RS61372B1

RS61372B1 - Ligand a3 adenozinskog receptora za primenu u lečenju nagomilavanja ektopične masnoće

Info

Publication number: RS61372B1
Application number: RS20210079A
Authority: RS
Inventors: Pnina Fishman; Shira Cohen
Original assignee: Can Fite Biopharma Ltd
Priority date: 2015-11-23
Filing date: 2016-11-22
Publication date: 2021-02-26
Also published as: IL242723A0; WO2017090036A1; US20200384009A1; IL259396B; MX378107B; CA3005961C; IL259396A; MX2018006026A; JP2018534333A; JP6990934B2; IL289841A; CA3005961A1; US10780106B2; SI3380104T1; HRP20210020T1; JP2020090532A; KR102103657B1; DK3380104T3; PT3380104T; PL3380104T3

Description

Opis

OBLAST PRONALASKA

[0001] Ova objava se odnosi na medicinsku upotrebu A3AR liganada.

STANJE TEHNIKE

[0002] U nastavku se nalaze reference koje se smatraju relevantnim kao stanje tehnike za temu koja se trenutno stavlja na uvid javnosti:

• Objava međunarodne prijave patenta sa br. WO09/050707

• Objava međunarodne prijave patenta sa br. WO2013/111132

STANJE TEHNIKE

[0003] Gi protein povezani sa ćelijskom površinom A3adenozinski receptor (A3AR), prekomerno je eksprimiran u ćelijama kancera, kao i u inflamatornim ćlijama i u mononuklearnim ćelijama periferne krvi (PBMC - peripheral blood mononuclear cells) izvedenim od pacijenata sa različitim autoimunim inflamatornim bolestima, kao što je reumatoidni artritis psorijaza i Kronova bolest.

[0004] Aktivacija Gi protein povezanog sa ćelijskom površinom A3adenozinskog receptora (A3AR) sa visoko specifičnim ligandima, kao što je A3AR agonist 2-hloro-N<6>-(3-jodobenzil)-adenozin-5'-N-metiluronamid (Cl-IB-MECA) utvrđeno je da indukuje proliferaciju hepatocita, kao što je otkriveno u objavi međunarodne patentne prijave sa br. WO09/050707.

[0005] Pored toga, objava međunarodne patentne prijave sa br. WO2013/111132 opisuje upotrebu Cl-IB-MECA za lečenje hepatocelularnog karcinoma (HCC) i za održavanje funkcije jetre kod subjekta koji ima hroničnu bolest jetre. Choi Ha-Neul i saradnici: „Cordyceps militaris alleviates non-alcoholic fatty liver disease in ob/ob mice“, ISTRAŽIVANJE I PRAKSA ISHRANE APR 2014, (201404), tom 8, br.2, opisuje da Cordyceps militaris ublažava nealkoholnu bolest masne jetre kod miševa.

OPŠTI OPIS

[0006] Predmetni pronalazak odnosi se na sledeća tehnička rešenja definisana pod tačkama 1-7:

1. Agonist adenozinskog A3receptora (A3AR) za primenu u smanjenju nakupljanja lipida u tkivu jetre kod subjekta koji ima nealkoholnu bolest masne jetre (NAFLD), pri čemu je navedeni A3AR agonist odabran iz grupe koja se sastoji od N<6>-2-(4-aminofenil)etil adenozina (APNEA), N<6>-(4-amino-3-jodobenzil)adenozin-5'-(N-metiluronamida) (AB-MECA), N<6>-(3-jodobenzil) -adenozin-5'-N-metiluronamida (IB-MECA) i 2-hloro-N<6>-(3-jodobenzil)-adenozin-5'-N-metiluronamida (Cl-IB-MECA).

2. A3AR ligand iz tačke 1, pri čemu je količina efikasna za smanjenje nivoa najmanje triglicerida u navedenom tkivu.

3. A3AR ligand iz tačke 1 ili 2, pri čemu navedeno lečenje obuhvata dnevnu administraciju pomenutog A3AR liganda navedenom subjektu.

4. A3AR ligand iz bilo koje od tačaka 1 do 3, pri čemu navedeno lečenje obuhvata hroničnu administraciju pomenutog A3AR liganda.

5. A3AR ligand iz bilo koje od tačaka 1 do 4, pri čemu je navedena administracija oralna administracija.

6. A3AR ligand iz bilo koje od tačaka 1 do 5, pri čemu je navedena administracija jednom ili dva puta dnevno.

7. A3AR ligand iz bilo koje od tačaka 1 do 6, za lečenje nealkoholnog steatohepatitisa (NASH).

[0007] Ova objava pruža, u skladu sa prvim od svojih aspekata, ligand A3adenozinskog receptora (A3AR) za primenu u smanjenju ektopične akumulacije lipida u tkivu subjekta.

[0008] Ova objava pruža, u skladu sa drugim aspektom, postupak za smanjenje ektopične akumulacije lipida u tkivu subjekta, postupak koji uključuje davanje navedenom subjektu količine A3AR liganda.

[0009] Ova objava pruža, u skladu sa trećim aspektom, upotrebu A3AR liganda za pripremu farmaceutske kompozicije za smanjenje ektopične akumulacije lipida.

[0010] Dalje, Ova objava obezbeđuje, u skladu sa četvrtim aspektom, farmaceutsku kompoziciju koja sadrži farmaceutski prihvatljiv nosač i kao aktivni sastojak A3AR ligand u količini efikasnoj za smanjenje ektopične akumulacije lipida u tkivu subjekta.

[0011] Konačno, Ova objava pruža, u skladu sa svojim petim aspektom, komplet koji sadrži farmaceutsku kompoziciju koja sadrži A3AR ligand i uputstva za upotrebu farmaceutske kompozicije za smanjenje ektopične akumulacije lipida u tkivu subjekta.

[0012] U nekim tehničkim rešenjima, A3AR ligand se koristi za smanjenje akumulacije masti u jetri.

[0013] U nekim daljim tehničkim rešenjima, A3AR ligand je A3AR agonist, poželjno 2-hloro-N<6>-(3-jodobenzil)-adenozin-5'-N-metiluronamid (Cl-IB-MECA, ovde takođe naznačen kao CF102) za upotrebu u lečenju akumulacije masti u jetri ili stanja povezanog sa akumulacijom masti u jetri subjekta.

KRATAK OPIS SLIKA

[0014] Da bi se bolje razumela tema koja se ovde stavlja na uvid javnosti i da bi se ilustrovalo kako se to može sprovesti u praksi, sada će biti opisana tehnička rešenja, samo na neograničavajućem primeru, pozivajući se na prateće crteže, na kojima:

Slika 1 je trakasti grafikon koji prikazuje smanjenje odnosa mase jetre i tela u NASH jetri kod miševa nakon dnevne administracije CF102 tokom tri nedelje u poređenju sa nelečenim miševima (transporter).

Slika 2A-2B su trakasti grafikoni koji prikazuju smanjenje nivoa ALT u plazmi (Slika 2A) i nivoa triglicerida (Slika 2B) kod NASH miševa nakon dnevnog davanja CF102 tokom tri nedelje u poređenju sa nelečenim miševima (transporter).

Slika 3A-3D su histološki preseci jetre iz grupa tretiranih sa CF102 u dva različita uvećanja, X50 i X200 (Slike 3A i 3B, respektivno) i grupe tretirane transporterom (DMSO) (Slika 3C i 3D).

Slika 4 je grafikon koji prikazuje smanjenje rezultata aktivnosti NAFLD nakon tretmana sa CF102 u koncentraciji od 200 µg/kg.

Slika 5 je grafikon koji prikazuje efekat CF102, u koncentraciji od 200 µg/kg, na smanjenje NAS rezultata upale u poređenju sa transporterom.

