RS57714B1 - Rastvori za blokiranje transdermalnim venoznim putem - Google Patents

Description

Opis

OBLAST PRONALASKA

[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na oblast medicinskih sredstava za zatvorenih transdermalnh sredstava, kao što su katetri, kao i na oblast rastvora za ispiranje koji inhibiraju rast mikroba, blokiraju i oblažu ova medicinska sredstva. Određenije, oblast ovog pronalaska se odnosi na rastvore koji inhibiraju rast mikroba. Takođe, ovaj pronalazak se odnosi na rastvore za inhibiranje rasta mikroba, rastvore koji su korisni za održavanje prohodnosti katetera i sprečavanje infekcija. Takođe, sa ovim pronalaskom su povezani postupci za upotrebu rastvora za inhibiranje rasta mikroba iz ovog pronalaska i postupci za rukovanje i održavanje transdermalnih vaskularnih katetera.

OSNOVA PRONALASKA

[0002] Transdermana medicinska sredstva, uključujući vaskularne katetere, postala su bitna u održavanju hospitalizovanih ili hronično bolesnih pacijenata. Nažalost, vaskularni kateteri, u slučajevima kada se zahteva hospitalizacija, su postali glavni izvor sepsi. Prema tome, benefit koji proističe iz transdermalnih medicinskih sredstava, kao što je vaskularni kateter, često kvare infektivne komplikacije. Trombotska začepljenja kanala centralnih venoznih katetera ("CVK") predstavljaju sledeću komplikaciju, koja često dovodi do uklanjanja katetera.

[0003] Potreba za smanjivanjem problema povezanih sa stvaranjem tromba, danas je uobičajena u slučaju "blokiranja" katetera sa intravaskularnim pristupom, prilikom njihovih uzastopnih upotreba. Tipično, blokiranje katetera obuhvata prvo ispiranje sa rastvorom soli, da se ukloni krv, lekovi, ćelijski otpaci i druge supstance iz kanala katetera. Posle ispiranja katetera, injektira se rastvor za blokiranje, tipično heparin, da se istisne rastvor soli i da se ispuni kanal. Rastvor heparina za blokiranje, uklanja krv iz kanala i aktivno inhibira zgrušavanje i stvaranje trombova unutar kanala. Da bi se tretirala infekcija, sa rastvorom za blokiranje se kombinuju razne supstance protiv mikroba, da bi se istovremeno sa inhibiranjem tromboze inhibirala infekcija. Međutim, problemi sa tekućom i stalo rastućom rezistentnošću prema supstancama protiv mikroba, kao i preterana upotreba supstanci protiv mikroba (a time i povećani rizik od razvijanja rezistentnosti), predstavljaju stalno rastuću brigu.

[0004] Staphylococcus epidermidis i S. aureus su odgovroni za 75% infekcija povezanih sa CVK. Sojevi Candida su odgovorni za sledećih 10% do 15% tih infekcija. Nađeno je da upotreba antistafilokoknih antibiotika u sprečavanju ovih inekcija smanjuje bakterijske infekcije povezane sa CVK, ali po cenu povećanog udela gljivičnih infekcija (Candida). Fibrozni glikokalusni materijal, koji proizvode Staphylococci i Candida, pomaže da se ovi organizmi lepe za površinu katetra. Ovi slojevi mikrobiološkog biofilma sačinjeni su od fibroznog glikokalusnog materijala, koji prvenstveno ima prirodu polisaharida. Zaštitna prevlaka koju obezbeđuje ovaj glikokalusni materijal na inficiranom mestu, efikasno sprečava eliminaciju i tretman ovih infekcija. Kao posledica toga, potreban je rastvor za inhibiranje rasta mikroba koji smanjuje ili eliminiše glikokalusni sloj zaraznih mikrooganizama, tipično povezanih sa naseljavanjem i infekcijom katetera.

[0005] Transdermalni vaskularni kateter se prekriva fibrinskom oblogom, koja deluje tako što oblaže unutrašnje i spoljašnje površine katetera. Ova fibrinska obloga obezbeđuje organizmima, kao što su Staphylococci i Candida, povećani kapacitet adheriranja za površinu katetera. Za razliku od ovih pomenutih mikroba, gramnegativni bakcili ne adheriraju dobro za fibrin i fibronektin. Prema tome, sredstvo koje usporava stvaranje fibrina, moglo bi biti naročito korisno za zaustavljanje nastajanja kolonija koje na površinama transdermalnog katetera stvaraju Staphylococci, Candida i slično.

[0006] Etilendiamintetrasirćetna kiselina ("EDTA") predstavlja jedan koagulant, koji se koristi u epruvetama za sakupljanje krvi. Poznata je takođe, i kao agens za helatiranje kalcijuma. Poznato je takođe da EDTA ima antibakterijski i antistafilokokni efekat (sama ili u kombinaciji) (Harper & Epis (1987) Microbios. 51:107; Said et al. (1987) J. Med. Microbiol. 24:267; Root et al. (1988) Antimicrob. Agents Chemother.

32:1627). Međutim, iako su ovi istraživači pronašli da je EDTA baktericid, ne postoji objašnjenje ili sugestija kako bi se iz ovog sistema mogao eliminisati mikrobiološki glikokaliks, koji je povezan sa infekcijom,.

[0007] Etilen glikol tetrasirćetna kiselina ("EGTA") je sledeći poznati agens za helatiranje. Nije opisano da ovaj agens ima antimikrobno dejstvo. Trietilen tetramin dihidrohlorid (trientin 2HCl) ("TTH") je poznati agens za helatiranje, koji helatira bakar. Slično, za TTH i druge agense za helatiranje, uključujući dietilentriamin pentasirćetnu kiselinu ("DTPA"), nije poznato da imaju antimikrobno dejstvo.

[0008] Mada su glikopeptidni antibiotici (vancomicin i teicoplanin) efikasni protiv stafilokoka i in vitro i u tkivu, oni nisu efikasni prema adheriranim stafilokokama ugrađenim u sloj biofilma, kao što je glikokaliks. Iako ispiranje sa tim agensima može akutno da uništi ove mikroorganizme, rizik od brzog razvijanja tolerantnosti i rezistentnosti sojeva u tretiranom pacijentu, u većini slučajeva predstavlja kontraindikovanu proceduru.

[0009] U dokumentu U.S. Patent No.5,362,754, priznatom subjektu Raad ("Raad I") opisane su kompozicije za upotrebu u kateterima, koje uključuju neki tetraciklinski antibiotik, kao što je minocycline, i EDTA. Ovaj Raad I opisuje upotrebu 10-100 mg/mL EDTA u kombinaciji sa 0.001-100 mg/mL minociklina, a u poželjnijoj kombinaciji od 20-60 mg/mL EDTA i 2-9 mg/mL minociklina. U dokumentu U.S. Pat. No. 5,688,516, takođe priznatom subjektu Raad ("Raad II"), u Primeru 10 se opisuje da su kompozicije minociklina i EDTA, sa manje od 3 mg/mL EDTA, neefikasne u kontroli rasta svih mikroba. Raad II opisuje još isledeće: "Ova ispitivanja takođe pokazuju značajno pojačavanje anti-Candida albicans inhibitorne aktivnosti, ukoliko se koristi odnos minociklina prema EDTA od 10:1 (10% EDTA)."

[0010] U dokumentima U.S. Patent Nos. 4,343,788 i 4,479,795, priznatih R.V. Mustacich-u, opisuju se kompozicije polimera koje sadrže karboksilatne antimikrobne agense za ugradnju u katetere. U dokumentu U.S. Patent No.

