RS57961B1

RS57961B1 - Novi derivati aminokiselina, postupak njihove izrade i farmaceutske kompozicije koje ih sadrže

Info

Publication number: RS57961B1
Application number: RS20181327A
Authority: RS
Inventors: Zoltán Szlávik; Zoltán Szabó; Márton Csékei; Attila Paczal; András Kotschy; Alain Bruno; Olivier Geneste; I-Jen Chen; James Edward Paul Davidson; James Brooke Murray; Levente Ondi; Gábor Radics; Szabolcs Sipos; Ágnes Proszenyák; Françoise Perron-Sierra; Balázs Bálint
Original assignee: Servier Lab; Vernalis R&D Ltd
Priority date: 2015-06-23
Filing date: 2016-06-22
Publication date: 2019-01-31
Also published as: GEP20207075B; CL2017003163A1; CA2990089A1; KR20180015261A; FR3037956B1; TN2017000521A1; RU2747673C2; CU20170164A7; AU2016282837B2; ES2703997T3; WO2016207226A1; MX368845B; CY1120991T1; FR3037956A1; TWI631124B; PE20190111A1; US20190031675A1; JP2018522856A; MA42232A; CA2990089C

Description

Opis

Ovaj pronalazak se odnosi na nove derivate aminokiselina, na postupak njihovog dobijanja i i na farmaceutske kompozicije koje ih sadrže.

Jedinjenja ovog pronalaska su nova i ispoljavaju farmakološke osobine koje su veoma korisne u domenu apoptoze i onkologije.

Apoptoza, ili programirana ćelijska smrt, je fiziološki proces, koji je ključan za embrionalni razvoj i održavanje tkivne homeostaze.

Ćelijska smrt apoptotskog tipa će prouzrokovati morfološke promene, kao što je kondenzacija jezgra, fragmentacija DNA, kao i biohemijske fenomene, kao što je aktivacija kaspaza koje će degradirati ključne ćelijske strukturne komponente, kako indukuju ćelijsko rasklapanje i njenu smrt. Regulacija procesa apoptoze je složena i obuhvata aktivaciju ili represiju više puteva unutarćelijske signalizacije (Cory S. et al., Nature Review Cancer, 2002, 2, 647-656).

Deregulacija apoptoze je upletena u izvesne patologije. Intenzivnija apoptoza se povezuje sa neurodegenerativnim bolestima, kao što je Parkinsonova bolest, Alzheimerova bolest i ishemija. Suprotno, nedovoljno odigravanje apoptoze igra važnu ulogu u razvoju kancera i njihove hemorezistencije, auto-imunih bolesti, inflamatornih bolesti i virusnih infekcija. Dakle, slabljenje apoptoze je deo fenotipskih karakteristika kancera (Hanahan D. et al., Cell 2000, 100, 57-70).

Anti-apoptotski proteini familije Bcl-2 su povezani sa brojnim patologijama. Povezanost proteina familije Bcl-2 je opisana kod brojnih vrsta kancera, kao što je kancer debelog creva, kancer dojke, mikrocelularni kancer pluća, nemikrocelularni kancer pluća, kancer bešike, kancer jajnika, kancer prostate, hroničnih limfoidnih leukemija, limfoma, mijeloma, akutne mijeloidne leukemije, kancer pankreasa, itd. Prekomerna ekspresija anti-apoptotskih proteina Bcl-2 familije povezuje se sa tumorogenezom, rezistencijom na hemoterapiju i kliničkim prognozama pacijenata koji boluju od kancera. Pre svega se Mcl-1, član anti-apoptotske Bcl-2 familije, prekomerno ekspresuje u raznim vrstama kancera (Beroukhim R. et al., Nature 2010, 899-905). WO 2013/110890 izlaže Bcl-2 inhibitore. Postoji, zbog toga, terapeutska potreba za jedinjenjima koja inhibiraju anti-apoptotsku aktivnost proteina Bcl-2 familije.

Jedinjenja ovog pronalaska, osim š to su nova, poseduju pro-apoptotska svojstva koja im omogućavaju da se koriste za patologije koje podrazumevaju greške u apoptozi, kao na primer, za lečenje kancera, imunih i auto-imunih bolesti. Ovaj pronalazak se preciznije odnosi na jedinjenja formule (I):

u kojoj:

♦ A predstavlja grupu

u kojoj je1 povezan sa -NH- grupom i 2 je povezan sa aromatičnim prstenom,

♦ E predstavlja cikloalkil grupu, heterocikloalkil grupu, aril grupu ili heteroaril grupu,

♦ X predstavlja atom azota ili C-R4grupu,

♦ Y predstavlja atom azota ili C-R3grupu,

♦ R1predstavlja a halogen atom, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)polihaloalkil grupu, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9’, -NR9-C(O)-R9’, -NR9-C(O)-OR9’, -alkil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9’, -SO2-NR9R9’, -SO2-alkil(C1-C6), ♦ R2, R3, R4i R5nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika, atom halogena, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)polihaloalkil grupu, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-R10, C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9’, -NR9-C(O)-R9’, -NR9-C(O)-OR9’, -alkil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9’, -SO2-NR9R9’, ili -SO2-alkil(C1-C6),

ili supstituenti para (R1, R2) formiraju zajedno sa atomima ugljenika koji ih nose aromatičan ili nearomatičan prsten sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji može imati od 1 do 3 heteroatoma odabranih od kiseonika, sumpora i azota, pri čemu se podrazumeva da nastali prsten može biti supstituisan sa od 1 do 2 grupe odabrane od: halogena, linearnog ili razgranatog (C1-C6)alkila, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -NR11R11’, -alkil(C0-C6)-Cy1, ili okso,

♦ R6predstavlja atom vodonika, atom halogena, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)polihaloalkil grupu, hidroksi grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -O-Cy1, -alkil(C0-C6)-Cy1, -alkenil(C2-C6)-Cy1, -alkinil(C2-C6)-Cy1, -O-alkil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9’, -NR9-C(O)-R9’, -NR9-C(O)-OR9’, -alkil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9’, -SO2-NR9R9’, ili -SO2-alkil(C1-C6),

♦ R7predstavlja atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C8)alkil grupu, -CHRaRbgrupu, aril grupu, heteroaril grupu, arilalkil(C1-C6) grupu, ili heteroarilalkil(C1-C6) grupu,

♦ R8predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, -Cy2, atom halogena, cijano grupu, -C(O)-R11, ili -C(O)-NR11R11’,

♦ R9i R9’ nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, ili supstituenti para (R9, R9’) formiraju zajedno sa atomom azota koji ih nosi aromatičan ili nearomatičan prsten sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji osim atoma azota može imati od 1 do 3 heteroatoma, odabranih od kiseonika sumpora i azota, pri čemu se podrazumeva da azot koji je u pitanju može biti supstituisan grupom koja predstavlja atom vodonika, ili linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu,

♦ R10predstavlja -Cy3, -Cy3-alkil(C0-C6)-Cy4, -C(O)-NR9R9’, -NR9R9’, -OR9, -NR9-C(O)-R9’, -O-alkil(C1-C6)-OR9, -SO2-R9, -C(O)-OR9, ili -NH-C(O)-NH-R9,

♦ R11i R11’ nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika ili opciono supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu,

♦ R12predstavlja atom vodonika, hidroksi grupu, ili hidroksi(C1-C6)alkil grupu,

♦ Rapredstavlja atom vodonika ili linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu,

♦ Rbpredstavlja -O-C(O)-O-Rcgrupu, -O-C(O)-NRcRc’ grupu, ili -O-P(O)(ORc)2grupu, ♦ Rci Rc’ nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C8)alkil grupu, cikloalkil grupu, (C1-C6)alkoksi(C1-C6)alkil grupu, (C1C6)alkoksikarbonil(C1-C6)alkil grupu, ili supustituenti para (Rc, Rc’) formiraju zajedno sa atomom azota koji ih nosi nearomatični prsten koji je sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji osim atoma azota može imati od 1 do 3 heteroatoma, odabranih od kiseonika i azota, pri čemu se podrazumeva da azot koji je u pitanju može biti supstituisan grupom koja predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu,

♦ Cy1, Cy2, Cy3i Cy4nezavisno jedan od drugog, predstavljaju cikloalkil grupu, heterocikloalkil grupu, aril grupu ili heteroaril grupu,

♦ n je ceo broj, koji iznosi 0, 1 ili 2,

pri čemu se podrazumeva da:

- "aril" označava fenil, naftil, bifenil grupu,

- "heteroaril" označava svaku mono- ili bi-cikličnu grupu, sastavljenu od 5 do 10 članova prstena, koja ima najmanje jedan aromatičan deo i sadrži od 1 do 3 heteroatoma odabranih od: kiseonika, sumpora i azota,

- "cikloalkil" označava svaku mono- ili bi-cikličnu nearomatičnu karbocikličnu grupu, koja sadrži od 3 do 10 članova prstena,

- "heterocikloalkil označava svaku mono- ili bi-cikličnu nearomatičnu karbocikličnu grupu, koja sadrži od 3 do 10 članova prstena, kao i od 1 do 3 heteroatoma, odabranih od: kiseonika, sumpora i azota, koja može obuhvatiti spojene, premošćene ili spiro prstenaste sisteme,

moguće je za aril, heteroaril, cikloalkil i heterocikloalkil grupe tako definisane i alkil, alkenil, alkinil, alkoksi grupe, da budu supstituisane sa od 1 do 4 grupe, odabrane od: opciono supstituisanog linearnog ili razgranatog (C1-C6)alkila, opciono supstituisanog linearnog ili razgranatog (C2-C6)alkenila, opciono supstituisanog linearnog ili razgranatog (C2-C6)alkinila, opciono supstituisanog linearnog ili razgranatog (C1-C6)alkoksi, opciono supstituisanog (C1-C6)alkil-S-, hidroksi, hidroksi(C1-C6)alkila, okso (ili N-oksida gde je odgovarajuće), nitro, cijano, -C(O)-OR’, -O-C(O)-R’, -C(O)-NR’R", -OC(O)-NR’R", -NR’R", -(C=NR’)-OR", -O-P(O)(OR’)2, -O-P(O)(O-M<+>)2, linearnog ili razgranatog (C1-C6)polihaloalkila, trifluorometoksi, halogena, ili aldoheksoza formula:

gde je svaki R’ nezavisan;

pri čemu se podrazumeva da R’ i R" nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika ili opciono supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu i M<+>predstavlja farmaceutski prihvatljiv monovalentan katjon,

njihove enantiomere, dijastereoizomere i atropoizomere i, njihove adicione soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom.

Povoljno, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenja koja imaju formulu (I) u kojoj:

♦ R1i R2nezavisno jedan od drugog, predstavljaju halogen atom, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, ili supstituenti para (R1, R2) formiraju, zajedno sa atomima ugljenika koji ih nose, aromatičan prsten sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji može imati 1 do 3 atoma azota, pri čemu se podrazumeva da dobijeni prsten može biti supstituisan sa od 1 do 2 grupe, odabrane od: halogena, linearnog ili razgranatog (C1-C6)alkila, ili -alkil(C0-C6)-NR9R9’,

♦ R3predstavlja atom vodonika, halogen atom, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, hidroksi grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, ili -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’, ♦ R4i R5nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika, halogen atom, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, hidroksi grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, ♦ R6predstavlja atom vodonika, halogen atom, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)polihaloalkil grupu, hidroksi grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -alkil(C0-C6)-Cy1, -O-alkil(C1-C6)-R10ili -C(O)-NR9R9’,

♦ R7predstavlja atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C8)alkil grupu, -CHRaRbgrupu, ili heteroarilalkil(C1-C6) grupu,

♦ R8predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, -Cy2, halogen atom, ili -C(O)-R11,

♦ R9i R9’ nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, ili supstituenti para (R9, R9’) formiraju zajedno sa atomom azota koji ih nosi nearomatičan prsten sastavljen od 5 do 7 članova prstena, koji može imati, osim atoma azota, od 1 do 3 heteroatoma, odabrana od kiseonika i azota, pri čemu se podrazumeva da azot koji je u pitanju može biti supstituisan grupom koju predstavlja linearna ili razgranata (C1-C6)alkil grupa,

♦ R10predstavlja -Cy3ili -Cy3-alkil(C0-C6)-Cy4,

♦ R11predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu,

moguće je za aril, heteroaril, cikloalkil i heterocikloalkil grupe tako definisane i alkil, alkenil, alkinil, alkoksi grupe, da budu supstituisane sa od 1 do 4 grupe, odabrane od opciono supstituisanog linearnog ili razgranatog (C1-C6)alkila, opciono supstituisanog linearnog ili razgranatog (C1-C6)alkoksi, hidroksi, hidroksi(C1-C6)alkila, okso (ili N-oksida gde odgovara), -C(O)-OR’, -C(O)-NR’R", -O-C(O)-NR’R", -NR’R", -O-P(O)(OR’)2, -O-P(O)(O-M<+>)2, linearnog ili razgranatog (C1-C6)polihaloalkila, halogena, ili aldoheksoze formule:

gde je svaki R’ nezavisan;

pri čemu se podrazumeva da R’ i R" nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika ili opciono supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu i M<+>predstavlja farmaceutski prihvatljiv monovalentan katjon.

Od farmaceutski prihvatljivih kiselina, mogu se pomenuti, bez namere ikakvog ograničavanja, hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, sumporna kiselina, fosforna kiselina, sirćetna kiselina, trifluorosirćetna kiselina, mlečna kiselina, piruvatna kiselina, malonska kiselina, jantarna kiselina, glutarna kiselina, fumarna kiselina, vinska kiselina, maleinska kiselina, limunska kiselina, askorbinska kiselina, oksalna kiselina, metansulfonska kiselina, kamforna kiselina itd.

Od farmaceutski prihvatljivih baza, mogu se pomenuti, bez namere ikakvog ograničavanja, natrijum hidroksid, kalijum hidroksid, trietilamin, terc-butilamin itd.

Preciznije, jedinjenja koja imaju formulu (I), kojima se daje prednost, su jedinjenja u kojima je n ceo broj koji iznosi 1.

U drugom ostvarenju pronalaska, povoljne mogućnosti čine jedinjenja koja imaju formulu (I-a):

gde su A, E, R1, R2, R5, R6, R7, R12, X, Y i n kao što su definisani za formulu (I).

Atropoizomeri su stereoizomeri koji se pojavljuju zbog ometene rotacije oko jednostruke veze, gde energetske razlike, zahvaljujući sternom naprezanju ili drugim doprinosima, stvaraju prepreku za rotiranje koja je dovoljno snažna da omogući izolovanje pojedinačnih konformera. Za jedinjenja prema pronalasku, atropoizomeri su kako slede:

Poželjni atropoizomer je (5Sa) kada X predstavlja C-R4grupu i Y predstavlja C-R3grupu.

Povoljno, najmanje jedna od grupa odabranih od R2, R3, R4i R5ne predstavlja atom vodonika.

Poželjno, R12predstavlja atom vodonika, hidroksimetil grupu ili hidroksietil grupu. Poželjnije, R12predstavlja atom vodonika.

U jedinjenjima pronalaska koja imaju prednost, R1predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu ili atom halogena. Poželjnije, R1predstavlja metil grupu, etil grupu, atom broma ili atom hlora. Čak poželjnije, R1predstavlja metil grupu.

Povoljno, R2predstavlja atom halogena, hidroksi grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu. Poželjnije, R2predstavlja metoksi grupu, hidroksi grupu, atom fluora, atom broma ili atom hlora. Čak je poželjnije da R2predstavlja atom hlora.

U izvesnom poželjnom ostvarenju pronalaska, kada supstituenti para (R1, R2) formiraju zajedno sa atomima ugljenika koji ih nose aromatičan prsten,

gde R13predstavlja atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu ili -alkil(C0-C6)-NR9R9’ u kojoj su R9i R9’ kao što su definisani za formulu (I), a R14predstavlja atom vodonika, atom halogena ili linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu.

R13predstavlja poželjno atom vodonika, metil grupu ili -(CH2)m-NR9R9’ u kojoj je m ceo broj i iznosi 2 ili 3 a, R9i R9’ predstavljaju metil grupu ili supstituenti para (R9, R9’) formiraju zajedno sa atomom azota koji ih nosi pirolidinil, piperidinil, morfolinil ili 4-metil-piperazin-1-il grupu.

R14predstavlja povoljno atom vodonika, atom broma, atom joda, atom hlora ili metil grupu. R14je poželjno supstituisan na β položaju u odnosu na atom azota.

Poželjno, X predstavlja C-R4grupu. U poželjnom ostvarenju pronalaska, Y predstavlja C-R3grupu. R3povoljno predstavlja atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu ili -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’. R4poželjno predstavlja atom vodonika.

U izvesnom poželjnom ostvarenju pronalaska,

predstavlja

gde su R1, R2, R9i R9’ kao što su definisani za formulu (I).

U poželjnim jedinjenjima pronalaska,

predstavlja

gde su R9i R9’ kao što su definisani za formulu (I).

R5poželjno predstavlja atom vodonika.

U povoljnom ostvarenju, supstituenti para R5) su identični i supstituenti para (R2, R4) su identični. U poželjnim jedinjenjima pronalaska, supstituenti para (R1, R5) su identični i predstavljaju (C1-C6)alkil grupu, poželjno metil grupu, dok supstituenti para (R2, R4) su identični i predstavljaju atom halogena, poželjno atom hlora, ili atom vodonika.

U drugom ostvarenju pronalaska, E predstavlja fenil grupu, piridin-2-il, cikloheksil grupu, pirazol-1-il grupu, ciklopentil grupu, indol-4-il grupu, ciklopropil grupu, piridin-3-il grupu, indol-3-il grupu, naft-1-il grupu, imidazol-4-il grupu ili piridin-4-il grupu. Povoljno, E predstavlja fenil grupu.

U poželjnim jedinjenjima pronalaska, R6predstavlja atom vodonika; atom fluora; atom hlora; atom broma; metil grupu; trifluorometil grupu; hidroksi grupu; metoksi grupu; linearnu (C1-C6)alkoksi grupu supstituisanu halogenim atomima, -C(O)-NR’R" grupu ili -NR’R" grupu; cijano; nitro grupu; aminometil grupu; benzil grupu; -O-alkil(C1-C6)-R10; -C(O)-NR9R9’. Poželjno, R6predstavlja metoksi grupu, 2,2,2-trifluoroetoksi grupu ili -O-alkil(C1-C6)-R10.

U drugom ostvarenju pronalaska, korisne mogućnosti se sastoje u jedinjenjima koja imaju formulu (I-b):

u kojoj su R1, R2, R5, R6, R7, R12, X, Y, A i n kao što su definisani za formulu (I).

U drugom ostvarenju pronalaska, korisne mogućnosti se sastoje u jedinjenjima koja imaju formulu (I-c):

u kojoj su R6, R7, R9, R9’, R12i A kao što su definisani za formulu (I).

Poželjno, R7predstavlja atom vodonika, -CHRaRbgrupu, opciono supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C8)alkil grupu, ili heteroarilalkil(C1-C6)grupu. Ppoželjno, R7predstavlja -CHRaRbgrupu u kojoj Rapredstavlja atom vodonika ili metil grupu dok Rbpredstavlja -O-C(O)-O-(C1-C8)alkil grupu; -O-C(O)-O-cikloalkil grupu; -O-C(O)-NRcRc’ grupu, u kojoj Rci Rc’ nezavisno jedan od drugog predstavljaju atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C8)alkil grupu, (C1-C6)alkoksi(C1-C6)alkil grupu, (C1-C6)alkoksikarbonil(C1-C6)alkil grupu, ili supstituenti para (Rc, Rc’) formiraju zajedno sa atomom azota koji ih nosi nearomatični prsten sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji osim atoma azota može imati od 1 do 3 heteroatoma, odabranih od kiseonika i azota; ili -O-P(O)(OH)2grupu. Poželjne R7grupe su kako sledi: vodonik; metil; etil; (5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil; -CHRaRbgrupa u kojoj Rapredstavlja metil grupu i Rbpredstavlja -O-C(O)-OCH2CH3grupu ili -O-C(O)-N(CH3)2grupu. Još bolje, R7predstavlja vodonik.

U poželjnim jedinjenjima pronalaska, R8predstavlja linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, aril grupu ili heteroaril grupu. Poželjnije, R8predstavlja prop-1-in-1-il grupu, fenil grupu ili furan-2-il grupu. U poželjnijem ostvarenju, R8predstavlja prop-1-in-1-il grupu, 4-fluorofenil grupu ili 5-fluorofuran-2-il grupu. Još bolje, R8predstavlja 4-fluorofenil grupu.

U poželjnim jedinjenjima pronalaska, R9i R9’ nezavisno jedan od drugog, predstavljaju linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, ili supstituenti para (R9, R9’) formiraju zajedno sa atomom azota koji ih nosi nearomatični prsten sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji, osim atoma azota, može imati od 1 do 3 heteroatoma, odabrana od kiseonika i azota, pri čemu se podrazumeva da azot koji je u pitanju može biti supstituisan linearnom ili razgranatom (C1-C6)alkil grupom. Poželjnije, R9i R9’ predstavljaju metil grupu, ili supstituenti para (R9, R9’) zajedno formiraju 4-metil-piperazinil grupu.

Povoljno, R10predstavlja -Cy3ili -Cy3-alkil(C0-C6)-Cy4. Poželjno, R10predstavlja -Cy3ili -Cy3-Cy4.

Cy3poželjno predstavlja cikloalkil grupu, naročito, ciklopentil grupu. U poželjnom ostvarenju, Cy3predstavlja aril grupu, naročito, fenil grupu. Povoljno, Cy3predstavlja heteroaril grupu, naročito, pirimidinil grupu, pirazolil grupu ili piridinil grupu. Poželjnije, Cy3predstavlja pirimidin-4-il grupu, pirazol-5-il grupu ili piridin-2-il grupu. U poželjnim ostvarenjima pronalaska, Cy3predstavlja pirimidin-4-il grupu. U drugom ostvarenju pronalaska, Cy3predstavlja heteroaril grupu koja je supstituisana opciono supstituisanom linearnom ili razgranatom (C1-C6)alkil grupom, opciono supstituisanom linearnom ili razgranatom (C1-C6)alkoksi grupom ili linearnom ili razgranatom (C1-C6)polihaloalkil grupom. Poželjno, Cy3predstavlja heteroaril grupu koja je supstituisana sa 2,2,2-trifluoroetoksi grupom, 2-metoksietil grupom, etoksi grupom; terc-butil grupom, etil grupom, n-butil grupom, 2,2,2-trifluoroetil grupom ili metil grupom.

Cy4poželjno predstavlja fenil grupu, piridinil grupu, piridazinil grupu, pirazinil grupu, pirimidinil grupu ili morfolinil grupu. Poželjnije, Cy4predstavlja fenil grupu.

Druga jedinjenja pronalaska, kojima se daje prednost su ona u kojima, R10predstavlja

gde je p ceo broj i iznosi 0 ili 1 i R15predstavlja atom vodonika, hidroksi grupu, opciono supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -O-(CHR16-CHR17-O)q-R’ grupu, -O-P(O)(OR’)2grupu, -O-P(O)(O-M<+>)2grupu, -O-C(O)-NR18R19grupu, di(C1-C6)alkilamino(C1-C6)alkoksi grupu, atom halogena ili aldoheksozu formule:

pri čemu je svako R’ nezavisno;

pri čemu se podrazumeva da:

♦ R’ predstavlja atom vodonika ili linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu,

♦ R16predstavlja atom vodonika ili (C1-C6)alkoksi(C1-C6)alkil grupu,

♦ R17predstavlja atom vodonika ili hidroksi(C1-C6)alkil grupu,

♦ R18predstavlja atom vodonika ili (C1-C6)alkoksi(C1-C6)alkil grupu,

♦ R19predstavlja (C1-C6)alkoksi(C1-C6)alkil grupu, -(CH2)r-NR9R9’ grupu ili -(CH2)r-O-(CHR16-CHR17-O)q-R’ grupu,

♦ q je ceo broj i iznosi 1, 2 ili 3 i r je ceo broj i iznosi 0 ili 1,

♦ M<+>predstavlja farmaceutski prihvatljiv monovalentan katjon.

Aldoheksoza prema pronalasku je poželjno D-manoza. Korisno, R15predstavlja metoksi grupu, 2-metoksietoksi grupu ili fluor. Poželjno, grupa -(CH2)p-R15je locirana u orto položaju fenil grupe.

Od poželjnih jedinjenja pronalaska se mogu pomenuti:

- N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-[(1-metil-1H-pirazol-5-il)metoksi]-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-[(2-etoksipirimidin-4-il)metoksi]-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(furan-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-metoksi-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-metoksi-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-(2,2,2-trifluoroetoksi)-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-(piridin-2-ilmetoksi)-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-[(1-metil-1H-pirazol-5-il)metoksi]-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-[(1-etil-1H-pirazol-5-il)metoksi]-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-[(2-etoksipirimidin-4-il)metoksi]-D-fenilalanin

- 2-[(1-butil-1H-pirazol-5-il)metoksi]-N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi] fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoksi)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-metoksi-D-fenilalanin

- 2-[(1-terc-butil-1H-pirazol-5-il)metoksi]-N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metil piperazin-1-il) etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksietil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[1-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-pirazol-5-il]metoksi}-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(morfolin-4-il)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoksi)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[1-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-pirazol-5-il]metoksi}-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(morfolin-4-il)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoksi)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

- N-[5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[2-(2-metoksietoksi)fenil]pirimidin-4-il}metoksi)-D-fenilalanin

- etil N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalaninat

- etil N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalaninat

- etil N-[(5Sa)-5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalaninat

- N-[5-{3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

Pronalazak se isto tako odnosi na postupak za proizvodnju jedinjenja koja imaju formulu (I), pri čemu se postupak odlikuje time što se kao polazni materijal koristi jedinjenje koje ima formulu (II-a):

u kojoj Z predstavlja brom ili jod i A je kao što su definisano za formulu (I) gde 1 je povezan sa atomom hlora dok je 2 povezan za Z grupu,

pri čemu se jedinjenje koje ima formulu (II-a) podvrgava kuplovanju sa jedinjenjem formule (III):

u kojoj su R6, R12, E i n kao š to su definisani za formulu (I), a Alk predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6) alkil grupu, da bi se dobilo jedinjenje koje ima formulu (IV):

u kojoj su R6, R12, A, E i n kao što su definisani za formulu (I) a, Z i Alk su kao što su prethodno definisani,

jedinjenje koje ima formulu (IV) se dalje podvrgava kuplovanju sa jedinjenjem koje ima formulu (V):

u kojoj su R1, R2, R5, X i Y kao š to su definisani za formulu (I), a RB1i RB2predstavljaju atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6) alkil grupu, ili RB1i RB2formiraju sa kiseonikom koji ih nosi opciono metilovani prsten, da bi se dobilo jedinjenje koje ima formulu (VI):

u kojoj su R1, R2, R5, R6, R12, X, Y, A, E i n kao što su definisani za formulu (I) i Alk je kao što je prethodno definisan, Alk-O-C(O)- estarska funkcija jedinjenja formule (VI) se hidrolizuje da bi se dobila karboksilna kiselina, koja opciono može reagovati sa alkoholom formule R7’-OH ili hlorovanim jedinjenjem formule R7’-Cl gde R7’ predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C8)alkil grupu, -CHRaRbgrupu, aril grupu, heteroaril grupu, arilalkil(C1-C6) grupu, ili heteroarilalkil(C1-C6) grupu, Rai Rbsu kao što su definisani za formulu (I),

da bi se dobilo jedinjenje koje ima formulu (I), koje se može prečistiti prema konvencionalnim tehnikama razdvajanja, koje se prevodi, ukoliko se želi, u svoju adicionu so sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom i, koje se opciono razdvaja u svoje izomere prema konvencionalnim tehnikama razdvajanja,

razume se da u svakom momentu za koji se smatra da je odgovarajuć u toku gore opisanog procesa, neke grupe (hidroksi, amino...) polaznih reagenasa ili sintetskih intermedijera mogu da se zaštite, potom da im se ukloni zaštita i da se funkcionalizuju, kako se sintezom zahteva.

U drugom ostvarenju pronalaska, jedinjenja koja imaju formulu (I) mogu da se dobiju primenom alternativnog postupka, pri čemu se postupak odlikuje time da se kao polazni materijal koristi jedinjenje koje ima formulu (II-b):

u kojoj je A definisano u formuli (I) pri čemu je 1 povezano sa atomom hlora i 2 je povezano sa atomom joda,

u kome se jedinjenje koje ima formulu (II-b) podvrgava kuplovanju sa jedinjenjem koje ima formulu (V):

u kojoj su R1, R2, R5, X i Y kao š to su definisani za formulu (I), a RB1i RB2predstavljaju atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6) alkil grupu, ili RB1i RB2formiraju sa kiseonikom koji ih nosi opciono metilovani prsten, da bi se dobilo jedinjenje koje ima formulu (VII):

u kojoj su R1, R2, R5, A, X i Y kao što su definisani za formulu (I),

pri čemu se jedinjenje formule (VII) dalje podvrgava kuplovanju sa jedinjenjem koje ima formulu (III):

u kojoj su R6, R12, E i n kao š to su definisani za formulu (I), a Alk predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6) alkil grupu, da bi se dobilo jedinjenje koje ima formulu (VI):

Jedinjenja koja imaju formule (II-a), (II-b), (III), (V), R7’-OH i R7’-Cl se ili mogu kupiti ili ih stručna lica u ovoj oblasti mogu dobiti primenom konvencionalnih hemijskih reakcija, koje su opisane u literaturi.

Farmakološka ispitivanja jedinjenja pronalaska su pokazala da ona imaju proapoptotska svojstva. Mogućnost reaktivacije procesa apoptoze u kanceroznim ćelijama je glavni terapeutski interes u lečenju kancera i imunih i auto-imunih bolesti.

Preciznije, jedinjenja prema pronalasku koristiće se za lečenje hemo- ili radiorezistentnih kancera.

Od razmatranih tretmana kancera mogu se navesti, bez ograničavanja na ove, tretman kancera bešike, mozga, dojke i materice, hronične limfoidne leukemije, kancera debelog creva, jednjaka i jetre, limfoblastne leukemije, akutne mijeloidne leukemije limfoma, melanoma, malignih hemopatija, mijeloma, kancera jajnika, nemikrocelularnog kancera pluća, kancera prostate, kancera pankreasa i mikrocelularnog kancera pluća.

Predmet ovog pronalaska su, takođe i farmaceutske kompozicije koje sadrže najmanje jedno jedinjenje formule (I) zajedno sa jednom ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa.

Od farmaceutskih kompozicija prema pronalasku, mogu se navesti, posebno one koje su prikladne za primenjivanje oralno, parenteralno, nazalno, per- ili trans-kutano, rektalno, perlingvalno, okularno ili respiratornim putem, a pre svih, tablete ili dražeje, sublingvalne tablete, kesice, pakovanja, kapsule, glosete, lozenge, supozitorije, kreme, masti, gelovi za kožu, ampule sa sadržajem za pijenje ili injektabilni preparati.

Doziranje je promenljivo u zavisnosti od pola, starosti i težine pacijenta, načina primene leka, prirode terapeutske indikacije, ili opciono udruženih tretmana i, kreće se između 0,01 mg i 1 g na 24 časa u jednoj ili više doza.

Osim toga, ovaj pronalazak se, isto tako, odnosi na spregu jedinjenja formule (I) sa antikanceroznim sredstvom, koje se bira od: genotoksičnih sredstava, otrova mitoze, antimetabolita, inhibitora proteazoma, inhibitora kinaze i antitela, kao i na farmaceutske kompozicije koje sadrže ovu vrstu sprege i njihovo korišćenje u proizvodnji lekova koji se koriste za lečenje kancera.

Povoljno, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja koje ima formulu (I) sa EGFR inhibitorom, kao isto tako na farmaceutske kompozicije koje sadrže ovu vrstu kombinacije.

U drugom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja koje ima formulu (I) sa mTOR/PI3K inhibitorom, kao takođe na farmaceutske kompozicije koje sadrže ovu vrstu kombinacije.

U poželjnom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja koje ima formulu (I) sa MEK inhibitorom, kao i na farmaceutske kompozicije koje sadrže ovu vrstu kombinacije. Poželjno, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja koje ima formulu (I) sa HER2 inhibitorom, kao i na farmaceutske kompozicije koje sadrže ovu vrstu kombinacije.

Povoljno, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja koje ima formulu (I) sa RAF inhibitorom, kao i na farmaceutske kompozicije koje sadrže ovu vrstu kombinacije.

U drugom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja koje ima formulu (I) sa EGFR/HER2 inhibitorom, kao i na farmaceutske kompozicije koje sadrže ovu vrstu kombinacije.

U poželjnom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja koje ima formulu (I) sa taksanom, kao i na farmaceutske kompozicije koje sadrže ovu vrstu kombinacije.

U drugom ostvarenju, ovaj pronalazak se odnosi na kombinaciju jedinjenja koje ima formulu (I) sa inhibitorom proteazoma, imunomodulatorom ili alkilirajućim sredstvom, kao i na farmaceutske kompozicije koje sadrže ovu vrstu kombinacije.

Kombinacija jedinjenja koje ima formulu (I) sa antikancerskim agensom može da se primenjuje istovremeno ili uzastopno. Put primenjivanja je poželjno oralni put i, odgovarajuće farmaceutske kompozicije mogu omogućiti neposredno ili produženo oslobađanje aktivnih sastojaka. Jedinjenja kombinacije mogu, sem toga, biti primenjena u vidu dve zasebne farmaceutske kompozicije, od kojih svaka sadrži po jedan aktivni sastojak, ili u vidu jedne farmaceutske kompozicije, u kojoj su aktivni sastojci izmešani.

Jedinjenja pronalaska mogu se primeniti u kombinaciji sa radioterapijom u lečenju kancera.

Na kraju, jedinjenja pronalaska mogu se povezati sa monoklonskim antitelima ili sa fragmentima ovih ili se mogu povezati sa gradivnim proteinima, koji mogu ili ne moraju biti srodni sa monoklonskim antitelima.

Pod fragmentima antitela, podrazumevaju se fragmenti tipa Fv, scFv, Fab, F(ab’)2, F(ab’), scFv-Fc, ili diantitela, koja generalno imaju istu specifičnost vezivanja kao i antitela od kojih su proizašli. Prema ovom pronalasku, fragmenti antitela pronalaska se mogu dobiti polazeći od antitela, pomoću postupaka, kao što su digestija enzimima, kao što su pepsin ili papain, i/ili pomoću otcepljivanja disulfidnih mostova putem hemijske redukcije. Drugačije, fragmenti antitela koji su obuhvaćeni ovim pronalaskom mogu da se dobiju tehnikama genetskog rekombinovanja, koje su isto tako dobro poznate stručnim licima u ovoj oblasti ili pak, sintezom peptida pomoću automatskih sintetizera peptida na primer, kao š to su oni kojima snabdeva društvo Applied Biosystems itd.