DETALJAN OPIS

[0015] Predmetna objava se zasniva na nalazu da 2-hloro-N<6>-(3-jodobenzil)-adenozin-5'-N-metiluronamid (Cl-IB-MECA, ovde takođe naznačen kao CF102), agonist A3adenozinskog receptora (A3AR), sa visokim afinitetom i selektivnošću prema A3AR, indukovao je poboljšanje nealkoholne masne bolesti jetre (NAFLD) u eksperimentalnom modelu na miševima. Ovo neočekivano poboljšanje ispoljilo se, između ostalog, smanjenjem odnosa težine jetre i tela kod jetri sa nealkoholnim steatohepatitisom (NASH), smanjenjem nivoa triglicerida u jetri i što je najvažnije, rezultatom NAFLD koji se smatra krajnjom tačkom (slika 4) i smanjenjem rezultata NAS upale u odnosu na kontrolni transporter (slika 5).

[0016] Na osnovu ovih nalaza, pronalazači su zaključili da je aktivator A3AR, bio on A3AR agonist ili A3AR alosterični pojačivač, efikasno sredstvo za smanjenje nakupljanja masti/lipida u ektopičnim mestima, naročito i poželjno u jetri.

[0017] Prema tome, u skladu sa prvim od njegovih aspekata, Ova objava daje A3AR ligand za upotrebu u smanjenju ektopične akumulacije masti u tkivu subjekta koji ima stanje koje je u vezi sa takvom akumulacijom masti, npr. nealkoholna masna bolest jetre (NAFLD) ili specifično nealkoholni steatohepatitis (NASH).

[0018] U sledećem opisu, kada se govori o A3AR ligandu za upotrebu u smanjenju ektopične akumulacije lipida, podrazumeva se da takođe obuhvata postupak za smanjenje ektopične akumulacije lipida administracijom A3AR liganda; na upotrebu liganda A3AR za pripremu farmaceutske kompozicije za smanjenje ektopične akumulacije lipida; na farmaceutsku kompoziciju koja sadrži farmaceutski prihvatljiv nosač i kao aktivni sastojak A3AR ligand u količini efikasnoj za smanjenje ektopične akumulacije lipida; i na komplet koji sadrži farmaceutsku kompoziciju i uputstva za upotrebu preparata za smanjenje ektopične akumulacije lipida.

[0019] U kontekstu ove objave, kada se govori o akumulaciji lipida, treba je shvatiti kao ekvivalent koji se odnosi na akumulaciju masti. U kontekstu ove objave, ektopična akumulacija masti se koristi za označavanje taloženja ili skladištenja lipida, posebno triglicerida u tkivima i/organima koji nisu masno tkivo, tj. u normalnim (zdravim) uslovima nedostaju ćelije lipida (lipociti/masne ćelije). Ektopično taloženje masti prepoznaje se kao nakupljanje masti u trbušnim regionima (za razliku od potkožnog/perifernog taloženja masti) i poznato je da se javlja u jetri, skeletnim mišićima, srcu i pankreasu. Ektopično taloženje masti nije poželjno i može prouzrokovati zdravstvene komplikacije, poput insulinske rezistencije, pa je stoga poželjno njegovo sprečavanje ili smanjenje.

[0020] U poželjnom tehničkom rešenju, A3AR ligand se koristi za smanjenje akumulacije lipida u jetri.

[0021] U nekim tehničkim rešenjima, smanjenje akumulacije lipida je u populaciji subjekata kojima se dijagnostikuje da boluju od NAFLD i/ili NASH.

[0022] Primećeno je da NAFLD ne uključuje nužno zapaljenje i može biti da masna jetra ostaje bez upale. Dalje je primećeno da u masnoj jetri, jetra funkcioniše normalno i izgleda normalno pod mikroskopom, osim akumulacije masti u ćelijama. Pored toga, u NAFLD testovi krvi jetre su obično ili normalni, ili može doći do neznatnog povećanja dva enzima koja stvara jetra, serumskog ALT (alanin aminotransferaza) i/ili serumskog AST (aspartat aminotransferaza).

[0023] Mast koja se tipično akumulira u stanju ektopične akumulacije masti uključuje, bez ograničenja na to, gliceride (monogliceride, digliceride, trigliceride), a ponekad i sterole kao što je holesterol.

[0024] U jednom aspektu, smanjenje lipidnih naslaga se pokazuje barem smanjenjem nivoa triglicerida (TG) u tkivu. U tom kontekstu, smanjenje nivoa TG treba utvrditi kao značajan medicinski parametar. To može ponekad da uključuje najmanje 5% smanjenja nivoa TG u poređenju sa nivoom istog u najmanje jednoj ranijoj vremenskoj tački merenja (npr. jedan ili više dana, nedelja ili meseci).

[0025] Kada je tkivo sa nakupinom lipida jetra, smanjenje odlaganja lipida se takođe može ispoljiti na jedan od sledećih načina:

• smanjenje odnosa težine jetre i tela;

• smanjeni nivoi alanin aminotransferaze (ALT);

• smanjenje NAS rezultata upale.

[0026] U jednom tehničkom rešenju, A3AR ligand se koristi za lečenje nealkoholne masne bolesti jetre (NAFLD).

[0027] NAFLD je stanje u kojem se masnoća akumulira u jetri pacijenta bez anamneze zloupotrebe alkohola. NAFLD se klasifikuje na jednostavnu steatozu i nealkoholni steatohepatitis (NASH). U NASH nisu prisutni samo steatoza već i intralobularna upala i hepatocelularno baloniranje, često praćeni progresivnom fibrozom. U kontekstu ove objave, bilo koji od gore navedenih su lečenje, tj. jednostavna steatoza, bezalkoholni steatohepatitis (NASH), intralobularno zapaljenje, hepatocelularno baloniranje, progresivna fibroza, od kojih svako predstavlja nezavisno tehničko rešenje u skladu sa predmetnom objavom.

[0028] Dugotrajni NASH može preći u cirozu jetre, a ishod može biti hepatocelularni karcinom (HCC). Prema tome, u nekim tehničkim rešenjima, lečenjem NAFLD, ili konkretno, NASH, ova objava obezbeđuje prevenciju bolesti jetre, kao što su ciroza jetre i hepatocelularni karcinom (HCC).

[0029] Shodno tome, u jednom tehničkom rešenju, ova objava pruža upotrebu A3AR liganda za sprečavanje bolesti jetre kod subjekta koji je u predispoziciji za razvoj navedene bolesti jetre. Predispozicija subjekta da razvije bolest jetre određena je prisustvom masti nagomilane u jetri ili postojanjem NAFLD.

[0030] U kontekstu ove objave, " ligand A3adenozinskog receptora" ili "A3AR ligand" označava svako jedinjenje sposobno da direktno (npr. preko mesta vezivanja receptora) ili indirektno (npr. preko alosteričnog mesta vezivanja) pojača aktivnost A3adenozinskog receptora, što uključuje potpunu ili delimičnu aktivaciju A3adenozinskog receptora. A3AR ligand je prema tome molekul koji svoj glavni efekat ispoljava pojačavanjem aktivnosti A3AR, bez obzira da li je aktivacija preko vezivnog mesta ili alosteričnog vezivnog mesta. To znači da u dozama koje se primenjuju u suštini utiče samo na A3AR

[0031] U jednom tehničkom rešenju, " ligand A3adenozinskog receptora" je A3AR agonist.

[0032] U još jednom tehničkom rešenju, the " ligand A3adenozinskog receptora " je A3AR alosterični pojačivač.

[0033] Kada se govori o "agonistu A3adenozinskog receptora" ili "A3AR agonistu", podrazumeva se da označava bilo koji ligand sposoban da se specifično veže za A3adenozinski receptor, čime u potpunosti ili delimično aktivira A3adenozinski receptor. A3AR agonist je tako molekul koji svoj glavni efekat ispoljava vezivanjem i aktiviranjem A3AR. To znači da se u dozama kojima se primenjuje u suštini vezuje i aktivira samo A3AR.