4,392,848, priznatom D.S. Lucas-u, opisane su polimerne kompozicije za ugradnju u katetere, koji su propusni za karboksilatne antimikrobne agense. U dokumentu U.S. Pat. No. 4,489,097, koji je priznat to R.L. Stone-u ("Stone"), opisani su intravenozni rastvori koji sadrže karboksilatne antimikrobne agense, poželjno n-heksanoinske i noktanoinske kiseline, i njihove farmaceutski prihvatljive soli, rastvorne u vodi. Dokument Stone opisuje upotrebu ovih karboksilatnih antimikrobnih agenasa za sterilizovanje intravenoznih rastvora i održavanje ovih intravenoznih rastvora sterilnim, tokom manipulacije sa njima. Ordiniranje Stone-ovih rastvora, kao što je opisano u intravenoznom kateteru za ”blokiranje” katetera pod statičnim (bez protoka) situacijama, trebalo je da za rezultat daje bržu okluziju usled povratnog protoka krvi u sistem i gubitka antikoagulacionih karakteristika opisanih kompozicija. U dokumentu WO 2010/110908) opisane su kompozicije za ispiranje i oblaganje medicinskih sistema, kao što su kateteri, koje se sastoje od jedne kombinacije agensa za helatiranje, poželjno EDTA, sa nekom C4-C9 karboksilnom kiselinom, ili njenom solju, poželjno oktanoinskom kiselinom, i opciono sa nekim agensom za puferovanje. Opisan je takođe i postupak za dezinfikovanje, za blokiranje ili ispiranje implantiranog katetera, korišćenjem istog kao što je opisano. U dokumentu EP 0083 820 opisan je rastvor za dezinfekciju, koji sadrži 0.001-3% C5-C12 masne kiseline, npr. oktanoinske kiseline, zatim od 0.01 to 2% helatora kalcijuma, npr. EDTA , neku so rastvornu u vodi (npr. natrijum-hlorid, natrijum-fosfat ili natrijum-oktanoat) i 0.01 do 5% nekog farmakološki prihvatljivog pufera, npr. nekog pufera koji sadrži citrat.

[0011] Profilaktički agens koji služi za održavanje katetera treba da inhibira i eliminiše formiranje glikokaliksa, bogatog polisaharidima i da eliminiše Stafilokoke i gljivice. U vezi sa prethodnim, postoji potreba za poboljšavanjem kompozicija, kompleta i postupaka ispiranja, blokiranja i dezinfecije katetera. Te kompozicije treba da imaju antimikrobno dejstvo za široki spektar mikroorganizama, poželjno, uljučujući i gljivice, kao i gram-pozitivne i gram-negativne bakterije, i poželjno je da budu efikasne protiv planktonskih (slobodno lebdećih) i adheriranih mikroorganizama, koji su ugrađeni u neki biofilm. Ove kompozicije treba da spreče razvoj rezistentnih mikroba, da su relativno jeftine, netoksične, kompatiiibilne sa materijalom katetera, bezbedne ukoliko se nesmotreno daju sistemski, kroz infuziju, da se lako implementiraju, da zahtevaju minimalan ili nikakav rastvor, i da su upotrebive sa skoro svim vrstama implantiranih katetera, uključujući katetetre za hemodijalizu i hemifiltriranje, IV katetere, katetere za peritonealnu dijalizu, urinarne katetere, katetere za hemoterapiju i slično. Bar neka od ovih svojstava se sreću u realizacijama ovog pronalaska, koje su opisane u nastavku.

IZLAGANJE SUŠTINE PRONALASKA

[0012] Ovaj pronalazak daje jedan rastvor za inhibiranje rasta mikroba, u skladu sa patentnim zahtevom 1, jedan postupak za oblaganje medicisnkog sistema u skladu sa patentnim zahtevom 6, jedan medicinski sistem za oblagnje sa rastvorom za inhibiranje rasta mikroba, prema patentnom zahtevu 7, i jedan komplet za blokiranje i/ili ispiranje nekog implantiranog katetera, prema patentnim zahtevima 9 i 11.

[0013] U jednoj realizaciji, ovaj rastvor za inhibiranje rasta mikroba čini jedan rastvor farmakološki prihvatljivog nosača, kao što su voda, Ringer-ov rastvor ili rastvor soli, čiji pH je podešen na 5.2 ili manje. Ovaj rastvor za inhibiranje rasta mikroba može imati u upotrebi pH oko 6.0, ili niže, opično unutar opsega od oko 3.5 dooko 5.8, ili najpoželjnije u opsegu pH od oko 3.5 do oko 5.2. Unutar ovog kiselog opsega pH, odgovarajuće koncentracije karboksilatnih jedinjenja, u obliku slobodnih kiselina, brzo i efikasno ubijaju široke vrste bakterija i gljivica.

[0014] U jednoj realizaciji, agensi za helatiranje imaju snažan potencijal za inhibiranje glikokaliksa. Pored toga, C4-C9 karboksilatni antimikrobni agensi ovih komozicija poželjno je da imaju još i neki fungicidni efekat i jedinstvenu sposobnost da prodiru u glikokaliksni sloj biofilma bogat nekim polisaharidom. Ova kombinacija C4-C9 karboksilatnog antimikrobnog agensa i agensa za helatiranje, pogodno je da predstavlja antikoagulantni agens, inhibirajući za glikokaliks, koji ima antibakterijski i fungicidni efekat u prevenciji tromobogeneze, adheriranja mikroba i infekcija povezanih sa ovim sistemom.

[0015] Opiasni su takođe, ali se ne štite, postupci za upotrebu rastvora za inhibiranje rasta mikroba, koji uključuju agens za helatiranje sa C4-C9 karboksilanim antimikrobnim agensom, u brojnim terapeutskim aplikacijama. Jedna takva terapeutska aplikacija je za prevenciju infekcija katetera. Primer jedne kompozicije koja se koristi u korišćenju ovih postupaka, sadrži n-oktanoinsku kiselinu, zajedno sa nekim agensom za helatiranje. EDTA predstavlja primer agensa za helatiranje, za koji se predpostavlja da se upotrebljava u tim postupcima; međutim, takođe se može očekivati da su upotrebivi i drugi agensi za helatiranje.

[0016] Za upotrebu u održavanju prohodnosti katetera, rastvor za inhibiranje rasta mikroba može se efiksno upotrebiti u medicinskim sistemima, kao što su centralni venozni kateter, periferni intravenozni kateter, arterijski kateter, Swan-Ganz-ov kateter, kateter za hemodijalizu, pupčani kateter, perkutani netunelski silikonski kateter, tunelski centralni venozni kateter u obliku mažetne, kao i za potkožni centralni venozni dovod.

[0017] Realizacije iz ovog pronalaska predstavljaju takođe medicinske sisteme, kao što su kateteri, koji su obloženi sa rastvorom za inhibiranje rasta mikroba. Posebni egzemplarni medicinski sistemi koji se mogu dobiti i obložiti sa rastvorima iz ovog pronalaska navedeni su gore.

[0018] Realizacije iz ovog pronalaska daju takođe postupke za proizvodnju medicinskih sistema obloženih sa kompozicijama koje su ovde opisane. U jednoj realizaciji, postupak se sastoji od izlaganja medicinskog sistema nekom rastvoru za inhibiraje rasta mikroba tokom dovoljno dugog vremena, sve dok se ne obezbedi oblaganje izložene površine tog sistema. Ukoliko je ovaj rastvor za inhibiranje rasta mikroba u tečnom obliku, može se omogućiti da se suši na površini ovog sistema dok se ne formira film.

[0019] U jednoj poželjnoj realizaciji ovih gore opisanih postupaka, taj sistem se prvo tretira sa nekim surfaktantom, pre nego što se sistem izloži delovanju rastvora za inhibiranje rasta mikroba. Ti surfaktanti su, na primer, tridodecilmetil amonijum-hlorid i benzalkonijum-hlorid.

