RS59467B1 - Derivati pirimidina korisni kao selektivni jak3 i/ili jak1 inhibitori - Google Patents

Derivati pirimidina korisni kao selektivni jak3 i/ili jak1 inhibitori

Info

Publication number
RS59467B1
RS59467B1 RSP20191336A RS59467B1 RS 59467 B1 RS59467 B1 RS 59467B1 RS P20191336 A RSP20191336 A RS P20191336A RS 59467 B1 RS59467 B1 RS 59467B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
fluoro
amino
propyl
chloro
phenylamino
Prior art date
Application number
Other languages
English (en)
Inventor
Xianping Lu
Jindi Yu
Qianjiao Yang
Zhibin Li
Desi Pan
Song Shan
Jiangfei Zhu
Xianghui Wang
Xiangheng Liu
Zhiqiang Ning
Original Assignee
Shenzhen Chipscreen Biosciences Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Shenzhen Chipscreen Biosciences Ltd filed Critical Shenzhen Chipscreen Biosciences Ltd
Publication of RS59467B1 publication Critical patent/RS59467B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
    • C07D239/48—Two nitrogen atoms
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P17/00—Drugs for dermatological disorders
    • A61P17/06—Antipsoriatics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P19/00—Drugs for skeletal disorders
    • A61P19/02—Drugs for skeletal disorders for joint disorders, e.g. arthritis, arthrosis
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00—Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08—Antiallergic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/02—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings
    • C07D239/24—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D239/28—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings not condensed with other rings having three or more double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D239/46—Two or more oxygen, sulphur or nitrogen atoms
    • C07D239/47—One nitrogen atom and one oxygen or sulfur atom, e.g. cytosine
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Orthopedic Medicine & Surgery (AREA)
  • Rheumatology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Physical Education & Sports Medicine (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Dermatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)

