RS61457B1 - Imunoregulatorna sredstva - Google Patents

Imunoregulatorna sredstva

Info

Publication number
RS61457B1
RS61457B1 RS20210198A RSP20210198A RS61457B1 RS 61457 B1 RS61457 B1 RS 61457B1 RS 20210198 A RS20210198 A RS 20210198A RS P20210198 A RSP20210198 A RS P20210198A RS 61457 B1 RS61457 B1 RS 61457B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
optionally substituted
cyclohexyl
cancer
ido
cis
Prior art date
Application number
RS20210198A
Other languages
English (en)
Inventor
Hilary Plake Beck
Juan Carlos Jaen
Maksim Osipov
Jay Patrick Powers
Maureen Kay Reilly
Hunter Paul Shunatona
James Ross Walker
Mikhail Zibinsky
James Aaron Balog
David K Williams
Jay A Markwalder
Emily Charlotte Cherney
Weifang Shan
Audris Huang
Original Assignee
Flexus Biosciences Inc
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Flexus Biosciences Inc filed Critical Flexus Biosciences Inc
Publication of RS61457B1 publication Critical patent/RS61457B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/416—1,2-Diazoles condensed with carbocyclic ring systems, e.g. indazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4375—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having nitrogen as a ring heteroatom, e.g. quinolizines, naphthyridines, berberine, vincamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/519—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/04—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms, directly attached to the ring carbon atoms
    • C07D215/06—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with only hydrogen atoms or radicals containing only hydrogen and carbon atoms, directly attached to the ring carbon atoms having only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, attached to the ring nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/12—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/12—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with substituted hydrocarbon radicals attached to ring carbon atoms
    • C07D215/14—Radicals substituted by oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D215/00—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems
    • C07D215/02—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom
    • C07D215/16—Heterocyclic compounds containing quinoline or hydrogenated quinoline ring systems having no bond between the ring nitrogen atom and a non-ring member or having only hydrogen atoms or carbon atoms directly attached to the ring nitrogen atom with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D215/20—Oxygen atoms
    • C07D215/22—Oxygen atoms attached in position 2 or 4
    • C07D215/233—Oxygen atoms attached in position 2 or 4 only one oxygen atom which is attached in position 4
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/02—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with only hydrogen atoms or radicals containing only carbon and hydrogen atoms, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring; Alkylene-bis-isoquinolines
    • C07D217/04—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with only hydrogen atoms or radicals containing only carbon and hydrogen atoms, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring; Alkylene-bis-isoquinolines with hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals attached to the ring nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/12—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with radicals, substituted by hetero atoms, attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D217/00—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems
    • C07D217/22—Heterocyclic compounds containing isoquinoline or hydrogenated isoquinoline ring systems with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to carbon atoms of the nitrogen-containing ring
    • C07D217/24—Oxygen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/54—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D231/56—Benzopyrazoles; Hydrogenated benzopyrazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D239/00—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings
    • C07D239/70—Heterocyclic compounds containing 1,3-diazine or hydrogenated 1,3-diazine rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D239/72—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines
    • C07D239/74—Quinazolines; Hydrogenated quinazolines with only hydrogen atoms, hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals, attached to ring carbon atoms of the hetero ring
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/08—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing alicyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/08—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing alicyclic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39533—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals
    • A61K39/39558—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum against materials from animals against tumor tissues, cells, antigens

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)
  • Quinoline Compounds (AREA)
  • Other In-Based Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Description

