RS58739B1 - Elitni događaj ee-gm3 i postupci i kompleti za identifikaciju takvog događaja u biološkim uzorcima - Google Patents

Elitni događaj ee-gm3 i postupci i kompleti za identifikaciju takvog događaja u biološkim uzorcima

Info

Publication number
RS58739B1
RS58739B1 RS20190242A RSP20190242A RS58739B1 RS 58739 B1 RS58739 B1 RS 58739B1 RS 20190242 A RS20190242 A RS 20190242A RS P20190242 A RSP20190242 A RS P20190242A RS 58739 B1 RS58739 B1 RS 58739B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
nucleotide
soybean variety
seq
sequence according
nucleotide sequence
Prior art date
Application number
RS20190242A
Other languages
English (en)
Inventor
Justin Thomas Mason
Leslie James Lettow
Mark Alan Eby
William H Eby
Günter Welz
Steven Verhaeghe
Beuckeleer Marc De
Veerle Habex
Jean-Marc Ferullo
Original Assignee
Basf Agricultural Solution Seed Us Llc
Ms Technologies Llc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Basf Agricultural Solution Seed Us Llc, Ms Technologies Llc filed Critical Basf Agricultural Solution Seed Us Llc
Publication of RS58739B1 publication Critical patent/RS58739B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H5/00—Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their plant parts; Angiosperms characterised otherwise than by their botanic taxonomy
    • A01H5/10—Seeds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C12Q1/6876—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes
    • C12Q1/6888—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms
    • C12Q1/6895—Nucleic acid products used in the analysis of nucleic acids, e.g. primers or probes for detection or identification of organisms for plants, fungi or algae
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01H—NEW PLANTS OR NON-TRANSGENIC PROCESSES FOR OBTAINING THEM; PLANT REPRODUCTION BY TISSUE CULTURE TECHNIQUES
    • A01H5/00—Angiosperms, i.e. flowering plants, characterised by their plant parts; Angiosperms characterised otherwise than by their botanic taxonomy
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8274—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for herbicide resistance
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/82—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for plant cells, e.g. plant artificial chromosomes (PACs)
    • C12N15/8241—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology
    • C12N15/8261—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield
    • C12N15/8271—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance
    • C12N15/8274—Phenotypically and genetically modified plants via recombinant DNA technology with agronomic (input) traits, e.g. crop yield for stress resistance, e.g. heavy metal resistance for herbicide resistance
    • C12N15/8275—Glyphosate
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q1/00—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions
    • C12Q1/68—Measuring or testing processes involving enzymes, nucleic acids or microorganisms; Compositions therefor; Processes of preparing such compositions involving nucleic acids
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/13—Plant traits
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12Q—MEASURING OR TESTING PROCESSES INVOLVING ENZYMES, NUCLEIC ACIDS OR MICROORGANISMS; COMPOSITIONS OR TEST PAPERS THEREFOR; PROCESSES OF PREPARING SUCH COMPOSITIONS; CONDITION-RESPONSIVE CONTROL IN MICROBIOLOGICAL OR ENZYMOLOGICAL PROCESSES
    • C12Q2600/00—Oligonucleotides characterized by their use
    • C12Q2600/156—Polymorphic or mutational markers

Landscapes

  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Physiology (AREA)
  • Developmental Biology & Embryology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Measuring Or Testing Involving Enzymes Or Micro-Organisms (AREA)
  • Breeding Of Plants And Reproduction By Means Of Culturing (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
  • Investigating Or Analysing Biological Materials (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
  • Pretreatment Of Seeds And Plants (AREA)

