RS59113B1 - Kombinovane terapije za melanom koje uključuju davanje kobimetiniba i vemurafiniba - Google Patents

Description

OPIS

UPUĆIVANJE NA POVEZANE APLIKACIJE

[0001] Ovom prijavom se traži prioritet u odnosu na U.S. patentnu prijavu br.

61/684,673, podnetu 17. avgusta 2012. godine, US patentnu prijavu br. 61/705,575, podnetu 25. septembra 2012. godine, US patentnu prijavu br.61/706,026, podnetu 26. septembra 2012, US patentnu prijavu br. 61/722,725, podnetu 5. novembra 2012, i US patentnu prijavu br.

61/780,708, podnetu 13. marta 2013. godine.

OBLAST PRONALASKA

[0002] Predmetni pronalazak se generalno odnosi na oblast molekularne biologije i transdukcije signala. Konkretnije, pronalazak se odnosi na terapije za lečenje melanoma.

OSNOVA

[0003] Kancer ostaje jedna od najsmrtonosnijih pretnji po ljudsko zdravlje. Širom sveta, broj slučajeva melanoma raste brzinom koja je veća nego kod bilo kog drugog humanog kancera (Roberts et al., Br. J. Dermatol (2002) 146: 7-17, Boyle et al., Ann oncol (2004) 15:5-6). Dok se godišnje stope učestalosti razlikuju po populacijama, uopšteno, porast učestalosti je bio veći kod populacija pripadnika bele rase sa svetlom kožom (oko 3-7% godišnje). Procenjuje se da će se svake godine širom sveta pojaviti oko 132.000 novih slučajeva melanoma, i da će se desiti oko 37.000 smrtnih slučajeva od melanoma. U SAD je u 2009. godini bilo 68.720 novih slučajeva i 8650 smrtnih slučajeva od melanoma (Jemal et al., CA Cancer J Clin (2009) 59:225-49). Klinički ishod za pacijente sa melanomom u velikoj meri zavisi od stadijuma prilikom manifestovanja. Metastatski melanom je jedan od najsmrtonosnijih vrsta kancera. Uprkos nedavnim uspesima u razvoju novih terapija za melanom, velika većina pacijenata na kraju podlegne ovoj bolesti, stoga ostaje značajna neispunjena potreba za poboljšanjem ishoda u ovom segmentu populacije pacijenata sa melanomom.

[0004] Vemurafenib je odobren od strane FDA za lečenje pacijenata sa neresektabilnim ili metastatskim melanomom koji je pozitivan na BRAFV600E mutaciju, korišćenjem cobas® 4800 BRAF V600 testa mutacije (vidi ZELBORAF® [vemurafenib] umetak u pakovanju). Vemurafenib je bio povezan sa smanjenjem rizika od smrti od 63% i smanjenjem rizika od progresije bolesti ili smrti od 74%, u poređenju sa dakarbazinom (Chapman et al., NEJM (2011) 364 (26):2507-16. Štaviše, lečenje vemurafenibom je dovelo do stope odgovora koja je konstantno veća od 50%, i medijane ukupnog preživljavanja od 14 do 16 meseci (Flaherty et al., NEJM (2010) 363:809-819; Chapman et al., id.; Sosman et al., NEJM (2012) 366(8):707). Baudy et al. EJNMMI Research 2012, 2:22 otkrivaju da F-FDG može biti senzitivni farmakodinamički biomarker za procenu efikasnosti vemurafeniba. Takođe je objavljeno da su u toku klinička ispitivanja koja kombinuju vemurafenib i GDC-0973. Baudy et al ne otkrivaju specifični režim lečenja i njegove iznenađujuće efekte, u skladu sa predmetnim pronalaskom.

SAŽETAK PRONALASKA

Opseg pronalaska je definisan patentnim zahtevima. Bilo koja tema koja se nalazi izvan opsega patentnih zahteva daje se samo u informativne svrhe.

[0005] Predmetni pronalazak obezbeđuje kombinovane terapije za lečenje patološkog stanja, kao što je kancer, gde je inhibitor MEK kombinovan sa BRAF inhibitorom, čime se obezbeđuje značajna antitumorska aktivnost. Naročito, ovaj pronalazak daje podatke iz kliničkog ispitivanja BRAF inhibitora u kombinaciji sa inhibitorom MEK kod pacijenata koji imaju neresektabilni ili metastatski melanom pozitivan na BRAF<V600>mutaciju.

[0006] U jednom aspektu, objavljeni su postupci za lečenje (npr. terapeutsko lečenje) pacijenta (naizmenično se ovde koristi izraz "pojedinac") koji ima karcinom pozitivan na BRAF<V600>mutaciju, koji obuhvataju davanje pacijentu (i) prve kompozicije koja se sastoji od [3,4-difluor-2-[(2-fluor-4-jodfenil)amino]fenil][3-hidroksi-3-[(2S)-2-piperidinil]-1-azetidinil]metanona (Jedinjenje II) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli; i (ii) druge kompozicije koja sadrži propan-1-sulfonsku kiselinu {3-[5-(4-hlorfenil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-karbonil]-2,4-difluor-fenil}-amid (Jedinjenje I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa.

[0007] U jednom aspektu, objavljeni su postupci za lečenje (npr. terapeutsko lečenje) pacijenta koji ima neresektabilni ili metastatski melanom pozitivan na BRAF<V600>mutaciju, koji se sastoje od davanja pacijentu (i) prve kompozicije koja sadrži jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg (npr. jedna tableta od 60 mg), od 1. do 21. dana 28-dnevnog cilusa; i (ii) druge kompozicije koja sadrži jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg (npr. četiri tablete od 240 mg) dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa.

[0008] U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so je suštinski u amorfnom obliku. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so je u amorfnom obliku. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so se nalazi u čvrstom molekulskom kompleksu formiranom sa hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinatom, tako da je imobilisano u svom amorfnom obliku. U nekim otelotvorenjima, količine Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i hidroksipropil metil celuloze acetat sukcinata (HPMC-AS) u pomenutom kompleksu su u odnosu od oko 1:9, odnosno do oko 5:5. U nekim otelotvorenjima, količine Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i hidroksipropil metil celuloze acetat sukcinata u navedenom kompleksu su u odnosu od oko 2:8, odnosno do oko 4:6. U nekim otelotvorenjima, količine Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i hidroksipropil metil celuloze acetat sukcinata u pomenutom kompleksu su u odnosu od oko 3:7. U nekim otelotvorenjima, druga kompozicija sadrži mešavinu u kojoj je oko 97 mas.% smeše gorepomenuti čvrsti molekulski kompleks i oko 3 mas.% smeše je silicijum dioksid. U nekim otelotvorenjima, druga kompozicija sadrži suspenziju gorepomenutog čvrstog molekulskog kompleksa u farmaceutski prihvatljivom nosaču. U nekim otelotvorenjima, druga kompozicija sadrži tabletu koja sadrži čvrsti molekulski kompleks Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i HPMC-AS. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I je obezbeđeno kao tableta. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I je obezbeđeno kao tableta od 240 mg (tj. tableta koja sadrži 240 mg Jedinjenja I). U nekim otelotvorenjima, jedinjenje 1 je obezbeđeno kao tableta koja se prodaje kao ZELBORAF®.

[0009] U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija koja sadrži Jedinjenje II sadrži jedan ili više sastojaka od laktoze monohidrata, mikrokristalne celuloze, kroskarmeloze natrijuma i magnezijum stearata. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II je obezbeđeno kao tableta koja sadrži laktozu monohidrat, mikrokristalnu celulozu, kroskarmelozu natrijum i magnezijum stearat. U nekim otelotvorenjima, tableta sadrži oblogu tablete koja sadrži polivinil alkohol, delimično hidrolizovan, titanijum dioksid, polietilen glikol 3350 i talk. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II je obezbeđeno kao tableta od 20 mg, kao tableta od 40 mg, ili kao tableta od 60 mg (tj. tableta koja sadrži 60 mg Jedinjenja II). U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II je obezbeđeno kao tableta od 60 mg. U nekim otelotvorenjima, tableta od 60 mg je obezbeđena u kartici za pilule ili u blister pakovanju.

[0010] U nekim otelotvorenjima, doziranje može biti istovremeno ili sekvencijalno, a primena može biti kao kombinovana formulacija ili kao odvojene formulacije. U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija (koja sadrži Jedinjenje II) se primenjuje sekvencijalno sa drugom kompozicijom (koja sadrži Jedinjenje I) (uključujući, ali se ne ograničavajući na sledeće: daje se jedna od više tableta koje sadrže Jedinjenje I, zatim se daje jedna ili više tableta Jedinjenja II, daje se jedna ili više tableta sa Jedinjenjem I, zatim jedna ili više tableta sa Jedinjenjem II, zatim jedna ili više tableta Jedinjenja I). U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija se daje pre druge kompozicije. U nekim otelotvorenjima, druga kompozicija se daje pre prve kompozicije. U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija se daje istovremeno sa drugom kompozicijom. U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija se daje istovremeno sa drugom kompozicijom, nakon čega sledi primena prvog jedinjenja. U nekim otelotvorenjima, prva i druga kompozicija su obezbeđene kao kombinovani preparat (u nekim otelotvorenjima, kao tableta). U nekim otelotvorenjima, prva i druga kompozicija su koformulisane (npr. kao farmaceutska formulacija). U nekim otelotvorenjima, druga doza od 960 mg (npr. četiri tablete od 240 mg) Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli se daje oko 12 sati nakon prve doze od 960 mg (npr. četiri tablete od 240 mg) Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, i Jedinjenje II ili njegova farmaceutski prihvatljiva so se daju oralno, sa hranom ili bez hrane. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, i Jedinjenje II ili njegova farmaceutski prihvatljiva so se daju oralno, sa hranom. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, i Jedinjenje II ili njegova farmaceutski prihvatljiva so se daju oralno, bez hrane.

[0011] U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom je melanom pozitivan na BRAF<V600>mutaciju. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom je metastatski melanom. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom je neresektabilni melanom. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom pacijenta nije prethodno lečen (npr. vemurafenibom ili BRAF inhibitorom). U nekim otelotvorenjima, pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom je prethodno lečen (u nekim otelotvorenjima, bez prethodnog lečenja BRAF inhibitorom).

[0012] U nekim otelotvorenjima, BRAF<V600>mutacija je određena korišćenjem postupka koji obuhvata (a) izvođenje PCR ili sekvenciranje na nukleinskoj kiselini (npr. DNK, npr. genomska DNK) ekstrahovanoj iz uzorka pacijentovog melanoma i (b) određivanje ekspresije BRAF<V600>u uzorku. U nekim otelotvorenjima, uzorak melanoma je fiksiran formalinom i ubačen u parafin. U nekim otelotvorenjima, BRAF<V600>mutacija je određena upotrebom postupka koji obuhvata (a) izolovanje DNK (npr. genomske DNK) iz uzorka melanoma pacijenta, (b) izvođenje PCR-a ili sekvenciranje na nukleinskoj kiselini (npr. DNK) ekstrahovanoj iz uzorka melanoma pacijenta; i (c) određivanje ekspresije BRAF<V600>u uzorku. U nekim otelotvorenjima, uzorak melanoma je fiksiran formalinom i ubačen u parafin.

[0013] U drugom aspektu, prikazani su postupci produženja trajanja odgovora na lečenje (npr. terapeutsko lečenje) kod pacijenta koji ima neresektabilni ili metastatski melanom (npr. neresektabilni ili metastatski melanom pozitivan na BRAF<V600>mutaciju) koji se sastoje od davanja pacijentu (i) prve kompozicije koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa; i (ii) druge kompozicije koja sadrži Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, svakog dana 28-dnevnog ciklusa.

[0014] U drugom otelotvorenju, prikazani su postupci za odlaganje ili sprečavanje razvoja rezistencije na lečenje (npr. rezistencija na lečenje BRAF inhibitorom) kod pacijenta koji ima neresektabilni ili metastatski melanom (npr. neresektabilni ili metastatski melanom pozitivan na BRAF<V600>mutaciju) koji se sastoje od davanja pacijentu (i) Jedinjenja II ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa; i (ii) Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, svakog dana 28-dnevnog ciklusa.

[0015] U drugom aspektu, obezbeđeni su farmaceutski proizvodi koji sadrže (i) prvu kompoziciju koja sadrži [3,4-difluor-2-[(2-fluor-4-jodfenil) amino]fenil][3-hidroksi-3-[(2S)-2-piperidinil]-1-azetidinil]metanon (Jedinjenje II) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; i (ii) drugu kompoziciju koja sadrži propan-1-sulfonsku kiselinu {3-[5-(4-hlorfenil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-karbonil]-2,4-difluor-fenil}-amid (Jedinjenje I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so; kao kombinovani preparat za istovremenu ili sekvencijalnu upotrebu u lečenju neresektabilnog ili metastatskog melanoma pozitivnog na BRAF<V600>mutaciju, pri čemu se Jedinjenje II daje u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i pri čemu se Jedinjenje I primenjuje u dozi od 960 mg, dva puta dnevno svakog dana 28-dnevnog ciklusa, i gde je navedena primena za ljudske pacijente čiji neresektabilni ili metastatski melanom nije prethodno lečen.

[0016] U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so je suštinski u amorfnom obliku. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so je u amorfnom obliku. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so se nalazi u čvrstom molekulskom kompleksu formiranom sa hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinatom, tako da je imobilisano u svom amorfnom obliku. U nekim otelotvorenjima, količine Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i hhidroksipropil metil celuloza acetat sukcinata u navedenom kompleksu su u odnosu od oko 1:9, odnosno do oko 5:5. U nekim otelotvorenjima, količine Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i hidroksipropil metil celuloze acetat sukcinata u navedenom kompleksu su u odnosu od oko 2:8, odnosno do oko 4:6. U nekim otelotvorenjima, količine Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i hidroksipropil metil celuloze acetat sukcinata u pomenutom kompleksu su u odnosu od oko 3:7. U nekim otelotvorenjima, druga kompozicija sadrži mešavinu u kojoj je oko 97 mas.% smeše gorepomenuti čvrsti molekulski kompleks i oko 3 mas.% smeše je silicijum dioksid. U nekim otelotvorenjima, druga kompozicija sadrži suspenziju gorepomenutog čvrstog molekulskog kompleksa u farmaceutski prihvatljivom nosaču. U nekim otelotvorenjima, druga kompozicija sadrži tabletu koja sadrži čvrsti molekulski kompleks Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i HPMC-AS. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I je obezbeđeno kao tableta. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I je obezbeđeno kao tableta od 240 mg (tj. tableta koja sadrži 240 mg Jedinjenja I). U nekim otelotvorenjima, jedinjenje 1 je obezbeđeno kao tableta koja se prodaje kao ZELBORAF®.

[0017] U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija sadrži jednu ili više komponenti od laktoze monohidrata, mikrokristalne celuloze, kroskarmeloze natrijum i magnezijum stearata. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II je obezbeđeno kao tableta koja sadrži laktozu monohidrat, mikrokristalnu celulozu, kroskarmelozu natrijum i magnezijum stearat. U nekim otelotvorenjima, tableta sadrži oblogu tablete koja sadrži polivinil alkohol, delimično hidrolizovan, titanijum dioksid, polietilen glikol 3350 i talk. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II je obezbeđeno kao tableta od 20 mg, kao tableta od 40 mg, ili kao tableta od 60 mg. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II je obezbeđeno kao tableta od 60 mg.

[0018] U nekim otelotvorenjima, doziranje može biti istovremeno ili sekvencijalno, a primena može biti kao kombinovana formulacija ili kao odvojene formulacije. U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija (koja sadrži Jedinjenje II) se primenjuje sekvencijalno sa drugom kompozicijom (koja sadrži Jedinjenje I) (uključujući, ali se ne ograničavajući na sledeće: daje se jedna od više tableta koje sadrže Jedinjenje I, zatim se daje jedna ili više tableta Jedinjenja II, daje se jedna ili više tableta sa Jedinjenjem I, zatim jedna ili više tableta sa Jedinjenjem II, zatim jedna ili više tableta Jedinjenja I). U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija se daje pre druge kompozicije. U nekim otelotvorenjima, druga kompozicija se daje pre prve kompozicije. U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija se daje istovremeno sa drugom kompozicijom. U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija se daje istovremeno sa drugom kompozicijom, nakon čega sledi primena prvog jedinjenja. U nekim otelotvorenjima, prva i druga kompozicija su obezbeđene kao kombinovani preparat (u nekim otelotvorenjima, kao tableta). U nekim otelotvorenjima, prva i druga kompozicija su koformulisane (npr. kao farmaceutska formulacija). U nekim otelotvorenjima, druga doza od 960 mg (npr. četiri tablete od 240 mg) Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli se daje oko 12 sati nakon prve doze od 960 mg (npr. četiri tablete od 240 mg) Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, i Jedinjenje II ili njegova farmaceutski prihvatljiva so se daju oralno, sa hranom ili bez hrane. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, i Jedinjenje II ili njegova farmaceutski prihvatljiva so se daju oralno, sa hranom. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, i Jedinjenje II ili njegova farmaceutski prihvatljiva so se daju oralno, bez hrane.

[0019] U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom je melanom pozitivan na BRAF<V600E>mutaciju. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom je metastatski melanom. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom je neresektabilni melanom. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom pacijenta nije prethodno lečen (npr. vemurafenibom ili BRAF inhibitorom). U nekim otelotvorenjima, pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom je prethodno lečen (u nekim otelotvorenjima, bez prethodnog lečenja BRAF inhibitorom).

[0020] U nekim otelotvorenjima, BRAF<V600>mutacija je određena upotrebom postupka koji obuhvata (a) izvođenje PCR ili sekvenciranja na nukleinskoj kiselini (npr. DNK) ekstrahovanoj iz uzorka pacijentovog melanoma; i (b) određivanje ekspresije BRAF<V600>u uzorku. U nekim otelotvorenjima, uzorak melanoma je uzorak fiksiran formalinom i ubačen u parafin.

[0021] U drugom aspektu, obezbeđeni su postupci za izbor terapije za pacijenta sa neresektabilnim ili metastatskim melanomom, koji obuhvataju određivanje prisustva BRAF<V600>mutacije u uzorku pacijentovog neresektabilnog ili metastatskog melanoma, i izbor leka za kancer na osnovu prisustva BRAF<V600>mutacije. U nekim otelotvorenjima, pokazalo se da uzorak eksprimira BRAF<V600>mutaciju, i odabrano je lečenje kompozicijom koja sadrži Jedinjenje II u kombinaciji sa kompozicijom koja sadrži Jedinjenje I. U nekim otelotvorenjima, pacijent se leči od neresektabilnog ili metastatskog melanoma postupkom koja se sastoji od davanja pacijentu (i) prve kompozicije koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa; i (ii) druge kompozicije koja sadrži Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa.