Opis
OBLAST TEHNIKE
[0001] Indolamin 2,3-dioksigenaza (IDO; takođe poznat i kao IDOl) je IFN-γ ciljni gen koji igra ulogu u imunomodulaciji. IDO je oksidoreduktaza i jedan od dva enzima koji katalizuju prvi korak i korak koji ograničava brzinu konverzije triptofana u N-formil-kinurenin. Postoji kao monomer od 41kD koji se nalazi u nekoliko ćelijskih populacija, uključujući imunske ćelije, endotelne ćelije, i fibroblaste. IDO je relativno dobro očuvan među vrstama, sa mišem i čovekom dele 63% identiteta sekvence na nivou aminokiselina. Podaci izvedeni iz njegove kristalne strukture i mutageneze usmerene na položaj pokazuju da su za aktivnost neophodni i vezivanje supstrata i odnos supstrata i dioksigenaze vezane za gvožđe. Identifikovan je homolog IDO (IDO2) koji deli 44% homoligije sekvence amino kiselina sa IDO, ali njegova funkcija se u velikoj meri razlikuje od IDO. (videti, npr., Serafini P, i sar., Semin. Cancer Biol., 16(1):53-65 (Feb.2006) i Ball, H.J. i sar., Gene, 396(1):203-213 (Jul 2007)).
[0002] IDO igra glavnu ulogu u imunološkoj regulativi, i njegova imunosupresivna funkcija se manifestuje na nekoliko načina. Važnije, IDO reguliše imunitet na nivou T ćelija, i postoji veza između IDO i proizvodnje citokina. Dodatno, tumori često manipulišu imunološkom funkcijom preko regulacije IDO. Prema tome, modulacija IDO može imati terapijski uticaj na brojne bolesti, poremećaje i stanja.
[0003] Postoji patofiziološka veza između IDO i raka. Poremećaj imunološke homeostaze usko je povezan sa rastom i progresijom tumora, i proizvodnja IDO u tumorskom mikrookruženju pomaže u rastu i metastazama tumora. Pored toga, povećani nivoi aktivnosti IDO povezani su sa nizom različitih tumora (Brandacher, G. i sar., Clin. Cancer Res., 12(4):1144-1151 (Feb.15, 2006)).
[0004] Lečenje raka obično podrazumeva hiruršku resekciju praćenu hemoterapijom i radioterapijom. Standardni režimi lečenja pokazuju veoma promenljive stepene dugoročnog uspeha zbog sposobnosti tumorskih ćelija da u suštini pobegnu regeneracijom primarnog rasta tumora i, što je još važnije, sejanjem udaljenih metastaza. Nedavni napredak u lečenju raka i bolesti, poremećaja i stanja povezanih sa rakom obuhvata primenu kombinovane terapije koja uključuje imunoterapiju sa tradicionalnijom hemoterapijom i radioterapijom. U većini scenarija, imunoterapija je povezana sa manje toksičnim od tradicionalne hemoterapije, jer koristi sopstveni imuni sistem pacijenta za identifikaciju i uklanjanje tumorskih ćelija.
[0005] Pored raka, IDO je umešan, između ostalog, u imunosupresiju, hronične infekcije i autoimune bolesti ili poremećaje (npr., reumatoidni artritis). Prema tome, suzbijanje razgradnje triptofana inhibicijom IDO aktivnosti ima ogromnu terapijsku vrednost. Pored toga, inhibitori IDO mogu se primeniti za pojačavanje aktivacije T ćelija kada su T ćelije potisnute trudnoćom, malignim bolestima, ili virusom (npr., HIV). Iako njihove uloge nisu tako dobro definisane, IDO inhibitori takođe mogu naći primenu u lečenju pacijenata sa neurološkim ili neuropsihijatrijskim bolestima ili poremećajima (npr., depresijom).
[0006] Sitnomolekulski inhibitori za IDO razvijeni su za lečenje ili prevenciju bolesti povezanih sa IDO. Na primer, IDO inhibitori 1-metil-DL-triptofan; p-(3-benzofuranil)-DL-alanin; p-[3-benzo(b)tienil]-DL-alanin; i 6-nitro-L-triptofan su primenjeni za modulaciju imuniteta koji je posredovan T ćelijama promenom lokalnih vanćelijskih koncentracija triptofana i metabolita triptofana (WO 99/29310). Jedinjenja koja imaju IDO inhibitornu aktivnost su dalje objavljena u WO 2004/094409.
[0007] S obzirom na ulogu koju ima indolamin 2,3-dioksigenaza u raznolikom nizu bolesti, poremećaja i stanja, i ograničenja (npr., efikasnosti) postojećih IDO inhibitora, potrebni su novi IDO modulatori, njihove kompozicije i postupci povezani sa njima.
KRATKA SUŠTINA PRONALASKA
[0008] Predmetni pronalazak se odnosi na jedinjenja koja moduliraju enzim oksidoreduktaze indolamin 2,3-dioksigenazu (IDO), i kompozicije (npr., farmaceutske kompozicije) koje sadrže jedinjenja. Takva jedinjenja, uključujući postupke njihove sinteze, i kompozicije su detaljno opisani u nastavku.
[0009] Predmetni pronalazak se takođe odnosi na primenu takvih jedinjenja i kompozicija za lečenje i/ili prevenciju raznolikog niza bolesti, poremećaja i stanja posredovanih, u celosti ili delimično, pomoću IDO. Takve bolesti, poremećaji i stanja su ovde detaljno opisani. Ako drugačije nije naznačeno, kada su primene jedinjenja predmentnog pronalaska ovde opisane, treba razumeti da takva jedinjena mogu biti u obliku kompozicije (npr., farmaceutske kompozicije).
[0010] Kao što je dalje razmotreno, iako se veruje da jedinjenja predmetnog pronalaska deluju na svoju aktivnost inhibicijom IDO, da bi se pronalazak primenio nije neophodno precizno razumevanje osnovnog mehanizma delovanja jedinjenja. Predočeno je da jedinjenja mogu alternativno da utiču na svoju aktivnost inhibicijom aktivnosti triptofan-2,3-dioksigenaze (TDO). Takođe je predočeno da jedinjenja mogu da utiču na svoju aktivnost inhibicijom IDO i TDO funkcije. Iako se jedinjenja iz pronalaska ovde generalno nazivaju IDO inhibitorima, treba razumeti da pojam "IDO inhibitori" obuhvata jedinjenja koja deluju pojedinačno inhibicijom TDO ili IDO i/ili jedinjenja koja deluju inhibicijom oba IDO i TDO.
[0011] U prvom aspektu obezbeđeno je jedinjenje koje ima formulu (I):
ili njegov stereoizomer, farmaceutski prihvatljiva so, hidrat ili solvat, pri čemu, Z je O; R<1>i R<2>su nezavisno vodonik, halogen, opciono supstituisan C1-C4haloalkil, opciono supstituisan C3-C6cikloalkil, opciono supstituisan 3- do 6-člani cikloheteroalkil, opciono supstituisan fenil, opciono supstituisan heteroaril, opciono supstituisan C1-C4alkil, opciono supstituisan C1-C4alkoksi, CN, SO2NH2, NHSO2CH3, NHSO2CF3, OCF3, SO2CH3, SO2CF3, ili CONH2, i kada R<1>i R<2>su na susednim temenima fenilnog prstena, oni mogu biti spojeni tako da formiraju zajedno 5- ili 6-člani cikloheteroalkilni prsten koji ima jedan ili dva temena prstena nezavisno izabrana od O, N i S, pri čemu pomenuti cikloheteroalkilni prsten je opciono supstituisan sa jednim do tri člana izabrana od fluora i C1-C3alkila; pri čemu J<1>je CH, N ili optiono C(R<2>) kada R<2>je vezan za teme prstena identifikovan kao J<1>; R<3>i R<3a>su nezavisno vodonik, opciono supstituisan C1-C6alkil, opciono supstituisan C2-C6alkenil, opciono supstituisan C2-C6alkinil, opciono supstituisan C1-C6haloalkil, opciono supstituisan C3-C6cikloalkil-C1-C4alkil, opciono supstituisan aril-C1-C6alkil, fluor, OH, CN, CO2H, C(O)NH2, N(R<5>)2, opciono supstituisan -O-C1-C6alkil, -(CR<5>R<5>)m-OH, -(CR<5>R<5>)m-CO2H, -(CR<5>R<5>)m-C(O)NH2, -(CR<5>R<5>)m-C(O)NHR<5>, - (CR<5>R<5>)mN(R<5>)2, -NH(CR<5>R<5>)mCO2H ili -NH(CR<5>R<5>)m-C(O)NH2; svaki R<5>je nezavisno H, F, OH, ili opciono substituisan C1-C6alkil; svaki R<5a>je nezavisno H, ili opciono supstituisan C1-C6alkil; R<6>je H, OH, F, opciono supstituisan C1-C6alkil, opciono supstituisan -O-C1-C6alkil, ili -N(R<5a>)2; svaki m je nezavisno 1, 2, ili 3 i R<11>i R<12>su nezavisno vodonik, halogen, opciono supstituisan C1-C4haloalkil, opciono supstituisan C3-C6cikloalkil, opciono supstituisan 3- to 6-člani cikloheteroalkil, opciono supstituisan fenil, opciono supstituisan heteroaril, opciono supstituisan C1-C4alkil, opciono supstituisan C1-C4alkoksi, CN, SO2NH2, NHSO2CH3, NHSO2CF3, OCF3, SO2CH3, SO2CF3, ili CONH2, i kada R<1>i R<2>su na susednim temenima fenilnog prstena, oni mogu biti spojeni tako da formiraju zajedno 5- ili 6-člani cikloheteroalkilni prsten koji ima jedan ili dva temena prstena nezavisno izabrana od O, N i S, pri čemu je pomenuti cikloheteroalkilni prsten opciono supstituisan sa jednim do tri člana izabrana od fluora i C1-C3alkila.
[001 2] U drugom aspektu je obezbeđeno jedinjenje izabrano od;
[0013] U trećem aspektu, obezbeđeno je jedinjenje prvog ili drugog aspekta, ili njegov stereoizomer, farmaceutski prihvatljiva so, hidrat ili solvat, za primenu u postupku lečenja bolesti, poremećaja ili stanja, posredovanih barem delimično pomoću IDO. Iz toga sledi da ova jedinjenja mogu biti primenjena u ovde opisanim postupcima lečenja i/ili prevenciji.
[0014] U četvrtom aspektu, obezbeđena je kombinacija koja sadrži jedinjenje formule (I) ili njegov stereoizomer, farmaceutski prihvatljivu so, hidrat ili solvat i najmanje jedno dodatno terapijsko sredstvo.
[0015] U jednom aspektu, predmetno obelodanjivanje obezbeđuje jedinjenja predstavljena formulom
ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, hidrat ili solvat, pri čemu, indeks n je 1 ili 0; indeks p je 1 ili 0; prsten označen kao A je fenil, 5- ili 6-člani heteroaril, ili C5-7cikloalkil; Z je O; B je N, C(OR<5a>), ili C(R<3a>); svaki X je nezavisno NR<5a>, O, CHR<5>, C(O), ili CH(OR<5a>); Q je N, C(CN), ili CR<6>; D je veza, O, C(R<5>)2, ili NR<5a>; E je opciono supstituisan 9- ili 10- člani kondenzovani biciklični heteroaril; R<1>i R<2>su nezavisno vodonik, halogen, C1-C4haloalkil, C3-C6cikloalkil, 3-do 6-člani cikloheteroalkil, opciono supstituisan fenil, opciono supstituisan heteroaril, opciono supstituisan C1-C4alkil, C1-C4alkoksi, CN, SO2NH2, NHSO2CH3, NHSO2CF3, OCF3, SO2CH3, SO2CF3, ili CONH2, i kada R<1>i R<2>su na susednim temenima fenilnog prstena, mogu se spojiti i formirati 5- ili 6-člani cikloheteroalkilni prsten koji ima jedan ili dva temena prstena nezavisno izabrana od O, N i S, pri čemu pomenuti cikloheteroalkilni prsten je opciono supstituisan sa jednim do tri člana izabrana od fluora i C1-C3alkila; R<3>, R<3a>i R<4>su nezavisno vodonik, opciono supstituisan C1-C6alkil, opciono supstituisan C2-C6alkenil, opciono supstituisan C2-C6alkinil, opciono supstituisan C1-C6haloalkil, opciono supstituisan C3-C6cikloalkil-C1-C4alkil, opciono supstituisan aril-C1-C6alkil, fluor, OH, CN, CO2H, C(O)NH2, N(R<5>)2, opciono supstituisan -O-C1-C6alkil, -(CR<5>R<5>)m-OH, -(CR<5>R<5>)m-CO2H, - (CR<5>R<5>)mC(O)NH2, -(CR<5>R<5>)m-C(O)NHR<5>, -(CR<5>R<5>)mN(R<5>)2, -NH(CR<5>R<5>)mCO2H ili - NH(CR<5>R<5>)m-C(O)NH2; svaki R<5>je nezavisno H, F, OH, ili opciono supstituisan C1-C6alkil; svaki R<5a>je nezavisno H, ili opciono supstituisan C1-C6alkil; R<6>je H, OH, F, opciono supstituisan C1-C6alkil, opciono supstituisan -O-C1-C6alkil, ili -N(R<5a>)2; i svaki m je nezavisno 1, 2, ili 3.
[0016] U još jednom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje kompozicije u kojima se jedinjenja formule (I) kombinuju sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih ekscipijenasa.
[0017] Predmetno otkriće razmatra postupke za lečenje ili prevenciju raka kod subjekta (npr., čoveka) koji obuhvataju administriranje subjektu terapijski efikasne količine najmanje jednog ovde opisanog IDO inhibitora. Predmetno otkriće uključuje postupke lečenja ili prevencije raka kod subjekta administriranjem subjektu IDO inhibitora u količini koja je efikasna da preokrene ili zaustavi napredovanje IDO posredovane imunosupresije. U nekim slučajevima, IDO posredovana imunosupresija je posredovana ćelijom koja prezentuje antigen (APC).
[0018] Primeri raka koji se mogu lečiti primenom ovde opisanih jedinjenja i kompozicija uključuju, ali nisu ograničeni na: rak prostate, kolorektuma, pankreasa, grlića materice, želuca, endometrijuma, mozga, jetre, bešike, jajnika, testisa, glave, vrata, kože (uključujući melanom i bazalni karcinom), mezotelijalne obloge, belih krvnih zrnaca (uključujući limfom i leukemiju) jednjaka, dojke, mišića, vezivnog tkiva, pluća (uključujući sitnoćelijski karcinom pluća i nesitnoćelijski karcinom), nadbubrežne žlezde, štitne žlezde, bubrega ili kosti; glioblastom, mezoteliom, rak bubrežnih ćelija, rak želuca, sarkom, horiokarcinom, kožni bazocelularni karcinom i seminom testisa. U nekim tehničkim rešenjima predmetnog pronalaska, rak je melanom, rak debelog creva, rak pankreasa, rak dojke, rak prostate, rak pluća, leukemija, tumor na mozgu, limfom, sarkom, rak jajnika ili Kaposijev sarkom. Karcinomi koji su kandidati za lečenje jedinjenjima i kompozicijama predmetnog pronalaska dalje će biti razmatrani.
[0019] Predmetno otkriće razmatra postupke lečenja subjekta koji prima transplantat koštane srži ili transplantat matičnih ćelija periferne krvi administriranjem terapijski efikasne količine IDO inhibitora dovoljne da poveća reakciju preosetljivosti odloženog tipa na tumorski antigen, odloži vreme relapsa posttransplantacionog maligniteta, poveća vreme preživljavanja bez relapsa nakon transplantacije i/ili poveća dugoročno preživljavanje nakon transplantacije.
[0020] U određenim slučajevima, predmetno otkriće razmatra postupke za lečenje ili prevenciju infektivnog poremećaja (npr., virusne infekcije) kod subjekta (npr., čoveka) koji obuhvataju administriranje subjektu terapijski efikasne količine najmanje jednog IDO inhibitora (npr., novog inhibitora ovog pronalaska). U nekim slučjevima, infektivni poremećaj je virusna infekcija (npr., hronična virusna infekcija), bakterijska infekcija, ili parazitska infekcija. U određenim slučajevima, virusna infekcija je virus humane imunodeficijencije ili citomegalovirus. U drugim tehničkim rešenjima, bakterijska infekcija je infekcija Micobacterium (npr. Micobacterium leprae ili Micobacterium tuberculosis). U još nekim drugim slučajevima parazitska infekcija je Leishmania donovani, Leishmania tropica, Leishmania major, Leishmania aethiopica, Leishmania mexicana, Plasmodium falciparum, Plasmodium vivak, Plasmodium ovale ili Plasmodium malariae. U daljim slučajevima, infektivni poremećaj je gljivična infekcija.
[0021] Predmetno obelodanjivanje takođe razmatra postupke za lečenje ili prevenciju imunološke bolesti, poremećaja ili stanja kod subjekta (npr., čoveka), koji obuhvataju davanje subjektu terapijski efikasne količine najmanje jednog IDO inhibitora (npr., poželjno novog inhibitora ovog pronalska). Primeri bolesti, poremećaja i stanja povezanih sa imunološkim sistemom su dalje opisani.
[0022] Ostale bolesti, poremećaji i stanja koja se mogu u potpunosti ili delimično lečiti ili sprečiti modulacijom IDO aktivnosti su kandidati indikacija za jedinjenja IDO inhibitora koja su ovde opisana.
[0023] Predmetno otkriće dalje razmatra primenu ovde opisanih IDO inhibitora u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih sredstava. Jedno ili više dodatnih sredstava mogu imati neku aktivnost modulacije IDO-a i/ili mogu funkcionisati kroz različite mehanizme delovanja. U nekim slučajevima takva sredstva uključuju zračenje (npr., lokalizovanu terapiju zračenjem ili terapiju zračenja ukupnog tela) i/ili druge modalitete lečenja koji nisu farmakološke prirode. Kada se koristi kombinovana terapija, IDO inhibitor(i) i jedno dodatno sredstvo(a) mogu biti u obliku pojedinačne kompozicije ili više kompozicija, i modaliteti lečenja mogu se primenjivati istovremeno, sekvencijalno ili kroz neki drugi režim. Kao primer, predmetni pronalazak razmatra režim lečenja gde fazu zračenja prati faza hemoterapije. Kombinovana terapija može imati aditivan ili sinergijski efekat. Ostale beneficije kombinovane terapije su ovde dalje opisane.
[0024] Predmetno obelodanjivanje dalje obuhvata primenu ovde opisanih IDO inhibitora u kombinaciji sa transplantacijom koštane srži, transplantacijom matičnih ćelija periferne krvi ili drugim vrstama transplantacione terapije.
[0025] Predmetno obelodanjivanje razmatra primenu ovde opisanih IDO inhibitora u kombinaciji sa inhibitorima imune kontrolne tačke. Pokazalo se da blokada imunoloških kontrolnih tačaka, koja rezultira pojačavanjem antigen-specifičnih odgovora T ćelija, obećava u terapiji humanih terapija. Primeri imunih kontrolnih tačaka (ligandi i receptori), od kojih su neki selektivno regulisani u različitim vrstama tumorskih ćelija, koji su kandidati za blokadu, uključuju PD1 (protein programirane ćelijske smrti 1); PDL1 (PD1 ligand); BTLA (atenuator B i T limfocita); CTLA4 (antigen 4 povezan sa citotoksičnim T-limfocitima); TIM3 (protein T-ćelijske membrane 3); LAG3 (limfocitni aktiirajući gen 3); A2aR (adenozinski A2a receptor A2aR); i inhibitorne receptore ubica. Inhibitori imunološke kontrolne tačke, i kombinovana terapija sa njima, detaljno su razmatrani ovde na drugom mestu.
[0026] Predmetno obelodanjivanje takođe obezbeđuje postupke za lečenje raka kod subjekta, koji obuhvataju administriranje subjektu terapijski efikasne količine najmanje jednog IDO inhibitora i najmanje jednog hemoterapijskog sredstva, kao što su sredstva, ali ne ograničavajući se na alkilirajuća sredstva (npr., azotni iperiti kao što su hlorambucil, ciklofosfamid, izofamid, mehloretamin, melfalan i uracil iperit; aziridini kao što je tiotepa; metansulfonatni estri kao što je busulfan; nukleozidni analozi (npr., gemcitabin); nitrozouree kao što su karmustin, lomustin i streptozocin; inhibitori topoizomeraze 1 (npr., irinotekan); kompleksi platine kao što su cisplatin i karboplatin; bioreduktivni alkilatori kao što su mitomicin, prokarbazin, dakarbazin i altretamin); sredstva za lomljenje lanaca DNK (npr., bleomicin); inhibitori topoizomeraze II (npr., amsakrin, daktinomicin, daunorubicin, idarubicin, mitoksantron, doksorubicin, etopozid, i tenipozid); sredstva za vezivanje manjih žljebova DNK npr., plikamidin); antimetaboliti (npr., antagonisti folata kao što su metotreksat i trimetreksat; antagonisti pirimidina kao što su fluorouracil, fluorodeoksiuridin, CB3717, azacitidin, citarabin i floksuridin; antagonisti purina kao što su merkaptopurin, 6-tioguanin, fludarabin, pentostatin; asparginaza; i inhibitori ribonukleotid reduktaze kao što je hidroksiurea); interaktivna sredstva tubulina (npr., vinkristin, estramustin, vinblastin, docetaksol, derivati epotilona, i paklitaksel); hormonalna sredstva (npr., estrogeni; konjugovani estrogeni; etinil estradiol; dietilstilbesterol; hlortrianizen; idenestrol; progestini kao što su hidroksiprogesteron kaproat, medroksiprogesteron, i megestrol; i androgeni kao što su testosteron, testosteron propionat, fluoksimesteron, i metiltestosteron); adrenalni kortikosteroidi (npr., prednizon, deksametazon, metilprednizolon, i prednizolon); sredstva za oslobađanje leutinizirajućeg hormona ili antagonisti hormona koji oslobađaju gonadotropin (npr., leuprolid acetat i goserelin acetat); i antihormonalni antigeni (npr., tamoksifen, antiandrogena sredstva kao što je flutamid; i antiadrenalna sredstva kao što su mitotan i aminoglutetimid). Predmetni pronalazak takođe razmatra primenu IDO inhibitora u kombinaciji sa drugim sredstvima poznatim u stanju tehnike (npr., arsenov trioksid) i drugim hemoterapijskim sredstvima razvijenim u budućnosti.
[0027] Takođe su otkriveni postupci za lečenje raka, davanje terapijski efikasne količine IDO inhibitora u kombinaciji sa najmanje jednim hemoterapijskim sredstvom rezultovalo je većom stopom preživljavanja od raka nego kada se primenjivalo samo. Takođe su otkriveni postupci lečenja raka, primenom terapijski efikasne količine IDO inhibitora u kombinaciji sa najmanje jednim hemoterapijskim sredstvom što je rezultovalo većim smanjenjem veličine tumora ili usporavanjem rasta tumora od smanjenja veličine tumora ili rasta tumora posmatrano administriranjem samo jednog sredstva.
[0028] Takođe su otkriveni postupci za lečenje ili prevenciju raka kod subjekta, koji obuhvataju administriranje subjektu terapijski efikasne količine najmanje jednog IDO inhibitora i najmanje jednog inhibitora transdukcije signala (STI). U određenom slučaju, najmanje jedan STI je izabran iz grupe koju čine inhibitori bcr/abl kinaze, inhibitori receptora za epidermalni faktor rasta (EGF), inhibitori her-2/neu receptora, i inhibitori farnezil transferaze (FTI). Ostali kandidati za STI sredstva su ovde navedeni na drugom mestu.
[0029] Predmetno obelodanjivanje takođe obezbeđuje postupke povećanja odbacivanja tumorskih ćelija kod subjekta koji obuhvataju davanje IDO inhibitora u sprezi sa najmanje jednim hemoterapijskim sredstvom i/ili terapije zračenjem, pri čemu je rezultujuće odbacivanje tumorskih ćelija veće od onog dobijenog davanjem bilo kog IDO inhibitora, hemoterapijskog sredstva ili terapije zračenjem zasebno.
[0030] Takođe su otkriveni postupci za lečenje raka kod subjekta, koji obuhvataju administriranje subjektu terapijski efikasne količine najmanje jednog IDO inhibitora i najmanje jednog imunomodulatora koji nije IDO inhibitor. U određenim slučajevima, najmanje jedan imunomodulator je izabran iz grupe koju čine CD40L, B7, B7RP1, ant-CD40, anti-CD38, anti-ICOS, 4-IBB ligand, vakcine protiv raka dendritičnih ćelija, IL2, IL12, ELC/CCL19, SLC/CCL21, MCP-1, IL-4, IL-18, TNF, IL-15, MDC, IPN-α/-β, M-CSF, IL-3, GM-CSF, IL-13, i anti-IL-10. Ostali kandidati za imunomodulatorna sredstva su ovde navedeni na drugom mestu.
[0031] Takođe su stavljeni na uvid javnosti postupci za lečenje ili prevenciju infektivnog poremećaja (npr., virusne infekcije) kod subjekta (npr., čoveka), koji obuhvataju administriranje subjektu terapijski efikasne količine najmanje jednog IDO inhibitora i terapijski efikasne količine anti-infektivnog sredstva(sredstava)
[0032] U nekim slučajevima, dodatno terapijsko sredstvo je citokin, koje obuhvata, na primer, faktor stimulisanja kolonije granulocita i makrofaga (GM-CSF) ili flt3-ligand. Takođe su otkriveni postupci za lečenje ili prevenciju virusne infekcije (npr., hronične virusne infekcije) koji obuhvataju, ali ne ograničavaju se na virus hepatitisa C (HCV), humani papiloma virus (HPV), citomegalovirus (CMV), Epstein-Barr virus (EBV), varičela-zoster virus, Koksaki virus, i virus humane imunodeficijencije (HIV). Primena ovde opisanih IDO inhibitora za lečenje infekcije (bilo samostalno, bilo kao komponenta kombinovane terapije) dalje će biti razmatrana.
[0033] Takođe je stavljeno na uvid javnosti lečenje infektivnog poremećaja koji se postiže istovremenim davanjem vakcine u kombinaciji sa terapijski efikasnom količinom IDO inhibitora predmetnog pronalaska. U nekim slučajevima, vakcina je antivirusna vakcina, koja obuhvata, na primer, anti-HIV vakcinu. U drugim slučajevima, vakcina je efikasna protiv tuberkuloze ili malarije. U još nekim drugim slučajevima, vakcina je tumorska vakcina (npr., vakcina efikasna protiv melanoma); tumorska vakcina može da sadrži genetski modifikovane ćelije tumora ili genetski modifikovanu ćelijsku liniju, koja obuhvata genetski modifikovane ćelije tumora ili genetski modifikovanu ćelijsku liniju koja je transfektovana da eksprimira faktor stimulisanja granulocita-makrofaga (GM-CSF). U posebnim slučajevima, vakcina obuhvata jedan ili više imunogenih peptida i/ili dendritičnih ćelija.
[0034] Takođe su obelodanjeni postupci primene IDO inhibitora koji su ovde obelodanjeni u kombinaciji sa jednim ili više antimikrobnih sredstava.
[0035] Takođe je obelodanjeno lečenje infekcije davanjem IDO inhibitora i najmanje jednog dodatnog terapijskog sredstva, simptom infekcije posmatran nakon davanja i IDO inhibitora i dodatnog terapijskog sredstva je poboljšan u odnosu na isti simptom infekcije posmatran nakon davanja bilo kog pojedinačno. U nekim slučajevima, posmatrani simptom infekcije može biti smanjenje virusnog opterećenja, povećanje broja CD4<+>T ćelija, smanjenje oportunističkih infekcija, produženo vreme preživljavanja, iskorenjivanje hronične infekcije ili njihova kombinacija.
KRATAK OPIS CRTEŽA
[0036] Slika 1A-1P obezbeđuje strukturu i biološku aktivnost ovde opisanih jedinjenja. Izmereni inhibitorski potencijali za jedinjenja pronalaska u testu opisanom u Primeru 251 su dati ispod na Slici 1A - 1P, gde su nivoi potencijala obezbeđeni na sledeći način: (IDO potencijal: IC50: A < 0.1 µM; B < 1 µM; C < 10 µM).
DETALJAN OPIS PRONALASKA
[0037] Pre nego što se predmetni pronalazak dalje opiše, treba shvatiti da pronalazak nije ograničen na određena tehnička rešenja koja su ovde izvedena, i takođe treba razumeti da terminologija koja se ovde koristi je u svrhu samo opisivanja određenih tehničkih rešenja, i nije namenjena ograničavanju.
[0038] Tamo gde je obezbeđen opseg vrednosti, podrazumeva se da svaka intervenirajuća vrednost, do desetine jedinice donje granice, osim ako kontekst jasno ne nalaže drugačije, između gornje i donje granice datog opsega i bilo koja druga navedena ili intervenirajuća vrednost u tom navedenom opsegu, je obuhvaćena pronalaskom. Gornje i donje granice ovih manjih opsega mogu se nezavisno uključiti u manje opsege, i takođe su obuhvaćene pronalaskom, podležu bilo kojoj posebno isključenoj granici u navedenom opsegu. Tamo gde navedeni opseg uključuje jedno ili oba ograničenja, opsezi koji isključuju jedno ili oba navedena ograničenja takođe su obuhvaćeni pronalaskom. Ukoliko drugačije nije definisano, tehnički i naučni izrazi koji su ovde upotrebljeni, imaju uobičajeno značenje tako da ih stučnjak iz oblast kome pronalazak pripada može razumeti.
[0039] Mora se primetiti da, kako se ovde koriste i u priloženim zahtevima, oblici jednine uključuju reference u množini, osim ako kontekst jasno ne nalaže drugačije. Dalje se napominje da zahtevi mogu biti sastavljeni tako da isključuju bilo koji opcioni element. Kao takva, ova izjava je namenjena da posluži kao prethodna osnova za upotrebu takve ekskluzivne terminologije kao što je "isključivo", "samo" i slično u vezi sa iznošenjem elemenata patentnih zahteva, ili upotrebom "negativnog" ograničenja.
[0040] Publikacije o kojima se ovde diskutuje daju se isključivo radi njihovog otkrivanja pre datuma podnošenja predmetne prijave. Dalje, dati datumi objavljivanja mogu se razlikovati od stvarnih datuma objavljivanja, što je možda potrebno nezavisno potvrditi.
Opšte
[0041] Imunska disregulacija je usko povezana sa evazijom tumora imunološkog sistema domaćina, što rezultuje rastom i progresijom tumora. Tradicionalni pristupi lečenju, koji obuhvataju hemoterapiju i radioterapiju su obično teški za pacijenta da ih podnose i postaju manje efikasni kako tumori evoluiraju da bi preživeli takva lečenja. Korišćenjem sopstvenog imunološkog sistema pacijenta za identifikaciju i uklanjanje tumorskih ćelija, imunoterapija donosi prednost smanjenjem toksičnosti. Kako regulacija imunoregulacionog enzima indolamin 2,3-dioksigenaze obuhvata jedan mehanizam kojim tumori manipulišu da bi pospešili rast, sredstva (npr., sitnomolekulska jedinjenja) koja inhibiraju aktivnost enzima predstavljaju obećavajući put za profilaksu i/ili lečenje.
[0042] Pored toga, veliki broj eksperimentalnih podataka ukazuje na ulogu IDO inhibicije u imunosupresiji, rezistenciji tumora i/ili odbacivanju, hroničnim infekcijama, HIV infekcijom i autoimunim bolestima ili poremećajima. Inhibicija IDO može biti takođe važna strategija lečenja za pacijente sa neurološkim ili neuropsihijatrijskim bolestima ili poremećajima kao što je depresija. Jedinjenja, kompozicije i metode koje su ovde navedene iskazuju potrebu za novim klasama IDO modulatora.
Definicije
[0043] Ukoliko nije drugačije naznačeno, sledeći izrazi imaju značenje navedeno u nastavku. Ostali izrazi su definisani na drugom mestu u specifikaciji.
[0044] Izraz "alkil", sam po sebi ili kao deo drugog supstituenta, znači, ukoliko nije drugačije naznačeno, ugljovodonični radikal ravnog ili razgranatog lanca, koji ima naznačeni broj atoma ugljenika (tj., C1-8znači jedan do osam ugljenika). Primeri alkil grupa uključuju metil, etil, npropil, izopropil, n-butil, t-butil, izobutil, sec-butil, n-pentil, n-heksil, n-heptil, n-oktil, i slično.
Izraz "alkenil" odnosi se na nezasićenu alkil grupu koja ima jednu ili više dvostrukih veza. Slično, izraz "alkinil" odnosi se na nezasićenu alkil grupu koja ima jednu ili više trostrukih veza. Primeri takvih nezasićenih alkil grupa uključuju vinil, 2-propenil, krotil, 2-izopentenil, 2-(butadienil), 2,4-pentadienil, 3-(1,4-pentadienil), etinil, 1- i 3-propyinil, 3-butinil, i viši homolozi i izomeri.
[0045] Izraz "cikloalkil" odnosi se na ugljovodonične prstenove koji imaju naznačeni broj atoma u prstenu (npr., C3-6cikloalkil) i koji su u potpunosti zasićeni ili imaju ne više od jedne dvostruke veze između temena prstena. "Cikloalkil" se takođe odnosi na biciklične i policiklične ugljovodonične prstenove kao što su, na primer, biciklo[2.2.1]heptan, biciklo[2.2.2]oktan, itd.
[0046] Izraz "cikloheteroalkil" odnosi se na cikloalkilni prsten koji ima naznačeni broj temena prstena (ili članova) i koji ima jedan do pet heteroatoma izabranih od N, O, i S, koji zamenjuju jedan do pet ugljeničnih temena, i pri čemu su atomi azota i sumpora opciono oksidisani, i atom(i) azota su opciono kvaternizovani. Cikloheteroalkil može biti monociklični, biciklični ili policiklični sistem prstena. Neograničavajući primeri cikloheteroalkilnih grupa uključuju pirolidin, imidazolidin, pirazolidin, butirolaktam, valerolaktam, imidazolidinon, hidantoin, dioksolan, ftalimid, piperidin, 1,4-dioksan, morfolin, tiomorfolin, tiomorfolin-S-oksid, tiomorfolin-S,S-oksid, piperazin, piran, piridon, 3-pirolin, tiopiran, piron, tetrahidrofuran, tetrhidrotiofen, hinuklidin, i slično. Cikloheteroalkilna grupa može biti vezana za ostatak molekula preko ugljenikovog prstena ili heteroatoma.
[0047] Kao što se ovde koristi, talasasta linija, " ", koja preseca jednostruku, dvostruku ili trostruku vezu u bilo kojoj ovde prikazanoj hemijskoj strukturi, predstavljaju tačku vezivanja jednostruke, dvostruke ili trostruke veze za ostatak molekula. Pored toga, veza koja se proteže do centra prstena (npr., fenilnog prstena) podrazumeva se da ukazuje na vezivanje na bilo koje od dostupnih temena prstena. Stručnjak iz date oblasti tehnike će razumeti da će višestruki supstituenti za koje je prikazano da su vezani za prsten zauzeti temena prstena koja obezbeđuju stabilna jedinjenja i koja su inače prostorno kompatibilna. Za dvovalentnu komponentu, podrazumeva se da uključuje bilo koju orijentaciju (napred ili unazad). Na primer, grupa "-C(O)NH-" podrazumeva se da uključuje vezivanje u bilo kojoj orijentaciji: -C(O)NH- ili -NHC(O)-, i slično, "-O-CH2CH2-" podrazumeva se da uključuje i -O-CH2CH2- i -CH2CH2-O-.
[0048] Izrazi "alkoksi", "alkilamino" i "alkiltio" (ili tioalkoksi) se koriste u njihovom uobičajenom smislu, i odnose se na one alkilne grupe povezane sa ostatkom molekula preko atoma kiseonika, amino grupe ili atoma sumpora. Pored toga, za dialkilamino grupe, alkilni delovi mogu biti isti ili različiti i takođe se mogu kombinovati da bi formirali 3- do 7- člani prsten sa atomom azota za koji je svaki vezan. Shodno tome, grupa predstavljena kao dialkilamino ili -NR<a>R<b>podrazumeva se da uključuje piperidinil, pirolidinil, morfolinil, azetidinil i slično.
[0049] Izrazi "halo" ili "halogen", sami po sebi ili kao deo drugog supstituenta, znače, ukoliko nije drugačije naznačeno, atom fluora, hlora, broma ili joda. Pored toga, pod pojmovima kao što je "haloalkil", podrazumeva se da uključuju monohaloalkil i polihaloalkil. Na primer, izraz "C1-4haloalkil" podrazumeva da uključuje trifluorometil, 2,2,2-trifluoroetil, 4-hlorobutil, 3-bromopropil, i slično.
[0050] Izraz "aril" znači, ukoliko nije drugačije naznačeno, polinezasićene, tipično aromatične, ugljovodonične grupe koje mogu biti jedan prsten ili više prstenova (do tri prstena) koji su međusobno fuzionisani ili kovalentno povezani. Neograničavajući primeri aril grupa uključuju fenil, naftil i bifenil.
[0051] Izraz "heteroaril" se odnosi na aril grupe (ili prstenove) koje sadrže od jednog do pet heteroatoma izabranih od N, O, i S, pri čemu su atomi azota i sumpora opciono oksidisani, i atom(i) azota su po izboru kvaternizovani. Heteroaril grupa može biti vezana za ostatak molekula preko heteroatoma. Neograničavajući primeri heteroaril grupa uključuju piridil, piridazinil, pirazinil, pirimidinil, triazinil, hinolinil, hinoksalinil, hinazolinil, cinolinil, ftalazinil, benzotriazinil, purinil, benzimidazolil, benzopirazolil, benzotriazolil, benzizoksazolyil, izobenzofuril, izoindolil, indolizinil, benzotriazinil, tienopiridinil, tienopirimidinil, pirazolopirimidinil, imidazopiridini, benzotiaksolil, benzofuranil, benzotienil, indolil, hinolil, izohinolil, izotiazolil, pirazolil, indazolil, pteridinil, imidazolil, triazolil, tetrazolil, oksazolil, izoksazolil, tiadiazolil, pirolil, tiazolil, furil, tienil i slično. Supstituenti za heteroarilni prsten mogu se izabrati iz grupe prihvatljivih supstituenata koji su opisani u nastavku.
[0052] Gornji izrazi (npr., "alkil", "aril" i "heteroaril"), u nekim tehničkim rešenjima, biće opciono zamenjeni. Supstituenti izabrani za svaku vrstu radikala dati su u nastavku.
[0053] Opcioni supstituenti za alkil radikale (koji uključuju grupe koje se često nazivaju alkilen, alkenil, alkinil i cikloalkil) mogu biti razne grupe izabrane od: halogena, -OR', -NR'R", -SR', -SiR'R"R"', -OC(O)R', -C(O)R', -CO2R', - CONR'R", -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', -NR'-C(O)NR"R"', -NR"C(O)2R', -NH-C(NH2)=NH, -NR'C(NH2)=NH, -NH-C(NH2)=NR', -S(O)R', -S(O)2R', -S(O)2NR'R", - NR'S(O)2R", -CN i -NO2u rasponu od nule do (2 m'+1), gde m' je ukupan broj atoma ugljenika u takvom radikalu. R', R" i R'" se svaki nezavisno odnose na vodonik, nesupstituisani C1-8alkil, nesupstituisani aril, aril supstituisan sa 1-3 halogena, nesupstituisane C1-
8alkil, C1-8alkoksi ili C1-8tioalkoksi grupe, ili nesupstituisane aril-C1-4alkil grupe. Kada su R' i R" vezani za isti atom azota, oni se mogu kombinovati sa atomom azota da se dobije 3-, 4-, 5-, 6-, ili 7-člani prsten. Na primer, -NR'R" se podrazumeva da uključuje 1-pirolidinil i 4-morfolinil.
[0054] Slično tome, opcioni supstituenti za aril i heteroaril grupe variraju i uglavnom su izabrani od: -halogena, -OR', -OC(O)R', -NR'R", -SR', -R', -CN, -NO2, - CO2R', -CONR'R", -C(O)R', -OC(O)NR'R", -NR"C(O)R', -NR"C(O)2R', -NR'-C(O)NR"R"', -NH-C(NH2)=NH, -NR'C(NH2)=NH, -NH-C(NH2)=NR', -S(O)R', - S(O)2R', -S(O)2NR'R", -NR'S(O)2R", -N3, perfluoro(C1-C4)alkoksi, i perfluoro(C1-C4)alkila, u broju u opsegu od nule do ukupnog broja otvorenih valenci na aromatičnom prstenastom sistemu; i gde R', R" i R'" su nezavisno izabrani od vodonika, C1-8alkila, C1-8haloalkila, C3-6cikloalkila, C2-8alkenila i C2-8alkinila. Drugi pogodni supstituenti uključuju svaki od gore navedenih aril supstituenata koji su vezani za atom prstena alkilenskim lancem od 1-4 atoma ugljenika.
[0055] Dva supstituenta na susednim atomima arilnog ili heteroarilnog prstena mogu se opciono zameniti supstituentom formule -T-C(O)-(CH2)q-U-, gde T i U su nezavisno -NH-, -O-, -CH2- ili jednostruka veza, i q je ceo broj od 0 do 2. Alternativno, dva supstituenta na susednim atomima arilnog ili heteroarilnog prstena mogu po želji biti zamenjena supstituentom formule -A-(CH2)r-B-, gde A i B su nezavisno -CH2-, -O-, -NH-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, -S(O)2NR'- ili jednostruka veza, i r je ceo broj od 1 do 3. Jedna od pojedinačnih veza tako formiranog novog prstena može se opciono zameniti dvostrukom vezom. Alternativno, dva supstituenta na susednim atomima arilnog ili heteroarilnog prstena mogu po želji biti zamenjena supstituentom formule -(CH2)s-X-(CH2)t-, gde s i t su nezavisno celi brojevi od 0 do 3, i X je -O-, -NR'-, -S-, -S(O)-, -S(O)2-, ili -S(O)2NR'-. Supstituent R' u -NR'- i -S(O)2NR'- je izabran od vodonika ili nesupstituianog C1-6alkila.
[0056] Kako se ovde koristi, izraz "heteroatom" podrazumeva da uključuje kiseonik (O), azot (N), sumpor (S) i silicijum (Si).
[0057] Izraz "farmaceutski prihvatljive soli" podrazumeva soli aktivnih jedinjenja koja se pripremaju sa relativno netoksičnim kiselinama ili bazama, u zavisnosti od određenih supstituenata koji se nalaze u jedinjenjima koja su ovde opisana. Kada jedinjenja predmetnog pronalaska sadrže relativno kisele funkcionalne funkcije, adicione soli baze mogu se dobiti kontaktiranjem neutralnog oblika takvih jedinjenja sa dovoljnom količinom željene baze, bilo prečišćene ili u pogodnom inertnom rastvaraču. Primeri soli izvedenih iz farmaceutski prihvatljivih neorganskih baza uključuju aluminijum, amonijum, kalcijum, bakar, feri gvožđe, fero gvožđe, litijum, magnezijum, mangan, manganat, kalijum, natrijum, cink i slično. Soli izvedene iz farmaceutski prihvatljivih organskih baza uključuju soli primarnih, sekundarnih i tercijarnih amina, uključujući supstituisane amine, ciklične amine, amine koji se javljaju u prirodi i slično, kao što su arginin, betain, kofein, holin, N,N'-dibenziletilendiamin, dietilamin, 2-dietilaminoetanol, 2-dimetilaminoetanol, etanolamin, etilendiamin, N-etilmorfolin, N-etilpiperidin, glukamin, glukozamin, histidin, hidrabamin, izopropilamin, lizin, metilglukamin, morfolin, piperazin, piperidin, poliaminske smole, prokain, purini, teobromin, trietilamin, trimetilamin, tripropilamin, trometamin i slično. Kada jedinjenja predmetnog pronalaska sadrže relativno osnovne funkcije, soli adicione kiseline mogu se dobiti kontaktiranjem neutralnog oblika takvih jedinjenja sa dovoljnom količinom željene kiseline, bilo u prečišćenom ili u pogodnom inertnom rastvaraču. Primeri farmaceutski prihvatljivih kiselih adicionih soli uključuju one izvedene iz neorganskih kiselina kao što su hlorovodonična, bromovodonična, azotna, ugljena, monohidrogenkarbonska, fosforna, monohidrogenfosforna, dihidrogenfosforna, sumporna, monohidrogen sumporna, jodovodonična, ili fosforne kiseline i slično, kao i soli izvedene od relativno netoksičnih organskih kiselina kao što su sirćetna, propionska, izobuterna, malonska, benzoeva, sukcinska, suberinska, fumarna, mandelinska, ftalna, benzensulfonska, p-tolilsulfonska, limunska, vinska, metansulfonska i slično. Takođe su uključene soli aminokiselina kao što je arginat i slično, i soli organskih kiselina poput glukuronske ili galaktunorske kiseline i slično (videti, na primer, Berge, S.M., i sar., "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci., 66:1-19 (1977)). Određena specifična jedinjenja predmetnog pronalaska sadrže i osnovne i kisele funkcionalnosti koje omogućavaju pretvaranje jedinjenja u bazne ili kisele adicione soli.
[0058] Neutralni oblici jedinjenja mogu se obnoviti kontaktom soli sa bazom ili kiselinom i izolovanjem matičnog jedinjenja na kovencionalan način. Matični oblik jedinjenja se razlikuje od različitih oblika soli u određenim fizičkim svojstvima, kao što je rastvorljivost u polarnim rastvaračima, ali u suprotnom soli su ekvivalentne matičnom obliku jedinjenja za potrebe predmetnog pronalaska.
[0059] Pored oblika soli, predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenja koja su u obliku proleka. Prolekovi jedinjenja koja su ovde opisana su ona jedinjenja koja se lako podvrgavaju hemijskim promenama u fiziološkim uslovima da bi se dobila jedinjenja predmetnog pronalaska. Pored toga, prolekovi se mogu konvertovati u jedinjenja predmetnog pronalaska hemijskim ili biohemijskim postupcima u ex vivo okruženju. Na primer, prolekovi se mogu polako konvertovati u jedinjenja predmetnog pronalaska kada se stave u rezervoar transdermalnih flastera sa odgovarajućim enzimom ili hemijskim reagensom.
[0060] Određena jedinjenja predmetnog pronalaska mogu postojati u nesolvatisanim oblicima, kao i u solvatisanim oblicima, uključujući hidratne oblike. Uopšteno, solvatisani oblici su ekvivalentni nesolvatisanim oblicima i predviđeno je da budu obuhvaćeni obimom predmetnog pronalaska. Određena jedinjenja predmetnog pronalaska mogu postojati u više kristalnih ili amorfnih oblika. Uopšteno, svi fizički oblici su ekvivalentni za primene razmatrane predmetnim pronalaskom i namenjeni su da budu u okviru predmetnog pronalaska.
[0061] Određena jedinjenja predmetnog pronalaska poseduju asimetrične atome ugljenika (optički centri) ili dvostruke veze; racemati, diastereomeri, geometrijski izomeri, regioizomeri i pojedinačni izomeri (npr., odvojeni enantiomeri) su svi predviđeni da budu obuhvaćeni obimom predmetnog pronalaska. Kada je prikazan stereohemijski prikaz, podrazumeva se da se odnosi na jedinjenje u kojem je jedan od izomera prisutan i suštinski bez drugog izomera. "Suštinski bez' drugog izomera ukazuje na odnos 80/20 dva izomera, poželjnije 90/10 ili 95/5 ili više. U nekim tehničkim rešenjima, jedan od izomera će biti prisutan u količini od najmanje 99%.
[0062] Jedinjenja predmetnog pronalska mogu takođe da sadrže neprirodne proporcije atomskih izotopa na jednom ili više atoma koji čine takva jedinjenja. Neprirodne proporcije izotopa mogu se definisati u odnosu od količine pronađene u prirodi do količine koja se sastoji od 100% dotičnog atoma. Na primer, jedinjenja mogu sadržati radioaktivne izotope, kao što su, na primer, tricijum (<3>H), jod-125 (<125>I) ili ugljenik-14 (<14>C), ili neradioaktivni izotopi, kao što je deuterijum (<2>H) ili ugljenik-13 (<13>C). Takve izotopske varijacije mogu obezbediti dodatnu korist za one koji su opisani na drugom mestu u ovoj prijavi. Na primer, izotopske varijante jedinjenja prema pronalasku mogu naći dodatnu korist, uključujući ali ne ograničavajući se na njih, kao dijagnostički i/ili reagensi za obradu slika ili kao citotoksični/radiotoksična terapijska sredstva. Pored toga, izotopske varijante jedinjenja pronalaska mogu imati izmenjene farmakokinetičke i farmakodinamičke karakteristike koje mogu doprineti povećanoj sigurnosti, podnošljivosti ili efikasnosti tokom lečenja. Sve izotopske varijacije jedinjenja predmetnog pronalaska, bilo da su radioaktivne ili ne, namenjene su da budu obuhvaćene obimom predmetnog pronalaska.
[0063] Izrazi "pacijent" ili "subjekat" se koriste naizmenično da bi se odnosili na čoveka ili životinju koja nije čovek (npr., sisar).
[0064] Izrazi "administracija", "administriranje" i slično, kao što se primenjuju na, na primer, subjekat, ćeliju, tkivo, organ, ili biološku tečnost, odnose se na kontakt, na primer, inhibitora IDO, farmaceutske kompozicije koja sadrži isto ili dijagnostičko sredstvo subjektu, ćeliji, tkivu, organu, ili biološkoj tečnosti. U kontekstu ćelije, administracija uključuje kontakt (npr., in vitro ili ex vivo) reagensa sa ćelijom, kao kontakt reagensa sa tečnosti, gde je tečnost u kontaktu sa ćelijom.
[0065] Izrazi "lečiti", "lečenje", "tretman" i slično se odnose na tok delovanja (kao što je administriranje inhibitora IDO ili farmaceutske kompozicije koja ga sadrži) započetog nakon bolesti, poremećaja ili stanja, ili njegov simptom, dijagnostikovan, posmatran i slično kako bi se eliminisao, smanjio, suzbio, ublažio ili poboljšao, bilo privremeno ili trajno, najmanje jedan od osnovnih uzroka bolesti, poremećaja ili stanja koje pogađaju subjekat, ili najmanje jedan od simptoma povezan sa bolešću, poremećajem, stanjem koji pogađaju subjekat. Prema tome, lečenje uključuje inhibiranje (npr., zaustavljanje razvoja ili daljeg razvoja bolesti, poremećaja ili stanja ili kliničkih simptoma u vezi sa istim) aktivne bolesti.
[0066] Izraz "kome je potrebno lečenje" kao što je ovde upotrebljen odnosi se na procenu učinjenu od strane lekara ili drugog pružaoca nege prema kojoj subjekat zahteva ili će imati koristi od lečenja. Ova procena donosi se na osnovu različitih faktora koji su u domenu stručnosti lekara ili negovatelja.
[0067] Izrazi "sprečiti", "sprečavanje", "prevencija" i slično odnose se na tok delovanja (kao što je primena IDO inhibitora ili farmaceutske kompozicije koja ga sadrži) započet na način (npr., pre početka bolesti, poremećaja, stanja ili simptoma) kako bi se sprečio, suzbio, inhibirao ili smanjio, privremeno ili trajno, rizik subjekta da razvije bolest, poremećaj, stanje ili slično (kako je utvrđeno, na primer, odsustvom kliničkih simptoma) ili odložio njihov nastanak, uopšteno u kontekstu subjekta koji je predisponiran da ima određenu bolest, poremećaj ili stanje. U određenim slučajevima, izrazi se takođe odnose na usporavanje napredovanja bolesti, poremećaja ili stanja ili inhibiranje njihovog napredovanja u štetno ili na drugi način neželjeno stanje.
[0068] Izraz "kome je potrebna prevencija" kao što je ovde upotrebljen odnosi se na procenu učinjenu od strane lekara ili drugog pružaoca nege prema kojoj subjekat zahteva ili će imati koristi od preventivne nege. Ova procena donosi se na osnovu različitih faktora koji su u domenu stručnosti lekara ili negovatelja.
[0069] Fraza "terapijski efikasna količina" odnosi se na administriranje sredstva subjektu, bilo samostalno ili kao deo farmaceutske kompozicije, bilo u pojedinačnoj dozi ili kao deo niza doza, u količini koja može da ima bilo koji vidljivi, pozitivan efekat na bilo koji simptom, aspekt ili karakteristiku bolesti, poremećaja ili stanja kada se administrira subjektu. Terapijski efikasna količina može se konstantovati merenjem relevantnih fizioloških efekata i može se prilagoditi u vezi sa režimom doziranja i dijagnostičkom analizom stanja subjekta i slično. Kao primer, merenje serumskog nivoa i IDO inhibitora (ili, npr., njegovog metabolita) u određeno vreme nakon administracije može biti pokazatelj da li je korišćena terapijski efikasna količina.
[0070] Fraza "u dovoljnoj količini da izvrši promenu" znači da postoji uočljiva razlika između nivoa indikatora izmerenog pre (npr., osnovnog nivoa) i nakon primene određene terapije. Indikatori uključuju bilo koji objektivni parametar (npr., serumska koncentracija) ili subjektivni parametar (npr., osećaj blagostanja subjekta).
[0071] Izraz "mali molekuli" odnosi se na hemijska jedinjenja koja imaju molekulsku težinu koja je manja od oko 10kDa, manja od oko 2kDa, ili manja od oko 1kDa. Mali molekuli uključuju, ali nisu ograničeni na, neorganske molekule, organske molekule, organske molekule koji sadrže neorgansku komponentu, molekule koji sadrže radioaktivni atom i sintetičke molekule. Terapijski, mali molekul može biti propusniji za ćelije, manje podložan razgradnji i manje je verovatno da će izazvati imunološki odgovor nego veliki molekuli.
[0072] Kako su ovde korišćeni, izrazi "IDO inhibitor", "IDO blokator" i izrazi slični njima odnose se na sredstva sposobna da inhibiraju aktivnost IDO, čime preokreću imunosupresiju posredovanu pomoću IDO. IDO inhibitor može biti konkurentan, nekonkurentan ili nepovratan IDO inhibitor. "Konkurentan IDO inhibitor " je jedinjenje koje reverzibilno inhibira aktivnost enzima IDO na katalitičkom mestu; "nekonkurentan IDO inhibitor" je jedinjenje koje reverzibilno inhibira aktivnost enzima IDO na nekatalitičkom mestu; i "ireverzibilan IDO inhibitor" je jedinjenje koje nepovratno eliminiše aktivnost enzima IDO formiranjem kovalentne veze (ili drugog stabilnog sredstva za inhibiranje funkcije enzima) sa enzimom. Brojni IDO inhibitori su komercijalno dostupni (npr., 5-Br-4-Cl-indoksil 1,3-diacetat i 1-metil-DL-triptofan (1 MT); oba su dostupna od Sigma -Aldrich, St. Louis, MO) i mogu se koristiti kao, na primer, "alat" ili "referentna" jedinjenja [0073] Izraz "ligand" odnosi se, na primer, na peptid, polipeptid, membranski povezan ili membranski vezan molekul, ili njihov kompleks, koji može delovati kao agonist ili antagonist receptora. Ligand obuhvata prirodne i sintetičke ligande, npr., citokine, varijante citokina, analoge, muteine, i vezivne kompozicije izvedene iz antitela, kao i male molekule. Izraz takođe obuhvata sredstvo koje nije ni agonist ni antagonist, ali koje se može vezati za receptor bez značajnog uticaja na njegova biološka svojstva, na primer, signalizaciju ili adheziju. Pored toga, termin uključuje membranski vezan ligand koji je promenjen, npr., hemijskim ili rekombinantnim postupcima, u rastvorljivu verziju membranski vezanog liganda. Ligand ili receptor moge biti potpuno unutarćelijski, odnosno mogu se nalaziti u citozolu, jezgru ili nekom drugom unutarćelijskom odeljenju. Kompleks liganda i receptora naziva se "kompleks ligand-receptor".
[0074] Izrazi "inhibitori" i "antagonisti", ili "aktivatori" i "agonisti" odnose se na inhibitorne ili aktivirajuće molekule, na primer, za aktivaciju, npr., liganda, receptora, kofaktora, gena, ćelije, tkiva, ili organa. Inhibitori su molekuli koji smanjuju, blokiraju, sprečavaju, odlažu aktivaciju, inaktiviraju, desenzitiviraju, ili smanjuju regulaciju, npr., gena, proteina, liganda, receptora, ili ćelije. Aktivatori su molekuli koji povećavaju, aktiviraju, olakšavaju, pojačavaju aktivaciju, senzibilizuju ili povećavaju regulaciju, npr., gena, proteina, liganda, receptora, ili ćelije. Inhibitor se takođe može definisati kao molekul koji smanjuje, blokira ili inaktivira konstitutivnu aktivnost. "Agonist" je molekul koji u interakciji sa ciljem izaziva ili podstiče povećanje aktivacije cilja. "Antagonist" je molekul koji se suprotstavlja delovanju(njima) agonista. Antagonist sprečava, smanjuje, inhibira ili neutrališe aktivnost agonista, i antagonist takođe može sprečiti, inhibirati ili smanjiti konstitutivnu aktivnost cilja, npr., ciljanog receptora, čak i tamo gde ne postoji identifikovani agonist.
[0075] Izrazi "modulirati", "modulacija" i slično odnose se na sposobnost molekula (npr., aktivatora ili inhibitora) da poveća ili smanji funkciju ili aktivnost IDO, bilo direktno ili indirektno. Modulator može delovati sam ili može koristiti kofaktor, npr., protein, metalni jon, ili mali molekul. Primeri modulatora uključuju jedinjenja malih molekula i druge bioorganske molekule. Brojne biblioteke jedinjenja malih molekula (npr., kombinatorne biblioteke) su komercijalno dostupne i mogu poslužiti kao polazna tačka za identifikovanje modulatora. Stručnjak iz oblasti tehnike je sposoban da razvije jedan ili više testova (npr., biohemijski testovi ili testovi zasnovani na ćelijama) u kojima se takve biblioteke jedinjenja mogu pregledati kako bi se identifikovalo jedno ili više jedinjenja koja imaju željena svojstva; nakon toga, kvalifikovani medicinski hemičar može da optimizuje takvo jedno ili više jedinjenja, na primer, sintezom i procenom njihovih analoga i derivata. Studije sintetičkog i/ili molekularnog modelovanja takođe se mogu koristiti za identifikaciju aktivatora.
[0076] "Aktivnost" molekula može opisati ili se odnositi na vezivanje molekula za ligand ili receptor; na katalitičku aktivnost; na sposobnost stimulisanja ekspresije gena ili ćelijske signalizacije, diferencijacije ili sazrevanja; na antigenu aktivnost; na modulaciju aktivnosti drugih molekula; i slično. Izraz "proliferativna aktivnost" obuhvata aktivnost koja promoviše, koja je neophodna ili je posebno povezana sa, na primer, normalnom deobom ćelija, kao i sa kancerom, tumorom, displazijom, transformacijom ćelija, metastazom i angiogenezom.
[0077] Kako se ovde koristi, "uporediva", "uporediva aktivnost", "aktivnost uporediva sa", "uprediv efekat", "efekat uporediv sa", i slično su relativni izrazi koji se mogu posmatrati kvantitativno i/ili kvalitativno. Značenje pojmova često zavisi od konteksta u kojem se koriste. Kao primer, dva sredstva koja aktiviraju receptor mogu se posmatrati kao da imaju uporediv efekat iz kvalitativne perspektive, ali dva sredstva mogu da imaju sličan efekat iz kvantitativne perspektive ako je jedno sredstvo samo u stanju da postigne 20% aktivnosti drugog sredstva utvrđenog u testu koji je prihvaćen u stanju tehnike (npr., test odgovora na dozu) ili na životinjskom modelu koji je prihvaćen u stanju tehnike. Kada se upoređuje jedan rezultat sa drugim rezultatom npr., jedan rezultat sa referentnim standardom), "uporediv" često (mada ne uvek) znači da jedan rezultat odstupa od referentnog standarda za manje od 35%, za manje od 30%, za manje od 25%, za manje od 20%, za manje od 15%, za manje od 10%, za manje od 7%, za manje od 5%, za manje od 4%, za manje od 3%, za manje od 2%, za manje od 1%. U određenim tehničkim rešenjima, jedan rezultat je uporediv sa referentnim standardom ako odstupa za manje od 15% za manje od 10% ili za manje od 5% od referentnog standarda. Kao primer, ali bez ograničenja, aktivnost ili efekat se mogu odnositi na efikasnost, stabilnost, rastvorljivost ili imunogenost.
[0078] "Suštinski čist" ukazuje na to da komponenta čini više od oko 50% ukupnog sadržaja kompozicije, i tipično više od oko 60% ukupnog sadržaja polipeptida. Još tipičnije, "suštinski čist" odnosi se na kompozicije u kojima je komponenta od interesa najmanje 75%, najmanje 85%, najmanje 90% ili više ukupne kompozicije. U nekim slučajevima, polipeptid će činiti više od oko 90%, ili više od oko 95% ukupnog sadržaja kompozicije.
[0079] Izrazi "specifično vezuje" ili "selektivno vezuje", kada se odnose na ligand/receptor, antitelo/antigen ili drugi vezujući par, ukazuje na reakciju vezivanja koja je odlučujuća za prisustvo proteina u heterogenoj populaciji proteina i drugih bioloških lekova. Prema tome, pod određenim uslovima, navedeni ligand se vezuje za određeni receptor i ne veže se u značajnoj količini za druge proteine prisutne u uzorku. Antitelo ili vezujuća kompozicija izvedena iz antigenvezujućeg mesta antitela, iz razmatrane metode, vezuje se za svoj antigen, ili njegovu varijantu ili mutein, afinitetom koji je najmanje dvostruko veći, najmanje deset puta veći, najmanje 20 puta veći ili najmanje 100 puta veći od afiniteta sa bilo kojim drugim antitelom ili iz njega izvedenim vezivajućim sastavom. U određenom tehničkom rešenju, antitelo će imati afinitet veći od oko 10<9>litara/mol, kako je određeno, npr., Scatchard analizom (Munsen, i sar., 1980 Analyt. Biochem.
107:220-239).
[0080] Izraz "odgovor", na primer, ćelije, tkiva, organa ili organizma, obuhvata promenu biohemijskog ili fiziološkog ponašanja, npr., koncentracije, gustine, adhezije ili migracije unutar biološkog odeljenja, brzine ekspresije gena ili stanje diferencijacije, gde je promena u korelaciji sa aktivacijom, stimulacijom ili lečenjem ili sa unutrašnjim mehanizmima kao što je genetsko programiranje. U određenim kontekstima, izrazi "aktivacija", "stimulacija", i slično odnose se na aktivaciju ćelija regulisanu unutrašnjim mehanizmima, kao i spoljnim faktorima ili faktorima okoline; pri čemu izrazi "inhibicija", "regulacija naniže" i slično odnose na suprotne efekte.
[0081] Izrazi "polipeptid", "peptid", i "protein", koji se ovde koriste naizmenično, odnose se na polimerni oblik aminokiselina bilo koje dužine, koji može uključiti genetski kodirane i negenetski kodirane aminokiseline, hemijski ili biohemijski modifikovane ili derivatizovane aminokiseline, i polipeptide koji imaju modifikovane polipeptidne okosnice. Izrazi uključuju fuzione proteine, uključujući, ali bez ograničenja, fuzione proteine sa heterolognom aminokiselinskom sekvencom, fuzione proteine sa heterolognim i homolognim vodećim sekvencama, sa ili bez ostataka metionina na N-kraju; proteine imunološki označene; i slično.
[0082] Kako su ovde upotrebljeni, izrazi "varijante" i "homolozi" koriste se naizmenično da bi se odnosili na sekvence aminokiselina ili DNK koje su slične referentnim sekvencama aminokiselina ili nukleinskih kiselina. Termin obuhvata varijante koje se javljaju u prirodi i varijante koje se ne pojavljuju u prirodi. Varijante koje se javljaju u prirodi uključuju homologe (polipeptide i nukleinske kiseline koji se razlikuju u aminokiselinskim ili nukleotidnim sekvencama, od jedne do druge vrste), i alelske varijante (polipeptidi i nukleinske kiseline koje se razlikuju u aminokiselinskim ili nukleotidnim sekvencama, od jedne do druge jedinke unutar vrste). Prema tome, varijante i homolozi obuhvataju prirodno prisutne DNK sekvence i proteine koji su time kodirani i njihove izoforme, kao i spojene varijante proteina ili gena. Izrazi takođe obuhvataju sekvence nukleinskih kiselina koje se razlikuju u jednoj ili više baza od prirodne DNK sekvence, ali se i dalje prevode u aminokiselinsku sekvencu koja odgovara proteinu koji se prirodno javlja zbog degeneracije genetskog koda. Varijante koje se ne pojavljuju u prirodi i homolozi uključuju polipeptide i nukleinske kiseline koje sadrže promenu u aminokiselinskoj ili nukleotidnoj sekvenci, gde se promena u sekvenci veštački uvodi (npr., mutageni); na primer, promena se generiše u laboratoriji ljudskom intervencijom ("ljudska ruka"). Prema tome, varijante i homolozi koji se ne pojavljuju u prirodi mogu se takođe odnositi na one koji se razlikuju od prirodnih sekvenci jednom ili više konzervativnih supstitucija i/ili oznaka i/ili konjugata.
[0083] Izraz "muteini" kako se ovde koristi, odnosi se široko na mutirane rekombinantne proteine. Ovi proteini obično nose pojedinačne ili višestruke supstitucije aminokiselina i često su izvedeni iz kloniranih gena koji su bili podvrgnuti lokalnoj ili slučajnoj mutagenezi ili iz potpuno sintetičkih gena.
[0084] Izrazi "DNK", " nukleinska kiselina", "molekul nukleinske kiseline", "polinukleotid" i slično ovde se koriste naizmenično da bi se odnosili na polimerni oblik nukleotida bilo koje dužine, bilo deoksiribonukleotide ili ribonukleotide, ili njihove analoge. Neograničavajući primeri polinukleotida uključuju linearne i kružne nukleinske kiseline, informacione RNK (mRNA), komplementarnu DNK (cDNA), rekombinantne polinukleotide, vektore, probe, prajmere i slično.
Indolamin 2,3-dioksigenaza
[0085] Kao što je prethodno pomenuto, IDO je imunološki regulatorni enzim koji se normalno eksprimira u ćelijama tumora i u aktiviranim imunološkim ćelijama. IDO je jedna od nekoliko kontrolnih tačaka imunog odgovora koje su uključene u imunološki beg tumora; prema tome, IDO inhibitori remete mehanizme pomoću kojih tumori izbegavaju normalan imunološki sistem tela.
[0086] IDO nishodno reguliše imunološki odgovor posredovan oksidacijom triptofana. Ovo dovodi do inhibicije aktivacije T-ćelija i indukcije T-ćelijske apoptoze, što stvara okruženje u kome citotoksični T limfociti specifični za tumore postaju funkcionalno neaktivni ili više nisu u stanju da napadnu ćelije raka subjekta. Zbog toga su poželjna terapijska sredstva usmerena na suzbijanje razgradnje triptofana inhibicijom IDO aktivnosti. Inhibitori IDO mogu se koristiti za aktiviranje T ćelija i zato povećavaju aktivaciju T ćelija kada su T ćelije suzbijene trudnoćom, malignim oboljenjem ili virusom kao što je HIV. Inhibicija IDO takođe može biti važna strategija lečenja za pacijente sa neurološkim ili neuropsihijatrijskim bolestima ili poremećajima kao što je depresija. Jedinjenja, kompozicije i postupci koji su ovde navedeni pomažu da se zadovolje trenutne potrebe za IDO modulatorima.
[0087] Ekspresija IDO je modulisana složenim nizom signala, tako da implicira brojne raličite mehanizme delovanja. Na primer, IDO može biti indukovan inhibicijom DNK metil transferaza ili histon deacetilaza. Signalni put NF-κB takođe je impliciran u funkciji IDO. Inhibiranje NF-kB aktivnosti blokira IDO ekspresiju i proizvodi robusne antitumorske odgovore koji zavise i od T ćelija- i od IDO; alternativno, NF-κB aktivacija (na koju mogu uticati različiti faktori kao što su signalizacija interferona-γR1/-γR2 i aktivacija toličnih receptora – eng. toll-like receptor) indukuje ekspresiju IDO gena.
[0088] Ostali mehanizmi su uključeni u modulaciju IDO funkcije. Kao primer, inhibitori reaktivnih kiseoničnih vrsta (ROS) mogu uticati na stabilizaciju IDO; IDO nivoi se mogu modulisati inhibicijom i aktivacijom puteva koji su nizvodno i uzvodno od IDO; i aktivacija interferona-γ može aktivirati autokrinu indukciju IDO.
[0089] Studije ukazuju da je IDO put aktivan kod mnogih karcinoma, kako unutar ćelija tumora kao direktna odbrana od napada T ćelija, tako i unutar ćelija koje predstavljaju antigen (APC) u limfnim čvorovima koji odvode tumor, što rezultuje perifernom tolerancijom na antigene povezane sa tumorom (TAAs). Kanceri mogu da koriste IDO put da olakšaju preživljavanje, rast, invaziju i metastaze malignih ćelija koje eksprimiraju TAA koje imunološki sistem inače može prepoznati i napasti.
[0090] Kao što je ovde navedeno, katabolizam triptofana u tumorskom tkivu pomoću enzima IDO koji ograničava brzinu daje priliku za primenu IDO inhibitora kao terapijske alternative ili dodatka konvencionalnoj hemoterapiji. Međutim, određeni karcinomi mogu katabolizovati triptofan, ali su uglavnom IDO negativni. Nedavne studije pokazuju da je alternativni enzimski put katabolizma triptofana koji uključuje triptofan-2,3-dioksigenazu (TDO) takođe relevantan za rak. TDO, koji se smatra odgovornim za regulaciju sistemskog nivoa triptofana u jetri, konstitutivno se eksprimira kod nekih karcinoma i takođe je sposoban da suzbije antitumorske imunološke odgovore (videti, npr., Platten, M. i sar., Cancer Res., 72(21):5435-5440 (1. novembar, 2012)).
[0091] IDO se eksprimira u širokom spektru humanih tumora i tumorskih ćelijskih linija kao i u APC-ima domaćina, što je u korelaciji sa lošijom kliničkom prognozom. Prema tome, inhibicija IDO može poboljšati preživljavanje kod pacijenata sa rakom sa IDO posredovanom imunosupresijom. U poređenju sa tim, TDO je izražen u širokom spektru humanih tumora i ćelijskih linija tumora, i ekspresija TDO je evidentna u naprednim humanim glioblastomima. Identifikacija tumora koji eksprimiraju visok nivo IDO ili TDO može omogućiti selektivniju inhibiciju imunosupresivnih puteva regulisanih triptofanom. Alternativno, jedinjenja koja inhibiraju i IDO i TDO mogu obezbediti najveću pokrivenost da spreče bekstvo tumora kompenzatornom ekspresijom drugog enzima koji degradira triptofan. Prema tome, primena dvostrukih IDO/TDO inhibitora ili kombinacija IDO- i TDO-specifičnih inhibitora može se pokazati kao superiorna alernativa lečenja u imunoterapiji raka za blokiranje imunosupresije posredovane metabolizmom triptofana.
[0092] Iako precizno razumevanje osnovnog mehanizma delovanja kojim jedinjenja iz ovog pronalaska utiču na svoju aktivnost nije potrebno za praktikovanje pronalaska, veruje se da jedinjenja (ili njihova podgrupa) inhibiraju IDO funkciju. Alternativno, jedinjenja (ili njihova podgrupa) mogu inhibirati TDO funkciju. Jedinjenja (ili njihova podgrupa) takođe mogu imati inhibitornu aktivnost i na IDO i na TDO funkciju. Iako se jedinjenja iz pronalaska ovde generalno nazivaju IDO inhibitorima, treba razumeti da izraz "IDO inhibitori" obuhvata jedinjenja koja deluju pojedinačno preko inhibicije TDO ili IDO i ili jedinjenja koja deluju preko inhibicije i IDO i TDO.
Identifikacija IDO inhibitora koji imaju poželjne karakteristike
[0093] Predmetni pronalazak se delimično odnosi na identifikaciju inhibitora IDO sa najmanje jednim svojstvom ili karakteristikom koja je od terapijskog značaja. Inhibitori kandidata mogu se identifikovati korišćenjem, na primer, testa ili modela koji su prihvaćeni u stanju tehnike, čiji su primeri ovde opisani.
[0094] Nakon identifikacije, kandidatski inhibitori mogu se dalje procenjivati korišćenjem tehnika koje pružaju podatke u vezi sa karakteristikama inhibitora (npr., farmakokinetički parametri, sredstva za određivanje rastvorljivosti ili stabilnosti). Poređenje kandidatskih inhibitora sa referentnim standardom (koji može biti "najbolji u klasi" trenutnih inhibitora) ukazuje na potencijalnu održivost takvih kandidata.
Jedinjenja
[0095] Kao što je gore navedeno, predmetna objava obezbeđuje jedinjenja koja su predstavljena formulom (Ix):
ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, hidrat ili solvat, pri čemu indeks n je 1 ili 0; indeks p je 1 ili 0; prsten označen kao A je fenil, 5- ili 6-člani heteroaril, ili C5-7cikloalkil; Z je O; B je N, C(OR<5a>), ili C(R<3a>); svaki X je nezavisno NR<5a>, O, CHR<5>, C(O), ili CH(OR<5a>); Q je N, C(CN) ili CR<6>; D je veza, O, C(R<5>)2, ili NR<5a>; E je opciono supstituisan 9- ili 10- člani fuzionisani biciklični heteroaril; R<1>i R<2>su nezavisno vodonik, halogen, C1-C4haloalkil, C3-C6cikloalkil, 3- do 6-člani cikloheteroalkil, opciono supstituisan fenil, opciono supstituisan heteroaril, opciono supstituisan C1-C4alkil, C1-C4alkoksi, CN, SO2NH2, NHSO2CH3, NHSO2CF3, OCF3, SO2CH3, SO2CF3, ili CONH2, i kada su R<1>i R<2>na susednim temenima fenilnog prstena, oni mogu biti spojeni da bi formirali 5- ili 6-člani cikloheteroalkilni prsten koji ima jedan ili dva temena prstena nezavisno izabrana od O, N i S, pri čemu navedeni cikloheteroalkilni prsten je opciono supstituisan sa jednim do tri člana izabrana od fluora i C1-C3alkila; R<3>, R<3a>i R<4>su nezavisno vodonik, opciono supstituisan C1-C6alkil, opciono supstituisan C2-C6alkenil, opciono supstituisan C2-C6alkinil, opciono supstituisan C1-C6haloalkil, opciono supstituisan C3-C6cikloalkil-C1-C4alkil, opciono supstituisan aril-C1-C6alkil, fluor, OH, CN, CO2H, C(O)NH2, N(R<5>)2, opciono supstituisan -O-C1-C6alkil, -(CR<5>R<5>)m-OH, -(CR<5>R<5>)m-CO2H, -(CR<5>R<5>)mC(O)NH2, -(CR<5>R<5>)m-C(O)NHR<5>, -(CR<5>R<5>)mN(R<5>)2, -NH(CR<5>R<5>)mCO2H ili -NH(CR<5>R<5>)m-C(O)NH2; svaki R<5>je nezavisno H, F, OH, ili opciono supstituisan C1-C6alkil; svaki R<5a>je nezavisno H, ili opciono supstituisan C1-C6alkil; R<6>je H, OH, F, opciono supstituisan C1-C6alkil, opciono supstituisan -O-C1-C6alkil, ili -N(R<5a>)2; i svaki m je nezavisno 1, 2, ili 3.
[0096] U nekim slučajevima, Q je C(CN) ili CR<6>.
[0097] U nekim slučajevima, obezbeđena su jedinjenja koja imaju formulu (Ia) ili (Ib):
pri čemu svaki od indeksa, slova, i R<1>, R<2>, R<3>, R<4>i R<6>imaju značenja data u vezi sa jedinjenjima formule (Ix).
[0098] U nekim slučajevima, obezbeđena su jedinjenja koja imaju formulu (Ic):
pri čemu J<1>je CH, N ili opciono C(R<2>) kada R<2>je vezan za teme prstena identifikovano kao J<1>, i svaki od indeksa, slova, i R<1>, R<2>, R<3>, R<4>i R<6>imaju značenja data u vezi sa jedinjenjima formule (Ix).
[0099] U nekim određenim slučajevima, obezbeđena su jedinjenja koja imaju formulu izabranu od (Ic1), (Ic2), (Ic3), (Ic4), (Ic5) i (Ic6):
pri čemu J<1>je CH, N ili opciono C(R<2>) kada R<2>je vezan za teme prstena identifikovano kao J<1>, i svaki od indeksa, slova, i R<1>, R<2>, R<3>, R<3a>, R<4>i R<6>imaju značenja data u vezi sa jedinjenjima formule (Ix).
[0100] U drugim slučajevima, obezbeđena su jedinjenja koja imaju formulu (Id):
pri čemu J<1>je CH, N ili opciono C(R<2>) kada R<2>je vezan za teme prstena identifikovano kao J<1>, svaki od indeksa, slova, i R<1>, R<2>, R<3>, R<3a>i R<6>imaju značenja data u vezi sa jedinjenjima formule (Ix).
[0101] U nekim izabranim slučajevima, obezbeđena su jedinjenja koja imaju formulu izabranu od (Id1), (Id2), (I) i (Id4):
pri čemu za svaku od (Id1) i (Id2), obezbeđena su jedinjenja u suštini bez drugih izomera na prikazanim stereocentrima. Za svaku od (I) i (Id4), R<11>i R<12>su nezavisno vodonik, halogen, C1-C4haloalkil, C3-C6cikloalkil, 3- do 6-člani cikloheteroalkil, opciono supstituisan fenil, opciono supstituisan heteroaril, opciono supstituisan C1-C4alkil, C1-C4alkoksi, CN, SO2NH2, NHSO2CH3, NHSO2CF3, OCF3, SO2CH3, SO2CF3, ili CONH2, i kada su R<1>i R<2>na susednim temenima fenilnog prstena mogu se spojiti u 5- ili 6-člani cikloheteroalkilni prsten koji ima jedan ili dva temena prstena nezavisno izabrana od O, N i S, pri čemu je pomenuti cikloheteroalkilni prsten opciono supstituisan sa jednim do tri člana izabrana od fluora i C1-C3alkila. Za svaku od (Id1), (Id2), (I) i (Id4), preostala slova, i J<1>, R<1>, R<2>, R<3>, R<3a>i R<6>imaju značenja navedena u vezi sa jedinjenjima formule (Id).
[0102] U drugim slučajevima, obezbeđena su jedinjenja koja imaju formulu (Ie):
pri čemu slova, i R<1>, R<2>, R<3>, R<3a>i R<6>imaju značenja navedena u vezi sa jedinjenjima formule (Ix).
[0103] U nekim izabranim slučajevima, obezbeđena su jedinjenja koja imaju formulu izabranu od (Ie1), (Ie2), (Ie3), (Ie4), (Ie5), (Ie6) i (Ie7):
[0104] Za svaku od formula (Ie1), (Ie4), (Ie5), (Ie6) i (Ie7), jedinjenja su u osnovi bez drugih izomera na prikazanim stereocentrima. U izabranim slučajevima formule (Ie4), obezbeđena su jedinjenja u kojima R<1>je Cl, F, opciono supstituisan fenil, ili CN. U izabranim slučajevima formule (Ie6), obezbeđena su jedinjenja u kojima R<1>je Cl, F, opciono supstituisan fenil, ili CN; i R<2>je H ili F. U izabranim slučajevima formule (Ie6), obezbeđena su jedinjenja u kojima R<1>je Cl. U drugim izabranim slučajevima formule (Ie6), obezbeđena su jedinjenja u kojima R<1>je Cl; i R<3>je CH3.
Kada nisu posebno definisani kako je ovde navedeno, preostala slova i R<1>, R<2>, R<3>, R<3a>i R<6>imaju značenja navedena u vezi sa jedinjenjima formule (Ix).
[0105] U drugim slučajevima, obezbeđena su jedinjenja koja imaju formulu (If) ili (Ig):
od kojih je svako u suštini bez drugih izomera u svakom od tri prikazana stereocentra, i gde R<2>i R<3>imaju značenja data u vezi sa formulom (Ix).
[0106] U jednoj grupi izabranih slučajeva, obezbeđeno je bilo koje jedinjenje sa Slika 1A-1L.
[0107] U drugoj grupi izabranih slučajeva, obezbeđeno je bilo koje jedinjenje sa Slika 1A-1L koje ima nivo aktivnosti identifikovan kao "A" ili "B".
[0108] U drugoj grupi izabranih slučajeva, obezbeđeno je bilo koje jedinjenje sa Slika 1A-1L koje ima nivo aktivnosti identifikovan kao "A".
Postupci sinteze
[0109] Jedinjenja koja su ovde opisana mogu se pripremiti različitim postupcima. Reprezentativni postupci su dati u Primerima.
Modifikacije za poboljšanje karakteristika inhibitora
[0110] Često je korisno, i ponekad i imperativno, poboljšati jednu od više fizičkih karakteristika ovde otkrivenih modaliteta lečenja i/ili načina na koji se oni daju. Poboljšanja fizičkih karakteristika uključuju, na primer, metode povećanja rastvorljivosti u vodi, bioraspoloživosti, poluživota u serumu i/ili terapijskog poluvremena; i/ili moduliranje biološke aktivnosti.
[0111] Modifikacije poznate u oblasti tehnike uključuju pegilaciju, Fc-fuziju i fuziju albumina. Iako su generalno povezane sa sredstvima velikih molekula (npr., polipeptidima), takve modifikacije su nedavno procenjene sa određenim malim molekulima. Kao primer, Chiang, M. i sar. (J. Am. Chem. Soc., 136(9):3370-3373 (2014)) opisuju agonist malog molekula za adenozinski 2a receptor konjugovan sa Fc domenom imunoglobulina. Mali molekul-Fc konjugat zadržao je moćne interakcije Fc receptora i adenozinskog 2a receptora i pokazao je superiorna svojstva u poređenju sa nekonjugovanim malim molekulom. Takođe je opisano kovalentno vezivanje PEG molekula za terapijska sredstva malih molekula (Li, W. i sar., Progress in Polymer Science, 38:421-444 (2013)).
Terapijske i profilaktičke primene
[0112] Predmetni pronalazak razmatra primenu inhibitora IDO koji su ovde opisani za primenu u lečenju ili prevenciji širokog spektra bolesti, poremećaja i/ili stanja i/ili njihovih simptoma. Iako su određene primene u nastavku detaljno opisane, treba razumeti da predmetni pronalazak nije tako ograničen. Osim toga, iako su u nastavku date opšte kategorije određenih bolesti, poremećaja i stanja, neke od bolesti, poremećaja i stanja mogu biti pripadnici više kategorija, i druge ne moraju biti pripadnici bilo koje od otkrivenih kategorija.
[0113] Poremećaji povezani sa onkologijom. U skladu sa predmetnim pronalaskom, IDO inhibitor se može koristiti za lečenje ili sprečavanje proliferativnog stanja ili poremećaja, uključujući rak, na primer, rak materice, grlića materice, dojke, prostate, testisa, gastrointestinalnog trakta (npr., jednjaka, orofarinksa, želuca, tankog ili debelog creva, debelog creva ili rektuma), bubrega, bubrežne ćelije, bešike, kosti, koštane srži, kože, glave ili vrata, jetre, žučne kese, srca, pluća, pankreasa, pljuvačne žlezde, nadbubrežne žlezde, štitaste žlezde, mozga (npr., glioma), ganglija, centralnog nervnog sistema (CNS) i perifernog nervnog sistema (PNS), i raka hematopoetskog sistema i imunog sistema (npr., slezine ili timusa). Predmetno otkriće takođe obezbeđuje postupke lečenja ili prevencije drugih bolesti, poremećaja ili stanja povezanih sa rakom, uključujući, na primer, munogene tumore, neimunogene tumore, uspavane tumore, karcinome izazvne virusom (npr., rak epitelnih ćelija, rak endotelnih ćelija, rak skvamoznih ćelija i papiloma virus), adenokarcinomi, limfomi, karcinomi, melanomi, leukemije, mijelomi, sarkomi, teratokarcinomi, hemijski izazvani karcinomi, metastaze i angiogeneza. Pronalazak podrazumeva smanjenje tolerancije na ćeliju tumora ili antigen ćelije karcinoma, npr., moduliranjem aktivnosti regulatorne T-ćelije i/ili CD8+ T-ćelije (videti, npr., Ramirez-Montagut i sar., Oncogene, 22:3180-3187 (2003); i Sawaya i sar., New Engl. J. Med., 349:1501-1509 (2003)). U određenim tehničkim rešenjima, tumor ili rak je rak debelog creva, rak jajnika, rak dojke, melanom, rak pluća, glioblastom, ili leukemija. Upotreba izraza bolesti, poremećaja i stanja povezanih sa rakom podrazumeva da se široko odnose na stanja koja su direktno ili indirektno povezana sa rakom i uključuju, npr., angiogenezu i prekancerozna stanja kao što je displazija.
[0114] Takođe su otkriveni postupci za lečenje proliferativnog stanja, karcinoma, tumora ili prekanceroznog stanja pomoću IDO inhibitora i najmanje jednim dodatnim terapijskim ili dijagnostičkim sredstvom, čiji su primeri dati ovde na drugom mestu.
[0115] Imunološki i inflamatorni poremećaji. Kako su ovde korišćeni, izrazi kao što su "imunološka bolest", "imunološko stanje", "imunološki poremećaj", "inflamatorna bolest", "inflamatorno stanje", "inflamatorni poremećaj" i slično, u širem smislu podrazumevaju bilo koje imunološko ili inflamatorno s tim povezano stanje (npr., patološka inflamacija i autoimune bolesti). Takva stanja su često neraskidivo povezana sa drugim bolestima, poremećajima i stanjima. Kao primer, "imunološko stanje" se može odnositi na proliferativne uslove, kao što su rak, tumori i angiogeneza; uključujući infekcije (akutne i hronične), tumore i karcinome koji se opiru eradikaciji od strane imunološkog sistema.
[0116] Neograničavajući spisak bolesti, poremećaja i stanja povezanih sa imunološkim i inflamatornim sistemima koji se mogu lečiti ili sprečiti jedinjenjima i kompozicijama iz predmetnog pronalaska uključuju, artritis (npr., reumatoidni artritis), otkazivanje bubrega, lupus, astmu, psorijazu, kolitis, pankreatitis, alergije, fibroza, hirurške komplikacije (npr., tamo gde inflamatorni citokini sprečavaju zarastanje), anemiju, i fibromialgiju. Ostale bolesti i poremećaji koji mogu biti povezani sa hroničnom upalom uključuju Alchajmerovu bolest, kongestivnu srčanu insuficijenciju, moždani udar, stenozu aortnog zaliska, arteriosklerozu, osteoporozu, Parkinsonovu bolest, infekcije, upalnu bolest creva (npr., Kronova bolest i ulcerozni kolitis), alergijski kontaktni dermatitis i druge ekceme, sistemsku sklerozu, transplantaciju i multiplu sklerozu.
[0117] Među ostalim poremećajima povezanim sa imunološkim sistemom, smatra se da inhibicija IDO funkcije takođe može igrati ulogu u imunološkoj toleranciji i prevenciji fetalnog odbacivanja u materici.
[0118] U nekim tehničkim rešenjima, inhibitor IDO koji je ovde opisan može se kombinovati sa imunosupresivnim sredstvom da bi se smanjio broj imunih efektorskih ćelija.
[0119] Neke od gore pomenutih bolesti, poremećaja i stanja za koja IDO inhibitor može biti posebno efikasan (zbog, na primer, ograničenja trenutnih terapija) detaljnije su opisani u nastavku.
[0120] Reumatoidni artritis (RA), koji se uopšteno karakteriše hroničnom inflamacijom u membranskoj oblozi (sinovijumu) zglobova, pogađa približno 1% američke populacije (∼2.1 miliona ljudi). Dalje razumevanje uloge citokina, uključujući TNF-α i IL-1, u procesu inflamacije omogućilo je razvoj i uvođenje nove klase antireumatskih lekova koji modifikuju bolest (DMARDs). Sredstva (od kojih se neka preklapaju sa modalitetima lečenja za RA) uključuju ENBREL® (etanercept), REMICADE® (infliksimab), HUMIRA® (adalimumab) i KINERET® (anakinra). Iako neka od ovih sredstava ublažavaju simptome, inhibiraju napredovanje strukturnih oštećenja i poboljšavaju fizičku funkciju u određenoj populaciji pacijenata, i dalje postoji potreba za alternativnim sredstvima sa poboljšanom efikasnosti, komplementarnim mehanizmima delovanja i sa malo/manje ozbiljnih neželjenih dejstava.
[0121] Psorijaza, konstelacija čestih imuloško posredovanih hroničnih bolesti kože, pogađa više od 4.5 miliona ljudi u SAD-u, od kojih se smatra da 1.5 mililon ima umereni do teški oblik bolesti. Pored toga, preko 10% pacijenata sa psorijazom razvija psorijatični artritis, koji oštećuje kost i vezivno tkivo oko zglobova. Poboljšano razumevanje osnovne fiziologije psorijaze rezultovalo je uvođenjem sredstava koja, na primer, ciljaju aktivnost T limfocita i citokina koji su odgovorni za inflamatornu prirodu bolesti. Takva sredstva uključuju TNF-α inhibitore (koji se takođe primenjuju za lečenje reumatoidnog arhritisa (RA)), koji uključuju ENBREL® (etanercept), REMICADE® (infliksimab) i HUMIRA® (adalimumab)), i inhibitore T-ćelija kao što su AMEVIVE® (alefacept) i RAPTIVA® (efalizumab). Iako je nekoliko ovih sredstava donekle efikasno u određenoj populaciji pacijenata, nijedno se nije pokazalo da efikasno leči sve pacijente.
[0122] Subjektima koji boluju od multiple skleroze (MS), ozbiljno oslabljujuće autoimnune bolesti koja obuhvata više područja inflamacije i ožiljaka mijelina u mozgu i kičmenoj moždini, mogu posebno pomoći IDO inhibitori koji su ovde opisani, jer trenutni tretmani samo ublažavaju simptome ili odlažu napredovanje invaliditeta.
[0123] Slično tome, IDO inhibitori mogu biti naročito korisni za subjekte koji su pogođeni neurodegenerativnim poremećajima, kao što je Alchajmerova bolest (AD), poremećaj mozga koji ozbiljno narušava procese misli, pamćenja i jezika kod pacijenata; i Parkinsonova bolest (PD), progresivni poremećaj CNS koji se karakteriše, na primer, abnormalnim kretanjem, rigidnošću i tremorom. Ovi poremećaji su progresivni i iscrpljujući i nisu dostupna lekovita sredstva.
[0124] Poremećaji povezani sa virusima. Predmetni pronalazak razmatra primenu IDO inhibitora za primenu u lečenju i/ili prevenciju bilo koje virusne bolesti, poremećaja ili stanja za koje lečenje IDO inhibitorom može biti korisno. U određenim tehničkim rešenjima, virusni poremećaj je hronični virusni poremećaj. Primeri virusnih bolesti, poremećaja i stanja koja se razmatraju uključuju, ali nisu ograničeni na, virus hepatitisa B (HBV), virus hepatitisa C (HCV), virus humanog papiloma (HPV), HIV, AIDS (uključujući njegove manifestacije kao što je kaheksija, demencija i dijareja), herpes simpleks virus (HSV), Epstein-Barr-ov virus (EBV), varičela-zoster virus, Koksaki virus, i citomegalovirus (CMV).
[0125] Poremećaji povezani sa bakterijama i parazitima. Tehnička rešenja predmetnog pronalaska razmatraju primenu IDO inhibitora koji su ovde opisani za lečenje bakterijske infekcije administracijom subjektu, na primer, mikobakterijske infekcije (npr., mikobakterijske lepre ili mikobakterijske tuberkoloze) ili infekcije izazvane bakterijom Listeria monocytogenes ili parazitom Toxplasma gondii. Druga tehnička rešenja razmatraju primenu IDO inhibitora koji su ovde opisani za lečenje parazitske infekcije koje uključuju, ali bez ograničenja na njih, Leishmania donovani, Leishmania tropica, Leishmania major, Leishmania aethiopica, Leishmania mexicana, Plasmodium falciparum, Plasmodium vivax, Plasmodium ovale, ili Plasmodium malariae. Često se antiparazitska terapija administrira profilaktički (npr., pre nego što subjekat putuje u područja sa velikom učestalošti parazitske infekcije).
Farmaceutske kompozicije
[0126] IDO inhibitori predmetnog prolanaska mogu biti u obliku kompozicija pogodnih za primenu kod subjekta. Uopšteno, takve kompozicije su "farmaceutske kompozicije" koje sadrže IDO inhibitor(e) i jedan ili više farmaceutski prihvatljivih ili fiziološki prihvatljivih razblaživača, nosača ili ekscipijenasa. U određenim tehničkim rešenjima, IDO inhibitori su prisutni u terapijski prihvatljivoj količini. Farmaceutske kompozicije se mogu primenjivati u postupcima prema predmetnoj objavi; tako, na primer, farmaceutske kompozicije mogu se primenjivati ex vivo ili in vivo na subjektu u cilju vežbanja terapijskih i profilaktičkih postupaka i primena koje su ovde opisane.