Description

Opis
OBLAST
[0001] Predmetni pronalazak pripada oblasti medicine, i odnosi se na aromatična heterociklična jedinjenja koja imaju inhibitoru aktivnost prema Janus kinazi 3 (JAK3) i/ili Janus kinazi 1 (JAK1). Predmetni pronalazak se takođe odnosi na postupke za pripremu jedinjenja, farmaceutsku kompoziciju koja obuhvata jedinjenje kao aktivni sastojak, i njihovu farmaceutsku upotrebu. Jedinjenje iz predmetnog pronalaska može da se koristi kao inhibitor JAK3 i/ili JAK1 kinaze, i u kliničkoj primeni, kao što je lečenje/prevencija bolesti koje su vezane sa abnormalnim aktivnostima ovih kinaza, uključujući autoimunske bolesti, inflamatorne bolesti, kancere i druge bolesti.
STANJE TEHNIKE
[0002] U 2002, ukupno 518 gena koji kodiraju proteinske kinaze u genomu je identifikovano od strane Manning et al., pri čemu je 218 gena blisko vezano sa pojavom i razvojem humanih bolesti (Manning G., et al. 2002, Science, 298:1912-1934). U do sada dobijenim lekovima, nalazi se 20% farmaceutika koji koriste enzime kao mete, i posebno, lekovi koji ciljaju proteinske kinaze su od posebnog značaja u kliničkim primenama.
[0003] Proteinska kinaza je tip unutarćelijskog enzima koji zavisi od prenosioca signala koja katalizuje fosforilaciju određenih proteina i sprovodi postupke prenošenja signala, koji uglavnom uključuje tirozin proteinske kinaze (JAKs, Src, Abl, EGFR, FGFR, PDGFR etc.), serin/treonin proteinske kinaze (PKC, MAPK, Rho kinaze etc.), bispecifične proteinske kinaze (MAPKK) i fosfatidil inozitol kinazu (PI3K). Postupak fosforilacije/defosforilacije proteinske kinaze je sposoban da reguliše razne biološke procese kod različitih ćelija, kao što je metabolizam, ćelijska diferencijacija, preživljavanje ćelija, apoptoza, organogeneza, angiogeneza, i imunski odgovori itd. (Shchemelinin I., et al. 2006, Folia Biol., 52: 81-100).
[0004] JAK kinaze (Janus kinaze, skraćeno naznačene sa JAK-e, uključujući 4 poznata člana: JAK3, JAK1, TYK2, i JAK2) su mala familija u superfamiliji unutarcitoplazmatske ne-receptorske tirozin proteinske kinaze. JAK3 je raspoređena u kostnoj srži i limfnom sistemu, dok su JAK1, TYK2, i JAK2 široko raspoređene u mnoštvu ćelija u tkivima. Kada se JAKs vežu za receptor citokina na površini ćelije, aktiviraju se JAKs koje su kuplovane sa receptorom, nakon čega se receptor fosforiluje, čime se obezbeđuju regrutujuća mesta odgovora, tj., JAKs vrše fosforilaciju STAT proteina, koji su citoplazmatski transduceri signala i aktivatori transkripcije, STAT proteini (STAT1∼4, STAT5a, STAT5b, i STAT6). Posle dimerizacije, JAKs fosforilovani STAT proteini se premeštaju u jedro i regulišu ekspresiju gena. Ova put se zove signalni put JAK/STAT (O’Shea J. J., et al.2013, N. Engl. J. Med., 368: 161-170).
[0005] JAK/STAT signalni put je put signalne transdukcije koji je stimulisan mnogim citokinima i receptorima faktora rasta. Ovi faktori uključuju interleukine (IL-2∼7, IL-9, IL-10, IL-15, i IL-21), interferone (IFN-α, IFN-β, i IFN-y), eritropoetin (EPO), faktor stimulacije kolonije granulocita-makrofaga (GM-CSF), hormon rasta (GH), prolaktin (PRL), trombopoetin (TPO) itd., koji su uključeni u proliferaciju imunskih ćelija i hematopoetskih stem ćelija, i igraju ključnu ulogu u imunoregulatornim biološkim procesima (Ghoreschi K., et al.2009, Immunol. Rev., 228: 273-287). Različiti podtipovi JAK kinaza mogu da se aktiviraju od strane različitih receptora, tako da se postignu raznovrsne biološke funkcije.
[0006] JAK1 može da se veže za IL-10, IL-19, IL-20, IL-22, IL-26, IL-28, IFN-α, IFN-γ, IL-6 u gp130 familiji i drugi receptori koji sadrže zajednički gama lanac (yc) (Rodig S J., et al. 1998, Cell, 93: 373-383). Eksperiment u kome se uklanja gen koji kodira za JAK1 u mišjem modelu je ukazao da ovaj enzim igra ključnu ulogu u biološkim efektima takvih gore opisanih grupa citokinskih receptora (Kisseleva T., et al.
2002, Gene, 285: 1-24). JAK1 je nova meta za bolesti poput bolesti koje su u vezi sa imunskim sistemom, inflamacijom i kancerom itd. JAK1 inhibitori mogu da se koriste za lečenje/prevenciju bolesti, uključujući ali bez ograničenja, autoimunske bolesti, inflamaciju i tumore (Hornakova T., et al. 2010, Blood, 115:3287-3295), kao što su leukemije, limfomi, melanomi, artritis, psorijaza, Kronova bolest, lupus eritematozus, stečeni sindrom imunodeficijencije, Behetova bolest (Hou S., et al. 2013, Hum. Genet., 132:1049-1058), itd.
[0007] Pronađeno je da JAK2 ima značajnu ulogu u regulaciji procesa brojnih receptora, uključujući EPO, GH, PRL, IL-3, IFN-γ itd. (Kisseleva T., et al.2002, Gene, 285: 1-24; Levy D. E., et al.2002, Nat. Rev. Mol. Cell Biol., 3: 651-662; O’Shea J. J., et al.2002, Cell, 109 (suppl.): S121-S131). U mišjem modelu, utišavanje gena za JAK2 može da dovede do smrti anemičnih životinja (Schindler C. et al.2007, J. Biol. Chem., 282: 20059-20063); Dok kod ljudi, bazna mutacija JAK2V617F u JAK2 genu je blisko u vezi sa pojavom mijeloproliferativnih bolesti, uključujući policitemiju veru (PV), esencijalnu trombocitemiju (ET), idiopatsku mijelofibrozu (IMF), i hroničnu mijelogenu leukemiju (CML) itd. (Ghoreschi K., et al.
2009, Immunol. Rev., 228: 273-287). Prema tome, JAK2 je postala precizna meta za lečenje/prevenciju takvih bolesti.
[0008] JAK3 reguliše ćelijsku signalizaciju preko vezivanja za zajednički gama lanac (yc) u receptorskim kompleksima citokina, kao što su IL-2, IL-4, IL-7, IL-9, IL-15, i IL-21. Mutacija u JAK3 ili yc može da dovede do ozbiljne kombinovane imunodeficijencije (SCID) (Villa A., et al. 1996, Blood, 88: 817-823). Abnormalna aktivnost JAK3 je predstavljena značajnim smanjenjem prisustva T-ćelija i NK ćelija, i gubitka u funkcijama B-ćelija, koji ima snažan uticaj na normalne biološke funkcije imunskog sistema itd. Na osnovu njegovih funkcionalnih karakteristika i specijalne tkivne distribucije, JAK3 je postao obećavajuća farmaceutska meta onih bolesti koje su povezane sa imunskim sistemom, i prema tome njeni inhibitori će imati veliku kliničku vrednost u lečenju/prevenciji reumatoidnog artritisa (RA), Kronove bolesti, sistemskog lupusa eritematozusa, multiple skleroze, tipa I dijabetesa, psorijaze, alergijskih bolesti, astme, hronične opstruktivne bolesti pluća, leukemije, limfoma, transplanta organa i drugih bolesti (Papageorgiou A. C., et al.2004, Trends Pharm. Sci., 2004, 25: 558-562).
[0009] TYK2 je prvi član u JAK familiji, i može da se aktivira brojnim receptorima, kao što su receptori za (IFNs), IL-10, IL-6, IL-12, IL-23, i IL-27. Kod miševa, gubitak u funkciji TYK2 može da dovede do deficijencije u signalnim putevima mnogih receptora citokina, koji dalje mogu da imaju za rezultat virusnu infekciju, i smanjuje antibakterijsku imunsku funkciju, i prema tome povećava mogućnost infekcije u plućima (Kisseleva T., et al.2002, Gene, 285: 1-24). Dodatno, istraživanje u grupi Larner A.C. je pokazalo da je TYK2 koristan u suprimiranju rasta i metastaza u kanceru grudi (Zhang Q., et al.2011, J. Interferon Cytokine Res., 31:671-677); nedavno, ova grupa je takođe prijavila da TYK2 olakšava regulisanje gojaznosti pomoću mrkog masnog tkiva (eng. brown adipose tissue, BAT) kod miševa i ljudi, tako da može da štiti organizme od gojaznosti ili, ili čak da je preokrene (Derecka M., et al., 2012, Cell Metab., 16:814-824). Ovo može da obezbedi novu priliku za gojazne pacijente koji pate od kancera.
[0010] U novembru 2012, pan-JAKs inhibitor Xeljanz (Tofacitinib) iz Pfizera je odobren od strane FDA za lečenje RA. U oktobru 2013, kompanija je predstavila podatke faze III kliničkog ispitivanja Xeljanz za lečenje psorijaze. U poređenju sa dvostruko slepim testom Enbrel (Etanercept), ovaj lek zadovoljava zahteve za klinička ispitivanja koja obuhvataju novi tretman (eng. non-inferiority trial). Međutim, Xeljanz sadrži nekoliko nepoželjnih sporednih efekata, na primer, može da dovede do smanjene količine eritrocita i leukocita, i povećanog nivoa holesterola. Ovo može da bude povezano sa njegovom visokom inhibitornom aktivnosti prema JAK2 i niskoj selektivnosti (Zak M., et al.2012, J. Med. Chem., 55: 6176-6193). Prema tome, veoma je traženo za istaživanje i otkriće selektivnih inhibitora JAK.
[0011] Postoji nekoliko selektivnih inhibitora JAK u različitim kliničkim fazama koji su korišćeni za lečenje bolesti koje su povezane sa imunskim sistemom, kao što je RA, Kronova bolest, psorijaza, i mijelofibroza, uključujući selektivni JAK3 inhibitor VX-509, selektivni JAK1 inhibitor GLPG0634 (Feist E., et al. 2013, Rheumatology, 52:1352-1357) i INCB39110 (http://www.incyte.com/research/pipeline) itd. Osim toga, neki pacijenti su prikazani za selektivne inhibitore sa različitim strukturnim tipovima: 1) selektivni JAK3 inhibitori, kao što je pirolo[1,2-b]piridazin (WO2012125887), pirazolo[3,4-d]pirimidin (WO2011048082, WO2011134861, WO2012022681), diaminopirimidini (WO2011090760, WO2011029807, WO2012015972), pirolo[2,3-b]piridin (JP2012012332), diamino-piridinil-3-formamid (WO2010061971, US20120108566), pirolo[2,3-b]pirazin (WO2011144584, WO2011144585).; 2) selektivni JAK1 inhibitori, kao što su triciklična jedinjenja (WO2011086053), supstituisani pirazoli i piroli (WO2010135650, WO2011112662), anilinoftalazini (WO2012037132). Dodatno, pacijenti su takođe predloženi za selektivne JAK2 inhibitore i selektivne TYK2 inhibitore, i inhibitore koji obuhvataju oba podtipa (JAK3/1, JAK1/2), koji neće dalje biti ovde opisani.
[0012] Inducibilna T-ćelijska kinaza (ITK), koja je takođe naznačena sa Emt ili Tsk, je jedna od nereceptorskih tirozin kinaza u Tec familiji. ITK je eksprimirana u T-ćelijama, NKT ćelijama i mast ćelijama. Ova kinaza igra kljućnu ulogu u regulaciji signalnog puta receptora T-ćelija (TCR), CD28, CD2, receptora hemokina CXCR4 i FcεR itd. Sekrecija citokina tipa Th2 (uključujući IL-4, IL-5, i IL-13 itd.) igra važan deo u regulaciji imunske inflamacije. Deficijencija ITK ima uticaj na Th2 ćelijski odgovor, čime ublažava hroničnu ili kasniju inflamatornu reakciju (Sahu N., et al.2009, Curr. Top. Med. Chem., 9: 690-703; Lin T. A., et al.2004, Biochemistry, 43: 11056-11062). Kinaza B-ćelije limfocita (BLK) je jedna od nereceptorskih tirozin kinaza u Src familiji, koja je eksprimirana u B limfocitima, i odnosi se na rast i diferencijaciju B limfocita. Tesna veza između BLK kinaze, ili fosfataze i odgovarajućih ko-receptora ima važan efekat na regulaciju signalnog puta receptora B-ćelija (BCR), na primer, takva kinaza može da utiče na apoptozu i obrazovanje zadržavanja BCR (Texido G., et al.2000, Mol. Cell Biol., 20: 1227-1233). BLK ima takođe važan uticaj na pre-B-ćelijskim receptorom-posredovanu aktivaciju NF-κB (Saijo K., et al.2003, Nat. Immunol., 4: 274-279). Nedavna istraživanja su pokazala da je BLK u vezi sa patogenezom RA, sistemskim lupusom eritematozusom i mnogim drugim autoimunskim bolestima (Simpfendorfer KR., et al.2012, Hum. Mol. Genet., 21: 3918-3925; Génin E., et al.2013, PLoS One, 8: e61044).
[0013] TANK-vezujuća kinaza 1 (TBK1), takođe naznačena sa NAK (NF-κB aktivirajuća kinaza) ili T2K, je vrsta Ser/Thr proteinske kinaze u IKK familiji. TBK1 je široko eksprimirana u stomaku, debelom crevu, plućima, timusu i jetri miša; i takođe je eksprimirana u limfoidnim i nelimfoidnim organima čoveka, uključujući slezinu, mozak i bubreg itd. Ova kinaza utiče na regulaciju imunskog ogovora prema bakteriji ili virusu, i ekspresiju faktora koji su povezani sa inflamacijom, kao što su IL-6, TNF-α i IFN-β, itd. U signalnom putu insulina, TBK1 može da posreduje fosforilaciji Ser994 u insulinskom receptoru i metabolizmu lipida. Ovi rezultati su pokazali da TBK1 igra važnu ulogu u različitim imunobiološkim i imunopatološkim mehanizmima (Yu T., et al. 2012, Mediators Inflamm., 2012: 979105-979112; Hammaker D., et al.2012, Rheumatology, 51: 610-618).
[0014] Familija receptora vaskularnog endotelnog faktora rasta (VEGFR) uključujući 3 člana, tj., VEGFR-1 (Flt1), VEGFR- 2 (KDR/Flk1) i VEGFR-3 (Flt4), sastoji se iz 7 vanćelijskih regiona sa strukturom koja je slična imunoglobulinu, sa membranskim regionom i tirozin kinaznim regionom, u kojoj je tirozin kinazna aktivnost aktivirana preko vezivanja između receptora i liganda, kao što je VEGFs A-F i faktora rasta placente, što dalje uključuje različite biološke efekte u ćelijama, kao što su efekti važni za rast i diferencijaciju ćelja (Shibuya M., et al. 2010, Genes Cancer, 1: 1119-1123). Druga istraživanja su pokazala da je VEGFR1 eksprimiran u endotelocitima, monocitima i makrofagima pacijenta koji ima RA. VEGFA može da aktivira VEGFR1, i da dovede do proliferacije endoteliocita i angiopoeze. Protein VEGFA je visoko eksprimiran u sinovijumu, limfi, serumu i sinovijalnom tkivu RA pacijenta, i nivo VEGFA je u pozitivnoj korelaciji sa RA. VEGFR2 je eksprimiran u sinovijalnom tkivu pacijenta koji ima RA. VEGF A, C, i D može da aktivira signalni put VEGFR2, i koja pojačava vaskularnu permeabilnost i angiopoezu.
VEGFC može da se detektuje u različitim tipovima ćelija u RA zadebljanom sinovijalnom unutrašnjem sloju, posebno u perivaskularnim ćelijama i glatkim mišićnim ćelijama. VEGFR3 može da se eksprimira u monocitima, makrofagima, nekim dendritičnim ćelijama, kapilarnih sudova normalnog tkiva grudi i neuroendokrinih organa. U nekim istraživanjima je pokazano da VEGFR3 doprinosi pojavljivanju autoimunskih bolesti, kao što je RA, zapaljenska bolest creva, ulcerozne bolesti i Kronove bolesti itd., i tumora koji su povezani sa limfoangiogenezom. Međutim, relevantni mehanizam nije bio u potpunosti shvaćen (D’ Aura Swanson C, et al.2009, Nat. Rev. Rheumatol., 5: 317-324; Aoki Y., et al.2005, J. Natl. Cancer Inst., 97: 2-3).
[0015] Ovde prikazane proteinske kinaze mogu da se koriste za lečenje i/ili prevenciju bolesti koje su posredovane sa imunskim sistemom, uključujući ali bez ograničenja RA, psorijazu, Kronovu bolest, sistemski lupus eritematozus, multiple sklerozu, tip I dijabetesa, alergijske bolesti, hroničnu opstruktivnu bolest pluća, astme, leukemije, i limfome, itd. Istovremeno, ova jedinjenja ili farmaceutska kompozicija koja obuhvata jedinjenja kao aktivne sastojke će imati maksimalnu kliničku efikasnost za ove bolesti u bezbednom terapeutskom prozoru.
KRATAK PREGLED
[0016] Jedan aspekt pronalaska je usmeren prema aromatičnim heterocikličnim jedinjenjima koja imaju inhibitornu aktivnost prema JAK3 i/ili JAK1, uključujući njihove derivate, kao što je njihova farmaceutski prihvatljiva so, hidrat i stereoizomer.
[0017] Drugi aspekt iz pronalaska se odnosi na postupak za pripremu ovde opisanih jedinjenja.
[0018] Još drugi aspekt iz pronalaska se odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja obuhvata jedinjenje iz pronalaska kao aktivni sastojak, i klinička upotreba jedinjenja ili farmaceutske kompozicije iz pronalaska u tretmanu/prevenciji bolesti koje su povezane sa abnormalnim aktivnostima kinaza, kao što su JAKs, i upotreba jedinjenja ili farmaceutska kompozicije pronalaska u pripremi leka koji se koristi za lečenje/prevenciju bolesti koje su povezane sa abnormalnim aktivnostima kinaza, kao što su JAKs.
[0019] Predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenje opšte formule (I), uključujući stereoizomer, farmaceutski prihvatljivu so ili njegov hidrat.
pri čemu,
R<1>je halogen ili C1-C6 alkil;
R<2>je jedan ili više supstituenata izabranih iz grupe koja obuhvata vodonik, hidroksi, cijano, halo, C1-C6 alkil, C1-C6 alkoksi, C1-C6 haloalkil, C1-C6 alkilkarbonil i C1-C6 alkil amino;
R<3>je vodonik ili halogen;
R<4>je vodonik ili C1-C4 alkil;
X je NH, O ili S;
Y je CO ili S(O)2;
Z je kovalentna veza, CH2ilil (CH2)2;
n je broj od 1 do 4; i
Prsten A je benzenov prsten, piridinski prsten ili piperidinski prsten.
[0020] U jednom poželjnom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenje opšte formule (I), uključujući njegov stereoizomer, farmaceutski prihvatljivu so ili hidrat, pri čemu,
R<1>je halogen ili C1-C6 alkil;
R<2>je jedan ili više supstituenata izabranih iz grupe koja obuhvata vodonik, hidroksi, cijano, fluoro, metil, etil, metoksil, difluorometil, trifluorometil, acetil i dimetilamino;
R<3>je vodonik ili halogen;
R<4>je vodonik ili metil;
X je NH ili O;
Y je CO ili S(O)2;
Z je kovalentna veza, CH2ili (CH2)2;
n je broj od 1 do 4; i
Prsten A je benzenov prsten, piridinski prsten ili piperidinski prsten.
[0021] U jednom poželjnijem aspektu, predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenje opšte formule (I), uključujući njegov stereoizomer, farmaceutski prihvatljivu so ili hidrogen, pri čemu,
R<1>je halogen ili C1-C6 alkil;
R<2>je jedan ili više supstituenata izabranih iz grupe koja obuhvata vodonik, hidroksi, cijano, fluoro, metil, etil, metoksil, difluorometil, trifluorometil, acetil i dimetilamino;
R<3>je vodonik ili fluoro;
R<4>je metil;
X je NH;
Y je CO;
Z je kovalentna veza;
n je broj od 1 do 4; i
Prsten A je benzenov prsten, piridinski prsten
[0022] U jednom poželjnijem aspektu, predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenje opšte formule (I), uključujuči njegov stereoizomer, farmaceutski prihvatljivu so ili hidrat, pri čemu,
R<1>je hloro, fluoro ili metil;
R<2>je jedan ili više supstituenata izabranih iz grupe koja obuhvata vodonik, hidroksi, cijano, fluoro, metil, etil, metoksil, difluorometil, trifluorometil, acetil i dimetilamino;
R<3>je vodonik ili fluoro;
R<4>je metil;
X je NH;
Y je CO;
Z je kovalentna veza;
n je broj od 1 do 4; i
Prsten A je benzenov prsten.
[0023] U jednom poželjnijem aspektu, predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenje opšte formule (I), uključujući njegov stereoizomer, farmaceutski prihvatljivu so ili hidrat, pri čemu,
R<1>je hloro;
R<2>je jedan ili više supstituenata izabranih iz grupe koja obuhvata vodonik, hidroksi, cijano, fluoro, metil, etil, metoksil, difluorometil, trifluorometil, acetil i dimetilamino;
R<3>je vodonik ili fluoro;
R<4>je metil; X je NH;
Y je CO;
Z je kovalentna veza;
n je broj od 1 do 4; i
Prsten A je benzenov prsten.
[0024] U jednom posebno poželjnom aspektu, predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenje opšte formule (I), uključujući njegov stereoizomer, farmaceutski prihvatljivu so ili hidrat, pri čemu,
R<1>je hloro;
R<2>je jedan ili više supstituenata izabranih iz grupe koja obuhvata cijano, fluoro i trifluorometil; R<3>je vodonik ili fluoro;
R<4>je metil; X je NH;
Y je CO;
Z je kovalentna veza;
n=1;
Prsten A je benzenov prsten.
[0025] U jednom posebno poželjnom aspektu, predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenje opšte formule (I), uključujući njegov stereoizomer, farmaceutski prihvatljivu so ili hidrat, pri čemu,
R<1>je hloro;
R<2>je jedan ili više supstituenata izabranih iz grupe koja obuhvata cijano;
R<3>je vodonik ili fluoro;
R<4>je metil;
X je NH;
Y je CO;
Z je kovalentna veza;
n=1; i
Prsten A je benzenov prsten.
KRATAK OPIS NACRTA
[0026] Sl.1 je šematski dijagram koji pokazuje princip testa Z’-LYTE kinazne aktivnosti, koji prikazuje korake iz testa, uključujući reakciju između kinaze i njenog supstrata, hromogenu reakciju i detekciju.
DETALJNI OPIS IZVOĐENJA
[0027] Ovde opisani termin "Halogen" se odnosi na fluor, hlor, brom, ili jod, i posebno na fluor, hlor ili brom.
[0028] Ovde opisani "alkil" uključuje linearni, razgranati ili ciklični alkil. Poželjno, alkil je C1-C8 alkil, ili C1-C6 alkil; i naročito poželjno, alkil je C1-C4 alkil; još više poželjno, alkil je metil, etil, propil ili izopropil, n-butil, izobutil ili t-butil. Alkil u jedinjenju iz predmetnog pronalaska može opciono da bude supstituisan ili nesupstituisan, i supstituent može da uključi alkil, halogen, alkoksi, hidrokarbil, i hidroksil, itd. Primeri alkila u predmetnom pronalasku uključuju metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izobutil, t-butil, n-pentil, izopentil, n-heksil, izoheksil, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, i cikloheksil, itd.
[0029] Ovde opisan "alkoksi" se odnosi na grupu koja se obrazuje vezivanjem gore navedenog alkila za atom kiseonika, gde je atom kiseonika sposoban da slobodno obrazuje vezu, kao što je metoksil, etoksi, propoksi, butoksi, pentoksi, izopropoksi, t-butoksi, ciklopropoksi, i cikloheksiloksi, itd.
[0030] Ovde opisan "alkilkarbonil" se odnosi na grupu koja se obrazuje vezivanjem gore navedenog alkila sa karbonilom, kao što je acetil, propionil, izopropionil, butiril, t-butiril, ciklopropionil, i cikloheksanoil, itd.
[0031] Ovde opisan "alkilamino" se odnosi na grupu koja se obrazuje vezivanjem gore navedenog alkila sa amino grupom, kao što je metilamino, etilamino, i 4-dimetilamino, itd.
[0032] Ovde opisan termin "farmaceutski" ili "farmaceutski prihvatljiv" može da se razume kao prihvatljiv za upotrebu kod ljudi i životinja u razumnom obimu medicine, i da se dobro podnosi bez nepoželjnih sporednih efekata, uključujući toksičnost, alergiju, stimulaciju, komplikacije i tako dalje.
[0033] Predmetni pronalazak se odnosi na farmaceutsku kompoziciju, koja obuhvata jedinjenje pomenuto gore u tekstu formule (I), uključujući njegov stereoizomer, farmaceutski prihvatljivu so ili hidrat, kao aktivni sastojak, i farmaceutski prihvatljivi nosač, adjuvans ili ekscipijens, itd. Farmaceutski prihvatljvi nosač, adjuvans ili ekscipijens se odnosi na bilo koji rastvarač, pomoćno sredstvo i nosač koje može da se koristi u farmaceutskoj oblasti, kao što su, ali bez ograničenja na, materijale koji se navode u "Handbook of Pharmaceutical Excipients", 8th ed, 2013.
[0034] Jedinjenje opisano u predmetnom pronalasku može opciono da se koristi kombinovano sa jednim ili više aktivnih sastojaka, pri čemu doza svake komponente i njihov odnos može da se odredi od strane stručnjaka iz oblasti tehnike na osnovu specifičnog poremećaja, specifičnosti stanja pacijenta i kliničkih zahteva.
[0035] Jedinjenje ili farmaceutska kompozicija opisani u predmetnom pronalasku mogu da se pripreme u bilo kojim doznim oblicima, koji obuhvataju zajednički ekscipijens u farmaceutskoj oblasti, kao što je, ali bez ograničenja na, oralnu formulaciju (tableta, kapsula, prah, granula, sirup, pilula itd.), injekciju, topikalnu formulaciju itd. Formulacija iz predmetnog pronalaska uobičajeno sadrži 0.5-70 mas% aktivnog sastojka u odnosu na težinu, i poželjno, 1-20 mas% aktivnog sastojka u odnosu na težinu.
[0036] Jedinjenje formule (I) koje se ovde opisuje može da se ordinira sisarima (uključujući čoveka) oralnim putem ili preko injekcije u klinićkoj praksi, i poželjno, oralnom primenom. Doza je 0.0001-200 mg/kg telesne težine po danu, i poželjnije, 0.01-100 mg/kg telesne težine po danu, i najpoželjnije, 0.1-50 mg/kg telesne težine po danu. Istovremeno, najbolja doza se određuje na osnovu stanja individue, obično početno sa nižom dozom, i postepenim povećavanjem do veće doze.
[0037] U primerima i preparativnim primerima iz predmetnog pronalaska, ovde opisana jedinjenja i njihovi postupci pripreme su dalje opisani i ilustrovani. Treba razumeti da preparativni primeri i primeri u tekstu ispod neće na bilo koji način ograničiti obim pronalaska.
[0038] Postupak za pripremu derivata formule (I) iz pronalaska će biti opisan u sledećem sintetičkom putu. Sirovi materijali, reagensi, katalizatori, i rastvarači itd. koji se koriste u šematskom sintetičkom putu mogu da se pripreme postupcima koji su dobro poznati stručnoj osobi u organskoj hemiji ili mogu biti komercijalno dostupni. Svi konačni derivati iz pronalaska mogu da se pripreme postupcima koji se opisuju u šematskom dijagramu ili drugim sličnim postupcima. Ovi postupci su dobro poznati stručnjaku iz organske hemije. Svi varijabilni faktori koji se koriste u šematskim dijagramima i definisani su kako sledi ili prema patentnim zahtevima.
Postupak pripreme:
[0039] (a) Intermedijer III(a) može da se kupi direktno ili pripremi prema sledećem ilustrativnom sintetičkom postupku:
[0040] Jedinjenje VIII je dobijeno kondenzacijom između unilateralno zaštićenog diamina VI i jedinjenja VII. U reakciji kondenzacije, kao katalizator je korišćeno sredstvo za kondenzovanje peptida, kao što je 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid (EDC), N,N’-dicikloheksilkarbodiimid (DCC), i N,N’-karbonildiimidazol (CDI) itd. Reakcija se izvodi na temperaturi opsega od 0-60°C tokom 2-72 h. Rastvarač koji je korišćen u reakciji je uobičajeni rastvarač, kao što je benzen, toluen, tetrahidrofuran, dioksan, dihlorometan, hloroform, N,N’-dimetilformamid itd. Baze, kao što je natrijum hidroksid, triethilamin ili piridin, itd., mogu, po potrebi da se dodaju.
[0041] Jedinjenje III(a) je dobijeno posle uklanjanja Boc iz dobijenog jedinjenja VIII pod delovanjem kiseline (poželjno, trifluorosirćetna kiselina). Reakcija se izvodi na temperaturi koja ima opseg od 0-60°C tokom 0.5-2 h. Rastvarač koji je korišćen u reakciji je dihlorometan, tetrahidrofuran, N,N’-dimetil formamid, itd.
[0042] (b) Intermedijer III(b) može direktno da se kupi ili pripremi u skladu sa sledećim ilustrativnim sintetičkim postupkom:
[0043] Jedinjenje X je dobijeno kondenzovanjem između unilateralno zaštićenog diamina VI i jedinjenja VX. Reakcija je izvedena na temperaturi opsega 0-60°C tokom 0.5-2 h. Rastvarač korišćen u reakciji je poznati rastvarač, kao što je benzen, toluen, tetrahidrofuran, dioksan, dihlorometan, hloroform, N,N’-dimetilformamid itd. Trietilamin, diizopropiletilamin, ili piridin je uobičajno korišćen kao sredstvo za vezivanje kiseline; opciono, neorganska baza kao što je NaOH, Na2CO3, NaOAc, itd., može da se doda.
[0044] Jedinjenje III(b) je dobijeno posle uklanjanja Boc iz dobijenog jedinjenja X pod delovanjem kiseline (poželjno, trifluorosirćetne kiseline). Reakcija se izvodi na temperaturi opsega od 0-60°C tokom 0.5-2h. Uobičajeni rastvarač korišćen u reakciji je dihlorometan, tetrahidrofuran, N,N’-dimetilformamid, i voda, itd. Korišćena kiselina može da bude trifluorosirćetna kiselina, hlorovodonična kiselina itd.
[0045] (C) Intermedijer V može da se pripremi u skladu sa ilustrativnim sintetičkim postupkom u tekstu ispod:
[0046] Jedinjenje XII je dobijeno kondenzovanjem između Jedinjenja XI (komercijalno dostupno ili pripremljeno) i akriloil hlorid u prisustvu baze (poželjno, diizopropiletilamin). Nitro grupa u dobijenom jedinjenju XII je nakon toga redukovana prahom gvožđa da se dobije ciljni intermedijer V. Korišćena baza može da bude diizopropiletilamin, ili trietilamin, itd.
[0047] (D) Jedinjenje formule (I) koje je ovde opisano može da se pripremi sledećim ilustrativim sintetičkim postupkom u tekstu ispod:
[0048] Jedinjenje IV je dobijeno rekacijom supstitucije jedinjenja II i jedinjenja III u prisustvu trietilamina, gde oba jedinjenja II i III mogu da se kupe direktno. Temperatura reakcije je refluks od 8-16 h. Rastvarač korišćen u reakciji je etanol, metanol, ili n-butanol, itd. Koršćena baza je trietilamin, ili diizopropiletilamin, itd.
[0049] Jedinjenje I je dobijeno reakcijom supstitucije jedinjenja IV i dobijenog jedinjenja V katalizovano kiselinom (poželjno, trifluorosirćetna kiselina). Temperatura reakcije je refluks sa trajanjem od 8-16 h. Rastvarač koji se koristi u reakciji je izopropanol, ili n-butanol, itd.; i kiselina korišćena u reakciji je trifluorosirćetna kiselina, ili hlorovodonična kiselina itd.
[0050] Jedinjenje formule I može da se prečisti poznatim postupcima za razdvajanje, kao što je ekstrakcija, rekristalizacija ili hromatografija na koloni, itd.
[0051] Primeri jedinjenja koja se opisuju u predmetnom pronalasku su navedeni u Tabeli 1. Broj jedinjenja je u skladu sa "brojem primera" u odeljku Primeri, tj., sinteza jedinjenja 1 u Tabeli 1 je opisana u "Primeru 1", i sinteza jedinjenja 30 u Tabeli 1 je opisana u "Primeru 30".
Tabela 1. Primeriedinena iz ronalaska
[0052] Predmetni pronalazak će dalje biti opisan pozivanjem na reference u Primerima u tekstu ispod. Međutim, obim pronalaska nije ograničen ovim primerima. Ovde opisani procenat se odnosi na maseni procenat, osim ukoliko nije drugačije naznačeno. Svi brojni opsezi, kao što su merne jedinice, uslovi reakcije, i fizička stanja ili procenti jedinjenja, opisani u specifikaciji su obezbeđeni za jasnu referencu. Očekivani rezultati mogu takođe da se postignu od strane stručnjaka iz oblasti tehnike kada se patent praktikuje sa temperaturama, koncentracijama, količinama, i brojem ugljenikovih atoma i slično izvan opsega ili različito od individualnih vrednosti.
Primer 1
Priprema 2-fluoro-N-metil-5-nitroanilina
[0054] Čvrsta supstanca žute boje 2-fluoro-N-metil-5-nitroanilina (19.0 g, prinosa 87.0%) je pripremljena prema sledećem.2-fluoro-5-nitroanilin (20.0 g, 128.2 mmol) i paraformaldehid (16.0 g, 533.3 mmol) u rastvoreni u 500 ml metanola i mešani su na sobnoj temperaturi. Nakon toga, u kapima se dodaje 100 ml rastvora natrijum metoksida (3.4 g, 63 mmol) u metanolu. Posle mešanja na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 h, rastvor reakcije je podeljen u dva jednaka dela, u koje se dodaje NaBH4(9.7 g, 255.2 mmol). Smeša je mešana 15 min. Reakcija se prati sa LC-MS. Posle reakcije, smeša se sipa u 1 M rastvor KOH u vodi, i meša se da bi se istaložila čvrsta supstanca. Ciljni intermedijer je dobijen ceđenjem. LC-MS (m/z) 171 (M+1).
Primer 2
Priprema N-(2-fluoro-5-nitrofenil)-N-metilakrilamida
[0055]
[0056] Žuto ulje N-(2-fluoro-5-nitrofenil)-N-metilakrilamida (12.0 g, prinos 83.0%) je pripremljeno prema sledećem. 2-fluoro-N-metil-5-nitroanilin (11.0 g, 64.7 mmol) i DIPEA (23 ml, 129.4 mmol) su rastvoreni u 100 ml THF, i mešani su na sobnoj temperaturi. Nakon toga, u kapima se dodaje akriloil hlorid (11 ml, 129.4 mmol). Posle mešanja na sobnoj temperaturi u trajanju 1 h, veći deo rastvarača reakcije je uklonjen evaporacijom. Rastvor je nakon toga razblažen sa 100 ml etil acetata, ispran sa zasićenim rastvorom soli, osušen, proceđen i koncentrovan pod redukovanim pritiskom da se dobije ciljni intermedijer. LC-MS (m/z) 225 (M+1).
Primer 3
Priprema N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida
[0057]
[0058] Braon ulje N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (5.6 g, prinos 54.0%) je pripremljeno prema sledećem. Gvožđe u prahu (20.0 g, 357 mmol) i NH4Cl (20.0 g, 374 mmol) su rastvoreni u 200 ml vode, zagrejani do 80°C, i mešani u trajanju od 0.5 h. Nakon toga, dodaje se 20 ml rastvora N-(2-fluoro-5-nitrofenil)-N-metilakrilamida (12.0 g, 53.6 mmol) u etil acetatu. Posle mešanja na 80°C u trajanju od 1 h, rastvor reakcije je podešen do bazne pH sa rastvrom NaHCO3u vodi. Blato gvožđa je proceđeno, i filtrat nakon ceđenja je ekstrahovan sa etil acetatom. Organske faze su kombinovane i koncentrovane na redukovanom pritisku da se dobije ciljni intermedijer. LC-MS (m/z) 195 (M+1).
Primer 4
Priprema t-butil estra N-(4-cijano-benzamino)propilaminomravlje kiseline
[0059]
[0060] Bela čvrsta supstanca t-butil estra N-(4-cijano-benzamino)propilaminomravlje kiseline (850 mg, prinos od 98.0%) je pripremljena prema sledećem. t-butil estar 3-aminopropilaminomravlje kiseline (500 mg, 2.87 mmol) je rastvoren u 20 ml THF, u koji su dodati 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid hidrohlorid (1.0 g, 5.24 mmol), 1-hidroksibenztriazol (580 mg, 4.30 mmol), DIPEA (1 ml, 5.63 mmol) i 4-cijanobenzoeva kiselina (425 mg, 2.89 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju 20 h. Nakon toga, pH vrednost smeše je podešena do 8-10 pomoću rastvora NaHCO3u vodi. Smeša je posle toga ekstrahovana sa etil acetatom. Organske faze su kombinovane i koncentrovane na redukovanom pritisku da se dobije ciljni intermedijer. LC-MS (m/z) 304 (M+1).
Primer 5
Priprema N-(3-aminopropil)-4-cijano-benzamida
[0061]
[0062] Bela čvrsta supstanca N-(3-aminopropil)-4-cijano-benzamid (350 mg, prinos 62.0%) je pripemljena prema sledećem. t-butil estar 3-(4-cijano-benzamino)propilaminomravlje kiseline (850 mg, 2.8 mmol) je rastvoren u 10 ml dihlorometanu, u koji je dodata trifluorosirćetna kiselina (500 µl, 6.7 mmol). Posle mešanja na sobnoj temperaturi u trajanju od 16 h, rastvor reakcije je podešen do vrednosti bazne pH sa rastvorom NaHCO3u vodi. Posle evaporacije do isušivanja, mešani rastvor dihlorometana/metanola (10:1) je dodat i nakon toga se izlaže ultrazvuku. Posle ceđenja čvrste supstance, filtrat nakon ceđenja je evaporisan do isušivanja da se dobije ciljni intermedijer. LC-MS (m/z) 204 (M+1).
Primer 6
Priprema 4-cijano-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil) benzamida
[0063]
[0064] Bela čvrsta supstanca N-(3-aminopropil)-4-cijano-benzamida (3.5 g, prinos 78.0%) je pripremljena prema sledećem.2,4,5-trihloropirimidin (2.6 g, 14.2 mmol), N-(3-aminopropil)-4-cijanobenzamid (2.6 g, 12.8 mmol) i trietilamin (2 ml, 14 mmol) su rastvoreni u 50 ml etanola. Nakon zagrevanja rastvora reakcije do 70°C i mešanja u trajanju od 4 h, reakcija je završena. Rastvor je evaporisan do isušivanja, i nakon toga je ispran sa dietil etrom. Ciljni intermedijer se dobija ceđenjem LC-MS (m/z) 351 (M+1).
Primer 7
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4-cijanobenzamida
[0065]
[0066] Bela čvrsta supstanca N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-4- cijano-benzamida (3.1 g, prinos 60.0%) je pripemljena prema sledećem. N-(3-aminopropil)-4-cijano-benzamid (4.0 g, 11.4 mmol), N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamid (2.7 g, 13.9 mmol) i trifluorosirćetna kiselina (1 ml, 7 mmol) su rastvoreni u 60 ml izopropanola. Posle zagrevanja rastvora reakcije do 90°C i mešanja u trajanju od 24 h, reakcija je završena. Rastvor reakcije se sipa u rastvor NaHCO3u vodi da bi se istaložila čvrsta supstanca. Smeša je stajala i nakon toga je proceđena. Sirovi proizvod je rastvoren u etil acetatu i izložen je ultrazvuku. Posle ceđenja, dobijeno je ciljno jedinjenje.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.80-1.83 (m, 2H, CH2), 3.10-3.12 (m, 2H, CH2), 3.32 (s, 3H, CH3), 3.44-3.46 (m, 2H, CH2), 5.59 (d, J=9.4 Hz, 1H, CH), 6.02-6.08 (m, 1H, CH), 6.18 (d, J=16.0 Hz, 1H, CH), 7.21-7.23 (m, 1H, Ar-H), 7.26-7.27 (m, 1H, Ar-H), 7.64 (s, 1H, pirimidin-NH), 7.91 (s, 1H, Ar-H), 7.93 (s, 1H, pirimidin-H), 7.95-7.96 (m, 2H, Ar-H), 7.97-7.98 (m, 2H, Ar-H), 8.72 (s, 1H, NH), 9.43 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 508 (M+1).
Primer 8
Priprema N-(2-fluoro-5-nitrofenil)akrilamida
[0067]
[0068] Žuta čvrsta supstanca N-(2-fluoro-5-nitrofenil)akrilamida (0.3 g, prinos 71.4%) je pripremljena iz 2-fluoro-5-ni- troanilina (0.3 g, 2.0 mmol) i akriloil hlorida (0.27 g, 3 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 2. LC-MS (m/z) 211 (M+1).
Primer 9
Priprema N-(5-amino-2-fluorofenil)akrilamida
[0070] Braon čvrsta supstanca N-(5-amino-2-fluorofenil)akrilamida (0.1 g, prinos 46.7%) je pripremljena od N-(2-fluoro-5-nitrofenil)akrilamida (0.125 g, 4.7 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 3. LC-MS (m/z) 181 (M+1).
Primer 10
Priprema t-butil estra 3-(4-trifluorometilbenzamino)propilamino mravlje kiseline
[0071]
[0072] Bela čvrsta supstanca t-butil estra 3-(4-trifluorometilbenzamino)propilamino mravlje kiseline (0.22 g, prinos 90%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropilamino mravlje kiseline (0.4 g, 2.4 mmol) i 4-trifluorometil benzoeve kiseline (0.38 g, 2 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 4. LC-MS (m/z) 347 (M+1).
Primer 11
Priprema N-(3-aminopropil)-4-trifluorometilbenzamida
[0073]
[0074] Tečnost žute boje N-(3-aminopropil)-4-trifluorometilbenzamida (1.1 g, prinos 53%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(4-trifluorometilbenzamino)propilamino mravlje kiseline (2.8 g, 8 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 247 (M+1).
Primer 12
Priprema N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-trifluorometilbenzamida
[0075]
[0076] Bela čvrsta supstanca N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-trifluorometilbenzamida (1.9 g, prinos 57%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (1.46 g, 8 mmol) i N-(3-aminopropil)-4-trifluorometil benzamida (1.9 g, 8 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 393 (M+1).
Primer 13
Priprema N-(3-(2-(3-akrilamido-4-fluoro-fenilamino)-5-hloropirimidinil-4-amino)propil)-4-trifluorometilbenzamida
[0077]
[0078] Siva čvrsta supstanca N-(3-(2-(3-akrilamido-4-fluoro-fenilamino)-5-hloropirimidinil -4-amino)propil)-4-trifluorometilbenzamida (18 mg, prinos 33%) je pripremljena od N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-trifluorometilbenzamida (39 mg, 0.1 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)akrilamida (20 mg, 0.11 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.85-1.88 (m, 2H, CH2), 3.32-3.37 (m, 2H, CH2), 3.55-3.58 m, 2H, CH2), 5.76-5.79 (m, 1H, CH), 6.27-6.32 (m, 1H, CH), 6.61-6.68 (m, 1H, CH), 7.21 (t, J=10.04 Hz, 1H, pirimidin-NH), 7.36-7.40 (m, 1H, Ar-H), 7.82 (d, J=8.16 Hz, 2H, Ar-H), 8.02 (d, J=8.1 Hz, 2H, Ar-H), 8.16 (s, 1H, pirimidin-H), 8.28 (s, 1H, Ar-H), 8.37-8.38 (m, 1H, NH), 8.73-8.76 (m, 1H, NH), 9.99 (s, 1H, benzenov prsten-NH), 10.28 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 537(M+1).
Primer 14
Priprema t-butil estra 3-(4-fluorobenzamino)propilamino mravlje kiseline
[0079]
[0080] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra 3-(4-fluorobenzamino)propilaminomravlje kiseline (800 mg, prinos 94.1%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropilamino mravlje kiseline (500 mg, 2.87 mmol) i 4-fluorobenzoeve kiseline (400 mg, 2.86 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 4. LC-MS (m/z) 297 (M+1).
Primer 15
Priprema N-(3-aminopropil)-4-fluorobenzamida
[0082] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-4-fluorobenzamida (400 mg, prinosa 75.2%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(4-fluorobenzamino)propilamino mravlje kiseline (800 mg, 2.70 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 197 (M+1).
Primer 16
Priprema N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-fluorobenzamida
[0083]
[0084] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-fluorobenzamida (440 mg, prinosa 63.2%) je pripremljena od 2,4,5-trihloropirimidina (400 mg, 2.19 mmol) i N-(3-aminopropil)-4-fluorobenzamida (400 mg, 2.03 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 343 (M+1).
Primer 17
Priprema N-(3-(2-(3-akrilamido-4-fluoro-fenilamino)-5-hloropirimidinil-4-amino)propil)-4-fluorobenzamida
[0085]
[0086] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(2-(3-akrilamido-4-fluoro-fenilamino)-5-hloropirimidinil-4-amino)propil)-4-fluorobenzamida (8 mg, prinos 9.41%) je pripremljena od N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-fluorobenzamida (60 mg, 0.17 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)akrilamida (40 mg, 0.22 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.79-1.83 (m, 2H, CH2), 3.31-3.33 (m, 2H, CH2), 3.49-3.51 (m, 2H, CH2), 5.75 (d, J=11.2 Hz, 1H, CH), 6.26 (d, J=16.99 Hz, 1H, CH), 6.55-6.62 (m, 1H, CH), 7.11(t, J=9.92 Hz, 1H, Ar-H), 7.22 (t, J=5.66 Hz, 1H, pirimidin-NH), 7.28 (t, J=8.73 Hz, 2H, Ar-H), 7.47 (t, J=4.93 Hz, 1H, Ar-H), 7.88-7.93 (m, 3H, Ar-H, pirimidin-H), 8.31 (d, J=5.12 Hz, 1H, Ar-H), 8.50-8.52 (m, 1H, NH), 9.26 (s, 1H, benzenov prsten-NH), 9.85 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 487 (M+1).
Primer 18
Priprema N-(3-(2-hloro-5-metilpirimidinil-4-amino)propil)-4-fluorobenzamida
[0087]
[0088] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(2-hloro-5-metilpirimidinil-4-amino)propil)-4-fluorobenzamida (40 mg, prinos 52.3%) je pripremljena iz 2,4-dihloro-5-metilpirimidina (40 mg, 0.25 mmol) i N-(3-aminopropil)-4-fluorobenzamida (40 mg, 0.20 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 323 (M+1).
Primer 19
Priprema 4-fluoro-N-(3-(2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)-5-metilpirimidinil-4-amino)propil)benzamida
[0089]
[0090] Čvrsta supstanca bele boje 4-fluoro-N-(3-(2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) -5-metilpirimidinil-4-amino)propil)benzamida (5 mg, prinos 8.68%) je pripremljena iz N-(3-(2-hloro-5-metilpirimidinil-4-amino)propil)-4-fluorobenzamida (40 mg, 0.12 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamid (40 mg, 0.21 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.80-1.83 (m, 2H, CH2), 1.92 (s, 3H, CH3), 3.19 (s, 3H, CH3), 3.30-3.32 (m, 2H, CH2), 3.42-3.44 (m, 2H, CH2), 5.58-5.61 (m, 1H, CH), 6.04-6.11 (m, 1H, CH), 6.16-6.21 (m, 1H, CH), 6.72 (t, J=5.17 Hz, 1H, Ar-H), 7.21 (t, J= 9.44 Hz, 1H, pirimidin-NH), 7.28 (t, J=8.8 Hz, 2H, Ar-H), 7.66-7.68 (m, 2H, Ar-H, pirimidin-H), 7.88-7.92 (m, 2H, Ar-H), 7.98-7.99 (m, 1H, Ar-H), 8.51 (t, J=5.26 Hz, 1H, NH), 9.09 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 481 (M+1).
Primer 20
Priprema N-(3-(2-hloro-5-metilpirimidinil-4-amino)propil)-4-trifluorometilbenzamida
[0092] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(2-hloro-5-metilpirimidinil-4-amino)propil)-4-trifluorometil benzamida (0.26 g, prinos 72%) je pripremljena iz 2,4-dihloro-5-metilpirimidina (0.16 g, 1 mmol) i N-(3-aminopropil)-4-trifluorometil-benzamida (0.24 g, 1 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 373 (M+1).
Primer 21
Priprema N-(3-(2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)-5-metilpirimidinil-4-amino)propil)-4-trifluorometilbenzamida
[0093]
[0094] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)-5-metilpirimidinil-4-amino)propil)-4-trifluorometilbenzamida (0.26 g, prinos 72%) je pripremljena iz N-(3-(2-hloro-5-metilpirimidinil-4-amino)propil)-4-trifluorometilbenzamida (75 mg, 0.2 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil) -N-metilakrilamida (70 mg, 0.3 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 7.
<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.81-1.87 (m, 2H, CH2), 1.93 (s, 3H, CH3), 3.19 (s, 3H, CH3), 3.36-3.38 (m, 2H, CH2), 3.44-3.46 (m, 2H, CH2), 5.58-5.61 (m, 1H, CH), 6.04-6.11 (m, 1H, CH), 6.16-6.21 (m, 1H, CH), 6.73 (t, J=5.64 Hz, 1H, Ar-H), 7.21 (t, J=9.4 Hz, 1H, pirimidin-NH), 7.66-7.68 (m, 2H, Ar-H, pirimidin-H), 7.84 (d, J=8.3 Hz, 2H, Ar-H), 7.98-8.00 (m, 1H, Ar-H), 8.03 (d, J=8.1 Hz, 2H, Ar-H), 8.71-9.74 (m, 1H, NH), 9.10 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 531 (M+1).
Primer 22
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-4-trifluorometil benzamida
[0095]
[0096] Čvrsta supstanca sive boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-4-tri-fluorometilbenzamida (0.23 g, prinos 42%) je pripremljena iz N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-trifluorometil benzamida (0.39 g, 1 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (0.28 g, 1.5 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.81-1.84 (m, 2H, CH2), 3.31-3.33 (m, 2H, CH2), 3.45-3.47 (m, 2H, CH2), 5.60 (d, J=9.6 Hz, 1H, CH), 6.02-6.08 (m, 1H, CH), 6.18 (d, J=15.1 Hz, 1H, CH), 7.25-7.29 (m, 1H, Ar-H), 7.61-7.67 (m, 3H, Ar-H, pirimidin-NH), 7.82-7.84 (m, 3H, Ar-H, pirimidin-H), 8.00-8.03 (m, 3H, Ar-H, NH), 8.71 (s, 1H, benzenov prsten-NH), 9.71 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 551 (M+1).
Primer 23
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4-fluorobenzamida
[0097]
[0098] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-4-fluorobenzamida (117 mg, prinos 40.3%) je pripremljena iz N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-fluorobenzamida (200 mg, 0.58 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (150 mg, 0.77 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.78-1.81 (m, 2H, CH2), 3.28-3.29 (m, 2H, CH2), 3.32 (s, 3H, CH3), 3.43-3.45 (m, 2H, CH2), 5.59 (d, J=9.8 Hz, 1H, CH), 6.05-6.09 (m, 1H, CH), 6.15-6.20 (m, 1H, CH), 7.22-7.30 (m, 4H, Ar-H), 7.64-7.66 (m, 1H, pirimidin-NH), 7.87-7.91 (m, 3H, Ar-H), 7.96 (s, 1H, pirimidin-H), 8.50 (t, J=5.2 Hz, 1H, NH), 9.43 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 501 (M+1).
Primer 24
Priprema t-butil estra 3-(1-metilpiperidinil-4-formamino)propilamino mravlje kiseline
[0099]
[0100] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra 3-(1-metilpiperidinil-4-formamino) propilamino mravlje kiseline (220 mg, prinos 25.6%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropilamino mravlje kiseline (500 mg, 2.87 mmol) i 1-metilpiperidinil- 4-karboksilne kiseline (410 mg, 2.87 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 4. LC-MS (m/z) 300 (M+1).
Primer 25
Priprema N-(3-aminopropil)-N-metilpiperidinil-4-formamida
[0102] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-1-metilpiperidinil-4-formamida (130 mg, prinos 80.1%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(1-metilpiperidinil-4-formamino)propilamino mravlje kiseline (220 mg, 0.74 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 200 (M+1).
Primer 26
Priprema N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-1-metilpiperidinil-4-formamida
[0103]
[0104] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-1-metillpiperidinil-4-formamida (200 mg, prinos 79.6%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (130 mg, 0.71 mmol) i N-(3-aminopropil)-1-metilpiperidinil-4-formamida (130 mg, 0.65 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 346 (M+1).
Primer 27
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-1-metil-piperidinil-4-formamida
[0105]
[0106] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-1-metilpiperidinil-4-formamida (12 mg, prinos 11.6%) je pripremljena iz N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-1-metilpiperidinil-4-formamida (80 mg, 0.23 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (40 mg, 0.20 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 7.
<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.52-1.58 (m, 4H, 2XCH2), 1.74-1.79 (m, 2H, CH2), 1.96-1.99 (m, 1H, CH), 2.11 (s, 3H, CH3), 3.05-3.12 (m, 4H, 2XCH2), 3.13-3.16 (m, 4H, 2XCH2), 3.18 (s, 3H, CH3), 5.60 (d, J=9.7 Hz, 1H, CH), 6.03-6.09 (m, 1H, CH), 6.15-6.21 (m, 1H, CH), 7.25-7.30 (m, 2H, Ar-H, pirimidin-NH), 7.64-7.69 (m, 1H, Ar-H), 7.76 (t, J=5.45 Hz, 1H, NH), 7.84-7.88 (m, 1H, Ar-H), 7.96 (s, 1H, pirimidin-H), 9.43 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 504 (M+1).
Primer 28
Priprema N-(3-(2-(3-akrilamido-4-fluorofenilamino)-5-hloropirimidinil-4-amino)propil)-4-cijanobenzamida
[0107]
[0108] Čvrsta supstanca crne boje N-(3-(2-(3-akrilamido-4-fluorofenilamino)-5-hloropirimidinil-4-amino)propil)-4-cijano-benzamida (20 mg, prinosa 40%) je pripremljena iz 4-cijano-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)benzamida (35 mg, 0.1 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)akrilamida (22 mg, 0.12 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.81-1.87 (m, 2H, CH2), 3.30-3.34 (m, 2H, CH2), 3.52-3.57 (m, 2H, CH2), 5.75-5.78 (m, 1H, CH), 6.25-6.30 (m, 1H, CH), 6.59-6.66 (m, 1H, CH), 7.19 (t, J=10.48 Hz, 1H, pirimidin-NH), 7.36-7.40 (m, 1H, Ar-H), 7.92-7.97 (m, 4H, Ar-H), 8.11 (s, 1H, pirimidin-H), 8.34 (d, J=4.6 Hz, 1H, Ar-H), 8.73 (t, J=5.44 Hz, 1H, NH), 9.95 (s, 1H, benzenov prsten-NH), 10.05 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 494 (M+1).
Primer 29
Priprema t-butil estra 3-(4-dimetilaminobenzamino)propilamino mravlje kiseline
[0109]
[0110] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra 3-(4-dimetilaminobenzamino)propilamino mravlje kiseline (840 mg, prinos 91.1%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropilamino mravlje kiseline (500 mg, 2.87 mmol) i 4-dimetilaminobenzoeve kiseline (475 mg, 2.87 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 4. LC-MS (m/z) 322 (M+1).
Primer 30