[0020] Sledeći aspekt ovog pronalaska daje jedan postupak za dobijanje medicinskog sistema sa rezistentnim biofilmom. U jednoj realizaciji, taj postupak se sastoji od izlaganja sistema rastvoru za inhibiranje rasta mikroba koji je ovde opisan. Bilo koja vrsta katetera se može tretirati ili obložiti u skladu sa ovde opisanim postupkom, korišćenjem tehnika za oblaganje koje su dobro poznate onima koji su prosečni stručnjaci iz stanje tehnike.

[0021] Iako se ovaj postupak može koristiti za oblaganje bilo koje virtualne površine na kojoj se stvaranje glikokaliksa želi inhibirati, korišćenje ovog postupka posebno je poželjno kod dobijanja biofilma rezistentnog prema mikrobima u sistemu katetera. Primera radi, kateteri koji se mogu tretirati u skladu sa realizacijom iz ovog pronalaska, su centralni venozni kateter i kateter sa trostrukim kanalom. Podrazumeva se da je ovaj postupak pogodan za sistem koji je rezistentan na formiranje glikokaliksa bogatog sa polisaharidima, kao što je onaj koji je tipičan za Stafilokoke.

[0022] U jednom poželjnom aspektu opisanog postupka, medicinski sistem sa rezistentnim biofilmom dobija se korišćenjem rastvora za inhibiciju rasta mikroba. Podrazumeva se takođe da su u kompozicijama za oblaganje medicinskih sistema korisni različiti opsezi koncentracija C4-C9 karboksilatnih antimikrobnih agenasa i agenasa za helatiranje.

[0023] U jednoj realizaciji, ovaj postupak se sastoji od dobijanja rastvora za inhibiranje rasta mikroba kao željene kombinacije u rastvoru nekog biokompatibilnog adherenta za oblaganje. Površina ovog medicinskog sistema se zatim izlaže rastvoru za inhibiranje rasta mikroba, tokom dovoljno dugog perioda vremena da se iz tog rastvora formira film ili obloga po površini sistema. Ovo se može obaviti, na primer, uronjavanjem posmatranog sistema u ovaj rastvor. Najpoželjniji sistem za oblaganje je neki kateter. Ovaj tretman daje kateter obložen biorezistentnim filmom.

[0024] Takođe, opisani su postupci za inhibiranje stvaranja glikokaliksa bogatog glikoproteinom na ulazu u kateter. Jedan postupak se sastoji od periodičnog ispiranja katetera sa nekim rastvorom za inhibiranje rasta mikroba, koji sadrži neku koncentraciju agensa za helatiranje koja inhibira glikokaliks, i neki antimikrobni C4-C9 karboksilatni agens, u nekom rastvoru farmakološki prihvatljivog nosača.

[0025] Opisani postupci se mogu koristiti za inhibiranje infekcije u nekom tunelskom ili netunelskom kateteru. Kao deo režima održavanja katetera, najpoželjnije je da se kateter ispire sa nekom kompozicijom koja sadrži neki C4-C9 karboksilatni antimikrobni agens i neki agens za helatiranje, u nekom rastvoru farmaceutski prihvatljivog nosača. Ovako opisani režim se ponavlja jedanput na nedelju dana, jedanput na svaka 4 dana, na svakih 2 dana, jedanput na dan (na svkih oko 24 h), dvaput na dan, na svakih 4 h, ili kako je neophodno, u skladu sa potrebama pacijenta.

[0026] Takođe, opisani su postupci za eliminisanje stvaranja glikokaliksa mikroba, naročito stvaranja glikokaliksa bogatog polisaharidima (Stafilokoka), u kanalu katetera. Jedan postupak se sastoji od dobijanja rastvora za inhibiranje rasta mikroba, koji sadrži agens za helatiranje (npr., EDTA, EGTA, ili oba), zajedno sa nekim C4-C9 karboksilatnim antimikrobnim agensom (npr., n-buternom, npentanoinskom, n-heksanoinskom, n-heptanoinskom, n-oktanoiinskom ili nnonanoinskom kiselinom i/ili njihovim farmaceutski prihvaltjivim solima), u rastvoru nekog nosača, tako da se dobije kompozicija za ispiranje, pa se kateter ispira sa količinom koja je efikasna za inhibiranje rasta mikroba u kompozicji za ispiranje.

[0027] Najpoželjnije je da se kateter ispira sa zapreminom od 3 mL opisanog rastvora n-oktanoinske kiseline i EDTA, koji sadrži oko 0.5 mg/mL EDTA i oko 1.15 mg/mL n-oktanoinske kiseline. Kateter se može periodično ispirati, u intervalima od jedanput na nedelju dana, jedanput na svakih 4 dana, jedanput na svakih 2 dana, jedanput na dan, dvaput na dan, na svakih 4 h, ili prema potrebi, u skladu sa potrebama pacijenta, sa oko 2-3 mL rastvora n-oktanoinske kiseline i EDTA. Režim ispiranja katetera može jednostavno da bude jedanput, svaki put kada se kateter koristi ili menja. U poželjnom postupku, kateter treba da se ispire sa ovde opisanim rastvorima u intervalima od 4 h.

[0028] Poželjno je da ovde opisane kompozicije ostanu terapeutski efikasne za korišćenje kao agens za ispiranje katetera, posle skladištenja na temperaturi frižidera.

[0029] U još jednom aspektu ovaj pronalazak daje komplet. Opisuje se takođe komplet koji sadrži neki kontejner, kao što je špric, koji sadrži neku zapreminu jednog od prethodno opisanih rastvora, koji se sastoji od nekog C4-C9 karboksilatnog antimikrobnog agensa i nekog agensa za helatiranje i nekog kanala katetera koji se može implantirati, a koji može da primi taj rastvor. Ovaj komplet može još da sadrži i neko pakovanje za držanje kontejnera, kao što su kutija, tacna, cev, obloga, kesa i slično. Zapremina rastvora u ovom kontejneru je tipično u opsegu od 1 mL-20 mL, poželjno od 2 mL-10 mL, a obično je oko 2 mL-4 mL. Opciono, ovaj kontejner se obično sastojiod šprica, ili nekog uređaja koji dozvoljava direktno unošenje rastvora u kateter.

[0030] U sledećoj realizaciji ovaj komplet sadrži neki kontejner, kao što je špric sa odeljcima, koji sadrži više odeljaka. Na primer, ovakav kontejner može imati tri odeljka, pri čemu, jedan odeljak sadrži C4-C9 karboksilatni antimikrobni agens, koji se sastoji od natrijum-kaprilata; drugi odeljak koji sadrži neki agens za heltiranje, koji se sastoji od EDTA; i treći odeljak, koji se sastoji od nekog razblaživača, kao što je rastvor soli, Ringer-ov rastvor ili voda, sa pH podešenim na 5.2 ili manje. Kompleti u kojima je nosač prilagođen tako da ima najmanje dva odeljka, čine još jednu realizaciju ovog kompleta. U ovim realizacijama, agens za helatiranje može biti uključen zajedno sa C4-C9 karboksilatnim antimikrobnim agensom, unutar jednog odeljka ovog kontejnera. Drugi odeljak može sadržati neki razblaživač, kao što su oni koji su opisani gore. U jednoj realizaciji, agens za helatiranje i antimikrobni agens, u obliku praha, su zajedno sadražni u prvom odeljku ovog sistema. Poželjno je da se ove suve komponente kombinuju sa nekim razblaživačem iz drugog odeljka, tako da daju rastvor koji je pogodan za upotrebu.

[0031] Takođe, opisan je jedan postupak za dezinfekciju implantiranog katetera, koji se sastoji od uvođenja rastvora koji sadrži neki C4-C9 karboksilat kao antimikrobni agens i neki agens za helatiranje, u nekom rastvoru farmaceutski prihvatljivog nosača, u kanal katetra, u kome je bar deo katetera dovoljno porozan da dozvoljava difuziju ovog rastvora iz kanala na spoljašnju površinu katetera i u tkivo okolnog krvotoka koje okružuje kateter, gde inhibira infekciju. Implantirani kateter može biti subkutani ili transkutani kateter.