[0022] U drugom aspektu, obezbeđeni su postupci za optimizaciju terapeutske efikasnosti koji obuhvataju utvrđivanje prisustva BRAF<V600>mutacije u pacijentovom uzorku neresektabilnog ili metastatskog melanoma, i izbor leka za kancer na osnovu prisustva BRAF<V600>mutacije. U nekim otelotvorenjima, pokazalo se da uzorak eksprimira BRAF<V600>mutaciju, i odabrano je lečenje prvom kompozicijom koja sadrži Jedinjenje II u kombinaciji sa drugom kompozicijom koja sadrži Jedinjenje I. U nekim otelotvorenjima, pacijent se leči od neresektabilnog ili metastatskog melanoma postupkom koja se sastoji od davanja pacijentu (i) prve kompozicije koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa; i (ii) druge kompozicije koja sadrži Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa.

[0023] U nekim otelotvorenjima bilo kog ovde opisanog pronalaska, prisustvo (u nekim otelotvorenjima, prisustvo ili odsustvo) BRAF<V600>mutacije se određuje procenom BRAF nukleinske kiseline. U nekim otelotvorenjima, prisustvo BRAF<V600>mutacije se određuje korišćenjem postupka odabranog od: lančane reakcije polimeraze (PCR) (uključujući, ali se ne ograničavajući na, kvantitativnu PCR u realnom vremenu i alelspecifičnu PCR), sekvenciranja (uključujući, ali se ne ograničavajući na Sangerovo sekvenciranje i/ili pirosekvenciranje), hibridizacije korišćenjem alel-specifičnih oligonukleotida, ekstenzije prajmera, alel-specifične ligacije ili tehnike elektroforetskog odvajanja (uključujući, ali se ne ograničavajući na konformacioni polimorfizam jednolančanih fragmenata (SSCP) i heterodupleks analizu) i analize 5' nukleaza. U nekim otelotvorenjima, prisustvo BRAF<V600>mutacije se određuje korišćenjem PCR ili sekvenciranja. U nekim otelotvorenjima, prisustvo BRAF<V600>mutacije se određuje postupkom koji obuhvata (a) izvođenje PCR na genomskoj DNK ekstrahovanoj iz uzorka melanoma pacijenta; i (b) određivanje ekspresije mutantnog BRAF polinukleotida sekvenciranjem PCR amplifikovane nukleinske kiseline. U nekim otelotvorenjima, prisustvo BRAF<V600>mutacije se određuje postupkom (a) hibridizacije prvog i drugog oligonukleotida na najmanje jednu varijantu BRAF ciljne sekvence, pri čemu je navedeni prvi oligonukleotid barem delimično komplementaran jednoj ili više varijanti ciljne sekvence i navedeni drugi oligonukleotid je barem delimično komplementaran jednoj ili više varijanti ciljne sekvence, i ima najmanje jedan interni selektivni nukleotid komplementaran samo jednoj varijanti ciljne sekvence; (b) produženja drugog oligonukleotida polimerazom nukleinske kiseline, pri čemu je navedena polimeraza sposobna za produženje pomenutog drugog oligonukleotida poželjno kada navedeni selektivni nukleotid formira bazni par sa ciljem, i znatno manje kada pomenuti selektivni nukleotid ne formira bazni par sa ciljem; i (c) detektovanja produkata navedenog produženja oligonukleotida, pri čemu produženje označava prisustvo varijante ciljne sekvence na koju oligonukleotid ima komplementarni selektivni nukleotid. U nekim otelotvorenjima, uzorak (uzorak melanoma) je uzorak fiksiran formalinom i ubačen u parafin. Uzorak se može dobiti pre lečenja pacijenta lekom protiv kancera. Uzorak se može dobiti iz primarnog tumora ili iz metastatskog tumora. Uzorak se može dobiti kada se prvi put dijagnostikuje kancer i/ili, na primer, nakon što je tumor metastazirao. U nekim otelotvorenjima, metastazirani uzorak tumora potiče od pluća, kože, limfnog čvora, kosti, jetre, debelog creva, štitne žlezde i/ili jajnika.

[0024] U drugom aspektu, ovde opisani postupci dalje obuhvataju lečenje dodatnim terapeutskim agensom. U nekim otelotvorenjima, dodatni terapeutski agens je lek protiv kancera.

[0025] U drugom aspektu, obezbeđeni su kompleti koji sadrže (i) prvu kompoziciju koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i (ii) drugu kompoziciju koja sadrži Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so. U nekim otelotvorenjima, komplet sadrži uputstva za izvođenje bilo kog od ovde opisanih postupaka. U nekim otelotvorenjima, uputstvo je za postupke lečenja (npr. terapeutsko lečenje) pacijenta koji ima neresektabilni ili metastatski melanom pozitivan na BRAF<V600>mutaciju, koji obuhvataju davanje pacijentu (i) prve kompozicije koja sadrži jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) druge kompozicije koja sadrži jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa. U nekim otelotvorenjima, kompleti su za upotrebu u lečenju neresektabilnog ili metastatskog melanoma pozitivnog na BRAF<V600>mutaciju. U nekim otelotvorenjima, melanom je neresektabilni ili metastatski melanom pozitivan na BRAF<V600E>mutaciju. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom nije prethodno lečen. U nekim otelotvorenjima, pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom je prethodno lečen (u nekim otelotvorenjima, bez prethodnog lečenja BRAF inhibitorom). U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija koja sadrži Jedinjenje II je tableta. U nekim otelotvorenjima, druga kompozicija koja sadrži Jedinjenje I je tableta. U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija koja sadrži Jedinjenje II i prva kompozicija koja sadrži Jedinjenje I su svaka obezbeđene kao tablete. U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija koja sadrži Jedinjenje I i druga kompozicija koja sadrži Jedinjenje II obezbeđene su kao pojedinačni dozni oblik. U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija koja sadrži Jedinjenje II i druga kompozicija koja sadrži Jedinjenje I su koformulisane (npr. kao farmaceutska formulacija).

[0026] U drugom aspektu, prikazani su proizvodi za upotrebu u lečenju (npr. terapeutsko lečenje) kancera (kao što je neresektabilni ili metastatski melanom pozitivan na BRAF<V600>mutaciju). Proizvod sadrži ambalažu i etiketu ili uputstvo u pakovanju, na ambalaži ili povezano sa njom. Odgovarajuća ambalaža uključuju, na primer, boce, bočice, špriceve, pakovanja za pilule, blister pakovanja, pakovanja sa označenim danima, itd. U nekim otelotvorenjima, proizvod obuhvata ambalažu i tabletu koja sadrži 60 mg Jedinjenja II.

1

U nekim otelotvorenjima, proizvod obuhvata ambalažu i tabletu koja sadrži 20 mg ili 40 mg Jedinjenja II. U nekim otelotvorenjima, proizvod obuhvata ambalažu koja sadrži (a) prvu kompoziciju koja sadrži Jedinjenje II (npr. 60 mg Jedinjenja II) obezbeđeno kao tableta i (b) drugu kompoziciju koja sadrži Jedinjenje I (npr.960 mg Jedinjenja I) obezbeđeno kao tableta. U nekim otelotvorenjima, ambalaža je pakovanje za pilule ili blister pakovanje. U nekim otelotvorenjima, proizvod (npr. obezbeđen kao pakovanje za pilule ili blister pakovanje) sadrži 21 tabletu kompozicije koja sadrži Jedinjenje II (npr. 60 mg Jedinjenja II) i tablete kompozicije koja sadrži Jedinjenje I (npr.960 mg Jedinjenja I (npr. četiri tablete od 240 mg)). U nekim otelotvorenjima, etiketa daje uputstvo za bilo koji od ovde opisanih postupaka lečenja.

[0027] U drugom aspektu, prikazani su dijagnostički kompleti korisni za detektovanje jednog ili više biomarkera koji su ovde definisani. Shodno tome, obezbeđen je dijagnostički komplet koji sadrži jedan ili više reagenasa za određivanje ekspresije BRAF, kao što je ekspresija BRAF<V600>biomarkera u uzorku pacijenta sa kancerom. Opciono, komplet dalje sadrži uputstvo za upotrebu kompleta ako pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom eksprimira BRAF<V600>, da bi se izabralo Jedinjenje II u kombinaciji sa Jedinjenjem I za lečenje (npr. terapeutsko lečenje) pacijenta, pri čemu lečenje obuhvata davanje (i) Jedinjenja II ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom pacijenta nije prethodno lečen. U nekim otelotvorenjima, pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom je prethodno lečen (u nekim otelotvorenjima, bez prethodnog lečenja BRAF inhibitorom).

[0028] U drugom aspektu, ovde su opisani postupci za promovisanje ili reklamiranje leka protiv kancera koji se sastoje od promovisanja, ciljnoj publici, upotrebe Jedinjenja II za lečenje (npr. terapeutsko lečenje) pacijenta sa neresektabilnim ili metastatskim melanomom pozitivnim na BRAF<V600>mutaciju, u kombinaciji sa vemurafenibom, pri čemu lečenje uključuje davanje (i) Jedinjenja II ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom pacijenta nije prethodno lečen (npr. vemurafenibom ili BRAF inhibitorom). U nekim otelotvorenjima, pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom je prethodno lečen (u nekim otelotvorenjima, bez prethodnog lečenja BRAF inhibitorom).

[0029] U drugom aspektu, ovde su opisani poslovni postupci koji obuhvataju reklamiranje upotrebe Jedinjenja II za lečenje (npr. terapeutsko lečenje) pacijenta sa neresektabilnim ili metastatskim melanomom pozitivnim na BRAF<V600>mutaciju, u kombinaciji sa Jedinjenjem I, pri čemu lečenje obuhvata davanje (i) Jedinjenja II ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom pacijenta nije prethodno lečen (npr. vemurafenibom ili BRAF inhibitorom). U nekim otelotvorenjima, pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom je prethodno lečen (u nekim otelotvorenjima, bez prethodnog lečenja BRAF inhibitorom).

[0030] Ovi i drugi aspekti i prednosti predmetnog pronalaska će postati očigledni iz sledećeg detaljnog opisa i priloženih patentnih zahteva.

KRATAK OPIS SLIKA

[0031] SLIKA 1: pokazuje plan eskalacije doze za kliničko ispitivanje Faze Ib koji obuhvata lečenje kombinacijom vemurafeniba i GDC-0973, koji se daju po jednom od sledećih 28-dnevnih rasporeda: 14 uzastopnih dana studijskog leka, nakon čega sledi 14-dnevni odmor od leka (14/14), 21 uzastopni dan studijskog leka, nakon čega sledi 7-dnevni odmor od leka (21/7), ili kao kontinuirana dnevna doza (28/0). Svaki ciklus lečenja trajao je 28 dana.

[0032] SLIKA 2: prikazuje šemu doziranja za vemurafenib i GDC-0973 ili placebo. Prikazana su dva ciklusa doziranja.

[0033] SLIKA 3: prikazuje karakteristike pacijenta.

[0034] SLIKA 4: prikazuje neželjeni događaj koji se pripisuje ili vemurafenibu ili leku GDC-0973 kod svih pacijenata.

[0035] SLIKA 5: prikazuje neželjene događaje koji su doveli do prekida doza, smanjenja i trajnih prekida.

[0036] SLIKA 6: prikazuje promenu veličine tumora od početne vrednosti do najboljeg odgovora kod pacijenata koji su progradirali uz prethodno primenjeni vemurafenib.

[0037] SLIKA 7: prikazuje promenu u veličini tumora od početne vrednosti do najboljeg odgovora kod pacijenata koji do sada nisu primali vemurafenib.

[0038] SLIKE 8A i B: A. Odgovor na PET snimku kod pacijenta koji je progradirao uz prethodno lečenje vemurafenibom i nakon lečenja vemurafenibom lekom GDC-0973. B. Dodatni primeri PET odgovora kod pacijenata koji su progradirali uz prethodno lečenje vemurafenibom koji su lečeni vemurafenibom lekom GDC-0973 (GDC).

DETALJAN OPIS OTELOTVORENJA PRONALASKA

[0039] Farmaceutski proizvod koji sadrži (i) prvu kompoziciju koja sadrži [3,4-difluor-2-[(2-fluor-4-jodfenil)amino]fenil][3-hidroksi-3-[(2S)-2-piperidinil]-1-azetidinil]metanon (Jedinjenje II) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i (ii) drugu kompoziciju koja sadrži propan-1-sulfonsku kiselinu {3-[5-(4-hlorfenil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-karbonil]-2,4-difluor-fenil}-amid (Jedinjenje I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, kao kombinovani preparat za istovremenu ili sekvencijalnu upotrebu u lečenju neresektabilnog ili metastatskog melanoma pozitivnog na BRAF<V600>mutaciju, pri čemu se Jedinjenje II daje u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i pri čemu se Jedinjenje I daje u dozi od 960 mg, dva puta dnevno svakog dana 28-dnevnog ciklusa, i pri čemu je navedena primena za humane pacijente čiji neresektabilni ili metastatski melanom nije prethodno lečen.

[0040] U drugom otelotvorenju, dat je farmaceutski proizvod za upotrebu prema odeljku [0039], pri čemu se prva kompozicija daje sekvencijalno sa drugom kompozicijom.

[0041] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema odeljku [0039], pri čemu se prva kompozicija daje istovremeno sa drugom kompozicijom.

[0042] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema odeljku [0039], pri čemu su prva i druga kompozicija koformulisane.

[0043] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0042], pri čemu je Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so u suštini u amorfnom obliku.

[0044] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0042], pri čemu je Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so u amorfnom obliku.

[0045] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0044], pri čemu je Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so sadržano u čvrstom molekulskom kompleksu formiranom sa hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinatom tako da je imobilisan u svom amorfnom obliku.

[0046] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema odeljku [0045], pri čemu su količine Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinata u pomenutom kompleksu u odnosu od oko 1:9, odnosno do oko 5:5.

1

[0047] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema odeljku [0045], pri čemu su količine jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinata u navedenom kompleksu u odnosu od oko 2,8, odnosno do oko 4,6.

[0048] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema odeljku [0045], pri čemu su količine Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinata u navedenom kompleksu u odnosu od oko 3:7.

[0049] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema odeljku [0045], pri čemu su količine Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinata u pomenutom kompleksu u odnosu 3:7.

[0050] U drugom otelotvorenju, dat je farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0049], pri čemu druga kompozicija sadrži mešavinu, pri čemu je oko 97 mas.% mešavine čvrsti molekulski kompleks prema zahtevu 7 i oko 3 mas.% mešavine je silicijum dioksid.

[0051] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0049], pri čemu druga kompozicija sadrži suspenziju čvrstog molekulskog kompleksa prema zahtevu 7 u farmaceutski prihvatljivom nosaču.

[0052] U drugom otelotvorenju, dat je farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0049], pri čemu druga kompozicija sadrži tabletu koja sadrži čvrsti molekulski kompleks Jedinjenja I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i HPMC-AS.

[0053] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0052], pri čemu prva kompozicija sadrži jedan ili više sastojaka od laktoza monohidrata, mikrokristalne celuloze, kroskarmeloza natrijuma i magnezijum stearata.

[0054] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0052], pri čemu je Jedinjenje II obezbeđeno kao tableta koja sadrži laktozu monohidrat, mikrokristalnu celulozu, kroskarmelozu natrijum i magnezijum stearat.

[0055] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema odeljku [0054], pri čemu tableta sadrži oblogu tablete koja sadrži polivinil alkohol, delimično hidrolizovan, titanijum dioksid, polietilen glikol 3350 i talk.

[0056] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0055], pri čemu je Jedinjenje II obezbeđeno kao tableta od 20 mg, kao tableta od 40 mg, ili kao tableta od 60 mg.

[0057] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0056], pri čemu se druga doza od 960 mg Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli daje oko 12 sati nakon prve doze od 960 mg Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0058] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0057], pri čemu se Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so i Jedinjenje II ili njegova farmaceutski prihvatljiva so daju oralno, sa hranom ili bez nje.

[0059] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0058], pri čemu je neresektabilni ili metastatski melanom, melanom pozitivan na BRAF<V600E>mutaciju.

[0060] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0059], pri čemu je neresektabilni ili metastatski melanom metastatski melanom.

[0061] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0060], pri čemu je BRAF<V600>mutacija određena upotrebom postupka koji obuhvata (a) izvođenje PCR ili sekvenciranja na nukleinskoj kiselini (npr. DNK) ekstrahovanoj iz uzorka melanoma pacijenta, i (b) određivanje ekspresije BRAF<V600>u uzorku.

[0062] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod za upotrebu prema odeljku [0061], pri čemu je uzorak melanoma uzorak fiksiran formalinom i ubačen u parafin.

[0063] U drugom otelotvorenju, dat je farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0062], pri čemu pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom nije prethodno lečen.

[0064] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0063], za upotrebu u proizvodnji medikamenta za lečenje neresektabilnog ili metastatskog melanoma pozitivnog na BRAF<V600>mutaciju.

[0065] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je farmaceutski proizvod prema odeljku [0064], pri čemu neresektabilni ili metastatski melanom pozitivan na BRAF<V600>mutaciju nije prethodno lečen.

1

[0066] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je komplet koji sadrži (i) prvu kompoziciju koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i (ii) drugu kompoziciju koja sadrži Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.

[0067] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je komplet prema odeljku [0066], za upotrebu u lečenju neresektabilnog ili metastatskog melanoma pozitivnog na BRAF<V600>mutaciju.

[0068] U drugom otelotvorenju, obezbeđen je komplet prema odeljku [0067], pri čemu neresektabilni ili metastatski melanom pozitivan na BRAF<V600>mutaciju nije prethodno lečen.

[0069] U jednom otelotvorenju, prikazan je postupak za produženje trajanja odgovora na lečenje kod pacijenta koji ima neresektabilni ili metastatski melanom pozitivan na BRAF<V600>mutaciju koji se sastoji od davanja pacijentu (i) prve kompozicije koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) druge kompozicije koja sadrži Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, svakog dana 28-dnevnog ciklusa.

[0070] U jednom otelotvorenju, prikazan je postupak za odlaganje ili sprečavanje razvoja rezistencije na lečenje (npr. rezistencija na lečenje sa BRAF) kod pacijenta koji ima neresektabilni ili metastatski melanom pozitivan na BRAF<V600>mutaciju koji se sastoji od davanja pacijentu (i) prve kompozicije koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) druge kompozicije koja sadrži Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, svakog dana 28-dnevnog ciklusa.

[0071] U jednom otelotvorenju, prikazan je postupak za lečenje pacijenta koji ima neresektabilni ili metastatski melanom pozitivan na BRAFV600 mutaciju koji se sastoji od davanja pacijentu (i) prve kompozicije koja sadrži jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) druge kompozicije koja sadrži jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa.

[0072] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0071], pri čemu se prva kompozicija daje sekvencijalno sa drugom kompozicijom.

