RS59763B1 - Derivati benzofurana, postupci njihove pripreme i njihova upotreba u medicini - Google Patents

Derivati benzofurana, postupci njihove pripreme i njihova upotreba u medicini

Info

Publication number
RS59763B1
RS59763B1 RS20191628A RSP20191628A RS59763B1 RS 59763 B1 RS59763 B1 RS 59763B1 RS 20191628 A RS20191628 A RS 20191628A RS P20191628 A RSP20191628 A RS P20191628A RS 59763 B1 RS59763 B1 RS 59763B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
mmol
mixture
ethyl
methyl
group
Prior art date
Application number
RS20191628A
Other languages
English (en)
Inventor
Biao Lu
Xiaodong Shen
Mingxun He
Dong Liu
Minsheng Zhang
Original Assignee
Jiangsu Hengrui Medicine Co
Shanghai hengrui pharmaceutical co ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Jiangsu Hengrui Medicine Co, Shanghai hengrui pharmaceutical co ltd filed Critical Jiangsu Hengrui Medicine Co
Publication of RS59763B1 publication Critical patent/RS59763B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4433—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with oxygen as a ring hetero atom
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D409/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D409/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Furan Compounds (AREA)

Description

Opis pronalaska
OBLAST TEHNIKE NA KOJU SE PRONALAZAK ODNOSI
[0001] Predmetni pronalazak pripada oblasti medicine i odnosi se na derivat benzofurana, postupak njegove pripreme i njegovu upotrebu u medicinskim istraživanjima. Predmetni pronalazak opisuje upotrebu derivata kao inhibitora EZH2 u prevenciji i/ili lečenju oboljenja poput tumora i kancera itd., posebno u prevenciji i/ili lečenju ne-Hočkinovog limfoma, difuznog krupnoćelijskog B limfoma, folikularnog limfoma i sinovijalnog sarkoma itd.
POZNATO STANJE TEHNIKE
[0002] Pojava tumora je razvojni proces na koga utiču višestruki faktori i koji podrazumeva više faza, uključujući mutaciju i epigenetske promene većeg broja gena, poput onkogena, anti-onkogena i gena uključenih u popravku oštećenja DNK. Strogo rečeno, epigenetika je definisana kao kombinacija genetičkih mehanizama koji su sposobni da izmene funkciju genoma pored direktne promene DNK sekvence. Ovde se "epigenetika" odnosi, u širem smislu, na elemente hromatinske strukture koji kontrolišu funkciju genoma, bez obzira da li je kontrola nasledna. Epigenetička ili regulacija zasnovana na hromatinu ima važnu ulogu u ekspresiji gena u normalnoj fiziološkoj funkciji ili u razvoju kancera [0003] PcG protein (od engl. Polycomb group protein) je važan proteinski faktor uključen u negativnu regulaciju epigenetike gena/hromatina. Kod sisara, PcG su uglavnom podelјeni u dva tipa sa različitim strukturama i funkcijama: represivni polycomb kompleks 2 (PRC2) i represivni polycomb kompleks 1 (PRC1). Histon metiltransferaza kodirana genom EZH2 je katalitička komponenta represivnog polycomb kompleksa 2 (PRC2) i ispoljava metiltransferaznu aktivnost na lizinu 27 (H3K27) histona H3 da bi nastao H3K27me3 posredstvom SET domena EZH2 subjedinice. Rezultat je represija transkripcije posredstvom raznih mehanizama, uklјučujući hitno regrutovanje DNK metiltransferaza (DNMT) i PRC 1 koji dovode do ubikvitinacije H2AK119. Mutacija kodona u kodonu 641 EZH2, najčešće “žarište” mutacije, je mutacija tipa dobitka funkcije koja vodi pojačanoj trimetilaciji histona H3K27 i igra važnu ulogu u tumorigenezi difuznog krupnoćelijskog B-limfoma tipa GCB (DLBCL) i folikularnog limfoma (FL). Ponavlјajuće somatske mutacije u SET domenu Ezh2 su uobičajene kod pacijenata sa difuznim krupnoćelijskim B-limfomom (DLBCL). Dodatno, prekomerna ekspresija EZH2 je uobičajena kod raznih tipova tumora sa lošom prognozom, uklјučujući kancer, limfome i sarkome mekog tkiva itd. Ekspresija EZH2 u sinovijalnom sarkomu je povezana sa visokom stopom trimetilacije H3K27. Nivoi EZH2 su abnormalno povišeni u tkivima kancera u odnosu na normalna tkiva, a EZH2 je najviše eksprimiran u uznapredovalim kancerima ili kancerima sa lošom prognozom. U pojedinim tipovima kancera, prekomerna ekspresija EZH2 nastaje istovremeno sa amplifikacijom EZH2 gena. Veliki broj eksperimentalnih studija sa si/shRNK je pokazao da smanjenje ekspresije Ezh2 u tumorskim ćelijskim linijama može inhibirati proliferaciju, migraciju i invaziju tumorskih ćelija ili angiogenezu i dovesti do apoptoze.
[0004] Patentne prijave koje opisuju selektivne ihnibitore EZH2 obuhvataju WO2012005805, WO2012050532, WO2012118812, WO2012142513, WO2012142504, WO2013049770, WO2013039988, WO2013067300, WO2015141616, WO2011140325 itd.
[0005] EZH2 inhibitori kao lekovi su sa obećavajućim izgledima primene u medicinskoj industriji. Ipak, još uvek postoji potreba da se razviju novi inhibitori EZH2 za postizanje bolјeg terapijskog efekta kod tumora ili kancera i radi bolјeg zadovoljenja potreba tržišta.
KRATKO IZLAGANJE SUŠTINE PRONALASKA
[0006] Predmetni pronalazak je usmeren na jedinjenje formule (I) ili njegov tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihovu smešu, ili njegovu farmaceutski prihvatlјivu so, pri čemu je struktura jedinjenja formule (I) sledeća:
gde:
prsten A je izabran iz grupe koja se sastoji od heterociklila i cikloalkila;
svaki R<1>je identičan ili različit i svaki je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, halogen, alkil, haloalkil, alkoksi, haloalkoksi, amino, nitro, hidroksi, cijano, cikloalkil, heterociklil, aril, heteroaril, -OR<6>, -C(O)R<6>, -C(O)OR<6>, -S(O)mR<6>, -S(O)mNR<7>R<8>i -(CH2)xR<a>, pri čemu je svaki alkil, haloalkil, heterociklil, aril i heteroaril nezavisno i po izboru supstituisan sa jednom ili sa više grupa izabranih iz grupe koju čine alkil, haloalkil, halogena, amino, nitro, cijano, hidroksi, alkoksi, haloalkoksi, hidroksialkil, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril grupa;
R<a>je izabran iz grupe koju čine halogen, cikloalkil, heterociklil i -NR<7>R<8>, pri čemu je svaki cikloalkil i heterociklil nezavisno i po izboru supstituisan sa jednom ili sa više grupa izabranih iz grupe koju čine alkil, haloalkil, halogena, amino, nitro, cijano, hidroksi, alkoksi, haloalkoksi, hidroksialkil, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril grupa;
R<2>je vodonik ili alkil, pri čemu je alkil po izboru supstituisan sa jednom ili sa više grupa izabranih iz grupe koju čine halogena, hidroksi, cijano, cikloalkil i heterociklil grupa;
R<3>je izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, halogena, cijano, alkoksi i haloalkil grupa; svaki R<4>je identičan ili različit i svaki je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, haloalkil, hidroksi, amino, alkoksi, haloalkoksi, cikloalkil, heterociklil, aril, heteroaril grupa, -OR<6>, -C(O)R<6>, -C(O)OR<6>, -S(O)mR<6>, -S(O)mNR<7>R<8>i -NR<7>R<8>;
svaki R<5>je identičan ili različit i svaki je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, okso, halogena, haloalkil, hidroksi, amino, alkoksi, haloalkoksi, cikloalkil, heterociklil, aril, heteroaril grupa, -OR<6>, -C(O)R<6>, -C(O)OR<6>, -S(O)mR<6>, -S(O)mNR<7>R<8>i -NR<7>R<8>;
R<6>je izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, haloalkil, alkoksi, hidroksialkil, hidroksi, amino, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril;
R<7>i R<8>su identični ili različiti i svaki je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, alkoksi, hidroksialkil, hidroksi, amino, alkoksikarbonil, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril, pri čemu je svaki alkil, amino, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril nezavisno i po izboru supstituisan sa jednom ili sa više grupa izabranih iz grupe koju čine alkil, halogena, hidroksi, amino, alkoksikarbonil, nitro, cijano, alkoksi, hidroksialkil, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril grupa; m je 0, 1 ili 2;
n je 0, 1, 2 ili 3;
p je 0, 1, 2, 3, 4 ili 5;
q je 0, 1 ili 2; i
x je 0, 1, 2 ili 3.
[0007] U poželјnom primeru izvođenja predmetnog pronalaska, u jedinjenju formule (I), ili u tautomeru, mezomeru, racematu, enantiomeru, dijastereomeru ili njihovoj smeši, ili njegovoj farmaceutski prihvatlјivoj soli, n je 2.
[0008] U poželјnom primeru izvođenja predmetnog pronalaska, u jedinjenju formule (I), ili u tautomeru, mezomeru, racematu, enantiomeru, dijastereomeru ili njihovoj smeši, ili njegovoj farmaceutski prihvatlјivoj soli, q je 0 ili 1.
[0009] U poželјnom primeru izvođenja predmetnog pronalaska, u jedinjenju formule (I), ili u tautomeru, mezomeru, racematu, enantiomeru, dijastereomeru ili njihovoj smeši, ili njegovoj farmaceutski prihvatlјivoj soli, p je 0 ili 1.
[0010] U poželјnom primeru izvođenja predmetnog pronalaska, u jedinjenju formule (I), ili u tautomeru, mezomeru, racematu, enantiomeru, dijastereomeru ili njihovoj smeši, ili njegovoj farmaceutski prihvatlјivoj soli, svaki R<1>je identičan ili različit i svaki je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, halogena, alkil, haloalkil, cijano, cikloalkil, heterociklil grupa i -(CH2)xR<a>, pri čemu je svaki alkil i heterociklil nezavisno i po izboru supstituisan sa jednom ili sa više grupa izabranih iz grupe koja se sastoji od alkila, hidroksialkila i halogena; a R<a>je izabran iz grupe koju čine halogen, cikloalkil, heterociklil i -NR<7>R<8>, pri čemu je svaki cikloalkil i heterociklil nezavisno i po izboru supstituisan sa jednom ili sa više grupa izabranih iz grupe koja se sastoji od hidroksialkila, alkila i halogena; i R<7>, R<8>i x su kao što je definisano u formuli (I).
[0011] U poželјnom primeru izvođenja predmetnog pronalaska, u jedinjenju formule (I), ili u tautomeru, mezomeru, racematu, enantiomeru, dijastereomeru ili njihovoj smeši, ili njegovoj farmaceutski prihvatlјivoj soli, svaki R<1>je identičan ili različit i svaki je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, haloalkil, cijano i -(CH2)xR<a>, gde je x 0, a R<a>je halogen ili cikloalkil.
[0012] U poželјnom primeru izvođenja predmetnog pronalaska, u jedinjenju formule (I), ili u tautomeru, mezomeru, racematu, enantiomeru, dijastereomeru ili njihovoj smeši, ili njegovoj farmaceutski prihvatlјivoj soli, R<2>je alkil po izboru supstituisan sa cikloalkilom.
[0013] U poželјnom primeru izvođenja predmetnog pronalaska, u jedinjenju formule (I), ili u tautomeru, mezomeru, racematu, enantiomeru, dijastereomeru ili njihovoj smeši, ili njegovoj farmaceutski prihvatlјivoj soli, R<3>je izabran iz grupe koja se sastoji od alkila, halogena i haloalkila.
[0014] U poželјnom primeru izvođenja predmetnog pronalaska, u jedinjenju formule (I), ili u tautomeru, mezomeru, racematu, enantiomeru, dijastereomeru ili njihovoj smeši, ili njegovoj farmaceutski prihvatlјivoj soli, svaki R<4>je identičan ili različit i svaki je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od vodonika, alkila i alkoksi grupe.
[0015] U poželјnom primeru izvođenja predmetnog pronalaska, u jedinjenju formule (I), ili u tautomeru, mezomeru, racematu, enantiomeru, dijastereomeru ili njihovoj smeši, ili njegovoj farmaceutski prihvatlјivoj soli, svaki R<5>je identičan ili različit i svaki je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, halogena, okso, haloalkil grupa, -C(O)R<6>, -S(O)mR<6>i -NR<7>R<8>, pri čemu su od R<6>do R<8>i m kao što je definisano u formuli (I) i poželјno vodonik.
[0016] U poželјnom primeru izvođenja predmetnog pronalaska, jedinjenje formule (I), ili tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihova smeša, ili njegova farmaceutski prihvatlјiva so, je jedinjenje formule (II), ili tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihova smeša, ili njegova farmaceutski prihvatlјiva so:
gde:
G je izabran iz grupe koju čine CR<b>R<c>, C=O, S(O)m, NR<d>i kiseonik;
svaki od R<b>i R<c>je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, alkoksi, halogena, amino, nitro, hidroksi, cijano, cikloalkil, heterociklil, aril, heteroaril grupa, -OR<6>, -C(O)R<6>, -C(O)OR<6>, -S(O)mR<6>i -NR<7>R<8>;
R<d>je izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, cikloalkil, haloalkil, hidroksialkil, heterociklil, aril, heteroaril, -C(O)R<6>, -C(O)OR<6>i S(O)mR<6>; i
od R<1>do R<4>, od R<6>do R<8>, n, m i q su kao što je definisano u formuli (I).
[0017] U poželјnom primeru izvođenja predmetnog pronalaska, jedinjenje formule (II), ili tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihova smeša, ili njegova farmaceutski prihvatlјiva so, je jedinjenje formule (III), ili tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihova smeša, ili njegova farmaceutski prihvatlјiva so:
gde:
E je CH ili N atom;
F je izabran iz grupe koja se sastoji od CR<b>R<c>, C=O, NR<d>i kiseonika;
svaki od R<b>i R<c>je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, alkoksi, halogen, amino, nitro, hidroksi, cijano, cikloalkil, heterociklil, aril, heteroaril, -OR<6>, -C(O)R<6>, -C(O)OR<6>, -S(O)mR<6>i -NR<7>R<8>; R<d>je izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, cikloalkil, haloalkil, hidroksialkil, heterociklil, aril, heteroaril, -C(O)R<6>, -C(O)OR<6>i S(O)mR<6>;
svaki R<e>je identičan ili različit i svaki je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, haloalkil, halogena, amino, nitro, cijano, hidroksi, alkoksi, haloalkoksi, hidroksialkil, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroari grupa;
t je 0, 1, 2, 3, 4 ili 5;
x je 0, 1, 2 ili 3;
y je 0, 1, 2 ili 3; i
od R<1>do R<4>, od R<6>do R<8>, m i n su kao što je definisano u formuli (I).
[0018] U poželјnom primeru izvođenja predmetnog pronalaska, jedinjenje formule (III), ili tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihova smeša, ili njegova farmaceutski prihvatlјiva so, je jedinjenje formule (IV), ili tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihova smeša, ili njegova farmaceutski prihvatlјiva so:
gde:
svaki R<e>je identičan ili različit i svaki je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od vodonika, alkila i halogena;
t je 0, 1, 2, 3, 4 ili 5; i
od R<2>do R<4>i n su kao što je definisano u formuli (I).
[0019] U poželјnom primeru izvođenja predmetnog pronalaska, jedinjenje formule (III), ili tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihova smeša, ili njegova farmaceutski prihvatlјiva so, je jedinjenje formule (V), ili tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihova smeša, ili njegova farmaceutski prihvatlјiva so:
gde:
R<e>je izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, haloalkil, halogena, amino, nitro, cijano, hidroksi, alkoksi, haloalkoksi, hidroksialkil, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril grupa; i
od R<2>do R<4>i n su kao što je definisano u formuli (I).
[0020] Karakteristična jedinjenja formule (I), ili njihov tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihova smeša, ili njihova farmaceutski prihvatlјiva so, obuhvataju, ali nisu ograničena na:
ili tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihova smeša, ili njegova farmaceutski prihvatlјiva so.
[0021] Predmetni pronalazak dalјe obezbeđuje intermedijer za dobijanje jedinjenja formule (I), ili tautomera, mezomera, racemata, enantiomera, dijastereomera ili njihove smeše, ili njegove farmaceutski prihvatlјive soli, tj. jedinjenje formule (VI):
ili tautomera, mezomera, racemata, enantiomera, dijastereomera ili njihove smeše, ili njegove farmaceutski prihvatlјive soli,
gde:
prsten A, od R<1>do R<3>, R<5>, p i q su kao što je definisano u formuli (I).
[0022] Prema drugom aspektu, predmetni pronalazak je takođe usmeren na postupak pripreme jedinjenja formule (I), ili tautomera, mezomera, racemata, enantiomera, dijastereomera ili njihove smeše, ili njegove farmaceutski prihvatlјive soli, koji obuhvata korak:
kondenzovanja jedinjenja formule (VI) sa jedinjenjem formule (VII) na sobnoj temperaturi da bi se dobilo jedinjenje formule (I);
gde:
od R<1>do R<5>, prstenovi A, p, q i n su kao što je definisano u (I).
[0023] Prema sledećem aspektu, predmetni pronalazak je takođe usmeren na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži terapijski efektivnu količinu jedinjenja formule (I), (II), (III), (IV) ili (V), ili tautomera, mezomera, racemata, enantiomera, dijastereomera ili njihove smeše, ili njegove farmaceutski prihvatlјive soli i jedan ili više farmaceutski prihvatlјivih nosača, razblaživača ili ekscipijenasa. Predmetni pronalazak je takođe usmeren na postupak pripreme prethodno navedene kompozicije koji obuhvata korak mešanja jedinjenja formule (I), (II), (III), (IV) ili (V) ili tautomera, mezomera, racemata, enantiomera, dijastereomera ili njihove smeše, ili njegove farmaceutski prihvatlјive soli, sa jednim ili sa više farmaceutski prihvatlјivih nosača, razblaživača ili ekscipijenasa.
[0024] Predmetni pronalazak je dalјe usmeren na upotrebu jedinjenja formule (I), ili tautomera, mezomera, racemata, enantiomera, dijastereomera ili njihove smeše, ili njegove farmaceutski prihvatlјive soli, ili farmaceutske kompozicije koja sadrži iste, u pripremi medikamenta za prevenciju i/ili lečenje tumora i kancera, pri čemu je kancer izabran iz grupe koja se sastoji od limfoma, leukemije, kancera dojke, kancera pluća, kancera prostate, kancera jajnika, kancera jetre, melanoma, rabdomiosarkoma, sinovijalnog sarkoma, mezotelioma, kancera grlića materice, kancera debelog creva, rektalnog kancera, kancera želuca, kancera pankreasa, kancera mozga, kancera kože, oralnog kancera, kancera kostiju, kancera bubrega, kancera mokraćne bešike, tumora jajovoda, tumora jajnika, peritonealnog tumora, glioma, glioblastoma, kancera glave i vrata i mijeloma; poželјno, limfoma, leukemije, kancere dojke, kancere pluća, kancera prostate, kancera jajnika, kancera jetre, melanoma, rabdomiosarkoma, sinovijalnog sarkoma i mezotelioma; pri čemu je kancer pluća izabran iz grupe koja se sastoji od sitnoćelijskog kancera pluća i nesitnoćelijskog kancera pluća; i pri čemu je leukemija izabrana iz grupe koja se sastoji od hronične mijeloidne leukemije, akutne mijeloidne leukemije i leukemije mešovitih linija; pri čemu je limfom izabran između ne-Hočkinovog limfoma, difuznog krupnoćelijskog B-limfoma i folikularnog limfoma.
[0025] Predmetni pronalazak je dalјe usmeren na jedinjenje formule (I), ili tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihovu smešu, ili na njegovu farmaceutski prihvatlјivu so, ili farmaceutsku kompoziciju koji sadrži iste za upotrebu u vidu medikametna za prevenciju i/ili lečenje tumora i kancera, pri čemu su tumor i kancer kao što je prethodno definisano.
[0026] Predmetni pronalazak je dalјe usmeren na upotrebu jedinjenja formule (I), ili tautomera, mezomera, racemata, enantiomera, dijastereomera ili njihove smeše, ili njegove farmaceutski prihvatlјive soli, ili farmaceutske kompozicije koja sadrži iste, kao EZH2 inhibitora u pripremi medikamenta za prevenciju i/ili lečenje tumora i kancera, pri čemu su tumor i kancer kao što je prethodno definisano.
[0027] Predmetni pronalazak je dalјe usmeren na upotrebu jedinjenja formule (I), ili tautomera, mezomera, racemata, enantiomera, dijastereomera ili njihove smeše, ili njegove farmaceutski prihvatlјive soli, ili farmaceutske kompozicije koja sadrži iste, u priprema medikamenta za inhibiciju EZH2.
[0028] Predmetni pronalazak je dalјe usmeren na jedinjenje formule (I), ili tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihovu smešu, ili njegovu farmaceutski prihvatlјivu so, ili farmaceutsku kompoziciju koja sadrži iste, za upotrebu u vidu medikamenta za inhibiciju EZH2.
[0029] Farmaceutske kompozicije koje sadrže aktivni sastojak mogu biti u obliku pogodnom za oralnu primenu, na primer, u vidu tablete, pastile, lozenge, vodene ili uljane suspenzije, disperzibilnog praha ili granula, emulzije, tvrde ili meke kapsule, ili sirupa ili eliksira. Oralne kompozicije mogu biti pripremljene u skladu sa bilo kojim postupkom koji je poznat u stanju tehnike za pripremu farmaceutskih kompozicija. Takve kompozicije mogu sadržavati jedan ili više agenasa izabranih iz grupe koja se sastoji od zaslađivača, aroma, boja i konzervanasa, da bi se obezbedila prijatna i ukusna farmaceutska formulacija. Tableta sadrži aktivni sastojak u mešavini sa netoksičnim farmaceutski prihvatlјivim pomoćnim sastojcima koji su pogodni za proizvodnju tablete.
[0030] Vodena suspenzija sadrži aktivni sastojak u mešavini sa eksipijensima koji su pogodni za proizvodnju vodene suspenzije. Vodena suspenzija takođe može sadržavati jedan ili više konzervanasa, kao što su etilparaben ili n-propilparaben, jedno ili više sredstava za boju, jedno ili više sredstava za aromu i jedan ili više zaslađivača, poput saharoze, saharina ili aspartama.
[0031] Uljana suspenzija može biti formulisana resuspendovanjem aktivnog sastojka u bilјnom ulјu. Uljana suspenzija može sadržavati agens za zgušnjavanje. Prethodno navedeni zaslađivači i sredstva za aromu mogu biti dodata da bi se obezbedio ukusan preparat.
[0032] Aktivni sastojak u mešavini sa sredstvima za disperziju ili vlaženje, resuspendirajućim agensom ili sa jednim ili sa više konzervanasa, može biti pripremljen u vidu disperzibilnog praha ili granula koji su pogodni za pripremu vodene suspenzije dodavanjem vode. Pogodna sredstva za disperziju ili vlaženje i resuspendujući agensi su navedeni u vidu prethodno navedenih primera. Mogu biti uključeni i dodatni pomoćni sastojci, poput zaslađivača, aroma i boja. Ovakve kompozicije mogu biti sa konzervansima, odnosno može biti dodat antioksidans kao što je askorbinska kiselina.
[0033] Predmetna farmaceutska kompozicija takođe može biti u vidu emulzije ulјa-u-vodi.
[0034] Farmaceutska kompozicija može biti u obliku sterilnog vodenog rastvora za injeciranje. Prihvatlјivi nosači i rastvarači koji mogu biti upotrebljeni su voda, Ringerov rastvor i izotonični rastvor natrijum hlorida. Sterilni preparat za injeciranje takođe može biti sterilna mikroemulzija tipa ulјa-uvodi u kojoj se aktivni sastojak rastvara u ulјanoj fazi. Na primer, aktivni sastojak može najpre biti rastvoren u smeši sojinog ulјa i lecitina, nakon čega se ulјani rastvor uvodi u smešu vode i glicerola i obrađuje u oblik mikroemulzije. Rastvor za injeciranje ili mikroemulzija mogu biti uvedene u krvotok pojedinca lokalnom bolusnom injekcijom. Alternativno, može biti korisno da se primeni rastvor ili mikroemulzija na način kojim se koncentracija predmetnog jedinjenja u cirkulaciji održava konstantnom. Da bi se ovakva koncentracija odžala konstantnom, može biti upotrebljen uređaj za kontinuiranu intravensku isporuku. Primer takvog uređaja je intravenska injekciona pumpa Deltec CADD-PLUS. TM.5400.
[0035] Farmaceutska kompozicija može biti u obliku sterilne vodene ili uljane suspenzije za injeciranje za intramuskularnu i subkutanu primenu. Takva suspenzija može biti formulisana sa pogodnim agensima za dispergovanje ili vlaženje i resuspedujućim agensima, kao što je prethodno opisano i u skladu sa poznatim tehnikama. Sterilin preparat za injeciranje može takođe biti sterilan rastvor ili suspenzija za injeciranje koji je pripremljen u netoksičnom, parenteralno prihvatlјivom razblaživaču ili rastvaraču. Štaviše, sterilno zasićeno ulјe može lako biti upotrebljeno kao rastvarač ili medijum za resuspendovanje.
[0036] Predmetno jedinjenje može biti primenjeno u obliku supozitorije za rektalnu primenu. Ovakve farmaceutske kompozicije mogu biti pripremljene mešanjem leka sa pogodnim neiritirajućim ekscipijensom koji je u čvrstom stanju na uobičajenim temperaturama, ali je tečan u rektumu, pri čemu se topljenjem u rektumu oslobađa lek. Takvi materijali obuhvataju puter kakaa, glicerinski želatin, hidrogenizovana bilјna ulјa, kao i smeše polietilen glikola raznih molekulskih težina i estara masnih kiselina polietilen glikola.
[0037] Stručnjacima je dobro poznato da doza leka zavisi od raznih faktora koji obuhvataju, ali nisu ograničeni na, sledeće faktore: aktivnost specifičnog jedinjenja, starost pacijenta, težinu pacijenta, opšte zdravstveno stanje pacijenta, ponašanje pacijenta, ishranu pacijenta, vreme primene, način primene, stopu izlučivanja, kombinaciju lekova i slično. Pored navedenog, najbolјi režim lečenja, kao što je način lečenja, dnevna doza jedinjenja formule (I) ili vrsta njegove farmaceutski prihvatlјive soli, može biti potvrđena tradicionalnim terapijskim režimima.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0038] Ukoliko nije drugačije navedeno, termini koji se upotrebljavaju u specifikaciji i patentnim zahtevima su sa značenjima koja su opisana u tekstu koji sledi.
[0039] "Alkil" se odnosi na zasićenu alifatičnu uglјovodoničnu grupu, uklјučujući grupe od C1do C20pravog i razgranatog lanca, poželјno alkil sa od 1 do 12 atoma uglјenika, i poželјnije, alkil sa od 1 do 6 atoma uglјenika. Neograničavajući primeri obuhvataju metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izobutil, terc-butil, sek-butil, n-pentil, 1,1-dimetilpropil, 1,2-dimetilpropil, 2,2-dimetilpropil, 1-etilpropil, 2-metilbutil, 3-metilbutil, n-heksil, 1-etil-2-metilpropil, 1,1,2-trimetilpropil, 1,1-dimetilbutil, 1,2-dimetilbutil, 2,2-dimetilbutil, 1,3-dimetilbutil, 2-etilbutil, 2-metilpentil, 3-metilpentil, 4-metilpentil, 2,3-dimetilbutil, n-heptil, 2-metilheksil, 3-metilheksil, 4-metilheksil, 5-metilheksil, 2,3-dimetilpentil, 2,4-dimetilpentil, 2,2-dimetilpentil, 3,3-dimetilpentil, 2-etilpentil, 3-etilpentil, n-oktil, 2,3-dimetilheksil, 2,4-dimetilheksil, 2,5-dimetilheksil, 2,2-dimetilheksil, 3,3-dimetilheksil, 4,4-dimetilheksil, 2-etilheksil, 3-etilheksil, 4-etilheksil, 2-metil-2-etilpentil, 2-metil-3-etilpentil, n-nonil, 2-metil-2-etilheksil, 2-metil-3-etilheksil, 2,2-dietilpentil, n-decil, 3,3-dietilheksil, 2,2-dietilheksil i njihove razgranate izomere. Poželјnije, alkil grupa je niži alkil sa od 1 do 6 atoma uglјenika, a neograničavajući primeri uklјučuju metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, izobutil, terc-butil, sek-butil, n-pentil 1,1-dimetilpropil, 1,2-dimetilpropil, 2,2-dimetilpropil, 1-etilpropil, 2-metilbutil, 3-metilbutil, n-heksil, 1-etil-2-metilpropil, 1,1,2-trimetilpropil, 1,1-dimetilbutil, 1,2-dimetilbutil, 2,2-dimetilbutil, 1,3-dimetilbutil, 2-etilbutil, 2-metilpentil, 3-metilpentil, 4-metilpentil, 2,3-dimetilbutil i slične. Alkil grupa može biti supstituisana ili nesupstituisana. Kada je supstituisana, supstituciona grupa/grupe mogu biti supstituisane na bilo kom dosuptnom mestu vezivanja. Poželјno je da su supstituciona grupa/grupe jedna ili više grupa nezavisno izabranih iz grupe koju čine alkil, alkenil, alkinil, alkoksi, alkiltio, alkilamino, halogena, tio, hidroksi, nitro, cijano, cikloalkil, heterociklil, aril, heteroaril, cikloalkoksi, heterociklična alkoksi, cikloalkiltio, heterociklička alkiltio, okso, karboksi i alkoksikarbonil grupa.
[0040] "Alkilen" se odnosi na alkil u kome je atom vodonika dodatno supstituisan, na primer, "metilen" se odnosi na -CH2-, "etilen" se odnosi na -(CH2)2-, "propilen" se odnosi na -(CH2)3-, "butilen" se odnosi na -(CH2)4- i slično.
[0041] "Alkenil" se odnosi na alkil koji je prethodno definisan, a koji sadrži najmanje dva atoma uglјenika i najmanje jednu dvostruku vezu uglјenik-uglјenik, na primer, odnosi se na etenil, 1-propenil, 2-propenil, 1-, 2- ili 3-butenil i slično. Alkenil grupa može biti supstituisana ili nesupstituisana. Kada je supstituisana, poželjno je da supstituciona grupa/grupe budu jedna ili više grupa nezavisno izabranih iz grupe koju čine alkil, alkenil, alkinil, alkoksi, alkiltio, alkilamino, halogena, tio, hidroksi, nitro, cijano, cikloalkil, heterociklil, aril, heteroaril, cikloalkoksi, heterociklična alkoksi, cikloalkiltio i heterociklička alkiltio grupa.
[0042] "Cikloalkil" se odnosi na zasićenu i/ili delimično nezasićenu monocikličnu ili policikličku uglјovodoničnu grupu koja sadrži 3 do 20 atoma uglјenika, poželјno 3 do 12 atoma uglјenika, a poželјnije 3 do 6 atoma uglјenika. Neograničavajući primeri monocikličkog cikloalkila obuhvataju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, ciklopentenil, cikloheksil, cikloheksenil, cikloheksadienil, cikloheptil, cikloheptatrienil, ciklooktil gupu i slične. Policikličan cikloalkil uklјučuje cikloalkil sa spiro prstenom, fuzionisanim ili premošćenim prstenom.
[0043] "Spiro cikloalkil" se odnosi na policikličku grupu sa od 5 do 20 članova prstena i sa prstenovima koji su povezani preko jednog zajedničkog atoma uglјenika (označenog kao spiro atom), pri čemu jedan ili više prstenova može sadržati jednu ili više dvostrukih veza, ali nijedan od prstenova nije sa potpuno konjugovanim sistemom pi-elektrona, pri čemu su poželjni 6- do 14-člani spirocikloalkili i još poželјniji 7- do 10-člani spiro-cikloalkili. Prema broju spiro atoma koji je zajednički za prstenove, spiro cikloalkil može biti svrstan u mono-spiro cikloalkil, di-spiro cikloalkil ili poli-spiro cikloalkil, pri čemu je poželјan mono-spiro cikloalkil ili di-spiro cikloalkil, a još poželјniji je 4-člani/4-člani, 4-člani/5-člani, 4-člani/6-člani, 5-člani/5-člani, ili 5-člani/6-člani mono-spiro cikloalkil. Neograničavajući primeri spiro cikloalkila obuhvataju:
[0044] "Kondenzovani cikloalkil" se odnosi na policikličnu grupu sa od 5 do 20 članova, pri čemu su svi članovi prstenova atomi ugljenika, a svaki prsten u sistemu deli susedan par atoma uglјenika sa drugim prstenom, pri čemu jedan ili više prstenova može sadržavati jednu ili više dvostrukih veza, ali nijedan od prstenova nije sa potpuno konjugovanim sistemom pi-elektrona. Pozeljan je 6- do 14-člani kondenzovani cikloalkil, a poželјniji je 7 do 10-člani kondenzovan cikloalkil. Prema broju prstenova koji sadrži, kondenzovani cikloalkil može biti svrstan u bicikličan, tricikličan, tetracikličan ili policikličan kondenzovan cikloalkil, pri čemu je poželјan bicikličan ili tricikličan kondenzovan cikloalkil, a još poželјniji je 5-člani/5-člani ili 5-člani/6-člani bicikličan kondenzovan cikloalkil. Neograničavajući primeri kondenzovanog cikloalkila obuhvataju:
