RS58376B1 - Supstituisana heterociklična sulfonamidna jedinjenja korisna kao modulatori trpa1 - Google Patents

Supstituisana heterociklična sulfonamidna jedinjenja korisna kao modulatori trpa1

Info

Publication number
RS58376B1
RS58376B1 RS20190254A RSP20190254A RS58376B1 RS 58376 B1 RS58376 B1 RS 58376B1 RS 20190254 A RS20190254 A RS 20190254A RS P20190254 A RSP20190254 A RS P20190254A RS 58376 B1 RS58376 B1 RS 58376B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
mmol
methyl
trifluoromethyl
fluoro
compound
Prior art date
Application number
RS20190254A
Other languages
English (en)
Inventor
Huifen Chen
Yanyan Chu
Steven Do
Anthony Estrada
Baihua Hu
Aleksandr Kolesnikov
Xingyu Lin
Joseph P Lyssikatos
Daniel Shore
Vishal Verma
Lan Wang
Guosheng Wu
Po-Wai Yuen
Original Assignee
Hoffmann La Roche
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoffmann La Roche filed Critical Hoffmann La Roche
Publication of RS58376B1 publication Critical patent/RS58376B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/4025—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. cromakalim
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/4155—1,2-Diazoles non condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/06—Antiasthmatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/08—Bronchodilators
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A61P11/14—Antitussive agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/02—Drugs for disorders of the urinary system of urine or of the urinary tract, e.g. urine acidifiers
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/04—Antipruritics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/02—Drugs for disorders of the nervous system for peripheral neuropathies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/04—Centrally acting analgesics, e.g. opioids
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P27/00—Drugs for disorders of the senses
    • A61P27/16—Otologicals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P29/00—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID]
    • A61P29/02—Non-central analgesic, antipyretic or antiinflammatory agents, e.g. antirheumatic agents; Non-steroidal antiinflammatory drugs [NSAID] without antiinflammatory effect
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D207/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D207/46—Heterocyclic compounds containing five-membered rings not condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom with hetero atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D207/48—Sulfur atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D451/00—Heterocyclic compounds containing 8-azabicyclo [3.2.1] octane, 9-azabicyclo [3.3.1] nonane, or 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring systems, e.g. tropane or granatane alkaloids, scopolamine; Cyclic acetals thereof
    • C07D451/02—Heterocyclic compounds containing 8-azabicyclo [3.2.1] octane, 9-azabicyclo [3.3.1] nonane, or 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring systems, e.g. tropane or granatane alkaloids, scopolamine; Cyclic acetals thereof containing not further condensed 8-azabicyclo [3.2.1] octane or 3-oxa-9-azatricyclo [3.3.1.0<2,4>] nonane ring systems, e.g. tropane; Cyclic acetals thereof
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D491/04—Ortho-condensed systems
    • C07D491/044—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring
    • C07D491/048—Ortho-condensed systems with only one oxygen atom as ring hetero atom in the oxygen-containing ring the oxygen-containing ring being five-membered

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Pyrrole Compounds (AREA)