[0073] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0071], pri čemu se prva kompozicija daje istovremeno sa drugom kompozicijom.

[0074] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema odeljku [0073], pri čemu su prva i druga kompozicija koformulisane.

1

[0075] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak za izbor terapije za pacijenta sa neresektabilnim ili metastatskim melanomom, koji obuhvata utvrđivanje prisustva BRAF<V600>mutacije u uzorku pacijentovog neresektabilnog ili metastatskog melanoma, i izbor leka za kancer na osnovu prisustva BRAF<V600>mutacije.

[0076] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema odeljku [0075], pri čemu je pokazano da uzorak eksprimira BRAF<V600>mutaciju, i pri čemu je odabrano lečenje Jedinjenjem II u kombinaciji sa Jedinjenjem I.

[0077] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema odeljku [0076], pri čemu se pacijent leči od neresektabilnog ili metastatskog melanoma pozitivnog na BRAF<V600>mutaciju, koji obuhvata davanje pacijentu (i) prve kompozicije koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) druge kompozicije koja sadrži Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa.

[0078] U drugom otelotvorenju, prikazan je postupak za optimizaciju terapeutske efikasnosti koji se sastoji od određivanja prisustva BRAF<V600>mutacije u uzorku pacijentovog neresektabilnog ili metastatskog melanoma i odabira leka za kancer na osnovu prisustva BRAF<V600>mutacije.

[0079] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema odeljku [0078], pri čemu je pokazano da uzorak eksprimira BRAF<V600>mutaciju, i pri čemu je odabrano lečenje Jedinjenjem II u kombinaciji sa Jedinjenjem I.

[0080] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema odeljku [0079], pri čemu se pacijent leči od neresektabilnog ili metastatskog melanoma pozitivnog na BRAF<V600>mutaciju, koji obuhvata davanje pacijentu (i) prve kompozicije koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) druge kompozicije koja sadrži Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa.

[0081] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0080], pri čemu je prisustvo BRAF<V600>mutacije određeno procenom BRAF nukleinske kiseline.

[0082] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0081], pri čemu je prisustvo BRAF<V600>mutacije određeno upotrebom postupka odabranog od: lančane reakcije polimeraze (PCR) (uključujući, ali se ne ograničavajući na, kvantitativnu PCR u realnom vremenu i alel-specifičnu PCR), sekvenciranja (uključujući, ali se ne ograničavajući na, Sangerovo sekvenciranje i/ili pirosekvenciranje), hibridizacije

1

koristeći alel-specifične oligonukleotide, ekstenziju prajmera, alel-specifičnu ligaciju, ili elektroforetske tehnike razdvajanja (uključujući, ali se ne ograničavajući na, konformacioni polimorfizam jednolančanih fragmenata (SSCP) i heterodupleks analizu) i analize 5' nukleaza.

[0083] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0081], pri čemu je prisustvo BRAF<V600>mutacije određeno korišćenjem PCR ili sekvenciranja.

[0084] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0081], pri čemu je prisustvo BRAF<V600>mutacije određeno postupkom koji sadrži (a) hibridizaciju prvog i drugog oligonukleotida na najmanje jednu varijantu BRAF ciljne sekvence, pri čemu je navedeni prvi oligonukleotid barem delimično komplementaran jednoj ili više varijanti ciljne sekvence i navedeni drugi oligonukleotid je barem delimično komplementaran jednoj ili više varijanti ciljne sekvence i ima najmanje jedan unutrašnji selektivni nukleotid komplementaran samo jednoj varijanti ciljne sekvence, (b) ekstenziju drugog oligonukleotida sa polimerazom nukleinske kiseline, pri čemu je navedena polimeraza sposobna za ekstenziju pomenutog drugog oligonukleotida preferencijalno kada navedeni selektivni nukleotid formira bazni par sa ciljem, i znatno manje kada spomenuti selektivni nukleotid ne formira bazni par sa ciljem i (c) detektovanje proizvoda navedene ekstenzije oligonukleotida, pri čemu ekstenzija označava prisustvo varijante ciljne sekvence na koju oligonukleotid ima komplementarni selektivni nukleotid.

[0085] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema odeljku [0084], pri čemu je uzorak fiksiran formalinom i ubačen u parafin.

[0086] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0085], koji dalje obuhvata lečenje dodatnim terapeutskim agensom.

[0087] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0086], gde neresektabilni ili metastatski melanom pozitivan na BRAF<V600>mutaciju nije prethodno lečen.

[0088] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0087], pri čemu je Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so u suštini u amorfnom obliku.

[0089] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0087], pri čemu je Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so u amorfnom obliku.

[0090] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0089], pri čemu je Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so sadržano u

1

čvrstom molekulskom kompleksu formiranom sa hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinatom tako da je imobilizovan u amorfnom obliku.

[0091] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema odeljku [0090], pri čemu su količine Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinata u navedenom kompleksu u odnosu od oko 1:9, odnosno do oko 5:5.

[0092] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema odeljku [0090], pri čemu su količine Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinata u navedenom kompleksu u odnosu od oko 2:8, odnosno do oko 4:6.

[0093] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema odeljku [0090], pri čemu su količine Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinata u pomenutom kompleksu u odnosu od oko 3:7.

[0094] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema odeljku [0090], pri čemu su količine Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinata u pomenutom kompleksu u odnosu od 3:7.

[0095] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0089], pri čemu druga kompozicija sadrži mešavinu gde je oko 97 mas.% mešavine čvrsti molekulski kompleks prema zahtevu 7 i oko 3 mas.% mešavine je silicijum dioksid.

[0096] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0089], pri čemu druga kompozicija sadrži suspenziju čvrstog molekulskog kompleksa prema zahtevu 7 u farmaceutski prihvatljivom nosaču.

[0097] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0089], pri čemu druga kompozicija sadrži tabletu koja sadrži čvrsti molekulski kompleks Jedinjenja I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i HPMC-AS.

[0098] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0097], pri čemu prva kompozicija sadrži jedan ili više sastojaka od laktoza monohidrata, mikrokristalne celuloze, kroskarmeloze natrijuma i magnezijum stearata.

[0099] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0098], pri čemu je Jedinjenje II obezbeđeno kao tableta koja sadrži laktozu monohidrat, mikrokristalnu celulozu, kroskarmelozu natrijum i magnezijum stearat.

[00100] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema odeljku [0098], pri čemu tableta sadrži oblogu tablete koja sadrži polivinil alkohol, delimično hidrolizovan, titanijum dioksid, polietilen glikol 3350 i talk.

1

[00101] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0098], pri čemu je Jedinjenje II obezbeđeno kao tableta od 20 mg, kao tableta od 40 mg, ili kao tableta od 60 mg.

[00102] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0101], pri čemu se druga doza od 960 mg Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli daje oko 12 sati nakon prve doze od 960 mg Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[00103] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0102], pri čemu se Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so i Jedinjenje II ili njegova farmaceutski prihvatljiva so daju oralno, sa hranom ili bez nje.

[00104] U drugom otelotvorenju, prikazan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0103], pri čemu je neresektabilni ili metastatski melanom melanom pozitivan na BRAF<V600E>mutaciju.

[00105] U drugom otelotvorenju, prikazan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0103], pri čemu je neresektabilni ili metastatski melanom metastatski melanom.

[00106] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0105], pri čemu je BRAF<V600>mutacija određena korišćenjem postupka koji obuhvata (a) izvođenje PCR ili sekvencioniranja na nukleinskoj kiselini (npr. DNK) ekstrahovanoj iz uzorka melanoma pacijenta i (b) određivanje ekspresije BRAF<V600>u uzorku.

[00107] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema odeljku [0106], pri čemu je uzorak melanoma fiksiran formalinom i ubačen u parafin.

[00108] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kojem od paragrafa do paragrafa [0108], gde neresektabilni ili metastatski melanom pozitivan na BRAF<V600>mutaciju nije prethodno lečen.

[00109] U drugom otelotvorenju, opisan je postupak prema bilo kom od odeljaka do odeljka [0108], koji dalje obuhvata lečenje dodatnim terapeutskim agensom.

I. DEFINICIJE

[00110] Ovde je "pacijent" (naizmenično se naziva "pojedinac") humani pacijent. Pacijent je "pacijent sa neresektabilnim ili metastatskim melanomom", tj. osoba koja pati ili je u opasnosti da pati od jednog ili više simptoma neresektabilnog ili metastatskog melanoma.

[00111] Termin "BRAF", kako se ovde koristi, odnosi se, ukoliko nije drugačije naznačeno, na bilo koji nativni ili varijantni (bilo nativni ili sintetički) BRAF polipeptid. Termin "BRAF divljeg tipa" se uopšteno odnosi na polipeptid koji sadrži aminokiselinsku sekvencu BRAF proteina prisutnog u prirodi.

2

[00112] Termin "BRAF varijanta" kako se ovde koristi odnosi se na BRAF polipeptid koji uključuje jednu ili više aminokiselinskih mutacija u nativnoj BRAF sekvenci. Opciono, jedna ili više mutacija aminokiselina uključuju supstitucije aminokiselina.

[00113] Kao što se ovde koristi, "melanom pozitivan na BRAF<V600>mutaciju" se odnosi na melanom pacijenta (npr. neresektabilni ili metastatski melanom) za koji se pokazalo da eksprimira BRAF<V600>.

[00114] Kako se ovde koristi, "melanom pozitivan na BRAF<V600E>mutaciju" se odnosi na melanom pacijenta (npr. neresektabilni ili metastatski melanom) za koji se pokazalo da eksprimira BRAF<V600E>.

[00115] "V600" mutacija BRAF kako se ovde koristi (naizmenično se naziva "BRAF<V600>"), odnosi se na mutaciju u BRAF proteinu gde je aminokiselinski ostatak valina na položaju 600 BRAF zamenjen drugim aminokiselinskim ostatkom. "V600" je takođe poznat kao "V599" prema prethodnom sistemu numerisanja (Kumar et al., Clin. Cancer Res.

9:3362-3368, 2003).

[00116] Mutacija "V600E" BRAF, kako se ovde koristi, odnosi se na mutaciju u BRAF proteinu, gde je ostatak valina u položaju 600 BRAF zamenjen glutaminskom kiselinom. "V600E" je takođe poznat kao "V599E" prema prethodnom sistemu numerisanja (Kumar et al., Clin. Cancer Res.9:3362-3368, 2003).

[00117] Termin "mutacija", kako se ovde koristi, označava razliku u aminokiselinskoj sekvenci ili sekvenci nukleinske kiseline određenog proteina ili nukleinske kiseline (gen, RNK) u odnosu na divlji tip proteina, odnosno nukleinske kiseline. Mutirani protein ili nukleinska kiselina mogu se eksprimirati ili pronaći na jednom alelu (heterozigotni) ili oba alela (homozigotni) gena, i mogu biti somatska ili germinativna linija. U ovom pronalasku, mutacije su uopšteno somatske. Mutacije uključuju preuređenje sekvenci kao što su ubacivanja, izbacivanja i tačkaste mutacije (uključujući polimorfizam pojedinačnih nukleotida/aminokiselina).

[00118] "Inhibirati" znači smanjiti ili redukovati aktivnost, funkciju i/ili količinu u poređenju sa referencom.

[00119] "Ekspresija" proteina se odnosi na konverziju informacija kodiranih u genu u informacionu RNK (iRNK), a zatim u protein.

[00120] Ovde, uzorak ili ćelija koji "eksprimiraju" posmatrani protein (kao što je BRAF<V600>, na primer BRAF<V600E>) su oni za koje je utvrđeno prisustvo nukleinske kiseline (npr. DNK ili iRNK) koja kodira protein, ili proteina, uključujući njegove fragmente, u uzorku ili ćeliji. Kancer (npr. neresektabilni ili metastatski melanom) koji "eksprimira" posmatrani protein (kao što je BRAF<V600>, na primer BRAF<V600E>) je onaj za koji je utvrđeno prisustvo nukleinske kiseline (npr. DNK ili iRNK) koja kodira protein, ili proteina, uključujući i njegove fragmente, u uzorku kancera (npr. neresektabilnog ili metastatskog melanoma).

[00121] „Populacija” pacijenata odnosi se na grupu ispitanika sa kancerom, kao što je to u kliničkom ispitivanju, ili prema viđenju onkologa koji poštuju odobrenje FDA za određenu indikaciju, kao što je terapija neresektabilnog ili metastatskog melanoma. U nekim otelotvorenjima, indikacija je neresektabilni ili metastatski melanom pozitivan na BRAF<V600>mutaciju.

[00122] Za ovde objavljene postupke, termin „podučavanje” pacijenta znači davanje uputstva za primenu terapije, lekova, lečenja, režima lečenja i slično, na bilo koji način, ali poželjno u pisanoj formi, kao što je u obliku umetaka pakovanja ili drugog pisanog promotivnog materijala.

[00123] Za ovde prikazane postupke, termin „promovisanje” označava ponudu, oglašavanje, prodaju ili opisivanje određenog leka, kombinacije lekova ili modaliteta lečenja, na bilo koji način, uključujući, pisanje, kao što je u obliku umetaka pakovanja. Ovde se promovisanje odnosi na promociju terapeutskog agensa, kao što je MEK inhibitor i/ili BRAF inhibitor, za indikaciju, kao što je lečenje neresektabilnog ili metastatskog melanoma pozitivnog na BRAF<V600>mutaciju, gde je takvo promovisanje odobreno od strane Uprave za hranu i lekove (FDA) jer je dokazano da je povezano sa statistički značajnom terapijskom efikasnošću i prihvatljivom bezbednošću u populaciji ispitanika.

[00124] Termin „marketing” se ovde koristi za opisivanje promocije, prodaje ili distribucije proizvoda (npr. lek). Marketing posebno uključuje pakovanje, oglašavanje i bilo koju poslovnu aktivnost u svrhu komercijalizacije proizvoda.

[00125] Za ovde navedene svrhe, "prethodno lečeni" pacijenti sa kancerom su dobijali prethodnu terapiju protiv kancera. Pacijent sa neresektabilnim ili metastatskim melanomom koji je "prethodno lečen" je prethodno bio podvrgnut terapiji za neresektabilni ili metastatski melanom.

[00126] "Lek protiv kancera" je lek koji je delotvoran za lečenje kancera.

[00127] Termin "biomarker" ili "marker", kako se ovde koristi, uopšteno se odnosi na molekul, uključujući gen, iRNK, protein, ugljenohidratnu strukturu, ili glikolipid, čija se ekspresija u ili na tkivu ili ćeliji ili kada je izlučen može otkriti poznatim postupcima (ili ovde opisanim postupcima), i predviđa, ili se može koristiti za predviđanje (ili pomoći u predviđanju) odgovora ćelije, tkiva ili pacijenta na režime lečenja.

[00128] Pod "pacijentovim uzorkom" podrazumeva se skup sličnih ćelija dobijenih od pacijenta sa kancerom. Izvor uzorka tkiva ili ćelije može biti čvrsto tkivo poput onog iz svežeg, zamrznutog i/ili sačuvanog uzorka organa ili tkiva ili biopsije ili aspirata, krv ili bilo koji sastojak krvi, telesne tečnosti kao što su cerebrospinalna tečnost, amnionska tečnost, peritonealna tečnost ili intersticijalna tečnost, ćelije iz bilo kog trenutka gestacije ili razvoja subjekta. Uzorak tkiva može da sadrži jedinjenja koja nisu prirodno mešana sa tkivom u prirodi, kao što su konzervansi, antikoagulansi, puferi, fiksatori, nutrijenti, antibiotici ili slično. Primeri uzoraka tumora ovde obuhvataju, ali nisu ograničeni na, tumorske biopsije, cirkulišuće tumorske ćelije, serum ili plazmu, cirkulišuće proteine plazme, ascitnu tečnost, primarne ćelijske kulture ili ćelijske linije izvedene iz tumora ili koje pokazuju svojstva nalik tumoru, kao i sačuvani uzorci tumora, kao što su uzorci tumora fiksirani u formalinu, ubačeni u parafin ili zamrznuti uzorci tumora. U jednom otelotvorenju, uzorak potiče od neresektabilnog ili metastatskog melanoma.

[00129] "Efektivni odgovor" pacijenta ili "responsivnost" pacijenta na lečenje lekom i slično sročeno odnosi se na kliničku ili terapeutsku korist koja se pruža pacijentu koji je izložen riziku od kancera, ili boluje od kancera (npr. neresektabilnog ili metastatskog melanoma pozitivnog na BRAF<V600>mutaciju) nakon davanja leka protiv kancera. Takva korist uključuje jedno ili više od: produžavanja preživljavanja (uključujući ukupno preživljavanje i preživljavanje bez progresije), postizanja objektivnog odgovora (uključujući kompletan odgovor ili delimičan odgovor) ili poboljšanja znakova ili simptoma kancera, itd.

[00130] "Preživljavanje“ se odnosi na pacijenta koji ostaje živ, i uključuje ukupno preživljavanje, kao i preživljavanje bez progresije.

[00131] "Ukupno preživljavanje“ se odnosi na pacijenta koji ostaje živ u određenom vremenskom periodu od trenutka dijagnoze ili lečenja.

[00132] "Preživljavanje bez progresije“ se odnosi na pacijenta koji ostaje živ, bez napredovanja ili pogoršanja kancera.

[00133] Pod "produžavanjem preživljavanja" podrazumeva se porast ukupnog preživljavanja ili preživljavanja bez progresije kod lečenog pacijenta u odnosu na nelečenog pacijenta (tj. u odnosu na pacijenta koji nije lečen lekom), ili u odnosu na pacijenta koji ne eksprimira biomarker na određenom nivou i/ili u odnosu na pacijenta koji je lečen odobrenim lekom protiv kancera, kao što je vemurafenib.

[00134] "Objektivni odgovor" se odnosi na merljivi odgovor, uključujući kompletan odgovor (CR) ili delimični odgovor (PR).

2

[00135] Pod "potpunim odgovorom" ili "CR" podrazumeva se nestanak svih znakova kancera kao odgovor na lečenje. To ne znači uvek da je kancer izlečen.

[00136] "Delimični odgovor" ili "PR" se odnosi na smanjenje veličine jednog ili više tumora ili lezija ili obima kancera u telu, kao odgovor na lečenje.

[00137] "Lečenje" se odnosi i na terapeutski tretman i na profilaktičke ili preventivne mere.