[0045] "Premošćeni cikloalkil" se odnosi na policikličku grupu sa od 5 do 20 članova prstena, pri čemu su svi članovi prstenova atomi ugljenika, a svaka dva prstena u sistemu dele dva nepovezana atoma, pri čemu prstenovi mogu sadržavati jednu ili više dvostrukih veza, ali nijedan od prstenova nije sa potpuno konjugovanim sistemom pi-elektrona. Poželjan je 6- do 14-člani premošćeni cikloalkil, a poželјniji je 7- do 10-člani premošćeni cikloalkil. Prema broju prstenova koji sadrži, premošćeni cikloalkil može biti svrstan u bicikličan, tricikličan, tetracikličan ili policikličan premošćeni cikloalkil, pri čemu je poželјan bicikličan, tricikličan ili tetracikličan premošćeni cikloalkil, a još poželјniji je bicikličan ili tricikličan premošćeni cikloalkil. Neograničavajući primeri premošćenih cikloalkila uključuju:
[0046] Cikloalkilni prsten može biti fuzionisan sa prstenom arila, heteroarila ili heterociklila, pri čemu je prsten koji je vezan za matičnu strukturu cikloalkil. Neograničavajući primeri uklјučuju indanil, tetrahidronaftil, benzocikloheptil i slično. Cikloalkil može biti po izboru supstituisan ili nesupstituisan. Kada je supstituisana, supstituciona grupa/grupe su poželjno jedna ili više grupa nezavisno izabranih iz grupe koju čine alkil, alkenil, alkinil, alkoksi, alkiltio, alkilamino, halogena, tio, hidroksi, nitro, cijano, cikloalkil, heterociklil, aril, heteroaril, cikloalkoksi, heterociklična alkoksi, cikloalkiltio, heterociklična alkiltio, okso, karboksi i alkoksikarbonil grupa.
[0047] "Heterociklil" se odnosi na 3- do 20-članu zasićenu i/ili delimično nezasićenu monocikličnu ili policikličku uglјovodoničnu grupu koja sadrži jedan ili više heteroatoma izabranih iz grupe koja se sastoji od N, O i S(O)m (gde je m ceo broj od 0 do 2) kao atomima prstena, ali isklјučujući prisustvo -O-O-, -O-S- ili –S-S- u prstenu, pri čemu su preostali atomi prstena atomi uglјenika. Poželјno je da heterociklil sadrži od 3 do 12 atoma, pri čemu su od 1 do 4 atoma heteroatomi, poželјnije je da sadrži od 3 do 8 atoma, pri čemu su od 1 do 3 atoma heteroatomi, a najpoželјnije je da sadrži od 3 do 6 atoma, pri čemu su od 1 do 2 atoma heteroatomi. Neograničavajući primeri monocikličnih heterociklila uklјučuju pirolidinil, imidazolidinil, tetrahidrofuranil, tetrahidrotienil, dihidroimidazolil, dihidrofuril, dihidropirazolil, dihidropirolil, piperidinil, piperazinil, morfolinil, tiomorfolinil, homopiperazinil, piranil i slične grupe, poželјno piperidinil, pirolidinil, piranil, morfolinil ili
Policikličan heterociklil uklјučuje heterociklil koji je sa spiro prstenom, kondenzovanim prstenom illi premošćenim prstenom.
[0048] "Spiro heterociklil" se odnosi na 5- do 20-člani policikličan heterociklil sa prstenovima koji su povezani preko jednog zajedničkog atoma (nazvanog spiro atom), pri čemu su prstenovi sa jednim ili sa više heteroatoma izabranim iz grupe koju čine N, O i S(O)m (pri čemu je m ceo broj od 0 do 2) kao atomima prstena, pri čemu su preostali atomi prstena atomi uglјenika, pri čemu jedan ili više prstenova može sadržavati jednu ili više dvostrukih veza, ali nijedan od prstenova nije sa potpuno konjugovanim sistemom pi elektrona i poželjno je da je 6- do 14-člani spiro heterociklil, a poželјnije 7-do 10-člani spiro heterociklil. Prema broju spiro atoma koji je zajednički za prstenove, spiro heterociklil može biti svrstan u mono-spiro i heterociklil, di-spiro heterociklil ili poli-spiro heterociklil, pri čemu je poželјan mono-spiro heterociklil ili di-spiro heterociklil, a poželјniji je 4-člani/4-člani, 4-člani/5-člani, 4-člani/6-člani, 5-člani/5-člani ili 5-člani/6-člani mono-spiro heterociklil. Neograničavajući primeri spiro heterociklila uklјučuju:
[0049] "Kondezovan heterociklil" se odnosi na 5 do 20-članu policikličku heterociklil grupu, pri čemu svaki prsten u sistemu deli susedni par atoma sa drugim prstenom, pri čemu jedan ili više prstenova može sadržavati jednu ili više dvostrukih veza, ali nijedan od prstenova nije sa potpuno konjugovanim sistemom pi elektrona i pri čemu su prstenovi sa jednim ili sa više heteroatoma izabranih iz grupe koja se sastoji od N, O i S(O)m (gde je m ceo broj od 0 do 2) kao atomima prstena, pri čemu su preostali atomi u prstenu atomi uglјenika. Poželjan je 6- do 14-člani kondenzovani heterociklil, a poželјniji je 7- do 10-člani fuzionirani heterociklil. Prema broju prstenova koji ga čine, kondenzovani heterociklil može biti svrstan u bicikličan, tricikličan, tetracikličan ili policikličan kondenzovan heterociklil, pri čemu je poželјan bicikličan ili tricikličan kondenzovan heterociklil, a još poželјniji je 5-člani/5-člani, ili 5-člani/6-člani bicikličan kondenzovan heterociklil. Neograničavajući primeri kondenzovanog heterociklila uklјučuju:
[0050] "Premošćeni heterociklil" se odnosi na 5- do 14-članu policikličku heterociklil grupu, pri čemu svaka dva prstena u sistemu dele dva nepovezana atoma, pri čemu prstenovi mogu biti sa jednom ili sa više dvostrukih veza, ali nijedan od prstenova nije sa potpuno konjugovanim sistemom pi elektrona i prstenovi sadrže jedan ili više heteroatoma izabranih iz grupe koja se sastoji od N, O i S(O)m (gde je m ceo broj od 0 do 2) kao atomima prstena, dok su preostali atomi prstena atomi uglјenika. Poželјan je 6- do 14-člani premošćeni heterociklil, a poželјniji je 7- do 10-člani premošćeni heterociklil. Prema broju prstenova koji ga čine, premošćeni heterociklil može biti svrstan u bicikličan, tricikličan, tetracikličan ili policikličan premošćeni heterociklil, poželјno bicikličan, triciklični ili tetracikličan premošćeni heterociklil i još poželјnije bicikličan ili tricikličan premošćeni heterociklil. Neograničavajući primeri premošćenih heterociklila uklјučuju:
[0051] Heterociklil prsten može biti fuzionisan sa prstenom arila, heteroarila ili cikloalkila, pri čemu je prsten koji je vezan za matičnu strukturu heterociklil. Neograničavajući primeri uklјučuju:
, itd.
[0052] Heterociklil može biti po izboru supstituisan ili nesupstituisan. Kada je supstituisan, supstituciona grupa/grupe su poželjno jedna ili više grupa nezavisno izabranih iz grupe koju čine alkil, alkenil, alkinil, alkoksi, alkiltio, alkilamino, halogena, tio, hidroksi, nitro, cijano, cikloalkil, heterociklil aril, heteroaril, cikloalkoksi, heterociklična alkoksi, cikloalkiltio, heterociklična alkiltio, okso, karboksi i alkoksikarbonilna grupa.
[0053] "Aril" se odnosi na 6- do 14-člani monociklični prsten sastavljen samo od atoma ugljenika ili poličikličan kondenzovan prsten (tj. svaki prsten u sistemu deli susedni par atoma uglјenika sa drugim prstenom u sistemu), a koji je sa potpuno konjugovanim sistemom pi elektrona i poželjno je da je 6 do 10-člani aril, na primer, fenil i naftil, a još poželјnije fenil. Arilni prsten može biti fuzionisan sa prstenom heteroarila, heterociklila ili cikloalkila, pri čemu je prsten koji je vezan za matičnu strukturu arilni prsten. Neograničavajući primeri uklјučuju:
[0054] Aril može biti po izboru supstituisan ili nesupstituisan. Kada je supstituisan, supstituciona grupa/grupe su poželjno jedna ili više grupa nezavisno izabranih iz grupe koju čine alkil, alkenil, alkinil, alkoksi, alkiltio, alkilamino, halogena, tio, hidroksi, nitro, cijano, cikloalkil, heterociklil, aril, heteroaril, cikloalkoksi, heterociklična alkoksi, cikloalkiltio, heterociklična alkiltio, karboksi i alkoksikarbonilna grupa.
[0055] "Heteroaril" se odnosi na 5- do 14-člani heteroaromatičan sistem sa od 1 do 4 heteroatoma izabrana iz grupe koju čine O, S i N kao atomi u prstenu, poželјno 5- do 10-člani heteroaril sa od 1 do 3 heteroatoma, poželјnije 5- ili 6-člani heteroaril sa 1 do 2 heteroatoma, na primer, imidazolil, furil, tienil, tiazolil, pirazolil, oksazolil, pirolil, tetrazolil, piridinil, pirimidinil, tiadiazol, pirazinil i slično, a poželjno je da je imidazolil, tetrazolil, pirazolil, tienil, pirazolil, pirimidinil ili tizozolil i još poželjnije pirazolil ili tiazolil. Heteroarilni prsten može biti fuzionisan sa prstenom arila, heterociklila ili cikloalkila, pri čemu je prsten koji je vezan za matičnu strukturu heteroarilni prsten. Neograničavajući primeri uklјučuju:
[0056] Heteroaril može biti po izboru supstituisan ili nesupstituisan. Kada je supstituisan, supstituciona grupa/grupe su poželjno jedna ili više grupa nezavisno izabranih iz grupe koju čine alkil, alkenil, alkinil, alkoksi, alkiltio, alkilamino, halogena, tio, hidroksi, nitro, cijano, cikloalkil, heterociklil, aril, heteroaril, cikloalkoksi, heterociklična alkoksi, cikloalkiltio, heterociklična alkiltio, karboksi i alkoksikarbonilna grupa.
[0057] "Alkoksi" se odnosi na -O-(alkil) ili -O-(nesupstituisanu cikloalkil) grupu, pri čemu je alkil kao što je prethodno definisano. Neograničavajući primeri uklјučuju metoksi, etoksi, propoksi, butoksi, ciklopropiloksi, ciklobutiloksi, ciklopentiloksi, cikloheksiloksi grupu i slične. Alkoksi može biti po izboru supstituisana ili nesupstituisana. Kada je supstituisana, supstituent je poželјno jedna ili više grupa koja je nezavisno izabrana iz grupe koju čine alkil, alkenil, alkinil, alkoksi, alkiltio, alkilamino, halogena, tio, hidroksi, nitro, cijano, cikloalkil, heterociklil, aril, heteroaril, cikloalkoksi, heterociklična alkoksi, cikloalkiltio, heterociklična alkiltio, karboksi i alkoksikarbonil grupa.
[0058] "Haloalkil" se odnosi na alkil grupu supstituisanu sa jednim ili sa više halogena, pri čemu je alkil kao što je prethodno definisano.
[0059] "Haloalkoksi" se odnosi na alkoksi grupu koja je supstituisana sa jednim ili sa više halogena, pri čemu je alkoksi kao što je prethodno definisano.
[0060] "Hidroksialkil" se odnosi na alkil supstituisan sa hidroksi grupom/grupama, pri čemu je alkil kao što je prethodno definisano.
[0061] "Hidroksi" se odnosi na -OH grupu.
[0062] "Halogen" se odnosi na fluor, hlor, brom ili jod.
[0063] "Amino" se odnosi na -NH2grupu.
[0064] "Cijano" se odnosi na -CN grupu.
[0065] "Nitro" se odnosi na -NO2grupu.
[0066] "Oko" se odnosi na = O grupu.
[0067] "Karbonil" se odnosi na C=O grupu.
[0068] "Karboksi" se odnosi na -C(O)OH grupu.
[0069] "Izocijanato" se odnosi na -NCO grupu.
[0070] "Hidroksiimino" se odnosi na =N-OH grupu.
[0071] "Alkoksikarbonil" se odnosi na -C(O)O(alkil) ili -C(O)O(cikloalkil) grupu, pri čemu su alkil i cikloalkil kao što je prethodno definisano.
[0072] "Acil halid" se odnosi na jedinjenje koje sadrži grupu -C(O)-halogen.
[0073] "Opciono" ili "po izboru" označava da se događaj ili okolnost koja je dalje opisana može, ali ne mora dogoditi, a takav opis uklјučuje situaciju u kojoj se događaj ili okolnost događa ili ne događa. Na primer, "heterociklil grupa po izboru supstituisana alkilom" podrazumeva da alkil grupa može, ali ne mora biti prisutna, odnosno takav opis uklјučuje situaciju kada je heterociklil grupa supstituisana alkilom i kada heterociklil grupa nije supstituisan alkilom.
[0074] "Supstituisan" se odnosi na jedan ili više atoma vodonika u grupi, poželјno do 5, poželјnije od 1 do 3 atoma vodonika, koji su nezavisno supstituisani odgovarajućim brojem supstituenata. Podrazumeva se da su supstituenti prisutni samo na svojoj mogućoj hemijskoj poziciji. Stručnjak iz oblasti tehnike je u stanju da utvrdi da li je supstitucija moguća ili nije moguća, korišćenjem eksperimenata ili teorije i bez ulaganja prekomernog napora. Na primer, kombinacija amino ili hidroksi grupe koja je sa slobodnim atomima vodonika i uglјenika i sa nezasićenim vezama (kao što je olefinska) može biti nestabilna.
[0075] "Farmaceutska kompozicija" se odnosi na smešu jednog ili više jedinjenja prema predmetnom pronalasku ili njihovih fiziološki/farmaceutski prihvatlјivih soli ili prolekova i drugih hemijskih komponenti, kao i drugih hemijskih komponenti poput fiziološki/farmaceutski prihvatlјivih nosača i eksipijensa. Svrha farmaceutske kompozicije je da se olakša primena jedinjenja organizmu, što je pogodno za apsorpciju aktivnog sastojka, čime se ispoljava biološka aktivnost.
[0076] "Farmaceutski prihvatlјiva so" se odnosi na so jedinjenja predmetnog pronalaska koja je sigurna i efektivna kod sisara i koja ispoljava želјenu biološku aktivnost.
POSTUPAK SINTEZE JEDINJENJA PREDMETNOG PRONALASKA
[0077] Da bi se postigao cilј predmetnog pronalaska, predmetni pronalazak primenjuje tehnička rešenja sinteze koja slede.
[0078] Proces za pripremu jedinjenja formule (I) predmetnog pronalaska, ili tautomera, mezomera, racemata, enantiomera, dijastereomera ili njihove smeše, ili njegove farmaceutski prihvatlјive soli, obuhvata sledeće korake:
[0079] Jedinjenje formule (I-1) se dodaje sumpornoj kiselini u ledenom kupatilu, a zatim se dodaju natrijum nitrat i N-bromosukcinimid da bi se, uz zagrejanje, dobilo jedinjenje formule (I-2). Jedinjenje formule (I-2) se podvrgava reakciji esterifikacije sa hloridom, u alkalnim uslovima, da bi se dobilo jedinjenje formule (I-3), pri čemu je alkalni reagens koji obezbeđuje alkalne uslove poželjno kalijum karbonat. Jedinjenje formule (I-3) se dalje redukuje da bi se dobilo jedinjenje formule (I-4). Jedinjenje (I-5) se dobija u prisustvu sumporne kiseline i natrijum nitrita iz jedinjenja formule (I-4). Jedinjenje formule (I-5) reaguje sa 2-bromo-1,1-dietoksietanom, u alkalnim uslovima, da bi se dobilo jedinjenje formule (I-6). Jedinjenje formule (I-6) se podvrgava reakciji ciklizacije sa 3-bromo-5-(2,2-dietoksietoksi)-2-etilbenzoatom, uz zagrevanje i u kiselim uslovima, da bi se dobilo jedinjenje formule (I-7). Jedinjenje formule (I-7) reaguje sa jedinjenjem formule (la) u prisustvu katalizatora, uz zagrejanje i u alkalnim uslovima, da bi se dobilo jedinjenje formule (I-8), pri čemu je alkalni reagens koji obezbeđuje alkalne uslove ove reakcije poželјno kalijum karbonat, a katalizator je poželjno tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum ili (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftalen. Jedinjenje formule (I-8) reaguje sa alkil halidom, u alkalnim uslovima, da bi se dobilo jedinjenje formule (I-9). Jedinjenje formule (I-9) reaguje sa N,N-dimetilformamidom, u alkalnim uslovima, da bi se dobilo jedinjenje formule (I-10), pri čemu je alkalni reagens koji obezbeđuje alkalne uslove za ovu reakciju poželјno litijum-diizopropilamid. Jedinjenje formule (I-10) se redukuje do jedinjenja formule (I-11) u prisustvu redukujućeg agensa, pri čemu je redukujući agens u ovim uslovima poželjno natrijum borhidrid. Jedinjenje formule (I-11) reaguje sa fosfor tribromidom da bi se dobilo jedinjenje formule (I-12). Jedinjenje formule (I-12) reaguje sa R<1>H da bi se dobilo jedinjenje formule (I-13). Jedinjenje formule (I-13) se hidrolizuje pod alkalnim uslovima da bi se dobilo jedinjenje formule (VI), pri čemu je alkalni reagens koji obezbeđuje alkalne uslove za ovu reakciju poželjno natrijum hidroksid. Jedinjenje formule (VI) se podvrgava reakciji acilacije sa jedinjenjem formule (VII) da bi se dobilo jedinjenje formule (I).
[0080] Reagens koji obezbeđuje alkaline uslove obuhvata organske baze i neorganske baze, pri čemu organske baze uklјučuju, ali nisu ograničene na, trietilamin, N,N-diizopropiletilamin, n-butil litijum, litijum diizopropilamin, kalijum acetat, natrijum terc-butoksid i kalijum terc-butoksid, dok neorganske baze uklјučuju, ali nisu ograničene na, natrijum hidrid, kalijum fosfat, natrijum karbonat, kalijum karbonat i cezijum karbonat.
[0081] Katalizator koji se upotrebljava obuhvata, ali nije ograničen na, 2-dicikloheksilfosfino-2',4',6'-triizopropilbifenil, (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftalen, tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum, paladijum acetat, [1,1'-bis(difenilfosfin)ferocen]dihloropaladijum, trifenilfosfin, tetrakistrifenilfosfin paladijum.
[0082] Pri čemu:
R<x>je izabran iz grupe koja se sastoji od vodonika, alkila, haloalkila, hidroksialkila, cikloalkila, heterociklila, arila i heteroarila, pri čemu je svaki alkil, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril nezavisno i po izboru supstituisan sa jednom ili sa više grupa izabranih iz grupe koju čine alkil, halogena, hidroksi, amino, alkoksikarbonil, nitro, cijano, alkoksi, hidroksialkil, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril grupa;
X je halogen;
od R<1>do R<5>, prstenovi A, p, q i n su kao što je definisano u formuli (I).
POŽELJNI PRIMERI IZVOĐENJA
[0083] Predmetni pronalazak će dalјe biti opisan pozivanjem na primere koji slede, ali primere ne treba smatrati oraničavajućim za područje pronalaska.
Primeri
[0084] Strukture jedinjenja su identifikovane nuklearnom magnetnom rezonancom (NMR) i/ili masenom spektrometrijom (MS). NMR je određen upotrebom mašine tipa Bruker AVANCE-400. Rastvarači za određivanje su bili deuterizovan dimetil sulfoksid (DMSO-d6), deuterizovan hloroform (CDCl3i deuterizovan metanol (CD3OD), dok je interni standard bio tetrametilsilan (TMS). NMR hemijski pomeraji (δ) su dati u 10<-6>(ppm).
[0085] MS je određen upotrebom masenog spektrometra FINNIGAN LCQAd (ESI) (proizvođač: Thermo, tip: Finnigan LCQ advantage MAX).
[0086] Tečna hromatografija visokih performansi (HPLC) je rađena na Agilent 1200DAD spektrometru za tečnu hromatografiju pod visokim pritiskom (hromatografska kolona Sunfire C18150×4,6 mm) i Waters 2695-2996 spektrometru za tečnu hromatografiju pod visokim pritiskom (hromatografska kolona Gimini C18150×4,6 mm).
[0087] Prosečne stope inhibicije kinaza i IC50vrednosti su određivane ELISA čitačem tipa NovoStar (BMG Co., Nemačka).
[0088] Yantai Huanghai HSGF254 ili Qingdao GF254 ploče sa silikagelom su upotrebljavane za tankoslojnu hromatografiju na silika gelu (TLC). Dimenzija ploče sa silika gelom koja je upotrebljavana za TLC je iznosila od 0,15 mm do 0,2 mm, a dimenzija ploče sa silika gelom koja je upotrebljavana za prečišćavanje proizvoda je iznosila od 0,4 mm do 0,5 mm.
[0089] Yantai Huanghai silika gel od 200 do 300 mesha je upotrebljavan kao nosač za hromatografiju na koloni.
[0090] Poznati polazni materijali predmetnog pronalaska mogu biti pripremljni konvencionalnim postupcima sinteze iz oblasti tehnike ili mogu biti nabavljeni od firmi ABCR GmbH & Co. KG, Acros Organnics, Aldrich Chemical Company, Accela ChemBio Inc. ili Dari chemical Company itd.
[0091] Ukoliko nije drugačije navedeno, reakcije su izvođene u atmosferi argona ili u atmosferi azota.
[0092] Izraz "atmosfera argona" ili "atmosfera azota" označava da je reakciona posuda opremlјena balonom zapremine 1 L sa argonom ili azotom.
[0093] Izraz "atmosfera vodonika" označava da je reakcioni sud bio opremljen sa balonom zapremine 1 L koji je sadržavao vodonikom.
[0094] Reakcije hidrogenizacije pod pritiskom je izvođena upotrebom instrumenta za hidrogenizaciju Parr 3916EKX i QL-500 generatora vodonika ili HC2-SS instrumenta za hidrogenizaciju.
[0095] Tokom reakcija hidrogenizacije, reakcioni sistem je obično bio pod vakuumom i ispunjen vodonikom, pri čemu je prethodno navedena operacija ponavlјana tri puta.
[0096] Mikrotalasni reaktor tipa CEM Discover-S 908860 je upotrebljavan za zagrevanje mikrotalasima.
[0097] Ukoliko nije drugačije naznačeno, rastvor koji je upotrebljavan u reakcijama se odnosi na vodeni rastvor.
[0098] Ukoliko nije drugačije naznačeno, temperatura reakcije u reakcijama podrazumeva sobnu temperaturu.
[0099] Sobna temperatura je najprikladnija temperatura reakcije i opsega je od 20°C do 30°C.
[0100] Proces reakcije je praćen tankoslojnom hromatografijom (TLC), a sistem rastvarača za razvijanje je obuhvatao: A: sistem dihlorometana i metanola, B: sistem n-heksana i etil acetata, C: sistem petrolej etra i etil acetata, D: aceton. Odnos zapremina rastvarača može biti podešen u skladu sa polarnošću jedinjenja.
[0101] Sistem elucije za prečišćavanje jedinjenja hromatografijom na koloni i tankoslojnom hromatografijom obuhvata: A: sistem dihlorometana i metanola, B: sistem n-heksana i etil acetata, C: sistem n-heksana, etil acetata i dihlorometana, D: sistem petrolej etra i etil acetat, E: etil acetat. Odnos zapremina rastvarača može biti podešen u skladu sa polarnošću jedinjenja, a ponekad može biti dodato malo alkalnog reagensa kao što je trietilamin ili može biti dodat kiseli reagens.
Primer 1
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksamid
[0102]
Korak 1
3-Bromo-2-etil-5-nitrobenzoeva kiselina
[0103] 2-Etilbenzoeva kiselina 1a (20,0 g; 133 mmol; pripremlјena postupkom opisanim u "Journal of the American Chemical Society, 1991, 113(13), 4931-6") je dodata u 150 mL sumporne kiseline, nakon čega je u serijama dodavan natrijum nitrat (11,3 g; 133 mmol), u ledenom kupatilu. Smeša je zatim mešana tokom 3 sata, pa je u serijama dodat N-bromosukcinimid (2,6 g; 14,5 mmol). Reakcioni sistem je dalje mešan tokom 1 sata na 60°C. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je presut u ledenu vodu, dobro promešan i profiltriran. Filtrat je ispran sa vodom i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 3-bromo-2-etil-5-nitrobenzoeva kiselina 1b (35 g), kao bela čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 2
Metil 3-bromo-2-etil-5-nitrobenzoat
[0104] Sirova 3-bromo-2-etil-5-nitrobenzoeva kiselina 1b (35 g; 128 mmol) je rastvorena u 200 mL N,N-dimetilformamida, a zatim su dodati jodometan (21,8 g; 153 mmol) i kalijum karbonat (35,3 g; 255 mmol). Reakcioni sistem je mešan tokom 2 sata na sobnoj temperaturi. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Dalje je dodata voda u višku i smeša je ekstrahovana etil acetatom . Organske faze su spojene, isprane vodom i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, metil 3-bromo-2-etil-5-nitrobenzoat 1c (36 g), u vidu žutog ulja koje je direktno upotrebljeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 3
Metil 5-amino-3-bromo-2-etilbenzoat
[0105] Sirovi metil 3-bromo-2-etil-5-nitrobenzoat 1c (35,0 g; 121 mmol) je dodat u 250 mL etanola i 150 mL vode. Smeša je zagrejana do 70°C, pa je dodat amonijum hlorid (52,8 g; 969 mmol), a zatim je u serijama dodato i gvožđe u prahu (34 g; 606 mmol). Reakcioni sistem je zatim mešan na 70°C tokom 2 sata. Po završetku reakcije, smeša je, dok je bila vruća, profiltrirana kroz celit. Dobijeni kolač je ispran vrućim etanolom, nakon čega je filtrat spojen i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Potom su dodati etil acetat i zasićeni rastvor natrijum bikarbonata, pa su dve faze razdvojene i vodena faza je ekstrahovana etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom elucionog sistema B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 5-amino-3-bromo-2-etilbenzoat 1d (22,0 g; prinos 70%), kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 4
Metil 3-bromo-2-etil-5-hidroksibenzoat
[0106] Metil 5-amino-3-bromo-2-etilbenzoat 1d (15,0 g; 58 mmol) je rastvoren u 10 mL acetonitrila, nakon čega je dodato 200 mL 10% sumporne kiseline. Smeša je dobro promešana i ohlađena do 3°C u ledenom slanom kupatilu, nakon čega je dodato 10 mL prethodno pripremlјenog rastvora natrijum nitrita (4,4 g; 64 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 4 sata na prethodno navedenoj temperaturi, pa je u kapima dodato 200 mL 50% sumporne kiseline i smeša je mešana na 90°C tokom 1 sata. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je ekstrahovan tri puta sa etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 3-bromo-2-etil-5-hidroksibenzoat 1e (5,5 g; prinos 37%), kao smeđa čvrsta supstanca.
Korak 5
Metil 3-bromo-5-(2,2-dietoksietoksi)-2-etilbenzoat
[0107] Metil 3-bromo-2-etil-5-hidroksibenzoat 1e (35 g; 135 mmol) je rastvoren u 200 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su dodati 2-bromo-1,1-dietoksietan (40 g; 202 mmol) i kalijum karbonat (37 g; 269 mmol). Reakcioni sistem je zatim mešan na 120°C tokom 12 sati. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se uklonio N,N-dimetilformamid. Dalje je dodata voda i smeša je ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 3-bromo-5-(2,2-dietoksetoksi)-2-etilbenzoat 1f (40 g; prinos 80%), kao svetlo žuto ulјe.
Korak 6
Metil 6-bromo-5-etilbenzofuran-4-karboksilat
[0108] Polifosforna kiselina (30 g) je dodata u 400 mL toluena. Smeša je zagrejana do 100°C, pa je uz mešanje dodato 50 mL prethodno pripremlјenog rastvora metil 3-bromo-5-(2,2-dietoksietoksi)-2-etilbenzoata 1f (40 g; 107 mmol) u toluenu. Smeša je zatim mešana na 100°C tokom 16 sati. Po završetku reakcije, supernatant je dekantovan. U ostatak su dodati voda i etil acetat. Dve faze su razdvojene i vodena faza je ekstrahovana etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum karbonata i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 6-bromo-5-etilbenzofuran-4-karboksilat 1g (11,8 g; prinos 39%), kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 7
Metil 5-etil-6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat
[0109] Metil 6-bromo-5-etilbenzofuran-4-karboksilat 1g (11,0 g; 39 mmol), tetrahidro-2H-piran-4-amin (5,89 g; 58 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum (3,6 g; 3,9 mmol), (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftalen (4,86 g; 7,8 mmol) i cezijum karbonat (38 g; 117 mmol) su rastvoreni u 100 mL toluena. Smeša je zatim mešana tokom 12 sati na 100°C. Po završetku reakcije, smeša je profiltrirana kroz jastuče celita i izdvojen kolač je ispran etil acetatom. Organske faze su spojene, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 5-etil-6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 1h (10,0 g; prinos 85%), kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 8
Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat
[0110] Metil 5-etil-6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 1h (10,0 g; 0,033 mmol) je rastvoren u 150 mL 1,2-dihloretana, a zatim su dodati acetaldehid (7,2 g; 0,165 mmol) i sirćetna kiselina (9,9 g; 0,165 mmol). Smeša je mešana tokom 1 sata, pa je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (20,8 g; 0,1 mmol). Smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, neutralisan zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovan etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 1i (7,8 g; prinos 71%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (LC-MS):332,4 [M+1]
Korak 9
Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-formilbenzofuran-4-karboksilat
[0111] Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 1i (1,6 g; 4,8 mmol) je rastvoren u 25 mL tetrahidrofurana. Smeša je ohlađena do -70°C, pa je u kapima dodat 2,0 M litijum-diizopropilamid (3,6 mL; 7,3 mmol) u atmosferi argona. Smeša je zatim mešana tokom 90 minuta, a potom je dodat N,N-dimetilformamid (536 mg; 7,3 mmol). Smeša je dalje mešana tokom 2 sata, pa je lagano zagrejana do sobne temperature. Dalje je u višku dodat amonijum-hlorid. Smeša je dobro promešana i ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-formilbenzofuran-4-karboksilat 1j (1,3 g; prinos 75%), kao žuto ulјe.
MS m/z (ESI):360,2 [M+1]
Korak 10
Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(hidroksimetil)benzofuran-4-karboksilat
[0112] Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-formilbenzofuran-4-karboksilat 1j (1,4 g; 3,9 mmol) je rastvoren u 5 mL tetrahidrofurana i 10 mL metanola, a zatim je dodat natrijum borohidrid (222 mg; 5,8 mmol). Smeša je dalje mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega su dodati voda i zasićeni rastvor natrijum bikarbonata i smeša je ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(hidroksimetil)benzofuran-4-karb oksilat 1k (1,4 g; prinos 99%), u vidu žutog ulja.
Korak 11
Metil 2-(bromometil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat
[0113] Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(hidroksimetil) benzofuran-4-karboksilat 1k (1,0 g; 2,8 mmol) je rastvoren u 30 mL tetrahidrofurana, a zatim je u kapima dodavan fosfor tribromid (1,12 g; 4,2 mmol). Smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Po završetku reakcije, smeša je neutralisana zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, metil 2-(bromometil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 1l (1,15 g), u vidu žutog ulja koje je direktno upotrebljeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 12
Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksilat
[0114] Sirovi metil 2-(bromometil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 1l (1,15 g; 2,7 mmol) je rastvoren u 15 mL acetonitrila, a zatim je u kapima dodato 10 mL prethodno pripremlјenog rastvora piperidina (362 mg; 4,3 mmol) u acetonitrilu. Smeša je zatim mešana tokom 30 minuta na sobnoj temperaturi. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Dalje su dodati etil acetat i zasićeni rastvor natrijum bikarbonata. Dve faze su razdvojene i vodena faza je ekstrahovana etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksilat 1m (1,2 g; prinos 99%), kao žuto ulјe.
MS m/z (LC-MS): 429,2 [M+1]
Korak 13
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksilna kiselina
[0115] Metil 5-etil -6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-1-ilmetil) benzofuran-4-karboksilat 1m (1,2 g; 2,7 mmol) je rastvoren u 5 mL tetrahidrofurana i 20 mL metanola, a zatim je dodato 5 mL 4M rastvora natrijum hidroksida. Smeša je potom mešana na 60°C tokom 12 sati. Po završetku reakcije, dodata je koncentrovana hlorovodonična kiselina da bi se pH reakcionog rastvora podesio na 4. Smeša je zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom, a ostatak je rastvoren u smeši dihlorometana i metanola (V:V=5:1) i profiltriran. Dobijeni kolač je ispran smešom dihorometana i metanola (V:V=5:1). Filtrati su spojeni i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksilna kiselina 1n (1,1 g), kao žuta čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
MS m/z (LC-MS): 415,2 [M+1]
Korak 14
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksamid
[0116] Sirovi 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksilna kiselina 1n (150 mg; 0,36 mmol) je rastvoren u 5 mL N,N-dimetilformamida, a zatim su dodati 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid (104 mg; 0,54 mmol), 1-hidroksibenzotriazol (73 mg; 0,54 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (232 mg; 1,8 mmol). Smeša je mešana tokom 1 sata, pa je dodat 3-(aminometil)-4-metoksi-6-metilpiridin-2(1H)-on hidrohlorid 1o (96 mg; 0,47 mmol; pripremlјen postupkom opisanim u patentnoj prijavi "WO2014177982"). Smeša je dalje mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Po završetku reakcije, u višku je dodata voda i reakcioni rastvor je ekstrahovan smešom dihlormetana i metanola (V:V=8:1). Organske faze su spojene, isprane vodom i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobio jedinjenje iz naslova, 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-d ihidropiridin-3-il)metil)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksamid 1 (155 mg; prinos 76%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (ESI): 565,3 [M+1]
<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6): δ 11,44(s, 1H), 8,00(s, 1H), 7,40(s, 1H), 6,53(brs, 1H), 6,10(s, 1H), 4,29(d, 2H), 3,85(brs, 2H), 3,83(s, 3H), 3,56(brs, 2H), 3,22(t, 2H), 3,03-3,08(m, 2H), 2,93-2,98(m, 1H), 2,78-2,84(m, 2H), 2,42(brs, 4H), 2,18(s, 3H), 1,64-1,67(brd, 2H), 1,47-1,56(m, 6H), 1,38(brs, 2H), 1,06(t, 3H), 0,83(t, 3H).
Primer 2
N-((4,6-Dimetil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksamid
[0117]
[0118] 5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzof uran-4-karboksilna kiselina 1n (1,0 g; 2,4 mmol) je rastvorena u 30 mL N,N-dimetilformamida, a zatim su dodati 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid (696 mg; 3,6 mmol), 1-hidroksibenzotriazol (490 mg; 3,6 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (1,56 g; 12,1 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata, pa je dodat 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-on hidrohlorid 2a (593 mg; 3,0 mmol; pripremlјen postupkom opisanim u patentnoj prijavi "WO2014097041”). Smeša je dalje mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Po završetku reakcije, u višku je dodata voda i reakcioni rastvor je ekstrahovan smešom dihlorometana i metanola (V:V=8:1). Organske faze su spojene, isprane vodom i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobio jedinjenje iz naslova, N-((4,6-dimetil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksamid 2 (750 mg; prinos 57%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (ESI): 549,7 [M+1]
<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6): δ 11,48(s, 1H), 8,15(t, 1H), 7,39(s, 1H), 6,46(s, 1H), 5,86(s, 1H), 4,32(d, 2H), 3,83(d, 2H), 3,54(s, 2H), 3,21(t, 2H), 3,01-3,07(m, 2H), 2,92-2,97(m, 1H), 2,77-2,82(m, 2H), 2,39(brs, 4H), 2,23(s, 3H), 2,11(s, 3H), 1,64-1,67(brd, 2H), 1,47-1,55(m, 6H), 1,36-1,37(brd, 2H), 1,02(t, 3H), 0,82 (t, 3H).
Primer 3
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-etil-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksamid
[0119]
[0120] 5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzof uran-4-karboksilna kiselina 1n (50 mg; 0,12 mmol) je rastvorena u 3 mL N,N-dimetilformamida, pa su dodati 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid (35 mg; 0,18 mmol), 1-hidroksibenzotriazol (24 mg; 0,18 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (78 mg; 0,60 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata i dalje je dodat 3-(aminometil)-4-etil-6-metilpiridin-2(1H)-on hidrohlorid 3a (36 mg; 0,18 mmol; dobijen postupkom opisanim u patentnoj prijavi. "WO2013173441”). Smeša je potom mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Po završetku reakcije, u višku je dodata voda i reakcioni rastvor je ekstrahovan smešom dihlormetana i metanola (V:V=8:1). Organske faze su spojene, isprane vodom i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobio jedinjenje iz naslova, 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-etil-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksamid 3 (58 mg; prinos 85%), kao bela čvrsta supstanca. MS m/z (ESI): 563,7 [M+1]
<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6): δ 11,51(s, 1H), 8,12(t, 1H), 7,39(s, 1H), 6,47(s, 1H), 5,91(s, 1H), 4,33(d, 2H), 3,81-3,83(brd, 2H), 3,54(brs, 2H), 3,20(t, 2H), 3,01-3,06(m, 2H), 2,91-2,97(m, 1H), 2,76-2,82(m, 2H), 2,59(q, 2H), 2,39(brs, 4H), 2,13(s, 3H), 1,63-1,66(brd, 2H), 1,48-1,50(m, 6H), 1,36(brs, 2H), 1,37(t, 3H), 1,01 (t, 3H), 0,81(t, 3H).
Primer 4
6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidro-piridin-3-il)metil)-5-metil-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksamid
[0121]
Korak 1
Metil 5-amino-3-bromo-2-metilbenzoat
[0122] Metil 3-bromo-2-metil-5-nitrobenzoat 4a (13 g; 47,3 mmol; pripremlјen postupkom opisanim u patentnoj prijavi "WO2012061602") je dodat u 200 mL etanola i 50 mL vode. Smeša je zatim zagrejana do 70°C, pa su u serijama dodavani amonijum hlorid (20,6 g; 378 mmol) i gvožđe u prahu (13,3 g; 236 mmol). Reakcioni sistem je mešan 2 sata na 70°C. Po završetku reakcije, smeša je, dok je bila vruća, profiltrirana kroz sloj celita. Dobijeni kolač je ispran vrućim etanolom, pa su filtrati spojeni i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Ostatak je neutralisan zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovan tri puta sa etil acetatom. Organske faze su spojene, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 5-amino-3-bromo-2-metilbenzoat 4b (11,0 g; prinos 95%), kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 2
Metil 3-bromo-5-hidroksi-2-metilbenzoat
[0123] Metil 5-amino-3-bromo-2-metilbenzoat 4b (3,0 g; 0,012 mmol) je resuspendovan u 20 mL 10% sumporne kiseline. Smeša je ohlađena do 0°C, pa je u kapima dodato 5 mL prethodno pripremlјenog rastvora natrijum nitrita (1,0 g; 14,7 mmol). Nakon mešanja tokom 3 sata na prethodno navedenoj temperaturi, reakcioni rastvor je presut u 30 mL prethodno pripremlјene 10% sumporne kiseline na 80°C, a zatim je mešan 1 sat na 80°C. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je ekstrahovan tri puta sa etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 3-bromo-5-hidroksi-2-metilbenzoat 4c (1,1 g; prinos 32%), kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 3
Metil 3-bromo-5-(2,2-dietoksietoksi)-2-metilbenzoat
[0124] Metil 3-bromo-5-hidroksi-2-metilbenzoat 4c (800 mg; 3,3 mmol) je rastvoren u 15 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su dodati 2-bromo-1,1-dietoksietan (965 mg; 4,9 mmol) i kalijum karbonat (900 mg; 6,5 mmol). Reakcioni sistem je zatim mešan tokom 12 sati na 120°C. Po završetku reakcije, u višku je dodata voda i smeša je ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 3-bromo-5-(2,2-dietoksetoksi)-2-metilbenzoat 4d (820 mg; prinos 69%), u vidu svetlo žutog ulјa.
Korak 4
Metil 6-bromo-5-metilbenzofuran-4-karboksilat
[0125] Metil 3-bromo-5-(2,2-dietoksietoksi)-2-metilbenzoat 4d (650 mg; 1,8 mmol) je rastvoren u 10 mL toluena, nakon čega je dodato 10 mL prethodno pripremlјenog rastvora polifosforne kiseline (10 g) u toluenu. Smeša je zatim mešana 5 sati na 100°C. Po završetku reakcije, gornja organska faza je dekantovana. Ostatku je dodata voda i ekstrahovan je etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum karbonata i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 6-bromo-5-metilbenzofuran-4-karboksilat 4e (220 mg; prinos 45%), kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 5
Metil 5-metil-6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat
[0126] Metil 6-bromo-5-metilbenzofuran-4-karboksilat 4e (250 mg; 0,93 mmol), tetrahidro-2H-piran-4-amin (141 mg; 1,4 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum (85 mg; 0,09 mmol), (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftalen (116 mg; 0,19 mmol) i cezijum karbonat (909 mg; 2,79 mmol) su rastvoreni u 10 mL toluena. Smeša je zatim mešana tokom 12 sati na 100°C. Po završetku reakcije, smeša je profiltrirana kroz sloj celita, nakon čega je dobijeni kolač ispran etil acetatom. Organske faze su spojene, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 5-metil-6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 4f (250 mg; prinos 90%), kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 6
Metil 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metilbenzofuran-4-karboksilat
[0127] Metil 5-metil-6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 4f (250 mg; 0,87 mmol) je rastvoren u 10 mL 1,2-dihloretana, pa su dodati acetaldehid (190 mg; 4,3 mmol) i sirćetna kiselina (260 mg; 4,3 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata, a potom je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (545 mg; 2,6 mmol). Smeša je dalje mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Dalje su dodati etil acetat i zasićeni rastvor natrijum bikarbonata. Dve faze su razdvojene i vodena faza je ekstrahovana etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metilbenzofuran-4-karboksilat 4g (180 mg; prinos 56%), kao žuto ulјe.
MS m/z (LC-MS):318,2 [M+1]
Korak 7
Metil 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-formil-5-metilbenzofuran-4-karboksilat
[0128] 5 Metil 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il-)amino)-5-metilbenzofuran-4-karboksilat 4g (180 mg; 0,57 mmol) je rastvoren u 5 mL tetrahidrofurana. Smeša je zatim ohlađena do -70°C, pa je, u atmosferi argona, u kapima dodat 2,0 M litijum-diizopropilamin (0,57 mL; 1,14 mmol). Smeša je dalje mešana tokom 1 sata i dodat je 4-formilmorfolin (98 mg; 0,85 mmol). Smeša je ponovo mešana tokom 1 sata, a zatim je lagano zagrejana do sobne temperature i dodat je rastvor amonijum hlorida. Smeša je potom mešana tokom 20 minuta i ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-formil-5-metilbenzofuran-4-karboksilat 4h (130 mg; prinos 66%), kao žuto ulјe.
Korak 8
Metil 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(hidroksimetil)-5-metilbenzofuran-4-karboksilat
[0129] Metil 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-formil-5-metilbenzofuran-4-karboksilat 4h (130 mg; 0,38 mmol) je rastvoren u 1 mL tetrahidrofurana i 5 mL metanola, a zatim je u serijama dodat natrijum borhidrid (22 mg; 0,57 mmol). Reakciona smeša je dalje mešana tokom 1 sata na sobnoj temperaturi. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Potom je dodat zasićeni rastvor natrijum bikarbonata i smeša je ekstrahovan tri puta sa etil acetatom.
Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, metil 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(hidroksimetil)-5-metilbenzofuran-4-ka rboksilat 4i (120 mg), u vidu žutog ulјa koje je direktno upotrebljeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
MS m/z (LC-MS):348,0 [M+1]
Korak 9
Metil 2-(bromometil)-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metilbenzofuran-4-karboksilat
[0130] Sirovi metil 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(hidroksimetil)-5-metilbenzofuran-4-ka rboksilat 4i (130 mg; 0,36 mmol) je rastvoren u 5 mL tetrahidrofurana, pa je u kapima dodat fosfor tribromid (146 mg; 0,54 mmol). Smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Po završetku reakcije, dodata je voda i smeša je ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, metil 2-(bromometil)-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metilbenzofuran-4-karb oksilat 4j (152 mg), kao žuto ulјe koje je direktno upotrebljeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 10
Metil 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metil-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksilat
[0131] Sirovi metil 2-(bromometil)-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metilbenzofuran-4-karb oksilat 4j (140 mg; 0,33 mmol) je rastvoren u 5 mL acetonitrila, a zatim je u kapima dodato 5 mL prethodno pripremlјenog rastvora piperidina (56 mg; 0,66 mmol) u acetonitrilu. Smeša je dalje mešana 1 sat na sobnoj temperaturi. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega su dodati etil acetat i zasićeni rastvor natrijum bikarbonata. Dve faze su razdvojene i vodena faza je ekstrahovana etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-metil-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofura n-4-karboksilat 4k (120 mg; prinos 86%) u vidu bezbojnog ulјa.
Korak 11
6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metil-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofura n-4-karboksilna kiselina
[0132] Metil 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metil-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksilat 4k (120 mg; 0,29 mmol) je rastvoren u 10 mL metanola, a zatim je dodato 3 mL 4M rastvora natrijum hidroksida. Smeša je potom mešana tokom 12 sati na 60°C. Po završetku reakcije, dodata je koncentrovana hlorovodonična kiselina da bi se pH reakcionog rastvora podesio na 4. Smeša je dalje koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je rastvoren u smeši dihlorometana i metanola (V:V=5:1) i profiltriran. Dobijeni kolač je ispran smešom dihorometana i metanola (V:V=5:1). Filtrati su spojeni i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metil-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofura n-4-karboksilna kiselina 4i (120 mg), kao žuta čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
MS m/z (LC-MS):399,0 [M+1]
Korak 12
6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidro-piridin-3-il)metil)-5-metil-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksamid
[0133] Sirova 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metil-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofura n-4-karboksilna kiselina 4i (40 mg; 0,1 mmol) je rastvorena u 3 mL N,N-dimetilformamida, a zatim su dodati 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid (29 mg; 0,15 mmol), 1-hidroksibenzotriazol (20 mg; 0,15 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (63 mg; 0,48 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 16 sati, nakon čega je dodat 3-(aminometil)-4-metoksi-6-metilpiridin-2(1H)-on hidrohlorid 1o (26 mg; 0,13 mmol). Smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Po završetku reakcije, u višku je dodata voda i reakcioni rastvor je ekstrahovan smešom dihlorometana i metanola (V:V=8:1). Organske faze su spojene, isprane vodom i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropridin-3-il)metil)-5-metil-2-(piperidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksamid 4 (35 mg; prinos 64%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (ESI): 551,7 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,45(s, 1H), 8,01(s, 1H), 7,40(s, 1H), 6,91(brs, 1H), 6,12(s, 1H), 4,30(d, 2H), 3,84(brs, 5H), 3,23(t, 2H), 3,04-3,09(m, 2H), 2,95-3,01(m, 1H), 2,62(s, 3H), 2,19(s, 3H), 1,64-1,81(brd, 6H), 1,50-1,55(m, 4H), 1,38(brs, 2H), 0,81(t, 3H).
Primer 5
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-((4-izopropilpiperazin-1-il)metil)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksamid
[0134]
Korak 1
terc-Butil 4-((5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-4-(metoksikarbonil)benzofuran-2-il)metil)piperazin-1-karboksilat
[0135] Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-formilbenzofuran-4-karboksilat 1j (30 mg; 0,083 mmol), 1-(terc-butoksikarbonil)piperazin (24 mg; 0,13 mmol) i sirćetna kiselina (25 mg; 0,42 mmol) su dodati u 5 mL metanola. Smeša je zatim mešana tokom 1 sata, pa je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (53 mg; 0,25 mmol). Smeša je dalje mešana tokom 12 sati. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je neutralisan zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovan tri puta sa etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, terc-butil 4-((5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-4-(metoksikarbonil)benzofuran-2-il)metil)piperazin-1-karboksilat 5a (40 mg; prinos 90%), kao žuto ulјe.
MS m/z (LC-MS): 530,3 [M+1]
Korak 2
Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-((4-izopropilpiperazin-1-il)metil)benzofuran-4-karboksilat
[0136] terc-Butil 4-((5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-4-(metoksikarbonil)benzofuran-2-il)metil)piperazin-1-karboksilat 5a (40 mg; 0,075 mmol) je dodat u 10 mL trifluorosirćetne kiseline. Smeša je zatim mešana 1 sat na sobnoj temperaturi, pa je koncentrovana pod sniženim pritiskom. U ostatak su dodati 5 mL N,N-dimetilformamida i kalijum karbonat (21 mg; 0,15 mmol), nakon čega je smeša mešana tokom 30 minuta. Zatim je dodat 1-jodopropan (20 mg; 0,11 mmol) i reakcioni sistem je mešan na 70°C tokom 1 sata. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je presut u vodu u višku i ekstrahovan je tri puta smešom dihlorometana i metanola (V:V=8:1). Organske faze su spojene, isprane vodom i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-((4-izopropilpiperazin-1-il)metil)benzofuran-4-karboksilat 5b (25 mg; prinos 70%) u vidu bezbojnog ulјa.
MS m/z (LC-MS): 472,3 [M+1]
Korak 3
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-((4-izopropilpiperazin-1-il)metil)benzofuran-4-karboksilna kiselina
[0137] Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-((4-izopropilpiperazin-1-il)metil)benzofuran-4-karboksilat 5b (10 mg; 0,021 mmol) je rastvoren u 3 mL metanola i 1 mL tetrahidrofurana, nakon čega je dodato 13 mL 2M rastvora natrijum hidroksida. Reakcioni sistem je zatim mešan tokom 12 sati na 60°C. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je neutralisan koncentrovanom sumpornom kiselinom i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u smeši dihlorometana i metanola (V:V=5:1) i zatim profiltriran. Dobijeni kolač je ispran smešom dihorometana i metanola (V:V=5:1). Filtrati su spojeni i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-((4-izopropilpiperazin-1-il)metil)benzofuran-4-karboksilna kiselina 5c (9 mg), kao bela čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
MS m/z (LC-MS): 458,4 [M+1]
Korak 4
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-((4-izopropilpiperazin-1-il)metil)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksamid
[0138] Sirova 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-((4-izopropilpiperazin-1-il)metil)benzofuran-4-karboksilna kiselina 5c (10 mg; 0,022 mmol) je rastvorena u 3 mL N,N-dimetilformamida, a zatim su dodati 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid (7 mg; 0,033 mmol), 1-hidroksibenzotriazol (5 mg; 0,033 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (6 mg; 0,044 mmol). Smeša je dalje mešana tokom 30 minuta, pa je dodat 3-(aminometil)-4-metoksi-6-metilpiridin-2(1H)-on hidrohlorid 1o (5,8 mg; 0,028). Smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Po završetku reakcije, u višku je dodata voda i reakcioni rastvor je ekstrahovan smešom dihlorometana i metanola (V:V=8:1). Organske faze su spojene, isprane vodom i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-((4-izopropilpiperazin-1-il)metil)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksa mid 5 (9 mg; prinos 69%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (ESI): 608,6 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,45(s, 1H), 8,01(s, 1H), 7,39(s, 1H), 6,56(brs, 1H), 6,11(s, 1H), 4,29(d, 2H), 3,85(brs, 2H), 3,83(s, 3H), 3,63(brs, 3H), 3,22(t, 2H), 3,03-3,07(m, 2H), 2,93-2,99(m, 2H), 2,79-2,82(m, 2H), 2,34-2,68(brs, 8H), 2,19(s, 3H), 1,64-1,67(brd, 2H), 1,50-1,52(m, 2H), 1,24-1,26(brd, 2H), 1,06(t, 3H), 0,98(brs, 6H), 0,83(t, 3H).
Primer 6
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(morfolinometil)benzofuran-4-karboksamid
[0139]
Korak 1
Metil 6-bromo-5-etil-2-formilbenzofuran-4-karboksilat
[0140] Metil 6-bromo-5-etilbenzofuran-4-karboksilat 1g (260 mg; 0,92 mmol) je rastvoren u 8 mL tetrahidrofurana. Smeša je ohlađena do -70°C, pa je u atmosferi argona u kapima dodat 2,0 M litijumdiizopropilamid (0,92 mL; 1,84 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata, nakon čega je dodat 4-formilmorfolin (158 mg; 1,38 mmol). Reakciona smeša je dalje lagano zagrejana do sobne temperature i u višku je dodat amonijum-hlorid. Smeša je dobro promešana i ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 6-bromo-5-etil-2-formilbenzofuran-4-karboksilat 6a (80 mg; prinos 48%), kao žuta i bela čvrsta supstanca.
Korak 2
Metil 6-bromo-5-etil-2-(hidroksimetil)benzofuran-4-karboksilat
[0141] Metil 6-bromo-5-etil-2-formilbenzofuran-4-karboksilat 6a (80 mg; 0,26 mmol)) je rastvoren u 4 mL metanola i 0,5 mL tetrahidrofurana, nakon čega je na sobnoj temperaturi u serijama dodavan natrijum borhidrid (20 mg; 0,51 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 3 minuta. Po završetku reakcije, dodati su etil acetat i zasićeni rastvor natrijum bikarbonata. Dve faze su razdvojene i smeša je ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, metil 6-bromo-5-etil-2-(hidroksimetil)benzofuran-4-karboksilat 6b (80 mg), kao bela čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 3
Metil 6-bromo-5-etil-2-(morfolinometil)benzofuran-4-karboksilat
[0142] Sirovi metil 6-bromo-5-etil-2-(hidroksimetil)benzofuran-4-karboksilat 6b (80 mg; 0,26 mmol) je rastvoren u 5 mL dihlormetana, nakon čega su dodati metansulfonil hlorid (45 mg; 0,38 mmol) i trifluorosirćetna kiselina (130 mg; 1,29 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 12 sati. Smeša je dalje koncentrovana pod sniženim pritiskom, pa su dodati N,N-dimetilformamid (5 ml), kalijum karbonat (71 mg; 0,51 mmol) i morfolin (40 mg; 0,51 mmol). Reakcioni sistem je zatim mešan na 80°C tokom 1 sata. Po završetku reakcije, dodata je voda i smeša je ekstrahovana tri puta sa etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 6-bromo-5-etil-2-(morfolinometil)benzofuran-4-karboksilat 6c (65 mg; prinos 64%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (ESI):382,0 [M+1]
Korak 4
Metil 5-etil-2-(morfolinometil)-6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat
[0143] Metil 6-bromo-5-etil-2-(morfolinometil)benzofuran-4-karboksilat 6c (90 mg; 0,24 mmol), tetrahidro-2H-piran-4-amin (36 mg; 0,35 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum (22 mg; 0,02 mmol), (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftalen (30 mg; 0,05 mmol) i cezijum karbonat (230 mg; 0,71 mmol) su rastvoreni u 5 mL toluena. Smeša je zatim mešana tokom 12 sati na 100°C. Po završetku reakcije, smeša je profiltrirana kroz sloj celita. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 5-etil-2-(morfolinometil)-6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karbo ksilat 6d (85 mg; prinos 89%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (LC-MS): 401,2 [M+1]
Korak 5
Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(morfolinometil)benzofuran-4-karboksilat
[0144] Metil 5-etil-2-(morfolinometil)-6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino) benzofuran-4-karboksilat 6d (85 mg; 0,21 mmol) je rastvoren u 5 mL 1,2-dihloretana, pa su dodati acetaldehid (93 mg; 2,1 mmol) i sirćetna kiselina (63 mg; 1,06 mmo). Smeša je zatim mešana tokom 2 sata, pa je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (133 mg; 0,63 mmol). Smeša je dalje mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, neutralisan zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovan etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(morfolinometil)benzofuran-4-k arboksilat 6e (75 mg; prinos 82%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (LC-MS):344,1 [M-86]
Korak 6
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(morfolinometil)benzofuran-4-karboksilna kiselina
[0145] Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(morfolinometil)benzofuran-4-karboksilat 6e (75 mg; 0,17 mmol) je rastvoren u 1 mL tetrahidrofurana i 3 mL metanola, nakon čega je dodato 3 mL 4M rastvora natrijum hidroksida. Smeša je zatim mešana na 60°C tokom 12 sati. Po završetku reakcije, dodata je koncentrovana hlorovodonična kiselina da bi se pH reakcionog rastvora podesio na 4. Smeša je zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je ispran metanolom i profiltriran da bi se uklonila bela čvrsta supstanca. Filtrat je dalje koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(morfolinometil)benzofuran-4-k arboksilna kiselina 6f (71 mg), kao bela čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 7
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(morfolinometil)benzofuran-4-karboksamid
[0146] Sirovi 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(morfolinometil)benzofuran-4-k arboksilna kiselina 6f (45 mg; 0,11 mmol) je rastvoren u 5 mL N,N-dimetilformamida, pa su dodati 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid (31 mg; 0,16 mmol), 1-hidroksibenzotriazol (22 mg; 0,16 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (70 mg; 0,54 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata i dodat je 3-(aminometil)-4-metoksi-6-metilpiridin-2(1H)-on hidrohlorid 1o (33 mg; 0,16 mmol). Smeša je dalje mešana 36 sati na sobnoj temperaturi. Po završetku reakcije, u višku je dodata voda, pa je reakcioni rastvor ekstrahovan smešom dihlorometana i metanola (V:V=8:1). Organske faze su spojene, isprane vodom i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-d ihidropiridin-3-il)metil)-2-(morfolinometil)benzofuran-4-karboksamid 6 (35 mg; prinos 57%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (ESI): 567,4 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,43(s, 1H), 7,99(t, 1H), 7,39(s, 1H), 6,54(s, 1H), 6,10(s, 1H), 4,28(d, 2H), 3,84(brs, 2H), 3,82(s, 3H), 3,59(s, 2H), 3,55-3,57(m, 4H), 3,21(t, 2H), 3,02-3,07(m, 2H), 2,92-2,97(m, 1H), 2,78-2,83(m, 2H), 2,43(brs, 4H), 2,18(s, 3H), 1,64-1,67(brd, 2H), 1,45-1,55(m, 2H), 1,05(t, 3H), 0,82(t, 3H).
Primer 7
2-((4,4-Difluoropiperidin-1-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amin o)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karbo ksamid
Korak 1
Metil 2-((4,4-difluoropiperidin-1-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat
[0148] Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-formilbenzofuran-4-karboksilat 1j (50 mg; 0,14 mmol), 4,4-difluoropiperidin hidrohlorid (33 mg; 0,21 mmol) i sirćetna kiselina (42 mg; 0,49 mmol) su dodati u 5 mL metanola. Smeša je zatim mešana tokom 1 sata, a zatim su dodata molekulska sita i natrijum triacetoksiborohidrid (88 mg; 0,42 mmol). Smeša je dalje mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Po završetku reakcije, smeša je neutralisana zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana smešom dihlorometana i metanola (V:V=5:1). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 2-((4,4-difluoropiperidin-1-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 7a (25 mg; prinos 45%) u vidu bezbojnog ulјa.
MS m/z (ESI): 465,1 [M+1]
Korak 2
2-((4,4-Difluoropiperidin-1-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amin o)benzofuran-4-karboksilna kiselina
[0149] Metil 2-((4,4-difluoropiperidin-1-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 7a (20 mg; 0,043 mmol) je rastvoren u 1 mL tetrahidrofurana i 3 mL metanola, nakon čega je dodato 3 mL 4M rastvora natrijum hidroksida. Smeša je zatim mešana tokom 12 sati na 60°C. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je neutralisan koncentrovanom hlorovodoničnom kiselinom i dalje koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u smeši dihlorometana i metanola (V:V=5:1) i profiltriran. Dobijeni kolač je ispran smešom dihorometana i metanola (V:V=5:1). Filtrati su spojeni i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 2-((4,4-difluoropiperidin-1-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilna kiselina 7b (20 mg), kao bela čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 3
2-((4,4-Difluoropiperidin-1-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amin o)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksamid
[0150] Sirova 2-((4,4-difluoropiperidin-1-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilna kiselina 7b (20 mg; 0,044 mmol) je rastvorena u 5 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su dodati 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid (13 mg; 0,066), 1-hidroksibenzotriazol (9 mg; 0,066 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (29 mg; 0,22 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata, pa je dodat 3-(aminometil)-4-metoksi-6-metilpiridin-2(1H)-on hidrohlorid 1o (12 mg; 0,058 mmol). Smeša je dalje mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Po završetku reakcije, u višku je dodata voda i reakcioni rastvor je ekstrahovan smešom dihlorometana i metanola (V:V=8:1). Organske faze su spojene, isprane vodom i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 2-((4,4-difluoropiperidin-1-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksa mid 7 (21 mg; prinos 78%) kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (ESI): 601,5 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,43(s, 1H), 8,00(t, 1H), 7,39(s, 1H), 6,55(s, 1H), 6,10(s, 1H), 4,28(d, 2H), 3,84(brs, 2H), 3,82(s, 3H), 3,69(s, 2H), 3,21(t, 2H), 3,02-3,07(m, 2H), 2,92-2,98(m, 1H), 2,78-2,83(m, 2H), 2,57(brs, 4H), 2,17(s, 3H), 1,95-1,98(m, 4H), 1,64-1,66(brd, 2H), 1,46-1,55(m, 2H), 1,05(t, 3H), 0,82(t, 3H).
Primer 8
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(pirolidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksamid
[0151]
Korak 1
Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(pirolidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksilat
[0152] Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-formilbenzofuran-4-karboksilat 1j (40 mg; 0,11 mmol), pirolidin (15 mg; 0,22 mmol) i sirćetna kiselina (30 mg; 0,55 mmol) su rastvoreni u 5 mL metanola. Smeša je zatim mešana tokom 1 sata, pa je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (70 mg; 0,33 mmol). Smeša je dalje mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Po završetku reakcije, smeša je neutralisana zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana etil acetatom.
Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(pirolidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksilat 8a (44 mg; prinos 95%) u vidu bezbojnog ulјa.
Korak 2
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(pirolidin-1-ilmetil)benzofuran -4-karboksilna kiselina