[0034] U jednom tehničkom rešenju, A3AR agonist ima afinitet vezivanja (Ki) za humani A3AR u opsegu manjem od 100 nM, tipično manjem od 50 nM, poželjno manjem od 20 nM, poželjnije manjem od 10 nM i idealno manjem od 5 nM. Naročito su poželjni A3AR agonisti koji imaju Ki do ljudskog A3AR manje od 2 nM i poželjno manje od 1 nM.

[0035] Međutim, treba razumeti da neki A3AR agonisti takođe mogu da interaguju i aktiviraju druge receptore, međutim, sa nižim afinitetima (naime većim Ki).

[0036] Molekul će se smatrati agonistom A3AR u kontekstu ove objave (naime molekul koji svoj primarni efekat ispoljava vezivanjem i aktiviranjem A3AR) ako je njegov afinitet prema A3AR najmanje 3 puta (tj. njegov Ki prema A3AR je najmanje 3 puta niži), poželjno 10 puta, poželjno 20 puta i najpoželjnije najmanje 50 puta veći od afiniteta prema bilo kom drugom adenozinskom receptoru (tj. Ai, A2ai A2b).

[0037] Afinitet A3AR agonista za humani A3AR, kao i njegov relativni afinitet za druge humane adenozinske receptore mogu se odrediti brojnim testovima, kao što je test vezivanja. Primeri testova vezivanja uključuju obezbeđivanje membrana koje sadrže receptor i merenje sposobnosti A3AR agonista da zameni vezani radioaktivni agonist; korišćenje ćelija koje prikazuju odgovarajući humani adenozinski receptor i merenje, u funkcionalnom testu, sposobnosti agonista A3AR da aktivira ili deaktivira, zavisno od slučaja, nizvodne signalne događaje kao što je efekat na adenilat ciklazu izmeren kroz povećanje ili smanjenje nivo cAMP; itd. Ako se administrirani nivo A3AR agonista poveća tako da njegov nivo u krvi dostigne nivo koji se približava nivou Ki adenozinskih receptora A1, A2ai A2b, nakon takvog davanja može doći do aktivacije ovih receptora, pored aktivacije A3AR. Stoga se poželjno daje agonist A3AR u dozi takvoj da je nivo u krvi takav da će u suštini biti aktiviran samo A3AR.

[0038] U jednom tehničkom rešenju, A3AR agonist je molekul koji ima purinski glavni deo. U nekom tehničkom rešenju, jedinjenje koje sadrži purin može se odrediti kao A3AR agonist na osnovu testova prihvatljive strukture i funkcionalne aktivnosti.

[0039] Karakteristika nekih A3AR agonista i postupci njihove pripreme detaljno su opisani, između ostalog, u US 5,688,774; US 5,773,423, US 5,573,772, US 5,443,836, US 6,048,865, WO 95/02604, WO 99/20284, WO 99/06053, WO 97/27173 i WO 01/19360.

[0040] Prema nekim tehničkim rešenjima ove objave, A3AR agonist je derivat purina koji spada u opseg formule (I):

pri čemu,

• R11 predstavlja alkil, hidroksialkil, karboksialkil ili cijanoalkil ili grupu sledeće opšte formule (II):

u kojoj:

o Y predstavlja kiseonik, sumpor ili CH2;

o X11 predstavlja H, alkil, R<e>R<f>NC(=O)- ili HOR<g>-, pri čemu

▪ R<e>i R<f>mogu biti isti ili različiti i biraju se iz grupe koja se sastoji od vodonika, alkila, amino, haloalkila, aminoalkila, BOC-aminoalkila i cikloalkila ili su spojeni zajedno da formiraju heterociklični prsten koji sadrži dva do pet atoma ugljenika; i

▪ R<g>je izabran iz grupe koja se sastoji od alkila, amino, haloalkila, aminoalkila, BOC-aminoalkila i cikloalkila;

▪ X12 je H, hidroksil, alkilamino, alkilamido ili hidroksialkil;

▪ X13 i X14 predstavljaju nezavisno vodonik, hidroksil, amino, amido, azido, halo, alkil, alkoksi, karboksi, nitrilo, nitro, trifluoro, aril, alkaril, tio, tioestar, tioetar, -OCOPh, -OC(=S)OPh ili su oba X13 i X14 kiseonici povezani sa >C=S da bi se formirao 5-člani prsten, ili X12 i X13 čine prsten formule (III):

gde R' i R" predstavljaju nezavisno alkil grupu;

• R12 je odabran iz grupe koja se sastoji od vodonika, halo, alkiletra, amino, hidrazido, alkilamino, alkoksi, tioalkoksi, piridiltio, alkenila; alkinila, tio i alkiltio; i

• R13 je grupa formule -NR15R16u kojoj

• R15 je atom vodonika ili grupa izabrana od alkila, supstituisanog alkila ili aril-NH-C(Z)-, pri čemu Z je O, S ili NR<a>, pri čemu R<e>ima gore navedena značenja; pri čemu kada je R15vodonik tada

• R16 je odabran iz grupe koja se sastoji od R- i S-1-feniletila, benzila, feniletila ili anilid grupa nesupstituisanih ili supstituisanih u jednom ili više položaja supstituentom izabranim iz grupe koja se sastoji od alkila, amino, halo, haloalkila, nitro, hidroksila, acetoamido, alkoksi i sulfonske kiseline ili soli istog; benzodioksanmetila, fururila, L-propilalanilaminobenzila, β-alanilamino- benzila, T-BOC-β-alanilaminobenzila, fenilamino, karbamoila, fenoksi ili cikloalkila; ili R16 je grupa sledeće formule (IV):

ili kada je R15 alkil ili aril-NH-C(Z)-, tada je R16 izabran iz grupe koja se sastoji od heteroaril-NR<a>-C(Z)-, heteroaril-C (Z)-, alkaril-NR<a>-C(Z)-, alkaril-C(Z)-, aril-NR-C(Z)- i aril-C(Z)-; pri čemu Z predstavlja kiseonik, sumpor ili amin.

[0041] Primer agonista A3AR (stavljen na uvid javnosti u US 5,688,774 u koloni 4, redovi 67-kolona 6, red 16; kolona 5, redovi 40-45; kolona 6, redovi 21-42; kolona 7, redovi 1-11; kolona 7, redovi 34 -36; i kolona 7, redovi 60-61):

N<6>-(3-jodobenzil)-9-metiladenin;

N<6>-(3-jodobenzil)-9-hidroksietiladenin;

R-N<6>-(3-jodobenzil)-9-(2,3-dihidroksipropil)adenin;

S-N<6>-(3-jodobenzil)-9-(2,3-dihidroksipropil)adenin;

N<6>-(3-jodobenziladenin-9-il)sirćetna kiselina;

N<6>-(3-jodobenzil)-9-(3-cijanopropil)adenin;

2-hloro-N<6>-(3-jodobenzil)-9-metiladenin;

2-amino-N<6>-(3-jodobenzil)-9-metiladenin;

2-hidrazido-N<6>-(3-jodobenzil)-9-metiladenin;

N<6>-(3-jodobenzil)-2-metilamino-9-metiladenin;

2-dimetilamino-N<6>-(3-jodobenzil)-9-metiladenin;

N<6>-(3-jodobenzil)-9-metil-2-propilaminoadenin;

2-heksilamino-N<6>-(3-jodobenzil)-9-metiladenin;

N<6>-(3-jodobenzil)-2-metoksi-9-metiladenin;

N<6>-(3-jodobenzil)-9-metil-2-metiltioadenin;

N<6>-(3-jodobenzil)-9-metil-2-(4-piridiltio)adenin;

(1S, 2R, 3S, 4R)-4-(6-amino-2-feniletilamino-9H-purin-9-il)ciklopentan-1,2,3-triol; (1S, 2R, 3S, 4R)-4-(6-amino-2-hloro-9H-purin-9-il)ciklopentan-1,2,3-triol;

