sastoji od jednogube veze i metilen grupe (tj. -C(H)2- grupe); Y5f je atom azota; i Z5f je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma azota i atoma kiseonika.
[0122] Alternativno, poželjno, R<5>je grupa predstavljena formulom (e):
gde R5g je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika i izborno supstituisane C1-C3alkil grupe. Poželjnije, R<5g>je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika i metil grupe.
[0123] Poželjno, u jedinjenju formule (I), R<1>je grupa predstavljena formulom (a) kao što je definisana u prethodnom tekstu; i/ili R2 i R3 nezavisno su izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, atoma deuterijuma, izborno supstituisane metil grupe, izborno supstituisane šesto-člane aril grupe i izborno supstituisane peto- do sedmo-člane heteroaril grupe; i/ili R<4>je atom vodonika, izborno supstituisana C1-C6alkil grupa, izborno supstituisana C1-C6alkenil grupa, izborno supstituisana šesto-člana aril grupa ili izborno supstituisana peto- do sedmočlana heteroaril grupa; i/ili R<5>je grupa predstavljena formulom (c) kao što je definisana u prethodnom tekstu.
[0124] Poželjnije, R<1>je grupa predstavljena formulom (a) kao što je definisana u prethodnom tekstu; i/ili R2 i R3 su nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, atoma deuterijuma, metil grupe, izborno supstituisane šesto-člane aril grupe i izborno supstituisane peto- do šesto-člane heteroaril grupe; i/ili R<4>je atom vodonika, izborno supstituisana C1-C6alkil grupa, izborno supstituisana C1-C6alkenil grupa, izborno supstituisana šesto-člana aril grupa ili izborno supstituisana peto- do sedmo-člana heteroaril grupa; i/ili R<5>je grupa predstavljena formulom (d) ili formulom (f) kao što je definisana u prethodnom tekstu.
[0125] Poželjno, R<1>je grupa predstavljena formula (b) kao što je opisana u prethodnom tekstu; i/ili R2 i R3 su nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, atoma deuterijuma, metil grupe, izborno supstituisane šesto-člane aril grupe i izborno supstituisane pet- do šesto-člane heteroaril grupe; i/ili R<4>je atom vodonika ili metil grupa; i/ili R<5>je grupa predstavljena formulom (d) ili formulom (f) kao što je definisana u prethodnom tekstu.
[0126] Poželjno, R<1>je 2-hlorofenil grupa, 2,6-dihlorofenil grupa ili 2-hloro-6-fluorofenil grupa i/ili R2 je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, atoma deuterijuma, metil grupe i fenil grupe;
i/ili R3 je izabran iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika i atoma deuterijuma; i/ili R5 je grupa predstavljena formulom (d) ili formulom (f) kao što je definisana u prethodnom tekstu.
[0127] Poželjno, jedinjenje formule (I) je izabrano od sledećih:
(1) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(2) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(2-(metilamino)etoksi)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(3) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-metoksi-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(4) hidrohlorid 2-(4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)piperazin-1-il)sirćetne kiseline;
(5) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((metilamino)metil)-4-morfolinofenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(6) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(7) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-fluoro-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(8) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-(4-metoksibenzil)-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(9) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(10) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(11) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-cijano-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(12) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-ilmetil)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(13) 7-((4-(4-(2-aminoacetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(14) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((1,2,3,4-tetrahidroizohinolin-7-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(15) 3-(2,6-dihlorofenil)-2,2-dideutero-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(16) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(17) (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(18) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-(piperidin-4-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(19) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(20) (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(21) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(4-izopropilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(22) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((2-metil-1,2,3,4-tetrahidroizohinolin-7-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(23) (rac)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2-fenil-7-((1,2,3,4-tetrahidroizohinolin-7-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(24) 3-(2-hlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(25) 3-(2-hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(26) 3-(2,6-dihlorofenil)-1,2-dimetil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(27) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(morfolinometil)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on;
(28) 6-(2,6-dihlorofenil)-2-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-6a,7,8,9-tetrahidropirimido[5,4-e]pirolo[1,2-a]pirimidin-5(6H)-on;
(29) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-((4-metilpiperazin-1-il)metil)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; i
(30) (rac)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(S-metilsulfonimidoyl)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on.
[0128] Poželjno, dato je jedinjenje formule (I), ili njegova farnaceutski prihvatljiva so ili N-oksidni derivat, i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijens.
[0129] Pogodni farmaceutski prihvatljivi ekscipijensi bi bili poznati stručnjaku iz date oblasti tehnike, na primer, masti, voda, fiziološki rastvor, alkohol (npr., etanol), glicerol, polioli, vodeni rastvor glukoze, ekstender, sredstvo za raspadanje, vezujuće sredstvo, lubrikant, sredstvo za vlaženje, stabilizator, emulgator, disperzant, konzervans, zaslađivač, boja, začinsko sredstvo ili aromatizer, sredstvo za koncentrovanje, razblaživač, puferska supstanca, rastvarač ili solubilizujuće sredstvo, hemikalija za postizanje efekta skladištenja, so za modifikaciju osmotskog pritiska, sredstvo za oblaganje ili antioksidant, saharidi kao što su laktoza ili glukoza; kukuruzni skrob, pšenica ili pirinač; masne kiseline kao što je stearinska kiselina; neorganske kiseline kao što je magnezijum metasilikat aluminat ili anhidrovani kalcijum fosfat; sintetički polimeri kao što je polivinilpirolidon ili polialkilen glikol; alkoholi kao što je stearil alkohol ili benzil alkohol; sintetički celulozni derivati kao što je metilceluloza, karboksimetilceluloza, etilceluloza ili hidroksipropilmetilceluloza; i drugi konvencionalno korišćeni aditivi kao što je želatin, talk, biljno ulje i guma arabika.
[0130] Poželjno, data je farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili N-oksidni derivat, i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijens.
[0131] Poželjno, data je farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje formule (I) koja sadrži jedan ili više dodatnih farmaceutski aktivnih sredstava.
[0132] Poželjno, dato je jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili N-oksidni derivat, ili farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje formule (I) za upotrebu u terapiji.
[0133] Poželjno, dato je jedinjenje formule (I) za upotrebu kao lek.
[0134] Poželjno, dato je jedinjenje formule (I) za upotrebu u lečenju ili prevenciji kancera.
[0135] Poželjno, dato je jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili N-oksidni derivat, ili farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje formule (I) za upotrebu kao lek i/ili za upotrebu u lečenju ili prevenciji kancera.
[0136] Poželjno, jedinjenja prema predmetnom pronalasku imaju IC50vrednost za Wee-1 kinazu od oko 1 nM do oko 1,000 nM, poželjnije od oko 1 nM do oko 500 nM, ili od oko 1 nM do oko 300 nM, ili od oko 1 nM do oko 100 nM, ili od oko 1 nM do oko 50 nM, ili od oko 1 nM do oko 30 nM, ili od oko 1 nM do oko 15 nM, ili od oko 1 nM do oko 10 nM, najpoželjnije manje od 10nM. Postupak za određivanje IC50vrednosti jedinjenja za Wee-1 kinazu je opisan u daljem tekstu (videti primere).
[0137] Kada se uvode elementi prema predmetnom pronalasku ili njihov poželjni primer (primeri) izvođenja, članovi "a", "an", "the" i "navedeni" su određeni zako da označavaju da je prisutan jedan ili više elemanata. Termini "koji sadrži", "uključujući" i "koji ima" su određeni tako da uključuju navedene elemente i označavaju da može biti dodatnih elemenata osim navedenih elemenata.
[0138] Gore navedeni detaljni opis je obezbeđen radi objašnjenja i ilustracije, i nije nameravano da ograniče obim priloženih patentnih zahteva. Mnoge varijacije u trenutno poželjnim primerima izvođenja koji su ovde ilustrovani biće očigledne stručnjaku iz date oblasti tehnike, i ostaju unutar obima priloženih patentnih zahteva i njihovih ekvivalenata.
[0139] Sledeći neograničavajući primeri dalje ilustruju predmetni pronalazak.
PRIMERI
[0140] Predmetni pronalazak će sada biti opisan u vezi sa nekoliko primerima.
[0141] Primeri 1 do 185 su sintetisani prema postupcima opisanim kasnije. Vrednosti IC50za Wee-1 i druge vrednosti su određene kao što je opisano u daljem tekstu i predstavljene su u sledećoj tabeli.
Tabela 1
[0142] Za reprezentativne primere u Tabeli 1, aktivnosti Wee-1, HT29 pCDC2 i HLM su klasifikovane kao što sledi:
EKSPERIMENTALNI DEO
Skraćenice
[0143] aq: vodeni; Boc: terc-butoksikarbonil; c-heks: cikloheksan; cv: zapremine kolona; dba: dibenzilidenaceton; DCM: dihlorometan; DIPEA: diizopropiletilamin; DMF: N,N-dimetilformamid; DMSO: dimetilsulfoksid; dppf: 1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen; EtOAc: etil acetat; ESI: elektrosprej jonizacija; h: čas; HATU: 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinijum 3-oksid heksafluorofosfat; HPLC: tečna hromatografija na visokom pritisku; LC: tečna hromatografija; LCMS: tečna hromatografija masena spektrometrija; M: molarni; m/z: odnos mase prema naelektrisanju; mCPBA: 3-hloroperbenzoeva kiselina; MeOH: metanol; min: minuti; MS: masena spektrometrija; NBS: N-bromosukcinimid; NMR: nuklearna magnetna rezonanca; RT: vreme zadržavanja; RT: sobna temperatura; sat.: zasićen; SM: početni materijal; TFA: trifluorosirćetna kiselina; THF: tetrahidrofuran.
Opšti eksperimentalni uslovi
Rastvarači i reagensi
[0144] Uobičajeni organski rastvarači koji su korišćeni u reakcijama (npr. THF, DMF, DCM, i metanol) su kupljeni anhidrovani iz Sigma-Aldrich® u Sure/Seal™ bocama i njima je na odgovarajući način rukovano pod azotom. Voda je dejonizovana upotrebom Elga PURELAB Option-Q. Svi drugi rastvarači koji su korišćeni (tj. za postupke obrade i prečišćavanje) su generalno bili HPLC kvaliteta i korišćeni su kakvi su nabavljeni iz različitih komercijalnih izvora. Osim ukoliko je drugačije naznačeno, svi korišćeni početni materijali su kupljeni od komercijalnih nabavljača i korišćeni kakvi su dopremljeni.
Mikrotalasna sinteza
[0145] Osim ukoliko nije navedeno drugačije, eksperimenti sa mikrotalasnim zračenjem su izvedeni upotrebom CEM Discover™/Explorer24™ sistema kontrolisanog sa Synergy 1.5 softverom. U drugim slučajevima je korišćen Biotage Initiator™ Eight. Obe mašine daju dobru reproducibilnost i kontrolu na temperaturnim opsezima od 60-250°C i pritiscima do maksimalno 20 bara.
„Flash“ hromatografija
[0146] Prečišćavanje jedinjenja pomoću „flash“ hromatografije je postignuto upotrebom Biotage Isolera Four sistema. Osim ukoliko je drugačije naznačeno, Biotage KP-Sil SNAP ili Grace Resolv kertridž kolone (10-340 g) su korišćeni zajedno sa naznačenim sistemom rastvarača i odgovarajućim gradijentom rastvarača u zavisnosti od polarnosti jedinjenja. U slučaju polarnijih i baznijih jedinjenja, korišćene su Biotage KP-NH SNAP kertridž kolone (11-28 g).
NMR spektroskopija
[0147] 1H NMR spektri su beleženi na temperaturi sredine upotrebom Bruker Avance (500 MHz) ili Bruker Avance (400 MHz) ili Bruker Avance (300 MHz) spektrometra. Sva hemijska pomeranja (δ ) su izražena u ppm. Rezidualni signali rastvarača su korišćeni kao interni standard i karakteristični pikovi rastvarača su ispravljeni prema referentnim podacima navedenim u J. Org. Chem., 1997, 62, p 7512-7515; u drugim slučajevima, NMR rastvarači su sadržali tetrametilsilan, koji je korišćen kao interni standard.
Tečna hromatografija pod visokim pritiskom
[0148] Eksperimenti sa tečnom hromatografijom masenom spektrometrijom (LCMS) za određivanje vremena zadržavanja (RT) i povezane mase jona su izvedene upotrebom jednog od sledećih postupaka.
[0149] Postupak A: sistem se sastoji od Agilent Technologies 6140 „single quadrupole mass“ spektrometra vezanog za Agilent Technologies 1290 Infinity LC sistem sa UV detektorom sa diodnim nizom i autosemplerom. Spektrometar se sastoji od multimodnog izvora jonizacije (elektrosprej i hemijske jonizacije pod atmosferskim pritiskom) koji funkcioniše u pozitivnom i negativnom jonskom modu. LCMS eksperimenti su izvedeni na svakom uzorku dostavljenom upotrebom sledećih uslova: LC kolona: Zorbax Eclipse Plus C18 RRHD 1.8 mikrona 50 x 2.1 mm održavana na 40°C. Pokretne faze: A) 0.1% (zapr./zapr.) mravlja kiselina u vodi; B) 0.1% (zapr./zapr.) mravlja kiselina u acetonitrilu.
Vreme Protok %A %B
gradijenta (min) (mL/min)
0.00 1.0 95 5
1.80 1.0 0 100
2.20 1.0 0 100
2.21 1.0 95 5
2.50 1.0 95 5
[0150] Postupak B: sistem se sastoji od Varian Prostar 1200 LC-MS sistema koji koristi Phenomenex 50 x 4.6 mm ID 3 μM C18(2) Luna kolonu. UV detekcija je izvedena na dve talasne dužine (214 i 254 nM), sa analizom masenog spektra u pozitivnom jonizacionom modu. Pokretne faze: A) 0.05% (zapr./zapr.) mravlja kiselina u vodi; B) 0.05% (zapr./zapr.) mravlja kiselina u acetonitrilu.
Vreme Protok %A %B
gradijenta (min) (mL/min)
0.00 1.0 95 5
0.50 1.0 95 5
4.50 1.0 0 100
5.50 1.0 0 100
[0151] Postupak C: Sistem se sastoji od Agilent Technologies 6130 „quadrupole mass“ spektrometra vezanog za Agilent Technologies 1290 Infinity LC sistem sa UV detektorom sa diodnim nizom i autosemplerom. Spektrometar se sastoji od izvora elektrosprej jonizacije koji funkcioniše u pozitivnom i negativnom jonskom modu. LCMS eksperimenti su izvedeni na svakom uzorku dostavljenom upotrebom sledećih uslova: LC kolona: Agilent Eclipse Plus C18 RRHD 1.8 mikrona 50 x 2.1 mm održavana na 40°C. Pokretne faze: A) 0.1% (zapr./zapr.) mravlja kiselina u vodi; B) 0.1% (zapr./zapr.) mravlja kiselina u acetonitrilu.
Vreme gradijenta Protok (mL/min) %A %B (min)
0.00 0.5 80 20
1.80 0.5 0 100
2.20 0.5 0 100
2.50 0.5 80 20
3.00 0.5 80 20
Preparativna tečna hromatografija pod visokim pritiskom
[0152] Sistem se sastoji od Agilent Technologies 6120 „single quadrupole mass“ spektrometra vezanog za Agilent Technologies 1200 Preparative LC sistem sa Multiple Wavelength detektorom i autosemplerom. Maseni spektrometar koristi multimodni izvor jonizacije (elektrosprej i hemijske jonizacije pod atmosferskim pritiskom) koji funkcioniše u pozitivnom i negativnom jonskom modu. Sakupljanje frakcija je pokrenuto preko mase (multimodni pozitivni i negativni jon). Eksperimenti prečičišćavanja, osim ukoliko nije drugačije navedeno, su izvedeni pod baznim uslovima u odgovarajućem gradijentu rastavarača koji je tipično određen preko vremena zadržavanja nađenog upotrebom HPLC postupka A. U slučajevima gde su bazni uslovi bili neuspešni, korišćeni su kiseli uslovi.
[0153] Bazni uslovi: LC kolona: Waters XBridge™ Prep C18 5 μm OBD™ 19 x 50 mm kolona na sobnoj temperaturi ili Water XBridge™ Prep C18 5 μM OBD™ 30 x 100 mm kolona na sobnoj temperaturi. Pokretna faza: A) 0.1% (zapr./zapr.) amonijum hidroksid u vodi; B) 0.1% (zapr./zapr.) amonijum hidroksid u 95:5, acetonitrilu/vodi. Ukupno vreme eksperimenta je bilo oko 10 ili 20 min i dat je primer postupka:
Vreme Protok %A %B
gradijenta (mL/min)
(min)
0.00 20.0 50 50
3.00 20.0 12 88
5.00 20.0 12 88
7.00 20.0 0 100
8.0 20.0 0 100
8.20 20.0 50 50
[0154] Kiseli uslovi: LC kolona: Waters XBridge™ Prep C18 5μm OBD™ 19 x 50 mm kolona na sobnoj temperaturi ili Water XBridge™ Prep C18 5 μM OBD™ 30 x 100 mm kolona na sobnoj temperaturi. Pokretna faza: A) Voda 0.1% (zapr./zapr.) mravlja kiselina u vodi; B) 0.1% (zapr./zapr.) mravlja kiselina u 95:5, acetonitrilu/vodi. Ukupno vreme eksperimenta bilo je oko 10 ili 20 min i dat je primer postupka:
Vreme Protok %A %B
gradijenta (mL/min)
(min)
0.00 20.0 95 5
7.00 20.0 0 100
9.00 20.0 0 100
9.20 20.0 95 5
[0155] Čiste frakcije su spojene i koncentrovane upotrebom Genevac EZ-2 Elite, osim ukoliko je navedeno drugačije.
Nonenklatura
[0156] Osim ukoliko je naznačeno drugačije, nomenklatura struktura je određena upotrebom funkcije ’prevođenja struktura u naziv’ ChemBioDraw Ultra 12.0.2 (CambridgeSoft/PerkinElmer).
Masa jona
[0157] Za jedinjenja koja sadrže atome hlora, prikazani joni su oni koji sadrže samo izotop 35Cl.
Primer 1: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0158]
Korak 1: N-(2,6-Dihlorofenil)-4-(metilamino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid:
[0159] 4-(Metilamino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksilna kiselina [Bioorg. Med. Chem.
2005, 13 (16), 4936] (0.5 g, 2.51 mmol) je suspendovana u hlorobenzenu (10 mL) i dodat je 2,6-dihloroanilin (0.407 g, 2.51 mmol). Dodat je fosfor trihlorid (0.220 mL, 2.51 mmol) smeša je mešana na 120°C u trajanju od 16 časova. Reakcija je ugašena sa 2 M vodenim rastvorom Na2CO3, zatim ekstrahovana sa etil acetatom (x 2). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom i zatim sušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani (pretvoreni u azeotropnu smešu sa toluenom). Ostatak je triturisan sa dietil etrom i jedinjenje iz naslova je sakupljeno filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (180 mg, 21%). Ishodna tečnost je koncentrovana da bi se dobio dodatni, neznatno manje čist uzorak jedinjenja iz naslova (300 mg; ukupan prinos 56%). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.72 (br s, 1H), 8.61 (br s, 1H), 7.60 (m, 2H), 7.45 (m, 1H), 2.96 (s, 3H), SMe pik verovatno maskiran rastvaračem. LCMS (postupak A): RT= 1.24 min, m/z = 343 [M+H]+ .
Korak 2: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0160] N-(2,6-Dihlorofenil)-4-(metilamino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid (500 mg, 1.46 mmol) je suspendovan u acetonitrilu (10 mL) i dodat je cezijum karbonat (1.90 g, 5.83 mmol). Dodat je dibromometan (0.304 mL, 4.37 mmol) i reakcija je mešana na 80°C u trajanju od 16 časova. Smeša je razblažena vodom i zatim ekstrahovana sa etil acetatom (x 3). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom i zatim sušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (Isolera 10 g; eluiran 0-70% EtOAc / cheks preko 20 cv) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao kristalna bela čvrsta supstanca (190 mg, 37%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.44 (d, 2H), 7.30 (t, 1H), 4.91 (s, 2H), 3.20 (s, 3H), 2.58 (s, 3H). LCMS (postupak A): RT= 1.29 min, m/z = 355 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido [4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0161] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (30 mg, 0.084 mmol) je suspendovan u toluenu (2 mL) i dodat je mCPBA (34.4 mg, 0.110 mmol) kao suspenzija u toluenu (2 mL) na sobnoj temperaturi. Posle 15 minuta dodat je DIPEA (0.044 mL, 0.253 mmol), a zatim terc-butil 4-(4-aminofenil)piperazin-1-karboksilat [Activate Scientific] (23.4 mg, 0.084 mmol). Dobijena smeša je zagrevana na 80°C u trajanju od 1 časa, zatim koncentrovana in vacuo i pretvorena u azeotropnu smešu sa etil acetatom. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (Isolera 10 g; eluiran 0-90% EtOAc / c-heks preko 20 cv) da bi se dobio polu-čvrsti materijal. Ovo je suspendovano u dietil etru i žuta čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom. Čvrsta supstanca je rastvorena u DCM (1 mL) i dodata je TFA (1 mL). Smeša je mešana u trajanju od 30 min, zatim koncentrovana. Ostatak je rastvoren u metanolu i dodat u 2 g SCX-2 kertridž. Kolona je isprana metanolom zatim eluirana sa 2 M NH3/ MeOH. Bazna frakcija je koncentrovana da bi se dobila voskasta čvrsta supstanca. Ovo je suspendovano u dietil etru i čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (7 mg, 17%).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.42 (s, 1H), 7.63 (m, 4H), 7.48 (m, 1H), 6.90 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 3.10 (s, 3H), 2.97 (m, 4H), 2.81 (m, 4H). LCMS (postupak A): RT= 0.71 min, m/z = 484 [M+H]+ .
Primer 2: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(2-(metilamino)etoksi)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0162]
[0163] 3-(2,6-Dihlorofenil)-l-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (82 mg, 0.231 mmol) je reagovao sa terc-butil (2-(4-aminofenoksi)etil)(metil)karbamatom (61.5 mg, 0.231 mmol) praćenjem postupka za Primer 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (27 mg, 24%).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 9.71 (s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.69 (m, 4H), 7.47 (m, 1H), 6.89 (d, 2H), 4.88 (s, 2H), 3.97 (m, 2H), 3.10 (s, 3H), 2.81 (t, 2H), 2.32 (s, 3H). LCMS (postupak A) : R
T= 0.77 min, m/z = 473 [M+H] .
Primer 3: 3-(2,6-Dihlorofenil)-7-((3-metoksi-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0164]
[0165] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (50 mg, 0.141 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-amino-2-metoksifenil)piperazin-1-karboksilatom (43 mg, 0.14 mmol) praćenjem postupka za Primer 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (34 mg, 47%).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.48 (s, 1H), 7.65 (m, 3H), 7.47 (m, 1H), 7.21 (d, 1H), 6.85 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.69 (s, 3H), 3.13 (s, 3H), 2.92 (m, 8H). LCMS (postupak A) : RT= 0.75 min, m/z = 514 [M+H]+ .
Primer 4: hidrohlorid 2-(4-(4-((6-(2,6-Dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)piperazin-1-il)sirćetne kiseline
[0166]
Korak 1: terc-Butil 2-(4-(4-nitrofenil)piperazin-1-il)acetat:
[0167] 1-(4-Nitrofenil)piperazin (3 g, 14.5 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (25 mL) i dodat je cezijum karbonat (6.43 g, 19.7 mmol), a zatim terc-butil 2-bromoacetat (1.95 mL, 13.2 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa, zatim koncentrovana in vacuo. Ostatak je apsorbovan u dihlorometanu i ispiran redom vodenim rastvorom NaHCO3, vodom i fiziološkim rastvorom. Organska komponenta je sušena upotrebom kertridža faznog separatora, zatim koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (3.5 g, 85%) koje je korišćeno kao što je dobijeno bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak A): RT= 0.90 min, m/z = 322 [M+H]+ .
Korak 2: terc-Butil 2-(4-(4-aminofenil)piperazin-1-il)acetat:
[0168] terc-Butil 2-(4-(4-nitrofenil)piperazin-1-il)acetat (1.5 g, 4.67 mmol) je rastvoren u etanolu (50 mL) i dodat je 10% paladijum na uglju (0.497 g, 0.467 mmol) pod atmosferom azota. Dodat je amonijum format (2.94 g, 46.7 mmol) i smeša je zagrevana do 40°C. Dodata je nova porcija amonijum formata (2.94 g, 46.7 mmol) i dobijena smeša je mešana na 40°C u trajanju od 16 časova. Smeša je filtrirana kroz Celite® i koncentrovana in vacuo. Ostatak je apsorbovan u vodenom rastvoru natrijum bikarbonata i ekstrahovan sa dihlorometanom (x 3). Spojeni organski ekstrakti su sušeni preko Na2SO4, zatim filtrirani i koncentrovani in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (Isolera 50 g Si; eluiran 1:1 CH2Cl2:EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.2 g, 88%) koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 3: hidrohlorid 2-(4-(4-((6-(2,6-Dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)piperazin-1-il)sirćetne kiseline:
[0169] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (50 mg, 0.141 mmol) je suspendovana u toluenu (1 mL) i dodat je mCPBA (57.4 mg, 0.183 mmol) kao suspenzija u toluenu (1 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Dodat je DIPEA (0.074 mL, 0.422 mmol), a zatim terc-butil 2-(4-(4-aminofenil)piperazin-1-il)acetat (41 mg, 0.141 mmol). Dobijena smeša je zagrevana na 80°C u trajanju od 16 časova, zatim koncentrovana in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (Isolera 10 g Si; eluiran 0-90% EtOAc / c-heks preko 20 cv) da bi se dobilo žuto ulje. Ovo je triturisano sa dietil etrom da bi se dobila prljavo bela čvrsta supstanca, koja je suspendovana u 1 mL 4 M HCl u dioksanu i zagrevana na 70°C u trajanju od 16 časova. Smeša je koncentrovana in vacuo, kada je NMR pokazala da deprotekcija nije završena. Ostatak je rastvoren u 2 mL 2 M HCl u vodi i zagrevana na 60°C u trajanju od 3 časa, zatim koncentrovana in vacuo i pretvoren u azeotropnu smešu sa toluenom (x 3). Preostalo staklo je rastvoreno u acetonitrilu / vodi i liofilizovano da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (24 mg, 32%).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ (s, 1H), 10.05 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.77 (m, 4H), 7.50 (t, 1H), 7.00 (d, 2H), 5.01 (s, 2H), 4.22 (s, 2H), 3.85 (m, 8H), 3.12 (s, 3H).
LCMS (postupak A): RT= 0.74 min, m/z = 542 [M+H]+ .
Primer 5: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((metilamino)metil)-4-morfolinofenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0170]
Korak 1: 2-Morfolino-5-nitrobenzaldehid:
[0171] U rastvor 2-hloro-5-nitrobenzaldehida (3.00 g, 16.2 mmol) u DMF (20 mL) dodat je DIPEA (4.24 mL, 24.3 mmol) i morfolin (1.55 g, 17.8 mmol). Reakciona smeša je mešana na 90°C u trajanju od 4 časa. Reakcija je hlađena do sobne temperature i dodata je voda. Smeša je ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko Na2SO4, filtriran, i rastvarači su uklonjeni in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (sirovo 3.2 g, 85%), koje je korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak A): R
T= 0.99 min, m/z = 237 [M+H] .
Korak 2: N-Metil-1-(2-morfolino-5-nitrofenil)metanamin:
[0172] U suspenziju natrijum bikarbonata (0.356 g, 4.23 mmol) u MeOH (6 mL) dodat je 2-morfolino-5-nitrobenzaldehid (0.5 g, 2.12 mmol) i metilamin (2 M in MeOH) (1.27 mL, 2.54 mmol). Reakciona smeša je mešana na 70°C. Posle 4 časa, reakcija je hlađena do 0°C i dodat je natrijum borohidrid (0.096 g, 2.54 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Dodato je nekoliko kapi vode i rastvarači su uklonjeni in vacuo. Preostali dodatak je podeljen između DCM i fiziološkog rastvora, razdvojen, ekstrahovan upotrebom dodatnog DCM, sušen preko Na2SO4, filtriran, i rastvarači su uklonjeni in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (sirov, 450 mg, 85%), koje je korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak A): RT= 0.47 min, m/z = 221 [M+H-30 (CH
3NH)] .
Korak 3: terc-Butil metil(2-morfolino-5-nitrobenzil)karbamat:
[0173] U rastvor N-metil-1-(2-morfolino-5-nitrofenil)metanamina (450 mg, 1.79 mmol) u THF (5 mL) dodat je trietilamin (0.50 mL, 3.58 mmol) i Boc2O (0.46 mL, 1.97 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova. Dodata je voda i reakciona smeša je ekstrrahovana upotrebom EtOAc. Kombinovana organska faza je isprana upotrebom vode i fiziološkog rastvora, sušena preko Na2SO4, filtrirana, i rastvarači su uklonjeni in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (sirovo, 622 mg, 99%), koje je korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak A): RT= 1.39 min, m/z = 296 [M+H-56(tBu)]+ .
Korak 4: terc-Butil 5-amino-2-morfolinobenzil(metil)karbamat:
[0174] U rastvor terc-butil metil(2-morfolino-5-nitrobenzil)karbamata (640 mg, 1.82 mmol) u etanolu (4 mL) dodat je 10% paladijum na uglju (194 mg, 0.182 mmol) i amonijum format (230 mg, 3.64 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60°C u trajanju od 3 časa. Smeša je filtrirana kroz Celite® i filtrat je koncentrovan in vacuo. Preostali ostatak je podeljen između EtOAc i zasićenog (vodenog) rastvora natrijum bikarbonata, organska faza je isprana upotrebom fiziološkog rastvora, sušena preko Na2SO4, filtrirana, i rastvarači su uklonjeni in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (sirovo, 580 mg, 99%), koje je korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak A): RT= 0.83 min, m/z = 322 [M+H]+ .
Korak 5: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((metilamino)metil)-4-morfolinofenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0175] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (50 mg, 0.141 mmol) je reagovao sa terc-butil 5-amino-2-morfolinobenzil(metil)karbamatom (45.2 mg, 0.141 mmol) praćenjem postupka za Primer 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (6 mg, 8%).<1>H NMR (500 8.45 (s, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.65 (m, 2H), 7.57 (d, 1H), 7.47 (t, 1H), 7.05 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.97 (m, 4H), 3.69 (s, 2H), 3.12 (s, 3H), 2.82 (m, 4H), 2.31 (s, 3H). LCMS (postupak A): RT= 0.85 min, m/z = 528 [M+H]+ .
Primer 6: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0176]
[0177] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (50 mg, 0.141 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-amino-2-metilfenil)piperazin-1-karboksilatom (41 mg, 0.141 mmol) praćenjem postupka za Primer 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (14 mg, 20%).<1>H NMR (500 MHz,
8.46 (s, 1H), 7.68 (m, 2H), 7.56 (m, 2H), 7.47 (m, 2H), 6.97 (d, 2H), 4.96 (s, 2H), 3.08 (s, 3H), 2.81 (m, 4H), 2.72 (m, 4H), 2.23 (s, 3H). LCMS (postupak A): RT= 0.78 min, m/z = 499 [M+H]+ .
Primer 7: 3-(2,6-Dihlorofenil)-7-((3-fluoro-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0178]
[0179] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (50 mg, 0.141 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-amino-2-fluorofenil)piperazin-1-karboksilatom (42 mg, 0.141 mmol) praćenjem postupka za Primer 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (22 mg, 31%).<1>H NMR (500 MHz,
8.48 (s, 1H), 7.74 (m, 3H), 7.45 (m, 2H), 6.96 (t, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.11 (s, 3H), 2.85 (m, 8H). LCMS (postupak A): RT= 0.76 min, m/z = 503 [M+H]+ .
Primer 8: 3-(2,6-Dihlorofenil)-l-(4-metoksibenzil)-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0180]
Korak 1: 4-((4-Metoksibenzil)amino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksilna kiselina:
[0181] Etil 4-hloro-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksilat (3 g, 12.9 mmol) je rastvoren u DMF (10 mL) i hlađen do 0°C. Lagano je dodavan rastvor trietilamina (2 mL, 14.4 mmol) i (4-metoksifenil)metanamina (1.85 mL, 14.2 mmol) u DMF (10 mL). Smeša je mešana u trajanju od 1 časa zatim sipana u led / 10% rastvor limunske kiseline. Smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (x 2). Spojeni organski slojevi su isprani rastvorom limunske kiseline, zatim fiziološkim rastvorom, zatim sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani in vacuo. Ostatak je pretvoren u azeotropnu smešu sa cikloheksanom/ DCM da bi se dobio sirup koji je kristalizovao da bi se proizvelo 5.20 g bele čvrste supstance posle stajanja. Ovo je rastvoreno u etanolu (25 mL) i 2 M NaOH (25 mL) i rastvor je mešan preko noći. Smeša je koncentrovana in vacuo, zatim zakišeljena (2 M HCl). Istaložena čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, zatim sušena in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (4.1 g, kvantitativan).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.85 (t, 1H), 8.53 (s, 1H), 7.29 (t, 2H), 6.90 (t, 2H), 4.63 (d, 2H), 3.74 (s, 3H), 2.45 (s, 3H). LCMS (postupak A): RT= 1.05 min, m/z = 306 [M+H]+ .
Korak 2: N-(2,6-Dihlorofenil)-4-((4-metoksibenzil)amino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid:
[0182] 4-((4-Metoksibenzil)amino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksilna kiselina (4.1 g, 13.4 mmol) je suspendovana u hlorobenzenu (30 mL). 2,6-Dihloroanilin (2.18 g, 13.4 mmol) je dodat, a zatim i fosfor trihlorid (1.18 mL, 13.4 mmol). Smeša je mešana na 120°C u trajanju od 60 časova. Reakcija je ugašena sa Na2CO3i dodat je etil acetat. Nerastvorena čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom. Bifazna ishodna tečnost je ekstrahovana sa DCM (x 3). Spojeni organski slojevi su sušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani do sirupa koji očvršćuje posle stajanja preko noći. Ovo je spojeno sa čvrstom supstancom sakupljenom filtracijom. Kombinovani materijal je suspendovan u dietil etru i ultrazvučno obrađen, zatim je čvrsta supstanca sakupljena filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (3.19 g, 53%) kao prljavo bela čvrsta supstanca koja je korišćena bez dodatnog prečišćavanja.<1>H NMR (500
8.77 (s, 1H), 7.58 (d, 2H), 7.41 (m, 2H), 7.27 (d, 2H), 6.88 (d, 2H), 4.60 (d, 2H), 3.72 (s, 3H). LCMS (postupak A): RT= 1.49 min, m/z = 449 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-(4-metoksibenzil)-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0183] N-(2,6-Dihlorofenil)-4-((4-metoksibenzil)amino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid (760 mg, 1.69 mmol) je suspendovan u acetonitrilu (20 mL) i dodat je cezijum karbonat (2.76 g, 8.46 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 10 min. Dodat je dijodometan (0.341 mL, 4.23 mmol) i smeša je mešana u trajanju od 1 časa na 70°C. Dodata je nova porcija dijodometana (0.341 mL, 4.23 mmol) i smeša je mešana dodatni 1 čas na 80°C. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa dihlorometanom (x 2). Spojeni organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, zatim sušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (Isolera 25 g; eluiran 0-80% EtOAc / c-heks.) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao lepljivo staklo (125 mg, 16%) koje je korišćeno direktno bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak A): RT= 1.48 min, m/z = 461 [M+H]+ .
Korak 4: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-(4-metoksibenzil)-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0184] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-(4-metoksibenzil)-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (123 mg, 0.267 mmol) je suspendovan u toluenu (1 mL) i dodat je mCPBA (109 mg, 0.347 mmol) kao suspenzija u toluenu (1 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta, zatim je dodat DIPEA (0.140 mL, 0.800 mmol), a nakon toga terc-butil 4-(4-aminofenil)piperazin-1-karboksilat (73.9 mg, 0.267 mmol). Smeša je zagrevana na 80°C u trajanju od 4 časa, zatim hlađena i koncentrovana in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (Isolera 10 g; eluiran 0-80% EtOAc / c-heks preko 20 cv) da bi se dobilo žuto staklo. Ovo je rastvoreno u DCM (1 mL) i TFA (1 mL) i mešano u trajanju od 1 časa na sobnoj temperaturi, zatim koncentrovano in vacuo. Ostatak je rastvoren u metanolu i dodat u 2 g SCX-2 kertridž. Kolona je isprana metanolom, zatim eluirana sa 2 M NH3/ MeOH i rastvarač je koncentrovan in vacuo da bi se dobilo žuto staklo. Ovo je triturisano sa etil acetatom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao narandžasta čvrsta supstanca (43 mg,
8.49 (s, 1H), 7.62 (d, 2H), 7.54 (d, 2H), 7.45 (m, 1H), 7.35 (d, 2H), 6.87 (m, 4H), 4.90 (s, 2H), 4.77 (s, 2H), 3.71 (s, 3H), 2.96 (m, 4H), 2.80 (m, 4H). LCMS (postupak A): RT= 0.97 min, m/z = 590 [M+H]+ .
Primer 9: 3-(2,6-Dihlorofenil)-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0185]
[0186] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-(4-metoksibenzil)-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (35 mg, 0.059 mmol) je rastvoren u TFA (2 mL, 26.0 mmol) u mikrotalasnoj epruveti. Epruveta je hermetički zatvorena i zagrevana na 150°C u trajanju od 20 min u mikrotalasnom reaktoru. Smeša je koncentrovana in vacuo. Ostatak je rastvoren u metanolu i dodat u 5 g SCX-2 kertridž. Kolona je isprana metanolom, zatim eluirana sa 2 M NH3/ MeOH i koncentrovana in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (Isolera KP-NH 11 g; eluiran 0-100% EtOAc / c-heks.; zatim 0-25% MeOH / EtOAc preko 25 cv) da bi se dobila staklasta čvrsta supstanca. Ovo je triturisano sa dietil etrom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (6 mg, 21%).<1>H NMR (500 MHz,
8.46 (m, 1H), 8.25 (m, 1H), 7.57 (m, 4H), 7.46 (t, 1H), 6.87 (d, 1H), 4.89 (s, 2H), 2.98 (m, 4H), 2.83 (m, 4H). LCMS (postupak A): RT= 0.62 min, m/z = 470 [M+H]+ .
Primer 10: 3-(2,6-Dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0187]
Korak 1: terc-Butil 4-(4-amino-2-(hidroksimetil)fenil)piperazin-1-karboksilat:
[0188] Amonijum format (1.47 g, 23.2 mmol) je pažljivo dodat [napomena: egzotermna] u mešani rastvor terc-butil 4-(2-(hidroksimetil)-4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilata (1.57 g, 4.65 mmol) [J. Med. Chem., 2011, 54(13), 4638-4658] i 10% paladijuma na ugljeniku (0.247 g, 0.232 mmol) u etanolu (15 mL) u posudi od 100 mL sa okruglim dnom na sobnoj temperaturi pod azotom. Posle 16 časova, reakciona smeša je filtrirana kroz Celite® i rastvarači su uklonjeni in vacuo. Preostali ostatak je podeljen između zasićenog (vodenog) rastvora natrijum bikarbonata (30 mL) i DCM (30 mL), odvojen i ekstrahovan upotrebom dodatnog DCM (2 x 15 mL). Kombinovana organska faza je sušena (fazni separator) i rastvarači su uklonjeni in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.40 g, 98%) kao svetlo braon pena. LCMS (postupak A): RT= 0.72 min, m/z = 308 [M+H]+ .
Korak 2: 3-(2,6-Dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0189] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (58 mg, 0.163 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-amino-2-(hidroksimetil)fenil)piperazin-1-karboksilatom (55.2 mg, 0.180 mmol) praćenjem postupka za Primer 1 da bi se dobio proizvod iz naslova (10 mg, 12%) kao bež čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.46 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.57 (d, 1H), 7.48 (t, 1H),7.01 (d, 1H), 5.07 (t, 1H), 4.98 (s, 2H), 4.66 (d, 2H), 3.14 (s, 3H), 2.78 (m, 4H), 2.70 (m, 4H). LCMS (postupak B): RT= 2.20 min, m/z = 514 [M+H]+ .
Primer 11: 3-(2,6-Dihlorofenil)-7-((3-cijano-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0190]
[0191] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (75 mg, 0.211 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-amino-2-cijanofenil)piperazin-1-karboksilatom (70.2 mg, 0.232 mmol) praćenjem postupka za Primer 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (15 mg, 14%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.51 (s, 1H), 8.15 (s, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.68 (d, 2H), 7.52 (t, 1H), 7.16 (d, 1H), 5.01 (s, 2H), 3.13 (s, 3H), 2.99 (m, 4H), 2.85 (m, 4H). LCMS (postupak B): RT= 3.35 min, m/z = 509 [M+H]+ .
Primer 12: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-ilmetil)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0192]
[0193] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (75 mg, 0.211 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-aminobenzil)piperazin-1-karboksilatom (67.7 mg, 0.232 mmol) praćenjem postupka za Primer 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (15 mg, 14%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.61 (d, 2H), 7.44 (d, 2H), 7.31 (m, 4H), 4.90 (s, 2H), 3.48 (s, 2H), 3.20 (s, 3H), 2.90 (m, 4H), 2.44 (m, 4H). LCMS (postupak B): RT= 3.38 min, m/z = 498 [M+H]+ .
Primer 13: 7-((4-(4-(2-Aminoacetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0194]
[0195] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (85 mg, 0.175 mmol) je suspendovan u THF (1 mL) i piridinu (0.1 mL, 1.24 mmol). Dodat je N-Boc-glicin (32.3 mg, 0.184 mmol), a zatim HATU (73.4 mg, 0.193 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova zatim koncentrovana in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (Isolera 10 g; eluiran 0-100% EtOAc / c-heks. zatim 0-15% MeOH / EtOAc) da bi se dobilo žuto staklo. Ovo je rastvoreno u DCM (1 mL) i TFA (1 mL) i mešano na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 min, zatim koncentrovano in vacuo. Ostatak je rastvoren u MeOH i dodato u 5 g SCX-2 kertridž. Kolona je isprana metanolom, zatim eluirana sa 2 M NH3/ MeOH i rastvarač je koncentrovan in vacuo da bi se dobilo žuto staklo. Ovo je triturisano sa etil acetatom i čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom i sušena in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bež čvrsta supstanca (54 mg, 57%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.45 (s, 1H), 7.65 (m, 4H), 7.49 (t, 1H), 6.93 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 3.62 (m 3H), 3.10 (m, 8H), nekoliko pikova sakrivenih širokim signalom vode. LCMS (postupak A): RT= 0.70 min, m/z = 541 [M+H]+ .
Primer 14: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((1,2,3,4-tetrahidroizohinolin-7-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0196]
[0197] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (80 mg, 0.225 mmol) je reagovao sa terc-butil 7-amino-3,4-dihidroizohinolin-2(1H)-karboksilatom (61.5 mg, 0.248 mmol) praćenjem postupka za Primer 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (8 mg, 8%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.76 (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.48 (m, 4H), 6.97 (m, 1H), 4.98 (d, 2H), 3.83 (m 2H), 3.11 (s, 3H), 2.95 (m, 2H), 2.65 (m, 2H). LCMS (postupak A): RT= 0.76 min, m/z = 455 [M+H]+ .
Primer 15: 3-(2,6-Dihlorofenil)-2,2-dideutero-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0198]
Korak 1: 3-(2,6-Dihlorofenil)-2,2-dideutero-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0199] N-(2,6-Dihlorofenil)-4-(metilamino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid (500 mg, 1.46 mmol) je suspendovan u acetonitrilu (10 mL) i dodat je cezijum karbonat (1.90 g, 5.83 mmol). Dodat je dibromometan-d2 (0.307 mL, 4.37 mmol) i smeša je mešana na 80°C u trajanju od 16 časova, zatim koncentrovana in vacuo. Ostatak je razblažen vodom, zatim ekstrahovan sa etil acetatom(x 3). Spojeni organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, zatim sušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (Isolera 10 g; eluiran 0-90% EtOAc / c-heks preko 20 cv) da bi se dobio 3-(2,6-dihlorofenil)-2,2-dideutero-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on kao kristalna bela čvrsta supstanca (85 mg, 16%). Ovo je korišćeno direktno bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 2: 3-(2,6-Dihlorofenil)-2,2-dideutero-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0200] 3-(2,6-Dihlorofenil)-2,2-dideutero-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (80 mg, 0.224 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-aminofenil)piperazin-1-karboksilatom (68.3 mg, 0.246 mmol) praćenjem postupka za Primer 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo braon čvrsta supstanca (51 mg, 47%).<1>H 8.44 (s, 1H), 7.65 (m, 4H), 7.49 (t, 1H), 6.88 (d, 2H), 3.11 (s, 3H), 2.98 (m, 4H), 2.85 (m, 4H). LCMS (postupak A): RT= 0.72 min, m/z = 486 [M+H]+ .
Primer 16: (R)-3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0201]
Korak 1: (R)-terc-Butil 2-metil-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0202] Smeša (R)-terc-butil 2-metilpiperazin-1-karboksilata (1.42 g, 7.09 mmol), 1-fluoro-4-nitrobenzena (1 g, 7.09 mmol) i kalijum karbonata (1.47 g, 10.6 mmol) u DMF (10 mL) je zagrevana na 60°C u trajanju od 18 časova. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature i razblažena vodom (120 mL) i mešana u trajanju od 1 časa. Dobijena čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom i isprana vodom (3 X 40 mL), zatim sušena in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.9 g, 81%).
LCMS (postupak A): RT= 1.45 min, m/z = 322 [M+H]+ .
Korak 2: (R)-terc-Butil 4-(4-aminofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0203] Smeša (R)-terc-butil 2-metil-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilata (1.9 g, 5.91 mmol) i paladijuma na uglju (0.4 g, 0.376 mmol) u EtOH (50 mL) je zagrevana do 50°C. Amonijum format (2.2 g, 34.9 mmol) je dodat u jednoj porciji. Dobijena reakciona smeša je mešana na 50°C u trajanju od 2 časa, zatim hlađena i filtrirana kroz Celite®. Filtrat je koncentrovan i ostatak je podeljen između etil acetata (80 mL) i rastvora natrijum bikarbonata (70 mL). Organska faza je odvojena i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.7 g, 98%). LCMS (postupak A): RT= 0.77 min, m/z = 236 [M-56]+ .
Korak 3: (R)-3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0204] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (107 mg, 0.301 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilatom (88 mg, 0.301 mmol) praćenjem postupka iz Primera 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (50 mg, 33%).<1>H NMR (400 MHz,
8.44 (s, 1H), 7.65 (m, 4H), 7.49 (t, 1H), 6.91 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 3.46 (m, 2H), 3.11 (s, 3H), 2.94 (m, 1H), 2.78 (m, 2H), 2.15 (t, 1H), 1.02 (d, 3H), jedan pik je izgleda maskiran rastvaračem. LCMS (postupak A): RT= 0.76 min, m/z = 498 [M+H]+ .
Primer 17: (S)-3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0205]
Korak 1: (S)-terc-Butil 2-metil-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0206] Smeša (S)-terc-butil 2-metilpiperazin-1-karboksilata (1.42 g, 7.09 mmol), 1-fluoro-4-nitrobenzena (1 g, 7.09 mmol) i kalijum karbonata (1.47 g, 10.6 mmol) u DMF (6 mL) je zagrevana na 50°C u trajanju od 20 časova. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature i razblažena vodom (50 mL). Dobijeni talog je sakupljen filtracijom i ispran vodom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.83 g, 80%). LCMS (postupak A): RT= 1.45 min, m/z = 266 [M+H-tBu]+ .
Korak 2: (S)-terc-Butil 4-(4-aminofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0207] Smeša (S)-terc-butil 2-metil-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilata (1.82 g, 5.66 mmol) i paladijuma na uglju (0.301 g, 0.283 mmol) u etanolu (30 mL) je zagrevana do 50°C. Amonijum format (1.43 g, 22.7 mmol) je dodavan u porcijama i smeša je zagrevana na 50°C u trajanju od 1 časa, zatim hlađena. Smeša je filtrirana kroz Celite® i filtrat je koncentrovan in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.46 g, 88%). LCMS (postupak A): RT= 0.77 min, m/z = 236 [M+H-tBu]+ .
Korak 3: (S)-3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0208] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (107 mg, 0.301 mmol) je reagovao sa (S)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilatom (88 mg, 0.301 mmol) praćenjem postupka za Primer 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (32 mg, 21%).<1>H NMR (400 MHz,
8.45 (s, 1H), 7.65 (m, 4H), 7.49 (t, 1H), 6.90 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 3.46 (m, 2H), 3.11 (s, 3H), 2.94 (m, 1H), 2.78 (m, 2H), 2.15 (t, 1H), 1.02 (d, 3H), jedan pik je izgleda maskiran rastvaračem. LCMS (postupak A): RT= 0.75 min, m/z = 498 [M+H]+ .
Primer 18: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-(piperidin-4-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0209]
[0210] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (80 mg, 0.225 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-amino-2-metilfenil)piperidin-1-karboksilatom (78 mg, 0.270 mmol) paćenjem postupka za Primer 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (14 mg, 13%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.47 (s, 1H), 7.55 (m, 4H), 7.13 (m, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.11 (s, 3H), 3.02 (m, 2H), 2.57 (m, 5H), 2.30 (s, 3H), 1.62 (m, 2H), 1.51 (m, 2H). LCMS (postupak A): RT= 0.82 min, m/z = 497 [M+H]+ .
Primer 19: (R)-3-(2,6-Dihlorofenil)-7-((4-(3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0211]
[0212] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (70 mg, 0.197 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilatom [pripremljen od (R)-terc-butil 2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilata i 1-fluoro-4-nitrobenzena na sličan način Primeru 17, Koraci 1 i 2] (60 mg, 0.195 mmol) praćenjem postupka za Primer 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao narandžasta čvrsta supstanca (23 mg, 20%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.53 (d, 2H), 7.46 (d, 2H), 7.30 (m, 2H), 6.94 (m, 2H), 4.88 (s, 2H), 3.72 (dd, 1H), 3.64 (dd, 1H), 3.48 (d, 2H), 3.20 (m, 1H), 3.18 (s, 3H), 3.08 (m, 2H), 2.78 (t, 1H), 2.60 (t, 1H), 1.27 (m, 1H). LCMS (postupak A): RT= 0.71 min, m/z = 514 [M+H]+ .
Primer 20: (S)-3-(2,6-Dihlorofenil)-7-((4-(3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0213]
[0214] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (80 mg, 0.225 mmol) je reagovao sa (S)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilatom [pripremljen od (S)-terc-butil 2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilata i 1-fluoro-4-nitrobenzena na način sličan Primeru 17, Koraci 1 i 2] (83 mg, 0.270 mmol) praćenjem postupka za Primer 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (19 mg, 16%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.53 (d, 2H), 7.46 (d, 2H), 7.30 (m, 2H), 6.94 (m, 2H), 4.88 (s, 2H), 3.72 (dd, 1H), 3.64 (dd, 1H), 3.48 (d, 2H), 3.20 (m, 1H), 3.18 (s, 3H), 3.08 (m, 2H), 2.78 (t, 1H), 2.60 (t, 1H), 1.27 (m, 1H). LCMS (postupak A): RT= 0.71 min, m/z = 514 [M+H]+ .
Primer 21: 3-(2,6-Dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(4-izopropilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0215]
Korak 1: 2-(4-Izopropilpiperazin-1-il)-5-nitrobenzaldehid:
[0216] Smeša 2-hloro-5-nitrobenzaldehida (2 g, 10.8 mmol), 1-izopropilpiperazina (2.07 g, 16.2 mmol) i kalijum karbonata (2.68 g, 19.4 mmol) u DMF (10 mL) je zagrevana na 90°C u trajanju od 4 časa. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature i razblažena vodom. Dobijeni talog je sakupljen filtracijom, zatim ispran na filteru vodom i sušen u vakuumskoj peći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.8 g, 96%). LCMS (postupak A): RT= 0.49 min, m/z = 278 [M+H]+ .
