RS56832B1 - Laktoferin za upotrebu u dijagnozi ili prognozi alchajmerove bolesti - Google Patents

Laktoferin za upotrebu u dijagnozi ili prognozi alchajmerove bolesti

Info

Publication number
RS56832B1
RS56832B1 RS20180039A RSP20180039A RS56832B1 RS 56832 B1 RS56832 B1 RS 56832B1 RS 20180039 A RS20180039 A RS 20180039A RS P20180039 A RSP20180039 A RS P20180039A RS 56832 B1 RS56832 B1 RS 56832B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
disease
lactoferrin
alzheimer
subject
phenoconversion
Prior art date
Application number
RS20180039A
Other languages
English (en)
Inventor
Díaz Eva María Carro
Original Assignee
Geroa Diagnostics S L
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Geroa Diagnostics S L filed Critical Geroa Diagnostics S L
Publication of RS56832B1 publication Critical patent/RS56832B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
    • G01N33/6896—Neurological disorders, e.g. Alzheimer's disease
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/79—Transferrins, e.g. lactoferrins, ovotransferrins
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/28—Neurological disorders
    • G01N2800/2814—Dementia; Cognitive disorders
    • G01N2800/2821—Alzheimer
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/28—Neurological disorders
    • G01N2800/2835—Movement disorders, e.g. Parkinson, Huntington, Tourette
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/50—Determining the risk of developing a disease