(±)-9-[2α,3α-dihidroksi-4β-(N-metilkarbamoil)ciklopent-1β-il)]-N<6>-(3-jodobenzil)-adenin;

2-hloro-9-(2'-amino-2',3'-dideoksi-β-D-5'-metil-arabino-furonamido)-N<6>-(3-jodobenzil)adenin;

2-hloro-9-(2',3'-dideoksi-2'-fluoro-β-D-5'-metil-arabino-furonamido)-N<6>-(3-jodobenzil)adenin;

9-(2-acetil-3-deoksi-β-D-5-metil-ribofuronamido)-2-hloro-N<6>(3-jodobenzil)adenin;

2-hloro-9-(3-deoksi-2-metansulfonil-β-D-5-metil-ribofuronamido)-N<6>-(3-jodobenzil)adenin;

2-hloro-9-(3-deoksi-β-D-5-metil-ribofuronamido)-N<6>-(3-jodobenzil)adenin;

2-hloro-9-(3,5-1,1,3,3-tetraizopropildisiloksil-β-D-5-ribofuranozil)-N<6>-(3-jodobenzil)adenin;

2-hloro-9-(2', 3'-O-tiokarbonil-β-D-5-metil-ribofuronamido)-N<6>-(3-jodobenzil)adenin; 9-(2-fenoksitiokarbonil-3-deoksi-β-D-5-metil-ribofuronamido)-2-hloro-N<6>-(3-jodobenzil)adenin;

1-(6-benzilamino-9H-purin-9-il)-1-deoksi-N, 4-dimetil-β-D-ribofuranoziduronamid; 2-hloro-9-(2,3-dideoksi-β-D-5-metil-ribofuronamido)-N<6>benziladenin;

2-hloro-9-(2'-azido-2', 3'-dideoksi-β-D-5'-metil-arabino-furonamido)-N<6>-benziladenin; 2-hloro-9-(β-D-eritrofuranozid)-N<6>-(3-jodobenzil)adenin;

N<6>-(benzodioksanmetil)adenozin;

1-(6-furfurilamino-9H-purin-9-il)-1-deoksi-N-metil-P-D-ribofuranoziduronamid;

N<6>-[3-(L-prolilamino)benzil]adenozin-5'-N-metiluronamid;

N<6>-[3-(β-alanilamino)benzil]adenozin-5'-N-metiluronamid;

N<6>-[3-(N-T-Boc-β-alanilamino)benzil]adenozin-5'-N-metiluronamid 6-(N'-fenilhidrazinil)purin-9-β-ribofuranozid-5'-N-metiluronamid;

6-(O-fenilhidroksilamino)purin-9-β-ribofuranozid-5'-N-metiluronamid;

9-(β-D-2', 3'-dideoksieritrofuranozil)-N<6>-[(3-β-alanilamino)benzil]adenozin;

9-(β-D-eritrofuranozid)-2-metilamino-N<6>-(3-jodobenzil)adenin;

2-hloro-N-(3-jodobenzil)-9-(2-tetrahidrofuril)-9H-purin-6-amin; 2-hloro-(2'-deoksi-6'-tio-L-arabinozil)adenin; i

2-hloro-(6'-tio-L-arabinozil)adenin.

[0042] Ostali primerni A3AR agonisti, stavljeni na uvid javnosti u US 5,773,423, su jedinjenja formule (V):

u kojoj

X1je R<a>RNC(=O), pri čemu R<a>i Rmogu biti isti ili različiti i biraju se iz grupe koja se sastoji od vodonika, C1-C10alkila, amino, C1-C10haloalkila, C1-C10aminoalkila i C3-C10cikloalkila;

R2je odabran iz koja se sastoji od vodonika, halo, C1-C10alkioksi, amino, C2-C10alkenila i C2-C10alkinila; i

R5je odabran iz grupe koja se sastoji od R- i S-1-feniletila, nesupstituisane benzil grupe i benzil grupe supstituisane u jednom ili više položaja supstituentom izabranim iz grupe koja se sastoji od C1-C10alkila, amino, halo, C1-C10haloalkila, nitro, hidroksi, acetamido, C1-C10alkoksi i sulfo.

[0043] Specifičnija jedinjenja uključuju ona gornje formule u kojima R<a>i Rmogu biti isti ili različiti i biraju se iz grupe koja se sastoji od vodonika i C1-C10alkila, posebno kada je R2vodonik ili halo, naročito vodonik.

[0044] Dodatna specifična jedinjenja su ona jedinjenja gde je R<a>vodonik i gde je R2vodonik, naročito kada je R5nesupstituisani benzil.

[0045] Specifičnija jedinjenja su takva jedinjenja u kojima Rje C1-C10alkil ili C3-C10cikloalkil, naročito C1-C10alkil, i još naročitije metil.

[0046] Posebno su specifična ona jedinjenja gde R<a>je vodonik, Rje C1-C10alkil ili C3-C10cikloalkil, a R5je R- ili S-1-feniletil ili benzil supstituisan u jednom ili više položaja supstituentom izabranim iz grupe koja se sastoji od halo, amino, acetamido, C1-C10haloalkila i sulfo, gde sulfo derivate je so, kao što je trietilamonijumova so.

[0047] Primer posebno poželjnog jedinjenja stavljenog na uvid javnosti u US 5,773,423 je N<6>-(3-jodobenzil)-2-metilamino-9-[5-(metilamido)-β-D-ribofuranozil]-adenin, takođe poznat kao N<6>-(3-jodobenzil)-adenozin-5'-N-metiluronamid ili poznat kao 1-Deoksi-1-[6-[[(3-jodofenil)metil]amino]-9H-purin-9-il]-N-metil-D-ribofuranuronamid, ili pod skraćenicom IB-MECA.

[0048] Pored toga, ona jedinjenja u kojima R2je C2-C10alkenilen formule R<d>-C=C-, gde R<d>je C1-C8alkil, takođe su posebno zabeležena u US 5,773,423.

[0049] Takođe su specifična ona jedinjenja u kojima R2nije vodonik, posebno ona u kojima R2je halo, C1-C10alkilamino ili C1-C10alkiltio, i, još poželjnije, kada dodatno R<a>je vodonik, Rje C1-C10alkil, i/ili R5je supstituisani benzil.

[0050] Dalji primerni A3AR agonisti stavljeni na uvid javnosti u US 5,773,423 su modifikovani ksantin-7-ribozidi koji imaju formulu (VI):

u kojoj

X je O;

R6je R<a>RNC(=O), u kojoj R<a>i Rmogu biti isti ili različiti i biraju se iz grupe koja se sastoji od vodonika, C1-C10alkila, amino, C1-C10haloalkila, C1-C10aminoalkila, i C3-C10cikloalkila;

R7i R8mogu biti isti ili različiti i biraju se iz grupe koja se sastoji od C1-C10alkila, R- i S-1-feniletila, nesupstituisane benzil grupe i benzil grupe supstituisane u jednom ili više položaja supstituentom izabranim iz grupe koji se sastoji od C1-C10alkila, amino, halo, C1-C10haloalkila, nitro, hidroksi, acetamido, C1-C10alkoksi i sulfo; i

R9je odabran iz grupe koja se sastoji od halo, benzila, fenila, i C3-C10cikloalkila.