[0153] Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(pirolidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksilat 8a (56 mg; 0,13 mmol) je rastvoren u 1 mL tetrahidrofurana i 5 mL metanola, pa je dodato 2 mL 4M rastvora natrijum hidroksida. Smeša je zatim mešana tokom 12 sati na 60°C. Po završetku reakcije, dodata je koncentrovana hlorovodonična kiselina da bi se pH podesio na 4, nakon čega je smeša koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u smeši dihlorometana i metanola (V:V=5:1) i profiltriran. Dobijeni kolač je ispran smešom dihorometana i metanola (V:V=5:1). Filtrati su spojeni i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(pirolidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksilna kiselina 8b (50 mg), kao bela čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
MS m/z (ESI):399,0 [M-1]
Korak 3
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(pirolidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksamid
[0154] Sirova 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(pirolidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksilna kiselina 8b (25 mg; 0,60 mmol) je rastvorena u 3 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su dodati 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid (15 mg; 0,09 mmol), 1-hidroksibenzotriazol (12 mg; 0,09 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (387 mg; 3,0 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata, pa je dodat 3-(aminometil)-4-metoksi-6-metilpiridin-2(1H)-on hidrohlorid 1o (16 mg; 0,078 mmol). Smeša je dalje mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Po završetku reakcije, u višku je dodata voda i reakcioni rastvor je ekstrahovan smešom dihlorometana i metanola (V:V=8:1). Organske faze su spojene, isprane vodom i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-d ihidropiridin-3-il)metil)-2-(pirolidin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksamid 8 (12 mg; prinos 36%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (ESI): 551,6 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,43(s, 1H), 7,99(t, 1H), 7,37(s, 1H), 6,50(s, 1H), 6,10(s, 1H), 4,28(d, 2H), 3,84(brs, 2H), 3,82(s, 3H), 3,71(brs, 2H), 3,18-3,26(m, 4H), 3,03-3,07(m, 2H), 2,92-2,97(m, 1H), 2,78-2,81(m, 2H), 2,17(s, 3H), 1,70(brs, 4H), 1,64(brs, 2H), 1,46-1,54(m, 2H), 1,23(brs, 2H), 1,05(t, 3H), 0,82(t, 3H)).
Primer 9
N-((4,6-Dimetil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-izopropilpiperidin-4-il)benzofuran-4-karboksamid
[0155]
Korak 1
Metil 2-bromo-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat
[0156] Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 1i (1 g; 3,0 mmol) je rastvoren u 15 mL tetrahidrofurana, pa je u kapima dodato 1,8 mL 2M litijum-diizopropilamida na -70°C. Smeša je zatim mešana 90 minuta, nakon čega je dodat 1,2-dibromotetrahloroetan (978 mg; 3 mmol). Reakcioni rastvor je dalje mešan tokom 1 sata i zagrejan do sobne temperature. Potom je dodat rastvor amonijum-hlorida i smeša je ekstrahovana etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 2-bromo-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 9a (320 mg; prinos 40%) u vidu žutog ulja.
Korak 2
terc-Butil 4-(5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-4-(metoksikarbonil) benzofuran-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat
[0157] Metil 2-bromo-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 9a (1,4 g; 3,4 mmol), terc-butil 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (1,6 g; 5,1 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum (312 mg; 0,34 mmol), 2-dicikloheksilfosfino-2',4',6'-triizopropilbifenil (325 mg; 0,68 mmol) i cezijum karbonat (3,4 g; 10,2 mmol) su pomešani sa 50 mL smeše 1,4-dioksana i vode (V:V=4:1). Smeša je zatim zagrejana do 80°C i mešana tokom 16 sati. Reakcioni rastvor je potom profiltriran kroz sloj celita i ispran etil acetatom. Filtratu je dodata voda, razdvojene su dve faze i vodena faza je ekstrahovana etil acetatom. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, terc-butil 4-(5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-4-(metoksikarbonil) benzofuran-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat 9b (1,67 g; prinos 95%) u vidu lјubičastog ulјa.
Korak 3
terc-Butil 4-(5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-4-(metoksikarbonil)benzofuran-2-il)piperidin-1-karboksilat
[0158] terc-Butil 4-(5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-4-(metoksikarbonil)benzofuran-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat 9b (1,7 g; 3,3 mmol) je rastvoren u 23 mL smeše metanola i tetrahidrofurana (V:V=20:3), a zatim je dodat Pd/C (200 mg; 10%). Reakcioni sistem je potom produvan tri puta sa vodonikom i mešan tokom 1 sata. Reakcioni rastvor je dalje profiltriran kroz sloj celita. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, terc-butil 4-(5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-4-(metoksikarbonil)benzofuran-2-il)piperidin-1-karboksilat 9c (1,6 g; prinos 94%), u vidu svetlo žutog ulja.
MS m/z (ESI): 515,0 [M+1]
Korak 4
Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-4-il)benzofuran-4-karboksilat 2,2,2-trifluoroacetat
[0159] terc-Butil 4-(5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-4-(metoksikarbonil)benzofuran-2-il)piperidin-1-karboksilat 9c (1,6 g; 3,3 mmol) je rastvoren u 20 mL dihlorometana, nakon čega je dodato 4 mL trifluorosirćetne kiseline. Smeša je zatim mešana tokom 2 sata i dalje je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-4-il)benzofuran-4-karbo ksilat 2,2,2-trifluoroacetat 9d (1,3 g) u vidu svetlo žutog ulјa koje je direktno upotrebljeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
MS m/z (ESI): 415,3 [M+1]
Korak 5
Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-izopropilpiperidin-4-il)benzofuran-4-karboksilat
[0160] Sirovi metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperidin-4-il)benzofuran-4-karbo ksilat 2,2,2-trifluoroacetat 9d (1,3 g; 3,1 mmol) je rastvoren u 30 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega je dodat kalijum karbonat (1,3 g; 8,4 mmol). Smeša je zatim mešana 10 minuta, pa su dodati 2-bromopropan (575 mg; 4,7 mmol) i kalijum jodid (261 mg; 1,5 mmol). Smeša je dalje mešana tokom 2 sata na 70°C, nakon čega je dodata voda i reakcioni rastvor je ekstrahovan smešom dihlorometana i metanola (V:V=5:1). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-izopropilpiperidin-4-il)benzofu ran-4-karboksilat 9e (1,4 g; prinos 90%) u vidu bezbojnog ulјa.
MS m/z (ESI): 457,0 [M+1]
Korak 6
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-izopropilpiperidin-4-il)benzofu ran-4-karboksilna kiselina
[0161] Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-izopropilpiperidin-4-il)benzofuran-4-karboksilat 9e (1,1 g; 2,4 mmol) je rastvoren u 30 mL metanola, pa je dodato 5 mL 4M rastvora natrijum hidroksida. Smeša je zatim mešana tokom 16 sati na 60°C, nakon čega je dodata koncentrovana hlorovodonična kiselina da bi se pH reakcionog rastvora podesio na 4. Smeša je potom koncentrovana pod sniženim pritiskom, a ostatak je rastvoren u mešavini dihlormetana i metanola (V:V=5:1) i profiltriran. Dobijeni kolač je ispran smešom dihlorometana i metanola (V:V=5:1). Filtrati su spojeni i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-izopropilpiperidin-4-il)benzofu ran-4-karboksilna kiselina 9f (1,4 g), kao bela čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
MS m/z (ESI): 443,3 [M+1]
Korak 7
N-((4,6-Dimetil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-izopropilpiperidin-4-il)benzofuran-4-karboksamid
[0162] Sirovi 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-izopropilpiperidin-4-il)benzofu ran-4-karboksilna kiselina 9f (1,1 g; 2,5 mmol) je rastvorena u 20 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su dodati 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid (715 mg; 3,7 mmol), 1-hidroksibenzotriazol (510 mg; 3,7 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (1,6 g; 12,5 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata, pa je dodat 3-(aminometil)-4,6-dimetilpiridin-2(1H)-on hidrohlorid 2a (470 mg; 2,5 mmol). Smeša je dalje mešana tokom 16 sati. Po završetku reakcije, u višku je dodata voda i reakcioni rastvor je ekstrahovan smešom dihlorometana i metanola (V:V=8:1). Organske faze su spojene, isprane vodom i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, N-((4,6-dimetil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-izopropilpiperidin-4-il)benzofuran-4-karboksamid 9 (850 mg; prinos 59%), kao bela čvrsta supstanca. MS m/z (ESI): 577,7 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,50(s, 1H), 8,16(t, 1H), 7,38(s, 1H), 6,37(brs, 1H), 5,87(s, 1H), 4,31(d, 2H), 3,82(d, 2H), 3,21(t, 2H), 3,01-3,07(m, 4H), 2,91-2,96(m, 1H), 2,79-2,81(m, 2H), 2,24(s, 3H), 2,17(brs, 2H), 2,12(s, 3H), 2,02(brs, 2H), 1,63-1,66(brd, 2H), 1,45-1,54(m, 2H), 1,25(brs, 6H), 1,01(t, 3H), 0,81(t, 3H).
Primer 10
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-izopropilpiperidin-4-il)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksamid
[0163]
[0164] Sirova 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-izopropilpiperidin-4-il)benzofu ran-4-karboksilna kiselina 9f (30 mg; 0,07 mmol) je rastvorena u 5 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su dodati 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid (20 mg; 0,1 mmol), 1-hidroksibenzotriazol (15 mg; 0,1 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (45 mg; 0,34 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata i dodat je 3-(aminometil)-4-metoksi-6-metilpiridin-2(1H)-on hidrohlorid 1o (21 mg; 0,1 mmol). Smeša je dalje mešana tokom 16 sati. Po završetku reakcije, u višku je dodata voda i reakcioni rastvor je ekstrahovan smešom dihlorometana i metanola (V:V=8:1). Organske faze su spojene, isprane vodom i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(1-izopropilpiperidin-4-il)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksamid 10 (31 mg; prinos 77%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (ESI): 593,3 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,44(s, 1H), 7,95(brs, 1H), 7,36(s, 1H), 6,37(brs, 1H), 6,11(s, 1H), 4,28(d, 2H), 3,84(brs, 2H), 3,82(s, 3H), 3,21(t, 3H), 3,01-3,06(m, 3H), 2,90-2,96(m, 2H), 2,77-2,83(m, 3H), 2,19(s, 3H), 2,01(brs, 4H), 1,63-1,67(brd, 2H), 1,45-1,53(m, 2H), 1,22(brs, 6H), 1,04(t, 3H), 0,81(t, 3H).
Primer 11
N-((4,6-Dimetil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-((4-(2-hidroksi-2-metilpropil)piperazin-1-il)metil)benzofur an-4-karboksamid 11
[0165]
Korak 1
Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-(piperazin-1-ilmetil)benzofuran-4-karboksilat 11a
[0166] 5a (60 mg; 0,12 mmol) je rastvoren u 5 mL dihlorometana, a zatim je dodato 0,5 mL trifluorosirćetne kiseline. Nakon mešanja tokom 2 sata, smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, neutralisana zasićenim rastvorom natrijum karbonata i ekstrahovana smešom dihlorometana i metanola. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 11a (45 mg), kao žuta čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 2
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-((4-(2-hidroksi-2-metilpropil)pi perazin-1-il)metil)benzofuran-4-karboksilna kiselina 11b
[0167] Sirovi 11a (25 mg; 0,06 mmol) je rastvoren u 5 mL etanola, pa su dodati 2,2-dimetiloksiran (6,5 mg; 0,09 mmol) i kalijum karbonat (17 mg; 0,12 mmol). Smeša je zatim mešana na 60°C tokom 12 sati. Po završetku reakcije, smeša je profiltrirana i dodata je 12M hlorovodonična kiselina da bi se pH podesio na 4. Smeša je dalje koncentrovana pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tečnom hromatografijom visokih performansi da bi se dobio jedinjenje iz naslova, 11b (15 mg; prinos 52%), kao bela čvrsta supstanca.
Korak 3
N-((4,6-Dimetil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-((4-(2-hidroksi-2-metilpropil)piperazin-1-il)metil)benzofur an-4-karboksamid 11
[0168] 11b (15 mg; 0,031 mmol) je rastvorena u 4 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su u prethodno navedeni rastvor dodati 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid (9 mg; 0,046 mmol), 1-hidroksibenzotriazol (7 mg; 0,046 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (20 mg; 0,155 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata i potom je u prethodno navedeni rastvor dodat 2a (9 mg; 0,046 mmol). Smeša je dalje mešana tokom 12 sati. Po završetku reakcije, u višku je dodata voda i reakcioni rastvor je ekstrahovan smešom dihlormetana i metanola (V:V=10:1) (10 mL). Organske faze su spojene, isprane vodom (20 mL) i zasićenim rastvorom natrijum hlorida (20 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 11 (13 mg; prinos 70%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (ESI): 622,7 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,48(brs, 1H), 8,17(t, 1H), 7,39(s, 1H), 6,48(s, 1H), 5,86(s, 1H), 4,32(d, 2H), 4,04(brs, 1H), 3,83(brd, 2H), 3,58(s, 2H), 3,21(t, 2H), 3,04(q, 2H), 2,91-2,97(m, 1H), 2,79(q, 2H), 2,56(brs, 4H), 2,45(brs, 4H), 2,23(s, 3H), 2,16(brs, 2H), 2,11(s, 3H), 1,63-1,66(m, 2H), 1,48-1,52(m, 2H), 1,00- 1,06(m, 9H), 0,82(t, 3H).
Primer 12
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-((4-metilpiperazin-1-il)metil)benzofuran-4-karboksa mid 12
[0169]
Korak 1
Metil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-((4-metilpiperazin-1-il)metil)benzofuran-4-karboksilat 12a
[0170] 5a (74 mg; 0,14 mmol) je rastvoren u 10 mL 1,2-dihloretana, nakopn čega je dodat 1,0 mL trifluorosirćetne kiseline. Nakon mešanja tokom 1 sata, smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Zatim su u ostatak sukcesivno dodati 5 mL metanola, formaldehid (61 mg; 1,4 mmol) i natrijum triacetoksiborohidrid (88 mg; 0,42 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 3 sata. Po završetku reakcije, smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, neutralisana sa 20 mL zasićenog rastvora natrijum bikarbonata i ekstrahovana smešom dihlorometana i metanola (V:V=8:1) (10 ml). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (20 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 12a (60 mg; prinos 97%) u vidu žutog ulja.
Korak 2
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-((4-metilpiperazin-1-il)metil)b enzofuran-4-karboksilna kiselina 12b
[0171] 12a (60 mg; 0,13 mmol) je rastvoren u 4 mL metanola, pa je dodato 4 mL 20% rastvora natrijum hidroksida. Smeša je zatim mešana tokom 12 sati na 60°C. Po završetku reakcije, dodata je 12 M hlorovodonična kiselina da bi se pH podesio na 4. Smeša je zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom, a ostatak je rastvoren u 10 mL metanola i profiltriran. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 12b (55 mg), kao žuta čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 3
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-((4-metilpiperazin-1-il)metil)benzofuran-4-karboksa mid 12
[0172] Sirova 12b (25 mg; 0,058 mmol) je rastvorena u 3 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su dodati 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid (17 mg; 0,087 mmol), 1-hidroksibenzotriazol (12 mg; 0,087 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (38 mg; 0,29 mmol). Smeša je zatim mešana 2 sata, pa je u reakcioni rastvor dodat 1o (18 mg; 0,087 mmol). Smeša je dalje dodatno mešana tokom 12 sati. Po završetku reakcije, dodato je 20 mL vode i reakcioni rastvor je ekstrahovan smešom dihlorometana i metanola (V:V=8:1) (10 mL×3). Organske faze su spojene, isprane vodom (10 mL) i zasićenim rastvorom natrijum hlorida (10 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 12 (22 mg; prinos 65%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (ESI): 580,3 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,43(brs, 1H), 7,99(s, 1H), 7,38(s, 1H), 6,56(s, 1H), 6,10(s, 1H), 4,28(d, 2H), 3,85(brs, 2H), 3,82(s, 3H), 3,63(s, 2H), 3,21(t, 2H), 3,02-3,07(m, 2H), 2,92-2,97(m, 1H), 2,79-2,81(m, 2H), 2,58(brs, 4H), 2,40(brs, 4H), 2,18(s, 3H), 1,64-1,66(m, 2H), 1,46-1,55(m, 2H), 1,05(t, 3H), 0,82(t, 3H).
Primer 13
2-((Dimetilamino)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-m etoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksamid 13
[0173]
Korak 1
Metil 2-((dimetilamino)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 13a
[0174] 1j (30 mg; 0,084 mmol) je rastvoren u 5 mL metanola, nakon čega je dodat dimetilamin hidrohlorid (14 mg; 0,17 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata i dodat je natrijum triacetoksiborohidrid (53 mg; 0,25 mmol). Smeša je dalje mešana tokom 12 sati. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, neutralisan zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovan smešom dihlormetana i metanola. Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 13a (30 mg; prinos 90%) u vidu žutog ulja.
Korak 2
2-((Dimetilamino)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofur an-4-karboksilna kiselina 13b
[0175] 13a (30 mg; 0,077 mmol) je rastvoren u 3 mL etanola i 1 mL tetrahidrofurana, nakon čega je dodato 5 mL 2N rastvora natrijum hidroksida. Smeša je zatim mešana tokom 12 sati na 60°C. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je podešen do slabe kiselosti sa koncentrovanom hlorovodoničnom kiselinom. Smeša je zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom, a ostatak je rastvoren u mešavini dihlormetana i metanola (V:V=1:1) i profiltriran da bi se uklonile neorganske soli. Filtrat je dalje koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 13b (25 mg), kao žuto ulјe koje je direktno upotrebljeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 3
2-((Dimetilamino)metil)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-m etoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksamid 13
[0176] Sirova 13b (15 mg; 0,040 mmol) je rastvorena u 3 mL N,N-dimetilformamida, pa su dodati 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid (7,7 mg; 0,04 mmol), 1-hidroksibenzotriazol (8 mg; 0,060 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (26 mg; 0,20 mmol). Smeša je zatim mešana 0,5 sata i dalje je dodat 1o (11 mg; 0,052 mmol). Smeša je dalje mešana tokom 12 sati. Po završetku reakcije, u višku je dodata voda i reakcioni rastvor je ekstrahovan smešom dihlorometana i metanola (V:V=8:1) (10 mL). Organske faze su spojene, isprane vodom (10 mL) i zasićenim rastvorom natrijum hlorida (10 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 13 (7 mg; prinos 30%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (ESI): 525,5 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,44(brs, 1H), 8,00(brs, 1H), 7,37(s, 1H), 6,51(s, 1H), 6,10(s, 1H), 4,28(d, 2H), 3,85(brs, 2H), 3,82(s, 3H), 3,52(s, 2H), 3,21(t, 2H), 3,02-3,06(m, 2H), 2,92-2,96(m, 1H), 2,77-2,83(m, 2H), 2,19(s, 6H), 2,17(s, 3H), 1,63-1,67(m, 2H), 1,46-1,53(m, 2H), 1,06(t, 3H), 0,82(t, 3H).
Primer 14
2-Ciklopentil-N-((4,6-dimetil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-etil-6-(eti l(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksamid 14
[0177]
Korak 1
Metil 2-(ciklopen-1-en-1-il)-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 14b
[0178] 9a (70 mg; 0,17 mmol), 2-(ciklopent-1-en-1-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan 14a (40 mg; 0,20 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum (16 mg; 0,017 mmol), 2-dicikloheksilfosfino-2',4',6'-triizopropilbifenil (16 mg; 0,034 mmol) i natrijum karbonat (52 mg; 0,51 mmol) su rastvoreni u 5 mL toluena. Smeša je zatim mešana tokom 12 sati na 100°C, u atmosferi argona. Po završetku reakcije, smeša je profiltrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 14b (50 mg; prinos 75%), u vidu žutog ulja.
Korak 2
Metil 2-ciklopentil-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 14c
[0179] 14b (75 mg; 0,19 mmol) je rastvoren u 5 mL metanola, pa je dodato 20 mg 10% Pd/C. Reakcioni sistem je zatim produvan tri puta sa vodonikom i mešan tokom 1 sata. Po završetku reakcije, smeša je profiltrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 14c (55 mg; prinos 73%), u vidu bezbojnog ulјa.
Korak 3
2-Ciklopentil-5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilna kiselina 14d
[0180] 14c (55 mg; 0,14 mmol) je rastvoren u 5 mL smeše metanola i tetrahidrofurana (V:V=3:2), nakon čega je dodato 2 mL 2N rastvora natrijum hidroksida. Smeša je zatim mešana tokom 12 sati na 60°C. Po završetku reakcije, smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se uklonili organski rastvarači, neutralisana je sa 12M hlorovodoničnom kiselinom da se pH podesio na 3 i ekstrahovana je sa etil acetatom (10 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (10 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 14d (45 mg; prinos 85%)) u vidu bezbojnog ulјa.
Korak 4
2-Ciklopentil-N-((4,6-dimetil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-etil-6-(eti l(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksamid 14
[0181] 14d (15 mg; 0,065 mmol) je rastvorena u 4 mL N,N-dimetilformamida, pa su u reakcioni rastvor dodati 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid (20 mg; 0,097 mmol), 1-hidroksibenzotriazol (15 mg; 0,097 mmol) i N,N-dizopropiletilamin (50 mg; 0,33 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata i dodat je 2a (18 mg; 0,097 mmol). Smeša je potom mešana tokom 12 sati. Po završetku reakcije, dodato je 20 mL vode, i reakcioni rastvor je ekstrahovan smešom dihlorometana i metanola (V:V=8:1) (10 mL×3). Organske faze su spojene, sukcesivno isprane vodom i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 14 (18 mg; prinos 53%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (ESI): 520,5 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,49(brs, 1H), 8,09(s, 1H), 7,35(s, 1H), 6,30(s, 1H), 5,87(s, 1H), 4,31(d, 2H), 3,82(brd, 2H), 3,16-3,23(m, 3H), 3,03(q, 2H), 2,90-2,96(m, 1H), 2,79(q, 2H), 2,24(s, 3H), 2,11(s, 3H), 2,00(brd, 2H), 1,67(brs, 8H), 1,43-1,53(m, 2H), 1,01(t, 3H), 0,81(t, 3H).
Primer 15
N-((4,6-Dimetil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metil-2-(1-metilpiperidin-4-il)benzofuran-4-karboksamid
[0182]
Korak 1
Metil 2-bromo-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metilbenzofuran-4-karboksilat 15a
[0183] 4g (330 mg; 1,04 mmol) je rastvoren u 6 mL tetrahidrofurana, pa je na -70°C u kapima dodato 0,63 mL 2M litijum diizopropilamida u atmosferi argona. Smeša je zatim mešana 1 sat i dalje je dodato 20 mL prethodno pripremlјenog rastvora 1,2-dibromotetrahloroetana (170 mg; 0,53 mmol) u tetrahidrofuranu. Smeša je lagano zagrejana, pa mešana tokom 1 sata. Po završetku reakcije, dodato je 5 mL zasićenog rastvora amonijum hlorida da bi se reakcija prekinula i smeša je ekstrahovana etil acetatom (10 ml×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (20 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 15a (145 mg; prinos 35%), u vidu žutog ulja.
Korak 2
terc-Butil 4-(6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-4-(metoksikarbonil)-5-metilbenzofuran-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat 15b
[0184] 15a (90 mg; 0,23 mmol), terc-butil 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-5,6-dihidropiridin-1(2H)-karboksilat (105 mg; 0,34 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum (21 mg; 0,023 mmol), 2-dicikloheksilfosfino-2',4',6'-triizopropilbifenil (22 mg; 0,045 mmol) i natrijum karbonat (72 mg; 0,68 mmol) su rastvoreni u 5 mL smeše 1,4-dioksana i vode (V:V=4:1). Smeša je zatim mešana tokom 12 sati na 90°C u atmosferi argona. Po završetku reakcije, smeša je profiltrirana kroz sloj celita i dve faze su razdvojene. Organska faza je sukcesivno isprana vodom i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušena upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirana. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 15b (100 mg; prinos 88%), kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 3
terc-Butil 4-(6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-4-(metoksikarbonil)-5-metilbenzofuran-2-il)piperidin-1-karboksilat 15c
[0185] 15b (100 mg; 0,2 mmol) je rastvoren u 6 mL etanola, nakon čega je dodato 30 mg 10% Pd/C. Reakcioni sistem je zatim tri puta produvavan vodonikom i mešan tokom 0,5 sata. Reakcioni ratvor je dalje profiltriran i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 15c (80 mg; prinos 80%), u vidu žutog ulja.
Korak 4
Metil 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metil-2-(1-metilpiperidin-4-il)benzofuran-4-karboksilat 15d
[0186] 15c (80 mg; 0,16 mmol) je rastvoren u 10 mL dihlorometana, nakon čega je dodat 1 mL trifluorosirćetne kiseline. Nakon mešanja od 1 sata, smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dalje je dodato 5 mL metanola i 5 mL formaldehida i smeša je mešana tokom 1 sata, pa je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (100 mg; 0,48 mmol). Nakon mešanja od 3 sata, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, neutralisan zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovan smešom dihlorometana i metanola (V:V=8:1). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida i osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata. Dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 15d (60 mg; prinos 90%), u vidu žutog ulja.
Korak 5
6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metil-2-(1-metilpiperidin-4-il)benzofu ran-4-karboksilna kiselina
[0187] 15d (30 mg; 0,072 mmol) je rastvoren u 5 mL metanola i 2 mL tetrahidrofurana, nakon čega je dodato 2 mL 4M rastvora natrijum hidroksida. Smeša je zatim mešana tokom 12 sati na 60°C. Dalje je dodata 12 M hlorovodonična kiselina da bi se pH reakcionog rastvora podesio na 4 i smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u 10 mL metanola i profiltriran. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 15e (30 mg), kao bela čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 6
N-((4,6-Dimetil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-6-(etil(tetrahidro-2H-piran -4-il)amino)-5-metil-2-(1-metilpiperidin-4-il)benzofuran-4-karboksamid 15
[0188] Sirova 15e (25 mg; 0,06 mmol) je rastvorena u 3 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su dodati 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil)karbodiimid (18 mg; 0,094 mmol), 1-hidroksibenzotriazol (15 mg; 0,094 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (40 mg; 0,31 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata i dalje je dodat 2a (18 mg; 0,094 mmol). Smeša je potom mešana tokom 12 sati. Po završetku reakcije, dodato je 20 mL vode, pa je reakcioni rastvor ekstrahovan smešom dihlormetana i metanola.
Organske faze su spojene, sukcesivno isprane vodom i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 15 (24 mg; prinos 73%), kao bela čvrsta supstanca. MS m/z (ESI): 535,5 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,50(brs, 1H), 8,10(s, 1H), 7,34(s, 1H), 6,29(s, 1H), 5,87(s, 1H), 4,31(d, 2H), 3,81(brd, 2H), 3,22(t, 2H), 3,03(q, 2H), 2,91-2,94(m, 1H), 2,80(brd, 2H), 2,67(brs, 1H), 2,23(s, 3H), 2,22(s, 3H), 2,18(s, 3H), 2,11(s, 3H), 1,92-2,02(m, 4H), 1,61-1,64(m, 4H), 1,45-1,48(m, 2H), 0,78(t, 3H).
Primer 16
N-((4,6-Dimetil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-6-(etil(tetrahidro-2H-piran -4-il)amino)-5-metil-2-(1-metil-1,2,3,6-tetrahidropiridin-4-il)benzofuran-4-karboksamid 16
[0189]
[0190] U skladu sa putem sinteze iz Primera 12, početni materijal 5a je zamenjen sa 15b i 1o je zamenjen sa 2a, čime je pripremljeno jedinjenje iz naslova, 16 (18 mg; prinos 62%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (ESI): 533,5 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,51(brs, 1H), 8,17(t, 1H), 7,35(s, 1H), 6,58(s, 1H), 6,35(s, 1H), 5,87(s, 1H), 4,31(d, 2H), 3,81(brd, 2H), 3,19-3,25(m, 3H), 3,02-3,07(m, 3H), 2,90-2,97(m, 1H), 2,43(brs, 2H), 2,23(s, 3H), 2,22(s, 3H), 2,11(s, 3H), 1,62-1,64(m, 2H), 1,44-1,51(m, 2H), 1,17(t, 2H), 0,79(t, 3H).
Primer 17
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-2-(1-metilpiperidin-4-il)benzofuran-4-karboksamid 17
[0192] U skladu sa putem sinteze iz Primera 12, početni materijal 5a je zamenjen sa 9c, čime je pripremljeno jedinjenje iz naslova, 17 (17 mg; prinos 50%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (ESI): 565,2 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,43(brs, 1H), 7,94(brs, 1H), 7,35(s, 1H), 6,39(brs, 1H), 6,10(s, 1H), 4,27(d, 2H), 3,83(brs, 2H), 3,81(s, 3H), 3,20(t, 2H), 3,02(q, 2H), 2,90-2,95(m, 2H), 2,79(q, 2H), 2,44(brs, 4H), 2,18(s, 3H), 2,07(brs, 2H), 1,81(brs, 2H), 1,62-1,64(m, 2H), 1,43-1,52(m, 2H), 1,03(t, 3H), 0,80(t, 3H).
Primer 18
6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidro-piridin-3-il)metil)-5-metilbenzofuran-4-karboksamid 18
[0193]
Korak 1
6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metilbenzofuran-4-karboksilna kiselina 18a
[0194] 4g (45 mg; 0,142 mmol) je rastvoren u 4 mL smeše metanola i vode (V:V=1:1), a potom je dodat natrijum hidroksid (60 mg; 1,58 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 12 sati na 70°C. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se uklonio metanol. Dalje je dodata 10% hlorovodonična kiselina da bi se pH podesio na 3 i smeša je ekstrahovana etil acetatom (10 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (20 mL×1) i osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 18a (40 mg; prinos 93%), kao bela čvrsta supstanca.
Korak 2
6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidro-piridin-3-il)metil)-5-metilbenzofuran-4-karboksamid 18
[0195] 18a (15 mg; 0,049 mmol) je rastvoren u 3 mL N,N-dimetilformamida, a potom su dodati N,N-diizopropiletilamin (18,9 mg; 0,147 mmol) i 2-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (27,9 mg; 0,0735 mmol). Reakcioni sistem je zatim mešan tokom 1 sata na 0°C. U atmosferi azota je dalje dodat 1o (12 mg; 0,0558 mmol). Smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Po završetku reakcije, dodato je 30 mL vode i smeša je ekstrahovana etil acetatom (10 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (20 mL×1), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 18 (4,4 mg; prinos 20%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (ESI): 454,2 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10,90(s, 1H), 7,43(s, 1H), 7,27(s, 1H), 6,76(s, 1H), 6,61(s, 1H), 5,85(s, 1H), 4,52(brs, 2H), 3,90-3,93(brd, 2H), 3,82(s, 3H), 3,28(t, 2H), 3,02-3,07(m, 2H), 2,91-2,95(m, 1H), 2,29(s, 3H), 1,83(s, 3H), 1,56-1,68(m, 4H), 0,83(t, 3H).