Priprema N-(3-aminopropil)-4-dimetilaminobenzamida
[0112] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-4-dimetilaminobenzamida (500 mg, prinos 86.5%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(4-dimetilaminobenzamino)propilamino mravlje kiseline (840 mg, 2.62 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 222 (M+1).
Primer 31
Priprema N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil) -4-dimetilaminobenzamida
[0113]
[0114] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-dimetilamino benzamida (700 mg, prinos 84.3%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (550 mg, 3.00 mmol) i N-(3-aminopropil)-4-dimetilaminobenzamids (500 mg, 2.26 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 368 (M+1).
Primer 32
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-4-dimetil-aminobenzamida
[0115]
[0116] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido) fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4-dimetilamino benzamida (49 mg, prinos 58.3%) je pripremljena iz N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-dimetilaminobenzamida (50 mg, 0.14 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (30 mg, 0.15 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.74-1.78 (m, 2H, CH2), 2.95 (s, 6H, 2XCH3), 3.25-3.60 (m, 2H, CH2), 3.32 (s, 3H, CH3), 3.41-3.43 (m, 2H, CH2), 5.59 (d, J=9.8 Hz, 1H, CH), 6.02-6.09 (m, 1H, CH), 6.16-6.20 (m, 1H, CH), 6.68(d, J=9.8 Hz, 2H, Ar-H), 7.22-7.27 (m, 1H, Ar-H), 7.31-7.34 (m, 1H, Ar-H), 7.64-7.67 (m, 1H, pirimidin-NH), 7.70 (d, J=8.7 Hz, 2H, Ar-H), 7.89-7.90 (m, 1H, Ar-H), 7.96 (s, 1H, pirimidin-H), 8.14 (t, J=5.6 Hz, 1H, NH), 9.43 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 526 (M+1).
Primer 33
Priprema t-butil estra 3-(2,4,6-trifluorobenzamino)propilamino mravlje kiseline
[0117]
[0118] Bela čvrsta supstanca t-butil estra 3-(2,4,6-trifluorobenzamino)propilamino mravlje kiseline (200 mg, prinos 60.1%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropilamino mravlje kiseline (174 mg, 1.0 mmol) i 2,4,6-trifluorobenzoeve kiseline (176 mg, 1.0 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 4. LC-MS (m/z) 333 (M+1).
Primer 34
Priprema N-(3-aminopropil)-2,4,6-trifluorobenzamida
[0119]
[0120] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-2,4,6-trifluorobenzamida (100 mg, prinos 43.1%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(2,4,6-trifluorobenzamino)propilamino mravlje kiseline (200 mg, 0.6 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 233 (M+1).
Primer 35
Priprema N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-2,4,6-trifluorobenzamida
[0121]
[0122] Čvrsta supstanca žute boje N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-2,4,6-trifluorobenzamida (120 mg, prinos 73.6%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (100 mg, 0.55 mmol) i N-(3-aminopropil)-2,4,6-trifluorobenzamida (100 mg, 0.43 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 379 (M+1).
Primer 36
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-2,4,6-trifluorobenzamida
[0123]
[0124] Čvrsta supstanca žute boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido) fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-2,4,6-trifluorobenzamida (80 mg, prinosa 58.3%) je pripremljena iz N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-2,4,6- trifluorobenzamida (120 mg, 0.32 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (110 mg, 0.56 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.75-1.82 (m, 2H, CH2), 3.19 (s, 3H, CH3), 3.25-3.31 (m, 2H, CH2), 3.44-3.45 (m, 2H, CH2), 5.61 (d, J=9.5 Hz, 1H, CH), 6.04-6.11 (m, 1H, CH), 6.16-6.22 (m, 1H, CH), 7.22-7.28 (m, 4H, Ar-H, pirimidin-NH), 7.67-7.69 (m, 1H, Ar-H), 7.87 (d, J=5.2 Hz, 1H, Ar-H), 7.96 (s, 1H, pirimidin- H), 8.71 (t, J=5.4 Hz, 1H, NH), 9.40 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 537 (M+1). Primer 37
Priprema t-butil estra 3-(4-metoksibenzamino)propilamino mravlje kiseline
[0125]
[0126] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra 3-(4-metoksibenzamino)propilamino mravlje kiseline (800 mg, prinos 90.4%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropilamino mravlje kiseline (500 mg, 2.87 mmol) i 4-metoksibenzoeve kiseline (437 mg, 2.87 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 4. LC-MS (m/z) 309 (M+1).
Primer 38
Priprema N-(3-aminopropil)-4-metoksilbenzamida
[0127]
[0128] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-4-metoksilbenzamida (500 mg, prinos 92.6%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(4-metoksilbenzamino)propilamino mravlje kiseline (800 mg, 2.60 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 209 (M+1).
Primer 39
Priprema N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4 -metoksilbenzamida
[0129]
[0130] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-metoksil benzamida (600 mg, prinos 70.3%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (690 mg, 3.74 mmol) i N-(3-aminopropil)-4-metoksilbenzamida (500 mg, 2.40 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 355 (M+1).
Primer 40
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4-metoksilbenzamida
[0131]
[0132] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-4-metoksilbenzamida (10 mg, prinos 13.9%) je pripremljena iz N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-metoksil benzamida (50 mg, 0.14 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (30 mg, 0.15 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.77-1.80 (m, 2H, CH2), 3.19 (s, 3H, CH3), 3.28-3.31 (m, 2H, CH2), 3.43-3.45 (m, 2H, CH2), 3.80 (s, 3H, CH3), 5.59 (d, J=9.5 Hz, 1H, CH), 6.03-6.09 (m, 1H, CH), 6.16-6.21 (m, 1H, CH), 6.97 (d, J=8.7 Hz, 2H, Ar-H), 7.21-7.27 (m, 2H, Ar-H, pirimidin-NH), 7.65-7.67 (m, 1H, Ar-H), 7.81 (d, J=8.7 Hz, 2H, Ar-H), 7.89 (d, J=6.4 Hz, 1H, Ar-H), 7.96 (s, 1H, pirimidin-H), 8.31 (t, J=5.2 Hz, 1H, NH), 9.40 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 513 (M+1).
Primer 41
Priprema t-butil estra 3-(2-cijano-nikotinamino)propilamino mravlje kiseline
[0134] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra 3-(2-cijano-nikotinamino)propilamino mravlje kiseline (400 mg, prinos 91.3%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropilamino mravlje kiseline (250 mg, 1.44 mmol) i 6-cijano-nikotinske kiseline (212 mg, 1.44 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 4. LC-MS (m/z) 305 (M+1).
Primer 42
Priprema N-(3-aminopropil)-6-cijano-nikotinamida
[0135]
[0136] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-6-cijano-nikotinamida (240 mg, prinosa 89.6%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(2-cijano-nikotinamino)propilamino mravlje kiseline (400 mg, 1.32 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 205 (M+1).
Primer 43
Priprema 6-cijano-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino) propil)nikotinamida
[0137]
[0138] Čvrsta supstanca bele boje 6-cijano-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil) nikotinamida (80 mg, prinos 19.3%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (280 mg, 1.53 mmol) i N-(3-aminopropil)-6-cijano-nikotinamida (240 mg, 1.18 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 351 (M+1).
Primer 44
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-6-cijanonikotinamida
[0140] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-6-cijano-nikotinamida (15 mg, prinos 17.4%) je pripremljena iz 6-cijano-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)nikotinamida (60 mg, 0.17 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (46 mg, 0.24 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.81-1.88 (m, 2H, CH<2>), 3.21 (s, 3H, CH3), 3.32-3.36 (m, 2H, CH2), 3.46-3.51 (m, 2H, CH2), 5.61 (d, J=9.8 Hz, 1H, CH), 6.04-6.1 (m, 1H, CH), 6.17-6.22 (m, 1H, CH), 7.29(t, J=9.3 Hz, 1H, pirimidin-NH), 7.61-7.62 (m, 1H, Ar-H), 7.78 (s, 1H, Ar-H), 7.83 (d, J=5.3 Hz, 1H, Ar-H), 8.06 (s, 1H, pirimidin-H), 8.17 (d, J=7.4 Hz, 1H, Ar-H), 8.36-8.41 (m, 1H, Ar-H), 8.89 (t, J=5.4 Hz,1H, NH), 9.09 (s, 1H, Ar-H), 9.85 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 509 (M+1).
Primer 45
Priprema t-butil estra 3-(4-hidroksibenzamino)propilamino mravlje kiseline
[0141]
[0142] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra 3-(4-hidroksibenzamino)propilamino mravlje kiseline (600 mg, prinos 71.1%) je pripremljena iz t-butil estra 3-t-butilamino mravlje kiseline (500 mg, 2.87 mmol) i 4-hidroksibenzoeve kiseline (440 mg, 2.87 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 4. LC-MS (m/z) 295 (M+1).
Primer 46
Priprema N-(3-aminopropil)-4-hidroksibenzamida
[0143]
[0144] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-4-hidroksibenzamida (300 mg, prinos 75.8%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(4-hidroksibenzamino)propilamino mravlje kiseline (600 mg, 2.04 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 195 (M+1).
Primer 47
Priprema N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-hidroksi benzamida
[0145]
[0146] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-hidroksi benzamida (200 mg, prinos 84.3%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (300 mg, 1.64 mmol) i N-(3-aminopropil)-4-hidroksibenzamida (300 mg, 1.54 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 341 (M+1).
Primer 48
Priprema N-(3-(5 -hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-4-hidroksibenzamida
[0147]
[0148] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4-hidroksibenzamida (3 mg, prinos 1.3%) je pripremljena iz N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-hidroksi-benzamida (200 mg, 0.47 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (100 mg, 0.52 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.75-1.81 (m, 2H, CH2), 3.19 (s, 3H, CH3), 3.27-3.29 (m, 2H, CH2), 3.42-3.44 (m, 2H, CH2), 5.59 (d, J=9.4 Hz, 1H, CH), 6.03-6.09 (m, 1H, CH), 6.16-6.20 (m, 1H, CH), 6.78 (d, J=7.9 Hz, 2H, Ar-H), 7.24-7.27 (m, 2H, Ar-H, pirimidin-NH), 7.67-7.69 (m, 1H, Ar-H), 7.70 (d, J=8.1 Hz, 2H, Ar-H), 7.88-7.90 (m, 1H, Ar-H), 7.96 (s, 1H, pirimidin-H), 8.20 (s, 1H, NH), 9.40 (s, 1H, benzenov prsten-NH), 9.89 (s, 1H, OH). LC-MS (m/z) 499 (M+1).
Primer 49
Priprema t-butil estra 3-(4-cijano-2-fluorobenzamino)propilamino mravlje kiseline
[0149]
[0150] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra 3-(4-cijano-2-fluorobenzamino)propilamino mravlje kiseline (450 mg, prinos 70.1%) je pripemljena iz t-butil estra 3-aminopropilamino mravlje kiseline (348 mg, 2.0 mmol) i 4-cijano-2-fluobenzoeve kiseline (330 mg, 2.0 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 4. LC-MS (m/z) 322 (M+1).
Primer 50
Priprema N-(3-aminopropil)-4-cijano-2-fluorobenzamida
[0151]
[0152] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-4-cijano-2-fluorobenzamida (278 mg, prinosa 90.0%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(4-cijano-2-fluorobenzamino)propilamino mravlje kiseline (450 mg, 1.4 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 222 (M+1).
Primer 51
Priprema 4-cijano-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-2-fluorobenzamida
[0153]
[0154] Čvrsta supstanca bele boje 4-cijano-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-fluorobenzamida (312 mg, prinos 67.4%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (238 mg, 1.3 mmol) i N-(3-aminopropil)-4-cijano-2-fluorobenzamida (278 mg, 1.26 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 368 (M+1).
Primer 52
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4-cijano-2-fluorobenzamida
[0155]
Primer 52
[0156] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-4-cijano-2-fluorobenzamida (106 mg, prinosa 49.3%) je pripremljena iz 4-cijano-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-2-fluorobenzamida (150 mg, 0.41 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (87 mg, 0.45 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.
<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.80-1.83 (m, 2H, CH2), 3.20 (s, 3H, CH3), 3.30-3.31 (m, 2H, CH2), 3.45-3.47 (m, 2H, CH2), 5.61 (d, J=9.7 Hz, 1H, CH), 6.04-6.10 (m, 1H, CH), 6.15-6.21(m, 1H, CH), 7.20-7.25 (m, 2H, Ar-H, pirimidin-NH), 7.62-7.65 (m, 1H, Ar-H), 7.75-7.76 (m, 2H, Ar-H), 7.88-7.94 (m, 2H, Ar-H), 7.96 (s, 1H, pirimidin-H), 8.57 (s, 1H, NH), 9.41 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 526 (M+1).
Primer 53
Priprema t-butil estra 3-(4-cijano-3-fluorobenzamino)propilamino mravlje kiseline
[0157]
[0158] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra 3-(4-cijano-3-fluorobenzamino)propilamino mravlje kiseline (462 mg, prinoa 71.9%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropil t-butilamino mravlje kiseline (348 mg, 2.0 mmol) i 4-cijano-3-fluobenzoeve kiseline (330 mg, 2.0 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 4. LC-MS (m/z) 322 (M+1).
Primer 54
Priprema N-(3-aminopropil)-4-cijano-3-fluorobenzamida
[0159]
[0160] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-4-cijano-3-fluorobenzamida (275 mg, prinosa 86.5%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(4-cijano-3-fluorobenzamino)propilamino mravlje kiseline (462 mg, 1.44 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 222 (M+1).
Primer 55
Priprema 4-cijano-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil) -3-fluorobenzamida
[0161]
[0162] Čvrsta supstanca bele boje 4-cijano-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-fluorobenzamida (340 mg, prinos 74.6%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (229 mg, 1.25 mmol) i N-(3-aminopropil)-4-cijano-3-fluorobenzamida (275 mg, 1.24 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 368 (M+1).
Primer 56
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4-cijano-3-fluorobenzamida
[0163]
[0164] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-4-cijano-3-fluorobenzamida (98 mg, prinosa 45.6%) je pripremljena iz 4-cijano-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil) -3-fluorobenzamida (150 mg, 0.41 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (87 mg, 0.45 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 7.
<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.81-1.84 (m, 2H, CH2), 3.19 (s, 3H, CH3), 3.33-3.35 (m, 2H, CH2), 3.45-3.46 (m, 2H, CH2), 5.59 (d, J=9.7 Hz, 1H, CH), 6.02-6.09 (m, 1H, CH), 6.21-6.20(m, 1H, CH), 7.21-7.25 (m, 2H, Ar-H, pirimidin-NH), 7.63-7.65 (m, 1H, Ar-H), 7.81-7.89 (m, 2H, Ar-H), 7.95 (s, 1H, pirimidin-H), 8.04-8.12 (m, 2H, Ar-H), 8.76 (t, J=5.6 Hz, 1H, NH), 9.45 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 526 (M+1).
Primer 57
Priprema N-(3-(2-hloro-5-metilpirimidinil-4-amino)propil)-4-cijanobenzamida
[0165]
[0166] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(2-hloro-5-metilpirimidinil-4-amino)propil)-4-cijanobenzamida (100 mg, prinosa 60.6%) je pripremljena i 2,4-dihloro-5-metilpirimidina (82 mg, 0.5 mmol) i N-(3-aminopropil)-4-cijano-benzamida (100 mg, 0.5 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 330 (M+1).
Primer 58
Priprema 4-cijano-N-(3-(2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)-5-metilpirimidinil-4-amino)propil)benzamida
[0167]
[0168] Čvrsta supstanca crne boje 4-cijano-N-(3-(2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)-5-metilpirimidinil-4-amino)propil)-benzamida (10 mg, prinos 3.3%) je pripremljena iz N-(3-(2-hloro-5-metilpirimidinil-4-amino)propil)-4-cijano-benzamida (100 mg, 0.61 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (128 mg, 0.66 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.82-1.85 (m, 2H, CH2), 1.92 (s, 3H, CH3), 3.19 (s, 3H, CH3), 3.35-3.37 (m, 2H, CH2), 3.43-3.46 (m, 2H, CH2), 5.59 (d, J=9.8 Hz,1H, CH), 6.04-6.1 (m, 1H, CH), 6.15-6.20 (m, 1H, CH), 6.68 (t, J=5.5 Hz, 1H, Ar-H), 7.19 (t, J=9.5 Hz, 1H, pirimidin-NH), 7.65-7.67 (m, 2H, Ar-H), 7.93-7.99 (m, 5H, Ar-H, pirimidin-H), 8.69 (t, J=5.5 Hz, 1H, NH), 9.04 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 488 (M+1).
Primer 59
Priprema N-(3-(2-hloro-5-fluoro-pirimidinil-4-amino)propil)-4-cijano-benzamida
[0169]
[0170] Čvrsta supstanca žute boje N-(3-(2-hloro-5-fluoro-pirimidinil-4-amino)propil)-4-cijanobenzamida (100 mg, prinosa 60.0%) je pripremljena iz 2,4-dihloro-5-fluoro-pirimidina (83 mg, 0.5 mmol) i N-(3-aminopropyl)-4-cijanobenzamida (100 mg, 0.5 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 334 (M+1).
Primer 60
Priprema 4-cijano-N-(3-(5-fluoro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)benzamida
[0171]
[0172] Čvsta supstanca sive boje 4-cijano-N-(3-(5-fluoro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)benzamida (49 mg, prinos 58.3%) je pripremljena iz N-(3-(2-hloro-5-fluoropirimidinil-4-amino)propil)-4-cijanobenzamida (100 mg, 0.30 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (110 mg, 0.56 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.84-1.85 (m, 2H, CH2), 3.18 (s, 3H, CH3), 3.33-3.35 (m, 2H, CH2), 3.42-3.43 (m, 2H, CH2), 5.59 (d, J=8.6 Hz,1H, CH), 6.02-6.09 (m, 1H, CH), 6.15-6.20 (m, 1H, CH), 7.20 (t, J=9.1 Hz, 1H, pirimidin-NH), 7.47-7.49 (m, 1H, Ar-H), 7.63-7.64 (m, 1H, Ar-H), 7.88-7.89 (m, 2H, Ar-H), 7.92-7.96 (m, 4H, pirimidin-H, Ar-H), 8.68 (s, 1H, NH), 9.23 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 492 (M+1).
Primer 61
Priprema t-butil estra 3-(2-(4-cijanofenil)acetamino)propilamino mravlje kiseline
[0173]
[0174] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra 3-(2-(4-cijanofenil)acetamino)propilamino mravlje kiseline (511 mg, prinos 80.6%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropilamino mravlje kiseline (348 mg, 2.0 mmol) i 2-(4-cijano-fenil) sirćetne kiseline (322 mg, 2.0 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 4. LC-MS (m/z) 318 (M+1).
Primer 62
Priprema N-(3-aminopropil)-2-(4-cijanofenil)acetamida
[0175]
[0176] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-2-(4-cijanofenil)acetamida (312 mg, prinosa 89.4%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(2-(4-cijanofenil)acetamino)propilamino mravlje kiseline (511 mg, 1.61 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 218 (M+1).
Primer 63
Priprema 2-(4-cijanofenil)-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)acetamida
[0178] Čvrsta supstanca bele boje2-(4-cijanofenil)-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)acetamida (360 mg, prinos 68.9%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (265 mg, 1.45 mmol) i N-(3-aminopropil)-2-(4-cijanofenil)acetamida (312 mg, 1.44 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 364 (M+1).
Primer 64
Priprema N-(5-(5-hloro-4-(3-(2-(4-cijanofenil)acetamino)propilamino) pirimidinil-2-amino)-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida
[0179]
[0180] Čvrsta supstanca bele boje N-(5-(5-hloro-4-(3-(2-(4-cijanofenil)acetamino)propilamino) pirimidinil-2-amino)-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (113 mg, prinos 53.1%) je pripremljena iz 2-(4-cijanofenil)-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil- 4-amino)propil) acetamida (150 mg, 0.41 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (87 mg, 0.45 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.67-1.72 (m, 2H, CH2), 3.08-3.11 (m, 2H, CH2), 3.18 (s, 3H, CH3), 3.37-3.38 (m, 2H, CH2), 3.52 (s, 2H, CH2), 5.60 (d, J=10.2 Hz, 1H, CH), 6.03-6.09 (m, 1H, CH), 6.16-6.21 (m, 1H, CH), 7.19-7.22 (m, 1H, Ar-H), 7.26 (t, J=9.3 Hz, 1H, pirimidin-NH), 7.44 (d, J=8.1 Hz, 2H, Ar-H), 7.64-7.66 (m, 1H, Ar-H), 7.74 (d, J=8.2 Hz, 2H, Ar-H), 7.88-7.89 (m, 1H, Ar-H), 7.95 (s, 1H, pirimidin-H), 8.13 (t, J=5.6 Hz, 1H, NH), 9.39 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 522 (M+1).
Primer 65
Priprema t-butil estra 3-(4-cijano-fenilsulfonamino)propilamino mravlje kiseline
[0181]
[0182] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra 3-(4-cijano-fenilsulfonamino)propilamino mravlje kiseline (0.25 g, prinos 73.7%) je pripremljena prema sledećem.4-cijano-benzen sulfonil hlorid (0.2 g, 1.0 mmol) i N-Boc-1,3-propan diamin (0.18 g, 1.03 mmol) u rastvoreni u 5 ml THF uz mešanje na sobnoj temperaturi. Nakon toga, je dodata DIPEA (0.26 g, 2.0 mmol) i reagovala je 4 h. Reakcija je praćena sa LC-MS. Posle reakcije, dodaje se zasićeni rastvor NaHCO3u vodi, i smeša se meša da bi se istaložila čvrsta supstanca. Ciljni intermedijer je dobijen ceđenjem. LC-MS (m/z) 340 (M+1).
Primer 66
Priprema N-(3-aminopropil)-4-cijanofenilsulfonamida
[0183]
[0184] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-4-cijano-fenilsulfonamida (150 mg, prinos 85.2%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(4-cijano-fenilsulfonamino)propilamino mravlje kiseline (250 mg, 0.74 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 240 (M+1).
Primer 67
Priprema 4-cijano-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil) fenilsulfonamida
[0185]
[0186] Čvrsta supstanca bele boje 4-cijano-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil) fenilsulfonamida (150 mg, prinos 61.9%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (128 mg, 0.7 mmol) i N-(3-aminopropil)-4-cijano-fenilsulfonamida (150 mg, 0.63 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 386 (M+1).
Primer 68
Priprema 4-cijano-N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metiilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)benzensulfonamida
[0187]
[0188] Čvrsta supstanca bele boje N-(5-(5-hloro-4-(3-(4-cijano-fenilsulfonamino)propilamino) pirimidinil-2-amino)-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (35 mg, prinosa 30.7%) je pripremljena iz 4-cijano-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil) fenilsulfonamida (80 mg, 0.21 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (43 mg, 0.22 mmol) na onovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.63-1.70 (m, 2H, CH2), 2.80-2.85 (m, 2H, CH2), 3.17 (s, 3H, CH3), 3.34-3.35 (m, 2H, CH2), 5.60 (d, J=10.3 Hz, 1H, CH), 6.02-6.09 (m, 1H, CH), 6.15-6.20 (m, 1H, CH), 7.13-7.16 (m, 1H, Ar-H), 7.25 (t, J=9.4 Hz, 1H, pirimidin-NH), 7.65-7.67 (m, 1H, Ar-H), 7.81-7.82 (m, 1H, Ar-H), 7.88 (t, J=5.9 Hz, 1H, NH), 7.91 (d, J=8.4 Hz, 2H, Ar-H), 7.94 (s, 1H, pirimidin-H), 8.03 (d, J=8.4 Hz, 2H, Ar-H), 9.38 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 544 (M+1).
Primer 69
Priprema 4-cijano-N-(3-hidroksipropil)benzamida
[0189]
[0190] Tečnost žute boje 4-cijano-N-(3-hidroksipropil)benzamida (400 mg, prinos 99%) je pripremljena iz 3-amino-1-propanola (150 mg, 2 mmol) i 4-cijanobenzoeve kiseline (294 mg, 2 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 4. LC-MS (m/z) 205 (M+1).
Primer 70
Priprema 4-cijano-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-okso)propil)benzamida
[0191]
[0192] Čvrsta supstanca žute boje 4-cijano-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-okso)propil)benzamida (120 mg, prinosa 17%) je pripremljena prema sledećem.4-cijano-N-(3-hidroksipropil)benzamid (408 mg, 2 mmol) je rastvoren u 3 ml DMF uz mešanje u ledenom kupatilu. Posle 10 min, dodaje se NaH (48 mg, 2 mmol), i smeša se održava uz mešanje.10 min kasnije, dodaje se 2,4,5-trihloropirimidin (366 mg, 2 mmol), i smeša se uklanja iz vodenog kupatila i reaguje na sobnoj temeperaturi. Reakcija se prati LC-MS. Posle reakcije, smeša je sipana u 200 ml slanog rastvora kako bi se istaložila žuta viskozna supstanca. Vodeni sloj je nakon toga proceđen, i dodato je 200 mL PE. Nakon toga, smeša je izložena ultrazučnim talasima. Ciljni intermedijer je dobijen ceđenjem. LC-MS (m/z) 351 (M+1).
Primer 71
Priprema N(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-okso)propil)-4-cijanobenzamida