Description

Opis
Unakrsna referenca sa srodnim prijavama
[0001] Ova prijava ima prioritet SAD privremene patentne prijave br. 61/367,227, podnete 23.07.2010.; SAD privremene patentne prijave br. 61/263,690, podnete 23.11.2009.; i evropske prijave br. EP 09014564.0, podnete 23.11.2009.
Oblast pronalaska
[0002] Ovaj pronalazak se odnosi na transgene bilke soje, biljni materijal i semena, okarakterisane time što imaju specifičan događaj transformacije, naročito preko prisustva gena koji kodiraju proteine koji daju toleranciju na herbicid, na specifičnoj lokaciji u genomu soje. Biljke soje prema pronalasku kombinuju fenotip tolerancije na herbicid sa agronomskim učinkom, genetičkom stabilnošću i funkcionalnošću u različitim genetičkim osnovama ekvivalentnim netransformisanoj liniji soje u odsustvu jednog ili više herbicida. Ovaj pronalazak dalje daje postupke i komplete za identifikaciju prisustva biljnog materijala koji sadrži specifičan događaj transformacije EE-GM3 u biološkim uzorcima.
Osnova pronalaska
[0003] Fenotipska ekspresija transgena u biljci je određena strukturom gena iili samim genom ili preko njegove ili njihove lokacije u biljnom genomu. Istovremeno prisustvo transgena ili "strane DNK" na različitim lokacijama u genomu će uticati na ukupni fenotip biljke na različite načine. Agronomski ili industrijski uspešno uvođenje komercijalno interesantne osobine u biljku pomoću genetičke manipulacije može biti duga procedura zavisna od nekoliko faktora. Stvarna transformacija i regeneracija genetički transformisanih biljaka su samo prvi u seriji koraka selekcije, koji obuhvataju ekstenzivnu genetičku karakterizaciju, oplemenjivanje i procenu u ispitivanjima na polju, konačno dovodeći do selekcije elitnog događaja.
[0004] Nedvosmislena identifikacija elitnog događaja postaje sve više važna u pogledu diskusija o novoj hrani/stočnoj hrani, segregaciji GMO i ne-GMO proizvoda i identifikaciji vlasničkog materijala. Idealno, takav postupak identifikacije je brz i jednostavan, bez potrebe za ekstenzivnom laboratorijskom postavkom. Pored toga, postupak bi trebalo da obezbedi rezultate koji omogućavaju nedvosmisleno određivanje elitnog događaja bez ekspertske interpretacije, ali koje bi se održalo pod stručnim ispitivanjem ako je neophodno. Specifični alati za upotrebu u identifikaciji elitnog događaja EE-GM3 u biološkim uzorcima su opisani ovde.
[0005] U ovom pronalasku, EE-GM3 je identifikovan kao elitni događaj iz populacije transgenih biljaka soje u razvoju soje (Glycine max) tolerantne na herbicid koje sadrže gen koji kodira toleranciju glifosata u kombinaciji sa genom koji pruža toleranciju na inhibitore 4-hidroksi fenilpiruvat dioksigenaze (HPPD), od kojih je svaki pod kontrolom promotora koji se može eksprimirati u biljci.
[0006] Green, J. (2009). Evolution of Glifosat-Resistant Crop Technology. Weed Science, 57(1), 108-117 opisuje useve rezistentne na glifosat, zajedno sa dosta rezistencija na drugi herbicid, naročito sa rezistencijom na inhibitore HPPD.
Međunarodna patentna objava WO 98/02562 opisuje transgene biljke rezistentne na inhibitore HPPD i inhibitore EPSPS.
Herouet-Guicheney, C., et al. Safety evaluation of the double mutant 5-enol pyruvylshikimate-3-phosphate synthase (2mEPSPS) from maize that confers tolerance to glyphosate herbicide in transgenic plants. Regulatory Toxicology and Pharmacology 54.2 (2009): 143-153., opisuje transgene biljke koje sadrže gen za rezistenciju 2mEPSPS glifosata. Patentne objave FR 2770854 A1 i EP 1186666 opisuju upotrebu HPPD-Pf-W336 gena za generisanje transgenih biljaka rezistentnih na inhibitore HPPD.
Pored toga, u stanju tehnike su otkrivene biljke soje koje sadrže gen za toleranciju na herbicid. Međutim, nijedno od otkrića iz stanja tehnike ne navodi niti sugeriše predmetni pronalazak.
[0007] U stanju tehnike je poznato da dobijanje elitnog događaja transformacije tolerantnog na komercijalni herbicid u biljkama soje sa prihvatljivim agronomskim učinkom, bez negativnog uticaja na prinos, i obezbeđivanje dovoljne tolerancije na herbicid, sigurno 2 različite klase herbicida, nije nipošto jednostavno.
[0008] Zaista, objavljeno je da je prvi događaj soje (događaj 40-3-2) pušten na tržište sa tolerancijom na herbicid, imao značajan negativan uticaj na prinos u poređenju sa (skoro)izogenim linijama (Elmore et al. (2001) Agron. J.93:408-412).
[0009] Takođe, napravljena je Optimum GAT(TM) soja za kombinaciju tolerancije glifosata sa tolerancijom na ALS herbicid, ali je objavljeno od strane osobe koja ih je razvila da ova soja nije ispunjavala standarde za samu toleranciju na glifosfat (bez kombinacije sa drugim događajem soje tolerancije na glifosat kao što je događaj 40-3-2 (videti, npr., www.bloomberg.com/apps/news?pid=newsarchive&sid=ad4L0hH9MKWE)).
Rezime poželjnih primera izvođenja prema pronalasku
[0010] Predmetni pronalazak se odnosi na biljku soje, ili njene ćelije, delove, seme ili potomstvo, od kojih svaki sadrži u svom genomu elitni događaj, pri čemu navedeni elitni događaj, kao što se nalazi u referentnom semenu deponovanom u NCIMB pod deponovanim brojem NCIMB 41659, je genetički lokus koji sadrži stranu DNK koja sadrži himerni gen koji kodira HPPD Pf W336 i himerni gen koji kodira 2mEPSPS. Pronalazak se takođe odnosi na biljku soje tolerantnu na glifosat i/ili herbicide inhibitore HPPD, kao što su izoksaflutol, kloji se može dobiti uvođenjem u genom navedenog elitnog događaja.
[0011] Specifičnije, predmetni pronalazak se odnosi na transgenu biljku soje, ili njena semena, ćelije ili tkiva, koji sadrže, stabilno integrisanu u svoj genom, ekspresionu kasetu koja sadrži gen za toleranciju na herbicid koji sadrži kodirajuću sekvencu 2mEPSPS gena i drugi gen za toleranciju na herbicid koji sadrži kodirajuću sekvencu HPPD-Pf W336 (obe kao što su opisane u Primeru 1.1 ovde i kao što su predstavljene u SEQ ID No 1), koja je tolerantna na glifosat i herbicid inhibitor HPPD kao što je izoksaflutol, i, u odsustvu jednog ili više herbicida, ima agronomski učinak koji je značajno ekvivalentan netransgenoj izogenoj liniji. Posle primene jednog ili više herbicida na koje je obezbeđena tolerancija, biljka će imati bolji agronomski fenotip u poređenju sa netransgenom biljkom.
[0012] Prema predmetnom pronalasku biljka soje ili njeno seme, ćelije ili tkiva sadrže elitni događaj EEGM3.
[0013] Specifičnije, predmetni pronalazak se odnosi na transgenu biljku soje, njeno seme, ćelije ili tkiva, čija genomska DNK je okarakterisana činjenicom da, kada je analizirana u PCR identifikacionom protokolu kao što je ovde opisan, upotrebom dva prajmera usmerena na 5’ ili 3’ flankirajući region EE-GM3 i strane DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid, respektivno, proizvodi fragment koji je specifičan za EE-GM3. Prajmeri mogu biti usmereni protiv 5’ flankirajućeg regiona unutar SEQ ID NO: 2 i strane DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid, respektivno. Prajmeri takođe mogu biti usmereni protiv 3’ flankirajućeg regiona unutar SEQ ID NO: 3 i strane DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid, respektivno, kao što su prajmeri koji sadrže ili se sastoje od (uglavnom) od nukleotidne sekvence prema SEQ ID NO: 5 i SEQ ID NO: 4 ili SEQ ID No.: 7 respektivno, i prinos DNK fragmenta od između 100 i 800 bp, kao što je fragment od oko 263 bp ili 706 bp.
[0014] Referentno seme koje sadrži elitni događaj prema pronalasku deponovano je u NCIMB pod pristupnim brojem NCIMB 41659. Jedan primer izvođenja prema pronalasku je seme koje sadrži elitni događaj EE-GM3 deponovan kao pristupni broj NCIMB 41659, koje će da raste u biljku soje tolerantnu na herbicide, naročito tolerantnu na glifosat i/ili inhibitore HPPD kao što je izoksaflutol. Seme NCIMB deponovani broj NCIMB 41659, je serija semena koja se sastoji od najmanje oko 95% transgenih semena homozigotnih za prenetu DNK, koja sadrži elitni događaj prema pronalasku, koja će da rastu u biljke tolerantne na herbicid, pri čemu su biljke tolerantne na glifosat i/ili izoksaflutol. Seme ili seme potomstva koje se može dobiti ili je dobijeno od deponovanog semena (npr., posle ukrštanja sa drugim biljkama soje sa različitom genetičkom pozadinom) može biti posejano i rastuće biljke mogu biti tretirane glifosatom ili izoksaflutolom kao što je opisano ovde da bi se dobile biljke 100% tolerantne na glifosat ili izoksaflutol, koje sadrže elitni događaj prema pronalasku. Pronalazak se dalje odnosi na ćelije, tkiva, potomstvo i potomke od biljke koja sadrži elitni događaj prema pronalasku gajene iz semena deponovanog u NCIMB koji ima pristupni broj NCIMB 41659. Pronalazak se dalje odnosi na biljke koje se mogu dobiti od (kao što je preko umnožavanja i/ili oplemenjivanja sa) biljke soje koja sadrži elitni događaj prema pronalasku (kao što je biljka gajena iz semena deponovanog u NCIMB koji ima pristupni broj NCIMB 41659). Pronalazak se takođe odnosi na biljke soje koje sadrže elitni događaj EE-GM3.
[0015] Specifikacija dalje opisuje postupak za identifikaciju transgene biljke ili njenih ćelija ili tkiva, koja sadrži elitni događaj EE-GM3 pri čemu je postupak zasnovan na identifikaciji prisustva karakterizujućih DNK sekvenci ili aminokiselina kodiranih preko takvih DNK sekvenci u transgenoj biljci, ćelijama ili tkivima. Prema poželjnom primeru izvođenja prema pronalasku, takve karakterizujuće DNK sekvence su sekvence od 15bp ili najmanje 15 bp, poželjno 20bp ili najmanje 20 bp, najpoželjnije 30bp ili više koje sadrže mesto insercije događaja, tj. deo inserirane strane DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid i deo genoma soje (5’ ili 3’ flankirajući region) kontinuiran sa njim, omogućavajući specifičnu identifikaciju elitnog događaja. Pronalazak se takođe odnosi na biljke koje sadrže događaj EE-GM3 kao što je ovde identifikovan.
[0016] Predmetni pronalazak se dalje odnosi na postupke za identifikaciju elitnog događaja EE-GM3 u biološkim uzorcima, kao što su navedeni u bilo kom od patentnih zahteva 17-19, 23 i 26, pri čemu su ti postupci zasnovani na prajmerima ili probama koji specifično prepoznaju 5’ i/ili 3’ flankirajuću sekvencu strane DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid u EE-GM3.
[0017] Predmetni pronalazak se takođe odnosi na postupak za detekciju prisustva elitnog događaja EE-GM3 u biološkim uzorcima kao što je otkriven u patentnom zahtevu 27.
[0018] Specifičnije, pronalazak se odnosi na postupak koji sadrži amplifikaciju sekvence nukleinske kiseline prisutne u biološkim uzorrcima, upotrebom lančane reakcije polimeraze sa najmanje dva prajmera, od kojih jedan prepoznaje 5’ ili 3’ flankirajući region strane DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid u EE-GM3, od kojih drugi prepoznaje sekvencu unutar strane DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid, poželjno radi dobijanja DNK fragmenta od između 100 i 800 bp. Prajmeri mogu da prepoznaju sekvencu unutar 5’ flankirajućeg regiona EE-GM3 (SEQ ID No. 2, od položaja 1 do položaja 1451) ili unutar 3’ flankirajućeg regiona EE-GM3 (komplement SEQ ID No 3 od položaja 241 do položaja 1408) i sekvencu unutar strane DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid (komplement SEQ ID No 2 od položaja 1452 do 1843 ili SEQ ID No 3 od položaja 1 do položaja 240), respektivno. Prajmer koji prepoznaje 3’ flankirajući region može da sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No. 5 i prajmer koji prepoznaje sekvencu unutar strane DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid mogu da sadrže nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No. 4 ili SEQ ID No.7 koje su ovde opisane. Ovaj pronalazak se takođe odnosi na specifične prajmere, kao što su ovde opisani.
[0019] Predmetni pronalazak se specifičnije odnosi na postupak za identifikaciju elitnog događaja EE-GM3 u biološkim uzorcima, pri čemu taj postupak sadrži amplifikaciju sekvence nukleinske kiseline prisutne u biološkom uzorku, upotrebom lančane reakcije polimeraze sa dva prajmera koji sadrže ili se sastoje (uglavnom) od nukleotidne sekvence prema SEQ ID No. 4 i SEQ ID No. 5 respektivno, da bi se dobio DNK fragment od oko 263 bp ili sa dva prajmera koji sadrže ili se sastoje (uglavnom) od nukleotidne sekvence prema SEQ ID No.5 i SEQ ID No. 7 respektivno, da bi se dobio DNK fragment od oko 706 bp. U ovaj pronalazak su takođe obuhvaćene biljke koje sadrže tako identifikovani elitni događaj EE-GM3.
[0020] Ovde su takođe opisane specifične flankirajuće sekvence EE-GM3 koji je ovde opisan, koje mogu biti korišćene za razvoj specifičnih postupaka identifikacije za EE-GM3 u biološkim uzorcima. Takve specifične flankirajuće sekvence takođe mogu biti korišćene kao referentni kontrolni materijal u analizama identifikacije. Naročito, predmetna specifikacija opisuje 5’ i/ili 3’ flankirajuće regione EE-GM3 koji mogu biti korišćeni za razvoj specifičnih prajmera i proba kao što su ovde dalje opisani. Takođe pogodni kao referentni materijal su molekuli nukleinske kiseline, poželjno od oko 150-850 bp, koji sadrže sekvencu koja može biti amplifikovana pomoću prajmera koji sadrže ili sastoje (uglavnom) od nukleotidne sekvence prema SEQ ID No.7 i SEQ ID No.5 ili prema SEQ ID No.4 i SEQ ID No.5.
[0021] Pronalazak se dalje odnosi na postupke za identifikaciju prisustva EE-GM3 u biološkim uzorcima na bazi upotrebe takvih specifičnih prajmera ili proba. Prajmeri mogu da sadrže, da se sastoje ili da se sastoje uglavnom od nukleotidne sekvence od 17 do oko 200 uzastopnih nukleotida izabranih iz nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1 do nukleotida 1451 ili komplements nukleotidne sekvence prema SEQ ID 3 od nukleotida 241 do nukleotida 1408, kombinovane sa prajmerima koji sadrže, sastoje se ili se uglavnom sastoje od nukleotidne sekvence od 17 do oko 200 uzastopnih nukleotida izabranih iz nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2, kao što je nukleotidna sekvenca od 17 do oko 200 uzastopnih nukleotida izabrana od komplementa nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1452 do nukleotida 1843 ili nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 1 do nukleotida 240. Prajmeri mogu takođe da sadrže ove nukleotidne sekvence locirane na njihovom ekstremnom 3’ kraju, i dalje sadrže nesrodne sekvence ili sekvence poreklom od navedenih nukleotidnih sekvenci, ali sadrže nepoklapanja.
[0022] Pronalazak se dalje odnosi na komplete za identifikaciju elitnog događaja EE-GM3 u biološkim uzorcima, kao što je navedeno u patentnom zahtevu 25, pri čemu navedeni kompleti sadrže najmanje jedan prajmer ili probu koja specifično prepoznaje 5’ ili 3’ flankirajući region strane DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid u EE-GM3.
[0023] Komplet prema pronalasku može da sadrži, pored prajmera koji specifično prepoznaje 5’ ili 3’ flankirajući region EE-GM3, drugi prajmer koji specifično prepoznaje sekvencu unutar strane DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid EE-GM3, za upotrebu u PCR identifikacionom protokolu. Kompleti prema pronalasku mogu da sadrže najmanje dva specifična prajmera, od kojih jedan prepoznaje sekvencu unutar 5’ flankirajućeg regiona EE-GM3, i drugi koji prepoznaje sekvencu unutar strane DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid. Prajmer koji prepoznaje 3’ flankirajući region može da sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No. 5 i prajmer koji prepoznaje transgene ili stranu DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid mogu da sadrže nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID Nos. 4 ili 7, ili bilo koji drugi prajmer ili kombinaciju prajmera kao što su ovde opisani.
[0024] Pronalazak se dalje odnosi na komplet za identifikaciju elitnog događaja EE-GM3 u biološkim uzorcima, pri čemu navedeni komplet sadrži PCR prajmere koji sadrže ili se sastoje (uglavnom) od nukleotidne sekvence prema SEQ ID No.5 i SEQ ID No.4 za upotrebu u PCR identifikacionom protokolu EE-GM3 koji je ovde opisan.
[0025] Pronalazak se takođe odnosi na komplet za identifikaciju elitnog događaja EE-GM3 u biološkim uzorcima, pri čemu taj komplet sadrži specifičnu probu kao što je otkrivena u patentnom zahtevu 24. Najpoželjnije specifična proba sadrži ili se sastoji (uglavnom) od (ili je komplementarna sa) sekvence koja ima između 80% i 100% identičnosti sekvence sa sekvencom između nukleotida 1431 do 1472 prema SEQ ID No 2 ili sekvence koja ima između 80% i 100% identičnosti sekvence sa sekvencom između nukleotida 220 do 260 prema ID No.3.
[0026] Prema sledećem aspektu specifikacije, otkrivene su DNK sekvence koje sadrže mesto insercije događaja i dovoljnu dužinu polinukleotida genomske DNK soje i strane DNK koja sadrži gene (transgen) za toleranciju na herbicid, tako da su korisne kao prajmer ili proba za detekciju EE-GM3 i za karakterizaciju biljaka koje sadrže događaj EE-GM3. Takve sekvence mogu da sadrže najmanje 9 nukleotida genomske DNK soje i sličan broj nukleotida strane DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid EEGM3, na svakoj strani mesta spajanja respektivno. Najpoželjnije, takve DNK sekvence sadrže najmanje 9 nukleotida genomske DNK soje i sličan broj nukleotida strane DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid kontinuirane sa mestom insercije u SEQ ID NO: 2 ili SEQ ID NO: 3. U jednom aspektu, obezbeđene su biljke soje koje sadrže takve specifične DNK sekvence.
[0027] Pronalazak se dalje odnosi na molekul nukleinske kiseline kao što je otkriven u bilo kom od patentnih zahteva 2 do 6.
[0028] Pronalazak se dalje odnosi na DNK molekul kao što je otkriven u patentnom zahtevu 7, i na biljku soje koja sadrži navedeni DNK molekul, kao što je otkriven u patentnom zahtevu 9. Pronalazak se dalje odnosi na DNK molekul kao što je otkriven u patentnom zahtevu 8, i na biljku, ćelijsko tkivo ili seme soje, od kojih svaki sadrži navedeni molekul DNK, kao što je otkriven u patentnom zahtevu 10.
[0029] Postupci i kompleti obuhvaćeni predmetnim pronalaskom mogu biti korišćeni za različite svrhe kao što su, ali bez ograničenja na sledeće: za identifikaciju prisustva ili određivanje (nižeg) praga EE-GM3 u biljkama, biljnom materijalu ili proizvodima kao takvim, ali bez ograničenja na proizvode hrane ili stočne hrane (sveže ili obrađene) koji sadrže ili su poreklom od biljnog materijala; dodatno ili alternativno, postupci i kompleti prema predmetnom pronalasku mogu biti korišćeni za identifikaciju transgenog biljnog materijala za svrhe segregacije između transgenog i netransgenog materijala; dodatno ili alternativno, postupci i kompleti prema predmetnom pronalasku mogu biti korišćeni za određivanje kvaliteta (tj. procenta čistog materijala) biljnog materijala koji sadrži EE-GM3.
[0030] Specifikacija dalje opisuje 5’ i/ili 3’ flankirajuće regione EE-GM3 i pronalazak se odnosi na specifične prajmere i probe razvijene od 5’ i/ili 3’ flankirajućih sekvenci EE-GM3, kao što su otkrivene u bilo kom od patentnih zahteva 20-22 i 24.
[0031] Ovde je takođe opisana genomska DNK dobijena od biljaka koje sadrže elitni događaj EE-GM3. Takva genomska DNK može biti korišćena kao referentni kontrolni materijal u analizama identifikacije koje su ovde opisane.
[0032] Ovde je takođe obezbeđena transgena biljka soje, ili njene ćelije, delovi, semena ili potomstvo tolerantni na herbicid, od kojih svaki sadrži najmanje jedan elitni događaj, pri čemu navedeni elitni događaj sadrži stranu DNK koja sadrži:
i) prvi himerni gen koji sadrži modifikovani epsps gen iz Zea mays koji kodira enzim EPSPS toleranatan na glifosat pod kontrolom promotora koji može da se eksprimira u biljci i ii) drugi himerni gen koji sadrži modifikovani hppd gen iz Pseudomonas fluorescens koji kodira enzim tolerantan na herbicid inhibitor HPPD pod kontrolom promotora koji može da se eksprimira u biljci.
[0033] U jednom primeru izvođenja, navedeni elitni događaj sadrži nukleotide 1 do 1451 prema SEQ ID No 2 neposredno ushodno od i kontinuirane sa navedenom starnom DNK i nukleotide 241 do 1408 prema SEQ ID No 3 neposredno nishodno od i kontinuirane sa navedenom stranom DNK.
U dodatnom primeru izvođenja, navedeni elitni događaj se može dobiti oplemenjivanjem sa biljkom soje koja je gajena iz referentnog semena koje sadrži navedeni događaj koji je deponovan u NCIMB pod deponovanim brojem NCIMB 41659.
[0034] U sledećem primeru izvođenja, genomska DNK navedene biljke soje ili njenih ćelija, delova, semena ili potomstva kada je analizirana upotrebom protoka identifikacije elitnog događaja za navedeni elitni događaj sa dva prajmera koja sadrže nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No 4 i SEQ ID No 5 respektivno, proizvodi DNK fragment od (oko) 263 bp.
[0035] Ovde je takođe obezbeđen postupak za identifikaciju transgene biljke soje ili njenih ćelija, delova, semena ili potomstva tolerantna na glifosat i/ili herbicid inhibitor HPPD, kao što je izoksaflutol, u biološkim uzorcima, pri čemu navedeni postupak sadrži amplifikaciju DNK fragmenta od između 100 i 500 bp iz nukleinske kiseline prisutne u biološkim uzorcima upotrebom lančane reakcije polimeraze sa najmanje dva prajmera, pri čemu jedan od navedenih prajmera prepoznaje 5’ flankirajući region elitnog događaja naznačen u prethodnom tekstu, pri čemu navedeni 5’ flankirajući region sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1 do nukleotida 1451, ili 3’ flankirajući region navedenog elitnog događaja, pri čemu navedeni 3’ flankirajući region sadrži ili nukleotidnu sekvencu komplementa SEQ ID No 3 od nukleotida 241 do nukleotida 1408, pri čemu drugi prajmer od navedenih prajmera prepoznaje sekvencu unutar strane DNK koja sadrži nukleotidnu sekvencu komplementa SEQ ID No 2 od nukleotida 1452 do nukleotida 1843 ili nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No 3 od nukleotida 1 do nukleotida 240.
[0036] Ovde je takođe obezbeđen komplet za identifikaciju transgene biljke soje, ili njenih ćelija, delova, semena ili potomstva tolerantnih na glifosat i/ili herbicid inhibitor HPPD, kao što je izoksaflutol, u biološkim uzorcima, pri čemu navedeni komplet sadrži jedan prajmer koji prepoznaje 5’ flankirajući region elitnog događaja naveden u prethodnom tekstu, pri čemu navedeni 5’ flankirajući region sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1 do nukleotida 1451, ili jedan prajmer koji prepoznaje 3’ flankirajući region navedenog elitnog događaja, pri čemu navedeni 3’ flankirajući region sadrži nukleotidnu sekvencu komplementa prema SEQ ID No 3 od nukleotida 241 do nukleotida 1408, i jedan prajmer koji prepoznaje sekvencu unutar strane DNK, pri čemu navedena strana DNK sadrži nukleotidnu sekvencu komplementa SEQ ID No.2 od nukleotida 1452 do nukleotida 1843 ili nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No 3 od nukleotida 1 do nukleotida 240.
[0037] U jednom primeru izvođenja prema pronalasku, strana DNK elitnog događaja EE-GM3, kao što je ovde korišćena, sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No 11 od nukleotidnog položaja 1452 do nukleotidnog položaja 16638 ili njen komplement. Ovde je takođe otkrivena strana DNK elitnog EE-GM3 koja sadrži sekvencu sa najmanje 95, 98, 99, ili 99.5 % identičnosti sekvence sa nukleotidnom sekvencom prema SEQ ID No 11 od nukleotidnog položaja 1452 do nukleotidnog položaja 16638 ili njen komplement.
[0038] Ovde je takođe opisana biljka, biljna ćelija, tkivo ili seme soje, koji sadrže u svom genomu molekul nukleinske kiseline koji sadrži nukleotidnu sekvencu sa najmanje 97, 98 ili najmanje 99 % identičnosti sekvence sa nukleotidnom sekvencom prema SEQ ID No. 11 od nukleotidnog položaja 1452 do nukleotidnog položaja 16638 ili njen komplement, ili nukleotidnu sekvencu sa najmanje 97, 98 ili najmanje 99 % identičnosti sekvence sa SEQ ID No. 11 ili njen komplement.
[0039] Ovde je takođe opisana biljka, biljna ćelija, tkivo ili seme soje, koje sadrži u svom genomu molekul nukleinske kiseline koji se hibridizuje sa nukleotidnom sekvencom prema SEQ ID No 1 ili njen komplement, ili se hibridizuje sa nukleotidnom sekvencom prema SEQ ID No. 11 od nukleotidnog položaja 1452 do nukleotidnog položaja 16638 ili njen komplement, ili se hibridizuje sa nukleotidnom sekvencom prema SEQ ID No. 11 ili njen komplement.
[0040] Ovde je takođe opisan izolovani molekul nukleinske kiseline koji sadrži nukleotidnu sekvencu sa najmanje 99 % identičnosti sekvence sa nukleotidnom sekvencom prema SEQ ID No. 11 od nukleotidnog položaja 1452 do nukleotidnog položaja 16638 ili njen komplement, ili nukleotidnu sekvencu sa najmanje 99 % identičnosti sekvence sa SEQ ID No. 11 ili njen komplement, ili izolovani molekul nukleinske kiseline koji sadrži nukleotidnu sekvencu koja se hibridizuje sa nukleotidnom sekvencom prema SEQ ID No. 11 od nukleotidnog položaja 1452 do nukleotidnog položaja 16638 ili njen komplement, ili se hibridizuje sa nukleotidnom sekvencom prema SEQ ID No.11 ili njen komplement.
[0041] Pronalazak se takođe odnosi na postupak za proizvodnju proizvoda soje kao što je otkriven u patentnom zahtevu 11.
[0042] Pronalazak se dalje odnosi na postupak za gajenje biljaka soje koje sadrže elitni događaj EE-GM3, kao što je otkriven u bilo kom od patentnih zahteva 12-15.
Kratak opis crteža
[0043] Sledeći Primeri, koji nisu namenjeni za ograničenje pronalaska na opisane specifične primere izvođenja, mogu se razumeti zajedno sa pratećim slikama, u kojima:
Sl. 1: Šematski prikaz veze između navedenih nukleotidnih sekvenci i prajmera. Crni stubić: strana DNK; šrafirani stubić: DNK biljnog porekla; strelica sa kvadratićima (a): himerni gen koji kodira HPPD Pf W366 (videti Tabelu 1 za sastav himernog gena); šrafirana strelica (b): himerni gen koji kodira 2mEPSPS (videti Tabelu 1 za sastav himernog gena); crne strelice: oligonukleotidni prajmeri, brojevi ispod stubića predstavljaju nukleotidne položaje; (c) označava komplement naznačene nukleotidne sekvence; Napomena: šema nije prikazana u razmeri.
Sl. 2: Rezultati dobijeni pomoću PCR protokola identifikacije razvijenog za EE-GM3.
Sekvenca punjenja gela: Traka 1: Marker molekulske mase (100 bp lestvica); trake 2 i 3 : DNK uzorci iz biljaka soje koji sadrže transgeni događaj EE-GM3; trake 4-7: DNK uzorci iz transgenih biljaka soje koji ne sadrže elitni događaj EE-GM3, ali koji sadrže iste gene za toleranciju na herbicid (drugi transformacioni događaji); traka 8: DNK uzorak iz soje divljeg tipa; traka 9: kontrola, ne sadrži matričnu DNK; traka 10: marker molekulske mase.
Sl. 3: Rezultati dobijeni pomoću PCR protokola ocenjivanja zigotnosti razvijenog za EE-GM3. Sekvenca punjenja gela: Traka 1: Marker molekulske mase (100 bp lestvica); trake 2 i 5: DNK uzorci iz biljaka soje koji sadrže transgeni događaj EE-GM3 u homozigotnom obliku; trake 3, 8 i 9: DNK uzorci iz biljaka soje koji sadrže transgeni efekat EE-GM3 u heterozigotnom obliku; trake 4, 6 i 7: uzorak kontrolne DNK iz azigotne biljke soje; traka 10: kontrola, ne sadrži matričnu DNK; traka 11: marker molekulske mase.
Detaljan opis poželjnih primera izvođenja prema pronalasku
[0044] Ugradnja rekombinantnog molekula DNK u biljni genom tipično je rezultat transformacije ćelije ili tkiva. Određeno mesto ugradnje je obično posledica slučajne ugradnje.
[0045] DNK uvedena u biljni genom kao rezultat transformacije biljne ćelije ili tkiva sa rekombinantnom DNK ili "transformišućom DNK", i koja je poreklom od takve transformišuće DNK je ovde u daljem tekstu označena kao "strana DNK" koja sadrži jedan ili više "transgena". Transgeni EE-GM3 su geni za toleranciju na glifosat i herbicid inhibitor HPPD. "Biljna DNK" u kontekstu predmetnog pronalaska označavaće DNK koja je poreklom iz biljke koja je transformisana. Biljna DNK će se obično naći u istom genetičkom lokusu u odgovarajućoj biljci divljeg tipa. Strana DNK može biti okarakterisana lokacijom i konfiguracijom na mestu ugradnje rekombinantnog molekula DNK u biljni genom. Mesto u biljnom genomu gde je rekombinantna DNK umetnuta je takođe označeno kao "mesto insercije" ili "ciljno mesto". Insercija rekombinantne DNK u region biljnog genoma označen kao "pre-inserciona biljna DNK" može biti povezana sa delecijom biljne DNK, označena kao "delecija ciljnog mesta". "Flankirajući region" ili "flankirajuća sekvenca" kao što su ovde korišćeni označavaju sekvencu od najmanje 20 bp, poželjno najmanje 50 bp i do 5000 bp od DNK različite od uvedene DNK, poželjno DNK iz biljnog genoma koja je locirana bilo neposredno ushodno od i kontinuirana sa ili neposredno nishodno od i kontinuirana sa stranom DNK. Postupci transformacije koji dovode do slučajne integracije strane DNK imaće za rezultat transformante sa različitim flankirajućim regionima, koji su karakteristični i jedinstveni za svakog transformanta. Kada je rekombinantna DNK uvedena u biljku preko tradicionalnog ukrštanja, njeno mesto insercije u biljni genom ili njeni flankirajući regioni generalno neće biti promenjeni.
[0046] "Izolovana nukleinska kiselina (sekvenca)" ili "izolovana DNK (sekvenca)", kao što su ovde korišćene, označavaju nukleinsku kiselinu ili DNK (sekvencu) koja više nije u prirodnoj sredini iz koje je izolovana, npr., sekvenca nukleinske kiseline u drugom bakterijskom domaćinu ili u biljnom genomu, ili nukleinska kiselina ili DNK fuzionisana sa DNK ili nukleinska kiselina iz drugog porekla, kao što je kada je sadržana u himernom genu pod kontrolom promotora koji se može eksprimirati u biljci.
[0047] Događaj je definisan kao (veštački) genetički lokus koji, kao rezultat genetičkog inženjeringa, nosi stranu DNK ili transgen koji sadrži najmanje jednu kopiju gena jednog ili više gena od interesa. Tipična alelska stanja događaja su prisustvo ili odsustvo strane DNK. Događaj je okarakterisan fenotipski ekspresijom transgena. Na genetičkom nivou, događaj je deo genetičkog sastava biljke. Na molekularnom nivou, događaj može biti okarakterisan restrikcionom mapom (npr., kao što je određena pomoću Southern blotting-a), pomoću ushodnih i/ili nishodnih flankirajućih sekvenci transgena, lokacije molekularnih markera i/ili molekularne konfiguracije transgena. Uobičajena transformacija biljke sa transformišućom DNK koja sadrži najmanje jedan gen od interesa dovodi do populacije transformanata koji sadrže mnoštvo posebnih događaja, od kojih je svaki jedinstven. Događaj je okarakterisan pomoću strane DNK i najmanje jednom od flankirajućih sekvenci.
[0048] Elitni događaj, kao što je ovde korišćen, je događaj koji je izabran iz grupe događaja, dobijenih transformacijom sa istom transformišućom DNK, na osnovu ekspresije i stabilnosti jednog ili više transgena i njegove kompatibilnosti sa optimalnim agronomskim karakteristikama biljke koja ga sadrži. Na taj način kriterijumi za selekciju elitnog događaja su jedan ili više, poželjno dva ili više, povoljno svi od sledećih:
a) da prisustvo strane DNK ne sadrži druže željene karakteristike biljke, kao što su one koje se odnose na agronomski učinak ili komercijalnu vrednost;
b) da je događaj okarakterisan pomoću dobro definisane molekularne konfiguracije koja je stabilno nasleđena i za koju mogu biti razvijeni odgovarajući alati za kontrolu identiteta; c) da gen(i) od interesa pokazuje(pokazuju) ispravnu, odgovarajuću i stabilnu prostornu i temporalnu fenotipsku ekspresiju, u heterozigotnom (ili hemizigotnom) i homozigotnom stanju događaja, na komercijalno prihvatljivom nivou u opsegu sredinskih uslova u kojima će biljke koje nose događaj verovatno biti izložene u normalnoj agronomskoj upotrebi.
[0049] Poželjno je da je strana DNK povezana sa položajem u biljnom genomu koji omogućava laku introgresiju u željene komercijalne genetičke osnove.
[0050] Status događaja kao elitnog događaja je potvrđen introgresijom elitnog događaja u različitim relevantnim genetičkim osnovama i beleženjem komplajansa sa jednim, dva ili svim kriterijumima npr. a), b) i c) iz prethodnog teksta.
[0051] "Elitni događaj" na taj način označava genetički lokus koji sadrži stranu DNK, koja ispunjava gore opisane kriterijume. Biljka, biljni materijal ili potomstvo kao što su semena, mogu da sadrže jedan ili više elitnih događaja u svom genomu.
[0052] Alati razvijeni za identifikaciju elitnog događaja ili biljke ili biljnog materijala koji sadrži elitni događaj, ili proizvodi koji sadrže biljni materijal koji sadrži elitni događaj, zasnovani su na specifičnim genomskim karakteristikama elitnog događaja, kao što su, specifična restrikciona mapa genomskog regiona koji sadrži stranu DNK, molekularne markere ili sekvencu flankirajućeg regiona (jednog ili više) strane DNK.
[0053] Pošto su jedan ili oba flankirajuća regiona strane DNK sekvencirana, mogu biti razvijeni prajmeri i probe koji specifično prepoznaju ovu (ove) sekvencu (sekvence) u nukleinskoj kiselini (DNK ili RNK) uzorka pomoću tehnike molekularne biologije. Na primer, PCR postupak može biti razvijen za identifikaciju elitnog događaja u biološkim uzorcima (kao što su uzorci biljaka, biljnog materijala ili proizvoda koji sadrže biljni materijal). Takav PCR je zasnovan na najmanje dva specifična "prajmera", jedan koji prepoznaje sekvencu unutar 5’ ili 3’ flankirajućeg regiona elitnog događaja i drugi koji prepoznaje sekvencu unutar strane DNK. Prajmeri poželjno imaju sekvencu od između 15 i 35 nukleotida koji pod optimizovanim PCR uslovima "specifično prepoznaju" sekvencu unutar 5’ ili 3’ flankirajućeg regiona elitnog događaja i stranu DNK elitnog događaja respektivno, tako da je specifičan fragment ("integracioni fragment" ili diksriminišući amplikon) je amplifikovan iz uzorka nukleinske kiseline koji sadrži elitni događaj. Ovo znači da je samo ciljni integracioni fragment, a ne druga sekvenca u biljnom genomu ili stranoj DNK, amplifikovan pod optimizovanim PCR uslovima.
[0054] PCR prajmeri pogodni za pronalazak mogu biti sledeći:
- oligonukleotidi u opsegu dužine od 17 nt do oko 200 nt, koji sadrže nukleotidnu sekvencu od najmanje 17 uzastopnih nukleotida, poželjno 20 uzastopnih nukleotida, selekcionisanih iz biljne DNK u 5’ flankirajućoj sekvenci (SEQ ID No 2 od nukleotida 1 do nukleotida 1451) na njihovom 3’ kraju (prajmeri prepoznaju 5’ flankirajuće sekvence); ili
- oligonukleotidi u opsegu dužine od 17 nt do oko 200 nt, koji sadrže nukleotidnu sekvencu od najmanje 17 uzastopnih nukleotida, poželjno 20 uzastopnih nukleotida, selekcionisanih iz biljne DNK u 3’ flankirajućoj sekvenci (komplement SEQ ID No 3 od nukleotida 241 do nukleotida 1408) na njihovom 3’ kraju (prajmeri koji prepoznaju 3’ flankirajuće sekvence); ili - oligonukleotidi u opsegu dužine od 17 nt do oko 200 nt, koji sadrže nukleotidnu sekvencu od najmanje 17 uzastopnih nukleotida, poželjno 20 uzastopnih nukleotida, selekcionisanih iz inseriranih DNK sekvenci (komplement SEQ ID No 2 od nukleotida 1452 do nukleotida 1843) na njihovom 3’ kraju (prajmeri koji prepoznaju stranu DNK); ili
- oligonukleotidi u opsegu dužine od 17 nt do oko 200 nt, koji sadrže nukleotidnu sekvencu od najmanje 17 uzastopnih nukleotida, poželjno 20 uzastopnih nukleotida, selekcionisanih iz inseriranih DNK sekvenci (SEQ ID No 3 od nukleotida 1 do nukleotida 240); ili
- pogodni oligonukleotidi u opsegu dužine od 17 nt do oko 200 nt, koji sadrže nukleotidnu sekvencu od najmanje 17 uzastopnih nukleotida, poželjno 20 uzastopnih nukleotida, selekcionisanih iz nukleotidne sekvence inseriranog DNK fragmenta ili njegovog komplementa (SEQ ID No 1 ili SEQ ID No 11 od nukleotidnog položaja 1452 do 16638).
[0055] Prajmeri mogu naravno biti duži od navedenih 17 uzastopnih nukleotida, i mogu, npr., biti dužine 20, 21, 30, 35, 50, 75, 100, 150, 200 nt ili čak duži. Prajmeri mogu potpuno da se sastoje od nukleotidne sekvence selekcionisane iz navedenih nukleotidnih sekvenci flankirajućih sekvenci i stranih DNK sekvenci. Međutim, nukleotidna sekvenca prajmera na njihovom 5’ kraju (tj. izvan 3’-lociranih 17 uzastopnih nukleotida) je manje kritična. Na taj način, 5’ sekvenca prajmera može da sadrži ili da se sastoji od nukleotidne sekvence selekcionisane od flankirajućih sekvenci ili strane DNK, kako je odgovarajuće, ali može da sadrži nekoliko (npr., 1, 2, 5 ili 10) nepoklapanja. 5’ sekvenca prajmera može čak potpuno biti nukleotidna sekvenca nesrodna sa flankirajućim sekvencama ili stranom DNK, kao što je, npr., nukleotidna sekvenca koja predstavlja jedno ili više mesta prepoznavanja restrikcionog enzima. Takve nesrodne sekvence ili flankirajuće DNK sekvence sa nepoklapanjima poželjno ne bi trebalo da su duže od 100, poželjnije ne duže od 50 ili čak 25 nukleotida.
[0056] Pored toga, pogodni prajmeri mogu da sadrže ili da se sastoje (uglavnom) od nukleotidne sekvence na njihovom 3’ kraju koji obuhvata spajajući region između sekvenci poreklom od biljne DNK i sekvenci strane DNK (locirane na nukleotidima 1451-1452 u SEQ ID No 2 i nukleotidima 240-241 u SEQ ID No 3) uz uslov da navedenih 3’-lociranih 17 uzastopnih nukleotida nisu poreklom isključivo iz strane DNK ili sekvenci poreklom od biljke u SEQ ID Nos 2 ili 3.
[0057] Takođe će stručnjaku iz date oblasti tehnike neposredno biti jasno da prikladno izabrani PCR prajmer parovi takođe ne bi trebalo da sadrže sekvence međusobno komplementarne.
[0058] Za svrhu pronalaska, "komplement nukleotidne sekvence predstavljene u SEQ ID No: X" je nukleotidna sekvenca koja može biti poreklom od predstavljene nukleotidne sekvence zamenom nukleotida sa njihovim komplementarnim nukleotidom prema Chargaff-ovim pravilima (A⇔T; G⇔C) i čitajući sekvencu u smeru 5’ do 3’, tj., u suprotnom smeru predstavljene nukleotidne sekvence.
[0059] Primeri pogodnih prajmera su oligonukleotidne sekvence prema SEQ ID No 5 (prajmer koji prepoznaje 3’ flankirajuću sekvencu), SEQ ID No 4 (prajmer koji prepoznaje stranu DNK za upotrebu sa prajmerima koji prepoznaju 3’ flankirajuću sekvencu) ili SEQ ID No 7 (prajmer koji prepoznaje stranu DNK za upotrebu sa prajmerima koji prepoznaju 3’ flankirajuću sekvencu).
[0060] Ostali primeri pogodnih oligonukleotidnih prajmera sadrže na svom 3’ kraju sledeće sekvence ili se sastoje (uglavnom) od takvih sekvenci:
a. prajmeri koji prepoznaju 5’ flankirajuću sekvencu:
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 264 do nukleotida 283
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 266 do nukleotida 285
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1240 do nukleotida 1259 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 265 do nukleotida 285 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 265 do nukleotida 283 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1239 do nukleotida 1259 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1241 do nukleotida 1259 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1244 do nukleotida 1263 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1248 do nukleotida 1267 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1250 do nukleotida 1269 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 262 do nukleotida 279 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 263 do nukleotida 279 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 264 do nukleotida 285 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 266 do nukleotida 283 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1238 do nukleotida 1259 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1242 do nukleotida 1259 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1243 do nukleotida 1263 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1245 do nukleotida 1263 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1247 do nukleotida 1267 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1249 do nukleotida 1269 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1249 do nukleotida 1267 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 263 do nukleotida 285 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 267 do nukleotida 283 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1242 do nukleotida 1263 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1243 do nukleotida 1259 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1246 do nukleotida 1267 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1246 do nukleotida 1263 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1248 do nukleotida 1269 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1250 do nukleotida 1271 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1250 do nukleotida 1267 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1241 do nukleotida 1263 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1245 do nukleotida 1267 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1247 do nukleotida 1269 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1247 do nukleotida 1263 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1249 do nukleotida 1271 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1242 do nukleotida 1261 - nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1241 do nukleotida 1261
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1243 do nukleotida 1261
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1240 do nukleotida 1261
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1244 do nukleotida 1261
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1239 do nukleotida 1261
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1245 do nukleotida 1261
b. prajmeri koji prepoznaju stranu DNK sekvencu za upotrebu sa prajmerima koji prepoznaju 5’ flankirajuću sekvencu:
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1732 do nukleotida 1751
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1735 do nukleotida 1754
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1731 do nukleotida 1750
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1732 do nukleotida 1750
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1732 do nukleotida 1752
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1731 do nukleotida 1749
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1732 do nukleotida 1749
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1731 do nukleotida 1751
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1732 do nukleotida 1753
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1731 do nukleotida 1748
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1732 do nukleotida 1748
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1735 do nukleotida 1751
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1731 do nukleotida - komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1732 do nukleotida 1754
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1731 do nukleotida 1747
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1731 do nukleotida 1753
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1727 do nukleotida 1746
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1727 do nukleotida 1745
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1727 do nukleotida 1747
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1727 do nukleotida 1744
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1727 do nukleotida 1748
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1727 do nukleotida 1749
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1726 do nukleotida 1745
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1726 do nukleotida 1744
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1726 do nukleotida 1746
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1726 do nukleotida 1747
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1726 do nukleotida 1748
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1724 do nukleotida 1744
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1724 do nukleotida 1745
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1724 do nukleotida - komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1461 do nukleotida 1478
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1670 do nukleotida 1686
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1469 do nukleotida 1486
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1508 do nukleotida 1527
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1667 do nukleotida 1686
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1670 do nukleotida 1687
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1673 do nukleotida 1689
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1688 do nukleotida 1704
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1688 do nukleotida 1705
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1692 do nukleotida 1709
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1467 do nukleotida 1486
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1481 do nukleotida 1497
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1481 do nukleotida 1498
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1491 do nukleotida 1507
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1491 do nukleotida 1508
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1672 do nukleotida 1688
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1673 do nukleotida - komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1673 do nukleotida 1691
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1688 do nukleotida 1706
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1691 do nukleotida 1707
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1691 do nukleotida 1708
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1469 do nukleotida 1487
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1481 do nukleotida 1499
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1489 do nukleotida 1505
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1489 do nukleotida 1506
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1489 do nukleotida 1507
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1489 do nukleotida 1508
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1666 do nukleotida 1686
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1667 do nukleotida 1687
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1670 do nukleotida 1688
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1672 do nukleotida 1689
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1688 do nukleotida 1707
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1691 do nukleotida 1709
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1692 do nukleotida - komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1481 do nukleotida 1500
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1491 do nukleotida 1509
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1670 do nukleotida 1689
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1672 do nukleotida 1690
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1672 do nukleotida 1691
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1687 do nukleotida 1705
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1687 do nukleotida 1706
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1691 do nukleotida 1710
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1472 do nukleotida 1488
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1488 do nukleotida 1507
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1491 do nukleotida 1510
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1495 do nukleotida 1512
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1495 do nukleotida 1513
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1495 do nukleotida 1514
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1673 do nukleotida 1692
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1678 do nukleotida 1694
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1678 do nukleotida 1695
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1678 do nukleotida 1696
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1687 do nukleotida 1703
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1687 do nukleotida 1704
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1692 do nukleotida 1711
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1469 do nukleotida 1488
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1488 do nukleotida 1506
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1491 do nukleotida 1511
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1670 do nukleotida 1690
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1678 do nukleotida 1697
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1688 do nukleotida 1709
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1467 do nukleotida 1487
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1488 do nukleotida 1508
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1495 do nukleotida 1511
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1491 do nukleotida 1512
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1666 do nukleotida 1687
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1667 do nukleotida 1688
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1672 do nukleotida 1692
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1673 do nukleotida 1693
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1687 do nukleotida 1707
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1472 do nukleotida 1490
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1472 do nukleotida 1491
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1481 do nukleotida 1501
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1489 do nukleotida 1509
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1495 do nukleotida 1515
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1670 do nukleotida 1691
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1673 do nukleotida 1694
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1678 do nukleotida 1698
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1469 do nukleotida 1489
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1667 do nukleotida 1689
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1687 do nukleotida 1708
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1688 do nukleotida 1710
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1691 do nukleotida 1711
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1472 do nukleotida 1492
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1489 do nukleotida 1510
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1666 do nukleotida 1688
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1687 do nukleotida 1709
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1692 do nukleotida 1712
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1467 do nukleotida 1488
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1469 do nukleotida 1490
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1488 do nukleotida 1509
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1489 do nukleotida 1511
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1678 do nukleotida 1699
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1472 do nukleotida 1493
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1472 do nukleotida 1494
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1481 do nukleotida 1502
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1670 do nukleotida 1692
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1469 do nukleotida 1491
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1488 do nukleotida 1510
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1691 do nukleotida 1712
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1692 do nukleotida 1713
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1692 do nukleotida 1714
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1467 do nukleotida 1489
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1678 do nukleotida 1700
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1481 do nukleotida 1503
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1691 do nukleotida 1713
c. 3’ prajmeri koji prepoznaju flankirajuću sekvencu:
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 828 do nukleotida 847
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 830 do nukleotida 849
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 828 do nukleotida 846
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 828 do nukleotida 848
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 830 do nukleotida 848
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 830 do nukleotida 850