Pod gradivnim proteinima, koji mogu ili ne moraju biti srodni sa monoklonskim antitelima, podrazumeva se protein koji obuhvata, ili ne, jednu repliku imunoglobulina i koji ispoljava mogućnost vezivanja sličnu onoj kao kod monoklonskih antitela. Stručno lice zna kako selektovati gradivan protein. Preciznije, poznato je da, da bi bio selektovan, jedan takav gradivni derivat ispoljava nekoliko osobina, kao š to su sledeće (Skerra A., J. Mol. Recogn. 13, 2000, 167-187): dobru filogenetsku konzerviranost, robustnu strukturu sa dobro poznatom trodimenzionalnom molekulskom organizacijom (kao kristalografija ili NMR, na primer), malu veličinu, bez ili sa neznatnim post-translacionim modifikacijama, lakoća dobijanja, ekspresije i prečišćavanja. Jedan takav gradivan protein može biti, bez ograničavanja na ove, struktura odabrana iz grupe koju č ine: fibronektin i pre svega deseti domen tip III fibronektina (FNfn10), lipokalin, antikalin (Skerra A., J. Biotechnol., 2001, 74(4):257-75), protein Z izveden od domena B stafilokoknog proteina A, tioredoksin A ili jedan protein ili drugi sa domenom koji se ponavlja, kao š to je jedan "ponavljanje ankirina" (Kohl et al., PNAS, 2003, vol.100, no.4, 1700-1705), jedan "ponavljanje armadillo", jedan "ponavljanje bogatog u leucinu" ili jedan "ponavljanje tetratrikopeptida". Može se, isto tako, pomenuti gradivni derivat toksina (kao toksini škorpija, insekata, biljaka ili dupljara, na primer) ili proteini koji inhibiraju oksid azotnu sintazu (PIN).

Sledeće izrade i primeri ilustruju pronalazak ali ga ni na koji način ne ograničavaju.

Opšte procedure

Svi reagensi su nabavljeni kupovinom i korišćeni su bez prethodnog prečišćavanja. Anhidrovani rastvarači su nabavljeni kupovinom i korišćeni su bez prethodnog dodatnog sušenja.

Flash hromatografija je izvođena na ISCO CombiFlash Rf 200i sa prethodno napakovanim silika-gel kartridžima (Re-diSep®Rf Gold High Performance).

Tankoslojna hromatografija je izvođena na pločama, dimenzije 5 x 10 cm, koje su obložene sa Merck Type 60 F254 silika-gelom.

Mikrotalasno zagrevanje je izvođeno u Anton Parr MonoWave ili CEM Discover® instrumentu.

Prečišćavanja preparativnom HPLC su izvođena na sistemu tečne hromatografije Armen Spot sa Gemini-NX® 10 µM C18, 250 mm x 50 mm i.d. kolonom sa brzinom protoka od118 mL min<-1>i niznom detekcijom UV diodom (210 - 400 nm) primenom 25 mM vodenog rastvora NH4HCO3i MeCN kao eluenata, osim ako nije drugačije navedeno.

Analitička LC-MS: Jedinjenja ovog pronalaska su opisana pomoću sistema tečna hromatografija visoke performanse-masena spektroskopija (HPLC-MS) na Agilent HP1200 sa Agilent 6140 kvadripolom LC/MS, radeći u modu pozitivne ili negativne jon elektrosprej jonizacije. Skan opseg molekulske težine je 100 do 1350. Paralelna UV detekcija je urađena na 210 nm i 254 nm. Uzorci su dobijeni u vidu 1 mM rastvora u ACN, ili u THF/H2O (1:1) sa 5 µL savijenom injekcijom. LCMS analize su izvedene na dva instrumenta, od kojih je jedan radio sa baznim, a drugi sa kiselim eluentima.

LCMS bazni uslovi: Gemini-NX, 3 µm, C18, 50 mm x 3.00 mm i.d. kolona na 23°C, pri brzini protoka od 1 mL min<-1>korišćenjem 5 mM amonijum bikarbonata (Rastvarač A) i acetonitrila (Rastvarač B) sa gradijentom koji polazi od 100% Rastvarača A i završava sa 100% Rastvarača B u toku različitih/određenih vremenskih trajanja.

LCMS kiseli uslovi: ZORBAX Eclipse XDB-C18, 1.8 µm, 50 mm x 4.6 mm i.d. kolona na 40°C, pri brzini protoka od 1 mL min<-1>korišćenjem 0.02% v/v vodene mravlje kiseline (Rastvarač A) i 0.02% v/v mravlje kiseline u acetonitrilu (Rastvarač B) sa gradijentom koji polazi od 100% Rastvarač A i završava sa 100% Rastvarača B u toku različitih/određenih vremenskih trajanja.

<1>H-NMR merenja su izvedena na Bruker Avance III 500 MHz spektrometru i Bruker Avance III 400 MHz spektrometru, korišćenjem DMSO-d6ili CDCl3kao rastvarača.<1>H NMR podaci su u vidu delta vrednosti, date u delovima na milion (ppm), korišćenjem rezidualnih pikova rastvarača (2.50 ppm za DMSO-d6i 7.26 ppm za CDCl3) kao internog standarda. Obrasci razdvajanja su označeni kao: s (singlet), d (dublet), t (triplet), q (kvartet), quint (kvintet), m (multiplet), br s (široki singlet), dd (dublet dubleta), td (triplet dubleta), dt (dublet tripleta), ddd (dublet dubleta dubleta).

Kombinacija gasne hromatografije i masene spektrometrije niske rezolucije su izvedene na Agilent 6850 gasnom hromatografu i Agilent 5975C masenom spektrometru, korišćenjem 15 m x 0.25 mm kolone sa 0.25 µm HP-5MS oblogom i helijumom kao nosećim gasom. Jonski izvor: EI<+>, 70 eV, 230°C, kvadripol: 150°C, interfejs: 300°C.

HRMS su određene na Shimadzu IT-TOF, temperatura jonskog izvora 200°C, ESI /-, jonizaciona voltaža: (+-)4.5 kV. Masena rezolucija min.10000.

Analize elemenata su izvođene na Thermo Flash EA 1112 analizatoru elemenata.

Lista skraćenica

Skraćenica Naziv

2-Me-THF 2-metil-tetrahidrofuran

Ac acetil

Ad adamantil

aq. vodeni

AtaFos bis(di-terc-butil(4-dimetilaminofenil)fosfin)dihloropaladijum(II) BuPAd2 butil-di(adamant-1-il)fosfan

cc. koncentrovan(a)

DAST dietilaminosulfurni trifluorid

dba dibenzilidenaceton

DCM metilen hlorid

DIPA diizopropilamin

DMA dimetilacetamid

DME 1,2-dimetoksietan

DMF dimetilformamid

DMSO dimetil sulfoksid

dppf 1,1’-bis(difenilfosphino)ferrocene

eq. equivalent

Et etil

HILIC tečna hromatografija hidrofilne interakcije HMDS heksametildisilazan

<i>Pr izopropil

LDA litijum diizopropilamid

Me metil

MeCN acetonitril

MTBE metil terc-butil etar

MW mikrotalasni

NBS N-bromosukcinimid

<n>Bu n-butil

NCS N-hlorosukcinimid

Ph fenil

P<t>Bu3x HBF4tri-terc-butilfosfonijum tetrafluoroborat PCy3x HBF4tricikloheksilfosfonijum tetrafluoroborat

Q-Fos 1,2,3,4,5-pentafenil-1’-(di-terc-butilfosfino)ferocen r.t. sobna temperatura

TBAF tetrabutil amonijum fluorid

<t>Bu terc-butil

TEA trietilamin

TFA trifluorosirćetna kiselina

THF tetrahidrofuran

TIPSCl triizopropilsilil hlorid

XantFos 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten

Opšta procedura Ia:

1 eq. odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina, 2 eq. odgovarajućeg derivata amino kiseline i 2 eq. K2CO3se pomešaju u smeši<t>BuOH:voda 4:1 (4 mL/mmol) i mešaju na temperaturi refluksa (ili u MW reaktoru na 100°C ukoliko je neophodno) sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Mešavina je zatim razblažena sa vodom, zakiseljena sa 1M rastvorom HCl (do pH = 1, ili do pH = 6 u prisustvu bazne amino grupe) i ekstrahovana sa EtOAc, ili se talog formiran posle zakiseljavanja izoluje filtracijom. U slučaju prečišćavanja ekstrakta, spojene organske faze se ispiraju sa slanim rastvorom, suše preko MgSO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi korišćenjem 25 mM vodenog NH4HCO3i acetonitrila kao eluenata, ukoliko nije drugačije navedeno.

Opšta procedura Ib:

1 eq. odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina, 2 eq. odgovarajućeg derivata amino kiseline i 3 eq. K2CO3se pomešaju u DMSO (10 mL/mmol) i mešaju na 50°C sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Mešavina je zatim razblažena sa vodom, zakiseljena sa 1M rastvorom HCl (do pH = 1, ili do pH = 6 u prisustvu bazne amino grupe) i ekstrahovana sa EtOAc, ili se talog formiran posle zakiseljavanja izoluje filtracijom. U slučaju prečišćavanja ekstrakta, spojene organske faze se ispiraju sa slanim rastvorom, suše preko MgSO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi korišćenjem 25 mM vodenog NH4HCO3i acetonitrila kao eluenata, ukoliko nije drugačije navedeno.

Opšta procedura Ic:

1 eq. odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina, 1.5 eq. odgovarajućeg derivata aminokiseline i 1.5 eq. Cs2CO3je pomešano u DMSO (6 mL/mmol) i mešano na 70°C sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Mešavina je zatim razblažena sa vodom, zakiseljena sa 1M rastvorom HCl (do pH = 1, ili do pH = 6 u prisustvu bazne amino grupe) i ekstrahovana sa EtOAc, ili se talog formiran posle zakiseljavanja izoluje filtracijom. U slučaju prečišćavanja ekstrakta, spojene organske faze se ispiraju sa slanim rastvorom, suše preko MgSO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi korišćenjem 25 mM vodenog NH4HCO3i acetonitrila kao eluenata, ukoliko nije drugačije navedeno.

Opšta procedura IIa:

1 eq. odgovarajućeg derivata 5- (ili 6)-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 3 eq. odgovarajućeg derivata borne kiseline rastvore se u DME (15 mL/mmol), zatim se doda 5 eq. K2CO3, 0.2 eq. Pd2dba3, 0.4 eq.<n>BuPAd2i voda (5 mL/mmol) i, smeša se meša na 60°C u MW reaktoru sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Isparljive materije se zatim uklanjaju in vacuo i ostatak prečisti putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi korišćenjem 25 mM vodenog NH4HCO3i acetonitrila kao eluenata, ukoliko nije drugačije navedeno.

Opšta procedura IIb:

1 eq. odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 5 eq. odgovarajućeg derivata borne kiseline rastvore se u 2-Me-THF (8 mL/mmol), zatim se doda 5 eq. K2CO3, 0.1 eq. Q-Fos i 0.05 eq. Pd2dba3i, smeša se meša na 80°C sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Smeša se filtrira kroz sloj Celita, filtrat se ukoncentriše sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, ukoliko nije drugačije navedeno.

Opšta procedura IIc:

1 eq. odgovarajućeg derivata 5-(or 6)-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 1.1 eq. odgovarajućeg derivata borne kiseline rastvore se u 2-Me-THF (8 mL/mmol), zatim se doda 1.1 eq. Ag2CO3i 0.1 eq. Pd(PPh3)4i, smeša se meša na 100°C sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Smeša se filtrira kroz sloj Celita, filtrat se ukoncentriše sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, ukoliko nije drugačije navedeno.

Opšta procedura IId:

1 eq. odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 3 eq. odgovarajućeg derivata borne kiseline rastvore se u dioksan:voda 2:1 smeši (10 mL/mmol), zatim se doda 2 eq.

Cs2CO3, 5 mol% Pd(OAc)2i 0.2 eq. P<t>Bu3xHBF4i, smeša se meša na 120°C u MW reaktoru sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Smeša se neutrališe sa 1M HCl rastvorom i ekstrahuje sa DCM. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše in vacuo. Sirovi proizvod se prečisti putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi korišćenjem 0.1% vodenog TFA rastvora i acetonitrila kao eluenata, ukoliko nije drugačije navedeno.

Opšta procedura IIIa:

1 eq. odgovarajućeg derivata 6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 4 eq. odgovarajućeg derivata borne kiseline rastvore se u dioksan:voda 4:1 smeši (10 mL/mmol), zatim se doda 2.2 eq. Cs2CO3i 0.1 eq. Pd(dppf)Cl2i, smeša se meša na 40°C sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Mešavina se zatim razblaži sa vodom i ekstrahuje sa DCM. Spojene organske faze se isperu sa vodom, osuše preko MgSO4, filtrira filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi korišćenjem 25 mM vodenog NH4HCO3rastvora i acetonitrila kao eluenata, ukoliko nije drugačije navedeno.

Opšta procedura IIIb:

1 eq. odgovarajućeg derivata 6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 3 eq. odgovarajućeg derivata borne kiseline rastvore se u THF:voda 1:1 smeši (10 mL/mmol), zatim se dodaju 3 eq. Cs2CO3i 0.1 eq. AtaFos i, smeša se meša na 100°C u MW reaktoru sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Isparljive materije se zatim uklanjaju uparavanjem pod sniženim pritiskom, i ostatak se prečisti putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi korišćenjem 25 mM vodenog NH4HCO3rastvora i acetonitrila kao eluenata, ukoliko nije drugačije navedeno.

Opšta procedura IVa:

1 eq. Izrade 4i se rastvori u suvom THF-u (5 mL/mmol) i ohladi na -78°C. U vidu kapi, doda se LDA rastvor (1.2 eq.2M u THF-u, heptan, EtPh) po argonom i smeša se meša 1.5 sat. Onda se, na -78°C, doda 1.2 eq. odgovarajućeg elektrofilnog reagensa bilo u vidu rastvora (rastvoren u 3mL/mmol suvog THF-a) bilo čistog i, smeša se ostavlja da se zagreje na r.t. Meša se sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Reakciona smeša se ugasi pažljivim dodavanjem cc. NH4Cl rastvora. Smeša se ekstrahuje sa MTBE, organski sloj se ispere sa slanim rastvorom, osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, ukoliko nije drugačije navedeno.

Opšta procedura Va:

1 eq. odgovarajućeg acetala je mešan u 2M HCl rastvoru (3 mL/mmol) na 60°C sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Reakciona smeša se ohladi na 0°C, zatim se, deo po deo, doda 5.7 eq. NaOH. pH se podesi na 8 korišćenjem 10% K2CO3rastvora, a onda se, deo po deo, doda 2 eq. natrijum borohidrida uz održavanje temperature ispod 5°C. Posle dodavanja, smeša se meša na 0°C sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Smeša se ekstrahuje sa EtOAc, spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, ukoliko nije drugačije navedeno.

Opšta procedura Vb:

Korak A

U rastvor od 1 eq. odgovarajućeg N-alkil pirazola u suvom THF-u (1.5 mL/mmol), na -78°C doda se, kap po kap, 1.1 eq.<n>BuLi. Smeša se meša 30 minuta i zatim, ostavlja da se zagreje na 0°C i, ponovo se meša još 30 minuta, onda se ponovo ohladi na -78°C. Dodaje se, u vidu kapi, 1.1 eq. DMF, zatim se reakciona smeša ostavlja da dostigne r.t. i meša se preko noći. Smeša se ugasi sa cc. NH4Cl rastvorom. Faze se razdvoje i vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Ostatak se koristi u narednom koraku bez prethodnog prečišćavanja.

Korak B

U rastvor od 1 eq. odgovarajućeg sirovog aldehida u EtOH (0.5 mL/mmol), deo po deo se doda 1.3 eq. natrijum borohidrida na -15°C i, reakciona smeša se meša na r.t. sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Smeša se izruči na smrvljeni led i meša se u toku 16 sati. Talog se odfiltrira i, filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Uljana faza se razdvoji i, vodeni sloj se ekstrahuje sa EtOAc. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Proizvod se dalje prečisti putem flash hromatografije, ukoliko je neophodno.

Opšta procedura Vc:

U smešu od 1.2 eq. odgovarajuće amidine soli i 1 eq. Izrade 8a u suvom metanolu (0.5 mL/mmol), deo po deo, doda se 1.2 eq. natrijum metoksida i, smeša se meša na 75°C sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Reakciona smeša se ohladi i ukoncentriše pod sniženim pritiskom. U ostatak se doda voda i, ekstrahuje se sa DCM. Spojene organske faze se osuše preko MgSO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, ukoliko nije drugačije navedeno.

Opšta procedura Vd:

U smešu od 1.2 eq. odgovarajućeg hidrazina ili hidrazin hidrohlorida i 1 eq. Izrade 8a u suvom metanolu (0.5 mL/mmol), deo po deo, doda se 1.2 eq. natrijum metoksida i, smeša se meša na 75°C sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Reakciona smeša se ohladi i ukoncentriše pod sniženim pritiskom. U ostatak se doda voda i, ekstrahuje se sa DCM. Spojene organske faze se osuše preko MgSO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, ukoliko nije drugačije navedeno.

Opšta procedura Ve:

1 eq. odgovarajućeg acetala je mešan sa 1M HCl rastvorom (3 mL/mmol) na 50°C sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Reakciona smeša se ohladi na 0°C, zatim se, deo po deo, doda 2.85 eq. čvrstog NaOH. pH se podesi na 8 korišćenjem 10% K2CO3rastvora, a onda se, deo po deo, doda 2 eq. natrijum borohidrida uz održavanje temperature ispod 5°C i, smeša se meša na 0°C sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Smeša se ekstrahuje sa EtOAc, spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, ukoliko nije drugačije navedeno.

Opšta procedura VI:

1 eq. odgovarajućeg derivata fenola, 2 eq. odgovarajućeg alkoholnog derivata i 3 eq. PPh3se rastvore u suvom toluenu (7 mL/mmol) u atmosferi N2, onda se doda 3 eq. di-terc-butil azodikarboksilata na r.t. Onda se smeša meša na 50°C sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Isparljive materije se uklone in vacuo i ostatk se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc (i MeOH ukoliko je potrebno) kao eluenata. Ukoliko je neophodno, proizvod se prečisti putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi korišćenjem 25 mM vodenog NH4HCO3rastvora i acetonitrila kao eluenata, ukoliko nije drugačije navedeno.

Opšta procedura VII:

1 eq. odgovarajućeg estarskog derivata se rastvori u THF-u (15 mL/mmol) i zatim se dodaju 10 eq. LiOHxH2O i voda (15 mL/mmol). Smeša se meša na r.t. (ili na 60°C ukoliko je potrebno) sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. pH se podesi na 6 sa 1M HCl rastvorom, zatim se smeša razblaži sa slanim rastvorom, ekstrahuje sa DCM ili EtOAc. Organski sloj se osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi korišćenjem 25 mM vodenog NH4HCO3rastvora i acetonitrila kao eluenata, ukoliko nije drugačije navedeno.

Opšta procedura VIII:

1 eq. odgovarajućeg derivata indola i 2 eq. odgovarajućeg alkoholnog derivata se rastvore u suvom toluenu (8 mL/mmol) u atmosferi N2, onda se smeša ohladi na 0°C, zatim doda 2 eq. 2-(tributil-fosfaniliden)acetonitrila. Onda se smeša zagreje na 100°C i meša se sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Isparljive materije se uklone in vacuo, zatim se doda voda (4 mL/mmol) i 2M NaOH rastvor (1 mL/mmol) i, smeša se meša sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Smeša se onda zakiseli sa 1M HCl rastvorom na pH = 6 i ekstrahuje sa DCM. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi korišćenjem 40 mM vodenog NH4OAc rastvora i (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata, ukoliko nije drugačije navedeno vodenog rastvora.

Opšta procedura IXa:

Korak A

1 eq. Izrade 9b se rastvori u suvom toluenu (8 mL/mmol), zatim se doda 1.18 eq. PPh3, 1.1 eq. odgovarajućeg alkoholnog derivata i 1.18 eq. dietilazodikarboksilata (40% rastvor u toluenu) na r.t. Smeša se meša na r.t. sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Dobijeni talog se odfiltrira i filtrat se ispere uzastopno sa 10% KHSO4rastvorom, vodom, sat. NaHCO3rastvorom i ponovo vodom. Organska faza se osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Ostatak se mućka sa dietil-etrom (5 mL/mmol), nerastvorni materijal se odfiltrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom kako se dobija sirovi proizvod.

Korak B

Proizvod Koraka A se obradi sa 10 eq. HCl rastvora (4.9M u MeOH) i meša se na r.t. sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Onda se smeša ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Ostatak se podeli između hladnog EtOAc i ledeno-hladne vode, faze se razdvoje i organska faza se ekstrahuje sa ledeno-hladnim 5% KHSO4rastvorom. Spojene vodene faze se zaalkališu sa č vrstim Na2CO3, te se proizvod ekstrahuje sa EtOAc. Organska faza se osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom kako se dobija metil estar naslovljenog proizvoda.

Korak C

1 eq. metil estra dobijenog u Koraku B se rastvori u MeOH (9 mL/mmol), zatim se dodaju 1.05 eq. NaOH i voda (1 mL/mmol) i, smeša se meša na r.t. sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Metanol se ukolni pod sniženim pritiskom i smeša se neutrališe korišćenjem 1M HCl rastvora, zatim se ekstrahuje sa DCM. Organska faza se osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom kako se dobija O-alkilovani aminokiselinski derivat, koji se upotrebljava bez prethodnog prečišćavanja.

Opšta procedura IXb:

Korak A

1 eq. Izrade 9b se rastvori u suvom DMF-u (10 mL/mmol) i, doda se 4 eq. K2CO3i 2 eq. odgovarajućeg alkilirajućeg agensa na r.t. Smeša se meša na 50°C sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Smeša se razblaži sa vodom, zatim ekstrahuje sa DCM. Organska faza se osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem DCM i metanola kao eluenata, ukoliko nije drugačije navedeno.

Korak B i Korak C su isti, kao što je opisano u Opštoj proceduri IXa.

Izrada 1a: 5-bromo-4-hloro-6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin

Korak A: 6-jodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-on

U 2 L-ski balon zaobljenog dna, koji je opremljen sa mehaničkom mešalicom, termometrom i refluksnim kondenzatorom, stavljen je rastvor od 433 mL sirćetne kiseline, 13 mL sumporne kiseline i 87 mL vode. U rastvor koji se meša, dodato je 69.3 g 3H-tieno[2,3-d] pirimidin-4-ona (0.46 mol), 51.9 g perjodne kiseline (0.23 mol) i 104 g joda (0.41 mol), zatim se greje na 60°C tokom 1 sata. Nastala suspenzija se ohladi do r.t., odfiltrira, ispere sa smešom sirćetne kiseline i vode (5:1) i, zatim sa dietil etrom. Dobijena kristalna čvrsta masa bež boje osuši se na vazduhu.<1>H NMR (500 MHz, DMSOd6) δ: 12.57 (br s, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.65 (s, 1H)

Korak B: 4-hloro-6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin

U 1 L-ski balon zaobljenog dna, koji je opremljen sa mehaničkom mešalicom, termometrom, refluksnim kondenzatorom i CaCl2-epruvetom stavljeno je 113 mL fosfornog oksihlorida i 35 mL N,N-dimetilanilina (0.29 mol). U smešu se doda 75.54 g 6-jodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona (0.27 mol), deo po deo, u toku 5 minuta. Reakciona smeša se meša na 105°C u toku 1 sata. Dobijena suspenzija se ohladi do 10°C, filtrira i ispere sa heksanom. Sirovi proizvod se doda u ledenu vodu i meša se tokom 10 minuta, odfiltrira se, ispere sa hladnom vodom, dietil etrom i osuši na vazduhu. Dobija se kristalna čvrsta masa bež boje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.89 (s, 1H), 7.98 (s, 1H)

Korak C: Izrada 1a

U 2 L-ski balon zaobljenog dna, koji je opremljen sa mehaničkom mešalicom, termometrom i cevčicom za produvavanje, stavi se 600 mL acetonitrila. Doda se 84.9 g 4-hloro-6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina (0.29 mol), 50.9 g NBS (0.29 mol) i 8.5 mL kompleksa dietil etra tetrafluoroborne kiseline. Reakciona smeša se meša na r.t. tokom 16 sati. Dalje se, iz tri dela, doda 22.9 g (0.12 mol) NBS u smešu. Posle hlađenja suspenzije na 0°C i mešanja u periodu od još 1 sata, talog se odfiltrira, ispere sa acetonitrilom i osuši na vazduhu. Proizvod se dobija u kristalne čvrste mase bež boje.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.88 (s, 1H)

Izrada 1b: 4-hloro-5,6-dijodo-tieno[2,3-d]pirimidin

Korak A: 5,6-dijodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-on

U dobro izmešanu žitku masu koju č ini 61.3 g 3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-on (396 mmol), doda se 92.4 g perjodne kiseline (405 mmol), 1 L sirćetne kiseline, 200 mL vode, 6 mL cc. sumporne kiseline i, 203 g joda (799 mmol). Reakciona smeša se zagreje na 110°C i, meša se u toku 3 sata. Suspenzija se ohladi na r.t., zatim se doda 940 mL dietil etra i, smeša se dalje meša na 10°C u toku 30 minuta. Talog se odfiltrira, ispere sa 2:1 smešom dietil etra i etanola (100 mL), konačno sa dietil etrom (3 x 250 mL), zatim se osuši na vazduhu kako se dobija proizvod u vidu žućkastog praška.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 12.60 (br s, 1H), 8.13 (s, 1H)

Korak B: Izrada 1b

U dobro izmešanu žitku masu sastavljenu od 180 g 5,6-dijodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona (445 mmol) u 2.5 L fosfornog oksihlorida se doda 64 mL N,N-dimetilanilina. Reakciona smeša se zagreje na 105°C i, meša se u toku 1,5 sata. Dobijena suspenzija se ohladi na r.t. i doda se 1.5 L heksana i, meša se još 20 minuta. Talog se odfiltrira, ispere sa heksanom (3 x 500 mL) i vodom (3 x 100 mL), zatim se osuši na vazduhu kako se dobija proizvod u vidu kristalne čvrste mase sive boje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.88 (s, 1H)

Izrada 1c: 4-hloro-5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin

52.8 g jedinjenja Izrade 1b (125 mmol) se rastvori u 400 mL suvog THF-a i, ohladi se na 0°C. Dodaje se 100 mL<t>BuMgCl (200 mmol, 2M u dietil etru) u toku 15 minuta. Onda se doda 50 mL vode i rastvor se dekantuje i ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se ozvuči u smeši acetonitrila i vode (3:1) i zatim, sakupi filtracijom.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.95 (s, 1H), 8.45 (s, 1H)

Izrada 2a: 4-hloro-6-etil-5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin

Korak A: 6-etil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-on

Smeša od 701 g etil estra 2-amino-5-etil-tiofen-3-karboksilne kiseline (3.52 mol) i 2200 mL formamida se greje na 200°C i, rastvarači nižih tački ključanja se oddestilišu. Posle 2 sata, doda se još 250 mL formamida i smeša se meša na istoj temperaturi još jedan sat, a onda na r.t. u toku 16 sati. Dobijena smeša se izruči u 7.5 L vode i, talog se odfiltrira, ispere sa 1.5 L toluena i 3 L vode, onda se osuši na vazduhu, kako se dobija proizvod u vidu kristalne čvrste mase smeđe boje.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 12.40 (br s, 1H), 8.05 (s, 1H), 7.11 (t, 1H), 2.85 (qd, 2H), 1.27 (t, 3H)

Korak B: 6-etil-5-jodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-on

Smeša od 301 g 6-etil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona (1.67 mol), 847 g joda (3.34 mol), 1040 g srebro sulfata (3.34 mol) i 1.7 L etanola je mešana na r.t. tokom 3 dana.

Dobijeni talog je odfiltriran i ispran sa etanolom (3 x 400 mL). Proizvod je eluiran sa filterskog kolača sledećom procedurom: filterski kolač se meša sa 800 mL DMF-a na 50°C u toku 1 sata, a zatim se suspenzija filtrira. Ovaj redosled se ponavlja 6 puta. Spojeni organski slojevi se upare do suvog, kako se dobija proizvod u vidu kristalne čvrste mase žućkaste boje.

Korak C: Izrada 2a

Smeša mešanih 880 mL fosfornog oksihlorida i 102 mL N,N-dimetilanilina se greje na 95°C i brzo se doda 220 g 6-etil-5-jodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona (0.719 mol) na istoj temperaturi i, zatim se meša 15 minuta. Reakciona smeša se ohladi na 80°C i izruči na mešanu smešu vode (1 L), smrvljenog leda (2 kg) i DCM (700 mL). Dobijena smeša se meša još 30 minuta uz održavanje temperature ispod 20°C. Faze se razdvoje, organski sloj se ekstrahuje sa DCM (100 mL) i, organski sloj se ispere sa vodom (100 mL). Spojeni organski slojevi se osuše preko MgSO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom kako se dobija proizvod u vidu kristalne čvrste mase žućkaste boje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.79 (s, 1H), 3.02 (q, 2H), 1.39 (t, 3H)

Izrada 2b: 5-bromo-4-hloro-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin

75.08 g jedinjenja Izrade 1a (200 mmol), 53.63 g 2-(4-fluorofenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana (240 mmol), 130 g cezijum karbonata (400 mmol), 2.245 g Pd(OAc)2(10 mmol) i 8.50 g<t>BuX-Fos (20 mmol) stave se u 2 L-ski balon. Dodaju se 600 mL THF-a i 200 mL vode i, meša se preko noći na 70°C u atmosferi argona. THF se upari i, zatim se proizvod sakupi filtracijom. Sirovi proizvod se ozvuči u 250 mL acetonitrila i ponovo filtrira. Onda se jedinjenje Izrade 2b kristališe iz EtOH / THF (2:1).<1>H NMR (400 MHz, DMSOd6) δ: 9.02 (s, 1H), 7.80-7.77 (m, 2H), 7.47-7.43 (m, 2H)

Izrada 2c: 4-hloro-5-jodo-6-(prop-1-inil)-tieno[2,3-d]pirimidin

42.24 g jedinjenja Izrade 1b (100 mmol), 3.509 g Pd(PPh3)2Cl (5 mmol) i 1.904 g CuJ (10 mmol) se rastvore u 400 mL DIPA, zatim se propusti u vidu mehurčića, propin kroz reakcinu smešu, koja se meša na r.t. sve dok se ne zapazi kraj konverzije. Isparljive materije se upare pod sniženim pritiskom i, sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptan / EtOAc kao eluenata.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.92 (s, 1H), 2.25 (s, 3H)

Izrada 2d: 4-hloro-5-jodo-6-izopropil-tieno[2,3-d]pirimidin

Korak A: 6-izopropil-5-jodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-on

Smeša od 2.858 g (14.7 mmol) 6-izopropil-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona, 7.468 g (29.4 mmol) joda, 9.175 g (29.4 mmol) srebro sulfata i 55 mL etanola se meša na r.t. u toku 3 dana. Smeša se razblaži sa Et2O, nastali talog se odfiltrira i koristi bez prethodnog prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 12.49 (br s, 1H), 8.11 (s, 1H), 3.35 (m, 1H, prekriven signalom H2O), 1.28 (d, 6H) MS (M-H): 319.0

Korak B: Izrada 2d

Smeša od 15 mL (161 mmol) fosfornog oksihlorida i 1.9 mL (14.7 mmol) N,N-dimetilanilina se greje na 95°C i brzo se doda 25.9 g (14.7 mmol) 6-izopropil-5-jodo-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona (0.719 mol) i, zatim se meša još 15 minuta na ovoj temperaturi. Reakciona smeša se ohladi na 80°C i izruči u mešanu smešu ledene vode (300 g) i EtOAc (200 mL). Dobijena smeša se meša još 30 minuta dok se temperatura održava ispod 20°C. Faze se razdvoje, neorganski sloj se ekstrahuje sa EtOAc (100 mL) i organski sloj se ispere sa vodom i NaHCO3rastvorom. Spojeni organski slojevi se osuše preko MgSO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom i prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i EtOAC kao eluenata, kako se dobija naslovljeni proizvod.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.78 (s, 1H), 3.63 (septet, 1H), 1.41 (d, 6H) MS (M+H): 339.0

Izrada 3a: (2R)-2-[(6-etil-5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]-3-fenil-propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure Ia i jedinjenja Izrade 2a kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i D-fenilalanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se jedinjenje Izrade 3a.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.44 (s, 1H), 7.45 (d, 1H), 7.30-7.20 (m, 5H), 5.07 (m, 1H), 3.35 (dd, 1H), 3.16 (dd, 1H), 2.82 (q, 2H), 1.22 (t, 3H) HRMS izračunato za C17H16JN3O2S: 453.0008; nađeno: 454.0064 (M+H)

Izrada 4a: 4-hloro-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-jodo-tieno [2,3-d]pirimidin

Korak A: 4-hloro-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]tieno[2,3-d]pirimidin

Korišćenjem Opšte procedure IIa i jedinjenja Izrade 1c kao odgovarajućeg 5-jodotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i Izrade B4 kao odgovarajućeg derivata borne kiseline i, prečišćavanjem proizvoda putem flash hromatografije, korišćenjem DCM i MeOH kao eluenata dobija se 4-hloro-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]tieno[2,3-d]pirimidin.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.98 (s, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.22 (d, 1H), 7.09 (s, 1H), 4.25-4.16 (m, 2H), 2.76 (t, 2H), 2.54 (br s, 4H), 2.32 (br s, 4H), 2.14 (s, 3H), 2.06 (s, 3H)

Korak B: Izrada 4a

10.935 g 4-hloro-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]tieno[2,3-d] pirimidina (25 mmol) se rastvori u 250 mL suvog THF-a i ohladi se na -78°C. U vidu kapi, doda se 25 mL LDA rastvora (50 mmol, 2M u THF-u, heptan, etil benzen) u atmosferi argona i smeša se meša u toku 15 minuta. Onda se doda 12.69 g (50 mmol) joda na -78°C i, smeša se ostavi da se zagreje na r.t. Onda se smeša razblaži sa EtOAc i ispere sa NH4Cl rastvorom, a potom sa Na2S2O3rastvorom, osuši preko Na2SO4, filtrira i ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem DCM i MeOH kao eluenata kako se dobija jedinjenje Izrade 4a.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.93 (s, 1H), 7.15 (d, 1H), 7.13 (d, 1H), 4.22 (t, 2H), 2.77 (t, 2H), 2.56 (br s, 4H), 2.34 (br s, 4H), 2.16 (s, 3H), 2.00 (s, 3H)

Izrada 4b: 4-hloro-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(2-furil) tieno[2,3-d]pirimidin

Korišćenjem Opšte procedure IIa i jedinjenja Izrade 4a kao odgovarajućeg 6-jodotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i 2-(2-furil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se jedinjenje Izrade 4b. MS: (M+H) = 503.0

Izrada 4c: 4-hloro-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(5-fluoro-2-furil)tieno[2,3-d]pirimidin

Korišćenjem Opšte procedure IIIa i jedinjenja Izrade 4a kao odgovarajućeg 6-jodotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i 2-(5-fluoro-2-furil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se jedinjenje Izrade 4c.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.93 (s, 1H), 7.24 (d, 1H), 7.18 (d, 1H), 5.92 (dd, 1H), 5.68 (t, 1H), 4.23 (t, 2H), 2.79 (t, 2H), 2.58 (br s, 4H), 2.38 (br s, 4H), 2.19 (s, 3H), 2.05 (s, 3H) HRMS izračunato za C24H23N4O2FSCl2: 520.0903; nađeno: 521.0972 (M+H)

Izrada 4d: 2-hloro-4-(4-hloro-6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin-5-il)-3-metil-fenol

Korak A: [2-hloro-4-(4-hlorotieno[2,3-d]pirimidin-5-il)-3-metil-fenoksi]-triizopropil-silan

Korišćenjem Opšte procedure IIa i jedinjenja Izrade 1c kao odgovarajućeg 5-jodotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i jedinjenja Izrade B3 kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se [2-hloro-4-(4-hlorotieno[2,3-d]pirimidin-5-il)-3-metil-fenoksi]-triizopropil-silan.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.95 (s, 1H), 7.98 (s, 1H), 7.13 (d, 1H), 6.91 (d, 1H), 2.05 (s, 3H), 1.40-1.29 (m, 3H), 1.10 (dd, 18H)

Korak B: [2-hloro-4-(4-hloro-6-jodotieno[2,3-d]pirimidin-5-il)-3-metil-fenoksi]-triizopropil-silan

33.7 g [2-hloro-4-(4-hlorotieno[2,3-d]pirimidin-5-il)-3-metil-fenoksi]-triizopropil-silana (72 mmol) se rastvori u 300 mL suvog THF-a i ohladi se na -78°C. Kap po kap, doda se 43.2 mL LDA rastvora (86.4 mmol, 2M u THF-u, heptan, etil benzen) pod argonom i, smeša se meša 15 minuta. Zatim se doda 23.8 g joda (93.7 mmol) na -78°C i, smeša se ostavlja da se zagreje na r.t. Onda se smeša razblaži sa EtOAc i, ispere sa NH4Cl rastvorom, zatim sa Na2S2O3rastvorom. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran i ukoncentrisan pod sniženim pritiskom.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.91 (s, 1H), 7.05 (d, 1H), 6.97 (d, 1H), 1.99 (s, 3H), 1.39-1.30 (m, 3H), 1.10 (dd, 18H)

Korak C: Izrada 4d

10.0 g [2-hloro-4-(4-hloro-6-jodotieno[2,3-d]pirimidin-5-il)-3-metil-fenoksi]-triizopropilsilana (16.85 mmol) se rastvori u 100 mL suvog THF-a i doda se 18.5 mL TBAF rastvora (18.5 mmol, 1M u THF-u) i, smeša se meša na r.t. 10 minuta. Zatim se smeša razblaži sa EtOAc i ispere sa 1M HCl rastvorom i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran i ukoncentrisan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobilo jedinjenje Izrade 4d. HRMS izračunato za C13H7Cl2JN2OS: 435.8701, nađeno: 436.8780 (M+H)

Izrada 4e: 2-[2-hloro-4-(4-hloro-6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin-5-il)-3-metil-fenoksi]-N,N-dimetiletanamin

Korišćenjem Opšte procedure VI i jedinjenja Izrade 4d kao odgovarajućeg fenolnog derivata i N,N-dimetiletanolamina kao odgovarajućeg alkohola, dobija se jedinjenje Izrade 4e. MS (M+H): 508.0

Izrada 4f: 2-hloro-4-[4-hloro-6-(3-tienil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3-metil-fenol

Korišćenjem Opšte procedure IIIa i jedinjenja Izrade 4d kao odgovarajućeg 6-jodotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i pinakol estra tiofen-3-borne kiseline kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se jedinjenje Izrade 4f. MS (M+H): 393.0

Izrada 4g: 4-hloro-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(3-tienil)tieno [2,3-d]pirimidin

Korišćenjem Opšte procedure VI i jedinjenja Izrade 4f kao odgovarajućeg 6-jodotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanola kao odgovarajućeg alkohola, dobija se jedinjenje Izrade 4g.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.94 (s, 1H), 7.60 (dd, 1H), 7.56 (dd, 1H), 7.19 (d, 1H), 7.12 (d, 1H), 6.79 (dd, 1H), 4.21 (t, 1H), 2.77 (t, 1H), 2.56 (br, 4H), 2.33 (br, 4H), 2.15 (s, 3H), 2.04 (s, 3H) HRMS izračunato za C24H24Cl2N4OS2: 518.0769; nađeno: 519.0852 (M+H)

Izrada 4h: 4-[2-[2-hloro-4-[4-hloro-6-(3-tienil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3-metil-fenoksi]etil] morfolin

Korišćenjem Opšte procedure VI i jedinjenja Izrade 4f kao odgovarajućeg fenolnog derivata i 2-morfolinoetanola kao odgovarajućeg alkohola, dobija se jedinjenje Izrade 4h.