Description

OPIS
Oblast pronalaska
Predmetni pronalazak se odnosi na supstituisana sulfonamidna jedinjenja, njihovu proizvodnju, farmaceutske kompozicije koje ih sadrže i njihovu upotrebu kao antagoniste kanala za prolazne receptorske potencijale (Transient Receptor Potential – TRP).
Osnova pronalaska
TRP kanali su klasa jonskih kanala koji se nalaze na plazma membrani različitih tipova humanih (i drugih životinjskih) ćelija. Postoji najmanje 28 poznatih ljudskih TRP kanala koji su razbijeni u više porodica ili grupa na osnovu homologije sekvenci i funkcije. TRPA1 je neselektivni kanal za provođenje katjona koji preinačuje membranski potencijal putem fluksa natrijuma, kalijuma i kalcijuma. Pokazalo se da se TRPA1 eksprimira u velikim količinama u humanim ganglijama zadnjeg korena spinalnog nerva i perifernim senzornim nervima. Kod ljudi se TRPA1 aktivira brojnim reaktivnim jedinjenjima, kao što su akrolein, alilizotiocijanat, ozon, ali i nereaktivnim jedinjenjima, kao što su nikotin i mentol, te se stoga smatra da deluje kao „hemosenzor”.
Mnogi od poznatih agonista TRPA1 su iritanti koji uzrokuju bol, iritaciju i neurogenu upalu kod ljudi i drugih životinja. Prema tome, moglo bi se očekivati da bi antagonisti TRPA1 ili agensi koji blokiraju biološki efekat aktivatora TRPA1 kanala bili korisni u lečenju bolesti, kao što su astma i njena pogoršanja, kronični kašalj i srodne bolesti, kao i da su korisni za lečenje akutnog i hroničnog bola. Nedavno je takođe pokazano da produkti oštećenja tkiva i oksidativnog stresa, npr. 4-hidroksinonenalna i srodna jedinjenja, aktiviraju TRPA1 kanal. Ovaj nalaz pruža dodatni razlog za korisnost malih molekula antagonista TRPA1 u tretmanu bolesti povezanih sa oštećenjem tkiva, oksidativnim stresom i kontrakcijom glatkih mišića bronhija, kao što su astma, hronična opstruktivna plućna bolest (COPD), profesionalna astma i virusom indukovana upala pluća. Štaviše, nedavna otkrića u vezi sa aktivacijom TRPA1 kanala sa povećanom percepcijom bola ( Kosugi et al., J. Neurosci 27 , (2007) 4443-4451; Kremayer et al., Neuron 66 (2010) 671–680; Wei et al. ,Pain 152 (2011) 582–591); Wei et al., Neurosci Lett 479 (2010) 253–256)) pružaju dodatni razlog za korisnost malih molekula TRPA1 inhibitora u lečenju poremećaja bola. Dodatne osnovne informacije mogu se naći u WO 2013/108857, WO 2012/152983 i WO 2010/141805.
Kratak prikaz pronalaska
Ovaj pronalazak obezbeđuje jedinjenje pronalaska koje je jedinjenje formule II:
kako je definisano u zahtevima
ili je njegova so ili farmaceutski prihvatljiva so.
Ovaj pronalazak takođe obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje iz ovog pronalaska i farmaceutski prihvatljiv nosač.
Pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenje pronalaska ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u medicinskoj terapiji.
Ovaj pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenje iz ovog pronalaska ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za lečenje ili profilaksu respiratornog poremećaja.
Pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenje iz ovog pronalaska ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za modulaciju aktivnosti TRPA1.
U sledećem primeru izvođenja, pronalazak obezbeđuje jedinjenje iz ovog pronalaska ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za lečenje ili profilaksu bolesti ili stanja koje ublažava TRPA1 aktivnost. U okviru aspekata ovog primera izvođenja, bolest ili stanje je bol, svrab, upalni poremećaj, poremećaj unutrašnjeg uha, groznica ili drugi poremećaj termoregulacije, traheobronhijalna ili dijafragmalna disfunkcija, poremećaj gastrointestinalnog ili urinarnog trakta, hronična opstruktivna bolest pluća, inkontinencija, ili poremećaj doveden u vezu sa smanjenim protokom krvi do CNS ili hipoksijom CNS. U okviru određenih aspekata ovog primera izvođenja, bolest ili stanje je bol, artritis, svrab, kašalj, astma, upalna bolest creva ili poremećaj unutarnjeg uha.
Detaljan opis predmetnog pronalaska
Definicije
Osim ako nije drugačije naznačeno, sledeći specifični izrazi i fraze korišćeni u opisu i zahtevima definisani su na sledeći način:
Termin „ostatak” se odnosi na atom ili grupu hemijski vezanih atoma koji su vezani za drugi atom ili molekul pomoću jedne veze ili više hemijskih veza, čime se formira deo molekula. Na primer, varijable R<1>do R<5>formule I ili II odnose se na komponente koje su vezane kovalentnom vezom za osnovnu strukturu formule I ili II.
U odnosu na određenu komponentu sa jednim atomom vodonika ili više atoma vodonika, termin „supstituiran” odnosi se na činjenicu da je najmanje jedan od vodonikovih atoma tog ostatka zamenjen drugim supstituentom ili komponentom. Na primer, izraz „niži alkil supstituisan halogenom” odnosi se na činjenicu da je jedan atom ili više atoma vodonika nižeg alkila (kao što je definirano u nastavku) zamenjen jednim atomom ili više atoma halogena (npr. trifluorometil, difluorometil, fluorometil, hlorometil, itd.).
Termin „alkil” se odnosi na alifatičnu zasićenu ugljovodoničnu komponentu ravnog ili razgranatog niza koja ima 1–20 atoma ugljenika. U posebnim primerima izvođenja, alkil ima 1–10 atoma ugljenika. U posebnim primerima izvođenja, alkil ima 1–6 atoma ugljenika.
Termin „alkoksi” označava grupu formule-−O-R', pri čemu je R' alkilna grupa. Primeri alkoksi komponenti uključuju metoksi, etoksi, izopropoksi i tert-butoksi.
„Aril” označava ciklični aromatični ugljovodoničnideo koji ima mono, bi ili triciklični aromatični prsten od 6–16 atoma ugljenika u prstenu. Arilna grupa može biti opciono supstituisana kako je ovde definisano. Primeri arilnih grupa uključuju, bez ograničenja, fenil, naftil, fenantril, fluorenil, indenil, pentalenil, azulenil i slično. Izraz „aril” takođe uključuje delimično hidrogenizovane derivate ciklične aromatične ugljovodične komponente, pod uslovom da je najmanje jedan prsten ciklične aromatične ugljovodične komponente aromatičan, i da je svaki po izboru supstituisan. U jednom primeru izvođenja, aril ima 6–14 atoma ugljenika u prstenu (tj. (C6−C14)aril). U drugom primeru izvođenja, aril ima 6–10 atoma ugljenika u prstenu (tj. (C6−C10)aril).
Termin „heteroaril” označava sistem aromatičnog heterocikličnog mono ili bicikličnog prstena koji sadrži 5–12 atoma prstena, a sastoji se od 1, 2, 3 ili 4 heteroatoma izabrana od N O i S, dok su preostali atomi prstena ugljenici. Primeri heteroarilnih komponenti uključuju: pirolil, furanil, tienil, imidazolil, oksazolil, tiazolil, triazolil, oksadiazolil, tiadiazolil, tetrazolil, piridinil, pirazinil, pirazolil, piridazinil, pirimidinil, triazinil, izoksazolil, benzofuranil, izotiazolil, benzotienil, indolil, izoindolil, izobenzofuranil, benzimidazolil, benzoksazolil, benzoizoksazolil, benzotiazolil, benzoizotiazolil, benzooksadiazolil, benzotiadiazolil, benzotriazolil, purinil, hinolinil, izohinolinil, hinazolinil ili hinoksalinil.
Izrazi „halo”, „halogen” i „halid”, koji se mogu koristiti kao sinonimi, odnose se na fluoro, hloro, bromo ili jodo supstituent.
Termin „haloalkil” označava alkilnu grupu u kojoj je jedan atom ili više atoma vodonika alkilne grupe zamenjen istim ili različitim atomima halogena, posebno atomima fluora. Primeri haloalkila uključuju monofluoro, difluoro ili trifluoro metil, etil ili propil, na primer, 3,3,3-trifluoropropil, 2-fluoroetil, 2,2,2-trifluoroetil, fluorometil ili trifluorometil.
„Cikloalkil” označava zasićenu ili delimično nezasićenu karbocikličnu komponentu koja ima mono ili biciklične (uključujući, premošćene biciklične) prstenove i 3–10 atoma ugljenika u prstenu. Cikloalkilna komponenta može opciono biti supstituirana jednim supstituentom ili više supstituenata. U posebnim primerima izvođenja, cikloalkil sadrži od 3 do 8 atoma ugljenika (tj. (C3−C8)cikloalkil). U drugim posebnim primerima izvođenja, cikloalkil sadrži od 3 do 6 atoma ugljenika (tj. (C3−C6)cikloalkil). Primeri cikloalkilnih komponenti uključuju, bez ograničenja, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil i njihove delimično nezasićene (cikloalkenil) derivate (npr. ciklopentenil, cikloheksenil i cikloheptenil). Cikloalkilna komponenta može biti vezana na
„spirocikloakilni” način, poput
„Heterocikl” se odnosi na četvoročlanu, petočlanu, šestočlanu i sedmočlanu monocikličnu ili sedmočlanu, osmočlanu, devetočlanu i desetočlanu bicikličnu (uključujući, premošćenu bicikličku) heterocikličnu komponentu koja je zasićena ili delimično nezasićena i ima jedan ili više (npr.1, 2, 3 ili 4) heteroatoma odabranih od kiseonika, azota i sumpora u prstenu, dok su preostali atomi prstena ugljenični. Kada ukazuju na atome heterocikličnog prstena, azot ili sumpor mogu biti u oksidiranom obliku, a azot može biti zamenjen jednim (C1−C6)alkilom ili grupom ili više njih. Heterocikl može biti vezan za svoju bočnu grupu na bilo kom heteroatomu ili atomu ugljenika, čime se stvara stabilna struktura i bilo koji od atoma prstena može biti opciono supstituiran. Primeri takvih zasićenih ili delimično nezasićenih heterocikala uključuju, bez ograničenja, tetrahidrofuranil, tetrahidrotienil, pirolidinil, pirolidonil, piperidinil, pirolinil, tetrahidrohinolinil, tetrahidroizohinolinil, dekahidrohinolinil, oksazolidinil, piperazinil, dioksanil, dioksolanil, diazepinil, oksazepinil, tiazepinil, morfolinil i hinuklidinil. Izraz heterociklični uključuje i grupe u kojima je heterocikl spojen za jedan arilski, heteroarilski ili cikloalkilni prsten ili više njih, kao što su indolinil, 3H-indolil, hromanil, 2-azabiciklo[2.2.1]heptanil, okctahidroindolil ili tetrahidrohinolinil.
Ukoliko nije drugačije naznačeno, izraz „vodonik” ili „hidro” odnosi se na komponentu atoma vodonika (-H), a ne H2.
Ukoliko nije drugačije naznačeno, izraz „jedinjenje ove formule” ili „jedinjenje formule” ili „jedinjenja ove formule” ili „jedinjenja formule” odnosi se na bilo koje jedinjenje izabrano iz vrste jedinjenja kako je definisano formulom (uključujući bilo koju farmaceutski prihvatljivu so ili estar bilo kog takvog jedinjenja, ako nije drugačije napomenuto).
Izraz „farmaceutski prihvatljive soli” odnosi se na one soli koje zadržavaju biološku efikasnost i svojstva slobodnih baza ili slobodnih kiselina, a koje nisu biološki ili na drugi način nepoželjne. Soli se mogu formirati sa neorganskim kiselinama, kao što su hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, sumporna kiselina, fosforna kiselina i slično, poželjno hlorovodonična kiselina, i organske kiseline kao što su sirćetna kiselina, propionska kiselina, glikolna kiselina, piruvinska kiselina, oksalna kiselina, maleinska kiselina, malonska kiselina, salicilna kiselina, sukcinska kiselina, fumarna kiselina, vinska kiselina, limunska kiselina, benzojeva kiselina, cimetna kiselina, mandelinska kiselina, metansulfonska kiselina, etansulfonska kiselina, p-toluensulfonska kiselina, N-acetilcistein i slično. Pored toga, soli se mogu pripremiti dodatkom neorganske baze ili organske baze u slobodnu kiselinu. Soli izvedene iz neorganske baze uključuju, bez ograničenja, soli natrijuma, kalijuma, litijuma, amonijaka, kalcijuma, magnezijuma i slično. Soli izvedene iz organskih baza obuhvataju, bez ograničenja, soli primarnih, sekundarnih i tercijarnih amina, supstituisanih amina, uključujući i supstituisane amine koji se nalaze u prirodi, cikličnih amina i baznih jonoizmenjivačkih smola, kao što je izopropilamin, trimetilamin, dietilamin, trietilamin, tripropilamin, etanolamin, lizin, arginin, N-etilpiperidin, piperidin, poliaminske smole i sl.
Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu biti prisutna u obliku farmaceutski prihvatljivih soli. Sledeći primer izvođenja obezbeđuje nefarmaceutski prihvatljive soli jedinjenja formule I ili II koje mogu biti korisne kao intermedijeri za izolovanje ili prečišćavanje jedinjenja formule I ili II. Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu takođe biti prisutna u obliku farmaceutski prihvatljivih estara (tj. metil i etil esteri kiselina formule I ili II koji se koriste kao prolekovi). Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se i solvatirati, npr. hidratisati. Solvatacija se može sprovesti tokom postupka proizvodnje ili se može odigrati, na primer, kao posledica higroskopskih svojstava početno anhidriranog jedinjenja formule I ili II.
Jedinjenja koja imaju istu molekularnu formulu, ali se razlikuju po prirodi ili sekvenci vezivanja njihovih atoma ili rasporedu njihovih atoma u prostoru, nazivaju se „izomeri”. Izomeri koji se razlikuju po rasporedu njihovih atoma u prostoru nazivaju se „stereoizomeri”. Dijastereomeri su stereoizomeri sa suprotnom konfiguracijom na jednom hiralnom centru ili više hiralnih centara koji nisu enantiomeri. Stereoizomeri koji nose jedan ili više asimetričnih centara, koji se međusobno ne preklapaju, nazivaju se „enantiomeri”. Kada jedinjenje ima asimetrični centar, na primer, ako je atom ugljenika vezan za četiri različite grupe, moguć je par enantiomera. Enantiomer se može okarakterisati apsolutnom konfiguracijom svog asimetričnog centra ili asimetričnih centara i opisan je pravilima R i S sekvenciranja Kana, Ingolda i Preloga, ili načinom na koji molekul rotira ravninu polarizovane svetlosti i označava ga kao dekstrorotatorni i levorotatorni (tj. kao (+) ili (-) izomere, datim redosledom). Hiralno jedinjenje može da postoji kao pojedinačni enantiomer ili kao njihova smeša. Smeša koja sadrži jednake proporcije enantiomera naziva se „racemska smeša”. U određenim primerima izvođenja, jedinjenje je obogaćeno za najmanje oko 90% mase jednim dijastereomerom ili enantiomerom. U drugim primerima izvođenja, jedinjenje je obogaćeno za najmanje oko 95%, 98% ili 99% mase jednim dijastereomerom ili enantiomerom.
Određena jedinjenja predmetnog pronalaska poseduju asimetrične atome ugljenika (optičke centre) ili dvostruke veze; svi racemati, dijastereomeri, geometrijski izomeri, regioizomeri i pojedinačni izomeri (npr. odvojeni enantiomeri) obuhvaćeni su opsegom predmetnog pronalaska.
Izraz „terapeutski efikasna količina” jedinjenja podrazumeva količinu koja može efikasno da spreči, ublaži ili poboljša simptome bolesti ili da produži život tretiranog pacijenta. Utvrđivanje terapeutski efikasne količine sprovodi se u skladu sa znanjem iz struke. Terapeutski efikasna količina ili doza jedinjenja u skladu s ovim pronalaskom može varirati u širokim granicama i može se odrediti na način poznat u struci. Takva doza će se podesiti prema pojedinačnim zahtevima u svakom konkretnom slučaju, uključujući specifično jedinjenje/jedinjenja koja se primenjuju, način primene, stanje koje se leči, kao i pacijenta koji se leči. Uglavnom, u slučaju oralnog ili parenteralnog davanja odraslim ljudima težine približno 70 kg, dnevna doza od približno 0,1 mg do 5,000 mg, 1 mg do približno 1,000 mg ili 1 mg do 100 mg može biti prikladna, iako donja i gornja granica mogu biti prekoračene kada je naznačeno. Dnevna doza se može primeniti kao pojedinačna doza ili u podeljenim dozama, ili za parenteralnu primenu, može se dati kao kontinuirana infuzija.
Izraz „farmaceutski prihvatljiv nosač” treba da uključi bilo koji i sav materijal kompatibilan sa farmaceutskom primenom, uključujući rastvarače, disperzioni medij premaze, antibakterijska i antifungalna sredstva, izotonična sredstva i sredstva za odlaganje apsorpcije, kao i druge materijale i jedinjenja kompatibilna sa farmaceutskom primenom. Osim ako se ne ukaže da je neki od konvencionalnih medija ili agenasa nekompatibilan sa aktivnim sastojkom, njegova je upotreba u kompozicijama predmetnog pronalaska razmotrena. Dodatna aktivna jedinjenja se takođe mogu ugraditi u kompozicije.
Korisni farmaceutski nosači za pripremu ovih kompozicija mogu biti čvrste supstance, tečnosti li gasovi; prema tome, kompozicije mogu biti u obliku tableta, pilula, kapsula, supozitorija, prašaka, enterički obloženih ili drugih zaštićenih formulacija (npr. vezivanje na jono-izmenjivačkim smolama ili pakovanje u lipidno-proteinske vezikule), formulacije sa produženim oslobađanjem, rastvori, suspenzije, eliksiri, aerosoli i slično. Nosač se može izabrati iz različitih ulja, uključujući naftna, životinjska, biljna ili sintetička, npr. ulje kikirikija, sojino ulje, mineralno ulje, susamovo ulje i slično. Voda, fiziološki rastvor, vodeni rastvor dekstroze i glikoli poželjni su tečni nosači, posebno (kada su izotonični s krvlju) za rastvore za ubrizgavanje. Na primer, formulacije za intravenozno davanje sadrže sterilne vodene rastvore aktivnog sastojka (sastojaka) koji se pripremaju rastavaranjem čvrstog aktivnog sastojka (sastojaka) u vodi da bi se proizveo vodeni rastvor, a rastvor postao sterilan. Prikladni farmaceutski ekscipijenti uključuju skrob, celulozu, talk, glukozu, laktozu, talk, želatin, slad, pirinač, brašno, kredu, silicijum, magnezijum-stearat, natrijum-stearat, glicerol-monostearat, natrijum-hlorid, suvo obrano mleko, glicerol, propilen-glikol, vodu, etanol i slično. Kompozicije se mogu podvrgnuti konvencionalnim farmaceutskim aditivima, kao što su konzervansi, stabilizatori, sredstva kvašenje ili emulgatori, soli za podešavanje osmotskog pritiska, puferi i slično. Odgovarajući farmaceutski nosači i njihova formulacija opisani su u delu Remington's Pharmaceutical Sciences, E.W Martin. Takve kompozicije, u svakom slučaju, sadrže efikasnu količinu aktivnog jedinjenja zajedno sa odgovarajućim nosačem, tako da se pripremi odgovarajući dozni oblik za pravilno davanje primaocu.
U praksi ovdeopisanog postupka, efikasna količina bilo kog od jedinjenja ovog pronalaska ili kombinacija bilo kojih jedinjenja ovog pronalaska ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili estera, primjenjuje se bilo kojim od uobičajenih i prihvatljivih postupaka poznatih u struci, pojedinačno ili u kombinaciji. Jedinjenja ili kompozicije se mogu davati oralno (npr. bukalna šupljina), sublingvalno, parenteralno (npr. intramuskularno, intravenozno ili supkutano), rektalno (npr. supozitorijama ili ispiranjima), transdermalno (npr. elektroporacijom kože) ili inhalacijom (npr. aerosolom) i u obliku čvrstih, tečnih ili gasovitih doza, uključujući tablete i suspenzije. Primena se može sprovesti u jediničnom doznom obliku uz kontinuiranu terapiju ili u terapiji pojedinačne doze ad libitum. Terapeutska kompozicija može takođe biti u obliku uljne emulzije ili disperzije zajedno sa lipofilnom soli, kao što je pamoinska kiselina, ili u obliku biorazgradive kompozicije s produženim oslobađanjem za supkutanu ili intramuskularnu primenu.
JEDINJENJA
Opisana su jedinjenja izabrana iz niženavedene Tabele 1 ili njihove soli ili farmaceutski prihvatljive soli.
Tabela 1
1
1
Predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenja formule II u skladu s niženavedenim opisom (primer izvođenja „EE1”):
EE1. Jedinjenje formule II:
B<2>je piridinil, pri čemu svaki piridinil od B<2>, opciono je supstituisan sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od halogena: (C1−C6)alkil, –O (C1−C6)alkil, –O(C1−C6)alkil-O(C1−C6)alkil, (C3−C7)cikloalkil, (C1−C6)haloalkil, –CN, i 6-člani heteroaril, pri čemu svaki 6-člani heteroaril opciono je supstituisan sa jednim ili više (C1−C6)alkilom ili (C1−C6)haloalkilom;
R<1>je fenil, 5-člani heteroaril ili 6-člani heteroaril, pri čemu svaki fenil, 5-člani heteroaril ili 6-člani heteroaril R<1>opciono je supstituisan sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od halogena, −CN, (C1−C6)alkila i (C1−C6)haloalkila;
jedna R<3b>grupa je halogen, −CN ili (C1−C6)alkil, a preostale R<3b>grupe su nezavisno odabrane od H, (C1−C6)alkila i (C1−C6)haloalkila;
R<4>je H, (C1−C6)alkil ili (C1−C6)haloalkil;
R<5b>je
ili njegova so.
Dodatni primeri izvođenja ovog pronalaska izloženi su u nastavku.
EE16. Jedinjenje predmetnog pronalaska, pri čemu jedna R<3b>grupa je F, a preostale R<3b>grupe su H.
EE17. Jedinjenje predmetnog pronalaska, pri čemu je
(1) A grupa
EE18. Jedinjenje predmetnog pronalaska, pri čemu je B2 piridinil, pri čemu svaki od piridinila B2 opciono supstituisan sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od halogena: (C1−C6)alkil, –O (C1−C6)alkil, –O(C1−C6)alkil-O(C1−C6)alkil, (C3−C7)cikloalkil, (C1−C6)haloalkil, –CN, i 6-člani heteroaril, pri čemu svaki 6-člani heteroaril opciono je supstituisan jednim ili više (C1−C6)alkilom ili (C1−C6)haloalkilom;
EE19. Jedinjenje predmetnog pronalaska pri čemu je B<2:>
pri čemu svaki R<Z1>je nezavisno odabran od H, halogena, (C1−C6)alkila, −O(C1−C6)alkila, −O(C1−C6)alkil-O (C1−C6)alkila, (C3−C7)cikloalkila, (C1−C6)haloalkila, −CN, i 6-članih heteroarila, pri čemu svaki 6-člani heteroaril opciono je supstituisan (C1−C6)alkilom ili (C1−C6)haloalkilom.
EE37. Jedinjenje predmetnog pronalaska, pri čemu je R<4>H.
EE38. Jedinjenje predmetnog pronalaska pri čemu R<1>je fenil ili tiofenil, pri čemu svaki fenil ili tiofenil od R<1>opciono je supstituisani sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od halogena, −CN, (C1−C6)alkila i (C1−C6)haloalkila.
1
EE39. Jedinjenje predmetnog pronalaska pri čemu R<1>je fenil ili tiofenil, pri čemu svaki fenil ili tiofenil od R<1>opciono je supstituisani sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od halogena i −CN.
EE40. Jedinjenje predmetnog pronalaska pri čemu R<1>je fenil ili tiofenil, pri čemu svaki fenil ili tiofenil od R<1>opciono je supstituisani sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od fluoro, hloro i −CN.
EE41. Jedinjenje predmetnog pronalaska pri čemu je R<1>4-fluorofenil, 3-fluorofenil, 4-cijanofenil, 2-hlorotiofen-5-il, 3,4,-difluorofenil ili 3-fluoropiridin-5-il.
EE51. Jedinjenje u skladu s predmetnim pronalaskom, koje je:
njegova so ili farmaceutski prihvatljiva so.
EE52. U niženavedenoj tabeli 2 opisano je jedinjenje, so ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. Jedinjenja označena * nisu deo pronalaska. ;Tabela 2 ;; ;;;; 1 ; ;;; 1 ;;; 1 ;;; 1 ;;; 2 ; ; ;;; 2 ; ;;; 2 ;;; 2 ;;; 2 ;;; 2 ;;; 2 ; ;;; 1 ;;; 2 ; ;;; 4 ;; EE53. Jedinjenje predmetnog pronalaska ;pri čemu: ;;(1) A grupa je: ; EE54. Jedinjenje predmetnog pronalaska, pri čemu: ;;(1) A grupa je: ; EE55. Jedinjenje predmetnog pronalaska, pri čemu: (1) A grupa je: ;EE56. Jedinjenje predmetnog pronalaska ;pri čemu: ;;(1) A grupa je: ; EE57. Jedinjenje predmetnog pronalaska ;pri čemu: ;;(1) A grupa je: ; EE58. Jedinjenje predmetnog pronalaska ;pri čemu: ;;(1) A grupa je: ; EE59. Jedinjenje predmetnog pronalaska ;pri čemu: ;;(1) A grupa je: ; EE60. Jedinjenje predmetnog pronalaska ;pri čemu: ;;(1) A grupa je: ; EE61. Jedinjenje predmetnog pronalaska ;pri čemu: ;;(1) A grupa je: ; Jedinjenja formule II mogu biti izotopski označeni tako da im je jedan atom ili više atoma zamenjen atomom koji ima različitu atomsku masu ili maseni broj. Smatra se da takva izotopski označena (tj. radioaktivno obeležena) jedinjenja formule II spadaju u opseg ovog pronalaska. Primeri izotopa koji se mogu ugraditi u jedinjenja formule II uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, sumpora, fluora, hlora i joda, kao što su, bez ograničenja,<2>H,<3>H,<11>C,<13>C,<14>C,<13>N,<15>N,<15>O,<17>O,<18>O,<31>P,<32>P,<35>S,<18>F,<36>Cl,<123>I i<125>I, datim redosledom. Ova izotopski obeležena jedinjenja bila bi korisna za određivanje ili merenje efikasnosti jedinjenja, karakterišući, na primer, mesto ili način delovanja na jonskim kanalima ili afinitet vezivanja prema farmakološki važnom mestu delovanja na jonskim kanalima, posebno TRPA1. Određena izotopski obeležena jedinjenja formule I ili II, na primer, ona koja sadrže radioaktivni izotop, korisna su u studijama distribucije leka i/ili supstrata u tkivu. Radioaktivni izotopi tricijum, odnosno<3>H i ugljenik-14, odnosno,<14>C, posebno su korisni za tu svrhu s obzirom na njihovu jednostavnost ugradnje i spremna sredstva detekcije. Na primer, jedinjenje formule II može biti obogaćeno 1, 2, 5, 10, 25, 50, 75, 90, 95 ili 99 procenata datog izotopa. ;Zamena sa težim izotopima kao što je deuterijum, odnosno<2>H, može priuštiti određene terapijske prednosti usled veće metaboličke stabilnosti, na primer, povećan in vivo poluživot ili manje potrebne doze. ;Supstitucija izotopima koji emituju pozitrone, kao što su<11>C,<18>F,<15>O i<13>N može biti korisna u studijama pozitronske emisione tomografije (PET) za ispitivanje popunjenosti receptora supstrata. Izotopski obeležena jedinjenja formule II uglavnom se mogu pripremiti konvencionalnim tehnikama poznatim stručnjacima ili postupcima u skladu s opisima u Primerima, kao što je navedeno u nastavku, upotrebom odgovarajućeg izotopski obeleženog reagensa umesto prethodno upotrebljenog neoznačenog reagensa. ;U sledećem primeru izvođenja, predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži terapeutski efikasnu količinu jedinjenja u skladu s formulom II i farmaceutski prihvatljivi nosač. ;Pored navedenih oblika soli, opisana su i jedinjenja u obliku proleka. U smislu ovog dokumenta, izraz „prolek” se odnosi na ona jedinjenja koja se lako podvrgavaju hemijskim promenama u fiziološkim uslovima da bi se dobila jedinjenja predmetnog pronalaska. Pored toga, prolekovi se mogu konvertovati u jedinjenja predmetnog pronalaska hemijskim ili biohemijskim postupcima u ex vivo okruženju. Na primer, prolekovi se mogu polako konvertovati u jedinjenja predmetnog pronalaska kada se stavljaju u rezervoar transdermalnog flastera sa pogodnim enzimom ili hemijskim reagensom. ;Prolekovi uključuju jedinjenja u kojima je aminokiselinski ostatak, ili polipeptidni lanac s dva ili više (npr. dva, tri ili četiri) aminokiselinskih ostataka, kovalentno spojen preko amidne ili estarske veze za slobodnu amino, hidroksi ili karboksilnu grupu jedinjenja predmetnog pronalaska. Ostaci aminokiselina uključuju, bez ograničenja, 20 prirodnih aminokiselina koje su obično označene troslovnim simbolima i uključuju fosfoserin, fosfotreonin, fosfotirozin, 4-hidroksiprolin, hidroksilzin, demozin, izodemozin, gamakarboksiglutamat, hipurinsku kiselinu, oktahidroindol-2-karboksilna kiselinu, statin, 1,2,3,4tetrahidroizohinolin-3-karboksilnu kiselinu, penicilamin, ornitin, 3-metilhistidin, norvalin, beta-alanin, gama-aminobuternu kiselinu, citrulin, homocistein, homoserin, metil-alanin, para-benzoilfenilalanin, fenilglicin, propargilglicin, sarkozin, metionin sulfon i tercbutilglicin. ;Takođe su otkriveni dodatni tipovi prolekova. Na primer, slobodna karboksilna grupa jedinjenja pronalaska može biti derivatizovana kao amid ili alkil-estar. Kao još jedan primer, jedinjenja ovog pronalaska koja sadrže slobodne hidroksi grupe mogu biti derivatizovana kao prolekovi pretvaranjem hidroksi grupe u grupu kao što je, bez ograničenja, fosfatni ester, hemisukcinat, dimetilaminoacetat ili fosforiloksimetiloksikarbonil grupa, kao što je navedeno u Fleisher, D. et al., (1996) Improved oral drug delivery: solubility limitations overcome by the use of prodrugs Advanced Drug Delivery Reviews, 19:115 . Karbamatni prolekovi hidroksi i amino grupa su takođe uključeni, kao i karbonatni prolekovi, sulfonatni esteri i sulfatni esteri hidroksi grupa. Derivatizacija hidroksi grupa kao (aciloksi)metil i (aciloksi)etil eteri, pri čemu acilna grupa može biti alkil-ester opciono supstituisan grupama koje uključuju, bez ograničenja, etarske, aminske i karboksilne kiseline, ili kada je acilna grupa aminokiselinski ester kao što je gore opisano, takođe su obuhvaćeni. Prolekovi ovog tipa opisani su u J. Med. Chem., (1996), 39:10. Konkretniji primeri uključuju zamenu atoma vodonika alkoholne grupe grupom kao što je (C1−6)alkanoiloksimetil, 1-((C1−6)alkanoiloksi)etil, 1-metil-1-((C1−6)alkanoiloksi)etil, (C1−6)alkoksikarboniloksimetil, N-(C1−6)alkoksikarbonilaminometil, sukcinoil, (C1-6)alkanoil, alfa-aniino (C1-4)alkanoil, arilacil i alfa-aminoacil, ili alfa-aminoacil-alfa-aminoacil, gde se svaka alfa-aminoacil grupa nezavisno bira iz prirodnih L-aminokiselina, P(O)(OH)2,−P(O)(O(C1−6)alkil)2ili glikozil (radikal koji nastaje uklanjanjem hidroksilne grupe hemiacetalnog oblika ugljenog hidrata). ;Za dodatne primere derivata prolekova, videti, na primer, a) Design of Prodrugs, uredio H. Bundgaard, (Elsevier, 1985 ) i Methods in Enzymology, Vol. 42, str. 309-396, uredio K. Widder, et al. (Academic Press, 1985 ); b) A Textbook of Drug Design and Development, koji su uredili Krogsgaard-Larsen i H. Bundgaard, poglavlje 5 "Design and Application of Prodrugs,", H. Bundgaard p. 113-191 (1991 ); c) H. Bundgaard, Advanced Drug Delivery Reviews, 8: 1-38 (1992 ); d) H. Bundgaard, et al., Journal of Pharmaceutical Sciences, 77: 285 (1988 ); i e) N. Kakeya, et al., Chem. Pharm. Bull., 32: 692 (1984 ), od kojih je svaki ovde posebno uključen referencom. ;Pored toga, opisani su metaboliti jedinjenja predmetnog pronalaska. U smislu ovog dokumenta, „metabolit” se odnosi na proizvod koji nastaje metabolizmom određenog jedinjenja ili njegove soli u organizmu. Takvi proizvodi mogu rezultirati, na primer, oksidacijom, redukcijom, hidrolizom, amidacijom, deamidacijom, esterifikacijom, deesterifikacijom, enzimatskim cepanjem i slično, primenjenog jedinjenja. ;Produkti metabolizma obično se identifikuju pripremom radioaktivnog (npr<14>C ili<3>H) izotopa jedinjenja pronalaska, parenteralnom primenom u dozi koja se može detektovati (npr. veća od oko 0,5 mg/kg) na životinje, kao što su pacov, miš, zamorac, majmun, ili čovek, omogućavajući dovoljno vremena da dođe do metabolizma (obično oko 30 sekundi do 30 sati) i izolujući njegove proizvode konverzije iz urina, krvi ili drugih bioloških uzoraka. Ovi proizvodi se lako izoluju jer su obeleženi (drugi su izolovani upotrebom antitela sposobnih za vezivanje epitopa koji prežive u metabolitu). Strukture metabolita se određuju na konvencionalan način, npr. pomoću MS, LC/MS ili NMR analize. Generalno, analiza metabolita se vrši na isti način kao i konvencionalne studije metabolizma lekova, dobro poznat stručnjacima. Produkti metabolizma, sve dok se inače ne nalaze in vivo, korisni su u dijagnostičkim testovima za terapeutsko doziranje jedinjenja pronalaska. ;Određena jedinjenja iz ovog pronalaska mogu postojati u nesolvatnim oblicima, kao i solvatnim oblicima uključujući hidratne oblike. Uopšteno, solvatni oblici su ekvivalentni nesolvatnim oblicima i predviđeni su da budu obuhvaćeni opsegom ovog pronalaska. Određena jedinjenja iz ovog pronalaska mogu postojati u višestrukim kristalnim ili amorfnim oblicima. Uopšteno, svi fizički oblici su ekvivalentni za namene koje se razmatraju u ovom izumu i namenjene su da budu u opsegu ovog pronalaska. ;;FARMACEUTSKE KOMPOZICIJE I PRIMENA ;Pored jednog gorenavedenog ili više gorenavedenih jedinjenja (uključujući stereoizomere, geometrijske izomere, tautomere, solvate, izotope ili njihove farmaceutski prihvatljive soli), pronalazak takođe obezbeđuje kompozicije i lekove koji sadrže jedinjenje formule II ili njegovu realizaciju i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač. Kompozicije ovog pronalaska se mogu koristiti za selektivno inhibiranje TRPA1 kod pacijenata (npr. ljudi). ;Termin „kompozicija”, u smislu ovog dokumenta, ima za cilj da obuhvati proizvod koji sadrži specifične sastojke u specifičnim količinama, kao i bilo koji proizvod koji nastaje, direktno ili indirektno, od kombinacije specifičnih sastojaka u specifičnim količinama. Pod „farmaceutski prihvatljivim” podrazumeva se da nosač, diluent ili ekscipijent mora biti kompatibilan sa drugim sastojcima formulacije i da nije štetan za primaoca. ;U jednom primeru izvođenja, pronalazak obezbeđuje farmaceutske kompozicije ili lekove koji sadrže jedinjenje formule II ili njegovu realizaciju, i njegove stereoizomere, geometrijske izomere, tautomere, solvate, izotope, njihove farmaceutski prihvatljive soli i farmaceutski prihvatljiv nosač, diluent ili ekscipijent. U sledećem primeru izvođenja, pronalazak obezbeđuje postupak pripreme kompozicija (ili lekova) koje sadrže jedinjenja pronalaska. Kompozicije su formulisane, dozirane i primenjene na način koji je u skladu sa dobrom medicinskom praksom. Faktori za razmatranje u ovom kontekstu uključuju konkretni poremećaj koji se leči, konkretnog sisara koji se leči, kliničko stanje pojedinačnog pacijenta, uzrok poremećaja, mesto isporuke agensa, postupak primene, raspored primene i ostale faktore poznate lekarima. Efikasna količina jedinjenja koje se primenjuje biće regulisana takvim razmatranjima i predstavlja minimalnu količinu neophodnu za inhibiranje aktivnosti TRPA1, kao što je potrebno za sprečavanje ili lečenje neželjenih bolesti ili poremećaja, poput boli. Na primer, takva količina može biti manja od količine koja je toksična za normalne ćelije ili sisara u celini. ;U jednom primeru, terapeutski efikasna količina jedinjenja iz ovog pronalaska koja se primenjuje parenteralno po dozi biće u opsegu od oko 0,01 mg/kg – 100 mg/kg, alternativno oko, npr. 0,1 mg/kg do 20 mg/kg telesne težine pacijenta dnevno, sa tipičnim početnim opsegom korišćenog jedinjenja od 0,3 mg/kg do 15 mg/kg/dan. Dnevna doza, u određenim primerima izvođenja, data je kao pojedinačna dnevna doza ili u podeljenim dozama dva do šest puta dnevno ili u obliku sa produženim oslobađanjem. U slučaju odraslog čoveka od 70 kg, ukupna dnevna doza će generalno biti od oko 7 mg do oko 1,400 mg. Ovaj režim doziranja može se prilagoditi kako bi se dobio optimalni terapijski odgovor. Jedinjenja se mogu primenjivati u režimu od 1 do 4 puta dnevno, poželjno jednom ili dva puta dnevno. ;Jedinjenja iz predmetnog pronalaska mogu biti primenjena u svakom pogodnom obliku primene, npr. tablete, praškovi, kapsule, rastvori, disperzije, suspenzije, sirupi, sprejevi, supozitorije, gelovi, emulzije, flasteri itd. Takve kompozicije mogu sadržati komponente koje su uobičajene u farmaceutskim preparatima, npr. razblaživače, nosače, pH modifikatore, zaslađivače, balastne materije, i druge aktivne agense. ;Jedinjenja iz pronalaska mogu se primeniti na bilo koji pogodan način, uključujući oralnu, topikalnu (uključujući bukalnu i sublingvalnu), rektalnu, vaginalnu, transdermalnu, parenteralnu, supkutanu, intraperitonealnu, intrapulmonarnu, intradermalnu, intratekalnu i epiduralnu i intranazalnu, i, ako se želi lokalni tretman, intralezionu primenu. Parenteralne infuzije uključuju intramuskularno, intravensko, intraarterijsko, intraperitonealno, intracerebralno, intraokularno, intraleziono ili supkutano davanje. ;Kompozicije koje sadrže jedinjenja formule II ili primer izvođenja obično su formulisane u skladu sa standardnom farmaceutskom praksom kao farmaceutska kompozicija. Tipična formulacija se priprema mešanjem jedinjenja predmetnog pronalaska i ;;;4 ;diluenta, nosača ili ekscipijenta. Odgovarajući diluenti, nosači i ekscipijenti su dobro poznati stručnjacima i detaljno su opisani u, na primer, Ansel, Howard C., et al., Ansel's Pharmaceutical Dosage Forms and Drug Delivery Systems. Philadelphia: Lippincott, Williams & Wilkins, 2004; Gennaro, Alfonso R., et al. Remington: The Science and Practice of Pharmacy. Philadelphia: Lippincott, Williams & Wilkins, 2000; i Rowe, Raymond C. Handbook of Pharmaceutical Excipients. Chicago, Pharmaceutical Press, 2005. Formulacije takođe mogu sadržati jedan ili više pufera, stabilizatora, surfaktanasa, sredstava za vlaženje, lubrikanata, emulgatora, sredstava za suspendovanje, konzervanasa, antioksidanata, sredstava za neprozirnost, glidanasa, pomoćnih agenasa za obradu, boja, zaslađivača, mirisa, aroma, diluenata i drugih poznatih aditiva kako bi se dobio elegantan izgled leka (tj. jedinjenja iz predmetnog pronalaska ili njegove farmaceutske kompozicije) ili kako bi se olakšala proizvodnja farmaceutskog proizvoda (tj. leka). Pogodni nosači, diluenti i ekscipijenti dobro su poznati stručnjacima u ovom području i uključuju pufere kao što su fosfat, citrat i druge organske kiseline; antioksidanti, uključujući askorbinsku kiselinu i metionin; konzervansi (kao što je oktadecildimetilbenzil-amonijum-hlorid; heksametonijum-hlorid; benzalkonijumhlorid; benzetonijum-hlorid; fenol, butil ili benzil alkohol; polipeptidi male molekulske mase (manje od oko 10 ostataka); proteini, kao što su serumski albumin, želatin ili imunoglobulini; hidrofilni polimeri kao što je polivinilpirolidon; aminokiseline kao što su glicin, glutamin, asparagin, histidin, arginin ili lizin; monosaharidi, disaharidi i drugi ugljenihidrati uključujući glukozu, manozu ili dekstrine; sredstva za želiranje kao što je EDTA; šećere kao što su saharoza, manitol, trehaloza ili sorbitol; kontrajoni koji formiraju soli, kao što je natrijum; kompleksi metala (npr. kompleksi Zn-proteina); i/ili nejonske surfaktante kao što su TWEEN ™, PLURONICS ™ ili polietilen-glikol (PEG). Aktivni farmaceutski sastojak prema pronalasku (npr. jedinjenje formule I ili II ili njegovo izvođenje) takođe može biti zarobljen u mikrokapsule pripremljene, na primer, tehnikama koacervacije ili interfacijalnom polimerizacijom, na primer, hidroksimetilceluloza ili želatin-mikrokapsule i mikrokapsule poli(metilmetacilata) u koloidnim sistemima za davanje lekova (na primer, lipozomi, mikrosfere albumina, mikroemulzije, nanočestice i nanokapsule) ili u makroemulzijama. Takve tehnike su otkrivene u Remington: The Science and Practice of Pharmacy: Remington the Science and Practice of Pharmacy (2005) 21<st>Edition, Lippincott Williams & Wilkins, Philidelphia, PA. Određeni nosač, diluent ili ekscipijent koji će se koristiti zavisi od načina i svrhe za koju se primenjuje jedinjenje iz ovog pronalaska. Rastvarači se generalno biraju na osnovu rastvarača koje stručnjaci iz struke prepoznaju kao sigurne (GRAS) za davanje sisarima. Uopšteno, sigurni rastvarači su netoksični vodeni rastvarači, kao što su voda i drugi netoksični rastvarači koji su rastvorljivi ili se mešaju u vodi. Pogodni vodeni rastvarači uključuju vodu, etanol, propilen-glikol, polietilen-glikole (npr. PEG 400, PEG 300), itd. I njihove smeše. Prihvatljivi diluenti, nosači, ekscipijenti i stabilizatori su netoksični za primaoce u upotrebljenim dozama i koncentracijama, i uključuju ;preparate sa produženim oslobađanjem jedinjenja pronalaska (npr. jedinjenje formule II ili njegovo izvođenje) mogu biti pripremljeni. Prikladni primeri preparata sa produženim oslobađanjem uključuju polupropusne matrice čvrstih hidrofobnih polimera koji sadrže jedinjenje formule II ili njegovu realizaciju, čije su matrice u formi oblikovanih proizvoda, npr. filmova ili mikrokapsula. Primeri matrica za produženo oslobađanje uključuju poliestere, hidrogelove (na primer, poli (2-hidroksietil-metakrilat), ili poli (vinil-alkohol)), polilaktide ( US Patent No. 3,773,919 ), kopolimere L-glutaminske kiseline i gama-etil-L-glutamat (Sidman et al., Biopolymers 22: 547, 1983 ), nerazgradivi etilen-vinil-acetat ( Langer et al., J. Biomed. Mater. Res. 15: 167, 1981 , razgradivi kopolimeri mlečne kiseline i glikolne kiseline, kao što je LUPRON DEPOT™ (injekcione mikrosfere sastavljene od kopolimera mlečne kiseline i glikolne kiseline i leuprolid-acetata) i poli-D-(-)-3-hidroksibutirne kiseline (EP) 133,988A). Kompozicije sa produženim oslobađanjem takođe uključuju lipozomalno zarobljena jedinjenja, koja se mogu dobiti postupcima poznatim per se (Epstein et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 82:3688, 1985; Hwang et al., Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 77:4030, 1980; U.S. Patent Nos. 4,485,045 i 4,544,545; i EP 102,324A). Uobičajeno, lipozomi su malog (oko 200–800 angstroma) unilamelarnog tipa u kojem je sadržaj lipida veći od oko 30 mol% holesterola, a odabrana razmera je prilagođena optimalnoj terapiji. ;U jednom primeru, jedinjenja formule II ili njihovo izvođenje mogu se formulisati mešanjem na sobnoj temperaturi uz odgovarajuću pH, u željenom stepenu čistoće, sa fiziološki prihvatljivim nosačima, tj. nosačima koji su netoksični za primaoce u dozama i koncentracijama upotrebljenim u galenskom obliku za primenu. pH formulacije zavisi uglavnom od naročite primene i koncentracije jedinjenja, ali se poželjno nalazi u opsegu između oko 3 do oko 8. U jednom primeru, jedinjenje formule II (ili njegovo izvođenje) formulisano je u acetatnom puferu, na pH 5. U sledećem primeru izvođenja, jedinjenja Formule I ili II ili njihova izvođenja su sterilna. Jedinjenje može da se skladišti, na primer, kao čvrsta ili amorfna kompozicija, kao liofilizirana formulacija ili kao vodeni rastvor. ;Formulacije jedinjenja pronalaska (npr. jedinjenje formule I ili II ili njihova izvođenja) pogodne za oralnu primenu mogu biti pripremljene kao diskretne jedinice kao što su pilule, kapsule, kašete ili tablete od kojih svaka sadrži prethodno određenu količinu jedinjenja izuma. ;Komprimovane tablete se mogu pripremiti komprimovanjem u odgovarajućoj mašini aktivnog sastojka u slobodno tečnom obliku, kao što je prah ili granule, po izboru pomešane sa vezivom, lubrikantom, inertnim diluentom, konzervansom, površinski aktivnim ili disperzivnim sredstvom. Oblikovane tablete se mogu napraviti pomoću kalupa, odgovarajuće mašine i smeše aktivnog sastojka u prahu navlaženog inertnim tečnim diluentom. Tablete se mogu opciono obložiti ili zarezati i opciono su formulisane tako da omogućavaju sporo ili kontrolisano oslobađanje aktivnog sastojka. ;Tablete, pastile, lozenge, vodene ili uljane suspenzije, disperzivni praškovi ili granule, emulzije, tvrde ili meke kapsule, npr. želatinske kapsule, sirupi ili eliksiri mogu se pripremiti za oralnu upotrebu. Formulacije jedinjenja iz ovog pronalaska (npr. jedinjenja formule I ili II ili njihova izvođenja) namenjene za oralnu upotrebu mogu se pripremiti prema bilo kom postupku koji je poznat u struci za proizvodnju farmaceutskih kompozicija i takve kompozicije mogu da sadrže jedan ili više agenasa, uključujući agense za zaslađivanje, sredstva za poboljšanje ukusa, sredstva za bojenje i sredstva za očuvanje, kako bi se obezbedio ukusan preparat. Prihvatljive su tablete koje sadrže aktivni sastojak u smeši s netoksičnim farmaceutski prihvatljivim ekscipijentom koji je pogodan za proizvodnju tableta. Ovi ekscipijenti mogu biti, na primer, inertni diluenti, kao što su kalcijum ili natrijumkarbonat, laktoza, kalcijum ili natrijum-fosfat; sredstva za granuliranje i dezintegraciju, kao što je kukuruzni skrob, ili alginska kiselina; sredstva za vezivanje, kao što su skrob, želatina ili akacija; i sredstva za podmazivanje, kao što su magnezijum-stearat, stearinska kiselina ili talk. Tablete mogu biti neobložene ili obložene poznatim tehnikama, uključujući mikroinkapsuliranje da bi se odložila dezintegracija i adsorpcija u gastrointestinalnom traktu i time osiguralo kontinuirano delovanje tokom dužeg perioda. Na primer, može se koristiti materijal za odloženo razlaganje, kao što je gliceril-monostearat ili gliceril-distearat, sam ili sa voskom. ;Primer prikladnog oblika za oralnu primenu je tableta koja sadrži oko 1 mg, 5 mg, 10 mg, 25 mg, 30 mg, 50 mg, 80 mg, 100 mg, 150 mg, 250 mg, 300 mg i 500 mg jedinjenje predmetno pronalaska sa oko 90 mg – 30 mg anhidrovane laktoze, oko 5 mg – 40 mg natrijum-kroskarmeloze, oko 5 mg – 30 mg polivinilpirolidona (PVP) K30 i oko 1 mg – 10 mg magnezijum-stearata. Praškasti sastojci se prvo izmešaju, a zatim mešaju sa rastvorom PVP. Dobijena kompozicija se može osušiti, granulirati, pomešati s magnezijum-stearatom i komprimovati u oblik tablete koristeći konvencionalnu opremu. Primer formulacije aerosola može se pripremiti rastvaranjem jedinjenja, na primer 5 mg – 400 mg pronalaska, u pogodnom puferskom rastvoru, npr. fosfatnom puferu, dodavanjem modifikatora tonusa, npr. ;;;4 ;soli kao što je natrijum-hlorid, ako se želi. Rastvor se može filtrirati, npr. pomoću filtera od 0,2 mikrona, da bi se uklonile nečistoće i zagađivači. ;Za tretman oka ili drugih spoljnih tkiva, npr. usta i kože, formulacije se poželjno primenjuju kao topikalna mast ili krema koja sadrži aktivni sastojak (aktivne sastojke) u količini od, na primer, 0,075 % w/w – 20% w/w. Kada se formuliše u obliku masti, aktivni sastojak može da se koristi sa parafinskom bazom ili bazom koja se meša sa vodom. Alternativno, aktivni sastojci mogu biti formulisani u kremu sa bazom kreme ulje-u-vodi. Po želji, vodena faza baze kreme može sadržati polihidrični alkohol, tj. alkohol koji ima dve ili više hidroksilnih grupa, kao što su propilen-glikol, butan 1,3-diol, manitol, sorbitol, glicerol i polietilen-glikol (uključujući PEG 400) i njihove mešavine. Topikalne formulacije mogu poželjno sadržati jedinjenje koje poboljšava apsorpciju ili penetraciju aktivnog sastojka kroz kožu ili druga zahvaćena područja. Primeri takvih pojačivača dermalne penetracije uključuju dimetil-sulfoksid i srodne analoge. ;Za topikalne formulacije, poželjno je davati efikasnu količinu farmaceutske kompozicije u skladu s pronalaskom predmetnog područja, npr. površina kože, mukozne membrane i slično koje su u blizini perifernih neurona koje treba tretirati. Ova količina se obično kreće od oko 0,0001 mg do oko 1 g jedinjenja pronalaska po primeni, u zavisnosti od područja koje se tretira, da li je upotreba dijagnostička, profilaktička ili terapijska, ozbiljnost simptoma i priroda topikalnog vehikuluma koji se koristi. Poželjni topikalni preparat je mast, u kojoj se koristi približno 0,001 mg do oko 50 mg aktivnog sastojka po cc baze masti. Farmaceutska kompozicija se može formulisati kao transdermalni preparati ili transdermalni uređaji za isporuku („flasteri”). Takve kompozicije uključuju, na primer, podlogu, rezervoar aktivnog sastojka, kontrolnu membranu, oblogu i kontaktni adheziv. Takvi transdermalni flasteri mogu se koristiti da se obezbedi kontinuirano pulsativno ili periodično davanje jedinjenja ovog pronalaska po želji. ;Formulacije se mogu pakovati u kontejnere sa jediničnom dozom ili više doza, na primer, zapečaćene ampule i bočice i mogu se skladištiti u suvo smrznutom (liofilizovanom) stanju koje zahteva samo dodavanje sterilnog tečnog nosača, na primer, vode, za ubrizgavanje neposredno pre upotrebe. Nepripremljeni rastvori za injekcije i suspenzije se pripremaju iz sterilnih prašaka, granula i tableta prethodno opisane vrste. Poželjne formulacije jedinične doze su one koje sadrže dnevnu dozu ili jediničnu dnevnu subdozu, kao što je prethodno navedeno, ili odgovarajuću frakciju aktivnog sastojka. ;Kada se vezujući cilj nalazi u mozgu, određeni primeri izvođenja ovog pronalaska obezbeđuju da jedinjenje formule I ili II (ili njegovi primeri izvođenja) prelaze krvnomoždanu barijeru. Određene neurodegenerativne bolesti dovode se u vezu sa povećanjem permeabilnosti krvno-moždane barijere, tako da se jedinjenje formule I ili II (ili njegovi primeri izvođenja) može lako uvesti u mozak. Kada krvno-moždana barijera ostane netaknuta, postoji nekoliko poznatih postupaka za transport molekula preko nje, uključujući, bez ograničenja, fizički postupci, postupci zasnovani na lipidima i postupci bazirani na receptorima i kanalima. ;Fizički postupci prenošenja jedinjenja formule I ili II (ili njegovi primeri izvođenja) preko krvno-moždane barijere uključuju, bez ograničenja, potpuno zaobilaženje krvnomoždane barijere ili stvaranje otvora u krvno-moždanoj barijeri. ;Postupci zaobilaženja uključuju, bez ograničenja, direktno ubrizgavanje u mozak (videti, npr. Papanastassiou et al., Gene Therapy 9: 398-406, 2002 ), intersticijska infuzija / konvekcijom-poboljšana isporuka (videti, npr. Bobo et al., Proc. Natl. Acad. Sci U.S.A. 91: 2076-2080, 1994 ), i implantirani uređaj za isporuku u mozak (vidi npr. Gill et al., Nature Med. 9: 589-595, 2003; i Gliadel Wafers™, Guildford. ;Pharmaceutical). Postupci stvaranja otvora u barijeri uključuju, bez ograničenja, ultrazvuk (videti npr. US Patent Publication No. 2002/0038086), osmotski pritisak (npr. davanjem hipertoničnog manitola (Neuwelt, EA, Implikacija krvi-Brain Barrier i njene manipulacije, Volumes 1 i 2, Plenum Press, New York, 1989)), i permeabilizacija pomoću, npr. bradikinina ili permeabilizatora A-7 (vidi, npr. US Patent br. 5112596, 5268164, 5506206 i 5686416). ;Postupci transporta na bazi lipida jedinjenja formule II (ili njegovih primera izvođenja) preko krvno-moždane barijere uključuju, bez ograničenja, inkapsuliranje jedinjenja formule II (ili njegovih primera izvođenja) u lipozome koji su vezani za fragmente koji vezuju antitela koji se vezuju za receptore na vaskularnom endotelu krvno-moždane barijere (videti, npr. US Patent Application Publication No. 2002/0025313 ), i oblaganje jedinjenja formule I ili II (ili njegove primere izvođenja )- česticama lipoproteina male gustine (videti npr. U.S. Patent Application Publication br.2004/0204354 ) ili apolipoprotein E (videti npr. U.S. Patent Application Publication br.2004/0131692). ;Receptorski i kanalni postupci prenošenja jedinjenja formule I ili II (ili njegove primere izvođenja) preko krvno-moždane barijere uključuju, bez ograničenja, upotrebu glukokortikoidnih blokatora za povećanje propusnosti krvno-moždane barijere (videti, npr. US Patent Application Publication No. 2002/0065259, 2003/0162695 i 2005/0124533); aktiviranje kalijumovih kanala (videti, na primer, US Patent Application Publication No. ;2005/0089473), inhibirajuće ABC transportere lekova (videti, npr. US Patent Application ;;;4 ;Publication No. 2003/0073713); oblaganje jedinjenja formule I ili II (ili njegove primere izvođenja) transferinom i modulirajuće aktivnosti jednog ili više receptora transferina (videti, npr. publikaciju U.S. Patent Application Publication br. 2003/0129186 ) i katjonizovanje antitela (videti, npr. US Patent No. 5,004,697). ;Za intracerebralnu upotrebu, u određenim primerima izvođenja, jedinjenja se mogu administrirati kontinuirano infuzijom u rezervoare za fluid u CNS, iako bolus injekcija može biti prihvatljiva. Inhibitori se mogu davati u ventrikule mozga ili na drugi način uvesti u CNS ili spinalnu tečnost. Primena se može izvršiti upotrebom unutrašnjeg katetera i kontinuiranih sredstava za administraciju, kao što je pumpa, ili se može primeniti implantacijom, npr. intracerebralnom implantacijom nosača sa produženim otpuštanjem. Konkretnije, inhibitori se mogu ubrizgavati kroz hronično implantirane kanile ili hronično infuzirati uz pomoć osmotskih minipumpa. Na raspolaganju su potkožne pumpe koje isporučuju proteine kroz male cevi u moždane komore. Visoko sofisticirane pumpe mogu se dopuniti kroz kožu, a njihova brzina isporuke se može postaviti bez hirurške intervencije. Primere pogodnih administrativnih protokola i sistema za isporuku koji uključuju supkutanu pumpu ili kontinuiranu intracerebroventrikularnu infuziju preko potpuno implantiranog sistema za davanje leka predstavljaju oni koji se koriste za primenu dopamina, agonista dopamina i holinergičkih agonista kod pacijenata sa Alchajmerovom bolešću i životinjskih modela za Parkinsonovu bolest, kao što su opisali Harbaugh, J. Neural Transm. Suppl. 24:271, 1987; i DeYebenes et al., Mov. Disord.2: 143, 1987. ;;INDIKACIJE I POSTUPCI TRETMANA ;Pokazano je da reprezentativna jedinjenja pronalaska moduliraju aktivnost TRPA1. Prema tome, jedinjenja pronalaska su korisna za lečenje bolesti i stanja posredovanih TRPA1 aktivnošću. Takve bolesti i stanja uključuju, bez ograničenja, bol (akutni, hronični, upalni ili neuropatski bol); svrab ili razne upalne poremećaje; poremećaje unutrašnjeg uha; groznica ili drugi poremećaji termoregulacije; disfunkcija traheobronhijalne ili dijafragme; poremećaji gastrointestinalnog ili urinarnog trakta; hronična opstruktivna plućna bolest; inkontinencija; i poremećajei u vezi sa smanjenim protokom krvi do CNS ili hipoksija CNS. ;Jedinjenja iz ovog pronalaska se mogu primenjivati za lečenje bola, uključujući, bez ograničenja, neuropatsku i inflamatornu bol, između ostalog. Određeni tipovi boli mogu se smatrati bolešću ili poremećajem, dok se drugi tipovi mogu smatrati simptomima različitih bolesti ili poremećaja, a bol može uključivati različite etiologije. Tipični tipovi bola koji se mogu tretirati sredstvom za modulaciju TRPA1 prema pronalasku, uključuju bol u vezi sa sledećim oboljenjima, koji je posledica sledećih oboljenja ili je uzrokovan sledećim ;;;4 ;oboljenjima: osteoartritis, poremećaji rotatorne manžetne, artritis (npr. reumatoidni artritis ili upalni artritis; videti Barton et al. Exp. Mol. Pathol. 2006, 81 (2), 166-170 ), fibromialgija, migrena i glavobolja (npr. klasterska glavobolja, sinusna glavobolja ili tenziona glavobolja; videti Goads by Curr. Pain Headache Reports 2004, 8, 393 ), sinusitis, oralni mukozitis, zubobolja, zubna trauma, ekstrakcija zuba, zubne infekcije, opekotine (Bolcskei et al., Pain 2005, 117 (3), 368-376), opekotine od sunca, dermatitis, psorijaza, ekcem, ubod insekata ili ubod, muskuloskeletni poremećaji, koštane frakture, ligamentozna uganuća, plantarni fasciitis, kostohondritis, tendonitis, burzitis, teniski lakat, bacački lakat, patelarni tendonitis, povreda ponovljenog istezanja, miofacijalni sindrom, napetost mišića, miozitis, poremećaj temporomandibularnog zgloba, amputacija, bol u donjim leđima, povreda kičmene moždine, bol u vratu, istegnuće vrata, grčevi mokraćne bešike, poremećaji Gl trakta, cistitis, intersticijalni cistitis, kolecistitis, infekcija urinarnog trakta, uretralni kolici, bubrežni kolici, faringitis, groznica, stomatitis, spoljni otitis, otitis media (Chan et al., Lancet , 2003), 361, 385), sindrom pečenja u ustima, mukozitis, bol u jednjaku, grčevi jednjaka, abdominalni poremećaji, gastroezofagealna refluksna bolest, pankreatitis, enteritis, poremećaj iritabilnog creva, inflamatorna bolest creva, Kronova bolest, ulcerativni kolitis, distenzija debelog creva, abdominalna konstrikcija, divertikulitis, crevni gasovi, hemoroidi, analne pukotine, anorektalni poremećaji, prostatitis, epididimitis, bol u testisima, proktitis, rektalni bol, porođaj, endometrioza, menstrualni grčevi, bol u karlici, vulvodinija, vaginitis, orolabijalne i genitalne infekcije (npr. herpes simplex), upala pluća, perikarditis, bol u grudima koji nisu srčani, kontuzije, abrazije, rez kože (Honore, P. i sar., J Pharmacal Exp Ther ., 2005, 314, 410-21), postoperativni bol, periferna neuropatija, centralna neuropatija, dijabetesna neuropatija, akutna herpetična neuralgija, postherpetična neuralgija, trigeminalna neuralgija, glosofaringealna neuralgija, atipična facijalna bol, gradikulopatija, neuropatija u vezi s virusom HIV, fizičko oštećenje živaca, kauzalgija, distrofija, išijas, cervikalna, torakalna ili lumbalna radikulopatija, brahijalna pleksopatija, lumbalna pleksopatija, neurodegenerativni poremećaji, ocipitalna neuralgija, interkostalna neuralgija, supraorbitalna neuralgija, sindrom karpalnog tunela, Mortonova neuroma, postmastektomijski sindrom, posttorakotomijski sindrom, postpolio sindrom, Gijen–Bareov sindrom, Rejnoov sindrom, spazam koronarne arterije (Princmetalova ili varijantna angina), visceralna hiperalgezija (Pomonis, JD et al. J. Pharmacal. Exp. Ther . 2003, 306, 387; Walker, KM et al., J. Pharmacal. Exp. Ther . 2003, 304 (1), 56-62), talamički bol, rak (npr. bol uzrokovan rakom, uključujući osteolitički sarkom, lečenje raka zračenjem ili hemoterapijom, ili lezije na živcima ili kostima u vezi s rakom (videti: Menendez, L. i dr., Neurosci. Lett. 2005, 393 (1), 70-73; Asai, H. et al., Pain ;;;4 ;2005, 117, 19-29), ili bol usled uništenja kostiju (videti, Ghilardi, JR et al., J. Neurosci . ;2005, 25, 3126-31)), infekcija, ili metaboličke bolesti. Pored toga, jedinjenja se mogu koristiti za lečenje indikacija bola kao što su visceralni bol, bol u oku, toplotni bol, bol u zubima, bol izazvan kapsaicinom (kao i druga simptomatska stanja izazvana kapsaicinom, kao što su kašalj, suze i bronhospazam). ;Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se primenjivati za lečenje svraba, koji može nastati iz različitih izvora, kao što su dermatološki ili inflamatorni poremećaji. ;Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se primenjivati za lečenje inflamatornih poremećaja, uključujući poremećaje izabrane iz grupe koja se sastoji od: bubrežnih ili hepatobilijarnih poremećaja, imunoloških poremećaja, reakcija lekova i nepoznatih/idiopatskih stanja. Upalni poremećaji koji se mogu lečiti inventivnim sredstvom uključuju, na primer, upalnu bolest creva (lBO), Kronovu bolest i ulcerativni kolitis (Geppetti, P. i sar., Br. J. Pharmacal. 2004, 141, 1313-20; Yiangou, Y. et al., Lancet2001, 357, 1338-39; Kimball, E.S. etal., Neurogastroenterol. Motif., 2004,16, 811), osteoarthritis (Szabo, A. et al., J. Pharmacal. Exp. Ther . 2005, 314, 111-119), psorijaza, psorijatični artritis, reumatoidni artritis, mijastenija gravis, multipla skleroza, skleroderma, glomerulonefritis, pankreatitis, inflamatorni hepatitis, astma, hronična opstruktivna plućna bolest, alergijski rinitis, uveitis i kardiovaskularne manifestacije zapaljenja, uključujući aterosklerozu, miokarditis, perikarditis i vaskulitis. ;Jedinjenja pronalaska se mogu primenjivati za lečenje poremećaja unutrašnjeg uha. Takvi poremećaji uključuju, na primer, hiperakuziju, tinitus, vestibularnu preosetljivost i epizodičnu vrtoglavicu. ;Na primer, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se primenjivati za lečenje traheobronhijalnih i dijafragmatskih disfunkcija, uključujući, na primer, astmu i alergijski povezane imune odgovore (Agopyan, N. et al., Am. J. Physiol. Lung Cell Mol. Physiol.2004, 286, L563-72; Agopyan, N. et al., Toxicol. Appl. Pharmacal. 2003, 192, 21-35), kašalj (npr. akutni ili hronični kašalj, ili kašalj uzrokovan iritacijom od gastroezofagealne refluksne bolesti; videti, Lalloo, U.G. et al., J. Appl. Physiol. 1995, 79(4), 1082-7), bronhospazam, hronična opstruktivna plućna bolest, hronični bronhitis, emfizem i štucanje (singultus). ;Jedinjenja pronalaska se mogu primenjivati za lečenje poremećaja gastrointestinalnog i urinarnog trakta, kao što su prekomerna aktivnost mokraćne bešike, inflamatorna hiperalgezija, visceralna hiperrefleksija mokraćne bešike, hemoragični cistitis (Dinis, P. et al., J Neurosci., 2004, 24, 11253-11263), intersticijalni cistitis (Sculptoreanu, A. et al., Neurosci Lett., 2005, 381, 42-46), upalna bolest prostate, prostatitis (Sanchez, M. et al., Eur J ;;;4 ;Pharmacal., 2005, 515, 20-27), mučnina, povraćanje, grčevi u crevima, nadutost creva, grčevi mokraćne bešike, urinarna hitnost, hitna defekacija i urgentna inkontinencija. ;Jedinjenja pronalaska se mogu primenjivati za lečenje poremećaja u vezi sa smanjenim protokom krvi do CNS ili hipoksijom CNS. Takvi poremećaji uključuju, na primer, traumu glave, povredu kičme, tromboembolijski ili hemoragijski moždani udar, prolazne ishemijske napade, cerebralni vazospazam, hipoglikemiju, srčani zastoj, status epilepticus, perinatalnu asfiksiju, Alchajmerovu bolest i Hantingtonovu bolest. ;Jedinjenja pronalaska se mogu primenjivati za lečenje drugih bolesti, poremećaja ili stanja posredovanih TRPA1 aktivnostima, kao što su: anksioznost; poremećaji učenja ili pamćenja; poremećaji u vezi s očima (kao što je glaukom, gubitak vida, povećan intraokularni pritisak i konjuktivitis); ćelavost (npr. stimuliranjem rasta kose); dijabetes (uključujući dijabetes otporan na insulin ili dijabetička stanja posredovana osetljivošću ili sekrecijom insulina); gojaznost (npr. potiskivanjem apetita); dispepsija; žučni kolici; bubrežni kolici; sindrom bolne mokraćne bešike; upaljeni jednjak; bolest gornjih disajnih puteva; urinarna inkontinencija; akutni cistitis; i envenomacije (kao što su ubodi morskih bića, zmijskih ugriza ili uboda ili ugriza insekata, uključujući meduze, paukove ili ubod raže). ;Jedinjenja pronalaska se daju za lečenje bola (uključujući, bez ograničenja, akutni, hronični, neuropatski i inflamatorni bol), artritisa, svraba, kašlja, astme ili inflamatorne bolesti creva. ;Opisan je postupak za lečenje neuropatskog bola ili inflamatornog bola koji sadrži korak davanja terapeutski efikasne količine jedinjenja prema Formuli II ispitaniku kom je to potrebno. ;U sledećem primeru izvođenja, pronalazak obezbeđuje jedinjenje formule II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za modulaciju aktivnosti TRPA1. ;U sledećem primeru izvođenja, pronalazak obezbeđuje jedinjenje formule II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u medicinskoj terapiji. ;Opisan je postupak za lečenje respiratornog poremećaja odabranog od hroničnog opstruktivnog plućnog poremećaja (COPD), astme, alergijskog rinitisa i bronhospazma, koji sadrži korak davanja terapeutski efikasne količine jedinjenja prema formuli II ispitaniku kom je to potrebno. ;U sledećem primeru izvođenja, pronalazak obezbeđuje jedinjenje formule II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za lečenje ili profilaksu respiratornog poremećaja. ;Opisan je postupak za lečenje respiratornog poremećaja kod sisara (npr. čoveka) koji obuhvata primenu jedinjenja formule II ili njegove farmaceutski prihvatljive soli na sisaru. ;;;4 ;Opisan je postupak za modulaciju aktivnosti TRPA1, koji uključuje dovođenje u kontakt TRPA1 i jedinjenja formule II ili njegovu so. ;U sledećem primeru izvođenja, pronalazak obezbeđuje jedinjenje formule II (npr. jedinjenje kao što je opisano u bilo kom od E1-E50, E1A-E33A, E1B-E24B, E1C-E29C, E1D-E26D, E1E-E33E, Tabela 1, Tabela 2 ili EE1-EE67 iznad) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za lečenje ili profilaksu bolesti ili stanja posredovanih TRPA1 aktivnošću. U okviru aspekata ovog primera izvođenja, bolest ili stanje je bol (uključujući, bez ograničenja, akutni, hronični, neuropatski i upalni bol), svrab, upalni poremećaj, poremećaj unutrašnjeg uha, groznica ili drugi poremećaj termoregulacije, traheobronhijalna ili dijafragmalna disfunkcija, poremećaj gastrointestinalnog ili urinarnog trakta, hronična opstruktivna bolest pluća, inkontinencija, ili poremećaj doveden u vezu sa smanjenim protokom krvi do CNS ili hipoksijom CNS. U okviru određenih aspekata ovog primera izvođenja, gde je bolest ili stanje bol (uključujući, bez ograničenja, akutni, hronični, neuropatski i inflamatorni bol), artritis, svrab, kašalj, astma, upalna bolest creva ili poremećaj unutrašnjeg uha. ;Opisan je postupak za lečenje bolesti ili stanja posredovanog aktivnošću TRPA1 kod sisara (npr. čoveka), koji se sastoji od davanja sisaru jedinjenja formule II ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. U okviru određenih aspekata, bolest ili stanje je bol (uključujući, bez ograničenja, akutni, hronični, neuropatski i upalni bol), svrab, upalni poremećaj, poremećaj unutrašnjeg uha, groznica ili drugi poremećaj termoregulacije, traheobronhijalna ili dijafragmalna disfunkcija, poremećaj gastrointestinalnog ili urinarnog trakta, hronična opstruktivna bolest pluća, inkontinencija, ili poremećaj doveden u vezu sa smanjenim protokom krvi do CNS ili hipoksijom CNS. U okviru određenih aspekata ovog primera izvođenja, bolest ili stanje je bol (uključujući, bez ograničenja, akutni, hronični, neuropatski i inflamatorni bol), artritis, svrab, kašalj, astma, upalna bolest creva ili poremećaj unutrašnjeg uha. ;U jednom aspektu, jedinjenja iz ovog pronalaska pokazuju iznenađujuće visoku stabilnost u in vivo farmakokinetskim (PK) ispitivanjima pacova u odnosu na srodna jedinjenja. Monofluorinacija, posebno na poziciji 4. prolinskog prstena, povećava stabilnost jedinjenja, tako da se jedinjenja ne pročišćavaju brzo iz krvi kao druga srodna jedinjenja. Na primer, monofluorirano jedinjenje na 3. poziciji prolina, (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[6-[6-(trifluorometil)-3-piridil] pirimidin \ t-4-il] metil] pirolidin-2-karboksamid, poseduje najveću stabilnost (najsporije čišćenje) u odnosu na srodne difluorisane, nefluorisane i 3-fluorisane supstance kao što je prikazano u nastavku: ; ;; Druga reprezentativna jedinjenja, srazmerna opsegu ovog pronalaska, pokazuju sličnu iznenađujuće povećanu PK stabilnost kao (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[6-[6-(trifluorometil)-3-piridil] pirimidin-4-il] metil] pirolidin-2-karboksamid, prikazanu u nastavku: ;;; ;;;; 1 ; ;;; 2 ; ;; KOMBINACIONA TERAPIJA ;Jedinjenja prema pronalasku mogu se korisno kombinovati sa jednim jedinjenjem ili više drugih jedinjenja iz ovog pronalaska ili sa jednim terapeutskim agensom ili više drugih terapeutskih agenasa, ili kao bilo koja njihova kombinacija, u lečenju bolesti i stanja posredovanih jonskim kanalima. Na primer, jedinjenje pronalaska može se primenjivati istovremeno, uzastopno ili odvojeno u kombinaciji sa drugim terapeutskim sredstvima, uključujući, bez ograničenja: ;● opijatske analgetike, npr. morfijum, heroin, kokain, oksimorfin, levorfanol, levalorfan, oksikodon, kodein, dihidrokodein, propoksifen, nalmefen, fentanil, hidrokodon, hidromorfon, meripidin, metadon, nalorfin, nalokson, naltrekson, buprenorfin, butorfanol, nalbufin i pentazocin; ;● neopijatski analgetici, npr. acetomenifen, salicilati (npr. aspirin); ;● nesteroidni antiinflamatorni lekovi (NSAID), npr. ibuprofen, naproksen, fenoprofen, ketoprofen, celekoksib, diklofenak, difluszinal, etodolak, fenbufen, fenoprofen, flufenizal, flurbiprofen, ibuprofen, indometacin, ketoprofen, ketorolak, meklofenaminska kiselina, mefenaminska kiselina, naproksen, nimesulid, nitroflurbiprofen, olsalazin, oksaprozin, fenilbutazon, piroksikam, sulfasalazin, sulindak, tolmetin i zomepirak; ;● antikonvulzivi, npr. karbamazepin, okskarbazepin, lamotrigin, valproat, topiramat, gabapentin i pregabalin; ;● antidepresivi, kao što su triciklični antidepresivi, npr. amitriptilin, klomipramin, despramin, imipramin i nortriptilin; ;● COX-2 selektivni inhibitori, npr. celekoksib, rofekoksib, parekoksib, valdekoksib, derakoksib, etorikoksib i lumirakoksib; ;● alfa-adrenergici, npr. doksazosin, tamsulozin, klonidin, gvanfacin, deksmetatomidin, modafinil i 4-amino-6,7-dimetoksi-2-(5-metansulfonamido-1,2,3,4-tetrahidroizohinol-2-il )-5-(2-piridil) hinazolin; ;● barbituratni sedativi, npr. amobarbital, aprobarbital, butabarbital, butabital, mefobarbital, metarbital, metoheksital, pentobarbital, fenobartital, sekobarbital, talbutal, teamilal i tiopental; ;● antagonist tahikinina (NK), posebno antagonist NK-3, NK-2 ili NK-1, npr. (R, 9R)-7-[3,5-bis(trifluorometil) benzil)]-8,9,10, 11-tetrahidro-9-metil-5-(4-metilfenil)-7H-[l, 4] diazocino [2,1-g][1,7]-naftiridin-6-13-dion (TAK-637) 5-[[2R, 3S)-2-[(1R)-1-[3,5-bis (trifluorometilfenil] etoksi-3-(4-fluorofenil)-4-morfolinil] metil]-1,2-dihidro-3H-1,2,4-triazol-3-on (MK-869), aprepitant, lanepitant, dapitant ili 3-[[2-metoksi-5-(trifluorometoksi) fenil]-metilamino]-2-fenilpiperidin (2S, 3S); ;● analgetici ugljenog katrana, posebno paracetamol; ;● inhibitori ponovnog preuzimanja serotonina, npr. paroksetin, sertralin, norfluoksetin (fluoksetin-dezmetil metabolit), metabolit demetilsertralin, 3 fluvoksamin, paroksetin, citalopram, metabolit citaloprama desmetilcitalopram, escitalopram, d, lfenfluramin, femoksetin, ipoksetin nefazodon, ceriklamin, trazodon i fluoksetin; ;● inhibitori ponovnog preuzimanja noradrenalina (norepinefrina), npr. maprotilin, lofepramin, mirtazepin, oksaprotilin, fezolamin, tomoksetin, mianserin, buproprion, metabolit buproprion hidroksibupropiona, nomifensin i viloksazin (Vivalan®)), posebno selektivni inhibitor ponovnog preuzimanja noradrenalina kao što je reboksetin, specifično (S, S)-reboksetin, i venlafaksin duloksetin neuroleptici sedativ/anksiolitici; ;● dvostruki inhibitori ponovnog preuzimanja serotonina i noradrenalina, kao što su venlafaksin, venlafaksin metabolit O-desmetilvenlafaksin, klomipramin, metabolit klomipramina desmetilklomipramin, duloksetin, milnacipran i imipramin; ;● inhibitori acetilkolinesteraze, kao što je donepezil; ;● 5-HT3 antagonisti, kao što je ondansetron; ;● antagonisti metabotropnog glutamatnog receptora (mGluR); ;● lokalni anestetici, kao što su meksiletin i lidokain; ;● kortikosteroid, kao što je deksametazon; ;● antiaritmici, npr. meksiletin i fenitoin; ;● muskarinski antagonisti, npr. tolterodin, propiverin, tropsijum t-hlorid, darifenacin, solifenacin, temiverin i ipratropijum; ;● kanabinoidi; ;● agonisti vaniloidnog receptora (npr. resinferatoksin) ili antagonisti (npr. kapsazepin); ;● sedativi, npr. glutetimid, meprobamat, metakvalon i dihloralfenazon; ;● anksiolitici, kao što su benzodiazepini, ;● antidepresivi, kao što su mirtazapin, ;● lokalna sredstva (npr. lidokain, kapsacin i resiniferotoksin); ;;;4 ;● relaksanti mišića kao što su benzodiazepini, baklofen, karisoprodol, hlorzoksazon, ciklobenzaprin, metokarbamol i orfrenadin; ;● antihistaminici ili antagonisti H1; ;● antagonisti NMDA receptora; ;● agonisti/antagonisti 5-HT receptora; ;● PDEV inhibitori; ;● Tramadol®; ;● holinergički (nikotink) analgetici; ;● alfa-2-delta ligandi; ;● antagonisti prostaglandina E2 podtipa; ;● antagonisti leukotriena B4; ;● inhibitori 5-lipoksigenaze; i ;● 5-HT3 antagonisti. ;U smislu ovog dokumenta, „kombinacija” se odnosi na bilo koju mešavinu ili permutaciju jednog ili više jedinjenja iz pronalaska i jednog ili više drugih jedinjenja iz ovog pronalaska ili jednog ili više dodatnih terapeutskih agenasa. Ukoliko kontekst ne ukazuje drugačije, „kombinacija” može uključivati istovremenu ili sekvencijalnu isporuku jedinjenja iz pronalaska sa jednim agensom ili više terapijskih agenasa. Ukoliko kontekst ne ukazuje drugačije, „kombinacija” može uključivati dozne oblike jedinjenja iz ovog pronalaska sa drugim terapeutskim sredstvom. Ukoliko kontekst ne ukazuje drugačije, „kombinacija” može uključivati puteve davanja spoja iz izuma sa drugim terapijskim sredstvom. Ukoliko kontekst ne ukazuje drugačije, „kombinacija” može uključivati formulacije jedinjenja iz ovog pronalaska sa drugim terapijskim sredstvom. Dozni oblici, putevi primene i farmaceutske kompozicije uključuju, bez ograničenja, ovdeopisane. ;U sledećem primeru izvođenja, dat je pronalazak u skladu s ranijim opisom. ;Opšta priprema jedinjenja formule II ;Startni materijali i reagensi koji se koriste u pripremi ovih jedinjenja uglavnom su dostupni kod komercijalnih dobavljača, kao što je Aldrich Chemical Co., ili se pripremaju prema postupcima poznatim stručnjacima u oblasti utvrđenim u referentnoj literaturi, kao što su: Fieser and Fieser's Reagents for Organic Synthesis; Wiley & Sons: New York, 1991, Volumes 1-15; Rodd's Chemistry of Carbon Compounds, Elsevier Science Publishers, 1989, Volumes 1-5 and Supplementals; and Organic Reactions, Wiley & Sons: New York, 1991, Volumes 1-40. ;Sledeće šeme sintetskih reakcija su samo ilustracija nekih postupaka kojima se mogu sintetizovati jedinjenja iz ovog pronalaska, i mogu se napraviti različite modifikacije ovih sintetskih reakcionih šema i biće predložene onima koji su verzirani u stanje tehnike, pozivajući se na objavljeni sadržaj u ovoj primeni. ;Polazni materijali i intermedijeri sintetskih reakcionih šema mogu se izolovati i pročistiti po želji koristeći konvencionalne tehnike, uključujući, bez ograničenja, filtraciju, destilaciju, kristalizaciju, kromatografiju i slično. Takvi materijali mogu se karakterisati konvencionalnim sredstvima, uključujući fizičke konstante i spektralne podatke. ;Ukoliko nije drugačije naznačeno, ovdeopisane reakcije su poželjno sprovedene u inertnoj atmosferi pod atmosferskim pritiskom pri temperaturama reakcije od oko-78° C do oko 150° C, poželjnije od oko 0° C do oko 125° C. i najpoželjnije i pogodnije na sobnoj (ili ambijentalnoj) temperaturi, npr. oko 20° C. ;Jedinjenja iz ovog pronalaska mogu se napraviti prema postupcima poznatim u struci. U jednom aspektu, jedinjenja prema pronalasku mogu biti načinjena kao što je prikazano u šemama 1–4. U šemama 1–4, varijabla A, B, R<1>, R<4>, R<z1>i R<5>imaju značenje u skladu s definicijom formule I ili II. R je neinterferirajuća grupa, a Hal predstavlja halogen. ;;; ;; Prema šemi 1, N-PG-supstituirana karboksilna kiselina, gde amin može biti zaštićen korišćenjem dobro poznatih zaštitnih grupa (PG) kao što je opisano u Protective Groups in Organic Synthesis" [T.W. Greene and P.G.M. Wuts, 3. izdanje, John Wiley i Sons, NY.1999 ], može reagovati sa aminom formule 2 da bi se dobio amid formule 3. Ova transformacija je dobro dokumentovana u hemijskoj literaturi i poznata stručnjacima. Nastavlja se u različitim uslovima reakcije, na primer, karboksilna kiselina i amin se mogu kombinovati u aprotičnom rastvaraču kao što je N, N-dimetilformamid i tretirati sa bilo kojim brojem peptidnih reagensa za spajanje, kao što je 2-(1H-7-azabenzotriazol-1)-yl-1,1,3,3-tetrametil uronij heksafluorofosfat metanaminij ili bromo-tris-pirolidino fosfoniumheksafluorofosfat. Veliki broj i broj N-PG-supstituisanih karboksilnih kiselina može se kupiti iz komercijalnih izvora. Primeri uključuju (2 S, 4 R)-1-(tert-butoksikarbonil)-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline, 1-(tert-butoksikarbonil)-2-metilazetidin-2-karboksilne kiseline, i (2 S, 4 S )-1-( tercbutoksikarbonil)-4-fluoropirolidin-2-karboksilna kiselina. Partner za kuplovanje amina formule 2 u šemi 1 može se kupiti ili napraviti u skladu s postupcima opisanim u šemi 3. Intermedijer formule 4 tada može biti napravljen različitim dobro utvrđenim postupcima. Na primer, intermedijer formule 3 može da se tretira hlorovodoničnom kiselinom, trifluorosirćetnom kiselinom ili drugim reagensom da se dobije intermedijer formule 4. ;Intermedijer formule 4 onda može da se kupluje sa sulfonil--hloridom supstituisanim R<1>pomoću poznatih postupaka dobijanja jedinjenja formule 1. Na primer, sulfonil-hlorid i amin se mogu kombinovati u aprotičnom rastvaraču, kao što je dihlorometan, i tretirati viškom baze, kao što je trietilamin ili kalijum-karbonat. Brojni sulfonil-hloridi mogu se dobiti iz komercijalnih izvora, uključujući benzensulfonil-hlorid, 4-fluorobenzensulfonil-hlorid, 3,4-dihlorobenzensulfonil-hlorid, piridin-3-sulfonil-hlorid, 2-hloropiridin-5-sulfonil-hlorid, 3-cijanobenzensulfonil-hlorid i 2-tiazolesulfonil hlorid. ;;; ;; Alternativno, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se naprave u skladu sa procesima koji su prikazani u šemi 2. Prema šemi 2, sulfonamidi formule 5 mogu se lako pripremiti prema dobropoznatim postupcima kombinovanjem sulfonil-hlorida koji sadrži R<1>sa aminokiselinama. Na primer, sulfonil-hlorid se može dodati u rastvor aminokiseline i organske baze, kao što je trietilamin u polarnom, aprotičnom rastvaraču, kao što je THF. ;Alternativno, reagensi se mogu kombinovati u umereno baznom rastvaraču, kao što je piridin. Veliki broj različitih aminokiselina može se nabaviti iz komercijalnih izvora. Intermedijer formule 5 može zatim reagovati sa aminom formule 2. Ova transformacija je dobro dokumentovana u hemijskoj literaturi i poznata stručnjacima. Nastavlja se u različitim uslovima reakcije, na primer, karboksilna kiselina i amin se mogu kombinovati u aprotičnom rastvaraču kao što je N, N-dimetilformamid i tretirati bilo kojim brojem peptidnih reagensa za spajanje, kao što je 2-(1H-7-azabenzotriazol-1)-yl-1,1,3,3-tetrametil uronijumheksafluorofosfat metanaminijum ili bromo-tris-pirolidino fosfonijumheksafluorofosfat. ;;; ;; Kao što je prikazano u šemi 3, intermedijeri opšte strukture 2 mogu se sintetizovati dobro utvrđenim postupcima. Na primer, veza između centralnog aromatičnog prstena i R<5>može se kreirati pomoću brojnih efikasnih postupaka kuplovanja katalizovanog metalom, kao postupak koji je postao poznati pod nazivom Suzukijevo kuplovanje. Prema ovoj šemi, bilo koja od dve grupe koje se mogu povezati može biti boronska kiselina ili estar ili halogen/pseudo-halogen. Drugi partner u kuplovanju bi tada bio halogen/pseudo-halogen ili boronska kiselina/estar. Uslovi za sprovođenje ovog spajanja uključuju zagrevanje boronske kiseline i aril-halida u smeši polarnog rastvarača, kao što je dioksan/voda u prisustvu organske ili neorganske baze, kao što je trietilamin ili kalijum-karbonat i upotrebom paladijum-katalizatora, kao što je tetrakis [trifenilfosfin] paladijum ili paladijum (II) acetat. ;Brojni polazni materijali formule 2a i 2b mogu se komercijalno kupiti. Na primer, 2-hloro-6-(trifluorometoksi)-4-piridinmetanamin, 2-bromo-4-piridinmetanamin hidrohlorid, (3,6-dihloropiridazin-4-il) metanamin, 4-aminometil-6-hloropirimidin, (3-aminometilfenil) boronske kiseline hidrohlorid, 5-(aminometil)-2-fluorofenilboronska kiselina, HCl, [5-(aminometil)-2-metilfenil] boronska kiselina, (5-bromopiridin-3-il) metanamin, 3-(aminometil)-5-bromopiridin-2-ol, (5-brom-2-hloro-piridin-3-il)-metanamin hidrohlorid, (4-bromopiridin-2-il) metanamin, (4-bromo-6-(trifluorometil) piridin-2-il) metanamin, 2-bromo-4-piridinetilamin, (2-bromo-5-hloropiridin-4-il) metanamin. ; ;; Kao što je prikazano u šemi 4, jedinjenja iz ovog pronalaska u kojima je B pirimidinil mogu se dobiti poznatim postupcima za sintezu pirimidina. Na primer, mogu se dobiti postupkom navedenim u šemi 4 u kojem arilketoester reaguje sa amidinom ili odgovarajućim ekvivalentom koji daje 4-arilpirimidinone, u kom R<Z1>i R<5>imaju ovdeopisane vrednosti za jedinjenja formule I i II. Ovaj intermedijer bi zatim mogao da se hloriše pod utvrđenim uslovima, kao što je zagrevanje u fosfor-oksihloridu. Hlorid se zatim može pretvoriti u nitril nizom poznatih postupaka i zatim reducirati u aminometilnu grupu. Na primer, hloropirimidin se može zagrevati sa kalijum-cijanidom u polarnom rastvaraču, kao što je DMSO da bi se dobio cijanopirimidin. Alternativno, hloropirimidin se može tretirati sa cinkcijanidom i katalitičkom količinom katalizatora prelaznog metala, kao što je tetrakis[trifenilfosfin]paladijum u polarnom rastvaraču, kao što je N-metilpirolidinon ili THF. Nitril se zatim može smanjiti otapanjem u polarnom rastvaraču, kao što je etanol i tretirati katalitičkom količinom metalnog katalizatora, kao što je paladijum na ugljenu i mućkati u atmosferi vodonika ili pod pritiskom, na primer 60 psi. ;;PRIMERI ;Iako su ovde prikazani i opisani određeni primeri izvođenja, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu da se pripreme korišćenjem odgovarajućih polaznih materijala prema postupcima koji su ovde opšte opisani i/ili postupcima koje su dostupne stručnjaku. ;Intermedijari i konačna jedinjenja su prečišćena fleš hromatografijom i/ili preparativnom HPLC reverzne faze (tečna hromatografija visokih performansi) i/ili superkritičnom tečnom hromatografijom. Osim ako nije drugačije navedeno, fleš hromatografija je izvedena korišćenjem prethodno upakovanih patrona silikagela iz bilo ISCO ili SiliCycle na ISCO CombiFlash<®>instrumentu za hromatografiju (Teledyne Isco, Inc.). Reverzna faza preparativne HPLC je izvedena pomoću (1) Polaris C-18 5 µM kolone (50 mm x 21 mm) ili (2) XBridge Prep C-18 OBD 5 µM koloneu (19 mm x 150 mm). Hromatografija sa superkritičnom tečnošću je izvršena pomoću zapakovanih kolona Chiral Technologies, Chiralpak AD, Chiralpak AS, Chiralpak IA, Chiralpak IB, Chiralpak IC, Chiralcel OD, ili Chiralcel OJ sa dimenzijama kolone kao što su (1) 4,6 cm x 5 cm, 3 µM, (2) 4,6 cm x 5 cm, 5 µM, ili (3) 15 cm x 21,2 mm, 5 µM. ;Masena spektrometrija (MS) je izvedena pomoću (1) Sciex 15 masenog spektrometra u ES režimu ili (2) Shimadzu LCMS 2020 masenog spektrometra u ESI režimu. Podaci o masenim spektrima obično samo ukazuju na matične jone, osim ako nije drugačije navedeno. Podaci o MS ili HRMS dati su za određeni intermedijer ili jedinjenje. gde je naznačeno. ;Spektroskopija nuklearne magnetne rezonance (NMR) izvedena je pomoću (1) NMR spektrometra Bruker AV III 300, (2) NMR spektrometra Bruker AV III 400 ili (3) NMR spektrometra Bruker AV III 500, i upućuje na tetrametilsilan. Podaci o NMR dati su za određeni intermedijer ili jedinjenje. gde je naznačeno. ;Sve reakcije koje uključuju reagense osetljive na vazduh sprovedene su u inertnoj atmosferi. Reagensi su korišćeni u stanju u kom su primljeni od komercijalnih dobavljača, osim ako nije drugačije navedeno. ;Primer 1: Priprema (S)-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-metil-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida. ;;; ;; Korak br. 1: Priprema (S)-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline. ;;; ;; Smeša (S)-2-metilpirrolidin-2-karboksilna kiselina (0,1 g, 0,77 mmol), 4-fluorobenzen-1-sulfonl-hlorid (0,16 g, 0,81 mmol) i 10 N NaOH (1,5 ml, 15 mmol) u THF (1,5 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 12 h. Smeša je razređena pomoću EtOAc, acidifikovana pomoću 3 N HCl (pH 2-3) i odvojena. Vodeni sloj je ekstrahovan pomoću EtOAc (2x). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (2x), osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani za dobijanje sirove (S)-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline u obliku bele čvrste materije, koja se koristi u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. ;Korak br. 2: Priprema (S)-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-metil-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida. ; ;; Smeša sirove (S)-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (0,043 g, 0,15 mmol), (6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metanamin (0,046 mg, 0,18 mmol), EDC (0,057 mg, 0,3 mmol), HOAt (0,042 mg, 0,3 mmol) i Et3N (0,063 ml, 0,45 mmol) u DMF (1,5 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 48 h. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana EtOAc (2x). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani. Dobijeni ostatak je prečišćen reverznom faznom HPLC dajući naslovno jedinjenje (37 mg, 9%, dva koraka):<1>(400 MHz, DMSO−d6) δ 9,47 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 9,29 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 8,78 (dd, J = 8,2, 1,7 Hz, 1H), 8,62 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 8,25 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,02−7,93 (m, 2H), 7,48−7,39 (m, 2H), 4,61 (dd, J = 17,4, 6,3 Hz, 1H), 4,41 (dd, J = 17,4, 5,4 Hz, 1H), 3,67−3,58 (m, 1H), 3,38−3,31 (m, 1H), 2,22−2,13 (m, 1H), 2,06−1,95 (m, 1H), 1,94−1,80 (m, 2H), 1,50 (s, 3H). ;Primer 2: Priprema (S)-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-metil-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)azetidin-2-karboksamida. ;;; ;; Korak br.1: Priprema tert-butil 2-metil-2-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metilkarbamoil)azetidin-1-karboksilata. ;;; ;; Smeša sirove 1-(tert-butoksikarbonil)-2-metilazetidin-2-karboksilne kiseline (0,1 g, 0,51 mmol), (6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metanamin (0,13 mg, 0,51 mmol), iPr2NEt (0,17 ml, 0,98 mmol), PyAOP (0,29 mg, 0,54 mmol) i 4-DMAP (0,006 mg, 0,05 mmol) u DMF (3 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Smeša je isprana zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3i slanog rastvora, a zatim ekstrahovana pomoću EtOAc (2x). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4), filtrirani, propušteni kroz sloj silika gela, isprani EtOAc i koncentrovani radi dobijanja sirovog tert-butil 2-metil-2-((6- ;;;1 ;(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metilkarbamoil)azetidin-1-karboksilata, koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. ;Korak br. 2: Priprema 2-metil-2-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metilkarbamoil)azetidinijum-hlorida. ;;; ;; Rastvoru sirovog tert-butil 2-metil-2-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metilkarbamoil)azetidin-1-karboksilata (0,22 g, 0,49 mmol), u CH2Cl2(2 ml) dodato je 4 N HCl u dioksanu (1 ml, 4 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom radi dobijanja 2-metil-2-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metilkarbamoil)azetidinijum-hlorida u obliku sirove soli, koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. ;Korak br. 3: Priprema (S)-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-metil-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)azetidin-2-karboksamida. ;;; ;; Smeša sirovog 2-metil-2-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metilkarbamoil)azetidinijum-hlorida (0,085 g, 0,22 mmol), 4-fluorobenzen-1-sulfonilhlorida (0,047 mg, 0,24 mmol) i Et3N (0,15 ml, 1,1 mmol) u CH2Cl2(2 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 12 h. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana CH2Cl2(2x). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani. Dobijeni ostatak je prečišćen hiralnom SFC dajući naslovno jedinjenje (22 mg) kao slabije eluiran izomer:<1>NMR (400 MHz, DMSO−d6) δ 9,48 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 9,32 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 8,79 (dd, J = 8,2, 1,7 Hz, 1H), 8,74 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 8,18 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 8,03−7,95 (m, 2H), 7,54−7,43 (m, 2H), 4,66 (dd, J = 17,4, 6,4 Hz, 1H), 4,49 (dd, J = 17,4, 5,4 Hz, 1H), 3,97−3,86 (m, 1H), 3,82−3,74 (m, 1H), 2,10−1,98 (m, 1H), 1,54 (s, 3H). ;Primer 3: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida. ;;;2 ; ;; Korak br. 1: Priprema (2S,4R)-tert-butil 4-fluoro-2-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilata. ;;; ;; (2S,4R)-tert-butil 4-fluoro-2-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilat je pripremljen prema proceduri opisanoj u primeru 2, korak br. 1, pomoću (2S, 4R)-1-(tert-butoksikarbonil)-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline. ;Korak br. 2: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-2-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metilkarbamoil)pirolidinijum-hlorida. ;;; ;; (2S,4R)-4-fluoro-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamid je pripremljen prema proceduri opisanoj u primeru 2, korak br.2. ;Korak br. 3: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida. ;;; ;; Naslovno jedinjenje je pripremljeno prema proceduri opisanoj u primeru 2, korak br.3 (29 mg):<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,48 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 9,30 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 9,11 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 8,79 (dd, J = 8,3, 1,7 Hz, 1H), 8,23 (s, 1H), 8,08 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 8,05−7,98 (m, 2H), 7,47 (t, J = 8,8 Hz, 2H), 5,21 (d, J = 52,4 Hz, 1H), 4,53 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 4,25 (dd, J = 9,8, 7,2 Hz, 1H), 3,79−3,60 (m, 2H), 2,46−2,37 (m, 1H), 2,25−2,04 (m, 1H). ;Primer 4: Priprema (2S,4S)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida. ;;; ;; Naslovno jedinjenje je pripremljeno prema proceduri opisanoj u primeru 2, korak br.1 pomoću (2S, 4R)-1-(tert-butoksikarbonil)-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline i prema primeru 2, koraci br. 2 i 3 (37 mg):<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,43 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 9,28 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 8,89 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 8,75 (dd, J = 8,1, 1,8 Hz, 1H), 8,14−8,01 (m, 4H), 7,55−7,43 (m, 2H), 5,26 (dt, J = 53,3, 3,7 Hz, 1H), 4,61−4,44 (m, 2H), 4,39 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 3,81 (dd, J = 22,4, 12,2 Hz, 1H), 3,45 (ddd, J = 36,0, 12,3, 3,8 Hz, 1H), 2,37−2,24 (m, 1H), 2,07−1,85 (m, 1H). ;Primer 5: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida. ;;; ;; Naslovno jedinjenje je pripremljeno prema proceduri opisanoj u primeru 2, korak br.1 pomoću (2S, 4R)-1-(tert-butoksikarbonil)-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline i (6-(4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metanamina i prema primeru 2, koraci br. 2 i 3 (107 mg):<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,25 (s, 1H), 9,11 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 8,40 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 8,15 (s, 1H), 8,07−7,99 (m, 2H), 7,88 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,47 (t, J = 8,6 Hz, 2H), 5,21 (d, J = 52,4 Hz, 1H), 4,51 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 4,31−4,22 (m, 1H), 3,78−3,59 (m, 2H), 2,48−2,38 (m, 1H), 2,23−2,05 (m, 1H). ;;;4 ;Primer 6: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(3-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida. ;;; ;; Naslovno jedinjenje je pripremljeno prema proceduri opisanoj u primeru 2, korak br.1 pomoću (2S, 4R)-1-(tert-butoksikarbonil)-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline i (6-(4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metanamina i prema primeru 2, korak br. 2 i primer 2, korak br.3 pomoću 3-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorid (108 mg):<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,25 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 9,13 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 8,40 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 8,15 (s, 1H), 7,88 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,85−7,77 (m, 2H), 7,73−7,65 (m, 1H), 7,63−7,56 (m, 1H), 5,22 (d, J = 52,3 Hz, 1H), 4,59−4,45 (m, 2H), 4,31 (dd, J = 9,9, 7,1 Hz, 1H), 3,83−3,58 (m, 2H), 2,48−2,39 (m, 1H), 2,23−2,05 (m, 1H). ;Primer 7: Priprema (R)-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-(hidroksimetil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida. ;;; ;; Korak br.1: Priprema (3R,7aS)-3-(trihlorometil)-tetrahidropirolo[1,2−c]oksazol-1(3H)-ona. ;;; ;; Rastvor (2S)-pirolidin-2-karboksilna kiselina (5,8 g, 50,38 mmol), 2,2,2-trihloroacetaldehid (12,4 g, 84,13 mmol) u hloroformu (100 ml) mešan je 18 h na 75° C u uljanoj kupki. Dobijena smeša je isprana vodom (2x) i fiziološkim rastvorom, osušena (Na2SO4) i koncentrisana pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je zatim rekristalizovan iz etanola radi dobijanja naslovnog jedinjenja (6,2 g, 50%) u obliku bele čvrste materije. ;Korak br. 2: Priprema (3R,7aR)-7a-(benziloksimetil)-3-(trihlorometil)-tetrahidropirolo[1,2−c]oksazol-1(3H)-ona. ; ;; n-BuLi (36 ml, 90 mmol) dodat je kap po kap rastvoru diizopropilamina (9,1 g, 89,93 mmol,) u THF (60 ml) uz mešanje na -78° C u azotu, a reakciona smeša je mešana dodatnih 15 minuta na 0° C, Dobijeni rastvor je dodavan kap po kap u rastvor (3R,7aS)-3-(trihlorometil)-heksahidropirolo[1,2−c][1,3]oksazol-1-on (14,6 g, 59,71 mmol) u THF (100 ml) tokom 30 minuta na -78° C, pa mešana dodatnih 30 minuta na -78° C, Zatim je [(hlorometoksi)metil]benzen (14,1 g, 90,03 mmol) dodat kap po kap. Dobijeni rastvot je mešan dodatna 2 sata na -40° C i ugašen dodavanjem vode (150 ml), ekstrahovan EtOAc (3 ml x 200 ml) i razdvojen. Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela, eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (1:10) dajući naslovno jedinjenje (10 g, 38%) kao žuto ulje. ;Korak br.3: Priprema (R)-metil 2-(benziloksimetil)pirolidin-2-karboksilata. ;;; ;; Natrijum-metoksid (890 mg, 16,47 mmol) je dodavan deo po deo rastvoru (3R,7aR)-7a-[(benziloksi)metil]-3-(trihlorometil)-heksahidropirolo[1,2−c][1,3]oksazol-1-on (10 g, 27,42 mmol) u metanolu (100 ml). Dobijeni rastvor je mešan 30 min na sobnoj temperaturi i acetil-hlorid (38 ml, 532,50 mmol) je dodat uz mešanje tokom 1 h na 0° C. Dobijenom rastvoru je dozvoljeno da reaguje tokom dodatna 24 h na sobnoj temperaturi i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren EtOAc (50 ml) i zasićen vodenim rastvorom natrijum-karbonata (100 ml), pa ekstrahovan pomoću EtOAc (3x100 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (100 ml), osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (5,85 g, 86%) u obliku svetlocrvenog ulja. ;Korak br. 4: Priprema (R)-metil 2-(benzilooksimetil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksilata. ; ;; 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorid (6,8 g, 34,94 mmol) dodat je kap po kap u rastvoru metil (2R)-2-[(benziloksi)metil]pirolidin-2-karboksilata (5,8 g, 23,26 mmol), DIPEA (9 g, 69,64 mmol), 4-dimetilaminopiridin (280 mg, 2,29 mmol) u CH2Cl2(150 ml) uz mešanje na 0° C. Dobijeni rastvor je mešan 18 h na sobnoj temperaturi i razređen CH2Cl2(150 ml), ispran 2 N HCl (2x) i slanim rastvorom. Smeša je osušena (Na2SO4), filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (8,3 g, 88%) u obliku žutog ulja. ;Korak br.5: Priprema (R)-metil 1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-(hidroksimetil)pirolidin-2-karboksilata. ;;; ;; Smeša metil (2R)-2-[(benziloksi)metil]-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilata (510 mg, 1,3 mmol), 10% paladijum ugljenik (100 mg) u metanolu (30 ml) mešana je 18h na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (400 mg) kao svetložuto ulje koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. ;Korak br. 6: Priprema (R)-metil-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-(hidroksimetil)pirolidin-2-karboksilne kiseline. ;;; ;; Smeša metil (2R)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-(hidroksimetil)pirolidin-2-karboksilata (40 mg, 0,13 mmol), LiOH (30 mg, 1,25 mmol) u metanolu (1 ml), vodi (1 ml) mešana je 18 h na sobnoj temperaturi. Rastvor je acidifikovan (pH∼5) pomoću 2 N HCl i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan EtOAc (3x10 ml), a organski slojevi su kombinovani, osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (40 mg) kao svetložuti sirup, koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. ;Korak br. 7: Priprema (2R)-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-(hidroksimetil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida. ;;; ;; Rastvor (2R)-1-[(4-fluorobenzen-sulfonil]-2-(hidroksimetil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (40 mg, 0,13 mmol), HATU (62,7 mg, 0,16 mmol), DIPEA (57 mg, 0,44 mmol) i [6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il)]pirimidin-4-il]methanamin hidrohlorid (32 mg, 0,11 mmol) u DMF (2 ml) mešana je tokom 2 sata na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen vodom (10 ml), ekstrahovan EtOAc (3x). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (3x), osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je (70 mg) prečišćen preparativnom HPLC visoke pH radi dobijanja naslovnog jedinjenja (24,7 mg) u obliku bele čvrste materije.<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,47 (s, 1H), 9,28 (s, 1H), 8,78 (d, J = 8 Hz, 1H), 8,57−8,56 (m, 1H), 8,25 (s, 1H), 8,08 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,96−7,92 (m, 2H), 7,38 (t, J = 8,8 Hz, 2H), 5,20−5,17 (m, 1H), 4,59−4,57 (m, 1H), 4,47−4,46 (m, 1H), 4,06−4,03 (m, 1H), 3,87−3,85 (m, 1H), 3,53−3,52 (m, 1H), 3,24−3,22 (m, 1H), 2,34−2,33 (m, 1H), 2,04−1,90 (m, 3H). ;Primer 8: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-((5-fluoro-6'-(trifluorometil)-2,3'-bipiridin-4-il)metil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida. ;;; ;; Korak br.1: Priprema 5-fluoro-6'-(trifluorometil)-2,3'-bipiridin-4-karbaldehida. ;;; ;; Smeša 2-bromo-5-fluoropiridin-4-karbaldehida (300 mg, 1,47 mmol), [6-(trifluorometil)piridin-3-il]boronska kiselina (420 mg, 2,20 mmol), Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(60 mg, 0,07 mmol), Cs2CO3(1,44 g, 0,09 mmol) u vodi (2ml) i 1,4-dioksanu (6 ml) mešana je tokom noći na 90° C u uljanoj kupki u atmosferi azota. Dobijena smeša je ugašena vodom (20 ml), ekstrahovana CH2Cl2(3 x) i razdvojena. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (50 ml), osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela pomoću EtOAc/petroleum-etra (12:88) dajući naslovno jedinjenje (110 mg) u obliku svetložute čvrste materije. ;Korak br.2: Priprema (5-fluoro-6'-(trifluorometil)-2,3'-bipiridin-4-il)metanamin. ;;; ;; Smeša 5-fluoro-2-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-karbaldehid (363 mg, 1,34 mmol), NH2OH.HCl (187 mg, 2,69 mmol) u etanolu (15 ml) i vodi (3 ml) mešana je 30 minuta na 25° C. Zatim je dodata koncentrovana HCl (0,08 ml, 36%), Pd/C (300 mg, 10%), a reakciona smeša je mešana tokom 50 minuta na 25° C u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Dobijena smeša je rastvorena pomoću H2O (20 ml) i prilagođena na pH ∼7-8 pomoću 5 N NaHCO3, ekstrahovana pomoću EtOAc (3x). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (50 ml), osušeni (Na2SO4)i koncentrovani pod sniženim pritiskom, dajući sirovo naslovno jedinjenje (300 mg) kao svetložuto ulje koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. ;Korak br. 3: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-((5-fluoro-6'-(trifluorometil)-2,3'-bipiridin-4-il)metil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida. ;;; ;; Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzene)sulfonil]pirolidin-2-karboksilna kiselina (129 mg, 0,44 mmol), HATU (169 mg, 0,44 mmol), DIPEA (143 mg, 1,11 mmol), [5-fluoro-2-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-il]metanamin (100 mg, 0,37 mmol) u DMF (2 ml) mešana je tokom noći na 25° C. Reakciona smeša je ugašena vodom (20 ml), ekstrahovana dihlormetanom (3x). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 ml), osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (6:4). Sirovi proizvod je zatim rekristalizovan iz metanola radi dobijanja naslovnog jedinjenja (67 mg) u obliku beličaste čvrste materije.<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9,08 (s, 1H), 8,61 (d, J = 3 Hz, 1H), 8,43 (d, J = 6 Hz, 1H), 8,02−7,92 (m, 4H), 7,38−7,32 (m, 2H), 5,16 (d, J = 54 Hz, 1H), 4,65 (s, 2H), 4,31−4,26 (m, 1H), 3,86−3,68 (m, 2H).2,54−2,52 (m, 1H), 2,32−2,06 (m, 1H). ;Primer 9: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-((5'-fluoro-6-(trifluorometil)-3,4'-bipiridin-2'-il)metil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida. ;;; ;; Korak br.1: Priprema 2-hloro-5'-fluoro-6-(trifluorometil)-3,4'-bipiridina ;;; ;; Smeša 2-hloro-5-fluoro-4-jodopiridina (2,57 g, 9,98 mmol), [6-(trifluorometil)piridin-3-il]boronska kiselina (2,00 g, 10,48 mmol), Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(407,63 mg, 0,50 mmol), natrijum-karbonata (2,12 g, 20,00 mmol) u vodi (10 ml) i toluenu (25 ml) mešana je tokom noći na 90° C u uljanoj kupki u atmosferi azota. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, razređena vodom (100 ml), ekstrahovana dihlormetanom (2 x 100 ml) i razdvojema. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (200 ml), osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela, eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (1:5) dajući naslovno jedinjenje (2,31 g,) kao bezbojno ulje. ;Korak br.2: Priprema 5'-fluoro-6-(trifluorometil)-3,4'-bipiridin-2'-karbonitrila. ;;; ;; Smeša 2-hloro-5-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridina (1 g, 3,62 mmol), Pd2(dba)3.CHCl3(187 mg, 0,18 mmol), Zn(CN)2(254 mg, 2,16 mmol), DPPF (200 mg, 0,36 mmol) i Zn (24 mg, 0,37 mmol) u DMA (10 ml) ozračena mikrotalasnim zračenjem 1 h na 125° C u atmosferi azota. Reakcija je zatim ugašena vodom (100 ml) i ekstrahovana EtOAc (3 x 100 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (100 ml), osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (1:5) dajući naslovno jedinjenje (860 mg) u obliku žute čvrste materije. ;Korak br.3: Priprema (5-fluoro-6'-(trifluorometil)-3,4'-bipiridin-2'-il)metanamina. ;;; ;; Smeša 5-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-karbonitrila (250 mg, 0,94 mmol), Ranei nikla (100 mg, 1,17 mmol) u metanolu (10 ml) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom radi dobijanja sirovog naslovnog jedinjenja (250 mg) kao smeđeg ulje koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. ;Korak br. 4: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-((5'-fluoro-6-(trifluorometil)-3,4'-bipiridin-2'-il)metil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida. ;;; ;; Smeša [5-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metanamina (141 mg, 0,52 mmol), HATU (231 mg, 0,61 mmol), DIPEA (157 mg, 1,21 mmol), (3R,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzene)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (110 mg, 0,38 mmol) u DMF (5 ml) mešana je preko noći na 25° C. Reakciona smeša je ugašena vodom (20 ml), ekstrahovana CH2Cl2(3 x 20 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 ml), osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (32,4 mg) u obliku bele čvrste materije.<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9,41 (s, 1H), 8,72 (d, J = 9,9 Hz, 2H), 8,58 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 8,28 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 8,04−7,99 (m, 2H), 7,86 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,37−7,31 (m, 2H), 5,16 (d, J = 51,9 Hz, 1H), 4,74−4,56 (m, 2H), 4,33−4,27 (m, 1H), 3,86−3,67 (m, 2H), 2,54−2,52 (m, 1H), 2,30−2,12 (m, 1H). ;Primer 10: Priprema (2S,4R)-N-((6-(4-ciklopropilfenil)pirimidin-4-il)metil)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida. ;;;1 ; ;; Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzene)sulfonil]pirolidin-2-karboksilna kiselina (155,2 mg, 0,53 mmol), HATU (253,3 mg, 0,67 mmol), DIPEA (172 mg, 1,33 mmol), [6-(4-ciklopropilfenil)pirimidin-4-il]metanamin (100 mg, 0,44 mmol) u DMF (5 ml) mešana je tokom noći na 25° C. Reakciona smeša je ugašena vodom (20 ml), ekstrahovana CH2Cl2(3x) i razdvojena. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 ml), osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (36,4 mg) u obliku bele čvrste materije.<1>H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8,94 (s, 1H), 8,04 (d, J = 8 Hz, 3H), 7,94−7,90 (m, 2H), 7,26−7,21 (m, 2H), 7,05 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 5,06 (d, J = 52 Hz, 1H), 4,48 (dd, J = 17,6, 8,8 Hz, 2H), 4,23−4,18 (m, 1H), 3,76−3,63 (m, 2H), 2,43−2,39 (m, 1H), 2,17−2,04 (m, 1H), 1,86−1,81 (m, 1H), 0,92−0,90 (m, 2H), 0,65−0,63 (m, 2H). ;Primer 11: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(4-(trifluorometil)piperidin-1-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida. ;;; ;; Korak br.1: Priprema 4-hloro-6-(4-(trifluorometil)piperidin-1-il)pirimidina. ;;; ;; Smeša 4,6-dihloropirimidina (2 g, 13,42 mmol), DIPEA (0,65 ml, 3,93 mmol), 4-(trifluorometil)piperidin (9,74 g, 63,60 mmol) u DMF (20 ml) mešana je 3 h na 25° C. Reakcija je zatim ugašena vodom (100 ml) i ekstrahovana EtOAc (3 x 100 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (3 xl), osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (3:7) dajući naslovno jedinjenje (3,4 g) u obliku bele čvrste materije. ;Korak br.2: Priprema 6-(4-(trifluorometil)piperidin-1-il)pirimidin-4-karbonitrila. ;;;2 ; ;; Smeša 4-hloro-6-[4-(trifluorometil)piperidin-1-il]pirimidina (2,6 g, 9,79 mmol), Pd2(dba)3.CHCl3(506 mg, 0,49 mmol), Zn(CN)2(686 mg, 5,84 mmol), DPPF (540 mg, 0,97 mmol) i Zn (64 mg, 0,98 mmol) u DMA (26 ml) ozračena mikrotalasnim zračenjem 1 h na 125° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je zatim ugašena vodom (100 ml) i ekstrahovana EtOAc (3 x 100 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (3 xl), osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela pomoću EtOAc/petroleum-etra (35:65) dajući naslovno jedinjenje (3,4 g) u obliku svetložute čvrste materije. ;Korak br.3: Priprema (6-(4-(trifluorometil)piperidin-1-il)pirimidin-4-il)metanamina ;;; ;; Smeša 6-[4-(trifluorometil)piperidin-1-il]pirimidin-4-karbonitrila (500 mg, 1,95 mmol), 10% Pa/C (500 mg), konc. HCl (0,2 ml) un metanolu(10 ml) mešana je 20 minuta na 25° C u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom radi dobijanja sirovog naslovnog jedinjenja (500 mg) kao ljubičasto ulje koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. ;Korak br. 4: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(4-(trifluorometil)piperidin-1-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida. ;;; ;; Smeša [6-[4-(trifluorometil)piridin-1-il]pirimidin-4-il]metanamina (178.7 mg, 0.69 mmol), (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (200 mg, 0,69 mmol), HOBT (102 mg, 0,75 mmol), EDC.HCl (213 mg, 1,11 mmol) i DIPEA (117,2 mg, 0,91 mmol) u DMF (5 ml) mešana je tokom noći na 25° C. Reakciona smeša je ugašena vodom (20 ml), ekstrahovana EtOAc (3x20 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 ml), osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem dihlormetanom/metanolom (85:15) radi dobijanja sirovog proizvoda (101 mg), koji je zatim prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (45,5 mg) u obliku bele čvrste materije.<1>H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8,42 (s, 1H), 8,04−8,01 (m, 2H), 7,39−7,35 (m, 2H), 7,05 (s, 1H), 5,15 (d, J = 39 Hz, 1H), 4,74 (m, 2H), 4,44−4,27 (m, 3H), 3,84−3,73 (m, 2H), 3,00−2,94 (m, 2H), 2,56−2,51 (m, 2H), 2,40−2,11 (m, 1H), 1,88−1,82 (m, 2H), 1,50−1,43 (m, 2H). ;Primer 12: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(4-(trifluorometil)cikloheks-1-enil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida. ;;; ;; Korak br. 1: Priprema [6-[4-(trifluorometil)cikloheks-1-en-1-il]pirimidin-4-il]metanola. ;;; ;; NaBH4(76 mg, 2,01 mmol) dodat je deo po deo rastvoru etil 6-[4-(trifluorometil)cikloheks-1-en-1-il]pirimidin-4-karboksilata (300 mg, 1,00 mmol) u metanolu (10 ml) uz mešanje. Dobijena smeša je mešana 2 h na 25°C i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (1:1) dajući naslovno jedinjenje (254 mg) u obliku bele čvrste materije. ;Korak br. 2: Priprema 2-([6-[4-(trifluorometil)cikloheks-1-en-1-il]pirimidin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona. ;;; ;; DIAD (235 mg, 1,16 mmol) dodat je kap po kap rastvoru [6-[4-(trifluorometil)cikloheks-1-en-1-il]pirimidin-4-il]metanola (150 mg, 0,58 mmol), 2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (94 mg, 0,64 mmol), PPh3(305 mg, 1,16 mmol) u THF (10 ml) na 0° C uz mešanje. Dobijena smeša je mešana 2 h na 25° C, zatim rastvorena vodom (20 ml), ekstrahovana dihlormetanom (3 x20 ml). Organski slojevi su kombinovani i isprani slanim rastvorom (20 ml), osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću ;;;4 ;EtOAc/petroleum-etra (1:1) dajući naslovno jedinjenje (425 mg) u obliku bele čvrste materije. ;Korak br. 3: Priprema [6-[4-(trifluorometil)cikloheks-1-en-1-il]pirimidin-4-il]metanamina. ;;; ;; Smeša 2-([6-[4-(trifluorometil)cikloheks-1-en-1-il]pirimidin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (425 mg, 1,10 mmol), hidrazin-hidrata (80%) (0,5 ml) u metanolu (10 ml) mešana je 3 h na 25° C i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u EtOAc (3 ml), a Čvrste supstance su filtrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom radi dobijanja sirovog naslovnog jedinjenja (210 mg) kao bela čvrsta supstanca koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. ;Korak br. 4: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(4-(trifluorometil)cikloheks-1-enil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida. ;;; ;; Smeša [6-[4-(trifluorometil) cikloheks-1-en-1-il]pirimidin-4-il]metanamin (284 mg, 1,10 mmol), HATU (465,8 mg, 1,23 mmol), DIPEA (317 mg, 2,45 mmol) u DMF (5 ml) mešana 10 minuta na 25° C. Zatim je (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilna kiselina (210 mg, 0,72 mmol) dodata, a dobijen smeša je mešana tokom noći na 25° C. Reakciona smeša je zatim ugašena vodom (10 ml) i ekstrahovana dihlormetanom (3 x 10 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (2 x 10 ml), osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod (120 mg) je prečišćen preparativnom fleš HPLC tehnikom u sledećim uslovima (IntelFlash-1): kolona, C18 silikagel; mobilna faza, CH3CN: H2O od 10% do 65% tokom 30 minuta; Detektor, UV 254 nm radi dobijanja naslovnog jedinjenja (25,8 mg) u obliku bele čvrste supstance.<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8,99 (s, 1H), 8,04 (q, J = 6 Hz, 2H), 7,84 (s, 1H), 7,38 (t, J = 9 Hz, 2H), 7,15 (s, 1H), 5,16 (d, J = 51 Hz, 1H), 4,88−4,86 (d, J = 6 Hz, 2H), 4,31 (t, J = 9 Hz, 1H), 3,86−3,72 (m, 2H), 2,84 (m, 1H), 2,59−2,47 (m, 4H), 2,32−2,14 (m, 3H), 1,67−1,61 (m, 1H). ;Primer 13: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-((1s,4R)-4-(trifluorometil)cikloheksil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida i ((2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-((1r,4S)-4-(trifluorometil)cikloheksil)-pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida. ;;; ;; Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[4-(trifluorometil)cikloheks-1-en-1-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida (180 mg, 0,34 mmol), 10% Pd(OH)2/C (30 mg) u metanolu (20 ml) mešana je tokom 15 minuta na 25° C u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak (260 mg) je prečišćen preparativnom fleš HPLC tehnikom u sledećim uslovima: kolona, C18 silikagel; mobilna faza, CH3CN: H2O od 10% do 55% tokom 30 minuta; Detektor, UV 254 nm radi dobijanja smeše cis/trans-izomeri (120 mg). Izomeri su razdvojeni preparativnom hiralnom HPLC u sledećim uslovima (Prep-HPLC-004): kolona, Chiralpak IA, 2*25 cm, 5 um; mobilna faza, Hex i IPA (sadrži 30,0% IPA u 20 min); detektor, UV 254/220 nm.
Brže eluirani izomer (33,6 mg) proizvoljno dodeljen kao transizomer (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[(1r,4S)-4-(trifluorometil)cikloheksil]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida:<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8,97 (s, 1H), 8,04 (q, J = 6 Hz, 2H), 7,71 (s, 1H), 7,37 (t, J = 9 Hz, 2H), 5,16 (d, J = 54 Hz, 1H), 4,54 (s, 2H), 4,32 (t, J = 9 Hz, 1H), 3,86−3,72 (m, 2H), 2,72 (t, J = 3 Hz, 1H), 2,51 (m, 1H), 2,27−2,04 (m, 6H), 1,74−1,53 (m, 2H), 1,50−1,44 (m, 2H).
Sporije eluirani izomer (18 mg) proizvoljno dodeljen kao cisizomer (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[(1s,4R)-4-(trifluorometil)cikloheksil]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida:<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9,02 (s, 1H), 8,01 (q, J = 6 Hz, 2H), 7,74 (s, 1H), 7,36 (t, J = 9 Hz, 2H), 5,15 (d, J = 54 Hz, 1H), 4,56 (d, J = 3 Hz, 2H), 4,27 (t, J = 9 Hz, 1H), 3,86−3,72 (m, 2H), 3,03−3,00 (m, 1H), 2,53−2,51 (m, 1H), 2,35−2,06 (m, 5H), 1,88−1,61 (m, 6H).
Primer 14: Priprema (S)-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-metil-N-((6-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema etil 6-hidroksipirimidin-4-karboksilata.
Trietilamin (19 g, 187,8 mmol) dodat je kap po kap smeši 1,4-dietil but-2-inedioat (25 g, 146,92 mmol), metanimidamid-hidrohlorid (11,83 g, 146,93 mmol), CH3CN (500 ml). Reakciona smeša je mešana 2,5 sata na 80 °C u uljanoj kupki, a zatim ohlađena na 5° C. Sirovi proizvodi su prikupljeni filtracijom i rekristalizovani od CH3CN radi dobijanja naslovnog jedinjenja (18,0 g, 73%) u obliku bele čvrste supstance.
Korak br.2: Priprema etil 6-hloropirimidin-4-karboksilata.
Smeši etil 6-hidroksipirimidin-4-karboksilata (5,0 g, 29,74 mmol), EtOAc (150 ml) i N,N-dimetilformamida (0,2 ml) dodat je (COCl)2(11,3 g, 89,03 mmol) kap po kap uz mešanje. Reakciona smeša je mešana tokom noći na 75° C. Reakciona smeša je ohlađena, a čvrste supstance su filtrirane. Filtrat je koncentrovan i prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (10:1–5:1) dajući naslovno jedinjenje (2,2 g, 40%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br.3: Priprema etil 6-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]pirimidin-4-karboksilata.
Smeša 2-(tributilstanil)-5-(trifluorometil)piridin (8,4 g, 19,26 mmol), Pd(PPh3)2Cl2(558 mg, 0,79 mmol), CuI (168 mg, 0,88 mmol) i etil 6-hloropirimidin-4-karboksilata (900 mg, 4,82 mmol) u DMF (72 ml) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 30 minuta na 60° C u atmosferi azota. Reakcija je razređena EtOAc (300 ml), a zatim isprana slanim rastvorom (2x), osušena iznad Na2SO4i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (10/1) dajući naslovno jedinjenje (300 mg, 21%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.4: Priprema [6-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]pirimidin-4-il]metanola.
NaBH4(55 mg, 1,45 mmol) dodat je smeši etil 6-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]pirimidin-4-karboksilata (290 mg, 0,98 mmol) u THF (30 ml) deo po deo na 0° C – 5° C. Reakciona smeša je mešana 0,5 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim prekinuta dodatkom vode (50ml) na 0° C – 5° C, smeša je ekstrahovana EtOAc (3x50 ml), isprana zasićenim rastvorom soli (3x30ml), osušena iznad anhidrovanog Na2SO4 i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum etra (5:1) dajući naslovno jedinjenje (216 mg, 87%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema 2-([6-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]pirimidin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona.
DIAD (326 mg, 1,61 mmol) dodat je kap po kap smeši [6-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]pirimidin-4-il]metanola (206 mg, 0,81 mmol), THF (20 ml), PPh3(423 mg, 1,61 mmol) i 2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (142 mg, 0,97 mmol) uz mešanje na 0° C. Reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum etra (20:1) dajući naslovno jedinjenje (300 mg, 97%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.6: Priprema [6-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]pirimidin-4-il]metanamina.
Smeša 2-([6-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]pirimidin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (290 mg, 0,75 mmol), metanol (15 ml) i hidrazin-hidrata (472 mg, 9,43 mmol) mešana je 4 sati na 40 °C. Smeša je koncentrovana, razređena vodom (20ml), ekstrahovana pomoću EtOAc (3x30 ml). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4, koncentrovani radi dobijanja naslovnog jedinjenja (360 mg) u obliku zelene čvrste supstance, koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 7: Priprema (2S)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-metil-N-([6-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S)-1-[(4-fluorobenzene)sulfonil]-2-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (190 mg, 0,66 mmol), N,N-dimetilformamid (5 ml), DIPEA (213 mg, 1,65 mmol, 3,00 ekviv), HATU (314 mg, 0,83 mmol) i [6-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]pirimidin-4-il]metanamin (140 mg, 0,55 mmol) mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (7,6 mg, 3%) u obliku bele čvrste materije.<1>H-NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 9,35 (s, 1H), 9,17 (s, 1H), 8,69 (d, J = 3 Hz, 1H), 8,60−8,57 (m, 1H), 8,53−8,50 (m, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,01−7,96 (m, 2H), 7,50−7,44 (m, 2H), 4,58−4,55 (m, 2H), 3,70−3,50 (m, 2H), 2,31−2,26 (m, 1H), 2,06−1,95 (m, 3H), 1,58 (s, 3H), 1,40−1,20 (m, 1H).
Primer 15: Priprema (2S,4R)-N-([3-hloro-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilna kiselina (48 mg, 0,16 mmol), DIPEA (63 mg, 0,49 mmol), DMF (3 ml), HATU (94 mg, 0,25 mmol) i [3-hloro-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metanamin (46 mg, 0,17 mmol) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je direktno prečišćena preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (40 mg, 44%) u obliku bele čvrste materije.<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9,16 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,33−8,37 (m, 1H), 7,94−8,02 (m, 3H), 7,32−7,38 (m, 2H), 5,15 (d, J = 52,5 Hz, 1H), 4,39 (s, 2H), 4,25−4,19 (m, 1H), 3,85−3,67 (m, 2H), 2,53−2,42 (m, 1H), 2,29−2,10 (m, 1H).
Primer 16: Priprema (2S,4R)-N-([3-hloro-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-pirolidin-2-karboksilna kiselina (100 mg, 0,34 mmol), DMF (2 ml), DIPEA (132 mg, 1.02 mmol), HATU (194 mg, 0,51 mmol) i [3-hloro-1-[4-(trifluorometil)feniil]-1H-pirazol-4-il]metanamin (187 mg, 0,68 mmol) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je direktno prečišćena preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (38 mg, 20%) u obliku bele čvrste materije.<1>H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8,45 (s, 1H), 8,00−7,79 (m, 6H), 7,42−7,31 (m, 2H), 5,14 (d, J = 52 Hz, 1H), 4,37 (s, 2H), 4,30−4,19 (m, 1H), 3,87−3,69 (m, 3H), 2,52−2,43 (m, 1H), 2,25−2,08 (m, 1H).
Primer 17: Priprema (2S,4R)-N-([3-ciklopropil-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 2-(ciklopropankarbonil)-3-etoksiprop-2-enenitrila.
Smeša 3-ciklopropil-3-oksopropanenitril (5,5 g, 50,40 mmol), (dietoksimetoksi)etana (74,7 g, 504,05 mmol), nhidrid sirćetne kiseline (60 ml, 634,74 mmol) mešana je 2 h na 150° C. Smeša je ohlađena, koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je zatim rekristalizovan iz etanola radi dobijanja naslovnog jedinjenja (6 g, 72%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 3-ciklopropil-1H-pirazol-4-karbonitrila.
Smeša 2-(ciklopropankarbonil)-3-etoksiprop-2-enenitrila (2 g, 12,11 mmol), hidrazinhidrata (85%) (6,1 g, 121,85 mmol) i etanola (20 ml) je mešana 10 min na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je zatim rekristalizovan iz toluena radi dobijanja naslovnog jedinjenja (1 g, 62%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema 3-ciklopropil-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-karbonitrila.
Smeša 3-ciklopropil-1H-pirazol-4-karbonitrila (1 g, 7,51 mmol), 5-bromo-2-(trifluorometil)piridin (2,88 g, 12,74 mmol), CuI (143 mg, 0,75 mmol), L-proline (173 mg, 1,50 mmol), kalijum-karbonata (2,28 g, 16,50 mmol) i DMSO (50 ml) mešana je 12 h na 100° C u atmosferi azota. Smeša je ohlađena, razređena EtOAc (200 ml), isprana slanim rastvorom (3 x 100 ml), osušena iznad anhidrovanog Na2SO4 i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (50/1) dajući naslovno jedinjenje (1,1 g, 53%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema [3-ciklopropil-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol--4-il]metanamina.
Smeša 3-ciklopropil-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-karbonitrila (1 g, 3,59 mmol), metanola (50 ml) i Ranei nikla (500 mg, 5,84 mmol) mešana je 15 minuta na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (900 mg) u obliku bele čvrste materije koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 5: Priprema (2S,4R)-N-([3-ciklopropil-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-pirolidin-2-karboksilna kiselina (80 mg, 0,27 mmol), DMF (5 ml), DIPEA (106,8 mg, 0.83 mmol), HATU (156,6 mg, 0,41 mmol) i 3-ciklopropil-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-ilmetanamina (77,55
1
mg, 0,27 mmol) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (50 mg, 33%) u obliku bele čvrste materije.<1>H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,14 (s, 1H), 8,66 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,32 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 8,02−7,96 (m, 3H), 7,74 (m, 1H), 5,27−5,10 (m, 1H), 4,33−4,30 (m, 2H), 4,19−4,14 (m, 1H), 3,71−3,67 (m, 1H), 3,62−3,58 (m, 1H), 2,51 (m, 1H), 2,42−2,29 (m, 1H), 2,18−1,94 (m, 1H), 0,96−0,90 (m, 4H).
Primer 18: Priprema (2S,4R)-N-([3-hloro-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)-1-[(4-cijanobenzen)sulfonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema (2S,4R)-1-[(4-cijanobenzene)sulfonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline
Smeša (2S,4R)-4-fluoropirrolidin-2-karboksilna kiselina (79 mg, 0,59 mmol), tetrahidrofurana (5 ml), vode (2 ml), natrijum-karbonata (121 mg, 1,13 mmol) i 4-cijanobenzen-1-sulfonil-hlorida (100 mg, 0,50 mmol) mešana je 1 h na 0° C. Smeša je razređena vodom i ekstrahovana eterom (30ml). Vodeni slojevi su acidifikovani pomoću 3 N HCl to pH= 2-3, ekstrahovani EtOAc (3 x 50ml). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4, koncentrovani radi dobijanja naslovnog jedinjenja (100 mg, 68%) u obliku bele čvrste supstance, koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 2: Priprema (2S,4R)-N-([3-hloro-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)-1-[(4-cijanobenzen)sulfonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-1-[(4-cijanobenzen)sulfonil]-4-pirolidin-2-karboksilna kiselina (180 mg, 0,60 mmol), N,N-dimetilformamida (2 ml), DIPEA (234 mg, 1.81 mmol), HATU (234 mg, 0,62 mmol) i [3-hloro-1-[4-(trifluorometil)feniil]-1H-pirazol-4-il]metanamin (234 mg,
2
0,85 mmol) mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (85,1 mg, 25%) u obliku bele čvrste materije.<1>H-NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 8,74 (m, 1H), 8,60 (s, 1H), 8,12−8,04 (m, 4H), 7,99−7,88 (m, 4H), 5,20 (d, J = 51,9 Hz, 1H), 4,21−4,17 (m, 3H), 3,85−3,55 (m, 2H), 2,77−2,33 (m, 1H), 2,19−1,98 (m, 1H).
Primer 19: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-metil-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema 1-tert-butil 2-metil (2S,4R)-4-fluoropirolidin-1,2-dikarboksilata.
Smeša (2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilna kiselina (2 g, 8,57 mmol), kalijum-karbonat (5,9 g, 42,69 mmol), THF (80 ml) i CH3I (6,1 g, 42,98 mmol) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela, eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (1:5) dajući naslovno jedinjenje (800 mg, 38%) kao bezbojno ulje.
Korak br. 2: Priprema 1-tert-butil 2-metil (4R)-4-fluoro-2-metilpirolidin-1,2-dikarboksilata.
Rastvor od 1 M LiHMDS (4,85 ml, 4.,85 mmol) dodavan je kap po kap u smešu 1-tert-butil 2-metil (2S,4R)-4-fluoropirolidin-1,2-dikarboksilata (400 mg, 1,62 mmol) u THF (20 ml) uz mešanje na -78° C u atmosferi azota. Reakcioni rastvor je mešan 30 minuta na -78° C. U njemu je kap po kap dodavan CH3I (690 mg, 4,86 mmol) na -78° C. Reakciona smeša je mešana 12 sati na sobnoj temperaturi, ugašena vodom (20 ml), ekstrahovana EtOAc (3 x 30ml), osušena iznad anhidrovanog Na2SO4 i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela, eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (1:5) dajući naslovno jedinjenje (360 mg, 85%) kao bezbojno ulje.
Korak br. 3: Priprema hidrohlorida 4R-4-fluoro-2-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline.
Smeša 1-tert-butil 2-metil (4R)-4-fluoro-2-metilpirolidin-1,2-dikarboksilata (360 mg, 1,38 mmol) i HCl u dioksanu (10 ml, 1mol/L) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom radi dobijanja sirovog proizvoda (315 mg) kao svetložuta čvrsta supstanca koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 4: Priprema metil (4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-metilpirolidin-2-karboksilata.
Smeša 4R-4-fluoro-2-metilpirolidin-2-karboksilata hidrohlorida (315 mg, 1,60 mmol), trietilamina (485 mg, 4,80 mmol), dihlorometana (20 ml) i 4-fluorobenzen-1-sulfonil hlorida (310 mg, 1,60 mmol) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je razređena dihlormetanom(100 ml), isprana slanim rastvorom (3 x 20 ml), osušena iznad Na2SO4i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela, eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (1:4) dajući naslovno jedinjenje (380 mg,) kao bezbojno ulje, koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 5: Priprema metil (4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline.
Smeša metil (4R)-4-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-metilpirolidin-2-karboksilata (380 mg, 1,19 mmol), LiOH (58 mg, 2,42 mmol) u metanolu (8 ml), vodi (2 ml) mešana je na 12 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana, razređena u vodi (20 ml), ekstrahovana eterom (3 x 20 ml). Vodeni slojevi su acidifikovani pomoću 3 N HCl (pH 2-3), ekstrahovani EtOAc (3 x 50ml), osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4 i koncentrovani radi dobijanja naslovnog jedinjenja (260 mg, 72%) u obliku žutog ulja, koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
4
Korak br. 6: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-metil-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-metilpirolidin-2-karboksilna kiselina (125 mg, 0,41 mmol), DMF (4 ml), HATU (228 mg, 0.60 mmol), DIPEA (206 mg, 1.59 mmol) i [6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (104 mg, 0,36 mmol) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen vodom (20 ml), ekstrahovan EtOAc (3 x 50 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (1:1 do 2:1).
Sporije eluirani izomer (72,7 mg mg) dodeljen je prema potenciji kao (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-metil-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamid:<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9,50 (s, 1H), 9,20 (s,1H), 8,83 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,06−7,98 (m, 3H), 7,37 (t, J = 17,4 Hz, 2H), 5,26 (d, J = 51 Hz, 1H), 4,80 (d, J = 15 Hz, 1H), 4,54 (d, J = 17,4 Hz, 1H), 4,19−4,07 (m, 1H), 3,76−3,60 (m, 1H), 2,76−2,64 (m, 1H), 2,33−2,14 (m, 1H), 1,61(s, 3H).
Primer 20: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-metil-N-((6-(4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-metilpirolidin-2-karboksilna kiselina (125 mg, 0,41 mmol), DMF (4 ml), HATU (234 mg, 0.62 mmol), DIPEA (212 mg, 1.64 mmol) i [6-[4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (106 mg, 0,37 mmol) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razređena vodom (20 ml), ekstrahovana EtOAc (3 x 50ml), isprana slanim rastvorom (3 x 20 ml), osušena iznad Na2SO4i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (1:1).