[0194] Čvrsta supstanca braon boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-okso)propil)-4-cijano-benzamida (20 mg, prinos 20.0%) je pripremljena iz 4-cijano-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-okso)propil)benzamida (70 mg, 0.2 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (50 mg, 0.24 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.98-2.06 (m, 2H, CH2), 3.18 (s, 3H, CH3), 3.40-3.47 (m, 2H, CH2), 4.45-4.51 (m, 2H, CH2), 5.60 (d, J=9.5 Hz, 1H, CH), 6.03-6.09 (m, 1H, CH), 6.16-6.21 (m, 1H, CH), 7.28 (t, J=9.4 Hz, 1H, pirimidin-NH), 7.64-7.67 (m, 1H, Ar-H), 7.78-7.80 (m, 1H, Ar-H), 7.93 (d, J=8.3 Hz, 2H, Ar-H), 7.98 (d, J=8.3 Hz, 2H, Ar-H), 8.32 (s, 1H, pirimidin-H), 8.77 (t, J=5.3 Hz, 1H, NH), 9.85 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 509 (M+1).
Primer 72
Priprema t-butil estra 3-(izonikotinamino)propilamino mravlje kiseline
[0195]
[0196] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra 3-(izonikotinamino)propilamino mravlje kiseline (1.0 g, prinos 78.0%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropilamino mravlje kiseline (800 mg, 4.60 mmol) i izonikotinoil hlorida (900 mg, 6.38 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 4. LC-MS (m/z) 280 (M+1).
Primer 73
Priprema N-(3-aminopropil)-izonikotinamida
[0197]
[0198] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-izonikotinamida (180 mg, prinos 28.1%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(izonikotinamino)propilamino mravlje kiseline (1.0 g, 3.58 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC- MS (m/z) 180 (M+1).
Primer 74
Priprema N-(3-(2,5-dihloropirimidini-4-amino)propil)izonikotinamida
[0199]
[0200] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)izonikotinamida (120 mg, prinos 32.8%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidin (276 mg, 1.51 mmol) i N-(3-aminopropil)-izonikotinamida (180 mg, 1.00 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 326 (M+1).
Primer 75
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)izonikotinamida
[0201]
[0202] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)izonikotinamida (4.2 mg, prinos 2.3%) je pripremljena iz N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)izonikotinamida (120 mg, 0.36 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (70 mg, 0.36 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.80-1.84 (m, 2H, CH2), 3.19 (s, 3H, CH3), 3.26-3.33 (m, 2H, CH2), 3.45-3.47 (m, 2H, CH2), 5.59 (d, J=10.1 Hz, 1H, CH), 6.03-6.09 (m, 1H, CH), 6.15-6.20 (m, 1H, CH), 7.23-7.27 (m, 2H, Ar-H, pirimidin-NH), 7.64-7.66 (m, 1H, Ar-H), 7.72 (d, J=5.6 Hz, 2H, Ar-H), 7.89 (d, J=5.2Hz, 1H, Ar-H), 7.96 (s, 1H, pirimidin-H), 7.70 (d, J=5.5 Hz, 2H, Ar-H), 8.73 (s, 1H, NH), 9.40 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 484 (M+1).
Primer 76
Priprema t-butil estra 3-(4-etilfenilformamino)propilamino mravlje kiseline
[0203]
[0204] Čvrsta supstanca bele boje 3-(4-etilbenzamino)propil t-butil karbamata (800 mg, prinos 91.1%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropil t-butilamino mravlje kiseline (500 mg, 2.87 mmol) i 4-etilbenzoil hlorida (530 mg, 3.15 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 4. LC-MS (m/z) 307 (M+1).
Primer 77
Priprema N-(3-aminopropil)-4-etilbenzamida
[0205]
[0206] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-4-etilbenzamida (300 mg, prinos 55.7%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(4-etilbenzamino)propilamino mravlje kiseline (800 mg, 2.61 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 207 (M+1).
Primer 78
Priprema N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-etil benzamida
[0207]
[0208] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-etil benzamida (500 mg, prinos 97.5%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (300 mg, 1.64 mmol) i N-(3-aminopropil)-4-etilbenzamida (300 mg, 1.46 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 353 (M+1).
Primer 79
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4-etilbenzamida
[0209]
[0210] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-4-etilbenzamida (86 mg, prinos 59.4%) je pripremljena iz N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-hidroksibenzamida (100 mg, 0.28 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (71 mg, 0.37 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.19 (t, J=7.6 Hz, 3H, CH3), 1.78-1.81 (m, 2H, CH2), 2.62-2.67 (m, 2H, CH2), 3.19 (s, 3H, CH3), 3.30-3.33 (m, 2H, CH2), 3.44-3.45 (m, 2H, CH2), 5.59 (d, J=10.1 Hz, 1H, CH), 6.03-6.09 (m, 1H, CH), 6.16-6.21 (m, 1H, CH), 7.22-7.29 (m, 4H, Ar-H, pirimidin-NH), 7.65-7.67 (m, 1H, Ar-H), 7.76 (m, J=8.0 Hz, 2H, Ar-H), 7.89 (d, J=5.2 Hz, 1H, Ar-H), 7.96 (s, 1H, pirimidin-H), 8.37 (t, J=5.5 Hz, 1H, NH), 9.39 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 511 (M+1).
Primer 80
Priprema t-butil estra 3-(4-metilbenzamino)propilamino mravlje kiseline
[0211]
[0212] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra 3-(4-metilbenzamino)propilamino mravlje kiseline (0.45 g, prinos 79%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropilamino mravlje kiseline (0.3 g, 1.95 mmol) i 4-metilbenzoil hlorida (0.34 g, 1.95 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 76. LC-MS (m/z) 293 (M+1).
Primer 81
Priprema N-(3-aminopropil)-4-metilbenzamida
[0213]
[0214] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-4-metilbenzamida (290 mg, prinos 99%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(4-metilbenzamino)propilamino mravlje kiseline (450 mg, 1.54 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 193 (M+1).
Primer 82
Priprema N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-metil benzamida
[0215]
[0216] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-metil benzamida (400 mg, prinos 78.1%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (300 mg, 1.64 mmol) i N-(3-aminopropil)-4-metilbenzamida (290 mg, 1.51 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 339 (M+1).
Primer 83
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-4-metil-benzamida
[0217]
[0218] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-4-metil benzamida (200 mg, prinos 34.2%) je pripremljena iz N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-metilbenzamida (400 mg, 1.18 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (400 mg, 2.06 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.76-1.83 (m, 2H, CH2), 2.34 (s, 3H, CH3), 3.19 (s, 3H, CH3), 3.29-3.33 (m, 2H, CH2), 3.44-3.45 (m, 2H, CH2), 5.59 (d, J=9.7 Hz, 1H, CH), 6.03-6.10 (m, 1H, CH), 6.16-6.21 (m, 1H, CH), 7.22-7.26 (m, 4H, Ar-H, pirimidin-NH), 7.65-7.67 (m, 1H, Ar-H), 7.74 (d, J=8.0 Hz, 2H, Ar-H), 7.89 (d, J=5.2 Hz, 1H, Ar-H), 7.96 (s, 1H, pirimidin-H), 8.38 (t, J=5.4Hz, 1H, NH), 9.40 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 497 (M+1).
Primer 84
Priprema t-butil estra 3-benzamidopropilamino mravlje kiseline
[0219]
[0220] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra 3-benzamidopropilamino mravlje kiseline (700 mg, prinos 88.3%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropilamino mravlje kiseline (400 mg, 2.85 mmol) i benzoil hlorida (500 mg, 3.57 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 76. LC-MS (m/z) 279 (M+1).
Primer 85
Priprema N-(3-aminopropil)benzamida
[0222] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra N-(3-aminopropil)benzamida (375 mg, prinos 80.4%) je pripremljena iz 3-benzamidopropilamino mravlje kiseline (700 mg, 2.62 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 179 (M+1).
Primer 86
Priprema N-(3-(2,5-dihloropirimidini-4-amino)propil)benzamida
[0223]
[0224] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)benzamida (556 mg, prinos 81.7%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (550 mg, 3.00 mmol) i N-(3-aminopropil)benzamida (375 mg, 2.1 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 325 (M+1).
Primer 87
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)benzamida
[0225]
[0226] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)benzamida (245 mg, prinos 42.8%) je pripremljena iz N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)benzamida (400 mg, 1.23 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (280 mg, 1.44 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.79-1.83 (m, 2H, CH2), 3.19 (s, 3H, CH3), 3.31-3.34 (m, 2H, CH2), 3.44-3.46 (m, 2H, CH2), 5.59 (d, J=9.8 Hz, 1H, CH), 6.03-6.09 (m, 1H, CH), 6.16-6.21 (m, 1H, CH), 7.22-7.27 (m, 2H, Ar-H, pirimidin-NH), 7.45 (d, J=7.5 Hz, 2H, Ar-H), 7.52 (t, J=7.1 Hz, 1H, Ar-H), 7.65-7.67 (m, 1H, Ar-H), 7.83 (d, J=5.2 Hz, 2H, Ar-H), 7.89 (d, J=7.4 Hz, 1H, Ar-H), 7.96 (s, 1H, pirimidin-H), 8.46 (t, J=5.2Hz, 1H, NH), 9.40 (s, 1H, benzeneov prsten-NH). LC- MS (m/z) 483 (M+1).
Primer 88
Priprema t-butil estra 3-(3-trifluorometilbenzamino)propilamino mravlje kiseline
[0227]
[0228] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra3-(3-trifluorometilbenzamino)propilamino mravlje kiseline (640 mg, prinos 79.7%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropilamino mravlje kiseline (400 mg, 2.32 mmol) i 3-trifluorometil benzoil hlorida (596 mg, 2.87 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 76. LC-MS (m/z) 347 (M+1).
Primer 89
Priprema N-(3-aminopropil)-3-trifluorometilbenzamida
[0229]
[0230] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-3-trifluorometilbenzamida (300 mg, prinos 66.0%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(3-trifluorometilbenzamino)propilamino mravlje kiseline (640 mg, 1.84 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 247 (M+1).
Primer 90
Priprema N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-3-trifluorometilbenzamida
[0231]
[0232] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-3-trifluorometil benzamida (480 mg, prinos 93.2%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (360 mg, 2.21 mmol) i N-(3-aminopropil)-3-trifluorometilbenzamida (300 mg, 1.47 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 393 (M+1).
Primer 91
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-3-trifluorometilbenzamida
[0234] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-3-trifluorometilbenzamida (240 mg, prinos 35.7%) je pripremljena iz N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-3-trifluorometil benzamida (480 mg, 1.22 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (260 mg, 1.34 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.80-1.87 (m, 2H, CH2), 3.19 (s, 3H, CH3), 3.32-3.37 (m, 2H, CH2), 3.44-3.48 (m, 2H, CH2), 5.59 (d, J=9.6 Hz, 1H, CH), 6.03-6.09 (m, 1H, CH), 6.16-6.21 (m, 1H, CH), 7.21-7.25 (m, 2H, Ar-H, pirimidin-NH), 7.65-7.67 (m, 1H, Ar-H), 7.71 (t, J=7.8 Hz, 1H, Ar-H), 7.88-7.90 (m, 2H, Ar-H), 7.96 (s, 1H, pirimidin-H), 8.14 (d, J=7.9 Hz, 1H, Ar-H), 8.16 (s, 1H, Ar-H), 8.72 (t, J=5.4 Hz, 1H, NH), 9.40 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 551 (M+1).
Primer 92
Priprema t-butil estra 3-(3-cijano-benzamino)propilamino mravlje kiseline
[0235]
[0236] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra3-(3-cijano-benzamino)propilamino mravlje kiseline (740 mg, prinos 80.6%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropilamino mravlje kiseline (600 mg, 3.44 mmol) i 3-cijano-benzoil hlorida (500 mg, 3.02 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 76. LC-MS (m/z) 304 (M+1).
Primer 93
Priprema N-(3-aminopropil)-3-cijanobenzamida
[0237]
[0238] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-3-cijanobenzamida (300 mg, prinos 86.5%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(3-cijano-benzamino)propilamino mravlje kiseline (740 mg, 2.62 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 204 (M+1).
Primer 94
Priprema N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-3-cijano benzamida
[0239]
[0240] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-3-cijano benzamida (460 mg, prinos 89.4%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (360 mg, 2.21 mmol) i N-(3-aminopropil)-3-cijanobenzamida (300 mg, 1.47 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 350 (M+1).
Primer 95
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-3-cijanobenzamida
[0241]
[0242] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-3-cijanobenzamida (210 mg, prinos 31.8%) je pripremljena iz N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-3-cijanobenzamida (460 mg, 1.31 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (280 mg, 1.44 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.80-1.86 (m, 2H, CH2), 3.19 (s, 3H, CH3), 3.31-3.35 (m, 2H, CH2), 3.44-3.48 (m, 2H, CH2), 5.59 (d, J=10.2 Hz, 1H, CH), 6.03-6.09 (m, 1H, CH), 6.16-6.21 (m, 1H, CH) 7.21-7.26 (m, 2H, Ar-H, pirimidin-NH), 7.64-7.66 (m, 1H, Ar-H), 7.68-7.70 (m, 1H, Ar-H), 7.89-7.90 (m, 1H, Ar-H), 7.96 (s, 1H, pirimidin-H), 7.98 (d, J=7.7 Hz, 1H, Ar-H), 8.13 (d, J=7.9 Hz, 1H, Ar-H), 8.24 (s, 1H, Ar-H), 8.66 (t, J=5.7Hz, 1H, NH), 9.40 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 508 (M+1).
Primer 100
Priprema t-butil estra 3-(3-fluoro-4-trifluorometil benzamino)propilamino mravlje kiseline
[0243]
[0244] Čvrsta supstanca žute boje t-butil estra 3-(3-fluoro-4-trifluorometil benzamino)propilamino mravlje kiseline (728 mg, prinos 100%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropilamino mravlje kiseline (348 mg, 2 mmol) i 3-fluoro-4-trifluorometilbenzoeve kiseline (416 mg, 2 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 4. LC-MS (m/z) 365 (M+1).
Primer 101
Priprema N-(3-aminopropil)-3-fluoro-4-trifluorometilbenzamida
[0245]
[0246] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-3-fluoro-4-trifluorometilbenzamida (264 mg, prinos 50%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(3-fluoro-4-trifluorometilbenzamino)propilamino mravlje kiseline (728 mg, 2 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 265 (M+1).
Primer 102
Priprema N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-3-fluoro-4-trifluorometil benzamida [0247]
[0248] Čvrsta supstanca žute boje N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil) -3-fluoro-4-trifluorometilbenzamida (200 mg, prinos 49%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (183 mg, 1.00 mmol) i N-(3-aminopropil)-3-fluoro-4-trifluorometil benzamida (264 mg, 1.00 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 411 (M+1).
Primer 103
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-3-fluoro-4-trifluorometilbenzamida
[0249]
[0250] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-3-fluoro-4-trifluorometil benzamida (50 mg, prinos 20%) je pripremljena iz N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil) -3-fluoro-4-trifluorometilbenzamida (205 mg, 0.5 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (110 mg, 0.6 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H -NMR (DMSO-d6) δ 1.81-1.86 (m, 2H, CH2), 3.19 (s, 3H, CH3), 3.32-3.36 (m, 2H, CH2), 3.45-3.47 (m, 2H, CH2), 5.59 (d, J=9.4 Hz, 1H, CH), 6.02-6.09 (m, 1H, CH), 6.15-6.20 (m, 1H, CH), 7.20-7.24 (m, 2H, Ar-H, pirimidin-NH), 7.64-7.66 (m, 1H, Ar-H), 7.83-7.92 (m, 4H, Ar-H), 7.96 (s, 1H, pirimidin-H), 8.75 (t, J=5.2 Hz, 1H, NH), 9.40 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 569 (M+1).
Primer 104
Priprema t-butil estra 3-(2,3,4,5-tetrafluorobenzamino)propilamino mravlje kiseline
[0251]
[0252] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra 3-(2,3,4,5-tetrafluorobenzamino)propilamino mravlje kiseline (400 mg, prinos 57.1%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropilamino mravlje kiseline (348 mg, 2.00 mmol) i 2,3,4,5-tetrafluorobenzoil hlorida (848 mg, 4.00 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 76. LC-MS (m/z) 351 (M+1).
Primer 105
Priprema N-(3-aminopropil)-2,3,4,5-tetrafluorobenzamida
[0253]
[0254] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-2,3,4,5-tetrafluorobenzamida (250 mg, prinos 100%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(2,3,4,5-tetrafluorobenzamino)propilamino mravlje kiseline (350 mg, 1.00 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 251 (M+1).
Primer 106
Priprema N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-2,3,4,5-tetrafluorobenzamida
[0255]
[0256] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil) -2,3,4,5-tetrafluorobenzamida (200 mg, prinos 50%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (183 mg, 1.00 mmol) i N-(3-aminopropil)-2,3,4,5-tetrafluorobenzamida (250 mg, 1.00 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 397 (M+1).
Primer 107
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-2,3,4,5-tetrafluorobenzamida
[0257]
[0258] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-2,3,4,5-tetrafluorobenzamida (50 mg, prinos 18%) je pripremljena iz N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-2,3,4,5 -tetrafluorobenzamida (200 mg, 0.5 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (110 mg, 0.6 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.
<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.79-1.82 (m, 2H, CH2), 3.19 (s, 3H, CH3), 3.28-3.30 (m, 2H, CH2), 3.44-3.46 (m, 2H, CH2), 5.60 (d, J=9.8 Hz, 1H, CH), 6.03-6.09 (m, 1H, CH), 6.16-6.21 (m, 1H, CH), 7.23-7.27 (m, 2H, Ar-H, pirimidin-NH), 7.56-7.61 (m, 1H, Ar-H), 7.65-7.67 (m, 1H, Ar-H), 7.88 (d, J=5.4 Hz, 1H, Ar-H), 7.95 (s, 1H, pirimidin-H), 8.52 (s, 1H, NH), 9.40 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 555 (M+1).
Primer 108
Priprema t-butil estra 3-(4-acetilbenzamino)propilamino mravlje kiseline
[0259]
[0260] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra 3-(4-acetilbenzamino)propilamino mravlje kiseline (385 mg, prinos 60.2%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropilamino mravlje kiseline (350 mg, 2.01 mmol) i 4-acetilbenzoeve kiseline (328 mg, 2.00 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 4. LC-MS (m/z) 321 (M+1).
Primer 109
Priprema 4-acetil-N-(3-aminopropil)benzamida
[0261]
[0262] Čvrsta supstanca bele boje 4-acetil-N-(3-aminopropil)benzamida (200 mg, prinos 75.8%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(4-acetilbenzamino)propilamino mravlje kiseline (385 mg, 1.20 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 221 (M+1).
Primer 110
Priprema 4-acetil-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil) benzamida
[0263]
[0264] Čvrsta supstanca bele boje 4-acetil-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil) benzamida (120 mg, prinos 36.1%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidina (180 mg, 0.98 mmol) i 4-acetil-N-(3-aminopropil)benzamida (200 mg, 0.91 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 367 (M+1).
Primer 111
Priprema 4-acetil-N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)benzamida
[0265]
[0266] Čvrsta supstanca bele boje 4-acetil-N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido) fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)benzamida (83 mg, prinos 47.9%) je pripremljena iz 4-acetil-N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)benzamida (120 mg, 0.33 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)N-metilakrilamida (70 mg, 0.36 mmol) na osovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.79-1.85 (m, 2H, CH2), 2.61 (s, 3H, CH3), 3.19 (s, 3H, CH3), 3.32-3.36 (m, 2H, CH2), 3.45-3.48 (m, 2H, CH2), 5.59 (d, J=9.9 Hz, 1H, CH), 6.02-6.09 (m, 1H, CH), 6.15-6.20 (m, 1H, CH), 7.21-7.28 (m, 2H, pirimidin-NH, Ar-H), 7.64-7.69 (m, 1H, Ar-H), 7.88-7.89 (m, 1H, Ar-H), 7.94 (d, J=8.3 Hz, 2H, Ar-H), 7.96 (s, 1H, pirimidin-H), 8.01 (d, J=8.4 Hz, 2H, Ar-H), 8.65 (t, J=5.3 Hz, 1H, NH), 9.40 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 525 (M+1).
Primer 112
Priprema t-butil estra 3-(4-difluorometilbenzamino)propilamino mravlje kiseline
[0267]
[0268] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra 3-(4-difluorometilbenzamino)propilamino mravlje kiseline (780 mg, prinos 84.3%) je pripremljena iz t-butil estra 3-aminopropilamino mravlje kiseline (49 mg, 2.82 mmol) i 4-difluorometilbenzoeve kiseline (485 mg, 2.82 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 4. LC-MS (m/z) 329 (M+1).
Primer 113
Priprema N-(3-aminopropil)-4-difluorometilbenzamida
[0269]
[0270] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-aminopropil)-4-difluorometilbenzamida (180 mg, prinos 33.2%) je pripremljena iz t-butil estra 3-(4-difluorometilbenzamino)propilamino mravlje kiseline (780 mg, 2.38 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 229 (M+1).
Primer 114
Priprema N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-difluorometilbenzamida
[0271]
[0272] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-difluorometilbenzamida (250 mg, prinos 84.5%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidin (180 mg, 0.98 mmol) i N-(3-aminopropil)-4-difluorometilbenzamida (180 mg, 0.79 mmol) na osnovu koraka sličnih prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 375 (M+1).
Primer 115
Priprema N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-4-difluorometilbenzamida
[0273]
[0274] Čvrsta supstanca bele boje N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)propil)-4-difluorometilbenzamida (26 mg, prinos 23.2%) je pripremljena iz N-(3-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)propil)-4-difluorometilbenzamida (80 mg, 0.21 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil) -N-metilakrilamida (50 mg, 0.26 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.81-1.84 (m, 2H, CH2), 3.19 (s, 3H, CH3), 3.32-3.40 (m, 2H, CH2), 3.45-3.47 (m, 2H, CH2), 5.59 (d, J=9.4 Hz, 1H, CH), 6.03-6.09 (m, 1H, CH), 6.16-6.20 (m, 1H, CH), 6.94 (s, 0.4H, CHF2), 7.08 (s, 0.6H, CHF2), 7.22-7.26 (m, 2H, Ar-H, pirimidin-NH), 7.64-7.66 (m, 3H, Ar-H), 7.89-7.90 (m, 1H, Ar-H), 7.95 (d, J=7.3 Hz, 2H, Ar-H), 7.96 (s, 1H, pirimidin-H), 8.59 (s, 1H, NH), 9.40 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 533 (M+1).
Primer 120
Priprema t-butil estra 6-(4-cijano-benzamino)heksilamino mravlja kiselina
[0275]
[0276] Čvrsta supstanca bele boje t-butil estra 6-(4-cijano-benzamino)heksilamino mravlje kiseline (1300 mg, prinosa 73.4%) je pripremljena iz t-butil estra 6-heksilamino mravlje kiseline (1100 mg, 5.09 mmol) i 4-cijano-benzoil hlorida (900 mg, 5.45 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 76. LC-MS (m/z) 346 (M+1).
Primer 121
Priprema N-(6-aminoheksil)-4-cijano-benzamida
[0277]
[0278] Čvrsta supstanca bele boje N-(6-aminoheksil)-4-cijano-benzamida (700 mg, prinos 75.6%) je pripremljena iz t-butil estra 6-(4-cijano-benzamino)heksilamino mravlje kiseline (1300 mg, 3.76 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 5. LC-MS (m/z) 246 (M+1).
Primer 122
Priprema 4-cijano-N-(6-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)heksil) benzamida
[0279]
[0280] Čvrsta supstanca bele boje 4-cijano-N-(6-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)heksil) benzamida (80 mg, prinosa 49.7%) je pripremljena iz 2,4,5-trihloropirimidin (120 mg, 0.66 mmol) i N-(6-aminoheksil)-4-cijano-benzamida (100 mg, 0.41 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 6. LC-MS (m/z) 392 (M+1).
Primer 123
Priprema N-(6-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)heksil)-4-cijanobenzamida
[0281]
[0282] Čvrsta supstanca bele boje N-(6-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino) pirimidinil-4-amino)heksil)-4-cijano-benzamida (47 mg, prinos 50.3%) je pripremljena iz 4-cijano-N-(6-(2,5-dihloropirimidinil-4-amino)heksil)benzamida (68 mg, 0.17 mmol) i N-(5-amino-2-fluorofenil)-N-metilakrilamida (46 mg, 0.24 mmol) na osnovu sličnih koraka prema Primeru 7.<1>H-NMR (DMSO-d6) δ 1.30-1.32 (m, 4H, 2 X CH2), 1.52-1.56 (m, 4H, 2XCH2), 3.19 (s, 3H, CH3), 3.26-3.29 (m, 2H, CH2), 3.36-3.37 (m, 2H, CH2), 5.60 (d, J=9.9 Hz, 1H, CH), 6.03-6.10 (m, 1H, CH), 6.17-6.21 (m, 1H, CH), 7.22-7.27 (m, 2H, pirimidin-NH, Ar-H), 7.59-7.61 (m, 1H, Ar-H), 7.93-7.98 (m, 6H, pirimidin- NH, Ar-H), 8.64 (s, 1H, NH), 9.38 (s, 1H, benzenov prsten-NH). LC-MS (m/z) 550 (M+1).
In vitro biološka evaluacija