Izrada 4i: 4-hloro-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin

Korak A: etil 2-amino-4-(1-naftil)tiofen-3-karboksilat

50.00 g 1-(1-naftil)etanona (293.8 mmol), 43.66 g etil cijanoacetata (386.0 mmol), 18.84 g sumpora (587.5 mmol), 8.4 mL AcOH i 38.39 g morfolina se rastvore u 300 mL EtOH i, meša se na 60°C sve dok se ne zapazi prestanak konverzije. Isparljive materije se uklone in vacuo, a ostatak se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobija etil 2-amino-4-(1-naftil)tiofen-3-karboksilat. HRMS izračunato za C17H15NO2S: 297.0823; nađeno: 298.0891 (M+H)

Korak B: 5-(1-naftil)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-on

9.40 g etil 2-amino-4-(1-naftil)tiofen-3-karboksilata (31.6 mmol) se rastvori u 45 mL formamida i, meša se na 200°C sve dok se ne zapazi prestanak konverzije. Smeša se ohladi na r.t. i, izruči u vodu. Istaložena čvrsta masa se filtrira, ispere sa vodom, zatim osuši da bi se dobio 5-(1-naftil)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-on. HRMS izračunato za C16H10N2OS: 278.0514; nađeno: 279.0582 (M+H)

Korak C: Izrada 4i

8.50 g 5-(1-naftil)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona (30.5 mmol), 4.07 g N,N-dimetilanilina (33.6 mmol) i 22.8 mL fosfornog oksihlorida (244 mmol) se međa na 100°C u toku 1 sata. Smeša se ohladi na r.t. i, izruči u mešanu ledenu vodu. Istaložena čvrsta masa se filtrira i rekristališe iz acetonitrila kako se dobija jedinjenje Izrade 4i. HRMS izračunato za C16H9N2SCl: 296.0175; nađeno: 297.0255 (M+H)

Izrada 4j: 4-hloro-5-(3-hloro-2-metil-fenil)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin

Korišćenjem Opšte procedure IIb i jedinjenja Izrade 2a kao odgovarajućeg 5-jodotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (3-hloro-2-metil-fenil)borne kiseline kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se jedinjenje Izrade 4j.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.89 (s, 1H), 7.55 (dd, 1H), 7.33 (t, 1H), 7.23 (dd, 1H), 2.65 (m, 2H), 2.03 (s, 3H), 1.17 (t, 3H) HRMS izračunato za C15H12Cl2N2S: 322.0098; nađeno: 323.0164 (M+H)

Izrada 4k: 4-hloro-6-etil-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin

Korišćenjem Opšte procedure IIb i jedinjenja Izrade 2a kao odgovarajućeg 5-jodotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i neopentil glikol estra 1-naftalenborne kiseline kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se jedinjenje Izrade 4k.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.91 (s, 1H), 8.07 (dd, 1H), 8.03 (dm, 1H), 7.63 (dd, 1H), 7.55 (tm, 1H), 7.51 (dd, 1H), 7.44 (tm, 1H), 7.33 (dm, 1H), 2.61 (q, 2H), 1.13 (t, 3H) HRMS izračunato za C18H13ClN2S: 324.0488; nađeno: 325.0562 (M+H)

Izrada 4l: 4-hloro-6-metil-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin

Korišćenjem Opšte procedure IVa i metil-jodida kao odgovarajućeg elektrofila, dobija se jedinjenje Izrade 4l.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.90 (s, 1H), 8.04 (dd, 2H), 7.63 (dd, 1H), 7.54 (td, 1H), 7.49 (dd, 1H), 7.43 (td, 1H), 7.32 (d, 1H), 2.28 (s, 3H) MS (M+H): 311.0

Izrada 4m: [4-hloro-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin-6-il]metanol

Korak A: 4-hloro-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin-6-karbaldehid

Korišćenjem Opšte procedure IVa i DMF-a kao odgovarajućeg elektrofila, dobija se 4-hloro-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin-6-karbaldehid.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 9.65 (s, 1H), 9.00 (s, 1H), 8.07 (d, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.68-7.52 (m, 3H), 7.47 (t, 1H), 7.33 (d, 1H)

Korak B: Izrada 4m

4-hloro-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin-6-karbaldehid se rastvori u THF:MeOH 1:1 (4 mL/mmol) i, doda se 3 eq. NaBH4na 0°C. Smeša se meša 10 minuta, zatim se ugasi sa 1M limunskom kiselinom. Smeša se ekstrahuje sa DCM, ispere sa NaHCO3rastvorom i sa slanim rastvorom, osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše in vacuo. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobija jedinjenje Izrade 4m.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.92 (s, 1H), 8.06 (d, 1H), 8.03 (d, 1H), 7.62 (m, 1H), 7.58-7.49 (m, 2H), 7.44 (m, 1H), 7.35 (d, 1H), 5.99 (t, 1H), 4.54 (dd, 1H), 4.33 (dd, 1H) MS (M+H): 327.0

Izrada 4n1 i Izrada 4n2: 1-[4-hloro-5-(1-naftil)tieno[2,3-d] pirimidin-6-il]etanol

Korišćenjem Opšte procedure IVa i acetaldehida kao odgovarajućeg elektrofilnog reagensa, sirovi proizvod je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera, koji su razdvojeni sekvencijalnom flash hromatografijom, korišćenjem DCM-aceton i heptan-MTBE kao eluenata. Redosled eluacije dijastereomernih-parova je bio isti u oba eluirajuća sistema. Jedinjenje Izrade 4n1 je dobijeno kao dijastereoizomer koji se ranije eluira (racemat).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.85 (s, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.95 (d, 1H), 7.60-7.49 (m, 2H), 7.46-7.34 (m, 3H), 4.84 (m, 1H), 2.06 (d, 1H) 1.53 (d, 3H) MS (M+H): 341.0 Jedinjenje Izrade 4n2 je dobijeno kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira (racemat).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.85 (s, 1H), 7.99 (d, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.60-7.49 (m, 2H), 7.46 (dd, 1H) 7.43-7.37 (m, 1H), 7.27 (prekriven, 1H), 4.98 (m, 1H), 2.14 (d, 1H) 1.35 (d, 3H) MS (M+H): 341.0

Izrada 4o: 1-[4-hloro-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin-6-il]etanon

157 mg Dess-Martin reagensa (0.37 mmol) se rastvori u 2 mL DCM, zatim se doda smeša jedinjenja Izrade 4n1 i Izrade 4n2 (120 mg, 0.35 mmol rastvoreno u 10 mL DCM) i, smeša se meša sve dok ne prestane konverzija. Zatim se smeša razblaži sa DCM, ispere sa rastvorima NaOH i NaHCO3i sa slanim rastvorom, osuši preko Na2SO4, filtrira i ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobija jedinjenje Izrade 4o.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9.09 (s, 1H), 8.16 (dd, 1H), 8.08 (d, 1H), 7.72-7.65 (m, 2H), 7.62-7.57 (m, 1H), 7.52-7.43 (m, 2H), 1.71 (s, 3H) MS (M+H): 339.0

Izrada 4p: 2-[4-hloro-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin-6-il]propan-2-ol

Korišćenjem Opšte procedure IVa i acetona kao odgovarajućeg elektrofila, dobija se jedinjenje Izrade 4p.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.80 (s, 1H), 7.98 (d, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.59-7.46 (m, 2H), 7.46-7.34 (m, 2H), 7.30 (d, 1H), 2.53 (br s, 1H), 1.54 (s, 3H), 1.21 (s, 3H) MS (M+H): 355.0

Izrada 4q: 4-hloro-6-izopropil-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin

Korak A: 6-izopropil-5-(1-naftil)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-on

250 mg jedinjenja Izrade 4p (0.705 mmol) i 1.75 mL Et3SiH (10.9 mmol) se stave u balon i obrade sa 10 mL TFA na -10°C. Smeša se onda meša na 50°C sve dok ne prestane konverzija. Smeša se onda razblaži sa DCM, neutrališe sa čvrstim K2CO3i rastvorom NaHCO3. Posle razdvajanja faza, organska faza je isprana sa slanim rastvorom, osušena preko Na2SO4, filtrirana i ukoncentrisana in vacuo kako se dobija 6-izopropil-5-(1-naftil)-3H-tieno[2,3-d] pirimidin-4-on u vidu sirovog intermedijera. MS (M+H): 321.0

Korak B: Izrada 4q

2 mL fosfornog oksihlorida i 0.161 mL N,N-dimetilanilina (1.27 mmol) se stave u balon pod argonom i, deo po deo, doda se 1.22 g 6-izopropil-5-(1-naftil)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-ona u smešu tokom 5 minuta. Reakciona smeša se meša na 100°C sve dok ne prestane konverzija. Smeša se ohladi na r.t. i izruči se u mešanu ledenu vodu. Dobijeni vodeni medijum se neutrališe pažljivim dodavanjem čvrstog NaHCO3. Kada prestane stvaranje gasa, proizvod se ekstrahuje tri puta sa DCM. Spojeni organski slojevi se osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata kako se dobija jedinjenje Izrade 4q.

<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ: 8.80 (s, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.94 (d, 1H), 7.57 (dd, 1H), 7.54-7.49 (m, 1H), 7.42-7.37 (m, 2H), 7.34 (d, 1H), 3.02 (septet, 1H), 1.31 (d, 3H), 1.20 (d, 3H) MS (M+H): 339.0

Izrada 4r: 4-hloro-6-(difluorometil)-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin

0.250 g 4-hloro-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin-6-karbaldehida (Korak A intermedijer u sintezi jedinjenja Izrade 4m, 0.77 mmol) se rastvori u 7 mL DCM, zatim se doda 270 µl DAST (1.16 mmol). Smeša se meša na r.t. sve dok ne prestane konverzija. Smeša se onda razblaži sa DCM i ispere sa vodom, zatim sa NaHCO3rastvorom i slanim rastvorom. Organska faza se osuši preko Na2SO4, filtrira i ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata kako se dobija jedinjenje Izrade 4r.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ: 8.97 (s, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.97 (d, 1H), 7.62-7.54 (m, 2H), 7.49-7.43 (m, 2H), 7.28 (d, 1H), 6.47 (t, 1H) MS (M+H): 347.0

Izrada 4s: 4-hloro-6-jodo-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin

Korišćenjem Opšte procedure IVa i joda kao odgovarajućeg elektrofilnog reagensa, dobija se jedinjenje Izrade 4s.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.94 (s, 1H), 8.10 (dm, 1H), 8.05 (dm, 1H), 7.66 (dm, 1H), 7.56 (tm, 1H), 7.48 (dd, 1H), 7.44 (tm, 1H), 7.31 (dm, 1H) HRMS izračunato za C16H8N2SClJ: 421.9141; nađeno: 422.9211 (M+H)

Izrada 4t: 4-hloro-5-(3-hloro-2-metil-fenil)-6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin

Korak A: 4hloro-5-(3-hloro-2-metil-fenil)tieno[2,3-d]pirimidin

Korišćenjem Opšte procedure IIb i jedinjenja Izrade 1c kao odgovarajućeg 5-jodotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (3-hloro-2-metil-fenil)borne kiseline kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se 4-hloro-5-(3-hloro-2-metilfenil)tieno[2,3-d]pirimidin.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.89 (s, 1H), 7.47 (dd, 1H), 7.43 (s, 1H), 7.20 (t, 1H), 7.14 (dd, 1H), 2.14 (s, 3H)

Korak B: Izrada 4t

Korišćenjem Opšte procedure IVa i 4-hloro-5-(3-hloro-2-metil-fenil)tieno[2,3-d] pirimidina umesto jedinjenja Izrade 4i i joda kao odgovarajućeg elektrofilnog reagensa,dobija se jedinjenje Izrade 4t.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.82 (s, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.25 (t, 1H), 7.05 (dd, 1H), 2.09 (s, 3H)

Izrada 4u: 4-hloro-5-(3-hloro-2-metil-fenil)-6-izopropil-tieno[2,3-d] pirimidin

Korišćenjem Opšte procedure IIb i jedinjenja Izrade 2d kao odgovarajućeg 5-jodotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (3-hloro-2-metil-fenil)borne kiseline kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se jedinjenje Izrade 4u.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.90 (s, 1H), 7.56 (dd, 1H), 7.34 (t, 1H), 7.29-7.22 (m, 1H), 2.94 (septet, 1H), 2.04 (s, 3H), 1.26 (d, 3H), 1.22 (d, 3H) HRMS izračunato za C16H14N2SCl2: 336.0255; nađeno: 337.0335 (M+H)

Izrada 4v: 4-hloro-6-etil-5-(1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin

Smeša od 0.664 g jedinjenja Izrade 2a (2.0 mmol), 0.400 g 1H-indol-4-ilborne kiseline (1.2 eq, 2.4 mmol), 44.9 mg Pd(OAc)2(10 mol%, 0.2 mmol), 152 mg PCy3xHBF4(20 mol%, 0.4 mmol), 1.96 g Cs2CO3(3.0 eq, 6.0 mmol) u 7.3 mL dimetoksietana i 7.3 mL vode se greje u mikrotalasnom reaktoru na 100°C sve dok se zapaža konverzija. Sirova reakciona smeša se filtrira kroz sloj Celita, ispira sa 2 x 10 mL MTBE i 2 x 10 mL vode. Dva sloja filtrata se razdvoje i organski sloj se ispere sa slanim rastvorom, zatim osuši preko Na2SO4, filtrira i ukoncentriše in vacuo. Ostatak se prečisti putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi korišćenjem vode (koja sadrži 0.1% TFA) i acetonitrila kao eluenata da bi se dobilo jedinjenje Izrade 4v.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 11.22 (br s, 1H), 8.87 (s, 1H), 7.49 (dm, 1H), 7.32 (m, 1H), 7.19 (dd, 1H), 6.95 (dm, 1H), 5.96 (m, 1H), 2.67 (m, 2H), 1.14 (t, 3H) HRMS izračunato za C16H12ClN3S: 313.0440; nađeno 314.0508 (M+H)

Izrada 4w: 4-hloro-5-(1-naftil)-6-vinil-tieno[2,3-d]pirimidin

Korišćenjem Opšte procedure IIc i jedinjenja Izrade 4s kao odgovarajućeg 6-jodotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i pinakol estra vinilborne kiseline kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se jedinjenje Izrade 4w.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.95 (s, 1H), 8.09 (d, 1H), 8.05 (d, 1H), 7.65 (dd, 1H), 7.56 (t, 1H), 7.52 (dd, 1H), 7.45 (t, 1H), 7.35 (d, 1H), 6.34 (dd, 1H), 5.90 (d, 1H), 5.45 (d, 1H) HRMS izračunato za C18H11ClN2S: 322.0331; nađeno 323.0415 (M+H)

Izrada 4x: 4-hloro-5-(1-naftil)-6-[(E/Z)-prop-1-enil]tieno[2,3-d]pirimidin

Korak A: 5,5-dimetil-2-[(Z/E)-prop-1-enil]-1,3,2-dioksaborinan

U rastvor 0.172 g (Z)-prop-1-en-1-il borne kiseline (2.0 mmol, 9:1 Z/E izomerna smeša) i 0.208 g neopentil glikola (2.0 mmol) u 6 mL 2-Me-THF-a, doda se 20 mg Amberlyst 15H<+>jono-izmenjivačke smole i, meša se na r.t. sve dok se zapaža konverzija. Konverzija se prati<1>H-NMR merenjem u CDCl3rastvoru. Smeša se filtrira kroz sloj celita, ispira sa 2 x 3 mL 2-Me-THF-om i filtrat se ukoncentriše in vacuo. Dobijeni sirovi materijal se dovoljno prečisti za sledeći korak u vidu smeše 87:13 Z/E izomera prema NMR merenjima.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6.57-6.43 (m, 1H), 5.39-5.27 (dd, 1H), 3.67 (s, 4H), 1.95-1.83 (dd, 3H), 0.97 (s, 6H)

Korak B: Izrada 4x

Korišćenjem Opšte procedure IIc i jedinjenja Izrade 4s kao odgovarajućeg 6-jodotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i 5,5-dimetil-2-[(Z/E)-prop-1-enil]-1,3,2-dioksaborinana (Z/E-smeša, Korak A) kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se jedinjenje Izrade 4x u vidu 63:37 smeše Z/E izomera.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.95-8.90 (s, 1H), 8.11-8.06 (m, 1H), 8.06-8.01 (m, 1H), 7.67-7.60 (m, 1H), 7.58-7.52 (m, 1H), 7.52-7.48 (m, 1H), 7.46-7.40 (m, 1H), 7.36-7.29 (m, 1H), 6.45-5.90 (m, 1H), 6.10-6.04 (m, 1H), 2.06-1.72 (dd, 3H) HRMS izračunato za C19H13ClN2S: 336.0488; nađeno 337.0541 (M+H)

Izrada 4y: 4-hloro-6-izopropenil-5-(1-naftil)tieno[2,3-d]pirimidin

Korišćenjem Opšte procedure IIc i jedinjenja Izrade 4s kao odgovarajućeg 6-jodotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i 2-izopropenil-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se jedinjenje Izrade 4y.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.83 (s, 1H), 7.96 (d, 1H), 7.92 (d, 1H), 7.55-7.37 (m, 5H), 5.23 (m, 1H), 5.12 (m, 1H), 1.65 (dd, 3H) HRMS izračunato za C19H13ClN2S: 336.0488; nađeno 337.0551 (M+H)

Izrada 4z: 4-hloro-5-(1-naftil)-6-[(E)-prop-1-enil]tieno[2,3-d]pirimidin

Korak A: 5,5-dimetil-2-[(E)-prop-1-enil]-1,3,2-dioksaborinan

U rastvor od 0.172 g (E)-prop-1-en-1-il borne kiseline (2.0 mmol) i 0.208 g neopentil glikola (2.0 mmol) u 6 mL 2-Me-THF-a, doda se 20 mg Amberlyst 15H<+>jono-izmenjivačke smole i meša se na r.t. sve dok se ne zapazi da više nema konverzije. Konverzija se prati pomoću 1H-NMR merenja u CDCl3rastvoru. Smeša se filtrira kroz sloj celita, ispere sa 2 x 3 mL 2-Me-THF-a i filtrat se ukoncentriše in vacuo. Dobijeni sirovi materijal je dovoljne čistoće za sledeći korak. Sastoji se samo od E-stereoizomera.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 6.57 (m, 1H), 5.39 (dd, 1H), 3.63 (s, 4H), 1.83 (dd, 3H), 0.97 (s, 6H)

Korak B: Izrada 4z

Korišćenjem Opšte procedure IIcIIIb i jedinjenja Izrade 4s kao odgovarajućeg 6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i 5,5-dimetil-2-[(E)-prop-1-enil]-1,3,2-dioksaborinana (Korak A) kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se jedinjenje Izrade 4z.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.90 (s, 1H), 8.09 (d, 1H), 8.04 (d, 1H), 7.64 (dd, 1H), 7.58-7.53 (m, 1H), 7.50 (dd, 1H), 7.44 (m, 1H), 7.34 (d, 1H), 6.45 (m, 1H), 6.10-6.03 (m, 1H), 1.72 (dd, 3H) HRMS izračunato za C19H13ClN2S: 336.0488; nađeno 337.0550 (M+H)

Izrada 5a: (2R)-2-[[5-(3-hloro-2-metil-fenil)-6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-fenilpropanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4t kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i D-fenilalanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, sintetiše se jedinjenje Izrade 5a. Sirovi proizvod se prečisti putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, korišćenjem 0.1% TFA rastvora i acetonitrila kao eluenata i, dobija se jedinjenje Izrade 5a u vidu 1:1 smeše dijastereoizomera.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 13.15 (br s, 1H), 8.42-8.41 (s, 1H), 7.62-7.54 (d, 1H), 7.39-7.17 (t, 1H), 7.21-7.01 (m, d, 1H), 7.21 (m, 4H), 6.82-6.79 (d, 1H), 5.15-5.11 (d, 1H), 4.82-4.76 (q, 1H), 3.23-3.14 (dd, 1H), 2.73-2.67 (dd, 1H), 2.02-1.80 (s, 3H) HRMS izračunato za C22H17N2O2SClJ: 548.9775; nađeno 549.9842 i 549.9864 (M+H)

Izrada 5b: (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-jodotieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[(2-metilpirazol-3-il)metoksi]fenil]propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4a kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i jedinjenja Izrade A1 kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, što je praćeno HILIC prečišćavanjem, dobija se jedinjenje Izrade 5b kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. MS: (M+H) = 802.0

Izrada 5c: (2R)-2-[[5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-jodotieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[(2-etilpirazol-3-il)metoksi]fenil]propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4a kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i jedinjenja Izrade A7 kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, što je praćeno HILIC prečišćavanjem, dobija se jedinjenje Izrade 5c kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. MS: (M+H) = 816.0

Izrada 6a: (2R)-2-[[5-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 2b kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (2R)-2-amino-3-(2-hidroksifenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se jedinjenje Izrade 6a izolovano filtracijom.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 12.90 (br s, 1H), 9.65 (br s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.70 (m, 2H), 7.45-7.34 (m, 3H), 7.18 (dd, 1H), 7.04 (td, 1H), 6.80 (d, 1H), 6.72 (t, 1H), 4.96 (m, 1H), 3.31 (dd, 1H), 3.08 (dd, 1H) MS (M+H): 488.0

Izrada 6b: (2R)-3-(2-hidroksifenil)-2-[(5-jodo-6-prop-1-inil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)amino] propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 2c kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (2R)-2-amino-3-(2-hidroksifenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se jedinjenje Izrade 6b. Proizvod je izolovan filtracijom umesto hromatografijom. MS: (M+H) = 480.0

Izrada 6c: metil (2R)-2-[(6-etil-5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)amino]-3-fenil-propanoat

3.246 g jedinjenja Izrade 2a (10 mmol), 3.70 g [(1R)-1-benzil-2-metoksi-2-okso-etil] amonijum hlorida (17 mmol) i 13.03 g Cs2CO3(40 mmol) se rastvore u 15 mL DMSO i meša se na r.t. u atmosferi N2sve dok se zapaža konverzija. Smeša se onda zakiseli sa 2M HCl rastvorom na pH=1 i ekstrahuje sa 2 x 300 mL EtOAc. Spojene organske faze se isperu sa NaHCO3rastvorom, osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata kako se dobija jedinjenje Izrade 6c.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 8.39 (s, 1H), 7.33 (d, 1H), 7.30 (m, 2H), 7.25-7.22 (m, 3H), 5.11 (m, 1H), 3.69 (s, 3H), 3.33 (dd, 1H), 3.18 (dd, 1H), 2.82 (q, 2H), 1.23 (t, 3H) HRMS izračunato za C18H18N3O2S: 467.0164; nađeno 468.0242 (M+H)

Izrada 7a: etil (2R)-2-[[5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanoat

Korak A: (2R)-2-[[5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno [2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)ppropanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IId i jedinjenja Izrade 6a kao odgovarajućeg 5-jodotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i jedinjenja Izrade B4 kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se (2R)-2-[[5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanska kiselina. HRMS izračunato za C35H35ClFN5O4S: 675.2082; nađeno 676.2097 (M+H)

Korak B: Izrada 7a

2.3 g (2R)-2-[[5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanske kiseline (3.4 mmol) se rastvori u 20 mL 1.25 M HCl u EtOH i meša se na 40°C preko noći. Smeša se onda razblaži sa NaHCO3rastvorom i ekstrahuje se sa DCM. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu in vacuo. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem DCM i MeOH kao eluenata kako se dobija jedinjenje Izrade 7a. HRMS izračunato za C37H39ClFN5O4S: 703.2395; nađeno 704.2417 (M+H)

Izrada 7ad2: etil (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4- fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanoat

Korak A: (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IId i jedinjenja Izrade 6a kao odgovarajućeg 5-jodotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i jedinjenja Izrade B4 kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se (2R)-2-[[5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanska kiselina u vidu smeše dijastereomera. Smeša se razdvaj putem flash hromatografije korišćenjem HILIC eluenata. Dijastereoizomer koji se ranije eluira se sakuplja kao jedinjenje Izrade 7a1. MS (M+H): 676.2 Dijastereoizomer koji se kasnije eluira se sakuplja kao jedinjenje Izrade 7a2. MS (M+H): 676.2

Korak B: Izrada 7ad2

44.51 g jedinjenja Izrade 7a2 (6.67 mmol) se rastvori u 85 mL 1.25 M HCl u EtOH i meša se na 40°C preko noći. Smeša se pažljivo razblaži sa NaHCO3rastvorom i ekstrahuje se sa DCM. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu in vacuo. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem DCM i MeOH kao eluenata kako se dobija jedinjenje Izrade 7ad2.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9.49 (s, 1H), 8.40 (s, 1H), 7.34 (d, 1H), 7.27-7.21 (m, 3H), 7.20-7.14 (m, 2H), 7.00 (td, 1H), 6.71 (dd, 1H), 6.60 (td, 1H), 6.39 (dd, 1H), 5.03 (d, 1H), 4.92 (m, 1H), 4.26 (t, 2H), 4.03 (m, 2H), 3.03 (dd, 1H), 2.78 (t, 2H), 2.54 (br, 4H), 2.36 (dd, 1H), 2.30 (br, 4H), 2.12 (s, 3H), 1.83 (s, 3H), 1.10 (t, 3H) HRMS izračunato za C37H39ClFN5O4S: 703.2395; nađeno 704.2450 (M+H)

Izrada 7b: etil (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-prop-1-inil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanoat

Korak A: (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-prop-1-iniltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksi fenil)propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IIb i jedinjenja Izrade 6b kao odgovarajućeg 5-jodotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i jedinjenja Izrade B4 kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, Atafos kao katalizatora i THF:voda 3:1 kao rastvarača, dobija se smeša dijastereoizomera. Razdvajaju se putem flash hromatografije korišćenjem HILIC eluenata. Dijastereoizomer koji se kasnije eluira, sakuplja se kao (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-prop-1-inil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil) propanska kiselina. MS: (M+H): 620.2

Korak B: Izrada 7b

2.3 g (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-prop-1-iniltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanske kiseline (3.71 mmol) se rastvori u 20 mL 1.25M HCl u EtOH i meša se na 40°C preko noći. Smeša se razblaži sa NaHCO3rastvorom i ekstrahuje se sa DCM. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu in vacuo. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem EtOAc ili DCM i MeOH kao eluenata kako se dobija jedinjenje Izrade 7b.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9.47 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.00 (td, 1H), 6.70 (dd, 1H), 6.60 (td, 1H), 6.34 (d, 1H), 5.11 (d, 1H), 4.89 (m, 1H), 4.27 (t, 2H), 4.03 (m, 2H), 3.06 (dd, 1H), 2.79 (t, 2H), 2.55 (br, 4H), 2.40 (dd, 1H), 2.30 (br, 4H), 2.12 (s, 3H), 2.00 (s, 3H), 1.97 (s, 3H), 1.11 (t, 3H) HRMS izračunato za C34H38ClN5O4S: 647.2333; nađeno 648.2385 (M+H)

Izrada 7c: etil (2R)-2-[[5-[3-hloro-4-(2-dimetilaminoetiloksi)-2-metil-fenil]-6-prop-1-iniltieno [2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanoat

Korak A: (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-4-(2-dimetilaminoetiloksi)-2-metil-fenil]-6-prop-1-inil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IId i jedinjenja Izrade 6b kao odgovarajućeg 5-jodotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i jedinjenja Izrade B5 kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se smeša dijastereoizomera. Razdvajaju se putem flash hromatografije korišćenjem HILIC eluenata. Dijastereoizomer koji se kasnije eluira, sakuplja se kao (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-4-(2-dimetilaminoetiloksi)-2-metil-fenil]-6-prop-1-inil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il] amino]-3-(2-hidroksifenil) propanska kiselina. MS (M+H): 565.2

Korak B: Izrada 7c

2.3 g (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-4-(2-dimetilaminoetiloksi)-2-metil-fenil]-6-prop-1-iniltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanske kiseline (4.07 mmol) se rastvori u 20 mL 1.25M HCl u EtOH i meša se na 40°C preko noći. Dobijena smeša se razblaži sa NaHCO3rastvorom i ekstrahuje se sa DCM. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu in vacuo. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem DCM i MeOH kao eluenata kako se dobija jedinjenje Izrade 7c.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9.45 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.00 (td, 1H), 6.70 (dd, 1H), 6.60 (td, 1H), 6.34 (d, 1H), 5.12 (d, 1H), 4.89 (m, 1H), 4.26 (m, 2H), 4.03 (m, 2H), 3.06 (dd, 1H), 2.74 (t, 2H), 2.39 (dd, 1H), 2.27 (s, 6H), 2.01 (s, 3H), 1.97 (s, 3H), 1.11 (t, 3H) HRMS izračunato za C31H33ClN4O4S: 592.1911; nađeno 593.1954 (M+H)

Izrada 7d: etil (2R)-2-[[5-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanoat

2.5 g jedinjenja Izrade 6a (5.1 mmol) se rastvori u 20 mL 1.25M HCl u EtOH i meša se na 40°C preko noći. Dobijena smeša se razblaži sa aq. NaHCO3rastvorom i ekstrahuje se sa DCM. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu in vacuo. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata kako se dobija jedinjenje Izrade 7d.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.67 (s, 1H), 8.42 (s, 1H), 7.70 (m, 2H), 7.43-7.37 (m, 3H), 7.14 (dd, 1H), 7.05 (td, 1H), 6.80 (dd, 1H), 6.72 (td, 1H), 5.01 (m, 1H), 4.12 (q, 2H), 3.26 (dd, 1H), 3.14 (dd, 1H), 1.17 (t, 3H)

Izrada 7e: metil (2R)-2-[[6-etil-5-(4-hidroksi-2-metil-fenil)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]amino]-3-fenil-propanoat

934 mg jedinjenja Izrade 6c (2 mmol), 903 mg jedinjenja Izrade B6 (2.4 mmol), 231 mg Pd(PPh3)4(0.2 mmol), 662 mg Ag2CO3(2.4 mmol) i 81 µL metanola (2 mmol) se rastvore u 20 mL 2-Me-THF-a i meša se u MW reaktoru na 110°C dok ne prestane konverzija. Smeša se filtrira kroz Celit, razblaži sa 100 mL EtOAc, onda se doda 2.5 mL TBAF (1M rastvor u THF) i, smeša se meša na r.t. dok ne prestane konverzija. Smeša se onda ispere sa NH4Cl rastvorom i slanim rastvorom, osuši preko Na2SO4, filtrira i ukoncentriše i prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata kako se dobija jedinjenje Izrade 7e u vidu smeše dijastereoizomera.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.43-8.43 (s, 1H), 7.26-6.80 (m, 7H), 6.76-6.64 (m, 2H), 5.18 (m, 1H), 5.03 (m, 1H), 3.66-3.65 (s, 3H), 3.16-3.13 (dd, 1H), 2.73 (dd, 1H), 2.57 (m, 2H), 2.07-1.80 (s, 3H), 1.18-1.17 (t, 3H) MS (M+H): 448.2

Izrada 7f: metil (2R)-2-[[5-(3,5-dihloro-4-hidroksi-2-metil-fenil)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-fenil-propanoat

402 mg jedinjenja Izrade 7e (0.898 mmol) i 300 mg NCS (2.245 mmol) se rastvore u 5 mL THF-a i meša se na 60°C sve dok ne prestane konverzija. Isparljive materije se uklanjaju in vacuo, ostatak se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata kako se dobija naslovljeni proizvod u vidu smeše dijastereoizomera.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10.46-10.44 (s, 1H), 8.40-8.38 (s, 1H), 7.29-7.24 (s, 1H), 7.20 (m, 3H), 6.80-6.78 (d, 2H), 5.09-5.01 (d, 1H), 4.95 (m, 1H), 3.59-3.58 (s, 3H), 3.15-3.13 (dd, 1H), 2.78-2.61 (dd, 1H), 2.53 (q, 2H), 2.02-1.84 (s, 3H), 1.11 (t, 3H) HRMS izračunato za C25H23Cl2N3O3S: 515.0837; nađeno 516.0908 (M+H)

Izrada 7g: metil (2R)-2-[[5-(3-hloro-4-hidroksi-2-metil-fenil)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il] amino]-3-fenil-propanoat

Korišćenjem Opšte procedure IIc i jedinjenja Izrade 6c kao odgovarajućeg 5-jodotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i jedinjenja Izrade B2 kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se jedinjenje Izrade 7g u vidu smeše dijastereoizomera. MS (M+H): 482.1

Izrada 7gd1: metil (2R)-2-[[(5Sa)-5-(3-hloro-4-hidroksi-2-metil-fenil)-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]amino]-3-fenil-propanoat

Dijastereoizomeri jedinjenja Izrade 7g su razdvojeni putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata. Dijastereoizomer koji se kasnije eluira se sakuplja kao jedinjenje Izrade 7gd1.

