RS61696B1 - Derivati 3-tetrazolil-benzen-1,2-disulfonamida kao inhibitori metalo-beta-laktamaze - Google Patents

Derivati 3-tetrazolil-benzen-1,2-disulfonamida kao inhibitori metalo-beta-laktamaze

Info

Publication number
RS61696B1
RS61696B1 RS20210436A RSP20210436A RS61696B1 RS 61696 B1 RS61696 B1 RS 61696B1 RS 20210436 A RS20210436 A RS 20210436A RS P20210436 A RSP20210436 A RS P20210436A RS 61696 B1 RS61696 B1 RS 61696B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
mmol
ring
optionally substituted
tert
independently selected
Prior art date
Application number
RS20210436A
Other languages
English (en)
Inventor
Frank Bennett
Jinlong Jiang
Alexander Pasternak
Shuzhi Dong
Xin Gu
Jack D Scott
Haiqun Tang
Zhiqiang Zhao
Yuhua Huang
Dexi Yang
Katherine Young
Li Xiao
Zhibo Zhang
Jianmin Fu
Original Assignee
Merck Sharp & Dohme
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Merck Sharp & Dohme filed Critical Merck Sharp & Dohme
Publication of RS61696B1 publication Critical patent/RS61696B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/185—Acids; Anhydrides, halides or salts thereof, e.g. sulfur acids, imidic, hydrazonic or hydroximic acids
    • A61K31/19—Carboxylic acids, e.g. valproic acid
    • A61K31/195—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group
    • A61K31/197—Carboxylic acids, e.g. valproic acid having an amino group the amino and the carboxyl groups being attached to the same acyclic carbon chain, e.g. gamma-aminobutyric acid [GABA], beta-alanine, epsilon-aminocaproic acid or pantothenic acid
    • A61K31/198—Alpha-amino acids, e.g. alanine or edetic acid [EDTA]
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D257/00—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D257/02—Heterocyclic compounds containing rings having four nitrogen atoms as the only ring hetero atoms not condensed with other rings
    • C07D257/04—Five-membered rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/407—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with other heterocyclic ring systems, e.g. ketorolac, physostigmine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/416—1,2-Diazoles condensed with carbocyclic ring systems, e.g. indazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4164—1,3-Diazoles
    • A61K31/4184—1,3-Diazoles condensed with carbocyclic rings, e.g. benzimidazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4192—1,2,3-Triazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4196—1,2,4-Triazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/42—Oxazoles
    • A61K31/421—1,3-Oxazoles, e.g. pemoline, trimethadione
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/42—Oxazoles
    • A61K31/423—Oxazoles condensed with carbocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/4245—Oxadiazoles
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/428—Thiazoles condensed with carbocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/425—Thiazoles
    • A61K31/429—Thiazoles condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/43—Compounds containing 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula, e.g. penicillins, penems
    • A61K31/431—Compounds containing 4-thia-1-azabicyclo [3.2.0] heptane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula, e.g. penicillins, penems containing further heterocyclic rings, e.g. ticarcillin, azlocillin, oxacillin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4375—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having nitrogen as a ring heteroatom, e.g. quinolizines, naphthyridines, berberine, vincamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/439—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom the ring forming part of a bridged ring system, e.g. quinuclidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/4427—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4439—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. omeprazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/454—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a five-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pimozide, domperidone
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/44—Non condensed pyridines; Hydrogenated derivatives thereof
    • A61K31/445—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine
    • A61K31/4523—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems
    • A61K31/4545—Non condensed piperidines, e.g. piperocaine containing further heterocyclic ring systems containing a six-membered ring with nitrogen as a ring hetero atom, e.g. pipamperone, anabasine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/4709—Non-condensed quinolines and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A61K31/472—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine
    • A61K31/4725—Non-condensed isoquinolines, e.g. papaverine containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/496—Non-condensed piperazines containing further heterocyclic rings, e.g. rifampin, thiothixene or sparfloxacin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/498—Pyrazines or piperazines ortho- and peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinoxaline, phenazine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/50—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines
    • A61K31/5025—Pyridazines; Hydrogenated pyridazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/506—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim not condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/505—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim
    • A61K31/517—Pyrimidines; Hydrogenated pyrimidines, e.g. trimethoprim ortho- or peri-condensed with carbocyclic ring systems, e.g. quinazoline, perimidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/541—Non-condensed thiazines containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/54—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame
    • A61K31/542—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one sulfur as the ring hetero atoms, e.g. sulthiame ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/545—Compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins, cefaclor, or cephalexine
    • A61K31/546—Compounds containing 5-thia-1-azabicyclo [4.2.0] octane ring systems, i.e. compounds containing a ring system of the formula:, e.g. cephalosporins, cefaclor, or cephalexine containing further heterocyclic rings, e.g. cephalothin
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
    • A61P31/04—Antibacterial agents
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings
    • C07D401/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D401/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom
    • C07D401/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, at least one ring being a six-membered ring with only one nitrogen atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/14—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D453/00—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids
    • C07D453/02—Heterocyclic compounds containing quinuclidine or iso-quinuclidine ring systems, e.g. quinine alkaloids containing not further condensed quinuclidine ring systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D471/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00
    • C07D471/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, at least one ring being a six-membered ring with one nitrogen atom, not provided for by groups C07D451/00 - C07D463/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D471/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/10—Spiro-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
    • C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D493/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D493/00—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system
    • C07D493/02—Heterocyclic compounds containing oxygen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D493/08—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D495/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D495/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having sulfur atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D495/08—Bridged systems
    • Y—GENERAL TAGGING OF NEW TECHNOLOGICAL DEVELOPMENTS; GENERAL TAGGING OF CROSS-SECTIONAL TECHNOLOGIES SPANNING OVER SEVERAL SECTIONS OF THE IPC; TECHNICAL SUBJECTS COVERED BY FORMER USPC CROSS-REFERENCE ART COLLECTIONS [XRACs] AND DIGESTS
    • Y02—TECHNOLOGIES OR APPLICATIONS FOR MITIGATION OR ADAPTATION AGAINST CLIMATE CHANGE
    • Y02A—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE
    • Y02A50/00—TECHNOLOGIES FOR ADAPTATION TO CLIMATE CHANGE in human health protection, e.g. against extreme weather
    • Y02A50/30—Against vector-borne diseases, e.g. mosquito-borne, fly-borne, tick-borne or waterborne diseases whose impact is exacerbated by climate change

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Communicable Diseases (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Cephalosporin Compounds (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Oxygen Or Sulfur (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)

Description

OBLAST PRONALASKA
Ovaj pronalazak se odnosi na nove inhibitore metalo-β-laktamaze i njihove upotrebe. Poželjna upotreba inhibitora metalo-β-laktamaze je za redukciju bakterijske rezistencije na beta-laktamski antibiotik.
OSNOVA PRONALASKA
Bakterijska rezistencija na antibiotike je postala jedna od najozbiljnih pretnji modernoj zdravstvenoj nezi. Infekcije uzrokovane rezistentnim bakterijama često rezultuju u dužim boravcima u bolnici, većem mortalitetu i povećanim troškovima lečenja. Videti, npr., Cohen, Science 1992, 257:1051-1055. Potreba za novim antibioticima će nastaviti da raste zbog toga što bakterije imaju izuzetnu sposobnost da razviju rezistenciju na nova sredstva, čineći ih brzo neefikasnim. Videti, npr., Neu, Science 1992, 257: 1064-1073. Širenje rezistencije na antibiotike je označeno kao pandemija. Rešenje rastuće pretnje javnom zdravlju će zahtevati interdiciplinarni pristup. Videti, npr., Anderson, Nature America 1999, 5: 147-149. Videti takođe Bush et al., Nature Reviews in Microbiology 2011, 9: 894-896; Levy and Marshall, Nature Medicine 2004, 10: S122-S129; Livermore, Clinical Infectious Diseases 2003, 36: S11-S23; i Roberts et al., Clinical Infectious Diseases 2009, 49: 1175-1184.
Trenutna kriza je dovela do različitih pokušaja rasvetljivanja mehanizama odgovornih za bakterijsku rezistenciju. Raširena upotreba penicilina i cefalosporina je rezultovala u pojavi βlaktamaza, familiji bakterijskih enzima koji katalizuju hidrolizu β-laktamskog prstena zajedničkog za brojne trenutno korišćene antibiotike. Videti, Coulton et al., Progress in Medicinal Chemistry 1994, 31: 297-349. Ova familija bakterijskih β-laktamaza je dalje podeljena u četiri podfamilije: A, C i D familije, koje sadrže β-laktamaze koje imaju serin na aktivnom mestu koje katalizuje hidrolizu β-laktamskih antibiotika i B familiju, koja sadrži βlaktamaze koje su cink metaloenzimi. Rezistencija posredovana preko β-laktamaza je kritičan aspekt u jezgru razvoja bakterijske rezistencije na antibiotike. Videti, Dudley, Pharmacotherapy 1995, 15: 9S-14S. Klavulanska kiselina, koja je metabolit Streptomyces clavuligerus, i dva polusintetička inhibitora, sulbaktam i tazobaktam, su trenutno dostupni polu-sintetički ili prirodni proizvodi inhibitori β-laktamaze. Takođe su opisani sintetički inhibitori β-laktamaze. Videti, SAD patente br. 5,698,577; 5,510,343; 6,472,406; Hubschwerlen et al., J. Med. Chem.1998, 41: 3961; i Livermore et al., J. Med. Chem.1997, 40: 335-343. Poole (Cell. Mol. Life Sci.2004, 61: 2200-2223) daje prikaz rezistencije bakterijskih patogena na β-laktamske antibiotike i pristupe za prevazilaženje rezistencije. Za prikaz inhibitora metalo β-laktamaza, videti Fast and Sutton, Biochimica et Biophysica Acta - Proteins and Proteomics 2013, 1834(8): 1648-1659.
SAD objava patentne prijave br. US 2003/0199541 otkriva određena azabiciklična jedinjenja uključujući određene 7-okso-6-diazabiciklične[3.2.1]oktan-2-karboksamide i njihovu upotrebu kao anti-bakterijskih sredstava. SAD objava patentne prijave br. US 2004/0157826 otkriva heterobiciklična jedinjenja uključujući određeni diazepin karboksamid i diazepin karboksilat derivate i njihovu upotrebu kao anti-bakterijskih sredstava i inhibitora β-laktamaze. Objava međunarodne patentne prijave br. WO 2008/039420 otkriva 7-okso-2,6-diazabiciklo[3.2.0]heptane-6-sulfooksi-2-karboksamide i njihovu upotrebu kao inhibitora βlaktamaze.
Zheng et al. (PLOS One 2013, 8(5), e62955) otkrivaju supstituisane 2,5-bis-tetrazolilmetiltiofene i njihovu upotrebu kao inhibitora β-laktamaze. Objava kineske patentne prijave br. CN103130686 A otkriva N,N'-diaril-uree i njihovu upotrebu kao inhibitora metalo β-laktamaza. Objava kineske patentne prijave br. CN103191091 A otkriva supstituisane arilsulfonamide i njihovu upotrebu kao inhibitora metalo β-laktamaza.
SAD Patenti br. 4,786,311; 4,746,353; 4,838,925; objava evropske patentne prijave br. EP204513; EP244166; i objava kineske patentne prijave br. CN1095549A otkrivaju supstituisane 2-(1H-tetrazol-5-il)benzensulfonamide i njihovu upotrebu kao herbicida.
Objava međunarodne patentne prijave br. WO 2015/112441 otkriva supstituisana jedinjenja 1H-i 2H-tetrazol-5-il sulfonamida kao inhibitore metalo β-laktamaze.
KRATAK OPIS PRONALASKA
Predmetni pronalazak je usmeren na supstituisana jedinjenja 1H- i 2H-tetrazol-5-il sulfonamida i srodna jedinjenja koja su inhibitori metalo-β-laktamaze. Jedinjenja i njihove farmaceutski prihvatljive soli, su korisni, na primer, u kombinaciji sa β-laktamskim antibioticima, i izborno inhibitorima serin β-laktamaze, za lečenje bakterijskih infekcija, naročito bakterijskih infekcija rezistentnih na antibiotik. Naročito, predmetni pronalazak obuhvata jedinjenja formule I:
ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, gde:
X1 je N ili CH;
X2 je N ili CH;
Z je tetrazolil, gde je Z vezan preko veze ugljenik-ugljenik za šestočlano prsten jezgro koji ima X1i X2;
RA je -(CH2)n-AryA1, -(CH2)n-HetA1, -(CH2)n-C4-C6cikloalkil, ili -(CH2)n-C4-C6cikloalkenil, gde su navedeni -(CH2)n-C4-C6cikloalkil i -(CH2)n-C4-C6cikloalkenil izborno supstituisani sa 1, 2 ili 3 supstituenta nezavisno izabrana od -NH2, -OH,-F, i -NRaC(O)C1-C6alkila izborno supstituisanog sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od -F, -CF a
3 ,-NR Rb , i -ORa;
R1 je
1) -NH2;
2) -NRa-C1-C6alkil izborno supstituisan sa 1, 2, 3, ili 4 supstituenta nezavisno izabrana od -F, -CF3, C1-C6alkil, -CH(NH2)C(O)NH2, -C(O)NRaRb, -C(O)OH, -(CH2)1-2NH2, -NRa(CH2)2-3NH2, -NRaRb, -N+RaRbCH3, -NHCH2CH2OCH3, -ORa i -O(CH2)2-3NH2;
3) -NRaC(O)C1-C6alkil izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od -F, -CF3, -C(O)NRaRb, -C(O)OH,-NRaRb, -N+RaRbCH3, -NHCH2CH2OCH3, -ORa i -O(CH2)2-3NH2; 4) -NRa(CH2)n-C3-C6cikloalkil, gde je C3-C6cikloalkil izborno supstituisan sa -CH2OH ili -NH2; 5) azotom-vezan 4-6 člani monociklični heterocikloalkil sa 0, 1, ili 2, dodatna heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N, O i S, ili azotom-vezanog 6- do 10-članog bicikličnog heterocikloalkila sa 0, 1, 2, ili 3 dodatna heteroatoma u prstenu izabrana od N, O i S gde bicikličan prsten može biti premošćen, fuzionisan ili spirocikličan, gde su 4-6 –člani monocikličan heterocikloalkil i 6- do 10-člani bicikličan heterocikloalkil izborno supstituisani sa jednim do tri supstituenta, nezavisno izabrana od: -F, -NRaRb, okso, -(CH2)1-2OH, -CH2NH2, -SO2CH3, i C1-C6alkila i gde je atom sumpora u prstenu izborno supstituisan sa jednim ili dva okso;
6) -NRa-(C1-C3alkil)n-AryB1, gde je C1-C3alkil izborno supstituisan sa -NH2; i
7) -NRa-(C1-C3alkil)n-HetB1;
AryA1 je aromatičan sistem prstena izabran od:
1) 5-6 članog monocikličnog prstena sa 0, 1, 2, ili 3 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N, O i S, izborno supstituisanog sa 1, 2, ili 3 supstituenata nezavisno izabranih od sledećih: a) halogen,
b) -C1-C6alkil,
c) -CN,
d) -CH2OH,
e) -C(O)NRaRb,
f) -C(O)NH(CH2)2-4NH2izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od -NRaRb i -(CH2)nORa,
g) -C(O)ORa,
h) -(CH2)pNHRa izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od -NRaRb ili -ORa,
i) -(CH2)pNRaC(=NH)NH2,
j) -NRaC(O)C1-C6alkil izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od -NRaRb ili -ORa,
k) -NRaSO2-C1-C6alkil,
l) -NRaSO2-ciklopropil,
m) -ORa,
n) okso,
o) -C1-C6alkil izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od -NRaRb ili --ORa;
p) -SO2Ra,
q) -SO2NRaRb,
r) -SO2NH-ciklopropil,
s) -AryA2,
t) -(CH2)nNRaAryA2,
u) -C(O)NRaHetA2 i
v) -HetA2, i
2) 8- do 10-člani biciklični pfrsten sa 1, 2, 3 ili 4 heteroatoma u prstenu izabranih od N, O i S, gde S atom izborno ima jedan ili dva okso supstituenta i N atom je izborno u obliku N-oksida i gde je prsten izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih
a) halogen;
b) C tuisan sa jednim do tri supstituenta ne b
1-C6alkil izborno supsti zavisno izabrana od -NRaR , -F i -ORa;
c) -(CH2)nCF3;
d) -C(=NH)NH2;
e) -CN;
f) -C(O)CF3;
g) -C(O)NRaRb;
h) -C(O)NHCH2C(O)ORa;
i) -C(O)NH-C2-C4alkil-NH2,
j) -C(O)ORa;
k) -NRaRb;
l) -NHCH2SO3H;
m) -(CH2)nNHC(=NH)NH2;
n) -NHC(O)C1-C6alkil;
o) -NHC(O)NH2;
p) -NHC(O)ORa
;
q) -NHSO2CH3;
r) -ORa;
s) okso;
t) -SO2Ra,
u) -CH2-fenil-OCH3; i
v) -HetA2;
HetA1 je dihidrotiopiranil ili tetrahidropiranil;
AryA2 je 5-6-člani aromatični monociklični prsten sa 1, 2 ili 3 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N, N kao kvaternarna so i S, ili 4 N atoma prstena, izborno supstituisan sa -CH2OH,-COOH,-CONH2, -C(O)OC1-C6alkil, i -(CH2)pNHRa izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od -NRaRb i-ORa;
HetA2 je 4-6-člani zasićeni monociklični prsten sa 1 ili 2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N, O i S, gde je S izborno supstituisan sa dve okso grupe, i gde je prsten izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od C1-C6alkila, -CN, -OH i okso;
AryB1 je aromatičan prsten izabran od:
1) 5-6 -članog monocikličnog aromičnog prstena sa 0, 1, 2, ili 3 N atoma u prstenu, izborno supstituisan sa 1 supstituentom izabranim od -CF3, C1-C6alkila, -(CH2)nNH2i -OCH3; ili 2) 9-člani bicikličan prsten sa 2 N atoma u prstenu;
HetB1 je zasićeni prsten izabran od:
1) 4-6 člani zasićeni monociklični prsten sa 1 ili 2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N, O i S, gde je N atom prstena izborno u obliku kvaternarnog amina, gde je S supstituisan sa dve okso grupe i gde je prsten izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od -F, C1-C6alkil, C1-C6hidroksialkil, -C(O)ORa,-(CH2)kNRaRb, -ORa, i okso; ili
2) 6-10-člani biciklični prsten sa 1 ili 2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N i O, izborno supstituisan sa -OH ili -NH2, gde je biciklični prsten premošćen ili fuzionisan;
Ra i Rb su nezavisno H ili C1-C6alkil;
k je 0, 1, 2, 3, ili 4;
svaki n je nezavisno 0 ili 1; i
svaki p je nezavisno 0, 1, 2, ili 3.
Jedinjenja formule I inhibiraju metalo-β laktamaze i mogu da sinergizuju antibakterijske efekte β laktamskih antibiotika (npr., imipenem, ceftazidim, ceftolozan i piperacilin) protiv mikroorganizama normalno rezistentnih na β laktamske antibiotike kao rezultat prisustva metaloβ laktamaza. Jedinjenja prema predmetnom pronalasku su efikasna protiv metalo-β laktamaza i njihova kombiancija sa β-laktamskim antibiotikom, kao što je imipenem, ceftazidim, ceftolozan ili piperacilin, može da obezbedi efikasan tretman bakterijskih infekcija uzrokovanih mikroorganizmima koji proizvode metalo-β laktamazu. Prema tome, u određenim primerima izvođenja, predmetni pronalazak daje kompozicije koje sadrže jedinjenje formule I, IA, ili IB sa β-laktamskim antibiotikom, i izborno jednim ili više dodatnih inhibitora β-laktamaze, pogodnih za upotrebu protiv bakterija koje proizvode metalo-β laktamazu kao što su Pseudomonas spp. I Klebsiella spp. U nekim primerima izvođenja, dodatni jedan ili više inhibitora β-laktamaze je serinski (klasa A, C i D) inhibitora β-laktamaze. Pronalazak takođe obuhvata kompozicije koje sadrže jedinjenje formule I, IA, ili IB ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv nosač. Pronalazak dalje obuhvata jedinjenje formule I, IA, ili IB, ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, ili farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje formule I, IA, ili IB ili njegovu so i farmaceutski prihvatljiv nosač, za upotrebu u postupcima za lečenje bakterijskih infekcija. Takođe su otkriveni postupci za inhibiciju bakterijskog rasta primenom jedinjenja formule I, IA, ili IB, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, na pacijenta kod koga postoji potreba za tim, ili primenom farmaceutske kompozicije koja sadrži jedinjenje formule I, IA, ili IB ili njegovu so i farmaceutski prihvatljiv nosač.
Primeri izvođenja, pod-primeri izvođenja, aspekti i karakteristike predmetnog pronalaska su dalje opisani u ili će biti očigledni iz opisa, primera i priloženih zahteva koji slede.
DETALJAN OPIS PRONALASKA
Kao što je navedeno u prethodnom tekstu, predmetni pronalazak obuhvata jedinjenja formule I, IA, i IB, gde su jedinjenja inhibitori metalo-β-laktamaze pogodni za upotrebu u kombinaciji sa βlaktamskim antibioticima i izborno inhibitorima β-laktamaze klase A, C i/ili D za lečenje bakterijskih infekcija.
Pronalazak je zasnovan, delimično, na prisustvu sumpornog linkera na 6-položaju prstena jezgra kao sulfonamid. Prisustvo sumpora na ovom položaju rezultuje u poboljšanoj potenciji enzima u poređenju sa tim kada je linker ugljenik i takođe obezbeđuje poboljšanu aktivnost na bakterijske sojeve Pseudomonas-a u koje se teško prodire. Poboljšana Pseudomonal-na aktivnost je verovatno posledica smanjenog efluksa iz ćelija kao rezultat sulfonamidnog linkera.
U svakom od različitih primera izvođenja jedinjenja prema pronalasku opisanom ovde, svaka promenljiva uključujući one formula I, IA i IB i različiti njihovi primeri izvođenja, je izabrana nezavisno od drugih promenljivih osim ukoliko je drugačije naznačeno.
Predmetni pronalazak obuhvata za svaki od različitih primera izvođenja jedinjenja prema pronalasku opisana ovde, uključujući ona formula I, IA i IB, i njihove različite primere izvođenja i jedinjenja primera, sve oblike jedinjenja kao što su, na primer, bilo koji solvati, hidrati, stereoizomeri i tautomeri navedenih jedinjenja i bilo koje njihove farmaceutski prihvatljive soli, osim ukoliko je drugačije naznačeno. Dodatno, u primerima opisanim ovde, jedinjenja prema pronalasku mogu biti prikazana u obliku soli. U takvim slučajevima, potrebno je razumeti da jedinjenja prema pronalasku obuhvataju oblike slobodne kiseline ili slobodne baze takvih soli, i bilo koju farmaceutski prihvatljivu so navedenih oblika slobodne kiseline ili slobodne baze. Pored toga, u slučajevima gde su kisela grupa kao što je tetrazol i bazna grupa kao što je amin prisutne unutar istog jedinjenja, ta jedinjenja mogu biti prikazana ovde radi prikladnosti kqao oblici slobodne kiseline i baze, ali trebalo bi razumeti da oni mogu takođe biti alternativno prikazani u njihovim cviterjonskim oblicima u kojima tetrazol nosi negativno naelektrisanje i amin nosi pozitivno naelektrisanje, koji su takođe ukljućeni kao jedinjenja prema pronalasku.
Jedinjenja formule (I):
U jednom aspektu, predmetni pronalazak obuhvata jedinjenja formule I:
ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, gde su X1, X2, Z, RA i R1 kao što su ovde definisani za jedinjenja formule (I) (tj. Kao što su definisani u Kratkom opisu pronalaska); gde jedinjenja mogu biti pogodna za upotrebu za lečenje bakterijskih infekcija.
Prvi primer izvođenja pronalaska (Primer izvođenja E1) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde su X1, X2, Z, RA i R1 kao što su definisani u formuli (I) u Kratkom opisu pronalaska.
Drugi primer izvođenja (Primer izvođenja E2) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde X1je CH, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Treći primer izvođenja (Primer izvođenja E3) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde X1je N, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Četvrti primer izvođenja (Primer izvođenja E4) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je CH, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Peti primer izvođenja (Primer izvođenja E5) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je N, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Šesti primer izvođenja (Primer izvođenja E6) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je -(CH2)n-AryA1 i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Sedmi primer izvođenja (Primer izvođenja E7) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde X1je definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je -(CH2)n-HetA1 i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Osmi primer izvođenja (Primer izvođenja E8) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde X1je definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je -(CH2)n-C4-C6cikloalkil, gde je navedeni -(CH2)n-C4-C6cikloalkil izborno supstituisan sa 1, 2, ili 3 supstituenta nezavisno izabrana od -NH2, -OH, -F i -NRaC(O)C1-C6alkila izborno supstituisanog sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od -F, -CF3, -NRaRb, i -ORa i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1. U podprimeru izvođenja primera izvođenja E8, -(CH2)n-C4-C6cikloalkil je nesupstituisan. U drugom podprimeru izvođenja primera izvođenja E8, -(CH2)n-C4-C6cikloalkil je supstituisan sa 1 supstituentom. U sledećem podprimeru izvođenja primera izvođenja E8, -(CH2)n-C4-C6cikloalkil je supstituisan sa 2 supstituenta. U sledećem podprimeru izvođenja primera izvođenja E8, -(CH2)n-C4-C6cikloalkil je supstituisan sa 3 supstituenta.
U sledećem podprimeru izvođenja primera izvođenja E8 -(CH2)n-C4-C6cikloalkil je supstituisan sa najmanje jednim NH2.
U sledećem podprimeru izvođenja primera izvođenja E8 -(CH2)n-C4-C6cikloalkil je supstituisan sa najmanje jednim -OH.
U sledećem podprimeru izvođenja primera izvođenja E8 -(CH2)n-C4-C6cikloalkil je supstituisan sa najmanje jednim -F.
U jednom podprimeru izvođenja primera izvođenja E8 -(CH2)n-C4-C6cikloalkil je supstituisan sa najmanje jednim -NRaC(O)C1-C6alkil izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od -F, -CF3,-NRaRb i -ORa.
Deveti primer izvođenja (Primer izvođenja E9) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je -(CH2)n-C4-C6cikloalkenil, gde -(CH2)n-C4-C6cikloalkenil je izborno supstituisan sa 1, 2, ili 3 supstituenta nezavisno izabrana od -NH2, -OH, -F i -NRaC(O)C1-C6alkila izborno supstituisanog sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od -F, -CF3, -NRaRb i -ORa i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
U jednom podprimeru izvođenja primera izvođenja E9, -(CH2)n-C4-C6cikloalkenil je nesupstituisan. U sledećem podprimeru izvođenja primera izvođenja E9, -(CH2)n-C4-C6cikloalkenil je supstituisan sa 1 supstituentom. U sledećem podprimeru izvođenja primera izvođenja E9, -(CH2)n-C4-C6cikloalkenil je supstituisan sa 2 supstituenta. U sledećem podprimeru izvođenja primera izvođenja E9, -(CH2)n-C4-C6cikloalkenil je supstituisan sa 3 supstituenta.
U sledećem podprimeru izvođenja primera izvođenja E9 -(CH2)n-C4-C6cikloalkenil je supstituisan sa najmanje jednim NH2.
U dodatnom podprimeru izvođenja primera izvođenja E9 -(CH2)n-C4-C6cikloalkenil je supstituisan sa najmanje jednim -OH.
U sledećem podprimeru izvođenja primera izvođenja E9 -(CH2)n-C4-C6cikloalkenil je supstituisan sa najmanje jednim -F.
U jednom podprimeru izvođenja primera izvođenja E9 -(CH2)n-C4-C6cikloalkenil je supstituisan sa najmanje jednim -NRaC(O)C1-C6alkil izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od -F, -CF3,-NRaRb i -ORa.
Deseti primer izvođenja (Primer izvođenja E10) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je AryA1 i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Jedanaesti primer izvođenja (Primer izvođenja E11) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u
1
primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je C4-C6cikloalkil izborno supstituisan sa -NH2ili NHC(O)(CH2)1-3NH2, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1. Dvanaesti primer izvođenja (Primer izvođenja E12) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je C4-C6cikloalkenil izborno supstituisan sa -NH2ili NHC(O)(CH2)1-3NH2, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1. Trinaesti primer izvođenja (Primer izvođenja E13) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je HetA1 i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Četrnaesti primer izvođenja (Primer izvođenja E14) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je: izabran iz grupe koja se sastoji od:
RD je F,-C1-C6alkil, -CONH-C2-C4alkil-NH2, -NHRa ili -(CH2)xNHRa svaki x je nezavisno 0, 1, ili 2, n je 0 ili 1, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Petnaesti primer izvođenja (Primer izvođenja E15) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5 R<A>je:
RD je F,-C1-C6alkil, -CONH-C2-C4alkil-NH2, -NHRa ili -(CH2)xNHRa svaki x je nezavisno 0, 1, ili 2, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Šesnaesti primer izvođenja (Primer izvođenja E16) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je:
RD je F-C1-C6alkil, -CONH-C2-C4alkil-NH a
2, -NHRa ili -(CH2)xNHR svaki x je nezavisno 0, 1, ili 2, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Sedamnaesti primer izvođenja (Primer izvođenja E17) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je:
RD je -F,-C1-C6alkil, -CONH-C2-C4alkil-NH2, -NHRa ili -(CH2)xNHRa, x je 0, 1, ili 2, n je 0 ili 1, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Osamnaesti primer izvođenja (Primer izvođenja E18) je jedinjenje formule I, ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je:
RD je F, -C1-C6alkil, -CONH-C2-C4alkil-NH2, -NHRa ili -(CH2)xNHRa x je 0, 1, ili 2, n je 0 ili 1, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
U pod-primerima izvođenja primera izvođenja E17 i E18, n je 0.
U drugim pod-primerima izvođenja primera izvođenja E17 i E18, najmanje jedan R<D>je NH2. U drugim pod-primerima izvođenja primera izvođenja E17 i E18, najmanje jedan R<D>je -(CH2)xNHRa. U dodatnim pod-primerima izvođenja primera izvođenja E17 i E18, najmanje jedan RD je metil. U drugim pod-primerima izvođenja primera izvođenja E17 i E18, najmanje jedan RD je -CH2NH2. U dodatnim pod-primerima izvođenja primera izvođenja E17 i E18, najmanje jedan RD je -F. U dodatnim pod-primerima izvođenja primera izvođenja E17 i E18, najmanje jedan RD je -CONH-C2-C4alkil-NH2. U drugim pod-primerima izvođenja primera izvođenja E17 i E18, najmanje jedan R<D>je -C1-C6alkil.
Devetnaesti primer izvođenja (Primer izvođenja E19) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je:
RD je F-C1-C6alkil, -CONH-C2-C4alkil-NH2, -NHRa ili -(CH a
2)xNHR svaki x je nezavisno 0, 1, ili 2, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Dvadeseti primer izvođenja (Primer izvođenja E20) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je:
RD je F,-C1-C6alkil, -CONH-C2-C4alkil-NH2, -NHRa ili -(CH2)xNHRa svaki x je nezavisno 0, 1, ili 2, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Dvadeset i prvi primer izvođenja (Primer izvođenja E21) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je:
ili
i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Dvadeset i drugi primer izvođenja (Primer izvođenja E22) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u
1
primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je 5-6 -člani aromatični monociklični prsten sa 0, 1, 2, ili 3 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N, O i S, izborno supstituisan sa 1, 2, ili 3 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: halogen, -C1-C6alkil, -CN, -CH2OH, - C(O)NRaRb, -C(O)NH(CH2)2-4NH2izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od -NRaRb i -(CH2)nORa, -C(O)ORa, -(CH2)pNHRa izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od -NRaRb ili -ORa, -(CH2)pNRaC(=NH)NH2, -NRaC(O)C1-C6alkila izborno supstituisanog sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od -NRaRb ili -ORa, -NRaSO2-C1-C6alkila, -NRaSO2-ciklopropila, -ORa, okso, -SC1-C6alkila izborno supstituisanog sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: -NR<a>R<b>ili -OR<a>; -SO2Ra, -SO2NRaRb, -SO2NH-ciklopropil, -AryA2, -(CH2)nNRaAryA2, -C(O)NRaHetA2 i -HetA2, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Dvadeset i treći primer izvođenja (Primer izvođenja E23) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je 8- do 10-člani biciklični aromatični sistem prstena sa 1, 2, 3 ili 4 heteroatoma u prstenu izabrana od N, O i S, gde S atom izborno ima jedan ili dva okso supstituenta i N atom je izborno u obliku N-oksida, i gde je prsten izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od halogena; C1-C6alkil izborno supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabrana od -NRaRb, -F i -ORa; -(CH2)nCF3; -C(-NH)NH2; -CN; C(O)CF3; -C(O)NRaRb; -C(O)NHCH2C(O)ORa; -C(O)NH-C2-C4alkil-NH2, -C(O)ORa
;-NRaRb;-NHCH2SO3H; -(CH2)nNHC(=NH)NH2; -NHC(O)C1-C6alkil; -NHC(O)NH2; -NHC(O)ORa; -NHSO2CH3; -ORa; okso; -SO2Ra, -CH2-fenil-OCH3; i -HetA2; i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Dvadeset i četvrti primer izvođenja (Primer izvođenja E24) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je dihidrotiopiranil, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Dvadeset i peti primer izvođenja (Primer izvođenja E25) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je tetrahidropiranil, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Dvadeset i šesti primer izvođenja (Primer izvođenja E26) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je definisan u bilo kom od primera izvođenja E6-E25, R<1>je NH2i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Dvadeset i sedmi primer izvođenja (Primer izvođenja E27) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je definisan u bilo kom od primera izvođenja E6- E25, R<1>je -NRa-C1-C6alkil izborno supstituisan sa 1, 2, 3, ili 4 supstituenta nezavisno izabrana od -F, - CF3, C1-C6alkil, -CH(NH2)C(O)NH2, -C(O)NRaRb, -C(O)OH, -(CH2)1-2NH2, -NRa(CH2)2-3NH2, -NRaRb, -N+RaRbCH3, -NHCH2CH2OCH3, -ORa, i -O(CH2)2-3NH2i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Dvadeset i osmi primer izvođenja (Primer izvođenja E28) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je definisan u bilo kom od primera izviđenja E6- E25, R<1>je -NRaC(O)C1-C6alkil izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od -F, -CF3, -C(O)NRaRb, -C(O)OH, -NRaRb, -N+RaRbCH3, -NHCH2CH2OCH3, -ORa, i -O(CH2)2-3NH2i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Dvadeset i deveti primer izvođenja (Primer izvođenja E29) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je definisan u bilo kom od primera izvođenja E6- E25, R<1>je -NRa(CH2)n-C3-C6cikloalkil, gde je C3-C6cikloalkil izborno supstituisan sa -CH2OH ili -NH2i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Trideseti primer izvođenja (Primer izvođenja E30) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je definisan u bilo kom od primera izvođenja E6- E25, R<1>je azotom-vezani 4-6 -člani monociklični heterocikloalkil sa 0, 1, ili 2 dodatna heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N, O i S, ili azotom-vezani 6- do 10-člani biciklični heterocikloalkil sa 0, 1, 2, ili 3 dodatna heteroatoma u prstenu izabrana od N, O i S gde biciklični prsten može biti premošćen, fuzionisan ili spirocikličan, gde su 4-6 -člani monocikličan heterocikloalkil i 6- do 10-člani bicikličan heterocikloalkil izborno supstituisani sa jednim do tri supstituenta, nezavisno izabrana od sledećih: -F, -NR<a>R<b>, okso, -(CH2)1-2OH, -CH2NH2, -SO2CH3i C1-C6alkil i gde je atom sumpora u prstenu izborno supstituisan sa jednim ili dva okso i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Trideset i prvi primer izvođenja (Primer izvođenja E31) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je definisan u bilo kom od primera izvođenja E6- E25, R<1>je -NRa-(C1-C3alkil)n-AryB1, gde je C1-C3alkil izborno supstituisan sa -NH2i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
1
U podprimeru izvođenja primera izvođenja E31, R<a>je H i AryB1 je 5-6 -člani monocikličan aromatičan prsten sa 0, 1, 2, ili 3 N atoma u prstenu, izborno supstituisan sa 1 supstituentom izabranim od -CF3, C1-C6alkila, -(CH2)nNH2i -OCH3.