Brže eluirani izomer (24,8 mg) (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-metil-N-((6-(4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamid:<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9,19 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 8,45 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 8,34 (s, 1H), 8,05−8,01 (m, 2H), 7,77 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,32 (t, J = 8,7 Hz, 2H), 5,30 (d, J = 51,9 Hz, 1H), 4,71−4,51 (m, 2H), 3,94−3,90 (m, 1H), 3,82 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 2,72−2,34 (m, 2H), 1,82 (s, 3H).
Primer 21: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(4-(trifluorometoksi)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 4-hloro-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidina.
Smeša 4,6-dihloropirimidina (2,17 g, 14,57 mmol), [4-(trifluorometoksi)fenil]boronska kiselina (1 g, 4,86 mmol), Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (731 mg, 1,00 mmol), kalijum-karbonata (5 g, 36,18 mmol), dioksana (40 ml) i vode (4 ml) mešana je 12 sati na 100° C u atmosferi azota. Smeša je razblažena EtOAc (150ml), isprana slanim rastvorom (3x), osušena i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (1:50) dajući naslovno jedinjenje (1,1 g, 82%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-karbonitrila.
Smeša 4-hloro-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidina (820 mg, 2,99 mmol), Zn(CN)2(421 mg, 3,58 mmol), Pd(PPh3)4(347 mg, 0,30 mmol), DMF (6 ml) mešana je 9 sati na 100° C u atmosferi azota. Reakcija je ohlađena, razblažena vodom (30 ml) i ekstrahovana EtOAc (3 x 50ml). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (1:50) dajući naslovno jedinjenje (320 mg, 40%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema (6-(4-(trifluorometoksi)fenil)pirimidin-4-il)metanamin hidrohlorida.
Smeša 6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-karbonitrila (160 mg, 0,60 mmol), etanola (10 ml), koncentrovanog rastvora HCl (0,02 ml), 10% paladijuma na ugljenu (100 mg) mešana je 10 minuta na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan radi dobijanja sirovog proizvoda (200 mg) u obliku čvrste materije koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 4: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(4-(trifluorometoksi)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-pirolidin-2-karboksilna kiselina (150 mg, 0,51 mmol), DMF (2 ml), DIPEA (263 mg, 2.03 mmol), HATU (294 mg, 0,77 mmol) i [6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-il]metanamin (200 mg, 0,74 mmol) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (51 mg, 13%) u obliku bele čvrste materije.<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9,15 (s, 1H), 8,41 (d, J = 8,7 Hz, 6H), 8,25 (s, 1H), 8,08−8,03 (m, 2H), 7,40−7,34 (m, 4H), 5,17 (d, J = 51,6 Hz, 1H), 4,63 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 4,37−4,31 (m, 1H), 3,88−3,75 (m, 2H), 2,61−2,48 (m, 1H), 2,35−2,11 (m, 1H).
Primer 22: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((2-metil-6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 4-hloro-2-metil-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidina.
Smeša 4,6-dihloro-2-metilpirimidin (1 g, 6,13 mmol), [6-(trifluorometil)piridin-3-il]boronske kiseline (229 mg, 1,20 mmol), kalijum-karbonata (2,07 g, 14,98 mmol), dioksana (50 ml), vode (2 ml) i Pd(dppf)Cl2(320 mg, 0,44 mmol) ozračena mikrotalasnim zračenjem 3 h na 100° C u atmosferi azota. Smeša je razređena EtOAc (150 ml), isprana slanim rastvorom (3 x 50 ml), osušena iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (1:10) dajući naslovno jedinjenje (1,1 g, 66%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema 2-metil-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-karbonitrila.
Smeša 4-hloro-2-metil-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin (300 mg, 1,10 mmol), DMF (5 ml), Zn(CN)2(128,7 mg, 1,10 mmol), dppf (60,9 mg, 0,11 mmol) i Pd2(dba)3CHCl3(113,9 mg, 0,11 mmol) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 3 h na 120° C u atmosferi azota. Smeša je razređena EtOAc (100 ml), isprana slanim rastvorom (3 x), osušena iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (1:10) dajući naslovno jedinjenje (250 mg, 86%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema [2-metil-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin-hlorovodonika.
Smeša 2-metil-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-karbonitrila (250 mg, 0,94 mmol), etanola (20 ml), koncentrovanog rastvora HCl (0,2 ml), 10% paladijuma na ugljenu (200 mg) mešana je 5 minuta na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan radi dobijanja sirovog proizvoda (200 mg) u obliku crne čvrste materije koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 4: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((2-metil-6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-pirolidin-2-karboksilna kiselina (107,7 mg, 0,37 mmol), DMF (5 ml), DIPEA (144,4 mg, 1,12 mmol), HATU (212,8 mg, 0,56 mmol) i [2-metil-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin-hlorovodonika (112 mg, 0,37 mmol) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (32,9 mg, 16%) u obliku bele čvrste materije.<1>H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,46 (s, 1H), 8,69 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,94−7,91 (m, 3H), 7,89 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,28−7,23 (m, 1H), 5,09 (d, J = 52,2 Hz, 1H), 4,94−4,89 (m, 1H), 4,50−4,45 (m, 1H), 4,37−4,31 (m, 1H), 3,96−3,62 (m, 2H), 2,83 (s, 3H), 2,64−2,54 (m, 1H), 2,34−1,52 (m, 1H).
Primer 23: Priprema (2S,4R)-N-((6-(6-ciklopropilpiridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 2-ciklopropil-5-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina.
Smeša 4,4,5,5-tetrametil-2-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3,2-dioksaborolan (2,7 g, 10,63 mmol), Pd(dppf)Cl2(519 mg, 0,71 mmol), KOAc (1,39 g, 14,16 mmol), 1,4-dioksana (100 ml) i 5-bromo-2-ciklopropilpiridina (1,4 g, 7,07 mmol) mešana je 6 sati na 90° C u atmosferi azota. Smeša je koncentrovana fleš hromatografijom i prečišćena na koloni silika gela, eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (10/1) dajući naslovno jedinjenje (1,5 g, 87%) kao smeđe ulje.
Korak br.2: Priprema 6-(6-ciklopropilpiridin-3-il)pirimidin-4-karboksilne kiseline.
Smeša 2-ciklopropil-5-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin (1,5 g, 6,12 mmol), etil 6-hloropirimidin-4-karboksilat (1,3 g, 6,97 mmol), Pd(PPh3)4(1,04 g, 0,90 mmol), K3PO4(3,18 g, 14,98 mmol), 1,4-dioksan (100 ml) i voda (10 ml) mešana je tokom noći na 65° C u atmosferi azota. Smeša je koncentrovana, razređena vodom (50 ml), acidifikovana 3 N HCl (pH 2-3), ekstrahovana pomoću EtOAc (3 x 100 ml). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4, koncentrovani radi dobijanja naslovnog jedinjenja (2,6 g) u obliku smeđe čvrste supstance, koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 3: Priprema metil 6-(6-ciklopropilpiridin-3-il)pirimidin-4-karboksilne kiseline.
Smeša 6-(6-ciklopropilpiridin-3-il)pirimidin-4-karboksilne kiseline (2,6 g, 10,78 mmol), metanola (60 ml, 1,48 mol), koncentrovana H2SO4(0,5 ml, 98%) mešana je tokom noći na 70° C. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, rastvorena u EtOAc (150 ml), oprana zasićenim rastvorom NaHCO3(3 x 30ml), osušena iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovana radi dobijanja naslovnog jedinjenja (310 mg) u obliku smeđe čvrste supstance, koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br.4: Priprema [6-(6-ciklopropilpiridin-3-il)pirimidin-4-il]metanola.
NaBH4(136 mg, 3,69 mmol) dodat je rastvoru 6-(6-ciklopropilpiridin-3-il)pirimidin-4-karboksilata (310 mg, 1,21 mmol) i metanola (10 ml) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana 30 minuta i ugašena vodom (20 ml), ekstrahovana EtOAc (3 x 30 ml), isprana slanim rastvorom (3 x 20 ml), osušena iznad anhidrovanog Na2SO4 i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću dihlormetana/metanola (10/1) dajući naslovno jedinjenje (230 mg, 83%) u obliku smeđe čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema 2-[[6-(6-ciklopropilpiridin-3-il)pirimidin-4-il]metil]-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona.
DIAD (266 mg, 1,32 mmol) dodat je kap po kap smeši [6-(6-ciklopropilpiridin-3-il)pirimidin-4-il]metanola (100 mg, 0,44 mmol), 2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (98 mg, 0,67 mmol), PPh3(346 mg, 1,32 mmol) i THF (10 ml) uz mešanje na 0° C. Reakciona smeša je mešana 5 h na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, a ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (1/1) dajući naslovno jedinjenje (102 mg, 65%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.6: Priprema [6-(6-ciklopropilpiridin-3-il)pirimidin-4-il]metamina
Smeša 2-[[6-(6-ciklopropilpiridin-3-il)pirimidin-4-il]metil]-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (102 mg, 0,29 mmol), metanola (20 ml) i hidrazin-hidrata (140 mg, 80%) mešana je 5 sati na 40 °C. Dobijena smeša je koncentrovana, razređena 1 N HCl (20ml), isprana EtOAc (30ml). Vodeni sloj je bazifikovan pomoću 3 N NaOH (pH∼8-9), ekstrahovan EtOAc (3 x 50ml). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani radi dobijanja sirovog jedinjenja (35 mg, 54%) u obliku žute čvrste supstance, koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br.7: Priprema (2S,4R)-N-((6-(6-ciklopropilpiridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-pirolidin-2-karboksilna kiselina (52 mg, 0,18 mmol), DMF (5 ml), DIPEA (38,7 mg, 0.30 mmol), HATU (85,5 mg, 0,22 mmol) i [6-(6-ciklopropilpiridin-3-il)pirimidin-4-il]metamina (35 mg, 0,15 mmol) mešana je tokom noći na sobnoj temperaturi. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (16,5 mg, 21%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,21 (s, 2H), 9,39 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,96−7,91 (m, 3H), 7,64 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,25 (t, J = 3,9 Hz, 3H), 5,09 (d, J = 51,9 Hz, 1H), 4,89−4,81 (m, 1H), 4,59−4,52 (m, 1H), 4,34 (t, J = 9 Hz, 1H), 3,98−3,63 (m, 2H), 2,66−2,52 (m, 1H), 2,37−2,17 (m, 2H), 1,14−1,05 (m, 4H).
Primer 24: Priprema (2S,4R)-1-(5-hlorotiofen-2-ilsulfonil)-4-fluoro-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
1
Naslovno jedinjenje je pripremljeno prema proceduri opisanoj u primeru 2, korak br.1 pomoću (2S,4R)-1-(tert-butoksikarbonil)-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline i (6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamina i prema primeru 2, korak br. 2 i primer 2, korak br. 3 pomoću 5-hlorotiofen-2-sulfonil-hlorid (50,9 mg) u obliku svetložute čvrste materije.<1>H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,46 (s, 1H), 9,30 (s, 1H), 9,12 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 8,80−8,76 (m, 1H), 8,13 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 7,78 (s, 1H), 7,40 (s, 1H), 5,27 (d, J = 51 Hz, 1H), 4,52 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 4,32−4,26 (m, 1H), 3,86−3,75 (m, 1H), 3,70 (s, 1H), 2,59−2,47 (m, 1H), 2,29−2,06 (m, 1H).
Primer 25: Priprema (2S,4R)-1-(3,4-difluorofenilsulfonil)-4-fluoro-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Naslovno jedinjenje je pripremljeno prema proceduri opisanoj u primeru 2, korak br.1 pomoću (2S,4R)-1-(tert-butoksikarbonil)-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline i (6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metanamina i prema primeru 2, korak br. 2 i primer 2, korak br. 3 pomoću 3,4-difluorobenzen-1-sulfonil-hlorid u obliku svetložute čvrste materije.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,52 (s, 1H), 9,28 (s, 1H), 8,70 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,83−7,68 (m, 3H), 7,61−7,58 (m, 1H), 7,42−7,33 (m, 1H), 5,11 (d, J = 51,6 Hz, 1H), 4,99−4,92 (m, 1H), 4,62−4,55 (m, 1H), 4,35 (t, J = 9 Hz, 1H), 3,95−3,64 (m, 2H), 2,65−2,57 (m, 1H), 2,37−2,02 (m, 1H).
Primer 26: Priprema (2S,4R)-1-(3,4-difluorofenilsulfonil)-4-fluoro-N-((6-(4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
2
Naslovno jedinjenje je pripremljeno prema proceduri opisanoj u primeru 2, korak br.1 pomoću (2S,4R)-1-(tert-butoksikarbonil)-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline i (6-(4-(trifluorometil)feniil)pirimidin-4-il)metanamina i prema primeru 2, korak br. 2 i 3 pomoću 3,4-difluorobenzen-1-sulfonil-hlorid u obliku bele čvrste materije.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,29 (s, 1H), 8,33 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 8,08 (s, 1H), 7,82−7,61 (m, 5H), 7,41−7,33 (m, 1H), 5,11 (d, J = 51,9 Hz, 1H), 4,95−4,88 (m, 1H), 4,71−4,65 (m, 1H), 4,33 (dd, J = 7,4, 9,9 Hz, 1H), 3,94−3,69 (m, 2H), 2,67−2,53 (m, 1H), 2,40−2,23 (m, 1H).
Primer 27: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(5-fluoropiridin-3-ilsulfonil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Naslovno jedinjenje je pripremljeno prema proceduri opisanoj u primeru 2, korak br.1 pomoću (2S,4R)-1-(tert-butoksikarbonil)-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline i (6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metanamina i prema primeru 2, korak br. 2 i primer 2, korak br. 3 pomoću 5-fluoropiridin-3-sulfonil-hlorid u obliku bele čvrste materije.<1>H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,49 (s, 1H), 9,31 (s, 1H), 9,20−9,10 (m, 1H), 9,01 (s, 1H), 8,94 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,80 (m, 1H), 8,40 (m, 1H), 8,21 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,10 (m, 1H), 5,24 (d, J = 51,3 Hz, 1H), 4,40−4,38 (m, 2H), 4,36−4,33 (m, 2H), 3,97−3,59 (m, 2H), 2,44−2,04 (m, 2H).
Primer 28: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(5-fluoropiridin-3-ilsulfonil)-N-((6-(4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Naslovno jedinjenje je pripremljeno prema proceduri opisanoj u primeru 2, korak br.1 pomoću (2S, 4R)-1-(tert-butoksikarbonil)-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline i (6-(4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metanamina i prema primeru 2, koraci br. 2 i 3 5-fluoropiridin-3-sulfonil-hlorid.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,26 (s, 1H), 8,94 (s, 1H), 8,75 (s, 1H), 8,29 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,94−7,89 (m, 2H), 7,77 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 7,61 (s, 1H), 5,13 (d, J = 51 Hz, 1H), 4,82 (m, 1H), 4,75 (m, 1H), 4,39 (m, 1H), 4,29 (m, 1H), 3,97−3,6 (m, 2H), 2,63−2,2 (m, 2H).
Primer 29: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(4-(trifluorometilio)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-pirolidin-2-karboksilna kiselina (102 mg, 0,35 mmol), DMF (5 ml), DIPEA (136 mg, 1,05 mmol), HATU (200 mg, 0,53 mmol) i (6-[4-[(trifluorometil)sulfanil]fenil]pirimidin-4-il)metanamina (100 mg, 0,35 mmol) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (75,4 mg, 39%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H-NMR (300MHz, CD3OD) δ 9,16 (s, 1H), 8,39 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 8,27 (s, 1H), 8,07−8,01 (m, 2H), 7,79 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,38−7,32 (m, 2H), 5,16 (d, J = 51,9 Hz, 1H), 4,63 (d, J = 4,2 Hz, 2H), 4,32 (dd, J = 10,2, 7,2 Hz, 1H), 3,87−3,9 (m, 2H), 2,57−2,15 (m, 2H).
Primer 30: Priprema (R)-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-(metoksimetil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema 1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-(metoksimetil) pirolidin-2-karboksilne kiseline.
Natrijum-hidrid (379 mg, 9,47 mmol, 60% u mineralnom ulju) dodat je rastvoru metil 1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-(hidroksimetil)pirolidin-2-karboksilata (100 mg, 0,32 mmol), THF (7 ml). Smeša je mešana 20 minuta na sobnoj temperaturi, i dodat je CH3I (222,8 mg, 1,57 mmol). Dobijeni rastvor je mešan 2 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena pomoću 5-procentne HCl (15 m), ekstrahovane EtOAc (3 x 30ml). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4, koncentrovani radi dobijanja naslovnog
4
jedinjenja (75 mg) u obliku bele čvrste supstance, koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 2: Priprema (R)-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-(metoksimetil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2R)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-(metoksimetil)pirolidin-2-karboksilna kiselina (70 mg, 0,22 mmol), DMF (2 ml), DIPEA (113,9 mg, 0.88 mmol), HATU (125,86 mg, 0,33 mmol) i [6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (77,1 mg, 0,27 mmol) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je direktno prečišćena preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (51,8 mg, 42%) u obliku svetložute čvrste materije.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,50 (s, 1H), 9,25 (s, 1H), 8,70 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,99−7,94 (m, 2H), 7,77−7,71 (m, 1H), 7,21−7,15 (m, 2H), 4,82−4,64 (m, 2H), 4,00 (dd, J = 67,5, 9,6 Hz, 2H), 3,57−3,52 (m, 1H), 3,38−3,29 (m, 4H), 2,48−2,41 (m, 1H), 2,23−2,19 (m, 1H), 2,05−1,98 (m, 2H).
Primer 31: Priprema (S)-2-(difluoromethyl)-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema metil (2R)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-formilpirolidin-2-karboksilata.
Smeša metil (2R)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-(hidroksimetil)pirolidin-2-karboksilata (100 mg, 0,32 mmol), dihlorometan (20 ml), silikagela (1 g), PCC (136 mg, 0,63 mmol) mešana je tokom noći na sobnoj temperaturi. Smeša je prečišćena fleš hromatografijom na koloni silika gela, eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (1/5) dajući naslovno jedinjenje (70 mg, 70%) kao bezbojno ulje.
Korak br. 2: Priprema metil (2S)-2-(difluorometil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilata.
Smeša metil (2R)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-formilpirolidin-2-karboksilata (120 mg, 0,38 mmol), dihlorometana (20 ml), DAST (123 mg, 2.00 ekviv.) mešana je tokom noći na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana, a ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum-etra (1/5) dajući naslovno jedinjenje (90 mg, 70%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema (2S)-2-(difluorometil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline.
Smeša metil (2S)-2-(difluorometil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilata (90 mg, 0,27 mmol), metanola (10 ml) i LiOH (20 mg, 0,83 mmol) mešana je tokom noći na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana, razređena vodom (20 ml), ekstrahovana eterom (30 ml). Vodeni slojevi su acidifikovani pomoću 3N HCl na pH ∼ 2-3, ekstrahovani EtOAc (3 x 30ml). Organske faze su osušene iznad anhidrovanog Na2SO4, koncentrovane radi dobijanja naslovnog jedinjenja (30 mg) u obliku bezbojnog ulja, koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 4: Priprema (S)-2-(difluoromethyl)-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S)-2-(difluorometil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (110 mg, 0,34 mmol), HOBt (55 mg, 0,41 mmol), DIPEA (2 ml, 12,10 mmol), N,N-dimetilformamida (10 ml), EDC.HCl (78 mg, 0,41 mmol) i [6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin (95 mg, 0,37 mmol) mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Smeša je razređena EtOAc (100 ml), isprana slanim rastvorom (3 x 20 ml), osušena iznad Na2SO4i koncentrovana. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (12,3 mg) u obliku svetložute čvrste materije.<1>H-NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,47 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 9,26 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 8,66 (dd, J = 1,5, 8,1 Hz, 1H), 8,07 (s, 1H), 7,95−7,90 (m, 2H), 7,79 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,25−7,20 (m, 2H), 6,61 (t, J = 56,1 Hz, 1H), 4,93−4,85 (m, 1H), 4,64−4,57 (m, 1H), 3,77−3,71 (m, 1H), 3,29−3,21 (m, 1H), 2,56−2,48 (m, 1H), 2,36−2,27 (m, 1H), 2,10−2,01 (m, 2H).
Primer 32: Priprema (R)-2-cijano-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema (2R)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-[(1E)-(hidroksimino)metil]-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2R)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-formil-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida (60 mg, 0,11 mmol), etanola (10 ml), NH2OH.HCl (23 mg, 0,33 mmol) i NaOAc (46 mg, 5,00 ekviv.) mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana, razblažena pomoću EtOAc (100 ml), isprana slanim rastvorom (30 ml), osušena iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovana radi dobijanja naslovnog jedinjenja (70 mg) u obliku smeđe čvrste supstance, koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 2: Priprema (R)-2-cijano-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša Ph3PO (4 mg, 0,01 mmol), hloroforma (15 ml), tionil-hlorida (45 mg, 0,38 mmol) mešana je 5 minuta na 0° C. Dodat joj je rastvor (2R)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-[(1E)-(hidroksimino)metil]-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida (70 mg, 0,13 mmol) u hloroformu (5 ml) kap po kap uz mešanje na 0° C. Dobijeni rastvor je mešan dodatnih 30 minuta na sobnoj temperaturi, ugašen zasićenim NaHCO3(20 ml), ekstrahovan EtOAc (3 x 30ml) i razdvojen. Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (19,6 mg) u obliku bele čvrste materije.<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,47 (s, 1H), 9,28 (d, J = 0,8 Hz, 1H), 8,65 (dd, J = 6,4, 2,0 Hz, 1H), 8,06−8,03 (m, 3H), 7,78 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,48 (t, J = 5,4Hz, 1H), 7,27−7,22 (m, 3H), 4,79 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 3,69−3,66 (m, 1H), 3,39−3,35 (m, 1H), 2,68−2,64 (m, 2H), 2,28−2,08 (m,2H).
Primer 33: Priprema (1R,3S,4S)-2-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metil)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-karboksamida.
Naslovno jedinjenje je pripremljeno prema procedurama opisanim u primeru 2, korak br.1 pomoću (1R,3S,4S)-2-(tert-butoksikarbonil)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilne kiseline i (6-(4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metanamina i prema primeru 2, koraci br.
2 i 3 (71 mg):<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,23 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 8,78 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 8,38−8,32 (m, 2H), 8,06−7,99 (m, 3H), 7,84 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,46−7,38 (m, 2H), 4,46 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 4,07 (s, 1H), 3,92 (s, 1H), 2,64 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 2,10 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 1,69−1,59 (m, 1H), 1,52−1,39 (m, 2H), 1,34 (d, J = 9,9 Hz, 1H), 1,19−1,08 (m, 1H).
Primer 34: Priprema (1R,3S,4S)-2-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-karboksamida.
Naslovno jedinjenje je pripremljeno prema procedurama opisanim u primeru 2, korak br.1 pomoću (1R,3S,4S)-2-(tert-butoksikarbonil)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilne kiseline i prema primeru 2, koraci br. 2 i 3 (72 mg):<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,43 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 9,28 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 8,81 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 8,77−8,72 (m, 1H), 8,14 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 8,07−7,99 (m, 3H), 7,46−7,39 (m, 2H), 4,48 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 4,07 (s, 1H), 3,92 (s, 1H), 2,65 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 2,10 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 1,70−1,57 (m, 1H), 1,47−1,38 (m, 2H), 1,34 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 1,17−1,07 (m, 1H).
Primer 35: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema (2S,3R)-3-hidroksi-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidini-1-karboksilata.
Smeša (2S,3R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-3-hidroksipirolidin-2-karboksilna kiselina (200 mg, 0,86 mmol), DMF (4 ml), HATU (493,6 mg, 1,30 mmol), DIEA (446,9 mg, 3.46 mmol, 4,00 ekviv.) i [6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (302,3 mg, 1,04 mmol, 1,20 ekviv.) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena dodavanjem 15 ml vode i ekstrahovana etil-acetatom (3 x 15 ml). Organski slojevi su spojeni, isprani vodom (2 x 25 ml) i slanim rastvorom (20 ml), osušeni nad anhidrovanim natrijumsulfatom i koncentrovani u vakuumu. Na taj se način dobilo 400 mg (99%) naslovnog jedinjenja u obliku narandžastog ulja.
Korak br. 2: Priprema tert-butil (2R,3S)-3-fluoro-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidini-1-karboksilata.
DAST (204 mg, 0,89 mmol, 3,00 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru tertbutil(2S,3R)-3-hidroksi-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilat (200 mg, 0,43 mmol, 1,00 ekviv.) u 10 ml DCM na 0° C. Dobijeni rastvor je mešan dodatnih 30 min na sobnoj temperaturi, ugašen vodom (15 ml) i ekstrahovan etil-acetatom (3 x 15 ml). Organski slojevi su spojeni, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela eluiranjem pomoću dihlormetana/metanola (40/1) dajući naslovno jedinjenje (85 mg, 42%) u obliku narandžaste čvrste materije.
Korak br.3: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida.
Smeša tert-butil (2R,3S)-3-fluoro-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidini-1-karboksilata (85 mg, 0,18 mmol, 1,00 ekviv.) i HCl u dioksanu (10 ml, 1 mol/L) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen 5 ml EtOAc. Čvrste materije su prikupljene filtracijom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (70 mg, 95%) kao narandžaste čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2R,3S)-3-fluoro-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (70 mg, 0,17 mmol, 1,00 ekviv), TEA (51,5 mg, 0,51 mmol, 3,00 ekviv), 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorid (39,6 mg, 0,20 mmol, 1,10 ekviv) i 4-dimetilaminopiridina (2,1 mg, 0,02 mmol, 0,10 ekviv) u DCM (3 ml) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena vodom (10 ml) i ekstrahovana etil-acetatom (3 x 10 ml). Organski slojevi su spojeni, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je primenjen na koloni silika gela etil-acetatom/petrolej-
1
etrom (1/1) dajući naslovno jedinjenje (40 mg, 44%) u obliku svetložute čvrste materije.<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,49 (s, 1H), 9,28 (s, 1H), 8,69 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,94−7,91 (m, 2H), 7,84−7,80 (m, 2H), 7,29 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 5,32 (d, J = 48 Hz, 1H), 4,96−4,90 (m, 1H), 4,59−4,53 (m, 1H), 4,41 (d, J = 22,4 Hz, 1H), 3,84 (t, J = 8,8 Hz 1H), 3,34−3,27 (m, 1H), 2,26−2,03 (m, 2H).
Primer 36: Priprema (2R,3R)-3-fluoro-1-(3-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema tert-butil (2S,3S)-3-hidroksi-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilat.
Smeša (2S,3S)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-3-hidroksipirolidin-2-karboksilna kiselina (200 mg, 0,86 mmol, 1.00 ekviv), DMF (10 ml), HATU (493,6 mg, 1,30 mmol, 1.50 ekviv), DIEA (446,9 mg, 3.46 mmol, 4.00 ekviv) i [6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (302,3 mg, 1,04 mmol, 1,20 ekviv) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Smeša je ugašena vodom (15 ml) i ekstrahovana etil-acetatom (3 x 15 ml). Organski slojevi su spojeni, isprani vodom (2 x 25 ml) i slanim rastvorom (20 ml), osušeni nad anhidrovanim natrijum-sulfatom i koncentrovani u vakuumu. Na taj se način dobilo 400 mg (99%) naslovnog jedinjenja u obliku narandžastog ulja.
Korak br. 2: Priprema (2R,3R)-3-fluoro-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidini-1-karboksilata.
DAST (413,7 mg, 1,81 mmol, 3,00 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru tertbutil(2S,3S)-3-hidroksi-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (400 mg, 0,86 mmol, 1,00 ekviv.) u DCM (15 ml) na -78 °C. Dobijeni rastvor je polako zagrevan do sobne temperature, ugašen vodom (20 ml) i ekstrahovan etil-acetatom (3 x 25 ml). Organski slojevi su spojeni, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani. Ostatak je primenjen na koloni silika gela
1 1
etil-acetatom/petrolej-etrom (1/1) dajući naslovno jedinjenje (210 mg, 52%) u obliku bezbojne čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema (2R,3R)-3-fluoro-N-([6-[4-(trifluorometil)-1lambda4,3-fluorazin-1-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida.
Smeša tert-butil (2R,3R)-3-fluoro-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidinin-1-karboksilata (200 mg, 0,43 mmol, 1,00 ekviv.) i HCl u dioksanu (10 ml, 1mol/L) mešana je 5 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen 10 ml EA. Čvrste materije su prikupljene filtracijom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (105 mg, 60%) kao bezbojne čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema (2R,3R)-3-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2R,3R)-3-fluoro-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (100 mg, 0,25 mmol, 1,00 ekviv), TEA (101 mg, 1,00 mmol, 4,00 ekviv), 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorid (58,3 mg, 0,30 mmol, 1,20 ekviv) i 4-dimetilaminopiridina (3 mg, 0,02 mmol, 0,10 ekviv) u dihlormetanu (10 ml) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Smeša je ugašena vodom (10 ml) i ekstrahovana DCM (3 x 10 ml). Organski slojevi su spojeni, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je primenjen na koloni silika gela etil-acetatom/petrolejetrom (1/1) dajući naslovno jedinjenje (35 mg, 27%) u obliku svetložute čvrste materije.<1>H-NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,34 (s, 1H), 9,26 (s, 1H), 8,70 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 8,10 (s, 1H), 7,96−7,93 (m, 2H), 7,80 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,51 (s, 1H), 7,31 (t, J = 8 Hz, 2H), 5,46 (d, J = 52 Hz, 1H), 4,95−4,91 (m, 1H), 4,75−4,66 (m, 1H), 4,29−4,22 (m, 1H), 3,83 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 2,32−2,12 (m, 1H), 1,37−1,16 (m, 1H).
Primer 37: Priprema fluoro-(2S,4R)-4-fluoro-N-(((5-fluoro-4-(4-trifluorometil)piperidin-1-il)piridin-2-il)metil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
1 2
Korak br.1: Priprema 2-hloro-5-fluoro-4-(4-(trifluorometil)piperidin-1-il)piridina.
Smeša 2-hloro-5-fluoro-4-jodopiridina (1,5 g, 5,83 mmol), 4-(trifluorometil)piperidin (890 mg, 5,81 mmol), Pd2(dba)3·CHCl3(300 mg, 0.,29 mmol), BINAP (360 mg, 0,58 mmol) i t-BuONa (1,4 g, 14,57 mmol) u toluenu (15 ml) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 1 h na 125° C u atmosferi azota. Reakcija je zatim prekinuta vodom (50 ml), ekstrahovana dihlormetanom (3 x 100 ml), osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću etil-acetata/petroleum-etra (1:5) dajući naslovno jedinjenje (960 mg, 55%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 5-fluoro-4-(4-(trifluorometil)piperidin-1-il)pikolinonitrila.
Smeša 2-hloro-5-fluoro-4-[4-(trifluorometil)piridin-3-il]piperidina (400 mg, 1,42 mmol), Pd2(dba)3.CHCl3(72 mg, 0,07 mmol), Zn(CN)2(100 mg, 0,85 mmol), DPPF (80 mg, 0,14 mmol) i Zn (8 mg, 0,12 mmol) u DMA (10 ml) ozračena mikrotalasnim zračenjem 1 h na 125° C u atmosferi azota. Reakcija je zatim prekinuta vodom (100 ml), ekstrahovana dihlormetanom (3 x 150 ml), osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću etil-acetata/petroleum-etra (1:5) dajući naslovno jedinjenje (350 mg, 90%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema (5-fluoro-4-(4-(trifluorometil)piperidin-1-il)piridin-2-il)metanamina.
Smeša 5-fluoro-4-[4-(trifluorometil)piperidin-1-il]piridin-2-karbonitrila (200 mg, 0,73 mmol), 10% Pd/C (50 mg) i zasićene HCl (0,25 ml) u metanolu (10 ml) mešana je 1 h na
1
sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (200 mg) u obliku smeđe čvrste materije koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 4: Priprema fluoro-(2S,4R)-4-fluoro-N-(((5-fluoro-4-(4-trifluorometil)piperidin-1-il)piridin-2-il)metil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-pirolidin-2-karboksilna kiselina (315 mg, 1,08 mmol), HATU (410 mg, 1,08 mmol), DIEA (0,8 ml, 4,84 mmol) i [5-fluoro-4-[4-(trifluorometil)piperidin-1-il]piridin-2-il]metanamina (250 mg, 0,90 mmol) u DMF (4 ml) mešana je tokom noći na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je prečišćena preparativnom fleš HPLC tehnikom u sledećim uslovima: kolona, X Bridge C18; mobilna faza A: voda/0.,05% NH4HCO3; mobilna faza B: ACN=30% porasta do ACN=70% u toku 10 min; detektor, UV 254 nm. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (28,2 mg) u obliku bele čvrste materije.<1>H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8,09 (s, 1H), 8,03−7,99 (m, 2H), 7,39−7,34 (m, 2H), 7,17 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 5,14 (d, J = 52,4 Hz, 1H), 4,47 (s, 2H), 4,28−4,24 (m, 1H), 4,03 (d, J = 12,8 Hz, 2H), 3,83−3,70 (m, 2H), 2,97 (t, J = 12,8 Hz, 2H), 2,51−2,40 (m, 2H), 2,25−2,12 (m, 1H), 1,93 (d, J = 12,8 Hz, 2H), 1,71−1,65 (m, 2H).
Tabela 3: IC50Utvrđivanje pojašnjenih jedinjenja.
IC50(efikasne koncentracije) jedinjenja humanog TRPA1 kanala utvrđene su pomoću čitača fluorescencije s ploče Hamamatsu FDSS. CHO ćelije koje eksprimiraju humani TRPA1 stavljene su na ploču za uzorke sa 384 bunarčića, inkubirane preko noći na 37° C, natopljene BD bojom za indikaciju kalcijuma tokom 1 h na 37 °C s produžetkom od 15 minuta na sobnoj temperaturi. Pufer analize bio je balansirani slani rastvor Hank (HBSS) koji sadrži 20 mM HEPES (pH podešena na 7,4) uz 0,02% BSA.
Nakon natapanja bojom i hlađenja ploče, jedinjenja su dodata ćelijama pomoću FDSS, dok se istovremeno nadgledala pojava fluorescencije ne bi li se utvrdilo da li neko od ispitnih jedinjenja pokazuje agonističku aktivnost TRPA1. Ploče su zatim inkubirane jedinjenjem na 20 minuta na sobnoj temperaturi, pre dodavanja agonista. Nakon ove inkubacije, dodato je 100 mM cinamaldehida u sve bunarčiće na ploči, pa je izmeren influks kalcijuma izazvan blokiranjem cinamaldehida.
1 4
IC50s su imale standardnu Hilovu funkciju, održavajući Hilov koeficijent (n) fiksnim od 1,5. Fiksiranjem Hilovog koeficijenta obično se smanjuje varijabilnost utvrđivanja IC50. IC50vrednosti su vizuelno pregledane kako bi se utvrdilo da su tačke MIN i MAX pravilno postavljene pre validacije rezultata. Podaci reprezentativnih jedinjenja formule I izloženi su u Tabeli 3 u nastavku.
Tabela 3: IC50Utvrđivanje pojašnjenih jedinjenja.
1
1
1
1
Primer 38: Priprema (2S,3R)-N-([2-cijano-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil)-3-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 5-bromo-2,3-dihidro-1H-izoindol-1-ona
Smeša metil 4-bromo-2-(bromometil)benzoata (3 g, 9,74 mmol, 1,0 ekviv) i amonijum-hidroksida (30 ml, 30%) u 1,4-dioksanu (250 ml) mešana je 3 h na 20° C. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod je zatim prečišćen rekristalizacijom iz etil-acetata radi dobijanja naslovnog jedinjenja (1,8, 87%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema tert-butil 5-bromo-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-2-carboksilata
Smeša 5-bromo-2,3-dihidro-1H-izoindol-1-on (1,38 g, 6,51 mmol, 1,0 ekviv), TEA (1,8 g, 17,79 mmol, 2,70 ekviv), 4-dimetilaminopiridina (73 mg, 0,60 mmol) i di-tert-butildikarbonat (2,6 g, 11,91 mmol, 1,80 ekviv) u tetrahidrofuranu (50 ml) mešana je 12 h na 20° C. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/10) dajući naslovno jedinjenje (1,7 g, 84%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.3: Priprema 5-bromo-2,3-dihidro-1H-izoindol-1-ona
1
Smeša tert-butil 5-bromo-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-2-karboksilata (1,7 g, 5,45 mmol, 1,00 ekviv), KOAc (1,6 g, 16,30 mmol, 3,00 ekviv), 4,4,5,5-tetrametil-2-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3,2-dioksaborolan (2,08 g, 8,19 mmol, 1,50 ekviv) i Pd(dppf)Cl2(395 mg, 0,54 mmol, 0,10 ekviv) u 1,4-dioksanu (40 ml) mešana je 12 h na 90° C u atmosferi azota. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (2 g, sirovo) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema tert-butil 1-okso-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-2,3-dihidro-1H-izoindol-2-karboksilata
Smeša tert-butil 1-okso-5-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-2,3-dihidro-1H-izoindol-2-karboksilata (500 mg, 1,39 mmol, 1,00 ekviv), kalijum-karbonata (575 mg, 4,16 mmol, 3,00 ekviv), 5-bromo-2-(trifluorometil)piridina (313 mg, 1,38 mmol, 1,00 ekviv) i Pd(dppf)Cl2(106 mg, 0,14 mmol, 0,10 ekviv) u dioksanu (13 ml) / vodi (1,3 ml) mešana je 12 h na 80° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je rastvorena u etil-acetatu, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/10) dajući naslovno jedinjenje (400 mg, 76%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema 2-([[(tert-butoksi)karbonil]amino]metil)-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il] benzojeve kiseline
Smeša tert-butil 1-okso-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-2,3-dihidro-1H-izoindol-2-karboksilata (250 mg, 0,66 mmol, 1,00 ekviv) i LiOH (100 mg, 4,18 mmol, 6,30 ekviv) u tetrahidrofuranu (3 ml)/voda (0.3 ml) mešana je 12 h na 20° C. Dobijeni rastvor je razređen vodom i ekstrahovan dietil-etrom. pH vrednost rastvora je podešena na 3–4 uz 5-procentnu HCl. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-
11
sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (180 mg, 69%) u obliku smeđe čvrste materije.
Korak br. 6: Priprema tert-butil N-([2-karbamoil-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil)karbamata
Smeša 2-([[(tert-butoksi)karbonil]amino]metil)-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il] benzojeve kiseline (160 mg, 0,40 mmol, 1,00 ekviv), DIEA (600 mg, 4,64 mmol, 11,50 ekviv), HATU (183 mg, 0,48 mmol, 1,20 ekviv) i NH4Cl (260 mg, 4,86 mmol, 12,10 ekviv) u DMF (5 ml) mešana je 12 h na 20° C. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/1) dajući naslovno jedinjenje (160 mg, 100%) u obliku smeđe čvrste materije.
Korak br. 7: Priprema 2-(aminometil)-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]benzamid hidrohlorida
Smeša tert-butil N-([2-karbamoil-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil)karbamata (160 mg, 0,40 mmol, 1,00 ekviv) i HCl (zasićeni rastvor u 20 ml 1,4-dioksana) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (120 mg, sirovo) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 8: Priprema tert-butil (2S,3R)-2-[([2-karbamoil-5-[2-(trifluorometil)piridin-5-il]fenil]metil)karbamoil]-3-hidroksipirolidin-1-karboksilata
Smeša (2S,3R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-3-hidroksipirolidin-2-karboksilna kiselina (93,67 mg, 0,41 mmol, 1.00 ekviv), DIEA (157,06 mg, 1,22 mmol, 3,00 ekviv), HATU (231,03 mg, 0,61 mmol, 1,50 ekviv) i 2-(aminometil)-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5il]benzamid hidrohlorida (120,00 mg, 0,41 mmol, 1,00 ekviv) u DMF (5 ml) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije dihlormetanom/etanolom (20:1) dajući naslovno jedinjenje (130 mg, 63%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 9: Priprema tert-butil (2R,3S)-2-[([2-karbamoil-5-[2-(trifluorometil)piridin-5-il]fenil]metil)karbamoil]-3-fluoropirolidin-1-karboksilata
DAST (174,01 mg, 1,08 mmol, 5,00 ekviv) dodat je kap po kap smeši tert-butil (2S,3R)-2-[([2-karbamoil-5-[2-(trifluorometil)piridin-5-il]fenil]metil)karbamoil]-3-hidroksipirolidin-1-karboksilata (110,00 mg, 0,22 mmol, 1,00 ekviv) u dihlorometanu (5 ml) na -78° C u atmosferi azota. Reakcija je mešana 30 minuta na -78° C i 12 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim prekinuta vodom i ekstrahovana dihlormetanom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim vodenim rastvorom natrijum-bikarbonata i slanog rastvora, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (60 mg, 54%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 10: Priprema tert-butil (2R,3S)-2-[([2-cijano-5-[2-(trifluorometil)piridin-5-il]fenil]metil)karbamoil]-3-fluoropirolidin-1-karboksilata
TFAA (49,28 mg, 0,23 mmol, 2,00 ekviv) dodat je kap po kap smeši tert-butil (2R,3S)-2-[([2-karbamoil-5-[2-(trifluorometil)piridin-5-il]fenil]metil)karbamoil]-3-fluoropirolidin-1-karboksilata (60,00 mg, 0,12 mmol, 1,00 ekviv) u dihlorometanu (5 ml) / trietilmaminu (11,87 mg, 0,12 mmol, 1,00 ekviv). Reakciona smeša je mešana 10 minuta na sobnoj temperaturi, ugašena vodom i ekstrahovana dihlormetanom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:5) dajući naslovno jedinjenje (50 mg, 86%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 11: Priprema (2R,3S)-N-([2-cijano-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil)-3-fluoropirolidin-2-karboksamida
Smeša tert-butil (2R,3S)-2-[([2-cijano-5-[2-(trifluorometil)piridin-5-il]fenil]metil)karbamoil]-3-fluoropirolidin-1-karboksilata (50 mg, 0,10 mmol, 1,00 ekviv) i HCl (zasićeni rastvor u 5 ml 1,4-dioksana) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (40 mg, sirovo) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 12: Priprema (2S,3R)-N-([2-cijano-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil)-3-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida
Smeša (2R, 3S)-N-[[2-cijano-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]phenyl]metil]-3-fluoropirolidin-2-karboksamida (47,00 mg, 0,119 mmol, 1,000 ekviv), trietilamin (36,27 mg, 0,358 mmol, 3,000 ekviv) i 4-fluorobenzen-1-sulfonl-hlorida (46,51 mg, 0,239 mmol, 2,000 ekviv) u dihloromethanu (5 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 12 h. Reakcija je zatim prekinuta vodom i ekstrahovana dihlormetanom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleumetrom (1:1). Sirovi proizvod (40 mg) je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (25,1, 38% mg) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9,40 (s, 1H), 8,10 (s, 1H), 8,03-7,91 (m, 4H), 7,41−7,35 (m, 2H), 5,19 (d, J = 52 Hz, 1H), 4,92−4,87 (m, 1H), 4,64 (d, J = 24,4 Hz, 2H), 4,36 (d, J = 24,4 Hz, 1H), 3,80−3,85 (m, 1H), 3,33−3,27 (m, 1H), 2,29−2,14 (m, 2H).
Primer 39: Priprema (2S,5R)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-5-metil-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
11
Korak br.1: Priprema 1-tert-butil 2-metil (2S)-5-metoksipirolidin-1,2-dikarboksilata
Litijum-trietilborohidrid (34,5 ml, 1,20 ekviv) dodat je kap po kap rastvoru 1-tert-butil 2-metil (2S)-5-oksopirolidin-1,2-dikarboksilat (7g, 1,00 ekviv) u tetrahidrofuranu (30 ml) na -78° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je mešana 2 h na -78° C, pa ugašena vodenim rastvorom natrijum-bikarbonata na 0°C. Dodat je 30-procentni H2O2(15ml), a rekaciona smeša je mešana 20 minuta. Smeša je ekstrahovana pomoću Et2O (2 x 50 ml), isprana slanim rastvorom, osušena iznad Na2SO4i koncentrovana u vakuumu. Dobijenom sirovom aminolu u metanolu (25 ml) dodat je PTSA (656 mg, 0,38 mmol, 0,12 ekviv). Dobijeni rastvor je mešan 12 h na sobnoj temperaturi, ugašen vodenim rastvorom natrijum-bikarbonata, ekstrahovan eterom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (4,1g) u obliku svetložutog ulja.
Korak br.2: Priprema 1-tert-butil 2-metil (2S)-5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilata
Smeši bakar(I) bromid-dimetil-sulfida (1,05 g, 5,11 mmol, 4,00 ekviv) i dietl-etera (13 ml) dodat je MeMgBr (1,645 ml, 3M u Et2O) kap po kap na -40° C u atmosferi azota. Nakon 45 minuta na -40° C smeša je ohlađena na -78° C i dodat je BF3.Et2O (0,62 ml, 5,24 mmol, 4,00 ekviv) kap po kap na -78° C. Reakcija je mešana 30 minuta, a 1-tert-butil 2-metil (2S)-5-metokispirolidin-1,2-dikarboksilat (320 mg, 1,23 mmol, 1,00 ekviv) u dietil-eteru (17 ml) dodat je na -78° C. Dobijeni rastvor je mešan 30 min na -78° C i 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim mešana s vodenim rastvorom NH4Cl tokom 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ekstrahovana pomoću Et2O, isprana natrijumbikarbonatom i slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (180 mg, 60%) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br. 3: Priprema (2S)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline
Smeša 1-tert-butil 2-metil (2S)-5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (180 mg, 0,74 mmol, 1,00 ekviv) i LiOH (1,6 mg, 0,07 mmol, 0,10 ekviv) u metanolu (2 ml) / vodi (0,2 ml) mešana je preko noći i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je razblažen pomoću 10 ml vode, a pH vrednost rastvora je prilagođena na 3 pomoću razblažene HCl. Dobijeni rastvor je ekstrahovan dihlormetanom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (110 mg, 65%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 4: Priprema tert-butil (2R,5S)-2-metil-5-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata
Rastvor (2S,5R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-5-metilipirolidin-2-karboksilna kiselina (120 mg, 0,52 mmol, 1.00 ekviv), HATU (298 mg, 0,78 mmol, 1,50 ekviv), DIEA (202 mg, 1,56 mmol, 3,00 ekviv) i 6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-ilmetanamina (182 mg, 0,72 mmol, 1,20 ekviv) u DMF (5 ml) mešan je tokom noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je rastvorena pomoću 40 ml etil-acetata, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (90 mg, 37%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 5: Priprema (2S,5R)-5-metil-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida
Smeša tert-butil (2R,5S)-2-metil-5-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (90 mg, 0,19 mmol, 1,00 ekviv.) i zasićene HCl u
11
1,4-dioksanu (10 ml) mešana je tokom noći na sobnoj temperaturi i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (85 mg) u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 6: Priprema (2S,5R)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-5-metil-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida
Rastvor (2S,5R)-5-metil-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (75 mg, 0,19 mmol, 1,0 ekviv), TEA (56,6 mg, 0,56 mmol, 3,000 ekviv), 4-dimetilaminopiridina (2,28 mg, 0,019 mmol, 0,1 ekviv) i 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorida (43,5 mg, 0,224 mmol, 1,2 ekviv) u dihlormetanu (5 ml) mešan je 1,5 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je rastvorena u DCM, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (21mg, 21%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,49 (s, 1H), 9,26 (s, 1H), 8,68−8,65 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,15 (s, 1H), 7,97−7,93 (m, 2H), 7,77−7,16 (m, 1H), 7,26−7,16 (m, 3H), 4,94−4,82 (m, 1H), 4,65−4,57 (m, 1H), 4,43−4,41 (m, 1H), 4,28−4,24 (m, 1H), 2,29−2,15 (m, 3H), 1,65−1,59 (m, 1H), 1,14−1,12 (m, 3H).
Primer 40: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-(4-fluorometil)-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema 1-tert-butil 2-metil 4-hidroksi-4-(hidroksimetil) pirolidin-1,2-dikarboksilata
11
Smeša 1-tert-butil 2-metil 4-metilidenpirolidin-1,2-dikarboksilata (1 g, 4,14 mmol, 1,00 ekviv) i 4-metilmorfolin-4-ium-4-olata (1,175 g, 10,03 mmol, 1,60 ekviv) u acetonu (10 ml) / vodi (10 ml) mešana je 7 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (700 mg, 61%) u obliku narandžastog ulja.
Korak br. 2: Priprema 1-tert-butil 2-metil 4-[[(tert-butildimetilsilil)oksi]metil]-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksilata
Smeša 1-tert-butil 2-metil 4-hidroksi-4-(hidroksimetil) pirolidin-1,2-dikarboksilata (1,068 g, 3,88 mmol, 1,00 ekviv), TBS-Cl (1,165 g, 7,73 mmol, 2,00 ekviv), imidazol (528 mg, 7,76 mmol, 2,00 ekviv) i 4-dimetilaminopiridin (47 mg, 0,38 mmol, 0,10 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (27 ml) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (1,37 g, 91%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 3: Priprema 1-tert-butil 2-metil (2S)-4-[[(tert-butildimetilsilil)oksi]metil]-4-fluoropirolidin-1,2-dikarboksilata
DAST (1,13 g, 7,01 mmol, 2,00 ekviv) dodat je kap po kap rastvoru 1-tert-butil 2-metil (2S)-4-[[(tert-butildimetilsilil)oksi]metil]-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksilata (1,37 g, 3,52 mmol, 1,00 ekviv) u dihloromethana (25 ml) na -78°C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 1,5 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana etilacetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (1,25 g, 91%) u obliku svetložutog ulja.
11
Korak br.4: Priprema 1-tert-butil 2-metil (2S)-4-fluoro-4-(hidroksimetil)pirolidin-1,2-dikarboksilata
Smeša 1-tert-butil 2-metil (2S)-4-[[(tert-butildimetilsilil)oksi]metil]-4-fluoropirolidin-1,2-dikarboksilata (1 g, 2,55 mmol, 1,00 ekviv), TBAF (1.,335 g, 5,11 mmol, 2,00 ekviv) u tetrahidrofuranu (5 ml) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (520 mg, 73%) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br. 5: Priprema 1-tert-butil 2-metil (2S)-4-fluoro-4-(fluorometil)pirolidin-1,2-dikarboksilata
DAST (1,637 g, 7,40 mmol, 4,00 ekviv) dodat je kap po kap rastvoru 1-tert-butil 2-metil (2S)-4-fluoro-4-(hidroksimetil) pirolidin-1,2-dikarboksilata(513 mg, 1,85 mmol, 1,00 ekviv) u hloroformu (10 ml) na 0° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 5 h na 60°C. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, ugašena vodom i ekstrahovana dihlormetanom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (300 mg, 58%) u obliku narandžastog ulja.
Korak br. 6: Priprema (2S)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoro-4-(fluorometil)pirolidin-2-karboksilne kiseline
Smeša 1-tert-butil 2-metil (2S)-4-fluoro-4-(fluorometil)pirolidin-1,2-dikarboksilata (270 mg, 0,97 mmol, 1,00 ekviv) i LiOH (116 mg, 4,84 mmol, 5,00 ekviv) u tetrahidrofuranu (3 ml) / vodi (2 ml) mešana je 5 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razblažen vodom
11
i ekstrahovan etil-acetatom. pH vrednost vodenog rastvora je podešena na 4 sirćetnom kiselinom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (250 mg, 97%) u obliku narandžastog ulja.
Korak br. 7: Priprema tert-butil (2S)-4-fluoro-4-(fluorometil)-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidini-1-karboksilata
Smeša (2S)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoro-4-(fluorometil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (110 mg, 0,41 mmol, 1.00 ekviv), HATU (173,4 mg, 0,46 mmol, 1,10 ekviv), DIEA (160,6 mg, 1,24 mmol, 3,00 ekviv) i [6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (120,3 mg, 0,41 mmol, 1,00 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (6 ml) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etilacetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (170 mg, 82%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.8: Priprema (2S)-4-fluoro-4-(fluorometil)-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida
Smeša tert-butil (2S)-4-fluoro-4-(fluorometil)-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (170 mg, 0,34 mmol, 1,00 ekviv.) i zasićenog hlorovodonika u dioksanu (5 ml) mešana je 20 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (125 mg, 84%) u obliku ružičaste čvrste materije.
Korak br. 9: Priprema (2S,4S)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-(4-fluorometil)-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida
11
Smeša 4-fluorobenzen-1-sulfonl-hlorida (125 mg, 0,642 mmol, 1,00 ekviv), TEA (86,6 mg, 0,856 mmol, 3,00 ekviv) i (2S)-4-fluoro-4-(fluorometil)-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (61,0 mg, 0,139 mmol, 1,10 ekviv) u dihlorometanu (5 ml) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleumetrom (1:1). Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (15,2 mg, 4%) u obliku bele čvrste materije. tR= 0,93 min (CHIRALPAK AS-3, 4,6x100cm, 3µm, MeOH (0,1% DEA) = 10% do 40% u 2.0 min, držati 1,0 min na 40%, 4 ml/min).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,51 (s, 1H), 9,29 (s, 1H), 8,70−8,68 (d, J = 8 Hz, 1H), 8,09 (s, 1H), 7,95−7,92 (m, 2H), 7,83−7,81 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H), 7,52−7,28 (m, 2H), 4,97−4,91 (m, 1H), 4,61−4,35 (m, 4H), 3,93−3,71 (m, 2H), 2,52−2,49 (m, 1H), 2,38−2,27 (m, 1H).
I (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[(1s,4R)-4-(trifluorometil)cikloheksil]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid je takođe izolovan (31,8 mg, 9%) u obliku bele čvrste materije. tR= 1,18 min (CHIRALPAK AS-3, 4,6x100cm, 3µm, MeOH (0,1% DEA) = 10% do 40% u 2,0 min, držati 1,0 min na 40%, 4 ml/min).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,50 (s, 1H), 9,27 (s, 1H), 8,68−8,66 (d, J = 8 Hz, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,96−7,92 (m, 2H), 7,82−7,80 (d, J = 8 Hz, 1H), 7,69 (s, 1H), 7,35−7,31 (m, 2H), 4,92−4,85 (m, 1H), 4,70−4,64 (m, 1H), 4,59−4,31 (m, 3H), 4,02−3,94 (m, 1H), 3,45−3,33 (m, 1H), 2,65−2,57 (m, 1H), 2,03−1,72 (m, 1H).
Stereohemija 4-prolina za dva gorenavedena jedinjenja proizvoljno je dodeljena. Stereohemija 2-prolina za dva gorenavedena jedinjenja je prikazana.
Primer 41: Priprema (2S,5S)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-5-metil-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
12
Korak br.1: Priprema metil (2S)-2-[[(tert-butoksi)karbonil]amino]-5-oksoheksanoat
Rastvor MeMgBr (1M) (33 ml, 1,00 ekviv) dodat je kap po kap rastvoru 1-tert-butil 2-metil (2S)-5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilata (8 g, 32,89 mmol, 1.00 ekviv) u tetrahidrofuranu (20 ml) na -40° C. Dobijeni rastvor je mešan 2 h na -40° C. Dobijeni rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena zasićenim NH4Cl. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom i osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata. Čvrste supstance su filtrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum etrom (1:5) dajući naslovno jedinjenje (5,1 g, 60%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br.2: Priprema metil (2S)-5-metil-3,4-dihidro-2H-pirol-2-karboksilata
Rastvor metil (2S)-2-[[(tert-butoksi)karbonil]amino]-5-oksoheksanoata (3,7 g, 14,27 mmol, 1,00 ekviv) i trifluorosirćetne kiseline (10 ml, 134,63 mmol, 1,00 ekviv) u dihloromethanu (20 ml) mešan je 1 dan na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (3,5 g) u obliku svetložutog ulja.
Korak br.3: Priprema metil (2S,5S)-5-metilpirolidin-2-karboksilata
Smeša metil (2S)-5-metil-3,4-dihidro-2H-pirol-2-karboksilata (350 mg, 2,48 mmol, 1,00 ekviv) i paladijum na ugljenu (300 mg) u metanolu (3 ml) mešana je 8 h na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane. Filtrat je koncentrovan u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (400 mg) u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 4: Priprema metil (2S,5S)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-5-metilpirolidin-2-karboksilata
Smeša metil (2S,5R)-5-metilpirolidin-2-karboksilata (350 mg, 2,44 mmol, 1,00 ekviv), TEA (987 mg, 9,75 mmol, 4,00 ekviv), 4-dimetilaminopiridina (28 mg, 0,23 mmol, 0,10 ekviv) i 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorida (567 mg, 2,91 mmol, 1,20 ekviv) u dihlormetanu (30 ml) mešana je 8 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je rastvorena u etil-acetatu, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum etrom (1:3) dajući naslovno jedinjenje (190 mg, 26%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 5: Priprema (2S,5R)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline
Smeša metil (2S,5S)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-5-metilpirolidin-2-karboksilata (160 mg, 0,53 mmol, 1,00 ekviv) i LiOH (25,5 mg, 1,06 mmol, 1,00 ekviv) u metanolu (4 ml) / voda (0,5 ml) mešana je tokom noći na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen pomoću 20 ml vode. pH vrednost rastvora je podešena na pH 9 pomoću Na2CO3. Dobijeni rastvor je ekstrahovan dihlormetanom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (180 mg) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 6: Priprema (2S,5S)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-5-metil-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida
Smeša (2S,5S)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (150 mg, 0,522 mmol, 1.00 ekviv), HATU (285 mg, 0,750 mmol, 1,50 ekviv), DIEA (190 mg, 1,470 mmol, 3,000 ekviv) i 6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-ilmetanamin hidrohlorida (182 mg, 0,626 mmol, 1,200 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (4 ml) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (99,7 mg, 36%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,49 (s, 1H), 9,27 (s, 1H), 8,71−8,70 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 8,04 (s, 1H), 7,95−7,90 (m, 2H), 7,82−7,80 (m, 1H), 7,69−7,67 (m, 1H), 7,31−7,26 (m, 2H), 5,01−4,92 (m, 1H), 4,60−4,53 (m, 1H), 4,22−4,17 (m, 1H), 3,73−3,71 (m, 1H), 2,19−2,16 (m, 1H), 1,77−1,68 (m, 3H), 1,60−1,51 (m, 3H).
Primer 42: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[6-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]pirimidin-4-il]metil]pirolidin-2-karboksamida.
6-hloro-2'-(trifluorometil)-4,5'-bipirimidin
Degasiran je rastvor 2-(trifluorometil)pirimidin-5-il boronske kiseline (100 mg, 0,50 mmol), 4,6-dihloropirimidina (0,742559 mmol), cezijum-karbonata (322,595 mg, 0,99 mmol) i [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum (II) dihlorometan adukt (0,10 ekviv., 0,050 mmol) u acetonitrilu (6,0 ml) i vode (3.0 ml). Reakciona smeša je zagrevana na 95 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz celit. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (EtOAc/Hex_eluiran na 20% EtOAc) za dobijanje 74mg, 57,3% prinosa. LCMS (ESI) m/z:260,9 [M+H]+
2'-(trifluorometil)-[4,5'-bipirimidin]-6-karbonitril
Rastvor 4-hloro-6-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]pirimidin (A, 150 mg, 0,58 mmol), cink-cijanid (82,763 mg, 0,69071 mmol) i 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocenpaladijum(ii)dihlorid dihlorometan kompleks (48,0 mg, 0,058 mmol) u N,N-dimetilformamid (5,7559 ml, 74,4 mmol) mešan je na 150° C 45 minuta. Reakcija je ugašena vodom i ekstrahovana pomoću EtOAc. Organski slojevi su osušeni iznad natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani rotacionim isparivačem. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (MeOH/DCM) za dobijanje 103 mg, 71,2% prinosa. LCMS (ESI) m/z:252,0 [M+H]+
12
(2'-(trifluorometil)-[4,5'-bipirimidin]-6-il)metanamin
Rastvor 6-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]pirimidin-4-karbonitrila (A, 140 mg, 0,557 mmol) i paladijum na ugljenu 10% (11,864 mg, 0,0111 mmol) u metanolu (11,148 ml) i hlorovodonične kiseline (0,10 ml, 2,7870 mmol) mešan je 10 minuta u atmosferi H2. Reakciona smeša je filtrirana kroz celit. Sirovi proizvod je prebačen u sledeći korak. LCMS (ESI) m/z:255,95 [M+H]+
(2S,4R)-tert-butil 4-fluoro-2-(((2'-(trifluorometil)-[4,5'-bipirimidin]-6-il)metil)karbamoil)pirolidin-1-karbokslat
Rastvoru (2S,4R)-1-tert-butoksikarbonil-4-fluoro-pirolidin-2-karboksilne kiseline (125 mg, 0,536 mmol) i [6-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamina (136,77 mg, 0,536 mmol) u N,N-dimetilformamidu (2,0 ml) dodat je N,N-diizopropiletilamin (0,140 ml, 0,80389 mmol) i HATU (249,52 mg, 0,64311 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Reakcija je ugašena vodom i ekstrahovana pomoću EtOAc. Organski slojevi su osušeni iznad natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani rotacionim isparivačem. Sirovi proizvod je prebačen u sledeći korak. LCMS (ESI) m/z:471,20 [M+H]+
(2S,4R)-4-fluoro-N-((2'-(trifluorometil)-[4,5'-bipirimidin]-6-il)metil)pirolidin-2-karboksamid
Rastvoru tert-butil (2S,4R)-4-fluoro-2-[[6-[2-4-(fluorometil)-2-[([6-[6-(trifluorometil)pirimidin-5-il]pirimidin-4-il]metilkarbamoil]pirolidin-1-karboksilata (252 mg, 0,5357 mmol) u 1,4-dioksanu (2,7 ml) dodata je hlorovodonična kiselina (4 mol/L) u 1,4-dioksanu (1,34 ml, 5,357 mmol). Reakciona smeša je mešana 6 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana i prebačena u sledeći korak. LCMS (ESI) m/z:371,05 [M+H]+
(2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[6-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]pirimidin-4-il]metil]pirolidin-2-karboksamid
Rastvoru (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[6-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]pirimidin-4-il]metil]pirolidin-2-karboksamida (198 mg, 0,5347 mmol) u dihlorometanu (10,71 ml) dodat je trietilamin (1,49 ml, 10,71 mmol), zatim 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorid (156,4 mg, 0,8036 mmol). Reakciona smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana i predata za rHPLC radi dobijanja 119 mg, 42,03% prinosa.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,72−9,68 (s, 2H), 9,36−9,33 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 9,21−9,11 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,30−8,25 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 8,08−7,99 (m, 2H), 7,52−7,43 (m, 2H), 5,31−5,12 (d, J = 52,3 Hz, 1H), 4,61−4,47 (m, 2H), 4,30−4,20 (dd, J = 10,0, 7,1 Hz, 1H), 3,80−3,58 (m, 2H), 2,46−2,37 (m, 1H), 2,25−2,03 (dddd, J = 42,7, 13,8, 10,0, 3,3 Hz, 1H), LCMS (ESI) m/z:529,11 [M+H]+.
Primer 43: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[2-metil-6-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-4-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
(2S,4R)-tert-butil 4-fluoro-2-(((2-metil-6-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)piridin-4-il)metil)karbamoil)pirolidin-1-karboksilat
Rastvoru tert-butil (2S,4R)-2-[[2-hloro-6-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-4-piridil]metilkarbamoil]-4-fluoro-pirolidin-1-karboksilat (120 mg, 0,2381 mmol) i trimetilboroksina (45,30 mg, 0,0504 ml, 0,3572 mmol) u 1,2-dimetoksietanu (4,763 ml) dodat je kalijum-karbonat (99,73 mg, 0,7144 mmol) i [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum (II) (17,60 mg, 0,02381 mmol). Reakciona smeša je degasirana, a zatim zagrejana mikrotalasima na 120° C 40 minuta. Reakciona smeša je
12
filtrirana kroz celit i koncentrovana. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (DCM/MeOH) za dobijanje 95 mg, 82,5% prinosa. LCMS (ESI) m/z:484,15 [M+H]+
(2S,4R)-4-fluoro-N-((2-metil-6-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)piridin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamid
Rastvoru tert-butil (2S,4R)-4-fluoro-2-[[2-metil-6-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-4-piridil]metilkarbamoil]pirolidin-1-karboksilata (A, 95 mg, 0,1965 mmol) u 1,4-dioksanu (0,9824 ml) dodata je hlorovodonična kiselina (4 mol/L) u 1,4-dioksanu (0,4912 ml, 1,965 mmol). Reakciona smeša je mešana 6 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana i prebačena u sledeći korak. LCMS (ESI) m/z:384,1 [M+H]+
(2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[2-metil-6-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-4-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamid
Rastvoru (2S, 4R)-4-fluoro-N-[[2-metil-6-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-4-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida (75,31 mg, 0,1965 mmol) u dihlorometanu (3,930 ml) dodat je trietilamin (0,548 ml, 3,930 mmol), zatim 4-fluorobenzensulfonil-hlorid (57,36 mg, 0,2947 mmol). Reakciona smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana i predata za rHPLC radi dobijanja 65,4mg, 61,47% prinosa.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,67−9,58 (s, 2H), 9,04−8,93 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,06−7,95 (m, 3H), 7,53−7,42 (m, 2H), 7,41−7,36 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 5,30−5,11 (d, J = 52,4 Hz, 1H), 4,55−4,37 (m, 2H), 4,24−4,17 (dd, J = 10,0, 7,1 Hz, 1H), 3,76−3,58 (m, 2H), 2,61−2,56 (s, 3H), 2,22−2,00 (m, 1H), LCMS (ESI) m/z:542,13 [M+H]+
Primer 44: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([3-fluoro-5-[2-metoksi-6-(trifluorometil)piridin-3-il]fenil]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
12
Korak br.1: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([3-fluoro-5-[2-metoksi-6-(trifluorometil)piridin-3-il]fenil]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida
Smeša (2S,4R)-N-[(3-bromo-5-fluorofenil)metil]-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamid (500 mg, 1,05 mmol, 1,00 ekviv), kalijumkarbonata (430 mg, 3,11 mmol, 3,00 ekviv), [2-metoksi-6-(trifluorometil)piridin-3-il]boronske kiseline (230 mg, 1.,04 mmol, 1,00 ekviv) i Pd(dppf)Cl2(78 mg, 0,11 mmol, 0,10 ekviv) u 1,4-dioksanu (12 ml) / voda (1,2 ml) mešana je 12 h na 80° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad natrijumsulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (200 mg, 33%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,88−7,85 (m, 3H),7,85−7,78 (m, 1H), 7,35−7,26 (m, 3H), 7,24−7,22 (m, 2H), 7,21−7,07 (d, 1H), 5,10−4,97 (m, 1H), 4,67−4,62 (m, 1H), 4,51−4,48 (m, 1H), 4,29−2,25 (m, 1H), 4,03 (s, 3H), 3,95−3,86 (m, 1H),3,67−3,42 (s, 1H), 2,52−2,50 (m, 1H), 2,49−2,35 (m, 1H).
Primer 45: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-[[3-fluoro-5-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]fenil]metil]-4-metil-pirolidin-2-karboksamida.
U vatrostalnu bočicu dodato je (2S)-N-[(3-bromo-5-fluoro-fenil)metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-4-metil-pirolidin-2-karboksamida (INT-52-5 iz primera 52) (60 mg, 0,12 mmol), 3-hloro-6-(trifluorometil)piridazina (29 mg, 0,16 mmol), bis(di-tert-butil(4-dimetilaminofenil)fosfin)dihloropaladijum(II) (6,3 mg, 0,0089 mmol), natrijum-karbonata (17 mg, 0,16 mmol) i kalijum-aceata (15 mg, 0,16 mmol). Dodati su acetonitril (0,8 ml) i voda (0,16 ml), azot je puštan kroz reakcionu smešu tokom 3 minuta, a zatim je zagrevana na 140 °C 30 minuta mikrotalasima. Reakciona smeša je razređena dihlormetanom, filtrirana kroz sloj celita, eluirana dihlormetanom, a filtrat je koncentrovan in vacuo. Ostatak je
12
apsorbovan na silikagelu i prečišćen fleš hromatografijom na molekularnim sitima pomoću 0% – 100% EtOAc u heptanu radi dobijanja delimično prečišćenog proizvoda. Ostatak je dalje prečišćen RP-HPLC dajući naslovno jedinjenje u obliku bele čvrste materije (17,0 mg, 27%). MS-ESI: [M+H]<+>559,12
<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8,92 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 8,57 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 8,39 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,07 (t, J = 1,4 Hz, 1H), 8,04−7,92 (m, 3H), 7,51−7,38 (m, 3H), 4,57−4,42 (m, 2H), 4,25−4,16 (m, 1H), 3,72−3,47 (m, 2H), 2,49−2,32 (m, 1H), 2,14−1,94 (m, 1H), 1,38 (d, J = 20,8 Hz, 3H).
Primer 46: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-((4-fluorofenil)sulfonil)-4-metil-N-((6-(4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: tert-butil ((6-(4-(trifluorometoksi)fenil)pirimidin-4-il)metil)karbamat (INT-46-7)
U vatrostalnu bočicu dodato je tert-butil N-[(6-hloropirimidin-4-il)metil]karbamata (150 mg, 0,58 mmol), 4-(trifluorometoksi)fenil-boronske kiseline (174 mg, 0,82 mmol), bis(di-tert-butil(4-dimetilaminofenil)fosfin)dihloropaladijum(II) (33 mg, 0,047 mmol), natrijum-karbonata (87 mg, 0,82 mmol) i kalijum-acetata (81 mg, 0,82 mmol). Dodati su acetonitril (3,0 ml) i voda (0,6 ml), azot je puštan kroz reakcionu smešu tokom 3 minuta, a zatim je zagrevana na 140 °C 30 minuta mikrotalasima. Reakciona smeša je razređena dihlormetanom, filtrirana kroz sloj celita, eluirana dihlormetanom, a filtrat je koncentrovan in vacuo. Ostatak je apsorbovan na silikagelu i prečišćen fleš hromatografijom na molekularnim
12
sitima pomoću 0% – 100% EtOAc u heptanu radi dobijanja željenog jedinjenja u obliku žute pene (215 mg, 100%). MS-ESI: [M+H]<+>370,2
Korak br. 2: (S)-benzil 4-okso-2-(((6-(4-(trifluorometoksi)fenil)pirimidin-4-il)metil)karbamoil)pirolidin-1-karboksilat (INT-46-8)
Rastvoru tert-butil N-[[6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-il]metil]karbamata (215 mg, 0,6038 mmol,) u dihlorometanu (6 ml) dodata je hlorovodonična kiselina (4 mol/L) u 1,4-dioksanu (3 ml, 12 mmol), a reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi, zatim koncentrovana in vacuo. Ostatak je rastvoren u dihlormetanu (3 ml), pa je dodata (2S)-1-benzilooksikarbonil-4-okso-pirolidin-2-karboksilna kiselina (100 mg, 0,38 mmol), nakon N,N-diizopropiletilamina (147,3 mg, 0,199 ml, 1,140 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom noći na sobnoj temperaturi, zatim ugašena zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata i ekstrahovana EtOAc (3x). Kombinovani organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je apsorbovan na silikagelu i prečišćen fleš hromatografijom na molekularnim sitima pomoću 0% – 10% MeOH u DCM radi dobijanja željenog jedinjenja u obliku bež čvrste materije (142 mg, 46%). MS-ESI: [M+H]<+>515,2
Korak br. 3: (2S)-benzil 4-hidroksi-4-metil-2-(((6-(4-(trifluorometoksi)fenil)pirimidin-4-il)metil)karbamoil)pirolidin-1-karboksilat (INT-46-9) Rastvoru benzil (2S)-4-okso-2-[[6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-il]metilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilata (142 mg, 0,28 mmol) u tetrahidrofuranu (3,0 ml) dodat je rastvor kompleksa lantan(III) hlorid bis(litijum-hlorida) (0,6 M u THF) (0,51 ml, 0,30 mmol), a reakciona smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim ohlađena na -78° C, a metilmagnezijum-bromid (3,0 mol/L u dietil-eteru) (0,14 ml, 0,41 mmol) dodat je kap po kap, a reakciona smeša je mešana 30 minuta na -78° C. Dodata je dodatna količina metilmagnezijum-bromida (3,0 mol/L u dietil-eteru) (0,14 ml, 0,41 mmol), a reakciona smeša je mešana na -78° C još 15 minuta. Dodata je dodatna količina metilmagnezijum-bromida (3,0 mol/L u dietil-eteru) (0,14 ml, 0,41 mmol), a reakciona smeša je mešana na -78° C još 10 minuta. Reakciona smeša je ugrejana do sobne temperature, ugašena zasićenim rastvorom amonijum-hlorida i ekstrahovana EtOAc (3x). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je apsorbovan na silikagelu i prečišćen fleš hromatografijom na molekularnim sitima pomoću 0% – 10% MeOH u DCM radi dobijanja željenog jedinjenja u obliku bež pene (100 mg, 68%). MS-ESI: [M+H]<+>531,2
12
Korak br. 4: (2S)-benzil 4-fluoro-4-metil-2-(((6-(4-(trifluorometoksi)fenil)pirimidin-4-il)metil)karbamoil)pirolidin-1-karboksilata (INT-46-10)
Rastvoru (2S)-benzil 4-hidroksi-4-metil-2-[[6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-il]metilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilata (100 mg, 0,19 mmol) u dihlorometanu (4 ml) ohlađenom na -78° C dodat je dietilaminosumpor trifluorid (0,050 ml, 0,38 mmol), a reakciona smeša je mešana na -78° C tokom 2 h. Reakciona smeša je ugašena pažljivim dodavanjem zasićenog rastvora amonijum-hlorida i ekstrahovana DCM (3x). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je apsorbovan na silikagelu i prečišćen fleš hromatografijom na molekularnim sitima pomoću 0% – 10% MeOH u DCM radi dobijanja željenog jedinjenja u obliku smeđe čvrste materije (72,5 mg, 72%). MS-ESI: [M+H]<+>399,1
Korak br. 5: (2S)-4-fluoro-4-metil-N-((6--(4-(trifluorometoksi)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamid (INT-46-11)
Rastvoru (2S)-benzil 4-fluoro-4-metil-2-[[6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-il]metilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilata (72,5 mg, 0,14 mmol) u etanolu (4 ml) dodat je paladijum na ugljenu (10 mass%) (14,5 mg, 0,014 mmol). Vodonični gas je puštan kroz reakcionu smešu tokom 5 minuta, a mešanje je nastavljeno tokom jednog sata u vodoničnoj atmosferi tokom noći. Reakciona smeša je razređena dihlormetanom, filtrirana kroz sloj celita, eluirana dihlormetanom, a filtrat je koncentrovan in vacuo. Sirovoj smeši je dodat paladijum na ugljenu (10 mass%) (14,5 mg, 0,014 mmol) i etanol (4 ml), a vodonični gas je puštan kroz reakcionu smešu tokom 5 minuta. Smeša je zatim zagrevana na 60° C u vodoničnoj atmosferi tokom noći. Reakciona smeša je razređena dihlormetanom, filtrirana kroz sloj celita, eluirana dihlormetanom, a filtrat je koncentrovan in vacuo. Ostatak je apsorbovan na silikagelu i prečišćen fleš hromatografijom na molekularnim sitima pomoću 0% – 10% MeOH u DCM radi dobijanja željenog jedinjenja u obliku žute pene (37,6 mg, 69%). MS-ESI: [M+H]<+>533,2
Korak br. 6: (2S,4R)-4-fluoro-1-((4-fluorofenil)sulfonil)-4-metil-N-((6-(4-(trifluorometoksi)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamid
(2S)-4-fluoro-4-metil-N-[[6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-il]metil]pirolidin-2-karboksamidu (37,6 mg, 0,094 mmol) rastvorenom u dihlorometanu (2 ml) dodat je trietilamin (0,026 ml, 0,19 mmol) i 4-fluorobenzensulfonil-hlorid (20,2 mg, 0,10 mmol) na sobnoj temperaturi 4 h. Reakciona smeša je rastvorena u DCM i vodi, slojevi su izdvojeni, a vodeni sloj je ekstrahovan pomoću DCM (2x). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je apsorbovan na
1
silikagelu i prečišćen fleš hromatografijom na molekularnim sitima pomoću 0% – 10% MeOH u DCM radi dobijanja delimično prečišćenog naslovnog jedinjenja. Ostatak je prečišćen preparativnom RP-HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (4,1 mg, 8%) u obliku bele čvrste materije. MS-ESI: [M+H]<+>557,13
<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,20 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 9,07 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 8,37−8,28 (m, 2H), 8,09 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 8,06−7,94 (m, 2H), 7,51−7,43 (m, 4H), 4,57−4,41 (m, 2H), 4,32−4,23 (m, 1H), 3,74−3,48 (m, 2H), 2,49−2,34 (m, 1H), 2,18−1,97 (m, 1H), 1,39 (d, J = 20,8 Hz, 3H).
Primer 47: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-(3-fluoro-5-(5-(trifluorometil)pirazin-2-il)benzil)-1-((4-fluorobenzen)sulfonil)-4-metilpirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: (2S,4R)-4-fluoro-N-(3-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzil)-1-((4-fluorofenil)sulfonil)-4-metilpirolidin-2-karboksamid (INT-47-6)
U bočicu je dodat (2S,4R)-N-[(3-bromo-5-fluoro-fenil)metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-4-metil-pirolidin-2-karboksamid (INT-52-5) (340 mg, 0,69 mmol), 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen-paladijum(II)dihlorid dihlorometan kompleks (58 mg, 0,069 mmol), bis(pinakolato)diboron (264 mg, 1,04 mmol) i kalijum-acetat (204 mg, 2,08 mmol). Dodat je 1,4-dioksan (10 ml), a azot je puštan kroz reakcionu smešu tokom 3 minuta, a zatim je zagrevana na 85° C na 16 h. Reakciona smeša je razređena dihlormetanom, filtrirana kroz sloj celita, eluirana dihlormetanom, a filtrat je koncentrovan in vacuo. Ostatak je apsorbovan na silikagelu i prečišćen fleš hromatografijom na molekularnim sitima pomoću 0% – 88% EtOAc u heptanu radi dobijanja željenog jedinjenja u obliku smeđeg ulja (329 mg, 100%). MS-ESI: [M+H]<+>539,3
Korak br. 2: (2S,4R)-4-fluoro-N-(3-fluoro-5-(5-(trifluorometil)pirazin-2-il)benzil)-1-((4-fluorobenzen)sulfonil)-4-metilpirolidin-2-karboksamid
1 1
U vatrostalnu bočicu dodato je (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[3-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil]metil]-4-metil-pirolidin-2-karboksamida (329 mg, 0,61 mmol), 2-hloro-5-(trifluorometil)pirazin (138 mg, 0,73 mmol), bis(di-tert-butil(4-dimetilaminofenil)fosfin)dihloropaladijum(II) (35 mg, 0,049 mmol), natrijum-karbonat (91 mg, 0,86 mmol) i kalijum-acetat (85 mg, 0,86 mmol). Dodati su acetonitril (8,0 ml) i voda (1,6 ml), azot je puštan kroz reakcionu smešu tokom 4 minuta, a zatim je zagrevana na 140 °C 30 minuta mikrotalasima. Reakciona smeša je razređena dihlormetanom, filtrirana kroz sloj celita, eluirana dihlormetanom, a filtrat je koncentrovan in vacuo. Ostatak je apsorbovan na silikagelu i prečišćen fleš hromatografijom na molekularnim sitima pomoću 0% – 100% EtOAc u heptanu radi dobijanja delimično prečišćenog proizvoda. Ostatak je prečišćen preparativnom RP-HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (108 mg, 32%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,49 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 9,25 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 8,92 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,05 (t, J = 1,5 Hz, 1H), 8,00−7,92 (m, 3H), 7,53−7,36 (m, 3H), 4,56−4,40 (m, 2H), 4,25−4,16 (m, 1H), 3,71−3,47 (m, 2H), 2,44−2,34 (m, 1H), 2,14−1,93 (m, 1H), 1,38 (d, J = 20,8 Hz, 3H).
Primer 48: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[6-metil-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-2-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
(2S,4R)-tert-butil 2-(((4-bromo-6-metilpiridin-2-il)metil)karbamoil)-4-fluoropirolidin-1-karboksilat
Rastvoru (2S,4R)-1-tert-butoksikarbonil-4-fluoro-pirolidin-2-karboksilne kiseline (100 mg, 0,43 mmol) i (4-bromo-6-metil-2-piridil)metanamin hidrohlorida (112,02 mg, 0,47 mmol) u N,N-dimetilformamidu (1,7 ml) dodat je N,N-diizopropiletilamin (0,112 ml, 0,64 mmol) i HATU (199,62 mg, 0,51 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Reakcija je ugašena vodom i ekstrahovana pomoću EtOAc. Organski slojevi su osušeni iznad natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani rotacionim isparivačem. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (MeOH/DCM) za dobijanje 54mg, 30,2% prinosa. LCMS (ESI) m/z:416.05 [M+H]+
1 2
(2S,4R)-tert-butil 4-fluoro-2-(((6-metil-4-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)piridin-2-il)metil)karbamoil)pirolidin-1-karboksilat
Degasiran je rastvor 2-(trifluorometil)pirimidin-5-il boronske kiseline (1,2 ekviv., 0,3574 mmol), tert-butil (2S,4R)-2-[(4-bromo-6-metil-2-piridil)metilkarbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilata (124 mg, 0,2979 mmol), cezijum-karbonata (194,1 mg, 0,04714 ml, 0,5957 mmol) i [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum (II) dihlorometan adukt (0,10 ekviv., 0,02979 mmol) u acetonitrilu (3,0 ml) i vodi (1.5 ml). Reakciona smeša je zagrevana do 95 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz celit. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (MeOH/DCM) za dobijanje 70mg, 48,6% prinosa. LCMS (ESI) m/z:484.15 [M+H]+
(2S,4R)-4-fluoro-N-((6-metil-4-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)piridin-2-il)metil)pirolidin-2-karboksamid
Rastvoru tert-butil (2S,4R)-4-fluoro-2-[[6-metil-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-2-piridil]metilkarbamoil]pirolidin-1-karboksilata (70 mg, 0,1448 mmol) u 1,4-dioksanu (0,7239 ml) dodata je hlorovodonična kiselina (4 mol/L) u 1,4-dioksanu (0,3619 ml). Reakciona smeša je mešana 6 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana i prebačena u sledeći korak.
(2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[6-metil-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-2-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamid
1
Rastvoru (2S, 4R)-4-fluoro-N-[[6-metil-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-2-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida (55,5 mg, 0,1448 mmol) u dihlorometanu (2,9 ml) dodat je trietilamin (0,404 ml, 2,896 mmol), zatim 4-fluorobenzensulfonil-hlorid (42,26 mg, 0,2172 mmol). Reakciona smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana i predata za rHPLC radi dobijanja 61,4mg, 78,32% prinosa.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,51−9,41 (s, 2H), 9,06−8,95 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,05−7,95 (m, 2H), 7,77−7,68 (dd, J = 9,2, 1,5 Hz, 2H), 7,49−7,42 (m, 2H), 5,31−5,09 (d, J = 52,4 Hz, 1H), 4,56−4,40 (m, 2H), 4,30−4,20 (dd, J = 9,9, 7,1 Hz, 1H), 3,78−3,57 (m, 2H), 2,62−2,56 (s, 3H), 2,44−2,30 (m, 1H), 2,24−2,00 (dddd, J = 42,5, 14,0, 9,9, 3,4 Hz, 1H),, LCMS (ESI) m/z:542,13 [M+H]+
Primer 49: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([6-fluoro-4-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-il]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema (2,6-dihloropiridin-4-il) boronske kiseline
n-BuLi (3 ml, 2,5 M u heksanu, 1,50 ekviv) dodat je kap po kap rastvoru 2,6-dihloro-4-jodopiridina (1,40 g, 5,112 mmol, 1,00 ekviv) u tetrahidrofuranu (20 ml) na -78° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 30 min na -78° C. Trimetil-borat (580 mg, 5,582 mmol, 1,10 ekviv) dodat je na -78° C i reakcija je mešana 1 h na -78° C. Dobijeni rastvor je mešan dodatnih 12 h na sobnoj temperaturi, ugašen pomoću 1,6 g pinakola, a zatim AcOH (0,6 ml). Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (1 g, sirovo) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 2,6-dihloro-4-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]piridina
Smeša 2-bromo-5-(trifluorometil)piridina (800,00 mg, 3,54 mmol, 1,00 ekviv), (2,6-dihloropiridin-4-il)boronske kiseline (1 g, 5,21 mmol, 1.,00 ekviv), Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(290 mg, 0,36 mmol, 0,10 ekviv) i kalijum-karbonata (1,96 g, 14,18 mmol, 4,00 ekviv) u 1,4-
1 4
dioksanu (40 ml) / voda (2 ml) mešana je 12 h na 120° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijumsulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum-etra (1:100). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (680 mg, 66%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.3: Priprema 2-hloro-6-fluoro-4-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]piridina
Smeša 2,6-dihloro-4-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]piridina (680,00 mg, 2,32 mmol, 1,00 ekviv) i KF (134,80 mg, 2,32 mmol, 1,00 ekviv) u DMSO (5 ml) mešana je 6 h na 140° C. Dobijeni rastvor je razređen vodom i ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleumetra (1:100). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (600 mg, 93%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.4: Priprema 6-fluoro-4-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-karbonitrila
Smeša 2-hloro-6-fluoro-4-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]piridina (680,00 mg, 2,46 mmol, 1,00 ekviv), Zn(CN)2(288,71 mg, 2,46 mmol, 1,00 ekviv), Pd2(dba)3.CHCl3(250 mg, 0,24 mmol, 0,10 ekviv), dppf (410 mg, 0,74 mmol, 0,30 ekviv) i DMF (5 ml) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 2 h na 100° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je razređen u etilacetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću etilacetata / petroleum-etra (1:100). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (610 mg, 93%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema [6-fluoro-4-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-il]metanamin hidrohlorida
1
Smeša 6-fluoro-4-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-karbonitrila (300 mg, 1,12 mmol, 1,00 ekviv) i paladijuma na ugljenu (500 mg) u metanolu (50 ml) mešana je 30 minuta na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (300 mg, sirove) u obliku žute čvrste materije.
Korak 6: (2S,4R)-4-fluoro-2-[([6-fluoro-4-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata
Smeša (2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilna kiselina (260,00 mg, 1,11 mmol, 1.00 ekviv), DIEA (432,22 mg, 3,34 mmol, 3,00 ekviv), HATU (635,79 mg, 1,67 mmol, 1,50 ekviv) i [6-fluoro-4-[5-(trifluorometil)pirimidin-2-il]piridin-2-il]metanamina (302,33 mg, 1,11 mmol, 1,00 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (5 ml) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum-etra (1:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (200 mg, 37%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 7: (2S,4R)-4-fluoro-N-([6-fluoro-4-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorid
Smeša tert-butil (2S,4R)-4-fluoro-2-[([6-fluoro-4-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-il]metil)karbamoil]pirolidinin-1-karboksilata (200 mg, 0,41 mmol, 1,00 ekviv.) i zasićene HCl u 1,4-dioksanu (30 ml) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (150 mg, 94%) u obliku žute čvrste materije.
1
Korak br. 8: (2S,4R)-4-fluoro-N-([6-fluoro-4-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-il]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamid
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-N-([6-fluoro-4-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]pyridin-2-yl]metil)pirolidin-2-karboksamida (150,00 mg, 0,39 mmol, 1,00 ekviv), trietilamin (117,87 mg, 1,16 mmol, 3,00 ekviv) i 4-fluorobenzen-1-sulfonl-hlorida (151,13 mg, 0,78 mmol, 2,00 ekviv) u dihloromethanu (20 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 12 h. Reakcija je razređena vodom, ekstrahovana dihlormetanom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1). Sirovi proizvod (100 mg) je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (54,1 mg, 26%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,13 (s, 1H), 9,05−9,02 (m, 1H), 8,42−8,34 (m, 2H), 8,07 (s, 1H), 8,01−7,97 (m, 2H), 7,78 (s, 1H), 7,47−7,43 (m, 2H), 5,21 (d, J = 52,8 Hz, 2H), 4,46 (d, J = 6 Hz, 2H), 4,26−4,22 (m, 1H), 3,72−3,61 (m, 2H), 2,50−2,01 (m, 2H).
Primer 50: Priprema (2S,4R)-N-([3-cijano-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak 1: etil 4-metil-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-3-karboksilat
Smeša etil 4-metil-1H-pirazol-3-karboksilata (5 g, 32,43 mmol, 1,0 ekviv), 1-jodo-4-(trifluorometil)benzena (13,25 g, 48,71 mmol, 1,5 ekviv), CuI (600 mg, 3,15 mmol, 0,10 ekviv), L-prolina (750 mg, 6,51 mmol, 0,20 ekviv) i kalijum-karbonata (8,95 g, 64,76 mmol, 2,00 ekviv) u DMSO (150 mg) mešana je tokom noći na 100° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je ohlađena, rastvorena u etil-acetatu, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni
1
silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:5) dajući naslovno jedinjenje (5,3 g, 55%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak 2: etil 4-(bromometil)-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-3-karboksilat
Smeša etil 4-metil-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-3-karboksilata (5,78 g, 19,38 mmol, 1.00 ekviv), benzoil benzenekarboperoksoata (469 mg, 1,94 mmol, 0,10 ekviv), i 1-bromopirolidin-2,5-diona (3,45 g, 19,38 mmol, 1,00 ekviv) u CCl4(120 ml) mešana je tokom noći na 80° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:3) dajući naslovno jedinjenje (5 g, 68%) u obliku žute čvrste materije.
Korak 3: etil 4-(azidometil)-1-[4-(trifluorometil) fenil]-pirazol 1H-3-karboksilat
Smeša etil 4-(bromometil)-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-3-karboksilata (5 g, 13,26 mmol, 1,00 ekviv) i natrijum-azida (1 g, 15,38 mmol, 1,20 ekviv) u N, N-dimetilformamidu (80 ml) mešana je 2 dana na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (1,3 g, 29%) u obliku svetložutog ulja.
Korak 4: etil 4-(aminometil)-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-3-karboksilat hidrohlorid
U 100-mililitarsku laboratorijsku bocu s okruglim dnom (balon), prečišćenoj i održavanoj pomoću atmosfere H2, stavljen je etil 4-(azidometil)-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-3-karboksilat (1,15 g, 3,39 mmol, 1,00 ekviv), etanol (30 ml), paladijum na ugljenu (500 mg) i hidrogen-hlorid (2 ml). Dobijeni rastvor je mešan 1 h na sobnoj
1
temperaturi. Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (1 g, 84%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak 5: etil 4-([[(2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-3-karboksilat
Smeša (2S,4S)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline (824 mg, 3,53 mmol, 1.30 ekviv), HATU (1,55 g, 4,08 mmol, 1,50 ekviv), DIEA (1,05 g, 8,12 mmol, 3,00 ekviv) i etil 4-(aminometil)-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-3-karboksilat hidrohlorida (950 mg, 2,72 mmol, 1,00 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (30 ml) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleumetrom (1:3) dajući naslovno jedinjenje (1,35 g, 94%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 6: (2S,4R)-tert-butil 2-((3-karbamoil-1-(4-(trifluorometil)fenil)-1H-pirazol-4-il)metilkarbamoil)-4-fluoropirolidin-1-karboksilat
Smeša etil 4-([[(2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-3-karboksilata (1,3 g, 2,46 mmol, 1,00 ekviv) i NH3/metanola (20 ml, 493,98 mmol, 1,00 ekviv) mešana je tokom noći na 70° C. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (1,1 g) u obliku svetložute čvrste materije koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak 7: tert-butil (2S,4R)-2-[([3-cijano-1-[4-(trifluormetil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilat
1
Rastvor 4-([[(2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-3-karboksilna kiselina (400 mg, 0,80 mmol, 1,00 ekviv), TFAA (452 mg, 2,15 mmol, 2,00 ekviv) i TEA (320 mg, 3,16 mmol, 4,00 ekviv) u dihlorometanu (20 ml) mešan je 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:3) dajući naslovno jedinjenje (320 mg, 83%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 8: (2S,4R)-N-([3-cijano-1-[4-(trifluorometil)fenil)-1H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamid
Smeša tert-butil (2S,4R)-2-[([3-cijano-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidinin-1-karboksilata (310 mg, 0,64 mmol, 1,00 ekviv.) i HCl / 1,4-dioksana (20 ml) mešana je 5 h na sobnoj temperaturi. Čvrste materije su prikupljene filtracijom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (270 mg) u obliku bele čvrste supstance koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 9: (2S,4R)-N-([3-cijano-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamid
Rastvor (2S,4R)-N-([3-cyano-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (250 mg, 0,598 mmol, 1,00 ekviv), TEA (267 mg, 2,639 mmol, 4,00 ekviv), 4-dimetilaminopiridina (8 mg, 0,065 mmol, 0,10 ekviv) i 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorida (152 mg, 0,781 mmol, 1,20 ekviv) u dihlormetanu (10 ml) mešan je 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je rastvorena u dihlormetanu, isprana slanim rastvorom, osušena iznad natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je
14
prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (124,8 mg, 39%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,88−8,85 (m, 1H), 8,76 (s, 1H), 8,09−8,06 (m, 2H), 7,97−7,94 (m, 4H), 7,47−7,41 (m, 2H), 5,27−5,09 (d, J = 52,5 Hz, 1H), 4,38−4,34 (m, 2H), 4,16−4,10 (m, 1H), 3,71−3,57(m, 2H), 2,49−2,28(m, 1H), 2,20−2,35(m, 1H).
Primer 51: Priprema 5-fluoro-2-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[6-[6-(trifluormetil)-3-piridil]pirimidin-4-il]metil]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-karboksamida.
Korak br.1: Priprema etil 2-azabiciklo[2.2.1]hept-5-ene-3-karboksilata
Smeša ciklopenta-1,3-diena (16,5 g, 249,62 mmol, 1,00 ekviv), etil 2-oksoacetata (75 ml, 756,70 mmol, 3,00 ekviv) i NH4Cl (200 g, 3,74 mol, 15,00 ekviv) u vodi (800 ml) mešana je 16 h na sobnoj temperaturi. Natrijum-bikabonat (5 M) korišćen je za podešavanja pH vrednosti na 8. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (58 g, sirovo) u obliku smeđeg ulja.
Korak br.2: Priprema 2-benzil 3-etil 2-azabiciklo[2.2.1]hept-5-ene-2,3-dikarboksilata
Smeša etil 2-azabiciklo[2.2.1]hept-5-ene-3-karboksilata (5 g, 29,90 mmol, 1,00 ekviv), Cbz-Cl (5 g, 29,31 mmol, 1,00 ekviv) i TEA (6 g, 59,29 mmol, 2,00 ekviv) u dihlormetanu (30 ml) mešana je 16 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetata/petroleum-etra (1:5) dajući naslovno jedinjenje (1,8 g, 20%) u obliku crvenog ulja.
Korak br. 3: Priprema 2-benzil 3-etil 5-hidroksi-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilata
BH3.THF (47,8 ml, 1M u THF, 1,1 ekviv) dodat je kap po kap smeši 2-benzil 3-etil 2-azabiciklo[2.2.1]hept-5-ene-2,3-dikarboksilata (12 g, 42,4 mmol, 1,00 ekviv) u tetrahidrofuranu (150 ml) na -78° C u atmosferi azota. Nakon 1 h na sobnoj temperaturi, natrijum-hidroksid (10%) (69,6 ml, 148 mmol, 3,50 ekviv) i H2O2(30%) (22,6 ml, 212 mmol, 5,00 ekviv) je dodat na 0° C. Dobijeni rastvor je mešan 1 h na sobnoj temperaturi, ugašen vodom i ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (8,2 g, 62%) u obliku žutog ulja.
Korak br. 4: Priprema 2-benzil 3-etil 5-fluoro-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilata
DAST (4,.99g, 31 mmol, 2,2 ekviv.) dat je kap po kap smeši 2-benzil 3-etil 5-hidroksi-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilat i 2-benzil 3-etil 6-hidroksi-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilat (4,5 g, 14,1 mmol, 1,00 ekviv.) u DCM (100 mL) na -78° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 5 h na sobnoj temperaturi, ugašena vodom i ekstrahovana dihlormetanom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/5). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje i 2-benzil 3-etil 6-fluoro-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilat (1,2g, 27%) u obliku žutog ulja.
Korak br.5: Priprema etil 5-fluoro-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilata
Smeša 2-benzil 3-etil 6-fluoro-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilata i 2-benzil 3-etil 5-fluoro-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-2,3-dikarboksilata (4,7 g, 15,5 mmol, 1,00 ekviv.) i paladijum na ugljenu (1,0 g) u metanolu (50 mL) mešana je 16 h na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje i njegov etil 6-fluoro-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-dikarboksilat (2,5 g, 86%) u obliku žutog ulja.
Korak br. 6: Priprema etil 5-fluoro-2-(4-fluorofenilsulfonil)-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilata
Smeša dva poziciona izomera (2,5 g, 13,3 mmol, 1,00 ekviv.), TEA (2.7 g, 26.68 mmol, 2.00 ekviv.) i 4-fluorobenzen-1-sulfonl-hlorida (3,1 g, 15,93 mmol, 1,20 ekviv.) u dihlormetanu (50 ml) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1/5) radi dobijanja smeše naslovnog jedinjenja i etil 6-fluoro-2-(4-fluorofenilsulfonil)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilata (2,5 g, 54%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 7: Priprema 5-fluoro-2-(4-fluorofenilsulfonil)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilna kiselina
Smeša etil 5-fluoro-2-(4-fluorofenilsulfonil)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilata i etil 6-fluoro-2-(4-fluorofenilsulfonil)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilata (2,5 g, 7,24 mmol, 1,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (50 mL) i LiOH (522 mg, 21,80 mmol, 3,00 ekviv.) u vodi (50 mL) mešana je 16 h na sobnoj temperaturi. pH vrednost rastvora je podešena na 5 sirćetnom kiselinom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje i 6-fluoro-2-(4-fluorofenilsulfonil)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilna kiselina (2,0 g, 87%) u obliku žute čvrste materije.
14
Korak br. 8: Priprema 5-fluoro-2-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[6-[6-(trifluormetil)-3-piridil]pirimidin-4-il]metil]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-karboksamid
Smeša 5-fluoro-2-(4-fluorofenilsulfonil)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilne kiseline i 6-fluoro-2-(4-fluorofenilsulfonil)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilne kiseline (2,0g, 6,3 mmol, 1,00 ekviv.), (6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)mehanaminela (1,6 g, 6,3 mmol, 1,0 ekviv.), HATU (3,6g, 9,5mmol, 1,50 ekviv.) i DIPEA (1,6g, 12,6 mmol, 2,0 ekviv.) u DMF (50 mL) mešana je 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen preparativnom SFC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (137,3mg, 3,9%). tR= 0,90 min (Lux 3µm Cellulose-4, ,4,6x100mm, 3µm, MeOH (0,1%DEA) = 30%, 4 ml/min).
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,41 (s, 1H), 9,29 (d, J = 0,9 Hz, 1H), 8,91 (t, J = 6,3 Hz, 1H),8,73−8,70 (m, 1H), 8,09−7,99 (m, 4H),7,38 (t, J = 9,0Hz, 2H), 4,85−4,95 (d, J = 59,7 Hz, 1H),4,47 (t, J = 5,1Hz, 2H), 4,08 (s, 1H), 3,93 (s, 1H), 2,98 (d, J = 3,9Hz, 1H), 2,15 (s, J = 9,6Hz, 1H), 1,79−1,56 (m, 3H).
Takođe je izolovan 6-fluoro-2-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[6-[6-(trifluormetil)-3-piridil]pirimidin-4-il]metil]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-karboksamid (732,9mg, 20,9%) u obliku bele čvrste supstance. tR= 1,07 min (Lux 3µm Cellulose-4, 4,6x100mm, 3µm, MeOH (0,1%DEA) = 30%, 4 ml/min).
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,42 (s, 1H), 9,29 (s, 1H), 8,91 (t, J = 5,7 Hz, 1H),8,73 (d, J = 8,1Hz, 1H), 8,13−7,99 (m, 4H), 7,38 (t, J = 9,0Hz, 2H),4,85−4,65 (d, J = 59,7 Hz, 1H), 4,54−4,39 (m, 2H), 4,08 (s, 1H), 3,93 (s, 1H), 2,79 (d, J = 3,6Hz, 1H), 2,15 (s, J = 9,9 Hz, 1H), 1,91−1,39 (m, 3H).
Pozicija F (5-F ili 6-F) za gorenavedena dva poziciona izomera proizvoljno je određena. Stereohemija 2-prolina je prikazana.
Primer 52: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([3-fluoro-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)benzil)-1-[(4-fluorofenil)sulfonil)-4-metilpirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: (S)-tert-butil 2-((3-bromo-5-fluorobenzil)karbamoil)-4-oksopirolidin-1-karboksilat (INT-52-2)
U laboratorijsku bocu s okruglim dnom dodato je (2S)-1-tert-butoksikarbonil-4-oksopirolidin-2-karboksilna kiselina (2,35 g, 10,2 mmol), (3-bromo-5-fluorofenil)metanamin (2,00 g, 9,31 mmol) i HATU (3,97 g, 10,2 mmol). Dihlorometan (47 mL) je dodat, a za njim i N,N-diizopropiletilamin (3.25 mL, 18,6 mmol), a reakciona smeša je mešana tokom noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijumbikarbonata i ekstrahovana DCM (3x). Kombinovani organski ekstrakti su isprani vodom (1x), slanim rastvorom (1x), pa osušeni preko natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je apsorbovan na silikagelu i prečišćen fleš hromatografijom na molekularnim sitima pomoću 0% – 90% EtOAc u heptanu radi dobijanja željenog jedinjenja u obliku bež čvrste materije (3,47 g, 100%). MS-ESI: [M+H]<+>414,9
Korak br. 2: (2S,4R)-tert-butil 2-((3-bromo-5-fluorobenzil)karbamoil)-4-hidroksi-4-metilpirolidin-1-karboksilat (INT-52-3)
Rastvoru benzil (S)-tert-butil 2-((3-bromo-5-fluorobenzil)karbamoil)-4-oksopirolidin-1-karboksilata (1,94 g, 4,67 mmol) u tetrahidrofuranu (40 ml) dodat je rastvor kompleksa lantan(III) hlorid bis(litijum-hlorida) 0,6 M u THF (8,6 ml, 5,14 mmol), a reakciona smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ohlađena na -78° C, a metilmagnezijum-bromid (3,0 mol/L u dietil-eteru) (7,0 ml, 21,0 mmol) dodat je kap po kap, a reakciona smeša je mešana 30 minuta na -78° C. Dodata je dodatna količina
14
metilmagnezijum-bromida (3,0 mol/L) u dietil-eteru (7,0 ml, 21,0 mmol), a smeša je mešana na -78° C još 30 minuta. Dodata je dodatna količina metilmagnezijum-bromida (3,0 mol/L u dietil-eteru) (7,0 ml, 21,0 mmol), a smeša mešana na -78° C još 15 minuta. Reakciona smeša je ugrejana do sobne temperature, ugašena zasićenim rastvorom amonijum-hlorida i ekstrahovana EtOAc (3x). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je apsorbovan na silikagelu i prečišćen fleš hromatografijom na molekularnim sitima pomoću 0% – 64% EtOAc u heptanu radi dobijanja željenog jedinjenja u obliku bež pene (1,29 g, 100%). MS-ESI: [M-100]<+>331.0
Korak br. 3: (2S,4R)-tert-butil 2-((3-bromo-5-fluorobenzil)karbamoil)-4-fluoro-4-metilpirolidin-1-karboksilat (INT-52-3)
Rastvoru (2S,4R)-tert-butil 2-((3-bromo-5-fluorobenzil)karbamoil)-4-hidroksi-4-metilpirolidin-1-karboksilata (337 mg, 0,781 mmol) u dihlorometanu (10 ml) ohlađenom na -78° C dodat je dietilaminosumpor trifluorid (0,21 ml, 1,56 mmol), a reakciona smeša je mešana na -78° C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je ugašena pažljivim dodavanjem zasićenog rastvora amonijum-hlorida i ekstrahovana DCM (3x). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je apsorbovan na silikagelu i prečišćen fleš hromatografijom na molekularnim sitima pomoću 0% – 10% MeOH u DCM radi dobijanja željenog jedinjenja u obliku smeđe čvrste materije (314,7 mg, 93%). MS-ESI: [M+H]<+>433,1
Korak br. 4: (2S,4R)-N-(3-bromo-5-fluorobenzil)-4-fluoro-1-((4-fluorofenil)sulfonil)-4-metilpirolidin-2-karboksamid (INT-52-5)
Rastvoru (2S,4R)-tert-butil 2-((3-bromo-5-fluorobenzil)karbamoil)-4-hidroksi-4-metilpirolidin-1-karboksilata (315 mg, 0,7270 mmol) u dihlorometanu (4 mL) dodata je hlorovodonična kiselina (4 mol/L) u 1,4-dioksanu(1,5 mL, 6,0 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h i koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je rastvoren u dihlormetanu (6 mL) i dodati su trietilamin (0,30 mL, 2,2 mmol) i 4-fluorobenzenesulfonil-hlorid (156 mg, 0,8005 mmol), i reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je rastvorena u DCM i vodi, slojevi su izdvojeni, a vodeni sloj je ekstrahovan pomoću DCM (2x). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je apsorbovan na silikagelu i prečišćen fleš hromatografijom na molekularnim sitima pomoću 0% – 10% MeOH u DCM radi dobijanja naslovnog jedinjenja u obliku svetložute pene (172,4 mg, 48%). MS-ESI: [M-H]<−>493,1
14
Korak br. 5: (2S,4R)-4-fluoro-N-(3-fluoro-5-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)benzil)-1-((4-fluorobenzen)sulfonil)-4-metilpirolidin-2-karboksamid
U vatrostalnu bočicu dodato je (2S)-N-[(3-bromo-5-fluoro-fenil)metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-4-metil-pirolidin-2-karboksamida (60 mg, 0,12 mmol), 2-(trifluorometil)pirimidin-5-il boronske kiseline (33 mg, 0,17 mmol), bis(di-tert-butil(4-dimetilaminofenil)fosfin)dihloropaladijum(II) (6,9 mg, 0,0098 mmol), natrijum-karbonata (18 mg, 0,17 mmol) i kalijum-acetata (17 mg, 0,17 mmol). Dodati su acetonitril (0,8 ml) i voda (0,16 ml), azot je puštan kroz reakcionu smešu tokom 3 minuta, a zatim je zagrevana na 140 °C 30 minuta mikrotalasima. Reakciona smeša je razređena dihlormetanom, filtrirana kroz sloj celita, eluirana dihlormetanom, a filtrat je koncentrovan in vacuo. Ostatak je apsorbovan na silikagelu i prečišćen fleš hromatografijom na molekularnim sitima pomoću 0% – 100% EtOAc u heptanu radi dobijanja delimično prečišćenog proizvoda. Ostatak je dalje prečišćen RP-HPLC dajući naslovno jedinjenje u obliku bele čvrste materije (43,3 mg, 68%). MS-ESI: [M+H]<+>559,12
<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,42 (s, 2H), 8,92 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,02−7,92 (m, 2H), 7,78−7,69 (m, 2H), 7,51−7,40 (m, 2H), 7,40−7,32 (m, 1H), 4,56−4,38 (m, 2H), 4,25−4,16 (m, 1H), 3,71−3,46 (m, 2H), 2,48−2,31 (m, 1H), 2,15−1,94 (m, 1H), 1,38 (d, J = 20,7 Hz, 3H).
Primer 53: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-2-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 48.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,51−9,44 (s, 2H), 9,08−8,98 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,78−8,69 (dd, J = 5,2, 0,8 Hz, 1H), 8,04−7,96 (m, 2H), 7,94−7,89 (dd, J = 1,7, 0,9 Hz, 1H), 7,89−7,83 (dd, J = 5,2, 1,8 Hz, 1H), 7,51−7,40 (m, 2H), 5,30−5,09 (d, J = 52,5 Hz, 1H), 4,62−4,46 (m, 2H), 4,29−4,18 (dd, J = 9,9, 7,1 Hz, 1H), 3,78−3,57 (m, 2H), 2,43−2,35 (m, 1H), 2,23−2,02 (m, 1H),, LCMS (ESI) m/z:528,11 [M+H]+
Primer 54: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-(2-fluoro-5-(5-(trifluorometil)pirazin-2-il)benzil)-1-((4-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
14
U vatrostalnu bočicu dodato je (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[2-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil]metil]pirolidin-2-karboksamid 1 (216 mg, 0,41 mmol), 2-hloro-5-(trifluorometil)pirazin (105 mg, 0,58 mmol), Pd (amfos)Cl2(23 mg, 0,03 mmol), natrijum-karbonat (61 mg, 0,58 mmol) i kalijum-acetat (57 mg, 0,58 mmol), acetonitril (0,8 mL) i voda (0,16 mL). Reakciona smeša je prečišćena gasovitim azotom 3 minuta, a zatim zagrevana na na 140° C 30 minuta mikrotalasima. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, dobijena smeša je filtrirana kroz tanak sloj celita, isprana vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen reverznom faznom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (99 mg, 44%) u obliku bele čvrste materije. LC/MS (ESI+): m/z 545.5 (M+H).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,42 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 9,21 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 8,92 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 8,36−8,13 (m, 2H), 8,08−7,88 (m, 2H), 7,44 (td, J = 8,6, 1,3 Hz, 3H), 4,54−4,35 (m, 2H), 4,22 (dd, J = 9,8, 7,2 Hz, 1H), 3,78−3,49 (m, 2H), 2,50−2,27 (m, 2H), 2,09 (dddd, J = 42,1, 13,8, 9,8, 3,5 Hz, 1H).
Primer 55: Priprema (2R, 3S)-N-[[6-[4-(difluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil]-3-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida.
(2R,3S)-tert-butil 2-(((6-(4-(difluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metil)karbamoil)-3-fluoropirolidin-1-karboksilat
Rastvoru tert-butil (2S,3R)-2-[[6-[4-(difluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metilkarbamoil]-3-hidroksi-pirolidin-1-karboksilata (360 mg, 0,8027 mmol) u dihlorometanu (16,0 mL) na 0° C dodat je kap po kap dietilaminosulfur-trifluorida (388,1 mg, 0,3187 ml, 2,408 mmol). Reakciona smeša je zagrevana 1 h na sobnu temperaturu. Reakcija je ugašena vodom i ekstrahovana pomoću EtOAc. Organski slojevi su osušeni iznad
14
natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani rotacionim isparivačem. Sirovi proizvod je prebačen u sledeći korak.
(2R, 3S)-N-((6-(4-(difluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metil)-3-fluoropirolidin-2-karboksamid
Rastvor tert-butil (2R,3S)-2-[[6-[4-(difluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metilkarbamoil]-3-fluoro-pirolidin-1-karboksilata (361 mg, 0,8015 mmol) u hlorovodoničnoj kiselini (4 mol/L) u 1,4-dioksanu (2,00 mL) i 1,4-dioksan (3,00 mL) mešan je na RT 18 h. Reakciona smeša je koncentrovana i prebačena u sledeći korak. LCMS (ESI) m/z:351,05 [M+H]+
(2R, 3S)-N-[[6-[4-(difluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil]-3-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamid
Rastvoru (2R, 3S)-N-[[6-[4-(difluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil]-3-fluoropirolidin-2-karboksamida (281 mg, 0,8022 mmol) u dihlorometanu (8,027 ml) dodat je trietilamin (2,24 mL, 16,05 mmol), i 4-fluorobenzensulfonil-hlorid (187,5 mg, 0,9632 mmol). Reakciona smeša je mešana 1 h na RT. Sirovi proizvod je koncentrovan i prečišćen fleš hromatografijom (MeOH/DCM) i predat rHPLC za dobijanje 113mg, 27,69%.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,25−9,21 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 9,21−9,14 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,40−8,31 (m, 2H), 8,09−8,00 (m, 3H), 7,77−7,70 (dt, J = 8,5, 1,1 Hz, 2H), 7,56−7,47 (m, 2H), 7,28−6,96 (m, 1H), 5,32−5,12 (m, 1H), 4,61−4,38 (m, 3H), 3,74−3,63 (ddd, J = 9,7, 6,7, 1,9 Hz, 1H), 3,23−3,12 (m, 1H), 2,29−2,08 (m, 2H),, LCMS (ESI) m/z:509,13 [M+H]+
Primer 56: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-(2-fluoro-5-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)benzil)-1-((4-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
14
Prati iste procedure primera 183, korak 4: Naslovno jedinjenje (2S,4R)-4-fluoro-N-(2-fluoro-5-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)benzil)-1-((4-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamid (849 mg, 68%) pripremljen je od (2S,4R)-N-[(5-bromo-2-fluoro-fenil)metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida 1 (1,1 g, 2,3 mmol), [5-(trifluorometil)pirimidin-2-il]boronske kiseline (487mg, 2,5 mmol), cezijum-karbonata 1 M u vodi (3,2 mL, 3,2 mmol), Pd(dppf)Cl2(192 mg, 0,23 mmol) u acetonitrilu (4 mL). LC/MS (ESI+): m/z 545.5 (M+H).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,36 (s, 1H), 8,90 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 8,06−7,79 (m, 3H), 7,45 (td, J = 8,8, 1,4 Hz, 2H), 5,19 (d, J = 52,6 Hz, 1H), 4,47 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 4,29−4,10 (m, 1H), 3,75−3,67 (m, 1H), 3,67−3,51 (m, 1H), 2,47−2,29 (m, 1H), 2,09 (dddd, J = 42,5, 13,8, 10,0, 3,4 Hz, 1H).
Primer 57: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[2-[2-hidroksi-4-(trifluormetil) fenil]-4-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: (2S,4R)-N-((2-(2-(benziloksi)-4-(trifluorometil)fenil)piridin-4-il)metil)-4-fluoro-1-((4-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamid
Naslovno jedinjenje (72 mg, 64%) je pripremljeno prema proceduri Suzuki kuplovanja iz primera 8, korak 1 od (2S,4R)-N-[(2-bromo-4-piridil)metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida (82 mg, 0,18 mmol), 2-benziloksi-4-(trifluorometil)fenil boronske kiseline (69 mg, 0,22 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijuma(II) (14 mg, 0,02 mmol) i vodenog rastvora Cs2CO3 (0,22 mL, 0,22 mmol, 1,0 mol/L) u acetonotrilu (4 mL). LCMS (ESI_Formic_MeCN): [MH<+>] = 632.
1
Korak br. 2: (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[2-[2-hidroksi-4-(trifluormetil) fenil]-4-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamid
(2S,4R)-N-[[2-[2-benziloksi-4-(trifluorometil)fenil]-4-piridil]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamid (36 mg, 0,06 mmol) u metanolu (4 ml) hidrogenizovan je na 1 atm iznad paladijuma na ugljenu (10%) (22 mg) tokom 2 sata. Smeša je filtrirana kroz celit, a filtrat koncentrovan u vakuumu. Ostatak je izložen prečišćavanju RP HPLC tehnikom radi dobijanja 22 mg (71%) naslovnog jedinjenja.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d 6) δ 14,70 (s, 1H), 9,02 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,64 (dd, J = 5,3, 0,7 Hz, 1H), 8,32−8,22 (m, 2H), 8,06−7,97 (m, 2H), 7,53−7,43 (m, 3H), 7,27−7,21 (m, 1H), 7,20−7,14 (m, 1H), 5,21 (d, J = 52,2 Hz, 1H), 4,61−4,44 (m, 2H), 4,21 (dd, J = 9,9, 7,1 Hz, 1H), 3,81−3,57 (m, 2H), 2,49−2,36 (m, 1H), 2,11 (dddd, J = 42,5, 13,8, 10,0, 3,4 Hz, 1H).
Primer 58: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[3-metoksi-1-[5-(trifluorometil) pirazin-2-il]pirazol-4-il]metil]pirolidin;-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema etil 3-metoksi-1-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-karboksilata
Smeša etil 3-metoksi-1H-pirazol-4-karboksilata (1,116 g, 6,56 mmol, 1,00 ekviv) u N,N-dimetilformamid (60 mL), L-Prolina (151 mg, 1,31 mmol, 0,20 ekviv), CuI (128 mg, 0,67 mmol, 0,10 ekviv), 2-hloro-5-(trifluorometil)pirazina (1,19 g, 6,52 mmol, 1,00 ekviv) i kalijum-karbonata (2,72 g, 19,68 mmol, 3,00 ekviv) mešana je tokom noći na 100° C u atmosferi azota. Čvrste supstance su filtrirane. Filtrat je rastvoren pomoću 500 ml etil-acetata,
1 1
ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleumetrom (5:100) dajući naslovno jedinjenje (1 g, 48%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema [3-metoksi-1-[5-(trifluorometil) pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-il]metanola
DIBAL-H (6 mL, 6,33 mmol, 2,10 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru etl 3-metoksi-1-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-karboksilata (950 mg, 3,00 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlorometanu (50 mL) na -78° C u atmosferi azota. Nakon tri sata na 78° C, reakcija je ugašena metanolom, razređena slanim rastvorom, ekstrahovana dihlormetanom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (10:100) dajući naslovno jedinjenje (600 mg, 73%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema 2-([3-metoksi-1-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona
DIAD (267 mg, 1,32 mmol, 1,20 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru [3-metoksi-1-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-il]metanola (300 mg, 1,09 mmol, 1,00 ekviv.), 2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-dion (242 mg, 1,64 mmol, 1,50 ekviv.) i PPh3(577 mg, 2,20 mmol, 2,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (30 mL) na 0° C u atmosferi azota. Nakon 5 h na sobnoj temperaturi, dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (5:100) dajući naslovno jedinjenje (500 mg) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema [3-metoksi-1-[5-(trifluorometil) pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-il]metanamina
1 2
Rastvor 2-([3-metoksi-1-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (400 mg, 0,99 mmol, 1,00 ekviv.) i NH2NH2.H2O (1 mL, 20,58 mmol, 41,50 ekviv.) u metanolu (5 mL) mešan je tokom noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je rastvoren u etil-acetatu. Čvrste supstance su filtrirane. Filtrat je koncentrovan u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (210 mg, 77%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 5: Priprema tert-butil (2S,4R)-4-fluoro-2-[([3-metoksi-1-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata
Smeša [3-metoksi-1-[5-(trifluorometil) pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-il]metanamina (210 mg, 0,77 mmol, 1,00 ekviv.), (2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline (197 mg, 0,84 mmol, 1,10 ekviv), HATU (437 mg, 1,15 mmol, 1,50 ekviv.) i DIEA (248 mg, 1,92 mmol, 2.50 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (5 mL) mešana je tokom noći na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (190 mg, 51%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 6: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([3-metoksi-1-[5-(trifluorometil)-pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida
Smeša tert-butil (2S,4R)-4-fluoro-2-[([3-metoksi-1-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-il]metil)karbamoil]pirolidinin-1-karboksilata (100 mg, 0,205 mmol, 1,00 ekviv.) i zasićenog hlorovodonika u 1,4-dioksanu (5 ml) mešana je tokom noći na sobnoj temperaturi.
1
Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (79 mg, 91%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br.7: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[3-metoksi-1-[5-(trifluorometil) pirazin-2-il]pirazol-4-il]metil]pirolidin;-2-karboksamida
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-N-([3-metoksi-1-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (60 mg, 0,141 mmol, 1,00 ekviv), 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorida (36 mg, 0,185 mmol, 1,20 ekviv), 4-dimetilaminopiridina (2 mg, 0,016 mmol, 0,20 ekviv) i TEA (60 mg, 0,593 mmol, 3,80 ekviv) u dihlormetanu (5 ml) mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etilacetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/5) dajući naslovno jedinjenje (30,6 mg, 38%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,16 (s, 1H), 8,61 (s, 1H), 8,37 (s, 1H), 7,88−7,33 (m, 2H), 7,36−7,18 (m, 2H), 5,11−4,94 (d, J = 26,1 Hz, 1H), 4,44−4,22 (m, 3H), 4,19 (s, 3H), 3,95−3,38 (m, 1H), 3,69−3,50 (m, 1H), 2,50−2,19 (m, 2H).
Primer 59: Priprema (2S, 4R)-N-[[6-[4-(difluorometil)-3-fluorofenil]pirimidin-4-il]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 42.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,26−9,22 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 9,15−9,07 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,21−8,09 (m, 3H), 8,07−8,00 (m, 2H), 7,82−7,74 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,52−7,44 (m, 2H), 7,40−7,11 (m, 1H), 5,31−5,12 (m, 1H), 4,59−4,42 (m, 2H), 4,29−4,22 (dd, J = 10,0, 7,1 Hz, 1H), 3,76−3,58 (m, 2H), 2,46-2,36 (m, 1H), 2,24−2,02 (dddd, J = 42,6, 13,6, 10,0, 3,3 Hz, 1H),, LCMS (ESI) m/z:527,12 [M+H]+
1 4
Primer 60: Priprema (2S, 4R)-N-[[2-hloro-6-[6-(difluorometil)-3-piridil]-4-piridil] metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 62.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,36−9,28 (dd, J = 2,3, 0,8 Hz, 1H), 9,07−8,97 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,65−8,57 (dd, J = 8,2, 2,2 Hz, 1H), 8,14−8,09 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 8,04−7,96 (m, 2H), 7,86−7,80 (m, 1H), 7,61−7,55 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 7,52−7,43 (m, 2H), 7,20−6,87 (m, 1H), 5,31−5,10 (d, J = 52,4 Hz, 1H), 4,58−4,40 (m, 2H), 4,24−4,13 (dd, J = 10,0, 7,1 Hz, 1H), 3,79−3,59 (m, 2H), 2,46−2,36 (m, 1H), 2,22−1,99 (m, 1H),, LCMS (ESI) m/z:543,09 [M+H]+
Primer 61: Priprema (2S, 4R)-N-[[2,6-bis-[2-(trifluorometil) pirimidin-5-il]-4-piridil]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 62.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,96−9,82 (s, 4H), 9,21−9,09 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,42−8,29 (s, 2H), 8,10−7,98 (m, 2H), 7,55−7,41 (m, 2H), 5,31−5,12 (d, J = 52,2 Hz, 1H), 4,72−4,53 (m, 2H), 4,29−4,18 (dd, J = 10,1, 7,0 Hz, 1H), 3,80−3,60 (m, 2H), 2,47−2,37 (m, 1H), 2,26−2,03 (m, 1H),, LCMS (ESI) m/z:674,2 [M+H]+
Primer 62: Priprema (2S, 4R)-N-[[2-hloro-6-[2-(trifluorometil) pirimidin-5-il]-4-piridil]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin;-2-karboksamida.
1
(2S,4R)-tert-butil 2-(((2,6-dihloropiridin-4-il)metil)karbamoil)-4-fluoropirolidin-1-karboksilat
Rastvoru (2S,4R)-1-tert-butoksikarbonil-4-fluoro-pirolidin-2-karboksilne kiseline (500 mg, 2,1437 mmol) i 2,6-dihloropiridin-4-metilnamina (426 mg, 2,36 mmol) u N,N-dimetilformamidu (8,6 ml) dodat je N,N-diizopropiletilamin (0,561 ml, 3,2156 mmol) i HATU (998,09 mg, 2,5725 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Reakcija je ugašena vodom i ekstrahovana pomoću EtOAc. Organski slojevi su osušeni iznad natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani rotacionim isparivačem. Sirovi proizvod je prebačen u sledeći korak.
(2S,4R)-tert-butil 2-(((2-hloro-6-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)piridin-4-il)metil)karbamoil)-4-fluoropirolidin-1-karboksilat
Degasiran je rastvor 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-2-(trifluorometil)pirimidin (0,5 ekviv., 0,2295 mmol), tert-butil (2S,4R)-2-[(2,6-dihloro-4-piridil)metilkarbamoil]-4-fluoro-pirolidin-1-karboksilata (180 mg, 0,4589 mmol), cezijumkarbonata (299,1 mg, 0,07263 ml, 0,9179 mmol) i [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum (II) dihlorometan adukt (0,10 ekviv., 0,04589 mmol) u acetonitrilu (3,0 ml) i vode (1,5 ml). Reakciona smeša je zagrevana do 95 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz celit. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (MeOH/DCM) za dobijanje 84mg, 36,3% prinosa. LCMS (ESI) m/z:504,20 [M+H]+
1
(2S,4R)-N-((2-hloro-6-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)piridin-4-il)metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamid
Rastvoru tert-butil (2S,4R)-2-[[2-hlorol-6-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-4-piridil]metilkarbamoil]-4-fluoro-pirolidin-1-karboksilata (84 mg, 0,1667 mmol) u 1,4-dioksanu (860,2 mg, 0,8335 mL, 9,763 mmol) dodata je hlorovodonična kiselina (4 mol/L) u 1,4-dioksanu (438 mg, 0,4167 mL, 1,667 mmol). Reakciona smeša je mešana 6 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana i prebačena u sledeći korak. LCMS (ESI) m/z:404,0 [M+H]+
(2S, 4R)-N-[[2-hloro-6-[2-(trifluorometil) pirimidin-5-il]-4-piridil]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin;-2-karboksamid
Rastvoru (2S, 4R)-N-[[2-hloro-6-[2-(trifluorometil) pirimidin-5-il]-4-piridil]metil]-4-fluoro-pirolidin-2-karboksamida (B) u dihlorometanu (3,3 ml) dodat je trietilamin (337.4 mg, 0.465 mL, 3.334 mmol), zatim 4-fluorobenzensulfonil-hlorid (C, 48,66 mg, 0,2500 mmol). Reakciona smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana i predata za rHPLC radi dobijanja 32,1mg, 34,3% prinosa.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,64−9,57 (s, 2H), 9,11−9,01 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,23−8,16 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 8,05−7,97 (m, 2H), 7,70−7,63 (q, J = 0,9 Hz, 1H), 7,53−7,43 (m, 2H), 5,30−5,10 (d, J = 52,6 Hz, 1H), 4,59−4,41 (m, 2H), 4,23−4,13 (dd, J = 10,1, 7,1 Hz, 1H), 3,79−3,58 (m, 2H), 2,47−2,36 (m, 1H), 2,21−1,98 (m, 1H),, LCMS (ESI) m/z:562,2 [M+H]+
Primer 63: (2S, 4R)-N-[[6-[4-(difluorometil) fenil]pirimidin-4-il]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin-2-karboksamid.
1
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 42.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,26−9,20 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 9,12−9,04 (m, 1H), 8,37−8,32 (dd, J = 7,7, 1,2 Hz, 1H), 8,17−8,10 (m, 1H), 8,07−8,00 (m, 2H), 7,73−7,67 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,54−7,45 (m, 2H), 7,35−7,28 (m, 1H), 7,26−6,94 (m, 2H), 5,31−5,12 (d, J = 52,3 Hz, 1H), 4,60−4,42 (m, 2H), 4,31−4,21 (m, 1H), 3,79−3,59 (m, 2H), 2,46−2,31 (m, 1H), 2,23−2,01 (m, 1H),, LCMS (ESI) m/z:509,2 [M+H]+
Primer 64: (2S, 4R)-N-[[6-[4-(difluorometoksi) fenil]pirimidin-4-il] metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin-2-karboksamid.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 42.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,20−9,14 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 9,11−9,04 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,33−8,25 (m, 2H), 8,08−8,01 (m, 3H), 7,51−7,44 (m, 2H), 7,32−7,26 (m, 2H), 5,32−5,11 (d, J = 52,3 Hz, 1H), 4,50−4,45 (dd, J = 5,8, 3,7 Hz, 2H), 4,29−4,21 (m, 1H), 3,76−3,62 (m, 2H), 2,46−2,36 (m, 1H), 2,25−2,01 (m, 1H),, LCMS (ESI) m/z:525,2 [M+H]+ Primer 65: (2S,4R)-4-fluoro-N-[[5-fluoro-4-[5-fluoro-6-(trifluorometil)-3-piridil)-2-piridil)metil]-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamid.
Korak br.1: Priprema 5-bromo-3-fluoro-2-jodopiridina
Smeša 5-bromo-2-hloro-3-fluoropiridina (5,00 g, 23,76 mmol, 1,000 ekviv.), NaI (10,68 g, 71,25 mmol, 3,0 ekviv.) i hlorotrimetilsilana (2,58 g, 23,748 mmol, 1,000 ekviv.) u CH3CN (20 mL) mešana je 2 h na 80° C. Reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana etilacetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetata/petroleum-etra (1:100) dajući naslovno jedinjenje (1,5 g, 21%) u obliku žute čvrste materije.
1
Korak br.2: Priprema 5-bromo-3-fluoro-2-(trifluorometil)piridina
Smeša 5-bromo-3-fluoro-2-jodopiridina (1,20 g, 3,98 mmol, 1,00 ekviv.), metil 2,2-difluoro-2-(fluorosulfonil)acetata (5,35 g, 27,85 mmol, 7,00 ekviv.), CuI (5,30 g, 27,83 mmol, 7,00 ekviv.) i DMF (20 mL) mešana je 12 h na 70° C u atmosferi azota. Reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:200) dajući naslovno jedinjenje (200 mg, 21%) u obliku žutog ulja.
Korak br.3: Priprema [5-fluoro-6-(trifluorometil)piridin-3-il] boronske kiseline
Smeša tert-butil 5-bromo-3-fluoro-2-(trifluorometil)piridina (200,00 mg, 0,82 mmol, 1,00 ekviv.), 4,4,5,5-tetrametil-2-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3,2-dioksaborolan (312,24 mg, 1,23 mmol, 1,50 ekviv), Pd(dppf)Cl2(29,99 mg, 0,04 mmol) i KOAc (241,35 mg, 2,46 mmol, 3,00 ekviv.) u 1,4-dioksanu (5 ml) mešana je 3 h na 100° C u atmosferi azota. Reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (400 mg, sirovo) u obliku crne čvrste materije.
Korak br. 4: (2S,4R)-4-fluoro-N-[[5-fluoro-4-[5-fluoro-6-(trifluorometil)-3-piridil)-2-piridil)metil]-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamid
Smeša (2S,4R)-N-[(4-bromo-5-fluoropiridin-2-il)metil]-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]piroli-2-din-2-karboksamid (150,00 mg, 0,314 mmol, 1,000 ekviv), [5-fluoro-6-(trifluorometil)piridin-3-il] boronske kiseline (400 mg, 1,915 mmol, 3,000 ekviv), Pd(dppf)Cl2(22.95 mg, 0.031 mmol, 0.100 ekviv.), natrijum-karbonata (130,03 mg, 0,941 mmol, 3,000 ekviv.) u 1,4-dioksanu (20 ml) / voda (2 ml) mešana je 3 h na 100° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na
1
koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (57,3 mg, 32%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,07−9,03 (m, 1H), 8,89 (s, 1H), 8,74 (s, 1H), 8,40 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 8,00−7,95 (m, 2H), 7,77 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 7,48−7,42 (m, 2H), 5,19 (d, J = 52 Hz, 1H), 4,57−4,42 (m, 2H), 4,23−4,18 (m, 1H), 3,71−3,54 (m, 2H), 2,49−1,99 (m, 2H).
Primer 66: (2S,4R)-4-fluoro-1-((4-fluorofenil)sulfonil)-N-[[5-fluoro-4-[4-(trifluorometoksi)-1-piperidil]-2-piridil] metil] pirolidin-2-karboksamid.
Korak br.1: Priprema piperidin-4-ol hdrohlorida
Smeša tert-butil 4-hidroksipiperdin-1-karboksilata (5 g, 24,84 mmol, 1,00 ekviv) i HCl (zasićeni rastvor u 30 ml 1,4-dioksana) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (3,4 g, 99%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br.2: Priprema benzil 4-hidroksipiperidin-1-karboksilata
Benzil-hloroformat (4,64 g, 27,199 mmol, 1,101 ekviv.) dodat je kap po kap smeši piperidin-4-ol hidrohlorida (3,4 g, 24,71 mmol, 1,0 ekviv.), natrijum-hidroksida (2,17 g, 54,25 mmol, 2,2 ekviv.) i vode (55 mL)/1,4-dioksana (55 mL). Dobijeni rastvor je mešan 30 min na sobnoj temperaturi. Smeša je razređena vodom. pH vrednost smeše je podešena na 2 s 1N HCl. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:2). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (4,4 g, 76%) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br. 3: Preparation of benzil 4-[[(metilsulfanil)metanetioil]oksi]piperidin-1-karboksilata