[0283] Ovi postupci za ispitivanje se koriste za in vitro evaluaciju aktivnosti ovde opisanih jedinjenja, uključujući in vitro test za ispitivanje aktivnosti enzima, test za ispitivanje aktivnosti ćelijskog rasta, i test za ispitivanje intraćelijske aktivnosti.
[0284] Ovi testovi imaju za cilj da sveobuhvatno procene svojstva in vitro inhibicije enzima različitih jedinjenja na kinazama, kao što su JAK, ITK, BLK, i VEGFR itd., njihove karakteristike na selektivnost podtipa, i njihove uticaje na biološke aktivnosti, uključujući aktivnost ćelijskog rasta i aktivnost regulacije na signalnom putu, ćelijskih modela.
Primer A Detekcija enzimske aktivnosti
Glavni principi
[0285] Osnovni princip in vitro testa za ispitivanje enzimske aktivnosti je zasnovan na razlici između intenziteta signala fluorescencije koji su dobijeni na različitim talasnim dužinama (445 nm i 520 nm) od fosforilovanog supstrata i ne-fosforilovanog supstrata, gde je specifični fluorescentno obeleženi supstrat fosforilovan kinazom. Kada se dodaju različita jedinjenja koja se ispituju, inhibicija kinazne aktivnosti je predstavljena kao različit stepen fosforilacije supstrata, i prema tome kako različiti intenziteti signala fluorescencije, na osnovu kojih inhibitorna aktivnost jedinjenja na kinazu može da se izračuna. Osnovni princip detekcije je ilustrovan na Sl.1.
[0286] U detekciji enzimske inhibitorne aktivnosti, korišćene su GST-obeležene humane rekombinovane JAK kinaze, uključujući JAK1/PV4774, JAK2/PV4210, JAK3/PV3855, TYK2/PV4790 i njihove odgovarajuće specifične supstrate, uključujući Tyr6 (Z’-LYTE® Kinaza Test Kit-Tirozin 6 Peptid, JAK1/PV4122), Tyr4 (Z’-LYTE® Kinaza Test Kit-Tirozin 4 Peptid, JAK2/PV3193), Tyr4 (Z’-LYTE® Kinaza Test Kit-Tirozin 4 Peptid, JAK3/PV3193), Tyr3 (Z’-LYTE® Kinaza Test Kit-Tirozin 4 Peptid, TYK2/PV3192). U svim testovima, reagens A za razvijanje (PV3297) je korišćen kao sredstvo za ispitivanje. Svi gore pomenuti materijali su kupljeni od Invitrogena.
Glavni postupci
[0287] Test se izvodi u skladu sa instrukcijama proizvođača (Invitrogen). Specifični postupak je prema sledećem:
(1) Priprema: pufer kinazne reakcije (radni rastvor) je pripremljen u skladu sa instrukcijama; gradijent koncentracije na ispitivano jedinjenje je pripremljen rastvaranjem korišćenjem pufera za kinaznu reakciju (najveća koncentracija jedinjenja je bila 10 µM za detekciju JAK1, JAK2, i TYK2, i redom 1 µM za detekciju JAK3.
(2) 10 µl reakcionog sistema, koji obuhvata 2.5 µL jedinjenja koje se ispituje, 5 µL pufera kinazne reakcije i 2.5 µL ATP rastvora (obezbeđeno u kitu), je pomešano i reakcija se izvodi na sobnoj temperaturi 1 h.
(3) Kontrole, uključujući kontrolu rastvarača bez jedinjenja koje se ispituje, negativna kontrola bez ATP i pozitivna kontrola sa fosforilovanim supstratom, zajedno sa detekcijom su ispitani. Svi testovi se izvode u triplikatima.
(4) Posle enzimske reakcije, dodaje se 5 µL pre-formulisanog pufera za razvijanje, i reakcija se izvodi na sobnoj temperaturi 1 h. Nakon toga, reakcija se zaustavlja dodavanjem 5 µL pufera za zaustavljanje reakcije.
(5) Signal fluorescencije u svakom bunariću je detektovan Ascent Fluoroskan FL čitačem (Thermo Labsystems) na ekscitacionim talasnim dužinama 400 nm, i emisionim talasnim dužinama 445 nm i 520 nm. Proporcija foforilacije supstrata je dobijena pozivanjem na intenzitet signala fluorescencije C445/F520.
(6) Brzina enzimske inibicije ispitanog jedinjenja može da se izračuna na osnovu sledeće jednačine: Inhibitorna brzina (%) = 1 – udeo fosforilacije supstrata u detekciji po bunariću/udeo fosforilacije supstrata u kontrolnom bunariću sa rastvaračem. Polovina inhibitorne koncentracije (IC50) može da se izračuna korišenjem računanja IC50na osnovu inhibitornih brzina fosforilacije za jedinjenja koja se ispituju za različite gradijente koncentracije.
[0288] Na osnovu gore navedenog postupka, ovde opisana jedinjenja su ispitana enzimski in vitro za JAKs (koncentracija jedinjenja koje se ispituje je 30 nM za JAK3 i JAK2 test, i 300 nM za JAK1 test) korišćenjem Xeljanz (tofacitinib citrata) kao pozitivne kontrole. Podaci su prikazani u Tabeli 2.
Tabela 2. Enzimski podaci primera jedinjenja u predmetnom pronalasku za inhibiciju JAKs
(nastavak)
[0289] Kao što je naznačeno gore u tekstu podaci iz tabele, jedinjenja iz pronalaska imaju selektivnu inibitornu aktivnost JAK3 i/ili JAK1 kinaza, u poređenju sa pozitivnom kontrolom.
[0290] Proporcija jedinjenja iz predmetnog pronalaska je izložena skriningu kinaznog profila (KinaseProfiler™)) i enzimskoj inhibitornoj aktinvosti (IC50Profiler™)) test poveravanjem Eurofins kompaniji (http://www.eurofins.com). Osim kinaza u JAK familiji, kinaza čiji skrining je izvršen za njihovu aktivnost takođe uključuje većinu Grupe 3F i Grupe 4 kinaza (ITK, BLK, TBK1, VEGFRs, ERBBs, itd.), i kinaze koje su u vezi sa krvotokom (Zhang J. et al. 2009, Nat. Rev. Cancer., 9: 28-39). Koncentracija jedinjenja koje se ispituje za skrining kinaznog profila je 1 µM, i gradijent od 9 polulog gradijenata koncentracije su korišćeni da se odredi IC50. Detekcija se izvodi prema standarnom postupku Eurofins Kompanije. Ukratko, u skladu sa zahtevima različitih kinaznih reakcija, 0.2 µL jedinjenja koje se ispituje (50 µM, rastvoreno u dimetilsulfoksidu (DMSO)) se dodaje u reakcioni pufer koji sadrži specifičnu kinazu (puferski sistem koji sadrži 20 mM MOPS, 1 mM EDTA, 0.01% Brij-35, 5% Glicerol, 0.1%β-merkaptoetanol, 1 mg/mL BSA, ili 50 mM TRIS, 0.1 mM EGTA, 0.1 mM Na3VO4, 0.1%βmerkaptoetanol, 1 mg/mL BSA, na osnovu tipa korišćene kinaze). Nakon toga, supstrat specifičan za kinazu finalne koncentracije 50 µM (specifični supstrat je koriščen za specifičnu kinazu), 10 mM MgAcetata i izotopom obeležen γ-<33>P ATP (radio-aktivnost od oko 500 cpm/pmol) se postepeno dodaju za reakcioni sistem u ukupnoj zapremini od 10 µL. Posle inkubacije na sobnoj temperaturi u trajanju od 40 min, reakcija se završava dodavanjem 3% rastvora fosforne kiseline. Smeša se nakon toga prenosi na filter-tip niske temperature speja za sušenje (P30 filtermat), i isprani su sa 75 mM rastvorom fosforne kiseline 3 puta i jednom metanolom. Posle sušenja, detektuje se radioaktivnost. Za specifični postupak, videti standardni postupak koji je obezbeđen od strane Eurofins Kompanije: http://www.eurofins.com/media/9724077/kinaseprofiler assay protocol guide eurofi ns v64.pdf). Podaci su sažeto prikazani u tabeli u tekstu ispod (Tabela 3).
Tabela 3. IC50primera jedinjenja iz pronalaska za inhibiciju JAKs, ITK, BLK, TBK1 i VEGFR (nM)
[0291] Kao što je naznačeno podacima u gornjoj tabeli, (1) neka jedinjenja iz pronalaska imaju selektivnu inhibitornu aktivnost JAK3 i/ili JAK1 kinaza. (2) Neka jedinjenja iz pronalaska imaju inhibitornu aktivnost na deo ITK, BLK, TBK1 i VEGFR familije.
Primer B Test aktivnosti ćelijskog rasta
[0292] Kao što je opisano gore u tekstu, ekspresija JAK kinaze je distribuirana na specifičan način, i osim ćelija imunskog sistema, takođe je eksprimirana u nekim drugim tipovima ćelija. JAK3 je uglavnom eksprimirana u T ćelijama, dok su drugi podtipovi široko distribuirani. JAK kinaza potencijalno utiče na aktivnost rasta ciljne ćelije posredovanjem različitih signala citokina. Inhibitori JAK kinaza mogu da imaju različite efekte na rast model ćelija inibicijom različitih podtipova JAKs.
[0293] MTS test je rutinski postupak za detekciju ćelijske toksičnosti. Osnovni princip je zasnovan na kapacitetu dehidrogenaze u mitohondrijama živih ćelija da redukuju novo žuto jedinjenje formazan MTS u formazan, tako da je količina živih ćelija proporcionalna sa količinom proizvoda formazana detekcijom apsorbancije 490 nm (OD), na taj način se razmatra količina živih ćelija u odnosu na OD vrednost, i razume se kapacitet jedinjenja koje se ispituje da inhibira rast ćelija ili da ubije ćelije.
[0294] U ovom eksperimentu, efekat jedinjenja iz pronalaska na aktivnost ćelijskog rasta je procenjena MTS testom korišćenjem različitih tipova ćelijskih modela, tako da se dalje shvate njihove unutarćelijske aktivnosti.
<(1)>CTLL-2 ćelijski model
Glavni principi
[0295] Aktivnost JAKs ima značajan efekat na rast imunskih ćelija. Za aktivirane proliferativne T ćelije, njihov rast zavisi od aktivnosti receptora ćelijskog faktora rasta IL-2 i njegovih kinaza nishodnog puta JAK1 i JAK3.
[0296] U ovom eksprerimentu, korišćena je mišja T-ćelijska linija CTLL-2. Proliferacija i rast ove ćelijske linije snažno zavisi od IL-2, i uobičajeno se koristi za evaluaciju aktivnog titra egzogenog IL-2. Inhibiranjem aktivnosti kinaze JAK1/3, proliferacija CTLL-2 može da se inhibira u in vitro kulturi. Aktivacija i proliferacija T-ćelija je takođe važna patološka karakteristika za različite imunološke aktivnosti. Prema tome, ovaj model je patološki povezan.
[0297] Poređenjem promene u apsorbanciji koje su nastale od strane ćelija koje su tretirane sa jedinjenjima koje se ispituju korišćenjem MTS testa, inibitorna aktivnost rasta jedinjenja koja se ispituju na model ćelijama može da bude realizovana, i prema tome potentna inhibitorna aktivnost jedinjenja na put JAK1/3 može da se proceni.
Glavni postupci
[0298] MTS se izvodi u skladu sa rutinskim postupkom na ploči sa 96-bunarića.
[0299] Model ćelije su inokulisane u svaki bunarić na ploču sa 96-bunarića u odgovarajućoj koncentraciji (oko 20,000 ćelija/bunariću). Posle 24 h, jedinjenja koja se ispituju se dodaju u različitim gradijentima koncentracije (najveća koncentracija od 10 µM). Kontrola rastvarača (DMSO) i negativna kontrola se takođe zajedno izvode. Svaki eksperiment je ponovljen 3 puta. Ćelije su detektovane nakon gajenja u kulturi dodatnih 24 h.
[0300] CTLL-2 je suspedovana ćelija. Posle inkubacije, 20 µL pre-formulisane smeše MTS i PMS (u odnosu od 20:1) se direktno dodaje u svaki bunarić. Posle inkubiranja na 37°C tokom 2 h, nakon toga se detektuje na mikročitaču ploča (490 nm).
[0301] Efekat jedinjenja na ćelijski rast koje se ispituje se računa poređenjem promene u OD vrednostima između test bunarića i bunarića sa kontrolnim rastvaračem, posle oduzimanja pozadine negativne kontrole. Za jedinjenja koja se ispituju na različitim koncentracionim gradijentima, brzine inhibicije na rast modela ćelija i njihove inhibitorne koncentracije polu-rasta (GI50) su zasebno izračunate.
(2) HeLa i HUVEC ćelijski model
Glavni principi
[0302] HeLa ćelija je ćelijska linija humanog kancera cerviksa, i pripada ćelijskoj liniji tumora epitela; HUVEC je endotelna ćelija humane vene pupčane vrpce i pripada primarnim endotelnim ćelijama; oba tipa ćelija eksprimiraju sve podtipove osim JAK3.
[0303] Promena JAK kinazne aktivnosti nema značajan uticaj na druge tipove ćelija osim za imunske ćelije, i oba ćelijska modela koja su gore spomenuta se uglavnom koriste za evaluaciju da li postoje neke druge mete kinaza osim JAK kinaza ili postoje neselektivne ćelijske toksičnosti.
[0304] U ovom eksperimentu, model ćelije gajene u kulturi koja je inkubirana sa jedinjenjima koja se ispituju na različitim koncentracijama za specifično trajanje. Efekat tretmana sa jedinjenjem koje se ispituje na rast ćelija je detektovan korišćenjem MTS testa.
Glavni postupci
[0305] MTS se izvodi prema rutinskim postupkom na ploči sa 96-bunarića.
[0306] Ćelije modela su inokulisane u svaki bunarić na ploču sa 96-bunarića na odgovarajućoj koncentraciji (oko 5000 ćelija/bunariću). Posle 24 h, jedinjenja koja se ispituju se dodaju u različitim gradijentima koncentracije (najveća konačna koncentracija je 40 µM). Kontrola rastvarača (DMSO) i negativna kontrola se takođe izvode istovremeno. Svaki eksperiment je ponovljen 3 puta. Ćelije su detektovane posle gajenja u kulturi dodatnih 72 h.
[0307] Nakon što je medijum iz kulture aspiriran iz bunarića, 100 µL svežeg medijuma i 20 µL preformulisane smeše MTS i PMS (u odnosu od 20:1) se dodaju u svaki bunarić. Posle inkubiranja na 37°C u trajanju 2 h, nakon toga se detetuje na čitaču mikroploča (490 nm).
[0308] Brzina inhibitornog ćelijskog rasta i GI50jedinjenja koje se ispituje su izračunati kao što se gore u tekstu navodi.
[0309] Na osnovu gore navedenog postupka, citološka evaluacija je izvedena na ovde opisanim jedinjenjima (za detekciju CTLL-2 ćelija, koncentracija jedinjenja koje se ispituje je 300 nM; za detekciju HeLa i HUVEC ćelija, koncentracija jedinjenja koje se ispituje je 10 nM). Podaci su sažeto prikazani u tabeli u tekstu ispod (Tabela 4).
Tabela 4. Brzine rasta različitih ćeliskih soeva tretiranih rimerimaedinena iz ronalaska
(nastavak)
[0310] Kao što je naznačeno podacima u gornjoj tabeli, porcija jedinjenja iz pronalaska ima specifičnu inhibitornu aktivnost na CTLL-2 ćelijama.
[0311] Zasnovano na citološkim eksperimentalnim postupcima, jedinjenja iz pronalaska su izložena in vitro enzimskom IC50testu i GI50testu za različite ćelijske sojeve, korišćenjem Xeljanz kao pozitivne kontrole. Rezultati su prikazani u tabeli u tekstu ispod (Tabela 5).
Tabela 5. GI50primera jedinjenja iz pronalaska u različitim ćelijskim sojevima (mM)
[0312] Kao što je naznačeno podacima u gore navedenoj tabeli, jedinjenja iz pronalaska imaju visoko selektivnu inhibitornu aktivnost JAK3 kinaze, i ova jedinjenja takođe imaju poželjnu specifičnu inhibitornu aktivnost na CTLL-2 ćelijama, u poređenju sa pozitivnom kontrolom.
Primer C Test za ispitivanje unutarćelijske aktivnosti
[0313] Citokini, JAK kinazni STAT proteinski signalni put obrazuju kompleksnu mrežu. Aktivacijom homodimera specifičnog podtipa JAK ili heterodimera različitih podtipova, različiti citokini promovišu fosforilaciju različitih STAT proteinskih članova. U različitim ćelijskim modelima, signali za fosforilaciju nishodnog STAT specifično su povezani sa relevantnim JAK podtipom mogu da se detektuju korišćenjem specifične stimulacije citokinom, dok je aktivnost puta suprimirana inhibitorima JAK preko inhibiranja aktivnosti srodnih kinaza, tako da unutarćelijska inhibitorna aktivnost jedinjenja koja se ispituju na različite JAK podtipove može da se proceni.
[0314] U ovom eksperimentu, western blot (WB) i protočna citometrija se koriste za procenu unutarćelijskih aktivnosti jedinjenja koja se ispituju poređenjem relativnih nivoa signala fosforilovanih i nefosforilovanih STATs u 5 ćelijskih modela, uključujući U937, THP-1, CTLL-2, UT-7/EPO i aktiviranu ćeliju iz periferne krvi (hPBC). Primarno antitelo i sekundarno antitelo koje se koristi u hibridizaciji WB u ovom eksperimentu su kupljeni od Cell Signaling Company (http://www.cellsignal.com). Fluorescentno obeležena antitela koja se koriste u protočnoj citometriji kupljenja su od eBiosciences Company (http://www.ebioscience.com).
Glavi principi
[0315] U937 je monocitična ćelijska linija. Citokin IFN γ indukuje fosforilaciju nishodnog STAT5a aktivacijom heterodimera JAK1/2, i inhibira fosforilaciju STAT5a inhibiranjem aktivnosti JAK1/2. Na takvoj osnovi, unutarćelijska inhibitorna aktivnost jedinjenja koje se ispituje na JAK1/2 može da se proceni detekcijom promene u nivou fosforilacije STAT5.
[0316] THP-1 je monocitična ćelijska linija. Citokin IL-4 indukuje fosforilaciju nishodnog STAT6 akivacijom heterodimera JAK1/3, i JAK inhibitor suprimira fosforilaciju STAT6 suprimiranjem aktivnosti JAK1/3. Unutarćelijska inibitorna aktivnost jedinjenja na JAK1/3 može da bude procenjena detekcijom promene u nivou fosforilacije STAT6.
[0317] CTLL-2 je T-ćelijska linija, i njena proliferacija i rast zavisi od citokina IL-2. Citokin IL-2 indukuje fosforilaciju nishodnog STAT5 aktiviranjem heterodimera JAK1/3, i JAK inhibitor suprimira fosforilaciju STAT5 suprimiranjem aktivnosti JAK1/3. Unutarelijska inhibitorna aktivnost jedinjenja na JAK1/3 može da se proceni detekcijom promene u nivou fosforilacije STAT5.
[0318] UT-7/EPO je ćelijska linija koja je nastala iz kostne srži pacijenta koji pati od leukemije džinovskih ćelija nakon gajenja u kulturi sa EPO indukcijom, i očigledno reaguje na citokin EPO. Signal za EPO se prenosi pomoću homodimera JAK2 i indukuje fosforilaciju nishodnog STAT5, dok JAK inhibitor suprimira fosforilaciju STAT5 suprimiranjem aktivnosti JAK2. Unutarćelijska inhibitorna aktivnost jedinjenja na JAK2 može da se proceni detekcijom promene nivoa fosforilacije STAT5.
[0319] Proliferacija koja zavisi od citokina IL-2 se dobija nakon akitviranja sa ko-stimulacijom humane ćelije periferne krvi (hPBC) sa CD3 antitelom. Signalni put rasta je posredovan heterodimerom JAK1/3 i indukuje fosforilaciju nishodnog STAT5. Uutarćelijska inhibitorna aktivnost jedinjenja na JAK1/3 može da se proceni detekcijom nivoa fosforilacije STAT5.
Glavni postupci
Western blot (WB)
[0320]
<(1)>Tretman jedinjenjem: eksperiment se izvodi na ploči sa 6-bunarića. U937 i THP-1 ćelija je svaka gajena u kulturi do odgovarajuće gustine, u koje se dodaje jedinjenje koje se ispituje u različitim koncentracijama. Posle gajenja preko noći (16 h), dodaju se odgovarajući IFN γ ili IL-4 (10 ng/mL). Ćelije su sakupljene centrifugom 30 min kasnije.
<(2)>Ekstrakcija proteina i WB detekcija: posle ekstrakcije, određuje se sadržaj proteina. Protein se na membranu prenosi posle PAGE elektroforeze. WB detekcija se izvodi prema standardnom psotupku. Sekundarna antitela koja su korišćena za hibridizaciju uključuju STAT5 (#9363), STAT6 (#9362) i odgovarajući fosforilovani STAT5 (#9351), STAT6 (#9361). Detekcija se izvodi prema preporučenom postupku u instrukcijama za antitelo.
<(3)>Detekcija signala: signal hibridizacije se detektuje snimanjem X-zračenja. Signal sive skale koji se dobija skeniranjem se konvertuje u digitalni signal, i signalni intenziteti za oba fosforilovana STATs i STATs su svaki izračunati kako bi se procenile inhibitorne aktivnosti fosforilacije jedinjenja na STATs.
Protočna citometrija (FCS)
[0321]
<(1)>Tretman jedinjenjem: eksperiment se izvodi na ploči sa 6-bunarića. THP-1, CTLL-2, UT7/EPO i in vitro aktivisana ćelija periferne krvi (hPBC) iz volontera su svaka gajene u kulturi u odgovarajućoj gustini, u kojoj se dodaje jedinjenje koje se ispituje na različitim koncentracijama. Nakon gajenja preko noći u kulturi (16 h), odgovarajuće se dodaju IFN γ, IL-4, IL-2 i EPO (10 ng/mL). Ćelije su sakupljene centrifugom 30 min kasnije.
<(2)>Fiksacija ćelija i fluorescentno obeležavanje: ćelije su fiksirane korišćenjem paraformaldehida (30 min), i nakon toga su tretirane za membransku propustljivost u ohlađenom metanolu (15 min). Posle ispiranja sa PBS puferom, ćelije su suspendovane, gde su rezistentni na fosforilaciju STAT5 i STAT6 antitelo (Mišje anti-Humano p-STAT5 (pY694)-Fluor®488; Mišje anti-zečje p-STAT6 (pY641)-Fluor®488) dodati u odnosu od 100:1, i inkubirani u mraku 30 min. Posle ispiranja sa PBS, ćelije su u suspenziji pripremljene za nanošenje.
<(3)>Detekcija protočnom citometrijom: detekcija se izvodi korišćenjem Guava® easyCyte protočnog citometra prema instrukcijama. Srednja vrednost intenziteta fluorescencije (MFI) uzorka je detektovana korišćenjem pogodne ćelijske populacije. Na takvoj osnovi, relativni intenziteti signala su izračunati za fosforilovani STATs koji je tretiran sa jedinjenjima na različitim koncentracijama pozivanjem na signal negativnog (ili bez stimulacije sa faktorom) i pozitivna kontrola (sa oba faktorom stimulacije i kontrolom rastvarača) u eksperimentu, tako da može da se proceni IC50jedinjenja za inhibitornu aktivnost na fosforilaciju STATs.
[0322] Na osnovu gore navedenih eksperimentalnih postupaka, jedinjenja iz pronalaska su izabrana za WB i protočnu citometriju, gde porcija jedinjenja inhibira STATs fosforilaciju u specifičnim ćelijskim modelima sa IC50vrednostima koje su prema sledećem. Podaci su prikazani u tabeli u tekstu ispod (Tabela 6).
Tabela 6. Inhibicija jedinjenja iz pronalaska na fosforilaciju
[0323] Kao što je naznačeno u podacima gore u tabeli, porcija jedinjenja iz pronalaska imaju intraćelijsku selektivnu inhibitornu aktivnost JAK3 i/ili JAK1, što je u skladu sa rezultatom dobijenim in vitro evaluacijom enzima.
Primer D Efekat jedinjenja koja se ispituju u modelu artritisa indukovanog kolagenom (CIA) kod pacova [0324] Cilj: u ovom testu, artritis je indukovan kod Wistar pacova upotrebom kolagena kokošaka. Posle in vivo ordiniranja jedinjenja iz Primera 7 i Primera 22, procenjena je promena indeksa bolesti za artritis kod pacova da se odredi terapeutski efekat jedinjenja koja se ispituju na artritis kod pacova.
[0325] Eksperimentalne životinje: 36 ženki Wistar pacova su kupljene od centra za eksperimentalne životinje, Sun Yat-Sen University (Guangzhou) sa telesnom težinom opsega od 180 do 200 g na početku eksperimenta. Četiri grupe (8 pacova u svakoj grupi) su korišćene kao model artritisa, i druga grupa (4 pacova) je korišćena kao normalna kontrola.
[0326] Materijali: tip II kolagena kokoške i Frojndov kompletni adjuvans su kupljeni od Beijing Biolead Science i Technology Development Co., Ltd. Pozitivna kontrola: metotreksat (MTX).
[0327] Jedinjenja koja se ispituju: jedinjenje iz Primera 7 i Primera 22.
[0328] Postupak za pripremu: jedinjenja koja se ispituju su pripremljena dodavanjem u sveže pripremljeni 0.2mas% CMC-Na 0.1mas% Tween-80 rastvor u sterilnoj vodi do željene koncentracije i intenzivnim mešanjem kroz ultrazvuk.
Eksperimentalni postupci:
[0329] CIA model: kolagen kokoške je u potpunosti emulgovan u jednakoj zapremini Frojdovog kompletnog adjuvansa, i subkutano je ubrizgan u koren repa pacova u danu 0 za senzibilizaciju (250 µL/pacovu). Druga injekcija je primenjena na korenu repa u danu 7 za dopunsku imunizaciju (100 µL/pacovu). Posle pojave artritisa (oko dana 13), pacovi su slučajno raspoređeni u 4 grupe sa 8 pacova u svakoj grupi. Ordiniranje je započeto u danu 14 posle prve imunizacije, i trajalo je 14 dana. Ekstremiteti pacova su vizuelno pregledani, i težina simptoma artritisa je bodovana u opsegu od 1 do 4: 0 = normalno; 1 = blagi simptom, sa znacima, kao što je crveni i otečeni članak ili zglob; 2 = umereno crveni i otečeni članak ili zglob; 3 = teško crvena i otečena šapa, uključujući prste; 4 = teško otečeni zglob koga prati disfunkcija; najvei rezultat za svakog pacova je bio 16. Zadebljanje prstiju zadnjih udova i zapremina šape je merena istovremeno.
[0330] Lečenje: pacovima je i.g. ordinirano jedinjenje iz Primera 7 u koncentraciji od 40 mg/kg dva puta/dnevno; ili su pacovi i.g. ordinirani sa jedinjenjem prema Primeru 22 u koncentraciji od 40 mg/kg dva puta/danu. Za pozitivnu kontrolu, 5 mg/kg MTX je ubrizgano intraperitonealno dva puta nedeljno. i.g. ordiniranje rastvarača je korišćeno kao negativna kontrola. Podaci koji su dobijeni 14 dana posle ordiniranja i pre ordiniranja su upoređeni. Rezultati su navedeni u tabeli u tekstu ispod (Tabela 7). Tabela 7. Efikasnost testiranih jedinjenja u modelu artritisa indukovanog kolagenom (CIA) kod pacova
Rezultati:
[0331] 1. U poređenju sa grupom koja je primila rastvarač, stepen oticanja indukovan artritisom kod pacova je značajno inibiran kada je i.g ordinirano jedinjenje iz Primera 7 (40 mg/kg), i stope inhibicije za sve indekse su bile bolje nego za one koje su dobijene sa pozitivnom kontrolom metotreksatom; određeni inhibitorni efekat je takođe uočen za artritis kod pacova kada se i.g. ordinira jedinjenje iz Primera 22 (40 mg/kg).
[0332] 2. U poređenju sa grupom koja je primila rastvarač, telesna težina pacova u grupi metotreksata se smanjila, što ukazuje na određnu toksičnost metotreksata kod pacova. Dok je dobijanje na telesnoj težini pacova u obe grupe jedinjenja koje se ispituje prema Primeru 7 i 22 bilo bolje nego kod grupe koja je primila rastvarač, što ukazuje na to da oba jedinjenja prema Primeru 7 i 22 nemaju značajnu toksičnost. Indeksi efikasnosti/bezbednosti jedinjenja iz Primera 7 su bolji nego oni za pozitivnu kontrolu MTX.