U dodatnom podprimeru izvođenja primera izvođenja E31, R<a>je H i AryB1 je 9-člani biciklični aromatični sistem prstena sa 2 N atoma u prstenu.
Trideset i drugi primer izvođenja (Primer izvođenja E32) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je definisan u bilo kom od primera izvođenja E6- E25, R<1>je -NRa-(C1-C3alkil)n-HetB 1 i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
U podprimeru izvođenja primera izvođenja E32, R<a>je H i HetB1 je 4-6 člani zasićeni monociklični prsten sa 1 ili 2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N, O i S, gde je N atom u prstenu izborno u obliku kvaternarnog amina, gde je S supstituisan sa dve okso grupe, i gde je prsten izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: -F, C1-C6alkil, C1-C6hidroksialkil, -C(O)ORa,-(CH2)kNRaRb, -ORa i okso.
U sledećem podprimeru izvođenja primera izvođenja E32, R<a>je H i HetB1 je 6-10-člani zasićeni biciklični prsten sa 1 ili 2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N i O, izborno supstituisan sa -OH ili -NH2, gde je bicikličan prsten premošćen ili fuzionisan.
U sledećem podprimeru izvođenja primera izvođenja E32, R<a>je H i HetB1 je:
i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Trideset i treći primer izvođenja (Primer izvođenja E33) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je definisan u bilo kom od primera izvođenja E6- E25, R<1>je -NH-HetB1 izborno supstituisan sa NH2i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Trideset i četvrti primer izvođenja (Primer izvođenja E34) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je definisan u bilo kom od primera izvođenja E6- E25, R<1>je NH-C1-C3alkilNH2, izborno supstituisan sa -CH3, -OH ili -NH2i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Trideset i peti primer izvođenja (Primer izvođenja E35) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljivu so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u
1
primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je definisan u bilo kom od primera izvođenja E6- E25, R<1>je NH-HetB1, gde je HetB14-6 člani zasićeni monociklični prsten sa 1 ili 2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N i O, izborno supstituisan sa -NH2, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Trideset i šesti primer izvođenja (Primer izvođenja E36) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljivu so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je definisan u bilo kom od primera izvođenja E6- E25, R<1>je -NH(CH2)2NH2, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Trideset i sedmi primer izvođenja (Primer izvođenja E37) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je definisan u bilo kom od primera izvođenja E6- E25, R<1>je -NHCH(CH2NH2)CH2NH2, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Trideset i osmi primer izvođenja (Primer izvođenja E38) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je definisan i bilo kom od primera izvođenja E6- E25, R<1>je -NHCH2CH(OH)CH2NH2, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Trideset i deveti primer izvođenja (Primer izvođenja E39) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je definisan u bilo kom od primera izvođenja E6- E25, R<1>je -NHCH2CH(NH2)CH2NH2, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Četrdeseti primer izvođenja (Primer izvođenja E40) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je definisan u bilo kom od primera izvođenja E6- E25, R<1>je -NHCH(CH2OH)CH2NH2, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Četrdeset i prvi primer izvođenja (Primer izvođenja E41) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je definisan u bilo kom od primera izvođenja E6- E25, R<1>je -NHCH(CH3)CH2NH2, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1. Četrdeset i drugi primer izvođenja (Primer izvođenja E42) je jedinjenje formule I, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je X1definisan u primeru izvođenja E2 ili E3, X2je definisan u
1
primeru izvođenja E4 ili E5, R<A>je definisan u bilo kom od primera izvođenja E6- E25, R<1>je -NH2, -NH-HetB1 zasićeni biciklični prsten izborno supstituisan sa -NH2, ili -NH-C2-C3alkilNH2, izborno supstituisan sa -CH3, -OH ili -NH2, i sve ostale promenljive su kao što su definisane u primeru izvođenja E1.
Četrdeset i treći primer izvođenja (Primer izvođenja E43) je jedinjenje ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, koje ima formulu IA:
gde:
RA je AryA1, C4-C6cikloalkil, ili C4-C6cikloalkenil, gde su navedeni C4-C6cikloalkil i C4-C6cikloalkenil izborno supstituisani sa -NH2ili NHC(O)(CH2)1-3NH2;
AryA1 je aromatičan sistem prstena izabran od sledećih:
1) 5-6 -člani monocikličan prsten sa 0, 1, ili 2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N i S, izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih:
a) F,
b) -C1-C6alkil,
c) -CN,
d) -CH2OH,
e) -C(O)NRaRb,
f) -C(O)NH(CH2)2-4NH2,
g) -C(O)ORa,
h) -(CH2)nNHRa,
i) -NHC(=NH)NH2;
j) -NHC(O)CH3;
k) -NRaSO2-C1-C6alkil,
l) -NHSO2-ciklopropil,
m) -ORa,
n) -SO2NRaRb,
o) -SC1-C6alkil,
p) -SO2NH-ciklopropil,
q) -AryA2,
1
r) -(CH2)nNRaAryA2,
s) -C(O)NRaHetA2 i
t) -HetA2, i
2) 8- do 10-člani biciklični prsten sa 1, 2, 3 ili 4 heteroatoma u prstenu izabrana od N, O i S, gde je S atom izborno supstituisan sa jednim ili dva okso supstituenta i N atom je izborno u obliku N-oksida, i pri čemu je prsten izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: F, C1-C6alkil, -CH2CF3, - CF2CH2NH2, -CF3, -C(=NH)NH2, -CH(NH2)CH3, -CN, -C(O)CF3, - C(O)NRaRb, -C(O)NHCH2C(O)ORa, -C(O)ORa, -(CH2)0-2NRaRb, - NHC(O)CH3, -NHC(O)NH2, -NHC(O)ORa, -NHCH2SO3H, - NHSO2CH3, -ORa, okso, -CH2-fenil-OCH3, i -HetA2;
gde su sve druge promenljive definisane u primeru izvođenja E1.
Četrdeset četvrti primer izvođenja (Primer izvođenja E44) je jedinjenje, ili njegova farmaceutski prihvatljivu so, koje ima formulu IB:
gde:
AryA1 je aromatičan sistem prstena izabran od sledećih:
1) 5-6 -člani monociklični prsten sa 0 ili 1 N atoma u prstenu supstituisana sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: F, -C1-C6alkil, -CONH-C2-4alkil-NH2, ili -NHRa; ili
2) 9-člani bicikličan prsten sa 2 heteroatoma u prstenu izabrana od N i S, gde je prsten izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: F, C1-C6alkil, i -(CH2)xNRaRb;
R1 je
1) -NH2;
2) -NR-C1-6alkil izborno supstituisan sa 1 ili 2 F supstituenta i izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: -CF3, -CH(NH2)C(O)NH2; -C(O)NRaRb; -C(O)OH; -NRa(CH2)2-3NHz, - NRaRb, -N+RaRbCH3, -NHCH2CH2OCH3, -ORa i -O(CH2)2-3NH2;
3) -NRa(CH2)n-C3-C6cikloalkil, gde je C3-C6cikloalkil izborno supstituisan sa -CH2OH ili -NH2; 4) -NRa-(C1-C3alkil)n-AryB1; i
5) NRa-(C1-C3alkil)n-HetB1;
1
Ra i Rb su H ili -CH3; x je 0, 1 ili 2, i sve ostale promenljive su definisane u primeru izvođenja E1.
Četrdeset i peti primer izvođenja (Primer izvođenja E45) je jedinjenje, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, koje ima formulu (IB):
gde:
AryA1 je aromatičan sistem prstena izabran od sledećih:
1) 5-6 -člani monocikličan prsten sa 0 ili 1 N atoma u prstenu supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: F, -C1-C6alkil, -CONH-C2-4alkil-NH2, ili -NHRa; ili
2) 9-člani bicikličan prsten sa 2 heteroatoma u prstenu izabrana od N i S, gde je prsten izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: F, C1-C6alkil i -(CH2)0-
2NRaRb;
R1 je
1) -NH2;
2) -NRa-C1-C6alkil izborno supstituisan sa 1 ili 2 F supstituenta i izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih. -CF3, -CH(NH2)C(O)NH2; -C(O)NRaRb; -C(O)OH; -NRaRb, - N+RaRbCH3, -ORa, i -O(CH2)1-2NH2;
3) -NRa(CH2)0-1-C3-6cikloalkil, gde je C3-6cikloalkil izborno supstituisan sa -CH2OH ili -NH2; 4) -NRa-C0-3alkil-AryB1; i
5) -NRa-C0-3alkil-HetB 1;
HetB1 je:
1) 4-6 člani zasićeni monociklični prsten sa 1 ili 2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N, O i S, gde je S supstituisan sa dve okso grupe i gde je prsten izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: F, C1-C6alkil, C1-C6hidroksialkil, -NRaRb, -OH, C1-6alkoksi, -C(O)ORa i okso; ili
2) 6-8-člani biciklični prsten sa 1 ili 2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N i O, izborno supstituisana sa -OH ili -NH2, gde je bicikličan prsten je premošćen ili fuzionisan;
Ra i Rb su H ili -CH3i sve ostale promenljive su kao što su obezbeđene u primeru izvođenja E1. Četrdeset i šesti primer izvođenja pronalaska (primer izvođenja E46) je: (1) jedinjenje koje ima strukturu bilo kog od jedinjenja numerisanih 1-500 u ovde datim Primerima, (2) oblik slobodne
2
kiseline ili slobodne baze (kada je prisutna bazna grupa amina) bilo kog jedinjenja numerisanog sa 1-500 ovde koje je prikazano kao so, (3) cviterjonski oblik bilo kog od jedinjenja 1-500 koji sadrži baznu grupu amina, gde tetrazol nosi negativno naelektrisanje i grupa amina nosi pozitivno naelektrisanje, ili (4) farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja opisanog u (1), (2) i/ili (3). Četrdeset i sedmi primer izvođenja prema pronalasku (primer izvođenja E47) je jedinjenje koje ima strukturu:
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
Ostali primeri izvođenja predmetnog pronalaska obuhvataju sledeće:
(a) Farmaceutsku kompoziciju koja sadrži efikasnu količinu jedinjenja formule I, IA, ili IB kao što je definisano u prethodnom tekstu, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i farmaceutski prihvatljiv nosač.
(b) Farmaceutska kompozicije prema (a), koja dodatno sadrži efikasnu količinu β-laktamskog antibiotika i izborno dodatno sadrži efikasnu količinu jedinjenja koje je inhibitor β-laktamaze klase A, inhibitor β-laktamaze klase C i/ili inhibitor β-laktamaze klase D.
(c) Farmaceutska kompozicije prema (b), gde je β-laktamski antibiotik izabran iz grupe koja se sastoji od imipenema, ertapenema, meropenema, doripenema, biapenema, panipenema, ticarcilina, ampicilina, amoksicilina, karbenicilina, piperacilina, azlocilina, mezlocilina, ticarcilina, cefoperazona, cefotaksima, ceftriaksona, cefipima, ceftolozana i ceftazidima, i inhibitor β-laktamaze klase A, C i D je izabran iz grupe koja se sastoji od relebaktama, avibaktama, vaborbaktama, tazobaktama, sulbaktama, klavulanske kiseline ili CB-618.
(d) Farmaceutska kompozicije prema (b), gde β-laktamski antibiotik je imipenem.
(e) Farmaceutska kompozicije prema (b), gde β-laktamski antibiotik je ceftazidim.
(f) Farmaceutska kompozicije prema (b), gde β-laktamski antibiotik je ceftolozan.
(g) Farmaceutska kompozicije prema (b), gde β-laktamski antibiotik je piperacilin.
(h) Farmaceutska kompozicije prema (a), koja dodatno sadrži jedinjenje koje je inhibitor βlaktamaze klase A, inhibitor β-laktamaze klase C i/ili inhibitor β-laktamaze klase D.
(i) Farmaceutska kompozicije prema bilo kom od (b) -(h), gde jedinjenje inhibitor β-laktamaze je relebaktam.
(j) Farmaceutska kompozicije prema bilo kom od (b) -(h), gde jedinjenje inhibitor β-laktamaze je tazobaktam.
(k) Farmaceutska kompozicije prema (a), koja dodatno sadrži efikasne količine β-laktamskog antibiotika, inhibitor renalne dehidropeptidaze (DHP) i izborno, inhibitor β-laktamaze klase A, C i D.
(l) Farmaceutska kompozicije prema (k), gde β-laktamski antibiotik je imipenem, inhibitor DHP je cilastatin ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, i inhibitor β-laktamaze klase A, C i D je relebaktam.
(m) Kombinacija efikasnih količina jedinjenja formule I kao što je definisana u prethodnom tekstu, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, β-laktamskog antibiotika, i izborno, inhibitora β-laktamaze klase A, C i/ili D.
(n) Kombinacija prema (j), gde je β-laktamski antibiotik izabran iz grupe koja se sastoji od imipenema, ertapenema, meropenema, doripenema, biapenema, panipenema, ticarcilina, ampicilina, amoksicilina, karbenicilina, piperacilina, azlocilina, mezlocilina, ticarcilina, cefoperazona, cefotaksima, ceftriaksona, cefipima, ceftolozana i ceftazidima.
(o) Kombinacija prema (n), gde β-laktamski antibiotik je imipenem, izborno u kombinaciji sa cilistatinom, i inhibitor β-laktamaze klase A, C, D je relebaktam.
(p) Kombinacija prema (n), gde β-laktamski antibiotik je ceftazidim i inhibitor β-laktamaze klase A, C, D je avibaktam.
(q) Kombinacija prema (n), gde β-laktamski antibiotik je ceftolozan i inhibitor β-laktamaze klase A, C, D je avibaktam ili relebaktam.
(r) Kombinacija prema (n), gde β-laktamski antibiotik je piperacilin.
(s) Kombinacija efikasnih količina jedinjenja formule I, IA ili IB kao što je definisano u prethodnom tekstu, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i inhibitora β-laktamaze klase A, C i/ili D.
2
(t) Kombinacija efikasnih količina jedinjenja formule I, IA, ili IB kao što je definisano u prethodnom tekstu, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, β-laktamskog antibiotika, inhibitora DHP i izborno inhibitora β-laktamaze klase A, C i/ili D.
(u) Kombinacija prema (t), gde β-laktamski antibiotik je imipenem, inhibitor DHP je cilastatin ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, i inhibitor β-laktamaze klase A, C i D je relebaktam.
(v) Jedinjenje formule I, IA, ili IB kao što je definisano u prethodnom tekstu, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, u kombinaciji sa β-laktamskim antibiotikom i izborno u kombinaciji sa inhibitorom β-laktamaze klase A, C i D, za upotrebu u postupku za lečenje bakterijske infekcije kod subjekta.
(w) Jedinjenje formule I, IA, ili IB kao što je definisano u prethodnom tekstu, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, u kombinaciji sa β-laktamskim antibiotikom i inhibitorom DHP, i izborno u kombinaciji sa inhibitorom β-laktamaze klase A, C i D, za upotrebu u postupku za lečenje bakterijske infekcije kod subjekta.
(x) Kompozicija prema (a), (b), (c), (d), (e), (f), (g), (h), (i), (j), (k), ili (1) za upotrebu prema postupku za lečenje bakterijske infekcije kod subjekta.
(y) Kombinacija prema (m), (n), (o), (p), (q), (r), (s), (t), ili (u) za upotrebu u postupku za lečenje bakterijske infekcije kod subjekta.
(z) Jedinjenje za upotrebu kao što je navedeno u (v), (w), (x), (y) ili (z) gde je bakterijska infekcija posledica Pseudomonas spp., Klebsiella spp., Enterobacter spp., Escherichia spp., Morganella spp., Citrobacter spp., Serratia, spp. ili Acintetobacter spp.
Predmetni pronalazak obuhvata jedinjenje formule I, IA, ili IB, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, (i) za upotrebu u, ili (ii) za upotrebu kao lek za, lečenje bakterijske infekcije. Takođe je otkriveno jedinjenje formule I, IA, ili IB, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, (i) za upotrebu u inhibiciji aktivnosti beta-laktamaze, (ii) za upotrebu kao leka za inhibiciju aktivnosti beta-laktamaze, ili (iii) za upotrebu u pripremi (ili proizvodnji) leka za inhibiciju aktivnosti beta-laktamaze ili lečenje bakterijske infekcije.
Jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu izborno biti korišćena u kombinaciji sa jednim ili više β-laktamskih antibiotika, i mogu dalje biti korišćena u kombinaciji sa serinskim inhibitorom β-laktamaze klase A, C i/ili D i/ili jednim ili više inhibitora DHP.
Dodatni primeri izvođenja prema pronalasku obuhvataju farmaceutske kompozicije, kombinacije i upotrebe navedene u (a)-(z) u prethodnom tekstu i upotrebe navedene u prethodnom pasusu, pri čemu je jedinjenje predmetnog pronalaska koje je ovde korišćeno jedinjenje jednog od primera izvođenja, pod-primera izvođenja, klasa ili pod-klasa opisanih u prethodnom tekstu. Jedinjenje može biti korišćeno u obliku farmaceutski prihvatljive soli u ovim primerima izvođenja. Pored toga, jedinjenje može izborno biti korišćeno u obliku proleka koji oslobađa aktivno matično jedinjenje posle doziranja inrtravenskom ili oralnom primenom.
U primerima izvođenja jedinjenja i soli obezbeđenih u prethodnom tekstu, potrebno je razumeti da svaki primer izvođenja može biti kombinovan sa jednim ili više drugih primera izvođenja, do te mere da takva kombinacija obezbeđuje stabilno jedinjenje ili so i u skladu je sa opisom primera izvođenja. Dalje je potrebno razumeti da se primeri izvođenja kompozicija i upotreba obezbeđenih kao (a) do (z) u prethodnom tekstu razumeju tako da obuhvataju sve primere izvođenja jedinjenja i/ili soli, uključujući takve primere izvođenja kao rezultat kombinacija primera izvođenja.
Dodatni primeri izvođenja predmetnog pronalaska obuhvataju svaku od farmaceutskih kompozicija, kombinacija i upotreba navedenih u prethodnim pasusima, gde je jedinjenje predmetnog pronalaska ili njegova so korišćeno tu značajno čisto. U vezi sa farmaceutskom kompozicijom koja sadrži jedinjenje formule I, IA, ili IB ili njegovu so i farmaceutski prihvatljiv nosač i izborno jedan ili više ekscipijenasa, razume se da je termin "značajno čist" u vezi sa jedinjenjem formule I, IA, ili IB ili njegovom soli per se; tj., čistoćom aktivnog sastojka u kompoziciji.
Definicije i skraćenice:
Termin "inhibitor β-laktamaze" označava jedinjenje koje je sposobno za inhibiciju enzimske aktivnosti β-laktamaza. Kao što je ovde korišćena, aktivnost inhibicije β-laktamaze označava aktivnost inhibicije β-laktamaze klase A, B, C i/ili D. Za antimikrobijalne primene inhibicija na 50% inhibitorne koncentracije je poželjno postignuta na ili ispod oko 100 mikrograma/mL, ili na ili ispod oko 50 mikrograma/mL, ili na ili ispod oko 25 mikrograma/mL. Termini β-laktamaze "klase A", "klase B", "klase C" i "klase D" su jasni stručnjacima u datoj oblasti tehnike i opisani su u S. G. Waley, β-lactamase: mechanisms of action, u The Chemistry of β-Lactams, M. I. Page, Ed.; Chapman and Hall, London, (1992) 198-228.
Termin "inhibitor metalo-β-laktamaze" označava jedinjenje koje je sposobno za inhibiciju aktivnosti metalo-β-laktamaze. Kao što je ovde korišćena, inhibicija aktivnosti metalo-βlaktamaze označava inhibiciju aktivnosti metalo-β-laktamaze klase B. Za antimikrobijalne primene inhibicija u 50% inhibitorne koncentracije je poželjno postignuto na ili ispod oko 100 µg/mL, ili na ili ispod oko 50 µg/mL, ili na ili ispod oko 25 µg/mL.
Termin "metalo-β-laktamaza" označava metaloprotein sposoban da inaktivira β-laktamski antibiotik. β-laktamaza može biti enzim koji katalizuje hidrolizu β-laktamskog prstena βlaktamskog antibiotika. Od posebnog interesa ovde su mikrobijalne metalo-β-laktamaze. Metalo-
2
β-laktamaza može biti, na primer, cink metalo-β-laktamaza. β-laktamaze od interesa obuhvataju one otkrivene u, npr., S. G. Waley, β-lactamase: mechanisms of action, in The Chemistry of β-Lactams, M. I. Page, Ed.; Chapman and Hall, London, (1992) 198-228. β-Laktamaze od posebnog interesa ovde obuhvataju metalo-β-laktamaze od Escherichia coli (kao što je New Delhi Metalo-b-laktamaza, NDM), Serratia marcescens (kao što je IMP), Klebsiella spp. (kao što je Verona integron-kodirana metalo-β-laktamaza, VIM)) i Pseudomonas spp (kao što je Verona integron-kodirana metalo-β-laktamaza, VIM)). Dodatne metalo-β-laktamaze od interesa ovde obuhvataju enzime SPM-, GIM-, SIM-, KHM-, AIM-, DIM-, SMB-, TMB- i FIM-tipa. Termin "antibiotik" označava jedinjenje ili kompoziciju koja smanjuje vijabilnost mikroorganizma, ili koje inhibira rast ili proliferaciju mikroorganizma. Izraz "inhibira rast ili proliferaciju" označava povećava vreme generisanja (tj., vreme potrebno da se bakterijska ćelija podeli ili da se populacija udvostruči) za najmanje oko 2-puta. Poželjni antibiotici su oni koji mogu da povećaju vreme generisanja za najmanje oko 10-puta ili više (npr., najmanje oko 100-puta ili čak neograničeno, kao kod totalne ćelijske smrti). Kao što je korišćen u ovom otkrivanju, antibiotik je dalje određen tako da obuhvata antimikrobijalno, bakteriostatičko ili baktericidno sredstvo. Primeri antibiotika pogodnih za upotrebu u vezi sa predmetnim pronalaskom obuhvataju peniciline, cefalosporine i karbapeneme.
Termin "β-laktamski antibiotik" označava jedinjenje sa antibiotiskim osobinama koje sadrži βlaktamsku funkcionalnu grupu. Neograničavajući primeri β-laktamskih antibiotika korisni u vezi sa pronalaskom obuhvataju peniciline, cefalosporine, peneme, karbapeneme i monobaktame. Termin "oko", kada modifikuje količinu (npr., kg, L, ili ekvivalent) supstance ili kompozicije, ili vrednost fizičke osobine, ili vrednost parametra koji karakteriše korak postupka (npr., temperatura na kojoj je izveden korak postupka), ili slično označava varijaciju u numeričkoj količini koja može da se javi, na primer, preko tipičnih postupaka merenja, rukovanja i uzorkovanja uključenih u pripremu, karakterizaciju i/ili upotrebu supstance ili kompozicije; preko nesmotrene greške u ovim postupcima; preko razlika u proizvodnji, izvoru ili čistoći sastojaka korišćenih za pripremu ili upotrebu kompozicija ili izvođenje postupaka; i slično. U određenim primerima izvođenja, "oko" može da označava varijaciju ± 0.1, 0.2, 0.3, 0.4, 0.5, 1.0, 2.0, 3.0, 4.0, ili 5.0 odgovarajuće jedinice. U određenim primerima izvođenja, "oko" može da označava varijaciju ± 1%, 2%, 3%, 4%, 5%, 10%, ili 20%.
Sledeći primer izvođenja predmetnog pronalaska je jedinjenje formule I, IA, ili IB, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, kao što je originalno definisano ili kao što je definisano u bilo kom od gore navedenih primera izvođenja, podprimera izvođenja, aspekata, klasa ili podklasa, gde je jedinjenje ili njegova so u značajno čistom obliku. Kao što je ovde korišćeno "značajno čist"
2
označava pogodno najmanje oko 60 tež.%, tipično najmanje oko 70 tež.%, poželjno najmanje oko 80 tež.%, poželjnije najmanje oko 90 tež.% (npr., od oko 90 tež.% do oko 99 tež.%), čak poželjnije najmanje oko 95 tež.% (npr., od oko 95 tež.% do oko 99 tež.%, ili od oko 98 tež.% do 100 tež.%), i najpoželjnije najmanje oko 99 tež.% (npr., 100 tež.%) proizvoda koji sadrži jedinjenje formule I, IA ili IB, ili njegovu so (npr., proizvod je izolovan iz reakcione smeše dajući jedinjenje ili so) sastoji se od jedinjenja ili soli. Nivo čistoće jedinjenja i soli može biti određen upotrebom standardnog postupka analize kao što je hromatografija na tankom sloju, elektroforeza na gelu, tečna hromatografija visokog učinka i/ili masena spektrometrija. Ako je korišćen više od jednog postupka analize i postupci obezbeđuju eksperimentalno značajne razlike u nivou određene čistoće, tada se uzima u obzir postupak koji obezbeđuje najviši nivo čistoće. Jedinjenje ili so čistoće 100% je ono koje je bez detektabilnih nečistoća kao što je određeno pomoću standardnog postupka analize.
U vezi sa jedinjenjem pronalaska koje ima jedan ili više asimetričnih centara i može da se javi kao smeše stereoizomera, značajno čisto jedinjenje može biti značajno čista smeša stereoizomera ili značajano čist pojedinačni diastereomer ili enantiomer osim ukoliko je izričito prikazano drugačije. Predmetni pronalazak obuhvata sve stereoizomerne oblike jedinjenja formule I, IA i IB. Osim ukoliko je naznačena specifična stereohemija, predmetni pronalazak je označen tako da obuhvata sve takve izomerne oblike ovih jedinjenja. Centri asimetrije koji su prisutni u jedinjenjima formule I, IA i IB mogu svi međusobno nezavisno da imaju (R) konfiguraciju ili (S) konfguraciju. Kada su veze za hiralni ugljenik prikazane kao prave linije u strukturnim formulama pronalaska, razume se da su obe (R) i (S) konfiguracije hiralnog ugljenika, i stoga oba enantiomera i njihove smeše, obuhvaćeni unutar formule. Slično, kada je naziv jedinjenja naveden bez hiralne oznake za hiralni ugljenik, razume se da su obe (R) i (S) konfiguracije hiralnog ugljenika, i stoga pojedinačni enantiomeri, diastereomeri i njihove smeše, obuhvaćeni nazivom. Proizvodnja specifičnih steroizomera ili njihovih smeša može biti identifikovana u Primerima gde su takvi stereoizomeri ili smeše dobijeni, ali ovo ni na koji način ne ograničava obuhvatanje svih stereoizomera i njihovih smeša unutar obima ovog pronalaska.
Pronalazak obuhvata sve moguće enantiomere i diastereomere i smeše dva ili više stereoizomera, na primer smeše enantiomera i/ili diastereomera, u svim odnosima. Na taj način, enantiomeri su predmet pronalaska u enantiomerno čistom obliku, kao levorotatorni i desnorotatorni antipodi, u obliku racemata i u obliku smeša dva enantiomera u svim odnosima. U slučaju cis/trans izomerizma pronalazak obuhvata cis oblik i trans oblik kao i smeše ovih oblika u svim odnosima. Priprema pojedinačnih stereoizomera može se izvesti, ako je poželjno, odvajanjem smeše pomoću uobičajenih postupaka, na primer hromatografijom ili kristalizacijom, upotrebom
2
stereohemijski ujednačenih početnih materijala za sintezu ili pomoću stereoselektivne sinteze. Izborno, derivatizacija se može izvesti pre odvajanja stereoizomera. Odvajanje smeše stereoizomera se može izvesti u intermedijernom koraku u toku sinteze jedinjenja formule I, IA i IB ili se može izvesti na finalnom racemskom proizvodu. Apsolutna stereohemija može biti određena pomoću rendgenske kristaliografije kristalnih proizvoda ili kristalnih intermedijera koji su derivatizovani, ako je neophodno, sa reagensom koji sadrži stereogeni centar poznate konfiguracije. Osim ukoliko je naznačen određeni izomer, so, solvat (uključujući hidrate) ili solvatirana so takvog racemata, enantiomera ili diastereomera, predmetni pronalazak obuhvata sve takve izomere, kao is oli, solvate (uključujući hidrate) i solvatirane soli takvih racemata, enantiomera, diastereomera i njihove smeše.
"Alkil" označava zasićene ugljenikove lance koji mogu biti linearni ili granati ili njihove kombinacije, osim ukoliko je ugljenikov lanac drugačije definisan. Ostale grupe koje imaju prefiks "alk", kao što su alkoksi i alkanoil, takođe mogu biti linearne ili granate, ili njihove kombinacije, osim ukoliko je ugljenikov lanac definisan drugačije. Primeri alkil grupa obuhvataju metil, etil, propil, izopropil, butil, sek- i terc-butil, pentil, heksil, heptil, oktil, nonil i slično.
"Aminoalkil" označava zasićene ugljenične lance koji mogu biti linearni ili granati ili njihove kombinacije koji su supstituisani sa jednom amino grupom koja može biti terminalna (-NH2) ili unutrašnja (-NH-).
"Hidroksialkil" označava zasićene ugljenične lance koji mogu biti linearni ili granati ili njihove kombinacije koji su supstituisani sa jednom hidroksil (-OH) grupom.
"Diaminoalkil" označava zasićene ugljenične lance koji mogu biti linearni ili granati ili njihove kombinacije koji su supstituisani sa dve amino (-NH2) grupe.
"Dihidroksialkil" označava zasićene ugljenične lance koji mogu biti linearni ili granati ili njihove kombinacije koji su supstituisani sa dve hidroksil (-OH) grupe.
"Hidroksiaminoalkil" označava zasićene ugljenične lance koji mogu biti linearni ili granati ili njihove kombinacije koji su supstituisani sa jednom hidroksil (-OH) grupom i jednom amino (-NH2) grupom.
"Alkenil" označava ugljenikove lance koji sadrže najmanje jednu ugljenik-ugljenik dvogubu vezu, i koji mogu biti linearni ili granati, ili njihove kombinacije, osim ukoliko je drugačije definisano. Primeri alkenila obuhvataju vinil, alil, izopropenil, pentenil, heksenil, heptenil, 1-propenil, 2-butenil, 2-metil-2-butenil i slično.
"Aromatičan sistem prstena" označava monocikličan, bicikličan ili tricikličan aromatičan prsten ili sistem prstena koji sadrži 5-14 atoma u prstenu, gde je najmanje jedan od prstenova
2
aromatičan. Ovaj termin takođe može biti korišćen za opisivanje karbocikličnog prstena fuzionisanog za aril grupu. Na primer, 5-7-člani cikloalkil može biti fuzionisan preko dva susedna atoma u prstenu za 5-6-člani heteroaril koji sadrži 1, 2, ili 3 heteroatoma u prstenu izabrana od N, O i S. U sledećem primeru, heteromonocikličan prsten je fuzionisan preko dva atoma u prstenu za fenil ili 5-6-člani heteroaril koji sadrži 1, 2, ili 3 heteroatoma izabrana od N, O i S. U slučaju da heteromonocikličan prsten sadrži jedan ili više N atoma, N može biti u obliku kvaternarnog amina. U određenim primerima izvođenja, N atom u prstenu može biti u obliku N-oksida.
"Aril" označava monocikličan, bicikličan ili tricikličan karbocikličan aromatičan prsten ili sistem prstena koji sadrže 5-14 atoma ugljenika, gde je najmanje jedan od prstenova aromatičan. Primeri arila obuhvataju fenil i naftil. U jednom primeru izvođenja predmetnog pronalaska, aril je fenil.
"Cikloalkil" označava zasićeni monociklični, biciklični ili premošćeni karbociklični prsten, koji ima naznačeni broj atoma ugljenika. Primeri cikloalkila obuhvataju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, cikloheptil, indanil, 1,2,3,4-tetrahidronaftil i slično. U jednom primeru izvođenja predmetnog pronalaska, cikloalkil je izabran od: ciklopropana, ciklobutana, ciklopentana i cikloheksana.
