RS60350B1 - Kombinovani tretman agonistom tlr7 i inhibitorom sklopa hbv kapsida - Google Patents

Kombinovani tretman agonistom tlr7 i inhibitorom sklopa hbv kapsida

Info

Publication number
RS60350B1
RS60350B1 RS20200644A RSP20200644A RS60350B1 RS 60350 B1 RS60350 B1 RS 60350B1 RS 20200644 A RS20200644 A RS 20200644A RS P20200644 A RSP20200644 A RS P20200644A RS 60350 B1 RS60350 B1 RS 60350B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
compound
oxo
methyl
amino
thiazolo
Prior art date
Application number
RS20200644A
Other languages
English (en)
Inventor
Lue Dai
Lu Gao
Original Assignee
Hoffmann La Roche
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Hoffmann La Roche filed Critical Hoffmann La Roche
Publication of RS60350B1 publication Critical patent/RS60350B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/21—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates
    • A61K31/215—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids
    • A61K31/216—Esters, e.g. nitroglycerine, selenocyanates of carboxylic acids of acids having aromatic rings, e.g. benactizyne, clofibrate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/38—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom
    • A61K31/381—Heterocyclic compounds having sulfur as a ring hetero atom having five-membered rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/426—1,3-Thiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/513—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. cytosine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/52—Purines, e.g. adenine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A61K31/52—Purines, e.g. adenine
    • A61K31/522—Purines, e.g. adenine having oxo groups directly attached to the heterocyclic ring, e.g. hypoxanthine, guanine, acyclovir
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5355—Non-condensed oxazines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/66—Phosphorus compounds
    • A61K31/675—Phosphorus compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pyridoxal phosphate
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
    • A61K31/7042—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings
    • A61K31/7052—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides
    • A61K31/706—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom
    • A61K31/7064—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines
    • A61K31/7068—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid
    • A61K31/7072—Compounds having saccharide radicals and heterocyclic rings having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. nucleosides, nucleotides containing six-membered rings with nitrogen as a ring hetero atom containing condensed or non-condensed pyrimidines having oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. cytidine, cytidylic acid having two oxo groups directly attached to the pyrimidine ring, e.g. uridine, uridylic acid, thymidine, zidovudine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/12—Antivirals
    • A61P31/20—Antivirals for DNA viruses
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Virology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Saccharide Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)