<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10.53 (s, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.23 (m, 2H), 7.20 (m, 1H), 7.04 (d, 1H), 6.98 (d, 1H), 6.80 (m, 2H), 5.11 (d, 1H), 4.90 (m, 1H), 3.57 (s, 3H), 3.10 (dd, 1H), 2.63 (dd, 1H), 2.51-2.46 (m, 2H), 1.86 (s, 3H), 1.10 (t, 3H) HRMS izračunato za C25H24ClN3O3S: 481.1227; nađeno 482.1313 (M+H)

Izrada 7h: (2R)-2-[[6-etil-5-(1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-fenil-propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4v kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (2R)-2-amino-3-(2-hidroksifenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se jedinjenje Izrade 7h u vidu smeše dijastereoizomera.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 12.71-12.59 (br s, 1H), 11.48-11.37 (s, 1H), 8.35-8.30 (s, 1H), 7.64-7.53 (d, 1H), 7.45-7.39 (dd, 1H), 7.30-7.08 (t, 1H), 7.17-6.33 (m, 6H), 6.07-6.01 (s, 1H), 5.27 (d, 1H), 4.59/4.50 (m, 1H), 2.98-2.83 (dd, 1H), 2.56 (m, 2H), 2.35-2.15 (dd, 1H), 1.11-1.09 (t, 3H) HRMS izračunato za C25H22N4O2S: 442.1463; nađeno 443.1529 i 443.1538 (M+H)

Izrada 7i: metil (2R)-2-[[5-(3-hloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-fenilpropanoat

Korak A: metil (2R)-2-[[6-etil-5-(1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-fenil-propanoat

8.87 g jedinjenja Izrade 7h (20 mmol) se rastvori u 60 mL MeOH i doda se 5.88 mL cc. H2SO4(60 mmol). Smeša se meša na r.t. u atmosferi N2tokom 2 sata. Smeša se onda izruči u ledenu vodu, talog se filtrira da bi se dobio metil (2R)-2-[[6-etil-5-(1H-indol-4-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]amino]-3-fenil-propanoat u vidu smeše dijastereoizomera.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 11.52-11.43 (s, 1H), 8.39-8.34 (s, 1H), 7.65-7.57 (d, 1H), 7.47-7.42 (t, 1H), 7.30-7.11 (dd, 1H), 7.18-6.79 (m, 2H), 7.02 (m, 1H), 6.93 (m, 1H), 6.65 (m, 1H), 6.34 (m, 1H), 6.05 (dt, 1H), 5.28 (m, 1H), 4.71-4.62 (m, 1H), 3.55-3.41 (s, 3H), 2.91-2.77 (dd, 1H), 2.57 (m, 2H), 2.37-2.23 (dd, 1H), 1.11-1.10 (t, 3H) MS (M+H): 457.2 i 457.2

Korak B: Izrada 7i

8.477 g metil (2R)-2-[[6-etil-5-(1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-fenilpropanoat (18.5 mmol), 2.47 g NCS (18.5 mmol) i 30 mL abs. THF-a se meša na r.t. sve dok ne prestane konverzija. Onda se smeša izruči u ledenu vodu i ekstrahuje se sa EtOAc. Spojeni organski slojevi se osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobija jedinjenje Izrade 7i u vidu smeše dijastereoizomera.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 11.73-11.65 (d, 1H), 8.35-8.31 (s, 1H), 7.63-7.56 (d, 1H), 7.62-7.54 (d, 1H), 7.44-7.15 (dd, 1H), 7.20-7.03 (m, 3H), 7.04-6.84 (d, 1H), 6.70-6.44 (dm, 2H), 5.09-4.98 (d, 1H), 4.80-4.72 (m, 1H), 3.51-3.38 (s, 3H), 2.93-2.81 (dd, 1H), 2.52 (m, 2H), 2.46-2.29 (dd, 1H), 1.10-1.09 (t, 3H) HRMS izračunato za C26H23ClN4O2S: 490.1230; nađeno 491.1282 i 491.1316 (M+H)

Izrada 7j: 4-hloro-5-(3-hloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin

Smeša od 1.099 g jedinjenja Izrade 4v (3.5 mmol) i 0.572 g NCS (4.2 mmol) u 20 mL CCl4je mešana na r.t. sve dok ne prestane konverzija. Smeša se onda izruči na smrvljeni led i, ekstrahuje se sa DCM. Spojeni organski slojevi se osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobija 4-hloro-5-(3-hloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin Izrade 7j.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.79 (s, 1H), 8.33 (br s, 1H), 7.47 (dd, 1H), 7.31 (t, 1H), 7.18 (d, 1H), 7.03 (dd, 1H), 2.73 (m, 2H), 1.24 (t, 3H)

Izrada 8a: (E)-4-(dimetilamino)-1,1-dimetoksi-but-3-en-2-on

502.1 g 1,1-dimetoksipropan-2-ona (4.25 mol) i 506.4 g 1,1-dimetoksi-N,N-dimetilmetanamina (4.25 mol) se pomeša u 2 L-skom balonu i, meša se na 105°C 3 sata. Formirani MeOH se kontinuirano uklanja destilacijom. Kada prestane stvaranje MeOH (na 65°C glavna temperatura), reakciona smeša se vakuumski destiliše (smanjivanjem pritiska polako na 30 mbar) kako bi se uklonili sporedni proizvodi i neizreagovani polazni materijali. Sirovi proizvod se destiliše na 0.1 mbar. Frakcije se sakupljaju između 107-118°C glavna temperatura (temperatura kupatila 160-165°C) kako se dobija ulje žute boje.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 7.59 (d, 1H), 5.17 (d, 1H), 4.42 (s, 1H), 3.25 (s, 6H), 3.09 (s, 3H), 2.78 (s, 3H)

Izrada 8b: 4-(dimetoksimetil)-2-metilsulfonil-pirimidin

Korak A: 4-(dimetoksimetil)-2-metilsulfanil-pirimidin

198 g natrijum metoksida (3.67 mmol) se rastvori u 3 L MeOH i ohladi na 0°C. Deo po deo, doda se 322 g tiokarbamida (4.23 mol) i, smeša se meša 1 sat. Zatim se, kap po kap, doda 488 g jedinjenja Izrade 8a (2.82 mol) na 0°C, onda se greje na 70°C sve dok ne prestane konverzija. Ohladi se na r.t., kap po kap, doda se 237 mL metil jodida (3.81 mol) uz održavanje temperature ispod 28°C i, nastala smeša se meša preko noći na r.t. Filtrira se, filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom, razblaži sa EtOAc, ispere sa vodom i slanim rastvorom. Spojeni vodeni slojevi se ekstrahuju sa EtOAc. Spojeni organski slojevi se osuše preko Na2<SO>4<,>filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u 500 mL Et2O, filtrira kroz sloj silike, korišćenjem Et2O kao eluenta. Filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom kako se dobija ulje svetlo smeđe boje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.69 (d, 1H), 7.23 (d, 1H), 5.22 (s, 1H), 3.33 (s, 6H), 2.52 (s, 3H)

Korak B: Izrada 8b

U rastvor 180 g 4-(dimetoksimetil)-2-metilsulfanil-pirimidina (940 mmol) u 1.5 L metanola i 1.5 L vode, doda se 752 g Oksone® (kalijum peroksimonosulfat, 1220 mmol) iz delova na -5°C, zatim se meša na 0°C preko noći. Reakciona smeša se ukoncentriše pod sniženim pritiskom do polovine zapremine korišćenjem kupatila na 30°C i, zatim se smeša filtrira i talog se ispere sa DCM. Filtrat se ekstrahuje sa DCM. Spojeni organski slojevi se osuše preko MgSO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom kako se dobija ulje svetlo smeđe boje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.98 (d, 1H), 7.97 (d, 1H), 5.36 (s, 1H), 3.47 (s, 6H), 3.39 (s, 3H)

Izrada 9a: hidrohlorid metil (2R)-2-amino-3-(2-hidroksifenil)propanoata

24.6 g (2R)-2-amino-3-(2-hidroksifenil)propanske kiseline (136 mmol) se meša na r.t. u 900 mL rastvora 3M HCl u metanolu, u toku 40 sati. Reakciona smeša se ukoncentriše pod sniženim pritiskom uz održavanje temperature kupatila ispod 40°C. Ostatak se trituriše sa dietil etrom kako se dobija proizvod u vidu kremasto prebojenog sjajnog praška. HRMS izračunato za C11H15NO3(slobodna baza): 209.1052; nađeno 210.1128 (M+H)

Izrada 9b: metil (2R)-2-(terc-butoksikarbonilamino)-3-(2-hidroksifenil)propanoat

16.7 g jedinjenja Izrade 9a (73.0 mmol) se suspenduje u 180 mL DCM. Doda se 30.5 mL (219 mmol) TEA i rastvor se ohladi korišćenjem voda-led kupatila. Rastvor od 15.6 g di-terc-butil bikarbonata (73.0 mmol) u 75 mL DCM se doda polako (2.5 sata). Smeša se meša preko noći na r.t. Zatim se doda 100 mL vode i organska faza se razdvoji, ispere sa vodom, 1M HCl rastvorom i, konačno ponovo sa vodom. Organska faza se osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom kako se dobija proizvod u vidu ulja.

Izrada A1: (2R)-2-amino-3-[2-[(2-metilpirazol-3-il)metoksi]fenil]propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IXa i (2-metilpirazol-3-il)metanola kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, dobija se jedinjenje Izrade A1. MS (M+H): 276.2

Izrada A2: (2R)-2-amino-3-[2-[(2-etoksipirimidin-4-il)metoksi]fenil]propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IXa i Izrade C1 kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, dobija se jedinjenje Izrade A2. MS (M+H): 318.1

Izrada A3: (2R)-2-amino-3-[2-[(2-butilpirazol-3-il)metoksi]fenil]propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IXa i Izrade C2 kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, dobija se jedinjenje Izrade A3. MS (M+H): 318.2

Izrada A4: (2R)-2-amino-3-[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi]fenil]propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IXa i Izrade C3 kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, dobija se jedinjenje Izrade A4. MS (M+H): 380.2

Izrada A5: (2R)-2-amino-3-[2-(2-piridilmetoksi)fenil]propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IXa i 2-piridilmetanola kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, dobija se jedinjenje Izrade A5. MS (M+H): 273.1

Izrada A6: (2R)-2-amino-3-[2-(2,2,2-trifluoroetoksi)fenil]propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IXb i 2,2,2-trifluoroetil trifluorometansulfonata, kao odgovarajućeg alkilirajućeg sredstva, dobija se jedinjenje Izrade A6. MS (M+H): 264.1

Izrada A7: (2R)-2-amino-3-[2-[(2-etilpirazol-3-il)metoksi]fenil]propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IXa i (2-etilpirazol-3-il)metanola kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, dobija se jedinjenje Izrade A7. HRMS izračunato za C15H19N3O3: 289.1426, nađeno: 290.1512 (M+H)

Izrada A8: (2R)-2-amino-3-[2-[[2-(2,2,2-trifluoroetoksi)pirimidin-4-il]metoksi]fenil] propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IXa i Izrade C8 kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, dobija se jedinjenje Izrade A8. MS (M+H): 372.1

Izrada A9: (2R)-2-amino-3-[2-[2-(dimetilamino)-2-okso-etoksi]fenil]propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IXb i 2-hloro-N,N-dimetilacetamida, kao odgovarajućeg alkilirajućeg sredstva, dobija se jedinjenje Izrade A9. MS (M+H): 267.1

Izrada A10: (2R)-2-amino-3-[2-(2-ciklopentiletoksi)fenil]propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IXa i 2-ciklopentiletanola kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, dobija se jedinjenje Izrade A10. MS (M+H): 278.2

Izrada A11: hidrohlorid (2R)-2-amino-3-(2-fenetiloksifenil)propanske kiseline

Korišćenjem Opšte procedure IXa i 2-feniletanola kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, dobija se jedinjenje Izrade A11. MS (M+H): 286.1

Izrada A12: (2R)-2-amino-3-[2-(3-fenilpropoksi)fenil]propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IXa i 3-fenilpropan-1-ola kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, dobija se jedinjenje Izrade A12. MS (M+H): 300.2

Izrada A13: (2R)-2-amino-3-[2-[(3-hlorofenil)metoksi]fenil]propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IXa i (3-hlorofenil)metanola kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, dobija se jedinjenje Izrade A13. MS (M+H): 306.1

Izrada A14: (2R)-2-amino-3-[2-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IXa i 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanola kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, dobija se jedinjenje Izrade A14. MS (M+H): 308.2

Izrada A15: (2R)-2-amino-3-[2-(2-dimetilaminoetiloksi)fenil]propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IXa i 2-(dimetilamino)etanola kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, dobija se jedinjenje Izrade A15. MS (M+H): 253.2

Izrada A16: (2R)-2-amino-3-[2-[3-(dimetilamino)propoksi]fenil]propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure IXa i 3-(dimetilamino)propan-1-ola kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, dobija se jedinjenje Izrade A16. MS (M+H): 267.2

Izrada B1: 3-metil-4-(3,3,4,4-tetrametilborolan-1-il)-1H-indol

1.87 g 4-bromo-3-metil-1H-indola (8.9 mmol), 5.028 g bis(pinakolato)dibora (19.6 mmol) i 2.65 g kalijum acetata (26.7 mmol) se rastvori u 35 mL suvog DMF-a pod argonom, zatim se doda 652 mg [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijuma(II) (0.89 mmol). Reakciona smeša je grejana na 85°C i mešana sve dok se ne zapazi završetak konverzije. Zatim se ukoncentriše pod sniženim pritiskom i prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata, kako se dobija jedinjenje Izrade B1.

<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.92 (br s, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.42 (dd, 1H), 7.16 (t, 1H), 7.01 (d, 1H), 2.47 (d, 3H), 1.40 (s, 12H) HRMS izračunato za C15H20NO2B: 257.1587; nađeno 258.1665 (M+H)

Izrada B2: 2-hloro-3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenol

Korak A: (4-bromo-2-hloro-fenoksi)-trimetil-silan

20.8 g 4-bromo-2-hloro-fenol (100 mmol) se rastvori u 150 mL suvog THF-a, zatim se doda 24.2 g HMDS (150 mmol). Reakciona smeša se meša na 85°C u atmosferi argona u toku 1.5 sata, zatim ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Dobijeni sirovi proizvod se koristi bez prethodnog prečišćavanja.<1>H NMR (200 MHz, CDCl3) δ: 7.49 (d, 1H), 7.23 (dd, 1H), 6.75 (d, 1H), 0.26 (s, 9H)

Korak B: 4-bromo-2-hloro-3-metil-fenol

48 mL<n>BuLi rastvora (120 mmol, 2.5 M u heksanima) se, u vidu kapi, doda u rastvor 12.1 g suvog DIPA (120 mmol) u 250 mL suvog THF-a na -78°C u atmosferi argona. Smeša se meša tokom 30 minuta na istoj temperaturi, zatim se, kap po kap, doda 28.0 g (4-bromo-2-hloro-fenoksi)-trimetil-silana (100 mmol). Posle 2.5 sata, u vidu kapi, doda se 21.3 g MeJ (150 mmol) i zatim, ukloni se kupatilo za hlađenje i, smeša se meša preko noći. Reakcija se ugasi sa 100 mL NH4OH rastvora i 200 mL NH4Cl rastvora, zatim se ekstrahuje sa EtOAc. Organska faza se osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Dobijena tamna masa se podvrgne refluksu sa č istim heksanom nekoliko puta (150-150 mL alikvoti) i dekantuje, ostavljajući crni katran iza sebe. Spojene organske faze se ukoncentrišu pod sniženim pritiskom dajući 19.0 g sirovog proizvoda, koji se koristi bez prethodnog prečišćavanja.

<1>H NMR (200 MHz, CDCl3) δ: 7.32 (d, 1H), 6.76 (d, 1H), 5.62 (s, 1H), 2.49 (s, 3H)

Korak C: (4-bromo-2-hloro-3-metil-fenoksi)-trimetil-silan

20.8 g HMDS (129 mmol) se doda u rastvor od 19.0 g 4-bromo-2-hloro-3-metilfenola (86.0 mmol) u 150 mL suvog THF-a. Smeša se meša na 85°C pod balonom sa argonom u toku 1.5 sata i zatim se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Dobijeni proizvod se koristi bez prethodnog prečišćavanja.<1>H NMR (200 MHz, CDCl3) δ: 7.30 (d, 1H), 6.63 (d, 1H), 2.50 (s, 3H), 0.28 (s, 9H)

Korak D: Izrada B2

Rastvor od 25.2 g (4-bromo-2-hloro-3-metil-fenoksi)-trimetil-silana (86.0 mmol) u 250 mL suvog THF-a se ohladi na -78°C pod argonom i, zatim se, kap po kap, doda 38 mL<n>BuLi rastvora (94.6 mmol, 2.5M u heksanima). Posle 5 minuta, u vidu kapi, doda se 19.2 g 2-izopropoksi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana (103 mmol). Kupatilo za hlađenje se uklanja i, smeša se ostavlja da se zagreje na r.t. Zatim se smeša dodaje u 200 mL NH4Cl rastvora i ekstrahuje sa EtOAc. Spojene organske faze se ukoncentrišu pod sniženim pritiskom i propuste kroz sloj silika gela korišćenjem heksana i EtOAc kao eluenata. Sirovi proizvod se rekristališe iz smeše EtOAc i heksana, kako se dobija jedinjenje Izrade B2.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10.40 (s, 1H), 7.42 (d, 1H), 6.80 (d, 1H), 2.49 (s, 3H), 1.27 (s, 12H)

Izrada B3: [2-hloro-3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi]-triizopropil-silan

Korak A: (4-bromo-2-hloro-fenoksi)-triizopropil-silan

200 g 4-bromo-2-hloro-fenola (0.97 mol) i 126 mL TIPSCl (1.18 mol) rastvore se u 1.6 L DCM. Doda se 167 g imidazola (2.45 mol) i smeša se meša na r.t. u toku 2 sata. Zatim se isparljive materije upare pod sniženim pritiskom i ostatak se rastvori u 1.5 L EtOAc. Smeša se ispere sa slanim rastvorom, osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Onečišćenje triizopropilsilil hidroksid se uklanja destilacijom (120°C na 0.01 mmHg). Ostatak se filtrira kroz kratak sloj silike sa heksanom i ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Proizvod (bezbojno ulje) se koristi u sledećem koraku bez prethodnog prečišćavanja.

<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.49 (d, 1H), 7.21 (dd, 1H), 6.78 (d, 1H), 1.31 (septet, 3H), 1.14 (d, 18H) MS (EI, 70 eV) m/z (% relativnog intenziteta, [jon]): 63 (30), 79 (24), 93 (41), 170 (17), 235 (19), 251 (16), 265 (24), 293 (23), 319 (77), 321 (100), 323 (28), 362 (1, [M<+>]).

Korak B: (4-bromo-2-hloro-3-metil-fenoksi)-triizopropil-silan

76.0 mL suvog DIPA (0.54 mol) se rastvori u 1.2 L suvog THF-a u atmosferi argona i, u vidu kapi, doda se 51.2 mL<n>BuLi rastvora (0.512 mol, 10M u heksanima) na -78°C. Smeša se meša 45 minuta na istoj temperaturi. Zatim se, kap po kap, doda 178 g (4-bromo-2-hlorofenoksi)-triizopropil-silana (0.488 mol) na -78°C i, suspenzija bele boje se meša sve dok se ne zapazi prestanak konverzije. Onda se doda 36.5 mL MeJ (0.586 mmol) na ovoj temperaturi i, reakciona smeša se meša preko noći bez daljeg hlađenja. Isparljive materije se upare pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u 1.5 L EtOAc, ispere sa slanim rastvorom. Organska faza se osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se filtrira kroz kratak sloj silike korišćenjem heksana kao eluenta i ukoncentriše pod sniženim pritiskom, kako se dobija proizvod u vidu ulja bledo žute boje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.30 (d, 1H), 6.68 (d, 1H), 2.53 (s, 3H), 1.32 (septet, 3H), 1.14 (d, 18H)

Korak C: Izrada B3

178 g (4-bromo-2-hloro-3-metil-fenoksi)-triizopropil-silana (0.472 mol) se rastvori u 1.4 L suvog THF-a u atmosferi argona i, u vidu kapi, doda se 52 mL<n>BuLi rastvora (0.52 mol, 10M u heksanima) na -78°C. Smeša se meša u toku 5 minuta na ovoj temperaturi. Zatim se doda 116 mL 2-izopropoksi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana (0.569 mol) i, smeša se ostavlja da se zagreje na r.t. Isparljive materije se upare pod sniženim pritiskom. Ostatak se rastvori u 1.5 L EtOAc, ispere sa slanim rastvorom. Organska faza se osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Onečišćenje 2-izopropoksi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan se uklanja destilacijom (80°C pri 0.01 mmHg). Sirovi proizvod se trituriše u MeOH dajući jedinjenje Izrade B3 u vidu bele čvrste materije.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.53 (d, 1H), 6.74 (d, 1H), 2.60 (s, 3H), 1.34 (s, 12H), 1.32 (m, 3H), 1.12 (d, 18H)

Izrada B4: 1-[2-[2-hloro-3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi]etil]-4-metil-piperazin

10.0 g jedinjenja Izrade B2 (37.2 mmol), 8.7 g 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanola (60.3 mmol) i 15.8 g PPh3(60.3 mmol) se rastvori u 100 mL suvog toluena i zatim se, uvidu kapi, doda 27 mL dietil azodikarboksilata (60.3 mmol, 40 % rastvor u toluenu). Smeša se meša na 50°C pod argonom sve dok se ne zapazi prestanak konverzije. Isparljive materije se upare pod sniženim pritiskom i doda se 100 mL Et2O. Istaloženi beli kristali se odfiltriraju i isperu sa Et2O. Filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom i prečisti putem flash hromatografije korišćenjem CHCl3i MeOH kao eluenata. Dobijeno ulje svetlo smeđe boje se kristališe iz heksana da bi se dobilo jedinjenje Izrade B4 u vidu čvrste materije zatvoreno-bele boje.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 7.56 (d, 1H), 6.99 (d, 1H), 4.15 (t, 2H), 2.72 (t, 2H), 2.51 (s, 3H), 2.50 (br s, 4H), 2.29 (br s, 4H), 2.13 (s, 3H), 1.29 (s, 12H)

Izrada B5: 1-[2-[2-hloro-3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenoksi]etil]-4-metil-piperazin

10.0 g jedinjenja Izrade B2 (37.2 mmol), 5.366 g N,N-dimetiletanolamina (60.3 mmol) i 15.8 g PPh3(60.3 mmol) se rastvore u 100 mL suvog toluena i onda se, kap po kap, doda 27 mL dietil azodikarboksilata (60.3 mmol, 40 % rastvor u toluenu). Smeša se meša na 50°C pod argonom sve dok se ne zapazi prestanak konverzije. Isparljive materije se upare pod sniženim pritiskom i, doda se 100 mL Et2O. Istaloženi beli kristali se odfiltriraju i isperu sa Et2O. Filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom i prečisti putem flash hromatografije korišćenjem CHCl3i MeOH kao eluenata. Nastalo ulje svetlo smeđe boje kristališe iz heksana kako se dobija jedinjenje Izrade B5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.56 (d, 1H), 6.99 (d, 1H), 4.13 (t, 2H), 2.66 (t, 2H), 2.51 (s, 3H), 2.23 (s, 6H), 1.29 (s, 12H)

Izrada B6: [4-(5,5-dimetil-1,3,2-dioksaborinan-2-il)-3-metil-fenoksi]-triizopropil-silan

Korak A: 4-(5,5-dimetil-1,3,2-dioksaborinan-2-il)-3-metil-fenol

4.675 g (4-hidroksi-2-metil-fenil)borne kiseline (30.76 mmol), 3.204 neopentil glikola (32.9 mmol), Amberlyst 15H<+>i 150 mL 2-Me-THF-a se mešaju na r.t. u N2atmosferi sve dok se ne zapazi prestanak konverzije. Smeša se onda filtrira kroz Celit i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom kako se dobija 4-(5,5-dimetil-1,3,2-dioksaborinan-2-il)-3-metil-fenol.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.64 (m, 1H), 6.60 (m, 2H), 5.23 (br s, 1H), 3.75 (s, 4H), 2.47 (s, 3H), 1.01 (s, 6H)

Korak B: Izrada B6

30.76 mmol 4-(5,5-dimetil-1,3,2-dioksaborinan-2-il)-3-metil-fenola, 8.56 mL TIPSCl (40 mmol) i 4.19 g imidazola (61.52 mmol) se rastvori u 100 mL DCM i meša se na r.t. u atmosferi N2sve dok se ne zapazi prestanak konverzije. Imidazolijum hidrohlorid se uklanja filtracijom, filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom i prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata kako se dobija jedinjenje Izrade B6.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.62 (d, 1H), 6.68-6.66 (m, 2H), 3.76 (s, 4H), 2.47 (s, 3H), 1.32-1.21 (m, 3H), 1.11 (d, 18H), 1.03 (s, 6H)

Izrada B7: 2-(3-bromo-2-metil-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan

2.362 g 2,6-dibromo-toluena (9.45 mmol) se rastvori u 10 mL suvog THF-a u atmosferi N2i, smeša se ohladi na -78°C. Onda se, u vidu kapi, doda 5.2 mL<n>BuLi (2.0M u pentanu, 10.4 mmol) i, smeša se meša u toku 15 minuta. Onda se, u vidu kapi, doda 2.31 mL 2-izopropoksi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana (11.3 mmol) i, smeša se ostavlja da se zagreje na r.t.. Meša se sve dok se ne zapazi prestanak konverzije. Zatim se smeša ugasi sa vodenim NH4Cl rastvorom, onda ekstrahuje sa EtOAc. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata kako se dobija jedinjenje Izrade B7.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 7.67 (d, 1H), 7.62 (d, 1H), 7.10 (t, 1H), 2.53 (s, 3H), 1.29 (s, 12H)

Izrada C1: (2-etoksipirimidin-4-il)metanol

Korak A: 4-(dimetoksimetil)-2-etoksi-pirimidin

1500 mg jedinjenja Izrade 8b (6.46 mmol) se rastvori u 60 mL etanola, onda se doda 527 mg natrijum etoksida (7.75 mmol) i smeša se meša na r.t. tokom 1 sata. Isparljive materije se upare pod sniženim pritiskom i, ostatak se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata da bi se dobio 4-(dimetoksimetil)-2-etoksi-pirimidin. MS (M+H): 199.2

Korak B: Izrada C1

Korišćenjem Opšte procedure Va i 4-(dimetoksimetil)-2-etoksi-pirimidina kao odgovarajućeg acetala, dobija se jedinjenje Izrade C1 was obtained. MS (M+H): 155.2

Izrada C2: (1-butil-1H-pirazol-5-il)metanol

Korišćenjem Opšte procedure Vb i 1-butilpirazola kao odgovarajućeg alkil pirazola, dobija se jedinjenje Izrade C2.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.30 (d, 1H), 6.12 (d, 1H), 5.23 (t, 1H), 4.49 (d, 2H), 4.06 (t, 2H), 1.72 (m, 2H), 1.26 (m, 2H), 0.88 (t, 3H) MS (M+H): 155.2 Izrada C3: [2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metanol

Korak A: 4-(dimetoksimetil)-2-(2-metoksifenil)pirimidin

Korišćenjem Opšte procedure Vc i 2-metoksibenzamidinske soli sirćetne kiseline kao odgovarajuće amidinske soli, dobija se 4-(dimetoksimetil)-2-(2-metoksifenil)pirimidin.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.93 (d, 1H), 7.55-7.44 (m, 3H), 7.16 (d, 1H), 7.06 (m, 1H), 5.31 (s, 1H), 3.76 (s, 3H), 3.37 (s, 6H)

Korak B: Izrada C3

261 mg 4-(dimetoksimetil)-2-(2-metoksifenil)pirimidina (1.0 mmol) se rastvori u 2 mL HCl u dioksanu (4M rastvora), onda se doda 2 mL vode i ova smeša se meša na 50°C tokom 16 sati. Reakciona smeša se ohladi na 0°C, zatim se, deo po deo, doda 320 mg NaOH (8.0 mmol). pH se podesi na 8 korišćenjem 10 % K2CO3rastvora, zatim se doda 76 mg natrijum borohidrida (2.0 mmol) i smeša se meša u toku 30 minuta na 0°C. Reakciona smeša se razblaži sa 5 mL vode i ekstrahuje se sa EtOAc. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata kako se dobija jedinjenje Izrade C3.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.84 (d, 1H), 7.50-7.42 (m, 3H), 7.14 (d, 1H), 7.03 (m, 1H), 5.66 (t, 1H), 4.58 (d, 2H), 3.75 (s, 3H)

Izrada C4: (1-terc-butil-1H-pirazol-5-il)metanol

Korak A: 1-terc-butil-5-(dimetoksimetil)-1H-pirazol

Korišćenjem Opšte procedure Vd i terc-butilhidrazin hidrohlorida kao odgovarajućeg hidrazin hidrohlorida, dobija se 1-terc-butil-5-(dimetoksimetil)-1H-pirazol.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.34 (d, 1H), 6.34 (d, 1H), 5.74 (s, 1H), 3.24 (s, 6H), 1.57 (s, 9H)

Pažnja: 1-terc-butil-3-(dimetoksimetil)-1H-pirazol se takođe dobija.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.75 (d, 1H), 6.18 (d, 1H), 5.34 (s, 1H), 3.24 (s, 6H), 1.50 (s, 9H)

Korak B: Izrada C4

Korišćenjem Opšte procedure Ve i 1-terc-butil-5-(dimetoksimetil)-1H-pirazola kao odgovarajućeg acetala, dobija se jedinjenje Izrade C4.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.27 (d, 1H), 6.19 (d, 1H), 5.31 (t, 1H), 4.61 (d, 2H), 1.56 (s, 9H)

Izrada C5: [2-(2-metoksietil)pirimidin-4-il]metanol

Korak A: 4-(dimetoksimetil)-2-(2-metoksietil)pirimidin

Korišćenjem Opšte procedure Vc i 3-metoksipropanamidin hidrohlorida kao odgovarajućeg amidin hidrohlorida, dobija se 4-(dimetoksimetil)-2-(2-metoksietil)pirimidin.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.78 (d, 1H), 7.38 (d, 1H), 5.25 (s, 1H), 3.80 (t, 2H), 3.33 (s, 6H), 3.22 (s, 3H), 3.11 (t, 2H)

Pažnja: 2-[4-(dimetoksimetil)pirimidin-2-il]-N,N-dimetil-etanamin se takođe dobija. MS (M+H): 226.2

Korak B: Izrada C5

Korišćenjem Opšte procedure Va i 4-(dimetoksimetil)-2-(2-metoksietil)pirimidina kao odgovarajućeg acetala, dobija se jedinjenje Izrade C5.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.70 (d, 1H), 7.39 (d, 1H), 5.60 (t, 1H), 4.52 (d, 2H), 3.78 (t, 2H), 3.22 (s, 3H), 3.06 (t, 2H)

Izrada C6: [1-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-pirazol-5-il]metanol

Korak A: 5-(dimetoksimetil)-1-(2,2,2-trifluoroetil)-4,5-dihidro-1H-pirazol-5-ol

Korišćenjem Opšte procedure Vd bez natrijum metoksida i korišćenjem etanola umesto metanola i 2,2,2-trifluoroetilhidrazina (70 w/w% u vodi) kao odgovarajućeg hidrazina, dobija se 5-(dimetoksimetil)-1-(2,2,2-trifluoroetil)-4,5-dihidro-1H-pirazol-5-ol.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 6.83 (t, 1H), 6.03 (s, 1H), 4.30 (s, 1H), 3.95 (m, 1H), 3.47 (m, 1H), 3.40 (d, 6H), 2.88 (m, 1H), 2.50 (m, 1H)

Korak B: Izrada C6

Korišćenjem Opšte procedure Ve i 5-(dimetoksimetil)-1-(2,2,2-trifluoroetil)-4,5-dihidro-1H-pirazol-5-ola kao odgovarajućeg acetala, dobija se jedinjenje Izrade C6.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 7.48 (d, 1H), 6.27 (d, 1H), 5.46 (t, 1H), 5.08 (q, 2H), 4.56 (d, 2H)

Izrada C7: (2-(morfolin-4-il)pirimidin-4-il)metanol

Korak A: 4-[4-(dimetoksimetil)pirimidin-2-il]morfolin

25.0 g jedinjenja Izrade 8b (107.6 mmol) se rastvori u 161 mL morfolina i smeša se meša na r.t. sve dok se ne zapazi prestanak konverzije. Zatim se ukoncentriše pod sniženim pritiskom i sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije, korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata da bi se dobip 4-[4-(dimetoksimetil)pirimidin-2-il]morfolin.