1

[0032] Sposobost inhibiranja ili prevencije infekcije implantiranog katetera može se poboljšati korišćenjem katetera u kojima je najmanje deo katetera dovoljno porozan, tako da dozvoljava rastvoru za animikrobno blokiranje da prođe kroz telo katetera, a poželjno je da prođe i izvan njega (tj., procuri, propusti, ispusti, difunduje) u region tkiva koji okružuje kateter. Upotreba ovakvih pooznih ili delimično poroznih tela katetera može biti korisna kod mnogih rastvora za antimikrobno blokirianje, kao što su oni koji su opisani u dokumentima U.S. Patent Nos. 4,186,745; 4,767,400; 4,968,306; 5,077,281; 5,913,856; 6,949,087; 7,004,923; i U.S. Patent Publication Nos. 2006/0074388 and 2006/0253101. Podrazumeva se da C4-C9 karboksilatni antimikrobni agensi imaju molarne mase i druge kvalitete koji im omogućavaju da lako penetriraju u i kroz mnoge porozne materijale. Egzemplarni porozni materijali za konstrukciju tela katetera su silikonska guma, ekspandirani PTFE (npr., medicinske membrane od GORE-TEX<®>), filmovi od TEFLON<®>-a, prirodni, regenerisani ili polusintetski celulozni materijali, kao što su celuloza acetat, celuloza diacetat, kuprofan i slično. Ti materijali se mogu formirati u tubularna tela katetera, ili se mogu ugraditi kao odvojene komponente u tela katetera.

[0033] Očekuje se da je opisani rastvor za inhibiranje rasta mikroba efikasan za prevenciju adheriranja i kolonizacije površina katetera pomoću S. aureus, S. epidermidis i gljivica, a isto tako da je efikasan i u tretiranju i u eliminisanju već formiranih formacija od glikokaliksa ovih zaraznih organizama.

[0034] Podrazumeva se da kada god je to neophodno da se bilo koja realizacija iz ovog pronalaska može kombinovati sa jednom ili više drugih realizacija iz ovog pronalaska, čak i kada su te realiazcije opsane u različitim aspektima ili realizacijama ovog pronalaska. Ovde se opisuju dodatne karakteristike i pogodnosti, a biće jasne iz detaljnog opisa i slika, koji slede.

KRATAK OPIS SLIKA

[0035]

SLIKE 1A I 1B ilustruju postupke u skladu sa ovim pronalaskom za blokiranje i dezinfekciju nekog transkutanog katetera.

SLIKE 2A-2C ilustruju postupke u skladu sa ovim pronalaskom za ispiranje, blokiranje i dezinfekciju nekog subkutano implantiranog katetera.

SLIKE 3A-3C ilustruju postupke u skladu sa ovim pronalaskom za ispiranje, blokiranje i dezinfekciju nekog katetera za peritonealnu dijalizu.

Fig. 4 ilustruje jednu realizaciju ovog pronalaska, gde antimikrobni rastvor za blokiranje prodire u telo implantiranog katetera i poželjno u okolno tkivo tela katetera.

Fig. 5 ilustruje komplet načinjen u skladu sa principima ovog pronalaska.

Fig. 6 prikazuje poređenje Na-oktanoat/EDTA i Heparina pomoću aPTT.

KRATAK OPIS

[0036] Detalji jedne ili više realizacija iz ovog pronalaska opisuju se u priloženom opisu u nastavku. Mada se bilo koji postupci i materijali, koji su slični ili ekvivalentni onima koji su ovde opisani, mogu upotrebiti u praksi ili testiranju ovog pronalaska, ti postupci i materijali sada će se opisati. Druge karakteristike, predmeti i prednosti ovog pronalaska biće jasni iz ovog opisa. U ovoj prijavi, pojedinačni oblici takođe obuhvataju više njih, ukoliko kontekst izričito ne zahteva drugačije. Ukoliko se ne definišu drugačije, svi tehnički i naučni termini koji se ovde koriste, imaju isto značenje koje se obično podrazumeva od strane onog ko je prosečan stručnjak iz stanja tehnike kome ovaj pronalazak pripada. U slučaju nesporazuma, rukovodiće se ovom Prijavom.

Definicije

[0037] Termini u nastavku imaju sledeća značenja, ukoliko se drgačije ne naznači.

[0038] Termin "biofilm", kako se ovde koristi, odnosi se na neki glikokaliks obogaćen polisaharidom, koji tipično prati površinu kolonizacije mikroba.

[0039] Kako se ovde koristi, "rezistentan biofilm" nekog sistema ili površine, predstavlja neku površinu ili sistem koji sprečavaju adheriranje ili rast organizama koji stvaraju glikokaliksni materijal obogaćen polisaharidom. Takvi organizmi su, ali ne i ograničeni istima, vrste Staphylococcus aureus i S. epidermidis.

[0040] Termin "koncentracija koja inhibira glikokaliks", kako se ovde koristi, odnosi se na neku koncentraciju koja efikasno degradira, rastvara ili na drugi način inhibira glikokaliks obogaćen polisaharidom. Na primer, takav jedan glikokaliks obogaćen polisaharidom je karakterističan za ustanovljene stafilokokne infekcije sa S. aureus i S. epidermidis.

[0041] Kako se ovde koriste termini "implantiran", "potkožni", "subkutani" i "odvodni" koriste se kao sinonimi koji se odnose na postavljanje u neki medicinski sistem, na primer, kateter. Ovi implantirani kateteri tipično imaju jedan kraj, koji je bar delom otvoren ka nekoj telesnoj šupljini. Najčešće, kateteri su intravaskularni kateteri, kod kojih je jedan kraj implantiran ili spojen sa nekim krvnim sudom – obično nekom venom, a u nekim slučajevima sa nekom arterijom. Egzemplarni intravaskularni kateteri su kateteri za hemodijalizu i hemofiltraciju, kao što su intravenozni kateteri. Intravenozni kateteri se mogu koristiti za mnogobrojne svrhe, uključujući infuziju krvi i davanje lekova. Kateteri, koji nisu spojeni sa vaskulaturom, su kateteri za peritonealnu dijalizu, koji su otvoreni ka peritonealnoj šupljini, i urinarni kateteri, koji su otvoreni prema bešici.

[0042] Ovi medicinski sistemi, kao što su kateteri koji se ovde opisuju, mogu biti transkutano implantirani ili subkutano implantirani. Kada se kaže "transkutano implantiran," misli se da se jedan kraj katetera nalazi, ili je implantiran, unutar neke telesne šupljine, a drugi kraj katetera se nalazi izvan pacijenta. Središnji deo katetera će prema tome prolaziti kroz, ili penetrirati kožu pacijenta, a bliži kraj katetera obično ima spojno mesto, koje omogućava selektivno spajanje sa infuzionim crevima, špricevima, kesama sa rastvorom i slično. Najčešće, ovaj bliži kraj katetera ima neku spojnicu, kao što je Luerov špric. Pod "subkutano implantiran" podrazumeva se da je ceo kateter implantiran ispod kože i da se ni jedan deo katetera ne prostire kroz kožu. Ovakvi subkutano implantirani kateteri tipično su spojeni sa u celini implantiranim spojnim mestom na njihom drugom kraju. Ovo

1

spojno mesto dozvoljava perkutani pristup preko neke igle ili drugog elementa za penetriranje.

[0043] Očekuje se da je rastvor za inhibiranje rasta mikroba iz ovog pronalaska posebno koristan za prevenciju stvaranja "biofilma" ili glikokaliksa obogaćenog polisaharidima, koji tipično prati kolonizaciju mikroba na površini. Posebno se očekuje da je rastvor za inhibiranje rasta mikroba najefikasniji u razgradnji stafilokoknog glikokaliksa i inhibiranju njegovo stvaranja. Ovo svojstvo nudi rastvor za inhibiranje rasta mikroba iz ovog pronalaska, koji je naročito koristan u tretmanu stafilokoknih infekcija u kojima se stvara, ili može potencijalno da se stvori glikokaliks obogaćen polisaharidima, a isto tako u prevenciji i tretmanu infekcija sa Staphylococcus i Candida.