Description

OPIS
Predmetni pronalazak se odnosi na kompozicije i postupke za lečenje infekcije virusom hepatitisa B. Konkretno, predmetni pronalazak je usmeren na kombinovanu terapiju koja uključuje primenu agonista TLR7 i inhibitora sklopa HBV kapsida za upotrebu u lečenju pacijenta sa hroničnim hepatitisom B.
OBLAST PRONALASKA
Hronična infekcija virusom hepatitisa B (HBV) ozbiljan je problem javnog zdravlja širom sveta, a više od 240 miliona ljudi je hronično zaraženo širom sveta. HBV pripada familiji virusa Hepadnaviridae. Nakon ulaska u hepatocit, njegov virusni genom se dostavlja u jezgro, gde se kovalentno zatvorena kružna DNK (cccDNK) formira putem popravke DNK delimično dvolančane cccDNK virusnog genoma koji služi kao predložak za transkripciju virusnih RNK. Virusna predgenomska RNK interaguje sa drugim dvema virusnim komponentama, kapsidnim proteinom i polimerazom, kako bi se formirale čestice kapsida u kojima se dešava replikacija virusne DNK. HBV ima ikosaedarsko jezgro koje obuhvata 240 kopija proteina kapsida (ili jezgra). Preovlađujuća biološka funkcija kapsidnog proteina je da deluje kao strukturni protein za zatvaranje kapsida pregenomske RNK i formiranje nezrelih kapsidnih čestica u citoplazmi. Ovaj korak je preduslov za replikaciju viralne DNK. Kada je skoro celokupna dužina opuštenog prstena DNK formirana putem reverzne transkripcije viralne pregenomske RNK, nezreli kapsid postaje zreli kapsid. Većina kopija enkapsidiranog genoma se efikasno povezuje sa ćelijskim lipidima i proteinima virusnog omotača (S, M i L) za sastavljanje i izlučivanje viriona. Međutim, proizvode se i neinfektivne čestice koje znatno nadmašuju zarazne virione. Ove prazne čestice sa omotačem nazivaju se subvirusne čestice (SVP). S, M i L proteini omotača eksprimirani su iz jednog ORF (otvorenog okvira za čitanje) koji sadrži tri različita početna kodona. Sva tri proteina dele sekvencu 226aa, S-domen, na svojim C-terminusima. S-domen sadrži epitop HBsAg (Lambert, C. i R. Prange. Virol J, 2007, 4, 45).
Mnoga zapažanja su pokazala da nekoliko HBV virusnih proteina može suzbiti početni ćelijski odgovor domaćina uticajem na signalni sistem za prepoznavanje virusa i potom antivirusnu aktivnost interferona (IFN). Među njima, prekomerno izlučivanje praznih subvirusnih čestica HBV može učestvovati u održavanju imunološkog tolerantnog stanja koje se zapaža kod hronično inficiranih bolesnika (CHB). Perzistentna izloženost HBsAg i drugim virusnim antigenima može dovesti do delecije T ćelija specifičnih za HBV ili do progresivnog funkcionalnog oštećenja (Kondo i sar., Journal of Immunology 1993, 150, 4659-4671; Kondo i sar., Journal of Medical Virology 2004, 74, 425-433; Fisicaro i sar. Gastroenterology, 2010, 138, 682-93;). Nadalje, za HBsAg je prijavljeno da suzbija funkciju imunskih ćelija poput monocita, dendritskih ćelija (DC) i ćelija prirodnih ubica (NK) direktnom interakcijom (Op den Brouw i sar. Immunology, 2009b, 126, 280-9; Woltman i sar. PLoS One, 2011, 6, e15324; Shi i sar. J Viral Hepat. 2012, 19, e26-33; Kondo i sar. ISRN Gasteroenterology, 2013, ID članka 935295).
Kvantifikacija HBsAg je bila pokazatelj prognoze i odgovora na lečenje kod hroničnog hepatitisa B. Gubitak i serokonverzija HBsAg su cilj kliničkog izlečenja, ali se retko primećuju kod hronično inficiranih bolesnika. Trenutna terapija, kao što su analozi nukleozida (nukleotida) koji inhibiraju sintezu DNK HBV, ne utiče direktno na nivo HBsAg. Analozi nukleozida (nukleotida), čak i uz produženu terapiju, pokazali su vrlo nisku stopu klirensa HBsAg uporedivu sa onima primećenim u prirodi (Janssen i sar. Lancet, 2005, 365, 123-9; Marcellin i sar., N. Engl. J. Med., 2004, 351, 1206-17; Buster i sar. Hepatology, 2007, 46, 388-94).
Zvonasti receptori (TLR) otkrivaju širok opseg očuvanih molekulskih obrazaca povezanih sa patogenima (PAMP). Oni igraju važnu ulogu u otkrivanju invazivnih patogena i naknadnom pokretanju urođenog imunološkog odgovora. Kod čoveka postoji 10 poznatih članova porodice TLR, koji su transmembranski proteini tipa I koji sadrže ekstracelularni domen bogat leucinom i citoplazmatski rep koji sadrži sačuvani domen zvonastog / interleukinskog (IL)-1 receptora (TIR). U okviru ove porodice, TLR3, TLR7, TLR8 i TLR9 se nalaze u endozomima. TLR7 se može aktivirati vezivanjem za specifični ligand malog molekula (tj. agonist TLR7) ili njegov nativni ligand (tj. jednolančana RNK, ssRNK). Nakon vezivanja ssRNK za TLR7, smatra se da receptor u svom dimerizovanom obliku prolazi strukturnu promenu koja dovodi do naknadnog regrutovanja adapterskih proteina u njegovom citoplazmatskom domenu, uključujući gen 88 primarnog odgovora mijeloidne diferencijacije (MyD88). Nakon pokretanja signalne kaskade receptora pomoću puta MyD88, aktiviraju se faktori citoplazmatske transkripcije poput regulatornog faktora interferona 7 (IRF-7) i nuklearnog faktora kapa B (NF-<Κ>B). Ti faktori transkripcije se tada translociraju u jezgro i pokreću transkripciju različitih gena, npr. IFN-α i drugih antivirusnih gena citokina. TLR7 se pretežno eksprimira na ćelijama plazmacitoida, a takođe i na B-ćelijama. Izmenjena responsivnost imunih ćelija može doprineti smanjenom urođenom imunološkom odgovoru tokom hroničnih virusnih infekcija. Agonistom indukovana aktivacija TLR7 može stoga predstavljati novi pristup u lečenju hroničnih virusnih infekcija. (D. J Connolly i L. AJ O’Neill, Current Opinion in Pharmacology 2012, 12:510-518, P. A. Roethle i sar., J. Med. Chem. 2013, 56, 7324-7333).
Lečenje oralnim agonistom TLR7 je obećavajuće rešenje za pružanje veće efikasnosti i bolje podnošljivosti. Pegilovani IFN-α (PEG-IFN-α) trenutno se koristi za lečenje hroničnog HBV-a, i predstavlja alternativu potencijalno doživotnom lečenju antivirusnim analozima nukleozida/nukleotida. U podskupu pacijenata sa hroničnim HBV-om, terapija sa PEG-IFN-α može izazvati održivu imunološku kontrolu virusa nakon ograničenog trajanja terapije.
Međutim, procenat pacijenata sa HBV-om koji postižu serokonverziju pri terapiji interferonom je nizak (do 27% za pacijente pozitivne na HBeAg) i lečenje se obično slabo podnosi. Nadalje, funkcionalno izlečenje (definisano kao gubitak HBsAg i serokonverzija) je takođe vrlo retko i kod PEG-IFN-α i kod lečenja nukleozidima/nukleotidima. Uzevši u obzir ta ograničenja, postoji hitna potreba za poboljšanim terapeutskim opcijama za lečenje i indukovanje funkcionalnog izlečenja za hronični HBV. Lečenje oralnim agonistom TLR7 malog molekula je obećavajući pristup koji ima potencijal da pruži veću efikasnost i podnošljivost (T. Asselah i sar. Clin Liver Dis 2007, 11, 839-849).
HBV kapsidni protein ima ključnu ulogu u HBV replikaciji.
Heteroarildihidropirimidini ili HAP, uključujući jedinjenja pod nazivom Bay 41-4109, Bay 38-7690 i Bay 39-5493, otkriveni su na skriningu zasnovanom na kulturi tkiva (Deres K. i sar. Science 2003, 893). Ovi HAP analozi deluju kao sintetički alosterni aktivatori i sposobni su da indukuju aberantnu formaciju kapsida, što dovodi do degradacije jezgra proteina. HAP analozi takođe reorganizuju jezgro proteina od prethodno sklopljenih kapsida u nekapsidne polimere, verovatno interakcijom HAP sa dimerima oslobođenim tokom „disanja“ kapsida, kratkotrajnim prekidom pojedinačnih veza između podjedinica. Bay 41-4109 je primenjen na model transgenskih miševa ili humanizovanih miševa inficiranih virusom HBV, i pokazana je in vivo efikasnost redukcije DNK HBV (Deres K. i sar. Science 2003, 893; Brezillon N. i sar. PLoS ONE 2011, e25096). Takođe je pokazano da bis-ANS, mali molekul koji deluje kao molekulski „klin“ i ometa normalnu geometriju kapsidnog proteina i formiranje kapsida (Zlotnick A. i sar. J. Virol.2002, 4848-4854).
Sada, standard kliničkog lečenja HBV infekcije jeste gubitak i/ili serokonverzija HBsAg. Iako su PEG-IFN-α i nukleozidi (nukleotidi) dostupni pacijentima sa HBV, većina (oko ili više od 90%) lečenih pacijenata ne uspeva da postigne ovaj cilj, uglavnom zbog činjenice da trenutne terapije ne mogu prouzrokovati pojavu neutrališućih antitela na HBsAg (anti-HBs), znak razrešenja HBV infekcije, kod većine hronično inficiranih pacijenata.
Stoga sigurno postoji medicinska potreba za tretmanima koji imaju poboljšanu stopu uspeha indukovanja gubitka HBsAg i/ili serokonverzije i promovisanja proizvodnje anti-HBs.
WO2013/096744 se odnosi na metodu inhibiranja, suzbijanja ili sprečavanja infekcije HBV-om kod pojedinca, koja uključuje davanje pojedincu terapeutski efikasne količine najmanje jednog jedinjenja.
US2014/275167 se odnosi na jedinjenja korisna u lečenju HBV infekcije kod čoveka.
WO2009/026292 se odnosi na postupak za lečenje bolesti poput virusnih infekcija, tumora i kancera, koji obuhvata primenu agonista TLR7 ili prolek agonista TLR7 prema cikličnom rasporedu doziranja koji ima period doziranja i period mirovanja.
WO2006/066080 se odnosi na jedinjenja 3,5-disupstituisani i 3,5,7-trisupstituisani-3-H-oksazolo i 3H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2-on i prolekove koji imaju imunomodulatorsku aktivnost. Takođe je usmeren na terapeutsku ili profilaktičku upotrebu takvih jedinjenja i farmaceutskih kompozicija koje ih sadrže, i na ovde opisane postupke lečenja bolesti i poremećaja, davanjem efikasnih količina takvih jedinjenja i prolekova.
WO2014/184328 se odnosi na jedinjenja, i/ili na njihove farmaceutski prihvatljive soli, ili tautomere, ili na njihove enantiomere, ili na njihove dijastereomere. Takođe sadrži kompozicije koje uključuju jedinjenja i postupke za upotrebu ovih jedinjenja za lečenje ili profilaksu infekcije virusom hepatitisa B.
WO2014/037480 se odnosi na jedinjenja, kompozicije koje uključuju jedinjenja i postupke za upotrebu tih jedinjenja.
SAŽETAK PRONALASKA
Predmetni pronalazak se odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži agonist TLR7 i inhibitor kapsidnog sklopa HBV, u farmaceutski prihvatljivom nosaču.
Ovde je „TLR7 agonist“ odabran od
[(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetata strukture
i
5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona strukture
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, enantiomera ili dijastereomera.
Ovde je inhibitor sklopa HBV kapsida odabran od
3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
i
3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, enantiomera ili dijastereomera.
KRATAK OPIS SLIKA
Slika 1: Nivoi DNK HBV i HBsAg iz seruma miševa u AAV-HBV modelu miša. Rezultati su prikazani na slici.1 za miševe sa održanim nivoom DNK HBV i HBsAg tretirane vehikulumom (prikazan kao romb), samo jedinjenje 1 pri 100 mg/kg (prikazano kao krug), samo jedinjenje 2 pri 12 mg/kg (prikazano kao trougao) ili kombinacija jedinjenja 1 i jedinjenja 2 (prikazano kao kvadrat). Relativno smanjenje DNK HBV i HBsAg nakon tretmana izračunato je normalizacijom na njihove nivoe u grupi sa vehikulumom kao početnom vrednošću. Primećen je sinergistički antivirusni efekat smanjenja HBsAg kod miševa lečenih kombinovanom terapijom, i, što je još važnije, smanjenje DNK HBV i HBsAg održano je tokom dvonedeljnog perioda bez lečenja nakon kombinovane terapije. LLQ: donja granica kvantifikacije.
Slika 2: Rendgenska kristalna struktura jedinjenja 2A-2a.
Slika 3: Rendgenska kristalna struktura jedinjenja 3J.
Slika 4: DNK HBV i HBsAg u miševima zaraženim pomoću AAV-HBV, tretiranim vehikulumom, jedinjenjem 1 (100 mg/kg), jedinjenjem 4 (20 mg/kg) ili kombinacijom jedinjenja 1 i jedinjenja 4. Lečenje je započelo nakon što su miševi zaraženi pomoću AAV-HBV tokom 4 nedelje. Dobijali su lečenje tokom 6 nedelja, i praćeni su još 6 nedelja u periodu bez lečenja. DNK HBV i HBsAg u mišjem serumu izmereni su u naznačenim terminima pomoću RT-qPCR, odnosno HBsAg CLIA. Rezultati su predstavljeni kao srednja vrednost ± SEM. LLQ: donja granica kvantifikacije.
Slika 5: DNK HBV i HBsAg u miševima zaraženim pomoću AAV-HBV, tretiranim vehikulumom, jedinjenjem 3 (30 mg/kg), jedinjenjem 4 (20 mg/kg) ili kombinacijom jedinjenja 3 i
jedinjenja 4. Lečenje je započelo nakon što su miševi zaraženi pomoću AAV-HBV tokom 4 nedelje. Dobijali su lečenje tokom 6 nedelja, i praćeni su još 6 nedelja u periodu bez lečenja. DNK HBV i HBsAg u mišjem serumu izmereni su u naznačenim terminima pomoću RT-qPCR, odnosno HBsAg CLIA. Rezultati su predstavljeni kao srednja vrednost ± SEM. LLQ: donja granica kvantifikacije.
Slika 6: DNK HBV i HBsAg u miševima zaraženim pomoću AAV-HBV, tretiranim vehikulumom, jedinjenjem 1 (100 mg/kg), jedinjenjem 5 (12mg/kg) ili kombinacijom jedinjenja 1 i jedinjenja 5. Lečenje je započelo nakon što su miševi zaraženi pomoću AAV-HBV tokom 4 nedelje. Dobijali su lečenje tokom 6 nedelja, i praćeni su još 6 nedelja u periodu bez lečenja. DNK HBV i HBsAg u mišjem serumu izmereni su u naznačenim terminima pomoću RT-qPCR, odnosno HBsAg CLIA. Rezultati su predstavljeni kao srednja vrednost ± SEM. LLQ: donja granica kvantifikacije.
Slika 7: Nivo anti-HBs antitela (antitelo na HBsAg) u serumu svakog miša koji uzima pojedinačno ili kombinovano lečenje, kako je opisano na slikama 4, 5 i 6. Uzorci seruma prikupljeni su 24. dana nakon prekida lečenja, i anti-HBs su izmereni pomoću anti-HBs CLIA. LLQ: donja granica kvantifikacije.
Slika 8: DNK HBV i HBsAg u miševima zaraženim pomoću AAV-HBV, tretiranim vehikulumom, jedinjenjem 8 (300mg/kg), jedinjenjem 4 (20 mg/kg) ili kombinacijom jedinjenja 8 i jedinjenja 4. Lečenje je započelo nakon što su miševi bili zaraženi pomoću AAV-HBV najmanje 38 dana. Dobijali su lečenje tokom 6 nedelja, i praćeni su još 6 nedelja u periodu bez lečenja. DNK HBV i HBsAg u mišjem serumu izmereni su u naznačenim terminima pomoću RT-qPCR, odnosno HBsAg CLIA. Rezultati su predstavljeni kao srednja vrednost ± SEM. LLQ: donja granica kvantifikacije.
Slika 9: DNK HBV i HBsAg u miševima zaraženim pomoću AAV-HBV, tretiranim vehikulumom, jedinjenjem 8 (300mg/kg), jedinjenjem 10 (20 mg/kg) ili kombinacijom jedinjenja 8 i jedinjenja 10. Lečenje je započelo nakon što su miševi bili zaraženi pomoću AAV-HBV najmanje 38 dana. Dobijali su lečenje tokom 6 nedelja, i praćeni su još 6 nedelja u periodu bez lečenja. DNK HBV i HBsAg u mišjem serumu izmereni su u naznačenim terminima pomoću RT-qPCR, odnosno HBsAg CLIA. Rezultati su predstavljeni kao srednja vrednost ± SEM. LLQ: donja granica kvantifikacije.
Slika 10: DNK HBV i HBsAg u miševima zaraženim pomoću AAV-HBV, tretiranim vehikulumom, jedinjenjem 1 (100 mg/kg), jedinjenjem 10 (20 mg/kg) ili kombinacijom jedinjenja 1 i jedinjenja 10. Lečenje je započelo nakon što su miševi bili zaraženi pomoću AAV-HBV najmanje 38 dana. Dobijali su lečenje tokom 6 nedelja, i praćeni su još 6 nedelja u periodu bez lečenja. DNK HBV i HBsAg u mišjem serumu izmereni su u naznačenim terminima pomoću RT-qPCR, odnosno HBsAg CLIA. Rezultati su predstavljeni kao srednja vrednost ± SEM. LLQ: donja granica kvantifikacije.
Slika 11: Nivo anti-HBs antitela (antitelo na HBsAg) u serumu svakog miša koji uzima pojedinačno ili kombinovano lečenje, kako je opisano na slikama 8, 9 i 10. Uzorci seruma prikupljeni su 31. dana nakon prekida lečenja, i anti-HBs su izmereni pomoću anti-HBs CLIA. LLQ: donja granica kvantifikacije.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
Ukoliko nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni pojmovi koji se ovde koriste imaju isto značenje kao što je obično poznato stručnjaku u ovoj oblasti u koju spada ovaj pronalazak.
Kao što se ovde koristi, termin „C1−6alkil“ se odnosi na jednovalentnu linearnu ili račvastu zasićenu ugljovodoničnu grupu sa 1 do 6 atoma ugljenika. U specifičnim otelotvorenjima, C1−6alkil ima 1 do 6 atoma ugljenika, a u specifičnijim otelotvorenjima 1 do 4 atoma ugljenika. Primeri za C1−6alkil uključuju metil, etil, propil, izopropil, n-butil, izobutil, sek-butil ili terc-butil.
Kao što se ovde koriste, termini „halo“ ili „halogen“ se koriste naizmenično, i označavaju fluor, hlor, brom ili jod.
Termin „C1−6alkoksi“ se odnosi na grupu C1−6alkil-O−, pri čemu je „C1−6alkil“ kao što je prethodno definisano; na primer metoksi, etoksi, propoksi, izo-propoksi, n-butoksi, izobutoksi, 2-butoksi i terc-butoksi. Posebne „C1−6alkoksi“ grupe su metoksi i etoksi, a posebno metoksi.
Kao što se ovde koristi, termin „C3−7cikloalkil“ se odnosi na zasićeni ugljenični prsten koji sadrži od 3 do 7 atoma ugljenika, posebno od 3 do 6 atoma ugljenika, na primer, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil i cikloheptil. Obično „C3−7cikloalkil“ grupe predstavljaju ciklopropil, ciklopentil i cikloheksil.
Kao što se ovde koristi, termin alkenil“ se odnosi na alkenil grupu nezasićenog, linearnog ili razgranatog lanca koja sadrži 2 do 6, posebno 2 do 4 atoma ugljenika, na primer vinil, propenil, alil i butenil. Konkretna „C2−6alkenil“ grupa je alil.
Kao što se ovde koristi, termin alkinil“ se odnosi na alkinil grupu nezasićenog, linearnog ili razgranatog lanca koja sadrži 2 do 6, posebno 2 do 4 atoma ugljenika, na primer etinil, 1-propinil, propargil, i butinil. Posebne alkinil“ grupe su etinil, 1-propinil i propargil.
Kao što se ovde koristi, termin „heterociklični“ prsten ili „heterociklil“ se odnosi na zasićeni ili delimično nezasićeni monociklični ili biciklični prsten koji sadrži od 3 do 10 atoma u prstenu, koji može sadržati jedan, dva ili tri atoma odabrana od azota, kiseonika i/ili sumpora. Primeri za monociklični heterociklil prsten koji sadrži konkretno od 3 do 7 atoma u prstenu uključuju aziridinil, azetidinil, oksetanil, piperidinil, piperazinil, azepinil, diazepanil, pirolidinil, morfolinil, dihidrofuril, tetrahidrofuril, tetrahidropiranil, tetrahidrotiopiranili tiomorfolinil. Biciklični heterociklil može biti biciklični kondenzovani prsten ili biciklični premošćeni prsten. Primeri za biciklični heterociklil su 8-aza-biciklo[3.2.1]oktil, hinuklidinil, 8-oksa-3-aza-biciklo[3.2.1]oktil, 9-aza-biciklo[3.3.1]nonil, 3-oksa-9-aza-biciklo[3.3.1]nonil, 3-tia-9-aza-biciklo[3.3.1]nonil ili difluorazabiciklo[3.2.1]oktil. Monociklični i biciklični heterociklil može biti dodatno supstituisan halogenom, alkil, cijano, karboksi, karboksiC1−6alkilom.
Izraz „heterociklični amino“ se odnosi na amino grupu sa atomom azota na heterocikličnom prstenu, pri čemu je „heterociklični“ prsten kao što je gore definisano.
Kao što se ovde koristi, termin „dijastereomer“ se odnosi na stereoizomer sa dva ili više hiralnih centara i čiji molekuli uzajamno nisu kao likovi u ogledalu. Dijastereomeri imaju različita fizička svojstva, npr. tačku topljenja, tačku ključanja, spektralne osobine, aktivnost i reaktivnost.
Kao što se ovde koristi, termin „enantiomeri“ se odnosi na dva stereoizomera jedinjenja koji nisu međusobno preklopivi kao likovi u ogledalu.
1
Kao što se ovde koristi, termin „farmaceutski prihvatljive soli” se odnosi na soli koje nisu biološki ili na drugi način nepoželjne. Farmaceutski prihvatljive soli uključuju kisele i bazne adicione soli.
Kao što se ovde koristi, termin „prolek“ se odnosi na oblik ili derivat jedinjenja koji se metaboliše in vivo, npr. pomoću bioloških tečnosti ili enzima od strane ispitanika nakon primene, u farmakološki aktivni oblik jedinjenja kako bi se proizvelo željeno farmakološko dejstvo. Prolekovi su opisani npr. u „The Organic Chemistry of Drug Design and Drug Action” („Organska hemija dizajna i dejstva lekova“), čiji je autor Richard B. Silverman, Academic Press, San Diego, 2004, Poglavlje 8 Prodrugs and Drug Delivery Systems (Prolekovi i sistemi za isporuku lekova), str.497-558.
Termin „farmaceutski prihvatljiva kisela adiciona so“ se odnosi na one farmaceutski prihvatljive soli formirane sa neorganskim kiselinama, kao što su hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, sumporna kiselina, azotna kiselina, ugljena kiselina, fosforna kiselina, i organskim kiselinama odabranim od alifatičnih, cikloalifatičnih, aromatičnih, aralifatičnih, heterocikličnih, karboksilnih i sulfonskih organskih kiselina, kao što su mravlja kiselina, sirćetna kiselina, propionska kiselina, glikolna kiselina, glukonska kiselina, mlečna kiselina, piruvinska kiselina, oksalna kiselina, jabučna kiselina, maleinska kiselina, malonska kiselina, ćilibarna kiselina, fumarna kiselina, vinska kiselina, limunska kiselina, asparaginska kiselina, askorbinska kiselina, glutaminska kiselina, antranilna kiselina, benzojeva kiselina, cimetna kiselina, bademova kiselina, embonska kiselina, fenilsirćetna kiselina, metansulfonska kiselina, etansulfonska kiselina, p-toluensulfonska kiselina i salicilna kiselina.
Termin „farmaceutski prihvatljiva bazna adiciona so” se odnosi na one farmaceutski prihvatljive soli formirane sa organskom ili neorganskom bazom. Primeri za prihvatljive neorganske baze uključuju soli natrijuma, kalijuma, amonijaka, kalcijuma, magnezijuma, gvožđa, cinka, bakra, mangana i aluminijuma. Soli izvedene iz farmaceutski prihvatljivih organskih netoksičnih baza obuhvataju soli primarnih, sekundarnih i tercijarnih amina, supstituisanih amina, uključujući i supstituisane amine koji se nalaze u prirodi, cikličnih amina i baznih jonoizmenjivačkih smola, kao što su izopropilamin, trimetilamin, dietilamin, trietilamin, tripropilamin, etanolamin, 2-dietilaminoetanol, trimetamin, dicikloheksilamin, lizin, arginin, histidin, kafein, prokain, hidrabamin, holin, betain, etilendiamin, glukozamin, metilglukamin, teobromin, purini, piperazin, piperidin, N-etilpiperidin, i poliaminske smole.
Jedinjenja opšte formule (I) koja sadrže jedan ili više hiralnih centara mogu biti prisutna kao racemati, dijastereomerne smeše ili optički aktivni pojedinačni izomeri.
Racemati se mogu podeliti prema poznatim postupcima u enantiomere. Naročito, dijastereomerne soli koje se mogu odvojiti putem kristalizacije formiraju se iz racemskih smeša reakcijom sa optički aktivnom kiselinom, kao što je npr. D− ili L-vinska kiselina, bademova kiselina, jabučna kiselina, mlečna kiselina ili kamforsulfonska kiselina.
Kao što se ovde koristi, „kombi“ se odnosi na kombinaciju.
Kao što se ovde koristi, "RT-PCR" se odnosi na lančanu reakciju polimeraze sa reversnom transkripcijom.
Kao što se ovde koristi, "CLIA" se odnosi na imunotest hemiluminiscencije.
Kao što se ovde koristi, "AAV" se odnosi na adeno-asocirani virus.
Kao što se ovde koristi, „AAV-HBV“ se odnosi na rekombinantni virus koji nosi 1,3 kopije HBV genoma upakovane u AAV kapside. Mišji model hronične infekcije HBV može se uspostaviti injektovanjem AAV-HBV miševima putem injekcije u repnu venu. U ovom mišjem modelu, aktivna replikacija HBV daje postojane virusne markere HBV (npr. DNK HBV, HBsAg, HBeAg, itd.).
Kako se ovde koristi, „HBsAg“ se odnosi na površinski antigen hepatitisa B.
Kako se ovde koristi, „HBeAg“ se odnosi na e antigen hepatitisa B.
Kako se ovde koristi, „anti-HBs“ se odnosi na antitela protiv HBsAg.
Kao što se ovde koristi, „HBV specifični prajmeri“ se odnosi na par jednolančanih nukleinskih kiselina koje služe kao polazne i završne tačke za specifičnu amplifikaciju regiona DNK HBV.
Kao što se ovde koristi, „TLR7“ se odnosi na zvonasti receptor 7 bilo kog porekla (npr. ljudski, mišji, mrmota itd.).
Kako se ovde koristi, „agonist TLR7“ se odnosi na jedinjenje koje deluje kao agonist TLR7. Ako nije naznačeno drugačije, agonist TLR7 može uključiti jedinjenje u bilo kom farmaceutski prihvatljivom obliku, uključujući bilo koji izomer (npr. dijastereomer ili enantiomer), so, solvat i polimorf. TLR agonizam za određeno jedinjenje može se odrediti na bilo koji pogodan način. Na primer, testovi za otkrivanje TLR agonizma ispitivanih jedinjenja opisani su, na primer, u US Privremenoj patentnoj prijavi ser. br.60/432,650, podnetoj 11. decembra 2002. godine, i rekombinantne ćelijske linije pogodne za upotrebu u takvim ispitivanjima opisane su, na primer, u US Privremenoj patentnoj prijavi ser. br.60/432,651, podnetoj 11. decembra 2002.
Predmetni pronalazak se odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži agonist TLR7 i inhibitor kapsidnog sklopa HBV, u farmaceutski prihvatljivom nosaču.
U jednom otelotvorenju predmetne prijave, „agonist TLR7“ je referentno jedinjenje formule (I):
pri čemu
R<1>je hidroksi, C1−6alkil, haloC1−6alkil, C1−6alkilkarbonil-O−, C1−6alkil-S−, azido, cijano, C2−6alkenil, C1−6alkilsulfonil-NH−, (C1−6alkil)2N−, C1−6alkilkarbonil-NH− ili heterociklični amino;
R<2>je vodonik, C1−6alkil, C1−6alkoksiC1−6alkil, C3−7cikloalkil, C2−6alkinil, C2−6alkenil, benzil i tiofenil;
R<3>je vodonik ili C1−6alkilkarbonil;
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, enantiomer ili dijastereomer;
U drugom otelotvorenju predmetne prijave, „agonist TLR7“ je referentno jedinjenje formule (II):
1
pri čemu
R<4>i R<5>su nezavisno izabrani od vodonika, C2−6alkenil i C1−6alkil;
R<6>i R<7>su nezavisno izabrani od vodonika, C1−6alkil, C3−7cikloalkil, C3−7cikloalkilC2−6alkinil, C2−6alkenil, C2−6alkinil i 2-tiofenil;
R<8>je vodonik ili C1−6alkilkarbonil;
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, enantiomer ili dijastereomer.
Agonist TLR7 prema predmetnom pronalasku je izabran od
[(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetata strukture
i
5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona strukture
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, enantiomera ili dijastereomera.