"Cikloalkenil" označava nearomatičan monociklični ili biciklični karbociklični prsten koji sadrži najmanje jednu dvogubu bezu. Primeri cikloalkenila obuhvataju ciklopropenil, ciklobutenil, ciklopentenil, cikloheksenil, cikloheptenil, ciklookstenil i slično.
"Cikloheteroalkil" ili "heterocikloalkil" označava zasićeni ili delimično nezasićeni nearomatični monociklični, biciklični (uključujući spirociklični) ili premošćeni karbociklični prsten ili sistem prstena koji sadrži 3 do oko 11 atoma u prstenu, koji sadrže najmanje jedan heteroatom u prstenu izabran od N, S i O i ostatak atoma prstena su atomi ugljenika. Atom azota ili sumpora heterocikloalkila mogu biti izborno oksidovani do odgovarajućih N-oksida, S-oksida ili S-dioksida. Heterocikloalkil grupa može biti spojena preko ugljenika u prstenu, ili atoma azota u prstenu, osim ukoliko je naznačeno drugačije. Cikloheteroalkil prsten može biti supstituisan na ugljenicima prstena i/ili azotu (azotima) prstena. U jednom primeru izvođenja, heterocikloalkil grupa je monociklična i ima od oko 3 do oko 7 atoma u prstenu ("3 do 7-člana monociklična heterocikloalkil" grupa). U sledećem primeru izvođenja, heterocikloalkil grupa je monociklična koja ima od oko 4 do oko 7 atoma u prstenu ("4 do 7-člana monociklična heterocikloalkil" grupa). U drugim primerima izvođenja, heterocikloalkil grupa je biciklična i ima 7-10 atoma u prstenu, 8-10 atoma u prstenu, ili 9 ili 10 atoma u prstenu ("9 ili 10-člana biciklična heterocikloalkil" grupa). U sledećem primeru izvođenja, heterocikloalkil grupa je monociklična i
2
ima 5 ili 6 atoma u prstenu. U jednom primeru izvođenja, heterocikloalkil grupa je monociklična. U sledećem primeru izvođenja, heterocikloalkil grupa je biciklična. U sistemu prstena nema prisutnih susednih atoma kiseonika i/ili sumpora. Primeri cikloheteroalkila obuhvataju tetrahidrofuran, piperazin, piperidin, morfolin, oksetan, tetrahidropiran, indolinil, izoindolinil, azabiciklooktan, heksahidrofuro[3,2-b]furan i 2,3,3a,5,6,6a-heksahidrofuro[3,2-b]furan. Tamo gde prsten ili sistem prstena sadrži jedan ili više N atoma, N može biti u obliku kvaternarnog amina.
Kao što je ovde korišćen, "azotom-vezani heterocikloalkil" označava heterocikloalkil koji sadrži azot koji je vezan za ostatak jedinjenja preko veze sumpora-azota za SO2linker, koji je vezan za 6-člano jezgro prsena koje sadrži X1i X2. Na primer, sledeća jedinjenja pronalaska sadrže azotom-vezani heterocikloalkil:
Azotom-vezani heterocikloalkil može biti 4-6 -člani monociklični prsten, koji može da sadrži 0, 1, ili 2, dodatna heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N, O i S ili 7- do 10-člani biciklični prsten sa 0, 1, 2, ili 3 dodatna heteroatoma u prstenu izabrana od N, O i S. Biciklični azotom-vezani heterocikloalkil može biti premošćen, fuzionisan ili spirocikličan. Azotom-vezani heterocikloalkil može izborno biti supstituisan sa jednim do tri supstituenta kao što su ovde definisani.
"Heteroaril" označava monocikličan, bicikličan ili tricikličan prsteb ili sistem prstena koji sadrži 5-14 atoma ugljenika i koji sadrže najmanje jedan heteroatom u prstenu izabran od N, S (uključujući SO i SO2) i O, gde je najmanje jedan od heteroatoma u prstenu atomatičan. U slučaju heteroaril sistema prstena gde su jedan ili više prstenova zasićeni i sadrže jedan ili više N atoma, N može biti u obliku kvaternarnog amina. Primeri heteroarila obuhvataju pirolil, izoksazolil, izotiazolil, pirazolil, piridil, oksazolil, oksadiazolil, tiadiazolil, tiazolil, imidazolil, triazolil, tetrazolil, furanil, triazinil, tienil, pirimidil, piridazinil, pirazinil, benzizoksazolil, benzoksazolil, benzotiazolil, benzimidazolil, benzopirazolil, benzofuranil, benzotiofenil (uključujući S-oksid i dioksid), benzotriazolil, furo(2,3-b)piridil, hinolil, indolil, izohinolil, hinazolinil, dibenzofuranil i slično. Primeri bicikličnih heteroaril prstenova obuhvataju:
"Halogen" obuhvata fluor, hlor, brom i jod.
"Okso" označava atom kiseonika vezan za drugi atom dvogubom vezom i može biti predstavljen sa "=O".
Tamo gde je bilo koji amin prisutan u jedinjenju, N atom može biti izborno u obliku kvaternarnog amina koji ima jednu ili više odgovarajućih dodatnih supstitucija, kao što je dodatno opisano ovde.
Tamo gde je bilo koji atom prstena naznačen kao izborno supstituisan sa, ili u naznačenom boliku, na primer, S supstituisan sa okso grupama, ili N u obliku N-oksida, ovo ne isključuje supstituciju bilo kog atoma u prstenu sa drugim navedenim izbornim supstituentima kada nije supstituisan sa okso grupama ili u obliku N-oksida.
Kada se bilo koja promenljiva (npr., n, Ra, Rb, itd.) javlja više od jednom u bilo kom konstituentu ili u formuli I, IA, ili IB, njena definicija u svakom slučaju je nezavisna od njene definicije u svakom drugom slučaju. Takođe, kombinacije supstituenata i/ili promenljivih su dozvoljene samo ako takve kombinacije rezultuju u stabilnim jedinjenjima.
Talasasta linija , kao što je ovde korišćena oznalčava tačku vezivanja za ostatak jedinjenja. Linije nacrtane u sistemu prstena, na primer:
označavaju da veza može biti vezana za bilo koje od atoma u prstenu koji se mogu suspstituisati. Pod standardnom nomenklaturom korišćenom u ovom otkriću, terminalni deo označenog bočnog lanca je opisan poslednji, pre njega je susedna funkcionalna grupa prema tački vezivanja.
U izboru jedinjenja predmetnog pronalaska, stručnjak iz date oblasti tehnike će prepoznati da bi različite supstituente, tj. R<1>, R<A>, itd., trebalo izabrati u skladu sa dobro poznatim principa vezivanja i stabilnosti hemijske strukture.
Termin "supstituisan" će biti određen tako da obuhvata višestruke stepene supstitucije sa imenovanim supstituentom. Tamo gde su višestruke grupe supstituenta otkrivene ili navedene u zahtevima, supstituisano jedinjenje može biti nezavisno supstituisano sa jednim ili više od
1
otkrivenih ili u zahtevima navedenih grupa supstituenata, pojedinačno ili u množini. Nezavisno supstituisan, označava da (dva ili više) supstituenata mogu biti isti ili različiti.
U jedinjenjima formule I, IA, ili IB, atomi mogu da ispoljavaju njihove prirodne izotopske abundance, ili jedan ili više od atoma mogu biti veštački obogaćeni u određenom izotopu koji ima isti atomski broj, ali atomsku masu ili maseni broj različit od atomske mase ili masenog broja koji se pretežno nalazi u prirodi. Predmetni pronalazak je označen tko da obuhvata sve pogodne izotopske varijacije jedinjenja formule I, IA, ili IB. Na primer, različiti izotopski oblici vodonika (H) obuhvataju protijum (1H) i deuterijum (2H ili D). Protijum je pretežni vodonični izotop zabeležen u prirodi. Obogaćenje za deuterijum može da omogući određene terapeutske prednosti, kao što je povećanje in vivo polu-života ili smanjenje potrebne doze, ili može da obezbedi jedinjenje korisno kao standard za karakterizaciju bioloških uzoraka. Izotopskiobogaćena jedinjenja unutar formule I, IA, ili IB, mogu biti pripremljena bez nepotrebnog eksperimentisanja pomoću konvencionalnih tehnika dobro poznatih stručnjacima iz date oblasti tehnike ili pomoću postupaka analognih onima opisanim u Šemama i Primerima ovde upotrebom odgovarajućih izotopski-obogaćenih reagenasa i/ili intermedijera.
Osim ukoliko nije izričito navedeno suprotno u određenom kontekstu, bilo koja od različitih promenljivih ili supstituenata cikličnog prstena i sistema prstena opisanih ovde može biti vezana/vezan za ostatak jedinjenja na bilo kom atomu prstena (tj., bilo koji atom prstena ili bilo koji heteroatom) uz uslov da se dobia stabilno jedinjenje.
Osim ukoliko je izričito navedeno suprotno, svi opsezi citirani ovde su takvi da uključuju granične vrednosti. Na primer, heteroaromatični prsten opisan tako da sadrži od "1 do 4 heteroatoma" označava da prsten može da sadrži 1, 2, 3 ili 4 heteroatoma. Takođe je potrebno razumeti da bilo koji opseg citiran ovde obuhvata unutar svog obima sve pod-opsege unutar tog opsega. Na taj način, na primer, heterocikličan prsten opisan tako da sadrži od "1 do 4 heteroatoma" je određen tako da obuhvata kao svoje aspekte, heterociklične prstenove koji sadrže 2 do 4 heteroatoma, 3 ili 4 heteroatoma, 1 do 3 heteroatoma, 2 ili 3 heteroatoma, 1 ili 2 heteroatoma, 1 heteroatom, 2 heteroatoma, 3 heteroatoma i 4 heteroatoma. Slično, C1-C6kada je korišćen sa lancem, na primer alkil lanac, označava da lanac može da sadrži 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 atoma ugljenika. On takođe obuhvata sve opsege koji su tu sadržani uključujući C1-C5, C1-C4, C1-C3, C1-C2, C2-C6, C3-C6, C4-C6, C5-C6, i sve druge moguće kombinacije.
"Stabilno" jedinjenje je jedinjenje koje može biti pripremljeno i izolovano i čija struktura i osobine ostaju ili mogu biti uzrokovani da ostanu esencijalno nepromenjeni tokom vremenskog perioda koji je dovoljan da se jedinjenje koristi za svrhe opisane ovde (npr., terapeutska primena
2
na subjekta). Jedinjenja predmetnog pronalaska su ograničena na stabilna jedinjenja obuhvaćena formulama I, IA i IB.
Termin "jedinjenje" označava jedinjenje i, u određenim slučajevima, stepen do koga su stabilna, bilo koji njegov hidrat ili solvat. Hidrat je jedinjenje u kompleksu sa vodom, i solvat je jedinjenje u kompleksu sa organskim rastvaračem.
Kao što je naznačeno u prethodnom tekstu, jedinjenja predmetnog pronalaska mogu biti korišćena u obliku farmaceutski prihvatljivih soli. Stručnjaci iz date oblasti tehnike će prepoznati one slučajeve u kojima jedinjenja prema pronalasku mogu da formiraju soli. Termin "farmaceutski prihvatljiva so" označava so (uključujući unutrašnju so kao što je cviterjon) koja poseduje efikasnost sličnu matičnom jedinjenju i koja nije biološki ili na drugi način neželjena (npr., nije toksična niti na drugi način štetna za njenog primaoca). Na taj način, primer izvođenja pronalaska daje farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja prema pronalasku. Termin "so(soli)", kao što je ovde korišćen, označava bilo koje od sledećih: kisele soli formirane sa neorganskim i/ili organskim kiselinama, kao i bazne soli formirane sa neorganskim i/ili organskim bazama. Soli jedinjenja prema pronalasku mogu biti formirane pomoću postupaka poznatih stručnjacima iz date oblasti tehnike, na primer, reakcijom jedinjenja prema pronalasku sa količinom kiseline ili baze, kao što je ekvivalentna količina, u medijumu kao što je onaj u kome se so taloži ili u vodenom medijumu nakon čega sledi liofilizacija.
Primeri kiselih adicionih soli obuhvataju acetate, askorbate, benzoate, benzensulfonate, bisulfate, borate, butirate, citrate, kamforate, kamforsulfonate, fumarate, hidrohloride, hidrobromide, hidrojodide, laktate, maleate, metansulfonate ("mezilate"), naftalensulfonate, nitrate, oksalate, fosfate, propionate, salicilate, sukcinate, sulfate, tartarate, tiocijanate, toluensulfonate (takođe poznate kao tozilate) i slično. Dodatno, razmatrane su kiseline koje se generalno smatraju pogodnim za formiranje farmaceutski prihvatljivih soli od baznih farmaceutskih jedinjenja, na primer, od strane P. Stahl et al, Camille G. (eds.) Handbook of Pharmaceutical Salts. Properties, Selection and Use. (2002) Zurich: Wiley-VCH; S. Berge et al, Journal of Pharmaceutical Sciences (1977) 66(1) 1-19; P. Gould, International J. of Pharmaceutics (1986) 33 201-217; Anderson et al, The Practice of Medicinal Chemistry (1996), Academic Press, New York; i u The Orange Book (Food & Drug Administration, Washington, D.C. na njihovoj veb stranici). Primeri baznih soli obuhvataju amonijum soli, soli alkalnih metala kao što su soli natrijuma, litijuma i kalijuma, soli zemnoalkalnih metala kao što su soli kalcijuma i magnezijuma, soli sa organskim bazama (na primer, organski amini) kao što su dicikloheksilamin, t-butil amin, holin i soli sa aminokiselinama kao što su arginin, lizin i slično. Bazne grupe koje sadrže azot mogu biti kvaternizovane sa sredstvima kao što su niži alkil halogenidi (npr., metil, etil i butil hloridi, bromidi i jodid), dialkil sulfati (npr., dimetil, dietil i dibutil sulfati), dugolančani halogenidi (npr., decil, lauril i stearil hloridi, bromidi i jodidi), aralkil halogenidi (npr., benzil i fenetil bromidi) i ostali.
Sve takve kisele soli i bazne soli su određene kao farmaceutski prihvatvljive soli unutar obima pronalaska i sve kisele i bazne soli se smatraju ekvivalentnim slobodnim oblicima odgovarajućih jedinjenja za svrhe pronalaska.
Pored toga, kada jedinjenje prema pronalasku sadrži i baznu grupu, kao što je, ali bez ograničenja na alifatični primarni, sekundarni, tercijarni ili ciklični amin, aromatični ili heteroaril amin, piridin ili imidazol, i kiselu grupu, kao što je, ali bez ograničenja na tetrazol ili karboksilnu kiselinu, cviterjoni ("unutrašnje soli") mogu biti formirani i uključeni su unutar termina "so(soli)" kao što je ovde korišćen. Potrebno je razumeti da određena jedinjenja pronalaska mogu da postoje u cviterjonskom obliku, koji ima i anjonske i katjonske centre unutar istog jedinjenja i neto netutračlno naleketrisanje. Takvi cviterjoni su uključeni unutar pronalaska.
Jedinjenja formule I, IA i IB mogu da postoje kao tautomeri koji se brzo interkonvertuju sa različitim tačkama vezivanja vodonika što je praćeno pomeranjima jedne ili više dvogubih veza. Pojedinačni tautomeri kao i njihove smeše su obuhvaćeni predmetnim pronalaskom. Odnos između tautomernih oblika će varirati u zavisnosti od uslova. Kao što je dobro poznato stručnjacima iz date bolasti tehnike, takva jedinjenja mogu biti nacrtana i izmenovana na različite načine. Na primer, sledeće strukture prikazane u daljem teksatu pokazuju različite načine na koje ilustrativno jedinjenje prema pronalasku može biti nacrtano:
4
Razume se da su svi mogući tautomerni oblici jedinjenja formule I, IA i IB razmatrani kao da su unutar obima ovog pronalaska, kao i njihove smeše. Dalje se razume da iako samo jedan navedeni tautomerni oblik svakog primera jedinjenja i primera izvođenja pronalaska može biti prikazan u specifikaciji i pratećim patentnim zahtevima, takav prikaz obuhvata pozivanje na sve tautomerne oblike navedenih jedinjenja, koji su uključeni unutar obima pronalaska.
Kao što je navedeno u prethodnom tekstu, predmetni pronalazak obuhvata farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje formule I, IA, ili IB prema predmetnom pronalasku, izborno jednu ili više drugih aktivnih komponenti (npr., β-laktamski antibiotik), i farmaceutski prihvatljiv nosač. Karakteristike nosača će zavisiti od puta primene. "Farmaceutski prihvatljiv" označava sastojke farmaceutske kompozicije koje moraju biti kompatibilne međusobno, ne utiču na efikasnost aktivnog sastojka (sastojaka), i nisu štetni (npr., toksični) za njihovog primaoca. Na taj način, kompozicije prema pronalasku mogu, pored inhibitora, da sadrže razblaživače, punioce, soli, pufere, stabilizatore, solubilizatore i ostale materijale koji su dobro poznati u stanju tehnike.
Takođe kao što je navedeno u prethodnom tekstu, predmetni pronalazak obuhvata jedinjenje formule I, IA ili IB, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, u kombinaciji sa β-laktamskim antibiotikom i izborno inhibitorom DHP, za upotrebu u postupku za lečenje bakterijske infekcije kod subjekta. Termin "subjekat" (ili, alternativno, "pacijent") kao što je ovde korišćen označava životinju, poželjno sisara, i naročito čoveka ili nehumanu životinju uključujući stočne životinje i domaće životinje uključujući, ali bez ograničenja na, stoku, konje, ovce, svinje, koze, zečeve, mačke, pse i druge sisare kod kojih postoji potreba za lečenjem. U izabranom primeru izvođenja, subjekat je čovek. U izabranom primeru izvođenja, subjekat je predmet lečenja, posmatranja ili eksperimenta. Termin "primena" i njegove varijacije (npr., "primena" jedinjenja) u vezi sa jedinjenjem formule I, IA ili IB označava obezbeđivanje jedinjenja, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, na individuu kod koje postoji potreba za lečenjem. Kada je jedinjenje ili njegova so obezbeđeno u kombinaciji sa jednim ili više drugih aktivnih sredstava (npr., karbapenem antibiotik ili inhibitor DHP ili oba), "primena" i njene varijante se svaka razumeju tako da obuhvataju obezbeđivanje jedinjenja ili njegovih soli i drugih sredstava u isto vreme ili u različita vremena. Kada su sredstva kombinacije primenjena u isto vreme, ona mogu biti primenjivana zajedno u jednoj kompoziciji ili ona mogu biti primenjivana posebno. Razume se da "kombinacija" aktivnih sredstava može biti jedna kompozicija koja sadrži sva aktivna sredstva ili višestruke kompozicije od kojih svaka sadrži jedno ili više aktivnih sredstava. U slučaju dva aktivna sredstva, kombinacija može biti jedna kompozicija koja sadrži oba sredstva ili dve posebne kompozicije od kojih svaka sadrži jedno od sredstava; u slučaju tri aktivna sredstva, kombinacija može biti jedna kompozicija koja sadrži sva tri sredstva, tri posebne kompozicije od kojih svaka sadrži jedno od sredstava, ili dve kompozicije od kojih jedna sadrži dva od sredstava i druga sadrži treće sredstvo; i tako dalje.
Kompozicije i kombinacije predmetnog pronalaska su pogodno primenjivane u efikasnim količinama. Termin "efikasna količina," kada je korišćen sa inhibitorom β-laktamaze (uključujući inhibitor DHP), označava količinu aktivnog jedinjenja koja je dovoljna da inhibira β-laktamazu i na taj način izazove odgovor koji se traži (tj., "efikasna količina za inhibiciju") u ćeliji, tkivu, sistemu, životinji ili čoveku. U jednom primeru izvođenja, efikasna količina je "terapeutski efikasna količina" za ublažavanje simptoma bolesti ili stanja koje se leči (npr., isceljenje stanja povezanih sa bakterijskom infekcijom i/ili bakterijskom rezistencijom na lek) u kombinaciji sa β-laktamskim antibiotikom. U sledećem primeru izvođenja, efikasna količina je "profilaktički efikasna količina" za profilaksu simptoma bolesti ili stanja koje se prevenira. Kada se aktivno jedinjenje (tj., aktivni sastojak) primenjuje kao so, pozivanje na količinu aktivnog sastojka je za oblik slobodne kiseline ili slobodne baze jedinjenja. "Efikasna količina" βlaktamskog antibiotika je količina dovoljna da se ublaže simptomi bolesti ili stanja koje se leči (npr., isceljivanje stanja povezanih sa bakterijskom infekcijom i/ili bakterijskom rezistencijom na lek).
Primena kompozicije prema predmetnom pronalasku je pogodno parenteralna, oralna, sublingvalna, transdermalna, topikalna, intranazalna, intratrahealna, intraokularna ili intrarektalna, gde je kompozicija pogodno formulisana za primenu pomoću izabranog puta upotrebom postupaka formulacije koji su dobro poznati u stanju tehnike, uključujući, na primer, postupke za pripremu i primenu formulacija opisanih u odeljcima 39, 41, 42, 44 i 45 u Remington - The Science and Practice of Pharmacy, 21st edition, 2006. U jednom primeru izvođenja, jedinjenja prema pronalasku su primenjivana intravenski u bolničkom okruženju. U sledećem primeru izvođenja, primena je oralna u obliku tablete ili kapsule ili slično. Kada se primenjuje sistemski, terapeutska kompozicija je na priemr, pogodno primenjena u dovoljnoj dozi da bi se održao nivo inhibitora u krvi od najmanje oko 1 µg/mL, i u dodatnom primeru izvođenja najmanje oko 10 µg/mL, i najmanje oko 25 µg/mL. Za lokalizovanu primenu, mnogo niže koncentracije od ovoga mogu biti efikasne, i mnogo više koncentracije mogu biti tolerisane. Intravenska primena jedinjenja prema pronalasku može biti izvedena rekonstitucijom oblika jedinjenja u prahu sa prihvatljivim rastvaračem. Pogodni rastvarači obuhvataju, na primer, fiziološke rastvore (npr., injekcija 0.9% natrijum hlorida) i sterilnu vodu (npr., sterilna voda za injekciju, bakteriostatička voda za injekciju sa metilparabenom i propilparabenom ili bakteriostatička voda za injekciju sa 0.9% benzil alkoholom). Oblik jedinjenja u prahu može biti dobijen pomoću gama-zračenja jedinjenja ili liofilizacijom rastvora jedinjenja, nakon čega se prah može čuvati (npr., u hermetički zatvorenoj bočici) na ili ispod sobne temperature do rekonstitucije. Koncentracija jedinjenja u rekonstituisanom IV rastvoru može biti, na primer, u opsegu od oko 0.1 mg/mL do oko 20 mg/mL.
Takođe je otkriven postupak za inhibiciju bakterijskog rasta koji sadrži primenu na bakterijsku ćelijsku kulturu, ili na bakterijski inficiranu ćelijsku kulturu, tkivo ili organizam, inhibitorno efikasne količine jedinjenja formule I. Takođe je otkriven postupak za inhibiciju bakterijskog rasta koji je uopravo opisan, pri čemu je jedinjenje prema predmetnom pronalasku korišćeno tu jedinjenje jednog od primera izvođenja, pod-primera izvođenja ili klasa opisanih u prethodnom tekstu. Jedinjenje može izborno biti korišćen u obliku farmaceutski prihvatljive soli. Ovaj postupak može da obuhvata primenu jedinjenja formule I, IA ili IB na eksperimentalnu ćelijsku kulturu in vitro za sprečavanje rasta bakterija rezistentnih na β-laktam. Ovaj postupak može alternativno da obuhvata primenu jedinjenja formule I, IA, ili IB na životinju, uključujući čoveka, za sprečavanje rasta bakterija rezistentnih na β-laktam in vivo. U ovim slučajevima, jedinjenje formule I, IA ili IB je tipično ko-primenjeno sa β-laktamskim antibiotikom.
Jedinjenja prema pronalasku mogu biti korišćena za lečenje, profilaksu ili inhibiciju bakterijskog rasta ili infekcija kao posledica bakterija koje su rezistentne na β-laktamske antibiotike u kombinaciji sa β-laktamskim antibiotikom. Naročito, bakterije mogu biti sojevi pozitivni na metalo-β-laktamazu koji su visoko rezistentni na β-laktamske antibiotike. Termini "neznatno rezistentni" i "visoko rezistentni" dobro razumeju stručnjaci u datoj oblasti tehnike (videti, npr., Payne et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy 38:767-772 (1994); Hanaki et al., Antimicrobial Agents and Chemotherapy 30:11.20-11.26 (1995)). Za svrhe ovog pronalaska, bakterijski sojevi visoko rezistentni na imipenem su oni protiv kojih je MIC imipenema >16 µg/mL, i bakterijski sojevi koji su neznatno rezistentni na imipenem su oni protiv kojih je MIC imipenema >4 µg/mL.
Jedinjenja prema pronalasku mogu biti korišćena u kombinaciji sa antibiotskim sredstvima za lečenje infekcija uzrokovanih sojevima koji proizvode β-laktamzu klase B, pored onih infekcija koje su podvode pod antibakterijski spektar antibiotskog sredstva. Primeri bakterije koje proizvode metalo-β-laktamazu klase B su Pseudomonas aeruginosa, Pseudomonas putida, Enterobacter cloacae, Klebsiella pneumoniae, Klebsiella oksitoca, Escherichia coli, Serratia marcescens, Enterobacter aerogenes, Enterobacter asburiae, Citrobacter freundii, Proteus mirabilis, Morganella morganii, Providencia rettgeri i Acinetobacter baumannii.
Generalno je korisno koristiti jedinjenje formule I, IA, ili IB u smeši ili zajedno sa karbapenemom, penicilinom, cefalosporinom, ili drugim β-laktamskim antibiotikom, ili njegovim prolekom. Korisno je koristiti jedinjenje formule I, IA, ili IB u kombinaciji sa jednim ili više β-laktamskih antibiotika zbog inhibitornih osobina jedinjenja na β-laktamazu klase B. Takođe je korisno koristiti jedinjenje formule I, IA, ili IB u kombinaciji sa jednim ili više inhibitora β-laktamaze klase A, C i D za dalje ograničenje podložnosti β-laktama. Kao što je već navedeno, jedinjenje formule I, IA, ili IB i β-laktamski antibiotik može se primenjivati posebno (u isto vreme ili u različita vremena) ili u obliku jedne kompozicije koja sadrži oba aktivna sastojka.
Karbapenemi, penicilini, cefalosporini i drugi β-laktamski antibiotici pogodni za upotrebu u predmetnom pronalasku obuhvataju oba one poznate da pokazuju nestabilnosti ili da su na drugi način podložni β-laktamaza klase B.
Kada su jedinjenja formule I, IA, ili IB kombinovana sa karbapenem antibiotikom, inhibitor dehidropeptidaze (DHP) takođe može biti kombinovan. Mnogi karbapenemi su podložni napadu renalnog enzima poznatog kao DHP. Ovaj napad ili razlaganje može da smanji efikasnost karbapenem antibakterijskog sredstva. Inhibitori DHP i njihova upotreba sa karbapenemima su otkriveni u, npr., SAD patentima br. 4,539,208; 4,616,038; 4,880,793; i 5,071,843. Poželjan inhibitor DHP je 7-(L-2-amino-2-karboksietiltio)-2-(2,2-dimetilciklopropankarboksamid)-2-heptenska kiselina ili njena farmaceutski prihvatljiva so.
Karbapenemi pogodni za ko-primenu sa jedinjenjima predmetnog pronalaska obuhvataju imipenem, ertapenem, meropenem, biapenem, (4R, 5S, 6S)-3-[3S, 5S)-5-(3-karboksifenilkarbamoil)pirolidin-3-iltio]-6-(1R)-1-hidroksietil]-4-metil-7-okso-1-azabiciklo[3.2.0]hept-2-en-2-karboksilna kiselina, (1S, 5R, 6S)-2-(4-(2-(((karbamoilmetil)-1,4-diazoniabiciklo[2.2.2]okt-1-il)-etil(1,8-naftosultam)metil)-6-[1(R)-hidroksietil]-1-metilkarbapen-2-em-3-karboksilat hlorid, BMS181139 ([4R-[4α,5β,6β(R*)]]-4-[2-[(aminoiminometil)amino]etil]-3-[(2-cijanoetil)tio]-6-(1-hidroksietil)-7-okso-1-azabiciklo[3.2.0]hept-2-en-2-karboksilna kiselina), BO2727 ([4R-3[3S*,5S*(R*)], 4α,5β,6β(R*)]]-6-(1-hidroksietil)-3-[[5-[1-hidroksi-3-(metilamino)propil]-3-pirolidinil]tio]-4-metil-7-okso-1-azabiciklo[3.2.0]hept-2-en-2-karboksilna kiselina monohidrohlorid), E1010 ((1R, 5S, 6S)-6-[1(R)-hidroksimetil]-2-[2(S)-[1(R)-hidroksi-1-[pirolidin-3(R)-il]metil]pirolidin-4(S)-ilsulfanil]-1-metil-1-karba-2-penem-3-karboksilna kiselina hidrohlorid) i S4661 ((1R,5S,6S)-2-[(3S,5S)-5-(sulfamoilaminometil) pirolidin-3-il]tio-6-[(1R)-1-hidroksietil]-1-metilkarbapen-2-em-3-karboksilna kiselina), (1S,5R,6S)-1-metil-2-{7-[4-(aminokarbonilmetil)-1,4-diazoniabiciklo(2.2.2)oktan-1-il]-metil-fluoren-9-on-3-il}-6-(1R-hidroksietil)-karbapen-2-em-3 karboksilat hlorid.
Penicilini pogodni za ko-primenu sa jedinjenjima predmetnog pronalaska obuhvataju benzilpenicilin, fenoksimetilpenicillin, karbenicilin, azidocilin, propicilin, ampicilin, amoksicilin, epicilin, tikarcilin, ciklacilin, pirbenicilin, azlocilin, mezlocilin, sulbenicilin, piperacilin i drugi poznati penicilini. Penicilini mogu biti korišćeni u obliku njegovih prolekova; na primer kao estri koji se mogu hidrolizovati in vivo, na primer acetoksimetil, pivaloyloksimetil, α-etoksikarboniloksi-etil i ftalidil estri ampicilina, benzilpenicilina i amoksicilina; kao aldehid ili keton adukti penicilina koji sadrže 6-α-aminoacetamido bočni lanac (na primer hetacilin, metampicilin i analogni derivati amoksicilina); i kao estri karbenicilina i tikarcilina, na primer fenil i indanil α-estri.
Cefalosporini pogodni za ko-primenu sa jedinjenjem prema predmetnom pronalasku obuhvataju cefatrizin, cefaloridin, cefalotin, cefazolin, cefaleksin, cefacetril, cefapirin, cefamandol nafat, cefradin, 4-hidroksicefaleksin, cefaloglicin, cefoperazon, cefsulodin, ceftolozan, ceftazidim, cefuroksim, cefmetazol, cefotaksim, ceftriakson, cefipim i drugi poznati cefalosporini, od kojih svi mogu biti korišćeni u obliku njihovih prolekova.
β-laktamski antibiotici osim penicilina i cefalosporina koji mogu biti ko-primenjivani sa jedinjenja prema predmetnom pronalasku obuhvataju aztreonam, latamoksef (MOKSALAKTAM), i drugi poznati β-laktamski antibiotici kao što su karbapenemi kao imipenem, ertapenem, meropenem ili (4R,5S,6S)-3-[(3S,5S)-5-(3-karboksifenilkarbamoil)pirolidin-3-iltio]-6-(1R)-1-hidroksietil]-4-metil-7-okso-1-azabiciklo[3.2.0]hept-2-en-2-karboksilna kiselina, od kojih svi mogu biti korišćeni u obliku njihovih prolekova.
U jednom primeru izvođenja, antibiotik ko-primenjen sa jedinjenjem prema predmetnom pronalasku je izabran iz grupe koja se sastoji od imipenema, ertapenema, meropenema i (4R, 5S, 6S)-3-[(3S,5S)-5-(3-karboksifenilkarbamoil)pirolidin-3-iltio]-6-(1R)-1-hidroksietil]-4-metil-7-okso-1-azabiciklo[3.2.0]hept-2-en-2-karboksilne kiseline.
U sledećem primeru izvođenja, antibiotik ko-primenjen sa jedinjenjem prema predmetnom pronalasku je izabran iz grupe penicilina koja se sastoji od ampicilina, amoksicilina, karbenicilina, piperacilina, azlocilina, mezlocilina i tikarcilina. Takvi penicilini mogu izborno biti korišćeni u obliku njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, na primer njihovih natrijumovih soli. Ampicilin ili amoksicilin može alternativno biti korišćen u obliku finih čestica cviterjonskog oblika (generalno kao ampicilin trihidrat ili amoksicilin trihidrat) za upotrebu u injektabilnoj ili infuzabilnoj suspenziji. U aspektu ovog primera izvođenja, penicilin koprimenjen sa jedinjenjem prema predmetnom pronalasku je amoksicilin, izborno u obliku njegove natrijumove soli ili trihidrata.
U sledećem primeru izvođenja, antibiotik ko-primenjen sa jedinjenjem predmetnog pronalaska je izabran iz grupe cefalosporina koja se sastoji od cefotaksima, ceftriakson, cefipim i ceftazidim, koji su izborno korišćeni u obliku njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, na primer njihovih natrijumovih soli.
U određenim primerima izvođenja prema pronalasku, jedinjenja prema pronalasku u kombinaciji sa serinskim inhibitorima β-laktamaze (koji mogu da inhibiraju beta laktamaze klase A, C, D) pored β-laktamskih antiobiotika. Serinski inhibitori β-laktamaze obuhvataju, ali bez ograničenja na avibaktam, vaborbaktam, relebaktam, tazobaktam i klavulanska kiselina.
Kada se ko-primenjuju sa β-laktamskim antibiotikom, i izborno inhibitorom β-laktamaze, kombinacija jedinjenja prema pronalasku i antibiotik mogu da obezbede sinergistički efekat. Termini "sinergistički efekat" i "sinergija" označavaju da je efekat proizveden kada su dva ili više lekova ko-primenjivani veći od onog koji bi se predvideo na osnovu efekta proizvedenog kada su jedinjenja primenjivana pojedinačno. Bez želje da se vežemo za teoriju, veruje se da su jedinjenja predmetnog pronalaska inhibitori β-laktamaze koji deluju tako da sprečavaju razgradnju β-laktamskih antibiotika, na taj način pojačavajući njegovu efikasnost i proizvodnju sinergističkog efekta.