[0044] Realizacije iz ovog pronalaska daju takođe tretirane ili obložene medicinske sisteme, kao što su kateteri, koji spečavaju kolonizaciju stafilokoka ili gljivica. Obloga ili film, koji se daju u ovim sistemima, sadrže rastvor za inhibiranje rasta mikroba iz ovog pronalaska. Predviđeno je da takođe mogu da budu od koristi sistemi, koji su obloženi sa ovim kombinacijama.

Antimikrobni agensi

[0045] Antimikrobni agens, C4-C9 karboksilat, koji se koristi u bilo kom od rastvora za inhibiranje rasta mikroba i postupaka koji su ovde opisani, sadrži natrijum-kaprilat, a može sadržati i druge ne-aromatične, rastvorne u vodi C4-C9 alkil, alkenil ili alkinil organske kiseline, ili bilo koju od njihovih u vodi rastvornih, farmaceutski prihvatljivih soli. Iste obuhvataju, na primer, natrijumove, kalijumove i amonijumove soli. Poželjne su natrijumove i kalijumove soli.

[0046] Iako razna karboksilatna jedinjenja pokazuju različite stepene antimikrobnog dejstva (po molu), agensi koji su rastvorni u vodi imaju formulu: R-COOH, gde je R = C3-C8n-alkil, kao i njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili neka njihova kombinacija, i oni pokazuju odlično antimikrobno dejstvo. Naročito su poželjni n-oktanoinska kiselina i njene farmaceutski prihvatljive, u vodi rastvorne, soli.

[0047] Mikrobiocidna aktivnost antimikrobnih C4-C9 karboksilata direktno je povezana sa prisustvom njihovih respektivnih slobodnih kiselina u rastvoru. Koncentracija slobodne karboksilne kiseline u rastvoru, nasuprot obliku (anjonskom) karboksilatne soli, funkcija je vrednosti pH rastvora. Mogu se koristit soli karboksilne kiseline, samo ukoliko je pH rastvora takvo da je prisutna minimalna letalna koncentracija ("MLK") slobodne kiseline. U skladu sa tim, količina kiseline ili kisele soli koja se koristi, variraće sa upotrebom pH. Količina date kisele soli ili kiseline, koja treba da obezbedi MLK pri datom pH, zavisiće od vrednosti pKate kiseline. Naravno, znajući pKa, lako se može izračunati MLK posmatrane kiseline i potrebna vrednost pH, iz količine bilo koje C4-C9kiseline ili kisele soli, koja treba da se upotrebi, korišćenjem sledeće formule:

pKa= pH log([HCx]/[Cx-])

gde je [HCx] koncentracija slobodne kiseline sa lancem čija je dužina x, a [Cx-] je koncentracija njenog anjona.

[0048] Ovaj antimikrobni agens je prisutan u koncentraciji koja se u rastvoru za inhibiranje rasta mikroba kreće od oko 0.071 mg/mL do oko 1.15 mg/mL. Određenije, koncentracija antimikrobnog agensa može biti oko 0.1 mg/mL, 0.25 mg/mL, 0.5 mg/mL, 0.75 mg/mL, 1 mg/mL i slično. Treba napomenuti da bilo koje dve koncentracije antimikrobnog agensa, koje su ovde navedene, mogu predstavljati još i krajnje tačke unutar nekog terapeutskog opsega ovog antimikrobnog agensa.

Agensi za helatiranje i puferi

[0049] Pored karboksilatnog antimikrobnog agensa C4-C9, koji se sastoji od natrijum-kaprilata, rastvor za inhibiranje rasta mikroba i postupci koji su ovde opisani, obuhvataju takođe i agense za helatiranje, koji se sastoje od dinatrijum etilendiamin tetrasirećtne kiseline i nekog pufera, koji čini citrat, npr. citrat-limunska kiselina. Bilo koji od rastvora za inhibiranje rasta mikroba i ovde opisanih postupaka, može takođe da sadržei dodatne agense za helatiranje i pufere. Primeri, ali bez ograničavanja istima, pogodnih agenasa za helatiranje i pufera, koji se mogu koristiti u raznim

1

realizacijana iz ovog pronalaska, mogu se birati iz Tabela 1 i 2, respektivno. Mogu se koristiti farmaceutski prihvatljive soli (npr., kalcijum-dinatrijum edetat) bilo koga od agenasa za helatiranje navedenih u Tabeli 1.

Tabela 1.

Tabela 2.

[0050] Oni koji su verziranu i stanje tehnike znaju da su gornji spiskovi dati samo za primer. Drugi agensi za helatiranje, kao i puferi, očekuje se da takođe budu efikasni u kombinaciji sa C4-C9 karboksilatom kao antimikrobnim agensom. Ove kombinacije, kada su formulisane kao obloga, poželjno je da obuhvate i još neki materijal, kao što je neki katjonski surfaktant (npr., tridodecilmetil amonijum hlorid ili benzalkonijum hlorid), koji će poboljšati adheriranje filma ili karakteristike formiranja filma iz ovog rastvora. U nekom rastvoru za ispiranje ili drugu medicinsku upotrebu, ovi sastojci se suspenduju u nekom nosaču rastvora, kao što je sterilni rastvor soli,

1

slani fosfatni pufer, dekstroza u vodi, Ringer-ov rastvor, destilovana voda ili bilo koji drugi fiziološki prihvatljiv rastvor, sa pH podešenim na 5.2 ili manje.

[0051] U jednoj realizaciji, koncentracija agensa za helatiranje može biti oko 0.1 mg/mL, 0.15 mg/mL, 0.2 mg/mL, 0.25 mg/mL, 0.3 mg/mL, 0.35 mg/mL, 0.4 mg/mL, 0.45 mg/mL, 0.5 mg/mL, 0.55 mg/mL, 0.6 mg/mL, 0.65 mg/mL, 0.7 mg/mL, 0.75 mg/mL, 0.8 mg/mL, 0.85 mg/mL, 0.9 mg/mL, 0.95 mg/mL, 1 mg/mL i slično. Treba znati da bilo koje dve koncentracije agensa za helatiranje, koje su ovde date, mogu da predstavljaju krajnje tačke u terapeutski poželjnom opsegu agensa za helatiranje. Na primer, koncentracije 0.2 mg/mL i 0.5 mg/mL mogu da predstavljaju pojedinačne koncentracije agensa za helatiranje, a isto tako i poželjan opseg agensa za helatiranje u rastvoru, koji se kreće od oko 0.2 mg/mL do oko 0.5 mg/mL.

Postupci ispiranja, blokiranja i definfekcije katetera

[0052] Pozivajući se na SLIKE 1A i 1B, biće opisani postupci za blokiranje nekog implantiranog venoznog katetera 10. Venozni kateter 10 se implantira kroz kožu pacijenta S u venu V, za infuziju pacijentu. Kada se želi da se pacijent odvoji od izvora infuzije, potrebno je da se zatvori kateter, da bi se inhibiralo zapušavanje i zagađenje koje izaziva koagulacija, a poželjno je da se inhibira ili eliminiše rizik od infekcije. Na Slici. 1A, prikazana je cev 12 koja sadrži IV rastvor, koja se normalno povezuje sa spojnim mestom 14, na kraju katetera 10. Kada se IV cev 12 odvoji, kateter 10 se ispere sa rastvorom za ispiranje. Po završetku ispiranja, uvodi se rastvor za blokiranje dok ne ispuni unurašnju šupljinu katetera, pa se dovodi rastvor iz ovog pronalaska dok ne ispuni unutrašnju šupljinu katetera 10, kao što je pokazno na SLICI 1B. Obično, dovodi se zapremina rastvora za blokiranje koja je dovoljna da potpuno ispuni šupljinu implantiranog katetera 10, stim da minimalni višak izađe na kraju 16 katetera. Gubitak viška rastvora u krvnom sudu, ili većinom u nekoj drugoj telesnoj šupljini, obično ne predstavlja problem. "Stub" rastvora zatim zauzima unutrašnju šupljinu, koji je sa kraja za spajanje zatvoren, čime se pomaže da rastvor ostaje na svom mestu. Ovaj rastvor za blokiranje će efikasno inhibirati ugrušavanje i koagulaciju na kraju katetera 16, a isto tako inhibirati ili eliminisati infekciju kroz kateter. Kada se želi da se ponovo pacijent spoji sa IV izvorom, ovaj rastvor se ukloni, a šupljina katetera se ispere.