Nakon primene, neka od prethodno prikazanih jedinjenja, referentna jedinjenja formule (I) ili formule (II) ili referentna jedinjenja u patentu WO2006/066080 metabolišu se u svoje aktivne oblike koji su korisni agonisti TLR7.
Kao što se ovde koristi, „virus hepatitisa B“ ili „HBV“ se odnosi na člana porodice Hepadnaviridae koji ima mali dvolančani DNK genom od oko 3200 baznih parova i tropizam prema ćelijama jetre. "HBV" uključuje virus hepatitisa B koji inficira sve vrste domaćina sisara (npr. ljudi, primati koji nisu ljudi, itd.) i ptica (patka itd.). „HBV“ uključuje bilo koji poznati genotip HBV, npr. serotip A, B, C, D, E, F i G; bilo koji HBV serotip ili HBV podtip; bilo koji HBV izolat; varijante HBV, npr. HBeAg-negativne varijante, varijante HBV otporne na lekove (npr. varijante otporne na lamivudin; mutanti otporni na adefovir; mutanti otporni na tenofovir; i mutanti otporni na entekavir; itd.).
Kao što se ovde koristi, „inhibitor sklopa HBV kapsida“ odnosi se na jedinjenje koje inhibira i/ili prekida i/ili ubrzava i/ili ometa i/ili odlaže i ili smanjuje i/ili modifikuje normalno sklapanje HBV kapsida (npr. tokom sazrevanja) i/ili normalno rastavljanje kapsida (npr. tokom infektivnosti) i/ili remeti stabilnost kapsida, izazivajući time aberantnu morfologiju i funkciju kapsida.
U jednom otelotvorenju predmetne prijave, inhibitor sklopa HBV kapsida je referentno jedinjenje formule (III):
1
pri čemu
R<9>je C1−6alkil;
R<10>je fenil, koji je jednom ili dva puta ili tri puta supstituisan halogenom ili C1−6alkil grupom;
R<11>je vodonik ili C1−6alkil;
R<12>je monociklični, biciklični kondenzovani ili biciklični premošćeni heterociklil;
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, enantiomer ili dijastereomer.
Inhibitor sklopa HBV kapsida prema predmetnom pronalasku izabran je od
3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il−,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
i
3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
1
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, enantiomera ili dijastereomera.
U jednom otelotvorenju predmetne prijave, farmaceutska kompozicija sadrži agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida, pri čemu su agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida nezavisno izabrani iz tabele 1: (jedinjenja 2 i 4 su otkrivena u patentu WO2015/132276; jedinjenja 5 i 6 su otkrivena u patentu WO2014/184328; jedinjenja 7, 8 i 9 su otkrivena u patentu WO2006/066080; jedinjenje 10 je otkriveno u patentu WO2014/037480).
Tabela 1. Lista agonista TLR7 i HBV kapsida
1
1
Konkretnije, predmetni pronalazak se odnosi na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida koji je izabran od bilo koje od sledećih kombinacija:
jedinjenje 1 i jedinjenje 2; jedinjenje 1 i jedinjenje 4;
jedinjenje 1 i jedinjenje 5 (referentno jedinjenje); jedinjenje 1 i jedinjenje 6 (referentno jedinjenje);
jedinjenje 1 i jedinjenje 10 (referentno jedinjenje); jedinjenje 3 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 2;
1
jedinjenje 3 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 4; jedinjenje 3 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 5 (referentno jedinjenje);
jedinjenje 3 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 6 (referentno jedinjenje); jedinjenje 3 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 10 (referentno jedinjenje);
jedinjenje 7 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 2; jedinjenje 7 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 4;
jedinjenje 7 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 5 (referentno jedinjenje); jedinjenje 7 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 6 (referentno jedinjenje);
jedinjenje 7 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 10 (referentno jedinjenje); jedinjenje 8 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 2;
jedinjenje 8 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 4; jedinjenje 8 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 5 (referentno jedinjenje);
jedinjenje 8 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 6 (referentno jedinjenje); jedinjenje 8 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 10; (referentno jedinjenje)
jedinjenje 9 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 2; jedinjenje 9 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 4;
jedinjenje 9 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 5 (referentno jedinjenje); jedinjenje 9 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 6 (referentno jedinjenje);
jedinjenje 9 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 10 (referentno jedinjenje); jedinjenje 11 i jedinjenje 2;
jedinjenje 11 i jedinjenje 4; jedinjenje 11 i jedinjenje 5 (referentno jedinjenje);
jedinjenje 11 i jedinjenje 6 (referentno jedinjenje); i jedinjenje 11 i jedinjenje 10 (referentno jedinjenje).
Jedinjenje 1 do 11 iz prethodno navedene kombinacije se može zameniti svojom odgovarajućom farmaceutski prihvatljivom solju, enantiomerom ili dijastereomerom, što je drugi aspekt ovog pronalaska.
Jedinjenje 11 iz prethodno navedene kombinacije se može zameniti svojim odgovarajućim mono, dvostrukim ili trostrukim prolekovima, kao što su:
2
njihova farmaceutski prihvatljiva so, enantiomer ili dijastereomer.
Farmaceutska kompozicija se sastoji od agonista TLR7 i inhibitora sklopa HBV kapsida, u farmaceutski prihvatljivom nosaču, pri čemu je kompozicija odabrana od:
[(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetata strukture
i
3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
[(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetata strukture
i
3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona strukture
3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona strukture
i
3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
2
U drugom otelotvorenju predmetnog pronalaska, drugi agonisti TLR7 ili inhibitori sklopa HBV kapsida takođe se mogu koristiti u farmaceutskoj kompoziciji, uključujući male molekule ili velike molekule. Primeri drugih agonista TLR7 uključuju imikvimod, rezikvimod, PF-4878691, SM-276001, ANA975, ANA773 i GS9620. Primeri ostalih inhibitora sklopa HBV kapsida uključuju Bay 41-4109, Bay 38-7690, Bay 39-5493, GLS4, AT-61 i AT-130.
U drugom otelotvorenju predmetnog pronalaska, farmaceutska kompozicija može dodatno da sadrži jedan ili više drugih antivirusnih agenasa, što uključuje lamivudin, adefovir, tenofovir, telbivudin i entekavir.
Uobičajene doze agonista TLR7 i/ili inhibitora sklopa HBV kapsida mogu biti u opsezima koje preporučuje proizvođač, a gde je naznačeno in vitro odgovorima u životinjskim modelima, mogu biti smanjene za do oko jedan red veličine koncentracije ili količine. Tako, stvarna doza će zavisiti od procene lekara, stanja pacijenta, kao i delotvornosti terapijskog postupka na osnovu in vitro odgovora odgovarajućih životinjskih modela.
Drugo referentno otelotvorenje predmetne prijave se odnosi na postupak za proizvodnju leka za lečenje ili profilaksu infekcije virusom hepatitisa B, okarakterisan time što se u leku koriste agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida.
Dalje referentno otelotvorenje predmetnog pronalaska se odnosi na postupak za proizvodnju leka za lečenje ili profilaksu infekcije virusom hepatitisa B, okarakterisan time što se agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida zajedno primenjuju u istoj formulaciji ili različitoj formulaciji.
Za svrhe predmetnog pronalaska, „zajednička primena“ se odnosi na bilo kakvu primenu agonista TLR7 i inhibitora sklopa HBV kapsida kao dva aktivna agensa, odvojeno ili zajedno, kada se dva aktivna agensa primenjuju kao deo odgovarajućeg doznog režima osmišljenog da bi se ostvarila korist od kombinovane terapije. Prema tome, dva aktivna agensa se mogu primeniti ili kao deo iste farmaceutske kompozicije, ili u zasebnim farmaceutskim kompozicijama. Takođe, dva aktivna agensa se mogu primenjivati istovremeno ili sekvencijalno.
Agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida se mogu primenjivati sa različitim farmaceutski prihvatljivim inertnim nosačima u obliku tableta, kapsula, lozengi, pastila, tvrdih bombona, praškova, sprejeva, kremova, melema, supozitorija, želea, gelova, pasta, losiona, masti, eliksira i sirupa. Primena takvih doznih oblika se može obaviti u jednoj ili više doza. Nosači uključuju čvrste razblaživače punilaca, sterilne vodene medijume i razne netoksične organske rastvarače. Primena takvih doznih oblika se može sprovesti oralnom primenom, parenteralnom primenom, veterinarskom primenom.
Dalje referentno otelotvorenje predmente prijave se odnosi na postupak za proizvodnju leka za lečenje ili profilaksu infekcije virusom hepatitisa B, okarakterisan time što su agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida namenjeni za primenu na ispitaniku istim putem ili različitim putevima.
Dalje referentno otelotvorenje predmetne prijave se odnosi na postupak za proizvodnju leka za lečenje ili profilaksu infekcije virusom hepatitisa B, okarakterisan time što su agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida namenjeni za primenu na ispitaniku putem parenteralne ili oralne primene.
Dalje referentno otelotvorenje predmetne prijave se odnosi na postupak za proizvodnju leka za lečenje ili profilaksu infekcije virusom hepatitisa B, okarakterisan time što je primena agonista TLR7 i inhibitora sklopa HBV kapsida na ispitaniku istovremena ili sekvencijalna. U bilo kom od postupaka predmetne prijave, istovremena primena agenasa može biti izvršena odvojenom ili sekvencijalnom primenom agenasa istovremeno, ili zajedno kao fiksna kombinacija. Takođe, u bilo kom od postupaka iz predmetne prijave, primena agenasa odvojeno ili sekvencijalno može biti bilo kojim redosledom.
Drugo referentno otelotvorenje predmetne prijave se odnosi na postupak za proizvodnju leka za lečenje ili profilaksu infekcije virusom hepatitisa B, okarakterisan time
2
što je njegov agonist TLR7 jedinjenje formule (I) ili formule (II), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, enantiomer ili dijastereomer.
Agonist TLR7 je izabran od [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-oksotiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksi-tetrahidrofuran-2-il]propil] acetata strukture
i
5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona strukture
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, enantiomera ili dijastereomera.
Drugo referentno otelotvorenje predmetne prijave se odnosi na postupak za proizvodnju leka za lečenje ili profilaksu infekcije virusom hepatitisa B, okarakterisan time što je njegov inhibitor sklopa HBV kapsida referentno jedinjenje formule (III), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, enantiomer ili dijastereomer.
Inhibitor sklopa HBV kapsida je izabran od 3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
2
3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, enantiomera ili dijastereomera.
Drugo referentno otelotvorenje predmetne prijave se odnosi na postupak za proizvodnju leka za lečenje ili profilaksu infekcije virusom hepatitisa B, okarakterisan time što lek dodatno sadrži jedno ili više drugih antivirusnih sredstava, što uključuje lamivudin, adefovir, tenofovir, telbivudin i entekavir.
Drugo referentno otelotvorenje predmetnog pronalaska se odnosi na postupak za proizvodnju leka za lečenje ili profilaksu infekcije virusom hepatitisa B, pri čemu su agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida koji se koriste u leku:
[(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetat i 3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-
2
etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionska kiselina;
[(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetat i 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metilfenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionska kiselina;
[(S)-[(2S,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-1,3-oksatiolan-2-il]-ciklopropil-metil] acetat i 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionska kiselina;
[(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetat i 2-[(1R,3S,5S)-8-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-metoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-6,6-difluor-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-il]sirćetna kiselina;
[(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetat i (S)-4-[(R)-6-(2-hlor-4-fluor-fenil)-5-metoksikarbonil-2-tiazol-2-il-3,6-dihidropirimidin-4-ilmetil]-morfolin-3-karboksilna kiselina;
5-amino-3-(2’-O-acetil-3’-deoksi-β-D-ribofuranozil)-3H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2-on i 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionska kiselina; ili
5-amino-3-(2’-O-acetil-3’-deoksi-β-D-ribofuranozil)-3H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2-on i (S)-4-[(R)-6-(2-hlor-4-fluor-fenil)-5-metoksikarbonil-2-tiazol-2-il-3,6-dihidropirimidin-4-ilmetil]-morfolin-3-karboksilna kiselina; u farmaceutski prihvatljivom nosaču.
Drugo otelotvorenje predmetnog pronalaska se odnosi na komplet koji sadrži ambalažu koja sadrži agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida, pri čemu navedeni komplet može dalje da sadrži sterilni razblaživač.
Dalje otelotvorenje predmetnog pronalaska se odnosi na pomenuti komplet, pri čemu komplet može dalje da sadrži umetak u pakovanju koji sadrži štampano uputstvo koje
2
usmerava upotrebu kombinovanog lečenja agonistom TLR7 i inhibitorom sklopa HBV kapsida kao postupak za lečenje ili profilaksu infekcije virusom hepatitisa B.
Drugo otelotvorenje predmetnog pronalaska se odnosi na pomenuti komplet, pri čemu je agonist TLR7, ambalaža koja sadrži agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida, pri čemu je agonist TLR7 odabran od
[(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetata strukture
; ili
5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona strukture
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, enantiomera ili dijastereomera; i pri čemu je inhibitor sklopa HBV kapsida izabran od
3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
2
3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, enantiomera ili dijastereomera.
Drugo otelotvorenje predmetnog pronalaska se odnosi na navedeni komplet, pri čemu su agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida koji se koriste u ambalaži:
[(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetat i 3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionska kiselina;
[(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetat i 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metilfenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionska kiselina;
[(S)-[(2S,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-1,3-oksatiolan-2-il]-ciklopropil-metil] acetat i 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionska kiselina (referentna kombinacija);
[(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetat i 2-[(1R,3S,5S)-8-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-metoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-6,6-difluor-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-il]sirćetna kiselina (referentna kombinacija);
[(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetat i (S)-4-[(R)-6-(2-hlor-4-fluor-fenil)-5-metoksikarbonil-2-tiazol-2-il-3,6-dihidro-pirimidin-4-ilmetil]-morfolin-3-karboksilna kiselina (referentna kombinacija);
5-amino-3-(2’-O-acetil-3’-deoksi-β-D-ribofuranozil)-3H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2-on i 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionska kiselina (referentna kombinacija); ili
5-amino-3-(2’-O-acetil-3’-deoksi-β-D-ribofuranozil)-3H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2-on i (S)-4-[(R)-6-(2-hlor-4-fluor-fenil)-5-metoksikarbonil-2-tiazol-2-il-3,6-dihidro-pirimidin-4-ilmetil]-morfolin-3-karboksilna kiselina (referentna kombinacija); u farmaceutski prihvatljivom nosaču.
Drugo otelotvorenje predmetne prijave se odnosi na postupak za lečenje ili profilaksu infekcije virusom hepatitisa B koji se sastoji od davanja ispitaniku efikasne prve količine agonista TLR7, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, enantiomera ili dijastereomera; i druge količine inhibitora sklopa HBV kapsida, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, enantiomera ili dijastereomera; pri čemu je agonist TLR7 [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksi-tetrahidrofuran-2-il]propil] acetat; [(S)-[(2S,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-1,3-oksatiolan-2-il]-ciklopropilmetil] acetat; 5-amino-3-(3’-deoksi-β-D-ribofuranozil)-3H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2-on; 5-amino-3- O-acetil-3’-deoksi-β-D-ribofuranozil)-3H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2-on; 5-amino-3-(3’-deoksi-β-D-ribofuranozil)-3H,6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-dion; ili [(2R,3R,5S)-5-[(1S)-1-acetoksipropil]-2-(5-amino-2,7-diokso-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)tetrahidrofuran-3-il] acetat; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, enantiomer ili
1
dijastereomer; i/ili je inhibitor sklopa HBV kapsida 3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluorfenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8atetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionska kiselina; 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionska kiselina; 2-[(1R,3S,5S)-8-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-metoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-6,6-difluor-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-il]sirćetna kiselina; 2-[(1S,3R,5R)-8-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-metoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-6,6-difluor-8-azabiciklo[3.2.1]oktan-3-il]sirćetna kielina; ili (S)-4-[(R)-6-(2-hlor-4-fluor-fenil)-5-metoksikarbonil-2-tiazol-2-il-3,6-dihidropirimidin-4-ilmetil]-morfolin-3-karboksilna kiselina; ili njena farmaceutski prihvatljiva so, enantiomer ili dijastereomer.
Drugo otelotvorenje predmetnog pronalaska se odnosi na upotrebu ovde prethodno pomenute farmaceutske kompozicije kao antivirusnog leka, posebno kao leka za lečenje ili profilaksu infekcije virusom hepatitisa B.
Drugo otelotvorenje predmetne prijave se odnosi na upotrebu agonista TLR7 i inhibitora sklopa HBV kapsida za proizvodnju ovde prethodno pomenute farmaceutske kompozicije kao antivirusnog leka, posebno leka za lečenje ili profilaksu infekcije virusom hepatitisa B.
Drugo otelotvorenje predmetnog pronalaska se odnosi na kombinacije
[(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetata i 3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline;
[(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetata i 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metilfenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline;
5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona i 3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-
2
etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline;
ili
5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona i 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metilfenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline;
ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, enantiomera ili dijastereomera za upotrebu u lečenju ili profilaksi infekcije virusom hepatitisa B.
Drugo otelotvorenje predmetnog pronalaska se odnosi na kombinaciju [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksi-tetrahidrofuran-2-il]propil] acetata strukture
i 3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, enantiomera ili dijastereomera za upotrebu u lečenju ili profilaksi infekcije virusom hepatitisa B.
Drugo otelotvorenje predmetnog pronalaska se odnosi na kombinaciju [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksi-tetrahidrofuran-2-il]propil] acetata strukture
i 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline;
ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, enantiomera ili dijastereomera za upotrebu u lečenju ili profilaksi infekcije virusom hepatitisa B.
Drugo otelotvorenje predmetnog pronalaska se odnosi na kombinaciju 5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona strukture
4
i 3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline;
ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, enantiomera ili dijastereomera za upotrebu u lečenju ili profilaksi infekcije virusom hepatitisa B.
Drugo otelotvorenje predmetnog pronalaska se odnosi na kombinaciju 5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil] tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona strukture
i 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, enantiomera ili dijastereomera za upotrebu u lečenju ili profilaksi infekcije virusom hepatitisa B.
Drugo otelotvorenje ovog pronalaska se odnosi na gore pomenute kombinacije za upotrebu, pri čemu se agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida zajedno primenjuju u istoj formulaciji ili različitim formulacijama.
Drugo otelotvorenje ovog pronalaska se odnosi na gore pomenute kombinacije za upotrebu, pri čemu su agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida namenjeni za primenu na ispitaniku istim putem ili različitim putevima.
Drugo otelotvorenje ovog pronalaska se odnosi na gore pomenute kombinacije za upotrebu, pri čemu su agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida namenjeni za primenu ispitaniku putem oralne ili parenteralne primene.
Drugo otelotvorenje ovog pronalaska se odnosi na gore pomenute kombinacije za upotrebu, pri čemu je primena istovremena ili sekvencijalna.
Drugo otelotvorenje ovog pronalaska se odnosi na gore pomenute kombinacije za upotrebu, pri čemu su navedena druga antivirusna sredstva odabrana od lamivudina, adefovira, tenofovira, telbivudina i entekavira.
PRIMERI
Pronalazak će se u potpunosti bolje shvatiti kroz primere koji slede. Referentna jedinjenja su data u tabeli 1.
Primer 1
[(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetat (jedinjenje 1)
Jedinjenje 1 je pripremljeno prema sledećoj šemi:
Priprema [(2R)-2-[(3aR,5S,6aR)-2,2-dimetil-3a,5,6,6atetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksol-5-il]-2-hidroksi-etil] 4-metilbenzensulfonata
U rastvor (1R)-1-[(3aR,5S,6aR)-2,2-dimetil-3a,5,6,6atetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksol-5-il]etan-1,2-diola (jedinjenje 1A, 100 g, 490 mmol) u suvom piridinu (1000 ml) dodat je p-toluensulfonil hlorid (139 g, 735 mmol) na 0°C. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 12 sati, dobijeni rastvor je ugašen vodom (100 ml) i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluiranje sa 1:10 do 1:3 EtOAc u petrol etru) radi dobijanja 130 g [(2R)-2-[(3aR,5S,6aR)-2,2-dimetil-3a,5,6,6a-tetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksol-5-il]-2-hidroksi-etil] 4-metilbenzensulfonata (jedinjenje 1B) kao žućkastog ulja.
Jedinjenje 1B:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 7,82 (d, J = 8,00 Hz, 2H), 7,38 (d, J = 8,00 Hz, 2H), 5,78 (d, J = 3,76 Hz, 1H), 4,75 (t, J = 4,00 Hz, 1H), 4,20− 4,12 (m, 2H), 4,03− 3,97 (m, 2H), 2,48 (s, 3H), 2,39 (d, J = 3,51 Hz, 1H), 2,08-2,15 (m, 1 H), 1,75-1,80 (m, 1 H), 1,51 (s, 3 H), 1,33 (s, 3 H).
Priprema (3aR,5S,6aR)-2,2-dimetil-5-[(2R)-oksiran-2-il]-3a,5,6,6atetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksola
U rastvor [(2R)-2-[(3aR,5S,6aR)-2,2-dimetil-3a,5,6,6atetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksol-5-il]-2-hidroksi-etil] 4-metilbenzensulfonata (jedinjenje 1B, 100 g, 280 mmol) u anhidrovanom THF-u (1500 ml) ohlađenom na -70°C dodat je kalijum bis(trimetilsilil)amid (340 ml, 340 mmol, 1 M u THF-u) u atmosferi N2. Nakon mešanja tokom 1 sata na -70°C, reakciona smeša je sipana u zasićeni rastvor NH4Cl.
Organski sloj je razdvojen, a vodena faza ekstrahovana pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad Na2SO4i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluiranje sa 1:3 EtOAc u petrol etru) radi dobijanja 40,5 g (3aR,5S,6aR)-2,2-dimetil-5-[(2R)-oksiran-2-il]-3a,5,6,6atetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksola (jedinjenje 1C) kao žućkastog ulja.
Jedinjenje 1C:<1>H NMR: (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 5,87 (d, J = 3,76 Hz, 1H), 4,77 (t, J = 4,00, 1H), 4,20-4,28 (m, 1H), 3,14-3,20 (m, 1H), 2,83-2,88 (m, 1H), 2,63 (dd, J = 5,00, 2,80 Hz, 1H), 2,09 (dd, J = 12,00, 4,00 Hz, 1H), 1,69-1,79 (m, 1H), 1,52 (s, 3H), 1,34 (s, 3H).
Priprema (1R)-1-[(3aR,5S,6aR)-2,2-dimetil-3a,5,6,6atetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksol-5-il]propan-1-ola
U suspenziju Cul (19,3 g, 107 mmol) u suvom THF-u (2000 ml) u atmosferi N2dodat je metil magnezijum bromid (3 M u dietil etru, 537 ml, 1,61 mol) na -70°C. Nakon mešanja na istoj temperaturi tokom 1 sata, rastvor (3aR,5S,6aR)-2,2-dimetil-5-[(2R)-oksiran-2-il]-3a,5,6,6a-tetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksola (jedinjenje 1C, 100 g, 537 mmol, rastvoreno u 200 ml anhidrovanog THF-a) u kapima je dodat u reakcionu smešu. Nakon dodatna 2 sata mešanja na -70°C, reakciona smeša je sipana u zasićeni rastvor NH4CI. Organski sloj je odvojen, a vodena faza je dva puta ekstrahovana pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad Na2SO4i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluiranje sa 1:3 EtOAc u petrol etru) radi dobijanja 82 g (1R)-1-[3aR,5S,6aR]-2,2-dimetil-3a,5,6,6a-tetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksol-5-il]propan-1-ola (jedinjenje 1D) kao žućkaste čvrste supstance.