Korak 2: (2-(4-Izopropilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil)metanol:
[0217] Rastvor 2-(4-izopropilpiperazin-1-il)-5-nitrobenzaldeida (2.8 g, 10.1 mmol) u THF (25 mL) je hlađen do 0°C. Dodat je natrijum borohidrid (0.382 g, 10.1 mmol) i dobijena suspenzija je mešana na 0°C u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa DCM (x 3). Spojeni organski ekstrakti su isprani vodom, sušeni, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (Isolera KP-Sil 50g, eluiran sa 0-100% etil acetatom/cikloheksanom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.5 g, 53%). LCMS (postupak A): RT= 0.50 min, m/z = 280 [M+H]+ .
Korak 3: (5-Amino-2-(4-izopropilpiperazin-1-il)fenil)metanol:
[0218] Paladijum na uglju (0.419 g, 0.39 mmol) dodat je u rastvor (2-(4-izopropilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil)metanola (1.1 g, 3.94 mmol) u etanolu (35 mL). Dobijeni rastvor je zagrevan do 50°C. Dodat je amonijum format (0.745 g, 11.8 mmol) i smeša je mešana na 50°C u trajanju od 30 min. Smeša je hlađena do sobne temperature i filtrirana kroz Celite®. Filtrat je koncentrovan in vacuo i ostatak je podeljen između DCM i (vodenog) rastvora natrijum bikarbonata. Organska faza je odvojena i koncentrovana in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.65 g, 66%). LCMS (postupak A): RT= 0.13 min, m/z = 250 [M+H]+ .
Korak 4: 3-(2,6-Dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(4-izopropilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0219] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (80 mg, 0.225 mmol) je reagovao sa (5-amino-2-(4-izopropilpiperazin-1-il)fenil)metanolom (67.4 mg, 0.270 mmol) praćenjem postupka za Primer 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (11 mg, 8%).<1>H NMR (400 MHz,
8.47 (s, 1H), 8.01 (s, 1H), 7.66 (d, 2H), 7.55 (m, 1H), 7.50 (t, 1H), 7.01 (d, 1H), 5.08 (m, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.55 (s, 2H), 3.12 (s, 3H), 2.79 (m, 4H), 2.70 (m, 1H), 2.58 (m, 4H), 1.03 (d, 6H) . LCMS (postupak A) : RT= 0.76 min, m/z = 556 [M+H]+ .
Primer 22: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((2-metil-1,2,3,4-tetrahidroizohinolin-7-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0220]
[0221] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((1,2,3,4-tetrahidroizohinolin-7-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (51 mg, 0.112 mmol) [Primer 14] je rastvoren u 1,2-dihloroetanu (1 mL) i dodat je formalin (0.017 mL, 0.224 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 min, zatim hlađena do 0°C. Dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (28.5 mg, 0.134 mmol) i smeša je ostavljena da se vrati do sobne temperature uz mešanje tokom 1 časa. Dodate su nove porcije formalina (0.1 mL) i natrijum triacetoksiborohidrida (28.5 mg, 0.134 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova. Dodat je 1,4-dioksan zajedno sa dodatnim porcijama formalina (0.1 mL) i natrijum triacetoksiborohidrida (28.5 mg, 0.134 mmol). Posle dodatng 1 časa, dodate su nove porcije formalina (0.1 mL) i natrijum triacetoksiborohidrida (28.5 mg, 0.134 mmol). Posle još 1 časa mešanja, reakcija je ugašena dodavanjem 1 N HCl (1 mL) i mešana u trajanju od 20 min. Smeša je dodata u 5 g SCX-2 kertridž. Kolona je isprana metanolom, zatim eluirana sa 2 M NH3/ MeOH i bazne frakcije su koncentrovane in vacuo da bi se proizvelo žuto staklo. Ovo je triturisano sa dietil etrom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (20 mg, 38%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.40 (m, 4H), 7.30 (m, 2H), 7.10-7.00 (m, 1H), 4.90 (s, 2H), 3.58 (s, 2H), 3.17 (s, 3H), 2.91 (m, 2H), 2.70 (m, 2H), 2.48 (s, 3H). LCMS (postupak A): RT= 0.75 min, m/z = 469 [M+H]+ .
Primer 23: (rac)-3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-2-fenil-7-((1,2,3,4-tetrahidroizohinolin-7-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0222]
Korak 1: (rac)-3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2-fenil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0223] N-(2,6-Dihlorofenil)-4-(metilamino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid (200 mg, 0.58 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (10 mL) i dodat je benzaldehid (0.25 mL, 2.47 mmol), a zatim hidrat p-toluensulfonske kiseline (25 mg, 0.15 mmol). Epruveta je hermetički zatvorena i smeša je podvrgnuta mikrotalasnom zagrevanju na 220°C u trajanju od 16 časova. Smeša je koncentrovana in vacuo i podvrgnuta hromatografiji (Isolera Si 10 g kertridž, eluiran 0-60% EtOAc / c-heks.), zatim podvrgnuta hromatografiji ponovo (11 g KP-NH kertridž, eluiran 0-70% DCM / c-heks.) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta pena (59 mg,
7.45 (m, 1H), 7.38 (m, 1H), 7.29 (m, 4H), 7.10 (d, 2H), 5.85 (s, 1H), 3.08 (s, 3H), 2.61 (s, 3H). LCMS (postupak A): RT= 1.50 min, m/z = 431 [M+H]+ .
Korak 2: (rac)-3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-2-fenil-7-((1,2,3,4-tetrahidroizohinolin-7-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0224] (rac)-3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2-fenil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (57 mg, 0.132 mmol) je rastvoren u toluenu (2 mL) i dodat je mCPBA (49.8 mg, 0.159 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 min, zatim je dodat DIPEA (0.069 mL, 0.396 mmol), a nakon toga terc-butil 7-amino-3,4-dihidroizohinolin-2(1H)-karboksilat (32.8 mg, 0.132 mmol). Smeša je zagrevana na 80°C u trajanju od 64 časa, zatim koncentrovana in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (Isolera 10 g GraceResolv; eluiran 0-70% EtOAc / c-heks preko 20 cv) da bi se dobilo braon staklo. Ovo je rastvoreno u DCM (1 mL) i TFA (1 mL) i mešano u trajanju od 30 min, zatim koncentrovano in vacuo. Ostatak je rastvoren u metanolu i dodat u 2 g SCX-2 kertridž. Kolona je isprana metanolom, zatim eluirana sa 2 M NH3/ MeOH i rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobilo staklo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (Isolera KP-NH 11 g, eluiran 0-100% EtOAc / c-heks zatim 0-10% MeOH / EtOAc), zatim triturisan sa dietil etrom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (11 mg, 16%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.37 (m, 6H), 7.15 (m, 6H), 5.83 (s, 1H), 4.02 (m, 2H), 3.15 (m, 2H), 3.07 (s, 3H), 2.79 (m, 2H). LCMS (postupak A): RT= 0.90 min, m/z = 531 [M+H]+ .
Primer 24: 3-(2-Hlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0225]
Korak 1: N-(2-Hlorofenil)-4-(metilamino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid:
[0226] 4-(Metilamino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksilna kiselina (400 mg, 2.01 mmol) je suspendovana u hlorobenzenu (10 mL) i dodat je fosfor trihlorid (0.184 mL, 2.11 mmol), a zatim 2-hloroanilin (282 mg, 2.21 mmol). Smeša je mešana na 120°C u trajanju od 64 časa, zatim koncentrovana in vacuo. Ostatak je apsorbovan u vodenom rastvoru Na2CO3i ekstrahovan sa etil acetatom (x 2). Organske materije su sušene (Na2SO4), filtrirane i koncentrovane in vacuo da bi se proizvela prljavo bela čvrsta supstanca. Ovo je triturisano sa dietil etrom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (460 mg, 74%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 8.42 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 8.21 (s, 1H), 7.42 (d, 1H), 7.31 (t, 1H), 7.10 (t, 1H), 3.10 (d, 3H), 2.57 (s, 3H). LCMS (postupak A): RT= 0.58 / 0.65 min (podeljeni pik), m/z = 450 [M+H]+ .
Korak 2: 3-(2-Hlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0227] N-(2-Hlorofenil)-4-(metilamino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid (250 mg, 0.810 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (10 mL) i dodat je cezijum karbonat (1055 mg, 3.24 mmol), a zatim dibromometan (0.170 mL, 2.429 mmol). Smeša je zagrevana na 80°C u trajanju od 1 časa. Dodato je još 0.06 mL dibromometana i smeša je zagrevana na 90°C u trajanju od 16 časova. Dodato je još 0.12 mL dibromometana i smeša je zagrevana na 125°C u mikrotalasnom reaktoru u trajanju od 1 časa. Smeša je koncentrovana in vacuo i ostatak je podvrgnut hromatografiji (Isolera 25 g; eluiran 0-100% EtOAc / c-heks preko 20 cv) da bi se dobio polučvrsti materijal koji je korišćen bez dodatnog prečišćavanja (92 mg, 35%).
Korak 3: 3-(2-Hlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0228] 3-(2-Hlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (90 mg, 0.281 mmol) je rastvoren u toluenu (4 mL) i dodat je mCPBA (106 mg, 0.337 mmol). Smeša je mešana u trajanju od 15 min, zatim je dodat terc-butil 4-(4-aminofenil)piperazin-1-karboksilat (78 mg, 0.281 mmol), a nakon toga DIPEA (0.064 mL, 0.365 mmol), i smeša je mešana na 80°C u trajanju od 16 časova. Smeša je koncentrovana in vacuo, zatim je podvrgnuta hromatografiji (Isolera 10 g GraceResolv, eluirana 0-100% EtOAc / c-heks preko 20 cv) i frakcije koje sadrže jedinjenje su koncentrovane in vacuo da bi se dobilo žuto staklo. Ono je rastvoreno u DCM (1 mL) i TFA (1 mL) i mešano u trajanju od 1 časa zatim koncentrovano in vacuo. Ostatak je rastvoren u metanolu i dodat u 2 g SCX-2 kertridž. Kolona je isprana metanolom, zatim eluirana sa 2 M NH3/ MeOH i rastvarač je koncentrovan in vacuo da bi se dobilo žuto staklo. Ono je podvrgnuto hromatografiji (Isolera 11 g KP-NH, eluirano 0-100% EtOAc / c-heks., zatim 0-15% MeOH / EtOAc preko 20 cv) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (11 mg, 8%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.52 (m, 3H), 7.35 (m, 3H), 7.22 (s, 1H), 6.94 (d, 2H), 4.90 (br m, 2H), 3.15 (m, 7H), 3.06 (m, 4H). LCMS (postupak A): RT= 0.65 min, m/z = 450 [M+H]+ .
Primer 25: 3-(2-Hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0229]
Korak 1: N-(2-Hloro-6-fluorofenil)-4-(metilamino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid:
[0230] Pripremljen od 4-(metilamino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksilne kiseline i 2-hloro-6-fluoroanilina praćenjem postupka opisanog u Primeru 1, Korak 1.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.72 (s, 1H), 8.61 (br d, 1H), 7.41 (m, 3H), 2.95 (d, 3H), SMe signal verovatno sakriven rastvaračem. LCMS (postupak A): RT= 1.17 min, m/z = 327 [M+H]+ .
Korak 2: 3-(2-Hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0231] Pripremljen od N-(2-hloro-6-fluorofenil)-4-(metilamino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamida praćenjem postupka opisanog u Primeru 1, Korak 2. Dobijen je sirov proizvod i korišćen je kao takav. LCMS (postupak A): RT= 1.19 min, m/z = 339 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2-Hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0232] Pripremljen od 3-(2-hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-ona praćenjem postupka opisanog u Primeru 1, Korak 3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.53 (s, 1H), 7.69 (d, 2H), 7.57 (m, 2H), 7.48 (m, 1H), 6.97 (d, 2H), 5.07 (d, 1H), 5.02 (d, 1H), 3.17 (s, 3H), 3.07 (m, 4H), 2.91 (m, 4H). LCMS (postupak A): RT= 0.68 min, m/z = 468 [M+H]+ .
Primer 26: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1,2-dimetil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0233]
Korak 1: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1,2-dimetil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0234] N-(2,6-Dihlorofenil)-4-(metilamino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid (200 mg) je suspendovan u acetaldehidu (1.5 mL). Smeša je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 150°C u trajanju od 7 časova. Dodata je voda i smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (x 2). Spojeni organski ekstrakti su sušeni preko Na2SO4i koncentrovani. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (Isolera 10 g Si, eluiran 0-60% EtOAc / c-heks.) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuti sirup (65 mg, 29%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 7.47 (t, 2H), 7.29 (d, 1H), 4.97 (q, 1H), 3.22 (s, 3H), 2.58 (s, 3H), 1.56 (d, 3H). LCMS (postupak A): RT= 1.30 min, m/z = 369 [M+H]+ .
Korak 2: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1,2-dimetil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0235] Pripremljen od 3-(2,6-dihlorofenil)-1,2-dimetil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-ona praćenjem postupka opisanog u Primeru 1, Korak 3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.44 (s, 1H), 7.67 (m, 4H), 7.48 (t, 1H), 6.89 (d, 1H), 5.15 (q, 1H), 3.14 (s, 3H), 2.98 (m, 4H), 2.83 (m, 4H), 1.43 (d, 3H). LCMS (postupak A): RT= 0.75 min, m/z = 498 [M+H]+ .
Primer 27: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(morfolinometil)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0236]
[0237] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (60 mg, 0.17 mmol) je reagovao sa 4-(morfolinometil)anilinom (36 mg, 0.19 mmol) praćenjem postupka za Primer 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (37 mg, 44%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.49 (s, 1H), 7.74 (d, 2H), 7.65 (d, 2H), 7.49 (m, 1H), 7.24 (d, 2H), 4.98 (s, 2H), 3.57 (m, 4H), 3.41 (s, 2H), 3.12 (s, 3H), 2.35 (m, 4H). LCMS (postupak A): RT= 0.78 min, m/z = 499 [M+H]+ .
Primer 28: 6-(2,6-Dihlorofenil)-2-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-6a,7,8,9-tetrahidropirimido[5,4-e]pirolo[1,2-a]pirimidin-5(6H)-on
[0238]
Korak 1: 2-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-4-((4-hidroksibutil)amino)pirimidin-5-karboksamid:
[0239] U rastvor 2,4-dihloro-N-(2,6-dihlorofenil)pirimidin-5-karboksamida (350 mg, 1.04 mmol) (pripremljen kao što je opisano u US 2005/0209221) i DIPEA (0.200 mL, 1.14 mmol) u THF (5 mL) na 0°C dodat je 4-aminobutan-1-ol (0.096 mL, 1.04 mmol) u THF (1 mL). Reakcija je zatim mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 min, koncentrovana in vacuo i ostatak je podeljen između vode i DCM. Slojevi su zatim odvojeni upotrebom faznog separatora i organski sloj je koncentrovan in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.4 g, 1.03 mmol, 99%) kao bela čvrsta supstanca. LCMS (postupak A): RT= 1.08 min, m/z = 389 [M+H]+ .
Korak 2: terc-Butil 4-(4-((5-((2,6-dihlorofenil)karbamoil)-4-((4-hidroksibutil)amino) pirimidin-2-il)amino)fenil)piperazin-1-karboksilat:
[0240] Rastvor 2-hloro-N-(2,6-dihlorofenil)-4-((4-hidroksibutil)amino)pirimidin-5-karboksamida (401 mg, 1.03 mmol), terc-butil 4-(4-aminofenil)piperazin-1-karboksilata (400 mg, 1.44 mmol) i DIPEA (0.36 mL, 2.06 mmol) u anhidrovanom DMF (7 mL) je mešan na 90°C u trajanju od 60 časova. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i vodom i slojevi su odvojeni, vodeni sloj je zatim ekstrahovan još jednom sa EtOAc i organski slojevi su spojeni, isprani vodom 4 puta, sušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani in vacuo. Ostatak je prečišćen pomoću „flash“ hromatografije (SiO2, 30-70% etil acetat u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (480 mg, 74%) kao braon čvrsta supstanca. LCMS (postupak A): RT= 1.17 min, m/z = 630 [M+H]+ .
Korak 3: terc-Butil 4-(4-((5-((2,6-dihlorofenil)karbamoil)-4-((4-oksobutil)amino)pirimidin-2-il)amino)fenil)piperazin-1-karboksilat:
[0241] U rastvor terc-butil 4-(4-((5-((2,6-dihlorofenil)karbamoil)-4-((4-hidroksibutil)amino)pirimidin-2-il)amino)fenil)piperazin-1-karboksilata (480 mg, 0.761 mmol) u THF (10 mL) dodat je 1,1,1-tris(acetiloksi)-1,1-dihidro-1,2-benziodoksol-3-(1H)-on [Dess-Martin perjodinan] (517 mg, 1.218 mmol). Heterogena smeša je zatim mešana na 50°C u trajanju od 4 časa. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena etil acetatom i filtrirana, filtrat je koncentrovan in vacuo i prečišćen pomoću „flash“ hromatografije (SiO2, 30-65% etil acetat u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (110 mg, 23%) kao braon guma. LCMS (postupak A): RT= 1.27 min, m/z = 628 [M+H]+ .
Korak 4: terc-Butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-5-okso-5,6,6a,7,8,9-heksahidropirimido[5,4-e]pirolo[1,2-a]pirimidin-2-il)amino)fenil)piperazin-1-karboksilat:
[0242] terc-Butil 4-(4-((5-((2,6-dihlorofenil)karbamoil)-4-((4-oksobutil)amino)pirimidin-2-il)amino)fenil)piperazin-1-karboksilat (55 mg, 0.088 mmol) i monohidrat p-toluensulfonske kiseline (1.7 mg, 8.75 μmol) u toluenu (1 mL) je zagrevan na 150°C u trajanju od 30 min u mikrotalasnom reaktoru. Rastvarači su uklonjeni in vacuo i ostatak je prečišćen pomoću „flash“ hromatografije (SiO2, 20-60% etil acetat u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (35 mg, 66%) LCMS (postupak A): RT= 1.46 min, m/z = 610 [M+H]+ .
Korak 5: 6-(2,6-Dihlorofenil)-2-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-6a,7,8,9-tetrahidropirimido[5,4-e]pirolo[1,2-a]pirimidin-5(6H)-on:
[0243] U rastvor terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-5-okso-5,6,6a,7,8,9-heksahidropirimido[5,4-e]pirolo[1,2-a]pirimidin-2-il)amino)fenil)piperazin-1-karboksilata (70 mg, 0.115 mmol) u DCM dodata je TFA (8.8 μl, 0.115 mmol) na sobnoj temperaturi, reakcija je zatim mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Reakciona smeša je zatim koncentrovana in vacuo i ostatak je triturisan sa etil acetatom da bi se formirala braon čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je sakupljena i rastvorena u MeOH i sipana na Biotage SCX-2 kertridž, kertridž je ispran sa MeOH i proizvod je eluiran sa 2 M NH3u MeOH. Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane in vacuo i proizvod je sušen (Genevac EZ-2) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (26 mg, 44%) kao braon čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.66-7.63 (m, 4H), 7.49 (t, 1H), 6.90 (d, 2H), 5.63-5.60 (m, 1H), 4.77-3.64 (m, 2H), 3.08-3.05 (m, 4H), 2.95-2.93 (m, 4H), 2.10-1.91 (m, 2H), 1.86-1.71 (m, 2H). LCMS (postupak A): RT= 0.79 min, m/z = 510 [M+H]+ .
Primer 29: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-((4-metilpiperazin-1-il)metil)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0244]
[0245] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-ilmetil)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (120 mg, 0.241 mmol) je zagrevan na refluksu u smeši mravlje kiseline (2 mL) i formaldehida (37 tež.% u vodi, 2.5 mL) u trajanju od 30 min. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom i sipana na SCX-2 kertridž. Kolona je isprana metanolom, zatim eluirana sa 2 M NH3/ MeOH i rastvarač je koncentrovan in vacuo. Preostali ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (25 mg, 20%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.48 (s, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.65 (d, 2H), 7.48 (m, 1H), 7.22 (d, 2H), 4.98 (s, 2H), 3.39 (s, 2H), 3.11 (s, 3H), 2.33 (br s, 8H), 2.14 (m, 3H). LCMS (postupak A): RT= 0.74 min, m/z = 512 (slab) [M+H]+ .
Primer 30: (rac)-3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(S-metilsulfonimidoyl)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0246]
Korak 1: 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(metiltio)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0247] Pripremljen od 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-ona praćenjem postupka opisanog u Primeru 1, Korak 3. Dobijen je kao sirov proizvod i korišćen kao takav. LCMS (postupak A): RT= 1.34 min, m/z = 446 [M+H]+ .
Korak 2: (rac)-3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(metilsulfinil)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0248] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(metiltio)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (148 mg, 0.332 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (5 mL) i dodat je gvožđe (III) hlorid (1.6 mg, 0.001 mmol), a zatim perjodna kiselina (79 mg, 0.348 mmol). Dobijena smeša je mešana u trajanju od 16 časova i koncentrovana in vacuo. Ostatak je apsorbovan u vodeni rastvor natrijum tiosulfata i ekstrahovan sa DCM (x 2). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom i zatim sušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao braon čvrsta supstanca (150 mg) koje je korišćeno sirovo kao što je dobijeno. LCMS (postupak A): RT= 0.91 min, m/z = 462 [M+H]+ .
Korak 3: (rac)-3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(S-metilsulfonimidoyl)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0249] (rac)-3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(metilsulfinil)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.216 mmol) je rastvoren u DCM (3 mL) i dodat je rodijum (II) acetatni dimer (5.0 mg, 1.13 μmol), a zatim magnezijum oksid (52 mg, 1.30 mmol) i 2,2,2-trifluoroacetamid (74 mg, 0.65 mmol). Zatim je dodat jodobenzen diacetat (157 mg, 0.49 mmol) i dobijena smeša je mešana na 40°C u trajanju od 16 časova. Dodata je nova porcija rodijum (II) acetatnog dimera (5.0 mg, 1.13 μmol), a zatim 2,2,2trifluoroacetamid (37 mg, 0.32 mmol) i jodobenzen diacetat (78 mg, 0.24 mmol). Smeša je mešana na 40°C dodatnih 16 časova, zatim filtrirana kroz Celite® i koncentrovana. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (Isolera 10 g; eluiran 0-100% EtOAc / c-heks zatim 0-20% MeOH / EtOAc) da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Ovo je rastvoreno u metanolu (2 mL) i dodat je kalijum karbonat (30 mg, 0.217 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 časova, zatim koncentrovana in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (Isolera 12 g GraceResolv; eluiran 0-100% EtOAc / c-heks zatim 0-25% MeOH / EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao siva čvrsta supstanca (5.3 mg, 5%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ .31 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.00 (d, 2H), 7.87 (d, 2H), 7.68 (d, 2H), 7.65 (t, 1H), 5.03 (s, 2H), 4.05 (s, 1H), 3.16 (s, 3H), 3.04 (s, 3H). LCMS (postupak A): RT= 0.91 min, m/z = 477 [M+H]+ .
Primer 31: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(metoksimetil)-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0250]
Korak 1: terc-butil 4-(2-formil-4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0251] Suspenzija 2-fluoro-5-nitrobenzaldehida (3 g, 17.74 mmol), terc-butil piperazin-1-karboksilata (3.30 g, 17.74 mmol) i kalijum karbonata (3.68 g, 26.6 mmol) u anhidrovanom DMF (15 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota preko noći. Reakciona smeša je ostavljena dase hladi do sobne temperature, razblažena vodom (70 mL) i mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Istaložena čvrsta supstanca je izolovana filtracijom, isprana vodom, sušena usisavanjem i sušena zamrzavanjem preko noći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (5.89 g, 99%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ
1H), 8.65 (d, 1H), 8.33 (dd, 1H), 7.09 (d, 1H), 3.68 (t, 4H), 3.26 (t, 4H), 1.49 (s, 9H). LCMS (postupak C) RT= 1.60 min, m/z = 336 [M+H]+ .
Korak 2: terc-butil 4-(2-(hidroksimetil)-4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0252] Rastvor terc-butil 4-(2-formil-4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilata (5.89 g, 17.56 mmol) u anhidrovanom THF (32.5 mL) je hlađen do 0°C, zatim je u porcijama dodavan natrijum borohidrid (0.664 g, 17.56 mmol). Reakciona smeša je mešana na 0°C u trajanju od 90 minuta, zatim ugašena vodom (50 mL) i ekstrahovana u dihlorometan (3 x 30 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (5.42 g, 91%). 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ (d, 1H), 8.13 (dd, 1H), 7.10 (d, 1H), 4.80 (d, 2H), 3.61 (t, 4H), 3.05 (t, 1H), 2.99 (t, 4H), 1.48 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.48 min, m/z = 338 [M+H]+ .
Korak 3: terc-butil 4-(2-(metoksimetil)-4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0253] Rastvor terc-butil 4-(2-(hidroksimetil)-4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilata (2.00 g, 5.93 mmol) u anhidrovanom THF (19.7 mL) je hlađen do 0°C, nakon čega je usledilo dodavanje natrijum hidrida (60% u mineralnom ulju, 0.26 g, 6.52 mmol). Posle mešanja na 0°C pod atmosferom azota u trajanju od 10 minuta, dodat je metil jodid (0.45 mL, 7.11 mmol). Dobijena smeša je ostavljena da se zagreva do sobne temperature i mešana 60 minuta. Dodato je još metil jodida (0.13 mL, 2.08 mmol) i smeša je mešana dodatnih 60 minuta. Reakciona smeša je razblažena rastvorom amonijum hlorida (30 mL) i ekstrahovana u etil acetatu (3 x 20 mL). Kombinovane organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane, koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom i podvrgnute hromatografiji (silika 50g kertridž, eluiranje sa gradijentom cikloheksana:etil acetata, od 95:5 do 50:50) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (1.48 g, 71%).
8.13 (dd, 1H), 7.04 (d, 1H), 4.48 (s, 2H), 3.60
(t, 4H), 3.46 (s, 3H), 3.00 (t, 4H), 1.49 (s, 9H). LCMS (postupak C) RT= 1.79 min, m/z = 352 [M+H]+ .
Korak 4: terc-butil 4-(4-amino-2-(metoksimetil)fenil)piperazin-1-karboksilat:
[0254] Rastvor terc-butil 4-(2-(metoksimetil)-4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilata (1.48 g, 4.21 mmol) u metanolu (100 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, kompletan H2, 25°C, 1 mL/min) sa dva prolaza. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (1.33 g, 98%). 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 6.78 (d, 1H), 6.59 (dd, 1H), 4.49 (s, 2H), 3.47-3.61 (m, 6H), 3.42 (s, 3H), 2.77 (t, 4H), 1.48 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 0.94 min, m/z = 322 [M+H]+ .
Korak 5 : terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(metoksimetil)fenil)piperazin-1-karboksilat:
[0255] Rastvor mCPBA, 50 % čistoće (291 mg, 0.844 mmol) u dihlorometanu (1.50 mL) je propušten kroz fazni separator i ispran dodatnim dihlorometanom (0.750 mL). Ovaj rastvor je dodat u mešajuću suspenziju 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-ona (250 mg, 0.704 mmol) u anhidrovanom toluenu (7.5 mL) i smeša je mešana u trajanju od 30 minuta. Dodata je Hunig-ova baza (0.369 mL, 2.111 mmol), a zatim terc-butil 4-(4-amino-2-(metoksimetil)fenil)piperazin-1-karboksilat (215 mg, 0.669 mmol) i smeša je zagrevana do 75°C u trajanju od 40 časova. Posle hlađenja, reakciona smeša je prečišćena direktno pomoću „flash“ hromatografije (5-65% etil acetat u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (360 mg, 81 %). LCMS (postupak C): RT= 1.81 min, m/z = 628 [M+H]+ .
Korak 6 : 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(metoksimetil)-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0256] U mešajući rastvor terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(metoksimetil)fenil)piperazin-1-karboksilata u anhidrovanom dihlorometanu (6 mL) dodata je trifluorosirćetna kiselina (1.5 mL, 19.5 mmol) i rastvor je mešan 2 časa. SCX-2 silika kertridž (10 g) je prethodno tretiran sa 20% zapr./zapr. metanola u dihlorometanu (100 mL). Reakciona smeša je dodata u SCX-2 kolonu upotrebom dihlorometana (3 x 2 mL) da bi se posuda isprala. Posle 5 min kolona je isprana sa 20% zapr./zapr. metanolom u dihlorometanu (100 mL), a zatim sa 20% zapr./zapr. (7 M amonijak u metanolu) u dihlorometanu (50 mL). Frakcija koja sadrži amonijak je koncentrovana in vacuo. Ostatak je rastvoren u metanolu (3 mL) i vodi (12 mL) i sušen zamrzavanjem da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (260 mg, 86%). 1H NMR (400 MHz,
8.01 (m, 1H), 7.53-7.64 (m, 3H), 7.44 (dd, 1H), 7.14 (d, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.59 (s, 2H), 3.45 (s, 3H), 3.21 (s, 3H), 3.00 (t, 4H), 2.90 (t, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.77 min, m/z = 528 [M+H]+ .
Primer 32: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3,4-dimetil piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0257]
Korak 1: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0258] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (150 mg, 0.42 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilatom (123 mg, 0.422 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (120 mg, 41%) koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 2: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3,4-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0259] (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (60 mg, 0.12 mmol) je reagovao sa formaldehidom (0.018 mL, 0.24 mmol) praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (56 mg, 8.43 (s, 1H), 7.66 (m, 3H), 7.46 (m, 1H), 6.91 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 3.45 (m, 2H), 3.34 (s, 1H), 3.09 (s, 3H), 2.83 (m, 1H), 2.67 (m, 1H), 2.30 (m, 1H), 1.05 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.72 min, m/z = 512 [M+H]+ .
Primer 33: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0260]
[0261] 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (60 mg, 0.117 mmol) je reagovao sa formaldehidom (0.018 mL) praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (59 mg, 8.45 (s, 1H), 8.12 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.48 (m, 1H), 7.01 (d, 1H), 5.09 (t, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.54 (d, 2H), 3.17 (s, 3H), 2.80 (m, 4H), 2.4 (m, 4H), 2.25 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.69 min, m/z = 528 [M+H]+ .
Primer 34: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(hidroksimetil)-4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0262]
[0263] (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (60 mg, 0.117 mmol) je reagovao sa formaldehidom (0.017 mL) praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (60 mg, 8.44 (s, 1H), 7.7-7.6 (m, 4H), 7.48 (m, 1H), 6.91 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 3.65 (m, 2H), 3.43 (m, 1H), 3.17 (d, 1H), 3.09 (s, 3H), 2.80 (m, 1H), 2.65 (m, 1H),2.45 (m, 1H), 2.31 (m, 1H), 2.25 (s, 3H), 2.13 (m, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.69 min, m/z = 528 [M+H]+ .
Primer 35: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(5-metilheksahidropirolo[3,4-c]pirol-2(1H)-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0264]
Korak 1: terc-butil 5-(4-nitrofenil)heksahidropirolo[3,4-c]pirole-2(1H)-karboksilat:
[0265] Suspenzija 1-fluoro-4-nitrobenzena (1.662 g, 11.78 mmol), terc-butil heksahidropirolo[3,4-c]pirol-2(1H)-karboksilata (2.5 g, 11.78 mmol) i kalijum karbonata (2.441 g, 17.66 mmol) u anhidrovanom DMF (5 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota preko noći. Dodato je još DMF (5 mL) i smeša je zagrevana na 50°C dodatna 24 časa. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (30 mL) i mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Istaložena čvrsta supstanca je izolovana filtracijom, isprana vodom i sušena usisavanjem da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (3.21 g, 82%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ
2H), 6.47 (dt, 2H), 3.59-3.74 (m, 4H), 3.21-3.43 (m, 4H), 2.98-3.14 (m, 2H), 1.45 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.66 min, m/z = 334 [M+H]+ .
Korak 2: terc-butil 5-(4-aminofenil)heksahidropirolo[3,4-c]pirole-2(1H)-karboksilat:
[0266] Rastvor terc-butil 5-(4-nitrofenil)heksahidropirolo[3,4-c]pirol-2(1H)-karboksilata (2.3 g, 6.90 mmol) u metanolu (500 mL) je hidrogenizovana pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, kompletan H2, 25°C, 1.5 mL/min). Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao siva čvrsta supstanca (1.35 g,
3.55 (m,
10H), 1.45 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 0.76 min, m/z = 304 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(5-metilheksahidropirolo[3,4-c]pirol-2(1H)-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0267] Rastvor terc-butil 5-(4-aminofenil heksahidropirolo[3,4-c]pirole-2(1H)-karboksilata (50 mg, 0.098 mmol), formaldehida (37% u vodi, 0.015 mL, 0.196 mmol, 2 ekv.) i natrijum triacetoksiborohidrida (0.062 g, 0.294 mmol, 3 ekv.) je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Rastvor je zatim sipan na SCX-2 kolonu. Kolona je eluirana sa DCM/MeOH (20/80, 20 mL), zatim sa 7 N rastvorom amonijaka u metanolu. Frakcija sa amonijakom je koncentrovana in vacuo. Ostatak je razblažen metanolom i vodom i sušena zamrzavanjem da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (25 mg, 49%). 1H NMR (400 MHz,
8.43 (s, 1H), 7.64 (m, 2H), 7.56-7.45 (m, 3H), 6.62 (d, 2H), 4.94 (s, 2H), 3.34 (m, 3H), 3.08 (s, 3H), 3.02 (m, 2H), 2.85 (m, 2H), 2.56 (m, 1H), 2.37 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.72 min, m/z = 524 [M+H]+ .
Primer 36: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(heksahidropirolo [3,4-c]pirol-2(1H)-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0268]
[0269] 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3 dihidropirimido [4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (150 mg, 0.422 mmol) je reagovao sa terc-butil 5-(4-aminofenil) heksahidropirolo [3,4-c]pirol-2(1H)-karboksilatom (128 mg, 0.422 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (120 mg, 56%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.43 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.56-7.45 (m, 3H), 6.62 (d, 2H), 4.94 (s, 2H), 3.40-3.32 (m, 3H), 3.08 (s, 3H), 3.10-2.95 (m, 3H), 2.85 (m, 2H), 2.66 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.72 min, m/z = 510 [M+H]+ .
Primer 37: 7-((4-(1-aminociklobutil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0270]
[0271] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (150 mg, 0.422 mmol) je reagovao sa terc-butil (1-(4-aminofenil) ciklobutil) karbamatom (111 mg, 0.422 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (45 mg, 8.49 (s, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.65 (d, 2H), 7.48 (t, 1H), 7.40 (d, 2H), 4.98 (s, 2H), 3.12 (s, 3H), 2.38 (m, 2H), 2.07 (m, 2H), 1.95 (m, 1H), 1.60 (m, 1H). LCMS (postupak A): R
T= 0.81 min, m/z = 469 [M+H]
Primer 38: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0272]
Korak 1: (R)-terc-butil 4-(2-formil-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0273] Suspenzija 2-fluoro-5-nitrobenzaldehida (2.53 g, 14.98 mmol), (R)-terc-butil 2-metilpiperazin-1-karboksilata (3 g, 14.98 mmol) i kalijum karbonata (3.11 g, 22.47 mmol) u anhidrovanom DMF (10 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota preko noći. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (70 mL) i mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Smeša je zatim ekstrahovana u etil acetatu (100 mL) i isprana sa 50:50 vodom:fiziološkim rastvorom. Organska faza je sušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (4.72 g, 90%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 8.63 (d, 1H), 8.31 (dd, 1H), 7.08 (d, 1H), 4.41 (br s, 1H), 3.97 (dt, 1H), 3.20-3.53 (m, 4H), 3.08 (td, 1H), 1.48 (d, 9H), 1.31 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.68 min, m/z = 350 [M+H]+ .
Korak 2: (R)-terc-butil 4-(2-(hidroksimetil)-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0274] Rastvor (R)-terc-butil 4-(2-formil-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (4.72 g, 13.51 mmol) u anhidrovanom THF (25.02 mL) je hlađen do 0°C, zatim je usledilo dodavanje u porcijama natrijum borohidrida (0.511 g, 13.51 mmol). Reakciona smeša je mešana na 0°C u trajanju od 90 minuta zatim ugašena vodom (50 mL) i ekstrahovana u dihlorometanu (3 x 30 mL). Kombinovane organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (4.39 g, 92%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 8.12 (dd, 1H), 7.09 (d, 1H), 4.81 (br s, 2H), 4.37 (br s, 1H), 3.99 (dt, 1H), 3.27 (td, 1H), 3.12 (ddd, 1H), 3.05 (dt, 1H), 2.88-3.01 (m, 2H), 2.80 (td, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.36 (d, 3H). LCMS (postupak C) : RT= 1.56 min, m/z = 352 [M+H]+ .
Korak 3: (R)-terc-butil 4-(4-amino-2-(hidroksimetil)fenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0275] Rastvor (R)-terc-butil 4-(2-(hidroksimetil)-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (2.4 g, 6.83 mmol) u metanolu (100 mL) je hidrogenizovan sa H-Cube (10% Pd/C kertidž, kompletan H2, 25°C, 1 mL/min). Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (2.05 g,
6.57 (dd, 1H), 6.53 (d, 1H), 4.96 (br s, 1H),
4.69 (s, 2H), 4.26-4.39 (m, 1H), 3.94 (br d, 1H), 3.62 (br s, 2H), 3.21 (td, 1H), 2.87-2.97 (m, 2H), 2.65-2.82 (m, 2H), 1.48 (s, 9H), 1.33 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.81 min, m/z = 322 [M+H]+ .
Korak 4 : (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0276] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (120 mg, 0.338 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-amino-2-(hidroksimetil)fenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilatom (109 mg, 0.338 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (57.5 mg, 76 %).1H NMR (400 MHz, MeOH-d
4): δ (s, 1H), 7.90 (br s, 1H), 7.54-7.61 (m, 3H), 7.44 (dd, 1H), 7.15 (d, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.77 (s, 2H), 3.21 (s, 3H), 2.94-3.06 (m, 5H), 2.77 (td, 1H), 2.46 (t, 1H), 1.13 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.71 min, m/z = 528 [M+H]+ .
Primer 39: 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0277]
Korak 1: terc-butil 5-(4-nitrofenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat:
[0278] U mešajuću suspenziju 1-fluoro-4-nitrobenzena (1.294 g, 9.17 mmol) i kalijum karbonata (5.07 g, 36.7 mmol) u anhidrovanom DMF (10 mL) dodat je terc-butil 2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (2 g, 10.09 mmol) i smeša je zagrevana na 80°C u trajanju od 40 časova. Posle hlađenja smeša je podeljena između fiziološkog rastvora/vode (100 mL) i etil acetata (50 mL). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 50 mL). Kombinovane frakcije sa etil acetatom su isprane fiziološkim rastvorom/vodom (1:1, 4 x 25 mL), sušene (anhidrovani natrijum sulfat), filtrirane i redukovane in vacuo. Dobijeni ostatak je podvrgnut hromatografiji (gradijent 0-50% etil acetata u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.11 g, 72.0 %). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ
6.49 (d, 2H), 4.53-4.71 (m, 2H), 3.59 (d, 1H), 3.23-3.51 (m, 3H), 2.00 (m, 2H), 1.44 (d, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.57 min, m/z = 320 [M+H]+ .
Korak 2: terc-butil 5-(4-aminofenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat:
[0279] Rastvor terc-butil 5-(4-nitrofenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (1.20 g, 3.76 mmol) u tetrahidrofuranu (50 mL) je propuštan dva puta kroz H-Cube aparat opremljen sa 10% Pd-C kertridžom uz praćenje podešavanja [1.0 ml/min protok, 20°C, režim kompletnog H2]. Rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja (1.03 g, 95 %). LCMS (postupak C): RT= 0.68 min, m/z = 290 [M+H]+ .
Korak 3: 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0280] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (120 mg, 0.338 mmol) je reagovao sa (1S,4S)-terc-butil 5-(4-aminofenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilatom (98 mg, 0.338 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (84.0 mg, 100 %). 1H NMR (400 MHz,
7.57 (d, 2H), 7.49 (br s 2H), 7.43 (dd, 1H), 6.64 (d, 2H), 4.97 (s, 2H), 4.39 (s, 1H), 3.78 (s, 1H), 3.63 (dd, 1H), 3.16 (s, 3H), 3.06 (t, 2H), 2.97 (dd, 1H), 1.99 (d, 1H), 1.82 (d, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.72 min, m/z = 496 [M+H]+ .
Primer 40: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0281]
Korak 1: (2S,5R)-terc-butil 2,5-dimetil-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0282] U mešajuću suspenziju 1-fluoro-4-nitrobenzena (0.60 g, 4.24 mmol) i kalijum karbonata (2.34 g, 16.97 mmol) u anhidrovanom DMF (5 mL) dodat je (2S,5R)-terc-butil 2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (1 g, 4.67 mmol) i smeša je zagrevana na 90°C u trajanju od 120 časova. Posle hlađenja smeša je podeljena između fiziološkog rastvora/vode (1:1, 50 mL) i etil acetata (25 mL). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 25 mL). Kombinovane frakcije sa etil acetatom su isprane fiziološkim rastvorom/vodom (1:1, 4 x 12.5 mL), sušene (anhidrovani natrijum sulfat), filtrirane i redukovane in vacuo. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 0-50% etil acetata u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.03 g, 72.4 %). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ
2H), 6.77 (d, 2H), 4.24-4.58 (m, 1H), 4.03-4.16 (m, 1H), 3.73-3.93 (m, 1H), 3.31-3.49 (m, 3H), 1.49 (s, 9H), 1.24 (d, 3H), 1.18 (d, 3H).
LCMS (postupak C): RT= 1.80 min, m/z = 336 [M+H]+ .
Korak 2: (2S,5R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat:
[0283] Rastvor (2S,5R)-terc-butil 2,5-dimetil-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilata (1.03 g, 3.07 mmol) u metanolu (100 mL) je propušten kroz H-Cube aparat opremljen sa 10% Pd-C kertridžom uz praćenje podešavanja [1.0 ml/min protok, 40°C, režim kompletnog H2]. Rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja (900 mg, 96 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ
6.49 (d, 2H), 4.51 (s, 2H), 4.21-4.29 (m, 1H), 3.67-3.75 (m, 1H), 3.63 (d, 1H), 3.33 (dd, 1H), 3.04 (dd, 1H), 2.79 (d, 1H), 1.41 (s, 9H), 1.17 (d, 3H), 0.78 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.82 min, m/z = 306 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0284] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (200 mg, 0.563 mmol) je reagovao sa (2S,5R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilatom (163 mg, 0.535 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (151 mg, 92 %). 1H NMR (300 MHz, MeOH-d
4): δ (s, 1H), 7.69 (d, 2H), 7.57 (d, 2H), 7.43 (dd, 1H), 7.18 (d, 2H), 5.00(s, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.92-3.11 (m, 4H), 2.64 (dd, 1H), 2.50 (t, 1H), 1.09 (d, 3H), 0.90 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.79 min, m/z = 512 [M+H]+ .
Primer 41: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-morfolinofenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0285]
[0286] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (120 mg,0.338 mmol) je reagovao sa 4-morfolinoanilinom (60 mg, 0.338 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (67 mg, 41%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.45 (s, 1H), 7.64 (d, 4H), 7.50 (t, 1H), 6.91 (d, 2H),4.97 (s, 2H), 3.74 (m, 4H), 3.09 (s, 3H), 3.04 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 1.17 min, m/z = 485 [M+H]+ .
Primer 42: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(1,1-dioksidotiomorfolino)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0287]
[0288] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (120 mg,0.338 mmol) je reagovao sa terc-5 butil 4-(4-amino-2-metoksifenil)piperazin-1-karboksilatom (76 mg, 0.338 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (91 mg, 53 %). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.45 (s, 1H), 7.7-7.6 (m, 4H), 7.48 (m, 1H), 7.01 (d, 2H), 4.96 (s, 2H), 3.72 (m, 4H), 3.13 (m, 4H), 3.03 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.09 min, m/z = 533 [M+H]+ .
Primer 43: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-fluoro-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0289]
Korak 1: (R)-terc-butil 4-(2-fluoro-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0290] U mešajuću suspenziju 1,2-difluoro-4-nitrobenzena (1.444 g, 9.08 mmol) i kalijum karbonata (5.02 g, 36.3 mmol) u anhidrovanom DMF (10 mL) dodat je (R)-terc-butil 2-metilpiperazin-1-karboksilat (2 g, 9.99 mmol) i smeša je zagrevana na 90°C u trajanju od 21 časa. Posle hlađenja smeša je podeljena između fiziološkog rastvora/vode (100 mL) i etil acetata (50 mL). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 50 mL). Spojene frakcije sa etil acetatom su isprane fiziološkim rastvorom/vodom (1:1, 4 x 25 mL), sušene (anhidrovani natrijum sulfat), filtrirane i redukovane in vacuo. Dobijeni ostatak je podvrgnut hromatografiji (gradijent 0-30% etil acetat u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova 7.90 (dd, 1H), 6.89 (t, 1H), 4.30-4.40 (m, 1H), 3.97 (d, 1H), 3.44-3.56 (m, 2H), 3.28 (td, 1H), 3.07 (dd, 1H), 2.93 (td, 1H), 1.49 (s, 9H), 1.31 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.87 min, m/z = 284 [M-buten]+ .
Korak 2 : (R)-terc-butil 4-(4-amino-2-fluorofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0291] Rastvor (R)-terc-butil 4-(2-fluoro-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (1.3 g, 3.83 mmol) u tetrahidrofuranu (40 mL) je propušten kroz H-Cube aparat opremljen sa 10% Pd-C kertridžom uz praćenje podešavanja [1.0 ml/min protok, 40°C, Režim kompletnog H2]. Rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja (1.17 g, 99 %).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 6.32 (dd, 1H), 6.29 (dd, 1H), 5.01 (br s, 2H), 4.07-4.20 (m, 1H), 3.75 (d, 1H), 3.08 (td, 1H), 2.98 (d, 1H), 2.91 (d, 1H), 2.62 (dd, 1H), 2.55 (dd, 1H), 1.41 (s, 9H), 1.23 (d, 3H). LCMS (postupak C): R
T= 1.32 min, m/z = 310 [M+H] .
Korak 3: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-fluoro-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0292] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (250mg, 0.704 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-amino-2-fluorofenil)-2metilpiperazin-1-karboksilatom (207 mg, 0.669 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (227 mg, 88 %). 1H NMR (400 MHz, MeOH-d
4): δ (s, 1H), 7.70 (dd, 1H), 7.58 (d, 2H), 7.44 (dd, 1H), 7.36 (d, 1H), 7.03 (t, 1H), 5.01 (s, 2H), 3.28 (d, 2H), 3.20 (s, 3H), 2.98-3.11 (m, 3H), 2.75 (td, 1H), 2.42 (t, 1H), 1.14 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.83 min, m/z = 516 [M+H]+ .
Primer 44: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-((1S,4S)-5-metil-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0293]
Korak 1: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-((1S,4S)-5-metil-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0294] 7-((4-(2,5-Diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (25mg, 0.050 mmol) je metilovan praćenjem postupka u Primeru 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (25.0mg, 97%). 1H NMR (400
7.57 (d, 2H), 7.46-7.53 (m, 2H), 7.43 (dd, 1H), 6.64 (d, 2H), 4.97 (s, 2H), 4.32 (s, 1H), 3.54 (s, 1H), 3.46 (dd, 1H), 3.31 (d, 1H), 3.16 (s, 3H), 2.77-2.88 (m, 2H), 2.39 (s, 3H), 1.97 (qAB, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.72 min, m/z = 510 [M+H]+ .
Primer 45: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-((2R,5S)-2,4,5-trimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0295]
Korak 1 : 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-((2R,5S)-2,4,5-trimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0296] 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (26 mg, 0.051 mmol) je metilovan praćenjem postupka u Primeru 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (26.5 mg, 99 %). 1H NMR (400
7.70 (d, 2H), 7.58 (d, 2H), 7.44 (dd, 1H), 7.18 (d, 2H), 5.00 (s, 2H), 3.20 (s, 3H), 3.13-3.19 (m, 1H), 3.01 (dd, 1H), 2.93 (dd, 1H), 2.66 (dd, 1H), 2.37-2.43 (m, 1H), 2.36 (s, 3H), 2.19 (dd, 1H), 1.11 (d, 3H), 0.92 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.84 min, m/z = 526 [M+H]+ .
Primer 46: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3,4-dimetilpiperazin-1-il)-3-(hidroksimetil)fenil) amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0297]
Korak 1: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3,4-dimetilpiperazin-1-il)-3-(hidroksimetil)fenil) amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0298] (R)-3-(2,6-Dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (26 mg, 0.051 mmol) je metilovan praćenjem postupka u Primeru 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (25.3 mg, 99%).<1>H 7.90 (s, 1H), 7.57-7.62 (m, 1H), 7.58 (d, 2H), 7.44 (dd, 1H), 7.15 (d, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.76 (s, 2H), 3.21 (s, 3H), 2.88-3.02 (m, 4H), 2.61 (dd, 1H), 2.52 (td, 1H), 2.35-2.45 (m, 1H), 2.38 (s, 3H), 1.15 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.73 min, m/z = 542 [M+H]+ .
Primer 47: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3,4-dimetilpiperazin-1-il)-3-fluorofenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0299]
[0300] (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-fluoro-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (23 mg, 0.045 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (20 mg,
8.48 (s, 1H), 7.69 (dd, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.43-7.52 (m, 2H), 6.98 (t, 1H), 4.98 (s, 2H), 3.07-3.20 (m, 5H), 2.73-2.82 (m, 2H), 2.42 (t, 1H), 2.29 (td, 1H), 2.14-2.24 (m, 4H), 1.01 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.87 min, m/z = 530 [M+H]+ .
Primer 48: (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-fluoro-4-(3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0301]
Korak 1: (S)-terc-butil 4-(2-fluoro-4-nitrofenil)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilat:
[0302] U mešanu suspenziju 1,2-difluoro-4-nitrobenzena (0.464 mL, 4.20 mmol) i kalijum karbonata (2.324 g, 16.81 mmol) u anhidrovanom DMF (5 mL) dodat je (S)-terc-butil 2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilat (1 g, 4.62 mmol) i smeša je zagrevana na 90°C u trajanju od 21 časa. Posle hlađenja smeša je podeljena između fiziološkog rastvora/vode (100 mL) i etil acetata (50 mL). Vodena faza je odvojena i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 50 mL). Spojene frakcije sa etil acetatom su isprane fiziološkim rastvorom/vodom (1:1, 4 x 25 mL), sušene (anhidrovani natrijum sulfat), filtrirane i redukovane in vacuo. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 20-100% etil acetata u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.14 g, 76 %). 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ
1H), 7.92 (dd, 1H), 6.94 (t, 1H), 4.22-4.35 (m, 1H), 4.03 (d, 1H), 3.90 (d, 2H), 3.74 (d, 1H), 3.50 (d, 1H), 3.30 (t, 1H), 3.05 (dd, 1H), 2.97 (td, 1H), 1.97 (br s, 1H), 1.49 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.48 min, m/z = 356 [M+H]+ .
Korak 2: (S)-terc-butil 4-(4-amino-2-fluorofenil)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilat:
[0303] Rastvor (S)-terc-butil 4-(2-fluoro-4-nitrofenil)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilata (1.14 g, 3.21 mmol) u metanolu (100 mL) je propušten kroz H-Cube aparat opremljen sa 10% PD-C kertridžom uz praćenje podešavanja [1.0 ml/min protok, 40°C, režim kompletnog H2] kao dve porcije. Rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja (1.04 g, 100 %).<1>H NMR (300 MHz,
6.36 (m, 2H), 5.01 (br s, 2H), 4.72 (t, 1H), 3.90-4.02 (m, 1H), 3.67-3.93 (m, 2H), 3.42-3.54 (m, 1H), 3.17 (d, 1H), 2.92-3.09 (m, 2H), 2.57 (dd, 1H), 2.44-2.54 (m, 1H), 1.41 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 0.89 min, m/z = 326 [M+H]+ .
Korak 3: (S)-terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-fluorofenil)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilat:
[0304] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (120 mg, 0.338 mmol) je reagovao sa (S)-terc-butil 4-(4-amino-2-fluorofenil)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilatom (110 mg, 0.338 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (108 mg, 51%).