Skraćenice korišćene ovde obuhvataju sledeće: Ac = acetil = CH3C(=O); AcOH = sirćetna kiselina; ACN = MeCN = acetonitril; aq = vodeni; BH3 DMS = boran dimetil sulfid; BINAP = (2,2'-bis(difenilfosfino)-1,1'-binaftil); BLI = inhibitor β-laktamaze; Bn = benzil; BOC (ili Boc) = terc-butiloksikarbonil; Boc anhidrid = Boc2O = di-terc-butil dikarbonat; BrettPhos prekatalizator generacije 3 = [(2-Di-cikloheksilfosfino-3,6-dimetoksi-2',4',6'-triizopropil-1,1'-bifenil)-2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladijum(II) metansulfonat; BPBD = N,N'-{bis(piridin-2-il)benziliden}butan-1,4-diamin; CBZ (ili Cbz) = karbobenzoksi (alternativno, benziloksikarbonil); CH3CN = acetonitril; CELITE = dijatomejska zemlja; konc. = koncentrovana; DBU = 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en; DCM = dihlorometan; DEAD = dietil azodikarboksilat; DIAD = diizopropil azodikarboksilat; DIBAL-H = diizobutilaluminijum hidrid; DIEA = N,N-Diizopropiletilamin; DIPEA = diizopropiletilamin (ili Hunig-ova baza); DMA = dimetilacetamid; DMAP = 4-dimetilaminopiridin ili N,N-dimetilaminopiridin; DME = 1,2-dimetoksietan; DMF = N,N-dimetilformamid; DMSO = dimetil sulfoksid; DPPA = difenilfosforil azid; EA = AcOEt = EtOAc = etil acetat; EDC = 1-etil-3-(3-dimetilaminopropil) karbodiimid; Et = etil; EtOH = etanol; HATU = (1-[Bis(dimetilamino)metilen]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinijum 3-oksid heksafluorofosfat); heks. = heksan; HOAt = 1-Hidroksi-7-azabenzotriazol; HPLC = tečna hromatografija visokog učinka; h = časovi; i-Pr = izopropil alkohol; KOAc = kalijum acetat; LCMS = LC-MS = tečna hromatografija/masena spektrometrija; LDA = litijum di-izopropil amid; mCPBA = meta-hloroperoksibenzojeva kiselina; Me = metil; MeCN = acetonitril; MeOH = metanol; MIC = minimalna inhibitorna
4
koncentracija; min = minute; MPLC = tečna hromatografija srednjeg pritiska; Ms = metansulfonil; MsCl = metan sulfonil hlorid; n-BuLi = n-butil litijum; NCS = N-Hlorosukcinimid; NIS = N-jodosukcinimid; NMP = N-Metil-2-pirolidon; NMR = nuklearna magnetna rezonanca; PCy3 Pd G2 = PCy3prekatalizator druge generacije= Hloro[(tricikloheksilfosfin)-2-(2'-aminobifenil)]paladijum(II); Pd(dppf)Cl2= [1,1'-Bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II); PE = Pet. etar= petroletar; Ph = fenil; PMB = p-Metoksibenzil; PPh3prekatalizator generacije 2 = PPh3 prekatalizator druge generacije= Hloro(trifenilfosfin) [2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladijum(II); prep-HPLC = preparativna HPLC; RBF = posuda sa okruglim dnom; RPLC = reverzno-fazna tečna hromatografija; RT = sobna temp. = sobna temperatura; SFC = superkritična tečna hromatografija; SM = početni materijal; TBAF = tetrabutilamonijum fluorid; tBuXPhos prekatalizator generacije 3= [(2-Di-tercbutilfosfino-2',4',6'-triiizopropil-1,1'-bifenil)-2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladijum(II) metansulfonat; TEA = trietilamin; TFA = trifluorosirćetna kiselina; THF = tetrahidrofuran; TLC = hromatografija na tankom sloju; TMS = trimetilsilan; TMSN3= azidotrimetilsilan; XPhos-Pd-2G ili XPHOS Pd G2 prekatalizator ili Xphos prekatalizator generacije 2 = Hloro(2-dicikloheksilfosfino-2',4',6'-triizopropil-1,1'-bifenil)[2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladijum(II), X-Phos aminobifenil paladijum hlorid prekatalizator.
Jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu bit lako pripremljena prema sledećim reakcionim šemama i primerima, ili njihovim modifikacijama, upotrebom lako dostupih početnih materijala, reagenasa i konvencionalnih postupaka sinteze. U voim reakcijama, takođe je moguće koristiti poznate varijante. Ostali postupci za pripremu jedinjenja prema pronalasku će biti očigledni stručnjacima iz date oblasti tehnike u svetlu sledećih reakcionih šema i primera.
Sulfonamid jedinjenja trenutniog pronalaska, ID, može biti pripremljeno prema opštoj Šemi I. Prema Šemi, bromidni intermedijeri 1a i 1b mogu selektivno da reaguju na bromo položaj sa 2(trimetilsilil)entantiolom u prisustvu baze (kao što je cezijum karbonat) da bi se dobili sulfidi 2a i 2b. Oksidacija, na primer upotrebom meta-hloroperoksibenzojeve kiseline daje sulfone 3a i 3b. Tretman sa tetrabutilamonijum fluoridom (TBAF) daje odgovarajuće sulfinske kiseline 4a i 4b. Sulfinske kiseline mogu biti prevedene u odgovarajuće sulfonil hloride na različite načine, na primer tretmanom sa N-hlorosukcinimidom. Tretman rezultujućih sulfonil hlorida 5a i 5b sa aminom u prisustvu baze kao što je trietil amin daje sulfonamide 6a i 6b. Alternativno, sulfinske kiseline 4a i 4b mogu biti direktno prevedene u jednoj posudi u sulfonamide 6a i 6b reakcijom sa N-hlorosukcinimidom u prisustvu reaktanta amina. Metalom posredovanje kuplovanje, na primer upotrebom paladijumskim katalizatora, sa alkil, aril, heteroaril ili vinil boronskim kiselinama, boronskim estrima, organostananima, organobakrom ili organo cink reagensima dobijaju se intermedijeri 7a i 7b. Finalno uklanjanje PMB zaštitne grupe može se postići pod kiselim uslovima kao što je upotrebom TFA u izbornom prisustvu skvendžera karbokacije, kao što je anizol ili trietilsilan, dajući ciljna jedinjenja ID.
Alternativno, sulfonamid jedinjenja ID mogu biti pripremljena prema Šemi II. Prema Šemi, jodo intermedijeri 3a i 3b su podvrgnuti metalom posredovanom kuplovanju, na primer upotrebom paladijumskim katalizatora, sa alkilom, arilom, heteroarilom ili vinil boronskim kiselinama, boronskim estrima, organostananima, organobakrom ili organo cink reagensima da bi se dobili intermedijeri 8a i 8b. Kada R' sadrži aktivne NH grupe, one mogu biti izborno zaštićene kao terc-butoksikarbamati upotrebom Boc anhidrida i baze kao što je 4-dimetilaminopiridin, dajući 9a i 9b. Prevođenje trimetilsililetan sulfona u odgovarajuće sulfonil hloride može se postići u dva koraka (kao što je opisano u Šemi I) da bi se dobio 11a i 11b. Kuplovanje sulfonil hlorida sa aminima može zatim biti postignuto u prisustvu baze (kao što je trimetilamin), dajući 12a i 12b.
Finalno uklanjanje PMB zaštitne grupe pod kiselim uslovima kao što je upotrebom TFA u izbornom prisustvu skavendžera karbokacije, kao što hje anizol ili trietilsilan, daje ciljna jedinjenja ID. Ponovo, kada intermedijeri 12a i 12b sadrže zaštitnu grupu osetljivu na kiselinu (kao što je terc-butoksikarbonil), istovremeno uklanjanje ove zaštitne grupe se javlja u finalnom uklanjanju kiseline PMB grupa. Ovo se može izvesti u jednom koraku, ili na postepeni način tretmanom sa TFA na sobnoj temperaturi da bi se uklonila grupa kao što je terc-butoksikarbonil, zatim zagrevanjem sa TFA i anizolom ili tioanizolom da bi se uklonila PMB grupa.
4
Intermedijeri 1a i 1b mogu biti pripremljeni prema Šemi III. Prema Šemi, komercijalno dostupan aril fluorid 13 može biti preveden u karboksilnu kiselinu 14 tretmanom sa LDA, a zatim suvim ledom. Funkcionalna grupa karboksilne kiseline može biti prevdena u odgovarajući nitril 15 na brojne načine poznate u stanju tehnike. Jedan pristup obuhvata prevođenje u kiseli hlorid, na priemr upotrebom oksalil hlorida, nakon čega sledi tretman sa amonijum hidroksidom da bi se dobio karboksamid, i konačno, dehidratacija, na primer upotrebom trihloro-1,3,5-triazina, da bi se dobio nitril 15. Nukleofilna aromatična supstitucija fluorida upotrebom benzil merkaptana i baze kao što je natrijum hidrid daje sulfid 16. Nitril prisutan u 16 može biti preveden u tetrazol 17 upotrebom jednog od nekoliko postupaka, na primer tretmanom sa trimetilsilil azidom i dibutilkalaj oksidom. Prevođenje benzil sulfida u sulfonil hlorid može se postići na nekoliko načina, na primer, tretmanom sa N-hloro sukcinimidom u sirćetnoj kiselini. Tretman sa amonijum hidroksidom zatim daje sulfonamid 18. Istovremena zaštita tetrazola i sulfonamida da bi se dobila poziciona smeša 1a i 1b može se postići tretmanom sa viškom para-metoksibenzil hlorida u prisustvu baze, kao što je kalijum karbonat, i NaI i tetrabutil amonijum hlorid kao katalizatora. Tipično 1a i 1b se koriste kao smeša regioizomera, ali izomeri mogu izborno biti odvojeni i korišćeni pojedinačno na isti način. U donjim primerima, trebalo bi razumeti da se smeša regioizomera ili pojedinačni regioizomeri mogu koristiti naizmenično (povremeno samo jedan izomer je prikazan radi jednostavnosti).
REFERENTNI PRIMER 1
6-bromo-3-jodo-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzensulfonamid i 6-bromo-3-jodo-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfonamid
Korak A: 3-bromo-2-fluoro-6-jodobenzojeva kiselina
U posudu od 2000 mL sa 3 grlića i sa okruglim dnom koja je održavana sa inertnom atmosferom azota sipan je rastvor (i-Pr)2NH (40.4 g, 400.00 mmol, 1.20 ekviv.) u THF (400 mL). Nakon ovoga je usledilo dodavanje n-butil litijuma (146 mL, 1.10 ekviv.) ukapavanjem uz mešanje na -20°C tokom 30 minuta. U ovo je dodat rastvor 1-bromo-2-fluoro-4-jodobenzena (100 g, 332.34 mmol, 1.00 ekviv.) u THF (600 mL) ukapavanjem uz mešanje na -78°C. Dobijeni rastvor je mešan 90 minuta na -78°C. Reakciona smeša je zatim sipana u 1.5 L suvog leda. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa 2000 mL vodenog rastvora natrijum hidroksida (4 M), zatim je ispran sa 2 x 800 mL etra. Vodeni rastvor je podešen do pH 2 sa HCl (2 M), zatim je ekstrahovan sa 3 x 800 mL etil acetata. Organski slojevi su spojeni, isprani sa 3 x 500 mL vode, sušeni, i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova.
Korak B: 3-bromo-2-fluoro-6-jodobenzoil hlorid
U posudu od 300 mL sa okruglim dnom sipana je 3-bromo-2-fluoro-6-jodobenzojeva kiselina (235 g, 681.35 mmol, 1.00 ekviv.) i tionil hlorid (1175 mL). Dobijeni rastvor je mešan 2 časa na 80°C u uljanom kupatilu. Dobijena smeša je hlađena i koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova.
Korak C: 3-bromo-2-fluoro-6-jodobenzamid
U posudu od 10000 mL sa 4 grlića i sa okruglim dnom sipan je rastvor NH4OH (840 g) u THF (2000 mL), zatim je usledilo dodavanje rastvora 3-bromo-2-fluoro-6-jodobenzoil hlorida (223 g, 614 mmol, 1.00 ekviv.) u THF (2460 mL) ukapavanjem uz mešanje na 0°C. Dobijeni rastvor je mešan 60 minuta na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Čvrste supstance su sakupljene filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova.
Korak D: 3-bromo-2-fluoro-6-jodobenzonitril
U posudu od 10000 mL sa 4 grlića i sa okruglim dnom sipan je rastvor 3-bromo-2-fluoro-6-jodobenzamida (223 g, 648 mmol, 1.00 ekviv.) u N,N-dimetilformamidu (4460 mL), trihloro-1,3,5-triazin (840 g, 4.56 mol, 7.00 ekviv.). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na sobnoj
4
temperaturi. Reakciona smeša je sipana u 10 L vodenog rastvora natrijum bikarbonata. Čvrste supstance su sakupljene filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova.
Korak E: 2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-jodobenzonitril
U posudu od 5000 mL sa 4 grlića i okruglim dnom koja je prečišćena i održavana sa inertnom atmosferom azota sipan je rastvor natrijum hidrida (14.8 g, 617 mmol, 1.20 ekviv.) u 1,4-dioksanu (1000 mL). Rastvor fenilmetantiola (38.1 g, 306.76 mmol, 1.00 ekviv.) u 1,4-dioksanu (100 mL) je dodat ukapavanjem uz mešanje na 0°C tokom 20 minuta. U ovo je dodat rastvor 3-bromo-2-fluoro-6-jodobenzonitrila (100 g, 306.84 mmol, 1.00 ekviv.) u 1,4-dioksanu (400 mL) ukapavanjem uz mešanje na 0°C. Dobijeni rastvor je mešan 60 minuta na sobnoj temperaturi i dodatnih 60 minuta na 60°C. Reakcija je zatim ugašena dodavanjem 750 mL HCl (1 M). Dobijeni rastvor je razblažen sa 3 L vode, zatim je ekstrahovan sa 3x1 L etil acetata. Organski slojevi su spojeni, sušen i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela i eluiran sa etil acetatom/petroletrom (1:4) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova.
Korak F: 5-[2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-jodofenil]-1H-1,2,3,4-tetrazol
U posudu od 3000 mL sa 4 grlića i sa okruglim dnom sipan je rastvor 2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-jodobenzonitrila (54.0 g, 126 mmol, 1.00 ekviv.) u toluenu (750 mL), TMSN3(43.4 g, 3.00 ekviv.) i dibutilkalaj oksid (6.3 g, 0.20 ekviv.). Dobijeni rastvor je mešan 48 časova na 105°C u uljanom kupatilu. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature. Dobijeni rastvor je razblažen sa 3 L vodenog rastvora natrijum hidroksida, zatim je ekstrahovan sa etil acetatom. Vodeni sloj je podešen do pH 3 sa HCl (2 M), zatim je ekstrahovan sa 2x1 L etil acetata. Organski slojevi su spojeni, isprani sa 2x1 L vode, sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova.
Korak G: 5-[2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-jodofenil]-1-[(4-metoksifenil)metil]-1H-1,2,3,4-tetrazol i 5-[2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-jodofenil]-2-[(4-metoksifenil)metil]-2H-1,2,3,4-tetrazol
U posudu od 3000 mL sa 3 grlića i sa okruglim dnom koja je prečišćena i održavana sa inertnom atmosferom azota sipan je rastvor 5-[2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-jodofenil]-1H-1,2,3,4-tetrazola (84.4 g, 178 mmol, 1.00 ekviv.) u hloroformu (700 mL), rastvor kalijum karbonata (49.0 g, 355 mmol, 2.00 ekviv.) u vodi (520 mL) i tetrabutilamonijum hlorid (10.2 g, 0.20 ekviv.). Nakon ovoga je usledilo dodavanje para-metoksibenzil hlorida (42.2 g, 1.50 ekviv.) ukapavanjem uz mešanje na 15°C. Dobijeni rastvor je mešan 180 min na 50°C u uljanom kupatilu. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature. Dobijeni rastvor je razblažen sa 200 mL vode, zatim je ekstrahovan sa 2x200 mL DCM. Organski slojevi su spojeni, sušeni preko
4
natrijum sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela i eluiran sa etil acetatom/petroletrom (1:2), čime se dobija jedinjenje iz naslova kao smeša dva izomera.
Korak H: 6-bromo-3-jodo-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzen-1-sulfonil hlorid i 6-bromo-3-jodo-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1-sulfonil hlorid
U posudu od 2000 mL sa 4 grlića i sa okruglim dnom koja je prečišćena i održavana sa inertnom atmosferom azota sipana je smeša 5-[2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-jodofenil]-1-[(4-metoksifenil)metil]-1H-1,2,3,4-tetrazola i 5-[2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-jodofenil]-2-[(4-metoksifenil)metil]-2H-1,2,3,4-tetrazola (50.0 g, 84.3 mmol, 1.00 ekviv., 60%), DCM (750 mL), AcOH (12.7 g, 211 mmol, 2.50 ekvivalenata), i voda (3.8 g, 2.5 ekviv.). SO2Cl2(28.3 g, 2.50 ekvivalenata) je zatim dodat ukapavanjem uz mešanje na 0°C. Dobijeni rastvor je mešan 60 minuta na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao smeša izomera.
Korak I: 6-bromo-3-jodo-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzensulfonamid i 6-bromo-3-jodo-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfonamid
U posudu od 2000 mL sa 4 grlića i sa okruglim dnom koja je prečišćena i održavana sa inertnom atmosferom azota sipan je rastvor 6-bromo-3-jodo-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzen-1-sulfonil hlorida i 6-bromo-3-jodo-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1-sulfonil hlorida (smeša izomera, 50.0 g, 52.7 mmol, 1.00 ekviv., 60%) u THF (300 mL) i rastvor NH4OH (200 mL) u THF (200 mL). Dobijeni rastvor je mešan 60 minuta na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa 3x150 mL etil acetata. Organski slojevi su spojeni, sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen sa Flash-Prep-HPLC pod sledećim uslovima: kolona, C18 silika gel; pokretna faza, H2O: MeCN = 25 rastuća do H2O: MeCN = 55 u roku od 30 min; Detektor, UV 210 nm, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. H-NMR (DMSO-d6, 300MHz, ppm): δ 3.727-3.748 (3H, d), 5.001-5.068 (0.78H, m), 5.428-5.477 (0.75H, m), 5.941 (0.5H, m), 6.823-6.958 (2H, m), 7.148-7.363 (2H, m), 7.732-7.864 (1.6H, m), 7.993-8.117 (3H, m).
REFERENTNI PRIMER 2
6-bromo-3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzensulfonamid i 6-bromo-3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfonamid
4
Korak A: 3-bromo-2-fluoro-6-jodobenzojeva kiselina
U posudu od 5000 mL sa 4 grlića i sa okruglim dnom koja je prečišćena i održavana sa inertnom atmosferom azota, sipan je bis(propan-2-il)amin (121.2 g, 1.20 mol, 1.20 ekviv.) i THF (1000 mL). Nakon ovoga je usledilo dodavanje n-butil litijuma (440 mL, 2.5 M u heksanima, 1.10 mol, 1.10 ekviv.) ukapavanjem uz mešanje na -78°C u trajanju od 20 minuta. Posle 60 minuta, rastvor 1-bromo-2-fluoro-4-jodobenzena (300 g, 997 mmol, 1.00 ekviv.) u THF (2000 mL) je dodat ukapavanjem uz mešanje na -78°C u trajanju od 30 minuta. Dobijeni rastvor je mešan 2 časa na -78°C u kupatilu tečnog azota. Napredovanje reakcije je praćeno pomoću LCMS. Reakcija je zatim ugašena sipanjem u 5000 g suvog leda. Posle mešanja od 2 časa, dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u 3000 mL 4 M vodenog rastvora natrijum hidroksida. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa 2x1000 mL etra. pH vrednost vodenog rastvora je podešena do 2-3 sa vodenim rastvorom hidrogen hlorida (1 M). Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa 4x1000 mL etil acetata, i organski slojevi su spojeni i sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovani pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću rekristalizacije iz heksana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova.
Korak B: 3-bromo-2-fluoro-6-jodobenzoil hlorid
U posudu od 5000 mL sa 3 grlića i sa okruglim dnom, koja je prečišćena i održavana sa inertnom atmosferom azota, sipana je 3-bromo-2-fluoro-6-jodobenzojeva kiselina (273 g, 791.5 mmol, 1.00 ekviv.), THF (2730 mL) i N,N-dimetilformamid (27.3 mL). Nakon ovoga je usledilo dodavanje oksalil hlorida (110.9 g, 873.7 mmol, 1.10 ekviv.) ukapavanjem uz mešanje na 20°C 20 minuta. Dobijeni rastvor je mešan 1 čas na sobnoj temp. Napredovanje reakcije je praćeno pomoću LCMS. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova.
Korak C: 3-bromo-2-fluoro-6-jodobenzamid
U posudu od 5000 mL sa 4 grlića i sa okruglim dnom koja je prečišćena i održavana sa inertnom atmosferom azota, sipan je NH4OH (1200 g). Nakon ovoga je usledilo dodavanje rastvora 3-bromo-2-fluoro-6-jodobenzoil hlorida (280 g, 771 mmol, 1.00 ekviv.) u THF (2800 mL) ukapavanjem uz mešanje na 0°C u trajanju od 30 minuta. Dobijeni rastvor je mešan 1 čas na sobnoj temperaturi. Napredovanje reakcije je praćeno pomoću LCMS. Dobijena smeša je
4
koncentrovana pod vakuumom. Čvrste supstance su sakupljene filtracijom i ispranei sa H2O da bi se dobilo jedinjenje iz naslova.
Korak D: 3-bromo-2-fluoro-6-jodobenzonitril
U posudu od 10000 mL sa 4 grlića i sa okruglim dnom koja je prečišćena i održavana sa inertnom atmosferom azota, sipan je 3-bromo-2-fluoro-6-jodobenzamid (270 g, 785.1 mmol, 1.00 ekviv.), N,N-dimetilformamid (5400 mL). Nakon ovoga je usledilo dodavanje trihloro-1,3,5-triazin (1014 g, 5.50 mol, 7.00 ekviv.) u porcijama na 0°C. Dobijeni rastvor je mešan 2 časa na sobnoj temperaturi. Napredovanje reakcije je praćeno pomoću LCMS. Reakcija je zatim ugašena dodavanjem 15000 mL zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata. Čvrste supstance su sakupljene filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova.
Korak E: 2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-jodobenzonitril
U posudu od 5000 mL sa 4 grlića i sa okruglim dnom koja je prečišćena i održavana sa inertnom atmosferom azota, sipan je natrijum hidrid (34 g, 60% disperzija u mineralnom ulju, 850 mmol, 1.20 ekviv.) i 1,4-dioksan (700 mL). Nakon ovoga je usledilo dodavanje rastvora fenilmetantiola (88.7 g, 714.2 mmol, 1.00 ekviv.) u 1,4-dioksanu (950 mL) ukapavanjem uz mešanje na 10°C u trajanju od 15 minuta. Posle 30 minuta, u ovu reakcionu smešu dodat je rastvor 3-bromo-2-fluoro-6-jodobenzonitrila (230 g, 705.7 mmol, 1.00 ekviv.) u 1,4-dioksanu (1800 mL) ukapavanjem uz mešanje na 10°C. Dobijeni rastvor je mešan 2 časa na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim ugašena sipanjem u 5000 mL vode/leda. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa 5x1000 mL etil acetata i organski slojevi su spojeni. Organski slojevi su isprani sa 2x1000 mL vode i 2x1000 mL zasićenog rastvora natrijum bikarbonata i 2x1000 mL fiziološkog rastvora. Dobijena smeša je sušena preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovana pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen rekristalizacijom iz etra da bi se dobilo jedinjenje iz naslova.
Korak F: 5-[2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-jodofenil]-1H-1,2,3,4-tetrazol
U posudu od 2000 mL sa 4 grlića i sa okruglim snom, sipan je 2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-jodobenzonitril (66 g, 153.5 mmol, 1.00 ekviv.), toluen (660 mL), azidotrimetilsilan (44.2 g, 383.6 mmol, 2.50 ekviv.), i dibutilstananon (7.7 g, 30.93 mmol, 0.20 ekviv.). Dobijeni rastvor je mešan 48 časa na 105°C u uljanom kupatilu. Napredovanje reakcije je praćeno pomoću LCMS. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela sa tetrahidrofuranom:PE (100:1) kao eluentom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova.
Korak G: 6-bromo-3-jodo-2-(1H-1,2,3,4-tetrazol-5-il)benzen-1-sulfonil hlorid
U posudu od 2000 mL sa 4 grlića i sa okruglim dnom koja je prečišćena i održavana sa inertnom atmosferom azota, sipan je 5-[2-(benzilsulfanil)-3-bromo-6-jodofenil]-1H-1,2,3,4-tetrazol (100
4
g, 211.4 mmol, 1.00 ekviv.), sirćetna kiselina (1000 mL) i voda (100 mL). Nakon ovoga je usledilo dodavanje NCS (70.7 g, 529.5 mmol, 2.50 ekviv.), u porcijama upotrebom ledenog/vodenog kupatila da bi se sprečile egzotermne reakcije koje se javljaju usled dodavanja NCS, i održavanje interne temperature približno između 20-30°C. Dobijeni rastvor je mešan 2 časa na sobnoj temperaturi upotrebom ledenog/vodenog kupatila prema potrebi za održavanje temperature posle dodavanja NCS koje je egzotermno. Napredovanje reakcije je praćeno pomoću LCMS. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom i zatim je razblažena sa 2000 mL EtOAc. Dobijena smeša je isprana sa 2x1000 mL vode i 2x1000 mL fiziološkog rastvora. Smeša je sušena preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova.
Korak H: 6-bromo-3-jodo-2-(1H-1,2,3,4-tetrazol-5-il)benzen-1-sulfonamid
U posudu od 3000 mL sa 4 grlića i sa okruglim dnom koja je prečišćena i održavana sa inertnom atmosferom azota, sipan je NH4OH (1180 mL) i THF (290 mL). Nakon ovoga je usledilo dodavanje rastvora 6-bromo-3-jodo-2-(1H-1,2,3,4-tetrazol-5-il)benzen-1-sulfonil hlorida (118 g, 262.5 mmol, 1.00 ekviv.) u THF (300 mL) ukapavanjem uz mešanje na 0°C. Dobijeni rastvor je mešan 2 časa na 0-25°C u ledenom/slanom kupatilu (lagano zagrevajući do sobne temperature). Napredovanje reakcije je praćeno pomoću LCMS. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom i razblažena sa 500 mL etra. Posle mešanja od 30 minutes, čvrste supstance su sakupljene filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova.
Korak I: 6-bromo-3-jodo-N,N-bis[(4-metoksifenil)metil]-2-[1-[(4-metoksifenil)metil]-1H-1,2,3,4-tetrazol-5-il]benzen-1-sulfonamid i 6-bromo-3-jodo-N,N-bis[(4-metoksifenil)metil]-2-[2-[(4-metoksifenil)metil]-2H-1,2,3,4-tetrazol-5-il]benzen-1-sulfonamid
U posudu od 3000 mL sa 4 grlića i sa okruglim dnom koja je prečišćena i održavana sa inertnom atmosferom azota, sipan je 6-bromo-3-jodo-2-(1H-1,2,3,4-tetrazol-5-il)benzen-1-sulfonamid (105 g, 244.2 mmol, 1.00 ekviv.), hloroform (1050 mL), kalijum karbonat (168.9 g, 1.22 mol, 5.00 ekviv.), voda (525 mL), NaI (11 g, 73.4 mmol, 0.30 ekviv.), tetrabutilamonijum hlorid (20.4 g, 73.4 mmol, 0.30 ekviv.) i 1-(hlorometil)-4-metoksibenzen (230 g, 1.47 mol, 6.00 ekviv.). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na 50°C u uljanom kupatilu. Napredovanje reakcije je praćeno pomoću LCMS. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa 2x1000 mL DCM. Organski slojevi su spojeni i sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobila jedinjenja iz naslova. 1H-NMR: (300 MHz, CDCl3, ppm): δ 7.956-7.928 (m, 0.5H), 7.852-7.824 (m, 1H), 7.656-7.612 (m, 1.5H), 7.323-7.282 (m, 1.5H), 7.195-7.224 (m, 2H), 6.944-6.908 (m, 6H), 6.822-6.760 (m, 9H), 5.791 (m, 1H), 5.570-5.521 (m, 1H), 5.149-5.100 (m, 1H), 4.769-4.718 (m, 2H), 4.232-4.221 (m, 2H), 3.900-3.848 (m, 2H), 3.789-3.742 (m, 14H).
U eksperimentalnim postupcima u daljem tekstu, jedinjenje REFERENTNOG PRIMERA 2 može biti korišćeno kao smeša 4-metoksilbenzil tetrazol regioizomera. Alternativno, dva regioizomera mogu biti odvojena i svaki može biti korišćen kao što je opisano u daljem tekstu na isti način. U nekim REFERENTNIM PRIMERIMA i PRIMERIMA u daljem tekstu, oba regioizomera su eksplicitno korišćena; međutim, u drugim slučajevima, radi pojednostavljenja, prikazan je samo jedan regioizomer. Potrebno je razumeti da je u ovim slučajevima tipično korišćena smeša regioizomera.
REFERENTNI PRIMER 3
3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid i 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid
Korak A: 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-(2-(trimetilsilil)etiltio)benzensulfonamid i 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)tio)benzensulfonamid Komercijalno dostupan (na primer, iz Sigma-Aldrich order # 364681), poznat (Canadian Journal of Chemistry, 1994, 72(2), 325; Journal of Organic Chemistry, 2005, 70(14), 5611) 2-(trimetilsilil)etantiol (21.24 g, 158 mmol) je dodat u smešu NaH (7.59 g, 60% disperzija u mineralnom ulju, 190 mmol) u DMF (350 mL). Dobijena smeša je mešana na 0°C 30 minuta. Nakon toga, dodat je 6-bromo-3-jodo-N,N-bis[(4-metoksifenil)metil]-2-[1-[(4-metoksifenil)metil]-1H-1,2,3,4-tetrazol-5-il]benzen-1-sulfonamid i 6-bromo-3-jodo-N,N-bis[(4-metoksifenil)metil]-2-[2-[(4-metoksifenil)metil]-2H-1,2,3,4-tetrazol-5-il]benzen-1-sulfonamid (50 g, 63.4 mmol) u porcijama. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa pod atmosferom azota. Reakcija je praćena pomoću LCMS, i ugašena vodom (500 mL). Dobijena smeša je ekstrahovana sa EtOAc(2x300 mL). Organski slojevi su spojeni i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 844.
1
Korak B: 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-(2-(trimetilsilil)etilsulfonil)benzensulfonamid i 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid
m-CPBA (654 g, 379 mmol) je dodat u rastvor 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-(2-(trimetilsilil)etiltio)benzensulfonamida i 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)tio) benzensulfonamida (160 g, 190 mmol) u DCM (2000 mL) na 0°C. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pod atmosferom azota. Reakcija je praćena pomoću LCMS. Dobijena smeša je ugašena zasićenim rastvorom Na2S2O3 (150 mL) i isprana zasićenim rastvorom Na2CO3(1 L) i vodom (1 L). Organski sloj je sakupljen i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela sa EtOAc/PE (1/2) kao eluentom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LCMS (ESI) izrač. za C36H42IN5O7S2Si [M H]+: 876, zabeleženo 876;<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.62 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.26 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.90-7.88 (m, 1H), 7.69-7.68 (m, 0.5H), 7.56-7.53 (m, 0.5H), 7.27-7.20 (m, 2H), 6.91-6.79 (m, 12H), 5.44-5.39 (m, 1H), 5.20-5.15 (m, 1H), 4.58-4.53 (m, 2H), 3.98-3.79 (m, 2H), 3.75-3.66 (m, 9H), 2.50-2.48 (m, 2H), 1.19-1.03 (m, 1H), 0.83-0.82 (m, 1H), 0.01 (s, 9H).
REFERENTNI PRIMER 4
2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina i 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)- 1H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina
U rastvor 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida i 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (2.0 g, 2.28 mmol) u THF (23 mL) dodat je tetrabutilamonijum fluorid (5.02 mL, 1.0 M u THF, 5.02 mmol) ukapavanjem na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod N230 minuta. Dobijena smeša je razblažena etil acetatom, isprana zasićenim vodenim rastvorom KHSO4, sušena preko MgSO4i koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod kao čvrsta supstanca. Sirovi materijal je korišćen direktno za pripremu jedinjenja prema pronalasku: LCMS [M H]+: 776.
REFERENTNI PRIMER 5
2
2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfonil hlorid i 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzensulfonil hlorid
2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina (800 mg, 1.031 mmol) u THF (10 mL) je hlađena do 0°C. 1-hloropirolidin-2,5-dion (275 mg, 2.063 mmol) u THF (2 mL) je dodavan tokom 5 minuta. Smeša je mešana na istoj temperaturi 30 minuta, zatim je razblažena etil acetatom, isprana zasićenim NaHCO3i fiziološkim rastvorom, sušena preko MgSO4i koncentrovana da bi se dobio sirovi proizvod: LCMS (ESI) [M H]+: 810.
REFERENTNI PRIMER 6
terc-Butil (4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(hlorosulfonil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)benzo[d]tiazol-2-il)(terc-butoksikarbonil)karbamat
Korak A: 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)tio)benzensulfonamid
Suspenzija 6-bromo-3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfonamida (10 g, 12.65 mmol), cezijum karbonata (8.24 g, 25.3 mmol) i 2-(trimetilsilil)etantiola (6.08 ml, 38.0 mmol) u DMF (100 ml) je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je razblažena etrom i isprana fiziološkim rastvorom. Organski sloj je sušen (MgSO4), i koncentrovan da bi se dobio sirovi 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)tio)benzensulfonamid, koji je korišćen direktno u sledećem koraku. LCMS [M+1]: 844.63.