1
Natrijum-hidrid (960 mg, 60% u mineralnom ulju, 2,139 ekviv.) dodat je u nekoliko serija u rastvor benzil 4-hidroksipiperidin-1-karboksilata (4,4 g, 18,70 mmol, 1,0 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (50 mL) na 0° C u atmosferi azota. Nakon 0,5 h na 0° C, ugljenikdisulfid (5,8 g, 76,174 mmol, 4,07 ekviv.) dodat je kap po kap. Dobijena smeša je mešana 0,5 h na 0° C, a CH3I (4,0 g, 28,181 mmol, 1,51 ekviv.) dodat je kap po kap. Nakon 1 h na 0° C, reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/10). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (3 g, 49%) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br.4: Priprema benzil 4-(trifluorometoksi)piperidin-1-karboksilata
HF piridin (20 g, 201,80 mmol, 21,89 ekviv.) i benzil 4-[[(metilsulfanil)metanetioil]oksi]piperidin-1-karboksilat (3 g, 9,22 mmol, 1,0 ekviv.) u 10 mL dihlorometana dodati su postepeno u smešu 1,3-dibromo-5,5-dimetilimidazolidin-2,4-dion (7,9 g, 27,630 mmol, 2,997 ekviv.) u dihlorometanu (100 mL) na -78° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 12 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena zasićenim natrijum-bikarbonatom, ekstrahovana dihlormetanom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (1,5 g, 54%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br.5: Priprema 4-(trifluorometoksi)piperidina
Smeša benzil 4-(trifluorometoksi)piperidin-1-karboksilata (1,1 g, 3,63 mmol, 1,0 ekviv.) i paladijum na ugljenu (1 g, 9,397 mmol, 2,591 ekviv.) u metanolu (50 ml) mešana je
1 1
12 h na sobnoj temperaturi. Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u zasićenom rastvoru HCl u 1,4-dioksanu i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (0,7 g, sirovo) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 6: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([5-fluoro-4-[4-(trifluorometil)piridin-1-il]piridin-2-il]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida
Smeša 4-(trifluorometoksi)piperidin hidrohlorida (200 mg, 0,973 mmol, 1,0 ekviv.), kalijum-karbonat (410 mg, 2,967 mmol, 3,05 ekviv.), (2S,4R)-N-[(4-bromo-5-fluoropiridin-2-il)metil]-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida (231 mg, 0,483 mmol, 0,5 ekviv.), Pd2(dba)3.CHCl3 (100 mg, 0,097 mmol, 0,099 ekviv.) i XantPhos (112 mg, 0,194 mmol, 0,2 ekviv.) u toluenu (10 mL) mešana je 12 sati na 100° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u vodi, ekstrahovan etil-acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijumsulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/10) dajući naslovno jedinjenje (46,9 mg, 9%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8,87−8,86 (m, 1H), 8,19−8,18 (m, 1H), 8,00−7,96 (m, 2H), 7,50−7,44 (m, 2H), 7,01−6,98 (d, J = 15 Hz, 1H), 5,27−5,10 (d, J = 95 Hz, 1H), 4,69−4,63 (m, 1H), 4,35−4,16 (m, 3H), 3,71−3,53 (m, 4H), 3,21−3,14 (m, 2H), 2,43−2,36 (m, 1H), 2,28−2,10 (m, 1H), 2,01−1,97 (m, 2H), 1,79−1,72 (m, 2H).
Primer 67: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[2-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]-4-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
1 2
Korak 1: 2-(trifluorometil)-5-(trimetilstanil)pirazin (INT-67-1)
U cev pod pritiskom dodat je 2-hloro-5-(trifluorometil)pirazin (200 mg, 1,1 mmol), heksametilditin (0,281 mL 1,3 mmol), Pd(PPh3)4(318,5 mg, 0,27 mmol) i dioksan (10 mL). Reakciona smeša je prečišćena azotom i zagrevana na 100° C tokom 1 sata. Dobijena smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i filtrirana kroz tanak sloj celita. Filter kolač je ispran pomoću DCM. Filtrat je koncentrovan u vakuumu, dajući tamnu čvrstu materiju. Sirovi proizvod se čuva u frižideru i koristi se bez daljeg prečišćavanja. (341 mg, 100%). MS-ESI:
[M+H]+ 311,9
Korak br.2: Prateći proceduru za HATU kuplovanje iz primera 35, korak 1: tert-butil (2S,4R)-2-[(2-hloro-4-piridil)metilkarbamoil]-4-fluoro-pirolidin-1-karboksilata (INT-67-3) (801 mg, 89%) napravljen je od (2S,4R)-1-tert-butoksikarbonil-4-fluoro-pirolidin-2-karboksilne kiseline (450 mg, 1,9 mmol) i (2-hloro-4-piridil)metanamin hidrohlorida (380 mg, 2,1 mmol), DIPEA (1 mL, 6,4 mmol), HATU (898 mg, 2,3 mmol), DMF (2mL). MS-ESI: [M+H]+ 358,9
Korak br. 3: Prati iste procedure za ukljanjanje boc grupe iz primera 35, korak 3: (2S,4R)-N-[(2-hloro-4-piridil)metil]-4-fluoro-pirolidin-2-karboksamid (INT-67-4) (375 mg, 100%) napravljen je od tert-butil (2S,4R)-2-[(2-hloro-4-piridil)metilkarbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilata (500 mg, 1,94 mmol) i 4 N HCl u dioksanu (3 mL, 12,4 mmol). MS-ESI: [M+H]+ 258,9
Korak br. 4: Prati iste procedure za formiranje sulfonamida iz primera 35, korak 4: (2S,4R)-N-[(2-hloro-4-piridil)metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida (INT-67-5) (95 mg, 63%) napravljen je od (2S,4R)-N-[(2-hloro-4-
1
piridil)metil]-4-fluoro-pirolidin-2-karboksamida (INT-67-4) (100 mg, 0,3 mmol), Et3N (0,8 mL, 6 mmol), 4-fluorobenzenesulfonil-hlorid (70 mg, 0,36 mmol) u DCM (1 mL). MS-ESI:
[M+H]+ 416,5
Korak br. 5: (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[2-fluoro-5-[5-(trifluorometil) pirazin-2-il] fenil] metil] pirolidin-2-karboksamid (67)
U cev pod pritiskom dodat je trimetil-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]stanan (67 mg, 0,2mmol), (2S,4R)-N-[(5-hloro-2-fluoro-fenil)metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonilpirolidin-2-karboksamid (50 mg, 0,11 mmol), Pd(PPh3)4(13 mg, 0,011 mmol) i N,N-dimetilacetamid (1 mL). Reakciona smeša je prečišćena azotom i izložena mikrotalasima na 150° C tokom 30 minuta. Dobijena smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i filtrirana kroz tanak sloj celita. Sirovi proizvod je prečišćen reverznom faznom HPLC dajući naslovno jedinjenje 67 (30 mg, 53%). MS-ESI: [M+H]+ 528,5
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,42 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 9,29 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 8,81 (t, J = 5,9 Hz, 1H), 8,73 (ddd, J = 8,4, 2,3, 0,9 Hz, 1H), 8,17 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 8,11−7,94 (m, 3H), 7,49−7,19 (m, 2H), 4,67−4,48 (m, 2H), 4,39 (dd, J = 17,4, 5,6 Hz, 1H), 2,24−2,10 (m, 1H), 2,02 (td, J = 11,5, 6,5 Hz, 1H), 1,84 (ddt, J = 12,0, 6,1, 2,7 Hz, 1H), 1,71 (ddd, J = 11,8, 6,7, 2,9 Hz, 1H), 1,45 (s, 3H), 1,24 (s, 3H).
Primer 68: Priprema (2R, 3S)-3-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[3-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]pirimidin-4-il]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 55.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,46−9,42 (s, 2H), 9,09−8,99 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,04−7,94 (m, 2H), 7,79−7,72 (dt, J = 9,9, 2,1 Hz, 1H), 7,72−7,67 (t, J = 1,5 Hz, 1H), 7,54−7,45 (m, 2H), 7,38−7,30 (dt, J = 9,6, 1,8 Hz, 1H), 5,29−5,09 (m, 1H), 4,54−4,39 (m, 2H), 4,39−4,30 (d, J = 24,6 Hz, 1H), 3,73−3,61 (m, 1H), 3,21−3,11 (m, 1H), 2,22−2,02 (m, 2H),, LCMS (ESI) m/z:545,11 [M+H]+
Primer 69: Priprema (2S,4R)-N-[[4-(2,2-difluoro-6-azaspiro[2.5]oktan-6-il)-5-fluoro-2-piridil]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida.
1 4
Korak br.1: Priprema tert-butil 1,1-difluoro-6-azaspiro[2.5]oktan-6-karboksilata
Smeša tert-butil 4-metilidenpiperidin-1-karboksilata (1,00 g, 5,07 mmol, 1,00 ekviv.), NaI (379,91 mg, 2,53 mmol, 0,50 ekviv.) i trimetil(trifluorometil)silana (1,80 g, 12,66 mmol, 2,50 ekviv.) u THF (10 mL) mešana je 12 h na 60° C u atmosferi azota. Reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (1,2 g, 96%) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br.2: Priprema 1,1-difluoro-6-azaspiro[2.5]oktan hidrohlorida
Smeša tert-buti 1,1-difluoro-6-azaspiro[2.5]oktan-6-karboksilata (1,2 g, 4,85 mmol, 1,00 ekviv) i HCl (zasićeni rastvor u 20 ml 1,4-dioksana) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (800 mg, 90%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.3: Priprema (2S,4R)-N-[[4-(2,2-difluoro-6-azaspiro[2.5]oktan-6-il)-5-fluoro-2-piridil]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida
Smeša (2S,4R)-N-[(4-br-omo-5-fluoropiridin-2-il)metil]-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida (135,00 mg, 0,28 mmol, 1,00 ekviv.), 1,1-difluoro-6-azaspiro[2.5]oktane hidrohlorida (51,83 mg, 0,28 mmol, 1,00 ekviv.), Pd2(dba)3.CHCl3(58,43 mg, 0,06 mmol, 0,20 ekviv.), XantPhos (65,33 mg, 0,11 mmol, 0,40
1
ekviv.), Cs2CO3(275,90 mg, 0,85 mmol, 3,00 ekviv.) i toluena (5 mL) mešana je 12 h na 110°C u atmosferi azota. Reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (2:1). Sirovi proizvod je ponovo prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (26,5 mg, 17%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,15−8,13 (m, 1H), 7,89−7,86 (m, 2H), 7,54 (s, 1H), 7,26−7,19 (m, 2H), 5,87 (d, J = 57,2 Hz, 1H), 5,05 (d, J = 52 Hz, 1H), 4,66−4,60 (m, 1H), 4,37−4,43 (m, 1H), 4,29−4,25 (m, 1H), 3,88−3,64 (m, 2H), 3,49−3,42 (m, 2H), 3,34−3,28 (m, 2H), 2,60−2,45 (m, 1H), 2,31−2,11 (m, 1H), 1,79−1,74 (m, 4H), 1,16−1,12 (m, 2H).
Primer 70: Priprema (2S,4R)-((5-cijano-4-(4-(trifluorometil)fenil)piridin-2-il)metil)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema (2S,4R)-((5-cijano-4-(4-(trifluorometil)fenil)piridin-2-il)metil)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida
Smeša metil 6-([[(2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-4-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-3-karboksilata (1,4 g, 2,66 mmol, 1,00 ekviv) u tetrahidrofuranu (20 mL) / voda (2 mL) i LiOH (96 mg, 4,01 mmol, 1,50 ekviv) u vodi (2 ml) mešana je 14 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je razblažena pomoću vode, a pH vrednost rastvora je prilagođena na 7 pomoću limunske kiseline. Dobijeni rastvor je ekstrahovan dihlormetanom i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (405mg, 30%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema tert-butil (2S,4R)-2-[([5-karbamoil-4-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-2-il]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilata
1
Smeši 6-([[(2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-4-[4-(trifluorometil)fenil]-piridin-3-karboksilna kiselina (405 mg, 0,79 mmol, 1,00 ekviv), NH4Cl (51 mg, 0,95 mmol, 1,20 ekviv), HATU (361 mg, 0,95 mmol, 1,20 ekviv.), DIEA (307 mg, 2,38 mmol, 3,00 ekviv) u tetrahidrofuranu (20 ml) mešana je 14 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleumetrom (3/1) dajući naslovno jedinjenje (190mg, 47%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema tert-butil (2S,4R)-2-[([5-cijano-4-[4-(trifluorometil)piridin-2-il]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilata
Smeša (2S,4R)-2-fluoro-N-([5-karbamoil-4-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-2-il]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilata (190 mg, 0,37 mmol, 1,00 ekviv), TFAA (157 mg, 0.75 mmol, 2.00 ekviv.) i TEA (37 mg, 0.37 mmol, 1.00 ekviv.) u dihloromethanu (20 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 30 sekundi. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobio sirovi proizvod (200 mg) u obliku žute čvrste materije koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 4: Priprema (2R,4S)-N-([5-cijano-4-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-2-il]metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamid hdrohlorida
Smeša tert-butil (2S,4R)-2-[([5-cijano-1-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-2-il]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidinin-1-karboksilata (200 mg, 0,41 mmol, 1,00 ekviv.) i TFA (1 mL, 13.46 mmol, 33.20 ekviv.) u dihlormetanu (2 ml) mešana je 2 minuta na sobnoj
1
temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razređen pomoću 2 ml hlorovodonika (6 M) i koncentrovan u vakuumu. Dobijena čvrsta materija isprana je 2 x 20 ml heksana radi dobijanja naslovnog jedinjenja u obliku sirovog proizvoda.
Korak br.5: Priprema (2S,4R)-((5-cijano-4-(4-(trifluorometil)fenil)piridin-2-il)metil)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida
Smeša 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorid (47,5 mg, 0,24 mmol, 1,20 ekviv.), (2S,4R)-N-([5-cijano-4-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-2-il]metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamida (80 mg, 0,10 mmol, 1,00 ekviv., 50%), i TEA (62 mg, 0.61 mmol, 3.00 ekviv.) u dihlorometanu (5 mL) mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana dihlormetanom i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (15,8 mg, 28%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,94 (s, 1H), 7,88−7,85 (m, 2H), 7,81−7,77 (m, 4H), 7,66−7,63 (m, 2H), 7,30−7,20 (m, 2H), 5,12−4,99 (d, J = 51,2 Hz, 1H), 4,95−24,89 (dd, J = 8,0 Hz, J = 6,8 Hz, 1H), 4,67−4,61 (dd, J = 4,8 Hz, J = 5,2 Hz, 1H), 4,30−4,25 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 3,93−3,84 (m, 1H), 3,75−3,64 (m, 1H), 2,60−2,50 (m, 1H), 2,32−2,00 (m, 1H).
Primer 71: Priprema (2S,4R)-N-[[5-cijano-4-[6-(trifluorometil)-3-piridil]-2-piridil] metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 6-hloro-4-jodopiridin-3-karboksilna kiselina
n-BuLi (8,8 ml, 2,5 M u heksanu, 2,00 ekviv) dodat je kap po kap rastvoru bis(propan-2-il) (2,02 g, 19,96 mmol, 2,00 ekviv) u 30 ml suvog THF na -78° C u atmosferi azota. Smeša je zagrejana na -30°C i mešana 30 minuta. Rastvoru 6-hloropirolidin-3-karboksilne kiseline (1.58 g, 10.03 mmol, 1.00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (10 mL) dodat je kap po kap na -78° C. Nakon 1 h, I2(3.07 g, 12.10 mmol, 1.20 ekviv.) dodat je na 0° C.
1
Nakon 30 minuta, reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (1,2 g, 42%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema 6-hloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-3-karboksilne kiseline
Smeša 6-hloro-4-jodopiridin-3-karboksilne kiseline (5 g, 17.64 mmol, 1.00 ekviv.) u dioksanu (100 mL), [6-(trifluorometil)piridin-3-il]boronske kiseline (3.17 g, 16.60 mmol, 0.90 ekviv.), kalijum-karbonata (6.9 g, 49.93 mmol, 2.80 ekviv.), Pd(dppf)Cl2(1g, 1.37 mmol) i vode (20 mL) mešana je 5 h na 80° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (8,7 g) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.3: Priprema 6-metil-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-3-karboksilata
Rastvor metil (2S)6-[[(tert-butoksi)karbonil]amino]-5-oksoheksanoata (8,5 g, 28,09 mmol, 1,00 ekviv) i trifluorosirćetne kiseline (10 ml, 137,85 mmol, 4,90 ekviv) u dihloromethanu (20 ml) mešane je 1 dan na sobnoj temperaturi. Reakcioni rastvor je koncentrovan pod vakuumom, ostatak je rastvoren u metanolu (10 mL) i mešan tokom 30 minuta. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:4) dajući naslovno jedinjenje (2,6 g, 29%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema 6-metil-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-karbonitrila.
1
Smeša metil 6-hloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-3-karboksilata (1,0 g, 3,16 mmol, 1,00 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (10 mL), Zn(CN)2(444 mg, 3,78 mmol, 1,20 ekviv.), Pd2(dba)3(200 mg, 0,22 mmol) i dppf (400 mg, 0,72 mmol, 0,20 ekviv.) mešana je 3 h na 100° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etilacetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (750 mg, 77%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema 6-(aminometil)-4-[6-(trifluorometil)pirimidin-5-il]benzamid hidrohlorida
Smeša metil 6-cijano-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-3-karboksilata (750 mg, 2,44 mmol, 1,00 ekviv.) u metanolu (50 mL), konc. HCl (1 mL) i paladijum na ugljenu (750 mg, 7,05 mmol, 2,90 ekviv.) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (700 mg, 92,3%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 6: Korak 5: etil 6-([[(2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-4-[6-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-3-karboksilat
Smeša metil 6-(aminometil)-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-3-karboksilat hidrohlorida (700 mg, 2,25 mmol, 1,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (50 mL), (2S,4R)-1-[(tertbutoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline (629 mg, 2,70 mmol, 1,20 ekviv.), HATU (1.28 g, 3.37 mmol, 1.50 ekviv.) i DIPEA (870 mg, 6.73 mmol, 3.00 ekviv.) mešana je 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etilacetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i
1
koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (650 mg, 55%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 7: Korak 5: etil 6-([[(2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-4-[6-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-3-karboksilat
Rastvor 6-([[(2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-4-[6-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-3-karboksilna kiselina (600 mg, 1,14 mmol, 1,00 ekviv), TFAA (452 mg, 2,15 mmol, 20 ekviv) i TEA (96 mg, 4,01 mmol, 3,50 ekviv) u dihlorometanu (20 ml) mešana je 16 h na sobnoj temperaturi. pH vrednost rastvora je podešena na 5 sirćetnom kiselinom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (480 mg, 82%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 8: Priprema tert-butil (2S,4R)-2-[([5-karbamoil-5-[6-(trifluorometil)piridin-5-il]fenil]metil)karbamoil]-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata
Smeša 6-([[(2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-4-[6-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-3-karboksilna kiselina (480 mg, 0,94 mmol, 1,00 ekviv), TFAA (496 mg, 9,27 mmol, 9,90 ekviv) i TEA (714 mg, 1,88 mmol, 2,00 ekviv) u dihlorometanu (20 ml) mešana je 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (450 mg, 94%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 9: Priprema tert-butil (2S,4R)-2-[([5-karbamoil-5-[6-(trifluorometil)piridin-5-il]fenil]metil)karbamoil]-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata
1 1
Smeša (2S,4R)-2-fluoro-N-([5-karbamoil-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilata (450 mg, 0,88 mmol, 1,00 ekviv), TFAA (370 mg, 1.76 mmol, 2.00 ekviv.) i TEA (133 mg, 1.31 mmol, 1.50 ekviv.) u dihloromethanu (20 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (2/1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (410 mg, 94%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 10: Priprema (2R,4S)-N-([5-cijano-5-[6-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamida
Smeša tert-butil (2R,3S)-2-[([2-cijano-5-[5-(trifluorometil)piridin-5-il]fenil]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilata (410 mg, 0,83 mmol, 1,00 ekviv) i HCl (zasićeni rastvor u 50 ml 1,4-dioksana) mešana je 4 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (300 mg, 84%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.11: (2S,4R)-4-fluoro-N-[[5-fluoro-4-[6-fluoro-6-(trifluorometil)-3-piridil)-2-piridil)metil]-4-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamid
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-N-([5-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-2-il]pyridin-2-yl]metil)pirolidin-2-karboksamida (300 mg, 0,70 mmol, 1,00 ekviv), trietilamin (282 mg, 2,79 mmol, 4,00 ekviv) i 4-fluorobenzen-1-sulfonl-hlorida (204 mg, 1,05 mmol, 1,50 ekviv) u dihloromethanu (20 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni
1 2
silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (41,1 mg, 11%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,17−9,04 (m, 3H), 8,43−8,40 (m, 1H), 8,15 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,97−7,83 (m, 2H), 7,83 (s, 1H), 7,44 (t, J = 9,0 Hz, 2H), 5,28−5,10 (d, J = 52,2 Hz, 1H), 4,60−4,58 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 4,23−4,17(m, 1H), 3,71−3,63 (m, 2H), 2,73−2,08 (m, 2H).
Primer 72: Priprema (2R, 3S)-3-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[4-[5-(trifluorometil)-2-piridil]-2-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 55.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,15−9,10 (dt, J = 2,0, 1,0 Hz, 1H), 9,11−9,04 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,73−8,69 (dd, J = 5,0, 0,9 Hz, 1H), 8,42−8,36 (m, 1H), 8,36−8,29 (m, 1H), 8,07−8,01 (m, 2H), 8,01−7,95 (m, 2H), 7,52−7,43 (m, 2H), 5,27−5,08 (m, 1H), 4,61−4,49 (m, 2H), 4,49−4,38 (d, J = 24,1 Hz, 1H), 3,73−3,60 (t, J = 9,1 Hz, 1H), 3,25−3,14 (td, J = 9,2, 7,0 Hz, 1H), 2,30−2,06 (m, 2H),, LCMS (ESI) m/z:527,12 [M+H]+
Primer 73: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-4-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 48.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,69−9,63 (s, 2H), 9,05−8,97 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,78−8,72 (dd, J = 5,1, 0,7 Hz, 1H), 8,20−8,16 (dd, J = 1,5, 0,7 Hz, 1H), 8,05−7,97 (m, 2H), 7,54−7,43 (m, 3H), 5,30−5,11 (d, J = 52,3 Hz, 1H), 4,59−4,40 (m, 2H), 4,25−4,15 (dd, J = 10,0, 7,1 Hz, 1H), 3,79−3,59 (m, 2H), 2,47−2,37 (m, 1H), 2,21−2,00 (m, 1H),, LCMS (ESI) m/z:528,11 [M+H]+
1
Primer 74: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)-2-piperidil]fenil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Reakcija je izvedena na H-Cube uz Rh/C 1,0 mL/min, 80 bar, 100° C u sirćetnoj kiselini. LCMS je prikazao 50% željenog proizvoda. Reakcija je koncentrovana i prečišćena fleš hromatografijom (EtOAc zatim MeOH/DCM eluiran pri 8% MeOH). Proizvod je koncentrovan i predat za rHPLC radi dobijanja 12,3mg, 9,358% prinosa.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8,84−8,76 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,01−7,92 (m, 2H), 7,51−7,40 (m, 2H), 7,20−7,14 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 7,12−6,96 (m, 2H), 5,29−5,08 (d, J = 52,6 Hz, 1H), 4,44−4,27 (m, 2H), 4,22−4,11 (m, 1H), 3,79−3,55 (m, 3H), 3,05−2,84 (m, 2H), 2,46−2,28 (m, 2H), 2,17−1,94 (dt, J = 43,0, 11,0 Hz, 1H), 1,86−1,63 (m, 4H),, LCMS (ESI) m/z:550,16 [M+H]+
Primer 75: Priprema (2S, 4R)-N-[[3-[5-(difluorometil)-2-piridil]-5-fluoro-fenil] metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 48.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8,95−8,84 (m, 2H), 8,22−8,15 (m, 1H), 8,13−8,06 (m, 1H), 8,03−7,94 (m, 3H), 7,88−7,79 (ddd, J = 10,1, 2,5, 1,5 Hz, 1H), 7,52−7,41 (m, 2H), 7,35−7,04 (m, 2H), 5,31−5,10 (d, J = 52,5 Hz, 1H), 4,55−4,38 (m, 2H), 4,25−4,15 (dd, J = 9,8, 7,2 Hz, 1H), 3,78−3,57 (m, 2H), 2,47−2,28 (m, 1H), 2,20−1,98 (m, 1H),, LCMS (ESI) m/z:526,12 [M+H]+
Primer 76: Priprema (2S,4R)-N-([3-ciklopropil-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-5H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
1 4
Korak br.1: Priprema (2S,4R)-N-([3-ciklopropil-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-5H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-N-[(3-bromo-5-fluorofenil)metil]-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida (150 mg, 0.31 mmol, 1.00 ekviv.) u dioksanu (20 mL), 2-(difluorometoksi)-5-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin (94 mg, 0.35 mmol, 1.10 ekviv.), kalijum-karbonata (174 mg, 1.26 mmol, 4.00 ekviv.) u vodi (4 mL) i Pd(dppf)Cl2(46 mg, 0.06 mmol, 0.20 ekviv.)mešana je 6 h na 60° C u atmosferi azota. Čvrste supstance su filtrirane. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (47,4 mg, 28%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8,55 (s, 1H), 8,21−8,18 (m, 1H), 8,00−7,97 (m, 2H), 7,56 (s, 1H), 7,41 (s, 1H), 7,36−7,32 (m, 3H), 7,20−7,18 (m, 1H), 7,05−7,03 (m, 1H), 5,21−5,10 (d, J = 52 Hz, 1H), 4,55 (s, 2H), 4,28−4,23 (m, 1H), 3,85−3,69 (m, 2H), 2,51−2,49 (m, 1H), 2,21−2,06 (m, 1H).
Primer 77: Priprema ((2S,4R)-N-([4-[4-(difluorometoksi)fenil]-5-fluoropiridin-2-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema (2-[4-(difluorometoksi)fenil]-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana
1
Smeša 1-(difluorometoksi)-4-jodobenzen (1.35 g, 5.00 mmol, 1,00 ekviv.), 4,4,5,5-tetrametil-2-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3,2-dioksaborolan (1,413 g, 5,56 mmol, 1,10 ekviv.), AcOK (1,47 g, 14,98 mmol, 3,00 ekviv.), i Pd(dppf)Cl2(186 mg, 0,25 mmol, 0,05 ekviv.) u dioksanu (30 mL)/ voda(3 mL) mešana je 2 sata na 95°C u atmosferi azota. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleumetrom (1:50) dajući naslovno jedinjenje (660 mg, 49%) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br.2: Priprema 2-hloro-4-[4-(difluorometoksi)fenil]-5-pirimidina.
Smeša 2-[4-(difluorometoksi)fenil]-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan (600 mg, 2,22 mmol, 1,00 ekviv.), 2-hloro-5-fluoro-4-jodopiridina (682,7 mg, 2,65 mmol, 1,20 ekviv.), kalijum-karbonata (910 mg, 6,58 mmol, 3,00 ekviv) i Pd(dppf)Cl2(82,7 mg, 0,11 mmol, 0,05 ekviv.) u dioksanu (20 ml) / vodi (2 ml) mešana je 12 h na 75° C u atmosferi azota. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:80). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (410 mg, 67%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.3: Priprema 4-[4-(difluorometoksi)fenil]-5-fluoropiridin-4-karbonitrila.
1
Smeša 2-hloro-4-[4-(difluorometoksi)fenil]-5-fluoropiridin (370 mg, 1,35 mmol, 1.00 ekviv.), Zn(CN)2(208,7 mg, 1,78 mmol, 1,50 ekviv.), dppf (65,8 mg, 0,12 mmol, 0,10 ekviv.) i Pd2(dba)3CHCl3(61,5 mg, 0,06 mmol, 0,05 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (10 ml) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 2 h na 120° C u atmosferi azota. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:12) dajući naslovno jedinjenje (330 mg, 92%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br.4: Priprema (4-(4-(difluorometoksi)fenil]-5-fluoropiridin-2il] hidrohlorida.
Smeša 4-[4-(difluorometoksi)fenil]-5-fluoropiridin-2-karbonitrila (300 mg, 1,14 mmol, 1,00 ekviv), koncentrovanog hlorovodonika (0,05mL), paladijuma na ugljenu (600 mg) u metanolu (30 ml) mešana je 5 minuta na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (310mg) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema tert-butil (2S,4R)-2-[([4-[4-(difluorometoksi)fenil]-5-fluoropiridin-2-il]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilata
Smeša (2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilna kiselina (359 mg, 1,54 mmol, 1.33 ekviv), HATU (643,7 mg, 1,69 mmol, 1,46 ekviv), DIEA (595,9 mg, 4,61 mmol, 4,00 ekviv.) i [4-[4-(difluorometoksi)fenil]-5-fluoropiridin-2-il]metamin hidrohhlorid (310 mg, 1,16 mmol, 1,00 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (15 ml) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:3) dajući naslovno jedinjenje (310 mg, 55%) u obliku narandžastog ulja.
Korak br. 6: Priprema (2S,4R)-N-([4-[4-(difluorometoksi)fenil]5-fluoropiridin-2-il]metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamid hidrohlorida
1
Smeša tert-butil (2S,4R)-2-[([4-[4 (difluorometoksi)fenil]-5-fluoropiridin-2-il]metil)karbamoil]-4-fluoropiolidin-1-karboksilat (310 mg, 0,64 mmol, 1,00 ekviv.) i zasićenog hlorovodonika u dioksanu (15 ml) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (255 mg, 95%) u obliku ružičaste čvrste materije.
Korak br. 7: Priprema (2S,4R)-N-([4-[4-(difluorometoksi)fenil]-5-fluoropiridin-2il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša 4-fluorobenzen-1-sulfonil hlorida (255 mg, 1.31 mmol, 1.00 ekviv.), (2S,4R)-N-([4-[4-(difluoromethoxy)fenil]-5-fluoropiridin-2-yl]metil)-4-fluoropyrrolidine-2-karboksamida hidrohlorida (130,2 mg, 0,31 mmol, 1,10 ekviv), trietilamin (184,8 mg, 1,83 mmol, 3,00 ekviv.) i 4-dimetilaminopiridin (7,44 mg, 0,06 mmol, 0,10 ekviv.) u dihloromethanu (5 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:4). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (108,2 mg, 15%) u obliku beličaste čvrste materije.
<1>H-NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8,46 (s, 1H), 8,00−7,96 (m, 2H), 7,82−7,79 (m, 3H), 7,36−7,22 (m, 3H), 7,16−6,67 (t, J = 73,8 Hz, 1H), 5,22−5,05 (d, J = 51,6 Hz, 1H), 4,60 (s, 1H), 4,29−4,23 (m, 1H), 3,84−3,66 (m, 2H), 2,51−2,43 (m, 1H), 2,29−2,11 (m, 1H).
Primer 78: Priprema (2S,4R)-N-([5-cijano-2-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 4-hloro-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidina.
1
Smeša metil 4,6-dihloropiridin-3-karboksilata (10 g, 48,54 mmol, 2,00 ekviv.), (4(trifluorometil)fenil]boronske kiseline (4,6 g, 24,22 mmol, 1.,00 ekviv), Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (800 mg, 1,09 mmol, 0,05 ekviv.) i kalijum-karbonata (10 g, 72,36 mmol, 3,00 ekviv.) u 1,4-dioksanu (100 ml) / voda (10 ml) mešana je 3 h na 70° C u atmosferi azota. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (5,6 g, 73%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.2: Priprema metil 4-cijano-6-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-3-karboksilata
U zapečaćenu cev zapremine 30 ml stavljen je metil 4-hloro-6-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-3-karboksilat (2g, 6.34 mmol, 1.00 ekviv.), Zn(CN)2(740 mg, 6.30 mmol, 1.00 ekviv.), Pd2(dba)3.CHCl3(320 mg, 0.31 mmol, 0.05 ekviv.) i dppf (350 mg, 0.63 mmol, 0.10 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (10 mL). Reakciona smeša je ozračena mikrotalasnim zračenjem 90 min na 110 °C. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (0,8 g, 41%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema metil 4-(aminometil)-6-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-3-carboksilat hidrohlorida
U 100-mililitarsku laboratorijsku bocu s okruglim dnom stavljen je metil 4-cijano-6-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-3-karboksilat (150 mg, 0,49 mmol, 1.00 ekviv.), paladijum na ugljenu (10 mg), metanol (10 mL) i koncentrovani hlorovodonik (0.1 mL). Dobijeni rastvor
1
je održavan pomoću atmosfere H2 i mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Čvrste supstance su filtrirane i rastvor je koncentrovan u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (147 mg, 87%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 4: Korak 5: metil 4-([[(2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-piridin-3-karboksilat
Rastvor (2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilna kiselina (67 mg, 0,29 mmol, 1,00 ekviv), HATU (131 mg, 0,34 mmol, 1,20 ekviv) i DIEA (111 mg, 0,86 mmol, 3,00 ekviv) u tetrahidrofuranu (5 ml) mešana je 14 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (2:1) dajući naslovno jedinjenje (100 mg, 66%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema metil 4-([[(2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-6-[4-(trifluorometil)fenil]-piridin-3-karboksilne kiseline
LiOH (46 mg, 1.92 mmol, 2.00 ekviv.) u vodi (2 mL) dodat je kap po kap smeši metil 4-([[(2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-6-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-3-karboksilata (500mg, 0.95 mmol, 1.00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (10 mL) na 0° C. Nakon mešanja 14 h na sobnoj temepraturi, reakcija je zatim ugašena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Vodeni slojevi su spojeni, a pH vrednost rastvora je prilagođena na 7 pomoću vodene limunske kiseline. Dobijeni rastvor je ekstrahovan 2 x 100 ml etil-acetata, a organski slojevi su kombinovani i koncentrovani u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (396 mg, 81%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 6: Priprema tert-butil (2S,4R)-2-[([5-karbamoil-2-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-4-il]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilata
1
Rastvor 4-([[(2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-6-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-3-karboksilna kiselina (336 mg, 0,66 mmol, 1,00 ekviv), NH4Cl (42 mg, 0,79 mmol, 1,20 ekviv.), HATU (299 mg, 0,79 mmol, 1,20 ekviv) i DIEA (254 mg, 1,97 mmol, 3,00 ekviv) u tetrahidrofuranu (10 ml) mešana je 2,5 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (2:1) dajući naslovno jedinjenje (130 mg, 39%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 7: Priprema tert-butil (2S,4R)-2-[([5-cijano-2-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-4-il]metil)carbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilata
Rastvor tert-butil (2S,4R)-2-[([5-karbamoil-2-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-4-il]]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilat (130 mg, 0,25 mmol, 1,00 ekviv.), TFAA (107 mg, 0,51 mmol, 2,00 ekviv) i TEA (38 mg, 0,38 mmol, 1,50 ekviv) u dihloromethanu (2 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom . Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (74 mg, 59%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 8: Priprema (2R,4S)-N-([5-cijano-4-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-2-il]metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamid hidrohlorida
Rastvor tert-butil (2S,4R)-2-[([5-cijano-1-[4-(trifluorometil)fenil]-piridin-4-il]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidinin-1-karboksilata (74 mg, 0,15 mmol, 1,00 ekviv.) i TFA (2 mL, 26,93 mmol, 179,20 ekviv.) u dihlorometanu (4 mL) mešan je 1 h na sobnoj
1 1
temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razređen pomoću 0,5 ml hlorovodonika (6 M) i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (56mg, 87%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 9: Priprema (2S,4R)-N-([5-cijano-1-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida
Smeša 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorid (31 mg, 0,16 mmol, 1,20 ekviv.), (2S,4R)-N-([5-cijano-2-[4-(trifluorometil)fenil]piridin-4-il]metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamida hidrohlorida (56 mg, 0,13 mmol, 1,00 ekviv.), i TEA (40 mg, 0,40 mmol, 3,00 ekviv.) u dihlorometanu (2 mL) mešana je 14 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana DCM i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (25,4 mg, 35%) u obliku svetložute čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,91 (s, 1H), 8,31−8,28 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 8,15 (s, 1H), 7,92−7,88 (m, 2H), 7,73−7,70 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,50−7,46 (m, 1H), 7,28−7,26 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 7,22 (s, 1H), 5,15−4,96 (m, 2H), 4,68−4,57 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 4,34−4,28 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 3,97−3,61 (m, 2H), 2,61−2,53 (m, 1H), 2,35−2,12 (m, 1H).
Primer 79: Priprema (2S,4R)-N-([5-cijano-2-[6-(trifluorometil)(4 mL)-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema 4-metil-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-karbonitrila.
Smeša metil 4,6-dihloropridin-3-karboksilata (5.5 g, 26.70 mmol, 2.00 ekviv.), [6-(trifluorometil)piridin-3-il]boronske kiseline (2.5 g, 13.09 mmol, 1.00 ekviv.), Pd(dppf)Cl2(480 mg, 0.66 mmol,0.05 ekviv.) i kalijum-karbonata (5.5 g, 39.80 mmol, 3.00 ekviv.) u 1,4-dioksanu (100 mL)/vodi (10 mL) mešana je 3 h na 70° C. Reakcija je zatim ugašena vodom,
1 2
ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:3). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (2,0g, 48%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 4-metil-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-3-karboksilata
U zapečaćenu cev zapremine 30 ml pročišćenu i održavanu pod inertnom atmosferom stavljen je metil 4-hloro-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]]piridin-3-karboksilata (400 mg, 1,26 mmol, 1,00 ekviv.), Zn(CN)2(148 mg, 1,26 mmol, 1,00 ekviv.), Pd2(dba)3.CHCl3(131 mg, 0,13 mmol, 0,10 ekviv.) i dppf (140 mg, 0,25 mmol, 0,20 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (8 mL). Reakciona smeša je ozračena mikrotalasnim zračenjem 90 min na 105°C. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana 2 x 250 ml etil-acetatom, isprana slanim rastvorom i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:10). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (342 mg, 88%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema metil 4-(aminometil)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-3-karboksilat hidrohlorida
Suspenzija metil-4-ciano-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-3-karboksilata (200 mg, 0,65 mmol, 1.00 ekviv.), paladijum na ugljenu (20 mg, 0.19 mmol, 0,30 ekviv.) u metanolu (10 mL)/koncentrovanoj vodenoj HCl (0,3 mL) održavana je pomoću atmosfere H2 i mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Dobijena smeša je isprana 20 mL heksana radi dobijanja naslovnog jedinjenja (224 mg, 99%) u obliku smeđe čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema metil 4-([[(2R,4S)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-3-karboksilat
1
Rastvor (2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilna kiselina (150 mg, 0.64 mmol, 1,00ekviv), HATU (294 mg, 0,77 mmol, 1,20 ekviv) i DIEA (249 mg, 1,93 mmol, 3,00 ekviv) u tetrahidrofuranu (10 ml) mešana je 14 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (212 mg, 63%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema 4-([[(2R,4S)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il] piridin-3-karboksilne kiseline
Rastvor LiOH (46 mg, 1,92 mmol, 2.00 ekviv.) u vodi (2 mL) dodat je kap po kap rastvoru metil 4-([[(2R,4S)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-3-karboksilata (500 mg, 0,95 mmol, 1,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (10 mL) na 0° C. Dobijeni rastvor je mešan 4 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je razređena pomoću 50 ml vode. pH vrednost rastvora je podešena na pH 7 HCl (6M). Dobijeni rastvor je ekstrahovan dihlormetanom, a organski slojevi su kombinovani i koncentrovani u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (191mg) u obliku zelene čvrste materije koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 6: Priprema tert-butil (2S,4R)-2-[([5-karbamoil-2-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-il]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilata
Rastvor 4-([[(2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3il]piridin-3-karboksilna kiselina (191 mg, 0,37 mmol, 1,00 ekviv.), NH4Cl (30 mg, 0,56 mmol, 1,50 ekviv.), HATU (171 mg, 0,45
1 4
mmol, 1,20 ekviv) i DIEA (145 mg, 1,12 mmol, 3,00 ekviv) u tetrahidrofuranu (20 ml) mešana je 14 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena pomoću 10 ml vode, ekstrahovana etil-acetatom, osušena iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je nanesen na kolonu silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (7:1). Na taj se način dobilo 100 mg (52%) naslovnog jedinjenja u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 7: Priprema tert-butil (2S,4R)-2-[([5-cijano-2-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-il]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilata.
Rastvor tert-butil (2S,4R)-2[([5-karbamoil-2-[6-(trifluorometil)fenil]piridin-3-il]piridin-4-il]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilata (100 mg, 0,20 mmol, 1,00 ekviv), TFAA (82 mg, 0,39 mmol, 2,00 ekviv.) i TEA (20 mg, 0,20 mmol, 1,00 ekviv.) u dihloromethanu (5 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 14 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (100 mg) u obliku žute čvrste materije
Korak br. 8: Priprema (2R,4R)-N-([5-cijano-6'-(trifluorometil)-2,3'-bipirimidin-4-il)metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamid hidrohlorida
Smeša (2R,4R)-tert-butil 2-((5-cijano-6'-(trifluorometil)-2,3'-bipiridin-4-il)metilkarbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilata (74 mg, 0,15 mmol, 1,00 ekviv.) i TFA (2 mL, 26,93 mmol, 179,20 ekviv.) u dihlormetanu (4 ml) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen pomoću 0,5 mL HCl (6M). Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (56mg, 87%) u obliku bele čvrste materije
Korak br. 9: Priprema (2S,4R)-N-([5-cijano-2-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
1
Rastvor 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorid (49 mg, 0,25 mmol, 1,20 ekviv.), (2S,4R)-N-([5-cijano-2-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-il]metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (91 mg, 0,21 mmol, 1,00 ekviv.), i TEA (64 mg, 0.63 mmol, 3.00 ekviv.) u dihlorometanu (3 mL) mešan je 2 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana dihlormetanom i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (15,9 mg, 14%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,51 (s, 1H), 8,97 (s, 1H), 8,70−8,68 (dd, J = 1,6 Hz, J = 1,6 Hz, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,94−7,91 (m, 2H), 7,81−7,79 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,51−7,48 (m, 1H), 7,30−7,26 (m, 2H), 5,16−5,03 (m, 2H), 4,64−4,58 (dd, J = 4,8 Hz, J = 4,8 Hz, 1H), 4,36−4,32 (m, 1H), 3,96−3,80 (m, 1H), 2,66−2,64 (m, 1H), 2,15−2,35 (m, 1H).
Primer 80: Priprema (S)-5-(4-fluorofenil)sulfonil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)-5-azaspiro[2.4]heptan-6-karboksamida.
Korak br. 1: (S)-tert-butil 6-(((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)karbamoil)-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karboksilat (INT-80-12)
Rastvoru (5S)-6-tert-butoksikarbonil-6-azaspiro[2.4]heptan-5-karboksilna kiselina (200 mg, 0,83 mmol) i [6-[6-(trifluorometil)-3-piridil]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorid (265 mg, 0,91 mmol) u etil-acetatu (8.3 mL) dodat je 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6-trioksatrifosforinan-2,4,6-trioksid (50 wt%) u etil-acetatu (0,74 mL, 1,24 mmol)i N,N-diizopropiletilamin (0,43 mL, 2,49 mmol), a reakciona smeša je mešana tokom noći na sobnoj temperaturi. Dodatna količina 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6-trioksatrifosforinan-2,4,6-trioksid (50 wt%) u etil-acetatu (1.48 mL, 2.48 mmol) dodata je u reakcionu smešu i mešana
1
dodatna 72 h. Dodatna količina 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6-trioksatrifosforinan-2,4,6-trioksid (50 wt%) u etil-acetatu (1.48 mL, 2.48 mmol) dodata je u reakcionu smešu i zagrejana na 60° C. Reakciona smeša je ugašena zasićenim rastvorom amonijum-hlorida i ekstrahovana EtOAc (3x). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je apsorbovan na silikagelu i prečišćen fleš hromatografijom na molekularnim sitima pomoću 0% – 100% EtOAc u heptanu radi dobijanja željenog jedinjenja u obliku bež pene (295 mg, 100%).
MS-ESI: [M+H]+ 478,3
Korak br. 2: (S)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)-5-azaspiro[2.4]heptan-6-karboksamid (INT-80-13)
Rastvoru tert-butil (5S)-5-[[6-[6-(trifluorometil)-3-piridil]pirimidin-4-il]metilkarbamoil]-6-azaspiro[2.4]heptan-6-karboksilat (295 mg, 0.62 mmol) u dihlorometanu (4 mL) dodata je hlorovodonična kiselina (4 mol/L) u 1,4-dioksanu (2,0 mL, 8,0 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i korišćena neposredno bez daljeg prečišćavanja.
MS-ESI: [M-HCl]+ 376,1
Korak br. 3: (S)--5-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il] pirimidin-4-il] metil]-5-azaspiro [2.4] heptan-6-karboksamid
Sirovom (S)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)-5-azaspiro[2.4]heptan-6-karboksamidu (122 mg, 0,29 mmol) rastvorenom u dihlorometanu (3 ml) dodat je trietilamin (0,123 ml, 0,88 mmol) i 4-fluorobenzensulfonil-hlorid (63 mg, 0,32 mmol) na sobnoj temperaturi 4 h. Reakciona smeša je rastvorena u DCM i vodi, slojevi su izdvojeni, a vodeni sloj je ekstrahovan pomoću DCM (2x). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je apsorbovan na silikagelu i prečišćen fleš hromatografijom na molekularnim sitima pomoću 0% – 10% MeOH u DCM radi dobijanja delimično prečišćenog jedinjenja. Ostatak je prečišćen preparativnom RP-HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (110,6 mg, 70%) u obliku bele čvrste materije.
MS-ESI: [M+H]+ 536,14
<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,49 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 9,30 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 8,98 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 8,84−8,77 (m, 1H), 8,22 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 8,14−8,08 (m, 1H), 8,08−8,01 (m, 2H), 7,58−7,46 (m, 2H), 4,67−4,56 (m, 1H), 4,51−4,41 (m, 1H), 4,32−4,23 (m, 1H), 3,45 (d, J = 10,4 Hz, 1H), 3,19 (d, J = 10,5 Hz, 1H), 1,93−1,78 (m, 2H), 0,62−0,52 (m, 1H), 0,52−0,41 (m, 1H), 0,27−0,17 (m, 1H), 0,17−0,06 (m, 1H).
1
Primer 81: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[4-[6-(trifluorometil)3-piridil]-2-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 48.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,24−9,15 (m, 1H), 9,05−8,96 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,73−8,66 (dd, J = 5,1, 0,8 Hz, 1H), 8,51−8,44 (m, 1H), 8,07−7,95 (m, 3H), 7,89−7,84 (dd, J = 1,8, 0,8 Hz, 1H), 7,82−7,75 (dd, J = 5,2, 1,8 Hz, 1H), 7,51−7,39 (m, 2H), 5,29−5,10 (m, 1H), 4,61−4,45 (m, 2H), 4,29−4,18 (dd, J = 9,9, 7,1 Hz, 1H), 3,77−3,57 (m, 2H), 2,47−2,30 (m, 1H), 2,23−2,02 (dddd, J = 42,4, 13,8, 9,9, 3,4 Hz, 1H),, LCMS (ESI) m/z:527,12 [M+H]+ Primer 82: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[4-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]-2-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 48.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,53−9,51 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 9,33−9,30 (t, J = 0,9 Hz, 1H), 9,06−8,98 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,79−8,74 (dd, J = 5,2, 0,8 Hz, 1H), 8,17−8,13 (dd, J = 1,6, 0,8 Hz, 1H), 8,09−8,05 (dd, J = 5,1, 1,7 Hz, 1H), 8,03−7,96 (m, 2H), 7,49−7,39 (m, 2H), 5,31−5,12 (d, J = 52,5 Hz, 1H), 4,59−4,51 (d, J = 5,9 Hz, 2H), 4,29−4,22 (dd, J = 9,8, 7,2 Hz, 1H), 3,75−3,57 (m, 2H), 2,47−2,31 (td, J = 16,5, 16,0, 6,8 Hz, 1H), 2,24−2,02 (dddd, J = 42,1, 13,8, 9,6, 3,4 Hz, 1H),, LCMS (ESI) m/z:528,11 [M+H]+
Primer 83: Priprema 2S,4R)-N-[[2,6-bis[6-(trifluorometil)-3-piridil]-4-piridil]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: (2S,4R)-N-((6,6"-bis(trifluorometil)-[3,2':6',3"-terpiridin]-4'-il)metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamid hidrohlorid
1
Naslovno jedinjenje (60 mg, 98%) pripremljeno je prema proceduri deprotekcije grupe Boc iz primera 2, korak 2 od tert-butil (2S,4R)-2-[[2,6-bis-6(trifluorometil)-3-piridil]-4-piridil]metilkarbamoil]-4-fluoro-pirolidin-1-karboksilat (68 mg, 0.11 mmol) i 4M HCl u dioksanu (4 ml) u DCM (4 ml). LCMS (ESI_Formic_MeCN): [MH<+>] = 514.
Korak br. 2: (2S, 4R)-N-[[2,6-bis [6-(trifluorometil)-3-piridil]-4-piridil] metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin-2-karboksamid.
Naslovno jedinjenje (48 mg, 65%) pripremljeno je prema proceduri kuplovanja sulfonamida iz primera 2, korak 3 od (2S,4R)-N-[[2,6-bis[6-(trifluorometil)-3-piridil]-4-piridil]metil]-4-fluoro-pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (60 mg, 0,11 mmol), 4-fluorobenzenesulfonil hlorida (27 mg, 0,14 mmol) i trietilamina (0,05 mL, 0,4 mmol) u DCM (6 mL).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,58 (dt, J = 2,2, 0,7 Hz, 2H), 9,11 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,92−8,85 (m, 2H), 8,23 (d, J = 0,8 Hz, 2H), 8,07 (dd, J = 8,3, 0,8 Hz, 2H), 8,05−8,00 (m, 2H), 7,51−7,44 (m, 2H), 5,22 (d, J = 52,4 Hz, 1H), 4,70−4,52 (m, 2H), 4,24 (dd, J = 10,1, 7,1 Hz, 1H), 3,77−3,60 (m, 2H), 2,44 (dd, J = 17,2, 7,7 Hz, 2H), 2,24−2,03 (m, 1H).
Primer 84: Priprema (2S, 4R)-N-[[2-hloro-6-[6-(trifluorometil)-3-piridil]-4-piridil] metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: (2S,4R)-tert-butil 2-(((2,6-dihloropiridin-4-il)metil)karbamoil)-4-fluoropirolidin-1-karboksilat
1
Naslovno jedinjenje (1473 mg, 66%) pripremljeno je tokom postupka kuplovanja amina iz primera 7, korak 7 od (2,6-dihloro-4-piridil)metanamin (1,00 g, 5,65 mmol), (2S,4R)-1-tert-butoksikarbonil-4-fluoro-pirolidin-2-karboksilna kiselina (1320 mg, 5,66 mmol), HATU (2210 mg, 5,81 mmol) i trietilamina (2,05 mL, 14,7 mmol) u DMF (12 mL). LCMS (ESI_Formic_MeCN): [MH<+>] = 392.
Korak br. 2: (2S,4R)-tert-butil 2-(((6-hloro-6'-(trifluorometil)-[2,3'-bipiridin]-4-il)metil)karbamoil)-4-fluoropirolidin-1-karboksilat i (2S,4R)-tert-butil 2-(((6,6"-bis(trifluorometil)-[3,2':6',3"-terpiridin]-4'-il)metil)karbamoil)-4-fluoropirolidin-1-karboksilata
Naslovna jedinjenja su pripremljena u skladu s postupkom Suzuki kuplovanja iz primera 8, korak 1 od tert-butil (2S,4R)-2-[(2,6-dihloro-4-piridil)metilkarbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilata (157 mg, 0,40 mmol), [6-(trifluorometil)-3-piridil]boronska kiselina (105 mg, 0,55 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II) (31 mg., 0,040 mmol) i 1 M aq Cs2CO3 (0,41mL, 0,41 mmol, 1,0 mol/L) u acetonitrilu (4 ml). Jedinjenje A (72 mg, 36%): LCMS (ESI_Formic_MeCN): [MH<+>] = 503. Jedinjenje B (68 mg, 28%): LCMS (ESI_Formic_MeCN): [MH<+>] = 614.
Korak br. 3: (2S,4R)-N-((6-hloro-6'-(trifluorometil)-[2,3'-bipiridin]-4-il)metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamid hidrohlorid
Naslovno jedinjenje (61 mg, 97%) pripremljeno je prema proceduri deprotekcije grupe Boc iz primera 2, korak 2 od tert-butil (2S,4R)-2-[[2-hloro-6-[6-(trifluorometil)3-
1
piridil]-4-piridil]metilkarbamoil]-4-fluoro-pirolidin-1-karboksilat (72 mg, 0,1432 mmol) i 4M HCl u dioksanu (5 ml) u DCM (5 ml). LCMS (ESI_Formic_MeCN): [MH<+>] = 403.
Korak br. 4: (2S, 4R)-N-[[2-hloro-6-[6-(trifluorometil)-3-piridil]-4-piridil] metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin-2-karboksamid
Naslovno jedinjenje (47 mg, 61%) pripremljeno je prema proceduri kuplovanja silfonamida iz primera 2, korak 3 od 2S,4R)-N-[[2-hloro-6-[6-(trifluorometil)-3-piridil]-4-piridil]metil]-4-fluoro-pirolidin-2-karboksamid hidrohlorid (61 mg, 0,14 mmol), 4-fluorobenzensulfonil hlorid (33 mg, 0,17 mmol) i trietilamin (0,35 mL, 2,5 mmol) u DCM (5 ml).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,38 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 9,03 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,71−8,64 (m, 1H), 8,14 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 8,05 (dd, J = 8,3, 0,8 Hz, 1H), 8,03−7,97 (m, 2H), 7,60 (d, J = 1,1 Hz, 1H), 7,51−7,43 (m, 2H), 5,20 (d, J = 52,6 Hz, 1H), 4,60−4,41 (m, 2H), 4,23−4,14 (m, 1H), 3,79−3,57 (m, 2H), 2,49−2,36 (m, 1H), 2,23−1,98 (m, 1H).
Primer 85: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-N-[[3-fluoro-5-[2-okso-4-(trifluorometil)-1-piridil] fenil] metil]-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin;-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 86.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8,93−8,86 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 7,99−7,92 (m, 2H), 7,92−7,87 (dt, J = 7,2, 0,9 Hz, 1H), 7,50−7,41 (m, 2H), 7,37−7,25 (m, 3H), 6,94−6,89 (dq, J = 2,0, 1,0 Hz, 1H), 6,56−6,51 (dd, J = 7,2, 2,0 Hz, 1H), 5,28−5,09 (m, 1H), 4,50−4,33 (m, 2H), 4,21−4,11 (dd, J = 9,9, 7,1 Hz, 1H), 3,73−3,54 (m, 2H), 2,44−2,30 (td, J = 15,2, 14,7, 6,1 Hz, 1H), 2,19−1,96 (m, 1H),, LCMS (ESI) m/z:560,11 [M+H]+
Primer 86: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[3-fluoro-5-[4-(trifluorometil) pirazol-1-il] fenil] metil] pirolidin-2-karboksamida.
1 1
Rastvor koji sadrži (2S,4R)-N-[(3-bromo-5-fluoro-fenil)metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamid (80 mg, 0,1676 mmol), 4-(trifluorometil)-1hpirazol (48,0 mg, 0,3352 mmol), kupri-jodid (31,92 mg, 0,1676 mmol), N,N'-dimetiletilenediamin (0,036 mL, 0,34 mmol) i kalijum-karbonata (48,65 mg, 0,3520 mmol) u 1,4-dioksanu (1,7 mL) mešan je na 100° C 18 h. Sirovi proizvod je filtriran kroz sloj celita i prečišćen fleš hromatografijom (EtOAc/Heptane_eluiran pri 80% EtOAc) i predat za rHPLC radi dobijanja 60,9 mg, 68,23% prinosa.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,19−9,14 (t, J = 1,0 Hz, 1H), 8,95−8,88 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 8,28−8,22 (d, J = 0,8 Hz, 1H), 8,02−7,93 (m, 2H), 7,77−7,72 (t, J = 1,7 Hz, 1H), 7,71−7,65 (dt, J = 10,0, 2,2 Hz, 1H), 7,51−7,42 (m, 2H), 7,25−7,18 (ddd, J = 9,5, 2,4, 1,3 Hz, 1H), 5,30−5,10 (m, 1H), 4,53−4,36 (m, 2H), 4,22−4,13 (dd, J = 9,9, 7,1 Hz, 1H), 3,74−3,56 (m, 2H), 2,45−2,31 (m, 1H), 2,20−1,97 (m, 1H),, LCMS (ESI) m/z:533,11 [M+H]+
Primer 87: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[3-fluoro-5-[3-(trifluorometil) pyrazol-1-il] fenil] metil] pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 86.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8,95−8,89 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 8,75−8,71 (dq, J = 2,7, 1,0 Hz, 1H), 8,02−7,94 (m, 2H), 7,74−7,65 (m, 2H), 7,50−7,41 (m, 2H), 7,28−7,19 (ddd, J = 9,6, 2,3, 1,4 Hz, 1H), 7,10−7,07 (m, 1H), 5,30−5,08 (d, J = 52,4 Hz, 1H), 4,53−4,36 (m, 2H), 4,22−4,13 (dd, J = 9,8, 7,2 Hz, 1H), 3,75−3,57 (m, 2H), 2,46−2,29 (td, J = 16,3, 7,2 Hz, 1H), 2,18−1,98 (m, 1H),, LCMS (ESI) m/z:533,11 [M+H]+
1 2
Primer 88: Priprema ((2S,4R)-N-[[4-[4-(difluorometil)fenil]-5-fluoro-2-piridil]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 4-(2-hloro-5-fluoropiridin-4-il)benzaldehida
Smeša (4-formilfenil)boronska kiselina (500 mg, 3,33 mmol, 1,00 ekviv.), 2-hloro-5-fluoro-4-jodopiridin (575 mg, 2,23 mmol, 0,70 ekviv.), Pd(dppf)Cl2(80 mg, 0,11 mmol), kalijum-karbonata (930 mg, 6,73 mmol, 2,00 ekviv.) i 1,4-dioksana (15 ml) / voda (1,5 ml) mešana je 12 h na 75° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je rastvorena u etil-acetatu, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije petroleum-etra/etilacetata (5:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (520 mg, 66%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 2-hloro-4-[4-(difluorometil)fenil]-5-fluoropiridina
DAST 3,56 mL, 22,09 mmol, 10,00 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru 4-(2-hloro-5-fluoropiridin-4-il)benzaldehid (520 mg, 2,21 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlorometanu (130 mL) na -78° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 12 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata, pa zatim slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije petroleum-etrom / etil-acetatom (5:1) dajući naslovno jedinjenje (500 mg, 88%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.3: Priprema 4-[4-(difluorometil)fenil]-5-fluoropiridin-2-karbonitril
1
Smeša 2-hloro-4-[4-(difluorometil)fenil]-5-fluoropiridin (500 mg, 1,94 mmol, 1,00 ekviv.), Zn(CN)2(272 mg, 2,32 mmol, 1,20 ekviv), Pd2(dba)3.CHCl3(200 mg, 0,19 mmol, 0,10 ekviv.) i dppf (214 mg, 0,39 mmol, 0,20 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (16 mL) mešana je 1,5 h na 100° C u atmosferi azota. Ostatak je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (10:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (440 mg, 91%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br.4: Priprema [4-[4-(difluorometil)fenil]-5-fluoropiridin-2-il]metanamina.
Smeša 4-[4-(difluorometil)fenil]-5-fluoropiridine2-karbonitril (440 mg, 1,77 mmol, 1,00 ekviv.), metanol (40 mL) i paladijum na ugljenu (400 mg, 3,76 mmol, 2,10 ekviv.) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (420 mg, 94%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema tert-butil (2S,4R)-2-[([4-[4-(difluorometil)fenil]-5-fluoropiridin-2-il]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidin--karboksilata
Smeša (2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilna kiselina (92 mg, 0,39 mmol, 1,00 ekviv.), N,N-dimetilformamid (20 mL), DIEA (154 mg, 1,19 mmol, 3,00 ekviv.), HATU (226 mg, 0,59 mmol, 1,50 ekviv.), i [4-[4-(difluorometil)fenil]-5-fluoropiridin-2-il]metanamin (100 mg, 0,40 mmol, 1,00 ekviv) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je rastvorena u etil-acetatu, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (5:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (120 mg, 65%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br. 6: (2S,4R)-N-([4-[4-(difluorometil)fenil]-5-fluoropiridin-2-il]metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamid hidrohlorid
1 4
Smeša tert-butil (2S,4R)-2-[([4-[4-(difluorometil)fenil]-5-fluoropiridin-2-il]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilata (138 mg, 0,30 mmol, 1,00 ekviv.) i HCl (zasićeni rastvor u 5 ml dioksana) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (120 mg, sirovo) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br.7: Priprema (2S,4R)-N-[[4-[4-(difluorometil)fenil]-5-fluoro-2-piridil]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-N-([4-[4-(difluorometil)fenil]-5-fluoropiridin--2-il]metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (120 mg, 0,33 mmol, 1,00 ekviv), dihlorometan (10 mL), TEA (99 mg, 0.98 mmol, 3.00 ekviv.), 4-dimetilaminopiridina (99 mg, 0,98 mmol, 3,00 ekviv) i 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorida (64 mg, 0,33 mmol, 1,00 ekviv) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je rastvorena u etil-acetatu, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije petroleum-etrom / etil-acetatom (1:2) dajući naslovno jedinjenje (41,4 mg, 24%) u obliku beličaste čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,01−8,99 (m, 1H), 8,64 (s, 1H), 8,00−7,98 (m, 2H), 7,98−7,97 (m, 2H), 7,81−7,70 (m, 3H), 7,69−7,67 (m, 2H), 7,48−7,43 (m, 3H), 5,28−5,10 (d, J = 27 Hz, 1H), 4,50−4,46 (m, 2H), 4,20−4,17 (m, 1H), 3,72−3,59 (m, 2H), 2,46−2,35 (m, 1H), 2,27−2,02 (m, 1H).
Primer 89: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[3-fluoro-5-[6-(trifluorometil) piridazin-3-il] fenil] metil] pirolidin-2-karboksamida.
1
Naslovno jedinjenje je pripremljeno prema istoj opštoj proceduri opisanoj u primeru 91.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8,97−8,90 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,59−8,55 (m, 1H), 8,41−8,37 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 8,09−8,04 (t, J = 1,5 Hz, 1H), 8,01−7,94 (m, 3H), 7,50−7,39 (m, 3H), 5,29−5,10 (d, J = 52,4 Hz, 1H), 4,57−4,42 (m, 2H), 4,22−4,14 (dd, J = 9,9, 7,1 Hz, 1H), 3,74−3,58 (m, 2H), 2,44−2,30 (m, 1H), 2,20−1,98 (m, 1H),, LCMS (ESI) m/z:545,2 [M+H]+
Primer 90: Priprema (2S, 4R)-N-[[3-[5-(difluorometil) pirazin-2-il]-5-fluorofenil] metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin-2-karboksamida.
Naslovno jedinjenje je pripremljeno prema istoj opštoj proceduri opisanoj u primeru 91.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,43−9,40 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 9,06−9,02 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 8,96−8,89 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 8,06−8,02 (t, J = 1,5 Hz, 1H), 8,01−7,95 (m, 2H), 7,95−7,88 (dt, J = 9,8, 2,0 Hz, 1H), 7,51−7,42 (m, 2H), 7,40−7,33 (dd, J = 9,7, 2,1 Hz, 1H), 7,32−7,03 (t, J = 54,2 Hz, 1H), 5,30−5,09 (d, J = 52,4 Hz, 1H), 4,55−4,40 (m, 2H), 4,24−4,14 (dd, J = 9,8, 7,2 Hz, 1H), 3,76−3,71 (q, J = 2,0, 1,5 Hz, 1H), 3,70−3,57 (m, 1H), 2,43−2,29 (dt, J = 16,5, 7,9 Hz, 1H), 2,20−1,98 (m, 1H),, LCMS (ESI) m/z:527,2 [M+H]+
Primer 91: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N[[3-fluoro-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
(2S,4R)-tert-butil 2-((3--bromo-5-fluorobenzil)karbamoil)-4-fluoropirolidin-1-karboksilat
Rastvoru (2S,4R)-1-tert-butoksikarbonil-4-fluoro-pirolidin-2-karboksilne kiseline (A, 2000 mg, 8,6 mmol) i (3-bromo-5-fluoro-fenil)metanamin (1,9 g, 9,4 mmol) u N,N-dimetilformamidu (34 ml) dodat je N,N-diizopropiletilamin (2,2 mL, 13 mmol) i HATU (4,0
1
g, 10 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Reakcija je ugašena vodom i ekstrahovana pomoću EtOAc. Organski slojevi su osušeni iznad natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani rotacionim isparivačem. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (EtOAc/Heptan_eluiran na 50% EtOAc) za dobijanje 3,24g, 90% prinosa. LCMS (ESI) m/z:419,1 [M+H]+
(2S,4R)-N-(3-bromo-5-fluorobenzil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamid Rastvoru tert-butil (2S,4R)-2-[(3-bromo-5-fluoro-fenil)metilcarbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilata (820 mg, 1,956 mmol) u 1,4-dioksanu (6.519 mL) dodata je hlorovodonična kiselina (4 mol/L) u 1,4-dioksanu (4.9 mL, 19.56 mmol). Reakciona smeša je mešana 6 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana i prebačena u sledeći korak. LCMS (ESI) m/z:318,9 [M+H]+
(2S,4R)-N-(3-bromo-5-fluorobenzil)-4-fluoro-1-((4-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamid
Rastvoru (2S,4R)-N-[(3-bromo-5-fluoro-phenyl)metil]-4-fluoro-pirolidin-2-karboksamida (624 mg, 1,9553 mmol) u dihlorometanu (39 ml) dodat je trietilamin (5,45 mL, 39,11 mmol), i 4-fluorobenzensulfonil-hlorid (571,0 mg, 2,933 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Reakcija je ugašena vodom i ekstrahovana pomoću EtOAc. Organski slojevi su osušeni iznad natrijum-sulfata, filtrirani i koncentrovani rotacionim isparivačem. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (EtOAc/Heptan_eluiran na 65% EtOAc) za dobijanje 933,4mg, 89,46% prinosa. LCMS (ESI) m/z:477,0 [M+H]+
1
(2S,4R)-4-fluoro-N-(3-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzil)-1-((4-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Rastvoru (2S,4R)-N-[(3-bromo-5-fluoro-fenil)metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida (205 mg, 0,4295 mmol) i bis(pinakolato)diborona (166,9 mg, 0,6442 mmol) u 1,4-dioksanu (8,60 mL, 100,6 mmol) dodat je kalijum-acetat (126,5 mg, 0,0805 mL, 1,288 mmol) i [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II) (31,74 mg, 0,04295 mmol). Reakciona smeša je degasirana, a zatim zagrevana na 85° C 18 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz celit. Sirovi proizvod je koncentrovan i prebačen u sledeći korak. LCMS (ESI) m/z:525,1 [M+H]+
(2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[3-fluoro-5-[2-(trifluorometil) pirimidin-5-il] fenil] metil] pirolidin-2-karboksamid
Degasiran je rastvor (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[3-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil]metil]pirolidin-2-karboksamida (225 mg, 0,4291 mmol), 5-bromo-2-(trifluorometil)pirimidina (153,9 mg, 0,6442 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II) (31,74 mg, 0,04295 mmol) i cezijumkarbonata (279,9 mg, 0,8590 mmol) u vodi (2,0 mL) i acetonitrila (4,0 mL). Reakciona smeša je zagrevana do 95 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz celit. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (EtOAc/Hep_eluiran na 70% EtOAc) i predat za rHPLC radi dobijanja 111,2mg, 47,55% prinosa.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,46−9,37 (s, 2H), 8,98−8,89 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,03−7,94 (m, 2H), 7,77−7,70 (m, 2H), 7,51−7,42 (m, 2H), 7,40−7,31 (m, 1H), 5,31−5,09 (m, 1H), 4,56−4,37 (m, 2H), 4,23−4,13 (dd, J = 9,9, 7,1 Hz, 1H), 3,77−3,55 (m, 2H), 2,47−2,29 (m, 1H), 2,20−1,98 (m, 1H), LCMS (ESI) m/z:545,2 [M+H]+
Primer 92: Priprema (2S,4R)-N-[[6-(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5--il)pirimidin-4-il]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
1
Korak br. 1: Priprema 2-(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana
Smeša 5-bromo-2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksola (1 g, 4,22 mmol, 1,00 ekviv.), 4,4,5,5-tetrametil-2-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3,2-dioksaborolan (1,2 g, 4,73 mmol, 1,10 ekviv), Pd(dppf)Cl2(300 mg, 0,41 mmol) i AcOK (800 mg, 8,15 mmol, 2,00 ekviv.) u dioksanu (20 ml) mešana je preko noći na 100° C. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:20) dajući naslovno jedinjenje (900 mg, 75%) u obliku žutog ulja.
Korak br.2: Priprema 4-hloro-6-(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)pirimidina
Rastvor 2-(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolana (800 mg, 2,82 mmol, 1,00 ekviv.), 4,6-dihloropirimidina (640 mg, 4,30 mmol, 1,50 ekviv.), kalijum-karbonata (776 mg, 5,61 mmol, 2,00 ekviv.) i Pd(PPh3)4(328 mg, 0,28 mmol, 0,10 ekviv.) u dioksanu (15 mL) / vodi (3 mL) mešan je preko noći na 100° C. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:6) dajući naslovno jedinjenje (570 mg, 75%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema 6-(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)pirimidin-4-karbonitrila.
Rastvor 4-hloro-6-(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)pirimidina (500 mg, 1,85 mmol, 1,00 ekviv.), Pd(PPh3)4(180 mg, 0,16 mmol, 0,10 ekviv.) i Zn(CN)2(330 mg, 2,81 mmol, 1,50 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (8 mL) mešan je 1 h na 100° C. Reakciona smeša je razređena pomoću 100 ml etil-acetata, isprana vodom, osušena iznad natrijum-
1
sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:6). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (360 mg, 75%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema [6-(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)pirimidin-4-il]metamina
Smeša 6-(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)pirimidin-4-karbonitrila (340 mg, 1,30 mmol, 1,00 ekviv.), paladijuma na ugljenu (100 mg, 0,.94 mmol, 1,00 ekviv.) i hlorovodonika (2 kapi) u metanolu (80 mL) mešana je 5 minuta na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije DCM:MeOH (100:5) dajući naslovno jedinjenje (220 mg, 64%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema (2S,4R)-N-N-[[6-(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)pirimidin-4-il]metil]-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Rastvor (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (110 mg, 0,38 mmol, 1,0 ekviv.), HATU (172 mg, 0,45 mmol, 1,2 ekviv.) i DIEA (200 mg, 1,55 mmol, 2,00 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (10 mL) mešan je 10 minuta na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat [6-(2,2-difluoro-2H-1,3-benzodioksol-5-il)pirimidin-4-il]metanamin (100 mg, 0,38 mmol, 1,0 ekviv.), a dobijeni rastvor je mešan dodatna 3 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran vodom, osušen iznad natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom dajući naslovno jedinjenje (43,2 mg, 21%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,20 (s, 1H), 8,06−8,02 (m, 3H), 7,96−7,92 (m, 2H), 7,80 (s, 1H), 7,28−7,23 (m, 2H),7,18 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,15−5,02 (d, J = 51,2 Hz, 1H), 4,95−4,92 (m, 1H), 4,66−4,62 (m, 1H), 4,29 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 3,88−3,72 (m, 2H), 2,59−2,53 (m, 1H), 2,34−2,17 (m, 1H).
2
Primer 93: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-N-((6-(3-fluoro-4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4--il)metil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema (2S,3R)-tert-butil 2-((6-(3-fluoro-4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metilcarbamoil)-3-hidroksipirolidin-1-karboksilata
Smeša (2S,3R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-3-hidropirolidin-2-karboksilna kiselina (209 mg, 0,90 mmol, 1,00 ekviv.), [6-[3-fluoro-4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorid (280 mg, 0,91 mmol, 1,00 ekviv.), HATU (414 mg, 1,09 mmol, 1,20 ekviv) i DIEA (351 mg, 2,72 mmol, 3,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (10 mL) mešana je 6 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena vodom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan 2 x 50 ml etilacetata, a organski slojevi su kombinovani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (2:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (270 mg, 62%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema (2R,3S)-tert-butil 3-fluoro-2-[([6-[3-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il]metilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilata.
DAST (36,6 mg, 0,23 mmol, 2,20 ekviv) dodat je kap po kap smeši tert-butil (2S,3R)-2-[([6-[3-fluoro-4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]-3-hidroksipirolidin-1-karboksilata (50 mg, 0,10 mmol, 1,00 ekviv) u dihlorometanu (5 ml) na 0° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 10 minuta na 0° C u vodenom/ledenom kupatilu. Reakcija je zatim prekinuta ledenom vodom, reakciona smeša je ekstrahovana dihlormetanom 2x50 ml, isprana 2x10 mL zasićenim vodenim NaHCO3, i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (3:1) dajući naslovno jedinjenje 57 mg (sirovo) u obliku smeđe čvrste materije.
2 1
Korak br. 3: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-N-((6-(3-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida
Smeša tert-butil (2S,3R)-3-fluoro-2-[([6-[3-fluoro-4-(trifluoromethyl)fenil]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (57 mg, 0,12 mmol, 1,00 ekviv.) i zasićenog hlorovodonika u 1,4-dioksanu (5 ml) mešana je 14 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (44 mg, 89%) u obliku smeđe čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema fluoro-(2S,3R)-3-fluoro-N-(((6-fluoro-4-(3-trifluorometil)piperidin-1-il)piridin-2-il)metil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorid (24 mg, 0,12 mmol, 1,20 ekviv.), (2R,3S)-3-fluoro-N-([6-[3-fluoro-4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil)-4-pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (44 mg, 0,10 mmol, 1,00 ekviv.), i TEA (31,5 mg, 0.31 mmol, 3,00 ekviv.) u dihlorometanu (5 mL) mešana je 14 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (3:1) dajući naslovno jedinjenje (21,4mg, 38%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,25 (s, 1H), 8,10−8,06 (t, J = 8,5 Hz, 2H), 7,94−7,91 (m, 3H), 7,78−7,72 (m, 2H), 7,31−7,26 (m, 2H), 5,38−5,25 (d, J = 50,8 Hz, 1H), 4,93−4,91 (m, 1H), 4,58−4,53 (m, 1H), 4,43−4,37 (d, J = 22,0 Hz,1H), 3,83 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 3,35−3,28 (m, 1H), 2,23−2,03 (m, 2H).
Primer 94: Priprema (2S, 4R)-N-[[3-[6-(difluorometil)-3-piridil]-5-fluorofenil] metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin-2-karboksamida.
2 2
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 48.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,07−9,04 (dd, J = 2,3, 0,8 Hz, 1H), 8,93−8,87 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,35−8,30 (dd, J = 8,2, 2,3 Hz, 1H), 8,02−7,94 (m, 2H), 7,80−7,75 (m, 1H), 7,65−7,62 (t, J = 1,5 Hz, 1H), 7,62−7,56 (ddd, J = 10,0, 2,5, 1,6 Hz, 1H), 7,50−7,41 (m, 2H), 7,30−7,23 (ddd, J = 9,8, 2,4, 1,5 Hz, 1H), 7,17−6,86 (t, J = 54,9 Hz, 1H), 5,30−5,10 (d, J = 52,7 Hz, 1H), 4,54−4,37 (m, 2H), 4,23−4,13 (dd, J = 9,9, 7,1 Hz, 1H), 3,76−3,56 (m, 2H), 2,46−2,30 (m, 1H), 2,20−1,99 (m, 1H),, LCMS (ESI) m/z:526,12 [M+H]+
Primer 95: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)-2-piridil]fenil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 91.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9,09−9,03 (dt, J = 1,9, 0,9 Hz, 1H), 8,95−8,87 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 8,35−8,29 (m, 1H), 8,28−8,23 (m, 1H), 8,03−7,93 (m, 3H), 7,91−7,83 (ddd, J = 10,2, 2,6, 1,6 Hz, 1H), 7,51−7,41 (m, 2H), 7,36−7,28 (ddd, J = 9,5, 2,4, 1,3 Hz, 1H), 5,31−5,10 (d, J = 52,5 Hz, 1H), 4,54−4,39 (m, 2H), 4,23−4,13 (dd, J = 9,8, 7,1 Hz, 1H), 3,79−3,57 (m, 2H), 2,46−2,29 (td, J = 16,5, 15,8, 7,1 Hz, 1H), 2,19−1,98 (m, 1H),, LCMS (ESI) m/z:544,11 [M+H]+
Primer 96: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil)-N-[[5-metil-4-[6-(trifluorometil)-3-piridil]--2-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
2
Korak br.1: Priprema 5-metil-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-karbonitrila.
Smeša 5-hloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-karbonitrila (1,08 g, 3,81 mmol, 1,00 ekviv.) u dioksanu (50 mL), Pd(dppf)Cl2(560 mg, 0,77 mmol, 0,20 ekviv.) i Zn(CH3)2(4.2 mL, 5,72 mmol, 1,30 ekviv.) mešana je preko noći na 65° C u atmosferi azota. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (15:100). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (292 mg, 29%) u obliku žutog ulja.
Korak br.2: Priprema [5-metil-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metanamin hidrohlorida
Smeša 5-metil-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-karbonitrila (280 mg, 1,06 mmol, 1,00 ekviv.) u metanolu (40 mL), paladijum na ugljenu (50 mg, 0,47 mmol, 0,40 ekviv.) i koncentrovanog hlorovodonika (1 mL) mešana je 10 minuta na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (263 mg, 81%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema tert-butil (2S,4R)-4-fluoro-2-[([5-metil-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil)karbamoil]pirolidini-1-karboksilata.
Smeša [5-metil-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metanamin hidrohlorida (260 mg, 0,86 mmol, 1,00 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (20 mL), (2S,4R)-1-[(tertbutoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline (200 mg, 0,86 mmol, 1,00 ekviv.), DIEA (1,11 g, 8,59 mmol, 10,00 ekviv.) i HATU (392 mg, 1,03 mmol, 1,20 ekviv.) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije
2 4
dihlormetanom/metanolom (100:5) dajući naslovno jedinjenje (380 mg, 92%) u obliku smeđeg ulja.
Korak br. 4: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([5-metil-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorid
Rastvor tert-butil (2S,4R)-4-fluoro-2-[([5-metil-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (380 mg, 0,79 mmol, 1,00 ekviv.) u zasićenoj HCl (zasićeni rastvor u 50 mL1,4 dioksanu) mešan je 2 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (285 mg, 86%) u obliku svetlosmeđe čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-[[5-fluoro-5-[6-(trifluorometil)-3piridil]-2-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-N-([5-metil-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pyridin-2-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (285 mg, 0,680 mmol, 1,000 ekviv) ,u dihlorometanu (20 ml) TEA (687 mg, 6,789 mmol, 10,000 ekviv) i 4-fluorobenzen-1-sulfonlhlorida (200 mg, 1,028 mmol, 1,500 ekviv.) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Dobijeni rastvor je razređen u dihlormetanu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije dihlormetanom/metanolom (100:10). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (71,6 mg, 19%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8,92−8,83 (m, 2H), 8,52 (s, 1H), 8,18−8,16 (m, 1H), 8,01−7,91 (m, 3H), 7,45−7,40 (m, 3H), 5,27−5,01 (d, J = 52,2 Hz, 1H), 4,47−4,44 (m, 2H), 4,23−4,17 (m, 1H), 3,67−3,57 (m, 2H), 2,44−2,41 (m, 1H), 2,38−2,14 (m, 3H), 2,07−2,00 (m, 1H).
Primer 97: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-N-([4-fluoro-3-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
2
Korak br.1: Priprema 4-fluoro-3-(5-(trifluorometil)pirazin-2-il)benzonitril
Smeša (5-cijano-2-fluorofenil)boronska kiselina (91 mg, 0,55 mmol, 1,00 ekviv.), 2-hloro-5-(trifluorometil)pirazin (100 mg, 0,55 mmol, 1,00 ekviv.), Pd(PPh3)4(63 mg, 0,05 mmol, 0,10 ekviv.) i kalijum-karbonata (152 mg, 1,10 mmol, 2,00 ekviv) u 1,4-dioksanu (2 ml) / voda (0,4 ml) mešana je preko noći na 95° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:10). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (110 mg) u obliku svetložute čvrste materije
Korak br.2: Priprema [4-fluoro-3-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metanamina
Smeša 4-fluoro-3-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]benzonitrila (200 mg, 0,75 mmol, 1,0 ekviv.), paladijuma na ugljenu (50 mg, 0,47 mmol, 1.00 ekviv) u metanolu (20 ml) mešana je 20 minuta na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (95 mg, 47%) u obliku smeđe čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema tert-butil (2S,3R)-2-[([4-fluoro-3-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metil)karbamoil]-3-hidroksipirolidin-1-karboksilata
Smeša (2S,3R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-3-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (90 mg, 0,39 mmol, 1,00 ekviv.), DIEA (226 mg, 1,75 mmol, 2,00 ekviv.) i HATU (160 mg, 0,42 mmol, 1,20 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (5 mL) mešana je 10 minuta na sobnoj temperaturi. Zatim je reakcionoj smeši dodat [4-fluoro-3-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metanamin (95 mg, 0,35 mmol, 1,00 ekviv.). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcioni rastvor je razređen vodom, ekstrahovan etil-acetatom, osušen
2
iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (160 mg, 85%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema tert-butil (2R,3S)-3-fluoro-2-[([4-fluoro-3-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata
Kap po kap je dodavan DAST (220 mg, 1,36 mmol, 3,00 ekviv.) u izmešani rastvor tert-butil (2S,3R)-2-[([4-fluoro-3-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metil)karbamoil]-3-hidroksipirolidin-1-karboksilata (220 mg, 0,45 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlorometanu (20 mL) na 0° C. Dobijeni rastvor je mešan 5 h na sobnoj temperaturi, a zatim ugašen vodenim rastvorom NaHCO3. Reakcioni rastvor je ekstrahovan pomoću 100 ml etil-acetata, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (65 mg, 29%) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br. 5: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-N-([4-fluoro-3-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il)fenil]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida.
Smeša tert-butil (2R,3S)-3-fluoro-2-[([4-fluoro-3-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (65 mg, 0,13 mmol, 1,00 ekviv.) i zasićenhlorovodonik u dioksanu (6 ml) mešana je tokom noći na sobnoj temperaturi i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (60 mg) u obliku smeđe čvrste materije.
Korak br. 6: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-N-([4-fluoro-3-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2R,3S)-3-fluoro-N-([4-fluoro-3-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (60 mg, 0,14 mmol, 1,00 ekviv), TEA (42 mg, 0,42 mmol, 3,00 ekviv) i 4-fluorobenzen-1-sulfonl-hlorida (30 mg, 0,15 mmol, 1,10
2
ekviv) u dihloromethanu (5 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Rastvoren pomoću 50 ml DCM, ispran vodom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:2). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (23,7 mg, 31%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,23 (s, 1H), 9,02 (s, 1H), 8,01 (dd, J = 7,2 Hz, J = 2,4 Hz, 1H), 7,87−7,85 (m, 2H), 7,49−7,46 (m, 2H), 7,27−7,22 (m, 3H), 5,44−5,31 (dd, J = 50,4 Hz, J = 2,4Hz, 1H), 4,63−4,49 (m, 2H), 4,34−4,29 (d, J = 22,0 Hz, 2H), 3,74 (t, J = 9,2 Hz, 1H), 3,32−3,26 (m, 1H), 2,16−1,90 (m, 2H).
Primer 98: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-N-([3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema tert-butil (2S,3R)-2-[([3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metil)karbamoil]-3-hidroksipirolidin-1-karboksilata
Smeša (2S,3R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-3-hidroksipirolidin-2--karboksilne kiseline (358 mg, 1,55 mmol, 1,00 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (30 mL), [3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metanamina (420 mg, 1,55 mmol, 1,00 ekviv.), DIEA (1 g, 7,74 mmol, 5,00 ekviv.) i HATU (707 mg, 1,86 mmol, 1,20 ekviv.) mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću etilacetata / petroleum etera (1:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (400 mg, 53%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema tert-butil (2R,3S)-3-fluoro-2-[([3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata
2
DAST (81 mg, 0,50 mmol, 1,20 ekviv) dodat je kap po kap smeši tert-butil (2S,3R)-2-[([3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metil)karbamoil]-3-hidroksipirolidin-1-karboksilata (200 mg, 0,41 mmol, 1,00 ekviv) u dihlorometanu (20 ml) na -0° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 1 h na 5° C u vodenom/ledenom kupatilu. Reakcija je zatim ugašena zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata., ekstrahovana dihlormetanom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum etra (1:10). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (100 mg, 50%) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br. 3: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-N-([3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il)fenil]pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida.
Rastvor tert-butil (2R,3S)-3-fluoro-2-([3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]karbamoil)pirolidin-1-karboksilata (100 mg, 0,21 mmol, 1,00 ekviv.) u zasićenoj HCl (20 mL) u 1,4-dioksanu mešan je preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (75 mg, 87%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-N-([3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida
Smeša (2R,3S)-3-fluoro-N-([3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (75 mg, 0,18 mmol, 1,00 ekviv), u dihloromethanu (20 ml), TEA (182 mg, 1,80 mmol, 10,10 ekviv.) i 4-fluorobenzen-1-sulfonlhlorida (53 mg, 0,27 mmol, 1,50 ekviv) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Dobijeni rastvor je razređen u dihlormetanu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću dihlormetana/metanola (10/1) dajući naslovno jedinjenje (32,2 mg, 33%) u obliku bele čvrste materije.
2
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9,50 (s, 1H), 9,26 (s, 1H), 9,08−9,05 (m, 1H), 8,03 (s, 1H), 8,00−7,95 (m, 3H), 7,51−7,47 (m, 2H), 7,39−7,37 (m, 1H), 5,24−5,11 (d, J = 52,4 Hz, 1H), 4,49−4,46 (m, 2H), 4,39−4,33 (m, 1H), 3,70−3,66 (m, 1H), 3,21−3,14 (m, 1H), 2,16−2,10 (m, 2H).
Primer 99 i primer 100: Priprema (2S,3aR,6aS)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil)-heksahidro-1H-furo[3,4−b]pirol-2-karboksamida.
i (2S,3aS,6aR)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil)-heksahidro-1H-furo[3,4−b]pirol-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 3,6-dioksabiciklo[3.1.0]heksana
m-CPBA (88 g, 509.95 mmol, 1.20 ekviv.) dodat je u nekoliko serija rastvora 2,5-dihidrofurana (30 g, 428.02 mmol, 1.00 ekviv.) u dihlorometanu (300 mL) na ∼0° C. Nakon 12 h na sobnoj temperaturi, dobijeni rastvor je razređen zasićenom Na2SO3i mešan 0,5 h na sobnoj temperaturi. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim vodenim rastvorom natrijumbikarbonata i slanog rastvora, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (30 g) u obliku bezbojnog ulja Korak br.2: Priprema (3R,4S)-4-(prop-2-en-1-il)oksolan-3-ola
Bromo(prop-2-en-1-il)magnezijum (300 mL, 2.06 mol, 2.00 ekviv.) dodat je kap po kap smeši 3,6-dioksabiciklo[3.1.0]heksana (12.9 g, 149.84 mmol, 1.00 ekviv.) i CuI (2.85 g, 14.96 mmol, 0.10 ekviv.) u tetrahidrofuranu (100 mL) na 0 °C – 5 °C u atmosferi nitrogena. Dobijeni rastvor je mešan 3 h na 0° C, ugašen NH4Cl (aq.) i ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog
21
natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:6) dajući naslovno jedinjenje (5 g, 26%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br.3: Priprema 4-(prop-2-en-1-il)oksolan-3-ona
Smeša (3S,4R)-4-(prop-2-en-1-il)oksolan-3-ol (3,5 g, 27,31 mmol, 1,00 ekviv.) i PCC (13 g, 60,31 mmol, 2,00 ekviv.) u dihlorometanu (160 mL) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (2,0 g, 58%) u obliku sive tečnosti.
Korak br.4: Priprema N-[(3Z)-4-(prop-2-en-1-il)oksolan-3-iliden]hidroksilamina
Smeša 4-(prop-2-en-1-il)oksolan-3-ona (2,25 g, 17,84 mmol, 1,00 ekviv.), NH2OH.HCl (2.46 g, 35.40 mmol, 2.00 ekviv.) i piridina (1,4 g, 17,48 mmol, 1,00 ekviv.) u etanolu (50 ml) mešana je 1,5 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (1,3 g, 52%) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br.5: Priprema 4-(prop-2-en-1-il)oksolan-3-amina
LiAlH4(1,186 g, 31,25 mmol, 3,00 ekviv.) dodat je u nekoliko serija rastvoru N-[(3Z)-4-(prop-2-en-1-il)oksolan-3-iliden]hidroksilamina (1,17 g, 8,29 mmol, 1,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (25 mL) na 0° C – 5° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 1 h na sobnoj temperaturi, pa 2 h na 45° C. Reakcija je zatim ugašena vodenim rastvorom Na2SO4. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (1,46 g, sirovo) u obliku bezbojne tečnosti.
Korak br. 6: Priprema 4-fluoro-N-[4-(prop-2-en-1-il)oksolan-3-il]benzen-1-sulfonamida
Smeša 4-(prop-2-en-1-il)oksolan-3-amina (1,35 g, 10,61 mmol, 1,00 ekviv), 4-fluorobenzen-1-sulfonil hlorida (1,65 g, 8,48 mmol, 0,80 ekviv.), TEA (2.14 g, 21.15 mmol, 2.00 ekviv.) i 4-dimetilaminopiridina (50 mg, 0.41 mmol, 0,05 ekviv) i u tetrahidrofuranu (50 ml) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razređena vodom, ekstrahovana etilacetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:9) dajući naslovno jedinjenje (1,46 g, 48%) u obliku narandžastog ulja.
Korak br. 7: Priprema [1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-heksahidro-1H-furo[3,4−b]pirol-2-il]metanola
Smeša 4-fluoro-N-[4-(prop-2-en-1-il)oksolan-3-il]benzen-1-sulfonamid (1,57 g, 5,50 mmol, 1,00 ekviv.), kalijuma peroksimonosulfata (6,77 g, 11,01 mmol, 2,00 ekviv.) i TsOH (105,8 mg, 0,61 mmol, 0,10 ekviv.) u vodi (15 mL) mešana je 12 h na 50° C. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, ugašena zasićenim natrijum bikarbonatom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijumsulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:3) dajući naslovno jedinjenje (700 mg, 42%) u obliku svetložutog ulja
Korak br. 8: Priprema beličaste 1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-heksahidro-1H-furo[3,4−b]pirol-2-karboksilne kiseline
Rastvor [1-[(4-fluorobenzen)sulfonl]-heksahidro-1H-furo[3,4−b]pirol-2-il]metanola (700 mg, 2,32 mmol, 1,00 ekviv.) u acetonu (40 mL) pomešan je s rastvorom CrO3(1,163 g, 11,63 mmol, 5,00 ekviv.) u vodi (5mL) koja sadrži sumpornu kiselinu (1 mL). Dobijeni rastvor je mešan 2 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena metanolom. Nakon 15 minuta smeša je izlivena u 200 mL slanog rastvora. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etilacetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (630 mg, 86%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br. 9: Priprema (2S,3aR,6aS)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil)-heksahidro-1H-furo[3,4−b]pirol-2-karboksamida i (2R,3aS,6aR)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil)-heksahidro-1H-furo[3,4−b]pirol-2-karboksamida
Smeša 1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-heksahidro-1H-furo[3,4−b]pirol-2-2-karboksilne kiseline (600 mg, 1,90 mmol, 1,00 ekviv.), HATU (794,2 mg, 2,09 mmol, 1,10 ekviv), DIEA (735,3 mg, 5,69 mmol, 3,00 ekviv) i [6-[4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (550 mg, 1,90 mmol, 1,00 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (25 ml) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:3). Smeša je razdvojena preparativnom hiralnom HPLC radi dobijanja (2S,3aR,6aS)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil)-heksahidro-1H-furo[3,4−b]pirol-2-karboksamida (47,9 mg, 5%) u obliku bele čvrste supstance. tR= 4,84 min (Repaired IA (CHIRALPAK IA), 0,46 x 10cm, 5 µm, Hex (0,1%TEA):EtOH = 50:50, 1,0 ml/min).
21
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,26 (s, 1H), 8,28−8,26 (d, J = 6 Hz, 2H), 7,89−7,84 (m, 3H), 7,77−7,74 (d, J = 9 Hz, 2H), 7,26−7,11 (m, 3H), 4,68−4,60 (m, 2H), 4,55−4,50 (m, 2H), 4,10−4,06 (m, 1H), 3,73−3,70 (m, 1H), 3,61−3,54 (m, 2H), 3,29−3,19 (m, 1H), 2,42−2,29 (m, 1H), 2,12−2,02 (m, 1H).
(2R,3aS,6aR)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil)-heksahidro-1H-furo[3,4−b]pirol-2-karboksamida (51,5 mg, 5%) je isto tako izolovano u obliku bele čvrste materije. tR= 12,96 min (Lux Cellulose-4, 0,46 cm x 15 cm, 5 µm, Hex (0,1%TEA):EtOH = 50:50, 1,0 ml/min).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,24 (s, 1H), 8,36−8,34 (d, J = 9 Hz, 2H), 8,05 (s, 1H), 7,96−7,91 (m, 2H), 7,87−7,83 (b, 1H), 7,76−7,73 (d, J = 9 Hz, 2H), 7,33−7,26 (m, 2H), 4,85−4,64 (m, 2H), 4,42−4,38 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,33−4,27 (m, 2H), 3,74−3,67 (m, 2H), 2,88−2,79 (m, 1H), 2,36−2,31 (m, 1H), 1,94−1,83 (m, 1H).
(2S,3aS,6aR)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil)-heksahidro-1H-furo[3,4−b]pirol-2-karboksamida (36 mg, 3%) izolovano u obliku bele čvrste materije. tR= 3,27 min (Repaired IA (CHIRALPAK IA), 0,46 x 10cm, 5 µm, Hex (0,1%TEA):EtOH = 50:50, 1,0 ml/min).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,25 (s, 1H), 8,28−8,26 (d, J = 6 Hz, 2H), 7,89−7,84 (m, 3H), 7,77−7,74 (d, J = 9 Hz, 2H), 7,26−7,12 (m, 3H), 4,62−4,61 (m, 2H), 4,56−4,50 (m, 2H), 4,10−4,06 (m, 1H), 3,73−3,70 (m, 1H), 3,58−3,53 (m, 2H), 3,29−3,19 (m, 1H), 2,35−2,28 (m, 1H), 2,12−2,02 (m, 1H).
(2R,3aR,6aS)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil)-heksahidro-1H-furo[3,4−b]pirol-2-karboksamida (34,3 mg, 3%) izolovano u obliku bele čvrste materije. tR= 6,60 min (Lux Cellulose-4, 0,46 cm x 15cm, 5 µm, Hex (0,1%TEA):EtOH = 50:50, 1,0 ml/min).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,24 (s, 1H), 8,37−8,34 (d, J = 8,5 Hz, 2H), 8,04 (s, 1H), 7,96−7,91 (q, 2H), 7,86−7,83 (m, 1H), 7,76−7,73 (d, J = 9 Hz, 2H), 7,33−7,27 (m, 2H), 4,86−4,64 (m, 2H), 4,42−4,38 (d, J = 12 Hz, 1H), 4,33−4,27 (m, 2H), 3,74−3,67 (m, 2H), 2,86−2,82 (m, 1H), 2,36−2,31 (m, 1H), 1,94−1,84 (m, 1H).
Stereohemija za biciklične prstenove gorepomenutog jedinjenja proizvoljno je dodeljena. Stereohemija 2-prolina je prikazana.
Primer 101: Priprema (2S,4R)-N-([5-hloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 2,5-dihloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridina
Smeša 2,5-dihloro-4-jodopiridin (10 g, 36,511 mmol, 1,00 ekviv.), [6-(trifluorometil)piridin-3-il]boronske kiseline (6,7 g, 35,094 mmol, 1,00 ekviv.), Pd(dppf)Cl2(2,67 g, 3,649 mmol, 0,10 ekviv.), 1,4-dioksana (250 mL), kalijum-karbonata (15 g, 108.534 mmol, 3.00 ekviv.) i vode (25 mL) mešana je 12 h na 80° C u atmosferi azota. Čvrste supstance su filtrirane i rastvor je koncentrovan u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum etera (1:20). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (9,9 g, 93%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema metil 5-hloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-karboksilata
Smeša 2,5-dihloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridina (8,8 g, 30,027 mmol, 1,00 ekviv.), Pd(dppf)Cl2(2,2 g, 3,007 mmol, 0,10 ekviv.), metanola (120 mL), TEA (9,1 g, 89,930 mmol, 2,995 ekviv.) mešana je 12 h na 60° C u atmosferi azota. Čvrste supstance su filtrirane. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum etra (1:10). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (4,5 g, 47%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.3: Priprema [5-hloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metanola.
DIBAL-H (47,5 mL, 1M u heksanu, 3.00 ekviv, 3,00 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru metil 5-hloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-karboksilata (5,0 g, 15,790 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlorometanu (200 mL) na -78° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor
21
je mešan 30 min na -70° C. Reakcija je ugašena metanolom na -70° C, a zatim je dodat NaBH4(0,9g) na 0° C. Nakon 10 minuta na 0° C smeša je ugašena pomoću 1N HCl na 0° C. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, ispran natrijum-bikarbonatom i slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum etra (1:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (4,2 g, 92%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema 2-([5-chloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona.
DIAD (6,0 g, 29,672 mmol, 1,992 ekviv.) dodat je kap po kap smeši[[5-hloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]]metanola (4,3 g, 14,897 mmol, 1,000 ekviv.), 2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-dion (4,4 g, 29,905 mmol, 2,008 ekviv.) i PPh3(7,8 g, 29,739 mmol, 1,996 ekviv.) u tetrahidrofuranu (200 mL) na 0° C u atmosferi azota. Nakon 12 h na sobnoj temperaturi, reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum etera (1:10). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (6,0 g, 96%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br.5: Priprema [5-hloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metanamin
Smeša 2-([5-hloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (6,0 g, 14,362 mmol, 1,000 ekviv.), metanola (150 mL) i NH2NH2H2O (7,2 g, 143,826 mmol, 10,014 ekviv.) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu, a ostatak je rastvoren u etil-acetatu. Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (7,5 g) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 6: Priprema tert-butil (2S,4R)-2-[([5-hloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-ill]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidin-1-karboksilata
21
Smeša (2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilna kiselina (4,1 g, 17,579 mmol, 1,00 ekviv.), N,N-dimetilformamid (50 mL), DIEA (4,5 g, 34,818 mmol, 1,98 ekviv.) , HATU (7,9 g, 20,777 mmol, 1,18 ekviv.) i [5-chloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metanamin (7,5 g, 26,072 mmol, 1,48 ekviv.) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum etera (1:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (4,5 g, 51%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br. 7: Priprema (2R,4S)-N-([5-cijano-5-[6-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamida
Smeša tert-butil (2S,4R)-2-[([5-hloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil)karbamoil]-4-fluoropirolidinin-1-karboksilata (3,5 g, 6,960 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlorometanu (100 mL) i trifluorosirćetna kiselina (20 ml) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u vodi. pH vrednost rastvora je podešena na 8 zasićenim natrijum-bikarbonatom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijumsulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (2,5 g, 89%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br. 8: (2S,4R)-N-([5-hloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-3-il]piridin-2-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida
Rastvor (2S,4R)-N-([5-chloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamid (2,5 g, 6,207 mmol, 1,00 ekviv.), dihlormetan (100 ml), TEA (,9 g, 18,777 mmol, 3,025 ekviv.) i 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorida (1,3 g, 6,680 mmol,
21
1,08 ekviv.) mešan je 12 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću etilacetata / petroleum etera (1/1). Sirovi proizvod je zatim prečišćen rekristalizacijom iz etilacetata radi dobijanja naslovnog jedinjenja (2,66 g, 76%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,89 (m, 1H), 8,69 (s, 1H), 8,08−8,06 (m, 1H), 7,89−7,80 (m, 3H), 7,67−7,64 (br, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,28−7,21 (m, 2H), 5,13−5,00 (d, J = 52 Hz, 1H), 4,86−4,80 (m, 1H), 4,60−4,55 (m, 1H), 4,30−4,26 (m, 1H), 3,94−3,61 (m, 2H), 2,55−2,21 (m, 2H).
Primer 102: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([5-fluoro-4-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]piridin-2-il]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema 2-hloro-5-fluoro-4--(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina.
Smeša 2-hloro-5-fluoro-4-jodopiridina (500 mg, 1.94 mmol, 1.00 ekviv.), 4,4,5,5-tetrametil-2-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3,2-dioksaborolana (544 mg, 2,14 mmol, 1,10 ekviv.), KOAc (572 mg, 5,83 mmol, 3,00 ekviv.) i Pd(dppf)Cl2(142 mg, 0,19 mmol, 0,10 ekviv.) u 1,4-dioksanu (4 mL) mešana je 14 h na 100° C u atmosferi azota. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:5) dajući naslovno jedinjenje (272 mg) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 2-(2-hloro-5-fluoropiridin-4-il)-5-(trifluorometil)pirazina
Smeša (2-hloro-5-fluoropiridin-4-il)boronske kiseline (3g, 17,11 mmol, 3,10 ekviv), 2-hloro-5-(trifluorometil)pirazin (1g, 5,48 mmol, 1,00 ekviv.), Pd(dppf)Cl2. (200 mg, 0,27
21
mmol, 0,05 ekviv) i kalijum-karbonata (2,26g, 16,35 mmol, 3,00 ekviv) u vodi (2 ml)/ 1,4-dioksanu (20 ml) mešana je 14 h na 75° C u atmosferi azota. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (500mg, 33%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.3: Priprema 5-fluoro-4-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]piridin-2-karbonitrila
Smeša 2-(2-hloro-5-fluoropiridin-4-il)-5-(trifluorometil)pirazina (500 mg, 1,80 mmol, 1,00 ekviv.), Zn(CN)2(253 mg, 2,15 mmol, 1,20 ekviv.), Pd2(dba)3.CHCl3(186 mg, 0,18 mmol, 0,10 ekviv.) i dppf (200 mg, 0,36 mmol, 0,20 ekviv.) u 10 mL N,N-dimetilformamidu ozračena je mikrotalasnim zračenjem 1 h na 100°C u atmosferi azota. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (250mg, 52%) u obliku žute čvrste materije
Korak br. 4: Priprema [5-fluoro-4-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]piridin-2-il]metanamin hidrohlorida
Smeša 5-fluoro-4-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]piridin-2-karbonitrila (200 mg, 0,75 mmol, 1,00 ekviv) i paladijuma na ugljenu (50 mg), i hlorovodinika (0,5 mL, konc.) u 20 ml metanola mešana je 1 min na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane. Filtrat je koncentrovan u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (120 mg) u obliku smeđe čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([5-fluoro-4-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]piridin-2-il]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida
21
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (47 mg, 0,16 mmol, 1,00 ekviv.), [5-fluoro-4-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]piridin-2-il]metanamin hidrohlorida (50 mg, 0,16 mmol, 1,00 ekviv.), HATU (74 mg, 0,19 mmol, 1,20 ekviv.) i DIEA (63 mg, 0,49 mmol, 3,00 ekviv.) u 3 mL tetrahidrofuranu mešana je 14 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (19,7mg, 22%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,32 (s, 1H), 9,11 (s, 1H), 8,67 (s, 1H), 8,21 (s, 1H), 8,20−7,90 (m, 3H), 7,29−7,20 (m, 2H), 5,13−5,0 (d, J = 39 Hz, 1H), 4,80−4,76 (m, 1H), 4,28−4,24 (t, 1H), 3,92−3,75 (m, 2H), 2,55−2,45 (m, 1H), 2,39−2,22 (m, 1H).
Primer 103: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((3-metoksi-1-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)-1H-pyrazol-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema tert-butil (2S,3S)-3-hidroksi-2-[([3-methoksi-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilat.
Smeša (2S,3S)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-3-hidroksipirolidin-2-karboksilna kiselina (108 mg, 0,47 mmol, 1,20 ekviv), HATU (222 mg, 0,58 mmol, 1,50 ekviv), DIEA (151 mg, 1,17 mmol, 3,00 ekviv) i [3-methoxy-1-[6-(trifluorometil)pIridin-3-Il]-1H-pIrazol-4-Il]metamin hIdrohlorid (120 mg, 0,39 mmol, 1,00 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (10 ml) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je rastvorena u etil-acetatu, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:4) dajući naslovno jedinjenje (150 mg, 79%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-2-[([3-metoksi-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)carbamoil]pirolidin-1-carboksilata
22
DAST (109 mg, 0,48 mmol, 3,00 ekviv) dodat je kap po kap rastvoru tert-butil (2S,3R)-3-hidroksi-2-[([3-metoksi-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)carbamoil]pirolidin-1-carboksilata (110 mg, 0,23 mmol, 1,0 ekviv) u dihloromethana (10 ml) na 0°C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 15 minuta na 0° C. Reakcija je zatim ugašena zasićenim natrijum-bikarbonatom, ekstrahovana dihlormetanom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (65mg, 59%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema (2S,3R)-3-fluoro-N-([3-metoksi-1-[6-(trifluorometil)-piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida
Smeša tert-butil (2R,3S)-3-fluoro-2-[([3-metoksi-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)karbamoil]pirolidinin-1-karboksilata (65 mg, 0,13 mmol, 1,00 ekviv.) i zasićene HCl u 1,4-dioksanu (5 mL). Dobijeni rastvor je mešan 2 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (61mg) u obliku žutog ulja.
Korak br. 4: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-((3-metoksi-1-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)-1H-pyrazol-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2R,3S)-3-fluoro-N-([3-metoksi-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (50 mg, 0,12 mmol, 1,00 ekviv), 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorida (25 mg, 0,13 mmol, 1,10 ekviv.), 4-dimetilaminopiridina (1 mg, 0,01 mmol, 0,10 ekviv) i TEA (30 mg, 0,30 mmol, 1,00 ekviv) u dihlormetanu (5 ml) mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je rastvorena u dihlormetanu, ispranavodom, osušena iznad natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (29,53mg) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,98 (s, 1H), 8,07−8,05 (m, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,89−7,86 (m, 2H), 7,73−7,70 (m, 1H), 7,52−7,36 (m, 1H), 7,28−7,23 (m, 2H), 5,38−5,26 (d, J = 50,4 Hz, 1H), 4,49−4,44 (m, 1H), 4,32−4,21 (m, 2H), 4,05 (s, 3H), 3,77−3,72 (m, 1H), 3,31−3,24 (m, 1H), 2,15−1,85 (m, 2H).
Primer 104: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([6-fluoro-4-[3-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema[3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil]boronske kiseline
n-BuLi (2,3 ml, 2,5 M u heksanu, 1,50 ekviv) dodat je kap po kap rastvoru 4-bromo-2-fluoro-1-(trifluorometoksi)benzena (1 g, 3,86 mmol, 1,00 ekviv) u tetrahidrofuranu (10 ml) na -78° C u atmosferi azota. Nakon 1h na -78° C tris(propan-2-il) borat (1,1 g, 5,85 mmol, 1,50 ekviv.) dodat je kap po kap na -78° C. Dobijeni rastvor je mešan 14 h na sobnoj temperaturi, a zatim ugašen 3N NaOH. Dobijeni rastvor je mešan 30 min na sobnoj temperaturi. pH vrednost rastvora je podešena na 73N zasićenim hlorovodonikom. Dobijena smeša je ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (1,6 g) u obliku žutog ulja.
Korak br.2: Priprema 4-hloro-6-[3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidina
Smeša [3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil]boronske kiseline (500 mg, 2,23 mmol, 1,00 ekviv.), 4,6-dihloropirimidina (660 mg, 4,43 mmol, 2.,00 ekviv.), Pd(dppf)Cl2. (82 mg, 0,11 mmol, 0,05 ekviv) i kalijum-karbonata (616 mg, 4,46 mmol, 2,00 ekviv) u vodi (1 ml)/1,4-dioksanu (10 ml) mešana je 14 h na 75° C u atmosferi azota. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (150mg, 23%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.3: Priprema 6-[3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-karbonitrila
Smeša 4-hloro-6-[3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin (150 mg, 0,51 mmol, 1,00 ekviv), Zn(CN)2(72 mg, 0,61 mmol, 1,20 ekviv), Pd2(dba)3.CHCl3(53 mg, 0,05 mmol, 0,10 ekviv) i dppf (57 mg, 0,10 mmol, 0,20 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (5 ml) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 1 h na 100° C u atmosferi azota. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (120mg, 83%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema ([6-[3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida.
Smeša 6-[3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-karbonitrila (120 mg, 0,42 mmol, 1,00 ekviv.), paladijum na ugljenu (40 mg, 0,38 mmol, 0,90 ekviv.) i hlorovodonika (6M, 0,1 mL) u metanolu (20 mL) mešana je 20 minuta na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane. Filtrat je koncentrovan u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (133mg, 97%) u obliku smeđe čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([6-[3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-il]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida
22
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (119 mg, 0,41 mmol, 1,00 ekviv.), [6-[3-fluoro-4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (133 mg, 0,41 mmol, 1,00 ekviv.), EDCI (158 mg, 0,82 mmol, 2,00 ekviv.), HOBT (61 mg, 0,45 mmol, 1,10 ekviv.) i DIEA (159 mg, 1,23 mmol, 3,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (10 mL) mešana je 14 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (6,6 mg, 3%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,23 (s, 1H), 8,16−8,12 (m, 1H), 8,06−8,02 (m, 2H), 7,96−7,91 (m, 2H), 7,65 (s, 1H), 7,44−7,38 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 7,28−7,23 (m, 1H), 5,17−4,90 (m, 2H), 4,61−4,54 (dd, J = 3,9 Hz, J = 3,6 Hz, 1H), 4,35−4,29 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 3,96−3,66 (m, 2H), 2,61−2,53 (m, 1H), 2,35−2,18 (m,1H).
Primer 105: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorobenzen)sulfonil)-N-[[2-(metilamino)-6-[4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema tert-butil N-[4-okso-4-[4-(trifluorometil)fenil]but-2-in-1-il]karbamata
Smeši tert-butil N-(prop-2-in-1-il)karbamata (5 g, 32,22 mmol, 1,0 ekviv.), Pd(PPh3)2Cl2(2,25 g, 3,21 mmol, 0,10 ekviv.), CuI (1,84 g, 9,66 mmol, 0,20 ekviv.), 4-(trifluorometil)benzoil-hlorida (6,5 g, 31,17 mmol, 1,00 ekviv.) i TEA (3,2 g, 31,62 mmol, 1,0 ekviv.) u THF (150 mL) mešana je 20 min na sobnoj temperaturi. Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:5). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (10g, 98%) u obliku smeđe čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema tert-butil N-[[2-(benzilsulfanil)-6-[4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil]karbamata
Smeša tert-butil N-[4-okso-4-[4-(trifluorometil)fenil]but-2-in-1-il]karbamata (10 g, 30,55 mmol, 1,0 ekviv.), benzil-karbamimidotioat-hidrohlorid (6,3 g, 31,08 mmol, 1,00 ekviv.) i kalijum-karbonata (6,35 g, 45,95 mmol, 1,50 ekviv.) u CH3CN (150 mL) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je rastvorena u etil-acetatu, isprana vodom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:5). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (7g, 48%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema[2-(benzilsulfanil)-6-[4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metаnamin hidrohlorida
Rastvor tert-butil N-[[2-(benzilsulfanil)-6-[4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil]karbamata (3 g, 6,31 mmol, 1,00 ekviv.) i zasićene HCl u 1,4-dioksanu (50 mL) mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Čvrste materije su prikupljene filtracijom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (2,5g, 96%) u obliku svetlosmeđe čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema ((2S,4R)-N-[[2-(benzilsulfanil)-6-[4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (276,5 mg, 0,95 mmol, 1.00 ekviv.), HATU (433 mg, 1,14 mmol, 1,20 ekviv.), DIEA (367,5 mg, 2,84 mmol, 3,0 ekviv.) i [[2-(benzilsulfanil)-6-[4(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (400 mg, 0,97 mmol, 1,00 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (10 ml) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je rastvorena pomoću 50 ml etil-acetata, ispranа slanim rastvorom, osušenа iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovanа u
22
vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleumetrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (360mg, 57%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 5: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-[[2-(fenilmetan)sulfonil-6-[4--(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Rastvor (2S,4R)-N-[[2-(benzilsulfanil)-6-[4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil]-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida (360 mg, 0,55 mmol, 1,00 ekviv.) i m-CPBA (385 mg, 2,23 mmol, 4,00 ekviv.) u dihlorometanu (30 mL) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 6 h. Dobijena smeša je rastvorena pomoću 50 ml DCM, ispranа vodenim rastvorom natrijum-bikarbonata, osušenа iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovanа u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (2:3). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (260mg, 69%) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br. 6: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorobenzen)sulfonil)--N-[[2-(metilamin)-6-[4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-[[2-(fenilmetan)sulfonil-6-[4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil]pirolidin-2-karboksamida (100 mg, 0,15 mmol, 1,00 ekviv.) i CH3NH2(100 mg, 3,22 mmol, 21,00 ekviv.) u CH3CN (15 mL) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 5 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (41,7mg, 51%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.25 - 8.19 (m, 2H), 7.93 - 7.89 (m, 3H), 7.73 - 7.71 (m, 2H), 7.25 - 7.21 (m, 2H), 7.12 (s, 1H), 5.13 - 5.00 (d, J = 52.0 Hz, 1H), 4.67 - 4.61 (m, 1H), 4.45 - 4.39 (m, 1H), 4.36 - 4.32 (m, 1H), 3.96 - 3.87 (m, 1H), 3.78 - 3.65 (m, 1H), 3.15 (s, 3H), 2.57 - 2.48 (m, 1H), 2.41 - 2.28 (m, 1H).
22
Primer 106: Priprema (2S,3R,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-3-metil-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 1-benzil 2-etil (2S,4R)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksilata
Cbz-Cl (70 g, 410,33 mmol, 2,00 ekviv.) u dihlorometanu (50 mL) dodat je kap po kap smeši etil (2S,4R)-4-hidroksipirolidin-2-karboksilat-hidrohlorida (40 g, 204,45 mmol, 1,00 ekviv.) i TEA (83 g, 820,24 mmol, 4,00 ekviv.) u dihlorometanu (400 mL) na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (2:1) dajući naslovno jedinjenje (60 g) u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 2: Priprema 1-benzil 2-etil (2S,4R)-4-[[(4-metilbenzen)sulfonil]oksi]pirolidin-1,2-dikarboksilata
4-metilbenzen-1-sulfonil-hlorid (24.0 g, 125.89 mmol, 1.00 ekviv.) u dihlorometanu (200 mL) dodat je kap po kap rastvoru 1-benzil 2-etil (2S,4R)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksilata (18,6 g, 63,41 mmol, 0,50 ekviv.), TEA (16,5 g, 163,06 mmol, 1,30 ekviv.) i 4-dimetilaminopiridina (1,0 g, 8,19 mmol) u dihlorometanu (1 l) na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je mešan 12 h na 30° C. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etilacetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/5) dajući naslovno jedinjenje (25 g, 44%) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br. 3: Priprema 1-benzil 2-etil (2S,4S)-4-(fenilselanil)pirolidin-1,2-dikarboksilata
22
Smeša (fenildiselanil)benzena (109 g, 349,21 mmol, 1,20 ekviv.) i NaBH4(13 g, 343,62 mmol, 1,20 ekviv.) u etanolu (600 mL) mešana je 30 minuta na sobnoj temperaturi. Tome je dodat 1-benzil 2-etil (2S,4R)-4-[[(4-metilbenzen)sulfonil]oksi]pirolidin-1,2-dikarboksilat (78 g, 174,30 mmol, 1,00 ekviv.). Dobijeni rastvor je refluksovan preko noći i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je razređen u etil-acetatu, ispran vodom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela etil-acetatom/petroleum-etrom (1/1) dajući naslovno jedinjenje (32 g, 42%) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br.4: Priprema 1-benzil 2-etil (2S)-2,5-dihidro-1H-pirol-1,2-dikarboksilata
Piridin (52 mg, 0,66 mmol, 1,40 ekviv.) i H2O2(30%, 131 mg, 3,85 mmol, 2,50 ekviv.) postepeno su dodavani u rastvor 1-benzil 2-etil (2S,4S)-4-(fenilselanil)pirolidin-1,2-dikarboksilata (200 mg, 0,46 mmol, 1,00 ekviv.) u DCM (20 ml) na 0° C. Dobijeni rastvor je mešan 2 h na sobnoj temperaturi, razređen pomoću DCM, ispran vodom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:5). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (100 mg, 79%) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br.5: Priprema 3-benzil 2-etil (2S)-6-oksa-3-azabiciko[3.1.0][3.1.0]heksan-2,3-dikarboksilata
m-CPBA (36 g, 208,62 mmol, 6,00 ekviv.) dodavan je deo po deo u mešani rastvor 1-benzil 2-etil (2S)-2,5-dihidro-1H-pirol-1,2-dikarboksilata (9,5 g, 34,51 mmol, 1,00 ekviv.) u hloroformu (300 mL). Dobijeni rastvor je zagrevan uz refluks preko noći. Dobijena smeša je isprana slanim rastvorom natrijum-bikarbonata, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:5) dajući naslovno jedinjenje (4 g, 40%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br.6: Priprema 1-benzil 2-etil 4-hidroksi-3-metilpirolidin-1,2-dikarboksilata
22
CH3Li (20 mL, 5,00 ekviv.) dodat je kap po kap smeši CuI (2,8 g, 14,70 mmol, 2,40 ekviv.) u eteru (60 mL) na -10° C u atmosferi azota. Nakon 20 minuta na -10° C, rastvor 3-benzi 2-etil 6-oksa-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-2,3-dikarboksilata (1,8 g, 6,18 mmol, 1,00 ekviv.) u eteru (13 mL) dodat je kap po kap na -10° C. Nakon 1h na -10° C reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, osušena iznad natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije /petroleum-etrom/dietil etrom (5:1) dajući naslovno jedinjenje (700 mg, 37%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 7: Priprema 1-benzil 2-etil (2S)-4-fluoro-3--metilpirolidin-1,2-dikarboksilata
DAST (8,4 g, 36,68 mmol, 6,00 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru 1-benzil 2-etil (2S)-4-hidroksi-3-metil pirolidin-1,2-dikarboksilata(2,7 g, 8,79 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlorometanu (100 ml) na 0° C u atmosferi azota. Dobijena smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi, rastvorena pomoću DCM, ispranа zasićenim rastvorom natrijumbikarbonata, osušenа iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovanа u vakuumu. Ostatak je nanesen na kolonu silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:5) dajući naslovno jedinjenje (710 mg, 26%) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br. 8: Priprema (2S)-1-[(benziloksi)karbonil]-4-fluoro-3-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline
Smeša 1-benzyl 2-ethyl (2S)-4-fluoro-3-metilpirolidin-1,2-dikarboksilat (710 mg, 2,30 mmol, 1,00 ekviv) i LiOH (276 mg, 11,52 mmol, 5,00 ekviv) u metanolu (30 ml)mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen pomoću vode, a pH vrednost rastvora je prilagođena na 4 pomoću razblažene HCl. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (480 mg, 74%) kao sirovo ulje.
Korak br.9: Priprema (2S)-4--fluoro-3-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline.
22
Smeša (2S)-1-[(benziloksi)karbonil]-4-fluoro-3-metilpirolidin-2-karboksilna kiselina (480 mg, 1,71 mmol, 1,00 ekviv.) i paladijuma na ugljenu (50 mg) u metanolu (30 ml) mešana je preko noći na 35°C u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane. Filtrat je koncentrovan u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (250 mg) u obliku svetlosmeđe čvrste materije.
Korak br. 10: Priprema metil (2S)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-3-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline.
Smeša (2S)-4-fluoro-3-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (250 mg, 1,70 mmol, 1,00 ekviv.), TEA (515 mg, 5.09 mmol, 3.00 ekviv.) i 4-fluorobenzen-1-sulfonl-hlorida (330 mg, 1,70 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlormetanu (20 ml) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razređen vodom. pH vrednost rastvora je podešena na 10-11 vodenim rastvorom natrijum-bikarbonata. Dobijeni rastvor je ispran etil-acetatom. pH vrednost vodenog sloja je podešena na ∼1 razblaženom HCl. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (330 mg) u obliku smeđe čvrste materije koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 11: Priprema (2R,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorobenzen)sulfonil]-3-metil-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša(2S)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-3-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (160 g, 524,08 mmol, 1.00 ekviv), HATU (239 g, 628,57 mmol, 1,20 ekviv), DIEA (135 g, 1,04 mol, 2,00 ekviv) i 6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (153 g, 526,37 mmol, 1,00 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (5 ml) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela
2
pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (4:1). Sirovi proizvod je razdvojen preparativnom hiralnom HPLC radi dobijanja naslovnog jedinjenja (7,3 mg) u obliku bele čvrste materije. tR= 5,14 min (Lux Cellulose-4, 0,46 cm x 5cm, 3µm, Hex:EtOH = 80:20, 1,0 ml/min).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,51 (s, 1H), 9,26 (s, 1H), 8,70 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,93−7,89 (m, 2H), 7,80−7,77 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,29−7,23 (m, 2H), 5,04−4,96 (m, 1H), 4,89−4,71 (d, J = 52,2 Hz, 1H), 4,53−4,46 (m, 1H), 3,89−3,64 (m, 3H), 2,51−2,34 (m, 1H), 1,19 (d, J = 6,6 Hz, 3H).
A (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-3-metil-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid (82 mg) takođe je izolovan u obliku bele čvrste materije. tR= 4,08 min (Lux Cellulose-4, 0,46 cm x 5cm, 3µm, Hex:EtOH = 80:20, 1,0 ml/min).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,51 (s, 1H), 9,26 (s, 1H), 8,70 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 8,17 (s, 1H), 7,93−7,89 (m, 2H), 7,80−7,77 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,29−7,23 (m, 2H), 5,04−4,96 (dd, J = 17,7 Hz, J = 7,2 Hz, 1H), 4,89−4,71(d, J = 52,2 Hz, 1H), 4,53−4,46 (dd, J = 18,0 Hz, J = 4,2 Hz, 1H), 3,89−3,64 (m, 3H), 2,51−2,34 (m, 1H), 1,19 (d, J = 6,6 Hz, 3H).
Stereohemija 3-prolina za dva gorenavedena jedinjenja proizvoljno je dodeljena. Stereohemija 2-prolina i 4-prolina za dva gorenavedena jedinjenja je prikazana.
Primer 107: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-4-metil-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema (2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline
Smeša 1-tert-butil 2-metil (2S,4R)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksilata (6,45 g, 26,30 mmol, 1,00 ekviv) i LiOH (3,16 g, 131,95 mmol, 5,00 ekviv.) uvodi (50 ml)/metanolu (50 ml)) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u vodi. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom. Vrednost pH vodenog sloja podešena je na pH 4 pomoću 1M hlorovodonika. Dobijena smeša
2 1
je ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (3,5 g, 58%)) u obliku bezbojnog sirupa koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 2: Priprema (2S,4R)-4-hidroksi-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidini-1-karboksilata
Smeša ((2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (3,5 g, 15,14 mmol, 1.00 ekviv), HATU (8,6 g, 22,62 mmol, 1,50 ekviv), DIEA (7,84 g, 60,66 mmol, 4,00 ekviv) i 6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (4,4 g, 15,14 mmol, 1,00 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (300 ml) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim prekinuta vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije dihlormetanom/metanolom (50:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (6,8 g, 96%) u obliku svetlosmeđe čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema tert-butil (2S)-4-okso-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata.
Smeša tert-butil (2S,4R)-4-hydroxy-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (1,23 g, 2,63 mmol, 1,00 ekviv.), Dess-Martin (1,34 g, 3,16 mmol, 1,20 ekviv.) u dihlorometanu (25 mL) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena vodom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan dihlorometanom, ispran zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata i slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (960 mg, 78%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema tert-butil (2S)-4-hidroksi-4-metil-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidini-1-karboksilata.
2 2
MeMgBr (1.4 mL, 2.00 ekviv.) dodat je kap po kap smeši tert-butil (2S)-4-okso-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-ilpirimidin-4il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (960 mg, 2,06 mmol, 1,00 ekviv) u tetrahidrofuranu (15 ml) na -5° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 5 h na 0° C, ugašen zasićenim rastvorom NH4Cl i ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije dihlormetanom/metanolom (50:1) dajući naslovno jedinjenje (250 mg, 25%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.5: Priprema tert-butil (2S)-4-fluoro-4-metil-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidini-1-karboksilata.
DAST (170,6 mg, 0,74 mmol, 3,00 ekviv) dodat je kap po kap smeši tert-butil )-4-hidroksi-4-metil-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]-3-pirolidin-1-karboksilata (170 mg, 0,35 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlorometanu (3 ml) na -10° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 1 h na -10° C, ugašen vodom i ekstrahovan dihlormetanom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata i slanog rastvora, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (160 mg, 94%) u obliku narandžaste čvrste materije.
Korak br. 6: Priprema (2S)-4-fluoro-4-metil)-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida
Smeša tert-butil (2S)-4-fluoro-4-(metil-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (200 mg, 0,41 mmol, 1,00 ekviv.) i zasićenog hlorovodonika u dioksanu (5 ml) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je koncentrovan u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (186 mg) u obliku narandžaste čvrste materije.
2
Korak br.7: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-4-metil-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida
Smeša (2S)-4-fluoro-4-metil-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida (186 mg, 0,49 mmol, 1,00 ekviv.), TEA (196 mg, 1,94 mmol, 4,00 ekviv), 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorid (113 mg, 0,58 mmol, 1,20 ekviv.) i 4-dimetilaminopiridina (6 mg, 0,05 mmol, 0,10 ekviv) u dihlormetanu (5 ml) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:3). Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (51,7 mg, 20%) u obliku bele čvrste materije. tR= 1,94 min (CHIRALPAK IC-3, 0,46 cm x5cm, 3µm, Hex:EtOH = 70:30, 1,0 ml/min).
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,45 (s, 1H), 9,31 (s, 1H), 9,15−9,11 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 8,81−8,78 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 8,24 (s, 1H), 8,07−8,01 (m, 3H), 7,50−7,44 (t, 2H), 4,54−4,52 (d, J = 6,1 Hz, 2H), 4,28−4,24 (m, 1H), 3,74−2,48 (m, 2H), 2,46−2,39 (m, 1H), 2,19−2,02 (m, 1H), 1,43−1,36 (d, J = 9,0 Hz, 3H).
Stereohemija 4-prolina za gorenavedeno jedinjenje proizvoljno je dodeljena. Stereohemija 2-prolina za gorenavedeno jedinjenje je prikazana.
Primer 108: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([5-metoksi-4-[6--(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 2-hloro-4-jodo-5-metoksipiridina
Natrijum-hidrid (1,2 g, 60% u mineralnom ulju, 2,30 ekviv.) dodavan je deo po deo u mešani rastvor 6-hloro-4-jodopiridin-3-ol hidrohlorida (3,80 g, 13,02 mmol, 1,00 ekviv.) u
2 4
N,N-dimetilformamidu (30 mL) na 0° C u atmosferi azota. Nakon 30 minuta na 0° C u rastvor je dodat CH3I (2,22 g, 15,64 mmol, 1,20 ekviv.). Dobijeni rastvor je mešan 12 h na sobnoj temperaturi, ugašen vodom, ekstrahovan etil-acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silikagelu eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum etera (10:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (2,9 g, 83%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 2-hloro-5-metoksi-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridina
Smeša 2-hloro-4-jodo-5-metoksipiridina (1 g, 3,71 mmol, 1,00 ekviv.) u dioksanu (30 mL), [6-(trifluorometil)piridin-3-il]boronska kiselina (710 mg, 3,72 mmol, 1,00 ekviv.), Pd(dppf)Cl2(271 mg, 0,37 mmol, 0,10 ekviv.), kalijum-karbonata (1,532 g, 11,08 mmol, 3,00 ekviv) i vode (3 ml) mešana je 5 sati na 50° C u atmosferi azota. Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silikagelu eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum etera (100:3). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (510 mg, 48%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.3: Priprema 5-metoksi-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-karbonitrila
Smeša 2-hloro-5-metoksi-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridina (400 mg, 1,39 mmol, 1,00 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (10 mL), Zn(CN)2(162 mg, 1,38 mmol, 1,00 ekviv.), DPPF (77 mg, 0,14 mmol, 0,10 ekviv.) i Pd2(dba)3.CHCl3 (72 mg, 0,07 mmol, 0,05 ekviv.) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 1 h na 110° C u atmosferi azota. Reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum etera (15:100). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (440 mg,) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema [5-metoksi-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metanamin hidrohlorida
2