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 828 do nukleotida 845
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 830 do nukleotida 847
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 828 do nukleotida 849
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 830 do nukleotida 851
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 828 do nukleotida 844
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 830 do nukleotida 846
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 828 do nukleotida 850
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 830 do nukleotida 852
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 992 do nukleotida 1009
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 731 do nukleotida 752
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 776 do nukleotida 795
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 731 do nukleotida 753
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 776 do nukleotida 794
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 776 do nukleotida 796
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 776 do nukleotida 793
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 776 do nukleotida 797
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 776 do nukleotida 792
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 776 do nukleotida 798
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 733 do nukleotida 752
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 733 do nukleotida 753
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 733 do nukleotida 754
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 733 do nukleotida 755
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 838 do nukleotida 854
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 246 do nukleotida 263
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 838 do nukleotida 855
- komplement nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 3 od nukleotida 245 do nukleotida 264
d. prajmeri koji prepoznaju stranu DNK sekvencu za upotrebu sa prajmerima koji prepoznaju 3’ flankirajuću sekvencu:
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 173 do nukleotida 192
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 22 do nukleotida 41
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 172 do nukleotida 192
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 174 do nukleotida 192
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 191 do nukleotida 210
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 171 do nukleotida 192
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 175 do nukleotida 192
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 190 do nukleotida 210
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 192 do nukleotida 210
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 176 do nukleotida 192
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 189 do nukleotida 210
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 193 do nukleotida 210
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 188 do nukleotida 210
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 194 do nukleotida 210
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 199 do nukleotida 218
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 200 do nukleotida 218
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 197 do nukleotida 218
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 201 do nukleotida 218
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 201 do nukleotida 220
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 200 do nukleotida 220
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 199 do nukleotida 220
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 200 do nukleotida 221
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 199 do nukleotida 221
- nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 150 do nukleotida 172
[0061] Kao što je ovde korišćena, "nukleotidna sekvenca prema SEQ ID No. Z iz položaja X u položaj Y" ukazuje na nukletodinu sekvencu koja uključuje obe nukleotidne krajnje tačke.
[0062] Poželjno, amplifikovani fragment ima dužinu od između 50 i 500 nukleotida, kao što je dužina između 100 i 350 nukleotida. Specifični prajmeri mogu imati sekvencu koja je između 80 i 100% identična sa sekvencom unutar 5’ ili 3’ flankirajućeg regiona elitnog događaja i strane DNK elitnog događaja, respektivno, uz uslov da je nepoklapanja još uvek omogućiti specifičnu identifikaciju elitnog događaja sa ovim prajmerima pod optimizovanim PCR uslovima. Opseg dozvoljenih nepoklapanja međutim, može se lako odrediti eksperimentalno i poznat je stručnjaku iz date oblasti tehnike.
[0063] Detekcija integracionih fragmenata može se izvesti na različite načine, npr., preko procene veličine posle analize na gelu. Integracioni fragmenti takođe mogu biti direktno sekvencirani. Ostali postupci specifični za sekvencu za detekciju amplifikovanih DNK fragmenata su takođe poznati u stanju tehnike.
[0064] Kako su sekvenca prajmera i njihova relativna lokacija u genomu jedinstveni za elitni događaj, amplifikacija integracionog fragmenta javiće se samo u biološkim uzorcima koji sadrže (nukleinsku kiselinu) elitnog događaja. Poželjno kada se izvodi PCR za identifikaciju prisustva EE-GM3 u nepoznatim uzorcima, kontrola je obuhvatala grupu prajmera sa kojima fragment unutar "domaćinskog gena" biljne vrste događaja može biti amplifikovan. Domaćinski geni su geni koji su eksprimirani u većini ćelijskih tipova i koji se odnose na osnovne metaboličke aktivnosti zajedničke za sve ćelije. Poželjno, fragment amplifikovan iz domaćinskog gena je fragment koji je veći od amplifikovanog integracionog fragmenta. U zavisnosti od uzoraka koji se analiziraju, mogu biti uključene druge kontrole.
[0065] Standardni PCR protokoli su opisani u stanju tehnike, kao što je u "PCR Applications Manual" (Roche Molecular Biochemicals, 2nd Edition, 1999) i drugim referencama. Optimalni uslovi za PCR, uključujući sekvencu specifičnih prajmera, su naznačeni u "PCR (ili lančana reakcija polimeraze) identifikacionom protokolu" za svaki elitni događaj. Međutim, razume se da može biti potrebno prilagoditi broj parametara u PCR identifikacionom protokolu prema specifičnim laboratorijskim uslovima, i mogu biti malo modifikovani za dobijanje sličnih rezultata. Na primer, upotreba različitog postupka za pripremu DNK može da zahteva podešavanje, na primer, količine prajmera, polimeraze i korišćenih uslova sparivanja. Slično, selekcija drugih prajmera može da diktira druge optimalne uslove za PCR identifikacioni protokol. Ova prilagođavanja će međutim biti očigledna stručnjaku iz date oblasti tehnike i dalje su detaljno opisana u trenutnim uputstvima za primenu PCR kao što je onaj citiran u prethodnom tekstu.
[0066] Alternativno, specifični prajmeri mogu biti korišćeni za amplifikaciju integracionog fragmenta koji se mogu koristiti kao "specifična proba" za identifikaciju EE-GM3 u biološkim uzorcima. Dovođenje u kontakt nukleinske kiseline biološkog uzorka, sa probom, pod uslovima koji omogućavaju hibridizaciju probe sa njenim odgovarajućim fragmentom u nukleinskoj kiselini, rezultuje u formiranju hibrida nukleinske kiseline/probe. Formiranje ovog hibrida može biti detektovano (npr., preko obeležavanja nukleinske kiseline ili probe), pri čemu formiranje ovog hibrida ukazuje na prisustvo EE-GM3. Takvi postupci identifikacije na bazi hibridizacije sa specifičnom probom (bilo na nosaču čvrste faze ili u rastvoru) opisani su u stanju tehnike. Specifična proba je poželjno sekvenca koja, pod optimizovanim uslovima, hibridizuje se specifično sa regionom unutar 5’ ili 3’ flankirajućeg regiona elitnog događaja i poželjno takođe sadrži deo strane DNK kontinuirane sa njom (u daljem tekstu označen kao "specifičan region"). Poželjno, specifična proba sadrži sekvencu od između 50 i 500 bp, poželjno od 100 do 350 bp koja je najmanje 80%, poželjno između 80 i 85%, poželjnije između 85 i 90%, naročito poželjno između 90 i 95%, najpoželjnije između 95% i 100% identičnu (ili komplementarnu) sa nukleotidnom sekvencom specifičnog regiona. Poželjno, specifična proba će da sadrži sekvencu od oko 15 do oko 100 kontinuiranih nukleotida identičnih (ili komplemtarnih) sa specifičnim regionom elitnog događaja.
[0067] Oligonukleotidi pogodni kao PCR prajmeri za detekciju elitnog događaja EE-GM3 takođe mogu biti korišćeni za razvoj protokola na bazi PCR-a za određivanje statusa zigotnosti biljaka koje sadrže elitni događaj. U tom cilju, dva prajmera koja prepoznaju lokus divljeg tipa pre integracije dizajnirani su na takav način da su usmereni jedan prema drugom i imaju mesto insercije locirano između dva prajmera. Ovi prajmeri mogu biti prajmeri koji specifično prepoznaju 5’ i 3’ flankirajuće sekvence sadržane unutar SEQ ID NO 2 ili 3, respektivno. Ovi prajmeri takođe mogu biti prajmeri koji specifično prepoznaju 5’ ili 3’ flankirajuću sekvencu. Za sadašnji pronalazak, naročito pogodni prajmeri koji prepoznaju lokus divljeg tipa pre integracije su prajmeri koji sadrže ili se sastoje (esencijalno) od nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 4 i SEQ ID 6. Ova grupa prajmera, zajedno sa trećim prajmerom komplemetarnim sa transformišućim DNK sekvencama (kao što je prajmer koji sadrži ili se sastoji (uglavnom) od nukleotidne sekvence prema SEQ ID No 7) omogućavaju istovremenu dijagnostičku PCR amplifikaciju EE-GM3 specifičnog lokusa, kao i lokusa divljeg tipa. Ako je biljka homozigotna za transgeni lokus ili odgovarajući lokus divljeg tipa, dijagnostički PCR će dati jedan PCR proizvod tipičan, poželjno tipičan u dužini, za transgeni lokus ili lokus divljeg tipa. Ako je biljka hemizogotna za transgeni lokus, dva lokusspecifična PCR proizvoda će se javiti, reflektujući amplifikaciju transgenog lokusa i lokusa divljeg tipa.
[0068] Pored toga, postupci detekcije specifični za elitni događaj EE-GM3 koji se razlikuju od postupaka amplifikacije na bazi PCR takođe se mogu razviti upotrebom informacije sekvence specifične za elitni događaj koja je ovde data. Takvi alternativni postupci detekcije obuhvataju postupke detekcije amplifikacije linearnog signala na bazi invazivnog cepanja određenih struktura nukleinske kiseline, takođe poznato kao InvaderTM tehnologija, (kao što je opisana npr. u SAD patentu 5,985,557 "Invasive Cleavage of Nucleic Acids", 6,001,567 "Detection of Nucleic Acid sequences by Invader Directed Cleavage"). U tom smislu, ciljna sekvenca je hibridizovana sa obeleženim oligonukleotidom prve nukleinske kiseline koji sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1452 do nukleotida 1469 ili njen komplement ili probom navedene obeležene nukleinske kiseline koja sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No 3 od nukleotida 223 do nukleotida 240 ili njen komplement i dalje je hibridizovana sa oligonukleotidom druge nukleinske kiseline koji sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1434 do nukleotida 1451 ili njen komplement ili probom navedene obeležene nukleinske kiseline koja sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No 3 od nukleotida 241 do nukleotida 258 ili njen komplement, pri čemu se prvi i drugi poligonukleotid preklapaju u najmanje jednom nukleotidu. Dvostruka ili trostruka struktura koja je proizvedena pomoću ove hibridizacije omogućava selektivno cepanje probe sa enzimom (Cleavase®) ostavljajući ciljnu sekvencu intaktnom. Odcepljena obeležena proba je zatim detektovana, potencijalno preko srednjeg koraka koji rezultuje u daljoj amplifikaciji signala.
[0069] "Komplet" kao što je ovde korišćen označava grupu reagenasa za svrhu izvođenja postupka prema pronalasku, naročito, identifikaciju elitnog događaja EE-GM3 u biološkim uzorcima ili određivanje statusa zigotnosti EE-GM3 koji sadrži biljni materijal. Naročito, poželjan primer izvođenja kompleta prema pronalasku sadrži najmanje dva specifična prajmera, kao što je opisan u prethodnom tekstu za identifikaciju elitnog događaja, ili tri specifična prajmera za određivanje statusa zigotnosti. Izborno, komplet može dalje da sadrži bilo koji drugi reagens koji je ovde opisan u PCR identifikacionom protokolu. Alternativno, prema drugom primeru izvođenja ovog pronalaska, komplet može da sadrži specifičnu probu, kao što je opisana u prethodnom tekstu, koja se specifično hibridizuje sa nukleinskom kiselinom bioloških uzoraka za identidikaciju prisustva EE-GM3. Izborno, komplet može dalje da sadrži bilo koji drugi reagens (kao što je, ali bez ograničenja na hibridizacioni pufer, obeleživač) za identifikaciju EE-GM3 u biološkim uzorcima, upotrebom specifične probe.
[0070] Komplet prema pronalasku se može koristiti, i njegove komponente mogu biti specifično prilagođene, za svrhe kontrole kvaliteta (npr., čistoće serije semena), detekciju prisustva ili odsustva elitnog događaja u biljnom materijalu ili materijalu koji sadrži ili je poreklom od biljnog materijala, kao što su, ali bez ograničenja na proizvode hrane ili stočne hrane.
[0071] Kao što je ovde korišćena, "identičnost sekvence" u odnosu na nukleotidne sekvence (DNK ili RNK), označava broj položaja sa identičnim nukleotidima podeljen sa brojem nukleotida u kraćoj od dve sekvence. Poravnanje dve nukleotidne sekvence izvedeno je pomoću Wilbur and Lipmann algoritma (Wilbur and Lipmann, 1983, Proc. Nat. Acad. Sci. USA 80:726) upotrebom veličine prozora od 20 nukleotida, dužine reči od 4 nukleotda i kaznu proreda od 4. Kompjuterski potpomognuta analiza i tumačenje podataka o sekvenci, uključujući poravnanje sekvence kao što su opisani u prethodnom tekstu, mogu, npr., biti pogodno izvedeni upotrebom softverskog paketa za analizu sekvence od Genetics Computer Group (GCG, University of Wisconsin Biotechnology Center). Sekvence su naznačene kao "uglavnom slične" kada takve sekvence imaju identičnost sekvence od najmanje oko 75%, naročito najmanje oko 80%, naročito najmanje oko 85%, naročito najmanje oko 90%, naročito najmanje oko 95%, naročito najmanje oko 98 %, ili najmanje oko 99 %. Jasno je da kada je navedeno da su RNK sekvence uglavnom slične ili imaju određeni stepen identičnosti sekvence sa DNK sekvencama, timidin (T) u DNK sekvenci se smatra jednakim uracilu (U) u RNK sekvenci. Takođe, jasno je da male razlike ili mutacije mogu da se jave u DNK sekvencama tokom vremena i da neka nepoklapanja mogu biti omogućena za prajmere ili probe prema pronalasku specifne za događaj, tako da bilo koja DNK sekvenca koja je ovde naznačena u bilo kom primeru izvođenja ovog pronalaska za bilo koju 3’ ili 5’ flankirajuću DNK ili za bilo koji insert ili stranu DNK ili bilo koji prajmer ili probu ovog pronalaska, takođe obuhvata sekvence uglavnom slične sekvencama koje su ovde obezbeđene, kao što su sekvence koje se hibridizuju sa ili sa najmanje 90 %, 95 %, 96 %, 97 %, 98 %, ili najmanje 99 % identičnosti sekvenci datim za bilo koju 3’ ili 5’ flankirajuću DNK, za bilo koji prajmer ili probu ili za bilo koji insert ili stranu DNK prema ovom pronalasku.
[0072] Termin "prajmer" kao što je ovde
korišćen obuhvata bilo koju nukleinsku kiselinu koja je sposobna da započne sintezu nascentne nukleinske kiseline na način zavistan od obrasca, kao što je PCR. Tipično, prajmeri su oligonukleotidi od 10 do 30 nukleotida, ali se mogu koristiti i duže sekvence. Prajmeri mogu biti obezbeđeni u dvolančanom obliku, iako je poželjan jednolančani oblik.
[0073] Probe mogu biti korišćene kao prajmeri, ali su dizajnirane da se vezuju za ciljnu DNK ili RNK i ne moraju se koristiti u postupku amplifikacije.
[0074] Termin "prepoznavanje" kao što je ovde korišćen kada se odnosi na specifične prajmere, označava činjenicu da se specifični prajmeri specifično hibridizuju sa sekvencom nukleinske kiseline u elitnom događaju pod uslovima navedenim u postupku (kao što su uslovi PCR protokola identifikacije), pri čemu je specifičnost određena preko prisustva pozitivnih i negativnih kontrola.
[0075] Termin "hibiridizacija" kao što je ovde korišćen kada se odnosi na specifične probe, označava činjenicu da se proba vezuje za specifičan region u sekvenci nukleinske kiseline elitnog događaja pod standarnim uslovima stringentnosti. Standardni uslovi stringentnosti kao što su ovde korišćeni označavaju uslove za hibridizaciju koji su ovde opisani ili konvencionalne uslove hibridizacije kao što su opisali Sambrook et al., 1989 (Molecular Cloning: A Laboratory Manual, Second Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, NY) koja na primer može da sadrži sledeće korake: 1) imobilizaciju fragmenata biljne genomske DNK na filteru, 2) prehibridizaciju filtera u trajanju od 1 do 2 časa na 42°C u 50% formamidu, 5 X SSPE, 2 X Denhardt-ovom reagensu i 0.1% SDS, ili u trajanju od 1 do 2 časa na 68°C u 6 X SSC, 2 X Denhardt-ovom reagensu i 0.1% SDS, 3) dodavanje hibridizacione probe koja je obeležena, 4) inkubaciju u trajanju od 16 do 24 časa, 5) ispiranje filtera u trajanju od 20 min. na sobnoj temperaturi u IX SSC, 0.1 %SDS, 6) ispiranje filtera tri puta u trajanju od 20 min. svaki put na 68°C u 0.2 X SSC, 0.1 %SDS, i 7) izlaganje filtera u trajanju od 24 do 48 časova rentgenskom filmu na -70°C sa intenzivirajućim ekranom.
[0076] Kao što je ovde korišćen, biološki uzorak je uzorak biljke, biljnog materijala ili proizvoda koji sadrži biljni materijal. Termin "biljka" je određen tako da obuhvata biljna tkiva soje (Glycine max), na bilo kom stadijumu sazrevanja, kao i bilo koje ćelije, tkiva ili organe uzete od ili poreklom od bilo koje takve bliljke, uključujući bez ograničenja, bilo koja semena, listove, stabljike, cvetove, korenove, pojedinačne ćelije, gamete, ćelijske kulture, tkivne kulture ili protoplaste. "Biljni materijal", kao što je ovde korišćen označava materijal koji je dobijen ili je poreklom od biljke. Proizvodi koji sadrže biljni materijal se odnose na hranu, stočnu hranu ili druge proizvode koji su proizvedeni upotrebom biljnog materijala ili mogu biti kontaminirani biljnim materijalom. Razume se da, u kontekstu predmetnog pronalaska, takvi biološki uzorci su testirani za prisustvo nukleinskih kiselina specifičnih za EEGM3, što ukazuje na prisustvo nukleinskih kiselina u uzorcima. Na taj način postupci koji se ovde navode za identifikaciju elitnog dođaja EE-GM3 u biološkim uzorcima, odnose se na identifikaciju u biološkim uzorcima nukleinskih kiselina koje sadrže elitni događaj.
[0077] Kao što je ovde korišćen "sadrži" trebalo bi da se tumači kao naznačavanje prisustva navedenih karakteristika, celih brojeva, koraka, reagenasa ili komponenti kao što su navedene, ali ne isključuje prisustvo ili dodavanje jedne ili više karakteristika, celih brojeva, koraka ili komponenti, ili njihovih grupa. Na taj način, npr., nukleinska kiselina ili protein koji sadrže sekvencu nukleotida ili aminokiselina, mogu da sadrže više nukleotida ili aminokiselina od onih koju su stvarno navedeni, tj., da su ukalupljeni u veću nukleinsku kiselinu ili protein. Himerni gen koji sadrži DNK sekvencu koja je funkcionalno ili strukturno definisana, može da sadrži dodatne DNK sekvence, kao što su promotor i transkripcione terminacione sekvence.
[0078] Predmetni pronalazak se takođe odnosi na razvoj elitnog događaja EE-GM3 u biljkama soje koje sadrže taj događaj, biljke i semena potomstva koji sadrže elitni događaj EE-GM3 dobijen iz ovih biljaka i na biljne ćelije, ili biljni materijal poreklom od biljaka koje sadrže ovaj događaj. Biljke koje sadrže elitni događaj EE-GM3 mogu biti dobijene kao što je opisano u Primeru 1. Ovaj pronalazak se takođe odnosi na seme koje sadrži elitni događaj EE-GM3 deponovan u NCIMB pod brojem deponovanja NCIMB 41659 ili njegove derivate koji sadrže elitni događaj EE-GM3. "Derivati (semena)" kao što su ovde korišćeni, označavaju biljke koje mogu biti gajene iz takvog semena, čije potomstvo je rezultat ukrštanja ili povratnog ukrštanja, kao i biljne ćelije, organe, delove, tkivo, ćelijske kulture, protoplaste i biljni materijal istog.
[0079] Biljke soje ili biljni materijal koji sadrži EE-GM3 mogu biti identifikovani prema PCR identifikacionom protokolu opisanom za EE-GM3 u Primeru 2. Ukratko, genomska DNK soje prisutna u biološkom uzorku je amplifikovana pomoću PCR upotrebom prajmera koji specifično prepoznaje sekvencu unutar 5’ ili 3’ flankirajuće sekvence EE-GM3 kao što je prajmer sa sekvencom prema SEQ ID NO: 5, i prajmer koji prepoznaje sekvencu u stranoj DNK, kao što je prajmer sa sekvencom prema SEQ ID NO: 4. DNK prajmeri koji amplifikuju deo endogene sojine sekvence su korišćeni kao pozitivna kontrola za PCR aplifikaciju. Ako posle PCR amplifikacije, materijal proizvodi fragment očekivane veličine, materijal sadrži biljni materijal iz biljke soje koja sadrži elitni događaj EE-GM3.
[0080] Biljke koje sadrže EE-GM3 su okarakterisane njihovom tolerancijom na glifosat, kao i njihovom tolerancijom na inhibitore HPPD kao što je izoksaflutol. Biljke koje sadrže EE-GM3 su takođe okarakterisane time što imaju agronomske karakteristike koje su slične komercijalno dostupnim sortama soje, u odsustvu primene herbicida. Zabeleženo je da prisustvo strane DNK u insercionom regionu biljnog genoma soje opisanog ovde, pruža naročito zanimljive fenotipske i molekularne karakteristike biljkama koje sadrže ovaj događaj.
[0081] Jedan primer izvođenja ovog pronalaska daje elitni događaj u biljkama soje, koji se može dobiti insercijom 2 transgena na specifičnu lokaciju u genomu soje, pri čemu taj elitni događaj pruža toleranciju na glifosat i herbicid inhibitor HPPD kao što je izoksaflutol takvim biljkama soje, i pri čemu takav elitni događaj ne izaziva nikakav efekat na agonomski učinak takve soje koji negativno utiče na prinos takvih biljaka soje, u poređenju sa izogenim linijama (kao što su ovde korišćene, "izogene linije" ili "skoro-izogene linije" su linije soje iste genetičke osnove, ali kojima nedostaju transgeni, kao što su biljke iste genetičke osnove kao što je biljka korišćena za transformaciju, ili segregacione sisterske linije koje su izgubile transgene). Naročito, ovaj pronalazak obezbeđuje elitni događaj u biljkama soje, pri čemu insercija ili prisustvo navedenog elitnog događaja u genomu takvih biljaka soje ne izaziva povećanu podložnost na bolest, ne izaziva negativan uticaj na prinos, ili ne izaziva povećano poleganje kod takvih biljaka soje, u poređenju sa izogenim linijama. Stoga, ovaj pronalazak obezbeđuje elitni događaj u biljkama soje, označen kao EE-GM3, koji rezultuje u biljkama soje koje mogu da tolerišu primenu glifosata i herbicida inhibitora HPPD (bilo istovremeno ili odvojeno) bez negativnog uticaja na prinos navedenih biljaka soje u poređenju sa izogenim linijama, pri čemu te biljke soje nemaju statistički značajnu razliku u njihovoj podložnosti bolesti, ili poleganju, kao izogene biljke soje. Ove karakteristike čine trenutni elitni događaj veoma zanimljivim za kontrolu korova rezistentnih na glifosat u poljima soje, i takođe se mogu koristiti u pristupima za prevenciju ili odlaganje daljeg razvoja rezistencije glifosata u poljima soje (npr., primenom glifosata i izoksaflutola, osiguravajući 2 načina delovanja primenjena na polju soje).
[0082] Ovde je takođe obezbeđena biljka soje ili njen deo koji sadrže događaj EE-GM3, pri čemu je reprezentativno seme soje koje sadrži događaj EE-GM3 deponovano pod NCIMB pristupnim brojem 41659. Ovde su dalje obezbeđena semena takvih biljaka, koja sadrže takav događaj, i ovde je takođe opisan proizvod soje koji je proizveden od takvih semena, pri čemu navedeni proizvod soje sadrži događaj EE-GM3. Takav proizvod soje može biti ili može da sadrži brašno, mlevena semena, brašno, pahuljice, itd. Naročito, takav proizvod soje sadrži nukleinsku kiselinu koja proizvodi amplikon dijagnostički ili specifičan za događaj EE-GM3, pri čemu takav amplikon sadrži SEQ ID No. 2 ili 3. Ovde je takođe opisan postupak za proizvodnju proizvoda soje, koji sadrži seme soje koji sadrži događaj EE-GM3, i proizvodnju takvog proizvoda soje od njega. Ovde je takođe obezbeđena biljka soje, koja je potomstvo bilo koje od gore navedenih biljaka soje, i koja sadrži događaj EE-GM3. Ovde je dalje opisan postupak za proizvodnju bilje soje tolerantne na glifosat i/ili herbicide izoksaflutol, koji sadrži uvođenje u genom takvog biljnog događaja EE-GM3, naročito ukrštanjem prve biljke soje kojoj nedostaje događaj EE-GM3 sa biljkom soje koja sadrži EE-GM3, i selekciju biljke potomstva koja je tolerantna na glifosat i/ili izoksaflutol.
[0083] Ovde je takođe opisana biljka tolerantna na glifosat i/ili izoksaflutol koja sadrži elitni događaj EE-GM3, naročito bez negativnog uticaja na prinos, i sa prihvatljivim agronomskim karakteristikama, koja sadrži 2mEPSPS i HPPD protein, i sposobna je da proizvodi amplikon dijagnostički za događaj EE-GM3. Ovde su takođe opisani specifični izolovani amplikoni (fragmenti DNK sekvence) kao takvi, koji se mogu dobiti upotrebom specifičnih detekcionih alata koji su ovde opisani, naročito amplikona uključujući u njihovoj sekvenci DNK fragment koji je poreklom od biljne DNK i DNK fragmenta koji je stran ili heterologan u odnosu na takvu biljku, kao što je DNK inserirana u biljni genom transformacijom, kao što je ovde opisana.
[0084] Ovde je dalje opisan postupak za kontrolu korova u polju biljaka soje koji sadrži događaj EEGM3, ili polju u koje se zasađuju takve biljke soje, koji sadrži tretman polja efikasnom količinom herbicidom na bazi izoksaflutola, pri čemu su takve biljke toleraqntne na takav herbicid.
[0085] Ovde je dalje opisana DNK koja sadrži sekvencu prema SEQ ID No 1 ili sekvencu koja je uglavnom njoj slična, i bilo koju biljku, ćeliju, tkivo ili seme, naročito soje, koji sadrže takvu DNK sekvencu, kao što su biljka, ćelija, tkivo ili seme koji sadrže EE-GM3, naročito DNK koja sadrži 2 susedna reagiona koja sadrže ili se sastoje (uglavnom) od SEQ ID No 1, ili DNK koja sadrži 2 susedna reagiona koja sadrže ili se sastoje od SEQ ID No 1 sa izvesnim nukleotidima koji su promenjeni, deletirani ili adirani, kao što je DNK koja sadrži duplikaciju SEQ ID No 1 sa 4, 6, 8 ili 10 nukleotida koji su deletirani ili zamenjeni, locirani međusobno blizu (kao što je 200-500 nt, ili manje od 2000 ili 10.000 nt, odvojeni). Ovo obuhvata DNK prema SEQ ID No.11 od nukleotidnog položaja 2257 do nukleotidnog položaja 16601 gde su 2, 4, 6, 8 ili 10 nukleotida zamenjeni drugim nukleotidima, ili pri čemu su 2, 4, 6, 8 ili 10 nukleotida deletirani ili adirani, ili DNK prema SEQ ID No. 11 od nukleotidnog položaja 2257 do nukleotidnog položaja 16601 prema SEQ ID No 11, kao i DNK prema SEQ ID No.
11, i bilo koju biljku, ćeliju, tkivo ili seme, naročito soje, koja sadrži bilo koju od takvih DNK sekvenci. Ovde je takođe obuhvaćena bilo koja biljka, ćelija, tkivo ili seme soje, koji sadrže DNK sekvencu (heterolognu ili stranu za konvencionalnu biljku, seme, tkivo ili ćeliju soje) prema SEQ ID No. 11. Ovde je takođe opisana bilo koja biljka, ćelija, tkivo ili seme soje koji sadrže DNK sekvencu prema SEQ ID No.11 od nukleotidnog položaja 2257 do nukleotidnog položaja 16601, ili koji sadrže DNK sekvencu sa najmanje 99 % ili 99.5 % identičnosti sekvence sa sekvencom prema SEQ ID No.11, ili koji sadrže DNK sekvencu sa najmanje 99 % ili 99.5 % identičnosti sekvence sa sekvencom prema SEQ ID No. 11 od nukleotidnog položaja 2257 do nukleotidnog položaja 16601.
[0086] Ovde je takođe obezbeđena transgena biljka, biljna ćelija, tkivo ili seme soje, koji sadrže u svom genomu događaj EE-GM3 okarakterisan molekulom nukleinske kiseline koji sadrži nukleotidnu sekvencu koja je uglavnom slična SEQ ID No. 2 od nukleotida 1441 do nukleotida 1462 i molekulom nukleinske kiseline koji sadrži nukleotidnu sekvencu koja je uglavnom slična SEQ ID No. 3 od nukleotida 230 to 251, ili komplementom navedenih sekvenci, kao i biljka, biljna ćelija, tkivo ili seme soje koji sadrže u svom genomu događaj EE-GM3 okarakterisan molekulom nukleinske kiseline koja sadrži nukleotidnu sekvencu uglavnom sličnu sa SEQ ID No. 2 i molekulom nukleinske kiseline koja sadrži nukleotidnu sekvencu uglavnom sličnu sa SEQ ID No.3, ili komplementom navedenih sekvenci.
[0087] Ovde je još dalje opisana biljka, ćelija, tkivo ili seme soje, koji sadrže EE-GM3, okarakterisani time što sadrže u svom genomu svojih ćelija sekvencu nukleinske kiseline sa najmanje 80%, 90%, 95 % ili 100 % identičnosti sekvence sa SEQ ID No. 2 od nukleotida 1431 do 1472 i sekvencu nukleinske kiseline sa najmanje 80%, 90%, 95 % ili 100 % identičnosti sekvence sa SEQ ID No. 3 od nukleotida 220 do 261, ili komplement navedenih sekvenci.
[0088] Termin "izoksaflutol", kao što je ovde korišćen, označava herbicid izoksaflutol [tj. (5-ciklopropil-4-izoksazolil)[2-(metilsulfonil)-4-(trifluorometil)fenil]metanon], njegov aktivni metabolit, diketonitril, i bilo koje smeše ili rastvore koji sadrže navedena jedinjenja. Herbicidi koji inhibiraju HPPD korisni za primenu na događaj prema ovom pronalasku su diketonitrili, npr. 2-cijano-3-ciklopropil-1-(2-metilsulfonil-4-trifluorometilfenil)-propan-1,3-dion i 2-cijano-1-[4-(metilsulfonil)-2-trifluorometilfenil]-3-(1-metilciklopropil)propan-1,3-fion; drugi izoksazoli; i pirazolinati, npr. topramezon [tj. [3-(4,5-dihidro-3-izoksazolil)-2-metil-4-(metilsulfonil) fenil](5-hidroksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)metanon], i pirasulfotol [(5-hidroksi-1,3-dimetilpirazol-4-il(2-mezil-4-trifluarometilfenil)metanon]; ili pirazofen [2-[4-(2,4-dihlorobenzoil)-1,3-dimetilpirazol-5-iloksi]acetofenon].
[0089] U jednom primeru izvođenja ovog pronalaska, polje na kome se zasađuju biljke soje koje sadrže EE-GM3 događaj, može biti tretirano herbicidom inhibitorom HPPD, kao što je izoksaflutol (’IFT’), pre nego što su biljke soje zasađene ili su semena zasejana, koje čisti polje od korova koji su ubijeni inhibitorom HPPD, omogućavajući „no-till“ prakse, praćene sađenjem ili zasejavanjem soje na isto prethodno tretirano polje kasnije („burndown“ primena upotrebom herbicida inhibitora HPPD). Rezidualna aktivnost IFT takođe će štititi biljke soje koje niču ili rastu od kompeticije sa korovom u ranim stadijumima rasta. Pošto biljke soje imaju određenu veličinu, i korov ima tenedenciju da se ponovo javi, glifosat ili smeša HPPD inhibitora-glifosata, može se primeniti kao herbicid posle nicanja na vrh biljaka.
[0090] U sledećem primeru izvođenja ovog pronalaska, polje u kome su semena koja sadrže EE-GM3 događaj zasejana, može biti tretirano herbicidom inhibitorom HPPD, kao što je IFT, pre nicanja biljaka soje, ali pošto su semena zasejana (polje može biti očišćeno od korova pre zasejavanja upotrebom drugih sredstava, tipično konvencionalnih praksi za obradu zemlje kao što je oranje, oranje sa chissel plugom ili pred-setvena priprema zemljišta), gde će rezidualna aktivnost održavati polje bez korova ubijenog herbicidom tako da nicanje i rast biljaka soje nema kompeticiju sa korovima (primena herbicidina inhibitora HPPD pre nicanja). Pošto biljke soje imaju određenu veličinu, i korovi imaju tendenciju da se vraćaju, glifosat – ili smeša inhibitora HPPD-glifosata – može se primeniti kao herbicid posle nicanja na vrh biljaka.
[0091] U sledećem primeru izvođenja ovog pronalaska, biljke koje sadrže EE-GM3 događaj, mogu biti tretirane herbicidom inhibitorom HPPD, kao što je IFT, preko vrha biljaka soje koje su nikle iz semena koja su zasejana, što čisti polje od korova ubijenih inhibitorom HPPD, čija primena može biti zajedno sa (npr., u mešavini u rezervoaru za sprej), pre ili posle tretmana glifosatom kao herbicidom posle nicanja preko vrha biljaka (primena posle nicanja herbicida inhibitora HPPD (sa ili bez glifosata)).
[0092] Takođe, u skladu sa ovim pronalaskom, biljke soje koje sadrže EE-GM3 mogu biti tretirane sledećim insekticidima, herbicidima ili fungicidima ili semena soja koja sadrže EE-GM3 mogu biti obložena omotačem koji sadrži sledeće insekticidi, herbicide ili fungicide:
Sojini herbicidi:
Alahlor, bentazon, trifluralin, hlorimuron-etil, kloransulam-metil, fenoksaprop, fomesafen, fluazifop, glifosat, imazamoks, imazakvin, imazetapir, (S-)metolahlor, metribuzin, pendimetalin, tepraloksidim, izoksaflutol.
Sojini insekticidi:
Lambda-cihalotrin, metomil, paration, tiokarb, imidakloprid, klotianidin, tiametoksam, tiakloprid, acetamiprid, dinetofuran, flubendiamid, rinaksipir, ciazipir, spinosad, spinotoram, emamektin-benzoat, fipronil, etiprol, deltametrin, β-ciflutrin, gama i lambda cihalotrin, 4-[[(6-hlorpiridin-3-il)metil](2,2-difluoretil)amino]furan-2(5H)-on, spirotetramat, spinodiklofen, triflumuron, flonikamid, tiodikarb, beta-ciflutrin.
Sojini fungicidi:
Azoksistrobin, ciprokonazol, epoksikonazol, flutriafol, piraklostrobin, tebukonazol, trifloksistrobin, protiokonazol, tetrakonazol.
[0093] Sledeći primeri opisuju razvoj i identifikaciju elitnog događaja EE-GM3, razvoj različitih linija soje koje sadrže ovaj događaj, i razvoj alata za specifičnu identifikaciju elitnog događaja EE-GM3 u biološkim uzorcima.
[0094] Osim ukoliko nije naznačeno drugačije u Primerima, sve rekombinantne tehnike su izvedene prema standardnim protokolima kao što su opisani u "Sambrook J and Russell DW (eds.) (2001) Molecular Cloning: A Laboratory Manual, 3rd Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, New York" i u "Ausubel FA, Brent R, Kingston RE, Moore DD, Seidman JG, Smith JA and Struhl K (eds.) (2006) Current Protocols in Molecular Biology. John Wiley & Sons, New York".
[0095] Standardni materijali i reference su opisani u "Croy RDD (ed.) (1993) Plant Molecular Biology LabFax, BIOS Scientific Publishers Ltd., Oxford and Blackwell Scientific Publications, Oxford" and in "Brown TA, (1998) Molecular Biology LabFax, 2nd Edition, Academic Press, San Diego". Standardni materijali i postupci za lančane reakcije polimeraze (PCR) mogu se naći u "McPherson MJ and Møller SG (2000) PCR (The Basics), BIOS Scientific Publishers Ltd., Oxford" i u "PCR Applications Manual, 3rd Edition (2006), Roche Diagnostics GmbH, Mannheim ili www.rocheapplied-science.com "
[0096] Trebalo bi razumeti da može biti potrebno da se broj parametara u bilo kom laboratorijskom protokolu kao što su PCR protokoli u donjim Primerima prilagodi specifičnim laboratorijskim uslovima, i mogu biti neznatno modifikovani za dobijanje sličnih rezultata. Na primer, upotreba različitog postupka za pripremu DNK ili selekciju drugih prajmera u PCR postupku može da diktira druge optimalne uslove za PCR protokol. Ova prilagođavanja će međutim biti očigledna stručnjaku iz date oblasti tehnike, i dalje su detaljno opisana u uputstvima za primenu PCR.
[0097] U opisu i primerima, referenca je napravljena sa sledećim sekvencama:
SEQ ID No.1: SalI fragment nukleotidne sekvence vektora pSF10.
SEQ ID No. 2: nukleotidna sekvenca koja sadrži 5’ region koja flankira stranu DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid u EE-GM3.
SEQ ID No. 3: nukleotidna sekvenca koja sadrži 3’ region koja flankira stranu DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid u EE-GM3.
SEQ ID No.4: prajmer SOY028
SEQ ID No.5: prajmer SOY029
SEQ ID No.6: prajmer SMP187
SEQ ID No.7: prajmer STV019
SEQ ID No.8: nukleotidna sekvenca amplikona
SEQ ID No.9: prajmer 1 za amplifikaciju kontrolnog fragmenta (SOY01)
SEQ ID No.10: prajmer 2 za amplifikaciju kontrolnog fragmenta (SOY02)
SEQ ID No.11: nukleotidna sekvenca strane DNK i biljne flankirajuće sekvence u EE-GM3 SEQ ID No.12: prajmer SHA130
SEQ ID No.13: prajmer SHA178
Primeri
1. Transformacija Glycine max sa genima za toleranciju na herbicid.
1.1. Opis strane DNK koja sadrži 2mEPSPS i HPPD-Pf-W336 himerne gene
[0098] Plazmid pSF10 je pUC19 izvedeni klonirajući vektor koji sadrži himerni 2mepsps gen i himerni hppd-Pf-W336 gen lociran na SalI fragmentu od oko 7.3 kb. Pun opis DNK sadržane između dva SalI restrikciona mesta dat je u Tabeli 1 u daljem tekstu. Nukleotidna sekvenca je predstavljena u SEQ ID No.1.
Tabela 1. Nukleotidni položaji DNK sadržani između SalI restrikcionih mesta pSF10
(SEQ ID No 1)
1.2. Događaj EE-GM3
[0099] HPLC prečišćeni Sail-linearizovani pSF10 fragment od oko 7.3 kb (koji sadrži gen za toleranciju glifosata 2mEPSPS i gen za toleranciju inhibitora HPPD HPPD-Pf- W336) korišćen je za dobijanje transformisanih biljaka soje pomoću direktnog transfera gena u ćelije soje tipa Jack (Nickell, C. D., G. R. Noel, D. J. Thomas, and R. Waller. Registration of ’Jack’ soybean. Crop Sci 1365. 30.1990), što je praćeno regeneracijom transformisanih biljnih ćelija u transgene fertilne biljke soje.
1.2.1 Identifikacija elitnog događaja EE-GM3
[0100] Elitni događaj EE-GM3 je selekcionisan na osnovu ekstenzivne procedure selekcije na osnovu dobre ekspresije i procenjivana je stabilnost gena za toleranciju na herbicid, i njegova kompatibilinosti sa optimalnim agronomskim karakteristikama kao što su visina biljke, visina do nodusa, otpornost na poleganje, snaga, prinos semena. Biljke soje koje sadrže ovaj događaj su izabrane iz širokog opsega različitih transformacionih događaja dobijenih upotrebom istih himernih gena. Parametri korišćeni u selekciji ovog događaja su: a) prihvatljiva tolerancija na primenu herbicida izoksaflutola u ispitivanjima na polju, b) prihvatljiva tolerancija na primenu herbicida glifosata u ispitivanjima na polju, c) prihvatljiva tolerancija na kombinovanu primenu herbicida izoksaflutola i glifosata u ispitivanjima na polju, d) insercija transgena za toleranciju na herbicid na jednom lokusu u genomu biljke soje, uz odsustvo vektorske osnove, e) ukupna agronomija slična matičnim biljkama korišćena za transformaciju (zrelost, poleganje, podložnost bolesti, itd.), i f) nije izazvan značajan negativan uticaj na prinos uzrokovan insercijom transformišuće DNK (u poređenju sa izogenom linijom bez događaja, kao što je biljna linija korišćena za transformaciju, gajena pod istim uslovima).
[0101] U T3 generaciji, homozigotna linija transformacionog događaja soje EE-GM3 selekcionisana je za proizvodnju semena. Multi-lokacione ponavljane agronomske studije na polju izvedene su u regionima prilagođavanja matične sorte, Jack. Procene na polju obuhvatale su toleranciju na herbicid i agronomski učinak. Nađeno je da je agronomski učinak biljaka koje sadrže EE-GM3 sličan Jack (kada nisu primenjivani herbicidi). Procenjivanja na polju su takođe pokazala da biljke koje nose EE-GM3 događaj imaju:
- sličnu biljnu morfologiju i karakteristike semena u poređenju sa Jack,
- nemaju promene u odgovoru na bolesti soje u poređenju sa Jack, i
- nemaju promene u klijanju ili dormanciji semena u poređenju sa Jack.
[0102] Seme (T1 ili S1 generacija) sakupljeno iz biljke početnog transformanta (T0) (biljka transformisana sa konstruktom tako da se proizvede događaj EE-GM3) u stakleniku zasejano je na polju. Tri bloka su zasađena i prskana sa 0, 2 ili 4 kg/ha glifosata. Seme je sakupljeno iz biljaka koje su pokazale željeni nivo tolerancije na herbicid, glifosat.
[0103] Semena (T2 generacija) sakupljena iz samo-oprašenih T1 biljaka gajenih u polju sejana su "biljka u redu". Hi kvadrat analiza segregacionih podataka za redove (potpuno ili delimično tolerantne) i pojedinačne biljke unutar redova (tolerantni ili osetljivi) pokazuju očekivano nasleđivanje prema Mendelu jedne insercije za EE-GM3.
[0104] Selekcija i povećanje semena su nastavljeni sve dok linija nije određena kao homozigotna za događaj transformacije EE-GM3 i selekcionisana za prozvodnju semena u četvrtoj generaciji. Zatim, T5 generacija semena je služila kao kandidat za razvoj različitih sorti. Biljke u šestoj generaciji (T6 generaciji) su ukrštane sa konvencionalnim linijama soje za oplemenjivanje u programu introgresije dizajniranom za pomeranje događaja u širu osnovu komercijalne sojine germplazme. F1 hibridne biljke (EE-GM3 linije x konvencionalne linije) su gajene do zrelosti i F2 seme je zasađeno. Uzorci lista 901 F2 biljaka analizirani su pomoću PCR prajmera dizajniranih za identifikaciju zigotnosti EE-GM3 inserta. Zabeležen je očekivani odnos od 1:2:1 za segregaciju jedne insercije prema pravilima Mendela.
[0105] Selekcionisani događaj EE-GM3 je uveden u različite komercijalne genetičke osnove, i upoređivani su rezultati ispitivanjima na polju na različitim lokacijama. Biljke su izlagane herbicidu glifosatu i/ili herbicidu izoksaflutolu upotrebom različitih tretmana. Biljke su ispoljile dobru toleranciju na herbicid. Stotine različitih sorti soje koje sadrže događaj EEGM3 korišćene su u studiji nasleđivanja, i primenjeni su herbicidi. Selekcionisane linije iz ovog ispitivanja su kasnije povećane u polju i takođe tretirane herbicidom. Iz tog ispitivanja, 50 selekcionisanih linija je povećano, i one su takođe tretirane herbicidom. Ocene fitotoksičnosti za poslednje linije prskane izoksaflutolom i glifosatom pokazale su izvesnu varijabilnost u odgovoru, ali opseg odgovora među linijama reflektovao je sličnu varijabilnost kao što je zabeleženo u 4 replikacije EE-GM3 događaja u originalnoj Jack osnovi, gajenoj pod istim uslovima tretmana i sredine. Stoga, tolerancija na relevantne herbicide u širokom opsegu germplazme zabeležena je za biljke koje sadrže EE-GM3.
[0106] Pored toga, biljke koje sadrže događaj EE-GM3 imale su normalnu morfologiju lista, cveta i mahune, odličan fertilitet i pokazale su da nema bolesti ili abnormalne podložnosti na insekte u višestrukim genetičkim osnovama. U toku introgresije u višestruke genetičke osnove nisu zabeleženi aberantni problemi ili abnormaliteti.
[0107] U jednoj sezoni, studija na 10 lokacija je dizajnirana za upoređivanje agronomskog učinka soje tolerantne na dvostruki herbicid koja sadrži transformacioni događaj EE-GM3 sa transformacionom matičnom sortom, Jack i nekim netransgenim sortama soje. Upotrebom randomizovanog kompletnog blok dizajna, EE-GM3 biljke su gajene u ponovljenim parcelama sa konvencionalnom kontrolom korova ili sa nameravanim herbicidima, glifosatom i izoksaflutolom. Parcele sa biljkama soje koje sadrže transformacioni događaj EE-GM3 prskane su herbicidom izoksaflutolom na ciljnoj stopi od 70 grama ai/Ha i herbicidom glifosatom na ciljnoj stopi od 1060 grama ai/Ha. Primena herbicida je izvedena na ove biljke kao folijarni sprej na oko V4-V5 stadijumu biljnog rasta. Agronomska zapažanja su izvedena rano, na sredini i kasno u sezoni. Gustina biljaka (parametar; broj uspravnih biljaka) je bila viša za parcele Jack i netransgene sorte nego u parceli događaja EE-GM3 za jednu standardnu devijaciju. Rana razlika broja uspravnih biljaka može biti rezultat kvaliteta serije semena, kako je seme EE-GM3 proizvedeno u uzgajalištu u suprotnoj sezoni, dok je seme netransgenih sorti proizveden u kontinuiranoj SAD, normalnoj produkcionoj sezoni. Međutim, broj dana za postizanje 50% nisanja i ocene vigora biljaka bili su isti, što ukazuje na to da su serije semena bile slične za ove parametre učinka. U kasnoj sezoni brojevi uspravljenih biljaka, Jack i netransgenih sorti ostali su različiti za jednu standardnu devijaciju od EE-GM3 biljaka. Prinosi parcele biljaka sa EE-GM3 događajem takođe su bili niži od onih kod Jack za jednu standardnu devijaciju, možda kao rezultat niže gustine biljaka parcele EE-GM3 događaja. Prinos netransgenih sorti bio je više od Jack kao što se moglo očekivati zbog toga što je zabeležen napredak u potencijalnu prinosa u novijim sortama.
[0108] U jednom ispitivanju, ocene zdravlja biljaka su davane na tri stadijuma rasta: V4-5, R1 i puna zrelost. Prva procena je bila kratko posle nameravane primene herbicida. U vreme krajnje procene zdravlja biljaka, biljke koje sadrže EE-GM3 prskane sa oba herbicida imale su istu ocenu kao neprskane Jack biljke, ili neprskane biljke koje sadrže EE-GM3. U ocenama agronomskog osoblja, biljke prskane herbicidom dobile su ocenu zdravlja od 3-4 (umerena povreda) na stadijumima rasta biljaka V4-5 i R1. Neprskane biljke (netransformisane Jack ili biljke soje koje sadrže EEGM3) su ocenje sa 4.6-4.8 (ocena 5 označava da nema povrede). Prilikom krajnjeg ocenjivanja zdravlja biljaka, sve parcele su primile istu ocenu 5 (bez povrede).
[0109] Jedna sezona ispitivanja je bila sa izuzetnim padavinama, i povreda useva u EE-GM3 biljkama posle primene nameravanog herbicida bila je očiglednija od one zabeležen u drugim sezonama. Procene polja su takođe obuhvatale praćenje adaptacionih karakteristika (reprodukacija, rezistencija na bolest, fekunditet, dispergovanje semena, dormancija, perzistencija). Za reproduktivne karaktestike; dani do nicanja, dani do 50% cvetanja i dani do 90% sazrevanja mahuna, EE-GM3 i Jack biljke nisu bile različite. Nije zabeležena razlika u reakciji na prirodne infestacije biljnih bolesti i insekata štetočina. Iako je EE-GM3 proizveo manji prinos od Jack, nije nađena razlika u fekunditetu (težina 100 semena). Procenom parametara disperzije semena (lomljenje mahuna i poleganje biljaka) nađeno je da EE-GM3 i Jack imaju istu ocenu lomljenja mahuna, ali je nađeno da su EE-GM3 biljke manje podložne poleganju. Procena semena sakupljenog sa 10 lokacija ne nalazi probleme postavljene testiranjem klijanja ili dormancije.
[0110] U ovim ispitivanjima u toku sezone sa izuzetnim padavinama, konačan prinos EE-GM3 biljaka, bez obzira na kontrolni tretman korova, bio je manji od prinosa Jack za jednu standardnu devijaciju (možda rezultat niže gustine biljaka parcela sa EE-GM3 događajem). U izuzetno vlažnoj sezoni, povreda useva (izbeljivanje u 10-30% površine useva) zabeležena je za EE-GM3 parcele do šest nedelja posle folijarne primene herbicida glifosata i izoksaflutola. Međutim, sa zrelošću, ocena zdravlja biljaka "bez povrede" dodeljena je svim parcelama. Ponovljena multi-lokaciona ispitivanja na polju sa EE-GM3 introgresiranom u elitnu osnovu sorte soje, u poređenju sa skoro-izogenim sestrinskim linijama koje ne sadrže transgen, očekuje se da pokazuje da nema razlike između biljaka koje sadrže događaj EE-GM3 i skoroizogenih linija (u odsustvu tretmana herbicidom).
[0111] Pored toga, u ponovljenom ispitivanju na polju nađena je značajna tolerancija useva (izbeljivanje od manje od 10 %) kod biljaka soje koje sadrže EE-GM3 kada su tretirane preili posle nicanja sa IFT (70 g ai/ha sa 0.5 % NIS, Agridex), ali takođe značajna tolerancija useva (izbeljivanje od manje od 10 %) je nađeno kod biljaka soje koje sadrže EE-GM3 kada su tretirane primenom pirasulfotola posle nicanja (35 g ai/ha sa 0.5 % NIS, Agridex), drugim herbicidom inhibitorom HPPD.
1.2.2. Identifikacija flankirajućih regiona i strane DNK elitnog događaja EE-GM3
[0112] Sekvenca regiona koji flankiraju stranu DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid u EEGM3 elitnom događaju određena je kao sledeća:
1.2.2.1. Desni (5’) flankirajući region
[0113] Fragment identifikovan tako da sadrži 5’ flankirajući region je sekvenciran i njegova nukleotidna sekvenca je predstavljena u SEQ ID No.2. Sekvenca između nukleotida 1 i 1451 odgovara biljnoj DNK, dok sekvenca između nukleotida 1452 i 1843 odgovara stranoj DNK.
1.2.2.2. Levi (3’) flankirajući region
[0114] Fragment identifikovan tako da sadrži 3’ flankirajući region je sekvenciran i njegova nukleotidna sekvenca je predstavljena u SEQ ID No. 3. Sekvenca između nukleotida 1 i 240 odgovara stranoj DNK, dok sekvenca između nukleotida 241 i 1408 odgovara biljnoj DNK.
1.2.2.3. Strana DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid od EE-GM3
[0115] Upotrebom različitih molekularnih tehnika, određeno je da strana DNK elitnog događaja EE-GM3 koja sadrži gene za toleranciju na herbicid sadrži dve delimične 3’ histonAt sekvence u orijentaciji glava-ka-glavi, praćene sa 2 skoro kompletne kopije SalI fragmenta pSF10 uređene u orijentaciji glava-ka-repu (videti Sliku 1).
[0116] Strana DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid od EE-GM3 na taj način sadrži po redosledu sledeće sekvence:
- od nukleotida 1 do nukleotida 199: nukleotidnu sekvencu koja odgovara komplementu nukleotidne sekvence prema SEQ ID 1 od nt 6760 do nt 6958;
- od nukleotida 200 do nukleotida 624: nukleotidnu sekvencu koja odgovara nukleotidnoj sekvenci prema SEQ ID 1 od nt 6874 do nt 7298;
- od nukleotida 625 do nukleotida 7909: nukleotidnu sekvencu koja odgovara nukleotidnoj sekvenci prema SEQ ID 1 od nt 7 do nt 7291;
- od nukleotida 7910 do nukleotida 15163: nukleotidnu sekvencu koja odgovara nukleotidnoj sekvenci prema SEQ ID 1 od nt 12 do nt 7265; i
- od nukleotida 15164 do nukleotida 15187: nukleotidnu sekvencu koja odgovara nukleotidnoj sekvenci prema SEQ ID 3 od nt 217 do nt 240 (ova sekvenca ne odgovara pSF10 plazmidnoj DNK ili divljem tipu biljne DNK i prema tome je označena kao DNK punilac). Ovoj stranoj DNK prethodi neposredno ushodno i kontinuirano sa stranom DNK, 5’ flankirajuća sekvenca prema SEQ ID No 2 od nukleotida 1 do 1451 i posle nje sledi neposredno nishodno i konitinuirano sa stranom DNK, 3’ flankirajuća sekvenca prema SEQ ID No 3 od nukleotida 241 do nukleotida 1408.
[0117] Potvrđeno sekvenciranje cele DNK strane DNK i flankirajućih DNK sekvenci u EE-GM3 rezultovalo je u sekvenci objavljenoj u SEQ ID No. 11. U ovoj sekvenci, inserirana DNK je od nukleotidnog položaja 1452 do nukleotidnog položaja 16638, i 2 skoro potpune kopije iz pSF10 uređene u orijentaciji glava-ka-repu su od nukleotidnog položaja 2257 do nukleotidnog položaja 16601. 5’ Flankirajuća DNK sekvenca u SEQ ID No. 11 je sekvenca od nukleotidnog položaja 1 do nukleotidnog položaja 1451 u SEQ ID No.11, i 3’ flankirajuća DNK sekvenca u SEQ ID No. 11 je sekvenca od nukleotidnog položaja 16639 do nukleotidnog položaja 17806 u SEQ ID No.11.
2. Razvoj identifikacionih protokola lančane rekacije polimeraze za EE-GM3
2.1. Prajmeri
[0118] Razvijeni su specifični prajmeri koji prepoznaju sekvence unutar elitnog događaja.
[0119] Razvijen je prajmer koji prepoznaje sekvencu unutar 3’ flankirajućeg regiona od EE-GM3. Drugi prajmer je zatim izabran unutar sekvence strane DNK tako da se prajmeri protežu preko sekvence od oko 263 nukleotida. Nađeno je da sledeći prajmeri daju naročito jasne i ponovljive rezultate u PCR reakciji na EE-GM3 DNK:
SOY028: 5’-ATC.gCT.TTA.ACg.TCC.CTC.Ag -3 (cilj: insert DNK) (SEQ ID No.: 4) SOY029: 5’-CAA.ggC.CTC.gAg.ATT.ATC -3’ (cilj: biljna DNK) (SEQ ID No.: 5)
[0120] Prajmeri koji ciljno deluju na endogenu sekvencu poželjno su uključeni u PCR koktel. Ovi prajmeri služe kao interna kontrola u nepoznatim uzorcima i u DNK pozitivnoj kontroli. Pozitivan rezultat sa endogenim prajmerskim parom (prisustvo PCR amplifikovanog fragmenta od 413 bp) pokazuje da postoji obilna DNK adekvatnog kvaliteta u preparatu genomske DNK za generisanje PCR proizvoda. Endogeni prajmeri su izabrani tako da prepoznaju endogeni gen za aktin soje:
SOY01 5’-gTC.AgC.CAC.ACA.gTg.CCT.AT -3’ (SEQ ID No.: 9) SOY02 5’-gTT.ACC.gTA.CAg.gTC.TTT.CC -3’ (SEQ ID No.: 10)
2.2. Amplifikovani fragmenti
[0121] Očekivani amplifikovani fragmenti u PCR reakciji su:
Za prajmerski par SOY01-SOY02: 413bp (endogena kontrola)
Za prajmerski par SOY028-SOY029: 263bp (EE-GM3 elitni događaj)
2.3. Matrična DNK
[0122] Matrična DNK je pripremljena od fragmenta lista prema Edwards et al. (Nucleic Acid Research, 19, p1349, 1991). Kada se koristi DNK pripremljena sa drugim postupcima, trebalo bi izvesti test koji koristi različite količine matrice. Uobičajeno 50 ng genomske matrične DNK proizvodi najbolje rezultate.
2.4. Dodeljene pozitivne i negativne kontrole
[0123] Da bi se izbegli lažno pozitivni ili negativni rezultati, određeno je da bi sledeće pozitivne i negativne kontrole trebalo biti uključene u PCR:
- Master Mix kontrola (DNK negativna kontrola). To je PCR u kome se u reakciju ne dodaje DNK. Kada je zabeležen očekivani rezultat, da nema proizvoda PCR-a, to ukazuje da PCR koktel nije kontaminiran sa ciljnom DNK.
- DNA pozitivna kontrola (uzorak genomske DNK za koji je poznato da sadrži transgene sekvence). Uspešna amplifikacija ove pozitivne kontrole pokazuje da je PCR izveden pod uslovima koji omogućavaju amplifikaciju ciljnih sekvenci.
- DNK kontrola divljeg tipa. Ovo je PCR u kome je obezbeđena matrična DNK – genomska DNK pripremljena od netransgene biljke. Kada je zabeležen očekivani rezultat, da nema amplifikacije transgenog PCR proizvoda, već ima amplifikacija endogenog PCR proizvoda, to ukazuje da nema detektabilne amplifikacije osnove transgena u uzorak genomske DNK.
2.5. Uslovi PCR-a