[00138] Termin "terapeutski efikasna količina” se odnosi na količinu terapeutskog agensa za lečenje ili prevenciju bolesti ili poremećaja kod sisara. U slučaju kancera, terapeutski efikasna količina terapeutskog agensa može smanjiti broj ćelija kancera, smanjiti veličinu primarnog tumora, inhibirati (tj. usporiti do izvesnog stepena i poželjno zaustaviti) infiltraciju ćelija kancera u periferne organe, inhibirati (tj. usporiti do izvesnog stepena i poželjno zaustaviti) metastaze tumora, inhibirati, do određenog stepena, rast tumora; i/ili ublažiti do izvesnog stepena jedan ili više simptoma vezanih za poremećaj. Prema stepenu do koga lek može sprečiti rast i/ili uništiti postojeće ćelije kancera, on može biti citostatični i/ili citotoksični lek. Za terapiju kancera, efikasnost in vivo može se, na primer, meriti procenom trajanja preživljavanja, vremena do progresije bolesti (TTP), stope odgovora (RR), trajanja odgovora i/ili kvaliteta života.

[00139] Termini „kancer“ i „kancerogeni“ odnose se na fiziološko stanje sisara koje se tipično karakteriše neregulisanim rastom ćelija, ili ga opisuju. U ovu definiciju spadaju benigni i maligni kanceri. U nekim otelotvorenjima, kancer je neresektabilan ili metastatski melanom koji eksprimira, ili se pokazalo da eksprimira BRAF<V600>.

[00140] Termin "polinukleotid", kada se koristi u jednini ili množini, uopšteno se odnosi na bilo koji poliribonukleotid ili polidezoksiribonukleotid, koji može biti nemodifikovana RNK ili DNK ili modifikovana RNK ili DNK. Tako, na primer, polinukleotidi kao što su ovde definisani uključuju, bez ograničenja, jednolančanu i dvolančanu DNK, DNK koja obuhvata jedno- i dvolančane regione, jedno- i dvolančanu RNK, i RNK koja obuhvata jedno- i dvolančane regione, hibridne molekule koji sadrže DNK i RNK koje mogu biti jednolančane ili, češće, dvolančane, ili uključuju jedno- i dvolančane regione. Pored toga, termin "polinukleotid", kako se ovde koristi, odnosi se na trolančane regione koji sadrže RNK ili DNK, ili i RNK i DNK. Lanci u takvim regionima mogu biti iz istog molekula ili iz različitih molekula. Regioni mogu uključivati sve od jednog ili više molekula, ali uobičajeno uključuju samo region nekih molekula. Jedan od molekula regiona trojne spirale je često oligonukleotid. Termin "polinukleotid" specifično uključuje kDNK. Pojam uključuje DNK (uključujući kDNK) i RNK koje sadrže jednu ili više modifikovanih baza. Prema tome, DNK ili RNK sa strukturama modifikovanim za stabilnost ili iz drugih razloga su "polinukleotidi", kao što se taj termin ovde koristi. Štaviše, DNK ili RNK koje sadrže neobične baze, kao što je inozin, ili modifikovane baze, kao što su tricijumske baze, obuhvaćene su terminom "polinukleotidi" kao što je ovde definisano. Uopšteno, pojam "polinukleotid" obuhvata sve hemijski, enzimski i/ili ili metabolički modifikovane oblike nemodifikovanih polinukleotida, kao i hemijske oblike DNK i RNK karakteristične za viruse i ćelije, uključujući proste i složene ćelije.

[00141] "Ciljna publika" je grupa ljudi ili institucija kojima ili kojoj se određeni lek promoviše ili se namerava promovisati, recimo putem marketinga ili oglašavanja, naročito za posebne upotrebe, lečenja ili indikacije, kao što su pojedinačni pacijenti, populacije pacijenata, čitaoci novina, medicinske literature i časopisa, televizijski ili veb gledaoci, slušaoci radija ili internet stanica, lekari, farmaceutske kompanije, itd.

[00142] "Umetak pakovanja” se koristi da se ukaže na uputstvo koje se uobičajeno nalazi u komercijalnim pakovanjima terapeutskih proizvoda, koje sadrži informacije o indikacijama, upotrebi, doziranju, primeni, kontraindikacijama, drugim terapeutskim proizvodima koji se kombinuju sa upakovanim proizvodom i/ili upozorenjima u vezi sa upotrebom takvih terapeutskih proizvoda, itd.

[00143] Termin "farmaceutska formulacija” odnosi se na sterilni preparat koji je u takvom obliku da omogućava efikasnu biološku aktivnost leka i koji ne sadrži dodatne komponente koje su neprihvatljivo toksične za ispitanika na kome će formulacija biti primenjena.

[00144] "Sterilna" formulacija je aseptična ili oslobođena prisustva svih živih mikroorganizama i njihovih spora.

[00145] "Komplet" je svaki proizvod (npr. pakovanje ili ambalaža) koji sadrži najmanje jedan reagens, npr. lek za lečenje kancera (npr. neresektabilnog ili metastatskog melanoma), ili reagens (npr. prajmer) za specifično detektovanje biomarkera gena ili proteina. Poželjno je da se proizvod promoviše, distribuira ili prodaje kao jedinica za izvođenje postupaka iz predmetnog pronalaska.

[00146] "Farmaceutski prihvatljiv nosač" upućuje na sastojak farmaceutske formulacije koji nije aktivni sastojak, i koji je netoksičan za ispitanika. Neograničavajući spisak primera farmaceutski prihvatljivih nosača je pufer, ekscipijens, stabilizator ili konzervans.

[00147] Fraza "farmaceutski prihvatljiva so", kako se ovde koristi, odnosi se na farmaceutski prihvatljive organske ili neorganske soli jedinjenja.

2

[00148] Kako se ovde koristi, izraz "suštinski amorfna" supstanca znači supstanca koji ima najviše oko 10% kristaliničnosti, a "amorfna" supstanca je supstanca koji ima najviše oko 2% kristaliničnosti.

[00149] Termin "molekulski dispergovan", kako se ovde koristi, odnosi se na nasumičnu distribuciju jedinjenja (npr. Jedinjenja I) sa polimerom. U određenim otelotvorenjima jedinjenje je prisutno u polimeru u konačnom stanju podele. Videti, npr. MG, Vachon et al., J Microencapsulation, 14281-301 (1997) i Vandelli et al. J Microencapsulation, 10- 55-65 (1993). U nekim otelotvorenjima, jedinjenje (na primer, Jedinjenje I) može biti dispergovano u matrici formiranoj od polimera u svom čvrstom stanju, tako da je jedinjenje imobilisano u svom amorfnom obliku. Da li je jedinjenje molekulski dispergovano u polimeru može se dokazati na različite načine, npr. dobijenim čvrstim molekulskim kompleksom koji ima jednu temperaturu ostakljivanja.

[00150] Termin "čvrsti molekulski kompleks", kako se ovde koristi, označava čvrstu disperziju koja uključuje Jedinjenje I molekulski dispergovano unutar polimerne matrice.

[00151] Termin "imobilizacija", kako se ovde koristi, u vezi sa imobilizacijom aktivnog jedinjenja u polimernoj matrici, znači da molekuli jedinjenja interaguju sa molekulima polimera na takav način da se molekuli jedinjenja drže u gore pomenutoj matrici i onemogućena im je nukleacija kristala zbog nedostatka pokretljivosti. U nekim otelotvorenjima, polimer može da spreči intermolekulske vodonične veze ili slabe disperzione sile između dva ili više molekula leka Jedinjenja I. Vidite, na primer, Matsumoro i Zografi, Pharmaceutical Research, Vol.16. No.11, str.1722-1728, 1999.

II. LEKOVI ZA KANCER

[00152] U jednom aspektu, predmetni pronalazak predstavlja upotrebu MEK inhibitora i BRAF inhibitora u kombinovanoj terapiji za lečenje patološkog stanja, kao što je kancer, kod pacijenta. U drugom aspektu, pronalazak se odnosi na izbor pacijenata koji mogu biti lečeni MEK inhibitorima i BRAF inhibitorima na osnovu ekspresije jednog ili više biomarkera koji su ovde opisani.

[0100] Vemurafenib

[00153] Vemurafenib je oralno dostupan inhibitor nekih mutiranih oblika BRAF serin/treonin kinaze, uključujući BRAF<V600E>. Vemurafenib je dostupan u obliku tableta od 240 mg za oralnu upotrebu. Vemurafenib, koji se u ovom tekstu naziva i "Jedinjenje I", ima hemijsko ime propan-1-sulfonska kiselina {3-[5-(4-hlorfenil)-1H-pirolo [2,3-b]piridin-3-karbonil]-2,4-difluor-fenil}-amid. Ovo jedinjenje je opisano u WO 2007/002325 (vidi npr. str.

80 i odgovarajuću formulu na stranici 82). Jedinjenje I ima sledeću hemijsku strukturu:

2

[00154] Jedinjenje I postoji u svom prirodnom, tj. termodinamički stabilnom stanju u kristalnom obliku. Međutim, amorfni oblik jedinjenja ima veću rastvorljivost u vodi u poređenju sa kristalnim oblikom, i stoga ima poboljšanu brzinu oslobađanja i, prema tome, poboljšanu bioraspoloživost u odnosu na kristalni oblik. Prema tome, u nekim otelotvorenjima ovog pronalaska, Jedinjenje I je u suštinski amorfnom obliku i, u nekim otelotvorenjima, u amorfnom obliku.

[0101] GDC-0973

[00155] GDC-0973 (koji se u ovom tekstu naziva i "kobimetinib" ili "Jedinjenje II") je oralno dostupan, snažan i visoko selektivan inhibitor MEK1 i MEK2, centralnih komponenti RAS/RAF puta. GDC-0973 ima hemijsko ime [3,4-difluor-2-[(2-fluor-4-jodfenil)amino]fenil][3-hidroksi-3-[(2S)-2-piperidinil]-1-azetidinil]metanon. GDC-0973 ima hemijsku strukturu:

[00156] Jedinjenje II može se dobiti postupcima opisanim u US2009/0156576. Jedinjenje II ima sledeći CAS registarski broj: 934660-93-2.

Dodatni terapeutski agensi

[00157] Kombinovana terapija prema pronalasku može dodatno obuhvatiti lečenje sa jednim ili više terapeutskih agenasa. U nekim aspektima, jedan ili više terapeutskih agenasa je jedan ili više lekova za lečenje kancera. Kombinovana primena obuhvata istovremenu primenu, korišćenjem zasebnih formulacija ili jedne farmaceutske formulacije, ili sekvencijalno davanje bilo kojim redosledom, pri čemu poželjno postoji vremenski period dok oba (ili svi) aktivni agensi istovremeno obavljaju svoje biološke aktivnosti. Terapeutski agens, ako se daje, obično se daje u dozama koje su za to poznate, ili opciono smanjene zbog kombinovanog delovanja lekova. Izrada i rasporedi doziranja za takve terapeutske agense

2

mogu da se primene prema uputstvu proizvođača, ili kako je empirijski određeno od strane stručnog lica. U nekim otelotvorenjima, dodatni terapeutski agens je hemoterapeutski agens.

III. KOMBINOVANE TERAPIJE

[00158] U jednom aspektu, opisani su postupci za lečenje pacijenta koji ima kancer koji obuhvataju davanje efikasne (npr. terapeutski efikasne) količine BRAF inhibitora (npr. vemurafeniba) i MEK inhibitora (npr. GDC-0973). Postupci uključuju bilo koje ovde prikazane postupke lečenja.

[00159] U jednom aspektu, otkriveni su postupci za lečenje (npr. terapeutsko lečenje) pacijenta koji ima kancer pozitivan na BRAF<V600>mutaciju, koji obuhvataju davanje pacijentu (i) prve kompozicije koja sadrži [3,4-difluor-2-[(2-fluor-4-jodfenil)amino]fenil][3-hidroksi-3-[(2S)-2-piperidinil]-1-azetidinil]metanon (Jedinjenje II) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i (ii) druge kompozicije koja sadrži propan-1-sulfonsku kiselinu {3-[5-(4-hlorfenil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-karbonil]-2,4-difluor-fenil}-amid (Jedinjenje I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg (npr. četiri tablete od 240 mg) dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa.

[00160] U jednom aspektu, otkriveni su postupci za lečenje (npr. terapeutsko lečenje) pacijenta koji ima neresektabilni ili metastatski melanom pozitivan na BRAF<V600>mutaciju koji obuhvataju davanje pacijentu (i) prve kompozicije koja sadrži jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) druge kompozicije koja sadrži jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa.

[00161] U jednom aspektu, otkriveni su postupci za produženje trajanja odgovora na lečenje kod pacijenta koji ima neresektabilni ili metastatski melanom koji se sastoje od davanja pacijentu (i) prve kompozicije koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) druge kompozicije koja sadrži Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, svakog dana 28-dnevnog ciklusa. U nekim otelotvorenjima, trajanje odgovora na kombinovano lečenje se produžava u odnosu na trajanje odgovora na lečenje Jedinjenjem I (npr. lečenje monoterapijom sa Jedinjenjem I).

[00162] U jednom aspektu, otkriveni su postupci za odlaganje ili sprečavanje razvoja rezistencije na lečenje (npr. rezistencija na lečenje BRAF inhibitorima) kod pacijenta koji ima neresektabilni ili metastatski melanom, koji se sastoje od davanja pacijentu (i) prve kompozicije koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) druge kompozicije koja sadrži Jedinjenje I ili

2

njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, svakog dana 28-dnevnog ciklusa. U nekim otelotvorenjima, razvoj rezistencije na kombinovano lečenje se odlaže u odnosu na razvoj rezistencije na lečenje Jedinjenjem I (npr. lečenje monoterapijom Jedinjenjem I).

[00163] U drugom aspektu, obezbeđena je kompozicija za upotrebu u lečenju (npr. terapeutskom lečenju) pacijenta sa neresektabilnim ili metastatskim melanomom koja sadrži prvu kompoziciju koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, pri čemu pomenuta upotreba obuhvata istovremeno ili sekvencijalno davanje druge kompozicije koja sadrži Jedinjenje I, pri čemu se prva kompozicija koja sadrži Jedinjenje II daje u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i pri čemu se druga kompozicija koja sadrži Jedinjenje I daje u dozi od 960 mg, dva puta dnevno svakog dana 28-dnevnog ciklusa.

[00164] U nekim otelotvorenjima bilo kog ovde opisanog postupka lečenja, pacijent nije dobijao prethodno lečenje za neresektabilni ili metastatski melanom. U nekim otelotvorenjima, pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom je prethodno lečen (u nekim otelotvorenjima, bez prethodnog lečenja BRAF inhibitorom). U nekim otelotvorenjima, pacijent nije dobijao prethodno lečenje inhibitorom Raf puta. U nekim otelotvorenjima, pacijent nije dobijao prethodno lečenje inhibitorom MEK puta. U nekim otelotvorenjima, pacijent nije dobijao prethodno lečenje inhibitorom Raf puta niti inhibitorom MEK puta. U nekim otelotvorenjima, pacijent je dobio prethodno adjuvantno lečenje. U nekim otelotvorenjima, pacijent nije dobijao prethodno lečenje inhibitorom Raf puta i dobio je prethodno adjuvantno lečenje. U nekim otelotvorenjima, pacijent nije dobijao prethodno lečenje inhibitorom MEK puta i dobio je prethodno adjuvantno lečenje. U nekim otelotvorenjima, pacijent nije dobijao prethodno lečenje inhibitorom Raf puta niti inhibitorom MEK puta i dobio je prethodno adjuvantno lečenje.

[00165] Sistemi za određivanje stadijuma kancera opisuju koliko se kancer proširio anatomski i pokušavaju da pacijente sa sličnom prognozom i lečenjem smeste u istu grupu. Nekoliko testova se može uraditi kako bi se pomoglo u određivanju stadijuma kancera, uključujući biopsiju i određene testove snimanja, kao što su rendgenski snimci grudi, mamografija, skeniranje kostiju, CT skeniranje i MR snimanje. Testovi krvi i klinička procena takođe se koriste za procenu celokupnog zdravlja pacijenta i otkrivanje da li se kancer proširio na određene organe.

[00166] Da bi odredio stadijum kancera, Američki zajednički komitet za kancer prvo razvrstava kancer, posebno čvrste tumore, u slovnu kategoriju koristeći TNM sistem klasifikacije. Kanceri su označeni slovom T (veličina tumora), N (opipljivi čvorovi), i/ili M

2

(metastaze). T1, T2, T3 i T4 opisuju rastuću veličinu primarne lezije; N0, N1, N2, N3 označavaju progresivno napredovanje čvorova; i M0 i M1 odražavaju odsustvo ili prisustvo udaljenih metastaza.

[00167] Kod druge metode razvrstavanja, poznate i pod nazivom Opšte grupisanje po stadijumima ili obeležavanje stadijuma rimskim brojevima, kanceri se dele na stadijume 0 do IV, uključujući i veličinu primarnih lezija, kao i prisustvo širenja čvorova i udaljenih metastaza. U ovom sistemu, slučajevi su grupisani u četiri stadijuma označena rimskim brojevima od I do IV, ili su klasifikovani kao "rekurentni". Za neke vrste kancera, faza 0 se naziva "in situ" ili "Tis", kao što je duktalni karcinom in situ ili lobularni karcinom in situ za karcinome dojke. Adenomi visoke klase mogu se klasifikovati kao stadijum 0. Uopšteno govoreći, kanceri stadijuma I su mali lokalizovani kanceri koji su obično izlečivi, dok IV stadijum obično predstavlja neoperabilni ili metastatski kancer. Kanceri II i III faze su obično lokalno uznapredovali i/ili pokazuju da su uključeni u lokalne limfne čvorove. Uopšteno, brojevi višeg stadijuma ukazuju na opsežniju bolest, uključujući veće tumore i/ili širenje kancera na obližnje limfne čvorove i/ili organe u blizini primarnog tumora. Ove faze su precizno definisane, ali definicija je različita za svaku vrstu kancera i poznata je iskusnom stručnjaku.

[00168] Mnogi registri za kancer, kao što je Program za nadzor, epidemiologiju i krajnje rezultate (SEER) američkog Nacionalnog instituta za kancer (NCI), koriste sumarno raspoređivanje po stadijumima. Ovaj sistem se koristi za sve vrste kancera. On grupiše slučajeve kancera u pet glavnih kategorija:

[00169] In situ je rani kancer koji je prisutan samo u sloju ćelija u kojem je nastao.

[00170] Lokalizovan je kancer koji je ograničen na organ u kojem je nastao, bez dokaza širenja.

[00171] Regionalni je kancer koji se proširio izvan originalnog (primarnog) mesta na obližnje limfne čvorove ili organe i tkiva.

[00172] Udaljen je kancer koji se proširio od primarnog mesta na udaljene organe ili udaljene limfne čvorove.

[00173] Nepoznato se koristi za opis slučajeva za koje ne postoji dovoljno informacija koje ukazuju na stadijum.

[00174] TNM klasifikacija melanoma Američkog zajedničkog komiteta za kancer (AJCC) je sistem za određivanje stadijuma melanoma. U nekim otelotvorenjima, melanom je neresektabilnog stadijuma IIIC. U nekim otelotvorenjima, melanom je stadijuma M1a. U nekim otelotvorenjima, melanom je stadijuma M1b. U nekim otelotvorenjima, melanom je stadijuma M1c.