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)
  • Apparatus Associated With Microorganisms And Enzymes (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Opis
Oblast pronalaska
[0001] Predmetni pronalazak je za primenu u medicinskoj nauci, naročito u dijagnozi Alchajmerove bolesti.
Osnova pronalaska
[0002] Alchajmerova bolest (AD) čini najveći broj slučajeva demencije. Potrebno je da prođu decenije da bi se bolest potpuno razvila, i bolest deli mnoge pre-simptomatske efekte sa drugim degenerativnim demencijama koje se prvo klinički pojavljuju kao blagno kognitivno ošetećenje (MCI). Prvi simptomi AD su često pogrešno pripisani starenju ili stresu.
[0003] AD se trenutno dijagnostifikuje na osnovu medicinske istorije pacijenta, istorije od rođaka i bihejvioralnih posmatranja. Detaljno neuropsihijatrijsko testiranje može da otkrije blage kognitivne teškoće nekoliko godina pre nego što osoba ispuni kliničke kriterijume za dijagnozu AD. Suptilni problemi sa izvršnim funkcijama pažnje, planiranja, fleksibilnosti i apstraktnog mišljenja ili oštećenja u semantičkoj memoriji takođe mogu biti simptomatski. Procena intelektualnog funkcionisanja uključujući testiranje pamćenja može dalje da odredi stanje bolesti.
[0004] Svi pokušaji od strane nadležnog lekara da stvori dijagnostičke kriterijume koji mogu da omoguće olakšanje i standardizaciju dijagnostičkog postupka prate ove parametre. Trenutno, definitvna AD dijagnoza zahteva histopatološku potvrdu uključujući mikroskopsko ispitivanje moždanog tkiva.
[0005] Trenutna definicija ili dijagnoza AD je klinička. Klinička dijagnoza je, u mnogim slučajevima, bez bioloških markera. Samo monogenetički slučajevi porodične AD imaju genetičke markere, i oni predstavljaju manje od 2% svih slučajeva bolesti. Otkriće od strane Kane da je ApoE4 alel faktor rizika za demenciju Alchajmerovog tipa za povećanje rizika i uticaj na starost na početku bolesti imalo je više naučni nego klinički značaj, i pokazuje malu dijagnostičku snagu (Kane RA, Kane RL. "Effect of genetic testing for risk of Alzheimer’s disease". N. Engl. J. Med.2009, 361(3), 298-299).
[0006] Najjači kandidati biomarkeri za AD obuhvataju studije imadžinga mozga u magnetno rezonantnom imadžingu ili pozitron emisionoj tomografiji, i proteini kao što su beta-amiloid i tau u cerebrospinalnoj tečnosti (CSF). Naglasak u istraživanju AD je stavljen na dijagnozu stanja pre nego što počnu simptomi. Određeni broj biomarkera i biohemijskih testova je korišćen i razvijen da se omogući rana detekcija AD.
[0007] Neki od velikih nedostataka upotrebe testova na bazi proteina obuhvataju povećane troškove, potrebu za invanzivnim procedurama i komplikacije koje su rezultat interpretacije rezultata, koji ih čine nesposobnim za produženu upotrebu. Na primer, neuroimadžing kortikalnog amiloidnog opterećenja i volumetrijske promene u mozgu i procena koncentracija proteina u CSF su dijagnostički alati koji nisu široko dostupni.
[0008] Nivoi proteina autolizozoma u krvi takođe mogu da prave razliku između kontrola i bolesne populacije između 1 i 10 godina pre dijagnoze (Goetzl et al., "Altered lysosomal proteins in neural-derived plasma exosomes in preclinical Alzheimer’s disease", Neurology 2015, Jul 7;85(1):40-7). Sledeća novija studija je validirala neke od prethodno opisanih biomarkera plazme koji su sposobnio da predvide konverziju u demenciju iz prodomnih stadijuma (Hye et al., "Plasma proteins predict conversion to dementia from prodromal disease". Alzheimer’s & Dementia 2014, 10, 799-807). Međutim, sve ove studije su fokusirane na set ili panel biomarkera, uključujući proteine, lipide ili druge metabolite. Uopšteno, biomarkeri su sadržani među molekulima izvedenim od beta-amiloida i tau. Ovi potencijalni biomarkeri su dati kao indikatori već započete bolesti, bez mogućnosti stvarne rane detekcije ili prognoze. U tom smislu, predmetni pronalazak odgovara naučnoj saglasnosti u potrebi za dijagnozom na stadijumu AD-a pre demencije.
[0009] Nedavno je objavljeno nekoliko radova koji opisuju detektabilne molekularne ili biohemijske promene pre pojave ranih simptoma demencije, kao što je redukcija u nivoima fosfolipida u plazmi (Mapstone et al, "Plasma phospholipids identify antecedent memory impairment in older adults". Nat. Med.2014, 20 (4) 415-420). Ova studija je bila sposobna da predvidi MCI ili AD unutrar vremenskog okvira od 2-3 godine upotrebom panela od deset lipida iz periferne krvi. Značajno je ograničenje vremena.
[0010] Nedavni pokušaj od strane Dubois da ustanovi dijagnozu AD pre demencije na bazi strogih kliničkih kriterijuma, testova neuroimadžinga i bioloških podataka uglavnom u CSF je od interesa tražeći bolje definisane kliničke fenotipove u cilju integracije biomarkera u dijagnostički postupak, da bi se dobile terapije koje modifikuju bolest ili preventivne terapije (Dubois et al. "Advancing research diagnostic criteria for Alzheimer’s disease" Lancet Neurol. 2014 Jun;13(6):614-29). Međutim, trenutni biomarkeri su nezadovoljavajući zbog toga što su oni invanzivni, zahtevaju puno vremena ili su skupi, uključujući nivo određivanja u CSF ili strukturni ili funkcionalni imadžing magnetnom rezonancom.
[0011] Prijava US 20140602046 A1 opisuje lečenje AD koje sadrži primenu specifičnog antitela protiv peptida poreklom od tau proteina. Ovaj dokument se odnosi na sporo napredovanje bolesti i na prevenciju kod asimptomatskog subjekta. Profilaktička primena je preporučena celoj populaciji tokom 10 godina. Kao što je navedeno u prethodnom tekstu, tau izomeri koji se detektuju su veoma verovatno proizvedeni u telu pošto se bolest razvila, odbacujući prognozu.
[0012] US 20110236917 A1 opisuje postupak za dijagnozu AD kod subjekta koji sadrži detekciju panela od četrdeset i sedam (47) biomarker proteina u uzorku seruma subjekta. Transferin I i II su navedeni među markerima panela. Prvi nedostatak ovih navoda je potreba za uzorkom seruma, za čiju ekstrakciju je potreban profesionalni lekar. Pored toga, nijedan protein iz seta nije posebno sugerisan pored ostalih koji bi doprineo tačnijim informacijama. Na bazi navoda ovog dokumenta, ekspert ne bi sugerisao da se traži bilo koji protein koji je sam po sebi relevantan za dijagnozu AD kod subjekta. Zaista, idealni pojedinačni biomarker koji omogućava predviđanje ili ranu detekciju AD još uvek nije identifikovan.
[0013] Nekoliko linija istraživanja su naznačili moguću korelaciju između inflamacije mozga i oralnog zdravlja. Nedavno, određeni broj publikacija povezanih sa pljuvačnom proteomikom je povećao značajno predlaganje ljudske pljuvačke kao biološke tečnosti za dijagnostiku. Pljuvačka ima mnoge prednosti prema niskoj invazivnosti, minimalnim troškovima i lakom sakupljanju i obradi. Opisano je prisustvo proteina A i tau u ljudskoj pljuvački, što sugeriše njihovu korist kao potencijalnih biomarkera za AD (Shi et al., "Salivary tau species are potential biomarkers of Alzheimer’s disease". J Alzheimer’s Dis. 2011;27(2):299-305). Drugi proteini su opisani u uzorcima pljuvačke, uključujući one povezane sa inflamatornim odgovorima i patogenezom AD (Ciregia et al., "A multidisciplinary approach to study a couple of monozygotic twins discordant for the chronic fatigue syndrome: a focus on potential salivary biomarkers." J Transl Med.2013 Oct 2;11:243).