[0124] Optimalni rezultati su dobijeni pod sledećim uslovima (U opisivanju različitih uslova za optimalne rezultate, oni označavaju obezbeđivanje primera takvih uslova. Jasno je da bi stručnjak iz date oblasti tehnike mogao da varira uslove, reagense i parametre kao što je upotreba drugih Taq polimeraza, i postizanje željenih rezultata):
- PCR mešavina za 25µl reakciju sadrži:
20 ng matrične DNK
2.5 µl 10x amplifikacioni pufer (nabavljen od strane proizvođača sa Taq polimerazom) 0.5 µl 10 mM dNTP’s
0.4 µl SOY01 (10pmola/µl)
0.4 µl SOY02 (10pmola/µl)
0.7 µl SOY028 (10pmola/µl)
0.7 µl SOY029 (10pmola/µl)
0.1 µl Taq DNK polimeraze (5 jedinica/µl)
voda do 25 µl
- profil termociklusa koji se prati za optimalne rezultate je sledeći:
4 min. na 95°C
Praćeno sa: 1 min. na 95°C
1 min. na 57°C
2 min. na 72°C
Tokom 5 ciklusa
Praćeno sa: 30 sek. na 92°C
30 sek. na 57°C
1 min. na 72°C
Tokom 25 ciklusa
Praćeno sa: 10 minuta na 72°C
2.6. Analiza agaroznog gela
[0125] Da bi se optimalno vizualizovani rezultati PCR-a određeno je da bi se između 10 i 20µl PCR uzoraka trebalo naneti na 1.5% agarozni gel (Tris-boratni pufer) sa odgovarajućim markerom molekulske mase (npr.100bp lestvica Pharmacia).
2.7. Validacija rezultata
[0126] Određeno je da podaci od uzoraka transgene biljne DNK unutar jednog PCR i jednog PCR koktela ne bi trebalo da su prihvatljivi osim ukoliko 1) DNK pozitivna kontrola pokazuje očekivane PCR proizvode (transgeni i endogeni fragmenti), 2) DNA negativna kontrola je negativna za PCR amplifikaciju (bez fragmenata) i 3) kontrola divljeg tipa DNK pokazuje očekivani rezultat (amplifikacija endogenog fragmenta).
[0127] Kada se prati PCR identifikacioni protokol za EE-GM3 kao što je opisano u prethodnom tekstu, trake koje pokazuju vidljive količine transgenih i endogenih PCR proizvoda očekivanih veličina, ukazuju na to da odgovarajuća biljka iz koje je pripremljena genomska matrična DNK, je nasledila EE-GM3 elitni događaj. Trake koje ne pokazuju vidljive količine transgenih PCR proizvoda i koje pokazuju vidljive količine endogenog PCR proizvoda, ukazuju na to da odgovarajuća biljka iz koje je pripremljena genomska matrična DNK, ne sadrži elitni događaj. Trake koje ne prikazuju vidljive količine endogenih i transgenih PCR proizvoda, ukazuju na to da kvalitet i/ili količina genomske DNK nije omogućila generisanje PCR proizvoda. Obe biljke ne mogu biti ocenjivane. Priprema genomske DNK bi trebalo da se ponavlja i mora se izvesti novi PCR, sa odgovarajućim kontrolama.
2.8. Upotreba diskriminišućeg PCR protokola za identifikaciju EE-GM3
[0128] Pre pokušaja za skrining nepoznatih obrazaca, izveden je test sa svim odgovarajućim kontrolama. Razvijeni protokol bi mogao da zahteva optimizaciju za komponente koje mogu da se razlikuju između laboratorija (preparat matrične DNK, Taq DNK polimeraza, kvalitet prajmera, dNTP’s, termocikler, itd.).
[0129] Amplifikacija endogene sekvence ima ključnu ulogu u protokolu. Potrebno je da se postignu uslovi PCR i termociklusa koji amplifikuju ekvimolarne količine endogene i transgene sekvence u poznatoj transgenoj genomskoj DNK matrici. Kada god ciljni endogeni fragment nije amplifikovan ili kada god ciljne sekvence nisu amplifikovane sa istim intenzitetima bojenja etidijum bromidom, kao što je procenjeno pomoću elektroforeze na agaroznom gelu, može biti potrebna optimizacija PCR uslova.
[0130] Materijal od listova od određenog broja biljaka soje, od kojih neke sadrže EE-GM3 testiran je prema gore opisanom protokolu. Uzorci iz elitnog događaja EE-GM3 i od divljeg tipa su uzeti kao pozitivne i negativne kontrole, respektivno.
[0131] Slika 2 ilustruje rezultat dobijen sa PCR identifikacionim protokolom elitnog događaja za EE-GM3 na broj uzoraka biljaka soje. Nađeno je da uzorci na trakama 2 i 3 sadrže elitni događaj EE-GM3 kako je detektovana 263 bp traka, dok uzorci na trakama 4 do 8 ne sadrže EE-GM3. Trake 6 i 7 sadrže uzorke iz drugih transformacionih događaja soje dobijenih upotrebom istih himernih gena za toleranciju na herbicid; traka 8 sadrži DNK iz divljeg tipa biljaka soje i traka 9 predstavlja negativni kontrolni (voda) uzorak, trake 1 i 10 predstavljaju marker molekulske mase (100 bp lestvica).
2.9. dPCR analiza za detekciju EE-GM3 u zapreminskoj partiji semena
[0132] Diskriminišuća PCR (dPCR) analiza je postavljena za detekciju niskog nivoa prisustva EE-GM3 u zapreminskoj partiji semena. Minimalan nivo od 0.4% (tež./tež.) transgenih semena u zapreminskoj partiji netransgenih semena uspešno je detektovan pod ponovljivim uslovima. Prema tome granica detekcije je određena kao 0.4% (tež./tež.).
[0133] Sledeći prajmeri su primenjeni u ovoj ciljnoj PCR reakciji:
Direktni prajmer usmeren na T-DNK sekvencu:
SHA130 5’-CTA.TAT.TCT.ggT.TCC.AAT.TTA.TC-3’ (SED ID No.12)
Reverzni prajmer usmeren na 3’ flankirajuću sekvencu:
SMP178 5’-TgA.ggC.ACg.TAT.TgA.TgA.CC-3’ (SEQ ID No.13)
Očekivani amplifikovani fragment u PCR reakciji od ovih prajmera je 115 bp.
[0134] Ciljna PCR reakcija je izvedena na približno 200ng matrične DNK pripremljene od mlevene zapreminske partije semena prema modifikovanom kompletu za prečišćavanje i ekstrakciju DNK, „Gentra Puregene DNA purification extraction kit“ (Qiagen). Kada se koristi DNK pripremljena sa drugim postupcima, trebalo bi izvesti test upotrebom uzoraka sa poznatim relativnim nivoima EE-GM3. Validirani referentni sistem PCR reakcije, ciljnog delovanja na endogenu sekvencu, trebalo bi idealno da se izvede u posebnom PCR ciklusu radi verifikacije pogodnosti DNK uzorka za PCR analizu da bi se izbegli lažni negativni rezultati. Za nepoznate test uzorke PCR eksperiment bi idealno trebalo da obuhvata odgovarajuće pozitivne i negativne kontrolne uzorke, tj.:
- Master Mix kontrola (DNK negativna kontrola). Ovo je PCR u kome DNK nije dodata u reakciju. Kada je očekivani rezultat (da nema PCR proizvoda) zabeležen za ciljni i referentni sistem, ovo ukazuje na to da PCR koktel nije kontaminiran sa ciljnom DNK.
- DNK pozitivna kontrola (uzorak genomske DNK za koji je poznato da sadrži transgene sekvence). Uspešna amplifikacija ove pozitivne kontrole pokazuje da je PCR izveden pod uslovima koji omogućavaju amplifikaciju ciljnih sekvenci.
- Takođe kontrola divljeg tipa DNK može se dodati u ovaj PCR. Ovo je PCR u kome je obezbeđena matrična DNK – genomska DNK pripremljena od netransgene biljke. Kada je zabeležen očekivani rezultat, da nema amplifikacije transgenog PCR proizvoda, već amplifikacije endogenog PCR proizvoda, to ukazuje na to da nema detektabilne amplifikacije transgene osnove u uzorku genomske DNK.
[0135] Optimalni rezultati su dobijeni pod sledećim uslovima:
Očigledno, mogu se koristiti druge Taq polimeraze i zatim uslovi mogu da se razlikuju tako da se slede preporuke nabavljača.
- PCR mešavina za 25µl reakcije sadrži:
200 ng matrične DNK
5 µl 5x reakcionog pufera
0.25 µl 20 mM dNTP’s
0.7 µl SHA130 (10pmola/l)
0.4 µl SMP178 (10pmola/l)
0.1 µl GO-Taq DNK polimeraze (5 jedinica/l)
Dodati vodu do 25 µl
- profil termociklusa koji se prati za optimalne rezultate je sledeći:
4 min. na 95°C
Praćeno sa: 1 min. na 95°C
1 min. na 57°C
2 min. na 72°C
Tokom 5 ciklusa
Praćeno sa: 30 sek. na 92°C
30 sek. na 57°C
1 min. na 72°C
Tokom 30 ciklusa
Praćeno sa: 10 minuta na 72°C
[0136] Da bi se optimalno vizuelizovali rezultati PCR-a određeno je da bi 25 µl PCR proizvoda trebalo naneti na 1.5% agarozni gel (Tris-boratni pufer) sa odgovarajućim markerom molekulske mase (npr.50bp lestvica).
[0137] Prilikom praćenja PCR postupka kao što je opisan u prethodnom tekstu, trake koje prikazuju vidljive količine PCR proizvoda ciljnog i referentnog sistema očekivanih veličina, ukazuju na to da je test uzorak od koga je priprmeljena genomska matrična DNK sadržao nivoe EE-GM3 elitnog događaja iznad granice detekcije ciljne reakcije. Trake koje ne prikazuju vidljive količine ciljnih PCR proizvoda, ali koje pokazuju vidljive količine PCR proizvoda referentnog sistema, ukazuju na to da je test uzorak od koja je pripremljen genomska matrična DNK, sadržao nivoe EE-GM3 elitnog događaja ispod granice detekcije ciljne reakcije. Trake koje ne prikazuju vidljive količine endogenoh i transgenih PCR proizvoda, ukazuju na to da kvalitet i/ili količina genomske DNK nije omogućila generisanje PCR proizvoda. Ove biljke se ne mogu ocenjivati. Priprema genomske DNK bi trebalo da se ponovi i mora se izvesti novi PCR, sa odgovarajućim kontrolama.
3. Upotreba specifičnog integracionog fragmenta kao probe za detekciju materijala koji sadrži EE-GM3
[0138] Specifičan integracioni fragment EE-GM3 je dobijen pomoću PCR amplifikacije upotrebom specifičnih prajmera SOY028 (SEQ ID No. 4) i SOY029 (SEQ ID No. 5) proizvodeći amplikon sa nukleotidnom sekvencom prema SEQ ID No 8 ili pomoću hemijske sinteze i obeležen je. Ovaj integracioni fragment je korišćen kao specifična proba za detekciju EE-GM3 u biološkim uzorcima. Nukleinska kiselina je ekstrahovana iz uzoraka prema standardnim postupcima. Ova nukleinska kiselina je zatim dovedena u kontakt sa specifičnom probom pod uslovima hibridizacije koji su optimizovani da se omogući formiranje hibrida. Formiranje hibrida je zatim detektovano da ukazuje na prisustvo EE-GM3 nukleinske kiseline u uzorku. Izborno, nukleinska kiselina u uzorcima je amplifikovana upotrebom specifičnih prajmera pre kontakta sa specifičnom probom. Alternativno, nukleinska kiselina je obeležena pre kontakta sa specifičnom probom umesto integracionog fragmenta. Izborno, specifična proba je vezana za čvrsti nosač (kao što su, ali bez ograničenja na filter, traka ili kuglice), pre kontakta sa uzorcima.
4. Protokol za određivanje statusa zigotnosti EE-GM3 sojinog biljnog materijala na bazi PCR-a
4.1. Prajmeri
[0139] Dva prajmera koja prepoznaju nukleotidne sekvence lokusa divljeg tipa pre insercije elitnog događaja, dizajnirani su na takav način da su usmereni jedan ka drugom i da imaju inserciono mesto strane DNK koji između sadrže gene za toleranciju na herbicid. Ova grupa prajmera, zajedno sa trećim prajmerom komplementarnim sa stranim DNK sekvencama i usmerenim ka flankirajućoj DNK, omogućava istovremenu PCR amplifikaciju EEGM3 specifične sekvence kao i sekvence divljeg tipa.
[0140] Nađeno je da sledeći prajmeri imaju naročito jasne i ponovljive rezultate u oceni zigotnosti PCR reakcije na EE-GM3 DNK:
SMP187: 5’-ATA.TCA.ACC.CgT.AgC.TCg.AC-3’ (SEQ ID No.: 6) (cilj: divlji tip biljne DNK ushodno od 3’ flankirajuće sekvence)
SOY029 5’-CAA.ggC.CTC.gAg.ATT.ATC-3’ (SEQ ID No.:5) (cilj: biljka DNK 3’ flankirajuće sekvence)
STV019 5’-ggC.ATT.AAA.TTg.gTg.AAA.ATT.gC-3’ (SEQ ID No.: 7) (cilj: insert DNK)
4.2. Amplifikovani fragmenti
[0141] Očekivani amplifikovani fragmenti u PCR reakciji su:
Za prajmer par SMP187 - SOY029: 319 bp (divlji tip lokusa)
Za prajmer par STV019 - SOY029: 706 bp (EE-GM3 lokus)
4.3. Matrična DNK
[0142] Matrična DNK je pripremljena od materijala od listova prema Edwards et al. (Nucleic Acid Research, 19, p1349, 1991). Kada se koristi DNK pripremljena sa drugim postupcima, trebalo bi izvesti test uz upotrebu različitih količina matrice. Uobičajeno 25 ili 50 ng genomske matrične DNK proizvodi najbolje rezultate.
4.4. Dodeljene pozitivne i negativnekontrole
[0143] Da bi se izbegli lažno pozitivni ili negativni rezultati, preporučljivo je da bi sledeće pozitivne i negativne kontrole trebalo biti uključene u PCR:
- Master Mix kontrola (DNK negativna kontrola). To je PCR u kome se u reakciju ne dodaje DNK. Kada je zabeležen očekivani rezultat, da nema proizvoda PCR-a, to ukazuje da PCR koktel nije kontaminiran sa ciljnom DNK.
- DNA pozitivna kontrola (uzorak genomske DNK za koji je poznato da sadrži transgene sekvence). Uspešna amplifikacija ove pozitivne kontrole pokazuje da je PCR izveden pod uslovima koji omogućavaju amplifikaciju ciljnih sekvenci.
- DNK kontrola divljeg tipa. Ovo je PCR u kome je obezbeđena matrična DNK – genomska DNK pripremljena od netransgene biljke. Kada je zabeležen očekivani rezultat, da nema amplifikacije transgenog PCR proizvoda, već ima amplifikacija endogenog PCR proizvoda, to ukazuje da nema detektabilne amplifikacije osnove transgena u uzorak genomske DNK.
4.5. PCR conditions
[0144] Optimalni rezultati su dobijeni pod sledećim uslovima:
Očigledno, mogu se koristiti druge Taq polimeraze, kao što je GOTaq, i zatim uslovi mogu da se razlikuju tako da se slede preporuke nabavljača.
- PCR mešavina za 25µl reakcije sadrži:
x µl matrične DNK (25 ng)
2.5 µl 10x amplifikacionog pufera (dopremljen od strane proizvođača sa Taq polimerazom) 0.5 µl 10 mM dNTP’s
0.5 µl SMP187(10pmola/µl)
0.5 µl STV019(10pmola/µl)
1 µl SOY029 (10pmola/µl)
0.1 µl Taq DNK polimeraze (5 jedinica/µl)
voda do 25 µl
- profil termociklusa koji se prati za optimalne rezultate je sledeći:
4 min. na 95°C
Praćeno sa: 1 min. na 95°C
1 min. na 57°C
2 min. na 72°C
Tokom 5 ciklusa
Praćeno sa: 30 sek. na 92°C
30 sek. na 57°C
1 min. na 72°C
Tokom 25 ciklusa
Praćeno sa: 10 minuta na 72°C
4.6. Analiza agaroznog gela
[0145] Da bi se optimalno vizuelizovali rezultati PCR-a određeno je da bi između 10 i 20 µl PCR uzoraka trebalo naneti na 1.5% agarozni gel (Tris-boratni pufer) sa odgovarajućim markerom molekulske mase (npr.100bp lestvica Pharmacia).
4.7. Validacija rezultata
[0146] Podaci od uzoraka transgene biljne DNK unutar jednog PCR-a i jedne PCR Master Mix neće biti prihvatljivi osim ukoliko:
- pozitivna kontrola pokazuje očekivane PCR proizvode (transgena ciljna amplifikacija) - divlji tip pozitivna DNK kontrola pokazuje očekivani rezultat (divlji tip ciljna amplifikacija).
- negativna kontrola je negativna za PCR amplifikaciju (bez fragmenata).
[0147] Trake koje pokazuju vidljive količine transgenog PCR proizvoda očekivane veličine i koje ne pokazuju vidljive količine PCR proizvoda divljeg tipa, ukazuju na to da je odgovarajuća biljka iz koje je pripremljena genomska DNK matrica, homozigotna za transgenu gensku kasetu.
[0148] Trake koje pokazuju vidljive količine transgenih PCR proizvoda i PCR proizvoda divljeg tipa očekivanih veličina, ukazuju na to da je odgovarajuća biljka iz koje je genomska matrična DNK pripremljena, hemizigotna za transgenu gensku kasetu. Trake koje ne prikazuju vidljive količine transgenog PCR proizvoda i koje pokazuju vidljive količine PCR proizvoda divljeg tipa, ukazuju na to da odgovarajuća biljka od koje je pripremljena genomska matrična DNK, nije nasledila trasgenu sekvencu analiziranu za i na taj način homozigotnu za lokus divljeg tipa.
[0149] Trake koje ne prikazuju vidljive količine transgenih PCR proizvoda i PCR proizvoda divljeg tipa, ukazuju na to da kvalitet i/ili količina genomske DNK nije omogućio generisanje PCR proizvoda. Ove biljke se ne mogu ocenjivati. Priprema genomske DNK bi trebalo da se ponavlja i mora se izvesti novi PCR, sa odgovarajućim kontrolama.
4.8. Upotreba protokola ocene zigotnosti za identifikaciju statusa zigotnosti u biljkama koje sadrže EE-GM3
[0150] Slika 3 ilustruje rezultat dobijen sa ocenjivanjem zigotnosti PCR-a za EE-GM3 na broju uzoraka biljaka soje. Nađeno je da uzorci u trakama 2 i 5 sadrže samo PCR fragment (706 bp) karakterističan za elitni događaj EE-GM3, dok su uzorci u trakama 4, 6 i 7 sadržali samo fragment karakterističan za prisustvo lokusa divljeg tipa. Trake 3, 8 i 9 sadržale su oba fragmenta. Trake 2 i 5 prema tome sadrže EE-GM3 u homozigotnom obliku, trake 3, 8 i 9 sadrže EE-GM3 u hemizigotnom obliku u trake 4, 6 i 7 sadrže lokus divljeg tipa u homozigotnom obliku (azigotni za EE-GM3). Traka 10 predstavlja negativni kontrolni (vode) uzorak, i trake 1 i 11 predstavljaju marker molekulske mase (100 bp lestvica).
5. Introgresija EE-GM3 u poželjne sorte
[0151] Elitni događaj EE-GM3 je uveden ponavljanim povratnim ukrštanjem u komercijalne sorte soje kao što su, ali bez ograničenja na sorta soje 7631014 (US2009252860); sorta soje 7431014 (US2009252859); sorta soje 7925084 (US2009252858); sorta soje 7311153 (US2009252857); sorta soje S070159 (US2009252856); sorta soje 7535357 (US2009246353); sorta soje S070160 (US2009246352); sorta soje 26074414 (US2009249508); sorta soje 7509171 (US2009249507); sorta soje S070158 (US2009246351); sorta soje 7511119 (US2009249506); sorta soje 7113111 (US2009238945); sorta soje S06-02RM018047 (US7592518); sorta soje 7013345 (US2009232957); sorta soje 7041461 (US2009235376); sorta soje 7549450 (US2009232956); sorta soje 7317090 (US2009232955); sorta soje 2N2V58015 (US2009226597); sorta soje 7243182 (US2009226596); sorta soje 7143182 (US2009226595); sorta soje 7043182 (US2009220673); sorta soje S070157 (US2009222950); sorta soje 306924721 (US2009220672); sorta soje 7614385 (US2009220671); sorta soje 7925118 (US2009214750); sorta soje 7821295 (US2009214749); sorta soje 7811336 (US2009214748); sorta soje S070150 (US2009214747); sorta soje 6214260 (US2009214746); sorta soje S070152 (US2009214745); sorta soje 7429331 (US2009214751); sorta soje 26034631 (US2009208634); sorta soje S07-03JR108674 (US7560621); sorta soje S07-03KL016279 (US7560620); sorta soje S06-CL959411 (US7554017); sorta soje SG3870NRR (US2009158453); sorta soje HFPR-G (CA2645702); sorta soje S06-02JR423016 (US7521606); sorta soje S06-01JR119814 (US7518039); sorta soje S06-01JR119448 (US7518038); sorta soje 6540220 (US2009055960); sorta soje S060292 (US2009055959); sorta soje S050228 (US2009055958); sorta soje S06-02JR423003 (US7491873); sorta soje S06-02JR423005 (US7491872); sorta soje S06-02JR409114 (US7485782); sorta soje S06-SJ144056 (US7473823); sorta soje (US7470835); sorta soje 6910450 (US2008282369); sorta soje 6223012 (US7446246); sorta soje 6549250 (US7446245); sorta soje 17731225 (US2008271204); sorta soje 6928285 (US2008271203); sorta soje 6736054 (US2008271169); sorta soje S060299 (US2008271199); sorta soje S060294 (US2008271202); sorta soje 6943322 (US2008271201); sorta soje 5343260 (US2008263719); sorta soje 6439359 (US2008263704); sorta soje 6238359 (US2008263703); sorta soje 6547272 (US2008263702); sorta soje 6929431 (US2008263701); sorta soje 6703392 (US2008263700); sorta soje 6044483 (US2008263699); sorta soje S050224 (US2008263698); sorta soje 6719022 (US2008263697); sorta soje 5826056 (US2008263696); sorta soje 6265047 (US2008263724); sorta soje 6928331 (US2008263695); sorta soje 6719331 (US2008263694); sorta soje 6636454 (US2008263693); sorta soje 6226454 (US2008263718); sorta soje Q0073801 (US2008256657); sorta soje 6326393 (US2008256652); sorta soje 6408448 (US2008256651); sorta soje 6449315 (US2008250524); sorta soje S060296 (US2008250523); sorta soje 6012078 (US2008250522); sorta soje 6342078 (US2008250521); sorta soje 6419156 (US2008250520); sorta soje 5723264 (US2008250519); sorta soje S050225 (US2008250518); sorta soje S060298 (US2008244783); sorta soje 6935331 (US2008244782); sorta soje 6819456 (US2008244787); sorta soje S060297 (US2008244781); sorta soje 6135319 (US2008244786); sorta soje 6819331 (US2008244780); sorta soje 6137445 (US2008244779); sorta soje 6917445 (US2008244778); sorta soje 6111333 (US2008244777); sorta soje S050229 (US2008244776); sorta soje 6114011 (US2008244775); sorta soje 6900358 (US2008244784); sorta soje 6345184 (US2008244774); sorta soje 6836085 (US2008244773); sorta soje 6635047 (US2008244772); sorta soje 6139105 (US2008244771); sorta soje 6434385 (US2008244770); sorta soje S060295 (US2008244769); sorta soje 6035184 (US2008244768); sorta soje S060293 (US2008209590); sorta soje 6733322 (US2008209594); sorta soje 6421326 (US2008209593); sorta soje S060077 (US2008209589); sorta soje 6600375 (US2008209592); sorta soje S06-CL821457 (US7420104); sorta soje S07-02KG294306 (US7414178); sorta soje S06-BA046119 (US7414175); sorta soje S07-02KG294307 (US7411114); sorta soje SG3865N (US2008189802); sorta soje 6701475 (US7408097); sorta soje 1335025 (US2008178316); sorta soje 1686017 (US2008178315); sorta soje 2388028 (US2008178314); sorta soje 2387029 (US2008178313); sorta soje S06-WW152330 (US7388129); sorta soje 6424090 (US7385118); sorta soje 6723322 (US7385115); sorta soje SG4377NRR (US7385114); sorta soje S06-02JR111334 (US7381864); sorta soje 6141287 (US7378577); sorta soje MT110501 (US7378576); sorta soje (US7378575); sorta soje S06-WW169267 (US7375261); sorta soje 6223392 (US7371939); sorta soje S06-CL968413 (US7371937); sorta soje S06-CL951107 (US7368636); sorta soje S06-MT9152077 (US7361810); sorta soje 4211676 (US2008092253); sorta soje S06-M059029 (US7355101); sorta soje 6548193 (US7345228); sorta soje 6440261 (US7345227); sorta soje S060291 (US7342151); sorta soje S06-MT9206166 (US7339094); sorta soje S06-WW013107 (US7339093); sorta soje S06-M03256 (US7335820); sorta soje 6134466 (US7332656); sorta soje S06-01JR123373 (US7329800); sorta soje S06-MT9211059 (US7326831); sorta soje 26170838 (US2008016590); sorta soje 306612412 (US2008016588); sorta soje 26660135 (US2008016587); sorta soje 306734323 (US2008016586); sorta soje S06-01JR122235 (US7317144); sorta soje 5900450 (US7314986); sorta soje S06-MT116260 (US7314984); sorta soje S06-SJ143606 (US7312381); sorta soje S06-98181-G01-35167 (US7309819); sorta soje 26082635 (US7304219); sorta soje BA922834 (US7304217); sorta soje 01JR123480 (US7304216); sorta soje M061422 (US7304215); sorta soje 17082821 (US2007277262); sorta soje 17621620 (US2007277261); sorta soje 00977706 (US2007277260); sorta soje S060182 (US2007277259); sorta soje 26312034 (US7301078); sorta soje 26143837 (US7301077); sorta soje 435.TCS (US2007271626); sorta soje 495.RC (US2007271625); sorta soje 5306230 (US7297845); sorta soje S06-WW167686 (US7291772); sorta soje 6141145 (US2007245426); sorta soje S050232 (US2007226829); sorta soje 5333301 (US2007226828); sorta soje S050215 (US2007226827); sorta soje 3235020 (US2007226826); sorta soje 5720482 (US2007226825); sorta soje S050216 (US2007226824); sorta soje 5512112 (US2007226823); sorta soje 3233021 (US2007226822); sorta soje 1336024 (US2007226821); sorta soje 5348287 (US2007226820); sorta soje 5204220 (US2007226819); sorta soje 6188027 (US2007226818); sorta soje 4183026 (US2007226817); sorta soje S06-WW157958 (US7271325); sorta soje 5733056 (US2007209091); sorta soje 90501911 (US2007209090); sorta soje S050221 (US2007204361); sorta soje 5802205 (US2007204360); sorta soje 1000642 (US2007204359); sorta soje 5420128 (US2007204358); sorta soje S050222 (US2007199094); sorta soje S050217 (US2007199093); sorta soje S050223 (US2007199092); sorta soje S050218 (US2007199091); sorta soje 5419227 (US2007199089); sorta soje 5319227 (US2007199088); sorta soje 5723045 (US2007199087); sorta soje 5051007 (US2007199086); sorta soje 5826175 (US2007192893); sorta soje S050231 (US2007192892); sorta soje 5826376 (US2007192891); sorta soje 5628386 (US2007192890); sorta soje 5138236 (US2007186307); sorta soje 5608398 (US2007186306); sorta soje S050230 (US2007186305); sorta soje 5624126 (US2007180561); sorta soje 5019225 (US2007180560); sorta soje 5549483 (US2007180559); sorta soje 4189010 (US2007180551); sorta soje 1486018 (US2007180550); sorta soje S050235 (US2007180549); sorta soje 5023230 (US2007180548); sorta soje S050238 (US2007174930); sorta soje 5830261 (US2007174928); sorta soje S050226 (US7247772); sorta soje 5806063 (US7247771); sorta soje S050233 (US7244881); sorta soje 5726085 (US7241939); sorta soje MT000792 (US7238867); sorta soje 5521161 (US7235718); sorta soje WW109447 (US7235717); sorta soje BA947474 (US7220898); sorta soje 5939002 (US7217870); sorta soje 5726175 (US7217869); sorta soje 5432082 (US7217868); sorta soje SG0850RR (US7211715); sorta soje SG1750NRR (US7208658); sorta soje MT017827 (US7208657); sorta soje 4N2V74028 (US7205458); sorta soje CL431203 (US7202400); sorta soje 4N0S63222 (US7199288); sorta soje 5520279 (US7196253); sorta soje 5834401 (US7196252); sorta soje 5621161 (US7196251); sorta soje CL722114 (US7196250); sorta soje 5741081 (US7193140); sorta soje CL727422 (US7186895); sorta soje 4N2V55022 (US7183468); sorta soje 5083011 (US7173169); sorta soje 5626085 (US7169976); sorta soje S050051 (US7169974); sorta soje 4506816 (US2006294626); sorta soje WW152201 (US7132594); sorta soje CL727636 (US7132593); sorta soje M08851 (US7126047); sorta soje 4324401 (US7105728); sorta soje S050164 (US7105727); sorta soje 4136015 (US2006195931); sorta soje 3133014 (US2006195930); sorta soje S040132 (US2006195929); sorta soje 4328386 (US2006195928); sorta soje 1339013 (US2006195927); sorta soje 4423183 (US2006195925); sorta soje S040131 (US2006195924); sorta soje 4929388 (US2006195923); sorta soje 4817034 (US2006195922); sorta soje 4916816 (US7098385); sorta soje 4713487 (US2006191032); sorta soje 4348019 (US2006191031); sorta soje S040122 (US2006191030); sorta soje S040133 (US2006185031); sorta soje CL821418 (US7091404); sorta soje 4441080 (US7091403); sorta soje 4805442 (US2006179509); sorta soje 4921237 (US2006179508); sorta soje 4417380 (US2006174369); sorta soje 4405070 (US2006174368); sorta soje 4417779 (US7084328); sorta soje S040125 (US2006168678); sorta soje 4909380 (US7081572); sorta soje S050162 (US7081571); sorta soje 6084016 (US7081570); sorta soje S050163 (US7078600); sorta soje S040135 (US7078598); sorta soje S040117 (US7078597); sorta soje M03393 (US7071391); sorta soje 4145306 (US7064253); sorta soje 900213 (US2006117405); sorta soje 1000126 (US2006117404); sorta soje 901023 (US2006117403); sorta soje S040130 (US7053280); sorta soje 4706198 (US7053279); sorta soje S040118 (US7053278); sorta soje S040119 (US7053277); sorta soje S040123 (US7053276); sorta soje 4442112 (US7049497); sorta soje 917013 (US7045689); sorta soje S040124 (US7045691); sorta soje 4238491 (US7045690); sorta soje S010136 (US7041882); sorta soje 900613 (US7030297); sorta soje 4337175 (US7030301); sorta soje S040121 (US7030300); sorta soje 4216033 (US7030299); sorta soje S040128 (US7022901); sorta soje S040120 (US7022900); sorta soje S040127 (US7019199); sorta soje S040134 (US7015378); sorta soje S040129 (US7015377); sorta soje 4513420 (US7005564); sorta soje 943013 (US2006031958); sorta soje S030136 (US2006021081); sorta soje 927013 (US2006021080); sorta soje 1000109 (US2006015962); sorta soje 90046112 (US2006010530); sorta soje 90897327 (US2006010529); sorta soje 90362421 (US2006010528); sorta soje 03022253 (US2006010527); sorta soje 02022433 (US2006010526); sorta soje 02022323 (US2006010525); sorta soje 02912951 (US2006010524); sorta soje 0102115 (US2006010523); sorta soje 915034 (US2006010522); sorta soje 0509255 (US2006010521); sorta soje 4803070 (US6982368); sorta soje 4704310 (US6979762); sorta soje SJ919784 (US2005268362); sorta soje CL615261 (US2005268361); nova soja (US2004199964); sorta soje 0509214 (US2005210542); sorta soje 70826751 (US2005193442); sorta soje 0509243 (US2005193441); sorta soje 0509246 (US2005193440); sorta soje 0509253 (US2005193439); sorta soje 0509247 (US2005193438); sorta soje 0509252 (US2005193437); sorta soje 0509241 (US2005193436); sorta soje 0509249 (US6884927); sorta soje 0509244 (US2005183158); sorta soje 0509240 (US2005183157); sorta soje 0509239 (US2005183156); sorta soje 0509254 (US2005183155); sorta soje 0509245 (US2005183154); sorta soje 0509251 (US2005183153); sorta soje 4283008 (US6888050); sorta soje 2386009 (US2005183152); sorta soje 3282002 (US6870080); sorta soje 0509248 (US2005183151); sorta soje 5091007 (US6906249); sorta soje 0509236 (US2005166281); sorta soje 0509235 (US2005166280); sorta soje 0509237 (US2005166279); sorta soje SG5322NRR (US2005164390); sorta soje SG5030NRR (US2005166278); sorta soje SG4911NRR (US2005166277); sorta soje S030153 (US2005160504); sorta soje S030158 (US2005144680); sorta soje S030160 (US2005144679); sorta soje S030161 (US2005144678); sorta soje S030157 (US2005144677); sorta soje S030155 (US2005144676); sorta soje S030156 (US2005144675); sorta soje S030159 (US2005144674); sorta soje S030154 (US6900376); sorta soje S020030 (US2005114929); sorta soje S030010 (US2005114928); sorta soje SG1431RR (US2005097629); sorta soje SG1330NRR (US2005097642); sorta soje S030150 (US2005071900); sorta soje S022209 (US2005050601); sorta soje S022217 (US2005050600); sorta soje S022219 (US2005050599); sorta soje S030151 (US2005050598); sorta soje 0491735 (US2005022272); sorta soje SO22218 (US2005022271); sorta soje 6190006 (US2004268447); sorta soje SG1120RR (US2004250316); sorta soje 0487681 (US2004237153); sorta soje 0491717 (US2004237152); sorta soje SO22220 (US2004237151); sorta soje 0491715 (US2004237150); sorta soje 0491712 (US2004237149); sorta soje 0491718 (US2004237148); sorta soje 99271316 (US2004221344); sorta soje SO22212 (US2004221343); sorta soje 0491737 (US2004221342); sorta soje SO22211 (US2004221341); sorta soje SO22210 (US2004221340); sorta soje SO22213 (US2004221339); sorta soje 0491725 (US2004221346); sorta soje 03129016 (US2004221329); sorta soje SO22208 (US2004221328); sorta soje SO22207 (US2004221345); sorta soje 02932 (US2004210968); sorta soje 94137321 (US2004205862); sorta soje 94106224 (US2004205861); sorta soje 94143901 (US2004205859); sorta soje 0487685 (US2004205858); sorta soje 92440927 (US2004205857); sorta soje 0487686 (US2004205856); sorta soje SO22215 (US2004205855); sorta soje SO22214 (US2004205854); sorta soje 0491726 (US2004205849); sorta soje 92478609 (US2004205853); sorta soje 922013 (US6781040); sorta soje 0491727 (US2004205852); sorta soje 0491728 (US2004205851); sorta soje 1465003 (US2004098766); sorta soje 3186004 (US2004019936); sorta soje 7085005 (US2004205850); sorta soje SO22204 (US2004199958); sorta soje SO22206 (US2004199957); sorta soje 0491731 (US2004199956); sorta soje 0491733 (US2004199955); sorta soje 0491738 (US2004199954); sorta soje 0491732 (US2004199953); sorta soje 0491729 (US2004199952); sorta soje SO20011 (US2004199951); sorta soje 0491739 (US2004199950); sorta soje 0491730 (US2004199949); sorta soje 13873 (US2004199948); sorta soje 954011 (US2004181822); sorta soje 010022 (US2004181831); sorta soje 4181001 (US2003229926); sorta soje 0491721 (US2004168228); sorta soje 0491723 (US6911581); sorta soje 0491716 (US2004168226); sorta soje 0491713 (US2004168225); sorta soje 0491711 (US2004168224); sorta soje 0491722 (US2004168223); sorta soje 0491724 (US2004168222); sorta soje 0491720 (US2004168221); sorta soje 0487682 (US2004168220); sorta soje 0491714 (US2004168219); sorta soje 0491719 (US2004168218); sorta soje DP 5634 RR (US2003177540); sorta soje S56-D7 (US2004098765); sorta soje 926877 (US2004064859); sorta soje SE73753 (US2004055059); sorta soje SN83594 (US2004055058); sorta soje SE71112 (US2004055056); sorta soje SE73090 (US2004055054); sorta soje SN79526 (US2004055053); sorta soje SW90702 (US2004055052); sorta soje SN79525 (US2004055051); sorta soje SE90345 (US2004055050); sorta soje 0149928 (US2004055049); sorta soje SN83780 (US2004055048); sorta soje 0053840 (US2004055047); sorta soje 924001 (US2004055046); sorta soje 0004747 (US2004055057); sorta soje 0037357 (US2004055045); sorta soje SN83366 (US2004055044); sorta soje SN76208 (US2004055043); sorta soje 0037370 (US2004055042); sorta soje SX95512 (US2004049821); sorta soje 0096008 (US2004049820); sorta soje SN83544 (US2004049819); sorta soje 0088401 (US2004049818); sorta soje SN64195 (US2004049817); sorta soje 0034754 (US2004049816); sorta soje SN71173 (US2004049815); sorta soje SN83211 (US2004049814); sorta soje 92422749 (US2004045058); sorta soje 0120311 (US2004045057); sorta soje S010344 (US2004003438); sorta soje 70876922 (US2004003437); sorta soje 924496 (US2004003436); sorta soje 19705120 (US2003237116); sorta soje 19704220 (US2003235914); sorta soje 19704280 (US2003237115); sorta soje 19704210 (US2003237114); sorta soje S37-N4 (US2003237113); sorta soje 19602310 (US2003233685); sorta soje 19704120 (US2003233684); sorta soje 19704230 (US2003233683); sorta soje 1000126 (US2003233682); sorta soje 93831526 (US2003221226); sorta soje 0322581 (US2003221225); sorta soje 0332149 (US2003213028); sorta soje 0332144 (US2003213027); sorta soje 924788 (US2003213026); sorta soje 924861 (US2003213025); sorta soje 928070 (US2003213024); sorta soje S010354 (US2003213023); sorta soje S010360 (US2003213022); sorta soje S010361 (US2003213021); sorta soje S010363 (US2003213020); sorta soje S010364 (US2003213019); sorta soje 0332148 (US2003208805); sorta soje 0332147 (US2003208804); sorta soje 0332146 (US2003208803); sorta soje 0332135 (US2003208802); sorta soje 1000144 (US2003208801); sorta soje 0332143 (US2003208800); sorta soje 0332145 (US2003208799); sorta soje S010345 (US2003204884); sorta soje 0332131 (US2003204883); sorta soje 0332130 (US2003204882); sorta soje 0332129 (US2003204881); sorta soje 0332122 (US2003204880); sorta soje S010350 (US2003204879); sorta soje S010355 (US2003204878); sorta soje 031766 (US2003204877); sorta soje S010353 (US2003204876); sorta soje 0322580 (US2003200579); sorta soje 0322579 (US2003200578); sorta soje S010347 (US2003200577); sorta soje S010349 (US2003200576); sorta soje 0332141 (US2003200575); sorta soje 0332142 (US2003200574); sorta soje 0332133 (US2003200573); sorta soje 0332134 (US2003200572); sorta soje 0332139 (US2003200571); sorta soje 0332137 (US2003200570); sorta soje XB33U08 (US7598435); sorta soje XB27D08 (US7592519); sorta soje XB41M08 (US7589261); sorta soje XB05J08 (US7589260); sorta soje XB33T08 (US7589259); sorta soje XB30Y08 (US7586025); sorta soje XB40U08 (US7582813); sorta soje XB29M08 (US7582811); sorta soje 93Y10 (US2009144843); sorta soje D4325666 (US2009055957); sorta soje D4125897 (US2009055956); sorta soje D4698573 (US2009055955); sorta soje D4356652 (US2009019592); sorta soje D4456885 (US2009019591); sorta soje D4698013 (US2009019590); sorta soje D4637114 (US2009019589); sorta soje D4102367 (US2009019595); sorta soje D4266582 (US2009019594); sorta soje D4422801 (US2009019593); sorta soje D4520980 (US2009019588); sorta soje D4521369 (US2009019587); sorta soje D4223057 (US2009019586); sorta soje D4682156 (US2009019585); sorta soje D4233569 (US2009019584); sorta soje D4925614 (US2009019583); sorta soje D4203144 (US2009019604); sorta soje D4102536 (US2009019582); sorta soje D4865324 (US2009019581); sorta soje D4825495 (US2009019580); sorta soje D4659251 (US2009019579); sorta soje D4258962 (US2009019578); sorta soje D4253969 (US2009019577); sorta soje D4696658 (US2009019603); sorta soje D4256925 (US2009019576); sorta soje D4253681 (US2009019575); sorta soje D4789254 (US2009019574); sorta soje D4713125 (US2009019573); sorta soje D4526223 (US2009019572); sorta soje D4556201 (US2009019571); sorta soje D4012368 (US2009019570); sorta soje D4452019 (US2009019569); sorta soje D4201483 (US2009019568); sorta soje D4463892 (US2009019567); sorta soje D4159630 (US2009019566); sorta soje D4470236 (US2009019565); sorta soje D4063284 (US2009019564); sorta soje D4021792 (US2009013429); sorta soje D4902530 (US2009013428); sorta soje D4367012 (US2009013427); sorta soje D4923560 (US2009013426); sorta soje D4253854 (US2009013425); sorta soje D4210110 (US2009007290); sorta soje D4523081 (US2009007289); sorta soje D4328762 (US2009007288); sorta soje D4483789 (US2009007287); sorta soje D4311702 (US2009007286); sorta soje D4127789 (US2008313765); sorta soje D4361423 (US2008313764); sorta soje D4208814 (US2008313763); sorta soje D4201139 (US2008313762); sorta soje D4120384 (US2008313761); sorta soje D4572906 (US2008313760); sorta soje D4301279 (US2008313759); sorta soje D4422957 (US2008313758); sorta soje D4256958 (US2008313757); sorta soje 4074328 (US2008282366); sorta soje XB47Q06 (US2008244767); sorta soje XB26R06 (US2008244766); sorta soje 4991629 (US2008216190); sorta soje 4158090 (US2008216189); sorta soje XB40K07 (US2008209582); sorta soje D0069201 (US2008178345); sorta soje D0064801 (US2008178320); sorta soje D0063801 (US2008178344); sorta soje D0061501 (US2008178343); sorta soje 4938051 (US2008178319); sorta soje 4880500 (US2008178318); sorta soje 4835953 (US2008178317); sorta soje 4684181 (US2008178342); sorta soje 4427363 (US2008178340); sorta soje 4676311 (US2008178339); sorta soje 4953710 (US2008178337); sorta soje 4857548 (US2008178336); sorta soje 4551757 (US2008178335); sorta soje 4027271 (US2008178334); sorta soje 4274171 (US2008178333); sorta soje 0341931 (US2008178332); sorta soje 4282159 (US2008178331); sorta soje 4852004 (US2008178330); sorta soje 4688589 (US2008178329); sorta soje 4614131 (US2008178327); sorta soje 4201823 (US2008178326); sorta soje 92M22 (US2008178350); sorta soje 4174206 (US2008178322); sorta soje 4305498 (US2008178321); sorta soje 4423586 (US2008172761); sorta soje 4568207 (US2008172756); sorta soje 4840308 (US2008172755); sorta soje 4256323 (US2008172754); sorta soje 4789516 (US7399907); sorta soje 90Y40 (US2008168581); sorta soje 4959932 (US7396983); sorta soje 4062885 (US7394000); sorta soje 4858197 (US7390940); sorta soje 4092390 (US7390939); sorta soje 4735486 (US7390938); sorta soje 4219527 (US7388132); sorta soje 4599695 (US7388131); sorta soje 4554257 (US7388130); sorta soje 4896902 (US7385113); sorta soje 4367308 (US7385112); sorta soje 4589609 (US7385111); sorta soje 4640250 (US7385110); sorta soje 4540394 (US7385109); sorta soje 4297661 (US7385108); sorta soje 4958786 (US7381866); sorta soje 4440685 (US7375262); sorta soje 4008211 (US7371938); sorta soje 4778469 (US7368637); sorta soje 4766295 (US7355103); sorta soje 4436909 (US7355102); sorta soje 4812469 (US7351886); sorta soje 4761767 (US7351885); sorta soje 4142393 (US7329801); sorta soje 4502135 (US7326832); sorta soje 4353363 (US7321082); sorta soje 91B42 (US7317143); sorta soje 0330739 (US2007271622); sorta soje 0384279 (US7294768); sorta soje 4175567 (US2007256187); sorta soje 4336643 (US2007256186); sorta soje 4671685 (US2007256185); sorta soje 4309194 (US2007256190); sorta soje 0330738 (US2007256184); sorta soje 0045477 (US2007256183); sorta soje 0437973 (US2007256182); sorta soje 0457028 (US2007256181); sorta soje 0367478 (US2007256180); sorta soje 0358232 (US2007256179); sorta soje 0417158 (US2007256178); sorta soje 4559809 (US2007256177); sorta soje 0196172 (US2007256176); sorta soje 4785923 (US2007256175); sorta soje 4587513 (US2007256174); sorta soje 0409670 (US2007256173); sorta soje 4010165 (US2007256172); sorta soje 0421133 (US2007256171); sorta soje 0240187 (US2007256170); sorta soje 0387907 (US2007256169); sorta soje 0232405 (US2007256168); sorta soje 0146529 (US2007256167); sorta soje 4788561 (US2007256166); sorta soje 457114 (US2007256165); sorta soje 0149217 (US2007256164); sorta soje 4247825 (US2007254366); sorta soje 0212938 (US2007256163); sorta soje 0146565 (US2007256162); sorta soje 4647672 (US2007256161); sorta soje 0215818 (US2007256160); sorta soje 0384531 (US2007256159); sorta soje 4878185 (US2007254365); sorta soje 4498438 (US2007256158); sorta soje 0436052 (US2007256157); sorta soje 4782157 (US2007256156); sorta soje 0385457 (US2007256155); sorta soje 0385240 (US2007256154); sorta soje 4735316 (US2007256153); sorta soje 0277524 (US2007256152); sorta soje 0276951 (US2007256151); sorta soje XB37L07 (US2007245429); sorta soje XB35X07 (US2007226837); sorta soje XB35S07 (US2007226836); sorta soje XB35F07 (US2007226835); sorta soje XB34R07 (US2007226834); sorta soje XB34L07 (US2007226833); sorta soje XB34D07 (US2007226832); sorta soje XB33G07 (US2007226831); sorta soje 98Y11 (US2007169220); sorta soje 0137335 (US7241941); sorta soje XB15E07 (US2007150980); sorta soje 92M52 (US2007150979); sorta soje XB47R07 (US2007136888); sorta soje XB46V07 (US2007136887); sorta soje XB57E07 (US2007136886); sorta soje XB54X07 (US2007136885); sorta soje XB54V07 (US2007136884); sorta soje XB52Q07 (US2007136883); sorta soje XB37M07 (US2007136882); sorta soje XB37J07 (US2007136881); sorta soje XB34Q07 (US2007136880); sorta soje XB32S07 (US2007136879); sorta soje XB32J07 (US2007136878); sorta soje XB31R07 (US2007136877); sorta soje XB31J07 (US2007136876); sorta soje XB29K07 (US2007136875); sorta soje XB31H07 (US2007136874); sorta soje XB30G07 (US2007136873); sorta soje XB30E07 (US2007136872); sorta soje XB25E07 (US2007136871); sorta soje XB26X07 (US2007136870); sorta soje XB23L07 (US2007136869); sorta soje XB19Z07 (US2007136868); sorta soje XB19E07 (US2007136867); sorta soje XB18M07 (US2007136866); sorta soje XB18K07 (US2007136865); sorta soje XB18J07 (US2007136864); sorta soje XB17W07 (US2007136863); sorta soje XB17U07 (US2007136862); sorta soje XB15B07 (US2007136861); sorta soje XB12R07 (US2007136860); sorta soje XB11J07 (US2007136859); sorta soje XB04E07 (US2007136858); sorta soje XB02K07 (US2007136857); sorta soje XB49V07 (US2007136856); sorta soje XB48X07 (US2007136855); sorta soje 92M75 (US2007136854); sorta soje XB48W07 (US2007136853); sorta soje XB44G07 (US2007136852); sorta soje XB42K07 (US2007136851); sorta soje XB42H07 (US2007136850); sorta soje XB41J07 (US2007136849); sorta soje XB40Y07 (US2007136848); sorta soje XB40X07 (US2007136847); sorta soje XB39E07 (US2007136846); sorta soje XB38W07 (US2007136845); sorta soje XB38S07 (US2007136844); sorta soje XB23V07 (US2007136843); sorta soje XB31M07 (US2007130652); sorta soje XB28E07 (US2007130651); sorta soje XB25S07 (US2007130650); sorta soje XB21N07 (US2007130649); sorta soje XB03Q07 (US2007130648); sorta soje XB49Q07 (US2007130647); sorta soje XB06M07 (US2007130646); sorta soje S04-97130-15-02 (US7196249); sorta soje S04-97026-N99-42648-01 (US7189896); sorta soje S05-97016-G99-21212 (US7186894); sorta soje S05-99048-19 (US7164064); sorta soje 92B14 (US7161065); sorta soje 98R31 (US2007006350); sorta soje S05-97177-N00-22972 (US7132592); sorta soje XB25G06 (US2006225160); sorta soje 91M70 (US2006174381); sorta soje XB24R06 (US2006162029); sorta soje S03-95368-N98-52902 (US7078594); sorta soje S05-97130-51 (US7078599); sorta soje XB11L06 (US2006130187); sorta soje 94B13 (US7064251); sorta soje 94B74 (US7064250); sorta soje XB27J06 (US2006112462); sorta soje XB29N06 (US2006112460); sorta soje XB28T06 (US2006112459); sorta soje XB16W06 (US2006112458); sorta soje XB18C06 (US2006112456); sorta soje XB 10M06 (US2006107391); sorta soje XB06K06 (US2006107390); sorta soje XB28V06 (US2006107389); sorta soje XB004A06 (US2006107388); sorta soje XB12L06 (US2006107387); sorta soje XB005A06 (US2006107386); sorta soje XB25H06 (US2006107385); sorta soje XB39W06 (US2006107384); sorta soje XB27K06 (US2006107383); sorta soje XB29R06 (US2006107382); sorta soje XB16S06 (US2006107381); sorta soje XB36V06 (US2006107380); sorta soje XB07N06 (US2006107379); sorta soje XB23H06 (US2006107378); sorta soje XB35C06 (US2006107377); sorta soje XB32L06 (US2006107376); sorta soje XB58P06 (US2006107375); sorta soje XB36M06 (US2006107374); sorta soje XB22G06 (US2006107373); sorta soje XB36Q06 (US2006107372); sorta soje 91M61 (US2006107371); sorta soje XB32A06 (US2006107370); sorta soje XB19V06 (US2006107369); sorta soje XB43C06 (US2006107368); sorta soje XB22N06 (US2006107367); sorta soje XB38E06 (US2006107366); sorta soje XB37U06 (US2006107365); sorta soje XB37Q06 (US2006107364); sorta soje XB00D06 (US2006107363); sorta soje XB14N06 (US2006107362); sorta soje XB31H06 (US2006107361); sorta soje XB21Z06 (US2006107360); sorta soje XB005B06 (US2006107359); sorta soje XB15W06 (US2006107358); sorta soje XB33N06 (US2006107357); sorta soje XB18W06 (US2006107356); sorta soje XB32M06 (US2006107355); sorta soje XB19F06 (US2006107354); sorta soje S03-95021-55-138-AB (US7026531); sorta soje 94M41 (US7002061); sorta soje 91M50 (US6998518); sorta soje 92B13 (US6989475); sorta soje 93B68 (US6989474); sorta soje 93B09 (US6979759); sorta soje 92M00 (US6972352); sorta soje XB08P05 (US2005120433); sorta soje XB26V05 (US2005150023); sorta soje XB21R05 (US2005108795); sorta soje XB28E05 (US2005114942); sorta soje XB58K05 (US2005114941); sorta soje XB27B05 (US2005114940); sorta soje XB21S05 (US2005150022); sorta soje XB26U05 (US2005138695); sorta soje XB35K05 (US2005150021); sorta soje XB18S05 (US2005120436); sorta soje XB25C05 (US2005120435); sorta soje 90M01 (US2005120434); sorta soje XB22H05 (US2005150020); sorta soje XB22K05 (US2005114939); sorta soje XB58G05 (US2005114938); sorta soje XB57U05 (US2005120432); sorta soje XB49M05 (US2005120431); sorta soje XB20D05 (US2005144683); sorta soje XB41B05 (US2005150019); sorta soje XB38T05 (US2005120430); sorta soje XB13T05 (US2005120429); sorta soje XB19Y05 (US2005120428); sorta soje XB43D05 (US2005120427); sorta soje XB40E05 (US2005120426); sorta soje XB39N05 (US2005120425); sorta soje 93M01 (US2005120424); sorta soje XB31W05 (US2005223439); sorta soje XB32C05 (US2005114937); sorta soje XB40D05 (US2005120423); sorta soje 92M61 (US2005120422); sorta soje 91M91 (US2005114936); sorta soje XB33Y05 (US2005120421); sorta soje XB34A05 (US2005120420); sorta soje XB13U05 (US2005114935); sorta soje XB12K05 (US2005114934); sorta soje XB30P05 (US2005120419); sorta soje XB57T05 (US2005114933); sorta soje XB17S05 (US2005114932); sorta soje XB25Y05 (US2005114930); sorta soje XB25S05 (US2005150017); sorta soje XB43W04 (US2004177420); sorta soje XB44W04 (US2004177419); sorta soje XB53J04 (US2004199960); sorta soje XB43V04 (US2004216192); sorta soje XB49K04 (US2004172668); sorta soje XB27P04 (US2004205864); sorta soje XB29L04 (US2004177418); sorta soje XB29K04 (US2004177417); sorta soje XB41U04 (US2004231017); sorta soje XB34D04 (US2004177416); sorta soje XB09J04 (US2004172711); sorta soje XB32Y04 (US2004194169); sorta soje XB44D04 (US2004172710); sorta soje XB44C04 (US2004172709); sorta soje XB10L04 (US2004172708); sorta soje XB19U04 (US2004172707); sorta soje XB02F04 (US2004172706); sorta soje XB25X04 (US2004172705); sorta soje XB26L04 (US2004172704); sorta soje XB11F04 (US2004172703); sorta soje XB40Z04 (US2004177415); sorta soje XB40Y04 (US2004181833); sorta soje XB007C04 (US2004181832); sorta soje 96M20 (US2004172702); sorta soje XB39J04 (US2004172701); sorta soje XB29A04 (US2004172700); sorta soje XB35P04 (US2004172699); sorta soje XB58Z04 (US2004177414); sorta soje XB43R04 (US2004172698); sorta soje XB35L04 (US2004172697); sorta soje XB06H04 (US2004172696); sorta soje XB59U04 (US2004172695); sorta soje XB64C04 (US2004172694); sorta soje 95M80 (US2004172693); sorta soje XB35Q04 (US2004177413); sorta soje XB04D04 (US2004177412); sorta soje XB08L04 (US2004177411); sorta soje XB18Q04 (US2004177410); sorta soje XB16Q04 (US2004177409); sorta soje XB55K04 (US2004172692); sorta soje XB57M04 (US2004172691); sorta soje XB25L04 (US2004205863); sorta soje XB48T04 (US2004194168); sorta soje XB42X04 (US2004199959); sorta soje XB31T04 (US2004177408); sorta soje XB31U04 (US2004194167); sorta soje XB30E04 (US2004177407); sorta soje XB31R04 (US2004177406); sorta soje S03-95341-A98-60618 (US6909033); sorta soje SN97-6946 (US2004168227); sorta soje 94M70 (US6864408); sorta soje 92M70 (US6797866); sorta soje 92M71 (US6858782); sorta soje 91M40 (US6828490); sorta soje 93M80 (US6849789); sorta soje XB39N03 (US6864407); sorta soje 93M90 (US6846975); sorta soje 90M90 (US6852913); sorta soje 92M72 (US6960708); sorta soje 91M90 (US6849788); sorta soje 92M50 (US6855876); sorta soje 92M30 (US6951974); sorta soje 93M60 (US6797865); sorta soje 93M40 (US6791016); sorta soje 93M41 (US6835875); sorta soje XB15P03 (US6797864); sorta soje XB24H03 (US6936752); sorta soje XB05A03 (US6815585); sorta soje 92M80 (US6849787); sorta soje XB33S03 (US6855875); sorta soje XB48P03 (US6797863); sorta soje XB29X03 (US6806406); sorta soje XB02C03 (US6800795); sorta soje XB29W03 (US6858781); sorta soje 91M10 (US6958437); sorta soje 92M10 (US6916975); sorta soje XB10G03 (US6806405); sorta soje 92M31 (US6846974); sorta soje XB38D03 (US6806404); sorta soje XB34N03 (US6803508); sorta soje XB30W03 (US6809236); sorta soje XB37J03 (US6844488); sorta soje SE72581 (US2004148665); sorta soje SE90076 (US2004148664); sorta soje SD82997 (US2004148663); sorta soje 0037393 (US2004148662); sorta soje 0088414 (US2004148661); sorta soje 0149926 (US2004148660); sorta soje 0037209 (US2004148659); sorta soje 93B36 (US6833498); sorta soje 90B74 (US6812384); sorta soje 90B51 (US6818809); sorta soje 91B03 (US6815584); sorta soje 95B43 (US6818808); sorta soje 95B42 (US6815583); sorta soje 92B47 (US6812383); sorta soje SE90346 (US2004055055); sorta soje 0007583 (US2004010824); sorta soje 0008079 (US2004010823); sorta soje S02-AP98041-2-333-01 (US2003121076); sorta soje S02-98041-2-251-01 (US2003182694); sorta soje S02-AP98041-2-262-02 (US2003196220); sorta soje S02-95021-55-240-BA (US2003188348); sorta soje APA94-31572 (US2003061641); sorta soje AP98041-1-203 (US2003056251); sorta soje APA95-15294 (US2003061640); sorta soje AP98041-4-117 (US2003056250); sorta soje 91B33 (US6580018); sorta soje 93B85 (US6605762); sorta soje 92B76 (US6610911); sorta soje 92B38 (US6605761); sorta soje 94B24 (US6613967); sorta soje 94B73 (US6605760); sorta soje 93B86 (US6610910); sorta soje 91B12 (US6583343); sorta soje 95B34 (US6605759); sorta soje 94B23 (US6605758); sorta soje 90B11 (US6583342); sorta soje 91B92 (US6586659); sorta soje 95B96 (US6605757); sorta soje 93B72 (US6566589); sorta soje 95B97 (US6613966); sorta soje 92B95 (US6608243); sorta soje 93B47 (US6583341); sorta soje 97B52 (US6605756); sorta soje 93B15 (US6617499); sorta soje 94B54 (US6613965); sorta soje 93B67 (US6573433); sorta soje 93B87 (US6727410); sorta soje 96B51 (US6613964); sorta soje 92B84 (US6730829); sorta soje 92B12 (US6605755); sorta soje 90A07 (US6320105); sorta soje 93B26 (US6342659); sorta soje 96B21 (US6369301); sorta soje 92B63 (US6326529); sorta soje 93B46 (US6323402); sorta soje 92B75 (US6362400); sorta soje 93B08 (US6323401); sorta soje 97B62 (US6323400); sorta soje 92B37 (US6323399); sorta soje 92B56 (US6339186); sorta soje 93B66 (US6307131); sorta soje 92B62 (US6346657); sorta soje 92B36 (US6369300); sorta soje 90B73 (US6316700); sorta soje 95B95 (US6323398); sorta soje 93B65 (US6229074); sorta soje 92B24 (US6284950); sorta soje 94B53 (US6235976); sorta soje 94B22 (US6140557); sorta soje 93B84 (US6143956); sorta soje 95B32 (US6229073); sorta soje 95B53 (US6147283); sorta soje 93B35 (US6153816); sorta soje 93B07 (US6143955); sorta soje 92B74 (US6124526); sorta soje 92B35 (US6166296); sorta soje 94B45 (US6162968); sorta soje 96B01 (US6143954); sorta soje 93B53 (US6335197).
[0152] Zabeleženo je da introgresija elitnog događaja u ove sorte ne utiče značajno na bilo koju od željenih fenotipskih ili agronomskih karateristika ovih sorti (nema negativnog uticaja na prinos), dok ekspresija transgena, kao što je određena pomoću tolerancije glufosata i/ili izoksaflutola, ispunjava komercijalno prihvatljive nivoe. Ovo potvrđuje status događaja EE-GM3 kao elitnog događaja.
[0153] Elitni događaj EE-GM3 može biti povoljno kombinovan sa jednim ili više drugih događaja soje dostupnim na tržištu, uključujući, ali bez ograničenja na druge događaje tolerancije na herbicid, kao što su događaji opisani u USDA-APHIS peticijama: 09-349-01p, 09-201-01p, 09-183-01p, 09-082-01p, 09-015-01p, 06-354-01p, 06-271-01p, 06-178-01p, 98-238-01p, 98-014-01p, 97-008-01p, 96-068-01p, 95-335-01p, 93-258-01p (videti, npr., www.aphis.usda.gov/brs/not_reg.html), ili događaj MON89788 (tolerancija glifosata) opisan u US 2006-282915, događaj DP-305423-1 (visoka tolerancija oleinske kiseline / inhibitora ALS) opisan u WO 2008/054747, događaji A2704-12 i A5547-127 (tolerancija glufosinata) opisani respektivno u WO 2006/108674 ili WO 2006/108675, MON87701 opisan u US2009130071, događaj 3560.4.3.5 opisan u US2009036308, događaj DP-305423-1 opisan u US2008312082, ili događaj BPS-CV127-9 (događaj 127) iz WO 2010/080829.
[0154] Kao što je korišćeno u patentnim zahtevima u daljem tekstu, osim ukoliko je drugačije jasno naznačeno, termin "biljka" je određen tako da obuhvata biljna tkiva, na bilo kom stadijumu zrelosti, kao i bilo koje ćelije, tkiva ili organe uzete iz ili poreklom od bilo koje takve biljke, uključujući bez ograničenja na, bilo koja semena, listove, stabljike, cvetove, korenove, pojedinačne ćelije, gamete, ćelijske kulture, kulture tkiva ili protoplaste.
[0155] Referentno seme koje sadrži elitni događaj EE-GM3 je deponovan kao 32-RRMM-0531 u NCIMB (Ferguson Building, Craibstone Estate, Bucksburn, Aberdeen AB9YA, Scotland) 12.10.2009., pod NCIMB pristupnim brojem NCIMB 41659, i njegova vijabilnost je potvrđena. Alternativni nazivi za EE-GM3 su događaj FG-072, ili događaj MST-FGØ72-3.
[0156] Različite promene ili modifikacije u opisanim primerima izvođenja mogu da se jave stručnjacima iz date oblasti tehnike. One se mogu napraviti bez udaljavanja od duha i obima pronalaska.