[00175] Pored toga, uobičajeno je da se kancer vrati mesecima ili godinama nakon što je uklonjen primarni tumor. Kancer koji se vraća nakon što je kompletno uklonjen vidljivi tumor, naziva se rekurentna bolest. Bolest koja se vraća u području primarnog tumora je lokalno rekurentna, a bolest koja se ponovo javlja kao metastaze naziva se udaljeni recidiv.

[00176] U jednom aspektu, pacijent koji boluje od kancera se leči (npr. terapeutski leči) dodatnim lekom za kancer. U nekim otelotvorenjima, dodatni lek za kancer je hemoterapeutski agens.

[00177] Terapeutski agensi korišćeni u pronalasku biće formulisani, dozirani i davani u skladu sa dobrom lekarskom praksom. Faktori za razmatranje u ovom kontekstu uključuju konkretni poremećaj koji se leči, konkretnog pacijenta koji se leči, kliničko stanje pacijenta, uzrok poremećaja, mesto isporuke agensa, postupak primene, raspored primene, međusobnu interakciju lekovitih agenasa koji će se kombinovati i ostale faktore poznate lekarima.

[00178] Terapeutske formulacije mogu biti pripremljene korišćenjem standardnih postupaka poznatih u struci, mešanjem aktivnog sastojka koji ima željeni stepen čistoće sa opcionalnim fiziološki prihvatljivim nosačima, ekscipijensima ili stabilizatorima (Remington's Pharmaceutical Sciences (20. izdanje), izd. A. Gennaro, 2000, Lippincott, Williams i Wilkins, Filadelfija, PA). Pogodni nosači, razblaživači i ekscipijensi su dobro poznati stručnjacima, i uključuju materijale kao što su ugljeni hidrati, voskovi, vodorastvorljivi i/ili bubreći polimeri, hidrofilni ili hidrofobni materijali, želatin, ulja, rastvarači, voda, i slično. Određeni nosač, razblaživač ili ekscipijens koji će se koristiti zavisi od načina i svrhe za koju se primenjuje jedinjenje iz predmetnog pronalaska. Rastvarači se generalno biraju na osnovu rastvarača koje stručnjaci iz struke prepoznaju kao sigurne za davanje sisarima. Uopšteno, sigurni rastvarači su netoksični vodeni rastvarači, kao što su voda i drugi netoksični rastvarači koji su rastvorljivi ili se mešaju u vodi. Pogodni vodeni rastvarači uključuju vodu, etanol, propilen-glikol, polietilen-glikole (npr. PEG 400, PEG 300), itd. i njihove smeše. Formulacije mogu takođe sadržati jedan ili više pufera, stabilizatora, surfaktanata, kvašljivaca, lubrikanasa, emulgatora, sredstava za suspendovanje, konzervanasa, antioksidanasa, sredstava za zamućivanje, glidanasa, sredstava za preradu, boja, zaslađivača, mirisa, aroma i drugih poznatih aditiva koji obezbeđuju elegantnu prezentaciju leka (tj. jedinjenja iz predmetnog pronalaska ili njegove farmaceutske kompozicije), ili pomažu u proizvodnji farmaceutskog proizvoda (tj. leka). U nekim otelotvorenjima, jedinjenje je formulisano zajedno sa farmaceutski prihvatljivim nosačem ili ekscipijensom.

1

[00179] Aktivni sastojci mogu takođe da se nalaze u mikrokapsulama pripremljenim, na primer, tehnikama koacervacije ili međupovršinske polimerizacije, na primer, hidroksimetilceluloze, odnosno želatinskih mikrokapsula i poli-(metilmetakrilat) mikrokapsula, u koloidnim sistemima za isporuku leka (na primer, lipozomima, albuminskim mikrosferama, mikroemulzijama, nanočesticama i nanokapsulama) ili u makroemulzijama. Takve tehnike su prikazane u Remington's Pharmaceutical Sciences, supra.

[00180] Farmaceutski prihvatljive soli su opisane ovde i poznate u struci. Primeri za soli uključuju, ali nisu ograničeni na soli sulfat, citrat, acetat, oksalat, hlorid, bromid, jodid, nitrat, bisulfat, fosfat, kiseli fosfat, izonikotinat, laktat, salicilat, kiseli citrat, tartarat, oleat, tanat, pantotenat, bitartrat, askorbat, sukcinat, maleat, gentizinat, fumarat, glukonat, glukuronat, saharat, format, benzoat, glutamat, metansulfonat "mezilat", etansulfonat, benzensulfonat, p-toluensulfonat i pamoat (tj. 1,1'-metilen-bis-(2-hidroksi-3-naftoat)). Farmaceutski prihvatljiva so može obuhvatati uključivanje drugog molekula kao što je acetatni jon, sukcinatni jon ili drugi kontra jon. Kontra jon može biti bilo koji organski ili neorganski ostatak koji stabilizuje naelektrisanje u matičnom jedinjenju. Nadalje, farmaceutski prihvatljiva so može imati više od jednog naelektrisanog atoma u svojoj strukturi. Primeri u kojima su atomi sa višestrukim naelektrisanjem deo farmaceutski prihvatljive soli mogu imati više kontra jona. Prema tome, farmaceutski prihvatljiva so može imati jedan ili više naelektrisanih atoma i/ili jedan ili više kontra jona. Ako je jedinjenje baza, željena farmaceutski prihvatljiva so može se pripremiti bilo kojim pogodnim postupkom koji je dostupan u struci, na primer, tretmanom slobodne baze neorganskom kiselinom, kao što je hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, sumporna kiselina, azotna kiselina, metansulfonska kiselina, fosforna kiselina i slično, ili organskom kiselinom, kao što je sirćetna kiselina, maleinska kiselina, ćilibarna kiselina, bademova kiselina, fumarna kiselina, malonska kiselina, piruvinska kiselina, oksalna kiselina, glikolna kiselina, salicilna kiselina, piranozidna kiselina, kao što je glukuronska kiselina ili galakturonska kiselina, alfa hidroksi kiselina, kao što je limunska kiselina ili vinska kiselina, aminokiselina, kao što je asparaginska kiselina ili glutaminska kiselina, aromatična kiselina, kao što je benzojeva kiselina ili cimetna kiselina, sulfonska kiselina kao što je p-toluensulfonska kiselina ili etansulfonska kiselina, ili slično. Kiseline koje se generalno smatraju pogodnim za formiranje farmaceutski korisnih ili prihvatljivih soli baznih farmaceutskih jedinjenja razmatrali su, na primer, P. Stahl et al, Camille G. (izd.) Handbook of Pharmaceutical Salts. Properties, Selection and Use. (2002) Zurich: Wiley-VCH; S. Berge et al, Journal of Pharmaceutical Sciences (1977) 66(1) 1 19; P. Gould, International J. of Pharmaceutics (1986) 33 201 217;

2

Anderson et al, The Practice of Medicinal Chemistry (1996), Academic Press, New York; Remington's Pharmaceutical Sciences, 18. izd., (1995) Mack Publishing Co., Easton Pa.; i u Narandžastoj knjizi (Uprava za hranu i lekove, Vašington, D.C. na veb strani). Ako je jedinjenje kiselina, željena farmaceutski prihvatljiva so se može pripremiti bilo kojim pogodnim postupkom, na primer, tretiranjem slobodne kiseline neorganskom ili organskom bazom, kao što je amin (primarni, sekundarni ili tercijarni), hidroksid alkalnog metala ili hidroksid zemnoalkalnog metala, ili slično. Ilustrativni primeri prikladnih soli uključuju, ali nisu ograničeni na, organske soli izvedene iz aminokiselina, kao što su glicin i arginin, amonijak, primarni, sekundarni i tercijarni amini i ciklični amini, kao što su piperidin, morfolin i piperazin, i neorganske soli dobijene iz natrijuma, kalcijuma, kalijuma, magnezijuma, mangana, gvožđa, bakra, cinka, aluminijuma i litijuma. Farmaceutski prihvatljive soli, hidrati i drugi čvrsti oblici, kao što su na primer polimorfi vemurafeniba, opisani su u međunarodnoj patentnoj prijavi br. PCT/US2012/025965.

[00181] U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II je obezbeđeno kao tableta od 20 mg, kao tableta od 40 mg, i/ili kao tableta od 60 mg. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II je obezbeđeno kao tableta od 60 mg. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II je obezbeđeno kao tableta koja sadrži jedno ili više od laktoza monohidrata, mikrokristalne celuloze, kroskarmeloze natrijuma i magnezijum stearata za jezgro tablete. U nekim otelotvorenjima, obloga tablete sadrži jednan ili više delova polivinil alkohola, delimično hidrolizovanog, titanijum dioksida, polietilen glikola 3350 i talka. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II je obezbeđeno kao tableta koja sadrži laktozu monohidrat, mikrokristalnu celulozu, kroskarmelozu natrijum i magnezijum stearat za jezgro tablete, i oblogu tablete koja sadrži polivinil alkohol, delimično hidrolizovan, titanijum dioksid, polietilen glikol 3350 i talk. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II je obezbeđeno kao tableta koja sadrži (a) 60 mg Jedinjenja II (aktivni sastojak), i (b) laktozu monohidrat, mikrokristalnu celulozu, kroskarmelozu natrijum i magnezijum stearat za jezgro tablete, te oblogu tablete koja se sastoji od polivinil alkohola, delimično hidrolizovanog, titanijum dioksida, polietilen glikola 3350 i talka.

[00182] U otelotvorenju predmetnog pronalaska, Jedinjenje I je sadržano u čvrstom molekulskom kompleksu formiranom sa hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinatom (HPMC-AS). U određenim otelotvorenjima, Jedinjenje I je prisutno u polimeru u konačnom stanju podele. U određenim otelotvorenjima, Jedinjenje I je molekulski dispergovano u HPMC-AS matrici tako da je imobilisano u svom amorfnom obliku. U nekim otelotvorenjima, polimer može da spreči intramolekulske vodonične veze ili slabe disperzione sile između dva ili više molekula Jedinjenja I. U nekim otelotvorenjima, odnos količine po masi Jedinjenja I u čvrstom molekulskom kompleksu prema količini po masi HPMC-AS u njoj je od oko 1:9 do oko 5:5. U jednom otelotvorenju, navedeni odnos je od oko 2:8 do oko 4:6. U drugom otelotvorenju, navedeni odnos je oko 3:7.

[00183] U određenim otelotvorenjima, jedinjenje I je obezbeđeno u gore pomenutom čvrstom molekulskom kompleksu jedinjenja I i HPMC-AS, pomešanom sa koloidnim silicijum dioksidom. U određenim otelotvorenjima, smeša je najmanje 0,5 mas.% silicijum dioksid. U otelotvorenju predmetnog pronalaska, smeša je oko 97% kompleks i oko 3% silicijum dioksid.

[00184] U drugim otelotvorenjima, jedinjenje I je obezbeđeno kao kompozicija koja sadrži gore pomenuti čvrsti molekulski kompleks, pomešan ili nepomešan sa silicijum dioksidom kao što je gore opisano, i farmaceutski prihvatljiv nosač. U određenim otelotvorenjima, gore pomenuti kompleks ili smeša koja sadrži isti su suspendovani u nosaču. Primer za nosač je hidroksipropilceluloza (HPC). U jednom otelotvorenju, vehikulum sadrži oko 2 mas.% HPC. Kompozicija može da sadrži i dodatne agense, kao što su konzervansi, sredstva za solubilizaciju, stabilizatori, kvašljivci, emulgatori, zaslađivači, boje, arome, soli za promenu osmotskog pritiska, puferi, sredstva za oblaganje i antioksidansi. U određenim otelotvorenjima, jedinjenje I je obezbeđeno kao kompozicija koja sadrži čvrsti molekulski kompleks jedinjenja I i HPMC-AS pomešan sa koloidnim silicijum dioksidom, hidroksipropilcelulozom, krospovidonom (agens za dezintegraciju), magnezijum stearatom (lubrikans koji se može koristiti u tabletama i operacijama kapsulacije), i/ili kroskarmelozom natrijum (agens za dezintegraciju). U jednom otelotvorenju, Jedinjenje I je obezbeđeno kao tvrda želatinska kapsula koja sadrži čvrsti molekulski kompleks Jedinjenja I i HPMC-AS pomešan sa koloidnim silicijum dioksidom, hidroksipropilcelulozom, magnezijum stearatom i kroskarmelozom natrijum. U jednom otelotvorenju, Jedinjenje I je obezbeđeno kao tableta koja sadrži Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so. U jednom otelotvorenju, tableta sadrži čvrsti molekulski kompleks Jedinjenja I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i HPMC-AS. Kompleks se, na primer, može mešati sa koloidnim silicijum dioksidom, hidroksipropilcelulozom, magnezijum stearatom i kroskarmelozom natrijum. Tableta može, na primer, biti obložena filmom. Film obloga može, na primer, sadržati polivinil alkohol, titanijum dioksid, polietilen glikol 3350, talk i crveni oksid gvožđa. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I je obezbeđeno kao tableta od 240 mg. Kompozicije koje sadrže Jedinjenje I i postupci za izradu takvih kompozicija opisani su u WO2010/114928.

4

[00185] U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so je u suštini u amorfnom obliku. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so je u amorfnom obliku. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so se nalazi u čvrstom molekulskom kompleksu formiranom sa hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinatom, tako da je imobilisano u svom amorfnom obliku. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so i hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinata u navedenom kompleksu su u odnosu od oko 1:9, odnosno do oko 5:5. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so i hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinata u pomenutom kompleksu su u odnosu od oko 3:7. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I je sadržano u smeši gde je oko 97 mas.% smeše čvrsti molekulski kompleks i oko 3 mas.% smeše je silicijum dioksid. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I je sadržano u suspenziji čvrstog molekulskog kompleksa u farmaceutski prihvatljivom nosaču, pri čemu je je čvrsti molekulski kompleks u farmaceutski prihvatljivom nosaču. U nekim otelotvorenjima, prva komponenta obuhvata tabletu koja sadrži čvrsti molekulski kompleks Jedinjenja I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i HPMC-AS. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I je obezbeđeno kao tableta. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I je obezbeđeno kao tableta od 240 mg (tj. tableta koja sadrži 240 mg Jedinjenja I).

[00186] Primena terapeutskih agenasa u kombinaciji obično se sprovodi u određenom vremenskom periodu (uobičajeno minuti, sati, dani ili nedelje, zavisno od odabrane kombinacije). Kombinovana terapija ima za cilj da obuhvati davanje ovih terapeutskih agenasa na sekvencijalni način, tj. kada se svaki terapeutski agens daje u različito vreme (bilo kojim redosledom), kao i davanje terapeutskih agenasa na istovremen (simultan) način. Istovremeno davanje može biti u vidu odvojenih farmaceutskih formulacija ili kao pojedinačni dozni oblik (npr. kao jedinstvena farmaceutska formulacija. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II se daje jednom dnevno, na primer, ujutru ili u formulaciji). U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II se daje jednom dnevno u bilo koje doba dana. U nekim otelotvorenjima, druga doza od 960 mg (npr. četiri tablete od 240 mg) Jedinjenja I je oko 12 sati nakon prve doze od 960 mg (npr. četiri tablete od 240 mg) Jedinjenja I. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I se daje jednom ujutru i jednom uveče.

[00187] Prema tome, razmatrano je obezbeđivanje jedinjenja I i II u jednom doznom obliku (npr. koformulacija dva ili više aktivnih agenasa). U skladu sa tim, u jednom otelotvorenju, ovde data farmaceutska kompozicija može da sadrži više od jednog aktivnog jedinjenja (tj. prva kompozicija koja sadrži prvi aktivni sastojak može biti koformulisana sa drugom kompozicijom koja sadrži drugi aktivni sastojak). Takvi molekuli su pogodno prisutni u kombinaciji u količinama koje su efikasne za nameravane svrhe.

[00188] U drugom aspektu, svaki od dva (ili više) aktivnih sastojaka je strpljivo formulisan i primenjen kao odvojeni dozni oblik. U skladu sa tim, u nekim otelotvorenjima, farmaceutski proizvod sadrži prvu kompoziciju koja sadrži (kao aktivni sastojak) Jedinjenje II, i drugu kompoziciju koja sadrži (kao aktivni sastojak) Jedinjenje I, pri čemu se prva kompozicija daje u prvom doznom obliku, a druga kompozicija se daje u drugom doznom obliku. U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija se primenjuje sekvencijalno u odnosu na drugu kompoziciju. U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija se daje pre druge kompozicije. U nekim otelotvorenjima, druga kompozicija se daje nakon druge kompozicije. U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija se daje istovremeno sa prvom kompozicijom.

[00189] Terapeutski agensi se daju ljudskom pacijentu, u skladu sa poznatim postupcima, kao što je intravenska primena kao bolus ili kontinualnom infuzijom tokom vremenskog perioda, intramuskularnim, intraperitonealnim, intracerebrospinalnim, supkutanim, intraartikularnim, intrasinovijalnim, intratekalnim, oralnim, topikalnim ili inhalacionim putem. U nekim otelotvorenjima, primena je oralna (u nekim otelotvorenjima, sa hranom ili bez nje). U nekim otelotvorenjima, oralna primena je sa hranom. U nekim otelotvorenjima, oralna primena je bez hrane.

[00190] Terapeutski agens se može davati istim putem ili različitim putevima. Na primer, jedan terapeutski agens u kombinaciji može se davati intravenskom injekcijom, dok se drugi inhibitor terapeutskog agensa u kombinaciji može davati oralno. Alternativno, na primer, oba terapeutska agensa se mogu primenjivati oralno, ili se oba terapeutska agensa mogu primenjivati intravenskom injekcijom, u zavisnosti od specifičnih terapeutskih agenasa. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II i Jedinjenje I se daju oralno. Jedinjenje II i Jedinjenje I se mogu primenjivati oralno, sa hranom ili bez hrane. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II se daje oralno, sa hranom ili bez hrane. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje I se daje oralno, sa hranom ili bez hrane.

III. DIJAGNOSTIČKE METODE

[00191] U nekim otelotvorenjima, pacijent je ovde podvrgnut dijagnostičkom testu, npr. pre i/ili za vreme i/ili nakon terapije.