Smeša5-metoksi-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-karbonitrila (150 mg, 0,54 mmol, 1,00 ekviv), metanol (30 ml), paladijuma na ugljenu (30 mg), hlorovodonika u metanolu (0,6 mL, koncetrovana) mešana je 1h na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (325 mg) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N[5-metoksi-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (291 mg, 1,00 mmol, 1,00 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (30 mL), [5-metoksi-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metanamin-hidrohloridu (320 mg, 1,00 mmol, 1,00 ekviv.), DIEA (1,29 g, 9,98 mmol, 10,00 ekviv.) i HATU (570 mg, 1,50 mmol, 1,50 ekviv.) mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum etera (1/10). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (55,7 mg, 10%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,95−8,90 (m, 2H), 8,48 (s, 1H), 8,28−8,25 (m, 1H), 7,99−7,93 (m, 3H), 7,52 (s, 1H), 7,46−7,41 (m, 2H), 5,27−5,01 (d, J = 52,8 Hz, 1H), 4,46−4,42 (m, 2H),4,23−4,17 (m, 1H), 3,93 (s, 3H), 3,70 (s, 1H), 3,62−3,57 (m, 1H), 2,39−2,00 (m, 2H).
Primer 109: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil)-N-[[5-metoksi-4-[6-(trifluorometil)-3-piridil]-2-piridil]metil]-2-metil-pirolidin-2-karboksamida.
2
Korak br.1: Priprema (2R,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil)-N-[[5-metoksi-4-[6-(trifluorometil)3-piridil]-2-piridil]metil]-2-metil-pirolidin-2-karboksamida.
Smeša [5-metoksi-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metanamin (150 mg, 0,530 mmol, 1,000 ekviv.), DMF (5 mL), DIEA (190 mg, 1,470 mmol, 2,776 ekviv.), HATU (280 mg, 0,736 mmol, 1,391 ekviv.) i (4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-metilpirolidin-2-karboksilna kiselina (157 mg, 0,514 mmol, 0,971 ekviv.) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1). Sirovi proizvod (200 mg) je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom pomoću elucije Hex i etanolom (sadrži 20,0% etanola u 20 min) radi dobijanja naslovnog jedinjenja (89,5 mg, 30%) u obliku bele čvrste materije. tR= 2,68 min (CHIRALPAK IC, 4,6 mm x 100mm, 5µm, MeOH (0,1%) = 10% do 50% u 4,0 min, sadrži 2,0 min pri 50%, 4 ml/min).
<1>H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8,96 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,33 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 8,00−7,96 (m, 2H), 7,88 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,37−7,31 (m, 2H), 5,20 (d, J = 52,8 Hz, 1H), 4,86−4,49 (m, 2H), 4,07−3,95 (m, 4H), 3,73−3,57 (m, 1H), 2,67−2,60 (m, 1H), 2,27−2,08 (m, 2H), 1,58 (s, 3H).
(2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[5-metoksi-4-[6-(trifluorometil)-3-piridil]-2-piridil]metil]-2-metil-pirolidin-2-karboksamid (37,1 mg, 12%) takođe je izolovan u obliku bele čvrste materije. tR= 2.,46 min (CHIRALPAK IC, 4,6 mm x 100mm, 5µm, MeOH (0,1%) = 10% do 50% u 4,0 min, sadrži 2,0 min pri 50%, 4 ml/min).
<1>H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8,97 (s, 1H), 8,40 (s, 1H), 8,32−8,28 (m, 1H), 7,94−7,90 (m, 2H), 7,82 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,73 (s, 1H), 7,30−7,24 (m, 2H), 5,20 (d, J = 52,8 Hz, 1H), 4,64−4,51 (m, 2H), 3,99 (s, 3H), 3,86−3,75 (m, 1H), 2,60−2,27 (m, 1H), 1,75 (s, 3H).
Primer 110: Priprema (2S,4R)-4-cijano-1-(4-fluorobenzen)sulfonil)-N-([3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
2
Korak br. 1: Priprema (2S,4S)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline
Smeša 1-tert-butil 2-metil (2S,4S)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksilata (5 g, 20,39 mmol, 1,00 ekviv.), metanola (100 mL), vode (20 mL) i natrijum-hidroksida (2,85 g, 71,26 mmol, 3,50 ekviv.) mešana je 12 h na 20° C. Dobijeni rastvor je koncentrovan i rastvoren u vodi. pH vrednost rastvora je podešena na 3–4 pomoću petoprocentne HCl, rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (2,4 g, 51%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema (2S,4S)-4-hidroksi-2-[([3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata
Smeša (2S,4S)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-hidroksipirolidin-2-karboksilna kiselina (500 mg, 2,16 mmol, 1,00 ekviv.), dihlorometana (20 mL), EDCI (412,5 mg, 2,15 mmol, 1,00 ekviv.), HOBT (292,5 mg, 2,16 mmol, 1,00 ekviv.) i 3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-ilmetanamina (600 mg, 2,21 mmol, 1,00 ekviv.) mešana je 1 h na 20° C. Dobijeni rastvor je razređen vodom, ekstrahovan dihlormetanom, osušen iznad natrijumsulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silikagelu eluiranjem dihlormetanom/metanolom (20/1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (630 mg, 60%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.3: Priprema 2S,4S)-4-hidroksi-N-([3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida
2
Rastvor tert-butil (2S,4S)-4-hidroksi-2-[([3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (1,6 g, 3,30 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlorometanu (20 mL)/ trifluorosirćetnoj kiselini (4 mL) mešan je 12 h na 20° C. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je rastvoren u vodi. pH vrednost rastvora je podešena na 8-9 pomoću natrijum-bikarbonata. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (1,2 g, 95%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema (2S,5S)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-4-hidroksi-N-([3-metoksi-1-[-4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida
Rastvor (2S,4S)-4-hidroksi-N-([3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida (1,2 g, 3,12 mmol, 1,00 ekviv.), dihlorometana (60 mL), TEA (630 mg, 6,23 mmol, 2,00 ekviv.) i 4-fluorobenzen-1-sulfonl-hlorida (606 mg, 3,11 mmol, 1,00 ekviv.) mešan je 12 h na 20° C. Dobijeni rastvor je razređen vodom, ekstrahovan etil-acetatom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum etera (1:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (1,1g, 65%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema (3S,5S)-1-[(4-fluorobenzene)sulfonil]-5-[([3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-3-il 4-metilbenzen-1-sulfonata
Smeša (2S,4S)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-4-hidroksi-N-([3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida (1,1 g, 2,03 mmol, 1,00 ekviv.), TEA (615 mg, 6,08 mmol, 3,00 ekviv.), Tesco (578 mg, 3,03 mmol, 1,50 ekviv.) i 4-dimetlaminopiridina (25 mg, 0,20 mmol, 0,10 ekviv.) u dihlorometanu (20 mL) mešana je 24 h na 20° C. Dobijeni rastvor je razblažen vodom i ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak
2
je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum etra (1:10) dajući naslovno jedinjenje (1 g, 71%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 6: Priprema (2S,4R)-4-cijano-1-[(4-fluorobenzen)sulfonl]-N-([3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida
Smeša (3S,5S)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-5-[([3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-3-il 4-metilbenzen-1-sulfonata (1,1 g, 1,58 mmol, 1,00 ekviv.), DMSO (6 mL) i NaCN (93 mg, 1,90 mmol, 1,20 ekviv.) mešana je 48 h na 50° C. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum etera (1/1). Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (43,1 mg, 5%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,90−7,85 (m, 3H), 7,71−7,64 (m, 4H), 7,31−7,26 (s, 2H), 4,35−4,23 (m, 3H), 4,05 (s, 3H), 3,87−3,83 (m, 1H), 3,40−3,35 (m, 1H), 3,18−3,14 (m, 1H), 2,69−2,65 (m, 1H), 1,93−1,87 (m, 1H).
Primer 111: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-1-(3-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(4-(trifluorometoksi)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 4-hloro-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidina
Smeša [4-(trifluorometoksi)fenil]boronske kiseline (5 g, 24,28 mmol, 1,00 ekviv.) u 1,4-dioksanu (50 mL), vode (10 mL), 4,6-dihloropirimidina (3,59 g, 24,10 mmol, 1,00 ekviv.), kalijum-karbonata (6,67 g, 48,26 mmol, 1,00 ekviv.) i Pd(dppf)Cl2(1,2 g, 1,64 mmol, 1,00 ekviv.) mešana je 3 h na 80° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Sirovi
24
proizvod je zatim prečišćen rekristalizacijom iz etil-acetata/petroleum-etra radi dobijanja naslovnog jedinjenja (3,6 g, 54%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-karbonitrila
Smeša 4-hloro-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidina (500 mg, 1,82 mmol, 1,00 ekviv), Zn(CN)2(256 mg, 2,18 mmol, 1,20 ekviv), dppf (150 mg, 0,27 mmol, 0,30 ekviv) i Pd2(dba)3(100 mg, 0,11 mmol, 0,20 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (5 ml) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 3 h na 100° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum etera (1/10). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (200 mg, 41%) u obliku žutog ulja.
Korak br. 3: Priprema [6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida
Smeša 6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-karbonitrila (200 mg, 0,75 mmol, 1,00 ekviv.), paladijuma na ugljenu (100 mg, 0,94 mmol, 1,00 ekviv.), etanola (10 mL) i koncentrovanog hlorovodonika (0,2 mL) mešana je 10 minuta na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (65 mg, 32%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-1-[(4-fluorofenil)sulfonil]-N-([6-[4-(trifluorometoksi))fenil]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida
Smeša [6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (65 mg, 0,24 mmol, 1,00 ekviv.), (2R,3S)-3-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (70 mg, 0,24 mmol, 1,00 ekviv.), DIPEA (93 mg, 0,72 mmol, 3,00 ekviv.) i HATU (182 mg, 0,48 mmol, 2,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (10 mL) mešana je 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom na silikagelu eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum-etra (1:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (23 mg, 18%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,21 - 9,17 (m, 2H), 8,35 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 8,05 -8,01 (m, 3H), 7,54 - 7,49 (m, 4H), 5,33 - 5,15 (d, J = 52,2 Hz, 1H), 4,57 - 4,40 (m, 3H), 3,71 -3,66 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 3,33 - 3,15 (m, 1H), 2,27 - 2,01 (m, 2H).
Primer 112: Priprema (2S,4R)-N-([3-cijano-5-[6-(trifluorometil)piridil]fenil]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorofenil)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema (3-bromo-5-jodofenil)metanola
BH3.THF (51 mL, 1 mol/L u THF) dodat je kap po kap rastvoru 3-bromo-5-jodobenzojeva kiselina (10 g, 30,59 mmol, 1,00 ekviv.) u THF (50 mL) na 0° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 12 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena vodom na at 0°C. Dobijeni rastvor je ekstrahovana etil-acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (8,5 g, 89%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 1-bromo-3-(hlorometil)-5-jodobenzena
Smeša (3-bromo-5-jodofenil)metanola (3,00 g, 9,59 mmol, 1,00 ekviv.), dihlorometana (20 mL) i sulfurildihlorida (2,20 g, 19,21 mmol, 2,00 ekviv.) mešana je 1 h na 0° C. Dobijeni rastvor je razređen vodom i ekstrahovan dihlormetanom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:10). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (2 g, 63%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema 2-[(3-bromo-5-jodofenil)metil]-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona
Smeša 1-bromo-3-(hlorometil)-5-jodobenzen (2.00 g, 6,04 mmol, 1,00 ekviv.) i 2-kalium-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (1,68 g, 9,07 mmol, 1,50 ekviv.) u DMF (15 ml) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena vodom. Čvrsta materija je prikupljena filtracijom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (2,5 g, 94%) kao bele čvrste materije.
Korak br.4: Priprema (3-bromo-5-jodofenil)metanamina
Smeša 2-[(3-bromo-5-jodofenil)metil]-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (3,00 g, 6,79 mmol, 1,00 ekviv.), metanola (50 mL) i NH2NH2.H2O (3,40 g, 67,92 mmol, 10,00 ekviv.) mešana je 12 h na 50° C. Čvrsta supstanca je filtrirana i tečnost je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije dihlormetanom/metanolom (20:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (2 g, 94%) u obliku žutog ulja.
Korak br. 5: Priprema (2S,4R)-N-([3-bromo-5-jodofenil)metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonl]pirolidin-2-karboksilna kiselina (780,00 mg, 2,68 mmol, 1,00 ekviv.), DMF (10,01 ml), HATU (1527,34 mg, 4,02 mmol, 1,50 ekviv.), DIEA (1038,31 mg, 8,03 mmol, 3,00 ekviv.) i (3-bromo-5-jodofenil)metanamin (1002,44 mg, 3,21 mmol, 1,20 ekviv.) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razblažen vodom i ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu.
24
Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (1,2 g, 77%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 6: Priprema (2S,4R)-N-([3-bromo-5-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]fenil]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida
Smeša [6-(trifluorometil)piridin-3-il]boronska kiselina (130,50 mg, 0,68 mmol, 1,00 ekviv.), (2S,4R)-N-[(3-bromo-5-jodofenil)metil]-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida (400,01 mg, 0,68 mmol, 1,00 ekviv.), Pd(dppf)Cl2(50,02 mg, 0,07 mmol, 0,10 ekviv.), kalijum-karbonata (380 mg, 2,75 mmol, 4,00 ekviv.) i 1,4-dioksana (15 mL) / vode (3 mL) mešana je 12 h na 50° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je razblažen vodom i ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (260 mg, 63%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br.7: Priprema (2S,4R)-N-([3-cijano-5-[6-(trifluorometil)-3-piridil]fenil]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorofenil)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida
Smeša (2S,4R)-N-([3-bromo-5-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]fenil]metil)-4-fluoro-1-[(4fluorobenzen)su-lfonil]-pirolidin-2-karboksamida (220 mg, 0,36 mmol, 1,00 ekviv.), DMF (3 mL), dppf (55 mg, 0,10 mmol, 0,30 ekviv.), Zn(CN)2(43 mg, 0,37 mmol, 1,00 ekviv.) i Pd2(dba)3(33 mg, 0,04 mmol, 0,10 ekviv.) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 2 h na 100° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je razblažen vodom i ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1). Sirovi proizvod (200 mg) je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (92 mg, 46%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8,97 (s, 1H), 8,14−8,11 (m, 1H), 7,90−7,71 (m, 7H), 7,43 (s, 1H), 7,26−7,21 (m, 2H), 5,05 (d, J = 52,5 Hz, 1H), 4,87−4,80 (m, 1H), 4,48−4,42 (m, 1H), 4,30−4,24 (m, 1H), 3,96−3,84 (m, 1H), 3,72−3,49 (m, 1H), 2,61−2,41 (m, 1H), 2,35−2,00 (m, 1H).
Primer 113: Priprema fluoro-(2S,4R)-4-fluoro-N-(((6-fluoro-4-(2-trifluorometil)piperidin-1-il)piridin-2-il)metil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 4-hloro-6-[2-fluoro-4-(trifluorometil)fenil]pirimidina
Smeša [2-fluoro-4-(trifluorometiyl)fenil]boronska kiselina (1 g, 4,81 mmol, 1,00 ekviv.), 4,6-dihloropirimidina (2 g, 13,42 mmol, 3,00 ekviv.), kalijum-karbonata (1,66 g, 12,01 mmol, 2,50 ekviv.) i Pd(dppf)Cl2(180 mg, 0,25 mmol, 0,05 ekviv.) u 1,4-dioksanu (15 mL) / vodi (1 mL) mešana je tokom noći na 100° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je ohlađena na sobnoj temperaturi, ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (0,7 g, 53%) u obliku smeđe čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 6-[2-fluoro-4-(trifluorometil)fenil]pirimidina-4-karbonitrila
Smeša 4-hloro-6-[fluoro-4-(trifluorometil)fenil]pirimidina (2,2 g, 7,95 mmol, 1,00 ekviv), Zn(CN)2(564 mg, 4,80 mmol, 0,60 ekviv), Pd2(dba)3.CHCl3(414 mg, 0,40 mmol, 0,05 ekviv), dppf (446 mg, 0,80 mmol, 0,10 ekviv) i Zn (50 mg, 0,76 mmol, 0,10 ekviv.) u DMA (15 mL) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 1 h na 125° C u atmosferi azota. Dobijena smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, ugašena vodom, ekstrahovana etilacetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etil-
24
acetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (730 mg, 34%) u obliku smeđe čvrste materije.
Korak br.3: Priprema [6-[2--fluoro-4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metanamina.
Smeša 6-[2-fluoro-4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-karbonitrila (300 mg, 1,12 mmol, 1,00 ekviv.) u etil-acetatu (5 mL), metanola (5 mL, 123,49 mmol, 110,00 ekviv.) i Pd(OH)2/C (200 mg, 1,42 mmol, 1,30 ekviv.) mešana je 15 h na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (280 mg) u obliku smeđeg ulja.
Korak br. 4: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-((6-fluoro-4-trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Rastvor [6-[2-fluoro-4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metanamina (280 mg, 1,03 mmol, 1,00 ekviv.), (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (300 mg, 1,03 mmol, 1,00 ekviv.), EDCI (297 mg, 1,55 mmol, 1,50 ekviv.), HOBT (153 mg, 1,13 mmol, 1,10 ekviv.) i DIEA (267 mg, 2,07 mmol, 2,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (10 mL) mešana je 10 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (28,4 mg, 5%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,41 (s, 1H), 8,35−8,29 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,94−7,88 (m, 3H), 7,79 (s, 1H), 7,62−7,59 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,49−7,46 (d, J = 11,4 Hz, 1H), 7,31−7,20 (m, 2H), 5,16−4,99 (d, J = 52,2 Hz, 1H), 4,77−4,66 (s, 2H), 4,33−4,27 (t, J = 8,5 Hz, 1H), 3,97−3,49 (m, 2H), 2,60−2,46 (m, 1H), 2,42−2,04 (m, 1H).
Primer 114: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([6-fluoro-4-[3-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]piridin-2-il]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
24
Korak br.1: Priprema 6-[3-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-karbonitrila
Smeša 4-hloro-6-[3-fluoro-4-(trifluorometil)fenil]pirimidin (200 mg, 0,72 mmol, 1,00 ekviv.), dppf (80 mg, 0,14 mmol, 0,20 ekviv.), Zn(CN)2(124 mg, 1,06 mmol, 1,50 ekviv.) i Pd2(dba)3.CHCl3(72 mg, 0,07 mmol, 0,10 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (4 mL) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 2 h na 100° C u atmosferi azota. Reakcija je zatim ugašena vodom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, ispran slanim rastvorom i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (160 mg, 80%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.2: Priprema [6-[3-fluoro-4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metanamina.
U 100-mililitarsku laboratorijsku bocu s okruglim dnom stavljen je 6-[3-fluoro-4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-karbonitril (160 mg, 0,60 mmol, 1,00 ekviv.), paladijum na ugljenu (160 mg, 1,50 mmol, 2,50 ekviv.), metanol (5 mL) i etil-acetat (5 mL). Dobijeni rastvor je održavan pomoću atmosfere H2tokom 10 minuta na sobnoj temperaturi. Zatim je čvrsta supstanca filtrirana i tečnost je koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (120 mg, 74%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([6-fluoro-4-[3-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida
Rastvor [6-[3-fluoro-4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metanamina (120 mg, 0,44 mmol, 1,00 ekviv.), (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (128 mg, 0,44 mmol, 1,00 ekviv.), EDCI (170 mg, 0,89 mmol, 2,00 ekviv.), HOBT (65,7 mg, 0,49 mmol, 1,10 ekviv.) i DIEA (114 mg, 0,88 mmol, 2,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (4 mL) mešana je 13 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena
24
vodom/ledom, ekstrahovana etil-acetatom i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (34,7 mg, 14%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,21 (s, 1H), 8,19−8,08 (m, 3H), 7,95−7,86 (m, 2H), 7,74−7,64 (m, 2H), 7,28−7,23 (m, 2H), 5,17−4,91 (m, 2H), 4,54−4,53 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 4,36−4,30 (t, J = 8,5 Hz, 1H), 3,95−3,65 (m, 2H), 2,66−2,56 (m, 1H), 2,34−2,13 (m, 1H).
Primer 115: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-1-[(4-fluorofenil)sulfonil]-N-([5-fluoro-4-[6-(trifluorometil)-3-piridil]-2-piridil]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 1-tert-butil 2-metil (3S)-3-fluoropirolidin-1,2-dikarboksilata
Smeši 1-tert-butil 2-metil (3R)-3-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksilata (760 mg, 3,10 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlorometanu (20 mL, 314,60 mmol, 1,00 ekviv.) dodat je DAST (1,1 g, 4,80 mmol, 3,00 ekviv.) kap po kap uz mešanje na -78° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana dihlormetanom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (420 mg, 55%) u obliku smeđeg ulja.
Korak br.2: Priprema metil (3S)-3-fluoropirolidin-2-karboksilat hidrohlorida
Smeša tert-butil 2-metil (3S)-3-fluoropirolidin-1,2-dikarboksilat (420 mg, 1,70 mmol, 1,00 ekviv) i HCl (zasićeni rastvor u 10 ml 1,4-dioksana) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (320 mg, sirovo) u obliku smeđeg ulja.
Korak br. 3: Priprema metil (3R)-3-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilata.
24
Smeša metil (3S)-3-fluoropirolidin-2-karboksilat hidrohlorida (320 mg, 2,17 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlormetanu (20 ml), TEA (661 mg, 6,53 mmol, 3,00 ekviv) i 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorida (844 mg, 4,34 mmol, 2,00 ekviv.) mešana je 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (520 mg, 78%) u obliku smeđe čvrste materije.
Korak br. 4: (3S)-3-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilna kiselina
Smeša metil (3S)-3-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilata (200 mg, 0,66 mmol, 1,00 ekviv.) u 1,4-dioksanu (2 mL) i sumporne kiseline (50%) (10 mL, 187,61 mmol, 1,00 ekviv.) mešana je 1 h na 100° C.Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijumsulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (228 mg, sirovo) u obliku žutog ulja.
Korak br. 5: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-1-[(4-fluorofenil)sulfonil]-N-([5-fluoro-4-[6-(trifluorometil)-3-piridil]-2-piridil]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša [5-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metanamina (100 mg, 0,37 mmol, 1,00 ekviv.) u DMF (10 mL), (3S)-3-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (92 mg, 0,32 mmol, 1,00 ekviv.), DIPEA (133 mg, 1,03 mmol, 3,00
24
ekviv.) i HATU (258 mg, 0,68 mmol, 2,00 ekviv.) mešana je 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silikagelu eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum etra (1/1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (45,2 mg, 23%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,11−9,09 (m, 1H), 8,73 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 8,40 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,99−7,95 (m, 2H), 7,71 (d, J = 6 Hz, 1H), 7,51 (t, J = 8,7 Hz, 2H), 5,27−5,10 (d, J = 51,6 Hz, 1H), 4,59−4,35 (m, 3H), 3,68−3,62 (m, 1H), 3,21−3,12 (m, 1H), 2,27−2,08 (m,2H).
Primer 116: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil)-N-[[3-metoksi-5-[6-(trifluorometil)-3-piridil]fenil]metil]-4-metil-pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 1-bromo-3-(bromometil)-5-metoksibenzena
Smeša NBS (5,31 g, 29,83 mmol, 1,20 ekviv.), AIBN (2,04 g, 12,42 mmol, 0,50 ekviv.), CCl4(100 mL) i 1-bromo-3-metoksi-5-metillbenzena (5,00 g, 24,87 mmol, 1,00 ekviv.) mešana je 12 h na 80° C u atmosferi azota. Reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana dihlormetanom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:100) dajući naslovno jedinjenje (6 g, 86%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema 2-[(3-bromo-5-metoksifenil)metil]-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona
Smeša 2-kalijum-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (5,95 g, 32,12 mmol, 1,00 ekviv.), DMF (30 ml) i 1-bromo-3-(bromometil)-5-metoksibenzena (6 g, 21,43 mmol, 1,00
2
ekviv.) mešana je 12 h na 50° C. Dobijeni rastvor je razređen vodom, ekstrahovan etilacetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:20) dajući naslovno jedinjenje (5 g, 45%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.3: Priprema (3-bromo-5-metoksifenil)metanamina
Smeša 2-[(3-bromo-5-metoksifenil)metil]-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (4,90 g, 14,15 mmol, 1,00 ekviv.), metanola (50 mL) i NH2NH2.H2O (7,09 g, 141,63 mmol, 10,00 ekviv.) mešana je 3 h na 50° C. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil-acetatu. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (3 g, 98%) u obliku žutog ulja.
Korak br. 4: Priprema (2S,4R)-N-([3-bromo-5-metoksifenil)metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilna kiselina (1,00 g, 3,43 mmol, 1,00 ekviv.), HATU (1,96 g, 5,15 mmol, 1,50 ekviv.), DIEA (1,33 g, 10.29 mmol, 3,00 ekviv.) i (3-bromo-5-metoksifenil)metanamin (890 mg, 4,12 mmol, 1,20 ekviv.) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen vodom, ekstrahovan etil-acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijumsulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (1 g, 60%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-[[3-metoksi-5-[6-(trifluorometil)-3-piridil]fenil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
2 1
Smeša (2S,4R)-N-[(3-bromo-5-metoksifenil)metil]-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamid (500 mg, 1,02 mmol, 1,00 ekviv), [6-(trifluorometil)pridin-3-il]boronska kiselina (400 mg, 2,10 mmol, 2.10 ekviv.), Pd(dppf)Cl2(80 mg, 1.,04 mmol, 0,10 ekviv.), kalijum-karbonata (a560 mg, 4.05 mmol, 4.00 ekviv.) i 1,4-dioksan (20 ml) / voda (4 ml) mešana je 12 h na 100° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je razređen vodom, ekstrahovan etil-acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (2:1). Sirovi proizvod (230 mg) je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (152 mg, 27%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8,94 (s, 1H), 8,08 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,89−7,85 (m, 2H), 7,73 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,29−7,18 (m, 4H), 7,02 (d, J = 9,3 Hz, 2H), 5,04 (d, J = 51,3 Hz, 1H), 4,76−4,71 (m, 1H), 4,46−4,40 (m, 1H), 4,31−4,28 (m, 1H), 3,94−3,82 (m, 4H), 3,70−3,52 (m, 1H), 2,55−2,47 (m, 1H), 2,34−2,19 (m,1H).
Primer 117: Priprema (2S,4R)-N-([3,5-difluoro-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 3,5-difluoro-4-jodopiridina-2-karbonitrila
nLDA (841,14 mg, 7,85 mmol, 1.10 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru 3,5-difluoropiridin-2-karbonitrila (1,00 g, 7,14 mmol, 1,00 ekviv) u tetrahidrofuranu (15 ml) na -78° C u atmosferi azota. Nakon mešanja od 30 minuta na -78° C, rastvor I2(1,81 g, 7,13 mmol, 1,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (8 mL) dodat je kap po kap. Dobijena reakcija je mešana na -78° C tokom 40 minuta, ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:5) dajući naslovno jedinjenje (920 mg, 48%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema 3,5-difluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-karbonitrila
2 2
Smeša 3,5-difluoro-4-jodopiridin-2-karbonitrila (650,00 mg, 2,44 mmol, 1,00 ekviv.), [6-(trifluorometil)piridin-3-il]boronska kiselina (1399,64 mg, 7,33 mmol, 3.00 ekviv.), Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(99,78 mg, 0,12 mmol), natrijum-karbonata (518,01 mg, 4,89 mmol, 2,00 ekviv.) u vodi (4,5 ml) i toluenu (40 ml) mešana je tokom noći na 70° C u atmosferi azota. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana dihlormetanom i isprana slanim rastvorom. Organski slojevi su osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etil-acetatom/petroleumetrom (1:4) dajući naslovno jedinjenje (220 mg, 32%) u obliku bele čvrste materije Korak br. 3: Priprema (3,5-difluoro-4-(6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il)metanamina
U 25-mililitarsku laboratorijsku bocu s okruglim dnom stavljen je 3,5-difluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-karbonitril (20 mg, 0,07 mmol, 1,00 ekviv.), metanol (15 mL), paladijum na ugljenu (20 mg, 0,19 mmol, 2,70 ekviv.) i koncentrovani hlorovodonik (0,05 mL). U gorenavedenu smešu uveden je vodonik. Dobijeni rastvor je mešan 15 minuta na 25°C. Čvrste supstance su filtrirane i dobijena tečnost je koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (20 mg) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema (2S,4R)-N-([3,5-difluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Rastvor [3,5-difluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metanamina (50 mg, 0,17 mmol, 1,00 ekviv.), (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (50,3 mg, 0,17 mmol, 1,00 ekviv.), EDCI (66,4 mg, 0,35 mmol, 2,00 ekviv.), HOBT (25,7 mg, 0,19 mmol, 1,10 ekviv.) i DIEA (44,6 mg, 0,35 mmol, 2,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (5 mL) mešana je 10 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim ugašena vodom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom i koncentrovan u vakuumu.
2
Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/5) dajući naslovno jedinjenje (10 mg, 10%) u obliku beličaste čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8,91 (s, 1H), 8,52 (s, 1H), 8,10−8,07 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,92−7,81 (m, 4H), 7,23−7,20 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 5,16−4,99 (d, J = 52,2 Hz, 1H), 4,75 (s, 2H), 4,33−4,27 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 3,99−3,86 (m, 1H), 2,53−2,26 (m, 2H).
Primer 118: Priprema (2R,3R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-metoksi-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema (2R,3R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-metoksi-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-N-([6-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida (55 mg, 0,10 mmol, 1,00 ekviv.), metanola (5 mL, 123,49 mmol, 1222,50 ekviv.) i MeONa (6 mg, 0,11 mmol, 1,10 ekviv.) mešana je preko noći na 60° C. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu, rastvorena u vodi i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Sirovi proizvod (48,6 mg) je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (12,5 mg, 22%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9,11 (s, 1H), 8,45−8,43 (m, 1H), 8,03−7,99 (m, 2H), 7,90−7,88 (m, 1H), 7,56 (s, 1H), 7,37−7,32 (m, 2H), 7,09 (s, 1H), 5,22−5,09 (d, J = 52 Hz, 1H), 4,63−4,53 (m, 2H), 4,35−4,30 (m, 1H), 4,02 (s, 3H), 3,90−3,70 (m, 2H), 2,54−2,16 (m, 2H).
Primer 119: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([2-fluoro-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-il]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
2 4
Korak br.1: Priprema 2-hloro-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-karbonitrila
Smeša 2,6-dihloropiridina-4-karbonitrila (5,00 g, 28,90 mmol, 1,00 ekviv), [6-(trifluorometil)piridin-3-il]boronske kiseline (1,82 g, 9,53 mmol, 0.,30 ekviv), Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(1,18 g, 1,44 mmol, 0,05 ekviv), natrijum-karbonata (6,13 g, 57,84 mmol, 2,00 ekviv.) i voda (12 ml)/ 1,4-dioksanu (100 ml) / mešana je 1 h na 70° C u atmosferi azota. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum etra (1:10) dajući naslovno jedinjenje (2,6 g, 32%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 2-fluoro-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-karbonitrila
Smeša 2-hloro-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-karbonitrila (1,5 g, 5,29 mmol, 1,00 ekviv.), KF (928 mg, 15,97 mmol, 4,00 ekviv.) i 30 mL DMSO mešana je 5 h na 110° C u atmosferi azota. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum etra (1:10) dajući naslovno jedinjenje (1,1 g, 78%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.3: Priprema [2-fluoro-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin4-il]metanamin hidrohlorida
Smeša 2-fluoro-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridine-4-karbonitrila (3 g, 11,23 mmol, 1,00 ekviv.), paladijuma na ugljenu (500 mg) i hlorovodonika (2 mL) u 60mL tetrahidrofurana mešana je 12 h na 40° C. Čvrsta supstanca je filtrirana i tečnost je
2
koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (3 g, 87%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema tert-butil (2S,4R)-4-fluoro-2-[([2-fluoro-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata.
Smeša (2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilna kiselina (3 g, 12,86 mmol, 1,00 ekviv.), HOBT (1,74 g, 12,88 mmol, 1,10 ekviv.), EDCI (4,47 g, 23,32 mmol, 2,00 ekviv.), DIEA (3,02 g, 23.37 mmol, 2,00 ekviv.) i [2-fluoro-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-il]metanamin hidrohlorida (3,6 g, 11,70 mmol, 1,00 ekviv.) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je razređena u etil-acetatu, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću etilacetata / petroleum etera (1:2). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (4g, 64%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([2-fluoro-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida.
Smeša tert-butil (2S,4R)-4-fluoro-2-[([2-fluoro-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (4 g, 8,22 mmol, 1,00 ekviv.) u 100 mL HCl (zasićeni rastvor u 1,4-dioksanu) mešana je 2 h na 40° C. Čvrsta materija je prikupljena filtracijom i isprana heksanom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (4 g) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 6: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([2-fluoro-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-il]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida
2
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-N-([2-fluoro-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (4 g, 9,46 mmol, 1,00 ekviv.), 4-dimetilaminopiridin (115 mg, 0,94 mmol, 0,10 ekviv.), TEA (3,83 g, 37,85 mmol, 4,00 ekviv.) i 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorida (2,2 g, 11,30 mmol, 1,20 ekviv.) u 200 mL dihlorometanu mešana je 3 h na 40° C. Dobijeni rastvor je razređen u dihlormetanu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem pomoću etil-acetata / petroleum etera (1/1) dajući naslovno jedinjenje (1,204 g, 23%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,35 (s, 1H), 8,58−8,56 (m, 1H), 7,92−7,88 (m, 2H), 7,83 (s, 1H), 7,78−7,76 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,27−7,23 (m, 2H), 6,97 (s, 1H), 5,13−4,99 (d, J = 51,6 Hz, 1H), 4,89−4,83 (m, 1H), 4,47−4,42 (m, 1H), 4,32−4,28 (m, 1H), 3,96−3,87 (m, 1H), 3,74−3,59 (m, 1H), 2,60−2,58 (m, 1H), 2,31−2,12 (m, 1H).
Primer 120: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil)-N-[[6-fluoro-4-[6-(trifluorometil)-3-piridil]-2-piridil]metil-pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil)-N-[[6-fluoro-4-[6-(trifluorometil))-3-piridil]-2-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša 2,6-dihloro-4-jodopiridin (7,00 g, 25,56 mmol, 1,00 ekviv.), [6-(trifluorometil)piridin-3-il]boronska kiselina (4,88 g, 25,56 mmol, 1,00 ekviv.), 1,4-dioksana (100 mL), natrijum-karbonata (5,42 g, 51,14 mmol, 2,00 ekviv.) i vode (2 mL) mešana je tokom noći na 100° C u atmosferi azota. Reakcija je razređena vodom, ekstrahovana etilacetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:20) dajući naslovno jedinjenje (6,5 g, 87%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 6-hloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-karbonitrila
2
Smeša 2,6-dihloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridina (5,00 g, 17,06 mmol, 1,00 ekviv.), DMSO (15 mL, 211,18 mmol, 12,40 ekviv.) i KF (990 mg, 17,04 mmol, 1,00 ekviv.) mešana je preko noći na 150° C u uljanoj kupki. Reakcija je ohlađena do sobne temperature, razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/20) dajući naslovno jedinjenje (3,8 g, 81%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.3: Priprema 6-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-karbonitrila
Smeša 6-hloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-karbonitrila (1 g, 3,53 mmol, 1,00 ekviv), Zn(CN)2(420 mg, 3.58 mmol, 1,00 ekviv.), Pd2(dba)3.CHCl3(190 mg, 0,18 mmol, 0,05 ekviv.), dppf (100 mg, 0,18 mmol, 0,05 ekviv.) i DMA (4 mL, 43,02 mmol, 12,20 ekviv.) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 1 h na 125° C u atmosferi azota. Reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/20) dajući naslovno jedinjenje (410 mg) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema [6-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metanamin hidrohlorida
Smeša 6-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-karbonitrila (200 mg, 0,75 mmol, 1,00 ekviv.), tetrahidrofurana (30 mL), paladijuma na ugljenu (200 mg, 1,88 mmol, 2,50 ekviv.) i koncentrovanog hlorovodonika (0,1 mL) mešana je 8 h na 25° C. Čvrsta materija je filtrirana. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom radi dobijanja sirovog proizvoda (200 mg) kao svetložuta čvrsta supstanca koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
2
Korak br. 5: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil)-N-[[6-fluoro-4-[6-(trifluorometil)-3-piridil]-2-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (214,79 mg, 0,74 mmol, 1,00 ekviv.), [6-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metanamin hidrohlorida (200,00 mg, 0,74 mmol, 1,00 ekviv.), tetrahidrofurana (10 mL), HOBT (109,61 mg, 0,81 mmol, 1,10 ekviv.), EDCI (282,73 mg, 1,47 mmol, 2,00 ekviv.) i DIEA (190,61 mg, 1,47 mmol, 2,00 ekviv.) mešana je tokom noći na 25° C. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod (50,8 mg) je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (21,2 mg, 5%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9,18 (s, 1H), 8,52−8,49 (m, 2H), 8,04−8,00 (m, 2H), 8,00−7,91 (m, 2H),7,43 (s, 1H), 7,38−7,33 (m, 2H), 5,23−5,10 (d, J = 52 Hz, 1H), 4,65−4,54 (m, 2H), 4,33−4,29 (m, 1H), 3,86−3,71 (m, 2H), 2,54−2,53 (m, 1H), 2,30−2,16 (m, 1H).
Primer 121: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([5-fluoro-4-[3-(trifluorometil)-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema tert-butil 3-(trifluorometil)-3-[(trimetilsilil)oksi]-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilata
Rastvor tert-butil 3-okso-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilata (20 g, 88,78 mmol, 1,00 ekviv.), trimetil(trifluorometil)silana (38 g, 267,24 mmol, 3,00 ekviv.) i TBAF (4 mL, 61,02 mmol, 1,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (180 ml) mešan je 1 dan na 60° C i koncentrovan
2
u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (19g, 58%) u obliku žutog ulja.
Korak br.2: Priprema tert-butil 3-hidroksi-3-(trifluorometil)-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilata
Smeša tert-butil 3-(trifluorometil)-3-[(trimetilsilil)oksi]-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilata (7,0 g, 19,05 mmol, 1,0 ekviv.) i kalijum-metaneperoksoata (4 g, 28,73 mmol, 1,50 ekviv.) u metanolu (100 mL) mešana je 30 minuta na sobnoj temperaturi i koncentrovana u vakuumu. Dobijeni rastvor je razređen pomoću 50 ml etil-acetata, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (6g) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br.3: Priprema 3-(trifluorometil)-8-azabiciklo[3.2.1]okt-2-ena
Tionil-hlorid (7 g, 58,84 mmol, 6,00 ekviv.) i piridin (4,7 g, 59,42 mmol, 6,0 ekviv.) dodati su kap po kap rastvoru tert-butil 3-hidroksi-3-(trifluorometil)-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilata (3g, 10,16 mmol, 1,00 ekviv.), 4-dimetilaminopiridina (122mg, 0,10 ekviv.) u 1,4-dioksanu (100 mL) na 0° C. Dobijeni rastvor je zagrevan do 60° C tokom 12 h, ugašen rastvorom natrijum-bikarbonata (200 ml), ekstrahovan etil-acetatom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (900 mg, 50%) u obliku svetložute čvrste materije
Korak br. 4: Priprema tert-butil 3-(trifluorometil)-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilata
2
U 100-mililitarsku laboratorijsku bocu s okruglim dnom (balon), prečišćenoj i održavanoj pomoću atmosfere H2, stavljen je tert-butil 3-(trifluorometil)-8-azabiciklo[3.2.1]okt-2-ene-8-karboksilat (900 mg, 3,25 mmol, 1,00 ekviv) i paladijum na ugljenu (30 mg) u metanolu (15 ml). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (800mg, 88%) u obliku svetložutog ulja
Korak br.5: Priprema 3-(trifluorometil)-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-hidrohlorida
Rastvor tert-butil 3-(trifluorometil)-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-karboksilata (800 mg, 2,86 mmol, 1,00 ekviv.) i zasićene HCl u 1,4-dioksanu (20 mL) mešan je 2 h na sobnoj temperaturi i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (400 mg, 65%) u obliku bele čvrste materije
Korak br. 6: Priprema 8-(2-hloro-5-fluoropiridin-4-il)-3-(trifluorometil)-8-azabiciclo[3.2.1]oktana
U zapečaćenu cev zapremine 20 ml, prečišćenu i održavanu pomoću inertne atmosfere azota, stavljen je 3-(trifluorometil)-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-hidrohlorid (400 mg, 1,85 mmol, 1,00 ekviv.), 2-hloro-5-fluoro-4-jodopiridin (860 mg, 3,34 mmol, 1,80 ekviv.), Pd2(dba)3CHCl3(385 mg, 0,37 mmol, 0,20 ekviv.), ksantfos (400 mg, 0,69 mmol, 0,40 ekviv.), Cs2CO3(1,8 g, 5,52 mmol, 3,00 ekviv.) i metilbenzen (6 mL). Nastali rastvor je mešan preko noći na 110° C i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je nanesen na kolonu silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1). Na taj se način dobilo 580 mg naslovnog jedinjenja u obliku svetlosmeđe čvrste materije
Korak br. 7: Priprema 5-fluoro-4-[3-(trifluorometil)-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-karbonitrila
2 1
U zapečaćenu cev zapremine 20 ml, prečišćenu i održavanu pomoću inertne atmosfere azota, stavljen je 8-(2-hloro-5-fluoropiridin-4-il)-3-(trifluorometil)-8-azabiciklo[3.2.1]oktan (760 mg, 2,46 mmol, 1,00 ekviv.), Pd2(dba)3CHCl3(248 mg, 0,24 mmol, 0,10 ekviv.), dppf (265 mg, 0,48 mmol, 0,20 ekviv.), cink-dikarbonitril (282 mg, 2,40 mmol, 1,00 ekviv.), Zn (15,5 mg, 0,24 mmol, 0,10 ekviv.) i DMA (8 mL). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na 110°C, razređen 20 ml vode, ekstrahovan etil-acetatom, osušen iznad anhidrovanog natrijumsulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:3) dajući naslovno jedinjenje (120 mg, 16%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 8: Priprema [5-fluoro-4-[3-(trifluorometil)-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il]metanamin hidrohlorida
U 50-mililitarsku laboratorijsku bocu s okruglim dnom (balon), prečišćenoj i održavanoj pomoću inertne atmosfere H2, stavljen je 5-fluoro-4-[3-(trifluorometil)-8-azabiciklo[3.2.1]octan-8-il]piridin-2-karbonitril (120 mg, 0,40 mmol, 1,00 ekviv), metanol (30 ml), paladijum na ugljenu (100 mg) i hlorovodonik (0,5 ml). Dobijeni rastvor je mešan 20 min na sobnoj temperaturi. Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje 120 mg (88%) u obliku svetlosmeđe čvrste materije.
Korak br. 9: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([5-fluoro-4-[3-(trifluorometil)-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-8-il]piridin-2-il]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida
2 2
Smeša (2S)-4-[(tert-butoksi)karbonil]4-fluoro-4-(fluorometil)pirolidin-2-karboksilne kiseline (170 mg, 0,58 mmol, 1.50 ekviv), HATU (227 mg, 0,60 mmol, 1,50 ekviv), DIEA (154 mg, 1,19 mmol, 3,00 ekviv) i [5-[3-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (120 mg, 0,35 mmol, 1,00 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (6 ml) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je razređena u etil-acetatu, isprana slanim rastvorom, osušena iznad natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja 56,8 mg (28%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8,86−8,84 (m, 1H), 8,15−8,13 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 8,01−7,96 (m, 2H), 7,49−7,43 (t, J = 9,0 Hz, 2H), 6,92−6,89 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 5,27−5,10 (d, J = 51,3 Hz, 1H), 4,53 (s, 2H), 4,39−4,16 (m, 3H), 3,71 (s, 1H), 3,61−3,59 (m, 1H), 2,95 (s, 1H), 2,42−2,35 (m, 1H), 2,14−2,07 (s, 1H), 2,00−1,96 (m, 2H), 1,90−1,85 (m, 2H), 1,83−1,60 (m, 4H).
Primer 122: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil)-N-[[3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)piridazin-2-il]fenil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema etil 3-bromo-5-fluorobenzoata.
Smeša 3-bromo-5-fluorobenzojeve kiseline (2 g, 9,13 mmol, 1,00 ekviv.), etanola (40 mL) i sumporne kiseline (3 mL) mešana je preko noći na 85° C u uljanoj kupki. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (1,9 g, 84%) u obliku svetlosmeđe čvrste materije.
Korak br.2: Priprema etil 3-fluoro-5-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoata
Smeša etil 3-bromo-5-fluorobenzoata (800 mg, 3,24 mmol, 1,00 ekviv.) u dioksanu (30 mL), 4,4,5,5-tetrametil-2-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3,2-dioksaborolana (1,24
2
g, 4,88 mmol, 1,50 ekviv.), AcOK (959 mg, 9,77 mmol, 3,00 ekviv.) i Pd(dppf)Cl2(477 mg, 0,65 mmol, 0,20 ekviv.) mešana je tokom noći na 90° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (700 mg, sirovo) u obliku crne sirove materije.
Korak br.3: Priprema etil 3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]benzoata
Smeša etil 3-fluoro-5-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoata (700 mg, 2,38 mmol, 1,00 ekviv.) u dioksanu (15 mL), 2-hloro-5-(trifluorometil)pirazina (437 mg, 2,39 mmol, 1,00 ekviv.), Pd(dppf)Cl2 (352 mg, 0,48 mmol, 0,20 ekviv.) i Cs2CO3(2,35 g, 7,21 mmol, 3,00 ekviv.) mešana je tokom noći na 90° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/100) dajući naslovno jedinjenje (300 mg, 40%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br.4: Priprema [3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metanola
DLiAlH4(73 mg, 1,92 mmol, 2,00 ekviv.)) dodat je nekoliko serija rastvoru etl 3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]benzoata (300 mg, 0,95 mmol, 1,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (15 mL) na 0° C u atmosferi azota. Nakon 10 minuta na 0° C, reakcija je ugašena vodom. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (7:100) dajući naslovno jedinjenje (160 mg, 62%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema 2-([3-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]pirimidin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona.
2 4
DIAD (134 mg, 0,66 mmol, 1,20 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru [3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metanola (150 mg, 0,55 mmol, 1,00 ekviv.), 2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-dion (98 mg, 0,67 mmol, 1,20 ekviv.) i PPh3(288 mg, 1,10 mmol, 2,00 ekviv.) u 10 ml THF na 0° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (7:100) dajući naslovno jedinjenje (230 mg) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 6: Priprema [3-fluoro-4-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]piridin-2-il]metanamina
Rastvor 2-([3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (230 mg, 0,57 mmol, 1,00 ekviv.) u etanolu (7 mL) i NH2NH2H2O (7 mL, 144,03 mmol, 251,30 ekviv.) mešana je tokom noći na 60° C. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije dihlormetanom/metanolom (100:10) dajući naslovno jedinjenje (100 mg, 64%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br. 7: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil)-N-[[3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša [3-fluoro-5-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]fenil]metanamina (104 mg, 0,38 mmol, 1,00 ekviv.), (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (168 mg, 0,58 mmol, 1,50 ekviv.), N,N-dimetilformamida (5 mL), DIEA (150 mg, 1,16 mmol, 3,00 ekviv.) i HATU (220 mg, 0,58 mmol, 1,50 ekviv.) mešan je preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleumetrom (20:100) dajući naslovno jedinjenje (15,7 mg, 8%) u obliku bele čvrste materije.
2
<1>H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9,39−9,38 (m, 1H), 9,07 (s, 1H), 8,07 (s, 1H), 8,00−7,88 (m, 3H), 7,37−7,30 (m, 3H), 5,50−5,22 (d, J = 83,1 Hz, 1H), 4,58 (s, 2H), 4,29−4,23 (m, 1H), 3,85−3,70 (m, 2H), 2,60−2,40 (m, 1H), 2,39−2,04 (m, 1H).
Primer 123: Priprema (1R,3S,5R)-2-(4-fluorofenil)sulfonil)-N-[[6-[6-(trifluorometil)-3-piridil]pirimidin-4-il)metil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksamida.
Korak br.1: Priprema (5S)-5-[[(tert-butildifenilsilil)oksi]metil]pirolidin-2-ona
Smeša (5S)-5-(hidroksimetil)pirolidin-2-ona (20 g, 173,72 mmol, 1,00 ekviv.), 1H-imidazola (26 g, 381,92 mmol, 2,20 ekviv.), 4-dimetilaminopiridina (2,12 g, 17,35 mmol, 0,10 ekviv.) i TBDPS-Cl (50 g, 181,91 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlorometanu (800 mL) mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etilacetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (62,7 g, sirovo) u obliku bezbojnog kristala.
Korak br. 2: Priprema tert-butil 2-metil (2S)-2-[[(tert-butildifenilsilil)oksi]metil]-5-oksipirolidin-1-karboksilata
Smeša (5S)-5-[[(tert-butildifenilsilil)oksi]metil]pirolidin-2-ona (62,7 g, 177,35 mmol, 1,00 ekviv), 4-dimetilaminopiridina (24 g, 196,45 mmol, 1,10 ekviv) i di-tert-butil dikarbonata (38,6 g, 176,86 mmol, 1,00 ekviv) u acetonitrilu (800 ml) mešana je 16 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije petroleum-etrom / etilacetatom (50:1) dajući naslovno jedinjenje (45 g, 56%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.3: Priprema tert-butil (2S)-2-[[(tert-butyildifenilsilil)oksi]metil]-2,3-dihidro-1H-pirol-1-karboksilata
2
Litijum trietilborohidrid (23 mL, 217,10 mmol, 9,80 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru tert-butil (2S)-2-[[(tert-butildifenilsilil)oksi]metil]-5-roksopirolidin-1-karboksilata (10,05 g, 22,15 mmol, 1,00 ekviv) u toluenu (36 ml) na -50°C u atmosferi azota. Nakon 30 minuta, DIEA (16,5 mL, 99,84 mmol, 4,50 ekviv.), 4-dimetilaminopiridin (34 mg, 0,28 mmol) i Tf2O (3,6 mL, 21,31 mmol, 1,00 ekviv.) postepeno su dodavani na -50° C. Dobijeni rastvor je mešan preko noći na 20° C. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana etilacetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (3:100) dajući naslovno jedinjenje (4,321 g, 45%) u obliku žutog ulja.
Korak br. 4: Priprema tert-butil (3S)-3-[[(tert-butildifenilsilil)oksi]metil]-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksilata
Dietilcink (8,3 mL, 67,19 mmol, 1,10 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru tert-butil (2S)-2-[[(tert-butildifenilsilil)oksi]metil]-2,3-dihidro-1H-pirol-1-karboksilata (3,3 g, 7,54 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlorometanu (30 mL) na 0° C.Tome je dodat dijodometan (3,04 g, 11,35 mmol, 1,50 ekviv.) kap po kap uz mešanje na 0° C. Nakon 30 minuta na 0° C, dobijeni rastvor je mešan 4 h na 20° C. pH vrednost rastvora je podešena na 8 zasićenim natrijumbikarbonatom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan dihlormetanom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:50) dajući naslovno jedinjenje (2 g, 59%) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br. 5: Priprema tert-butil (3S)-3-(hidroksimetil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksilata
Smeša tert-butil (3S)-3-[[(tert-butildifenilsilil)oksi]metil]-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksilata (1,6 g, 3,54 mmol, 1,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (20 mL) i TBAF (3,5 mL, 13,39 mmol, 1,00 ekviv.) mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-
2
acetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (900 mg) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br. 6: Priprema ((3S)-2-[(tert-butoksi)karbonil]-2-azabiciklo[3.1.0]-(heksan-3-karboksilne kiseline
Smeša tert-butil (3S)-3-(hidroksimetil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksilata (900 mg, 4,22 mmol, 1,00 ekviv.) u CH3CN (10 mL)/CCl4(10 mL), NaIO4(2,72 g, 12,72 mmol, 3,00 ekviv.) u vodi (10 mL) i RuCl3.H2O (44 mg, 0,20 mmol) mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (620 mg, 65%) u obliku smeđe čvrste materije.
Korak br. 7: Priprema tert-butil (3S)-3-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksilata
Smeša (3S)-2-[(tert-butoksi)karbonil]-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilne kiseline (620 mg, 2,73 mmol, 1,00 ekviv.), N,N-dimetilformamida (20 mL), [6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (955 mg, 3,29 mmol, 1,20 ekviv.), DIEA (3,52 g, 27,24 mmol, 10,00 ekviv.) i HATU (1,246 g, 3,28 mmol, 1,20 ekviv.) mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijumsulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (30:100) dajući naslovno jedinjenje (700 mg, 55%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 8: Priprema (3S)-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksamid hidrohlorida
Smeša tert-butil(3S)-3-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]-2-azabiciklo-1-karboksilata (700 mg, 1,51 mmol, 1,00 ekviv) i HCl
2
(zasićeni rastvor u 50 ml 1,4-dioksana) mešana je 20 min. na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (790 mg, sirovo) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 9: Priprema (1R,3S,5S)-2-(4-fluorofenil)sulfonil)-N-((6-(6-(trifluorometil)-3-piridil]pirimidin-4-il)metil)-2-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksamida.
Smeša (3S)-2-[(4-fluorobenzene)sulfonyl]-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)-2'azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksamida (700 mg, 1,34 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlormetanu (40 ml), trietilamin (884 mg, 8,74 mmol, 5,00 ekviv), 4-dimetilaminopiridina (43 mg, 0,35 mmol, 0,30 ekviv) i 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorida (683 mg, 3,51 mmol, 2,60 ekviv) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (35:100) dajući naslovno jedinjenje (328,3 mg, 47%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9,47 (s, 1H), 9,30−9,29 (m, 1H), 8,94−8,90 (m, 1H), 8,80−8,77 (m, 1H), 8,26−8,25 (m, 1H), 8,10−8,01 (m, 1H), 8,01−7,97 (m, 2H), 7,57−7,51 (m, 2H), 4,52−4,48 (m, 2H), 3,60−3,54 (m, 1H), 3,39−3,32 (m, 1H), 2,30−2,15 (m, 2H), 1,67−1,66 (m, 1H), 0,38−0,35 (m, 1H), -0,41−-0,39 (m,1H).
Primer 124: Priprema (3R,6S)-1,1-difluoro-5-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)-5-azaspiro[2.4]heptane-6-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema 5-tert-butil 6-metil (6S)-1,1-difluoro-5-(azaspiro[2.4]heptan-5,6-dikarboksilata
2
Smeša NaI (87,14 mg, 0.,50 ekviv.), 1-tert-butil 2-metil (2S)-4-metilidenepirolidin-1,2-dikarboksilata (280 mg, 1,16 mmol, 1,00 ekviv.) i TMS-CF3(412,5 mg, 2,50 ekviv.) u tetrahidrofuranu (10 mL) mešana je 12 h na 60° C u atmosferi azota. Reakcija je zatim ugašena zasićenim rastvorom NH4Cl. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, ispran zasićenim Na2S2O3, pa slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (400 mg, sirovo) u obliku narandžastog ulja.
Korak br. 2: Priprema (6S)-5-[(tert-butoksi)karbonil]-1,1-difluoro-5-azaspiro[2.4]heptan-6-karboksilne kiseline
Smeša 5-tert-butil 6-metil (6S)-1,1-difluoro-5-azaspiro[2.4]heptane-5,6-dikarboksilata (400 mg, 1,37 mmol, 1,00 ekviv.) i LiOH (164,95 mg, 6,89 mmol, 5,00 ekviv.) u vodi (5 mL)/ metanolu (2 mL) mešana je 2 h na 0° C – 5° C. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Vrednost pH vodenog sloja podešena je na pH 5 pomoću hlorovodonika (10 %). Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (240 mg, 63%) u obliku narandžastog ulja.
Korak br. 3: Priprema tert-butil (6S)-1,1-difluoro-6-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karboksilata
Smeša 6S)-5-[(tert-butoksi)karbonil]-1,1-difluoro-5-azaspiro[2.4]heptan-6-karboksilne kiseline (247 mg, 0,89 mmol, 1.00 ekviv), HATU (508 mg, 1,34 mmol, 1,50 ekviv), DIEA (460,2 mg) i [6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (271,7 mg, 0,93 mmol, 1,20 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (15 ml) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom.
2
Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:3) dajući naslovno jedinjenje (230 mg) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema (6S)-1,1-difluoro-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)-5-azaspiro[2.4]heptane-6-karboksamida
Smeša tert-butil 6S)-1,1-difluoro-6-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)carbamoil]-5-azaspiro[2.4]heptan-5-karboksilata (230 mg, 0,45 mmol, 1,00 ekviv.) i zasićenog hlorovodonika u dioksanu (3 ml) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je koncentrovan u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (200 mg, sirovo) u obliku narandžaste čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema (3R,6S)-1,1-difluoro-5-[(4-fluorobenzene)sulfonyl]-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)-5-azaspiro[2.4.1]heptan-3-karboksamida
Smeša (6S)-1,1-difluoro-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)-5-azaspiro[2.4]heptane-6-karboksamid hidrohlorida (200 mg, 0,44 mmol, 1,00 ekviv), trietilamina (179,78 mg, 1,78 mmol, 4,00 ekviv), 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorid (103,7 mg, 0,53 mmol, 1,20 ekviv.) i 4-dimetilaminopiridina (5,43 mg, 0,04 mmol, 0,10 ekviv) u dihlormetanu (10 ml) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim prekinuta vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Organski slojevi su kombinovani, isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (42,7 mg, 17%) u obliku bele čvrste materije. tR= 1,14 min (Repaired IC (CHIRALPAK IC), 0,46 cm x 10cm, 5µm, MeOH (0,1%DEA) = 2%, 4 ml/min).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.48 (s, 1H), 9.29 (s, 1H), 8.70 - 8.67 (m, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.96 - 7.91 (m, 2H), 7.91 - 7.84 (m, 1H), 7.75 - 7.71 (m, 1H), 7.34 - 7.26 (m, 2H), 4.99 -4.91 (m, 1H), 4.64 - 4.56 (m, 1H), 4.39 - 4.34 (m, 1H), 3.61 (s, 2H), 2.25 - 2.01 (m, 2H), 1.40 - 1.34 (m, 2H).
2 1
A (3S,6S)-1,1-difluoro-5-[(4-fluorobenzen)sulfonil-N-[[6-[6-(trifluorometil)-3-piridil] pirimidin-4-il] metil]-5-azaspiro [2.4] heptan-6-karboksamide takođe je izolovan (27,3 mg, 11%) u obliku bele čvrste materije. tR= 1,45 min (Repaired IC (CHIRALPAK IC), 0,46 cm x10 cm, 5µm, MeOH (0,1%DEA) = 2%, 4 ml/min).
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.47 (s, 1H), 9.30 (s, 1H), 8.99 (m, 1H), 8.79 - 8.77 (d, J = 6 Hz, 1H), 8.15 - 8.03 (m, 4H), 7.53 - 7.47 (m, 2H), 4.53 - 4.45 (m, 3H), 3.61 - 3.32 (m, 2H), 2.03 (s, 2H), 1.48 - 1.44 (m, 2H).
Stereohemija za 4. poziciju prolina proizvoljno je dodeljena. Stereohemija za 2. poziciju prolina je prikazana.
Primer 125: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([3-metoksi-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)-2-metilpirolidin-2-karboksamida
Korak br.1: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([3-metoksi-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)-2-metilpirolidin-2-karboksamida
Smeša (2R,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (360 mg, 1,18 mmol, 1.00 ekviv.), HATU (673 mg, 1,77 mmol, 1,50 ekviv), DIEA (456 mg, 3,53 mmol, 3,00 ekviv.) i 3-metoksi-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metanamin (250 mg, 0,92 mmol, 0,80 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (15 ml) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim prekinuta vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:5). Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom hiralnom HPLC radi dobijanja naslovnog jedinjenja (39,8 mg, 6%) u obliku bele čvrste materije. tR= 2,42 min (Lux 3µm, Cellulose-4, 0,46 cm x 5cm, 3µm, Hex:EtOH = 70:30, 1,0 ml/min).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.98 (s, 1H), 8.06 - 8.04 (m, 2H), 7.93 - 7.89 (m, 2H), 7.70 - 7.68 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 7.24 - 7.17 (m, 2H), 7.05 (s, 1H), 5.23 - 5.05 (m, 1H), 4.45 -
2 2
4.25 (m, 2H), 4.04 (s, 3H), 3.91 - 3.63 (m, 2H), 2.77 - 2.58 (m.1H), 2.33 - 2.27 (m, 1H), 1.70 (s, 3H).
(2R,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([3-metoksi-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)-2-metilpirolidin-2-karboksamid takođe je izolovan (110 mg, 17%) u obliku bele čvrste materije. tR= 3,56 min (Lux 3µm, Cellulose-4, 0,46 cm x 5cm, 3µm, Hex:EtOH = 70:30, 1,0 ml/min).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.96 (s, 1H), 8.07 - 8.02 (m, 2H), 7.91 - 7.86 (m, 2H), 7.70 - 7.67 (d, J = 6 Hz, 1H), 7.26 - 7.20 (m, 3H), 5.22 - 5.03 (m, 1H), 4.48 - 4.24 (m, 2H), 4.07 - 3.96 (m, 4H), 3.52 - 3.36 (m, 1H), 2.95 - 2.83 (m, 1H), 2.05 - 1.86 (m, 1H), 1.64 (s, 3H).
Primer 126: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil)-N-[[5-fluoro-4-[6-(trifluorometil)-3-piridi]-2-piridil]metil]-2-metil-pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema (2R,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil)-N-[[5-fluoro-4-[6-(trifluorometil)-3-piridil]-2-piridil]metil]-2-metil-pirolidin-2-karboksamida.
Smeša [5-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metanamina (100,00 mg, 0,37 mmol, 1,00 ekviv.), (4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (112,57 mg, 0,37 mmol, 1,00 ekviv.), HOBT (54,80 mg, 0,41 mmol, 1,10 ekviv.), EDCI (141,37 mg, 0,74 mmol, 2,00 ekviv.) i DIEA (95,31 mg, 0,74 mmol, 2,00 ekviv.) u THF (5 mL) mešana je 12 h na 25° C. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijumsulfata i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod (100,09 mg) je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja (2S,4R)-4-fluoro-N-([5-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-2-il]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-metilpirolidin-2-karboksamid (41,9 mg, 20%) u obliku bele čvrste materije. tR= 1,68 min (CHIRALPAK AD-H, 0,46 cm x 15 cm, 5µm, MeOH (0,1% DEA) = 30%, 4 ml/min).
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.06 (s, 1H), 8.60 - 8.59 (d, J = 4 Hz, 1H),8.42 - 8.40 (m, 1H), 8.03 - 7.96 (m, 3H), 7.88 - 7.87 (d, J = 4 Hz, 1H), 7.39 - 7.35 (m, 2H), 5.36 - 5.18
2
(d, J = 72 Hz, 1H), 4.79 - 4.75 (d, J = 16 Hz, 1H), 4.58 - 4.54 (d, J = 16 Hz, 1H), 4.18 - 4.05 (m, 1H), 3.83 - 3.62 (m, 1H), 2.78 - 2.62 (m, 1H), 2.13 - 2.28 (m, 1H), 1.60(s, 3H).
(2R,4R)-4-fluoro-N-([5-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-metilpirolidin-2-karboksamid (20,9 mg, 10%) takođe je izolovan iz reakcije u obliku bele čvrste materije. tR= 2,12 min (CHIRALPAK AD-H, 0,46 cm x 15 cm, 5µm, MeOH (0,1% DEA) = 30%, 4 ml/min).
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.09 (s, 1H), 8.60 - 8.59 (d, J = 4 Hz, 1H), 8.41 - 8.39 (d, J = 8 Hz, 1H), 7.98 - 7.90 (m, 4H), 7.32 - 7.27 (m, 2H), 5.35 - 5.34 (d, J = 4 Hz, 1H), 4.89 - 4.58 (m, 2H), 3.92 - 3.76 (m, 2H), 2.70 - 2.32 (m, 2H), 1.78 (s, 1H).
Primer 127: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([2-metoksi-6[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema [2-(benzylsulfanyl)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida
Smeša tert-butil N-([2-(benzylsulfanyl)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamata (1,2 g, 2,52 mmol, 1,00 ekviv) i zasićeni HCl (u 50 ml 1,4-dioksana) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Čvrsta materija je prikupljena filtracijom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (850 mg, 82%) u obliku sive čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema (1S,4R)-N-[[2-(benzilsulfanil)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil]-4-fluoro-2-[(4-fluorobenzen)sulfonil]ciklopentan-1-karboksamid hidrohlorida
Rastvor (1S,4R)-4-fluoro-2-[(4-fluorobenzen)sulfonil]ciklopentan-1-karboksilne kiseline (300 mg, 1,03 mmol, 1,00 ekviv.), HATU (470 mg, 1,24 mmol, 1,00 ekviv.) i DIEA (266 mg, 2,06 mmol, 2,00 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (8 mL) mešan je 10 minuta na
2 4
sobnoj temperaturi. Dodat je [2-(benzilsulfanil)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorid (424 mg, 1,03 mmol, 1,00 ekviv.), a dobijeni rastvor je mešane preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (320 mg, 48%) u obliku svetlosmeđeg ulja.
Korak br. 3: Priprema (1S,4R)-4-fluoro-2-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-[[2-(fenilmetan)sulfonil-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)ciklopentan-1-karboksamida
m-CPBA (340 mg, 1,97 mmol, 4,00 ekviv.) dodavan je deo po deo u rastvor (1S,4R)-N-[[2-(benzilsulfanil)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil]-4-fluoro-2-[(4-fluorobenzen)sulfonil]ciklopentan-1-karboksamida (320 mg, 0,49 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlorometanu (50 mL) na sobnoj temperaturi. Nakon 4 h na sobnoj temperaturi, dobijeni rastvor je rastvoren pomoću dihlormetana, ispran zasićenim natrijum-bikarbonatom, osušen iznad natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (2:1) dajući naslovno jedinjenje (250mg, 74%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.4: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([2-metoksi-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Natrijum-metilat (60 mg, 2.00 ekviv.) dodat je u nekoliko serija rastvoru (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonl]-N-[[2-(fenilmetan)sulfonil-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil]pirolidin-2-karboksamida (250 mg, 0.37 mmol, 1.00 ekviv.) u metanolu (20 mL) na 0° C. Dobijeni rastvor je mešan 30 minuta na sobnoj temperaturi i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (2:1) dajući naslovno jedinjenje (91,7 mg, 45%) u obliku ružičaste čvrste materije.
2
<1>H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 9.46 (s, 1H), 9.10 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 8.78 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.09 - 8.00 (m, 3H), 7.88 (s, 1H), 7.47 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 5.29 - 5.12 (d, J = 52.0 Hz, 1H), 4.46 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 4.27 - 4.22 (dd, J = 9.9 Hz, J = 7.2 Hz, 1H), 4.04 (s, 3H), 3.75 (s, 1H), 3.71 - 3.58 (m, 1H), 2.51 - 2.37 (m, 1H), 2.24 - 2.01 (m, 1H).
Primer 128: Priprema (2S,4R)-N-[[4-(4,4-difluoro-1-piperidil)-5-fluoro-2-piridil]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema tert-butil 4,4-difluoropiperidin-1-karboksilata
DIBAL-H (6 mL, 1,01 mol, 20,00 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru etl 3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-karboksilata (10 g, 50,19 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlorometan (200 mL) na -78° C u atmosferi azota. Reakcija je mešana preko noći na 25°C.. Reakcija je zatim ugašena zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata., ekstrahovana dihlormetanom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleumetrom (1/10). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (9,7 g, 87%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 4,4-difluoropiperidin hidrohlorida
Smeša tert-butil 4,4-difluoropiperidin-1-karboksilata (5 g, 22.60 mmol, 1.00 ekviv.) i hlorovodonika (zasićeni rastvor u 150 mL 1,4-dioksana) mešana je 6 h na 25° C.Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (4,2 g, sirovo) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.3: Priprema 2-hloro-4-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-5-fluoropiridina
2
Smeša 2-hloro-5-fluoro-4-jodopiridina (813 mg, 3.16 mmol, 1.00 ekviv.), 4,4-difluoropiperidin hidrohlorida (500 mg, 3.17 mmol, 1.00 ekviv.), XantPhos (183 mg, 0.32 mmol, 0.10 ekviv.), Cs2CO3(3.1 g, 9.51 mmol, 3.00 ekviv.) i Pd2(dba)3CHCl3(164 mg, 0.16 mmol, 0.05 ekviv.) u toluenu (20 mL) mešana je tokom noći na 100° C u atmosferi azota. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeni rastvor je razređen vodom, ekstrahovan etil-acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijumsulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:5) dajući naslovno jedinjenje (200 mg, 25%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.4: Priprema 4-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-5-fluoropiridin-2-karbonitrila
Smeša 2-hloro-4-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-5-fluoropiridin 150 mg, 0,60 mmol, 1,00 ekviv.), , Pd2(dba)3.CHCl3(10,3 mg, 0,01 mmol, 0.05 ekviv.), Zn(CN)2(23,3 mg, 0,20 mmol, 1,00 ekviv.), dppf (11 mg, 0,02 mmol, 0,10 equiv) Zn (1,3 mg, 0,02 mmol, 0,10 ekviv.) i DMA (2 ml) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 1,5 h na 125° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:4) dajući naslovno jedinjenje (180 mg) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.5: [4-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-5-fluoropiridin-2-il]metanamin hidrohlorid
Smeša 4-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-5-fluoropiridin-2-karbonitrila (180 mg, 0.75 mmol, 1.00 ekviv.), metanola (20 mL), paladijum na ugljenu (180 mg, 1.69 mmol, 1.00 ekviv.) i koncentrovanog hlorovodonika (0.2 mL) mešana je 20 minuta na 25° C u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane. Dobijeni rastvor je koncentrovan u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (180 mg, 98%) u obliku bele čvrste materije.
2
Korak br. 6: Priprema (2S,4R)-N-[[4-(4,4-difluoro-1-piperidil)-5-fluoro-2-piridil]metil)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša [4-(4,4-difluoropiperidin-1-il)-5-fluoropiridin-2-il]metanamin hidrohlorida (180 mg, 0.73 mmol, 1.00 ekviv.), (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (213.8 mg, 0.73 mmol, 1.00 ekviv.), EDCI (282.1 mg, 1.47 mmol, 2.00 ekviv.), HOBt (109.1 mg, 0.81 mmol, 1.10 ekviv.) i DIEA (189.6 mg, 1.47 mmol, 12.00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (10 mL) mešana je tokom noći na 25° C. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod (150 mg) je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (39,2 mg, 10%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.09 - 8.01 (m, 1H), 8.00 - 7.97 (m, 2H), 7.38 - 7.32 (m, 2H), 7.19 - 7.17 (m, 1H), 5.21 - 5.14 (d, J = 52.0 Hz, 1H), 4.52 - 4.39 (m, 2H), 4.27 -4.21 (m, 1H), 3.83 - 3.74 (m, 2H), 3.70 - 3.54 (m, 4H), 2.62 - 2.42 (m, 1H), 2.27 - 2.00 (m, 5H).
Primer 129: Priprema (2S,4R)-N-[[4-(6-azaspiro[2.5]oktan-6-il)-5-fluoro-2-piridil]metil)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 6-(2-hloro-5-fluoropiridin-4-il)-6-azaspiro[2.5]oktana
Smeša 6-azaspiro[2.5]oktan hidrohlorida (1.00 g, 6.77 mmol, 1.00 ekviv.), 2-hloro-5-fluoro-4-jodopiridina (1.74 g, 6.76 mmol, 1.00 ekviv.), Pd2(dba)3.CHCl3(350 mg, 0.34 mmol, 0.05 ekviv.), BINAP (420 mg, 0.67 mmol, 0.10 ekviv.) i t-BuONa (1.95 g, 20.29 mmol, 3.00 ekviv.) u toluenu (20 mL) mešana je tokom noći na 100° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom,
2
osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (480 mg, 29%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br.2: Priprema [4-(4-ciklopropilpiperidin-1-il)-5-fluoropiridin-2-karbonitrila
Smeša 2-hloro-4-(4-ciklopropilpiperidin-1-il)-5-fluoropiridin (480.00 mg, 1.88 mmol, 1.00 ekviv.), Pd2(dba)3.CHCl3(103 mg, 0.10 mmol, 0.05 ekviv.), Zn(CN)2(140 mg, 1.19 mmol, 0.60 ekviv.), dppf (104.46 mg, 0.19 mmol, 0.10 ekviv.), Zn (12.33 mg, 0.19 mmol, 0.10 ekviv.) i DMA (5 mL, 53.78 mmol, 28.50 ekviv.) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 1 h na 100° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etilacetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (170 mg, 37%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema (4-[6-azaspiro[2.5]oktan-6-il]-5-fluoropiridin-2-il)metanamin hidrohlorida
Smeša 4-[6-azaspiro[2.5]oktan-6-il]-5-fluoropiridin-2-karbonitril (140 mg, 0.61 mmol, 1.00 ekviv.), metanol (5 mL, 123.49 mmol, 204.00 ekviv.), paladijuma na ugljenu (140 mg, 1.32 mmol, 2.20 ekviv.) i koncentrovanog hlorovodonika (0.1 mL) mešana je 20 minuta na 25° C u vodoničnoj atmosferi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (140 mg, 98%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema (2S,4R)-N-[[4-(6-azaspiro[2.5]oktan-6-il)-5-fluoro-2-piridil]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamida
Smeša (4-[6-azaspiro[2.5]oktan-6-il]-5-fluoropiridin-2-il)metanamina (140.00 mg, 0.59 mmol, 1.00 ekviv.), (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzene)sulfonil]pirolidin-2-
2
karboksilne kiseline (225.29 mg, 0.77 mmol, 1.30 ekviv.), EDCI (228.12 mg, 1.19 mmol, 2.00 ekviv.), HOBT (88.44 mg, 0.65 mmol, 1.10 ekviv.) i DIEA (153.80 mg, 1.19 mmol, 2.00 ekviv.) u THF (5 mL) mešana je tokom noći na 25° C. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod (43,9 mg) je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (28,4 mg, 9%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.04 - 7.98 (m, 3H), 7.38 - 7.33 (m, 2H), 7.16 - 7.14 (d, J = 8 Hz, 1H), 5.20 - 5.07(d, J = 52 Hz, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.28 - 4.24 (m, 1H), 3.83 - 3.68 (m, 2H), 3.49 - 3.46 (m, 4H), 2.54 - 2.46 (m, 1H), 2.26 - 2.12 (m, 1H),1.51 - 1.49 (m, 4H), 0.37 (s, 4H).
Primer 130: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[5-(trifluorometil)-4-[4-(trifluorometil)-1-piperidil]-2-piridil]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema 2-hloro-5-(trifluorometil)-4-[4-(trifluorometil)piperidin-1-il]piridina
Smeša 2-hloro-4-jodo-5-(trifluorometil)piridina (1,00 g, 3,25 mmol, 1,00 ekviv), 4-(trifluorometil)piperidina (500 mg, 3,26 mmol, 1,00 ekviv), Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(130 mg, 0,16 mmol, 0,05 ekviv.) i Cs2CO3(2,12 g, 6,51 mmol, 2,00 ekviv.) u toluenu (10,00 ml)mešana je preko noći na 100° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijumsulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (700 mg, 65%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema 5-(trifluorometil)-4-[4-(trifluorometil)piperidin-1-il)piridin-2-karbonitrila.
2
Smeša 2-hloro-5-f(trifluorometil)-4-[4-(trifluorometil)piperidin-1-il]piridin (700,00 mg, 2,10 mmol,1.00 ekviv.), Pd2(dba)3.CHCl3(108,90 mg, 0,11 mmol, 0,05 ekviv.), Zn(CN)2(148,27 mg, 1,26 mmol, 0.60 ekviv.), dppf (116,65 mg, 0,21 mmol, 0,10 ekviv), Zn (13,76 mg, 0,21 mmol, 0,10 ekviv.) i DMA (5,01 ml) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 1 h na 125° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleumetrom (1/10) dajući naslovno jedinjenje (450 mg, 66%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema [5-(trifluorometil)-4-[4-(trifluorometil)piperidin-1-il]piridin-2-il]metanamin hidrohlorida
Smeša 5-(trifluorometil)-4-[4-(trifluorometil)piperidin-1-il]piridin-2-karbonitrila (120 mg, 0.37 mmol, 1.00 ekviv.), paladijuma na ugljenu (120 mg, 1.13 mmol, 3.00 ekviv.) i koncentrovanog hlorovodonika (0.1 mL) u metanolu (10 mL) mešana je 10 minuta na 25° C u vodoničnoj atmosferi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (130 mg, sirovo) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[5-(trifluorometil)-4-[4-(trifluorometil)-1-piperidil]-2-piridil]metil)pirolidin-2-karboksamida
Smeša [5-(trifluorometil)-4-[4-(trifluorometil)piperidin-1-il]piridin-2-il]metanamina (100.00 mg, 0.31 mmol, 1.00 ekviv.), (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (115.70 mg, 0.40 mmol, 1.30 ekviv.), EDCI (117.15 mg, 0.61 mmol, 2.00 ekviv.), HOBT (45.42 mg, 0.34 mmol, 1.10 ekviv.) i DIEA (78.98 mg, 0.61 mmol, 2.00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (5 mL) mešana je tokom noći na 25° C. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod (58 mg) je
2 1
prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (43,4 mg, 24%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.42 (s,1H), 8.05 - 8.00 (m, 2H), 7.40 - 7.35 (m, 3H), 5.24 - 5.18 (d, J = 18 Hz, 2H), 4.57 - 4.56 (m, 2H), 4.31 - 4.26 (m, 1H), 3.86 (s, 1H), 3.68 -3.63 (m, 3H), 3.02 (m, 2H), 2.68 - 2.12 (m, 3H), 1.97 - 1.93 (d, J = 12 Hz, 2H), 1.73 - 1.72 (m, 2H).
Primer 131: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil)-N-[[4-[5-(trifluorometil))-2-piridil]-2-piridil]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 4-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-carbonitrila
Smeša 4-hloropiridin-2-karbonitrila (5 g, 36.09 mmol, 1.00 ekviv.), 4,4,5,5-tetrametil-2-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3,2-dioksaborolana (13.8 g, 54.34 mmol, 1.50 ekviv.), KOAc (11 g, 112.08 mmol, 3.10 ekviv.) i Pd(dppf)Cl2(1.33 g, 1.82 mmol) u dioksanu (40 mL) mešana je 6 h na 100° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (16 g, sirovo) u obliku crnog ulja.
Korak br.2: Priprema 4-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-karbonitrila
Smeša 4-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-karbonitril (1,6 g, 6,95 mmol, 3,10 ekviv.), (2-bromo-5-(trifluorometil)piridin (500 mg, 2,21 mmol, 1,00 ekviv.), Pd(dppf)Cl2(170 mg, 0,23 mmol, 0,10 ekviv) i kalijum-karbonata (921 mg, 6,66 mmol, 3,00 ekviv.) u dioksanu (40 ml) / voda (2 ml) mešana je 12 h na 100° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:20) dajući naslovno jedinjenje (380 mg, 69%) u obliku bele čvrste materije.
2 2
Korak br. 3: Priprema [4-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-il]metanamin hidrohlorida
Smeša 4-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-karbonitrila (200 mg, 0.80 mmol, 1.00 ekviv.), paladijuma na ugljenu (100 mg, 0.94 mmol, 1.20 ekviv.) i koncentrovanog hlorovodonika (0.1 mL) u etanolu (10 mL) mešana je 30 minuta na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane. Filtrat je koncentrovan u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (240 mg, sirovo) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil)-N-((4-(5-(trifluorometil)-2-piridil]-2-piridil]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzene)sulfonyl]pirolidin-2-karboksilna kiselina (150,00 mg, 0,51 mmol, 1.00 ekviv.), DIEA (266,23 mg, 2,06 mmol, 4,00 ekviv.), HATU (293,72 mg, 0,77 mmol, 1,50 ekviv) i 4-[5-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-il]metanamin hidrohlorida (223,77 mg, 0,77 mmol, 1,50 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (5 ml) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etilacetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije dihlormetanom/etanolom (20:1) dajući naslovno jedinjenje (78,2 mg, 29%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.11 (s, 1H), 9.02 - 9.01 (m, 1H), 8.71 (d, J = 4.8 HZ, 1H), 8.83 - 8.22 (m, 2H), 8.09 - 7.98 (m, 4H), 7.47 - 7.43 (m, 2H), 5.21 (d, J = 52.8 Hz, 2H), 4.53 - 4.24 (m, 3H), 3.76 - 3.58 (m, 2H), 2.50 - 2.33 (m, 1H), 2.22 - 2.04 (m, 1H).
Primer 132: Priprema (2S,4R-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([3-metoksi-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-1H-pirazol-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
2
Korak br.1: Priprema 5-bromo-2-(trifluorometil)pirimidina
Smeša 5-bromo-2-jodopirimidina (10 g, 35,10 mmol, 1,00 ekviv.), trimetil(trifluorometil)silana (20 g, 140,65 mmol, 4,00 ekviv.), KF (4,1 g, 70,57 mmol, 2,00 ekviv.) i CuI (13 g, 68,26 mmol, 2,00 ekviv.) u NMP (80 mL) mešana je tokom noći na 70° C u atmosferi azota. Reakcija je ugašena pomoću 200 mL amonijum hidroksida, ekstrahovana etil-acetatom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:5) dajući naslovno jedinjenje (5,3 g, 55%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br.2: Priprema etil 3-metoksi-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-1H-pirazol-4-karboksilata
Smeša CuI (88 mg, 0,46 mmol, 0,10 ekviv.), L-prolina (108 mg, 0,94 mmol, 0,20 ekviv.), kalijum-karbonata (1,3 g, 9,41 mmol, 2,00 ekviv.), etil 3-metoksi-1H-pirazol-4-karboksilata (800 mg, 4,70 mmol, 1,00 ekviv.) i 5-bromo-2-(trifluorometil)primidin (1,28 g, 5,64 mmol, 1,20 ekviv.) u DMSO (5 mL) mešana je tokom noći na 100° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je razređena pomoću 40 ml vode, ekstrahovana etil-acetatom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:5) dajući naslovno jedinjenje (580mg, 39%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.3: Priprema [3-metoksi-1-[2-(trifluorometil) pirimidin-5-il]-1H-pirazol-4-ilkarboksilne kiseline
Smeša etil 3-metoksi-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-1H-pirazol-4-karboksilata (150 mg, 0,47 mmol, 1,0 ekviv) i LiOH (22 mg, 0,92 mmol, 2,0 ekviv) u THF (5 ml)/voda (2,0 ml) mešana je 2 h na 50° Ci razređena pomoću 30 mL vode i ekstrahovana dietil-eterom. pH vrednost rastvora je podešena na pH 2 razređenom HCl. Dobijeni rastvor je ekstrahovan
2 4
etil-acetatom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (120 mg, 88%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema [3-metoksi-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-1H-pirazol-4-karboksamida
Smeša 3-metoksi-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-1H-pirazol-4-karboksilne kiseline (400 mg, 1,39 mmol, 1,0 ekviv.), HATU (792 mg, 2,08 mmol, 1,5 ekviv.), DIEA (540 mg, 4,18 mmol, 3,0 ekviv.) i NH4Cl (110 mg, 2,06 mmol, 1,5 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (20 ml) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena pomoću 30 ml vode, ekstrahovana etil-acetatom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:3). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (300mg, 75%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.5: Priprema [3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-karbonatrila
Smeša 3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)feni]-1H-pirazol-4-karboksamida (300 mg, 1,05 mmol, 1,00 ekviv.), piridina (347 mg, 4,39 mmol, 4.00 ekviv.) i Tf2O (620 mg, 2,20 mmol, 2,00 ekviv.) u dihlorometanu (30 mL) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena pomoću 30 ml vode, ekstrahovana dihlormetanom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje 170 mg (60%) u obliku smeđe čvrste materije.
Korak br. 6: Priprema (3-metoksi-1-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)-1H-pirazol-4-il)metanamin hidrohlorida
2
U 100-mililitarsku laboratorijsku bocu s okruglim dnom (balon), prečišćenoj i održavanoj pomoću inertne atmosfere H2stavljen je 3-metoksi-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-1H-pirazol-4-karbonitril (170 mg, 0,63 mmol, 1,00 ekviv.), metanol (30 mL), hlorovodonik (0,5 mL, 13,71 mmol, 1,00 ekviv.) i paladijum na ugljenu (40 mg, 0,38 mmol, 1,00 ekviv.). Nakon 30 minuta na sobnoj temperatuti, čvrsta materija je filtrirana. Tečnost je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (120mg, 70%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br.7: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([3-metoksi-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-1H-pirazol-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (253 mg, 0,87 mmol, 1,50 ekviv.), HATU (330 mg, 0,87 mmol, 1,50 ekviv.) i DIEA (224 mg, 1,73 mmol, 3,00 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (3 mL) mešana je 15 minuta na sobnoj temperaturi, a zatim je dodat (3-metoksi-1-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)-1H-pirazol-4-il)metanamin hidrohlorid (160 mg, 0,59 mmol, 1,0 ekviv.). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi, razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog magnezijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja 20 mg (6%) u obliku bele čvrste materije
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.32 (s, 1H), 8.65 - 8.62 (m, 1H), 8.48 (s, 1H), 7.97 -7.79 (m, 2H), 7.47 - 7.42 (m, 2H), 5.24 - 5.11 (d, J = 52.4 Hz, 1H), 4.18 - 4.05 (m, 3H), 3.99 (s, 3H), 3.69 - 3.58 (m, 2H), 2.40 - 2.22 (m, 1H), 2.18 - 1.95 (m, 1H).
Primer 133: Priprema (2S,4R)-N-[[6-[4-(difluorometil)-1-biciklo[2.2.2]oktanil]pirimidin-4-il] metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema metil 4-[2-acetil-3-(tert-butoksi)-3-oksopropanoil]biciklo[2.2.2]oktan-1-karboksilata
2
PrMgBr (71 mL, 575.75 mmol, 1M u THF, 1,50 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru tert-butil 3-oksobutanoata (11,2 g, 70,80 mmol, 1,50 ekviv) u tetrahidrofuranu (150 mL) na 0°C u atmosferi azota. Nakon 2 h na 0° C hlorid (pripremljen refluksovanjem 4-(metoksikarbonil)biciklo[2.2.2]oktan-1-karboksilne kiseline (10 g, 47.12 mmol, 1.00 ekviv.) u tionil-hloridu (50 mL) tokom 3h) u 50 mL THF na 0° C. Dobijeni rastvor je mešan 12 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena zasićenim rastvorom NH4Cl, ekstrahovana etilacetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (10 g, sirovo) u obliku žutog ulja.
Korak br.2: Priprema metil 4-(3-oksbutanoil)biciklo[2.2.2]oktan-1-karboksilata
Rastvor metil 4-[2-acetil-3-(tert-butoksi)-3-oksopropanoil]biciklo[2.2.2]oktan-1-karboksilata (10 g, 28,38 mmol, 1,00 ekviv.) i 2,2,2-trifluoroacetaldehida (20 mL) u DCM (100 mL) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. pH vrednost rastvora je podešena na 8 do 9 pomoću natrijum-bikarbonata. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (4,8 g, 67%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema metil 4-(6-metilpirimidin-4-il)biciklo[2.2.2]oktan-1-karboksilata
Rastvor metil 4-(3-oksbutanoil)biciklo[2.2.2]oktan-1-karboksilata (4,8 g, 19,02 mmol, 1,00 ekviv.) u formamidu (50 mL) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 3 h na 180° C u 5 serija. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak
2
je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:20) dajući naslovno jedinjenje (1,5 g, 30%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br.4: Priprema 4-(6-metilpirimidin-4-il)biciklo[2.2.2]oktan-1-metanola
DIBAL-H (17 mL, 119,53 mmol, 1M u heksanima, 3,00 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru metil 4-(6-metilpirimidin-4-il)biciklo[2.2.2]oktan-1-karboksilata (1,5 g, 5,76 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlorometan (150 mL) na -78° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 3 h na -78°C. Reakcija je zatim prekinuta dodavanjem natrijum hidroksida. Čvrste supstance su filtrirane. Filtrat je osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (1,1 g, 82%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.5: Priprema 4-(6-metilpirimidin-4-il)biciklo[2.2.2]oktan-1-karbaldehida
Smeša [4-(6-metilpirimidin-4-il)biciklo[2.2.2]oktan-1-il]metanol (1.1 g, 4.73 mmol, 1.00 ekviv.) i DMP (2,0 g, 4,72 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlormetanu (150 ml) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Čvrste supstance su filtrirane. Dobijeni rastvor je rastvoren pomoću CH2Cl2, ispran zasićenim natrijum-bikarbonatom i slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (875 mg, 80%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br.6: Priprema 4-[4-(difluorometil)biciklo[2.2.2]oktan-1-il]-6-metilpirimidina
DAST (8,67 g, 37,86 mmol, 10,00 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru 4-(6-metilpirimidin-4-il)biciklo[2.2.2]oktan-1-karbaldehida (875 mg, 3,80 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlorometanu (200 mL) na -78° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 12 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena zasićenim natrijum-bikarbonatom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen
2
na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:4) dajući naslovno jedinjenje (750 mg, 78%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 7: Priprema 4-(bromometil)-6-[4-(difluorometil)biciklo[2.2.2]oktan-1-il]pirimidina
BPO (152 mg, 0,59 mmol, 0,20 ekviv.) dodavan je deo po deo u smešu 4-[4-(difluorometil)biciklo[2.2.2]oktan-1-il]-6-metilpirimidina (750 mg, 2,97 mmol, 1.00 ekviv.) i NBS (530 mg, 2,98 mmol, 1,00 ekviv.) u CCl4(50 mL) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je zagrevan do 80° C. Nakon 6 h na 80° C, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (750 mg, sirovo) u obliku žutog ulja.
Korak br. 8: Priprema 2-([6-[4-(difluorometil)biciklo[2.2.2]oktan-1-il]pirimidin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona
Smeša 4-(bromometil)-6-[4-(difluorometil)biciklo[2.2.2]oktan-1-il]pirimidina (550 mg, 1,66 mmol, 1,00 ekviv) i 2-kalij-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (307 mg, 1,66 mmol, 1,00 ekviv) u N, N-dimetilformamidu (5 ml) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1/1) dajući naslovno jedinjenje (180 mg) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br. 9: Priprema [6-[4-(difluorometil)biciklo[2.2.2]oktan-1-il]pirimidin-4-il]metanamina
2
Smeša 2-([6-[4-(difluorometil)biciklo[2.2.2]oktan-1-il]pirimidin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (180 mg, 0,45 mmol, 1,00 ekviv.) i hidrazin-hidrata (227 mg, 4,53 mmol, 10,00 ekviv.) u metanolu (10 mL) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u etil-acetatu. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (100 mg, 83%) u obliku žute čvrste materije koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 10: Priprema (2S,4R)-N-[[6-[4-(difluorometil)-1-biciklo[2.2.2]oktanil]pirimidin-4-il]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida
Smeša (2S,4R)-4-[fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilna kiselina (218 mg, 0,75 mmol, 2.00 ekviv), DIEA (145 mg, 1,12 mmol, 3,00 ekviv), HATU (285 mg, 0,75 mmol, 2,00 ekviv) i [6-[4-(difluorometil)biciklo[2.2.2]oktan-1-il]pirimidin-4-il]metanamina (100 mg, 0,37 mmol, 1,00 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (3 ml) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (38,7 mg, 19%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8.95 (s, 1H), 8.04 - 8.00 (m, 2H), 7.72 (s, 1H), 7.39 -7.34 (m, 2H), 5.67 - 5.29 (t, J = 56.9 Hz, 1H), 5.23 - 5.05 (d, J = 52.2 Hz, 1H), 4.59 - 4.46 (m, 2H), 4.28 - 4.25 (m, 1H), 3.84 - 3.70 (m, 2H), 2.52 - 2.11 (m, 2H), 2.04 - 1.94 (m, 6H), 1.68 - 1.63 (m, 6H).
Primer 134: Priprema (2R,3R)-4-fluoro-1-[(3-fluorobenzen)sulfonil]-N-([3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(3-fluorobenzen)-N-((3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida
2
Smeša (1S,4S)-4-[(3-fluorobenzen)sulfonil]-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (384 mg, 1,32 mmol, 1.50 ekviv), HATU (501 mg, 1,32 mmol, 1,50 ekviv), DIEA (227 mg, 1,76 mmol, 2,00 ekviv) i [3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metanamina (240 mg, 0,88 mmol, 1,00 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (20 ml) mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena vodom, ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (60,4 mg, 13%) u obliku svetložute čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.62 - 8.61 (m, 1H), 8.36 (s, 1H), 7.88 - 7.54 (m, 8H), 5.25 - 5.12 (d, J = 52.4 Hz, 1H), 4.21 - 4.05 (m, 3H), 3.96 (s, 3H), 3.76 - 3.54 (m, 2H), 2.37 - 2.29 (m, 1H), 2.15 - 1.95 (m, 1H).
Primer 135: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-[4-fluorobenzen)-N-((3methoxy-1-(4-(trifluorometil)fenil)-1H-pirazol-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 1-tert-butil 4-etil 3-hidroksi-1H-pirazol-1,4-dikarboksilata
Smeša etil 3-hidroksi-1H-pirazol-4-karbokslata (15 g, 96.07 mmol, 1.00 ekviv.), 4-dimetilaminopiridina (587 mg, 4.80 mmol, 0.05 ekviv.), trietilamina (29 g, 286.59 mmol, 3.00 ekviv.) i Boc2O (42 g, 192.4 mmol, 2.0 ekviv.) u tetrahidrofuranu (180 mL) mešana je tokom noći na sobnoj temperaturi i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:3) dajući naslovno jedinjenje (20g, 81%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 1-tert-butil 4-etil 3-metoksi-1H-pirazol-1,4-dikarboksilata
2 1
U 250-mililitarsku laboratorijsku bocu s okruglim dnom stavljen je 1-tert-butil 4-etil 3-hidroksi-1H-pirazol-1,4-dikarboksilat (1,8 g, 7,02 mmol, 1,00 ekviv.), CH3CN (60 mL, 1,14 mol, 100,00 ekviv.) i kalijum-karbonat (3,86 g, 27,93 mmol, 4,00 ekviv.). Jodometan (3,0 g, 21,14 mmol, 3,0 ekviv.) dodat je kap po kap na 0° C. Nakon 3 h na sobnoj temperatuti, čvrsta materija je filtrirana. Tečnost je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (600mg, 32%) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br.3: Priprema etil 3-metoksi-1H-pirazol-4-karboksilata
Rastvor 1-tert-butil 4-etil 3-metoksi-1H-pirazol-1,4-dikarboksilata (16 g, 59,20 mmol, 1,00 ekviv.) i zasićenog hlorovodonika u 1,4-dioksanu (200 mL) mešan je 5 h na sobnoj temperaturi i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je razblažen pomoću 10 ml vode, a pH vrednost rastvora je prilagođena na 8 pomoću razblažene HCl. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (7 g, 69%) u obliku smeđeg ulja.
Korak br. 4: Korak 1: etil 3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-karboksilat
Smeša CuI (95 mg, 0,50 mmol, 0,10 ekviv.), L-prolina (115 mg, 1,00 mmol, 0,20 ekviv.), kalijum-karbonata (1,38 g, 9,99 mmol, 2,00 ekviv.), etil 3-metoksi-1H-pirazol-4-karboksilata (850 mg, 5,00 mmol, 1,00 ekviv.) i 1-bromo-4-(trifluorometil)benzena (2,04 g, 7,50 mmol, 1,50 ekviv.) u DMSO (10 mL) mešana je tokom noći na 100° C u atmosferi azota. Reakcija je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (1,06g, 68%) u obliku bele čvrste materije.
2 2
Korak br.5: Priprema [3-metoksi-1-[4-(trifluorometil) fenil]-1H-pirazol-4-il]metanola
LiAlH4(385 mg, 10,14 mmol, 3,0 ekviv.) dodat je u serijama rastvoru etl 3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-karboksilata (1,06 g, 3,37 mmol, 1,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (20 mL) na 0° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 1,5 h na 0° C, ugašen vodom, ekstrahovan etil-acetatom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (800 mg, 87%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 6: Priprema [3-metoksi-1-[4-(trifluorometil) fenil]-1H-pirazol-4-il]karbaldehida
Rastvor [3-metoksi-1-[4-(trifluorometil) fenil]-1H-pirazol-4-il]metanola (580 mg, 2,13 mmol, 1,00 ekviv.) i PCC (916 mg, 4,25 mmol, 2.0 ekviv.) u dihlorometanu (20 mL) mešan je 3 h na sobnoj temperaturi i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:3) dajući naslovno jedinjenje (500mg, 87%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 7: Priprema (E)-N-([3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metiliden)hidroksilamina
Smeša 3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)feni]-1H-pirazol-4-karbaldehida (500 mg, 1,85 mmol, 1,00 ekviv.), hidroksilamin-hidrohlorida (383 mg, 5.51 mmol, 3.00 ekviv.) i natrijumacetata (759 mg, 9.25 mmol, 5.00 ekviv.) u etanolu (20 mL) mešana je 40 minuta na sobnoj temperaturi i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je razređen vodom, ekstrahovan etilacetatom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (520 mg, 99%) u obliku žute čvrste materije.
2
Korak br. 8: Priprema [3-metoksi-1-[4-(trifluorometil) fenil]-1H-pirazol-4-il]metanamina
U 250-mililitarsku laboratorijsku bocu s okruglim dnom, prečišćenoj i održavanoj pomoću atmosfere H2stavljen je Ranei nikl (50 mg, 0,58 mmol, 1,00 ekviv.), metanol (10 mL) i (E)-N-([3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metiliden)hidroksilamin (520 mg, 1,82 mmol, 1,00 ekviv.). Nakon 30 minuta na sobnoj temperatuti, čvrsta materija je filtrirana. Tečnost je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (480 mg) u obliku zelenkaste čvrste materije.
Korak br.9: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([3-metoksi-1-[4-(trifluorometill)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (384 mg, 1,32 mmol, 1,50 ekviv), HATU (501 mg, 1,32 mmol, 1,50 ekviv), DIEA (227 mg, 1,76 mmol, 2,00 ekviv.) i [3-metoksi-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metanamina (240 mg, 0,88 mmol, 1,00 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (20 ml) mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je razređena pomoću 20 ml vode, ekstrahovana etil-acetatom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:6). Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (53,8 mg, 11%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.61 - 8.58 (m, 1H), 8.35 (s, 1H), 7.98 - 7.94 (m, 2H), 7.87 - 7.80 (m, 4H), 7.47 - 7.42 (m, 2H), 5.24 - 5.11 (d, J = 52.8 Hz, 1H), 4.16 - 4.05 (m, 3H), 3.96 (s, 3H), 3.68 - 3.55 (m, 2H), 2.38 - 2.28 (m, 1H), 2.15 - 1.90 (m, 1H).
Primer 136: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema tert-butil (2S,3R)-3-hidroksi-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidini-1-karboksilata.
2 4
Smeša (2S,3R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-3-hidroksipirolidin-2-karboksilna kiselina (200 mg, 0,86 mmol, 1.00 ekviv.), DMF (10 ml), HATU (493,6 mg, 1,30 mmol, 1.50 ekviv), DIEA (446,9 mg, 3.46 mmol, 4.00 ekviv) i [6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (302,3 mg, 1,04 mmol, 1,20 ekviv) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena dodatkom vode, ekstrahovana etil-acetatom. Organski slojevi su spojeni, isprani vodom i slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog natrijumsulfata i koncentrovani radi dobijanja naslovnog jedinjenja 400 mg (99%) u obliku narandžastog ulja.
Korak br. 2: Priprema tert-butil (2R,3S)-3-fluoro-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidini-1-karboksilata.
DAST (204 mg, 0,89 mmol, 3,00 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru tertbutil(2S,3R)-3-hidroksi-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilat (200 mg, 0,43 mmol, 1,00 ekviv.) u 10 ml DCM na 0° C. Dobijeni rastvor je mešan dodatnih 30 min na sobnoj temperaturi, ugašen vodom i ekstrahovan etil-acetatom. Organski slojevi su spojeni, osušeni iznad anhidrovanog natrijumsulfata i koncentrovani. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela eluiranjem pomoću dihlormetana/metanola (40:1) dajući naslovno jedinjenje 85 mg (42%) u obliku narandžaste čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema tert-butil (2R,3S)-3-fluoro-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksimid hidrohlorida.
Smeša tert-butil (2R,3S)-3-fluoro-2-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidinin-1-karboksilata (85 mg, 0,18 mmol, 1,00 ekviv.) i HCl u dioksanu (10 ml, 1mol/L) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen
2
etil-acetatom. Čvrsta materija je prikupljena filtracijom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (70 mg, 95%) u obliku narandžaste čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema (2S,4R)-3-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-(4-fluorometil)-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2R,3S)-3-fluoro-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (70 mg, 0,17 mmol, 1,00 ekviv), TEA (51,5 mg, 0,51 mmol, 3,00 ekviv.), 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorid (39,6 mg, 0,20 mmol, 1,10 ekviv.) i 4-dimetilaminopiridina (2,1 mg, 0,02 mmol, 0,10 ekviv.) u DCM (3 ml) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena dodatkom vode, ekstrahovana etil-acetatom. Organski slojevi su spojeni, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani. Ostatak je primenjen na koloni silika gela etil-acetatom/petrolej-etrom (1/1) dajući naslovno jedinjenje 40 mg (44%) u obliku svetložute čvrste materije.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.49 (s, 1H), 9.28 (s, 1H), 8.70 - 8.68 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.94 - 7.91 (m, 2H), 7.84 - 7.80 (m, 2H), 7.31 - 7.27 (t, J = 8.4 Hz, 2H), 5.38 - 5.26 (d, J = 48 Hz, 1H), 4.96 - 4.90 (m, 1H), 4.59 - 4.53 (m, 1H), 4.43 - 4.38 (d, J = 22.4 Hz, 1H), 3.86 - 3.81 (t, J = 8.8 Hz 1H), 3.34 - 3.27 (m, 1H), 2.26 - 2.03 (m, 2H).
Primer 137: Priprema (2S,4R)-N-([3-hloro-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-pirolidin-2-karboksilna kiselina (100 mg, 0,34 mmol), DMF (2 ml), DIPEA (132 mg, 1.02 mmol), HATU (194 mg, 0,51 mmol) i [3-hloro-1-[4-(trifluorometil)feniil]-1H-pirazol-4-il]metanamin (187 mg, 0,68 mmol) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je prečišćena preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (38 mg, 20%) u obliku bele čvrste materije.<1>H-NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8,45 (s, 1H), 8,00−7,79 (m, 6H), 7,42−7,31 (m, 2H), 5,14 (d, J = 52 Hz, 1H), 4,37 (s, 2H), 4,30−4,19 (m, 1H), 3,87−3,69 (m, 3H), 2,52−2,43 (m, 1H), 2,25−2,08 (m, 1H).
2
Primer 138: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[6-[4-(trifluorometil)pirimidin-5-il]pirimidin-4-il]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-metilpirolidin-2-karboksilna kiselina (125 mg, 0,41 mmol), DMF (4 ml), HATU (234 mg, 0.62 mmol), DIPEA (212 mg, 1.64 mmol) i [6-[4-(trifluorometil)fenil]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (106 mg, 0,37 mmol) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razređena vodom, ekstrahovana EtOAc, isprana slanim rastvorom, osušena iznad Na2SO4i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum etera (1:1).
Brže eluirani izomer (24,8 mg) dodeljen prema potenciji SAR kao (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-metil-N-((6-(4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamid:<1>H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.19 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.45 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 8.34 (s, 1H), 8.05 - 8.01 (m, 2H), 7.77 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.32 (t, J = 8.7 Hz, 2H), 5.30 (d, J = 51.9 Hz, 1H), 4.71 - 4.51 (m, 2H), 3.94 - 3.90 (m, 1H), 3.82 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 2.72 -2.34 (m, 2H), 1.82 (s, 3H
Primer 139: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-[[3-fluoro-5-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]fenil]metil]-4-metil-pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 3-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-karbonitrila
Smeša 3-bromo-5-fluorobenzonitrila (10 g, 50,00 mmol, 1,00 ekviv.), [6-(trifluorometil)piridin-3-il] boronske kiseline (9,6 g, 50,28 mmol, 1,00 ekviv.), kalijumkarbonata (27,6 g, 199,70 mmol, 4,00 ekviv.) i Pd(dppf)Cl2(3,67 g, 5,02 mmol, 0.10 ekviv.) u dioksanu (400 mL) / vodi (80 mL) mešana je tokom noći na 100° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je
2
prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (10:100) dajući naslovno jedinjenje (11,4 g, 86%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema [3-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metanamin hidrohlorida
Smeša 3-fluoro-5-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]benzonitrila (3 g, 11,27 mmol, 1,00 ekviv.), paladijuma na ugljenu (1 g, 9,40 mmol, 0,80 ekviv.) i koncentrovane HCl (10 mL) u metanolu (200 mL) / tetrahidrofuranu (100 mL) mešana je 1,5 h na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (4 g, sirovo) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-[[3-fluoro-5-[6-(trifluorometil)piridazin-3-il]fenil]metil]-4-metil-pirolidin-2-karboksamida.
Smeša [3-metoksi-1-[6-(trifluorometil) pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-il]metanamina (8 g, 26,09 mmol, 1,00 ekviv.), (2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline (7,6 g, 26,09 mmol, 1,00 ekviv.), HATU (34 g, 263,07 mmol, 10,10 ekviv.) i DIEA (14,8 g, 38,92 mmol, 1.50 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (300 mL) mešana je tokom noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleumetrom (30:100) dajući naslovno jedinjenje (2,7672 g, 20%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.14 (s, 1H), 8.95 - 8.91 (m, 1H), 8.43 - 8.40 (m, 1H), 8.01 - 7.95 (m, 3H), 7.66 - 7.62 (m, 2H), 7.50 - 7.43 (m, 2H), 7.32 - 7.29 (m, 1H), 5.28 -5.11 (m, 1H), 4.55 - 4.54 (m, 2H), 4.22 - 4.16 (m, 1H), 3.73 - 3.60 (m, 2H), 2.42 - 2.37 (m, 1H), 2.16 - 2.02 (m, 1H).
Primer 140: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-((5'-fluoro-6-(trifluorometil)-3,4'-bipiridin-2'-il)metil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 2-hloro-5'-fluoro-6-(trifluorometil)-3,4'-bipiridina
2
Smeša 2-hloro-5-fluoro-4-jodopiridina (2,57 g, 9,98 mmol), [6-(trifluorometil)piridin-3-il]boronska kiselina (2,00 g, 10,48 mmol), Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(407,63 mg, 0,50 mmol), natrijum-karbonata (2,12 g, 20,00 mmol) u vodi (10 ml) i toluenu (25 ml) mešana je tokom noći na 90° C u uljanoj kupki u atmosferi azota. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, razređena vodom, ekstrahovana dihlormetanom i razdvojena. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela, eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum etera (1:5) dajući naslovno jedinjenje (2,31 g,) kao bezbojno ulje.
Korak br.2: Priprema 5'-fluoro-6-(trifluorometil)-3,4'-bipiridin-2'-karbonitrila
Smeša 2-hloro-5-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridina (1 g, 3,62 mmol), Pd2(dba)3.CHCl3(187 mg, 0,18 mmol), Zn(CN)2(254 mg, 2,16 mmol), DPPF (200 mg, 0,36 mmol) i Zn (24 mg, 0,37 mmol) u DMA (10 ml) ozračena mikrotalasnim zračenjem 1 h na 125° C u atmosferi azota. Reakcija je zatim prekinuta vodom i ekstrahovana EtOAc. Organski slojevi su spojeni i isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum etera (1:5) dajući naslovno jedinjenje (860 mg) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.3: Priprema (5-fluoro-6'-(trifluorometil)-3,4'-bipiridin-4-il)metanamin.
Smeša 5-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-karbonitrila (250 mg, 0,94 mmol), Ranei nikla (100 mg, 1,17 mmol) u metanolu (10 ml) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan
2
pod sniženim pritiskom radi dobijanja sirovog naslovnog jedinjenja (250 mg) kao smeđeg ulje koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 4: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-((5'-fluoro-6-(trifluorometil)-3,4'-bipiridin-2'-il)metil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida
Smeša [5-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metanamina (141 mg, 0,52 mmol), HATU (231 mg, 0,61 mmol), DIPEA (157 mg, 1,21 mmol), (3R,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzene)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (110 mg, 0,38 mmol) u DMF (5 ml) mešana je preko noći na 25° C. Reakciona smeša je ugašena vodom, ekstrahovana CH2Cl2. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (32,4 mg) u obliku bele čvrste materije. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.41 (s, 1H), 8.72 (d, J = 9.9 Hz, 2H), 8.58 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.28 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 8.04 - 7.99 (m, 2H), 7.86 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.37 - 7.31 (m, 2H), 5.16 (d, J = 51.9 Hz, 1H), 4.74 - 4.56 (m, 2H), 4.33 - 4.27 (m, 1H), 3.86 - 3.67 (m, 2H), 2.54 - 2.52 (m, 1H), 2.30 - 2.12 (m, 1H).
Primer 141: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-((5'-fluoro-6-(trifluorometil)-2,3'-bipiridin-2'-il)metil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 5-fluoro-6'-(trifluorometil)-2,3'-bipiridin-4-karbaldehida
Smeša 2-bromo-5-fluoropiridin-4-karbaldehida (300 mg, 1,47 mmol), [6-(trifluorometil)piridin-3-il] boronske kiseline (420 mg, 2,20 mmol), Pd(dppf)Cl2. CH2Cl2(60 mg, 0.07 mmol), Cs2CO3(1.44 g, 0.09 mmol) u vodi (2mL) i 1,4-dioksanu (6 mL) mešana je tokom noći na 90° C u uljanoj kupki u atmosferi azota. Dobijena smeša je ugašena vodom (20 ml), ekstrahovana CH2Cl2(3 x) i razdvojena. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela pomoću EtOAc/petroleum etera (12:88) dajući naslovno jedinjenje (110 mg) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br.2: Priprema (5-fluoro-6'-(trifluorometil)-2,3'-bipiridin-4-il)metanamina
Smeša 5-fluoro-2-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-karbaldehid (363 mg, 1,34 mmol), NH2OH.HCl (187 mg, 2,69 mmol) u etanolu (15 ml) i vodi (3 ml) mešana je 30 minuta na 25° C. Zatim je dodata koncentrovana HCl (0,08 ml, 36%), Pd/C (300 mg, 10%), a reakciona smeša je mešana tokom 50 minuta na 25° C u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Dobijena smeša je rastvorena pomoću H2O i prilagođena na pH ∼7-8 pomoću 5 N NaHCO3, ekstrahovana pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4)i koncentrovani pod sniženim pritiskom, dajući sirovo naslovno jedinjenje (300 mg) kao svetložuto ulje koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br.3: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-((5'-fluoro-6'-(trifluorometil)-2,3'-bipiridin-4-il)metil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzene)sulfonil]pirolidin-2-karboksilna kiselina (129 mg, 0,44 mmol), HATU (169 mg, 0,44 mmol), DIPEA (143 mg, 1,11 mmol), [5-fluoro-2-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-il]metanamin (100 mg, 0,37 mmol) u DMF (2 ml) mešana je tokom noći na 25° C. Reakciona smeša je ugašena vodom, ekstrahovana dihlormetanom. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4) i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum etera (6:4). Sirovi proizvod je zatim rekristalizovan iz metanola radi dobijanja naslovnog jedinjenja (67 mg) u obliku beličaste čvrste materije. 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.08 (s, 1H), 8.61 (d, J = 3 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 6 Hz, 1H), 8.02 - 7.92 (m, 4H), 7.38 - 7.32 (m, 2H), 5.16 (d, J = 54 Hz, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.31 - 4.26 (m, 1H), 3.86 - 3.68 (m, 2H).2,54−2,52 (m, 1H), 2,32−2,06 (m, 1H).
Primer 142: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[6-[6-(trifluorometil)pirimidin-5-il]pirimidin-4-il]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 1-tert-butil 2-metil (2S)-4-metilpirolidin-1,2-dikarboksilata
1
Smeša (2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilna kiselina (2 g, 8,57 mmol), kalijum-karbonat (5,9 g, 42,69 mmol), THF (80 ml) i CH3I (6,1 g, 42,98 mmol) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela, eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum etera (1:5) dajući naslovno jedinjenje (800 mg, 38%) kao bezbojno ulje.
Korak br. 2: Priprema 1-tert-butil 2-metil (4R)-4-fluoro-2-metilpirolidin-1,2-dikarboksilata.
Rastvor od 1 M LiHMDS (4,85 ml, 4.,85 mmol) dodavan je kap po kap u smešu 1-tert-butil 2-metil (2S,4R)-4-fluoropirolidin-1,2-dikarboksilata (400 mg, 1,62 mmol) u THF (20 ml) uz mešanje na -78° C u atmosferi azota. Reakcioni rastvor je mešan 30 minuta na -78° C. Ovo je kap po kap dodavan CH3I (690 mg, 4,86 mmol) na -78° C. Reakciona smeša je mešana 12 sati na sobnoj temperaturi, ugašena vodom, ekstrahovana EtOAc, osušena iznad anhidrovanog Na2SO4 i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela, eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum etera (1:5) dajući naslovno jedinjenje (360 mg, 85%) kao bezbojno ulje.
Korak br. 3: Priprema hidrohlorida 4R-4-fluoro-2-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline
Smeša 1-tert-butil 2-metil (4R)-4-fluoro-2-metilpirolidin-1,2-dikarboksilata (360 mg, 1,38 mmol) i HCl u dioksanu (10 ml, 1mol/L) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovan pod sniženim pritiskom radi dobijanja sirovog proizvoda (315 mg) kao svetložuta čvrsta supstanca koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 4: Priprema metil (4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-metilpirolidin-2-karboksilata.
2
Smeša 4R-4-fluoro-2-metilpirolidin-2-karboksilata hidrohlorida (315 mg, 1,60 mmol), trietilamina (485 mg, 4,80 mmol), dihlorometana (20 ml) i 4-fluorobenzen-1-sulfonil hloridea (310 mg, 1,60 mmol) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je razređena dihlormetanom(100 ml), isprana slanim rastvorom (3 x 20 ml), osušena iznad Na2SO4i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela, eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum etera (1:4) dajući naslovno jedinjenje (380 mg,) kao bezbojno ulje, koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 5: Priprema metil (4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline.
Smeša metil (4R)-4-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-metilpirolidin-2-karboksilata (380 mg, 1,19 mmol), LiOH (58 mg, 2,42 mmol) u metanolu (8 ml), vodi (2 ml) mešana je na 12 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana, razređena u vodi, ekstrahovana eterom. Vodeni slojevi su acidifikovani pomoću 3 N HCl (pH 2-3), ekstrahovani EtOAc, osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4 i koncentrovani radi dobijanja naslovnog jedinjenja (260 mg, 72%) u obliku žutog ulja, koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 6: (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-metil-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamid
Smeša (4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-metilpirolidin-2-karboksilna kiselina (125 mg, 0,41 mmol), DMF (4 ml), HATU (228 mg, 0.60 mmol), DIPEA (206 mg, 1.59 mmol) i [6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (104 mg, 0,36 mmol) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena vodom, ekstrahovana EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum etera (1:1 do 2:1).
Sporije eluirani izomer (72.7 mg) dodeljen prema potenciji SAR kao (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-metil-N-((6-(6-(trifluorometil)fenil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamid: 1H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.50 (s, 1H), 9.20 (s,1H), 8.83 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.31 (s, 1H), 8.06 - 7.98 (m, 3H), 7.37 (t, J = 17.4 Hz, 2H), 5.26 (d, J = 51 Hz, 1H), 4.80 (d, J = 15 Hz, 1H), 4.54 (d, J = 17.4 Hz, 1H), 4.19 - 4.07 (m, 1H), 3.76 -3.60 (m, 1H), 2.76 - 2.64 (m, 1H), 2.33 - 2.14 (m, 1H), 1.61 (s, 3H).
Primer 143: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida
Naslovno jedinjenje je pripremljeno prema proceduri opisanoj u primeru 198, korak 1 pomoću (2S,4R)-1-(tert-butoksikarbonil)-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline i (6-(4-(trifluorometoksi)fenil)pirimidin-4-il)metanamina (u skladu s primerom 145, koraci 1, 2, 3 i standardnoj deprotonaciji soli HCl) i primeru 198, koraci 2 i 3 (107 mg): 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.25 (s, 1H), 9.11 (t, J = 5.7 Hz, 1H), 8.40 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 8.15 (s, 1H), 8.07 - 7.99 (m, 2H), 7.88 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 7.47 (t, J = 8.6 Hz, 2H), 5.21 (d, J = 52.4 Hz, 1H), 4.51 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 4.31 - 4.22 (m, 1H), 3.78 - 3.59 (m, 2H), 2.48 - 2.38 (m, 1H), 2.23 - 2.05 (m, 1H).
Primer 144: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-((5'-fluoro-6-(trifluorometil)-3,4'-bipiridin-2'-il)metil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 2-hloro-5-fluoro-4-(4-(trifluorometil)piperidin-1-il)piridina
Smeša 2-hloro-5-fluoro-4-jodopiridina (1,5 g, 5,83 mmol), 4-(trifluorometil)piperidina (890 mg, 5,81 mmol), Pd2(dba)3.CHCl3(300 mg, 0,29 mmol), BINAP (360 mg, 0,58 mmol), t-BuONa (1,4 g, 14,57 mmol) u toluenu (15 mL) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 1 h na 125° C u atmosferi azota, zatim ugašena vodom (50 ml), ekstrahovana dihlormetanom, a organski slojevi su spojeni i osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš
4
hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću etil-acetat/petroleum etera (1:5) dajući naslovno jedinjenje (960 mg) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 5-fluoro-4-(4-(trifluorometil)piperidin-1-il)pikolinonitrila
Smeša 2-hloro-5-fluoro-4-[4-(trifluorometil)piridin-3-il]piperidina (400 mg, 1,42 mmol), Pd2(dba)3.CHCl3(72 mg, 0,07 mmol), Zn(CN)2(100 mg, 0,85 mmol), DPPF (80 mg, 0,14 mmol) i Zn (8 mg, 0,12 mmol) u DMA (10 ml) ozračena mikrotalasnim zračenjem 1 h na 125° C u atmosferi azota. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću etil-acetat/petroleum etera (1:5) dajući naslovno jedinjenje (350 mg) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema (5-fluoro-4-(4-(trifluorometil)piperidin-1-il)piridin-2-il)metanamina
Smeša 5-fluoro-4-[4-(trifluorometil)piperidin-1-il]piridin-2-karbonitrila (200 mg, 0,73 mmol), 10% Pd/C (50 mg) i koncentrovane HCl (0,25 ml) u metanolu (10 ml) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom radi dobijanja sirovog naslovnog jedinjenja u obliku smeđe čvrste materije koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br.4: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-((5'-fluoro-6'-(trifluorometil)-2,3'-bipiridin-4-il)metil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-pirolidin-2-karboksilna kiselina (315 mg, 1,08 mmol), HATU (410 mg, 1,08 mmol), DIEA (0,8 ml, 4,84 mmol) i [5-fluoro-4-[4-(trifluorometil)piperidin-1-il]piridin-2-il]metanamina (250 mg, 0,90 mmol) u DMF (4 ml) mešana je tokom noći na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je prečišćena preparativnom fleš HPLC tehnikom u sledećim uslovima: kolona, X Bridge C18; mobilna faza, mobilna faza A: voda/0,05% NH4HCO3, mobilna faza B: H2O od 10% do 70% tokom 30 minuta; Detektor, UV 254 nm radi dobijanja naslovnog jedinjenja (28,2 mg) u obliku bele čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.09 (s, 1H), 8.03 - 7.99 (m, 2H), 7.39 - 7.34 (m, 2H), 7.18 - 7.16 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 5.21 - 5.07 (d, J = 52.4 Hz, 1H), 4.47 (s, 2H), 4.28 - 4.24 (m, 1H), 4.04 - 4.01 (d, J = 12.8 Hz, 2H), 3.83 - 3.70 (m, 2H), 3.00 - 2.94 (t, J = 12.8 Hz, 2H), 2.51 - 2.40 (m, 2H), 2.25 - 2.12 (m, 1H), 1.94 - 1.91 (d, J = 12.8 Hz, 2H), 1.71 - 1.65 (m, 2H).
Primer 145: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 4-hloro-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidina
Smeša 4,6-dihloropirimidina (2,17 g, 14,57 mmol), [4-(trifluorometoksi)fenil]boronska kiselina (1 g, 4,86 mmol), Pd(dppf)Cl2(731 mg, 1,00 mmol), natrijum-karbonata (5 g, 36,18 mmol), dioksana (40 ml) i vode (4 ml) mešana je 12 sati na 100° C u atmosferi azota. Smeša je razblažena EtOAc isprana slanim rastvorom, osušena i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum etera (1:50) dajući naslovno jedinjenje (1,1 g, 82%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-karbonitrila
Smeša 4-hloro-6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidina (820 mg, 2,99 mmol), Zn(CN)2(421 mg, 3,58 mmol), Pd(PPh3)4 (347 mg, 0,30 mmol), DMF (6 ml) mešana je 9 sati na 100° C u atmosferi azota. Reakcija je ohlađena, razblažena vodom (30 ml) i ekstrahovana EtOAc. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum etera (1:50) dajući naslovno jedinjenje (320 mg, 40%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema (6-(4-(trifluorometoksi)fenil)pirimidin-4-il)metanamin hidrohlorida
Smeša 6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-karbonitrila (160 mg, 0,60 mmol), etanola (10 ml), koncentrovanog rastvora HCl (0,02 ml), 10% paladijuma na ugljenu (100 mg) mešana je 10 minuta na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan radi dobijanja sirovog proizvoda (200 mg) u obliku čvrste materije koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 4: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamid
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-pirolidin-2-karboksilna kiselina (150 mg, 0,51 mmol), DMF (2 ml), DIPEA (263 mg, 2.03 mmol), HATU (294 mg, 0,77 mmol) i [6-[4-(trifluorometoksi)fenil]pirimidin-4-il]metanamin (200 mg, 0,74 mmol) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (51 mg, 13%) u obliku bele čvrste materije.<1>H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.15 (s, 1H), 8.41 (d, J = 8.7 Hz, 6H), 8.25 (s, 1H), 8.08 - 8.03 (m, 2H), 7.40 - 7.34 (m, 4H), 5.17 (d, J = 51.6 Hz, 1H), 4.63 (d, J = 4.8 Hz, 2H), 4.37 - 4.31 (m, 1H), 3.88 - 3.75 (m, 2H), 2.61 - 2.48 (m, 1H), 2.35 - 2.11 (m, 1H).
Primer 146: Priprema (2S,4R)-N-([3-hloro-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilna kiselina (48 mg, 0,16 mmol), DIPEA (63 mg, 0,49 mmol), DMF (3 ml), HATU (94 mg, 0,25 mmol) i [3-hloro-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metanamin (46 mg, 0,17 mmol) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je prečišćena preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (40 mg, 44%) u obliku bele čvrste materije.<1>H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.16 (s, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.33 - 8.37 (m, 1H), 7.94 - 8.02 (m, 3H), 7.32 - 7.38 (m, 2H), 5.15 (d, J = 52.5 Hz, 1H), 4.39 (s, 2H), 4.25 - 4.19 (m, 1H), 3.85 -3.67 (m, 2H), 2.53 - 2.42 (m, 1H), 2.29 - 2.10 (m, 1H).
Primer 147: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(4-(trifluorometil)fenil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-pirolidin-2-karboksilna kiselina (102 mg, 0,35 mmol), DMF (5 ml), DIPEA (136 mg, 1,05 mmol), HATU (200 mg, 0,53 mmol) i (6-[4-[(trifluorometil)sulfanil]fenil]pirimidin-4-il)metanamina (100 mg, 0,35 mmol) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (75,4 mg, 39%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300MHz, CD3OD) δ 9.16 (s, 1H), 8.39 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 8.27 (s, 1H), 8.07 - 8.01 (m, 2H), 7.79 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.38 - 7.32 (m, 2H), 5.16 (d, J = 51.9 Hz, 1H), 4.63 (d, J = 4.2 Hz, 2H), 4.32 (dd, J = 10.2, 7.2 Hz, 1H), 3.87 - 3.9 (m, 2H), 2.57 - 2.15 (m, 2H).
Primer 148: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(4-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema [6-[4-(trifluorometil)cikloheks-1-en-1-il]pirimidin-4-il]metanola
NaBH4(76 mg, 2,01 mmol) dodat je deo po deo rastvoru etil 6-[4-(trifluorometil)cikloheks-1-en-1-il]pirimidin-4-karboksilata (300 mg, 1,00 mmol) u metanolu (10 ml) uz mešanje. Dobijena smeša je mešana 2 h na 25° C i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum etera (1:1) dajući naslovno jedinjenje (254 mg) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema 2-([6-[4-(trifluorometil)cikloheks-1-en-1-il]pirimidin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona.
DIAD (235 mg, 1,16 mmol) dodat je kap po kap rastvoru [6-[4-(trifluorometil)cikloheks-1-en-1-il]pirimidin-4-il]metanola (150 mg, 0,58 mmol), 2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (94 mg, 0,64 mmol), PPh3(305 mg, 1,16 mmol) u THF (10 ml) na 0° C uz mešanje. Dobijeni rastvor je mešan 2 h na sobnoj temperaturi, ugašena vodom i ekstrahovana dihlormetanom. Organski slojevi su spojeni i isprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum etera (1:1) dajući naslovno jedinjenje (425 mg) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema [6-[4-(trifluorometil)cikloheks-1-en-1-il]pirimidin-4-il]metanamina
Smeša 2-([6-[4-(trifluorometil)cikloheks-1-en-1-il]pirimidin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (425 mg, 1,10 mmol), hidrazin-hidrata (80%) (0,5 ml) u metanolu (10 ml) mešana je 3 h na 25° C i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u EtOAc, a Čvrste supstance su filtrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom radi dobijanja sirovog naslovnog jedinjenja (210 mg) kao bela čvrsta supstanca koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 4: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(4-(trifluorometil)cikloheks-1-enil)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša [6-[4-(trifluorometil) cikloheks-1-en-1-il]pirimidin-4-il]metanamin (284 mg, 1,10 mmol), HATU (465,8 mg, 1,23 mmol), DIPEA (317 mg, 2,45 mmol) u DMF (5 ml) mešana 10 minuta na 25° C. Zatim je (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilna kiselina (210 mg, 0,72 mmol) dodata, a dobijen smeša je mešana tokom noći na 25° C. Reakciona smeša je zatim ugašena vodom (10 ml) i ekstrahovana dihlormetanom (3 x 10 ml). Reakciona smeša je zatim ugašena vodom i ekstrahovana dihlormetanom. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (2 x 10 ml), osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod (120 mg) je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (25,8 mg) u obliku bele čvrste materije.<1>H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8.99 (s, 1H), 8.04 (q, J = 6 Hz, 2H), 7.84 (s, 1H), 7.38 (t, J = 9 Hz, 2H), 7.15 (s, 1H), 5.16 (d, J = 51 Hz, 1H), 4.88 - 4.86 (d, J = 6 Hz, 2H), 4.31 (t, J = 9 Hz, 1H), 3.86 - 3.72 (m, 2H), 2.84 (m, 1H), 2.59 - 2.47 (m, 4H), 2.32 - 2.14 (m, 3H), 1.67 - 1.61 (m, 1H).
Primer 149: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(-4-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[4-(trifluorometil)cikloheks-1-en-1-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida (180 mg, 0,34 mmol), 10% Pd(OH)2/C (30 mg) u metanolu (20 ml) mešana je tokom 15 minuta na 25° C u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak (260 mg) je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja smeše cis/trans izomera (120 mg). Izomeri su razdvojeni preparativnom hiralnom HPLC pomoću elucije Hex i IPA (sadrži 30,0% IPA u 20 min). Brže eluirani izomer (33,6 mg) proizvoljno dodeljen kao transizomer (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[(1r,4S)-4-(trifluorometil)cikloheksil]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida:<1>H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 8.97 (s, 1H), 8.04 (q, J = 6 Hz, 2H), 7.71 (s, 1H), 7.37 (t, J = 9 Hz, 2H), 5.16 (d, J = 54 Hz, 1H), 4.54 (s, 2H), 4.32 (t, J = 9 Hz, 1H), 3.86 - 3.72 (m, 2H), 2.72 (t, J = 3 Hz, 1H), 2.51 (m, 1H), 2.27 - 2.04 (m, 6H), 1.74 - 1.53 (m, 2H), 1.50 - 1.44 (m, 2H).
Sporije eluirani izomer (18 mg) proizvoljno dodeljen kao cisizomer (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[(1s,4R)-4-(trifluorometil)cikloheksil]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida:<1>H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.02 (s, 1H), 8.01 (q, J = 6 Hz, 2H), 7.74 (s, 1H), 7.36 (t, J = 9 Hz, 2H), 5.15 (d, J = 54 Hz, 1H), 4.56 (d, J = 3 Hz, 2H), 4.27 (t, J = 9 Hz, 1H), 3.86 - 3.72 (m, 2H), 3.03 - 3.00 (m, 1H), 2.53 - 2.51 (m, 1H), 2.35 -2.06 (m, 5H), 1.88 - 1.61 (m, 6H).