[0014] U tom smislu, WO 2013/153461 A2 opisuje dijagnozu AD pošto su dva biomarkera izabrana iz seta molekula prisutnih u pljuvački. Ponovo, naznačeni proteini su pre indikativni za već započetu bolest i prema tome dobijeni rezultati se ne mogu koristiti za prognozu bolesti.
[0015] Laktoferin je glikoprotein koji se vezuje za gvožđe iz porodice transferina, koji je ekstenzivno korišćen u dijagnozi inflamatornih bolesti. Molekul suprimira proizvodnju inflamatornih citokina i modulira oksidativni stres. On je takođe povezan sa zaštitom moždanog tkiva od oksidativnog oštećenja kod drugih neurodegenerativnih bolesti, uključujući Parkinsonovu bolest (PD), i detektovan je u neurofibrilarnim snopićima tau proteina i senilnim plakovima amiloida beta (Aβ), koji su glavne histopatološke karakteristioke kod AD zajedno sa smrti neurona (Wang et al., "Deposition of lactoferrin in fibrillar-type senile plaques in the brains of transgenic mouse models of Alzheimer’s disease". Neurosci Lett 2010; 481: 164-7). Protein je jedna komponenta ljudskih sekrecija sintetisanih u egzokrinim žlezdama i neutrofilima na mestima infekcije/inflamacije. Među proteinima pljuvačke, to je najvažniji faktor prirodnog imuniteta, predstavljajući u pljuvački važan faktor odbrane protiv bakterijskih povreda.
[0016] Welling opisuje neke antimikrobijalne peptide (AMPs) koji prolaze kroz krvnomoždanu barijeru (BBB) (Welling m. et al. "Potential role of antimicrobial peptides in the early onset of Alzheimer’s disease", A lzheimer & Dementia, 11, p.51-57, 2015). Ova publikacija ističe sposobnost laktoferina da prođe kroz BBB kada je primenjen na pacijenta, ili da je ushodno regulisan u toku infektivnih procesa. Pored toga, ona predlaže moguću upotrebu AMPs u detekciji infekcija mozga in vivo. Međutim, bilo koja veza koja bi se mogla ustanoviti između njegove ushodne regulacije u infektivnim procesima i efikasne upotrebe u dijagnozi AD je spekulativna.
[0017] Laktoferin je naveden u US 2003/0096736 A1, međutim, kao koristan u lečenju nekoliko bolesti uključujući neurodegenerativne bolesti, i naročito AD. Nije napravljena nikakva veza, niti je dat nagoveštaj prema molekulu koji se koristi u dijagnozi ili predviđanju bilo koje druge neurodegenerativne bolesti, naročito AD.
[0018] U stanju tehnike nije naveden laktoferin za upotrebu u dijagnozi i/ili prognozi AD.
[0019] WO 2009074331 A3 se smatra najbližim stanjem tehnike predmetnom pronalasku. Cilj ovog dokumenta je opisati postupak za ranu dijagnozu AD koji sadrži detekciju proteinskog proizvoda nekoliko gena u biološkom uzorku subjekta. Proizvodi gena za transferin (TF) su sadržani u ovim biomarkerima, kao i oni od drugih gena kao IGF-1R ili HISTIH3E. Predloženi geni nemaju nikakvu vezu među sobom prema bilo kom biološkom osnovu, svi pokazuju slične prediktivne vrednosti za upotrebu u postupku. Naročito, tu nema proizvoda TF-gena sugerisanog za upotrebu među bilo kojim drugim, kao ni za laktoferin. Rezultujući obim prijave prema proizvodima gena je nepogodan, i daje nepotrebnu količinu rada za eksperta za testiranje za dijagnozu bolesti. Naznačeno je da biološki uzorak sadrži pljuvačku, primeri su izvedeni u uzorcima krvi. Ovaj dokument identifikuje glavni problem dijagnostičkih postupaka iz stanja tehnike da su sposobni samo da detektuju bolest kod pacijenta koji već pati od iste, na taj način ne uspostavljajući prognozu i moguće preventivno delovanje. Međutim i uprkos očekivanjima autora, mora se navesti da problem ostaje nerešen. Na testiranim populacijama pacijenata, otkriveno je da su testirani geni HIST3H3E i CNR2 sposobni da stvarno pokažu prisustvo bolesti, ni u jednom slučaju međutim nisu korisni za prognozu. Pored toga, nijedan od njih nije povezan sa laktoferinom.
[0020] Problem iz stanja tehnike je još uvek formulisan kao nalaz jednog biomarkera za dijagnozu ili prognozu Alchajmerove bolesti. Rešenje predloženo predmetnim pronalaskom je postupak za detekciju nivoa laktoferina kod subjekta u uzorku pljuvačke ili mukoznog tkiva.
Opis pronalaska
[0021] Predmetni pronalazak je upotreba laktoferina, ili molekula nukleinske kiseline koji kodira isti, u dijagnozi ili prognozi AD u biološkom uzorku dobijenom od subjekta izabranog od mukoznog tkiva, poželjno oralnog mukoznog tkiva i pljuvačke.
[0022] U obimu predmetnog pronalaska, termin "dijagnoza" obuhvata određeni stadijum razvoja bolesti koji može biti izmeren kod pacijenata, bilo AD ili prvi simptomi MCI u bilo kom od njegovih stadijuma.
[0023] U obimu predmetnog pronalaska, termin "prognoza" se razume kao predviđanje AD kada nikakva fenokonverzija u simptomima još uvek nije detektabilna kod zdravog subjekta.
[0024] Granične vrednosti proteina su izvedene za laktoferin protein identifikovan u modelu fenokonverzije. Prediktivna vrednost fenokonverzije u MCI/AD bila je < 6.5 μg/ml. To znači, da su svi subjekti sa MCI ili AD dijagnozom pokazali vrednosti laktoferina u pljuvački niže od 6.5 μg/ml, i svi zdravi kontrolni subjekti su pokazali vrednosti laktoferina u pljuvački više od 6.5 μg/ml.
[0025] Na osnovu ovoga, sledeći aspekt pronalaska je postupak za dijagnozu AD kod subjekta, koji sadrži procenu nivoa laktoferina u uzorku pljuvačke dobijenom od navedenog subjekta, i određivanje da li je navedeni nivo iznad ili ispod vrednosti od 6.5 μg/ml, pri čemu je vrednost ispod 6.5 μg/ml indikativna za AD. Ako je nivo laktoferina ispod 6.5 μg/ml i subjekat pokazuje fenokonverziju neurološke bolesti, tada je postupak indikativan za AD.
[0026] Sledeći poželjan aspekt pronalaska je postupak za prognozu AD kod subjekta, koji sadrži procenu nivoa laktoferina u uzorku pljuvačke dobijenom od navedenog subjekta, i određivanje da li je navedeni nivo iznad ili ispod vrednosti od 6.5 μg/ml, pri čemu je vrednost ispod 6.5 μg/ml indikativna za prognozu AD. Ako je nivo laktoferina ispod 6.5 μg/ml i subjekat ne pokazuje fenokonverziju neurološke bolesti, tada je postupak indikativan za prognozu AD.
[0027] Predmetna prijava pokazuje niže nivoe laktoferina u ljudskoj pljuvački od MCI i AD pacijenata u poređenju sa kontrolom iste starosti, što sugeriše da ovaj protein može biti uključen u rane stadijume AD. Postulirano je da je mera redukovanih nivoa laktoferina u pljuvački specifična za AD patologiju.
[0028] U obimu predmetnog pronalaska, određivanje prisustva laktoferina u pljuvački ne obuhvata nikakav invazivni ili hirurški korak koji bi mogao da obuhvata značajan rizik za zdravlje subjekta, bez obzira na to da li je navedeno određivanje izvedeno ex-vivo ili in-vivo.
[0029] Predmetna prijava pokazuje da su nivoi laktoferina u pljuvački sposobni da nedvosmisleno naprave razliku između kognitivno normalnih subjekata koji će napredovati do MCI ili AD u roku od 5 godina od onih koji će ostati kognitivno normalni u budućnosti. Prema našem znanju, ovo je prvi pojedinačni biomarker opisan kao sposoban da predvidi fenokonverziju u vremenskom okviru od 5 godina sa tačnošću od 100%. Predmetni pronalazak je čak sposoban da predvidi fenokonverziju MCI i/ili AD od zdravog statusa u vremenskom okviru od 9 godina.
[0030] Logistička regresiona analiza upotrebom kombinacije nivoa laktoferina u pljuvački i starost u vreme sakupljanja uzorka pljuvačke tačno je klasifikovala subjekte u mlade i stare grupe (Sl.5A), i unutar starosnih grupa, oni koji su imali fenokonverziju u MCI/AD i oni koji nisu imali fenokonverziju (Sl.5B).