[00192] U nekim aspektima, obezbeđeni su postupci za izbor terapije za pacijenta sa neresektabilnim ili metastatskim melanomom, koji obuhvataju određivanje prisustva (u nekim otelotvorenjima, prisustva ili odsustva) BRAF<V600>mutacije u pacijentovom neresektabilnom ili metastatskom uzorku melanoma, i izbor leka za kancer na osnovu prisustva (u nekim otelotvorenjima, prisustva ili odsustva) BRAF<V600>mutacije. U jednom otelotvorenju, pokazalo se da uzorak eksprimira BRAF<V600>mutaciju (na primer, BRAF<V600E>mutaciju), pri čemu je odabrano lečenje (npr. terapeutsko lečenje) Jedinjenjem II u kombinaciji sa Jedinjenjem I (npr. kao što je ovde opisano). U nekim otelotvorenjima, pacijent se leči (npr. terapeutski leči) od neresektabilnog ili metastatskog melanoma postupkom koji uključuje davanje pacijentu (i) prve kompozicije koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) druge kompozicije koja sadrži Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa. Postupci lečenja uključuju sve ovde navedene postupke lečenja. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom pacijenta nije prethodno lečen (npr. vemurafenibom ili BRAF inhibitorom). U nekim otelotvorenjima, pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom je prethodno lečen (u nekim otelotvorenjima, bez prethodnog lečenja BRAF inhibitorom).

[00193] U drugim aspektima, obezbeđeni su postupci za optimizaciju terapeutske efikasnosti, koji obuhvataju određivanje prisustva (u nekim otelotvorenjima, prisustva ili odsustva) BRAF<V600>mutacije u uzorku neresektabilnog ili metastatskog melanoma pacijenta i izbor leka za kancer na osnovu prisustva (u nekim otelotvorenjima prisustva ili odsustva) BRAF<V600>mutacije. U jednom otelotvorenju, pokazano je da uzorak eksprimira BRAF<V600>mutaciju (na primer, BRAF<V600E>mutaciju), pri čemu je odabrano lečenje Jedinjenjem II u kombinaciji sa Jedinjenjem I (npr. kao što je ovde opisano). U nekim otelotvorenjima, pacijent se leči od neresektabilnog ili metastatskog melanoma postupkom koji se sastoji od davanja pacijentu (i) Jedinjenja II ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa. Postupci lečenja uključuju sve ovde navedene postupke lečenja. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom pacijenta nije prethodno lečen (npr. vemurafenibom ili BRAF inhibitorom). U nekim otelotvorenjima, pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom je prethodno lečen (u nekim otelotvorenjima, bez prethodnog lečenja BRAF inhibitorom).

[00194] Postupci za detekciju BRAF i mutantnog BRAF su poznati u struci i komercijalno su dostupni. Vidite, npr. Hailat et al, Diagn Mol Pathol.2012 Mar; 21(1):1-8. U nekim otelotvorenjima, BRAF V600E mutacija (takođe poznata kao V599E (T1796A)) je detektovana koristeći postupak koji uključuje određivanje prisustva mutacije jedne baze (T u A) na nukleotidnoj poziciji 1799 u kodonu 600 eksona 15. Ova mutacija može takođe biti rezultat dvobazne mutacije TG do AA na nukleotidnim pozicijama 1799-1800. Ostale mutacije se takođe mogu pojaviti na BRAF proteinskom ostatku 600. One uključuju V600K, V600D i V600R.

[00195] U nekim otelotvorenjima, prisustvo V600 mutacije može se odrediti procenom BRAF nukleinske kiseline, npr. genomske DNK ili iRNK, na prisustvo supstitucije baze na poziciji 1799. U nekim otelotvorenjima, detektovana je sledeća V600 mutacija: V600K (GTG do AAG), V600R (GTG do AGG), V600E (GTG do GAA) i/ili V600D (GTG do GAT), u svim slučajevima gde se zagrada odnosi na nukleotidne pozicije 1798-1800 BRAF. U nekim otelotvorenjima, mutirani BRAF polinukleotid sadrži T1799A mutaciju.

[00196] Različiti postupci za analizu DNK (kao što je genomska DNK ili kDNK) su poznati u struci, i uključuju, ali nisu ograničeni na profilisanje ekspresije gena, lančane reakcije polimeraze (PCR) (uključujući kvantitativni PCR u realnom vremenu (qRT-PCR) alel-specifični PCR), sekvenciranje, RNK-Sek, FISH i/ili analizu mikročipa. U nekim otelotvorenjima, analitički postupak za nukleinske kiseline je jedan ili više od: hibridizacije pomoću alel-specifičnih oligonukleotida, ekstenzije prajmera, alel-specifične ligacije, sekvenciranja (uključujući, ali se ne ograničavajući na Sangerovo sekvenciranje, pirosekvenciranje), ili elektroforetskih tehnika razdvajanja, npr. konformacioni polimorfizam jednolančanih fragmenata (SSCP) i heterodupleks analiza, analize 5' nukleaza, alel-specifični PCR, uključivanje terminatora sa bojom kontrolisano šablonom, alel-specifični oligonukleotidni testovi sa molekulskom sondom, testovi produženja jedne baze.

[00197] Analiza amplifikovanih sekvenci nukleinskih kiselina može se izvesti koristeći različite tehnologije, kao što su mikročipovi, testovi polarizacije fluorescencije i matricom potpomognuta laserska desorpcija/jonizacija (MALDI) masena spektometrija. U nekim otelotvorenjima, amplifikovane nukleinske kiseline se analiziraju sekvenciranjem. Dve dodatne metode koje se mogu koristiti su testovi zasnovani na invazivnom cepanju sa Flap nukleazama i metodologijama koje koriste sonde u obliku katanca.

[00198] COBAS® 4800 BRAF V600 test mutacije je komercijalno dostupan i koristi PCR tehnologiju u realnom vremenu. Svaka ciljno-specifična oligonukleotidna sonda u reakciji je označena fluorescentnom bojom koja služi kao reporter, i molekulom za gašenje koji apsorbuje (gasi) fluorescentne emisije iz reporterske boje unutar netaknute sonde. Tokom svakog ciklusa amplifikacije, sonda komplementarna sa jednolančanom sekvencom DNK u amplikonu se vezuje, i zatim se cepa putem 5 'do 3' nukleazne aktivnosti Z05 DNK polimeraze. Kada se reporterska boja odvoji od molekula za gašenje ovom nukleaznom aktivnošću, može se izmeriti fluorescencija karakteristične talasne dužine kada se reporterska boja pobudi odgovarajućim svetlosnim spektrom. Dve različite reporterske boje se koriste za označavanje ciljno specifične BRAF sonde divljeg tipa (WT) i sonde BRAF V600E mutacije (MUT). Pojačanje dve BRAF sekvence može se detektovati nezavisno u jednom reakcionom bunarčiću merenjem fluorescencije na dve karakteristične talasne dužine u namenskim optičkim kanalima.

[00199] U nekim otelotvorenjima, mutirani BRAF polinukleotid (npr. DNK) se detektuje koristeći postupak koji obuhvata (a) izvođenje PCR na nukleinskoj kiselini (npr. genomska DNK) ekstrahovanoj iz uzorka kancera pacijenta (kao što je uzorak pacijenta fiksiran formalinom i ubačen u parafin), i (b) određivanje ekspresije mutantnog BRAF polinukleotida u uzorku. U nekim otelotvorenjima, ekspresija mutantnog BRAF polinukleotida je detektovana koristeći postupak koji obuhvata (a) hibridizaciju prvog i drugog oligonukleotida na najmanje jednu varijantu BRAF ciljne sekvence, pri čemu je pomenuti prvi oligonukleotid barem delimično komplementaran sa jednom ili više varijanti ciljne sekvence i pomenuti drugi oligonukleotid je barem delimično komplementaran sa jednom ili više varijanti ciljne sekvence, i ima najmanje jedan interni selektivni nukleotid komplementaran samo sa jednom varijantom ciljne sekvence, (b) produženje drugog oligonukleotida polimerazom nukleinske kiseline, pri čemu je navedena polimeraza sposobna za produženje pomenutog drugog oligonukleotida poželjno kada pomenuti selektivni nukleotid formira bazni par sa ciljem, i znatno manje kada pomenuti selektivni nukleotid ne formira bazni par sa ciljem, i (c) detektovanje proizvoda pomenutog produženja oligonukleotida, pri čemu produženje označava prisustvo varijante ciljne sekvence za koju oligonukleotid ima komplementarni selektivni nukleotid. U nekim otelotvorenjima, mutirani BRAF polinukleotid (npr. DNK) se detektuje koristeći postupak koji obuhvata (a) izvođenje PCR na nukleinskoj kiselini (npr. genomska DNK) ekstrahovanoj iz uzorka kancera pacijenta (kao što je uzorak pacijenta fiksiran formalinom i ubačen u parafin), i (b) određivanje ekspresije mutantnog BRAF polinukleotida u uzorku. U nekim otelotvorenjima, mutirani BRAF polinukleotid (npr. DNK) se detektuje koristeći postupak koji obuhvata (a) izolovanje DNK (npr. genomske DNK) iz uzorka kancera pacijenta (kao što je uzorak kancera pacijenta fiksiran formalinom i ubačen u parafin), (b) izvođenje PCR na DNK ekstrahovanoj iz uzorka kancera pacijenta, i (c) određivanje ekspresije mutantnog BRAF polinukleotida u uzorku.

[00200] U nekim otelotvorenjima, ekspresija mutantnog BRAF polinukleotida je detektovana koristeći postupak koja obuhvata (a) izolovanje DNK (npr. genomske DNK) iz uzorka kancera pacijenta (kao što je uzorak kancera pacijenta fiksiran formalinom i ubačen u parafin), (b) hibridizaciju prvog i drugog oligonukleotida na najmanje jednu varijantu BRAF ciljne sekvence u DNK, pri čemu je navedeni prvi oligonukleotid barem delimično komplementaran sa jednom ili više varijanti ciljne sekvence i navedeni drugi oligonukleotid je barem delimično komplementaran sa jednom ili više varijanti ciljne sekvence i ima najmanje jedan interni selektivni nukleotid komplementaran samo sa jednom varijantom ciljne sekvence, (c) produženje drugog oligonukleotida polimerazom nukleinske kiseline, pri čemu je navedena polimeraza sposobna za produženje pomenutog drugog oligonukleotida poželjno kada pomenuti selektivni nukleotid formira bazni par sa ciljem, i znatno manje kada pomenuti selektivni nukleotid ne formira bazni par sa ciljem, i (d) detektovanje proizvoda navedenog produženja oligonukleotida, pri čemu produženje označava prisustvo varijante ciljne sekvence za koju oligonukleotid ima komplementarni selektivni nukleotid. U nekim otelotvorenjima, ekspresija mutantnog BRAF polinukleotida je detektovana koristeći postupak koji obuhvata (a) hibridizaciju prvog i drugog oligonukleotida na najmanje jednu varijantu BRAF ciljne sekvence, pri čemu je pomenuti prvi oligonukleotid barem delimično komplementaran sa jednom ili više varijanti ciljne sekvence i pomenuti drugi oligonukleotid je barem delimično komplementaran sa jednom ili više varijanti ciljne sekvence, i ima najmanje jedan interni selektivni nukleotid komplementaran samo sa jednom varijantom ciljne sekvence, (b) produženje drugog oligonukleotida polimerazom nukleinske kiseline, pri čemu je navedena polimeraza sposobna za produženje pomenutog drugog oligonukleotida poželjno kada pomenuti selektivni nukleotid formira bazni par sa ciljem, i znatno manje kada pomenuti selektivni nukleotid ne formira bazni par sa ciljem, i (c) detektovanje proizvoda pomenutog produženja oligonukleotida, pri čemu produženje označava prisustvo varijante ciljne sekvence za koju oligonukleotid ima komplementarni selektivni nukleotid.

[00201] U nekim otelotvorenjima, mutirani BRAF polinukleotid (npr. DNK) se detektuje koristeći postupak koji obuhvata (a) izvođenje PCR na nukleinskoj kiselini (npr. genomska DNK) ekstrahovanoj iz uzorka kancera pacijenta (kao što je uzorak kancera pacijenta fiksiran formalinom i ubačen u parafin), (b) određivanje ekspresije mutantnog BRAF polinukleotida sekvenciranjem nukleinske kiseline amplifikovane putem PCR. U nekim otelotvorenjima, mutantni BRAF polinukleotid (npr. DNK) se detektuje pomoću sekvenciranja (npr. Sangerova sekvenca ili pirosekvenciranje).

[00202] U nekim otelotvorenjima se analizira ekspresija BRAF (npr. BRAF<V600>) proteina. Takva analiza proteina može se izvršiti imunohistohemijom (IHC), npr. na uzorcima tumora pacijenta ili metodama proteomike.

[00203] Uzorak pacijenta se testira na ekspresiju jednog ili više biomarkera. Izvor tkiva ili uzorak ćelije može biti čvrsto tkivo kao iz svežeg, zamrznutog i/ili sačuvanog uzorka

4

organa ili tkiva ili biopsije ili aspirata, krv ili bilo koji sastojak krvi, telesne tečnosti, kao što je cerebrospinalna tečnost, amnionska tečnost, peritonealna tečnost ili intersticijalna tečnost, ćelije iz bilo kog trenutka gestacije ili razvoja pacijenta. Uzorak tkiva može da sadrži jedinjenja koja nisu prirodno mešana sa tkivom u prirodi, kao što su konzervansi, antikoagulansi, puferi, fiksatori, nutrijenti, antibiotici ili slično. Primeri za uzorke tumora ovde obuhvataju, ali nisu ograničeni na tumorske biopsije, tumorske ćelije, serum ili plazmu, cirkulišuće proteine plazme, ascitne tečnosti, primarne kulture ćelija ili ćelijske linije izvedene iz tumora ili koje pokazuju svojstva nalik tumoru, kao i sačuvane uzorke tumora, kao što su uzorci tumora fiksirani u formalinu, ubačeni u parafin ili zamrznuti uzorci tumora. U jednom otelotvorenju, uzorak pacijenta je uzorak kancera fiksiran formalinom i ubačen u parafin (FFPE) (npr. uzorak neresektabilnog ili metastatskog melanoma). Uzorak se može dobiti pre lečenja pacijenta lekom protiv kancera. Uzorak se može dobiti iz primarnog tumora ili iz metastatskog tumora. Uzorak se može dobiti kada se prvi put dijagnostikuje kancer i/ili, na primer, nakon što je tumor metastazirao. U nekim otelotvorenjima, metastazirani uzorak tumora potiče od pluća, kože, limfnog čvora, kosti, jetre, debelog creva, štitne žlezde i/ili jajnika.

IV. PROIZVODI

[00204] U drugom aspektu, opisan je proizvod za upotrebu u lečenju kancera (kao što je neresektabilni ili metastatski melanom pozitivan na BRAF<V600>). Proizvod sadrži ambalažu i etiketu ili uputstvo u pakovanju, na ambalaži ili povezano sa njom. Odgovarajuća ambalaža uključue, na primer, boce, bočice, špriceve, pakovanja za pilule, blister pakovanja, pakovanja sa označenim danima, itd. Ambalaža može biti izrađena od raznih materijala, kao što su staklo ili plastika. Ambalaža čuva ili sadrži kompoziciju koja sadrži lek za kancer (npr. Jedinjenje II) kao aktivni agens. U nekim otelotvorenjima, kompozicija koja sadrži lek za kancer je obezbeđena kao tableta. U nekim otelotvorenjima, proizvod obuhvata ambalažu i tabletu koja sadrži 60 mg Jedinjenja II. U nekim otelotvorenjima, proizvod obuhvata ambalažu i tabletu koja sadrži 20 mg ili 40 mg Jedinjenja II. U nekim otelotvorenjima, proizvod obuhvata prvu ambalažu koja sadrži (a) prvu kompoziciju koja sadrži Jedinjenje II (npr. 60 mg Jedinjenja II) obezbeđeno u vidu tablete i (b) drugu kompoziciju koja sadrži Jedinjenje I (npr. 960 mg Jedinjenja I) obezbeđeno u vidu tablete (npr. četiri tablete od 240 mg). U nekim otelotvorenjima, ambalaža je pakovanje za pilule ili blister pakovanje. U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija koja sadrži Jedinjenje I i druga kompozicija koja sadrži Jedinjenje II obezbeđene su kao jedan dozni oblik. U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija koja sadrži Jedinjenje II i druga kompozicija koja sadrži Jedinjenje I su koformulisane (npr. kao farmaceutska formulacija). U nekim otelotvorenjima, proizvod (npr. obezbeđen kao pakovanje za tablete ili blister pakovanje) sadrži 21 tabletu (npr. kompozicije koja sadrži Jedinjenje II (npr. tablete koje sadrže 60 mg Jedinjenja II, i tablete kompozicije koja sadrži Jedinjenje I (npr. tablete koje sadrže 240 mg jedinjenja I). U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II je obezbeđeno kao tableta od 60 mg. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II je obezbeđeno kao tableta koja sadrži jedan ili više sastojaka od laktoza monohidrata, mikrokristalne celuloze, kroskarmeloze natrijum i magnezijum stearata za jezgro tablete. U nekim otelotvorenjima, obloga tableta sadrži jedan ili više sastojaka od polivinil alkohola, delimično hidrolizovanog, titanijum dioksida, polietilen glikola 3350 i talka. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II je obezbeđeno kao tableta koja sadrži laktozu monohidrat, mikrokristalnu celulozu, kroskarmelozu natrijum i magnezijum stearat za jezgro tablete, i oblogu tablete koja sadrži polivinil alkohol, delimično hidrolizovan, titanijum dioksid, polietilen glikol 3350 i talk. U nekim otelotvorenjima, Jedinjenje II je obezbeđeno kao tableta koja sadrži (a) 60 mg Jedinjenja II (aktivni sastojak) i (b) laktoza monohidrat, mikrokristalnu celulozu, kroskarmelozu natrijum i magnezijum stearat za jezgro tablete, i oblogu tablete koja sadrži polivinil alkohol, delimično hidrolizovan, titanijum dioksid, polietilen glikol 3350 i talk.

[00205] Proizvod može dalje da obuhvati drugu ambalažu i/ili druge materijale poželjne sa komercijalnog i korisničkog aspekta, uključujući druge pufere, razblaživače, filtere, igle i špriceve.

[00206] Proizvod iz predmetnog pronalaska takođe uključuje informacije, na primer u obliku umetaka u pakovanju, koje ukazuju, na primer, da je Jedinjenje II za lečenje (npr. terapeutsko lečenje) pacijenta sa neresektabilnim ili metastatskim melanomom pozitivnim na BRAF<V600>mutaciju, u kombinaciji sa Jedinjenjem I, pri čemu lečenje obuhvata davanje (i) prve kompozicije koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) druge kompozicije koja sadrži Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg (npr. četiri tablete od 240 mg) dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa. Lečenje može, na primer, povećati preživljavanje pacijenta, smanjiti rizik od recidiva kancera i/ili povećati verovatnoću preživljavanja pacijenta. Umetak ili etiketa mogu biti u bilo kom obliku, kao što je papir ili na elektronskim medijima kao što je magnetski snimljeni medijum (npr. disketa) ili CD-ROM. Etiketa ili umetak mogu takođe uključivati i druge informacije koje se odnose na farmaceutske kompozicije i oblike doziranja u kompletu ili proizvodu. Postupci lečenja uključuju bilo koji od postupaka koji su ovde opisani. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom pacijenta nije prethodno lečen (npr. vemurafenibom ili BRAF inhibitorom). U nekim otelotvorenjima, pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom je prethodno lečen (u nekim otelotvorenjima, bez prethodnog lečenja BRAF inhibitorom).