Primer 150: Priprema (S)-1-(3,4-fluorofenilsulfonil)-4-metil-N-((6-(4-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
1
Naslovno jedinjenje je pripremljeno prema proceduri opisanoj u primeru 198, korak br.1 pomoću (2S,4R)-1-(tert-butoksikarbonil)-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline i (6-(4-(trifluorometil)feniil)pirimidin-4-il)metanamina i prema primeru 2, korak br.198 i 3 pomoću 3,4-difluorobenzen-1-sulfonil-hlorid u obliku bele čvrste materije.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.29 (s, 1H), 8.33 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 8.08 (s, 1H), 7.82 - 7.61 (m, 5H), 7.41 - 7.33 (m, 1H), 5.11 (d, J = 51.9 Hz, 1H), 4.95 - 4.88 (m, 1H), 4.71 - 4.65 (m, 1H), 4.33 (dd, J = 7.4Hz, J = 9.9 Hz, 1H), 3.94 - 3.69 (m, 2H), 2.67 - 2.53 (m, 1H), 2.40 - 2.23 (m, 1H).
Primer 151: Priprema (2S,4R)-N-([3-ciklopropil-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 2-(ciklopropankarbonil)-3-etoksiprop-2-enenitrila
Smeša 3-ciklopropil-3-oksopropanenitril (5,5 g, 50,40 mmol), (dietoksimetoksi)etana (74,7 g, 504,05 mmol), nhidrid sirćetne kiseline (60 ml, 634,74 mmol) mešana je 2 h na 150° C. Smeša je ohlađena, koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je zatim rekristalizovan iz etanola radi dobijanja naslovnog jedinjenja (6 g, 72%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 3-ciklopropil-1H-pirazol-4-karbonitrila
Smeša 2-(ciklopropankarbonil)-3-etoksiprop-2-enenitrila (2 g, 12,11 mmol), hidrazinhidrata (85%) (6,1 g, 121,85 mmol) i etanola (20 ml) je mešana 10 min na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je zatim rekristalizovan iz toluena radi dobijanja naslovnog jedinjenja (1 g, 62%) u obliku žute čvrste materije.
11
Korak br. 3: Priprema 3-ciklopropil-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-karbonitrila
Smeša 3-ciklopropil-1H-pirazol-4-karbonitrila (1 g, 7,51 mmol), 5-bromo-2-(trifluorometil)piridin (2,88 g, 12,74 mmol), CuI (143 mg, 0,75 mmol), L-proline (173 mg, 1,50 mmol), kalijum-karbonata (2,28 g, 16,50 mmol) i DMSO (50 ml) mešana je 12 h na 100° C u atmosferi azota. Smeša je ohlađena, razređena EtOAc, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog Na2SO4 i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum etera (50/1) dajući naslovno jedinjenje (1,1 g, 53%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema [3-ciklopropil-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol--4-il]metanamina
Smeša 3-ciklopropil-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-karbonitrila (1 g, 3,59 mmol), metanola (50 ml) i Ranei nikla (500 mg, 5,84 mmol) mešana je 15 minuta na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (900 mg) u obliku bele čvrste materije koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br.5: Priprema (2S,4R)-N-([3-ciklopropil-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-pirolidin-2-karboksilna kiselina (80 mg, 0,27 mmol), DMF (5 ml), DIPEA (106,8 mg, 0,83 mmol), HATU (156,6 mg, 0,41 mmol) i (3-[6-[(trifluorometil)sulfanil]fenil]pirimidin-4-il)metanamina (77,55 mg, 0,27 mmol) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (50 mg, 33%) u obliku bele čvrste materije.<1>H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9,14 (s, 1H), 8,66 (s, 1H), 8,49 (s, 1H), 8,32 (d, J
12
= 7,8 Hz, 1H), 8,02−7,96 (m, 3H), 7,74 (m, 1H), 5,27−5,10 (m, 1H), 4,33−4,30 (m, 2H), 4,19−4,14 (m, 1H), 3,71−3,67 (m, 1H), 3,62−3,58 (m, 1H), 2,51 (m, 1H), 2,42−2,29 (m, 1H), 2,18−1,94 (m, 1H), 0,96−0,90 (m, 4H).
Primer 152: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((2-metil-6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 4-hloro-2-metil-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidina
Smeša 4,6-dihloro-2-metilpirimidin (1 g, 6,13 mmol), [6-(trifluorometil)piridin-3-il]boronske kiseline (229 mg, 1,20 mmol), kalijum-karbonata (2,07 g, 14,98 mmol), dioksana (50 ml), vode (2 ml) i Pd(dppf)Cl2(320 mg, 0,44 mmol) ozračena mikrotalasnim zračenjem 3 h na 100° C u atmosferi azota. Smeša je razređena EtOAc (150 ml), isprana slanim rastvorom (3 x 50 ml), osušena iznad Na2SO4i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum etera (1:10) dajući naslovno jedinjenje (1,1 g, 66%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 2-metil-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-karbonitrila
Smeša 4-hloro-2-metil-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin (300 mg, 1,10 mmol), DMF (5 ml), Zn(CN)2(128,7 mg, 1,10 mmol), dppf (60,9 mg, 0,11 mmol) i Pd2(dba)3CHCl3 (113,9 mg, 0,11 mmol) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 3 h na 120° C u atmosferi azota. Smeša je razređena EtOAc (100 ml), isprana slanim rastvorom (3 x), osušena iznad Na2SO4i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem pomoću EtOAc/petroleum etera (1:10) dajući naslovno jedinjenje (250 mg, 86%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema [2-metil-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin-hlorovodonika
1
Smeša 2-metil-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-karbonitrila (250 mg, 0,94 mmol), etanola (20 ml), koncentrovanog rastvora HCl (0,2 ml), 10% paladijuma na ugljenu (200 mg) mešana je 5 minuta na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan radi dobijanja sirovog proizvoda (200 mg) u obliku crne čvrste materije koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 4: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((2-metil-6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-pirolidin-2-karboksilna kiselina (107,7 mg, 0,37 mmol), DMF (5 ml), DIPEA (144,4 mg, 1,12 mmol), HATU (212,8 mg, 0,56 mmol) i [2-metil-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin-hlorovodonika (112 mg, 0,37 mmol) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (32,9 mg, 16%) u obliku bele čvrste materije.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.46 (s, 1H), 8.69 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.94 - 7.91 (m, 3H), 7.89 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H), 7.28 - 7.23 (m, 1H), 5.09 (d, J = 52.2 Hz, 1H), 4.94 - 4.89 (m, 1H), 4.50 - 4.45 (m, 1H), 4.37 - 4.31 (m, 1H), 3.96 - 3.62 (m, 2H), 2.83 (s, 3H), 2.64 - 2.54 (m, 1H), 2.34 - 1.52 (m, 1H).
Primer 153: Priprema (2S,4R)-N-([3-ciklopropil-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema etil 3-metoksi-1-[6-(trifluorometil)pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-karboksilata
Smeša CuI (122,93 mg, 0,65 mmol, 0,10 ekviv.), L-prolina (148,8 mg, 1,29 mmol, 0,20 ekviv.), kalijum-karbonata (1,786 g, 12,92 mmol, 2,00 ekviv.), etil 3-metoksi-1H-
14
pirazol-4-karboksilata (1,1 g, 6,46 mmol, 1,00 ekviv.) i 5-bromo-2-(trifluorometil)piridin (2,185 g, 9,67 mmol, 1,50 ekviv.) u DMSO (60 mL) mešana je tokom noći na 100° C u atmosferi azota. Reakcioni rastvor je razblažen vodom i ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela etilacetatom/petroleum-etrom (1:6) dajući naslovno jedinjenje (790 mg, 39%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema [3-metoksi-1-[6-(trifluorometil) piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metanola
LiAlH4(190,61 mg, 5,02 mmol, 1,50 ekviv.) dodat je u nekoliko serija rastvoru etil 3-metoksi-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-karboksilata (790 mg, 2,51 mmol, 1,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (10 mL) na 0° C. Dobijeni rastvor je mešan 30 minuta na 0° C. Reakcija je zatim ugašena vodom, a čvrsta materija je filtrirana. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, a organski slojevi su spojeni. Organski su isprani slanim rastvorom, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:12) dajući naslovno jedinjenje (462 mg, 67%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema [3-metoksi-1-[6-(trifluorometil) piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metanola
Smeša etil 2-azabiciklo[3.6]hept-5-ene-3-karboksilata (5 g, 29,90 mmol, 1,00 ekviv), Cbz-Cl (460 mg, 1,68 mmol, 1,00 ekviv) i TEA (714,43 mg, 3,31 mmol, 2,00 ekviv) u dihlormetanu (30 ml) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:12) dajući naslovno jedinjenje (283 mg, 62%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema [3-metoksi-1-[6-(trifluorometil) piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metanamina
1
Smeša 3-metoksi-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-karbaldehida (450 mg, 1,66 mmol, 1,00 ekviv.), etanola (20 mL), vode (1 mL) i hidroksilamin-hidrohlorida (229,15 mg, 3,30 mmol, 2,00 ekviv.) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Zatim je laboratorijska boca prečišćena i održavana pomoću atmosfere H2(g). Koncentrovani hlorovodonik (0,1 mL) i Pd/C (300 mg, 10%) dodat je u gorepomenutu smešu. Dobijeni rastvor je mešan 15 min na sobnoj temperaturi. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni rastvor je razređen vodom. pH vrednost rastvora je podešena na 8 pomoću natrijum-bikarbonata. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (280 mg, 62%) u obliku sive čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema (2S,4R)-N-([3-ciklopropil-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4S)-4-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (64,13 mg, 0,22 mmol, 1.20 ekviv), HATU (104,89 mg, 0,28 mmol, 1,50 ekviv), DIEA (71,21 mg, 0,55 mmol, 3,00 ekviv) i 3-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-ilmetanamin hidrohlorida (50 mg, 0,18 mmol, 1,00 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (4 ml) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena vodom. Čvrsta materija je prikupljena filtracijom. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (41,5 mg, 41%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.57 - 8.51 (m, 2H), 8.02 - 7.88 (m, 6H), 7.47 - 7.41 (t, 2H), 4.42 - 4.36 (m, 1H), 4.15 - 4.05 (m, 5H), 3.57 - 3.51 (t, 1H), 3.42 - 3.35 (m, 1H).
Primer 154: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: (2S,4R)-tert-butil 4-fluoro-2-(((6-metil-4-(6-(trifluorometil)pirimidin-5-il)piridin-2-il)metil)karbamoil)pirolidin-1-karboksilat
1
(2S,4R)-tert-butil 4-fluoro-2-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metilkarbamoil)pirolidin-1-karboksilat je pripremljen prema proceduri opisanoj u primeru 2, korak br. 1, pomoću (2S, 4R)-1-(tert-butoksikarbonil)-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline.
Korak br. 2: Priprema-4-metil-2-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metilkarbamoil)azetidinijum-hlorid.
(2S,4R)-4-fluoro-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamid je pripremljen prema proceduri opisanoj u primeru 2, korak br.198.
Korak br. 3: (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamid
Naslovno jedinjenje je pripremljeno prema proceduri opisanoj u primeru 198, korak br. 3 (29 mg):<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.48 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 9.30 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 9.11 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 8.79 (dd, J = 8.3 Hz, J = 1.7 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H), 8.08 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.05 - 7.98 (m, 2H), 7.47 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 5.21 (d, J = 52.4 Hz, 1H), 4.53 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 4.25 (dd, J = 9.8, 7.2 Hz, 1H), 3.79 - 3.60 (m, 2H), 2.46 - 2.37 (m, 1H), 2.25 -2.04 (m, 1H).
Primer 155: Priprema (2S,4R)-N-((6-(4-ciklopropilfenil)pirimidin-4-il)metil)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksilne kiseline (155,2 mg, 0,53 mmol), HATU (253,3 mg, 0,67 mmol), DIPEA (172 mg, 1,33 mmol), [6-(4-
1
ciklopropilfenil)pirimidin-4-il]metanamina (100 mg, 0,44 mmol) u DMF (5 mL) mešana je tokom noći na 25° C. Reakciona smeša je ugašena vodom (20 ml), ekstrahovana CH2Cl2(3 x) i razdvojena. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 ml), osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (36,4 mg) u obliku bele čvrste materije.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 8.94 (s, 1H), 8.04 (d, J = 8 Hz, 3H), 7.94 -7.90 (m, 2H), 7.26 - 7.21 (m, 2H), 7.05 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 5.06 (d, J = 52 Hz, 1H), 4.48 (dd, J = 17.6Hz, J = 8.8 Hz, 2H), 4.23 - 4.18 (m, 1H), 3.76 - 3.63 (m, 2H), 2.43 - 2.39 (m, 1H), 2.17 - 2.04 (m, 1H), 1.86 - 1.81 (m, 1H), 0.92 - 0.90 (m, 2H), 0.65 - 0.63 (m, 2H).
Primer 156: Priprema (2S,4R)-1-fluoro-1-(3,4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Naslovno jedinjenje je pripremljeno prema proceduri opisanoj u primeru 198, korak br.1 pomoću (2S,4R)-1-(tert-butoksikarbonil)-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline i (6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metanamina i prema primeru 2, korak br. 198 i primer 2, korak br. 3 pomoću 3,4-difluorobenzen-1-sulfonil-hlorid u obliku svetložute čvrste materije.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.52 (s, 1H), 9.28 (s, 1H), 8.70 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 8.09 (s, 1H), 7.83 - 7.68 (m, 3H), 7.61 - 7.58 (m, 1H), 7.42 - 7.33 (m, 1H), 5.11 (d, J = 51.6 Hz, 1H), 4.99 - 4.92 (m, 1H), 4.62 - 4.55 (m, 1H), 4.35 (t, J = 9 Hz, 1H), 3.95 - 3.64 (m, 2H), 2.65 - 2.57 (m, 1H), 2.37 - 2.02 (m, 1H).
Primer 157: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-2-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 55.
1
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.52 - 9.47 (s, 2H), 9.15 - 9.06 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.77 - 8.71 (dd, J = 4.8, 1.2 Hz, 1H), 8.05 - 7.96 (m, 2H), 7.90 - 7.83 (m, 2H), 7.54 - 7.45 (m, 2H), 5.30 - 5.12 (m, 1H), 4.64 - 4.46 (m, 2H), 4.46 - 4.37 (m, 1H), 3.71 - 3.62 (ddd, J = 9.8, 5.6, 2.1 Hz, 1H), 3.21 - 3.12 (m, 1H), 2.29 - 2.05 (m, 2H)., LCMS (ESI) m/z:528.2 [M+H]+ Primer 158: Priprema (2S, 4R)-N-[[2-hloro-6-[2-(trifluorometil) pirimidin-5-il]-4-piridil]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin;-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 48.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.39 - 9.36 (s, 2H), 9.00 - 8.92 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 8.02 - 7.94 (m, 3H), 7.90 - 7.85 (dd, J = 8.3, 2.3 Hz, 1H), 7.72 - 7.68 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.49 - 7.40 (m, 2H), 5.29 - 5.09 (d, J = 52.2 Hz, 1H), 4.51 - 4.46 (d, J = 5.9 Hz, 2H), 4.27 - 4.19 (dd, J = 10.0, 7.1 Hz, 1H), 3.73 - 3.56 (m, 2H), 2.46 - 2.35 (m, 1H), 2.21 - 2.00 (m, 1H)., LCMS (ESI) m/z:561.2 [M+H]+
Primer 159: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[2-[4-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-4-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 48.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.98 - 8.91 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.64 - 8.59 (dd, J = 5.0, 0.8 Hz, 1H), 8.25 - 8.19 (m, 2H), 8.03 - 7.96 (m, 2H), 7.96 - 7.93 (dd, J = 1.6, 0.9 Hz, 1H), 7.52 - 7.41 (m, 5H), 7.36 - 7.31 (dd, J = 5.0, 1.5 Hz, 1H), 5.31 - 5.11 (d, J = 52.3 Hz, 1H), 4.55 - 4.37 (m, 2H), 4.25 - 4.16 (dd, J = 9.9, 7.1 Hz, 1H), 3.76 - 3.57 (m, 2H), 2.47 - 2.35 (m, 1H), 2.21 - 2.00 (m, 1H)., LCMS (ESI) m/z:542.2 [M+H]+
Primer 160: (2S, 4R)-N-[[2-[4-(difluorometoksi) fenil]-4-piridil] metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin-2-karboksamida.
1
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 48.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.99 - 8.88 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.62 - 8.56 (dd, J = 5.0, 0.7 Hz, 1H), 8.20 - 8.12 (m, 2H), 8.04 - 7.96 (m, 2H), 7.94 - 7.89 (dd, J = 1.6, 0.8 Hz, 1H), 7.53 - 7.45 (m, 2H), 7.45 - 7.13 (m, 1H), 7.31 - 7.22 (m, 3H), 5.31 - 5.10 (m, 1H), 4.53 - 4.36 (m, 2H), 4.26 - 4.16 (dd, J = 9.9, 7.1 Hz, 1H), 3.78 - 3.58 (m, 2H), 2.47 - 2.35 (m, 1H), 2.20 -1.98 (dddd, J = 42.5, 13.7, 9.9, 3.4 Hz, 1H)., LCMS (ESI) m/z:524.2 [M+H]+
Primer 161: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-(2-fluoro-5-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)benzil)-1-((4-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Prati iste procedure primera 163, korak 2: Naslovno jedinjenje (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[2-fluoro-5-[6-(trifluorometil)-3-piridil] fenil] metil] pirolidin-2-karboksamid (39 mg, 60%) pripremljeno je od (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[2-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil]metil]pirolidin-2-karboksamida 1 (62 mg, 0,12 mmol), 2-bromo-5-(trifluorometil)piridina (37 mg, 0,17 mmol), cezijumkarbonata 1 M u vodi (0,16 mL, 0,16 mmol), Pd(amphos)Cl2(7 mg, 0,009 mmol) u acetonitrilu (1 mL). LC/MS (ESI+): m/z 544.2 (M+H).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.08 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.89 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 8.44 - 8.20 (m, 1H), 8.07 - 7.93 (m, 2H), 7.93 - 7.72 (m, 2H), 7.56 - 7.29 (m, 3H), 5.12 (t, J = 2.7 Hz, 1H), 4.46 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 4.21 (dd, J = 9.9, 7.1 Hz, 1H), 3.79 - 3.50 (m, 2H), 2.47 - 2.29 (m, 1H), 2.08 (dddd, J = 42.5, 13.8, 9.9, 3.4 Hz, 1H).
Primer 162: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-(2-fluoro-5-(5-(trifluorometil)piridin-2-il)benzil)-1-((4-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
2
Prati iste procedure primera 163, korak 2: Naslovno jedinjenje (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[2-fluoro-5-[5-(trifluorometil)-2-piridil] fenil] metil] pirolidin-2-karboksamid (15 mg, 14%) pripremljeno je od (2S)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[2-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil]metil]pirolidin-2-karboksamida 1 (108 mg, 0,21 mmol), 2-hloro-5-(trifluorometil)piridina (52 mg, 0,29 mmol), cezijumkarbonata 1 M u vodi (0,6 mL, 0,6 mmol), Pd(amphos)Cl2(11 mg, 0,016 mmol) u acetonitrilu (1 mL). LC/MS (ESI+): m/z 544.2 (M+H).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.02 (dq, J = 2.5, 1.0 Hz, 1H), 8.87 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 8.28 - 8.11 (m, 3H), 8.01 - 7.92 (m, 2H), 7.48 - 7.41 (m, 2H), 7.38 (dd, J = 9.8, 8.6 Hz, 1H), 5.37 - 5.04 (m, 1H), 4.55 - 4.37 (m, 2H), 4.30 - 4.13 (m, 1H), 3.81 - 3.49 (m, 2H), 2.46 -2.28 (m, 1H), 2.08 (dddd, J = 42.1, 13.8, 9.8, 3.7 Hz, 1H).
Primer 163: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-(2-fluoro-5-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)benzil)-1-((4-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[2-fluoro-5-[4,4-(trifluorometil) pirazin-2-il] fenil] metil] pirolidin-2-karboksamid (2)
U vatrostalnu bočicu dodato je (2S,4R)-N-[(5-bromo-2-fluoro-fenil)metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin;-2-karboksamida 1 (pripremljen prateći istu proceduru iz primera 177, koraci 1–3) (1,2 g, 2,5 mmol), Pd(dppf)Cl2(210 mg, 0,25 mmol),
21
bis(pinakolato)diborona (960 mg, 3,8 mmol), kalijum-acetata (740 mg, 7,5 mmol) i dioksana (5 mL). Reakciona smeša je prečišćena gasovitim azotom 3 minuta, a zatim zagrevana na na 85° C 16 sati mikrotalasima. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, dobijena smeša je razblažena pomoću DCM, filtrirana kroz tanak sloj celita i koncentrovana pod sniženim pritiskom radi dobijanja sirovog proizvoda 2 (1,3, 100%).
LC/MS (ESI+): m/z 525.5 (M+H).
Korak br. 2: (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[2-fluoro-5-[6-(trifluorometil) piridazin-3-il] fenil] metil] pirolidin-2-karboksamid
U vatrostalnu bočicu dodato je (2S)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[2-fluoro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil]metil]pirolidin-2-karboksamida 2 (108 mg, 0,2059 mmol), 3-hloro-6-(trifluorometil)piridazina (52,63 mg, 0,2883 mmol), cezijumkarbonata 1 M u vodi (0,6 mL, 0,6 mmol), acetonitrila (0,8 mL) i Pd(amphos)Cl2(11,67 mg, 0,016 mmol), a reakciona smeša je prečišćena gasovitim azotom 3 minuta, a zatim zagrevana na 140° C 30 minuta mikrotalasima. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, dobijena smeša je filtrirana kroz tanak sloj celita, isprana vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen reverznom faznom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (39 mg, 25%) u obliku bele čvrste materije.
LC/MS (ESI+): m/z 545.2 (M+H).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.89 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 8.49 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 8.33 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 8.26 (ddd, J = 10.6, 5.8, 2.5 Hz, 2H), 8.04 - 7.89 (m, 2H), 7.56 - 7.32 (m, 3H), 5.35 - 5.02 (m, 1H), 4.62 - 4.36 (m, 2H), 4.21 (dd, J = 9.8, 7.2 Hz, 1H), 3.82 - 3.64 (m, 1H), 3.58 (dd, J = 13.4, 2.7 Hz, 1H), 2.39 (dt, J = 17.5, 8.8 Hz, 1H), 2.08 (dddd, J = 42.0, 13.8, 9.7, 3.5 Hz, 1H).
Primer 164: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-(2-fluoro-5-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)benzil)-4-((4-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
22
2-(aminometil)-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]benzamid 1 pripremljen je prateći istu proceduru iz primera 176, koraci 1–5.
Prati iste procedure primera 176, korak 6: (2S,4R)-tert-butil 2-(2-karbamoil-5-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)benzilkarbamoil)-4-fluoropirolidin-1-karboksilat 2 (387 mg, 75%) pripremljen je od (2S,4R)-1-tert-butoksikarbonil-4-fluoro-pirolidin-2-karboksilne kiseline (259,9 mg, 1,11 mmol) i 2-(aminometil)-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]benzamida 1 (300 mg, 1,01 mmol), DIPEA (0,530 mL, 3,04 mmol), HATU (471.6 mg, 1.2 mmol) u DMF (4mL). LC/MS (ESI+): m/z 512.5 (M+H).
Prati iste procedure primera 176, korak 7: (2S,4R)-N-[[2-karbamoil-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamid 3 (180 mg, 52%) pripremljen je od (2S,4R)-tert-butil 2-(2-karbamoil-5-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)benzilkarbamoil)-4-fluoropirolidin-1-karboksilata 2 (387 mg, 0,76 mmol), 4 N HCl u dioksanu (1,9 mL, 7,6 mmol) praćeno reakcijom Et3N (1,7 mL, 12,15 mmol), 4-fluorobenzensulfonil-hlorida (142 mg, 0.73 mmol) u DCM (1 mL).
LC/MS (ESI+): m/z 570.5 (M+H).
Prati iste procedure primera 176, korak 8: Naslovno jedinjenje (129 mg, 78%) pripremljeno je od (2S,4R)-N-[[2-karbamoil-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida 3 (180 mg, 0,3 mmol), anhidrida trifluorosirćetne kiseline (0,08 mL, 0,6 mmol), Et3N (0,04 mL, 0,32mmol) u DCM (5 mL). LC/MS (ESI+): m/z 552.5 (M+H).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.43 (s, 2H), 9.09 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 8.11 - 8.05 (m, 2H), 8.03 (dd, J = 8.0, 1.9 Hz, 1H), 8.01 - 7.94 (m, 2H), 7.57 - 7.31 (m, 2H), 5.34 - 5.07 (m, 1H), 4.69 - 4.52 (m, 2H), 4.20 (dd, J = 10.0, 7.1 Hz, 1H), 3.79 - 3.70 (m, 1H), 3.70 - 3.53 (m, 1H), 2.41 (td, J = 16.3, 15.8, 6.7 Hz, 1H), 2.24 - 2.00 (m, 1H).
Primer 165: Priprema (2S, 4R)-N-[[2-[4-(difluorometil)-3-fluorofenil]pirimidin-4-il]metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin-2-karboksamida.
2
Prateći proceduru za HATU kuplovanje iz primera 183, korak 1: tert-butil (2S,4R)-2-[(2-bromo-6-hloro-4-piridil)metilkarbamoil]-4-fluoro-pirolidin-1-karboksilat 3 (4 g, 93%) pripremljen je od (2S,4R)-1-tert-butoksikarbonil-4-fluoro-pirolidin-2-karboksilne kiseline 1 (2,3 g, 9,9 mmol) i (2-bromo-6-hloro-4-piridil)metanamina 2 (2,4 g, 11 mmol), DIPEA (5,2 mL, 30 mmol), HATU (4,6 g, 12 mmol) u DMF (39mL). LC/MS (ESI+): m/z 437.7 (M+H).
Prati iste procedure primera 183, korak 2: (2S,4R)-N-[(2-bromo-6-hloro-4-piridil)metil]-4-fluoro-pirolidin-2-karboksamid 4 (2,3 g, 100%) pripremljen je od tert-butil (2S,4R)-2-[(2-bromo-6-hloro-4-piridil)metilkarbamoil]-4-fluoro-pirolidin-l-karboksilata 3 (3 g, 6,9 mmol) i 4 N HCl u dioksanu (8,6 mL, 34 mmol). LC/MS (ESI+): m/z 337.7 (M+H).
Prati iste procedure primera 183, korak 3: (2S,4R)-N-[(2-bromo-6-hloro-4-piridil)metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamid 5 (2,2 g, 60%) pripremljen je od tert-butil (2S,4R)-2-[(2-bromo-6-hloro-4-piridil)metilkarbamoil]-4-fluoropirolidin-l-karboksilata 4 (2,5 g, 7,4 mmol), Et3N (21 mL, 0,148 mol), 4-fluorobenzenesulfonil-hlorida (1,7 g, 8,9 mmol) u DCM (10 mL). LC/MS (ESI+): m/z 495.7 (M+H).
Prati iste procedure primera 183, korak 4: Naslovno jedinjenje (2S,4R)-4-fluoro-N-(2-fluoro-5-(4-(trifluorometil)pirimidin-5-il)benzil)-4-((-4-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamid (18 mg, 28%) pripremljen je od (2S,4R)-N-[(2-bromo-2-fluoro-fenil)metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida 5 (54 mg, 0,11 mmol), [5-(trifluorometil)pirimidin-2-il]boronske kiseline (30 mg, 0,16 mmol), cezijum-karbonata 1 M u vodi (0,16 mL, 0,16 mmol), Pd(dppf)Cl2(11 mg, 0,016 mmol) u acetonitrilu (1 mL). LC/MS (ESI+): m/z 558.2 (M+H).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.08 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.89 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 8.44 - 8.20 (m, 1H), 8.07 - 7.93 (m, 2H), 7.93 - 7.72 (m, 2H), 7.56 - 7.29 (m, 3H), 5.12 (t, J = 2.7 Hz, 1H), 4.46 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 4.21 (dd, J = 9.9, 7.1 Hz, 1H), 3.79 - 3.50 (m, 2H), 2.47 - 2.29 (m, 1H), 2.08 (dddd, J = 42.5, 13.8, 9.9, 3.4 Hz, 1H).
24
Primer 166: Priprema (2S,3R)-N-([5-cijano-5-[6-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil)-3-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Korak 5: etil 4-([[(2S,3R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-3-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-6-[6-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-3-karboksilat
Smeša 2-([[(tert-butoksi)karbonil]amino]metil)-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il] benzojeve kiseline (318 mg, 1,38 mmol, 1,00 ekviv), DIEA (356 mg, 2,75 mmol, 2,00 ekviv), HATU (525 mg, 1,38 mmol, 1,00 ekviv) i NH4Cl (430 mg, 1,38 mmol, 1,00 ekviv) u DMF (5 ml) mešana je 1 h na 20° C. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije DCM/MeOH (10:1) dajući naslovno jedinjenje (450 mg, 62%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema 4-([[(2S,3R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-3-hidroksipirolidin-2-il]formamido]metil)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-3-karboksilne kiseline
Rastvor metil 4-([[(2S,3R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-3-hidroksipirolidin-2-il]formamido]metil)-6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-3-karboksilata (280mg, 0,53mmol, 1,00 ekviv.) i LiOH (64 mg, 2,67 mmol, 5,00 ekviv.) u THF (2 mL) / vodi (2 mL) mešan je 4 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen vodom. pH vrednost rastvora je podešena na pH 4 pomoću AcOH, rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, ispran vodom i slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo 180 mg (66%) naslovnog jedinjenja u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema tert-butil (2S,3R)-2-[([5-karbamoil-2-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4]metil)karbamoil]-3-hidroksipirolidin-1-karboksilata
2
Rastvor 4-([[(2S,3R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-3-fluoropirolidin-2-il]formamido]metil)-6-[6-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-3-karboksilna kiselina (147 mg, 0,39 mmol, 1,10 ekviv), TFAA (182 mg, 1,41 mmol, 4,00 ekviv) i TEA (20,58 mg, 0,38 mmol, 1,10 ekviv) u dihlorometanu (20 ml) mešana je 3 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo 155 mg (86%) naslovnog jedinjenja u obliku smeđeg ulja.
Korak br. 4: Priprema tert-butil (2R,3S)-2-[([5-karbamoil-2-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4]metil)karbamoil]-3-fluoropirolidin-1-karboksilata
DAST (237,2 mg, 1,47 mmol, 5,00 ekviv.) dodat je rastvoru tert-butil (2S,3R)-2-[([5-karbamoil-2-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-il]metil)karbamoil]-3-hidroksipirolidin-1-karboksilata (150 mg, 0,29 mmol, 1,00 ekviv.) u hloroformu (2 mL) kap po kap na 0° C. Dobijeni rastvor je mešan 2 h na sobnoj temperaturi i zatim ugašen vodom, ekstrahovan dihlormetanom, ispran natrijum-bikarbonatom/vodom, osušen iznad anhidrovanog natrijumsulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (3:2) dajući naslovno jedinjenje (50 mg, 33%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema tert-butil (2R,3S)-2-[([5-cijano-2-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4]metil)karbamoil]-3-fluoropirolidin-1-karboksilata
Smeša (2R, 3S)-N-[[2-cijano-5-[5-(trifluorometil)pirimidin-5-il]phenyl]metil]-3-fluoropirolidin-2-karboksamida (40 mg, 0,08 mmol, 1,00 ekviv), trietilamin (32,8 mg, 0,16 mmol, 2,00 ekviv) i 4-fluorobenzen-1-sulfonl-hlorida (12 mg, 0,12 mmol, 1,50 ekviv) u dihloromethanu (5 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 12 h. Reakcija je ugašena
2
vodom, ekstrahovana dihlormetanom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo 50 mg (sirovog) naslovnog jedinjenja u obliku narandžastog ulja.
Korak br. 6: Priprema (2R,3S)-N-([5-cijano-5-[6-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil)-3-fluoropirolidin-2-karboksamida
Smeša tert-butil (2S)3-fluoro-4-(fluorometil)-2-[([5-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (50 mg, 0,10 mmol, 1,00 ekviv.) i zasićenog hlorovodonika u dioksanu (5 ml) mešana je 0,5 h na sobnoj temperaturi. Čvrsta materija je prikupljena filtracijom. Na taj se način dobilo 40 mg (92%) naslovnog jedinjenja u obliku tamnocrvene čvrste materije.
Korak br. 7: Priprema (2S,3R)-N-([5-cijano-5-[6-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil)-3-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida
4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorid (19,9 mg, 102,20 mmol, 1,10 ekviv.) dodat je rastvoru (2R,3S)-N-([5-cijano-2-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4-il]metil)-3-fluoropirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (40 mg, 93,06 mmol, 1,00 ekviv.) i TEA (28 mg, 276,70 mmol, 3,00 ekviv.) u dihlorometanu (5 mL). Mešano je 2 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana dihlormetanom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (3:2) dajući naslovno jedinjenje 12,6 mg (sirovo) u obliku ružičaste čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.48 (s, 1H), 8.95 (s, 1H), 8.68 - 8.65 (d, J = 8.1 Hz, J = 1.2 Hz, 1H), 8.11 (s, 1H), 7.93 - 7.89 (m, 2H), 7.82 - 7.79 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.70 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 7.32 - 7.26 (m, 2H), 5.39 - 5.22 (dd, J = 49.8 Hz, J = 1.8 Hz, 1H), 5.11 - 5.02 (dd, J = 17.4 Hz, J = 7.8 Hz, 1H), 4.61 (dd, J = 17.7 Hz, J = 4.8 Hz, 1H), 4.41 - 4.33 (d, J = 23.1 Hz, 1H), 3.83 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 3.34 - 3.25 (m, 1H), 2.23 - 1.98 (m, 2H).
2
Primer 167: Priprema fluoro-(2S,4R)-4-fluoro-N-(((5-fluoro-4-(2-trifluorometil)pirimidin-5-il)piridin-2-il)metil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema[5-fluoro-2-([[(2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-il]formamido]metil)piridin-4-il] boronske kiseline
Smeša (2S,4R)-N-[(4-bromo-5-fluorofenil)metil]-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamid (300 mg, 0,63 mmol, 1,00 ekviv), kalijumkarbonata (430 mg, 3,11 mmol, 2 ekviv), [1,50-metoksi-6-(trifluorometil)piridin-3-il]boronske kiseline (184 mg, 1.,04 mmol, 3,00 ekviv) i Pd(dppf)Cl2(46 mg, 0,06 mmol, 0,10 ekviv) u 1,4-dioksanu (12 ml) / voda (1,2 ml) mešana je 20 h na 80° C u atmosferi azota. Čvrste supstance su filtrirane. Filtrat je razblažen vodom i ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (500 mg, sirovo) u obliku smeđeg ulja.
Korak br. 2: Priprema fluoro-(2S,4R)-4-fluoro-N-(((5-fluoro-4-(2-trifluorometil)pirimidin-5-il)piridin-2-il)metil)-1-(4-fluorofenilsulfonil)pirolidin-2-karboksamida
Smeša [5-fluoro-2-([[(2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-il]formamido]metil)piridin-4-il] boronske kiseline (278 mg, 0,627 mmol, 1,00 ekviv.), 5-bromo-2-(trifluorometil)pirimidina (284 mg, 1,251 mmol, 2,00 ekviv.), kalijum-karbonata (260 mg, 1,881 mmol, 3,00 ekviv.) i Pd(dppf)Cl2(46 mg, 0,063 mmol, 0,100 ekviv.) u 1,4-dioksanu (20 mL)/vodi (2 mL) mešana je 4 h na 70° C u atmosferi azota. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je
2
prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/1). Sirovi proizvod (100 mg) je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (35,5 mg, 10%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.23 (s, 2H), 8.61 (s, 1H), 7.90 - 7.86 (m, 2H), 7.72 -7.70 (d, J = 6 Hz, 1H), 7.58 - 7.54 (t, J = 5.86 Hz, 1H), 7.26 - 7.24 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 5.15 -4.92 (m, 2H), 4.56 - 4.48 (m, 1H), 4.32 - 4.26 (t, J = 8.7 Hz, 1H), 3.94 - 3.59 (m, 2H), 2.60 -2.54 (m, 1H), 2.32 - 2.01 (m, 1H).
Primer 168: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-4-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 55.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.69 - 9.65 (s, 2H), 9.16 - 9.09 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.77 - 8.73 (m, 1H), 8.17 - 8.12 (s, 1H), 8.06 - 7.98 (m, 2H), 7.55 - 7.45 (m, 3H), 5.30 - 5.13 (m, 1H), 4.59 - 4.42 (m, 2H), 4.42 - 4.33 (d, J = 24.3 Hz, 1H), 3.75 - 3.64 (ddd, J = 9.4, 7.5, 2.3 Hz, 1H), 3.24 - 3.12 (ddd, J = 10.8, 9.1, 7.3 Hz, 1H), 2.25 - 2.05 (m, 2H)., LCMS (ESI) m/z:527.2 [M+H]+
Primer 169: Priprema (2R,3R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([5-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 5-hloro-2-metil-6-[-2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidina
Smeša tert-butil 5-bromo-1-okso-2,3-dihidro-1H-izoindol-2-karboksilata (1,7 g, 5,45 mmol, 1,00 ekviv), KOAc (10,0 g, 44,056 mmol, 1,0 ekviv), 4,4,5,5-tetrametil-2-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,3,2-dioksaborolan (11,19 g, 44,066 mmol, 1,0 ekviv) i Pd(dppf)Cl2(100 mg, 0,445 mmol, 0,10 ekviv) u 1,4-dioksanu (40 ml) mešana je 12 h na 90°
2
C u atmosferi azota. Reakciona smeša je zatim ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (10 g, 83%) u obliku crnog ulja.
Korak br. 2: Priprema metil 5-hloro-2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-karboksilata
Smeša 5-bromo-5-(trifluorometil)piridina (3 g, 10,95 mmol, 1,00 ekviv), (2,6-dihloropiridin-4-il)boronske kiseline (6 g, 29,12 mmol, 1.,00 ekviv), Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2 (1,55 g, 2,12 mmol, 0,20 ekviv) i kalijum-karbonata (8,78 g, 63,53 mmol, 5,80 ekviv) u 1,4-dioksanu (40 ml) / voda (2 ml) mešana je 12 h na 120° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (1,4 g, 40%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema metil 5-metil-2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-karboksilata
Smeša metil 5-hloro-2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-karboksilata (600,00 mg, 1,89 mmol, 1,00 ekviv.), Pd(dppf)Cl2(230,35 mg, 0,315 mmol, 0,200 ekviv.), i Zn(CH3)2(4.8 ml, 3.000 ekviv., 1.2 mol/L u toluenu) u dioksanu (20 mL) mešana je 12 h na 65° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (400 mg, 71%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.4: Priprema [5-[2-(trifluorometil)piridin-2-il]pirimidin-4-il]metanola.
DIBAL-H (4 mL, 1 mol, 3,000 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru etl 5-metoksi-1-[2-(trifluorometil)pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-karboksilata (380,00 mg, 1,278 mmol, 1,000 ekviv.) u dihlorometan (20 mL) na -78° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 30 min na -78° C. Dobijeni rastvor je mešan 12 h na sobnoj temperaturi, pa je ugašen metanolom. pH vrednost rastvora je podešena na pH 9 pomoću natrijum-hidroksida (1 mol/L). Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (250 mg, 73%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema 2-([5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-2-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona
DIAD (300,43 mg, 1,486 mmol, 2,0 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru [5-metoksi-1-[2-(trifluorometil)pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-il]metanola (200,0 mg, 0,743 mmol, 1,0 ekviv.), 2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-dion (389,69 mg, 1,486 mmol, 2,0 ekviv.) i PPh3 (131,16 mg, 0,891 mmol, 1,2 ekviv.) u tetrahidrofuranu (20 mL) na 0° C u atmosferi azota. Reakcija je mešana 10 minuta na 0° C i 12 h na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (400 mg) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.6: Priprema [5-[2-(trifluorometil)piridin-2-il]pirimidin-4-il]metanamina.
Smeša 2-([5-metil-2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (400.00 mg, 1.004 mmol, 1.000 ekviv.) i NH2NH2.H2O (502,69 mg, 10,042 mmol, 10,000 ekviv.) u metanolu (40 mL) mešana je 12 h na 60° C. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, a organski slojevi su spojeni. Tečnost je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (200 mg, 74%) u obliku bele čvrste materije.
1
Korak br. 7: Priprema (2S,4R)-4-hidroksi-2-[([5-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidini-1-karboksilata.
Smeša (2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilna kiselina (130,43 mg, 0,559 mmol, 1.000 ekviv), DIEA (318,95 mg, 0,839 mmol, 1,500 ekviv), HATU (216,83 mg, 1,678 mmol, 3,000 ekviv) i [5-fluoro-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-2-il]piridin-2-il]metanamina (150,0 mg, 0,559 mmol, 1,0 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (5 ml) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je rastvorena u etil-acetatu, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (200 mg, 74%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 8: Priprema (2R,3R)-4-fluoro-N-([5-[2-(trifluorometil)-1lambda4,3-fluorazin-1-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida.
Smeša tert-butil (2S,4R)-4-fluoro-2-[([5-fluoro-4-[2-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-il]metil)karbamoil]pirolidinin-1-karboksilata (200 mg, 0,414 mmol, 1,000 ekviv.) i zasićene HCl u 1,4-dioksanu (30 ml) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (150 mg, 95%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 9: Priprema (2R,3R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([5-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-N-([5-fluoro-4-[2-(trifluorometil)piridin-2-il]pyridin-2-yl]metil)pirolidin-2-karboksamida (200,00 mg, 0,522 mmol, 1,0 ekviv), trietilamin (158,38 mg, 1,565 mmol, 3,0 ekviv) i 4-fluorobenzen-1-sulfonl-hlorida (203,07 mg, 1,04 mmol, 2,0 ekviv) u dihloromethanu (20 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 12 h. Reakcija je
2
zatim ugašena vodom, ekstrahovana dihlormetanom, osušena iznad anhidrovanog natrijumsulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1). Sirovi proizvod (200 mg) je ponovo prečišćen preparativnom fleš HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (105,5 mg, 37%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.65 (s, 2H), 8.51 (s, 1H), 8.04 (s, 1H), 7.92 - 7.88 (m, 2H), 7.46 - 7.43 (m, 1H), 7.28 - 7.23 (m, 2H), 5.05 (d, J = 51.2 Hz, 1H), 4.89 - 4.83 (m, 2H), 4.36 - 4.32 (m, 2H), 3.95 - 3.86 (m, 1H), 3.74 - 3.60 (m, 1H), 2.63 - 2.61 (m, 1H), 2.39 (s, 3H), 2.28 - 2.00 (m, 1H).
Primer 170: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(2-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 2,6-dihloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridina
Smeša Pd(dppf)Cl2(534 mg, 0,73 mmol, 0,10 ekviv.), kalijum-karbonata (2g, 14,47 mmol, 2,00 ekviv.), 2,6-dihloro-4-jodopiridina (2 g, 7.30 mmol, 1.00 ekviv.) i [6-(trifluorometil)piridin-3-il] boronske kiseline (1.39 g, 7.28 mmol, 1.00 ekviv.) u 1,4-dioksanu (80 mL) / vodi (8 mL) mešana je 12 h na 60° C u atmosferi azota. Čvrste supstance su filtrirane. Filtrat je razblažen vodom i ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:50) dajući naslovno jedinjenje (1,9 g, 89%) u obliku čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema 2-hloro-6-(2-metoksietoksi)-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridina
Smeša 2,6-dihloro-4-[6-(trifluorometil)piridin-2-il]piridina (900 mg, 3,07 mmol, 1,00 ekviv) i KF (134,80 mg, 2,7 mmol, 1,50 ekviv) u DMSO (5 ml) mešana je 12 h na 140° C. Dobijeni rastvor je razređen vodom i ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (948 mg, 93%) u obliku bele čvrste materije koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 3: Priprema 2-hloro-6-(2-metoksietoksi)-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-karbonitrila
Smeša 2-hloro-6-(2-metoksietoksi)-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridina (400 mg, 1,202 mmol, 1,00 ekviv.), dppf (133 mg, 0,241 mmol, 0,20 ekviv.), Zn(CN)2(282 mg, 2,401 mmol, 2,0 ekviv.) i Pd2(dba)3CHCl3(62 mg, 0,060 mmol, 0,050 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (8 mL) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 1 h na 100° C u atmosferi azota. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:5) dajući naslovno jedinjenje (350 mg, 90%) u obliku čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema [-4-[6-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-il]metanamin hidrohlorida
4
Smeša 6-fluoro-4-[6-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-karbonitrila (1 g, 3,093 mmol, 1,00 ekviv) i paladijuma na ugljenu (2 g) u metanolu (50 ml) mešana je 30 minuta na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane. Filtrat je koncentrovan u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (1,43 g, sirovo) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema tert-butil (2R,5S)-4-metil-5-[([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata
Smeša (2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-hidroksipirolidin-2-karboksilna kiselina (235 mg, 1,008 mmol, 1.00 ekviv), DIEA (355 mg, 2,747 mmol, 2,73 ekviv), HATU (418 mg, 1,099 mmol, 1,09 ekviv) i 6-(aminometil)-4-[6-(trifluorometil)pirimidin-5-il]benzamid hidrohlorida (300 mg, 0,917 mmol, 0,91 ekviv) u DMF (5 ml) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1/1) dajući naslovno jedinjenje (450 mg, 82%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 6: Priprema 4-fluoro-N-[[6-(2-metoksietoksi)-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil]-1H-pirol-2-karboksamida
Rastvor tert-butil 4-fluoro-2-([[6-(2-metoksietoksi)-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil]-1H-pirol-2-karboksilata (450 mg, 0.836 mmol, 1.000 ekviv.) i trifluorosirćetne kiseline (4 mL) u dihloromethanu (20 mL) mešan je na 25° C tokom 1 h. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je rastvoren u vodi. pH vrednost smeše je podešena na 8 zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (270 mg, 75%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 7: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(2-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša 4-fluoro-N-[[6-(2-metoksietoksi)-4-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-2-il]metil]-1H-pirol-2-karboksamida (270 mg, 0,616 mmol, 1,000 ekviv.), trietilamina (178 mg) i 4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorida (138 mg, 0,709 mmol, 0,703 ekviv.) u dihlorometanu (30 mL) mešana je 12 h na 25° C. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/1). Sirovi proizvod (300 mg) je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (99 mg) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.97 (s, 1H), 8.13 - 8.10 (m, 1H), 7.93 - 7.87 (m, 3H), 7.79 - 7.77 (m, 1H), 7.27 - 7.19 (m, 3H), 6.98 (s, 1H), 5.11 - 4.98 (d, J = 52 Hz, 1H), 4.984.63 (m, 3H), 4.53-4.48 (m, 1H), 4.35 - 4.30 (m, 1H), 3.96 - 3.87 (m, 1H), 3.82 - 3.80 (m, 2H), 3.71 - 3.58 (m, 1H), 3.47 (s, 3H), 2.67 - 2.20 (m, 2H).
Primer 171: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[2-fluoro-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-3-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 48.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.45 - 9.37 (d, J = 2.3 Hz, 2H), 9.06 - 8.95 (dq, J = 6.2, 2.8 Hz, 1H), 8.76 - 8.67 (t, J = 2.5 Hz, 1H), 8.47 - 8.38 (dt, J = 9.1, 2.6 Hz, 1H), 8.03 -7.93 (ddd, J = 8.2, 5.1, 2.4 Hz, 2H), 7.51 - 7.41 (td, J = 8.9, 2.5 Hz, 2H), 5.30 - 5.07 (m, 1H), 4.52 - 4.38 (m, 2H), 4.24 - 4.13 (ddd, J = 9.7, 7.2, 2.4 Hz, 1H), 3.76 - 3.55 (m, 2H), 2.46 -2.30 (td, J = 16.8, 16.3, 7.2 Hz, 1H), 2.20 - 1.98 (m, 1H)., LCMS (ESI) m/z:546.2 [M+H]+ Primer 172: Priprema (1R, 4S, 5S)-3-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[2-[2-(trifluorometil) pirimidin-5-il]-4-piridil] metil]-3-azabiciklo [3.1.0] heksan-4-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 48.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.68 - 9.63 (s, 2H), 8.92 - 8.85 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.77 - 8.71 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 8.17 - 8.10 (s, 1H), 7.97 - 7.89 (m, 2H), 7.51 - 7.42 (m, 3H), 4.58 - 4.38 (qd, J = 16.7, 6.0 Hz, 2H), 4.24 - 4.21 (s, 1H), 3.82 - 3.71 (dd, J = 10.4, 3.4 Hz, 1H), 3.54 - 3.45 (d, J = 10.5 Hz, 1H), 1.68 - 1.51 (dtd, J = 7.5, 5.9, 5.2, 3.7 Hz, 2H), 0.59 -0.48 (td, J = 7.8, 5.3 Hz, 1H), -0.77 - -0.89 (q, J = 4.4 Hz, 1H)., LCMS (ESI) m/z:522.2 [M+H]+
Primer 173: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[3-fluoro-5-[2-(trifluorometil) tiazol-4-il] fenil] metil] pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 91.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.96 - 8.90 (t, J = 6.1 Hz, 1H), 8.65 - 8.59 (q, J = 0.9 Hz, 1H), 8.02 - 7.94 (m, 2H), 7.83 - 7.78 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 7.72 - 7.66 (ddd, J = 9.4, 2.5, 1.6 Hz, 1H), 7.50 - 7.42 (m, 2H), 7.40 - 7.34 (ddd, J = 9.7, 2.4, 1.4 Hz, 1H), 5.29 - 5.09 (m, 1H), 4.54 - 4.38 (m, 2H), 4.23 - 4.13 (dd, J = 9.9, 7.1 Hz, 1H), 3.75 - 3.57 (m, 2H), 2.47 - 2.31 (m, 1H), 2.20 - 1.97 (m, 1H)., LCMS (ESI) m/z:550.2 [M+H]+
Primer 174: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[3-fluoro-5-[2-(trifluorometil) tiazol-5-il] fenil] metil] pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 91.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.96 - 8.89 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.61 - 8.58 (q, J = 1.1 Hz, 1H), 8.03 - 7.95 (m, 2H), 7.69 - 7.62 (m, 1H), 7.62 - 7.58 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 7.51 - 7.43 (m, 2H), 7.32 - 7.25 (ddd, J = 9.7, 2.4, 1.4 Hz, 1H), 5.29 - 5.10 (dd, J = 50.1, 3.0 Hz, 1H), 4.54 - 4.34 (m, 2H), 4.23 - 4.14 (dd, J = 10.0, 7.1 Hz, 1H), 3.76 - 3.57 (m, 2H), 2.47 - 2.34 (m, 1H), 2.19 - 1.98 (m, 1H)., LCMS (ESI) m/z:550.2 [M+H]+
Primer 175: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[3-fluoro-5-[4-(trifluorometil) tiazol-2-il] fenil] metil] pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 91.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 8.92 - 8.86 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.65 - 8.62 (s, 1H), 8.01 - 7.94 (m, 2H), 7.82 - 7.79 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 7.74 - 7.68 (ddd, J = 9.9, 2.5, 1.5 Hz, 1H), 7.49 - 7.41 (m, 2H), 7.26 - 7.20 (ddd, J = 9.7, 2.4, 1.4 Hz, 1H), 5.28 - 5.10 (d, J = 52.6 Hz, 1H), 4.50 - 4.37 (m, 2H), 4.22 - 4.15 (dd, J = 9.8, 7.1 Hz, 1H), 3.74 - 3.56 (m, 2H), 2.46 -2.33 (m, 1H), 2.20 - 1.98 (m, 1H)., LCMS (ESI) m/z:550.2 [M+H]+
Primer 176: Priprema (1S,2S,5R)-N-(2-cijano-5-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)benzil)-3-((4-fluorofenil)sulfonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksamida.
Korak 1: smeša tert-butil 5-bromo-1-okso-izoindolin-2-karboksilat 2A, 5-bromoizoindolin-1-on 1 (5 g, 23.6 mmol), THF (50 mL), 4-dimetilaminopiridina (288 mg, 2.36 mmol) i di-tert-butil dikarbonata (8 g, 35,4 mmol) mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, razređena etilacetatom, isprana 10-procentnom limunskom kiselinom. Organski slojevi su osušeni iznad Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem pomoću etil-acetata / heptana (1:1) dajući naslovno jedinjenje 2 (7,1 g, 96%) u obliku bele čvrste materije. LC/MS (ESI+): m/z 313.2 (M+H).
Korak 2: tert-butil 1-okso-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]izoindolin-2-karboksilat 3
U vatrostalnu bočicu dodato je tert-butil 5-bromo-1-okso-izoindolin-2-karboksilat 2 (800 mg, 2,6 mmol), [5-(trifluorometil)pirimidin-2-il] boronske kiseline (584 mg, 3,1 mmol), kalijum-karbonata (1,1 g, 7,7 mmol), vode (0,5 mL, 30 mmol) i Pd(dppf)Cl2(214 mg, 0,26 mmol) u dioksanu (5 mL). Reakciona smeša je prečišćena gasovitim azotom 3 minuta, a zatim zagrevana na na 120° C 30 minuta mikrotalasima. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, dobijena smeša je filtrirana kroz tanak sloj celita, isprana vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Spojeni organski sloj je osušen iznad Na2SO4, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem pomoću etil-acetata / heptana (1:1) dajući naslovno jedinjenje 3 (700 mg, 72%) u obliku bele čvrste materije. LC/MS (ESI+): m/z 380.3 (M+H).
Korak 3: 2-[(tert-butoksi)karbonilamino)metil]-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il] benzojeva kiselina 4
tert-butil 1-okso-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]izoindol-2-karboksilat 3 (200 mg, 0,53 mmol), litijum-hidroksid 1 M u vodi (1 mL) i THF (1 mL) mešani su 12 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, acidifikovan 10-procentnim vodenim rastvorom limunske kiseline do pH = 5 i dva puta ekstrahovan etilacetatom. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni iznad Na2SO4, filtrirani i koncentrovani radi dobijanja sirovog proizvoda 4 koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja. LC/MS (ESI+): m/z 398.4 (M+H).
Korak 4: tert-butil N-[[2-karbamoil-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil)karbamata 5
2-[(tert-butoksi)karbonilamino)metil]-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il] benzojeva kiselina 4 (300 mg, 0.75 mmol) u THF (10 mL) tretiran je pomoću HATU (351 mg, 0,91 mmol), DIPEA (1,5 mL, 8,3 mmol) praćeno NH4Cl (485 mg, 9,1 mmol). Dobijeni rastvor je ispran zasićenim natrijum-karbonatom i dva puta ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad natrijum-sulfata i koncentrovani. Ostatak je prečišćen fleš
4
hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem pomoću etil-acetata / heptana (1:1) dajući naslovno jedinjenje 5 (250 mg, 84%) u obliku bele čvrste materije. LC/MS (ESI+): m/z 397.4 (M+H).
Korak 5: 2-(aminometil)-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]benzamid 6
tert-butil N-[[2-karbamoil-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil)karbamat 5 (400 mg, 1 mmol) tretiran je 4N HCl u dioksanu (1,8 mL, 7,4 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakciona smeša je koncentrovana do suvog ostatka, a sirovi proizvod 6 je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. LC/MS (ESI+): m/z 297.4 (M+H).
Korak 6: tert-butil (1R,4S,5S)-4-[[2-karbamoil-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metilkarbamoil]-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat 7
Rastvoru (2S,4R)0-tert-butoksikarbonil-4-fluoro-pirolidin-2-karboksilne kiseline (278 mg, 1,23 mmol) i [-4-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamina (330 mg, 1,11 mmol) u N,N-dimetilformamidu (2,0 ml) dodat je N,N-diizopropiletilamin (0,140 ml, 3,3 mmol) i HATU (518,6 mg, 1,34 mmol). Reakciona smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je razređena u etil-acetatu, isprana slanim rastvorom, osušena iznad natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem pomoću etil-acetata / heptana (1:1) dajući naslovno jedinjenje 7 (499 mg, 88%) u obliku bele čvrste materije. LC/MS (ESI+): m/z 506.5 (M+H).
Korak br. 7: (1R,4S,5S)-N-[[2-karbamoil-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil]-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-4-karboksamid 8
tert-butil (1R,4S,5S)-4-[[2-karbamoil-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metilkarbamoil]-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat 7 (387 mg, 0,7656 mmol) tretiran je pomoću 4N HCl u dioksanu (1,9 mL, 7,6 mmol), i mešan na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakciona smeša je koncentrovana do suvog ostatka, a sirovi proizvod (310 mg, 0,76 mmol) tretiran je pomoću Et3N (2 mL, 1,415,369 mmol) u DCM (1 mL), a nakon toga 4-fluorobenzensulfonil-hloridom (179 mg, 0,92 mmol). Reakcioni rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem pomoću etil-acetata / heptana (1:1) dajući naslovno jedinjenje 8 (180 mg, 40%) u obliku žute čvrste materije. LC/MS (ESI+): m/z 564.5 (M+H).
Korak br. 8: (1R,4S,5S)-N-[[2-cijano-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil]-3-(4-fluorofenil)sulfonil-3-azabiciklo [3.1.0]heksan-4-karboksamid
41
(1R,4S,5S)-N-[[2-carbamoil-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil]-3-(4-fluorofenil)sulfonil-3-azabiciklo [3.1.0] heksan-4-karboksamid 8 (180 mg, 0,32 mmol) tretiran je anhidridom trifluorosirćetne kiseline (0,09 mL, 0,64 mmol) i trietilamina (0.04 mL, 0.32mmol) u DCM (5 mL). Reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je koncentrovan i prečišćen reverznom faznom HPLC dajući naslovno jedinjenje (54 mg, 31%). LC/MS (ESI+): m/z 546.2 (M+H).
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.43 (s, 2H), 8.95 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.06 - 7.95 (m, 2H), 7.95 - 7.79 (m, 2H), 7.59 - 7.38 (m, 2H), 4.65 (dd, J = 16.0, 6.1 Hz, 1H), 4.52 (dd, J = 16.0, 5.5 Hz, 1H), 4.22 (s, 1H), 3.74 (dd, J = 10.4, 3.7 Hz, 1H), 3.47 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 1.59 (tdd, J = 9.6, 7.0, 3.8 Hz, 2H), 0.54 (td, J = 7.8, 5.3 Hz, 1H), -0.84 (q, J = 4.4 Hz, 1H).
Primer 177: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-(4-fluoro-5-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)benzil)-1-((4-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamida.
Prateći proceduru za HATU kuplovanje iz primera 35, korak 1: tert-butil (2S,4R)-2-[(5-bromo-2-fluoro-fenil)metilkarbamoil]-4-fluoro-pirolidin-1-karboksilat 3 (801 mg, 89%) pripremljen je od (2S,4R)-1-tert-butoksikarbonil-4-fluoro-pirolidin-2-karboksilne kiseline 1 (500 mg, 2,14 mmol) i (5-bromo-2-fluorofenil)metanamina 2 (567 mg, 2,55 mmol), DIPEA (1,12 mL, 6,4 mmol), HATU (998 mg, 2,57 mmol), DMF (8mL). LC/MS (ESI+): m/z 420.3 (M+H).
Prati iste procedure primera 35, korak 3: (2S,4R)-N-[(5-bromo-2-fluorofenil)metil]-4-fluoro-pirolidin-2-karboksamid 4 (609 mg, 100%) pripremljen je od tert-butil (2S,4R)-2-[(5-bromo-2-fluoro-fenil)metilkarbamoil]-4-fluoro-pirolidin-l-karboksilata 3 (801 mg, 1,9 mmol) i 4 N HCl u dioksanu (3,8 mL, 15,2 mmol). LC/MS (ESI+): m/z 320.3 (M+H).
42
Prati iste procedure primera 35, korak 4: (2S,4R)-N-[(5-bromo-2-fluorofenil)metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamid 6 (710 mg, 70%) pripremljen je od (2S,4R)-N-[(5-bromo-2-fluoro-fenil)metil]-4-fluoro-pirolidin-2-karboksamida 4 (680 mg, 2,1 mmol), Et3N (6 mL, 42,6 mmol), 4-fluorobenzensulfonil-hlorida (710 mg, 1,5 mmol) u DCM (1 mL). LC/MS (ESI+): m/z 478.3 (M+H).
Prati iste procedure primera 183, korak 4: Naslovno jedinjenje (2S,4R)-4-fluoro-N-(4-fluoro-5-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)benzil)4-((4-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamid (48 mg, 39%) pripremljen je od (2S,4R)-N-[(5-bromo-2-fluoro-fenil)metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida 6 (110 mg, 0,23 mmol), [4-(trifluorometil)pirimidin-2-il]boronske kiseline (48 mg, 0,25 mmol), cezijum-karbonata 1 M u vodi (0,32 mL, 0,32 mmol), Pd(dppf)Cl2(19 mg, 0,023 mmol) u acetonitrilu (1 mL). LC/MS (ESI+): m/z 543.2 (M+H).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.86 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 8.07 - 7.93 (m, 2H), 7.89 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 7.82 (dd, J = 7.2, 2.5 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.72 - 7.64 (m, 1H), 7.53 - 7.40 (m, 2H), 7.34 (dd, J = 9.9, 8.5 Hz, 1H), 5.38 - 4.97 (m, 1H), 4.45 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 4.22 (dd, J = 9.8, 7.1 Hz, 1H), 3.79 - 3.65 (m, 1H), 3.65 (s, 1H), 2.43 - 2.29 (m, 1H).
Primer 178: Priprema (2S, 4R)-N-[[2-[2-amino-6-(trifluorometil)-3-piridil]-4-piridil] metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: (2S,4R)-tert-butil 2-(((2-bromopiridin-4-il)metil)karbamoil)-4-fluoropirolidin-1-karboksilat
Naslovno jedinjenje (4812 mg, 98%) pripremljeno je prema proceduri kuplovanja amida iz primera 35, korak 1 od (2-bromo-4-piridil)metanamina (2020 mg, 10,800 mmol), (2S,4R)-1-tert-butoksikarbonil-4-fluoro-pirolidin-2-karboksilne kiseline (2771 mg, 11,88 mmol), HATU (4610 mg, 11,88 mmol) i trietilamina (3,31 mL, 23,7 mmol) u N,N-dimetilformamidu (25 mL). LC/MS (ESI+): m/z 402 (M+H).
Korak br.2: (2S,4R)-N-((2-bromopiridin-4-il)metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamid
4
Trifluorosirćetna kiselina (8 ml) dodata je kap po kap rastvoru tert-butil (2S,4R)-2-[(2-bromo-4-piridil)metilkarbamoil]-4-fluoro-pirolidin-1-karboksilata (1010 mg, 2,51 mmol) u smeši DCM (12 ml). Smeša je mešana 2 h, koncentrovana u vakuumu, ostatak razblažen vodenim rastvorom NaHCO3i ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni iznad Na2SO4i koncentrovani za dobijanje smeđeg ulja. Ostatak je korišćen bez daljeg prečišćavanja. LC/MS (ESI+): m/z 302 (M+H).
Korak br. 3: (2S,4R)-N-((2-bromopiridin-4-il)metil)-4-fluoro-1-((4-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamid
Naslovno jedinjenje (369 mg, 57%) pripremljeno je prema proceduri kuplovanja sulfonamida iz primera 35, korak 4 pomoću (2S,4R)-N-[(2-bromo-4-piridil)metil]-4-fluoropirolidin-2-karboksamida (422 mg, 1,40 mmol), 4-fluorobenzensulfonil hlorida (300 mg, 1,54 mmol) i trietilamina (0,30 mL, 2,2 mmol) u 9 ml smeše DMF/DCM (2:1). LC/MS (ESI+): m/z 460 (M+H).
Korak br. 4: ((2S,4R)-4-fluoro-N-((2'-fluoro-6'-(trifluorometil)-[2,3'-bipiridin]-4-il)metil)-1-((4-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamid
Naslovno jedinjenje (174 mg, 40%) je pripremljeno prema proceduri Suzuki kuplovanja iz primera 42, korak 1 od (2S,4R)-N-[(2-bromo-4-piridil)metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida (369 mg, 0,80 mmol), 2-benziloksi-4-(trifluorometil)fenil boronske kiseline (402 mg, 1,92 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijuma(II) (112 mg, 0,15 mmol) i vodenog rastvora Cs2CO3 (1.6 mL, 1.60 mmol, 1.0 mol/L) u acetonotrilu (10 mL). LCMS (ESI_Formic_MeCN): [MH<+>] = 545.
44
Korak br. 5: (2S, 4R)-N-[[2-[2-amino-6-(trifluorometil)-3-piridil]-4-piridil] metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-pirolidin-2-karboksamid
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[2-[2-fluoro-6-(trifluorometil)-3-piridil]-4-piridil] metil] pirolidin-2-karboksamida (80 mg, 0,13 mmol) u DMSO (2 ml) zasićena je amonijakom (u gasovitom obliku), a zatim zagrevana na 80° C u zapečaćenoj bočici tokom 24 sata. Smeša je degasirana u vakuumu i podvrgnuta prečišćavanju RP HPLC tehnikom radi dobijanja 51 mg (71%) naslovnog proizvoda.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.96 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.63 (dd, J = 5.1, 0.7 Hz, 1H), 8.29 - 8.21 (m, 1H), 8.04 - 7.88 (m, 5H), 7.52 - 7.43 (m, 2H), 7.37 (dd, J = 5.2, 1.5 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 5.32 - 5.09 (m, 1H), 4.57 - 4.38 (m, 2H), 4.20 (dd, J = 9.9, 7.1 Hz, 1H), 3.80 - 3.57 (m, 2H), 2.48 - 2.35 (m, 1H), 2.10 (dddd, J = 42.5, 13.9, 10.0, 3.4 Hz, 1H).
Primer 179: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[2-[2-(metilamino)-6-(trifluorometil)-3-piridil]-4-piridil] metil] pirolidin;-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[2-[2-fluoro-6-(trifluorometil)-3-piridil]-4-piridil] metil] pirolidin-2-karboksamida (80 mg, 0,15 mmol) i metilamina u tetrahidrofuranu (1,0 mL, 2,0 mmol, 2 mol/L) u dimetil sulfoksidu (2 mL) zagrevana je u zapečaćenoj bočici na 80° C tokom 3 sata. Smeša je degasirana u vakuumu i podvrgnuta prečišćavanju RP HPLC tehnikom radi dobijanja 46 mg (56%) naslovnog jedinjenja.
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.34 (q, J = 4.8 Hz, 1H), 8.96 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.63 (dd, J = 5.2, 0.7 Hz, 1H), 8.28 - 8.21 (m, 1H), 8.05 - 7.95 (m, 3H), 7.52 - 7.43 (m, 2H), 7.39 (dd, J = 5.2, 1.5 Hz, 1H), 6.97 (d, J =7.8 Hz, 1H), 5.32 - 5.10 (m, 1H), 4.56 - 4.39 (m,
4
2H), 4.20 (dd, J = 9.9, 7.1 Hz, 1H), 3.80 - 3.56 (m, 2H), 2.98 (d, J = 4.7 Hz, 3H), 2.42 (dddd, J = 20.0, 14.7, 6.6, 2.0 Hz, 1H), 2.22 - 1.97 (m, 1H).
Primer 180: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[5-fluoro-2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-4-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 48.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.63 - 9.57 (s, 2H), 9.11 - 9.04 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 8.81 - 8.74 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 8.28 - 8.21 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 8.06 - 7.99 (m, 2H), 7.52 -7.44 (m, 2H), 5.30 - 5.11 (m, 1H), 4.60 - 4.50 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 4.27 - 4.19 (dd, J = 10.0, 7.1 Hz, 1H), 3.76 - 3.57 (m, 2H), 2.47 - 2.36 (m, 1H), 2.21 - 2.00 (m, 1H)., LCMS (ESI) m/z:546.2 [M+H]+
Primer 181: Priprema (1R, 5S)-4-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[3-fluoro-5-[2-(trifluorometil) pirimidin-5-il] fenil] metil]-4-azabiciklo [3.1.0] heksan-5-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 48.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.47 - 9.39 (s, 2H), 8.75 - 8.68 (dd, J = 6.8, 5.3 Hz, 1H), 7.95 - 7.87 (m, 2H), 7.82 - 7.77 (t, J = 1.5 Hz, 1H), 7.76 - 7.69 (ddd, J = 9.8, 2.3, 1.4 Hz, 1H), 7.56 - 7.48 (m, 2H), 7.44 - 7.36 (ddd, J = 9.7, 2.3, 1.3 Hz, 1H), 4.70 - 4.59 (dd, J = 16.0, 6.8 Hz, 1H), 4.40 - 4.27 (dd, J = 16.2, 5.4 Hz, 1H), 3.74 - 3.62 (ddd, J = 10.5, 9.0, 3.1 Hz, 1H), 2.99 - 2.87 (dt, J = 10.4, 8.3 Hz, 1H), 2.24 - 2.10 (dtd, J = 12.6, 8.9, 5.7 Hz, 1H), 1.87 -1.72 (m, 2H), 1.50 - 1.43 (dd, J = 9.0, 5.9 Hz, 1H), 0.31 - 0.22 (t, J = 5.9 Hz, 1H)., LCMS (ESI) m/z:539.2 [M+H]+
Primer 182: Priprema (1R, 5S)-4-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[2-fluoro-5-[2-(trifluorometil) pirimidin-5-il] fenil] metil]-4-azabiciklo [3.1.0] heksan-5-karboksamida.
4
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 48.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.40 - 9.35 (s, 2H), 8.71 - 8.66 (dd, J = 6.8, 5.2 Hz, 1H), 8.10 - 8.04 (dd, J = 7.2, 2.4 Hz, 1H), 7.95 - 7.85 (m, 3H), 7.56 - 7.47 (m, 2H), 7.47 -7.40 (dd, J = 9.9, 8.6 Hz, 1H), 4.75 - 4.64 (dd, J = 16.1, 6.8 Hz, 1H), 4.36 - 4.26 (dd, J = 16.1, 5.3 Hz, 1H), 3.74 - 3.62 (ddd, J = 10.6, 9.2, 3.1 Hz, 1H), 3.00 - 2.88 (dt, J = 10.5, 8.5 Hz, 1H), 2.24 - 2.11 (dtd, J = 13.0, 9.1, 5.9 Hz, 1H), 1.88 - 1.74 (m, 2H), 1.52 - 1.42 (dd, J = 9.0, 5.9 Hz, 1H), 0.33 - 0.23 (t, J = 6.0 Hz, 1H)., LCMS (ESI) m/z:539.2 [M+H]+
Primer 183: Priprema (1S,2S,5R)-N-(2-fluoro-5-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)benzil)-3-((4-fluorofenil)sulfonil)-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-2-karboksamida.
Korak 1: tert-butil (1R,4S,5S)-4-[(5-bromo-2-fluoro-fenil)metilkarbamoil]-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilat 3
Rastvoru (1R,4S,5S)-3-tert-butoksikarbonil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-4-karboksilne kiseline 1 (31 mg, 0,13 mmol), (5-bromo-2-fluoro-fenil)metanamin hidrohlorida 2 (36 mg, 0,15 mmol) i DIPEA (0,07 mL, 0,4 mmol) u DMF (0.5 mL) dodat je HATU (63,5 mg, 0,16 mmol). Reakciona smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je razređena u etil-acetatu, isprana slanim rastvorom, osušena iznad natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem pomoću
4
etil-acetata / heptana (1:1) dajući naslovno jedinjenje 3 (30 mg, 53%) u obliku prozirnog ulja. LC/MS (ESI+): m/z 414 (M+H).
Korak br.2: (1R,4S,5S)-N-[(5-bromo-2-fluoro-fenil)metil]-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-4-karboksamid 4
Rastvor tert-butil (1R,4S,5S)-4-[(5-bromo-2-fluoro-fenil)metilkarbamoil]-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-3-karboksilata 3 (30 mg, 0.072 mmol) u dioksanu (5 mL) tretiran je pomoću 4N HCl u dioksanu (0.46 mL, 1.9 mmol). Reakcija je mešana 30 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom radi dobijanja sirovog proizvoda 4 koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja. LC/MS (ESI+): m/z 314 (M+H).
Korak br. 3: (1R,4S,5S)-N-[(5-bromo-2-fluoro-fenil)metil]-3-(4-fluorofenil)sulfonil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-4-karboksamid 6
(1R,4S,5S)-N-[(5-bromo-2-fluoro-fenil)metil]-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-4-karboksamid 4 (23 mg, 0.07 mmol) u DCM (1 mL) tretiran je pomoću Et3N (0.2 mL, 1.5 mmol), a nakon toga i 4-fluorobenzenesulfonil-hloridom 5 (17 mg, 0,09 mmol). Reakcioni rastvor je mešan preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem pomoću etil-acetata / heptana (1:1) dajući naslovno jedinjenje 6 (26 mg, 75%) u obliku prozirnog ulja. LC/MS (ESI+): m/z 472 (M+H).
Korak br. 4: (1R, 5S)-3-(4-fluorofenil) sulfonil-N-[[2-fluoro-5-[2-(trifluorometil) pirimidin-5-il] fenil] metil]-3-azabiciklo [3.1.0] heksan-5-karboksamid
U vatrostalnu bočicu dodato je (1R,4S,5S)-N-[(5-bromo-2-fluoro-fenil)metil]-3-(4-fluorofenil)sulfonil-3-azabiciklo[3.1.0]heksan-4-karboksamid 6 (35 mg, 0,07 mmol), [5-(trifluorometil)pirimidin-2-il]boronska kiselina (15,7 mg, 0,08 mmol), cezijum-karbonat 1 M u vodi (0,10 mL, 0,10 mmol), Pd(dppf)Cl2(0,1 ekviv., 0,01 mmol) i acetonitril (0.8 mL). Reakciona smeša je prečišćena gasovitim azotom 3 minuta, a zatim zagrevana na na 140° C 30 minuta mikrotalasima. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, dobijena smeša je filtrirana kroz tanak sloj celita, isprana vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silikagela eluiranjem pomoću etil-acetata / heptana (3:1) dajući naslovno jedinjenje (24 mg, 60%) u obliku bele čvrste materije. LC/MS (ESI+): m/z 539.2 (M+H).
1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.36 (s, 2H), 8.77 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 8.02 - 7.75 (m, 4H), 7.57 - 7.28 (m, 3H), 4.60 - 4.31 (m, 2H), 4.22 (s, 1H), 3.72 (td, J = 9.9, 3.6 Hz, 1H),
4
3.47 (d, J = 10.4 Hz, 1H), 1.69 - 1.40 (m, 2H), 0.60 - 0.45 (m, 1H), -0.82 (dt, J = 5.1, 4.0 Hz, 1H).
Primer 184: Priprema (2S,4R)-N-([5-cijano-1-[2-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema (2,5-dihloropiridin-4-il)metanola
Rastvor 2,5-dihloropiridin-4-karboksilne kiseline (2.00 g, 10,417 mmol, 1,0 ekviv.) i BH3-THF (30 mL, 3,0 ekviv., 1 mol/L u THF) u tetrahidrofuranu (100 mL) mešan je 30 minuta na 0° C i 2 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:3) dajući naslovno jedinjenje (1,5 g, 81%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema 2-[(2,5-dihloropiridin-4-il)metil]-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona
DIAD (3,18 g, 15,726 mmol, 2,0 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru [2,5-metoksi-1-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-il]metanola (1,40 g, 7,864 mmol, 1,0 ekviv.), 2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-dion (4125,47 mg, 15,729 mmol, 2,0 ekviv.) i PPh3 (1735,66 mg, 11,797 mmol, 1,5 ekviv.) u tetrahidrofuranu (50 mL) na 0° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 2 h na 0° C, a zatim je reakcija ugašena vodom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijumsulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:5) dajući naslovno jedinjenje (1,4 g, 58%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema 2-([5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-2-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona
4
Smeša 2-[(2,5-dihloropiridin-4-il)metil]-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (1,40 g, 4,558 mmol, 1,0 ekviv.), 5-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-2-(trifluorometil)pirimidina (1,25 g, 4,561 mmol, 1,0 ekviv.), Pd(dppf)Cl2(330 mg, 0,451 mmol, 0,1 ekviv.) i kalijumkarbonata (1,89 g, 13,675 mmol, 3,000 ekviv.) u dioksanu (100 mL) / vodi (5 mL) mešana je 12 h na 60° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je rastvorena u etil-acetatu, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije dihlormetanom/petroleum-etrom (20:1) dajući naslovno jedinjenje (700 mg, 37%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.4: Priprema [5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-2-il]metanamina
Smeša 2-([5-hloro-2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (300,00 mg, 0,716 mmol, 1,0 ekviv.) i NH2NH2.H2O (358,64 mg, 7,164 mmol, 10.0 ekviv.) u metanolu (20 mL) mešana je 12 h na 50° C. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu. Rastvor je razređen u etil-acetatu, a čvrsta supstanca je filtrirana. Rastvor je koncentrovan u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (200 mg, 97%) u obliku sive čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema tert-butil (2S,4R)-2-[([5-karbamoil-2-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4]metil)karbamoil]-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata
Rastvor (2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-metilipirolidin-2-karboksilna kiselina (161,60 mg, 0,52 mmol, 1.00 ekviv), HATU (298 mg, 0,693 mmol, 1,0 ekviv), DIEA (268,64 mg, 2,079 mmol, 3,0 ekviv) i 6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-ilmetanamina (316,14 mg, 0,831 mmol, 1,2 ekviv) u DMF (5 ml) mešana je tokom noći na sobnoj temperaturi. Zatim je [5-hloro-2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metanamin (200,00 mg, 0,693 mmol, 1,0 ekviv.) dodat rastvoru. Dobijeni rastvor je mešan 12 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je rastvorena u etil-acetatu, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:3) dajući naslovno jedinjenje (250 mg, 72%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 6: Priprema (2R,4S)-N-([5-cijano-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamida
Smeša tert-butil (2S,4R)-2-fluoro-2-[([5-fluoro-4-[2-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-il]metil)karbamoil]pirolidinin-1-karboksilata (250 mg, 0,496 mmol, 1,000 ekviv.) i zasićene HCl u 1,4-dioksanu (30 ml) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (200 mg, 100%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 7: Priprema (2S,4R)-N-([5-cijano-1-[2-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-((5-hloro-2-(2-(trifluorometil)pirimidin-2-il]pyridin-4-il]metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamida (300,00 mg, 0,743 mmol, 1,0 ekviv), trietilamin (225,56 mg, 2,229 mmol, 3,0 ekviv) i 4-fluorobenzen-1-sulfonl-hlorida (289,20 mg, 1,486 mmol, 2,0 ekviv) u dihloromethanu (20 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 12 h. Reakciona smeša je ugašena vodom, ekstrahovana dihlormetanom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (33,5 mg, 8%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9,65 (s, 1H), 8,69 (s, 1H), 8,18 (s, 1H), 7,91−7,33 (m, 2H), 7,41−7,18 (m, 2H), 7,29−4,94 (d, J = 26,1 Hz, 1H), 5,15−4,22 (m, 3H), 4,45 (s, 3H), 3,95−3,38 (m, 1H), 2,70−3,50 (m, 1H), 2,15−2,19 (m, 2H).
1
Primer 185: Priprema 5-fluoro-N-((5-fluoro-2-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)piridin-4-il)metil)-2-(4-fluorofenilsulfonil)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-3-karboksamida.
Smeša 5-fluoro-2-(4-fluorobenzen)sulfonil)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilne kiseline i 6-fluoro-2-(4-fluorobenzen)sulfonill)-2-aza-biciklo[2.2.1]heptan-3-karboksilne kiseline (150 mg, 0,473 mmol, 1,74 ekviv.), [5-fluoro-2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-yl]methanamine(74 mg, 0,272 mmol, 1,00 ekviv.), DIEA (121 mg, 0,936 mmol, 3,44 ekviv.) i HATU (270 mg, 0,710 mmol, 2,61 ekviv.) u tetrahidrofuranu (20 mL) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:15). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (6,7 mg, 4%) u obliku bele čvrste materije. tR= 2,09 min (Lux Cellulose-4, 0,46 cm x 5 cm, 3µm, Hex:EtOH = 50:50, 1,0 ml/min).
<1>H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.58 (s, 2H), 8.59 (s, 1H), 8.28 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 8.04 - 8.00 (m, 2H), 7.34 - 7.29 (m, 2H), 5.18 - 5.00 (m, 1H), 4.77 - 4.51 (m, 2H), 4.44 (s, 1H), 4.23 (s, 1H), 3.01 (d, J = 3.9 Hz, 1H), 2.25 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 1.90 - 1.77 (m, 1H), 1.57 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 1.46 - 1.28 (m, 1H).
6-fluoro-N-([5-fluoro-2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metil)-2-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-3-karboksamid (7.1 mg, 5%) takođe je izolovan u obliku bele čvrste materije. tR= 2,76 min (Lux Cellulose-4, 0,46 cm x 5cm, 3µm, Hex:EtOH = 50:50, 1,0 ml/min).
<1>H NMR (300 MHz, CD3OD) δ 9.58 (s, 2H), 8.60 (s, 1H), 8.28 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 8.04 - 8.00 (m, 2H), 7.34 - 7.26 (m, 2H), 5.19 - 4.99 (m, 1H), 4.77 - 4.51 (m, 2H), 4.44 (s, 1H), 4.23 (s, 1H), 3.02 (d, J = 4.2 Hz, 1H), 2.25 (d, J = 10.2 Hz, 1H), 2.00 - 1.77 (m, 1H), 1.57 (d, J = 11.4 Hz, 1H), 1.41 - 1.21 (m, 1H).
Pozicija F (5-F ili 6-F) za gorenavedena dva poziciona izomera proizvoljno je određena. Stereohemija 2-prolina je prikazana.
Primer 186: Priprema (2S,4R)-1-fluoro-1-(5-fluorofenilsulfonil)-5-metil-N-((2-(2-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
2
Korak br. 1: Priprema 2-([2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona
Smeša Pd(dppf)Cl2(1,15 g, 1,572 mmol, 0,10 ekviv.), kalijum-karbonata (4,35 g, 31,475 mmol, 2,00 ekviv.), 2-[(2-bromopiridin-4-il)metil]-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (5 g, 15.77 mmol, 1.00 ekviv.) i bis(propan-2-il) [2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]boronata (4,35 g, 15,757 mmol, 1,00 ekviv.) u dioksanu (80 mL)/vodi (8 mL) mešana je 12 h na 70° C u atmosferi azota. Čvrste supstance su filtrirane i filtrat je rastvoren u vodi. Vodeni sloj je ekstrahovan etil -acetatom. pH vrednost rastvora je podešena na pH 3–4 pomoću 1N HCl. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (10 g, sirovo) u obliku žute čvrste materije.
Korak br.2: Priprema [2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metanamina
Rastvor 2-([2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (10 g, 26,021 mmol, 1,00 ekviv.) i NH2NH2.H2O (13 g, 259,686 mmol, 9,98 ekviv.) u etanolu (150 mL) mešan je 12 h na 80° C. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu. Reakcija je rastvorena u vodi. pH vrednost rastvora je podešena na pH 3–4 pomoću 1N HCl. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom. pH vrednost rastvora je podešena na 8 pomoću natrijum-bikarbonata. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (1 g, sirovo) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema (2S,4R)-1-fluoro-1-(5-fluorofenilsulfonil)-5-metil-N-((2-(2-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,5S)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (140 mg, 0,487 mmol, 0.67 ekviv), HATU (189 mg, 1,462 mmol, 2,0 ekviv), DIEA (222 mg, 0,584 mmol, 0,8 ekviv) i 2-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-ilmetanamin hidrohlorida (186 mg, 0,732 mmol, 1,00 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (4 ml) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/1). Sirovi proizvod (568 mg) je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (136 mg) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.59 (s, 2H), 8.74 - 8.72 (s, 1H), 7.95 - 7.89 (m, 3H), 7.54 (s, 1H), 7.36 - 7.26 (m, 3H), 4.94 - 4.86 (m, 1H), 4.48 - 4.41 (m, 1H), 4.19 - 4.15 (m, 1H), 3.73 - 3.67 (m, 1H), 2.22 - 2.15 (s, 1H), 1.81 - 1.71 (m, 2H), 1.70 - 1.46 (m, 4H).
Primer 187: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([2-fluoro-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)benzil)-1-[(4-fluorofenil)sulfonil)-4-metilpirolidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 52.
MS-ESI: [M+H]<+>559,2
<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.36 (s, 2H), 8.89 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 8.00 - 7.93 (m, 3H), 7.92 - 7.87 (m, 1H), 7.52 - 7.39 (m, 3H), 4.47 (d, J = 5.8 Hz, 2H), 4.27 - 4.18 (m, 1H), 3.70 - 3.45 (m, 2H), 2.45 - 2.30 (m, 1H), 2.14 - 1.93 (m, 1H), 1.37 (d, J = 20.7 Hz, 3H).
Primer 188: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[2-metoksi-6-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-4-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
4
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 48.
1H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.69 - 9.63 (s, 2H), 9.00 - 8.93 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 8.03 - 7.96 (m, 2H), 7.82 - 7.79 (d, J = 1.1 Hz, 1H), 7.52 - 7.44 (m, 2H), 6.97 - 6.92 (q, J = 1.0 Hz, 1H), 5.29 - 5.10 (d, J = 52.3 Hz, 1H), 4.53 - 4.36 (m, 2H), 4.23 - 4.16 (dd, J = 10.0, 7.1 Hz, 1H), 4.03 - 3.98 (s, 3H), 3.75 - 3.58 (m, 2H), 2.46 - 2.36 (m, 1H), 2.21 - 1.99 (m, 1H)., LCMS (ESI) m/z:558.2 [M+H]+
Primer 189: Priprema (2S,4R)-N-([5-cijano-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-ii]piridin-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema (2S,4R)-N-([5-cijano-1-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-ii]piridin-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-N-([5-hloro-2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida (150 mg, 0,267 mmol, 1,0 ekviv.), Zn(CN)2(32 mg, 0,272 mmol, 1,02\ ekviv.), Pd2(dba)3.CHCl3(28 mg, 0,027 mmol, 0,10 ekviv.) i dppf (45 mg, 0,081 mmol, 0,31 ekviv.) u DMF (15 mL) ozračena je mikrotalasnim zračenjem 1 h na 150° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je rastvorena u etil-acetatu, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:1). Sirovi proizvod (100 mg) je ponovo prečišćen preparativnom fleš HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (44,5 mg, 30%) u obliku ružičaste čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.65 (s, 2H), 8.96 (s, 1H), 8.32 (s, 1H), 7.92 - 7.88 (m, 2H), 7.52 - 7.49 (m, 1H), 7.29 - 7.24 (m, 2H), 5.17 - 5.01 (m, 2H), 4.58 - 4.52 (m, 1H), 4.34 -4.30 (m, 1H), 3.91 - 3.65 (m, 2H), 2.66 - 2.60 (m, 1H), 2.25 - 2.12 (m, 1H).
Primer 190: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([3-fluoro-5-[2-metoksi-6-(trifluorometil)piridin-3-il]fenil]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 3-bromo-2-hloro-6-(trifluorometil)piridina.
2-hloro-6-(trifluorometil)piridin-3-amin (3 g, 15,263 mmol, 1,000 ekviv.) dodat je smeši CuBr2(6,8 g, 30,445 mmol, 2,000 ekviv.) i t-BuONO (3,1 g, 30,062 mmol, 2,000 ekviv.) u CH3CN (100 mL). Dobijeni rastvor je mešan 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (3 g, 75%) u obliku smeđe tečnosti.
Korak br.2: Priprema 3-bromo-2-(2-metoksietoksi)-6-(trifluorometil)piridin
Smeša 3-bromo-2-hloro-6-(trifluorometil)piridin (3 g, 11,519 mmol, 1,00 ekviv.) i 1-metoksi-2-(sodiooksi)etana (1,2 g, 12,235 mmol, 1,10 ekviv.) u 2-metoksietanu-1-ol (30 mL) mešana je preko noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je zatim ugašena vodom, ekstrahovana dietil-eterom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (4 g) u obliku crvene tečnosti koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 3: Priprema metil 3-fluoro-5-[2-(2-metoksietoksi)-6-(trifluorometil)piridin-3-il]benzoata
Smeša 3-bromo-2-(2-metoksietoksi)-6-(trifluorometil)piridina (1,6 g, 5,33 mmol, 1,0 ekviv.), metil 3-fluoro-5-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoata (1,5 g, 5,36 mmol, 1,0 ekviv.), kalijum-karbonata (1,5 g, 10,85 mmol, 2,0 ekviv.) i Pd(dppf)Cl2(390 mg, 0,533 mmol, 0,10 ekviv.) u dioksanu (50 mL) mešana je tokom noći na 90° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, osušena iznad natrijumsulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (1,9 g, 95%) u obliku smeđeg ulja.
Korak br. 4: Priprema [3-fluoro-5-[2-(2-metoksietoksi)-6-(trifluorometil)piridin-3-il]fenil]metanola
LiAlH4(360 mg, 9,485 mmol, 2,000 ekviv.) dodat je u nekoliko serija rastvoru metil 3-fluoro-5-[2-(2-metoksietoksi)-6-(trifluorometil)piridin-3-il]benzoata (1,8 g, 4,822 mmol, 1,000 ekviv.) u tetrahidrofuranu (50 mL) na 0° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 2 h na 0° C, a zatim je reakcija ugašena vodom. Čvrste supstance su filtrirane i tečnost je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo 1,5 g naslovnog jedinjenja u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema 2-([2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona
DIAD (1,6 g, 7,913 mmol, 2,000 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru [3-metoksi-1-[2-(trifluorometil)pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-il]metanola (1,4 g, 4,055 mmol, 1,000 ekviv.), 2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-dion (1,2 g, 8,156 mmol, 2,000 ekviv.) i PPh3(2,1 g, 8,007 mmol, 2,000 ekviv.) u tetrahidrofuranu (50 mL) na 0° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 2 h na sobnoj temperaturi i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:5) dajući naslovno jedinjenje (1,3 g, 68%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 6: Priprema [3-fluoro-5-[2-(2-metoksietoksi)-6-(trifluorometil)piridin-3-il]fenil]metanamina
Rastvor 2-([3-metoksi-1-[2-(trifluorometil)pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (1,2 g, 2,53 mmol, 1,0 ekviv.) i NH2NH2.H2O (2 mL, 41,150 mmol, 10,0 ekviv.) u metanolu (10 mL) mešana je tokom noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, osušena iznad natrijumsulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (750 mg, 86%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 7: Priprema tert-butil (4R)-4-fluoro-2-[([3-fluoro-5-[2-(2-metoksietoksi)-6-(trifluorometil)piridin-3-il]fenil]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata
Smeša (2S,4S)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline (68 mg, 0,292 mmol, 1.000 ekviv), HATU (132 mg, 0,347 mmol, 1,200 ekviv), DIEA (1,05 g, 8,12 mmol, 2 ekviv) i etil-6-(aminometil)-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-3-karboksilat hidrohlorida (75 mg, 0,580 mmol, 2,000 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (30 ml) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (180 mg) u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 8: Priprema (2R,3R)-4-fluoro-N-([3-[2-(trifluorometil)-1lambda4,3-fluorazin-1-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida.
Smeša tert-butil (2S)-4-fluoro-4-(fluorometil)3-[([2-[-6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (180 mg, 0,322 mmol, 1,000 ekviv.) i zasićenog hlorovodonika u dioksanu (5 ml) mešana je 20 h na sobnoj temperaturi. Proizvod je precipitiran dodavanjem heksana. Čvrsta materija je prikupljena filtracijom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (160 mg, ) u obliku smeđe čvrste materije.
Korak br. 9: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-N-([3-fluoro-5-[2-metoksi-6-(trifluorometil)piridin-3-il]fenil]metil)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-N-([3-fluoro-4-[2-(trifluorometil)piridin-2-il]pyridin-2-yl]metil)pirolidin-2-karboksamida (160 mg, 0,32 mmol, 1,000 ekviv), trietilamin (125 mg, 0,967 mmol, 3,0 ekviv) i 4-fluorobenzen-1-sulfonl-hlorida (69 mg, 0,355 mmol, 1,1 ekviv) u dihloromethanu (20 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etilacetatom/petroleum-etrom (1:1). Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (50,3 mg, 25%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.79 - 7.84 (m, 3H), 7.40 - 7.22 (m, 6H), 7.11 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 5.12 - 4.99 (d, J = 52.0 Hz, 1H), 4.68 - 4.60 (m, 3H), 4.53 - 4.48 (dd, J = 15.2 Hz, J = 5.2 Hz, 1H), 4.29 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 3.96 - 3.87 (m, 1H), 3.78 (t, J = 4.8 Hz, 1H), 3.70 - 3.56 (m, 1H), 3.43 (s, 3H), 2.60 - 2.47 (m, 1H), 2.40 - 2.20 (m, 1H).
Primer 191: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 5-(2,6-dihloropiridin-4-il)-2-(trifluorometil)pirimidina
Smeša 2,6-dihloro-4-jodopiridina (8,61 g, 31,43 mmol, 1,00 ekviv.), 5-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-2-(trifluorometil)pirimidina (7,85 g, 28,64 mmol, 1,00 ekviv.), kalijum-karbonata (11,9 g, 86,10 mmol, 1,00 ekviv.) i Pd(dppf)Cl2(1,05 g, 1.43 mmol, 1,00 ekviv.) u dioksanu (150 mL)/vodi (10 mL) mešana je 12 h na 60° C u atmosferi azota. Reakciona smeša je rastvorena u etil-acetatu, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:20) dajući naslovno jedinjenje (6 g, 65%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br.2: Priprema 5-(2,6-dimetilopiridin-4-il)-2-(trifluorometil)pirimidina
Smeša 5-(2,6-dihloropiridin-4-il)-2-(trifluorometil)pirimidin (1,7 g, 5,78 mmol, 1,00 ekviv.), Pd(dppf)Cl2(423 mg, 0,57 mmol, 0,10 ekviv.) i dimetilcink (21,7 mL, 1,2 M u toluenu, 4.50 ekviv.) u dioksanu (100 mL) mešana je 12 h na 60° C u atmosferi azota. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:5) dajući naslovno jedinjenje (770 mg, 53%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br.3: Priprema 2,6-fluoro-4-[2-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-karbonitrila
Rastvor m-CPBA (578 mg, 3.34 mmol, 1.10 ekviv.) u etil-acetatu (5 mL) dodat je, uz mešanje, kap po kap rastvoru 5-(2,6-dimetilpiridin-4-il)-2-(trifluorometil)pirimidina (770 mg, 3,04 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlorometanu (50 mL) na 0° C. Dobijeni rastvor je mešan 12 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijumsulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije dihlormetanom/etanolom (50:1) dajući naslovno jedinjenje (750 mg, 92%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 4: Priprema [6-[2-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-il]metanamin hidrohlorida
Rastvor 2,6-dimetil-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-1-ijum-1-olata (750mg, 2,78 mmol, 1,00 ekviv.) u anhidridu sirćetne kiseline (15 mL) zagrevan je pri refluksu 1 h. Smeša je ohlađena i izlivena u ledenu vodu. Reakcija je zatim ugašena zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije dihlormetanom/etanolom (20/1) dajući naslovno jedinjenje (650 mg, 75%) u obliku beličaste čvrste materije.
Korak br.5: Priprema [6-[2-(trifluorometil)piridin-4-il]pirimidin-2-il]metanola.
Rastvor [6-metil-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-2-il]metil-acetata (650 mg, 2,08 mmol, 1,00 ekviv.) i hlorovodonika (15 mL, 493,67 mmol, 1,00 ekviv.) u etanolu (15 mL) zagrevan je pri refluksu 2 h. Dobijeni rastvor je razređen vodom. Reakcija je zatim ugašena zasićenim rastvorom natrijum-bikarbonata, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije dihlormetanom/etanolom (20:1) dajući naslovno jedinjenje (340 mg, 60%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 6: Priprema 2-([6-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona
DIAD (511 mg, 2,52 mmol, 2,00 ekviv.) dodat je rastvoru [6-metil-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-2-il]metanola (340 mg, 1,26 mmol, 1,00 ekviv.), 2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (372 mg, 2,52 mmol, 2.00 ekviv.) i PPh3(662 mg, 2,52 mmol, 1,99 ekviv.) u THF (50 mL) kap po kap na 0° C. Dobijeni rastvor je mešan 12 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije acetatom/petroleum-etrom (1:1) dajući naslovno jedinjenje (300 mg, 60%) u obliku bele čvrste materije.
1
Korak br. 7: Priprema 6-metil-6-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-karbonitrila.
Rastvor 2-[6-metl-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-2-il]-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (600 mg, 1,56 mmol, 1,00 ekviv.) i NH2NH2.H2O (754 mg, 15,06 mmol, 9,64 ekviv.) u metanolu (15 mL) mešan je 12 h na 25° C. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil-acetatu, a čvrsta supstanca je filtrirana. Filtrat je koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo 686 mg (sirovog) naslovnog jedinjenja u obliku ulja.
Korak br. 8: Priprema (2S,3R)-3-hidroksi-2-[([6-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidini-1-karboksilata.
Rastvor (2S,3R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-3-hidroksipirolidin-2-karboksilne kiseline (97 mg, 0,41 mmol, 1,19 ekviv.), DIEA (136 mg, 1,05 mmol, 3,00 ekviv.), HATU (213 mg, 0,56 mmol, 1,59 ekviv.) i [6-metil-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-2-il]metanamina (94 mg, 0,35 mmol, 1,00 ekviv.) u DMF (5 mL) mešan je 30 minuta na 25° C. Reakciona smeša je rastvorena u etil-acetatu, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo 168 mg (sirovog) naslovnog jedinjenja u obliku čvrste materije.
Korak br. 9: Priprema tert-butil (2R,5S)-3-metil-5-[([6-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata
DAST (112 mg, 0,69 mmol, 1,99 ekviv.) dodat je rastvoru tert-butil (2S,3R)-3-hidroksi-2-[([6-metil-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-2-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (168 mg, 0,34 mmol, 1,00 ekviv.) u
2
dihlorometanu (20 mL) kap po kap na 0° C, a reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena natrijum-bikarbonatom/vodom, ekstrahovana etilacetatom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo 65 mg (39%) naslovnog jedinjenja u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 10: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-N-([6-[2-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida.
Smeša tert-butil (2S,3R)-3-fluoro-2-[([6-fluoro-4-[2-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-il]metil)karbamoil]pirolidinin-1-karboksilata (65 mg, 0,13 mmol, 1,00 ekviv.) i zasićene HCl u 1,4-dioksanu (30 ml) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu radi dobijanja naslovnog jedinjenja (120 mg, sirovo) u obliku sirove čvrste materije.
Korak br. 11: Priprema (2R,3S)-3-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-N-([6-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorid (84 mg, 0,43 mmol, 1,51 ekviv.) dodat je rastvoru (2R,3S)-3-fluoro-N-([6-metil-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-2-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorid (120 mg, 0,28 mmol, 1,00 ekviv.) i TEA (87 mg, 0,86 mmol, 3,00 ekviv.) u dihlorometanu (20 mL). Reakciona smeša je mešana 12 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (24,4 mg, 16%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.18 (s, 2H), 7.98 - 7.88 (m, 3H), 7.60 - 7.50 (m, 1H), 7.34 - 7.23 (m, 2H), 6.91 (m, 1H), 5.39 - 5.22 (d, J = 51.0 Hz, 1H), 4.94 - 4.86 (m, 1H), 4.60 - 4.55 (m, 1H), 4.41 - 4.33 (m, 1H), 3.84 - 3.70 (m, 1H), 3.33 - 3.24 (m, 1H), 2.72 - 2.62 (s, 3H), 2.20 - 1.95 (m, 2H).
Primer 192: Priprema (2S,4R)-N-([5-cijano-1-[2-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br.1: Priprema 5-(2,5-dihloropiridin-4-il)-2-(trifluorometil)pirimidina
Smeša 2,5-dihloro-4-jodopiridina (3,86 g, 14,09 mmol, 1,00 ekviv.), 5-(tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-2-(trifluorometil)pirimidina (4,26 g, 15,54 mmol, 1,10 ekviv.), kalijum-karbonata (5,83 g, 42,19 mmol, 2,99 ekviv.) i Pd(dppf)Cl2(516 mg, 0,70 mmol, 0,05 ekviv.) u dioksanu (50 mL)/vodi (5 mL) mešana je 12 h na 60° C u atmosferi azota. Čvrste supstance su filtrirane. Filtrata je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije acetatom/petroleum-etrom (1:100) dajući naslovno jedinjenje (2,2 g, 53%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema metil 5-hloro-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-2-karboksilata
Smeša 5-(2,5-dihloropiridin-4-il)-2-(trifluorometil)pirimidina (2,19 g, 7,47 mmol, 1,00 ekviv.), Pd(dppf)Cl2(549 mg, 0,75 mmol, 0,10 ekviv.) i TEA (2,27 g, 22,47 mmol, 3,00 ekviv.) u metanolu (50 mL) mešana je 12 h na 60° C u atmosferi ugljen-monoksida. Reakcioni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije acetatom/petroleum-etrom (1:100) dajući naslovno jedinjenje (1,2 g, 52%) u obliku ružičaste čvrste materije.
Korak br.3: Priprema 5-dihloro-4-[2-(trifluorometil)piridin-2-il]piridina
4
DIBAL-H (4,5 mL, 31,64 mmol, 3,00 ekviv.) dodat je rastvoru metil 5-hloro-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-2-karboksilata (482 mg, 1,51 mol, 1,00 ekviv.) u dihlorometanu (200 mL) kap po kap na -78° C u atmosferi azota i mešan 20 min na -78° C. Reakcija je zatim ugašena metanolom. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije acetatom/petroleum-etrom (1:20) dajući naslovno jedinjenje 344 mg (sirovo) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br.4: Priprema [5-[2-(trifluorometil)piridin-2-il]pirimidin-4-il]metanola.
NaBH4(18 mg, 0,47 mmol, 0,39 ekviv.) dodat je rastvoru 5-hloro-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-2-karbaldehida (344 mg, 1,19 mmol, 1,00 ekviv.) u metanolu (200 mL) u nekoliko serija na -20° C i mešan 30 minuta. Reakciona smeša je ugašena zasićenim NH4Cl, ekstrahovana etil-acetatom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije acetatom/petroleum-etrom (1/1) dajući naslovno jedinjenje (330 mg, 95%) u obliku smeđe čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema 2-([5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona
DIAD (490 mg, 2,42 mmol, 2.00 ekviv.) dodat je rastvoru [5-hloro-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-2-il]metanola (350 mg, 1,20 mmol, 1,00 ekviv.), 2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (356 mg, 2,42 mmol, 2,00 ekviv.) i PPh3(634 mg, 2,41 mmol, 2,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (200 mL) kap po kap na 0° C. Dobijeni rastvor je mešan 12 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije acetatom/petroleum-etrom (1/5) dajući naslovno jedinjenje 800 mg (sirovo) u obliku žutog ulja.
Korak br.6: Priprema [5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metanamina
Rastvor 2-([5-hloro-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-2-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (800 mg, 1,91 mmol, 1,00 ekviv.), NH2NH2.H2O (957 mg, 19,17 mmol, 10,00 ekviv.) u metanolu (60 mL) mešan je 3 h na 60° C. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil-acetatu. Čvrste supstance su filtrirane. Filtrat je koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo 700 mg (sirovog) naslovnog jedinjenja u obliku žutog ulja.
Korak br. 7: Priprema tert-butil (2S,4R)-2-[([5-karbamoil-2-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]piridin-4]metil)karbamoil]-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata
Smeša (2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilna kiselina (690 mg, 2,95 mmol, 1.23 ekviv), DIEA (1,091 g, 2,86 mmol, 1,20 ekviv), HATU (618 mg, 4,78 mmol, 2,00 ekviv) i [5-fluoro-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-2-il]piridin-2-il]metanamina (690 mg, 2,39 mmol, 1,00 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (5 ml) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije acetatom/petroleum-etrom (1:5) dajući naslovno jedinjenje (800 mg, 66%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 8: Priprema (2R,4S)-N-([5-cijano-5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]fenil]metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamida
Smeša tert-butil (2S,4R)-2-fluoro-2-[([5-fluoro-4-[2-(trifluorometil)piridin-2-il]piridin-2-il]metil)karbamoil]pirolidinin-1-karboksilata (210 mg, 0,41 mmol, 1,00 ekviv.) i zasićene HCl u 1,4-dioksanu (30 ml) mešana je 12 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo 168 mg (92%) naslovnog jedinjenja u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 9: Priprema (2S,4R)-N-([5-cijano-1-[2-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorid (180 mg, 0,92 mmol, 2,42 ekviv.) dodat je rastvoru (2S,4R)-N-([5-hloro-4-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-2-il]metil)-4-fluoropirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (168 mg, 0,38 mmol, 1,00 ekviv.) i TEA (200 mg, 1,97 mmol, 5,17 ekviv.) u dihlorometanu (30 mL) i mešan 4 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Sirovi proizvod (200 mg) je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (32,3 mg, 15%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.10 (s, 2H), 8.73 (s, 1H), 7.87 - 7.84 (m, 2H), 7.58 (s, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.23 (s, 1H), 7.21 (s, 1H), 5.12 - 4.99 (d, J = 52.0 Hz, 1H), 4.94 - 4.88 (m, 1H), 4.57 - 4.52 (m, 1H), 4.29 - 4.25 (t, J = 8.4 Hz, 1H), 3.91 - 3.61 (m, 2H), 2.61 - 2.51 (m, 1H), 2.31 - 2.15 (m, 1H).
Primer 193: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-5-metil-N-([2-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema 1-tert-butil 2-metil (2S)-4-[[(tert-butildimetilsilil)oksi]metil]-4-fluoropirolidin-1,2-dikarboksilata
Rastvor 2-metil (2S,4S)-4-hidroksipirolidin-1,2-dikarboksilata (10 g, 40,77 mmol, 1,00 ekviv.), imidazola (2,78 g, 40,83 mmol, 1,10 ekviv.) i tert-butil(hloro)dimetilsilana (6,7 g, 44,45mmol, 1,10ekviv.) u DMF (100 mL) mešan je preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije acetatom/petroleum-etrom (1:8) dajući naslovno jedinjenje (16 g) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br. 2: Priprema 1-tert-butil 2-metil (2S,4S)-4-[(tert-butildimetilsilil)oksi]-5-oksopirolidin-1,2-dikarboksilata
Smeša NaIO4(7,43 g, 34,73 mmol, 2,50 ekviv.) i rutenijum(IV) oksida (370 mg, 2,78 mmol, 0,20 ekviv.) u vodi (107 mL) mešana je 5 minuta na sobnoj temperaturi. Tome je dodat rastvor 1-tert-butil 2-metil (2S,4S)-4-[(tert-butildimetilsilil)oksi]pirolidin-1,2-dikarboksilat (5 g, 13.90 mmol, 1.00 ekviv.) u etil-acetatu (60 mL) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran NaHSO3/vodom i slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije acetatom/petroleum-etrom (1:8) dajući naslovno jedinjenje (3,3 g, 64%) u obliku bezbojnog ulja.
Korak br.3: Priprema metil (2S,4S)-1-tert-butil 2-metil 4-(tert-butildimetilsililoksi)-5-hidroksi-5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilata
Bromo(metil)magnezijum (3,48 mL, 87,55 mmol, 1,20 ekviv.) dodat je rastvoru 1-tert-butil 2-metil (2S,4S)-4-[(tert-butildimetilsilil)oksil-5-oksopirolidin-1,2-dikarboksilat (3,25 g, 8,70 mmol, 1,00 ekviv.) u THF (50 mL) kap po kap na -40° C i mešan je 2h na -40° C. Reakcija je zatim ugašena zasićenim NH4Cl, ekstrahovana etil-acetatom, isprana vodom i slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:8) dajući naslovno jedinjenje (1,1 g, 32%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 4: Priprema metil 4-[(tert-butildimetilsilil)oksi]-5-metil-3,4-dihidro-2H-pirol-2-karboksilata
Rastvor metil (2S)4-[[(tert-butoksi)karbonil]amino]-5-oksoheksanoata (6 g, 15,40 mmol, 1,00 ekviv) i trifluorosirćetne kiseline (10 ml, 67,31 mmol, 1,00 ekviv) u dihloromethanu (20 ml) mešane je 5 dan na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo 6 g naslovnog jedinjenja u obliku smeđeg ulja.
Korak br. 5: Priprema metil (2S,4S)-4-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-5-metilpirolidin-2-karboksilata
Smeša metil (2S)4-metil-3,4-dihidro-2H-pirol-2-karboksilata (6 g, 22,10 mmol, 1,00 ekviv) i paladijum na ugljenu (500 mg) u metanolu (3 ml) mešana je 2 h na sobnoj temperaturi u vodoničnoj atmosferi. Čvrste supstance su filtrirane. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo 5,6 g (93%) u obliku žutog ulja.
Korak br. 6: Priprema 1-tert-butil 2-metil (2S)-4-[[(tert-butildimetilsilil)oksi]metil]-5-fluoropirolidin-1,2-dikarboksilata
Smeša-4-bromo-2,3-dihidro-1H-izoindol-1-on (5,5 g, 20,11 mmol, 1,00 ekviv), TEA (8,13 g, 80,34 mmol, 4,00 ekviv), 4-dimetilaminopiridina (245mg, 2,00 mmol) i di-tert-butildikarbonat (13,16 g, 60,29 mmol, 3,00 ekviv) u tetrahidrofuranu (50 ml) mešana je 12 h na 20° C. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:10) dajući naslovno jedinjenje (3 g, 40%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 7: Priprema (2S,4S,5S)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-[(tertbutildimetilsilil)oksi]-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline
Rastvor 1-tert-butil 2-metil (2S,4S,5S)-4-[(tert-butildimetilsilil)oksi]-5-metilpirolidin-1,2-dikarboksilata (20 mg, 0,05 mmol, 1,00 ekviv.) i LiOH (3 mg, 0,12 mmol, 2,00 ekviv.) u metanolu (2 mL)/vodi (0,2 mL) mešan je 5 h na 40° C. Dobijeni rastvor je razređen vodom. pH vrednost rastvora je podešena na pH 4 sirćetnom kiselinom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan dihlormetanom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Na taj se način dobilo 20 mg (sirovog) naslovnog jedinjenja u obliku žutog ulja.
Korak br. 8: Priprema tert-butil (-3R,5S)-2-metil-5-[([2-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata
Rastvor (2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-5-metilipirolidin-2-karboksilna kiselina (400 mg, 1,11 mmol, 1.00 ekviv), HATU (880 mg, 2,31 mmol, 1,50 ekviv), DIEA (600 mg, 4,64 mmol, 3,00 ekviv) i 2-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-ilmetanamina (464 mg, 1,82 mmol, 1,20 ekviv) u DMF (5 ml) mešana je tokom noći na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen u etil-acetatu, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:3) dajući naslovno jedinjenje (360 mg, 54%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 9: Priprema tert-butil (2R,3S)-3-fluoro-2-[([2-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidini-1-karboksilata.
Rastvor tert-butil (2S,3S,5S)-3-[(tert-butildimetilsilil)oksi]-2-metil-5-[([2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (360 mg, 0.60 mmol, 1.00 ekviv.) i TBAF (1,34 mL, 5,12 mmol, 1,00 ekviv.) u THF (10 mL) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (2:1) dajući naslovno jedinjenje (300 mg, sirovo) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 10: Priprema (2S,3R)-3-hidroksi-2-[([2-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidini-1-karboksilata.
DAST (424 mg, 2,63 mmol, 3,00 ekviv.) dodat je rastvoru tert-butil (2S,3S,5S)-3-hidroksi-2-metil-5-[([2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (300 mg, 0,62 mmol, 1,00 ekviv.) u dihlorometanu (10 mL) kap po kap na 0° C i mešan preko noći na sobnoj temperaturi.
Reakcija je zatim ugašena vodom, ekstrahovana dihlormetanom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (2:1) dajući naslovno jedinjenje (110 mg, 37%) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 11: Priprema (2S,4R)5-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((2-(2-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša tert-butil (2S,3R)-3-fluoro-2-[([2-metoksi-1-[2-(trifluorometil)pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-il]metil)karbamoil]pirolidinin-1-karboksilata (110 mg, 0,22 mmol, 1,00 ekviv.) i zasićenog hlorovodonika u 1,4-dioksanu (5 ml) mešana je tokom noći na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Na taj se način dobilo 105 mg (sirovog) naslovnog jedinjenja u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 12: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-5-metil-N-([2-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamida
4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorid (73 mg, 0,37 mmol, 1,20 ekviv.) dodat je rastvoru (2S,4R,5S)-4-fluoro-5-metil-N-([2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (105 mg, 0,25 mmol, 1,00 ekviv.) i natrijumbikarbonata (41,5 mg, 0,49 mmol, 2.00 ekviv.) u THF (8 mL) / vodi (8 mL). Mešano je 1 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (16,9 mg, 12%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.65 (s, 2H), 8.80 (s, 1H), 8.13 (s, 1H), 7.93 - 7.90 (m, 2H), 7.54 - 7.51 (m, 2H), 7.28 - 7.25 (m, 1H), 5.03 - 4.99 (m, 1H), 4.82 - 4.68 (d, J = 51.6 Hz, 1H), 4.50 - 4.32 (m, 1H), 4.30 - 4.27 (m, 1H), 4.15 - 4.08 (m, 1H), 2.65 - 2.55 (m, 1H), 2.39 - 2.23 (m, 1H), 1.48 - 1.38 (m, 3H).
Primer 194: Priprema (2S)-1-(4-fluorofenil) sulfonil-5,5-dimetil-N-[[6-[6-(trifluorometil)-3-piridil] pirimidin-4-il] metil] pirolidin-2-karboksamida.
1
Korak br.1: Prateći proceduru za HATU kuplovanje iz primera 35, korak 1: tert-butil (5S)-2,2-dimetil-5-[[6-[6-(trifluorometil)-3-piridil]pirimidin-4-il]metilkarbamoil]pirrolidin-1-karboksilata (INT-194-2) (320 mg, 81%) pripremljen je od (2S)-1-tert-butoksikarbonil-5,5-dimetil-pirolidin-2-karboksilne kiseline (200 mg, 0,8 mmol) i [6-[6-(trifluorometil)-3-piridil]pirimidin-4-il]metanamina (230 mg, 0,9 mmol), DIPEA (0,4 mL, 2,5 mmol), HATU (383 mg, 0,99 mmol) u DMF (2mL). MS-ESI: [M+H]+ 480,5
Korak br.2: Prati iste procedure za ukljanjanje boc grupe iz primera 35, korak 3: (2S)-5,5-dimetil-N-[[6-[6-(trifluorometil)-3-piridil]pirimidin-4-il]metil]pirolidin-2-karboksamid hidrohlorid (INT-194-3) (250 mg, 81%) pripremljen je od tert-butil (5S)-2,2-dimetil-5-[[6-[6-(trifluorometil)-3-piridil]pirimidin-4-il]metilkarbamoil]pirolidin-1-karboksilata (387 mg, 0,8 mmol) i 4 N HCl u dioksanu (2 mL, 8 mmol). MS-ESI: [M+H]<+>380,5
Korak br. 3: Prati iste procedure za formiranje sulfonamida iz primera 35, korak 4: Naslovno jedinjenje 194 (2S)-1-(4-fluorofenil) sulfonil-5,5-dimetil-N-[[6-[6-(trifluorometil)-3-piridil] pirimidin-4-il] metil] pirolidin-2-karboksamid (162 mg, 37%) pripremljeno je od (2S)-5,5-dimetil-N-[[6-[6-(trifluorometil)-3-piridil]pirimidin-4-il]meti]pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida (INT194-3) (306 mg, 0,8 mmol), Et3N (2,25 mL, 16 mmol), 4-fluorobenzenesulfonil hlorida (188 mg, 0.97 mmol) u DCM (1 mL). MS-ESI: [M+H]<+>538,5<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.42 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 9.29 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 8.81 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 8.73 (ddd, J = 8.4, 2.3, 0.9 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 1.3 Hz, 1H), 8.11 -7.94 (m, 3H), 7.49 - 7.19 (m, 2H), 4.67 - 4.48 (m, 2H), 4.39 (dd, J = 17.4, 5.6 Hz, 1H), 2.24 -2.10 (m, 1H), 2.02 (td, J = 11.5, 6.5 Hz, 1H), 1.84 (ddt, J = 12.0, 6.1, 2.7 Hz, 1H), 1.71 (ddd, J = 11.8, 6.7, 2.9 Hz, 1H), 1.45 (s, 3H), 1.24 (s, 3H).
2
Primer 195: Priprema (2S, 4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-N-[[5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]-3-piridil]metil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Prateći proceduru za HATU kuplovanje iz primera 35, korak 1: tertbutil (2S,4R)-2-[(5-bromo-3-piridil)metilkarbamoil]-4-fluoro-pirolidin-1-karboksilata (INT-195-2) (280 mg, 32%) pripremljen je od (2S,4R)-1-tert-butoksikarbonil-4-fluoro-pirolidin-2-karboksilne kiseline (500 mg, 2,1 mmol) i (5-bromo-3-piridil)metanamina (441 mg, 2,4 mmol), DIPEA (1,1 mL, 6,4 mmol), HATU (998 mg, 2,6 mmol) u DMF (2mL). MS-ESI:
[M+H]<+>403,3
Korak br. 2: Prati iste procedure za ukljanjanje boc grupe iz primera 35, korak 3: (2S,4R)-N-[(5-bromo-3-piridil)metil]-4-fluoro-pirolidin-2-karboksamid (INT-195-3) (210 mg, 100%) pripremljen je od tert-butil (2S,4R)-2-[(5-bromo-3-piridil)metilkarbamoil]-4-fluoro-pirolidin-1-karboksilata (INT-195-2) (280 mg, 0,7 mmol) i 4 N HCl u dioksanu (1,7 mL, 7 mmol). MS-ESI: [M+H]<+>303,3
Korak br. 3: Prati iste procedure za formiranje sulfonamida iz primera 35, korak 4: (2S,4R)-N-[(5-bromo-3-piridil)metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida (INT-195-4) (200 mg, 63%) pripremljen je od (2S,4R)-N-[(5-bromo-3-piridil)metil]-4-fluoro-pirolidin-2-karboksamida (INT-195-3) (210 mg, 0,7 mmol), Et3N (1,9 mL, 14 mmol), 4-fluorobenzenesulfonil-hlorida (162 mg, 0,8 mmol) u DCM (1 mL). MS-ESI: [M+H]<+>461,3
Korak br.4: Prati iste procedure Suzuki kuplovanja iz primera 42, korak 1: Naslovno jedinjenje (2S,4R)-4-fluoro-N-(4-fluoro-5-(2-(trifluorometil)pirimidin-5-il)benzil)2-((-3-fluorofenil)sulfonil)pirolidin-2-karboksamid (62 mg, 54%) pripremljen je od (2S,4R)-N-[(5-bromo-2-fluoro-fenil)metil]-4-fluoro-1-(4-fluorofenil)sulfonil-pirolidin-2-karboksamida 1 (100 mg, 0,22 mmol), [5-(trifluorometil)pirimidin-2-il]boronske kiseline (46 mg, 0,24 mmol), cezijum-karbonata 1 M u vodi (0,3 mL, 0,3 mmol), Pd(dppf)Cl2(18 mg, 0,02 mmol) u acetonitrilu (1 mL). MS-ESI: [M+H]<+>528,5
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.53 - 9.37 (m, 2H), 9.07 - 8.97 (m, 1H), 8.70 (d, J = 2.0 Hz, 1H), 8.23 (t, J = 2.2 Hz, 1H), 8.05 - 7.87 (m, 2H), 7.56 - 7.33 (m, 2H), 5.19 (d, J = 52.8 Hz, 1H), 4.63 - 4.33 (m, 2H), 4.25 - 4.09 (m, 1H), 3.78 - 3.67 (m, 1H), 3.64 (dd, J = 14.9, 2.4 Hz, 1H), 2.49 - 2.28 (m, 1H), 2.07 (s, 1H).
Primer 196: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((5-(2-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema 2-[(2-bromo-5-fluoropiridin-4-il)metil]-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona
DIAD (1,57 g, 7,76 mmol, 2,00 ekviv.) dodat je kap po kap rastvoru [2,3-metoksi-1-[5-(trifluorometil)pirazin-2-il]-1H-pirazol-4-il]metanola (690 mg, 4,69 mmol, 1,20 ekviv.), 2-dihidro-1H-izoindol-1,3-dion (800,00 mg, 3,88 mmol, 1,00 ekviv.) i PPh3 (2,04 g, 7,78 mmol, 2,00 ekviv.) u tetrahidrofuranu (40 mL) na 0° C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan 12 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silikagela etil-acetatom/petroleum-etrom (1:5) dajući naslovno jedinjenje (500 mg, 38%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema 2-([5-fluoro-2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona
Smeša Pd(dppf)Cl2(196 mg, 0,268 mmol, 0,10 ekviv.), kalijum-karbonata (741 mg, 5,362 mmol, 2,0 ekviv.), 2-[(2-bromo-5-fluoropiridin-4-il)metil]-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-dion (900 mg, 2,686 mmol, 1,0 ekviv.) i bis(propan-2-il) [2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]boronata (3,3 g, 11,954 mmol, 4,45 ekviv.) u 1,4-dioksanu (25 mL) / water(2,5 mL)
4
mešana je 12 h na 70° C u atmosferi azota. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:5) dajući naslovno jedinjenje (1g, 91%) u obliku žute čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema 2-([5-fluoro-2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona
Rastvor 2-([5-fluoro-2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metil)-2,3-dihidro-1H-izoindol-1,3-diona (250 mg, 0,621 mmol, 1,00 ekviv.) i MeONa (340 mg, 6,294 mmol, 10,128 ekviv.) u metanolu (50 mL) mešan je 5 h na 85° C. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu i razređena vodom. pH vrednost rastvora je podešena na 3-51N hlorovodonikom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (250 mg, 93%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br.4: Priprema [5-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metanamina
Rastvor 2-[([5-metoksi-2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metil)karbamoil]benzojeve kiseline (250 mg, 0,578 mmol, 1,00 ekviv.) i NH2NH2.H2O (300 mg, 5,993 mmol, 10,36 ekviv.) u etanolu (30 mL) mešan je 12 h na 80° C. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu i razređena vodom. pH vrednost rastvora je podešena na 3-5 1N hlorovodonikom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom. pH vrednost vodenog rastvora je podešena na 8 pomoću natrijum-bikarbonata. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etilacetatom. Kombinovani ekstrakti su osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (120 mg, 73%) u obliku čvrste materije.
Korak br. 5: Priprema (2S,4R)-4-hidroksi-2-[([5-[2-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)karbamoil]pirolidini-1-karboksilata.
Rastvor (2S,4R)-1-[(tert-butoksi)karbonil]-4-fluoropirolidin-2-karboksilne kiseline (108 mg, 0,463 mmol, 1,097 ekviv.), DIEA (164 mg, 1,269 mmol, 3,0 ekviv.), HATU (193 mg, 0,508 mmol, 1,202 ekviv.) i [5-metoksi-2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metanamina (120 mg, 0,422 mmol, 1,000 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (8 mL) mešan je 30 minuta na 25° C. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1/5). Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (180 mg, 85%) u obliku svetložutog ulja.
Korak br. 6: Priprema (2R,3R)-4-fluoro-N-([5-[2-(trifluorometil)-1lambda4,3-fluorazin-1-il]pirimidin-4-il]metil)pirolidin-2-karboksamid hidrohlorida.
Rastvor tert-butil (2S,4R)-4-fluoro-2-[([5-metoksi-2-[2-(trifluorometil)pirimidin-5-il]piridin-4-il]metil)karbamoil]pirolidin-1-karboksilata (120 mg, 0,24 mmol, 1,00 ekviv.) i trifluorosirćetne kiseline (4 mL) u dihlorometanu (20 mL) mešan je 30 minuta na 25° C. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je rastvoren u vodi. pH vrednost rastvora je podešena na 7-9 vodenim rastvorom natrijum-bikarbonata. Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil-acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (140 mg, sirovo) u obliku svetložute čvrste materije.
Korak br. 7: Priprema (2S,4R)-4-fluoro-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((5-(2-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,4R)-4-fluoro-N-([5-fluoro-4-[2-(trifluorometil)piridin-2-il]pyridin-2-yl]metil)pirolidin-2-karboksamida (225 mg, 0,563 mmol, 1,00 ekviv), trietilamin (171 mg, 1,690 mmol, 3,0 ekviv) i 4-fluorobenzen-1-sulfonl-hlorida (132 mg, 0,678 mmol, 1,20 ekviv) u dihloromethanu (20 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 12 h. Kombinovani ekstrakti su isprani zasićenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovani u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (20,7 mg) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 9.55 (s, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.88 - 7.91 (m, 2H), 7.44 - 7.52 (s, 1H), 7.23 - 7.26 (m, 2H), 4.99 - 5.12 (d, J = 51.2 Hz, 1H), 4.83 - 4.90 (m, 1H), 4.29 - 4.39 (m, 2H), 4.07 (s, 3H), 3.84 - 3.93 (m, 1H), 3.61 - 3.73 (m, 1H), 2.55 - 2.61 (m, 1H), 2.13 - 2.26 (m, 1H).
Primer 197: Priprema (2S,4R)-N-([3-hloro-1-[4-(trifluorometil)fenil]-1H-pirazol-4-il]metil)-1-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,5S)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (62 mg, 0,24 mmol, 1.20 ekviv), HATU (114 mg, 0,30 mmol, 1,50 ekviv), DIEA (77 g, 595,78 mmol, 3,00 ekviv) i 3-[4-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-ilmetanamin hidrohlorida (55 mg, 0,20 mmol, 1,00 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (4 ml) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen vodom, ekstrahovan etil-acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Sirovi proizvod (100 mg) je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (63,3 mg, 61%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.59 (s, 1H), 8.55 - 8.52 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 8.00 -7.88 (m, 6H), 7.55 - 7.51 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 4.31 - 4.21 (m, 2H), 3.73 - 3.71 (m, 1H), 3.58 -3.55 (m, 1H), 2.21 - 2.14 (m, 2H).
Primer 198: Priprema (S)-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-metil-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)azetidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema tert-butil 2-metil-2-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metilkarbamoil)azetidin-1-karboksilat.
Smeša sirove 1-(tert-butoksikarbonil)-2-metilazetidin-2-karboksilne kiseline (0,1 g, 0,51mmol), (6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metanamin (0,13 mg, 0,51 mmol),
iPr2NEt (0,17 ml, 0,98 mmol), PyAOP (0,29 mg, 0,54 mmol) i 4-DMAP (0,006 mg, 0,05 mmol) u DMF (3 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Smeša je isprana zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3i slanog rastvora, a zatim ekstrahovana pomoću EtOAc (2x). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4), filtrirani, propušteni kroz sloj silika gela, isprani EtOAc i koncentrovani radi dobijanja sirovog tert-butil 2-metil-2-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metilkarbamoil)azetidin-1-karboksilata, koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 2: Priprema 2-metil-2-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metilkarbamoil)azetidinijum-hlorida
Rastvoru sirovog tert-butil 2-metil-2-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metilkarbamoil)azetidin-1-karboksilata (0,22 g, 0,49mmol), u CH2Cl2(2 ml) dodtao je 4 N HCl u dioksanu (1 ml, 4 mmol), a smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom radi dobijanja 2-metil-2-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metilkarbamoil)azetidinijum-hlorida u obliku sirove soli, koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak br. 3: Priprema (S)-1-(4-fluorofenilsulfonil)-2-metil-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)azetidin-2-karboksamida
Smeša sirovog 2-metil-2-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metilkarbamoil)azetidinijum-hlorida (0,085 g, 0,22mmol), 4-fluorobenzen-1-sulfonilhlorida (0,047 mg, 0,24mmol) i Et3N (0,15 ml, 1,1mmol) u CH2Cl2(2 ml) mešana je na sobnoj temperaturi tokom 12 h. Smeša je razblažena vodom i ekstrahovana CH2Cl2(2x). Kombinovani organski slojevi su osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani. Dobijeni ostatak je prečišćen hiralnom SFC dajući naslovno jedinjenje (22 mg) kao slabije eluiran izomer:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.48 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 9.32 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.79 (dd, J = 8.2, 1.7 Hz, 1H), 8.74 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.03 - 7.95 (m, 2H), 7.54 - 7.43 (m, 2H), 4.66 (dd, J = 17.4Hz, J = 6.4 Hz, 1H), 4.49 (dd, J = 17.4, J = 5.4 Hz, 1H), 3.97 - 3.86 (m, 1H), 3.82 - 3.74 (m, 1H), 2.10 - 1.98 (m, 1H), 1.54 (s, 3H).
Primer 199: Priprema (2S,4R)-N-([3-ciklopropil-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)-1-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema (2S,5R)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline
4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorid (2,14 g, 11,00 mmol, 1,00 ekviv.) dodat je rastvoru (2S)-azetidin-2-karboksilne kiseline (1 g, 9,89 mmol, 1,10 ekviv.) u zasićenom vodenom rastvoru natrijum-hidroksida (6 mL)/ tetrahidrofurana (6 mL) na 0° C. Dobijena smeša je mešana 18 h na sobnoj temperaturi. Smeša je ekstrahovana etrom. pH vrednost vodenog rastvora je podešena na 3 pomoći 2 M hlorovodonika. Dobijena smeša je ekstrahovana etilacetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (1,7 g, 60%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 2: Priprema (2S,4R)-N-([3-hloro-1-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]-1H-pirazol-4-il]metil)-1-fluoro-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]pirolidin-2-karboksamida.
Smeša (2S,5S)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-5-metilpirolidin-2-karboksilne kiseline (62 mg, 0,24 mmol, 1.20 ekviv), HATU (114 mg, 0,30 mmol, 1,50 ekviv), DIEA (77 mg, 0,60 mmol, 3,00 ekviv) i 3-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-ilmetanamin hidrohlorida (55 mg, 0,20 mmol, 1,00 ekviv) u N,N-dimetilformamidu (4 ml) mešana je 1 h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razređen vodom, ekstrahovan etil-acetatom, ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovan u vakuumu. Sirovi proizvod (100 mg) je prečišćen preparativnom HPLC tehnikom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (40,2 mg, 39%) u obliku bele čvrste materije.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.21 (s, 1H), 8.67 (s, 1H), 8.56 - 8.53 (m, 1H), 8.44 - 8.41 (m, 1H), 8.09 - 8.07 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.98 - 7.93 (m, 2H), 7.55 - 7.49 (m, 2H), 4.31 - 4.22 (m, 3H), 3.73 - 3.70 (m, 1H), 3.61 - 3.52 (m, 1H), 2.27 - 2.11 (m, 2H).
Primer 200: Priprema (2S,4R)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-4-metil-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)azetidin-2-karboksamida.
Korak br. 1: Priprema metil 1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-4-metilazetidin-2-karboksilata
4-fluorobenzen-1-sulfonil-hlorid (312 mg, 1,60 mmol, 1,20 ekviv.) dodat je rastvoru metil 4-metilazetidin-2-karboksilata (400 mg, 3,10 mmol, 1,00 ekviv.), 4-dimetilaminopiridin (240 mg, 1,96 mmol, 0,70 ekviv.) i TEA (0,8 mL, 5,76 mmol, 4,00 ekviv.) u dihlorometanu (12 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana 12 h na sobnoj temperaturi. Smeša je razređena vodom, ekstrahovana dihlormetanom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (1:5) dajući naslovno jedinjenje (220 mg, 25%) u obliku narandžastog ulja.
Korak br. 2: Priprema 1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-4-(metoksimetil) pirolidin-2-karboksilne kiseline.
Smeša metil (1S,5S)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-4-metilpirolidin-2-karboksilata (180 mg, 0,63 mmol, 1,00 ekviv) i LiOH (15 mg, 0,63 mmol, 1,00 ekviv) u metanolu (4 ml) / voda (0,5 ml) mešana je tokom noći na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je rastvoren u vodi. pH vrednost rastvora je podešena na 3 pomoći 1 M hlorovodonika. Dobijena smeša je ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Na taj se način dobilo naslovno jedinjenje (0,12 g, 70%) u obliku bele čvrste materije.
Korak br. 3: Priprema (2S,4R)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-4-metil-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)azetidin-2-karboksamida
Rastvor 1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-4-metilazetidin-2-karboksilne kiseline (123 mg, 0,45 mmol, 1,00 ekviv.), [6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metanamin hidrohlorida (198 mg, 0,68 mmol, 1,50 ekviv.), DIEA (290 mg, 2,24 mmol, 5,00 ekviv.) i HATU (259 mg, 0,68 mmol, 1,50 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (4 mL) mešan je preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je razređena vodom, ekstrahovana etil-acetatom, isprana slanim rastvorom, osušena iznad anhidrovanog natrijum-sulfata i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela pomoću elucije etil-acetatom/petroleum-etrom (30:100). Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom hiralnom HPLC radi dobijanja naslovnog jedinjenja (96,9 mg, 42%) u obliku bele čvrste materije. tR= 5,32 min (Lux Cellulose-4, 0,46 cm x 5cm, 3µm, Hex:EtOH = 80:20, 1,0 ml/min).
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.47 (m, 1H), 9.31 - 9.30 (m, 1H), 9.08 - 9.04 (m, 1H), 8.79 - 8.76 (m, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.10 - 8.07 (m, 1H), 7.91 - 7.86 (m, 2H), 7.43 - 7.38 (m, 2H), 4.77 - 4.72 (m, 1H), 4.51 - 4.45 (m, 3H), 2.37 - 2.31 (m, 1H), 2.11 - 2.06 (m, 1H), 1.28 - 1.26 (m, 3H).
A (2R,4S)-1-[(4-fluorobenzen)sulfonil]-3-metil-N-([6-[6-(trifluorometil)piridin-3-il]pirimidin-4-il]metil)azetidin-2-karboksamid (94,4 mg, 41%) takođe je izolovan u obliku bele čvrste materije. tR= 6.48 min (Lux Cellulose-4, 0,46 cm x 5cm, 3µm, Hex:EtOH = 80:20, 1,0 ml/min).
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 9.47 (m, 1H), 9.31 - 9.30 (m, 1H), 9.08 - 9.04 (m, 1H), 8.79 - 8.76 (m, 1H), 8.18 (s, 1H), 8.10 - 8.07 (m, 1H), 7.91 - 7.87 (m, 2H), 7.44 - 7.38 (m, 2H), 4.77 - 4.72 (m, 1H), 4.57 - 4.43 (m, 3H), 2.39 - 2.31 (m, 1H), 2.11 - 2.03 (m, 1H), 1.28 - 1.26 (m, 3H).
1
Primer 201: Priprema (S)-1-(4-fluorofenilsulfonil)-N-((6-(6-(trifluorometil)piridin-3-il)pirimidin-4-il)metil)azetidin-2-karboksamida.
Priprema naslovnog jedinjenja prati opšte procedure kao u primeru 198.
LCMS: m/z = 496 (vreme zadržavanja: 4,78)
<1>H NMR (400 MHz, DMSO) δ 9.49 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 9.30 (d, J = 1.2 Hz, 1H), 8.96 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 8.80 (dd, J = 8.3, 1.9 Hz, 1H), 8.16 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.05 - 7.98 (m, 2H), 7.56 (t, J = 8.8 Hz, 2H), 4.56 (ddd, J = 40.0, 17.3, 6.0 Hz, 2H), 4.42 - 4.35 (m, 1H), 3.81 - 3.73 (m, 1H), 3.59 (dd, J = 16.9, 8.5 Hz, 1H), 2.34 - 2.15 (m, 2H), LCMS (ESI) m/z: 496 [M+H]
Tabela 4: MS podaci za pojašnjena jedinjenja.
2
4
IC50 Utvrđivanje pojašnjenih jedinjenja.
IC50 (efikasne koncentracije) jedinjenja humanih i murinskih TRPA1 kanala utvrđene su pomoću instrumenta FLIPR Tetra. CHO ćelije koje eksprimiraju TRPA1 stavljene su na ploču za uzorke sa 384 bunarčića, inkubirane preko noći na 37° C, natopljene BD bojom za indikaciju kalcijuma tokom 1 h na 37 °C s produžetkom od 15 minuta na sobnoj temperaturi. Pufer analize bio je balansirani slani rastvor Hank (HBSS) koji sadrži 20 mM HEPES (pH podešena na 7.4) uz 0,02% BSA.
Nakon natapanja bojom i hlađenja ploče, jedinjenja su dodata ćelijama pomoću FLIPR Tetra. Ploče su zatim inkubirane jedinjenjem na 20 minuta na sobnoj temperaturi, pre dodavanja agonista. Nakon ove inkubacije, dodat je cinamaldehid koncentracije ∼ EC80 (75 uM za humani TRPA1 i 45 uM za murinski TRPA1) radi aktivacije kanala, a izmeren je influks kalcijuma izazvan blokiranjem cinamaldehida.
IC50s su imale standardne Hilove funkcije, održavajući Hilov koeficijent (n) fiksnim od 1,5. Fiksiranjem Hilovog koeficijenta obično se smanjuje varijabilnost utvrđivanja IC50. IC50 vrednosti su pojedinačno pregledane kako bi se utvrdilo da su tačke MIN i MAX pravilno postavljene pre validacije rezultata. Podaci reprezentativnih jedinjenja formule I i II izloženi su u Tabeli 5 u nastavku.
Tabela 5: IC50 Utvrđivanje pojašnjenih jedinjenja.
1
2
4
4
41
42
4
44
4
4
4