[0051] WO 99/06053 stavlja na uvid javnosti u primerima 19-33 jedinjenja izabrana od:

N<6>-(4-bifenil-karbonilamino)-adenozin-5'-N-etiluronamid;

N<6>-(2,4-dihlorobenzil-karbonilamino)-adenozin-5'-N-etiluronamid;

N<6>-(4-metoksifenil-karbonilamino)-adenozin-5'-N-etiluronamid;

N<6>-(4-hlorofenil-karbonilamino)-adenozin-5'-N-etiluronamid;

N<6>-(fenil-karbonilamino)-adenozin-5'-N-etiluronamid;

N<6>-(benzilkarbamoilamino)-adenozin-5'-N-etiluronamid;

N<6>-(4-sulfonamido-fenilkarbamoil)-adenozin-5'-N-etiluronamid;

N<6>-(4-acetil-fenilkarbamoil)-adenozin-5'-N-etiluronamid;

N<6>-((R)-α-feniletilkarbamoil)-adenozin-5'-N-etiluronamid;

N<6>-((S)-α-feniletilkarbamoil)-adenozin-5'-N-etiluronamid;

N<6>-(5-metil-izoksazol-3-il-karbamoil)-adenozin-5'-N-etiluronamid;

N<6>-(1,3,4-tiadiazol-2-il-karbamoil)-adenozin-5'-N-etiluronamid;

N<6>-(4-n-propoksi-fenilkarbamoil)-adenozin-5'-N-etiluronamid;

N<6>-bis-(4-nitrofenilkarbamoil)-adenozin-5'-N-etiluronamid; i

N<6>-bis-(5-hloro-piridin-2-il-karbamoil)-adenozin-5'-N-etiluronamid.

[0052] Tačnije jedinjenja stavljena na uvid javnosti uključuju:

2-hloro-N<6>-(3-jodobenzil)-9-[5-(metilamido)-β-D-ribofuranozil]-adenin poznat i kao 2-hloro-N<6>-(3-jodobenzil)-adenozin-5'-N-metiluronamid ili pod skraćenicom Cl-IB-MECA; N<6>-(3-jodobenzil)-2-metilamino-9-[5-(metilamido)-β-D-ribofuranozil]-adenin, poznat i kao N<6>-(3-jodobenzil)-adenozin-5'-N-metiluronamid ili poznat kao 1-deoksi-1-[6-[[(3-jodofenil)metil]amino]-9H-purin-9-il]-N-metil-D-ribofuranuronamid ili pod skraćenicom IB-MECA;

N<6>-2-(4-aminofenil)etiladenozin (APNEA);

N<6>-(4-amino-3-jodobenzil)adenozin-5'-(N-metiluronamid) (AB-MECA).

[0053] U jednom određenom tehničkom rešenju, Cl-IB-MECA se koristi za smanjenje ektopične akumulacije lipida, u skladu sa ovom objavom.

[0054] Kada se govori o "alosteričnom pojačanju A3AR", treba ga razumeti kao da se odnosi na pozitivnu regulaciju, aktivaciju ili razbuktavanje aktivnosti receptora vezivanjem alosteričnog efektorskog molekula na alosteričnom mestu receptora, koje može biti različito od mesta vezivanja endogenog liganda ili njegovog agonista.

[0055] U jednom tehničkom rešenju, "pojačanje" označava efekat efektorskog jedinjenja na receptor koji se pokazuje povećanjem od najmanje 15% efikasnosti A3adenozinskog receptora vezivanjem efektorskog jedinjenja za alosterično mesto receptora i/ili smanjenjem stope disocijacije adenozina ili A3AR agonista za ortosterično mesto vezivanja.

[0056] U jednom tehničkom rešenju, pojačanje je pomoću "A3AR alosteričnog pojačivača" ili "A3ARAE" koji je derivat imidazohinolina.

[0057] U jednom tehničkom rešenju A3AR pojačivač, ili derivat imidazohinolina ima sledeću opštu formulu (VII):

u kojoj:

• R1predstavlja aril ili alkaril koji je po izboru supstituisan na aromatičnom prstenu sa jednim ili više supstituenata izabranih iz grupe koja se sastoji od C1-C10alkila, halo, C1-C10alkanola, hidroksila, C1-C10acila, C1-C10alkoksila; C1-C10-alkoksikarboni, C1-C10alkoksilalkila; C1-C10tioalkoksi; C1-C10alkiletra, amino, hidrazido, C1-C10alkilamino, piridiltio, C2-C10alkenila; C2-C10alkinila, tio, C1-C10alkiltio, acetoamido, sulfonske kiseline; ili pomenuti supstituenti mogu zajedno formirati cikloalkil ili cikloalkenil spojen sa navedenim arilom, cikloalkil ili cikloalkenil koji opciono sadrže jedan ili više heteroatoma; pod uslovom da navedeni aril nije nesupstituisana fenil grupa;

• R2predstavlja vodonik ili supstituent odabran iz grupe koja se sastoji od C1-C10alkila, C2-C10alkenila; C2-C10alkinila, C4-C10cikloalkila, C4-C10cikloalkenila, pet do sedmočlanog heterocikličnog aromatičnog prstena, C5-C15spojenog cikloalkila, bicikličnih aromatičnih ili heteroaromatičnih prstenova; C1-C10alkiletra, amino, hidrazido, C1-C10alkilamino, C1-C10alkoksi, C1-C10-alkoksikarboni, C1-C10alkanola, C1-C10acila, C1-C10tioalkoksi, piridiltio, tio i C1-C10alkiltio, acetoamido i sulfonske kiseline;

i farmaceutski prihvatljive soli istog.

[0058] Prema nekim tehničkim rešenjima, R1supstituent u A3ARAE ima sledeću opštu formulu (VIII):

u kojoj je n 0 ili ceo broj izabran od 1-5; poželjno, n je 0, 1 ili 2; i

• X1i X2koji mogu biti isti ili različiti, biraju se između vodonika halogena, alkila, alkanola ili alkoksi, indanila, pirolina, pod uslovom da kada pomenuto n je 0, X1i X2nisu vodonik.

[0059] U još nekim tehničkim rešenjima, R1u A3ARAE je supstituent koji ima gornju formulu (VIII), gde su X1ili X2, koji mogu biti isti ili različiti, izabrani između vodonika, hloro, metoksi, metanola ili supstituenta koji ima formule (VIIIa) ili (VIIIb):

u kojima je Y odabran od N ili CH.

[0060] U nekim još daljim tehničkim rešenjima R2u A3ARAE se bira između H, C1-10alkila, C4-

10cikloalkila, alkilni lanac može biti ravan ili razgranat ili formirati četvoro- do sedmočlani cikloalkilni prsten.

[0061] U jednom tehničkom rešenju, R2u A3ARAE je odabran između peto- do sedmočlanog heterocikličnog aromatičnog prstena.

[0062] U nekim tehničkim rešenjima, R2supstituenti u A3ARAE su izabrani između H, n-pentila ili petočlanog heterocikličnog aromatičnog prstena koji ima sledeću formulu (IX):

u kojoj je Z odabran od O, S ili NH, poželjno O.

[0063] U skladu sa jednim tehničkim rešenjem, R2u A3ARAE sadrži jedan ili više spojenih prstenova, posebno tako da formiraju biciklične supstituente.

[0064] Neograničavajući primeri bicikličnih jedinjenja koja se mogu koristiti za formiranje supstituenata u kontekstu pronalaska uključuju biciklo[2.2.1]heptan, biciklo[4.1.0]heptan, biciklo[4.1.0]heptan-3-karboksilnu kiselinu, biciklo[3.1.0]heksan-3- karboksilnu kiselinu, biciklo[4.1.0]heptan-2- karboksilnu kiselinu, biciklo[3.1.0]heksan-2- karboksilnu kiselinu i biciklo[2.2.1]heptan-2 - karboksilnu kiselinu.

[0065] U skladu sa još nekim tehničkim rešenjima, R2u A3ARAE može biti izabran između 2-cikloheksena i 3-cikloheksena.