[0031] Vreme fenokonverzije je određeno preko analize linearne regresije, upotrebom korelacije između deplecije nivoa laktoferina u pljuvački sa početkom fenokonverzije. Niži nivoi laktoferina su povezani sa povećanim rizikom od fenokonverzije u ovom modelu (Sl.6). Nivoi laktoferina u pljuvački su povezani sa promenama u vremenu početka fenokonverzije.
[0032] Regresiona analiza je generisala jednačinu
koja opisuje vezu između nivoa laktoferina u pljuvački i vremena početka u godinama. U ovoj formuli, "y" predstavlja nivoe laktoferina u pljuvački i "x" je vreme fenokonverzije u godinama. Primenom ove jednačine u hipotetičkom slučaju subjekta sa nivoima laktoferina u pljuvački nižim od granične vrednosti, na primer do 6.45 μg/ml, rezultujući vremenski okvir je veći od 9 godina fenokonverzije u MCI/AD.
[0033] Prema tome, u sledećem poželjnom aspektu, navedena prognoza je do vremenskog okvira od devet godina pre nego što subjekat pokazuje fenokonverziju AD, poželjnije do osam godina, sedam godina, šest godina ili pet godina.
[0034] U sledećem poželjnom aspektu pronalaska subjekat je sisar, poželjnije čovek.
[0035] Kao u pljuvački, slični rezultati dobijeni iz suza i peleta oralne mukoze ukazuju da bi se nivoi laktoferina iz perifernih neinvazivnih uzoraka tela mogli koristiti kao dijagnostički alat za AD. Moguće je da laktoferin u pljuvački predstavlja prvu liniju odbrane pre detektovanja moždanih patoloških i/ili kliničkih promena, i njegova redukcija kod MCI subjekata može se smatrati ranim biomarkerom AD-a.
[0036] Stvarno, slično smanjenje nivoa laktoferina u pljuvački je takođe detektabilno u oralnoj mukozi dobijenoj iz pilot studije upotrebom dve grupe, zdrave kontrolne i AD grupa sparenih prema starosti i polu. Nivoi laktoferina kod AD pacijenata bili su značajno smanjeni u poređenju sa zdravim kontrolnim subjektima, koji su 5.93 ± 0.56 μg/ml u AD naspram 9.05 ± 1.47μg/ml. Model korišćen u predmetnom pronalasku klasifikovao je obolele grupe (MCI/AD) i zdrave kontrolne subjekte sa AUC od 0.89 sa 95% intervalom poverenja (CI) (0.93-0.98), za klasifikaciju MCI/AD naspram zdrave kontrole (Sl. 4B). Ovi podaci nisu međutim ponovljivi u uzorcima krvi ili CSF.
[0037] Na osnovu ovih rezultata, sugerisano je smatrati bilo koji glikoprotein koji vezuje gvožđe iz porodice transferina kao potencijalni marker za AD.
[0038] Međutim, rezultati prema predmetnom pronalasku ne mogu biti ekstrapolirani ni na koji način na druge neurološke bolesti. Neurološke bolesti se veoma razlikuju među sobom, i odgovaraju različitim uzrocima i etiologiji. Ovo je utvrđeno naročito u Primeru 2, koji pokazuje da nije nađena promena u nivou laktoferina kod Parkinsonove bolesti (PD). Parna poređenja između PD i kontrolnih zdravih grupa pokazala su da nema značajnih promena, 12.73 ± 1.56 μg/ml u PD naspram 9.50 ± 1.27 μg/ml u zdravoj kontrolnoj grupi.
[0039] Pronalazak nudi mogućnost dijagnoze ili prognoze širokog niza pacijenata u drugim centrima osim onih u kojima su biološki uzorci dobijeni. U tom smislu, sledeći primer izvođenja prema pronalasku je sistem za predviđanje razvoja subjekta do AD koji sadrži sredstvo za obradu podataka, pri čemu je navedeno sredstvo za obradu podataka konfigurisano tako da procenjuje nivo laktoferina ili molekula koji kodira isti u uzorku pljuvačke, za određivanje da li je navedeni nivo laktoferina ispod unapred određene granične vrednosti, poželjno 6,5 μg/ml, i za predviđanje funkcionalnog ishoda AD kod subjekta procenom rezultata prethodnog određivanja.
Kratak opis slika
[0040]
Slika 1A pokazuje traku laktoferina od 75kDa posle SDS-PAGE frakcionisanja prisutnog u svim uzorcima. Identifikacija laktoferina u ljudskoj pljuvački iz MCI, AD i zdravih kontrola.
Coomassie plavom obojeni PAGE-SDS gel odgovara pulovima pljuvačke. Traka 1, kontrolna grupa; traka 2, MCI grupa; traka 3, i 4 AD grupa. Traka koja odgovara oko 75kDa je označena strelicom.
Slika 2A pokazuje da su nivoi laktoferina u pljuvački, mereni pomoću humanog ELISA kompleta, bili smanjeni kod MCI i AD pacijenata u poređenju sa kontrolnom grupom.
Slika 2B pokazuje da su nivoi laktoferina u pljuvački, mereni pomoću humanog ELISA kompleta, bili nepromenjeni kod PD u poređenju sa kontrolnom grupom.
Slika 3A pokazuje korelaciju izmeđui nivoa laktoferina u pljuvački i kognitivnog opadanja u MCI i AD grupama. Ova relacija je primarno određena značajnom negativnom vezom između stadijuma bolesti i nivoa laktoferina (R= 0.61; p=0.01).
Slika 3B pokazuje korelaciju između nivoa laktoferina u pljuvački i MMSE ocene, mere kognicije dostupne kod MCI i AD (R= 0.73; p=0.003).
Slika 4A pokazje krivu operativnih karakteristika primaoca (ROC) dobijenu za test nivoa laktoferina u pljuvački iz cele kontrolne grupe i grupe sa fenokonverzijom. ROC grafikon predstavlja osetljivost (ili pravu pozitivnu stopu) naspram 1-specifičnosti (ili lažno pozitivne stope). Ovaj binarni klasifikujući sistem (ROC kriva) proizveo je veliku površinu ispod krive (AUC) od 0.92. AUC je mera koliko dobro parametar može da napravi razliku između dve dijagnostičke grupe, sa intervalima poverenja 95% (CI) od 0.93 do 0.98)
Slika 4B pokazuje ROC krivu dobijenu za test nivoa laktoferina u pljuvački iz cele kontrolne grupe i MCI/AD grupe. ROC grafikon predstavlja osetljivost (pravu pozitivnu stopu) naspram 1-specifičnosti (lažno pozitivne stope). Površina ispod ROC krive (AUC) je bila 0.89.
Slika 5A pokazuje regresionu analizu upotrebom vrednosti ekspresije laktoferina u pljuvački i starosti kao tačne mere za klasifikaciju mladih i starih zdravih grupa. ○ Mladi bez demencije; ● Stariji bez demencije.
Slika 5B pokazuje regresionu analizu upotrebom vrednosti ekspresije laktoferina u pljuvački i starosti kao tačne mere za klasifikaciju stare grupe (bez fenokonverzije) i sa fenokonverzijom u MCI i AD. □ Sa fenokonverzijom; ● Stariji bez demencije.
Slika 6 pokazuje logističku regresionu analizu upotrebom vrednosti ekspresije laktoferina i vreme u godinama od početka ili fenokonverzije. Jednačina generisana regresionom analizom bila je y = 0.5755x 1.1539.
Primeri
[0041] Sledeći primeri su obezbeđeni za svrhu pokazivanja predmetnog pronalaska na ilustrativni, ali neograničavajući način.
Primer 1. Ekstrakcija uzoraka pljuvačke