Jedinjenje 1D:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δppm: 5,83 (d, J = 3,76 Hz, 1H), 4,81 -4,73 (m, 1H), 4,26-4,19 (m, 1H), 3,91-3,82 (m, 1H), 2,08-2,02 (m, 1H), 1,93 - 1,89 (m, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,49-1,39 (m, 2H), 1,34 (s, 3H), 1,02 (t, J = 7,53 Hz, 3H).
Priprema [(1S)-1-[(3aR,5S,6aR)-2,2-dimetil-3a,5,6,6atetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksol-5-il]propil] 4-nitrobenzoata
U rastvor (1R)-1-[(3aR,5S,6aR)-2,2-dimetil-3a,5,6,6atetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksol-5-il]propan-1-ola (jedinjenje 1D, 50 g, 245 mmol), trifenilfosfina (195 g, 743 mmol), 4-nitrobenzojeve kiseline (124 g, 743 mmol) u THF-u (1200 ml) uz mešanje je dodat dietil azodikarboksilat (130 g, 743 mmol) u kapima na 0°C pod N2. Nakon mešanja na 18°C tokom 10 sati, smeša je ugašena dodatkom zasićenog rastvora NaHCO3i ekstrahovana pomoću EtOAc. Organski slojevi su spojeni, osušeni iznad Na2SO4i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluiranje sa 1:3 EtOAc u petrol etru) radi dobijanja 61 g [(1S)-1-[(3aR,5S,6aR)-2,2-dimetil-3a,5,6,6a-tetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksol-5-il]propil] 4-nitrobenzoata (jedinjenje 1E) kao žućkaste čvrste supstance.
Jedinjenje 1E:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δppm: 8,34− 8,22 (m, 4 H), 5,85 (d, J = 3,76 Hz, 1H), 5,23− 5,17 (m, 1H), 4,76 (t, J = 4,27 Hz, 1H), 4,48− 4,39 (m, 1H), 2,12 (dd, J = 13,30, 4,52 Hz, 1H), 1,88− 1,78 (m, 2H), 1,71− 1,62 (m, 1H), 1,55 (s, 3 H), 1,34 (s, 3 H), 1,01 (t, J = 7,40 Hz, 3 H).
Priprema (1S)-1-[(3aR,5S,6aR)-2,2-dimetil-3a,5,6,6atetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksol-5-il]propan-1-ola
U rastvor [(1S)-1-[(3aR,5S,6aR)-2,2-dimetil-3a,5,6,6atetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksol-5-il]propil] 4-nitrobenzoata (jedinjenje 1E, 100 g, 285 mmol) u metanolu (1200 ml) dodat je K2CO3(78,7 g, 570 mmol). Nakon 10 minuta mešanja na sobnoj temperaturi, dobijena smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluiranje sa 1:8 EtOAc u petrol etru) radi dobijanja 54,7 g (1S)-1-[(3aR,5S,6aR)-2,2-dimetil-3a,5,6,6a-
4
tetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksol-5-il]propan-1-ola (jedinjenje 1F) kao žućkaste čvrste supstance.
Jedinjenje 1F:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δppm: 5,81 (d, J = 3,64 Hz, 1H), 4,75 (t, J = 4,20 Hz, 1H), 4,18− 4,11 (m, 1H), 3,49-3,40 (m, 1H), 2,07-2,00 (m, 2H), 1,84-1,75 (m, 1H),1,59− 1,47 (m, 5H), 1,32 (s, 3H), 1,01 (t, J = 7,40 Hz, 3H).
Priprema [(1S)-1-[(3aR,5S,6aR)-2,2-dimetil-3a,5,6,6atetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksol-5-il]propil] acetata
U rastvor (1S)-1-[(3aR,5S,6aR)-2,2-dimetil-3a,5,6,6atetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksol-5-il]propan-1-ola (jedinjenje 1F,13,5 g, 67 mmol), TEA (81 g, 804 mmol), DMAP (1,6 g, 13 mmol) u anhidrovanom DCM (150 ml) uz mešanje je dodat anhidrid sirćetne kiseline (62 g, 603 mmol). Nakon mešanja na 22°C tokom 10 sati, reakcija je ugašena zasićenim rastvorom NaHCO3. Organski sloj je razdvojen, a vodena faza ekstrahovana pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad Na2SO4i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluiranje sa 1:8 EtOAc u petrol etru) radi dobijanja 13 g [(1S)-1-[(3aR,5S,6aR)-2,2-dimetil-3a,5,6,6a-tetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksol-5-il]propil] acetata (jedinjenje 1G) kao bezbojnog ulja.
Jedinjenje 1G:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δppm: 5,83 (d, J = 3,76 Hz, 1H), 4,92 (dt, J = 7,97, 5,18 Hz, 1H), 4,74 (t, J = 4,00 Hz, 1H), 4,35− 4,27 (m, 1H), 2,12 (s, 3H), 2,08 -1,99 (m, 1H), 1,74− 1,56 (m, 3H), 1,53 (s, 3H), 1,34 (s, 3H), 0,95 (t, J = 7,40 Hz, 3H).
Priprema [(3R,5S)-2-acetoksi-5-[(1S)-1-acetoksipropil]tetrahidrofuran-3-il] acetata
U rastvor [(1S)-1-[(3aR,5S,6aR)-2,2-dimetil-3a,5,6,6atetrahidrofuro[2,3−d][1,3]dioksol-5-il]propil] acetata (jedinjenje 1G, 4,8 g, 20 mmol), sirćetne kiseline (12,2 g, 200 mmol) i anhidrida sirćetne kiseline (10,2 g, 100 mmol) u anhidrovanom DCM (100 ml) dodata je koncentrovana H2SO4(0,5 ml) na 0°C. Nakon mešanja na 22°C tokom 3 sata, reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog rastvora NaHCO3. Organski sloj je razdvojen, a vodena faza ekstrahovana pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela (eluiranje sa 1:8 EtOAc u petrol etru) radi dobijanja 2,3 g [(3R,5S)-2-acetoksi-5-[(1S)-1-acetoksipropil]tetrahidrofuran-3-il] acetata (jedinjenje 1H) kao bezbojnog ulja.
Jedinjenje 1H:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 6,12 (s, 1H), 5,19 (d, J = 4,52 Hz, 1H), 4,83− 4,91 (m, 1H), 4,34− 4,44 (m, 1H), 2,09− 2,19 (m, 9H), 1,51− 1,74 (m, 4H), 0,94 (t, J = 7,40 Hz, 3H).
Priprema [(2R,3R,5S)-5-[(1S)-1-acetoksipropil]-2-(5-amino-2-oksotiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)tetrahidrofuran-3-il] acetata
U suspenziju 5-amino-3H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2-ona (3,5 g, 20,8 mmol) u ksilenu (160 ml) dodat je BSA (21,2 g, 104 mmol). Reakciona smeša je mešana na 70°C tokom 1 sata u atmosferi argona da bi nastao bistri rastvor. Nakon što su deo ksilena i višak BSA isparili, [(3R,5S)-2-acetoksi-5-[(1S)-1-acetoksipropil]tetrahidrofuran-3-il] acetat (jedinjenje 1H, 3,0 g, 10,4 mmol) i TMSOTf (2,6 g, 11,6 mmol) su redom dodati na 0°C. Nakon zagrevanja uz mešanje na 65°C tokom 2 sata, reakcija je ugašena vodom (30 ml), ekstrahovana tri puta pomoću EA (30 ml). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad Na2SO4i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela (eluiranje sa 1:10 do 1:1 EtOAc u petrol etru), dajući 2,0 g [(2R,3R,5S)-5-[(1S)-1-acetoksipropil]-2-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)tetrahidrofuran-3-il] acetat (jedinjenje 1I) kao belu čvrstu supstancu.
Jedinjenje 1I:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δppm: 8,15 (s, 1 H), 6,04 (d, J = 1,51 Hz, 1 H), 5,80 (d, J = 7,03 Hz, 1 H), 5,27 (br. s., 2 H), 4,98− 5,04 (m, 1 H), 4,32− 4,39 (m, 1 H), 2,63 - 2,77 (m, 1 H), 2,13 (s, 3 H), 2,09 (s, 3 H), 2,00 - 2,07 (m, 1 H), 1,61− 1,75 (m, 2 H), 0,94 (t, J = 7,40 Hz, 3 H).
Priprema [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksi-tetrahidrofuran-2-il]propil] acetata
[(2R,3R,5S)-5-[(1S)-1-acetoksipropil]-2-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)tetrahidrofuran-3-il] acetat (jedinjenje 1I, 3,2 g, 8,0 mmol) i K2CO3(2,2 g, 16,0 mmol) su suspendovani u anhidrovanom etanolu (85 ml) na sobnoj temperaturi. Metanol (85 ml) je dodat u kapima u atmosferi N2. Nakon dodavanja, smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 10 minuta (praćeno putem TLC). Nakon reakcije, smeša je sipana u zasićeni NH4Cl, ekstrahovana četiri puta pomoću EA (150 ml). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad Na2SO4i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela (eluiranje sa 1:100 do 1:70 MeOH u DCM) da bi se dobio sirovi proizvod, koji je dalje prečišćen na fleš koloni (eluiranje acetonitrilom i vodom), dajući 1,64 g [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksi-tetrahidrofuran-2-il]propil] acetata (jedinjenje 1) kao beli prašak.
Jedinjenje 1:<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4) δppm: 8,19 (s, 1 H), 6,02− 6,05 (m, 1 H), 4,94− 5,00 (m, 2 H), 4,33− 4,40 (m, 1 H), 2,58− 2,68 (m, 1 H), 2,03 (s, 3 H), 1,86− 1,96 (m, 1 H), 1,56 - 1,77 (m, 2 H), 0,93 (t, J = 7,40 Hz, 3 H). MS prim. (ESI-) [(M+H)<+>]: 355,0.
Primer 2
4
3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionska kiselina
Jedinjenje 2 je pripremljeno prema sledećoj šemi:
U rastvor etil (4R)-6-(brommetil)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-5-karboksilata (jedinjenje 2A, 0,073 g, 0,16 mmol) i 3-[(8aS)-3-okso-1,5,6,7,8,8a-heksahidroimidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline (jedinjenje 2B, sirovo, 0,25 mmol) u 1,2-dihloretanu (5 ml) uz mešanje je u kapima dodat DIPEA (0,078 ml, 0,45 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi sve do nestanka jedinjenja 2A. Smeša je zatim razblažena pomoću EtOAc (50 ml) i isprana sukcesivno zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl i slanim vodenim rastvorom. Organski sloj je izdvojen i osušen iznad Na2SO4. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, a sirovi proizvod je prečišćen putem prep-HPLC, dajući 3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirmidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionsku kiselinu (jedinjenje 2) kao svetložutu čvrstu supstancu (12 mg).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4) ppm 7,92 - 8,02 (m, 1H), 7,70 -7,80 (m, 1H), 7,21 - 7,36 (m, 2H), 7,10 - 7,21 (m, 1H), 6,19 - 6,28 (m, 1H), 3,99 - 4,14 (m, 3H), 3,81 - 3,96 (m, 3H), 3,47 - 3,56 (m, 1H), 3,38 - 3,44 (m, 1H), 3,27 - 3,32 (m, 1H), 3,15 -3,25 (m, 1H), 3,07 - 3,14 (m, 1H), 2,79 - 2,96 (m, 2H), 2,30 - 2,41 (m, 1H), 2,13 - 2,23 (m, 1H), 1,20 (d, J = 2,76 Hz, 6H), 1,13 (m, 3H). MS: izrač.619 (M+H)<+>, izmereno 619 (M+H)<+>.
Priprema etil (4R)-6-(brommetil)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4− dihidropirimidin-5-karboksilata (jedinjenje 2A):
Priprema tiazol-2-karboksamidin hidrohlorida (jedinjenje 2A-1):
U rastvor tiazol-2-karbonitrila (1,5 g, 14 mmol) u 5 ml suvog MeOH uz mešanje je, kap po kap, dodat rastvor natrijum metoksida (0,74 g, 14 mmol) u 10 ml suvog metanola. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi sve do nestanka početne supstance. Zatim
4
je, u jednoj porciji, dodat amonijum hlorid (1,5 g, 28 mmol), i reakciona smeša je mešana preko noći. Nerastvorena supstanca je uklonjena filtracijom, i filtrat je koncentrovan da bi se dobio tiazol-2-karboksamidin hidrohlorid (jedinjenje 2A-1, 2,1 g) kao siva čvrsta supstanca koja je korišćena direktno u sledećem koraku, bez daljeg prečišćavanja. MS: izrač.128 (M+H)<+>, izmereno 128 (M+H)<+>.
Priprema etil 4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-6-metil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-5-karboksilata (jedinjenje 2A-2):
U rastvor tiazol-2-karboksamidin hidrohlorida (1,3 g, 10 mmol), etil acetoksietata (1,3 g, 10 mmol) i 2-hlor-3-fluorbenzaldehida (1,6 g, 10 mmol) u trifluoretanolu (30 ml) uz mešanje je dodat kalijum acetat (2,0 g, 20 mmol). Reakciona smeša je zagrevana uz refluks 16 sati. Nakon što je ohlađena do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana, a ostatak je rastvoren u etil acetatu i zatim ispran slanim rastvorom. Organski sloj je osušen iznad Na2SO4. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (etil acetat/petrol etar: od 1/4 do 1/2), dajući etil 4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-6-metil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-5-karboksilat (jedinjenje 2A-2, 2,8 g) kao žutu čvrstu supstancu. MS: izrač. (M+H)<+>380, izmereno (M+H)<+>380.
Priprema etil (4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-6-metil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-5-karboksilata (jedinjenje 2A-2a):
Hiralna separacija racemskog jedinjenja 2A-2 eluiranjem sa mešanim rastvaračem sa 85% superkritičnog CO2/15% EtOH pri brzini od 100 ml/min na SFC (SFC-Multigram; IC: 5 × 250 mm, 5µ) dala je dva enantiomera etil (4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-6-metil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidine-5-karboksilat (jedinjenje 2A-2a, brže eluiranje) i etil (4S)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-6-metil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-5-karboksilat (jedinjenje 2A-2b, sporije eluiranje). Apsolutna konfiguracija željenog (-)-enantiomernog jedinjenja 2A-2a ([α]D<20>-46,6 (c 0,28, MeOH)) određena je studijom rendgenske difrakcije (Slika 2).
Priprema etil (4R)-6-(brommetil)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-5-karboksilata (jedinjenje 2A):
U rastvor etil (4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-6-metil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-5-karboksilata (jedinjenje 2A-2a, 0,37 g, 1,0 mmol) u CCl4(5 ml) u porcijama je uz mešanje dodat NBS (0,20 g, 1,1 mmol). Nakon što je reakciona smeša mešana 1 sat na sobnoj temperaturi, rastvarač je uklonjen pod vakuumom, i ostatak je prečišćen hromatografijom na
4
koloni silika gela dajući etil (4R)-6-(brommetil)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-5-karboksilat (jedinjenje 2A, 0,35 g) kao žutu čvrstu supstancu. MS: izrač.
459 (M+H)<+>, izmereno 459 (M+H)<+>.
Priprema 3-[(8aS)-3-okso-1,5,6,7,8,8a-heksahidroimidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline (jedinjenje 2B):
Priprema O1-benzil O4-terc-butil (2S)-2-(hidroksimetil)piperazin-1,4-dikarboksilata (jedinjenje 2B-1):
U mešani rastvor terc-butil (3S)-3-(hidroksimetil)piperazin-1-karboksilata (CAS broj: 314741-40-7, Bepharm; za njegovu sintezu, pogledajte: Gao H., Renslo A. R. J. Org. Chem.
2007, 72, 8591-8592) (6 g, 27,8 mmol) u zasićenom rastvoru NaHCO3(45 ml) i EtOAc (45 ml) dodat je, kap po kap, benzil hlorformat (7,1 g, 41,7 mmol) na 0°C. Zatim je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 15 sati. Reakciona smeša je razblažena pomoću EtOAc (60 ml). Organski sloj je razdvojen, i vodeni sloj je ekstrahovan pomoću EtOAc (35 ml). Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad Na2SO4. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, dajući sirovi proizvod koji je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (petrol etar: EtOAc = 10:1 do 1:1) da bi se dobio O1-benzil O4-terc-butil (2S)-2-(hidroksimetil)piperazin-1,4-dikarboksilat (jedinjenje 2B-1, 6,7 g). MS: izrač.351 (M+H)<+>, izmereno 351 (M+H)<+>.
4
Priprema O1-benzil O4-terc-butil (2S)-2-formilpiperazin-1,4-dikarboksilata (jedinjenje 2B-2):
U rastvor oksalil hlorida (3,64 g, 28,6 mmol) u anhidrovanom dihlormetanu (80 ml) na -78°C uz mešanje je, kap po kap, dodat dimetil sulfoksid (4,47 g, 57,3 mmol). Nakon 10 minuta, rastvor O1-benzil O4-terc-butil (2S)-2-(hidroksimetil)piperazin-1,4-dikarboksilata (jedinjenje 2B-1, 6,7 g, 19,1 mmol) u dihlormetanu (20 ml) dodat je u kapima. Nakon što je smeša mešana 30 minuta na -78°C, dodat je N,N-diizopropiletilamin (14,78 g, 114,6 mmol), i reakciona smeša je mešana 30 minuta. Nakon što je reakciona smeša polako zagrejana na 0°C tokom 30 minuta, razblažena je dihlormetanom (80 ml), isprana 5% vodenim rastvorom limunske kiseline (10 ml), zasićenim rastvorom soli, a zatim osušena iznad Na2SO4. Nakon filtracije, smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod O1-benzil O4-terc-butil (2S)-2-formilpiperazin-1,4-dikarboksilat (jedinjenje 2B-2, 7,0 g). MS: izrač. 349 (M+H)<+>, izmereno 349 (M+H)<+>.
Priprema O1-benzil O4-terc-butil (2R)-2-[[(3-etoksi-2,2-dimetil-3-oksopropil)amino]metil]piperazin-1,4-dikarboksilata (jedinjenje 2B-3):
U rastvor soli etil 3-amino-2,2-dimetil-propanoat hidrohlorida (3,4 g, 18,6 mmol) u anhidrovanom DCM-u (100 ml) uz mešanje je dodat DIPEA (2,6 g, 27,3 mmol) na sobnoj temperaturi. Onda je dodat O1-benzil O4-terc-butil (2S)-2-formilpiperazin-1,4-dikarboksilat (jedinjenje 2B-2, sirovo, 7,0 g, 20 mmol), a zatim NaBH(OAc)3(6,3 g, 29,8 mmol) i AcOH (1,5 ml) na 0°C. Reakciona smeša je mešana 16 sati na sobnoj temperaturi. Dodata je voda (100 mL), i smeša je ekstrahovana DCM-om (100 ml). Organski sloj je osušen i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod O1-benzil O4-terc-butil (2R)-2-[[(3-etoksi-2,2-dimetil-3-okso-propil)amino]metil]piperazin-1,4-dikarboksilat (jedinjenje 2B-3, 7,3 g). MS: izrač.478 (M+H)<+>, izmereno 478 (M+H)<+>.
Priprema terc-butil (3R)-3-[[(3-etoksi-2,2-dimetil-3-oksopropil)amino]metil]piperazin-1-karboksilata (jedinjenje 2B-4):
U rastvor O1-benzil O4-terc-butil (2R)-2-[[(3-etoksi-2,2-dimetil-3-oksopropil)amino]metil]piperazin-1,4-dikarboksilata (jedinjenje 2B-3, sirovo, 3,3 g, 6,9 mmol) u EtOH (100 ml) dodat je 10% paladijum na ugljeniku (1 g). Zatim je smeša mešana na 50 °C tokom 3 sata u atmosferi vodonika (50 psi). Reakciona smeša je filtrirana, i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio terc-butil (3R)-3-[[(3-etoksi-2,2-dimetil-3-okso-
4
propil)amino]metil]piperazin-1-karboksilat (jedinjenje 2B-4, 1,8 g). MS: izrač.344 (M+H)<+>, izmereno 344 (M+H)<+>.
Priprema terc-butil (8aR)-2-(3-etoksi-2,2-dimetil-3-okso-propil)-3-okso-5,6,8,8atetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-7-karboksilata (jedinjenje 2B-5):
U rastvor terc-butil (3R)-3-[[(3-etoksi-2,2-dimetil-3-oksopropil)amino]metil]piperazin-1-karboksilata (jedinjenje 2B-4, 1,8 g, 5,2 mmol) u anhidrovanom dihlormetanu (60 ml) dodat je N,N-diizopropiletilamin (3,4 g, 26,2 mmol) na 0°C. Zatim je dodat trifosgen (783 mg, 2,6 mmol) na 0°C, i smeša je mešana na 10-15°C tokom 16 sati. Dodata je voda (50 ml), i smeša je ekstrahovana dihlormetanom (60 ml). Organski sloj je osušen iznad Na2SO4i rastvarač je uklonjen pod vakuumom, čime se dobija sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (petrol etar: EtOAc = 5:1 do 1:1), dajući terc-butil (8aR)-2-(3-etoksi-2,2-dimetil-3-okso-propil)-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazine-7-karboksilat (jedinjenje 2B-5, 1,3 g). MS: izrač.370 (M+H)<+>, izmereno 370 (M+H)<+>.
Priprema 3-[(8aS)-3-okso-1,5,6,7,8,8a-heksahidroimidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline (jedinjenje 2B):
U rastvor terc-butil (8aR)-2-(3-etoksi-2,2-dimetil-3-okso-propil)-3-okso-5,6,8,8atetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-7-karboksilata (jedinjenje 2B-5, 94 mg, 0,25 mmol) u THF-u (3 ml) uz mešanje je dodat rastvor LiOH∙H20 (84 mg, 2,0 mmol) u H2O (1 ml) na sobnoj temperaturi. Nakon što je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi preko noći, ona je zakiseljena do vrednosti pH 3~4 pomoću 1N HCl na 0°C. Smeša je zatim koncentrovana pod vakuumom i azeotropski osušena toluenom, čime se dobija sirova kiselina koja je rastvorena u dihlormetanu (2 ml) i tretirana trifluorsirćetnom kiselinom (2 ml) na sobnoj temperaturi. Nakon što je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 1 sat, rastvarač je uklonjen pod vakuumom, čime se dobija 3-[(8aS)-3-okso-1,5,6,7,8,8aheksahidroimidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionska kiselina (jedinjenje 2B) koje je direktno korišćeno. MS: izrač.242 (M+H)<+>, izmereno 242 (M+H)<+>.
Primer 3
[(S)-[(2S,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-1,3-oksatiolan-2-il]-ciklopropil-metil] acetat (jedinjenje 3)
4
Jedinjenje 3 je pripremljeno prema sledećoj šemi:
Priprema 5-hidroksi-1,3-oksatiolan-2-karboksilne kiseline
U rastvor 1,4-ditian-2,5-diola (jedinjenje 3A, 150 g, 0,98 mol) u metil terc-butil etru (500 ml) i cikloheksanu (150 ml) uz mešanje je dodata glioksilna kiselina (180 g, 1,96 mol). Dobijena reakciona smeša je mešana 16 sati na 80°C pod Din-Starkovim uslovima.
Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluiranje sa 1:7 etil acetatom u petrol etru do 100% etil acetata) radi dobijanja 220 g sirove 5-hidroksi-1,3-oksatiolan-2-karboksilne kiseline (jedinjenje 3B), koja se koristi direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Priprema trans-5-acetoksi-1,3-oksatiolan-2-karboksilne kiseline
U rastvor 5-hidroksi-1,3-oksatiolan-2-karboksilne kiseline (jedinjenje 3B, 220 g, 1,5 mol) u HOAc (1,5 l) dodata je koncentrovana sumporna kiselina (1 ml) i anhidrid sirćetne kiseline (50 g, 0,5 mol). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 16 sati, dobijena reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana pomoću EtOAc. Organska faza je kombinovana i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (eluiranje sa 1:10 do 1:7 etil acetatom u petrol etru) radi dobijanja sirovog proizvoda, koji je prekristalisan iz toluena da bi se dobilo 10 g trans-5-acetoksi-1,3-oksatiolan-2-karboksilne kiseline (jedinjenje 3C trans). (Za sintezu pogledajte i: J. Org. Chem. 1995, 60, 2621-2623.)
Jedinjenje 3C trans:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δppm: 13,26 (br, 1 H), 6,66 (d, J = 4,0 Hz, 1 H), 5,66 (s, 1 H), 3,30 - 3,37 (m, 1 H), 3,19 - 3,25 (m, 1 H), 2,04 (s, 3 H).
Priprema [(1R,2S,5R)-2-izopropil-5-metil-cikloheksil] (2S,5S)-5-acetoksi-1,3-oksatiolan-2-karboksilata
Rastvor dicikloheksilkarbodiimida (12 g, 57 mmol) u DCM-u (50 ml) dodat je u bocu sa okruglim dnom koja sadrži rastvor trans-5-acetoksi-1,3-oksatiolan-2-karboksilne kiseline (jedinjenje 3C trans, 10 g, 52 mmol), L-(-)-mentola (8,9 g, 57 mmol) i DMAP (0,6 g, 5,2 mmol) u DCM-u (100 ml), na 0°C. Nakon što je reakciona smeša mešana na sobnoj
1
temperaturi tokom 16 sati, dodati su metanol (2 ml) i glacijalna sirćetna kiselina (2 ml).
Reakciona smeša je mešana dodatnih 10 minuta, a zatim je razblažena heksanom (250 ml), filtrirana kroz celit, i filtrat je koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod. (J. Org. Chem.
1995, 60, 2621-2623). Sirovi proizvod je ponovo rastvoren u heksanu (250 ml), filtriran, i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen superkritičnom fluidnom hromatografijom (SFC), dajući 3,2 g [(1R,2S,5R)-2-izopropil-5-metil-cikloheksil] (2S,5S)-5-acetoksi-1,3-oksatiolan-2-karboksilata (jedinjenje 3D) sa dijastereoizomernim viškom od 85% u obliku bezbojnog ulja. Vrednost dijastereoizomernog viška jedinjenja 3D dobijena je putem HPLC analize (Agilent 1260 HPLC) korišćenjem hiralne kolone (CHIRALPAK IA-3 ODH (4,6 mm × 250 mm, 5 µm)). Mobilna faza hiralne analize bila je 20:80 acetonitrila u MeOH.
Jedinjenje 3D:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm: 6,81 (d, J = 4,0 Hz, 1 H), 5,63 (s, 1 H), 4,76 (dt, J = 10,9, 4,5 Hz, 1 H), 3,44 (dd, J = 11,7, 4,1 Hz, 1 H), 3,17 (d, J = 11,8 Hz, 1 H), 2,11 (s, 3 H), 2,00 (d, J = 12,0 Hz, 1 H), 1,85 (dt, J = 6,9, 2,5 Hz, 1 H), 1,69 (d, J = 11,0 Hz, 2 H), 1,55 - 1,26 (m, 3 H), 1,11 - 1,00 (m, 2 H), 0,91 (dd, J = 6,8, 9,8 Hz, 6 H), 0,76 (d. J = 7,0 Hz, 3 H).
Priprema [(1R,2S,5R)-2-izopropil-5-metil-cikloheksil] (2S,5R)-5-(5-amino-2-oksotiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-1,3-oksatiolan-2-karboksilata
Suspenzija 5-amino-3H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2-ona (6,0 g, 36 mmol) i BSA (24,0 g, 118 mmol) u DCE (250 ml) zagrevana je na 85°C tokom 1 sata. Reakciona smeša je ohlađena na 0°C, u prethodnu smešu je dodat rastvor [(1R,2S,5R)-2-izopropil-5-metilcikloheksil] (2S,5S)-5-acetoksi-1,3-oksatiolan-2-karboksilata (jedinjenje 3D, 9,0 g, 27 mmol) u DCE (10 ml), a zatim, kap po kap, TMSI (14 g, 70 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 5 sati, ugašena vodenim rastvorom NaHCO3, a zatim ekstrahovana pomoću EtOAc. Organski sloj je ispran slanim vodenim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan radi dobijanja sirovog proizvoda kao ulja, koje je prečišćeno hromatografijom na koloni silika gela (eluiranje sa 1:100 do 1:50 metanola u dihlormetanu),
2
dajući 7,7 g smeše dva izomera, koja je dalje prečišćena i razdvojena preparativnom HPLC da bi se dobilo željenih 2,8 g beta izomera [(1R,2S,5R)-2-izopropil-5-metil-cikloheksil] (2S,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-1,3-oksatiolan-2-karboksilata (jedinjenje 3E) kao bela čvrsta supstanca. Konfiguracija jedinjenja 3E je određena pomoću NOESY.
Jedinjenje 3E:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δppm: 8,17 (s, 1 H), 6,44 (m, 1 H), 5,51 (s, 1 H), 5,12 (bs, 2 H), 4,78 (m, 1 H), 4,47 (m, 1 H), 3,16 (m, 1 H), 2,00 (m, 1 H), 1,79 (m, 1 H), 1,62 (m, 2 H), 1,38 (m, 2 H), 0,98 (m, 2 H), 0,9 - 0,72 (m, 10 H). MS prim. (ESI<+>) [(M+H)<+>]: 439.
Priprema (2S,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-N-metoksi-N-metil-1,3-oksatiolan-2-karboksamida
Rastvor [(1R,2S,5R)-2-izopropil-5-metil-cikloheksil] (2S,5R)-5-(5-amino-2-oksotiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-1,3-oksatiolan-2-karboksilata (jedinjenje 3E, 3,0 g, 7,5 mmol) u 80% vodenog rastvora TFA (20 ml) mešan je na 50°C tokom 16 sati, a zatim koncentrovan radi dobijanja sirove kiseline kao bele čvrste supstance, koja je ponovo rastvorena u THF-u (40 ml). U prethodnu smešu je dodat N-metoksimetilamin hidrohlorid (2,1 g, 22 mmol), DIPEA (14,5 g, 112 mmol) i HATU (8,36 g, 22 mol) na sobnoj temperaturi. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 16 sati, reakciona smeša je razblažena DCM-om, isprana vodom i zasićenim vodenim rastvorom soli, osušena iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovana radi dobijanja sirovog proizvoda koji je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (eluiranje sa 1:100 do 1:50 metanola u dihlormetanu) da bi se dobio 2,1 g (2S,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-N-metoksi-N-metil-1,3-oksatiolan-2-karboksamida (jedinjenje 3F) kao bela čvrsta supstanca.
Jedinjenje 3F:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δppm: 8,16 (s, 1 H), 6,42 (m, 1 H), 5,83 (s, 1 H), 5,14 (bs, 2 H), 4,46 (t, J = 9,6 Hz, 1 H), 3,72 (s, 3 H), 3,23 (s, 3 H), 3,15 (m, 1 H). MS prim. (ESI<+>) [(M+H)<+>]: 344.
Priprema (2S,5R)-N-metoksi-5-[5-[[(4-metoksifenil)-difenil-metil]amino]-2-oksotiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il]-N-metil-1,3-oksatiolan-2-karboksamida