[0127] Farmaceutske kompozicije predmetnog pronalaska mogu se formulisati da budu kompatibilne sa predviđenim postupkom ili načinom administracije; ovde su izloženi primeri puteva administracije. Osim toga, farmaceutske kompozicije se mogu primenjivati u kombinaciji sa drugim terapijskim aktivnim sredstvima ili jedinjenjima kao što je ovde opisano u cilju lečenja ili sprečavanja bolesti, poremećaja i stanja koja su predviđena ovim pronalaskom.
[0128] Farmaceutske kompozicije koje sadrže aktivni sastojak (npr., inhibitor IDO funkcije) mogu biti u obliku pogodnom za oralnu primenu, na primer, u obliku tableta, kapsula, pastila, lozengi, vodenih ili uljanih suspenzija, disperzibilnih praškova ili granula, emulzija, tvrdih ili mekih kapsule, ili sirupa, rastvora, mikroperlice ili eliksira. Farmaceutske kompozicije namenjene za oralnu primenu mogu se pripremiti u skladu sa bilo kojim postupkom poznatim u stanju tehnike za proizvodnju farmaceutskih kompozicija, i takve kompozicije mogu da sadrže jedno ili više sredstava kao što su, na primer, zaslađivači, sredstva za ukus, sredstva za bojenje i konzervansi kako bi se obezbedili farmaceutski elegantni i ukusni preparati. Tablete, kapsule i slično sadrže aktivni sastojak u smeši sa netoksičnim farmaceutski prihvatljivim ekscipijensima koji su pogodni za proizvodnju tableta. Ovi ekscipijensi mogu biti, na primer, razblaživači, kao što su kalcijum karbonat, natrijum karbonat, laktoza, kalcijum fosfat ili natrijum fosfat; sredstva za granulisanje i raspadanje, na primer, kukuruzni skrob ili alginska kiselina; vezivna sredstva, na primer skrob, želatin ili akacija i lubrikanti, na primer, magnezijum stearat, stearinska kiselina ili talk.
[0129] Tablete, kapsule i slično pogodne za oralnu administraciju mogu biti neobložene ili obložene poznatim tehnikama da bi se odložilo raspadanje i apsorpcija u gastrointestinalnom traktu i na taj način obezbedilo održivo delovanje. Na primer, može se koristiti materijal sa vremenskim odlaganjem kao što je gliceril monostearat ili gliceril distearat. Oni takođe mogu biti obloženi tehnikama poznatim u stanju tehnike da bi se stvorile osmotske terapijske tablete za kontrolisano oslobađanje. Dodatna sredstva uključuju biodegradibilne ili biokompatibilne čestice ili polimernu supstancu kao što su poliestri, poliaminske kiseline, hidrogel, polivinil pirolidon, polianhidridi, poliglikolna kiselina, etilen-vinilacetat, metilceluloza, karboksimetilceluloza, protamin sulfat ili laktid/likolid kopolimeri, polilaktid/glikolid kopolimeri, ili kopolimeri etilenvinilacetata kako bi se kontrolisala isporuka administrirane kompozicije. Na primer, oralno sredstvo se može uhvatiti u mikrokapsule koje su pripremljene tehnikama koacervacije ili međufaznom polimerizacijom, primenom hidroksimetilceluloze ili želatinskih mikrokapsula ili poli (metilmetakrolata) mikrokapsula, ili u koloidnog sistema za isporuku lekova. Koloidni disperzioni sistemi uključuju komplekse makromolekula, nanokapsule, mikrosfere, mikroperlice i sisteme na bazi lipida, uključujući emulzije ulja u vodi, micele, mešane micele i lipozome. Postupci za pripremu gore pomenutih formulacija biće očigledni stručnjacima u ovoj oblasti.
[0130] Formulacije za oralnu primenu mogu se takođe predstaviti u obliku tvrdih želatinskih kapsula u kojima je aktivni sastojak pomešan sa inertnim čvrstim razblaživačem, na primer kalcijum karbonatom, kalcijum fosfatom, kaolinom ili mikrokristalnom celulozom ili kao meke želatinske kapsule u kojima je aktivni sastojak pomešan sa vodom ili uljanim medijumom, na primer, ulje kikirikija, tečni parafin, ili maslinovo ulje.
[0131] Vodene suspenzije sadrže aktivne materijale u smeši sa ekscipijensima pogodnim za njihovu proizvodnju. Takvi ekscipijensi mogu biti sredstva za suspendovanje, na primer, natrijum karboksimetilceluloza, metilceluloza, hidroksipropilmetilceluloza, natrijum alginat, polivinilpirolidon, tragakant gume i akacija gume; sredstva za dispergovanje ili vlaženje, na primer, prirodni fosfati (npr., lecitin), ili proizvodi kondenzacije alkilen oksida sa masnim kiselinama (npr., polioksietilen stearat), ili proizvodi kondenzacije etilen oksida sa alifatičnim alkoholima sa dugim lancima (npr., za heptadekaetileneoksiacetanol), ili proizvodi kondenzacije etilen oksida sa delimičnim estrima dobijenim iz masnih kiselina i heksitola (npr., polioksietilen sorbitol monooleat), ili proizvodi kondenzacije etilen oksida sa delimičnim estrima dobijenim iz masnih kiselina i heksitol anhidrida (npr., polietilen sorbitan monooleat). Vodene suspenzije mogu takođe da sadrže jedan ili više konzervanasa.
[0132] Uljane suspenzije mogu se formulisati suspendovanjem aktivnog sastojka u biljnom ulju, na primer, ulju kikirikija, maslinovom ulju, sezamovom ulju ili kokosovom ulju, ili u mineralnom ulju kao što je tečni parafin. Uljane suspenzije mogu da sadrže sredstvo za zgušnjavanje, na primer, pčelinji vosak, tvrdi parafin ili cetil alkohol. Sredstva za zaslađivanje kao što su gore navedena i sredstva za aromu mogu se dodati da bi se dobio ukusan oralni preparat.
[0133] Disperzibilni praškovi i granule pogodni za pripremu vodene suspenzije dodatkom vode daju aktivni sastojak u smeši sa sredstvom za dispergovanje ili vlaženje, sredstvom za suspendovanje i jednim ili više konzervanasa. Ovde su dati primeri pogodnih sredstava za dispergovanje ili vlaženje i suspendovanje.
[0134] Farmaceutske kompozicije predmetnog pronalaska mogu takođe biti u obliku emulzija ulje u vodi. Uljana faza može biti biljno ulje, na primer, maslinovo ulje ili ulje kikirikija, ili mineralno ulje, na primer, tečni parafin, ili njihove smeše. Pogodna sredstva za emulgovanje mogu biti prirodne gume, na primer, guma akacija ili tragakant gume; prirodni fosfatidi, na primer, soja, lecitin, i estri ili delimični estri izvedeni iz masnih kiselina; heksitol anhidridi, na primer, sorbitan monooleat; i proizvodi kondenzacije delimičnih estara sa etilen oksidom, na primer, polioksietilen sorbitan monooleat.
[0135] Formulacije mogu takođe da sadrže nosače koji štite kompoziciju od brze razgradnje ili eliminacije iz tela, kao što je formulacija sa kontrolisanim otpuštanjem, uključujući implantate, lipozome, hidrogelove, prolekove i mikrokapsulirane sisteme za isporuku. Na primer, može se koristiti materijal za vremensko odlaganje kao što je gliceril monostearat ili gliceril stearat sam ili u kombinaciji sa voskom.
[0136] Farmaceutske kompozicije tipično sadrže terapijski efikasnu količinu IDO inhibitora koji je razmatran u predmetnom pronalasku i jedno ili više farmaceutski i fiziološki prihvatljivih sredstava za formulaciju. Pogodni farmaceutski prihvatljivi ili fiziološki prihvatljivi razblaživači, nosači ili ekscipijensi uključuju, ali nisu ograničeni na, antioksidanse (npr., askorbinska kiselina i matrijum bisulfat), konzervanse (npr., benzil alkohol, metil parabeni, etil ili n-propil, phidroksibenzoat), emulgatore, sredstva za suspendovanje, sredstva za dispergovanje, rastvarače, punioce, sredstva za povećanje zapremine, deterdžente, pufere, nosače, rastvarače, i/ili ađuvanse. Na primer, pogodan nosač može biti fiziološki rastvor ili fiziološki rastvor puferisan citratom, eventualno dopunjen drugim materijalima uobičajenim u farmaceutskim kompozicijama za parenteralnu administraciju. Neutralno puferisani fiziološki rastvor ili fiziološki rastvor pomešan sa serumskim albuminom su primeri nosača. Stručnjaci u ovoj oblasti lako će prepoznati razne pufere koji se mogu koristiti u ovde razmatranim farmaceutskim kompozicijama i doznim oblicima. Tipični puferi uključuju, ali nisu ograničeni na, farmaceutski prihvatljive slabe kiseline, slabe baze ili njihove smeše. Kao primer, komponente pufera mogu biti materijali rastvorljivi u vodi kao što su fosforna kiselina, vinske kiseline, mlečna kiselina, sukcinska kiselina, limunska kiselina, sirćetna kiselina, askorbinska kiselina, asparaginska kiselina, glutaminska kiselina i njihove soli. Prihvatljiva puferska sredstva uključuju, na primer, Tris pufer, N-(2-hidroksietil)piperazin-N'-(2-etansulfonska kiselina) (HEPES), 2-(N-morfolino)etansulfonska kiselina (MES), natrijumova so 2-(N-morfolino)etansulfonske kiseline (MES), 3-(N-morfolino)propansulfonska kiselina (MOPS), i N-tris[hidroksimetil]metil-3-aminopropansulfonska kiselina (TAPS).
[0137] Nakon formulisanja farmaceutska kompozicija može se čuvati u sterilnim bočicama kao rastvor, suspenzija, gel, emulzija, čvrsti ili dehidrirani ili liofilizovani prašak. Takve formulacije se mogu čuvati bilo u obliku spremnom za primenu, liofilizovanom obliku koji zahteva rekonstituciju pre primene, tečnom obliku koji zahteva razblaživanje pre primene ili u drugom prihvatljivom obliku. U nekim tehničkim rešenjima, farmaceutska kompozicija je obezbeđena u kontejneru za jednokratnu primenu (npr., u bočici za jednokratnu primenu, ampuli, špricu, ili autoinjektoru (slično, npr., EPIPEN®)), pri čemu je višenamenski kontejner (npr., višenamenska bočica) obezbeđen u drugim tehničkim rešenjima. Bilo koji uređaj za isporuku leka može se koristiti za isporuku i IDO inhibitora, uključujući implantate (npr., implantabilne pumpe) i kateter sisteme, pumpe i uređaje za sporo ubrizgavanje, što je sve dobro poznato stručnjaku iz date oblasti. Depo injekcije, koje se uopšteno administriraju subkutano ili intramuskularno, takođe se mogu koristiti za oslobađanje polipeptida koji su ovde opisani, tokom određenog vremenskog perioda. Depo injekcije su obično ili na čvrstoj ili na uljanoj osnovi i uopšteno sadrže najmanje jednu od komponenata formulacije koje su ovde opisane. Prosečan stručnjak iz date oblasti je upoznat sa mogućim formulacijama i primenama depo injekcija.
[0138] Farmaceutske kompozicije mogu biti u obliku sterilne vodene ili uljane suspenzije za injekcije. Ova suspenzija se može formulisati u skladu sa poznatim stanjem tehnike, koristeći ona pogodna sredstva za dispergovanje ili vlaženje, i ovde navedena sredstva za suspendovanje. Sterilni injekcioni preparat može takođe biti sterilni injekcioni rastvor ili suspenzija u netoksičnom parenteralno prihvatljivom razblaživaču ili rastvaraču, na primer, kao rastvor u 1,3-butan diolu. Prihvatljivi razređivači, rastvarači i disperzioni mediji koji se mogu koristiti uključuju vodu, Ringerov rastvor, izotonični rastvor natrijum hlorida, CREMOPHOR® EL (BASF, Parsippany, NJ) ili fiziološki rastvor puferovan fosfatom (PBS), etanol, poliol (npr., glicerol, propilen glikol, i tečni polietilen glikol), i njihove pogodne smeše. Pored toga, sterilna, fiksna ulja se konvencionalno koriste kao rastvarač ili medijum za suspendovanje. U tu svrhu se može koristiti bilo koje blago fiksno ulje, uključujući sintetičke mono- ili digliceride. Pored toga, masne kiseline, poput oleinske kiseline, pronalaze primenu u pripremi injekcija. Produžena apsorpcija određenih formulacija za injekcije može se postići uključivanjem sredstva koji odlaže apsorpciju (npr., aluminijum monostearat ili želatin).
[0139] Predmetni pronalazak razmatra primenu IDO inhibitora u obliku supozitorija za rektalnu primenu. Supozitorije se mogu pripremiti mešanjem leka sa odgovarajućim nenadražujućim ekscipijensom, koji je čvrst na uobičajenim temperaturama, ali tečan na rektalnoj temperaturi i zbog toga će se rastopiti u rektumu da se oslobodi lek. Takvi materijali uključuju, ali nisu ograničeni na, kakao buter i polietilen glikole.
[0140] IDO inhibitori razmatrani predmetnim pronalaskom mogu biti u obliku bilo koje druge pogodne farmaceutske kompozicije (npr., sprejevi za nazalnu ili inhalacionu primenu) koja je trenutno poznata ili koja će biti razvijena u budućnosti.
[0141] Koncentracija polipeptida ili njegovog fragmenta u formulaciji može da varira u velikoj meri (npr., od manje od oko 0.1%, obično na ili najmanje oko 2% do čak 20% do 50% ili više po masi) i obično će biti odabrani prvenstveno na osnovu zapremine tečnosti, viskoznosti i faktora zasnovanih na subjektu u skladu sa, na primer, određenim odabranim načinom administracije.
Putevi administracije
[0142] Predmetni pronalazak razmatra primenu IDO inhibitora i njihovih kompozicija, na bilo koji odgovarajući način. Pogodni putevi administracije uključuju oralnu, parenteralnu (npr., intramuskularnu, intravensku, subkutanu (npr., injekciju ili implantant), intraperitonealnu, intracisternalnu, intraartikularnu, intraperitonealnu, intracerebralnu (intraparenhimalnu) i intracerebroventrikularnu), nazalnu, vaginalnu, sublingvalnu, intraokularnu, rektalnu, topikalnu npr., transdermalnu), sublingvalnu i inhalaciju. Depo injekcije, koje se uopšteno administriraju subkutano ili intramuskularno, takođe se mogu koristiti za oslobađanje inhibitora IDO koji su ovde opisani, tokom određenog vremenskog perioda.
[0143] Posebna tehnička rešenja predmetnog pronalaska razmatraju oralnu administraciju.
Kombinovana terapija
[0144] Predmetna objava razmatra primenu IDO inhibitora u kombinaciji sa jednim ili više aktivnih terapijskih sredstava (npr., hemoterapijska sredstva) ili drugih profilaktičkih ili terapijskih modaliteta (npr., zračenje). U takvoj kombinovanoj terapiji, različita aktivna sredstva često imaju različite, komplementarne mehanizme delovanja. Takva kombinovana terapija može biti posebno povoljna jer je omogućeno smanjenje doze jednog ili više sredstava, čime se smanjuju ili eliminišu neželjena dejstva povezana sa jednim ili više sredstava. Dalje, takva kombinovana terapija može imati sinergijski terapijski ili profilaktički efekat na osnovnu bolest, poremećaj, ili stanje.
[0145] Kako se ovde koristi, "kombinacija" podrazumeva terapije koje se mogu administrirati odvojeno, na primer, formulisane odvojeno za odvojenu administraciju (npr., kao što se može obezbediti u kitu), i terapije koje se mogu administrirati zajedno u jedinoj formulaciji (tj., "koformulacija").
[0146] U određenim slučajevima, IDO inhibitori se administriraju ili primenjuju sekvencijalno, npr., gde se jedno sredstvo administrira pre jednog ili više drugih sredstava. U drugim slučajevima, IDO inhibitori se administriraju istovremeno, npr., gde se dva ili više sredstava administriraju istovremeno ili približno istovremeno; dva ili više sredstava mogu biti prisutni u dve ili više odvojenih formulacija ili kombinovani u jednu formulaciju (tj., ko-formulaciju). Bez obzira da li se dva ili više sredstava administriraju sekvencijalno ili istovremeno, smatra se da se administiraju u kombinaciji u svrhe predmetnog pronalaska.
[0147] IDO inhibitori predmetnog pronalaska mogu se primenjivati u kombinaciji sa najmanje jednim drugim (aktivnim) sredstvom na bilo koji način koji je prikladan u datim okolnostima. U jednom slučaju, lečenje sa najmanje jednim aktivnim sredstvom i najmanje jednim IDO inhibitorom predmetnog pronalaska se održava tokom određenog vremenskog perioda. U drugom slučaju, lečenje sa najmanje jednim aktivnim sredstvom se smanjuje ili prekida (npr., kada je subjekat stabilan), dok se lečenje sa IDO inhibitorom predmetnog pronalaska održava u režimu konstantnog doziranja. U daljem slučaju, lečenje sa najmanje jednim aktivnim sredstvom se smanjuje ili prekida (npr., kada je subjekat stabilan), dok se lečenje sa IDO inhibitorom predmetnog pronalaska smanjuje (npr., manja doza, ređe doziranje ili kraći režim lečenja). U još jednom slučaju, lečenje sa najmanje jednim aktivnim sredstvom se smanjuje ili prekida (npr., kada je subjekat stabilan), i lečenje sa IDO inhibitorom predmetnog pronalaska se povećava (npr., veća doza, češće doziranje ili duži režim lečenja). U još jednom slučaju, lečenje sa najmanje jednim aktivnim sredstvom se održava i lečenje sa IDO inhibitorom predmetnog pronalaska se smanjuje i prekida (npr., manja doza, ređe doziranje ili kraći režim lečenja). U još jednom slučaju, lečenje sa najmanje jednim aktivnim sredstvom i lečenje sa IDO inhibitorom predmetnog pronalaska se smanjuju i prekidaju (npr., manja doza, ređe doziranje ili kraći režim lečenja).
[0148] Poremećaji povezani sa onkologijom. Predmetno otkriće obezbeđuje postupke za lečenje i/ili prevenciju proliferativnog stanja, raka, tumora ili prekancerozne bolesti, poremećaja ili stanja sa IDO inhibitorom i najmanje jednim dodatnim terapijskim sredstvom, kao što su zračenje, imunomodulatorno sredstvo ili hemoterapijsko sredstvo, ili dijagnostičko sredstvo. Pogodna imunomodulatorna sredstva koja se mogu primenjivati u predmetnom pronalasku uključuju CD40L, B7, i B7RP1; aktiviranje monoklonskih antitela (mAbs) na stimulativne receptore, kao što su, ant-CD40, anti-CD38, anti-ICOS, i 4-IBB ligand; opterećenje antigena dendritičnih ćelija (in vitro ili in vivo); vakcine protiv kancera kao što su vakcine protiv kancera dendritičnih ćelija; citokini/hemokini, kao što su, IL1, IL2, IL12, IL18, ELC/CCL19, SLC/CCL21, MCP-1, IL-4, IL18, TNF, IL-15, MDC, IFNa/b, M-CSF, IL-3, GM-CSF, IL-13, i anti-IL-10; bakterijski lipopolisaharidi (LPS); i imunostimulativni oligonukleotidi.
[0149] Primeri hemoterapijskih sredstava uključuju, ali nisu ogrničeni na, alkilirajuća sredstva kao što su tiotepa i ciklosfosfamid; alkil sulfonate kao šro su busulfan, improsulfan i piposulfan; aziridine kao što su benzodopa, karboken, meturedopa i uredopa; etilenimine i metilamelamine, koji uključuju altretamin, trietilenmelamin, trietilenfosforamid, trietilentiofosfaoramid i trimetilolomelamim; azotne iperite kao što su hiorambucil, hlornafazin, holofosfamid, estramustin, ifosfamid, mehloretamin, mehloretamin oksid hidrohlorid, melfalan, novembikin, fenesterin, prednimustin, trofosfamid, uracil iperit; nitrozouree kao što su karmustin, hlorozotocin, fotemustin, lomustin, nimustin, ranimustin; antiobiotike kao što su aklacinomizini, aktinomicin, autramicin, azaserin, bleomicini, kaktinomicin, kaliheamicin, karabicin, kaminomicin, karzinofilin, hromomicini, daktinomicin, daunorubicin, detorubicin, 6-diazo-5-okso-L-norleucin, doksorubicin, epirubicin, esorubicin, idarubicin, marcelomicin, mitomicini, mikogenolna kiselina, nogalamicin, olivomicini, peplomicin, potfiromicin, puromicin, kvelamicin, rodorubicin, streptonigrin, streptozocin, tubercidin, ubenimeks, zinostatin, zorubicin; antimetaboliti kao što su metotreksat i 5-fluorouracil (5-FU); analoge folne kiseline kao što su denopterin, metotreksat, pteropterin, trimetreksat; purinske analoge kao što su fludarabin, 6-merkaptopurin, tiamiprin, tioguanin; pirimidinski analozi kao što su ancitabin, azacitidin, 6-azauridin, karmofur, citarabin, dideoksiuridin, doksifluridin, enocitabin, floksuridin, 5-FU; androgene kao što su kalusteron, dromostanolon propionat, epitiostanol, mepitiostan, testolakton; anti-adrenalna jedinjenja kao što su minoglutetimid, mitotan, trilostan; nadoknađivač folne kiseline kao što je frolinska kiselina; aceglaton; aldofosfamid glikozid; aminolevulinsku kiselinu; amsakrin; bestrabucil; bisantren; edatraksat; defofamin; demekolcin; diazikvon; elformitin; eliptinijum acetat; etoglucid; galijum nitrat; hidroksiureu; lentinan; lonidamin; mitoguazon; mitoksantron; mopidamol; nitracrin; pentostatin; fenamet; pirarubicin; podofilinsku kiselinu; 2-etilhidrazid; prokarbazin; razoksan; sizofiran; spirogermanijum; tenuazonsku kiselinu; triazikvon; 2,2',2"-trihlorotrietilamin; uretan; vindezin; dakarbazin; manomustin; mitobronitol; mitolaktol; pipobroman; gacitozin; arabinozid (Ara-C); ciklofosfamid; tiotepu; taksoide, npr., paklitaksel i doksetaksel; hlorambucil; gemcitabin; 6-tioguanin; merkaptopurin; metotreksat; platinu i platinaste koordinacione komplekse kao što su cisplatin i karboplatin; vinblastin; etopozid (VP-16); ifosfamid; mitomicin C; mitoksantron; vinkristin; vinorelbin; navelbin; novantron; tenipozid; daunomicin; aminopterin; kselodu; ibandronat; CPT11; inhibitore topoizomeraze; difluorometilornitin (DMFO); retinoinsku kiselinu; esperamicine; kapecitabin; i farmaceutski prihvatljive soli, kiseline ili derivate bilo kog od gore navedenih.
[0150] Hemoterapijska sredstva takođe uključuju antihormonska sredstva koja deluju da regulišu ili inhibiraju hormonalno delovanje na tumore kao što su antiestrogeni, koji uključuju na primer tamoksifen, raloksifen, inhibitore aromataze 4(5)-imidazoli, 4-hidroksitamoksifen, trioksifen, keoksifen, onapriston, i toremifen; i antiandrogene kao što su flutamid, nilutamid, bikalutamid, leuprolid, i goserelin; i farmaceutski prihvatljive soli, kiseline ili derivate bilo kog od gore navedenih. U određenim tehničkim rešenjima, kombinovana terapija uključuje administraciju hormona ili srodnog hormonskog sredstva.
[0151] Hemoterapijska sredstva takođe uključuju inhibitore transdukcije signala (STI). Izraz "inhibitor transdukcije signala " odnosi se na sredstvo koje selektivno inhibira jedan ili više koraka u signalnom putu. Inhibitori transdukcije signala (STI) predmetnog pronalaska uključuju: (i) inhibitore bcr/abl kinaze (npr., GLEEVEC); (ii) inhibitore receptora za epidermalni faktor rasta (EGF), koji uključuju inhibitore kinaze i antitela; (iii) inhibitore her-2/neu receptora (npr., HERCEPTIN); (iv) inhibitore Akt porodice kinaza ili Akt puta (npr., rapamicin); (v) inhibitore kinaze ćelijskog ciklusa (npr., flavopiridol); i (vi) inhibitore fosfatidil inozitol kinaze.
[0152] Dodatni modaliteti lečenja koji se mogu koristiti u kombinaciji sa IDO inhibitorom uključuju citokin ili antagonist citokina, kao što su IL-12, IFN, ili receptor za antiepidermalni faktor rasta, radioterapiju, monoklonalno antitelo protiv drugog antigena tumora, kompleks monoklonalnog antitela i toksina, ađuvans T-ćelija, transplantaciju koštane srži ili ćelije koje predstavljaju antigen (npr., terapija dendritičnim ćelijama). Vakcine (npr., kao rastvorljivi protein ili kao nukleinska kiselina koja kodira protein) su ovde takođe obezbeđene.
[0153] Kardiovaskularne bolesti. Predmetno otkriće obezbeđuje jedinjenja predmetnog pronalaska za primenu u lečenju i/ili prevenciji određenih kardiovaskularnih i/ili metaboličkih bolesti, poremećaja i stanja, kao i poremećaja povezanih s tim, sa IDO inhibitorom i najmanje jednim dodatnim terapijskim ili dijagnostičkim sredstvom.
[0154] Primeri terapijskih sredstava korisnih u kombinovanoj terapiji za lečenje hiperholesterolemije (i ateroskleroze takođe) uključuju statine (npr., CRESTOR, LESCOL, LIPITOR, MEVACOR, PRAVACOL, i ZOCOR), koji inhibiraju enzimsku sintezu holesterola; smole žučne kiseline (npr., COLESTID, LO-CHOLEST, PREVALITE, QUESTRAN, i WELCHOL), koji odvajaju holesterol i sprečavaju njegovu apsorpciju; ezetimib (ZETIA), koji blokira apsorpciju holesterola; vlaknasta kiselina npr., (TRICOR), koja smanjuju trigliceride i može umereno povećati HDL; niacin (npr., NIACOR), koji umereno smanjuju LDL holesterol i trigliceride; i/ili kombinacija gore pomenutih (npr., VYTORIN (ezetimib sa simvastatinom). Alternativni postupci lečenja holesterola koji mogu biti kandidati za primenu u kombinaciji sa IDO inhibitorima koji su ovde opisani uključuju razne suplemente i lekovito bilje (npr., beli luk, polikozanol, i gugul). Predmetni pronalazak obuhvata farmaceutski prihvatljive soli, kiseline ili derivate bilo kog od gore navedenih.
[0155] Imunološki i inflamatorni poremećaji. Predmetna objava obezbeđuje postupke za lečenje i/ili prevenciju imunoloških i/ili inflamatornih bolesti, poremećaja i stanja, kao i poremećaja povezanih sa njima, sa IDO inhibitorom i najmanje jednim dodatnim terapijskim ili dijagnostičkim sredstvom.
[0156] Primeri terapijskih sredstava korisnih u kombinovanoj terapiji uključuju, ali nisu ograničeni na, sledeće: nesteroidni antiinflamatorni lek (NSAID) kao što su aspirin, ibuprofen, i drugi derivati propionske kiseline (alminoprofen, benoksaprofen, bukloksična kiselina, karprofen, fenbufen, fenoprofen, fluprofen, flurbiprofen, indoprofen, ketoprofen, miroprofen, naproksen, oksaprozin, pirprofen, pranoprofen, suprofen, tiaprofenska kiselina, i tioksaprofen), derivati sirćetne kiseline (indometacin, acemetacin, alklofenak, klidanak, diklofenak, fenklofenak, fenklozična kiselina, fentiazak, fuirofenak, ibufenak, izoksepak, okspinak, sulindak, tiopinak, tolmetin, zidometacin, i zomepirak), derivati fenaminske kiseline (flufenaminska kiselina, meklofenaminska kiselina, mefenaminska kiselina, nifluminska kiselina i tolfenaminska kiselina), derivati bifenilkarboksilne kiseline (diflunisal i flufenisal), oksikami (izoksikam, piroksikam, sudoksikam i tenoksikan), salicilati (acetilsalicilna kiselina, sulfasalazin) i pirazoloni (apazon, bezpiperilon, feprazon, mofebutazon, oksifenbutazon, fenilbutazon). Ostale kombinacije uključuju inhibitore ciklooksigenaze-2 (COX-2).
[0157] Ostala aktivna sredstva za kombinaciju uključuju steroide kao što su prednizolon, prednizon, metilprednizolon, betametazon, deksametazon, ili hidrokortizon. Takva kombinacija može biti posebno korisna, jer se jedan ili više neželjenih dejstava steroida može smanjiti ili čak eliminisati sužavanjem potrebne doze steroida.
[0158] Dodatni primeri aktivnih sredstava koji se mogu primenjivati u kombinaciji za lečenje, na primer, reumatoidnog artritisa, uključuju citokin supresivni antiinflamatorni lek(ove) (CSAID); antitela, ili antagoniste drugih humanih citokina ili faktora rasta, na primer, TNF, LT, IL-1β, IL-2, IL-6, IL-7, IL-8, IL-15, IL-16, IL-18, EMAP-II, GM-CSF, FGF, ili PDGF.
[0159] Određene kombinacije aktivnih sredstava mogu ometati različite tačke autoimune i kasnijih inflamatornih kaskada, i uključuju TNF antagoniste kao što su himerna, humanizovana ili humana TNF antitela, REMICADE, fragmetni anti-TNF antitela (npr., CDP870), i rastvorljiv p55 ili p75 TNF receptori, njihovi derivati, p75TNFRIgG (ENBREL.) ili p55TNFR1gG (LENERCEPT), rastvorljiv IL-13 receptor (sIL-13), i takođe inhibitori TNFα kovertujućeg enzima (TACE); slično, IL-1 inhibitori (npr., inhibitori enzima koji konvertuju interleukin-1) mogu biti efikasni. Ostale kombinacije uključuju interleukin 11, anti-P7s i p- selektin glikoproteinski ligand (PSGL). Ostali primeri sredstava korisnih u kombinaciji sa IDO inhibitorima koji su ovde opisani uključuju interferon-β1a (AVONEX); interferon-β1b (BETASERON); kopakson; hiperbarični kiseonik; intravenski imunoglobulin; klabribin; i antitela na druge humane citokine ili faktore rasta (npr., antitela na CD40 ligand i CD80).
[0160] Inhibitori imunološke kontrolne tačke. Predmetno otkriće razmatra primenu IDO inhibitora funkcije koji su ovde opisani u kombinaciji sa dodatnim inhibitorima imunološke kontrolne tačke.
[0161] Ogroman broj genetskih i epigenetskih promena koje su karakteristične za sve karcinome obezbeđuju raznovrstan set antigena koje imuni sistem može koristiti za razlikovanje tumorskih ćelija od svojih normalnih pandana. U slučaju T ćelija, krajnja amplituda (npr., nivoi proizvodnje ili proliferacije citokina) i kvalitet (npr., vrsta generisanog imunološkog odgovora, kao što je obrazac proizvodnje citokina) odgovora koji se započinje prepoznavanjem antigena pomoću receptora T-ćelija (TCR), reguliše se ravnotežom između kostimulativnih i inhibitornih signala (imunolške kontrolne tačke). U normalnim fiziološkim uslovima, imunološke kontrolne tačke su presudne za prevenciju autoimunosti (tj., održavanje samotolerancije) i takođe i za zaštitu tkiva od oštećenja kada imunološki sistem reaguje na patogenu infekciju. Ekspresija proteina imunoloških kontrolnih tačaka može biti poremećena tumorom kao važnim mehanizamom imunološke rezistencije.
[0162] T ćelije su glavni fokus napora za terapijsku manipulaciju endogenim antitumorskim imunitetom zbog i) njihove sposobnosti selektivnog prepoznavanja peptida koji su izvedeni iz proteina u svim ćelijskim delovima; ii) njihove sposobnost da direktno prepoznaju i ubiju ćelije koje eksprimuju antigen (pomoću CD8+ efektorskih T ćelija; takođe poznate kao citotoksični T limfociti (CTL)); i iii) njihove sposobnosti da orkestriraju različite imunološke odgovore pomoću CD4+ pomoćnih T ćelija, koje integrišu adaptivne i urođene efektorske mehanizme. U kliničkom okruženju, blokada imunoloških kontrolnih tačaka - koja kao rezultat daje pojačan odgovor T-ćelija koje su specifične za antigen - pokazala se kao obećavajući pristup u terapiji humanih karcinoma.
[0163] Imunitet koji je posredovan T ćelijama uključuje više uzastopnih koraka, od kojih je svaki regulisan uravnoteženjem stimulativnih i inhibitornih signala kako bi se optimizovao odgovor. Iako gotovo svi inhibitorni signali u imunološkom odgovoru na kraju moduliraju unutarćelijske signalne puteve, mnogi se pokreću preko membranskih receptora, čiji su ligandi ili vezani za membranu ili rastvorljivi (citokini). Iako kostimulativni i inhibitorni receptori i ligandi koji regulišu aktivaciju T-ćelija često nisu prekomerno izraženi u karcinomima u odnosu na normalna tkiva, inhibitorni ligandi i receptori koji regulišu efektorske funkcije T-ćelija u tkivima su obično preeksprimovani na tumorskim ćelijama ili na ne-transformisanim ćelijama povezanim sa mikrookruženjem tumora. Funkcije rastvorljivih i membranski vezanih receptor - ligand imunoloških kontrolnih tačaka mogu se modulisati primenom agonističkih antitela (za kostimulacione puteve) ili antagonističkih antitela (za inhibitorne puteve). Prema tome, za razliku od većine antitela koja su trenutno odobrena za terapiju kancera, antitela koja blokiraju imunološke kontrolne tačke ne ciljaju direktno tumorske ćelije, već ciljaju limfocitne receptore ili njihove ligande kako bi pojačale endogenu antitumorsku aktivnost. [videti Pardoll, (April 2012) Nature Rev. Cancer 12:252-64].
[0164] Primeri imunoloških kontrolnih tačaka (ligandi i receptori), od kojih su neki selektivno regulisani u različitim vrstama tumorskih ćelija, koji su kandidati za blokadu uključuju PD1 (protein programirane ćelijske smrti 1); PDL1 (PD1 ligand); BTLA (atenuator B i T limfocita); CTLA4 (antigen 4 povezan sa citotoksičnim T-limfocitima); TIM3 (protein T-ćelijske membrane 3); LAG3 (limfocitni aktivacioni gen 3); A2aR (adenozinski A2a receptor A2aR); i inhibitorni receptori ubica, koji se mogu podeliti u dve klase na osnovu njihovih strukturnih karakteristika: i) imunolobulinu-slični receptori ćelija ubica (KIR), i ii) receptori lektina C-tipa (članovi familije transmembranskih receptora tipa II). U literaturi su opisane druge manje dobro definisane imunološke kontrolne tačke, uključujući receptore (npr., 2B4 (poznate i kao CD244) receptor) i ligande (npr., određeni inhibitorni ligandi familije B7 kao što je B7-H3 (takođe poznati kao CD276) i B7-H4 (takođe poznati kao B7-S1, B7x i VCTN1)). [videti Pardoll, (April 2012) Nature Rev. Cancer 12:252-64].
[0165] Predmetno otkriće razmatra primenu inhibitora IDO funkcije koji su ovde opisani u kombinaciji sa inhibitorima gore pomenutih receptora i liganada imunoloških-kontrolnih tačaka, kao i još opisanih receptora i liganada imunoloških-kontrolnih tačaka. Trenutno su dostupni određeni modulatori imunoloških kontrolnih tačaka, pri čemu su drugi u kasnoj fazi razvoja. Ilustracije radi, kada je odobreno za lečenje melanoma 2011. godine, potpuno humanizovano CTLA4 monoklonalno antitelo ipilimumab (YERVOY; Bristol-Myers Squibb) postalo je prvi inhibitor imunološke kontrolne tačke koji je dobio registraciono odobrenje u SAD-u. Fuzijski proteini koji sadrže CTLA4 i antitelo (CTLA4-Ig; abatcept (ORENCIA; Bristol-Myers Squibb)) primenjivani su za lečenje reumatoidnog artritisa, i drugi fuzijski proteini pokazali su se efikasnim kod pacijenata sa transplantacijom bubrega koji su osetljivi na Epstein Barr-ov virus. PD1 antitela su takođe dostupna za lečenje kancera, uključujući na primer nivolumab (Bristol-Myers Squibb) i pembroluzimab (Merck), i anti-PDL1 antitela su takođe procenjivana (npr., MPDL3280A (Roche)). Nivolumab (Opdivo®) se pokazao obećavajuće kod pacijenata sa melanomom, kancerom pluća i bubrega, kao i sa više drugih malignih bolesti.
[0166] U jednom aspektu predmetnog pronalaska, zahtevani IDO inhibitori se kombinuju sa imunološko-onkološkim sredstvom koje je (i) agonist stimulativnog (uključujući kostimulativni) receptora ili (ii) antagonist inhibitora (uključujući koinhibitorni) signala na T ćelijama, što kao rezultat pojačava odgovor T ćelija koje su specifične za antigen. Neki od stimulativnih i inhibitornih molekula su članovi super familije imunoglobulina (IgSF). Jedna važna familija za membranu vezanih liganada koji se vezuju za kostimulativne ili kohibitorne receptore je familija B7 koja uključuje B7-1, B7-2, B7-H1 (PD-L1), B7-DC (PD-L2), B7-H2 (ICOS-L), B7-H3, B7-H4, B7-H5 (VISTA), i B7-H6. Druga familija za membranu vezanih liganada koji se vezuju za kostimulativne ili kohibitorne receptore je familija TNF molekula koja se vezuje za srodne članove familije TNF receptora, što uključuje CD40 i CD40L, OX-40, OX-40L, CD70, CD27L, CD30, CD30L, 4-1BBL, CD137 (4-1BB), TRAIL/Apo2-L, TRAILR1/DR4, TRAILR2/DR5, TRAILR3, TRAILR4, OPG, RANK, RANKL, TWEAKR/Fn14, TWEAK, BAFFR, EDAR, XEDAR, TACI, APRIL, BCMA, LTβR, LIGHT, DcR3, HVEM, VEGI/TL1A, TRAMP/DR3, EDAR, EDA1, XEDAR, EDA2, TNFR1, limfotoksin α/TNFβ, TNFR2, TNFα, LTβR, limfotoksin α 1β2, FAS, FASL, RELT, DR6, TROY, NGFR.
[0167] U drugom aspektu, imunološko-onkološko sredstvo je citokin koji inhibira aktivaciju T ćelije (npr., IL-6, IL-10, TGF-β, VEGF, i drugi imunosupresivni citokini) ili citokin koji stimuliše aktivaciju T ćelije, za stimulaciju imunološkog odgovora.
[0168] U jednom aspektu, odgovori T ćelija mogu se stimulisati kombinacijom navedenih IDO inhibitora i jednog ili više (i) antagonista proteina koji inhibira aktivaciju T ćelija (npr., inhibitori imunološke kontrolne tačke) kao što je CTLA-4, PD-1, PD-L1, PD-L2, LAG-3, TIM-3, galektin 9, CEACAM-1, BTLA, CD69, galektin-1, TIGIT, CD113, GPR56, VISTA, 2B4, CD48, GARP, PD1H, LAIR1, TIM-1, i TIM-4, i/ili (ii) agonista proteina koji stimuliše aktivaciju T ćelije kao što su B7-1, B7-2, CD28, 4-1BB (CD137), 4-1BBL, ICOS, ICOS-L, OX40, OX40L, GITR, GITRL, CD70, CD27, CD40, DR3 i CD2. Druga sredstva koja se mogu kombinovati sa IDO inhibitorima predmetnog pronalaska za lečenje kancera uključuju antagoniste inhibitornih receptora na NK ćelijama ili agoniste aktivirajućih receptora na NK ćelijama. Na primer, jedinjenja koja su ovde navedena mogu se kombinovati sa antagonistima KIR, kao što je lirilumab.
[0169] Ipak druga sredstva za kombinovane terapije uključuju sredstva koja ihnibiraju ili iscrpljuju makrofage ili monocite, koji uključuju, ali bez ograničenja, antagoniste CSF-1R kao što su antagonisti CSF-1R antitela koji uključuju RG7155 (WO11/70024, WO11/107553, WO11/131407, WO13/87699, WO13/119716, WO13/132044) or FPA-008 (WO11/140249; WO13169264; WO14/036357).
[0170] U jednom aspektu, IDO inhibitori za koje se traži zaštita mogu se primenjivati sa jednim ili više agonističkih sredstava koja povezuju pozitivne kostimulatorne receptore, blokatora koji umanjuju signalizaciju preko inhibitornih receptora, antagonista i jednim ili više sredstava koja sistemski povećavaju učestalost antitumorskih T ćelija, sredstava koja prevazilaze različite imuno supresivne puteve u mikrookruženju tumora (npr. blokiraju interakciju inhibitornog receptora (npr., PD-L1/PD-1 interakcije), iscrpljuju ili inhibiraju Treg (npr., primenjujući anti-CD25 monoklonalna antitela (npr., daklizumab) ili ex vivo iscrpljivanje anti-CD25 perlicama), ili obrću/sprečavaju anergiju ili iscrpljivanje T ćelija) i sredstava koja pokreću urođenu imunološku aktivaciju i/ili inflamaciju na mestima tumora.
[0171] U jednom aspektu, imunološko-onkološko sredstvo je antagonist CTLA-4, kao što je antagonističko CTLA-4 antitelo. Pogodna antitela CTLA-4 uključuju, na primer, YERVOY (ipilimumab) ili tremelimumab.
[0172] U drugom aspektu, imunološko-onkološko sredstvo je PD-1 antagonist, kao što je antagonističko PD-1 antitelo. Pogodna PD-1 antitela uključuju, na primer, OPDIVO (nivolumab), KEYTRUDA (pembrolizumab), ili MEDI-0680 (AMP-514; WO2012/145493). Imunološkoonkološko sredstvo može takođe da uključi pidilizumab (CT-011), mada je njegova specifičnost za vezivanje PD-1 dovedena u pitanje. Drugi pristup cilju PD-1 receptora je rekombinantni protein koji se sastoji od vanćelijskog domena PD-L2 (B7-DC) koji je fuzionisan sa Fc delom IgG1, nazvanim AMP-224
[0173] U drugom aspektu, imunološko-onkološko sredstvo je PD-L1 antagonist, kao što je agonističko PD-L1 antitelo. Pogodna PD-L1 antitela uključuju, na primer, MPDL3280A (RG7446; WO2010/077634), durvalumab (MEDI4736), BMS-936559 (WO2007/005874), i MSB0010718C (WO2013/79174).
[0174] U drugom aspektu, imunološko-onkološko sredstvo je LAG-3 antagonist, kao što je agonističko LAG-3 antitelo. Pogodna LAG3 antitela uključuju, na primer, BMS-986016 (WO10/19570, WO14/08218), ili IMP-731 ili IMP-321 (WO08/132601, WO09/44273).
[0175] U drugom aspektu, imunološko-onkološko sredstvo je CD137 (4-1BB) agonist, kao što je agonističko CD137 antitelo. Pogodna CD137 antitela uključuju, na primer, urelumab i PF-05082566 (WO12/32433).
[0176] U drugom aspektu, imunološko-onkološko sredstvo je GITR agonist, kao što je agonističko GITR antitelo. Pogodna GITR antitela uključuju, na primer, BMS-986153, BMS-986156, TRX-518 (WO06/105021, WO09/009116) i MK-4166 (WO11/028683).
[0177] U drugom aspektu, imunološko-onkološko sredstvo je OX40 agonist, kao što je agonističko OX40 antitelo. Pogodna OX40 antitela uključuju, na primer, MEDI-6383 ili MEDI-6469.
[0178] U drugom aspektu, imunološko-onkološko sredstvo je OX40L antagonist, kao što je antagonističko OX40 antitelo. Pogodni antagonisti OX40L uključuju, na primer, RG-7888 (WO06/029879).
[0179] U drugom aspektu, imunološko-onkološko sredstvo je CD40 agonist, kao što je agonističko CD40 antitelo. U još jednom tehničkom rešenju, imunološko-onkološko sredstvo je CD40 antagonist, kao što je antagonističko CD40 antitelo. Pogodna antitela CD40 uključuju, na primer, lukatumumab ili dacetuzumab.
[0180] U drugom aspektu, imunološko-onkološko sredstvo je CD27 agonist, kao što je agonističko CD27 antitelo. Pogodna CD27 antitela uključuju, na primer, varlilumab.
[0181] U drugom aspektu, imunološko-onkološko sredstvo je MGA271 (do B7H3) (WO11/109400).
[0182] Predmetni pronalazak obuhvata farmaceutski prihvatljive soli, kiseline ili derivate bilo kog od gore navedenih.
[0183] Virusne bolesti. Predmetni pronalazak obezbeđuje postupke za lečenje i/ili prevenciju virusnih bolesti, poremećaja i stanja, kao i poremećaja povezanih s tim, sa IDO inhibitorom i najmanje jednim dodatnim terapijskim ili dijagnostičkim sredstvom (npr., jednim ili više drugih antivirusnih sredstava i/ili jedan ili više sredstava koja nisu povezana sa virusnom terapijom).
[0184] Takva kombinovana terapija uključuje antivirusna sredstva koja ciljaju različite stadijume životnog ciklusa virusa i imaju različite mehanizme delovanja, uključujući, ali ne ograničavajući se na sledeće: inhibitore virusnog razotkrivanja (npr., amantadin i rimantidin); inhibitore reverzne transkriptaze (npr., aciklovir, zidovudin, i lamivudin); sredstva koja ciljaju integrazu; sredstva koja blokiraju vezivanje faktora transkripcije za virusnu DNK; sredstva (npr., antisens molekuli) koji utiču na translaciju (npr., fomivirsen); sredstva koja moduliraju translaciju/funkciju ribozima; inhibitori proteaze; modulatori virusnog sakupljanja (npr., rifampicin); antiretrovirusna sredstva kao što su, na primer, nukleozidni analogni inhibitori reverzne transkriptaze (npr., azidotimidin (AZT), ddl, ddC, 3TC, d4T); nenukleozidni inhibitori reverzne transkriptaze (npr., efavirenz, nevirapin); inhibitori analogne nukleotidne reverzne transkriptaze; i sredstva koja sprečavaju oslobađanje virusnih čestica (npr., zanamivir i oseltamivir). Lečenje i/ili prevencija određenih virusnih infekcija (npr., HIV) često podrazumeva grupu ("koktel") antivirusnih sredstava.
[0185] Ostala antivirusna sredstva koja se razmatraju za primenu u kombinaciji sa IDO inhibitorom uključuju, ali nisu ograničena na, sledeće: abakavir, adefovir, amantadin, amprenavir, ampligen, arbidol, atazanavir, atripla, boceprevirertet, cidofovir, kombivir, darunavir, delavirdin, didanozin, dokozanol, edoksudin, emtricitabin, enfuvirtid, entekavir, famciklovir, fosamprenavir, foskarnet, fosfonet, ganciklovir, ibacitabin, imunovir, idoksuridin, imikvimod, indinavir, inozin, različiti interferoni (npr., peginterferon alfa-2a), lopinavir, lovirid, maravirok, moroksidin, metisazon, nelfinavir, neksavir, penciklovir, peramivir, plekonaril, podofilotoksin, raltegravir, ribavirin, ritonavir, piramidin, sakvinavir, stavudin, telaprevir, tenofovir, tipranavir, trifluridin, trizivir, tromantadin, truvada, valaciklovir, valganciklovir, vikrivirok, vidarabin, viramidin, i zalcitabin.
[0186] Predmetni pronalazak obuhvata farmaceutski prihvatljive soli, kiseline ili derivate bilo kog od gore navedenih.
[0187] Parazitski poremećaji. Predmetni pronalazak razmatra primenu inhibitora IDO funkcije koji su ovde opisani u kombinaciji sa antiparazitskim sredstvom. Takva sredstva uključuju, ali nisu ograničena na, tiabendazol, pirantel pamoat, mebendazol, prazikvantel, niklozamid, bitionol, oksaminkin, metrifonat, ivermektin, albendazol, eflornitin, melarsoprol, pentamidin, benznidazol, nifurtidazol, i nitroimidamoksol. Stručnjak iz date oblasti tehnike je svestan drugih sredstava koja mogu biti korisna za lečenje parazitskih poremećaja.
[0188] Predmetni pronalazak obuhvata farmaceutski prihvatljive soli, kiseline ili derivate bilo kog od gore navedenih.
[0189] Bakterijske infekcije. Tehnička rešenja predmetnog otkrića razmatraju primenu IDO inhibitora koji su ovde opisani u kombinaciji sa sredstvima korisnim u lečenju ili prevenciji bakterijskih poremećaja. Antibakterijska sredstva se mogu klasifikovati na različite načine, uključujući na osnovu mehanizma delovanja, hemijske strukture i spektra delovanja. Primeri antibakterijskih sredstava uključuju ona koja ciljaju bakterijski ćelijski zid (npr., cefalosporini i penicilini) ili ćelijsku membranu (npr., polimksini), ili ometaju neophodne bakterijske enzime (npr., sulfonamidi, rifamicini, i hinolini). Većina antibakterijskih sredstava koja ciljaju sintezu proteina (npr., tetraciklini i makrolidi) su bakteriostatični, pri čemu su sredstva poput aminoglikozida baktericidna. Drugo sredstvo za kategorizaciju antibakterijskih sredstava zasniva se na njihovoj ciljanoj specifičnosti; sredstva "uskog spektra" ciljaju određene vrste bakterija (npr., gram-pozitivne bakterije kao što je Streptococcus), dok sredstva "širokog spektra" deluju na širi spektar bakterija. Stručnjak iz date oblasti tehnike je svestan vrsta antibakterijskih sredstava koja su prikladna za primenu kod određenih bakterijskih infekcija.
[0190] Predmetni pronalazak obuhvata farmaceutski prihvatljive soli, kiseline ili derivate bilo kog od gore navedenih sredstava (i članova klasa sredstava).
Doziranje
[0191] IDO inhibitori predmetnog pronalaska mogu se administrirati kod subjekta u količini koja zavisi od, na primer, cilja administracije (npr., željenog stepena rezolucije); starosti, težine, pola, i zdravlja i fizičkog stanja subjekta kome se daje formulacija; puta administracije; i prirode bolesti, poremećaja, stanja ili njihovih simptoma. Rezim doziranja takođe može uzeti u obzir postojanje, prirodu, i obim bilo kakvih neželjenih efekata povezanih sa sredstvom(ima) koje se administrira. Efikasne dozne količine i režimi doziranja mogu se lako odrediti iz, na primer, ispitivanja bezbednosti i povećanja doze, in vivo studija (npr., životinjski modeli), i drugih metoda poznatih stručnjaku iz date oblasti tehnike.
[0192] Uopšteno, parametri doziranja nalažu da količina doziranja bude manja od količine koja može biti nepovratno toksična za subjekat (maksimalno tolerisana doza (MTD)) i ne manja od količine potrebne da bi se kod subjekta proizveo merljivi efekat. Takve količine se određuju, na primer, farmakokinetičkim i farmakodinamičkim parametrima povezanim sa ADME, uzimajući u obzir put administracije i druge faktore.
[0193] Efikasna doza (ED) je doza ili količina sredstva koja proizvodi terapijski odgovor ili željeni efekat kod neke frakcije subjekata koji ga uzimaju. "Srednja efikasna doza" sredstva ili ED50 je doza ili količina sredstva koja proizvodi terapijski odgovor ili željeni efekat u 50% populacije kojoj se administrira. Iako se ED50 obično koristi kao mera razumnog očekivanja dejstva sredstva, nije nužno doza koju kliničar može smatrati prikladnom uzimajući u obzir sve relevantne faktore. Dakle, u nekim situacijama efikasna količina je veća od izračunatog ED50, u drugim situacijama efikasna količina je manja od izračunatog ED50, i u još nekim situacijama efikasna količina je ista kao izračunati ED50.
[0194] Pored toga, efikasna doza IDO inhibitora predmetnog pronalaska može biti količina koja, kada se administrira u jednoj ili više doza subjektu, daje željeni rezultat u odnosu na zdravi subjekat. Na primer, za subjekat koji doživljava određeni poremećaj, efikasna doza može biti ona koja poboljšava dijagnostički parametar, meru, marker i slično tom poremećaju za najmanje oko 5%, najmanje oko 10%, najmanje oko 20%, najmanje oko 25%, najmanje oko 30%, najmanje oko 40%, najmanje oko 50%, najmanje oko 60%, najmanje oko 70%, najmanje oko 80%, najmanje oko 90%, ili više od 90%, pri čemu je 100% definisano kao dijagnostički parametar, mera, marker i slično koje prikazuje normalan subjekat.
[0195] Za administraciju oralnog sredstva, smeše se mogu obezbediti u obliku tableta, kapsula i slično koje sadrže od 1.0 do 1000 miligrama aktivnog sastojka, naročito 1.0, 3.0, 5.0, 10.0, 15.0, 20.0, 25.0, 50.0, 75.0, 100.0, 150.0, 200.0, 250.0, 300.0, 400.0, 500.0, 600.0, 750.0, 800.0, 900.0, i 1000.0 miligrama aktivnog sastojka.
[0196] U određenim tehničkim rešenjima, doza željenog IDO inhibitora sadržana je u " jediničnom obliku doziranja". Fraza "jedinični oblik doziranja" odnosi se na fizički razdvojene jedinice, pri čemu svaka jedinica sadrži unapred određenu količinu IDO inhibitora, bilo samostalno ili u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih sredstava, dovoljne da proizvedu željeni efekat. Podrazumevaće se da parametri jediničnog oblika doziranja zavise od određenog sredstva i efekta koji treba da postigne.
Kitovi
[0197] Predmetni pronalazak takođe razmatra kitove koji sadrže IDO inhibitor, i njegove farmaceutske kompozicije. Kitovi su uglavnom u obliku fizičke strukture koja sadrži različite komponente, kao što je opisano u nastavku, i mogu se koristiti, na primer, u praktikovanju gore opisanih postupaka.
[0198] Kit može da sadrži jedan ili više IDO inhibitora koji su ovde otkriveni (koji su obezbeđeni u, npr., sterilnim kontejnerima), koji mogu biti u obliku farmaceutske kompozicije pogodne za administraciju subjektu. IDO inhibitori se mogu obezbediti u obliku koji je spreman za primenu (npr., tableta ili kapsula) ili u obliku koji zahteva, na primer, rekonstituciju ili razblaženje (npr., prašak) pre administriranja. Kada su IDO inhibitori u obliku koji korisnik treba da rekonstituiše ili razblaži, kit takođe može sadržati razblaživače (npr., sterilnu vodu), pufere, farmaceutski prihvatljive ekscipijense i slično, upakovane sa IDO inhibitorima ili odvojeno od njih. Kada se razmišlja o kombinovanoj terapiji, kit može da sadrži nekoliko sredstava odvojeno ili se oni već mogu kombinovati u kitu. Svaka komponenta kita može biti zatvorena u pojedinačni kontejner, i svi različiti kontejneri mogu biti u jednom paketu. Kit predmetnog pronalaska može biti dizajniran za uslove neophodne za pravilno održavanje komponenata smeštenih u njemu (npr., hlađenje ili zamrzavanje).
[0199] Kit može sadržati nalepnicu ili uputstvo za pacijenta, koje sadrži podatke za identifikaciju komponenata u njima i uputstva za njihovu primenu (npr., parametre doziranja, kliničku farmakologiju aktivnih sastojaka), uključujući mehanizam delovanja, farmakokinetiku i farmakodinamiku, neželjene dejstva, kontraindikacije itd.). Nalepnice ili uputstvo za pacijenta mogu sadržati informacije o proizvođaču kao što su brojevi serije leka i datumi isteka roka upotrebe leka. Nalepnica ili uputstvo za pacijenta mogu biti, npr., integrisani u fizičku strukturu u kojoj se nalaze komponente, gde su odvojeno sadržani u fizičkoj strukturi ili zalepljeni na komponentu kita (npr., ampula, cevčica ili bočica).
[0200] Nalepnice ili uputstvo za pacijenta mogu dodatno da uključuju ili da se ugrade u računarski čitljiviji medijum, kao što je disk (npr., hard disk, kartica, memorijski disk), optički disk kao što su CD- ili DVD-ROM/RAM, DVD, MP3, magnetna traka ili električni medijum za skladištenje kao što su RAM i ROM ili njihovi hibridi kao što su magnetni/optički medijum za skladištenje, FLASH medijum ili memorijske kartice. U nekim tehničkim rešenjima, stvarna uputstva za pacijenta nisu prisutna u kitu, ali su obezbeđena sredstva za dobijanje uputstava iz udaljenog izvora, npr., putem Interneta.
EKSPERIMENTALNO
[0201] Sledeći primeri su obezbeđeni kako bi stručnjacima u ovoj oblasti tehnike pružili potpuno otkriće i opis načina izrade i primene predmetnog pronalaska, i svi eksperimeni koji su u nastavku izvedeni, nisu namenjeni da predsavlaju sve one eksperimente koji se mogu izvoditi. Podrazumeva se da opisani primeri koji su napisani u sadašnjem vremenu nisu nužno izvedeni, već da se opisi mogu izvoditi da bi se generisali podaci i slično prirodi koja je tamo opisana. Uloženi su napori da se osigura tačnost u odnosu na korišćene brojeve (npr., količina, temperatura itd.), ali treba uzeti u obzir neke eksperimentalne greške i odstupanja.
[0202] Ako nije drugačije naznačeno, delovi su maseni delovi, molekulska masa je prosečna molekulska masa, temperatura je u stepenima Celzijusa (°C), i pritisak je na ili blizu atmosferskog. Koriste se standardne skraćenice, uključujući sledeće: wt = divlji tip; bp = bazni par(ovi); kb = kilobaza(e); nt = nukleotid(i); aa = amino kiselina(e); s ili sec = sekunda(e); min = minut(e); h ili hr = sat(i); ng = nanogram; µg = mikrogram; mg = miligram; g = gram; kg = kilogram; dl ili dL = decilitar; µl ili µL = mikrolitar; ml ili mL = mililitar; 1 ili L = litar; µM = mikromolarni; mM = milimolarni; M = molarni; kDa = kilodalton; i.m. = intramuskularno; i.p. = intraperitonealno; SC ili SQ = subkutano; QD = dnevno; BID = dva puta dnevno; QW = nedeljno; QM = mesečno; HPLC = tečna hromatografija visokih performansi; BW = telesna težina; U = jedinica; ns = nije statistički značajno; PBS = fiziološki rastvor puferovan fosfatom; IHC = imunohistohemija; DMEM = Dulbeccova modifikacija orlovog medijuma; EDTA = etilendiamintetrasirćetna kiselina.
Materijali i metode
[0203] Sledeći opšti materijali i metode su primenjeni, tamo gde je naznačeno, ili se mogu primeniti u primerima u nastavku:
[0204] Standardne metode u molekularnoj biologiji su opisane u naučnoj literaturi (videti, npr., Sambrook i sar., Molecular Cloning, Third Edition, Cold Spring Harbor Laboratory Press, Cold Spring Harbor, NY (2001); i Ausubel i sar., Current Protocols in Molecular Biology, tomovi 1-4, John Wiley i Sons, Inc. Njujork, NY (2001), koje opisuju kloniranje u bakterijskim ćelijama i DNK mutagenezu (tom 1), kloniranje u ćelijama sisara i kvascu (tom 2), glikokonjugate i eksprimiranje proteina (tom 3) i bioinformatiku (tom 4)).
[0205] Naučna literatura opisuje postupke za prečišćavanje proteina, uključujući imunoprecipitaciju, hromatografiju, elektroforezu, centrifugiranje i kristalizaciju, kao i hemijsku analizu, hemijsku modifikaciju, posttranslacionu modifikaciju, proizvodnju fuzionih proteina i glikozilaciju proteina (videti, npr., Coligan, i sar., Current Protocols in Protein Science, tomovi 1-2, John Wiley and Sons, Inc., NY (2000)).
[0206] Dostupni su softverski paketi i baze podataka za određivanje, npr., antigenskih fragmenata, vodećih sekvenci, savijanja proteina, funkcionalnih domena, mesta glikozilacije i poravnanja sekvenci (videti, npr., GCG Wisconsin Package (Accelrys, Inc., San Diego, CA); i DECYPHER® (TimeLogic Corp., Crystal Bay, NV).
[0207] Literatura je puna testova i drugih eksperimentalnih tehnika koje mogu poslužiti kao osnova za procenu jedinjenja koja su ovde opisana.
[0208] IDO enzimski test i ćelijska proizvodnja kinurenina (KYN) opisana je u Sarkar, S.A. i sar., Diabetes, 56:72-79 (2007). Ukratko, sve hemikalije mogu se kupiti od kompanije Sigma-Aldrich (St. Louis, MO) ukoliko nije drugačije naznačeno. Grupe od 1,000 ljudskih ostrvaca mogu se kultivisati tokom 24 sata u medijumu od 1 mL sa citokinima, povratiti centrifugiranjem tokom 5 minuta na 800 x g i ultrazvučno obrađivati u 150 µL PBS koji sadrži koktel inhibitora proteaze (set 2; Calbiochem, EMD Biosciences, San Dijego, CA). Sonikat se može centrifugirati 10 minuta na 10 000 x g, i supernatant se može analizirati u tri primerka inkubacijom uzorka od 40 µl sa jednakom zapreminom od 100 mmol/L kalijum fosfatnog pufera, pH 6.5, koji sadrži 40 mmol/L askorbinske kiseline (neutralizovani do pH 7.0), 100 µmol/L metilen plavog, 200 µg/mL katalaze, i 400 µmol/l L-Trp tokom 30 minuta na 37 °C. Test se može završiti dodavanjem 16 µL 30% (m/v) trihlorosirćetne kiseline (TCA) i dalje inkubirati na 60 °C tokom 15 minuta da bi se hidrolizovao N-formilkinurenin u KYN. Smeša se zatim može centrifugirati na 12,000 opm tokom 15 minuta, i KYN se može kvantifikovati mešanjem jednake zapremine supernatanta sa 2% (m/v) Ehrlichovog reagensa u ledenoj sirćetnoj kiselini u mikrotitarskoj ploči sa 96 bunarića i očitavanjem apsorbancije na 480 nm koristeći L-KYN kao standard. Proteini u uzorcima ostrvaca mogu se kvantifikovati analizom proteina Bio-Rad na 595 nm. Za detekciju L-KYN u supernatantima kulture ostrvaca, proteini se mogu istaložiti sa 5% (m/v) TCA i centrifugirati na 12,000 opm tokom 15 minuta, i određivanje KYN u supernatantu sa Ehrlichovim reagensom može se odrediti kako je gore opisano. IL-4 (10 µg/mL; 500-2,000 jedinica/mL) i 1-α-metil Trp (1-MT; 40 µmol/L) mogu se dodati u inkubacioni medijum kako je naznačeno. Ovaj test takođe može biti osnova testa na bazi ćelija, i može se kvantifikovati putem LCMS/MS kao alternativa UV/Vis detekciji.
[0209] Western Blot analiza. Grupe od 1,000 -1,200 ostrvaca inkubiranih tokom 24 sata u Miami medijumu u prisustvu citokina mogu se sakupljati i obrađivati ultrazvukom u PBS kao gore, i uzorci proteina od 50 µg mogu se elektroforezirati na 10% SDS-PAGE gelovima. COS7 ćelije (0.6 × 10<6>ćelija/60 mm3 petri šolja) transficirane humanim IDO plazmidom (3 µg) ili prazne vektorske ćelije mogu se koristiti kao pozitivne, odnosno negativne kontrole. Proteini se mogu elektroforetski preneti na membrane polivinilidin fluorida polusuvim postupkom i blokirati na 1 sat sa 5% (m/v) nemasnog suvog mleka u fiziološkom rastvoru koji je puferisan Tris-om i 0.1% Tween-om i zatim inkubirati preko noći sa antihumanim mišjim IDO antitelom (1:500; Chemicon, Temecula, CA), fosfo-STAT1αp91, i STAT1αp91 (1:500; Zymed, San Francisko, CA). Imunoreaktivni proteini se mogu vizualizovati pomoću ECL PLUS® Western blotting reagensa za detekciju (Amersham BioSciences, Bakinghamšir, U.K.) posle inkubacije u trajanju od 1 h sa anti-mišjon ren peroksidazom konjugovanom sekundarnim antitelom (Jackson Immunolabs, West Grove, PA).
[0210] Imunohistohemijska detekcija IDO. Ostrvca se mogu fiksirati u 4% paraformaldehidu u PBS (Invitrogen) tokom 1 sata, imobilisati u rastopljene blokove želatina od 10% svinjske kože (37 °C) i ugraditi u jedinjenje optimalne temperature rezanja. Imunofluorescentno bojenje na ostrvskom tkivu može se izvesti na presecima od 7 µm koji su obojeni antitelima izdignutim protiv duodenalnog homeoboksa pankreasa 1 (PDX1) i IDO. Preuzimanje antigena može se izvršiti u vodenom kupatilu 30 minuta u puferu koji sadrži 10 mmol/l Tris i 1 mmol/l EDTA (pH 9.0) na 97 °C. Sekcije se mogu blokirati na 1 sat pomoću 5% normalnog kozjeg seruma u PBS-u. Tada tkiva mogu da reaguju sa mišjim monoklonskim anti-humanim IDO antitelom (1:20; Chemicon) i kozjim poliklonalnim anti-humanim PDKS1 antitelom (1:2,000; što se može zatražiti od Dr. Chris Wright, School of Medicine, Vanderbilt, TN) preko noći na sobnoj temperaturi u vlažnoj komori. Sekundarna anti-kozija (obeležena sa Cy3) i anti-mišija (obeležena sa Cy2) antitela mogu se naručiti u kompaniji Jackson Immunolabs i mogu se koristiti u koncentraciji od 1:200. Jezgra mogu biti obojena Hoechst-om 33258 (Molekularne probe, Eugene, OR). Slike se mogu dobiti softverom Inteligentni sistem za obradu slike sa obrnutog motorizovanog mikroskopa Olimpus 1X81 opremljenog sa Olympus DSU (konfokalni disk koji se vrti) i Hamamatsu ORCA IIER monohromatskom CCD kamerom.
[0211] Alternativni načini za procenu IDO inhibitora predmetnog pronalaska opisani su u WO 2010/0233166 i u nastavku su rezimirani.
[0212] Biohemijski test. cDNK klonovi za IDO čoveka i miša su izolovani i verifikovani sekvenciranjem i komercijalno su dostupni. Da bi se IDO pripremio za biohemijske studije, C-terminalni Hiso obeleženi IDO protein može se proizvesti u E. coli pomoću IPTG inducibilnog sistema pET5a vektora i izolovati preko kolone nikla. Prinos delimično prečišćenog proteina može se verifikovati gelskom elektroforezom i proceniti koncentracija upoređivanjem sa proteinskim standardima. Za ispitivanje IDO enzimske aktivnosti, spektrofotometrijski test sa 96-bunarića na ploči za proizvodnju kinurenina može se sprovesti prema objavljenim postupcima (videti, npr., Littlejohn, T.K., i sar., Prot. Exp. Purif., 19:22-29 (2000)). Da bi se utvrdilo da li postoji IDO inhibitorna aktivnost, jedinjenja se mogu proceniti pri pojedinačnoj koncentraciji, na primer, 200 µM naspram 50 ng IDO enzima u 100 µL reakcionih zapremina sa dodatkom triptofana pri rastućim koncentracijama, na primer, 0, 2, 20, i 200 µM. Proizvodnja kinurenina može se meriti na 1 sat.
[0213] Test zasnovan na ćelijama. COS-1 ćelije se mogu privremeno transfektovati plazmidom pokretanim promotorom CMV koji eksprimira IDO cDNK primenom Lipofektamina 2000 (Invitrogen) prema preporukama proizvođača. Prateći skup ćelija može se privremeno transfektovati plazmidom koji eksprimira TDO. Četrdeset osam sati nakon transfekcije, ćelije se mogu rasporediti u format sa 96-bunarića sa 6 × 10<4>ćelija po bunariću. Sledećeg dana bunarići se mogu oprati i dodati novi medijum (bez fenol crvene) koji sadrži 20µg/mL triptofana zajedno sa inhibitorom. Reakcija se može zaustaviti za 5 sati i ukloniti supernatant i spektrofotometrijski analizirati kinurenin kao što je prethodno opisano za test enzima. Da bi se dobila početna potvrda IDO aktivnosti, jedinjenja se mogu procenjivati pri pojedinačnoj koncentraciji, na primer, 100 µM. Za odabrana jedinjenja mogu se prikupiti opsežniji profili eskalacije doze.
[0214] Farmakodinamička i farmakokinetička procena. Farmakodinamički test može se zasnivati na merenju nivoa kinurenina i triptofana u serumu, i izračunavanje odnosa kinurenin/triptofan daje procenu IDO aktivnosti koja je nezavisna od početnog nivoa triptofana. Nivoi serumskog triptofana i kinurenina mogu se odrediti HPLC analizom, i nivoi serumskih jedinjenja mogu se opciono takođe odrediti u istoj HPLC seriji.
[0215] Jedinjenja se mogu inicijalno proceniti izazivanjem miševa pomoću LPS i zatim davanjem bolusne doze jedinjenja u vreme kada su platoi nivoa kinurenina u serumu. Kako se bazen kinurenina brzo preokreće u serumu sa poluživotom kraćim od 10 minuta, ne očekuje se da će postojeći kinurenin prekomerno maskirati uticaj koji IDO inhibitor ima na proizvodnju kinurenina. Svaki eksperiment može da uključi miševe koji nisu izloženi (da bi se odredili početni nivoi kinurenina sa kojima se upoređuju ostali miševi) i skup miševa izloženih LPS-u kojima se dozira samo nosač (kako bi se obezbedila pozitivna kontrola za IDO aktivaciju). Svako jedinjenje može se inicijalno proceniti na miševima pri jednoj visokoj i.p. bolus doza u opsegu od najmanje 100 mg/kg. Krv se može sakupljati u određenim vremenskim intervalima (na primer, 50 µL uzorka na 5, 15, 30 minuta, 1, 2, 4, 6, 8, i 24 sata nakon primene jedinjenja) za HPLC analizu nivoa kinurenina i triptofana (farmakodinamička analiza) kao i za nivo jedinjenja (farmakokinetička analiza). Iz farmakokinetičkih podataka može se odrediti pik koncentracija postignutog jedinjenja u serumu, kao i procenjena brzina klirensa. Upoređivanjem nivoa jedinjenja u serumu u odnosu na odnos kinurenin/triptofan u različitim vremenskim tačkama, može se grubo proceniti efikasna IC50za inhibiciju IDO in vivo. Jedinjenja koja pokazuju efikasnost mogu se proceniti da bi se odredila maksimalna doza koja postiže 100% IDO inhibiciju pri najvišoj koncentraciji.
PRIMERI
[0216] Pronalazak je sada opisan pozivanjem na sledeće primere. Ovi primeri su dati samo u svrhu ilustracija i pronalazak se nikako ne može smatrati ograničenim na ove primere već ga treba tumačiti da obuhvata bilo koje i sve varijacije koje postaju evidentne kao rezultat tumačenja koja su ovde data.
[0217] Skraćenice kako se ovde koriste, definišu se na sledeći način: "1 x" za jednom, "2 x" za dva puta, "3 x" za tri puta, "°C" za stepene Celzijusa, "ekv" za ekvivalent ili ekvivalente, "g" za gram ili grame, "mg" za miligram ili miligrame, "L" za litar ili litre, "mL" za mililitar ili mililitre, "µL" za mikrolitar ili mikrolitre, "N" za normalno, "M" za molarni, "mmol" za milimol ili milimole, "min" za minut, minute ili min, "h" za sat, sate ili h, "st" za sobnu temperaturu, "Tr" za vreme zadržavanja, "atm" za atmosferu, "psi" za funte po kvadratnom inču, "konc." za koncentrat ili koncentrovani, "aq" za "vodeni rastvor", "zas" ili "zasić" za zasićeni, "MW" za molekulsku masu, "mp" za tačku topljenja, "MS" ili "Mas Spek" za masenu spektrometriju, "ESI" za elektrosprej jonizacionu masenu spektroskopiju, "HR" za visoku rezoluciju, "HRMS" za masnu spektrometriju visoke rezolucije, "LCMS" za masenu spektrometriju tečnu hromatografiju, "HPLC" za tečnu hromatografiju pod visokim pritiskom, "RP HPLC" za reverzno faznu HPLC, "TLC" ili "tlc" za tankoslojnu hromatografiju, "NMR" za nuklearno magnetnu rezonantnu spektroskopiju, "nOe" za nuklearnu spektroskopiju Overhauserovog efekta, "<1>H" za proton, "δ" za deltu, "s" za singlet, "d" za dublet, "t" za triplet, "q" za kvartet, "m" za multiplet, "br" za široki, "Hz" za herc, i "α", "β", "R", "S", "E", i "Z" stereohemijske oznake poznate stručnjaku u ovoj oblasti tehnike.
[0218] Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se pripremiti na brojne načine poznate stručnjaku iz oblasti organskih sinteza. Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se sintetizovati primenom dole opisanih postupaka, zajedno sa sintetičkim postupcima poznatim u stanju tehnike iz oblasti sintetičke organske hemije, ili njihovim varijacijama kako ih procenjuju stručnjaci. Poželjni postupci uključuju, ali nisu ograničene na, one opisane u nastavku. Reakcije se izvode u rastvaraču ili smeši rastvarača koji odgovaraju reagensima i materijalima koji su primenjeni i pogodni za transformacije koje se izvode. Stručnjaci u oblasti organske sinteze razumeće da funkcionalnost koja je prisutna u molekulu treba da bude u skladu sa predloženim transformacijama. Ovo će ponekad zahtevati odluku za modifikovanje redosleda sintetičkih koraka ili za odabir jedne određene procesne sheme u odnosu na drugu kako bi se dobilo željeno jedinjenje pronalaska.
[0219] Nova jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se pripremiti primenom reakcija i tehnika koje su opisane u ovom odeljku. Takođe, u opisu sintetičkih postupaka u nastavku, treba razumeti da su svi predloženi reakcioni uslovi, uključujući izbor rastvarača, reakcione atmosfere, reakcione temperature, trajanje eksperimenta i postupka obrade, izabrani da budu standardni uslovi za tu reakciju, koju bi stručnjak u datoj oblasti tehnike lako mogao prepoznati. Ograničenja supstituenata koji su kompatibilni sa reakcionim uslovima biće očigledni stručnjaku u datoj oblasti tehnike i tada se moraju primeniti alternativni postupci.
SINTEZA
POSTUPCI PRIPREME
[0220] Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu se pripremiti postupcima kao što su oni koji su ilustrovani u sledećim Shemama, koristeći hemijske transformacije poznate stručnjacima u stanju tehnike. Rastvarači, temperature, pritisci i drugi reakcioni uslovi mogu biti lako izabrani od strane stručnjaka iz ove oblasti tehnike. Početni materijali su komercijalno dostupni ili ih stručnjak može lako pripremiti. Ove Sheme su ilustrativne i ne podrazumevaju ograničavanje mogućih iz stanja tehnike koje stručnjaci u ovoj oblasti mogu koristiti za proizvodnju jedinjenja koja su ovde opisana. Različiti postupci mogu biti očigledni stručnjacima u ovoj oblasti tehnike. Pored toga, različiti koraci u sintezi mogu se izvoditi u alternativnom nizu ili po redosledu da bi se dobilo željeno jedinjenje(a). Dalje, predstavljanje reakcija u ovim Shemama kao odvojenih koraka ne sprečava njihovo izvođenje u tandemu, bilo teleskopiranjem više koraka u istoj reakcionoj posudi ili izvođenjem više koraka bez prečišćavanja ili karakterizacije intermedijera. Pored toga, mnoga jedinjenja pripremljena donjim postupcima mogu se dalje modifikovati koristeći konvencionalnu hemiju dobro poznatu stručnjacima u stanju tehnike.
[0221] Reference za mnoge hemijske transformacije koje su ovde primenjene mogu se naći u Smith, M.B. i sar., March's Advanced Organic Chemistry Reactions, Mechanisms, and Structure, peto izdanje, Wiley-Interscience, Njujork (2001), ili drugi standardni tekstovi na temu sintetičke organske hemije. Određene transformacije mogu zahtevati da reaktivne funkcionalne grupe budu maskirane zaštitnom grupom(a). Pogodna referenca koja pruža uslove za uvođenje, uklanjanje i relativnu podložnost reakcionim uslovima ovih grupa je Greene, T.W. i sar., Protective Groups in Organic Synthesis, treće izdanje, Wiley-Interscience, Njujork (1999).
[0222] Pozivajući se na Shemu I, tretiranje cikloheksanona II pod standardnim Horner-Wadsworth Emmons-ovim uslovima sa fosfonatom III daje odgovarajući nezasićeni estar. Katalitičkom hidrogenacijom sa, na primer, Pd/C i vodonik gasom i naknadnom ketalnom hidrolizom pod kiselim uslovima dobija se dodati cikloalkanon opšte stukture IV. Tretiranje jedinjenja IV sa trifilnim anhidridom i organskom bazom kao što je 2,6-lutidin daje vinil triflat opšte formule V. Kuplovanje V sa arilboronskim kiselinama ili estrima E-B(OR)2, poželjno pod uslovima Suzukija (videti Kotha, S. i sar., Tetrahedron, 58:9633-9695 (2002)) daje cikloalkene opšte formule VI. Tipično, ova reakcija se izvodi zagrevanjem halida i boronske kiseline ili estra od oko 90 do oko 98 °C sa bazom kao što je vodeni tribazni natrijum ili kalijum fosfat ili natrijum ili kalijum karbonat u rastvaraču kao što su dioksan, DMF, THF, ili NMP uz primenu katalizatora kao što je tetrakis(trifenilfosfin)paladijum ili Cl2Pd(dppf). Mnoge varijacije ove reakcije koje uključuju primenu različitih temperatura, rastvarača, baza, bezvodnih uslova, katalizatora, derivata boronata i surogata halida kao što su triflati koji su poznati stručnjacima u oblasti organske/medicinske hemije. Izvešteni su blagi uslovi za spajanje osetljivih derivata boronske kiseline. Prijavljeni su blagi uslovi za kuplovanje osetljivih derivata boronske kiseline. Videti Kinzel, T. i sar., J. Am. Chem. Soc., 132(40):14073-14075 (2010). Zasićenje olefina u VII može se postići tretiranjem sa Pd/C u atmosferi vodonika dajući jedinjenje opšte strukture VII kao smešu cis i trans izomera karbocikla. Dalja supstitucija estra može se postići tretiranjem jakom bazom, kao što je LDA ili LiHMDS, praćeno dodavanjem elektrofila R<4>-X pri čemu X je Br ili I, da se dobiju jedinjenja opšte strukture VIII nakon bazne hidrolize sa bazom kao što je LiOH. Kuplovanje kiseline VIII sa aminima opšte strukture IX pod standardnim uslovima, koji su dobro poznati stručnjaku iz stanja tehnike, daje jedinjenja opšte strukture I.
[0223] Kao što je prikazano u Shemi 2, olefin VI se može hidroborovati tretiranjem boranom, kao što je katehol boran, zatim standardnim oksidativnim postupkom sa vodonik peroksidom da se dobije hidroksilirano jedinjenje koje se zatim konvertuje u jedinjenje opšte strukture X, najverovatnije u smešu izomera. Jedinjenje X se zatim može konvertovati u jedinjenje opšte strukture I postupcima koji su prikazani u Shemi 1.
[0224] U Shemi 3, N-alkilacija zaštićenog piperidona opšte srtrukture XI može se postići tretiranjem sa haloacetatom opšte strukture III (X=Br, Cl), naknadna kisela hidroliza ketala daje keto estar opšte strukture XII. Formiranje vinil triflata, kao što je prethodno opisano, daje jedinjenje opšte strukture XIII. Tretiranje vinil triflata sa diboranom, kao što je bispinakolatoboran, u prisustvu izvora Pd(0), kao što je (PPh3)4Pd, daje vinil borni estar opšte strukture XIV. Suzuki kuplovanjem aril halida, E-X, gde je X=Br, I, Cl, OTf, pod standardnim uslovima koji su prethodno opisani, dobija se nezasićeno jedinjenje opšte strukture XV. Jedinjenja opšte strukture XV mogu se konvertovati u jedinjenja opšte strukture I postupcima koji su prethodno ovde opisani. U drugom tehničkom rešenju, jedinjenja opšte strukture XV mogu se prvo tretirati boranom, kao što je katehol boran, nakon čega sledi oksidativni postupak sa vodonik peroksidom, kada se dobijaju jedinjenja opšte strukture XVI, koja mogu biti konvertovana u jedinjenja opšte stukture I postupcima koji su već opisani.
[0225] Shema 4 prikazuje formiranje amida putem anhidrida opšte strukture XVIII. Tretiranje kiseline opšte strukture XVII sa hlorovanim reagensom, kao što je oksalil hlorid ili tionil hlorid, daje željeni acil hlorid opšte strukture XVIII. Jedinjenja opšte strukture XVIII mogu se konvertovati u amide opšte strukture I tretiranjem aminom opšte strukture IX i organskom bazom, kao što je diizopropiletilamin.
[0226] Shema 5 prikazuje kako se može izvršiti selektivno alkilovanje za ugradnju R<3>u alfa položaj amida koji su opšte strukture I. Pod standardnim uslovima, mešani anhidridi opšte strukture XIX mogu se tretirati metalizovanim hiralnim pomoćnim sredstvima dobijenim iz oksazolidinona opšte strukture XX da se dobije imid opšte strukture XXI. Evanova hiralna pomoćna sredstva su dobro poznata stručnjaku u oblasti tehnike. Selektivnim alkilovanjem XXI, koje se postiže tretiranjem jakom bazom, kao što je NaHMDS, i elektrofilom R<3>-X, dobija se jedinjenje opšte strukture XXII sa visokom diastereoselektivnošću za ugradnju R<3>. Hidroliza imida XXII može se postići standardnim postupcima kao što su jaka baza i vodonik peroksid (videti Evans i sar., Tetrahedron Lett., 28:6141-6144 (1987)) da se dobije jedinjenje opšte strukture XXIII. Kiselina XXIII se može konvertovati u jedinjenje opšte strukture I postupcima koji su već ovde opisani.
[0227] U Shemi 6, keton opšte strukture XXIV, koji se može pripremiti postupcima opisanim na Shemama 1 i 3, može se tretirati pod snažno redukujućim uslovima borohidridom kao što je natrijum borohidrid, dajući alkohol opšte strukture XXV. Alkohol se može tretirati jakom bazom u prisustvu aktivisanih halo supstituisanih heteroaromata da se dobije etar opšte strukture XXVI. Alternativno, alkohol XXV se može tretirati pod standardnim Mitsunobu uslovima DIAD i trifenilfosfinom da se dobiju etri opšte strukture XXVI, koji se mogu konvertovati u jedinjenja opšte strukture I postupcima koji su već ovde opisani.
[0228] Shema 7 pokazuje kako se keton opšte strukture XXIV može konvertovati u amin opšte strukture XXVII reduktivnom aminacijom. To se prvo može postići sekvencijalnim tretmanom sa aminom, zatim redukcionim sredstvom, kao što je natrijum borhidrid. Amin u XXVII može biti dodat pomoću E-X gde je X=Cl, Br ili I, pod termičkim uslovima, kao što je zagrevanje u rastvaraču kao što je DMF, ili putem kuplovanja koje je katalizovano paladijumom, kao što je Buchwaldovo kuplovanje, da se dobije amin opšte strukture XXVIII. Estar opšte strukture XXVIII može se zatim konvertovati u jedinjenje opšte strukture I postupcima koji su ovde opisani.
[0229] Kao što je prikazano na Shemi 8, keton opšte strukture XXIX može se tretirati sa haloacetatom opšte strukture III u prisustvu aktiviranog metala cinka da se dobije tercijarni alkohol opšte strukture XXX. Estar opšte strukture XXX može se zatim konvertovati u jedinjenje opšte strukture I postupcima koji su ovde već opisani.
[0230] Kao što je prikazano na Shemi 9, keton opšte strukture XXIV može se tretirati sa metalizovanom vrstom E-M, gde je M = Li, Na ili K, koji je dobijen tretiranjem aril halida sa, na primer alkil litijumom, kao što je terc-butillitijum, da se dobije tercijarni alkohol opšte strukture XXXI. Estar opšte strukture XXXI može se konvertovati u jedinjenje opšte strukture I postupcima koji su ovde već opisani.
[0231] Kao što je prikazano na Shemi 10, monozaštićeni diamin opšte strukture XXXII može se konvertovati u jedinjenje opšte strukture XXXIII postupcima opisanim na Shemi 3. Tretiranje amina opšte strukture XXXIII sa E-X, gde je X = Cl, Br, I, i paladijum katalizator, kao što je Pd(Ph3P)4, daje jedinjenje opšte strukture XXXIV. Alternativno, amin opšte strukture XXXIII može se tretirati sa jedinjenjem ECH2X pod baznim uslovima dovoljnim za N-alkilaciju da se dobije jedinjenje opšte strukture XXXIV. Estar opšte strukture XXXIV može se zatim konvertovati u jedinjenje opšte strukture I postupcima koji su ovde već opisani.
HPLC/MS I METODE PREPARATIVNE/ANALITIČKE HPLC KORIŠĆENE ZA KARAKTERIZACIJU ILI PREČIŠĆAVANJE PRIMERA
[0232] Analitička i preperativna HPLC/MS izvršena je primenom sledećih metoda:
Metoda A: Waters Acquity SDS primenjuje sledeću metodu: linearni gradijent od 2% do 98% rastvarača B tokom 1.7 min; UV vizualizovanje na 220 nm; kolona: BEH C18 2.1 mm × 50 mm; čestice 1.7 µm (zagrevanje do temperature 50 °C); brzina protoka: 0.8 ml/min; mobilna faza A: 100% vode, 0.05% TFA; mobilna faza B: 100% acetonitrila, 0.05% TFA.
Metoda B: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, čestice 1.7 µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100% B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje od 0.75 minuta na 100% B; brzina protoka: 1.00 mL/min; detekcija: UV na 220 nm.
Metoda C: Berger SFC MGII, kolona: IC 25 × 3 cm ID, 5µm brzina protoka:85.0 mL/min, mobilna faza:70/30 CO2/MeOH, talasna dužina detektora: 220 nm
Metoda D: Berger analitička SFC, kolona: hiralna IC 250 × 4.6 mm ID, 5µm, brzina protoka: 2.0 mL/min, mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH
Metoda E: Berger SFC MGII, kolona: hiralna OJ-H 25 × 3 cm ID, 5µm brzina protoka: 85.0 mL/min, mobilna faza:75/25 CO2/MeOH, talasna dužina detektora: 220 nm
Metoda F: Aurora analitička SFC, kolona: hiralna IC 250 × 4.6 mm ID, 5µm, brzina protoka: 2.0 mL/min, mobilna faza: 70/30 CO2/MeOH
Metoda G: Berger SFC MGII, kolona: hiralna AS 25 × 3 cm ID, 5µm brzina protoka: 85.0 mL/min, mobilna faza: 87/13 CO2/MeOH, talasna dužina detektora: 220a nm
Metoda H: Aurora analitička SFC, kolona: hiralna AS 250 × 4.6 mm ID, 5µm, brzina protoka: 2.0 mL/min, mobilna faza: 85/15 CO2/MeOH
Metoda I: Berger SFC MGII, kolona: hiralna AS 25 × 3 cm ID, 5µm brzina protoka: 85.0 mL/min, mobilna faza: 90/10 CO2/MeOH w/ 0.1% DEA, talasna dužina detektora: 220 nm
Metoda J: Aurora analitička SFC, kolona: hiralna AS 250 × 4.6 mm ID, 5µm, brzina protoka: 2.0 mL/min, mobilna faza: 90/10 CO2/MeOH m/ 0.1% DEA
Metoda K: Kolona: Waters Acquity UPLC BEH C18, 2.1 × 50 mm, čestice 1.7 µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetne kiseline; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 0.1% trifluorosirćetne kiseline; temperatura: 50 °C; gradijent: 0-100% B tokom 3 minuta, zatim zadržavanje od 0.75 minuta pri 100% B; brzina protoka: 1.0 mL/min; detekcija: UV na 220 nm.
Metoda L: Hiralna HPLC: IF-3 kolona, ID 4.6 mm × 150 mm, brzina protoka: 1 mL/min, mobilna faza: 85% heptana/15% izopropanola.
Metoda M: Hiralna HPLC: ID kolona CHIRALPAK®, Chiral Technologies, West Chester, PA, 5 µm, ID 4.6 mm × 250 mm, brzina protoka: 20 mL/min mobilna faza: 0.4% Et2NH u acetonitrilu.
NMR KORIŠĆENI ZA KARAKTERIZACIJU PRIMERA
[0233]<1>H NMR spektri (ukoliko nije drugačije naznačeno) dobijeni su pomoću JEOL® ili Bruker FOURIER® transformatorskih spektrometara koji rade na 400 MHz ili 500 MHz.
[0234] Spektralni podaci su zabeleženi kao hemijski pomak (višestrukost, broj vodonika, konstante spajanja u Hz) i zabeleženi su u ppm (δ jedinice) u odnosu na bilo koji interni standard (tetrametil silan = 0 ppm) za<1>H NMR spektre, ili se odnose na zaostali pik rastvarača (2.49 ppm za CD3SOCD2H, 3.30 ppm za CD2HOD, 1.94 za CHD2CN, 7.26 ppm za CHCl3, 5.32 ppm za CDHCl2). Skraćenice korišćene u opisu NMR pikova: "a" = očigledno, "br. s." = široki singlet
OPŠTI POSTUPCI
Opšti postupak A: Priprema aril cikloheksana putem reakcije Suzuki-jevog ukrštenog kuplovanja
[0235]
[0236] U etil 2-(4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-il)acetat* (1.0 ekv.), boronske kiseline (1.2 ekviv), Na2CO3(2.5 ekv.), KBr (1.1 ekv.) u 1,4-dioksan/voda (10:1 po zapremini, 0.25M) dodat je Pd(PPh3)4(5 mol.%). Dobijena reakciona smeša je zagrevana 16 h na 80-90 °C, nakon čega je sirova reakciona smeša koncentrovana. Dobijene čvrste supstance su razblažene sa EtOAc i vodom i slojevi su odvojeni. Vodeni sloj je tri puta ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni bezvodnim MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Sirova reakciona smeša je prečišćena primenom hromatografije na silika gelu da se dobije željeni proizvod.
* Etil 2-(4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-il)acetat je poznato jedinjenje koje se može dobiti od komercijalno dostupnog 1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-ona primenom postupaka koji su navedeni u 1) Stocks, P.A. i sar., Angew. Chem. Int. Ed., 46:6278-6283 (2007); 2) Barlind, J.G. i sar., J. Med. Chem., 55:10610-10629 (2012).
Opšti postupak B: Hidrogenovanje
[0237]
[0238] Nezasićeni polazni materijal je rastvoren u rastvaraču po izboru (npr., metanol, etil acetat, ili sirćetna kiselina) da se formira 0.1-0.3 M rastvor. Dobijeni rastvor je pročišćen sa azotom i 20 mas. % katalizatora (suvo aktivirani Pd/C 10 mas. %, ili Degussa Pd/C 10 mas. %, ili Pd(OH)2/C 10 mas. %) je dodat u rastvor da se formira heterogena smeša. Vodonik je u mehurićima uveden u rastvor do potpunog nestanka polaznog materijala određenog pomoću TLC, i/ili LC-MS, i/ili NMR. Po završetku, reakciona smeša je pročišćena azotom, filtrirana kroz CELITE®, i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Krajnji proizvod je prečišćen fleš hromatografijom.
Opšta postupak E: Hidroliza estra
[0239]
[0240] Rastvoru estra (1.0 ekv) u EtOH (1.0 M) dodata je jednaka zapremina vodenog rastvora LiOH (7.25 M). Reakciona smeša je snažno mešana, zagrevana na 50 °C tokom 1 h i zatim razblažena sa 50 mL vode i dalje zagrevana na 50 °C tokom 5 h. Reakciona smeša je ohlađena u ledenom kupatilu i zakiseljena (pH ∼ 1) laganim dodavanjem 3 M HCl rastvora. Dodat je EtOAc, slojevi su odvojeni, i vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (3x). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni anhidrovanim Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod smanjenim pritiskom da se dobije željena karboksilna kiselina koja se koristi bez daljeg prečišćavanja.
Opšti postupak G: Reakcija između estara i anilina
[0241]
[0242] Rastvoru anilina (2.0 ekv.) u THF (0.25 M) na 0 °C dodat je rastvor<i>PrMgCl (2.0 ekv., 2 M u THF). Dobijeni rastvor je zagrejan na sobnu temperaturu i mešan 5 minuta i zatim je dodat estar (1.0 ekv.). Dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 8 sati i nasuta je u vodu. Dodat je etil acetat i slojevi su odvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan tri puta etil acetatom.
Kombinovani organski ekstrakti su osušeni anhidrovanim MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Sirova reakciona smeša je prečišćena primenom hromatografije na silika gelu da se dobije željeni proizvod.