[0042] Dve grupe davaoca su uključene u studiju: (n= 80) AD pacijenata i (n= 90) stariji bez demencije -kontrola, regrutovani u Hospital 12 de Octubre, Madrid, Spain (Tabela 1). Za AD pacijente, dijagnoza je ustanovljena prema vodiču od National Institute on Neurological Disorders and Stroke, and the Alzheimer’s Disease and Related Disorders Association (NINDS-ADRDA) (McKhann et al., "The diagnosis of dementia due to Alzheimer’s disease: recommendations from the National Institute on Aging-Alzheimer’s Association workgroups on diagnostic guidelines for Alzheimer’s disease". Alzheimer’s Dement. 2011; 7: 263-9). Grupa pacijenata sa Parkinsonovom bolešću (PD) su dodati kao definisani prema pacijenatima koji su dijagnostifikovani pod kriterijumima moguće PD (Gelb et al., "Diagnostic criteria for Parkinson disease". Arch Neurol. 1999 Jan;56(1):33-9). Grupa MCI pacijenata je takođe dodata prema pacijenatima sa kognitivnim oštećenjem koji nisu ispunili kriterijume za demenciju (Pedersen, "Mild cognitive impairment as a diagnostic entity". J Intern Med 2004; 256: 183-94). Težina bolesti je procenjena upotrebom ocena Mini ispitivanja mentalnog stanja (MMSE). Pristanak subjekata je dobijen prema Helsinškoj deklaraciji, i odobrenje je dobijeno od Research Ethic Committee of Hospital 12 de Octubre. Nestimulisana cela pljuvačka je sakupljena u sterilne plastične spremnike prethodno obložene sa 2% rastvorom natrijum azida, kao što je prethodno opisao Bermejo-Pareja (Bermejo-Pareja et al., "Saliva levels of Abeta1-42 as potential biomarker of Alzheimer’s disease: a pilot study". BMC Neurol 2010; 10: 108). Sakupljeni uzorci su odmah postavljeni na led i prethodno razbistreni niskim brojem obrta na 600 x g u trajanju od 10 min na 4°C. Poodeljeni u alikvote 0.5 ml uzorci su čuvani na -80°C posle tretmana sa koktelom inhibitora proteaze (Roche). Procena proteina je analizirana upotrebom kompleta za analizu BCA proteina (Pierce, Rockford, IL) prema uputstvima proizvođača.
1
Tabela 1. Demografske karakteristike subjekata.
Primer 2: Mera laktoferina u uzorcima pljuvačke
[0043] Ekspresioni nivoi humanog laktoferina prema SEQ.ID.NO.:1 u pljuvački detektovani su pulovanim uzorcima od AD pacijenata u poređenju sa MCI davaocima i kontrolnim subjektima. Uzorci pljuvačke od 4 muška subjekta iz svake grupe (MCI, AD, i starije bez demencije kontrole) su pulovani mešanjem istih količina. 50 μg svakog pula je sipano na SDS-PAGE gel. Posle SDS-PAGE frakcionisanja detektovana je traka 75kDa u svim uzorcima koja se poklapaja sa molekularnom težinom laktoferina kao što je potvrđeno pomoću masene spektrometrijske analize (31% pokrivenost). Razlike u ekspresiji proteina su procenjivane upotrebom ImageQuant softvera (GE Healthcare). Pošto su sipane iste količine proteina, analiza intenziteta traka pokazala je smanjene nivoe laktoferina kod MCI (14%) i AD (51% i 58%) u poređenju sa zdravom kontrolnom grupom (Sl. 1A). Da bi se validiralo prisustvo laktoferina u ljudskoj pljuvački, ovaj protein je identifikovan pomoću MALDITOF/TOF masenog spektrometra 4800 Proteomics Analyzer (Applied Biosystems, Framingham, MA) i 4000 Series ExplorerTM softvera (Applied Biosystems) posle gel digestije sa tripsinom i endopeptidazom Asp-N (Thermo Fisher Scientific). Aminokiselinska pokrivenost je bila 31% za laktoferin.
[0044] Dodatna potvrda ovih razlika je dobijena izračunavanjem srednje vrednosti nivoa ekspresije laktoferina pomoću komercijalnog kompleta humane ELISA za laktoferin (Abcam), prema uputstvima proizvođača. Parna poređenja između tri grupe, upotrebom ANOVA, a zatim Tuckey-Kramer testa, pokazala su značajno smanjenje u nivoima laktoferina u MCI i AD grupama pacijenata u odnosu na zdravu kontrolnu grupu (p<0.05; Sl.
2A). Pokazano je da su nivoi laktoferina u PD pljuvački slični onima zabeležnim u kontrolnoj zdravoj grupi (Sl.2B).
Primer 3. Sadržaj laktoferina u pljuvački kao dijagnostički alat
[0045] Nivoi laktoferina u pljuvački su procenjivani u toku napredovanja demencije. Korelacija između nivoa laktoferina u pljuvački i kognitivnog opadanja u MCI i AD grupama bila je očigledna. Ova korelacija je vođena primarno značajnom negativnom vezom između stadijuma bolesti i nivoa laktoferina (R= 0.61; p=0.01) (Sl.3A). MMSE ocena je korišćena za praćenje napredovanja demencije. Koncentracija laktoferina u pljuvački takođe bi mogla biti u korelaciji sa MMSE ocenom kod pacijenata sa MCI i AD, posle visoko značajne korelacije (R= 0.73; p=0.003) (Sl. 3B) do 15 i 10 μg/ml kod zdravih ljudi, i manje od 6.5 μg/ml kod ljudi sa demencijom, uključujući MCI i AD. Spearman rank korelacija je korišćena za korelacione analize.
Primer 4. Sadržaj laktoferina u pljuvački kao prediktivni alat
[0046] U cilju ispitivanja prediktivnog potencijala nivoa laktoferina u pljuvački, kognitivno zdravi kontrolni učesnici, bez oštećenja pamćenja, integrisali su ovu grupu (Tabela 2).
Tabela 2. Demografske karakteristike subjekata.
[0047] Nestimulisana cela pljuvačka je sakupljena u sterilne plastične spremnike, i nivoi laktoferina su određeni kao što je opisano u Primeru 1. Osam (8) subjekata su pokazali značajno smanjene nivoe laktoferina u pljuvački u poređenju sa zdravom kontrolnom grupom (3.47 ± 0.41 μg/ml naspram 10.54 ± 1.58 μg/ml; p<0.05). Srednje vreme za fenokonverziju u MCI ili AD bilo je 3.25 godina (opseg 1-5 godina). Tabela 3 pokazuje prisustvo veze između vremena fenokonverzije (početak) i starosti, koje je kraće sa starijim subjektima.
Tabela 3. Demografske karakteristike subjekata sa fenokonverzijom.
Primer 5. Sadržaji laktoferina u mukozi
[0048] Oralna mukoza je sakupljena u sterilne plastične spremnike prema Aagaard (Aagaard et al., "The Human Microbiome Project strategy for comprehensive sampling of the human microbiome and why it matters". FASEB J. 2013 Mar; 27(3):1012-22). Ukratko, učesnici, opisani u Tabeli 4, stavili su pljuvačku u 50-ml epruvetu za sakupljanje posle omogućavanja da se pljuvačka sakupi u ustima u trajanju od ≥1 minute, ona je centrifugirana na 6000 x g u trajanju od 10 min na 4°C, i talozi su čuvani na -80°C.
1
Tabela 4. Demografske karakteristike subjekata.
[0049] (Nivoi laktoferina su određeni kao što je opisano u Primeru 1. Šest (6) subjekata su pokazali značajno smanjene nivoe laktoferina u poređenju sa zdravom kontrolnom grupom (4.28 ± 0.50 μg/ml u AD naspram 9.05 ± 1.47 μg/ml; p<0.05; Tabela 5). Srednje vreme za fenokonverziju u MCI ili AD bilo je 3.83 godina (opseg 4-3 godina). Kognitivno zdravi kontrolni učesnici, bez oštećenja pamćenja, integrisali su grupu prikazanu u Tabeli 4.
Tabela 5. Demografske karakteristike subjekata sa fenokonverzijom.
Primer 6. Izgradnja prediktivnog modela fenokonverzije u MCI/AD
[0050] Podaci prikazani u gore navedenim primerima Elisa analize laktoferina korišćeni su za izgradnju posebnog linearnog klasifikatorskog modela sposobnog da napravi razliku između AD patološkog i nepatološkog statusa. Analiza operativnih karakteristika primaoca (ROC) procenjuje učinak klasifikatorskih modela za klasifikaciju grupa. Klasifikujući model upotrebom otkrivenih nivoa laktoferina iz analize pljuvačke efikasno je klasifikovao subjekte sa fenokonverzijom i zdrave kontrolne grupe sa površinom ispod krive (AUC) od 0.92 sa 95% (0.93-0.98) intervalom poverenja (Cl; Sl. 4A). Ovaj model je proizveo osetljivost od 90% i specifičnost od 90%, za klasifikaciju subjekata sa fenokonverzijom i zdravih kontrolnih grupa (Sl. 4A).
[0051] Ova ROC kriva, fundamentalni alat za dijagnostičku test procenu, procenjivala je tačnost testa da napravi razliku između obolelih slučajeva od normalnih slučajeva. ROC se može razumeti kao grafikon verovatnoće za ispravnu klasifikaciju pozitivnih uzoraka prema stopi netačno klasifikovanih pravih negativnih uzoraka. Tako da je AUC mera ROC grafikona - mera prediktivne tačnosti.
[0052] U predstavljenoj studiji, AUC=0.92 je pokazala veliku snagu diskriminacije, pri čemu je 1 perfektna diskriminacija. Regresiona analiza je generisala jednačinu za opisivanje ove veze između nivoa laktoferina u pljuvački i vremena (godine) fenokonverzije (početak), y = 0.5755x 1.1539, gde "y" predstavlja nivoe laktoferina u pljuvački, i "x" je vreme u godinama fenokonverzije.
LISTING SEKVENCI
[0053]
1
�
�

Claims (8)

Patentni zahtevi
1. Upotreba laktoferina ili molekula nukleinske kiseline koji kodira isti, u dijagnozi ili prognozi Alchajmerove bolesti u biološkom uzorku dobijenom od subjekta izabranog od mukoznog tkiva i pljuvačke.
2. Postupak za dijagnozu Alchajmerove bolesti kod subjekta koji pokazuje fenokonverziju neurološke bolesti, koji sadrži:
- procenu nivoa laktoferina u uzorku pljuvačke dobijenom od navedenog subjekta, i
- određivanje da li je navedeni nivo iznad ili ispod vrednosti od 6.5 μg/ml, pri čemu je vrednost ispod 6.5 μg/ml indikativna za Alchajmerovu bolest.
3. Postupak za prognozu Alchajmerove bolesti kod subjekta koji ne pokazuje fenokonverziju neurološke bolesti, koji sadrži:
- procenu nivoa laktoferina u uzorku pljuvačke dobijenom od navedenog subjekta, i
- određivanje da li je navedeni nivo iznad ili ispod vrednosti od 6.5 μg/ml, pri čemu je vrednost ispod 6.5 μg/ml indikativna za prognozu Alchajmerovu bolest.
4. Postupak za prognozu prema patentnom zahtevu 3, u kome je navedena prognoza do vremenskog okvira od devet godina pre nego što navedeni subjekat pokaže fenokonverziju Alchajmerove bolesti.
5. Postupak za prognozu prema patentnom zahtevu 4, u kome je navedeni vremenski okvir pet godina.
6. Postupak prema bilo kom od patentnih zahteva 2 do 5, u kome je navedeni subjekat sisar.
7. Postupak prema patentnom zahtevu 6, u kome je navedeni sisar čovek.
8. Sistem za predviđanje razvoja Alchajmerove bolesti kod subjekta koji sadrži sredstvo za obradu podataka, pri čemu je sredstvo za obradu podataka konfigurisano:
- da procenjuje nivo laktoferina ili molekula nukleinske kiseline koja kodira isti u uzorku pljuvačke;
- da određuje da li je navedeni nivo laktoferina ispod unapred određene granične vrednosti; i - da predvidi funkcionalni ishod Alchajmerove bolesti kod subjekta procenom rezultata prethodnog određivanja.
1
RS20180039A 2015-11-20 2015-11-20 Laktoferin za upotrebu u dijagnozi ili prognozi alchajmerove bolesti RS56832B1 (sr)