[0066] Specifični derivati imidazohinolina koji se mogu koristiti kao alosterični efektori A3AR navedeni su u nastavku:

N-(4-metil-fenil)-2-ciklopentil-1H-imidazo[4,5-c]hinolin-4-amin

N-(4-metoksi-fenil)-2-ciklopentil-1H-imidazo[4,5-c]hinolin-4-amin

N-(3,4-dihloro-fenil)-2-ciklopentil-1H-imidazo[4,5-c]hinolin-4-amin

N-(4-hloro-fenil)-2-ciklopentil-1H-imidazo[4,5-c]hinolin-4-amin

N-(3-metanol-fenil)-2-ciklopentil-1H-imidazo[4,5-c]hinolin-4-amin

N-([3,4-c] Indan)-2-ciklopentil-1H-imidazo[4,5-c]hinolin-4-amin

N-(1 H-indazol-6-il)-2-ciklopentil-1H-imidazo[4,5-c]hinolin-4-amin

N-(4-metoksi-benzil)-2-ciklopentil-1H-imidazo[4,5-c]hinolin-4-amin

N-(1 H-indol-6-il)-2-ciklopentil-1H-imidazo[4,5-c]hinolin-4-amin

N-(benzil)-2-ciklopentil-1H-imidazo[4,5-c]hinolin-4-amin

N-(feniletil)-2-ciklopentil-1H-imidazo[4,5-c]hinolin-4-amin

N-(3,4-dihloro-fenil)-2-cikloheptil-1H-imidazo[4,5-c]hinolin-4-amin

N-(3,4-dihloro-fenil)-2-furil-1H-imidazo[4,5-c]hinolin-4-amin

N-(3,4-dihloro-fenil)-2-ciklobutil-1H-imidazo[4,5-c]hinolin-4-amin

N-(3,4-dihloro-fenil)-2-cikloheksil-1H-imidazo[4,5-c]hinolin-4-amin

N-(3,4-dihloro-fenil)-2-1H-imidazo[4,5-c]hinolin-4-amin

N-(3,4-dihloro-fenil)-2-pentil-1H-imidazo[4,5-c]hinolin-4-amin.

[0067] Gore navedeni derivati imidazohinolina smatraju se alosteričnim efektorima (koji moduliraju aktivnost), jer se pokazalo da imaju, s jedne strane, smanjeni afinitet, ako postoji, za ortosterična mesta vezivanja A1i A2A, A2B adenozinskih receptora i smanjeni afinitet za ortosterično mesto vezivanja A3adenozinskog receptora, a sa druge strane, visok afinitet za alosterično mesto A3adenozinskog receptora [Međunarodna patentna prijava br. WO07/089507].

[0068] Posebno poželjan derivat imidazohinolina u skladu sa ovom objavom je N-(3,4-dihlorofenil)-2-cikloheksil-1H-imidazo[4,5-c]hinolin-4-amin (na koga se ponekad odnosi i skraćenica LUF6000 ili CF602), koji je alosterični pojačivač.

[0069] U kontekstu ovde opisanih opštih formula, treba uzeti u obzir sledeće značenje za različite pojmove:

Termin "alkil" ovde se koristi da se odnosi na ravan ili razgranat lanac ugljovodonika koji ima od 1 do 10 atoma ugljenika i još poželjnije 1 do 6 atoma ugljenika, uključujući, ali bez ograničenja, metil, etil, n-propil, izopropil, n -butil, t-butil, n-heptil, oktil i slično.

[0070] Slično tome, termini "alkenil" i "alkinil" označavaju ravan ili razgranat lanac ugljovodonika koji ima, od 2 do 10, odnosno od 3 do 10 atoma ugljenika, a poželjnije 2 do 6 ili 3 do 6 atoma ugljenika, pri čemu alkenil ili alkinil koji ima najmanje jednu nezasićenu vezu.

[0071] Supstituenti alkil, alkenil ili alkinil mogu biti supstituisani sa grupom koja sadrži heteroatom. Prema tome, treba razumeti da iako nije izričito navedeno, bilo koja od ovde opisanih modifikacija alkila gore i dole, kao što su alkiltio, alkoksi, akanol, alkilamin itd., takođe uključuje odgovarajuće modifikacije alkenila ili alkinila, kao što su: akeniltio, akeniloksi, alkenol, alkenilamin, ili redom akiniltio, alkiniloksi, alkinol, alkinilamin.

[0072] Termin "aril" označava nezasićenu aromatičnu karbocikličku grupu od 5 do 14 atoma ugljenika koja ima jedan prsten (npr. fenil) ili više kondenzovanih prstenova (npr. naftil ili antril). Poželjni aril uključuje fenil, indanil, benzimidazol.

[0073] Termin "alkaril" odnosi se na -alkilen-aril grupe koje poželjno imaju od 1 do 10 atoma ugljenika u alkilenskom delu i od 6 do 14 atoma ugljenika u arilnom delu. Primeri takvih alkarilnih grupa su benzil, fenetil i slično.

[0074] Termin "supstituisani aril" odnosi se na aromatični deo koji je supstituisan sa 1 do 3 supstituenta kako je gore definisano. Mogući su različiti supstituenti, kako cene upućeni u struci. Ipak, neki poželjni supstituenti uključuju, bez ograničenja na njih, halogen, (supstituisani) amino, nitro, cijano, alkil, alkoksi, aciloksi ili alkanol, sulfonil, sulfinil.

[0075] Termin "halo" ili "halogen" odnosi se na fluoro, hloro, bromo i jodo, poželjno na hloro.

[0076] Termin "acil" odnosi se na grupe H-C(O)- kao i na alkil-C(O)-.

[0077] Termin "alkanol" odnosi se na grupu -COH kao i na alk-OH, "alk" označava alkilenski, alkenilenski ili alkinilenski lanac.

[0078] Termin "alkoksi" se ovde koristi za označavanje -O-alkil, uključujući, ali bez ograničenja, metoksi, etoksi, propoksi, izopropoksi, n-butoksi i slično.

[0079] Termin "alkiltio" se ovde koristi za označavanje -S-alkil, uključujući, ali bez ograničenja na, metiltio, etiltio, n-propiltio, izopropiltio, n-butiltio i slično.

[0080] Termin "alkoksialkil" se ovde koristi za označavanje -alkil-O-alkil, uključujući, ali bez ograničenja, metoksimetil, etoksimetil, n-propoksimetil, izopropoksimetil, n-butoksimetil, izobutoksimetil, t-butoksimetil i slično.

[0081] Termin "cikloalkil" se ovde koristi za označavanje cikličnih ugljovodoničnih radikala koji uključuju, ali nisu ograničeni na, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil i slično.

[0082] Termin "alkoksikarbonil" se ovde koristi u značenju -C(O)O-alkil, uključujući, ali bez ograničenja, metoksikarbonil, etoksikarbonil, propoksikarbonil i slično.

[0083] Termin "spojeni cikloalkil" se ovde koristi da označi bilo koje jedinjenje ili supstituent koji sadrži najmanje dva alifatična prstena koji su povezani na jednom atomu (da bi se formirao spirociklični deo), na dva međusobno vezana atoma ili preko niza atoma (mostobran). Spojeni prstenovi mogu uključivati bilo koje biciklične, triciklične, kao i policiklične delove. Poželjni su biciklični supstituenti u skladu sa nekim tehničkim rešenjima ove objave.

[0084] Ova objava takođe koristi fiziološki prihvatljive soli A3AR liganda, kao što su gore otkrivena jedinjenja. „Fiziološki prihvatljive soli“ odnose se na sve netoksične soli alkalnih metala, zemnoalkalnih metala i amonijum soli, koje se obično koriste u farmaceutskoj industriji, uključujući soli natrijuma, kalijuma, litijuma, kalcijuma, magnezijuma, barijum amonijuma i protamin cinka, pripremljene postupcima poznatim u struci. Termin takođe uključuje netoksične kisele adicione soli, koje se generalno pripremaju reakcijom liganda sa odgovarajućom organskom ili neorganskom kiselinom. Kisele adicione soli su one koje zadržavaju biološku efikasnost i kvalitativna svojstva slobodnih baza i koje nisu toksične ili na drugi način nepoželjne. Primeri uključuju, između ostalog, kiseline izvedene iz mineralnih kiselina, hlorovodoničnu, bromovodoničnu, sumpornu, azotnu, fosfornu, metafosfornu i slično. Organske kiseline uključuju, između ostalog, vinsku, sirćetnu, propionsku, limunsku, jabučnu, malonsku, mlečnu, fumarnu, benzoevu, cimetnu, mandelinsku, glikolnu, glukonsku, piruvičnu, sukcinsku salicilnu i arilsulfonsku, npr. p-toluensulfonsku, kiselinu.