U rastvor (2S,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-N-metoksi-N-metil-1,3-oksatiolan-2-karboksamida (jedinjenje 3F, 2,1 g, 6,1 mmol) u DCM-u (30 ml) dodat je kolidin (1,45 g, 12 mmol), AgNO3(2,04 g, 12 mmol) i MMTrCl (3,8 g, 12 mmol) na sobnoj temperaturi. Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 16 sati, reakciona smeša je razblažena DCM-om, filtrirana kako bi se uklonila čvrsta supstanca. Filtrat je ispran vodom i zasićenim vodenim rastvorom soli, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan radi dobijanja sirovog proizvoda, koji je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (eluiranje sa 1:100 do 1:2 etil acetata u petrol etru) dajući 3,6 g (2S,5R)-N-metoksi-5-[5-[[(4-metoksifenil)-difenil-metil]amino]-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il]-N-metil-1,3-oksatiolan-2-karboksamida (jedinjenje 3G) kao žute čvrste supstance. (ESI<+>) [(M+H)<+>]: 616.
Priprema 3-[(2S,5R)-2-[ciklopropil(hidroksi)metil]-1,3-oksatiolan-5-il]-5-[[(4-metoksifenil)-difenil-metil]amino]tiazolo[4,5−d]pirimidin-2-ona
U rastvor (2S,5R)-N-metoksi-5-[5-[[(4-metoksifenil)-difenil-metil]amino]-2-oksotiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il]-N-metil-1,3-oksatiolan-2-karboksamida (jedinjenje 3G, 3 g, 5 mmol) u THF-u (40 ml) dodat je Grinjarov reagens, ciklopropilmagnezium bromid (0,5 M, 25 ml) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na 0°C tokom 30 min. Reakcija je ugašena zasićenim rastvorom NH4Cl i ekstrahovana pomoću EtOAc. Organski sloj je osušen i koncentrovan, dajući sirovi proizvod, koji je ponovo rastvoren u MeOH (50 ml). U prethodnu smešu je dodat NaBH4(2,0 g, 540 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj
4
temperaturi 30 min. Reakcija je ugašena zasićenim rastvorom NH4Cl i ekstrahovana pomoću DCM. Organski sloj je osušen iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovan radi dobijanja sirovog proizvoda, koji je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (eluiranje sa 1:100 do 1:1 etil acetata u petrol etru) dajući 1,8 g 3-[(2S,5R)-2-[ciklopropil(hidroksi)metil]-1,3-oksatiolan-5-il]-5-[[(4-metoksifenil)-difenil-metil]amino]tiazolo[4,5−d]pirimidin-2-ona (jedinjenje 3H) kao žutu čvrstu supstancu. (ESI<+>) [(M+H)<+>]: 599.
Priprema [ciklopropil-[(2S,5R)-5-[5-[[(4-metoksifenil)-difenil-metil]amino]-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il]-1,3-oksatiolan-2-il]metil] acetata
U rastvor 3-[(2S,5R)-2-[ciklopropil(hidroksi)metil]-1,3-oksatiolan-5-il]-5-[[(4-metoksi fenil)-difenil-metil]amino]tiazolo[4,5−d]pirimidin-2-ona (jedinjenje 3H, 1,2 g, 2 mmol) u DCM-u (10 ml) dodat je TEA (800 mg, 8 mmol), DMAP (30 mg, 0,2 mmol) i Ac2O (400 mg, 4 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 48 sati. Nakon završetka reakcije, reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana pomoću DCM. Organski sloj je osušen i koncentrovan radi dobijanja 1,3 g sirovog proizvoda [ciklopropil-[(2S,5R)-5-[5-[[(4-metoksifenil)-difenil-metil]amino]-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il]-1,3-oksatiolan-2-il]metil] acetata (jedinjenje 3I) kao bele čvrste supstance koja je korišćena direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. (ESI<+>) [(M+H)<+>]: 641.
Priprema [(S)-[(2S,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-1,3-oksatiolan-2-il]-ciklopropil-metil] acetata
Rastvor [ciklopropil-[(2S,5R)-5-[5-[[(4-metoksifenil)-difenil-metil]amino]-2-oksotiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il]-1,3-oksatiolan-2-il]metil] acetata (jedinjenje 3I, 1,3 g, 2 mmol) u 90% vodenom rastvoru HCOOH (25 ml) mešan je na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Reakciona smeša je koncentrovana, a ostatak je dalje prečišćen i odvojen preparativnom HPLC da bi se dobilo 114 mg [(S)-[(2S,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-1,3-oksatiolan-2-il]-ciklopropil-metil] acetata (jedinjenje 3) kao bela čvrsta supstanca.
Jedinjenje 3:<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4) δppm: 8,20 (s, 1 H), 6,34 (m, 1 H), 5,34 (d, J = 6,4 Hz, 1 H), 4,54 (t, J = 6,0 Hz, 1 H), 4,18 (t, J = 8,4 Hz, 1 H), 3,31 (t, J = 6,0 Hz, 1 H), 2,02 (s, 3 H), 1,13 (m,1 H), 0,65 - 0,42 (m, 4 H). MS prim. (ESI<+>) [(M+Na)<+>]: 391.
Priprema 5-amino-3-[(2S,5R)-2-[(S)-ciklopropil(hidroksi)metil]-1,3-oksatiolan-5-il]tiazolo[4,5−d]pirimidin-2-ona
U rastvor [(S)-[(2S,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-1,3-oksatiolan-2-il]-ciklopropil-metil] acetata (jedinjenje 3, 500 mg, 1,36 mmol) u metanolu (5 ml) dodat je K2CO3(94 mg, 0,68 mmol). Nakon mešanja na sobnoj temperaturi tokom 4 sata, reakcija je ugašena sa HOAc do pH 7, a zatim koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen pomoću EtOAc i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen i odvojen preparativnom HPLC, dajući 45 mg 5-amino-3-[(2S,5R)-2-[(S)-ciklopropil(hidroksi)metil]-1,3-oksatiolan-5-il]tiazolo[4,5−d]pirimidin-2-ona (jedinjenje 3J) kao beli prah.
Jedinjenje 3J: Apsolutna struktura je određena pomoću<1>H NMR i rendgenskom strukturnom analizom pojedinačnog kristala, kao što je prikazano na slici 3.<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ ppm: 8,25 (s, 1 H), 6,39 (dd, J = 9,16, 5,65 Hz, 1 H), 5,24 (d, J = 5,27 Hz, 1 H), 4,06 (dd, J = 10,29, 9,29 Hz, 1 H), 3,13 - 3,30 (m, 2 H), 0,37 - 1,04 (m, 5 H). MS prim. (ESI<+>) [(M+H)<+>]: 327,0.
Primer 4
3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionska kiselina (jedinjenje 4)
3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionska kiselina (jedinjenje 4)
Jedinjenje 4 je pripremljeno prema sledećoj šemi:
Naslovno jedinjenje je pripremljeno analogno jedinjenju 2 korišćenjem etil (4S)-6-(brommetil)-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-5-karboksilata (jedinjenje 4A) umesto etil (4R)-6-(brommetil)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-5-karboksilata (jedinjenje 2A). Jedinjenje 4 je dobijeno kao svetložuta čvrsta supstanca (132 mg).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ ppm 7,95 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 3,3 Hz, 1H), 7,08-7,23 (m, 2H), 6,95 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 5,99 (s, 1H), 4,02-4,17 (m, 3H), 3,79-4,00 (m, 3H), 3,36-3,57 (m, 2H), 3,26-3,33 (m, 1H), 3,17-3,25 (m, 1H), 3,11 (dd, J = 9,3, 4,0 Hz, 1H), 2,78-2,99 (m, 2H), 2,53 (d, J = 2,0 Hz, 3H), 2,39 (dd, J = 11,2, 8,2 Hz, 1H), 2,14-2,26 (m, 1H), 1,21 (d, J = 2,8 Hz, 6H), 1,15 ppm (t, J = 7,2 Hz, 3H). MS: izrač. 599 (M+H)<+>, izmereno 599 (M+H)<+>.
Priprema etil (4S)-6-(brommetil)-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-5-karboksilata (jedinjenje 4A):
Jedinjenje 4A je pripremljeno analogno jedinjenju 2A korišćenjem 2-metil-3-fluorbenzaldehida umesto 2-hlor-3-fluorbenzaldehida. Optička rotacija jedinjenja 4A: [α]D<20>-21,0 (c 0,10, MeOH).
Primer 5
5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-dion (jedinjenje 11)
Jedinjenje 11
Jedinjenje 11 je pripremljeno prema sledećoj šemi.
Priprema [(2R,3R,5S)-5-[(1S)-1-acetoksipropil]-2-(5-amino-2,7-diokso-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)tetrahidrofuran-3-il] acetata
U suspenziju 5-amino-3,6-dihidrotiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona (5,37 g, 29,1 mmol) i [(3R,5S)-2-acetoksi-5-[(1S)-1-acetoksipropil]tetrahidrofuran-3-il] acetata (jedinjenje 1H, 2,8 g, 9,7 mmol) u acetonitrilu (140 ml) dodat je BSA (21,4 ml, 87,3 mmol). Reakciona smeša je mešana na 65 °C tokom 1,5 sata u atmosferi argona da bi nastao bistri rastvor. Zatim je rastvoru dodat TMSOTf (9,8 g, 43,7 mmol) i smeša je mešana na 65°C još 3 sata. Reakcija je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u EtOAc (200 ml) i ekstrahovan zasićenim rastvorom NaHCO3(50 ml). Talog je nestao iz organskog sloja. Dobijena smeša je filtrirana i filtrat je ispran slanim vodenim rastvorom (50 ml), osušen iznad Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom radi dobijanja 2,3 g sirovog proizvoda [(2R,3R,5S)-5-[(1S)-1-acetoksipropil]-2-(5-amino-2,7-diokso-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)tetrahidrofuran-3-il] acetata (jedinjenje 11A) kao žute čvrste supstance. MS prim. (ESI-) [(M+H)<+>]: 413,1.
Priprema 5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona
U rastvor [(2R,3R,5S)-5-[(1S)-1-acetoksipropil]-2-(5-amino-2,7-diokso-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)tetrahidrofuran-3-il] acetata (jedinjenje 11A, 2,3 g, 5,58 mmol) u metanolu (100 ml) dodat je natrijum metoksid (1,5 g, 27,9 mmol). Nakon dodavanja, smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1,5 sati (praćeno pomoću TLC). Nakon što je reakcija završena, reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (50 ml). Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se uklonio veći deo MeOH. Ostatak je deset puta ekstrahovan pomoću EtOAc (100 ml). Kombinovani organski sloj je ispran slanim vodenim rastvorom (100 ml), osušen iznad Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela eluiranjem sa DCM/MeOH=20/1 do 10/1 radi dobijanja 360 mg 5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona (jedinjenje 11) kao bele čvrste supstance i 550 mg sirovog proizvoda.
Jedinjenje 11:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 11,22 (br s, 1H), 6,95 (br s, 2H), 5,72 (d, 7=2,26 Hz, 1H), 5,42 (d, J=4,52 Hz, 1H), 4,73 (m, 1H), 4,53 (d, J=6,02 Hz, 1H), 3,96 (m, 1H), 3,25-3,32 (m, 1H), 2,25-2,48 (m, 1H), 1,66-1,74 (m, 1H), 1,35-1,46 (m, 1H), 1,19-1,31 (m, 1H), 0,88 (t, J=7,28 Hz, 3H)
Primer 6
Test za ćelije HEK293-Blue-hTLR-7:
Stabilna ćelijska linija HEK293-Blue-hTLR-7 kupljena je od kompanije InvivoGen (kat. br: hkb-htlr7, San Diego, California, SAD). Ove ćelije su konstruisane za ispitivanje stimulacije humanih TLR7 praćenjem aktivacije NF-<Κ>B. Reporterski gen SEAP (sekretovana embrionalna alkalna fosfataza) stavljen je pod kontrolu IFN-β minimalnog promotera spojenog sa pet mesta vezivanja NF-<Κ>B i AP-1. SEAP je indukovana aktiviranjem NF-<Κ>B i AP-1 putem stimulacije ćelija HEK-Blue-hTLR7 ligandima TLR7. Tako je reporterska ekspresija regulisana NF-<Κ>B promoterom nakon stimulacije humanih TLR7 tokom 20 sati. Aktivnost reportera SEAP u supernatantu ćelijske kulture utvrđena je pomoću kompleta QUANTI-Blue™ (kat. br: rep-qb1, Invivogen, San Diego, Ca, USA) na talasnoj dužini od 640 nm, medijuma za detekciju koji postaje ljubičast ili plav u prisustvu alkalne fosfataze.
Ćelije HEK293-Blue-hTLR7 inkubirane su pri gustini od 250.000~450.000 ćelija/ml u zapremini od 180 µl na ploči sa 96 bunarčića u Dulbekovom modifikovanom Iglovom medijumu (DMEM) koji sadrži 4,5 g/l glukoze, 50 J/ml penicilina, 50 mg/ml streptomicina, 100 mg/ml normocina, 2 mM L-glutamina, 10% (V/V) termički inaktiviranog fetalnog goveđeg seruma, tokom 24 h. Potom su ćelije HEK293-Blue-hTLR-7 inkubirane uz dodatak 20 µl ispitivanog jedinjenja u serijskom razblaženju u prisustvu DMSO u finanoj koncentraciji od 1%, i izvršena je inkubacija na 37°C u inkubatoru sa CO2tokom 20 sati. Zatim je 20 µl supernatanta iz svakog bunarčića inkubirano 2 sata sa 180 µl rastvora supstrata Quanti-blue na 37°C, i očitana je apsorbanca na 620~655 nm koristeći spektrofotometar. Opšte je prihvaćen signalni put koji TLR7 aktivacija vodi do nishodne aktivacije NF-<Κ>B, i zbog toga je sličan test reportera takođe široko korišćen za procenu agonista TLR7 (Tsuneyasu Kaisho i Takashi Tanaka, Trends in Immunology, Volume 29, izdanje 7. juli 2008., strane 329.sci; Hiroaki Hemmi i sar., Nature Immunology 3, 196 - 200 (2002)).
Aktivnost agonizma TLR7 u testu HEK293-hTLR-7 jedinjenja 11 bila je 72 μM.
Primer 6
Kombinacija agonista TLR7 (jedinjenje 1) i inhibitora sklopa HBV kapsida (jedinjenje 2) snažno je smanjila DNK HBV i HBsAg u modelu AAV-HBV miša
Životinjski model
Mužjaci C57BL/6 miševa starosti 4 nedelje, bez specifičnih patogena, kupljeni su od Šangajskog laboratorijskog centra za životinje Kineske akademije nauka (Shanghai Laboratory Animal Center of Chinese Academy of Sciences, SLAC) i smešteni u ustanovu za negu životinja u zasebno ventiliranim kavezima na kontrolisanoj temperaturi i svetlosti prema institucionalnim Smernicama za negu životinja. AAV/HBV virus je kupljen od Pekinškog
1
instituta za molekularnu medicinu FivePlus (Beijing FivePlus Molecular Medicine Institute, Peking, Kina). Ovaj rekombinantni virus nosi 1,3 kopije genoma HBV koji je bio upakovan u AAV serotip 8 (AAV8) kapside. C57BL/6 miševima je injektovano 200 μl rekombinantnog virusa, razblaženog u fiziološkom puferu, injekcijom u repnu venu. Miševim je vađena krv 7. i 14. dana nakon injekcije radi praćenja površinskog antigena HBV (HBsAg), HBV e antigena (HBeAg), HBs antitela (HBsAb) i HBV genomske DNK u serumu, a potom su nasumično grupisani prema tim HBV biomarkerima.
Merenje HBV biomarkera
HBsAg i HBeAg u serumu su izmereni pomoću CLIA kompleta (Autobio Diagnostics Co., Ltd, Zhengzhou, Kina) prema uputstvu proizvođača. Donja granica detekcije za HBsAg i HBeAg bila je 0,1 ng/ml, odnosno 0,25 NCU/ml (nacionalna klinička jedinica/ml).
Rablaženje seruma od 100 puta (za HBsAg) ili 500 puta (za HBeAg) korišćeno je za dobijanje vrednosti u linearnom rasponu standardne krive. DNK HBV iz seruma ekstrahovana je pomoću kompleta MagNA Pure 96 DNA and Viral NA Small Volume Kit (Roche) prema uputstvu proizvođača. Uzorci DNK su analizirani pomoću kvantitativnog PCR (qPCR) u stvarnom vremenu pomoću HBV-specifičnog prajmera i kompleta sondi za specifično pojačavanje i detekciju regiona genoma od 128bp HBV od nukleotida 2969 do 3096. Sekvence prajmera i sonde prikazane su u nastavku:
Direktni prajmer
Reversni prajmer
HBV sonda
Anti-HBs u serumu izmeren je 24. dana nakon završetka lečenja primenom Anti-HBs CLIA kompleta (Autobio Diagnostics Co., Ltd, Zhengzhou, Kina) prema uputstvu proizvođača. Uzorci seruma su 3-struko razblaženi, i 50 µl razblaženih uzoraka je korišćeno za ispitivanje.
Dizajn i rezultati eksperimenta
10 mg/ml jedinjenja 1 i 1,2 mg/ml jedinjenja 2 formulisano je kao inkluzioni kompleks sa 2% Klucel LF, 0,1% polisorbata 80 i 0,1% parabena u vodi. Svi miševi su dobijali oralnu dozu ukupno 6 nedelja, nakon čega je usledio dvonedeljni period bez lečenja. U jednoj kontrolnoj studiji sa jednim tretmanom, pet miševa iz grupe jedinjenja 1 tretirano je
2
jedinjenjem 1 pri 100 mg/kg svaki drugi dan (QOD). Grupa sa vehikulumom tretirana je ekvivalentnom zapreminom oralnog vehikuluma placeba QD (2% Klucel LF, 0,1% polisorbat 80 i 0,1% parabena u vodi). U studiji sa kombinovanom terapijom, pet miševa iz grupe jedinjenja 2 primalo je 12 mg/kg oralno jednom dnevno (QD). Grupa kombi primila je 100 mg/kg jedinjenja 1 QOD plus 12 mg/kg jedinjenja 2 QD. Grupa sa vehikulumom tretirana je ekvivalentnom zapreminom oralnog vehikuluma placeba QD (2% Klucel LF, 0,1% polisorbat 80 i 0,1% parabena u vodi).
Mišji model sa visokim nivoom ekspresije DNK HBV i HBsAg generisan je injektovanjem C57BL/6 miševa rekombinantnim adeno-asociranim virusom (AAV) koji nosi HBV genom (AAV-HBV) koji može da se replikuje. 3 nedelje nakon infekcije, otkriveni su uporni HBV virusni markeri poput HBV genomske DNK, HBsAg i HBeAg u serumima zaraženih miševa. Sa dugotrajnom viremijom HBV i potpuno kompetentnim imunskim sistemom, model AAV-HBV korišćen je za ispitivanje pojedinačnog i kombinovanog efekta jedinjenja 1, proleka agonista TLR7, čiji aktivni oblik nakon konverzije indukuje snažne urođene imunološke odgovore, i jedinjenja 2, malog molekula koji inhibira sklop HBV kapsida. Kao što je prikazano na slici 1, nakon 6-nedeljnog tretmana, jedinjenje 1 je indukovalo više od 2-log redukcije DNK HBV i više od 1-log redukcije HBsAg. Samo jedinjenje 2 smanjilo je DNK HBV za više od 3-log i na nivo ispod LLQ (donja granica kvantifikacije), i umereno je smanjilo nivo HBsAg. Kombinacija jedinjenja 1 i jedinjenja 2 dovela je do održivog smanjenja i DNK HBV i HBsAg na nivo ispod LLQ čak i na kraju perioda od 2 nedelje bez lečenja. Rezultati pružaju dokaze za sinergistički antivirusni efekat nove terapije sa kombinovanim lečenjem agonistom TLR7 i inhibitorom sklopa HBV kapsida.
Primer 7
Kombinacija agonista TLR7 (jedinjenja 1 i 3) i inhibitora sklopa HBV kapsida (jedinjenja 4 i 5) snažno je smanjila DNK HBV i HBsAg na modelu AAV-HBV miša
U drugoj nezavisnoj studiji, više kombinacija agonista TLR7 i inhibitora kapsida i odgovarajućih lečenja pojedinačnim jedinjenjima ispitano je (sažeto u Tabeli 2) koristeći isti model AAV-HBV miša i postupak merenja HBV biomarkera opisanih u Primeru 5.
Tabela 2. Dizajn kombinovane studije na modelu AAV-HBV miša za jedinjenja 1, 3, 4 i 5
U ovom istraživanju je regrutovano osam miševa u svakoj grupi, a životinje su prvu dozu primile 28. dana nakon AAV-HBV infekcije. Ispitane kombinacije su uključivale jedinjenje 1 i jedinjenje 4, jedinjenje 3 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 4, i jedinjenje 1 i jedinjenje 5 (referentno jedinjenje). Sva jedinjenja su formulisana kao inkluzioni kompleks sa 2% Klucel LF, 0,1% polisorbata 80 i 0,1% parabena u vodi, i ekvivalentna zapremina placeba koji sadrži 2% Klucel LF, 0,1% polisorbata 80 i 0,1% parabena je korišćena u grupi sa vehikulumom. Konkretno, za kombinaciju jedinjenja 1 i jedinjenja 4, formulisano je 10 mg/ml jedinjenja 1 i 2 mg/ml jedinjenja 4. Grupa sa jedinjenjem 1 je primala oralnu dozu od 100 mg/kg QOD, dok je grupa sa jedinjenjem 4 primala oralnu dozu od 20 mg/kg QD. Odgovarajuća kombinovana grupa primala je 100 mg/kg jedinjenja 1 QOD i 20 mg/kg jedinjenja 4 QD. Za kombinaciju jedinjenja 3 (referentno jedinjenje) i jedinjenja 4,
4
formulisano je 3mg/ml jedinjenja 3 (referentno jedinjenje) i 2mg/ml jedinjenja 4. Grupa sa jedinjenjem 3 (referentno jedinjenje) je primala oralnu dozu od 30 mg/kg QOD, dok je grupa sa jedinjenjem 4 primala oralnu dozu od 20 mg/kg QD. Odgovarajuća kombinovana grupa primala je 30 mg/kg jedinjenja 3 (referentno jedinjenje) QOD i 20 mg/kg jedinjenja 4 QD. Za kombinaciju jedinjenja 1 i jedinjenja 5 (referentno jedinjenje), formulisano je 10mg/ml jedinjenja 1 i 1,2mg/ml jedinjenja 5 (referentno jedinjenje). Grupa sa jedinjenjem 1 je primala oralnu dozu od 100 mg/kg QOD, dok je grupa sa jedinjenjem 5 (referentno jedinjenje) primala oralnu dozu od 12 mg/kg QD. Odgovarajuća kombinovana grupa primala je 100 mg/kg jedinjenja 1 QOD i 12mg/kg jedinjenja 5 (referentno jedinjenje) QD. Nakon prve doze, miševima je izvađena krv submandibularno (75 µl krvi/mišu) dva puta nedeljno radi prikupljanja seruma do kraja ispitivanja. Sakupljena krv je ostavljena na 37°C najmanje 30 minuta da se zgruša, a zatim je centrifugirana na 13.200 × g, na 4°C tokom 3 minuta kako bi se dobio mišji serum. Ovi uzorci seruma podvrgnuti su analizi HBV biomarkerima.
Kao što je prikazano na slici 4, jednokratno tretiranje jedinjenjem 4 sa 20 mg/kg inhibiralo je DNK HBV i smanjilo HBsAg za 2-log na kraju 6-nedeljnog tretmana.
Kombinacija jedinjenja 1 (agonist TLR7) i jedinjenja 4 (inhibitor HBV kapsida) jasno je pokazala sjajan antivirusni efekat, posebno u kontroli HBsAg. Kod svih životinja koje su uzimale kombinovanu terapiju, njihov HBsAg je pao na nivo koji je blizu ili ispod LLQ za 4 nedelje nakon lečenja, a smanjenje HBsAg za više od 3,5 log na kraju lečenja moglo bi trajati najmanje 6 nedelja tokom perioda bez lečenja. U periodu bez lečenja, za 6 od 8 miševa je otkriveno da su razvili primetne nivoe anti-HBs, kao što je prikazano na slici 7.
Kao što je prikazano na slici 5, drugi agonist TLR7 jedinjenje 3 (referentno jedinjenje) takođe je smanjio i DNK HBV i HBsAg. Kombinacija jedinjenja 3 (referentno jedinjenje) i kapsidnog inhibitora jedinjenja 4 pokazala je dalje smanjenje DNK HBV (> 4 log) i HBsAg (2,7-log). Kao što je prikazano na slici 7, 3 od 8 miševa koji su uzimali jedinjenje 3 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 4 razvili su uočljive nivoe anti-HBs tokom 6-nedeljnog perioda bez lečenja.
Kao što je prikazano na slici 6, jedinjenje 5 (referentno jedinjenje) je još jedan kapsidni inhibitor koji je smanjio i DNK HBV i HBsAg. Kombinacija jedinjenja 5 (referentno jedinjenje) i agonista TLR7 jedinjenja 1 dalje je potisnula HBsAg ispod LLQ za 4 nedelje nakon lečenja, a smanjenje virusa je održano tokom cele studije, čak i nakon što je lečenje obustavljeno na 6 nedelja. Kao što je prikazano na slici 7, 4 od 8 miševa koji su uzimali jedinjenje 1 i jedinjenje 5 (referentno jedinjenje) razvili su uočljive nivoe anti-HBs tokom 6-nedeljnog perioda bez lečenja.
Primer 8
Kombinacija agonista TLR7 (jedinjenja 1 i 8) i inhibitora sklopa HBV kapsida (jedinjenja 4 i 10) snažno je smanjila DNK HBV i HBsAg na modelu AAV-HBV miša
U drugoj nezavisnoj studiji, testirano je više kombinacija agonista TLR7 i inhibitora kapsida i odgovarajućih lečenja pojedinačnim jedinjenjem (kako je sažeto u Tablici 3) koristeći isti model AAV-HBV miša i postupke merenja HBV biomarkera opisane u primeru 5.
Tabela 3. Dizajn kombinovane studije na modelu AAV-HBV miša za jedinjenja 1, 4, 8 i 10
U ovoj specifičnoj studiji regrutovano je sedam miševa u svakoj grupi, i životinje su primile prvu dozu najmanje 38 dana nakon AAV-HBV infekcije. Testirane kombinacije su uključivale jedinjenje 8 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 4, jedinjenje 8 (referentno jedinjenje) i jedinjenje 10 (referentno jedinjenje), i jedinjenje 1 i jedinjenje 10 (referentno jedinjenje). Sva jedinjenja su formulisana kao inkluzioni kompleks sa 2% Klucel LF, 0,1% polisorbata 80 i 0,1% parabena u vodi, i ekvivalentna zapremina placeba koji sadrži 2% Klucel LF, 0,1% polisorbata 80 i 0,1% parabena je korišćena u grupi sa vehikulumom. Konkretno, za kombinaciju jedinjenja 8 (referentno jedinjenje) i jedinjenja 4, formulisano je 30 mg/ml jedinjenja 8 (referentno jedinjenje) i 2 mg/ml jedinjenja 4. Grupa sa jedinjenjem 8 (referentno jedinjenje) je primala oralnu dozu od 300 mg/kg QOD, dok je grupa sa jedinjenjem 4 primala oralnu dozu od 20 mg/kg QD. Zatim je odgovarajuća kombinovana grupa primala 30 mg/kg jedinjenja 8 (referentno jedinjenje) QOD i 20 mg/kg jedinjenja 4 QD. Za kombinaciju jedinjenja 8 (referentno jedinjenje) i jedinjenja 10 (referentno jedinjenje), formulisano je 30 mg/ml jedinjenja 8 (referentno jedinjenje) i 2 mg/ml jedinjenja 10 (referentno jedinjenje). Grupa sa jedinjenjem 8 (referentno jedinjenje) je primala oralnu dozu od 300 mg/kg QOD, dok je grupa sa jedinjenjem 10 (referentno jedinjenje) primala oralnu dozu od 20 mg/kg QD. Zatim je odgovarajuća kombinovana grupa primala 300 mg/kg jedinjenja 8 (referentno jedinjenje) QOD i 20 mg/kg jedinjenja 10 (referentno jedinjenje) QD. Za kombinaciju jedinjenja 1 i jedinjenja 10 (referentno jedinjenje), formulisano je 10 mg/ml jedinjenja 1 i 2 mg/ml jedinjenja 10 (referentno jedinjenje). Grupa sa jedinjenjem 1 je primala oralnu dozu od 100 mg/kg QOD, dok je grupa sa jedinjenjem 10 (referentno jedinjenje) primala oralnu dozu od 20 mg/kg QD. Zatim je odgovarajuća kombinovana grupa primala 100 mg/kg jedinjenja 1 QOD i 20 mg/kg jedinjenja 10 (referentno jedinjenje) QD. Nakon prve doze, miševima je izvađena krv submandibularno (75 µl krvi/mišu) dva puta nedeljno radi prikupljanja seruma do kraja ispitivanja. Sakupljena krv je ostavljena na 37°C najmanje 30 minuta da se zgruša, a zatim je centrifugirana na 13.200 × g, na 4°C tokom 3 minuta kako bi se dobio mišji serum. Ovi uzorci seruma podvrgnuti su analizi HBV biomarkerima.
Rezultati na slici 8 pokazali su da je samo agonist TLR7 jedinjenje 8 (referentno jedinjenje) na kraju tretmana smanjio DNK HBV i HBsAg za oko 2-log i 1,5-log, dok je kombinacija jedinjenja 8 (referentno jedinjenje) i inhibitora kapsida jedinjenje 4, nadalje smanjila HBsAg na nivo ispod LLQ. U 6-nedeljnom periodu bez lečenja, kombinovana grupa je pokazala održivo smanjenje HBsAg, minimalni povrat DNK HBV i visoke nivoe anti-HBs koji nisu primećeni kod vehikuluma i pojedinačnih grupa za lečenje, kao što je prikazano na Slici 11. Takve koristi kombinovanog lečenja takođe su dosledno primećene u kombinovanim grupama jedinjenja 8 (referentno jedinjenje) i jedinjenja 10 (referentno jedinjenje), i jedinjenja 1 i jedinjenja 10 (referentno jedinjenje), kao što je prikazano na Slikama 9, 10 i 11.
Ukratko, gore navedeni rezultati po prvi put su dokazali da je kombinacija agonista TLR7 i HBV inhibitora kapsida efikasna terapija za značajno smanjenje ili čak eliminaciju DNK HBV i HBsAg. Nakon kombinovane terapije, dokazano je da supresija virusa traje čak 6 nedelja bez lečenja. Kod većine hroničnih bolesnika sa HBV, trenutne raspoložive terapije retko mogu postići serokonverziju HBsAg zbog činjenice da većina ovih terapija nije u stanju da izazove anti-HBs (antitelo na HBsAg). U našim kombinovanim studijama, uočljivo je da je anti-HBs mogao da se detektuje tokom 6-nedeljnog perioda bez lečenja, a to je bilo najuočljivije kod miševa koji su uzimali kombinovane terapije, kao što je prikazano na Slikama 7 i 11. Zato kombinovana terapija agonistom TLR7 i HBV inhibitorom kapsida nudi još jednu ključnu korist za podsticanje razvoja anti-HBs. Budući da je produženi gubitak HBsAg i/ili anti-HBs serokonverzija idealna krajnja točka lečenja hroničnog hepatitisa B, naše kombinovano lečenje predstavlja novi način za postizanja kliničkog izlečenja od hronične HBV infekcije.