Korak B: 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid
Sirovi 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)tio)benzensulfonamid (10.5 g, 12.5 mmol) je rastvoren u DCM (100 ml) i hlađen do 0°C. m-CPBA (10.92 g, 63.3 mmol) je dodat u porcijama. Smeša je mešana preko noći. Talog je otfiltriran kroz CELITE čep, i filtrat je razblažen sa DCM (100 ml), ispran sa 1N NaOH i fizološkim rastvorom. Organski sloj je sušen i koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO (120 g, 0-50% EtOAc u heksanu, 50% heksan). LCMS [M+1]: 876.49.
Korak C: 3-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid
Suspenzija 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (9 g, 10.28 mmol), (2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)boronske kiseline (3.99 g, 20.55 mmol), TETRAKIS(trifenilfosfin)Paladijuma(0) (1.187 g, 1.028 mmol) i natrijum karbonata (3.27 g, 30.8 mmol) u dioksanu (75 ml) i vodi (25 ml) je degazirana i zagrevana na 80°C u trajanju od 3 h. Smeša je razblažena sa AcOEt, isprana fiziološkim rastvorom. Organski sloj je sušen (MgSO4) i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću ISCO (220 g, 0-50% zatim 50% EtOAc u heksanu. LCMS: 898.74.
Korak D: terc-butil (4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)benzo[d]tiazol-2-il)(tercbutoksikarbonil)karbamat
U smešu 3-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (7 g, 7.79 mmol), di-terc-butil dikarbonata (5.95 g, 27.3 mmol) i TEA (3.80 ml, 27.3 mmol) u DCM (80 ml) dodat je DMAP (0.952 g, 7.79 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas, razblažena etrom, isprana zasićenim vodnim rastvorom KHSO4i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je sušen preko MgSO4i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću ISCO (120 g, 0-30% zatim 30% EtOAc u heksanu). LCMS [M+1]: 1098.56.
Korak E: 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(N,N-bis(terc-butoksikarbonil)amido) benzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina Rastvor terc-butil (4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)benzo[d]tiazol-2-il)(terc-butoksikarbonil)karbamata (6.9 g, 6.28 mmol) u THF (100 mL) je mešan sa tetrabutilamonijum fluoridom (25.1 mL, 25.1 mmol) na sobnoj temperaturi pod N2u trajanju od 0.5 časa. Smeša je razblažena sa AcOEt, isprana zasićenim vodenim rastvorom KHSO4, zatim sušena preko MgSO4, i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen pomoću ISCO (0-50% zatim 50% EtOH-EtOAc (1:3) u heksanu. LCMS [M+1]: 998.51.
4
Korak F: terc-butil (4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(hlorosulfonil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)benzo[d]tiazol-2-il)(terc-butoksikarbonil)karbamat Smeša natrijum acetata (0.789 g, 9.62 mmol), sirćetne kiseline (0.551 ml, 9.62 mmol) i 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(N,N-bis(terc-butoksikarbonil)amido)benzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (3.2 g, 3.21 mmol) u THF (75 ml) je hlađena do 0°C. Dodat je čvrsti NCS (0.856 g, 6.41 mmol). Smeša je mešana na istoj temperaturi 30 minuta, razblažena sa Et2O, isprana sa KHSO4i fiziološkim rastvorom, zatim sušena preko MgSO4, i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen pomoću ISCO 0-30% EtOAc zatim 30% EtOAc u heksanu). LCMS [M+1]: 1032.67. Izolovani materijal je sadržao malu količinu mono-Boc jedinjenja. LCMS [M+1]: 932.57.
REFERENTNI RPIMER 7
2-amino-7-metilbenzo[d]tiazol-4-ilboronska kiselina
Korak A: N-((2-bromo-5-metilfenil)karbamotioil)benzamid
2-bromo-5-metilbenzenamin (10 g, 54 mmol) je dodat u rastvor tioanhidrida benzojeve cijanske kiseline (8.8 g, 54 mmol) u acetonu (100 ml) na temperaturi sredine i mešan na 80°C 1 čas. Reakcioni rastvor je hlađen i filtriran. Filtrat je ispran sa EA i sušen da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS (ESI) [M 1]<+>349;<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ): δ 12.54 (s, 1H), 9.16 (s, 1H), 8.06 (s, 1H), 7.90 (d, J= 8.4 Hz, 2H), 7.73-7.65 (m, 1H), 7.60-7.54 (m, 3H), 7.20 (dd, J = 8.0 Hz, 1H), 2.42 (s, 3H).
Korak B: 1-(2-bromo-5-metilfenil)tiourea
Rastvor N-((2-bromo-5-metilfenil)karbamotioil)benzamida (5 g, 14 mmol) i NaOH (5.6 g, 140 mmol) u vodi (100 ml) i MeOH (100 ml) je mešan na 80°C 3 časa. Reakciona smeša je razblažena vodom (80 mL) i ekstrahovana sa DCM (3 x 80 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 10 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 10 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS (ESI): [M 1]<+>245;<1>H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ): δ 9.20 (s, 1H), 7.94 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.53 (s, 1H), 6.99 (dd, J = 1.2 Hz, 1H), 2.26 (s, 3H).
Korak C: 4-bromo-7-metilbenzo[d]tiazol-2-amin
Br2(4.20 ml, 82 mmol) u hloroformu (50 mL) je ukapavanjem dodavan u mešani rastvor 1-(2-bromo-5-metilfenil)tiouree (3.1 g, 13 mmol) u hloroformu (200 mL) u ledenom kupatilu i zatim mešan na 80°C 4 časa. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom i isprana sa EA (3 x 30 ml). Smeša je filtrirana i filter kolač je sušen da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS (ESI): [M 1]+ 243; 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHZ): δ 7.81 (s, 2H), 7.34 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 6.77 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 2.30 (s, 3H).
Korak D: (2-amino-7-metilbenzo[d]tiazol-4-il)boronska kiselina
Rastvor 4-bromo-7-metilbenzo[d]tiazol-2-amina (2.0 g, 8.3 mmol), 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborinana) (2.79 g, 12.3 mmol), PCy3 Pd G2 (0.972 g, 1.645 mmol) i kalijum acetata (2.422 g, 24.7 mmol) u 1,4-dioksanu (40 ml) je mešan na 80°C 16 časova. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom i čvrsta supstanca je rastvorena sa EA (300 ml). Rastvor je ispran vodom (15 % NaOH) i vodena faza je podešena do pH 3 sa 2 M HCl, i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 100 ml). Organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS (ESI): [M 1]+ 209; 1H NMR (DMSO-d6, 300 MHZ): δ 7.84 (s, 2H), 7.33 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 2.31 (s, 3H).
REFERENTNI PRIMER 8
2-aminobenzo[d]oksazol-4-ilboronska kiselina
Korak A: 4-bromobenzo[d]oksazol-2-amin
Smeša 2-amino-3-bromofenola (5 g, 26.6 mmol) i cijanid bromida (1.673 ml, 31.9 mmol) u DCM (25 ml) i MeOH (50 ml) je mešana na temperaturi sredine 4 časa. Dobijena smeša je ugašena vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata (500 mL), razblažena vodom (20 mL) i ekstrahovana sa DCM (3 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 10 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 10 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS (ESI): [M 1]+ 213; 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHZ): 7.70 (s, 2H), 7.35 (s, J = 7.6 Hz, 1H), 7.30 (s, J = 8.4 Hz, 1H), 6.93-6.89 (m, 1H).
Korak B: 2-aminobenzo[d]oksazol-4-ilboronska kiselina
Rastvor 4-bromobenzo[d]oksazol-2-amina (1.00 g, 4.69 mmol), Pd(dppf)Cl2.CH2Cl2(0.686 g, 0.939 mmol), bis(nneopentilglikolato)dibor (1.060 g, 4.69 mmol) i kalijum acetat (0.921 g, 9.39 mmol) u 1,4-dioksanu (30 ml) je mešan na 80°C 24 časa pod azotom. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: kolona, Sunfire C 18, 19 x 150mm; pokretna faza: voda (0.05% TFA) i acetonitril (Vreme gradijenta: 7 min. B%: 10% - 20%); Detektor, UV 220 i 254 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS (ESI): [M 1]+ 179.
REFERENTNI PRIMER 9
(2-aminohinolin-8-il)boronska kiselina
Rastvor 8-bromohinolin-2-amina (500 mg, 2.241 mmol), Pd(dppf)Cl2(328 mg, 0.448 mmol), bis(pinakolato)dibora (1138 mg, 4.48 mmol) i kalijum acetata (440 mg, 4.48 mmol) u 1,4-dioksanu (20 ml) je mešan na 80°C u trajanju od 2 časa pod azotom. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću kolone C18 eluiranjem sa acetonitrilom/vodom sa 0.05% TFA (15/85). Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS (ESI) [M H]<+>: 189;<1>H NMR (300 MHz, CD3OD): δ 8.32 (d, J = 9.6 Hz, 1H), 8.20-8.10 (m, 1H), 7.94 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.64 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.0 Hz, 1H).
REFERENTNI PRIMER 10
2-aminobenzo[d]tiazol-7-ilboronska kiselina
Smeša 4-bromobenzo[d]tiazol-2-amina (komercijalno dostupan, 2000 mg, 8.73 mmol) i bispinakolatodibora (6651 mg, 26.2 mmol), kalijum acetata (2570 mg, 26.2 mmol) i PCy3 Pd G2 (516 mg, 0.873 mmol) u suvom dioksanu (80 ml) je degazirana i zagrevana na 80°C 48 časova. Smeša je koncentrovana i ostatak je rastvoren u hlorovodoničnoj kiselini (2N, 100 mL). Vodeni sloj je ispran etil acetatom (60 mL) i koncentrovan. Ostatak je rastvoren u metanolu (50 ml). Čvrsta supstanca je otfiltrirana i filtrat je koncentrovan da bi se dobila čvrsta supstanca koja je direktno korišćena. LCMS (M+1): 195.12.
REFERENTNI PRIMERI 11-12 u Tabeli neposredno ispod su pripremljeni na analogan način kao što je opisano za 2-aminobenzo[d]tiazol-7-ilboronsku kiselinu (REFERENTNI PRIMER 10) od naznačenih početnih materijala aril bromida (SM).
REFERENTNI PRIMER 13
(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina
Smeša 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborinan) (5.59 g, 24.7 mmol), KOAc (4.86 g, 49.5 mmol) i komercijalno dostupnog (na primer, iz Sigma-Aldrich order # ARK379288552), poznatog (PCT međunarodna prijava WO 2015177367) 4-bromo-1H-benzo[d]imidazol-2-amin (3.50 g, 16.5 mmol) u 1,4-dioksanu (82 mL) je degazirana sa N2pre dodavanja hloro(trifenilfosfin) [2-(2'-amino-1,1'-bifenil)]paladijuma(II) (945 mg, 1.65 mmol). Dobijena smeša je zagrevana na 80°C preko noći pod N2. Posle hlađenja do sobne temperature reakciona smeša je filtrirana kroz CELIT, i isprana sa MeOH. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je prečišćen pomoću reverzno-fazne hromatografije na koloni (ISCO RediSep Rf Gold 150 g HP C18 kolona) eluiranjem sa 0-100% MeCN/vodom (bez kiselog aditiva) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+1]+: 178.38.
REFERENTNI PRIMER 14
2-amino-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-ilboronska kiselina
Korak A: 3-bromo-N-metil-2-nitrobenzenamin
Rastvor 1-bromo-3-fluoro-2-nitrobenzena (10 g, 45.6 mmol) u NH2CH3u THF (2 M, 100 ml) je mešan na 80°C 2 časa. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio 3-bromo-N-metil-2-nitrobenzenamin. LCMS (ESI) [M 1]+: 231, 1H NMR (CDCl3, 400 MHZ): 7.21-7.16 (m, 1H), 6.97 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.76 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 2.94 (s, 3H).
Korak B: 3-bromo-N1-metilbenzen-1,2-diamin
HCl (12 M) je ukapavanjem dodavan u mešani rastvor 3-bromo-N-metil-2-nitrobenzenamina (10.1 g, 44 mmol) i prah Zn (14 g, 0.2 mmol) u metanolu (200 ml) na sobnoj temperaturi i mešan na temperaturi sredine 2 časa. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 3-bromo-N1-metilbenzen-1,2-diamin. LCMS (ESI) [M 1]+: 201, 1HNMR (DMSO, 400 MHZ): 6.70 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.47 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 6.37 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 4.99 (s, 1H), 4.62 (s, 2H), 2.70 (s, 3H).
Korak C: 4-bromo-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-amin
Rastvor 3-bromo-N1-metilbenzen-1,2-diamina (3.2 g, 16 mmol) i BrCN (1.68 g, 16 mmol) u metanolu (100 ml) je mešan na temperaturi sredine 4 časa. Reakciona smeša je sipana u zasićeni rastvor NaHCO3i filtrirana. Filter kolač je sušen da bi se dobio 4-bromo-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-amin. LCMS (ESI) [M 1]+: 226, 1H NMR (DMSO, 400 MHZ): 7.14-7.11 (m, 2H), 6.83-6.79 (m, 1H), 6.71 (s, 1H), 4.99 (s, 2H), 3.49 (s, 3H).
Korak D: 2-amino-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-ilboronska kiselina
Smeša 4-bromo-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-amina (3.5 g, 15.5 mmol), bis(pinakolato)dibora (4.7 g, 18.6 mmol) i kalijum acetata (4.5 g, 46.5 mmol) u 1,4-dioksanu (100 ml) je mešana na 80°C 4 časa pod azotom. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod. Proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: kolona, Sunfire C 18, 19 x 150mm; pokretna faza: voda (0.05% TFA) i acetonitril (Vreme gradijenta: 7 min. B%: 10%-20%); Detektor, UV 220 i 254 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobila 2-amino-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-ilboronska kiselina. LCMS (ESI) [M 1]+: 192.
REFERENTNI PRIMER 15
(2-amino-6-fluoro-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina.
U 200 mL RBF sipan je rastvor 3-bromo-5-fluorobenzen-1,2-diamina (5 g, 24.39 mmol) u etanolu (100ml), zatim je dodavan cijanid bromid (5.17 g, 48.8 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 80°C preko noći. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature, koncentrovana u vacuo, zatim je prečišćena hromatografijom na koloni (ISCO, 80g, 0-20% MeOH u DCM) da bi se dobio 4-bromo-6-fluoro-1H-benzo[d]imidazol-2-amin (4.2g, 18.26 mmol), LC-MS [M+H]+: 230.08. Intermedijer je rastvoren u 50 mL anhidrovanog etanola, zatim je dodat 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborinan) (7.86 g, 34.8 mmol), kalijum acetat (3.41 g, 34.8 mmol), PCy3 Pd G2 (2.054 g, 3.48 mmol) i anhidrovani etanol (50 ml). Smeša je degazirana u trajanju od 20 minuta i zatim je zagrevana na 80°C 18 časova. Reakciona smeša je zakišeljena sa 1.0 M HCl do ~ pH 4, zatim je isprana sa EtOAc. Sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji preko C18 kolone da bi se dobio željeni proizvod (2-amino-6-fluoro-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina. LC/MS (M+H)+: 196.07.
REFERENTNI PRIMERI 16A i 16B
Racemski terc-butil 3-amino-3-(hidroksimetil)pirolidin-1-karboksilat je odvojen u pojedinačne enantiomere A i B preko SFC (kolona: AD-H 50x250 mm, UV detekcija: 210 nm, rastvarač: 25% EtOH (sa 0.2 % DIPA) u CO2, protok 230 g CO2/min 120 bar). Apsolutna stereohemija nije potvrđena za dva čista enantiomera. Oba enantiomera su korisna za pripremu inhibitora metaloβ-laktamaze.
REFERENTNI PRIMERI 17A i 17B
Komercijalno dostupan racemski terc-butil 6-amino-2-azabiciklo[2.2.1]heptan-2-karboksilat je odvojen u pojedinačne enantiomere A i B preko SFC (kolona: AD-H 50x250 mm, UV detekcija: 210 nm, rastvarač: 15% EtOH (sa 0.2 % DIPA) u CO2, protok 230 g CO2/min 120 bar). Apsolutna stereohemija nije potvrđena za dva čista enantiomera. Oba enantiomera su korisna za pripremu inhibitora metalo-β-laktamaze.
REFERENTNI PRIMER 18
2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina
Korak A: 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid Smeša 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (5.0 g, 5.71 mmol), (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (2.02 g, 11.42 mmol), Na2CO3(1.82 g, 17.13 mmol) i 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen-paladijum(ii)dihlorid dihlorometan kompleksa (0.699 g, 0.856 mmol) u dioksanu (60 mL) i vodi (15 mL) degazirana je sa N2u trajanju od 5 minuta. Dobijena smeša je zagrevana na 90°C 6 časova. Reakciona smeša je filtrirana i ekstrahovana sa EtOAc (2 × 100 mL). Organske faze su sušene (MgSO4) i koncentrovane. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 220 g, eluiranjem sa EtOAc/izoheksanom (0 - 100% u 45 min) da bi se dobila čvrsta supstanca. LC/MS [M+H]<+>: 881.
Korak B: terc-butil (4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamat U 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid (6.22 g, 7.06 mmol) u DCM (60 mL) na sobnoj temperaturi, dodat je BOC-anhidrid (1.69 g, 7.77 mmol), TEA (2.46 mL, 17.65 mmol) i DMAP (0.86 g, 7.1 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa, razblažena etrom, isprana vodenim rastvorom KHSO4i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je sušen preko MgSO4 i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela 220 g, eluiranjem sa 0-80% EtOAc u heksanu da bi se dobio čisti proizvod. LC/MS [M+H]: 981. Korak C: 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina TBAF (10.1 mL, 10.1 mmol) je dodat u mešani rastvor terc-butil (4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil) sulfonil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamata (4.5 g, 4.6 mmol) u THF (50 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 45 minuta. Smeša je razblažena sa AcOEt,
1
isprana zasićenim vodenim rastvorom KHSO4(3 × 60 mL), sušena preko MgSO4i koncentrovana da bi se dobio sirovi proizvod kao čvrsta supstanca posle koncentrovanja. Sirovi materijal je korišćen direktno za sledeći korak. LC/MS [M+H]<+>: 881.
REFERENTNI PRIMER 19
2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina
Korak A: 3-(2-aminopiridin-3-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid
3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid (REFERENTNI PRIMER 3; 2.69 g, 3.07 mmol), N-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-il)acetamid (1.610 g, 6.14 mmol), Na2CO3(0.977 g, 9.21 mmol), 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen-paladijum(ii)dihlorid dihlorometan kompleks (0.376 g, 0.461 mmol) dodati su u posudu od 100 mL sa okruglim dnom u dioksanu (12 mL) i vodi (3 mL) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na 80°C preko noći. Smeša je filtrirana, isprana sa EtOAc, razblažena vodom (50 mL), i ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (60 mL), sušeni (MgSO4) i filtrirani i rastvarač je isparavan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 40 g, eluiranjem sa EtOAc/izoheksanom da bi se dobio proizvod kao pena posle koncentrovanja. LC/MS [M+H]+: 842
Korak B: terc-butil (3-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)piridin-2-il)karbamat
Boc-anhidrid (0.31 mL, 1.33 mmol) i DMAP (0.148 g, 1.211 mmol) su dodati u mešani rastvor početnog materijala 3-(2-aminopiridin-3-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (1.02g, 1.211 mmol) u DCM (10 mL) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Smeša je razblažena vodom (50 mL), i ekstrahovana sa DCM (2 x 50 mL). Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 24 g, eluiranjem sa EtOAc/izoheksanom da bi se dobila pena posle koncentrovanja. LC/MS [M+H]+: 942
2
Korak C: 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina
Rastvor terc-butil (3-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)piridin-2-il)karbamata (0.92 g, 0.97 mmol) u THF (9 mL) je mešan sa TBAF (2.153 mL, 2.153 mmol) na sobnoj temperaturi pod N230 minuta. Smeša je razblažena sa AcOEt, isprana zasićenim vodenim rastvorom KHSO4(3 × 50 mL), sušena preko MgSO4, i koncentrovana da bi se dobio sirovi proizvod kao čvrsta supstanca. Sirovi materijal je korišćen direktno za sledeći korak.
REFERENTNI PRIMER 20
Korak A: (S)-metil 3-amino-2-(((benziloksi)karbonil)amino)propanoat
U rastvor (S)-3-amino-2-(((benziloksi)karbonil)amino)propionske kiseline (6 g, 25.2 mmol) u MeOH (60 mL) dodat je SOCl2(9.19 mL, 126 mmol) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Dobijena smeša je ugašena vodom (300 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 300 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (300 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod (S)-metil 3-amino-2-(((benziloksi)karbonil)amino)propanoat kao čvrsta supstanca, koja je korišćena direktno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1]<+>: 253. Korak B: (S)-metil-2-(((benziloksi)karbonil)amino)-3-((terc-butoksikarbonil)amino) propanoat
U rastvor (S)-metil-3-amino-2-(((benziloksi)karbonil)amino)propanoata (4.0 g, 13.85 mmol) u MeOH (50 mL) dodati su (Boc)2O (6.4 mL, 27.70 mmol) i TEA (7.7 mL, 55.40 mmol) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 12 časova. Dobijena smeša je ugašena vodom (200 mL), i zatim je ekstrahovan sa EA (3 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 x 200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 70% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio (S)-metil-2-(((benziloksi)karbonil)amino)-3-((terc-butoksikarbonil) amino)propanoat kao ulje: LC/MS [M 1]+: 353.
Korak C: (S)-benzil-terc-butil (3-hidroksipropan-12-diil)dikarbamat
U rastvor (S)-metil-2-(((benziloksi)karbonil)amino)-3-((terc-butoksikarbonil) amino)propanoata (4.3 g, 12.2 mmol) u THF (45 mL) dodat je LiBH4 (0.8 g, 36.6 mmol) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Dobijena smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (200 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 300 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (300 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 60% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio (S)-benzil-terc-butil(3-hidroksipropan-1,2-diil)dikarbamat kao ulje. LC/MS [M 1]+: 325.
Korak D: (S)-2-(((benziloksi)karbonil)amino)-3-((terc-butoksikarbonil)amino)propil metan sulfonat
U rastvor (S)-benzil-terc-butil (3-hidroksipropan-1,2-diil)dikarbamata (4.0 g, 12.33 mmol) u DCM (40 mL) dodati su MsCl (1.9 mL, 24.66 mmol), TEA (5.2 mL, 37.0 mmol) i DMAP (0.301 g, 2.47 mmol) na 0°C. Smeša je mešana na 50°C 1 čas. Dobijena smeša je ugašena vodom (200 mL) i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 300 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (300 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 60% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio (S)-2-(((benziloksi)karbonil)amino)-3-((terc-butoksikarbonil) amino)propil metansulfonat kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 403.
Korak E: (S)-benzil-terc-butil (3-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)propan-1,2-diil) dikarbamat U rastvor (S)-2-(((benziloksi)karbonil)amino)-3-((terc-butoksikarbonil)amino)propil metansulfonata (3.8 g, 9.44 mmol) u DMF (60 mL) dodat je kalijum 1,3-dioksoizoindolin-2-id (3.5 g, 18.88 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na 60°C 3 časa. Dobijena smeša je ugašena vodom (200 mL) i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (300 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 60% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio (S)-benzil terc-butil (3-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)propan-1,2-diil)dikarbamat kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 454.
Korak F: (R)-benzil-terc-butil (3-aminopropan-1,2-diil)dikarbamat
U rastvor (S)-benzil-terc-butil (3-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)propan-1,2-diil) dikarbamata (3.0 g, 6.62 mmol) u EtOH (50 mL) dodat je N2H4H2O (80%, 0.99 g, 19.85 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na 70°C 2 h. Dobijena smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature. Dobijena smeša je ugašena vodom (200 mL), i zatim je ekstrahovan sa EA (3 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 30% EA u PE. Frakcije koje sadrže
4
željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio (R)-benzil terc-butil (3-aminopropan-1,2-diil)dikarbamat kao čvrsta supstanca: LC/MS [M 1]<+>: 324.
REFERENTNI PRIMER 21
(R)-benzil (1-amino-3-hidroksipropan-2-il)karbamat hidrohlorid
HCl (4 mL, 1.25 M u dioksanu, 5.00 mmol) dodata je u mešani rastvor početnog materijala (R)-benzil terc-butil (3-hidroksipropan-1,2-diil)dikarbamata (1.0 g, 3.08 mmol) u DCM (10 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Smeša je koncentrovana. Proizvod je korišćen u datom stanju. LC/MS [M+H]+: 225.
REFERENTNI PRIMER 22
terc-butil (R)-(2-amino-3-hidroksipropil)karbamat
U rastvor (R)-benzil terc-butil (3-hidroksipropan-1,2-diil)dikarbamata (1.05 g, 3.24 mmol) u MeOH (20 mL) u RBF na sobnoj temperaturi pod N2, dodat je Pd-C (10% tež./tež., 0.689 g, 0.65 mmol) i hidrogenizovan na 1 atm. (pritisak balona) preko noći. Reakciona smeša je filtrirana kroz CELITE čep, i ispran sa EtOAc (3×50 mL). Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je korišćen u datom stanju. LC/MS [M+H] : 191.
REFERENTNI PRIMER 23
terc-butil (R)-(3-amino-2-hidroksipropil)karbamat
U rastvor epoksida (S)-terc-butil (oksiran-2-ilmetil)karbamata (2.0 g, 11.55 mmol) u etanolu (20 mL) dodat je amonijum hidroksid (20 mL, 114 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana 2 časa, i koncentrovana u vacuo. Ostatak je rastvoren u DCM (40 mL), sušen (MgSO4) i koncentrovan u vacuo. Sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji preko silika gela (40 g), eluiranjem sa 0-10% MeOH u DCM da bi se dobio željeni proizvod. LC/MS [M+H]<+>: 191.
REFERENTNI PRIMER 24
(3-(5-amino-1H-1,2,4-triazol-3-il)fenil)boronska kiselina
Kalijum acetat (1.232 g, 12.55 mmol) i PCy3 Pd G2 (0.371 g, 0.627 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (2.124 g, 8.37 mmol), su dodati u mešani rastvor 3-(3-bromofenil)-1H-1,2,4-triazol-5-amina (1.0 g, 4.18 mmol) u dimetilsulfoksidu (15 mL) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na 90°C preko noći. Reakciona smeša je filtrirana kroz čep od CELITE, razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 100 mL). Ostatak je prečišćen pomoću reverzno-fazne hromatografije na koloni silika gela 240 g C18, eluiranjem sa acetonitrilom/vodom, 0 - 100% za 45 minuta da bi se dobio željeni proizvod kao čvrsta supstanca posle koncentrovanja. LC/MS [M+H]+: 205.
REFERENTNI PRIMER 25
terc-butil (3R,4S)-3-amino-4-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat
Korak A: terc-butil (3S,4S)-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilat
U rastvor (3S,4S)-terc-butil 3-amino-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata (1000 mg, 4.94 mmol) u dioksanu (12.4 mL) i vodi (12.4 mL) dodat je natrijum karbonat (629 mg, 5.93 mmol) i Cbz-Cl (0.847 mL, 5.93 mmol) na 0°C. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Dodat je EtOAc (20 mL). Organski sloj je odvojen, ispran fiziološkim rastvorom, sušen, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću „flash“ hromatografije na silika gelu (0-10% MeOH/DCM kao eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 337.38.
Korak B: terc-butil (3S,4S)-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-((metilsulfonil)oksi) pirolidin-1-karboksilat
U rastvor (3S,4S)-terc-butil 3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata (1200 mg, 3.57 mmol) u DCM (17.8 mL) dodat je trietilamin (0.796 mL, 5.71 mmol) i MsCl (0.445 mL, 5.71 mmol) na 0°C. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Posle isparavanja, ostatak je prečišćen pomoću „flash“ hromatografije na silika gelu (40 g zlatne kolone, 0-10% MeOH/DCM kao eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 415.38.
Korak C : terc-butil (3R,4S)-3-azido-4-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat U rastvor (3S,4S)-terc-butil 3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-((metilsulfonil)oksi)pirolidin-1-karboksilata (1470 mg, 3.55 mmol) u DMF (17.7 mL) dodat je natrijum azid (922 mg, 14.19 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakcija je mešana na 100°C 4 časa. Dodati su EtOAc (20 mL) i voda (20 mL). Organski sloj je odvojen, ispran vodom i fiziološkim rastvorom, sušen, filtriran, i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]<+>: 362.44.
Korak D: terc-butil (3R,4S)-3-amino-4-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor (3R,4S)-terc-butil 3-azido-4-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-karboksilata (1200 mg, 3.32 mmol) u THF (15.1 mL) i vodi (1.51 mL) dodat je trifenilfosfin (1045 mg, 3.98 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakcija je mešana na 60°C preko noći. Posle koncentrovanja pod sniženim pritiskom, ostatak je prečišćen pomoću „flash“ hromatografije na silika gelu (0-10% MeOH/DCM kao eluent) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 336.36.
REFERENTNI PRIMER 26
terc-butil (3S,4R)-3-amino-4-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način gore navedenom intermedijeru (REFERENTNI PRIMER 25) upotrebom (3R,4R)-terc-butil 3-amino-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata. LC/MS [M+H]+: 336.42.
REFERENTNI PRIMER 27
(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-4-il)boronska kiselina
Smeša 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborinana) (1027 mg, 4.54 mmol), kalijum acetata (446 mg, 4.54 mmol), i 4-bromo-1H-benzo[d][1,2,3]triazola (300 mg, 1.515 mmol) u dioksanu (7.6 mL) je degazirana azotom pre dodavanja hloro(trifenilfosfin) [2-(2'-amino-1,1'bifenil)] paladijuma (II) (130 mg, 0.227 mmol). Dobijena smeša je dalje degazirana azotom i zagrevana na 80°C preko noći. Posle hlađenja do sobne temperature reakciona smeša je filtrirana kroz CELITE, i isprana sa EtOAc. Filtrat je koncentrovan i ostatak je prečišćen pomoću reverzno fazne hromatografije na C18 koloni eluiranjem sa 0-100% MeCN/vodom (bez kiselog aditiva) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 164.05.
REFERENTNI PRIMER 28
benzo[c][1,2,5]oksadiazol-4-ilboronska kiselina
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na način analogan REFERENTNOM PRIMERU 27 upotrebom 4-hlorobenzo[c][1,2,5]oksadiazola. LC/MS [M+H]+: 165.20.
REFERENTNI PRIMER 29
(R)-benzil-terc-butil (3-aminopropan-1,2-diil)dikarbamat
Korak A: (S)-3 -(((benzil)oksi)karbonil))amino)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)propionski (izobutil karbonski) anhidrid
U mešani rastvor (S)-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-2-((terc-butoksikarbonil)amino) propionske kiseline (20 g, 59 mmol) u THF (200 mL) dodat je izobutil karbonohloridat (9.60 g, 71 mmol) i 4-metilmorfolin (7.20 g, 71 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana 6 časova na 0°C. Reakciona smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio (S)-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)propionski (izobutil karbonski) anhidrid kao ulje. Sirovi proizvod je korišćen direktno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.
Korak B: (S)-benzil terc-butil (3-hidroksipropan-1,2-diil)dikarbamat
U mešani rastvor (S)-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-2-((terc-butoksikarbonil) amino)propionskog (izobutil karbonskog) anhidrida (15 g, 34 mmol) u THF (100 mL) dodat je NaBH4(5.0 g, 136 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Dobijena smeša je ugašena vodom (500 mL) i zatim je ekstrahovan sa EA (3 x 800 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 500 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 500 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 5% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio (S)-benzil terc-butil (3-hidroksipropan-1,2-diil)dikarbamat kao ulje: LCMS (ESI) izrač. za C
16H24N2O5[M 1] : 325, zabeleženo 325.
Korak C: (S)-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)propil metan sulfonat
U mešani rastvor (S)-benzil terc-butil (3-hidroksipropan-1,2-diil)dikarbamata (8.20 g, 25 mmol) u DCM (100 mL) dodat je TEA (10.4 mL, 75 mmol) i MsCl (2.38 mL, 30 mmol) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Dobijena smeša je ugašena vodom (500 mL), i zatim je ekstrahovan sa EA (3 x 800 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 500 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 500 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, i eluiran sa 5% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio (S)-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-2((tercbutoksikarbonil)amino)propil metansulfonat kao ulje: LCMS [M 1]+: 403.
Korak D: (S)-benzil-terc-butil (3-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)propan-1,2-diil) dikarbamat U rastvor (S)-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)propil metansulfonat (2.00 g, 4.97 mmol) u DMF (20 mL) dodat je kalijum 1,3-dioksoizoindolin-2-id (1.38 g, 7.45 mmol). Smeša je mešana na 60°C 2 časa. Dobijena smeša je ugašena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio (S)-benzil-terc-butil (3-(1,3-dioksoizoindolin-2-il) propan-1,2-diil)dikarbamat kao čvrsta supstanca: LC/MS [M 1]<+>: 454.
Korak E: (R)-benzil terc-butil (3-aminopropan-1,2-diil)dikarbamat
U rastvor (S)-benzil terc-butil (3-(1,3-dioksoizoindolin-2-il) propan-1,2-diil) dikarbamata (1.80 g, 3.97 mmol) u EtOH (2 mL) dodat je N2H4H2O (80%, 5 mL, 3.97 mmol). Smeša je mešana na 80°C 1 čas. Dobijena smeša je ugašena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 10% MeOH i 1% vodenim rastvorom NH3u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio (R)-benzil-terc-butil (3-aminopropan -1,2-diil)dikarbamat kao čvrsta supstanca: LC/MS [M 1]<+>: 323.
REFERENTNI PRIMER 30
Di-terc-butil (2-aminopropan-1,3-diil)dikarbamat
Korak A: Di-terc-butil (2-hidroksipropan-1,3-diil)dikarbamat
U rastvor 1,3-diaminopropan-2-ola (10.0 g, 11 mmol) i KOH (16.0 g, 28 mmol) u THF (50 mL) i vodi (50 mL) dodat je (Boc)2O (64 mL, 28 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL), ekstrahovana sa EA (2 x 300 mL). Spojeni organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 30% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio di-terc-butil (2-hidroksipropan-1,3-diil)dikarbamat kao ulje: LC/MS [M 1]+: 291.