Claims (13)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje opšte formule (I),
    ili njegov stereoizomer, farmaceutski privatljiva so ili hidrat, pri čemu, R<1>je halogen ili C1-C6 alkil; R<2>je jedan ili više od supstituenata izabranih iz grupe koja obuhvata vodnik, hidroksi, cijano, halogen, C1-C6 alkil, C1-C6 alkoksi, C1-C6 haloalkil, C1-C6 alkilkarbonil i C1-C6 alkilamino; R<3>je vodonik ili halogen; R<4>je vodonik ili C1-C4 alkil; X je NH, O ili S; Y je CO ili S(O)2; Z je kovalentna veza, CH2ili (CH2)2; n je broj od 1 do 4; i Prsten A je benzenov prsten, piridinski prsten ili piperidinski prsten.
  2. 2. Jedinjenje opšte formule (I) prema zahtevu 1, pri čemu: R<1>je halogen ili C1-C6 alkil; R<2>je jedan ili više od supstituenata izabranih iz grupe koja obuhvata vodonik, hidroksi, cijano, fluoro, metil, etil, metoksil, difluorometil, trifluorometil, acetil i dimetilamino; R<3>je vodonik ili halogen; R<4>je vodonik ili metil; X je NH ili O; Y je CO ili S(O)2; Z je kovalentna veza, CH2ili (CH2)2; n je broj od 1 do 4; i prsten A je benzenov prsten, piridinski prsten ili piperidinski prsten.
  3. 3. Jedinjenje opšte formule (I) prema zahtevu 1, pri čemu: R<1>je halogen ili C1-C6 alkil; R<2>je jedan ili više od supstituenata izabranih iz grupe koja obuhvata vodonik, hidroksi, cijano, fluoro, metil, etil, metoksil, difluorometil, trifluorometil, acetil i dimetilamino; R<3>je vodonik ili fluoro; R<4>je metil; X je NH; Y je CO; Z je kovalentna veza; n je broj od 1 do 4; i prsten A je benzenov prsten, piridinski prsten.
  4. 4. Jedinjenje opšte formule (I) prema zahtevu 1, pri čemu: R<1>je hloro, fluoro ili metil; R<2>je jedan ili više od supstituenata izabranih iz grupe koja obuhvata vodonik, hidroksi, cijano, fluoro, metil, etil, metoksil, difluorometil, trifluorometil, acetil i dimetilamino; R<3>je vodonik ili fluoro; R<4>je metil; X je NH; Y je CO; Z je kovalentna veza; n je ceo broj od 1 do 4; i prsten A je benzenov prsten.
  5. 5. Jedinjenje opšte formule (I) prema zahtevu 1, pri čemu: R<1>je hloro; R<2>je jedan ili više od supstituenata izabranih iz grupe koja obuhvata vodonik, hidroksi, cijano, fluoro, metil, etil, metoksil, difluorometil, trifluorometil, acetil i dimetilamino; R<3>je vodonik ili fluoro; R<4>je metil; X je NH; Y je CO; Z je kovalentna veza; n je ceo broj od 1 do 4; i prsten A je benzenov prsten.
  6. 6. Jedinjenje opšte formule (I) prema zahtevu 1, pri čemu: R<1>je hloro; R<2>je jedan ili više od supstituenata izabranih iz grupe koja obuhvata cijano, fluoro i trifluorometil; R<3>je vodonik ili fluoro; R<4>je metil; X je NH; Y je CO; Z je kovalentna veza; n=1; i prsten A je benzenov prsten.
  7. 7. Jedinjenje opšte formule (I) prema zahtevu 1, pri čemu: R<1>je hloro; R<2>je jedan ili više od supstituenata izabranih iz grupe koja obuhvata cijano; R<3>je vodonik ili fluoro; R<4>je metil; X je NH; Y je CO; Z je kovalentna veza; n=1; i prsten A je benzenov prsten.
  8. 8. Jedinjenje prema zahtevu 1, pri čemu je jedinjenje izabrano iz grupe koja obuhvata: N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4-cijanobenzamid; N-(3-(2-(3-akrilamido-4-fluoro-fenilamino)-5-hloropirimidinil-4-amino)propil)-4-trifluorometilbenzamid; N-(3-(2-(3-akrilamido-4-fluoro-fenilamino)-5-hloropirimidinil-4-amino)propil)-4-fluorobenzamid; 4-fluoro-N-(3-(2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)-5-metilpirimidinil-4-amino)propil)benzamid; N-(3-(2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)-5-metilpirimidinil-4-amino)propil)-4-trifluorometil-benzamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4-trifluorometil-benzamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4-fluorobenzamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-1-metilpiperidinil-4-formamid; N-(3-(2-(3-akrilamido-4-fluorofenilamino)-5-hloropirimidinil-4-amino)propil)-4-cijanobenzamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4--dimetilamino benzamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-2,4,6-trifluorobenzamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4-metoksilbenzamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-6-cijanonikotinamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4-hidroksibenzamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4-cijano-2-fluorobenzamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4-cijano-3-fluorobenzamid; 4-cijano-N-(3-(2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)-5-metilpirimidinil-4-amino)propil)-benzamid; 4-cijano-N-(3-(5-fluoro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)benzamid; N-(5-(5-hloro-4-(3-(2-(4-cijanofenil)acetamino)propilamino)pirimidil-2-amido)-2-fluorofenil)-N-metil-akriloil; N-(5-(5-hloro-4-(3-(4-cijanofenilsulfonamino)propilamino)pirimidil-2-amido)-2-fluorofenil)-N-metil-akriloil; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-okso)propil)-4-cijanobenzamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-izonikotinamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4-etilbenzamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4-metilbenzamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)benzamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-3-trifluorometil-benzamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-3-cijanobenzamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-3-fluoro-4-trifluorometilbenzamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-2,3,4,5-tetrafluorobenzamid; 4-acetil-N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)benzamid; N-(3-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)propil)-4-difluorometil-benzamid; i N-(6-(5-hloro-2-(4-fluoro-3-(N-metilakrilamido)fenilamino)pirimidinil-4-amino)heksil)-4-cijanobenzamid.
  9. 9. Postupak za pripremu jedinjenja opšte formule (I) prema zahtevu 1, koji obuhvata reagovanje jedinjenja opšte formule (IV)
    sa jedinjenjem opšte formule (V)
    pod organskim rastvaračem i katalizatorom da se dobije jedinjenje opšte formule (I), pri čemu R<1>je halogen ili C1-C6 alkil; R<2>je jedan ili više od supstituenata izabranih iz grupe koja obuhvata vodonik, hidroksi, cijano, halo, C1-C6 alkil, C1-C6 alkoksi, C1-C6 haloalkil, C1-C6 alkilkarbonil i C1-C6 alkil amino; R<3>je vodonik ili halogen; R<4>je vodonik ili C1-C4 alkil; X je NH, O ili S; Y je CO ili S(O)2; Z je kovalentna veza, CH2ili (CH2)2; n je ceo broj od 1 do 4; i prsten A je benzenov prsten, piridinski prsten ili piperidinski prsten.
  10. 10. Postupak za pripremu prema zahtevu 9, pri čemu je katalizator izabran iz grupe koja se sastoji iz trifluorosirćetne kiseline, hlorovodonične kiseline i metansulfonske kiseline.
  11. 11. Farmaceutska kompozicija za upotrebu u lečenju bolesti koje su povezane sa abnormalnim aktivnostima JAK3 i/ili JAK1 kinaza, koje obuhvata jedinjenje opšte formule (I) prema zahtevu 1 kao aktivni sastojak i farmaceutski prihvatljivi nosač, adjuvans ili rastvarač.
  12. 12. Upotreba jedinjenja prema bilo kom od zahteva 1 do 8 u pripremi leka za lečenje ili prevenciju autoimunskih bolesti, inflamatornih bolesti, kancera, mijeloproliferativnih bolesti, bolesti vezanih za resorpciju kostiju, bolesti grafta protiv domaćina, reumatoidnog artritisa, psorijaze, Kronove bolesti, sistemskog lupusa eritmatozusa, multiple skleroze, tipa I dijabetesa, alergijskih bolesti, hronične opstruktivne bolesti pluća, astme, leukemije i limfoma.
  13. 13. Upotreba farmaceutske kompozicije prema zahtevu 11 u pripremi leka za lečenje ili prevenciju autoimunskih bolesti, inflamatornih bolesti, kancera, mijeloproliferativnih bolesti, bolesti vezanih za resorpciju kostiju, bolesti grafta protiv domaćina, reumatoidnog artritisa, psorijaze, Kronove bolesti, sistemskog lupusa eritmatozusa, multiple skleroze, tipa I dijabetesa, alergijskih bolesti, hronične opstruktivne bolesti pluća, astme, leukemije i limfoma.
RSP20191336 2014-09-16 2015-09-14 Derivati pirimidina korisni kao selektivni jak3 i/ili jak1 inhibitori RS59467B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201410471468.9A CN105399685B (zh) 2014-09-16 2014-09-16 作为选择性jak3和/或jak1激酶抑制剂的芳杂环化合物的制备方法及其应用
PCT/CN2015/089499 WO2016041472A1 (zh) 2014-09-16 2015-09-14 作为选择性jak3和/或jak1激酶抑制剂的芳杂环化合物的制备方法及其应用
EP15842179.2A EP3196194B1 (en) 2014-09-16 2015-09-14 Pyrimidine derivatives useful as selective jak3 and/or jak1 inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS59467B1 true RS59467B1 (sr) 2019-11-29