Opšti postupak K: Priprema aril cikloheksana putem reakcije Suzuki-jevog ukrštenog kuplovanja
[0243]
[0244] U etil 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)acetat* (1.1 ekv), aril halid (1.0 ekv), i Cs2CO3(2.2 ekv), u smeši 1,4-dioksan/voda(10:1 po zapremini, 0.25 M) dodata je katalitička količina PEPPSI-IPr (2 mol.%). Dobijena reakciona smeša je zagrevana na 100 °C tokom 2-12 sati, nakon čega je sirova reakciona smeša koncentrovana i napunjena na silika gel. Sirova reakciona smeša je prečišćena primenom hromatografije na silika gelu. * Etill 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)acetat je poznato jedinjenje koje se može pripremiti iz komercijalno dostupnog 1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-ona primenom postupaka navedenih u Barlind, J.G. i sar., J. Med. Chem., 55:10610-10629 (2012).
Opšti postupak L: Kuplovanje karboksilne kiseline sa hiralnim pomoćnim sredstvom
[0245]
[0246] U tikvicu okruglog dna koja je osušena u peći (tikvica #1) dodata je karboksilna kiselina (1.0 ekv) kao smeša diastereomera. Tikvica je ispražnjena i ponovo napunjena azotom i zatim je napunjena THF (0.25 M) i trietilaminom (2.0 ekv). Dobijeni rastvor je ohlađen na -78 °C pre laganog dodavanja pivaloil hlorida (1.25 ekv) preko 15 minuta. Reakciona smeša je zatim mešana na 0 °C tokom jednog sata.
[0247] U zasebnu tikvicu okruglog dna koja je osušena u peći (tikvica #2) dodaju se hiralni (R)-ili (S)-4-benzil- ili 4-fenil-2-oksazolidinon (1.3 ekv) i THF (0.25 M). Ovaj rastvor je ohlađen na -78 °C pre pažljivog dodavanja n-BuLi (2.5M u heksanima, 1.3 ekv). Ova reakciona smeša je mešana na -78 °C tokom 15 minuta pre nego što je uklonjena iz hladnog kupatila.
[0248] Tikvica #1 je zatim ohlađena na -78 °C i sadržaj tikvice #2 se dodaje u tikvicu #1 putem kanile tokom 15 minuta. Nakon potpunog dodavanja, hladno kupatilo je uklonjeno i reakcija je mešana 3 sata na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena dodavanjem zasićenog rastvora amonijum hlorida (100 mL) i naknadnom ekstrakcijom sa etil acetatom (100 mL × 3). Kombinovane organske materije su oprane slanim rastvorom, osušene natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu.
Opšti postupak M: Alkilacija imida izvedenih iz oksazalidinona
[0249]
[0250] NaHMDS (2 M u THF, 1.2 ekv) je dodat u kapima u 0.2 M rastvor imida (1.0 ekv) u anhidrovanom tetrahidrofuranu na -50 °C. Rastvor je mešan 10 minuta na -50 °C i zatim je u kapima dodat čist alkilhalid. Reakciona smeša je mešana dodatnih 2 do 48 sati na -50 do -20 °C i zatim je ugašena dodavanjem zasićenog rastvora amonijum hlorida dok je još hladna. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i ekstrahovana je 3 puta etil acetatom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni sa MgSO4, filtrirani, koncentrovani pod smanjenim pritiskom i podvrgnuti fleš hromatografiji na silika gelu.
Opšti postupak N: Cepanje hiralnog pomoćnog sredstva
[0251]
[0252] U tikvicu sa okruglim dnom dodat je imid izveden iz oksazalidinona (0.418 mmol, 1.0 ekv), THF (0.25 M) i destilovana voda (1M). Ovaj rastvor je ohlađen na 0 °C pre polaganog dodavanja H2O2(35 mas. % u vodi, 4 ekv) praćeno je dodavanjem LiOH (2.7 M u vodi, 1.6 ekv). Reakcioni rastvor je ostavljen da se zagreje do sobne temperature. Praćen je napredak LC/MS i reakcioni rastvor je pažljivo ugašen na 0 °C dodavanjem zasićenog Na2SO3nakon što se potroši početni materijal. pH je podešen na ∼5-6 sa 1N HCl i zatim smeša je ekstrahovana sa EtOAc i metilen hloridom. Kombinovani organski slojevi su osušeni natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu.
Opšti postupak O: Kuplovanje karboksilnih kiselina i anilina
[0253]
[0254] Propilfosfonski anhidrid (1.5 ekv, 50 mas. % rastvora u etil acetatu) je dodat rastvoru karboksilne kiseline (1 ekv) i piridina (3 ekv) u etil acetatu (0.1 M) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana 5 minuta, i zatim je dodat anilin (1.5 ekv). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi do potpune potrošnje kiseline, koja je određena pomoću TLC i/ili LC-MS. Reakciona smeša je sipana u vodu, dodat je 1M NaOH (10 ekv), i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom tri puta. Kombinovani organski ekstrakti su sušeni sa MgSO4i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni silika gela.
Primeri 1 i 2
N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid
[0255]
N-(4-hlorofenil)-2-(4-(cis-hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid
[0256]
Primeri 1 i 2: N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid i N-(4-hlorofenil)-2-(4-(cis-hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid
[0257] Primeri 1 i 2 pripremljeni su primenom opštih postupaka A, B, i G. Opšti postupak A koristio je 7.91 g (25 mmol) etil 2-(4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi) cikloheks-3-en-1-il)acetata i 4.56 g (26 mmol) hinolin-4-boronske kiseline. Opšti postupak B koristio je 20 mas. % suvog Pd/C (10 mas. %) i metanol kao rastvarač. Opšti postupak G koristio je 100 mg etil 2-(4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetata (smeša diastereomera) i 87 mg 4-hloroanilina. Prečišćen je hromatografijom na silika gelu (0% do 60% etil acetata u toluenu) da se dobije Primer 1 (trans-diastereomer) kao prvi izomer za eluiranje.<1>H NMR trans-izomera (400 MHz; CDCl3): δ 8.85 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.04-8.14 (m, 2H), 7.67-7.72 (m, 1H), 7.53-7.59 (m, 1H), 7.47-7.53 (m, 2H), 7.27-7.31 (m, 3H), 3.27-3.37 (m, 1H), 2.34 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 2.03-2.11 (m, 5H), 1.61-1.73 (m, 2H), 1.31-1.44 (m, 2H) ppm. m/z 379.2 (M+H<+>).
[0258] Daljim eluiranjem iz kolone dobija se Primer 2 (cis-diastereomer) kao drugi izomer koji se eluira.<1>H NMR cis-izomera (400 MHz; CDCl3): δ 8.84 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.04-8.14 (m, 2H), 7.67-7.73 (m, 1H), 7.48-7.60 (m, 3H), 7.25-7.31 (m, 3H), 3.36-3.46 (m, 1H), 2.51-2.60 (m, 3H), 1.68-1.96 (m, 8H) ppm. m/z 379.2 (M+H<+>).
Primeri 3 i 4
N-(4-cijanofenil)-2-(trans-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid hidrohlorid
[0259]
N-(4-cijanofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid hidrohlorid
[0260]
Primeri 3 i 4: N-(4-cijanofenil)-2-(trans-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid hidrohlorid i N-(4-cijanofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid hidrohlorid
[0261] Primeri 3 i 4 pripremljeni su primenom opštih postupaka A, B, i G. Opšti postupak A koristio je 7.91 g (25 mmol) etil 2-(4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi) cikloheks-3-en-1-il)acetata i 4.56 g (26 mmol) hinolin-4-boronske kiseline. Opšti postupak B koristio je 20 mas. % suvog Pd/C (10 mas. %) i metanol kao rastvarač. Opšti postupak G koristio je 100 mg etil 2-(4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetata (smeša diastereomera) i 80 mg 4-cijanoanilina. Prečišćen je hromatografijom na silika gelu (0% do 60% etil acetata u toluenu) da se dobije Primer 3 (trans-diastereomer) kao prvi izomer za eluiranje. Slobodna baza je konvertovana u hidrohlorid mešanjem sa viškom 2M HCl u dietil etru, uklanjanjem isparljivih sastojaka i sušenjem pod visokim vakuumom.<1>H NM trans-izomera (400 MHz; CDCl3): δ 10.53 (s, 1H), 9.2 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 8.60 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.33 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.09-8.15 (m, 1H), 7.91-8.00 (m, 2H), 7.79-7.84 (m, 2H), 7.72-7.77 (m, 2H), 3.60-3.70 (m, 1H), 2.37 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 1.87-1.99 (m, 5H), 1.65-1.77 (m, 2H), 1.34-1.47 (m, 2H) ppm. m/z 370.2 (M+H<+>).
[0262] Daljim eluiranjem iz kolone dobija se Primer 4 (cis-diastereomer) kao drugi izomer koji se eluira. Slobodna baza je konvertovana u hidrohlorid mešanjem sa viškom 2M HCl u dietil etru, uklanjanjem isparljivih sastojaka i sušenjem pod visokim vakuumom.<1>H NMR cis-izomera (400 MHz; DMSO-d6): δ 10.79 (s, 1H), 9.26 (d, J = 5.7 Hz, 1H), 8.59 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.36 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.09-8.17 (m, 2H), 7.91-7.97 (m, 1H), 7.83-7.87 (m, 2H), 7.72-7.77 (m, 2H), 3.65-3.75 (m, 1H), 2.66 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 2.37-2.46 (m, 1H), 1.81-1.99 (m, 4H), 1.65-1.77 (m, 4H) ppm. m/z 370.2 (M+H<+>).
Primeri 5 i 6
N-(4-fluorofenil)-2-(trans-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid
[0263]
N-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid
[0264]
Primeri 5 i 6: N-(4-fluorofenil)-2-(trans-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid i N-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid
[0265] Pripremljeni su primenom opštih postupaka A, B, i G. Opšti postupak A koristio je 7.91 g (25 mmol) etil 2-(4-(((trifluorometil) sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-il)acetata i 4.56 g (26 mmol) hinolin-4-boronske kiseline. Opšti postupak B koristio je 20 mas. % suvog Pd/C (10 mas. %) i metanol kao rastvarač. Opšti postupak G koristio je 100 mg etil 2-(4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetata (smeša diastereomera) i 76 mg 4-fluoroanilina. Prečišćen je hromatografijom na silika gelu (0% do 60% etil acetata u toluenu) da se dobije Primer 5 (trans-diastereomer) kao prvi eluirani izomer.<1>H NMR trans-izomera (400 MHz; CDCl3): δ 8.85 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.05-8.15 (m, 2H), 7.67-7.73 (m, 1H), 7.48-7.58 (m, 4H), 7.27 (d, J=4.7Hz, 1H), 6.98-7.05 (m, 2H), 3.25-3.36 (m, 1H), 2.34 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 2.01-2.10 (m, 5H), 1.58-1.72 (m, 2H), 1.29-1.42 (m, 2H) ppm. m/z 363.2 (M+H<+>).
[0266] Daljim eluiranjem iz kolone dobija se Primer 6 (cis-diastereomer) kao drugi eluirani izomer.<1>H NMR cis-izomera (400 MHz; CDCl3): δ 8.84 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.05-8.15 (m, 2H), 7.67-7.73 (m, 1H), 7.54-7.62 (m, 2H), 7.48-7.54 (m, 2H), 7.27 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 6.97-7.05 (m, 2H), 3.36-3.46 (m, 1H), 2.51-2.60 (m, 3H), 1.68-1.98 (m, 8H) ppm. m/z 379.2 (M+H<+>).
Referentni Primeri 7 i 8
N-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)acetamid
[0267]
N-(4-fluorofenil)-2-(trans-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)acetamid hidrohlorid
[0268]
Reference Examples 7 i 8: N-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)acetamid i N-(4-fluorofenil)-2-(trans-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)acetamid hidrohlorid
[0269] Pripremljeni su primenom opštih postupaka A, B, i G. Opšti postupak A koristio je 10.0 g (32 mmol) etil 2-(4-(((trifluorometil) sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-il)acetata i 6.02 g (35 mmol) hinolin-3-boronske kiseline. Opšti postupak B koristio je 20 mas. % suvog Pd/C (10 mas. %) i metanol kao rastvarač. Opšti postupak G koristio je 95 mg etil 2-(4-(hinolin-3-il)cikloheksil)acetata (smeša diastereomera) i 71 mg 4-fluoroanilina. Prečišćen je hromatografijom na silika gelu (0% do 60% etil acetata u toluenu) da se dobije referentni Primer 7 (cis-diastereomer) kao prvi eluirani izomer.<1>H NMR cis-izomera (400 MHz; DMSO-d6): δ 8.87-8.89 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.18 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 7.91-8.00 (m, 2H), 7.65-7.72 (m, 1H), 7.55-7.64 (m, 3H), 7.09-7.15 (m, 3H) 2.77-2.87 (m, 1H), 2.47 (m, J = 8.0 Hz, 2H), 2.26-2.36 (m, 1H), 1.79-1.91 (m, 2H), 1.57-1.78 (m, 6H) ppm. m/z 379.2 (M+H<+>).
[0270] Daljim eluiranjem iz kolone dobija se referentni Primer 8 (trans-diastereomer) kao drugi eluirani izomer. Slobodna baza je konvertovana u hidrohlorid mešanjem sa viškom 2M HCl u dietil etru, uklanjanjem isparljivih sastojaka i sušenjem pod visokim vakuumom.<1>H NMR trans-izomera (400 MHz; CDCl3): δ 10.05 (s, 1H), 9.21 (d, J = 1.8 Hz, 1H), 8.89 (s, 1H), 8.18-8.26 (m, 2H), 7.96-8.03 (m, 1H), 7.81-7.87 (m, 1H), 7.60-7.65 (m, 2H), 7.08-7.16 (m, 2H), 2.83-2.93 (m, 1H), 2.27 (d, J = 6.6 Hz, 2H), 1.84-2.02 (m, 5H), 1.59-1.71 (m, 2H), 1.15-1.28 (m, 2H) ppm. m/z 379.2 (M+H<+>).
Referentni Primeri 9 i 10
N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)acetamid
[0271]
N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)acetamid
[0272]
Referentni Primeri 9 i 10: N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)acetamid i N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)acetamid
[0273] Pripremljeni su primenom opštih postupaka A, B, i G. Opšti postupak A koristio je 10.0 g (32 mmol) etil 2-(4-(((trifluorometil) sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-il)acetata i 6.02 g (35 mmol) hinolin-3-boronske kiseline. Opšti postupak B koristio je 20 mas. % suvog Pd/C (10 mas. %) i metanol kao rastvarač. Opšti postupak G koristio je 95 mg etil 2-(4-(hinolin-3-il)cikloheksil)acetata (smeša diastereomera) i 82 mg 4-hloroanilina. Prečišćen je hromatografijom na silika gelu (0% do 60% etil acetata u heksanu) da se dobije referentni Primer 9 (cisdiastereomer) kao prvi eluirani izomer.<1>H NMR cis-izomera (400 MHz; CDCl3): δ 8.80 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.06-8.11 (m, 1H), 7.74-7.82 (m, 3H), 7.66-7.72 (m, 1H), 7.51-7.59 (m, 3H), 7.26-7.30 (m, 2H), 2.79-2.89 (m, 1H), 2.43-2.47 (m, 3H), 1.60-1.90 (m, 8H) ppm. m/z 379.1 (M+H<+>).
[0274] Daljim eluiranjem iz kolone dobija se referentni Primer 10 (trans-diastereomer) kao drugi eluirani izomer.<1>H NMR trans-izomera (400 MHz; CDCl3): δ 8.81 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 8.04-8.09 (m, 1H), 7.90-7.93 (m, 1H), 7.76-7.80 (m, 1H), 7.63-7.68 (m, 1H), 7.47-7.55 (m, 3H), 7.26-7.32 (m, 2H), 7.24 (bs, 1H), 2.66-2.76 (m, 1H), 2.32 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 1.99-2.09 (m, 5H), 1.57-1.72 (m, 2H), 1.21-1.34 (m, 2H) ppm. m/z 379.1 (M+H<+>).
Referentni Primeri 11 i 12
N-(4-cijanofenil)-2-(cis-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)acetamid
[0275]
N-(4-cijanofenil)-2-(trans-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)acetamid
Referentni Primeri 11 i 12: N-(4-cijanofenil)-2-(cis-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)acetamid i N-(4-cijanofenil)-2-(trans-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)acetamid
[0276] Pripremljeni su primenom opštih postupaka A, B, i G. Opšti postupak A koristio je 10.0 g (32 mmol) triflata i 6.02 g (35 mmol) hinolin-3-boronske kiseline. Opšti postupak B koristio je 20 mas. % suvog Pd/C (10 mas. %) i metanol kao rastvarač. Opšti postupak G koristio je 65 mg etil 2-(4-(hinolin-3-il)cikloheksil)acetata (smeša diastereomera) i 52 mg 4-cijanoanilina. Prečišćen je hromatografijom na silika gelu (0% do 60% etil acetata u heksanu) da se dobije referentni Primer 11 (cis-diastereomer) kao prvi eluirani izomer.<1>H NMR cis-izomera (400 MHz; CDCl3): δ 8.76 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.58 (bs, 1H), 8.07-8.11 (m, 1H), 7.69-7.79 (m, 4H), 7.64-7.67 (m, 1H), 7.57-7.63 (m, 3H), 2.75-2.85 (m, 1H), 2.45-2.50 (m, 3H), 1.45-1.85 (m, 8H) ppm. m/z 370.2 (M+H<+>).
[0277] Daljim eluiranjem iz kolone dobija se referentni Primer 12 (trans-diastereomer) kao drugi eluirani izomer.<1>H NMR trans-izomera (400 MHz; CDCl3): δ 8.80 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.05-8.09 (m, 1H), 7.90-7.93 (m, 1H), 7.76-7.80 (m, 1H), 7.60-7.73 (m, 5H), 7.50-7.56 (m, 1H), 7.45 (bs, 1H), 7.67-7.77 (m, 1H), 2.36 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 1.99-2.10 (m, 5H), 1.59-1.72 (m, 2H), 1.22-1.35 (m, 2H) ppm. m/z 370.2 (M+H<+>).
Referentni Primeri 13 (a) i (b)
2-(4-(cis-1H-indazol-4-il)cikloheksil)-N-(4-cijanofenil)acetamid (prvi eluirani izomer, relativna stereohemija nije određena i proizvoljno dodeljena)
[0278]
2-(4-(trans-1H-indazol-4-il)cikloheksil)-N-(4-cijanofenil)acetamid (drugi eluirani izomer, relativna stereohemija nije određena i proizvoljno dodeljena) Referentni Primer 13: 2-(4-(1H-indazol-4-il)cikloheksil)-N-(4-cijanofenil)acetamid
[0279] Pripremljeni su opštim postupcima A, B, i G. Opšti postupak A koristio je indazol-4-boronsku kiselinu i etil 2-(4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-il)acetat sa dimetoksietanom kao rastvaračem, Pd(dppf)Cl2kao katalizator, K2CO3kao bazu, i izostavljen je KBr kao aditiv. Opšti postupak B primenjivao je 10 mast. % Pd(OH)2/C (10 mas. %) kao katalizator i metanol kao rastvarač. Opšti postupak G koristio je 4-cijanoanilin (2 ekv.) i etil 2-(4-(1H-indazol-4-il)cikloheksil)acetat (smeša diastereomera) (1 ekv). Prečišćavanjem reakcione smeše hromatografijom na silika gelu dobijena su oba izomera referentnog Primera 13. Referentni Primer 13(a) (prvi eluirani izomer, relativna stereohemija nije određena i proizvoljno dodeljena):<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.15 (s, 1H), 7.55 - 7.40 (m, 2H), 7.40 - 7.20 (m, 4H), 7.14 (s, 1H), 7.08 - 7.01 (m, 1H), 3.21 - 3.00 (m, 1H), 2.59 - 2.44 (m, 3H), 1.98 - 1.72 (m, 8H) ppm.
[0280] Referentni Primer 13(b) (drugi eluirani izomer, relativna stereohemija nije određena i proizvoljno dodeljena):<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.13 (s, 1H), 7.69 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.63 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.37 - 7.20 (m, 3H), 6.99 (t, J = 4.0 Hz, 1H), 3.06 - 2.88 (m, 14H), 2.37 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 2.13 - 1.97 (m, 5H), 1.83 - 1.65 (m, 2H), 1.39 - 1.27 (m, 2H) ppm.
Referentni Primer 14
2-(4-(1H-indazol-4-il)cikloheksil)-N-(4-hlorofenil)acetamid (smeša diastereomera)
[0281]
Referentni Primer 14: 2-(4-(1H-indazol-4-il)cikloheksil)-N-(4-hlorofenil)acetamid
[0282] Pripremljeni su opštim postupcima A, B, i G. Opšti postupak A koristio je indazol-4-boronsku kiselinu i etil 2-(4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-il)acetat sa dimetoksietanom kao rastvaračem, Pd(dppf)Cl2kao katalizator, K2CO3kao bazu, i izostavljen KBr kao aditiv. Opšti postupak B primenjivao je 10 mast. % Pd(OH)2/C (10 mas. %) kao katalizator i metanol kao rastvarač. Opšti postupak G koristio je 4-cijanoanilin (2 ekv.) i etil 2-(4-(1H-indazol-4-il)cikloheksil)acetat (1 ekv). Prečišćavanjem reakcione smeše hromatografijom na silika gelu daje referentni Primer 14 kao smešu cis- i trans-diastereomera.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.13 (s, 1H), 7.55 - 7.45 (m, 2H), 7.38 - 7.21 (m, 4H), 7.13 (s, 1H), 6.99 (t, J = 3.9 Hz, 1H), 3.06 - 2.90 (m, 1H), 2.33 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 2.13 - 1.96 (m, 5H), 1.82 - 1.64 (m, 2H), 1.38 - 1.28 (m, 2H) ppm. m/z 368.2 (M+H<+>).
Primer 16
N-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)propanamid (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije određena i proizvoljno dodeljena)
[0283]
Intermedijer 16A: etil 2-(4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetat
[0284] Intermedijer 16A je pripremljen pomoću opštih postupaka A i B. Opšti postupak A koristio je etil 2-(4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-il)acetat i hinolin-4-boronsku kiselinu. Opšti postupak B koristio je 20 mas. % suvog Pd/C (10 mas. %) i metanol kao rastvarač da se dobije željeni proizvod Intermedijer 16A.
Intermedijer 16B: etil 2-(4-(hinolin-4-il)cikloheksil)propanoat
[0285] Rastvoru Intermedijara 16A (630 mg, 2.15 mmol) u THF (10 mL) na 0 °C dodat je rastvor NaHMDS (4.3 mL, 4.3 mmol, 1M u THF). Dobijeni žuti rastvor je mešan na 0 °C tokom 5 minuta i dodat je MeI (608 mg, 4.3 mmol). Reakciona smeša je mešana 1 sat na 0 °C, nakon čega je dodata sirćetna kiselina (200 µL) zajedno sa Et2O (10 mL). Reakciona smeša je filtrirana kroz čep od silicijum dioksida eluirana sa dodatnim Et2O (50 mL). Filtrat je koncentrovan i prečišćen primenom hromatografije na silika gelu (15% do 30% EtOAc u heksanima) da se dobije Intermedijer 16B kao ulje i 2:1 smeša cis:trans diastereomera.
Primeri 16: N-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)propanamid
[0286] Pripremljen sa opštim postupkom G koji koristi Intermedijer 16B (78 mg, 0.25 mmol) i 4-fluoroanilin (56 mg, 0.5 mmol). Prečišćen je hromatografijom na silika gelu (30% do 45% etil acetata u heksanima) da se dobije Primer 16 u obliku bele čvrste supstance i pojedinačnog diastereomera (prvi eluirani izomer, racemski, relativna stereohemija nije određena).<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 8.83 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.11 (dd, J = 8.4, 0.8 Hz, 1H), 8.05 (dd, J = 8.4, 0.5 Hz, 1H), 7.69 (ddd, J = 8.4, 6.9, 1.4 Hz, 1H), 7.57-7.52 (m, 4H), 7.26 (s, 1H), 7.05-6.99 (m, 2H), 3.31-3.25 (m, 1H), 2.22-2.15 (m, 1H), 2.11-1.98 (m, 4H), 1.90 (s, 1H), 1.82-1.73 (m, 1H), 1.60 (qd, J = 11.8, 2.6 Hz, 2H), 1.44-1.27 (m, 5H) ppm. m/z 377.3 (M+H<+>).
Primeri 17 i 18
N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)propanamid
[0287]
N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)propanamid
[0288]
Primeri 17 i 18: N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)propanamid i N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)propanamid
[0289] Pripremljen je opštim postupkom G koji koristi Intermedijer 16B (44 mg, 0.14 mmol) i 4-hloroanilin (36 mg, 0.28 mmol). Prečišćen je primenom hromatografije na silika gelu (30% do 45% EtOAc u heksanima) da se dobije Primer 17 (trans-diastereomer, racemski) kao bela čvrsta supstanca i prvi eluirani izomer.<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 8.84 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.11 (dd, J = 8.4, 1.0 Hz, 1H), 8.07-8.05 (m, 1H), 7.69 (ddd, J = 8.4, 6.9, 1.4 Hz, 1H), 7.58-7.50 (m, 3H), 7.31-7.25 (m, 4H), 3.34-3.26 (m, 1H), 2.22-2.15 (m, 1H), 2.14-1.98 (m, 5H), 1.83-1.74 (m, 1H), 1.65-1.57 (m, 2H), 1.44-1.32 (m, 2H), 1.30 (d, J= 6.9 Hz, 3H) ppm. m/z 393.2 (M+H<+>).
[0290] Dalje eluiranje iz kolone u prethodnom primeru dalo je Primer 18 (cis-diastereomer, racemski) kao bela čvrsta supstanca i drugi eluirani izomer.<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 8.79 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.11 (dd, J = 8.4, 1.2 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.71 (ddd, J = 8.3, 6.9, 1.3 Hz, 1H), 7.58 (ddd, J = 8.4, 6.9, 1.4 Hz, 1H), 7.55-7.52 (m, 2H), 7.28-7.23 (m, 3H), 3.50-3.42 (m, 1H), 2.68-2.60 (m, 1H), 2.18-2.12 (m, 1H), 1.95-1.67 (m, 8H), 1.29 (d, J = 6.8 Hz, 3H) ppm. m/z 393.2 (M+H<+>).
Primer 19
(R)-N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)propanamid
[0291]
Primer 19: (R)-N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)propanamid
[0292] Pipremljen je primenom opštih postupaka K, B, E, L, M, N, i O. Opšti postupak L koristio je 2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)-cikloheksil)sirćetnu kiselinu (smeša diastereomera), i (R)-2-feniloksazolidinon. Opšti postupak M koristio je cis proizvod i metil jodid. Pomoćno sredstvo je uklonjeno prateći opšti postupak N i formiran je željeni proizvod primenom opšteg postupka O sa 4-hloroanilinom. Prečišćen je hromatografijom na silika gelu (0% do 100% etil acetata u heksanima) da se dobije Primer 19.<1>H NMR cis-izomera (400 MHz; CDCl3): δ 9.14 (s, 1H), 8.70 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.06 (dd, J = 9.2 Hz, J = 5.6 Hz, 1H), 7.58-7.64 (m, 3H), 7.45 (ddd, J = 9.3 Hz, J = 7.8 Hz, J = 2.7 Hz, 1H), 7.19-7.24 (m, 2H), 7.15 (d, J = 4.6Hz, 1H), 3.16-3.26 (m, 1H), 2.59-2.69 (m, 1H), 2.08-2.16 (m, 1H), 1.66-1.86 (m, 7H), 1.31-1.42 (m, 1H), 1.21 (d, J = 6.8Hz, 3H) ppm. m/z 411.2 (M+H)<+>.
Referentni Primer 20 (S)-N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)propanamid
[0293]
Primer 20: (S)-N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)propanamid
[0294] Pipremljen je primenom opštih postupaka K, B, E, L, M, N, i O. Opšti postupak L koristio je 2-(4-(hinolin-3-il)-cikloheksil)sirćetnu kiselinu (smeša diastereomera), i (S)-2-feniloksazolidinon. Opšti postupak M koristio je smešu diastereomera i metil jodid. Pomoćno sredstvo je uklonjeno prateći opšti postupak N i formiran je željeni proizvod primenom opšteg postupka O sa 4-hloroanilinom. Prečišćen je primenom hromatografije na silika gelu (0% do 10% izopropanola u heksanima) da se dobije Primer 20 (trans-izomer) kao drugi izomer za eluiranje.<1>H NMR transizomera (400 MHz; MeOH): δ 9.21 (d, J = 1.9 Hz, 1H), 9.10 (d, J = 1.9Hz, 1H), 8.30-8.34 (m, 1H), 8.19-8.23 (m, 1H), 8.10-8.16 (m, 1H), 7.94-8.00 (m, 1H), 7.57-7.63 (m, 2H), 7.29-7.34 (m, 2H), 3.00 (tt, J = 12.0Hz, J = 3.1 Hz, 1H), 2.28-2.38 (m, 1H), 2.07-2.22 (m, 3H), 1.9302.01 (m, 1H), 1.65-1.82 (3H), 1.22-1.46 (m, 5H) ppm. m/z 393.2 (M+H)<+>.
Primer 21
(R)-N-(4-cijanofenil)-2-(cis-4-(7-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)butanamid
[0295]
Primer 21: (R)-N-(4-cijanofenil)-2-(cis-4-(7-fluorohinolin-4-il)cikloheksil) butanamid
[0296] Pipremljen primenom opštih postupaka K, B, E, L, M, N, i O. Opšti postupak L koristio je 2-(4-(7-fluorohinolin-4-il)-cikloheksil)sirćetnu kiselinu (smeša diastereomera), i (R)-2-feniloksazolidinon. Opšti postupak M koristio je cis-proizvod i etil jodid. Pomoćno sredstvo je uklonjeno prateći opšti postupak N i formiran je željeni proizvod primenom opšteg postupka O sa 4-cijanoanilinom. Prečišćen je primenom hromatografije na silika gelu (10% do 25% EtOAc u CH2Cl2) da se dobije Primer 21 (cis-izomer).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.78 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.55 (s, 1H), 8.07 (dd, J = 9.4, 5.9 Hz, 1H), 7.80 - 7.67 (m, 3H), 7.60 - 7.53 (m, 2H), 7.37 (ddd, J = 9.4, 7.9, 2.7 Hz, 1H), 7.26 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 3.44 (s, 1H), 2.51 (td, J = 10.4, 3.7 Hz, 1H), 2.23 - 2.11 (m, 1H), 2.09 - 1.35 (m, 10H), 1.01 (t, J = 7.4 Hz, 3H) ppm. m/z 416.2 (M+H)<+>.
Primer 22
(R)-N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(7-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)butanamid
[0297]
Primer 22: (R)-N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(7-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)butanamid
[0298] Pipremljen primenom opštih postupaka K, B, E, L, M, N, i O. Opšti postupak L koristio je 2-(4-(7-fluorohinolin-4-il)-cikloheksil)sirćetnu kiselinu (smeša diastereomera), i (R)-2-feniloksazolidinon. Opšti postupak M koristio je cis-proizvod i etil jodid. Pomoćno sredstvo je uklonjeno prateći opšti postupak N i formiran je željeni proizvod primenom opšteg postupka O sa 4-hloroanilinom. Prečišćen je primenom hromatografije na silika gelu (20% do 50% EtOAc u heksanima). Ostatak je dalje prečišćen hromatografijom na silika gelu (25% EtOAc u CH2Cl2) da se dobije željeni proizvod.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.83 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.07 (dd, J = 9.4, 5.9 Hz, 1H), 7.74 (dd, J = 10.0, 2.7 Hz, 1H), 7.60 - 7.44 (m, 3H), 7.41 - 7.24 (m, 4H), 3.54 3.41 (m, 1H), 2.42 (td, J = 10.7, 3.7 Hz, 1H), 2.19 (d, J = 16.6 Hz, 1H), 2.17 - 1.37 (m, 10H), 1.02 (t, J = 7.4 Hz, 3H) ppm. m/z 425.2 (M+H)<+>.
Primer 23
(R)-N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)propamid
[0299]
Primer 23: (R)-N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)propamid
[0300] Pipremljen je primenom opštih postupaka K, B, E, L, M, N, i O. Opšti postupak L koristio je 2-(4-(hinolin-4-il)-cikloheksil)sirćetnu kiselinu (smeša diastereomera), i (R)-2-feniloksazolidinon. Opšti postupak M koristio je cis-proizvod i metil jodid. Pomoćno sredstvo je uklonjeno prateći opšti postupak N i formiran je željeni proizvod primenom opšteg postupka O sa 4-hloroanilinom da se dobije Primer 23. Manji, neželjeni enantiomer uklonjen je putem postupka L: vreme zadržavanja sporednog, neželjenog enantiomera = 7.1 min, vreme zadržavanja glavnog, željenog enantiomera = 8.0 min.<1>H NMR željenog enantiomera (400 MHz; CDCl3): δ 8.84 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.29 (s, 1H), 8.14 - 8.02 (m, 2H), 7.70 (ddd, J = 8.3, 6.8, 1.3 Hz, 1H), 7.62 - 7.54 (m, 2H), 7.32 - 7.20 (m, 2H), 3.60 - 3.26 (m, 1H), 2.71 - 2.48 (m, 1H), 2.16 - 2.08 (m, 1H), 1.96 -1.66 (m, 9H), 1.63 - 1.45 (m, 1H), 1.24 (d, J = 6.8 Hz, 3H) ppm. m/z 393.2 (M+H)-.
Primer 24
(R)-N-(4-cijanofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)propamid
[0301]
Primer 24: (R)-N-(4-cijanofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)propamid
[0302] Pipremljen je primenom opštih postupaka K, B, E, L, M, N, i O. Opšti postupak L koristio je 2-(4-(hinolin-4-il)-cikloheksil)sirćetnu kiselinu (smeša diastereomera), i (R)-2-feniloksazolidinon. Opšti postupak M koristio je cis proizvod i metil jodid. Pomoćno sredstvo je uklonjeno prateći opšti postupak N i formiran je željeni proizvod primenom opšteg postupka O sa 4-cijanoanilinom da se dobije Primer 24.<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 8.89 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.41 (s, 1H), 8.11 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.74 -7.67 (m, 1H), 7.64 - 7.54 (m, 3H), 7.33 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 3.54 - 3.37 (m, 1H), 2.67 - 2.53 (m, 1H), 2.16 - 2.09 (m, 1H), 2.00 - 1.72 (m, 7H), 1.57 - 1.45 (m, 1H), 1.26 (d, J = 6.8 Hz, 3H) ppm. m/z 384.2 (M+H)<+>.
Primer 25
(R)-N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)butanamid
[0303]
Primer 25: (R)-N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)butanamid
[0304] Pipremljen je primenom opštih postupaka K, B, E, L, M, N, i O. Opšti postupak L koristio je 2-(4-(hinolin-4-il)-cikloheksil)sirćetnu kiselinu (smeša diastereomera), i (R)-2-feniloksazolidinon, opšti postupak M koristio je cis proizvod iz postupka L i etil jodid. Pomoćno sredstvo je uklonjeno prateći opšti postupak N i formiran je željeni proizvod primenom opšteg postupka O sa 4-hloroanilinom. Jedinjenje je prečišćeno primenom hromatografije na silika gelu (10% do 100% EtOAc u metilen hloridu) da se dobije Primer 25 kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 8.83 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.15 - 7.95 (m, 3H), 7.69 (dd, J = 8.3, 7.0 Hz, 1H), 7.63 - 7.49 (m, 3H), 7.31 - 7.22 (m, 3H), 3.47 (s, 1H), 2.43 (td, J = 10.4, 3.7 Hz, 1H), 2.16 - 2.13 (m, 1H), 1.98 - 1.52 (m, 11H), 1.01 (t, J = 7.3 Hz, 3H) ppm. m/z 406.2 (M+H<+>).
Primer 26
(S)-N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)butanamid
[0305]
Primer 26: (S)-N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)butanamid
[0306] Pipremljen je primenom opštih postupaka K, B, E, L, M, N, i O. Opšti postupak L koristio je 2-(4-(hinolin-4-il)-cikloheksil)sirćetnu kiselinu (smeša diastereomera), i (S)-2-feniloksazolidinon, opšti postupak M koristio je etil jodid i trans proizvod iz postupka L. Pomoćno sredstvo je uklonjeno prateći opšti postupak N i formiran je željeni proizvod primenom opšteg postupka O sa 4-hloroanilinom. Jedinjenje je prečišćeno primenom hromatografije na silika gelu (10% do 100% EtOAc u metilen hloridu) da se dobije Primer 26 kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 8.84 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.11 (dd, J = 8.5, 1.1 Hz, 1H), 8.05 (dd, J = 8.4, 0.6 Hz, 1H), 7.69 (ddd, J = 8.4, 6.8, 1.4 Hz, 1H), 7.59 - 7.46 (m, 3H), 7.34 - 7.29 (m, 2H), 7.26 - 7.25 (m, 2H), 3.30 (t, J = 11.7 Hz, 1H), 2.25 - 1.88 (m, 4H), 1.85 - 1.69 (m, 3H), 1.70 - 1.50 (m, 3H), 1.50 - 1.27 (m, 2H), 0.99 (t, J = 7.4 Hz, 3H) ppm. m/z 406.2 (M+H<+>).
Referentni Primer 27
N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-iloksi)cikloheksil)propanamid (enantiomerno čist, apsolutna stereohemija nije određena)
Intermedijer 27A: etil 2-(1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-iliden)propanoat
[0308] Suspenzija 60% NaH (12.8 g, 385 mmol) u THF (500 mL) je ohlađena na 0 °C i dodavan je trietil-2-fosfono propionat (91.6 g, 385 mmol) tokom 30 minuta. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i zamućena suspenzija je postepeno postala žuti rastvor. Posle zagrevanja na sobnu temperaturu, reakciona smeša je ponovo ohlađena na 0 °C. Rastvor 1,4-cikloheksandion monoetilen acetala (50 g, 320 mmol) je dodat ukapavanjem pomoću levka za dodavanje. Po završenom dodavanju, reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 1 sat. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i žuti ostatak je razblažen zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(500 mL) i EtOAc (1000 mL). Organski sloj je odvojen i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (500 mL × 2). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni anhidrovanim Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod smanjenim pritiskom dajući Intermedijar 27A (93.8 g), koji se koristi u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijer 27B: racemski etil 2-(1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-iliden)propanoat
[0309] Intermedijer 27A (93.8 g, 390.3 mmol) je rastvoren u EtOH (1000 mL) i dodat je 10% paladijum na ugljeniku (9.4 g). Balon H2(g) sa iglom je prosipan preko crne suspenzije, nakon čega je balon ponovo napunjen i posuda je držana u atmosferi H2(g) preko noći. Smeša je filtrirana kroz CELITE®545 i filtrirani kolač je opran sa EtOH. Filtrat je koncentrovan pod smanjenim pritiskom dajući Intermedijar 27B (92.5 g), koji se koristi u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Intermedijer 27C: racemski etil 2-(4-oksocikloheksil)propanoat
[0310] Racemska smeša Intermedijera 27B (17.1 g, 70.6 mmol) rastvorena je u acetonu (250 mL). zatim je dodat 1 N vod. HCl (62 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturri tokom 24 sata.
Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ekstrahovana sa EtOAc (200 mL × 3). Kombinovani organski ekstrakti su oprani sa 1 N vod. NaOH (50 mL), osušeni anhidrovanim MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (0-20% EtOAc u petrolej etru) da se dobije Intermedijer 27C (12.8 g, 91.5% prinosa).
Intermedijer 27D: etil-2-(trans-4-hidroksicikloheksil)propanoat
[0311] Rastvoru racemskog Intermedijera 27C (5.94 g, 30 mmol) u MeOH (100 mL) na 0 °C dodat je NaBH4(1.67 g, 45 mmol) u porcijama. Smeša je zagrevana do sobne temperature i praćena je pomoću TLC. Kada je potrošen početni materijal, smeša je ugašena sa 1 M HCl i ekstrahovana sa CH2Cl2(2 × 100 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Dobijeno svetlo žuto ulje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu (25% do 40% EtOAc u heksanima) da se dobije trans-izomer, Intermedijer 27D kao drugi eluirani izomer.
Intermedijer 27E.etil-2-(cis-4-(hinolin-4-iloksi)cikloheksil)propanoat:
[0312] Rastvoru racemskog Intermedijera 27D (690 mg, 3.45 mmol), hinolin-4-ola (600 mg, 4.13 mmol) i trifenilfosfina (2.69 g, 10.3 mmol) u THF (11.5 mL) na 0 °C dodat je DEAD (0.921 mL, 5.87 mmol) u kapima. Smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi tokom 18 sati. Smeša je razblažena sa 1 M NaOH i ekstrahovana sa EtOAc (3 x). Kombinovani organski slojevi su oprani slanim rastvorom, osušeni MgSO4, filtrirani i koncentrovani pod smanjenim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (10% do 100% EtOAc u heksanima) da se dobije Intermedijer 27E.
Referentni Primer 27: N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-iloksi)cikloheksil)propanamid
[0313] Referentni Primer 27 je pripremljen opštim postupkom G koji je koristio Intermedijer 27E i 4-hloroanilin. Racemska smeša je rešena primenom postupka M da se dobije referentni Primer 27 kao pojedinačni enantiomer (apsolutna stereohemija nije određena, drugi eluirani enantiomer).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.61 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 8.27 (s, 1H), 8.14 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.61 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.7 Hz, 2H), 7.42 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.31 - 7.13 (m, 2H), 6.62 (d, J = 5.3 Hz, 1H), 4.44 - 4.20 (m, 1H), 2.27 - 2.01 (m, 3H), 1.99 - 1.78 (m, 2H), 1.72 - 1.58 (m, 1H), 1.51 (dd, J = 24.1, 12.8 Hz, 2H), 1.24 - 0.96 (m, 5H). m/z 409.2 (M+H)<+>.
Primer 30
N-(4-hlorofenil)-2-(cis-1-hidroksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije utvrđena i proizvoljno dodeljena)
[0314]
Intermedijer 30A: 4-(1,4-dioksaspiro[4.5]dec-7-en-8-il)hinolin
[0315] U reakcionu bočicu od 20 mL koja sadrži 4,4,5,5-tetrametil-2-(1,4-dioksaspiro[4.5]dec-7-en-8-il)-1,3,2-dioksaborolan (videti opšti postupak K za referencu zapripremu) koji je komercijalno dostupan, CAS# [680596-79-6]) (1.0 g, 3.8 mmol, 1.0 ekviv.), 4-bromohinolin (0.86 g, 4.1 mmol, 1.1 ekviv.), i Pd(dppf)Cl2(0.154 g, 0.188 mmol, 0.05 ekviv.) dodat je dioksan (12 mL), voda (1.2 mL), i NEt3(1.0 mL, 7.5 mmol, 2.0 ekviv.). Tikvica je isprana argonom i stavljena u prethodno zagrejan blok na 100 °C tokom 15 sati. Sirovi ostatak je razblažen sa EtOAc (100 mL), filtriran kroz sloj CELITE®, i koncentrovan. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% do 50% EtOAc u heksanima) da se dobije Intermedijer 30A (1.0 g, 99% prinosa).
Intermedijer 30B: 4-(hinolin-4-il)cikloheksan-1-on
[0316] Intermedijer 30A (3.25 g, 12.3 mmol, 1.0 ekviv.) je rastvoren u MeOH (100 mL) i poprskan sa argonom 1 sat pre dodavanja Pd/C (2.54 g, 2.4 mmol, 0.2 ekviv.). Reakcioni rastvor je poprskan sa H2(g) i stavljen je pod pozitivni pritisak H2balonom. Reakcija je mešana pod H2tokom 14 h i filtrirana kroz CELITE®, opirana sa 100 mL MeOH. Rastvor je koncentrovan i daje svetlo žutu smešu čvrste supstance i ulja. Sirova smeša je direktno razblažena sa 3 M HCl (100 mL) i acetonom (100 mL). Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 2 sata i praćen pomoću TLC. Reakcija je bazifikovana sa 1 N NaOH i ekstrahovana sa EtOAc (2 × 100 mL), oprana slanim rastvorom, osušena (MgSO4), filtrirana, i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% do 50% EtOAc u heksanima) da se dobije intermedijer 30B (1.25 g, 45% prinosa u 2 koraka).
Intermedijer 30Ca: etil 2-(cis-1-hidroksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetat Intermedijer 30Cb: etil 2-(trans-1-hidroksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetat
[0317] U reakcionu bočicu od 20 mL koja sadrži Intermedijer 30B (0.99 g, 4.4 mmol, 1.0 ekviv.) i Zn<0>(350 mg, 5.3 mol, 1.2 ekviv.) pod argonom dodat je anhidrovani THF (8 mL). Rastvor etil bromoacetata (0.54 mL, 4.8 mol, 1.1 ekviv.) u THF (4.0 mL) dodat je špricem praćen kristalnim jodom. Reakciona smeša je stavljena u prethodno zagrejan blok na 80 °C tokom 5 sati, nakon čega je dodato dodatnih 0.5 ekviv. etil bromacetata (0.24 mL, 2.2 mmol) i Zn<0>(150 mg, 2.2 mmol). Nastavljeno je sa mešanjem reakcije dodatnih 2 sata na 80 °C. Smeša je razblažena sa EtOAc i filtrirana kroz sloj CELITE®. Rastvor je koncentrovan i prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% do 100% EtOAc u heksanima) da se dobije Intermedijer 30Ca kao cis i Intermedijer 30Cb trans izomeri kao žute čvrste supstance.
Primer 30: N-(4-hlorofenil)-2-(cis-1-hidroksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid
[0318] U reakcionu bočicu koja sadrži 4-hloroanilin (56 mg, 0.44 mmol, 2.0 ekviv.) dodat je iPrMgCl (2.0 M u THF, 0.22 mL, 2.0 ekviv.). Reakcija je mešana 15 minuta na sobnoj temperaturi. U odvojenoj bočici, intermedijar 30C (70 mg, 0.22 mmol, 1.0 ekviv.) je rastvoren u 0.5 mL THF pre dodavanja 11 mL iPrMgCl (2.0 M u THF, 0.11 mmol, 1.0 ekviv.). Ovaj rastvor je mešan 5 minuta pre nego što je ubrizgan u bočicu za reakciju anilida. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 14 sati i razblažena sa EtOAc (30 mL), oprana sa 3 M HCl (2 × 15 mL) i slanim rastvorom, osušena (MgSO4), filtrirana i koncentrovana. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% do 100% EtOAc u heksanima) da se dobije Primer 30 (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije utvrđena i proizvoljno dodeljen).<1>H NMR (400 MHz; CD3OD): δ 8.89 (d, J = 5.5 Hz, 1H) 8.31 (d, J = 8.6 Hz, 1H) 8.14 (d, J = 8.4 Hz, 1H) 7.94 (s, 1H) 7.77-7.85 (m, 2H) 7.50 (d, J = 8.8 Hz, 2H) 7.19-7.28 (m, 2H) 3.50-3.64 (m, 1H) 2.75 (s, 2H) 1.93-2.10 (m, 4H) 1.73-1.89 (m, 4H). m/z 395.2 (M+H)<+>.
Referentni Primeri 31 i 32
Referentni Primer 31: N-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(izohinolin-4-iloksi)cikloheksil)acetamid trifluoroacetat
[0319]
Referentni Primer 32: N-(4-fluorofenil)-2-(trans-4-(izohinolin-4-iloksi)cikloheksil)acetamid trifluoroacetat
[0320]
Intermedijer 31A. Etil 2-(4-hidroksicikloheksil)acetat:
[0321] Rastvoru etil (2-(4-oksocikloheksil)acetata (videti reference u opštem postupku A za pripremu) (1.0 g, 5.4 mmol) u metanolu (40 mL) na sobnoj temperaturi dodat je NaBH4(0.60 g, 16 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na vazduhu tokom 13 h, nakon čega je razblažen sa CH2Cl2(60 mL), opran sa 1 M HCl (3 × 30 mL), osušen anhidrovanim MgSO4, filtriran, i koncentrovan pod smanjenim pritiskom da se dobije Intermedijer 31A kao 1:3 smeša cis i trans izomera, kao bistro bezbojno ulje (1.0 g, 99% prinosa).
Intermedijer 31B. N-(4-fluorofenil)-2-(4-hidroksicikloheksil)acetamid:
[0322] Pripremljen primenom opšteg postupka G koji koristi intermedijer 31A (1.0 g, 5.4 mmol) i 4-fluoroanilin (1.01 mL, 11 mmol). Prečišćen je primenom hromatografije na silika gelu (50% do 100% EtOAc u heksanima) da se dobije Intermedijer 31B kao 1:2 smeša diastereomera (bela čvrsta supstanca, 772 mg, 57%).
Referentni Primeri 31 i 32: N-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(izohinolin-4-iloksi)cikloheksil)acetamid trifluoroacetat i N-(4-fluorofenil)-2-(trans-4-(izohinolin-4-iloksi)cikloheksil)acetamid trifluoroacetat
[0323] U bočicu koja sadrži Intermedijer 31B (200 mg, 0.80 mmol, 1.0 ekviv.) i 4-izohinolinol (170 mg, 1.2 mmol, 1.5 ekviv.) dodat je toluen praćen cijanometilentributilfosforanom (0.31 mL, 1.2 mmol, 1.5 ekviv.), kap po kap. Reakcija je mešana na 60 °C tokom 16 h pre koncentrovanja. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% do 100% EtOAc u heksanima) da se dobije smeša koja sadrži referentne Primere 31 i 32, koja je dalje prečišćena preparativnom HPLC (PHENOMENEX® Gemini-NX, 10µ, C18, 110A, 250 × 30 mm, 20 mL/min, eluiranje sa 0% do 100% acetonitrila u vodi sa 0.1% TFA gradijentom tokom prvih 30 minuta od 40 minuta) da se dobije referentni Primer 31 (cis-diastereomer, prvo eluiranje) kao TFA so.<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 8.87 (s, 1H) 8.22 (d, J = 8.0 Hz, 1H) 8.07 (s, 1H) 7.94 (d, J = 8.0 Hz, 1H) 7.56-7.73 (m, 2H) 7.42-7.52 (m, 2H) 7.39 (br. s., 1H) 6.95-7.06 (m, 2H) 4.85 (br. s., 1H) 2.33 (d, J = 7.0 Hz, 2H) 2.22 (d, J = 13.1 Hz, 2H) 2.11 (s, 1H) 1.66-1.79 (m, 4H) 1.51-1.66 (m, 2H). m/z 379.2 (M+H)<+>.
[0324] Daljim eluiranjem prethodne preparativne HPLC reverzne faze dobijen je referentni Primer 32 (trans-diastereomer, drugo eluiranje) kao TFA so.<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 8.86 (s, 1H) 8.19-8.25 (m, 1H) 8.09 (s, 1H) 7.93 (d, J = 8.0 Hz, 1H) 7.69 (ddd, J = 8.3, 7.0, 1.3 Hz, 1H) 7.57-7.63 (m, 1H) 7.45-7.54 (m, 2H) 6.94-7.07 (m, 2H) 4.37-4.51 (m, 1H) 2.24-2.40 (m, 3H) 1.96-2.09 (m, 4H) 1.57-1.72 (m, 2H) 1.17-1.31 (m, 2H). m/z 379.2 (M+H)<+>.
Referentni Primer 33
N-(4-cijanofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-iloksi)cikloheksil)acetamid
[0325]
Referentni Primer 33: N-(4-cijanofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-iloksi)cikloheksil)acetamid
[0326] Smeši N-(4-cijanofenil)-2-(4-hidroksicikloheksil)acetamida (pripremljenog primenom opšteg postupka G iz Intermedijara 31A i 4-cijanoanilina) (200 mg, 0.775 mmol, 1.0 ekviv.), 4-hinolinola (168 mg, 1.16 mmol, 1.5 ekviv.), i PPh3(609 mg, 2.33 mmol 3.0 ekviv.) ohlađenoj na 0 °C dodat je DEAD (0.182 mL, 1.16 mmol, 1.5 ekviv.) kap po kap. Ledeno kupatilo je uklonjeno, i reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 16 sati. Smeša je zatim razblažena sa EtOAc, filtrirana kroz sloj CELITE®, i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% do 100% EtOAc u heksanima) da se dobije Primer 33 (cis-diastereomer), koji je dalje prečišćen preparativnom HPLC reverzne faze (PHENOMENEX® Gemini-NX, 10µ, C18, 110A, 250 × 30 mm, 20 mL/min, eluiranje sa 0% do 100% acetonitrila u vodi sa 0.1% TFA gradijentom tokom prvih 30 min od 40 minuta) da se dobije Primer 33 kao TFA so.<1>H NMR (400 MHz; CD3OD): δ 8.96 (d, J = 6.8 Hz, 1H) 8.48-8.56 (m, 1H) 8.06-8.17 (m, 2H) 7.90 (s, 1H) 7.76-7.83 (m, 2H) 7.62-7.69 (m, 2H) 7.52 (d, J = 6.8 Hz, 1H) 5.33 (br. s., 1H) 2.65 (d, J = 0.6 Hz, 1H) 2.43 (d, J = 7.2 Hz, 2H) 2.25 (br. s., 2H) 2.05-2.19 (m, 1H) 1.93 (br. s., 2H) 1.79 (d, J = 3.3 Hz, 2H) 1.64 (br. s., 2H). m/z 386.2 (M+H)<+>.
Primer 34
N-(4-hlorofenil)-2-(trans-1-hidroksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije utvrđena i proizvoljno dodeljena)
[0327]
Primer 34: N-(4-hlorofenil)-2-(trans-1-hidroksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije utvrđena i proizvoljno dodeljena)
[0328] U reakcionu bočicu koja sadrži 4-hloroanilin (33 mg, 0.25 mmol, 2.0 ekviv.) dodat je iPrMgCl (2.0 M u THF, 0.13 mL, 0.25 mmol, 2.0 ekviv.). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 minuta. U odvojenoj bočici, pojedinačni diastereomer dobijen je od Intermedijara 30Ca (40 mg, 0.13 mmol, 1.0 ekviv.) je rastvoren u 0.5 mL THF pre dodavanja 0.064 mL iPrMgCl (2.0 M u THF, 0.13 mmol, 1.0 ekviv.). Ovaj rastvor je mešan 5 minuta pre nego što se ubrizga u bočicu za reakciju anilida. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 14 sati i razblažena sa EtOAc (30 mL), oprana sa 3 M HCl (2 × 15 mL) i slanim rastvorom, osušena (MgSO4), filtrirana i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% do 100% EtOAc u heksanima) da se dobije Primer 34 (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije utvrđena i proizvoljno dodeljena).<1>H NMR (400 MHz; CD3OD): δ 9.09 (d, J = 5.9 Hz, 1H) 8.62 (d, J = 8.6 Hz, 1H) 8.20-8.29 (m, 1H) 8.15 (ddd, J = 8.4, 7.1, 1.1 Hz, 1H) 7.94-8.06 (m, 2H) 7.54-7.62 (m, 2H) 7.23-7.33 (m, 2H) 3.74 (t, J = 12.1 Hz, 1H) 3.30 (dt, J = 3.3, 1.6 Hz, 1H) 2.61 (s, 2H) 2.09-2.26 (m, 2H) 1.98-2.09 (m, 2H) 1.81-1.96 (m, 4H). m/z 395.2 (M+H)<+>.
Primer 35
N-(4-fluorofenil)-2-(trans-1-hidroksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije utvrđena i proizvoljno dodeljena)
[0329]
Primer 35: N-(4-fluorofenil)-2-(trans-1-hidroksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije utvrđena i proizvoljno dodeljena)
[0330] U reakcionu bočicu koja sadrži 4-fluoroanilina (28 mg, 0.25 mmol, 2.0 ekviv.) dodat je iPrMgCl (2.0 M u THF, 0.13 mL, 0.26 mmol, 2.0 ekviv.). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 minuta. U odvojenoj bočici, pojedinačni diastereomer dobijen je od Intermedijara 30Ca (40 mg, 0.13 mmol, 1.0 ekviv.) je rastvoren u 0.5 mL THF pre dodavanja 0.064 mL iPrMgCl (2.0 M u THF, 0.13 mmol, 1.0 ekviv.). Ovaj rastvor je mešan 5 minuta pre nego što je ubrizgan u bočicu za reakciju anilida. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 14 sati i razblažena sa EtOAc (30 mL), oprana sa 3 M HCl (2 × 15 mL) i slanim rastvorom, osušena (MgSO4), filtrirana, i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% do 100% EtOAc u heksanima) da se dobije Primer 35 (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije utvrđena i proizvoljno dodeljena).<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 8.81 (d, J = 4.7 Hz, 1H) 8.63-8.70 (m, 1H) 8.12 (dd, J = 8.4, 1.0 Hz, 1H) 8.05 (d, J = 8.2 Hz, 1H) 7.63-7.73 (m, 1H) 7.42-7.60 (m, 3H) 7.34 (d, J = 4.7 Hz, 1H) 6.94-7.05 (m, 2H) 3.28 (t, J = 12.0 Hz, 1H) 2.58 (s, 2H) 1.97-2.16 (m, 4H) 1.84 (d, J = 10.9 Hz, 2H) 1.57-1.70 (m, 2H). m/z 379.2 (M+H)<+>.
Primer 36
N-(4-hlorofenil)-2-(trans-1-hidroksi-4-(qhinolin-4-il)cikloheksil)acetamid (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije utvrđena i proizvoljno dodeljena)
[0331]
Primer 36: N-(4-hlorofenil)-2-(trans-1-hidroksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil) acetamid (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije utvrđena i proizvoljno dodeljena)
[0332] U reakcionu bočicu koja sadrži 4-hloroanilin (51 mg, 0.40 mmol, 2.0 ekviv.) dodat je iPrMgCl (2.0 M u THF, 0.20 mL, 0.40 mmol, 2.0 ekviv.). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 minuta. U odvojenoj bočici, cis-diastereomer dobijen iz Intermedijera 30C (63 mg, 0.20 mmol, 1.0 ekviv.) je rastvoren u 0.5 mL THF pre dodavanja 0.10 mL iPrMgCl (2.0 M u THF, 0.10 mmol, 1.0 ekviv.). Ovaj rastvor je mešan 5 minuta pre nego što je ubrizgan u bočicu za reakciju anilida. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 14 sati i razblažena sa EtOAc (30 mL), oprana sa 3 M HCl (2 × 15 mL) i slanim rastvorom, osušena (MgSO4), filtrirana, i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% do 100% EtOAc u heksanima) da se dobije Primer 36 (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije utvrđena i proizvoljno dodeljena).<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 9.73 (s, 1H) 8.75 (d, J = 4.5 Hz, 1H) 8.10 (dd, J = 8.4, 1.0 Hz, 1H) 8.03 (d, J = 7.8 Hz, 1H) 7.70 (ddd, J = 8.3, 7.0, 1.3 Hz, 1H) 7.50-7.62 (m, 3H) 7.21-7.29 (m, 2H) 7.14 (d, J = 4.7 Hz, 1H) 3.30-3.45 (m, 1H) 2.75 (s, 2H) 2.03-2.12 (m, 2H) 1.93-2.02 (m, 2H) 1.82 (td, J = 13.3, 3.3 Hz, 2H) 1.47-1.63 (m, 2H). m/z 395.2 (M+H)<+>.
Primer 37
N-(4-fluorofenil)-2-(trans-1-hidroksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije utvrđena i proizvoljno dodeljena)
[0333]
Primer 37: N-(4-fluorofenil)-2-(trans-1-hidroksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije utvrđena i proizvoljno dodeljena)
[0334] U reakcionu bočicu koja sadrži 4-fluoroanilin (44 mg, 0.40 mmol, 2.0 ekviv.) dodat je iPrMgCl (2.0 M u THF, 0.20 mL, 0.40 mmol, 2.0 ekviv.). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 minuta. U odvojenoj bočici, cis-diastereomer dobijen iz Intermedijera 30Cb (63 mg, 0.20 mmol, 1.0 ekviv.) je rastvoren u 0.5 mL THF pre dodavanja 0.064 mL iPrMgCl (2.0 M in THF, 0.10 mL, 0.20 mmol, 1.0 ekviv.). Ovaj rastvor je mešan 5 minuta pre nego što je ubrizgan u bočicu za reakciju anilida. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 14 sati i razblažena sa EtOAc (30 mL), opran sa 3 M HCl (2 × 15 mL) i slanim rastvorom, osušena (MgSO4), filtrirana, i koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% do 100% EtOAc u heksanima) da se dobije Primer 37 (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije utvrđena i proizvoljno dodeljena).<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 9.60 (s, 1H) 8.76 (d, J = 4.7 Hz, 1H) 8.10 (dd, J = 8.4, 1.0 Hz, 1H) 8.04 (d, J = 8.0 Hz, 1H) 7.71 (ddd, J = 8.3, 6.9, 1.4 Hz, 1H) 7.52-7.65 (m, 2H) 7.15 (d, J = 4.7 Hz, 1H) 6.93-7.07 (m, 2H) 3.30-3.45 (m, 1H) 2.75 (s, 2H) 2.07 (d, J = 13.5 Hz, 2H) 1.92-2.02 (m, 2H) 1.83 (td, J = 13.3, 3.4 Hz, 2H) 1.45-1.65 (m, 2H). m/z 379.2 (M+H)<+>.
Referentni Primeri 38 i 39
(R)-N-(4-cijanofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-iloksi)cikloheksil)propanamid (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije utvrđena i proizvoljno dodeljena)
[0335]
(S)-N-(4-cijanofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-iloksi)cikloheksil)propanamid (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije utvrđena i proizvoljno dodeljena)
[0336]
Intermedijer 38A: etil 2-(4-((terc-butildimetilsilil)oksi)ciklohekssil)acetat
[0337] Rastvoru etil 2-(4-hidroksicikloheksil)acetata (17.4 g, 93.4 mmol, 1.0 ekviv.) u DMF (100 mL) pod argonom dodat je imidazol (9.54 g, 140 mmol, 1.5 ekviv.) i terc-butildimetilsilil hlorid (15.5 g, 103 mmol, 1.1 ekviv.). Reakcija je postala zamućena i mešana je preko noći. Reakciona smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (150 mL i 2 × 60 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (MgSO4) i koncentrvani da daju Intermedijer 38A kao bistro, bezbojno ulje.
Intermedijer 38B: etil 2-(4-((terc-butildimetilsilil)oksi)cikloheksil)propanoat
[0338] Intermedijer 38A (5.0 g, 17 mmol, 1.0 ekviv.) je razblažen sa Et2O i ohlađen na -78 °C. Natrijum heksametildisilazid (2.0 M u THF, 9.2 mL, 18 mmol, 1.1 ekviv.) je dodat špricem, i reakcija je postala svetlo žuta i mešana je 5 minuta. Dodat je metil jodid (5.1 mL, 83 mmol, 5.0 ekviv.), i reakcija je ostavljena da se preko noći zagreje na sobnu temperaturu. Reakcija je razblažena sa EtOAc (100 mL) i slanim rastvorom (100 mL) i zas. vod. NH4Cl (100 mL). Slojevi su odvojeni, i zatim vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2 × 60 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni (MgSO4), filtrirani, koncentrovani pod smanjenim pritiskom i prečišćeni hromatografijom na silika gelu (0% do 10% EtOAc u heksanima) da se dobije Intermedijer 38B kao slabo žuto ulje (4.56 g, 86%).
Intermedijer 38C: etil 2-(4-hidroksicikloheksil)propanoat
[0339] Intermedijer 38B (4.54 g, 14.5 mmol, 1.0 ekviv.) je razbležen u THF (48 mL), i rastvor je tretiran rastvorom tetrabutilamonijum fluorida (1.0 M u THF, 22 mL, 21.7 mmol, 1.5 ekviv.). Reakcioni rastvor je ostavljen da se meša preko noći. Reakcioni rastvor je koncentrovan i zatim razblažen sa EtOAc (200 mL), opran sa vodom i slanim rastvorom, osušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan pod smanjenim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% do 30% EtOAc u heksanima) da se dobije Intermedijer 38C kao 7:3 trans u odnosu na cis (2.78 g, 96% prinosa).
Intermedijer 38D: etil 2-(cis-4-(hinolin-4-iloksi)cikloheksil)propanoat
[0340] Rastvoru Intermedijara 38C (1.07 g, 5.35 mmol, 1.0 ekviv.), 4-hinolinola (0.931 g, 6.42 mmol, 1.2 ekviv.), i PPh3(4.22 g, 16.1 mmol, 3.0 ekviv.) u THF (18 mL, 0.3 M) na 0 °C dodat je DEAD (1.27 mL, 8.03 mmol, 1.5 ekviv.). Reakcija je ostavljena da se preko noći zagreje na sobnu temperaturu. Reakcija je koncentrovana, i zatim razblažena sa EtOAc (100 mL). Rastvor je opran sa 1 M NaOH i slanim rastvorom, osupen (MgSO4), filtriran, koncentrovan pod smanjenim pritiskom i prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% do 100% EtOAc u heksanima) da se dobije Intermedijer 38D.
Referentni Primeri 38 i 39: (R)-N-(4-cijanofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-iloksi)cikloheksil)propanamid i (S)-N-(4-cijanofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-iloksi)cikloheksil)propanamid (oba kao pojedinačni enantiomeri, apsolutna stereohemija nije određena i proizvoljno dodeljena)
[0341] Rastvoru 4-hloroanilina (340 mg, 2.9 mmol, 2.0 ekviv.) u THF (2.5 mL) dodat je iPrMgCl (2.0 M u THF, 1.45 mL, 2.9 mmol, 2.0 ekviv.). Rastvor je postao narandžasto-braon i mešan 15 minuta. Dodat je rastvor Intermedijera 38D (502 mg, 1.45 mmol, 1.0 ekviv.) u THF (0.5 mL), i reakcija je ostavljena da se meša preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (30 mL) i oprana sa 3 M HCl (2 × 15 mL) i slanim rastvorom. Kombinovani organski slojevi su osušeni (MgSO4), filtrirani, koncentrovani pod smanjenim pritiskom i prečišćeni hromatografijom na silika gelu (0% do 100% EtOAc) da se dobiju referentni Primeri 38 i 39 kao smeša enantiomera. Hiralna polupreparativna HPLC normalne faze (Diacel CHIRALPAK® ID, 5µ, 250 × 20 mm, 15 mL/min, eluiranje sa 95% 1:1 heksan:CH2Cl2i 5% acetonitrila sa 0.4% dietilamin izokrata preko 40 minuta) da se dobije referentni Primer 38 kao prvi eluirani izomer.<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 8.71 (d, J = 5.3 Hz, 1H) 8.19 (dd, J = 8.4, 1.4 Hz, 1H) 8.02 (d, J = 8.4 Hz, 1H) 7.78 (s, 1H) 7.64-7.73 (m, 2H) 7.54-7.61 (m, 2H) 7.44 (ddd, J = 8.2, 7.0, 1.2 Hz, 1H) 6.70 (d, J = 5.5 Hz, 1H) 4.86 (br. s., 1H) 2.14-2.32 (m, 2H) 1.47-1.86 (m, 7H), 1.27 (d, J = 7.0 Hz, 2H). m/z 400.2 (M+H)<+>.
[0342] Dalja elucija prethodne polupreparativne hiralne HPLC kolone dala je referentni Primer 39 kao drugi eluirani izomer.<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 8.71 (d, J = 5.3 Hz, 1H) 8.19 (dd, J = 8.4, 1.4 Hz, 1H) 8.02 (d, J = 84 Hz, 1H) 7.78 (s, 1H) 7.64-7.73 (m, 2H) 7.54-7.61 (m, 2H) 7.44 (ddd, J = 8.2, 7.0, 1.2 Hz, 1H) 6.70 (d, J = 5.5 Hz, 1H) 4.86 (br. s., 1H) 2.14-2.32 (m, 2H) 1.47-1.86 (m, 7H), 1.27 (d, J = 7.0 Hz, 2H). m/z 400.2 (M+H)<+>.
Referentni Primeri 40 i 41
(R)-N-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-iloksi)cikloheksil) propanamid (pojedinačni enantiomer, apsolutna stereohemija nije određena i proizvoljno dodeljena)
[0343]
(S)-N-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-iloksi)cikloheksil) propanamid (pojedinačni enantiomer, apsolutna stereohemija nije određena i proizvoljno dodeljena)
[0344]
Referentni Primeri 40 i 41: (R)-N-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-iloksi)cikloheksil) propanamid i (S)-N-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-4-iloksi)cikloheksil) propanamid (oba kao pojedinačni enantiomeri, apsolutna stereohemija nije određena i proizvoljno dodeljena)
[0345] Rastvoru 4-fluoroanilina (0.275 mL, 2.9 mmol, 2.0 ekviv.) u THF (2.5 mL) dodat je iPrMgCl (2.0 M u THF, 1.45 mL, 2.9 mmol, 2.0 ekviv.). Rastvor je postao narandžasto-braon i mešan 15 minuta. Dodat je rastvor Intermedijera 38D (502 mg, 1.45 mmol, 1.0 ekviv.) u THF (0.5 mL), i reakcija je ostavljena da se meša preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (30 mL) i oprana sa 3 M HCl (2 × 15 mL) i slanim rastvorom. Rastvor je osušen (MgSO4), koncentrovan, i prečišćeni hromatografijom na silika gelu (0% do 100% EtOAc) da se dobiju referentni Primeri 40 i 41 kao smeša enantiomera. Hiralna polupreparativna HPLC normalne faze (Diacel CHIRALPAK® ID, 5µ, 250 × 20 mm, 15 mL/min, eluiranje sa 95% 1:1 heksan:CH2Cl2i 5% acetonitrila sa 0.4% dietilamin izokratia preko 40 minuta) da se dobije Primer 40 kao prvi eluirani izomer.<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 8.72 (d, J = 5.3 Hz, 1H) 8.22 (dd, J = 8.3, 1.1 Hz, 1H) 8.03 (d, J = 8.6 Hz, 1H) 7.69 (ddd, J = 8.4, 6.9, 1.5 Hz, 1H) 7.42-7.53 (m, 2H) 7.21 (s, 1H) 6.94-7.05 (m, 2H) 6.71 (d, J = 5.5 Hz, 1H) 4.87 (br. s., 1H) 2.06-2.31 (m, 4H) 1.47-1.88 (m, 5H) 1.22-1.29 (m, 4H). m/z 393.2 (M+H)<+>.
[0346] Dalja elucija prethodne polupreparativne hiralne HPLC kolone daje referentni Primer 41 kao drugi eluirani izomer.<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 8.72 (d, J = 5.3 Hz, 1H) 8.22 (dd, J = 8.3, 1.1 Hz, 1H) 8.03 (d, J = 8.6 Hz, 1H) 7.69 (ddd, J = 8.4, 6.9, 1.5 Hz, 1H) 7.42-7.53 (m, 2H) 7.21 (s, 1H) 6.94-7.05 (m, 2H) 6.71 (d, J = 5.5 Hz, 1H) 4.87 (br. s., 1H) 2.06-2.31 (m, 4H) 1.47-1.88 (m, 5H) 1.22-1.29 (m, 4H). m/z 393.2 (M+H)<+>.
Primer 42
(±)-N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)pent-4-enamid
[0347]
Intermedijer 42A: etil-2-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)pent-4-enoat
[0348] Rastvoru etil 2-(4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetata koji se može pripremiti primenom opštih postupaka A i B) u THF (0.2 M) na 0 °C dodat je rastvor NaHMDS (2 ekvivalenta). Dobijeni žuti rastvor je mešan na 0 °C tokom 5 minuta i dodat je alil bromid (2 ekvivalenta). Reakciona smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana 1 sat, nakon čega je dodat AcOH zajedno sa Et2O. Reakciona smeša je filtrirana kroz čep od silicijum dioksida eluirana sa dodatnim Et2O. Filtrat je koncentrovan i prečišćen primenom hromatografije na silika gelu dajući Intermedijer 42A kao smešu cis/trans diastereomera.
Primer 42: N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)pent-4-enamid
[0349] Intermedijer 42A je podvrgnut opštem postupku G primenom 4-hloroanilina i Primer 42 je izolovan kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 9.53 (s, 1H), 8.58 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 8.10 (dd, J = 11.5, 8.5 Hz, 2H), 7.70 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.60 (t, J = 7.2 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.25 (ddd, J = 8.9, 5.8, 2.3 Hz, 1H), 7.20 - 7.15 (m, 2H), 6.00 - 5.87 (m, 1H), 5.21 - 5.09 (m, 2H), 3.46 (s, 1H), 2.71 (td, J = 10.1, 4.9 Hz, 1H), 2.45 (q, J = 9.7 Hz, 2H), 2.28 - 1.62 (m, 9H).
Referentni Primer 43
2-(4-(1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)cikloheksil)-N-(4-hlorofenil)acetamid (mešavina cis-/transdiastereomera)
[0350]
Referentni Primer 43: 2-(4-(1H-pirazolo[3,4-b]piridin-4-il)cikloheksil)-N-(4-hlorofenil)acetamid (smeša cis-/trans-diastereomera)
[0351] Pripremljen je primenom opštih postupaka K, B i G. U opštem postupku K, 4-bromo-1H-pirazolo[3,4-b]piridin je primenjen kao partner za kuplovanje i dimetoksietan kao rastvarač. U opštem postupku G, primenjen je 4-hloroanilin. Referentni Primer 43 je izolovan kao bela čvrsta supstanca i ∼1:1 smeša diastereomera.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.52 - 8.45 (m, 1H), 8.20 -8.11 (m, 1H), 7.52 - 7.46 (m, 2H), 7.34 - 7.27 (m, 2H), 7.08 - 6.96 (m, 1H), 3.20 - 2.90 (m, 1H), 2.50 (s, 1H), 2.33 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 2.14 - 1.64 (m, 8H), 1.39 - 1.25 (m, 2H). LC/MS, m/z 369 (M+H)<+>.
Referentni Primeri 44 i 45
N-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(hinazolin-4-il)cikloheksil)acetamid
[0352]
N-(4-fluorofenil)-2-(4-(hinazlin-4-il)cikloheksil)acetamid (smeša diastereomera)
[0353]
Referentni Primeri 44 i 45: N-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(hinazolin-4-il)cikloheksil)acetamid i N-(4-fluorofenil)-2-(4-(hinazlin-4-il)cikloheksil)acetamid (smeša diastereomera)
[0354] Pripremljeni su primenom opštih postupaka K, B, i G.4-hlorohinazolin i Pd(PPh3)4su korišćeni i postupku K.4-hluoroanilin je korišćen u postupku G.4-fluoroanili je korišćen u postupku G. Prečišćen primenom hromatografije na silika gelu (50% EtOAc u heksanima) da se dobije referentni Primer 44 (cis-diastereomer) kao prvi eluirani izomer.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 9.15 (s, 1H), 8.37 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 8.08 - 7.93 (m, 2H), 7.75 (ddd, J = 8.4, 6.0, 2.2 Hz, 1H), 7.56 (ddd, J = 7.0, 5.3, 2.8 Hz, 2H), 7.08 - 6.97 (m, 2H), 3.82 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 2.56 (d, J = 7.9 Hz, 2H), 2.43 (s, 1H), 2.20 - 2.02 (m, 2H), 2.00 (s, 1H), 2.00 - 1.74 (m, 6H) ppm. m/z 364.2 (M+H)<+>.
[0355] Daljim eluiranjem iz kolone dobija se Referentni Primer 45 kao 1:1 smeša cis:trans izomera. m/z 364.2 (M+H)<+>.
Referentni Primeri 46 i 47
Referentni Primer 46: N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(hinazolin-4-il)cikloheksil)acetamid
[0356]
Referentni Primer 47: N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(hinazlin-4-il)cikloheksil)acetamid
[0357]
Referentni Primeri 46 i 47: N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(hinazolin-4-il)cikloheksil)acetamid i N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(hinazlin-4-il)cikloheksil)acetamid
[0358] Pripremljeni su primenom opštih postupaka K, B, i G. 4-horohinazolin i Pd(PPh3)4su korišćeni i postupku K. 4-hluoroanilin je korišćen u postupku G. Prečišćen primenom hromatografije na silika gelu (50% EtOAc u heksanima) da se dobije referentni Primer 46 (cisdiastereomer) kao prvi eluirani izomer.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.28 (s, 1H), 8.19 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.90 (ddd, J = 8.4, 6.9, 1.3 Hz, 1H), 7.67 (ddd, J = 8.3, 6.9, 1.2 Hz, 2H), 7.53 (d, J = 8.8 Hz, 2H), 7.32 - 7.24 (m,2H), 3.69 (dd, J = 12.0, 8.6 Hz, 1H), 2.57 (s, 3H), 2.05 (dt, J = 19.0, 8.4 Hz, 2H), 1.86 - 1.72 (m, J = 30.7, 27.2 Hz, 6H) ppm. m/z 380 (M+H)<+>.
[0359] Daljim eluiranjem iz kolone dobija se Referentni Primer 47 (trans-diastereomer) kao drugi eluirani izomer.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9.25 (s, 1H), 8.17 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.89 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.65 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 7.51 (d, J= 8.7 Hz, 2H), 7.35 - 7.15 (m, 3H), 3.54 (t, J = 11.5 Hz, 1H), 2.36 (d, J = 6.5 Hz, 2H), 2.15 - 1.81 (m, 5H), 1.48 - 1.30 (m, 2H), 0.87 (d, J = 11.4 Hz, 2H) ppm. m/z 380 (M+H)<+>.
Referentni Primer 48 N-(4-hlorofenil)-2-(4-(1,5-naftiridin-4-il)cikloheksil)acetamid (smeša diastereomera)
[0360]
Referentni Primer 48: N-(4-hlorofenil)-2-(4-(1,5-naftiridin-4-il)cikloheksil)acetamid (smeša diastereomera)
[0361] Pripremljen primenom opštih postupaka K, B, i G. 4-hloro-1,5-naftiridin korišćen je u postupku K i u postupku G korišćen je 4-hloroanilin. Prečišćen hromatografijom na silika gelu (25-75% EtOAc u heksanima) da se dobije ostatak. Ostatak je dalje prečišćen primenom hromatografije na silika gelu (25-75% EtOAc u toluenu) da se dobije željeni proizvod kao 2:1 smeša diastereomera. m/z 380.2 (M+H)<+>.
Referentni Primer 49
N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)propanamid
[0362]
Referentni Primer 49: N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)propanamid
[0363] Pripremljen opštim postupkom G primenom etil 2-(4-(hinolin-3-il)cikloheksil)propanoata i 4-hloroanilina. Prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% do 10% 2-propanol u heksanima) da se dobije referentni Primer 49 kao bela čvrsta supstanca i izomer koji prvi eluira.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.74 (d, J=2.2Hz.1H), 8.64 (s, 1H), 8.05-8.11 (m, 1H), 7.68-7.75 (m, 2H), 7.55-7.64 (m, 3H), 7.23-7.28 (m, 3H), 2.74-2.84 (m, 1H), 2.44-2.54 (m, 1H), 1.99-2.09 (m, 1H), 1.36-1.80 (m, 8H), 1.26 (d, J=6.9Hz, 3H) ppm. m/z 393.3 (M+H)<+>.
Referentni Primer 50
N-(4-fluorofenil)-2-(trans-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)propanamid
[0364]
Referentni Primer 50: N-(4-fluorofenil)-2-(trans-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)propanamid
[0365] Pripremljen opštim postupkom G primenom etil 2-(4-(hinolin-3-il)cikloheksil)propanoata i 4-fluoroanilina. Prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% do 10% 2-propanol u heksanima) da se dobije referentni Primer 50 kao bela čvrsta supstanca i izomer koji drugi eluira.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.80 (d, J=2.2Hz, 1H), 8.04-8.09 (m, 1H), 7.89-7.91 (m, 1H), 7.75-7.80 (m, 1H), 7.52-7.69 (m, 1H), 7.48-7.56 (m, 3H), 7.27 (s, 1H), 6.98-7.06 (2H), 2.69 (tt, 1H, J=3.1Hz, J=12.6Hz), 1.95-2.20 (m, 5H), 1.54-1.90 (m, 5H), 1.28 (d, J=6.9Hz, 3H) ppm. m/z 377.3 (M+H)<+>.
Referentni Primeri 51 i 52
N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-(izohinolin-1-il)cikloheksil)acetamid
[0366]
N-(4-hlorofenil)-2-((cis)-4-(izohinolin-1-il)cikloheksil)acetamid
[0367]
Referentni Primeri 51 i 52: N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-(izohinolin-1-il)cikloheksil)acetamid i N-(4-hlorofenil)-2-((cis)-4-(izohinolin-1-il)cikloheksil)acetamid
[0368] Pripremljeni primenom opštih postupaka K, B, i G. Za opšti postupak K, korišćen je 1-hloroizohinolin. Za opšti postupak B, etanol je korišćen kao rastvarač i reakcija je vođena na 50 °C. Za opšti postupak G, korišćen je 4-hloroanilin, i umesto<i>PrMgCl primenjen je trimetilaluminijum. Željeno jedinjenje je prečišćeno preparativnom HPLC (primenom Varian ProStar Hamilton C18 PRP-1 kolone (15 × 250 mm) sa brzinom protoka 20 mL/min, mobilnom fazom A: 0.5% mravlje kiseline u vodi; mobilnom fazom B: 0.5% mravlje kiseline u acetonitrilu; 0% do 100% B gradientom elucije tokom 30 minuta.) da se dobiju referentni Primeri 51 i 52 kao smeša diastereomera. Ostatak je dalje prečišćen preparativnom TLC (33% EtOAc u heksanima) da se dobije referentni Primer 51 (trans-diastereomer, viši faktor zadržavanja).<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 8.49-8.43 (m, 1H), 8.24-8.20 (m, 1H), 7.85-7.82 (m, 2H), 7.65-7.50 (m, 4H), 7.28-7.25 (m, 2H), 3.70-3.62 (m, 1H), 2.62-2.56 (m, 2H), 2.41-2.36 (m, 2H), 2.09-2.02 (m, 2H), 1.86-1.82 (m, 3H), 1.28-1.24 (m, 2H) ppm. m/z 379.2 (M+H)<+>.
[0369] Preparativnom TLC takođe je dobijen referentni Primer 52 (cis-diastereomer, niži faktor zadržavanja).<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 8.50-8.46 (m, 1H), 8.24-8.20 (m, 1H), 7.86-7.82 (m, 1H), 7.72-7.50 (m, 4H), 7.30-7.26 (m, 2H), 3.59-3.54 (m, 1H), 2.38-2.33 (m, 2H), 2.20-1.95 (m, 6H), 1.40-1.22 (m, 3H) ppm. m/z 379.1 (M+H)<+>.
Referentni Primeri 53 i 54
N-(4-hlorofenil)-2-((cis)-4-(izohinolin-8-il)cikloheksil)acetamid
[0370]
N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-(izohinolin-8-il)cikloheksil)acetamid
[0371]
Referentni Primeri 53 i 54: N-(4-hlorofenil)-2-((cis)-4-(izohinolin-8-il)cikloheksil)acetamid i N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-(izohinolin-8-il)cikloheksil)acetamid
[0372] Pripremljeni primenom opštih postupaka K, B, i G. Za opšti postupak K, korišćen je 8-bromoizohinolin. Za opšti postupak B, etanol je korišćen kao rastvarač i reakcija je vođena na 50 °C. Za opšti postupak G, korišćen je 4-hloroanilin i umesto<i>PrMgCl primenjen je trimetilaluminijum. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (primenom Varian ProStar Hamilton C18 PRP-1 kolone (15 × 250 mm) sa brzinom protoka 20 mL/min, mobilnom fazom A: 0.5% mravlje kiseline u vodi; mobilnom fazom B: 0.5% mravlje kiseline u acetonitrilu; 0% do 100% B gradientom elucije tokom 30 minuta.) da se dobije referentni Primer 53 (cis-diastereomer) kao izomer koji prvi eluira.<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 9.25 (s, 1H), 8.56-8.53 (m, 1H), 7.85-7.82 (m, 2H), 7.62-7.47 (m, 4H), 7.31-7.26 (m, 2H), 3.38-3.27 (m, 1H), 2.57-2.53 (m, 3H), 2.04-1.25 (m, 8H) ppm. m/z 379 (M+H)<+>.
[0373] Daljim eluiranjem dobija se Referentni Primer 54 (trans-diastereomer) kao izomer koji drugi eluira.<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 9.24 (s, 1H), 8.56-8.52 (m, 1H), 7.86-7.81 (m, 2H), 7.69-7.49 (m, 4H), 7.32-7.26 (m, 2H), 3.26-3.18 (m, 1H), 2.35-2.23 (m, 3H), 1.67-1.59 (m, 4H), 1.40-1.27 (m, 4H) ppm. m/z 379 (M+H)<+>.
Referentni Primer 55
N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-(izohinolin-5-il)cikloheksil)acetamid (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije određena i proizvoljno dodeljena)
[0374]
Referentni Primer 55: N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-(izohinolin-5-il)cikloheksil)acetamid
[0375] Pripremljen primenom opštih postupaka K, B, i G. Za opšti postupak K, korišćen je 5-bromoizohinolin. Za opšti postupak B, etanol je korišćen kao rastvarač i reakcija je vođena na 50 °C. Za opšti postupak G, korišćen je 4-hloroanilin i umesto<i>PrMgCl primenjen je trimetilaluminijum. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC (primenom Varian ProStar Hamilton C18 PRP-1 kolone (15 × 250 mm) sa brzinom protoka 20 mL/min, mobilnom fazom A: 0.5% mravlje kiseline u vodi; mobilnom fazom B: 0.5% mravlje kiseline u acetonitrilu; 0% do 100% B gradientom elucije tokom 30 minuta.) da se dobije referentni Primer 55 (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije određena i proizvoljno dodeljena).<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 9.24 (s, 1H), 8.55-8.52 (m, 1H), 7.85-7.81 (m, 2H), 7.60-7.48 (m, 4H), 7.32-7.26 (m, 2H), 3.27-3.20 (m, 1H), 2.38-2.32 (m, 1H), 2.09-2.02 (m, 3H), 1.70-1.57 (m, 3H), 1.41-1.24 (m, 4H). m/z 379 (M+H)<+>.
Referentni Primer 56
N-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)propanamid
[0376]
Referentni Primer: N-(4-fluorofenil)-2-(cis-4-(hinolin-3-il)cikloheksil)propanamid
[0377] Pripremljen opštim postupkom G primenom etil 2-(4-(hinolin-3-il)cikloheksil)propanoata i 4-fluoroanilina. Prečišćen je primenom hromatografije na silika gelu (0% do 10% 2-propanol u hekdanima) da se dobije referentni Primer 56 (cis-diastereomer) kao bela čvrsta supstanca i izomer koji prvi eluira.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3): δ 8.76-8.79 (m, 1H), 8.19 (bs, 1H), 8.06-8.11 (m, 1H), 7.65-7.77 (m, 3H), 7.53-7.62 (m, 3H), 6.96-7.04 (m, 2H), 2.79-2.89 (m, 1H), 2.43-2.53 (m, 1H), 1.99-2.08 (m, 1H), 1.50-1.85 (m, 8H), 1.27 (d, J=6.8Hz, 3H) ppm. m/z 377.3 (M+H)<+>.
Primer 57
(±)-N-(4-cijanofenil)-2-((cis)-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)pent-4-enamid
[0378]
Intermedijer 57A: etil 2-(cis-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)pent-4-enoat
[0379] Rastvoru etil 2-(4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetata (koji se može pripremiti primenom opštih postupaka A i B) (740 mg, 2.5 mmol) u THF (5 mL) na -78 °C dodat je NaHMDS (2 M u THF, 3.0 mL, 6.0 mmol). Dobijena reakciona smeša je mešana na -78 °C tokom 5 minuta, i dodat je alil bromid (333 mg, 2.75 mmol). Reakcija je zagrejana na 0 °C i mešana 10 minuta. Reakcija je razblažena sa Et2O i filtrirana kroz 2×2 cm sloj silika gela, ispirana sa dodatnih 50 mL Et2O. Filtrat je koncentrovan i korišćen direktno u sledećem koraku.
Primer 57: (±)-N-(4-cijanofenil)-2-((cis)-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)pent-4-enamid
[0380] Intermedijer 57A je hidrolizovan do karboksilne kiseline primenom opšteg postupka E. Kiseli proizvod je kuplovan sa 4-cijanoanilinom primenom opšteg postupka O. Primer 57 je dobijen kao bela čvrsta supstanca nakon hromatografije na koloni (10% do 30% 2-propanol u heksanima).<1>H NMR (400 MHz; CDCl3): δ 9.16 (s, 1H), 8.67 (d, J= 4.6 Hz, 1H), 8.13-8.08 (m, 2H), 7.72 (dtd, J= 8.7, 3.4, 1.7 Hz, 3H), 7.61 (ddd, J = 8.4, 6.9, 1.4 Hz, 1H), 7.55-7.51 (m, 2H), 7.14 (d, J = 4.6 Hz, 1H), 5.95-5.84 (m, 1H), 5.18 (dt, J = 16.3, 1.1 Hz, 1H), 5.13-5.10 (m, 1H), 3.50-3.49 (m, 1H), 2.69-2.68 (m, 1H), 2.48-2.41 (m, 2H), 2.23 (dt, J = 10.4, 0.3 Hz, 1H), 2.01-1.65 (m, 8H).
Primer 58
(R)-2-((cis)-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)-N-fenilpropanamid
[0381]
Intermedijer 58A: (R)-2-((cis)-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)propionska kiselina
[0382] Intermedijer 58A može biti pripremljen primenom opštih postupaka K, B, E, L, M, i N. U opštem postupku L su koršćeni 2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)-cikloheksil)sirćetna kiselina (smeša diastereomera), i (R)-2-fenil-oksazolidinon. Opšti postupak M je koristio cis proizvod i metil jodid. Pomoćno sredstvo je uklonjeno opštim postupkom N. LC-MS Anal: m/z [M+H]<+>302.2.<1>H-NMR (400 MHz; DMSO, d6): δ 12.10 (s, 1H), 8.70 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 8.07 (dd, J = 9.2, 5.9 Hz, 1H), 7.97-7.94 (m, 1H), 7.67-7.62 (m, 1H), 7.49 (d, J= 4.5 Hz, 1H), 3.41-3.36 (m, 1H), 2.73-2.65 (m, 1H), 1.83-1.61 (m, 9H), 1.08 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
Primer 58: (R)-2-((cis)-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)-N-fenilpropanamid
[0383] Intermedijer 58A (R)-2-((1s,4S)-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil) propionska kiselina (10 mg, 0.033 mmol) je dodat u bočicu i prenet u DMF (350 µl). Anilin (4.64 mg, 0.050 mmol) i HATU (18.93 mg, 0.050 mmol) su dodati, a zatim DIPEA (17.39 µl, 0.100 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakciona smeša je razblažena sa DMF da bi se postigla ukupna zapremina od 2 mL i filtrirana. Sirovi uzorak je prečišćen putem preparativne HPLC/MS da se dobije Primer 58 (9.7 mg, 0.026 mmol, 78%). LC-MS Anal. Izračunato za C24H25FN2O 376.20, ustanovljeno [M+H] 377.0 Tr= 1.969 min (Metoda B).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 9.96 (s, 1H), 8.82 (d, J=4.5 Hz, 1H), 8.05 (dd, J=9.2, 5.8 Hz, 1H), 7.93 (dd, J=10.9, 2.5 Hz, 1H), 7.62 (td, J=8.7, 2.6 Hz, 1H), 7.57 (d, J=7.9 Hz, 2H), 7.53 (d, J=4.5 Hz, 1H), 7.25 (t, J=7.8 Hz, 2H), 6.99 (t, J=7.4 Hz, 1H), 2.83 (dd, J=10.8, 6.7 Hz, 1H), 1.64-1.97 (m, 7H), 1.51-1.64 (m, 3H), 1.08 (d, J=6.6 Hz, 3H)
Primeri 59 do 81
[0384]
[0385] Primeri 59-81 su pripremljeni iz Intermedijera 58A koji sledi postupak za Primer 58 uz primenu odgovarajućih anilina ili aril amina.
Tabela 1
Primer 82
(R)-N-(3-cijano-4-(trifluorometil)fenil)-2-((cis)-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)propanamid
[0386]
[0387] Intermedijer 58A (15 mg, 0.050 mmol) je stavljen u tetrahidrofuran (249 µl) i dodat je trietilamin (13.88 µl, 0.100 mmol). Rastvor je ohlađen na 0 °C. Dodat je izobutil karbonohloridat (10.20 mg, 0.075 mmol) i reakcija je mešana na 0 °C tokom 10 minuta pre dodavanjao 5-amino-2-(trifluorometil)benzonitrila (12.97 mg, 0.070 mmol). Posle dodavanja anilina, reakcija je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i mešana je na sobnoj temperaturi preko noći. Posle 16 sati, dodat je 5-amino-2-(trifluorometil)benzonitril (12.97 mg, 0.070 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 24 sata. Reakcija je zatim koncentrovana u vakuumu, razblažena sa DMF (∼2 mL) filtrirana i prečišćena pomoću preparativne HPLC da se dobije Primer 82 (5.8 mg, 0.012 mmol, 25%). LC-MS Anal. Izračunato za C26H23F4N3O 469.18, ustanovljeno [M+H] 470.1 Tr= 2.219 min (Metoda B).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10.69 (br. s., 1H), 8.79 (br. s., 1H), 8.38 (br. s., 1H), 8.05 (d, J=8.2 Hz, 2H), 7.95 (d, J=8.0 Hz, 2H), 7.60-7.71 (m, 1H), 7.44 (br. s., 1H), 2.39 (br. s., 1H), 1.83-2.00 (m, 3H), 1.60-1.83 (m, 3H), 1.27-1.60 (m, 4H), 1.15 (d, J=6.2 Hz, 3H)
Primer 83
(±)-N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-((7-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi) cikloheksil)butanamid
[0388]
Intermedijer 83A: etil 2-(1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-iliden)acetat
[0389] Trietil fosfonoacetat (21.79 ml, 109 mmol) je dodat u suspenziju natrijum hidrida (3.84 g, 96 mmol) u THF (64.0 ml) i 0 °C. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Posle 30 minuta, reakcija je ohlađena na 0 °C i rastvor 1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-ona (10 g, 64.0 mmol) u 5 mL THF je dodat. Reakcija je zatim mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta pre gašenja vodom. Smeša je ekstrahovana DCM tri puta. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu dajući Intermedijer 83A (13.88 g, 61.3 mmol, 96% prinosa). TLC: mrlje od proizvoda kao ljubičasta tačka u anizaldehidu (Rf = 0.75 in 1:1 Hex/EtOAc).<1>H NMR (400 MHz, hloroformd) δ: 5.65 (s, 1H), 4.13 (q, J=7.2 Hz, 2H), 3.92-3.99 (m, 4H), 2.94-3.02 (m, 2H), 2.31-2.40 (m, 2H), 1.71-1.79 (m, 4H), 1.26 (t, J=7.2 Hz, 3H)
Intermedijer 83B: etil 2-(1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-il)acetat
[0390] Intermedijer 83A (13.88 g, 61.3 mmol) je prenet u EtOAc (61.3 ml) i dodat je Parrovoj boci za hidrogeniranje koja je sadržala mokri 10% paladijum na ugljeniku (1.306 g, 12.27 mmol) (54% m/m vode) pod atmosferom azota. Reakciona boca je pročišćena i napunjena azotom tri puta, i zatim je pročišćena i ponovo napunjena tri puta vodonikom. Nakon punjenja boce vodonikom do 50 psi, boca je stavljena u Parr šejker i promućkana. Posle 4 sata, reakcija je filtrirana preko presovanog CELITE® i koncentrovana u vakuumu dajući Intermedijer 83B (13.78 g, 60.4 mmol, 98% prinosa). LC-MS Anal. Izračunato za C12H20O4228.14, ustanovljeno [M+H] 299.1 Tr= 0.83 min (Metoda A).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ: 4.11 (q, J=7.2 Hz, 2H), 3.88-3.95 (m, 4H), 2.21 (d, J=7.0 Hz, 2H), 1.83 (dqd, J=11.0, 7.5, 3.5 Hz, 1H), 1.68-1.78 (m, 4H), 1.50-1.61 (m, 2H), 1.27-1.35 (m, 2H), 1.24 (t, J=7.2 Hz, 3H).
Intermedijer 83C: etil 2-(1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-il)butanoat
[0391] Diizopropilamin (2.347 ml, 16.63 mmol) je prenet u suvi THF (15.99 ml) (u atmosferi N2) i ohlađen na -78 °C. n-BuLi (6.14 ml, 15.35 mmol) (2.5 M u heksanima) je dodavan tokom ∼5 minuta na -78 °C. Posle mešanja tokom 45 minuta, reakcija je zagrejana na sobnu temperaturu tokom 10 minuta i vraćena na -78 °C. Zatim je dodat 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-on (1.541 ml, 12.79 mmol), zatim rastvor Intermedijera 83B (2.92 g, 12.79 mmol) u THF (15.99 ml) (kap po kap tokom ∼5 minuta). Posle 1 sata, dodavan je etil jodid (1.125 ml, 14.07 mmol) (čist) kap po kap tokom ∼5 minuta. Reakcija je mešana još 2 sata na -78 °C pre nego što se polako zagrejala na sobnu temperaturu. Reakcija je zatim mešana tokom noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena sipanjem u 1:1 voda/slani rastvor i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovane organske materije su oprane slanim rastvorom, osušene natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen putem hromatografije na koloni silika gela dajući Intermedijer 83C (2.27 g, 8.86 mmol, 69% prinosa). TLC: mrlje od proizvoda kao ljubičasta tačka u anizaldehidu (Rf = 0.80 in 1:1 Hex/EtOAc).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ: 4.14 (q, J=7.5 Hz, 2H), 3.88-3.95 (m, 4H), 2.09 (td, J=8.4, 5.6 Hz, 1H), 1.69-1.83 (m, 4H), 1.45-1.64 (m, 6H), 1.33-1.42 (m, 1H), 1.25 (t, J=7.1 Hz, 3H), 0.86 (t, J=7.5 Hz, 3H)