1

[0053] Pozivajući se sada na SLIKE 2A-2C, biće opisano ispiranje i blokiranje subkutano implantiranog katetera 20, koji se koristi za pristup hemodijalizi. Kateter 20 se implantira između ciljanog krvnog suda BV, tipično neke vene, i implantiranog ulaza 22. Za vreme hemodijalize, krv se izvlači kroz kateter 20, preko ulaza 22 i preko eksterne igle N creva za povezivanje 23, koja se koristi za perkutani pristup ulazu 22 (Slika.2A). Alternativno, ulaz i kateter se mogu koristiti za vraćanje tretirane krvi pacijentu.

[0054] Kada se želi da se tretman hemodijalize (ili hemofiltriranja) završi, uvodi se rastvor za ispiranje ("FS") iz ovog pronalaska, kroz iglu N (tipično iz šprica koji je vezan sa crevom za spajanje 23) da se ispere šupljina, kao što je prikazano na SLICI 2B. Po završetku ispiranja, injektira se rastvor za blokiranje iz nekog kontejnera, kao što je špric 26, kroz dolazno crevo 23, na ulazu 22, u šupljinu katetera 20, pa se izmesti rastvor za ispiranje i blokira kateter (SLIKA. 2C). Rastvor za blokiranje se zadržava unutar katetera 20. Alternativno ili dodatno, ovaj rastvor za blokiranje može biti neki rastvor iz ovog pronalaska.

[0055] Ovde opisani postupci mogu se takođe upotrebiti za ispiranje i blokiranje nevaskularnog katetera, kao što su kateteri za peritonealnu dijalizu 30, koji su prikazani na SLIKAMA 3A-3C. Posle tretmana peritonealne dijalize, iskorišćeni dijalizat se izvlači iz katetera 30, kao što je pokzano na SLICI. 3A. Kada se ukloni dovoljno dializata, kateter za dijalizu se ispire sa rastvorom za ispiranje FS iz ovog pronalaska, kao što pokazuje SLIKA. 3B. Posle ispiranja, u kateter za peritonealnu dijalizu 30 uvodi se rastvor za blokiranje, kao što je pokazano na SLICI.3C, tako da ispuni šupljinu katetera, kao što je ranije opisano za vaskularni kateter. Alternativno ili dodatno, rastvor za blokiranje može biti neki rastvor iz ovog pronalaska.

[0056] Pozivajući se sada na SLIKU. 4, upotreba rastvora za blokiranje se može pooboljšati korišćenjem nekog implantiranog katetera, koji je bar delom formiran od nekog poroznog materijala. Kada se šupljina 40 ovog poroznog tela katetera 42 ispuni rastvorom iz ovog pronalaska, taj rastvor je u stanju da polako penetrira (tj., curka) u telo katetera i izvan njega, u tkivo T, koje okružuje kateter, kao što pokazuju strelice na SLICI. 4. Dakle, antimikrobna svojstva rastvora za blokiranje ne

1

ograničavaju se u potpunosti na unutrašnju šupljinu katetera, već su takođe efikasna po površini katetera i u regionu tkiva neposredno uz telo katetera. Posebno pogodni materijali sa njihovim poroznim svojstvima za telo katetera pomenuti su gore.

[0057] Pozivajući se sada na SLIKU.5, kompleti, u skladu sa ovim pronalaskom, će sadržati najmanje jedan konntejner 60, kao što je špric, za držanje zapremine rastvora za blokiranje iz ovog pronalaska, i kateter sa implantabilnom šupljinom za prihvatanje tog rastvora. Zapremina je tipično unutar opsega koji su ranije pomenuti. Ovi kompleti mogu još sadržati i neko pakovanje 62, za držanje kontejnera 60. Ovo pakovanje može biti bilo koje pakovanje za neki konvencionalni medicisnki sistem ili uređaj, uključujući kutije, cevi, omotače, tacne i kese. Pored toga, komplet može da sadrži uputstvo za upotrebu ("IFU"), u kome je opisan postupak za blokiranje i/ili dezinfekciju implantiranog katetera, uvođenjem rastvora iz pomenutog kontejnera u šupljinu implantiranog katetera, između uzastopnih upotreba katetera.

PRIMERI

[0058] Ovaj pronalazak definišu još i Primeri koji slede. Treba shvatiti da ovi Primeri ukazuju na poželjne realizacije iz ovog pronalaska, i da su dati samo kao ilustracija.

PRIMER 1. Vrednovanje rastvora za inhibiranje rasta mikroba

[0059] Ispitivanja koja slede preduzeta su radi testiranja antimikrobnog/antigljivičnog testiranja formulisanog rastvora za inhibiranje rasta mikroba, u skladu sa ovim pronalaskom.

Staphylococcus Aureus rezistentan prema Meticilinu ("SARM")

[0060] Matični rastvor kulture Staphylococcus aureus, do upotrebe se drži u smrznutom stanju na -70°C. Za bakterijsko testiranje korišćen je Staphylococcus aureus, izolovan iz humane krvi. Suspenzija ćelija se priprema iz smrznute matične kulture, pa se kultviše u triptičnoj sojinoj čorbi ("TSČ"), dajući približno 1×10<8>jedinica koje formiraju koloniju ("JFK") po mililitru SARM. Konačna koncentracija ovog rastvora inokuluma je potvrđena korišćenjem brojanja na ploči.

1

[0061] Testiranje bakterija – Za test se inokulira 9.9 mL svakog od rastvora, sa 100 µL suspenzije ćelija SARM, dajući za konačnu koncentraciju ćelija približno 1×10<6>JFK/mL. Ovo predstavlja razblaženje 1:100 polazne kulture, sa 1×10<8>JFK/mL; početna koncentracija ćelija je izračunata na osnovu brojanja inokuluma na ploči. Svaki testirani ili kontrolni rastvor je vrednovan u triplikatu. Uzorci su sakupljani u vremenu T = 1 s.

[0062] Uzorkovanje tretiranih organizama za rast – Svaki uzorak je serijski razblaživan u PBS (pH 7.0), pa zasejavan u duplikatu na pločama prevučenim tripičnom sojom sa agarom ("TSA"). Sve ploče se inkubiraju invertovane na 37°C, tokom 24 h. Za preostalu zapreminu tretiranog uzorka: 1) svaki uzorak se profiltrira kroz membranu filtera od 0.22 μm, i 2) svaki filter se ispere sa 15 mL sterilne vode. Ovaj filter se stavlja direktno na TSA ploču, pa inkubira 24 h, bez invertovanja, na 37°C.

[0063] Analize - Vrednost JFK/mL za svaki rastvor se logaritamski transformiše (baza 10). U slučajevima kada je brojanje na ploči bilo nula, zamenjenjuje se sa vrednošću 0.5 za jedno od ovih nultih brojanja. Ova supstituisana vrednost je podešavana, zavisno od razblaženja pri zasejavanju ili od filtrirane zapremine. Rezultati za svaka tri eksperimenta se uproseče, za određivanje vrednosti logaritma srednje gustine, pa je izračunavana sa istim povezana standardna devijacija. Izračunavan je log smanjenja za ove kulture, posle tretiranja sa rastvorom za blokiranje, oduzimanjem logaritma srednje gustine, nakon 24 h od iste u vremenu nula.