Family

ID=55465491

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RSP20191336 RS59467B1 (sr) 2014-09-16 2015-09-14 Derivati pirimidina korisni kao selektivni jak3 i/ili jak1 inhibitori

Country Status (22)

Country Link
US (1) US10011571B2 (sr)
EP (1) EP3196194B1 (sr)
JP (1) JP6516305B2 (sr)
KR (1) KR101971887B1 (sr)
CN (1) CN105399685B (sr)
AU (1) AU2015317937B2 (sr)
BR (1) BR112017005113B1 (sr)
CA (1) CA2982881C (sr)
CY (1) CY1122423T1 (sr)
DK (1) DK3196194T3 (sr)
ES (1) ES2754403T3 (sr)
HR (1) HRP20191734T1 (sr)
HU (1) HUE045899T2 (sr)
LT (1) LT3196194T (sr)
PL (1) PL3196194T3 (sr)
PT (1) PT3196194T (sr)
RS (1) RS59467B1 (sr)
RU (1) RU2671195C2 (sr)
SI (1) SI3196194T1 (sr)
SM (1) SMT201900605T1 (sr)
TW (1) TWI570109B (sr)
WO (1) WO2016041472A1 (sr)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PE20221083A1 (es) * 2019-06-17 2022-07-05 Deciphera Pharmaceuticals Llc Inhibidores de la autofagia de la amida aminopirimidina y sus metodos de uso
EP4007752B1 (en) * 2019-08-02 2025-09-24 Amgen Inc. Kif18a inhibitors
US20220372135A1 (en) 2019-09-27 2022-11-24 Disc Medicine, Inc. Methods for treating myelofibrosis and related conditions
CN112773802B (zh) * 2019-11-08 2023-11-21 深圳微芯生物科技股份有限公司 一种化合物用于预防或治疗移植物抗宿主病的用途
CA3162886A1 (en) * 2019-11-26 2021-06-03 Shenzhen Chipscreen Biosciences Co., Ltd. Composition containing aromatic heterocyclic compound in amorphous form, and preparation method therefor and use thereof
CN111297866B (zh) * 2020-03-09 2021-04-02 深圳微芯生物科技股份有限公司 一种包含jak3/jak1/tbk1抑制剂和甲氨蝶呤的药物组合物及其用途
KR20230012539A (ko) 2020-05-13 2023-01-26 디스크 메디슨, 인크. 골수섬유증을 치료하기 위한 항-헤모주벨린 (hjv) 항체
CA3216017A1 (en) 2021-04-22 2022-10-27 Shengjian Huang Pharmaceutical composition containing jak3/jak1/tbk1 selective inhibitor and medical use thereof

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP2006508997A (ja) 2002-11-28 2006-03-16 シエーリング アクチエンゲゼルシャフト Ｃｈｋ−、Ｐｄｋ−およびＡｋｔ−阻害性ピリミジン、それらの製造および薬剤としての使用
CN101421250A (zh) * 2006-01-30 2009-04-29 埃克塞里艾克西斯公司 作为jak-2调节剂的4-芳基-2-氨基-嘧啶或4-芳基-2-氨基烷基-嘧啶及包含它们的药物组合物
JP5161233B2 (ja) * 2006-10-19 2013-03-13 ライジェル ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド 自己免疫疾患の処置のためのｊａｋキナーゼの阻害剤としての２，４−ピリミジンアミン誘導体
PT2114900T (pt) * 2007-01-31 2019-01-17 Ym Biosciences Australia Pty Compostos à base de tiopirimidina e as suas utilizações
US8338439B2 (en) * 2008-06-27 2012-12-25 Celgene Avilomics Research, Inc. 2,4-disubstituted pyrimidines useful as kinase inhibitors
NZ603525A (en) * 2008-06-27 2015-02-27 Celgene Avilomics Res Inc Pyrimidine based compound and uses thereof
DE102009001438A1 (de) 2009-03-10 2010-09-16 Bayer Schering Pharma Aktiengesellschaft Carbonylamino-substituierte Anilino-Pyrimidinderivate als Tyk-Inhibitoren, deren Herstellung und Verwendung als Arzneimittel
CN101906076B (zh) * 2009-06-04 2013-03-13 深圳微芯生物科技有限责任公司 作为蛋白激酶抑制剂和组蛋白去乙酰化酶抑制剂的萘酰胺衍生物、其制备方法及应用
CN103073508B (zh) * 2011-10-25 2016-06-01 北京大学深圳研究生院 激酶抑制剂及治疗相关疾病的方法
CN104109127B (zh) * 2013-04-19 2019-11-05 北京大学深圳研究生院 激酶抑制剂及治疗相关疾病的方法

Also Published As

Publication number Publication date
SI3196194T1 (sl) 2019-12-31
PT3196194T (pt) 2019-11-18
DK3196194T3 (da) 2019-10-28
JP2017527625A (ja) 2017-09-21
KR101971887B1 (ko) 2019-04-25
SMT201900605T1 (it) 2020-01-14
TWI570109B (zh) 2017-02-11
ES2754403T3 (es) 2020-04-17
EP3196194B1 (en) 2019-08-07
HUE045899T2 (hu) 2020-01-28
RU2017112299A (ru) 2018-10-17
TW201612165A (en) 2016-04-01
US20170253566A1 (en) 2017-09-07
CA2982881A1 (en) 2016-03-24
BR112017005113B1 (pt) 2023-02-14
CY1122423T1 (el) 2021-01-27
US10011571B2 (en) 2018-07-03
RU2017112299A3 (sr) 2018-10-17
EP3196194A1 (en) 2017-07-26
AU2015317937A1 (en) 2017-04-27
KR20170048593A (ko) 2017-05-08
PL3196194T3 (pl) 2020-01-31
CA2982881C (en) 2020-02-25
CN105399685B (zh) 2018-05-22
RU2671195C2 (ru) 2018-10-30
JP6516305B2 (ja) 2019-05-22
HK1220975A1 (zh) 2017-05-19
CN105399685A (zh) 2016-03-16
LT3196194T (lt) 2019-10-10
WO2016041472A1 (zh) 2016-03-24
BR112017005113A2 (pt) 2018-01-23
AU2015317937B2 (en) 2018-10-04
HRP20191734T1 (hr) 2019-12-13
EP3196194A4 (en) 2018-05-30

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10011571B2 (en) Preparation method for aromatic heterocyclic compound used as selective JAK3 and/or JAK1 kinase inhibitor and application of aromatic heterocyclic compound
CN109790158B (zh) 作为jak抑制剂杂环化合物，该化合物的盐类及其治疗用途
CN105705493B (zh) 喹唑啉衍生物、其制备方法、药物组合物和应用
EA039357B1 (ru) Новые способы иммунотерапии нескольких видов опухолей, в том числе рака желудочно-кишечного тракта и рака желудка
IL175572A (en) Condensed heterocycles, jak selective kinase inhibitors and pharmaceutical compositions comprising them
WO2014082578A1 (zh) 杂芳基炔烃化合物及其应用
CN105481778B (zh) 嘧啶衍生物、其制备方法及其应用
CN105399686B (zh) 嘧啶衍生物、其制备方法及其应用
CN106831779B (zh) 一类jak激酶抑制剂的新化合物
CN106397432B (zh) 作为jak抑制剂的一类化合物
HK1220975B (zh) 作为选择性jak3和/或jak1激酶抑制剂的芳杂环化合物的制备方法及其应用
HK40004455A (en) Heterocyclic compound as jak inhibitor, and salts and therapeutic use thereof
HK40004455B (en) Heterocyclic compound as jak inhibitor, and salts and therapeutic use thereof
WO2024000615A1 (zh) 一种酪氨酸蛋白激酶抑制剂及其用途