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
EP15195662.0A EP3171174B1 (en) 2015-11-20 2015-11-20 Lactoferrin for use in the diagnosis or prognosis of alzheimer's disease

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS56832B1 true RS56832B1 (sr) 2018-04-30

Family

ID=54697475

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20180039A RS56832B1 (sr) 2015-11-20 2015-11-20 Laktoferin za upotrebu u dijagnozi ili prognozi alchajmerove bolesti

Country Status (28)

Country Link
US (2) US11422137B2 (sr)
EP (2) EP3171174B1 (sr)
JP (1) JP6991970B2 (sr)
KR (1) KR102579727B1 (sr)
CN (1) CN108431608B (sr)
AU (1) AU2016354981B2 (sr)
CA (1) CA3005784C (sr)
CL (1) CL2018001343A1 (sr)
CO (1) CO2018006298A2 (sr)
CY (1) CY1119797T1 (sr)
DK (1) DK3171174T3 (sr)
EC (1) ECSP18046355A (sr)
ES (1) ES2657414T3 (sr)
HR (1) HRP20180115T1 (sr)
HU (1) HUE037916T2 (sr)
LT (1) LT3171174T (sr)
MD (1) MD3171174T2 (sr)
ME (1) ME02993B (sr)
MX (1) MX380889B (sr)
NO (1) NO3171174T3 (sr)
PL (2) PL3171174T3 (sr)
PT (1) PT3171174T (sr)
RS (1) RS56832B1 (sr)
RU (1) RU2745602C2 (sr)
SI (1) SI3171174T1 (sr)
SM (1) SMT201800031T1 (sr)
WO (1) WO2017085214A1 (sr)
ZA (1) ZA201804079B (sr)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
TR201818373A2 (tr) 2018-12-03 2020-06-22 T C Erciyes Ueniversitesi Bağirsak mi̇krobi̇yomundan alzhei̇mer hastaliğinin teşhi̇si̇ i̇çi̇n mi̇ni̇mal bi̇yobeli̇rteçler ve i̇lgi̇li̇ yeni̇ nesi̇l di̇zi̇leme ki̇ti̇
CN112142850A (zh) * 2019-06-27 2020-12-29 深圳市卫光生物制品股份有限公司 人神经生长因子-乳铁蛋白重组蛋白及用途
CN111415745A (zh) * 2020-04-03 2020-07-14 河北医科大学 一种雄激素提示老年男性阿尔茨海默病风险的计算方法
CN113049696B (zh) * 2021-03-04 2022-03-18 首都医科大学宣武医院 一种诊断受试者是否患阿尔茨海默病的代谢产物及其用途
CN113967250A (zh) * 2021-09-26 2022-01-25 四川大学 乳铁蛋白在预防治疗阿尔兹海默症中的应用
CN114242175A (zh) * 2021-12-22 2022-03-25 香港中文大学深圳研究院 一种评估脑白质高信号体积的方法及系统
CN115737787B (zh) * 2022-12-15 2024-04-19 四川大学 乳铁蛋白联合胆碱在制备预防和/或治疗阿尔兹海默症的药物中的用途