Claims (1)

  1. PATENTNI ZAHTEVI 1. Jedinjenje formule II:
    pri čemu: (2) A je
    B je B<2>i R<5>je R<5b>; B2 je piridinil, pri čemu svaki piridinil od B<2>,opciono je supstituisan sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od halogena, (C1−C6)alkila, –O(C1−C6)alkila, – O(C1−C6)alkil-O(C1−C6)alkila, (C3−C7)cikloalkila, (C1−C6)haloalkila, –CN, i 6-članog heteroarila, pri čemu svaki 6-člani heteroaril opciono je supstituisan sa jednim ili više (C1−C6)alkilom ili (C1−C6)haloalkilom; R<1>je fenil, 5-člani heteroaril ili 6-člani heteroaril, pri čemu svaki fenil, 5-člani heteroaril ili 6-člani heteroaril od R<1>opciono je supstituisan sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od halogena, −CN, (C1−C6)alkila i (C1−C6)haloalkila; jedna R<3b>grupa je halogen, −CN ili (C1−C6)alkil, a preostale R<3b>grupe su nezavisno odabrane od H, (C1−C6)alkila i (C1−C6)haloalkila; R<4>je H, (C1−C6)alkil ili (C1−C6)haloalkil; R<5b>je
    ili njegova so. 4 2. Jedinjenje prema zahtevu 1, pri čemu jedna R<3b>grupa je F, a preostale R<3b>grupe su H. 3. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1-2, pri čemu (1) A grupa je
    4. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1–3, pri čemu B<2>je piridinil, pri čemu svaki piridinila od B<2>opciono je supstituisan sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od halogena, (C1−C6)alkil, –O (C1−C6)alkil, –O(C1−C6)alkil-O(C1−C6)alkil, (C1−C6)haloalkil, – CN i 6-člani heteroaril, pri čemu svaki 6-člani heteroaril opciono je supstituisan sa jednim ili više (C1−C6)alkilom ili (C1−C6)haloalkilom; 5. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1-4, pri čemu, B<2>je:
    pri čemu svaki R<Z1>je nezavisno odabran od H, halogena, (C1−C6)alkila, −O(C1−C6)alkila, −O(C1−C6)alkil-O(C1−C6)alkila, (C3-C7)cikloalkila, (C1−C6)haloalkila, −CN, i 6-članih heteroarila, pri čemu svaki 6-člani heteroaril opciono je supstituisan sa (C1−C6)alkilom ili (C1−C6)haloalkilom. 6. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1–5, pri čemu R<4>je H. 7. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1–6, pri čemu R<1>je fenil ili tiofenil, pri čemu svaki fenil ili tiofenil od R<1>, opciono je supstituisani sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od halogena, −CN, (C1−C6)alkila i (C1−C6)haloalkila. 8. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1–7, pri čemu R<1>je fenil ili tiofenil, pri čemu svaki fenil ili tiofenil od R<1>, opciono je supstituisani sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od halogena i −CN. 9. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1–8, pri čemu R<1>je fenil ili tiofenil, pri čemu svaki fenil ili tiofenil od R<1>opciono je supstituisani sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od fluror, hloro i −CN. 4 10. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 1–9, pri čemu R<1>je 4-fluorofenil, 3-fluorofenil, 4-cijanofenil, 2-hlorotiofen-5-il, 3,4,-difluorofenil ili 3-fluoropiridin-5-il. 11. Jedinjenje prema zahtevu 1, koje je:
    12. Jedinjenje prema zahtevu 1, koje je:
    41
    ili njegova so. 13. Jedinjenje prema zahtevu 1, pri čemu (1) A grupa
    14. Jedinjenje prema zahtevu 1, pri čemu (1) A grupa
    je:
    15. Jedinjenje prema zahtevu 1, pri čemu (1) A grupa
    je:
    16. Jedinjenje prema zahtevu 1, pri čemu (1) A grupa
    je:
    17. Jedinjenje prema zahtevu 1, pri čemu (1) A grupa
    je:
    18. Jedinjenje prema zahtevu 1, pri čemu (1) A grupa
    je:
    41 19. Jedinjenje prema zahtevu 1, pri čemu (1) A grupa
    je:
    20. Jedinjenje prema zahtevu 1, pri čemu (1) A grupa
    je:
    21. Jedinjenje prema zahtevu 1, pri čemu: (1) A grupa
    je:
    22. Jedinjenje prema bilo kom od zahteva 13-21, pri čemu: R<1>je fenil ili tiofenil, pri čemu svaki fenil ili tiofenil od R<1>, opciono je supstituisan sa jednom ili više grupa nezavisno odabranih od fluoro, hloro i −CN; i R<4>je H. 23. Farmaceutska kompozicija, sadrži jedinjenje formule II kao što je opisano u bilo kom od zahteva 1–22 ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, farmaceutski prihvatljivi nosač, diluent ili ekscipijent. 24. Jedinjenje formule II kao što je opisano u bilo kom od zahteva 1–22 ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u medicinskoj terapiji. 25. Jedinjenje formule II kao što je opisano u bilo kom od zahteva 1–22 ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u lečenju ili profilaksi respiratornog poremećaja. 26. Jedinjenje formule II kao što je opisano u bilo kom od zahteva 1–22 ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u modulaciji aktivnosti TRPA1. 27. Jedinjenje formule II kao što je opisano u bilo kom od zahteva 1–22 ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so za upotrebu u lečenju ili profilaksi bolesti ili stanja posredovanih TRPA1 aktivnošću. 28. Jedinjenje za upotrebu prema zahtevu 27, pri čemi bolest ili stanje je bol, svrab, upalni poremećaj, poremećaj unutrašnjeg uha, groznica ili drugi poremećaj termoregulacije, traheobronhijalna ili dijafragmalna disfunkcija, poremećaj gastrointestinalnog ili urinarnog trakta, hronična opstruktivna bolest pluća, inkontinencija, ili poremećaj doveden u vezu sa smanjenim protokom krvi do CNS ili hipoksijom CNS, posebno bol, artritis, svrab, kašalj, astma, upalna bolest creva ili poremećaj unutarnjeg uha. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5 41
RS20190254A 2013-10-11 2014-10-09 Supstituisana heterociklična sulfonamidna jedinjenja korisna kao modulatori trpa1 RS58376B1 (sr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361890127P 2013-10-11 2013-10-11
CN2014086380 2014-09-12
EP14789194.9A EP3055302B1 (en) 2013-10-11 2014-10-09 Substituted heterocyclic sulfonamide compounds useful as trpa1 modulators
PCT/EP2014/071593 WO2015052264A1 (en) 2013-10-11 2014-10-09 Substituted heterocyclic sulfonamide compounds useful as trpa1 modulators