Intermedijer 83D: etil 2-(4-oksocikloheksil)butanoat
[0392] Intermedijer 83C (2.00 g, 7.80 mmol) je prenet u THF (39.0 ml) i dodata je hlorovodonična kiselina 1M (39.0 ml). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. Reakcija je koncentrovana u vakuumu, razblažena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni sa natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela dajući Intermedijer 83D (1.47 g, 6.92 mmol, 89% prinosa). TLC: proizvod mrlja blago ružičasto u anizaldehidu (Rf = 0.65 in 1:1 Hex/EtOAc).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ: 4.15 (q, J=7.1 Hz, 2H), 2.25-2.42 (m, 4H), 2.18 (ddd, J=9.3, 7.8, 5.2 Hz, 1H), 2.10 (ddt, J=13.1, 6.2, 3.3 Hz, 1H), 1.90-2.03 (m, 2H), 1.56-1.70 (m, 2H), 1.38-1.56 (m, 2H), 1.25 (t, J=7.2 Hz, 3H), 0.89 (t, J=7.4 Hz, 3H)
Intermedijer 83E: etil-2-((trans)-4-hidroksicikloheksil)butanoat
[0393] Intermedijer 83D (1.47 g, 6.92 mmol) je rastvoren u EtOH (13.85 ml) i ohlađen na 0 °C. Dodat je NaBH4(0.314 g, 8.31 mmol) i reakcija je zatim ostavljena da se meša na0 °C tokom 1 sata. Reakcija je ugašena zasićenim vodenim rastvoromNH4Cl i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni sa natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela dajući Intermedijer 83E (1.22 g, 5.69 mmol, 82% prinosa) zajedno sa (138 mg, 0.644 mmol, 9.30% prinosa) cisizomera.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ: 4.14 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.53 (t, J=10.5 Hz, 1H), 1.92-2.08 (m, 2H), 1.80-1.89 (m, 1H), 1.63-1.70 (m, 1H), 1.52-1.62 (m, 4H), 1.37-1.52 (m, 2H), 1.26 (t, J=7.2 Hz, 3H), 0.95-1.17 (m, 2H), 0.87 (t, J=7.4 Hz, 3H).
Intermedijer 83F: etil 2-((trans)-4-((7-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi)cikloheksil)butanoat
[0394] Intermedijer 83E (100 mg, 0.467 mmol) je prenet u DMSO (933 µl) i NaH (22.40 mg, 0.933 mmol) je dodat polako, u porcijama na sobnoj temperaturi. Posle 1 sata, dodat je 4-hloro-7-(trifluorometilhinolin (130 mg, 0.560 mmol) i reakcija je zagrevana na 80 °C. Posle 16 sati, reakcija je ugašena amonijum hloridom i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni sa natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela dajući Intermedijer 83F (91 mg, 0.222 mmol, 47.6% prinosa). LC-MS Anal. Izračunato za C22H26F3NO3409.19, ustanovljeno [M+H] 410.2 Tr= 0.91 min (Metoda A).
Intermedijer 83G: 2-((trans)-4-((7-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi)cikloheksil)butanska kiselina
[0395] Intermedijer 83F (91 mg, 0.222 mmol) je prenet u THF (889 µl), vodu (889 µl), i MeOH (445 µl). Dodat je litijum hidroksid (53.2 mg, 2.223 mmol) i reakcija je mešana na 60°C tokom 40 sati. Reakcija je koncentrovana u vakuumu, razblažena vodom, dodata je sirćetna kiselina (talog se formira), vodeni rastvor je ekstrahovan sa EtOAc. Organski slojevi su kombinovani, osušeni natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani u vakuumu dajući Intermedijer 83G (85 mg, 0.223 mmol, 100% prinosa). LC-MS Anal. Izračunato za C20H22F3NO3381.16, utvrđeno [M+H] 382.2 Tr= 0.78 min (Metoda A).
Primer 83: N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-((7-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi)cikloheksil)butanamid
[0396] Intermedijer 83G (41 mg, 0.108 mmol je stavljen u atmosferu azota i prenet u SOCl2(78 µl, 1.075 mmol). Dodata je 1 kap bezvodnog DMF i smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Smeša je zatim koncentrovana u vakuumu i primenjeno je zajedničko isparavanje sa toluenom, u vakuumu, da bi se uklonio preostali tionil hlorid. Sirovi acil hlorid je rastvoren u DCM (1075 µl) u atmosferi azota i dodat je TEA (74.9 µl, 0.538 mmol) praćen 4-hloroanilinom (20.57 mg, 0.161 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakcija je koncentrovana u vakuumu, preneta u DMF, filtrirana, i prečišćena preparativnom HPLC dajući Primer 83 (14.4 mg, 0.029 mmol, 27% prinosa). LC-MS Anal. Izračunato za C26H26ClF3N2O2490.16, utvrđeno [M+H] 491.2 Tr= 0.94 min (Metoda A).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10.07 (s, 1H), 8.82 (d, J=5.1 Hz, 1H), 8.32 (d, J=8.6 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 7.80 (d, J=8.7 Hz, 1H), 7.67 (d, J=8.5 Hz, 2H), 7.35 (d, J=8.5 Hz, 2H), 7.29 (d, J=5.0 Hz, 1H), 4.66 (t, J=10.1 Hz, 1H), 2.10-2.27 (m, 3H), 1.97 (d, J=11.4 Hz, 1H), 1.73 (d, J=13.2 Hz, 1H), 1.41-1.65 (m, 5H), 1.28-1.41 (m, 1H), 1.21 (d, J=10.4 Hz, 1H), 0.85 (t, J=7.1 Hz, 3H).
Enantiomer 1 i Enantiomer 2
Enantiomer 1: Primer 83 (a) N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-((7-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi)cikloheksil)-2-butanamid (homohiralan, apsolutna stereohemija nije određena)
[0397]
Enantiomer 2: Primer 83 (b) N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-((7-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi)cikloheksil)-2-butanamid (homohiralan, apsolutna stereohemija nije određena)
[0398]
[0399] Primer 83(a), Enantiomer 1, i Primer 83(b), Enantiomer 2: Hiralnim razdvajanjem racemskog uzorka (Metoda C) dobijeni su Enantiomer 1 Tr= 3.611 min (Metoda D) i Enantiomer 2 Tr= 5.106 min (Metoda D) Apsolutna stereohemija nije određena.
[0400] Primer 83(a), Enantiomer 1: MS(ES): m/z = 491.1 [M+H]<+>. Tr= 2.529 min (Metoda B).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10.14 (s, 1H), 8.78 (d, J=5.0 Hz, 1H), 8.32 (d, J=8.6 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.79 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.61 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.33 (d, J=8.7 Hz, 2H), 7.21 (d, J=5.3 Hz, 1H), 4.61 (br. s., 1H), 2.06-2.23 (m, 3H), 1.94 (d, J=13.0 Hz, 1H), 1.69 (d, J=12.0 Hz, 1H), 1.36-1.62 (m, 5H), 1.30 (d, J=13.2 Hz, 1H), 1.11-1.26 (m, 1H), 0.81 (t, J=7.1 Hz, 3H)
[0401] Primer 83(b), Enantiomer 2: MS(ES): m/z = 491.1 [M+H]<+>. Tr= 2.545 min (Metoda B).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10.13 (s, 1H), 8.78 (d, J=5.1 Hz, 1H), 8.32 (d, J=8.7 Hz, 1H), 8.23 (s, 1H), 7.79 (d, J=8.7 Hz, 1H), 7.62 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.33 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.22 (d, J=5.2 Hz, 1H), 4.62 (br. s., 1H), 2.08-2.25 (m, 3H), 1.95 (d, J=13.4 Hz, 1H), 1.70 (d, J=11.6 Hz, 1H), 1.39-1.62 (m, 5H), 1.30 (d, J=12.3 Hz, 1H), 1.18 (d, J=11.4 Hz, 1H), 0.81 (t, J=7.1 Hz, 3H)
Primer 84
(±)-N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-((2-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi)cikloheksil)butanamid
[0402]
Primer 84: (±)-N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-((2-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi)cikloheksil)butanamid
[0403] Primer 84 je pripremljen od Intermedijera 83E i navedeni su analogni postupci da se dobiju 83F, 83G, i Primer 83, osim što je 4-hloro-2-(trifluorometil) hinolin primenjen u delu F. LC-MS Anal. Izračunato za C26H26ClF3N2O2490.16, utvrđeno [M+H] 491.2 Tr= 1.20 min (Metoda A).
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10.07 (s, 1H), 8.20 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.05 (d, J=8.7 Hz, 1H), 7.84-7.91 (m, 1H), 7.63-7.74 (m, 3H), 7.48 (s, 1H), 7.35 (d, J=8.7 Hz, 2H), 4.79-4.90 (m, 1H), 2.10-2.27 (m, 3H), 1.96 (d, J=13.1 Hz, 1H), 1.72 (d, J=12.0 Hz, 1H), 1.44-1.63 (m, J=7.6 Hz, 5H), 1.32-1.42 (m, 1H), 1.20-1.32 (m, 1H), 0.85 (t, J=7.1 Hz, 3H).
Primer 85
(±)-N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-(hinolin-4-iloksi)cikloheksil)butanamid
[0404]
Primer 85: (±)-N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-(hinolin-4-iloksi)cikloheksil)butanamid
[0405] Primer 85 je pripremljen od Intermedijera 83E i navedeni su analogni postupci da se dobiju 83F, 83G, i Primer 83, osim što je 4-bromo-hinolin primenjen u delu F. LC-MS Anal. Izračunato za C25H27ClN2O2422.18, utvrđeno [M+H] 423.2 Tr= 0.87 min (Metoda A).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10.14 (s, 1H), 8.65 (d, J=5.2 Hz, 1H), 8.11 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.91 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.72 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.63 (d, J=8.7 Hz, 2H), 7.54 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.34 (d, J=8.6 Hz, 2H), 7.06 (d, J=5.2 Hz, 1H), 4.58 (t, J=10.1 Hz, 1H), 2.08-2.26 (m, 3H), 1.95 (d, J=12.6 Hz, 1H), 1.70 (d, J=12.9 Hz, 1H), 1.39-1.66 (m, 5H), 1.31 (q, J=11.9 Hz, 1H), 1.10-1.25 (m, J=12.4 Hz, 1H), 0.82 (t, J=7.2 Hz, 3H).
Primer 86
N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-((8-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi)cikloheksil)butanamid
[0406]
[0407] Primer 86 je pripremljen od Intermedijera 83E i navedeni su analogni postupci da se dobiju 83F, 83G, i Primer 83, osim što je 4-hloro-8-(trifluorometil) hinolin primenjen u delu F. LC-MS Anal. Izračunato za C26H26ClF3N2O2490.16, utvrđeno [M+H] 491.2 Tr= 1.03 min (Metoda A).
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10.13 (s, 1H), 8.77 (d, J=5.2 Hz, 1H), 8.39 (d, J=8.4 Hz, 1H), 8.12 (d, J=7.2 Hz, 1H), 7.58-7.67 (m, 3H), 7.33 (d, J=8.7 Hz, 2H), 7.19 (d, J=5.4 Hz, 1H), 4.61 (t, J=10.4 Hz, 1H), 2.08-2.24 (m, 3H), 1.94 (d, J=12.0 Hz, 1H), 1.69 (d, J=13.8 Hz, 1H), 1.37-1.63 (m, 5H), 1.24-1.37 (m, J=12.5 Hz, 1H), 1.11-1.24 (m, J=11.1 Hz, 1H), 0.81 (t, J=7.2 Hz, 3H)
Primer 87
2-(4-((R)-3-((4-hlorofenil)amino)-2-((cis)-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)-3-oksopropil)fenil)propionska kiselina
[0408]
Primer 87: 2-(4-((R)-3-((4-hlorofenil)amino)-2-((cis)-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)-3-oksopropil)fenil)propionska kiselina
[0409] Racemski Primer 87 može biti napravljen primenom opštih postupaka K sa 4-hlorohilinom, B, E, i L praćeni alkilacijom sa Intermedijerom 137A primenjujući postupak za dobijanje 137B praćen analognim postupcima za intermedijere 137C, D, i Primer 137.
Enantiomer 1 i Enantiomer 2
Enantiomer 1: Primer 87(a) 2-(4-((R)-3-((4-hlorofenil)amino)-2-((cis)-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)-3-oksopropil)fenil)-2-propionska kiselina (homohiralan, apsolutna stereohemija nije određena)
[0410]
Enantiomer 2: Primer 87(b) 2-(4-((R)-3-((4-hlorofenil)amino)-2-((cis)-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)-3-oksopropil)fenil)-2-propionska kiselina (homohiralan, apsolutna stereohemija nije određena)
[0411]
[0412] Primer 87 (a) Enantiomer 1 i Primer 87(b) Enantiomer 2: Hiralnim razdvajanjem racemskog uzorka (Metoda E) dobijeni su Enantiomer 1 Tr= 10.161 min (Metoda F) i Enantiomer 2 Tr= 13.160 min (Metoda F) Apsolutna stereohemija nije određena.
[0413] Primer 87 (a) Enantiomer 1: MS(ES): m/z = 541.3 [M+H]<+>. Tr= 0.84 min (Metoda A).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ: 8.78 (d, J=4.6 Hz, 1H), 8.09 (m, 2H), 7.69 (ddd, J=8.4, 7.0, 1.2 Hz, 1H), 7.58 (ddd, J=8.4, 7.0, 1.1 Hz, 1H), 7.30 (d, J=4.5 Hz, 1H), 7.11-7.20 (m, 8H), 6.91 (s, 1H), 3.72-3.78 (m, 1H), 3.02 (dd, J=13.2, 3.4 Hz, 1H), 2.79-2.89 (m, J=13.0 Hz, 1H), 2.62 (td, J=10.8, 3.5 Hz, 1H), 2.28-2.37 (m, 1H), 1.71-2.15 (m, 9H), 1.40 (d, J=7.1 Hz, 3H)
[0414] Primer 87(b) Enantiomer 2: MS(ES): m/z = 541.3 [M+H]<+>. Tr= 0.84 min (Metoda A).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ: 8.82 (d, J=4.6 Hz, 1H), 8.05-8.14 (m, 2H), 7.70 (ddd, J=8.3, 7.0, 1.2 Hz, 1H), 7.58 (ddd, J=8.3, 6.9, 1.2 Hz, 1H), 7.33 (d, J=4.6 Hz, 1H), 7.09-7.20 (m, 8H), 6.78 (s, 1H), 3.72-3.77 (m, 1H), 3.02 (dd, J=13.1, 3.5 Hz, 1H), 2.83 (t, J=12.2 Hz, 1H), 2.61 (td, J=10.9, 3.5 Hz, 1H), 2.29-2.37 (m, 1H), 1.72-2.16 (m, 9H), 1.40 (d, J=7.2 Hz, 3H)
Primer 88
(±)-N-(4-hlorofenil)-2-((cis)-4-((2-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi)cikloheksil)butanamid
[0415]
Intermedijer 88A: etil 2-((cis)-4-((2-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi)cikloheksil)butanoat
[0416] Intermedijer 83E (300 mg, 1.400 mmol) je rastvoren u THF (5600 µl) i dodati su 2-(trifluorometil)hinolin-4-ol (656 mg, 3.08 mmol) i trifenilfosfin (808 mg, 3.08 mmol). Rastvor je ohlađen na 0 °C u ledenom kupatilu. Dodat je diizopropil azodikarboksilat (599 µl, 3.08 mmol) i reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi kada je dodavanje završeno. Mešana je na sobnoj temperaturi preko noći. Zatim je reakcija koncentrovana u vakuumu i prečišćena hromatografijom na koloni silika gela dajući Intermedijer 88A (383 mg, 0.935 mmol, 66.8% prinosa). LC-MS Anal. Izračunato za C22H26F3NO3409.19, utvrđeno [M+H] 410.2 Tr= 1.22 min (Metoda A).
Intermedijer 88B: 2-((cis)-4-((2-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi)cikloheksil)butanska kiselina
[0417] Intermedijer 88A (383 mg, 0.935 mmol) je prenet u THF (748 µl), vodu (748 µl), i MeOH (374 µl). Dodat je litijum hidroksid (224 mg, 9.35 mmol) i reakcija je mešana na 60 °C preko noći. Posle 16 sati, dodato je još litijum hidroksida (224 mg, 9.35 mmol) i reakcija je zagrevana još 24 sata. Reakcija je koncentrovana u vakuumu, razblažena vodom, zakiseljena sa AcOH i ekstrahovana sa EtOAc. Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan sa 7:3 hloroform:propanol. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni natrijum sulfatom, filtrirani, i koncentrovani u vakuumu dajući Intermedijer 88B (348 mg, 0.912 mmol, 98% prinosa). LC-MS Anal. Izračunato za C20H22F3NO3381.16, utvrđeno [M+H] 382.3 Tr= 1.04 min (Metoda A).
Primer 88: N-(4-hlorofenil)-2-((cis)-4-((2-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi)cikloheksil)butanamid
[0418] Intermedijer 88B (50 mg, 0.131 mmol) je stavljen u atmosferu azota i prenet u SOCl2(96 µl, 1.311 mmol).1 kap anhidrovanog DMF je dodata i smeša je mešana 1 sat na sobnoj temperaturi. Smeša je zatim koncentrovana u vakuumu i isparavana zajedno sa toluenom u vakuumu, da bi se uklonio preostali tionil hlorid. Sirovi acil hlorid je rastvoren u DCM (1311 µl) u atmosferi azota i dodat je TEA (91 µl, 0.655 mmol) praćen 4-hloroanilinom (25.09 mg, 0.197 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakcija je koncentrovana u vakuumu, preneta u DMF, filtrirana i prečišćena preparativnom HPLC dajući Primer 88 (38.0 mg, 0.077 mmol, 59%). LC-MS Anal. Izračunato za C26H26ClF3N2O2490.16, utvrđeno [M+H] 491.2 Tr= 1.18 min (Metoda A).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10.09 (s, 1H), 8.21 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.05 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.87 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.66 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.61 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.36 (s, 1H), 7.32 (d, J=8.7 Hz, 2H), 5.13 (br. s., 1H), 2.17 (br. s., 1H), 2.03 (br. s., 2H), 1.60-1.78 (m, 4H), 1.46-1.60 (m, 4H), 1.34-1.46 (m, 1H), 0.81 (t, J=7.2 Hz, 3H)
Enantiomer 1 i Enantiomer 2
Enantiomer 1: Primer 88 (a) N-(4-hlorofenil)-2-((cis)-4-((2-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi)cikloheksil)butanamid (homohiralan, apsolutna stereohemija nije određena)
[0419]
Enantiomer 2: Primer 88(b) N-(4-hlorofenil)-2-((cis)-4-((2-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi)cikloheksil)butanamid (homohiralan, apsolutna stereohemija nije određena)
[0420]
[0421] Primer 88(a) Enantiomer 1 i Primer 88(b)Enantiomer 2: Hiralnim razdvajanjem racemskog uzorka (Metoda G) dobijeni su Enantiomer 1 1 Tr= 3.911 min (Metoda H) i Enantiomer 2 Tr= 4.551 min (Metoda H) Apsolutna stereohemija nije određena.
[0422] Primer 88(a), Enantiomer 1: MS(ES): m/z = 491.3 [M+H]<+>. Tr= 2.549 min (Metoda B).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10.05 (s, 1H), 8.22 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.06 (d, J=8.4 Hz, 1H), 7.88 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.68 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.63 (d, J=8.7 Hz, 2H), 7.38 (s, 1H), 7.33 (d, J=8.7 Hz, 2H), 5.15 (br. s., 1H), 2.19 (br. s., 1H), 2.04 (d, J=7.1 Hz, 2H), 1.35-1.78 (m, 9H), 0.83 (t, J=7.2 Hz, 3H)
[0423] Primer 88(b), Enantiomer 2: MS(ES): m/z = 491.3 [M+H]<+>. Tr= 2.541 min (Metoda B).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10.05 (s, 1H), 8.21 (d, J=8.2 Hz, 1H), 8.06 (d, J=8.5 Hz, 1H), 7.87 (t, J=7.5 Hz, 1H), 7.67 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.63 (d, J=8.7 Hz, 2H), 7.37 (s, 1H), 7.33 (d, J=8.7 Hz, 2H), 5.15 (br. s., 1H), 2.18 (br. s., 1H), 1.98-2.10 (m, J=5.0 Hz, 2H), 1.36-1.80 (m, 9H), 0.83 (t, J=7.2 Hz, 3H)
Primer 89
(±)-N-(4-hlorofenil)-2-((cis)-4-((6-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi)cikloheksil)butanamid
[0424]
Primer 89: (±)-N-(4-hlorofenil)-2-((cis)-4-((6-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi)cikloheksil)butanamid
[0425] Primer 89 je pripremljen od Intermedijera 83E i navedeni su analogni postupci da se dobiju 88F, 88G i Primer 88, osim što je 4-hidroksi-6-(trifluorometil) hinolin primenjen u delu F. LC-MS Anal. Izračunato za C26H26ClF3N2O2490.16, utvrđeno [M+H] 491.3 Tr= 0.90 min (Metoda A).
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10.06 (s, 1H), 8.83 (d, J=5.2 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1H), 8.00 (d, J=8.2 Hz, 1H), 7.62 (d, J=8.7 Hz, 2H), 7.30 (d, J=8.7 Hz, 2H), 7.17 (d, J=5.3 Hz, 1H), 4.98 (br. s., 1H), 2.22 (br. s., 1H), 2.05 (br. s., 2H), 1.72 (d, J=13.1 Hz, 4H), 1.46-1.62 (m, 4H), 1.41 (d, J=11.5 Hz, 1H), 0.83 (t, J=7.2 Hz, 3H)
Enantiomer 1 i Enantiomer 2
Enantiomer 1: Primer 89(a) N-(4-hlorofenil)-2-((cis)-4-((6-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi)cikloheksil)butanamid (homohiralan, apsolutna stereohemija nije određena)
Enantiomer 2: Primer 89(b) N-(4-hlorofenil)-2-((cis)-4-((6-(trifluorometil)hinolin-4-il)oksi)cikloheksil)butanamid (homohiralan, apsolutna stereohemija nije određena)
[0427]
[0428] Primer 89(a) Enantiomer 1 i Primer 89(b) Enantiomer 2: Hiralnim razdvajanjem racemskog uzorka (Metoda I) dobijeni su Enantiomer 11 Tr= 6.320 min (Metoda J) i Enantiomer 2 Tr= 7.500 min (Metoda J) Apsolutna stereohemija nije određena.
[0429] Primer 89(a), Enantiomer 1: MS(ES): m/z = 491.3 [M+H]<+>. Tr= 2.418 min (Metoda B).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10.05 (s, 1H), 8.82 (d, J=5.3 Hz, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.13 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.99 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.61 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.29 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.16 (d, J=5.4 Hz, 1H), 4.97 (br. s., 1H), 2.22 (br. s., 1H), 2.04 (br. s., 2H), 1.34-1.79 (m, 9H), 0.83 (t, J=7.2 Hz, 3H)
[0430] Primer 89(b), Enantiomer 2: MS(ES): m/z = 491.3 [M+H]<+>. Tr= 2.418 min (Metoda B).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ: 10.06 (s, 1H), 8.84 (d, J=5.2 Hz, 1H), 8.44 (s, 1H), 8.14 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.99 (d, J=7.6 Hz, 1H), 7.63 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.30 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.17 (d, J=5.3 Hz, 1H), 4.98 (br. s., 1H), 2.23 (br. s., 1H), 2.01-2.11 (m, J=5.4 Hz, 2H), 1.37-1.79 (m, 9H), 0.84 (t, J=7.2 Hz, 3H).
Referentni Primer 90
N-(4-hlorofenil)-2-(4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-il)acetamid
[0431]
Intermedijer 90A. terc-butil 4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-karboksilat, i Intermedijer 90B. terc-butil 4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-karboksilat
[0432] Rastvor terc-butil 4-hidroksipiperidin-1-karboksilata (0.242 g, 1.200 mmol) u 1 mL dioksana tretiran je kalijum heksametildisilazidom (1.200 ml, 1.200 mmol) u THF. Dobijeni zamagljeni rastvor je mešan 5 minuta na sobnoj temperaturi, zatim tretiran sa 4-hloro-6-fluorohinolinom (0.182 g, 1 mmol) u 1 mL dioksana. Reakcija je dovedena na 60 °C i mešana 30 minuta zatim preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena sa 0.1 mL glacijalne HOAc i hromatografisana na silika gelu (3:1 dihlorometan-EtOAc zatim EtOAc zatim 95:5 EtOAc-EtOH). Koncentracijom odgovarajućih (visokih Rf) frakcija dobijen je Intermedijer 90A: terc-butil 4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-karboksilat (0.11 g, 30% prinosa) kao bezbojno ulje. MS(ES): m/z = 363 [M+H]<+>. tR= 0.93 min (Metoda A). Koncentracija frakcija sa niskim Rfdaje Intermedijer 90B: terc-butil 4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-karboksilat (0.09 g, 26% prinosa) kao svetlo žuto ulje. MS(ES): m/z = 347 [M+H]<+>. tR= 0.77 min (Metoda A).
Intermedijer 90C.4-hloro-6-(piperidin-4-iloksi)hinolin
[0433] Smeša Intermedijera 90A (0.1 g, 0.276 mmol) u HCl/dioksanu (1.033 ml, 4.13 mmol) je mešana na sobnoj temperaturi. Početni materijal je nauljen na staklo nakon dodavanja HCl. Nije se rastvorio ni nakon ultrazvučne obrade, pa je dodato ∼0.5 mL dihlorometana, i mešavina je mešana 3 sata. U to vreme došlo do rastvaranja ulja i stvorio se beli talog. Reakciona smeša je pumpana do suva da se dobije 0.08 g (97%) Intermedijera 90C, HCl kao prljavo-beli prah. MS(ES): m/z = 263 [M+H]<+>. tR= 0.50 min (Metoda A).
Intermedijer 90D. etil 2-(4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-il)acetat
[0434] Suspenzija 4-hloro-6-(piperidin-4-iloksi)hinolina, HCl (0.06 g, 0.201 mmol) i kalijum karbonata (0.097 g, 0.702 mmol) u DMF (0.5 mL) tretirana je etil bromoacetatom (0.045 mL, 0.401 mmol), i rezultujuća smeša je mešana 4 sata na sobnoj temperaturi. Ova smeša je neutralisana sa glacijalnom HOAc, i ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (1:1 EtOAc-CH2Cl2do EtOAc). Koncentracija odgovarajućih frakcija Intermedijera 90D kao bezbojnog ulja. MS(ES): m/z = 349 [M+H]<+>. tR= 0.56 min (Metoda A).
Intermedijer 90E.2-(4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-il)sirćetna kisleina, 2 HCl
[0435] Rastvor od 0.04 g Intermedijera 90D u THF (2 mL) tretiran je litijum hidroksidom (0.04 g, 1.670 mmol) u vodi (1 mL). Dodat je metanol, ∼1 mL, da se dobije pojedinačna faza, i reakcija se meša 2 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen pod strujom azota, i dobijena suspenzija je tretirana sa ∼3 mL vode da se rastvori. Vod. HCl je dodavan polako, na kraju je pH rastvora sveden na ∼4, ali se proizvod nije taložio ni u jednom trenutku. pH je vraćen na ∼7.5 sa vod. natrijum bikarbonatom. Dodat je slani rastvor, ali još uvek bez taloga. Ovo rešenje je bilo ekst. šest puta sa 3:1 hloroform-IPA, i komb. org. ekst. su svučeni da daju ulje. Ovo je tretirano sa 5 ekv. HCl/dioksana, i dodata je kap vode da bi se rastvorilo. Ovaj rastvor je zatim liofilizovan dajući Intermedijer 90E (0.04 g, 92%) kao zelenkasto-smeđu čvrstu supstancu. MS(ES): m/z = 321 [M+H]<+>. tR= 0.48 min (Metoda A).
Referentni Primer 90. N-(4-hlorofenil)-2-(4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-il)acetamid
[0436] Rastvor Intermedijera 90E (0.04 g, 0.102 mmol) i 4-hloroanilina (0.014 g, 0.112 mmol) i trietilamina (0.057 mL, 0.406 mmol) u DMF (1 mL) tretiran je sa BOP (0.067 g, 0.152 mmol). Ovaj rastvor je mešan 2 sata na sobnoj temperaturi, zatim prečišćen prep. HPLC. Koncentracijom odgovarajuće frakcije dobijen je materijal čistoće ∼90%. Ovaj materijal je dalje prečišćen fleš hromatografijom. Koncentrovanjem odgovarajućih frakcija i liofilizacijom dobijen je Primer 90 (0.016 g, 36% prinos) kao beli prašak. MS(ES): m/z = 430 [M+H]+. tR= 0.73 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.88 (s, 1H), 8.69 (d, 1H, J = 4.7 Hz), 8.04 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 7.69-7.74 (m, 3H), 7.57 (dd, 1H, J = 9.2, 2.8 Hz), 7.50 (d, 1H, J = 2.7 Hz), 7.36-7.39 (m, 2H), 4.69-4.76 (m, 1H), 3.19 (s, 2H), 2.78-2.86 (m, 2H), 2.06-2.13 (m, 2H), 1.81-1.89 (m, 2H). Napomena: jedan signal pri ∼2.55 ppm je u velikoj meri zaklonjen rastvaračem.
Referentni Primer 91
(±)-N-(4-hlorofenil)-2-(4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-il)propanamid
[0437]
Intermedijer 91A. (±)-etil 2-(4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-il)propanoat
[0438] (±)-etil 2-(4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-il)propanoat je pripremljen kao bledo žuto ulje u prinosu od 97% iz 90C i etil 2-bromopropionata primenom postupka za konverziju 90C u 90D osim što je reakcija izvedena na 60 °C i nije izvedena hromatografija. MS(ES): m/z = 363 [M+H]<+>. tR= 0.58 min (Metoda A).
Intermedijer 91B. (±)-2-(4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-il)propionska kiselina
[0439] (±)-2-(4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-il)propionska kiselina je pripremljena kao prljavo bela pena u prinosu od 93% iz 91A primenom postupka za konverziju 90D u 90E osim što izolovani materijal nije pretvoren u HCl so. MS(ES): m/z = 335 [M+H]<+>. tR= 0.49 min (Metoda A).
Referentni Primer 91. (±)-N-(4-hlorofenil)-2-(4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-il)propanamid
[0440] (±)-N-(4-hlorofenil)-2-(4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-il)propanamid je pripremljen kao trifluoroacetatna so u prinosu od 57% nakon prečišćavanja preparativnom HPLC iz 91B primenom postupka za konverziju 90E u referentni Primer 90. MS(ES): m/z = 444 [M+H]+. tR= 0.73 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 10.83 (s, 1H), 8.69 (d, 1H, J = 4.4 Hz), 8.07 (d, 1H, J = 9.1 Hz), 7.73 (d, 1H, J = 4.2 Hz), 7.59-7.65 (m, 3H), 7.56 (s, 1H), 7.49 (d, 2H, J = 8.1 Hz), 4.63-4.67 (m, 1H), 3.10-3.70 (m, 5H), 2.01-2.39 (m, 4H), 1.66 (d, 3H, J = 6.7 Hz).
Referentni Primer 92
(±)-2-(4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-il)-N-(p-tolil)propanamid
[0441]
Referentni Primer 92. (±)-2-(4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-il)-N-(p-tolil)propanamid
[0442] (±)-2-(4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-il)-N-(p-tolil)propanamid je pripremljen kao HCl so u prinosu 77% nakon prečišćavanja preparativnom HPLC i razmene soli od 91B i ptoluidina primenom postupka za konverziju 90E u referentni Primer 90. MS(ES): m/z = 424 [M+H]+. tR= 0.71 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 11.02 (s, nije integrisano), 10.91 (s, nije integrisano), 10.72 (br. s, nije integrisano), 10.57 (br. s, nije integrisano), 8.78 (s, 1H), 8.13 (t, 1H, J = 9.8 Hz), 7.83 (s, 1H), 7.52-7.70 (m, 4H), 7.19 (d, 2H, J = 7.2 Hz), 4.27-4.35 (m, 1H), 3.25-3.77 (m, 5H), 1.96-2.41 (m, 7H), 1.62 (d, 3H, J = 5.1 Hz).
Enantiomer 1 i Enantiomer 2 racemskog referentnog Primera 91
Enantiomer 1: Referentni Primer 93 N-(4-hlorofenil)-2-(4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-il)propanamid (homohiralan, apsolutna stereohemija nije određena)
Enantiomer 2: Referentni Primer 94 N-(4-hlorofenil)-2-(4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-il)propanamid (homohiralan, apsolutna stereohemija nije određena)
[0444]
Referentni Primeri 93 i 94. N-(4-hlorofenil)-2-(4-((4-hlorohinolin-6-il)oksi)piperidin-1-il)propanamid (oba enantiomera, apsolutna stereohemija nije određena)
[0445] Racemski referentni Primer 91 materijala (0.038 g) je prečišćen hiralnom SFC (27% MeOH u CO2, 0.1% (v/v) svakog dietilamina i amonijum-formata) CHIRALPAK® AD kolonom, 85 ml/min.) Koncentracija odgovarajuće (ranije eluirajuće) frakcije:
[0446] Referentni Primer 93 (enantiomer 1, prvo eluiranje, apsolutna stereohemija nije određena) (0.007 g, 23%). MS(ESI): m/z = 444 [M+H]<+>. tR= 1.28 min (SCP TFA).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.65 (d, 1H, J = 4.5 Hz), 8.02 (d, 1H, J = 9.2 Hz), 7.69 (d, 1H, J = 4.5 Hz), 7.64 (d, 2H, J = 8.6 Hz), 7.54 (br. d, 1H, J = 9.3 Hz), 7.47 (br. s, 1H), 7.37 (d, 2H, J = 8.5 Hz), 4.68-4.75 (m, 1H), 3.56-3.0 (m, 5H), 2.06-2.15 (m, 2H), 1.80-1.90 (m, 2H), 1.24-1.32 (m, 3H).
[0447] Referentni Primer 94 (enantiomer 2, drugo eluiranje, apsolutna stereohemija nije određena) (0.027 g). MS(ESI): m/z = 444 [M+H]<+>. tR= 1.27 min (Metoda K).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6): u suštini isto što i racemat NMR (prisutan je neki dietilamonijum format.).
Referentni Primer 95
N-(4-hlorofenil)-2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)acetamid
[0448]
Intermedijer 95A.6-fluoro-4-(piperidin-4-iloksi)hinolin, 2 HCl
[0449] 6-fluoro-4-(piperidin-4-iloksi)hinolin, 2 HCl je pripremljen iz 90B u kvantitativnom prinosu u obliku žutosmeđe čvrste supstance primenjujući uslove za konverziju 90A u 90C. MS(ES): m/z = 247 [M+H]<+>. tR= 0.42 min (Metoda A).
Intermedijer 95B. etil 2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)acetat
[0450] Etil 2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)acetat je pripremljen u prinosu od 63% kao svetlo žito ulje iz 95A primenjujući uslove za konverziju 90C u 90D. MS(ES): m/z = 333 [M+H]<+>. tR= 0.48 min (Metoda A).
Intermedijer 95C.2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)sirćetna kiselina
[0451] 2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)sirćetna kiselina je pripremljena u prinosu od 75% kao žuto staklo iz 95B primenjujući uslove za konverziju 90D u 90E osim što izolovani materijal nije konvertovan u HCl so. MS(ES): m/z = 305 [M+H]<+>. tR= 0.42 min (Metoda A).
Referentni Primer 95. N-(4-hlorofenil)-2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)acetamid
[0452] N-(4-hlorofenil)-2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)acetamid je pripremljen u prinosu od 38% iz 95C primenjujući uslove za konverziju 90E u referentni Primer 90. MS(ES): m/z = 414 [M+H]+. tR= 0.66 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.68 (d, 1H, J = 5.1 Hz), 8.04 (dd, 1H, J = 9.0, 5.2 Hz), 7.81 (d, 1H, J = 9.3 Hz), 7.63-7.68 (m, 3H), 7.36 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 7.13 (d, 1H, J = 5.0 Hz), 4.81-4.87 (m, 1H), 3.69 (s, 2H), 2.80-2.88 (m, 2H), 2.58-2.67 (m, 2H), 2.07-2.14 (m, 2H), 1.89-1.98 (m, 2H).
Referentni Primer 96
(±)-N-(4-hlorofenil)-2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)propanamid
[0453]
Intermedijer 96A. (±)-etil 2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)propanoat
[0454] (±)-etil 2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)propanoat je pripremljen kao bezbojno ulje u prinosu od 83% od 95A i etil 2-bromopropionata primenjujući postupak za konverziju 90C u 90D. MS(ES): m/z = 347 [M+H]<+>. tR= 0.51 min. (Metoda A).
Intermedijer 96B. (±)-2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)propionska kiselina
[0455] (±)-2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)propionska kiselina je pripremljena kao staklo u prinosu od 68% iz 96A primenjujući postupak za konverziju 90D u 90E, osim što izolovani materijal nije konvertovan u HCl so. MS(ES): m/z = 319 [M+H]<+>. tR= 0.42 min. (Metoda A).
Referentni Primer 96. (±)-N-(4-hlorofenil)-2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)propanamid
[0456] (±)-N-(4-hlorofenil)-2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)propanamid je pripremljen u prinosu od 58% posle prečišćavanja preparativnom HPLC iz 96B primenjujući postupak za konverziju 90E u referentni Primer 90. MS(ES): m/z = 428 [M+H]+. tR= 0.72 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.97 (s, 1H), 8.69 (d, 1H, J = 5.4 Hz), 8.02 (dd, 1H, J = 9.8, 5.4 Hz), 7.77 (dd, 1H, J = 9.7, 2.8 Hz), 7.71 (d, 2H, J = 8.1 Hz), 7.64-7.68 (m, 1H), 7.37 (d, 2H, J = 8.8 Hz), 7.15 (d, 1H, J = 5.2 Hz), 4.78-4.85 (m, 1H), 2.77-2.87 (m, 2H), 2.57-2.63(m, 1H), 2.06-2.14 (m, 2H), 1.85-1.94 (m, 2H), 1.22 (d, 3H, J = 6.8 Hz). Napomena: Jedan signal je u velikoj meri zaklonjen rastvaračem.
Referentni Primeri 97 do 101
Intermedijer 97A: (±)-etil 2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)butanoat
[0457] (±)-etil 2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)butanoat je pripremljen kao bezbojno ulje u prinosu od 71% iz 95A i etil 2-bromobutirata primenom postupka za konverziju 90C u 90D, osim što je reakcija vođena na 50 °C MS(ES): m/z = 361 [M+H]<+>. tR= 0.54 min. (Metoda A).
Intermedijer 97B: (±)-2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)butanska kiselina
[0458] (±)-2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)butanska kiselina je pripremljena kao bledožuta pena u prinosu od 74% iz 97A primenom postupka za konverziju 90D u 90E, osim što izolovani materijal nije konvertovan u HCl so. MS(ES): m/z = 333 [M+H]<+>. tR= 0.44 min. (Metoda A).
Referentni Primeri 97 do 101:
[0459] Bop kuplovanjem (Shema 1, ispod) karboksilnih kiselina x (Intermedijeri 96B i 97B pripremljeni u prethodnim primerima) sa odgovarajućim anilinima pod uslovima opisanim za konverziju 90E u referentni Primer 90 daju jedinjenja prikazana u Tabeli 2 ispod. (Svi unosi su racemski.)
Referentni Primer 102
(±)-N-(4-hlorofenil)-2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)-3-metilbutanamid
[0460]
102A. (±)-etil 2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)-3-metilbutanoat
[0461] (±)-etil 2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)-3-metilbutanoat je pripremljen kao svetlo žuto ulje u prinosu od 59% od 95A i etil 2-bromo-3-metilbutirata primenom postupka za konverziju 90C u 90D, osim što je reakcija vođena na 90 °C MS(ES): m/z = 375 [M+H]<+>. tR= 0.60 min. (Metoda A).
102B. (±)-2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)-3-metilbutanska kiselina
[0462] (±)-2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)-3-metilbutanska kiselina je pripremljena u obliku beličaste čvrste supstance u prinosu od 77% iz 102A primenom postupka za konverziju 90D u 90E, osim što je reakcija vođena nekoliko dana na 75 °C i izolovani materijal nije pretvoren u HCl so. MS(ES): m/z = 347 [M+H]<+>. tR= 0.47 min. (Metoda A).
Referentni Primer 102. (±)-N-(4-hlorofenil)-2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)-3-metilbutanamid
[0463] Rastvor 2-(4-((6-fluorohinolin-4-il)oksi)piperidin-1-il)-3-metilbutanske kiseline (0.02 g, 0.058 mmol) i N-metilmorfolina (0.013 mL, 0.115 mmol) u THF (0.2 mL) je ohlađen na 0 °C i tretiran sa izobutil hloroformatom (9.10 µl, 0.069 mmol). Ova smeša je mešana 15 minuta zatim tretirana sa 4-hloroanilinom (8.84 mg, 0.069 mmol) i zagrejana do sobne temperature i mešana 1 sat. Reakcija je ugašena dodavanjem 1 kapi vode, razblažena sa DMF, i prečišćena preparativnom HPLC. Koncentrovanjem odgovarajuće frakcije dobijen je referentni Primer 102, 2 TFA (0.005 g, 13% prinosa) kao beli prašak. MS(ES): m/z = 456 [M+H]<+>. tR= 0.82 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 10.94 (br. s, 1H), 9.96 (br. s, 1H), 8.02-8.19 (m, 3H), 7.82-7.91 (m, 1H), 7.67 (d, 2H, J = 8.7 Hz), 7.44 (d, 2H, J = 8.2 Hz), 2.01-2.37 (m, 5H), 1.10 (d, 6H, J = 5.3 Hz). Napomena: Nekoliko signala zaklonjenih velikim vodenim pikom.
Referentni Primeri 103 do 112
[0464] Hiralna SFC (Shema 2, ispod) racemskih materijala (pripremljenih u prethodnim primerima) sa naznačenim kolonama pod uslovima (MeOH-CO2) opisanim za razlaganje referentnog Primera 91 u njegove komponentne enantiomere referentni Primer 93 i referentni Primer 94 daju homohiralna jedinjenja prikazana u Tabeli 2 dole. (Svi unosi su homohiralni, apsolutna stereohemija nije određena)
Referentni Primer 113
N-(4-hlorofenil)-2-(1-(hinolin-4-ilmetil)piperidin-4-il)acetamid
[0465]
Intermedijer 113A. metil 2-(1-(hinolin-4-ilmetil)piperidin-4-il)acetat
[0466] Rastvor metil 2-(1-(hinolin-4-ilmetil)piperidin-4-il)acetata, HCl (0.465 g, 2.400 mmol) i trietilamina (0.892 ml, 6.40 mmol) u 1 mL DMF tretiran je 4-(hlorometil)hinolinom, HCl (0.428 g, 2 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 3 sata zatim razblažen sa EtOAc. Organski ekstrakti su zatim isprani vodom, osušeni, filtrirani i odstranjeni da bi se dobio metil 2-(1-(hinolin-4-ilmetil)piperidin-4-il)acetat (0.54 g, 86% prinosa) kao ćilibarno ulje. MS(ES): m/z = 299 [M+H]<+>. tR= 0.48 min (Metoda A).
Intermedijer 113B.2-(1-(hinolin-4-ilmetil)piperidin-4-il)sirćetna kiselina
[0467] Rastvor Intermedijera 113A (0.1 g, 0.335 mmol) u THF (1 mL) je tretiran sa vod. litijum hidroksidom (0.268 mL, 0.670 mmol), a zatim 0.2 mL vode. Dodat je metanol, ∼0.5 mL dajući jednu fazu, i reakcija je mešana 18 h na sobnoj temperaturi. Većina organskog rastvarača je uklonjena pod strujom azota, i ostatak je ugašen sa 0.08 mL glacijalne HOAc. pH je doveden na ∼7 sa zas. vod. natrijum bikarbonatom, i dobijeni rastvor je ekstrahovan tri puta sa 3:1 hloroformizopropanolom. Kombinovani organski ekstrakti su osušeni, filtrirani i odstranjeni da se dobije 2-(1-(hinolin-4-ilmetil)piperidin-4-il)sirćetna kiselina (0.095 g, 95% prinos) kao žutosmeđa čvrsta supstanca. MS(ES): m/z = 285 [M+H]<+>. tR= 0.43 min (Metoda A).
Referentni Primer 113. N-(4-hlorofenil)-2-(1-(hinolin-4-ilmetil)piperidin-4-il)acetamid
[0468] N-(4-hlorofenil)-2-(1-(hinolin-4-ilmetil)piperidin-4-il)acetamid je pripremljen u prinosu od 51% iz 113B primenom uslova za konverziju 90E u referentni Primer 90. MS(ES): m/z = 394 [M+H]+. tR= 1.07 min (Metoda K).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 10.08 (s, 1H), 8.82 (d, 1H, J = 3.9 Hz), 8.27 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 8.02 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 7.75 (t, 1H, J = 7.5 Hz), 7.55-7.64 (m, 3H), 7.49 (d, 1H, J = 3.4 Hz), 7.33 (d, 2H, J = 8.4 Hz), 3.76 (s, 2H), 2.81-2.88 (m, 2H), 2.22 (d, 2H, J = 6.7 Hz), 2.03-2.13 (m, 2H), 1.73-1.82 (m, 1H), 1.59-1.65 (m, 2H), 1.19-1.28 (m, 2H).
Referentni Primer 114
N-(4-fluorofenil)-2-(1-(hinolin-4-ilmetil)piperidin-4-il)acetamid
[0469]
[0470] N-(4-fluorofenil)-2-(1-(hinolin-4-ilmetil)piperidin-4-il)acetamid je pripremljen u prinosu od 76% od 113B i 4-fluoroanilina primenom uslova za konverziju 90E u referentni Primer 90. MS(ES): m/z = 378 [M+H]+. tR= 0.88 min (Metoda K).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 10.03 (s, 1H), 8.79 (d, 1H, J = 4.0 Hz), 8.25 (d, 1H, J = 8.3 Hz), 8.01 (d, 1H, J = 8.4 Hz), 7.75 (t, 1H, J = 7.5 Hz), 7.61 (t, 1H, J = 7.5 Hz), 7.47-7.55 (m, 3H), 7.09 (t, 2H, J = 8.7 Hz), 3.90 (s, 2H), 2.802.86 (m, 2H), 2.20 (d, 2H, J = 6.9 Hz), 2.03-2.11 (m, 2H), 1.71-1.79 (m, 1H), 1.58-1.64 (m, 2H), 1.18-1.27 (m, 2H).
Referentni Primer 115
N-(4-fluorofenil)-2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)piperidin-4-il)acetamid
[0471]
Intermedijer 115A. metil 2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)piperidin-4-il)acetat
[0472] Smeši 4-hloro-6-fluorohinolina (200.0 mg, 1.1 mmol) u anhidrovanom NMP (4 mL), u zaptivenoj bočici, dodat je metil 2-(piperidin-4-il)acetat (260.0 mg, 1.7 mmol), zatim DIPEA (0.8 mL, 4.6 mmol). Bočica je zatvorena i smeša je mešana na sobnoj temperaturi dva sata, zatim na 120 °C tokom 66 sati. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature pre nego što je podeljena između vode i Et2O. Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan još dva puta sa Et2O. Ovi organski ekstrakti su kombinovani sa originalnim organskim slojem i oprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da se dobije sirovi proizvod. Prečišćavanjem Isco hromatografijom dobija se metil 2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)piperidin-4-il)acetat u obliku zlatnog ulja (304.3 mg; 91% prinosa). MS(ES): m/z = 303 [M+H]<+>. tR= 0.64 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.67 (d, J=5.0 Hz, 1H), 8.04 - 7.97 (m, 1H), 7.67 -7.53 (m, 2H), 7.02 (d, J=5.0 Hz, 1H), 3.63 (s, 3H), 3.51 - 3.43 (m, 2H), 2.87 - 2.76 (m, 2H), 2.39 (d, J=7.0 Hz, 2H), 1.94 - 1.89 (m, 1H), 1.87 - 1.81 (m, 2H), 1.62 - 1.49 (m, 2H).
Intermedijer 115B.2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)piperidin-4-il)sirćetna kiselina
[0473] Homogenoj smeši Intermedijera 115A (304.3 mg, 1.0 mmol) u EtOH (10 mL), na sobnoj temperaturi u atmosferi azota, u kapima se dodaje 2M NaOH (vod) (1 mL, 2.0 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 22 sata pre nego što je ugašena sa 4M HCl u dioksanu (0.5 mL, 2.0 mmol). Posle mešanja tokom 5 minuta, smeša je koncentrovana u vakuumu da bi se dobila bledo zlatna čvrsta supstanca, koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. MS(ES): m/z = 289 [M+H]<+>. tR= 0.55 min (Metoda A).
Referentni Primer 115. N-(4-fluorofenil)-2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)piperidin-4-il)acetamid
[0474] Smeši Intermedijera 115B (20.0 mg, 0.07 mmol) i 4-fluoroanilina (9.3 mg, 0.08 mmol) u anhidrovanom DMF (1 mL), na sobnoj temperaturi pod azotom, dodat je DIPEA (0.04 mL, 0.23 mmol) zatim PyBOP (36.1 mg, 0.07 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 sata pre nego što je koncentrovana u vakuumu da se uklone isparljive materije, razblažena sa DMSO, filtrirana kroz špric filter, zatim prečišćena pomoću preparativne HPLC/MS da se dobije jedinjenje iz naslova (14.4 mg; 54% prinos). MS(ES): m/z = 382 [M+H]<+>. tR= 1.25 min (Metoda K).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 10.04 (s, 1H), 8.66 (d, J=4.9 Hz, 1H), 8.03 - 7.99 (m, 1H), 7.64 - 7.58 (m, 4H), 7.16 - 7.11 (m, 2H), 7.03 (d, J=4.9 Hz, 1H), 3.59 - 3.15 (m, 2H), 2.86 - 2.78 (m, 2H), 2.36 (d, J=7.1 Hz, 2H), 2.07 - 1.98 (m, 1H), 1.89 - 1.84 (m, 2H), 1.62 - 1.53 (m, 2H).
Referentni Primeri 116 do 119
[0475] Reakcija Intermedijera 115B sa odgovarajućim aminom, pod uslovima opisanim za referentni Primer 115 (Shema 3, ispod), daje jedinjenja prikazana u Tabeli 3 ispod.
Tabela 4
Referentni Primer 120
N-(4-fluorofenil)-2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acetamid
[0476]
Intermedijer 120A. metil 2-(4-metilpiperidin-4-il)acetat, HCl
[0477] U bocu napunjenu sa MeOH (7.5 mL), na 0 °C u atmosferi azota, polako je dodat acetil hlorid (1.1 mL, 15.2 mmol). Po završenom dodavanju, smeša je mešana na 0 °C tokom 5 minuta pre dodavanja homogene smeše 2-(4-metilpiperidin-4-il)sirćetne kiseline, HCl (675.0 mg, 3.5 mmol) u MeOH (1.5 mL) polako u kapima. Dobijena homogena smeša je mešana na 0 °C tokom 5 minuta zatim na 60 °C tokom 8 sati, pre nego što je koncentrovana u vakuumu da se dobije HCl so Intermedijera 120A kao bela čvrsta supstanca (718.0 mg; 99% prinosa) koja je primenjivana bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.41 - 9.12 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.25 - 3.15 (m, 2H), 2.93 - 2.82 (m, 2H), 2.39 - 2.30 (m, 2H), 1.74 - 1.64 (m, 4H), 1.02 (s, 3H).
Intermedijer 120B. metil 2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acetat
[0478] Homogenoj smeši 4-hloro-6-fluorohinolina (350.0 mg, 1.9 mmol) u anhidrovanom NMP (5 mL), u zaptivenoj bočici, dodata je HCl so metil 2-(4-metilpiperidin-4-il)acetata (120A, 480.0 mg, 2.3 mmol) zatim DIPEA (1.6 mL, 9.2 mmol). Bočica je zatvorena i smeša je mešana na 120 °C. Posle 26 sati, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature zatim je podeljena između vode i EtOAc. Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je još jednom ekstrahovan EtOAc. Organski slojevi su kombinovani, oprani slanim rastvorom, zatim koncentrovani u vakuumu da se dobije sirovi proizvod. Prečišćavanjem Isco hromatografijom dobija se Intermedijer 120B kao ulje (565.8 mg; 93% prinosa). MS(ES): m/z = 317 [M+H]<+>. tR= 0.66 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.38 (d, J=5.4 Hz, 1H), 7.96 (dd, J=11.7, 2.8 Hz, 1H), 7.89 - 7.84 (m, 1H), 7.55 - 7.49 (m, 1H), 6.54 (d, J=5.5 Hz, 1H), 3.82 - 3.63 (m, 2H), 3.59 (s, 3H), 3.54 - 3.34 (m, 2H), 2.45 - 2.38 (m, 2H), 1.87 - 1.72 (m, 4H), 1.05 (s, 3H).
Intermedijer 120C.2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)sirćetna kiselina
[0479] U homogenu smešu metil 2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acetata (321.0 mg, 1.0 mmol) u MeOH (5 mL), u atmosferi azota, je dodat kap po kap 2M NaOH vodeni rastvor (1 mL, 2.0 mmol). Reakcija je zatim mešana na sobnoj temperaturi 20 sati pre nego što je tretirana sa 1N HCl (vod) do pH 6 na pH test trakama. Smeša je zatim podeljena između vode i EtOAc, slojevi su odvojeni i vodeni sloj je dva puta ekstrahovan sa EtOAc. Vodeni sloj iz ekstrakcije je liofilizovan da bi se dobio sirovi referentni Primer 120C kao beličasta čvrsta supstanca (302.1 mg, 98% prinosa) koja je primenjen bez daljeg prečišćavanja. MS(ES): m/z = 303 [M+H]<+>. tR= 0.59 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.12 (br.s, 1H), 8.41 (d, J=6.1 Hz, 1H), 8.12 (dd, J=11.5, 2.7 Hz, 1H), 8.00 (dd, J=9.3, 5.7 Hz, 1H), 7.75 - 7.64 (m, 1H), 6.64 (d, J=6.2 Hz, 1H), 3.98 - 3.87 (m, 1H), 3.87 - 3.78 (m, 1H), 3.69 - 3.49 (m, 2H), 2.38 - 2.29 (m, 2H), 1.92 - 1.70 (m, 4H), 1.06 (s, 3H).
Referentni Primer 120. N-(4-fluorofenil)-2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acetamid
[0480] Smeši 2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)sirćetne kiseline (25.6 mg, 0.09 mmol) i 4-fluoroanilina (11.3 mg, 0.1 mmol) u anhidrovanom DMF (1 mL), u atmosferi azota, dodat je DIPEA (0.05 mL, 0.3 mmol), zatim PyBOP (44.1 mg, 0.09 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 156 sati, pre nego što je razblažena sa DMF, filtrirana kroz filter špric, zatim prečišćena pomoću preparativne HPLC/MS da se dobije jedinjenje iz naslova (17.2 mg; 51% prinosa). MS(ES): m/z = 396 [M+H]<+>. tR= 1.32 min (Metoda K).<1>HKNMR (500MHz, DMSO-d6) δ 10.05 (s, 1H), 8.33 (d, J=5.5 Hz, 1H), 7.99 - 7.93 (m, 1H), 7.89 - 7.83 (m, 1H), 7.57 - 7.50 (m, 3H), 7.13 - 7.08 (m, 2H), 6.54 (d, J=5.5 Hz, 1H), 3.85 - 3.61 (m, 2H), 3.59 -3.36 (m, 2H), 2.41 - 2.31 (m, 2H), 1.86 - 1.75 (m, 4H), 1.07 (s, 3H).
Referentni Primeri 121 do 125
[0481] Reakcija 2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)sirćetne kiseline sa odgovarajućim aminom, pod uslovima opisanim za referentni Primer 120 (Shema 4, ispod), daje jedinjenja prikazana u Tabeli 4 ispod.
Tabela 5
Referentni Primer 126
(±)-N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)propanamid [0482]
Intermedijer 126A. terc-butil 4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-karboksilat
[0483] Smeši 4-hloro-6-fluorohinolina (200.0 mg, 1.1 mmol) u anhidrovanom NMP (4 mL), u zaptivenoj bočici, dodat je 1-Boc-piperizin (308.0 mg, 1.7 mmol), a zatim DIPEA (0.8 mL, 4.6 mmol). Bočica je zatvorena i smeša je mešana na sobnoj temperaturi dva sata zatim na 120 °C tokom 66 sata. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature pre nego što je podeljena između vode i Et2O. Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan još dva puta sa Et2O. Ovi organski ekstrakti su kombinovani sa originalnim organskim slojem i oprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da se dobije sirovi proizvod. Prečišćavanjem Isco hromatografijom dobija se terc-butil 4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-karboksilat kao ulje (362.8 mg; 98% prinosa). MS(ES): m/z = 332 [M+H]<+>. tR= 0.70 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.70 (d, J=4.9 Hz, 1H), 8.09 - 8.00 (m, 1H), 7.77 - 7.67 (m, 1H), 7.67 - 7.62 (m, 1H), 7.07 (d, J=4.9 Hz, 1H), 3.67 - 3.57 (m, 4H), 3.15 - 3.06 (m, 4H), 1.44 (s, 9H).
Intermedijer 126B.6-fluoro-4-(piperazin-1-il)hinolin
[0484] U bocu napunjenu terc-butil 4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-karboksilatom (362.8 mg, 1.1 mmol), u atmosferi azota, dodata je 4M HCl u dioksanu (10 mL, 40.0 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5.5 sati, za to vreme se stvorio talog. Heterogena smeša je koncentrovana na približno 1/2 svoje prvobitne zapremine. Vakuumskom filtracijom dobijena je HCl so jedinjenja iz naslova kao beličasta čvrsta supstanca (259.0 mg; 88% prinosa) koja je primenjena bez daljeg prečišćavanja. MS(ES): m/z = 232 [M+H]<+>. tR= 0.34 min (Metoda A).
Intermedijer 126C. etil 2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)propanoat
[0485] Homogenoj smeši HCl soli 6-fluoro-4-(piperazin-1-il)hinolina (126B, 80.0 mg, 0.3 mmol) u anhidrovanom NMP (2 mL), u zaptivenoj bočici, dodat je K2CO3(60.0 mg, 0.4 mmol), zatim etil 2-bromopropanoat (65.0 mg, 0.4 mmol). Boca je zatim zatvorena i smeša je mešana na 60 °C. Posle 67.5 sati, reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu zatim podeljena između vode i DCM. Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je još jednom ekstrahovan sa DCM. Organski slojevi su kombinovani i koncentrovani u vakuumu da se dobije proizvod u obliku ulja (92.7 mg, 94%), koja je primenjena bez daljeg prečišćavanja. MS(ES): m/z = 332 [M+H]<+>. tR= 0.51 min (Metoda A).
Intermedijer 126D.2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)propionska kiselina
[0486] Homogenoj smeši etil 2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)propanoata (92.7 mg, 0.3 mmol) u EtOH (3 mL), u atmosferi azota, dodat je u kapima 2M NaOH (vod) (0.3 mL, 0.6 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 21 sat pre nego što je ugašena sa 4M HCl u dioksanu (0.15 mL, 0.6 mmol). Posle mešanja na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta, smeša je koncentrovana u vakuumu da se u sledećem koraku dobije proizvod u obliku svetlo žutobraon čvrste supstance, koja je primenjena bez daljeg prečišćavanja, na osnovu 100%, u sledećem koraku. MS(ES): m/z = 304 [M+H]<+>. tR= 0.39 min (Metoda A).
Referentni Primer 126. (±)-N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)propanamid
[0487] Smeši 2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)propionske kiseline (30 mg, 0.1 mmol) i4-hloroanilina (15.1 mg, 0.1 mmol) u anhidrovanom DMF (1.5 mL), u atmosferi azota, dodata je DIPEA (0.06 mL, 0.3 mmol) zatim PyBOP (51.5 mg, 0.1 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 17.5 sati, pre nego što je razblažena sa DMF, filtrirana kroz filter špric, zatim prečišćena pomoću preparativne HPLC/MS da se dobije jedinjenje iz naslova kao racemat (11.0 mg; 27% prinosa). MS(ES): m/z = 413 [M+H]<+>. tR= 1.01 min (Metoda K).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 10.05 (s, 1H), 8.71 - 8.62 (m, 1H), 8.06 - 7.96 (m, 1H), 7.66 (d, J=8.7 Hz, 2H), 7.64 - 7.57 (m, 2H), 7.35 (d, J=8.7 Hz, 2H), 7.04 (d, J=4.9 Hz, 1H), 3.36 (q, J=6.8 Hz, 1H), 3.27 - 3.13 (m, 4H), 2.90 - 2.73 (m, 4H), 1.25 (d, J=6.8 Hz, 3H).
Referentni Primer 127
(±)-N-(4-bromofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)propanamid
[0488]
[0489] Referentni Primer 127 (17.1 mg; 37% prinosa) je pripremljen prema postupku analognom onom za sintezu referentnog Primera 126, s tim što je umesto 4-hloroanilina primenjivan 4-bromoanilin (20.4 mg, 0.12 mmol). MS(ES): m/z = 457 [M+H]<+>. Tr= 1.04 min (Metoda K).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 10.58 (br. s., 1H), 8.65 (d, J=6.0 Hz, 1H), 8.09 - 7.98 (m, 1H), 7.85 - 7.76 (m, 2H), 7.61 - 7.48 (m, 4H), 7.20 (d, J=6.1 Hz, 1H), 3.76 - 3.66 (m, 2H), 3.39 - 3.27 (m, 2H), 3.27 - 3.16 (m, 2H), 2.95 - 2.82 (m, 1H), 2.58 - 2.54 (m, 2H), 1.46 (d, J=6.6 Hz, 3H).
Referentni Primer 128
(±)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)-N-fenilpropanamid
[0490]
[0491] Referentni Primer 128 (10.9 mg; 29% prinosa) je pripremljen prema postupku analognom onom za sintezu referentnog Primera 126, s tim što je umesto 4-hloroanilina primenjivan anilin (11.1 mg, 0.12 mmol). MS(ES): m/z = 379 [M+H]<+>. Tr= 0.81 min (Metoda K).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 9.92 (s, 1H), 8.65 (d, J=4.9 Hz, 1H), 8.08 - 7.96 (m, 1H), 7.67 - 7.54 (m, 4H), 7.30 (t, J=7.7 Hz, 2H), 7.12 - 7.00 (m, 2H), 3.36 (q, J=6.7 Hz, 1H), 3.28 - 3.11 (m, 4H), 2.93 - 2.74 (m, 4H), 1.25 (d, J=6.8 Hz, 3H).
Enantiomer 1 i Enantiomer 2 racemskog referentog Primera 126
Enantiomer 1: Referentni Primer 129 N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)propanamid (homohiralni, apsolutna stereohemija nije određena)
[0492]
Enantiomer 2: Referentni Primer 130 N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)propanamid (homohiralni, apsolutna stereohemija nije određena)
[0493]
[0494] Racemski referentni Primer 126 (11.0 mg) je prečišćen hiralnom SFC (70/30 CO2/MeOH mobilna faza, hiralna AD 25 × 3 cm, 5µm kolona, 85 ml/min, talasna dužina detektora = 220 nm). Dobijena koncentracija odgovarajućih frakcija:
[0495] Referentni Primer 129 (Enantiomer 1, koji prvo eluira) (4.2 mg) MS(ES): m/z = 413 [M+H]<+>. Tr=1.04 min (Metoda K).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6): superponirajući na racematnom NMR
[0496] Referentni Primer 130 (Enantiomer 2, koji drugi eluira) (4.1 mg) MS(ES): m/z = 413 [M+H]<+>. Tr=1.04 min (Metoda K).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6): superponirajući na racematnom NMR
Referentni Primer 131
(±)-N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)butanamid
[0497]
[0498] Referentni Primer 131 (5.6 mg; 14% prinosa) je pripremljen prema postupku analognom onom za sintezu referentnog Primera 126, s tim što je umesto etil 2-bromopropanoata primenjivan etil 2-bromobutanoat. MS(ES): m/z = 427 [M+H]<+>. Tr= 1.09 min (Metoda K).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 10.17 (s, 1H), 8.65 (d, J=5.0 Hz, 1H), 8.01 (dd, J=9.0, 5.6 Hz, 1H), 7.68 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.64 - 7.57 (m, 2H), 7.37 (d, J=8.8 Hz, 2H), 7.03 (d, J=5.0 Hz, 1H), 3.58 - 3.54 (m, 1H), 3.25 - 3.11 (m, 4H), 2.95 - 2.76 (m, 4H), 1.85 - 1.60 (m, 2H), 0.89 (t, J=7.3 Hz, 3H).
Referentni Primer 132
(±)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)-N-fenilbutanamid
[0499]
[0500] Referentni Primer 132 (6.6 mg; 17% prinosa) je pripremljen prema postupku analognom onom za sintezu referentnog Primera 131, s tim što je umesto 4-hloroanilina primenjivan anilin. MS(ES): m/z = 393 [M+H]<+>. Tr= 0.91 min (Metoda K).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 10.08 (s, 1H), 8.61 (d, J=4.0 Hz, 1H), 7.98 (dd, J=8.8, 5.6 Hz, 1H), 7.65 - 7.52 (m, 4H), 7.31 (t, J=7.8 Hz, 2H), 7.13 - 6.98 (m, 2H), 3.24 - 3.09 (m, 5H), 2.96 - 2.76 (m, 4H), 1.83 - 1.60 (m, 2H), 0.87 (t, J=7.3 Hz, 3H).
Referentni Primer 133
(±)-N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)-3-metoksipropanamid
[0501]
[0502] Referentni Primer 133 (12.0 mg; 29% prinosa) je pripremljen prema postupku analognom onom za sintezu referentnog Primera 126, s tim što je umesto etil 2-bromopropanoata primenjivan metil 2-bromo-3-metoksipropanoat. MS(ES): m/z = 443 [M+H]<+>. Tr= 1.14 min (Metoda K).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 10.15 (s, 1H), 8.68 (d, J=4.4 Hz, 1H), 8.06 - 7.96 (m, 1H), 7.71 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.65 - 7.56 (m, 2H), 7.38 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.04 (d, J=4.3 Hz, 1H), 3.83 - 3.64 (m, 2H), 3.62 - 3.36 (m, 1H), 3.18 (s, 3H), 3.01 - 2.93 (m, 2H), 2.89 - 2.81 (m, 2H), 2.57 - 2.53 (m, 4H).
Referentni Primer 134
(±)-N-(4-fluorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)-3-metoksipropanamid
[0503]
[0504] Referentni Primer 134 (11.3 mg; 35% prinosa) je pripremljen prema postupku analognom onom za sintezu referentnog Primera 133, s tim što je umesto 4-hloroanilina primenjivan 4-fluoroanilin. MS(ES): m/z = 427 [M+H]<+>. Tr= 1.05 min (Metoda K).<1>H NMR (500MHz, DMSOd6) δ 10.07 (s, 1H), 8.67 (d, J=4.5 Hz, 1H), 8.09 - 7.98 (m, 1H), 7.73 - 7.65 (m, 2H), 7.63 - 7.58 (m, 2H), 7.20 - 7.11 (m, 2H), 7.04 (d, J=4.5 Hz, 1H), 3.88 - 3.62 (m, 2H), 3.60 - 3.34 (m, 1H), 3.19 (s, 3H), 3.01 - 2.94 (m, 2H), 2.89 - 2.82 (m, 2H), 2.56 - 2.52 (m, 4H).
Referentni Primeri 135 i 136
Enantiomer 1: N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)-3-metoksipropanamid (homohiralni, apsolutna stereohemija nije određena)
[0505]
Enantiomer 2: N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)-3-metoksipropanamid (homohiralni, apsolutna stereohemija nije određena)
[0506]
[0507] Racemski referentni Primer 133 (9.8 mg) je prečišćen hiralnom SFC (70/30 CO2/MeOH mobilna faza, hiralna Chiral Lux-425 × 3 cm, 5µm kolona 85 ml/min, talasna dužina detektora = 220 nm). Koncentracija odgovarajućih (ranije eluirajućih) frakcija je dala:
[0508] Referentni Primer 135 (prvo eluirajući) (3.2 mg) dodeljen kao N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)-3-metoksipropanamid (Enantiomer 1). MS(ES): m/z = 443 [M+H]<+>. Tr=1.19 min (Metoda K).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6): superponirajući na racematnom NMR
[0509] Referentni Primer 136 (drugo eluirajući) (3.3 mg) dodeljen kao N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)-3-metoksipropanamid (Enantiomer 2). MS(ES): m/z = 443 [M+H]<+>. Tr=1.19 min (Metoda K).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6): superponirajući na racematnom NMR
Primer 137
2-(4-((R)-3-((4-hlorofenil)amino)-2-((cis)-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)-3-oksopropil)fenil)propionska kiselina (smeša dva diastereomera)
[0510]
Intermedijer 137A. terc-butil 2-(4-(bromometil)fenil)propanoat
[0511] Ratvoru 2-(4-(bromometil)fenil)propionske kiseline (3 g, 12.34 mmol) u CH2Cl2(100 mL) na ST dodat je oksalil hlorid (1.400 mL, 16.04 mmol) i 1 kap DMF. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1h. Zatim je smeša koncentrovana do suva. U gornju reakciju je dodat CH2Cl2(2 mL) zatim t-BuOH (100 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16h. Smeša je razblažena sa CH2Cl2i oprana zasićenim rastvorom NaHCO3, slanim rastvorom, osušena MgSO4, filtrirana i koncentrovana dajući Intermedijer 137A (1.8 g, 6.02 mmol, 48.7% prinosa) kao svetlo žutu tečnost.<1>H NMR (400MHz, hloroform-d) δ 7.36 (d, J=8.3 Hz, 2H), 7.33 - 7.23 (m, 2H), 4.60 (s, 1H), 4.51 (s, 1H), 3.64 (dd, J=7.2, 2.8 Hz, 1H), 1.47 (dd, J=7.2, 1.2 Hz, 3H), 1.42 (s, 9H) Intermedijer 137B. terc-butil 2-(4-((R)2-((cis)-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)-3-okso-3-((R)-2-okso-4-feniloksazolidin-3-il)propil)fenil)propanoat (smeša diastereomera)
[0512] U rastvor (R)-3-(2-((cis)-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)acetil)-4-feniloksazolidin-2-ona (pripremljen iz opštih postupaka K, B, E, i L) (200 mg, 0.462 mmol) u THF (4 mL) na -40 °C dodat je u kapima NaHMDS (1M u THF) (0.555 mL, 0.555 mmol). Smeša je mešana na -40 °C do -30 °C tokom 20 minuta. Zatim je dodat terc-butil 2-(4-(bromometil)fenil)propanoat (304 mg, 1.017 mmol) u THF (0.5 mL). Reakcija je mešana na -20 °C tokom 16h. Reakcija je ugašena sa zasićenim NH4Cl i EtOAc na -20 °C. Organska supstanca se odvoji i opere slanim rastvorom, osuši MgSO4, filtrira i koncentruje do suva. Ovaj sirovi materijal je rastvoren u DMF i prečišćen prep. HPLC (PHENOMENEX® Luna 5µ 30 × 100 mm), brzinom protoka od 40 mL/min sa gradijentom od 20% B-100% B tokom 10 minuta. Drži se na 100%B tokom 5 minuta (A: 0.1% TFA u voda/MeOH (90:10), B: 0.1% TFA u voda/MeOH (10:90) praćenje na 254 nm. Kombinovane frakcije (tr=11.06 min) koje sadrže proizvod. Posle koncentracije, 134 mg Intermedijera 137B (0.204 mmol, 44.1%) je dobijeno kao smeša diastereomera.<1>H NMR (400MHz, hloroform-d) δ 9.15 (d, J=5.1 Hz, 1H), 8.65 (dd, J=9.2, 4.9 Hz, 1H), 8.02 (d, J=3.5 Hz, 1H), 7.94 (dd, J=9.3, 2.2 Hz, 1H), 7.89 - 7.73 (m, 1H), 7.36 - 7.24 (m, 4H), 7.13 (d, J=8.1 Hz, 1H), 7.17 (d, J=8.1 Hz, 1H), 6.99 (d, J=7.9 Hz, 2H), 6.84 - 6.64 (m, 2H), 5.44 - 5.35 (m, 1H), 4.98 (br. s., 1H), 4.63 - 4.46 (m, 1H), 4.10 (ddd, J=8.9, 6.5, 4.3 Hz, 1H), 3.69 - 3.60 (m, 1H), 3.52 (d, J=11.7 Hz, 1H), 3.03 (dt, J=13.6, 4.2 Hz, 1H), 2.74 (ddd, J=13.6, 10.6, 6.8 Hz, 1H), 2.37 - 2.23 (m, 1H), 2.16 (d, J=12.8 Hz, 1H), 2.10 - 2.00 (m, 1H), 2.00 - 1.74 (m, 7H), 1.50 (dd, J=8.6, 7.2 Hz, 3H), 1.45 - 1.29 (m, 9H) MS: Anal. Izračunato za C40H43FN2O5650.316, utvrđeno [M+H] 651.3 LC: tr = 1.03 min (Metoda B)
Intermedijer 137C. (2R)-3-(4-(1-terc-butoksi)-1-oksopropan-2-il)fenil)-2-((cis)-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)propionska kiselina (smeša diastereomera)
[0513] Rastvoru Intermedijera 137B (0.206 mmol, 134 mg) u THF (1.3 mL) na 0 °C dodat je u kapima 30% H2O2(0.093 mL, 0.824 mmol), zatim je dodavan 2.7 M LiOH u H2O (0.122 mL, 0.329 mmol). Reakcija je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i mešana je na sobnoj temperaturi 16 h. Reakcija je pažljivo ugašena na 0 °C dodavanjem zasićenog Na2SO3. pH je podešena na 5∼6 sa 1N HCl i smeša je ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni MgSO4, filtrirani i koncentrovani. Sirovi materijal je prečišćen sa ISCO kolonom od 12g, 30 mL/min. 0-100% EtOAc/heksan u 35 min. Željeni proizvod se eluira sa 22% EtOAc/heksan. Posle koncentracije, 35 mg (0.069 mmol, 33%) 137C je dobijeno kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400MHz, hloroform-d) δ 8.82 (d, J=4.6 Hz, 1H), 8.15 (dd, J=9.2, 5.7 Hz, 1H), 7.68 (dd, J=10.5, 2.7 Hz, 1H), 7.49 (ddd, J=9.2, 7.9, 2.7 Hz, 1H), 7.41 (d, J=4.5 Hz, 1H), 7.27 - 7.06 (m, 4H), 3.60 (d, J=7.0 Hz, 1H), 3.37 (br. s., 1H), 3.04 - 2.96 (m, 2H), 2.95 - 2.81 (m, 1H), 2.12 (d, J=19.2 Hz, 1H), 2.00 - 1.76 (m, 8H), 1.45 (d, J=7.2 Hz, 3H), 1.42 - 1.34 (m, 9H) MS: Anal. Izračunato za C31H36FNO4505.263, utvrđeno [M+H] 506.1 LC: tr = 0.92 min (Metoda B).
Intermedijer 137D. terc-butil 2-(4-((R)-3-((4-hlorofenil)amino)-2-((cis)-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)-3 -oksopropil)fenil)propanoat (smeša diastereomera)
[0514] Rastvoru 137C (35 mg, 0.069 mmol) u CH2Cl2(3 mL) na sobnoj temperaturi dodat je u kapima oksalil hlorid (8.90 µl, 0.104 mmol) zatim 1 kap DMF. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 2h. Zatim je smeša koncentrovana do suva. Ovoj smeši u THF (1 mL) na sobnoj temperaturi dodat je 4-hloroanilin (8.76 mg, 0.069 mmol), zatim Hunigova baza (0.018 mL, 0.103 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Smeša je razblažena sa MeOH i prečišćena preparativnom HPLC (PHENOM tokom 10 minuta. Držano na 100%B tokom 5minuta (A: 0.1% TFA u voda/MeOH (90:10), B: 0.1% TFA u voda/MeOH (10:90) praćeno na 254 nm. Intermedijer 137D (10 mg, 0.016 mmol, 46.4% prinosa) je dobijen kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400MHz, hloroform-d) δ 9.06 (br. s., 1H), 8.57 (br. s., 1H), 7.95 - 7.84 (m, 2H), 7.84 - 7.63 (m, 1H), 7.26 - 7.10 (m, 8H), 3.66 - 3.49 (m, 4H), 3.06 (dd, J=13.6, 3.4 Hz, 2H), 2.87 (t, J=12.3 Hz, 1H), 2.70 (br. s., 1H), 2.40 (br. s., 1H), 2.15 (br. s., 1H), 2.10 - 1.80 (m, 7H), 1.41 (d, J=7.1 Hz, 3H), 1.37 - 1.30 (m, 9H) MS: Anal. Izračunato za C37H40ClFN2O3614.271, utvrđeno [M+H] 615.3 LC: tr = 1.06 min (Metoda B)
Primer 137. 2-(4-((R)-3-((4-hlorofenil)amino)-2-((cis)-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)-3-oksopropil)fenil)propionska kiselina
[0515] Intermedijeru 137D (10 mg, 0.016 mmol) u bočici od 2 drama dodato je 50% TFA/CH2Cl2(0.3 mL, 0.016 mmol) Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakcija je koncentrovana do suva i liofilizovana 2 dana. Primer 137 (9.5 mg, 0.014 mmol, 83% prinosa) je dobijen kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400MHz, hloroform-d) δ 8.74 - 8.52 (m, 1H), 8.34 (br. s., 1H), 7.90 - 7.78 (m, 2H), 7.72 (t, J=7.9 Hz, 1H), 7.32 - 7.19 (m, 6H), 7.15 (d, J=8.7 Hz, 2H), 6.92 (d, J=8.6 Hz, 1H), 6.95 (d, J=8.3 Hz, 1H), 3.67 (d, J=6.7 Hz, 1H), 3.42 (br. s., 1H), 3.13 - 2.83 (m, 3H), 2.30 (br. s., 1H), 2.15 (br. s., 1H), 2.02 (br. s., 1H), 1.97 - 1.87 (m, 3H), 1.84 (br. s., 3H), 1.41 (t, J=6.1 Hz, 3H) MS: Anal. Izračunato za C33H32ClFN2O3558.209, utvrđeno [M+H] 559.3 LC: tr = 0.87 min (Metoda B)
Enantiomer 1 i 2 iz racemskog Primera 137
Enantiomer 1: Primer 138 2-(4-((R)-3-((4-hlorofenil)amino)-2-((cis)-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)-3-oksopropil)fenil)propionska kiselina (homohiralni, stereohemija nije određena)
[0516]
Enantiomer 2: Primer 139 2-(4-((R)-3-((4-hlorofenil)amino)-2-((cis)-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)-3 -oksopropil)fenil)propionska kiselina (homohiralna, stereohemija nije određena)
[0517]
[0518] Diastereomeri iz Primera 137 su prečišćeni preparativnom SFC pod sledećim uslovima: kolona: hiralna WHELK-O® KROMASIL® 25 × 3 cm ID, čestice 5µm; mobilna faza A: 70/30 CO2/MeOH; talasna dužina detektora: 220 nm; protok: 85 mL/min. Odgovarajuće frakcije (Enantiomer 1 "Pik-1" tr = 15.2 min (Primer 138) i Enantiomer 2 "Pik-2" tr = 17.2min (Primer 139) da se dobije:
Primer 138 (Enantiomer 1, koji prvi eluira):<1>H NMR (400MHz, hloroform-d) δ 8.67 (br. s., 1H), 8.18 - 7.97 (m, 1H), 7.67 (d, J=10.5 Hz, 1H), 7.47 (t, J=7.2 Hz, 1H), 7.33 - 7.23 (m, 6H), 7.17 (d, J=7.8 Hz, 2H), 7.08 (s, 4H), 7.02 (br. s., 1H), 3.76 (d, J=6.7 Hz, 1H), 3.36 (br. s., 1H), 3.03 (d, J=10.1 Hz, 1H), 2.87 (t, J=12.2 Hz, 1H), 2.63 (t, J=10.0 Hz, 2H), 2.32 (br. s., 2H), 2.12 (br. s., 2H), 2.02 - 1.79 (m, 2H), 1.73 (d, J=10.0 Hz, 2H), 1.53 (d, J=7.1 Hz, 3H) MS: Anal. Izračunato za C33H32ClFN2O3558.209, utvrđeno [M+H] 559.3 LC: tr = 0.86 min (Metoda B)
Primer 139 (Enantiomer 2, koji prvi eluira):<1>H NMR (400MHz, hloroform-d) δ 8.64 (br. s., 1H), 8.16 - 8.03 (m, 1H), 7.66 (d, J=8.8 Hz, 1H), 7.45 (t, J=7.3 Hz, 1H), 7.30 (br. s., 7H), 7.20 - 7.01 (m, 7H), 3.74 (br. s., 1H), 3.35 (br. s., 1H), 3.00 (d, J=11.1 Hz, 1H), 2.96 - 2.80 (m, 1H), 2.71 - 2.55 (m, 1H), 2.31 (d, J=8.7 Hz, 1H), 2.25 - 2.13 (m, 1H), 2.09 (br. s., 3H), 2.00 - 1.86 (m, 2H), 1.83 (br. s., 2H), 1.58 - 1.33 (m, 2H), 1.30 - 1.25 (m, 2H), 1.00 - 0.71 (m, 1H) MS: Anal. Izračunat za C33H32ClFN2O3558.209, utvrđeno [M+H] 559.3 LC: tr = 0.86 min (Metoda B)
Primer 140
2-(4-((R)-3-((4-cijanofenil)amino)-2-((cis)-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)-3-oksopropil)fenil)propionska kiselina
[0519]
[0520] Primer 140 je dobijen prateći postupke u Primeru 137 primenom odgovarajućeg 4-cijanoanilina.<1>H NMR (400MHz, hloroform-d) δ 8.99 (br. s., 1H), 8.42 (br. s., 1H), 8.06 (br. s., 1H), 7.95 (d, J=9.3 Hz, 1H), 7.83 (t, J=8.2 Hz, 1H), 7.50 - 7.35 (m, 3H), 7.25 - 7.10 (m, 4H), 3.78 - 3.54 (m, 1H), 3.53 (s, 1H), 3.18 - 2.92 (m, 2H), 2.92 - 2.65 (m, 1H), 2.38 (br. s., 1H), 2.27 - 2.16 (m, 1H), 2.03 (s, 2H), 2.00 - 1.93 (m, 3H), 1.91 (br. s., 3H), 1.80 (br. s., 1H), 1.52 - 1.36 (m, 3H), 0.94 - 0.69 (m, 1H) MS: Anal. Izračunato za C34H32FN3O3549.243, utvrđeno [M+H] 550.3 LC: tr = 0.83 min (Metoda B).
Primeri 141 i 142
[0521] Ova jedinjenja su dobijena praćenjem postupaka iz Primera 137 primenjujući odgovarajuće karboksilne kiseline (koje se mogu dobiti bilo primenom opštih postupaka K, B, E bilo 58A) i cikloheksilamin.
Primer 143
(±)-N-(4-hlorofenil)-2-(cis- i trans-4-(pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)cikloheksil)propanamid (smeša četiri izomera)
[0522]
Intermedijer 143A. etil 2-(1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-iliden)propanoat
[0523] Suspenziji NaH (0.307 g, 7.68 mmol) u THF (8 mL) ohlađenoj na 0°C polako je dodat etil 2-(dietoksifosforil)propanoat (1.830 g, 7.68 mmol). Posle 30minuta, dodat je 1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-on (1 g, 6.40 mmol). Dobijena smeša je mešana na 0°C tokom 2 sata, zatim je zagrevana do sobne temperature preko noći. Smeša je ugašena vodom, THF je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Ostatak je rastvoren u EtOAc, opran sa vodom, slanim rastvorom, osušen Na2SO4i koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO(EtOAc/heks 0-30%). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane dajući Intermedijer 143A (1.2 g, 78% prinosa) kao svetlo žuto ulje.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 4.19 (q, J=7.1 Hz, 2H), 4.03 - 3.89 (m, 4H), 2.68 - 2.53 (m, 2H), 2.46 - 2.28 (m, 2H), 1.89 (s, 3H), 1.78 - 1.66 (m, 4H), 1.30 (t, J=7.1 Hz, 3H)
Intermedijer 143B. etil 2-(1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-il)propanoat
[0524] Suspenzija Intermedijera 143A (500 mg, 2.081 mmol)(1A) i 10% paladijuma na ugljeniku (25mg, 0.024 mmol) u EtOAc (5 mL) je hidrogenizovana u Parrovom šejkeru na 45psi tokom 6h. Katalizator je filtriran, i filtrat je koncentrovan dajući Intermedijer143B (450mg, 89% prinosa) kao svetlo ulje.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 4.12 (dtt, J=10.7, 7.1, 3.6 Hz, 2H), 3.98 -3.81 (m, 4H), 2.35 - 2.17 (m, 1H), 1.83 - 1.68 (m, 3H), 1.66 - 1.45 (m, 4H), 1.43 - 1.28 (m, 2H), 1.27 - 1.22 (m, 3H), 1.14 - 1.07 (m, 3H)
Intermedijer 143C. etil 2-(4-oksocikloheksil)propanoat
[0525] Rastvoru etil 2-(1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-il)propanoata (450 mg, 1.857 mmol)(1B) u THF (5 mL) dodat je 1M hlorovodonik(vodeni) (0.929 mL, 3.71 mmol). Smeša je zagrevana na 50 °C tokom 6h. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je rastvoren u EtOAc, opran sa vodom(2X), slanim rastvorom, osušen Na2SO4i koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO(EtOAc/heks 0-30%). Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane dajući Intermedijer 143C (290 mg, 79 % prinosa) kao bistro ulje.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 4.22 - 4.06 (m, 2H), 2.46 - 2.30 (m, 5H), 2.13 - 1.91 (m, 3H), 1.56 - 1.42 (m, 2H), 1.31 - 1.24 (m, 3H), 1.18 (d, J=7.1 Hz, 3H)
Intermedijer 143D. etil 2-(4-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)cikloheks-3-en-1-il)propanoat
[0526] Intermedijer 143C (200 mg, 1.01 mmol)(1C) i 2,6-di-terc-butil-4-metilpiridin (238 mg, 1.16 mmol) su rastvoreni u suvom DCM (10 ml). Reakcionoj smeši je u kapima dodat trifluorometansulfonski anhidrid (0.186 mL, 1.11 mmol) i mešano je 2 h. Suspenzija je filtrirana i filtrat je razblažen sa DCM, opran sa 1N HCl(2X), zasić. rastvorom natrijum bikarbonata, vodom, slanim rastvorom i osušen Na2SO4i koncentrovan da se dobije Intermedijer 143D (320 mg, 96 % prinosa) kao ulje braon boje.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 5.73 (t, J=6.1 Hz, 1H), 4.28 - 4.05 (m, 2H), 2.52 - 2.17 (m, 4H), 2.08 - 1.79 (m, 3H), 1.49 (dt, J=11.1, 6.6 Hz, 1H), 1.31 - 1.20 (m, 3H), 1.19 - 1.04 (m, 3H)
Intermedijer 143E. etil 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)propanoat
[0527] Rastvoru Intermedijera 143D (300 mg, 0.908 mmol)(1D) u DMSO (5 mL) dodat je 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (230 mg, 0.908 mmol) i kalijum acetat (267 mg, 2.72 mmol). Nakon što je smeša 10 minuta degasirana sa N2, dodat je PdCl2(dppf) (19.9 mg, 0.027 mmol). Smeša je zagrevana na 80 °C preko noći. Smeša je podeljena između EtOAc i vode. Organska faza je koncentrovana i prečišćena pomoću ISCO. Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane dajući Intermedijer 143E (168 mg, 60 % prinosa) kao ulje braon boje.<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 6.66 - 6.40 (m, 1H), 4.31 - 4.00 (m, 2H), 2.34 - 2.26 (m, 1H), 2.25 - 2.19 (m, 1H), 2.19 - 2.04 (m, 2H), 1.95 - 1.75 (m, 3H), 1.73 - 1.60 (m, 1H), 1.29 - 1.24 (m, 15H), 1.13 (dd, J=11.6, 7.0 Hz, 3H)
Intermedijer 143F. etil 2-(4-(pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)cikloheks-3-en-1-il)propanoat
[0528] Smeša 7-hloropirazolo[1,5-a]pirimidina (0.193 g, 1.260 mmol), Intermedijera 143E (0.400 g, 1.298 mmol), Na2CO3(0.534 g, 5.04 mmol), i Pd(Ph3P)4(0.073 g, 0.063 mmol) u dioksanu (11.67 ml) i vodi (3.89 ml) zagrevana je na 100 °C preko noći. Reakcija je ugašena vodom i razblažena sa EtOAc. Slojevi su odvojeni. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (3X). Organski slojevi su kombinovani, osušeni Na2SO4, filtrirani i koncentrovani dajući smeđi ostatak. Prečišćavanje sirovog materijala hromatografijom na silikagelu pomoću ISCO mašine (40 g kolona, 40 mL/min, 0-70% EtOAc u heksanu tokom 16 min, tr= 10.5 minuta) dalo je 143F (0.224 g, 0.748 mmol, 59.4% prinosa) kao žuti ostatak. ESI MS (M+H)<+>= 300.2. HPLC pik tr= 0.95 minuta. HPLC uslovi: metoda A.
Intermedijer 143G. etil 2-(4-(pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)cikloheksil)propanoat
[0529] Rastvoru 143F (0.224 g, 0.748 mmol) u MeOH (3.74 ml) dodat je amonijum format (0.236 g, 3.74 mmol) zatim Pd/C (0.021 g, 0.202 mmol). Reakcija je zagrevana na 70 °C tokom 1 h. Reakcija je filtrirana kroz CELITE® i filter pogača je oprana sa CH2Cl2. Filtrat je koncentrovan. Sirovi materijal se preuzme u EtOAc i opere sa zasić. vod. rastvorom NaHCO3(1X). Organska faza je osušena Na2SO4, filtrirana, i koncentrovana da se dobije 143G (220 mg, 98%) kao žuti ostatak. ESI MS (M+H)<+>= 302.2. HPLC pik tr= 0.94 minuta. HPLC uslovi: metoda A.
Primer 143. (±)-N-(4-hlorofenil)-2-(cis- i trans-4-(pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il) cikloheksil) propanamid (smeša četiri izomera)
[0530] Rastvoru 4-hloroanilina (92 mg, 0.720 mmol) u THF (0.9 mL) na 0 °C dodat je rastvor izopropilmagnezijum hlorida (360 µl, 0.720 mmol). Dobijeni rastvor je zagrejan na sobnoj temperaturi i mešan 5 minuta, zatim je kap po kap dodat 143G (108.5 mg, 0.360 mmol) u THF (0.9 mL). Reakcija je zagrevana na 70 °C tokom 2.5 h, zatim ostavljena da se ohladi na st. Dodatni 4-hloroanilin (42 mg) i izopropilmagnezijum hlorid (360 µl, 0.720 mmol) su dodati. Reakcija je ugašena sa zas. vod. rastv. NH4Cl i razblažena sa EtOAc. Slojevi su bili odvojeni. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (3X). Kombinovane organske faze su osušene Na2SO4, filtrirane i koncentrovane da se dobije ostatak. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, čestice 5µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: 40-80% B tokom 20 minuta, zatim 5 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem dajući jedinjenje iz naslova kao smešu 4 izomera (43.4 mg, 31%). ESI MS (M+H)<+>= 383.1. HPLC pik tr= 0.96 minuta. čistića = 99%. HPLC uslovi: metoda A.
Primeri 144 (a), (b), (c), i (d)
(S)-N-(4-hlorofenil)-2-((cis)-4-(pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)cikloheksil)propanamid i (R)-N-(4-hlorofenil)-2-((cis)-4-(pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)cikloheksil)propanamid i (S)-N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-(pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)cikloheksil)propanamid i (R)-N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-(pirazolo[1,5-a]pirimidin-7-il)cikloheksil)propanamid (homohiralna, apsolutna i relativna stereohemija nisu određene i proizvoljno dodeljene)
[0531]
[0532] Približno 43.4 mg diastereomernog i racemskog Primera 143 je razloženo. Izomerna smeša je prečišćena preparativnom SFC pod sledećim uslovima: kolona: hiralna IE, 25 × 3 cm ID, čestice 5 µm; mobilna faza A: 80/20 CO2/MeOH; talasna dužina detektora: 220 nm; protok: 85 mL/min. Frakcije (144(a) "Pik-1" tr= 13.272, 144(b) "Pik-2" tr= 14.097, 144(c) "Pik-3" tr= 19.986, 144(d) "pik-4" tr= 27.958; analitički uslovi: kolona: hiralna IE, 250 × 4.6 mm ID, čestice 5µm; mobilna faza A: 80/20 CO2/MeOH; protok: 2.0 mL/min) sakupljeni su u MeOH. Procenjeno je da je stereoizomerna čistoća pika 2 i pika 3 veća od 99% na osnovu prep-SFC hromatograma. Pik 1 (23.8 mg) je ponovo prečišćen preparativnom SFC pod sledećim uslovima: kolona: hiralna OJ, 25 × 3 cm ID, čestice 5 µm; mobilna faza A: 80/20 CO2/MeOH; talasna dužina detektora: 220 nm; protok: 85 mL/min. Frakcije ("Pik-1" tr= 4.558 i "Pik-2" tr= 5.622; analitički uslovi: kolona: hiralna OJ, 250 × 4.6 mm ID, čestice 5 µm; mobilna faza A: 80/20 CO2/MeOH; protok: 2.0 mL/min) sakupljeni su u MeOH. Procenjeno je da je stereoizomerna čistoća frakcija veća od 99% na osnovu prep-SFC hromatograma. Svaki diastereomer ili enantiomer je dalje prečišćen pomoću preparativne LC/MS:
Primer 144(a) Izomer koji prvi eluira: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge c-18, 19 × 200 mm, čestice 5 µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acatatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum actatom; gradijent: 40-100% B tokom 20 minuta, zatim 10 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da bi se dobio izomer 1 (11.3 mg, 8.2%). ESI MS (M+H)<+>= 383.2. HPLC pik tr= 1.833 minuta. Čistoća = 100%. HPLC uslovi: B. Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 144(b) Izomer koji drugi eluira: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge c-18, 19 × 200 mm, čestice 5 µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acatatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum actatom; gradijent: 40-100% B tokom 20 minuta, zatim 10 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da bi se dobio izomer 2 (11.1 mg, 8.1%). ESI MS (M+H)<+>= 382.9. HPLC pik tr= 1.829 minuta. Čistoća = 100%. HPLC uslovi: B Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 144(c) Izomer koji treći eluira: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge c-18, 19 × 200 mm, čestice 5 µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acatatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum actatom; gradijent: 40-100% B tokom 20 minuta, zatim 10 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da bi se dobio izomer 3 (7.2 mg, 5.0%). ESI MS (M+H)<+>= 383.2. HPLC pik tr= 1.874 minuta. Čistoća = 96%. HPLC uslovi: B. Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 144(d) Izomer koji četvrti eluira: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: Waters XBridge c-18, 19 × 200 mm, čestice 5 µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acatatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum actatom; gradijent: 40-100% B tokom 20 minuta, zatim 10 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da bi se dobio izomer 4 (7.6 mg, 5.1%). ESI MS (M+H)<+>= 383.3. HPLC pik tr= 1.874 minuta. Čistoća = 93%. HPLC uslovi: B. Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 147
(±)-2-(cis- i trans-4-(1,8-naftiridin-4-il)cikloheksil)-N-(4-hlorofenil)propanamid (smeša četiri izomera)
[0533]
Intermedijer 147A. etil 2-(4-(1,8-naftiridin-4-il)cikloheks-3-en-1-il)propanoat
[0534] Smeša 4-bromo-1,8-naftiridina (0.070 g, 0.335 mmol), Intermedijera 143E (0.106 g, 0.345 mmol), Na2CO3(0.142 g, 1.339 mmol), i Pd(Ph3P)4(0.019 g, 0.017 mmol) u dioksanu (3.10 ml) i vodi (1.034 ml) je zagrevana na 100 °C preko noći. Reakcija je ugašena vodom i razblažena sa EtOAc. Slojevi su odvojeni. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (2X). Organski slojevi su kombinovani, osušeni Na2SO4, filtrirani i koncentrovani dajući smeđi ostatak. Prečišćavanjem sirovog materijala hromatografijom na silika gelu primenom ISCO mašine (24 g kolona, 35 mL/min, 0-20% MeOH u CH2Cl2tokom 25 min, tr= 17 min) dobija se 147A (92.7 mg, 0.299 mmol, 89% prinosa) kao žuti ostatak. ESI MS (M+H)<+>= 311.2. HPLC pik tr= 0.72 minuta. HPLC uslovi: metoda A.
Intermedijer 147B. etil 2-(4-(1,8-naftiridin-4-il)cikloheksil)propanoat
[0535] Rastvoru 147A (0.0927 g, 0.299 mmol) u MeOH (1.493 ml) dodat je amonijum format (0.094 g, 1.493 mmol) zatim 10% Pd/C (8.58 mg, 0.081 mmol). Reakcija je zagrevana na 70 °C tokom 1 h. Reakcija je filtrirana kroz CELITE® i filer pogača je oprana sa CH2Cl2. Filtrat je koncentrovan. Sirovi materijal se preuzme u EtOAc i opere sa zas. vod. rastvorom NaHCO3(1X). Organska faza je osušena Na2SO4, filtrirana, i koncentrovana da se dobije 147B (72.5 mg, 78%) kao ostatak braon boje. ESI MS (M+H)<+>= 313.3. HPLC pik tr= 0.70 minuta. HPLC uslovi: metoda A.
Primer 147. (±)-2-(cis- i trans-4-(1,8-naftiridin-4-il)cikloheksil)-N-(4-hlorofenil)propanamid (smeša četiri izomera)
[0536] Rastvoru 4-hloroanilina (0.059 g, 0.464 mmol) u THF (0.4 mL) na 0 °C dodat je rastvor izopropilmagnezijum hlorida (0.232 ml, 0.464 mmol). Dobijeni rastvor je zagrejan na sobnoj temperaturi i mešan 5 minuta, zatim je kap po kap dodat 147B (0.0725 g, 0.232 mmol) u THF (0.76 mL). Reakcija je zagrevana na 70 °C tokom 3 h, zatim ostavljena da se ohladi na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena sa zas. vod. rastv. NH4Cl i razblažena sa EtOAc. Slojevi su odvojeni. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (3X). Kombinovane organske faze su osušene Na2SO4, filtrirane i koncentrovane da bi se dobio ostatak. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS sa sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, čestice 5µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: 30-70% B tokom 19 minuta, zatim 5 minuta drži se na100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i suše centrifugalnim isparavanjem da se dobije jedinjenje iz naslova kao smeša četiri izomera (33.4 mg, 36%). ESI MS (M+H)<+>= 394.2. HPLC pik tr= 1.743 minuta. Čistoća = 98%. HPLC uslovi: metoda B.
Primer 148 (a), (b), (c), i (d)
(S)-2-((cis)-4-(1,8-naftiridin-4-il)cikloheksil)-N-(4-hlorofenil)propanamid i (R)-2-((cis)-4-(1,8-naftiridin-4-il)cikloheksil)-N-(4-hlorofenil)propanamid i (S)-2-((trans)-4-(1,8- naftiridin-4-il)cikloheksil)-N-(4-hlorofenil)propanamid i (R)-2-((trans)-4-(1,8- naftiridin-4-il)cikloheksil)-N-(4-hlorofenil)propanamid (homohiralna, apsolutna i relativna stereohemija nisu određene i proizvoljno dodeljene)
[0537]