Korak B: Izrada C7

Korišćenjem Opšte procedure Va i 4-[4-(dimetoksimetil)pirimidin-2-il]morfolina kao odgovarajućeg acetala, dobija se jedinjenje Izrade C7.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.35 (d, 1H), 6.75 (dm, 1H), 5.431 (t, 1H), 4.36 (dm, 2H), 3.67 (m, 4H), 3.63 (m, 4H)

Izrada C8: [2-(2,2,2-trifluoroetoksi)pirimidin-4-il]metanol

Korak A: 4-(dimetoksimetil)-2-(2,2,2-trifluoroetoksi)pirimidin

5.00 g jedinjenja Izrade 8b (21.5 mmol) se rastvori u 54 mL suvog acetonitrila, onda se doda 5.95 g K2CO3(43.1 mmol) i 3.24 g 2,2,2-trifluoroetanola (32.3 mmol) i, smeša se meša na 60°C sve dok se ne zapazi prestanak konverzije. Reakciona smeša se ohladi, filtrira, čvrsta materija se ispere sa EtOAc, onda se filtrat ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata da bi se dobio 4-(dimetoksimetil)-2-(2,2,2-trifluoroetoksi)pirimidin.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.74 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 5.25 (s, 1H), 5.05 (q, 2H), 3.34 (s, 6H)

Korak B: Izrada C8

Korišćenjem Opšte procedure Va i 4-(dimetoksimetil)-2-(2,2,2-trifluoroetoksi) pirimidina, kao odgovarajućeg acetala, dobija se jedinjenje Izrade C8.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.65 (d, 1H), 7.32 (d, 1H), 5.69 (t, 1H), 5.02 (q, 2H), 4.51 (d, 2H)

Izrada C9: [2-(2-fluorofenil)pirimidin-4-il]metanol

Korak A: 2-fluoro-N’-hidroksi-benzamidin

Smeša od 11.48 g hidroksilamin hidrohlorida (165 mmol), 13.87 g NaHCO3(165 mmol) i 120 mL MeOH se meša na r.t. u toku 30 minuta. Zatim se doda 10 g 2-fluorobenzonitrila (82.6 mmol) i, smeša se meša na 75°C sve dok se ne zapazi prestanak konverzije. Rastvarač se delimično upari pod sniženim pritiskom, ostatak se filtrira, ispere sa MeOH. Filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom, zatim razblaži sa vodom i ekstrahuje sa EtOAc. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom kako se dobija 2-fluoro-N’-hidroksi-benzamidin.

Korak B: 2-fluorobenzamidin

12.67 g 2-fluoro-N’-hidroksi-benzamidina (81.55 mmol) se rastvori u 300 mL AcOH na 0°C i, doda se 9.24 mL Ac2O (97.86 mmol). Smeša se meša na r.t. sve dok se ne zapazi prestanak konverzije. Zatim se doda 630 mg 10% Pd/C i, smeša se meša u atmosferi H2(4 bara) sve dok se ne zapazi prestanak konverzije. Smeša se filtrira kroz celit i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom da bi se dobip 2-fluorobenzamidin acetat. MS (M(slobodna baza)+H): 139.4

Korak C: 4-(dimetoksimetil)-2-(2-fluorofenil)pirimidin

Korišćenjem Opšte procedure Vc i 2-fluorobenzamidina, kao odgovarajućeg amidina, dobija se 4-(dimetoksimetil)-2-(2-fluorofenil)pirimidin. MS (M+H): 249.2

Korak D: Izrada C9

Korišćenjem Opšte procedure Va i 4-(dimetoksimetil)-2-(2-fluorofenil)pirimidina, kao odgovarajućeg acetala, dobija se jedinjenje Izrade C9. MS (M+H): 205.2

Izrada C10: [2-[2-(2-metoksietoksi)fenil]pirimidin-4-il]metanol

Korak A: N’-hidroksi-2-metoksietoksi-benzamidin

2 eq. hidroksilamin hidrohlorid se rastvori u MeOH (1mL/mmol), zatim se doda 2 eq. NaHCO3. Smeša se meša na r.t. u toku 20 minuta, onda se doda 1 eq. 2-metoksietoksibenzonitrila i smeša se meša na refluksu sve dok se ne zapazi prestanak konverzije. MeOH se delimično upari, a ostatak se filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Dobijeni N’-hidroksi-2-(2-metoksietoksi)benzamidin se koristi bez prethodnog prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 9.48 (s, 1H), 7.45 (m, 1H), 7.34 (m, 1H), 7.08 (d, 1H), 6.94 (td, 1H), 5.65 (br s, 2H), 4.17 (m, 2H), 3.67 (m, 2H), 3.31 (s, 3H)

MS (M+H): 211.2

Korak B: 2-metoksietoksi-benzamidin

8.22 g N’-hidroksi-2-(2-metoksietoksi)benzamidin (39.1 mmol) se rastvori u 80 mL AcOH na 0°C, zatim se, kap po kap, doda 4.43 mL Ac2O (46.92 mmol). Smeša se meša na r.t. sve do zapažanja kraja konverzije. Doda se 575 mg 10 % Pd/C i smeša se meša u atmosferi H2(4 bars) sve dok se ne zapazi kraj konverzije. Smeša se filtrira kroz celit i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom, kako se dobija 2-(2-metoksietoksi)benzamidin acetat. MS (M+H): 195.2

Korak C: 4-(dimetoksimetil)-2-[2-metoksietoksi-fenil]pirimidin

Korišćenjem Opšte procedure Vc i 2-(2-metoksietoksi)benzamidin acetata kao odgovarajuće amidinske soli, dobija se 4-(dimetoksimetil)-2-[2-metoksietoksi-fenil]pirimidin.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.92 (d, 1H), 7.55 (m, 1H), 7.47 (m, 1H), 7.45 (m, 1H), 7.17 (d, 1H), 7.08 (m, 1H), 5.29 (s, 1H), 4.12 (m, 2H), 3.57 (m, 2H), 3.36 (s, 6H), 3.20 (s, 3H) MS (M+H): 305.0

Korak D: Izrada C10

Korišćenjem Opšte procedure Va i 4-(dimetoksimetil)-2-[2-metoksietoksi-fenil] pirimidina kao odgovarajućeg acetala, dobija se jedinjenje Izrade C10.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ: 8.84 (d, 1H), 7.53 (m, 1H), 7.47 (m, 1H), 7.43 (m, 1H), 7.14 (d, 1H), 7.05 (td, 1H), 5.64 (t, 1H), 4.58 (d, 2H), 4.11 (m, 2H), 3.57 (m, 2H), 3.21 (s, 3H) MS (M+H): 261.0

Primer 1: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoksi-D-fenilalanin

i

Primer 2: N-[(5Ra)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoksi-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i Izrade 7a kao odgovarajućeg fenolnog derivata i metanola kao odgovarajućeg alkohola, zatim hidrolizujući formirani intermedijer prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 1 kao ranije eluirani dijastereoizomer. HRMS izračunato za C36H37ClFN5O4S: 689.2240, nađeno: 345.6182 (M+2H) Primer 2 se dobija kao kasnije eluirani dijastereoizomer. HRMS izračunato za C36H37ClFN5O4S: 689.2240, nađeno: 345.6185 (M+2H)

Primer 3: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(1-metil-1H-pirazol-5-il)metoksi]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i Izrade 7ad2 kao odgovarajućeg fenolnog derivata i (2-metilpirazol-3-il)metanola kao odgovarajućeg alkohola, zatim hidrolizujući formirani intermedijer prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 3. HRMS izračunato za C40H41ClFN7O4S: 769.2613, nađeno: 385.6378 (M+2H)

Primer 4: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(2-etoksipirimidin-4-il) metoksi]-D-fenilalanin

i

Primer 5: N-[(5Ra)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(2-etoksipirimidin-4-il) metoksi]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i Izrade 7a kao odgovarajućeg fenolnog derivata i Izrade C1 kao odgovarajućeg alkohola, zatim hidrolizujući formirani intermedijer prema Opštoj proceduri VII, dobija se smeša dijastereoizomera. Razdvajaju se putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, korišćenjem 40 mM vodenog NH4OAc rastvora (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata, dobija se Primer 4 kao ranije eluirani dijastereoizomer. HRMS izračunato za C42H43ClFN7O5S: 811.2719, nađeno: 406.6417 (M+2H)

Primer 5 se dobija kao kasnije eluirani dijastereoizomer. HRMS izračunato za C42H43ClFN7O5S: 811.2719, nađeno: 406.6436 (M+2H)

Primer 6: 2-[(1-butil-1H-pirazol-5-il)metoksi]-N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i Izrade 7ad2 kao odgovarajućeg fenolnog derivata i Izrade C2 kao odgovarajućeg alkohola, zatim hidrolizujući formirani intermedijer prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 6. HRMS izračunato za C43H47ClFN7O4S: 811.3082, nađeno: 406.6616 (M+2H)

Primer 7: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i Izrade 7ad2 kao odgovarajućeg fenolnog derivata i Izrade C3 kao odgovarajućeg alkohola, zatim hidrolizujući formirani intermedijer prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 7. HRMS izračunato za C47H45ClFN7O5S: 873.2875, nađeno: 437.6498 (M+2H)

Primer 8: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(furan-2-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoksi-D-fenilalanin

i

Primer 9: N-[(5Ra)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(furan-2-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoksi-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ic i Izrade 4b kao odgovarajućeg derivata 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-(2-metoksifenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se Primer 8 kao ranije eluirani dijastereoizomer. HRMS izračunato za C34H36ClN5O5S: 661.2126, nađeno: 662.2203 (M+H) Primer 9 se dobija kao kasnije eluirani dijastereoizomer. HRMS izračunato za C34H36ClN5O5S: 661.2126, nađeno: 662.2203 (M+H)

Primer 10: 2-hloro-N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(furan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin, diastereoizomer 1

Korišćenjem Opšte procedure Ic i Izrade 4b kao odgovarajućeg derivata 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-(2-hlorofenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se Primer 10 kao ranije eluirani dijastereoizomer. HRMS izračunato za C33H33Cl2N5O4S: 665.1630, nađeno: 666.1670 (M+H)

Primer 11: 2-karbamoil-N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(furan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korak A: 5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-4-fluoro-6-(2-furil)tieno[2,3-d] pirimidin

Smeša od 150 mg Izrade 4b (0.3 mmol) i 380 mg srebro fluorida (3.0 mmol) u 6 mL toluena se greje na temperaturi refluksa u toku 3 sata. Zatim se ohladi na r.t., i neorganske komponente se odfiltriraju. Filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom kako se dobija sirovi proizvod koji se u sledećem koraku koristi bez prethodnog prečišćavanja.

Korak B: Primer 11

Smeša od 316 mg 5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-4-fluoro-6-(2-furil)tieno[2,3-d]pirimidina (0.65 mmol), 271 mg (2R)-2-amino-3-(2-karbamoilfenil) propanske kiseline (1.30 mmol) i 424 mg Cs2CO3(1.30 mmol) u 6 mL DMSO se meša na 40°C u toku 30 minuta. Smeša se se razblaži sa vodom, pH se podesi na 5 korišćenjem 1M HCl rastvora i ekstrahuje se sa DCM. Organska faza se osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi korišćenjem 0.1% vodenog TFA rastvora rastvora i acetonitril kao eluenata. The dijastereoizomer, koji se ranije eluira se sakuplja kao Primer 11. HRMS izračunato za C34H35ClN6O5S: 674.2078, nađeno: 675.2146 (M+H)

Primer 12: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(furan-2-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(piridin-2-ilmetoksi)-D-fenilalanin

i

Primer 13: N-[(5Ra)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(furan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(piridin-2-ilmetoksi)-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ic i Izrade 4b kao odgovarajućeg derivata 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidina i Izrade A5 kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se Primer 12 u vidu kasnije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C39H39ClN6O5S: 738.2391, nađeno: 370.1269 (M+2H) Primer 13 se dobija kao ranije eluirani dijastereoizomer. HRMS izračunato za C39H39ClN6O5S: 738.2391, nađeno: 370.1263 (M+2H)

Primer 14: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-hidroksi-D-fenilalanin

Korak A: (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure Ic i Izrade 4a kao odgovarajućeg derivata 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-(2-hidroksifenil)propanske kiseline, dobija se smeša diastereoizomera. Razdvajaju se putem HILIC hromatografije. (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-jodotieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil) propanska kiselina se dobija kao kasnije eluirani dijastereoizomer.

MS (M+H): 708.0

Korak B: Primer 14

Korišćenjem Opšte procedure IIIb i (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metil piperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg derivata 6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 2-(5-fluoro-2-furil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana kao odgovarajućeg derivata estra borne kiseline, dobija se Primer 14. HRMS izračunato za C33H33ClFN5O5S: 665.1875, nađeno: 333.6012 (M+2H)

Primer 15: N-[(5Ra)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoksi-D-fenilalanin

i

Primer 16: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoksi-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i Izrade 4c kao odgovarajućeg derivata 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-(2-metoksifenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se Primer 15 kao kasnije eluirani dijastereoizomer. HRMS izračunato za C34H35ClFN5O5S: 679.2031, nađeno: 680.2100 (M+H) Primer 16 se dobija kao ranije eluirani dijastereoizomer. HRMS izračunato za C34H35ClFN5O5S: 679.2031, nađeno: 680.2092 (M+H)

Primer 17: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(2,2,2-trifluoroetoksi)-D-fenilalanin

Korak A: etil (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-jodotieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanoat

876 mg (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanske kiseline (1.24 mmol) se rastvori u 5 mL etanola zatim se doda 0.05 mL koncentrovane sumporne kiseline i, smeša se meša na 70°C tokom 2 sata. Onda se smeša razblaži sa vodom, pH se podesi na 5 korišćenjem 1M NaHCO3rastvora i ekstrahuje se sa DCM. Organska faza se osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem DCM i MeOH kao eluenata kako se dobija etil (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil) propanoat. MS (M+H): 736.1

Korak B: etil (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-jodotieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-(2,2,2-trifluoroetoksi)fenil]propanoat

648 mg etil (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-jodotieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanoata (0.88 mmol) se rastvori u 10 mL DMF i zatim se dodaju 415 mg K2CO3(3.00 mmol) i 348 mg 2,2,2-trifluoroetil trifluorometansulfonata (1.50 mmol) na r.t. Smeša se meša na 50°C tokom 5 sati. Reakciona smeša se razblaži sa slanim rastvorom, ekstrahuje sa DCM. Organska faza se osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem DCM i MeOH kao eluenata, kako se dobija etil (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-(2,2,2-trifluoro-etoksi)fenil]propanoat. MS (M+H): 818.1

Korak C: Primer 17

Etil (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-jodotieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-(2,2,2-trifluoroetoksi)fenil]propanoat se hidrolizuje prema Opštoj proceduri VII kako se dobija (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il) etoksi]fenil]-6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-(2,2,2-trifluoroetoksi)fenil]propanska kiselina. Ovo jedinjenje se koristi kao odgovarajući 6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidinski derivat i prevodi se u Primer 17 prema Opštoj Proceduri IIIb, korišćenjem 2-(5-fluoro-2-furil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana kao odgovarajućeg derivata borne kiseline. HRMS izračunato za C35H34ClF4N5O5S: 747.1905, nađeno: 374.6006 (M+2H)

Primer 18: N-[(5Ra)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(piridin-2-ilmetoksi)-D-fenilalanin

i

Primer 19: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(piridin-2-ilmetoksi)-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ic i Izrade 4c kao odgovarajućeg derivata 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidina i Izrade A5 kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se Primer 18 u vidu rasnije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C39H38ClFN6O5S: 756.2296, nađeno: 379.1230 (M+2H) Primer 19 se dobija u vidu kasnije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C39H38ClFN6O5S: 756.2296, nađeno: 379.1230 (M+2H)

Primer 20: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(1-metil-1H-pirazol-5-il)metoksi]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IIIb i Izrade 5b kao odgovarajućeg derivata 6-jodotieno[2,3-d]pirimidina i 2-(5-fluoro-2-furil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se Primer 20. HRMS izračunato za C38H39ClFN7O5S: 759.2406, nađeno: 380.6271 (M+2H)

Primer 21: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(1-etil-1H-pirazol-5-il)metoksi]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IIIb i Izrade 5c kao odgovarajućeg derivata 6-jodotieno[2,3-d]pirimidina i 2-(5-fluoro-2-furil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se Primer 21. HRMS izračunato za C39H41ClFN7O5S: 773.2562, nađeno: 387.6358 (M+2H)

Primer 22: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[(2-etoksipirimidin-4-il)metoksi]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ic i Izrade 4c kao odgovarajućeg derivata 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidina i Izrade A2 kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se Primer 22 u vidu kasnije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C40H41ClFN7O6S: 801.2512, nađeno: 401.6326 (M+2H)

Primer 23: 2-[(1-butil-1H-pirazol-5-il)metoksi]-N-[(5Ra)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin i

Primer 24: 2-[(1-butil-1H-pirazol-5-il)metoksi]-N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ic i Izrade 4c kao odgovarajućeg derivata 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidina i Izrade A3 kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se Primer 23 u vidu ranije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C41H45ClFN7O5S: 801.2875, nađeno: 401.6502 (M+2H) Primer 24 se dobija u vidu kasnije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C41H45ClFN7O5S: 801.2875, nađeno: 401.6505 (M+2H)

Primer 25: N-[(5Ra)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoksi)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

i

Primer 26: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoksi)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ic i Izrade 4c kao odgovarajućeg derivata 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidina i Izrade A8 kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se Primer 25 u vidu ranije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C40H38ClF4N7O6S: 855.2228, nađeno: 428.6181 (M+2H) Primer 26 se dobija u vidu kasnije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C40H38ClF4N7O6S: 855.2228, nađeno: 428.6193 (M+2H)

Primer 27: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

Korak A: etil (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(5-fluoro-2-furil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil)propanoat

0.97 g Primera 14 (1.46 mmol) se rastvori u 15 mL HCl rastvora (1.25M u EtOH) i meša se na 40°C preko noći. Smeša se ohladi na r.t., neutrališe sa vodenim NaHCO3rastvorom i, smeša se ekstrahuje sa DCM. Organska faza se osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Ostatak se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem DCM i MeOH kao eluenata kako se dobija etil (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(5-fluoro-2-furil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksi fenil)propanoat.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 9.48 (br s, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.30 (s, 2H), 7.01 (td, 1H), 6.72 (d, 1H), 6.64 (t, 1H), 6.41 (d, 1H), 5.83 (m, 1H), 5.56 (t, 1H), 5.08 (d, 1H), 4.94 (m, 1H), 4.30 (t, 2H), 4.03 (m, 2H), 3.07 (dd, 1H), 2.81 (t, 2H), 2.56 (br, 4H), 2.36 (dd, 1H), 2.32 (br, 4H), 2.14 (s, 3H), 1.91 (s, 3H) MS (M+H): 694.2

Korak B: Primer 27

Korišćenjem Opšte procedure VI i etil (2R)-2-[[(5Sa)-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metil piperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(5-fluoro-2-furil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-hidroksifenil) propanoata kao odgovarajućeg derivata fenola i Izrade C3 kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, zatim hidrolizom formiranog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 27. HRMS izračunato za C45H43ClFN7O6S: 863.2668, nađeno: 432.6414 (M+2H)

Primer 28: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-hidroksi-D-fenilalanin

Korak A: 2-[2-hloro-4-[4-hloro-6-(5-fluoro-2-furil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3-metil-fenoksi]-N,N-dimetil-etanamin

Korišćenjem Opšte procedure IIIb i Izrade 4e kao odgovarajućeg derivata 6-jodotieno[2,3-d]pirimidina i 2-(5-fluoro-2-furil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se 2-[2-hloro-4-[4-hloro-6-(5-fluoro-2-furil)tieno [2,3-d]pirimidin-5-il]-3-metil-fenoksi]-N,N-dimetil-etanamin.

Korak B: Primer 28

Korišćenjem Opšte procedure Ib i 2-[2-hloro-4-[4-hloro-6-(5-fluoro-2-furil)tieno[2,3-d] pirimidin-5-il]-3-metil-fenoksi]-N,N-dimetil-etanamina kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno [2,3-d]pirimidina i 2-hidroksi-D-fenilalanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se Primer 28 u vidu kasnije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C30H28ClFN4O5S: 610.1453, nađeno: 611.1503 (M+H)

Primer 29: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(tiofen-3-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanin

i

Primer 30: N-[(5Ra)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(tiofen-3-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanin

Korišćenjem Opšte procedure Ic i Izrade 4g kao odgovarajućeg derivata 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-(2-piridil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, korišćenjem 40 mM vodenog NH4OAc rastvora (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 29 se dobija u vidu ranije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C32H33ClN6O3S2: 648.1744, nađeno: 649.1811 (M+H) Primer 30 se dobija u vidu kasnije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C32H33ClN6O3S2: 648.1744, nađeno: 649.1816 (M+H)

Primer 31: N-[(5Ra)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(tiofen-3-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-cikloheksil-D-alanin

i

Primer 32: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(tiofen-3-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-cikloheksil-D-alanin

Korišćenjem Opšte procedure Ic i Izrade 4g kao odgovarajućeg derivata 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-cikloheksil-propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se Primer 31 u vidu ranije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C33H40ClN5O3S2: 653.2261, nađeno: 327.6194 (M+2H) Primer 32 se dobija u vidu kasnije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C33H40ClN5O3S2: 653.2261, nađeno: 327.6195 (M+2H)

Primer 33: N-[(5Ra)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(tiofen-3-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-fluoro-D-fenilalanin

i

Primer 34: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(tiofen-3-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-fluoro-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ic i Izrade 4g kao odgovarajućeg derivata 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-(2-fluorofenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se Primer 33 u vidu kasnije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C33H33ClFN5O3S2: 665.1697, nađeno: 666.1776 (M+H) Primer 34 se dobija u vidu ranije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C33H33ClFN5O3S2: 665.1697, nađeno: 666.1776 (M+H)

Primer 35: N-[(5Ra)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(morfolin-4-il)etoksi]fenil}-6-(tiofen-3-il)tieno [2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanin

i

Primer 36: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(morfolin-4-il)etoksi]fenil}-6-(tiofen-3-il)tieno [2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanin

Korišćenjem Opšte procedure Ic i Izrade 4h kao odgovarajućeg derivata 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-(2-piridil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se Primer 35 u vidu ranije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C31H30ClN5O4S2: 635.1428, nađeno: 636.1499 (M+H) Primer 36 se dobija u vidu kasnije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C31H30ClN5O4S2: 635.1428, nađeno: 636.1508 (M+H)

Primer 37: 2-(aminometil)-N-[(5Ra)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(morfolin-4-il)etoksi]fenil}-6-(tiofen-3-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 38: 2-(aminometil)-N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(morfolin-4-il)etoksi]fenil}-6-(tiofen-3-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ic i Izrade 4h kao odgovarajućeg derivata 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-[2-(aminometil)fenil]propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se Primer 37 u vidu ranije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C33H34ClN5O4S2: 663.1741, nađeno: 664.1808 (M+H) Primer 38 se dobija u vidu kasnije eluiranog dijastereoizomera. HRMS izračunato za C33H34ClN5O4S2: 663.1741, nađeno: 664.1825 (M+H)

Primer 39: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoksi-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i, odgovarajućeg fenolnog derivata iz Izrade 7b i metanola kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, zatim hidrolizovanjem formiranog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 39. HRMS izračunato za C33H36ClN5O4S: 633.2176, nađeno: 317.6163 (M+2H)

Primer 40: 2-[(1-terc-butil-1H-pirazol-5-il)metoksi]-N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalanin Korišćenjem Opšte procedure VI i, odgovarajućeg fenolnog derivata iz Izrade 7b i odgovarajućeg alkoholnog derivata iz Izrade C4, zatim hidrolizovanjem formiranog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 40. HRMS izračunato za C40H46ClN7O4S: 755.3021 nađeno: 378.6573 (M+2H)

Primer 41: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksietil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i, odgovarajućeg fenolnog derivata iz Izrade 7b i odgovarajućeg alkoholnog derivata iz Izrade C5, zatim hidrolizovanjem formiranog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 41. HRMS izračunato za C40H44ClN7O5S: 769.2813, nađeno: 385.6476 (M+2H).

Primer 42: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[1-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-pirazol-5-il]metoksi}-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i, odgovarajućeg fenolnog derivata iz Izrade 7b i odgovarajućeg alkoholnog derivata iz Izrade C6, zatim hidrolizovanjem formiranog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 42. HRMS izračunato za C38H39ClF3N7O4S: 781.2425, nađeno: 391.6300 (M+2H)

Primer 43: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(morfolin-4-il)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i, odgovarajućeg fenolnog derivata iz Izrade 7b i odgovarajućeg alkoholnog derivata iz Izrade C7, zatim hidrolizovanjem formiranog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 43. HRMS izračunato za C41H45ClN8O5S: 796.2922, nađeno: 399.1546 (M+2H)

Primer 44: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoksi)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i, odgovarajućeg fenolnog derivata iz Izrade 7b i odgovarajućeg alkoholnog derivata iz Izrade C8, zatim hidrolizovanjem formiranog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 44. HRMS izračunato za C39H39ClF3N7O5S: 809.2374, nađeno: 405.6262 (M+2H)

Primer 45: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i, odgovarajućeg fenolnog derivata iz Izrade 7b i odgovarajućeg alkoholnog derivata iz Izrade C3, zatim hidrolizovanjem formiranog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 45. HRMS izračunato za C44H44ClN7O5S: 817.2813, nađeno: 409.6494 (M+2H)

Primer 46: N-[(5Sa)-5-13-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[1-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-pirazol-5-il]metoksi}-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i, odgovarajućeg fenolnog derivata iz Izrade 7c i odgovarajućeg alkoholnog derivata iz Izrade C6, zatim hidrolizovanjem formiranog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 46. HRMS izračunato za C35H34ClF3N6O4S: 726.2003, nađeno: 727.2092 (M+H)

Primer 47: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(morfolin-4-il)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i, odgovarajućeg fenolnog derivata iz Izrade 7c i odgovarajućeg alkoholnog derivata iz Izrade C7, zatim hidrolizovanjem formiranog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 47. HRMS izračunato za C38H40ClN7O5S: 741.2500, nađeno: 371.6331 (M+2H)

Primer 48: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoksi)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i, odgovarajućeg fenolnog derivata iz Izrade 7c i odgovarajućeg alkoholnog derivata iz Izrade C8, zatim hidrolizovanjem formiranog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 48. HRMS izračunato za C36H34ClF3N6O5S: 754.1952, nađeno: 755.1971 (M+H)

Primer 49: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i, odgovarajućeg fenolnog derivata iz Izrade 7c i odgovarajućeg alkoholnog derivata iz Izrade C3, zatim hidrolizovanjem formiranog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 49. HRMS izračunato za C41H39ClN6O5S: 762.2391, nađeno: 371.6323 (M+2H)

Primer 50: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(4-fluorofenil) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-fluorofenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

Korak A: etil (2R)-2-[[5-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-(2-fluorofenil)pirimidin-4-il]metoksi]fenil]propanoat

Korišćenjem Opšte procedure VI i, odgovarajućeg fenolnog derivata iz Izrade 7d i odgovarajućeg alkoholnog derivata iz Izrade C9, dobija se etil (2R)-2-[[5-bromo-6-(4-fluorofenil) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-(2-fluorofenil)pirimidin-4-il]metoksi]fenil] propanoat.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.84 (d, 1H), 8.39 (s, 1H), 7.95 (td, 1H), 7.58-7.52 (m, 3H), 7.39-7.24 (m, 8H), 7.13 (d, 1H), 6.95 (t, 1H), 5.29-5.15 (m, 3H), 4.16 (q, 2H), 3.63 (dd, 1H), 3.25 (dd, 1H), 1.19 (t, 3H)

Korak B: etil (2R)-2-[[5-[3-hloro-4-(2-dimetilaminoetiloksi)-2-metil-fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-(2-fluorofenil)pirimidin-4-il]metoksi]fenil]propanoat

1 eq. etil (2R)-2-[[5-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-(2-fluorofenil)pirimidin-4-il]metoksi]fenil]propanoata i 1.2 eq. Izrade B5 se rastvore u dioksanu (5 mL/mmol), zatim se dodaju 5 mol% AtaFos, 3 eq. Cs2CO3i voda (5 mL/mmol) i, smeša se meša na 70°C u atmosferi argona sve dok se ne zapazi kraj konverzije. Zatim se smeša razblaži sa EtOAc i ispere sa slanim rastvorom. Organska faza se osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem DCM i MeOH kao eluenata, kako se dobija etil (2R)-2-[[5-[3-hloro-4-(2-dimetilaminoetiloksi)-2-metil-fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-(2-fluorofenil) pirimidin-4-il]metoksi]fenil] propanoat u vidu smeše dijastereoizomera. MS (M+H): 834.6

Korak C: Primer 50

Korišćenjem Opšte procedure VII i etil (2R)-2-[[5-[3-hloro-4-(2-dimetilaminoetiloksi)-2-metil-fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-(2-fluorofenil)pirimidin-4-il] metoksi]fenil]propanoata, kao odgovarajućeg estarskog derivata, dobija se Primer 50 kao kasnije eluirani dijastereoizomer. HRMS izračunato za C43H37ClF2N6O4S: 806.2254, nađeno: 807.2343 (M+H)

Primer 51: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(4-fluorofenil)tieno [2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[2-(2-metoksietoksi)fenil]pirimidin-4-il}metoksi)-D-fenilalanin

Korak A: etil (2R)-2-[[5-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-[2-(2-metoksietoksi)fenil]pirimidin-4-il]metoksi]fenil]propanoat

Korišćenjem Opšte procedure VI i, odgovarajućeg fenolnog derivata iz Izrade 7d i odgovarajućeg alkoholnog derivata iz Izrade C10, dobija se etil (2R)-2-[[5-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-[2-(2-metoksietoksi)fenil]pirimidin-4-il]metoksi] fenil] propanoat.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ: 8.80 (d, 1H), 8.41 (s, 1H), 7.57-7.53 (m, 3H), 7.46-7.23 (m, 7H), 7.16 (d, 1H), 7.07 (d, 1H), 7.03 (t, 1H), 6.94 (t, 1H), 5.28-5.23 (m, 1H), 5.19 (dd, 2H), 4.18-4.11 (m, 4H), 3.61-3.57 (m, 3H), 3.27 (dd, 1H), 3.21 (s, 3H), 1.19 (t, 3H)

Korak B: etil (2R)-2-[[5-[3-hloro-4-(2-dimetilaminoetiloksi)-2-metil-fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-[2-(2-metoksietoksi)fenil]pirimidin-4-il]metoksi]fenil]propanoat

1 eq. etil (2R)-2-[[5-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-[2-(2-metoksietoksi)fenil]pirimidin-4-il]metoksi]fenil]propanoata i 1.2 eq. jedinjenja Izrade B5 se rastvore u dioksanu (5 mL/mmol), zatim se dodaju 5 mol% AtaPhos, 3 eq. Cs2CO3i voda (5 mL/mmol) i smeša se meša na 70°C u atmosferi argona sve dok ne prestane konverzija. Onda se smeša razblaži sa EtOAc i ispere sa slanim rastvorom. Organska faza se osuši preko Na2SO4, filtrira i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem DCM i MeOH kao eluenata da bi se dobio etil (2R)-2-[[5-[3hloro-4-(2-dimetilaminoetiloksi)-2-metil-fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-[2-(2-metoksietoksi)fenil]pirimidin-4-il]metoksi]fenil]propanoat u vidu smeše dijastereoizomera. MS (M+H): 890.6

Korak C: Primer 51

Korišćenjem Opšte procedure VII i etil (2R)-2-[[5-[3-hloro-4-(2-dimetilaminoetiloksi)-2-metil-fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-[2-[[2-[2-(2-etoksietoksi)fenil] pirimidin-4-il]metoksi]fenil]propanoata kao odgovarajućeg estarskog derivata, dobija se Primer 51 kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C46H44ClFN6O6S: 862.2716, dobijeno: 432.1442 (M+2H)

Primer 52: N-[(5Ra)-5-(3,5-dihloro-4-hidroksi-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 53: N-[(5Sa)-5-(3,5-dihloro-4-hidroksi-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VII i jedinjenja Izrade 7f kao odgovarajućeg estarskog derivata, dobija se smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 0.1 % vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 52 se dobija kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C24H21Cl2N3O3S: 501.0681, dobijeno: 502.0755 (M+H) Primer 53 se dobija kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C24H21Cl2N3O3S: 501.0681, dobijeno: 502.0772 (M+H)

Primer 54: N-((5Sa)-5-{3,5-dihloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

i

Primer 55: N-((SRa)-5-{3,5-dihloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i jedinjenja Izrade 7f kao odgovarajućeg derivata fenola i 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanola kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, zatim hidrolizovanjem nastalog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 54 kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C31H35Cl2N5O3S: 627.1838, dobijeno: 628.1935 (M+H) Primer 55 se dobija kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C31H35Cl2N5O3S: 627.1838, dobijeno: 628.1932 (M+H)

Primer 56: N-{(5Sa)-5-[3-hloro-4-(2-hidroksietoksi)-2-metilfenil] -6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il}-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i jedinjenja Izrade 7gd1 kao odgovarajućeg derivata fenola i 10 eq. etilen glikola kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, zatim hidrolizovanjem nastalog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 56. HRMS izračunato za C26H26ClN3O4S: 511.1333, dobijeno: 512.1390 (M+H)

Primer 57: N-{(5Sa)-5-[4-(karboksimetoksi)-3-hloro-2-metilfenil]-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il}-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i jedinjenja Izrade 7gd1 kao odgovarajućeg derivata fenola i 2-hidroksi-N,N-dimetilacetamida kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, zatim hidrolizovanjem nastalog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 57. HRMS izračunato za C26H24ClN3O5S: 525.1125, dobijeno: 526.1217 (M+H)

Primer 58: N-((5Ra)-5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-etiltieno[2,3-d] pirimidin-4-il)-L-fenilalanin

i

Primer 59: N-((5Sa)-5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-etiltieno[2,3-d] pirimidin-4-il)-L-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i jedinjenja Izrade 7g kao odgovarajućeg derivata fenola i 2-(dimetilamino)etanola kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, zatim hidrolizovanjem nastalog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 58 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C28H31ClN4O3S: 538.1805, dobijeno: 539.1869 (M+H) Primer 59 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C28H31ClN4O3S: 538.1805, dobijeno: 539.1866 (M+H)

Primer 60: N-((5Sa)-5-{3-hloro-4-[3-(dimetilamino)propoksi]-2-metilfenil}-6-etiltieno[2,3-d] pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i jedinjenja Izrade 7gd1 kao odgovarajućeg derivata fenola i 3-(dimetilamino)propanola kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, zatim hidrolizovanjem nastalog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 60. HRMS izračunato za C29H33ClN4O3S: 552.1962, dobijeno: 553.2036 (M+H)

Primer 61: N-((5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(morfolin-4-il)etoksi]fenil}-6-etiltieno[2,3-d] pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i jedinjenja Izrade 7gd1 kao odgovarajućeg derivata fenola i 2-morfolinoetanola kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, zatim hidrolizovanjem nastalog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 61. HRMS izračunato za C30H33ClN4O4S: 580.1911, dobijeno: 581.1981 (M+H)

Primer 62: N-((5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-etiltieno [2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

i

Primer 63 N-((5Ra)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i jedinjenja Izrade 7gd1 kao odgovarajućeg derivata fenola i 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanola kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, zatim hidrolizovanjem nastalog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 62 u vidu dijastereoizomera koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C31H36ClN5O3S: 593.2227, dobijeno: 594.2313 (M+H) Primer 63 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C31H36ClN5O3S: 593.2227, dobijeno: 594.2304 (M+H)