Primer 19
6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidro piridin-3-il)metil)-2,5-dimetilbenzofuran-4-karboksamid 19
[0196]
Korak 1
3-Bromo-2-metil-5-nitrobenzoeva kiselina 19b
[0197] 2-Metil-5-nitrobenzoeva kiselina (30 g; 0,166 mol, Bide) je rastvorena u 70 mL koncentrovane sumporne kiseline, pa je u serijama dodat N-bromosukcinimid (35,4 g; 0,199 mol). Reakcioni sistem je zatim mešan tokom 3 sata na 60°C. Po završetku reakcije, dobijen je reakcioni rastvor jedinjenja iz naslova, 19b, koje je direktno upotrebljeno u sledećem koraku bez dodatnog tretmana.
Korak 2
Metil 3-bromo-2-metil-5-nitrobenzoat 19c
[0198] Prethodno navedeni reakcioni rastvor 19b je dodat u 100 mL metanola i neprestano mešan tokom 6 sati. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je presut u 1L vode i ekstrahovan etil acetatom (100 mL×3). Organske faze su spojene, sukcesivno isprane vodom (100 mL) i zasićenim rastvorom natrijum hlorida (200 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 19c (53 g), kao bela čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 3
Metil 5-amino-3-bromo-2-metilbenzoat 19d
[0199] Sirovi 19c (52 g; 0,189 mol) je rastvoren u 200 mL etanola, nakon čega je dodato gvožđe u prahu (31,7 g; 0,569 mol). Potom je polako ukapavano 16 mL 4 N hlorovodonične kiseline, pa je smeša zagrejana do 75°C i mešana 4 sata. Po završetku reakcije, dodato je 200 mL vode i smeša je ekstrahovana etil acetatom (100 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (200 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 19d (27 g; prinos 59%), kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 4
Metil 3-bromo-5-hidroksi-2-metilbenzoat 19e
[0200] 19d (5 g; 0,02 mol) je rastvoren u 50 mL 10% sumporne kiseline, nakon čega je na 0°C dodato 10 mL prethodno pripremlјenog rastvora natrijum nitrita (1,55 g; 0,023 mol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata, pa je dodato 50 mL 50% sumporne kiseline. Smeša je dalje zagrejana do 100°C i mešana tokom 1 sata. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je ekstrahovan etil acetatom (50 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (100 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 19e (1,4 g; prinos 29%), kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 5
Metil 3-bromo-2-metil-5-(prop-2-in-1-iloksi)benzoat 19f
[0201] 19e (0,5 g; 2,04 mmol) je rastvoren u 20 mL acetona, nakon čega su dodati 3-bromopropin (0,73 g; 6,12 mmol) i kalijum karbonat (0,85 g; 6,12 mmol). Reakcioni sistem je mešan na 80°C tokom 12 sati. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, pa je dodato 20 mL vode i smeša je ekstrahovana etil acetatom (10 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (20 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 19f (0,5 g; prinos 86,7%), kao žuta tečnost.
Korak 6
Metil 6-bromo-2,5-dimetilbenzofuran-4-karboksilat 19g
[0202] 19f (0,5 g; 1,76 mmol) i cezijum fluorid (0,79 g; 5,28 mmol) su dodati u 5 mL N,N-dietilanilina. Smeša je zatim mešana 2 sata na 200°C u mikrotalasnom reaktoru. Po završetku reakcije, dodato je 20 mL vode i smeša je ekstrahovana etil acetatom (20 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (20 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 19g (0,2 g; prinos 40%), u vidu žute tečnosti.
Korak 7
Metil 2,5-dimetil-6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 19h
[0203] 19h (0,2 g; 0,70 mmol), tetrahidro-2H-piran-4-amin (14 mg; 0,14 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum (64 mg; 0,07 mmol), (±)-2,2-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftalen (87,15 mg; 0,14 mmol) i cezijum karbonat (455 mg; 1,4 mmol) su rastvoreni u 5 mL toluena. Smeša je zatim mešana tokom 12 sati na 110°C u atmosferi azota. Po završetku reakcije, dodato je 10 mL vode i smeša je ekstrahovana etil acetatom (10 mL×3). Organske faze su spojene, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 19h (140 g; prinos 67%), kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 8
Metil 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2,5-dimetilbenzofuran-4-karboksilat 19i
[0204] 19h (90,0 g; 0,297 mmol), acetaldehid (39,2 mg; 0,89 mmol) i sirćetna kiselina (89,1 mg; 1,48 mmol) su rastvoreni u 8 mL metanola. Smeša je zatim mešana tokom 1 sata na 0°C i potom još 4 sata na sobnoj temperaturi u atmosferi azota, nakon čega je dodat natrijum cijanoborohidrid (55,9 mg; 0,891 mmol). Smeša je zatim dodatno mešana tokom 12 sati. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, dodato je 20 mL vode i smeša je ekstrahovana etil acetatom (10 ml×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (20 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 19i (60 mg; prinos 61%), kao bezbojna tečnost.
Korak 9
6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2,5-dimetilbenzofuran-4-karboksilna kiselina 19j
[0205] 19i (60 mg; 0,18 mmol) i kalijum hidroksid (50,6 mg; 0,90 mmol) su dodati u 4 mL smeše metanola i vode (V:V=1:1). Smeša je zatim mešana 16 sati na 75°C. Po završetku reakcije, smeša je ohlađena i dodata je 2N hlorovodonična kiselina da bi se pH reakcionog rastvora podesio na 3-4. Smeša je zatim ekstrahovana smešom dihlorometana i metanola (V:V=10:1) (10 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (20 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 19j (30 mg), kao žuta čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 10
6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidro piridin-3-il)metil)-2,5-dimetilbenzofuran-4-karboksamid 19
[0206] Sirova 19j (15 mg; 0,047 mmol) je rastvorena u 2 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su dodati N,N-diizopropiletilamin (18,3 mg; 0,14 mmol) i 2-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N' N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (47,7 mg; 0,125 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata na 0°C, pa je dodat 1o (11,58 mg; 0,057 mmol). Smeša je dalje mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Po završetku reakcije, dodato je 50 mL vode i smeša je ekstrahovana smešom dihlorometana i metanola (V:V=10:1) (10 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (20 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 19 (20 mg; prinos 91%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (ESI): 468,2 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 11,57(s, 1H), 7,19(s, 1H), 6,38(s, 1H), 5,93(s, 1H), 5,36(s, 1H), 4,64(d, 2H), 3,95(brs, 2H), 3,91(s, 3H), 3,28-3,33(m, 2H), 3,03-3,05(m, 2H), 2,92-2,96(m, 1H), 2,37(s, 3H), 2,34(s, 3H), 2,19(s, 3H), 1,69(brs, 2H), 1,25(brs, 2H), 0,85(t, 3H).
Primer 20
6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidro piridin-3-il)metil)-3,5-dimetilbenzofuran-4-karboksamid 20
[0207]
[0208] U skladu sa putem sinteze iz Primera 19, početni materijal 3-bromopropin upotrebljen u koraku 5 je zamenjen sa 1-bromopropan-2-onom i time je pripremljeno jedinjenje iz naslova 20 (17 mg; prinos 11%), kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z (ESI): 468,3 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 11,22(s, 1H), 7,27(s, 1H), 7,21(s, 1H), 6,94(s, 1H), 5,94(s, 1H), 4,61-4,62(brd, 2H), 3,92-3,95(brd, 2H), 3,89(s, 3H), 3,29(dt, 2H), 3,16-3,20(m, 3H), 2,29(s, 3H), 2,22(s, 3H), 2,11(s, 3H), 1,65(brs, 2H), 1,31(brs, 2H), 0,86(t, 3H).
Primer 21
6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidro-piridin-3-il)metil)-5-(trifluorometil)benzofuran-4-karboksamid
[0209]
Korak 1
Metil 3-bromo-5-(2,2-dietoksietoksi) benzoat 21b
[0210] Metil 3-bromo-5-hidroksibenzoat 21a (1,9 g; 8,23 mmol; pripremlјen postupkom opisanim u "Journal of Medicinal Chemistry, 2013, 56(8), 3217-3227") je rastvoren u 60 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su dodati 2-bromo-1,1-dietoksietan (3,23 g; 16,4 mmol) i cezijum karbonat (5,35 g; 16,4 mmol). Reakcioni sistem je zatim mešan 4 sata na 95°C. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je presut u ledenu vodu, ekstrahovan etil acetatom (50 mL×3), osušen upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltriran. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovo jedinjenje iz naslova, 21b (3,5 g), u vidu žutog ulja koje je direktno upotrebljeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 2
Metil 6-bromobenzofuran-4-karboksilat 21c
[0211] Polifosforna kiselina (5,46 g; 16,4 mmol) je dodata u 20 mL toluena. Smeša je zagrejana do 115°C, pa je uz mešanje dodato 40 mL prethodno pripremlјenog rastvora 21b (3,5 g; 10 mmol) u toluenu. Smeša je zatim mešana tokom 5 sati. Po završetku reakcije, smeša je presuta u ledenu vodu, neutralisana sa zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata, ekstrahovana etil acetatom (20 mL×3), osušena upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirana. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 21c (1,08 g; prinos 52%), kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 3
Metil 6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 21d
[0212] 21c (1,08 g; 4,25 mmol), tetrahidro-2H-piran-4-amin (0,644 g; 6,38 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum (393 mg; 0,43 mmol), (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftalen (267 mg; 0,43 mmol) i cezijum karbonat (2,6 g; 8,5 mmol) su rastvoreni u 60 mL toluena. Smeša je zatim mešana 36 sati u atmosferi azota. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je presut u ledenu vodu, ekstrahovan etil acetatom (30 mL×3), osušen upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltriran. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 21d (200 mg; prinos 17%), kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 4
Metil 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 21e
[0213] 21d (200 mg; 0,727 mmol), acetaldehid (160 mg; 3,64 mmol) i 0,2 mL sirćetne kiseline su rastvoreni u 4 mL metanola. Nakon mešanja od 24 sata, smeša je ohlađena do ispod 0°C. Dalje je dodat natrijum cijanoborohidrid (227 mg; 3,6 mmol) i smeša je prirodno zagrejana do sobne temperature. Reakcija je praćena upotrebom TLC postupka sve dok većina početnih materijala nije nestala. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je ohlađen do 0°C, a zatim je dodato 20 mL zasićenog rastvora natrijum bikarbonata da bi se reakcija zaustavila. Smeša je ekstrahovana etil acetatom (10 mL×3), osušena upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirana. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 21e (140 mg; prinos 64%), kao žuto-zelena čvrsta supstanca.
Korak 5
Metil 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-jodobenzofuran-4-karboksilat 21f
[0214] 21e (13 mg; 0,043 mmol) je rastvoren u 2 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su na 0°C dodati 5 kapi trifluorosirćetne kiseline i N-jodosukcinimid (12 mg; 0,052 mL). Smeša je zatim prirodno zagrejana do sobne temperature. Reakcija je praćena TLC postupkom sve dok većina početnih materijala nije nestala. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je ohlađen do 0°C, neutralisan zasićenim rastvorom natrijum karbonata i ekstrahovan etil acetatom. Organske faze su spojene, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 21f (16 mg; prinos 86%), u vidu žutog ulja.
Korak 6
Metil 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-(trifluorometil)benzofuran-4-karboksilat 21g
[0215] 21f (16 mg; 0,0373 mmol), bakar jodid (36 mg; 0,187 mmol) i metil fluorosulfonil difluoroacetat (140 mg; 0,75 mmol) su rastvoreni u 2 mL N,N-dimetilformamida. Smeša je zatim mešana tokom 12 sati na 80°C u atmosferi azota. Po završetku reakcije, smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 21g (10 mg; prinos 72%), kao žuto-zelena čvrsta supstanca.
Korak 7
6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-(trifluorometil)benzofuran-4-karboksilna kiselina 21h
[0216] 21g (10 mg; 0,027 mmol) je rastvoren u 4 mL smeše metanola i tetrahidrofurana (V:V=1:1), nakon čega je dodato 0,27 mL 2N rastvora natrijum hidroksida. Smeša je zatim mešana 4 sata na 60°C. Po završetku reakcije, smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom radi uklanjanja većine rastvarača. Dalje je ostatku na 0°C dodato 2 mL tetrahidrofurana, a potom je dodat i 1N hlorovodonična kiselina da bi se pH podesio na 3-4. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 21h (9 mg), kao žuta čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 8
6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidro-piridin-3-il)metil)-5-(trifluorometil)benzofuran-4-karboksamid 21
[0217] Sirova 21h (9 mg; 0,025 mmol) je rastvorena u 3 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su dodati 2-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-trametiluronijum heksafluorofosfat (14 mg; 0,041 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (17 mg; 0,135 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 20 minuta, pa je u reakcioni rastvor dodat 1o (8,3 mg; 0,041 mmol). Smeša je dodatno mešana 5 sati. Po završetku reakcije, dodato je 20 mL zasićenog rastvora natrijum hlorida i smeša je ekstrahovana etil acetatom (10 ml×3). Organske faze su spojene, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 21 (10 mg; prinos 78%), kao bela čvrsta supstanca.
MS (ESI) m/z: 508,3 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,98(brs, 1H), 7,53(m, 1H), 7,32(m, 1H), 6,92(s, 1H), 5,96(s, 1H), 4,65(d, 2H), 4,09-4,05(m, 2H), 3,92(s, 3H), 3,89-3,85(m, 1H), 3,55-3,50(m, 2H), 3,37(q, 2H), 2,27(s, 3H), 1,85-1,79(m, 4H), 1,20(t, 3H).
Primer 22
5-Hloro-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksamid
[0218]
Korak 1
Metil 3-bromo-2-hloro-5-nitrobenzoat 22b
[0219] Metil 2-hloro-5-nitrobenzoat (6,0 g; 27,8 mmol) je rastvoren u 30 mL koncentrovane sumporne kiseline, nakon čega je u prethodno pripremljen reakcioni rastvor dodat N-bromosukcinimid (5,2 g; 29,2 mmol). Reakcioni sistem je zatim mešan tokom 1 sata na 60°C. Po završetku reakcije, sistem reakcije je presut u 300 mL ledene vode i ekstrahovan etil acetatom (50 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (100 mL) i zasićenim rastvorom natrijum hlorida (100 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 22b (7,58 g), kao svetlo zelena čvrsta supstanca koja je upotrebljena direktno u sledećoj reakciji bez prečišćavanja.
Korak 2
Metil 5-amino-3-bromo-2-hlorobenzoat 22c
[0220] Sirovi 22b (7,5 g; 25 mmol) je rastvoren u 55 mL smeše etanola i vode (V:V=8:3), nakon čega je dodat amonijum hlorid (11,2 g; 203 mmol). Reakcioni sistem je potom zagrejan do 70°C, dodato je gvožđe u prahu (7,1 g; 127 mmol) i smeša je mešana tokom 2 sata. Po završetku reakcije, smeša je profiltrirana kroz sloj celita. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, neutralisan zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovan etil acetatom (50 ml×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (100 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 22c (5,0 g), kao žuta čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 3
Metil 3-bromo-2-hloro-5-jodobenzoat 22d
[0221] Sirovi 22c (7,0 g; 26,5 mmol) je rastvoren u 50 mL 40% sumporne kiseline i u 10 mL N,N-dimetilformamida. Smeša je zatim ohlađena do 0°C i dodato je 5 mL prethodno pripremlјenog rastvora natrijum nitrita (2,0 g; 29,1 mmol). Smeša je dalje mešana tokom 1 sata, nakon čega je u reakcioni rastvor dodato 50 mL prethodno pripremlјenog rastvora kalijum jodida (22 g; 132 mmol). Smeša je potom zagrejana do 70°C i mešana tokom 30 minuta. Po završetku reakcije, smeša je ekstrahovana etil acetatom (50 mL×3). Organske faze su spojene, isprane vodom (100 mL) i zasićenim rastvorom natrijum hlorida (100 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 22d (8,0 g; prinos 80%), kao svetlo žuta čvrsta supstanca.
Korak 4
3-Bromo-2-hloro-5-hidroksibenzoeva kiselina 22e
[0222] 22d (7,0g, 18,7 mmol) je rastvoren u 10 mL tetrahidrofurana, nakon čega je dodato 70 mL 4N rastvora natrijum hidroksida. Smeša je zatim mešana tokom 2 sata na 60°C, pa je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se uklonili organski rastvarači i dodat je bakar oksid (7,7 g; 53,5 mmol). Smeša je dalje mešana tokom 1 sata na 120°C u mikrotalasnom reaktoru. Po završetku reakcije, mešavina je profiltrirana. Filtrat je neutralisan sa 12M hlorovodoničnom kiselinom i ekstrahovan etil acetatom (100 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (100 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 22e (6,0 g), u vidu braon ulja koje je direktno upotrebljeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 5
Metil 3-bromo-2-hloro-5-hidroksibenzoat 22f
[0223] Sirova 22e (6,0 g; 24 mmol) je rastvorena u 30 mL metanola, nakon čega je u reakcioni rastvor u kapima dodato 2 mL koncentrovane sumporne kiseline. Reakcioni sistem je zatim mešan tokom 12 sati na 60°C. Po završetku reakcije, smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i rastvorena u 50 mL etil acetata. Dalje je dodato 100 mL vode i smeša je ekstrahovana etil acetatom (50 mL×3). Organske faze su spojene, sukcesivno isprane vodom (100 mL) i zasićenim rastvorom natrijum hlorida (100 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 22f (3,3 g; prinos 52%), kao bela čvrsta supstanca.
Korak 6
Metil 3-bromo-2-hloro-5-(2,2-dietoksietoksi)benzoat 22g
[0224] 22f (3,3 g; 12,5 mmol) je rastvoren u 30 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su dodati 2-bromo-1,1-dietoksietan (2,96 g; 15 mmol) i kalijum karbonat (3,4 g; 25 mmol). Smeša je zatim mešana na 120°C tokom 3 sata. Po završetku reakcije, dodato je 150 mL vode i smeša je ekstrahovana etil acetatom (50 mL×3). Organske faze su spojene, sukcesivno isprane vodom (100 mL) i zasićenim rastvorom natrijum hlorida (100 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 22 g (3,5 g; prinos 74%), u vidu bezbojnog ulјa.
Korak 7
Metil 6-bromo-5-hlorobenzofuran-4-karboksilat 22h
[0225] Polifosforna kiselina (1,0 g) je dodata u 15 mL toluena. Smeša je zagrejana do 100°C, pa je uz mešanje dodato 10 mL prethodno pripremlјenog rastvora 22g (780 mg; 2,1 mmol) u toluenu. Smeša je zatim mešana tokom 4 sata. Po završetku reakcije, supernatant je izdvojen, a u ostatak je dodata voda i smeša je ekstrahovana etil acetatom (20 mL×3). Etil acetatna faza i supernatant su spojeni, sukcesivno isprani zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (30 mL) i zasićenim rastvorom natrijum hlorida (100 mL), osušeni upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirani. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 22h (150 g; prinos 25%), kao svetlo žuta čvrsta supstanca.
Korak 8
Metil 5-hloro-6-((tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 22i
[0226] 22h (120 mg; 0,41 mmol), tetrahidro-2H-piran-4-amin (60 mg; 0,6 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum (38 g; 0,04 mmol), (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftalen (26 mg; 0,04 mmol) i cezijum karbonat (405 mg; 1,24 mmol) su rastvoreni u 2 mL toluena. Reakcioni sistem je zatim mešan tokom 16 sati na 80°C u atmosferi argona. Po završetku reakcije, smeša je profiltrirana kroz sloj celita. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 22i (125 mg; prinos 87%), kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 9
Metil 5-hloro-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 22j
[0227] 22i (50 mg; 0,16 mmol), acetaldehid (36 mg; 0,81 mmol) i sirćetna kiselina (49 mg; 0,81 mmol) su dodati u 5 mL 1,2-dihloretana. Smeša je zatim mešana 2 sata, pa je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (102 mg; 0,48 mmol). Smeša je dalje mešana tokom 12 sati. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, neutralisan zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovan etil acetatom (10 mL×3). Organske faze su spojene, sukcesivno isprane vodom (50 mL) i zasićenim rastvorom natrijum hlorida (50 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 22j (26 mg; prinos 50%), kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 10
5-Hloro-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilna kiselina 22k
[0228] 22j (51 mg; 0,16 mmol) je rastvoren u 3 mL smeše tetrahidrofurana i metanola (V:V=1:2), nakon čega je dodato 3 mL 2N rastvora natrijum hidroksida. Smeša je zatim mešana tokom 1 sata na 60°C. Po završetku reakcije, smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se uklonili organski rastvarači, nakon čega je dodata 12 M hlorovodonična kiselina da bi se pH reakcionog rastvora podesio na 5 i smeša je ekstrahovan etil acetatom (10 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (50 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 22k (42 mg), u vidu ulja crveno-smeđe boje koje je direktno upotrebljeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 11
5-Hloro-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksamid 22
[0229] Sirova 22k (8 mg; 0,025 mmol) je rastvorena u 1 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su u prethodno pripremljen rastvor dodati 2-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tatrametiluronijum heksafluorofosfat (14 mg; 0,037 mmol), N,N-diizopropiletilamin (16 mg; 0,12 mmol) i 1o (7 mg; 0,032 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 12 sati. Po završetku reakcije, dodato je 10 mL vode i reakcioni rastvor je ekstrahovan smešom dihlorometana i metanola (V:V=8:1) (10 mL×3). Organske faze su spojene, isprane vodom (50 mL) i zasićenim natrijum hloridom (50 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 22 (8 mg; prinos 70%), kao bela čvrsta supstanca.
MS (ESI) m/z: 474,3 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,46(brs, 1H), 8,17(s, 1H), 7,97(s, 1H), 7,56(s, 1H), 6,78(s, 1H), 6,10(s, 1H), 4,27(d, 2H), 3,85(brs, 2H), 3,82(s, 3H), 3,23(t, 2H), 3,11-3,15(m, 3H), 2,18(s, 3H), 1,66-1,69(m, 2H), 1,50-1,57(m, 2H), 0,83(t, 3H).
Primer 23
N-((4-Metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-metil-6-(metil(te trahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksamid
[0230]
Korak 1
Metil 5-metil-6-(metil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 23a
[0231] 4f (60 mg; 0,208 mmol) je rastvoren u 5 mL metanola, nakon čega su dodati formaldehid (18,7 mg; 0,623 mmol) i sirćetna kiselina (62,4 mg; 1,04 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata na 0°C, pa je zagrejana do sobne temperature. Smeša je dalje mešana tokom 12 sati, nakon čega je u prethodni rastvor dodat natrijum cijanoborohidrid (39,2 mg; 0,624 mmol). Reakciona smeša je zatim mešana tokom 6 sati. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, pa je dodato 20 mL vode i smeša je ekstrahovana etil acetatom (10 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (50 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 23a (50 mg; prinos 75%), kao bezbojna tečnost.
Korak 2
5-Metil-6-(metil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilna kiselina 23b
[0232] 23a (50 mg; 0,165 mmol) je rastvoren u 2 mL smeše metanola i vode (V:V=1:1), nakon čega je dodat natrijum hidroksid (33 mg; 0,825 mmol). Reakcioni sistem je zatim mešan tokom 16 sati na 75°C. Po završetku reakcije, smeša je ohlađena do sobne temperature. Dalje je dodata 2N hlorovodonična kiselina da bi se pH reakcionog rastvora podesio na 3-4 i smeša je ekstrahovana etil acetatom (10 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (30 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 23b (20 mg; prinos 48%), kao bezbojna tečnost.
Korak 3
N-((4-Metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-metil-6-(metil(te trahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksamid 23
[0233] 23b (15 mg; 0,052 mmol) je rastvoren u 2 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su dodati 2-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N’-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (47,7 mg; 0,125 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (18,3 mg; 0,14 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata na 0°C i dodat je 1o (11,58 mg; 0,057 mmol). Smeša je dalje mešana tokom 12 sati. Po završetku reakcije, dodato je 50 mL vode i reakcioni rastvor je ekstrahovan smešom dihlorometana i metanola (V:V=10:1) (10 ml×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (30 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 23 (21 mg; prinos 91%), kao bela čvrsta supstanca.
MS (ESI) m/z: 440,3 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 12,30(brs, 1H), 7,48(d, 1H), 7,18(brs, 1H), 6,74(s, 1H), 5,94(s, 1H), 4,64(d, 2H), 3,95-3,98(m, 2H), 3,91(s, 3H), 3,30-3,36(m, 2H), 2,96-3,01(m, 1H), 2,65(s, 3H), 2,39(s, 3H), 2,19(s, 3H), 1,69-1,73(m, 2H), 1,45(brs, 2H).
Primer 24
6-(((1r,4r)-4-(Dimetilamino)cikloheksil)(etil)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-metilbenzofuran-4-karboksamid
[0234]
Korak 1
Metil 6-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)cikloheksil)amino)-5-metilbenzofuran-4-karboksilat 24b
[0235] 4e (200 mg; 0,75 mmol), (1r,4r)-N1,N1-dimetilcikloheksan-1,4-diamin 24a (260 mg; 1,49 mmol; pripremlјen postupkom opisanim u "Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2011, 21(15), 4622-4628"), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum (137 mg; 0,15 mmol), (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)1,1'-binaftalen (140 mg; 0,22 mmol) i cezijum karbonat (731,25 mg; 2,25 mmol) su rastvoreni u 20 mL toluena. Reakcioni sistem je mešan na temperaturi refluksa tokom 12 sati u atmosferi azota. Po završetku reakcije, u reakcioni sistem je dodato 100 mL vode i smeša je ekstrahovana smešom dihlorometana i metanola (V:V=10:1) (20 mL×3) Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (50 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je dalje koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 24b (15 mg; prinos 6,1%), kao žuta čvrsta supstanca.
Korak 2
Metil 6-(((1r,4r)-4-(dimetilamino)cikloheksil)(etil)amino)-5-metilbenzofuran-4-karboksilat 24c
[0236] 24b (15 mg; 0,045 mmol), acetaldehid (6,3 mg; 0,136 mmol) i sirćetna kiselina (13,3 mg; 0,22 mmol) su dodati u 3 mL etanola. Smeša je zatim mešana tokom 1 sata na 0°C, pa je lagano zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 12 sati. Dalje je dodat natrijum cijanoborohidrid (8,5 mg; 0,135 mmol) i smeša je mešana tokom 10 sati. Po završetku reakcije, u reakcioni sistem je dodato 20 mL vode i smeša je ekstrahovana smešom dihlorometana i metanola (V:V=10:1) (10 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim natrijum hloridom (30 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 24c (20 mg) kao žuta čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 3
6-(((1r,4r)-4-(Dimetilamino)cikloheksil)(etil)amino)-5-metilbenzofuran-4-karboksi lna kiselina 24d
[0237] Sirovi 24c (20 mg; 0,056 mmol) je rastvoren u 4 mL smeše metanola i vode (V:V=1:1), nakon čega je dodat kalijum hidroksid (18,7 mg; 0,335 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 12 sati na 80°C. Po završetku reakcije, dodata je 2N hlorovodonična kiselina da bi se pH reakcionog rastvora podesio na 3-4. Nakon što je smeša koncentrovana pod sniženim pritiskom, sirovi proizvod je rastvoren u 8 mL smeše metilen hlorida i tetrahidrofurana (V:V=1:1) i profiltriran. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 24d (25 mg), kao smeđa čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 4
6-((1r,4r)-4-(Dimetilamino)cikloheksil)(etil)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-metilbenzofuran-4-karboksamid 24
[0238] Sirova 24d (25 mg; 0,073 mmol) je rastvorena u 2 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su dodati 2-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (41,8 mg; 0,110 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (28 mg; 0,219 mmol). Reakciona smeša je zatim mešana tokom 1 sata na 0°C. Dalje je dodat 1o (11,58 mg; 0,057 mmol) i smeša je mešana tokom 12 sati. Po završetku reakcije, dodato je 2 mL vode da bi se reakcija zaustavila i smeša je profiltrirana. Filtrat je potom koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 24 (4,9 mg; prinos 14%), kao bela čvrsta supstanca.
MS (ESI) m/z: 495,4 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 11,62(brs, 1H), 7,49(s, 1H), 7,20(brs, 1H), 6,77(s, 1H), 5,93(s, 1H), 5,35(brs, 1H), 4,66(d, 2H), 3,91(s, 3H), 3,07(q, 2H), 2,65-2,71(m, 1H), 2,39(s, 3H), 2,21(s, 6H), 2,15(s, 3H), 2,02(brs, 1H), 1,85-1,93(m, 4H), 1,32-1,43(m, 4H), 0,86(t, 3H).
Primer 25
6-(Etil(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-d ihidropiridin-3-il)metil)-5-metilbenzofuran-4-karboksamid
[0239]
Korak 1
terc-Butil 4-((4-(metoksikarbonil)-5-metilbenzofuran-6-il)amino)piperidin-1-karboksilat 25b
[0240] 4e (810 mg; 3,02 mmol), terc-butil 4-aminopiperidin-1-karboksilat 25a (1200 mg; 6,04 mmol; pripremlјen postupkom opisanim u "Bioorganic & Medicinal Chemistry Letters, 2011, 21(3), 983-988"), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum (553 mg; 0,604 mmol), (±)-2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftalen (564 mg; 6,04 mmol) i cezijum karbonat (1,96 g; 6,04 mmol) su rastvoreni u 10 mL toluena. Smeša je zatim mešana tokom 72 sata na 110°C. Po završetku reakcije, smeša je profiltrirana kroz celit, dodato je 60 mL etil acetata i smeša je isprana zasićenim natrijum hloridom (100 ml), pa osušena upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirana. Filtrat je potom koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 25b (1 g; prinos 83%), u vidu žute tečnosti.
Korak 2
terc-Butil 4-(etil(4-(metoksikarbonil)-5-metilbenzofuran-6-il)amino)piperidin-1-karboksilat 25c