[0538] Približno 34.3 mg diastereomernog i racemskog Primera 147 je razloženo. Izomerna smeša je prečišćena preparativnom SFC pod sledećim uslovima: kolona: hiralna AD, 25 × 3 cm ID, čestice 5 µm; mobilna faza A: 70/30 CO2/MeOH; talasna dužina detektora: 220 nm; protok: 85 mL/min. Frakcije ("Pik-1" tr= 7.377, "Pik-2" tr= 8.774, "Pik-3" tr= 10.106, "Pik-4" tr= 14.282; analitički uslovi: kolona: hiralna AD, 250 × 4.6 mm ID, čestice 5µm; mobilna faza A: 70/30 CO2/MeOH; protok: 2.0 mL/min) sakupljeni su u MeOH. Procenjeno je da je stereoizomerna čistoća frakcija veća od 99% na osnovu prep-SFC hromatograma. Svaki diastereomer ili enantiomer je dalje prečišćen pomoću preparativne LC/MS:
Primer 148 (a) Izomer koji prvi eluira: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, čestice 5 µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acatatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum actatom; gradijent: 30-70% B tokom 19 minuta, zatim 5 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da se dobio izomer 1 (5.3 mg, 5.7%). ESI MS (M+H)<+>= 394.1. HPLC pik tr= 1.757 minuta. Čistoća = 99%. HPLC uslovi: metoda B. Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 148 (b) Izomer koji drugi eluira: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, čestice 5 µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acatatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum actatom; gradijent: 30-70% B tokom 19 minuta, zatim 5 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da se dobio izomer 2 (6.0 mg, 6.4%). ESI MS (M+H)<+>= 394.1. HPLC pik tr = 1.719 minuta. Čistoća = 98%. HPLC uslovi: metoda B. Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 148 (c) Izomer koji treći eluira: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, čestice 5 µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acatatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum actatom; gradijent: 30-70% B tokom 19 minuta, zatim 5 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da se dobio izomer 3 (6.1 mg, 6.3%). ESI MS (M+H)<+>= 394.2. HPLC pik tr= 1.694 minuta. Čistoća = 95%. HPLC uslovi: metoda B. Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 148 (d) Izomer koji etvrti eluira: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, čestice 5 µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum acatatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10 mM amonijum actatom; gradijent: 30-70% B tokom 19 minuta, zatim 5 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da se dobio izomer 4 (3.5 mg, 3.8%). ESI MS (M+H)<+>= 394.3. HPLC pik tr= 1.743 minuta. Čistoća = 99%. HPLC uslovi: metoda B. Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 149
(±)-2-(cis- i trans-4-(1H-pirazolo[4,3-b]piridin-7-il)cikloheksil)-N-(4-hlorofenil)propanamid (smeša četiri izomera)
[0539]
Intermedijer 149A. etil 2-(4-(1H-pirazolo[4,3-b]piridin-7-il)cikloheks-3-en-1-il)propanoat
[0540] Smeša 7-hloro-1H-pirazolo[4,3-b]piridina (0.048 g, 0.315 mmol), Intermedijera 143E (0.100 g, 0.324 mmol), Na2CO3(0.134 g, 1.260 mmol), i 10% Pd(Ph3P)4(0.018 g, 0.016 mmol) u dioksanu (2.92 ml) i vodi (0.972 ml) je zagrevana na 100 °C preko noći. Reakcija je ugašena sa vodom i razblažena sa EtOAc. Slojevi su odvojeni. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (3X). Organski slojevi su kombinovani, osušeni Na2SO4, filtrirani i koncentrovani dajući ostatak braon boje. Prečišćavanje sirovog materijala hromatografijom na silika gelu primenom ISCO mašine (40 g kolona, 40 mL/min, 0-100% EtOAc u heksanima tokom 23 min, tr= 18 min) dalo je 149A (0.039 g, 0.124 mmol, 39.3% prinosa) kao žuti ostatak. ESI MS (M+H)<+>= 300.2. HPLC pik tr= 0.69 minuta. HPLC uslovi: metoda A.
Intermedijer 149B. etil 2-(4-(1H-pirazolo[4,3-b]piridin-7-il)cikloheksil)propanoat
[0541] Rastvoru 149A (0.0395 g, 0.132 mmol) u MeOH (0.660 ml) dodat je amonijum format (0.042 g, 0.660 mmol) zatim Pd/C (3.79 mg, 0.036 mmol). Reakcija je zagrevana na 70 °C tokom 1 h. Dodatni amonijum format (0.042 g, 0.660 mmol) je dodat i reakcija je 1 sat zagrevana na 70 °C, zatim je ostavljena da se ohladi na st. Reakcija je filtrirana kroz CELITE® i filter pogača je oprana sa CH2Cl2. Filtrat je koncentrovan. Sirovi materijal je preuzet u EtOAc i opran sa zas. vod. rastvorom NaHCO3(1X). Organska faza je osušena Na2SO4, filtrirana i koncentrovana da se dobije 149B (34.3 mg, 86%) kao žuti ostatak. Dalje se primenjuje sirov. ESI MS (M+H)<+>= 302.4. HPLC pik tr= 0.66 minua. HPLC uslovi: metoda A.
Primer 149. (±)-2-(cis- i trans-4-(1H-pirazolo[4,3-b]piridin-7-il)cikloheksil)-N-(4-hlorofenil) propanamid (smeša četiri izomera)
[0542] Rastvoru 4-hloroanilina (58.1 mg, 0.455 mmol) u THF (0.3 mL) na 0 °C dodat je rastvor izopropilmagnezijum hlorida (228 µl, 0.455 mmol). Dobijeni rastvor je zagrejan na sobnoj temperaturi i mešan 5 minuta, zatim je u kapima dodat 149B (34.3 mg, 0.114 mmol) u THF (0.3 mL). Reakcija je zagrevana 2 sata na 70 °C, zatim je ostavljena da se ohladi na st. Reakcija je ugašena sa zas. vod. rastv. NH4Cl i razblažena sa EtOAc. Slojevi su odvojeni. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (3X). Kombinovane organske faze su osušene Na2SO4, filtrirane i koncentrovane da se dobije ostatak. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, čestice 5 µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; gradijent: 20-60% B tokom 19 minuta, zatim 5-minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem dajući jedinjenje iz naslova kao smešu 4 izomera (25.4 mg, 58%). ESI MS (M+H)<+>= 383.3. HPLC pik tr= 1.662 minuta. Čistoća = 99%. HPLC uslovi: metoda B.
Primer 150 (a), (b), (c), i (d)
(S)-2-((cis)-4-(1H-pirazolo[4,3-b]piridin-7-il)cikloheksil)-N-(4-hlorofenil)propanamid i (R)-2-((cis)-4-(1H-pirazolo[4,3-b]piridin-7-il)cikloheksil)-N-(4-hlorofenil)propanamid i (S)-2-((trans)-4-(1H-pirazolo[4,3-b]piridin-7-il)cikloheksil)-N-(4-hlorofenil)propanamid i (R)-2-((trans)-4(1H-pirazolo[4,3-b]piridin-7-il)cikloheksil)-N-(4-hlorofenil)propanamid (homohiralna, apsolutna i relativna stereohemija nisu određene i proizvoljno dodeljene)
[0543]
[0544] Približno 29.3 mg diastereomernog i racemskog Primera 149 je razloženo. Izomerna smeša je prečišćena preparativnom SFC pod sledećim uslovima: kolona: hiralna WHELK-O®, 25 × 3 cm ID, čestice 5 µm; mobilna faza A: 70/30 CO2/MeOH; talasna dužina detektora: 220 nm; protok: 85 mL/min. Frakcije (150(a)"Pik-1" tr= 9.587, 150(b) "Pik-2" tr= 10.407, 150(c) "Pik-3" tr= 11.794, 150(d) "Pik-4" tr= 12.855; analitički uslovi: kolona: hiralna WHELK-O®, 250 × 4.6 mm ID, čestice 5µm; mobilna faza A: 80/20 CO2/MeOH; protok: 2.0 mL/min) sakupljeni su u MeOH. Procenjeno je da je stereoizomerna čistoća pika 1, 3 i 4 veća od 95% na osnovu prep-SFC hromatograma. Pik 2 je ponovo prečišćen preparativnom SFC pod sledećim uslovima: kolona: hiralna AS, 25 × 3 cm ID, čestice 5 µm; mobilna faza A: 80/20 CO2/MeOH; talasna dužina detektora: 220 nm; protok: 85 mL/min. Frakcije ("Pik-1" tr= 3.391 i "Pik-2" tr= 4.071; analitički uslovi: kolona: hiralna AS, 250 × 4.6 mm ID, čestice 5 µm; mobilna faza A: 80/20 CO2/MeOH; protok: 2.0 mL/min) sakupljeni su u MeOH. Procenjeno je da je stereoizomerna čistoća frakcija veća od 99% na osnovu prep-SFC hromatograma. Svaki diastereomer ili enantiomer je dalje prečišćen pomoću preparativne LC/MS:
Primer 150(a) Izomer koji prvi eluira: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, čestice 5µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: 20-60% B tokom 19 minuta, zatim 5 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da se dobije izomer 1 (4.6 mg, 11%). ESI MS (M+H)<+>= 383.1. HPLC pik tr= 1.611 minuta. Čistoća = 100%. HPLC uslovi: metoda B. Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 150(b) Izomer koji drugi eluira: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, čestice 5µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: 20-60% B tokom 19 minuta, zatim 5 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da se dobije izomer 2 (4.6 mg, 11%). ESI MS (M+H)<+>= 383.2. HPLC pik tr= 1.630 minuta. Čistoća = 100%. HPLC uslovi: metoda B. Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 150(c) Izomer koji treći eluira: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, čestice 5µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: 20-60% B tokom 19 minuta, zatim 5 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da se dobije izomer 3 (9.1 mg, 21%). ESI MS (M+H)<+>= 383.2. HPLC pik tr= 1.659 minuta. Čistoća = 100%. HPLC uslovi: metoda B. Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 150(d) Izomer koji četvrti eluira: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, čestice 5µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: 20-60% B tokom 19 minuta, zatim 5 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da se dobije izomer 4 (4.7 mg, 10%). ESI MS (M+H)<+>= 383.3. HPLC pik tr= 1.704 minuta. Čistoća = 93%. HPLC uslovi: metoda B. Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 151
(±)-N-(cis- i trans-4-hlorofenil)-2-(4-(6-jodohinolin-4-il)cikloheksil)propanamid
Intermedijer 151A. etil 2-(4-(6-nitrohinolin-4-il)cikloheks-3-en-1-il)propanoat
[0546] Zaptivena epruveta od 350 mL napunjena je sa smešom 4-hloro-6-nitrohinolina (2 g, 9.59 mmol), Intermediajera 143E (3.04 g, 9.88 mmol), Na2CO3(4.06 g, 38.4 mmol), i Pd(Ph3P)4(0.554 g, 0.479 mmol) u dioksanu (89 mL) i vodi (29.6 mL). Reakcija je zagrevana na 100 °C preko noći. Reakcija je ugašena vodom i razblažena sa EtOAc. Slojevi su odvojeni. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (3X). Organski slojevi su kombinovani, osušeni Na2SO4, filtrirani i koncentrovani dajući ostatak braon boje. Prečišćavanje sirovog materijala hromatografijom na silika gelu primenom ISCO mašine (80 g kolona, 60 mL/min, 0-45% EtOAc u heksanima tokom 19 min, tr= 14 min) daje 151A (2.955 g, 8.34 mmol, 87% prinosa) kao žuti ostatak. ESI MS (M+H)<+>= 355.2. HPLC pik tr= 0.98 minuta. HPLC uslovi: metoda A.
Intermedijer 151B. etil 2-(4-(6-aminohinolin-4-il)cikloheksil)propanoat
[0547] Rastvoru 151A (0.455 g, 1.284 mmol) u MeOH (6.42 ml) dodat je amonijum format (0.405 g, 6.42 mmol) zatim 10% Pd/C (0.037 g, 0.347 mmol). Reakcija je zagrevana 1 sat na 70 °C. Reakcija je filtrirana kroz CELITE® i filter pogača je oprana sa CH2Cl2. Filtrat je koncentrovan. Sirovi materijal se preuzet u EtOAc i opran sa zas. vod. rastvorom NaHCO3(2X). Organska faza je osušena Na2SO4, filtrirana i koncentrovana da se dobije 151B (379 mg, 90%) kao ostatak braon boje. NMR je pokazao čisti željeni proizvod u 1.8:1 dr. ESI MS (M+H)<+>= 327.3. HPLC pik tr= 0.71 minuta. HPLC uslovi: metoda A.
Intermedijer 151C. etil 2-(4-(6-jodohinolin-4-il)cikloheksil)propanoat
[0548] Rastvor 151B (0.379 g, 1.161 mmol) i vod. HCl (0.59 mL) u vodi (2.1 mL) ohlađen je na 0 °C, zatim je dodat rastvor natrijum nitrata (0.096 g, 1.393 mmol) u vodi (2.1 mL). Rastvor kalijum jodida (0.289 g, 1.742 mmol) u vodi (2.1 mL) je dodat u kapima gornjem rastvoru nakon što se čvrsta supstanca potpuno rastvorila. Posle dodavanja, smeša je mešana 30 minuta na sobnoj temperaturi, zatim zagrevana 1 sat na 70 °C. Posle hlađenja, rastvor je neutralisan polaganim dodavanjem rastvora Na2S2O3(1.81 mL), zatim ekstrahovana sa CH2Cl2(2X). Organska faza je oprana vodom, osušena Na2SO4, filtrirana i koncentrovana da dobije ostatak braon boje. Sirovi materijal je rastvoren u minimalnoj količini CH2Cl2i hromatografisan. Prečišćavanje sirovog materijala hromatografijom na silika gelu primenom ISCO mašine (40 g kolona, 40 mL/min, 0-55% EtOAc u heksanima preko 15 min, tr= 10.5 min) daje 151C (92.7 mg, 0.212 mmol, 18.26% prinosa) kao žuti ostatak. ESI MS (M+H)<+>= 438.1. HPLC pik tr= 0.89 minuta. HPLC uslovi: metoda A.
Primer 151. (±)-N-(cis- i trans-4-hlorofenil)-2-(4-(6-jodohinolin-4-il)cikloheksil)propanamid
[0549] Rastvoru 4-hloroanilina (0.464 g, 3.64 mmol) u THF (2.8 mL) na 0 °C dodat je rastvor izopropilmagnezijum hlorida (1.820 mL, 3.64 mmol). Dobijeni rastvor je zagrejan na sobnu temperaturu i mešan 5 minuta, zatim je kap po kap dodat 151C (0.796 g, 1.820 mmol) u THF (4.8 mL). Reakcija je zagrevana 2 sata na 70 °C, zatim je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu. Dodat je dodatni izopropilmagnezijum hlorid (1.820 mL, 3.64 mmol). Reakcija je zagrevana dodatnih 2 sata. Reakcija je ugašena sa zas. vod. rastv. NH4Cl i razblažena sa EtOAc. Slojevi su odvojeni. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (3X). Kombinovane organske faze su osušene Na2SO4, filtrirane i koncentrovane da se dobje ostatak. Prečišćavanje sirovog materijala hromatografijom na silika gelu primenom ISCO mašine (80 g kolona, 60 mL/min, 0-65% EtOAc u heksanima tokom 35 min, tr= 27 min) daje (±)-trans-Primer 151 (455 mg, 0.702 mmol, 39% prinosa) i (±)-cis-Primer 151 (111 mg, 12%). trans diastereomer prvi eluira zatim cis diastereomer. ESI MS (M+H)<+>= 519.1.
Primer 152 (a), (b), (c), i (d)
(S)-N-(4-hlorofenil)-2-((cis)-4-(6-jodohinolin-4-il)cikloheksil)propanamid i (R)-N-(4-hlorofenil)-2-((cis)-4-(6-jodohinolin-4-il)cikloheksil)propanamid i (S)-N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-(6jodohinolin-4-il)cikloheksil)propanamid i (R)-N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-(6-jodohinolin-4-il)cikloheksil)propanamid (homohiralna, apsolutna i relativna stereohemija nisu određene i proizvoljno dodeljene)
[0550]
[0551] Približno 65.1 mg diastereomernog i racemskog Primera 9 je razloženo. Izomerna smeša je prečišćena preparativnom SFC pod sledećim uslovima: kolona: OJ-H, 25 x 3 cm ID, čestice 5 µm; mobilna faza A: 80/20 CO2/MeOH; talasna dužina detektora: 220 nm; protok: 150 mL/min. Frakcije (152(a)"Pik-1" tr= 4.64 min, 152(b) "Pik-2" tr= 5.35 min, 152(c) i 152(d) "Pik-3" tr= 6.43 min) sakupljene su u MeOH. Procenjeno je da je stereoizomerna čistoća pika 1 i 2 veća od 95% na osnovu prep-SFC hromatograma. Pik 3 je ponovo prečišćen pomoću preparativne SFC pod sledećim uslovima da bi se dobili izomeri 3 i 4: kolona: Lux-Cellulose, 25 x 3 cm ID, čestice 5 µm; mobilna faza A: 75/25 CO2/MeOH; talasna dužina detektora: 220 nm; protok: 180 mL/min. Frakcije (152(a) "Pik-1" tr= 7.63 min i 152(b) "Pik-2" tr= 8.6 min) su sakupljene u MeOH. Procenjeno je da je stereoizomerna čistoća frakcija veća od 95% na osnovu prep-SFC hromatograma. Svaki diastereomer ili enantiomer je dalje prečišćen pomoću preparativne LC/MS:
Primer 152(a) Prvi eluirani izomer: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, čestice 5µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: 50-100% B tokom 20 minuta, zatim 5 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da se dobije izomer 1 (14.5 mg, 12%). ESI MS (M+H)<+>= 519.2. HPLC pik tr= 2.530 minuta. Čistoća = 92%. HPLC uslovi: metoda B. Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 152(b) Drugi eluirani izomer: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, čestice 5µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: 50-100% B tokom 20 minuta, zatim 5 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da se dobije izomer 2 (8.1 mg, 7.3%). ESI MS (M+H)<+>= 519.1. HPLC pik tr= 2.470 minuta. Čistoća = 100%. HPLC uslovi: metoda B. Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 152(c) Treći eluirani izomer: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, čestice 5µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: 50-100% B tokom 20 minuta, zatim 5 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da se dobije izomer 3 (13.7 mg, 12%). ESI MS (M+H)<+>= 519.1. HPLC pik tr= 2.481 minuta. Čistoća = 97%. HPLC uslovi: metoda B. Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 152(d) Četvrti eluirani izomer: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, čestice 5µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: 50-100% B tokom 20 minuta, zatim 5 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da se dobije izomer 4 (7.5 mg, 6.7%). ESI MS (M+H)<+>= 518.9. HPLC pik tr= 2.361 minuta. Čistoća = 99%. HPLC uslovi: metoda B. Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 153
(±)-2-((trans)-4-((1,8-naftiridin-4-il)oksi)cikloheksil)-N-(4-hlorofenil)propanamid
[0552]
Intermedijeri 153A i 153B. Etil 2-((cis)-4-hidroksicikloheksil)propanoat (sporedni) i etil 2-((trans)-4-hidroksicikloheksil)propanoat (glavni)
[0553] Rastvoru Intermedijera 143C (0.241 g, 1.216 mmol) u MeOH (6.08 ml) dodat je natrijum borohidrid (0.047 g, 1.240 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je ugašena vodom i ekstrahovana sa EtOAc. Slojevi su odvojeni. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (2X). Kombinovane organske faze su osušene Na2SO4, filtrirane i koncentrovane da se dobije ostatak. Prečišćavanje sirovog materijala hromatografijom na silika gelu primenom ISCO mašine (40 g kolona, 40 mL/min, 0-100% EtOAc u heksanima tokom 19 min, tr= 10.5 min = cis, 12 min = trans) daje 153A (173 mg, 71%) i 153B (37 mg, 15%). Glavni proizvod je trans. Sporedni proizvod je cis. Cis se prvi eluira. Trans se drugi eluira. ESI MS (M+H)<+>= 201.1.
Intermedijer 153C. Etil 2-((trans)-4-((1,8-naftiridin-4-il)oksi)cikloheksil)propanoat
[0554] Rastvoru 153B (59.5 mg, 0.297 mmol) u DMF (495 µl) dodat je NaH (19.80 mg, 0.495 mmol). Posle 30 minuta, dodat je 4-bromo-1,8-naftiridin (51.8 mg, 0.248 mmol). Reakcija je zagrevana na 80 °C preko noći. Reakcija je ugašena sa sat. vod. rastv. NH4Cl i razblažena sa EtOAc. Slojevi su odvojeni. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (2X). Kombinovane organske faze su oprane sa vodom, osušene Na2SO4, filtrirane i koncentrovane da se dobije ostatak braon boje. Prečišćavanje sirovog materijala hromatografijom na silika gelu primenom ISCO mašine (40 g kolona, 40 mL/min, 0-20% MeOH u CH2Cl2over 9 min, tr= 7.5 min) daje 153C (59.8 mg, 0.182 mmol, 73.5% prinosa) kao bezbojni ostatak. ESI MS (M+H)<+>= 329.2. HPLC pik tr= 0.72 minuta. HPLC uslovi: metoda A.
Referentni Primer 153. (±)-2-((trans)-4-((1,8-naftiridin-4-il)oksi)cikloheksil)-N-(4-hlorofenil) propanamid
[0555] Rastvoru 4-hloroanilina (0.080 g, 0.628 mmol) u THF (0.1 mL) na 0 °C dodat je rastvor izopropilmagnezijum hlorida (0.314 ml, 0.628 mmol). Dobijeni rastvor ja zagrejan na sobnu temperaturu za 5 minuta, zatim je dodat u kapima Intermedijer 153C (0.0516 g, 0.157 mmol) u THF (0.38 mL). Reakcija je zagrevana 2 h na 70 °C, zatim je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu. Reakcija je ugašena sa zas. vod. rastv. NH4Cl i razblažena sa EtOAc. Slojevi su odvojeni. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (3X). Kombinovane organske faze su osušene Na2SO4, filtrirane i koncentrovane da se dobije ostatak. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, čestice 5µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: 20-60% B tokom 20 minuta, zatim 5 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da se dobije referentni Primer 153 kao racemat (6.7 mg, 10%). ESI MS (M+H)<+>= 410.2. HPLC pik tr= 1.803 minuta. Čistoća = 99%. HPLC uslovi: metoda B.
Primer 154
N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)butanamid (smeša četiri izomera)
[0556]
Intermedijer 154A. etil 2-(1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-iliden)acetat
[0557] U bocu koja sadrži natrijum hidrid (46.1 g, 1153 mmol) dodat je THF (1200 mL) na 0 °C pod azotom. Zatim se u kapima dodaje trietil fosfonoacetat (258 g, 1153 mmol). Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 30 minuta. Zatim je dodat 1,4-dioksaspiro[4.5]deckan-8-on (150 g, 960 mmol) i mešana je na 0 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana 16 sati. Reakciona smeša je ugašena vodom (500 ml) i smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je ekstrahovan etil acetatom (3 × 1000 mL). Kombinovani organski sloj je opran vodom (500 ml) i slanim rastvorom (500 ml). Filtrat je osušen natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom na koloni, eluiran sa 0-30% etil acetata u petrolej etru dajući Intermedijer 154A (svetlo žuto ulje, 135 g, 597 mmol, 62.1% prinosa).
<1>H NMR (400MHz, hloroform-d) δ: 5.66 (s, 1H), 4.14 (q, J=7.2 Hz, 2H), 4.02 - 3.82 (m, 4H), 3.24 - 2.86 (m, 2H), 2.63 - 2.27 (m, 2H), 1.98 - 1.68 (m, 4H), 1.27 (t, J=7.2 Hz, 3H).
Intermedijer 154B. etil 2-(1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-il)acetat
[0558] Intermedijer 154A (13.88 g, 61.3 mmol) je prenet u EtOAc (61.3 ml) i dodat je u Parrovu bocu za hidrogenizaciju koja sadrži paladijum na ugljeniku (1.306 g, 12.27 mmol) (54% m/m vode) 10% Pd/C u atmosferi azota. Reakciona boca je pročišćena azotom, zatim sa vodonikom. Nakon punjenja boce vodonikom do 50 psi, boca je stavljena u Parr šejker i promućkana. Posle 4 sata, reakciona smeša je filtrirana preko presovanog CELITE® i koncentrovana u vakuumu dajući Intermedijer 154B etil 2-(1,4-dioksaspiro[4.5]dekan-8-il)acetat (bezbojno ulje, 13.78 g, 60.4 mmol, 98% prinosa). LC-MS Anal. Izračunato za C12H20O4228.14, utvrđeno [M+H]<+>229.1. Tr= 0.83 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, hloroform-d) δ: 4.31 - 4.08 (m, 2H), 4.00 - 3.86 (m, 4H), 2.22 (d, J=7.0 Hz, 2H), 1.91 - 1.79 (m, 1H), 1.78 - 1.70 (m, 4H), 1.63 - 1.50 (m, 2H), 1.37 -1.14 (m, 5H).
Intermedijer 154C. etil 2-(4-oksocikloheksil)acetat
[0559] U reaktor od 10 litara prenet je međuprodukt 154B (67.5 g, 296 mmol) u acetonu (5000 mL). Reakcionoj smeši je dodat 1 M rastvor HCl (1183 mL, 1183 mmol) i dobijena smeša je zagrevana 2 sata pod refluksom. Reakciona smeša je koncentrovana da se ukloni aceton. Ostatak je ekstrahovan etil acetatom (3 × 1000 mL). Kombinovani organski sloj je opran vodom i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom na koloni, eluiran sa 0-20% etil acetata u petrol etru dajući Intermedijer 154C (svetlo žuta tečnost, 40 g, 217 mmol, 73.4% prinosa). GC-MS Anal. Izračunato za C10H16O3, 184.11 utvrđeno [M+H]<+>184. Tr= 10.03 min (Metoda C).
Intermedijer 154D. etil 2-(4-(trifluorometilsulfoniloksi)cikloheks-3-enil)acetat
[0560] U bocu 2 od litra sa 4 grla prenet je 2,6-di-terc-butil-4-metilpiridin (84 g, 407 mmol) u dihlorometanu (500 mL) pod azotom. U kapima je dodat triflik anhidrid (55.0 mL, 326 mmol). Zatim je dodat polako rastvor Intermedijer 154C (50 g, 271 mmol) u dihlorometana (500 mL). Nakon završetka dodavanja, reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa 1000 mL dihlorometana i oprana vodom i rastvorom natrijum karbonata, i zatim vodom. Organski sloj je osušen natrijum sulfatom i koncentrovan u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom na koloni, eluiran sa 0-10% etil acetata u petrolej etru dajući Intermedijer 154D (svetlo žuto ulje, 65 g, 206 mmol, 76% prinosa). GC-MS Anal. Izračunato za C11H15F3O5S, 316.06 utvrđeno [M+H]<+>317. Tr= 10.16 min (Metoda C).
Intermedijer 154E. etil 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-enil)acetat
[0561] U bocu 2 od litra sa 4 grla prenet je Intermedijer 154D (120 g, 379 mmol), bis(pinakolato)diboron (106 g, 417 mmol), i kalijum acetat (112 g, 1138 mmol) u 1,4-dioksanu (1200 mL) pod azotom. Azot je pročišćen unutar reakcione smeše 10 minuta. Zatim je dodat 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen-paladijum dihlorid dihlorometanski kompleks (15.49 g, 18.97 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 80 °C tokom 16 sati. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je podeljen između etil acetata i vode, filtriran kroz sloj CELITE®. Organski sloj je odvojen, i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (3X). Kombinovani organski sloj je opran vodom, slanim rastvorom i osušen natrijum sulfatom i koncentrovan u vakuumu. Sirovi materijal je prečišćen fleš hromatografijom na koloni, eluiran sa 0-10% etil acetata u petrol etru dajući Intermedijer 154E (svetlo žuto ulje, 56 g, 190 mmol, 50.2% prinosa). GC-MS Anal. Izračunato za C16H27BO4, 294.20 utvrđeno [M+H]<+>295.3. Tr= 1.10 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, hloroform-d) δ: 6.52 (dd, J=4.1, 1.9 Hz, 1H), 4.14 (q, J=7.1 Hz, 2H), 2.62 - 1.97 (m, 6H), 1.94 - 1.68 (m, 2H), 1.33 - 1.21 (m, 16H)
Intermedijer 154F. etil 2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheks-3-en-1-il)acetat
[0562] Etil 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)acetat (Intermedijer 154E) (5 g, 17.00 mmol) je prenet u dioksan (28.3 ml) i vodu (7.08 ml). Dodat je 4-hloro-6-fluorohinolin (2.57 g, 14.15 mmol) zatim K2CO3(5.87 g, 42.5 mmol). Gas azot je u mehurićima uveden u smešu 5 minuta pre dodavanja Pd(Ph3P)4(0.327 g, 0.283 mmol). Posle dodavanja, reakcija je ispražnjena i ponovo punjena sa N2tri puta, i zatim zaptivena (zaptivena bočica parafilmovana) i zagrevana na 100 °C tokom 16 sati. Reakcija je koncentrovana u vakuumu i prečišćena direktno putem fleš hromatografije na silika gelu, dajući Intermedijer 154F (4.22 g, 13.47 mmol, 95% prinosa). LC-MS Anal. Izračunato za C19H20FNO2313.15, utvrđeno [M+H]<+>314.1 Tr= 0.75 min (Metoda A).
Intermedijer 154G. Etil 2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)acetat
[0563] Intermedijer 154F (4.22 g, 13.47 mmol) je rastvoren u MeOH (67.3 ml) i dodat je amonijum format (4.25 g, 67.3 mmol). Posuda je bila opremljena refluksnim kondenzatorom i ispražnjena i isprana gasom azota 3 puta. Zatim je dodat paladijum na ugljeniku (0.143 g, 1.347 mmol) (mokar, tip Degussa) i reakcija je zagrevana do refluksa tokom 1 sata. Reakcija je ohlađena, koncentrovana u vakuumu i razblažena sa DCM. Čvrste materije su odfiltrirane i filtrat je koncentrovan dajući sirovi Intermedijer 154G (4.20 g, 13.32 mmol, 99% prinosa) kao smešu cis- i trans-diastereomera. LC-MS Anal. Izračunato za C19H22FNO2315.16, utvrđeno [M+H] 316.2 Tr= 0.76 min (Metoda A).
Intermedijer 154H. etil 2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)butanoat
[0564] U balon koji sadrži THF (6 mL) je dodat litijum diizopropilamid (2.0 M rastvora u THF) (3.17 mL, 6.34 mmol) na -78 °C, zatim je dodat 1,3-dimetiltetrahidropirimidin-2(1H)-on (0.573 mL, 4.76 mmol) i rastvor Intermedijera 154G (1.0 g, 3.17 mmol) u THF (10 mL) u kapima na -78 °C. Dobijena smeša je konvertovana u rastvor braon boje i mešana 1 sat na -78 °C, zatim je polako dodat etil jodid (0.51 mL, 6.34 mmol). Reakciona smeša je zatim mešana na temperaturi ledenog kupatila tokom 1h, zagrejana na sobnu temperaturu tokom noći. Reakcija je ugašena sipanjem u vodu i ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen MgSO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je rastvoren u DCM i prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu, eluiran sa 0-20% etil acetata u heksanu dajući Intermedijer 154H (ulje, 0.81 g, 2.359 mmol, 74.4% prinosa). LC-MS Anal. Izračunato za C21H26FNO2, 343.19 utvrđeno [M+H] 344.3. Tr= 0.87-0.88 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, hloroform-d) δ: 8.88 - 8.77 (m, 1H), 8.18 - 8.06 (m, 1H), 7.66 (dd, J=10.6, 2.6 Hz, 1H), 7.47 (ddd, J=9.2, 8.0, 2.9 Hz, 1H), 7.36 (d, J=4.6 Hz, 1H), 4.25 - 4.15 (m, 2H), 3.34 - 3.09 (m, 1H), 2.70 - 2.16 (m, 1H), 2.13 -1.49 (m, 13 H), 1.36 - 1.24 (m, 3H), 1.00 - 0.90 (m, 3H)
Intermedijer 1541.2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)butanska kiselina
[0565] Rastvoru etil 2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)butanoata (0.81 g, 2.359 mmol) u THF (4 mL) i MeOH (7 mL) dodat je polako rastvor 2.0 M LiOH (7.1 mL, 14.2 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Sledećeg dana, reakcionoj smeši je dodato još rastvora LiOH (7.1 mL, 14.2 mmol) i rezultujuća reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom 28 h. Reakciona smeša je ohlađena i u smešu je dodat etil acetat. Vodeni sloj je odvojen i u vodeni sloj je dodat 1N rastvor HCl da se podesi pH na 5-6. Dobijena smeša je razblažena vodom i CHCl3: 2-propanol (2:1). Organski sloj je odvojen i osušen MgSO4. Filtrat je koncentrovan u vakuumu dajući Intermedijer 1541 kao smešu cis- i trans- (3:2) izomera (0.64 g, 2.029 mmol, 86% prinosa). LC-MS Anal. Izračunato za C19H22FNO2315.16 utvrđeno [M+H] 316.3. Tr= 0.72 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, hloroform-d) δ: 8.83 (d, J=4.4 Hz, 1H), 8.30 - 8.03 (m, 1H), 7.67 (dd, J=10.6, 2.4 Hz, 1H), 7.48 (ddd, J=9.2, 7.9, 2.6 Hz, 1H), 7.38 (d, J=4.6 Hz, 1H), 7.32 - 7.27 (m, 1H), 3.37 - 3.07 (m, 1H), 2.77 - 2.21 (m, 1H), 2.11 - 1.30 (m, 11H), 1.07 - 1.00 (m, 3H).
Primer 154: N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)butanamid
[0566] U rastvor Intermedijera 154I (60 mg, 0.190 mmol) dodat je tionil hlorid (0.21 mL, 2.85 mmol) i 1 kap DMF. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata, i smeša je razblažena sa 5 mL i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je sušena 1 sat u visokom vakuumu. Ostatku se dodaju acetonitril (3 mL), 4-hloroanilin (36.4 mg, 0.285 mmol) i 4-metilmorfolin (0.13 mL, 1.14 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 0.6 h. Reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom 1 h. Reakcionoj smeši je dodato još 4-metilmorfolina (0.13 mL, 1.14 mmol) i rezultujuća reakciona smeša je zagrevana na 70 °C preko noći. Reakciona smeša je razblažena etil acetatom i slanim rastvorom. Organski sloj je odvojen i koncentrovan u vakuumu.
Ostatak je rastvoren u MeOH, filtriran i prečišćen preparativnom HPLC da bi se dobio Primer 154 kao smeša 4 izomera (7.1 mg, 0.017 mmol, 8.8% prinosa). LC-MS Anal. Izračunato za C25H26ClFN2O, 424.17, utvrđeno [M+H] 425.3. Tr= 1.72 min (Metoda K).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ: 10.31 - 9.93 (m, 1H), 9.00 - 8.68 (m, 1H), 8.09 (dd, J=8.9, 5.9 Hz, 1H), 7.97 (d, J=9.3 Hz, 1H), 7.66 (d, J=8.7 Hz, 3H), 7.61 - 7.42 (m, 1H), 7.34 (d, J=8.7 Hz, 2H), 3.40 - 3.31 (m, 1H), 2.84 - 2.64 (m, 1H), 2.05 - 1.15 (m, 11H), 0.96 - 0.70 (m, 3H).
Primer 155
(R)-N-(4-hlorofenil)-4-hidroksi-2-((cis)-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)butanamid
[0567]
Intermedijer 155A: (R)-N-(4-hlorofenil)-4-okso-2-((cis)-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)butanamid
[0568]
[0569] Rastvoru Primera 224 (0.63 g, 1.5 mmol) u 15 mL 3:1 smeše dioksana i vode, dodat je NaIO4(1.28 g, 6 mmol) i 2,6-lutidin (0.32 g, 3 mmol) da se dobije bela kaša. Zatim je dodat OsO4(5 vol%, 0.15 mL). Posle 2 sata, reakcija je završena pomoću TLC. Ugašena je vodom i ekstrahovana tri puta sa EtOAc. Kombinovane organske materije su jednom oprane sa slanim rastvorom i zatim osušene MgSO4. Filtriranjem i koncentrovanjem dobija se sirovi preparat 155A kao ulje braon boje koje se dalje primenjuje bez prečišćavanja.
Primer 155: (R)-N-(4-hlorofenil)-4-hidroksi-2-((cis)-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)butanamid
[0570] U rastvor Intermedijera 155A (0.16 g, 0.38 mmol) u MeOH (3.8 mL) dodat je natrijum borhidrid (0.043 g, 1.14 momol). Posle 1 sata, reakcija je ugašena sa zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl i ekstrahovana sa rastvorom 10% MeOH u EtOAc. Fleš hromatografijom na silika gelu dobija se 2.2 mg Primera 155 kao bele čvrste supstace. MS(ES): m/z = 443.3 [M+H]<+>. Tr= 2.72 min (Metoda L).
Referentni Primeri 156(a) i 156(b)
N-(4-hlorofenil)-2-((cis)-4-cijano-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid i N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-cijano-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid (relativna stereohemija nije određena i proizvoljno dodeljena)
[0571]
Intermedijer 156A: 4-okso-1-(hinolin-4-il)cikloheksan-1-karbonitril
[0572]
[0573] U rastvor 2-(hinolin-4-il)acetonitrila (2.0 g, 11.4 mmol) u THF (30 mL) dodat je etil akrilat (2.38 g, 23.8 mmol) zatim kalijum terc-butoksid (1.6 g, 14.3 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi. Posle 1 sata, dodata je voda (200 mL) zatim je zagrevana na 85°C tokom 18 sati. Reakcija je zatim ohlađena na sobnu temperaturu i ekstrahovana tri puta sa EtOAc. Kombinovane organske materije su jednom oprane slanim rastvorom i osušene MgSO4. Filtriranje i naknadno koncentrovanje daje sirovi proizvod u obliku ulja braon boje. Prečišćavanje fleš hromatografijom na silika gelu (0-100% EtOAc u heksanima) daje intermedijer 156A (800 mg) kao belu čvrstu supstancu.
Intermedijer 156B: etil 2-(4-cijano-4-(hinolin-4-il)cikloheksiliden)acetat
[0574]
[0575] U rastvor etil 2-(dietoksifosforil)acetata (0.75 g, 3.36 mmol) u THF (7 mL) dodat je natrijum terc-butoksid (0.32 g, 3.36 mmol) na 0°C. Posle 10 minuta, dodat je rastvor Intermedijera 156A (0.80 g, 3.2 mmol) u THF (3 mL) u reakciju. Posle dodatna 2 sata, reakcija je ugašena vodom, ekstrahovana tri puta sa EtOAc. Kombinovane organske materije su jednom oprane slanim rastvorom, osušene MgSO4i filtrirane dajući sirovi proizvod. Prečišćavanjem fleš hromatografijom na silika gelu (85% EtOAc/heksani) dobijen je Intermedijer 156B (1.0 g) kao bela čvrsta supstanca.
Intermedijer 156C: etil 2-(4-cijano-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetat
[0576]
[0577] U rastvor preparata 156 B (1.00 g, 3.13 mmol) u MeOH (31 mL) dodat je Pd/C (tip Degussa, 0.10 g, 10% Pd). Vodonik je uveden putem balona. Posle 16 sati na st, reakcija je pročišćena argonom i zatim filtrirana kroz CELITE® ispirajući sa DCM. Koncentrovanjem je dobijen sirovi preprat 156 C kao smeša cis i trans izomera koja je korišćena bez daljeg prečišćavanja.
Primeri 156(a) i 156(b): N-(4-hlorofenil)-2-((cis)-4-cijano-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid i N-(4-hlorofenil)-2-((trans)-4-cijano-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid (relativna stereohemija nije određena i proizvoljno dodeljena) Primeri 156A i 156B su pripremljeni postupkom koji je opisan u opštem postupku G kada se dobija smeša cis- i trans- izomera. Oni su razdvojeni fleš hromatografijom na silika gelu da bi se dobili Primer 156A i Primer 156B.
Primer 156A MS(ES): m/z = 393.2 [M+H]<+>. Tr= 0.84 min (Metoda M).
Primer 156B MS(ES): m/z = 393.2 [M+H]<+>. Tr= 2.77 min (Metoda L).
Primer 157
(R)-N-(4-hlorofenil)-5-hidroksi-2-((cis)-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)pentanamid
[0578]
[0579] U rastvor Primera 224 (0.140 g, 0.33 mmol) u THF (3.3 mL) na -78°C, dodat je BH3-DMS (0.189 mL, 0.37 mmol, 2.0 M rast) zatim je zagrevan do sobne temperature. Posle 2 sata na sobnoj temperaturi, rastvor je ohlađen na -78°C i dodato je 5 mL 1N NaOH i 5 mL 30% vodonik peroksida zatim je zagrevano do sobne temperature. Posle 5 sati, ugašena je sa zas vod NH4Cl i ekstrahovana tri puta sa EtOAc. Kombinovane organske materije su jednom oprane slanim rastvorom i osušene MgSO4. Filtriranjem i koncetrovanjem dobija se sirovi proizvod. Prečišćavanjem fleš hromatografijom na silika gelu dobijen je Primer 157 kao bela čvrsta supstanca. MS(ES): m/z = 394.2 [M+H]<+>. Tr= 0.81 min (Metoda M).
Primer 158
N-(4-hlorofenil)-2-(1 -metoksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije određena)
Intermedijer 158A: etil 2-(1-metoksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetat
[0581]
[0582] U rastvor etil 2-(1-hidroksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetata (0.22 g, 0.69 mmol), koji je pripremljen postupcima iz Primera 30, u DME (3 mL) na -78°C dodat je KHMDS (1.5 mL, 0.5 M u toluenu, 0.756 mmol) zatim 18-kruna-6 (0.20 g, 0.756 mmol). Posle 30 minuta, dodat je Mel (0.057 mL, 0.756 mmol). Posle dodatnih 30 minuta, reakcija je ugašena sa zas vod NH4Cl i vodom. Ekstrahovana je tri puta sa EtOAc, kombinovane organske materije su jednom oprane sa slanim rastvorom, osušene MgSO4, filtrirane i koncentrovane dajući sirovi Intermedijer 158 A kao pojedinačni izomer, stereohemija nije potvrđena.
Primer 158
N-(4-hlorofenil)-2-(1-metoksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid
[0583] Primer 158 je pripremljen iz Intermedijera 158A postupcima koji su prikazani u Primeru 30. Izolovan kao pojedinačni izomer, relativna stereohemija nije potvrđena. MS(ES): m/z = 379.2 [M+H]<+>. Tr= 2.29 min (Metoda L).
Primer 159
N-(4-fluorofenil)-2-(4-hidroksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije određena)
Intermedijer 159A: etil 2-(4-hidroksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetat
[0585]
[0586] U rastvor 4-bromohinolina (0.36 g, 1.75 mmol) u THF (8 mL) na -78°C dodat je terc-butil litijum (1.7 M rastvor, 2.1 mL, 3.51 mmol). Posle 5 minuta, dodat je rastvor etil 2-(4-oksocikloheksil)acetata (0.294 g, 1.60 mmol) u THF (2 mL). posle 1 sata, dodat je 1 N NaOH zatim je zagrevan do sobne temperature. Smeša je zatim ekstrahovana tri puta sa EtOAc i kombinovane organske materije su jednom oprane sa slanim rastvorom. Organski slojevi su zatim osušeni MgSO4, filtrirani i koncentrovani dajući sirovi proizvod. Prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu eluiran sa 0 - 100% EtOAc u heksanima daje Intermedijer 159A (214 mg) kao žuto ulje.
Primer 159: N-(4-fluorofenil)-2-(4-hidroksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije određena)
Primer 159 je pripremljen iz Intermedijera 159A i 4-fluoroanilina postupcima opisanim u opštem postupku G. Primer 159 je izolovan kao pojedinačni izomer nakon kristalizacije posle koncentracije, stereohemija nije potvrđena. MS(ES): m/z = 393.2[M+H]<+>. Tr= 2.77 min (Metoda L).
Primer 160
N-(4-hlorofenil)-2-(4-hidroksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid (pojedinačni diastereomer, relativna stereohemija nije određena)
[0587]
Primer 160: N-(4-hlorofenil)-2-(4-hidroksi-4-(hinolin-4-il)cikloheksil)acetamid
[0588] Primer 160 je pripremljen iz preparata 159A i 4-hloroanilina postupcima koji su opisani u opšem postupku G. Primer 160 je izolovan kao pojedinačni izomer nakon kristalizacije posle koncentracije, stereohemija nije potvrđena. MS(ES): m/z = 431.3 [M+H]<+>. Tr= 0.85 min (Metoda M).
Tabela 7.
Tabela 8.
Primeri 229 i 230
Primer 229: N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(6-fluorohinolin-4-il)-1-hidroksicikloheksil) propanamid Primer 230: N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(6-fluorohinolin-4-il)-1-hidroksicikloheksil) propanamid (apsolutna stereohemija nepoznata)
[0589]
229A: metil 2-(trans-4-(6-fluorohinolin-4-il)-1-hidroksicikloheksil) propanoat
[0590]
229B: metil 2-(cis-4-(6-fluorohinolin-4-il)-1-hidroksicikloheksil) propanoat
[0591]
[0592] U rastvor 4-(6-fluorohinolin-4-il) cikloheksanona (200 mg, 0.822 mmol), metil 2-bromopropanoata (275 mg, 1.644 mmol) u CH3CN (6 mL) na 0°C dodat je tris(trifenilfosfin)rodijum(I) hlorid (45.6 mg, 0.049 mmol). Reakcija je mešana na 0°C tokom 30 minuta. Zatim je dodat dietilcink (1.0 M rastvor u heptanu) (1.726 mL, 1.726 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakcija je razblažena sa EtOAc i zasićenim NH4Cl. Organski sloj je odvojen i opran slanim rastvorom, osušen MgSO4, filtriran i koncentrovan dajući sirovi materijal. Ovaj sirovi materijal je prečišćen sa ISCO 24g, 40 mL/min. 0-100% EtOAc/heksan za 50 min. Proizvod 229A (87 mg, 0.26 mmol, 32%) je eluiran sa 50% EtOAc/heksan. Proizvod 229B (122 mg, 0.364 mmol, 44%) je eluiran sa 60% EtOAc/heksan.
229A:<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.83 (d, J=4.6 Hz, 1H), 8.14 (dd, J=9.2, 5.7 Hz, 1H), 7.67 (dd, J=10.5, 2.8 Hz, 1H), 7.50 (ddd, J=9.2, 8.0, 2.8 Hz, 1H), 7.33 (d, J=4.6 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.65 (s, 1H), 3.36 - 3.23 (m, 1H), 3.08 (q, J=7.1 Hz, 1H), 2.18 - 2.08 (m, 1H), 2.06 -1.94 (m, 2H), 1.94 - 1.81 (m, 2H), 1.79 - 1.68 (m, 3H), 1.68 - 1.51 (m, 1H), 1.36 - 1.23 (m, 3H) LC-MS: M+H=332.2 (tr=0.59 min) (Metoda A)
229B:<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.84 (d, J=4.6 Hz, 1H), 8.14 (dd, J=9.2, 5.7 Hz, 1H), 7.68 (dd, J=10.6, 2.8 Hz, 1H), 7.49 (ddd, J=9.1, 8.0, 2.8 Hz, 1H), 7.39 (d, J=4.6 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.21 - 3.04 (m, 2H), 2.56 (q, J=7.2 Hz, 1H), 2.18 - 1.97 (m, 3H), 1.93 - 1.67 (m, 5H), 1.65 (s, 2H), 1.55 - 1.41 (m, 1H), 1.36 - 1.23 (m, 3H)
Primeri 229 i 230
[0593] U rastvor 4-hloroanilina (63.5 mg, 0.498 mmol) u THF (1 mL) na sobnoj temperaturi dodat je kap po kap iPrMgCl (2.0 M u THF) (0.415 mL, 0.830 mmol). Mehurići su stvoreni. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 5 minuta. Zatim je dodato 229A (55 mg, 0.166 mmol) u THF (0.3 mL). Reakcija je mešana 1 sat na 70°C. reakcija je razblažena zasićenim NH4Cl i EtOAc. Organska materija je odvojena i oprana slanim rastvorom, osušena MgSO4, filtrirana i koncentrovana do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa ISCO 24g kolonom, 35 mL/min. 0-100% EtOAc/heksan za 30 minuta. Željeni proizvod je eluiran sa 80% EtOAc/heksan da se dobije N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(6-fluorohinolin-4-il)-1-hidroksicikloheksil)propanamid (58 mg, 0.135 mmol, 81 % prinosa) kao bela čvrsta supstanca.
Racemat je prečišćen preparativnom SFC pod sledećim uslovima: kolona: hiralna OD-H 25 x 3 cm ID, čestice 5µm; mobilna faza A: 70/30 CO2/MeOH; talasna dužina detektora: 220 nm; protok: 100 mL/min. Frakcije ("Pik-1" tr = 3.98 min (Primer 229) i "Pik-2" tr = 4.99 min (Primer 230); Primer 229:<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.83 (d, J=4.6 Hz, 1H), 8.14 (dd, J=9.2, 5.7 Hz, 1H), 7.67 (dd, J=10.5, 2.8 Hz, 1H), 7.50 (ddd, J=9.2, 8.0, 2.8 Hz, 1H), 7.33 (d, J=4.6 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.65 (s, 1H), 3.36 - 3.23 (m, 1H), 3.08 (q, J=7.1 Hz, 1H), 2.18 - 2.08 (m, 1H), 2.06 -1.94 (m, 2H), 1.94 - 1.81 (m, 2H), 1.79 - 1.68 (m, 3H), 1.68 - 1.51 (m, 1H), 1.36 - 1.23 (m, 3H) LC-MS: M+H=332.2 (tr=0.59 min)
Primer 230:<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.83 (d, J=4.6 Hz, 1H), 8.14 (dd, J=9.2, 5.7 Hz, 1H), 7.67 (dd, J=10.5, 2.8 Hz, 1H), 7.50 (ddd, J=9.2, 8.0, 2.8 Hz, 1H), 7.33 (d, J=4.6 Hz, 1H), 3.78 (s, 3H), 3.65 (s, 1H), 3.36 - 3.23 (m, 1H), 3.08 (q, J=7.1 Hz, 1H), 2.18 - 2.08 (m, 1H), 2.06 -1.94 (m, 2H), 1.94 - 1.81 (m, 2H), 1.79 - 1.68 (m, 3H), 1.68 - 1.51 (m, 1H), 1.36 - 1.23 (m, 3H) LC-MS: M+H=332.2 (tr=0.59 min) (Metoda A)
Primeri 231 i 232
Primer 231: N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(6-fluorohinolin-4-il)-1-hidroksicikloheksil) propanamid
Primer 232: N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(6-fluorohinolin-4-il)-1-hidroksicikloheksil) propanamid (apsolutna stereohemija nepoznata)
[0594]
[0595] U rastvor 4-hloroanilina (61.2 mg, 0.480 mmol) u THF (2 mL) na sobnoj temperaturi dodat je kap po kap iPrMgCl (2.0 M u THF) (0.400 mL, 0.800 mmol). Mehurići su evoluirali. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 minuta. Zatim je dodat preparat 229B (53 mg, 0.160 mmol). Reakcija je zagrevana 1 sat na 70°C. Ohlađena je na sobnu temperaturu. Smeša je razblažena zasićenim NH4Cl i EtOAc. Organska materija je odvojena i oprana slanim rastvorom, osušena MgSO4, filtrirana i koncentrovana do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa ISCO 24g kolonom, 35 mL/min. 0-100% EtOAc/heksan za 45 minuta. Željeni proizvod je eluiran sa 75% EtOAc/heksan da se dobije N-(4-hlorofenil)-2-((1s, 4s)-4-(6-fluorohinolin-4-il)-1-hidroksicikloheksil) propanamid (55 mg, 0.128 mmol, 80 % prinosa) kao bele čvrste supstance. Racemat je prečišćen preparativnom SFC pod sledećim uslovima: kolona: hiralna OD-H 25 x 3 cm ID, čestica 5µm; mobilna faza A: 70/30 CO2/MeOH; talasna dužina detektora: 220 nm; protok: 100 mL/min. Frakcije ("Pik-1" tr = 4.58 min (Primer 231) i "Pik-2" tr = 5.33 min (Primer 232);
[0596] Primer 231:<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.83 (d, J=4.5 Hz, 1H), 8.14 (dd, J=9.2, 5.7 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.66 (dd, J=10.6, 2.8 Hz, 1H), 7.55 - 7.45 (m, 3H), 7.38 (d, J=4.6 Hz, 1H), 7.35 - 7.31 (m, 2H), 3.60 (br. s., 1H), 3.24 - 3.02 (m, 1H), 2.38 (q, J=7.1 Hz, 1H), 2.21 -1.95 (m, 3H), 1.95 - 1.83 (m, 2H), 1.80 - 1.64 (m, 2H), 1.49 (td, J=13.3, 4.1 Hz, 1H), 1.42 (d, J=7.1 Hz, 3H) LC-MS: M+H=332.2 (tr=0.78 min)
(Metoda A)
[0597] Primer 232:<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.83 (d, J=4.5 Hz, 1H), 8.14 (dd, J=9.2, 5.7 Hz, 1H), 7.94 (s, 1H), 7.66 (dd, J=10.6, 2.8 Hz, 1H), 7.55 - 7.45 (m, 3H), 7.38 (d, J=4.6 Hz, 1H), 7.35 - 7.31 (m, 2H), 3.60 (br. s., 1H), 3.24 - 3.02 (m, 1H), 2.38 (q, J=7.1 Hz, 1H), 2.21 -1.95 (m, 3H), 1.95 - 1.83 (m, 2H), 1.80 - 1.64 (m, 2H), 1.49 (td, J=13.3, 4.1 Hz, 1H), 1.42 (d, J=7.1 Hz, 3H) LC-MS: M+H=332.2 (tr=0.78 min)
(Metoda A)
Primer 233
(+/-)-N-(4-hlorofenil)-2-(trans-1-fluoro-4-(6-fluorohinolin-4-il) cikloheksil) propanamid
[0598]
[0599] U rastvor 229B (20 mg, 0.047 mmol) u CH2Cl2(1 mL) na sobnoj temperaturi dodat je dietilaminosulfur trifluorid (0.019 mL, 0.141 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakcija je razblažena vodom i EtOAc. Organska materija je odvojena i oprana slanim rastvorom, osušena MgSO4, filtrirana i koncentrovana do suva. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, čestice 5 µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 0.1% trifluorosirćetnom kiselinom; gradijent: 25-50% B tokom 25 minuta, zatim 2 minuta držanje na 50% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem. Materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, čestice 5 µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; gradijenta: 50-75% B tokom 25 minuta, zatim 2-minuta držani na 75% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem. Prinos Primera 233 je 0.5 mg (1.17 mmol, 2.5%)<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 10.13 (s, 1H), 8.84 (d, J=4.4 Hz, 1H), 8.15 - 8.00 (m, 2H), 7.72 - 7.55 (m, 4H), 7.36 (d, J=8.7 Hz, 2H), 3.21 - 3.12 (m, 1H), 2.15 (br. s., 1H), 2.06 (br. s., 1H), 1.94 (d, J=9.0 Hz, 3H), 1.88 (br. s., 2H), 1.66 (d, J=11.4 Hz, 1H), 1.24 (d, J=6.9 Hz, 3H) LC-MS: M+H=429.0 (tr=0.82 min)
(Metoda A)
Primeri 234, 235, 236, 237
[0600]
Primer 234: N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(6-fluorohinolin-4-il)-4-hidroksicikloheksil) propanamid (apsolutna stereohemija nepoznata)
Primer 235: N-(4-hlorofenil)-2-(trans-4-(6-fluorohinolin-4-il)-4-hidroksicikloheksil) propanamid (apsolutna stereohemija nepoznata)
Primer 236: N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(6-fluorohinolin-4-il)-4-hidroksicikloheksil) propanamid (apsolutna stereohemija nepoznata)
Primer 237: N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(6-fluorohinolin-4-il)-4-hidroksicikloheksil) propanamid (apsolutna stereohemija nepoznata)
234A: etil 2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)-4-hidroksicikloheksil) propionat
[0601]
[0602] U rastvor 4-bromo-6-fluorohinolina (163 mg, 0.721 mmol) u THF (5 mL) na -78°C dodat je kap po kap t-BuLi (1.7M-3.2M u heptanu) (0.849 mL, 1.443 mmol). Prešao je iz bistre u tamno braon boju. Reakcija je mešana 3 minuta na -78°C. Zatim je kap po kap dodat etil 2-(4-oksoikloheksil) propanoat (130 mg, 0.656 mmol) u THF (1 mL). Reakcija je mešana 1 sat na -78°C. Reakcija je razblažena zasićenim NH4Cl i EtOAc. Organska materija je odvojena i oprana slanim rastvorom, osušena MgSO4, filtrirana i koncentrovana da daje sirovi materijal. Ovaj materijal je prečišćen pomoću ISCO 40g, 40 mL/min.0-100% EtOAc/heksan za 35 minuta. Željeni proizvod je eluiran sa 55% EtOAc/heksan dajući 234A (100 mg, 0.290 mmol, 44%) kao smešu diastereomera.
234B: N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)-4-hidroksicikloheksil)propanamid
[0604] U rastvor 4-hloroanilina (111 mg, 0.869 mmol) u THF (2 mL) na sobnoj temperaturi dodat je kap po kap iPrMgBr (2.0M u THF) (0.724 mL, 1.448 mmol. Mehurići su evoluirali. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 5 minuta. Zatim je dodat 234A (100 mg, 0.29 mmol) u THF (1 mL). Reakcija je mešana na 70 ° C tokom 1 sata. Zatim je ohlađena do sobne temperature i razblažena zasićenim NH4Cl i EtOAc. Organska materija je odvojena i oprana slanim rastvorom, osušena MgSO4, filtrirana i koncentrovana do suva. Sirovi materijal je prečišćen sa ISCO 24g kolonom, 35 mL/min. 0-100% EtOAc/heksan za 30 minuta. Željeni proizvod se eluira sa 80% EtOAc/heksan dajući 234B (110 mg, 0.258 mmol, 89%) kao smešu diastereomera.
[0605] Smeša diastereomera 234B je prečišćena preparativnom SFC pod sledećim uslovima: kolona: Whelk-O R, R Kromasil 25 x 3 cm ID, čestice 5µm; mobilna faza A: 75/25 CO2/MeOH; talasna dužina detektora: 220 nm; protok: 100 mL/min. Frakcije ("Pik-1" tr = 9.94 min (Primer 234) i "Pik-2" tr = 11.49 min (primer 236); "Pik-3" tr = 13.23 min (Primer 235) i "Pik-4" tr = 14.63 min (Primer 237);
Primeri 234 i 235: 5 mg svaki (0.011 mmol, 4.44%)<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.86 - 8.74 (m, 1H), 8.53 (dd, J=11.7, 2.8 Hz, 1H), 8.13 (dd, J=9.2, 5.9 Hz, 1H), 7.57 - 7.39 (m, 4H), 7.35 - 7.26 (m, 2H), 7.22 (s, 1H), 2.59 (d, J=7.3 Hz, 2H), 2.27 - 2.16 (m, 1H), 2.09 - 1.86 (m, 5H), 1.38 - 1.18 (m, 6H); LC-MS: M+H=427.1 (tr=0.78 min) (Metoda A)
Primeri 236 i 237: 40 mg svaki (0.093 mmol, 36.2%)<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.83 (d, J=4.6 Hz, 1H), 8.52 (dd, J=11.7, 2.8 Hz, 1H), 8.14 (dd, J=9.3, 6.0 Hz, 1H), 7.58 - 7.53 (m, J=8.8 Hz, 2H), 7.49 (ddd, J=9.2, 7.6, 2.8 Hz, 1H), 7.42 (d, J=4.5 Hz, 1H), 7.39 - 7.30 (m, 2H), 7.20 (s, 1H), 2.38 - 2.16 (m, 3H), 2.09 - 1.91 (m, 3H), 1.88 - 1.71 (m, 5H), 1.40 - 1.30 (m, 3H); LC-MS: M+H=427.1 (tr=0.78 min) (Metoda A)
Primeri 238 - 241 su dobijeni prateći postupke u Primeru 58 primenom odgovarajućih kiselina i anilina.
Referentni Primer 242
2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)-N-(1-metilcikloheksil)acetamid
[0606]
242A. metil 2-(4-metilpiperidin-4-il)acetat
[0607] U bocu napunjenu MeOH (7.5 mL), na 0°C u atmosferi azota, polako je dodat acetil hlorid (1.1 mL, 15.2 mmol). Po završenom dodavanju, smeša je mešana na 0°C tokom 5 minuta pre dodavaja polako u kapima homogene smeše 2-(4-metilpiperidin-4-il)sirćetne kiseline, HCl (675.0 mg, 3.5 mmol) u MeOH (1.5 mL). Dobijena homogena smeša je mešana na 0°C tokom 5 minuta zatim na 60 °C tokom 8 sati, pre nego što je koncentrovana u vakuumu da se dobije HCl so jedinjenja iz naslova kao bela čvrsta supstanca (718.0 mg; 99% prinosa) koja se primenjuje bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 9.41 - 9.12 (m, 1H), 3.60 (s, 3H), 3.25 -3.15 (m, 2H), 2.93 - 2.82 (m, 2H), 2.39 - 2.30 (m, 2H), 1.74 - 1.64 (m, 4H), 1.02 (s, 3H).
242B. metil 2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acetat
[0608] Homogenoj smeši 4-hloro-6-fluorohinolina (350.0 mg, 1.9 mmol) u anhidrovanom NMP (5 mL), u zaprivenoj bočici, dodata je HCl so metil 2-(4-metilpiperidin-4-il)acetata (242A, 480.0 mg, 2.3 mmol) zatim DIPEA (1.6 mL, 9.2 mmol). Bočica je zaptivena i smeša je mešana na 120 °C. Posle 26 sati, reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, i zatim je podeljena između vode i EtOAc. Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je još jednom ekstrahovan sa EtOAc. Organski slojevi su kombinovani, oprani slanim rastvorom, zatim koncentrovani u vakuumu da se dobije sirovi proizvod. Prečišćavanjem Isco hromatografijom dobija se metil 2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acetat kao ulje (565.8 mg; 93% prinosa). MS (ES): m/z = 317 [M+H]<+>. tR= 0.66 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.38 (d, J=5.4 Hz, 1H), 7.96 (dd, J=11.7, 2.8 Hz, 1H), 7.89 - 7.84 (m, 1H), 7.55 - 7.49 (m, 1H), 6.54 (d, J=5.5 Hz, 1H), 3.82 - 3.63 (m, 2H), 3.59 (s, 3H), 3.54 - 3.34 (m, 2H), 2.45 - 2.38 (m, 2H), 1.87 - 1.72 (m, 4H), 1.05 (s, 3H).
242C. 2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)sirćetna kiselina
[0609] U homogenu smešu metil 2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)acetata (321.0 mg, 1.0 mmol) u MeOH (5 mL), u atmosferi azota, dodat je kap po kap 2M vodeni rastvor NaOH (1 mL, 2.0 mmol). Reakcija je zatim mešana na sobnoj temperaturi 20 sati pre nego što je tretirana sa 1N HCl (aq) do pH 6 na pH test trakama. Smeša je zatim podeljena između vode i EtOAc, slojevi su odvojeni i vodeni sloj je dva puta ekstrahovan sa EtOAc. Vodeni sloj iz ekstrakcije liofilizovan da se dobije sirovi proizvod u obliku beličaste čvrste supstance (302.1 mg, 98% prinosa) koja je korišćena bez daljeg prečišćavanja. MS (ES): m/z = 303 [M+H]<+>. tR= 0.58 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 12.12 (br.s, 1H), 8.41 (d, J=6.1 Hz, 1H), 8.14 - 8.08 (m, 1H), 8.00 (dd, J=9.3, 5.7 Hz, 1H), 7.75 - 7.64 (m, 1H), 6.64 (d, J=6.2 Hz, 1H), 3.98 - 3.87 (m, 1H), 3.87 - 3.78 (m, 1H), 3.69 - 3.49 (m, 2H), 2.38 - 2.29 (m, 2H), 1.92 - 1.70 (m, 4H), 1.06 (s, 3H).
Referentni Primer 242: 2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)-N-(1-metilcikloheksil)acetamid
[0610] U smešu 2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)-4-metilpiperidin-4-il)sirćetne kiseline (26.5 mg, 0.09 mmol) u anhidrovanom DMF (1 mL), u zaptivenoj bočici, dodat je PyBOP (45.6 mg, 0.09 mmol) zatim DIPEA (0.06 mL, 0.34 mmol). Smeša je mešana 15 minuta pre nego što je dodat 1-metilcikloheksanamin, HCl (15.7 mg, 0.11 mmol) i bočica je zaptivena. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 21 sat, pre nego što je razblažena sa DMF, propuštena kroz filter špric, zatim prečišćena preparativnom HPLC/MS da se dobije jedinjenje iz naslova (17.2 mg; 38% prinosa). MS (ES): m/z = 398 [M+H]<+>. tR= 1.61 min (Metoda B).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.38 (d, J=5.6 Hz, 1H), 8.02 (d, J=9.7 Hz, 1H), 7.90 - 7.84 (m, 1H), 7.60 (t, J=7.6 Hz, 1H), 7.19 (s, 1H), 6.57 (d, J=5.8 Hz, 1H), 3.94 - 3.64 (m, 2H), 2.16 (t, J=7.8 Hz, 2H), 2.02 - 1.92 (m, 2H), 1.88 - 1.73 (m, 2H), 1.67 (t, J=7.3 Hz, 2H), 1.47 - 1.31 (m, 5H), 1.30 - 1.10 (m, 8H), 1.04 (s, 3H).
Referentni Primer 243
(±)-N-(4-hlorofenil)-2-(1-(6-fluorohinolin-4-ol)piperidin-4-il)butanamid
[0611]
243A. terc-butil 4-(1-etoksi-1-oksobutan-2-iliden)piperidin-1-karboksilat
[0612] Suspenziji NaH (0.29 g, 7.18 mmol) u anhidrovanom THF (10 mL), u atmosferi azota, dodat je trietil 2-fosfonobutirat (1.81 g, 7.18 mmol) tokom 5 minuta. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 minuta, za to vreme je postala homogena. Ovom rastvoru je u kapima dodata homogena smeša 1-Boc-4-piperidona (1.10 g, 5.52 mmol) u anhidrovanom THF (2.5 mL). Posle 1.5 sata mešanja, reakcija je ugašena zasićenim rastvorom NH4Cl (vod) pre nego što je temeljno ekstrahovana sa EtOAc. Organske frakcije se kombinuju, operu sa slanim rastvorom, osuše (MgSO4), filtriraju i koncentrišu u vakuumu dajući terc-butil 4-(1-etoksi-1-oksobutan-2-iliden)piperidin-1-karboksilat kao bistro ulje (1.64 g; 100% prinosa) koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 4.13 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.39 - 3.35 (m, 2H), 3.35 - 3.31 (m, 2H), 2.45 - 2.39 (m, 2H), 2.31 - 2.22 (m, 4H), 1.40 (s, 9H), 1.21 (t, J=7.2 Hz, 3H), 0.93 (t, J=7.5 Hz, 3H).243B. terc-butil 4-(1-etoksi-1-oksobutan-2-il)piperidin-1-karboksilat [0613] U bocu napunjenu terc-butil 4-(1-etoksi-1-oksobutan-2-iliden)piperidin-1karboksilatom (1.64 g, 5.52 mmol) i u atmosferi azota, dodat je platina (IV) oksid (0.07 g, 0.31 mmol) praćen pažljivim dodavanjem EtOH (5 mL). Linija azota je zatim zamenjena balonom sa vodonikom i smeša je mešana na sobnoj temperaturi. Posle 15 sati, reakciona smeša je pročišćena azotom pre filtriranja kroz sloj CELITE®. Podloga je temeljno isprana EtOAc pre nego što su kombinovani filtrati koncentrovani u vakuumu da se dobije terc-butil 4-(1-etoksi-1-oksobutan-2-il)piperidin-1-karboksilat kao bistro ulje (1.65 g; 100% prinosa) koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 4.08 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.98 - 3.83 (m, 2H), 2.78 - 2.52 (m, 2H), 2.13 - 2.03 (m, 1H), 1.69 - 1.62 (m, 1H), 1.52 - 1.43 (m, 2H), 1.38 (s, 9H), 1.28 - 1.13 (m, 5H), 1.10 - 0.98 (m, 2H), 0.80 (t, J=7.3 Hz, 3H).
243C. etil 2-(piperidin-4-il)butanoat
[0614] Homogenoj smeši terc-butil 4-(1-etoksi-1-oksobutan-2-il)piperidin-1-karboksilata (1.65 g, 5.52 mmol) u ahnidrovanom dioksanu (5 mL), u atmosferi azota, dodata je HCl (4N u dioksanu, 10 mL, 40.0 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi dva sata pre nego što je koncentrovana u vakuumu da bi se uklonile isparljive materije. Dobijeno ulje je tretirano zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3do pH5 i zatim 1N NaOH (vod) do pH 8, pre nego što je smeša temeljno ekstrahovana sa EtOAc. Slojevi su odvojeni, i vodeni sloj liofilizovan da se dobije jedinjenje iz naslova u obliku bledo žute čvrste supstance (1.20g; 92% prinosa) koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. MS (ES): m/z = 200 [M+H]<+>. tR= 0.57 min (Metoda A).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 4.07 (q, J=7.2 Hz, 2H), 3.01 - 2.78 (m, 2H), 2.48 - 2.29 (m, 3H), 2.07 -1.98 (m, 1H), 1.60 - 1.35 (m, 5H), 1.18 (t, J=7.1 Hz, 3H), 1.11 - 0.88 (m, 2H), 0.80 (t, J=7.4 Hz, 3H).
243D. etil 2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)piperidin-4-il)butanoat
[0615] U homogenu smešu 4-hloro-6-fluorohinolina (365.0 mg, 2.01 mmol) u anhidrovanom NMP (5 mL), u zaptivenoj bočici, dodat je etil 2-(piperidin-4-il)butanoat (243C, 544.0 mg, 2.31 mmol) zatim DIPEA (1.6 mL, 9.16 mmol). Bočica je zaptivena i smeša je mešana na 120 °C tri sata pre nego što je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu. Posle 7 dana mešanja, smeša je zagrevana tri dana na 120 °C, zatim je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu, pre nego što je podeljena između vode i EtOAc. Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je još jednom ekstrahovan sa EtOAc. Ovaj organski ekstrakt je kombinovan sa originalnim organskim slojem i opran vodom, i zatim koncentrovan u vakuumu da se dobije ostatak tamno braon boje. Prečišćavanjem Isco hromatografijom dobija se etil 2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)piperidin-4-il)butanoat kao zlatno ulje (76.1 mg; 11% prinosa). MS (ES): m/z = 345 [M+H]<+>. tR= 0.77 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, HLOROFORM-d) δ 8.68 (d, J=5.0 Hz, 1H), 8.06 - 8.03 (m, 1H), 7.59 - 7.55 (m, 1H), 7.43 - 7.38 (m, 1H), 6.84 (d, J=4.9 Hz, 1H), 4.21 (q, J=7.1 Hz, 2H), 3.62 - 3.52 (m, 2H), 2.84 -2.71 (m, 2H), 2.29 - 2.20 (m, 1H), 2.01 - 1.93 (m, 1H), 1.82 - 1.60 (m, 6H), 1.31 (t, J=7.2 Hz, 3H), 0.94 (t, J=7.4 Hz, 3H).
243E. 2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)piperidin-4-il)butanska kiselina
[0616] Homogenoj smeši etil 2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)piperidin-4-i)butanoata (76.1 mg, 0.22 mmol) u EtOH (4 mL u atmosferi azota, dodat je NaOH (2M vodeni rastvor, 0.2 mL, 0.40 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 21 sat pre dodavanja NaOH (2M vodeni rastvor, 0.2 mL, 0.40 mmol) i mešanje je nastavljeno. Posle 22 sata doda se NaOH (2M vodeni rastvor, 0.2 mL, 0.40 mmol) i reakcija se zagreje na 40°C. Reakcija je mešana 4 dana pre nego što je dodat NaOH (2M vodeni rastvor, 0.2 mL, 0.40 mmol) i mešanje je nastavljeno 21 sat. Nakon hlađenja na sobnoj temperaturi, reakcija je ugašena sa 4N HCl u dioksanu (do pH 5-6 na pH test trakama), mešana 5 minuta na sobnoj temperaturi, zatim koncentrovana u vakuumu da se dobije sirovi proizvod u obliku svetlo žute čvrste supstance, koja je primenjivana u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. MS (ES): m/z = 317 [M+H]<+>. tR= 0.63 min (Metoda A).
Referentni Primer 243: (±)-N-(4-hlorofenil)-2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)piperidin-4-il)-butanamid
[0617] U smešu 2-(1-(6-fluorohinolin-4-il)piperidin-4-il)butanske kiseline (35.0 mg, 0.11 mmol) i 4-hloroanilina (17.0 mg, 0.13 mmol) u anhidrovanom DMF, u atmosferi azota, dodat je DIPEA (0.1 mL, 0.57 mmol) zatim PyBOP (57.6 mg, 0.11 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 98 sati pre nego što je razblažena sa DMF, propuštena kroz filter špric, zatim prečišćena preparativnom HPLC/MS da se dobije jedinjenje iz naslova (2.5 mg; 3% prinosa). MS (ES): m/z = 426 [M+H]<+>. tR= 2.22 min (Metoda B).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 10.15 (s, 1H), 8.64 (d, J=4.9 Hz, 1H), 8.00 (dd, J=9.0, 5.7 Hz, 1H), 7.67 (d, J=8.7 Hz, 2H), 7.64 - 7.51 (m, 2H), 7.35 (d, J=8.7 Hz, 2H), 7.07 - 6.96 (m, J=4.9 Hz, 1H), 3.52 - 3.43 (m, 1H), 2.84 - 2.66 (m, 2H), 2.55 - 2.53 (m, 1H), 2.27 - 2.18 (m, 1H), 2.02 - 1.92 (m, J=11.9 Hz, 1H), 1.78 - 1.43 (m, 6H), 0.86 (t, J=7.2 Hz, 3H).
Referentni Primer 244
(±)-N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanamid
[0618]
244A. terc-butil 4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-karboksilat
[0619] U smešu 4-hloro-6-fluorohinolina (500.0 mg, 2.8 mmol) u anhidrovanom NMP (5 mL), u zaptivenoj bočici, dodat je 1-Boc-piperazin (750.0 mg, 4.0 mmol) zatim DIPEA (2.0 mL, 11.5 mmol). Bočica je zatvorena i smeša je mešana na 120 °C tokom 15.5 sati. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature pre nego što je podeljena između vode i Et2O. Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan još dva puta sa Et2O. Ovi organski ekstrakti su kombinovani sa originalnim organskim slojem i oprani slanim rastvorom, osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da se dobije sirovi proizvod. Prečišćavanjem Isco hromatografijom dobijen je terc-butil 4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-karboksilat kao ulje (719.3 mg; 77% prinosa). MS (ES): m/z = 332 [M+H]<+>. tR= 0.70 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.70 (d, J=4.9 Hz, 1H), 8.09 - 8.00 (m, 1H), 7.77-7.67 (m, 1H), 7.67 - 7.62 (m, 1H), 7.07 (d, J=4.9 Hz, 1H), 3.67 - 3.57 (m, 4H), 3.15 - 3.06 (m, 4H), 1.44 (s, 9H).
244B. 6-fluoro-4-(piperazin-1-il)hinolin
[0620] Homogenoj smeši terc-butil 4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-karboksilata (600.0 mg, 1.8 mmol) u dioksanu (4 mL), u atmosferi azota, dodat je 4M HCl u dioksanu (10 mL, 40.0 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2.5 sata, za to vreme je nastao talog. Heterogena smeša je koncentrovana na približno 1/2 svoje prvobitne zapremine. Vakuumskom filtracijom dobijena je HCl so naslovnog jedinjenja kao beličasta čvrsta supstanca (490.0 mg; 100% prinosa) koja je primenjena bez daljeg prečišćavanja. MS (ES): m/z = 232 [M+H]<+>. tR= 0.38 min (Metoda A).
244C. (±)-etil 2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanoat
[0621] Heterogenoj smeši HCl soli 6-fluoro-4-(piperazin-1-il)hinolina (244B, 200.0 mg, 0.75 mmol) u anihidrovanom DMF (5 mL), u zaptivenoj bočici, dodat je K2CO3(288.0 mg, 2.08 mmol) zatim etil 2-bromovalerat (234.0 mg, 1.12 mmol). Posuda je zatim zatvorena i smeša je mešana na 60 °C. Posle 16 sati, reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu zatim podeljena između vode i EtOAc. Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je još jednom ekstrahovan sa EtOAc. Organski slojevi su kombinovani, oprani slanim rastvorom, osušeni (anhidrovanim Na2SO4), filtrirani i koncentrovani u vakuumu da se dobije proizvod kao žuto ulje koje je korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.. MS (ES): m/z = 360 [M+H]<+>. tR= 0.62 min (Metoda A).
244D. (±)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanska kiselina
[0622] U homogenu smešu etil 2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)propanoata (244C, 0.75 mmol) u MeOH (4 mL), u atmosferi azota, u kapima je dodat 2M NaOH (vod) (0.8 mL, 1.6 mmol). Dobijena smeša je mešana na ambijentalnoj temperaturi 64 sata pre dodavanja 2M NaOH (vod) (0.8 mL, 1.6 mmol). Posle 6 sati mešanja, dodat je 2M NaOH (vod) (0.8 mL, 1.6 mmol) i mešanje je nastavljeno. Posle 115 sati, reakcija je tretirana sa HCl (4N u dioksanu) do pH 5 na pH test trakama. Smeša je zatim podeljena između vode i EtOAc. Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je liofilizovan da se dobije svetlo žuta čvrsta supstanca. Prečišćavanjem RP preparativnom HPLC (YMC-ODS 5µ 250 x 30 kolona. Uslovi: 30mL/min brzina protoka; 40 minuta gradijent od 30-100%B (rastvarač A = 95:5 H2O/MeCN sa 0.05%TFA. Rastvarač B = 5:95 H2O/MeCN sa 0.05%TFA) dobijena je TFA so 2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanske kiseline u obliku bledo žute čvrste supstance (160.0 mg; 58% prinosa). MS (ES): m/z = 332 [M+H]<+>. tR= 0.46 min (Metoda A).<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 8.77 (d, J=6.4 Hz, 1H), 8.10 (dd, J=10.1, 5.2 Hz, 1H), 7.93-7.86 (m, 2H), 7.28 (d, J=6.5 Hz, 1H), 3.84 - 3.73 (m, 4H), 3.72 - 3.51 (m, 1H), 3.38 - 2.99 (m, 4H), 1.86 - 1.68 (m, 2H), 1.46 - 1.33 (m, 2H), 0.94 (t, J=7.3 Hz, 3H).
Referentni Primer 244: (±)-N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanamid
[0623] Smeši soli (±)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanske kiseline (244D, 32.0 mg, 0.10 mmol) u anhidrovanom DMF (1.5 mL), u zaptivenoj bočici, dodat je PyBOP (50.3 mg, 0.10 mmol) zatim DIPEA (0.06 mL, 0.34 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 10 minuta pre dodavanja 4-hloroanilina (14.8 mg, 0.12 mmol). Bočica je zaptivena i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 63 sata, pre nego što je razblažena sa DMF, propuštena kroz filter špric, zatim prečišćena preparativnom HPLC/MS da se dobije jedinjenje iz naslova kao racemat (15.9 mg; 37 % prinosa). MS (ES): m/z = 441 [M+H]<+>. tR= 2.24 min (Metoda B).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 10.15 (s, 1H), 8.66 (d, J=4.8 Hz, 1H), 8.08 - 7.95 (m, 1H), 7.68 (d, J=8.7 Hz, 2H), 7.64 - 7.53 (m, 2H), 7.37 (d, J=8.7 Hz, 2H), 7.02 (d, J=4.8 Hz, 1H), 3.57 - 3.43 (m, 1H), 3.35 - 3.08 (m, 4H), 2.94 - 2.78 (m, 4H), 1.81 - 1.58 (m, 2H), 1.40 - 1.24 (m, 2H), 0.92 (t, J=7.3 Hz, 3H).
Referentni Primer 245
N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanamid (Enantiomer 1, apsolutna stereohemija nije dodeljena)
[0624]
i
Referentni Primer 246
N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanamid (Enantiomer 2, apsolutna stereohemija nije dodeljena)
[0625]
[0626] Racemski referentni Primer 244 (15.9 mg) prečišćen je hiralnom SFC (82/18 CO2/MeOH sa 0.1% DEA mobilne faze, Chiral OJ 25 X 3 cm, 5µm kolona, 85 ml/min, talasna dužina detektora = 220 nm). Koncentracija odgovarajućih (ranije eluirajućih) frakcija dala je referentni Primer 245 (6.7 mg) naznačen kao N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanamid (Enantiomer 1). MS (ES): m/z = 441 [M+H]<+>. Tr= 2.21 min (Metoda B).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6): superponira se na racematni NMR. Koncentracija kasnijih eluirajućih frakcija dala je Primer 246 (6.8 mg) naznačen kao N-(4-hlorofenil)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)pentanamid (Enantiomer 2). MS (ES): m/z = 441 [M+H]<+>. Tr= 2.21 min (Metoda B).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6): superponira se na racematni NMR.
Referentni Primer 247
(±)-2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)-N-(1-metilcikloheksil)pentanamid
[0627]
[0628] Referentni Primer 247 (17.5 mg; 42 % prinosa) pripremljen je postupkom analognim onom za sintezu Primera 244, s tim što je umesto 4-hloroanilina primenjen 1-metilcikloheksanamin, HCl (17.3 mg, 0.12 mmol). MS (ES): m/z = 427 [M+H]<+>. Tr= 2.23 min (Metoda B).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6) δ 8.64 (d, J=4.8 Hz, 1H), 8.01 (dd, J=9.0, 5.7 Hz, 1H), 7.68 - 7.52 (m, 2H), 7.35 - 7.23 (m, 1H), 7.03 (d, J=4.9 Hz, 1H), 3.19 - 3.09 (m, 4H), 2.90 - 2.77 (m, 3H), 2.56 - 2.51 (m, 2H), 2.11 - 2.00 (m, 2H), 1.70 - 1.58 (m, 1H), 1.53 - 1.35 (m, 6H), 1.30 - 1.19 (m, 8H), 0.88 (t, J=7.2 Hz, 3H).
Referentni Primer 248
2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)-N-(1-metilcikloheksil)pentanamid (Enantiomer 1, apsolutna stereohemija nije dodeljena)
[0629]
i
Referentni Primer 249
2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)-N-(1-metilcikloheksil)pentanamid (Enantiomer 2, apsolutna stereohemija nije dodeljena)
[0630]
[0631] Racemski referentni Primer 247 (16.7 mg) prečišćen je hiralnom SFC (80/20 CO2/MeOH sa 0.1% DEA mobilne faze, Chiral OJ 25 X 3 cm, 5µm kolona, 85 ml/min, talasna dužina detektora = 220 nm). Koncentracija odgovarajućih (ranije eluirajućih) frakcija dala je referentni Primer 248 (7.4mg) naznačen kao 2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)-N-(1-metilcikloheksil)pentanamid (Enantiomer 1). MS (ES): m/z = 427 [M+H]<+>. Tr= 2.28 min (Metoda B).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6): superponira se na racematni NMR. Koncentracija kasnijih eluirajućih frakcija dala je referentni Primer 249 (6.5 mg) naunačen kao 2-(4-(6-fluorohinolin-4-il)piperazin-1-il)-N-(1-metilcikloheksil)pentanamid (Enantiomer 2). MS (ES): m/z = 427 [M+H]<+>. Tr= 2.28 min (Metoda B).<1>H NMR (500MHz, DMSO-d6): superponira se na racematni NMR.
Primer 250
(+/-)-cis i trans-N-(4-hlorofenil)-2-(4-(3-metil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-7-il)cikloheksil)propanamid
[0632]
Priprema 250A.7-hloro-3-metil-3H-imidazo[4,5-b]piridina
[0633]
[0634] Rastvoru 7-hloro-3H-imidazo[4,5-b]piridin, soli mravlje kiseline (0.2 g, 0.820 mmol) u DMSO (4.10 ml) dodati su cezijum karbonat (0.534 g, 1.639 mmol) i metil jodid (0.054 ml, 0.860 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 28 h, zatim je ugašena sa H2O i ekstrahovana sa EtOAc (5X). Organski slojevi su kombinovani, osušeni Na2SO4, filtrirani i koncentrovani dajući tečnost narandžaste boje, koja je dalje sušena pod visokim vakuumom preko noći. TLC i LC-MS su pokazali ∼1:1 proizvod/SM. Sirovi materijal je rastvoren u minimalnoj količini CH2Cl2i hromatografisan. Prečišćavanjem sirovog materijala hromatografijom na silika gelu primenom ISCO mašine (40 g kolona, 40 mL/min, 0-20% MeOH u CH2Cl2preko 24 min, tr= 17 min) dobijeno je jedinjenje iz naslova (0.0729 g, 0.344 mmol, 42.0 % prinosa) kao bela čvrsta supstanca i smeša izomera 2.8:1. ESI MS (M+H)+ = 212.0. HPLC pik tr= 0.55 minuta. HPLC uslovi: Metoda A.
Priprema 250B. etil 2-(4-(3-metil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-7-il)cikloheks-3-en-1-il)propanoata
[0635]
[0636] Smeša preparata 250A (0.0729 g, 0.435 mmol), etil 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)propanoata (0.138 g, 0.448 mmol), Na2CO3(0.184 g, 1.740 mmol), i Pd(Ph3P)4(0.025 g, 0.022 mmol) u dioksanu (3.5 mL) i vodi (0.5 mL) je zagrevana na 100 °C preko noći. Reakcija je ugašena vodom i razblažena sa EtOAc. Slojevi su odvojeni. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (3X). Organski slojevi su kombinovani, osušeni Na2SO4, filtrirani i koncentrovani dajući ostatak braon boje. Prečišćavanjem sirovog materijala hromatografijom na silika gelu primenom ISCO mašine (40 g kolona, 40 mL/min, 0-20% MeOH u CH2Cl2tokom 25 min, tr= 12, 16 min) dobijeno je jedinjenje iz naslova (79 mg, 0.253 mmol, 58 % prinosa) kao bezbojni ostatak i njegov regioizomer (21 mg, 0.067 mmol, 15.41 % prinosa) kao bezbojni ostatak. ESI MS (M+H)+ = 314.3. HPLC pik tr= 0.75 minuta. HPLC uslovi: Metoda A.
Priprema 250C. etil 2-(4-(3-metil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-7-il)cikloheksil) propanoata
[0637]
[0638] Rastvoru preparata 250B (0.0792 g, 0.253 mmol) u MeOH (1.264 ml) dodat je amonijum format (0.080 g, 1.264 mmol) zatim Pd/C (7.26 mg, 0.068 mmol). Reakcija je zagrevana na 70 °C tokom 1 h. Reakcija je filtrirana kroz CELITE® i filter pogača je oprana sa CH2Cl2. Filtrat je koncentrovan. Sirovi materijal je preuzet u EtOAc i opran sa zas. vod. rastvorom NaHCO3(2X). Organska faza je osušena Na2SO4, filtrirana i koncentrovana, dajući naslovljeno jedinjenje (59.7 mg, 0.180 mmol, 71% prinosa) kao zeleni ostatak. ESI MS (M+H)+ = 316.2. HPLC pik tr= 0.72 minuta. HPLC uslovi: Metoda A.
Primer 250: (+/-)-cis i trans-N-(4-hlorofenil)-2-(4-(3-metil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-7-il)cikloheksil)propanamid
[0639] Rastvoru 4-hloroanilina (0.097 g, 0.757 mmol) u THF (0.4 mL) na 0 °C dodat je rastvor izopropilmagnezijum hlorida (0.379 ml, 0.757 mmol). Dobijeni rastvor je zagrejan na sobnu temperaturu i mešan 5 minuta, zatim je u kapima dodat preparat 250C (0.0597 g, 0.189 mmol) u THF (0.6 mL). Reakcija je zagrevana na 70 °C tokom 2.5 h, zatim je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu. Reakcija je ugašena sa zas. vod. rastv. NH4Cl i razblažena sa EtOAc. Slojevi su odvojeni. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (3X). Kombinovane organske faze su osušene Na2SO4, filtrirane i koncentrovane da bi se dobio ostatak. Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, čestice 5 µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril: voda sa 10-mM amonijum acetatom; gradijent: 30-70% B tokom 20 minuta, zatim držanje 5-minuta pri 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem dajući jedinjenje iz naslova kao smešu 4 izomera (26.6 mg, 35%). ESI MS (M+H)+ = 397.3. HPLC pik tr= 1.775 minuta i 1.793 minuta. Čistoća = 99%. HPLC uslovi: Metoda B.
Primer 251
N-(4-hlorofenil)-2-(4-(3-metil-3H-imidazo[4,5-b]piridin-7-il)cikloheksil)propanamid, apsolutna i relativna stereohemija nisu potvrđene
[0640]
[0641] Približno 25.4 mg diastereomernog i racemskog Primera 250 je razloženo. Izomerna smeša je prečišćena preparativnom SFC pod sledećim uslovima: kolona: hiralna OZ-H, 25 x 3 cm ID, čestice 5 µm; mobilna faza A: 82/18 CO2/MeOH sa 0.1% DEA; talasna dužina detektora: 220 nm; protok: 100 mL/min. Frakcije ("Pik-1" tr= 11.910 min, "Pik-2" tr= 15.648 min, "Pik-3" tr= 16.927 min, "Pik-4" tr= 19.403; analitički uslovi: kolona: hiralna OZ-H, 250 x 4.6 mm ID, čestice 5µm; mobilna faza A: 80/20 CO2/MeOH sa 0.1% DEA; protok: 2.0 mL/min) sakupljeni su u MeOH sa 0.1% DEA. Procenjeno je da je stereoizomerna čistoća frakcija veća od 99% na osnovu prep-SFC hromatograma. Svaki diastereomer ili enantiomer je dalje prečišćen pomoću preparativne LC/MS:
Primer 250a, prvi eluirani izomer: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 × 200 mm, čestice 5µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: 30-60% B tokom 20 minuta, zatim 5 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem. Materijal je dalje prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, čestice 5µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: 35-60% B tokom 25 minuta, zatim 2 minuta drži se na 60% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da se dobije izomer 1 (3.1 mg, 4%). ESI MS (M+H)+ = 397.3. HPLC pik tr= 1.840 minuta. Ćistoća = 95%. HPLC uslovi: Metoda B. Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 250b, drugi eluirani izomer: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, čestice 5µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: 30-70% B tokom 20 minuta, zatim 5 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da se dobije izomer 2 (3.0 mg, 4%). ESI MS (M+H)+ = 397.3. HPLC pik tr= 1.804 minuta. Čistoća = 93%. HPLC uslovi: Metoda B. Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 250c, treći eluirani izomer: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, čestice 5µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: 30-70% B tokom 20 minuta, zatim 5 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da se dobije izomer 3 (3.2 mg, 4%). ESI MS (M+H)+ = 397.3. HPLC pik tr= 1.806 minuta. Čistoća = 96%. HPLC uslovi: Metoda B. Apsolutna stereohemija nije određena.
Primer 250d, četvrti eluirani izomer: Sirovi materijal je prečišćen preparativnom LC/MS pod sledećim uslovima: kolona: XBridge C18, 19 x 200 mm, čestice 5µm; mobilna faza A: 5:95 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; mobilna faza B: 95:5 acetonitril:voda sa 10 mM amonijum acetatom; gradijent: 30-70% B tokom 20 minuta, zatim 5 minuta drži se na 100% B; protok: 20 mL/min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod se kombinuju i osuše centrifugalnim isparavanjem da se dobije izomer 4 (3.0 mg, 4%). ESI MS (M+H)+ = 397.2. HPLC pik tr= 1.841 minuta. Čistoća = 94%. HPLC uslovi: Metoda B. Apsolutna stereohemija nije određena.
BIOLOŠKI PRIMERI
Primer 251
Procena aktivnosti inhibitora indolamin 2,3-dioksigenaze (IDO) testom zasnovanim na HeLa ćelijama
[0642] HeLa (ATCC® CCL-2) ćelije su dobijene iz ATCC i kultivisane u Dulbecco-ovoj modifikaciji Eagle-ovog medijuma, dopunjenoj sa 4.5 g/L glukoze, 4.5 g/L L-glutamina i 4.5 g/L natrijum piruvata (#10-013-CV, Corning), 2 mM L-alanil-L-glutamin dipeptida (#35050-061, Gibco), 100U/mL penicilina, 100µg/mL streptomicina (#SV30010, Hyclone) i 10% fetalnog goveđeg seruma (#SH30071.03 Hyclone). Ćelije su održavane u vlažnom inkubatoru na 37 °C u 5% CO2.
[0643] IDO aktivnost je procenjena kao funkcija proizvodnje kinurenina na sledeći način: HeLa ćelije su posejane u ploču za kulturu sa 96-bunarića sa gustinom od 5,000 ćelija/bunarić i ostavljene da se uravnoteže preko noći. Posle 24 sata, medijum je aspiriran i zamenjen medijumom koji sadrži IPNγ (#285-IF/CF, R&D Systems) u konačnoj koncentraciji od 25 ng/mL. Serijsko razblaženje svakog test jedinjenja je dodato ćelijama u ukupnoj zapremini od 200 µL medijuma za kulturu. Posle dodatnih 48 sati inkubacije, 170 µL supernatanta je prebačeno iz svakog bunarića u svežu ploču sa 96 bunarića. U svaki bunarić je dodato 12.1 µL 6.1N trihlorosirćetne kiseline (#T0699, Sigma-Aldrich) i mešano je, nakon čega je sledila inkubacija na 65 °C tokom 20 minuta da se hidrolizuje N-formilkinurenin, proizvod indoleamin 2,3-dioksigenaze, u kinurenin. Reakciona smeša je zatim centrifugirana 10 min na 500xg da se talog taloži.100 µL supernatanta je prebačeno iz svakog otvora u svežu ploču sa 96 bunarića. 100 µl 2% (m/v) pdimetilaminobenzaldehida (#15647-7, Sigma-Aldrich) u sirćetnoj kiselini (#A6283, Sigma-Aldrich) je dodato u svaki bunarić mešano i inkubirano na sobnoj temperaturi 20 minuta.
Koncentracije kinurenina određene su merenjem apsorbancije na 480nm i kalibracijom na osnovu L-kinurenin (#K8625, Sigma-Aldrich) standardne krive primenom čitača mikroploča SPECTRAMAX® M2e (Molecular Devices). Određen je procenat aktivnosti pri svakoj koncentraciji inhibitora i procenjene vrednosti IC50primenom nelinearne regresije.
[0644] Aktivnost jedinjenja koja su ovde opisana data je na Slikama 1A-1P, gde su potencijalni nivoi dati na sledeći način: (Potencijal: IDO IC50: A < 0.1 µM; B < 1 µM; C < 10 µM)
Primer 252
[0645] 1HEK293 ćelije su transfektovane pomoću ekspresionog vektora sisara na osnovu pCDNK koji sadrži humanu IDOl cDNK (NM 002164.2) elektroporacijom. Kultivisani su u medijumu (DMEM sa 10% FBS) koji sadrži 1 mg/ml G418 tokom dve nedelje. Klonovi HEK293 ćelija koje stabilno eksprimiraju humani IDOl protein su izabrani i prošireni za test inhibicije IDO.
[0646] Humane IDO1/HEK293 ćelije su posejane sa 10,000 ćelija po 50µL po bunariću sa RPMI/ medijum bez fenol crvene sadrži 10% FBS u pločici za kulturu tkiva sa 384-bunarića sa prozirnim dnom i crnim zidom (Matrix Technologies LLC) 100 nL određene koncentracije jedinjenja je zatim dodato u svaki bunarić pomoću ECHO sistema za rukovanje tečnošću. Ćelije su inkubirane 20 sati u inkubatoru na 37 °C sa 5% CO2.
[0647] Tretmani jedinjenjima zaustavljeni su dodavanjem trihlorosirćetne kiseline (Sigma-Aldrich) do krajnje koncentracije od 0.2%. Ćelijska ploča je dalje inkubirana na 50 °C tokom 30 minuta. Supernatant jednake zapremine (20µL) i 0.2% (m/v) Ehrlic-ovog reagensa (4-dimetilaminobenzaldehid, Sigma-Aldrich) u glacijalnoj sirćetnoj kiselini mešan je u novoj ploči sa 384 bunarića sa prozirnim dnom. Zatim je ova ploča inkubirana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Apsorbancija na 490 nm izmerena je na čitaču ploče Envision.
[0648] IC50vrednosti jedinjenja su izračunate primenom brojanja od 500 nM referentnog standardnog tretmana kao stoprocentne inhibicije, i brojanja bez jedinjenja ali od DMSO tretmana kao nula procenta inhibicije.
[0649] Jedinjenja sa IC50većim od 250 nM su prikazana sa (C), jedinjenja sa IC50manjim od 250 nM su prikazana sa (B) i ona sa IC50manjim od 50 nM su prikazana sa (A) u Tabeli X ispod.
Tabela X
Biološka aktivnost za primere testirane u biološkom testu opisanom u Primeru 252
Biološka aktivnost za primere testirane u biološkom testu opisanom u Primeru 252
[0650] Ovde su opisana određena tehnička rešenja predmetnog pronalaska, uključujući najbolji način za sprovođenje pronalaska koji je poznat pronalazačima. Čitanjem prethodno navedenog, opisa, varijacije otkrivena tehnička rešenja mogu postati očigledni pojedincima koji se bave ovom tehničkom oblasti, i očekuje se da oni koji su kvalifikovani u ovoj oblasti, mogu primeniti takve varijacije prema potrebi.