Korak B: 2,2,12,12-Tetrametil-4,10-diokso-3,11-dioksa-5,9-diazatridekan-7-ilmetansulfonat
U rastvor di-terc-butil (2-hidroksipropan-1,3-diil)dikarbamata (20.0 g, 68.9 mmol) u DCM (200 mL) dodat je MsCl (8.1 mL, 103 mmol) ukapavanjem na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena sa EA (400 mL), i zatim je isprana vodom (3 x 200 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 150 mL). Sakupljeni organski sloj je sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 2,2,12,12-tetrametil-4,10-diokso-3,11-dioksa-5,9-diazatridekan-7-il metansulfonat kao ulje, koje je korišćeno u sledećem koraku direktno bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1]+: 369.
Korak C: Di-terc-butil (2-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)propan-1,3-diil)dikarbamat
U rastvor 2,2,12,12-tetrametil-4,10-diokso-3,11-dioksa-5,9-diazatridekan-7-il metansulfonata (20.0 g, 54.3 mmol) u DMF (200 mL) dodat je kalijum 1,3-dioksoizoindolin-2-id (10.0 g, 54.3 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana 16 časova na 80°C pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodom (300 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan sa EA (3 x 100 mL), i zatim su kombinovani organski slojevi isprani fiziološkim rastvorom (3 x 150 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio di-tercbutil(2-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)propan-1,3-diil) dikarbamat kao čvrsta supstanca, koja je korišćena u sledećem koraku direktno bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1]<+>: 420.
Korak D: Di-terc-butil (2-aminopropan-1,3-diil)dikarbamat
U rastvor di-terc-butil (2-(1,3-dioksoizoindolin-2-il) propan-1,3-diil) dikarbamata (14.0 g, 33.4 mmol) u EtOH (100 mL) dodat je N2H4H2O (80%, 6.7 g, 167 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakcija je ostavljena da se zagreva do 80°C. Reakciona smeša je mešana 4 časa na 80°C pod azotom. Dobijena smeša je hlađena do sobne temperature. Smeša je filtrirana. Filter kolač je ispran sa EtOH (2 x 50 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je rekristalizovan sa EA/PE (1 : 2) da bi se dobio di-terc-butil(2-aminopropan-1,3-diil) dikarbamat kao čvrsta supstanca: LC/MS [M 1]+: 290.
REFERENTNI PRIMER 31
(R)-di-terc-butil (3-aminopropan-1,2-diil)dikarbamat
Korak A: (S)-di-terc-butil (3-hidroksipropan-1,2-diil)dikarbamat
U rastvor (S)-metil 2,3-bis((terc-butoksikarbonil)amino)propanoata (komercijalno dostupan ili pripremljen kao što je opisano u WO 2006076706, 1.5 g, 4.71 mmol) u THF (15 mL) dodat je LiAlH4(0.27 g, 7.07 mmol) u nekoliko porcija na 5°C pod azotom. Smeša je mešana 2 časa na 5°C pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodom (30 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 30 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 30% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio (S)-di-terc-butil (3-hidroksipropan-1,2-diil)dikarbamat kao tečnost: LC/MS / [M 1]<+>: 291.
Korak B: (S)-2,3-bis((terc-butoksikarbonil)amino)propil metansulfonat
U rastvor (S)-di-terc-butil (3-hidroksipropan-1,2-diil)dikarbamata (0.8 g, 2.76 mmol) i TEA (0.84 g, 8.27 mmol) u DCM (8 mL) dodat je MsCl (0.47 g, 4.13 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Dobijena smeša je ugašena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio (S)-2,3-bis((terc-butoksikarbonil)amino)propil metansulfonat kao čvrsta supstanca, koja je direktno korišćena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1 ]+: 369.
Korak C: (S)-di-terc-butil (3-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)propan-1,2-diil)dikarbamat
U rastvor (S)-2,3-bis((terc-butoksikarbonil)amino)propil metansulfonata (1.1 g, 2.99 mmol) u DMF (10 mL) dodat je kalijum 1,3-dioksoizoindolin-2-id (0.83 g, 4.48 mmol) na sobnoj temperaturi. Zatim je smeša mešana na 60°C 16 časova. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature. Dobijena smeša je ugašena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 30% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio željeni proizvod kao čvrsta supstanca: LC/MS [M 1]<+>: 420.
Korak D: (R)-di-terc-butil (3-aminopropan-1,2-diil)dikarbamat
U rastvor (S)-di-terc-butil (3-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)propan-1,2-diil) dikarbamata (0.5 g, 1.19 mmol) u EtOH (5 mL) dodat je N2H4H2O (80%, 0.12 g, 3.58 mmol) na sobnoj temperaturi.
1
Reakcija je ostavljena da se zagreva do 80°C. Reakciona smeša je mešana 4 časa na 80°C pod azotom. Dobijena smeša je hlađena do sobne temperature. Smeša je filtrirana. Filter kolač je ispran sa EtOH (2 x 50 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio (R)-di-tercbutil (3-aminopropan-1,2-diil)dikarbamat kao čvrsta supstanca, koja je direktno korišćena za sledeći korak bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1]<+>: 290.
REFERENTNI PRIMER 32
(S)-benzil-terc-butil (3-aminopropan-1,2-diil)dikarbamat
Korak A: (R)-2-(((benziloksi)karbonil)amino)-3-((terc-butoksikarbonil)amino)propil metan sulfonat
U rastvor (R)-benzil-terc-butil (3-hidroksipropan-1,2-diil)dikarbamata (2 g, 6.17 mmol) u DCM (20 mL) dodat je TEA (2.6 mL, 18.50 mmol), MsCl (0.96 mL, 12.33 mmol) i DMAP (0.15 g, 1.23 mmol) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Dobijena smeša je ugašena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod kao ulje, koje je direktno korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1]<+>: 403.
Korak B: (R)-benzil terc-butil (3-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)propan-1,2-diil) dikarbamat U rastvor (R)-2-(((benziloksi)karbonil)amino)-3-((terc-butoksikarbonil)amino)propil metansulfonata (3.0 g, 7.45 mmol) u DMF (50 mL) dodat je kalijum 1,3-dioksoizoindolin-2-id (2.76 g, 14.90 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na 60°C 12 časova. Dobijena smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (200 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (200 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, i eluiran sa 60% EA u PE da bi se dobilo željeno jedinjenje kao čvrsta supstanca: LC/MS [M 1]<+>: 454.
Korak C: (S)-benzil terc-butil (3-aminopropan-1,2-diil)dikarbamat
U rastvor (R)-benzil-terc-butil(3-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)propan-1,2-diil) dikarbamata (3.0 g, 6.62 mmol) u EtOH (50 mL), dodat je N2H4·H2O (80%, 0.99 g, 19.85 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na 70°C 2 časa. Dobijena smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature. Dobijena reakcija je ugašena vodom (200 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen
2
pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 30% EA u PE da bi se dobio (S)-benzilterc-butil(3-aminopropan-1,2-diil)dikarbamat kao čvrsta supstanca: LC/MS [M 1]<+>: 324.
REFERENTNI PRIMER 33
(S)-di-terc-butil 2-(aminometil)piperazin-1,4-dikarboksilat
Korak A: (R)-1,4-di-terc-butil 2-metil piperazin-1,2,4-trikarboksilat
U rastvor (R)-1-terc-butil 2-metil piperazin-1,2-dikarboksilata (2.00 g, 8.19 mmol) i TEA (3.42 mL, 24.57 mmol) u DCM (20 mL) dodat je (Boc)2O (2.28 mL, 9.83 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 6 časova. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL) i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 70 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 150 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio željeni proizvod kao ulje: LC/MS [M 1]<+>: 345.
Korak B: (R)-di-terc-butil 2-(hidroksimetil)piperazin-1,4-dikarboksilat
U rastvor (R)-1,4-di-terc-butil 2-metil piperazin-1,2,4-trikarboksilata (2.00 g, 5.81 mmol) u THF (30 mL) dodat je LiAlH4(0.44 g, 11.61 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na 0°C 1 čas. Dobijena smeša je ugašena sa NaOH (1 M, 50 mL), i zatim je ekstrahovaan sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 70 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 40% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio željeni proizvod kao ulje: LC/MS [M 1]+: 317.
Korak C: (S)-di-terc-butil2-((1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil)piperazin-1,4-dikarboksilat U rastvor (R)-di-terc-butil 2-(hidroksimetil)piperazin-1,4-dikarboksilata (1.00 g, 3.16 mmol), trifenilfosfina (0.83 g, 3.16 mmol) i izoindolin-1,3-diona (0.47 g, 3.16 mmol) u THF (20 mL) dodat je DIAD (0.62 mL, 3.16 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodom (50 mL), i zatim je ekstrahovan sa EA (3 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 70 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 40% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo željeno jedinjenje kao čvrsta supstanca: LC/MS [M 1]<+>: 446.
Korak D: (S)-di-terc-butil 2-(aminometil)piperazin-1,4-dikarboksilat
U rastvor (S)-di-terc-butil 2-((1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil)piperazin-1,4-dikarboksilata (1.30 g, 2.92 mmol) u EtOH (30 mL) dodat je N2H4·H2O (80%, 0.58 g, 14.59 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 50°C 1 čas. Dobijena smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa EA (100 mL), ispran fiziološkim rastvorom (3 x 80 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ulje, koje je korišćeno direktno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1]<+>: 316.
REFERENTNI PRIMER 34
(R)-di-terc-butil 2-(aminometil)piperazin-1,4-dikarboksilat
Korak A: (S)-1,4-di-terc-butil-2-metil-piperazin-1,2,4-trikarboksilat
U rastvor (S)-1-terc-butil-2-metil-piperazin-1,2-dikarboksilata (2.0 g, 8.19 mmol) i TEA (2.28 mL, 16.37 mmol) u DCM (20 mL) dodat je (Boc)2O (2.85 mL, 12.28 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 6 časova. Dobijena smeša je ugašena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 70 mL). Spojeni organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 150 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio željeni proizvod kao ulje: LC/MS [M 1]<+>: 345.
Korak B: (S)-di-terc-butil-2-(hidroksimetil)piperazin-1,4-dikarboksilat
U rastvor (S)-1,4-di-terc-butil-2-metil-piperazin-1,2,4-trikarboksilata (1.50 g, 4.36 mmol) u THF (20 mL) dodat je LiAlH4(0.33 g, 8.71 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na 0°C 1 čas. Dobijena smeša je ugašena sa NaOH (1 M, 40 mL) i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 70 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 40% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio (S)-di-terc-butil -2-(hidroksimetil)piperazin-1,4-dikarboksilat kao ulje: LC/MS [M 1]+: 317.
Korak C: (R)-di-terc-butil-2-((1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil)piperazin-1,4- dikarboksilat
4
U rastvor (S)-di-terc-butil-2-(hidroksimetil)piperazin-1,4-dikarboksilata (1.10 g, 3.48 mmol), trifenilfosfina (1.82 g, 6.95 mmol) i izoindolin-1,3-diona (1.02 g, 6.95 mmol) u THF (15 mL) dodat je DIAD (1.35 mL, 6.95 mmol) na 0°C. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 70 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 40% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo željeno jedinjenje kao ulje: LC/MS / [M 1]<+>: 446.
Korak D: (R)-di-terc-butil-2-(aminometil)piperazin-1,4-dikarboksilat
U rastvor (R)-di-terc-butil-2-((1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil)piperazin-1,4- dikarboksilata (1.20 g, 2.69 mmol) u EtOH (10 mL) dodat je N2H4·H2O (0.26 g, 8.08 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 50°C 1 čas. Smeša je hlađena do sobne temperature. Dobijena smeša je filtrirana i filtrat je isparavan pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa EA (100 mL), ispran fiziološkim rastvorom (3 x 80 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio željeni proizvod kao ulje, koje je korišćeno direktno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1]<+>: 316.
REFERENTNI PRIMER 35
(S)-benzil (3-aminobutil)karbamat 2,2,2-trifluoroacetat
Korak A: (S)-terc-butil (4-hidroksibutan-2-il)karbamat
U rastvor (S)-3-((terc-butoksikarbonil)amino)buterne kiseline (5.0 g, 24.60 mmol) u THF (30 mL) dodat je BF3·THF (49 mL, 49 mmol, 1 M) ukapavanjem na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Dobijena smeša je ugašena vodom (50 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, i eluiran sa 25% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio željeni proizvod kao ulje: LC/MS [M 1]<+>: 190.
Korak B: (S)-3-((terc-butoksikarbonil)amino)butil metansulfonat
U rastvor (S)-terc-butil(4-hidroksibutan-2-il)karbamata (2.5 g, 13.21 mmol) i TEA (5.5 mL, 39.60 mmol) u DCM (50 mL) dodat je MsCl (1.5 mL, 19.81 mmol) ukapavanjem na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Dobijena smeša je razblažena sa EA (100 mL), isprana fiziološkim rastvorom (3 x 30 mL), sušena preko Na2SO4i filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio željeni proizvod kao ulje, koje je korišćeno direktno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1]<+>: 268.
Korak C: (S)-terc-butil (4-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)butan-2-il)karbamat
U rastvor (S)-3-((terc-butoksikarbonil)amino)butilmetansulfonata (3.0 g, 11.22 mmol) u DMF (40 mL) dodat je kalijum 1,3-dioksoizoindolin-2-id (3.0 g, 16.83 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 50°C 3 časa. Dobijena smeša je ugašena vodom (100 mL) i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, i eluiran sa 20% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo željeno jedinjenje kao čvrsta supstanca: LC/MS [M 1]<+>: 319.
Korak D: (S)-terc-butil (4-aminobutan-2-il)karbamat
U rastvor (S)-terc-butil (4-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)butan-2-il)karbamata (2.7 g , 8.48 mmol) u EtOH (50 mL) dodat je N2H4·H2O (80%, 0.85 g, 16.96 mmol). Reakciona smeša je mešana na 80°C 2 časa. Dobijena smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio (S)-terc-butil (4-aminobutan-2-il)karbamat kao ulje, koje je korišćeno direktno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1]<+>: 189.
Korak E : (S)-benzil terc-butil butan-1,3-diildikarbamat
U rastvor (S)-terc-butil(4-aminobutan-2-il)karbamata (1.4 g, 7.44 mmol) u DCM (15 mL) dodat je TEA (1.5 g, 14.87 mmol) i CbzCl (1.5 g, 8.55 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 0.5 časa. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa EA (100 mL), ispran fiziološkim rastvorom (3 x 30 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio željeni proizvod kao ulje, koje je korišćeno direktno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1]+: 323.
Korak F: (S)-benzil (3-aminobutil)karbamat 2,2,2-trifluoroacetat
Rastvor (S)-benzil terc-butil butan-1,3-diildikarbamata (1 g, 3.1 mmol) u TFA (8 mL) je mešan na sobnoj temperaturi 1 čas. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio (S)-benzil(3-aminobutil)karbamat 2,2,2-trifluoroacetat kao ulje, koje je korišćeno direktno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1-TFA]<+>: 223
REFERENTNI PRIMER 36
(S)-di-terc-butil (3-aminopropan-1,2-diil)dikarbamat
Korak A: (R)-23-bis((terc-butoksikarbonil)amino)propil metansulfonat
MsCl (0.59 g, 5.16) dodat je u di-terc-butil (3-hidroksipropan-1,2-diil)(R)-dikarbamat (J. Med. Chem. 2010, 53(8), 3198-3213; 1.0 g, 3.44 mmol) i TEA (1.0 g, 10.34 mmol) u DCM (10 mL) na 0°C. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreva do sobne temperature i mešana 1 h. Dobijena smeša je ugašena vodom (50 mL) i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo željeno jedinjenje, koje je direktno korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1]<+>: 369.
Korak B: (R)-di-terc-butil (3-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)propan-1,2-diil)dikarbamat
U rastvor (R)-2,3-bis((terc-butoksikarbonil)amino)propil metansulfonata (1.4 g, 0.38 mmol) u DMF (15 mL) dodat je kalijum 1,3-dioksoizoindolin-2-id (1.41 g, 7.60 mmol) na sobnoj temperaturi. Zatim je smeša mešana na 60°C 16 h. Dobijena smeša je ugašena vodom (50 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 30% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo željeno jedinjenje kao čvrsta supstanca: LC/MS [M 1]+: 420.
Korak C: (S)-di-terc-butil (3-aminopropan-1,2-diil)dikarbamat
U rastvor (R)-di-terc-butil (3-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)propan-1,2-diil)dikarbamata (1.0 g, 2.38 mmol) u EtOH (10 mL) dodat je N2H4H2O (80%, 0.36 g, 7.15 mmol). Smeša je mešana na 70°C 1 h. Reakciona smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom do željenog jedinjenja kao čvrsta supstanca, koje je korišćeno za pripremu jedinjenja prema pronalasku bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1]<+>: 290.
REFERENTNI PRIMER 37
(R)-benzil (2-aminobutil)karbamat hidrohlorid
Korak A: (R)-terc-butil (1-amino-1-oksobutan-2-il)karbamat
TEA (13.7 mL, 98 mmol) i BoC2O (15.8 g, 72.2 mmol) su dodati u rastvor (R)-2-aminobutanamid hidrohlorid (5.0 g, 36.1 mmol) u MeOH (100 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 časa. Dobijena smeša je ugašena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodenim rastvorom HCl (1 M, 2 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo željeno jedinjenje kao čvrsta supstanca, koja je korišćena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1]<+>: 203.
Korak B: (R)-terc-butil (1-aminobutan-2-il)karbamat
BH3·DMS (9.39 g, 124 mmol) dodat je ukapavanjem u mešani rastvor (R)-terc-butil (1-amino-1-oksobutan-2-il)karbamata (5.0 g, 24.72 mmol) u THF (50 mL) na 0°C. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana 12 časova na sobnoj temperaturi pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodenim rastvorom NaOH (1 M, 150 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koja je direktno korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1]<+>: 189.
Korak C: (R)-benzil terc-butil butan-1,2-diildikarbamat
Benzil karbonohloridat (8.16 g, 47.8 mmol) i TEA (10 mL, 71.7 mmol) dodati su u rastvor (R)-terc-butil (1-aminobutan-2-il)karbamata (4.50 g, 23.90 mmol) u DCM (50 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodom (200 mL), i zatim je ekstrahovan sa EA (3 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 20% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LC/MS [M 1]+: 323.
Korak D: (R)-benzil (2-aminobutil)karbamat hidrohlorid
Rastvor (R)-benzil terc-butil butan-1,2-diildikarbamata (1.0 g, 3.10 mmol) u HCl (1M u dioksanu) (10 mL) je mešan na sobnoj temperaturi 1 čas. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi (R)-benzil (2-aminobutil)karbamat hidrohlorid kao čvrsta supstanca, koja je direktno korišćena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1 -HCl]+: 223.
REFERENTNI PRIMER 38
(S)-terc-butil(2-(3-aminopirolidin-1-il)etil)karbamat
Korak A: benzil (S)-(1-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)pirolidin-3-il)karbamat Terc-butil (2-bromoetil)karbamat (4.5 g, 20 mmol) i Na2CO3(2.9 g, 27 mmol) dodati su u rastvor (S)-benzilpirolidin-3-ilkarbamata (3 g, 13.5 mmol) u DMF (15 mL). Smeša je mešana 10 časova na sobnoj temperaturi. Zatim je smeša sipana u vodu (60 mL). Vodena faza je ekstrahovana sa EA (2 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koje je korišćeno u sledećem koraku direktno bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1]<+>: 364.
Korak B: (S)-terc-butil(2-(3-aminopirolidin-1-il)etil)karbamat
U rastvor benzil (S)-(1-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)pirolidin-3-il)karbamata (4.8 g, 13 mmol) u MeOH (15 mL) dodat je Pd(OH)2/C (20% Pd, 2 g). Smeša je degazirana vodonikom tri puta. Zatim je smeša mešana na sobnoj temperaturi pod vodonikom 16 časova. Dobijena smeša je filtrirana kroz CELIT. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 10% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LC/MS [M 1 - 100]+: 130.
REFERENTNI PRIMER 39
(R)-terc-butil(2-(3-aminopirolidin-1-il)etil)karbamat
Korak A: terc-butil (R)-(2-(3-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-il)etil)karbamat Terc-butil (2-bromoetil)karbamat (4.48 g, 19.98 mmol) dodat je u smešu (R)-benzilpirolidin-3-ilkarbamata (2.2 g, 9.99 mmol) i K2CO3(4.14 g, 30.0 mmol) u DMF (40 mL). Reakciona smeša je mešana 4 časa na sobnoj temperaturi pod azotom. Reakciona smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 10% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo željeno jedinjenje: LC/MS [M 1]<+>: 364.
Korak B : (R)-terc-butil (2-(3-aminopirolidin-1-il)etil)karbamat
Pd(OH)2/C (20% Pd, 0.30 g, 2.14 mmol) dodat je u rastvor terc-butil (R)-(2-(3-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-il)etil)karbamata (2.96 g, 8.14 mmol) u MeOH (30 mL). Reakciona smeša je degazirana vodonikom tri puta i mešana 6 časova na sobnoj temperaturi pod vodonikom (oko 1.5 atm.). Dobijeni rastvor je filtriran i filter kolač je ispran sa MeOH (3 x 100 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo željeno jedinjenje kao ulje, koje je korišćeno direktno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1]+: 230.
REFERENTNI PRIMER 40
(R)-benzil(3-aminobutil)karbamat hidrohlorid
Korak A: (R)-terc-butil (4-hidroksibutan-2-il)karbamat
BF3·THF (84 mL, 84.0 mmol, 1 M) dodat je ukapavanjem na 0°C u rastvor (R)-3-((tercbutoksikarbonil)amino)buterne kiseline (8.5 g, 41.8 mmol) u THF (10 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Dobijena smeša je ugašena vodom (50 mL), i zatim je ekstrahovan sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 30% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo željeno jedinjenje kao ulje: LC/MS [M 1 - 56]<+>: 134.
Korak B: (R)-3-((terc-butoksikarbonil)amino)butil metansulfonat
TEA (7.0 g, 69.7 mmol) i MsCl (2.7 mL, 34.9 mmol) su dodati u rastvor (R)-terc-butil (4-hidroksibutan-2-il)karbamata (4.4 g, 23.3 mmol) u DCM (100 mL) na 0°C. Reakciona smeša je mešana 1 čas na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa EA (300 mL), ispran fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 10% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio (R)-3-((tercbutoksikarbonil) amino)butil metansulfonat kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 268.
Korak C: (R)-terc-butil (4-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)butan-2-il)karbamat
Kalijum 1,3-dioksoizoindolin-2-id (5.7 g, 30.0 mmol) dodat je u rastvor (R)-3-((tercbutoksikarbonil)amino)butil metansulfonata (5.5 g, 20.0 mmol) u DMF (20 mL). Smeša je mešana na 60°C 2 časa, razblažena vodom (100 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 200 mL). Kombinovane organske frakcije su isprane fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušene preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirane. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo željeno jedinjenje kao čvrsta supstanca, koja je direktno korišćena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LC/MS [M 1]<+>: 319.
Korak D: (R)-terc-butil (4-aminobutan-2-il)karbamat
N2H4H2O (1.44 g, 28.30 mmol) dodat je u rastvor (R)-terc-butil (4-(1,3-dioksoizoindolin-2-il)butan-2-il)karbamata (4.5 g, 14.10 mmol) u EtOH (2 mL). Smeša je mešana na 80°C 1 čas, zatim je ostavljena da se hladi do sobne temperature. Dobijena smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio (R)-terc-butil (4-aminobutan-2-il)karbamat kao ulje, koja je direktno korišćena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 189.
Korak E: (R)-benzil terc-butil butan-1,3-diildikarbamat
TEA (4.4 mL, 31.90 mmol) i CbzCl (1.7 mL, 12.20 mmol) dodati su u rastvor (R)-terc-butil (4-aminobutan-2-il)karbamata (2.0 g, 10.60 mmol) u THF (10 mL) i vodi (10 mL) na 0°C tokom 5 minuta. Reakcija je mešana 30 minuta na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 30 mL), zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(3 x 30 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 30 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio (R)-benzil terc-butil butan-1,3-diildikarbamat kao čvrsta supstanca, koji je korišćen u sledećem koraku direktno bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 323.
Korak F: (R)-benzil (3-aminobutil)karbamat hidrohlorid
U rastvor (R)-benzil terc-butil butan-1,3-diildikarbamata (1.0 g, 3.10 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL) dodata je koncentrovana HCl (1 mL, 12 M). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1.5 čas. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio (R)-benzil (3-aminobutil)karbamat hidrohlorid kao ulje, koje je korišćeno u pripremi finalnih jedinjenja bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1 - HCl]<+>: 223.
REFERENTNI PRIMERI 41 i 42
(R)- i (S)-terc-butil-3-amino-3-(aminometil)pirolidin-1-karboksilat
terc-Butil 3-amino-3-(aminometil)pirolidin-1-karboksilat (2.0 g, 9.29 mmol), pripremljen praćenjem detalja opisanih u Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2007, 17, 1181-1184), je odvojen pomoću Chiral Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: Chiralpak AD-H, 2 x 25 cm; Pokretna faza A: CO2(70%), Pokretna faza B: MeOH (2 mmol/L NH3/MeOH): 30%; Stopa protoka: 40 mL/min; Detektor: 210 nm; Vreme zadržavanja: RT1: 2.27 min; RT2: 3.30 min; Temperatura: 25°C. Enantiomer koji se brže eluira 41 je dobijen (R)-terc-butil 3-amino-3-(aminometil) pirolidin -1-karboksilat na 2.27 min kao ulje: LCMS (ESI) izrač. za C10H21N3O2[M 1]+: 216, zabeleženo 216. Enantiomer koji se sporije eluira 42 je dobijen (S)-terc-butil 3-
1
amino-3-(aminometil)pirolidin-1-karboksilat na 3.30 min kao ulje: LCMS (ESI) izrač. za C10H21N3O2[M 1]+: 216, zabeleženo 216.
REFERENTNI PRIMER 43
(S)-terc-butil-(3-amino-2-hidroksipropil)karbamat
25% NH3·H2O (20 mL) dodat je u mešani rastvor (R)-terc-butil-(oksiran-2-ilmetil)karbamata (1.50 g, 8.70 mmol) u EtOH (5 mL) na 0°C. Reakcioni rastvor je mešan 2 časa na sobnoj temperaturi, zatim je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio (S)-terc-butil-(3-amino-2-hidroksipropil) karbamat kao čvrsta supstanca, koja je korišćena za pripremu finalnih jedinjenja pronalaska bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 191.
REFERENTNI PRIMER 44
(3S,4R)-terc-butil-amino-4-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat
Korak A: terc-butil (3R,4R)-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilat
Cbz-Cl (10.12 g, 59.3 mmol) dodat je ukapavanjem u smešu (3R,4R)-terc-butil 3-amino-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata (10.0 g, 49.40 mmol) i Na2CO3(6.29 g, 59.30 mmol) u 1,4-dioksanu (100 mL) i vodi (100 mL) na 0°C. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas pod azotom. Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski sloj je ispran vodenim rastvorom NaOH (1 M, 2 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (2 x 100 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 10% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo željeno jedinjenje: LCMS [M 23]+: 359.
Korak B: (3R,4R)-terc-butil-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-((metilsulfonil)oksi) pirolidin -1-karboksilat
MsCl (10.9 g, 95 mmol) dodat je ukapavanjem u rastvor terc-butil (3R,4R)-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata (16.0 g, 47.6 mmol) i TEA (13.2 mL, 95 mmol) u DCM (200 mL) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h pod azotom. Dobijeni rastvor je ugašen vodom (100 mL) i ekstrahovan sa EA (3
2
x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 32% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio (3R,4R)-tercbutil-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-((metilsulfonil)oksi)pirolidin-1-karboksilat kao čvrsta supstanca: LCMS [M 23]+: 437.
Korak C: (3S,4R)-terc-butil 3-azido-4-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat NaN3(12.8 g, 198 mmol) dodat je u rastvor (3R,4R)-terc-butil-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4- ((metilsulfonil)oksi)pirolidin-1-karboksilata (20.5 g, 49.5 mmol) u DMF (200 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 100°C 3 časa pod azotom. Dobijeni rastvor je ugašena vodom (200 mL) i ekstrahovan sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio (3S,4R)-terc-butil-3-azido-4-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat kao ulje, koji je korišćen u sledećem koraku direktno bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 23]<+>: 384.
Korak D: (3S,4R)-terc-butil 3-amino-4-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor (3S,4R)-terc-butil-3-azido-4-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-karboksilata (17.8 g, 49.30 mmol) u THF (200 mL) i vodi (20 mL) dodat je trifenilfosfin (15.5 g, 59.10 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na 60°C 16 časova pod azotom. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 5% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ulje: LCMS [M 23]+: 358.
REFERENTNI PRIMER 45
(S)-terc-butil(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)karbamat
Pd(OH)2/C (20% Pd, 0.46 g) dodat je u rastvor (S)-benzil-terc-butil(3-hidroksipropan-1,2-diil)dikarbamata (2.10 g, 6.47 mmol) u MeOH (20 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana vodonikom tri puta. Reakciona smeša je mešana 12 časova na sobnoj temperaturi pod vodonikom (1.5 atm). Dobijena smeša je filtrirana. Filter kolač je ispran sa MeOH (3 x 20 mL). Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, i eluiran sa 45% MeOH i 5% NH3·H2O u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio metil-2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilat kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]+: 191.
REFERENTNI PRIMER 46
(S)-benzil (2-amino-3-hidroksipropil)karbamat 2,2,2-trifluoroacetat
TFA (3.3 mL) dodat je u mešani rastvor (S)-benzil-terc-butil (3-hidroksipropan-1,2-diil)dikarbamata (1.20 g, 3.70 mmol) u DCM (10 mL) na 0°C. Reakcioni rastvor je mešan 2 časa na 0°C. Rastvor je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio (S)-benzil (2-amino-3-hidroksipropil)karbamat 2,2,2-trifluoroacetat kao čvrsta supstanca, koji je korišćen za pripremu finalnih jedinjenja prema pronalasku direktno bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1 -TFA]+: 225.
REFERENTNI PRIMER 47
(R)-benzil (2-aminopropil)karbamat 2,2,2-trifluoroacetat
Korak A: (R)-terc-butil (1-amino-1-oksopropan-2-il)karbamat
U suspenziju (R)-2-aminopropanamid hidrohlorida (100 g, 0.80 mmol) u MeOH (1000 mL) dodati su TEA (244 g, 2.41 mol) i (Boc)2O (263 g, 1.20 mol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je razblažena vodom (1 L) i ekstrahovana sa EA (3 x 1.5 L). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 2 L), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio željeni proizvod kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 189.
Korak B: (R)-terc-butil (1-aminopropan-2-il)karbamat
BH3-DMS (128 mL, 1.28 mol, 10 M) dodat je u suspenziju (R)-terc-butil(1-amino-1-oksopropan-2-il)karbamata (120 g, 0.64 mol) u THF (200 mL) na 0°C. Reakciona smeša je mešana 4 časa na 45°C. Dobijena smeša je ugašena vodenim rastvorom NaOH (1.0 M, 1.0 L) i ekstrahovana sa EA (3 x 1 L). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 1.5 L), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio (R)-terc-butil (1-aminopropan-2-il)karbamat kao ulje, koje je korišćeno u sledećem koraku direktno bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 175.
4
Korak C: (R)-benzil-terc-butilpropan-1,2-diildikarbamat
TEA (7.20 mL, 51.70 mmol) i Cbz-Cl (5.87 g, 34.4 mmol) su dodati u rastvor (R)-terc-butil (1-aminopropan-2-il)karbamata (3 g, 17.2 mmol) u DCM (40 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 časa. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela sa 20% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio (R)-benzil -terc-butil propan-1,2-diildikarbamat kao čvrsta supstanca; LCMS [M 1]<+>: 309.
Korak D: (R)-benzil (2-aminopropil)karbamat 222-trifluoroacetat
Rastvor (R)-benzil-terc-butil-propan-1,2-diildikarbamata (1.10 g, 3.57 mmol) u TFA (15.0 ml, 214 mmol) i DCM (15.0 ml) je mešan na sobnoj temperaturi 1 čas. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ulje, koje je korišćeno za pripremu finalnih jedinjenja pronalaska bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M - TFA 1]<+>: 209.
REFERENTNI PRIMER 48
(R)-benzil (2-aminobutil)karbamat hidrohlorid
Korak A: (R)-terc-butil (1-amino-1-oksobutan-2-il)karbamat
(Boc)2O (15.8 g, 72.20 mmol) i TEA (13.7 mL, 98.00 mmol) dodati su u rastvor (R)-2-aminobutanamid hidrohlorida (5.0 g, 36.10 mmol) u MeOH (50 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Dobijena smeša je ugašena sa H2O (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani sa HCl (1 M, 2 x 50 mL), sušeni preko Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio željeni proizvod kao čvrsta supstanca, koja je korišćena u sledećem koraku direktno bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 203. Korak B: (R)-terc-butil (1-aminobutan-2-il)karbamat
BH3·Me2S (9.39 g, 124.0 mmol, 10 M) dodat je ukapavanjem u rastvor (R)-terc-butil(1-amino-1-oksobutan-2-il)karbamata (5.0 g, 24.7 mmol) u THF (50 mL) na 0°C. Reakciona smeša je mešana 12 časova na sobnoj temperaturi. Dobijena reakciona smeša je ugašena vodenim rastvorom NaOH (1 M, 150 mL) i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio (R)-terc-butil(1-aminobutan-2-il)karbamat kao čvrsta supstanca, koja je korišćena u sledećem koraku direktno bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 189.
Korak C: (R)-benzil terc-butil butan-1,2-diildikarbamat
CbzCl (8.16 g, 47.80 mmol) i TEA (7.26 g, 71.70 mmol) su dodati u rastvor (R)-terc-butil (1-aminobutan-2-il)karbamata (4.5 g, 23.90 mmol) u DCM (50 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Dobijena smeša je ugašena vodom (50 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 x 10 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4 i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 20% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio (R)-benzil terc-butil butan-1,2-diildikarbamat kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 323.
Korak D: (R)-benzil(2-aminobutil)karbamat hidrohlorid
Rastvor (R)-benzil-terc-butilbutan-1,2-diildikarbamata (1.0 g, 3.10 mmol) u HCl (1 M u dioksanu) (10 mL) je mešan na sobnoj temperaturi 2 h. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1 - HCl]<+>: 223.