[00207] Takođe je prikazan postupak za izradu proizvoda koji uključuje kombinovanje u pakovanju farmaceutske kompozicije koja sadrži Jedinjenje II i umetka koji ukazuje na to da je farmaceutska kompozicija za lečenje (npr. terapeutsko lečenje) pacijenta sa neresektabilnim ili metastatskim melanomom pozitivnim na BRAF<V600>mutaciju, u kombinaciji sa vemurafenibom, pri čemu (i) prva kompozicija koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so se daje u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) druga kompozicija koja sadrži Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so se daje u dozi od 960 mg dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa. Lečenje može, na primer, povećati preživljavanje pacijenta, smanjiti rizik od recidiva kancera, produžiti trajanje odgovora na lečenje i/ili povećati verovatnoću preživljavanja pacijenta. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom nije prethodno lečen (tj. prethodno lečen kao neresektabilni ili metastatski melanom). Postupci lečenja uključuju bilo koji od postupaka koji su ovde opisani. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom pacijenta nije prethodno lečen (npr. vemurafenibom ili BRAF inhibitorom). U nekim otelotvorenjima, pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom je prethodno lečen (u nekim otelotvorenjima, bez prethodnog lečenja BRAF inhibitorom).

[00208] Proizvod može dalje da obuhvati druge materijale poželjne sa komercijalnog i korisničkog aspekta, uključujući druge pufere, razblaživače, filtere, igle i špriceve.

V. KOMPLETI

[00209] Ovaj pronalazak se odnosi na komplete koji sadrže (i) prvu kompoziciju koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i (ii) drugu kompoziciju koja sadrži Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u lečenju neresektabilnog ili metastatskog melanoma, pri čemu se Jedinjenje II daje u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i pri čemu se Jedinjenje I daje u dozi od 960 mg (npr. četiri tablete od 240 mg), dva puta dnevno, svakog dana 28-dnevnog ciklusa. Komplet može dalje sadržati umetak u pakovanju koji ukazuje da je farmaceutska kompozicija za lečenje (npr. terapeutsko lečenje) pacijenta sa neresektabilnim ili metastatskim melanomom pozitivnim na BRAF<V600>mutaciju, u kombinaciji sa vemurafenibom, pri čemu (i) prva kompozicija koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so se daje u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) druga kompozicija koja sadrži

4

Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so se daje u dozi od 960 mg (npr. četiri tablete od 240 mg) dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa. Lečenje može, na primer, povećati preživljavanje pacijenta, smanjiti rizik od recidiva kancera, produžiti trajanje odgovora na lečenje i/ili povećati verovatnoću preživljavanja pacijenta. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom nije prethodno lečen (tj. prethodno lečen kao neresektabilni ili metastatski melanom). U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom nije prethodno lečen. U nekim otelotvorenjima, pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom je prethodno lečen (u nekim otelotvorenjima, bez prethodnog lečenja BRAF inhibitorom). U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija koja sadrži Jedinjenje II je tableta. U nekim otelotvorenjima, druga kompozicija koja sadrži Jedinjenje I je tableta. U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija koja sadrži Jedinjenje II i prva kompozicija koja sadrži Jedinjenje I su svaka obezbeđene kao tablete. U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija koja sadrži Jedinjenje I i druga kompozicija koja sadrži Jedinjenje II obezbeđene su kao pojedinačni dozni oblik. U nekim otelotvorenjima, prva kompozicija koja sadrži Jedinjenje II i druga kompozicija koja sadrži Jedinjenje I su koformulisane (npr. kao farmaceutska formulacija). Postupci lečenja uključuju bilo koji od postupaka koji su ovde opisani.

[00210] Pronalazak se takođe odnosi na dijagnostičke komplete koji su korisni za detekciju jednog ili više ovde identifikovanih biomarkera. Shodno tome, obezbeđen je dijagnostički komplet koji sadrži jedan ili više reagenasa za određivanje ekspresije BRAF, kao što je ekspresija BRAF<V600>biomarkera u uzorku pacijenta sa kancerom. Opciono, komplet dalje sadrži instrukcije za upotrebu kompleta ako pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom eksprimira BRAF<V600>, da bi se izabrala kompozicija koja sadrži Jedinjenje II u kombinaciji sa kompozicijom koja sadrži Jedinjenje I za lečenje (npr. terapeutsko lečenje) pacijenta, pri čemu lečenje obuhvata davanje (i) prve kompozicije koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) druge kompozicije koja sadrži Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom pacijenta nije prethodno lečen. U nekim otelotvorenjima, pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom je prethodno lečen (u nekim otelotvorenjima, bez prethodnog lečenja BRAF inhibitorom). Postupci lečenja uključuju bilo koji od postupaka koji su ovde opisani.

VI. METODE OGLAŠAVANJA

[00211] Ovde je dalje opisan postupak za promovisanje ili oglašavanje leka protiv kancera koji se sastoji od promovisanja ciljnoj publici upotrebe Jedinjenja II za lečenje (npr. terapeutsko lečenje) pacijenta sa neresektabilnim ili metastatskim melanomom pozitivnim na BRAF<V600>mutaciju, u kombinaciji sa vemurafenibom, pri čemu se lečenje sastoji od davanja (i) prve kompozicije koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) druge kompozicije koja sadrži Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa. Lečenje može, na primer, povećati preživljavanje pacijenta, smanjiti rizik od recidiva kancera, produžiti trajanje odgovora na lečenje i/ili povećati verovatnoću preživljavanja pacijenta. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom nije prethodno lečen. U nekim otelotvorenjima, pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom je prethodno lečen (u nekim otelotvorenjima, bez prethodnog lečenja BRAF inhibitorom). Oglašavanje je uopšteno plaćena komunikacija preko neličnih medijuma putem koje se identifikuje sponzor i poruka se kontroliše. Oglašavanje u tu svrhu ovde uključuje publicitet, odnose sa javnošću, plasman proizvoda, sponzorstvo, jemstvo i promociju prodaje. Ovaj pojam takođe uključuje i sponzorisana informativna javna obaveštenja koja se pojavljuju u bilo kojim štampanim medijima, osmišljena tako da se obraćaju masovnoj publici radi uveravanja, informisanja, promovisanja, motivisanja ili izmene ponašanja na drugi način prema povoljnom obrascu kupovine, podrške ili odobravanja ovog izuma.

[00212] Oglašavanje i promocija dijagnostičke metode ovde se može postići na bilo koji način. Primeri medija za oglašavanje koji se koriste za isporuku ovih poruka uključuju televiziju, radio, filmove, časopise, novine, internet i bilborde, uključujući reklame, koje su poruke koje se pojavljuju u elektronskim medijima. Oglasi takođe uključuju one na sedištima kolica za namirnice, na zidovima aerodromskih hodnika, i na stranama autobusa, ili one koje se čuju u porukama za vreme telefonskog čekanja ili preko sistema razglasa u prodavnicama, ili na bilo kom mestu gde se može postaviti vizuelna ili zvučna komunikacija.

[00213] Specifičniji primeri za promotivna ili reklamna sredstva uključuju televiziju, radio, filmove, internet, kao što su veb-kasting i vebinari, interaktivne računarske mreže čija je namena da dopru do simultanih korisnika, fiksne ili elektronske bilborde i druge javne znakove, postere, tradicionalnu ili elektronsku literaturu, kao što su časopisi i novine, druge medije, prezentacije ili kontakte sa pacijentima putem, npr. e-pošte, telefona, instant poruka, poštanskih, kurirskih, masovnih ili poštanskih pošiljaka, poseta uživo, itd.

4

[00214] Vrsta oglašavanja koja će se koristiti zavisi od mnogo faktora, na primer, od prirode ciljne publike do koje treba dopreti, npr. bolnice, osiguravajuća društva, klinike, lekari, medicinske sestre i pacijenti, kao i uzimanja u obzir troškova i relevantnih nadležnih zakona i propisa kojima se uređuje oglašavanje lekova i dijagnostika. Oglašavanje može biti usklađeno sa pacijentom ili prilagođeno na osnovu karakteristika korisnika koje su određene interakcijom prilikom usluga i/ili drugim podacima, poput demografskih podataka i geografske lokacije.

[00215] U nekim otelotvorenjima, promocija se vrši pomoću umetka u pakovanju, gde umetak daje uputstvo za primanje lečenja Jedinjenjem II u kombinaciji sa jedinjenjem I za lečenje (npr. terapeutsko lečenje) pacijenta, pri čemu lečenje obuhvata davanje (i) prve kompozicije koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) druge kompozicije koja sadrži Jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg (npr. četiri tablete od 240 mg) dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa. U nekim otelotvorenjima, promocija je praćena lečenjem pacijenta Jedinjenjem II sa Jedinjenjem I ili bez njega. U nekim otelotvorenjima, umetak u pakovanju ukazuje na to da se Jedinjenje II koristi za lečenje pacijenta ako je pacijentov uzorak neresektabilnog ili rekurentnog metastatskog melanoma pozitivan na BRAF<V600>mutaciju. Lečenje može, na primer, povećati preživljavanje pacijenta, smanjiti rizik od recidiva kancera, produžiti trajanje odgovora na lečenje i/ili povećati verovatnoću preživljavanja pacijenta. Postupci lečenja uključuju bilo koji od postupaka koji su ovde opisani. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom pacijenta nije prethodno lečen (npr. vemurafenibom ili BRAF inhibitorom). U nekim otelotvorenjima, pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom je prethodno lečen (u nekim otelotvorenjima, bez prethodnog lečenja BRAF inhibitorom).

[00216] Ovaj pronalazak takođe otkriva poslovne metode, koje obuhvataju reklamiranje upotrebe Jedinjenja II za lečenje (npr. terapeutsko lečenje) pacijenta sa neresektabilnim ili metastatskim melanomom pozitivnim na BRAF<V600>mutaciju, u kombinaciji sa Jedinjenjem I, pri čemu lečenje obuhvata davanje (i) prve kompozicije koja sadrži Jedinjenje II ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i (ii) druge kompozicije koja sadrži jedinjenje I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u dozi od 960 mg (npr. četiri tablete od 240 mg) dva puta dnevno, od 1. do 28. dana 28-dnevnog ciklusa. Lečenje može, na primer, povećati preživljavanje pacijenta, smanjiti rizik od recidiva kancera, produžiti trajanje odgovora na lečenje i/ili povećati verovatnoću preživljavanja pacijenta. Postupci lečenja uključuju bilo

4

koji od postupaka koji su ovde opisani. U nekim otelotvorenjima, neresektabilni ili metastatski melanom pacijenta nije prethodno lečen (npr. vemurafenibom ili BRAF inhibitorom). U nekim otelotvorenjima, pacijentov neresektabilni ili metastatski melanom je prethodno lečen (u nekim otelotvorenjima, bez prethodnog lečenja BRAF inhibitorom).

PRIMERI

[00217] U nastavku su dati primeri postupaka i kompozicija iz pronalaska.

Primer 1

[00218] Studija NO25395 (BRIM-7) je studija Faze Ib dizajnirana za procenu bezbednosti, podnošljivosti i farmakokinetike kombinacije (a) inhibicije MEK sa GDC-0973 i (b) inhibicije BRAF sa vemurafenibom. Ova multicentrična studija ima 2 faze: fazu eskalacije doze i fazu širenja kohorte.

[00219] Ova studija se sprovodi kod pacijenata sa neresektabilnim lokalno uznapredovalim ili metastatskim melanomom pozitivnim na BRAF<V600>mutaciju koji nisu prethodno lečeni vemurafenibom (nisu prethodno lečeni, ili su prethodno lečeni ali bez prethodnog izlaganja BRAF terapiji) ili su imali progresiju uz lečenje vemurafenibom neposredno pre uključivanja u ovu studiju. Ključni kriterijumi za uključivanje obuhvataju prisustvo V600E mutacije u tkivu tumora melanoma pomoću testa mutacije cobas® 4800 BRAF V600, merljivu bolest u skladu sa Kriterijumima za procenu odgovora kod solidnih tumora (RECIST) v1.1, ECOG status opšteg stanja ≤ 1, i odgovarajuću hematološku funkciju i funkciju krajnjih organa prema proceni pomoću ključnih laboratorijskih merenja. Pacijenti su bili isključeni ako su imali: okularnu patologiju ili faktore rizika koji predisponiraju okluziju retinalne vene, QTc> 450 ms, ili aktivne metastaze CNS. Pacijenti koji su lečeni stereotaktičnom radioterapijom ili hirurškim zahvatom bili su pogodni ako su bili stabilni ≥ 3 nedelje pre lečenja.

[00220] Svi pacijenti u fazi eskalacije doze primali su vemurafenib dva puta dnevno u kombinaciji sa GDC-0973 koji je davan svakodnevno, prema jednom od sledećih 28-dnevnih rsporeda: 14 uzastopnih dana studijskog leka, nakon čega sledi 14-dnevni odmor od leka (14/14), 21 uzastopni dan studijskog leka, nakon čega sledi 7-dnevni odmor od leka (21/7), ili kao kontinuirana dnevna doza (28/0). Svaki ciklus lečenja trajao je 28 dana.

[00221] Bilo je 10 kohorti za eskalaciju doze sa 3 do 6 pacijenata po kohorti (Slika 1). Pacijenti u Kohorti 1 primali su kontinuirano vemurafenib u dozi od 720 mg dva puta dnevno (BID) i 60 mg GDC-0973 jednom dnevno (QD) tokom 14 uzastopnih dana svakog 28-dnevnog ciklusa kombinovanog doziranja (14/14). Za eskalaciju doze je korišćen standardni

4

dizajn 3 3 i sproveden je inkrementalno, uzimajući u obzir bezbednost i podnošljivost kombinacije.

Rezultati

[00222] Od 20. septembra 2012. godine ukupno 92 pacijenta su primila najmanje jednu dozu kombinovanog lečenja vemurafenibom i GDC-0973. Sledeći dozni nivoi su ocenjeni bezbednim i podnošljivim:

Vemurafenib 720 mg BID GDC-097360 mg QD 14/14 (Kohorta 1) Vemurafenib 720 mg BID GDC-097380 mg QD 14/14 (Kohorta 2) Vemurafenib 960 mg BID GDC-097360 mg QD 14/14 (Kohorta 3) Vemurafenib 720 mg BID GDC-097360 mg QD 21/7 (Kohorta 1A) Vemurafenib 960 mg BID GDC-097360 mg QD 21/7 (Kohorta 1B) Vemurafenib 720 mg BID GDC-097360 mg QD 28/0 (Kohorta 1C) Vemurafenib 960 mg BID GDC-097380 mg QD 14/14 (Kohorta 4) Vemurafenib 720 mg BID GDC-0973100 mg QD 14/14 (Kohorta 2A) (BID = dva puta dnevno, QD = jednom dnevno)

[00223] Podobni pacijenti su imali neresektabilni ili metastatski melanom pozitivan na BRAF<V600>mutaciju i ECOG status opšteg stanja 0-1. Pacijenti nisu prethodno bili lečeni vemurafenibom, ili su imali progresiju bolesti na vemurafenibu. Studija se sastojala od faze eskalacije doze i faze širenja. Pacijenti su primali vemurafenib po 720 mg ili 960 mg BID (dva puta dnevno) svakog dana 28-dnevnog ciklusa. GDC-0973 je davan u dozama od 60 mg, 80 mg ili 100 mg QD (jednom dnevno) 14 dana (d) da/14 d ne (14/14), 21 d da/7 d ne (21/7), ili svakog dana 28-dnevnog ciklusa. Primarne krajnje tačke su bile maksimalno tolerisana doza (MTD), toksičnost koja ograničava dozu (DLT) oba leka, bezbednost i FK.

[00224] Slika 3 prikazuje karakteristike pacijenta od 6. jula 2012. godine. Sedamdeset pacijenata (70% muškaraca; medijana godina: 57,5 godina [raspon: 19-76], 74,3% Stadijum IV M1c, 54,5% je prethodno progradiralo na vemurafenibu) primilo je više od jedne doze ili jednu dozu GDC-0973 vemurafenib. Medijana broja ciklusa je bila tri.

[00225] Od 18. septembra 2012. godine, kod tri pacijenta je uočena toksičnost koja ograničava dozu: Produženi QT interval 3. stepena povezan sa vemurafenibom, koji je doveo do prekida vemurafeniba (kohorta IB), mukozitis 3. stepena povezan sa vemurafenibom i GDC-0973 (kohorta ID), i artralgija 3. stepena povezana sa vemurafenibom (kohorta ID).

[00226] Slika 4 prikazuje neželjena dejstva koja se pripisuju vemurafenibu ili GDC-0973 kod svih pacijenata od 6. jula 2012. godine. Najčešća neželjena dejstva kod svih pacijenata bila su dijareja (51,4%), neakneiformni osip (52,9%), mučnina (28,6%), umor

4

(30,0%) i fotosenzitivnost/opekotine od sunca (31,4%). Aditivna toksičnost nije uočena uz dodatak GDC-0973 vemurafenibu. Dvadeset procenata pacijenata je imalo povišene rezultate testa funkcije jetre, koji su uglavnom bili blagi (stepen 1 ili 2). Samo 4,3% pacijenata je imalo povišene rezultate testa funkcije jetre 3. ili 4. stepena. Artralgija je primećena kod 12,9% pacijenata, i to je u rasponu koji je primećen i kod lečenja samo vemurafenibom. Serozna horioretinopatija je uočena kod tri pacijenta, pri čemu su svi slučajevi bili blagi. Samo je jedan pacijent od 70 pacijenata lečenih vemurafenibom i GDC-0973 razvio kožni karcinom skvamoznih ćelija. Prema tome, učestalost karcinoma skvamoznih ćelija je bila niža od one opažene kod lečenja samo vemurafenibom. Ovaj zaključak je u skladu sa mehanizmom razvoja lezija karcinoma skvamoznih ćelija putem paradoksalne aktivacije MAPK puta. Najčešći neželjeni efekti povezani sa lečenjem stepena ≥3 bili su dijareja (5,7%), povišena kreatin fosfokinaza (4,5%), povišena alkalna fosfataza (4,5%) i makulopapularni osip (4,5%).