Claims (27)

Patentni zahtevi
1. Biljka soje ili njene ćelije, delovi, seme ili potpostvo, od kojijh svaki sadrži u svom genomu elitni događaj, naznačen time što navedeni elitni događaj, kao što je nađen u referentnom semenu deponovanom u NCIMB pod deponovanim brojem NCIMB 41659, je genetički lokus koji sadrži stranu DNK koja sadrži gen koji kodira himerni HPPD Pf W336i gen koji kodira himerni 2mEPSPS.
2. Molekul nukleinske kiseline koji se može dobiti od biljke soje prema patentnom zahtevu 1, naznačen time što navedeni molekul nukleinske kiseline sadrži stranu DNK elitnog događaja prema patentnom zahtevu 1, i 5’ i 3’ flankirajuće sekvence navedenog elitnog događaja, pri čemu navedeni molekul nukleinske kiseline sadrži nukleotidnu sekvencu SEQ ID No. 2 od nukleotida 1441 do nukleotida 1462 koja sadrži deo 5’ flankirajuće sekvence i stranu DNK koja je sa njom kontinuirana, i nukleotidnu sekvencu SEQ ID No.3 od nukleotida 230 do 251 koja sadrži deo 3’ flankirajuće sekvence i stranu DNK koja je sa njom kontinuirana.
3. Molekul nukleinske kiseline koji sadrži nuleotidnu sekvencu prema SEQ ID No. 2 od nukleotida 1431 do nukleotida 1462, ili njen komplement.
4. Molekul nukleinske kiseline prema patentnom zahtevu 3, koji sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.2 ili njen komplement.
5. Molekul nukleinske kiseline koji sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No. 3 od nukleotida 220 do 261, ili njen komplement.
6. Molekul nukleinske kiseline prema patentnom zahtevu 5, koji sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.3 ili njen komplement.
7. DNK molekul, koji sadrži po redosledu sledeće nukleotidne sekvence:
a) nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.2 od nukleotida 1 do 1451;
b) nukleotidnu sekvencu komplementa nukelotidne sekvence prema SEQ ID No. 1 od nukleotida 6760 do nukleotida 6958;
c) nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.1 od nukleotida 6874 do nukleotida 7298; d) nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.1 od nukleotida 7 do nukleotida 7291;
e) nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.1 od nukleotida 12 do nukleotida 7265;
f) nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.3 od nukleotida 217 do nukleotida 240; i
g) nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.3 od nukleotida 241 do nukleotida 1408.
8. DNK molekul koji sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.11.
9. Biljka soje koja sadrži DNK molekul prema patentnom zahtevu 7.
10. Biljka, ćelija, tkivo ili seme soje, od kojih svaki sadrži molekul DNK prema patentnom zahtevu 8.
11. Postupak za proizvodnju sojinog proizvoda, naznačen time što navedeni sojin proizvod je ili sadrži sojino brašno, mleveno semenje, vrašno ili pahuljice, koji sadrži dobijanje sojinog semena koje sadrži elitni događaj prema patentnom zahtevu 1, i proizvodnju takvog sojinog proizvoda od njega.
12. Postupak za uzgajanje biljaka soje koje sadrže elitni događaj prema patentnom zahtevu 1, koji sadrži zasejavanje polja semenima koja sadrže elitni događaj prema patentnom zahtevu 1, tretman navedenog polja herbicidom inhibitorom HPPD, kao što je izoksaflutol, pre nicanja biljaka soje, ali posle setve semena, izborno praćeno primenom glifosata ili smeše inhibitora HPPD i glifosata kao herbicida posle nicanja na vrh biljaka.
13. Postupak za uzgajanje biljaka soje koje sadrže elitni događaj prema patentnom zahtevu 1, koji sadrži tretman polja koje se zasađuje biljkama soje koje sadrže elitni događaj prema patentnom zahtevu 1 ili koje se zasejava semenjem soje koje sadrži elitni događaj prema patentnom zahtevu 1, sa herbicidom inhibitorom HPPD, pre sađenja biljaka soje ili pre zasejavanja semena, praćeno sađenjem ili zasejavanjem navedenih biljaka ili semena soje u navedenom prethodno tretiranom polju, izborno pri čemu se glifosat ili smeša inhibitora HPPD i glifosata primenjuje kao herbicid posle nicanja preko vrha biljaka.
14. Postupak za uzgajanje biljaka soje koje sadrže elitni događaj prema patentnom zahtevu 1, koji sadrži zasejavanje semena koja sadrže elitni događaj prema patentnom zahtevu 1 i tretman biljaka soje koje su nikle iz semena koja su zasejana sa herbicidom inhibitorom HPPD, kao što je izoksaflutol, peko vrha biljaka soje.
15. Postupak prema patentnom zahtevu 14, naznačen time što tretman sa herbicidom inhibitorom HPPD može biti primenjen zajedno sa, posle ili pre tretmana glifosatom kao herbicidom posle nicanja preko vrha biljaka.
16. Biljka soje tolerantna na herbicide glifosat i/ili izoksaflutol, koja se može dobiti uvođenjem u genom elitnog događaja prema patentnom zahtevu 1.
17. Postupak za identifikaciju elitnog događaja prema patentnom zahtevu 1 u biološkim uzorcima, naznačen time što taj postupak sadrži detekciju specifičnog regiona navedenog elitnog događaja sa dva specifična prajmera, od kojih jedan specifično prepoznaje sekvencu unutar 5’ ili 3’ flankirajućeg regiona strane DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid u navedenom elitnom događaju, navedeni 5’ flankirajući region sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No. 2 od nukleotida 1 do nukleotida 1451, i navedeni 3’ flankirajući region sadrži nukleotidnu sekvencu komplementa prema SEQ ID No. 3 od nukleotida 241 do nukleotida 1408, i drugi prajmer koji specifično prepoznaje sekvencu unutar strane DNK kontinuiranu sa navedenim 5’ ili 3’ flankirajućim regionom, pri čemu navedena strana DNK sadrži nukleotidnu sekvencu komplementa prema SEQ ID No. 2 od nukleotida 1452 do nukleotida 1843 ili nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.3 od nukleotida 1 do nukleotida 240, ili sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.11 od nukleotidnog položaja 1452 do nukleotidnog položaja 16638 ili njen komplement, ili sa specifičnom probom koja specifično prepoznaje 5’ ili 3’ flankirajući region navedenog elitnog događaja, i deo strane DNK koji je sa njim kontinuiran.
18. Postupak prema patentnom zahtevu 17, naznačen time što navedeni postupak sadrži amplifikaciju DNK fragmenta od između 50 i 1000 bp iz nukleinske kiseline prisutne u navedenim biološkim uzorcima upotrebom lančane reakcije polimeraze sa najmanje navedena dva specifična prajmera.
19. Postupak prema patentnom zahtevu 18, naznačen time što navedeni prajmer koji prepoznaje 5’ flankirajući region sadrži na njegovom ekstremnom 3’ kraju nukleotidnu sekvencu od najmanje 17 uzastopnih nukleotida izabranih iz nukleotidne sekvence prema SEQ ID No. 2 od nukleotida 1 do nukleotida 1451 ili navedeni prajmer koji prepoznaje 3’ flankirajući region navedenog elitnog događaja sadrži na svom ekstremnom 3’ kraju nukleotidnu sekvencu od najmanje 17 uzastopnih nukleotida izabranu od nukleotidne sekvence komplementa prema SEQ ID No. 3 od nukleotida 241 do nukleotida 1408, i navedeni prajmer koji prepoznaje sekvencu unutar strane DNA sadrži na svom 3’ kraju najmanje 17 uzastopnih nukleotida izabranih iz nukleotidne sekvence komplementa prema SEQ ID No. 2 od nukleotida 1452 do nukleotida 1843 ili nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.3 od nukleotida 1 do nukleotida 240 ili nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.1 od nukleotida 188 do nukleotida 7252 ili njegov komplement, ili nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No. 11 od nukleotidnog položaja 1452 do nukleotidnog položaja 16638 ili njegovog komplementa, ili pri čemu navedeni prajmeri sadrže sekvencu prema SEQ ID No.5 i SEQ ID No. 4, respektivno, ili sekvencu prema SEQ ID No.7 i SEQ ID No.5 respektivno.
20. Prajmer par pogodan za upotrebu u detekciji specifičan za elitni događaj prema patentnom zahtevu 1, koji sadrži prvi prajmer koji prepoznaje sekvencu unutar 5’ flankirajućeg regiona strane DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid u navedenom elitnom događaju, navedeni 5’ flankirajući region koji sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No. 2 od nukleotida 1 do nukleotida 1451 i drugi prajmer koji prepoznaje sekvencu unutar inserirane strane DNK kontinuirane sa navedenim 5’ flankirajućim regionom, pri čemu navedena inserirana strana DNK kontinuirana sa navedenim 5’ flankirajućim regionom koji sadrži nukleotidnu sekvencu komplementa prema SEQ ID No. 2 od nukleotida 1452 do nukleotida 1843; ili koji sadrži prvi prajmer koji prepoznaje sekvencu unutar 3’ flankirajućeg regiona strane DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid navedenog elitnog događaja, i drugi prajmer koji prepoznaje sekvencu unutar inserirane strane DNK kontinuirane sa navedenim 3’ flankirajućim regionom, pri čemu navedeni 3’ flankirajući region sadrži nukleotidnu sekvencu komplementa prema SEQ ID No. 3 od nukleotida 241 do nukleotida 1408, i navedenu inseriranu stranu DNK kontinuiranu sa navedenim 3’ flankirajućim regionom koja sadrži sekvencu prema SEQ ID No.3 od nukleotida 1 do nukleotida 240.
21. Prajmer par prema patentnom zahtevu 20, naznačen time što jedan od navedenih prajmera sadrži, poželjno na svom 3’ kraju, nukleotidnu sekvencu od 17 do 200 uzastopnih nukleotida izabranih od nukleotidne sekvence prema SEQ ID No. 2 od nukleotida 1 do nukleotida 1451 ili nukleotidne sekvence od 17 do 200 uzastopnih nukleotida izabranih od nukleotidne sekvence komplementa prema SEQ ID No.3 od nukleotida 241 do nukleotida 1408.
22. Prajmer par prema patentnom zahtevu 21, koji sadrži prvi prajmer koji sadrži na svom ekstremnom 3’ kraju sekvencu prema SEQ ID No. 5 i drugi prajmer koji sadrži na svom ekstremnom 3’ kraju sekvencu prema SEQ ID No.4.
23. Postupak prema patentnom zahtevu 17, naznačen time što taj postupak sadrži hibridizaciju nukleinske kiseline bioloških uzoraka sa specifičnom probom za navedeni elitni događaj, pri čemu sekvenca navedene specifične probe ima najmanje 80% identičnosti sekvence sa sekvencom koja sadrži deo 5’ flankirajuće sekvence ili 3’ flankirajuće sekvence u navedenom elitnom događaju i sekvencom starne DNK koja je sa njom kontinuirana, ili njen komplement, pri čemu navedena 5’ flankirajuća sekvenca sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.
2 od nukleotida 1 do nukleotida 1451, i stranu DNK koja je sa njom kontinuirana sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No. 2 od nukleotida 1452 do nukleotida 1843, i pri čemu navedena 3’ flankirajuća sekvenca koja sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.
3 od nukleotida 241 do nukleotida 1408, i stranu DNK koja je sa njom kontinuirana sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No. 3 od nukleotida 1 do nukleotida 240, kao što je tamo gde sekvenca navedene specifične probe ima najmanje 80% identičnosti sekvence sa SEQ ID No. 2 od nukleotida 1431 do 1472 ili SEQ ID No. 3 od nukleotida 220 do 261, ili komplement navedenih sekvenci.
24. Specifična proba za identifikaciju elitnog događaja prema patentnom zahtevu 1 u biološkim uzorcima, koja sadrži nukleotidnu sekvencu koja ima najmanje 80% identičnosti sekvence sa sekvencom koja sadrži deo 5’ flankirajuće sekvence ili 3’ flankirajuće sekvence strane DNK koja sadrži gene za toleranciju na herbicid u navedenom elitnom događaju i sekvencu strane DNK koja je sa njom kontinuirana, ili njen komplement, pri čemu navedena 5’ flankirajuća sekvenca sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.2 od nukleotida 1 do nukleotida 1451, i strana DNK koja je sa njom kontinuirana sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No. 2 od nukleotida 1452 do nukleotida 1843, i pri čemu navedena 3’ flankirajuća sekvenca sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.3 od nukleotida 241 do nukleotida 1408, i strana DNK koja je sa njom kontinuirana sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No. 3 od nukleotida 1 do nukleotida 240, kao što je proba koja ima najmanje 80% identičnosti sekvence sa SEQ ID No.2 od nukleotida 1441 do 1462 ili SEQ ID No.3 od nukleotida 230 do 251, ili komplement navedenih sekvenci.
25. Komplet koji sadrži prajmer par ili probu koji specifično prepoznaje elitni događaj prema patentnom zahtevu 1, naznačen time što navedeni prajmer par je par prema bilo kom od patentnih zahteva 20 do 22, i pri čemu navedena proba je proba prema patentnom zahtevu 24.
26. Postupak prema patentnom zahtevu 17 za potvrđivanje čistoće semena, ili za skrining semena za prisustvo elitnog događaja prema patentnom zahtevu 1, pri čemu taj postupak sadrži detekciju, u uzorcima semena, regiona specifičnog za nevedeni elitni događaj sa dva specifična prajmera, od kojih jedan specifično prepoznaje 5’ ili 3’ flankirajući region strane DNK koji sadrži gene za toleranciju na herbicid u navedenom elitnom događaju, i drugi specifično prepoznaje sekvencu unutar navedene strane DNK, ili sa specifičnom probom koja specifično prepoznaje 5’ ili 3’ flankirajući region navedenog elitnog događaja, i deo strane DNK kontinuirane sa njom, pri čemu navedeni 5’ flankirajući region sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No. 2 od nukleotida 1 do 1451, i strane DNK kontinuirane sa njom sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No. 2 od nukleotida 1452 do nukleotida 1843, i pri čemu navedeni 3’ flankirajući region sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.3 od nukleotida 241 do nukleotida 1408, i strana DNK koja je sa njom kontinuirana sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.3 od nukleotida 1 do nukleotida 240.
27. Postupak za detekciju prisustva elitnog događaja prema patentnom zahtevu 1 u biološkim uzorcima kroz hibridizaciju sa značajno komplementarno obeleženom nukleinsko kiselinskom probom u kojoj je odnos probe:ciljne nukleinske kiseline amplifikovan kro recikliranje ciljne sekvence nukleinske kiseline, pri čemu navedeni postupak sadrži:
a) hibridizaciju navedene ciljne sekvence nukleinske kiseline za prvi oligonukleotid nukleinske kiseline koji sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.2 od nukleotida 1452 do nukleotida 1469 ili njegov komplement ili navedeni prvi oligonukleotid nukleinske kiseline koji sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No. 3 od nukleotida 223 do nukleotida 240 ili njegov komplement;
b) hibridizaciju navedene ciljne sekvence nukleinske kiseline za drugi oligonukleotid nukleinske kiseline koji sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No.2 od nukleotida 1434 do nukleotida 1451 ili njegov komplement ili navedeni drugi oligonukleotid nukleinske kiseline koji sadrži nukleotidnu sekvencu prema SEQ ID No. 3 od nukleotida 241 do nukleotida 258 ili njegov komplement, pri čemu se navedeni prvi i drugi oligonukleotid preklapaju sa najmanje jednim nukleotidom i pri čemu je navedeni prvi ili navedeni drugi oligonukleotid obeležen tako da je navedena obeležena nukleinsko kiselinska proba;
c) cepanje samo obeležene probe unutar dupleksa probe:ciljne nukleinsko kiselinske sekvence sa enzimom koji izaziva selektivno cepanje probe rezultujući u odvajanju dupleksa, ostavljajući ciljnu sekvencu intaktnom;
d) recikliranje ciljne nukleinsko kiselinske sekvence ponavljanjem koraka (a) do (c); i e) detekciju odcepljene obeležene probe, na taj način određujući prisustvo navedene ciljne nukleinsko kiselinske sekvence.
RS20190242A 2009-11-23 2010-11-23 Elitni događaj ee-gm3 i postupci i kompleti za identifikaciju takvog događaja u biološkim uzorcima RS58739B1 (sr)