Claims (20)

  1. PATENTNI ZAHTEVI 1. Farmaceutska kompozicija koja sadrži agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida u farmaceutski prihvatljivom nosaču, pri čemu, agonist TLR7 je odabran od [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetata strukture
    i 5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona strukture
    i pri čemu, inhibitor sklopa HBV kapsida je odabran od 3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
    3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
    ili njene farmaceutski prihvatljive soli, enantiomera ili dijastereomera.
  2. 2. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 1, pri čemu, kompozicija se sastoji od [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetata strukture
    3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
    u farmaceutski prihvatljivom nosaču.
  3. 3. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 1, pri čemu, kompozicija se sastoji od [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetata strukture
    i 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture 1
    u farmaceutski prihvatljivom nosaču.
  4. 4. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 1, pri čemu, kompozicija se sastoji od 5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona strukture
    i 3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
    u farmaceutski prihvatljivom nosaču. 2
  5. 5. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 1, pri čemu, kompozicija se sastoji od 5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona strukture
    i 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
    u farmaceutski prihvatljivom nosaču.
  6. 6. Farmaceutska kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 5, pri čemu, kompozicija dodatno sadrži jedan ili više drugih antivirusnih agenasa.
  7. 7. Farmaceutska kompozicija prema bilo kom od zahteva 1 do 6, pri čemu, navedeni drugi antivirusni agensi su odabrani od lamivudina, adefovira, tenofovira, telbivudina i entekavira.
  8. 8. Komplet koji sadrži ambalažu koja sadrži agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida, pri čemu TLR7 agonist je izabran od [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetata strukture ili 5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona strukture
    ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, enantiomera ili dijastereomera; i pri čemu, inhibitor sklopa HBV kapsida je odabran od 3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture ili 4 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
    ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, enantiomera ili dijastereomera.
  9. 9. Komplet prema zahtevu 8, pri čemu, agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida koji se koriste u ambalaži su: [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetat i 3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionska kiselina; [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetat i 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metilfenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionska kiselina; 5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-dion i 3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionska kiselina; ili 5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-dion i 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metilfenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionska kiselina; u farmaceutski prihvatljivom nosaču.
  10. 10. Komplet prema zahtevu 9, koji dalje sadrži sterilni razblaživač.
  11. 11. Komplet prema bilo kom od zahteva 8 do 10, koji dalje sadrži umetak za pakovanje koji sadrži štampano uputstvo koje usmerava upotrebu kombinovanog lečenja agonistom TLR7 i inhibitorom sklopa HBV kapsida kao postupak za lečenje ili profilaksu infekcije virusom hepatitisa B.
  12. 12. Kombinacije [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetata i 3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline; [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksitetrahidrofuran-2-il]propil] acetata i 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metilfenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline; 5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona i 3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline; ili 5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona i 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metilfenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline; ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, enantiomera ili dijastereomera za upotrebu u lečenju ili profilaksi infekcije virusom hepatitisa B.
  13. 13. Kombinacija [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksi-tetrahidrofuran-2-il]propil] acetata strukture
    i 3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
    ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, enantiomera ili dijastereomera za upotrebu u lečenju ili profilaksi infekcije virusom hepatitisa B.
  14. 14. Kombinacija [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-okso-tiazolo[4,5−d]pirimidin-3-il)-4-hidroksi-tetrahidrofuran-2-il]propil] acetata strukture
    i 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline;
    ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, enantiomera ili dijastereomera za upotrebu u lečenju ili profilaksi infekcije virusom hepatitisa B.
  15. 15. Kombinacija 5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona strukture
    i 3-[(8aS)-7-[[(4R)-4-(2-hlor-3-fluor-fenil)-5-etoksikarbonil-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline;
    ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, enantiomera ili dijastereomera za upotrebu u lečenju ili profilaksi infekcije virusom hepatitisa B.
  16. 16. Kombinacija 5-amino-3-[(2R,3R,5S)-3-hidroksi-5-[(1S)-1-hidroksipropil]tetrahidrofuran-2-il]-6H-tiazolo[4,5−d]pirimidin-2,7-diona strukture
    i 3-[(8aS)-7-[[(4S)-5-etoksikarbonil-4-(3-fluor-2-metil-fenil)-2-tiazol-2-il-1,4-dihidropirimidin-6-il]metil]-3-okso-5,6,8,8a-tetrahidro-1H-imidazo[1,5−a]pirazin-2-il]-2,2-dimetil-propionske kiseline strukture
    ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, enantiomera ili dijastereomera za upotrebu u lečenju ili profilaksi infekcije virusom hepatitisa B.
  17. 17. Kombinacija za upotrebu prema bilo kom od zahteva 13 do 16, pri čemu, agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida se daju istovremeno u istoj formulaciji ili drugoj formulaciji.
  18. 18. Kombinacija za upotrebu prema bilo kom od zahteva 13 do 17, pri čemu, agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida su namenjeni za primenu na ispitaniku istim putem ili različitim putevima.
  19. 19. Kombinacija za upotrebu prema bilo kom od zahteva 13 do 18, pri čemu, agonist TLR7 i inhibitor sklopa HBV kapsida su namenjeni za primenu na ispitaniku parenteralnom ili oralnom primenom.
  20. 20. Kombinacija za upotrebu prema bilo kom od zahteva 13 do 19, pri čemu, primena je istovremena ili sekvencijalna.
RS20200644A 2015-03-16 2016-03-15 Kombinovani tretman agonistom tlr7 i inhibitorom sklopa hbv kapsida RS60350B1 (sr)