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS58376B1 true RS58376B1 (sr) 2019-04-30

Family

ID=51794850

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20190254A RS58376B1 (sr) 2013-10-11 2014-10-09 Supstituisana heterociklična sulfonamidna jedinjenja korisna kao modulatori trpa1

Country Status (22)

Country Link
US (4) US20160221945A1 (sr)
EP (1) EP3055302B1 (sr)
JP (2) JP2016532673A (sr)
KR (1) KR20160064230A (sr)
CN (1) CN105612153B (sr)
BR (1) BR112016002012A2 (sr)
CA (1) CA2917193A1 (sr)
DK (1) DK3055302T3 (sr)
ES (1) ES2713323T3 (sr)
HR (1) HRP20190329T1 (sr)
HU (1) HUE041652T2 (sr)
LT (1) LT3055302T (sr)
MX (1) MX363457B (sr)
PL (1) PL3055302T3 (sr)
PT (1) PT3055302T (sr)
RS (1) RS58376B1 (sr)
RU (1) RU2675792C2 (sr)
SG (1) SG11201609411SA (sr)
SI (1) SI3055302T1 (sr)
TR (1) TR201902249T4 (sr)
TW (1) TWI657076B (sr)
WO (1) WO2015052264A1 (sr)

Families Citing this family (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SG11201706451TA (en) * 2015-02-15 2017-09-28 Hoffmann La Roche 1-(het)arylsulfonyl-(pyrrolidine or piperidine)-2-carboxamide derivatives and their use as trpa1 antagonists
CN107531666A (zh) 2015-02-20 2018-01-02 里格尔药品股份有限公司 Gdf‑8抑制剂
EP3317258A4 (en) * 2015-07-01 2019-06-26 Pharmakea, Inc. LYSYL OXIDASE LIKE 2 INHIBITORS AND USES THEREOF
WO2017135462A1 (ja) * 2016-02-05 2017-08-10 Ｅａファーマ株式会社 複素環スルホンアミド誘導体及びそれを含有する医薬
CN109071444A (zh) 2016-03-16 2018-12-21 拜耳作物科学股份公司 作为农药和植物保护剂的n-(氰苄基)-6-(环丙基-羰基氨基)-4-(苯基)-吡啶-2-羧酰胺衍生物及相关化合物
JP6975515B2 (ja) * 2016-07-20 2021-12-01 エフ.ホフマン−ラ ロシュ アーゲーF. Hoffmann−La Roche Aktiengesellschaft Ｔｒｐａ１モデュレーターとしてのスルホニルシクロアルキルカルボキサミド化合物
WO2018015410A1 (en) * 2016-07-20 2018-01-25 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic proline compounds
JP7071959B2 (ja) * 2016-08-12 2022-05-19 エフ．ホフマン－ラ ロシュ アーゲー スルホニルピリジルｔｒｐ阻害剤
EP3630752B1 (en) 2017-06-01 2021-06-30 Bristol-Myers Squibb Company Substituted nitrogen containing compounds
JP2019019124A (ja) * 2017-07-19 2019-02-07 日本化薬株式会社 ピラジン化合物
EP3720849A2 (en) * 2017-12-08 2020-10-14 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Processes for making modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
WO2019164778A1 (en) * 2018-02-20 2019-08-29 Genentech, Inc. Process for preparing 1-arylsulfonyl-pyrrolidine-2-carboxamide transient receptor potential channel antagonist compounds and crystalline forms thereof
KR102006157B1 (ko) 2018-03-22 2019-08-01 (주)에스더블유엠 자율주행 차량의 주행 유도선 제공 방법 및 장치
KR102006158B1 (ko) 2018-03-27 2019-08-01 (주)에스더블유엠 차량 주행유도 장치 및 방법
KR102068473B1 (ko) 2018-03-30 2020-02-11 (주)에스더블유엠 차량 시뮬레이션 방법 및 장치
EP3951077B1 (en) 2019-03-28 2024-07-10 Sumitomo Construction Machinery Co., Ltd. Excavator and construction system
CN111116456B (zh) * 2019-12-26 2022-01-28 南通华祥医药科技有限公司 一种4,4-二氟哌啶盐酸盐的制备方法
FR3114235A1 (fr) 2020-09-18 2022-03-25 Université Grenoble Alpes Inhibition du canal trpa1 astrocytaire comme nouvelle cible therapeutique neuroprotectrice dans les phases prodromales de la maladie d’alzheimer
CN112624966B (zh) * 2020-12-25 2022-12-23 杭州澳赛诺生物科技有限公司 一种2-氨甲基-4-甲基-5-吡啶羧酸的合成方法
IT202100015098A1 (it) 2021-06-09 2022-12-09 Flonext S R L Composto antagonista del canale trpa1 per uso in patologie degenerative della retina
CN116478076A (zh) * 2023-04-26 2023-07-25 南京优氟医药科技有限公司 一种(2s,4s)-1-叔丁氧羰基-2-(二氟甲基)-4-羟基吡咯烷的制备方法
TW202542165A (zh) 2023-12-19 2025-11-01 瑞士商愛杜西亞製藥有限公司 大環食慾素激動劑
WO2025259779A1 (en) * 2024-06-12 2025-12-18 Insmed Incorporated Uses of certain carboxamides as dpp1 inhibitors
CN119019440A (zh) * 2024-10-24 2024-11-26 浙江雅辰药物科技股份有限公司 一种6-环丙基吡啶-3-硼酸频那醇酯的制备方法

Family Cites Families (24)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US3773919A (en) 1969-10-23 1973-11-20 Du Pont Polylactide-drug mixtures
US4485045A (en) 1981-07-06 1984-11-27 Research Corporation Synthetic phosphatidyl cholines useful in forming liposomes
EP0102324A3 (de) 1982-07-29 1984-11-07 Ciba-Geigy Ag Lipide und Tenside in wässriger Phase
US4544545A (en) 1983-06-20 1985-10-01 Trustees University Of Massachusetts Liposomes containing modified cholesterol for organ targeting
HUT35524A (en) 1983-08-02 1985-07-29 Hoechst Ag Process for preparing pharmaceutical compositions containing regulatory /regulative/ peptides providing for the retarded release of the active substance
US5004697A (en) 1987-08-17 1991-04-02 Univ. Of Ca Cationized antibodies for delivery through the blood-brain barrier
US5112596A (en) 1990-04-23 1992-05-12 Alkermes, Inc. Method for increasing blood-brain barrier permeability by administering a bradykinin agonist of blood-brain barrier permeability
US5268164A (en) 1990-04-23 1993-12-07 Alkermes, Inc. Increasing blood-brain barrier permeability with permeabilizer peptides
ATE191853T1 (de) 1992-07-27 2000-05-15 Us Health Zielgerichte liposome zur blut-hirne schranke
GB9826174D0 (en) * 1998-11-30 1999-01-20 Celltech Therapeutics Ltd Chemical compounds
US6514221B2 (en) 2000-07-27 2003-02-04 Brigham And Women's Hospital, Inc. Blood-brain barrier opening
US20020065259A1 (en) 2000-08-30 2002-05-30 Schatzberg Alan F. Glucocorticoid blocking agents for increasing blood-brain barrier permeability
US7034036B2 (en) 2000-10-30 2006-04-25 Pain Therapeutics, Inc. Inhibitors of ABC drug transporters at the blood-brain barrier
DE10121982B4 (de) 2001-05-05 2008-01-24 Lts Lohmann Therapie-Systeme Ag Nanopartikel aus Protein mit gekoppeltem Apolipoprotein E zur Überwindung der Blut-Hirn-Schranke und Verfahren zu ihrer Herstellung
JP4202250B2 (ja) 2001-07-25 2008-12-24 バイオマリン ファーマシューティカル インコーポレイテッド 血液脳関門輸送を調節するための組成物および方法
US20030162695A1 (en) 2002-02-27 2003-08-28 Schatzberg Alan F. Glucocorticoid blocking agents for increasing blood-brain barrier permeability
CN101284136A (zh) 2002-12-03 2008-10-15 布朗歇特洛克菲勒神经科学研究所 传输物质穿过血脑屏障的人工低密度脂蛋白载体
US20050089473A1 (en) 2003-09-10 2005-04-28 Cedars-Sinai Medical Center Potassium channel mediated delivery of agents through the blood-brain barrier
JP2009096764A (ja) * 2007-10-17 2009-05-07 Japan Tobacco Inc ピペリジン化合物及びそのｈｃｖポリメラーゼ阻害剤としての利用
WO2010141805A1 (en) * 2009-06-05 2010-12-09 Janssen Pharmaceutica Nv Heterocyclic amides as modulators of trpa1
JP2013028537A (ja) * 2009-11-11 2013-02-07 Dainippon Sumitomo Pharma Co Ltd Ｎ−ベンジルアミド誘導体およびそれを含有する医薬組成物
EP2520566A1 (en) * 2011-05-06 2012-11-07 Orion Corporation New Pharmaceutical Compounds
CN104203236A (zh) * 2012-01-17 2014-12-10 味之素株式会社 杂环酰胺衍生物和含有其的药物
RU2603770C2 (ru) * 2014-11-28 2016-11-27 Федеральное государственное автономное образовательное учреждение высшего образования "Белгородский государственный национальный исследовательский университет" (НИУ "БелГУ") Замещенные пиразинопиримидиноны как блокаторы trpa1 каналов, фармацевтическая композиция, способы их получения и применения

Also Published As

Publication number Publication date
US20180282272A1 (en) 2018-10-04
DK3055302T3 (en) 2019-03-18
JP2016532673A (ja) 2016-10-20
EP3055302B1 (en) 2018-12-26
JP6735330B2 (ja) 2020-08-05
TW201605795A (zh) 2016-02-16
PL3055302T3 (pl) 2019-05-31
US20180118680A1 (en) 2018-05-03
KR20160064230A (ko) 2016-06-07
HK1219478A1 (zh) 2017-04-07
MX2016002368A (es) 2016-05-18
CN105612153B (zh) 2018-09-14
CA2917193A1 (en) 2015-04-16
HUE041652T2 (hu) 2019-05-28
PT3055302T (pt) 2019-02-26
BR112016002012A2 (pt) 2017-08-01
RU2016115868A3 (sr) 2018-06-25
RU2016115868A (ru) 2017-11-17
SI3055302T1 (sl) 2019-04-30
JP2019065022A (ja) 2019-04-25
ES2713323T3 (es) 2019-05-21
HRP20190329T1 (hr) 2019-04-19
EP3055302A1 (en) 2016-08-17
US11236046B2 (en) 2022-02-01
MX363457B (es) 2019-03-25
WO2015052264A1 (en) 2015-04-16
TWI657076B (zh) 2019-04-21
US20200048197A1 (en) 2020-02-13
LT3055302T (lt) 2019-03-12
US20160221945A1 (en) 2016-08-04
SG11201609411SA (en) 2016-12-29
RU2675792C2 (ru) 2018-12-25
TR201902249T4 (tr) 2019-03-21
CN105612153A (zh) 2016-05-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6735330B2 (ja) Ｔｒｐａ１調節因子として有用な置換複素環式スルホンアミド化合物
JP6700291B2 (ja) １−（ｈｅｔ）アリールスルホニル−（ピロリジン又はピペリジン）−２−カルボキサミド誘導体、及びｔｒｐａ１拮抗薬としてのそれらの使用
JP6626449B2 (ja) ＰＤＥ２阻害剤としての置換［１，２，４］トリアゾロ［１，５−ａ］ピリミジン−７−イル化合物
EP4225746A1 (en) Mrgx2 antagonists
EP2976341A1 (en) Acyclic cyanoethylpyrazolo pyridones as janus kinase inhibitors
AU2014234908A1 (en) N-(2-cyano heterocyclyl)pyrazolo pyridones as Janus kinase inhibitors
WO2015164520A1 (en) Substituted 2,4,5,6-tetrahydropyrrolo[3,4-c] pyrazole and 4,5,6,7-tetrahydro-2h-pyrazolo [4,3-c] pyridine compounds as glyt1 inhibitors
CN115667259A (zh) 抑制h-pgds的稠环化合物
HK1219478B (zh) 用作trpa1调节剂的取代的杂环磺酰胺化合物
HK1251815B (zh) 1-(杂)芳基磺酰基-(吡咯烷或哌啶)-2-甲酰胺衍生物及其用途