Korak 4: (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-fluoro-4-(3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0305] (S)-terc-Butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-fluorofenil)-2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilat (108 mg, 0.171 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (41 mg, 45%).<1>H NMR (400
8.48 (s, 1H), 7.69 (dd, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.42-7.52 (m, 2H), 6.97 (t, 1H), 4.98 (s, 2H), 4.60 (t, 1H), 3.30-3.38 (m, 1H), 3.22 (d, 1H), 3.07-3.16 (m, 4H), 2.94 (d, 1H), 2.76-2.88 (m, 2H), 2.61 (td, 1H), 2.26-2.33 (m, 1H), 2.18 (br s, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.79 min, m/z = 532 [M+H]+ .
Primer 49: (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(hidroksimetil)-4-metilpiperazin-1-il)fenil) amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0307] (S)-3-(2,6-Dihlorofenil)-7-((4-(3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (27 mg, 0.052 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (27 mg, 8.44 (s, 1H), 7.57-7.67 (br m, 4H), 7.48 (dd, 1H), 6.89 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 4.56 (t, 1H), 3.66 (ddd, 1H), 3.59 (br d, 1H), 3.44 (br d, 1H), 3.33-3.39 (m, 1H), 3.09 (s, 3H), 2.79 (dt, 1H), 2.65-2.73 (m, 1H), 2.41-2.48 (m, 1H), 2.21-2.33 (m, 4H), 2.07-2.16 (m, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.70 min, m/z = 528 [M+H]+ .
Primer 50: (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-fluoro-4-(3-(hidroksimetil)-4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0308]
[0309] (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-fluoro-4-(3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (19 mg, 0.036 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (15 mg, 8.48 (s, 1H), 7.70 (dd, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.48 (dd, 2H), 6.98 (t, 1H), 4.98 (s, 2H), 4.53 (t, 1H), 3.61-3.69 (m, 1H), 3.26-3.38 (m, 2H), 3.07-3.17 (m, 4H), 2.71-2.81 (m, 2H), 2.44-2.51 (m, 1H), 2.28-2.36 (m, 1H), 2.25 (s, 3H), 2.13-2.21 (m, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.81 min, m/z = 546 [M+H]+ .
Primer 51 7-((4-(2,6-diazaspiro[3.3]heptan-2-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
Korak 1: terc-butil 6-(4-nitrofenil)-2,6-diazaspiro[3.3]heptan-2-karboksilat:
[0311] Suspenzija 1-fluoro-4-nitrobenzena (356 mg, 2.52 mmol), terc-butil 2,6-diazaspiro[3.3]heptan-2-karboksilata (500 mg, 2.52 mmol) i kalijum karbonata (523 mg, 3.78 mmol) u anhidrovanom DMF (3 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota preko noći. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (30 mL) i mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Istaložena čvrsta supstanca je izolovana filtracijom, isprana vodom, sušena usisavanjem i prečišćena pomoću Biotage hromatografije (silika 25g kertridž, eluiranjem gradijentom cikloheksana:etil acetata od 90:10 do 20:80) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (400 mg, 50%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.10 (dt, 2H), 6.31 (dt, 2H), 4.15 (s, 4H), 4.13 (s, 4H), 1.45 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.64 min, m/z = 320 [M+H]+ .
Korak 2: terc-butil 6-(4-aminofenil)-2,6-diazaspiro[3.3]heptan-2-karboksilat:
[0312] Rastvor terc-butil 6-(4-nitrofenil)-2,6-diazaspiro[3.3]heptan-2-karboksilata (400 mg, 1.253 mmol) u metanolu (100 mL) [NB: slaba rastvorljivost tako da je potrebno veće razblaženje] je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, kompletni H2, 25°C, 1 mL/min). Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo braon čvrsta supstanca (315 mg, 87%).<1>H NMR (400
3.87 (s, 4H), 3.34 (br s, 2H), 1.44 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 0.76 min, m/z = 290 [M+H]+ .
Korak 3: 7-((4-(2,6-diazaspiro[3.3]heptan-2-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0313] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (120 mg, 0.338 mmol) je reagovao sa terc-butil 6-(4-aminofenil)-2,6-diazaspiro[3.3]heptan-2-karboksilatom (98 mg, 0.338 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (71.6 mg, 81%). 1H NMR: (400 MHz, MeOH-d4): δ 8.51 (s, 1H), 7.57 (d, 2H), 7.47-7.55 (m, 2H), 7.43 (dd, 1H), 6.53 (d, 2H), 4.97 (s, 2H), 3.94 (s, 4H), 3.82 (s, 4H), 3.15 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.68 min, m/z = 496 [M+H]+ .
Primer 52: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-((3R,5S)-3,4,5-trimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0314]
[0315] 3-(2,6-Dihlorofenil)-7-((4-((3R,5S)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (57 mg, 0.111 mmol) je metilovan praćenjem postupka u Primeru 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (33.6 mg, 57.4 %).1H NMR (400
7.65 (m, 4H), 7.44 (dd, 1H), 6.99 (d, 2H), 4.98 (s, 2H), 3.52 (d, 2H), 3.17 (s, 3H), 2.42-2.57 (m, 4H), 2.97 (s, 3H), 1.22 (d, 6H). LCMS (postupak C): RT= 0.79 min, m/z = 526 [M+H]+ .
Primer 53 :(R)-3-(2-hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0316]
[0317] 3-(2-Hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.295 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilatom (86 mg, 0.295 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (45 mg, 33%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 8.45 (s, 1H), 7.60 (d, 2H), 7.51 (m, 2H), 7.42-7.37 (m, 1H), 6.88 (d, 1H), 4.98 (d, 1H), 4.93 (d, 1H), 3.48 (m, 1H), 3.08 (s, 3H), 2.93 (m, 1H), 2.75 (m, 2H), 2.13 (m, 2H), 1.01 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.62 min, m/z = 470 [M+H]+ .
Primer 54: 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-3-(2-hloro-6-fluorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0318]
[0319] 3-(2-Hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (85 mg, 0.295 mmol) je reagovao sa terc-5 butil 4-(4-amino-2-metoksifenil) piperazin-1-karboksilatom (100 mg, 0.295 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (36 mg, 27%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.44 (d, 2H), 7.31 (m, 2H), 7.13 (m, 1H), 6.55 (d, 2H), 4.91 (d, 1H), 4.80 (d, 1H), 4.29 (m, 1H), 3.80 (m, 1H), 3.66 (m, 1H), 3.14 (s, 3H), 3.05 (m, 1H), 2.95 (m, 1H), 2.00 (d, 1H), 1.84 (d, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.67 min, m/z = 480 [M+H]+ .
Primer 55: 3-(2-hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[ 4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0320]
Korak 1: terc-butil 4-(2-metil-4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0321] Suspenzija 1-fluoro-2-metil-4-nitrobenzena (2.00 g, 12.9 mmol), terc-butil piperazin-1-karboksilata (2.40 g, 12.9 mmol) i kalijum karbonata (2.67 g, 19.3 mmol) u anhidrovanom DMF (10 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota preko noći. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (200 mL) i mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Istaložena čvrsta supstanca je izolovana filtracijom, isprana vodom i sušena usisavanjem da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (1.51 g, 36%). LCMS (postupak A): RT= 1.52 min, m/z = 222 [M-Boc+H]+ .
Korak 2: terc-butil 4-(4-amino-2-metilfenil)piperazin-1-karboksilat:
[0322] U rastvor terc-butil 4-(2-metil-4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilata (0.85 g, 2.64 mmol) u etanolu (10 mL) dodat je 10% paladijum na uglju (0.141 g, 0.132 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do 50°C. Uz mešanje, amonijum format (0.667 g, 10.58 mmol) je dodat u porcijama, zatim zagrevan na 50°C u trajanju od 30 minuta. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature preko noći i filtrirana kroz Celite®. Filtrati su koncentrovani i ostatak je podeljen između DCM i rastvora natrijum bikarbonata. Organska faza je odvojena, sušena (fazni separator) i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (632 mg, 82%). LCMS (postupak A): RT= 0.88 min, m/z = 236 [M-tBu+H]+ .
Korak 3: 3-(2-hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0323] 3-(2-Hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on) (100 mg, 0.295 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-amino-2-metilfenil)piperazin-1-karboksilatom (86 mg, 0.295 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (56 mg, 39%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.48 (m, 1H), 7.43 (m, 1H), 7.33 (m, 2H), 7.15 (m, 1H), 6.92 (1, 2H), 4.93 (d, 1H), 4.83 (d, 1H), 3.18 (s, 3H), 3.06 (m, 4H), 2.90 (m, 4H), 2.33 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.75 min, m/z = 482 [M+H]+ .
Primer 56: 3-(2-hloro-6-fluorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0324]
[0325] 3-(2-hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.295 mmol) je reagovao sa (3-aminofenil)metanolom (36 mg, 0.295 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (35 mg, 29%).
7.81 (m, 1H), 7.67 (s,1H), 7.49 (m, 1H), 7.28 (m, 1H), 7.10 (m, 1H), 6.98 (m, 1H), 4.93 (d, 1H), 4.86 (d, 1H), 4.78 (d, 1H), 4.53 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.93 min, m/z = 414 [M+H]+ .
Primer 57: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-morfolinofenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0326]
[0327] 3-(2-hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg,0.295 mmol) je reagovao sa (5-amino-2-morfolinofenil) metanolom (61 mg, 0.295 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (57 mg, 7.48 (m, 1H), 7.43 (m, 1H), 7.33 (m, 2H), 7.15 (m, 1H), 6.92 (1, 2H), 4.95 (d, 1H), 4.83 (d, 1H), 4.78 (s, 2H), 3.18 (s, 3H), 3.72 (m, 4H), 3.04 (m, 4H). LCMS (postupak C): R
T= 0.93 min, m/z = 499 [M+H] .
Primer 58: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-(1-metil-1H-pirazol-3-il)-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0328]
Korak 1: 4-hloro-N-(2,6-dihlorofenil)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid:
[0329] Smeša 4-hloro-2-(metiltio)pirimidin-5-karbonil hlorida (35 g, 157 mmol) i Amberlyst A21 (6 g, 149 mmol) u etil acetatu (250 mL) je zagrevana do 40°C, nakon čega je ukapavanjem dodat rastvor 2,6-dihloroanilina (24.21 g, 149 mmol) u etil acetatu (250 mL). Reakciona smeša je zagrevana na 40°C pod atmosferom azota preko noći. Dobijena suspenzija je ostavljena da se hladi do sobne temperature i filtrirana. Izolovane čvrste supstance su apsorbovane u vrelom tetrahidrofuranu (100 mL) i filtrirane, ponavljanjem postupka sa nerastvorenom čvrstom supstancom još dva puta sve dok većina čvrste supstance nije rastvorena. Spojeni filtrati su koncentrovani do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobila svetlo žuta čvrsta supstanca. Ovo je suspendovano u dihlorometanu (100 mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (22.1 g, 42%).<1>H NMR (300 MHz,
8.82 (s, 1H), 7.62 (d, 2H), 7.43 (t, 1H), 2.60 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.46 min, m/z = 348 [M+H]+ .
Korak 2: N-(2,6-dihlorofenil)-4-((1-metil-1H-pirazol-3-il)amino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid:
[0330] U mešajući rastvor 4-hloro-N-(2,6-dihlorofenil)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamida (218 mg, 0.625 mmol) i Hunig-ove baze (0.328 mL, 1.876 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (4 mL) dodat je 1-metil-1H-pirazol-3-amin (0.052 mL, 0.657 mmol) i smeša je zagrevana do 50°C u trajanju od 16 časova. Rastvarač je uklonjen in vacuo. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 0-5% metanola u dihlorometanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (117 mg, 45.6%). LCMS (postupak C): RT= 1.45 min, m/z = 409 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-(1-metil-1H-pirazol-3-il)-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0331] U mikrotalasnu bočicu od 10 ml dodat je N-(2,6-dihlorofenil)-4-((1-metil-1H-pirazol-3-il)amino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid (112 mg, 0.274 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (3 mL), a zatim cezijum karbonat (535 mg, 1.642 mmol) i dibromometan (0.058 mL, 0.821 mmol). Epruveta je hermetički zatvorena i smeša je zagrevana do 90°C uz mešanje u trajanju od 40 časova. Rastvarač je uklonjen in vacuo. Ostatak je podeljen između vode (10 mL) i dihlorometana (20 mL). Vodena faza je odvojena i ekstrahovana sa dihlorometanom (2 x 10 mL). Spojene frakcije sa dihlorometanom su sušene (fazni separator) i redukovane in vacuo. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 0-50% etil acetata u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (54.1 mg, 46.9 %). LCMS (postupak C): RT= 1.53 min, m/z = 421 [M+H]+ .
Korak 4: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-(1-metil-1H-pirazol-3-il)-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0332] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-(1-metil-1H-pirazol-3-il)-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (50 mg,0.119 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilatom (38 mg, 0.131 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (25 mg, 37%).
1H NMR (400 MHz, metanol-d4): δ 1H), 7.60-7.35 (m, 5H), 6.93 (d, 2H), 6.61 (brs, 1H), 5.49 (s, 2H), 3.82 (s, 3H), 3.50 (m, 2H), 3.15-2.9 (m, 3H), 2.67 (dt, 1H), 2.35 (m, 1H), 1.17 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.88 min, m/z = 564 [M+H]+ .
Primer 59: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(metoksimetil)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0333]
Korak 1: (R)-terc-butil 4-(2-(metoksimetil)-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0334] Rastvor (R)-terc-butil 4-(2-(hidroksimetil)-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (1.00 g, 2.85 mmol) u anhidrovanom THF (9.49 mL) je hlađen do 0°C, nakon čega je dodat natrijum hidrid (60% u mineralnom ulju, 0.125 g, 3.13 mmol). Posle mešanja na 0°C pod atmosferom azota u trajanju od 10 minuta, dodat je metil jodid (0.214 mL, 3.41 mmol). Dobijena smeša je ostavljena da se zagreva do sobne temperature i mešana 60 minuta. Dodato je još metil jodida (0.071 mL, 1.138 mmol) i smeša je mešana dodatnih 60 minuta. Reakciona smeša je razblažena rastvorom amonijum hlorida (30 mL) i ekstrahovana u etil acetat (3 x 20 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane, koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom i prečišćene pomoću Biotage hromatografije (silika 50g kertridž, eluiranje gradijentom cikloheksana:etil acetata od 95:5 do 50:50) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje koje očvršćava usled stajanja (870 mg, 84%).<1>H NMR 8.13 (dd, 1H), 7.04 (d, 1H), 4.56 (d, 1H), 4.50 (d, 1H), 4.36 (br s, 1H), 3.98 (dt, 1H), 3.47 (s, 3H), 3.29 (td, 1H), 3.18 (ddd, 1H), 3.10 (dt, 1H), 2.97 (dd, 1H), 2.80 (td, 1H), 1.49 (s, 9H), 1.37 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.87 min, m/z = 366 [M+H]+ .
Korak 2: (R)-terc-butil 4-(4-amino-2-(metoksimetil)fenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0335] Rastvor (R)-terc-butil 4-(2-(metoksimetil)-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (870 mg, 2.381 mmol) u metanolu (40 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, kompletan H2, 25°C, 1 mL/min) sa tri prolaza. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (730 mg, 6.78 (d, 1H), 6.59 (dd, 1H), 4.55 (d, 1H), 4.51 (d, 1H), 4.28 (br s, 1H), 3.88 (d, 1H), 3.42 (s, 3H), 3.22 (td, 1H), 2.80-2.90 (m, 2H), 2.76 (dt, 1H), 2.66 (td, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.36 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.05 min, m/z = 336 [M+H]+ .
Korak 3: (R)-terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(metoksimetil)fenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0336] 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-amino-2-(metoksimetil)fenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilatom (95 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (98 mg, 54%).<1>H NMR (300
7.93 (br m, 2H), 7.53 (dd, 1H), 7.43 (d, 2H), 7.27 (dd, 1H), 7.04 (d, 1H), 4.88 (s, 2H), 4.61 (d, 1H), 4.56 (d, 1H), 4.24-4.38 (m, 1H), 3.92 (br d, 1H), 3.44 (s, 3H), 3.25 (td, 1H), 3.19 (s, 3H), 2.96 (br d, 1H), 2.82-2.89 (m, 2H), 2.71 (td, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.37 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.88 min, m/z = 642 [M+H]+ .
Korak 4: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(metoksimetil)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0337] (R)-terc-Butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(metoksimetil)fenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat (98 mg, 0.153 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (70 mg, 85%).<1>H NMR (400
7.90 (br s, 1H), 7.53-7.60 (m, 3H), 7.42 (dd, 1H), 7.11 (d, 1H), 4.98 (s, 2H), 4.56 (s, 2H), 3.43 (s, 3H), 3.19 (s, 3H), 2.92-3.05 (m, 5H), 2.69-2.78 (m, 1H), 2.42 (t, 1H), 1.11 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.82 min, m/z = 542 [M+H]+ .
Primer 60: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0338]
Korak 1: (R)-terc-butil 2-(hidroksimetil)-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0339] Suspenzija 1-fluoro-4-nitrobenzena (2.86 g, 20.30 mmol), (R)-terc-butil 2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilata (4.39 g, 20.30 mmol) i kalijum karbonata (4.21 g, 30.4 mmol) u anhidrovanom DMF (10 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota preko noći. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (30 mL) i mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Uljani proizvod je ekstrahovan u etil acetat (50 mL) i ispran sa 50:50 vodom:fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL). Organska faza je zatim sušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je suspendovan u smeši cikloheksana (20 mL) i dietil etra (2 mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (4.78 g, 70%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 2H), 6.78 (dt, 2H), 4.25 (br s, 1H), 3.87-4.03 (m, 2H), 3.62-3.80 (m, 3H), 3.26-3.42 (m, 2H), 3.18 (ddd, 1H), 1.49 (s, 9H).
LCMS (postupak C): RT= 1.39 min, m/z = 338 [M+H]+ .
Korak 2: (R)-terc-butil 2-(metoksimetil)-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0340] Rastvor (R)-terc-butil 2-(hidroksimetil)-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilata (500 mg, 1.482 mmol) u anhidrovanom THF (4.94 mL) je hlađen do 0°C, nakon čega je usledilo dodavanje natrijum hidrida (60% u mineralnom ulju, 65.2 mg, 1.630 mmol). Posle mešanja na 0°C pod atmosferom azota u trajanju od 10 minuta, dodat je metil jodid (111 μl, 1.778 mmol). Dobijena smeša je ostavljena da se zagreva do sobne temperature i mešana u trajanju od 60 minuta. Reakciona smeša je razblažena rastvorom amonijum hlorida (10 mL) i ekstrahovana u etil acetatu (3 x 10 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane, koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom i prečišćene pomoću Biotage hromatografije (silika 25g kertridž, eluiranje gradijentom cikloheksana:etil acetata od 95:5 do 20:80) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (200 mg, 38% prinos).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 12 (d, 2H), 6.79 (d, 2H), 4.29 (br s, 1H), 4.04 (br d, 1H), 3.95 (br d, 1H), 3.73 (br d, 1H), 3.36-3.43 (m, 2H), 3.33 (s, 3H), 3.08-3.30 (m, 3H), 1.49 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.69 min, m/z = 352 [M+H]+ .
Korak 3: (R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilat:
[0341] Rastvor (R)-terc-butil 2-(metoksimetil)-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilata (200 mg, 0.569 mmol) u metanolu (30 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, kompletan H2, 25°C, 1 mL/min) sa dva prolaza. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao braon ulje (160 mg, 87 % prinos)
1H), 3.97 (br d, 1H), 3.78 (t, 1H), 3.37-3.55 (m, 4H), 3.39 (s, 3H), 3.27 (dr d, 1H), 3.11 (td, 1H), 2.56-2.73 (m, 2H), 1.48 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 0.74 min, m/z = 322 [M+H]+ .
Korak 4: (R)-terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)-2-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilat:
[0342] 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilatom (91 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (113 mg, 64%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.51 (d, 2H), 7.44 (d, 2H), 7.28 (dd, 1H), 6.92 (d, 2H), 4.87 (s, 2H), 4.31 (br s, 1H), 4.00 (br d, 1H), 3.65-3.80 (m, 2H), 3.40-3.50 (m, 2H), 3.40 (d, 3H), 3.07-3.20 (m, 4H), 2.80 (dd, 1H), 2.74 (td, 1H), 1.49 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.67 min, m/z = 628 [M+H]+ .
Korak 5: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0343] (R)-terc-Butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)-2-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilat (113 mg, 0.180 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (83 mg, 87%).<1>H NMR (400 MHz,
7.61 (m, 4H), 7.42 (dd, 1H), 6.98 (d, 2H), 4.96 (s, 2H), 3.39-3.57 (m, 4H), 3.39 (s, 3H), 3.15 (s, 3H), 3.04-3.14 (m, 2H), 2.96 (td, 1H), 2.72 (td, 1H), 2.48 (t, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.75 min, m/z = 528 [M+H]+ .
Primer 61: (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0344]
Korak 1: (S)-terc-butil 2-(hidroksimetil)-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0345] Suspenzija 1-fluoro-4-nitrobenzena (1.305 g, 9.25 mmol), (S)-terc-butil 2-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilata (2.00 g, 9.25 mmol) i kalijum karbonata (1.917 g, 13.87 mmol) u anhidrovanom DMF (10 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota preko noći. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (70 mL) i mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Istaložena čvrsta supstanca je izolovana filtracijom, isprana vodom (50 mL), sušena usisavanjem i sušena zamrzavanjem preko noći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao narandžasta čvrsta supstanca 6.78 (dt, 2H), 4.25 (br s, 1H), 3.85-4.04 (m, 2H), 3.61-3.80 (m, 3H), 3.25-3.43 (m, 2H), 3.18 (ddd, 1H), 1.49 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.39 min, m/z = 338 [M+H]+ .
Korak 2: (S)-terc-butil 2-(metoksimetil)-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0346] Rastvor (S)-terc-butil 2-(hidroksimetil)-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilata (1.00 g, 2.96 mmol) u anhidrovanom THF (9.88 mL) je hlađen do 0°C, a zatim je dodat natrijum hidrid (60% u mineralnom ulju, 0.130 g, 3.26 mmol). Posle mešanja na 0°C pod atmosferom azota u trajanju od 10 minuta, dodat je metil jodid (0.222 mL, 3.56 mmol). Dobijena smeša je ostavljena da se zagreva do sobne temperature i mešana u trajanju od 60 minuta. Reakciona smeša je razblažena rastvorom amonijum hlorida (20 mL) i ekstrahovana u etil acetat (3 x 10 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane, koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom i prečišćene pomoću Biotage hromatografije (silika 50g kertridž, eluiranje gradijentom cikloheksana:etil acetata od 95:5 do 20:80) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (282 mg, 27% yield).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ (dt, 2H), 4.29 (br s, 1H), 4.05 (dt, 1H), 3.95 (br d, 1H), 3.74 (br d, 1H), 3.37-3.43 (m, 2H), 3.33 (s, 3H), 3.08-3.28 (m, 3H), 1.49 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.69 min, m/z = 352 [M+H]+ .
Korak 3: (S)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilat:
[0347] Rastvor (S)-terc-butil 2-(metoksimetil)-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilata (282 mg, 0.803 mmol) u metanolu (30 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, kompletan H2, 25°C, 1 mL/min) sa dva prolaza. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (236 mg, 91 % prinos).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ
(dt, 2H), 4.28 (br s, 1H), 3.98 (br d, 1H), 3.78 (t, 1H), 3.43-3.54 (m, 2H), 3.39 (s, 3H), 3.27 (dr d, 1H), 3.11 (td, 1H), 2.56-2.74 (m, 2H), 1.48 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 0.78 min, m/z = 322 [M+H]+ .
Korak 4: (S)-terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)-2-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilat:
[0348] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (200 mg, 0.563 mmol) je reagovao sa (S)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilatom (181 mg, 0.563 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (190 mg, 54%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.51 (d, 2H), 7.44 (d, 2H), 7.41 (br s, 1H), 7.28 (dd, 1H), 6.91 (d, 2H), 4.87 (s, 2H), 4.32 (br s, 1H), 4.00 (br d, 1H), 3.64-3.80 (m, 2H), 3.39-3.52 (m, 2H), 3.39 (s, 3H), 3.06-3.21 (m, 4H), 2.67-2.85 (m, 2H), 1.49 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.66 min, m/z = 628 [M+H]+ .
Korak 5: (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0349] (S)-terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)-2-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilat (190 mg, 0.302 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (135 mg, 85%).<1>H NMR (400 MHz, MeOH-d4): δ
1H), 7.51-7.62 (m, 4H), 7.42 (dd, 1H), 6.98 (d, 2H), 4.96 (s, 2H), 3.39-3.57 (m, 4H), 3.39 (s, 3H), 3.15 (s, 3H), 3.04-3.14 (m, 2H), 2.96 (td, 1H), 2.72 (td, 1H), 2.48 (t, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.76 min, m/z = 528 [M+H]+ .
Primer 62: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(3-(trifluorometil)piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0350]
Korak 1: 1-(4-nitrofenil)-3-(trifluorometil)piperazin:
[0351] Suspenzija 1-fluoro-4-nitrobenzena (0.915 g, 6.49 mmol), 2-(trifluorometil)piperazina (1.00 g, 6.49 mmol) i kalijum karbonata (1.345 g, 9.73 mmol) u anhidrovanom DMF (5 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota preko noći. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (30 mL) i mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Istaložena čvrsta supstanca je izolovana filtracijom, isprana vodom i sušena usisavanjem da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (1.47 g,
3.74 (ddd, 1H), 3.39-3.54 (m, 1H), 3.25 (dd, 1H), 2.93-3.16 (m, 3H), 2.00 (br s, 1H). LCMS (postupak C): RT= 1.12 min, m/z = 276 [M+H]+ .
Korak 2: terc-butil 4-(4-nitrofenil)-2-(trifluorometil)piperazin-1-karboksilat:
[0352] U rastvor 1-(4-nitrofenil)-3-(trifluorometil)piperazina (1.20 g, 4.36 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (14.53 mL) dodat je di-terc-butil dikarbonat (2.025 mL, 8.72 mmol), DIPEA (1.904 mL, 10.90 mmol) i DMAP (0.053 g, 0.436 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 3 dana. Dodata je nova količina di-terc-butil dikarbonata (2.025 mL, 8.72 mmol), DIPEA (1.904 mL, 10.90 mmol) i DMAP (0.053 g, 0.436 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 24 časa. Dodato je još diterc-butil dikarbonata (2.025 mL, 8.72 mmol), DIPEA (1.904 mL, 10.90 mmol) i DMAP (0.053 g, 0.436 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 24 časa. Dodato je još di-terc-butil dikarbonata (2.025 mL, 8.72 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je isprana zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (15 mL), sušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću Biotage hromatografije (silika 100g kertridž, eluiranje gradijentom cikloheksana:etil acetata od 95:5 do 60:40) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (1.49 g, 91%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ
(dt, 2H), 4.54-4.99 (br m, 1H), 3.97-4.27 (br m, 2H), 3.79 (d, 1H), 3.23-3.48 (br m, 2H), 3.10 (td, 1H), 1.49 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.78 min, m/z = 376 [M+H]+ .
Korak 3: terc-butil 4-(4-aminofenil)-2-(trifluorometil)piperazin-1-karboksilat:
[0353] Rastvor terc-butil 4-(4-nitrofenil)-2-(trifluorometil)piperazin-1-karboksilata (1.49 g, 3.97 mmol) u metanolu (50 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, kompletan H2, 25°C, 1 mL/min) sa dva prolaza. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (1.34 g, 98%).
1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 80 (dt, 2H), 6.65 (dt, 2H), 4.49-4.88 (br m, 1H), 4.10 (br s, 1H), 3.65 (d, 1H), 3.23-3.59 (br m, 4H), 2.85 (ddd, 1H), 2.66 (td, 1H), 1.49 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 0.99 min, m/z = 346 [M+H]+ .
Korak 4: terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)-2-(trifluorometil)piperazin-1-karboksilat:
[0354] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-aminofenil)-2-(trifluorometil)piperazin-1-karboksilatom (98 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (126 mg,
7.54 (d, 2H), 7.44 (d, 2H), 7.28 (dd, 1H), 7.24 (br s, 1H), 6.93 (d, 2H), 4.88 (s, 2H), 4.65 (br s, 1H), 4.13 (br s, 1H), 3.82 (d, 1H), 3.46 (d, 1H), 3.35 (br s, 1H), 3.17 (s, 3H), 2.97 (ddd, 1H), 2.76 (td, 1H), 1.50 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.80 min, m/z = 652 [M+H]+ .
Korak 5: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(3-(trifluorometil)piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0355] terc-Butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)-2-(trifluorometil)piperazin-1-karboksilat (126 mg, 0.193 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (92 mg, 86%).<1>H NMR (400 MHz, MeOH-d4): δ 1H), 7.60 (br d, 2H), 7.56 (d, 2H), 7.42 (dd, 1H), 7.00 (d, 2H), 4.97 (s, 2H), 3.66 (br d, 1H), 3.43-3.61 (m, 2H), 3.10-3.19 (m, 4H), 2.98 (td, 1H), 2.70-2.81 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 1.06 min, m/z = 552 [M+H]+ .
Primer 63: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(3,3,4-trimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
Korak 1 : 1,2,2-trimetil-4-(4-nitrofenil)piperazin:
[0357] U mešanu suspenziju 1-fluoro-4-nitrobenzena (0.668 g, 4.74 mmol) i kalijum karbonata (3.27 g, 23.68 mmol) u anhidrovanom DMF (5 mL) dodat je 1,2,2-trimetilpiperazin.2HCl (1 g, 4.97 mmol) i smeša je zagrevana na 90°C u trajanju od 21 časa. Posle hlađenja smeša je podeljena između fiziološkog rastvora/vode (100 mL) i etil acetata (50 mL). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 50 mL). Spojene frakcije sa etil acetatom su isprane fiziološkim rastvorom/vodom (1:1, 4 x 25 mL), sušene (anhidrovani natrijum sulfat), filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 50-100% etil acetata u cikloheksanu, zatim 0-20% metanola u etil acetatu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.15
2H), 2.67 (t, 2H), 2.29 (s, 3H), 1.08 (s, 6H). LCMS (postupak C) RT= 0.48 min, m/z = 250 [M+H]+ .
Korak 2 : 4-(3,3,4-trimetilpiperazin-1-il)anilin:
[0358] Rastvor 1,2,2-trimetil-4-(4-nitrofenil)piperazina (1.15 g, 4.61 mmol) u metanolu (30 mL) i tetrahidrofuranu (5.00 mL) je propušten dva puta kroz H-Cube aparat opremljen sa 10% Pd-C kertridžom uz praćenje podešavanja [1.0 ml/min protok, 40°C, režim kompletnog H2]. Rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.02g, 101 %).<1>H NMR 2.60 (s, 2H), 2.52 (t, 2H), 2.13 (s, 3H), 1.01 (s, 6H). LCMS (postupak C) RT= 0.21 min, m/z = 220 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(3,3,4-trimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0359] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa 4-(3,3,4-trimetilpiperazin-1-il)anilinom (62 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (19 mg, 13%). 1H), 7.50-7.60 (m, 4H), 7.42 (dd, 1H), 6.93 (d, 2H), 4.96 (s, 2H), 3.12-3.19 (m, 5H), 2.91 (s, 2H), 2.73 (t, 2H), 2.29 (s, 3H), 1.16 (s, 6H). LCMS (postupak C): RT= 0.80 min, m/z = 526 [M+H]+ .
Primer 64: 7-((4-(3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-7-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0360]
Korak 1: terc-butil 7-(4-nitrofenil)-3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-9-karboksilat:
[0361] U mešanu suspenziju 1-fluoro-4-nitrobenzena (124 mg, 0.876 mmol) i kalijum karbonata (484 mg, 3.50 mmol) u anhidrovanom DMF (2 mL) dodat je terc-butil 3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-9-karboksilat (200mg, 0.876 mmol) i smeša je zagrevana na 90°C u trajanju od 21 časa. Posle hlađenja, smeša je podeljena između fiziološkog rastvora/vode (20 mL) i etil acetata (10 mL). Vodena faza je odvojena i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 10 mL). Spojene frakcije sa etil acetatom su isprane fiziološkim rastvorom/vodom (1:1, 4 x 5 mL), sušene (anhidrovani natrijum sulfat), filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je podvrgnut hromatografiji (gradijent 0-50% etil acetata u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (237 mg, 77 %). 1H NMR (400 MHz,
6.78 (d, 2H), 4.24-4.31 (m, 1H), 4.11-4.18 (m, 1H), 3.95 (t, 2H), 3.84 (t, 4H), 3.37 (t, 2H), 1.49 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.54 min, m/z = 350 [M-buten]+ .
Korak 2: terc-butil 7-(4-aminofenil)-3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-9-karboksilat:
[0362] Rastvor terc-butil 7-(4-nitrofenil)-3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-9-karboksilata (230 mg, 0.658 mmol) u metanolu (30 mL) i tetrahidrofuranu (5 mL) je propušten kroz H-Cube aparat opremljen sa 10% Pd-C kertridžom uz praćenje podešavanja [1.0 ml/min protok, 40°C, režim kompletnog H2]. Rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (208 mg,
(br s, 2H), 3.96 (d, 2H), 3.85 (d, 2H), 3.64 (d, 2H), 3.50 (t, 2H), 2.76 (d, 2H), 1.42 (s, 9H). LCMS (postupak C) RT= 0.67 min, m/z = 320 [M+H]+ .
Korak 3: terc-butil 7-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)-3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-9-karboksilat:
[0363] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa terc-butil 7-(4-aminofenil)-3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-9-karboksilatom (90 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (108 mg, 61%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.50 (d, 2H), 7.44 (d, 2H), 7.28 (dd, 1H), 7.16 (br s, 1H), 6.87 (d, 2H), 4.87 (s, 2H), 4.22 (br s, 1H), 4.09 (br s, 1H), 4.00 (d, 1H), 3.96 (d, 1H), 3.87 (ddd, 2H), 3.71 (d, 2H), 3.09-3.21 (m, 5H), 1.49 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.46 min, m/z = 626 [M+H]+ .
Korak 4: 7-((4-(3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-7-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0364] terc-Butil 7-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)-3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-9-karboksilat (108 mg, 0.172 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (60 mg, 66%).<1>H NMR (400 MHz, MeOH-d4): δ 8.50 (s, 1H), 7.49-7.62 (m, 4H), 7.41 (dd, 1H), 6.93 (d, 2H), 4.96 (s, 2H), 3.91-4.00 (m, 4H), 3.79 (d, 2H), 3.09-3.18 (m, 5H), 3.03 (s, 2H). LCMS (postupak C) : RT= 0.66 min, m/z = 526 [M+H]+ .
Primer 65: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(metoksimetil)-4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0365]
[0366] (R)-3-(2,6-Dihlorofenil)-7-((4-(3-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (46 mg, 0.087 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (28 mg, 7.62 (m, 4H), 7.42 (dd, 1H), 6.97 (d, 2H), 4.96 (s, 2H), 3.54-3.62 (m, 2H), 3.44-3.54 (m, 2H), 3.38 (s, 3H), 3.16 (s, 3H), 2.93 (dt, 1H), 2.84 (td, 1H), 2.67 (dd, 1H), 2.41-2.55 (m, 2H), 2.39 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.78 min, m/z = 542 [M+H]+ .
Primer 66: (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(metoksimetil)-4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0367]
[0368] (S)-3-(2,6-Dihlorofenil)-7-((4-(3-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (41 mg, 0.078 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (28 mg, 7.62 (m, 4H), 7.42 (dd, 1H), 6.97 (d, 2H), 4.96 (s, 2H), 3.54-3.62 (m, 2H), 3.44-3.54 (m, 2H), 3.37 (s, 3H), 3.15 (s, 3H), 2.92 (dt, 1H), 2.84 (td, 1H), 2.67 (dd, 1H), 2.40-2.55 (m, 2H), 2.38 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.78 min, m/z = 542 [M+H]+ .
Primer 67: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3,4-dimetilpiperazin-1-il)-3-(metoksimetil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0369]
[0370] (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(metoksimetil)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (40 mg, 0.074 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (33 mg, 7.90 (br s, 1H), 7.52-7.60 (m, 3H), 7.42 (dd, 1H), 7.12 (d, 1H), 4.98 (s, 2H), 4.55 (s, 2H), 3.42 (s, 3H), 3.19 (s, 3H), 2.86-3.04 (m, 4H), 2.48-2.62 (m, 2H), 2.33-2.47 (m, 4H), 1.13 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.83 min, m/z = 556 [M+H]+ .
Primer 68: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(4-metil-3-(trifluorometil)piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0371]
[0372] 3-(2,6-Dihlorofenil)-l-metil-7-((4-(3-(trifluorometil)piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (57 mg, 0.103 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (17 mg, 7.62 (m, 4H), 7.43 (dd, 1H), 6.99 (d, 2H), 5.01 (s, 2H), 3.58 (d, 1H), 3.33-3.42 (m, 1H), 3.19 (s, 3H), 3.08-3.17 (m, 1H), 2.97-3.09 (m, 3H), 2.61-2.71 (m, 1H), 2.53 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.46 min, m/z = 566 [M+H]+ .
Primer 69: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(metoksimetil)-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0373]
[0374] 3-(2,6-Dihlorofenil)-7-((3-(metoksimetil)-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (55 mg, 0.104 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (29 mg,
8.46 (s, 1H), 7.95 (br s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.60 (dd, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.06 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.45 (s, 2H), 3.34 (s, 3H), 3.12 (s, 3H), 2.84 (t, 4H), 2.54 (br s, 4H), 2.29 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.81 min, m/z = 542 [M+H]+ .
Primer 70: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((6,7,8,9-tetrahidro-5H-5,8-epiminobenzo[7]anulen-3-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0375]
Korak 1: terc-butil 3-amino-6,7,8,9-tetrahidro-5H-5,8-epiminobenzo[7]anulen-10-karboksilat:
[0376] Rastvor 67,8,9-tetrahidro-5H-5,8-epiminobenzo[7]anulen-3-amina (WO 2008051547, 0.11 g, 0.631 mmol), di-terc-butil dikarbonata (0.138 g, 0.631 mmol) i trietilamina (0.128 g,1.26 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi preko noći, zatim koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen pomoću Biotage hromatografije da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.137g, 79 %). LCMS (postupak A): RT= 1.01 min, m/z = 275 [M+H]+
Korak 2 : 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((6,7,8,9-tetrahidro-5H-5,8-epiminobenzo[7]anulen-3-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0377] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (177 mg,0.498 mmol) je reagovao sa terc-butil 3-amino-6,7,8,9-tetrahidro-5H-5,8-epiminobenzo[7]anulen-10-karboksilatom (130 mg,0.474 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (58 mg, 25 %).1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.77 (brs, 1H), 7.44 (d, 2H), 7.36 (m, 2H), 7.28 (m, 1H), 7.02 (m, 1H), 4.90 (s, 2H), 4.20 (m, 1H), 3.91 (m, 1H), 3.18 (s, 3H), 3.10 (m, 1H), 2.55 (m, 1H), 2.11 (m, 2H), 1.92 (m, 1H), 1.62 (m, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.79 min, m/z = 481 [M+H]+ .
Primer 71: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(9-metil-3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-7-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0378]
[0379] 7-((4-(3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-7-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (30 mg, 0.057 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (13 mg, 8.43 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.59 (br s, 2H), 7.47 (t, 1H), 6.80 (d, 2H), 4.94 (s, 2H), 3.84 (d, 2H), 3.74 (d, 2H), 3.41 (d, 2H), 3.20 (dd, 2H), 3.08 (s, 3H), 2.76 (br s, 2H), 2.46 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.69 min, m/z = 540 [M+H]+ .
Primer 72: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4-etilpiperazin-1-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0380]
Korak 1: 2-(4-etilpiperazin-l-il)-5-nitrobenzaldehid:
[0381] Suspenzija 2-fluoro-5-nitrobenzaldehida (3 g, 17.74 mmol), 1-etilpiperazina (2.026 g, 17.74 mmol) i kalijum karbonata (3.68 g, 26.6 mmol) u anhidrovanom DMF (15 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota preko noći. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (70 mL) i mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Istaložena čvrsta supstanca je izolovana filtracijom, isprana vodom, sušena usisavanjem i sušena zamrzavanjem preko noći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (4.38 g, 94%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 8.62 (d, 1H), 8.30 (dd, 1H), 7.09 (d, 1H), 3.35 (t, 4H), 2.68 (t, 4H), 2.52 (q, 2H), 1.14 (t, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.38 min, m/z = 264 [M+H]+ .
Korak 2: (2-(4-etilpiperazin-l-il)-5-nitrofenil)metanol:
[0382] Rastvor 2-(4-etilpiperazin-1-il)-5-nitrobenzaldehida (4.38 g, 16.64 mmol) u anhidrovanom THF (30.8 mL) je hlađen do 0°C, a zatim je u porcijama dodavan natrijum borohidrid (0.629 g, 16.64 mmol). Reakciona smeša je mešana na 0°C u trajanju od 90 minuta. Reakciona smeša je ugašena vodom (50 mL) i ekstrahovana u dihlorometan (3 x 30 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane, koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom i prečišćene pomoću Biotage hromatografije (silika 100g kertridž, eluiranje gradijentom dihlorometana:metanola od 100:0 do 85:15) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (1.70 g, 39%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.26 (d, 1H), 8.12 (dd, 1H), 7.14 (d, 1H), 4.79 (s, 2H), 3.61 (br s, 1H), 3.08 (t, 4H), 2.64 (br s, 4H), 2.50 (q, 2H), 1.12 (t, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.37 min, m/z = 266 [M+H]+ .
Korak 3: (5-amino-2-(4-etilpiperazin-1-il)fenil)metanol:
[0383] Rastvor (2-(4-etilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil)metanola (1.70 g, 6.41 mmol) u metanolu (100 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž za srazmerno povećanje, kompletan H2, 40°C, 1 mL/min) sa dva prolaza. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca 6.66 (d, 1H), 6.39 (dd, 1H), 4.96 (t, 1H), 4.76 (br s, 2H), 4.45 (d, 2H), 2.70 (t, 4H), 2.44 (br s, 4H), 2.35 (q, 2H), 1.01 (t, 3H). LCMS (postupak C): R
T= 0.21 min, m/z = 236 [M+H] .
Korak 4: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4-etilpiperazin-1-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0384] 3-(2,6-Dihlorofenil)-l-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa (5-amino-2-(4-etilpiperazin-1-il)fenil)metanolom (67 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (24 mg, 16%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.46 (s, 1H), 7.99 (br s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.56 (dd, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.01 (d, 1H), 5.06 (t, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.54 (d, 2H), 3.11 (s, 3H), 2.81 (t, 4H), 2.50 (t, 4H), 2.38 (q, 2H), 1.02 (t, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.71 min, m/z = 542 [M+H]+ .
Primer 73: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-morfolinofenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0385]
[0386] Rastvor mCPBA, čistoće 50% (117 mg, 0.338 mmol) u dihlorometanu (0.400 mL) je propušten kroz fazni separator i ispran sa dodatnim dihlorometanom (0.400 mL). Ovaj rastvor je dodat u mešajuću suspenziju 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-ona (100 mg, 0.281 mmol) u anhidrovanom toluenu (2 mL) i smeša je mešana u trajanju od 30 minuta. Dodati su Hunig-ova baza (0.147 mL, 0.844 mmol), a zatim (5-amino-2-morfolinofenil)metanol (58.6 mg, 0.281 mmol) i smeša je zagrevana do 75°C u trajanju od 30 min. Dodat je DMF (0.5 mL) i zagrevanje je nastavljeno u trajanju od 16 časova. Posle hlađenja reakciona smeša je prečišćena direktno pomoću „flash“ hromatografije (0-100%, etil acetat u cikloheksanu, KP-NH kolona). Ostatak je rastvoren u metanolu (1 mL) i vodi (8 mL), zatim osušen zamrzavanjem. Ostatak je mešan u dietil etru (2 mL) u trajanju od 20 min. Dietil etar je uklonjen odlivanjem, zatim je čvrsta supstanca sušena in vacuo na 50°C. Čvrsta supstanca je rastvorena u metanolu (0.5 mL) i vodi (1.5 mL), zatim sušena zamrzavanjem da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (40.8mg, 28.1 %).<1>H NMR (400
8.46 (s, 1H), 8.00 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.58 (dd, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.03 (d, 1H), 5.06 (t, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.56 (d, 2H), 3.71 (t, 4H), 3.12 (s, 3H), 2.80 (t, 4H). LCMS (postupak C): RT= 1.08 min, m/z = 515 [M+H]+ .
Primer 74: 7-((4-(3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)fenil) amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0387]
Korak 1: terc-butil 3-(4-nitrofenil)-3,8-diazabiciklo [3.2.1] oktan-8-karboksilat:
[0388] Suspenzija 1-fluoro-4-nitrobenzena (0.266 g, 1.884 mmol), terc-butil 3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilata (0.4 g, 1.884 mmol) i kalijum karbonata (0.39 g, 2.83 mmol) u anhidrovanom DMF (5 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, podeljena između vode (50 mL) i etil acetata (50 ml). Etil acetat je odvojen i ispran vodom (3 x 20 ml), sušen (anhidrovani natrijum sulfat), filtriran i redukovan in vacuo. Ostatak je prečišćen pomoću „flash“ hromatografije (0-100% etil acetat u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.62 g, 100 %). LCMS (postupak A): RT= 1.61 min, m/z = 334 [M+H]+ .
Korak 2 : terc-butil 3-(4-aminofenil)-3,8-diazabiciklo [3.2.1] oktan-8-karboksilat:
[0389] Rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-(4-nitrofenil) piperazin-1-karboksilata (250 mg, 0.75 mmol) u metanolu (10 ml) je propušten kroz H-Cube aparat opremljen sa 10% PD-C kertridžom uz praćenje podešavanja [1.0 ml/min protok, 40°C, režim kompletnog H2)]. Rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja (230 mg, 100 %). LCMS (postupak C): RT= 0.84 min, m/z = 304 [M+H]+ .
Korak 3: 7-((4-(3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)fenil) amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0390] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (250 mg, 0.704 mmol) je reagovao sa terc-butil 3-(4-aminofenil)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilatom (203 mg,0.67 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (168 mg, 41%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.65 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.56 (m, 2H), 7.47 (m, 1H), 6.76 (d, 2H), 4.91 (s, 2H), 3.48 (m, 2H), 3.31 (m, 1H), 3.08 (s, 3H), 2.70 (m, 2H), 2.33 (m, 1H), 1.69 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.77 min, m/z = 510 [M+H]+ .
Primer 75: 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metilfenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0391]
Korak 1: (1S,4S)-terc-butil 5-(2-metil-4-nitrofenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat:
[0392] Suspenzija 2-fluoro-5-nitrotoluena (1.565 g, 10.09 mmol), (1S,4S)-terc-butil 2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (2.00 g, 10.09 mmol) i kalijum karbonata (2.091 g, 15.13 mmol) u anhidrovanom DMF (8 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota u trajanju od 2 dana, zatim na 100°C u trajanju od 3 dana. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana u etil acetat (3 x 30 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Biotage hromatografije (silika 100g kertridž, eluiranjem sa gradijentom cikloheksana:etil acetata od 90:10 do 0:100) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (1.87 g, 56%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): 7.92-8.02 (m, 2H), 6.60 (dd, 1H), 4.56 (d, 1H), 4.44 (s, 1H), 3.83 (d, 1H), 3.62 (dd, 1H), 3.47 (t, 1H), 3.32 (dd, 1H), 2.36 (s, 3H), 1.86-2.06 (m, 2H), 1.38-1.49 (m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.69 min, m/z = 334 [M+H]+ .
Korak 2: (1S,4S)-terc-butil 5-(4-amino-2-metilfenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat:
[0393] Rastvor (1S,4S)-terc-butil 5-(2-metil-4-nitrofenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (1.87 g, 5.61 mmol) u THF (140 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž za srazmerno povećanje, kompletan H2, 40°C, 1 mL/min) sa tri prolaza. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom, suspendovana u dietil etru (25 mL), filtrirana i sušena usisavanjem da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žutomrka čvrsta supstanca (1.21 g, 71%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 6.71 (dd, 1H), 6.55 (s, 1H), 6.48 (d, 1H), 4.46 (d, 1H), 3.91 (s, 1H), 3.54 (dd, 1H), 3.19-3.47 (m, 5H), 2.21 (s, 3H), 1.96 (t, 1H), 1.82 (t, 1H), 1.42-1.52 (m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 0.81 min, m/z = 304 [M+H]+ .
Korak 3: (1S,4S)-terc-butil 5-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-metilfenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat:
[0394] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa (1S,4S)-terc-butil 5-(4-amino-2-metilfenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilatom (86 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (109 mg, 63%).
7.73 (br s, 1H), 7.43 (d, 2H), 7.32-7.42 (m, 2H), 7.27 (dd, 1H), 6.79 (dd, 1H), 4.86 (s, 2H), 4.50 (d, 1H), 4.10 (br s, 1H), 3.61 (dd, 1H), 3.19-3.50 (m, 3H), 3.16 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.75-2.01 (m, 2H), 1.41-1.50 (m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.65 min, m/z = 610 [M+H]+ .
Korak 4: 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metilfenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0395] (1S,4S)-terc-Butil 5-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-metilfenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (109 mg, 0.179 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (76 mg, 83%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 59.63 (br s, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.39-7.53 (br m, 3H), 6.75 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 3.98 (s, 1H), 3.54 (s, 1H), 3.41 (dd, 1H), 3.09 (s, 3H), 3.04 (d, 1H), 2.95 (d, 1H), 2.84 (dd, 1H), 2.18 (s, 3H), 1.75 (d, 1H), 1.58 (d, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.78 min, m/z = 510 [M+H]+ .
Primer 76: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((2’-metil-2’,3’-dihidro-1’H-spiro[ciklopropan-1,4’-izohinolin]-7’-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0396]
Korak 1: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((2’-metil-2’,3’-dihidro-1’H-spiro[ciklopropan-1,4’-izohinolin]-7’-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0397] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa 2’-metil-2’,3’-dihidro-1’H-spiro[ciklopropan-1,4’-izohinolin]-7’-amin dihidrohloridnom soli [WO 2009/151997] (74 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (8 mg, 6%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.47 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 2.43-7.56 (br m, 3H), 6.65 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.55 (s, 2H), 3.10 (s, 3H), 2.43 (s, 2H), 2.30 (s, 3H), 0.85 (dt, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.84 min, m/z = 495 [M+H]+ .
Primer 77: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-((1S,4S)-5-metil-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0399] 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metilfenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (41 mg, 0.080 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (30 mg, 71%).<1>H NMR (400 MHz, MeOH-d4): δ 1H), 7.56 (d, 2H), 7.35-7.48 (m, 3H), 6.86 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.03 (s, 1H), 3.52 (s, 1H), 3.40 (d, 1H), 3.28 (dd, 1H), 3.17 (s, 3H), 3.01 (d, 1H), 2.85 (dd, 1H), 2.45 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.98 (d, 1H), 1.91 (d, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.80 min, m/z = 524 [M+H]+ .
Primer 78: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-d3-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0400]
Korak 1 : N-(2,6-dihlorofenil)-4-(d3-metilamino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid:
[0401] 4-hloro-N-(2,6-dihlorofenil)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid (3.1 g, 8.89 mmol) je suspendovan u anhidrovanom metanolu (30 mL). Dodati su metil-d3-amin hidrohlorid (0.627 g, 8.89 mmol) i Hunig-ova baza (4.66 mL, 26.7 mmol). Smeša je podeljena između dve mikrotalasne bočice koje su hermetički zatvorene i zagrevane do 50°C u trajanju od po 1 časa. Spojena smeša je podeljena između vode (25 mL) i dihlorometana (50 mL). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan sa dihlorometanom (2 x 50 mL). Spojene frakcije sa dihlorometanom su sušene (fazni separator) i redukovane in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja (3.31 g, 108 %).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) : δ (s, 1H), 8.45 (br s, 1H), 7.50 (br s, 1H), 7.42 (d, 2H), 7.22 (dd, 1H), 2.56 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.43 min, m/z = 346 [M+H]+ .