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL94183A (en) * 1989-05-05 2003-09-17 Baylor College Medicine cDNA SEQUENCE CODING FOR HUMAN LACTOFERRIN PROTEIN OR PORTION THEREOF AND LACTOFERRIN PROTEIN PRODUCED FROM SAID SEQUENCE
EP2071332A1 (en) * 2000-11-14 2009-06-17 Techlab, Inc. Method for monitoring persons with IBD using total endogeneous lactoferrin as a marker
US20030096736A1 (en) 2001-05-09 2003-05-22 Kruzel Marian L. Lactoferrin for age related disorders in humans
ATE395596T1 (de) * 2002-10-25 2008-05-15 Techlab Inc Diagnostisches panel ibd-first chek fur entzundliche darmerkrankung (ibd) und reizkolon
WO2009074331A2 (en) 2007-12-11 2009-06-18 Julius-Maximilians-Universität Würzburg Early and differential diagnosis test for alzheimer's disease
AU2010206657A1 (en) * 2009-01-23 2011-08-11 Drexel University Apparatus and methods for detecting inflammation using quantum dots
EP2251032A1 (en) 2009-05-12 2010-11-17 Nestec S.A. Lactoferrin and brain health and protection in adults
CA3239368A1 (en) 2009-06-10 2010-12-16 New York University Immunological targeting of pathological tau proteins
US20110236917A1 (en) 2009-11-17 2011-09-29 Power3 Medical Products, Inc. Diagnosis of Alzheimer's Disease
AU2011319319B2 (en) * 2010-10-20 2015-07-30 Eisai R&D Management Co., Ltd. Biomarker for Alzheimer's disease or mild cognitive impairment
EP2734543B1 (en) * 2011-07-24 2018-10-03 Carmel-Haifa University Economic Corp. Lactoferrin fragments and use thereof
MX358474B (es) 2012-04-13 2018-08-21 Oasis Diagnostics Corp Biomarcadores salivales específicos para detección de riesgo, diagnóstico temprano, pronóstico y vigilancia de las enfermedades de alzheimer y de parkinson.
CN103575903B (zh) * 2012-08-07 2016-01-20 中国检验检疫科学研究院 一种人乳铁蛋白夹心elisa检测试剂盒及其应用

Also Published As

Publication number Publication date
HRP20180115T1 (hr) 2018-04-06
NO3171174T3 (sr) 2018-03-24
US11422137B2 (en) 2022-08-23
AU2016354981A2 (en) 2018-08-09
CN108431608A (zh) 2018-08-21
EP3377909A1 (en) 2018-09-26
AU2016354981B2 (en) 2022-06-16
ME02993B (me) 2018-10-20
WO2017085214A1 (en) 2017-05-26
CL2018001343A1 (es) 2018-12-21
MX380889B (es) 2025-03-12
RU2745602C2 (ru) 2021-03-29
ZA201804079B (en) 2019-09-25
US20180328949A1 (en) 2018-11-15
PT3171174T (pt) 2018-01-12
KR20180083909A (ko) 2018-07-23
CA3005784A1 (en) 2017-05-26
CN108431608B (zh) 2021-12-07
SMT201800031T1 (it) 2018-03-08
US20230081393A1 (en) 2023-03-16
KR102579727B1 (ko) 2023-09-19
CY1119797T1 (el) 2018-06-27
BR112018010266A2 (pt) 2019-02-05
ES2657414T3 (es) 2018-03-05
CA3005784C (en) 2023-06-13
RU2018122111A3 (sr) 2019-12-20
NZ743563A (en) 2024-05-31
RU2018122111A (ru) 2019-12-20
LT3171174T (lt) 2018-02-12
JP2018536410A (ja) 2018-12-13
AU2016354981A1 (en) 2018-07-05
CO2018006298A2 (es) 2018-09-20
PL3377909T3 (pl) 2021-04-06
ECSP18046355A (es) 2018-09-30
EP3377909B1 (en) 2020-07-22
EP3171174B1 (en) 2017-10-25
HUE037916T2 (hu) 2018-09-28
SI3171174T1 (en) 2018-04-30
JP6991970B2 (ja) 2022-01-13
MD3171174T2 (ro) 2018-02-28
EP3171174A1 (en) 2017-05-24
DK3171174T3 (en) 2018-01-22
MX2018006189A (es) 2018-09-21
PL3171174T3 (pl) 2018-04-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US20230081393A1 (en) Lactoferrin for use in the diagnosis or prognosis of alzheimer&#39;s disease, or in the diagnosis of parkinson&#39;s disease
Carro et al. Early diagnosis of mild cognitive impairment and Alzheimer's disease based on salivary lactoferrin
Ryu et al. The microRNA-485-3p concentration in salivary exosome-enriched extracellular vesicles is related to amyloid β deposition in the brain of patients with Alzheimer’s disease
JP2014197022A (ja) アルツハイマー病の診断法
Ghidoni et al. Translational proteomics in Alzheimer's disease and related disorders
WO2022093274A1 (en) Methods, systems, and kits for prediction, detection, monitoring, and treatment of alzheimer&#39;s disease
ES3002582T3 (en) Identification of signatures for neurodegeneration diseases diagnoses
US20210270848A1 (en) Method for diagnosing dementia or determining the risk of developing dementia
US20200057078A1 (en) Melanotransferrin for use in the diagnosis of parkinson`s disease
Ronald et al. Consensus report of the working group on:“Molecular and biochemical markers of Alzheimer’s disease”
Parvizi et al. Promising diagnostic accuracy of plasma Gfap and Nfl within the ad continuum
Pawlik et al. The Role of Salivary Biomarkers in the Early Diagnosis of Alzheimer’s Disease and Parkinson’s Disease. Diagnostics 2021, 11, 371
HK1260353A1 (en) Lactoferrin for use in the diagnosis or prognosis of alzheimer&#39;s disease, or in the diagnosis of parkinson&#39;s disease
HK1260353B (zh) 用於诊断或预后阿尔茨海默病或用於诊断帕金森病的乳铁蛋白
BR112018010266B1 (pt) Uso de lactoferrina no diagnóstico ou prognóstico da doença de alzheimer e métodos relacionados
WO2024235880A1 (en) Method for diagnosing neurodegenerative diseases
WO2024235879A1 (en) A NASAL FLUID SAMPLE COMPRISING Aβ, PTAU AND/OR TTAU
Sande et al. Association of tear fluid glutathione synthetase and glutathione levels with amyloid positivity
KR20260006588A (ko) 경도인지장애 및 알츠하이머병에 대한 단백질 마커