Applications Claiming Priority (5)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US26369009P 2009-11-23 2009-11-23
EP09014564 2009-11-23
US36722710P 2010-07-23 2010-07-23
EP10832373.4A EP2504454B1 (en) 2009-11-23 2010-11-23 Elite event ee-gm3 and methods and kits for identifying such event in biological samples
PCT/US2010/057869 WO2011063411A1 (en) 2009-11-23 2010-11-23 Elite event ee-gm3 and methods and kits for identifying such event in biological samples

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS58739B1 true RS58739B1 (sr) 2019-06-28

Family

ID=44060085

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20190242A RS58739B1 (sr) 2009-11-23 2010-11-23 Elitni događaj ee-gm3 i postupci i kompleti za identifikaciju takvog događaja u biološkim uzorcima

Country Status (18)

Country Link
US (4) US9631202B2 (sr)
EP (1) EP2504454B1 (sr)
JP (2) JP2013511293A (sr)
KR (1) KR101951958B1 (sr)
CN (1) CN102858996B (sr)
AR (2) AR080946A1 (sr)
AU (1) AU2010321584C1 (sr)
BR (1) BR112012012385A2 (sr)
CA (1) CA2781557C (sr)
MX (1) MX2012005937A (sr)
NZ (1) NZ600376A (sr)
PH (1) PH12012501096A1 (sr)
PL (1) PL2504454T3 (sr)
RS (1) RS58739B1 (sr)
RU (1) RU2639530C2 (sr)
SI (1) SI2504454T1 (sr)
UY (1) UY33050A (sr)
WO (1) WO2011063411A1 (sr)

Families Citing this family (271)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
NZ600375A (en) 2009-11-23 2014-10-31 Bayer Cropscience Nv Herbicide tolerant soybean plants and methods for identifying same
PH12012501096A1 (en) * 2009-11-23 2012-10-29 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Elite event ee-gm3 and methods and kits for identifying such event in biological samples
US9605273B2 (en) * 2012-01-23 2017-03-28 Dow Agrosciences Llc Herbicide tolerant cotton event pDAB4468.19.10.3
US9797004B2 (en) 2012-06-12 2017-10-24 Syngenta Participations Ag Methods and compositions for determination of vector backbone in a nucleic acid sample
UA117816C2 (uk) 2012-11-06 2018-10-10 Байєр Кропсайєнс Акцієнгезелльшафт Гербіцидна комбінація для толерантних соєвих культур
KR20150119031A (ko) 2013-02-11 2015-10-23 바이엘 크롭사이언스 엘피 스트렙토미세스-기반 생물학적 방제제 및 살곤충제를 포함하는 조성물
MX2015010259A (es) 2013-02-11 2015-10-29 Bayer Cropscience Lp Composiciones que comprenden un agente de control biologico basado en la cepa nrrl b-50550 de streptomyces microflavus y otro agente de control biologico.
MX2015010260A (es) 2013-02-11 2016-04-04 Bayer Cropscience Lp Composicion que comprenden un agente de control biologico y un fungicida.
AU2014278519B2 (en) 2013-06-11 2020-09-10 Syngenta Crop Protection Ag Methods for generating transgenic plants
WO2015160618A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising ningnanmycin and a biological control agent
WO2015160620A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising ningnanmycin and an insecticide
WO2015160619A1 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Bayer Cropscience Lp Compositions comprising ningnanmycin and a fungicide
CA2999524A1 (en) 2015-10-02 2017-04-06 Wideorbit Inc. Systems, methods and articles to facilitate selling of advertising inventory
EP3445859B1 (en) 2016-04-20 2026-01-21 BASF Agricultural Solutions US LLC Elite event ee-gh7 and methods and kits for identifying such event in biological samples
KR20190095409A (ko) 2016-12-22 2019-08-14 바스프 아그리컬쳐럴 솔루션즈 시드 유에스 엘엘씨 엘리트 이벤트 ee-gm4, 및 생물학적 시료에서 이러한 이벤트를 동정하기 위한 방법 및 키트
US11555202B2 (en) 2016-12-22 2023-01-17 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Elite event EE-GM5 and methods and kits for identifying such event in biological samples
US10111398B1 (en) 2017-08-25 2018-10-30 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170015
US10244710B2 (en) 2017-08-25 2019-04-02 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170003
US10292349B2 (en) 2017-08-25 2019-05-21 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170011
US10244712B2 (en) 2017-08-25 2019-04-02 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170022
US10285350B2 (en) 2017-08-25 2019-05-14 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170020
US10111399B1 (en) 2017-08-25 2018-10-30 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170021
US10244713B2 (en) 2017-08-25 2019-04-02 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170017
US10178839B1 (en) 2017-08-25 2019-01-15 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170010
US10285349B2 (en) 2017-08-25 2019-05-14 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170019
US10244711B2 (en) 2017-08-25 2019-04-02 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170024
US10244709B2 (en) 2017-08-25 2019-04-02 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170008
US10201141B1 (en) 2017-08-25 2019-02-12 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170014
US10178840B1 (en) 2017-08-25 2019-01-15 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170018
US10188060B1 (en) 2017-08-25 2019-01-29 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170005
US10182541B1 (en) 2017-08-25 2019-01-22 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170000
US10182540B1 (en) 2017-08-25 2019-01-22 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170012
US10212897B1 (en) 2017-08-25 2019-02-26 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170001
US10238060B2 (en) 2017-08-25 2019-03-26 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170002
US10201135B1 (en) 2017-08-25 2019-02-12 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170013
US10201140B1 (en) 2017-08-25 2019-02-12 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170006
US10231427B1 (en) 2017-09-21 2019-03-19 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170030
US10194619B1 (en) 2017-09-21 2019-02-05 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170025
US10231411B1 (en) 2017-09-21 2019-03-19 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170027
US10285351B2 (en) 2017-09-21 2019-05-14 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170023
US10292350B2 (en) 2017-09-21 2019-05-21 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170026
US10182542B1 (en) 2017-09-21 2019-01-22 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170031
US10258008B2 (en) 2017-09-21 2019-04-16 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170029
US10258009B2 (en) 2017-09-21 2019-04-16 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170034
US10231410B1 (en) 2017-09-21 2019-03-19 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170028
US10165746B1 (en) 2017-09-22 2019-01-01 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170033
US10188062B1 (en) 2017-09-22 2019-01-29 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170037
US10165745B1 (en) 2017-09-22 2019-01-01 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170032
US10194620B1 (en) 2017-09-22 2019-02-05 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170035
US10182543B1 (en) 2017-09-22 2019-01-22 M.S. Technologies, Llc Soybean cultivar S170036
US10448606B1 (en) 2018-08-03 2019-10-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170158
US10470423B1 (en) 2018-08-03 2019-11-12 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170170
US10470424B1 (en) 2018-08-03 2019-11-12 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170169
US10440927B1 (en) 2018-08-03 2019-10-15 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170162
US10548272B1 (en) 2018-08-06 2020-02-04 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170070
US10499599B1 (en) 2018-08-06 2019-12-10 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 78020134
US10499598B1 (en) 2018-08-06 2019-12-10 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170166
US10440929B1 (en) 2018-08-06 2019-10-15 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170077
US10588283B2 (en) 2018-08-06 2020-03-17 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170076
US10631485B2 (en) 2018-08-06 2020-04-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170161
US10455798B1 (en) 2018-08-06 2019-10-29 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170052
US10631497B2 (en) 2018-08-06 2020-04-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170163
US10582677B2 (en) 2018-08-06 2020-03-10 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170160
US10506785B1 (en) 2018-08-06 2019-12-17 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170122
US10440928B1 (en) 2018-08-06 2019-10-15 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170174
US10537086B1 (en) 2018-08-06 2020-01-21 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170157
US10499600B1 (en) 2018-08-06 2019-12-10 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170068
US10542696B1 (en) 2018-08-06 2020-01-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170106
US10506784B1 (en) 2018-08-06 2019-12-17 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170171
US10455797B1 (en) 2018-08-06 2019-10-29 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170108
US10492445B1 (en) 2018-08-06 2019-12-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170168
US10542695B1 (en) 2018-08-06 2020-01-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 75163252
US10362757B1 (en) 2018-08-06 2019-07-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170156
US10542697B1 (en) 2018-08-06 2020-01-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170114
US10595485B2 (en) 2018-08-07 2020-03-24 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170044
US10375921B1 (en) 2018-08-07 2019-08-13 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170053
US10631498B2 (en) 2018-08-07 2020-04-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170111
US10542717B1 (en) 2018-08-07 2020-01-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170038
US10687489B2 (en) 2018-08-07 2020-06-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170065
US10555471B1 (en) 2018-08-07 2020-02-11 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170082
US10455799B1 (en) 2018-08-07 2019-10-29 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170074
US10687486B2 (en) 2018-08-07 2020-06-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170116
US10602688B2 (en) 2018-08-07 2020-03-31 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170062
US10368522B1 (en) 2018-08-07 2019-08-06 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170118
US10368523B1 (en) 2018-08-07 2019-08-06 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170119
US10512230B1 (en) 2018-08-07 2019-12-24 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170055
US10375920B1 (en) 2018-08-07 2019-08-13 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170117
US10477820B1 (en) 2018-08-07 2019-11-19 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170120
US10492448B1 (en) 2018-08-07 2019-12-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170104
US10412923B1 (en) 2018-08-07 2019-09-17 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170047
US10687488B2 (en) 2018-08-07 2020-06-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170041
US10492446B1 (en) 2018-08-07 2019-12-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170067
US10412922B1 (en) 2018-08-07 2019-09-17 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170113
US10542718B1 (en) 2018-08-07 2020-01-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170042
US10531624B1 (en) 2018-08-07 2020-01-14 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170115
US10548281B1 (en) 2018-08-07 2020-02-04 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170061
US10492447B1 (en) 2018-08-07 2019-12-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170105
US10433508B1 (en) 2018-08-07 2019-10-08 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170110
US10368524B1 (en) 2018-08-07 2019-08-06 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170057
US10687487B2 (en) 2018-08-07 2020-06-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170121
US10548280B1 (en) 2018-08-07 2020-02-04 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170059
US10531622B1 (en) 2018-08-07 2020-01-14 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170072
US10455800B1 (en) 2018-08-07 2019-10-29 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170109
US10531623B1 (en) 2018-08-07 2020-01-14 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170079
US10390513B1 (en) 2018-08-07 2019-08-27 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170107
US10492449B1 (en) 2018-08-07 2019-12-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170048
US10433520B1 (en) 2018-08-07 2019-10-08 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170049
US10798906B2 (en) 2018-08-07 2020-10-13 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar S170112
US10631490B1 (en) 2019-06-19 2020-04-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 82410316
US10757878B1 (en) 2019-06-19 2020-09-01 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 85162129
US10694705B1 (en) 2019-06-19 2020-06-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 83410047
US10609884B1 (en) 2019-06-19 2020-04-07 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 85380644
US10765077B1 (en) 2019-06-19 2020-09-08 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 81142227
US10765082B1 (en) 2019-06-19 2020-09-08 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 83261548
US10694695B1 (en) 2019-06-19 2020-06-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 84420047
US10631489B1 (en) 2019-06-19 2020-04-28 M.S. Technologyies, L.L.C. Soybean cultivar 80142922
US10631488B1 (en) 2019-06-19 2020-04-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 86172129
US10869450B1 (en) 2019-06-20 2020-12-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 86372839
US10694707B1 (en) 2019-06-20 2020-06-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 80361712
US10863687B1 (en) 2019-06-20 2020-12-15 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 80191933
US10694708B1 (en) 2019-06-20 2020-06-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 81162507
US10743506B1 (en) 2019-06-20 2020-08-18 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 85321341
US10869439B1 (en) 2019-06-20 2020-12-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 84080909
US10694710B1 (en) 2019-06-20 2020-06-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 81290801
US10785931B1 (en) 2019-06-20 2020-09-29 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 83070909
US10842115B1 (en) 2019-06-20 2020-11-24 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 83090832
US10694711B1 (en) 2019-06-20 2020-06-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 82201801
US10863686B1 (en) 2019-06-20 2020-12-15 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 88061933
US10869451B1 (en) 2019-06-20 2020-12-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 89081933
US10694706B1 (en) 2019-06-20 2020-06-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 82092934
US10694709B1 (en) 2019-06-20 2020-06-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 80260801
US10905076B1 (en) 2019-08-06 2021-02-02 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 87463802
US11116164B2 (en) 2019-08-06 2021-09-14 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 85260926
US11058087B2 (en) 2019-08-06 2021-07-13 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 84110426
US11083158B2 (en) 2019-08-06 2021-08-10 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 80361023
US10918059B1 (en) 2019-08-06 2021-02-16 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 83303830
US10918058B1 (en) 2019-08-06 2021-02-16 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 81092033
US11058088B2 (en) 2019-08-06 2021-07-13 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 85120426
US10918057B1 (en) 2019-08-06 2021-02-16 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 89370134
US11140844B2 (en) 2019-08-06 2021-10-12 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 87140321
US11044864B2 (en) 2019-08-06 2021-06-29 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 84370213
US10980202B2 (en) 2019-08-06 2021-04-20 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 83162926
US10980201B2 (en) 2019-08-06 2021-04-20 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 87370220
US10897865B1 (en) 2019-08-06 2021-01-26 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 85021070
US10912272B1 (en) 2019-08-07 2021-02-09 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 81382112
US10918060B1 (en) 2019-08-07 2021-02-16 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 81171313
US10918063B1 (en) 2019-08-07 2021-02-16 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 82230226
US10881075B1 (en) 2019-08-07 2021-01-05 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 86111722
US10918062B1 (en) 2019-08-07 2021-02-16 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 88001207
US10925242B1 (en) 2019-08-07 2021-02-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 88161514
US10925243B1 (en) 2019-08-07 2021-02-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 87112125
US10918061B1 (en) 2019-08-07 2021-02-16 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 82161323
US10905077B1 (en) 2019-08-07 2021-02-02 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 80560821
US11096358B2 (en) 2019-08-07 2021-08-24 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 88340813
US10918041B1 (en) 2019-08-07 2021-02-16 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 81252901
US10939649B2 (en) 2019-08-08 2021-03-09 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 84372449
US10912275B1 (en) 2019-08-08 2021-02-09 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 89242728
US10939650B2 (en) 2019-08-08 2021-03-09 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 82072600
US10925244B1 (en) 2019-08-08 2021-02-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 88212722
US10842118B1 (en) 2019-08-08 2020-11-24 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 84252433
US11076553B2 (en) 2019-08-08 2021-08-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 86270804
US10905078B1 (en) 2019-08-08 2021-02-02 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 85161246
US10939634B2 (en) 2019-08-08 2021-03-09 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 83082600
US10912274B1 (en) 2019-08-08 2021-02-09 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 86171246
US11109554B2 (en) 2019-08-27 2021-09-07 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 83211737
US10980208B2 (en) 2019-08-27 2021-04-20 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 85204020
US10952400B1 (en) 2019-08-27 2021-03-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 82225478
US11026390B2 (en) 2019-08-27 2021-06-08 M.S. Technologies L.L.C. Soybean cultivar 82201737
US11337399B2 (en) 2020-08-18 2022-05-24 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 98250971
US11229180B1 (en) 2020-08-18 2022-01-25 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 95230842
US11252917B1 (en) 2020-08-18 2022-02-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 92130046
US11185042B1 (en) 2020-08-18 2021-11-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 94020016
US11259492B1 (en) 2020-08-18 2022-03-01 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 94041029
US11425878B2 (en) 2020-08-18 2022-08-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 96140971
US11252918B1 (en) 2020-08-18 2022-02-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 97150620
US11178840B1 (en) 2020-08-18 2021-11-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 95130648
US11234404B1 (en) 2020-08-18 2022-02-01 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 98010233
US11252920B1 (en) 2020-08-18 2022-02-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 95482129
US11252916B1 (en) 2020-08-18 2022-02-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 95110118
US11234403B1 (en) 2020-08-18 2022-02-01 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 92181128
US11277994B2 (en) 2020-08-18 2022-03-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 93421515
US11178839B1 (en) 2020-08-18 2021-11-23 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 97250443
US11425877B2 (en) 2020-08-18 2022-08-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 95130328
US11229181B1 (en) 2020-08-18 2022-01-25 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 90110353
US11357199B2 (en) 2020-08-18 2022-06-14 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 94150027
US11252919B1 (en) 2020-08-18 2022-02-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 93040644
US11337398B2 (en) 2020-08-18 2022-05-24 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 99050353
US11432510B2 (en) 2020-08-18 2022-09-06 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 97330971
US11382300B2 (en) 2020-09-22 2022-07-12 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 98020446
US11363784B2 (en) 2020-09-22 2022-06-21 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 93050528
US11432511B2 (en) 2020-09-22 2022-09-06 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 91410186
US11363781B2 (en) 2020-09-22 2022-06-21 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 94220186
US11350599B2 (en) 2020-09-22 2022-06-07 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 93410924
US11363785B2 (en) 2020-09-22 2022-06-21 M.S. Technologies, L.L.C Soybean cultivar 94040525
US11363787B2 (en) 2020-09-22 2022-06-21 M.S. Technologies, L.L.C Soybean cultivar 99250985
US11425880B2 (en) 2020-09-22 2022-08-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 98020803
US11445687B2 (en) 2020-09-22 2022-09-20 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 98240804
US11363783B2 (en) 2020-09-22 2022-06-21 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 96050446
US11357202B2 (en) 2020-09-22 2022-06-14 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 92440084
US11363788B2 (en) 2020-09-22 2022-06-21 M.S. Technologies, L.L.C Soybean cultivar 94120010
US11357203B2 (en) 2020-09-22 2022-06-14 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 93250796
US11363786B2 (en) 2020-09-22 2022-06-21 M. S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 98220823
US11439112B2 (en) 2020-09-22 2022-09-13 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 91110044
US11350598B2 (en) 2020-09-22 2022-06-07 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 97220468
US11445686B2 (en) 2020-09-22 2022-09-20 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 95040446
US11432512B2 (en) 2020-09-22 2022-09-06 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 90210769
US11357204B2 (en) 2020-09-22 2022-06-14 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 98110801
US11363782B2 (en) 2020-09-22 2022-06-21 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 98310446
WO2023280702A1 (en) 2021-07-09 2023-01-12 Syngenta Crop Protection Ag Herbicidal compositions
WO2023280697A1 (en) 2021-07-09 2023-01-12 Syngenta Crop Protection Ag Herbicidal compositions
PY2254929A (es) 2021-07-09 2023-01-30 Syngenta Crop Protection Ag Composiciones herbicidas
JP2024522911A (ja) 2021-07-09 2024-06-21 シンジェンタ クロップ プロテクション アクチェンゲゼルシャフト 除草剤組成物
US11696551B2 (en) 2021-08-10 2023-07-11 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 05320408
US11666030B2 (en) 2021-08-10 2023-06-06 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 08320812
US11678633B2 (en) 2021-08-10 2023-06-20 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 05330031
US11612129B2 (en) 2021-08-10 2023-03-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 06310200
US11771036B2 (en) 2021-08-10 2023-10-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 02050106
US11617332B2 (en) 2021-08-10 2023-04-04 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 03070412
US11672228B2 (en) 2021-08-10 2023-06-13 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 05150826
US11771038B2 (en) 2021-08-10 2023-10-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 05140125
US11632930B2 (en) 2021-08-10 2023-04-25 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 04290138
US11696554B2 (en) 2021-08-10 2023-07-11 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 04190907
US11696553B2 (en) 2021-08-10 2023-07-11 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 02420133
US11659805B2 (en) 2021-08-10 2023-05-30 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 01160658
US11690344B2 (en) 2021-08-10 2023-07-04 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 00250653
US11771037B2 (en) 2021-08-10 2023-10-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 08130343
US11647717B2 (en) 2021-08-10 2023-05-16 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 03420647
US11696550B2 (en) 2021-08-10 2023-07-11 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 06130011
US11690343B2 (en) 2021-08-10 2023-07-04 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 02050022
US11696552B2 (en) 2021-08-10 2023-07-11 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 06040447
US11553681B1 (en) 2021-08-11 2023-01-17 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 07040726
US11627715B2 (en) 2021-08-11 2023-04-18 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 04040309
US11627716B2 (en) 2021-08-11 2023-04-18 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 04040632
US11553679B1 (en) 2021-08-11 2023-01-17 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 06330352
US11559027B1 (en) 2021-08-11 2023-01-24 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 07030206
US11707041B2 (en) 2021-08-11 2023-07-25 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 09110424
US11612130B2 (en) 2021-08-11 2023-03-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 02430132
US11553680B1 (en) 2021-08-11 2023-01-17 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 00220803
US11991979B2 (en) 2021-11-19 2024-05-28 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 81002137
US12133504B2 (en) 2021-11-19 2024-11-05 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 85030154
US12010971B2 (en) 2021-11-19 2024-06-18 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 05170605
US12543682B2 (en) 2022-09-29 2026-02-10 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 15150110
US12279589B2 (en) 2022-09-29 2025-04-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 19140413
US12274229B2 (en) 2022-09-29 2025-04-15 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 17110507
US12284972B2 (en) 2022-09-29 2025-04-29 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 12340609
US12290042B2 (en) 2022-09-29 2025-05-06 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 19150712
US12268176B2 (en) 2022-09-29 2025-04-08 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 17350536
US12268175B2 (en) 2022-09-29 2025-04-08 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 13470106
US12324396B2 (en) 2022-09-29 2025-06-10 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 10320519
US12302846B2 (en) 2022-09-29 2025-05-20 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 11140704
US12329114B2 (en) 2022-09-29 2025-06-17 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 12130154
US12213443B2 (en) 2022-09-29 2025-02-04 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 15450220
US12279590B2 (en) 2022-11-22 2025-04-22 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 20221948
US12295341B2 (en) 2022-11-22 2025-05-13 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 22424206
US12284975B2 (en) 2022-11-22 2025-04-29 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 24220137
US12317851B2 (en) 2022-11-22 2025-06-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 14380137
EP4637356A1 (en) 2022-12-20 2025-10-29 Syngenta Crop Protection AG Herbicidal compositions
CN120958122A (zh) 2023-02-03 2025-11-14 先正达农作物保护股份公司 除草剂抗性植物
WO2024175476A1 (en) 2023-02-24 2024-08-29 Syngenta Crop Protection Ag Herbicidal compositions
JP2026507059A (ja) 2023-02-24 2026-02-27 シンジェンタ クロップ プロテクション アクチェンゲゼルシャフト 除草剤組成物
AR132458A1 (es) 2023-04-19 2025-07-02 Syngenta Crop Protection Ag Plantas resistentes a herbicidas
AU2024292019A1 (en) 2023-07-20 2026-01-15 Syngenta Crop Protection Ag Herbicidal compositions
CN121443146A (zh) 2023-07-20 2026-01-30 先正达农作物保护股份公司 除草组合物
US12564158B2 (en) 2023-09-13 2026-03-03 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 20120319
US12520800B2 (en) 2023-09-13 2026-01-13 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 23110149
US12457985B2 (en) 2023-09-13 2025-11-04 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 24310133
US12514219B2 (en) 2023-09-13 2026-01-06 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 22460028
US12520801B2 (en) 2023-09-13 2026-01-13 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 24310632
US12557748B2 (en) 2023-09-13 2026-02-24 M.S. Technologies, L.L.C. Soybean cultivar 20250821
WO2025103880A1 (en) 2023-11-14 2025-05-22 Syngenta Crop Protection Ag Herbicidal compositions
WO2026027723A1 (en) 2024-08-01 2026-02-05 Syngenta Crop Protection Ag Herbicide resistant plants