Pseudomonas aeruginosa

[0064] Pseudomonas aeruginosa (predstavlja jednu gram negativnu bakteriju) se gaji u kulturi, sa definisanim logaritmom faze rasta. Reprezentativni uzorci ove kulture se inkubiraju/tretiraju tokom definisanog vremena u raznim tečnim nosačima (rastvarač) ili u rastvorima za blokiranje. Zaseju se alikvoti tretiranih uzoraka na

2

ploče sa agarom, pa se broje kolonije nastale posle dovoljno vremena za rast, da se oceni efikasnost blokiranja i ubijanja posmatrainih organizama.

[0065] Soj bakterija i rastvor kulture – ’Matična kultura Pseudomonas aeruginosa se do ispitivanja drži u bloku zamrznute kulture na -70°C. Za testiranje je korišćen Pseudomonas aeruginosa izolovan iz humane krvi. Pripremi se suspenzija ćelija iz zamrznutog bloka kulture, pa se kultiviše u TSČ, dajući približno 1×10<8>JFK P. aeruginosa po mililitru. Za poređenje, 0.5 McFarland jedinica tipično održava aproksimativno ovaj broj organizama. Konačna koncentracija u rastvoru inokuluma je potvrđena brojanjem na ploči.

[0066] Testiranje bakterija – Za testiranje, inokulira se 9.9 mL svakog testiranog rastvora sa 100 µL suspenzije ćelija P. aeruginosa, dajući konačnu koncentraciju ćelija od približno 1×10<6>JFK/mL. Napominje se da je ovo razblaženje 1:100 polazne kulture sa 1×10<8>JFK/mL. Početna koncentracija ćelija je izračunavana na osnovu brojanja na ploči sa inokuluiumom. Svaki testirani ili kontrolni rastvor je vrednovan u triplikatu. Uzorci su uzimani u vremenu T = 1 s. Svaki uzorak je serijski tazblaživan u PBS (pH 7.0), pa zasejavan u duplikatu na TSA pločama. Sve ploče su, uz invertovanje, inkubirane 24 h na 37°C. Za preostalu zapreminu tretiranog uzorka: 1) svaki uzorak je filtriran kroz membranu filtera od 0.22 μm, i 2) svaki filter je ispiran sa 15 mL sterilne vode. Filter se stavja direktno na TSA ploču i inkubira 24 h (bez invertovanja) na 37°C.

[0067] Analize – Za svaki rastvor broj JFK/mL je logaritamski transformisan (baza 10). U slučajevima kada je brojanje na ploči bilo nula, zamenjena je vrednost 0.5 za jedno od ovih nultih brojanja. Ova supstituisana vrednost je podešavana, zavisno od razblaženja pri zasejavanju ili od filtrirane zapremine. Rezultati za svaka tri eksperimenta su uprosečeni, za određivanje vrednosti logaritma srednje gustine, a izračunavana je sa istim povezana standardna devijacija. Izračunavan je log smanjenja za ove kulture, posle tretiranja sa rastvorom za blokiranje, oduzimanjem logaritma srednje gustine, nakon 24 h od iste u vremenu nula.

Candida albicans

[0068] Candida albicans (reprezentativni fungus/kvasac) raste u kulturi za narastanje sa definisanim log faze. Reprezentativni uzorci kulture se inkubiraju/treatiraju tokom definisanog vremena, sa raznim tečnim nosačima (rastvarač) ili rastvorima za blokiranje. Alikvoti tretiranih uzoraka se zaseju na ploče sa agarom, a nastale kolonije broje posle dovoljno vremena za narastanje, da se oceni efikasnost rastvora za blokiranje i za ubijanje posmatranih organizama.

[0069] Matična kultura Candida albicans ATCC se do korišćenja održava u bloku smrznute matične kulture, na -70°C. Za testiranje koristi se bakterija Candida albicans ATCC # 90028, izolovana iz humane krvi. Suspenzija ćelija se priprema iz smrznute matične kulture, pa kultiviše u TSČ, dajući približno 1×10<8>C. albicans JFK po mililitru. Za poređenje, 0.5 McFarland jedinica tipično održava ovaj aproksimativni broj organizama. Konačna koncentracija rastvora inokuluma je potvrđena korišćenjem brojanja na ploči.

[0070] Testiranje bakterija - Za testiranje, 9.9 mL svakog testiranog rastvora se inokulira sa 100 µL suspenzije ćelija C. albicans, dajući konačnu koncentraciju ćelija od približno 1×10<6>JFK/mL. Napominje se da ovo predstavlja razblaženje 1:100 polazne kulture sa 1×10<8>JFK/mL. Početna koncentracija ćelija se izračunava na osnovu brojanja na ploči inokuluma. Svaki testirani ili kontrolni rastvor je vrednovan u triplikatu. Uzorci su sakupljani u vremenu T = 1 s.

[0071] Uzorkovanje tretiranih organizama za rast – Svaki uzorak je serijski razblaživan u PBS (pH 7.0) i zasejavana na TSA ploče. Sve ploče su zasejavane u duplikatu, pa inkubirane invertovanjem 24 h na 37°C. Za preostalu zapreminu tretiranog uzorka: 1) svaki uzorak je filtriran kroz membranu filtera od 0.22 µm, i 2) svaki filter je ispiran sa 15 mL sterilne vode. Filter se stavja direktno na TSA ploču i inkubira (bez inverzije) 24 h na 37°C.

[0072] Analize – Za svaki rastvor broj JFK/mL je logaritamski transformisan (baza 10). U slučajevima kada je brojanje na ploči bilo nula, zamenjena je vrednost 0.5 za jedno od ovih nultih brojanja. Ovako supstituisana vrednost je podešavana, zavisno od razblaženja pri zasejavanju ili od filtrirane zapremine. Rezultati za svaka tri eksperimenta su uprosečeni, za određivanje vrednosti logaritma srednje gustine, a izračunavana je i sa istim povezana standardna devijacija. Izračunavan je log smanjenja za ove kulture, tretirane sa rastvorom za blokiranje, oduzimanjem logaritma srednje gustine, nakon 24 h od iste u vremenu nula. U Tabeli 3 su sabrani rezultati gore diskutovanog ispitivanja 1.0.

Tabela 3. Rezultati ispitivanja 1.0

Tabela 4. Rezultati ispitivanja koncentracije 2.0

2

Tabela 5. Rezultati ispitivanja 2.0

[0073] Protokoli za Staphylococcus aureus, Staphylococcus epidermidis, Enterococcus fecalis VRE, Escherichia coli, Klebsiella pneumoniae i Serratia marcescens bili su slični ili identični, izuzev za testirani mikroorganizam. Iz ispitivanja 1.0 je jasno da su efikasni natrijum-kaprilat, sa koncentracijom od 0.575 mg/mL, i dinatrijum- EDTA, sa koncentracijom od 0.5 mg/mL, i pH podešenim sa citratnim puferom na 5.0; sa logaritamskim smanjenjem 7-8, za glavne medicinski značajne mikroorganizme. Pored toga, efikasni su natrijum-kaprilat i dinatrijum-EDTA, sa niskom koncentracijom od 0.0625 mg/mL i pH, sa logaritamskim smanjenjem 6-7, za bar jedan medicinski značajan mikroorganizam (npr., Pseudomonas aeruginosa). Ukupno, ispitivanje 1.0 je pokazalo da su rastvori za inhibiranje rasta mikroba, koji imaju C4-C9 karboksilat kao antimikrobni agens i neki agens za helatiranje, sinergistični, pri koncentraciji agensa za helatiranje od 1 mg/mL ili nižoj.