Primer 64: N-((5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[3-(4-metilpiperazin-1-il)propoksi] fenil}-6-etiltieno [2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure VI i jedinjenja Izrade 7gd1 kao odgovarajućeg derivata fenola i 3-(4-metilpiperazin-1-il)propan-1-ola kao odgovarajućeg alkoholnog derivata, zatim hidrolizovanjem nastalog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobija se Primer 64. HRMS izračunato za C32H38ClN5O3S: 607.2384, dobijeno: 608.2444 (M+H)

Primer 65: N-((5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-[5-(metoksikarbonil)-4-metilfuran-2-il]tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-2-metoksi-D-fenilalanin

i

Primer 66: N-((5Ra)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-[5-(metoksikarbonil)-4-metilfuran-2-il]tieno[2,3-d]pirimidin-4-il)-2-metoksi-D-fenilalanin

Korak A: [4-hloro-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]tieno[2,3-d]pirimidin-6-il]-trimetil-stanan

1.97 g 4-hloro-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]tieno[2,3-d] pirimidina (4.50 mmol, iz Koraka A Izrade 4a) rastvori se u 40 mL suvog THF-a u atmosferi N2i, smeša se ohladi na -78°C. Zatim, doda se 4.5 mL LDA (9 mmol, 2M rastvor u heptanu, THF i etil benzenu) i, smeša se meša na -78°C u toku 1 sata. Onda, doda se 13.5 mL rastvora Me3SnCl (13.5 mmol, 1M u heksanu) i, smeša se ostavi da se zagreje na r.t. Smeša se onda razblaži sa cc. rastvorom NH4Cl i ekstrahuje sa dietil etrom. Organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Onda se izvrši rastvaranje u 60 mL EtOAc, pa se doda 40 mL zasićenog rastvora NaF i, meša se na r.t. preko noći. Posle filtriranja, faze filtrata se razdvajaju. Vodena faza se ekstrahuje sa EtOAc. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem DCM i MeOH kao eluenata kako se dobija [4-hloro-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]tieno[2,3-d]pirimidin-6-il]-trimetil-stanan. HRMS izračunato za C23H30N4OSCl2Sn: 600.0539, dobijeno: 601.0584 (M+H)

Korak B: metil 5-[4-hloro-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]tieno[2,3-d] pirimidin-6-il]-3-metil-furan-2-karboksilat

900 mg [4-hloro-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]tieno[2,3-d] pirimidin-6-il]-trimetil-stanana (1.50 mmol), 657 mg metil 5-bromo-3-metil-furan-2-karboksilata (3 mmol), 29 mg CuJ (0.15 mmol), 29 mg Pd(PhCN)2Cl2(0.075 mmol), 46 mg Ph3As (0.15 mmol) i 2 mL NMP se mešaju na 100°C dok konverzija ne prestane. Zatim se smeša razblaži sa EtOAc i ispere sa zasićenim rastvorom NaF. Vodena faza se ekstrahuje sa EtOAc. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem DCM i MeOH kao eluenata kako se dobija metil 5-[4-hloro-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]tieno[2,3-d] pirimidin-6-il]-3-metil-furan-2-karboksilat. HRMS izračunato za C27H28Cl2N4O4S: 574.1208, dobijeno: 575.1263 (M+H)

Korak C: Primer 65

Korišćenjem Opšte procedure Ib i metil 5-[4-hloro-5-[3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metil piperazin-1-il)etoksi]fenil]tieno[2,3-d]pirimidin-6-il]-3-metil-furan-2-karboksilata kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-(2-metoksifenil) propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, Primer 65 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C37H40ClN5O7S: 733.23369, dobijeno: 367.6263 (M+2H) Primer 66 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C37H40ClN5O7S: 733.23369, dobijeno: 367.6223 (M+2H)

Primer 67: N-[6-etil-5-(3-hidroksi-2-metilfenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IId i jedinjenja Izrade 3a kao odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 2-metil-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenola kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, Primer 67 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMS izračunato za C24H23N3O3S: 433.1460, dobijeno: 434.1545 i 434.1535 (M+H)

Primer 68: N-[6-etil-5-(3-fluoro-2-metilfenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IIa i jedinjenja Izrade 3a kao odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i (3-fluoro-2-metil-fenil)borne kiseline kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, Primer 68 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMS izračunato za C24H22FN3O2S: 435.1417, dobijeno: 436.1489 i 436.1484 (M+H)

Primer 69: N-[6-etil-(5Sa)-5-(3-fluoro-2-metilfenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin i

Primer 70: N-[6-etil-(5Ra)-5-(3-fluoro-2-metilfenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Dijastereoizomeri Primera 68 su razdvojeni putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 25 mM vodenog rastvora NH4HCO3i acetonitrila kao eluenata. Primer 69 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C24H22FN3O2S: 435.1417, dobijeno: 436.1481 (M+H) Primer 70 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C24H22FN3O2S: 435.1417, dobijeno: 436.1498 (M+H)

Primer 71: N-[6-etil-5-(1H-indol-7-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin, dijastereoizomer 1

i

Primer 72: N-[6-etil-5-(1H-indol-7-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin, dijastereoizomer 2

Korišćenjem Opšte procedure IIa i jedinjenja Izrade 3a kao odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-indola kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 71 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMSizračunato za C25H22N4O2S: 442.1463, dobijeno: 443.1540 (M+H) Primer 72 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C25H22N4O2S: 442.1463, dobijeno: 443.1537 (M+H)

Primer 73: N-[6-etil-(5Sa)-5-(1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 74: N-[6-etil-(5Ra)-5-(1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Dijastereoizomeri Izrade 7h su razdvojeni putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 73 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C25H22N4O2S: 442.1463, dobijeno: dobijeno: 443.1529 (M+H) Primer 74 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C25H22N4O2S: 442.1463, dobijeno: 443.1538 (M+H)

Primer 75: N-[6-etil-(5Sa)-5-(3-metoksi-2-metilfenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin i

Primer 76: N-[6-etil-(5Ra)-5-(3-metoksi-2-metilfenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IIb i jedinjenja Izrade 3a kao odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 2-(3-metoksi-2-metil-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, korišćenjem DME:voda 5:1 umesto 2-Me-THF, kao i razdvajanjem dijastereoizomera putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 25 mM vodenog rastvora NH4HCO3i acetonitrila kao eluenata, Primer 75 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C25H25N3O3S: 447.1617, dobijeno: 448.1701 (M+H) Primer 76 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C25H25N3O3S: 447.1617, dobijeno: 448.1672 (M+H)

Primer 77: N-[(5Ra)-5-(2-hloro-3-metilpiridin-4-il)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 78 N-[(5Sa)-5-(2-hloro-3-metilpiridin-4-il)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IIb i jedinjenja Izrade 3a kao odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 2-hloro-3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il) piridina kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, korišćenjem DME:voda 5:1 umesto 2-Me-THF, kao i razdvajanjem dijastereoizomera putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata, Primer 77 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C23H21ClN4O2S: 452.1074, dobijeno: 453.1158 (M+H) Primer 78 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C23H21ClN4O2S: 452.1074, dobijeno: 453.1165 (M+H)

Primer 79: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IIb i jedinjenja Izrade 3a kao odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 4,4,5,5-tetrametil-2-(1-naftil)-1,3,2-dioksaborolana kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se smeša dijastereoizomera. Prečišćeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata, Primer 79 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMS izračunato za C27H23N3O2S: 453.1511, dobijeno: 454.1580 i 454.1580 (M+H)

Primer 80: N-[6-etil-5-(quinolin-5-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IIa i jedinjenja Izrade 3a kao odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)hinolona kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se smeša dijastereoizomera. Prečišćeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 80 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMS izračunato za C26H22N4O2S: 454.1463, dobijeno: 455.1554 i 455.1518 (M+H)

Primer 81: N-[6-etil-(5Sa)-5-(izohinolin-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 82: N-[6-etil-(5Ra)-5-(izohinolin-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korak A: 4-hloro-6-etil-5-(4-izohinolil)tieno[2,3-d]pirimidin

Korišćenjem Opšte procedure IIc i jedinjenja Izrade 2a kao odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)izohinolina kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobijen je 4-hloro-6-etil-5-(4-izohinolil)tieno[2,3-d] pirimidin.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9.46 (s, 1H), 8.93 (s, 1H), 8.50 (s, 1H), 8.26 (m, 1H), 7.74 (m, 2H), 7.42 (m, 1H), 2.65 (q, 2H), 1.14 (t, 3H) HRMS izračunato za C17H12ClN3S: 325.0440; dobijeno 326.0502 (M+H)

Korak B: N-[6-etil-5-(izohinolin-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure la, proizvoda iz Koraka A kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i D-fenilalanina kao odgovarajućeg derivata amino kiseline, dobija se N-[6-etil-5-(izohinolin-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin u vidu smeše dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom vode i acetonitrila kao eluenata. Primer 81 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C26H22N4O2S: 454.1463, dobijeno: 455.1526 (M+H) Primer 82 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C26H22N4O2S: 454.1463, dobijeno: 455.1538 (M+H)

Primer 83: N-[6-etil-(5Sa)-5-(1-metil-1H-indol-7-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin i

Primer 84: N-[6-etil-(5Ra)-5-(1-metil-1H-indol-7-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IIb i jedinjenja Izrade 3a kao odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 1-metil-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)indola kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 40 mM vodenog rastvoraNH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 83 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C26H24N4O2S: 456.1620, dobijeno: 457.1671 (M+H) Primer 84 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C26H24N4O2S: 456.1620, dobijeno: 457.1701 (M+H)

Primer 85: N-[6-etil-(5Sa)-5-(3-metil-1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin i

Primer 86: N-[6-etil-(5Ra)-5-(3-metil-1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IIc i jedinjenja Izrade 3a kao odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 3-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-indola kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobija se smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. HRMS izračunato za C26H24N4O2S: 456.1620, dobijeno: 457.1691 (M+H) Primer 86 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C26H24N4O2S: 456.1620, dobijeno: 457.1688 (M+H)

Primer 87: N-[6-etil-5-(1-metil-1H-indazol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IIa i jedinjenja Izrade 3a kao odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 1-metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)indazola kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, Primer 87 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMS izračunato za C25H23N5O2S: 457.1572, dobijeno: 458.1646 and 458.1648 (M+H) Primer 88: N-[6-etil-(5Sa)-5-(1-metil-1H-indazol-7-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin i

Primer 89: N-[6-etil-(5Ra)-5-(1-metil-1H-indazol-7-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IIa i jedinjenja Izrade 3a kao odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i (1-metilindazol-7-il)borne kiseline kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, Primer 88 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C25H23N2O2S: 457.1572, dobijeno: 458.1641 (M+H) Primer 89 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C25H23N2O2S: 457.1572, dobijeno: 458.1634 (M+H)

Primer 90: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-4-hidroksi-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 91: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-4-hidroksi-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

500 mg jedinjenja Izrade 7e (1.12 mmol) i 157 mg NCS (1.173 mmol) se rastvore u 30 mL THF-a i smeša se meša na 60°C preko noći. Rastvarači se upare pod sniženim pritiskom i ostatak se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata da bi se dobio metil 2-[[5-(3-hloro-4-hidroksi-2-metilfenil)-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]amino]-3-fenil-propanoat u vidu smeše dijastereoizomera (zajedno sa drugim regioizomerima). Sirova smeša se hidrolizuje prema Opštoj proceduri VII. Dijastereoizomeri su prečišćeni i razdvojeni putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 25 mM vodenog rastvora NH4HCO3i acetonitrila kao eluenata. Primer 90 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C24H22ClN3O3S: 467.1070, dobijeno: 468.1153 (M+H) Primer 91 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C24H22ClN3O3S: 467.1070, dobijeno: 468.1143 (M+H)

Primer 92: N-[(5Ra)-5-(2,3-dihlorofenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 93: N-[(5Sa)-5-(2,3-dihlorofenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin Korišćenjem Opšte procedure IIa i jedinjenja Izrade 3a kao odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i (2,3-dihlorofenil)borne kiseline kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, primenom Xantphos umesto<n>BuPAd2, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata, Primer 92 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C23H19Cl2N3O2S: 471.0575, dobijeno: 472.0667 (M+H) Primer 93 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C23H19Cl2N3O2S: 471.0575, dobijeno: 472.0654 (M+H)

Primer 94: N-[(5Ra)-5-(3,4-dihloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin i

Primer 95: N-[(5Sa)-5-(3,4-dihloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IIb i jedinjenja Izrade 3a kao odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i (3,4-dihloro-2-metil-fenil)borne kiseline kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, primenom Xantphos kao liganda umesto Q-Phos i DME:voda 4:1 umesto 2-Me-THF, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata, Primer 94 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato zaC24H21Cl2N3O2S: 485.0731, dobijeno: 486.0816 (M+H) Primer 95 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C24H21Cl2N3O2S: 485.0731, dobijeno: 486.0797 (M+H)

Primer 96: N-[(5Ra)-5-(3-bromo-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin i

Primer 97: N-[(5Sa)-5-(3-bromo-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IIa i jedinjenja Izrade 3a kao odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i jedinjenja Izrade B7 kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 96 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C24H22BrN3O2S: 495.0616, dobijeno: 496.0673 (M+H) Primer 97 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C24H22BrN3O2S: 495.0616, dobijeno: 496.0687 (M+H)

Primer 98: N-[6-etil-5-(1H-indazol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IIa i jedinjenja Izrade 3a kao odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 1H-indazol-4-ilborne kiseline kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, zatim prečišćavanjem sirovog proizvoda putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata, Primer 98 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMS izračunato za C24<H>21<N>5<O>2<S: 443.1416,>dobijeno: 444.1485 i 444.1481 (M+H)

Primer 99: N-[6-etil-5-(quinolin-8-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IId i jedinjenja Izrade 3a kao odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 8-hinolilborne kiseline kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, Primer 99 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMS izračunato za C26H28N4O2S: 454.1463, dobijeno: 455.1558 (M+H)

Primer 100: N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 101: N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Razdvajanjem dijastereoizomera Primera 79, putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata, Primer 100 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C27H23N3O2S: 453.1511, dobijeno: 454.1596 (M+H) Primer 101 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C27H23N3O2S: 453.1511, dobijeno: 454.1577 (M+H)

Primer 102: N-[6-ethenil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin i

Primer 103: N-[6-ethenil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin Korišćenjem Opšte procedure Ia i jedinjenja Izrade 4w kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i D-fenilalanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, Primer 102 je dobijen u vidu dijastereoizomera koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C27H21N3O2S: 451.1354, dobijeno: 452.1411 (M+H) Primer 103 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C27H21N3O2S: 451.1354, dobijeno: 452.1412 (M+H)

Primer 104: N-[(5Sa)-5-(naftalen-1-il)-6-((1Z)-prop-1-en-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 105: N-[(5Ra)-5-(naftalen-1-il)-6-((1Z)-prop-1-en-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4x kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i D-fenilalanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 40 mM vodenog rastvora NH4<OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i>acetonitrila kao eluenata. Primer 104 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C28H23N3O2S: 465.1511, dobijeno: 466.1577 (M+H) Primer 104 takođe sadrži 55 % Primera 108. Primer 105 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C28H23N3O2S: 465.1511, dobijeno: 466.1578 (M+H) Primer 105 takođe sadrži 55 % Primera 109.

Primer 106: N-[(5Sa)-5-(naftalen-1-il)-6-(prop-1-en-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 107: N-[(5Ra)-5-(naftalen-1-il)-6-(prop-1-en-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ia i jedinjenja Izrade 4y kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i D-fenilalanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 106 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C28H23N3O2S: 465.1511, dobijeno: 466.1581 (M+H) Primer 107 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C28H23N3O2S: 465.1511, dobijeno: 466.1597 (M+H)

Primer 108: N-{(5Sa)-5-(naftalen-1-il)-6-[(1E)-prop-1-en-1-il]tieno[2,3-d]pirimidin-4-il}-D-fenilalanin

i

Primer 109: N-{(5Ra)-5-(naftalen-1-il)-6-[(1E)-prop-1-en-1-il]tieno[2,3-d]pirimidin-4-il}-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ia i jedinjenja Izrade 4z kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i D-fenilalanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 108 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C28H23N3O2S: 465.1511, dobijeno: 466.1593 (M+H) Primer 109 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C28H23N3O2S: 465.1511, dobijeno: 466.1581 (M+H)

Primer 110: N-[5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-(1H-pirazol-1-il) alanin

Korišćenjem Opšte procedure Ic i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i metil 2-amino-3-pirazol-1-il-propanoat hidrohlorida kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, zatim hidrolizom formiranog intermedijera prema Opštoj proceduri VII, dobijena je smeša dijastereoizomera. Prečišćeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata i, Primer 110 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMS izračunato zaC21H20ClN5O2S: 441.1026, dobijeno: 442.1120 and 442.1123 (M+H)

Primer 111: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-ciklopentil-D-alanin

i

Primer 112: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-ciklopentil-D-alanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-ciklopentil-propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 111 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C23H26ClN3O2S: 443.1434, dobijeno: 444.1519 (M+H) Primer 112 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C23H26ClN3O2S: 443.1434, dobijeno: 444.1518 (M+H)

Primer 113: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin i

Primer 114: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IIa i jedinjenja Izrade 3a kao odgovarajućeg derivata 5-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i (3-hloro-2-metil-fenil)borne kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 113 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C24H22ClN3O2S: 451.1121, dobijeno: 452.1192 (M+H) Primer 114 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C24H22ClN3O2S: 451.1121, dobijeno: 452.1174 (M+H)

Primer 115: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-L-fenilalanin i

Primer 116: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-L-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i L-fenilalanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 115 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C24H22ClN3O2S: 451.1121, dobijeno: 452.1207 (M+H) Primer 116 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C24H22ClN3O2S: 451.1121, dobijeno: 452.1183 (M+H)

Primer 117: N-[(SRa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-cikloheksil-D-alanin

i

Primer 118: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-cikloheksil-D-alanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-cikloheksil-propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 117 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C24H28ClN3O2S: 457.1591, dobijeno: 458.1672 (M+H) Primer 118 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C24H28ClN3O2S: 457.1591, dobijeno: 458.1663 (M+H)

Primer 119: N-[5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-alpha-metil-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-2-metil-3-fenil-propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 119 was obtained as a mixture of dijastereoizomers. HRMSizračunato za C25H24ClN3O2S: 465.1278, dobijeno: 466.1372 i 466.1356 (M+H)

Primer 120: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-hidroksi-D-fenilalanin

i

Primer 121: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-hidroksi-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-(2-hidroksifenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 120 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C24H22ClN3O3S: 467.1070, dobijeno: 468.1135 (M+H) Primer 121 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C24H22ClN3O3S: 467.1070, dobijeno: 468.1162 (M+H)

Primer 122: (βS)-N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-betahidroksi-D-fenilalanin

i

Primer 123: (βS)-N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-betahidroksi-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R,3S)-3-fenilserina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 122 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato zaC24H22ClN3O3S: 467.1070, dobijeno: 468.1151 (M+H) Primer 123 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C24H22ClN3O3S: 467.1070, dobijeno: 468.1133 (M+H)

Primer 124: (βR)-N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-betahidroksi-Lfenilalanin

i

Primer 125: (βR)-N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-betahidroksi-Lfenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2S,3R)-2-amino-3-hidroksi-3-fenilpropanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 124 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C24H22ClN3O3S: 467.1070, dobijeno: 468.1144 (M+H) Primer 125 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C24H22ClN3O3S: 467.1070, dobijeno: 468.1153 (M+H)

Primer 126: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-cijano-D-fenilalanin

i

Primer 127 N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-cijano-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-(2-cijanofenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C25H21ClN4O2S: 476.1074, dobijeno: 477.1129 (M+H) Primer 127 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C25H21ClN4O2S: 476.1074, dobijeno: 477.1134 (M+H)

Primer 128: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoksi-D-fenilalanin

i

Primer 129: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoksi-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ic i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-(2-metoksifenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C25H24ClN3O3S: 481.1227, dobijeno: 482.1320 (M+H) Primer 129 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira r. HRMS izračunato za C25H24ClN3O3S: 481.1227, dobijeno: 482.1319 (M+H)

Primer 130: N-[(SRa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2,6-difluoro-D-fenilalanin

i

Primer 131: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2,6-difluoro-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-(2,6-difluorofenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 130 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C24H20ClF2N3O2S: 487.0933, dobijeno: 488.1009 (M+H) Primer 131 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C24H20ClF2N3O2S: 487.0933, dobijeno: 488.1020 (M+H)

Primer 132: (2R)-2-{[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino}-3-(1H-indol-4-il)propanska kiselina

i

Primer 133: (2R)-2-{[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino}-3-(1H-indol-4-il)propanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i hidrohlorida (2R)-2-amino-3-(1H-indol-4-il)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 132 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C26H23ClN4O2S: 490.1230, dobijeno: 491.1289 (M+H) Primer 133 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C26H23ClN4O2S: 490.1230, dobijeno: 491.1309 (M+H)

Primer 134: 2-karbamoil-N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-(2-karbamoilfenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 134 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C25H23ClN4O3S: 494.1179, dobijeno: 495.1255 (M+H)

Primer 135: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-nitro-D-fenilalanin

i

Primer 136: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il] -2-nitro-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-(2-nitrofenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 135 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C24H21ClN4O4S: 496.0972, dobijeno: 497.1026 (M+H) Primer 136 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C24H21ClN4O4S: 496.0972, dobijeno: 497.1045 (M+H)

Primer 137: N-[(SRa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(trifluorometil)-D-fenilalanin

i

Primer 138: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(trifluorometil)-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-[2-(trifluorometil)fenil]propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 137 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C25H21ClF3N3O2S: 519.0995, dobijeno: 520.1068 (M+H) Primer 138 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C25H21ClF3N3O2S: 519.0995, dobijeno: 520.1047 (M+H)

Primer 139: 2-bromo-N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 140: 2-bromo-N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-[2-bromofenil]propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 139 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C24H21ClBrN3O2S: 529.0226, dobijeno: 530.0312 (M+H) Primer 140 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C24H21ClBrN3O2S: 529.0226, dobijeno: 530.0294 (M+H)

Primer 141: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[2-(dimetilamino)-2-oksoetoksi]-D-fenilalanin

i

Primer 142: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[2-(dimetilamino)-2-oksoetoksi]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i jedinjenja Izrade A9 kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 141 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C28H29ClN4O4S: 552.1598, dobijeno: 553.1694 (M+H) Primer 142 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C28H29ClN4O4S: 552.1598, dobijeno: 553.1673 (M+H)

Primer 143: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(2-ciklopentiletoksi)-D-fenilalanin

i

Primer 144: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(2-ciklopentiletoksi)-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i jedinjenja Izrade A10 kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 143 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato zaC31H34ClN3O3S: 563.2009, dobijeno: 564.2106 (M+H) Primer 144 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C31H34ClN3O3S: 563.2009, dobijeno: 564.2101 (M+H)

Primer 145: N-[(SRa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(2-feniletoksi)-D-fenilalanin

i

Primer 146: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(2-feniletoksi)-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i jedinjenja Izrade A11 kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 145 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato zaC32H30ClN3O3S: 571.1696, dobijeno: 572.1769 (M+H) Primer 146 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C32H30ClN3O3S: 571.1696, dobijeno: 572.1763 (M+H)

Primer 147: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(3-fenilpropoksi)-D-fenilalanin

i

Primer 148: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-(3-fenilpropoksi)-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i jedinjenja Izrade A12 kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 147 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C33H32ClN3O3S: 585.1853, dobijeno: 586.1917 (M+H) Primer 148 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C33H32ClN3O3S: 585.1853, dobijeno: 586.1906 (M+H)

Primer 149: 2-[(3-hlorobenzil)oksi]-N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 150: 2-[(3-hlorobenzil)oksi]-N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i jedinjenja Izrade A13 kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 149 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato zaC31H27Cl2N3O3S: 591.1150, dobijeno: 592.1211 (M+H) Primer 150 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C31H27Cl2N3O3S: 591.1150, dobijeno: 592.1234 (M+H)

Primer 151: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanin

i

Primer 152: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-(2-piridil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 151 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C23H21ClN4O2S: 452.1074, dobijeno: 453.1146 (M+H) Primer 152 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C23H21ClN4O2S: 452.1074, dobijeno: 453.1135 (M+H)

Primer 153: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]-D-fenilalanin

i

Primer 154: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i jedinjenja Izrade A14 kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 153 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato zaC31H36ClN5O3S: 593.2227, dobijeno: 594.2297 (M+H) [0329] Primer 154 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C31H36ClN5O3S: 593.2227, dobijeno: 594.2289 (M+H)

Primer 155: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[2-(dimetilamino)etoksi]-D-fenilalanin

i

Primer 156: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[2-(dimetilamino)etoksi]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i jedinjenja Izrade A15 kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 155 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C28H31ClN4O3S: 538.1805, dobijeno: 539.1890 (M+H) Primer 156 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C28H31ClN4O3S: 538.1805, dobijeno: 539.1887 (M+H)

Primer 157: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[3-(dimetilamino)propoksi]-D-fenilalanin

i

Primer 158: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-[3-(dimetilamino)propoksi]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4j kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i jedinjenja Izrade A16 kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 157 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato zaC29H33ClN4O3S: 552.1962, dobijeno: 553.2043 (M+H) Primer 158 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C29H33ClN4O3S: 552.1962, dobijeno: 553.2053 (M+H).

Primer 159: 3-ciklopropil-N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-alanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-ciklopropil-propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 159 je dobijen kao smeša dijastereoizomera. HRMSizračunato za C24H23N3O2S: 417.1511, dobijeno: 418.1570 (M+H)

Primer 160: (2R)-{[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino}(fenil)etanska kiselina, dijastereoizomer 1

i

Primer 161: (2R)-{[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino}(fenil)etanska kiselina, dijastereoizomer 2

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-2-fenil-sirćetne kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, upotrebom DMA kao rastvarača umesto DMSO, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 160 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C26H21N3O2S: 439.1354, dobijeno: 440.1428 (M+H) Primer 161 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C26H21N3O2S: 439.1354, dobijeno: 440.1412 (M+H)

Primer 162: N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-3-il-D-alanin i

Primer 163: N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-3-il-D-alanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-(3-piridil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 162 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C26H22N4O2S: 454.1463, dobijeno: 455.1520 (M+H) Primer 163 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C26H22N4O2S: 454.1463, dobijeno: 455.1536 (M+H)

Primer 164: 3-cikloheksil-N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-alanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-cikloheksil-propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Prečišćeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 0.02% vodenog rastvora HCOOH i acetonitrila kao eluenata. Primer 164 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMS izračunato za C27H29N3O2S: 459.1980, dobijeno: 460.2042 (M+H)

Primer 165: 3-cikloheksil-N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-alanin i

Primer 166: 3-cikloheksil-N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-alanin

Dijastereoizomeri Primera 164 razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 165 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C27H29N3O2S: 459.1980, dobijeno: 460.2043 (M+H) Primer 166 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C27H29N3O2S: 459.1980, dobijeno: 460.2058 (M+H)

Primer 167: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metil-D-fenilalanin, dijastereoizomer 1

i

Primer 168: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metil-D-fenilalanin, dijastereoizomer 2

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivativa i D-2’-metilfenilalanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 40 mM vodenog rastvora NH4<OAc (pH = 4, podešen>sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 167 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za for C28H25N3O2S: 467.1667, dobijeno: 468.1747 (M+H) Primer 168 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C28H25N3O2S: 467.1667, dobijeno: 468.1748 (M+H)

Primer 169: (2R)-2-{[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino}-4-fenilbutanska kiselina

Korišćenjem Opšte procedure Ia i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivativa i (2R)-2-amino-4-fenil-butanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Prečišćeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 0.02% vodenog rastvora HCOOH i acetonitrila kao eluenata. Primer 169 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMSizračunato za C28H25N3O2S: 467.1667, dobijeno: 468.1731 (M+H)

Primer 170: (2R)-2-{[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino}-4-fenilbutanska kiselina

i

Primer 171: (2R)-2-{[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino}-4-fenilbutanska kiselina

Dijastereoizomeri Primera 169 su razdvojeni putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, primenom 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 170 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C28H25N3O2S: 467.1667, dobijeno: 468.1733 (M+H) Primer 171 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C28H25N3O2S: 467.1667, dobijeno: 468.1726 (M+H)

Primer 172: N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-tirozin

i

Primer 173: N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-tirozin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (2R)-2-amino-3-(4-hidroksifenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, upotrebom DMA kao rastvarača umesto DMSO, dobija se smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 172 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C27H23N3O3S: 469.1460, dobijeno: 470.1539 (M+H) Primer 173 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C27H23N3O3S: 469.1460, dobijeno: 470.1534 (M+H)

Primer 174: N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-hidroksi-D-fenilalanin

i

Primer 175: N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-hidroksi-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (2R)-2-amino-3-(2-hidroksifenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, primenom 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 174 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C27H23N3O3S: 469.1460, dobijeno: 470.1546 (M+H) Primer 175 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C27H23N3O3S: 469.1460, dobijeno: 470.1520 (M+H)

Primer 176: N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-4-fluoro-D-fenilalanin i

Primer 177: N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-4-fluoro-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (2R)-2-amino-3-(4-fluorofenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, upotrebom DMA kao rastvarača umesto DMSO, dobija se smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 176 was obtained as the earlier eluting dijastereoizomer. HRMS izračunato za C27H22FN3O2S: 471.1417, dobijeno: 472.1493 (M+H) Primer 177 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C27H22FN3O2S: 471.1417, dobijeno: 472.1494 (M+H)

Primer 178: N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-fluoro-D-fenilalanin i

Primer 179: N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-fluoro-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (2R)-2-amino-3-(3-fluorofenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobija se smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 178 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C27H22FN3O2S: 471.1417, dobijeno: 472.1486 (M+H) Primer 179 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C27H22FN3O2S: 471.1417, dobijeno: 472.1482 (M+H)

Primer 180: N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-fluoro-D-fenilalanin i

Primer 181: N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-fluoro-D-fenilalanin Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (2R)-2-amino-3-(2-fluorofenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, upotrebom DMA kao rastvarača umesto DMSO, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 180 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C27H22FN3O2S: 471.1417, dobijeno: 472.1501 (M+H) Primer 181 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C27H22FN3O2S: 471.1417, dobijeno: 472.1492 (M+H)

Primer 182: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoksi-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (2R)-2-amino-3-(2-metoksifenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Prečišćeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, primenom 40 mM vodenog rastvoraNH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 182 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMS izračunato za C28H25N3O3S: 483.1617, dobijeno: 484.1682 i 484.1695 (M+H)

Primer 183: 2-hloro-N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (2R)-2-amino-3-(2-hlorofenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Prečišćeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 183 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMS izračunato za C27H22ClN3O2S: 487.1121, dobijeno: 488.1198 i 488.1199 (M+H)

Primer 184: N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-triptofan

i

Primer 185: N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-triptofan

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (2R)-2-amino-3-(1H-indol-3-il)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, upotrebom DMA kao rastvarača umesto DMSO, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 184 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C29H24N4O2S: 492.1620, dobijeno 493.1693 (M+H) Primer 185 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C29H24N4O2S: 492.1620, dobijeno 493.1690 (M+H)

Primer 186: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-naftalen-1-il-D-alanin, dijastereoizomer 1

i

Primer 187: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-naftalen-1-il-D-alanin, dijastereoizomer 2

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (2R)-2-amino-3-(1-naphthil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, upotrebom DMA kao rastvarača umesto DMSO, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 186 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C31<H>25<N>3<O>2<S: 503.1667,>dobijeno: 504.1754 (M+H) Primer 187 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C31H25N3O2S: 503.1667, dobijeno: 504.1758 (M+H)

Primer 188: (2R)-bifenil-2-il{[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino}etanska kiselina, dijastereoizomer 2

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (R)-amino-bifenil-2-il-sirćetne kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, primenom 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 188 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C32H25N3O2S: 515.1667, dobijeno: 516.1747 (M+H)

Primer 189: (2R)-bifenil-3-il{[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino}etanska kiselina, dijastereoizomer 1

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (R)-amino-bifenil-3-il-sirćetne kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, primenom 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 189 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C32H25N3O2S: 515.1667, dobijeno: 516.1743 (M+H)

Primer 190: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-histidin

Korišćenjem Opšte procedure Ia i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (2R)-2-amino-3-(1H-imidazol-4-il)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Prečišćeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 190 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMSizračunato za C24H21N5O2S: 443.1416, dobijeno: 444.1462 i 444.1471 za dva dijastereoizomera (M+H)

Primer 191: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il] -3-piridin-2-il-D-alanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (2R)-2-amino-3-(2-piridil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Prečišćeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 191 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMSizračunato za C26H22N4O2S: 454.1463, dobijeno: 455.1537 i 455.1558 za dva dijastereoizomera (M+H)

Primer 192: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-3-il-D-alanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i 3-(3-piridil)-D-alanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Prečišćeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 192 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMS izračunato za C26H22N4O2S: 454.1445, dobijeno: 455.1545 i 455.1553 za dva dijastereoizomera (M+H)

Primer 193: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-4-il-D-alanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (2R)-2-amino-3-(4-piridil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Prečišćeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 193 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMSizračunato za C26H22N4O2S: 454.1440, dobijeno: 455.1540 i 455.1545 za dva dijastereoizomera (M+H)

Primer 194: N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-1-metil-D-histidin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (2R)-2-amino-3-(1-metilimidazol-4-il)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Prečišćeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 194 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMSizračunato za C25H23N5O2S: 457.1572, dobijeno: 458.1641 i 458.1654 za dva dijastereoizomera (M+H)

Primer 195: 1-benzil-N-[6-etil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-histidin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4k kao odgovarajućeg 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidinskog derivata i (2R)-2-amino-3-(1-benzilimidazol-4-il)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Prečišćeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi, primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 195 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMS izračunato za C31H27N5O2S: 533.1885, dobijeno: 534.1934 i 534.1934 za dva dijastereoizomera (M+H)

Primer 196: N-[6-metil-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ia i jedinjenja Izrade 41 kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i D-fenilalanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Prečišćena je putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 196 je dobijen u vidu smeše dijastereoizomera. HRMS izračunato za C26H21N3O2S: 439.1354, dobijeno: 440.1421 i 440.1429 (M+H)

Primer 197: N-[6-(hidroksimetil)-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 198: N-[6-(hidroksimetil)-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ia i jedinjenja Izrade 4m kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i D-fenilalanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 197 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C26<H>21<N>3<O>3<S: 455.1304,>dobijeno: 456.1356 (M+H) Primer 198 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C26H21N3O3S: 455.1304, dobijeno: 456.1390 (M+H)

Primer 199: N-[6-acetil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 200: N-[6-acetil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ia i jedinjenja Izrade 4o kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i D-fenilalanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 199 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C27H21N3O3S: 467.1304, dobijeno: 468.1379 (M+H) Primer 200 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C27H21N3O3S: 467.1304, dobijeno: 468.1377 (M+H)

Primer 201: N-[5-(naftalen-1-il)-6-(propan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin, dijastereoizomer 1

i

Primer 202: N-[5-(naftalen-1-il)-6-(propan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin, dijastereoizomer 2