Family Cites Families (1044)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US27058A (en) * 1860-02-07 John w
US33266A (en) * 1861-09-10 Augustus reeve
US921263A (en) * 1908-07-20 1909-05-11 Samuel C Mason Form.
FR2673643B1 (fr) 1991-03-05 1993-05-21 Rhone Poulenc Agrochimie Peptide de transit pour l'insertion d'un gene etranger dans un gene vegetal et plantes transformees en utilisant ce peptide.
US5846717A (en) 1996-01-24 1998-12-08 Third Wave Technologies, Inc. Detection of nucleic acid sequences by invader-directed cleavage
KR100388121B1 (ko) * 1993-06-25 2003-12-06 바이엘 크롭사이언스 소시에떼아노님 식물의형질전환에사용될수있는키메라유전자내의터미네이터부위로서작용할수있는분리된dna서열
FR2736926B1 (fr) 1995-07-19 1997-08-22 Rhone Poulenc Agrochimie 5-enol pyruvylshikimate-3-phosphate synthase mutee, gene codant pour cette proteine et plantes transformees contenant ce gene
US5985557A (en) 1996-01-24 1999-11-16 Third Wave Technologies, Inc. Invasive cleavage of nucleic acids
US5786144A (en) * 1996-05-13 1998-07-28 American Museum Of Natural History Method and compositions for identification of species origin of caviar
FR2751347B1 (fr) 1996-07-16 2001-12-07 Rhone Poulenc Agrochimie Gene chimere a plusieurs genes de tolerance herbicide, cellule vegetale et plante tolerantes a plusieurs herbicides
US6376754B1 (en) 1997-03-07 2002-04-23 Asgrow Seed Company Plants having resistance to multiple herbicides and its use
US6245968B1 (en) 1997-11-07 2001-06-12 Aventis Cropscience S.A. Mutated hydroxyphenylpyruvate dioxygenase, DNA sequence and isolation of plants which contain such a gene and which are tolerant to herbicides
FR2770854B1 (fr) * 1997-11-07 2001-11-30 Rhone Poulenc Agrochimie Sequence adn d'un gene de l'hydroxy-phenyl pyruvate dioxygenase et obtention de plantes contenant un tel gene, tolerantes aux herbicides
US6069115A (en) * 1997-11-12 2000-05-30 Rhone-Poulenc Agrochimie Method of controlling weeds in transgenic crops
US6075182A (en) 1998-02-13 2000-06-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B53
US20090093620A1 (en) 2000-09-05 2009-04-09 David Kovalic Annotated Plant Genes
US6235976B1 (en) 1999-01-29 2001-05-22 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94B53
US6143956A (en) 1999-01-29 2000-11-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B84
US6229073B1 (en) 1999-01-29 2001-05-08 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 95B32
US6140557A (en) 1999-01-29 2000-10-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94B22
US6284950B1 (en) 1999-01-29 2001-09-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B24
US6153816A (en) 1999-01-29 2000-11-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B35
US6166296A (en) 1999-01-29 2000-12-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B35
US6124526A (en) 1999-01-29 2000-09-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B74
US6143954A (en) 1999-01-29 2000-11-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 96B01
US6147283A (en) 1999-01-29 2000-11-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 95B53
US6229074B1 (en) 1999-01-29 2001-05-08 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B65
US6143955A (en) 1999-01-29 2000-11-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B07
US6162968A (en) 1999-01-29 2000-12-19 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94B45
US20090087878A9 (en) * 1999-05-06 2009-04-02 La Rosa Thomas J Nucleic acid molecules associated with plants
US7365185B2 (en) 2000-07-19 2008-04-29 Monsanto Technology Llc Genomic plant sequences and uses thereof
NZ517929A (en) 1999-09-25 2004-02-27 Univ Iowa Res Found Immunostimulatory nucleic acids
US6339186B1 (en) 2000-02-09 2002-01-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B56
US6307131B1 (en) 2000-02-09 2001-10-23 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B66
US6323399B1 (en) 2000-02-09 2001-11-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B37
US6320105B1 (en) 2000-02-09 2001-11-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 90A07
US6323400B1 (en) 2000-02-09 2001-11-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 97B62
US6342659B1 (en) 2000-02-09 2002-01-29 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B26
US6369301B1 (en) 2000-02-09 2002-04-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 96B21
US6369300B1 (en) 2000-02-09 2002-04-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B36
US6326529B1 (en) 2000-02-09 2001-12-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B63
US6346657B1 (en) 2000-02-09 2002-02-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B62
US6323398B1 (en) 2000-02-09 2001-11-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 95B95
US6323402B1 (en) 2000-02-09 2001-11-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B46
US6316700B1 (en) 2000-02-09 2001-11-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 90B73
US6362400B1 (en) 2000-02-09 2002-03-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B75
US6323401B1 (en) 2000-02-09 2001-11-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B08
US20040181830A1 (en) 2001-05-07 2004-09-16 Kovalic David K. Nucleic acid molecules and other molecules associated with plants and uses thereof for plant improvement
JP2004523201A (ja) * 2000-05-16 2004-08-05 ザ チルドレンズ マーシー ホスピタル シングルコピーゲノムのハイブリダイゼーションプローブおよびその作製方法
FR2812883B1 (fr) 2000-08-11 2002-10-18 Aventis Cropscience Sa Utilisation d'inhibiteurs d'hppd comme agents de selection dans la transformation de plantes
FR2815969B1 (fr) 2000-10-30 2004-12-10 Aventis Cropscience Sa Plantes tolerantes aux herbicides par contournement de voie metabolique
US6727410B1 (en) 2000-12-22 2004-04-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B87
US6573433B1 (en) 2000-12-22 2003-06-03 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B67
US6583342B1 (en) 2000-12-22 2003-06-24 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 90B11
US6583341B1 (en) 2000-12-22 2003-06-24 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B47
US6610910B1 (en) 2000-12-22 2003-08-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B86
US6617499B1 (en) 2000-12-22 2003-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B15
US6610911B1 (en) 2000-12-22 2003-08-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B76
US6583343B1 (en) 2000-12-22 2003-06-24 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91B12
US6605758B1 (en) 2000-12-22 2003-08-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94B23
US6613967B1 (en) 2000-12-22 2003-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94B24
US6605756B1 (en) 2000-12-22 2003-08-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 97B52
US6605759B1 (en) 2000-12-22 2003-08-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 95B34
US6605760B1 (en) 2000-12-22 2003-08-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94B73
US6605761B1 (en) 2000-12-22 2003-08-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B38
US6605755B1 (en) 2000-12-22 2003-08-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B12
US6613966B1 (en) 2000-12-22 2003-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 95B97
US6613964B1 (en) 2000-12-22 2003-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 96B51
US6605757B1 (en) 2000-12-22 2003-08-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 95B96
US6586659B1 (en) 2000-12-22 2003-07-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91B92
US6730829B1 (en) 2000-12-22 2004-05-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B84
US6580018B1 (en) 2000-12-22 2003-06-17 Pioneer Hi-Bred International, Inc Soybean variety 91B33
US6608243B1 (en) 2000-12-22 2003-08-19 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B95
US6613965B1 (en) 2000-12-22 2003-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94B54
US6566589B1 (en) 2000-12-22 2003-05-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B72
US6605762B1 (en) 2000-12-22 2003-08-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B85
US6803504B2 (en) 2001-03-23 2004-10-12 Advanta U.S.A., Inc. Soybean variety S02-AP98041-2-333-01
US6632985B2 (en) 2001-03-29 2003-10-14 Advanta Usa, Inc. Soybean variety APA94-31572
US6630620B2 (en) 2001-03-29 2003-10-07 Advanta U.S.A., Inc. Soybean variety AP98041-4-117
US6831209B2 (en) 2001-03-29 2004-12-14 Advanta Usa, Inc. Soybean variety APA95-15294
US20030056251A1 (en) 2001-03-29 2003-03-20 Keith Bilyeu Soybean variety AP98041-1-203
US7189897B2 (en) 2001-03-30 2007-03-13 Dairyland Seed Co., Inc. Soybean cultivar 13946
US20040142325A1 (en) 2001-09-14 2004-07-22 Liat Mintz Methods and systems for annotating biomolecular sequences
US6815583B1 (en) 2002-01-29 2004-11-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 95B42
US7064251B1 (en) 2002-01-29 2006-06-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94B13
US6812384B1 (en) 2002-01-29 2004-11-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 90B74
US6979759B1 (en) 2002-01-29 2005-12-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B09
US6833498B1 (en) 2002-01-29 2004-12-21 Pioneer Ni-Bred International, Inc. Soybean variety 93B36
US6855874B1 (en) 2002-01-29 2005-02-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91B42
US6989475B1 (en) 2002-01-29 2006-01-24 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B13
US7064250B1 (en) 2002-01-29 2006-06-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94B74
US6818808B1 (en) 2002-01-29 2004-11-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 95B43
US6989474B1 (en) 2002-01-29 2006-01-24 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93B68
US6815584B1 (en) 2002-01-29 2004-11-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91B03
US6818809B1 (en) 2002-01-29 2004-11-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 90B51
US6812383B1 (en) 2002-01-29 2004-11-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B47
US7314974B2 (en) 2002-02-21 2008-01-01 Monsanto Technology, Llc Expression of microbial proteins in plants for production of plants with improved properties
US6803503B2 (en) 2002-03-13 2004-10-12 Advanta U.S.A., Inc. Soybean variety S02-AP98041-2-262-02
US20030188348A1 (en) 2002-03-13 2003-10-02 Keith Bilyeu Soybean variety S02-95021-55-240-BA
US6723899B2 (en) 2002-04-18 2004-04-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332134
US6720482B2 (en) 2002-04-18 2004-04-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332133
US6762349B2 (en) 2002-04-18 2004-07-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332137
US6762350B2 (en) 2002-04-18 2004-07-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332139
US6720483B2 (en) 2002-04-19 2004-04-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332141
US6730830B2 (en) 2002-04-19 2004-05-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332142
US6730831B2 (en) 2002-04-19 2004-05-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010349
US6849784B2 (en) 2002-04-19 2005-02-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010347
US6919496B2 (en) 2002-04-23 2005-07-19 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0322580
US6777593B2 (en) 2002-04-23 2004-08-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0322579
US6815582B2 (en) 2002-04-26 2004-11-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010353
US6774286B2 (en) 2002-04-26 2004-08-10 Stine Seed Farm Inc. Soybean cultivar 031766
US6765131B2 (en) 2002-04-26 2004-07-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010355
US6797862B2 (en) 2002-04-30 2004-09-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332122
US6806402B2 (en) 2002-04-30 2004-10-19 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010345
US6777595B2 (en) 2002-04-30 2004-08-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332129
US6838598B2 (en) 2002-04-30 2005-01-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332131
US6777594B2 (en) 2002-04-30 2004-08-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010350
US6844487B2 (en) 2002-04-30 2005-01-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332130
US6781037B2 (en) 2002-05-01 2004-08-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332145
US6794562B2 (en) 2002-05-01 2004-09-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332143
US6803505B2 (en) 2002-05-02 2004-10-12 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332148
US6924417B2 (en) 2002-05-02 2005-08-02 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332135
US6774287B2 (en) 2002-05-02 2004-08-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332147
US6781038B2 (en) 2002-05-02 2004-08-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 1000144
US7022898B2 (en) 2002-05-02 2006-04-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332146
US6781039B2 (en) 2002-05-07 2004-08-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010360
US6960707B2 (en) 2002-05-07 2005-11-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010364
US6806403B2 (en) 2002-05-07 2004-10-19 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010354
US6803506B2 (en) 2002-05-07 2004-10-12 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010361
US6903250B2 (en) 2002-05-07 2005-06-07 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010363
US20030213025A1 (en) 2002-05-09 2003-11-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 924861
US6894207B2 (en) 2002-05-09 2005-05-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332149
US6835873B2 (en) 2002-05-09 2004-12-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0332144
US6803507B2 (en) 2002-05-09 2004-10-12 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 928070
US20030213026A1 (en) 2002-05-09 2003-11-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 924788
US6849785B2 (en) 2002-05-21 2005-02-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 93831526
US6852912B2 (en) 2002-05-21 2005-02-08 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0322581
US6828486B2 (en) 2002-06-13 2004-12-07 Mertec Llc Soybean cultivar 19704230
US20030233682A1 (en) 2002-06-13 2003-12-18 Schultze Dennis L. Soybean cultivar 1000126
US6878862B2 (en) 2002-06-13 2005-04-12 Mertec Llc Soybean cultivar 19704120
US6828487B2 (en) 2002-06-13 2004-12-07 Mertec Llc Soybean cultivar 19602310
US6750383B2 (en) 2002-06-20 2004-06-15 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S37-N4
US6870078B2 (en) 2002-06-25 2005-03-22 Mertec Llc Soybean cultivar 19704220
US6838599B2 (en) 2002-06-25 2005-01-04 Mertec Llc Soybean cultivar 19704280
US6828488B2 (en) 2002-06-25 2004-12-07 Mertec Llc Soybean cultivar 19705120
US6831213B2 (en) 2002-06-25 2004-12-14 Mertec Llc Soybean cultivar 19704210
US6835874B2 (en) 2002-06-26 2004-12-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S010344
US6858780B2 (en) 2002-06-26 2005-02-22 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 924496
US6974897B2 (en) 2002-06-26 2005-12-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 70876922
US7053272B2 (en) 2002-07-11 2006-05-30 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety 0007583
US7241941B1 (en) 2002-07-11 2007-07-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0137335
US7138570B2 (en) 2002-07-11 2006-11-21 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety 0008079
US6849786B2 (en) 2002-09-04 2005-02-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0120311
US6846973B2 (en) 2002-09-04 2005-01-25 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 92422749
US6919497B2 (en) 2002-09-10 2005-07-19 First Line Seeds Ltd. Soybean cultivar SN83544
US6903251B2 (en) 2002-09-10 2005-06-07 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar 0096008
US6884923B2 (en) 2002-09-10 2005-04-26 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar 0034754
US6900372B2 (en) 2002-09-10 2005-05-31 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SN71173
US20040049814A1 (en) 2002-09-10 2004-03-11 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SN83211
US6884924B2 (en) 2002-09-10 2005-04-26 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SX95512
US7276648B2 (en) 2002-09-10 2007-10-02 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar SN64195
US6914172B2 (en) 2002-09-10 2005-07-05 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar 0088401
US7005563B2 (en) 2002-09-12 2006-02-28 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SN76208
US6924418B2 (en) 2002-09-12 2005-08-02 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SN83366
US6911579B2 (en) 2002-09-12 2005-06-28 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar 0004747
US6953876B2 (en) 2002-09-12 2005-10-11 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar 0037357
US6906246B2 (en) 2002-09-12 2005-06-14 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar 0037370
US6958436B2 (en) 2002-09-13 2005-10-25 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety SE90346
US6911578B2 (en) 2002-09-13 2005-06-28 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SN79526
US6888048B2 (en) 2002-09-13 2005-05-03 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar 0149928
US6900373B2 (en) 2002-09-13 2005-05-31 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SN83594
US6828489B2 (en) 2002-09-13 2004-12-07 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 924001
US7071387B2 (en) 2002-09-13 2006-07-04 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SN83780
US7071388B2 (en) 2002-09-13 2006-07-04 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SE71112
US7067723B2 (en) 2002-09-13 2006-06-27 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SE73753
US6951973B2 (en) 2002-09-13 2005-10-04 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SE90345
US6967263B2 (en) 2002-09-13 2005-11-22 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SN79525
US6881879B2 (en) 2002-09-13 2005-04-19 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SW90702
US6884925B2 (en) 2002-09-13 2005-04-26 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar 0053840
US6933423B2 (en) 2002-09-13 2005-08-23 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean cultivar SE73090
US6875908B2 (en) 2002-09-27 2005-04-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 926877
US7161065B1 (en) 2002-10-15 2007-01-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92B14
US6982365B2 (en) 2002-11-18 2006-01-03 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S56-D7
US20040148660A1 (en) 2003-01-23 2004-07-29 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety 0149926
US7193137B2 (en) 2003-01-23 2007-03-20 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety 0037209
US7294763B2 (en) 2003-01-23 2007-11-13 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0037393
US6927324B2 (en) 2003-01-23 2005-08-09 First Line Seeds, Ltd. Soybean variety 0088414
US7294764B2 (en) 2003-01-27 2007-11-13 Monsanto Technology Llc Soybean variety SD82997
US7294765B2 (en) 2003-01-27 2007-11-13 Monsanto Technology Llc Soybean variety SE72581
US7189900B2 (en) 2003-01-27 2007-03-13 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety SE90076
US6828490B1 (en) 2003-01-31 2004-12-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91M40
US6806405B1 (en) 2003-01-31 2004-10-19 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB10G03
US6849789B1 (en) 2003-01-31 2005-02-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93M80
US6916975B1 (en) 2003-01-31 2005-07-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M10
US6958437B1 (en) 2003-01-31 2005-10-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91M10
US6960708B1 (en) 2003-01-31 2005-11-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M72
US6797863B1 (en) 2003-01-31 2004-09-28 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB48P03
US6815585B1 (en) 2003-01-31 2004-11-09 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB05A03
US6852913B1 (en) 2003-01-31 2005-02-08 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 90M90
US6855876B1 (en) 2003-01-31 2005-02-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M50
US6791016B1 (en) 2003-01-31 2004-09-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93M40
US6864407B1 (en) 2003-01-31 2005-03-08 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB39N03
US6806406B1 (en) 2003-01-31 2004-10-19 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB29X03
US6797866B1 (en) 2003-01-31 2004-09-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M70
US7002061B1 (en) 2003-01-31 2006-02-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94M41
US6844488B1 (en) 2003-01-31 2005-01-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB37J03
US6835875B1 (en) 2003-01-31 2004-12-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93M41
US6849788B1 (en) 2003-01-31 2005-02-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91M90
US6806404B1 (en) 2003-01-31 2004-10-19 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB38D03
US6846975B1 (en) 2003-01-31 2005-01-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93M90
US6936752B1 (en) 2003-01-31 2005-08-30 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB24H03
US6797864B1 (en) 2003-01-31 2004-09-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc Soybean variety XB15P03
US6846974B1 (en) 2003-01-31 2005-01-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M31
US6809236B1 (en) 2003-01-31 2004-10-26 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB30W03
US6972352B1 (en) 2003-01-31 2005-12-06 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M00
US6998518B1 (en) 2003-01-31 2006-02-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91M50
US6797865B1 (en) 2003-01-31 2004-09-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93M60
US6800795B1 (en) 2003-01-31 2004-10-05 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB02C03
US6951974B1 (en) 2003-01-31 2005-10-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M30
US6855875B1 (en) 2003-01-31 2005-02-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB33S03
US6849787B1 (en) 2003-01-31 2005-02-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M80
US6858782B1 (en) 2003-01-31 2005-02-22 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M71
US6864408B1 (en) 2003-01-31 2005-03-08 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 94M70
US6858781B1 (en) 2003-01-31 2005-02-22 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB29W03
US6803508B1 (en) 2003-01-31 2004-10-12 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB34N03
US7193138B2 (en) 2003-02-15 2007-03-20 D&Pl Technology Holding Corporation Soybean cultivar DP 5634 RR
US7880061B2 (en) 2003-02-25 2011-02-01 The Curators Of The University Of Missouri Soybean variety SN97-6946
US6936753B2 (en) 2003-02-26 2005-08-30 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0487682
US7057092B2 (en) 2003-02-26 2006-06-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491714
US7057093B2 (en) 2003-02-26 2006-06-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491724
US6914173B2 (en) 2003-02-26 2005-07-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491721
US6919498B2 (en) 2003-02-26 2005-07-19 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491720
US6911581B1 (en) 2003-02-26 2005-06-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491723
US6861579B2 (en) 2003-02-26 2005-03-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491711
US7057094B2 (en) 2003-02-26 2006-06-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491722
US7038114B2 (en) 2003-02-26 2006-05-02 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491716
US7060877B2 (en) 2003-02-26 2006-06-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491713
US6911580B2 (en) 2003-02-26 2005-06-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491719
US6965061B2 (en) 2003-02-28 2005-11-15 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 4181001
US7026531B1 (en) 2003-03-03 2006-04-11 Garst Seed Company Soybean variety S03-95021-55-138-AB
US6909033B1 (en) 2003-03-03 2005-06-21 Advanta U.S.A., Inc. Soybean variety S03-95341-A98-60618
US7078594B1 (en) 2003-03-03 2006-07-18 Garst Seed Company Soybean variety S03-95368-N98-52902
US7038115B2 (en) 2003-03-14 2006-05-02 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 010022
US6909034B2 (en) 2003-03-14 2005-06-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 954011
US6984775B2 (en) 2003-04-02 2006-01-10 Schillinger Seed, Inc. Soybean cultivar 13873
US6933424B2 (en) 2003-04-07 2005-08-23 Mertec Llc Soybean cultivar 0491738
US7135628B2 (en) 2003-04-07 2006-11-14 Mertec Llc Soybean cultivar SO20011
US6909035B2 (en) 2003-04-07 2005-06-21 Mertec Llc Soybean cultivar SO22204
US7166773B2 (en) 2003-04-07 2007-01-23 Mertec Llc Soybean cultivar 0491729
US7041878B2 (en) 2003-04-07 2006-05-09 Mertec Llc Soybean cultivar 0491732
US6911582B2 (en) 2003-04-07 2005-06-28 Mertec Llc Soybean cultivar 0491733
US7109398B2 (en) 2003-04-07 2006-09-19 Mertec Llc Soybean cultivar 0491730
US6977326B2 (en) 2003-04-07 2005-12-20 Mertec Llc Soybean cultivar SO22206
US6900374B2 (en) 2003-04-07 2005-05-31 Mertec Llc Soybean cultivar 0491739
US6911583B2 (en) 2003-04-07 2005-06-28 Mertec Llc Soybean cultivar 0491731
US7161066B2 (en) 2003-04-10 2007-01-09 D&Pl Technology Holding Company Soybean cultivar 7085005
US6903252B2 (en) 2003-04-10 2005-06-07 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 3186004
US6891087B2 (en) 2003-04-10 2005-05-10 D&Pl Technology Holding Corporation Soybean cultivar 1465003
US6815587B2 (en) 2003-04-14 2004-11-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491726
US7041879B2 (en) 2003-04-14 2006-05-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar SO22215
US6781040B1 (en) 2003-04-14 2004-08-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 922013
US7074988B2 (en) 2003-04-14 2006-07-11 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 94137321
US6858783B2 (en) 2003-04-14 2005-02-22 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491727
US6903253B2 (en) 2003-04-14 2005-06-07 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 94143901
US6809237B1 (en) 2003-04-14 2004-10-26 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491728
US6906247B2 (en) 2003-04-14 2005-06-14 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 94106224
US6870079B2 (en) 2003-04-14 2005-03-22 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar SO22214
US6815586B2 (en) 2003-04-14 2004-11-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 92478609
US6815588B2 (en) 2003-04-14 2004-11-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 92440927
US6815589B2 (en) 2003-04-14 2004-11-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0487685
US6884926B2 (en) 2003-04-14 2005-04-26 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0487686
US6911584B2 (en) 2003-04-19 2005-06-28 Schillinger Seed, Inc. Soybean cultivar 02932
US6936754B2 (en) 2003-04-30 2005-08-30 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491725
US7060878B2 (en) 2003-04-30 2006-06-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar SO22207
US6914174B2 (en) 2003-04-30 2005-07-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar SO22208
US7045686B2 (en) 2003-04-30 2006-05-16 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 907012
US6911585B2 (en) 2003-05-01 2005-06-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar SO22212
US6858784B2 (en) 2003-05-01 2005-02-22 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 99271316
US7057095B2 (en) 2003-05-01 2006-06-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar SO22213
US7074989B2 (en) 2003-05-01 2006-07-11 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar SO22210
US6972353B2 (en) 2003-05-01 2005-12-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491737
US6906248B2 (en) 2003-05-01 2005-06-14 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar SO22211
US7041880B2 (en) 2003-05-20 2006-05-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491712
US7049494B2 (en) 2003-05-20 2006-05-23 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491717
US7126046B2 (en) 2003-05-20 2006-10-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491715
US7034209B2 (en) 2003-05-20 2006-04-25 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491718
US7034210B2 (en) 2003-05-20 2006-04-25 Stine Seed Farms, Inc. Soybean cultivar SO22220
US7057096B2 (en) 2003-05-20 2006-06-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0487681
US7081569B2 (en) 2003-06-06 2006-07-25 Soygenetics, Llc Soybean cultivar SG1120RR
US7161067B2 (en) 2003-06-26 2007-01-09 D&Pl Technology Holding Company Soybean cultivar 6190006
US7176357B2 (en) 2004-07-08 2007-02-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 90362421
US7109399B2 (en) 2003-07-22 2006-09-19 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0491735
US7119258B2 (en) 2003-07-22 2006-10-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar SO22218
US7256323B1 (en) * 2003-08-01 2007-08-14 Iowa State University Research Foundation, Inc. RPSk-1 gene family, nucleotide sequences and uses thereof
US7071390B2 (en) 2003-08-29 2006-07-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S022219
US7071389B2 (en) 2003-08-29 2006-07-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030151
US7119259B2 (en) 2003-08-29 2006-10-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S022217
US6888049B2 (en) 2003-08-29 2005-05-03 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S022209
US7041881B2 (en) 2003-09-26 2006-05-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030150
US6900375B2 (en) 2003-11-01 2005-05-31 Soygenetics, Llc Soybean cultivar SG1330NRR
US7157622B2 (en) 2003-11-01 2007-01-02 Soygenetics, Llc Soybean cultivar SG1431RR
US7102061B2 (en) 2003-11-24 2006-09-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S020030
US6979760B2 (en) 2003-11-24 2005-12-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030010
US7129399B2 (en) 2003-12-31 2006-10-31 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030158
US7087815B2 (en) 2003-12-31 2006-08-08 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030157
US7078595B2 (en) 2003-12-31 2006-07-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030156
US6979761B2 (en) 2003-12-31 2005-12-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030159
US6900376B1 (en) 2003-12-31 2005-05-31 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030154
US6969787B2 (en) 2003-12-31 2005-11-29 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030160
US7084324B2 (en) 2003-12-31 2006-08-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030155
US7098384B2 (en) 2003-12-31 2006-08-29 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030161
US7173167B2 (en) 2004-01-20 2007-02-06 Mertec Llc Soybean cultivar S030153
US7164060B2 (en) 2004-01-23 2007-01-16 Soygenetics, Llc Soybean cultivar SG5030NRR
US7196248B2 (en) 2004-01-23 2007-03-27 Soygenetics, Llc Soybean cultivar SG5322NRR
US7202399B2 (en) 2004-01-23 2007-04-10 Soygenetics, Llc Soybean cultivar SG4911NRR
US7053273B2 (en) 2004-01-27 2006-05-30 Mertec Llc Soybean cultivar 0509235
US7053274B2 (en) 2004-01-27 2006-05-30 Mertec Llc Soybean cultivar 0509236
US7015374B2 (en) 2004-01-27 2006-03-21 Mertec Llc Soybean cultivar 0509237
US20040181832A1 (en) 2004-01-30 2004-09-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB007C04
US20040205863A1 (en) 2004-01-30 2004-10-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB25L04
US20040177417A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB29K04
US20040205864A1 (en) 2004-01-30 2004-10-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB27P04
US20040216192A1 (en) 2004-01-30 2004-10-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB43V04
US20040172700A1 (en) 2004-01-30 2004-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB29A04
US20040177420A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB43W04
US6953877B2 (en) 2004-01-30 2005-10-11 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB04D04
US20040231017A1 (en) 2004-01-30 2004-11-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB41U04
US7034211B2 (en) 2004-01-30 2006-04-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB34D04
US20050144681A9 (en) 2004-01-30 2005-06-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety xb57m04
US20040172699A1 (en) 2004-01-30 2004-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB35P04
US20040177418A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB29L04
US20040177406A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB31R04
US7271319B2 (en) 2004-01-30 2007-09-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB39J04
US20040181833A1 (en) 2004-01-30 2004-09-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB40Y04
US20040177411A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB08L04
US7053275B2 (en) 2004-01-30 2006-05-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB10L04
US20040172704A1 (en) 2004-01-30 2004-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB26L04
US7164061B2 (en) 2004-01-30 2007-01-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB48T04
US20040172709A1 (en) 2004-01-30 2004-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB44C04
US7230169B2 (en) 2004-01-30 2007-06-12 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB06H04
US7176356B2 (en) 2004-01-30 2007-02-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB19U04
US20040172695A1 (en) 2004-01-30 2004-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB59U04
US6967264B2 (en) 2004-01-30 2005-11-22 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB32Y04
US20040177413A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB35Q04
US7019198B2 (en) 2004-01-30 2006-03-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB35L04
US20040172705A1 (en) 2004-01-30 2004-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB25X04
US20040172668A1 (en) 2004-01-30 2004-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB49K04
US7049495B2 (en) 2004-01-30 2006-05-23 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB64C04
US6953878B2 (en) 2004-01-30 2005-10-11 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB58Z04
US6977327B2 (en) 2004-01-30 2005-12-20 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB55K04
US7015376B2 (en) 2004-01-30 2006-03-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 95M80
US20040177408A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB31T04
US7276649B2 (en) 2004-01-30 2007-10-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB44D04
US20040177407A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB30E04
US7151207B2 (en) 2004-01-30 2006-12-19 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB43R04
US7022899B2 (en) 2004-01-30 2006-04-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB53J04
US7211714B2 (en) 2004-01-30 2007-05-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc Soybean variety 96M20
US7164062B2 (en) 2004-01-30 2007-01-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB09J04
US6992238B2 (en) 2004-01-30 2006-01-31 Pioneer Hi-Bred International Inc. Soybean variety XB11F04
US7015375B2 (en) 2004-01-30 2006-03-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB31U04
US20040177415A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB40Z04
US20040199959A1 (en) 2004-01-30 2004-10-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB42X04
US20040177410A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB18Q04
US20040172706A1 (en) 2004-01-30 2004-09-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB02F04
US7183460B2 (en) 2004-01-30 2007-02-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB16Q04
US20040177419A1 (en) 2004-01-30 2004-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB44W04
US6972354B2 (en) 2004-02-12 2005-12-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509245
US6884927B1 (en) 2004-02-12 2005-04-26 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509249
US7045687B2 (en) 2004-02-12 2006-05-16 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509251
US6888050B1 (en) 2004-02-12 2005-05-03 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 4283008
US6982366B2 (en) 2004-02-12 2006-01-03 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509239
US7002062B2 (en) 2004-02-12 2006-02-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509254
US6870080B1 (en) 2004-02-12 2005-03-22 D&Pl Technology Holding Corporation Soybean cultivar 3282002
US6982367B2 (en) 2004-02-12 2006-01-03 Stine Seed Farm, Inc Soybean cultivar 0509244
US7049496B2 (en) 2004-02-12 2006-05-23 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 2386009
US6972355B2 (en) 2004-02-12 2005-12-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509240
US7012174B2 (en) 2004-02-12 2006-03-14 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509248
US6906249B1 (en) 2004-02-12 2005-06-14 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 5091007
US7189896B1 (en) 2004-02-27 2007-03-13 Garst Seed Company Soybean variety S04-97026-N99-42648-01
US7196249B1 (en) 2004-02-27 2007-03-27 Garst Seed Company Soybean variety S04-97130-15-02
US7132591B2 (en) 2004-03-01 2006-11-07 Stine Seed Farm, Inc. “Soybean cultivar 0509241”
US7084326B2 (en) 2004-03-01 2006-08-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 70826751
US7105726B2 (en) 2004-03-01 2006-09-12 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509247
US7148408B2 (en) 2004-03-01 2006-12-12 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509252
US7084325B2 (en) 2004-03-01 2006-08-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509253
US7119260B2 (en) 2004-03-01 2006-10-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509246
US7115801B2 (en) 2004-03-01 2006-10-03 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509243
US7045688B2 (en) 2004-03-18 2006-05-16 Mertec Llc Soybean cultivar 0509214
WO2005098015A2 (en) 2004-04-06 2005-10-20 Metanomics Gmbh Process for the production of fine chemicals
US20050268362A1 (en) 2004-05-27 2005-12-01 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar SJ919784
US7071392B2 (en) 2004-05-27 2006-07-04 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar CL615261
US7183464B2 (en) 2004-07-08 2007-02-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 02022433
FR2872715B1 (fr) * 2004-07-08 2006-11-17 Commissariat Energie Atomique Microreacteur goutte
US7183462B2 (en) 2004-07-08 2007-02-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 02912951
US7183465B2 (en) 2004-07-08 2007-02-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 03022253
US7189898B2 (en) 2004-07-08 2007-03-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0102115
US7183463B2 (en) 2004-07-08 2007-02-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 02022323
US7176358B2 (en) 2004-07-08 2007-02-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 90897327
US7176359B2 (en) 2004-07-08 2007-02-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 90046112
US7166774B2 (en) 2004-07-08 2007-01-23 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 0509255
US7183461B2 (en) 2004-07-08 2007-02-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 915034
US7183466B2 (en) 2004-07-19 2007-02-27 Mertec Llc Soybean cultivar 1000109
US7193139B2 (en) 2004-07-23 2007-03-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 927013
US7183467B2 (en) 2004-07-23 2007-02-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S030136
US7368635B2 (en) 2004-08-03 2008-05-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 943013
US20060135758A1 (en) * 2004-08-31 2006-06-22 Kunsheng Wu Soybean polymorphisms and methods of genotyping
US8053636B2 (en) 2004-10-29 2011-11-08 Bayer Bioscience N.V. Stress tolerant cotton plants
US7030297B1 (en) 2004-11-30 2006-04-18 Mertec Llc Soybean cultivar 900613
US7271322B2 (en) 2004-11-30 2007-09-18 Mertec Llc Soybean cultivar 900213
US7045689B1 (en) 2004-11-30 2006-05-16 Mertec Llc Soybean cultivar 917013
US7271321B2 (en) 2004-11-30 2007-09-18 Mertec Llc Soybean cultivar 1000126
US7271320B2 (en) 2004-11-30 2007-09-18 Mertec Llc Soybean cultivar 901023
AU2005337132B2 (en) * 2004-12-21 2011-01-20 Monsanto Technology, Llc Transgenic plants with enhanced agronomic traits
FR2880356B1 (fr) * 2005-01-05 2007-04-06 Bayer Cropscience Sa Sa Plantes transplastomiques exemptes du gene marqueur de selection
US6979762B1 (en) 2005-01-24 2005-12-27 Mertec Llc Soybean cultivar 4704310
US7053276B1 (en) 2005-01-25 2006-05-30 Mertec Llc Soybean cultivar S040123
US7301072B2 (en) 2005-01-25 2007-11-27 Mertec Llc Soybean cultivar S040125
US7005564B1 (en) 2005-01-26 2006-02-28 Mertec Llc Soybean cultivar 4513420
US7053277B1 (en) 2005-01-26 2006-05-30 Mertec Llc Soybean cultivar S040119
US7053278B1 (en) 2005-01-26 2006-05-30 Mertec Llc Soybean cultivar S040118
US7015378B1 (en) 2005-01-27 2006-03-21 Mertec Llc Soybean cultivar S040134
US6982368B1 (en) 2005-01-27 2006-01-03 Mertec Llc Soybean cultivar 4803070
US7015377B1 (en) 2005-01-27 2006-03-21 Mertec Llc Soybean cultivar S040129
US7022900B1 (en) 2005-01-27 2006-04-04 Mertec Llc Soybean cultivar S040120
US7022901B1 (en) 2005-01-27 2006-04-04 Mertec Llc Soybean cultivar S040128
US7301073B2 (en) 2005-01-29 2007-11-27 Mertec Llc Soybean cultivar 4405070
US7045690B1 (en) 2005-01-29 2006-05-16 Mertec Llc Soybean cultivar 4238491
US7049497B1 (en) 2005-01-29 2006-05-23 Mertec Llc Soybean cultivar 4442112
US7273969B2 (en) 2005-01-29 2007-09-25 Mertec Llc Soybean cultivar 4417380
US7294766B2 (en) 2005-01-31 2007-11-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB28F05
US7271323B2 (en) 2005-01-31 2007-09-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 90M01
US20050150019A1 (en) 2005-01-31 2005-07-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB41B05
US7030298B2 (en) 2005-01-31 2006-04-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB43D05
US7169973B2 (en) 2005-01-31 2007-01-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB26U05
US20050120431A1 (en) 2005-01-31 2005-06-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB49M05
US20050120419A1 (en) 2005-01-31 2005-06-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB30P05
US20050114930A1 (en) 2005-01-31 2005-05-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB25Y05
US6992239B2 (en) 2005-01-31 2006-01-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 92M61
US20050120436A1 (en) 2005-01-31 2005-06-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB18S05
US7304211B2 (en) 2005-01-31 2007-12-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB35K05
US7189899B2 (en) 2005-01-31 2007-03-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB38T05
US20050150017A1 (en) 2005-01-31 2005-07-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB25S05
US20050114934A1 (en) 2005-01-31 2005-05-26 Pioneer Hi-Bred International , Inc. Soybean variety XB12K05
US7304212B2 (en) 2005-01-31 2007-12-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB21S05
US20050114942A1 (en) 2005-01-31 2005-05-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB28E05
US7282627B2 (en) 2005-01-31 2007-10-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB20D05
US7078596B2 (en) 2005-01-31 2006-07-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc, Soybean variety XB33Y05
US7015380B2 (en) 2005-01-31 2006-03-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc Soybean variety XB58G05
US7297841B2 (en) 2005-01-31 2007-11-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB22H05
US7015379B2 (en) 2005-01-31 2006-03-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB57T05
US7282626B2 (en) 2005-01-31 2007-10-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB40D05
US7326830B2 (en) 2005-01-31 2008-02-05 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB26V05
US20050114935A1 (en) 2005-01-31 2005-05-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB13U05
US7064252B2 (en) 2005-01-31 2006-06-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93M01
US7084327B2 (en) 2005-01-31 2006-08-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB22K05
US20050114932A1 (en) 2005-01-31 2005-05-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB17S05
US7015381B2 (en) 2005-01-31 2006-03-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB25C05
US7060879B2 (en) 2005-01-31 2006-06-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB13T05
US20050150018A1 (en) 2005-01-31 2005-07-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91M70
US20050108795A1 (en) 2005-01-31 2005-05-19 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB21R05
US7164063B2 (en) 2005-01-31 2007-01-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB39N05
US20050114937A1 (en) 2005-01-31 2005-05-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB32C05
US20070150979A1 (en) 2005-01-31 2007-06-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety 92M52
US6992240B2 (en) 2005-01-31 2006-01-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB31W05
US20050120432A1 (en) 2005-01-31 2005-06-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB57U05
US20050114940A1 (en) 2005-01-31 2005-05-26 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB27B05
US7022902B2 (en) 2005-01-31 2006-04-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB58K05
US6995303B2 (en) 2005-01-31 2006-02-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB34A05
US6956150B2 (en) 2005-01-31 2005-10-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91M91
US7005565B2 (en) 2005-01-31 2006-02-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB40E05
US20050120428A1 (en) 2005-01-31 2005-06-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB19Y05
US20050120433A1 (en) 2005-02-01 2005-06-02 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB08P05
US7030299B1 (en) 2005-02-07 2006-04-18 Mertec Llc Soybean cultivar 4216033
US7279620B2 (en) 2005-02-07 2007-10-09 Mertec Llc Soybean cultivar 4921237
US7335819B2 (en) 2005-02-07 2008-02-26 Mertec Llc Soybean cultivar 4805442
US7064253B1 (en) 2005-02-11 2006-06-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4145306
US7078597B1 (en) 2005-02-11 2006-07-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040117
US7279621B2 (en) 2005-02-11 2007-10-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040133
US7019199B1 (en) 2005-02-16 2006-03-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040127
US7078598B1 (en) 2005-02-16 2006-07-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040135
US7030300B1 (en) 2005-02-16 2006-04-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040121
US7314981B2 (en) 2005-02-24 2008-01-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4713487
US7314980B2 (en) 2005-02-24 2008-01-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040122
US7045691B1 (en) 2005-02-24 2006-05-16 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040124
US7291769B2 (en) 2005-02-24 2007-11-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4348019
US7030301B1 (en) 2005-02-24 2006-04-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4337175
US7358420B2 (en) 2005-02-25 2008-04-15 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040131
US7053280B1 (en) 2005-02-25 2006-05-30 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040130
US7314982B2 (en) 2005-02-25 2008-01-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4817034
US7053279B1 (en) 2005-02-25 2006-05-30 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4706198
US7304213B2 (en) 2005-02-25 2007-12-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean Cultivar 4929388
US7041882B1 (en) 2005-02-25 2006-05-09 Hornbeck Seed Co., Inc. Soybean cultivar S010136
US7358422B2 (en) 2005-02-28 2008-04-15 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 4136015
US7081570B1 (en) 2005-02-28 2006-07-25 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 6084016
US7304214B2 (en) 2005-02-28 2007-12-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4328386
US7291770B2 (en) 2005-02-28 2007-11-06 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 1339013
US7491870B2 (en) 2005-02-28 2009-02-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S040132
US7102062B1 (en) 2005-02-28 2006-09-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4423183
US7358421B2 (en) 2005-02-28 2008-04-15 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 3133014
US7091403B1 (en) 2005-02-28 2006-08-15 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4441080
US7164064B1 (en) 2005-03-01 2007-01-16 Garst Seed Company Soybean variety S05-99048-19
US7186894B1 (en) 2005-03-01 2007-03-06 Garst Seed Company Soybean variety S05-97016-G99-21212
US7078599B1 (en) 2005-03-01 2006-07-18 Garst Seed Company Soybean variety S05-97130-51
US7132592B1 (en) 2005-03-01 2006-11-07 Garst Seed Company Soybean variety S05-97177-N00-22972
US7304216B1 (en) 2005-03-04 2007-12-04 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar 01JR123480
US7126047B1 (en) 2005-03-04 2006-10-24 Sungenta Participations Ag Soybean cultivar M08851
US7186895B1 (en) 2005-03-04 2007-03-06 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar CL727422
US7196250B1 (en) 2005-03-04 2007-03-27 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar CL722114
US7132593B1 (en) 2005-03-04 2006-11-07 Syngente Participations Ag Soybean cultivar CL727636
US7091404B1 (en) 2005-03-04 2006-08-15 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar CL821418
US7071391B1 (en) 2005-03-04 2006-07-04 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar M03393
US7132594B1 (en) 2005-03-04 2006-11-07 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar WW152201
US7304215B1 (en) 2005-03-04 2007-12-04 Syngenta Participatians Ag Soybean cultivar M061422
US7202400B1 (en) 2005-03-04 2007-04-10 Syngenta Participations (Ag) Soybean cultivar CL431203
US7235717B1 (en) 2005-03-04 2007-06-26 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar WW109447
US7208657B1 (en) 2005-03-08 2007-04-24 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar MT017827
US7238867B1 (en) 2005-03-08 2007-07-03 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar MT000792
US7304217B1 (en) 2005-03-15 2007-12-04 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar BA922834
US7220898B1 (en) 2005-03-15 2007-05-22 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar BA947474
BRPI0608667B1 (pt) 2005-04-08 2018-05-02 Bayer Cropscience Nv Ácido nucléico específico, pares de iniciadores, sondas, kits e métodos para identificar o evento elite a2704-12 em amostras biológicas, confirmar a pureza de sementes e analisar sementes em relação à presença do referido evento elite
CN105112520B (zh) 2005-04-11 2019-05-28 拜尔作物科学公司 原种事件a5547-127以及在生物样品中鉴定此类事件的方法和试剂盒
US7105727B1 (en) 2005-05-25 2006-09-12 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050164
US7078600B1 (en) 2005-05-25 2006-07-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050163
AP2693A (en) 2005-05-27 2013-07-16 Monsanto Technology Llc Soybean event MON89788 and methods for detection thereof
US7081571B1 (en) 2005-06-03 2006-07-25 Mertec Llc Soybean cultivar S050162
US7098385B1 (en) 2005-06-27 2006-08-29 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4916816
US7105728B1 (en) 2005-06-27 2006-09-12 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4324401
US7173168B2 (en) 2005-06-27 2007-02-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4506816
US7081572B1 (en) 2005-06-27 2006-07-25 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4909380
US7084328B1 (en) 2005-06-27 2006-08-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 4417779
US7169974B1 (en) 2005-07-26 2007-01-30 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050051
ZA200800909B (en) * 2005-08-08 2009-08-26 Bayer Bioscience Nv Herbicide tolerant cotton plants and methods for identifying same
US7294768B1 (en) 2005-09-27 2007-11-13 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0384279
US7173169B1 (en) 2006-01-09 2007-02-06 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 5083011
US7211715B1 (en) 2006-01-11 2007-05-01 Soygenetics, Llc Soybean cultivar SG0850RR
US7208658B1 (en) 2006-01-11 2007-04-24 Soygenetics, Llc Soybean cultivar SG1750NRR
US7205458B1 (en) 2006-01-19 2007-04-17 Nidera Semillas S.A. Soybean cultivar 4N2V74028
US7183468B1 (en) 2006-01-19 2007-02-27 Nidera Semillas S.A. Soybean cultivar 4N2V55022
US7199288B1 (en) 2006-01-19 2007-04-03 Nidera Semillas S.A. Soybean cultivar 4N0S63222
US7217869B1 (en) 2006-01-24 2007-05-15 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5726175
US7217868B1 (en) 2006-01-24 2007-05-15 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5432082
US7169976B1 (en) 2006-01-24 2007-01-30 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5626085
US7196252B1 (en) 2006-01-25 2007-03-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5834401
US7196253B1 (en) 2006-01-25 2007-03-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5520279
US7196251B1 (en) 2006-01-25 2007-03-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5621161
US7193140B1 (en) 2006-01-25 2007-03-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5741081
US7285704B2 (en) 2006-01-26 2007-10-23 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5830261
US7241939B1 (en) 2006-01-26 2007-07-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5726085
US7217870B1 (en) 2006-01-26 2007-05-15 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5939002
US7265270B2 (en) 2006-01-26 2007-09-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050238
US7247771B1 (en) 2006-01-30 2007-07-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5806063
US7253344B1 (en) 2006-01-30 2007-08-07 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 4189010
US7235718B1 (en) 2006-01-30 2007-06-26 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5521161
US7265272B2 (en) 2006-01-30 2007-09-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050235
US7282628B2 (en) 2006-01-30 2007-10-16 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 1486018
US7265271B2 (en) 2006-01-30 2007-09-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5023230
US7439421B2 (en) 2006-01-31 2008-10-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB22N06
US20060107364A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB37Q06
US7169980B2 (en) 2006-01-31 2007-01-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB16W06
US20060107375A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB58P06
US7179967B2 (en) 2006-01-31 2007-02-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB15W06
US20060112457A1 (en) 2006-01-31 2006-05-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB47Q06
US20060107378A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB23H06
US7227059B2 (en) 2006-01-31 2007-06-05 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 91M61
US7161068B2 (en) 2006-01-31 2007-01-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB32A06
US20060112461A1 (en) 2006-01-31 2006-05-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB26R06
US7183469B2 (en) 2006-01-31 2007-02-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB21Z06
US7388128B2 (en) 2006-01-31 2008-06-17 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB36M06
US20060107385A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB25H06
US20060107373A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB22G06
US7169978B2 (en) 2006-01-31 2007-01-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB38E06
US20060107356A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB18W06
US20060112462A1 (en) 2006-01-31 2006-05-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB27J06
US7169977B2 (en) 2006-01-31 2007-01-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB00D06
US7186896B2 (en) 2006-01-31 2007-03-06 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB29R06
US7227058B2 (en) 2006-01-31 2007-06-05 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB33N06
US7265274B2 (en) 2006-01-31 2007-09-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5624126
US7176360B2 (en) 2006-01-31 2007-02-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB14N06
US20060107368A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB43C06
US20060107369A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB19V06
US20060107389A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB28V06
US20060107365A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB37U06
US7294769B2 (en) 2006-01-31 2007-11-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB18C06
US7378574B2 (en) 2006-01-31 2008-05-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB07N06
US20060107387A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB12L06
US7482513B2 (en) 2006-01-31 2009-01-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB11L06
US20060107354A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB19F06
US7179968B2 (en) 2006-01-31 2007-02-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB36Q06
US7301075B2 (en) 2006-01-31 2007-11-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB28T06
US7399906B2 (en) 2006-01-31 2008-07-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB 10M06
US20060112460A1 (en) 2006-01-31 2006-05-25 Pioneer Hi-Bred International , Inc. Soybean variety XB29N06
US7288699B2 (en) 2006-01-31 2007-10-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB24R06
US7265273B2 (en) 2006-01-31 2007-09-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5019225
US20060107376A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB32L06
US20060107388A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB004A06
US7259298B1 (en) 2006-01-31 2007-08-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5549483
US7227060B2 (en) 2006-01-31 2007-06-05 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB16S06
US20060225160A1 (en) 2006-01-31 2006-10-05 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB25G06
US20060107355A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB32M06
US7381863B2 (en) 2006-01-31 2008-06-03 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB27K06
US7371936B2 (en) 2006-01-31 2008-05-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB005A06
US7169979B2 (en) 2006-01-31 2007-01-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB35C06
US7241940B2 (en) 2006-01-31 2007-07-10 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB005B06
US7193141B2 (en) 2006-01-31 2007-03-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB31H06
US20060107390A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB06K06
US20060107380A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB36V06
US20060107384A1 (en) 2006-01-31 2006-05-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB39W06
US7314983B2 (en) 2006-02-06 2008-01-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5608398
US7244881B1 (en) 2006-02-06 2007-07-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050233
US7256330B1 (en) 2006-02-06 2007-08-14 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050230
US7247772B1 (en) 2006-02-06 2007-07-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050226
US7345224B2 (en) 2006-02-06 2008-03-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5138236
US7294770B2 (en) 2006-02-16 2007-11-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5826175
US7259299B1 (en) 2006-02-16 2007-08-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5628386
US7265275B1 (en) 2006-02-16 2007-09-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5826376
US7301076B2 (en) 2006-02-16 2007-11-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050231
US7271324B2 (en) 2006-02-21 2007-09-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5051007
US7291771B2 (en) 2006-02-21 2007-11-06 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5723045
US7297843B2 (en) 2006-02-21 2007-11-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5319227
US7332655B2 (en) 2006-02-21 2008-02-19 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5419227
US7309818B2 (en) 2006-02-23 2007-12-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050222
US7388129B1 (en) 2006-02-23 2008-06-17 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-WW152330
US7291772B1 (en) 2006-02-23 2007-11-06 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-WW167686
US7355101B1 (en) 2006-02-23 2008-04-08 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-M059029
US7312380B2 (en) 2006-02-23 2007-12-25 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050217
US7314984B1 (en) 2006-02-23 2008-01-01 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-MT116260
US7326831B1 (en) 2006-02-23 2008-02-05 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-MT9211059
US7271325B1 (en) 2006-02-23 2007-09-18 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-WW157958
US7339094B1 (en) 2006-02-23 2008-03-04 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-MT9206166
US7345225B2 (en) 2006-02-23 2008-03-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050218
US7339093B1 (en) 2006-02-23 2008-03-04 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-WW013107
US7375261B1 (en) 2006-02-23 2008-05-20 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-WW169267
US7335820B1 (en) 2006-02-23 2008-02-26 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-M03256
US7378575B1 (en) 2006-02-23 2008-05-27 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar
US7265276B1 (en) 2006-02-23 2007-09-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050223
US7378576B1 (en) 2006-02-23 2008-05-27 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar MT110501
US7329800B1 (en) 2006-02-24 2008-02-12 Sygenta Participations Ag Soybean cultivar S06-01JR123373
US7317144B1 (en) 2006-02-24 2008-01-08 Syngenta Participations Soybean cultivar S06-01JR122235
US7414175B1 (en) 2006-02-24 2008-08-19 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-BA046119
US7312381B1 (en) 2006-02-24 2007-12-25 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-SJ143606
US7381864B1 (en) 2006-02-24 2008-06-03 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-02JR111334
US7361810B1 (en) 2006-02-24 2008-04-22 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-MT9152077
US7309819B1 (en) 2006-02-24 2007-12-18 Garst Seed Company Soybean cultivar S06-98181-G01-35167
US7371937B1 (en) 2006-02-28 2008-05-13 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-CL968413
US7265277B1 (en) 2006-02-28 2007-09-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5802205
US7312382B2 (en) 2006-02-28 2007-12-25 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050221
US7420104B1 (en) 2006-02-28 2008-09-02 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-CL821457
US7368636B1 (en) 2006-02-28 2008-05-06 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-CL951107
US7405348B2 (en) 2006-02-28 2008-07-29 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 1000642
US7304218B2 (en) 2006-02-28 2007-12-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5420128
US7307201B2 (en) 2006-03-02 2007-12-11 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 90501911
US7321079B2 (en) 2006-03-02 2008-01-22 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5733056
US7321081B2 (en) 2006-03-23 2008-01-22 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 3233021
US7442856B2 (en) 2006-03-23 2008-10-28 Mertec Llc Soybean cultivar 5512112
US7321080B2 (en) 2006-03-23 2008-01-22 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 4183026
US7442857B2 (en) 2006-03-23 2008-10-28 Mertec Llc Soybean cultivar S050216
US7365243B2 (en) 2006-03-23 2008-04-29 Mertec Llc Soybean cultivar 5204220
US7365244B2 (en) 2006-03-23 2008-04-29 Mertec Llc Soybean cultivar 5348287
US7335821B2 (en) 2006-03-23 2008-02-26 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 6188027
US7279622B1 (en) 2006-03-23 2007-10-09 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 1336024
US7396982B2 (en) 2006-03-27 2008-07-08 Mertec Llc Soybean cultivar S050232
US7309820B2 (en) 2006-03-27 2007-12-18 Mertec Llc Soybean cultivar 5720482
US7297844B2 (en) 2006-03-27 2007-11-20 D & Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 3235020
US7396981B2 (en) 2006-03-27 2008-07-08 Mertec Llc Soybean cultivar 5333301
US7279623B1 (en) 2006-03-27 2007-10-09 Mertec Llc Soybean cultivar S050215
US7579523B2 (en) 2006-03-31 2009-08-25 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6141145
US7390942B2 (en) 2006-04-27 2008-06-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0385457
US7504565B2 (en) 2006-04-27 2009-03-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4878185
US7872174B2 (en) 2006-04-27 2011-01-18 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4647672
US7381867B2 (en) 2006-04-27 2008-06-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4782157
US7659452B2 (en) 2006-04-27 2010-02-09 Monsanto Technology Llc Soybean variety 457114
US20070256152A1 (en) 2006-04-27 2007-11-01 Jonathan Jenkinson Soybean variety 0277524
US20070256157A1 (en) 2006-04-27 2007-11-01 Jonathan Jenkinson Soybean variety 0436052
US7482516B2 (en) 2006-04-27 2009-01-27 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0387907
US20070254366A1 (en) 2006-04-27 2007-11-01 Christopher Goblirsch Soybean variety 4247825
US20070256160A1 (en) 2006-04-27 2007-11-01 Christopher Goblirsch Soybean variety 0215818
US7498489B2 (en) 2006-04-27 2009-03-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4498438
US20070256163A1 (en) 2006-04-27 2007-11-01 Christopher Goblirsch Soybean variety 0212938
US8115066B2 (en) 2006-04-27 2012-02-14 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0384531
US7399909B2 (en) 2006-04-27 2008-07-15 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0385240
US7390941B2 (en) 2006-04-27 2008-06-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4735316
US20070256151A1 (en) 2006-04-27 2007-11-01 Jonathan Jenkinson Soybean variety 0276951
US20070256166A1 (en) 2006-04-28 2007-11-01 Charlotte Sartell Soybean variety 4788561
US7378578B2 (en) 2006-04-28 2008-05-27 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0358232
US20070256167A1 (en) 2006-04-28 2007-11-01 Roger Lussenden Soybean variety 0146529
US7557270B2 (en) 2006-04-28 2009-07-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4074328
US20070256178A1 (en) 2006-04-28 2007-11-01 Floyd Thomas L Soybean variety 0417158
US7479582B2 (en) 2006-04-28 2009-01-20 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4671685
US7488867B2 (en) 2006-04-28 2009-02-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4587513
US7498490B2 (en) 2006-04-28 2009-03-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4010165
US7498491B2 (en) 2006-04-28 2009-03-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4785923
US7569750B2 (en) 2006-04-28 2009-08-04 Monsanto Technology Llc Soybean Variety 4559809
US7385117B2 (en) 2006-04-28 2008-06-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0367478
US7501562B2 (en) 2006-04-28 2009-03-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0421133
US7501563B2 (en) 2006-04-28 2009-03-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0409670
US7642407B2 (en) 2006-04-28 2010-01-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0330738
US7479583B2 (en) 2006-04-28 2009-01-20 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4336643
US20070256176A1 (en) 2006-04-28 2007-11-01 Nancy Sebern Soybean variety 0196172
US7592511B2 (en) 2006-04-28 2009-09-22 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0457028
US7385116B2 (en) 2006-04-28 2008-06-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0240187
US20070256164A1 (en) 2006-04-28 2007-11-01 Roger Lussenden Soybean variety 0149217
US7554014B2 (en) 2006-04-28 2009-06-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0437973
US7678962B2 (en) 2006-04-28 2010-03-16 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0330739
US20070256162A1 (en) 2006-04-28 2007-11-01 Roger Lussenden Soybean variety 0146565
US7615687B2 (en) 2006-04-28 2009-11-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0232405
US7626086B2 (en) 2006-04-28 2009-12-01 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0045477
US7485781B2 (en) 2006-04-28 2009-02-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4175567
US7592512B2 (en) 2006-04-28 2009-09-22 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4309194
US7365246B2 (en) 2006-05-18 2008-04-29 Scillinger Seed Inc. Soybean cultivar 435.TCS
US7365245B2 (en) 2006-05-18 2008-04-29 Schillinger Seed Inc. Soybean cultivar 495.RC
US7423200B2 (en) 2006-05-24 2008-09-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 17082821
US7423199B2 (en) 2006-05-24 2008-09-09 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 17621620
US7345226B2 (en) 2006-05-24 2008-03-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060182
US7342150B2 (en) 2006-05-24 2008-03-11 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 00977706
US7301077B1 (en) 2006-06-26 2007-11-27 Mertec Llc Soybean cultivar 26143837
US7304219B1 (en) 2006-06-26 2007-12-04 Mertec Llc Soybean cultivar 26082635
US7297845B1 (en) 2006-06-27 2007-11-20 Mertec Llc Soybean cultivar 5306230
US7301078B1 (en) 2006-06-27 2007-11-27 Mertec Llc Soybean cultivar 26312034
US7968770B2 (en) 2006-06-28 2011-06-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Methods for improving yield using soybean event 3560.4.3.5
US7951995B2 (en) 2006-06-28 2011-05-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean event 3560.4.3.5 and compositions and methods for the identification and detection thereof
US7442859B2 (en) 2006-07-12 2008-10-28 Mertec Llc Soybean cultivar 306612412
US7423201B2 (en) 2006-07-12 2008-09-09 Mertec Llc Soybean cultivar 306734323
US7459608B2 (en) 2006-07-12 2008-12-02 Mertec Llc Soybean cultivar 26170838
US7442858B2 (en) 2006-07-12 2008-10-28 Mertec Llc Soybean cultivar 26660135
US7314986B1 (en) 2006-07-12 2008-01-01 Mertec Llc Soybean cultivar 5900450
US7491873B1 (en) 2006-07-28 2009-02-17 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-02JR423003
US7554017B1 (en) 2006-07-28 2009-06-30 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-CL959411
US7521606B1 (en) 2006-07-28 2009-04-21 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-02JR423016
US7518038B1 (en) 2006-07-28 2009-04-14 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-01JR119448
US7470835B1 (en) 2006-07-28 2008-12-30 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar
US7518039B1 (en) 2006-07-28 2009-04-14 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-01JR119814
US7485782B1 (en) 2006-07-28 2009-02-03 Syngenta Participation Ag Soybean cultivar S06-02JR409114
US7592518B1 (en) 2006-07-28 2009-09-22 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-02RM018047
US7491872B1 (en) 2006-07-28 2009-02-17 Syngenta Participation Ag Soybean cultivar S06-02JR423005
FR2905195B1 (fr) 2006-08-23 2008-10-10 Dav Sa Module de commande, en particulier pour vehicule automobile
US7473823B1 (en) 2006-08-24 2009-01-06 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S06-SJ144056
US7381865B2 (en) 2006-09-06 2008-06-03 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety 98R31
US7456341B2 (en) 2006-10-17 2008-11-25 Hornbeck Seed Company Soybean cultivar 4211676
EP3067425A1 (en) 2006-10-31 2016-09-14 E. I. du Pont de Nemours and Company Soybean event dp-305423-1 and constructs for the generation thereof
US7388130B1 (en) 2007-01-17 2008-06-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4554257
US7880062B2 (en) 2007-01-17 2011-02-01 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4568207
US7414176B2 (en) 2007-01-17 2008-08-19 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4423586
US7498484B2 (en) 2007-01-17 2009-03-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4256323
US7385109B1 (en) 2007-01-17 2008-06-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4540394
US7385108B1 (en) 2007-01-17 2008-06-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4297661
US7598434B2 (en) 2007-01-17 2009-10-06 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4840308
US7388131B1 (en) 2007-01-17 2008-06-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4599695
US7381866B1 (en) 2007-01-18 2008-06-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4958786
US7385110B1 (en) 2007-01-18 2008-06-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4640250
US7351885B1 (en) 2007-01-18 2008-04-01 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4761767
US7399907B1 (en) 2007-01-18 2008-07-15 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4789516
US7521608B2 (en) 2007-01-18 2009-04-21 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4688589
US7355102B1 (en) 2007-01-18 2008-04-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4436909
US7554013B2 (en) 2007-01-18 2009-06-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4201823
US7388132B1 (en) 2007-01-18 2008-06-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4219527
US7525017B2 (en) 2007-01-18 2009-04-28 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4614131
US7351886B1 (en) 2007-01-18 2008-04-01 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4812469
US7501560B2 (en) 2007-01-19 2009-03-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4852004
US7528306B2 (en) 2007-01-19 2009-05-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4282159
US7414177B2 (en) 2007-01-19 2008-08-19 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4551757
US7632987B2 (en) 2007-01-19 2009-12-15 Monsanto Technology Llc Soybean variety 0341931
US7605305B2 (en) 2007-01-19 2009-10-20 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 2388028
US7518036B2 (en) 2007-01-19 2009-04-14 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4027271
US7482514B2 (en) 2007-01-19 2009-01-27 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 1686017
US7629510B2 (en) 2007-01-19 2009-12-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4174206
US7700844B2 (en) 2007-01-19 2010-04-20 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4991629
US7557269B2 (en) 2007-01-19 2009-07-07 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 1335025
US7629509B2 (en) 2007-01-19 2009-12-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4158090
US7525028B2 (en) 2007-01-19 2009-04-28 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4274171
US7649129B2 (en) 2007-01-19 2010-01-19 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4305498
US7601896B2 (en) 2007-01-19 2009-10-13 D&Pl Technology Holding Company, Llc Soybean cultivar 2387029
US7595435B2 (en) 2007-01-20 2009-09-29 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4953710
US7385111B1 (en) 2007-01-20 2008-06-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4589609
US7385112B1 (en) 2007-01-20 2008-06-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4367308
US7390938B1 (en) 2007-01-20 2008-06-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4735486
US7622642B2 (en) 2007-01-20 2009-11-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4857548
US7394000B1 (en) 2007-01-22 2008-07-01 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4062885
US7468474B2 (en) 2007-01-22 2008-12-23 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4427363
US7326832B1 (en) 2007-01-22 2008-02-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4502135
US7396983B1 (en) 2007-01-22 2008-07-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4959932
US7390939B1 (en) 2007-01-22 2008-06-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4092390
US7385113B1 (en) 2007-01-22 2008-06-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4896902
US7355103B1 (en) 2007-01-22 2008-04-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4766295
US7498485B2 (en) 2007-01-22 2009-03-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4676311
US7321082B1 (en) 2007-01-22 2008-01-22 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4353363
US7405349B1 (en) 2007-01-22 2008-07-29 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4684181
US20080178343A1 (en) 2007-01-23 2008-07-24 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety d0061501
US7390940B1 (en) 2007-01-23 2008-06-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4858197
US7504564B2 (en) 2007-01-23 2009-03-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4835953
US7371938B1 (en) 2007-01-23 2008-05-13 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4008211
US7329801B1 (en) 2007-01-23 2008-02-12 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4142393
US7375262B1 (en) 2007-01-23 2008-05-20 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4440685
US7368637B1 (en) 2007-01-23 2008-05-06 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4778469
US7531719B2 (en) 2007-01-23 2009-05-12 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4938051
US7498486B2 (en) 2007-01-23 2009-03-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety 4880500
US20080178345A1 (en) 2007-01-24 2008-07-24 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety d0069201
US20080178344A1 (en) 2007-01-24 2008-07-24 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety d0063801
US20080178320A1 (en) 2007-01-24 2008-07-24 Monsanto Technology, L.L.C. Soybean variety d0064801
US7385114B1 (en) 2007-02-02 2008-06-10 Soygenetics, Llc Soybean cultivar SG4377NRR
US7692069B2 (en) 2007-02-02 2010-04-06 M.S. Technologies Llc Soybean cultivar SG3865N
US7439422B2 (en) 2007-02-27 2008-10-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6600375
US7442860B2 (en) 2007-02-27 2008-10-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6421326
US7378577B1 (en) 2007-02-27 2008-05-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6141287
US7385115B1 (en) 2007-02-27 2008-06-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6723322
US7525018B2 (en) 2007-02-27 2009-04-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6733322
US7560620B1 (en) 2007-02-27 2009-07-14 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S07-03KL016279
US7453028B2 (en) 2007-02-27 2008-11-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060077
US7414178B1 (en) 2007-02-27 2008-08-19 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S07-02KG294306
US7560621B1 (en) 2007-02-27 2009-07-14 Syngenta Participations Ag Soybean cultivar S07-03JR108674
US7525019B2 (en) 2007-02-27 2009-04-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060293
US7411114B1 (en) 2007-02-27 2008-08-12 Bowers Glenn R Soybean cultivar S07-02KG294307
US20070136856A1 (en) 2007-02-28 2007-06-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB49V07
US7498487B2 (en) 2007-02-28 2009-03-03 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB54X07
US7544864B2 (en) 2007-02-28 2009-06-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB31J07
US7525022B2 (en) 2007-02-28 2009-04-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB21N07
US7528299B2 (en) 2007-02-28 2009-05-05 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB35X07
US20070136879A1 (en) 2007-02-28 2007-06-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB32S07
US7482515B2 (en) 2007-02-28 2009-01-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB19Z07
US7435880B2 (en) 2007-02-28 2008-10-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB18J07
US7521603B2 (en) 2007-02-28 2009-04-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB03Q07
US7442861B2 (en) 2007-02-28 2008-10-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB42K07
US7511195B2 (en) 2007-02-28 2009-03-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB54V07
US7511194B2 (en) 2007-02-28 2009-03-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB25E07
US20070136844A1 (en) 2007-02-28 2007-06-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB38S07
US7432424B2 (en) 2007-02-28 2008-10-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB33G07
US7435879B2 (en) 2007-02-28 2008-10-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB40Y07
US20070136865A1 (en) 2007-02-28 2007-06-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB18K07
US20070136853A1 (en) 2007-02-28 2007-06-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB48W07
US7432423B2 (en) 2007-02-28 2008-10-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB31H07
US20070136880A1 (en) 2007-02-28 2007-06-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB34Q07
US7495154B2 (en) 2007-02-28 2009-02-24 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB32J07
US7399908B2 (en) 2007-02-28 2008-07-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB37J07
US7511196B2 (en) 2007-02-28 2009-03-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB57E07
US7470834B2 (en) 2007-02-28 2008-12-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB26X07
US7525021B2 (en) 2007-02-28 2009-04-28 Pioneer Hi-Bred Internaitonal, Inc. Soybean variety XB17U07
US7525023B2 (en) 2007-02-28 2009-04-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB28K07
US7632988B2 (en) 2007-02-28 2009-12-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB04E07
US20070136882A1 (en) 2007-02-28 2007-06-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB37M07
US7511192B2 (en) 2007-02-28 2009-03-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB15B07
US20070130652A1 (en) 2007-02-28 2007-06-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB31M07
US7579522B2 (en) 2007-02-28 2009-08-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB44G07
US7601897B2 (en) 2007-02-28 2009-10-13 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB48X07
US7470833B2 (en) 2007-02-28 2008-12-30 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB23L07
US20070226832A1 (en) 2007-02-28 2007-09-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB34D07
US7485778B2 (en) 2007-02-28 2009-02-03 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB28E07
US7525024B2 (en) 2007-02-28 2009-04-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB35F07
US20070130650A1 (en) 2007-02-28 2007-06-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB25S07
US7432422B2 (en) 2007-02-28 2008-10-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB30G07
US7525020B2 (en) 2007-02-28 2009-04-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB12R07
US7435881B2 (en) 2007-02-28 2008-10-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB18M07
US20070226833A1 (en) 2007-02-28 2007-09-27 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB34L07
US7501561B2 (en) 2007-02-28 2009-03-10 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB40X07
US20070245429A1 (en) 2007-02-28 2007-10-18 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB37L07
US7518037B2 (en) 2007-02-28 2009-04-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB02K07
US7521602B2 (en) 2007-02-28 2009-04-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB38W07
US7547822B2 (en) 2007-02-28 2009-06-16 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB41J07
US20070136863A1 (en) 2007-02-28 2007-06-14 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB17W07
US7432421B2 (en) 2007-02-28 2008-10-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB30E07
US7511193B2 (en) 2007-02-28 2009-03-31 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB15E07
US20070130646A1 (en) 2007-02-28 2007-06-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean Variety XB06M07
US7514601B2 (en) 2007-02-28 2009-04-07 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB19E07
US7566819B2 (en) 2007-02-28 2009-07-28 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 98Y11
US7528300B2 (en) 2007-02-28 2009-05-05 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB52Q07
US7632989B2 (en) 2007-02-28 2009-12-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB34R07
US7388133B2 (en) 2007-02-28 2008-06-17 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB42H07
US7479581B2 (en) 2007-02-28 2009-01-20 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB40K07
US7572955B2 (en) 2007-02-28 2009-08-11 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB11J07
US7521604B2 (en) 2007-02-28 2009-04-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB35S07
US7423202B2 (en) 2007-02-28 2008-09-09 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB39E07
US7629505B2 (en) 2007-02-28 2009-12-08 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB49Q07
US7485779B2 (en) 2007-02-28 2009-02-03 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB31R07
US7521601B2 (en) 2007-02-28 2009-04-21 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB23V07
US7569749B2 (en) 2007-03-01 2009-08-04 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB46V07
US7498488B2 (en) 2007-03-01 2009-03-03 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB47R07
US8134048B2 (en) 2007-03-26 2012-03-13 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6114011
US7563953B2 (en) 2007-03-26 2009-07-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6836085
US7345228B1 (en) 2007-03-26 2008-03-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean Cultivar 6548193
US7442863B2 (en) 2007-03-26 2008-10-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6434385
US7345227B1 (en) 2007-03-26 2008-03-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6440261
US7572956B2 (en) 2007-03-26 2009-08-11 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6139105
US7485780B2 (en) 2007-03-26 2009-02-03 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6345184
US7342151B1 (en) 2007-03-26 2008-03-11 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060291
US7459609B2 (en) 2007-03-26 2008-12-02 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6035184
US7332656B1 (en) 2007-03-26 2008-02-19 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6134466
US7514602B2 (en) 2007-03-26 2009-04-07 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6635047
US7442862B2 (en) 2007-03-26 2008-10-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060295
US7777103B2 (en) 2007-03-26 2010-08-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6900358
US7563954B2 (en) 2007-03-28 2009-07-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050229
US7605306B2 (en) 2007-04-02 2009-10-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060298
US7834252B2 (en) 2007-04-02 2010-11-16 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6137445
US7514603B2 (en) 2007-04-02 2009-04-07 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6917445
US7649126B2 (en) 2007-04-02 2010-01-19 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6111333
US7592513B2 (en) 2007-04-02 2009-09-22 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6935331
US7579524B2 (en) 2007-04-02 2009-08-25 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6819456
US7786357B2 (en) 2007-04-02 2010-08-31 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6819331
US7649127B2 (en) 2007-04-02 2010-01-19 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6135319
US7557271B2 (en) 2007-04-02 2009-07-07 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060297
US7453029B2 (en) 2007-04-06 2008-11-18 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5723264
US7592514B2 (en) 2007-04-06 2009-09-22 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050225
US7728196B2 (en) 2007-04-06 2010-06-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6419156
US7880063B2 (en) 2007-04-06 2011-02-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6342078
US7582810B2 (en) 2007-04-06 2009-09-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060296
US7579525B2 (en) 2007-04-06 2009-08-25 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6449315
US7560616B2 (en) 2007-04-06 2009-07-14 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6012078
US7442864B1 (en) 2007-04-13 2008-10-28 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6326393
US7488868B2 (en) 2007-04-13 2009-02-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar Q0073801
US7408097B1 (en) 2007-04-13 2008-08-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6701475
US7446244B1 (en) 2007-04-13 2008-11-04 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6408448
US7557272B2 (en) 2007-04-20 2009-07-07 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6719022
US7803994B2 (en) 2007-04-20 2010-09-28 Mertec Llc Soybean cultivar 6547272
US7884266B2 (en) 2007-04-20 2011-02-08 Mertec Llc Soybean cultivar 6238359
US7531720B2 (en) 2007-04-20 2009-05-12 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050224
US7572957B2 (en) 2007-04-20 2009-08-11 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6928331
US7507877B2 (en) 2007-04-20 2009-03-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6636454
US7528302B2 (en) 2007-04-20 2009-05-05 Mertec Llc Soybean cultivar 6929431
US7488869B2 (en) 2007-04-20 2009-02-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6226454
US7531721B2 (en) 2007-04-20 2009-05-12 Stine Steel Farm, Inc. Soybean cultivar 6044483
US7563955B2 (en) 2007-04-20 2009-07-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6719331
US7622643B2 (en) 2007-04-20 2009-11-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6265047
US7371939B1 (en) 2007-04-20 2008-05-13 Mertec Llc Soybean cultivar 6223392
US7465854B2 (en) 2007-04-20 2008-12-16 Mertec Llc Soybean cultivar 6703392
US7579526B2 (en) 2007-04-20 2009-08-25 Mertec Llc Soybean cultivar 6439359
US7579527B2 (en) 2007-04-20 2009-08-25 Mertec Llc Soybean cultivar 5343260
US7528301B2 (en) 2007-04-20 2009-05-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 5826056
US7385118B1 (en) 2007-04-20 2008-06-10 Mertec Llc Soybean cultivar 6424090
US7626087B2 (en) 2007-04-25 2009-12-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060294
US7642408B2 (en) 2007-04-25 2010-01-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6928285
US7557273B2 (en) 2007-04-25 2009-07-07 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6943322
US7626088B2 (en) 2007-04-25 2009-12-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 17731225
US7507878B2 (en) 2007-04-25 2009-03-24 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 6736054
US7491871B2 (en) 2007-04-25 2009-02-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S060299
US7446245B1 (en) 2007-05-09 2008-11-04 Mertec Llc Soybean cultivar 6549250
US7592515B2 (en) 2007-05-09 2009-09-22 Mertec Llc Soybean cultivar 6910450
US7446246B1 (en) 2007-05-09 2008-11-04 Mertec Llc Soybean cultivar 6223012
MX2009012120A (es) 2007-05-09 2010-02-12 Dow Agrosciences Llc Genes novedosos con resistencia a herbicidas.
US20080313757A1 (en) 2007-06-12 2008-12-18 Monsanto Technology Llc Soybean variety d4256958
US7622644B2 (en) 2007-06-12 2009-11-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4201139
US7619139B2 (en) 2007-06-12 2009-11-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4572906
US7566820B2 (en) 2007-06-12 2009-07-28 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4208814
US7612259B2 (en) 2007-06-12 2009-11-03 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4127789
US7629506B2 (en) 2007-06-12 2009-12-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4422957
US7572958B2 (en) 2007-06-12 2009-08-11 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4361423
US7642409B2 (en) 2007-06-12 2010-01-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4120384
US7557274B2 (en) 2007-06-12 2009-07-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4301279
US7557275B2 (en) 2007-06-28 2009-07-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4210110
US7554015B2 (en) 2007-06-28 2009-06-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4483789
US7569751B2 (en) 2007-06-28 2009-08-04 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4523081
US7626089B2 (en) 2007-06-28 2009-12-01 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4311702
US7592516B2 (en) 2007-06-28 2009-09-22 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4328762
US7560617B2 (en) 2007-07-03 2009-07-14 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4253854
US7554016B2 (en) 2007-07-03 2009-06-30 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4923560
US7569752B2 (en) 2007-07-03 2009-08-04 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4902530
US7550653B2 (en) 2007-07-03 2009-06-23 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4367012
US7700843B2 (en) 2007-07-03 2010-04-20 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4021792
US7629508B2 (en) 2007-07-10 2009-12-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4012368
US7557277B2 (en) 2007-07-10 2009-07-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4526223
US7622645B2 (en) 2007-07-10 2009-11-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4063284
US7557276B2 (en) 2007-07-10 2009-07-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4556201
US7626091B2 (en) 2007-07-10 2009-12-01 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4159630
US7615688B2 (en) 2007-07-10 2009-11-10 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4713125
US7629507B2 (en) 2007-07-10 2009-12-08 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4201483
US7626090B2 (en) 2007-07-10 2009-12-01 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4470236
US7642410B2 (en) 2007-07-10 2010-01-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4452019
US7592517B2 (en) 2007-07-10 2009-09-22 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4463892
US20090019188A1 (en) * 2007-07-11 2009-01-15 Igt Processing input for computing systems based on the state of execution
US7619141B2 (en) 2007-07-12 2009-11-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4825495
US7652197B2 (en) 2007-07-12 2010-01-26 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4233569
US7514606B2 (en) 2007-07-12 2009-04-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4696658
US7521605B2 (en) 2007-07-12 2009-04-21 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4258962
US20090019581A1 (en) 2007-07-12 2009-01-15 Monsanto Technology Llc Soybean variety d4865324
US7525025B2 (en) 2007-07-12 2009-04-28 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4253681
US7619143B2 (en) 2007-07-12 2009-11-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4223057
US7514607B2 (en) 2007-07-12 2009-04-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4253969
US7514604B2 (en) 2007-07-12 2009-04-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4789254
US7514605B2 (en) 2007-07-12 2009-04-07 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4256925
US7622646B2 (en) 2007-07-12 2009-11-24 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4203144
US7655839B2 (en) 2007-07-12 2010-02-02 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4682156
US7619140B2 (en) 2007-07-12 2009-11-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4659251
US7642411B2 (en) 2007-07-12 2010-01-05 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4925614
US7619142B2 (en) 2007-07-12 2009-11-17 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4102536
US7652199B2 (en) 2007-07-13 2010-01-26 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4456885
US7649128B2 (en) 2007-07-13 2010-01-19 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4521369
US7566821B2 (en) 2007-07-13 2009-07-28 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4422801
US7531722B2 (en) 2007-07-13 2009-05-12 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4266582
US7560619B2 (en) 2007-07-13 2009-07-14 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4102367
US7652198B2 (en) 2007-07-13 2010-01-26 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4698013
US7560618B2 (en) 2007-07-13 2009-07-14 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4520980
US7572960B2 (en) 2007-07-13 2009-08-11 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4637114
US7659453B2 (en) 2007-07-13 2010-02-09 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4356652
US20090055957A1 (en) 2007-08-20 2009-02-26 Monsanto Technology Llc Soybean variety d4325666
US7692070B2 (en) 2007-08-20 2010-04-06 Monsanto Technology Llc Soybean variety D4125897
US20090055955A1 (en) 2007-08-20 2009-02-26 Monsanto Technology Llc Soybean variety d4698573
US7880064B2 (en) 2007-08-22 2011-02-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean Cultivar 6540220
US7939723B2 (en) 2007-08-22 2011-05-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S050228
US8809636B2 (en) 2007-08-22 2014-08-19 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar S060292
WO2009064652A1 (en) 2007-11-15 2009-05-22 Monsanto Technology Llc Soybean plant and seed corresponding to transgenic event mon87701 and methods for detection thereof
US7638682B2 (en) 2007-12-07 2009-12-29 The Ohio State University Research Foundation Soybean cultivar HFPR-5
US7557278B1 (en) 2007-12-12 2009-07-07 Mertec, Llc Soybean cultivar SG3870NRR
US8044268B2 (en) 2008-02-07 2011-10-25 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 93Y10
US7759552B2 (en) 2008-02-20 2010-07-20 Mertec Llc Soybean cultivar 26034631
US7759551B2 (en) 2008-02-20 2010-07-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7429331
US7906711B2 (en) 2008-02-21 2011-03-15 Mertec Llc Soybean cultivar 6214260
US7759553B2 (en) 2008-02-21 2010-07-20 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S070152
US7728198B2 (en) 2008-02-22 2010-06-01 Mertec Llc Soybean cultivar 7811336
US7880065B2 (en) 2008-02-22 2011-02-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S070150
US7728199B2 (en) 2008-02-27 2010-06-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7821295
US7728200B2 (en) 2008-02-27 2010-06-01 Mertec Llc Soybean cultivar 7925118
US7692071B2 (en) 2008-02-28 2010-04-06 Mertec Llc Soybean cultivar 306924721
US7728201B2 (en) 2008-02-28 2010-06-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7614385
US7642412B2 (en) 2008-02-29 2010-01-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S070157
US7705207B2 (en) 2008-03-03 2010-04-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7043182
US7705208B2 (en) 2008-03-04 2010-04-27 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7143182
US7642413B2 (en) 2008-03-05 2010-01-05 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7243182
US20090226597A1 (en) 2008-03-10 2009-09-10 Rodolfo Luis Rossi Soybean Cultivar 2N2V58015
US7642414B2 (en) 2008-03-11 2010-01-05 Mertec Llc Soybean cultivar 7317090
US7642415B2 (en) 2008-03-12 2010-01-05 Mertec Llc Soybean cultivar 7549450
US7732671B2 (en) 2008-03-13 2010-06-08 Mertec Llc Soybean cultivar 7041461
US7642416B2 (en) 2008-03-14 2010-01-05 Mertec Llc Soybean cultivar 7013345
US8629331B2 (en) 2008-03-24 2014-01-14 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 7113111
US7582812B2 (en) 2008-03-25 2009-09-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety 90Y40
US7589260B1 (en) 2008-03-25 2009-09-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc Soybean variety XB05J08
US7589261B1 (en) 2008-03-25 2009-09-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc Soybean variety XB41M08
US7838734B2 (en) 2008-03-25 2010-11-23 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7511119
US7598435B1 (en) 2008-03-25 2009-10-06 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB33U08
US7589259B1 (en) 2008-03-25 2009-09-15 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB33T08
US7582811B1 (en) 2008-03-25 2009-09-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB29M08
US7586025B1 (en) 2008-03-25 2009-09-08 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB30Y08
US7592519B1 (en) 2008-03-25 2009-09-22 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB27D08
US7582813B1 (en) 2008-03-25 2009-09-01 Pioneer Hi-Bred International, Inc. Soybean variety XB40U08
US7642420B2 (en) 2008-03-25 2010-01-05 Pioneer Hi-Bred Internaitonal, Inc. Soybean variety 92M22
US7728202B2 (en) 2008-03-26 2010-06-01 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S070158
US8003857B2 (en) 2008-03-27 2011-08-23 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7509171
US7799973B2 (en) 2008-03-28 2010-09-21 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 26074414
US8729345B2 (en) 2008-03-31 2014-05-20 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar S070160
US8742210B2 (en) 2008-04-01 2014-06-03 Monsanto Technology Llc Soybean cultivar 7535357
US7943824B2 (en) 2008-04-02 2011-05-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar S070159
US7939725B2 (en) 2008-04-03 2011-05-10 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7311153
US7943826B2 (en) 2008-04-04 2011-05-17 Stine Seed Farm, Inc. Soybean cultivar 7925084
US7989680B2 (en) 2008-04-07 2011-08-02 Mertec Llc Soybean cultivar 7631014
US7939726B2 (en) 2008-04-07 2011-05-10 Mertec Llc Soybean cultivar 7431014
AU2010203708B2 (en) 2009-01-07 2015-06-25 Basf Agrochemical Products B.V. Soybean event 127 and methods related thereto
RU2403807C2 (ru) * 2009-01-23 2010-11-20 Государственное научное учреждение Всероссийский научно-исследовательский институт сои Российской академии сельскохозяйственных наук Способ приготовления белковых продуктов
PH12012501096A1 (en) 2009-11-23 2012-10-29 BASF Agricultural Solutions Seed US LLC Elite event ee-gm3 and methods and kits for identifying such event in biological samples
NZ600375A (en) 2009-11-23 2014-10-31 Bayer Cropscience Nv Herbicide tolerant soybean plants and methods for identifying same