Korak 2: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-d3-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0402] N-(2,6-Dihlorofenil)-4-(d3-metilamino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid (3.31 g, 8.89 mmol) je suspendovan u anhidrovanom acetonitrilu (70 mL) u Schlenk epruveti. Dodat je cezijum karbonat (11.59 g, 35.6 mmol), a zatim dijodometan (1.434 mL, 17.78 mmol). Epruveta je hermetički zatvorena i smeša je zagrevana do 80°C uz mešanje u trajanju od 40 časova. Dodato je još dijodometana (1.434 mL, 17.78 mmol) i zagrevanje je nastavljeno u trajanju od 48 časova. Rastvarač je uklonjen in vacuo. Ostatak je podeljen između vode (50 mL) i dihlorometana (100 mL). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan sa dihlorometanom (2 x 25 mL). Spojene frakcije sa dihlorometanom su sušene (fazni separator) i redukovane in vacuo. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 0-50% etil acetata u cikloheksanu). Dobijeni ostatak je prečišćen dalje hromatografijom na silika gelu (izokratski 25% etil acetat u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (779 mg, 24.5
7.45 (d, 2H), 7.30 (dd, 1H), 4.91 (s, 2H), 2.57 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.44 min, m/z [M+H]+ .
Korak 3 : (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-d3-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0403] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100mg, 0.279 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilatom (81 mg, 0.279 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (84.4 mg, 96 %). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ s, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.60 (br d, 2H), 7.48 (t, 1H), 6.88 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 3.44 (t, 2H), 2.93 (d, 1H), 2.71-2.84 (m, 2H), 2.23 (br s, 1H), 2.14 (t, 1H), 1.01 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.78 min, m/z = 501 [M+H]+ .
Primer 79: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((2R,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0404]
Korak 1: (2R,5R)-terc-butil 2,5-dimetil-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0405] Suspenzija 1-fluoro-4-nitrobenzena (329 mg, 2.333 mmol), (2R,5R)-terc-butil 2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (500 mg, 2.333 mmol) i kalijum karbonata (484 mg, 3.50 mmol) u anhidrovanom DMF (2 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota u trajanju od 7 dana. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (70 mL) i mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Smeša je ekstrahovana u etil acetatu (3 x 20 mL), sušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću dva uzastopne Biotage hromatografske kolone (silika 100g kertridž, eluiranje sa gradijentom cikloheksana:etil acetata od 90:10 do 50:50) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (200 mg, 26%).<1>H NMR (400 MHz,
6.66 (d, 2H), 3.93-4.21 (m, 3H), 3.79 (dd, 1H), 3.08 (dd, 1H), 2.90 (dd, 1H), 1.41 (s, 9H), 1.20 (dd, 6H). LCMS (postupak C) : RT= 1.74 min, m/z = 336 [M+H]+ .
Korak 2: (2R,5R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat:
[0406] Rastvor (2R,5R)-terc-butil 2,5-dimetil-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilata (0.20 g, 0.596 mmol) u metanolu (20 mL) je hidrogenizovana pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, kompletan H2, 50°C, 1 mL/min). Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao siva čvrsta supstanca (150 mg, 82%).<1>H .54 (d, 2H), 5.49 (br s, 2H), 4.08 (br s, 1H), 3.74 (dd, 1H), 2.92 (dd, 1H), 2.75-2.87 (m, 1H), 2.63-2.75 (m, 2H), 1.40 (s, 9H), 1.22 (d, 3H), 0.79 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.84 min, m/z = 306 [M+H]+ .
Korak 3: (2R,5R)-terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat:
[0407] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa (2R,5R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilatom (86 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (105 mg, 61%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.64 (br s, 1H), 7.53 (d, 2H), 7.43 (d, 2H), 7.28 (dd, 1H), 6.98 (d, 2H), 4.87 (s, 2H), 4.20 (br s, 1H), 3.93 (d, 1H), 3.08-3.23 (m, 5H), 2.89 (dd, 1H), 2.83 (dd, 1H), 1.46 (s, 9H), 1.30 (d, 3H), 0.97 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.76 min, m/z = 612 [M+H]+ .
Korak 4: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((2R,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0408] (2R,5R)-terc-Butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (105 mg, 0.171 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (50 mg, 57%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-8.43 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.58 (br s, 2H), 7.47 (dd, 1H), 6.82 (d, 2H), 4.94 (s, 2H), 3.84-3.94 (m, 1H), 3.14 (dd, 1H), 3.08 (s, 3H), 2.97 (dd, 1H), 2.79 (d, 1H), 2.67-2.77 (m, 1H), 2.40 (t, 1H), 1.06 (d, 3H), 0.96 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.77 min, m/z = 512 [M+H]+ .
Primer 80: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0409]
Korak 1: (2R,5S)-terc-butil 2,5-dimetil-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0410] Suspenzija 1-fluoro-4-nitrobenzena (329 mg, 2.333 mmol), (2R,5S)-terc-butil 2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (500 mg, 2.333 mmol) i kalijum karbonata (484 mg, 3.50 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (3 mL) je zagrevana do 100°C pod atmosferom azota u trajanju od 11 dana. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (30 mL) i ekstrahovana u etil acetat (3 x 10 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Biotage hromatografije (silika 50g kertridž, eluiranje gradijentom cikloheksana:etil acetata od 95:5 do 60:40) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (530 mg,
4.42 (br d, 1H), 4.00-4.19 (m, 1H), 3.84 (dd, 1H), 3.29-3.50 (m, 3H), 1.24 (d, 3H), 1.49 (s, 9H), 1.19 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.80 min, m/z = 336 [M+H]+ .
Korak 2: (2R,5S)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat:
[0411] Rastvor (2R,5S)-terc-butil 2,5-dimetil-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilata (0.53 g, 1.580 mmol) u metanolu (50 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, kompletan H2, 50°C, 1 mL/min). Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao siva čvrsta supstanca (480 mg, 99%).<1>H 4.39 (br s, 1H), 3.70-3.82 (m, 2H), 3.42 (dd, 1H), 3.39 (br s, 2H), 3.22 (dd, 1H), 2.85 (dd, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.26 (d, 3H), 0.93 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.90 min, m/z = 306 [M+H]+ .
Korak 3: (2R,5S)-terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat:
[0412] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa (2R,5S)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilatom (86 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (133 mg, 77%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 8.13 (br s, 1H), 7.50 (d, 2H), 7.42 (d, 2H), 7.26 (dd, 1H), 6.84 (d, 2H), 4.86 (s, 2H), 4.41 (br s, 1H), 3.92 (br s, 1H), 3.79 (d, 1H), 3.42 (dd, 1H), 3.27 (dd, 1H), 3.15 (s, 3H), 3.05 (d, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.27 (d, 3H), 1.02 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.78 min, m/z = 612 [M+H]+ .
Korak 4: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0413] (2R,5S)-terc-Butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (133 mg, 0.217 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (79 mg, 71%).<1>H NMR (400 MHz,
(br s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.68 (d, 2H), 7.64 (d, 2H), 7.48 (dd, 1H), 7.03 (d, 2H), 4.96 (s, 2H), 3.10 (s, 3H), 2.80-3.00 (m, 4H), 2.45 (dd, 1H), 2.33 (dd, 1H), 0.95 (d, 3H), 0.80 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.80 min, m/z = 512 [M+H]+ .
Primer 81: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-3-fluorofenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0414]
Korak 1: (2S,5R)-terc-butil 4-(2-fluoro-4-nitrofenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat:
[0415] Suspenzija 1,2-difluoro-4-nitrobenzena (371 mg, 2.333 mmol), (2S,5R)-terc-butil 2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (500 mg, 2.333 mmol) i kalijum karbonata (484 mg, 3.50 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (3 mL) je zagrevana do 100°C pod atmosferom azota u trajanju od 8 dana. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (20 mL) i ekstrahovan u etil acetat (3 x 10 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Biotage hromatografije (silika 100g kertridž, eluiranje gradijentom cikloheksana:etil acetata od 95:5 do 60:40) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (800 mg, 7.90 (dd, 1H), 6.84 (t, 1H), 4.42 (br s, 1H), 4.00 (br s, 1H), 3.76 (d, 1H), 3.54 (dd, 1H), 3.46 (d, 1H), 3.16 (d, 1H), 1.49 (s, 9H), 1.28 (d, 3H), 1.15 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.92 min, m/z = 376 [M+Na]+ .
Korak 2: (2S,5R)-terc-butil 4-(4-amino-2-fluorofenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat:
[0416] Rastvor (2S,5R)-terc-butil 4-(2-fluoro-4-nitrofenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilata (800 mg, 2.264 mmol) u metanolu (80 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, kompletan H2, 50°C, 1 mL/min). Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao siva čvrsta supstanca (623 mg, 85%). 1H NMR (300 MHz, CDCl3) δ -6.71 (m, 1H), 6.34-6.45 (m, 2H), 4.37 (quin, 1H), 3.69 (d, 1H), 3.34-3.61 (m, 5H), 2.58 (dd, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.29 (d, 3H), 0.91 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.37 min, m/z = 324 [M+H]+ .
Korak 3: (2S,5R)-terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-fluorofenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat:
[0417] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa (2S,5R)-terc-butil 4-(4-amino-2-fluorofenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilatom (91 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (86 mg, 48%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1H), 7.93 (br s, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.43 (d, 2H), 7.28 (dd, 1H), 7.09 (dd, 1H), 6.80 (t, 1H), 4.89 (s, 2H), 4.40 (br s, 1H), 3.65-3.79 (m, 2H), 3.47 (ddd, 2H), 3.18 (s, 3H), 2.73 (d, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.30 (d, 3H), 0.98 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.98 min, m/z = 630 [M+H]+ .
Korak 4: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-3-fluorofenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0418] (2S,5R)-terc-Butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-fluorofenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (105 mg, 0.167 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (31 mg, 35%).<1>H NMR (400
8.50 (s, 1H), 7.75 (dd, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.43-7.53 (m, 2H), 7.18 (t, 1H), 4.99 (s, 2H), 3.12 (s, 3H), 2.80-2.99 (m, 4H), 2.46 (dd, 1H), 2.36 (t, 1H), 0.94 (d, 3H), 0.78 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.90 min, m/z = 530 [M+H]+ .
Primer 82: 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metoksifenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0419]
Korak 1: (1S,4S)-terc-butil 5-(2-metoksi-4-nitrofenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat:
[0420] Suspenzija 1-fluoro-2-metoksi-4-nitrobenzena (2.59 g, 15.13 mmol), (1S,4S)-terc-butil 2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (3.00 g, 15.13 mmol) i kalijum karbonata (3.14 g, 22.7 mmol) u anhidrovanom DMF (40 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota u trajanju od 24 časa. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (120 mL) i mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Istaložena čvrsta supstanca je izolovana filtracijom i sušena pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (4.49 g, 85%). LCMS (postupak C): RT= 1.44 min, m/z = 294 [M-tBu+H]+ .
Korak 2: (1S,4S)-terc-butil 5-(4-amino-2-metoksifenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat:
[0421] Suspenzija terc-butil 4-(2-metoksi-4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilata (3.15 g, 9.34 mmol), gvožđa u prahu (3.13 g, 56.0 mmol) i amonijum hlorida (4.50 g, 84 mmol) u smeši metanola (38.6 mL) i vode (8.12 mL) je zagrevana do refluksa pod atmosferom azota u trajanju od 1 časa. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature i filtrirana kroz Celite®. Filtrati su razblaženi sa etil acetatom i isprani zasićenim natrijum bikarbonatom (x3). Spojene organske materije su sušene (Na2SO4) i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je razblažen etil acetatom i čvrsta supstanca sakupljena filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao roze čvrsta supstanca (2.78 g, 68%). LCMS (postupak C): RT= 0.71 min, m/z = 320 [M+H]+ .
Korak 3: (1S,4S)-terc-butil 5-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-metoksifenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat:
[0422] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa (1S,4S)-terc-butil 5-(4-amino-2-metoksifenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilatom (90 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (88 mg, 50%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.75 (br s, 1H), 7.43 (d, 2H), 7.23-7.35 (m, 2H), 7.00 (dd, 1H), 6.61 (d, 1H), 4.87 (s, 2H), 4.48 (d, 1H), 4.40 (s, 1H), 3.83 (s, 3H), 3.71 (dd, 1H), 3.61 (dd, 1H), 3.30 (t, 1H), 3.26 (dd, 1H), 3.17 (s, 3H), 1.96 (d, 1H), 1.84 (dd, 1H), 1.43 (d, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.53 min, m/z = 626 [M+H]+ .
Korak 4: 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metoksifenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0423] (1S,4S)-terc-Butil 5-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-metoksifenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (88 mg, 0.140 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (36 mg, 49%).<1>H NMR (400 MHz,
8.44 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.57 (br s, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.11 (dd, 1H), 6.55 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.20 (s, 1H), 3.73 (s, 3H), 3.59 (dd, 1H), 3.48 (s, 1H), 3.11 (s, 3H), 2.99 (d, 1H), 2.88 (d, 1H), 2.81 (dd, 1H), 1.70 (d, 1H), 1.55 (d, 1H). LCMS (postupak C): R
T= 0.77 min, m/z = 526 [M+H] .
Primer 83: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((3R,5S)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0424]
Korak 1 : (3S,5R)-3,5-dimetil-1-(4-nitrofenil)piperazin:
[0425] U mešanu suspenziju 1-fluoro-4-nitrobenzena (562 mg, 3.98 mmol) i kalijum karbonata (688 mg, 4.98 mmol) u anhidrovanom DMSO (2 mL) dodat je (2S,6R)-2,6-dimetilpiperazin (500 mg, 4.38 mmol) i smeša je zagrevana na 100°C u trajanju od 16 časova. Posle hlađenja smeša je suspendovana u vodi (40 mL) i filtrirana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (889 mg, 95%). 1H NMR (500 MHz, DMSO-d
6): δ
2H), 7.03 (d, 2H), 3.88 (dd, 2H), 2.75-2.79 (m, 2H), 2.37-2.42 (m, 2H), 2.28 (br s, 1H), 1.03 (d, 6H). LCMS (postupak C): RT= 0.51 min, m/z = 236 [M+H]+ .
Korak 2: 4-((3S,5R)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)anilin:
[0426] Mešani rastvor (3S,5R)-3,5-dimetil-1-(4-nitrofenil)piperazina (888.8mg, 3.78 mmol) u etanolu (15 mL) je zagrevan do 50°C. Dodat je Pd/C (201 mg, 0.189 mmol), a zatim je u porcijama dodavan amonijum format (1191 mg, 18.89 mmol) i suspenzija je mešana u trajanju od 10 min. Suspenzija je filtrirana ispiranjem svežim etanolom (6 mL). Etanol je uklonjen in vacuo. Ostatak je podeljen između dihlorometana (15 mL) i vode (10 mL). Vodena faza je odvojena i ekstrahovana sa dihlorometanom (2 x 5 mL). Spojene frakcije sa dihlorometanom su sušene (fazni separator) i redukovane in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (111 mg,
4.49 (br s, 2H), 3.18 (dd, 2H), 2.81-2.84 (m, 2H), 1.82-2.10 (m, 1H), 1.96 (t, 2H), 0.98 (d, 6H). LCMS (postupak C): RT= 0.12 min, m/z = 206 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((3R,5S)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0427] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa 4-((3R,5S)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)anilinom (58 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (44 mg, 30%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.44 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.60 (br d, 2H), 7.47 (dd, 1H), 6.88 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 3.45 (dd, 2H), 3.08 (s, 3H), 2.77-2.90 (m, 2H), 2.00-2.13 (m, 3H), 1.01 (d, 6H). LCMS (postupak C): RT= 0.76 min, m/z = 512 [M+H]+ .
Primer 84: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-metoksi-4-((1S,4S)-5-metil-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0428]
[0429] 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metoksifenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (21 mg, 0.040 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (9 mg, 42%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.44 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.58 (br s, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.12 (dd, 1H), 6.55 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.17 (s, 1H), 3.74 (s, 3H), 3.41 (dd, 1H), 3.28 (s, 1H), 3.05-3.17 (m, 4H), 2.71 (dd, 1H), 2.63 (d, 1H), 2.24 (s, 3H), 1.76 (d, 1H), 1.66 (d, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.78 min, m/z = 540 [M+H]+ .
Primer 85: (R)-1-ciklopropil-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0430]
Korak 1 : 4-(ciklopropilamino)-N-(2,6-dihlorofenil)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid:
[0431] U suspenziju 4-hloro-N-(2,6-dihlorofenil)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamida (2 g, 5.74 mmol) u tetrahidrofuranu (20 mL) na 0°C sipana je Hunig-ova baza (2.004 mL, 11.47 mmol), a zatim ciklopropanamin (0.437 mL, 6.31 mmol). Reakcija je mešana na ovoj temperaturi u trajanju od 15 min i na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 min. Reakciona smeša je razblažena vodom i etil acetatom i slojevi su odvojeni, vodeni sloj je zatim ekstrahovan još dva puta sa etil acetatom i spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni (anhidrovani magnezijum sulfat), filtrirani i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.2 g) kao bela čvrsta supstanca. LCMS (postupak C) RT= 1.65 min, m/z = 369 [M+H]+ .
Korak 2: 1-ciklopropil-3-(2,6-dihlorofenil)-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0432] 4-(ciklopropilamino)-N-(2,6-dihlorofenil)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid (2.2 g, 5.96 mmol) je suspendovan u anhidrovanom acetonitrilu (25 mL) u Schlenk epruveti. Dodat je cezijum karbonat (11.65 g, 35.7 mmol), a zatim dibromometan (1.254 mL, 17.87 mmol). Epruveta je hermetički zatvorena i smeša je zagrevana do 80°C uz mešanje u trajanju od 40 časova. Rastvarač je uklonjen in vacuo. Ostatak je podeljen između vode (50 mL) i dihlorometana (100 mL). Vodena faza je odvojena i ekstrahovana sa dihlorometanom (2 x 25 mL). Spojene frakcije sa dihlorometanom su sušene (fazni separator) i redukovane in vacuo. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 0-40% etil acetata u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.22 g, 53.7%).
LCMS (postupak C): RT= 1.63 min, m/z = 381 [M+H]+ .
Korak 3: (R)-1-ciklopropil-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0433] 1-ciklopropil-3-(2,6-dihlorofenil)-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.262 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilatom (76 mg, 0.262 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (47.2 mg, 47.5 %). 1H NMR (400 MHz, MeOH-d4): δ 8.56 (s, 1H), 7.64-7.90 (m, 2H), 7.57 (d, 2H), 7.43 (dd, 1H), 7.00 (d, 2H), 4.99 (s, 2H), 3.52 (t, 2H), 3.09 (dt, 1H), 2.91-.3.04 (m, 2H), 2.63-2.77 (m, 2H), 2.34 (t, 1H), 1.17 (d, 3H), 1.02 (q, 2H), 0.83-0.89 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.88 min, m/z = 524 [M+H]+ .
Primer 86: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(8-metil-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0434]
Korak 1 : terc-butil 3-(2-formil-4-nitrofenil)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilat:
[0435] Suspenzija 2-fluoro-5-nitrobenzaldehida (0.358 g, 2.120 mmol) terc-butil 3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilata (0.45 g, 2.120 mmol) i kalijum karbonata (0.439 g, 3.18 mmol) u anhidrovanom DMF (2 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, podeljena između vode (50 mL) i etil acetata (50 mL). Etil acetat je odvojen i ispran vodom (3 x 20 mL), sušen (anhidrovani natrijum sulfat), filtriran i redukovan in vacuo. Ostatak je prečišćen pomoću „flash“ hromatografije (0-100% etil acetat u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (360 mg, 0.996 mmol). LCMS (postupak C): RT= 1.69 min, m/z = 384 [M+Na]+ .
Korak 2: terc-butil 3-(2-(hidroksimetil)-4-nitrofenil)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilat:
[0436] U mešajući rastvor terc-butil 3-(2-formil-4-nitrofenil)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilata (360 mg, 0.996 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuran (4 mL) na 0°C dodat je natrijum borohidrid (41.5 mg, 1.096 mmol). Mešanje je nastavljeno u trajanju od 3 časa. Smeša je redukovana in vacuo. Ostatak je podeljen između vode (20 mL) i dihlorometana (10 mL). Vodena faza je odvojena i ekstrahovana sa dihlorometanom (3 x 5 mL). Spojene frakcije sa dihlorometanom su sušene (fazni separator), filtrirane i redukovane in vacuo. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 0-50% etil acetata u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (343 mg, 95 %). 1H NMR (400 MHz,
8.12 (dd, 1H), 7.13 (d, 1H), 4.82 (d, 2H), 4.20-4.47 (m, 2H), 2.90-3.22 (m, 4H), 2.60 (t, 1H), 1.98-2.04 (m, 4H), 1.49 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.56 min, m/z = 364 [M+H]+ .
Korak 3: terc-butil 3-(4-amino-2-(hidroksimetil)fenil)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilat:
[0437] Rastvor terc-butil 3-(2-(hidroksimetil)-4-nitrofenil)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilata (335 mg, 0.922 mmol) u metanolu (10 mL) i tetrahidrofuranu (2.000 mL) je propušten kroz H-Cube aparat opremljen sa 10% Pd-C kertridžom uz praćenje podešavanja [1.0 ml/min protok, 40°C, režim kompletnog H2)]. Rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja (295.6 mg, 96 %).
6.67 (d, 1H), 6.38 (dd, 1H), 4.86 (t, 1H), 4.81 (br s, 2H), 4.04-4.13 (m, 2H), 4.53 (d, 2H), 2.75 (d, 2H), 2.59 (d, 2H), 1.93 (d, 2H), 1.72-1.84 (m, 2H), 1.43 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 0.84 min, m/z = 334 [M+H]+ .
Korak 4: 7-((4-(3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0438] 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100mg, 0.281 mmol) je reagovao sa terc-butil 3-(4-amino-2-(hidroksimetil)fenil)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilatom (94 mg, 0.281 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (81.3 mg, 88 %).1H NMR (400 MHz, CDCl3):
7.60 (m, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.44 (d, 2H), 7.28 (dd, 1H), 7.25 (d, 1H), 4.89 (s, 2H), 4.80 (s, 2H), 3.55-3.60 (m, 2H), 3.19 (s, 3H), 3.02 (d, 2H), 2.86 (dd, 2H), 1.99-2.08 (m, 2H), 1.83-1.89 (m, 2H). LCMS (postupak C) RT= 0.73 min, m/z = 540 [M+H]+ .
Korak 5: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(8-metil-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0439] 7-((4-(3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (77 mg, 0.142 mmol) je metilovan praćenjem postupka u Primeru 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (47.1 mg, 59.6 8.46 (s, 1H), 8.00 (br s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.53 (dd, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.04 (d, 1H), 5.05 (br s, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.60 (s, 2H), 3.12 (s, 3H), 3.04-3.10 (m, 2H), 2.88 (d, 2H), 2.62 (d, 2H), 2.20 (s, 3H), 1.88-1.98 (m, 2H), 1.80-1.98 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.72 min, m/z = 554 [M+H]+ .
Primer 87: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperidin-4-iloksi)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0440]
Korak 1: terc-butil 4-(4-nitrofenoksi)piperidin-1-karboksilat
[0441] U suspenziju terc-butil 4-hidroksipiperidin-1-karboksilata (3.00 g, 14.91 mmol) i 1-fluoro-4-nitrobenzena (3.89 g, 27.6 mmol) u vodenom rastvoru kalijum hidroksida (25% rastvor prema težini) (21.84 mL, 97 mmol) dodat je tetrabutilamonijum bromid (0.625 g, 1.938 mmol) i dobijena smeša je mešana na 35°C preko noći. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature i istaložena čvrsta supstanca je izolovana filtracijom, isprana vodom (2 x 20 mL) i sušena usisavanjem. Ostatak je prečišćen pomoću Biotage hromatografije (silika 50g kertridž, eluiranje gradijentom cikloheksana:etil acetata od 100:0 do 80:20) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (611 mg,
3.70 (ddd, 2H), 3.38 (ddd, 2H), 1.90-2.04 (m, 2H), 1.72-1.86 (m, 2H), 1.47 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.78 min, m/z = 345 [M+Na]+ .
Korak 2: terc-butil 4-(4-aminofenoksi)piperidin-1-karboksilat
[0442] Rastvor terc-butil 4-(4-nitrofenoksi)piperidin-1-karboksilata (611 mg, 1.895 mmol) u metanolu (60 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, kompletan H2, 50°C, 1 mL/min). Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo roze čvrsta supstanca (517 mg, 93%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 2H), 6.63 (dt, 2H), 4.26 (sep, 1H), 3.71 (ddd, 2H), 3.45 (br s, 2H), 3.26 (ddd, 2H), 1.80-1.95 (m, 2H), 1.61-1.78 (m, 2H), 1.46 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 0.85 min, m/z = 237 [M-tBu+H]+ .
Korak 3: terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenoksi)piperidin-1-karboksilat
[0443] 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (200 mg, 0.563 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-aminofenoksi)piperidin-1-karboksilatom (165 mg, 0.563 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (190 mg, 56%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.71 (s, 1H), 7.52 (d, 2H), 7.44 (d, 2H), 7.38 (br s, 1H), 7.28 (dd, 1H), 6.91 (d, 2H), 4.88 (s, 2H), 4.43 (sep, 1H), 3.71 (ddd, 2H), 3.32 (ddd, 2H), 3.16 (s, 3H), 1.83-1.99 (m, 2H), 1.65-1.83 (m, 2H), 1.47 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.75 min, m/z = 599 [M+H]+ .
Korak 4: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperidin-4-iloksi)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0444] terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenoksi)piperidin-1-karboksilat (150 mg, 0.250 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (123 mg, 98%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ
1H), 8.45 (s, 1H), 7.64 (d, 4H), 7.48 (dd, 1H), 6.90 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 4.31 (tt, 1H), 3.09 (s, 3H), 2.94 (dt, 2H), 2.55 (ddd, 2H), 1.84-1.95 (m, 2H), 1.36-1.49 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.76 min, m/z = 499 [M+H]+ .
Primer 88: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(8-metil-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0445]
[0446] 7-((4-(3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (67 mg, 0.131 mmol) je reagovao sa formaldehidom (0.018 mL) praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (65 mg, 7.40 (m, 3H), 7.30 (d, 2H), 6.80 (d, 2H), 4.85 (s, 2H), 3.33 (m, 2H), 3.25 (m, 2H), 3.15 (s, 3H), 3.02 (m, 2H), 2.35 (s, 3H), 2.02 (m, 2H), 1.78 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.72 min, m/z = 524 [M+H]+ .
Primer 89: 3-(2-hloro-6-fluorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(4-izopropilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0447]
[0448] 3-(2-hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (150 mg, 0.443 mmol) je reagovao sa (5-amino-2-(4-izopropilpiperazin-1-il)fenil)metanolom (105 mg, 0.422 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (109 mg, 48%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.51 (d, 2H), 7.40-7.3 (m, 3H), 7.23 (d, 1H), 7.15 (m, 1H), 4.94 (d, 1H), 4.85 (d, 1H), 4.81 (s, 2H), 3.19 (s, 3H), 3.03 (m, 4H), 2.73 (m, 4H), 2.78 (m, 1H), 1.11 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.709 min, m/z = 540 [M+H]+ .
Primer 90: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-((1-metilpiperidin-4-il)oksi)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0449]
[0450] 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperidin-4-iloksi)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (58 mg, 0.116 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (54 mg,
8.45 (s, 1H), 7.64 (d, 4H), 7.48 (dd, 1H), 6.91 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 4.28 (sep, 1H), 3.09 (s, 3H), 2.55-2.65 (m, 2H), 2.09-2.20 (m, 5H), 1.85-1.96 (m, 2H), 1.54-1.68 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.78 min, m/z = 513 [M+H]+ .
Primer 91: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((1-metilpiperidin-4-il)amino)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0451]
Korak 1: terc-butil 4-((3-nitrofenil)amino)piperidin-1-karboksilat:
[0452] U mešajući rastvor 3-nitroanilina (2 g, 14.48 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (40 mL) dodat je terc-butil 4-oksopiperidin-1-karboksilat (5.77 g, 29.0 mmol), a zatim natrijum triacetoksiborohidrid (9.21 g, 43.4 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 40 časova. Smeša je snažno mešana vodom (40 mL), zatim odvojena i sušena (fazni separator). Vodena faza je isprana dodatnim dihlorometanom (2 x 15 mL) koja je odvojena i sušena (fazni separator). Spojene frakcije sa dihlorometanom su redukovane in vacuo. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 10-15% etil acetata u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (3.64 g, 78 %). 1H NMR (400
7.38 (t, 1H), 7.27 (t, 1H), 6.84 (dd, 1H), 3.97-4.17 (m, 2H), 3.90 (d, 1H), 3.44-3.53 (m, 1H), 2.95 (t, 2H), 2.05(d, 2H), 1.47 (s, 9H), 1.31-1.41 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 1.74 min, m/z = 266 [M-Buten]+ .
Korak 2: terc-butil 4-((3-aminofenil)amino)piperidin-1-karboksilat:
[0453] Rastvor terc-butil 4-((3-nitrofenil)amino)piperidin-1-karboksilata (810 mg, 2.52 mmol) u metanolu (50 mL) je propušten kroz H-Cube aparat opremljen sa 10% PD-C kertridžom uz praćenje podešavanja [1.0 ml/min protok, 40°C, režim kompletnog H2)]. Rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja (735 mg, 100 %).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 5.84 (s, 1H), 5.81 (t, 2H), 5.05 (d, 1H), 4.68 (s, 2H), 3.86 (d, 2H), 3.54-3.60 (m, 1H), 3.37-3.47 (m, 1H), 3.22-3.31 (m, 1H), 1.85 (d, 2H), 1.41 (s, 9H), 1.21 (d, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.82 min, m/z = 292 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-(piperidin-4-ilamino)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0454] 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.281 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-((3-aminofenil)amino)piperidin-1-karboksilatom (82 mg, 0.281 mmol) praćenjem postupka za Primer 31, a zatim prečišćavanjem pomoću preparativne HPLC da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (41.9 mg, 54.4%).
LCMS (postupak C): RT= 0.79 min, m/z = 498 [M+H]+ .
Korak 4: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((1-metilpiperidin-4-il)amino)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0455] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((3-(piperidin-4-ilamino)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (41.9 mg, 0.084 mmol) je metilovan praćenjem postupka u Primeru 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (33.2 mg, 77 %). 1H NMR (400
7.58 (d, 2H), 7.44 (dd, 1H), 7.05-7.13 (m, 2H), 6.99 (d, 1H), 6.43 (dd, 1H), 5.00 (s, 2H), 3.21 (s, 3H), 2.92 (d, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.24 (t, 2H), 2.07 (d, 2H), 1.54 (q, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.80 min, m/z = 512 [M+H]+ .
Primer 92: 3-(2-hloro-6-metilfenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0456]
Korak 1: N-(2-hloro-6-metilfenil)-4-(metilamino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid:
[0457] U rastvor 4-hloro-2-(metiltio)pirimidin-5-karbonil hlorida (24.81 g, 111 mmol) u etil acetatu (250 mL), dodat je Amberlyst A21 (7 g, 106 mmol) i reakciona smeša je zagrevana do 40°C. Zatim je dodat rastvor 2-hloro-6-metilanilina (15 g, 106 mmol) u etil acetatu (250 mL) i reakcija je mešana na 40°C preko noći. Formiran je beli talog. On je filtriran, zatim apsorbovan u suvom THF (1 L) i zagrevan na 60°C u trajanju od 15 min, zatim ponovo filtriran. Filtrat je koncentrovan in vacuo. Ostatak je suspendovan u DCM (200 mL), zatim filtriran i sušen. Suspendovan je u THF (1 L) i dodat je metilamin (2 M u THF, 50 mL) na 0°C. Posle mešanja u trajanju od 1 časa na sobnoj temperaturi, rastvor je filtriran. Filtrat je koncentrovan in vacuo. Dobijeno ulje je triturisano u acetonitrilu do formiranja belog taloga koji je sakupljen i sušen na temperaturi sredine da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (3.5 g, 11%). LCMS (postupak A): RT= 1.43 min, m/z = 323 [M+H]+
Korak 2: 3-(2-hloro-6-metilfenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0458] Suspenzija N-(2-hloro-6-metilfenil)-4-(metilamino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamida (3.5 g, 10.8 mmol), dibromometana (2.3 mL, 32.5 mmol) i cezijum karbonata (21 g, 65.1 mmol) u acetonitrilu (120 mL) je zagrevana na 80°C u hermetički zatvorenoj epruveti u trajanju od 72 časa. Posle hlađenja, reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni (MgSO4), filtrirani i koncentrovani in vacuo. Ostatak je prečišćen pomoću Biotage hromatografije da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.87g, 24%).
LCMS (postupak A): RT= 1.48 min, m/z = 335 [M+H]+
Korak 3: 3-(2-hloro-6-metilfenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0459] 3-(2-Hloro-6-metilfenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (120 mg, 0.358 mmol) je reagovao sa terc-5 butil 4-(4-amino-2-metoksifenil)piperazin-1-karboksilatom (95 mg, 0.341 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (57 mg, 36%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 7.62 (m, 2H), 7.43 (m, 1H), 7.23 (m, 2H), 6.90 (d, 2H), 4.92 (d, 1H), 4.87 (d, 1H), 3.09 (s, 3H), 3.03 (m, 4H), 2.90 (m, 4H), 2.25 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.65 min, m/z = 464 [M+H]+ .
Primer 93: 3-(2-hloro-6-fluorofenil)-7-((4-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0460]
[0461] 3-(2-Hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.295 mmol) je reagovao sa (2S,5R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilatom (86 mg, 0.281 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (42 mg, 36%).1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.72 (s, 1H), 7.57 (d, 2H), 7.32 (m, 2H), 7.13 (m, 3H), 4.93 (d, 1H), 4.85 (d, 1H), 3.18 (s, 3H), 3.09 (m, 3H), 2.94 (m, 1H), 2.71 (m, 1H), 2.47 (m, 1H), 1.07 (d, 3H), 0.91 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.74 min, m/z = 496 [M+H]+ .
Primer 94: (R)-3-(2-hlorofenil)-1-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0462]
Korak 1: (R)-3-(2-hlorofenil)-1-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0463] 3-(2-hlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (200 mg, 0.623 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilatom (154 mg, 0.530 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (160 mg, 93%). 1H NMR (400 MHz, MeOH-d
4): δ (s, 1H), 7.54-7.66 (m, 3H), 7.39-7.53 (m, 3H), 7.00 (d, 2H), 4.95-5.06 (m, 2H), 3.53 (t, 2H), 3.17 (s, 3H), 3.06-3.14 (m, 1H), 2.93-3.05 (m, 2H), 2.69 (td, 1H), 2.36 (dd, 1H), 1.17 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.63 min, m/z = 464 [M+H]+ .
Primer 95: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(1-metilpiperidin-4-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0464]
[0465] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperidin-4-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (54 mg, 0.112 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (10 mg, 8.47 (s, 1H), 7.71 (d, 2H), 7.65 (d, 2H), 7.48 (dd, 1H), 7.18 (d, 2H), 4.97 (s, 2H), 3.11 (s, 3H), 3.02 (d, 2H), 2.43-2.54 (m, 1H), 2.11-2.41 (m, 5H), 1.63-1.83 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.80 min, m/z = 497 [M+H]+ .
Primer 96: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3,3-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0466]
Korak 1: terc-butil 2,2-dimetil-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0467] Suspenzija 1-fluoro-4-nitrobenzena (0.468 g, 3.32 mmol), terc-butil 2,2-dimetilpiperazin-1-karboksilat hidrohlorida (1.0 g, 3.48 mmol) i kalijum karbonata (1.83 g, 13.26 mmol) u anhidrovanom DMF (5 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, podeljena između vode (50 mL) i etil acetata (50 ml). Etil acetat je odvojen i ispran vodom (3 x 20 ml), sušen (anhidrovani natrijum sulfat), filtriran i redukovan in vacuo. Ostatak je prečišćen pomoću „flash“ hromatografije (0-100% etil acetat u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.15 g, 100 %). LCMS (postupak C): RT= 1.80 min, m/z = 336 [M+H]+ .
Korak 2: terc-butil 4-(4-aminofenil)-2,2-dimetilpiperazin-1-karboksilat:
[0468] Rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-(4-nitrofenil) piperazin-1-karboksilata (150 mg, 0.447 mmol) u metanolu (10 ml) je propušten kroz H-Cube aparat opremljen sa 10% PD-C kertridžom uz praćenje podešavanja [1.0 ml/min protok, 40°C, režim kompletnog H2]. Rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja (137 mg, 100 %). LCMS (postupak C): RT= 0.94 min, m/z = 306 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3,3-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0469] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (180 mg,0.507 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-aminofenil)-2,2-dimetilpiperazin-1-karboksilatom (147 mg, 0.483 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (87 mg, 34%).1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.71 (brs, 1H), 7.50 (d, 2H), 7.44 (d,2H), 7.29 (m, 1H), 6.90 (d,2H), 4.87 (s, 2H), 3.16 (s, 3H), 3.34 (s, 1H), 3.07 (m, 4H), 2.87 (m, 2H), 2.87 (m, 2H), 1.27 (s, 6H). LCMS (postupak C): RT= 0.759 min, m/z = 510 [M+H]+ .
Primer 97: 3-(2-hlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(8-metil-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0470]
Korak 1: 7-((4-(3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-3-(2-hlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0471] 3-(2-Hlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.312 mmol) je reagovao sa terc-butil 3-(4-amino-2-(hidroksimetil)fenil)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilatom (88 mg, 0.265 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (76.4 mg, 83 %). LCMS (postupak C): RT= 0.63 min, m/z = 506 [M+H]+ .
Korak 2: 3-(2-hlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(8-metil-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0472] 7-((4-(3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-3-(2-hlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (76.4 mg, 0.151 mmol) je metilovan praćenjem postupka u Primeru 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (71.1 mg, 91 %). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.44 (s, 1H), 7.89-8.09 (m, 1H), 7.62 (dd, 1H), 7.49-7.57 (m, 2H), 7.38-7.48 (m, 2H), 7.04 (d, 1H), 5.04 (t, 1H), 4.83-5.13 (m, 2H), 4.60 (d, 2H), 3.11 (s, 3H), 3.04-3.10 (m, 2H), 2.89 (d, 2H), 2.62 (dd, 2H), 2.20 (s, 3H), 1.88-2.00 (m, 2H), 1.77-1.88 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.66 min, m/z = 520 [M+H]+ .
Primer 98: 3-(2-hlorofenil)-7-((4-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0473]
Korak 1: (2S,5R)-terc-butil 4-(4-((6-(2-hlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat:
[0474] 3-(2-Hlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (80 mg, 0.249 mmol) je reagovao sa (2S,5R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilatom (76 mg, 0.249 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (74 mg, 51%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.29-7.54 (m, 7H), 6.84 (d, 2H), 4.88 (br d, 2H), 4.42 (br s, 1H), 3.93 (br s, 1H), 3.80 (d, 1H), 3.43 (dd, 1H), 3.28 (dd, 1H), 3.16 (s, 3H), 3.05 (dd, 1H), 1.49 (s, 9H), 1.27 (d, 3H), 1.02 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.63 min, m/z = 578 [M+H]+ .
Korak 2: 3-(2-hlorofenil)-7-((4-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0475] (2S,5R)-terc-Butil 4-(4-((6-(2-hlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (74 mg, 0.128 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (61 mg, 100%).<1>H NMR (400 MHz,
(br s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.68 (d, 2H), 7.62 (dd, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.39-7.48 (m, 2H), 7.03 (d, 2H), 5.07 (d, 1H), 4.90 (d, 1H), 3.10 (s, 3H), 2.79-2.98 (m, 4H), 2.45 (dd, 1H), 2.32 (dd, 1H), 2.19 (br s, 1H), 0.94 (d, 3H), 0.80 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.72 min, m/z = 478 [M+H]+ .
Primer 99: (R)-3-(2-hlorofenil)-7-((3-fluoro-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0476]
Korak 1: (R)-terc-butil 4-(4-((6-(2-hlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-fluorofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0477] 3-(2-Hlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (80 mg, 0.249 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-amino-2-fluorofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilatom (77 mg, 0.249 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (64 mg, 44%).<1>H NMR (400
7.68 (d, 1H), 7.65 (br s, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.30-7.43 (m, 3H), 7.10 (dd, 1H), 6.88 (t, 1H), 4.91 (br d, 2H), 4.31 (br s, 1H), 3.94 (d, 1H), 3.15-3.33 (m, 6H), 2.83 (dd, 1H), 2.73 (td, 1H), 1.49 (s, 9H), 1.36 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.83 min, m/z = 582 [M+H]+ .
Korak 2: (R)-3-(2-hlorofenil)-7-((3-fluoro-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0478] (R)-terc-Butil 4-(4-((6-(2-hlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-fluorofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat (64 mg, 0.110 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (41 mg, 77%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ
1H), 8.47 (s, 1H), 7.69 (dd, 1H), 7.62 (dd, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.39-7. 49 (m, 3H), 6.97 (t, 1H), 5.09 (d, 1H), 4.91 (d, 1H), 3.06-3.16 (m, 5H), 2.78-2.95 (m, 3H), 2.57 (td, 1H), 2.24 (t, 1H), 0.99 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.77 min, m/z = 482 [M+H]+ .
Primer 100: (R)-3-(2-hloro-6-metilfenil)-1-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0479]
[0480] 3-(2-Hloro-6-metilfenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (120 mg, 0.358 mmol) je reagovao sa (R)-4-(3-metilpiperazin-1-il)anilinom (99 mg, 0.341 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (39 mg,
7.51 (d, 1H), 7.35 (m, 1H), 7.22 (m, 2H), 6.94 (d, 2H), 5.01 (d, 1H), 4.65 (d, 1H), 3.50 (m, 2H), 3.14 (s, 3H), 3.12-2.95 (m, 3H), 2.70 (m, 1H), 2.37 (m, 1H), 2.32 (s, 3H), 1.13 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.67 min, m/z = 478 [M+H]+ .
Primer 101: (R)-3-(2-hloro-6-metilfenil)-7-((3-(metoksimetil)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0481]
[0482] 3-(2-Hloro-6-metilfenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (120 mg, 0.358 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-amino-2-(metoksimetil) fenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilatom (114 mg, 0.341 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (30 mg, 17%).1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ (s, 1H), 7.78 (s, 1H), 7.53 (m, 1H), 7.35 (m, 1H), 7.23 (m, 2H), 7.08 (d, 1H), 5.03 (d, 1H), 4.66 (d, 1H), 4.56 (s, 2H), 3.44 (s, 3H), 3.19 (s, 3H), 3.02 (m, 3H), 2.92 (m, 2H), 2.71 (m, 1H), 2.45 (m, 1H), 2.23 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.77 min, m/z = 522 [M+H]+ .
Primer 102: 3-(2-hloro-6-metilfenil)-7-((4-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0483]
Korak 1: (2S,5R)-terc-butil 4-(4-((6-(2-hloro-6-metilfenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat:
[0484] 3-(2-Hloro-6-metilfenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (60 mg, 0.180 mmol) je reagovao sa (2S,5R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilatom (55 mg, 0.180 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (85 mg, 80%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.54 (br s, 1H), 7.50 (d, 2H), 7.30-7.37 (m, 1H), 7.18-7.23 (m, 2H), 6.84 (d, 2H), 5.01 (d, 1H), 4.64 (d, 1H), 4.42 (br s, 1H), 3.93 (br s, 1H), 3.80 (d, 1H), 3.43 (dd, 1H), 3.27 (dd, 1H), 3.14 (s, 3H), 3.05 (dd, 1H), 2.32 (s, 3H), 1.49 (s, 9H), 1.27 (d, 3H), 1.02 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.73 min, m/z = 592 [M+H]+ .
Korak 2: 3-(2-hloro-6-metilfenil)-7-((4-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0485] (2S,5R)-terc-Butil 4-(4-((6-(2-hloro-6-metilfenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilat (85 mg, 0.144 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (60 mg, 85%).<1>H NMR (400 MHz,
8.45 (s, 1H), 7.68 (d, 2H), 7.41-7.48 (m, 1H), 7.30-7.37 (m, 2H), 7.03 (d, 2H), 4.92 (dd, 2H), 3.10 (s, 3H), 2.80-2.98 (m, 4H), 2.45 (dd, 1H), 2.33 (dd, 1H), 2.26 (s, 3H), 0.95 (d, 3H), 0.80 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.78 min, m/z = 492 [M+H]+ .
Primer 103: 3-(2-hlorofenil)-7-((4-((3S,5R)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0486]
Korak 1: 3-(2-hlorofenil)-7-((4-((3S,5R)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0487] Rastvor mCPBA, čistoće 50 % (103 mg, 0.299 mmol) u dihlorometanu (0.400 mL) je propušten kroz fazni separator i ispran dodatnim dihlorometanom (0.200 mL). Ovaj rastvor je dodat u mešajuću suspenziju 3-(2-hlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-ona (80 mg, 0.249 mmol) u anhidrovanom toluenu (2 mL) i smeša je mešana u trajanju od 30 minuta. Dodata je Hunig-ova baza (0.131 mL, 0.748 mmol), a zatim 4-((3S,5R)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)anilin (43.5 mg, 0.212 mmol) i smeša je zagrevana do 80°C u trajanju od 16 časova. Posle hlađenja reakciona smeša je prečišćena direktno pomoću „flash“ hromatografije (0-100%, etil acetat u cikloheksanu, KP-NH). Ostatak je rastvoren u metanolu (1 mL) i vodi (10 mL) i sušena zamrzavanjem da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (29.6 mg, 24.83 8.43 (s, 1H), 7.55-7.67 (m, 3H), 7.51 (dd, 1H), 7.44 (dtd, 2H), 6.88 (d, 2H), 4.80-5.15 (m, 2H), 3.45 (d, 2H), 3.08 (s, 3H), 2.78-2.90 (m, 2H), 2.12 (br s, 1H), 2.06 (t, 2H), 1.01 (d, 6H). LCMS (postupak C): RT= 0.67 min, m/z = 478 [M+H]+ .
Primer 104: 7-((4-((1S,4R)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-3-(2-hlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0488]
[0489] 3-(2-Hlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (60 mg, 0.187 mmol) je reagovao sa (1R,4S)-terc-butil 5-(4-aminofenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilatom (46.0 mg, 0.159 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (42.0 mg, 88%).1H NMR (400 MHz, MeOH7.62 (m, 1H), 7.46-7.57 (m, 3H), 7.40-7.46 (m, 2H), 6.63 (d, 2H), 4.92-5.03 (m, 2H), 4.39 (s, 1H), 3.79 (s, 1H), 3.63 (dd, 1H), 3.15 (s, 3H), 3.05 (t, 2H), 2.98 (dd, 1H), 1.99 (d, 1H), 1.81 (d, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.60 min, m/z = 462 [M+H]+ .
Primer 105: 7-((4-(4,7-diazaspiro[2.5]oktan-7-il)fenil)amino)-3-(2-hlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0490]
Korak 1: terc-butil 7-(4-nitrofenil)-4,7-diazaspiro[2.5]oktan-4-karboksilat:
[0491] Suspenzija 1-fluoro-4-nitrobenzena (0.166 g, 1.177 mmol), terc-butil 4,7-diazaspiro[2.5]oktan-7-karboksilata (0.25 g, 1.178 mmol) i kalijum karbonata (0.642 g, 4.64 mmol) u anhidrovanom DMF (5 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, zatim podeljena između vode (50 mL) i etil acetata (50 mL). Etil acetat je odvojen i ispran vodom (3 x 20 mL), sušen (anhidrovani natrijum sulfat), filtriran i redukovan in vacuo. Ostatak je prečišćen pomoću „flash“ hromatografije (0-100% etil acetat u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.334 g, 85 %). LCMS (postupak C): RT= 1.78 min, m/z = 334 [M+H]+ .
Korak 2: terc-butil 7-(4-aminofenil)-4,7-diazaspiro[2.5]oktan-4-karboksilat:
[0492] Rastvor terc-butil 7-(4-nitrofenil)-4,7-diazaspiro[2.5]oktan-4-karboksilata (149 mg, 0.447 mmol) u metanolu (10 mL) je propušten kroz H-Cube aparat opremljen sa 10% PD-C kertridžom uz praćenje podešavanja [1.0 ml/min protok, 40°C, režim kompletnog H2]. Rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja (136 mg, 100%). LCMS (postupak C): RT= 0.82 min, m/z = 304 [M+H]+ .
Korak 3: 7-((4-(4,7-diazaspiro[2.5]oktan-7-il)fenil)amino)-3-(2-hlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0493] 3-(2-Hlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (80 mg, 0.249 mmol) je reagovao sa terc-butil 7-(4-aminofenil)-4,7-diazaspiro[2.5]oktan-4-karboksilatom (64.3 mg, 0.212 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (25.7 mg, 93 %). 1H NMR (400 MHz, MeOH-d4): δ 8.52 (s, 1H), 7.53-7.66 (m, 3H), 7.38-7.52 (m, 3H), 6.98 (d, 2H), 4.93-5.06 (m, 2H), 3.11-3.21 (m, 5H), 3.05-3.11 (m, 2H), 2.97-3.02 (m, 2H), 0.63-0.75 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.67 min, m/z = 476 [M+H]+ .
Primer 106: 3-(2-hlorofenil)-7-((4-(3,3-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0494]
Korak 1: 3-(2-hlorofenil)-7-((4-(3,3-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0495] 3-(2-hlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (80 mg, 0.249 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-aminofenil)-2,2-dimetilpiperazin-1-karboksilatom (64.7 mg, 0.212 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (71.2 mg, 90 %).1H NMR (400 MHz, MeOH-d
4): δ (s, 1H), 7.52-7.65 (m, 3H), 7.39-7.52 (m, 3H), 6.95 (d, 2H), 4.93-5.04 (m, 2H), 3.16 (s, 3H), 3.00-3.09 (m, 4H), 2.89 (s, 2H), 1.26 (s, 6H). LCMS (postupak C): RT= 0.70 min, m/z = 478 [M+H]+ .
Primer 107: 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metoksifenil)amino)-3-(2-hlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0496]
Korak 1: 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metoksifenil)amino)-3-(2-hlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0497] 3-(2-hlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (80 mg, 0.249 mmol) je reagovao sa (1S,4S)-terc-butil 5-(4-amino-2-metoksifenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilatom (67.7 mg, 0.212 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (68.5 mg, 86 %).1H NMR (400 MHz, MeOH-7.61 (m, 1H), 7.35-7.50 (m, 4H), 7.11 (d, 1H), 6.70 (d, 1H), 4.90-5.03 (m, 2H), 4.33 (s, 1H), 3.82 (s, 3H), 3.63-3.70 (m, 2H), 3.12-3.22 (m, 4H), 3.05 (s, 1H), 2.91 (dd, 1H), 1.91 (d, 1H), 1.71 (d, 1H).
LCMS (postupak C): RT= 0.69 min, m/z = 492 [M+H]+ .
Primer 108: 3-(2-hlorofenil)-7-((3-(metoksimetil)-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0498]
Korak 1: 3-(2-hlorofenil)-7-((3-(metoksimetil)-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0499] 3-(2-Hlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (80 mg, 0.249 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-amino-2-(metoksimetil)fenil)piperazin-1-karboksilatom (68.1 mg, 0.212 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (46.6 mg, 96%).1H NMR (400 MHz, MeOH-d4): δ 8.54 (s, 1H), 7.92 (br s, 1H), 7.55-7.63 (m, 2H), 7.40-7.52 (m, 3H), 7.14 (d, 1H), 4.93-5.07 (m, 2H), 4.59 (s, 2H), 3.45 (s, 3H), 3.20 (s, 3H), 2.97-3.03 (m, 4H), 2.87-2.93 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.70 min, m/z = 494 [M+H]+ .
Primer 109: 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metilfenil)amino)-3-(2-hlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0500]
Korak 1: 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metilfenil)amino)-3-(2-hlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0501] 3-(2-Hlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (80 mg, 0.249 mmol) je reagovao sa (1S,4S)-terc-butil 5-(4-amino-2-metilfenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilatom (64.3 mg, 0.212 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (58.8 mg, 83 %).1H NMR (400 MHz, MeOH-d4): δ 51 (s, 1H), 7.57-7.63 (m, 1H), 7.36-7.54 (m, 5H), 6.90 (d, 1H), 4.92-5.05 (m, 2H), 4.10 (s, 1H), 3.74 (s, 1H), 3.45 (dd, 1H), 3.23 (d, 1H), 3.13-3.20 (m, 4H), 2.98 (dd, 1H), 2.96 (s, 3H), 1.98 (d, 1H), 1.76 (d, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.68 min, m/z = 476 [M+H]+ .