[0241] 25b (1 g; 2,58 mmol) je rastvoren u 10 mL metanola, nakon čega su dodati acetaldehid (360 mg; 7,73 mmol) i sirćetna kiselina (774 mg; 12,9 mmol). Smeša je zatim mešana na 0°C tokom 1 sata, pa je zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 12 sati. Dalje je dodat natrijum cijanoborohidrid (486 mg; 7,74 mmol) i nastavljeno je mešanje smeše tokom 10 sati. Po završetku reakcije, u reakcioni rastvor je dodato 50 mL vode i smeša je ekstrahovana etil acetatom (20 ml×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (100 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen hromatografijom na koloni sa silika gelom upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 25c (573,8 mg; prinos 62,8%), u vidu žute tečnosti.
Korak 3
Metil 6-(etil(piperidin-4-il)amino)-5-metilbenzofuran-4-karboksilat 25d
[0242] 25c (184 mg; 0,58 mmol) je dodat u 12 mL dihlormetana, nakon čega je dodato i 3 mL trifluorosirćetne kiseline. Smeša je zatim mešana tokom 2 sata. Po završetku reakcije, smeša je neutralisana zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovana etil acetatom (20 mL×3). Organske faze su spojene, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 25d (156), kao smeđa tečnost koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 4
Metil 6-(etil(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)amino)-5-metilbenzofuran-4-karboksilat 25e
[0243] Sirovi 25d (52 mg; 0,16 mmol) je dodat u 10 mL dihlorometana, nakon čega je na 0°C dodat trietilamin (64,6 mg; 0,64 mmol), a potom i metansulfonil hlorid (37,8 mg; 0,33 mmol). Smeša je zatim lagano zagrejana do sobne temperature i mešana tokom 12 sati. Po završetku reakcije, u reakcioni rastvor je dodato 50 mL vode i smeša je ekstrahovana etil acetatom (20 ml×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (20 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 25e (20 mg; prinos 33%), kao bezbojna tečnost.
Korak 5
6-(Etil(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)amino)-5-metilbenzofuran-4-karboksilna kiselina 25f
[0244] 25e (20 mg; 0,05 mmol) je rastvoren u 1 mL metanola i 1 mL vode, nakon čega je dodat kalijum hidroksid (14,2 mg; 0,25 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 12 sati na 70°C. Po završetku reakcije, dodata je 2N hlorovodonična kiselina da bi se pH reakcionog rastvora podesio na 3-4 i smeša je dalje ekstrahovana smešom dihlormetana i tetrahidrofurana (V:V=1:1) (10 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (20 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovo jedinjenje iz naslova, 25f (16 mg), u vidu bezobjne tečnosti koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 6
6-(Etil(1-(metilsulfonil)piperidin-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-d ihidropiridin-3-il)metil)-5-metilbenzofuran-4-karboksamid 25
[0245] Sirova 25f (8 mg; 0,21 mmol) je rastvorena u 2 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su u rastvor dodati 2-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N'-trametiluronijum heksafluorofosfat (12 mg; 0,0315 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (8 mg; 0,063 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata na 0°C, dodat je 1o (5,2 mg; 0,025 mmol) i reakciona smeša je mešana tokom 48 sati na sobnoj temperaturi. Po završetku reakcije, dodato je 20 mL vode, pa je smeša ekstrahovana smešom dihlorometana i metanola (V:V=10:1) (10 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (20 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 25 (12,5 mg; prinos 11%), kao bela čvrsta supstanca.
MS (ESI) m/z: 531,2 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 12,5(brs, 1H), 7,51(d, 1H), 7,29(s, 1H), 7,22(brs, 1H), 6,77(s, 1H), 5,96(s, 1H), 4,65(d, 2H), 3,92(s, 3H), 3,72-3,69(m, 2H), 3,17-3,11(m, 1H), 3,07(q, 2H), 2,96-2,89(m, 2H), 2,74(s, 3H), 2,67(t, 2H), 2,39(s, 3H), 2,19(s, 3H), 1,90-1,71(m, 4H), 0,88(t, 3H).
Primer 26
6-((1-Acetilpiperidin-4-il)(etil)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropi ridin-3-il)metil)-5-metilbenzofuran-4-karboksamid 26
[0246]
[0247] U skladu sa putem sinteze iz Primera 25, metansulfonil hlorid koji je upotrebljen u koraku 4 kao početni materijal je zamenjen anhidridom sirćetne kiseline i time je pripremljeno jedinjenje iz naslova, 26 (10,1 mg; prinos 50%), kao bela čvrsta supstanca.
MS (ESI) m/z: 495,3 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 7,76(brs, 1H), 7,45(brs, 1H), 6,80(brs, 1H), 6,30(s, 1H), 4,53(s, 2H), 3,96(s, 3H), 3,91(brs, 2H), 3,36-3,30(m, 2H), 3,23(q, 2H), 3,11-3,05(m, 3H), 2,41(brs, 3H), 2,33(s, 3H), 2,07(s, 3H), 1,85 (brs, 2H), 1,60(brs, 2H), 0,90(t, 3H).
Primer 27
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-fluoro-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksamid
[0248]
Korak 1
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilna kiselina 27a
[0249] Jedinjenje 1i (260 mg; 0,79 mmol) je rastvoreno u 15 mL smeše metanola i tetrahidrofurana (V:V=2:1), pa je dodato 5 mL 4 N rastvora natrijum hidroksida. Smeša je zatim mešana na 60°C tokom 12 sati. Po završetku reakcije, dodata je 12 M hlorovodonična kiselina da bi se pH reakcionog rastvora podesio na 4 i smeša je ekstrahovana etil acetatom (20 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (50 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 27a (220 mg), kao bela čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 2
4-Metoksibenzil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)benzofuran-4-karboksilat 27b
[0250] Sirova 27a (170 mg; 0,54 mmol) je rastvorena u 15 mL acetona, pa su u prethodno pripremljen rastvor dodati 1-(hlorometil)-4-metoksibenzen (168 mg; 1,07 mol, Accela) i kalijum karbonat (148 mg; 1,07 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 48 sati. Po završetku reakcije, smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, nakon čega je sukcesivno dodato 30 mL vode i 20 mL etil acetata. Dve faze su razdvojene i vodena faza je ekstrahovana etil acetatom (20 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (50 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 27b (230 mg; prinos 99%), u vidu bezbojnog ulјa.
Korak 3
4-Metoksibenzil 5-etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-fluorobenzofuran-4-karboksilat 27c
[0251] 27b (230 mg; 0,53 mmol) je dodat u 8 mL tetrahidrofurana. Smeša je ohlađena do -70°C, nakon čega je dodato 0,79 mL 2,0 M litijum-diizopropilamida i smeša je mešana tokom 1 sata na -70°C. Dalje je dodat N-fluorodibenzensulfonamid (182 mg; 0,58 mmol; Bepharm) i smeša je mešana tokom 1 sata na -70°C. Po završetku reakcije, smeša je lagano zagrejana do sobne temperature i dodato je 20 mL zasićenog rastvora amonijum hlorida da bi se reakcija zaustavila. Smeša je dalje ekstrahovana etil acetatom (10 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (20 mL), osušene upotrebom natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 27c (17 mg; prinos 7%), u vidu žutog ulja.
Korak 4
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-fluorobenzofuran-4-karboksilna kiselina 27d
[0252] 27c (17 mg; 0,037 mmol) je rastvoren u 3 mL dihlorometana, nakon čega je dodato 0,5 mL trifluorosirćetne kiseline. Reakciona smeša je zatim mešana 1 sat na sobnoj temperaturi. Po završetku reakcije, smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 27d (20 mg), u vidu žutog ulja koje je direktno upotrebljeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 5
5-Etil-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-2-fluoro-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksamid 27
[0253] Sirova 27d (20 mg; 0,06 mmol) je rastvorena u 3 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su u prethodno pripremljen rastvor dodati 2-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (32,6 mg; 0,85 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (39 mg; 0,30 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata. Dalje je dodat 1o (18 mg; 0,00 mmol) i smeša je mešana tokom 12 sati. Po završetku reakcije, dodato je 20 mL vode i smeša je ekstrahovana smešom dihlorometana i metanola (V:V=8:1). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 27 (12 mg; prinos 41%), kao bela čvrsta supstanca. MS (ESI) m/z: 486,4 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,48(brs, 1H), 8,06(t, 1H), 7,43(s, 1H), 1,55(d, 1H), 6,10(s, 1H), 4,25(d, 2H), 3,83(brd, 2H), 3,81(s, 3H), 3,21(t, 2H), 3,03(q, 2H), 3,90-3,96(m, 1H), 2,82(q, 2H), 2,18(s, 3H), 1,63-1,67(brd, 2H), 1,45-1,53(m, 2H), 1,05(t, 3H), 0,81(t, 3H).
Primer 28
2-Ciklopropil-6-((ciklopropilmetil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-etil-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksamid
[0254]
Korak 1
Metil 6-((ciklopropilmetil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-etilbenzofuran-4-karboksilat 28a
[0255] 1h (950 mg; 3,03 mmol) je rastvoren u 50 mL 1,2-dihloretana, nakon čega su u prethodno pripremljeni rastvor dodati ciklopropankarbaldehid (1,1 g; 15,7 mmol) i sirćetna kiselina (940 mg; 15,7 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 12 sati, pa je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (1,97 g; 9,4 mmol). Smeša je dalje mešana tokom 3 sata. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, neutralisan zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovan etil acetatom (20 mL×3). Organske faze su spojene, sukcesivno isprane vodom (50 mL) i zasićenim rastvorom natrijum hlorida (50 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 28a (850 mg; prinos 76%), u vidu svetlo žutog ulјa.
Korak 2
Metil 2-bromo-6-((ciklopropilmetil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-etilbenzofuran-4-karboksilat 28b
[0256] 28a (400 mg; 1,1 mmol) je rastvoren u 15 mL tetrahidrofurana. Smeša je potom ohlađena do -70°C, pa je u prethodno pripremljen rastvor dodato 1,65 mL 2,0 M litijum-diizopropilamida. Smeša je zatim mešana tokom 1 sata na -70°C. Reakcionom rastvoru je dalje u kapima dodato 15 mL prethodno pripremlјenog rastvora 1,2-dibromo-1,1,2,2-tetrahloretana (429 mg; 1,3 mmol) u tetrahidrofuranu. Reakciona smeša je mešana tokom 1 sata na -70°C. Po završetku reakcije, dodato je 50 mL zasićenog rastvora amonijum-hlorida da bi se reakcija prekinula i smeša je ekstrahovana etil acetatom (20 ml×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (50 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 28b (150 mg; prinos 31%), u vidu svetlo žutog ulja.
Korak 3
Metil 2-ciklopropil-6-((ciklopropilmetil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-etilbenzofuran-4-karboksilat 28c
[0257] 28b (50 mg; 0,11 mmol) je rastvoren u 5 mL toluena, nakon čega su u prethodni rastvor dodati ciklopropilboronska kiselina (20 mg; 0,23 mmol), paladijum acetat (5 mg; 0,2 mmol), tricikloheksilfosfin (10 mg; 0,03 mmol) i kalijum fosfat trihidrat (91 mg; 0,34 mmol). Reakciona smeša je zatim mešana tokom 12 sati na 100°C, u atmosferi argona. Po završetku reakcije, smeša je profiltrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 28c (33 mg; prinos 73%), u vidu bezbojnog ulјa.
Korak 4
2-Ciklopropil-6-((ciklopropilmetil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-etilbenzof uran-4-karboksilna kiselina 28d
[0258] 28c (33 mg; 0,08 mmol) je dodat u 5 mL tetrahidrofurana i 15 mL metanola, nakon čega je dodato 5 mL 4M rastvora natrijum hidroksida. Reakcioni sistem je zatim mešan tokom 12 sati na 60°C. Po završetku reakcije, smeša je koncentrovana da bi se uklonili organski rastvarači. Dalje je dodata mala količina vode, a potom i 12 M hlorovodonična kiselina da bi se pH podesio na 3 i smeša je ekstrahovana etil acetatom (10 mL×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (50 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 28d (25 mg), kao bela čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 5
2-Ciklopropil-6-((ciklopropilmetil)(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-etil-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksamid 28
[0259] Sirova 28d (25 mg; 0,065 mmol) je rastvorena u 3 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su u prethodni rastvor dodati 2-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (47 mg; 0,098 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (42 mg; 0,33 mmol). Smeša je zatim mešana tokom 1 sata, dodat je 1o (20 mg; 0,098 mmol) i smeša je mešana tokom 12 sati. Po završetku reakcije, u reakcioni rastvor je dodato 20 mL vode i smeša je ekstrahovana smešom dihlormetana i metanola (V:V=8:1). Organske faze su spojene, sukcesivno isprane vodom i zasićenim rastvorom natrijum hlorida, osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, nakon čega je dobijeni ostatak prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 28 (12 mg; prinos 34%), kao svetlo žuta čvrsta supstanca.
MS (ESI) m/z: 534,5 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,48(brs, 1H), 7,91(s, 1H), 7,38(s, 1H), 6,36(s, 1H), 6,12(s, 1H), 4,27(brs, 2H), 3,83(s, 3H), 3,79(brs, 2H), 3,28(brs, 2H), 3,17-3,23(m, 2H), 2,96-3,00(m, 1H), 2,83-2,86(m, 2H), 2,19(s, 3H), 2,06(brs, 1H), 1,38-1,46(m, 2H), 1,24(brs, 2H), 1,06(t, 3H), 0,98(brs, 2H), 0,83(brs, 2H), 0,64(brs, 1H), 0,28(brs, 2H), 0,03(brs, 2H).
Primer 29
6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidro-piridin-3-il)metil)-5-metil-2-(trifiuorometil)benzofuran-4-karboksamid
[0260]
Korak 1
Metil 6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metil-2-(trifluorometil)benzofuran-4-karboksilat 29a
[0261] 15a (50 mg; 0,126 mmol) je rastvoren u 8 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su u prethodno pripremljen rastvor dodati metil fluorosulfonil difluoroacetat (500 mg; 2,52 mmol) i bakar jodid (120 mg; 0,63 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 24 sata na 120°C u atmosferi azota. Po završetku reakcije, u reakcioni rastvor je dodato 50 mL vode i smeša je ekstrahovana etil acetatom (10 ml×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (50 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju B, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 29a (10 mg; prinos 20,8%), u vidu žute tečnosti.
Korak 2
6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metil-2-(trifluorometil)benzofuran-4-k arboksilna kiselina 29b
[0262] 29a (10 mg; 0,026 mmol) je dodat u 2 mL smeše vode i metanola (V:V=1:1), nakon čega je dodat natrijum hidroksid (5,16 mg; 0,129 mmol). Reakcioni sistem je zatim mešan tokom 16 sati na 70°C. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je ohlađen do 5°C, dodata je 2 N hlorovodonična kiselina da bi se pH podesio na 3-4 i smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 29b (10 mg), kao bela čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 3
6-(Etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidro piridin-3-il)metil)-5-metil-2-(trifluorometil)benzofuran-4-karboksamid 29
[0263] Sirova 29b (10 mg; 0,027 mmol) je rastvorena u 3 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su dodati 2-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (15,4 mg; 0,041 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (10,5 mg; 0,081 mmol). Reakcioni sistem je ohlađen do 0°C i mešan tokom 1 sata. Dalje je dodat 1o (6,6 mg; 0,032 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 12 sati. Po završetku reakcije, dodato je 40 mL vode i smeša je ekstrahovana smešom dihlorometana i metanola (V:V=8:1) (10 ml×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (50 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 29 (1,6 mg; prinos 11,4%), kao bela čvrsta supstanca.
MS (ESI) m/z: 522,3 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,52(s, 1H), 7,33(s, 1H), 7,19(brs, 1H), 5,98(s, 1H), 4,66(s, 2H), 4,00-3,95(m, 2H), 3,95(s, 3H), 3,36-3,30(m, 2H), 3,12(q, 2H), 3,04-2,99(m, 1H), 2,41(s, 3H), 2,28(s, 3H), 1,72(brs, 4H), 0,89(t, 3H).
Primer 30
2-Cijano-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-metilbenzofuran-4-karboksamid
Korak 1
2-Bromo-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-5-metilbenzofuran-4-karboksilna kiselina
[0265] 15a (30 mg; 0,076 mmol) je dodat u 2 mL smeše vode i metanola (V:V=1:1), nakon čega je dodat natrijum hidroksid (15,1 mg; 0,378 mmol). Reakcioni sistem je zatim mešan tokom 12 sati na 70°C. Po završetku reakcije, reakcioni rastvor je ohlađen do 5°C, dodata je 2 N hlorovodonična kiselina da bi se pH podesio na 3-4 i smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovo jedinjenje iz naslova, 30a (30 mg), kao bela čvrsta supstanca koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 2
2-Bromo-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-metilbenzofuran-4-karboksamid 30b
[0266] Sirova 30a (30 mg; 0,078 mmol) je rastvorena u 5 mL N,N-dimetilformamida, nakon čega su u prethodni rastvor dodati 2-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N’,N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat (44,5 mg; 0,117 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (30,2 mg; 0,234 mmol). Reakcioni sistem je zatim ohlađen do 0°C i mešan tokom 1 sata. Dalje je dodat 1o (6,6 mg; 0,032 mmol) i smeša je mešana tokom 12 sati. Po završetku reakcije, dodato je 50 mL vode i smeša je ekstrahovana smešom dihlorometana i metanola (V:V=8:1) (10 ml×3). Organske faze su spojene, isprane zasićenim rastvorom natrijum hlorida (20 mL), osušene upotrebom anhidrovanog natrijum sulfata i profiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, 30b (50 mg), kao žuta tečnost koja je direktno upotrebljena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak 3
2-Cijano-6-(etil(tetrahidro-2H-piran-4-il)amino)-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)-5-metilbenzofuran-4-karboksamid 30
[0267] Sirovi 30b (40 mg; 0,075 mmol) je rastvoren u 5 mL N,N-dimetilacetamida, nakon čega su dodati bakar cijanid (13,6 mg; 0,15 mmol) i bakar jodid (14,3 mg; 0,075 mmol). Reakcioni sistem je zatim mešan tokom 1 sata na 170°C. Po završetku reakcije, smeša je profiltrirana i filtrat je ispran smešom dihlorometana i metanola (V:V=10:1) (10 mL). Organske faze su spojene, koncentrovane pod sniženim pritiskom, a dobijeni ostatak je prečišćen tankoslojnom hromatografijom, upotrebom sistema za eluciju A, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, 30 (4,7 mg; prinos 12,5%), kao bela čvrsta supstanca.
MS (ESI) m/z: 479,4 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 11,5(brs, 1H), 7,55(s, 1H), 7,26(s, 1H), 7,16(brs, 1H), 5,97(s, 1H), 4,66(s, 2H), 3,98-3,96(m, 2H), 3,93(s, 3H), 3,35-3,30(m, 2H), 3,11(q, 2H), 3,04-2,99(m, 1H), 2,41(s, 3H), 2,27(s, 3H), 1,75-1,66(m, 4H), 0,89(t, 3H).
Primer 31
6-((4,4-Difluorocikloheksil)(etil)amino)-5-etil-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-d ihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksamid 31
[0268]
[0269] U skladu sa putem sinteze iz Primera 24, početni materijal 4e je zamenjen sa 1g i 24a zamenjen je 4,4-difluorocikloheksilaminom, čime je pripremljeno jedinjenje iz naslova, 31 (10 mg; prinos 77%), kao bela čvrsta supstanca.
MS (ESI) m/z: 502,4 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,47(brs, 1H), 8,02(t, 1H), 7,88(d, 1H), 7,46(s, 1H), 6,75(d, 1H), 6,11(s, 1H), 4,29(d, 2H), 3,82(s, 3H), 3,05(brs, 2H), 2,97(m, 1H), 2,82(q, 2H), 2,18(s, 3H), 1,98(brs, 2H), 1,81(brs, 2H), 1,73(m, 2H), 1,58(q, 2H), 1,08(t, 3H), 0,83(t, 3H).
Primer 32
6-((3,3-Difluorociklobutil)(etil)amino)-5-etil-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-di hidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksamid 32
[0270]
[0271] U skladu sa putem sinteze iz Primera 24, početni materijal 4e je zamenjen sa 1g i 24a zamenjeno sa 3,3-difluorociklobutanaminom, čime je pripremljeno jedinjenje iz naslova, 32 (15 mg; prinos 83%), kao bela čvrsta supstanca.
MS (ESI) m/z: 474,4 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,45(brs, 1H), 8,04(t, 1H), 7,88(d, 1H), 7,41(s, 1H), 6,75(d, 1H), 6,10(s, 1H), 4,28(d, 2H), 3,81(s, 3H), 3,79(brs, 1H), 2,93(q, 2H), 2,81(q, 2H), 2,70(brs, 2H), 2,25(brs, 2H), 2,18(s, 3H), 1,07(t, 3H), 0,86(t, 3H).
Primer 33
6-((1,1-Dioksidotetrahidro-2H-tiopiran-4-il)(etil)amino)-5-etil-N-((4-metoksi-6-m etil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksamid 33
[0273] U skladu sa putem sinteze iz Primera 24, početni materijal 4e je zamenjen sa 1g i 24a je zamenjen sa 4-aminotetrahidro-2H-tiopiran 1,1-dioksidom, čime je pripremljeno jedinjenje iz naslova, 33 (9 mg; prinos 64%), kao bela čvrsta supstanca.
MS (ESI) m/z: 516,3 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,46(brs, 1H), 8,02(t, 1H), 7,88(d, 1H), 7,47(s, 1H), 6,75(d, 1H), 6,10(s, 1H), 4,29(d, 2H), 3,81(s, 3H), 2,98-3,07(m, 5H), 3,01(q, 2H), 2,80(q, 2H), 2,18(s, 3H), 2,07(brs, 4H), 1,09(t, 3H), 0,83(t, 3H).
Primer 34
6-((Ciklopropilmetil)(1-(2,2,2-trifluoroetil)piperidin-4-il)amino)-5-etil-N-((4-metoksi-6-metil-2-okso-1,2-dihidropiridin-3-il)metil)benzofuran-4-karboksamid 34
[0274]
[0275] U skladu sa putem sinteze iz Primera 25, polazni materijal 4e je zamenjen sa 1g, acetaldehid kao početni materijal upotrebljen u koraku 2 je zamenjen ciklopropankarboksaldehidom, metansulfonil hlorid kao polazni materijal upotrebljen u koraku 4 je zamenjen sa trihlorometil(2,2,2trifluoroetil)sulfatom, čime je pripremljeno jedinjenje iz naslova, 34 (14 mg; prinos 65%), kao bela čvrsta supstance.
MS (ESI) m/z: 575,5 [M+1]
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8,01(brs, 1H), 7,87(s, 1H), 7,50(s, 1H), 6,75(s, 1H), 6,11(s, 1H), 4,29(d, 2H), 3,83(s, 3H), 3,10(q, 2H), 2,83-2,91(m, 4H), 2,76(brs, 1H), 2,26(t, 2H), 2,19 (3H), 1,70(brs, 2H), 1,49(q, 2H), 1,24(brs, 2H), 1,10(t, 3H), 0,65(brs, 1H), 0,28(d, 2H), 0,003(d, 2H).
BIOLOŠKA ISPITIVANJA
[0276] Predmetni pronalazak će biti dalјe opisan pozivanjem na sledeće primere ispitivanja, ali primere ne treba smatrati ograničavajućim za područje pronalaska.
Primer ispitivanja 1. Test za određivanje aktivnosti jedinjenja za primer predmetnog pronalaska na EZH2 enzim (mutant A677G ili mutant Y641F).
[0277] Aktivnost enzima EZH2 (sa mutacijom tipa A677G ili Y641F) je ispitana postupkom koji sledi.
[0278] Postupak se upotrebljava za određivanje inhibitornog dejstva jedinjenja predmetnog pronalaska na aktivnosti mutanta EZH2-A677G ili mutanta EZH2-Y641F.
1. Eksperimentalni materijali i instrumenti
[0279]
(1). EZH2-A677G (BPS Bioscience)
(2). EZH2-Y641F (BPS Bioscience)
(3). Histon H3 obeležen biotinom (AnaSpec)
(4). S-adenozil metionin (skraćeno kao SAM, Sigma)
(5). Monoklonsko antitelo na Histon H3K27 Me3 (Cisbio)
(6). Streptavidin-XL665 (Cisbio)
(7). HTRF detekcioni puffer (Cisbio)
(8). Višenamenski čitač za mikroploče (Tecan)
2. Eksperimentalna procedura
[0280] EZH2-A677G (ili EZH2-Y641F) mutant je razblažen do koncentracije 15 ng/µl, upotrebom kinaznog pufera (5×pufer: 5 mg/ml BSA, 150 mM Tris-Cl, 100 mM MgCl2), pa je u mikrotitar ploču sa 384 bunarića sipano po 2 µl/bunariću. Histon H3 obeležen biotinom i S-adenosil metionin su razblaženi kinaznim puferom do 50 nM i 50 uM, tim redom, nakon čega je po 4 µl/bunariću dodato u mikrotitar ploču sa 384 bunarića. Ispitivano jedinjenje je razblaženo kinaznim puferom (najviša koncentracija od 30 µM je razblaživana sa gradijentom koncetracije od 10, 7 tačaka koncentracija), nakon čega je u mikrotiter ploču sa 384 bunarića dodato po 4 µl/bunariću. Ploča je zatim inkubirana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Monoklonsko antitelo na Histon H3K27 Me3 i Streptavidin-XL665 su razblaženi do 30 nM i 500 nM sa HTRF detekcionim puferom, nakon čega su takođe dodati u mikrotitar ploču sa 384 bunarića u zapremini od po 10 µl/bunariću i inkubirani tokom 1 sata. Bunarić bez EZH2 enzima i jedinjenja je upotrebljeno kao negativna kontrola, dok je bunarić sa EZH2 enzimom ali bez jedinjenja upotrebljen kao pozitivna kontrola. Vrednosti fluorescencije su očitane na višenamenskom čitaču za mikrotitar ploče, upotrebom emisione talasne dužine od 620 nM i 665 nM. Logaritamska koncentracija jedinjenja u odnosu na procenat inhibicije, normalizovan u odnosu na vrednost dobijenu za bunarić sa pozitivnom kontrolom, uneta je na grafik upotrebom GraphPad Prism programa, a potom su izračunate IC50 vrednosti.
[0281] Aktivnost jedinjenja predmetnog pronalaska na enzim EZH2-A677G je ispitana testom koji je prethodno opisan, a IC50vrednosti su prikazane u Tabeli 1.
Tabela 1. IC50jedinjenja predmetnog pronalaska za inhibiciju aktivnosti enzima EZH2-A677G
[0282] Zaklјučak: Jedinjenja predmetnog pronalaska imaju značajan inhibitorni efekat na aktivnost enzima EZH2-A677G.
[0283] Aktivnost jedinjenja predmetnog pronalaska na enzim EZH2-Y641F je ispitana testom koji je prethodno opisan, a IC50vrednosti su prikazane u Tabeli 2.
Tabela 1. IC50jedinjenja predmetnog pronalaska za inhibiciju aktivnosti enzima EZH2-Y641F
Primer ispitivanja 2. Test za određivanje in vitro aktivnosti jedinjenja za primer predmetnog pronalaska na rast tumorskih ćelija
[0284] Ovaj postupak je upotrebljen za određivanje inhibitornog dejstva jedinjenja predmetnog pronalaska na aktivnost rasta tumorskih ćelija (Pfeiffer ili WSU-DLCL2) in vitro. Pfeiffer ćelije su A677G mutant, dok WSU-DLCL2 ćelije nose mutaciju Y641F.
1. Eksperimentalni materijali i instrumenti
[0285]
(1). RPMI-1640, inaktiviran fetalni goveđi serum, penicilin, streptomicin (Life technology) (2). Pfeiffer i WSU-DLCL2 ćelijska linija (ATCC)
(3). Mikrotitarska ploča za kulturu ćelija sa 96 bunarića (Fisher Scientific)
(4). Inkubator ćelija (Fisher Scientific)
(5). CellTiter - Glo®luminescentna detekcija vitalnosti ćelija (Promega)
(6). Čitač mikroploča (Tecan)
2. Eksperimentalna procedura
[0286] Ćelijska linija limfoma tipa suspenzije (Pfeiffer ili WSU-DLCL2) je gajena u RPMI-1640 medijumu koji je sadržavao 10%-ni inaktivirani fetalni goveđi serum, 100 U/mL penicilina i 100 µg/mL streptomicina, pri čemu su ćelije inkubirane u inkubatoru sa 5% uglјendioksida na 37°C i u uslovima zasićene vlage i pasažirana na svaka 3-4 dana.
[0287] Ćelijska suspenzija je pripremlјena sa svežim medijumom za ćelije i potom je prebačena u mikrotitar ploču za kulturu ćelija sa 96 bunarića pri gustini od 8000 ćelija/bunariću (Pfeiffer) ili 2000 ćelija/bunariću (WSU-DLCL2), pa je ploča inkubirana preko noći u inkubatoru sa 5% uglјendioksida, na 37°C. Na dan eksperimenta, ispitivana EZH2 jedinjenja (finalnih koncentracija: 20000, 2000, 200, 20, 2, 0,2 nM) su dodata u eksperimentalne bunariće tako da 3 paralelna bunarića čine grupu. Kontrolni bunarić je sadržavao samo medijum, bio je bez ćelija i upotrebljen je za dobijanje vrednosti luminescencije pozadine. Ploča za ćelijsku kulturu je inkubirana tokom 5 dana u inkubatoru sa 5% uglјendioksida i na 37°C.
[0288] Nakon što su jedinjenja inkubirana sa ćelijama tokom 5 dana, ploča za ćelijsku kulutru je prebačena na sobnu temperaturi tokom 30 minuta, pa je u svaki bunarić dodat CellTiter-Glo reagens u zapremini koja je bila jednaka zapremini medijuma za kulturu ćelija. Sadržaj je mešan na šejkeru tokom 10 minuta, nakon čega su očitane vrednosti fluorescentnog signala. Stopa inhibicije rasta ćelija je izračunata na osnovu formule: stopa ihibicije rasta ćelija = [(vrednost negativne kontrolne grupe – vrednost eksperimentalne grupe)/(vrednost negativne kontrolne grupe - vrednost luminescencije pozadine)]×100%. IC50vrednosti (polovina stope inhibicije IC50, tj. koncentracija leka koja je potrebna za stopu inhibicije rasta ćelija od 50%) su izračunate upotrebom kompjuterskog programa, na osnovu stope inhibicije rasta ćelija i odgovarajuće koncentracije.
[0289] In vitro inhibitorna aktivnost na rast tumorskih ćelija (Pfeiffer ili WSU-DLCL2) za jedinjenja predmetnog pronalaska je ispitana testom koji je prethodno opisan, a IC50vrednosti su prikazane u Tabelama 3 i 4.
Tabela 3. IC50za inhibitornu aktivnost jedinjenja predmetnog pronalaska na rast tumorskih ćelija (Pfeiffer) in vitro
[0290] Zaklјučak: Jedinjenja predmetnog pronalaska imaju značajan inhibitorni efekat na rast ćelije limfoma (Pfeiffer) in vitro.
Tabela 4. IC50za inhibitornu aktivnost jedinjenja predmetnog pronalaska na rast tumorskih ćelija
(WSU-DLCL2) in vitro.
[0291] Zaklјučak: Jedinjenja predmetnog pronalaska imaju značajan inhibitorni efekat na rast ćelije limfoma (WSU-DLCL2) in vitro.
FARMAKOKINETIČKA ISPITIVANJA
Primer ispitivanja 3. Farmakokinetičko ispitivanje jedinjenja iz Primera 1, 2, 3 i 9 predmetnog pronalaska.
1. Apstrat
[0292] Kao životinje za ispitivnje su upotrebljeni SD pacovi. Koncentracija leka u plazmi u različitim vremenskim tačkama je određivana LC/MS/MS postukom, nakon inragastične primene jedinjenja iz Primera 1, 2, 3 i 9 pacovima. Farmakokinetičko ponašanje jedinjenja predmetnog pronalaska je analizirano i procenjeno upotrebom pacova.
2. Protokol
2.1 Ispitivana jedinjenja
[0293] Jedinjenja iz Primera 1, 2, 3 i 9
2.2 Ispitivane životinje
[0294] 16 zdravih pacova Sprague-Dawley (SD) soja, od kojih su polovina bili mužjaci, a polovina ženke, nabavljeni su od firme SINO-BRITSH SIPPR/BK LAB. ANIMAL LTD., CO, sa sertifikatom br.: SCXK (Šangaj) 2008-0016.
2.3 Priprema ispitivanih jedinjenja
[0295] Odgovarajuća količina svakog jedinjenja je izmerena i dodata u 0,5% CMC-Na (koji je sadržavao 1% Tween 80) da bi se drobljenjem pripremila suspenzija od 1,0 mg/ml.2.4 Primena [0296] Nakon gladovanja preko noći, 16 SD pacova je podelјeno u 4 jednake grupe u kojima su polovina bili mužjaci, a polovina ženke, a zatim su životinjama intragastrično primenjivana ispitivana jedinjenja u zapremini za primenu od 5 mL/kg.
3. Postupak
[0297] Krv (0,2 mL) je uzimana iz orbitalnog sinusa pre primene i 0,5; 1,0; 2,0; 4,0, 6,0, 8,0, 11,0 i 24,0 sati nakon primene. Uzorci su čuvani u heparinizovanim epruvetama i centrifugirani tokom 10 minuta na 3,500 o/min da bi se izdvojila krvna plazma. Uzorci plazme su čuvani na -20°C.
[0298] Koncentracija ispitivanih jedinjenja u plazmi pacova nakon intragastrične primene je određena upotrebom LC-MS/MS postupka.
4. Rezultati farmakokinetičkih parametara
[0299] Farmakokinetički parametri jedinjenja predmetnog pronalaska iz Primera 1, 2, 3 i 9 su prikazani ispod:
[0300] Zaklјučak: Jedinjenja predmetnog pronalaska se dobro apsorbuju i ispoljavaju značajno farmakološko apsorpciono dejstvo.