Claims (23)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (I):
    ili njegov stereoizomer, farmaceutski prihvatljiva so, hidrat ili solvat, pri čemu, Z je O; R<1>i R<2>su nezavisno vodonik, halogen, opciono supstituisan C1-C4haloalkil, opciono supstituisan C3-C6cikloalkil, opciono supstituisan 3- do 6-člani cikloheteroalkil, opciono supstituisan fenil, opciono supstituisan heteroaril, opciono supstituisan C1-C4alkil, opciono supstituisan C1-C4alkoksi, CN, SO2NH2, NHSO2CH3, NHSO2CF3, OCF3, SO2CH3, SO2CF3, ili CONH2, i kada R<1>i R<2>su na susednim temenima fenilnog prstena, oni mogu biti spojeni zajedno da bi formirali 5- ili 6-člani cikloheteroalkilni prsten koji ima jedan ili dva temena prstena nezavisno izabrana od O, N i S, pri čemu je pomenuti cikloheteroalkilni prsten opciono supstituisan sa jednim do tri člana izabrana od fluoro i C1-C3alkila; pri čemu J<1>je CH, N ili opciono C(R<2>) kada R<2>je vezan za teme prstena identifikovano kao J<1>; R<3>i R<3a>su nezavisno vodonik, opciono supstituisan C1-C6alkil, opciono supstituisan C2-C6alkenil, opciono supstituisan C2-C6alkinil, opciono supstituisan C1-C6haloalkil, opciono supstituisan C3-C6cikloalkil-C1-C4alkil, opciono supstituisan aril-Ci-C6alkil, fluor, OH, CN, CO2H, C(O)NH2, N(R<5>)2, opciono supstituisan -O-C1-C6alkyl,-(CR<5>R<5>)m-OH, -(CR<5>R<5>)m-CO2H, -(CR<5>R<5>)m-C(O)NH2, -(CR<5>R<5>)m-C(O)NHR<5>,-(CR<5>R<5>)mN(R<5>)2, -NH(CR<5>R<5>)mCO2H ili -NH(CR<5>R<5>)m-C(O)NH2; svaki R<5>je nezavisno H, F, OH, ili opciono supstituisan C1-C6alkil; svaki R<5a>je nezavisno H, ili opciono supstituisan C1-C6alkil; R<6>je H, OH, F, opciono supstituisan C1-C6alkil, opciono supstituisan -O-C1-C6alkil, ili -N(R<5a>)2; svaki m je nezavisno 1, 2, ili 3 i R<11>i R<12>su nezavisno vodonik, halogen, opciono supstituisan C1-C4haloalkil, opciono supstituisan C3-C6cikloalkil, opciono supstituisan 3- do 6-člani cikloheteroalkil, opciono supstituisan fenil, opciono supstituisan heteroaril, opciono supstituisan C1-C4alkil, opciono supstituisan C1-C4alkoksi, CN, SO2NH2, NHSO2CH3, NHSO2CF3, OCF3, SO2CH3, SO2CF3, ili CONH2, i kada R<1>i R<2>su na susednim temenima fenilnog prstena, oni mogu biti spojeni zajedno da bi formirali 5- ili 6-člani cikloheteroalkilni prsten koji ima jedan ili dva temena prstena nezavisno izabrana od O, N i S, pri čemu je pomenuti cikloheteroalkilni prsten opciono supstituisan sa jednim do tri člana izabrana od fluoro i C1-C3alkila.
  2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, koje ima formulu
    pri čemu R<6>je H, i R<11>i R<12>su svaki nezavisno izabrani iz grupe koja se sastoji od halogena, CN i opciono supstituisanog C1-C4alkila; ili njegov stereoizomer, farmaceutski prihvatljiva so, hidrat ili solvat.
  3. 3. Jedinjenje prema patentmom zahtevu 1, koje je izabrano od:
    pri čemu
    ili
    ili stereoizomer ili farmaceutski prihvatljiva so, hidrat ili solvat istog.
  4. 4. Jedinjenje, koje je izabrano od:
    ili
    ili stereoizomer ili farmaceutski prihvatljiva so, hidrat ili solvat istog.
  5. 5. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 3 koje je (R)-N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)propanamid
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  6. 6. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 3 koje je (R)-N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)propanamid
    ili njegov stereoizomer ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  7. 7. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 5 koje je farmaceutski prihvatljiva so (R)-N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)propanamida.
  8. 8. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 7, ili njegov stereoizomer, farmaceutski prihvatljivu so, hidrat ili solvat i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens.
  9. 9. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 8, pri čemu je jedinjenje (R)-N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)propanamid
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  10. 10. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 8, pri čemu je jedinjenje farmaceutski prihvatljiva so (R)-N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)propanamida.
  11. 11. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 7, ili njegov stereoizomer, farmaceutski prihvatljiva so, hidrat ili solvat, za primenu u postupku lečenja bolesti, poremećaja ili stanja, posredovanog barem delom pomoću IDO.
  12. 12. Jedinjenje za primenu prema patentnom zahtevu 11, pri čemu je jedinjenje (R)-N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)propanamid
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  13. 13. Jedinjenje za primenu prema patentnom zahtevu 11, pri čemu je jedinjenje farmaceutski prihvatljiva so (R)-N-(4-hlorofenil)-2-(cis-4-(6-fluorohinolin-4-il)cikloheksil)propanamida.
  14. 14. Jedinjenje ili njegov stereoizomer, farmaceutski prihvatljiva so, hidrat ili solvat za primenu prema bilo kom od patentnih zahteva 11 do 13, pri čemu se pomenuto jedinjenje administrira u količini efikasnoj da preokrene ili zaustavi progresiju IDO-posredovane imunosupresije.
  15. 15. Jedinjenje ili njegov stereoizomer, farmaceutski prihvatljiva so, hidrat ili solvat za primenu prema bilo kom od patentnih zahteva 11 do 14, pri čemu je navedena bolest, poremećaj ili stanje kancer, opciono pri čemu pomenuti kancer je kancer prostate, debelog creva, rektuma, pankreasa, grlića materice, želuca, endometrijuma, mozga, jetre, bešike, jajnika, testisa, glave, vrata, kože (uključujući melanom i bazalni karcinom), mezotelne obloge, belih krvnih zrnaca (uključujući limfom i leukemiju), jednjaka, dojke, mišića, vezivnog tkiva, pluća (uključujući sitnoćelijski karcinom pluća i nesitnoćelijski karcinom), nadbubrežne žlezde, štitne žlezde, bubrega ili kosti; ili je glioblastom, mezoteliom, karcinom bubrežnih ćelija, gastrični karcinom, sarkom (uključujući Kaposijev sarkom), horiokarcinom, kožni bazocelularni karcinom ili seminom testisa; ili opciono pri čemu pomenuti kancer je izabran iz grupe koja se sastoji od melanoma, kancera debelog creva, kancera pankreasa, kancera dojke, kancera prostate, kancera pluća, kancera grlića materice, leukemije, sarkoma, kancera bubrega, tumora mozga, limfoma, kancera jajnika i Kaposijevog sarkoma.
  16. 16. Jedinjenje ili njegov stereoizomer, farmaceutski prihvatljiva so, hidrat ili solvat za primenu prema patentnom zahtevu 15, pri čemu pomenuti kancer je melanom, kancer pluća, kancer glave, kancer vrata, kancer bubrežnih ćelija, ili kancer bešike.
  17. 17. Kombinacija koja sadrži jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 7, ili njegov stereoizomer, farmaceutski prihvatljiva so, hidrat ili solvat, i najmanje jedno dodatno terapijsko sredstvo.
  18. 18. Kombinacija prema patentnom zahtevu 17, pri čemu pomenuto dodatno terapijsko sredstvo je imuno-onkološko sredstvo.
  19. 19. Kombinacija prema patentnom zahtevu 18, pri čemu pomenuto imuno-onkološko sredstvo je izabrano od CTLA-4 antagonista, PD-1 antagonista, PD-L1 antagonista, LAG-3 antagonista, CD137 agonista, GITR agonista, OX40 agonista, OX40L antagonista, CD40 agonista ili antagonista, CD27 agonista, ili B7H3 antitela.
  20. 20. Kombinacija prema patentnom zahtevu 18, pri čemu dodatno terapijsko sredstvo je ipilimumab.
  21. 21. Kombinacija prema patentnom zahtevu 18, pri čemu dodatno terapijsko sredstvo je nivolumab.
  22. 22. Kombinacija prema patentnom zahtevu 18, pri čemu dodatno terapijsko sredstvo je BMS-986016, BMS-936559, urelumab, BMS-986153, ili BMS-986156.
  23. 23. Kombinacija prema patentnom zahtevu 18, pri čemu dodatno terapijsko sredstvo je tremelimumab, pembrolizumab, MEDI-0680, pidilizumab, MPDL3280A, durvalumab, MSB0010718C, IMP-731, IMP-321, PF-05082566, TRX-518, MK-4166, MEDI-6383, MEDI- 6469, RG-7888, lukatumumab, dacetuzumab, varlilumab ili MGA271.
RS20210198A 2014-11-05 2015-11-05 Imunoregulatorna sredstva RS61457B1 (sr)