REFERENTNI PRIMER 49
(S)-benzil(2-aminobutl)karbamat hidrohlorid
Korak A: (S)-terc-butil(1-amino-1-oksobutan-2-il)karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano u REFERENTNOM PRIMERU 48 Korak A upotrebom (S)-2-aminobutanamid hidrohlorida (10 g, 65.50 mmol): LCMS [M 1]+: 203.
Korak B: (S)-terc-butil (1-aminobutan-2-il)karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano u REFERENTNOM PRIMERU 48 Korak B upotrebom (S)-terc-butil(1-amino-1-oksobutan-2-il)karbamata (3 g, 14.83 mmol): LCMS [M 1]+: 189.
Korak C: (S)-benzil terc-butilbutan-1,2-diildikarbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano u REFERENTNOM PRIMERU 48 Korak C upotrebom (S)-terc-butil(1-aminobutan-2-il)karbamata (1.0 g, 5.31 mmol): LCMS [M 1]+: 323.
Korak D: (S)-benzil (2-aminobutil)karbamat hidrohlorid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano u REFERENTNOM PRIMERU 48 Korak D upotrebom (S)-benzil terc-butil butan-1,2-diildikarbamata (1 g, 3.10 mmol): LCMS [M 1 - HCl]+: 223.
REFERENTNI PRIMER 50
(3R, 4S)-terc-butil 3 -amino-4-((terc-butoksikarbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat
Korak A: (3R, 4S)-terc-butil-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-((terc-butoksikarbonil) amino)pirolidin-1-karboksilat
TEA (1.02 g, 10.10 mmol) i (BOC)2O (1.76 g, 8.07 mmol) dodati su u mešani rastvor (3S, 4R)-terc-butil-3-amino-4-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-karboksilata (REFERENTNI PRIMER 44, 2.3 g, 6.72 mmol) u 1,4-dioksanu (15 mL) i vodi (15 mL) u ledenom kupatilu. Reakciona smeša je mešana 16 časova na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa Et2O (3 x 200 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom Na2CO3(2 x 100 mL), fiziološkim rastvorom (2 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4 i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koje je korišćeno u sledećem koraku direktno bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 436.
Korak B: (3R, 4S)-terc-butil 3-amino-4-((terc-butoksikarbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat
Pd(OH)2/C (20% Pd, 0.35 g, 0.50 mmol) dodat je u rastvor (3R, 4S)-terc-butil-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-((terc-butoksikarbonil)amino)pirolidin-1-karboksilata (2.20 g, 4.95 mmol) u MeOH (20 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana vodonikom tri puta. Reakciona smeša je mešana 16 časova na sobnoj temperaturi pod vodonikom (1.5 atm). Dobijena smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio (3R, 4S)-tercbutil-3-amino-4-((terc-butoksikarbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat kao čvrsta supstanca, koja je korišćena za pripremu jedinjenja prema pronalasku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]+: 302.
REFERENTNI PRIMER 51
(2-Karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina
Korak A: 4-Bromo-2-(trihlorometil)-1H-benzo[d]imidazol
Benzil 2,2,2-trihloroacetimidat (13.50 g, 53.50 mmol) dodat je u mešani rastvor 3-bromobenzen-1,2-diamina (10.0 g, 53.50 mmol) u AcOH (50 mL) na sobnoj temperaturi. Reakcioni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 4 časa. Dobijena smeša je sipana u vodu (300 mL) i čvrsta supstanca je istaložena. Dobijena smeša je filtrirana. Filter kolač je ispran vodom (3 x 50 mL) i sušen pod vakuumom da bi se dobio željeni proizvod kao čvrsta supstanca, koja je korišćena u sledećem koraku direktno bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 315.
Korak B: 4-Bromo-1H-benzo[d]imidazol-2-karbonitril
4-bromo-2-(trihlorometil)-1H-benzo[d]imidazol (10.00 g, 31.80 mmol) dodat je u rastvor tečnog NH3(20 mL) na -78°C. Smeša je mešana na -78°C 20 min. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Pošto je amonijak ispren, ostatak je rastvoren u EA (300 mL). Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4 i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 30% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio 4-bromo-1H-benzo[d]imidazol-2-karbonitril kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 222, 224.
Korak C: 4-Bromo-1H-benzo[d]imidazol-2-karboksamid
30% H2O2(0.3 mL, 2.25 mmol) i KOH (0.63 g, 11.26 mmol) dodati su u rastvor 4-bromo-1H-benzo[d]imidazol-2-karbonitrila (0.50 g, 2.25 mmol) u MeOH (10 mL) i vodi (5 mL). Reakciona smeša je mešana na 25°C 4 časa. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 10% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio željeni proizvod kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 240, 242.
Korak D: (2-Karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina
KOAc (1.23 g, 12.50 mmol), Pd(dppf)Cl2(0.51 g, 0.63 mmol) i 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborinan) (2.12 g, 9.37 mmol) su dodati u rastvor 4-bromo-1H-benzo[d]imidazol-2-karboksamida (0.75 g, 3.12 mmol) u 1,4-dioksanu (6 mL). Smeša je degazirana azotom tri puta i mešana 16 h na 80°C pod azotom. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću RPLC sa sledećim uslovima: Kolona: C18; pokretna faza: ACN/voda (0.5% TFA); Stopa protoka: 60 mL/min; Gradijent: 5%-30% ACN u vodi 30 min; Vreme zadržavanja: 20 min; Detektor: UV 254 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobila (2-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 206.
REFERENTNI PRIMER 52
terc-butil (2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-2H-benzo[d][1,2,3]triazol-2-il)etil)karbamat
Korak A: 4-Bromo-1H-benzo[d][1,2,3]triazol
Natrijum nitrit (1.7 g, 25.0 mmol) dodat je u nekoliko porcija u rastvor 3-bromobenzen-1,2-diamina (2.3 g, 12.5 mmol) u AcOH (10 mL) i vodi (4 mL) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 h. Dobijena smeša je ugašena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4 i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 4-bromo-1H-benzo[d][1,2,3]triazol kao čvrsta supstanca, koja je korišćena u sledećem koraku direktno bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 198, 200.
Korak B: Terc-butil (2-(4-bromo-2H-benzo[d][1,2,3]triazol-2-il)etil)karbamat
Na2CO3(2.6 g, 25 mmol) dodat je u rastvor 4-bromo-1H-benzo[d][1,2,3]triazola (2 g, 10 mmol) i terc-butil (2-bromoetil) karbamata (3.4 g, 15 mmol) u DMF (15 mL) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 časova. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 80 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4 i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 15% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio željeni proizvod kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 341, 343.
Korak C: Terc-butil (2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-2H-benzo[d][1,2,3]triazol-2-il)etil)karbamat
4,4,4',4',5,5,5',5' -oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (4.47 g, 17.58 mmol), KOAc (0.86 g, 8.79 mmol) i Pd(dppf)Cl2adukt CH2Cl2(0.48 g, 0.59 mmol) dodati su u rastvor terc-butil(2-(4-bromo-2H-benzo[d][1,2,3]triazol-2-il)etil) karbamata (1.0 g, 2.93 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta i mešana 16 časova na 80°C. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, i eluiran sa 20% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio terc-butil (2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-2H-benzo[d][1,2,3]triazol-2-il) etil)karbamat kao ulje: LCMS [M 1]+: 389.
REFERENTNI PRIMER 53
2-Amino-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-ilboronska kiselina
Korak A: 4-Metilbenzo[c][1,2,5]tiadiazol
SOCl2(18 mL, 246 mmol) je dodat ukapavanjem veoma lagano u rastvor 3-metilbenzen-1,2-diamina (10.0 g, 82 mmol) i TEA (45.6 mL, 327 mmol) u DCM (200 mL). Reakciona smeša je refluksovana 4 časa. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen vodom (700 mL), i zatim je ekstrahovan sa DCM (3 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 x 200 mL), fiziološkim rastvorom (2 x 200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4 i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, i eluiran sa 1% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio 4-metilbenzo[c] [1,2,5]tiadiazol kao ulje: LCMS [M 1]+: 151.
Korak B: 4-Bromo-7-metilbenzo[c][1,2,5]tiadiazol
Br2(7.6 mL, 146 mmol) dodat je u rastvor 4-metilbenzo[c][1,2,5]tiadiazola (11 g, 73.2 mmol) u 48% vodenom rastvoru HBr (120 mL, 1.06 mol). Reakciona smeša je mešana 16 časova na 80°C. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL), i zatim je ekstrahovana sa DCM (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 x 200 mL) i fiziološkim rastvorom (2 x 200 mL), sušeni preko anhidrovanog MgSO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio željeni proizvod kao čvrsta supstanca, koja je korišćena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 229, 231.
Korak C: 3-Bromo-6-metilbenzen-1,2-diamin
NaBH4(1.3 g, 34.90 mmol) i kobalt (II) hlorid heksahidrat (0.4 g, 1.75 mmol) su dodati u rastvor 4-bromo-7-metilbenzo[c][1,2,5]tiadiazola (4.0 g, 17.46 mmol) u MeOH (80 mL) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na 70°C 3 časa. Dobijena smeša je hlađena do sobne temperature, i zatim je filtrirana da bi se uklonila čvrsta supstanca. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u vodi (100 mL). Vodena faza je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4 i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiranjem sa 20% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio 3-bromo-6-metilbenzen-1,2-diamin kao ulje: LCMS [M 1]+: 201, 203.
Korak D: 4-Bromo-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-amin
BrCN (1.05 g, 9.95 mmol) dodat je u rastvor 3-bromo-6-metilbenzen-1,2-diamina (2.00 g, 9.95 mmol) u MeOH (20 mL) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 90 min. Reakciona smeša je sipana u zasićeni vodeni rastvor NaHCO3(50 mL). Čvrsta supstanca je istaložena i filtrirana. Filter kolač je sušen pod vakuumom da bi se dobio željeni proizvod, koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 226, 228.
Korak E: 2-Amino-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-ilboronska kiselina
5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborinan) (4.50 g, 19.91 mmol), prekatalizator druge generacije PPh3(0.69 g, 1.19 mmol) i KOAc (2.3 g, 23.90 mmol) dodati su u rastvor 4-bromo-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-amina (1.80 g, 7.96 mmol) u 1,4-dioksanu (18 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću RPLC sa sledećim uslovima: Kolona: C18; pokretna faza: ACN/voda (0.5% TFA); Stopa protoka: 60 mL/min; Gradijent: 5%-30% ACN u water 30 min; Vreme zadržavanja: 20 min; Detektor: 254 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje kiselinu iz naslova acid kao čvrstu supstancu: LCMS [M 1 192.
REFERENTNI PRIMER 54
Terc-butil(4-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-1H-imidazol-2-il)karbamat
Korak A: Terc-butil (4-(3-bromofenil)-1H-imidazol-2-il)karbamat
U rastvor 2-bromo-1-(3-bromofenil)etanona (3 g, 10.79 mmol) u DMF (30 mL) dodat je tercbutil-N-karbamimidoilkarbamat (3.5 g, 21.59 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 časova. Dobijena smeša je razblažena vodom (60 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 30 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4 i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 15% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio terc-butil (4-(3-bromofenil)-1H-imidazol-2-il)karbamat kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 338, 340. Korak B: Terc-butil( 4-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-1H-imidazol -2-il)karbamat
1
U rastvor terc-butil (4-(3-bromofenil)-1H-imidazol-2-il)karbamata (1.5 g, 4.44 mmol) u 1,4-dioksanu (20 mL) dodati su 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil -2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (2.3 g, 8.87 mmol), Pd(dppf)Cl2adukt CH2Cl2(0.6 g, 0.68 mmol) i KOAc (1.3 g, 13.31 mmol). Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana 16 časova pod azotom na 80°C. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]+: 386.
REFERENTNI PRIMER 55
(1H-pirolo[3,2-b)]piridin-6-il)boronska kiselina
KOAc (1.5 g, 15.20 mmol), Xphos prekatalizator druge generacije (1.2 g, 1.52 mmol) i 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (2.6 g, 10.15 mmol) dodati su u rastvor 6-bromo-1H-pirolo[3,2-b]piridina (1.0 g, 5.08 mmol) u 1,4-dioksanu (4 mL). Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena sa EA (30 mL), i zatim je ekstrahovana vodenim rastvorom NaOH (2N, 2 x 100 mL). Spojeni vodeni slojevi su koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je mešan u MeOH/DCM (1/10, 100 mL) 20 min. Dobijena smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: [M 1]<+>: 163.
REFERENTNI PRIMER 56
5-(4,4,5,5-Tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzo[d]tiazol-2-amin
Korak A: N-((3-bromofenil)karbamotioil)benzamid
3-bromoanilin (3.50 mL, 32.1 mmol) dodat je ukapavanjem u rastvor benzoil izotiocijanata (5.81 g, 35.7 mmol) u acetonu (50 mL) na 70°C. Reakciona smeša je mešana na 70°C 1 čas. Dobijeni rastvor je sipan u led-vodu (100 mL), mešan 10 minuta i filtriran. Filter kolač je ispran vodom (10 mL) i sušen pod vakuumom da bi se dobio željeni proizvod kao čvrsta supstanca, koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 335, 337.
Korak B: 1-(3-Bromofenil)tiourea
2
N-((3-bromofenil)karbamotioil)benzamid (10.0 g, 29.8 mmol) dodat je u rastvor NaOH (10.0 g, 250 mmol) u vodi (100 mL) na 80°C. Reakciona smeša je mešana na 80°C 1 čas pod azotom. Dobijena smeša je sipana u ledeni vodeni rastvor HCl (6M, 30 mL) i mešana 10 minuta. pH vrednost je podešena do 10 sa 25% NH3·H2O. Čvrsta supstanca je istaložena i filtrirana. Filter kolač je ispran vodom (10 mL) i sušen pod vakuumom. Sirova čvrsta supstanca je prečišćena hromatografijom na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobila 1-(3-bromofenil)tiourea kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 231, 233.
Korak C: 5-Bromobenzo[d]tiazol-2-amin
Rastvor broma (0.86 mL, 16.79 mmol) u AcOH (17.5 mL) dodat je ukapavanjem na 0°C U rastvor 1-(3-bromofenil)tiouree (4.00 g, 17.31 mmol) u ACN (350 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 časova pod azotom. Dobijena smeša je filtrirana. Filter kolač je ispran sa EA (10 mL) i sušen pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Select CSH Prep C18 OBD Kolona 19 x 150 mm, 5 µm, 13 nm, faza A: voda sa 0.05% TFA, faza B: MeOH; Stopa protoka: 20; Zapremina injekcije: 200 µL; Gradijent: 30-100% B; Vreme zadržavanja: 28 min (brži pik). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio 5-bromobenzo[d]tiazol-2-amin kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 229, 231.
Korak D: 5-(4,4,5,5-Tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzo[d]tiazol-2-amin
KOAc (5.27 g, 53.70 mmol) i prekatalizator PCy3druge generacije (2.11 g, 3.58 mmol) dodati su u rastvor 5-bromobenzo[d]tiazol-2-amina (4.10 g, 17.90 mmol) i 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolana) (9.09 g, 35.80 mmol) u 1,4-dioksanu (100 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana 4 časa na 80°C pod azotom. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 277.
REFERENTNI PRIMER 57
2-Metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-2H-benzo[d][1,2,3]triazol
Korak A: 4-Bromo-2-metil-2H-benzo[d][1,2,3]triazol
Jodometan (2.87 g, 20.20 mmol) je dodat u smešu 4-bromo-2H-benzo[d][1,2,3]triazola (4.0 g, 20.20 mmol) i kalijum karbonata (5.58 g, 40.40 mmol) u DMF (40 mL) na sobnoj temperaturi 2 min. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h pod azotom, zatim koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 7% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio 4-bromo-2-metil-2H-benzo[d][1,2,3]triazol kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 212, 214.
Korak B: 2-Metil-4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-2H-benzo[d][1,2,3] triazol 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'- bi(1,3,2-dioksaborolan) (1.72 g, 6.79 mmol), KOAc (1.67 g, 16.98 mmol) i Pd(dppf)Cl2adukt CH2Cl2(0.46 g, 0.57 mmol) dodati su u rastvor 4-bromo-2-metil-2H-benzo[d][1,2,3]triazola (1.20 g, 5.66 mmol) u 1,4-dioksan (16 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 10% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ulje: LCMS [M 1]+: 260.
REFERENTNI PRIMER 58
3-Oksocikloheks-1-enilboronska kiselina
Korak A: 3-Oksocikloheks-1-enil-trifluorometansulfonat
TEA (9.03 g, 89.4mmol) i Tf2O (15.1 g, 53.6 mmol) dodati su u rastvor cikloheksan-1,3-diona (5.00 g, 44.6 mmol) u DCM (50 mL) na -78°C 10 minuta pod azotom. Reakciona smeša je mešana na -78°C 1 čas. Dobijena smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(50 mL) i ekstrahovana sa DCM (3 x 50 mL). Spojeni organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4 i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću kolone silika gela i eluiran sa 10% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio 3-oksocikloheks-1-enil-trifluorometansulfonat kao ulje: LCMS [M 1]+: 245.
Korak B: 3-Oksocikloheks-1-enilboronska kiselina
4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'- bi(1,3,2-dioksaborolan) (15.2 g, 60 mmol), KOAc (8.80 g, 90 mmol), Pd(dppf)Cl2adukt CH2Cl2(2.50 g, 3.0 mmol) dodati su u rastvor 3-oksocikloheks-1-enil-
4
trifluorometansulfonata (7.30 g, 30 mmol) u 1,4-dioksanu (100 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 2 časa pod azotom. Dobijena smeša je razblažena sa EA (100 mL) i ekstrahovana vodenim rastvorom NaOH (2 M, 3 x 50 mL). Spojeni vodeni slojevi su koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću RPLC sa sledećim uslovima: Kolona: C18; pokretna faza: ACN/voda (1‰ TFA); Stopa protoka: 60 mL/min; Gradijent: 10%-40% ACN u vodi 30 min; Vreme zadržavanja: 23 min; Detektor: 254 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobila 3-oksocikloheks-1-enilboronska kiselina kao ulje: LCMS [M 1]+: 141.
REFERENTNI PRIMER 59
2-((2-((3-(4,4,5,5-Tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)amino)tiazol-4-il)metil)izoindolin-1,3-dion
Korak A: 2-((2-((3 -B romofenil)amino)tiazol-4-il)metil)izoindolin-1,3-dion
1,3-dibromopropan-2-on (2.2 g, 10 mmol) dodat je u mešani rastvor 1-(3-bromofenil)tiouree (2.3 g, 10 mmol) u NMP (20 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 50°C 2 časa. Dobijena smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature. Izoindolin-1,3-dion (2.2 g, 14.9 mmol) i K2CO3(2.8 g, 19.9 mmol) su dodati na sobnoj temperaturi u reakcioni rastvor. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 dana. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4 i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 70% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio 2-((2-((3-bromofenil)amino)tiazol-4-il) metil)izoindolin-1,3-dion kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 414, 416.
Korak B: 2-((2-((3-(4,4,5,5-Tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)amino)tiazol-4-il) metil)izoindolin-1,3 -dion
4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (2.5 g, 9.66 mmol), KOAc (1.4 g, 14.5 mmol) i prekatalizator PPh3druge generacije (0.57 g, 0.97 mmol) dodati su u mešani rastvor 2-((2-((3-bromofenil)amino)tiazol-4-il)metil)izoindolin-1,3-diona (2.0 g, 4.83 mmol) u 1,4dioksanu (15 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4 i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio ((2-((3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil) amino)tiazol-4-il)metil)izoindolin-1,3-dion kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 462.
REFERENTNI PRIMER 60
Imidazo[1,2-a]piridin-8-ilboronska kiselina
Korak A: 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-amin
Pd2(dba)3(2.10 g, 2.30 mmol), 3-bromopiridin-2-amin (2.00 g, 11.56 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (5.87 g, 23.12 mmol) i KOAc (3.40 g, 34.7 mmol) dodati su u rastvor tricikloheksilfosfina (1.10 g, 4.10 mmol) u 1,4-dioksanu (15 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta i mešana na 95°C 16 h. Dobijena smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koje je korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 139.
Korak B: Imidazo[1,2-a]piridin-8-ilboronska kiselina
2-hloroacetaldehid (13.7 g, 68.20 mmol) dodat je u rastvor 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-amina (1.00 g, 4.54 mmol) u EtOH (15 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 70°C 16 časova. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa EA (100 mL) i ekstrahovan vodenim rastvorom HCl (1 N, 3 x 30 mL). Spojeni vodeni slojevi su koncentrovani pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca, koja je korišćena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]+: 163.
REFERENTNI PRIMER 61
Terc-butil ((4-(5,5-dimetil-1,3,2-dioksaborinan-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)karbamat
Korak A: Terc-butil (2-((2-amino-3-bromofenil)amino)-2-oksoetil)karbamat
2-((terc-butoksikarbonil)amino)sirćetna kiselina (94 g, 535 mmol), HATU (610 g, 1.6 mol) i TEA (223 mL, 1.6 mol) dodati su u rastvor 3-bromobenzen-1,2-diamina (100 g, 535 mmol) u THF (1 L) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta i mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je razblažena vodom (500 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 600 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 500 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 500 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4 i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 60% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio terc-butil(2-((2-amino-3-bromofenil) amino)-2-oksoetil)karbamat kao čvrsta supstanca, koja je korišćena u sledećem koraku direktno bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 344, 346.
Korak B: Terc-butil ((4-bromo-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil(karbamat
Rastvor terc-butil (2-((2-amino-3-bromofenil)amino)-2-oksoetil)karbamat (180 g, 523 mmol) u AcOH (250 mL) je mešan 0.5 h na 60°C. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je kristalizovan iz EA/PE (50 : 1, 200 mL). Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom i sušena pod vakuumom da bi se dobio terc-butil ((4-bromo-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)karbamat kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 326, 328.
Korak C: Terc-butil((4-(5,5-dimetil-1,3,2-dioksaborinan-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il) metil)karbamat
U rastvor terc-butil((4-bromo-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)karbamata (70.0 g, 215 mmol) u 1,4-dioksanu (350 mL) dodat je Hloro(trifenilfosfin)[2-(2'-amino-1,1-bifenil)]Paladijum (II) (24.6 g, 42.9 mmol), 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborinan) (72.7 g, 322 mmol) i KOAc (63.2 g, 644 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta i mešana na 80°C 16 h. Dobijena smeša je razblažena vodom (500 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 400 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 800 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 500 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4 i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 60% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio terc-butil((4-(5,5-dimetil-1,3,2-dioksaborinan-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)karbamat: LCMS [M 1]+: 360.
REFERENTNI PRIMER 62
Terc-butil (2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)etil)karbamat
Korak A: Terc-butil (2-((3-bromo-2-nitrofenil)amino)etil)karbamat
Terc-butil (2-aminoetil)karbamat (3.3 g, 21 mmol) i Na2CO3(2.9 g, 27 mmol) dodati su u rastvor 1-bromo-3-fluoro-2-nitrobenzena (3.0 g, 14 mmol) u DMF (15 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 časova. Dobijena smeša je razblažena vodom (200 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 150 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 150 mL), fiziološkim rastvorom (3 x 150 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4 i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio terc-butil (2-((3-bromo-2-nitrofenil)amino)etil)karbamat kao ulje, koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 360, 362 (1: 1).
Korak B: Terc-butil (2-((2-amino-3-bromofenil)amino)etil)karbamat
Prah Zn (5.9 g, 84.0 mmol) je lagano dodavan u nekoliko porcija u rastvor terc-butil(2-((3-bromo-2-nitrofenil)amino)etil)karbamata (5.5 g, 14.0 mmol) u koncentrovanoj HCl i MeOH (1 : 4, 30 mL). Reakciona smeša je mešana 2 časa na 50°C. Dobijena smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio sirovi N1-(2-aminoetil)-3-bromobenzen-1,2-diamin kao ulje, koji je korišćen u sledećem koraku direktno bez dodatnog prečišćavanja. U rastvor sirovog N1-(2-aminoetil)-3-bromobenzen-1,2-diamina u DCM (50 mL) dodat je (Boc)2O (4.5 g, 21 mmol) i TEA (2.8 g, 28 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL), i zatim je ekstrahovana sa DCM (3 x 250 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 250 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4 i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio terc-butil (2-((2-amino-3-bromofenil)amino)etil)karbamat kao čvrsta supstanca, koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1 - 100]<+>: 230, 232.
Korak C: Terc-butil (2-(4-bromo-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)etil)karbamat
NaNO2(1.9 g, 28.0 mmol) dodat je u rastvor terc-butil(2-((2-amino-3-bromofenil)amino)etil)karbamata (5.0 g, 14.0 mmol) u AcOH i H2O (1 : 3, 15 mL) na 0°C.
Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA(3 x 200 mL). Kombinovane organske frakcije su isprane fiziološkim rastvorom (2 x 100 mL), sušene preko anhidrovanog Na2SO4 i filtrirane. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 10% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio terc-butil(2-(4-bromo-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)etil) karbamat kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 341, 343.
Korak D: Terc-butil(2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-benzo [d] [1,2,3] triazol-1-il)etil)karbamat
4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (4.5 g, 17.70 mmol), Pd(dppf)Cl2adukt CH2Cl2(0.5 g, 0.60 mmol) i KOAc (0.8 g, 8.70 mmol) dodati su u rastvor terc-butil(2-(4-bromo-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)etil) karbamata (1.0 g, 2.90 mmol) u 1,4-dioksanu (15 mL). Smeša je degazirana azotom tri puta i mešana na 80°C 16 časova. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 30% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio terc-butil (2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il) etil)karbamat kao ulje: LCMS [M 1]+: 389.
REFERENTNI PRIMER 63
(2-((2-Amino-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)amino)etil) karbamat
Korak A: Terc-butil (2-((5-bromo-2-nitrofenil)amino)etil)karbamat
Cs2CO3(22.2 g, 68.2 mmol) i terc-butil(2-aminoetil) karbamat (8.74 g, 54.5 mmol) dodati su u mešani rastvor 4-bromo-2-fluoro-1-nitrobenzena (10 g, 45.5 mmol) u NMP (35 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 100°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (200 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 200 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4 i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 30% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio terc-butil (2-((5-bromo-2-nitrofenil)amino)etil)karbamat kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 360, 362.
Korak B: Terc-butil(2-((2-nitro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)amino) etil)karbamat
Pd(dppf)Cl2(1.22 g, 1.67 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (4.23 g, 16.70 mmol) i KOAc (2.45 g, 25.00 mmol) dodati su u mešani rastvor terc-butil(2-((5-bromo-2-nitrofenil)amino)etil)karbamata (3.0 g, 8.33 mmol) u 1,4-dioksanu (30 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 h pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 30% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio terc-butil (2-((2-nitro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)amino)etil)karbamat kao ulje: LCMS [M 1]+: 408.
Korak C: Terc-butil(2-((2-amino-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)amino) etil)karbamat
Pd/C (10% tež., 0.3 g, 0.28 mmol) dodat je u rastvor terc-butil(2-((2-nitro-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il) fenil)amino)etil)karbamata (3 g, 7.37 mmol) u MeOH (30 mL) na sobnoj temperaturi pod azotom. Smeša je degazirana vodonikom tri puta. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 časova pod vodonikom (1.5 atm). Čvsrta supstanca je uklonjena filtracijom. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ulje, koje je korišćeno za pripremu jedinjenja prema pronalasku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 378.
REFERENTNI PRIMER 64
(2-Aminobenzo[d]tiazol-4-il)boronska kiselina
4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (4.43 g, 17.46 mmol), KOAc (2.84 g, 28.90 mmol) i prekatalizator PCy3druge generacije (1.03 g, 1.75 mmol) dodati su u rastvor komercijalno dostupnog 4-bromobenzo[d]tiazol-2-amina (2.0 g, 8.8 mmol) u 1,4-dioksanu (20 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta i mešana na 90°C 24 h pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 150 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 300 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 300 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom.
1
Ostatak je prečišćen pomoću RPLC sa sledećim uslovima: Kolona: C18 hromatografska kolona; Stopa protoka: 60 mL/min; Gradijent: 25%-30% ACN u vodi sa 0.5% TFA u 20 min; Detektor: 254 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobila (2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)boronska kiselina kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 195.
REFERENTNI PRIMER 65
Terc-butil ((5-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-1H-imidazol-2-il)metil)karbamat
Korak A: 2-(3-bromofenil)-2-oksoetil (terc-butoksikarbonil)glicinat
U rastvor 2-((terc-butoksikarbonil)amino)sirćetne kiseline (1.26 g, 7.20 mmol) u EtOH (20 mL) dodat je Cs2CO3(1.17 g, 3.60 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobila cezijumova so. U rastvor 2-bromo-1-(3-bromofenil)etanona (1.98 g, 7.20 mmol) u DMF (20 mL) dodata je cezijumova so. Reakciona smeša je mešana 2 časa na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 26% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 372, 374.
Korak B: Terc-butil ((4-(3-bromofenil)-1H-imidazol-2-il)metil)karbamat
U rastvor 2-(3-bromofenil)-2-oksoetil (terc-butoksikarbonil)glicinata (2 g, 5.37 mmol) u toluenu (20 mL) dodat je amonijum acetat (4.14 g, 53.70 mmol). Reakciona smeša je mešana na 110°C 16 časova. Reakciona smeša je zatim hlađena do sobne temperature, i zatim razblažena sa EA (50 mL). Dobijeni rastvor je ispran vodenim rastvorom NaHCO3(5% tež./zapr.) (3 x 30 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 30 mL). Organski sloj je sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiranjem sa 40% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 352, 354.
1 1
Korak C: Terc-butil((5-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-1H-imidazol-2-il)metil)karbamat
U rastvor terc-butil((4-(3-bromofenil)-1H-imidazol-2-il)metil)karbamata (1 g, 2.84 mmol) u 1,4-dioksanu (30 mL) dodati su 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil -2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (1.44 g, 5.68 mmol), PCy3prekatalizator druge generacije (0.50 g, 0.85 mmol) i KOAc (0.84 g, 8.52 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 40% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio terc-butil ((5-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-1H-imidazol-2-il)metil)karbamat kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 400.
REFERENTNI PRIMER 66
(2-(Metilamino)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina
Korak A: 7-Bromo-N-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-amin
U rastvor komercijalno dostupnog 7-bromo-2-hloro-1H-benzo[d]imidazola (0.50 g, 2.16 mmol) u THF (10 mL) dodat je metanamin (2 M u THF, 5.40 mL, 10.80 mmol). Reakcioni rastvor je mešan 24 časa na 80°C. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 2% MeOH u EA. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio 7-bromo-N-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-amin kao čvrsta supstanca: LCMS [M H]<+>: 226, 228.
Korak B: (2-(Metilamino)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina
U rastvor 7-bromo-N-metil-1H-benzo[d]imidazol-2-amina (0.30 g, 1.33 mmol) u dioksanu (4 mL) dodati su prekatalizator PPh3druge generacije (76 mg, 0.13 mmol), 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborinan) (0.45 g, 1.99 mmol) i KOAc (0.39 g, 3.98 mmol). Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana 16 časova na 80°C pod azotom. Dobijena smeša je filtrirana. Filtrat je prečišćen pomoću RPLC sa sledećim uslovima: Kolona: C18; Pokretna faza: voda (0.5% TFA)/ACN; Gradijent: 5%-30% ACN u vodi 25 min; Vreme zadržavanja: 18 min; Stopa protoka: 60 mL/min; Detektor: 254 nm i 220 nm. Frakcije koje
1 2
sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobila (2-(metilamino)-1H-benzo[d]imidazol-4-il) boronska kiselina kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]+: 192.
REFERENTNI PRIMER 67
terc-butil (2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)etil)karbamat i terc-butil (2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido) etil)karbamat
U rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline i 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (3 g, 3.87 mmol) u THF (38.7 ml) dodat je terc-butil (2-aminoetil)karbamat (1.239 g, 7.74 mmol), trietilamin (1.078 ml, 7.74 mmol) i NCS (1.033 g, 7.74 mmol) redom na 0°C pod azotom. Smeša je mešana na istoj temperaturi 30 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, isprana rastvorom NaHCO3i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je sušen preko MgSO4, ispravan i sirovi proizvod je prečišćen pomoću silica gel kolone eluiranjem sa 0-100% EtOAc/heks. da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 934.53.
REFERENTNI PRIMER 68
terc-butil (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat i terc-butil (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor smeše 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1-sulfonil hlorida i 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzen-1-sulfonil hlorida (0.46 g, 0.48 mmol) u THF (10 mL) dodat je (R)-terc-butil 3-aminopirolidin-1-karboksilat (90 mg, 0.48 mmol) na temperaturi
1
sredine. Reakcija je održavana na 25°C 30 minuta. Smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa EA (3 x 20 mL), ispran fiziološkim rastvorom (3 x 20 mL), sušen i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je nanet na hromatografsku kolonu silka gela sa etil acetatom/petroletrom (1 : 50 do 1 : 1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+ 960; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.52 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 8.29 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.29-7.25 (m, 2H), 6.83-6.69 (m, 10H), 5.95 (brs, 1H), 5.55-5.50 (m, 0.5H), 5.24-5.19 (m, 0.5H), 4.58-4.53 (m, 1H), 4.05-3.81 (m, 5H), 3.85 (s, 9H), 3.48-3.35 (m, 4H), 2.02-1.82 (m, 2H), 1.44 (s, 9H).
REFERENTNI PRIMER 69
terc-butil (R)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)karbamat i terc-butil (R)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)karbamat
U rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline i 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (1.0 g, 1.289 mmol) u DCM (20 ml) dodat je (R)-terc-butil (2-aminopropil)karbamat (0.337 g, 1.934 mmol), trietilamin (0.261 g, 2.58 mmol) i NCS (0.344 g, 2.58 mmol) redom na 0°C pod azotom. Reakciona smeša je mešana na 0°C 30 minuta. Reakciona smeša je isprana sa 10 ml zasićenog vodenog rastvora NaHCO3. Organska faza je sušena preko MgSO4, koncentrovana i sirovi proizvod je prečišćen pomoću silica hromatografije na koloni silika gela eluiranjem sa 0-10% MeOH u DCM da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 948.48.