Applications Claiming Priority (6)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN2015074269 2015-03-16
CN2015074854 2015-03-23
CN2015084480 2015-07-20
CN2016074012 2016-02-18
EP16710952.9A EP3270915B1 (en) 2015-03-16 2016-03-15 Combined treatment with a tlr7 agonist and an hbv capsid assembly inhibitor
PCT/EP2016/055484 WO2016146598A1 (en) 2015-03-16 2016-03-15 Combined treatment with a tlr7 agonist and an hbv capsid assembly inhibitor

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS60350B1 true RS60350B1 (sr) 2020-07-31

Family

ID=55587263

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20200644A RS60350B1 (sr) 2015-03-16 2016-03-15 Kombinovani tretman agonistom tlr7 i inhibitorom sklopa hbv kapsida

Country Status (26)

Country Link
US (1) US11771699B2 (sr)
EP (3) EP3695837B1 (sr)
JP (3) JP6667547B2 (sr)
KR (4) KR20220020412A (sr)
CN (1) CN107427514B (sr)
AU (3) AU2016232353B2 (sr)
CA (1) CA2979490C (sr)
CL (1) CL2017002230A1 (sr)
CR (1) CR20170424A (sr)
DK (1) DK3270915T3 (sr)
ES (1) ES2798598T3 (sr)
HR (1) HRP20200943T1 (sr)
HU (1) HUE050736T2 (sr)
IL (3) IL253493B (sr)
MA (2) MA55581A (sr)
MX (2) MX370769B (sr)
MY (1) MY190603A (sr)
PE (2) PE20171648A1 (sr)
PL (1) PL3270915T3 (sr)
PT (1) PT3270915T (sr)
RS (1) RS60350B1 (sr)
RU (1) RU2718917C2 (sr)
SG (2) SG10201912847QA (sr)
SI (1) SI3270915T1 (sr)
UA (1) UA123670C2 (sr)
WO (1) WO2016146598A1 (sr)