Applications Claiming Priority (4)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201462075671P 2014-11-05 2014-11-05
US201462098022P 2014-12-30 2014-12-30
PCT/US2015/059311 WO2016073770A1 (en) 2014-11-05 2015-11-05 Immunoregulatory agents
EP15857812.0A EP3215153B1 (en) 2014-11-05 2015-11-05 Immunoregulatory agents

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS61457B1 true RS61457B1 (sr) 2021-03-31

Family

ID=55909825

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20210198A RS61457B1 (sr) 2014-11-05 2015-11-05 Imunoregulatorna sredstva

Country Status (32)

Country Link
US (4) US20180282281A1 (sr)
EP (2) EP3215153B1 (sr)
JP (1) JP6735274B2 (sr)
KR (1) KR102514378B1 (sr)
CN (1) CN107427499B (sr)
AU (1) AU2015342940B2 (sr)
CA (1) CA2964290C (sr)
CL (1) CL2017001124A1 (sr)
CO (1) CO2017005452A2 (sr)
CY (1) CY1123961T1 (sr)
DK (1) DK3215153T3 (sr)
EA (1) EA037286B1 (sr)
ES (1) ES2848978T3 (sr)
HR (1) HRP20210291T1 (sr)
HU (1) HUE054015T2 (sr)
IL (1) IL252009B (sr)
LT (1) LT3215153T (sr)
MX (1) MX385822B (sr)
MY (1) MY187510A (sr)
PE (1) PE20171329A1 (sr)
PH (1) PH12017500629B1 (sr)
PL (1) PL3215153T3 (sr)
PT (1) PT3215153T (sr)
RS (1) RS61457B1 (sr)
SG (1) SG11201702811RA (sr)
SI (1) SI3215153T1 (sr)
SM (1) SMT202100163T1 (sr)
TN (1) TN2017000164A1 (sr)
TW (1) TWI740808B (sr)
UY (1) UY36390A (sr)
WO (1) WO2016073770A1 (sr)
ZA (1) ZA201702724B (sr)

Families Citing this family (125)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
HRP20160305T1 (hr) 2010-10-26 2016-07-01 Mars, Incorporated Borati kao inhibitori arginaze
GB201311888D0 (en) 2013-07-03 2013-08-14 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Novel compounds
GB201311891D0 (en) 2013-07-03 2013-08-14 Glaxosmithkline Ip Dev Ltd Novel compound
US20180228907A1 (en) 2014-04-14 2018-08-16 Arvinas, Inc. Cereblon ligands and bifunctional compounds comprising the same
RU2016149812A (ru) 2014-06-06 2018-07-17 Флексус Байосайенсиз, Инк. Иммунорегулирующие средства
UY36390A (es) * 2014-11-05 2016-06-01 Flexus Biosciences Inc Compuestos moduladores de la enzima indolamina 2,3-dioxigenasa (ido), sus métodos de síntesis y composiciones farmacéuticas que los contienen
UY36391A (es) 2014-11-05 2016-06-01 Flexus Biosciences Inc Compuestos moduladores de la enzima indolamina 2,3-dioxigenasa (ido1), sus métodos de síntesis y composiciones farmacèuticas que las contienen
BR112017008809A2 (pt) 2014-11-05 2017-12-19 Flexus Biosciences Inc agentes imunorreguladores
US10273281B2 (en) * 2015-11-02 2019-04-30 Five Prime Therapeutics, Inc. CD80 extracellular domain polypeptides and their use in cancer treatment
PT3889145T (pt) 2015-12-17 2024-04-02 Merck Patent Gmbh 8-ciano-5-piperidino-quinolinas como antagonistas de tlr7/8 e suas utilizações para tratamento de distúrbios imunitários
WO2017192813A1 (en) * 2016-05-04 2017-11-09 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
WO2017192844A1 (en) 2016-05-04 2017-11-09 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
WO2017192840A1 (en) 2016-05-04 2017-11-09 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
EP3452450A1 (en) 2016-05-04 2019-03-13 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
EP3487516A1 (en) * 2016-07-19 2019-05-29 Bristol-Myers Squibb Company Radioligands for imaging the ido1 enzyme
CN107674029A (zh) * 2016-08-02 2018-02-09 上海迪诺医药科技有限公司 多环化合物、其药物组合物及应用
CN107674013B (zh) * 2016-08-02 2022-05-24 上海迪诺医药科技有限公司 多环化合物、其制备方法、药物组合物及应用
EP4198031A1 (en) * 2016-08-08 2023-06-21 Merck Patent GmbH Tlr7/8 antagonists and uses thereof
US11351164B2 (en) 2016-08-26 2022-06-07 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
WO2018045150A1 (en) 2016-09-02 2018-03-08 Gilead Sciences, Inc. 4,6-diamino-pyrido[3,2-d]pyrimidine derivaties as toll like receptor modulators
AU2017318601B2 (en) 2016-09-02 2020-09-03 Gilead Sciences, Inc. Toll like receptor modulator compounds
US10882856B2 (en) 2016-09-24 2021-01-05 Beigene, Ltd. 5 or 8-substituted imidazo [1,5-a] pyridines as selective inhibitors of indoleamine and/or tryptophane 2,3-dioxygenases
JP7066696B2 (ja) 2016-10-11 2022-05-13 アジェナス インコーポレイテッド 抗ｌａｇ－３抗体及びその使用方法
KR20230010826A (ko) 2016-10-14 2023-01-19 프리시젼 바이오사이언시스 인코포레이티드 B형 간염 바이러스 게놈 내의 인식 서열에 대해 특이적인 조작된 메가뉴클레아제
CN114989205A (zh) 2016-12-22 2022-09-02 卡里塞拉生物科学股份公司 用于抑制精氨酸酶活性的组合物和方法
CA3047002A1 (en) * 2017-01-17 2018-07-26 Board Of Regents, The University Of Texas System Compounds useful as inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and/or tryptophan dioxygenase
TW202510891A (zh) 2017-01-31 2025-03-16 美商基利科學股份有限公司 替諾福韋埃拉酚胺(tenofovir alafenamide)之晶型
BR102018007822A2 (pt) 2017-04-20 2018-11-06 Gilead Sciences, Inc. composto, métodos para inibir pd-1, pd-l1 e/ou interação de pd-1/pd-l1 e para tratamento de câncer, composição farmacêutica, e, kit para tratamento de ou prevenção de câncer ou uma doença ou condição
US11066392B2 (en) 2017-05-12 2021-07-20 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
JP7315483B2 (ja) * 2017-06-30 2023-07-26 ブリストル－マイヤーズ スクイブ カンパニー 置換キノリニルシクロヘキシルプロパンアミド化合物および改良されたその製造方法
EP3644993B1 (en) * 2017-06-30 2023-08-02 Bristol-Myers Squibb Company Amorphous and crystalline forms of ido inhibitors
TW201920202A (zh) 2017-08-17 2019-06-01 瑞士商愛杜西亞製藥有限公司 吲哚胺2,3-二氧酶及/或色胺酸2,3-二氧酶的抑制劑
US11266640B2 (en) * 2017-09-20 2022-03-08 Hangzhou Innogate Pharma Co., Ltd. Polycyclic compound acting as IDO inhibitor and/or IDO-HDAC dual inhibitor
US11351163B2 (en) 2017-09-29 2022-06-07 Bristol-Myers Squibb Company Compositions and methods of treating cancer
WO2019074824A1 (en) 2017-10-09 2019-04-18 Bristol-Myers Squibb Company INDOLEAMINE 2,3-DIOXYGENASE INHIBITORS AND METHODS OF USE
WO2019074822A1 (en) 2017-10-09 2019-04-18 Bristol-Myers Squibb Company INDOLEAMINE 2,3-DIOXYGENASE INHIBITORS AND METHODS OF USE
WO2019078968A2 (en) 2017-10-18 2019-04-25 Angex Pharmaceutical, Inc. CYCLIC COMPOUNDS AS IMMUNOMODULATORS
BR112020008490A2 (pt) * 2017-10-30 2020-10-06 Glaxosmithkline Intellectual Property Development Limited moduladores de indoleamina 2,3-dioxigenase
EP3720843A1 (en) * 2017-12-05 2020-10-14 GlaxoSmithKline Intellectual Property Development Limited Modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase
CN109928921A (zh) * 2017-12-18 2019-06-25 成都华健未来科技有限公司 Ido抑制剂
CN109928922A (zh) * 2017-12-18 2019-06-25 成都华健未来科技有限公司 一类环己烷类化合物
CN109928923A (zh) * 2017-12-18 2019-06-25 成都华健未来科技有限公司 一类作为ido抑制剂化合物
CN109928924A (zh) * 2017-12-18 2019-06-25 成都华健未来科技有限公司 一类作为ido抑制剂
CN109928916A (zh) * 2017-12-18 2019-06-25 成都华健未来科技有限公司 一类作为ido抑制剂的喹啉-4-基环己烷类化合物
WO2019123339A1 (en) 2017-12-20 2019-06-27 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'3' cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the sting adaptor protein
EP3728283B1 (en) 2017-12-20 2023-11-22 Institute of Organic Chemistry and Biochemistry ASCR, V.V.I. 3'3' cyclic dinucleotides with phosphonate bond activating the sting adaptor protein
CN109956937A (zh) * 2017-12-22 2019-07-02 上海海雁医药科技有限公司 N-(2-环己基乙基)甲酰胺衍生物、其制法与医药上的用途
CN109956929B (zh) * 2017-12-22 2023-09-19 上海迪诺医药科技有限公司 杂环衍生物、其制备方法、药物组合物及应用
CN109575022B (zh) * 2017-12-25 2021-09-21 成都海博锐药业有限公司 一种化合物及其用途
CN109574988B (zh) * 2017-12-25 2022-01-25 成都海博锐药业有限公司 一种化合物及其用途
CN111471010B (zh) * 2017-12-29 2021-09-28 杭州阿诺生物医药科技有限公司 吲哚胺-2,3-双加氧酶(ido)抑制剂的制备方法
WO2019129114A1 (zh) * 2017-12-29 2019-07-04 杭州阿诺生物医药科技有限公司 吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂以及它们在医学上的应用
US11447449B2 (en) 2018-01-05 2022-09-20 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
ES2907282T3 (es) 2018-01-15 2022-04-22 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Inhibidores de la indoleamina 2,3-dioxigenasa y/o de la triptófano dioxigenasa
WO2019141095A1 (zh) * 2018-01-19 2019-07-25 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 脒类和胍类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
CN110092750B (zh) 2018-01-29 2023-07-21 北京诺诚健华医药科技有限公司 五氟硫烷基取代的酰胺类化合物、其制备方法及其在医药学上的应用
WO2019154380A1 (zh) * 2018-02-11 2019-08-15 南京明德新药研发股份有限公司 犬尿氨酸通路抑制剂
CR20200347A (es) 2018-02-13 2020-09-23 Gilead Sciences Inc Inhibidores pd-1/pd-l1
JP7050165B2 (ja) 2018-02-26 2022-04-07 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド Ｈｂｖ複製阻害剤としての置換ピロリジン化合物
EP3762379A1 (en) 2018-03-07 2021-01-13 Bayer Aktiengesellschaft Identification and use of erk5 inhibitors
CN117185987A (zh) * 2018-03-19 2023-12-08 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 脒类和胍类衍生物、其制备方法及其在医药上的应用
US10870691B2 (en) 2018-04-05 2020-12-22 Gilead Sciences, Inc. Antibodies and fragments thereof that bind hepatitis B virus protein X
TWI818007B (zh) 2018-04-06 2023-10-11 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 2'3'-環二核苷酸
TWI833744B (zh) 2018-04-06 2024-03-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 3'3'-環二核苷酸
TW202005654A (zh) 2018-04-06 2020-02-01 捷克科學院有機化學與生物化學研究所 ２，２，─環二核苷酸
CN110357813A (zh) * 2018-04-09 2019-10-22 信达生物制药(苏州)有限公司 一种新型吲哚胺2,3-双加氧酶抑制剂及其制备方法和用途
US11142750B2 (en) 2018-04-12 2021-10-12 Precision Biosciences, Inc. Optimized engineered meganucleases having specificity for a recognition sequence in the Hepatitis B virus genome
JP2021522211A (ja) * 2018-04-16 2021-08-30 アリーズ セラピューティクス， インコーポレイテッド Ｅｐ４阻害剤およびその使用
TWI712412B (zh) 2018-04-19 2020-12-11 美商基利科學股份有限公司 Pd‐1/pd‐l1抑制劑
US20190359645A1 (en) 2018-05-03 2019-11-28 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 2'3'-cyclic dinucleotides comprising carbocyclic nucleotide
CN110526898A (zh) * 2018-05-25 2019-12-03 北京诺诚健华医药科技有限公司 3-吲唑啉酮类化合物、其制备方法及其在医药学上的应用
CN110105275B (zh) * 2018-05-28 2020-12-29 上海海雁医药科技有限公司 酰胺类衍生物、其制法与医药上的用途
US11267786B2 (en) * 2018-06-01 2022-03-08 Merck Sharp & Dohme Corp. [3.3.1] bicyclo compounds as indoleamine 2,3-dioxygenase inhibitors
WO2020000236A1 (zh) * 2018-06-27 2020-01-02 深圳仁泰医药科技有限公司 (r)-n-(4-氯苯基)-2-(顺-4-(6-氟喹啉-4-基)环己基)丙酰胺的晶型
SG11202012425QA (en) 2018-07-13 2021-01-28 Gilead Sciences Inc Pd-1/pd-l1 inhibitors
WO2020018670A1 (en) 2018-07-17 2020-01-23 Board Of Regents, The University Of Texas System Compounds useful as inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and/or tryptophan dioxygenase
US12059420B2 (en) 2018-07-23 2024-08-13 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
WO2020023356A1 (en) 2018-07-23 2020-01-30 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
WO2020028097A1 (en) 2018-08-01 2020-02-06 Gilead Sciences, Inc. Solid forms of (r)-11-(methoxymethyl)-12-(3-methoxypropoxy)-3,3-dimethyl-8-0x0-2,3,8,13b-tetrahydro-1h-pyrido[2,1-a]pyrrolo[1,2-c] phthalazine-7-c arboxylic acid
US11253525B2 (en) 2018-08-29 2022-02-22 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
US10959986B2 (en) 2018-08-29 2021-03-30 Bristol-Myers Squibb Company Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and methods of their use
CN116574105B (zh) * 2018-09-27 2025-10-10 深圳微芯生物科技股份有限公司 具有吲哚胺-2,3-双加氧酶抑制活性的喹啉衍生物
WO2020086556A1 (en) 2018-10-24 2020-04-30 Gilead Sciences, Inc. Pd-1/pd-l1 inhibitors
US11203591B2 (en) 2018-10-31 2021-12-21 Gilead Sciences, Inc. Substituted 6-azabenzimidazole compounds
WO2020092528A1 (en) 2018-10-31 2020-05-07 Gilead Sciences, Inc. Substituted 6-azabenzimidazole compounds having hpk1 inhibitory activity
WO2020117627A1 (en) 2018-12-03 2020-06-11 Bristol-Myers Squibb Company Anti-ido antibody and uses thereof
WO2020147582A1 (zh) * 2019-01-16 2020-07-23 上海海雁医药科技有限公司 环烷基取代的酰胺类衍生物、其制法与医药上的用途
WO2020178768A1 (en) 2019-03-07 2020-09-10 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3'3'-cyclic dinucleotide analogue comprising a cyclopentanyl modified nucleotide as sting modulator
EP3934757B1 (en) 2019-03-07 2023-02-22 Institute of Organic Chemistry and Biochemistry ASCR, V.V.I. 2'3'-cyclic dinucleotides and prodrugs thereof
WO2020178770A1 (en) 2019-03-07 2020-09-10 Institute Of Organic Chemistry And Biochemistry Ascr, V.V.I. 3'3'-cyclic dinucleotides and prodrugs thereof
TW202212339A (zh) 2019-04-17 2022-04-01 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
TWI751516B (zh) 2019-04-17 2022-01-01 美商基利科學股份有限公司 類鐸受體調節劑之固體形式
EP3972695A1 (en) 2019-05-23 2022-03-30 Gilead Sciences, Inc. Substituted exo-methylene-oxindoles which are hpk1/map4k1 inhibitors
WO2020263830A1 (en) 2019-06-25 2020-12-30 Gilead Sciences, Inc. Flt3l-fc fusion proteins and methods of use
EP3997083A1 (en) 2019-07-11 2022-05-18 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase and/or tryptophan 2,3-dioxygenase
US20220257619A1 (en) 2019-07-18 2022-08-18 Gilead Sciences, Inc. Long-acting formulations of tenofovir alafenamide
WO2021034804A1 (en) 2019-08-19 2021-02-25 Gilead Sciences, Inc. Pharmaceutical formulations of tenofovir alafenamide
WO2021050653A1 (en) 2019-09-11 2021-03-18 Bristol-Myers Squibb Company Pharmaceutical formulations of indoleamine 2, 3-dioxygenase inhibitors
KR20220066950A (ko) 2019-09-25 2022-05-24 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 암 요법을 위한 복합 바이오마커
DK4037708T3 (da) 2019-09-30 2024-09-30 Gilead Sciences Inc HBV-vacciner og fremgangsmåder til at behandle HBV
US20220403006A1 (en) * 2019-11-12 2022-12-22 Edifice Health, Inc. A Precision Medicine Method for Immunotherapy
BR112022009944A2 (pt) 2019-11-26 2022-08-09 Bristol Myers Squibb Co Sais / cocristais de (r)-n-(4-clorofenil)-2-((1s,4s)-4-(6-fluoroquinolin-4-il)ciclo-hexil)propanamida
DK4069729T3 (da) 2019-12-06 2025-04-07 Prec Biosciences Inc Optimerede, modificerede meganukleaser med specificitet for en genkendelsessekvens i hepatitis b-virusgenomet
WO2021188959A1 (en) 2020-03-20 2021-09-23 Gilead Sciences, Inc. Prodrugs of 4'-c-substituted-2-halo-2'-deoxyadenosine nucleosides and methods of making and using the same
EP4192474B1 (en) 2020-08-07 2025-09-10 Gilead Sciences, Inc. Prodrugs of phosphonamide nucleotide analogues and their pharmaceutical use
TW202406932A (zh) 2020-10-22 2024-02-16 美商基利科學股份有限公司 介白素2-Fc融合蛋白及使用方法
MX2023010371A (es) 2021-03-05 2024-02-12 Univ Basel Composiciones para el tratamiento de enfermedades o condiciones asociadas al veb.
EP4052705A1 (en) 2021-03-05 2022-09-07 Universität Basel Vizerektorat Forschung Compositions for the treatment of ebv associated diseases or conditions
JP2024511617A (ja) * 2021-03-24 2024-03-14 ユーハン・コーポレイション 新規なインドールアミン－２，３－ジオキシゲナーゼ阻害剤、その製造方法、およびそれを含む医薬組成物
WO2022241134A1 (en) 2021-05-13 2022-11-17 Gilead Sciences, Inc. COMBINATION OF A TLR8 MODULATING COMPOUND AND ANTI-HBV siRNA THERAPEUTICS
JP7686091B2 (ja) 2021-06-23 2025-05-30 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド ジアシルグリセロールキナーゼ調節化合物
JP7651018B2 (ja) 2021-06-23 2025-03-25 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド ジアシルグリセロールキナーゼ調節化合物
MX2023014762A (es) 2021-06-23 2024-01-15 Gilead Sciences Inc Compuestos moduladores de diacilglicerol quinasa.
AU2022299051B2 (en) 2021-06-23 2025-03-13 Gilead Sciences, Inc. Diacylglyercol kinase modulating compounds
WO2023090850A1 (en) * 2021-11-17 2023-05-25 Yuhan Corporation Synergic combination of 2,3-dioxygenase inhibitor and immune checkpoint inhibitor for the treatment of cancer
WO2023122723A1 (en) 2021-12-23 2023-06-29 The Broad Institute, Inc. Panels and methods for diagnosing and treating lung cancer
CN116925080B (zh) * 2022-03-29 2025-12-12 杭州健崃生物科技有限公司 作为Akt蛋白激酶抑制剂的化合物及其制备方法和用途
WO2024145315A1 (en) * 2022-12-27 2024-07-04 Northwestern University Targeted protein degraders of indoleamine 2,3-dioxygenase 1 (ido1)
WO2025066935A1 (en) * 2023-09-28 2025-04-03 Hepaitech (Beijing) Biopharma Technology Co., Ltd. Compounds, compositions and methods thereof
WO2025222048A1 (en) * 2024-04-17 2025-10-23 Board Of Trustees Of Michigan State University Therapeutics for the treatment of non-tubercular mycobacterial or tuberculosis infections
WO2025235833A1 (en) * 2024-05-10 2025-11-13 Eli Lilly And Company Rxfp1 receptor agonists
WO2025240244A1 (en) 2024-05-13 2025-11-20 Gilead Sciences, Inc. Combination therapies comprising bulevirtide and lonafarnib for use in the treatment of hepatitis d virus infection
WO2025240246A1 (en) 2024-05-13 2025-11-20 Gilead Sciences, Inc. Combination therapies with ribavirin
WO2025240243A1 (en) 2024-05-13 2025-11-20 Gilead Sciences, Inc. Combination therapies with bulevirtide and an inhibitory nucleic acid targeting hepatitis b virus
WO2025240242A1 (en) 2024-05-13 2025-11-20 Gilead Sciences, Inc. Combination therapies with ribavirin

Family Cites Families (98)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
MX9201991A (es) * 1991-05-02 1992-11-01 Jonh Wyeth & Brother Limited Derivados de piperazina y procedimiento para su preparacion.
EP0582164B1 (en) 1992-07-31 1998-12-23 Bristol-Myers Squibb Company Adenosine re-uptake inhibiting derivatives of diphenyl oxazoles, thiazoles and imidazoles
AU666040B2 (en) 1992-10-28 1996-01-25 Bayer Aktiengesellschaft Substituted 1-H-3-aryl-pyrrolidine-2,4-dione derivatives
DE4239151A1 (de) 1992-11-20 1994-05-26 Thomae Gmbh Dr K N,N-Disubstituierte Arylcycloalkylamine, deren Salze, diese Verbindungen enthaltende Arzneimittel und deren Verwendung sowie Verfahren zu ihrer Herstellung
GB9411099D0 (en) 1994-06-03 1994-07-27 Wyeth John & Brother Ltd Piperazine derivatives
DE19615232A1 (de) 1996-04-18 1997-10-23 Merck Patent Gmbh Neue Carbamoylderivate und deren Verwendung als 5-HT ¶1¶¶A¶-Antagonisten
US6451840B1 (en) 1997-12-05 2002-09-17 Medical College Of Georgia Research Institute, Inc. Regulation of T cell-mediated immunity by tryptophan
DE19756036A1 (de) * 1997-12-17 1999-06-24 Merck Patent Gmbh Amid- und Harnstoffderivate
CN1307576A (zh) 1998-04-29 2001-08-08 美国家用产品公司 5－羟色胺能药物
US6632836B1 (en) 1998-10-30 2003-10-14 Merck & Co., Inc. Carbocyclic potassium channel inhibitors
US6100279A (en) 1998-11-05 2000-08-08 Schering Corporation Imidazoylalkyl substituted with a five, six or seven membered heterocyclic ring containing one nitrogen atom
CO5150225A1 (es) 1999-03-19 2002-04-29 Merck Sharp & Dohme Derivados del tetrahidropirano y su uso como agentes terapeuticos
JP2003509428A (ja) 1999-09-17 2003-03-11 アボツト・ゲー・エム・ベー・ハー・ウント・コンパニー・カーゲー 治療薬としてのピラゾロピリミジン
WO2001046199A1 (en) * 1999-12-22 2001-06-28 Eli Lilly And Company Methods and compounds for inhibiting mrp1
SE9904738D0 (sv) * 1999-12-22 1999-12-22 Astra Pharma Prod Novel compounds
US6677336B2 (en) 2000-02-22 2004-01-13 Cv Therapeutics, Inc. Substituted piperazine compounds
JP2003535073A (ja) 2000-06-01 2003-11-25 ワーナー−ランバート・カンパニー、リミテッド、ライアビリティ、カンパニー サブタイプ選択性ｎｍｄａレセプター拮抗物質としてのシクロヘキシルアミン誘導体
BR0114059A (pt) 2000-09-21 2003-07-01 Pfizer Prod Inc Derivados de resorcinol
CA2453383C (en) 2001-07-24 2010-04-06 Richter Gedeon Vegyeszeti Gyar Rt Piperidine derivatives as nmda receptor antagonists
US20040029887A1 (en) 2002-05-23 2004-02-12 Bhatia Pramila A. Acetamides and benzamides that are useful in treating sexual dysfunction
US7645771B2 (en) 2002-12-13 2010-01-12 Smithkline Beecham Corp. CCR5 antagonists as therapeutic agents
US7714139B2 (en) 2003-03-27 2010-05-11 Lankenau Institute For Medcial Research IDO inhibitors and methods of use
US7598287B2 (en) 2003-04-01 2009-10-06 Medical College Of Georgia Research Institute, Inc. Use of inhibitors of indoleamine-2,3-dioxygenase in combination with other therapeutic modalities
JP2006522744A (ja) * 2003-04-11 2006-10-05 ノボ　ノルディスク　アクティーゼルスカブ グルココルチコイド受容体アゴニスト療法に伴う副作用を最小化するための、１１β−ヒドロキシステロイドデヒドロゲナーゼ１型阻害剤およびグルココルチコイド受容体アゴニストを使用する併用療法
DE10337184A1 (de) * 2003-08-13 2005-03-10 Gruenenthal Gmbh Substituierte 3-Pyrrolidin-Indol-Derivate
WO2005025498A2 (en) 2003-09-08 2005-03-24 Corus Pharma Substituted acetanilides and benzamides for the treatment of asthma and pulmonary inflammation
PE20050948A1 (es) 2003-09-09 2005-12-16 Japan Tobacco Inc Compuestos de carbamoil-amina como inhibidores de la dipeptidil peptidasa iv
WO2005080317A2 (en) 2004-02-11 2005-09-01 Pfizer Japan, Inc. Therapeutic amide derivatives
DE102004023507A1 (de) 2004-05-10 2005-12-01 Grünenthal GmbH Substituierte Cyclohexylessigsäure-Derivate
DE102004039789A1 (de) 2004-08-16 2006-03-02 Sanofi-Aventis Deutschland Gmbh Arylsubstituierte polycyclische Amine, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Arzneimittel
TWI380996B (zh) 2004-09-17 2013-01-01 Hoffmann La Roche 抗ｏｘ４０ｌ抗體
PT2343320T (pt) 2005-03-25 2018-01-23 Gitr Inc Anticorpos anti-gitr e as suas utilizações
PL1879573T3 (pl) 2005-05-10 2013-05-31 Incyte Holdings Corp Modulatory 2,3-dioksygenazy indoloaminy i sposoby ich zastosowania
US8071768B2 (en) * 2005-06-10 2011-12-06 Janssen Pharmaceutica, N.V. Alkylquinoline and alkylquinazoline kinase modulators
PT1907424E (pt) 2005-07-01 2015-10-09 Squibb & Sons Llc Anticorpos monoclonais humanos para o ligando 1 de morte programada (pd-l1)
JP5301999B2 (ja) * 2005-10-31 2013-09-25 メルク・シャープ・アンド・ドーム・コーポレーション Ｃｅｔｐ阻害薬
ES2365869T3 (es) 2005-11-17 2011-10-11 OSI Pharmaceuticals, LLC COMPUESTOS BICÍCLICOS FUSIONADOS INHIBIDORES DE LA mTOR.
WO2007063839A1 (ja) 2005-11-30 2007-06-07 Shionogi & Co., Ltd. シクロヘキサン誘導体
BRPI0620362A2 (pt) 2005-12-22 2012-07-03 Astrazeneca Ab composto ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, uso do mesmo, métodos para produzir um efeito inibidor de csf-1r quinase em um animal de sangue quente, para produzir um efeito anti-cáncer em um animal de sangue quente e para tratar doença, e, composição farmacêutica
DE102005061428A1 (de) 2005-12-22 2007-08-16 Grünenthal GmbH Substituierte Cyclohexylmethyl-Derivate
US8088761B2 (en) * 2005-12-22 2012-01-03 Cancer Research Technology Limited Enzyme inhibitors
WO2007076055A2 (en) * 2005-12-22 2007-07-05 Entremed, Inc. Compositions and methods comprising proteinase activated receptor antagonists
WO2007095050A2 (en) 2006-02-09 2007-08-23 Incyte Corporation N-hydroxyguanidines as modulators of indoleamine 2,3-dioxygenase
US20080039453A1 (en) 2006-03-20 2008-02-14 David Putman Enantiomerically pure R-etifoxine, pharmaceutical compositions thereof and methods of their use
UA100669C2 (ru) * 2006-06-01 2013-01-25 Санофі-Авентіс Спироциклические нитрилы как ингибиторы протеазы, способ их получения (варианты) и лекарственное средство на их основе
EP1918281A1 (en) 2006-11-02 2008-05-07 Laboratorios del Dr. Esteve S.A. Phenylamino-substituted piperidine compounds, their preparation and use as medicaments
CA2668579A1 (en) 2006-11-06 2008-06-05 Neurogen Corporation Cis-cyclohexyl substituted pyrimidinone derivatives
CA2672373C (en) 2006-12-19 2011-08-30 Pfizer Products Inc. Nicotinamide derivatives as inhibitors of h-pgds and their use for treating prostaglandin d2 mediated diseases
EP1987839A1 (en) 2007-04-30 2008-11-05 I.N.S.E.R.M. Institut National de la Sante et de la Recherche Medicale Cytotoxic anti-LAG-3 monoclonal antibody and its use in the treatment or prevention of organ transplant rejection and autoimmune disease
US8591886B2 (en) 2007-07-12 2013-11-26 Gitr, Inc. Combination therapies employing GITR binding molecules
US7986356B2 (en) 2007-07-25 2011-07-26 Hewlett-Packard Development Company, L.P. System and method for determining a gamma curve of a display device
EP2044949A1 (en) 2007-10-05 2009-04-08 Immutep Use of recombinant lag-3 or the derivatives thereof for eliciting monocyte immune response
CA2702950A1 (en) 2007-10-16 2009-04-23 Northeastern University Methods and compounds for modulating cannabinoid activity
WO2009117095A1 (en) 2008-03-18 2009-09-24 Arena Pharmaceuticals, Inc. Modulators of the prostacyclin (pgi2) receptor useful for the treatment of disorders related thereto
CA2719735A1 (en) 2008-03-27 2009-10-01 Gruenenthal Gmbh Substituted 4-aminocyclohexane derivatives
US20090298834A1 (en) 2008-06-02 2009-12-03 Hassan Pajouhesh 4-(aminomethyl)cyclohexanamine derivatives as calcium channel blockers
JP5465720B2 (ja) 2008-07-08 2014-04-09 インサイト・コーポレイション インドールアミン２，３−ジオキシゲナーゼの阻害剤としての１，２，５−オキサジアゾール
EP2149373A1 (en) * 2008-08-01 2010-02-03 Laboratorios Del. Dr. Esteve, S.A. 5HT7 receptor ligands and compositions comprising the same
US8273900B2 (en) 2008-08-07 2012-09-25 Novartis Ag Organic compounds
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
US20110212467A1 (en) * 2008-08-27 2011-09-01 University Of Southern California INHIBITORS OF dUTPase
CN102216299B (zh) * 2008-12-01 2015-02-11 默克专利有限公司 作为自体毒素抑制剂的2,5-二氨基取代的吡啶并[4,3-d]嘧啶化合物
EP3255060A1 (en) 2008-12-09 2017-12-13 F. Hoffmann-La Roche AG Anti-pd-l1 antibodies and their use to enhance t-cell function
SG172352A1 (en) 2008-12-23 2011-07-28 Abbott Lab Anti-viral compounds
CA2752693A1 (en) * 2009-02-17 2010-08-26 Chiesi Farmaceutici S.P.A. Triazolopyridine derivatives as p38 map kinase inhibitors
WO2010103130A2 (en) 2009-03-13 2010-09-16 Katholieke Universiteit Leuven, K.U.Leuven R&D Novel bicyclic heterocycles
KR101790802B1 (ko) 2009-09-03 2017-10-27 머크 샤프 앤드 돔 코포레이션 항-ｇｉｔｒ 항체
EP2493862B1 (en) * 2009-10-28 2016-10-05 Newlink Genetics Corporation Imidazole derivatives as ido inhibitors
ES2722300T3 (es) 2009-12-10 2019-08-09 Hoffmann La Roche Anticuerpos que se unen preferentemente al dominio extracelular 4 de CSF1R y su uso
CN102108078B (zh) * 2009-12-24 2013-10-30 沈阳药科大学 1,4-取代酞嗪类化合物及其制备方法和用途
EP2542256B1 (en) 2010-03-04 2019-05-22 MacroGenics, Inc. Antibodies reactive with b7-h3, immunologically active fragments thereof and uses thereof
US9169323B2 (en) 2010-03-05 2015-10-27 Hoffmann-La Roche Inc. Antibodies against human CSF-1R
JP5989547B2 (ja) 2010-03-05 2016-09-07 エフ・ホフマン−ラ・ロシュ・アクチェンゲゼルシャフト ヒトｃｓｆ−１ｒに対する抗体及びその使用
AU2011242562B2 (en) 2010-04-24 2016-10-13 Mycovia Pharmaceuticals, Inc. Metalloenzyme inhibitor compounds
US20130109698A1 (en) * 2010-05-03 2013-05-02 Simon Cocklin Small Molecule Inhibitors of Functions of the HIV-1 Matrix Protein
HRP20190047T1 (hr) 2010-05-04 2019-02-22 Five Prime Therapeutics, Inc. Protutijela koja se vežu na csf1r
US8658603B2 (en) 2010-06-16 2014-02-25 The Regents Of The University Of Michigan Compositions and methods for inducing an immune response
MX337040B (es) 2010-09-09 2016-02-09 Pfizer Moleculas de union a 4-1bb.
JP6072771B2 (ja) 2011-04-20 2017-02-01 メディミューン，エルエルシー Ｂ７−ｈ１およびｐｄ−１に結合する抗体およびその他の分子
KR101764096B1 (ko) 2011-11-28 2017-08-02 메르크 파텐트 게엠베하 항-ｐｄ-ｌ1 항체 및 그의 용도
TW201326154A (zh) 2011-11-28 2013-07-01 拜耳知識產權公司 作為ｅｐ２受體拮抗劑之新穎２ｈ－吲唑
RU2658603C2 (ru) 2011-12-15 2018-06-21 Ф.Хоффманн-Ля Рош Аг Антитела против человеческого csf-1r и их применения
KR20140127855A (ko) 2012-02-06 2014-11-04 제넨테크, 인크. Csf1r 억제제를 사용하는 조성물 및 방법
AR090263A1 (es) 2012-03-08 2014-10-29 Hoffmann La Roche Terapia combinada de anticuerpos contra el csf-1r humano y las utilizaciones de la misma
RU2670743C9 (ru) 2012-05-11 2018-12-19 Файв Прайм Терапьютикс, Инк. Способы лечения состояний антителами, которые связывают рецептор колониестимулирующего фактора 1 (csf1r)
UY34887A (es) 2012-07-02 2013-12-31 Bristol Myers Squibb Company Una Corporacion Del Estado De Delaware Optimización de anticuerpos que se fijan al gen de activación de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
KR20210008155A (ko) 2012-08-30 2021-01-20 암젠 인크 단순 헤르페스 바이러스 및 면역 체크포인트 억제제를 사용한 흑색종의 치료방법
CN107759690A (zh) 2012-08-31 2018-03-06 戊瑞治疗有限公司 用结合群落刺激因子1受体(csf1r)的抗体治疗病状的方法
WO2014079850A1 (en) 2012-11-23 2014-05-30 F. Hoffmann-La Roche Ag Substituted heterocyclic derivatives
WO2014086453A1 (en) * 2012-12-07 2014-06-12 Merck Patent Gmbh Azaheterobicyclic compounds
EA031470B1 (ru) * 2013-03-15 2019-01-31 Бристол-Майерс Сквибб Компани Ингибиторы ido
US12433920B2 (en) 2013-03-29 2025-10-07 Biomed Valley Discoveries, Inc. C. novyi for the treatment of solid tumors in non-human animals
SI3148579T1 (sl) * 2014-05-28 2021-07-30 Agenus Inc. Proti GITR antitelesa in postopki z njihovo uporabo
RU2016149812A (ru) 2014-06-06 2018-07-17 Флексус Байосайенсиз, Инк. Иммунорегулирующие средства
GB201419579D0 (en) 2014-11-03 2014-12-17 Iomet Pharma Ltd Pharmaceutical compound
UY36391A (es) 2014-11-05 2016-06-01 Flexus Biosciences Inc Compuestos moduladores de la enzima indolamina 2,3-dioxigenasa (ido1), sus métodos de síntesis y composiciones farmacèuticas que las contienen
UY36390A (es) 2014-11-05 2016-06-01 Flexus Biosciences Inc Compuestos moduladores de la enzima indolamina 2,3-dioxigenasa (ido), sus métodos de síntesis y composiciones farmacéuticas que los contienen
BR112017008809A2 (pt) 2014-11-05 2017-12-19 Flexus Biosciences Inc agentes imunorreguladores

Also Published As

Publication number Publication date
LT3215153T (lt) 2021-03-10
MX2017005646A (es) 2017-07-14
US10533014B2 (en) 2020-01-14
EP3215153A1 (en) 2017-09-13
SI3215153T1 (sl) 2021-03-31
PL3215153T3 (pl) 2021-05-31
EP3215153B1 (en) 2020-12-23
CL2017001124A1 (es) 2018-01-12
US20160137652A1 (en) 2016-05-19
CY1123961T1 (el) 2022-05-27
PT3215153T (pt) 2021-02-09
PH12017500629A1 (en) 2017-09-25
UY36390A (es) 2016-06-01
BR112017008568A2 (pt) 2017-12-19
US9643972B2 (en) 2017-05-09
IL252009B (en) 2019-07-31
NZ730808A (en) 2023-12-22
EP3854394A1 (en) 2021-07-28
CN107427499A (zh) 2017-12-01
US20180282281A1 (en) 2018-10-04
JP2017537080A (ja) 2017-12-14
IL252009A0 (en) 2017-06-29
US20170197973A1 (en) 2017-07-13
ES2848978T3 (es) 2021-08-13
EA201790992A1 (ru) 2017-09-29
TW201630886A (zh) 2016-09-01
PE20171329A1 (es) 2017-09-13
CO2017005452A2 (es) 2017-09-29
WO2016073770A1 (en) 2016-05-12
HUE054015T2 (hu) 2021-08-30
EA037286B1 (ru) 2021-03-04
PH12017500629B1 (en) 2024-02-21
AU2015342940B2 (en) 2021-04-01
CA2964290A1 (en) 2016-05-12
DK3215153T3 (da) 2021-03-22
SG11201702811RA (en) 2017-05-30
TN2017000164A1 (en) 2018-10-19
TWI740808B (zh) 2021-10-01
HRP20210291T1 (hr) 2021-04-02
MY187510A (en) 2021-09-24
ZA201702724B (en) 2022-05-25
KR20170097644A (ko) 2017-08-28
US20190002472A1 (en) 2019-01-03
CA2964290C (en) 2021-11-16
SMT202100163T1 (it) 2021-05-07
AU2015342940A1 (en) 2017-04-27
KR102514378B1 (ko) 2023-03-28
CN107427499B (zh) 2021-04-16
JP6735274B2 (ja) 2020-08-05
EP3215153A4 (en) 2018-01-24
MX385822B (es) 2025-03-18
US10106546B2 (en) 2018-10-23

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10533014B2 (en) Immunoregulatory agents
US11932601B2 (en) Immunoregulatory agents
US10206893B2 (en) Immunoregulatory agents
CA2951259A1 (en) Immunoregulatory agents
HK40056802A (en) Immunoregulatory agents
HK1242196A1 (en) Immunoregulatory agents
HK1242196B (en) Immunoregulatory agents
BR112017008568B1 (pt) Agentes imunorregulatórios