Claims (15)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (I):
    ili tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihova smeša, ili njegova farmaceutski prihvatlјiva so, gde: prsten A je izabran iz grupe koja se sastoji od heterociklila i cikloalkila; svaki R<1>je identičan ili različit i svaki je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, halogen, alkil, haloalkil, alkoksi, haloalkoksi, amino, nitro, hidroksi, cijano, cikloalkil, heterociklil, aril, heteroaril, -OR<6>, -C(O)R<6>, -C(O)OR<6>, -S(O)mR<6>, -S(O)mNR<7>R<8>i -(CH2)xR<a>, pri čemu je svaka alkil, haloalkil, heterociklil, aril i heteroaril grupa nezavisno i po izboru supstituisana sa jednom ili sa više grupa izabranih iz grupe koju čine alkil, haloalkil, halogena, amino, nitro, cijano, hidroksi, alkoksi, haloalkoksi, hidroksialkil, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril grupa; R<a>je izabran iz grupe koju čine halogen, cikloalkil, heterociklil i -NR<7>R<8>, pri čemu je svaki cikloalkil i heterociklil nezavisno i po izboru supstituisan sa jednom ili sa više grupa izabranih iz grupe koju čine alkil, haloalkil, halogena, amino, nitro, cijano, hidroksi, alkoksi, haloalkoksi, hidroksialkil, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril grupa; R<2>je vodonik ili alkil, pri čemu je alkil po izboru supstituisan sa jednom ili sa više grupa izabranih iz grupe koju čine halogen, hidroksi, cijano, cikloalkil i heterociklil; R<3>je izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, halogena, cijano, alkoksi i haloalkil grupa; svaki R<4>je identičan ili različit i svaki je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, haloalkil, hidroksi, amino, alkoksi, haloalkoksi, cikloalkil, heterociklil, aril, heteroaril grupa, -OR<6>, -C(O)R<6>, -C(O)OR<6>, -S(O)mR<6>, -S(O)mNR<7>R<8>i -NR<7>R<8>; svaki R<5>je identičan ili različit i svaki je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, okso, halogena, haloalkil, hidroksi, amino, alkoksi, haloalkoksi, cikloalkil, heterociklil, aril, heteroaril grupa, -OR<6>, -C(O)R<6>, -C(O)OR<6>, -S(O)mR<6>, -S(O)mNR<7>R<8>i -NR<7>R<8>; R<6>je izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, haloalkil, alkoksi, hidroksialkil, hidroksi, amino, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril grupa; R<7>i R<8>su identični ili različiti i svaki je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, alkoksi, hidroksialkil, hidroksi, amino, alkoksikarbonil, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril grupa, pri čemu je svaka alkil, amino, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril grupa nezavisno i po izboru supstituisana sa jednom ili sa više grupa izabranih iz grupe koju čine alkil, halogena, hidroksi, amino, alkoksikarbonil, nitro, cijano, alkoksi, hidroksialkil, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril grupa; m je 0, 1 ili 2; n je 0, 1, 2 ili 3; p je 0, 1, 2, 3, 4 ili 5; q je 0, 1 ili 2; i x je 0, 1, 2 ili 3.
  2. 2. Jedinjenje formule (I) prema patentnom zahtevu 1, gde je n 2; i/ili gde je svaki od p i q 0, 1 ili 2.
  3. 3. Jedinjenje formule (I) prema bilo kom od patentnih zahteva 1 ili 2, gde je svaki R<1>identičan ili različit i svaki je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, halogen, alkil, haloalkil, cijano, cikloalkil, heterociklil i -(CH2)xR<a>, pri čemu je svaki alkil i heterociklil nezavisno i po izboru supstituisan sa jednom ili sa više grupa izabranih iz grupe koja se sastoji od alkila, hidroksialkila i halogena; i R<a>je izabran iz grupe koju čine halogen, cikloalkil, heterociklil i -NR<7>R<8>, pri čemu je svaki cikloalkil i heterociklil nezavisno i po izboru supstituisan sa jednom ili sa više grupa izabranih iz grupe koja se sastoji od hidroksialkila, alkila i halogena; a R<7>, R<8>i x su kao što je definisano u patentnom zahtevu 1; po izboru, gde je svaki R<1>identičan ili različit i svaki je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, haloalkil, cijano grupa i -(CH2)xR<a>, pri čemu je x 0 i R<a>je halogen ili cikloalkil.
  4. 4. Jedinjenje formule (I) prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 3, gde je R<2>alkil, po izboru supstituisan sa cikloalkil grupom; i/ili gde je R<3>izabran iz grupe koja se sastoji od alkila, halogena i haloalkila.
  5. 5. Jedinjenje formule (I) prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 4, gde je svaki R<4>identičan ili različit i svaki je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil i alkoksi; i/ili gde je svaki R<5>identičan ili različit i svaki je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, halogen, okso, haloalkil, -C(O)R<6>, -S(O)mR<6>i - NR<7>R<8>, pri čemu su od R<6>do R<8>i m kao što je definisano u patentnom zahtevu 1 i poželјno vodonik.
  6. 6. Jedinjenje formule (I) prema patentnom zahtevu 1, koje je jedinjenje formule (II):
    ili tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihova smeša, ili njegova farmaceutski prihvatlјiva so, gde: G je izabran iz grupe koju čine CR<b>R<c>, C=O, NR<d>, S(O)mi kiseonik; svaki R<b>i R<c>je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, alkoksi, halogena, amino, nitro, hidroksi, cijano, cikloalkil, heterociklil, aril, heteroaril grupa, -OR<6>, -C(O)R<6>, -C(O)OR<6>, -S(O)mR<6>i -NR<7>R<8>; R<d>je izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, cikloalkil, haloalkil, hidroksialkil, heterociklil, aril, heteroaril, -C(O)R<6>, -C(O)OR<6>i S(O)mR<6>; i R<1>do R<4>, R<6>do R<8>, n, m i q su kao što je definisano u patentnom zahtevu 1.
  7. 7. Jedinjenje formule (II) prema patentnom zahtevu 6, koje je jedinjenje formule (III):
    ili tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihova smeša, ili njegova farmaceutski prihvatlјiva so, gde: E je CH ili N atom; F je izabran iz grupe koja se sastoji od CR<b>R<c>, C=O, NR<d>i kiseonika; svaki R<b>i R<c>su nezavisno izabrani iz grupe koju čine vodonik, alkil, alkoksi, halogena, amino, nitro, hidroksi, cijano, cikloalkil, heterociklil, aril, heteroaril grupa, -OR<6>, -C(O)R<6>, -C(O)OR<6>, -S(O)mR<6>i -NR<7>R<8>; R<d>je izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, cikloalkil, haloalkil, hidroksialkil, heterociklil, aril, heteroaril, -C(O)R<6>, -C(O)OR<6>i S(O)mR<6>; svaki R<e>je identičan ili različit i svaki je nezavisno izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, haloalkil, halogena, amino, nitro, cijano, hidroksi, alkoksi, haloalkoksi, hidroksialkil, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril grupa; t je 0, 1, 2, 3, 4 ili 5; x je 0, 1, 2 ili 3; y je 0, 1, 2 ili 3; i R<1>do R<4>, R<6>do R<8>, m i n su kao što je definisano u patentnom zahtevu 1.
  8. 8. Jedinjenje formule (III) prema patentnom zahtevu 7, koje je jedinjenje formule (IV):
    ili tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihova smeša, ili njegova farmaceutski prihvatlјiva so, gde: svaki R<e>je identičan ili različit i svaki je nezavisno izabran iz grupe koja se sastoji od vodonika, alkila i halogena; t je 0, 1, 2, 3, 4 ili 5; i R<2>do R<4>i n su kao što je definisano u patentnom zahtevu 1.
  9. 9. Jedinjenje formule (III) prema patentnom zahtevu 7, koje je jedinjenje formule (V):
    ili tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihova smeša, ili njegova farmaceutski prihvatlјiva so, gde: R<e>je izabran iz grupe koju čine vodonik, alkil, haloalkil, halogena, amino, nitro, cijano, hidroksi, alkoksi, haloalkoksi, hidroksialkil, cikloalkil, heterociklil, aril i heteroaril grupa; i R<2>do R<4>i n su kao što je definisano u patentnom zahtevu 1.
  10. 10. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 9, pri čemu je jedinjenje izabrano iz grupe koja se sastoji od:
  11. 11. Jedinjenje formule (VI):
    ili tautomer, mezomer, racemat, enantiomer, dijastereomer ili njihova smeša, ili njegova farmaceutski prihvatlјiva so, gde: prsten A, R<1>do R<3>, R<5>, p i q su kao što je definisano u patentnom zahtevu 1.
  12. 12. Postupak za dobijanje jedinjenja formule (I) prema patentnom zahtevu 1, koji sadrži korak:
    kondenzacije jedinjenja formule (VI) sa jedinjenjem formule (VII) na sobnoj temperaturi da bi se dobilo jedinjenje formule (I); gde: R<1>do R<5>, prstenovi A, p, q i n su kao što je definisano u patentnom zahtevu 1.
  13. 13. Farmaceutska kompozicija koja sadrži terapijski efektivnu količinu jedinjenja formule (I) prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 10 i jedan ili više farmaceutski prihvatlјivih nosača, razblaživača ili ekscipijenasa.
  14. 14. Jedinjenje formule (I) prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 14 ili farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 13, za upotrebu u vidu inhibitora EZH2 radi prevencije i/ili lečenja tumora i kancera.
  15. 15. Jedinjenje ili kompozicija za upotrebu prema patentnom zahtevu 14, pri čemu su tumor i kancer izabrani iz grupe koja se sastoji od limfoma, leukemije, kancera dojke, kancera pluća, kancera prostate, kancera jajnika, kancera jetre, melanoma, rabdomiosarkoma, sinovijalnog sarkoma, mezotelioma, kancera grlića materice, kancera debelog creva, rektalnog kancera, kancera želuca, kancera pankreasa, kancera mozga, kancera kože, oralnog kancera, kancera kostiju, kancera bubrega, kancera mokraćne bešike, tumora jajovoda, tumora jajnika, peritonealnog tumora, glioma, glioblastoma, kancera glave i vrata i mijeloma; poželјno limfoma, leukemije, kancera dojke, kancera pluća, kancera prostate, kancera jajnika, kancera jetre, melanoma, rabdomiosarkoma, sinovijalnog sarkoma i mezotelioma; pri čemu je leukemija poželјno hronična mijeloidna leukemija, akutna mijeloidna leukemija ili leukemija mešovitih linija; i pri čemu je limfom poželјno ne-Hočkinov limfom, difuzni krupnoćelijski B-limfom ili folikularni limfom. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5
RS20191628A 2015-11-19 2016-11-02 Derivati benzofurana, postupci njihove pripreme i njihova upotreba u medicini RS59763B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201510800975 2015-11-19
PCT/CN2016/104318 WO2017084494A1 (zh) 2015-11-19 2016-11-02 苯并呋喃类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
EP16865671.8A EP3378859B1 (en) 2015-11-19 2016-11-02 Benzofuran derivative, preparation method thereof and use thereof in medicine