Families Citing this family (43)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PL3114128T3 (pl) * 2014-03-07 2019-06-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Nowe skondensowane w pozycji 6 heteroarylodihydropirymidyny stosowane w leczeniu i profilaktyce zakażenia wirusem zapalenia wątroby typu B
HUE053704T2 (hu) 2014-12-08 2021-07-28 Hoffmann La Roche 3-szubsztitutált 5-amino-6H-tiazolo[4,5-d]pirimidin-2,7-dion vegyületek vírusfertõzések kezelésére és megelõzésére
CN107427514B (zh) 2015-03-16 2021-07-13 豪夫迈·罗氏有限公司 使用tlr7激动剂和hbv衣壳装配抑制剂的组合治疗
CN107592864B (zh) * 2015-05-12 2021-04-16 豪夫迈·罗氏有限公司 用于治疗和预防病毒感染的新的取代的氨基噻唑并嘧啶二酮
BR102017010009A2 (pt) 2016-05-27 2017-12-12 Gilead Sciences, Inc. Compounds for the treatment of hepatitis b virus infection
WO2017211791A1 (en) * 2016-06-07 2017-12-14 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy of an hbsag inhibitor and a tlr7 agonist
CA3034185A1 (en) * 2016-09-13 2018-03-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Combined treatment with a tlr7 agonist and an hbv capsid assembly inhibitor
WO2018127525A1 (en) * 2017-01-06 2018-07-12 F. Hoffmann-La Roche Ag PROCESS FOR THE PREPARATION OF 3-SUBSTITUTED 5-AMINO-6H-THIAZOLO[4,5-d]PYRIMIDINE-2,7-DIONE COMPOUNDS
IL307295A (en) * 2017-01-06 2023-11-01 Hoffmann La Roche Solid forms of [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-oxo-thiazolo[5,4-D]pyrimidin-3-yl)-4-hydroxy-tetrahydrofuran -2-yl]propyl]acetate
UY37581A (es) 2017-02-02 2018-08-31 Gilead Sciences Inc Compuestos para el tratamiento de la infección por virus de la hepatitis b
KR102665544B1 (ko) 2017-06-26 2024-05-14 선샤인 레이크 파르마 컴퍼니 리미티드 디하이드로피리미딘 화합물 및 약제에서의 이의 용도
EP3645516A4 (en) 2017-06-27 2021-07-07 Janssen Pharmaceutica NV HETEROARYLDIHYDROPYRIMIDE DERIVATIVES AND METHODS OF TREATMENT OF HEPATITIS B INFECTIONS
US12012421B2 (en) 2017-07-07 2024-06-18 Hoffmann-La Roche Inc. Solid forms of [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-oxo-thiazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl)-4-hydroxy-tetrahydrofuran-2-yl]propyl] acetate
SG11202003320SA (en) * 2017-10-18 2020-05-28 Sunshine Lake Pharma Co Ltd Dihydropyrimidine compounds and uses thereof in medicine
MX2020004838A (es) 2017-11-02 2020-10-16 Aicuris Gmbh & Co Kg Nuevas indol-2-carboxamidas sustituidas con pirazolopiperidina, de alta actividad, activas contra el virus de la hepatitis b (vhb).
EA202091113A1 (ru) 2017-11-02 2020-08-28 Айкурис Гмбх Унд Ко. Кг Новые высокоактивные аминотиазолзамещенные индол-2-карбоксамиды, активные в отношении вируса гепатита b (hbv)
US12012420B2 (en) 2017-11-21 2024-06-18 Hoffmann-La Roche, Inc. Solid forms of [(1S)-1-[(2S,4R,5R)-5-(5-amino-2-oxo-thiazolo[4,5-d]pyrimidin-3-yl)-4-hydroxy-tetrahydrofuran-2-yl]propyl] acetate
BR112021000538A2 (pt) 2018-07-13 2021-04-06 F. Hoffmann-La Roche Ag Oligonucleotídeos para modular a expressão de rtel1
US11053235B2 (en) 2018-08-09 2021-07-06 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Substituted 1,4-dihydropyrimidines for the treatment of HBV infection or HBV-induced diseases
PY1991611A (es) 2018-11-02 2022-03-14 Aicuris Gmbh & Co Kg Nueva urea 6,7-dihidro-4h-pirazolo [1,5-a] pirazinas activas contra el virus de la hepatitis b (vhb)
AR117188A1 (es) 2018-11-02 2021-07-21 Aicuris Gmbh & Co Kg Derivados de urea 6,7-dihidro-4h-pirazolo[1,5-a]pirazinas activas contra el virus de la hepatitis b (vhb)
AR116947A1 (es) 2018-11-02 2021-06-30 Aicuris Gmbh & Co Kg Derivados de urea 6,7-dihidro-4h-pirazolo[1,5-a]pirazinas-indol-2-carboxamidas activas contra el virus de la hepatitis b (vhb)
UY38434A (es) 2018-11-02 2020-05-29 Aicuris Gmbh & Co Kg Nuevas 6,7-dihidro-4h-pirazolo[1,5-a]pirazin indol-2-carboxamidas activas contra el virus de la hepatitis b (hbv)
US20220009945A1 (en) 2018-11-02 2022-01-13 Aicuris Gmbh & Co. Kg Novel urea 6,7-dihydro-4h-thiazole[5,4-c]pyridines active against the hepatitis b virus (hbv)
PY1991606A (es) 2018-11-02 2022-02-10 Aicuris Gmbh & Co Kg Nueva urea 6,7-dihidro-4h-pirazolo [4,3-c] piridinas activas contra el virus de la hepatitis b (vhb)
EP3894004A1 (en) * 2018-12-14 2021-10-20 F. Hoffmann-La Roche AG Chroman-4-one derivatives for the treatment and prophylaxis of hepatitis b virus infection
TW202035412A (zh) * 2018-12-20 2020-10-01 比利時商健生藥品公司 雜芳基二氫嘧啶衍生物和治療ｂ型肝炎感染之方法
CA3124317A1 (en) * 2018-12-20 2020-06-25 Janssen Pharmaceutica Nv Heteroaryldihydropyrimidine derivatives and methods of treating hepatitis b infections
AU2020249331B2 (en) * 2019-03-25 2026-02-05 F. Hoffmann-La Roche Ag Solid forms of a compound of HBV core protein allosteric modifier
EP3962909B1 (en) 2019-04-30 2023-10-04 AiCuris GmbH & Co. KG Novel oxalyl piperazines active against the hepatitis b virus (hbv)
US20220306647A1 (en) 2019-04-30 2022-09-29 Aicuris Gmbh & Co. Kg Novel indole-2-carboxamides active against the hepatitus b virus (hbv)
MX2021013086A (es) 2019-04-30 2021-11-17 Aicuris Gmbh & Co Kg Nuevas fenil y piridil ureas activas contra el virus de la hepatitis b (vhb).
KR20220002498A (ko) 2019-04-30 2022-01-06 아이쿠리스 게엠베하 운트 코. 카게 B형 간염 바이러스 (hbv)에 대해 활성인 신규 인돌리진-2-카르복스아미드
EP3980419A1 (en) * 2019-06-06 2022-04-13 F. Hoffmann-La Roche AG Alternative process for the preparation of 4-phenyl-5-alkoxycarbonyl-2-thiazol-2-yl-1,4-dihydropyrimidin-6-yl]methyl]-3-oxo-5,6,8,8a-tetrahydro-1h-imidazo[1,5-a]pyrazin-2-yl]-carboxylic acid
US20220233526A1 (en) * 2019-06-18 2022-07-28 Janssen Sciences Ireland Unlimited Company Combination of hepatitis b virus (hbv) vaccines and dihydropyrimidine derivatives as capsid assembly modulators
TW202122392A (zh) * 2019-07-31 2021-06-16 愛爾蘭商健生科學愛爾蘭無限公司 二氫嘧啶衍生物及其於治療ｈｂｖ感染或ｈｂｖ誘發的疾病之用途
PH12022551280A1 (en) * 2019-11-26 2024-01-08 Primmune Therapeutics Inc Tlr7 agonists
AU2020415307A1 (en) * 2019-12-24 2022-06-09 F. Hoffmann-La Roche Ag Method of treating virus infection using a TLR7 agonist
EP4081639A1 (en) * 2019-12-24 2022-11-02 F. Hoffmann-La Roche AG Pharmaceutical combination of a therapeutic oligonucleotide targeting hbv and a tlr7 agonist for treatment of hbv
US11566019B2 (en) 2020-04-02 2023-01-31 Southern Research Institute 2-pyrimidone analogs as potent antiviral agents against alphaviruses
JP2023536999A (ja) 2020-08-05 2023-08-30 エフ． ホフマン－ラ ロシュ アーゲー Ｂ型肝炎患者のオリゴヌクレオチド処置
CN115003673B (zh) * 2020-12-09 2023-08-11 上海维申医药有限公司 一种二氢嘧啶类化合物、其制备方法及应用
CN118165920B (zh) * 2024-05-14 2024-08-06 内蒙古大学 一种Tlr7&8双激动剂小鼠性控分选液和使用方法及其应用

Family Cites Families (49)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5476659A (en) 1982-11-09 1995-12-19 The Scripps Research Institute Cancerous B cell treatment using substituted nucleoside derivatives
US5166141A (en) 1983-11-01 1992-11-24 Scripps Clinic And Research Foundation Immunostimulating 7-deaza-7-oxa- and 7-deaza-7-oxo-analogs of 8-substituted-guanine-9-(1'-beta-D-aldoglycosidyl) derivatives and methods of treating test animals
US5041426A (en) 1987-12-21 1991-08-20 Brigham Young University Immune system enhancing 3-β-d-ribofuranosylthiazolo[4,5-d]pyridimine nucleosides and nucleotides
EP1072607A3 (en) 1996-10-16 2001-09-12 ICN Pharmaceuticals, Inc. Purine L-nucleosides, analogs and uses therof
AU727177B2 (en) 1996-10-16 2000-12-07 Icn Pharmaceuticals, Inc. Purine L-nucleosides, analogs and uses thereof
DE10012549A1 (de) 2000-03-15 2001-09-20 Bayer Ag Arzneimittel gegen virale Erkrankungen
DE10012824A1 (de) 2000-03-16 2001-09-20 Bayer Ag Arzneimittel gegen virale Erkrankungen
DE10013126A1 (de) 2000-03-17 2001-09-20 Bayer Ag Arzneimittel gegen virale Erkrankungen
WO2005016235A2 (en) 2003-04-14 2005-02-24 The Regents Of The University Of California Combined use of impdh inhibitors with toll-like receptor agonists
CA2536249A1 (en) 2003-08-25 2005-03-10 3M Innovative Properties Company Delivery of immune response modifier compounds
EP1667694B1 (en) 2003-09-05 2010-04-28 Anadys Pharmaceuticals, Inc. Tlr7 ligands for the treatment of hepatitis c
ATE399168T1 (de) * 2003-10-01 2008-07-15 Nycomed Gmbh Imidazopyridin-derivate und ihre verwendung als induzierbare no-synthase inhibitoren
WO2005085462A1 (en) 2004-02-27 2005-09-15 Dsm Ip Assets B.V. Enzymatic preparation of an enantiomerically enriched beta-2-amino acids
EP1776105A2 (en) 2004-07-18 2007-04-25 Coley Pharmaceutical Group, Ltd Methods and compositions for inducing innate immune responses
WO2006033995A2 (en) 2004-09-16 2006-03-30 Valeant Research And Development Thiazolidin-4-ones having anti-hepatitis b activity
JP2006088985A (ja) * 2004-09-27 2006-04-06 Toyoda Gosei Co Ltd 頭部保護エアバッグ装置
WO2006054129A1 (en) 2004-11-19 2006-05-26 Institut Gustave Roussy Improved treatment of cancer by double-stranded rna
CN101212968B (zh) * 2004-12-17 2011-11-16 安那迪斯药品股份有限公司 3,5-二取代的和3,5,7-三取代的-3H-噁唑并以及3H-噻唑并[4,5-d]嘧啶-2-酮化合物及其前药
ES2459368T3 (es) * 2004-12-17 2014-05-09 Anadys Pharmaceuticals, Inc. Compuestos de 3H-oxazolo y 3H-tiazolo[4,5-d]pirimidin-2-ona 3,5-disustituidos y 3,5,7-trisustituidos y profármacos de los mismos
CA2621809A1 (en) 2005-09-22 2007-04-05 The Scripps Research Institute Alkoxy indolinone based protein kinase inhibitors
WO2007056527A2 (en) 2005-11-09 2007-05-18 Cheng Si Yuan (China-International) Hepatitis Research Foundation Diagnostic and therapeutic methods and agents
CL2007001427A1 (es) 2006-05-22 2008-05-16 Novartis Ag Sal de maleato de 5-amino-3-(2',3'-di-o-acetil-beta-d-ribofuranosil)-3h-tiazolo[4,5-d]pirimidin-2-ona; procedimiento de preparacion; composicion farmaceutica que comprende a dicho compuesto; y uso del compuesto para el tratamiento de una infeccion po
WO2007143582A2 (en) 2006-06-05 2007-12-13 Baylor College Of Medicine Reversal of the suppressive function of specific t cells via toll-like receptor 8 signaling
CA2655904C (en) 2006-06-22 2014-11-18 Anadys Pharmaceuticals, Inc. Prodrugs of 5-amino-3-(3'-deoxy-.beta.-d-ribofuranosyl)-thiazolo[4,5-d]pyrimidin-2,7-dione
EP2040712B1 (en) 2006-07-18 2011-03-02 Anadys Pharmaceuticals, Inc. Carbonate and carbamate prodrugs of thiazolo [4,5-d] pyrimidines
BRPI0717741A2 (pt) 2006-10-17 2014-04-08 Anadys Pharmaceuticals Inc Compostos e respectivos método de preparação, método de redução de composto de sulfonil substituído, composição farmacêutica método de tratamento ou prevenção de doença
GB0701366D0 (en) 2007-01-24 2007-03-07 Glaxo Group Ltd Novel pharmaceutical compositions
WO2009026292A1 (en) * 2007-08-20 2009-02-26 Anadys Pharmaceuticals, Inc. Dosing methods for treating disease
WO2009067547A1 (en) 2007-11-19 2009-05-28 Takeda Pharmaceutical Company Limited Polo-like kinase inhibitors
EP2098526B1 (en) 2008-02-22 2014-01-15 Neurotune AG Nitrogen-containing bicyclic compounds active on chronic pain conditions
DE102008027648A1 (de) 2008-06-10 2009-12-17 Schaeffler Kg Spannvorrichtung
JP5816087B2 (ja) 2008-08-29 2015-11-18 エンメエッセディ・イタリア・エッセ・エッレ・エッレ Ｓｍｏアンタゴニストとしての飽和二環式複素環誘導体
WO2010069147A1 (zh) 2008-12-17 2010-06-24 张中能 二氢嘧啶类化合物、其组合物及其应用
CN102372706A (zh) 2010-08-09 2012-03-14 江苏恒瑞医药股份有限公司 酞嗪酮类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
WO2012088414A1 (en) 2010-12-23 2012-06-28 Ludwig Institute For Cancer Research Ltd. Liposomal formulation of nonglycosidic ceramides and uses thereof
US20140336159A1 (en) 2011-10-07 2014-11-13 Pulmatrix, Inc. Methods for treating and diagnosing respiratory tract infections
EP2794565B1 (en) * 2011-12-21 2017-07-26 Novira Therapeutics Inc. Hepatitis b antiviral agents
MY182403A (en) * 2012-08-24 2021-01-25 Sunshine Lake Pharma Co Ltd Dihydropyrimidine compounds and their application in pharmaceuticals
CA2881322A1 (en) * 2012-09-10 2014-03-13 F. Hoffmann-La Roche Ag 6-amino acid heteroaryldihydropyrimidines for the treatment and prophylaxis of hepatitis b virus infection
US8993771B2 (en) * 2013-03-12 2015-03-31 Novira Therapeutics, Inc. Hepatitis B antiviral agents
PE20151951A1 (es) * 2013-05-17 2015-12-26 Hoffmann La Roche Heteroarildihidropirimidinas unidas por puentes en 6 para el tratamiento y la profilaxis de infeccion por el virus de la hepatitis b
CN104650069B (zh) 2013-11-19 2019-04-19 广东东阳光药业有限公司 4-甲基二氢嘧啶类化合物及其在药物中的应用
JP6619362B2 (ja) * 2014-02-21 2019-12-11 ヴィブラント ホールディングス リミテッド ライアビリティ カンパニー 一段階ペプチドカップリングのためのアミノ酸の選択的光活性化
PL3114128T3 (pl) * 2014-03-07 2019-06-28 F. Hoffmann-La Roche Ag Nowe skondensowane w pozycji 6 heteroarylodihydropirymidyny stosowane w leczeniu i profilaktyce zakażenia wirusem zapalenia wątroby typu B
WO2015172128A1 (en) 2014-05-09 2015-11-12 Indiana University Research And Technology Corporation Methods and compositions for treating hepatitis b virus infections
HUE053704T2 (hu) * 2014-12-08 2021-07-28 Hoffmann La Roche 3-szubsztitutált 5-amino-6H-tiazolo[4,5-d]pirimidin-2,7-dion vegyületek vírusfertõzések kezelésére és megelõzésére
CN107427514B (zh) 2015-03-16 2021-07-13 豪夫迈·罗氏有限公司 使用tlr7激动剂和hbv衣壳装配抑制剂的组合治疗
WO2017076791A1 (en) * 2015-11-03 2017-05-11 F. Hoffmann-La Roche Ag Combination therapy of an hbv capsid assembly inhibitor and an interferon
CA3034185A1 (en) 2016-09-13 2018-03-22 F. Hoffmann-La Roche Ag Combined treatment with a tlr7 agonist and an hbv capsid assembly inhibitor

Also Published As

Publication number Publication date
AU2016232353A1 (en) 2017-08-03
IL276865A (en) 2020-10-29
KR102139708B1 (ko) 2020-07-31
RU2017135467A3 (sr) 2019-09-10
AU2019202966A1 (en) 2019-05-16
EP3695837B1 (en) 2024-11-20
PE20211647A1 (es) 2021-08-24
WO2016146598A1 (en) 2016-09-22
JP2018508552A (ja) 2018-03-29
BR112017019758A2 (pt) 2018-05-29
JP2020100637A (ja) 2020-07-02
AU2019202966B2 (en) 2021-04-15
JP6667547B2 (ja) 2020-03-18
EP3695837C0 (en) 2024-11-20
US20180000824A1 (en) 2018-01-04
AU2021202122A1 (en) 2021-05-06
CR20170424A (es) 2018-01-26
KR20220020412A (ko) 2022-02-18
SG10201912847QA (en) 2020-02-27
MA52701A (fr) 2021-03-31
CN107427514A (zh) 2017-12-01
IL253493A0 (en) 2017-09-28
PT3270915T (pt) 2020-06-17
CL2017002230A1 (es) 2018-04-13
MX2017011488A (es) 2018-01-23
SI3270915T1 (sl) 2020-07-31
DK3270915T3 (da) 2020-06-15
JP2021100967A (ja) 2021-07-08
PE20171648A1 (es) 2017-11-13
AU2016232353B2 (en) 2019-05-16
CA2979490C (en) 2023-07-18
KR102359212B1 (ko) 2022-02-08
CN107427514B (zh) 2021-07-13
RU2017135467A (ru) 2019-04-17
JP7195360B2 (ja) 2022-12-23
HRP20200943T1 (hr) 2020-09-18
KR20190085185A (ko) 2019-07-17
IL282706A (en) 2021-06-30
MX2022011756A (es) 2022-10-07
US11771699B2 (en) 2023-10-03
EP3270915B1 (en) 2020-04-15
JP6859468B2 (ja) 2021-04-14
MX370769B (es) 2019-12-20
HUE050736T2 (hu) 2021-01-28
KR20170113658A (ko) 2017-10-12
RU2718917C2 (ru) 2020-04-15
EP3270915A1 (en) 2018-01-24
CA2979490A1 (en) 2016-09-22
IL276865B (en) 2021-05-31
NZ733805A (en) 2021-04-30
SG11201706835WA (en) 2017-09-28
ES2798598T3 (es) 2020-12-11
EP3695837A1 (en) 2020-08-19
MY190603A (en) 2022-04-27
HK1245082A1 (zh) 2018-08-24
PL3270915T3 (pl) 2020-08-24
IL253493B (en) 2020-11-30
UA123670C2 (uk) 2021-05-12
EP3845227A1 (en) 2021-07-07
KR20200091505A (ko) 2020-07-30
MA55581A (fr) 2022-02-16

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JP6859468B2 (ja) Ｔｌｒ７作動薬およびｈｂｖカプシド集合阻害剤を用いた併用処置
CN109715214B (zh) Tlr7激动剂和hbv衣壳组装抑制剂的组合治疗
WO2017211791A1 (en) Combination therapy of an hbsag inhibitor and a tlr7 agonist
NZ733805B2 (en) Combined treatment with a tlr7 agonist and an hbv capsid assembly inhibitor
BR112017019758B1 (pt) Tratamento combinado com um agonista de tlr7 e um inibidor de montagem de capsídeo de hbv
BR122021002683B1 (pt) Tratamento combinado com um agonista de tlr7 e um inibidor de montagem de capsídeo de hbv
HK1245082B (en) Combined treatment with a tlr7 agonist and an hbv capsid assembly inhibitor
HK40007966A (en) Combined treatment with a tlr7 agonist and an hbv capsid assembly inhibitor
HK40007966B (en) Combined treatment with a tlr7 agonist and an hbv capsid assembly inhibitor