[00227] Na slici 5 prikazani su neželjeni događaji koji su doveli do prekida doza, smanjenja i trajnih prekida, do 6. jula 2012. godine. Najčešći razlozi za privremeni prekid vemurafeniba bili su: osip (8 pacijenata), abnormalne vrednosti testa funkcije jetre (LFT) (3 pacijenta) i artralgija (3 pacijenta). Najčešći razlozi za privremeni prekid GDC-0973 bili su: osip (5 pacijenata) i dijareja (3 pacijenta). Razlozi za prekid smanjenja primarne doze vemurafeniba bili su: Abnormalnosti LFT (1 pacijent), centralna serozna retinopatija (1 pacijent) i osip (1 pacijent). Razlozi za prekid smanjenja primarne doze GDC-0973 bili su: centralna serozna retinopatija (1 pacijent) i osip (1 pacijent). Razlog za ukidanje vemurafeniba je bio: Produženje QT intervala (1 pacijent). Samo mali broj pacijenata je zahtevao smanjenje doze ili trajne prekide. Ovi rezultati podržavaju zaključak da se kombinacija dobro podnosila kod ispitivanih pacijenata.

[00228] Izabrana su dva dozna nivoa za širenje: vemurafenib (720 mg i 960 mg BID) GDC-097360 mg QD 21/7.

[00229] Slika 6 prikazuje promenu veličine tumora od početne vrednosti do najboljeg odgovora kod pacijenata koji su prethodno progradirali na vemurafenibu. Lečenje kombinacijom kod pacijenata koji su progradirali tokom prethodnog lečenja vemurafenibom nije bilo povezano sa značajnim odgovorom tumora.

[00230] Na slici 7 prikazana je promena veličine tumora od početne vrednosti do najboljeg odgovora kod pacijenata koji ranije nisu primali vemurafenib. Preliminarni podaci o efikasnosti kod 25 pacijenata koji ranije nisu primali vemurafenib pokazali su da je svih 25 pacijenata imalo smanjenje tumora. Potvrđena stopa odgovora po kriterijumu RECIST 1.1 kod bolesnika koji ranije nisu primali vemurafenib je 40%, a stopa stabilne bolesti je 60%.

4

[00231] Slika 8A prikazuje odgovor na PET snimku kod pacijenta koji je progradirao uz prethodno lečenje vemurafenibom nakon lečenja vemurafenibom lekom GDC-0973. Značajno smanjenje PET aktivnosti je uočeno 14. dana kombinovanog tretmana. Ovaj rezultat je pokazao da je lečenje kombinacijom vemurafeniba i GDC-0973 moglo brzo da preokrene rezistenciju na vemurafenib. Slika 8B prikazuje dodatne primere PET odgovora kod pacijenata koji su progradirali uz prethodno lečenje vemurafenibom koji su lečeni vemurafenibom (Vem) GDC-0973 (GDC).

[00232] Ovi rezultati su pokazali da je GDC-0973 u kombinaciji sa vemurafenibom podnošljiv i neželjena dejstva se mogu podneti. Kombinacija je dostavljena bezbedno pri odgovarajućoj MTD za pojedinačni agens vemurafenib (960 mg BID) i GDC-0973 (60 mg 21/7). Farmakokinetički podaci iz studije pokazali su da su izloženosti vemurafenibu i GDC-0973 slične onima koje su prethodno primećene u studijama sa jednim agensom. Nisu uočene značajne FK interakcije između vemurafeniba i GDC-0973.

[00233] Ažurirani rezultati: Na dan 25. januara 2013. godine, potvrđeni odgovori su uočeni kod pacijenata za koje može da se proceni efikasnost na sledeći način:

[00234] Uobičajena povezana i odabrana neželjena dejstva, prema populaciji pacijenata, bila su sledeća:

* 1 pacijent sa neakneiformnim osipom, odnosno akneiformnim osipom nije ocenjen. ;[00235] Modifikacije lečenja usled neželjenih događaja, po populaciji pacijenata, bile su kako sledi: ; ;;; 1 ; ;; * Po protokolu, kod prekida studijskih lekova dužeg od 28 dana, pacijenti su povučeni iz studije.

[00236] Zaključci: Vemurafenib i kobimetinib se mogu bezbedno kombinovati pri njihovim MTD kao pojedinačnih agenasa. Najčešća neželjena dejstva bila su osip, dijareja, fotosenzitivnost i povećanje vrednosti testa funkcije jetre. Većina neželjenih dejstava je bila blage do umerene ozbiljnosti. Većina neželjenih događaja je rešena prekidom lečenja i palijativnom negom, dok je smanjenje doze bilo retko.

Primer 2

[00237] Pokazalo se da je lečenje sa 960 mg vemurafeniba BID (dva puta dnevno) od 1. do 28. dana i sa 60 mg GDC-0973 QD (jednom dnevno) od 1. do 21. dana u 28-dnevnim ciklusima lečenja, bezbedno i dobro se podnosi. GO28141 je multicentrična, randomizovana, dvostruko slepa, placebom kontrolisana klinička studija Faze III za procenu bezbednosti i efikasnosti vemurafeniba u kombinaciji sa GDC-0973 samo sa vemurafenibom, kod prethodno nelečenih pacijenata pozitivnih na BRAF<V600>mutaciju sa neresektabilnim lokalno uznapredovalim ili metastatskim melanomom.

[00238] Oko 500 prethodno nelečenih pacijenata pozitivnih na BRAF<V600>mutaciju sa neresektabilnim lokalno uznapredovalim ili metastatskim melanomom će biti randomizovano u odnosu 1:1 da bi dobili lečenje po jednom od sledećih režima:

[0102] - Gupa A (kontrolna grupa): vemurafenib 960 mg oralno (PO) BID od 1. do 28. dana i placebo PO QD od 1. do 21. dana svakog 28-dnevnog ciklusa lečenja.

[0103] - Grupa B (istraživačka grupa): vemurafenib 960 mg PO BID od 1. do 28. dana i GDC-097360 mg PO QD od 1. do 21. dana svakog 28-dnevnog ciklusa lečenja.

[0104] BID = dva puta dnevno; QD = jednom dnevno.

2

[00239] Stratifikovana šema randomizacije sa permutovanim blokom će se koristiti za dodeljivanje lečenja na osnovu sledećih faktora stratifikacije:

[0105] - Geografski region(Severna Amerika, Evropa, Australija/Novi Zeland ili drugi).

[0106] - Metastatska klasifikacija (neresektabilni stadijum IIIc, M1a, M1b ili M1c).

[0107] Slika 2 prikazuje šemu doziranja za vemurafenib i GDC-0973/placebo u studiji.

[00240] Bezbednost i podnošljivost svih pacijenata je pažljivo praćena tokom svih ciklusa terapije, prilikom studijske posete za kraj lečenja i tokom perioda praćenja. Pacijenti su ispitivani na neželjena dejstva svake 2 nedelje tokom prva dva ciklusa, zatim pre svakog sledećeg ciklusa, i prema potrebi.

[00241] Tumorski odgovor je procenjen prema kriterijumima RECIST v1.1. Svaka bolest koja može da se proceni i meri dokumentuje se prilikom skrininga i ponovo procenjuje pri svakoj narednoj evaluaciji tumora. Odgovor se procenjuje od strane istraživača u intervalima od 8 nedelja. Po nahođenju istraživača, CT/MR snimanja se ponavljaju u bilo kom trenutku ako se sumnja na progresivnu bolest.

[00242] Opšti terminološki kriterijumi za neželjena dejstva (CTCAE) NCI v4.0 koriste se za karakterizaciju profila toksičnosti studijskog lečenja za sve pacijente. EKG testovi se obavljaju 15. dana prva 3 ciklusa, a zatim 15. dana na svaka 3 ciklusa lečenja (ciklusi 6, 9, 12, itd.). Dermatološka procena se obavlja na početku ciklusa 2 (± 1 nedelja), a zatim na svaka 3 ciklusa lečenja (± 1 nedelja) nakon toga (ciklusi 5, 8, 11, itd.). Oftalmološka ispitivanja se ponavljaju ako je to klinički naznačeno.

[00243] Pacijenti se leče do progresije bolesti, smrti, neprihvatljive toksičnosti ili povlačenja pristanka, šta god prvo nastupi. Pacijenti u grupi sa vemurafenibom i placebom ne ispunjavaju uslove za prelazak u grupu lečenja sa vemurafenibom i GDC-0973 pri progresiji bolesti, i prate se radi preživljavanja.

[00244] Primarni cilj efikasnosti ove studije je procena efikasnosti vemurafeniba u kombinaciji sa GDC-0973, u poređenju sa vemurafenibom i placebom, kod prethodno nelečenih pacijenata pozitivnih na BRAF<V600>mutaciju sa neresektabilnim lokalno uznapredovalim ili metastatskim melanomom, merena produženjem PFS, prema proceni istraživača u studijskom centru.

[00245] Sekundarni ciljevi efikasnosti ove studije su procena efikasnosti vemurafeniba u kombinaciji sa GDC-0973, u poređenju sa vemurafenibom i placebom, kod prethodno nelečenih pacijenata pozitivnih na BRAF<V600>mutaciju sa neresektabilnim lokalno uznapredovalim ili metastatskim melanomom, merena brzinom objektivnog odgovora (objective response rate, ORR), trajanjem odgovora (duration of response, DOR) i ukupnim preživljavanjem (overall survival, OS).

[00246] Bezbednosni cilj ove studije je da se okarakteriše profil toksičnosti kod pacijenata koji primaju vemurafenib i GDC-0973 u odnosu na vemurafenib i placebo. Farmakokinetički cilj ove studije je da se odredi farmakokinetika GDC-0973 i vemurafeniba i da se uporedi farmakokinetika vemurafeniba kada se daje sa GDC-0973 u odnosu na farmakokinetiku vemurafeniba kada se daje sa placebom. Ishod ovog istraživanja koji prijavljuju pacijenti je da se proceni kvalitet života vezan za zdravlje pacijenata koji primaju vemurafenib i GDC-0973 u odnosu na vemurafenib i placebo, kao što je mereno Upitnikom o kvalitetu života Evropske organizacije za istraživanje i lečenje karcinoma (EORTC) i upitnikom 5 dimenzija EuroQol (EQ-5D).

[00247] Pacijenti

[00248] Da bi bili podobni za ovu studiju, pacijenti prethodno nisu lečeni od neresektabilnog lokalno uznapredovalog ili metastatskog melanoma. Pacijentima je potvrđena mutacija BRAF<V600>na tumorskom tkivu njihovog melanoma. Neograničavajući spisak kriterijuma za uključivanje i isključivanje uključuje:

[0108] Kriterijumi za uključivanje specifični za bolest:

[0109] - Pacijenti sa histološki potvrđenim melanomom, bilo neresektabilnim melanomom stadijuma IIIc ili metastatskim melanomom stadijuma IV, kako je definisano u 7. izdanju u AJCC (Američki komitet za kancer).

[0110] - Pacijenti nisu prethodno dobijali lečenje za lokalno uznapredovalu neresektabilnu ili metastatsku bolest (tj. nije bilo prethodne sistemske terapije protiv kancera za uznapredovalu bolest, stadijum IIIc i IV). Dozvoljena je prethodna adjuvantna imunoterapija (uključujući ipilimumab).

[0111] - Dokumentacija o pozitivnom statusu BRAF<V600>mutacije u tumorskom tkivu melanoma (arhivski ili sveže pribavljeni uzorci tumora).

[0112] - Merljiva bolest u skladu sa RECIST v1.1

[0113] Kriterijumi za isključivanje vezani za kancer:

[0114] - Istorija prethodnog lečenja inhibitorima RAF ili MEK puta.

[0115] - Palijativna radioterapija u roku od 14 dana pre prve doze studijskog lečenja.

[0116] - Velika operacija ili traumatska povreda u roku od 14 dana pre prve doze studijskog lečenja.

4

[0117] - Aktivni malignitet osim melanoma koji bi potencijalno mogao da ometa tumačenje mera efikasnosti. Pacijenti sa prethodnim malignitetom u protekle 3 godine su isključeni, osim pacijenata sa reseciranim karcinomom bazalnih ili skvamoznih ćelija kože, melanomom in-situ, karcinomom in-situ grlića materice i karcinomom insitu dojke.

[0118] - Dozvoljena je istorija izolovanog povećanja antigena specifičnog za prostatu u odsustvu radiografskih dokaza metastatskog kancera prostate.

[00249] GDC-0973 i placebo

[00250] GDC-0973 se isporučuje u obliku tableta od 20 mg za oralnu upotrebu. GDC-0973 se pakuje u blister pakovanja. Placebo za GDC-0973 se pakuje u blister pakovanja identična pakovanjima GDC-0973. Neaktivni sastojci u GDC-0973 su sledeći: laktoza monohidrat, mikrokristalna celuloza, kroskarmeloza natrijum i magnezijum stearat za jezgro tablete. Obloga tablete se sastoji od polivinil alkohola, delimično hidrolizovanog, titanijum dioksida, polietilen glikola 3350 i talka. Placebo za GDC-0973 se sastoji od svih neaktivnih sastojaka navedenih gore, i po izgledu je identičan leku GDC-0973.

[00251] Vemurafenib

[00252] Vemurafenib se isporučuje u obliku tableta od 240 mg za oralnu upotrebu. Vemurafenib se pakuje u boce. Neaktivni sastojci u tabletama vemurafeniba su: hipromeloza acetat sukcinat, kroskarmeloza natrijum, koloidni silicijum dioksid, magnezijum stearat, hidroksipropil celuloza (jezgro tablete), polivinil alkohol, titanijum dioksid, polietilen glikol 3350, talk i crveni oksid gvožđa (obloga tablete).

[00253] Testiranje BRAF<V600>mutacije

[00254] Pacijenti čiji su tumori melanoma na testiranju pozitivni na BRAF<V600>mutaciju na testu mutacije cobas® 4800 BRAF V600 podobni su za uključivanje u kliničku studiju ako su ispunjeni drugi kriterijumi. Uzorci tumora se mogu dobiti iz primarnog tumora melanoma ili sa bilo kog metastatskog mesta, sve dok su ispunjeni zahtevi ispod. U nekim otelotvorenjima, arhivski ili sveže pribavljeni uzorci tumora fiksirani formalinom i ubačeni u parafin (FFPE) su korišćeni za test mutacije cobas® 4800 BRAF V600. U nekim otelotvorenjima, uzorci tumora se sakupljaju kao sveže zamrznuta tkiva, ali tkiva dobijena iz aspiracije finom iglom (FNA) nisu dozvoljena.

Claims (24)

PATENTNI ZAHTEVI

1. Farmaceutski proizvod koji sadrži (i) prvu kompoziciju koja sadrži [3,4-difluor-2-[(2-fluor-4-jodfenil)aminolfenil][3-hidroksi-3-[(2S)-2-piperidinil]-1-azetidinil]metanon (Jedinjenje II) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i (ii) drugu kompoziciju koja sadrži propan-1-sulfonsku kiselinu {3-[5-(4-hlorfenil)-1H-pirolo[2,3-b]piridin-3-karbonil]-2,4-difluor-fenil}-amid (Jedinjenje I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, kao kombinovani preparat za istovremenu ili sekvencijalnu upotrebu u lečenju neresektabilnog ili metastatskog melanoma pozitivnog na BRAF<V600>mutaciju, pri čemu se Jedinjenje II daje u dozi od 60 mg, od 1. do 21. dana 28-dnevnog ciklusa, i pri čemu se Jedinjenje I daje u dozi od 960 mg, dva puta dnevno svakog dana 28-dnevnog ciklusa, i pri čemu je navedena primena za ljudske pacijente čiji neresektabilni ili metastatski melanom nije prethodno lečen.

2. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema zahtevu 1, pri čemu se prva kompozicija daje sekvencijalno sa drugom kompozicijom.

3. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema zahtevu 1, pri čemu se prva kompozicija daje istovremeno sa drugom kompozicijom.

4. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema zahtevu 1, pri čemu su prva i druga kompozicija koformulisane.

5. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-4, pri čemu je Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so u suštini u amorfnom obliku.

6. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-4, pri čemu je Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so u amorfnom obliku.

7. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-6, pri čemu je Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so sadržano u čvrstom molekulskom kompleksu formiranom sa hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinatom tako da je imobilisano u svom amorfnom obliku.

8. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema zahtevu 7, pri čemu su količine Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinata u navedenom kompleksu u odnosu od oko 1:9, odnosno do oko 5:5.

9. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema zahtevu 7, pri čemu su količine Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinata u pomenutom kompleksu u odnosu od oko 2,8, odnosno do oko 4,6.

10. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema zahtevu 7, pri čemu su količine Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinata u pomenutom kompleksu u odnosu od oko 3:7.

11. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema zahtevu 7, pri čemu su količine Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli i hidroksipropil metil celuloza acetat sukcinata u navedenom kompleksu u odnosu 3:7.

12. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-7, pri čemu druga kompozicija sadrži mešavinu u kojoj je oko 97 mas.% smeše čvrsti molekulski kompleks prema zahtevu 7 i oko 3 mas.% smeše je silicijum dioksid.

13. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-7, pri čemu druga kompozicija sadrži suspenziju čvrstog molekulskog kompleksa prema zahtevu 7 u farmaceutski prihvatljivom nosaču.

14. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-7, pri čemu druga kompozicija obuhvata tabletu koja sadrži čvrsti molekulski kompleks Jedinjenja I ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i HPMC-AS.

15. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-14, pri čemu prva kompozicija sadrži jedno ili više od laktoza monohidrata, mikrokristalne celuloze, kroskarmeloze natrijuma i magnezijum stearata.

16. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-14, pri čemu je Jedinjenje II obezbeđeno kao tableta koja sadrži laktoza monohidrat, mikrokristalnu celulozu, kroskarmelozu natrijum i magnezijum stearat.

17. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema zahtevu 16, pri čemu tableta sadrži oblogu tablete koja sadrži polivinil alkohol, delimično hidrolizovan, titanijum dioksid, polietilen glikol 3350 i talk.

18. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-17, pri čemu je Jedinjenje II obezbeđeno kao tableta od 20 mg, kao tableta od 40 mg, ili kao tableta od 60 mg.

19. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-18, pri čemu se druga doza od 960 mg Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli daje oko 12 sati nakon prve doze od 960 mg Jedinjenja I ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

20. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-19, pri čemu se Jedinjenje I ili njegova farmaceutski prihvatljiva so i Jedinjenje II ili njegova farmaceutski prihvatljiva so daju oralno, sa hranom ili bez hrane.

21. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-20, pri čemu je neresektabilni ili metastatski melanom, melanom pozitivan na BRAF<V600E>mutaciju.

22. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-21, pri čemu je neresektabilni ili metastatski melanom metastatski melanom.

23. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema bilo kom od zahteva 1-22, pri čemu se BRAF<V600>mutacija određuje korišćenjem postupka koji obuhvata (a) izvođenje PCR ili sekvenciranja na nukleinskoj kiselini (npr. DNK) ekstrahovanoj iz uzorka melanoma pacijenta i (b) određivanja ekspresije BRAF<V600>u uzorku.

24. Farmaceutski proizvod za upotrebu prema zahtevu 23, pri čemu je uzorak melanoma uzorak fiksiran formalinom i ubačen u parafin.