Primer 110: 3-(2-hlorofenil)-7-((4-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-3-fluorofenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0502]
Korak 1: 3-(2-hlorofenil)-7-((4-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-3-fluorofenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0503] 3-(2-hlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (80 mg, 0.249 mmol) je reagovao sa (2S,5R)-terc-butil 4-(4-amino-2-fluorofenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilatom (68.6 mg, 0.212 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (49.7 mg, 92 %). 1H NMR (400 MHz, MeOH-d4): δ 7.77 (dd, 1H), 7.57-7.64 (m, 1H), 7.41-7.53 (m, 3H), 7.38 (dd, 1H), 7.21 (t, 1H), 4.95-5.10 (m, 2H), 3.21 (s, 3H), 3.06-3.14 (m, 1H), 2.96-3.06 (m, 3H), 2.63 (dd, 1H), 2.58 (t, 1H), 1.08 (d, 3H), 0.89 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.81min, m/z = 496 [M+H]+ .
Primer 111: 3-(2-hlorofenil)-7-((4-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0504]
Korak 1: 3-(2-hlorofenil)-7-((4-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0505] 3-(2-Hlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (80 mg, 0.249 mmol) je reagovao sa (2R,5S)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2,5-dimetilpiperazin-1-karboksilatom (64.7 mg, 0.212 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (66.1 mg, 100 %). 1H NMR (400 MHz, MeOH-d4): δ 1H), 7.70 (d, 2H), 7.57-7.64 (m, 1H), 7.40-7.53 (m, 3H), 7.18 (d, 2H), 4.95-5.07 (m, 2H), 3.19 (s, 3H), 2.93-3.09 (m, 4H), 2.64 (dd, 1H), 2.51 (dd, 1H), 1.10 (d, 3H), 0.90 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.71 min, m/z = 478 [M+H]+ .
Primer 112: 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metilfenil)amino)-3-(2-hloro-6-metilfenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0506]
Korak 1: (1S,4S)-terc-butil 5-(4-((6-(2-hloro-6-metilfenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-metilfenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat:
[0507] 3-(2-Hloro-6-metilfenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (60 mg, 0.180 mmol) je reagovao sa (1S,4S)-terc-butil 5-(4-amino-2-metilfenil)2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilatom (55 mg, 0.180 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (65 mg, 61%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.30-7.55 (m, 4H), 7.18-7.24 (m, 2H), 6.80 (t, 1H), 5.01 (d, 1H), 4.65 (d, 1H), 4.50 (d, 1H), 4.11 (br s, 1H), 3.62 (dd, 1H), 3.45 (t, 1H), 3.20-3.40 (m, 2H), 3.15 (s, 3H), 2.32 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 1.98 (d, 1H), 1.86 (t, 1H), 1.42-1.50 (m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.62 min, m/z = 590 [M+H]+ .
Korak 2: 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metilfenil)amino)-3-(2-hloro-6-metilfenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0508] (1S,4S)-terc-Butil 5-(4-((6-(2-hloro-6-metilfenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-metilfenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (65 mg, 0.110 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (36 mg, 67%).<1>H NMR (400 MHz,
8.42 (s, 1H), 7.39-7.58 (m, 3H), 7.29-7.37 (m, 2H), 6.76 (d, 1H), 4.90 (dd, 2H), 3.99 (s, 1H), 3.56 (s, 1H), 3.41 (dd, 1H), 3.08 (s, 3H), 3.05 (d, 1H), 2.96 (d, 1H), 2.85 (dd, 1H), 2.25 (d, 3H), 2.18 (s, 3H), 1.75 (d, 1H), 1.59 (d, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.75 min, m/z = 490 [M+H]+ .
Primer 113: 3-(2-hlorofenil)-7-((4-(4-etilpiperazin-1-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0509]
Korak 1: 3-(2-hlorofenil)-7-((4-(4-etilpiperazin-1-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0510] Rastvor mCPBA, čistoće 50 % (103 mg, 0.299 mmol) u dihlorometanu (0.400 mL) je propušten kroz fazni separator i ispran dodatnim dihlorometanom (0.200 mL). Ovaj rastvor je dodat u mešajuću suspenziju 3-(2-hlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-ona (80 mg, 0.249 mmol) u anhidrovanom toluenu (2 mL) i smeša je mešana u trajanju od 30 minuta. Dodata je Hunig-ova baza (0.131 mL, 0.748 mmol), a zatim (5-amino-2-(4-etilpiperazin-1-il)fenil)metanol (49.9 mg, 0.212 mmol), i smeša je zagrevana do 80°C u trajanju od 16 časova. Posle hlađenja reakciona smeša je prečišćena direktno pomoću „flash“ hromatografije (0-100%, etil acetat u cikloheksanu, KP-NH). Ostatak je suspendovan u dihlorometanu (4 mL). Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom i isprana svežim dihlorometanom (3 mL). Ostatak je suspendovan u metanolu (1 mL) i vodi (10 mL) i sušena zamrzavanjem da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (58.3 mg, 46.0 %).<1>H NMR (400
8.45 (s, 1H), 7.99 (br s, 1H), 7.62 (dd, 1H), 7.56 (dd, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.38-7.48 (m, 2H), 7.01 (d, 1H), 4.85-5.12 (m, 3H), 4.54 (d, 2H), 3.12 (s, 3H), 2.76-2.88 (m, 4H), 2.40 (q, 2H), 1.03 (t, 3H). 1H NMR (300 MHz, MeOH-d4): δ 1H), 7.90 (s, 1H), 7.54-7.68 (m, 2H), 7.39-7.53 (m, 3H), 7.18 (d, 1H), 4.97-5.07 (m, 2H), 4.76 (s, 2H), 3.21 (s, 3H), 2.95-3.06 (m, 4H), 4.64-2.82 (m, 4H), 2.59 (q, 2H), 1.19 (t, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.61 min, m/z = 508 [M+H]+ .
Primer 114: 3-(2-hloro-6-metilfenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(8-metil-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0511]
Korak 1: terc-butil 3-(4-((6-(2-hloro-6-metilfenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(hidroksimetil)fenil)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilat:
[0512] 3-(2-Hloro-6-metilfenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (60 mg, 0.180 mmol) je reagovao sa terc-butil 3-(4-amino-2-(hidroksimetil)fenil)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilatom (60 mg, 0.180 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (42 mg,
7.69 (br s, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.56 (dd, 1H), 7.31-7.38 (m, 1H), 7.16-7.24 (m, 3H), 5.03 (d, 1H), 4.81 (d, 2H), 4.67 (d, 1H), 4.19-4.42 (m, 3H), 3.17 (s, 3H), 2.94-3.14 (m, 2H), 2.82 (d, 2H), 2.32 (s, 3H), 2.00 (br s, 4H), 1.50 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.54 min, m/z = 620 [M+H]+ .
Korak 2: 7-((4-(3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-3-(2-hloro-6-metilfenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0513] terc-Butil 3-(4-((6-(2-hloro-6-metilfenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(hidroksimetil)fenil)-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilat (42 mg, 0.068 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (32 mg, 8.44 (s, 1H), 8.00 (br s, 1H), 7.54 (dd, 1H), 7.41-7.48 (m, 1H), 7.30-7.37 (m, 2H), 7.03 (d, 1H), 5.05 (t, 1H), 4.91 (dd, 2H), 4.61 (d, 2H), 3.41 (br s, 2H), 3.11 (s, 3H), 2.82 (d, 2H), 2.67 (dd, 2H), 2.26 (s, 3H), 1.91 (dd, 2H), 1.67 (dd, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.71 min, m/z = 520 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2-hloro-6-metilfenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(8-metil-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0514] 7-((4-(3,8-Diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-3-(2-hloro-6-metilfenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (32 mg, 0.062 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (15 mg, 46%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.37 (s, 1H), 7.93 (br s, 1H), 7.46 (dd, 1H), 7.35-7.40 (m, 1H), 7.24-7.30 (m, 2H), 6.98 (d, 1H), 4.98 (t, 1H), 4.87 (d, 1H), 4.82 (d, 1H), 4.54 (d, 2H), 3.04 (s, 3H), 3.01 (br s, 2H), 2.82 (d, 2H), 2.55 (dd, 2H), 2.19 (s, 3H), 2.13 (s, 3H), 1.71-1.92 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.71 min, m/z = 534 [M+H]+ .
Primer 115: 7-((4-(4-ciklopropilpiperazin-1-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0515]
Korak 1: 1-ciklopropil-4-(4-nitrofenil)piperazin:
[0516] Suspenzija 1-fluoro-4-nitrobenzena (1.096 g, 7.77 mmol), 1-ciklopropilpiperazina (1.00 g, 7.92 mmol) i kalijum karbonata (1.61 g, 11.65 mmol) u anhidrovanom DMF (10 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota preko noći. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature i sipana u led-vodu (50 mL). Istaložena čvrsta supstanca je izolovana filtracijom, isprana vodom i sušena usisavanjem da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (1.11 g, 58%).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3): δ
2H), 7.01 (d, 2H), 3.47 (t, 4H), 2.80 (t, 4H), 1.70-1.80 (m, 1H), 0.45-0.60 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.51 min, m/z = 248 [M+H]+ .
Korak 2: 4-(4-ciklopropilpiperazin-1-il)anilin:
[0517] Suspenzija 1-ciklopropil-4-(4-nitrofenil)piperazina (1.11 g, 4.49 mmol), gvožđa u prahu (1.504 g, 26.9 mmol) i amonijum hlorida (2.161 g, 40.4 mmol) u smeši metanola (18.54 mL) i vode (3.90 mL) je zagrevana do refluksa pod atmosferom azota u trajanju od 1 časa. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, filtrirana kroz Celite® i koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je apsorbovan u etil acetatu (100 mL) i ispran zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (3 x 70 mL). Organska faza je sušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao braon ulje koje očvršćava usled stajanja (910 mg, 93%).<1>H NMR 3.02 (t, 4H), 2.77 (t, 4H), 1.64-1.69 (m, 1H), 0.40-0.51 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.13 min, m/z = 218 [M+H]+ .
Korak 3: 7-((4-(4-ciklopropilpiperazin-1-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0518] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa 4-(4-ciklopropilpiperazin-1-il)anilinom (62 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (60 mg, 41%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.44 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.60 (br d, 2H), 7.48 (t, 1H), 6.89 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 3.08 (s, 3H), 3.04 (t, 4H), 2.67 (t, 4H), 1.65 (sep, 1H), 0.39-0.48 (m, 2H), 0.29-0.39 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.79 min, m/z = 524 [M+H]+ .
Primer 116: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4-(2-hidroksietil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
Korak 1: 2-(4-(4-nitrofenil)piperazin-1-il)etanol:
[0520] U mešanu suspenziju 1-fluoro-4-nitrobenzena (2 g, 14.17 mmol) i kalijum karbonata (3.92 g, 28.3 mmol) u anhidrovanom dimetil sulfoksidu (10 mL) dodat je 2-(piperazin-1-il)etanol (2.089 mL, 17.01 mmol) i smeša je zagrevana na 80°C u trajanju od 16 časova. Posle hlađenja smeša je podeljena između vode (100 mL) i etil acetata (30 mL). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan sa etil acetatom (2 x 30 mL). Spojene organske frakcije su redukovane in vacuo. Ostatak je triturisan u vodi (100 mL). Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom pod vakuumom i sušena u trajanju od 16 časova pod vakuumom i tekućim azotom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova
2H), 3.68 (t, 2H), 3.44 (t, 4H), 2.67 (t, 4H), 2.62 (t, 2H), 2.55 (br s, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.45 min, m/z = 252 [M+H]+ .
Korak 2: 2-(4-(4-aminofenil)piperazin-1-il)etanol:
[0521] Mešani rastvor 2-(4-(4-nitrofenil)piperazin-1-il)etanola (1.2 g, 4.78 mmol) u etanolu (20 mL) je zagrevan do 50°C. Dodat je 10% paladijum na uglju (0.254 g, 0.239 mmol), a zatim je u porcijama dodavan amonijum format (1.506 g, 23.88 mmol) i suspenzija je mešana u trajanju od 1 časa. Suspenzija je filtrirana kroz Celite® ispiranjem svežim etanolom (20 mL). Etanol je uklonjen in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.10 g, 104 %). 1H
3H), 2.74 (t, 4H), 2.66 (t, 2H).
LCMS (postupak C): RT= 0.13 min, m/z = 222 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4-(2-hidroksietil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0522] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa 2-(4-(4-aminofenil)piperazin-1-il)etanolom (63 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (67 mg, 45%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.44 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.61 (br d, 2H), 7.48 (dd, 1H), 6.90 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 4.42 (t, 1H), 3.53 (q, 2H), 3.02-3.14 (m, 7H), 2.55 (t, 4H), 2.43 (t, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.71 min, m/z = 528 [M+H]+ .
Primer 117: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0523]
Korak 1: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0524] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (150 mg, 0.422 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-aminofenil)piperazin-1-karboksilatom (100 mg, 0.359 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (143.5 mg, 86%). LCMS (postupak C): RT= 0.71 min, m/z = 484 [M+H]+ .
Korak 2: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0525] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (44 mg, 0.091 mmol) je metilovan praćenjem postupka u Primeru 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (41.2 mg, 91%). 1H NMR (400
8.44 (s, 1H), 7.53-7.72 (m, 3H), 7.47 (1H), 6.90 (d, 2H), 4.95 (s, 1H), 3.01-3.14 (m, 7H), 2.41-2.48 (m, 4H), 2.23 (m, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.72 min, m/z = 498 [M+H]+ .
Primer 118: 7-((4-((1R,4R)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metilfenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0526]
Korak 1: (1R,4R)-terc-butil 5-(2-metil-4-nitrofenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat:
[0527] Suspenzija 2-fluoro-5-nitrotoluena (391 mg, 2.52 mmol), (1R,4R)-terc-butil 2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (500 mg, 2.52 mmol) i kalijum karbonata (523 mg, 3.78 mmol) u anhidrovanom DMF (2 mL) je zagrevana do 100°C pod atmosferom azota u trajanju od 5 dana. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (20 mL) i ekstrahovana u etil acetatu (3 x 10 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Biotage hromatografije (silika 50g kertridž, eluiranje gradijentom cikloheksana:etil acetata od 90:10 do 30:70) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (503 mg, 60%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ
6.60 (d, 1H), 4.56 (d, 1H), 4.44 (s, 1H), 3.83 (d, 1H), 3.62 (dd, 1H), 3.47 (t, 1H), 3.32 (dd, 1H), 2.36 (s, 3H), 1.86-2.06 (m, 2H), 1.34-1.57 (m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.68 min, m/z = 334 [M+H]+ .
Korak 2: (1R,4R)-terc-butil 5-(4-amino-2-metilfenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat:
[0528] Rastvor (1R,4R)-terc-butil 5-(2-metil-4-nitrofenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (503 mg, 1.509 mmol) u metanolu (75 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, kompletan H2, sobna temperatura, 1 mL/min) sa dva prolaza. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom i prečišćena pomoću Biotage hromatografije (silika 50g kertridž, eluiranje gradijentom cikloheksana:etil acetata od 90:10 do 0:100) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao braon čvrsta supstanca (319 mg, 70%).<1>H 6.55 (s, 1H), 6.48 (d, 1H), 4.46 (d, 1H), 3.91 (s, 1H), 3.13-3.67 (m, 6H), 2.20 (s, 3H), 1.96 (d, 1H), 1.82 (dd, 1H), 1.46 (d, 9H). LCMS (postupak C): RT= 0.78 min, m/z = 304 [M+H]+ .
Korak 3: (1R,4R)-terc-butil 5-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-metilfenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat:
[0529] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa (1R,4R)-terc-butil 5-(4-amino-2-metilfenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilatom (86 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (95 mg, 55%).
7.44 (d, 2H), 7.32-7.42 (m, 2H), 7.28 (dd, 1H), 7.11 (br s, 1H), 6.80 (t, 1H), 4.87 (s, 2H), 4.50 (d, 1H), 4.11 (s, 1H), 3.62 (dd, 1H), 3.46 (t, 1H), 3.20-3.41 (m, 2H), 3.17 (s, 3H), 2.29 (s, 3H), 1.98 (d, 1H), 1.87 (t, 1H), 1.40-1.51 (m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.68 min, m/z = 610 [M+H]+ .
Korak 4: 7-((4-((1R,4R)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metilfenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0530] (1R,4R)-terc-butil 5-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-metilfenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (95 mg, 0.156 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (16 mg, 20%).<1>H NMR (400
8.43 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.37-7.55 (m, 3H), 6.75 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 3.98 (s, 1H), 3.52 (s, 1H), 3.41 (dd, 1H), 3.09 (s, 3H), 3.04 (d, 1H), 2.94 (d, 1H), 2.83 (dd, 1H), 2.18 (s, 3H), 1.74 (d, 1H), 1.57 (d, 1H).
LCMS (postupak C): RT= 0.80 min, m/z = 510 [M+H]+ .
Primer 119: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperidin-4-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0531]
Korak 1: terc-butil 4-(4-nitrofenil)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat:
[0532] Suspenzija 1-bromo-4-nitrobenzena (0.205 g, 1.012 mmol), terc-butil 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata (0.36 g, 1.164 mmol) i natrijum karbonata (0.322 g, 3.04 mmol) u smeši 1,4-dioksana (3.5 mL) i vode (0.700 mL) je degazirana sa N2u trajanju od 5 min. U smešu je zatim dodat PdCl2(dppf)-dihlorometanski adukt (0.083 g, 0.101 mmol) i reakciona smeša je degazirana sa N2u trajanju od 5 min pre zagrevanja u mikrotalasnom reaktoru na 100°C u trajanju od 10 min. Zagrevanje je ponovljeno još pet puta. Posle hlađenja, smeša je podeljena između zasićenog natrijum hidrogen karbonata (25 mL) i dihlorometana (25 mL). Slojevi su odvojeni i vodena faza je ekstrahovana sa dihlorometanom (3 x 25 mL). Spojene organske faze su sušene, filtrirane, koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom i prečišćene hromatografijom na silika gelu (gradijent 0-15% etil acetata u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (303 mg, 98 %). LCMS (postupak C): RT= 1.53 min, m/z = 304 [M]- .
Korak 2: terc-butil 4-(4-aminofenil)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat:
[0533] U mešani rastvor terc-butil 4-(4-nitrofenil)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata (303.1 mg, 0.996 mmol) u etanolu (3.5 mL) dodat je kalaj (II) hlorid (944 mg, 4.98 mmol) i smeša je zagrevana na 55°C u trajanju od 3 časa. Smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom i ostatak je podeljen između 4 M rastvora natrijum hidroksida (50 mL) i etil acetata (15 mL). Vodena faza je odvojena i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 15 mL). Spojene frakcije sa etil acetatom su sušene (anhidrovani natrijum sulfat), filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (310 mg, 100 6.52 (d, 2H), 5.88 (br s, 1H), 5.08 (br s, 2H), 3.91-3.96 (m, 2H), 3.49 (t, 2H), 2.34-2.39 (m, 2H), 1.42 (s, 9H).
LCMS (postupak C): RT= 1.07 min, m/z = 275 [M+H]+ .
Korak 3: terc-butil 4-(4-aminofenil)piperidin-1-karboksilat:
[0534] Mešana suspenzija terc-butil 4-(4-aminofenil)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata (79mg, 0.253 mmol) i 10% Pd/C (33.7 mg, 0.032 mmol) u etanolu (2 mL) je hermetički zatvorena zatim postavljena pod vakuumom i ponovo napunjena azotom. Ovo je ponovljeno još dva puta pre postavljanja pod vakuumom i ponovnog punjenja vodonikom (iz balona). Suspenzija je mešana u trajanju od 5 časova. Preostali vodonik je uklonjen pod vakuum. Smeša je filtrirana kroz Celite® ispiranjem etanolom (5 mL) i filtrat je koncentrovan do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću „flash“ hromatografije (0-10% Metanol u dihlorometanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (51.3 mg, 73.3 %). LCMS (postupak C): RT= 0.92 min, m/z = 221 [M-Buten]+ .
Korak 4: terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)piperidin-1-karboksilat:
[0535] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (200 mg, 0.563 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-aminofenil)piperidin-1-karboksilatom (156 mg, 0.563 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (182 mg, 55%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.72 (s, 1H), 7.58 (br d, 3H), 7.44 (d, 2H), 7.28 (dd, 1H), 7.18 (d, 2H), 4.88 (s, 2H), 4.24 (br s, 2H), 3.18 (s, 3H), 2.80 (br t, 2H), 2.63 (tt, 1H), 1.83 (br d, 2H), 1.54-1.71 (m, 2H), 1.49 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.82 min, m/z = 583 [M+H]+ .
Korak 5: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperidin-4-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0536] terc-Butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)piperidin-1-karboksilat (182 mg, 0.312 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (24 mg, 16%). 1H NMR (400 MHz, MeOH-d4) δ 1H), 7.66 (d, 2H), 7.58 (d, 2H), 7.44 (dd, 1H), 7.22 (d, 2H), 4.99 (s, 2H), 3.12-3.22 (m, 5H), 2.75 (td, 2H), 2.67 (tt, 1H), 1.84 (d, 2H), 1.68 (qt, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.80 min, m/z = 483 [M+H]+ .
Primer 120: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4-(2-metoksietil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0537]
Korak 1: 1-(2-metoksietil)-4-(4-nitrofenil)piperazin:
[0538] Suspenzija 1-fluoro-4-nitrobenzena (1.00 g, 7.09 mmol), 1-(2-metoksietil)piperazina (1.02 g, 7.09 mmol) i kalijum karbonata (1.47 g, 10.63 mmol) u anhidrovanom DMF (10 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota preko noći. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana u etil acetat (3 x 10 mL). Spojene organske faze su isprane vodom (5 x 20 mL), sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (1.10 g, 59%). LCMS (postupak C): RT= 0.51 min, m/z = 266 [M+H]+ .
Korak 2: 4-(4-(2-metoksietil)piperazin-1-il)anilin:
[0539] Rastvor 1-(2-metoksietil)-4-(4-nitrofenil)piperazina (1g, 3.77 mmol) u etanolu (20 mL) je zagrevan do 50°C. Uz mešanje je u porcijama dodat amonijum format (1.188 g, 18.85 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 50°C dodatnih 30 minuta. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, filtrirana kroz Celite® i koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao braon ulje (650 mg, 73%).
LCMS (postupak C): RT= 0.13 min, m/z = 236 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4-(2-metoksietil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0540] 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa 4-(4-(2-metoksietil)piperazin-1-il)anilinom (67 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (53 mg, 35%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.62 (br d, 2H), 7.48 (dd, 1H), 6.91 (d, 2H), 4.96 (s, 2H), 3.47 (t, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.02-3.15 (m, 7H), 2.51-2.62 (m, 6H). LCMS (postupak C): RT= 0.78 min, m/z = 542 [M+H]+ .
Primer 121: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-((1R,4R)-5-metil-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on [0541]
[0542] 7-((4-((1R,4R)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metilfenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (32 mg, 0.063 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (17 mg, 52%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.43 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.35-7.57 (br m, 3H), 6.73 (d, 1H), 4.95 (s, 2H), 3.92 (s, 1H), 3.32 (s, 1H), 3.20 (s, 2H), 3.09 (s, 3H), 2.75 (dd, 1H), 2.68 (d, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.19 (s, 3H), 1.78 (d, 1H), 1.69 (d, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.80 min, m/z = 524 [M+H]+ .
Primer 122: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4-etilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0543]
[0544] U suspenziju 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-ona (60mg, 0.124 mmol) i kalijum karbonata (51.4 mg, 0.372 mmol) u anhidrovanom DMF (2 mL) dodat je jodoetan (0.012 mL, 0.149 mmol) i smeša je zagrevana na 90°C u trajanju od 21 časa. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature i podeljena između fiziološkog rastvora/vode (20 mL) i etil acetata (5 mL). Vodena faza je odvojena i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 5 mL). Spojene organske faze su isprane sa 1:1 fiziološkim rastvorom:vodom (4 x 5 mL), sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 50-100% etil acetata u cikloheksanu, KP-NH) i sušen zamrzavanjem preko noći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (28 mg, 8.44 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.61 (br d, 2H), 7.47 (dd, 1H), 6.90 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 3.01-3.15 (m, 7H), 2.45-2.50 (m, 4H), 2.36 (q, 2H), 1.03 (t, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.75 min, m/z = 512 [M+H]+ .
Primer 123: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4-(2-(dimetilamino)acetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0545]
[0546] U rastvor 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-ona (40 mg, 0.083 mmol), 2-(dimetilamino)sirćetne kiseline (8.52 mg, 0.083 mmol) i N-metilmorfolina (0.036 mL, 0.330 mmol) u anhidrovanom DMF (1 mL) dodat je HBTU (37.6 mg, 0.099 mmol) i dobijena smeša je mešana preko noći. Reakciona smeša je razblažena vodom (8 mL) i ekstrahovana u etil acetat (3 x 4 mL). Spojene organske faze su isprane sa 50:50 vodom:fiziološkim rastvorom (3 x 8 mL), sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Biotage hromatografije (KP-NH 11g kertridž, eluiranje sa gradijentom cikloheksana:etil acetata:metanola od 90:10:0 do 0:100:0 do 0:80:20), suspendovan u dietil etru i sušen zamrzavanjem preko noći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (30 mg, 64%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ (br s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.54-7.74 (m, 4H), 7.48 (t, 1H), 6.94 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 3.68 (t, 2H), 3.59 (t, 2H), 2.97-3.17 (m, 9H), 2.19 (s, 6H). LCMS (postupak C) : RT= 0.75 min, m/z = 569 [M+H]+ .
Primer 124: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(4-(2-(metilamino)acetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0547]
Korak 1: terc-butil (2-(4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(metil)karbamat:
[0548] 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (40 mg, 0.083 mmol) je reagovao sa 2-((tercbutoksikarbonil)(metil)amino)sirćetnom kiselinom (15.62 mg, 0.083 mmol) praćenjem postupka za Primer 123 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (35 mg, 65%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.58 (br s, 1H), 7.54 (br d, 2H), 7.43 (d, 2H), 7.28 (dd, 1H), 6.93 (br d, 2H), 4.87 (s, 2H), 4.06 (br d, 2H), 3.74-3.83 (m, 2H), 3.54-3.65 (m, 2H), 3.16 (s, 3H), 3.13 (t, 4H), 2.94 (s, 3H), 1.41-1.50 (m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.31 min, m/z = 655 [M+H]+ .
Korak 2: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(4-(2-(metilamino)acetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0549] terc-butil (2-(4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)piperazin-1-il)-2-oksoetil)(metil)karbamat (35 mg, 0.053 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (25 mg, 84%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ
1H), 8.45 (s, 1H), 7.54-7.77 (m, 4H), 7.48 (t, 1H), 6.94 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 3.60 (br s, 2H), 3.55 (br s, 2H), 3.34 (s, 2H), 2.97-3.17 (m, 7H), 2.28 (s, 3H), 1.95 (br s, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.73 min, m/z = 555 [M+H]+ .
Primer 125: 7-((4-(4-acetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0550]
[0551] Suspenzija 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-ona (43 mg, 0.089 mmol) i trietilamina (0.062 mL, 0.444 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (1 mL) je hlađena do 0°C. Dodat je anhidrid sirćetne kiseline (0.017 mL, 0.178 mmol) i dobijeni rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan u trajanju od 3 časa. Smeša je isprana zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (3 x 1 mL), sušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (KP-NH 11g kertridž, eluiranje gradijentom cikloheksana:etil acetata:metanola od 90:10:0 do 0:100:0 do 0:80:20), suspendovan u dietil etru i sušen zamrzavanjem preko noći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (29 mg, 62%).
8.45 (s, 1H), 7.53-7.77 (m, 4H), 7.48 (t, 1H), 6.94 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 3.57 (br s, 4H), 2.95-3.16 (m, 7H), 2.04 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.02 min, m/z = 526 [M+H]+ .
Primer 126: (R)-3-(2-hloro-6-fluorofenil)-7-((4-(3-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0552]
[0553] 3-(2-hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (67 mg, 0.197 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-2-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilatom (60 mg, 0.186 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (37 mg,39 %). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.45 (s, 1H), 7.60 (d, 2H), 7.51 (m, 2H), 7.42-7.37 (m, 1H), 6.88 (d, 1H), 4.98 (d, 1H), 4.93 (d, 1H), 3.54 (m, 1H), 3.42 (m, 1H), 3.38 (s, 3H), 3.14 (s, 3H), 3.05 (m, 2H), 2.93 (m, 1H), 2.75 (m, 2H), 2.42 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.73 min, m/z = 482 [M+H]+ .
Primer 127: (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(2-(hidroksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0554]
Korak 1: (S)-terc-butil 3-(hidroksimetil)-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0555] 1-fluoro-4-nitrobenzen (1.460 g, 10.4 mmol) i kalijum karbonat (4.29 g, 31.0 mmol) su suspendovani u anhidrovanom DMF (10 mL). Dodat je (S)-terc-butil 3-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilat (2.35 g, 10.9 mmol) i smeša je zagrevana na 90°C u trajanju od 21 časa. Posle hlađenja smeša je podeljena između fiziološkog rastora/vode (100 mL) i etil acetata (25 mL). Vodeni sloj je odvojen i dalje ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 25 mL). Spojene frakcije sa etil acetatom su isprane fiziološkim rastvorom/vodom (1:1, 4 x 25 mL), sušene (anhidrovani natrijum sulfat), filtrirane i redukovane in vacuo. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 25-100% etil acetat u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.99 g, 28.4 %). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 2H), 6.83 (d, 2H), 4.20-4.46 (m, 1H), 4.02-4.14 (m, 2H), 3.48-3.76 (m, 3H), 3.08-3.30 (m, 3H), 2.86 (br s, 1H), 1.50 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.38 min, m/z = 338 [M+H]+ .
Korak 2: (S)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilat:
[0556] (S)-terc-butil 3-(hidroksimetil)-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat (450 mg. 1.33 mmol) je podvrgnut kontinuiranoj protočnoj hidrogenizaciji (ThalesNano H-cube aparat, 10% Pd/C kertridž, sobna temperatura, režim kompletnog H2, MeOH rastvarač). Sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji (10 g Si kertridž, eluiran 0-20% MeOH / DCM) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao staklo (95 mg, 23%). LCMS (postupak C): RT= 0.62 min, m/z = 308 [M+H]+ .
Korak 3: (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(2-(hidroksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0557] (S)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilat (88 mg, 0.42 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (150 mg, 0.42 mmol) kao što je opisano u Primeru 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (6 mg, 3%).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.68 (br s, 1H), 8.44 (s, 1H), 7.60 (m, 4H), 7.48 (t, 1H), 6.85 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 3.71 (t, 1H), 3.55 (m, 1H), 3.25 (dd, 1H), 3.13 (m, 5H), 2.94 (m, 1H), 2.81 (m, 2H), 2.71 (m, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.72 min, m/z = 514 [M+H]+ .
Primer 128: (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(2-(hidroksimetil)-4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0558]
[0559] (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(2-(hidroksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (52 mg, 0.101 mmol) je rastvoren u metanolu (1 mL) i dodat je vodeni rastvor formaldehida (0.015 mL, 0.20 mmol), a zatim natrijum triacetoksiborohidrid (107 mg, 0.51 mmol). Smeša je mešana u trajanju od 3 časa, zatim dodata u 2 g SCX kertridž. Kertridž je ispran metanolom, zatim eluiran sa 2 M NH3/ MeOH da bi se dobilo staklo. Ovo je suspendovano u etru i dobijena čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (29 mg, 54%).<1>H 8.44 (s, 1H), 7.60 (m, 4H), 7.48 (t, 1H), 6.86 (d, 2H), 4.95 (s, 2H), 4.59 (br s, 1H), 3.66 (s, 2H), 3.27 (m, 2H), 3.09 (s, 3H), 2.96 (m, 2H), 2.75 (m, 1H), 2.22 (s, 3H), 2.10 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.74 min, m/z = 528 [M+H]+ .
Primer 129: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(2-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0560]
Korak 1: (R)-terc-butil 3-(hidroksimetil)-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0561] 1-fluoro-4-nitrobenzen (1.056 g, 7.49 mmol) i kalijum karbonat (3.10 g, 22.5 mmol) su suspendovani u anhidrovanom DMF (10 mL). Dodat je (R)-terc-butil 3-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilat (1.70 g, 7.86 mmol) i smeša je zagrevana na 90°C u trajanju od 21 časa. Posle hlađenja smeša je podeljena između fiziološkog rastvora/vode (100 mL) i etil acetata (25 mL). Vodeni sloj je odvojen i dalje ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 25 mL). Spojene frakcije sa etil acetatom su isprane fiziološkim rastvorom/vodom (1:1, 4 x 25 mL), sušene (Na2SO4), filtrirane i redukovane in vacuo. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (gradijent 20-100% etil acetata u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.69 g, 27.3 %). LCMS (postupak C): RT= 1.38 min, m/z = 338 [M+H]+ .
Korak 2: (R)-terc-butil 3-(metoksimetil)-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0562] (R)-terc-butil 3-(hidroksimetil)-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat (430 mg, 1.28 mmol) je rastvoren u THF (10 mL) i hlađen do 0°C. Dodat je natrijum hidrid (61.3 mg, 1.53 mmol) i smeša je mešana u trajanju od 5 min. Dodat je jodometan (0.105 mL, 1.67 mmol) i smeša je mešana preko noći. Smeša je zatim koncentrovana in vacuo i podvrgnuta hromatografiji (Isolera 25 g Si kertridž; eluiran 0-50% EtOAc / c-heks) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (281 mg, 63%). LCMS (postupak C): RT= 1.67 min, m/z = 352 [M+H]+ .
Korak 3: (R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-3-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilat:
[0563] (R)-terc-butil 3-(metoksimetil)-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat (270 mg, 0.77 mmol mmol) je podvrgnut kontinuiranoj protočnoj hidrogenizaciji (H-cube, 10% Pd/C kertridž, sobna temperatura, kompletan H2, MeOH rastvarač). Smeša je koncentrovana da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova kao žuto staklo (280 mg, 113%), koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak C): RT= 0.83 min, m/z = 322 [M+H]+ .
Korak 4: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(2-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0564] (R)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-3-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilat (90 mg, 0.28 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (100 mg, 0.28 mmol) kao što je opisano u Primeru 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (45 mg, 30%).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.69 (br s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.60 (m, 4H), 7.48 (m, 1H), 6.86 (d, 2H), 4.96 (s, 2H), 3.72 (m, 2H), 3.19 (s, 3H), 3.13 (m, 5H), 2.98 (m, 2H), 2.83 (m, 2H), 2.70 (m, 1H). LCMS (postupak C): RT 0.81 min, m/z = 528 [M+H]+ .
Primer 130: (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(2-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0565]
Korak 1: (S)-terc-butil 3-(metoksimetil)-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0566] (S)-terc-butil 3-(hidroksimetil)-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat (470 mg, 1.39 mmol) je rastvoren u THF (10 mL) i hlađen do 0°C. Dodat je natrijum hidrid (61.3 mg, 1.53 mmol) i smeša je mešana u trajanju od 5 min. Dodat je jodometan (0.105 mL, 1.67 mmol) i smeša je mešana preko noći. Smeša je zatim koncentrovana in vacuo i podvrgnuta hromatografiji (25 g Si kertridž; eluiran 0-50% EtOAc / c-heks.) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (380 mg, 78%). LCMS (postupak C): RT= 1.67 min, m/z = 352 [M+H]+ .
Korak 2: (S)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-3-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilat:
[0567] (S)-terc-butil 3-(metoksimetil)-4-(4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat (450 mg, 1.28 mmol) je podvrgnut kontinuiranoj protočnoj hidrogenizaciji (H-cube, 10% Pd/C kertridž, sobna temperatura, režim kompletnog H2, MeOH rastvarač). Sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji (Isolera 10 g Si kertridž; eluiran 0-20% MeOH / DCM) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao staklo (90 mg, 22%). LCMS (postupak C): RT= 0.82 min, m/z = 322 [M+H]+ .
Korak 3: (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(2-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0568] (S)-terc-butil 4-(4-aminofenil)-3-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilat (62 mg, 0.28 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (100 mg, 0.28 mmol) kao što je opisano u Primeru 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (12 mg, 6%).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.68 (br s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.60 (m, 4H), 7.48 (m, 1H), 6.86 (d, 2H), 4.96 (s, 2H), 3.72 (m, 2H), 3.19 (s, 3H), 3.13 (m, 5H), 2.98 (m, 2H), 2.83 (m, 2H), 2.70 (m, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.81 min, m/z = 528 [M+H]+ .
Primer 131: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(piperidin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0569]
Korak 1: (5-amino-2-(piperidin-1-il)fenil)metanol:
[0570] 2-fluoro-5-nitrobenzaldehid (1 g, 5.91 mmol) je rastvoren u DMF (10 mL) i dodat je piperidin (0.644 mL, 6.50 mmol), a zatim DIPEA (2.272 mL, 13.0 mmol). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Dodata je voda i rezultujući žuti talog je sakupljen filtracijom. Ovo je rastvoreno u etanolu (10.0 mL) i dodat je natrijum borohidrid (0.336 g, 8.87 mmol). Dobijeni rastvor je mešan u trajanju od 30 min, zatim koncentrovan in vacuo. Ostatak je podeljen između DCM i zasićenog vodenog rastvora NH4Cl. Organski sloj je odvojen, ispran fiziološkim rastvorom, zatim koncentrovan in vacuo. Ostatak je rastvoren u metanolu i filtriran kroz vatu, zatim podvrgnut kontinuiranoj protočnoj hidrogenizaciji (H-cube, 10% Pd/C kertridž, sobna temperatura, 50 bar, rastvarač metanol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao narandžasto ulje (410 mg, 34%), koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak C): RT= 0.25 min, m/z = 207 [M+H]+ .
Korak 2: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(piperidin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0571] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (300 mg, 0.084 mmol) je suspendovan u toluenu (5 mL) i dodat je mCPBA (291 mg, 0.93 mmol) kao rastvor u DCM (3 mL) na sobnoj temperaturi. Posle 15 minuta dodat je DIPEA (0.44 mL, 2.53 mmol), a zatim (5-amino-2-(piperidin-1-il)fenil)metanol (174 mg, 0.84 mmol). Dobijena smeša je zagrevana na 70°C u trajanju od 16 časova, zatim koncentrovana in vacuo i pretvorena u azeotropnu smešu sa etil acetatom. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (10 g Si kertridž; eluiran 0-100% EtOAc / c-heks. zatim 0-5% MeOH / EtOAc) da bi se dobilo staklo. Ovo je suspendovano u dietil etru i čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (271 mg, 63%).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.46 (s, 1H), 7.66 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.55 (dd, 1H), 7.48 (t, 1H), 7.00 (d, 1H), 5.04 (br s, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.55 (s, 2H), 3.12 (s, 3H), 2.76 (m, 4H), 1.64 (m, 4H), 1.51 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.97 min, m/z = 513 [M+H]+ .
Primer 132: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(difluorometoksi)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0572]
Korak 1: 1-bromo-2-(difluorometoksi)-4-nitrobenzen:
[0573] Suspenzija 2-bromo-5-nitrofenola (1.00 g, 4.59 mmol), etil hlorodifluoroacetata (0.581 mL, 4.59 mmol) i kalijum karbonata (0.634 g, 4.59 mmol) u anhidrovanom DMF (10.35 mL) je zagrevana do 70°C pod atmosferom azota u trajanju od 5 časova. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana u etil acetatu (3 x 25 mL). Spojene organske faze su isprane sa 50:50 vodom:fiziološkim rastvorom (3 x 30 mL), sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Biotage hromatografije (silika 50g kertridž, eluiranje sa gradijentom cikloheksana: etil acetata od 100:0 do 80:20) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje (920 mg, 75%).1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.00 (dd, 1H), 7.83 (d, 1H), 6.66 (t, 1H).
Korak 2: (R)-terc-butil 4-(2-(difluorometoksi)-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0574] Suspenzija 1-bromo-2-(difluorometoksi)-4-nitrobenzena (400 mg, 1.492 mmol), (R)-terc-butil 2-metilpiperazin-1-karboksilata (299 mg, 1.492 mmol), tetrabutilamonijum bromida (48.1 mg, 0.149 mmol) i kalijum karbonata (309 mg, 2.239 mmol) u anhidrovanom DMSO (2 mL) je zagrevana do 80°C pod atmosferom azota u trajanju od 24 časa, zatim do 120°C tokom dodatnih 24 časa. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (10 mL) i ekstrahovana u etil acetatu (3 x 10 mL). Spojene organske faze su isprane sa 50:50 vodom:fiziološkim rastvorom (3 x 10 mL), sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Biotage hromatografije (silika 50g kertridž, eluiranje sa gradijentom cikloheksana:etil acetata od 95:5 do 60:40) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao narandžasto ulje koje očvršćava usled stajanja (320 mg, 55%). 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.99 (d, 1H), 6.98 (d, 1H), 6.53 (t, 1H), 4.37 (br s, 1H), 3.98 (br d, 1H), 3.51 (ddd, 1H), 3.44 (dt, 1H), 3.28 (td, 1H), 2.99 (dd, 1H), 2.85 (td, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.31 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.87 min, m/z = 410 [M+Na]+ .
Korak 3: (R)-terc-butil 4-(4-amino-2-(difluorometoksi)fenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0575] Rastvor (R)-terc-butil 4-(2-(difluorometoksi)-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (320 mg, 0.826 mmol) u metanolu (50 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, 40 bara, sobna temperatura, 1 mL/min). Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (262 mg, 89%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ -6.83 (m, 1H), 6.37-3.60 (m, 3H), 4.30 (br s, 1H), 3.89 (d, 1H), 3.58 (s, 2H), 3.23 (td, 1H), 3.13 (dd, 1H), 2.98 (dt, 1H), 2.79 (dd, 1H), 2.58 (td, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.30 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.54 min, m/z = 358 [M+H]+ .
Korak 4: (R)-terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(difluorometoksi)fenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0576] 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-amino-2-(difluorometoksi)fenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilatom (101 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (88 mg, 47%).
8.13 (br s, 1H), 7.89 (br s, 1H), 7.44 (dd, 2H), 7.29 (dd, 1H), 7.16 (br d, 1H), 6.94 (d, 1H), 6.59 (t, 1H), 4.90 (s, 2H), 4.33 (br s, 1H), 3.93 (d, 1H), 3.08-3.33 (m, 6H), 2.83 (dd, 1H), 2.65 (td, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.32 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.96 min, m/z = 664 [M+H]+ .
Korak 5: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(difluorometoksi)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0577] (R)-terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(difluorometoksi)fenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat (88 mg, 0.132 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (27 mg, 36%).<1>H NMR (400
8.48 (s, 1H), 7.82 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.43-7.53 (m, 2H), 7.05 (d, 1H), 7.02 (t, 1H), 4.98 (s, 2H), 3.11 (s, 3H), 3.07 (d, 2H), 2.75-2.94 (m, 3H), 2.43-2.58 (m, 1H), 2.23 (t, 1H), 0.98 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.93 min, m/z = 564 [M+H]+ .
Primer 133: (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(heksahidropirazino[2,1-c][1,4]oksazin-8(1H)-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on [0578]
Korak 1: (S)-2-(heksahidropirazino[2,1-c][1,4]oksazin-8(1H)-il)-5-nitrobenzaldehid:
[0579] Suspenzija 2-fluoro-5-nitrobenzaldehida (400 mg, 2.365 mmol), (S)-oktahidropirazino[2,1-c][1,4]oksazina (336 mg, 2.365 mmol) [pripremljen kao što je opisano za R-enantiomer u J. Med. Chem., 2012, 55(12), 5887-5900, ali upotrebom suprotnog enantiomera početnog materijala] i kalijum karbonata (490 mg, 3.55 mmol) u anhidrovanom DMF (2.5 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota preko noći. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (25 mL) i ekstrahovana u etil acetat (3 x 10 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (silika 50g kertridž, eluiranje gradijentom cikloheksana:etil acetata:metanola od 90:10:0 do 0:100:0 do 0:80:20) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao narandžasta čvrsta supstanca (506 mg, 73%).<1>H NMR 8.62 (d, 1H), 8.31 (dd, 1H), 7.08 (d, 1H), 3.90 (dd, 1H), 3.65-3.79 (m, 2H), 3.25-3.47 (m, 3H), 3.20 (dt, 1H), 2.79-2.93 (m, 2H), 2.74 (dt, 1H), 2.43-2.68 (m, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.48 min, m/z = 292 [M+H]+ .
Korak 2: (S)-(2-(heksahidropirazino[2,1-c][1,4]oksazin-8(1H)-il)-5-nitrofenil)metanol:
[0580] Rastvor (S)-2-(heksahidropirazino[2,1-c][1,4]oksazin-8(1H)-il)-5-nitrobenzaldehida (506 mg, 1.737 mmol) u anhidrovanom THF (3217 μl) je hlađen do 0°C, a zatim je u porcijama dodavan natrijum borohidrid (65.7 mg, 1.737 mmol). Smeša je mešana na 0°C u trajanju od 90 minuta, zatim ugašena vodom (20 mL) i ekstrahovana u dihlorometan (3 x 15 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (390 mg, 77%). 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 8.14 (dd, 1H), 7.12 (d, 1H), 4.72-4.86 (m, 2H), 3.90 (dd, 1H), 3.65-3.78 (m, 2H), 3.31 (t, 1H), 3.01-3.23 (m, 3H), 2.98 (dt, 1H), 2.89 (dt, 1H), 2.72 (dt, 1H), 2.42-2.67 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.26 min, m/z = 294 [M+H]+ .
Korak 3: (S)-(5-amino-2-(heksahidropirazino[2,1-c][1,4]oksazin-8(1H)-il)fenil)metanol:
[0581] Rastvor (S)-(2-(heksahidropirazino[2,1-c][1,4]oksazin-8(1H)-il)-5-nitrofenil)metanola (390 mg, 1.330 mmol) u metanolu (40 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, 30 bara H2, sobna temperatura, 1 mL/min) sa dva prolaza. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto-mrka čvrsta supstanca (296 mg, 85%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 6.57 (dd, 1H), 6.46 (d, 1H), 4.73 (d, 1H), 4.67 (d, 1H), 3.88 (dd, 1H), 3.71 (td, 2H), 3.61 (br s, 2H), 3.29 (dd, 1H), 2.92-3.08 (m, 2H), 2.86 (dt, 1H), 2.78 (dt, 1H), 2.70 (dt, 1H), 2.37-2.61 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.21 min, m/z = 264 [M+H]+ .
Korak 4: (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(heksahidropirazino[2,1-c][1,4]oksazin-8(1H)-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0582] 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa (S)-(5-amino-2-(heksahidropirazino[2,1-c][1,4]oksazin-8(1H)-il)fenil)metanolom (75 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (35 mg, 22%).<1>H NMR (400
8.46 (s, 1H), 7.99 (br s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.56 (dd, 1H), 7.48 (t, 1H), 7.00 (d, 1H), 5.06 (t, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.48-4.61 (m, 2H), 3.76 (d, 1H), 3.64 (dd, 1H), 3.52 (t, 1H), 3.07-3.18 (m, 4H), 2.90 (d, 1H), 2.70-2.85 (m, 3H), 2.65 (d, 1H), 2.19-2.42 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.72 min, m/z = 570 [M+H]+ .
Primer 134: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(2,2-difluoro-1-hidroksietil)-4-((R)-3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0583]
Korak 1: (2R)-terc-butil 4-(2-(2,2-difluoro-1-hidroksietil)-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat
[0584] Pod atmosferom N2, CsF (10 mg, 0.07 mmol) je dodat u rastvor (R)-terc-butil 4-(2-formil-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (1g, 2.86 mmol) i (difluorometil)trimetilsilana (0.81 mL, 5.72 mmol) u 10 mL DMF, zatim je smeša mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Zatim je dodat rastvor TBAF (5.7 ml, 1 M in THF) i cela smeša je mešana još 1 čas. Posle ekstrakcije sa Et2O i H2O, organska faza je isprana fiziološkim rastvorom, i zatim sušena preko anhidrovanog MgSO4. Pošto je rastvor filtriran i rastvarač je isparavan pod vakuumom, ostatak je podvrgnut hromatografiji da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.9 g, 78%).
Korak 2: (2R)-terc-butil 4-(4-amino-2-(2,2-difluoro-1-hidroksietil)fenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat
[0585] (2R)-terc-butil 4-(2-(2,2-difluoro-1-hidroksietil)-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat (0.3 g, 0.747 mol) je hidrogenizovan sa H-Cube (10% Pd/C kertridž, kompletan H2, 25°C, 1 mL/min). Rastvor je koncentrovan in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.27g, 97%).
Korak 3: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(2,2-difluoro-1-hidroksietil)-4-((R)-3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0586] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (191 mg, 0.538 mmol) je reagovao sa (2R)-terc-butil 4-(4-amino-2-(2,2-difluoro-1-hidroksietil)fenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilatom (183 mg, 0.512 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (154 mg, 52%). LCMS (postupak C): RT= 0.78 min, m/z = 578 [M+H]+ .
Primer 135:(R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(3-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
Korak 1: (R)-terc-butil 4-(2-formil-4-nitrofenil)-2-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilat [0588] 2-fluoro-5-nitrobenzaldehid (1g, 5.91 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 2-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilatom (1g, 4.34 mmol) praćenjem postupka za Primer 21 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.30 g, 79%). Korak 2: (R)-terc-butil 4-(2-(hidroksimetil)-4-nitrofenil)-2-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilat (R)-terc-butil 4-(2-formil-4-nitrofenil)-2-(metoksimetil) piperazin-1-karboksilat (0.27g, 0.712 mol) je reagovao sa natrijum borohidridom (0.032g, 0.854 mmol) praćenjem postupka za Primer 21 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.24 g, 88%).
Korak 3: (R)-terc-butil 4-(4-amino-2-(hidroksimetil)fenil)-2-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilat:
[0589] (R)-terc-butil 4-(2-(hidroksimetil)-4-nitrofenil)-2-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilat (0.24 g, 0.63 mmol) je hidrogenizovan upotrebom H-cube aparata (10% Pd/C kertridž, kompletan H2, 25°C, 1 mL/min). Rastvor je koncentrovan in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.21 g, 95%).
Korak 4: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(3-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0590] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido [4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (244 mg, 0.687 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-amino-2-(hidroksimetil) fenil)-2-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilatom (230 mg, mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (190 mg, 52%).1H NMR (400 MHz, MeOD): δ
1H), 7.88 (s, 1H), 7.54 (m, 3H), 7.41 (m, 1H), 7.12 (d, 2H), 4.98 (s, 2H), 4.74 (s, 2H), 3.80 (m, 1H), 3.28 (s, 3H), 3.19 (s, 3H), 3.05 (m, 1H), 2.95 (m, 1H), 2.00 (d, 1H), 1.84 (d, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.70 min, m/z = 558 [M+H]+ .
Primer 136: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((metilamino)metil)-4-(piperidin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0591]
Korak 1: 5-nitro-2-(piperidin-1-il)benzaldehid:
[0592] 2-fluoro-5-nitrobenzaldehid (1 g, 5.91 mmol) je rastvoren u DMF (10 mL) i dodat je piperidin (0.64 mL, 6.50 mmol), a zatim DIPEA (2.27 mL, 13.0 mmol). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Dodata je voda i dobijeni talog je sakupljen filtracijom i sušen in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.3 g, 94%) kao žuta čvrsta supstanca koja je korišćena bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak C): RT= 1.59 min, m/z = 235 [M+H]+ .
Korak 2: N-metil-1-(5-nitro-2-(piperidin-1-il)fenil)metanamin:
[0593] 5-nitro-2-(piperidin-1-il)benzaldehid (250 mg, 1.067 mmol) je rastvoren u metanolu (1 mL) i dodat je natrijum bikarbonat (108 mg, 1.281 mmol), a zatim metilamin (2M u THF, 0.640 mL, 1.281 mmol). Smeša je mešana 2 časa na 70°C, zatim hlađena do 0°C. Dodat je natrijum borohidrid (48.5 mg, 1.281 mmol) i smeša je mešana preko noći (ostavljena da se vrati do do sobne temperature). Dodata je kap vode i smeša je koncentrovana in vacuo. Ostatak je rastvoren u metanolu i zakišeljena sa HCl. Dobijeni rastvor je dodat u 5 g SCX kertridž i ispran sa MeOH, zatim eluiran sa 2 M NH3/ MeOH da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao staklo (245 mg, 92%).