[0085] A3AR ligand se može davati u jednoj dozi (jednokratni lek) ili kao kontinuirani tretman, tokom perioda dana, nedelja ili čak meseci.

[0086] U jednom tehničkom rešenju, A3AR ligand se koristi za dugotrajno lečenje. U kontekstu ove objave, dugotrajno lečenje treba shvatiti tako da obuhvata period lečenja koji traje najmanje danima, nedeljama ili mesecima, sve dok, na primer, ne bude medicinski značajanog nivoa lipida na mestu gde je otkrivena akumulacija lipida pre početka lečenja. Dalje, u kontekstu ovog otkrića, dugotrajno lečenje može obuhvatiti hroničan tretman, npr. dugotrajna primena bez predviđene krajnje tačke lečenja. U nekim tehničkim rešenjima, dugotrajno lečenje obuhvata najmanje nedelju dana dnevnog davanja liganda, s vremena na vreme, jednomesečno lečenje, s vremena na vreme, najmanje 2, 3, 4, 5, 6 ili čak 12 meseci svakodnevnog davanja liganda.

[0087] Kada se govori o „lečenju“ A3AR ligandom, treba razumeti da se odnosi na bilo koji željeni farmakološki i fiziološki efekat koji dovodi do medicinski značajnog poboljšanja stanja subjekta, kako je određeno parametrima poznatim onima koji su upućeni u stanje tehnike. Na primer, poboljšanje se može utvrditi smanjenjem za najmanje 5% nivoa triglicerida na ciljnom mestu (mestu deponovane masti).

[0088] U jednom dodatnom ili alternativnom tehničkom rešenju, poboljšanje se može odrediti smanjenjem odnosa težine ciljnog mesta i telesne težine (npr. odnos jetre i telesne težine).

[0089] U još jednom ili dodatnom tehničkom rešenju, poboljšanje se može odrediti promenom jednog ili više parametara koji ukazuju na funkcionalnost ciljnog organa. Na primer, kada je ciljno mesto jetra, poboljšanje se može odrediti smanjenjem nivoa ALT.

[0090] Dalje, u još jednom tehničkom rešenju, poboljšanje se može odrediti smanjenjem NAS rezultata upale. NAS rezultat se određuje različitim komponentama koje se nazivaju NAFLD ocena aktivnosti (NAS) i ocena fibroze. Tu spadaju, između ostalog, ocena steatoze, ocena lobularne upale, baloniranje hepatocita i fibroza. Ukupan rezultat NAS predstavlja zbir ocena za steatozu, lobularnu upalu i baloniranje i kreće se od 0-8. Ocene NAS 0-2 ne smatraju se dijagnozom NASH, a ocene 5-8 smatraju se dijagnozom NASH.

[0091] U nekim tehničkim rešenjima, tretman je nad subjektom koji je definisan kao pacijent koji pati od stanja koje je u vezi sa akumulacijom masti.

[0092] A3AR ligand se može davati na dnevnoj osnovi ili sa intervalima od jednog dana ili više između primena. U jednom tehničkom rešenju, A3AR ligand se koristi na dnevnoj osnovi, za hronični tretman.

[0093] A3AR ligand se može primenjivati sistemski ili lokalno. U tom cilju, A3AR ligand se kombinuje sa farmaceutski prihvatljivim nosačima da bi se formirala farmaceutska kompozicija pogodna za određeni način primene i koja sadrži efikasnu količinu A3AR liganda.

[0094] Pod pojmom "farmaceutski prihvatljiv nosač" podrazumeva se bilo koji od inertnih, netoksičnih materijala koji ne reaguju sa A3AR ligandom i koji se može dodati u ligand da bi se olakšala njegova isporuka subjektu.

[0095] U jednom tehničkom rešenju, nosač je prihvatljiv za pripremu jediničnog oblika doziranja za oralnu primenu.

[0096] Oralna formulacija može biti u obliku pilule, kapsule, u obliku sirupa, emulzije, aromatičnog praha i drugih različitih oblika. Nosač se ponekad bira na osnovu željenog oblika formulacije. Nosač takođe može ponekad uticati na poboljšanje isporuke ili prodiranja aktivnog sastojka u ciljno tkivo, za poboljšanje stabilnosti leka, za usporavanje brzine klirensa, za davanje svojstava usporenog oslobađanja, za smanjenje neželjenih efekata itd. Nosači takođe mogu biti supstanca koja stabilizuje formulaciju (npr. konzervans), za obezbeđivanje formulaciji jestivog ukusa itd. Nosači mogu biti bilo koji od konvencionalno korišćenih i ograničeni su samo hemijskofizičkim razmatranjima, kao što je npr. rastvorljivost i nedostatak reaktivnosti sa A3AR ligandom i put davanja. Nosač može sadržati aditive, boje, razblaživače, puferske agense, sredstva za raspadanje, sredstva za vlaženje, konzervanse, agense za aromatizaciju i farmakološki kompatibilne nosače. Pored toga, nosač može biti katalizator, koje su po definiciji supstance koje utiču na delovanje aktivnog sastojka na predvidljiv način.

[0097] Tipični primeri nosača pogodnih za oralnu primenu uključuju (a) suspenzije ili emulzije u odgovarajućoj tečnosti kao što je Cremophor RH40 ili metilceluloza (npr. Methocel A4M Premium); (b) kapsule (npr. uobičajenog želatinskog tipa sa tvrdom ili mekom opnom koji sadrži, na primer, površinski aktivna sredstva, lubrikans i inertna sredstva za punjenje), tablete, pastile (u kojima je aktivna supstanca sa ukusom, poput saharoze i bagrema ili tragakanta ili je aktivna supstanca u inertnoj osnovi, kao što su želatin i glicerin), i tablete, od kojih svaka sadrži unapred određenu količinu tragakante u obliku čvrstih supstanci ili granula; (c) praškove; (d) rastvor, tipično kada se kombinuje sa agensom za poboljšanje solubilizacije; (e) liposomsku formulaciju; i drugo.

[0098] A3AR ligand se koristi u količini koja je efikasna za lečenje nakupljanja masti, naime, količina koja pokazuje efekat smanjenja taloženja lipida u tkivima koja obično (u zdravom stanju) ne sadrže takve masne ćelije, pri čemu se smanjenje upoređuje između dve vremenske tačke, najmanje jednoj nakon konzumacije liganda. "Efektivna količina" se može lako odrediti, u skladu sa ovom objavom, administriranjem mnoštvu testiranih subjekata različitih količina A3AR liganda i zatim ucrtavanjem odgovora (na primer kombinovanjem nekoliko korisnih efekata) u zavisnosti od količine. Ponekad količina koja se koristi može zavisiti od različitih faktora kao što su način primene, starost, težina, površina tela, pol, zdravstveno stanje i genetski faktori subjekta; drugi primenjeni lekovi; itd.

[0099] Efikasna količina A3AR liganda može se definisati jediničnim doznim oblikom. Izraz "jedinični oblici doziranja" odnosi se na fizički odvojene jedinice pogodne kao jedinične doze za ljudske subjekte i ostale sisare, a svaka jedinica sadrži unapred određenu količinu aktivnog materijala izračunatog da proizvede željeni terapijski efekat, zajedno sa odgovarajućim farmaceutskim pomoćnim sastojkom.