[0074] Kao što je pokazano u tabelama 4-5 (ispitivanje 2.0), dinatrijum-EDTA u citratnom puferu i u navedenoj koncentraciji, dovodi do logaritmskog smanjena 2, ali nije u stanju da potpuno ubije testirane organizme. Međutim, dodatak 1.15 mg/mL natrijum-kaprilata u osnovni dinatrijum-EDTA citratni pufer, dovelo je do logaritamskog smanjenja 8, za testirane organizme.

[0075] Iz ispitivanja 1.0 i 2.0, vrednovane efikasne koncentracije agensa za helatiranje su ispod ranije poznatih koncentracija, i koncentracije koja mnogo smanuje potencijalni rizik od iznenadne srčane smrti, koja je povezana sa višim dozama. Pored toga, ovaj vrednovani rastvor za inhibiranje rasta mikroba, u predloženoj kompoziciji je u stanju da održava intravenozne katetere u "blokiranom" stanju, bez protoka, kao što je pokazano na SLICI.6.

[0076] Pri ovim koncentracijama mikroorganizama, moglo bi se očekivati da je u propustnim intravenoznim sistemima, rastvor za inhibiranje rasta mikroba, u kome su koncentracije agensa za helatiranje u skladu sa ovim pronalaskom, u stanju da održava ove sisteme i efikasno smanjuje ili eliminiše mikroorganizme, kao izvor sistemske infekcije.

[0077] Podrazumeva se da su razne izmene i modifikacije poželjnih realizacija, a koje su ovde opisane, jasne onima koji su verzirani u stanje tehnike.

2

Claims (13)

PATENTNI ZAHTEVI

1. Rastvor za inhibiranje rasta mikroba, koji kao antimikrobni agens sadrži C4-C9 karboksilat, koga čini natrijum-kaprilat, zatim citratni pufer i agens za helatiranje, koga čini dinatrijum etilendiamintetrasirećetna kiselina, gde dinatrijum etilendiamintetrasirćetna kiselina, kao agens za helatiranje, je prisutna u količini koja se kreće od oko 0.0625 mg/mL do oko 1 mg/mL, citratni pufer je prisutan u količini koja se kreće od oko 1.5 do oko 24 mM, i natrijum-kaprilat, kao antimikrobni agens, je prisutan u kojičini koja se kreće od oko 0.071 mg/mL do oko 1.15 mg/mL.

2. Rastvor za inhibiranje rasta mikroba prema Zahtevu 1, što je dinatrijum etilendiamintetrasirćetna kiselina, kao agens za helatiranje, prisutna u količini koja se kreće od oko 0.1 mg/mL do oko 1 mg/mL.

3. Rastvor za inhibiranje rasta mikroba prema Zahtevu 1, što je dinatrijum etilendiamintetrasirćetna kiselina, kao agens za helatiranje, prisutna u količini koja se kreće od oko 0.25 mg/mL do oko 0.5 mg/mL.

4. Rastvor za inhibiranje rasta mikroba prema Zahtevu 1, što sadrži još i neki rastvor farmakološki prihvatljivog nosača.

5. Rastvor za inhibiranje rasta mikroba prema Zahtevu 4, što pomenuti rastvor farmakološki prihvatljivog nosača, čini rastvor soli, Ringer-ov rastvor ili voda, sa podešenim pH na 5.2 ili manje.

6. Postupak za oblaganje medicinskog sistema, što postupak obuhvata

2

izlaganje medicinskog sistema delovanju rastvora za inhibiranje rasta mikroba, tokom dovoljno dugog vremena da se omogući oblaganje izožene površine tog sistema, a pri tome taj rastvor za inhibiranje rasta mikroba kao antimikrobni agens sadrži C4-C9 karboksilat, koga čini natrijum-kaprilat, zatim neki pufer koji sadrži citrat i neki agens za helatiranje, koga čini dinatrijum etilendiamintetrasirćetna kiselina, a pri tome je ova dinatrijum etilendiamintetrasirćetna kiselina, kao agens za helatiranje, prisutna u količini koja se kreće od oko 0.0625 mg/mL do oko 1 mg/mL, citratni pufer, je prisutan u količini od oko 1.5 do oko 24 mM, i natrijum-kaprilat, kao antimikrobni agens, je prisutan u količini od oko 0.071 mg/mL do oko 1.15 mg/mL.

7. Medicinski sistem, obložen sa rastvorom za inhibiranje rasta mikroba, koji kao antimikrobni agens sadrži C4-C9 karboksilat, koga čini natrijum-kaprilat, zatim neki puifer, koga čini citrat, i neki agens za helatiranje, koga čini dinatrijum etilendiamintetrasirćetna kiselina, što je dinatrijum etilendiamintetrasirćetna kiselina, kao agens za helatiranje, prisutna u količini koja se kreće od oko 0.0625 mg/mL do oko 1 mg/mL, citratni pufer je prisutan u količini od oko 1.5 do oko 24 mM, a natrijum-kaprilat, kao antimikrobni agens, je prisutan u količini koja se kreće od oko 0.071 mg/mL do oko 1.15 mg/mL.

8. Medicinski sitem prema Zahtevu 7, što se pomenuti medicinski sistem bira iz grupe uređaja koju čine centralni venozni kateter, periferni intravenozni kateter, arterijski kateter, Swant-Ganz-ov kateter, kateter za hemodijalizu, pupčani kateter, perkutani ne-tunelski silikonski kateter, manžetni tunelski centralni venozni kateter i subkutani centralni venozni uređaj.

9. Komplet za blokiranje i/ili ispiranje implantiranog katetera, gde komplet, se sastoji od:

nekog konntejnera u kome je sadržana zapremina rastvora za inhibiranje rasta mikroba, koji kao antimikrobni agens sadrži neki C4-C9 karboksilat, koga čini natrijum-kaprilat, zatim neki pufer, koji sadrži citrat, i neki agens za helatiranje, koga čini dinatrijum etilendiamintetrasirćetna kiselina, a pri tome je ova dinatrijum etilendiamintetrasirćetna kiselina, kao agens za helatiranje, prisutna u količini koja se kreće od oko 0.0625 mg/mL do oko 1 mg/mL, a citratni pufer je prisutan u količini koja se kreće od oko 1.5 do oko 24 mM, i natrijum-kaprilat, kao antimikrobni agens, je prisutan u količini koja se kreće od oko 0.5 mM do oko 8 mM; i

nekog implantabilnog katetera, čiji kanal prima pomenuti rastvor za inhibiranje rasta mikroba.

10. Komplet prema Zahtevu 9, što pomenuti kontejner predstavlja neki špric.

11. Komplet za blokiranje i/ili ispiranje nekog implantabilnog katetera, što se pomenuti komplet sastoji od:

nekog kontejnera, koji ima prvi odeljak, u kome je kao antimikrobni agens sadržan neki C4-C9 karboksilat, koga čini natrijum-kaprilat, i neki agens za helatiranje u obliku praha, koga čini dinatrijum etilendiamintetrasirćetna kiselina, i drugi odeljak, u kome se drži rastvor farmakološki prihvatljivog nosača,

a pri tome se dinatrijum etilendiamintetrasirćetna kiselina, kao agens za helatiranje, koja je prisutna u sadržaju koji se kreće od oko 0.0625 mg/mL do oko 1 mg/mL, i natrijum-kaprilat, kao antimikrobni agens, koji je prisutan u količini koja se kreće od oko 0.071 mg/mL do oko 1.15 mg/mL, pomešaju sa rastvorom farmakološki prihvatljivog nosača, a pri tome pomenuti prvi odeljak ili drugi odeljak sadrže još i neki citratni pufer, prisutan u količini koja se kreće od oko 1.5 do oko 24 mM.

12. Komplet prema Zahtevu 11, što pomenuti kontejner sadrži neki implantabilni kateter sa kanalom.

13. Komplet prema Zahtevu 11, što pomenuti kontejner predstavlja neki špric.

2