LCMS (postupak C): RT= 0.70 min, m/z = 250 [M+H]+ .
Korak 3: terc-butil metil(5-nitro-2-(piperidin-1-il)benzil)karbamat:
[0594] Rastvor di-terc-butil-dikarbonata (236 mg, 1.081 mmol) u DCM (5 mL) je dodat u N-metil-1-(5-nitro-2-(piperidin-1-il)fenil)metanamin (245 mg, 0.983 mmol). Dodat je trietilamin (0.274 mL, 1.965 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 90 min. Smeša je razblažena vodom i organski sloj je sakupljen upotrebom kertridža faznog separatora i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (344 mg, 99%) kao staklo.
LCMS (postupak C): RT= 2.05 min, m/z = 350 [M+H]+ .
Korak 4: terc-Butil 5-amino-2-(piperidin-1-il)benzil(metil)karbamat:
[0595] terc-butil metil(5-nitro-2-(piperidin-1-il)benzil)karbamat (344 mg, 0.98 mmol) je podvrgnut kontinuiranoj protočnoj hidrogenizaciji (H-cube, 10% Pd/C kertridž, sobna temperatura, 50 bar, rastvarač metanol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (306 mg, 96%) kao žuti sirup, koji je korišćen bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak C): RT= 1.03 min, m/z = 320 [M+H]+ .
Korak 5: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((metilamino)metil)-4-(piperidin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0596] terc-Butil 5-amino-2-(piperidin-1-il)benzil(metil)karbamat (71.9 mg, 0.22 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (80 mg, 0.22 mmol) kao što je opisano u Primeru 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (70 mg, 58%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ (br s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.64 (br s, 1H), 7.52 (d, 2H), 7.49 (m, 2H), 7.03 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.67 (m, 2H), 3.15 (s, 3H), 2.78 (m, 4H), 2.33 (s, 3H), 1.64 (m, 4H), 1.52 (m, 2H). LCMS (postupak C) : RT= 1.13 min, m/z = 526 [M+H]+ .
Primer 137: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((metilamino)metil)-4-(pirolidin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0597]
Korak 1: (5-nitro-2-(pirolidin-1-il)fenil)metanol:
[0598] 2-fluoro-5-nitrobenzaldehid (1 g, 5.91 mmol) je rastvoren u DMF (10 mL) i dodat je pirolidin (0.54 mL, 6.50 mmol), a zatim DIPEA (2.27 mL, 13.0 mmol). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Dodata je voda i dobijeni talog je sakupljen filtracijom i sušen in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.30 g, 99%) kao žuta čvrsta supstanca koja je korišćena bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak C): RT= 1.34 min, m/z = 221 [M+H]+ .
Korak 2: N-metil-1-(5-nitro-2-(pirolidin-1-il)fenil)metanamin.
[0599] (5-nitro-2-(pirolidin-1-il)fenil)metanol (235 mg, 1.07 mmol) je rastvoren u metanolu (1 mL) i dodat je natrijum bikarbonat (108 mg, 1.281 mmol), a zatim metilamin (2M u THF, 0.640 mL, 1.281 mmol). Smeša je mešana 2 časa na 70°C, zatim hlađena do 0°C. Dodat je natrijum borohidrid (48.5 mg, 1.28 mmol) i smeša je mešana preko noći (ostavljena da se vrati do sobne temperature). Dodata je kap vode i smeša je koncentrovana in vacuo. Ostatak je rastvoren u metanolu i zakišeljen sa HCl. Dobijeni rastvor je dodat u 5 g SCX kertridž i ispran sa MeOH, zatim eluiran sa 2 M NH3/ MeOH da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao staklo (240 mg, 96%).
LCMS (postupak C): RT= 0.61 min, m/z = 236 [M+H]+ .
Korak 3: terc-butil metil(5-nitro-2-(pirolidin-1-il)benzil)karbamat:
[0600] Rastvor di-terc-butil-dikarbonata (236 mg, 1.08 mmol) u DCM (5 mL) je dodat u N-metil-1-(5-nitro-2-(pirolidin-1-il)fenil)metanamin (235 mg, 1.00 mmol). Dodat je trietilamin (0.274 mL, 1.965 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 90 min. Smeša je razblažena vodom i organski sloj je sakupljen upotrebom kertridža faznog separatora i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (333 mg, 99%) kao staklo.
LCMS (postupak C): RT= 1.84 min, m/z = 336 [M+H]+ .
Korak 4: terc-butil 5-amino-2-(pirolidin-1-il)benzil(metil)karbamat:
[0601] terc-Butil metil(5-nitro-2-(pirolidin-1-il)benzil)karbamat (333 mg, 0.99 mmol) je podvrgnut kontinuiranoj protočnoj hidrogenizaciji (H-cube, 10% Pd/C kertridž, sobna temperatura, 50 bar, rastvarač metanol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (312 mg, 102%) kao žuti sirup, koji je korišćen bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak C): RT= 0.91 min, m/z = 306 [M+H]+ .
Korak 5: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((metilamino)metil)-4-(pirolidin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0602] terc-Butil 5-amino-2-(pirolidin-1-il)benzil(metil)karbamat (69 mg, 0.22 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (80 mg, 0.22 mmol) kao što je opisano u Primeru 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (51 mg, 50%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ (br s, 1H), 8.45 (s, 1H), 7.92 (br s, 1H), 7.65 (m, 2H), 7.48 (t, 2H), 6.91 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.65 (s, 2H), 3.12 (s, 3H), 3.06 (m, 4H), 2.32 (s, 3H), 1.86 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.96 min, m/z = 512 [M+H]+ .
Primer 138: 7-((4-(4-acetilpiperazin-1-il)-3-(pirolidin-1-ilmetil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0603]
Korak 1: 1-(4-(4-nitro-2-(pirolidin-1-ilmetil)fenil)piperazin-1-il)etanon:
[0604] 2-(4-acetilpiperazin-1-il)-5-nitrobenzaldehid (296 mg, 1.07 mmol) je rastvoren u metanolu (1 mL) i dodat je natrijum bikarbonat (108 mg, 1.28 mmol), a zatim pirolidin (0.11 mL, 1.28 mmol). Smeša je mešana 2 časa na 70°C, zatim hlađena do 0°C. Dodat je natrijum borohidrid (48.5 mg, 1.28 mmol) i smeša je mešana preko noći (ostavljena da se vrati do sobne temperature). Dodata je kap vode i smeša je koncentrovana in vacuo. Ostatak je rastvoren u metanolu i zakišeljen sa HCl. Dobijeni rastvor je dodat u 5 g SCX kertridž i ispran sa MeOH, zatim eluiran sa 2 M NH3/ MeOH da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao staklo (212 mg, 60%). LCMS (postupak C): RT= 0.25 min, m/z = 333 [M+H]+ .
Korak 2: 1-(4-(4-amino-2-(pirolidin-1-ilmetil)fenil)piperazin-1-il)etanon:
[0605] 1-(4-(4-nitro-2-(pirolidin-1-ilmetil)fenil)piperazin-1-il)etanon (205 mg, 0.61 mmol) je podvrgnut kontinuiranoj protočnoj hidrogenizaciji (H-cube, 10% Pd/C kertridž, sobna temperatura, 50 bar, rastvarač metanol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (196 mg, 106%) kao žuti sirup, koji je korišćen bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak C) : RT= 0.24 min, m/z = 303 [M+H]+ .
Korak 3: 7-((4-(4-acetilpiperazin-1-il)-3-(pirolidin-1-ilmetil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0606] 1-(4-(4-Amino-2-(pirolidin-1-ilmetil)fenil)piperazin-1-il)etanon (68 mg, 0.22 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (80 mg, 0.22 mmol) kao što je opisano u Primeru 131 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4 mg, 1%) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.77 (br s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.98 (br s, 1H), 7.66 (d, 2H), 7.50 (m, 2H), 7.03 (d, 1H), 4.98 (s, 2H), 3.65 (s, 2H), 3.57 (m, 4H), 3.14 (s, 3H), 2.80 (m, 4H), 2.04 (s, 3H), 1.70 (m, 4H); jedan signal većinom sakriven rastvaračem na 2.50, pretpostavlja se da je 4H. LCMS (postupak C): RT= 0.90 min, m/z = 609 [M+H]+ .
Primer 139: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(difluorometil)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0607]
Korak 1: (R)-terc-butil 4-(2-(difluorometil)-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0608] Rastvor (R)-terc-butil 4-(2-formil-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (0.5g, 1.43 mmol) i DAST (0.6g, 3.72 mmol) u DCM (20 mL) je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Zatim je razblažen zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (5 mL). Organski sloj je sušen preko magnezijum sulfata, filtriran i koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen pomoću Biotage hromatografije da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.43g, 81 %). LCMS (postupak A) RT= 0.1.65 min, m/z = 372 [M+H]+ .
Korak 2: (R)-terc-butil 4-(4-amino-2-(difluorometil)fenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0609] Rastvor (R)-terc-butil 4-(2-(difluorometil)-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (0.3g, 0.8 mmol) u metanolu (30 mL) je propušten kroz H-Cube aparat opremljen sa 10% PD-C kertridžom uz praćenje podešavanja [1.0 ml/min protok, 40°C, režim kompletnog H2)]. Rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja (270 mg, 97 %). LCMS (postupak A): RT= 1.65 min, m/z = 342 [M+H]+ .
Korak 3: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(difluorometil)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0610] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (183 mg,0.516 mmol) je reagovao sa terc-5 butil 4-(4-amino-2-metoksifenil) piperazin-1-karboksilatom (160 mg,0.47 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (121 mg, 47%). 1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 8.27 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.50 (br s, 1H), 7.44 (d, 2H), 7.30 (m, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.09 (t, 1H), 5.01 (d, 1H), 4.91 (s, 2H), 3.21 (s, 3H), 3.09 (m, 3H), 2.93 (m, 2H), 2.77 (m, 1H), 2.48 (m, 1H), 1.11 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.93 min, m/z = 548 [M+H]+ .
Primer 140: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(2-hidroksipropan-2-il)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3dihidropirimido [4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0611]
Korak 1: (R)-terc-butil 4-(2-(etoksikarbonil)-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0612] Suspenzija etil 2-fluoro-5-nitrobenzoata (2.13 g, 10 mmol), (R)-terc-butil 2-metilpiperazin-1-karboksilata (2 g, 10 mmol) i kalijum karbonata (2.1 g, 15 mmol) u anhidrovanom DMF (20 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota u trajanju od 16 časova. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, podeljena između vode (100 mL) i etil acetata (100 ml). Etil acetat je odvojen i ispran vodom (3 x 20 ml), sušen (anhidrovani natrijum sulfat), filtriran i redukovan in vacuo. Ostatak je prečišćen pomoću „flash“ hromatografije (0-100% etil acetat u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.8 g, 71 %). LCMS (postupak A): RT= 1.83 min, m/z = 394 [M+H]+ .
Korak 2 : (R)-terc-butil 4-(4-amino-2-(etoksikarbonil)fenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0613] Rastvor (R)-terc-butil 4-(2-(etoksikarbonil)-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (500 mg, 1.27 mmol) u metanolu (30 ml) je propušten kroz H-Cube aparat opremljen sa 10% PD-C kertridžom uz praćenje podešavanja [1.0 ml/min protok, 40°C, režim kompletnog H2)]. Rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobilo jedinjenje koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja (425 mg, 92 %). LCMS (postupak A) RT= 1.2 min, m/z = 364 [M+H]+ .
Korak 3: (R)-terc-butil 4-(4-amino-2-(2-hidroksipropan-2-il)fenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0614] U rastvor (R)-terc-butil 4-(4-amino-2-(etoksikarbonil)fenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (0.8 g, 2.2 mmol) u suvom THF (30 mL) na 0°C pod azotom je ukapavanjem dodavan rastvor metil magnezijum bromida u THF (1.4M, 7.26 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći zatim ugašen sa zasićenim rastvorom amonijum hlorida. Dobijeni rastvor je razblažen sa etil acetatom (100mL). Organski sloj je sušen preko magnezijum sulfata, filtriran i koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen pomoću Biotage hromatografije da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.16 g, 20.8 %). LCMS (postupak A): RT= 0.86 min, m/z = 350 [M+H]+ .
Korak 4: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(2-hidroksipropan-2-il)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil) amino)-1-metil-2,3dihidropirimido [4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0615] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido [4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (178 mg, 0.501 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-amino-2-(2-hidroksipropan-2-il)fenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilatom (160 mg,4.77 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (30 mg, 9.8%).1H NMR (400 MHz, CDCl
3): δ (s, 1H), 8.72 (s, 1H), 7.60 (s, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.47 (m, 1H), 7.44 (m, 1H), 7.32 (m, 2H), 5.30 (s, 1H), 4.90 (s, 2H), 3.21 (s, 3H), 3.2-3.05 (m, 3H), 2.99 (m, 3H), 2.67 (m, 1H), 1.61 (s, 3H), 1.60 (s, 3H), 1.15 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.75 min, m/z = 556 [M+H]+ .
Primer 141: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)-3-(((2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on [0616]
Korak 1: terc-butil 4-(2-(hlorometil)-4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0617] terc-butil 4-(2-(hidroksimetil)-4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat (900 mg, 2.67 mmol) je rastvoren u DMF (10 mL). Dodat je trietilamin (1.859 mL, 13.3 mmol), a zatim metansulfonil hlorid (0.624 mL, 8.00 mmol), i smeša je mešana preko noći na 60°C. Rastvarač je uklonjen in vacuo. Ostatak je razblažen sa vodom i ekstrahovan sa etil acetatom (x2). Spojeni organski ekstrakti su sušeni sa MgSO4i koncentrovani. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (25 g Si; eluiran 0-100% EtOAc / cikloheksan) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (410 mg, 43%) kao žuti sirup koji je kristalizovao (žute rozete) prilikom stajanja. LCMS (postupak C) : RT= 1.86 min, m/z = 356 [M+H]+ .
Korak 2: terc-butil 4-(4-nitro-2-(((2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)fenil)piperazin-1-karboksilat:
[0618] terc-butil 4-(2-(hlorometil)-4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat (200 mg, 0.562 mmol) je suspendovan u smeši 2,2,2-trifluoroetilamina (0.5 mL, 6.37 mmol), DIPEA (0.196 mL, 1.124 mmol) i DMF (0.5 mL). Smeša je zagrevana na 50°C preko noći, zatim koncentrovana in vacuo (pretvorena u azeotropnu smešu sa toluenom x3). Ostatak je rastvoren u dihlorometanu i rastvor je ispran zasićenim vodenim rastvorom natrijum karbonata, zatim koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (180 mg, 77%) kao žuto ulje, koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak C): RT= 1.82 min, m/z = 418 [M+H]+ .
Korak 3: terc-butil 4-(4-amino-2-(((2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)fenil)piperazin-1-karboksilat:
[0619] terc-Butil 4-(4-nitro-2-(((2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)fenil)piperazin-1-karboksilat (180 mg, 0.43 mmol) je podvrgnut kontinuiranoj protočnoj hidrogenizaciji (H-cube, 10% Pd/C kertridž, sobna temperatura, 50 bar, rastvarač metanol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (125 mg, 75%) kao braon staklo, koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak C): RT= 0.92 min, m/z = 389 [M+H]+ .
Korak 4: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)-3-(((2,2,2-trifluoroetil)amino) metil)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0620] terc-Butil 4-(4-amino-2-(((2,2,2-trifluoroetil)amino)metil)fenil)piperazin-1-karboksilat (109 mg, 0.28 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (100 mg, 0.28 mmol) kao što je opisano u Primeru 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (14 mg, 8%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.
8.46 (s, 1H), 7.97 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.49 (m, 2H), 7.05 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.81 (d, 2H), 3.26 (m, 2H), 3.11 (s, 3H), 2.76 (m, 8H). LCMS (postupak C): RT= 0.84 min, m/z = 595 [M+H]+ .
Primer 142: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((2-fluoro-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0621]
Korak 1: (R)-terc-butil 4-(3-fluoro-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0622] Suspenzija 2,4-difluoro-1-nitrobenzena (0.827 mL, 7.54 mmol), (R)-terc-butil 2-metilpiperazin-1-karboksilata (1.511 g, 7.54 mmol) i kalijum karbonata (1.564 g, 11.31 mmol) u anhidrovanom DMSO (6 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota preko noći. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana u etil acetat (3 x 25 mL). Spojene organske faze su isprane sa 50:50 vodom:fiziološkim rastvorom (3 x 40 mL), sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Biotage hromatografije (silika 100g kertridž, eluiranje sa gradijentom cikloheksana:etil acetata od 90:10 do 40:60) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (911 mg, 36%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1H), 6.40-6.56 (m, 2H), 4.26-4.40 (m, 1H), 3.93 (dt, 1H), 3.70 (dtd, 1H), 3.57 (ddd, 1H), 3.28-3.41 (m, 2H), 3.16 (ddd, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.21 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.71 min, m/z = 340 [M+H]+ .
Korak 2: (R)-terc-butil 4-(4-amino-3-fluorofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0623] Rastvor (R)-terc-butil 4-(3-fluoro-4-nitrofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilata (911 mg, 2.68 mmol) u metanolu (60 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, 30 bara H2, sobna temperatura, 1 mL/min) sa tri prolaza. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao plavo ulje (690 mg, 6.62 (dd, 1H), 6.54 (ddd, 1H), 4.24-4.38 (m, 1H), 3.87-3.97 (m, 1H), 3.46 (br s, 2H), 3.09-3.34 (m, 3H), 2.79 (dd, 1H), 2.61 (td, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.30 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.34 min, m/z = 310 [M+H]+ .
Korak 3: (R)-terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-3-fluorofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat:
[0624] 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (200 mg, 0.566 mmol) je reagovao sa (R)-terc-butil 4-(4-amino-3-fluorofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilatom (175 mg, 0.566 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo braon čvrsta supstanca (104 mg, 30%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 8.12 (t, 1H), 7.44 (dd, 2H), 7.28 (dd, 1H), 7.24 (br s, 1H), 6.61-6.72 (m, 2H), 4.88 (s, 2H), 4.34 (br s, 1H), 3.95 (td, 1H), 3.46 (br d, 1H), 3.18-3.36 (m, 2H), 3.16 (s, 3H), 2.93 (dd, 1H), 2.74 (td, 1H), 1.48 (s, 9H), 1.29 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.80 min, m/z = 616 [M+H]+ .
Korak 4: (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((2-fluoro-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0625] ((R)-terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-3-fluorofenil)-2-metilpiperazin-1-karboksilat (104 mg, 0.169 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (55 mg, 63%).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.38 (s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.47 (t, 1H), 7.35 (br s, 1H), 6.66-6.86 (m, 2H), 4.91 (s, 2H), 3.52 (t, 2H), 2.86-3.06 (m, 4H), 2.76 (t, 2H), 2.53-2.61 (m, 1H), 2.18 (t, 1H), 1.02 (d, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.81 min, m/z = 516 [M+H]+ .
Primer 143: 7-((4-(4-acetilpiperazin-1-il)-3-((metilamino)metil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0626]
Korak 1: 2-(4-acetilpiperazin-1-il)-5-nitrobenzaldehid:
[0627] 2-Fluoro-5-nitrobenzaldehid (1.00 g, 5.91 mmol) je rastvoren u DMF (10 mL) i dodat je 1-(piperazin-1-il)etanon (0.83 g, 6.50 mmol), a zatim DIPEA (2.27 mL, 13.0 mmol). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Dodata je voda i smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (x2). Spojeni organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom i koncentrovani in vacuo. Ostatak je sušen toluenskim azeotropom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.20 g, 73%) kao žuti sirup koji je delimično kristalizovan prilikom stajanja. LCMS (postupak C): RT= 0.95 min, m/z = 278 [M+H]+ .
Korak 2: 1-(4-(2-((metilamino)metil)-4-nitrofenil)piperazin-1-il)etanon:
[0628] 2-(4-acetilpiperazin-1-il)-5-nitrobenzaldehid (296 mg, 1.07 mmol) je rastvoren u metanolu (1 mL) i dodat je natrijum bikarbonat (108 mg, 1.281 mmol), a zatim metilamin (2M u THF, 0.640 mL, 1.281 mmol). Smeša je mešana u trajanju od 2 časa na 70°C, zatim hlađena do 0°C. Dodat je natrijum borohirid (48.5 mg, 1.28 mmol) i smeša je mešana preko noći (ostavljena da se vrati do sobne temperature). Dodata je kap vode i smeša je koncentrovana in vacuo. Ostatak je rastvoren u metanolu i zakišeljen sa HCl. Dobijeni rastvor je dodat u 5 g SCX kertridž i ispran sa MeOH, zatim eluiran sa 2 M NH3/ MeOH da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao staklo (256 mg, 82%). LCMS (postupak C) : RT= 0.26 min, m/z = 293 [M+H]+ .
Korak 3: terc-butil 2-(4-acetilpiperazin-1-il)-5-nitrobenzil(metil)karbamat:
[0629] Rastvor di-terc-butil-dikarbonata (236 mg, 1.08 mmol) u DCM (5 mL) je dodat u 1-(4-(2-((metilamino)metil)-4-nitrofenil)piperazin-1-il)etanon (250 mg, 0.85 mmol). Dodat je trietilamin (0.274 mL, 1.965 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 90 min. Smeša je razblažena vodom i organski sloj je sakupljen upotrebom kertridža faznog separatora i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (334 mg, 92%) kao staklo. LCMS (postupak C): RT= 1.41 min, m/z = 393 [M+H]+ .
Korak 4: terc-butil 2-(4-acetilpiperazin-1-il)-5-aminobenzil(metil)karbamat
[0630] terc-butil 2-(4-acetilpiperazin-1-il)-5-nitrobenzil(metil)karbamat (332 mg, 0.85 mmol) je podvrgnut kontinuiranoj protočnoj hidrogenizaciji (H-cube, 10% Pd/C kertridž, sobna temperatura, 50 bar, rastvarač metanol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (300 mg, 98%) kao žuti sirup, koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak C): RT= 0.77 min, m/z = 363 [M+H]+ .
Korak 5: 7-((4-(4-acetilpiperazin-1-il)-3-((metilamino)metil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0631] terc-Butil 2-(4-acetilpiperazin-1-il)-5-aminobenzil(metil)karbamat (82 mg, 0.22 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (80 mg, 0.22 mmol) kao što je opisano u Primeru 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (32 mg, 28%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ (br s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.93 (br s, 1H), 7.67 (m, 4H), 7.08 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.79 (s, 2H), 3.57 (m, 4H), 3.12 (s, 3H), 2.78 (m, 4H), 2.27 (s, 3H), 2.04 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.83 min, m/z = 569 [M+H]+ .
Primer 144: 7-((4-(4-acetilpiperazin-1-il)-3-((dimetilamino)metil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0632]
Korak 1: 1-(4-(2-((dimetilamino)metil)-4-nitrofenil)piperazin-1-il)etanon:
[0633] 2-(4-acetilpiperazin-1-il)-5-nitrobenzaldehid (296 mg, 1.07 mmol) je rastvoren u metanolu (1 mL) i dodat je natrijum bikarbonat (108 mg, 1.281 mmol), a zatim dimetilamin (2M u THF, 0.640 mL, 1.281 mmol). Smeša je mešana u trajanju od 2 časa na 70°C, zatim hlađena do 0°C. Dodat je natrijum borohidrid (48.5 mg, 1.28 mmol) i smeša je mešana preko noći (ostavljena da se vrati do sobne temperature). Dodata je kap vode i smeša je koncentrovana in vacuo. Ostatak je rastvoren u metanolu i zakišeljen sa HCl. Dobijeni rastvor je dodat u 5 g SCX kertridž i ispran sa MeOH, zatim eluiran sa 2 M NH3/ MeOH da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao staklo (198 mg, 61%). LCMS (postupak C): RT= 0.26 min, m/z = 307 [M+H]+ .
Korak 2: 1-(4-(4-amino-2-((dimetilamino)metil)fenil)piperazin-1-il)etanon:
[0634] 1-(4-(2-((dimetilamino)metil)-4-nitrofenil)piperazin-1-il)etanon (190 mg, 0.62 mmol) je podvrgnut kontinuiranoj protočnoj hidrogenizaciji (H-cube, 10% Pd/C kertridž, sobna temperatura, 50 bara, rastvarač metanol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (185 mg, 94%) kao žuti sirup, koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak C): RT= 0.23 min, m/z = 277 [M+H]+ .
Korak 3: 7-((4-(4-acetilpiperazin-1-il)-3-((dimetilamino)metil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0635] 1-(4-(4-Amino-2-((dimetilamino)metil)fenil)piperazin-1-il)etanon (62 mg, 0.22 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (80 mg, 0.22 mmol) kao što je opisano u Primeru 131 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (33 mg, 25%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 9.85 (br s, 1H), 8.4 (s, 1H), 8.03 (br s, 1H), 7.64 (m, 2H), 7.48 (m, 2H), 7.04 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.56 (m, 4H), 3.45 (s, 2H), 3.13 (s, 3H), 2.82 (m, 2H), 2.78 (m, 2H), 2.18 (s, 6H), 2.04 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.83 min, m/z = 583 [M+H]+ .
Primer 145: N-(5-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(piperazin-1-il)benzil)acetamid
[0636]
Korak 1: terc-butil 4-(2-(aminometil)-4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0637] terc-butil 4-(2-(hlorometil)-4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat (200 mg, 0.56 mmol) je suspendovan u smeši metanola (2 mL) i amonijum hidroksida (2 mL). Smeša je mešana preko noći, zatim koncentrovana in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (10 g Si kertridž; eluiran sa 0-100% etil acetatom / cikloheksanom zatim 0-10% metanolom / etil acetatom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (95 mg, 50%) kao staklo koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak C): R
T= 0.90 min, m/z = 337 [M+H] .
Korak 2: terc-butil 4-(2-(acetamidometil)-4-aminofenil)piperazin-1-karboksilat:
[0638] terc-Butil 4-(2-(aminometil)-4-nitrofenil)piperazin-1-karboksilat (90 mg, 0.27 mmol) je rastvoren u tetrahidrofuranu (2 mL). Dodat je trietilamin (0.09 mL, 0.67 mmol), a zatim anhidrid sirćetne kiseline (0.038 mL, 0.40 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa, zatim razblažena vodom i ekstrahovana sa etil acetatom. Organski sloj je sušen preko anhidrovanog magnezijum sulfata i koncentrovan. Ostatak je podvrgnut kontinuiranoj protočnoj hidrogenizaciji (H-cube, 10% Pd/C kertridž, sobna temperatura, 50 bara, rastvarač metanol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (74 mg, 79%) kao žuto ulje koje je korišćeno direktno bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak C): RT= 0.79 min, m/z = 349 [M+H]+ .
Korak 3: N-(5-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(piperazin-1-il)benzil)acetamid:
[0639] terc-Butil 4-(2-(acetamidometil)-4-aminofenil)piperazin-1-karboksilat (98 mg, 0.28 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (100 mg, 0.28 mmol) kao što je opisano u Primeru 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (36 mg, 23%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz,
8.45 (s, 1H), 8.20 (t, 1H), 7.65 (m, 4H), 7.46 (m, 1H), 7.05 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.33 (s, 2H), 3.09 (s, 3H), 2.84 (m, 4H), 2.73 (m, 4H), 1.89 (s, 3H). LCMS (postupak C): R
T= 0.72 min, m/z = 556 [M+H] .
Primer 146: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(1,1-dioksidotiomorfolino)-3-((metilamino)metil)fenil) amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0640]
Korak 1: 2-(1,1-dioksidotiomorfolino)-5-nitrobenzaldehid:
[0641] Suspenzija 2-fluoro-5-nitrobenzaldehida (2 g, 11.83 mmol), tiomorfolin 1,1-dioksida (1.599 g, 11.83 mmol) i kalijum karbonata (2.452 g, 17.74 mmol) u anhidrovanom DMF (10 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota preko noći. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (70 mL) i mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Istaložena čvrsta supstanca je izolovana filtracijom, isprana vodom, suspendovana u 1M HCl rastvoru (50 mL), izolovana filtracijom, sušena usisavanjem i sušena zamrzavanjem preko noći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (2.68
8.54 (d, 1H), 8.34 (dd, 1H), 7.43 (d, 1H), 3.69-3.80 (m, 4H), 3.36-3.45 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.95 min, m/z = 285 [M+H]+ .
Korak 2: 4-(2-((metilamino)metil)-4-nitrofenil)tiomorfolin 1,1-dioksid:
[0642] U suspenziju 2-(1,1-dioksidotiomorfolino)-5-nitrobenzaldehida (800 mg, 2.81 mmol) i natrijum bikarbonata (473 mg, 5.63 mmol) u metanolu (6 mL) dodat je metilamin (2M u metanolu, 1.688 mL, 3.38 mmol) i reakciona smeša je zagrevana do 70°C u trajanju od 2 časa. Smeša je zatim hlađena to 0°C pre dodavanja natrijum borohidrida (128 mg, 3.38 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa. Dodati su dodatni metilamin (2M u metanolu, 0.492 mL, 0.985 mmol) i natrijum borohidrid (38.8 mg, 1.688 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Reakciona smeša je ugašena sa nekoliko kapi vode, zatim je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je apsorbovan u dihlorometanu (20 mL), ispran fiziološkim rastvorom (20 mL) propušten kroz fazni separator. Organska faza je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (500 mg, 59%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 8.12 (dd, 1H), 7.15 (d, 1H), 3.79 (s, 2H), 3.60-3.69 (m, 4H), 3.20-3.29 (m, 4H), 2.50 (s, 3H). LCMS (postupak C) : RT= 0.36 min, m/z = 300 [M+H]+ .
Korak 3: terc-butil 2-(1,1-dioksidotiomorfolino)-5-nitrobenzil(metil)karbamat:
[0643] U rastvor 4-(2-((metilamino)metil)-4-nitrofenil)tiomorfolin 1,1-dioksida (500 mg, 1.670 mmol) i trietilamina (0.512 mL, 3.67 mmol) u anhidrovanom THF (5 mL) dodat je diterc-butil dikarbonat (0.427 mL, 1.837 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je razblažena fiziološkim rastvorom (20 mL) i ekstrahovana u etil acetatu (3 x 15 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane, koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom i podvrgnute hromatografiji (silika 50g kertridž, eluiranje gradijentom cikloheksana:etil acetata od 90:10 do 0:100) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (350 mg, 53%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 8.04 (br s, 1H), 7.23 (d, 1H), 4.53 (br s, 2H), 3.49 (dd, 4H), 3.26 (dd, 4H), 2.88 (s, 3H), 1.52 (br s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.43 min, m/z = 400 [M+H]+ .
Korak 4: terc-butil 5-amino-2-(1,1-dioksidotiomorfolino)benzil(metil)karbamat:
[0644] Rastvor terc-butil 2-(1,1-dioksidotiomorfolino)-5-nitrobenzil(metil)karbamata (350 mg, 0.876 mmol) u metanolu (40 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, 20 bara H2, sobna temperatura, 1 mL/min). Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (260 mg, 80%). 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 6.57 (dd, 1H), 6.47 (br s, 1H), 4.47 (br s, 2H), 3.62 (br s, 2H), 3.24-3.36 (m, 4H), 3.11-3.24 (m, 4H), 2.70-2.90 (br m, 3H), 1.39-1.56 (br m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 0.80 min, m/z = 370 [M+H]+ .
Korak 5: terc-butil 5-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(1,1-dioksidotiomorfolino)benzil(metil)karbamat:
[0645] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (150 mg, 0.423 mmol) je reagovao sa terc-butil 5-amino-2-(1,1-dioksidotiomorfolino)benzil(metil)karbamatom (156 mg, 0.423 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (170 mg,
8.10 (br s, 1H), 7.58 (dd, 1H), 7.37-7.47 (m, 3H), 7.27 (dd, 1H), 7.16 (d, 1H), 4.88 (s, 2H), 4.54 (br s, 2H), 3.30-3.43 (m, 4H), 3.15-3.25 (m, 4H), 3.15 (s, 3H), 2.70-2.90 (br m, 3H), 1.47 (br s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.46 min, m/z = 676 [M+H]+ .
Korak 6: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(1,1-dioksidotiomorfolino)-3-((metilamino)metil)fenil) amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0646] terc-Butil 5-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(1,1-dioksidotiomorfolino)benzil(metil)karbamat (170 mg, 0.251 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (121 mg, 84%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ (br s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.92 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.56 (dd, 1H), 7.48 (t, 1H), 7.13 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.69 (s, 2H), 3.29-3.33 (m, 4H), 3.21-3.29 (m, 4H), 3.12 (s, 3H), 2.33 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.83 min, m/z = 576 [M+H]+ .
Primer 147: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-3-((metilamino)metil)fenil) amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0647]
Korak 1: 2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-5-nitrobenzaldehid:
[0648] Suspenzija 2-fluoro-5-nitrobenzaldehida (1 g, 5.91 mmol), 4,4-difluoropiperidin hidrohlorida (0.932 g, 5.91 mmol) i kalijum karbonata (1.635 g, 11.83 mmol) u anhidrovanom DMF (5 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota preko noći. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (40 mL) i mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Istaložena čvrsta supstanca je izolovana filtracijom, isprana vodom, sušena usisavanjem i sušena zamrzavanjem preko noći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (1.52 g, 95%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 09 (s, 1H), 8.65 (d, 1H), 8.33 (dd, 1H), 7.13 (d, 1H), 3.41 (dd, 4H), 2.17-2.34 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 1.47 min, m/z = 271 [M+H]+ .
Korak 2: 1-(2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-5-nitrofenil)-N-metilmetanamin:
[0649] U suspenziju 2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-5-nitrobenzaldehida (700 mg, 2.59 mmol) i natrijum bikarbonata (435 mg, 5.18 mmol) u metanolu (5 mL) dodat je metilamin (2M u metanolu, 1.554 mL, 3.11 mmol) i reakciona smeša je zagrevana do 70°C u trajanju od 2 časa. Smeša je zatim hlađena do 0°C pre dodavanja natrijum borohidrida (118 mg, 3.11 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je ugašena sa nekoliko kapi vode, zatim koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je apsorbovan u dihlorometanu (20 mL), ispran fiziološkim rastvorom (20 mL) i propušten kroz fazni separator. Organska faza je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje koje je očvrslo prilikom stajanja (611 mg, 83%).<1>H 8.09 (dd, 1H), 7.09 (d, 1H), 3.78 (s, 2H), 3.18 (dd, 4H), 2.49 (s, 3H), 2.17 (tt, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.74 min, m/z = 286 [M+H]+ .
Korak 3: terc-butil 2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-5-nitrobenzil(metil)karbamat:
[0650] U rastvor 1-(2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-5-nitrofenil)-N-metilmetanamina (611 mg, 2.142 mmol) i trietilamina (0.657 mL, 4.71 mmol) u anhidrovanom THF (6 mL) dodat je diterc-butil dikarbonat (0.547 mL, 2.356 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je razblažena fiziološkim rastvorom (20 mL) i ekstrahovana u etil acetat (3 x 15 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane, koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom i prečišćene pomoću Biotage hromatografije (silika 50g kertridž, eluiranjem sa gradijetnom cikloheksana:etil acetata od 95:5 do 70:30) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (850 mg, kvantitativan prinos). 7.99 (br s, 1H), 7.14 (d, 1H), 4.39-4.60 (br m, 2H), 3.08 (t, 4H), 2.75-2.94 (br m, 3H), 2.08-2.26 (m, 4H), 1.38-1.59 (m, 9H). LCMS (postupak C) : RT= 1.85 min, m/z = 386 [M+H]+ .
Korak 4: terc-butil 5-amino-2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)benzil(metil)karbamat:
[0651] Rastvor terc-butil 2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-5-nitrobenzil(metil)karbamata (850 mg, 2.205 mmol) u metanolu (60 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, 20 bara H2, sobna temperature, 1 mL/min). Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (670 mg, 85%). 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 6.56 (dd, 1H), 6.49 (br d, 1H), 4.48 (d, 2H), 3.55 (s, 2H), 2.88 (t, 4H), 2.80 (d, 3H), 1.98-2.18 (m, 4H), 1.36-1.56 (m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.26 min, m/z = 356 [M+H]+ .
Korak 5: terc-butil 5-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)benzil(metil)karbamat:
[0652] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa terc-butil 5-amino-2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)benzil(metil)karbamatom (101 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (120 mg, 64%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1H), 7.77 (br s, 1H), 7.55 (br d, 1H), 7.43 (dd, 2H), 7.33-7.43 (br m, 1H), 7.28 (dd, 1H), 7.12 (d, 1H), 4.87 (s, 2H), 4.54 (br d, 2H), 3.17 (s, 3H), 2.90-3.00 (m, 4H), 2.71-2.90 (br m, 3H), 2.00-2.21 (m, 4H), 1.35-1.57 (br m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.91 min, m/z = 662 [M+H]+ .
Korak 6: 7-((4-((1R,4R)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metilfenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0653] terc-Butil 5-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(4,4-difluoropiperidin-1-il)benzil(metil)karbamat (120 mg, 0.181 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (94 mg, 92%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.46 (s, 1H), 7.93 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.54 (dd, 1H), 7.48 (t, 1H), 7.08 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.68 (s, 2H), 3.12 (s, 3H), 2.92-3.02 (m, 4H), 2.33 (s, 3H), 2.02-2.18 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 1.05 min, m/z = 562 [M+H]+ .
Primer 148: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-3-((metilamino)metil) fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0654]
Korak 1: 2-((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-nitrobenzaldehid:
[0655] Suspenzija 2-fluoro-5-nitrobenzaldehida (2 g, 11.83 mmol), cis-2,6-dimetilmorfolina (1.362 g, 11.83 mmol) i kalijum karbonata (2.452 g, 17.74 mmol) u anhidrovanom DMF (20 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota preko noći. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (70 mL) i mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta. Istaložena čvrsta supstanca je izolovana filtracijom, isprana vodom, sušena usisavanjem i sušena zamrzavanjem preko noći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (2.94 g, 94%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 8.63 (d, 1H), 8.31 (dd, 1H), 7.06 (d, 1H), 3.85-3.99 (m, 2H), 3.30 (d, 2H), 2.82 (dd, 2H), 1.25 (d, 6H).
LCMS (postupak C): RT= 1.43 min, m/z = 265 [M+H]+ .
Korak 2: 1-(2-((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-nitrofenil)-N-metilmetanamin:
[0656] U suspenziju 2-((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-nitrobenzaldehida (800 mg, 3.03 mmol) i natrijum bikarbonata (509 mg, 6.05 mmol) u metanolu (6 mL) dodat je metilamin (2M u metanolu, 1.816 mL, 3.63 mmol) i reakciona smeša je zagrevana do 70°C u trajanju od 2 časa. Smeša je zatim hlađena do 0°C pre dodavanja natrijum borohidrida (137 mg, 3.63 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Reakciona smeša je ugašena sa nekoliko kapi vode, zatim koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je apsorbovan u dihlorometanu (20 mL), ispran fiziološkim rastvorom (20 mL) i propušten kroz fazni separator. Organska faza je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (880 mg, kvantitativan prinos).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ d, 1H), 8.08 (dd, 1H), 7.02 (d, 1H), 3.79-3.93 (m, 2H), 3.77 (s, 2H), 3.17 (d, 2H), 2.53 (dd, 2H), 2.46 (s, 3H), 1.23 (d, 6H). LCMS (postupak C): RT= 0.62 min, m/z = 280 [M+H]+ .
Korak 3: terc-butil 2-((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-nitrobenzil(metil)karbamat:
[0657] U rastvor 1-(2-((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-nitrofenil)-N-metilmetanamina (880 mg, 3.15 mmol) i trietilamina (0.966 mL, 6.93 mmol) u anhidrovanom THF (9 mL) dodat je di-terc-butil dikarbonat (0.805 mL, 3.47 mmol) i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 2 časa. Reakciona smeša je razblažena fiziološkim rastvorom (40 mL) i ekstrahovana u etil acetat (3 x 30 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane, koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom i prečišćene pomoću Biotage hromatografije (silika 50g kertridž, eluiranje gradijentom cikloheksana:etil acetata od 95:5 do 70:30) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (1.06 g, 89%).<1>H NMR (400 MHz,
7.99 (br s, 1H), 7.07 (d, 1H), 4.39-4.58 (m, 2H), 3.85 (br s, 2H), 2.72-3.03 (m, 5H), 2.54 (t, 2H), 1.41-1.59 (m, 9H), 1.23 (d, 6H). LCMS (postupak C): RT= 1.87 min, m/z = 380 [M+H]+ .
Korak 4: terc-butil 5-amino-2-((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)benzil(metil)karbamat:
[0658] Rastvor terc-butil 2-((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-5-nitrobenzil(metil)karbamata (1.06 g, 2.79 mmol) u metanolu (60 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, 20 bara H2, sobna temperatura, 1 mL/min). Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (840 mg, 86%). 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 6.57 (dd, 1H), 6.50 (br d, 1H), 4.40-4.58 (m, 2H), 3.71-3.87 (m, 2H), 3.54 (br s, 2H), 2.61-2.88 (m, 5H), 2.41 (t, 2H), 1.37-1.55 (m, 9H), 1.18 (d, 6H). LCMS (postupak C): RT= 1.08 min, m/z = 350 [M+H]+ .
Korak 5: terc-butil 5-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)benzil(metil)karbamat:
[0659] 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa terc-butil 5-amino-2-((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)benzil(metil)karbamatom (99 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (109 mg, 59%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.78 (br s, 1H), 7.54 (br d, 1H), 7.43 (dd, 2H), 7.32-7.42 (br m, 1H), 7.28 (dd, 1H), 7.08 (br d, 1H), 4.86 (s, 2H), 4.55 (br d, 2H), 3.75-3.90 (m, 2H), 3.16 (s, 3H), 2.67-2.91 (m, 5H), 2.46 (t, 2H), 1.35-1.56 (m, 9H), 1.20 (d, 6H). LCMS (postupak C): RT= 1.88 min, m/z = 656 [M+H]+ .
Korak 6: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-3-((metilamino)metil) fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0660] terc-butil 5-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)benzil(metil)karbamat (109 mg, 0.166 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (64 mg, 69%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.78 (br s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.90 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.55 (dd, 1H), 7.48 (t, 1H), 7.02 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.72 (sep, 2H), 3.66 (s, 2H), 3.12 (s, 3H), 2.94 (d, 2H), 2.24-2.38 (m, 5H), 1.10 (d, 6H). LCMS (postupak C): RT= 0.97 min, m/z = 556 [M+H]+ .
Primer 149: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-((dimetilamino)metil)-4-(1,1-dioksidotiomorfolino) fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0661]
[0662] 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(1,1-dioksidotiomorfolino)-3-((metilamino)metil) fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (66 mg, 0.114 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (58 mg, 86%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.47 (s, 1H), 7.99 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.55 (d, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.15 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.44 (s, 2H), 3.32-3.39 (m, 4H), 3.21-3.30 (m, 4H), 3.13 (s, 3H), 2.20 (s, 6H). LCMS (postupak C): RT= 0.85 min, m/z = 590 [M+H]+ .
Primer 150: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-3-((dimetilamino)metil) fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0663]
[0664] 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-3-((metilamino)metil) fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (45 mg, 0.80 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (32 mg, 69%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.46 (s, 1H), 8.03 (br s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.53 (d, 1H), 7.48 (t, 1H), 7.09 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.42 (s, 2H), 3.13 (s, 3H), 2.92-3.04 (m, 4H), 2.20 (s, 6H), 2.01-2.17 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 1.07 min, m/z = 576 [M+H]+ .
Primer 151: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-((dimetilamino)metil)-4-((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on [0665]
[0666] 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-3-((metilamino)metil) fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (35 mg, 0.63 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (12 mg, 33%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.45 (s, 1H), 8.01 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.54 (dd, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.02 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.74 (sep, 2H), 3.41 (s, 2H), 3.13 (s, 3H), 3.02 (d, 2H), 2.32 (t, 2H), 2.19 (s, 6H), 1.10 (d, 6H). LCMS (postupak C): RT= 0.99 min, m/z = 570 [M+H]+ .
Primer 152: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-fluoro-3-((metilamino)metil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0667]
Korak 1: terc-butil 2-fluoro-5-nitrobenzil(metil)karbamat:
[0668] 2-Fluoro-5-nitrobenzaldehid (1 g, 5.91 mmol) je rastvoren u metilaminu (2 M u metanolu, 3.25 mL, 6.50 mmol) i etanolu (7 mL) i smeša je mešana u trajanju od 1 časa.
Dodat je natrijum borohidrid (0.447 g, 11.83 mmol) i smeša je mešana u trajanju od 1 časa, zatim koncentrovana in vacuo. Ostatak je apsorbovan u etil acetatu i ispran vodom i fiziološkim rastvorom, zatim koncentrovan do žutog ulja. Ovo je rastvoreno u dihlorometanu (15 mL) i dodat je DIPEA (1.343 mL, 7.69 mmol), a zatim di terc-butil dikarbonat (1.42 g, 6.50 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, zatim koncentrovana in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (25 g Si kertridž; eluiran 0-50% EtOAc / c-heks.) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.90 g, 54%) kao žuto ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 4.50 (m, 2H), 2.93 (m, 3H), 1.49 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.66 min, m/z = 185 [M+H-Boc]+ .
Korak 2: terc-butil 5-amino-2-fluorobenzil(metil)karbamat:
[0669] terc-Butil 2-fluoro-5-nitrobenzil(metil)karbamat (180 mg, 0.63 mmol) je podvrgnut kontinuiranoj protočnoj hidrogenizaciji (H-cube, 10% Pd/C kertridž, sobna temperatura, 50 bara, rastvarač metanol). Sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji (10 g Si kertridž; eluiran 0-100% EtOAc / c-heks.) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (105 mg, 65%) kao bezbojno ulje. LCMS (postupak C): RT= 1.05 min, m/z = 199 [M+H-tBu]+ .
Korak 3: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-fluoro-3-((metilamino)metil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0670] terc-Butil 5-amino-2-fluorobenzil(metil)karbamat (72 mg, 0.28 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (100 mg, 0.28 mmol) kao što je opisano u primeru 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (45 mg, 34%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.48 (s, 1H), 7.98 (br s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.47 (m, 2H), 7.09 (t, 1H), 4.98 (s, 2H), 3.65 (s, 2H), 3.12 (s, 3H), 2.28 (s, 3H), 2.03 (br s, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.84 min, m/z = 461 [M+H]+ .
Primer 153: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(dimetilamino)-3-((metilamino)metil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0671]
Korak 1: terc-butil 5-amino-2-(dimetilamino)benzil(metil)karbamat:
[0672] terc-Butil 2-fluoro-5-nitrobenzil(metil)karbamat (190 mg, 0.668 mmol) je rastvoren u 2 M rastvoru dimetilamina u THF (3 mL, 6.00 mmol). Smeša je zagrevana na 140°C u trajanju od 1 časa pod mikrotalasnim zračenjem. Rastvor je koncentrovan in vacuo, Ostatak je podeljen između vode i DCM i organski sloj je odvojen upotrebom kertridža faznog separatora, zatim koncentrovan in vacuo. Ostatak je podvrgnut koninuiranoj protočnoj hidrogenizaciji (H-cube, 10% Pd/C kertridž, sobna temperatura, 50 bara, rastvarač metanol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje (110 mg, 59%), koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak C): RT 0.76 min, m/z 280 [M+H]<+>.
Korak 2: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(dimetilamino)-3-((metilamino)metil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0673] terc-Butil 5-amino-2-(dimetilamino)benzil (metil)karbamat (79 mg, 0.28 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (100 mg, 0.28 mmol) kao što je opisano u Primeru 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (20 mg, 7%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ (br s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.64 (br s, 1H), 7.53 (m, 2H), 7.48 (m, 2H), 7.05 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.72 (s, 2H), 3.12 (s, 3H), 2.60 (s, 6H), 2.34 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.92 min, m/z = 486 [M+H]+ .
Primer 154: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-((dimetilamino)metil)-4-morfolinofenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0674]
Korak 1: 3-((dimetilamino)metil)-4-morfolinoanilin:
[0675] 2-Morfolino-5-nitrobenzaldehid (0.5 g, 2.117 mmol) je suspendovan u metanolu (6 mL). Dodat je natrijum bikarbonat (0.356 g, 4.23 mmol), a zatim 2 M rastvor dimetilamina u metanolu (1.270 mL, 2.54 mmol). Smeša je zagrevana na 80°C u trajanju od 3 časa, zatim hlađena do sobne temperature. Dodat je natrijum borohidrid (0.096 g, 2.54 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Reakcija je ugašena dodavanjem nekoliko kapi vode i rastvor je koncentrovan in vacuo. Ostatak je podeljen između vode i DCM i organski sloj je odvojen upotrebom kertridža faznog separatora i koncentrovan in vacuo. Ostatak je podvrgnut kontinuiranoj protočnoj hidrogenizaciji (H-cube, 10% Pd/C kertridž, sobna temperatura, 50 bara, rastvarač metanol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (160 mg, 32%) koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak C) : RT= 0.24 min, m/z = 236 [M+H]+ .
Korak 2: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-((dimetilamino)metil)-4-morfolinofenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0676] 3-((Dimetilamino)metil)-4-morfolinoanilin (66 mg, 0.28 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (100 mg, 0.28 mmol) kao što je opisano u primeru 131 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (75 mg, 49%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ r s, 1H), 8.46 (s, 1H), 8.01 (br s, 1H), 7.64 (m, 2H), 7.50 (m, 2H), 7.06 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.72 (m, 4H), 3.43 (s, 2H), 3.13 (s, 3H), 2.86 (m, 4H), 2.19 (s, 6H). LCMS (postupak C): RT= 0.88 min, m/z = 542 [M+H]+ .
Primer 155: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((metilamino)metil)-4-(piridin-4-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0677]
Korak 1: 2-bromo-5-nitrobenzaldehid:
[0678] Smeša koncentrovane sumporne kiseline (17.01 mL) i pušljive azotne kiseline (2.250 mL) je hlađena do 5°C, nakon čega je usledilo ukapavanje 2-bromobenzaldehida (3.15 mL, 27.0 mmol) tokom perioda od 30 minuta. Smeša je zatim ostavljena da se zagreva do sobne temperature i mešana 60 minuta. Reakciona smeša je sipana u led/vodu (200 mL) i istaložena čvrsta supstanca je izolovana filtracijom, isprana vodom i sušena usisavanjem da bi se dobila svetlo žuta čvrsta supstanca. Ona je rekristalizovana iz 50:50 cikloheksana:etil acetata (30 mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (3.39 g, 55%).<1>H 8.72 (d, 1H), 8.29 (dd, 1H), 7.89 (d, 1H).
Korak 2: 1-(2-bromo-5-nitrofenil)-N-metilmetanamin:
[0679] U suspenziju 2-bromo-5-nitrobenzaldehida (2.00 g, 8.70 mmol) u metanolu (22.53 mL) dodat je metilamin (2M u metanolu, 13.04 mL, 26.1 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 60 minuta. Posle hlađenja do 0°C, dodat je natrijum borohidrid (0.658 g, 17.39 mmol) i smeša je ostavljena da se zagreva do sobne temperature i mešana 2 časa. Reakciona smeša je ugašena dodavanjem nekoliko kapi vode i koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je apsorbovan u etil acetatu (30 mL) i ispran vodom (2 x 30 mL) i fiziološkim rastvorom (30 mL). Organska faza je sušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao narandžasta čvrsta supstanca (1.84 g, 86%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (d, 1H), 7.98 (dd, 1H), 7.72 (d, 1H), 3.90 (s, 2H), 2.50 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.33 min, m/z = 245 [M+H]+ .
Korak 3: terc-butil 2-bromo-5-nitrobenzil(metil)karbamat:
[0680] U rastvor 1-(2-bromo-5-nitrofenil)-N-metilmetanamina (1.84 g, 7.51 mmol) u anhidrovanom THF (18 mL) dodat je trietilamin (2.302 mL, 16.52 mmol) i di-terc-butil dikarbonat (1.917 mL, 8.26 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Reakciona smeša je razblažena etil acetatom (50 mL) i isprana zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (50 mL) i fiziološkim rastvorom (50 mL). Organska faza je sušena preko Na2SO4, filtrirana, koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom i suspendovana u cikloheksanu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca. Filtrat je koncentrovan i podvrgnut hromatografiji (silika 50g kertridž, eluiranje gradijentom cikloheksana:etil acetata od 100:0 do 80:20) da bi se dobila dodatna količina jedinjenja iz naslova. Ukupan prinos (2.34 g, 90%). 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ -8.11 (m, 2H), 7.74 (d, 1H), 4.47-4.63 (m, 2H), 2.96 (s, 3H), 1.33-1.61 (m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.81 min, m/z = 289 [M-tBu+H]+ .