[0100] Kada je A3AR ligand agonist A3AR, efikasna količina može, na primer, biti količina od najmanje oko 10 mg/dan, npr. najmanje oko 10 mg u režimu lečenja jednom dnevno, najmanje oko 5 mg dva puta dnevno, najmanje oko 3.3 mg tri puta dnevno, itd.).

[0101] Doza od najmanje oko 10 mg/dan može biti doza od najmanje oko 15 mg/dan, najmanje oko 20 g/dan, najmanje oko 25 mg/dan. U nekim tehničkim rešenjima, doza je 25±5 mg/dan.

[0102] Ukupna količina A3AR liganda koja se daje pacijentu dnevno, bez obzira na broj primena, ovde se naziva "dnevna doza lečenja".

[0103] Prema tome, u jednom tehničkom rešenju, A3AR ligand je formulisan u jediničnom doznom obliku za administriranje dnevne doze lečenja od najmanje 10 mg/dan. Tamo gde je oblik doziranja namenjen davanju pacijentu u režimu lečenja koji sadrži n doza dnevno, tada jedinični oblik doziranja može sadržavati 1/n dela dnevne doze lečenja (npr. gde je predviđena dnevna doza lečenja 20 mg i režim lečenja je dva puta dnevno, tada će svaki jedinični oblik doziranja imati dozu od 10 mg; ili gde je predviđena dnevna doza lečenja 25 mg, a režim lečenja dva puta dnevno, tada će svaki jedinični oblik doziranja imati dozu od 12.5 mg).

[0104] Kako se ovde koriste, članovi u engleskom jeziku "a", "an" i "the" uključuju reference u jednini kao i u množini, osim ako kontekst jasno ne nalaže drugačije. Na primer, termin "A3AR ligand" uključuje jedno ili više jedinjenja koja su sposobna da posebno utiču, direktno ili indirektno, u potpunosti ili delimično, na aktivnost A3AR.

[0105] Dalje, kako se ovde koristi, termin „koji sadrži“ podrazumeva da kompozicija uključuje navedeno aktivno sredstvo, tj. A3AR ligand, ali ne isključujući druge elemente, kao što su fiziološki prihvatljivi nosači i pomoćne supstance, kao i druga aktivna sredstva. Izraz "koji se sastoji u osnovi od" koristi se za definisanje kompozicija koje uključuju navedene elemente, ali isključuju druge elemente koji mogu imati suštinski značaj u lečenju nakupljanja masti. „Koji se sastoji od“ će, prema tome, značiti isključivanje više od elemenata u tragovima drugih elemenata.

[0106] Dalje, sve numeričke vrednosti, npr. kada se govori o količinama ili opsezima elemenata koji čine kompoziciju koja sadrži A3AR ligand kao aktivni sastojak, približne su vrednosti koje variraju (+) ili (-) do 20%, ponekad do 10% od navedenog vrednosti. To treba razumeti, čak iako nije uvek izričito navedeno da svim numeričkim oznakama prethodi izraz „oko“.

[0107] Pronalazak će sada biti prikazan u sledećem opisu eksperimenata koji su izvedeni u skladu sa pronalaskom. Treba razumeti da su ovi primeri namenjeni da budu u vidu ilustracije, a ne ograničenja. Očigledno je da su mnoge modifikacije i varijacije ovih primera moguće u svetlu gornjeg učenja.

NEOGRANIČAVAJUĆI PRIMERI

Primer 1 - Efekat CF102 na nivo ALT i TG

[0108] Mužjaci C57BL/6 miševa su korišćeni kao mišji eksperimentalni model.

[0109] A3AR agonist, 2-hloro-N<6>-(3-jodobenzil)-adenozin-5'-N-metiluronamid (Cl-IB-MECA, ovde naveden pod skraćenim nazivom CF102), je sintetisan za Can-Fite BioPharma od strane Albany Molecular Research Inc, Albany, NY, SAD. CF102 je korišćen u tečnom obliku, rastvoren u dimetil sulfoksidu (DMSO), korišćen kao transporter. Rastvoreni CF102 i DMSO transporteri administrirani su u istoj zapremini.

[0110] Mužjacima miševa C57BL/6 ubrizgana je jedna potkožna injekcija od 200 µg streptozotocina (STZ) dva dana nakon rođenja i hranjena hranom sa puno masti nakon 4 nedelje starosti. U dobi od 6 nedelja, miševi su randomizirani u grupe za lečenje nosačem i CF102 od 200 mg/kg, koji su davani oralno tri puta dnevno. Lečenje je vršeno između 6 nedelja starosti i 9 nedelja starosti.

[0111] Nakon završetka studije, izmerena je težina jetre i izračunat je odnos težine jetre i tela.

[0112] Izmereni su ALT u plazmi i trigliceridi jetre i urađene su histološke analize na presecima jetre za sledeće: Bojenje hematoksilinom i eozinom za procenu rezultata aktivnosti NAFLD i bojenje Sirius crvenom za procenu područja fibroze.

Rezultati:

[0113] CF102200 µg/kg je smanjio odnos težine jetre i tela u NASH jetrama (p = 0.05) (slika 1). Dalje, CF102 je smanjio nivo ALT (slika 2A) i nivo triglicerida u jetri (slika 2B).

[0114] Preseci jetre iz grupe transportera pokazali su ozbiljno taloženje mikro- i makrovezikularne masti, hepatocelularno baloniranje i inflamatornu ćelijsku infiltraciju. Grupa za lečenjesa CF102 pokazala je značajno smanjenje steatoze, baloniranja i lobularne upale u poređenju sa transporterom (slike 3C i 3D, slika 4, respektivno).

Primer 2- Efekat CF102 na NAS rezultat

[0115] Mužjacima miševa je ubrizgano 200 µg/životinjskog STZ dva dana nakon rođenja. Od 4 nedelje starosti, miševi su hranjeni hranom sa visokim sadržajem masti. U dobi od 6 nedelja, miševi su randomizirani u grupe za tretman transporterom i CF102200 µg/kg. Lečenje se davalo oralno, tri puta dnevno. Prekid je izvršen nakon 9 nedelja.

[0116] Za procenu NAFLD aktivnosti korišćeno je bojenje hematoksilinom i eozinom.

Rezultati:

[0117] CF102 (200 µg / kg) smanjio je rezultat NAS (NAFLD Activiti Score) upale u poređenju sa transporterom (slika 5).

Claims

Patentni zahtevi

1. Agonist A3adenozinskog receptora (A3AR) za primenu u smanjenju lipidne akumulacije u tkivu jetre subjekta koji ima nealkoholnu masnu bolest jetre (NAFLD - non-alcoholic fatty liver disease), pri čemu navedeni A3AR agonist je odabran iz grupe koja se sastoji od N<6>-2-(4-aminofenil)etil adenozina (APNEA), N<6>-(4-amino-3-jodobenzil)adenozin-5'-(N-metiluronamida) (AB-MECA), N<6>-(3-jodobenzil)-adenozin-5'-N-metiluronamida (IB-MECA) i 2-hloro-N<6>-(3-jodobenzil)-adenozin-5'-N-metiluronamida (CI-IB-MECA).

2. A3AR ligand za primenu iz patentnog zahteva 1 pri čemu količina je efikasna za smanjenje nivoa barem triglicerida u navedenom tkivu.

3. A3AR ligand za primenu iz patentnog zahteva 1 ili 2, pri čemu navedeno lečenje obuhvata dnevnu administraciju navedenog A3AR liganda navedenom subjektu.

4. A3AR ligand za primenu iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 3, pri čemu navedeno lečenje obuhvata hroničnu administraciju navedenog A3AR liganda.

5. A3AR ligand za primenu iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 4, pri čemu navedena administracija je oralna administracija.

6. A3AR ligand za primenu iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 5, pri čemu navedena administracija je jednom ili dva puta na dan.

7. A3AR ligand iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 6, za primenu u lečenju nealkoholnog steatohepatitisa (NASH).