Also Published As

Publication number Publication date
KR101951958B1 (ko) 2019-02-25
CN102858996A (zh) 2013-01-02
US20110162098A1 (en) 2011-06-30
US10494681B2 (en) 2019-12-03
UY33050A (es) 2011-06-30
JP2016195597A (ja) 2016-11-24
RU2639530C2 (ru) 2017-12-21
EP2504454A4 (en) 2013-10-23
JP6470704B2 (ja) 2019-02-13
NZ600376A (en) 2014-10-31
US8642748B2 (en) 2014-02-04
PL2504454T3 (pl) 2019-06-28
AU2010321584A1 (en) 2012-06-14
RU2012125962A (ru) 2013-12-27
EP2504454A1 (en) 2012-10-03
US20170114419A1 (en) 2017-04-27
US8592650B2 (en) 2013-11-26
JP2013511293A (ja) 2013-04-04
WO2011063411A1 (en) 2011-05-26
PH12012501096A1 (en) 2012-10-29
SI2504454T1 (sl) 2020-06-30
BR112012012385A2 (pt) 2018-05-15
AR118912A2 (es) 2021-11-10
AR080946A1 (es) 2012-05-23
KR20120107476A (ko) 2012-10-02
CA2781557A1 (en) 2011-05-26
US20130165642A1 (en) 2013-06-27
US20120304330A1 (en) 2012-11-29
EP2504454B1 (en) 2018-11-21
CN102858996B (zh) 2016-01-13
CA2781557C (en) 2018-01-09
AU2010321584C1 (en) 2016-12-22
MX2012005937A (es) 2012-09-12
AU2010321584B2 (en) 2016-03-24
US9631202B2 (en) 2017-04-25

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10494681B2 (en) Elite event EE-GM3 and methods and kits for identifying such event in biological samples
AU2010321586B2 (en) Herbicide tolerant soybean plants and methods for identifying same
EP3445859B1 (en) Elite event ee-gh7 and methods and kits for identifying such event in biological samples
ES2712773T3 (es) Evento Elite EE-GM3 y métodos y kits para identificar dicho evento en muestras biológicas