Korak 4: terc-butil metil(5-nitro-2-(piridin-4-il)benzil)karbamat:
[0681] Suspenzija terc-butil 2-bromo-5-nitrobenzil(metil)karbamata (200 mg, 0.579 mmol), piridin-4-ilboronske kiseline (107 mg, 0.869 mmol) i 2M rastvora natrijum karbonata (869 μl, 1.738 mmol) u 1,4-dioksanu (1745 μl) je degazirana barbotiranjem azota u trajanju od 10 minuta, nakon čega je usledilo dodavanje PdCl2(dppf)-dihlorometanskog adukta (47.3 mg, 0.058 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do 120°C pod mikrotalasnim zračenjem u trajanju od 15 minuta, razblažena vodom (10 mL) i ekstrahovana u etil acetat (3 x 6 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Biotage hromatografije (GraceResolv silika 24g kertridž, eluiranje gradijentom cikloheksana:etil acetata od 90:10 do 0:100) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (161 mg, 81%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.28 (m, 2H), 7.39 (d, 1H), 7.23 (s, 2H), 4.32-4.51 (br m, 2H), 2.76 (s, 3H), 1.35-1.55 (br m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.25 min, m/z = 344 [M+H]+ .
Korak 5: terc-butil 5-amino-2-(piridin-4-il)benzil(metil)karbamat:
[0682] Rastvor terc-butil metil(5-nitro-2-(piridin-4-il)benzil)karbamata (241 mg, 0.702 mmol) u metanolu (25 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, 10 bara H2, sobna temperatura, 1 mL/min). Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (206 mg, 94%).<1>H 6.65 (dd, 1H), 6.60 (br s, 1H), 4.38 (br d, 2H), 3.81 (br s, 2H), 2.67 (br d, 3H), 1.44 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 0.70 min, m/z = 314 [M+H]+ .
Korak 6: terc-butil 5-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(piridin-4-il)benzil(metil)karbamat:
[0683] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa terc-butil 5-amino-2-(piridin-4-il)benzil(metil)karbamatom (89 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (14 mg, 8%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.74 (s, 1H), 8.64 (br s, 2H), 7.73 (br s, 1H), 7.52 (br s, 2H), 7.45 (d, 2H), 7.29 (dd, 1H), 7.15-7.27 (m, 3H), 4.90 (s, 2H), 4.31-4.56 (m, 2H), 3.20 (s, 3H), 2.51-2.84 (m, 3H), 1.27-1.52 (m, 9H). LCMS (postupak C): R
T= 1.22 min, m/z = 620 [M+H] .
Korak 7: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((metilamino)metil)-4-(piridin-4-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0684] terc-Butil 5-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(piridin-4-il)benzil(metil)karbamat (14 mg, 0.023 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (5 mg, 43%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.60 (dd, 2H), 8.51 (s, 1H), 8.19 (br s, 1H), 7.72 (d, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.45-7.52 (m, 3H), 7.24 (d, 1H), 5.00 (s, 2H), 3.57 (s, 2H), 3.17 (s, 3H), 2.26 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.71 min, m/z = 520 [M+H]+ .
Primer 156: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((metilamino)metil)-4-(piridin-3-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0685]
Korak 1: terc-butil metil(5-nitro-2-(piridin-3-il)benzil)karbamat:
[0686] terc-Butil 2-bromo-5-nitrobenzil(metil)karbamat (300 mg, 0.869 mmol) je reagovao sa piridin-3-ilboronskom kiselinom (160 mg, 1.30 mmol) praćenjem postupka za Primer 155 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (255 mg, 85%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 8.57 (d, 1H), 8.10-8.28 (m, 2H), 7.57-7.71 (m, 1H), 7.34-7.49 (m, 2H), 4.33-4.51 (br m, 2H), 2.76 (s, 3H), 1.31-1.57 (br m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.30 min, m/z = 344 [M+H]+ .
Korak 2: terc-butil 5-amino-2-(piridin-3-il)benzil(metil)karbamat:
[0687] terc-Butil metil(5-nitro-2-(piridin-3-il)benzil)karbamat (255 mg, 0.743 mmol) je hidrogenizovan praćenjem postupka za Primer 155 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (243 mg, kvantitativan prinos). LCMS (postupak C): RT= 0.72 min, m/z = 314 [M+H]+ .
Korak 3: terc-butil 5-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(piridin-3-il)benzil(metil)karbamat:
[0688] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (100 mg, 0.283 mmol) je reagovao sa terc-butil 5-amino-2-(piridin-3-il)benzil(metil)karbamatom (89 mg, 0.283 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao braon čvrsta supstanca (14 mg, 8%). LCMS (postupak C): RT= 1.36 min, m/z = 620 [M+H]+ .
Korak 4: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((metilamino)metil)-4-(piridin-3-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0689] terc-Butil 5-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(piridin-3-il)benzil(metil)karbamat (14 mg, 0.23 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao roze čvrsta supstanca (7 mg, 60%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.62 (d, 1H), 8.55 (dd, 1H), 8.51 (s, 1H), 8.18 (br s, 1H), 7.87 (dt, 1H), 7.70 (dd, 1H), 7.66 (d, 2H), 7.49 (dd, 1H), 7.45 (dd, 1H), 7.22 (d, 1H), 5.00 (s, 2H), 3.54 (s, 2H), 3.17 (s, 3H), 2.24 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.78 min, m/z = 520 [M+H]+ .
Primer 157: 7-((4-bromo-3-((metilamino)metil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0690]
Korak 1: terc-butil 5-amino-2-bromobenzil(metil)karbamat:
[0691] U rastvor terc-butil 2-bromo-5-nitrobenzil(metil)karbamata (0.72 g, 2.086 mmol) u metanolu (11.99 mL) i tetrahidrofuranu (2.397 mL) je dodat cink u prahu (1.364 g, 20.86 mmol), a zatim je u porcijama dodavan amonijum hlorid (2.231 g, 41.7 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 60 minuta, zatim zagrevana do 40°C u trajanju od 4 časa. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom i podeljena između zasićenog rastvora natrijum karbonata (30 mL) i etil acetata (30 mL). Smeša je snažno mešana u trajanju od 10 minuta, filtrirana kroz Celite® i temeljno isprana sa etil acetatom (2 x 30 mL). Spojene organske faze su isprane zasićenim rastvorom natrijum karbonata (2 x 20 mL), vodom (2 x 20 mL) i fiziološkim rastvorom (20 mL), sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bezbojno ulje (544 mg, 6.57 (m, 2H), 4.34-4.52 (m, 2H), 3.37 (br s, 2H), 2.76-2.94 (m, 3H), 1.36-1.54 (m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.55 min, m/z = 259 [M-tBu+H]+ .
Korak 2: terc-butil 2-bromo-5-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)benzil(metil)karbamat:
[0692] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (300 mg, 0.846 mmol) je reagovao sa terc-butil 5-amino-2-bromobenzil(metil)karbamatom (267 mg, 0.846 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (223 mg, 42%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.71 (s, 1H), 7.32-7.61 (m, 6H), 7.29 (dd, 1H), 4.89 (s, 2H), 4.45-4.60 (br m, 2H), 3.18 (s, 3H), 2.80-2.96 (br m, 3H), 1.31-1.57 (br m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.98 min, m/z = 621 [M+H]+ .
Korak 3: 7-((4-bromo-3-((metilamino)metil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0693] terc-Butil 2-bromo-5-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)benzil(metil)karbamat (25 mg, 0.040 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (15 mg, 72%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ
1H), 8.49 (s, 1H), 8.15 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.43-7.58 (m, 3H), 4.99 (s, 2H), 3.67 (s, 2H), 3.15 (s, 3H), 2.33 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.91 min, m/z = 521 [M+H]+ .
Primer 158: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((3S,5R)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0694]
Korak 1 : 2-((3R,5S)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-nitrobenzaldehid:
[0695] U mešajuću suspenziju 2-fluoro-5-nitrobenzaldehida (2.69 g, 15.9 mmol) i kalijum karbonata (8.80 g, 63.7 mmol) u anhidrovanom DMF (10 mL) dodat je (2S,6R)-2,6-dimetilpiperazin (2 g, 17.51 mmol) i smeša je zagrevana na 90°C u trajanju od 16 časova. Posle hlađenja smeša je podeljen između fiziološkog rastvora/vode (100 mL) i etil acetata (25 mL). Vodeni sloj je odvojen i ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 25 mL). Spojene frakcije sa etil acetatom su isprane fiziološkim rastvorom/vodom (1:1, 4 x 25 mL), sušene (anhidrovani natrijum sulfat), filtrirane i redukovane in vacuo. Dobijeni ostatak je podvrgnut hromatografiji (gradijent 20-100% etil acetata u cikloheksanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.77 g, 66.1 %).1H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 0.07 (s, 1H), 8.62 (d, 1H), 8.28 (dd, 1H), 7.06 (d, 1H), 3.35 (d, 2H), 3.14-3.17 (m, 2H), 2.72 (dd, 2H), 1.13 (d, 6H). LCMS (postupak C): RT= 0.43 min, m/z = 264 [M+H]+ .
Korak 2: (2-((3R,5S)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil)metanol:
[0696] U mešajući rastvor 2-((3R,5S)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)-5-nitrobenzaldehida (2.77 g, 10.52 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (35 mL) na 0°C u porcijama je dodavan natrijum borohidrid (0.438 g, 11.57 mmol). Mešanje je nastavljeno u trajanju od 1 časa. Smeša je redukovana in vacuo. Ostatak je suspendovan u dihlorometanu (40 mL) i mešan u trajanju od 1 časa. Suspenzija je filtrirana i vlažni kola je ispran svežim dihlorometanom (2 x 5 mL). Spojeni filtrati su koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja (2.79 g, 100 %).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ (d, 1H), 8.12 (dd, 1H), 7.13 (d, 1H), 4.79 (s, 2H), 3.46 (br s, 1H), 3.09 (d, 4H), 2.44 (t, 2H), 1.41 (br s, 1H), 1.12 (d, 6H). LCMS (postupak C) RT= 0.38 min, m/z = 266 [M+H]+ .
Korak 3: (5-amino-2-((3R,5S)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)metanol:
[0697] (2-((3R,5S)-3,5-Dimetilpiperazin-1-il)-5-nitrofenil)metanol (1.40 g, 5.28 mmol) je podvrgnut kontinuiranoj protočnoj hidrogenizaciji (H-cube, 10% Pd/C kertridž, sobna temperatura, kompletan H2, 100 ml metanolskog rastvarača). Rastvarač je uklonjen in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja (1.16 g, 93
6.64 (d, 1H), 6.38 (dd, 1H), 4.97 (br s, 1H), 4.71 (s, 2H), 4.45 (s, 2H), 2.76-2.88 (m, 2H), 2.66 (d, 2H), 2.09 (t, 2H), 1.91 (t, 1H), 0.93 (d, 6H). LCMS (postupak C): R
T= 0.22 min, m/z = 236 [M+H] .
Korak 4: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((3S,5R)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)-3-(hidroksimetil)fenil) amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0698] (5-Amino-2-((3S,5R)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)metanol (66 mg, 0.28 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (100 mg, 0.28 mmol) kao što je opisano u Primeru 131 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (9 mg, 6%).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ (s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.99 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.54 (dd, 1H), 7.48 (dd, 1H), 6.96 (d, 1H), 5.07 (t, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.54 (d, 2H), 3.11 (s, 3H), 2.83 (m, 4H), 2.16 (t, 2H), 0.97 (d, 6H). LCMS (postupak C): RT= 0.78 min, m/z = 542 [M+H]+ .
Primer 159: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-metoksi-3-((metilamino)metil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0699]
Korak 1: terc-butil 5-amino-2-metoksibenzil(metil)karbamat:
[0700] terc-Butil 2-fluoro-5-nitrobenzil(metil)karbamat (185 mg, 0.65 mmol) je rastvoren u DMF (4 mL) i dodat je rastvor 28% natrijum metoksida u metanolu (0.16 mL, 0.78 mmol). Smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Dodata je voda i dobijeni talog je sakupljen filtracijom da bi se dobila čvrsta supstanca. Ovo je podvrgnuto kontinuiranoj protočnoj hidrogenizaciji (H-cube, 10% Pd/C kertridž, sobna temperatura, 50 bara, rastvarač metanol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (95 mg, 55%) kao bezbojno ulje, koje je korišćeno bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak C): RT= 0.82 min, m/z = 267 [M+H]+ .
Korak 2: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-metoksi-3-((metilamino)metil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0701] terc-Butil 5-amino-2-metoksibenzil(metil)karbamat (75 mg, 0.28 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (100 mg, 0.28 mmol) kao što je opisano u primeru 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (59 mg, 22%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.45 (s, 1H), 7.78 (br s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.49 (m, 2H), 6.91 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 3.76 (s, 3H), 3.60 (s, 2H), 3.10 (s, 3H), 2.28 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.78 min, m/z = 473 [M+H]+ .
Primer 160: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-((metilamino) metil)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0702]
Korak 1: terc-butil 5-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)benzil(metil)karbamat:
[0703] Suspenzija terc-butil 2-bromo-5-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)benzil(metil)karbamata (40 mg, 0.064 mmol), 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (20.06 mg, 0.096 mmol) i 2M rastvora natrijum karbonata (193 μl, 0.386 mmol) u 1,4-dioksanu (400 μl) je degazirana barbotiranjem azota u trajanju od 10 minuta. Dodat je PdCl2(dppf)-dihlorometanski adukt (5.25 mg, 6.43 μmol) i reakciona smeša je zagrevana do 120°C pod mikrotalasnim zračenjem u trajanju od 10 minuta, zatim do 150°C u trajanju od 15 minuta, zatim do 180°C u trajanju od 10 minuta. Reakciona smeša je razblažena vodom (10 mL) i ekstrahovana u etil acetat (3 x 6 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (KP-NH 11g kertridž, eluiranje sa gradijentom cikloheksana:etil acetata od 90:10 do 0:100) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (17 mg, 42%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.65 (br s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.36-7.48 (m, 4H), 7.25-7.35 (m, 3H), 4.89 (s, 2H), 4.55 (br s, 2H), 3.96 (s, 3H), 3.20 (s, 3H), 3.64-3.87 (br m, 3H), 1.33-1.56 (br m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.50 min, m/z = 623 [M+H]+ .
Korak 2: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-((metilamino)metil) fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0704] terc-butil 5-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(1-metil-1H-pirazol-4-il)benzil(metil)karbamat (17 mg, 0.27 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (7 mg, 49%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.49 (s, 1H), 8.03 (br s, 1H), 7.90 (s, 1H), 7.55-7.73 (m, 4H), 7.48 (t, 1H), 7.29 (d, 1H), 4.98 (s, 2H), 3.88 (s, 3H), 3.64 (s, 2H), 3.15 (s, 3H), 2.34 (s, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.85 min, m/z = 523 [M+H]+ .
Primer 161: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4-(2-(dimetilamino)acetil)piperazin-1-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on [0705]
[0706] 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (47 mg, 0.091 mmol) je rastvoren u THF (1 mL) i dodat je DIPEA (0.040 mL, 0.23 mmol). Dodat je 2-hloroacetil hlorid (7.99 μl, 0.101 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 min. Dodat je 2 M rastvor dimetilamina u THF (4.63 μl, 0.091 mmol) i smeša je zagrevana na 150°C u trajanju od 30 min pod mikrotalasnim zračenjem. Smeša je koncentrovana in vacuo i ostatak je podvrgnut hromatografiji (11 g KPNH kertridž; eluiran 10-100% EtOAc / c-heks. zatim 0-10% MeOH / EtOAc) da bi se dobilo bezbojno staklo. Ovo je triturisano sa etrom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (12 mg, 22%) kao bezbojno staklo. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ
1H), 8.46 (s, 1H), 8.02 (br s, 1H), 7.6 (d, 2H), 7.50 (m, 2H), 7.00 (d, 1H), 4.97 (s, 2), 3.59 (m, 4H), 3.39 (s, 2H), 3.12 (s, 3H), 2.77 (m, 4H), 2.35 (s, 6H). LCMS (postupak C): RT= 0.76 min, m/z = 599 [M+H]+ .
Primeri 162-163 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-((R)-2,2-difluoro-1-hidroksietil)-4-((R)-3-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0707]
[0708] Pod atmosferom N2, CsF (16 mg, 0.103 mmol) je dodat u rastvor (R)-terc-butil 4-(2-formil-4-nitrofenil)-2-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilata (300 mg, 0.50 mmol) i (difluorometil)trimetilsilana (196 mg, 1.581 mmol) u 5 mL DMF, zatim smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Zatim je dodat rastvor TBAF (2.5 mL, 1 M u THF) i cela smeša je mešana još 1 čas. Posle ekstrakcije sa etil acetatom i vodom, organska faza je isprana fiziološkim rastvorom, i zatim sušena preko anhidrovanog MgSO4. Rastvor je filtriran i rastvarač je isparavan pod vakuumom. LCMS analiza sirovog ostatka je pokazala prisustvo dva diastereoizomera koji su odvojeni pomoću Biotage hromatografije. Svaki diastereoizomer je zatim posebno hidrogenizovan upotrebom H-Cube aparata (10% Pd/C kertridž, kompletan H2, 25°C, 1 mL/min). Svaki rezultujući diastereoizomerni anilin (1 ekv.) je zatim kuplovan sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (1.1 ekv.) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobio svaki diastereoizomer proizvoda iz naslova. Diastereoizomer 1 (27 mg): 1H NMR (400 MHz, DMSO-d
6): δ 1H), 8.47 (s, 1H), 8.11 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.59(m,1H),7.48 (dd, 1H), 7.21 (d, 1H), 6.12 (d, 1H), 6.03 (dt,1H), 5.23 (m, 1H), 4.98 (s,2H),3.31(m,2H), 3.26(s, 3H), 2.95 (m, 2H), 3.12 (s, 3H), 2.80 (m, 3H), 2.61 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.87 min, m/z = 608 [M+H]+ Diastereoizomer 2 (60 mg): 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.47 (s, 1H),8.12 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.58 (m, 1H),7.48 (dd, 1H), 7.21 (d, 1H), 6.12 (d, 1H), 6.02 (dt,1H), 5.25 (m, 1H), 4.89 (s, 2H),3.28(m, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.12 (s, 3H), 3.00-2.60 (m, 7H), 2.37 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.77 min, m/z = 608 [M+H]+ .
Primer 164: 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0709]
Korak 1: (1S,4S)-terc-butil 5-(2-formil-4-nitrofenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat:
[0710] Suspenzija 2-fluoro-5-nitrobenzaldehida (1.00 g, 5.91 mmol), (1S,4S)-terc-butil 2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (1.172 g, 5.91 mmol) i kalijum karbonata (2.452 g, 17.74 mmol) u anhidrovanom DMF (5 mL) je zagrevana do 50°C pod atmosferom azota preko noći. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi to sobne temperature, razblažena vodom (30 mL) i mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Istaložena čvrsta supstanca je izolovana filtracijom, isprana vodom, sušena usisavanjem i sušena zamrzavanjem preko noći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (1.82 g, 89%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 8.62 (d, 1H), 8.22 (dd, 1H), 6.78 (dd, 1H), 4.50-4.76 (m, 2H), 3.96 (dd, 1H), 3.46-3.66 (m, 2H), 2.91 (dd, 1H), 1.95-2.19 (m, 2H), 1.42 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.47 min, m/z = 348 [M+H]+ .
Korak 2: (1S,4S)-terc-butil 5-(2-(hidroksimetil)-4-nitrofenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat:
[0711] Suspenzija (1S,4S)-terc-butil 5-(2-formil-4-nitrofenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (1.82 g, 5.24 mmol) u anhidrovanom THF (9.70 mL) je hlađena do 0°C, a zatim je u porcijama dodavan natrijum borohidrid (0.198 g, 5.24 mmol). Reakciona smeša je mešana na 0°C u trajanju od 90 minuta. Reakciona smeša je ugašena vodom (30 mL) i ekstrahovana u dihlorometanu (3 x 20 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (1.80 g, 98%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ
1H), 7.98-8.08 (m, 1H), 6.59 (d, 1H), 4.79 (s, 1H), 4.49-4.73 (m, 3H), 3.81 (d, 1H), 3.36-3.64 (m, 3H), 2.21 (q, 1H), 2.00 (br s, 2H), 1.37-1.53 (m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.34 min, m/z = 350 [M+H]+ .
Korak 3: (1S,4S)-terc-butil 5-(4-amino-2-(hidroksimetil)fenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat:
[0712] Rastvor (1S,4S)-terc-butil 5-(2-(hidroksimetil)-4-nitrofenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilata (1.80 g, 5.15 mmol) u metanolu (100 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, 40 bara H2, sobna temperatura, 1 mL/min). Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao braon čvrsta supstanca (1.49 g, 91%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 6.51-6.60 (m, 2H), 4.83 (d, 1H), 4.53 (d, 1H), 4.45 (d, 1H), 3.86 (s, 1H), 3.30-3.79 (m, 4H), 3.12-3.29 (m, 2H), 2.02 (d, 1H), 1.91 (t, 1H), 1.65 (br s, 1H), 1.40-1.55 (m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 0.68 min, m/z = 320 [M+H]+ .
Korak 4: (1S,4S)-terc-butil 5-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(hidroksimetil)fenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat:
[0713] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (150 mg, 0.423 mmol) je (1S,4S)-terc-butil 5-(4-amino-2-(hidroksimetil)fenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (135 mg, 0.423 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (190 mg, 72%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.59 (br s, 1H), 7.48 (dt, 1H), 7.44 (dd, 2H), 7.35 (br s, 1H), 7.29 (dd, 1H), 6.95 (d, 1H), 4.88 (s, 2H), 4.84 (d, 1H), 4.45-4.67 (m, 2H), 4.06-4.13 (m, 1H), 3.85 (br d, 1H), 3.26-3.63 (m, 4H), 3.18 (s, 3H), 1.86-2.05 (m, 2H), 1.40-1.53 (m, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.37 min, m/z = 626 [M+H]+ .
Korak 5: 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0714] (1S,4S)-terc-butil 5-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(hidroksimetil)fenil)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat (190 mg, 0.303 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (49 mg,
7.83 (br s, 1H), 7.56 (d, 2H), 7.49 (dd, 1H), 7.42 (dd, 1H), 6.97 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.70 (d, 1H), 4.61 (d, 1H), 4.15 (s, 1H), 3.88 (s, 1H), 3.42 (dd, 1H), 3.22-3.30 (m, 3H), 3.19 (s, 3H), 3.03 (dd, 1H), 2.05 (d, 1H), 1.80 (d, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.66 min, m/z = 526 [M+H]+ .
Primer 165: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(1-metilpiperidin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0716] 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(piperidin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (31 mg, 0.060 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (18 mg,
8.47 (s, 1H), 7.92 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.57 (dd, 1H), 7.48 (t, 1H), 7.18 (d, 1H), 5.07 (t, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.53 (d, 2H), 3.12 (s, 3H), 2.85 (d, 2H), 2.57-2.70 (m, 1H), 2.18 (s, 3H), 1.95 (td, 2H), 1.51-1.73 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.70 min, m/z = 527 [M+H]+ .
Primer 166: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((1,2,3,4-tetrahidro-1,4-epiminonaftalen-6-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0717]
Korak 1: terc-butil 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1,4-epiminonaftalen-9-karboksilat:
[0718] Rastvor terc-butil 6-nitro-1,4-dihidro-1,4-epiminonaftalen-9-karboksilata [Bioorg. Med. Chem., 2011, 19(8), 2726-2741] (500 mg, 1.734 mmol) u metanolu (50 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, 40 bara H2, sobna temperatura, 1 mL/min). Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (440 mg, 97%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.97 (dd, 1H), 7.37 (d, 1H), 7.01 (br d, 2H), 5.58 (br s, 2H), 1.37 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.62 min, m/z = 233 [M-tBu+H]+ .
Korak 2: terc-butil 6-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-1,2,3,4-tetrahidro-1,4-epiminonaftalen-9-karboksilat:
[0719] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (150 mg, 0.423 mmol) je reagovao sa terc-butil 6-amino-1,2,3,4-tetrahidro-1,4-epiminonaftalen-9-karboksilatom (110 mg, 0.423 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (143 mg, 60%).<1>H NMR 7.62 (br s, 1H), 7.44 (dd, 2H), 7.34 (d, 2H), 7.29 (dd, 1H), 7.19 (d, 1H), 5.10 (br s, 2H), 4.89 (s, 2H), 3.18 (s, 3H), 2.12 (d, 2H), 1.40 (s, 9H), 1.32 (d, 2H). LCMS (postupak C): RT= 1.76 min, m/z = 567 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((1,2,3,4-tetrahidro-1,4-epiminonaftalen-6-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0720] terc-Butil 6-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-1,2,3,4-tetrahidro-1,4-epiminonaftalen-9-karboksilat (143 mg, 0.252 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao svetlo žuta čvrsta supstanca (75 mg, 64%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.79 (br s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.61-7.67 (m, 3H), 7.48 (dd, 1H), 7.42 (d, 1H), 7.12 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.41 (dd, 2H), 3.09 (s, 3H), 1.85 (dd, 2H), 1.10 (dd, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.75 min, m/z = 467 [M+H]+ .
Primer 167: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(piperidin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0721]
Korak 1: terc-butil 4-(4-amino-2-(hidroksimetil)fenil)piperidin-1-karboksilat:
[0722] Rastvor terc-butil 4-(2-(hidroksimetil)-4-nitrofenil)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata u metanolu (15 mL) je hidrogenizovan pomoću H-Cube (10% Pd/C kertridž, 40 bara H2, sobna temperatura, 1 mL/min; zatim Pd(OH)2/C kertridž, 40 bara H2, sobna temperatura, 1 mL/min; zatim Pd(OH)2/C kertridž, 60 bara H2, sobna temperatura, 1 mL/min). Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (120 mg, 94%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 6.70 (d, 1H), 6.62 (dd, 1H), 4.62 (s, 2H), 4.19 (br s, 2H), 3.17 (br s, 2H), 2.64-2.90 (m, 3H), 1.50-1.73 (m, 4H), 1.47 (s, 9H). LCMS (postupak C) : RT= 0.78 min, m/z = 314 [M-tBu-H2O+H]+ .
Korak 2: terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(hidroksimetil)fenil)piperidin-1-karboksilat:
[0723] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (150 mg, 0.423 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-amino-2-(hidroksimetil)fenil)piperidin-1-karboksilatom (130 mg, 0.423 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (83 mg,
8.38 (br s, 1H), 7.58-7.69 (m, 2H), 7.43 (dd, 2H), 7.28 (dd, 1H), 7.20 (d, 1H), 4.88 (s, 2H), 4.74 (s, 2H), 4.23 (br s, 2H), 3.18 (s, 3H), 3.63-2.97 (m, 4H), 1.52-1.84 (m, 4H), 1.48 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.54 min, m/z = 613 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(piperidin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0724] terc-Butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(hidroksimetil)fenil)piperidin-1-karboksilat (83 mg, 0.135 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao prljavo bela čvrsta supstanca (56 mg, 81%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ s, 1H), 8.47 (s, 1H), 7.93 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.58 (dd, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.16 (d, 1H), 5.08 (br s, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.54 (s, 2H), 3.13 (s, 3H), 3.05 (d, 2H), 2.80 (tt, 1H), 2.63 (td, 2H), 1.62 (d, 2H), 1.53 (qd, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.85 min, m/z = 513 [M+H]+ .
Primer 168: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-(3-((metilamino)metil)fenil)-7-((4-morfolinofenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0725]
[0726] terc-Butil 3-(3-(2,6-dihlorofenil)-7-(metiltio)-4-okso-3,4-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-1(2H)-il)benzil(metil)karbamat (60 mg, 0.107 mmol) je reagovao sa 4-morfolinoanilinom (19 mg, 0.107 mmol) kao što je opisano u Primeru 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (27 mg, 47%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz,
8.63 (s, 1H), 7.62 (d, 2H), 7.40 (7 H, m), 6.70 (m, 2H), 5.37 (s, 2H), 3.70 (m, 6H), 2.98 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.81 min, m/z = 590 [M+H]+ .
Primer 169: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-etil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0727]
Korak 1: N-(2,6-dihlorofenil)-4-(etilamino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid:
[0728] 4-Hloro-N-(2,6-dihlorofenil)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid (2 g, 5.74 mmol) je suspendovan u THF (15 mL) i dodat je DIPEA (2.00 mL, 11.5 mmol), a zatim 2 M rastvor etilamina u THF (3.16 mL, 6.31 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 30 min. Smeša je koncentrovana in vacuo, zatim razblažena vodom i ekstrahovana sa etil acetatom (x3). Spojeni organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni (MgSO4) i koncentrovani in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.20 g, 107%) kao bela čvrsta supstanca koja je korišćena bez dodatnog prečišćavanja.
LCMS (postupak C): RT= 1.59 min, m/z = 357 [M+H]+ .
Korak 2: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-etil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0729] N-(2,6-Dihlorofenil)-4-(etilamino)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid (1.50 g, 4.20 mmol) je suspendovan u acetonitrilu (15 mL). Dodat je cezijum karbonat (6.84 g, 21.0 mmol), a zatim dibromometan (1.17 mL, 16.8 mmol) Smeša je zagrevana na refluksu preko noći. Smeša je hlađena do sobne temperature, razblažena vodom i ekstrahovana sa dihlorometanom (x2). Spojeni organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom i zatim sušeni (MgSO4) i koncentrovani. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (24 g Si kertridž; eluiran 0-100% EtOAc / c-heks.) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (460 mg, 30%) kao bezbojno staklo koje je kristalizovano prilikom stajanja.1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.46 (d, 2H), 7.31 (m, 1H), 4.94 (s, 2H), 3.75 (q, 2H), 2.57 (s, 3H), 1.26 (t, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.57 min, m/z = 369 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-etil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0730] terc-Butil 4-(4-aminofenil)piperazin-1-karboksilat (75 mg, 0.27 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-etil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (100 mg, 0.27 mmol) kao što je opisano u Primeru 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (60 mg, 45%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.45 (s, 1H), 7.63 (m, 4H), 7.48 (m, 1H), 6.88 (d, 2H), 4.99 (s, 2H), 3.65 (q, 2H), 2.99 (m, 4H), 2.84 (m, 4H), 1.20 (t, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.80 min, m/z = 498 [M+H]+ .
Primer 170: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((3S,5R)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-1-etil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0731]
[0732] (5-Amino-2-((3S,5R)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)metanol (64 mg, 0.27 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-etil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (100 mg, 0.27 mmol) kao što je opisano u Primeru 131 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (60 mg, 45%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ
(s, 1H), 8.46 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.65 (m, 2H), 7.50 (m, 2H), 6.96 (d, 1H), 5.05 (t, 1H), 5.00 (s, 2H), 4.54 (d, 2H), 3.68 (q, 2H), 2.85 (m, 4H), 2.16 (t, 2H), 1.20 (t, 3H), 0.97 (d, 6H). LCMS (postupak C): RT= 0.84 min, m/z = 556 [M+H]+ .
Primer 171: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-fenil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0733]
Korak 1: N-(2,6-dihlorofenil)-2-(metiltio)-4-(fenilamino)pirimidin-5-karboksamid:
[0734] 4-Hloro-N-(2,6-dihlorofenil)-2-(metiltio)pirimidin-5-karboksamid (2 g, 5.74 mmol) je suspendovan u THF (15 mL). Dodat je DIPEA (2.00 mL, 11.47 mmol), a zatim anilin (0.58 mL, 6.31 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Reakciona smeša je koncentrovana in vacuo, zatim razblažena vodom i DCM. Organski sloj je koncentrovan da bi se dobila čvrsta supstanca koja je isprana etil acetatom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.20 g, 95%) kao prljavo bela čvrsta supstanca, koja je korišćena bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak C): RT= 1.84 min, m/z = 405 [M+H]+ .
Korak 2: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-(metiltio)-1-fenil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0735] N-(2,6-Dihlorofenil)-2-(metiltio)-4-(fenilamino)pirimidin-5-karboksamid (1 g, 2.467 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (10 mL) i dodat je dibromometan (0.69 mL, 9.87 mmol), a zatim cezijum karbonat (4.02 g, 12.34 mmol). Reakcija je zagrevana na refluksu u trajanju od 64 časa. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa dihlorometanom (x3). Spojeni organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom i zatim sušeni (MgSO4) i koncentrovani in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (24 g Si kertridž; eluiran 0-50% EtOAc / c-heks.) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (293 mg, 29%) kao prljavo bela pena. LCMS (postupak C): RT= 1.72 min, m/z = 417 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-fenil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0736] terc-Butil 4-(4-aminofenil)piperazin-1-karboksilat (67 mg, 0.24 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-7-(metiltio)-1-fenil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (100 mg, 0.24 mmol) kao što je opisano u Primeru 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (60 mg, 45%) kao bela čvrsta
(s, 1H), 7.62 (m, 2H), 7.40 (m, 8H), 6.63 (m, 2H), 5.37 (s, 2H), 2.91 (m, 4H), 2.81 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.95 min, m/z = 546 [M+H]+ .
Primer 172: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(2-(dimetilamino)-1-hidroksietil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0737]
Korak 1: 2-(3-nitrofenil)oksiran 2-(3-nitro-fenil)-oksiran:
[0738] 5 g 2-bromo-1-(3-nitro-fenil)-etanona je rastvoreno u 100 mL etanola, tretirano sa 0.755 g natrijum borohidrida i mešano u trajanju od 1 časa na sobnoj temperaturi. Dodato je 1.15 g kalijum hidroksida i smeša je mešana još 15 časova na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena sa 500 mL etil acetata i rezultujući rastvor je ispran dva puta sa 300 mL pola zasićenog rastvora amonijum hlorida i jednom sa 100 mL vode. Organska faza je sušena preko natrijum sulfata i koncentrovana in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.50 g, 44%). 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H); 3.19 (dd, 1H); 3.93 (dd, 1H); 7.50 (t, 1H); 7.60 (d, 1H); 8.08-8.16 (m, 2H) ppm.
Korak 2: terc-butil (2-hidroksi-2-(3-nitrofenil) etil) (metil)karbamat:
[0739] 2-(3-Nitrofenil)oksiran (1.5 g,9.08 mmol) i metilamin (2N u THF, 20 mL, 40 mmol) su mešani na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvor je zatim koncentrovan in vacuo. Ostatak je rastvoren u THF. Zatim je dodat di-terc-butil dikarbonat (1.87 g, 8.56 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći zatim koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen pomoću Biotage hromatografije da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.57 g, 23.6%).
Korak 3: terc-butil (2-(3-aminofenil)-2-hidroksietil) (metil)karbamat:
[0740] terc-Butil (2-hidroksi-2-(3-nitrofenil)etil)(metil)karbamat (0.3 g, 1.012 mmol) je hidrogenizovan upotrebom H-Cube praćenjem postupka za Primer 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.17 g, 63%) koje je korišćeno dirketno u sledećem koraku.
Korak 4: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(2-(dimetilamino)-1-hidroksietil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0741] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido [4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (249 mg,0.702 mmol) je reagovao sa terc-butil (2-(3-aminofenil)-2-hidroksietil) (metil)karbamatom (170 mg, 0.638 mmol) praćenjem postupka za Primer 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (130 mg, 43%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.49 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.67 (d, 2H), 7.55-7.45 (m, 2H), 7.24 (t, 1H), 6.98 (d, 1H), 5.01 (d, 1H), 4.99 (s, 2H), 3.15 (s, 3H), 2.41 (dd, 1H), 2.31 (dd, 1H). LCMS (postupak C): RT= 0.72 min, m/z = 487 [M+H]+ .
Primer 173: 7-((4-(3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-7-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0742]
Korak 1: terc-butil 7-(2-formil-4-nitrofenil)-3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-9-karboksilat:
[0743] 2-Fluoro-5-nitrobenzaldehid (37 mg, 0.219 mol) je reagovao sa terc-butil 3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-9-karboksilatom praćenjem postupka za Primer 21 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (85 mg, 93 %) koje je korišćeno direktno u sledećem koraku.
Korak 2: terc-butil 7-(2-(hidroksimetil)-4-nitrofenil)-3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-9-karboksilat:
[0744] terc-Butil 7-(2-formil-4-nitrofenil)-3-oksa-7,9-diazabiciklo [3.3.1]nonan-9-karboksilat (85 mg, 0.225 mmol) je reagovao sa natrijum borohidridom (10.23 mg, 0.27 mmol) praćenjem postupka za Primer 21 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (78 mg, 91%) koje je korišćeno direktno u sledećem koraku.
Korak 3: terc-butil 7-(4-amino-2-(hidroksimetil)fenil)-3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-9-karboksilat:
[0745] terc-Butil 7-(2-(hidroksimetil)-4-nitrofenil)-3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-9-karboksilat (78mg, 0.206 mmol) je hidrogenizovan upotrebom H-Cube aparata (10% Pd/C kertridž, kompletan H2, 25 °C, 1 mL/min). Rastvor je koncentrovan in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (66.8 mg, 93%) koje je korišćeno direktno u sledećem koraku.
Korak 4: 7-((4-(3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-7-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0746] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (84 mg, 0.236 mmol) je reagovao sa terc-butil 7-(4-amino-2-(hidroksimetil)fenil)-3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-9-karboksilatom (75 mg,0.215 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (26 mg, 22%). 1H NMR (400 MHz, DMSO-8.46 (s, 1H), 7.86 (br s, 1H), 7.64 (d, 1H), 7.59 (dd, 1H), 7.48 (t, 1H), 7.05 (d, 1H), 5.22 (t, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.63 (d, 2H), 3.87 (m, 4H), 3.11 (s, 3H), 3.10 (m, 4H), 2.85 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.71 min, m/z = 556 [M+H]+ .
Primer 174: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-((etilamino)metil)-4-morfolinofenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0747]
Korak 1: terc-butil etil(2-morfolino-5-nitrobenzil)karbamat:
[0748] 2-Morfolino-5-nitrobenzaldehid (0.5 g, 2.12 mmol) je suspendovan u metanolu (6 mL). Dodat je natrijum bikarbonat (0.36 g, 4.23 mmol), a zatim 2 M rastvor etilamina u THF (1.27 mL, 2.54 mmol). Reakcija je zagrevana na 80°C u trajanju od 3 časa. Smeša je hlađena do sobne temperature. Dodat je natrijum borohidrid (0.096 g, 2.54 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa. Reakcija je ugašena dodavanjem vode i koncentrovana in vacuo. Ostatak je razblažen vodom i ekstrahovan sa dihlorometanom. Slojevi su odvojeni upotrebom kertridža faznog separatora i organski sloj je koncentrovan. Ostatak je rastvoren u dihlorometanu (5 mL) i dodat je DIPEA (0.481 m, 2.75 mmol), a zatim BOC-anhidrid (0.54 mL, 2.33 mmol). Reakcija je mešana preko noći. Smeša je koncentrovana in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (10 g Si kertridž; eluiran 0-70% EtOAc / cheks.) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (680 mg, 88%) kao žuto ulje.<1>H NMR (300 MHz,
4.53 (m, 2H), 3.88 (m, 4H), 3.19 (m, 2H), 2.99 (m, 4H), 1.54 (m, 9H), 1.10 (m, 3H). LCMS (postupak C): RT= 1.73 min, m/z = 366 [M+H]+ .
Korak 2: terc-butil 5-amino-2-morfolinobenzil(etil)karbamat:
[0749] terc-Butil etil(2-morfolino-5-nitrobenzil)karbamat (200 mg, 0.55 mmol) je podvrgnut kontinuiranoj protočnoj hidrogenizaciji (H-cube, 10% Pd/C kertridž, sobna temperatura, 60 bara, rastvarač metanol). Sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji (12 g Si kertridž; eluiran 0-80% EtOAc / c-heks.) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (85 mg, 46%). LCMS (postupak C): RT= 1.00 min, m/z = 336 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-((etilamino)metil)-4-morfolinofenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0750] terc-Butil 5-amino-2-morfolinobenzil(etil)karbamat (85 mg, 0.25 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (90 mg, 0.25 mmol) kao što je opisano u Primeru 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (35 mg, 26%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.45 (s, 1H), 7.97 (br s, 1H), 7.65 (m, 2H), 7.53 (dd, 1H), 7.47 (m, 1H), 7.08 (d, 1H), 4.97 (s, 2H), 3.74 (m, 6H), 3.17 (m, 1H), 3.13 (s, 3H), 2.84 (m, 4H), 2.62 (q, 2H), 1.07 (t, 3H). LCMS (postupak C): RT= 0.91 min, m/z = 542 [M+H]+ .
Primer 175: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((9-metil-1,2,3,4-tetrahidro-1,4-epiminonaftalen-6-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0752] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((1,2,3,4-tetrahidro-1,4-epiminonaftalen-6-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (40 mg, 0.086 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (18 mg,
8.48 (s, 1H), 7.68 (s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.44-7.56 (m, 2H), 7.18 (d, 1H), 4.96 (s, 2H), 4.01 (d, 2H), 3.10 (s, 3H), 1.86-2.03 (m, 5H), 1.01-1.11 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.81 min, m/z = 481 [M+H]+ .
Primer 176: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-((1S,4S)-5-metil-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0753]
[0754] 7-((4-((1S,4S)-2,5-Diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (34 mg, 0.065 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuta čvrsta supstanca (12 mg, 34%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.43 (s, 1H), 7.94 (br s, 1H), 7.64 (d, 2H), 7.44-7.52 (m, 2H), 6.75 (d, 1H), 5.03 (t, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.50 (dd, 1H), 4.39 (dd, 1H), 3.93 (s, 1H), 3.23 (d, 1H), 3.28-3.35 (m, 1H), 3.07-3.15 (m, 4H), 2.74 (dd, 1H), 2.64 (d, 1H), 2.28 (s, 3H), 1.77 (d, 1H), 1.69 (d, 1H), pik na 3.28-3.35ppm delimično sakriven rastvaračem. LCMS (postupak C): RT= 0.70 min, m/z = 540 [M+H]+ .
Primer 177: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0755]
Korak 1: terc-butil 4-(2-metil-4-nitrofenil)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat:
[0756] 1-Jodo-2-metil-4-nitrobenzen (0.61 g, 2.32 mmol) i terc-butil 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (0.932 g, 3.01 mmol) su rastvoreni u 1,4-dioksanu (7 mL) i dodat je 2M rastvor natrijum karbonata (3.48 mL, 6.96 mmol). Smeša je degazirana i postavljena pod atmosferu azota. Dodat je PdCl2(dppf) dihlorometanski adukt (0.189 g, 0.232 mmol) i smeša je zagrevana do 100°C pod mikrotalasnim zračenjem u trajanju od 20 minuta. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana sa etil acetatom (x3). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom, sušeni preko MgSO4, filtrirani i koncentrovani in vacuo. Ostatak je podvrgnut hromatografiji (24 g Si kertridž, eluiran 0-50% EtOAc / c-heks.) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao braon ulje (798 mg, 2.51 mmol, 90 % prinos). LCMS (postupak C): RT= 1.89 min, m/z = 263 [M+H-tBu]+ .
Korak 2: terc-butil 4-(4-amino-2-metilfenil)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat:
[0757] terc-Butil 4-(2-metil-4-nitrofenil)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (390 mg, 1.23 mmol) je rastvoren u etanolu (7 mL). Dodat je kalaj (II) hlorid (1.16 g, 6.12 mmol) i smeša je zagrevana na 65°C u trajanju od 3 časa. Rastvor je koncentrovan in vacuo. Ostatak je apsorbovan u 4 M vodenom rastvoru natrijum hidroksida i ekstrahovan sa etil acetatom (x3). Spojeni organski ekstrakti su isprani fiziološkim rastvorom i zatim sušeni (MgSO4) i koncentrovani da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (246 mg, 70) kao braon sirup koji je korišćen direktno bez dodatnog prečišćavanja. LCMS (postupak C): RT= 1.24 min, m/z = 289 [M+H]+ .
Korak 3: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0758] terc-Butil 4-(4-amino-2-metilfenil)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (179 mg, 0.62 mmol) je reagovao sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (200 mg, 0.56 mmol) kao što je opisano u Primeru 1 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (41 mg, 15%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.48 (s, 1H), 7.64 (m, 3H), 7.50 (m, 2H), 6.99 (d, 1H), 5.54 (s, 1H), 4.98 (s, 2H), 3.34 (m, delimičo sakriven pikom vode, verovatno 2H), 3.12 (s, 3H), 2.87 (t, 3H), 2.24 (s, 3H), 2.14 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.87 min, m/z = 495 [M+H]+ .
Primer 178: 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0759]
[0760] 3-(2,6-Dihlorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (18 mg, 0.036 mmol) je rastvoren u metanolu (1 mL). Dodat je koncentrovani vodeni rastvor formaldehida (5.41 μl, 0.073 mmol), a zatim natrijum triacetoksiborohidrid (38.5 mg, 0.18 mmol). Smeša je mešana u trajanju od 16 časova. Dodata je dodatna porcija vodenog rastvora formaldehida (5.41 μl, 0.073 mmol), a zatim natrijum triacetoksiborohidrid (38.5 mg, 0.18 mmol). Smeša je mešana u trajanju od 30 min. Reakcija je ugašena dodavanjem nekoliko kapi koncentrovane HCl. Smeša je dodata u 2 g SCX kertridž, koji je ispran metanolom, zatim eluiran sa 2 M NH3u metanolu da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Ona je suspendovana u dietil etru i čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (8 mg, 43%) kao bela čvrsta 8.48 (s, 1H), 7.62 (m, 3H), 7.55 (d, 1H), 7.48 (m, 1H), 7.00 (d, 1H), 5.50 (s, 1H), 4.98 (s, 2H), 3.12 (s, 3H), 2.97 (m, 2H), 2.73 (m, 2H), 2.28 (m, 5H). LCMS (postupak C) : RT= 0.90 min, m/z = 509 [M+H]+ .
Primer 179: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0761]
Korak 1: (2-bromo-5-nitrofenil)metanol:
[0762] Rastvor 2-bromo-5-nitrobenzoeve kiseline (2.460 g, 10.00 mmol) u anhidrovanom THF (50 mL) je hlađen do 0°C, a zatim je ukapavanjem dodavan boran tetrahidrofuran kompleks (1M u THF, 25 mL, 25.00 mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se zagreva do sobne temperature i mešana preko noći. Reakciona smeša je hlađena do 0°C i ugašena dodavanjem fiziološkog rastvora (50 mL). Slojevi su odvojeni i vodena faza je ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 50 mL). Spojene organske faze su koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom i prečišćene pomoću Biotage hromatografije (silika 100g kertridž, eluiranje sa gradijentom od cikloheksana:etil acetata od 95:5 do 60:40) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (1.80 g, 78%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 8.02 (dd, 1H), 7.72 (d, 1H), 4.83 (d, 2H), 2.16 (t, 1H).
Korak 2: terc-butil 4-(2-(hidroksimetil)-4-nitrofenil)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat:
[0763] Suspenzija (2-bromo-5-nitrofenil)metanola (500 mg, 2.155 mmol), terc-butil 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata (999 mg, 3.23 mmol) i 2M rastvora natrijum karbonata (3232 μl, 6.46 mmol) u 1,4-dioksanu (6491 μl) je degazirana barbotiranjem azota u trajanju od 10 minuta, nakon čega je usledulo dodavanje PdCl2(dppf)-dihlorometanskog adukta (88 mg, 0.108 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do 120°C pod mikrotalasnim zračenjem u trajanju od 20 minuta. Reakciona smeša je razblažena vodom (20 mL) i ekstrahovana u etil acetatu (3 x 12 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Biotage hromatografije (silika 50g kertridž, eluiranje sa gradijentom cikloheksana:etil acetata od 95:5 do 50:50) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje (743 mg, kvantitativan prinos).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1H), 8.11 (dd, 1H), 7.28 (d, 1H), 5.68 (br s, 1H), 4.75 (d, 2H), 4.06 (q, 2H), 3.64 (t, 2H), 2.37 (br s, 2H), 1.50 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.52 min, m/z = 235 [M-Boc+H]+ .
Korak 3: terc-butil 4-(4-amino-2-(hidroksimetil)fenil)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat:
[0764] U rastvor terc-butil 4-(2-(hidroksimetil)-4-nitrofenil)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata (370 mg, 1.107 mmol) u etanolu (7377 μl) dodat je kalaj (II) hlorid (1049 mg, 5.53 mmol) i dobijena smeša je zagrevana do 65°C u trajanju od 2.5 časa. Reakciona smeša je koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom, razblažena sa 4M rastvorom NaOH (15 mL) i ekstrahovana u etil acetat (3 x 10 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtriran, koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom i prečišćena pomoću Biotage hromatografije (GraceResolv silika 12g kertridž, eluiranje sa gradijentom cikloheksana:etil acetata:metanola od 90:10:0 do 0:100:0 do 0:90:10) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (45 mg, 13%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 6.79 (d, 1H), 6.58 (dd, 1H), 5.54 (br s, 1H), 4.57 (s, 2H), 3.99 (q, 2H), 3.69 (br s, 2H), 3.58 (t, 2H), 2.32 (br s, 2H), 1.49 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 0.92 min, m/z = 305 [M+H]+ .
Korak 4: terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(hidroksimetil)fenil)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat:
[0765] 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (53 mg, 0.148 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-amino-2-(hidroksimetil)fenil)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilatom (45 mg, 0.148 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (58 mg, 64%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.84 (d, 1H), 7.80 (br s, 1H), 7.57 (dd, 1H), 7.44 (d, 2H), 7.29 (dd, 1H), 7.11 (d, 1H), 5.61 (br s, 1H), 4.90 (s, 2H), 4.68 (d, 2H), 4.03 (d, 2H), 3.62 (t, 2H), 3.21 (s, 3H), 2.37 (br s, 2H), 1.50 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.58 min, m/z = 611 [M+H]+ .
Korak 5: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0766] terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(hidroksimetil)fenil)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (58 mg, 0.095 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (39 mg, 80%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.88 (br s, 1H), 8.48 (s, 1H), 8.07 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.55 (dd, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.01 (d, 1H), 5.56 (br s, 1H), 5.04 (t, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.48 (d, 2H), 3.13 (s, 3H), 2.89 (t, 2H), 2.50-2.53 (m, 2H), 2.15 (br s, 2H), protoni na 2.50-2.53 delimično sakriveni rastvaračem. LCMS (postupak C): RT= 0.74 min, m/z = 511 [M+H]+ .
Primer 180: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0767]
[0768] 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (27 mg, 0.91 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (27 mg, 91%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.48 (s, 1H), 8.07 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.55 (d, 1H), 7.48 (t, 1H), 7.02 (d, 1H), 5.52 (br s, 1H), 5.05 (t, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.46 (d, 2H), 3.13 (s, 3H), 2.96 (s, 2H), 2.50-2.57 (m, 2H), 2.22-2.35 (m, 5H), protoni na 2.50-2.57 delimično sakriveni rastvaračem.
LCMS (postupak C): R
T= 0.75 min, m/z = 525 [M+H] .
Primer 181: 7-((4-(1-ciklobutilpiperidin-4-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0769]
[0770] Suspenzija 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(piperidin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-ona (25 mg, 0.049 mmol), ciklobutanona (10.92 μl, 0.146 mmol) i sirćetne kiseline (8.36 μl, 0.146 mmol) u 1,2-dihloroetanu (1 mL) je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 15 minuta, nakon čega je usledilo dodavanje natrijum triacetoksiborohidrida (31.0 mg, 0.146 mmol). Reakciona smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dodato je još ciklobutanona (10.92 μl, 0.146 mmol) i natrijum triacetoksiborohidrida (31.0 mg, 0.146 mmol) i smeša je zagrevana na 60°C u trajanju od 4 časa. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, dodato je još ciklobutanona (10.92 μl, 0.146 mmol), natrijum triacetoksiborohidrida (31.0 mg, 0.146 mmol) i sirćetne kiseline (8.36 μl, 0.146 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperatura preko noći. Reakciona smeša je sipana na prethodno isprani 5g SCX-2 kertridž, ostavljena da se veže u trajanju od 10 minuta, isprana sa 80:20 dihlorometanom: metanolom pre nego što je proizvod eluiran sa 80:20 dihlorometana: 7M amonijaka u metanolu. Dobijeni rastvor je koncentrovan do sušenja, prečišćen hromatografijom (GraceResolv silika 12g kertridž, dihlorometan:2M amonijak u metanolu, eluiranje sa gradijentom od 100:0 do 80:20) i sušen zamrzavanjem preko noći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (10 mg, 36%).<1>H 8.47 (s, 1H), 7.95 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.56 (br d, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.18 (d, 1H), 5.10 (t, 1H), 4.97 (s, 2H), 4.53 (d, 2H), 3.12 (s, 3H), 2.57-3.05 (br m, 3H), 1.48-2.13 (br m, 13H). LCMS (postupak C): RT= 0.80 min, m/z = 567 [M+H]+ .