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4q kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i D-fenilalanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 40 mM vodenog rastvora NH4<OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i>acetonitrila kao eluenata. Primer 201 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C28H25N3O2S: 467.1667, dobijeno: 468.1731 (M+H) Primer 202 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C28H25N3O2S: 467.1667, dobijeno: 468.1720 (M+H)

Primer 203: N-[6-(1-hidroksietil)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin, dijastereoizomer 1

i

Primer 204: N-[6-(1-hidroksietil)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin, dijastereoizomer 2

Korišćenjem Opšte procedure Ia i jedinjenja Izrade 4n1 kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i D-fenilalanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 203 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C27<H>23<N>3<O>3<S: 469.1460,>dobijeno: 470.1511 (M+H) Primer 204 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C27H23N3O3S: 469.1460, dobijeno: 470.1536 (M+H)

Primer 205: N-[6-(1-hidroksietil)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin, dijastereoizomer 3

i

Primer 206: N-[6-(1-hidroksietil)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin, dijastereoizomer4

Korišćenjem Opšte procedure Ia i jedinjenja Izrade 4n2 kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i D-fenilalanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 205 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C27<H>23<N>3<O>3<S: 469.1460,>dobijeno: 470.1539 (M+H) Primer 206 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C27H23N3O3S: 469.1460, dobijeno: 470.1534 (M+H)

Primer 207: N-[6-(difluorometil)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin, dijastereoizomer 1

Primer 208: N-[6-(difluorometil)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin, dijastereoizomer 2

Korišćenjem Opšte procedure Ia i jedinjenja Izrade 4r kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i D-fenilalanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 40 mM vodenog rastvora NH4<OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i>acetonitrila kao eluenata. Primer 207 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C26H19F2N3O2S: 475.1166, dobijeno: 476.1242 (M+H) Primer 208 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C26H19F2N3O2S: 475.1166, dobijeno: 476.1244 (M+H)

Primer 209: N-[6-(2-hidroksipropan-2-il)-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 210: N-[6-(2-hidroksipropan-2-il)-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ia i jedinjenja Izrade 4p kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i D-fenilalanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 209 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C28H25N3O3S: 483.1617, dobijeno: 484.1689 (M+H) Primer 210 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C28H25N3O3S: 483.1617, dobijeno: 484.1704 (M+H)

Primer 211: N-[6-jodo-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ia i jedinjenja Izrade 4s kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i D-fenilalanina kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, korišćenjem DMA kao rastvarača umesto DMSO, dobijena je smeša dijastereoizomera. Prečišćena je putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 40 mM vodenograstvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 211 je dobijen kao smeša dijastereoizomera. HRMS izračunato za C25H18JN3O2S: 551.0164, dobijeno: 552.0258 (M+H)

Primer 212: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-ethenil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 213: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-ethenil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IIc i jedinjenja Izrade 5a kao odgovarajućeg derivata 6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i pinakol estra vinilborne kiseline kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 212 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C24H20ClN3O2S: 449.0965, dobijeno: 450.1038 (M+H) Primer 213 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C24H20ClN3O2S: 449.0965, dobijeno: 450.1050 (M+H)

Primer 214: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-(prop-1-en-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 215: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-(prop-1-en-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IIc i jedinjenja Izrade 5a kao odgovarajućeg derivata 6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i 2-izopropenil-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 214 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C25H22ClN3O2S: 463.1121, dobijeno: 464.1178 (M+H) Primer 215 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C25H22ClN3O2S: 463.1121, dobijeno: 464.1179 (M+H)

Primer 216: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-ciklopropil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 217: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-ciklopropil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure IIa i jedinjenja Izrade 5a kao odgovarajućeg derivata 6-jodo-tieno[2,3-d]pirimidina i ciklopropilborne kiseline kao odgovarajućeg derivata borne kiseline, kao i Bu4NOH umesto K2CO3, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 216 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C25H22ClN3O2S: 463.1121, dobijeno: 464.1177 (M+H) Primer 217 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C25H22ClN3O2S: 463.1121, dobijeno: 464.1182 (M+H)

Primer 218: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-(propan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-L-fenilalanin

i

Primer 219: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-(propan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-L-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4u kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i L-fenilalanina kao odgovarajućeg derivata amino kiseline, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 218 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C25H24ClN3O2S: 465.1278, dobijeno: 466.1371 (M+H) Primer 219 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C25H24ClN3O2S: 465.1278, dobijeno: 466.1361 (M+H)

Primer 220: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-(propan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

i

Primer 221: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-(propan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4u kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i D-fenilalanina kao odgovarajućeg derivata amino kiseline, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 220 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za for C25H24ClN3O2S: 465.1278, dobijeno: 466.1348 (M+H) Primer 221 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C25H24ClN3O2S: 465.1278, dobijeno: 466.1350 (M+H)

Primer 222: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-(propan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoksi-D-fenilalanin

i

Primer 223: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-2-metilfenil)-6-(propan-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-metoksi-D-fenilalanin

Korišćenjem Opšte procedure Ib i jedinjenja Izrade 4u kao odgovarajućeg derivata 4-hloro-tieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-(2-metoksifenil)propanske kiseline kao odgovarajućeg derivata amino kiseline, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi primenom 0.1% vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 222 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C26H26ClN3O3S: 495.1383, dobijeno: 496.1460 (M+H) Primer 223 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C26H26ClN3O3S: 495.1383, dobijeno: 496.1454 (M+H)

Primer 224: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin i

Primer 225: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

522 mg jedinjenja Izrade 7h (1 mmol), 164 mg NCS (1.2 mmol), 15 mL CCl4i 10 mL THF se meša na r.t. u atmosferi N2u toku 2 sata. Smeša se uzruči na ledenu vodu i ekstrahuje se sa DCM. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Formirani dijastereoizomeri se razdvajaju putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 224 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira.HRMS izračunato za C25H21ClN4O2S: 476.1074, dobijeno: 477.1133 (M+H) Primer 225 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C25H21ClN4O2S: 476.1074, dobijeno: 477.1137 (M+H)

Primer 226: N-[(5Sa)-5-(3-bromo-1H-indol-4-il)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin i

Primer 227: N-[(5Ra)-5-(3-bromo-1H-indol-4-il)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

522 mg jedinjenja Izrade 7h (1 mmol), 216 mg NBS (1.2 mmol), 15 mL CCl4i 5 mL THF se meša na r.t. u atmosferi N2u toku 2 sata. Smeša se uzruči na ledenu vodu i ekstrahuje se sa DCM. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Formirani dijastereoizomeri se razdvajaju putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 226 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C25H21BrN4O2S: 520.0569, dobijeno: 521.0653 (M+H) Primer 227 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C25H21BrN4O2S: 520.0569, dobijeno: 521.0629 (M+H)

Primer 228: N-[6-etil-(5Sa)-5-(3-jodo-1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin i

Primer 229: N-[6-etil-(5Ra)-5-(3-jodo-1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin 522 mg jedinjenja Izrade 7h (1 mmol), 196 mg KOH (3.5 mmol), 15 mL DMF i 267 mg joda (1.05 mmol) se meša na r.t. u atmosferi N2u toku 18 sati. Zatim se smeša izruči na ledenu vodu i doda se zasićeni rastvor Na2S2O3. Smeša se ekstrahuje sa DCM, spojene organske faze se osuše preko Na2SO4, filtriraju i filtrat se ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Formirani dijastereoizomeri se razdvajaju putem preparativne hromatografije na reverznoj fazi upotrebom 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 228 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C25H21JN4O2S: 568.043, dobijeno: 569.0498 (M+H) Primer 229 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C25H21JN4O2S: 568.043, dobijeno: 569.0502 (M+H)

Primer 230: N-((5Sa)-5-{3-hloro-1-[2-(dimetilamino)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

i

Primer 231: N-((5Ra)-5-{3-hloro-1-[2-(dimetilamino)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

Primenom Opšte procedure VIII i Izrade 7i kao odgovarajućeg derivata indola i 2-(N,N-dimetilamino)etanola kao odgovarajućeg alkohola, Primer 230 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C29H30ClN5O2S: 547.1809, dobijeno: 548.1902 (M+H) Primer 231 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C29H30ClN5O2S: 547.1809, dobijeno: 548.1889 (M+H)

Primer 232: N-((5Ra)-5-{3-hloro-1-[2-(pirolidin-1-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

i

Primer 233: N-((5Sa)-5-{3-hloro-1-[2-(pirolidin-1-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

Primenom Opšte procedure VIII i Izrade 7i kao odgovarajućeg derivata indola i 2-pirolidin-1-iletanola kao odgovarajućeg alkohola, Primer 232 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C31H32ClN5O2S: 573.1965, dobijeno: 574.2059 (M+H) Primer 233 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C31H32ClN5O2S: 573.1965, dobijeno: 574.2060 (M+H)

Primer 234: N-((5Ra)-5-{3-hloro-1-[2-(piperidin-1-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

i

Primer 235: N-((5Sa)-5-{3-hloro-1-[2-(piperidin-1-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

Primenom Opšte procedure VIII i Izrade 7i kao odgovarajućeg derivata indola i 2-(1-piperidil)etanola kao odgovarajućeg alkohola, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne reverzno-fazne hromatografije korišćenjem 0.1 % vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 234 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C32H34ClN5O2S: 587.2122, dobijeno: 588.2201 (M+H) Primer 235 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C32H34ClN5O2S: 587.2122, dobijeno: 588.2199 (M+H)

Primer 236: N-((5Ra)-5-{3-hloro-1-[2-(morfolin-4-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

i

Primer 237: N-((5Sa)-5-{3-hloro-1-[2-(morfolin-4-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

Primenom Opšte procedure VIII i Izrade 7i kao odgovarajućeg derivata indola i 2-morfolinoetanola kao odgovarajućeg alkohola, Primer 236 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C31H32ClN5O3S: 589.1914, dobijeno: 590.1998 (M+H) Primer 237 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C31H32ClN5O3S: 589.1914, dobijeno: 590.1994 (M+H).

Primer 238: N-((5Sa)-5-{3-hloro-1-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno [2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

i

Primer 239: N-((5Ra)-5-{3-hloro-1-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno [2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

Primenom Opšte procedure VIII i Izrade 7i kao odgovarajućeg derivata indola i 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanola kao odgovarajućeg alkohola, Primer 238 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C32H35ClN6O2S: 602.2231, dobijeno: 603.2312 (M+H) Primer 239 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C32H35ClN6O2S: 602.2231, dobijeno: 603.2311 (M+H)

Primer 240: N-((5Sa)-5-{3-hloro-1-[3-(4-metilpiperazin-1-il)propil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno [2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

i

Primer 241: N-((5Ra)-5-{3-hloro-1-[3-(4-metilpiperazin-1-il)propil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno [2,3-d]pirimidin-4-il)-D-fenilalanin

Primenom Opšte procedure VIII i Izrade 7i kao odgovarajućeg derivata indola i 3-(4-metilpiperazin-1-il)propan-1-ola kao odgovarajućeg alkohola, Primer 240 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C33H37ClN6O2S: 616.2387, dobijeno: 617.2466 (M+H) Primer 241 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C33H37ClN6O2S: 616.2387, dobijeno: 617.2473 (M+H)

Primer 242: 3-cikloheksil-N-[6-etil-5-(1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-alanin, dijastereoizomer 1

i

Primer 243: 3-cikloheksil-N-[6-etil-5-(1H-indol-4-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-alanin, dijastereoizomer 2

Primenom Opšte procedure Ia i Izrade 4v kao odgovarajućeg derivata 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-cikloheksil-propanske kiseline kao odgovarajućeg derivata aminokiseline, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne reverzno-fazne hromatografije korišćenjem 0.1 % vodenog rastvora TFA i acetonitrila kao eluenata. Primer 242 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C25H28N4O2S: 448.1933, dobijeno: 449.1994 (M+H) Primer 243 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C25H28N4O2S: 448.1933, dobijeno: 449.2006 (M+H)

Primer 244: N-[(5Sa)-5-(3-hloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanin

i

Primer 245: N-[(5Ra)-5-(3-hloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanin

Primenom Opšte procedure Ia i Izrade 7j kao odgovarajućeg derivata 4-hlorotieno[2,3-d]pirimidina i (2R)-2-amino-3-(2-piridil)propanske kiseline kao odgovarajućeg derivata aminokiseline, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne reverzno-fazne hromatografije korišćenjem 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 244 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C24H20ClN5O2S: 477.1026, dobijeno: 478.1087 (M+H) Primer 245 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C24H20ClN5O2S: 477.1026, dobijeno: 478.1089 (M+H)

Primer 246: N-((5Sa)-5-{3-hloro-1-[2-(morfolin-4-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il)-3-piridin-2-il-D-alanin

Korak A: metil (2R)-2-[[(5Sa)-5-(3-hloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoat

0.13 g Primera 244 (0.27 mmol) je rastvoreno u 13 mL MeOH, zatim je dodato 0.3 mL cc. H2SO4i, smeša je mešana na r.t. do završetka konverzije. Zatim je ukoncentrisana pod sniženim pritiskom i dodat je zasićeni vodeni rastvor NaHCO3i, smeša je mućkana. Formirani talog je sakupljen filtriranjem kako se dobija metil (2R)-2-[[(5Sa)-5-(3-hloro-1H-indol-4-il)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoat.

Korak B: Primer 246

Primenom Opšte procedure VIII i metil (2R)-2-[[(5Sa)-5-(3-hloro-1H-indol-4-il)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoata kao odgovarajućeg derivata indola i 2-morfolinoetanola kao odgovarajućeg alkohola, dobijen je Primer 246. HRMS izračunato za C30H31ClN6O3S: 590.1867, dobijeno: 591.1938 (M+H)

Primer 247: N-((5Ra)-5-{3-hloro-1-[2-(morfolin-4-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno[2,3-d] pirimidin-4-il)-3-piridin-2-il-D-alanin

Korak A: metil (2R)-2-[[(5Ra)-5-(3-hloro-1H-indol-4-il)-6-etil-tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoat

0.157 g Primer 245 (0.33 mmol) je rastvoreno u 15 mL MeOH, zatim je dodato 0.3 mL cc. H2SO4i, smeša je mešana na r.t. do završetka konverzije. Zatim je ukoncentrisana pod sniženim pritiskom i dodat je zasićeni vodeni rastvor NaHCO3i, smeša je mućkana. Formirani talog je sakupljen filtriranjem kako se dobija metil (2R)-2-[[(5Ra)-5-(3-hloro-1H-indol-4-il)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoat.

Korak B: Primer 247

Primenom Opšte procedure VIII i metil (2R)-2-[[(5Ra)-5-(3-hloro-1H-indol-4-il)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoata kao odgovarajućeg amina i 2-morfolinoetanola kao odgovarajućeg alkohola, dobijen je Primer 247. HRMS izračunato za C30H31ClN6O3S: 590.1867, dobijeno: 591.1918 (M+H)

Primer 248: N-((5Sa)-5-{3-hloro-1-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno [2,3-d]pirimidin-4-il)-3-piridin-2-il-D-alanin

0.13 g Primer 244 (0.27 mmol) je rastvoreno u 13 mL MeOH, zatim je dodato 0.3 mL cc. H2SO4i, smeša je mešana na r.t. do završetka konverzije. Zatim je ukoncentrisana pod sniženim pritiskom i dodat je zasićeni vodeni rastvor NaHCO3i, smeša je mućkana. Formirani talog je sakupljen filtriranjem kako se dobija metil (2R)-2-[[(5Sa)-5-(3-hloro-1H-indol-4-il)-6-etiltieno[2,3-d] pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoat.

Korak B: Primer 248

Primenom Opšte procedure VIII i metil (2R)-2-[[(5Sa)-5-(3-hloro-1H-indol-4-il)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoata kao odgovarajućeg derivata indola i 2-(4metilpiperazin-1-il)etanola kao odgovarajućeg alkohola, dobijen je Primer 248. HRMS izračunato za C31H34ClN7O2S: 603.2183, dobijeno: 302.6172 (M+2H)

Primer 249: N-((5Ra)-5-{3-hloro-1-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etil]-1H-indol-4-il}-6-etil-tieno [2,3-d]pirimidin-4-il)-3-piridin-2-il-D-alanin

0.157 g Primer 245 (0.33 mmol) je rastvoreno u 15 mL MeOH, zatim je dodato 0.3 mL cc. H2SO4i, smeša je mešana na r.t. do završetka konverzije. Zatim je ukoncentrisana pod sniženim pritiskom i dodat je zasićeni vodeni rastvor NaHCO3i, smeša je mućkana. Formirani talog je sakupljen filtriranjem kako se dobija metil (2R)-2-[[(5Ra)-5-(3-hloro-1H-indol-4-il)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil) propanoat.

Korak B: Primer 249

Primenom Opšte procedure VIII i metil (2R)-2-[[(5Ra)-5-(3-hloro-1H-indol-4-il)-6-etiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]amino]-3-(2-piridil)propanoata kao odgovarajućeg derivata indola i 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanola kao odgovarajućeg alkohola, dobijen je Primer 249. HRMS izračunato za C31H34ClN7O2S: 603.2183, dobijeno: 302.6164 (M+2H)

Primer 250: N-[6-(difluorometil)-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanin

i

Primer 251: N-[6-(difluorometil)-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-3-piridin-2-il-D-alanin

Primenom Opšte procedure Ia i Izrade 4r kao odgovarajućeg 4-hloro-tieno[2,3-d] pirimidinskog derivata i (2R)-2-amino-3-(2-piridil)propanske kiseline kao odgovarajućeg aminokiselinskog derivata, dobijena je smeša dijastereoizomera. Razdvojeni su putem preparativne reverzno-fazne hromatografije korišćenjem 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata. Primer 250 je dobijen kao dijastereoizomer koji se ranije eluira. HRMS izračunato za C25H18F2N4O2S: 476.1119, dobijeno: 477.1195 (M+H) Primer 251 je dobijen kao dijastereoizomer koji se kasnije eluira. HRMS izračunato za C25H18F2N4O2S: 476.1119, dobijeno: 477.1182 (M+H)

Primer 252: N-[(5Sa)-5-(naftalen-1-il)-6-propiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

266 mg Primer 108 (0.57 mmol) je rastvoreno u 10 mL MeOH i 2 mL AcOH, onda je dodato 61 mg 10 % Pd/C. Smeša je mešana u atmosferi H2na 40°C u toku 2 sata. Filtrirana je kroz Celit i filtrat je ukoncentrisan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen putem preparativne reverzno-fazne hromatografije korišćenjem 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata da bi se dobio Primer 252. HRMS izračunato za C28H25N3O2S: 467.1667, dobijeno: 468.1746 (M+H)

Primer 253: N-[(5Ra)-5-(naftalen-1-il)-6-propiltieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin

266 mg Primera 109 (0.57 mmol) je rastvoreno u 10 mL MeOH i 2 mL AcOH, onda je dodato 61 mg 10 % Pd/C. Smeša je mešana u atmosferi H2na 40°C u toku 2 sata. Filtrirana je kroz Celit i filtrat je ukoncentrisan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen putem preparativne reverzno-fazne hromatografije korišćenjem 40 mM vodenog rastvora NH4OAc (pH = 4, podešen sa AcOH) i acetonitrila kao eluenata da bi se dobio Primer 253. HRMS izračunato za C28H25N3O2S: 467.1667, dobijeno: 468.1736 (M+H)

Primer 254: metil N-[6-etil-(5Sa)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninat

102 mg Primera 101 (0.225 mmol) je rastvoreno u 2 mL MeOH i smeša je ohlađena na 0°C u atmosferi N2. Zatim je dodato 135 µL rastvora diazometil(trimetil)silana (2M u Et2O) i, smeša je ostavljena da se zagreje na r.t. Smeša je zatim ukoncentrisana u vakuumu i prečišćena putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata da bi se dobio Primer 254. HRMS izračunato za C28H25N3O2S: 467.1667, dobijeno: 468.1746 (M+H)

Primer 255: metil N-[6-etil-(5Ra)-5-(naftalen-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninat

102 mg Primera 100 (0.225 mmol) je rastvoreno u 2 mL MeOH i smeša je ohlađena na 0°C u atmosferi N2. Zatim je dodato 135 µL rastvora diazometil(trimetil)silana (2M u Et2O) i, smeša je ostavljena da se zagreje na r.t. Smeša je ukoncentrisana u vakuumu i prečišćena putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata da bi se dobio Primer 255. HRMS izračunato za C28H25N3O2S: 467.1667, dobijeno: 468.1737 (M+H)

Primer 256: etil N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalaninat

Primer 7 je rastvoren u rastvoru HCl (20 mL/mmol, 1.25M u EtOH) i smeša je mešana na r.t. preko noći. Zatim je smeša neutralisana sa rastvorom NaHCO3i ekstrahovana sa DCM. Organska faza je osušena preko Na2SO4, filtrirana i filtrat ukoncentrisan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen putem preparativne reverzno-fazne hromatografije korišćenjem 25 mM vodenog rastvora NH4HCO3i acetonitrila kao eluenata da bi se dobio Primer 256. HRMS izračunato za C49H49ClFN7O5S: 901.3188, dobijeno: 902.3225 (M+H)

Primer 257: etil 2-[(1-terc-butil-1H-pirazol-5-il)metoksi]-N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalaninat

Primer 40 je rastvoren u rastvoru HCl (20 mL/mmol, 1.25M u EtOH) i smeša je mešana na r.t. preko noći. Zatim je smeša neutralisana sa rastvorom NaHCO3i ekstrahovana sa DCM. Organska faza je osušena preko Na2SO4, filtrirana i filtrat ukoncentrisan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen putem preparativne reverzno-fazne hromatografije korišćenjem 25 mM vodenog rastvora NH4HCO3i acetonitrila kao eluenata da bi se dobio Primer 257. HRMS izračunato za C42H50ClN7O4S: 783.3334, dobijeno: 392.6744 (M+2H)

Primer 258: etil N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalaninat

Primer 45 je rastvoren u rastvoru HCl (20 mL/mmol, 1.25M u EtOH) i smeša je mešana na r.t. preko noći. Zatim je smeša neutralisana sa rastvorom NaHCO3i ekstrahovana sa DCM. Organska faza je osušena preko Na2SO4, filtrirana i filtrat ukoncentrisan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen putem preparativne reverzno-fazne hromatografije korišćenjem 25 mM vodenog rastvora NH4HCO3i acetonitrila kao eluenata da bi se dobio Primer 258. HRMS izračunato za C46H48ClN7O5S: 845.3126, dobijeno: 423.6650 (M+H) Primer 259: etil N-[(5Sa)-5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metil fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalaninat

Primer 49 je rastvoren u rastvoru HCl (20 mL/mmol, 1.25M u EtOH) i smeša je mešana na r.t. preko noći. Zatim je smeša neutralisana sa rastvorom NaHCO3i ekstrahovana sa DCM. Organska faza je osušena preko Na2SO4, filtrirana i filtrat ukoncentrisan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen putem preparativne reverzno-fazne hromatografije korišćenjem 25 mM vodenog rastvora NH4HCO3i acetonitrila kao eluenata da bi se dobio Primer 259. HRMS izračunato za C43H43ClN6O5S: 790.2704, dobijeno: 396.1425 (M+2H)

Primer 260: etil N-[(5Sa)-5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[2-(2-metoksietoksi)fenil]pirimidin-4-il}metoksi)-D-fenilalaninat

Primer 51 je rastvoren u rastvoru HCl (20 mL/mmol, 1.25M u EtOH) i smeša je mešana na 60°C sve dok se više nije zapažala konverzija. Zatim je smeša neutralisana sa rastvorom NaHCO3i ekstrahovana sa DCM. Organska faza je osušena preko Na2SO4, filtrirana i filtrat ukoncentrisan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen putem preparativne reverzno-fazne hromatografije korišćenjem 25 mM vodenog rastvora NH4HCO3i acetonitrila kao eluenata da bi se dobio Primer 260. HRMS izračunato za C48H48ClFN6O6S: 890.3029, dobijeno: 891.3105 (M+H)

Primer 261: (5-metil-2-okso-1,3-dioksol-4-il)metil-N-[(5Sa)-5-{3-hloro-4-[2-(dimetil-amino) etoksi]-2-metilfenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[2-(2-metoksi-etoksi) fenil]pirimidin-4-il}metoksi)-D-fenilalaninat

1 eq. Primera 51 i 1.1 eq. 4-(hlorometil)-5-metil-1,3-dioksol-2-ona su rastvoreni u DMF (10 mL/mmol), zatim je dodato 2 eq. NaJ i 2 eq. Cs2CO3i smeša je mešana do prestanka konverzije. Zatim je smeša direktno injektovana i prečišćena putem preparativne reverzno-fazne hromatografije korišćenjem 25 mM vodenog rastvora NH4HCO3i acetonitrila kao eluenata da bi se dobio Primer 261. HRMS izračunato za C51H48ClFN6O9S: 974.2876, dobijeno: 975.2949 (M+H)

Primer 262: 1-[(etoksikarbonil)oksi]etil-N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}-D-fenilalaninat

Primer 263: 1-[(dimetilkarbamoil)oksi]etil-N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil) pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalaninat

Primer 264: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[3-(hidroksimetil)fenil]pirimidin-4-il}metoksi)-D-fenilalanin

Primer 265: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[2-(hidroksimetil)piridin-4-il]pirimidin-4-il} metoksi)-D-fenilalanin

Primer 266: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[6-(hidroksimetil)piridazin-4-il]pirimidin-4-il} metoksi)-D-fenilalanin

Primer 267: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[6-(hidroksimetil)pirazin-2-il]pirimidin-4-il} metoksi)-D-fenilalanin

Primer 268: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2’-(hidroksimetil)-2,5’-bipirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

Primer 269: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[4-(fosfonooksi)fenil]pirimidin-4-il}metoksi)-D-fenilalanin

Primer 270: N-[5-{3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

Korak A: 4-bromo-2,6-dihloro-3,5-dimetil-fenol

30.16 g 4-bromo-3,5-dimetil-fenola (150 mmol) je rastvoreno u smeši 75 mL 1,2-dihloroetana i 75 mL acetonitrila, onda je, deo po deo, dodato 40.06 g NCS (300 mmol) i smeša je mešana na r.t. do prestanka konverzije. Reakciona smeša je ukoncentrisana pod sniženim pritiskom, ostatak je rastvoren u DCM, ispran sa vodom i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko Na2SO4i ukoncentrisan pod sniženim pritiskom i, korišćen u sledećem koraku bez prethodnog prečišćavanja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 10.10 (s, 1H), 2.46 (s, 6H)

Korak B: 1-bromo-3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-benzen

U rastvor 26.0 g 4-bromo-2,6-dihloro-3,5-dimetil-fenola (96.3 mmol) i 26.6 g K2CO3(192.6 mmol) u 300 mL MeCN dodato je 6.6 mL MeJ (105.9 mmol) i smeša je mešana na r.t. do prestanka konverzije. Čvrste materije su odfiltrirane i filtrat je ukoncentrisan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je rastvoren u DCM, ispran sa vodom i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko Na2SO4i ukoncentrisan pod sniženim pritiskom i, korišćen u sledećem koraku bez prethodnog prečišćavanja.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 3.78 (s, 3H), 2.49 (s, 6H)

Korak C: 2-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan

10.0 g 1-bromo-3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-benzena (35.2 mmol) je rastvoreno u 360 mL suvog THF-a pod azotom i, ohlađeno je na -78°C sa smešom suvi led-aceton. Dodato je 23.2 mL nBuLi (1.6 M u heksanima) (37.0 mmol) i, smeša je mešana u toku 15 minuta, zatim je dodato 8.6 mL 2-izopropoksi-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana (42.24 mmol) i smeša je ostavljena da se zagreje na r.t. Ugašena je sa slanim rastvorom, ekstrahovana sa DCM, osušena preko Na2SO4filtrirana i ukoncentrisana pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata kako se dobija 2-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 3.81 (s, 3H), 2.33 (s, 6H), 1.34 (s, 12H)

Korak D: etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)tiofen-3-karboksilat

3.92 g etil 4-bromotiofen-3-karboksilata (16.68 mmol) i 9.9 g 2-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetilfenil)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana (30.0 mmol) se rastvori u 140 mL dioksana, zatim se doda 10.87 g Cs2CO3(33.36 mmol) rastvorenog u 40 mL vode. Potom se dodaje 590 mg AtaPhos (0.83 mmol) i, smeša se meša pod azotom na temperaturi refluksa do završetka konverzije. Zatim se razblaži sa DCM i sa slanim rastvorom. Nakon razdvajanja faza, vodena faza se ekstrahuje sa DCM. Organski slojevi se spoje i osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata da bi se dobio etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)tiofen-3-karboksilat.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.53 (d, 1H), 7.47 (d, 1H), 4.02 (q, 2H), 3.83 (s, 3H), 1.95 (s, 6H), 1.00 (t, 3H) HRMS (M+NH4)<+>= 376.0538

Korak E: etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-2,5-dijodo-tiofen-3-karboksilat

2.65 g 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)tiofen-3-karboksilata (7.38 mmol) je rastvoreno u 75 mL acetonitrila, zatim se doda 2.2 mL kompleksa dietil etra fluoroborne kiseline (16.23 mmol) i 3.65 g N-jodosukcinimida (16.23 mmol) i, smeša se meša na r.t. do završetka konverzije. Reakciona smeša se ukoncentriše pod sniženim pritiskom i, sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata da bi se dobio etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-2,5-dijodo-tiofen-3-karboksilat.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 3.98 (q, 2H), 3.84 (s, 3H), 1.92 (s, 6H), 0.84 (t, 3H)

Korak F: etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-jodo-tiofen-3-karboksilat

5.29 g 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-2,5-dijodo-tiofen-3-karboksilat (8.66 mmol) se rastvori u 90 mL suvog THF-a, zatim ohladi na -78°C u atmosferi argona. Doda se 6.7 mL izopropil magnezijum hlorid, litijum hlorid kompleksa (1.3 M u THF) (8.66 mmol) i, smeša se meša na -78°C tokom 30 minuta. Onda se doda zasićeni aq. NH4Cl i smeša se ekstrahuje sa etil acetatom. Organski sloj se osuši preko Na2SO4i ukoncentriše pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata da bi se dobio etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-jodo-tiofen-3-karboksilat.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.71 (s, 1H), 4.01 (q, 2H), 3.86 (s, 3H), 1.89 (s, 6H), 0.99 (t, 3H)

Korak G: etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)tiofen-3-karboksilat

4.20 g etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-jodo-tiofen-3-karboksilata (8.66 mmol) i 1.82 g 4-fluorofenilborne kiseline (13.0 mmol) se rastvori u 80 mL dioksana, zatim se doda 5.64 g Cs2CO3(17.32 mmol) rastvorenog u 20 mL vode. Potom se dodaje 500 mg Pd(PPh3)4(0.43 mmol) i, smeša se meša pod azotom na 80°C do završetka konverzije. Zatim se razblaži sa DCM i sa slanim rastvorom. Nakon razdvajanja faza, vodena faza se ekstrahuje sa DCM. Organski slojevi se spoje i osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata da bi se dobio etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)tiofen-3-karboksilat.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.58 (s, 1H), 7.22-7.10 (m, 4H), 4.03 (q, 2H), 3.82 (s, 3H), 1.92 (s, 6H), 1.00 (t, 3H) HRMS (M+H)<+>= 453.0498

Korak H: etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)-2-nitro-tiofen-3-karboksilat

1.97 g etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)tiofen-3-karboksilat (4.34 mmol) se rastvori u 40 mL suvog acetonitrila, onda se doda 576 mg nitronijum tetrafluoroborata (4.34 mmol) i, smeša se meša na r.t. do završetka konverzije. Zatim se razblaži sa DCM i sa slanim rastvorom. Nakon razdvajanja faza, vodena faza se ekstrahuje sa DCM. Organski slojevi se spoje i osuše preko Na2SO4, filtriraju i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata da bi se dobio etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)-2-nitrotiofen-3-karboksilat.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 7.37-7.33 (m, 2H), 7.32-7.26 (m, 2H), 4.14 (q, 2H), 3.82 (s, 3H), 2.06 (s, 6H), 0.88 (t, 3H)

Korak I: etil 2-amino-4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)tiofen-3-karboksilat

1.85 g etil 4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)-2-nitro-tiofen-3-karboksilat (3.71 mmol) se rastvori u smeši 90 mL sirćetne kiseline i 18 mL vode, onda se, deo po deo, doda 2.43 g praha cinka (37.1 mmol) i, smeša se meša na r.t. do završetka konverzije. Reakciona smeša se ukoncentriše pod sniženim pritiskom i, sirovi proizvod se prečisti putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata da bi se dobio etil 2-amino-4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)tiofen-3-karboksilat.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 7.73 (s, 2H), 7.12-7.06 (m, 2H), 7.02-6.97 (m, 2H), 3.86-3.80 (m, 2H), 3.80 (s, 3H), 2.01 (s, 6H), 0.72 (t, 3H) HRMS (M+H)<+>= 456.0598

Korak J: 5-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-on

1.1 g etil 2-amino-4-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-5-(4-fluorofenil)tiofen-3-karboksilata (2.35 mmol) se rastvori u 20 mL formamida i meša se na 150°C do završetka konverzije. Zatim se izruči na vodu i istaloženi proizvod se sakupi filtracijom kako se dobija 5-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)-3H-tieno[2,3-d]pirimidin-4-on.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 12.53 (br s, 1H), 8.18 (s, 1H), 7.23-7.16 (m, 4H), 3.84 (s, 3H), 1.96 (s, 6H) HRMS (M+H)<+>= 449.0289

Korak K: 4-hloro-5-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin

700 mg 5-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)-3H-tieno[2,3-d] pirimidin-4-ona (1.56 mmol) se rastvori u 6 mL fosfor oksihlorida i meša se na 90°C sve do završetka konverzije. Reakciona smeša se ukoncentriše pod sniženim pritiskom, zatim se u sirovi proizvod doda ledena voda i ozvuči se tokom 10 minuta. Istaloženi proizvod se sakupi filtracijom kako se dobija 4-hloro-5-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)tieno [2,3-d] pirimidin.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 9.02 (s, 1H), 7.38-7.26 (m, 4H), 3.86 (s, 3H), 1.99 (s, 6H) HRMS (M+H)<+>= 466.9954

Korak L: 2,6-dihloro-4-[4-hloro-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3,5-dimetil-fenol i 4-[4-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-2,6-dihloro-3,5-dimetil-fenol

U mešani rastvor 700 mg 4-hloro-5-(3,5-dihloro-4-metoksi-2,6-dimetil-fenil)-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidina (1.50 mmol) u 15 mL DCM doda se 3.0 mL bor tribromida (1 M u DCM) (3.0 mmol) na 0°C i, smeša se ostavlja da se zagreje na r.t. i, meša se do završetka konverzije. Smeša se ugasi sa zasićenim aq. NH4Cl i ekstrahuje sa DCM. Spojene organske faze se osuše preko Na2SO4i ukoncentrišu pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen putem flash hromatografije korišćenjem heptana i EtOAc kao eluenata da bi se dobio 2,6-dihloro-4-[4-hloro-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3,5-dimetil-fenol i 4-[4-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno [2,3-d]pirimidin-5-il]-2,6-dihloro-3,5-dimetil-fenol u vidu 37:63 smeše proizvoda.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 10.14 (br s, 1H), 9.01 (s, 1H), 7.40-7.23 (m, 4H), 1.95 (s, 6H) i 10.14 (br s, 1H), 8.93 (s, 1H), 7.40-7.23 (m, 4H), 1.93 (s, 6H) HRMS (M+H)<+>= 452.9800 i 496.9287

Korak M: 4-hloro-5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil) tieno[2,3-d]pirimidin i 4-bromo-5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il) etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin

300 mg smeše 2,6-dihloro-4-[4-hloro-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-3,5-dimetil-fenola i 4-[4-bromo-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-5-il]-2,6-dihloro-3,5-dimetil-fenola (0.62 mmol), 286 mg 2-(4-metilpiperazin-1-il)etanola (1.98 mmol) i 520 mg trifenil fosfina (1.98 mmol) je rastvoreno u 10 mL suvog toluena, zatim je dodato 460 mg ditercbutil azodikarboksilata (1.98 mmol). Smeša je mešana na 50°C pod azotom dok se nije završila konverzija. Isparljive materije su uparene pod sniženim pritiskom i, sirovi intermedijer je prečišćen putem flash hromatografije korišćenjem EtOAc i metanola kao eluenata da bi se dobio 4-hloro-5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil) tieno[2,3-d]pirimidin i 4-bromo-5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin u vidu 35:65 smeše proizvoda.