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS59763B1 true RS59763B1 (sr) 2020-02-28

Family

ID=58717310

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20191628A RS59763B1 (sr) 2015-11-19 2016-11-02 Derivati benzofurana, postupci njihove pripreme i njihova upotreba u medicini

Country Status (20)

Country Link
US (2) US10759787B2 (sr)
EP (1) EP3378859B1 (sr)
JP (1) JP6828229B2 (sr)
KR (2) KR20250028514A (sr)
CN (1) CN107428742B (sr)
AU (1) AU2016357900B2 (sr)
BR (1) BR112018007876B1 (sr)
DK (1) DK3378859T3 (sr)
ES (1) ES2760510T3 (sr)
HR (1) HRP20192209T1 (sr)
HU (1) HUE047785T2 (sr)
LT (1) LT3378859T (sr)
MX (1) MX380122B (sr)
PL (1) PL3378859T3 (sr)
PT (1) PT3378859T (sr)
RS (1) RS59763B1 (sr)
RU (1) RU2727198C2 (sr)
SI (1) SI3378859T1 (sr)
TW (1) TWI718207B (sr)
WO (1) WO2017084494A1 (sr)

Families Citing this family (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10266542B2 (en) 2017-03-15 2019-04-23 Mirati Therapeutics, Inc. EZH2 inhibitors
MX393601B (es) * 2017-05-18 2025-03-21 Jiangsu Hengrui Medicine Co Uso del inhibidor mejorador de homologo zeste 2 (ezh2) combinado con el inhibidor tirosina cinasa de bruton (btk) en la preparacion de farmacos para tratar tumores.
MX386586B (es) 2017-05-18 2025-03-19 Jiangsu Hengrui Medicine Co Cristal de base libre de derivados benzofurano y método de preparación.
CN111094279B (zh) * 2017-11-10 2023-06-16 江苏恒瑞医药股份有限公司 一种苯并呋喃衍生物的制备方法
DK3746446T3 (da) 2018-01-31 2022-06-27 Mirati Therapeutics Inc PRC2-inhibitorer
CN110179796B (zh) * 2018-02-23 2023-01-24 江苏恒瑞医药股份有限公司 一种苯并呋喃类衍生物的组合物及制备方法
CN110563722A (zh) * 2018-06-06 2019-12-13 上海青煜医药科技有限公司 吡啶或哒嗪并环化合物及其应用
TW202027787A (zh) * 2018-09-29 2020-08-01 大陸商江蘇恆瑞醫藥股份有限公司 Ｅｚｈ２抑制劑與免疫檢查點抑制劑聯合在製備治療腫瘤的藥物中的用途
CN113631541B (zh) 2019-03-25 2024-10-01 上海华汇拓医药科技有限公司 酰胺类化合物制备方法及其在医药领域的应用
US12421228B2 (en) 2019-04-22 2025-09-23 Mirati Therapeutics, Inc. Naphthyridine derivatives as PRC2 inhibitors
WO2020220562A1 (zh) * 2019-04-29 2020-11-05 上海和誉生物医药科技有限公司 苯并呋喃-6-甲酰胺衍生物、其制备方法和药学上的应用
CN110003187B (zh) * 2019-05-10 2021-11-05 南京工业大学 一种多氟烷基取代苯并呋喃类化合物及其制备方法
TW202108578A (zh) * 2019-05-10 2021-03-01 大陸商江蘇恒瑞醫藥股份有限公司 6-取代氨基苯并呋喃化合物的製備方法
CN112007162B (zh) * 2019-05-30 2023-05-12 江苏恒瑞医药股份有限公司 Ezh2抑制剂与免疫检查点抑制剂、vegfr抑制剂联合在制备治疗肿瘤药物中的用途
CN110172448B (zh) * 2019-05-30 2020-07-28 中南大学湘雅二医院 一种滑膜肉瘤细胞系hSS-005R及其子代细胞系
US12252493B2 (en) 2019-06-05 2025-03-18 Mirati Therapeutics, Inc. Imidazo[1,2-c]pyrimidine derivatives as PRC2 inhibitors for treating cancer
WO2020259667A1 (zh) * 2019-06-28 2020-12-30 江苏恒瑞医药股份有限公司 Tlr激动剂与抗ox40抗体或其抗原结合片段联合在制备治疗肿瘤的药物中的用途
WO2021063332A1 (zh) * 2019-09-30 2021-04-08 江苏恒瑞医药股份有限公司 一种ezh2抑制剂与cdk4/6抑制剂联合在制备治疗肿瘤药物中的用途
WO2021063331A1 (zh) * 2019-09-30 2021-04-08 江苏恒瑞医药股份有限公司 EZH2抑制剂与含有TGF-β受体的融合蛋白联合在制备治疗肿瘤的药物中的用途
WO2021063340A1 (zh) * 2019-09-30 2021-04-08 江苏恒瑞医药股份有限公司 Ezh2抑制剂与免疫检查点抑制剂、酪氨酸激酶抑制剂联合在制备治疗肿瘤药物中的用途
CN112870365A (zh) * 2019-11-29 2021-06-01 江苏恒瑞医药股份有限公司 Ezh2抑制剂和/或parp抑制剂与化疗药物联合在制备治疗肿瘤药物中的用途
JP2024530310A (ja) * 2021-08-30 2024-08-16 江▲蘇▼恒瑞医▲薬▼股▲フン▼有限公司 Ｔ細胞リンパ腫治療薬の調製におけるｅｚｈ２阻害剤の使用
US20250092026A1 (en) 2021-10-15 2025-03-20 Jiangsu Hengrui Medicine Co., Ltd. Method for preparing benzofuran derivative
EP4536658A1 (en) 2022-06-13 2025-04-16 Treeline Biosciences, Inc. 1,8-naphthyridin-2-one heterobifunctional bcl6 degraders
WO2023244918A1 (en) 2022-06-13 2023-12-21 Treeline Biosciences, Inc. Quinolone bcl6 bifunctional degraders
TW202602861A (zh) * 2024-03-08 2026-01-16 新加坡商歐托梅拉公司 用於靶向自噬之苯并呋喃衍生物

Family Cites Families (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20110275630A1 (en) 2003-06-02 2011-11-10 Abbott Laboratories Isoindolinone kinase inhibitors
EP2245023B1 (en) * 2008-02-14 2011-12-28 F. Hoffmann-La Roche AG Heterocyclic antiviral compounds
US8846935B2 (en) 2010-05-07 2014-09-30 Glaxosmithkline Llc Indazoles
JP5889875B2 (ja) * 2010-05-07 2016-03-22 グラクソスミスクライン・リミテッド・ライアビリティ・カンパニーＧｌａｘｏＳｍｉｔｈＫｌｉｎｅ ＬＬＣ アザインダゾール
UA110112C2 (uk) * 2010-05-07 2015-11-25 Глаксосмітклайн Ллс Індоли
EP2410171A1 (en) 2010-07-23 2012-01-25 Ewt Ip B.V. Wind turbine having a rotor with hub
SG180031A1 (en) 2010-10-15 2012-05-30 Agency Science Tech & Res Combination treatment of cancer
ES2951688T3 (es) * 2011-02-28 2023-10-24 Epizyme Inc Compuestos de heteroarilo biciclico fusionados en 6,5 sustituidos
JO3363B1 (ar) 2011-04-13 2019-03-13 Epizyme Inc مركبات بنزين مستبدلة بأريل أو أريل غير متجانس
TWI598336B (zh) * 2011-04-13 2017-09-11 雅酶股份有限公司 經取代之苯化合物
EP2755962B1 (en) * 2011-09-13 2017-03-01 Glaxosmithkline LLC Azaindazoles
CA2850570A1 (en) 2011-09-30 2013-04-04 Glaxosmithkline Llc Methods of treating cancer
WO2013067300A1 (en) 2011-11-04 2013-05-10 Glaxosmithkline Intellectual Property (No. 2) Limited Method of treatment
WO2013173441A2 (en) 2012-05-16 2013-11-21 Glaxosmithkline Llc Enhancer of zeste homolog 2 inhibitors
UA111305C2 (uk) 2012-12-21 2016-04-11 Пфайзер Інк. Конденсовані лактами арилу та гетероарилу
EP2991980B1 (en) 2013-04-30 2019-01-02 Glaxosmithkline Intellectual Property (No. 2) Limited Enhancer of zeste homolog 2 inhibitors
WO2015077194A1 (en) * 2013-11-22 2015-05-28 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of lysine methyl transferase
SI3121175T1 (sl) 2014-03-17 2020-07-31 Daiichi Sankyo Company, Limited Derivati 1,3-benzodioksola kot EZH1 in/ali EZH2 inhibitorji

Also Published As

Publication number Publication date
AU2016357900B2 (en) 2020-09-17
WO2017084494A1 (zh) 2017-05-26
PT3378859T (pt) 2019-12-11
EP3378859A4 (en) 2018-09-26
DK3378859T3 (da) 2020-01-20
MX380122B (es) 2025-03-11
JP2018538257A (ja) 2018-12-27
KR20180081587A (ko) 2018-07-16
US10759787B2 (en) 2020-09-01
KR20250028514A (ko) 2025-02-28
JP6828229B2 (ja) 2021-02-10
AU2016357900A1 (en) 2018-05-24
PL3378859T3 (pl) 2020-04-30
RU2018119173A3 (sr) 2020-02-13
LT3378859T (lt) 2020-01-27
RU2018119173A (ru) 2019-12-19
MX2018005019A (es) 2018-06-13
US11059811B2 (en) 2021-07-13
BR112018007876A2 (pt) 2018-10-30
EP3378859A1 (en) 2018-09-26
BR112018007876B1 (pt) 2023-10-17
CN107428742A (zh) 2017-12-01
RU2727198C2 (ru) 2020-07-21
HUE047785T2 (hu) 2020-05-28
TW201718561A (zh) 2017-06-01
CN107428742B (zh) 2020-05-08
HK1243414A1 (zh) 2018-07-13
ES2760510T3 (es) 2020-05-14
CA3002436A1 (en) 2017-05-26
EP3378859B1 (en) 2019-10-30
US20180327394A1 (en) 2018-11-15
TWI718207B (zh) 2021-02-11
SI3378859T1 (sl) 2020-03-31
US20200354349A1 (en) 2020-11-12
HRP20192209T1 (hr) 2020-07-24

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11059811B2 (en) Benzofuran derivative, preparation method thereof and use thereof in medicine
JP7642647B2 (ja) 置換三環式化合物
CN107759587B (zh) [1,2,4]三唑并[1,5-a]吡啶类化合物及其制备方法和医药用途
KR101829940B1 (ko) 프탈라지논 케톤 유도체, 이의 제조방법, 및 이의 약학적 용도
KR20190005876A (ko) 액티빈 수용체 유사 키나아제의 저해제
EP3319966B1 (en) Bicyclic heterocyclic compounds as pde2 inhibitors
TWI669300B (zh) 嘧啶類衍生物、其製備方法、其藥物組合物以及其在醫藥上的用途
JP2023518609A (ja) 新規アミノピリミジン系ｅｇｆｒ阻害剤
JP7663968B2 (ja) Ｗｄｒ５阻害剤及び調節剤
KR20150132170A (ko) 야누스 키나제 억제제로서의 비-시클릭 시아노에틸피라졸로 피리돈
WO2020200069A1 (zh) 吡咯并杂环类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
TW202045493A (zh) ２－胺基嘧啶類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用
EP4562002A1 (en) Substituted bicyclic heteroaryl sulfonamide derivatives for the treatment of cancer
CA3002436C (en) Benzofuran derivative, preparation method thereof and use thereof in medicine
CN115124554A (zh) 吡咯酮并嘧啶类化合物、其制备方法及其在医药上的应用
CN112996784B (zh) 吲哚衍生物及其在医药上的应用
CN114907406A (zh) 嘧啶衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
HK40059622A (en) Pyrroloheterocyclic derivative, preparation method therefor, and application thereof in medicine
KR20150130309A (ko) 야누스 키나제 억제제로서의 시클로알킬 니트릴 피라졸로 피리돈