Primer 182: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-metoksi-4-(piperidin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0771]
Korak 1: terc-butil 4-(2-metoksi-4-nitrofenil)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat:
[0772] Suspenzija 1-jodo-2-metoksi-4-nitrobenzena (600 mg, 2.150 mmol), terc-butil 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata (997 mg, 3.23 mmol) i 2M rastvora natrijum karbonata (3225 μl, 6.45 mmol) u 1,4-dioksanu (6477 μl) je degazirana barbotiranjem azota u trajanju od 10 minuta, nakon čega je usledilo dodavanje PdCl2(dppf)-dihlorometanskog adukta (88 mg, 0.108 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do 120°C pod mikrotalasnim zračenjem u trajanju od 20 minuta. Reakciona smeša je razblažena vodom (20 mL) i ekstrahovana u etil acetat (3 x 12 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom (silika 50g kertridž, eluiranje sa gradijentom cikloheksana:etil acetata od 95:5 do 70:30) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao žuto ulje koje je prilikom stajanja očvrsnulo (661 mg, 92%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.71 (d, 1H), 7.28 (d, 1H), 5.87 (br s, 1H), 4.07 (q, 2H), 3.91 (s, 3H), 3.60 (t, 2H), 2.48 (br s, 2H), 1.49 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.85 min, m/z = 279 [M-tBu+H]+ .
Korak 2: terc-butil 4-(4-amino-2-metoksifenil)piperidin-1-karboksilat:
[0773] U suspenziju terc-butil 4-(2-metoksi-4-nitrofenil)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilata (400 mg, 1.196 mmol) i 10% paladijuma na uglju (127 mg, 0.120 mmol) u etanolu (5 mL) dodat je amonijum format (377 mg, 5.98 mmol) i dobijena smeša je zagrevana do 60°C pod atmosferom azota u trajanju od 2 časa. Reakciona smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, filtrirana kroz Celite® i koncentrovana do sušenja pod sniženim pritiskom. Ostatak je ponovo rastvoren u dihlorometanu (10 mL) i ispran zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (10 mL). Vodena faza je isprana dihlorometanom (2 x 10 mL). Spojene organske faze su sušene preko Na2SO4, filtrirane i koncentrovane do sušenja pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao roze čvrsta supstanca (270 mg, 74%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 6.20-6.30 (m, 2H), 4.20 (br s, 2H), 3.77 (s, 3H), 3.60 (br s, 2H), 2.94 (tt, 1H), 2.79 (br t, 2H), 1.74 (br d, 2H), 1.51 (td, 2H), 1.47 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.22 min, m/z = 251 [M-tBu+H]+ .
Korak 3: terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-metoksifenil)piperidin-1-karboksilat:
[0774] 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (210 mg, 0.590 mmol) je reagovao sa terc-butil 4-(4-amino-2-metoksifenil)piperidin-1-karboksilatom (181 mg, 0.590 mmol) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (210 mg, 58%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 1H), 7.59 (br s, 1H), 7.39-7.47 (m, 3H), 7.29 (dd, 1H), 7.02-7.12 (m, 2H), 4.89 (s, 2H), 4.22 (br s, 2H), 3.85 (s, 3H), 3.20 (s, 3H), 3.04 (tt, 1H), 2.82 (br t, 2H), 1.79 (br d, 2H), 1.59 (td, 2H), 1.48 (s, 9H). LCMS (postupak C): RT= 1.89 min, m/z = 613 [M+H]+ .
Korak 4: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-metoksi-4-(piperidin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on:
[0775] terc-butil 4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-metoksifenil)piperidin-1-karboksilat (210 mg, 0.342 mmol) je deprotektovan praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (168 mg, 96%).<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.48 (s, 1H), 7.68 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.48 (dd, 1H), 7.20 (br d, 1H), 7.06 (d, 1H), 4.98 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.14 (s, 3H), 2.99 (d, 2H), 2.88 (tt, 1H), 2.49-2.62 (m, 2H), 1.60 (d, 2H), 1.45 (qd, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.85 min, m/z = 513 [M+H]+ .
Primer 183: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-metoksi-4-(1-metilpiperidin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on
[0776]
[0777] 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-metoksi-4-(piperidin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on (50 mg, 0.97 mmol) je metilovan praćenjem postupka za Primer 35 da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao bela čvrsta supstanca (42 mg, 82%). 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ (br s, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.69 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.48 (dd, 1H), 7.21 (br d, 1H), 7.08 (d, 1H), 4.99 (s, 2H), 3.78 (s, 3H), 3.13 (s, 3H), 2.84 (d, 2H), 2.67-2.79 (m, 1H), 2.17 (s, 3H), 1.84-2.00 (m, 2H), 1.52-1.72 (m, 4H). LCMS (postupak C): RT= 0.86 min, m/z = 527 [M+H]+ .
Primeri 184-185: 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((R)-3-(metoksimetil)piperazin-1-il)-3-((R)-2,2,2-trifluoro-1-hidroksietil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on [0778]
[0779] (R)-terc-butil 2-(metoksimetil)-4-(4-nitro-2-((R)-2,2,2-trifluoro-1-hidroksietil)fenil)piperazin-1-karboksilat i (R)-terc-butil 2-(metoksimetil)-4-(4-nitro-2-((S)-2,2,2-trifluoro-1-hidroksietil)fenil)piperazin-1-karboksilat:
[0780] Tetrabutilamonijum fluorid (2 kapi) je dodat u rastvor 4-(R)-terc-butil 4-(2-formil-4-nitrofenil)-2-(metoksimetil)piperazin-1-karboksilata (220 mg, 0.58 mmol) i trimetil(trifluorometil)silana (165 mg, 1.160 mmol) u 5 mL THF, zatim smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Zatim je dodat rastvor TBAF (1.7 ml, 1 M u THF), i cela smeša je mešana još 1 čas. Posle ekstrakcije sa etil acetatom i vodom, organska faza je isprana fiziološkim rastvorom i zatim sušena preko anhidrovanog MgSO4. Rastvor je filtriran i rastvarač je isparavan pod vakuumom. LCMS analiza (postupak C) sirovog proizvoda je pokazala prisustvo dva diastereoizomera (1.69 and 1.74 min, m/z = 420) koji su odvojeni hromatografski. Svaki diastereoizomer je zatim posebno hidrogenizovan upotrebom H-Cube aparata (10% Pd/C kertridž, kompletan H2, 25 °C, 1 mL/min). Svaki rezultujući diastereoizomerni analin (1 ekv.) je zatim kuplovan sa 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-(metiltio)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-onom (1.1 ekv.) praćenjem postupka za Primer 31 da bi se dobila dva diastereoizomera proizvoda iz naslova. Diastereoizomer 1 (28 mg). 8.48 (s,1H), 8.26 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.61 (br s, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.27 (d, 1H), 6.75 (d, 1H), 5.69 (m, 1H), 4.98 (s, 2H),3.29 (m, 2H), 3.25 (s, 3H), 3.12 (s, 3H), 2.97 (m, 2H), 2.80 (m, 3H), 2.61 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.87 min, m/z = 626 [M+H]+ .
Diastereoizomer 2 (18 mg). 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 1H), 8.48 (s, 1H),8.26 (br s, 1H), 7.65 (d, 2H), 7.61 (br s,1H), 7.48 (dd, 1H), 7.27 (d, 1H), 6.75 (d, 1H), 5.67 (m, 1H), 4.98 (s, 2H),3.32 (m, 2H), 3.25(s, 3H), 3.12 (s, 3H), 3.00 (m, 2H), 2.9-2.55 (m, 6H), 2.61 (m, 2H). LCMS (postupak C): RT= 0.91 min, m/z = 626 [M+H]+ .
Poređenje zasićenih jedinjenja sa stanjem tehnike:
[0781] Jedinjenja ovde mogu imati bolje fizičkohemijske osobine u poređenju sa onima poznatim u stanju tehnike. Na primer, kinetička rastvorljivost primera prikazanih u daljem tekstu je veća od odgovarajućeg primera za koji se traži zaštita u WO2013126656.
[0782] Jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu takođe imati bolju metaboličku stabilnost u poređenju sa onima poznatim u stanju tehnike. Na primer, intrinzički klirens iz humanih mikrozoma primera prikazanih u daljem tekstu je niži od onog od odgovarajućih jedinjenja za koja se traži zaštita u WO 2013126656 i WO 2013059485.
CIinthumanog mikrozoma 9 μL/min/mg
[0783] Pored toga, jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu imati nižu aktivnost van ciljnog mesta i prema tome veći terapeutski indeks in vivo. Na primer, in vitro inhibicija hERG je povezana sa kardiovaskularnom toksičnošću in vivo. Jedinjenja prema predmetnom pronalasku generalno imaju nisku aktivnost protiv hERG, npr. primeri 1, 6, 10, 12, 16, 20 svi imaju hERG IC50> 10 μM. Pored toga, jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu imati nižu aktivnost protiv hERG od onih iz stanja tehnike, npr. Primer 5 prema predmetnom pronalasku ima nižu inhibiciju hERG od odgovarajućih analoga iz WO2013126656, WO2013013031 i WO2013059485
Komparativan primer iz WO2013059485
hERG IC50 > 7.2uM
Postupak 1: Merenje aktivnosti Wee-1 kinaze
[0784] U merenju aktivnosti Wee-1, komercijalni peptid Poly(Lys Tyr(4:1)) hidrobromid je kupljen iz Sigma Aldrich i korišćen kao supstrat. Aktivirana Wee-1 kinaza je kupljena iz Invitrogen (PV3817) i ADP-Glo luminiscentni komplet je kupljen iz Promega.
[0785] Sve reakcije su se odigrale u 60 μL zapreminama u reakcionom puferu koji sadrži 40 mM Tris-HCl i 20 mM magnezijum hlorid, dopunjen sa 0.1 mg/mL goveđim serum albuminom i 2 mM DTT. Jedinjenja su serijski razblažena u puferu i po 5 μL svake koncentracije je pipetirano u belu 384-komornu ploču (Sigma Aldrich M6186). Alikvota od 5 μL Wee-1 enzima je dodata u svaku komoricu i ploča je centrifugirana 1 min da bi se osiguralo mešanje enzima i inhibitora.
[0786] Ploča je inkubirana na sobnoj temperaturi 30 minuta pre dodavanja 2.0 μg/mL supstrata i 30 μM ATP-a u 5 μL alikvoti. Ploča je centrifugirana jedan minut i inkubirana u trajanju od 1 časa na sobnoj temperaturi.
[0787] 15 L ADP-Glo stop reagensa je dodato u svaku komoricu da bi se ugasila reakcija i potrošio neprevedeni ATP. Ploča je inkubirana dodatnih 40 min u mraku na sobnoj temperaturi.
[0788] 30 μL detekcionog reagensa ADP-Glo kinaze dodato je u svaku komoricu, prevodeći ADP u ATP, katalizujući generisanje luciferina pomoću luciferaze. Ploča je mućkana u trajanju od 1 min, i inkubirana u mraku dodatni čas.
[0789] Luminescencija iz svake komorice je detektovana upotrebom Biotek Synergy4 HD uređaja za očitavanje ploče i procenat inhibicije aktivnosti kinaze je izračunavan za svaki testirani inhibitor. Pozitivne (samo kinaza) i negativne (bez kinaze) kontrole su dodate u svaku ploču da bi se osigurala specifična interakcija kinaze i inhibitora. Koncentracija IC50za svaki inhibitor je izračunavana formiranjem grafikona procenta inhibicije kinaze prema koncentraciji inhibitora i aproksimacijom krive generisane nelinearnom regresijom.
Postupak 2: Određivanje efekta jedinjenja na fosforilaciju cdc2 na Tyr15
[0790] Ćelijske linije kolorektalnog kancera HT-29 i HCT-116 su kupljene iz ATCC i rutinski su održavane u McCoy-ovom medijumu (Invitrogen) dopunjenom sa 10% fetusnim telećim serumom.
[0791] Ćelije su tripsinizovane iz njihove posude za rast i brojane, 100 μL ćelijske suspenzije koja sadrži 6000 ćelija je pipetirano u crne 96-komorne Co-star ploče i inkubirano preko noći da bi se omogućilo lepljenje za površinu na temperaturi od 37°C i atmosferi od 5% CO2. Test jedinjenja su formulisana u DMSO i razblažena u medijumu dopunjenom fetusnim telećim serumom. Inkubirajući medijum je uklonjen usisavanjem i medijum dopunjen razblaženim lekom je dodat u svaku komoricu.
[0792] Ploča je vraćena u inkubator na dodatnih osam časova na 37°C i atmosferi od 5% CO2. Posle inkubiranja, medijum dopunjen lekom je usisan iz svake komorice i ćelije su isprane jednom u ledno hladnom fosfatno puferisanom fiziološkom rastvoru (PBS). 100 μL pufera za ćelijsku lizu (Cell Signalling Technologies #9803) koji sadrži 20 mM Tris, 150 mM NaCl, 1 mM EDTA, 1 mM EGTA, 1% Triton-X100, 2.5 mM natrijum pirofosfat, 1 mM glicerofosfat, 1 mM Na3VO4i 1 μg/mL leupeptin je dodato u svaku komoricu 96-komorne ploče i inkubirano na 4°C u trajanju od 30 min. Uzorci na ploči su naglo zamrznuti na -80°C dok nisu bili potrebni. Neposredno pre nastavka analize, ploča sa uzorcima je odmrznuta i centrifugirana na 4°C u trajanju od 10 min i supernatant je prebačen u sekundarne epruvete ili 96-komornu ploču.
[0793] Ćelijski supernatant je mešan u odnosu od 1:1 sa puferom za razblaženje uzorka i vorteksovan jedan minut. 100 μL razblaženog uzorka je pipetirano u prethodno obložene ploče koje sadrže zečje poliklonsko antitelo za fosfo-cdc2 (Tyr15) (Cell Signalling Technologies PathScan kit #7176). Ploča je hermetički zatvorena i inkubirana preko noći na 4°C.
[0794] Hermetički poklopac ploče je uklonjen i sadržaj komorica je usisan, nakon čega je usledilo 3 x 5 min ispiranja sa 200 μL razblaženog pufera za ispiranje. Između svakog ispiranja ploča je snažno tapkana na papir za bloting da bi se osiguralo uklanjanje kompletnog rastvora kompleta. 100 μL detekcionog antitela kompleta je dodato u svaku komoricu i ploča je ponovo hermetički zatvorena i inkubirana na 37°C u trajanju od 1 časa. Posle inkubacije ploča je isprana i obrađena na sličan način onome koji je prethodno opisan.
[0795] 100 μL sekundarnog antitela vezanog za hrenovu peroksidazu je dodato u svaku test komoricu, ploča je hermetički zatvorena i inkubirana trideset minuta na 37°C. Posle inkubacije, ploča je isprana kao što je prethodno navedeno, nakon čega je usledilo dodavanje 100 μL 3,3’,5,5’ tetrametilbenzidina (TMB reagens). Ploča je hermetički zatvorena i inkubirana na sobnoj temperaturi 30 min.
[0796] 100 μL stop rastvora je dodato u svaku komoricu i donja površina ploče je obrisana ubrusom bez neupredenih pamučnih vlakana, pre spektrofotometrijskog određivanja. Apsorbanca iz svake komorice je očitavana na 450 nm u roku od 30 min od dodavanja stop rastvora.
[0797] Procenat fosfo-cdc2 je izračunat u poređenju sa DMSO kontrolom i prikazan na grafikonu naspram koncentracije inhibitora upotrebom GraphPad Prism. Podaci su aproksimirani upotrebom nelinearne regresione analize i generisane su vrednosti IC50.
Postupak 3: Određivanje efekta jedinjenja na cdc2 fosforilaciju na Tyr15, upotrebom ELISA Base kompleta na bazi ćelija (R&D Systems, KCB001)
[0798] Ćelijska linija kolorektalnog kancera, HT-29 je kupljena iz ATCC i održavana u McCoy-ovom 5A medijumu (Gibco®, Life technologies) dopunjenom sa 10% fetusnim telećim serumom (FCS).
[0799] Ćelije su tripsinizovane i brojane, 100 μL 8000 ćelija je zasejano u svaku komoricu 96-komorne crne ploče sa providnim dnom i inkubirano preko noći da bi se omogućilo lepljenje za površinu, na 37°C i 5% CO2u inkubatoru ćelijske kulture. Test jedinjenja su formulisana u DMSO i razblažena u medijumu ćelijske kulture dopunjenom sa FCS. Medijum za rast je uklonjen iz ćelija i medijum koji sadrži razblažena jedinjenja je dodat u svaku komoricu. Ploča je vraćena u inkubator na dodatnih osam časova inkubacije na 37°C i 5% CO2.
[0800] Posle inkubacije ćelije su fiksirane zamenom medijuma dopunjenog jedinjenjima sa 100 μL 4% formaldehida u 1x fosfatno puferisanom fiziološkom rastvoru (PBS), u trajanju od 20 minuta na sobnoj temperaturi. Rastvor formaldehida je uklonjen i ćelije su isprane tri puta sa PBS. ELISA analiza na bazi ćelija (R&D Systems) je izvedena neposredno posle fiksiranja ćelija ili ploča je hermetički zatvorena i fiksirane ćelije su čuvane u PBS na 4°C dok nisu bile potrebne (ne više od dve nedelje).
[0801] Da bi se nastavila analiza, PBS je uklonjen i ćelije su isprane 3 puta za 5 minuta sa 200 μL 1x pufera za ispiranje. Svaki korak ispiranja je izveden pažljivim mućkanjuem. Posle ispiranja, dodato je 100 μL 0.6 % H2O2u 1x puferu za ispiranje (pufer za gašenje), ploča je hermetički zatvorena i inkubirana 20 minuta na sobnoj temperaturi. Posle inkubacije ćelije su ispirane 3 puta za 5 minuta sa 200 μL 1x pufera za ispiranje, pažljivim mućkanjem. U svaku komoricu je dodato 100 μL blokirajućeg pufera, ploča je ponovo hermetički zatvorena i inkubirana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 časa.
[0802] Posle blokiranja, ćelije su isprane kao što je opisano u prethodnom tekstu. Smeša primarnog antitela je pripremljena mešanjem dva primarna antitela, zečjeg monoklonskog antitela za fosfo-cdc2 (Tyr15) (Cell Signaling, #4539) i mišjeg monoklonskog antitela za ukupni cdc2 p34 (Santa Cruz Biotechnology, sc-54), razblažena 1:25 i 1:50 u puferu za blokiranje, respektivno. 60 μL smeše primarnog antitela je dodato u svaku komoricu, ploča je hermetički zatvorena i inkubirana preko noći na 4°C.
[0803] Primarna antitela su uklonjena i ćelije su isprane kao što je prethodno opisano. 100 μL smeše sekundarnog antitela, koja sadrži kozji anti-zečji IgG konjugovan sa hrenovom peroksidazom (HRP) i kozji anti-mičji IgG konjugovan sa alkalnom fosfatazom (AP), razblažene 1:100 u blokirajućem puferu, dodato je u svaku test komoricu. Ploča je ponovo hermetički zatvorena i inkubirana 2 časa na sobnoj temperaturi.
[0804] Sekundarna antitela su uklonjena i ćelije su isprane 2 puta puferom za ispiranje, nakon čega su usledila 2 ispiranja sa PBS. Svaki korak ispiranja je izvođen u trajanju od 5 minuta uz pažljivo mućkanje. PBS je uklonjen i u svaku komoricu je dodato 75 μL fluorogenog supstrata za HRP (supstrat F1). Ploča je hermetički zatvorena i inkubirana 1 čas na sobnoj temperaturi, u mraku. 75 μL fluorogenog supstrata za AP (supstrat F2) je dodato direktno u svaku komoricu, ploča je ponovo zasejana i inkubirana dodatnih 40 minuta na sobnoj temperaturi, zaštićena od direktne svetlosti.
[0805] Posle inkubacije fluorescencija iz svake komorice je očitavana na 600 nm (signal iz supstrata 1, fosforilisani protein) i zatim na 450 nm (signal iz supstrata 2, ukupni protein).
[0806] Procenat fosfo-cdc2 je izračunavan u poređenju sa DMSO kontrolom, normalizovan prema ukupnom cdc2 i prikazan na grafikonu naspram koncentracije inhibitora, upotrebom GraphPad Prism. Podaci su aproksimirani upotrebom nelinearne regresione analize i generisane su EC50vrednosti.
Postupak 4: Određivanje procena CLint upotrebom mikrozoma humane jetre
[0807] Test jedinjenja (krajnja koncentracija = 1 μM; krajnja koncentracija DMSO = 0.1%) su inkubirana u 0.1 M fosfatnom puferu pH 7.4 sa mikrozomima humane jetre (0.5 mg proteina/mL) na 37°C. Reakcije su započete dodavanjem NADPH u 0.1 M fosfatnog pufera pH 7.4 (krajnja koncentracija 1 mM).40 μL alikvote su uklonjene na 2, 5, 10, 15, 20, 30, 40 i 50 min. Reakcije su ugašene u 80 μL ledeno hladnog metanola. Uzorci su zatim zamrznuti preko noći, zatim centrifugirani na 3500 rpm u trajanju od 20 min na 4°C. Supernatanti su uklonjeni i prebačeni u analitičke ploče i analizirani pomoću LC/MS/MS.
LC/MS/MS postupak:
[0808] Svi uzorci su analizirani na Waters Acquity I-Class spojenim sa Waters Xevo TQD masenim spektrometrom. Waters BEH C182.1x50 mm 1.7 μm kolone je korišćeno i pokretne faze su bile voda i metanol koji sadrži 0.1% mravlje kiseline kao modifikator. Analiza je izvedena višestrukim praćenjem reakcije u uslovi su optimizovani za svako test jedinjenje.
Analiza podataka:
[0809] Iz grafikona In površine pika prema vremenu, određen je gradijent linije. Zatim su izračunavani polu-život i intrinzički klirens upotrebom sledećih jednačina.
Konstanta stope eliminacije (k) = (- gradijent)
gde V = zapremina inkubacije (μL)/broju ćelija
Postupak 5: Određivanje kinetičke rastvorljivosti (u PBS puferu)
[0810] Test jedinjenja (5μL; 10mM DMSO stok) su dodata u 245μL 10 PBS pufera pH 7.4 (Dulbecco A) u Millipore MultiScreen® Solubility Filter ploči i mešana na 300rpm na sobnoj temperaturi na uređaju za mućkanje ploče u trajanju od 90 minuta. U međuvremenu ustanovljene su kalibracione krive od 5-tačaka za svako jedinjenje u smeši acetonitrila/PBS pufera 15 (maksimalna koncentracija 200μM). Posle filtracije i podudaranja matriksa, kalibracine i ploče za analizu su analizirane na Bioteck Synergy 4 uređaju za očitavanje ploče (240-400nm). Krajnja koncentracija test jedinjenja u filtratu je izračunata upotrebom nagiba kalibracione krive. Svih 20 merenja su izvedena u tri ponavljanja.
Postupak 6: Određivanje aktivnosti hERG
[0811] Jedinjenja su testirana za inhibiciju hERG K+ kanala upotrebom IonWorks „patch clamp“ elektrofiziologije u Essen BioScience. Krive koncentracije i odgovora od 8 tačaka efekta jedinjenja na hERG struju kao procenat signala pre jedinjenja su generisane upotrebom 3-strukih serijskih razblaženja iz 11 μM i rezultati su prikazani kao IC50u μM.

Claims (15)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (I):
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili N-oksidni derivat, naznačeno time što: R1 je izborno supstituisana aril grupa ili izborno supstituisana heteroaril grupa; R2 i R3 su nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, atoma deuterijuma, izborno supstituisane alkil grupe, izborno supstituisane cikloalkil grupe, izborno supstituisane alkoksi grupe, izborno supstituisane amino grupe, izborno supstituisane aril grupe i izborno supstituisane heteroaril grupe; ili R2 , R3 i atom ugljenika za koji su oba vezani, kao uzeti zajedno, formiraju izborno supstituisanu cikloalkil grupu ili izborno supstituisanu heterociklil grupu; R4 je atom vodonika, izborno supstituisana alkil grupa, izborno supstituisana alkenil grupa, izborno supstituisana aril grupa ili izborno supstituisana heteroaril grupa; ili R4 i R2 ili R3 i atomi prstena za koji su vezani, kao uzeti zajedno, formiraju izborno supstituisanu heterociklil grupu; i R5 je izborno supstituisana aril grupa ili izborno supstituisana heteroaril grupa.
  2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili N-oksidni derivat, naznačeno time što R<1>je supstituisana aril ili supstituisana heteroaril grupa.
  3. 3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili patentnom zahtevu 2, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili N-oksidni derivat, naznačeno time što R1 je grupa predstavljena formulom (a):
    gde su R1a i R1b svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, halo grupe, hidroksil grupe, cijano grupe, amino grupe, C1-C6alkil grupe, C1-C6alkoksi grupe i C1-C6alkoksi-C1-C6alkil grupe.
  4. 4. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili N-oksidni derivat, naznačeno time što R<1>je 2,6-dihlorofenil grupa.
  5. 5. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili N-oksidni derivat, naznačeno time što R<2>i R<3>je svaki nezavisno atom vodonika.
  6. 6. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili N-oksidni derivat, naznačeno time što R<4>je izborno supstituisana C1-C6alkil grupa.
  7. 7. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 6, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili N-oksidni derivat, naznačeno time što R<4>je metil grupa.
  8. 8. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili N-oksidni derivat, naznačeno time što R<5>je grupa predstavljena formulom (d):
    R5a i R5b su nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od atoma vodonika, halo grupe, izborno supstituisane C1-C6alkil grupe, izborno supstituisane C1-C6nitril grupe, izborno supstituisane amino grupe, izborno supstituisane C1-C6alkoksi grupe, izborno supstituisane sulfanil grupe, izborno supstituisane sulfonil grupe, izborno supstituisane sulfoksiminil grupe i izborno supstituisane četvoro- do sedmo-člane heterociklil grupe koja sadrži azot; pri čemu je izborno supstitisana četvoro- do sedmo-člana heterociklil grupa koja sadrži azot izborno supstituisana sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od halo grupe, izborno supstituisane C1-C6alkil grupe, okso grupe, hidroksil grupe, grupe =N-R5g i grupe -Q-N(R5e)R5e’; R5e, RTi R5g svaki nezavisno je atom vodonika ili C1-C6alkil grupa ili, R5e i R5e’ i atom azota za koji su vezani, kao uzeti zajedno, mogu da formiraju izborno supstituisanu šesto-članu heterociklil grupu; i Q je jednoguba veza ili C1-C3alkil grupa.
  9. 9. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili N-oksidni derivat, naznačeno time što je jedinjenje izabrano od sledećih: (1) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (2) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(2-(metilamino)etoksi)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (3) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-metoksi-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (4) hidrohlorid 2-(4-(4-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)fenil)piperazin-1-il)sirćetne kiseline; (5) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((metilamino)metil)-4-morfolinofenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (6) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (7) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-fluoro-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (8) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-(4-metoksibenzil)-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (9) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (10) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (11) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-cijano-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (12) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-ilmetil)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (13) 7-((4-(4-(2-aminoacetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (14) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((1,2,3,4-tetrahidroizohinolin-7-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (15) 3-(2,6-dihlorofenil)-2,2-dideutero-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (16) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (17) (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (18) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-(piperidin-4-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (19) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (20) (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (21) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(4-izopropilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (22) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((2-metil-1,2,3,4-tetrahidroizohinolin-7-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (23) (rac)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2-fenil-7-((1,2,3,4-tetrahidroizohinolin-7-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (24) 3-(2-hlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (25) 3-(2-hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (26) 3-(2,6-dihlorofenil)-1,2-dimetil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (27) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(morfolinometil)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (28) 6-(2,6-dihlorofenil)-2-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-6a,7,8,9-tetrahidropirimido[5,4-e]pirolo[1,2-a]pirimidin-5(6H)-on; (29) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-((4-metilpiperazin-1-il)metil)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; i (30) (rac)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(S-metilsulfonimidoil)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; i time što je jedinjenje izabrano od sledećih: (31) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(metoksimetil)-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (32) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3,4-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (33) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (34) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(hidroksimetil)-4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (35) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(5-metilheksahidropirolo[3,4-c]pirol-2(1H)-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (36) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(heksahidropirolo[3,4-c]pirol-2(1H)-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (37) 7-((4-(1-aminociklobutil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (38) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (39) 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (40) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (41) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-morfolinofenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (42) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(1,1-dioksidotiomorfolino)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (43) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-fluoro-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (44) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-((1S,4S)-5-metil-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (45) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-((2R,5S)-2,4,5-trimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (46) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3,4-dimetilpiperazin-1-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (47) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3,4-dimetilpiperazin-1-il)-3-fluorofenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (48) (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-fluoro-4-(3-(hidroksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (49) (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(hidroksimetil)-4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (50) (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-fluoro-4-(3-(hidroksimetil)-4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (51) 7-((4-(2,6-diazaspiro[3.3]heptan-2-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (52) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-((3R,5S)-3,4,5-trimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (53) (R)-3-(2-hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (54) 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-3-(2-hloro-6-fluorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (55) 3-(2-hloro-6-fluorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (56) 3-(2-hloro-6-fluorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (57) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-morfolinofenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (58) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-(1-metil-1H-pirazol-3-il)-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (59) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(metoksimetil)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (60) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (61) (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (62) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(3-(trifluorometil)piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (63) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(3,3,4-trimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (64) 7-((4-(3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-7-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (65) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(metoksimetil)-4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (66) (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-(metoksimetil)-4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (67) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3,4-dimetilpiperazin-1-il)-3-(metoksimetil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (68) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(4-metil-3-(trifluorometil)piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (69) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(metoksimetil)-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (70) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((6,7,8,9-tetrahidro-5H-5,8-epiminobenzo[7]anulen-3-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (71) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(9-metil-3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-7-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (72) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4-etilpiperazin-1-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (73) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-morfolinofenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (74) 7-((4-(3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido [4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (75) 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metilfenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (76) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((2’-metil-2’,3’-dihidro-1’H-spiro[ciklopropan-1,4’-izohinolin]-7’-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (77) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-((1S,4S)-5-metil-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (78) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-d3-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (79) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((2R,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (80) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (81) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-3-fluorofenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (82) 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metoksifenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (83) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((3R,5S)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (84) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-metoksi-4-((1S,4S)-5-metil-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (85) (R)-1-ciklopropil-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (86) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(8-metil-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (87) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperidin-4-iloksi)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (88) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(8-metil-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (89) 3-(2-hloro-6-fluorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(4-izopropilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (90) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-((1-metilpiperidin-4-il)oksi)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (91) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((1-metilpiperidin-4-il)amino)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (92) 3-(2-hloro-6-metilfenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (93) 3-(2-hloro-6-fluorofenil)-7-((4-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (94) (R)-3-(2-hlorofenil)-1-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (95) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(1-metilpiperidin-4-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (96) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(3,3-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (97) 3-(2-hlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(8-metil-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (98) 3-(2-hlorofenil)-7-((4-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (99) (R)-3-(2-hlorofenil)-7-((3-fluoro-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (100) (R)-3-(2-hloro-6-metilfenil)-1-metil-7-((4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (101) (R)-3-(2-hloro-6-metilfenil)-7-((3-(metoksimetil)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (102) 3-(2-hloro-6-metilfenil)-7-((4-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (103) 3-(2-hlorofenil)-7-((4-((3S,5R)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (104) 7-((4-((1S,4R)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-3-(2-hlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (105) 7-((4-(4,7-diazaspiro[2.5]oktan-7-il)fenil)amino)-3-(2-hlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (106) 3-(2-hlorofenil)-7-((4-(3,3-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (107) 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metoksifenil)amino)-3-(2-hlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (108) 3-(2-hlorofenil)-7-((3-(metoksimetil)-4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (109) 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metilfenil)amino)-3-(2-hlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (110) 3-(2-hlorofenil)-7-((4-((2R,5S)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)-3-fluorofenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (111) 3-(2-hlorofenil)-7-((4-((2S,5R)-2,5-dimetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (112) 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metilfenil)amino)-3-(2-hloro-6-metilfenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (113) 3-(2-hlorofenil)-7-((4-(4-etilpiperazin-1-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (114) 3-(2-hloro-6-metilfenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(8-metil-3,8-diazabiciklo[3.2.1]oktan-3-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (115) 7-((4-(4-ciklopropilpiperazin-1-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (116) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4-(2-hidroksietil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (117) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (118) 7-((4-((1R,4R)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-metilfenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (119) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperidin-4-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (120) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4-(2-metoksietil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (121) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-((1R,4R)-5-metil-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (122) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4-etilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (123) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4-(2-(dimetilamino)acetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (124) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(4-(2-(metilamino)acetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (125) 7-((4-(4-acetilpiperazin-1-il)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (126) (R)-3-(2-hloro-6-fluorofenil)-7-((4-(3-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (127) (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(2-(hidroksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (128) (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(2-(hidroksimetil)-4-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (129) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(2-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (130) (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(2-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (131) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(piperidin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (132) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(difluorometoksi)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (133) (S)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(heksahidropirazino[2,1-c][1,4]oksazin-8(1H)-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (134) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(2,2-difluoro-1-hidroksietil)-4-((R)-3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (135) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(3-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (136) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((metilamino)metil)-4-(piperidin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (137) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((metilamino)metil)-4-(pirolidin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (138) 7-((4-(4-acetilpiperazin-1-il)-3-(pirolidin-1-ilmetil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (139) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(difluorometil)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (140) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(2-hidroksipropan-2-il)-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3dihidropirimido [4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (141) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(piperazin-1-il)-3-(((2,2,2-trifluoroetil)amino)metil) fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (142) (R)-3-(2,6-dihlorofenil)-7-((2-fluoro-4-(3-metilpiperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (143) 7-((4-(4-acetilpiperazin-1-il)-3-((metilamino)metil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (144) 7-((4-(4-acetilpiperazin-1-il)-3-((dimetilamino)metil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (145) N-(5-((6-(2,6-dihlorofenil)-8-metil-5-okso-5,6,7,8-tetrahidropirimido[4,5-d]pirimidin-2-il)amino)-2-(piperazin-1-il)benzil)acetamid; (146) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(1,1-dioksidotiomorfolino)-3-((metilamino)metil)fenil) amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (147) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-3-((metilamino)metil)fenil) amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (148) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)-3-((metilamino)metil)fenil) amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (149) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-((dimetilamino)metil)-4-(1,1-dioksidotiomorfolino)fenil) amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (150) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-3-((dimetilamino)metil)fenil) amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (151) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-((dimetilamino)metil)-4-((2S,6R)-2,6-dimetilmorfolino)fenil) amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (152) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-fluoro-3-((metilamino)metil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (153) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(dimetilamino)-3-((metilamino)metil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (154) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-((dimetilamino)metil)-4-morfolinofenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (155) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((metilamino)metil)-4-(piridin-4-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (156) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-((metilamino)metil)-4-(piridin-3-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (157) 7-((4-bromo-3-((metilamino)metil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (158) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((3S,5R)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)-3-(hidroksimetil)fenil) amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (159) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-metoksi-3-((metilamino)metil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (160) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((4-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-3-((metilamino)metil) fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (161) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-(4-(2-(dimetilamino)acetil)piperazin-1-il)-3-(hidroksimetil) fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (162, 163) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-((R)-2,2-difluoro-1-hidroksietil)-4-((R)-3-(metoksimetil)piperazin-1-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (164) 7-((4-((1S,4S)-2,5-diazabiciklo[2.2.1]heptan-2-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (165) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(1-metilpiperidin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (166) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((1,2,3,4-tetrahidro-1,4-epiminonaftalen-6-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (167) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(piperidin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (168) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-(3-((metilamino)metil)fenil)-7-((4-morfolinofenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (169) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-etil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (170) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((3S,5R)-3,5-dimetilpiperazin-1-il)-3-(hidroksimetil)fenil) amino)-1-etil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (171) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-fenil-7-((4-(piperazin-1-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (172) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(2-(dimetilamino)-1-hidroksietil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (173) 7-((4-(3-oksa-7,9-diazabiciklo[3.3.1]nonan-7-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (174) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-((etilamino)metil)-4-morfolinofenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (175) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((9-metil-1,2,3,4-tetrahidro-1,4-epiminonaftalen-6-il)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (176) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-((1S,4S)-5-metil-2,5-diazabiciklo [2.2.1]heptan-2-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (177) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (178) 3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-7-((3-metil-4-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)fenil)amino)-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (179) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (180) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-(hidroksimetil)-4-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (181) 7-((4-(1-ciklobutilpiperidin-4-il)-3-(hidroksimetil)fenil)amino)-3-(2,6-dihlorofenil)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (182) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-metoksi-4-(piperidin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; (183) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((3-metoksi-4-(1-metilpiperidin-4-il)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on; i (184, 185) 3-(2,6-dihlorofenil)-7-((4-((R)-3-(metoksimetil)piperazin-1-il)-3-((R)-2,2,2-trifluoro-1-hhidroksietil)fenil)amino)-1-metil-2,3-dihidropirimido[4,5-d]pirimidin-4(1H)-on.
  10. 10. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 9, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili N-oksidni derivat, i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijens.
  11. 11. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 9, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili N-oksidni derivat, i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv ekscipijens.
  12. 12. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 11 koja sadrži jedno ili više dodatnih farmaceutski aktivnih sredstava.
  13. 13. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 9, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so ili N-oksidni derivat, ili farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 11 ili 12 za upotrebu u terapiji.
  14. 14. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 9 za upotrebu kao lek.
  15. 15. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 9 za upotrebu u lečenju ili prevenciji kancera. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5
RS20171338A 2013-12-19 2014-12-19 Pirimidopirimidinoni korisni kao inhibitori wee-1 kinaze RS56731B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
GBGB1322602.2A GB201322602D0 (en) 2013-12-19 2013-12-19 Pharmaceutical compounds
EP14815843.9A EP3083625B1 (en) 2013-12-19 2014-12-19 Pyrimidopyrimidinones useful as wee-1 kinase inhibitors
PCT/GB2014/053793 WO2015092431A1 (en) 2013-12-19 2014-12-19 Pyrimidopyrimidinones useful as wee-1 kinase inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS56731B1 true RS56731B1 (sr) 2018-03-30

Family

ID=50071157

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20171338A RS56731B1 (sr) 2013-12-19 2014-12-19 Pirimidopirimidinoni korisni kao inhibitori wee-1 kinaze

Country Status (28)

Country Link
US (1) US9850247B2 (sr)
EP (1) EP3083625B1 (sr)
JP (1) JP6437559B2 (sr)
KR (1) KR102405462B1 (sr)
CN (1) CN105829315B (sr)
AU (1) AU2014369457B2 (sr)
BR (1) BR112016014151B1 (sr)
CA (1) CA2933755C (sr)
CY (1) CY1120035T1 (sr)
DK (1) DK3083625T3 (sr)
ES (1) ES2650013T3 (sr)
GB (1) GB201322602D0 (sr)
HR (1) HRP20180080T1 (sr)
HU (1) HUE037908T2 (sr)
IL (1) IL245672B (sr)
LT (1) LT3083625T (sr)
MX (1) MX371108B (sr)
NO (1) NO3083625T3 (sr)
NZ (1) NZ720178A (sr)
PL (1) PL3083625T3 (sr)
PT (1) PT3083625T (sr)
RS (1) RS56731B1 (sr)
RU (1) RU2691105C1 (sr)
SG (1) SG11201603814TA (sr)
SI (1) SI3083625T1 (sr)
SM (1) SMT201800020T1 (sr)
WO (1) WO2015092431A1 (sr)
ZA (1) ZA201603337B (sr)

Families Citing this family (34)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10364247B2 (en) * 2015-04-21 2019-07-30 Ruijin Hospital Affiliated To Shanghai Jiao Tong University School Of Medicine Preparation and use of novel protein kinase inhibitors
JP6692423B2 (ja) * 2015-11-01 2020-05-13 ザ リージェンツ オブ ザ ユニヴァーシティ オブ コロラド，ア ボディ コーポレイト Ｗｅｅ１キナーゼ阻害剤、並びにそれを作製及び使用する方法
US10703759B2 (en) 2016-11-16 2020-07-07 Impact Therapeutics, Inc 8,9-dihydroimidazo[1,2-a]pyrimido[5,4-e]pyrimidin-5(6H)-ones
WO2018124001A1 (ja) 2016-12-27 2018-07-05 国立研究開発法人理化学研究所 Ｂｍｐシグナル阻害化合物
WO2018133829A1 (zh) * 2017-01-23 2018-07-26 南京明德新药研发股份有限公司 作为Wee1抑制剂的1,2-二氢-3H-吡唑[3,4-d]嘧啶-3-酮衍生物
GB201703881D0 (en) * 2017-03-10 2017-04-26 Almac Discovery Ltd Pharmaceutical compounds
US20200108074A1 (en) 2017-03-31 2020-04-09 Seattle Genetics, Inc. Combinations of chk1- and wee1- inhibitors
US11345710B2 (en) 2017-07-10 2022-05-31 Impact Therapeutics (Shanghai), Inc Imidazo[1,2-b]pyrimido[4,5-d]pyridazin-5(6H)-ones and the use thereof
CN109422754A (zh) * 2017-08-24 2019-03-05 上海迪诺医药科技有限公司 吡唑并[3,4-d]嘧啶-3-酮衍生物、其药物组合物及应用
US10807994B2 (en) 2017-10-09 2020-10-20 Nuvation Bio Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
WO2019074979A1 (en) 2017-10-09 2019-04-18 Girafpharma, Llc HETEROCYCLIC COMPOUNDS AND USES THEREOF
DK3712150T3 (da) 2017-11-01 2024-07-29 Wuxi Biocity Biopharmaceutics Co Ltd Makrocyklisk forbindelse, der tjener som wee1-hæmmer, og anvendelser deraf
EP3758706A4 (en) 2018-02-28 2021-11-24 The Regents Of The University Of Colorado WEE1 KINASE INHIBITORS AND METHODS OF TREATING CANCER USING THEREOF
AU2019348120A1 (en) * 2018-09-27 2021-05-06 Betta Pharmaceuticals Co., Ltd FGFR4 inhibitor and use thereof
JP7481336B2 (ja) 2018-10-26 2024-05-10 ウーシー・バイオシティ・バイオファーマシューティクス・カンパニー・リミテッド Ｗｅｅ１阻害剤としてのピリミドピラゾロン類誘導体及びその使用
EP3902805A4 (en) 2018-12-28 2023-03-01 SPV Therapeutics Inc. CYCLINE-DEPENDENT KINASE INHIBITORS
EP3943496A4 (en) 2019-03-22 2022-05-18 Shouyao Holdings (Beijing) Co., Ltd. Wee1 inhibitor and preparation and use thereof
CN113939296A (zh) 2019-04-09 2022-01-14 诺维逊生物股份有限公司 杂环化合物及其用途
US20220162229A1 (en) * 2019-04-09 2022-05-26 Nuvation Bio Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
US20220168313A1 (en) * 2019-04-09 2022-06-02 Nuvation Bio Inc. Heterocyclic compounds and uses thereof
CN113784968B (zh) 2019-04-30 2024-03-15 无锡智康弘义生物科技有限公司 Wee1抑制剂化合物的晶型及其应用
CN112142763B (zh) * 2019-06-28 2024-01-26 上海医药集团股份有限公司 一种吡唑酮并嘧啶类化合物、其制备方法及应用
US12522607B2 (en) 2020-06-17 2026-01-13 Wigen Biomedicine Technology (shanghai) Co., Ltd. Substituted pyrazolo[3,4-d]pyrimidines as wee-1 inhibitors
WO2022072336A1 (en) * 2020-10-01 2022-04-07 University Of Washington Drug-like molecules and methods for the therapeutic targeting of microrna-21
US12551584B1 (en) 2020-12-07 2026-02-17 Actinium Pharmaceuticals, Inc. Lewis Y radioimmunotherapy for the treatment of cancer
JP2024502231A (ja) * 2020-12-18 2024-01-18 グラクソスミスクライン、インテレクチュアル、プロパティー、ディベロップメント、リミテッド Ｎａｖ１．８電位依存性ナトリウムチャネルを阻害するためおよびＮａｖ１．８介在疾患を治療するために有用な化学化合物
JP2023554430A (ja) * 2020-12-18 2023-12-27 グラクソスミスクライン、インテレクチュアル、プロパティー、ディベロップメント、リミテッド Ｎａｖ１．８阻害剤としての含窒素２，３－ジヒドロキナゾリノン化合物
AU2022265032A1 (en) 2021-04-30 2023-11-16 Wigen Biomedicine Technology (shanghai) Co., Ltd. Fused ring compound as wee-1 inhibitor, and preparation method therefor and use thereof
BR112023025403A2 (pt) 2021-06-25 2024-02-20 Korea Res Inst Chemical Tech Composto heterocíclico bifuncional tendo função de degradação de btk por meio da via ubiquitina proteassoma e uso do mesmo
CN116462687B (zh) 2022-01-18 2025-01-07 江苏天士力帝益药业有限公司 Wee1抑制剂及其制备和用途
CN116836184B (zh) * 2022-03-25 2025-07-25 药雅科技(上海)有限公司 Wee1激酶抑制剂的制备及其应用
WO2023217201A2 (zh) * 2022-05-10 2023-11-16 杭州德睿智药科技有限公司 作为Wee1抑制剂的新型嘧啶并杂环类新化合物及其应用
CN117402162A (zh) 2022-07-13 2024-01-16 江苏天士力帝益药业有限公司 Wee1抑制剂及其制备和用途
TW202519226A (zh) 2023-11-08 2025-05-16 美商艾克塞里克斯公司 使用抑制ｐｋｍｙｔ１之化合物治療癌症之方法

Family Cites Families (17)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US7504396B2 (en) 2003-06-24 2009-03-17 Amgen Inc. Substituted heterocyclic compounds and methods of use
EP1727819A1 (en) 2004-03-15 2006-12-06 F.Hoffmann-La Roche Ag Novel dichloro-phenyl-pyrido¬2,3-d|pyrimidine derivatives, their manufacture and use as pharmaceutical agents
FR2896246B1 (fr) 2006-01-13 2008-08-15 Sanofi Aventis Sa Derives de pyrido-pyrimidone, leur preparation, leur application en therapeutique.
AR060635A1 (es) 2006-04-27 2008-07-02 Banyu Pharma Co Ltd Derivados de 1,2-dihidro-3h-pirazolo[3,4-d]pirimidin-3-ona, composiciones farmaceuticas que los comprenden y su uso en el tratamiento del cancer
JP5411847B2 (ja) 2007-04-25 2014-02-12 Ｍｓｄ株式会社 Ｗｅｅｌキナーゼインヒビターとしてのジヒドロピラゾロピリミジノン誘導体の多形
ES2608940T3 (es) 2007-06-15 2017-04-17 Msd K.K. Derivado de bicicloanilina
EP2213673B1 (en) 2007-10-23 2013-06-05 Msd K.K. Pyridone-substituted-dihydropyrazolopyrimidinone derivative
EP2376493B1 (en) 2008-12-12 2016-10-05 Msd K.K. Dihydropyrimidopyrimidine derivative
CA2745959A1 (en) * 2008-12-12 2010-06-17 Msd K.K. Dihydropyrimidopyrimidine derivatives
PE20140421A1 (es) * 2010-12-06 2014-04-26 Glaxo Group Ltd COMPUESTOS DERIVADOS DE PIRIMIDINONA COMO INHIBIDORES DE Lp-PLA2
AR084515A1 (es) * 2010-12-22 2013-05-22 Merz Pharma Gmbh & Co Kgaa Derivados heterociclicos nitrogenados, composiciones farmaceuticas que los contienen y uso de los mismos en el tratamiento de enfermedades asociadas al sistema nervioso central tales como parkinson y alzheimer, entre otras
TWI532742B (zh) * 2011-02-28 2016-05-11 艾伯維有限公司 激酶之三環抑制劑
US8716297B2 (en) 2011-07-15 2014-05-06 Abbvie Inc. Chemical entities to be used for Wee1 inhibition for the treatment of cancer
WO2013013031A1 (en) * 2011-07-19 2013-01-24 Abbvie Inc. Pyridazino [4, 5 -d] pyrimidin- (6h) -one inhibitors of wee - 1 kinase
US9181239B2 (en) 2011-10-20 2015-11-10 Abbvie Inc. Pyridopyrimidinone inhibitors of kinases
CN104271576A (zh) * 2012-02-23 2015-01-07 艾伯维公司 激酶的吡啶并嘧啶酮抑制剂
CN102816164A (zh) * 2012-08-31 2012-12-12 北京理工大学 一种合成7-氨基-2,3-二氢嘧啶[4,5-d]嘧啶-4(1H)-酮的方法

Also Published As

Publication number Publication date
CA2933755C (en) 2023-01-31
US9850247B2 (en) 2017-12-26
HRP20180080T1 (hr) 2018-03-09
US20160318936A1 (en) 2016-11-03
MX371108B (es) 2020-01-17
BR112016014151B1 (pt) 2023-01-17
LT3083625T (lt) 2017-12-27
SMT201800020T1 (it) 2018-05-02
RU2691105C1 (ru) 2019-06-11
EP3083625B1 (en) 2017-11-01
JP2017500335A (ja) 2017-01-05
SG11201603814TA (en) 2016-07-28
EP3083625A1 (en) 2016-10-26
ES2650013T3 (es) 2018-01-16
CN105829315A (zh) 2016-08-03
PL3083625T3 (pl) 2018-03-30
CA2933755A1 (en) 2015-06-25
MX2016007801A (es) 2016-09-07
SI3083625T1 (en) 2018-03-30
KR20160098499A (ko) 2016-08-18
AU2014369457A1 (en) 2016-06-09
ZA201603337B (en) 2018-07-25
PT3083625T (pt) 2018-02-06
WO2015092431A1 (en) 2015-06-25
KR102405462B1 (ko) 2022-06-03
CN105829315B (zh) 2019-03-08
GB201322602D0 (en) 2014-02-05
CY1120035T1 (el) 2018-12-12
IL245672B (en) 2021-10-31
DK3083625T3 (en) 2017-12-18
NZ720178A (en) 2022-05-27
JP6437559B2 (ja) 2018-12-12
AU2014369457B2 (en) 2018-08-09
IL245672A0 (en) 2016-06-30
NO3083625T3 (sr) 2018-03-31
RU2016123363A (ru) 2018-01-25
HUE037908T2 (hu) 2018-09-28
BR112016014151A2 (sr) 2017-08-08

Similar Documents

Publication Publication Date Title
KR102405462B1 (ko) Wee-1 카이네이즈 억제제로 유용한 피리미도피리미디논
US10766902B2 (en) Wee-1 inhibiting pyrazolopyrimidinone compounds
ES2914284T3 (es) Derivados de piperidina como inhibidores de la proteasa específica de la ubiquitina 7
JP6412920B2 (ja) ２−アミノピリド［４，３−Ｄ］ピリミジン−５−オン誘導体及びＷｅｅ−１阻害薬としてのそれらの使用
US20230406860A1 (en) Heterocyclic spiro compounds and methods of use
WO2018011570A1 (en) Wee-1 inhibiting pyridopyrimidinone compounds
WO2015019037A1 (en) Pharmaceutical compounds
EP3746432B1 (en) 4-hydroxypiperidine derivatives and their use as inhibitors of ubiquitin specific protease 19 (usp19)
HK1227877B (en) Pyrimidopyrimidinones useful as wee-1 kinase inhibitors
HK1227877A1 (en) Pyrimidopyrimidinones useful as wee-1 kinase inhibitors
HK1219474B (en) 2-aminopyrido[4,3-d]pyrimidin-5-one derivatives and their use as wee-1 inhibitors