<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 9.02 (S, 1H), 7.40-7.22 (m, 4H), 4.11 (t, 2H), 2.78 (t, 2H), 2.63-2.20 (m, 8H), 2.17 (br s, 3H), 1.98 (s, 6H) i 8.94 (S, 1H), 7.40-7.22 (m, 4H), 4.11 (t, 2H), 2.78 (t, 2H), 2.63-2.20 (m, 8H), 2.15 (br s, 3H), 1.98 (s, 6H) HRMS (M+H)<+>= 579.0968 i 623.0455

Korak N: Primer 270

250 mg smeše 4-hloro-5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi] fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidina i 4-bromo-5-[3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil]-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidina (0.41 mmol), 327 mg (2R)-2-amino-3-[2-[[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi]fenil]propanske kiseline (Izrada A4, 0.86 mmol) i 280 mg Cs2CO3(0.86 mmol) je rastvoreno u 5 mL terc-butanola i, smeša je mešana na 70°C do završetka konverzije. Čvrste materije su odfiltrirane i filtrat je ukoncentrisan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen putem preparativne reverzno-fazne hromatografije korišćenjem 25 mM vodenog rastvora NH4HCO3i MeCN, Primer 270 je dobijen. HRMS izračunato za C48H46N7O5FSCl2: 921.2642, dobijeno: 461.6398 (M+2H)

Primer 271: N-[5-{2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin

Primer 272: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-β-(hidroksimetil)-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenilalanin

Primer 273: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-β-hidroksi-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenilalanin

Primer 274: N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-β-(2-hidroksietil)-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il] metoksi}fenilalanin

FARMAKOLOŠKO ISPITIVANJE

PRIMER A: Inhibicija Mcl-1 tehnikom polarizacije fluorescencije

Moć relativnog vezivanja svakog jedinjenja je određena putem polarizacije fluorescencije (FP). Postupak koristi ligand obeležen fluoresceinom (Fluorescein-βAla-Ahx-A-REIGAQLRRMADDLNAQY-OH; mw 2,765) koji vezuje Mcl-1 protein (kao š to je Mcl-1 koji odgovara UniProtKB® primarnom pristupnom broju: Q07820) što dovodi do povećanja anizotropije merene u jedinicama mili-polarizacije (mP) pomoću čitača. Dodavanje jedinjenja koje se kompetitivno vezuje za isti položaj kao i ligand dovešće do veće proporcije nevezanog liganda u sistemu što se indikuje padom jedinica mP.

Postupak 1: Pripremljena su serijska razblaženja svakog jedinjenja u DMSO u 11 tačaka i, 2 µl se prenese u ploče sa ravnim dnom, niskog vezivanja, sa 384 pozicije (konačna DMSO koncentracija 5%). Zatim se dodaje 38 µl pufera (10 mM 4-(2-hidroksietil)-1-piperazinetansulfonska kiselina [HEPES], 150 mM NaCl, 0.05 % Tween 20, pH 7.4), ), koji sadrži ligand obeležen fluoresceinom (konačna koncentracija 1 nM) i Mcl-1 protein (konačna koncentracija 5 nM).

Test ploče su inkubirane ~2 sata na r.t. pre mereanja FP na Biomek Synergy2 čitaču (Ex. 528 nm, Em.640 nm, Cut off 510 nm) i, izračunaju se mP jedinice. Vezivanje rastućih doza testiranog jedinjenja je izraženo u vidu procenta smanjenja mP u poređenju sa prozorom ustanovljenim između kontrola ’5% DMSO samo’ i ’100% inhibicije’. Krive odgovora na dozu u 11-tačaka su postavljene sa XL-Fit softverom korišćenjem 4-Parameter Logistic Model (Sigmoidal Dose-Response Model) i određene su inhibitorne koncentracije koje daju 50%smanjenja mP (IC50). Rezultati dobijeni primenom Postupka 2 su prezentovani u Tabeli 1, u nastavku; IC50Mcl-1 inhibicije, dobijene primenom Postupka 1, nisu podvučene.

Postupak 2: Pripremljena su serijska razblaženja svakog jedinjenja u DMSO u 11 tačaka i, 2 µl se prenese u ploče sa ravnim dnom, niskog vezivanja, sa 384 pozicije (konačna DMSO koncentracija 5%). Zatim se dodaje 38 µl pufera (20 mM Na2HPO4, 1mM EDTA, 50 mM NaCl, pH 7.4), koji sadrži ligand obeležen fluoresceinom (konačna koncentracija 10 nM) i Mcl-1 protein (konačna koncentracija 10 nM).

Test ploče su inkubirane ~2 sata na r.t. pre mereanja FP na Biomek Synergy2 čitaču (Ex. 528 nm, Em.640 nm, Cut off 510 nm) i, izračunaju se mP jedinice. Vezivanje rastućih doza testiranog jedinjenja je izraženo u vidu procenta smanjenja mP u poređenju sa prozorom ustanovljenim između kontrola ’5% DMSO samo’ i ’100% inhibicije’ (50 µM neobeleženog liganda). Krive odgovora na dozu u 11-tačaka su postavljene sa XL-Fit softverom korišćenjem 4-Parameter Logistic Model (Sigmoidal Dose-Response Model) i određene su inhibitorne koncentracije koje daju 50% smanjenja mP (IC50). Rezultati dobijeni primenom Postupka 2 su prezentovani u Tabeli 1, u nastavku; Dobijene IC50Mcl-1 inhibicije primenom Postupka 2 su podvučene.

Rezultati prikazuju da jedinjenja pronalaska inhibiraju interakciju između Mcl-1 proteina i fluorescentnog peptida, što je prethodno opisano.

PRIMER B: In vitro citotoksičnost

Ispitivanja citotoksičnosti su izvedena na tumorskoj liniji H929 multiplog mijeloma. Ćelije se podele u mikropločama i izlože test jedinjenjima u toku 48 sati. Vijabilnost ćelija se onda kvantitativno određuje kolorimetrijskim testom, Microculture Tetrazolium Assay (Cancer Res., 1987, 47, 939-942).

Rezultati su izraženi kao IC50(koncentracija jedinjenja koja inhibira vijabilnost ćelija za 50%) i prezentovani su u Tabeli 1, u nastavku.

Rezultati prikazuju da su jedinjenja pronalaska citotoksična.

Tabela 1: IC50inhibicije Mcl-1 (test polarizacije fluorescencije) i citotoksičnost za H929 ćelije

Zapaziti: IC50 Mcl-1 inhibicije dobijene primenom Postupka 2 su podvučene.

(Example = primer, prim.prev.)

ND: nije određeno

Za delimične inhibitore, naznačen je procenat inhibicije polarizacije fluorescencije za datu koncentraciju ispitivanog jedinjenja. Prema tome, 45.1% @10 µM znači da je zapaženo 45.1 % inhibicije polarizacije fluorescencije za koncentraciju ispitivanog jedinjenja koja iznosi 10 µM.

PRIMER C: Kvantitativno određivanje otcepljenog oblika PARP in vivo

Moć jedinjenja pronalaska da indukuju apoptozu je ispitana na modelu ksenografta AMO-1 ćelija multiplog mijeloma, merenjem nivoa otcepljenog PARP.

1.10<7>AMO-1 ćelija se subkutanim putem nakalemi imunosuprimiranim miševima (SCID soj).12 do 14 dana posle kalemljenja, životinje se intravenskim ili oralnim putem tretiraju sa različitim jedinjenjima. Nakon tretmana, tumorske mase se uzimaju i liziraju i, kvantitativno se određuje otcepljeni oblik PARP u lizatima tumora.

Kvantitativno određivanje se izvodi upotrebom "Meso Scale Discovery (MSD) ELISA platform" testa, koji specifično testira otcepljeni oblik PARP. Izražava se u vidu aktivacionog faktora, koji odgovara odnosu između količine otcepljenog PARP u tretiranim miševima podeljeno sa količinom otcepljenog PARP u kontrolnim miševima.

Rezultati (prezentovani u Tabeli 2 u nastavku) prikazuju da jedinjenja pronalaska imaju moć indukovanja apoptoze u AMO-1 tumorskim ćelijama in vivo.

Tabela 2. Kvantitativno određivanje otcepljenog oblika PARP in vivo

PRIMER D: Anti-tumorska aktivnost in vivo

Anti-tumorska aktivnost jedinjenja pronalaska je ispitana na modelu ksenografta ćelija AMO-1 multiplog mijeloma.

1x10<7>AMO-1 ćelija se subkutanim putem nakalemi imunosuprimiranim miševima (SCID soj). 6 do 8 dana posle kalemljenja, kada masa tumora dostigne otprilike 150 mm<3>, miševi se tretiraju raznim jedinjenjima po dnevnoj šemi (5-dnevni tretman). Tumorska masa se meri dva puta nedeljno od početka tretmana.

Jedinjenja pronalaska imaju anti-tumorske aktivnosti (tumor regresira) u modelu AMO-1 ćelija multiplog mijeloma sa ΔT/C (kvalifikacioni parametar aktivnosti proizvoda, koji se meri oduzimanjem srednje zapremine tumora na dan poslednjeg tretmana od srednje zapremine tumora na dan prvog tretmana / zapremina tumora nelečene kontrolne grupe na dan poslednjeg tretmana) koji se kreće u opsegu -1.5 do -24.5 %. Dobijeni rezultati pokazuju da jedinjenja pronalaska dovode do značajne regresije tumora u toku perioda tretmana.

PRIMER F : Farmaceutska kompozicija : tablete

1000 tableta doze od 5 mg jedinjenja odabranog od primera 1 do 274 5 g Pšenični skrob 20 g Kukuruzni skrob 20 g Laktoza 30 g Magnezijum stearat 2 g Silika 1 g Hidroksipropilceluloza 2 g

Claims

Patentni zahtevi 1. Jedinjenja formule (I):

u kojoj: ♦ A predstavlja grupu

u kojoj je1 povezan sa -NH- grupom i 2 je povezan sa aromatičnim prstenom, ♦ E predstavlja cikloalkil grupu, heterocikloalkil grupu, aril grupu ili heteroaril grupu, ♦ X predstavlja atom azota ili C-R4grupu, ♦ Y predstavlja atom azota ili C-R3grupu, ♦ R1predstavlja atom halogena, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)polihaloalkil grupu, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9’, -NR9-C(O)-R9’, -NR9-C(O)-OR9’, -alkil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9’, -SO2-NR9R9’, -SO2-alkil(C1-C6), ♦ R2, R3, R4i R5nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika, atom halogena, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)polihaloalkil grupu, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’, -O-alkil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9’, -NR9-C(O)-R9’, -NR9-C(O)-OR9’, -alkil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9’, -SO2-NR9R9’ ili -SO2-alkil(C1-C6), ili supstituenti para (R1, R2) formiraju zajedno sa atomima ugljenika koji ih nose aromatičan ili nearomatičan prsten sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji može imati od 1 do 3 heteroatoma odabranih od kiseonika, sumpora i azota, pri čemu se podrazumeva da nastali prsten može biti supstituisan sa od 1 do 2 grupe odabrane od halogena, linearnog ili razgranatog (C1-C6)alkila, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -NR11R11’, -alkil(C0-C6)-Cy1ili okso, ♦ R6predstavlja atom vodonika, atom halogena, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)polihaloalkil grupu, hidroksi grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -S-(C1-C6)alkil, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -O-Cy1, -alkil(C0-C6)-Cy1, -alkenil(C2-C6)-Cy1, -alkinil(C2-C6)-Cy1, -O-alkil(C1-C6)-R10, -C(O)-OR9, -O-C(O)-R9, -C(O)-NR9R9’, -NR9-C(O)-R9’, -NR9-C(O)-OR9’, -alkil(C1-C6)-NR9-C(O)-R9’, -SO2-NR9R9’ ili -SO2-alkil(C1-C6), ♦ R7predstavlja atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C8)alkil grupu, -CHRaRbgrupu, aril grupu, heteroaril grupu, arilalkil(C1-C6) grupu ili heteroarilalkil(C1-C6) grupu, ♦ R8predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, -Cy2, atom halogena, cijano grupu, -C(O)-R11ili -C(O)-NR11R11’, ♦ R9i R9’ nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu ili supstituenti para (R9, R9’) formiraju zajedno sa atomom azota koji ih nosi aromatičan ili nearomatičan prsten sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji osim atoma azota može imati od 1 do 3 heteroatoma, odabranih od kiseonika, sumpora i azota, pri čemu se podrazumeva da azot koji je u pitanju može biti supstituisan grupom koja predstavlja atom vodonika, ili linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, ♦ R10predstavlja -Cy3, -Cy3-alkil(C0-C6)-Cy4, -C(O)-NR9R9’, -NR9R9’, -OR9, -NR9-C(O)-R9’, -O-alkil(C1-C6)-OR9, -SO2-R9, -C(O)-OR9ili -NH-C(O)-NH-R9, ♦ R11i R11’ nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika ili opciono supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, ♦ R12predstavlja atom vodonika, hidroksi grupu ili hidroksi(C1-C6)alkil grupu, ♦ Rapredstavlja atom vodonika ili linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, ♦ Rbpredstavlja -O-C(O)-O-Rcgrupu, -O-C(O)-NRcRc’ grupu ili -O-P(O)(ORc)2grupu, ♦ Rci Rc’ nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C8)alkil grupu, cikloalkil grupu, (C1-C6)alkoksi(C1-C6)alkil grupu, (C1-C6)alkoksikarbonil(C1-C6)alkil grupu, ili supustituenti para (Rc, Rc’) formiraju zajedno sa atomom azota koji ih nosi nearomatični prsten koji je sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji osim atoma azota može imati od 1 do 3 heteroatoma, odabranih od kiseonika i azota, pri čemu se podrazumeva da azot koji je u pitanju može biti supstituisan grupom koja predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, ♦ Cy1, Cy2, Cy3i Cy4nezavisno jedan od drugog, predstavljaju cikloalkil grupu, heterocikloalkil grupu, aril grupu ili heteroaril grupu, ♦ n je ceo broj, koji iznosi 0, 1 ili 2, pri čemu se podrazumeva da: - "aril" označava fenil, naftil, bifenil grupu, - "heteroaril" označava svaku mono- ili bi-cikličnu grupu, sastavljenu od 5 do 10 članova prstena, koja ima najmanje jedan aromatičan deo i sadrži od 1 do 3 heteroatoma odabranih od kiseonika, sumpora i azota, - "cikloalkil" označava svaku mono- ili bi-cikličnu nearomatičnu karbocikličnu grupu, koja sadrži od 3 do 10 članova prstena, - "heterocikloalkil označava svaku mono- ili bi-cikličnu nearomatičnu karbocikličnu grupu, koja sadrži od 3 do 10 članova prstena i sadrži od 1 do 3 heteroatoma odabranih od kiseonika, sumpora i azota, koja može obuhvatiti spojene, premošćene ili spiro prstenaste sisteme, moguće je za aril, heteroaril, cikloalkil i heterocikloalkil grupe tako definisane i alkil, alkenil, alkinil, alkoksi grupe, da budu supstituisane sa od 1 do 4 grupe odabrane od opcionosupstituisanoglinearnog ili razgranatog (C1-C6)alkila, opciono supstituisanog linearnog ili razgranatog (C2-C6)alkenila, opciono supstituisanog linearnog ili razgranatog (C2-C6)alkinila, opciono supstituisanog linearnog ili razgranatog (C1-C6)alkoksi, opciono supstituisanog (C1-C6)alkil-S-, hidroksi, hidroksi(C1-C6)alkila, okso (ili N-oksida gde je odgovarajuće), nitro, cijano, -C(O)-OR’, -O-C(O)-R’, -C(O)-NR’R", -OC(O)-NR’R", -NR’R", -(C=NR’)-OR", -O-P(O)(OR’)2, -O-P(O)(O-M<+>)2, linearnog ili razgranatog (C1-C6)polihaloalkila, trifluorometoksi, halogena ili aldoheksoza formule:

u kojoj je svaki R’ nezavisan; pri čemu se podrazumeva da R’ i R" nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika ili opciono supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu i M<+>predstavlja farmaceutski prihvatljiv monovalentan katjon, njihove enantiomere, dijastereoizomere i atropoizomere i, njihove adicione soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom.
2. Jedinjenje formule (I) prema zahtevu 1, pri čemu: ♦ R1i R2nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom halogena, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, hidroksi grupu, hidroksi(C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, ili supstituenti para (R1, R2) formiraju, zajedno sa atomima ugljenika koji ih nose, aromatičan prsten sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji može imati 1 do 3 atoma azota, pri čemu se podrazumeva da dobijeni prsten može biti supstituisan sa od 1 do 2 grupe, odabrane od halogena, linearnog ili razgranatog (C1-C6)alkila,ili -alkil(C0-C6)-NR9R9’, ♦ R3predstavlja atom vodonika, halogen atom, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, hidroksi grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu ili -O-alkil(C1-C6)-NR9R9’, ♦ R4i R5nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika, halogen atom, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, hidroksi grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, ♦ R6predstavlja atom vodonika, halogen atom, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)polihaloalkil grupu, hidroksi grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, cijano grupu, nitro grupu, -alkil(C0-C6)-NR9R9’, -alkil(C0-C6)-Cy1, -O-alkil(C1-C6)-R10ili -C(O)-NR9R9’, ♦ R7predstavlja atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C8)alkil grupu, -CHRaRbgrupu ili heteroarilalkil(C1-C6) grupu, ♦ R8predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkenil grupu, linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, -Cy2, halogen atom ili -C(O)-R11, ♦ R9i R9’ nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu ili, supstituenti para (R9, R9’) formiraju zajedno sa atomom azota koji ih nosi nearomatični prsten sastavljen od 5 do 7 članova prstena, koji može imati, osim atoma azota, od 1 do 3 heteroatoma odabranih od kiseonika i azota, pri čemu se podrazumeva da azot koji je u pitanju može biti supstituisan grupom koju predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, ♦ R10predstavlja -Cy3ili -Cy3-alkil(C0-C6)-Cy4, ♦ R11predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, moguće je za aril, heteroaril, cikloalkil i heterocikloalkil grupe tako definisane i alkil, alkenil, alkinil, alkoksi grupe, da budu supstituisane sa od 1 do 4 grupe odabrane od opciono supstituisanog linearnog ili razgranatog (C1-C6)alkila, opciono supstituisanog linearnog ili razgranatog (C1-C6)alkoksi, hidroksi, okso (ili N-oksida gde odgovara), -C(O)-OR’, -C(O)-NR’R", -O-C(O)-NR’R", -NR’R", -O-P(O)(OR’)2, -O-P(O)(O-M<+>)2, linearnog ili razgranatog (C1-C6)poli haloalkila, halogena ili aldoheksoze formule: ili u kojoj je svaki R’ nezavisan; pri čemu se podrazumeva da R’ i R" nezavisno jedan od drugog, predstavljaju atom vodonika ili opciono supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu i M<+>predstavlja farmaceutski prihvatljiv monovalentan katjon.
3. Jedinjenja prema zahtevu 1, u kojima je n ceo broj jednak 1.
4. Jedinjenja prema zahtevu 1, u kojima najmanje jedna od grupa, odabrana od R2, R3, R4i R5ne predstavlja atom vodonika.
5. Jedinjenja prema zahtevu 1, u kojima R12predstavlja atom vodonika.
6. Jedinjenja prema zahtevu 1, u kojima R1predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu ili atom halogena.
7. Jedinjenja prema zahtevu 1, u kojima R2predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, hidroksi grupu ili atom halogena.
8. Jedinjenja prema zahtevu 1, u kojima X predstavlja C-R4grupu.
9. Jedinjenja prema zahtevu 1, u kojima Y predstavlja C-R3grupu.
10. Jedinjenja prema zahtevu 1, u kojima R4i R5predstavljaju atom vodonika.
11. Jedinjenje prema zahtevu 1, u kom su supstituenti para (R1, R5) identični i supstituenti para (R2, R4) su identični.
12. Jedinjenja prema zahtevu 1, u kojima :

predstavlja

gde su R1, R2, R9i R9’ kao što su definisani u zahtevu 1.
13. Jedinjenja prema zahtevu 1, u kojima:

predstavlja

gde su R9i R9’ kao što su definisani u zahtevu 1.
14. Jedinjenja prema zahtevu 1, u kojima E predstavlja fenil grupu, piridin-2-il, cikloheksil grupu, pirazol-1-il grupu, ciklopentil grupu, indol-4-il grupu, ciklopropil grupu, piridin-3-il grupu, indol-3-il grupu, naft-1-il grupu, imidazol-4-il grupu ili piridin-4-il grupu.
15. Jedinjenja prema zahtevu 1, koja su jedinjenja formule (I-b):

gde su R1, R2, R5, R6, R7, R12, X, Y, A i n kao što su definisani za formulu (I).
16. Jedinjenja prema zahtevu 1, u kojima R6predstavlja atom vodonika, atom fluora, atom hlora, atom broma, metil grupu, trifluorometil grupu, hidroksi grupu, metoksi grupu, linearnu (C1-C6)alkoksi grupu supstituisanu sa atomima halogena, -C(O)-NR’R" grupu ili -NR’R" grupu, cijano, nitro grupu, aminometil grupu, benzil grupu, -O-alkil(C1-C6)-R10; -C(O)-NR9R9’.
17. Jedinjenja prema zahtevu 1, u kojima R7predstavlja atom vodonika, opciono supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, -CHRaRbgrupu ili heteroarilalkil(C1-C6) grupu.
18. Jedinjenja prema zahtevu 1, u kojima R8predstavlja linearnu ili razgranatu (C2-C6)alkinil grupu, aril grupu ili heteroaril grupu.
19. Jedinjenja prema zahtevu 1, u kojima R9i R9’ nezavisno jedan od drugog, predstavljaju linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu ili, supstituenti para (R9, R9’) formiraju zajedno sa atomom azota koji ih nosi nearomatični prsten sastavljen od 5 do 7 članova u prstenu, koji može imati, osim atoma azota, od 1 do 3 heteroatoma odabranih od kiseonika i azota, pri čemu se podrazumeva da azot koji je u pitanju može biti supstituisan linearnom ili razgranatom (C1-C6)alkil grupom.
20. Jedinjenja prema zahtevu 1, u kojima R10predstavlja -Cy3ili -Cy3-alkil(C0-C6)-Cy4.
21. Jedinjenja prema zahtevu 20, u kojima Cy3predstavlja cikloalkil grupu, aril grupu ili heteroaril grupu.
22. Jedinjenja prema zahtevu 20, u kojima Cy4predstavlja fenil grupu ili morfolinil grupu.
23. Jedinjenja prema zahtevu 20, u kojima R10predstavlja

gde je p ceo broj i iznosi 0 ili 1 i R15predstavlja atom vodonika, hidroksi grupu, opciono supstituisanu linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkoksi grupu, -O-(CHR16-CHR17-O)q-R’ grupu, -O-P(O)(OR’)2grupu, -O-P(O)(O-M<+>)2grupu, -O-C(O)-NR18R19grupu, di(C1-C6)alkilamino(C1-C6)alkoksi grupu, atom halogena ili aldoheksozu formule:

u kojoj je svako R’ nezavisno; pri čemu se podrazumeva da: ♦ R’ predstavlja atom vodonika ili linearnu ili razgranatu (C1-C6)alkil grupu, ♦ R16predstavlja atom vodonika ili (C1-C6)alkoksi(C1-C6)alkil grupu, ♦ R17predstavlja atom vodonika ili hidroksi(C1-C6)alkil grupu, ♦ R18predstavlja atom vodonika ili (C1-C6)alkoksi(C1-C6)alkil grupu, ♦ R19predstavlja (C1-C6)alkoksi(C1-C6)alkil grupu, -(CH2)r-NR9R9’ grupu ili -(CH2)r-O-(CHR16-CHR17-O)q-R’ grupu, ♦ q je ceo broj i iznosi 1, 2 ili 3 i r je ceo broj i iznosi 0 ili 1, ♦ M<+>predstavlja farmaceutski prihvatljiv monovalentni katjon.
24. Jedinjenja prema zahtevu 23, u kojima je aldoheksoza D-manoza.
25. Jedinjenja prema zahtevu 1, koja su: - N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-[(1-metil-1H-pirazol-5-il)metoksi]-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-[(2-etoksipirimidin-4-il)metoksi]-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(furan-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-metoksi-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-metoksi-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-(2,2,2-trifluoroetoksi)-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-(piridin-2-ilmetoksi)-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-[(1-metil-1H-pirazol-5-il)metoksi]-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-[(1-etil-1H-pirazol-5-il)metoksi]-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-[(2-etoksipirimidin-4-il)metoksi]-D-fenilalanin, - 2-[(1-butil-1H-pirazol-5-il)metoksi]-N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi] fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoksi)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(5-fluorofuran-2-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-metoksi-D-fenilalanin, - 2-[(1-terc-butil-1H-pirazol-5-il)metoksi]-N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il) etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksietil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[1-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-pirazol-5-il]metoksi}-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(morfolin-4-il)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoksi)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[1-(2,2,2-trifluoroetil)-1H-pirazol-5-il]metoksi}-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(morfolin-4-il)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2,2,2-trifluoroetoksi)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin, - N-[5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-({2-[2-(2-metoksietoksi)fenil]pirimidin-4-il}metoksi)-D-fenilalanin, - etil N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalaninat, - etil N-[(5Sa)-5-{3-hloro-2-metil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(prop-1-in-1-il) tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalaninat, - etil N-[(5Sa)-5-{3-hloro-4-[2-(dimetilamino)etoksi]-2-metilfenil}-6-(prop-1-in-1-il)tieno[2,3-d] pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalaninat, - N-[5-{3,5-dihloro-2,6-dimetil-4-[2-(4-metilpiperazin-1-il)etoksi]fenil}-6-(4-fluorofenil)tieno[2,3-d]pirimidin-4-il]-2-{[2-(2-metoksifenil)pirimidin-4-il]metoksi}-D-fenilalanin.
26. Postupak dobijanja jedinjenja koje ima formulu (I) prema zahtevu 1, naznačen time što se kao polazni materijal koristi jedinjenje formule (II-a):

u kojoj Z predstavlja brom ili jod i A je kao što je definisano za formulu (I) gde 1 je povezan sa atomom hlora dok je 2 povezan sa Z grupom, pri čemu se jedinjenje koje ima formulu (II-a) podvrgava kuplovanju sa jedinjenjem formule (III):

u kojoj su R6, R12, E i n kao š to su definisani za formulu (I), a Alk predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6) alkil grupu, da bi se dobilo jedinjenje formule (IV):

gde su R6, R12, A, E i n kao š to su definisani za formulu (I) a, Z i Alk su kao š to su prethodno definisani, jedinjenje formule (IV), koje se dalje podvrgava kuplovanju sa jedinjenjem formule (V):

gde su R1, R2, R5, X i Y kao š to su definisani za formulu (I), a RB1i RB2predstavljaju atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6) alkil grupu ili ,RB1i RB2formiraju sa kiseonikom koji ih nosi opciono metilovani prsten, da bi se dobilo jedinjenje formule (VI):

gde su R1, R2, R5, R6, R12, X, Y, A, E i n kao što su definisani za formulu (I) i Alk je kao što je prethodno definisano, Alk-O-C(O)- estarska funkcija od koje se jedinjenja formule (VI) hidrolizuje da bi se dobila karboksilna kiselina, koja opciono može reagovati sa alkoholom formule R7’-OH ili hlorovanim jedinjenjem formule R7’-Cl, gde R7’ predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C8)alkil grupu, -CHRaRbgrupu, aril grupu, heteroaril grupu, arilalkil(C1-C6) grupu ili heteroarilalkil(C1-C6) grupu, Rai Rbsu kao što su definisani za formulu (I), da bi se dobilo jedinjenje formule (I), koje se može prečistiti prema konvencionalnim tehnikama razdvajanja, koje se prevodi, ukoliko se želi, u svoju adicionu so sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom i koje se opciono razdvaja u svoje izomere prema konvencionalnim tehnikama razdvajanja, pri čemu se podrazumeva da u svakom momentu za koji se smatra da je odgovarajući u toku gore opisanog procesa, neke grupe (hidroksi, amino...) polaznih reagenasa ili sintetskih intermedijera mogu da se zaštite, potom da im se ukloni zaštita i da se funkcionalizuju, kako to zahteva sinteza.
27. Postupak dobijanja jedinjenja formule (I) prema zahtevu 1, naznačen time što se kao polazni materijal koristi jedinjenje formule (II-b):

u kojoj je A kao š to je definisano u formuli (I), u kojoj je 1 povezano sa atomom hlora i 2 je povezano sa atomom joda, u kome se jedinjenje formule (II-b) podvrgava kuplovanju sa jedinjenjem formule (V):

u kojoj su R1, R2, R5, X i Y kao š to su definisani za formulu (I), a RB1i RB2predstavljaju atom vodonika, linearnu ili razgranatu (C1-C6) alkil grupu ili, RB1i RB2formiraju sa kiseonikom koji ih nosi opciono metilovani prsten, da bi se dobilo jedinjenje formule (VII):

u kojoj su R1, R2, R5, A, X i Y kao što su definisani za formulu (I), pri čemu se jedinjenje formule (VII) dalje podvrgava kuplovanju sa jedinjenjem formule (III):

u kojoj su R6, R12, E i n kao š to su definisani za formulu (I), a Alk predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C6) alkil grupu, da bi se dobilo jedinjenje formule (VI):

u kojoj su R1, R2, R5, R6, R12, X, Y, A, E i n kao što su definisani za formulu (I) i Alk je kao što je prethodno definisano, Alk-O-C(O)- estarska funkcija od koje se jedinjenja formule (VI) hidrolizuje da bi se dobila karboksilna kiselina, koja opciono može reagovati sa alkoholom formule R7’-OH ili hlorovanim jedinjenjem formule R7’-Cl, gde R7’ predstavlja linearnu ili razgranatu (C1-C8)alkil grupu, -CHRaRbgrupu, aril grupu, heteroaril grupu, arilalkil(C1-C6) grupu ili heteroarilalkil(C1-C6) grupu, Rai Rbsu kao što su definisani za formulu (I), da bi se dobilo jedinjenje formule (I), koje se može prečistiti prema konvencionalnim tehnikama razdvajanja, koje se prevodi, ukoliko se želi, u svoju adicionu so sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom i, koje se opciono razdvaja u svoje izomere prema konvencionalnim tehnikama razdvajanja, pri čemu se podrazumeva da u svakom momentu za koji se smatra da je odgovarajući u toku gore opisanog procesa, neke grupe (hidroksi, amino...) polaznih reagenasa ili sintetskih intermedijera mogu da se zaštite, potom da im se ukloni zaštita i da se funkcionalizuju, kako to zahteva sinteza.
28. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 25 ili njegova adiciona so sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom u kombinaciji sa jednom ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa.
29. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 28, za upotrebu kao pro-apoptotski agensi.
30. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 28, za upotrebu u lečenju kancera i auto-imunih i bolesti imunog sistema.
31. Farmaceutska kompozicija za upotrebu prema zahtevu 30, za lečenje kancera bešike, mozga, dojke i materice, hronične limfoidne leukemije, kancera debelog creva, jednjaka i jetre, limfoblastne leukemije, akutne mijeloidne leukemije, limfoma, melanoma, malignih hemopatija, mijeloma, kancera jajnika, nemikrocelularnog kancera pluća, kancera prostate, kancera pankreasa i mikrocelularnog kancera pluća.
32. Upotreba farmaceutske kompozicije prema zahtevu 28, u proizvodnji lekova za upotrebu kao proapoptotskih agenasa.
33. Upotreba farmaceutske kompozicije prema zahtevu 28, u proizvodnji lekova za upotrebu u lečenju kancera i auto-imunih i bolesti imunog sistema.
34. Upotreba farmaceutske kompozicije prema zahtevu 28, u proizvodnji lekova za upotrebu u lečenju kancera bešike, mozga, dojke i materice, hronične limfoidne leukemije, kancera debelog creva, jednjaka i jetre, limfoblastne leukemije, akutne mijeloidne leukemije, limfoma, melanoma, malignih hemopatija, mijeloma, kancera jajnika, nemikrocelularnog kancera pluća, kancera prostate, kancera pankreasa i mikrocelularnog kancera pluća.
35. Jedinjenje koje ima formulu (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 25 ili njegova adiciona so sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom, za upotrebu u lečenju kancera bešike, mozga, dojke i materice, hronične limfoidne leukemije, kancera debelog creva, jednjaka i jetre, limfoblastne leukemije, akutne mijeloidne leukemije, limfoma, melanoma, malignih hemopatija, mijeloma, kancera jajnika, nemikrocelularnog kancera pluća, kancera prostate, kancera pankreasa i mikrocelularnog kancera pluća.
36. Upotreba jedinjenja koje ima formulu (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 25 ili njegove adicione soli sa farmaceutski prihvatljivom kiselinom ili bazom, u proizvodnji lekova za upotrebu u lečenju kancera bešike, mozga, dojke i materice, hronične limfoidne leukemije, kancera debelog creva, jednjaka i jetre, limfoblastne leukemije, akutne mijeloidne leukemije, limfoma, melanoma, malignih hemopatija, mijeloma, kancera jajnika, nemikrocelularnog kancera pluća, kancera prostate, kancera pankreasa i mikrocelularnog kancera pluća.
37. Kombinacija jedinjenja formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 25, sa anti-kancerskim agensom odabranim od genotoksičnih sredstava, mitotičkih otrova, antimetabolita, inhibitora proteazoma, inhibitora kinaze i antitela.
38. Farmaceutska kompozicija koja sadrži kombinaciju prema zahtevu 37, u kombinaciji sa jednom ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa.
39. Kombinacija prema zahtevu 37, za upotrebu u lečenju kancera.
40. Upotreba kombinacije prema zahtevu 37, u proizvodnji lekova za upotrebu u lečenju kancera.
41. Jedinjenje formule (I) prema bilo kom od zahteva 1 do 25, za upotrebu u lečenju kancera koji zahtevaju radioterapiju. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5