REFERENTNI PRIMER 70
terc-butil (3S,4R)-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat i terc-butil (3S,4R)-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
1 4
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na način analogan REFERENTNOM PRIMERU 67 upotrebom terc-butil (3R,4S)-3-amino-4-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-karboksilata. LC/MS [M+H]+: 1109.80.
REFERENTNI PRIMER 71
terc-butil (3R,4S)-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat i terc-butil (3R,4S)-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na način analogan REFERENTNOM PRIMERU 67 upotrebom terc-butil (3S,4R)-3-amino-4-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-karboksilata. LC/MS [M+H]+: 1109.8.
REFERENTNI PRIMERI 68 (alternativna priprema) i 72-84 u donjoj Tabeli slično su pripremljeni na analogan način onome opisanom u REFERENTNOM PRIMERU 67 upotrebom 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (kao smeša dva tetrazol-PMB regioizomera) i odgovarajućih amina, koji su pripremljeni kao što je ovde opisano, ili koji su dostupni iz komercijalnih izvora. Dok je pojedinačni regioizomer PMB-zaštićenog tetrazola prikazan radi jednostavnosti, potrebno je razumeti da su intermedijeri pripremljeni ovde ustvari smeše oba moguća regioizomerna PMB supstituisana tetrazola.
1
1
1
REFERENTNI PRIMER 86
terc-butil (S)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)karbamat i terc-butil (S)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)karbamat
1
Jedinjenja iz naslova su pripremljena na isti način kao REFERENTNI PRIMER 69 upotrebom terc-butil (S)-(2-aminopropil)karbamata. LC/MS [M+H]+: 948.45.
REFERENTNI PRIMER 87
terc-butil (S)-(2-amino-3-hidroksipropil)karbamat
U rastvor (S)-benzil terc-butil (3-hidroksipropan-1,2-diil)dikarbamata (1.5 g, 4.62 mmol) u 20 ml etanola dodat je Pd/C (0.325 g, 0.231 mmol). Smeša je mešana na 45 psi H24 časa. Isparljive materije su uklonjene in vacuo i ostatak je rastvoren u 10 mL EtOAc, zatim koncentrovan ponovo da bi se dobio željeni proizvod kao prah. LC/MS [M+H]<+>: 191.22.
REFERENTNI PRIMER 88
terc-butil (S)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat i terc-butil (S)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat
Jedinjenja iz naslova su pripremljena na isti način kao REFERENTNI PRIMER 69 upotrebom terc-butil (S)-(2-amino-3-hidroksipropil)karbamata. LC/MS [M+H]+: 964.58.
REFERENTNI PRIMER 89
terc-butil (2S,4R)-4-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-2-(hidroksimetil)pirolidin-1-karboksilat i terc-butil (2S,4R)-4-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-2-(hidroksimetil)pirolidin-1-karboksilat
1
Jedinjenja iz naslova su pripremljena na isti način kao REFERENTNI PRIMER 69 upotrebom komercijalno dostupnog terc-butil (2S,4R)-4-amino-2-(hidroksimetil)pirolidin-1-karboksilata. LC/MS [M+H]+: 990.31.
REFERENTNI PRIMER 90
2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(6-((terc-butoksikarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina
Korak A. terc-butil (5-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)piridin-2-il)karbamat
(6-((terc-butoksikarbonil)amino)piridin-3-il)boronska kiselina (0.707 g, 2.97 mmol) i natrijum karbonat (0.726 g, 6.85 mmol) i Pd(dppf)Cl2(0.373 g, 0.457 mmol) dodati su u mešani rastvor početnog materijala 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (2.0 g, 2.283 mmol) u dioksanu (16 mL) i vodi (4 ml) na sobnoj temperaturi i smeša je degazirana 5 minuta i zatim mešana na 90°C preko noći. Smeša je razblažena vodom (50 mL), ekstrahovana sa EtOAc (2 x 50 mL). Spojene organske faze su isprane fiziološkim rastvorom, sušene (MgSO4) i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 120 g, eluiranjem sa EtOAc/izoheksanom, 0 - 40% 30 minuta da bi se dobio proizvod kao pena. LC/MS [M+H]+: 942.
Korak B. 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(6-((terc-butoksikarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina
Rastvor terc-butil (5-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)piridin-2-il)karbamata (1.76 g, 1.87 mmol) u THF (16 mL) je mešan sa TBAF (4.11 mL, 4.11 mmol) na sobnoj temperatrui pod N230 minuta. Smeša je razblažena sa EtOAc, isprana vodenim rastvorom KHSO4(3×), sušena preko MgSO4i koncentrovana da bi se dobio proizvod. LC/MS [M+H]+: 842.
REFERENTNI PRIMER 91
3'-(5-amino-1H-1,2,4-triazol-3-il)-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-sulfinska kiselina
11
Korak A. (3-(5-amino-1H-1,2,4-triazol-3-il)fenil)boronska kiselina
Kalijum acetat (1.232 g, 12.55 mmol) i PCy3 Pd G2 (0.371 g, 0.627 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (2.124 g, 8.37 mmol), dodati su u mešani rastvor početnog materijala 3-(3-bromofenil)-1H-1,2,4-triazol-5-amina (1.0 g, 4.18 mmol) u dimetil sulfoksidu (15 mL) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na 90°C preko noći. Reakciona smeša je filtrirana kroz čep od CELIT-a, razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 100 mL). Ostatak je prečišćen pomoću reverzno fazne LC hromatografije na koloni silika gela 240 g C18, eluiranjem sa Acetonitrilom/vodom, 0 - 100% 45 minuta da bi se dobio željeni proizvod. LC/MS [M+H]+: 205.
Korak B. 3'-(5-amino-1H-1,2,4-triazol-3-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-sulfonamid Smeša 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (1.0 g, 1.142 mmol), (3-(5-amino-1H-1,2,4-triazol-3-il)fenil)boronske kiseline (0.419 g, 2.055 mmol), Na2CO3(0.363 g, 3.43 mmol) i 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen-paladijum(ii)dihlorid dihlorometan kompleksa (0.140 g, 0.171 mmol) u dioksanu (10 mL) i vodi (2 mL) degazirana je sa N25 minuta. Dobijena smeša je mešana na 95°C 16 časova. Ova reakcija je filtrirana i ekstrahovana sa EtOAc (2 × 100 mL), organska faza je sušena (MgSO4), i koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 40 g, eluiranjem sa EtOAc/izoheksanom, B = 0 - 100% 45 min da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 909.
Korak C. 3'-(5-amino-1H-1,2,4-triazol-3-il)-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-sulfinska kiselina
TBAF (2.0 mL, 2.0 mmol) dodat je u mešani rastvor početnog materijala 3'-(5-amino-1H-1,2,4-triazol-3-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-sulfonamida (855 mg, 0.941 mmol) u THF na 0°C i smeša je mešana na 0°C 45 minuta. Smeša je razblažena sa KHSO4(zasićeni, 3 × 40 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 40 mL). Organska faza je koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 809.
REFERENTNI PRIMER 92
benzil terc-butil (3-aminopropan-1,2-diil)(S)-dikarbamat
Ovaj intermedijer je pripremljen na način analogan (R)-benzil terc-butil (3-aminopropan-1,2-diil)dikarbamatu (REFERENTNI PRIMER 20) upotrebom (R)-benzil terc-butil (3-hidroksipropan-1,2-diil)dikarbamata. LC/MS [M+H]+: 324.42.
REFERENTNI PRIMER 93
benzil terc-butil (3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-1,2-diil)(R)-dikarbamat i benzil terc-butil (3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-1,2-diil)(R)-dikarbamat
Jedinjenja iz naslova su pripremljena na isti način analogan REFERENTNOM PRIMERU 69 upotrebom benzil terc-butil (3-aminopropan-1,2-diil)(S)-dikarbamata. LC/MS [M+H]+: 1097.98.
REFERENTNI PRIMER 94
terc-butil (3S,4R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilat i terc-butil (3S,4R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilat
Jedinjenja iz naslova su pripremljena na isti način analogan REFERENTNOM PRIMERU 69 upotrebom komercijalno dostupnog terc-butil (3S,4R)-3-amino-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata. LC/MS [M+H]+: 976.30.
REFERENTNI PRIMER 95
terc-butil (3R,4S)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilat i terc-butil (3R,4S)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilat
Jedinjenja iz naslova su pripremljena na isti način analogan REFERENTNOM PRIMERU 69 upotrebom komercijalno dostupnog terc-butil (3S,4R)-3-amino-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata. LC/MS [M+H]+: 976.44.
REFERENTNI PRIMER 96
terc-butil (3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)karbamat i terc-butil (3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)karbamat
Jedinjenja iz naslova su pripremljena na isti način analogan REFERENTNOM PRIMERU 69 upotrebom terc- butil (3-aminopropil)karbamata. LC/MS [M+H]+: 948.45.
REFERENTNI PRIMER 97
terc- butil (R)-(1-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-2-il)karbamat i terc-butil (R)-(1-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-2-il)karbamat
Jedinjenja iz naslova su pripremljena na isti način analogan REFERENTNOM PRIMERU 69 upotrebom terc-butil (R)-(1-aminopropan-2-il)karbamata. LC/MS [M+H]+: 948.49.
REFERENTNI PRIMER 98
11
terc- butil (S)-(1-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-2-il)karbamat i terc-butil (S)-(1-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-2-il)karbamat
Jedinjenja iz naslova su pripremljena na isti način analogan REFERENTNOM PRIMERU 69 upotrebom terc-butil (S)-(1-aminopropan-2-il)karbamata. LC/MS [M+H]+: 948.37.
REFERENTNI PRIMER 99
terc-butil (3R,4R)-3-(((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfinil)amino)-4-((terc-butoksikarbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat i terc-butil (3R,4R)-3-(((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfinil)amino)-4-((tercbutoksikarbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat
Jedinjenja iz naslova su pripremljena na isti način analogan REFERENTNOM PRIMERU 69 upotrebom komercijalno dostupnog terc-butil ((3R,4R)-4-amino-1-benzilpirolidin-3-il)karbamata. LC/MS [M+H]+: 1065.77.
REFERENTNI PRIMER 100
terc-butil (2S,4R)-4-amino-2-((1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil)pirolidin-1-karboksilat
Korak A: terc-butil (2S,4R)-4-(((benziloksi)karbonil)amino)-2-(hidroksimetil)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor (2S,4R)-terc-butil 4-amino-2-(hidroksimetil)pirolidin-1-karboksilata (2.0g, 9.25 mmol) u dioksanu (20 ml) i vodi (20 ml) dodat je natrijum karbonat (1.176 g, 11.10 mmol) i Cbz-Cl (1.584 ml, 11.10 mmol) na 0°C. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Dodat je EtOAc (20 mL). Organski sloj je odvojen, ispran fiziološkim rastvorom, sušen (MgSO4), filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela eluiranjem sa 0-100% EtOAc/heksanima da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC-MS: [M+H-56]+: 295.28.
Korak B: terc-butil (2S,4R)-4-(((benziloksi)karbonil)amino)-2-((1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor (2S,4R)-terc-butil 4-(((benziloksi)karbonil)amino)-2-(hidroksimetil)pirolidin-1-karboksilata (2.67 g, 7.62 mmol), PPh3(2.60 g, 9.91 mmol) i izoindolin-1,3-dion (1.345 g, 9.14 mmol) u THF (40 ml) ukapavanjem je dodat DEAD (2.062 ml, 9.91 mmol) na 0°C. Reakcija je završena za 30 min. Reakciona smeša je koncentrovana in vacuo i ostatak je podvrgnut hromatografiji preko silika gela eluiranjem sa 0-60% EtOAc u heksanima da bi se dobio željeni proizvod (2S,4R)-terc-butil 4-(((benziloksi)karbonil)amino)-2-((1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil)pirolidin-1-karboksilat. LC-MS: [M+H]+: 480.29.
Korak C: terc-butil (2S,4R)-4-amino-2-((1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor (2S,4R)-terc-butil 4-(((benziloksi)karbonil)amino)-2-((1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil)pirolidin-1-karboksilata (3.0 g, 6.26 mmol) u 20 ml etanola dodat je Pd/C (0.44g, 0.313 mmol), smeša je mešana na 45psi H28 časova. Katalizator je uklonjen filtriranjem kroz čep od CELIT-a. Filtrat je koncentrovan i podvrgnut hromatografiji preko silika gela eluiranjem sa 0-20% MeOH u DCM da bi se dobio željeni proizvod. LC-MS [M+H]<+>: 346.41.
REFERENTNI PRIMER 101
terc-butil (2S,4R)-4-(((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfinil)amino)-2-((1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil)pirolidin-1-karboksilat i terc-butil (2S,4R)-4-(((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfinil)amino)-2-((1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil)pirolidin-1-karboksilat
11
Ovaj intermedijer je pripremljen na način analogan REFERENTNOM PRIMERU 69 upotrebom terc-butil (2S,4R)-4-amino-2-((1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil)pirolidin-1-karboksilata. LC/MS [M+H]+: 1120.07.
REFERENTNI PRIMER 102
(3-(2-Amino-1H-imidazol-4-il)fenil)boronska kiselina
Korak A: N-(4-(3-Bromofenil)-1H-imidazol-2-il)acetamid
2-Bromo-1-(3-bromofenil)etanon (3000 mg, 10.79 mmol) je mešan sa N-karbamimidoilacetamidom (3274 mg, 32.4 mmol) u DMF (8995 µl) na sobnoj temperaturi 48 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je odvojen i koncentrovan i dobijeni ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (eluiranjem sa 0- 100% EtOAc/heksana) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 280.1, 282.1.
Korak B: 4-(3-Bromofenil)-1H-imidazol-2-amin
N-(4-(3-Bromofenil)-1H-imidazol-2-il)acetamid (1.2 g, 4.28 mmol) je rastvoren u MeOH (8 mL), i dodata je HCl u dioksanu (4 N, 8 mL) i vodi (8 mL). Smeša je zagrevana na 100°C u hermetički zatvorenoj boci 1 čas. LC-MS je pokazala da je acil grupa uklonjena. Reakcija je hlađena i koncentrovana da bi se uklonili rastvarači. Dobijeni ostatak je rastvoren u MeOH, i prečišćen hromatografijom na koloni (eluiranjem sa 100% heksanom do 100% EtOAc/EtOH (3/1) do heksana) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 238.1, 240.1 Korak C: (3-(2-Amino-1H-imidazol-4-il)fenil)boronska kiselina
4-(3-Bromofenil)-1H-imidazol-2-amin (561 mg, 2.356 mmol), 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborinan) (1331 mg, 5.89 mmol), Ph3PPdG2 (202 mg, 0.353 mmol) i kalijum acetat (925 mg, 9.43 mmol) su sipani u bočicu, dodat je dioksan (3927 µl). Reakcija je degazirana 20 min, zatim zagrevana na 90°C 1 h. Reakcija je zatim hlađena do sobne temperature i filtrirana. Filtrati su koncentrovani i ostatak je prečišćen sa reverznom C18 kolonom, eluiranjem sa 0-60% CH3CN/vode. Ispravne frakcije su spojene i liofilizovane. LC/MS [M+H]+: 204.2.
REFERENTNI PRIMER 103
(3-(2-Amino-5-(etoksikarbonil)tiazol-4-il)fenil)boronska kiselina
11
Korak A: Etil 2-bromo-3-(3-bromofenil)-3-oksopropanoat
Etil 3-(3-bromofenil)-3-oksopropanoat (3.72 g, 13.72 mmol) je rastvoren u DCM (35.4 ml), i dodat je 1-bromopirolidin-2,5-dion (2.93 g, 16.47 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod N26 časova. Reakciona smeša je podeljena između DCM i zasićenog vodenog rastvora NaHCO3. Organski sloj je odvojen, koncentrovan i prečišćen hromatografijom na koloni (eluiranjem sa 0-20%EtOAc/heksanom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 351.2.
Korak B: Etil 2-amino-4-(3-bromofenil)tiazol-5-karboksilat
Etil 2-bromo-3-(3-bromofenil)-3-oksopropanoat (3.26 g, 9.31 mmol) i tiourea (0.723 g, 9.50 mmol) su zagrevani u etanolu (74.5 ml) na 75°C 1 h. LC-MS je pokazala formiranje željenog proizvoda. Reakciona smeša je koncentrovana i podeljena između DCM i vode. Organski sloj je odvojen, ispran fiziološkim rastvorom i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 327.2, 329.2.
Korak C: (3-(2-amino-5-(etoksikarbonil)tiazol-4-il)fenil)boronska kiselina
Etil 2-amino-4-(3-bromofenil)tiazol-5-karboksilat (250 mg, 0.764 mmol), 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborinan) (431 mg, 1.910 mmol), Ph3PPdG2 (65.6 mg, 0.115 mmol) i kalijum acetat (300 mg, 3.06 mmol) su sipani u reakcionu bočicu. Dodat je dioksan (5458 µl). Reakciona smeša je degazirana i zagrevana na 90° 1 čas 45 minuta. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature i proizvod je korišćen kao sirov za sledeći korak. LC/MS [M+H]+: 293.2.
REFERENTNI PRIMER 104
(3-(2-((terc-Butoksikarbonil)amino)-5-(((terc-butoksikarbonil)amino)metil)tiazol-4-il)fenil)boronska kiselina
Korak A: Etil 4-(3-bromofenil)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)tiazol-5-karboksilat Etil 2-amino-4-(3-bromofenil)tiazol-5-karboksilat (Korak B, intermedijer 103) (2 g, 6.11 mmol) je suspendovan u THF (30.6 ml). Dodat je DMAP (0.075 g, 0.611 mmol), a zatim BOC-anhidrid (3.12 ml, 13.45 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod N21 h. LC-MS je pokazala da je reakcija završena. Reakcija je podeljena između EtOAc i vode. Organski sloj je odvojen i
11
koncentrovan i ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (100% heksan do 25% EtOAc/heksan) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 427.3, 429.3.
Korak B: terc-Butil (4-(3-bromofenil)-5-(hidroksimetil)tiazol-2-il)karbamat
Etil 4-(3-bromofenil)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)tiazol-5-karboksilat (1.17 g, 2.74 mmol) je suspendovan u DCM (21.06 ml) i hlađen do -78°C. DIBAL-H (8.21 ml, 8.21 mmol) (1.0 M u toluenu) dodat je ukapavanjem pod N2. Smeša je ostavljena da se zagreva do sobne temperature 12 časova. LC-MS je pokazala da je ostalo oko 1/3 početnog materijala. Reakcija je hlađena do -78°C, dodato je još 1.5 ekv. DIBAL (4 mL, 1.0M u toluenu). Reakciona smeša je mešana na -78°C 1 čas i zatim je hladno kupatilo uklonjeno i reakciona smeša je zagrevana do sobne temperature. Reakcija je ugašena sa EtOAc i MeOH. Dobijena smeša je mešana sa CELIT-om i filtrirana. Filter kolač je ispran sa MeOH. Filtrati su koncentrovani i ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (100% heksan do 40% EtOAc/heksan) da bi se dobio proizvod. LC/MS [M+H]+: 385.3, 387.3.
Korak C: terc-Butil (5-(azidometil)-4-(3-bromofenil)tiazol-2-il)karbamat
terc-Butil (4-(3-bromofenil)-5-(hidroksimetil)tiazol-2-il)karbamat (450 mg, 1.168 mmol) u DCM (1.17E+04 µl) je tretiran sa DIEA (306 µl, 1.752 mmol) i hlađen do -78°C. Ms-Cl (109 µl, 1.402 mmol) je dodat pod N2. Posle mešanja na -78°C 5 minuta, reakciona smeša je ostavljena da se zagreva do sobne temperature i mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Reakciona smeša je koncentrovana i ponovo rastvorena u DMF (4 mL). Dodat je natrijum azid (228 mg, 3.50 mmol). Smeša je zagrevana na 80°C 20 minuta i nastavljena da se meša na sobnoj temperaturi 12 časova. LC-MS je pokazala da je većina početnog materijala prevedena u proizvod. Reakcija je podeljena između EtOAc i vode. Organski sloj je odvojen i koncentrovan. Dobijeni ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (100% heksan do 45% zatim do 80% EtOAc/heksan) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 410.2, 412.2.
Korak D: terc-Butil ((4-(3-bromofenil)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)tiazol-5-il)metil)karbamat
terc-Butil (5-(azidometil)-4-(3-bromofenil)tiazol-2-il)karbamat (195 mg, 0.475 mmol) je rastvoren u THF (1584 µl). Dodati su trifenilfosfin (249 mg, 0.951 mmol) i voda (1 ml). Smeša je mešana na 60°C 12 časova pod N2. LC-MS je pokazala željenu masu. Dodati su BOC-anhidrid (221 µl, 0.951 mmol) i 1mL zasićenog vodenog rastvora NaHCO3. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi pod N21 čas. LC-MS je pokazala formiranje željenog proizvoda. Reakciona smeša je podeljena između EtOAc i vode. Organski sloj je odvojen i koncentrovan i dobijeni ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (100% heksan do 100% EtOAc/EtOH (3/1)) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 484.4, 486.4
11
Korak E: (3-(2-((terc-Butoksikarbonil)amino)-5-(((terc-butoksikarbonil)amino)metil)tiazol-4-il)fenil)boronska kiselina.
terc-Butil ((4-(3-bromofenil)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)tiazol-5-il)metil)karbamat (148 mg, 0.306 mmol), 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborinan) (173 mg, 0.764 mmol), Ph3PPdG2 (26.2 mg, 0.046 mmol) i kalijum acetat (120 mg, 1.222 mmol) su sipani u reakcionu bočicu. Dodat je dioksan (2182 µl). Reakcija je degazirana i zagrevana na 90° 45 minuta. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature, i korišćena direktno u sledećoj reakciji. LC/MS [M+H]+: 450.5.
REFERENTNI PRIMER 105
(3-(2-((terc-Butoksikarbonil)amino)-5-(((2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)amino)metil)tiazol-4-il)fenil)boronska kiselina
Korak A: terc-Butil (4-(3-bromofenil)-5-(((2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)amino)metil) tiazol-2-il)karbamat
terc-Butil (4-(3-bromofenil)-5-(hidroksimetil)tiazol-2-il)karbamat (Korak B REFERENTNI PRIMER 104) (320 mg, 0.831 mmol) u DCM (8306 µl) je hlađen do -78°C i tretiran trietilaminom (109 mg, 1.080 mmol) i dodat je Ms-Cl (78 µl, 0.997 mmol) pod N2. Posle mešanja na -78°C 20 minuta, reakciona smeša je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Zatim je dodat terc-Butil (2-aminoetil)karbamat (266 mg, 1.661 mmol). Pošto je reakcija mešana na sobnoj temperaturi 15 min, LC-MS je pokazala željenu masu i glavni proizvod je reaktivni intermedijer. Dodat je terc-butil (2-aminoetil)karbamat u višku. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod N240 min. Reakciona smeša je koncentrovana i ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni dva puta (100% heksan do 50% EtOAc/heksan) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 527.4, 529.4.
Korak B: (3-(2-((terc-Butoksikarbonil)amino)-5-(((2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil) amino)metil)tiazol-4-il)fenil)boronska kiselina
terc-Butil (4-(3-bromofenil)-5-(((2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)amino)metil)tiazol-2-il)karbamat (135 mg, 0.256 mmol), 5,5,5',5'-tetrametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborinan) (145 mg, 0.640 mmol), Ph3PPdG2 (21.97 mg, 0.038 mmol) i kalijum acetat (100 mg, 1.024 mmol) su sipani u reakcionu bočicu. Dodat je dioksan (1828 µl). Reakciona smeša je degazirana i
11
zagrevana na 90° 45 minuta. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature i korišćena direktno u sledećoj reakciji. LC/MS [M+H]+: 493.5.
REFERENTNI PRIMER 106
terc-butil 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-2-(bis(terc-butoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilat i terc-butil 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-2-(bis(tercbutoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilat
Korak A: 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid i 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid
Suspenzija 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida i 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (2.0 g, 2.283 mmol), (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (0.808 g, 4.57 mmol), PdCl2(dppf) (0.251 g, 0.343 mmol) i natrijum karbonata (0.726 g, 6.85 mmol) u dioksanu (30 mL) i vodi (6 ml) je degazirana i zagrevana na 100°C 2 časa. Smeša je razblažena sa 20 ml EtOAc, zatim je filtrirana kroz čep od CELIT-A. Organski sloj je sušen (MgSO4) i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela eluiranjem sa 0-20% metanolom u DCM da bi se dobio željeni proizvod. LC/MS [M+H]<+>: 881.53.
Korak B: terc-butil 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-2-(bis(terc-butoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilat i terc-butil 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-2-(bis(tercbutoksicarbonynamino)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilat
U rastvor 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida i 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-
12
5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (1.4 g, 1.589 mmol) u DCM (20 ml) dodat je N,N-dimetilpiridin-4-amin (0.582 g, 4.77 mmol) i di-terc-butil dikarbonat (1.040 g, 4.77 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. NMR je pokazala prevođenje u željeni proizvod. Isparljive materije su uklonjene i ostatak je podvrgnut hromatogrfiji preko silika gela eluiranjem sa 0-100% EtOAc u heksanima da bi se dobio željeni proizvods. [M+H]+: 1181.87.
REFERENTNI PRIMER 107
2-((3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)amino) tiazol-4-karboksilat
Korak A: Metil 2-((3-bromofenil)amino)tiazol-4-karboksilat
U rastvor metil 3-bromo-2-oksopropanoata (3.96 g, 21.89 mmol) u MeOH (200 mL) dodata je 1-(3-bromofenil)tiourea (4.6 g, 19.90 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakcioni rastvor je mešan na 70°C 3 časa. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom, i ostatak je rastvoren u EA (200 mL). Organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(3 x 200 mL), fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 313, 315.
Korak B: Metil 2-((3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)amino)tiazol-4-karboksilat
U rastvor metil 2-((3-bromofenil)amino)tiazol-4-karboksilata (2 g, 6.38 mmol) u 1,4-dioksan (20 mL) dodati su 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi (1,3,2-dioksaborolan) (3.24 g, 12.8 mmol), kalijum acetat (1.88 g, 19.2 mmol) i prekatalizator PCy3druge generacije (0.75 g, 1.278 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta i mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 75% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 361.
REFERENTNI PRIMER 108
(2-((3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)amino)tiazol -4-il)metanol
Korak A: 2-((3-Bromofenil)amino)tiazol-4-karboksilna kiselina
U rastvor metil 2-((3-bromofenil)amino)tiazol-4-karboksilata (4.5 g, 14.37 mmol) u MeOH (50 mL) i THF (50 mL) dodat je vodeni rastvor NaOH (2 N, 28.7 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 časova. Organski rastvarač je isparavan pod vakuumom. Preostala vodena faza je podešena do pH 5 sa HCl i čvrsta supstanca je istaložena. Čvrsta supstanca je filtrirana. Filter kolač je ispran vodom (2 x 10 mL), sušen u peći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 299, 301 (1 : 1); 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 12.80 (s, 1H), 10.64 (brs, 1H), 8.04-8.01 (m, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.59-7.51 (m, 1H), 7.26 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.16-7.11 (m, 1H).
Korak B: (2-((3-Bromofenil)amino)tiazol-4-il)metanol
Mešani rastvor 2-((3-bromofenil)amino)tiazol-4-karboksilne kiseline (1.2 g, 4.01 mmol) u THF (10 mL) je degaziran azotom tri puta. Zatim je BH3.THF (20.06 mL, 1 M u THF) dodat ukapavanjem u reakcionu smešu na 0°C. Dobijena smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je ugašena ledenom vodom (100 mL). Vodeni rastvor NaOH (8 mL, 1N) je dodat u smešu i mešan 2 h. Dobijena smeša je ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 285, 287 (1 : 1).
Korak C: (2-((3-(4,4,5,5-Tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)amino)tiazol-4-il)metanol U rastvor (2-((3-bromofenil)amino)tiazol-4-il)metanola (0.9 g, 3.16 mmol) u 1,4-dioksanu (9 mL) dodati su 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi (1,3,2-dioksaborolan) (1.6 g, 6.31 mmol), kalijum acetat (0.93 g, 9.47 mmol) i prekatalizator PPh3druge generacije (0.34 mg, 0.63 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je degazirana azotom tri puta i mešana na 80°C 16 časova. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 30 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 75% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 333.
REFERENTNI PRIMER 109
N-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-1H-imidazol-2-amin
Korak A: 2,2-Dietoksi-N-(iminometilen)etanamin
U mešani rastvor 2,2-dietoksietanamina (2.5 g, 18.8 mmol) u Et2O (20 mL) i heksanu (20 mL) dodat je cijanid bromid (2.0 g, 18.8 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 časova. Dobijena smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 5% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 159; 1H NNM (400 MHz, CDCl3): δ4.59 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 3.77-3.70 (m, 2H), 3.66-3.53 (m, 2H), 3.18-3.15 (m, 2H), 1.23 (t, J = 7.0 Hz, 6H).
Korak B: 1-(3-Bromofenil)-3-(22-dietoksietil)guanidin
U rastvor 3-bromoanilina (1 g, 5.81 mmol) u EtOH (16 mL) dodati su rastvor 2,2-dietoksi-N-(iminometilen)etanamina (1.8 g, 11.63 mmol) u Et2O (1.6 mL) i metansulfonska kiselina (1.1 g, 11.63 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 90°C 16 h. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. Sirovi proizvod je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 330, 332.
Korak C: N-(3-bromofenil)-1H-imidazol-2-amin
1-(3-Bromofenil)-3-(2,2-dietoksietil)guanidin (0.8 g, 2.42 mmol) je rastvoren u konc. HCl (2 mL, 12.00 mmol). Reakcioni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 2 časa. Zatim je dodavan vodeni rastvor NaOH (25%) sve dok nije formiran talog (pH = 14). Smeša je mešana 30 minuta. Dobijena smeša je sipana u vodeni rastvor NaOH (30 mL, 0.5 M), ekstrahovana sa DCM (3 x 20 mL), sušena preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep C18 OBD Kolona; Pokretna faza A: voda (10 mmoL/L NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 80 mL/min; Gradijent: 0% B do 30% B 30 min; Detektor: UC 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 238, 240.
Korak D: N-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-1H-imidazol -2- amin U rastvor N-(3-bromofenil)-1H-imidazol-2-amina (0.6 g, 2.52 mmol) u 1,4-dioksanu (12 mL) dodati su 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi (1,3,2-dioksaborolan) (1.3 g, 5.04 mmol), PCy3
12
paladijum(II) bifenil-2-amin hlorid (0.3 g, 0.50 mmol) i kalijum acetat (0.05 g, 0.50 mmol). Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta i mešana 16 časova na 80°C pod azotom. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 286 REFERENTNI PRIMER 110
2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(((terc-butoksikarbonil)amino)metil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na način analogan kao što je opisano za 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(6-((terc-butoksikarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinsku kiselinu (REFERENTNI PRIMER 90) počevši od 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzensulfonamida i terc-butil ((4-(5,5-dimetil-1,3,2-dioksaborinan-2-il)-1H-benzo[d]imidazol -2-il)metil)karbamata (REFERENTNI PRIMER 61). LCMS [M 1]+: 895.
PRIMER 1
4-(2-amino-3H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: 5-jodo-N1,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid i 5-jodo-N1,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
U rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfonil hlorida i 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzensulfonil hlorida (sinteza opisana u prethodnom tekstu, 400 mg, 0.741 mmol) u THF (10 mL) dodat je amonijum hidroksid (78 mg, 2.222 mmol) na temperaturi sredine. Reakcija je održavana 30 minuta na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je zatim nanet na kolonu silika gela sa DCM/metanolom (10:1) da bi se dobio proizvod kao smeša regioizomera na p-metoksibenzil tetrazolu: LCMS [M hr - 15]<+>: 791.
Korak B: 5-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid i 5-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
U rastvor 5-jodo-N1 ,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida i 5-jodo-N1 ,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida (200 mg, 0.253 mmol) u 1,4-dioksanu (2 mL)/ vodi (0.2 mL) (5:1) dodata je (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina (90 mg, 0.506 mmol), natrijum karbonat (80 mg, 0.759 mmol) i prekatalizator Xphos druge generacije (39.8 mg, 0.051 mmol) na temperaturi sredine. Posuda je degazirana azotom tri puta. Zatim je smeša mešana 16 časova na 80°C pod atmosferom azota. Čvrsta supstanca je otfiltrirana i filtrat je ekstrahovan sa etil acetatom. Organski slojevi su spojeni i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je zatim nanet na kolonu silika gela sa DCM/metanolom (10:1) da bi se dobio proizvod kao smeša PMB zaštićenih tetrazol regioizomera: LCMS [M H]<+>: 796.
Korak C: 4-(2-amino-3H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
5-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid (100 mg, 0.126 mmol) je rastvoren u trifluorosirćetnoj kiselini (3 ml) na temperaturi sredine. Reakcije je održavana na 80°C 1 čas. Dobijena smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je zatim nanet na Prep-HPLC sa sledećim uslovima (Kolona: X Bridge RP C18, 19*150 mm, 5 µM; Pokretna faza A:voda/10 mM NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 10-35% B 10 min; 254 nm; Vreme zadržavanja: 5.89 min) da bi se dobio finalni proizvod: LCMS [M H]+: 436; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.34 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.90 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.62-7.33 (m, 4H), 7.11-6.94 (m, 2H), 6.78 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.33 (d, J = 7.6 Hz, 1H)
PRIMERI 2-7 u donjoj tabeli su pripremljeni na način analogan kao što je opisano za PRIMER 1, počevši sa 5-jodo-N<1>,N<1>-bis(4-metoksibenzil)-6-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamidom (Korak A, ili odgovarajućim N-metil sulfonamidom, 4-jodo-N<2>,N<2>-bis(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-metilbenzen-1,2-disulfonamidom,
12
pripremljen na analogan način) i spajanjem sa boronskim kiselinama ili boronskim estrima koji su pripremljeni kao što je opisano ovde ili koji su komercijalno dostupni.
12
PRIMER 8
4-(3,4-disulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-karboksilna kiselina
Korak A: 2',3'-diamino-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-sulfonamid
U posudu od 50 mL sa okruglim dnom sipan je 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzen-1,2-diamin (0.802 g, 3.43 mmol), 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid (sinteza opisana u prethodnom tekstu, 2.0 g, 2.3 mmol), Pd(PPh3)4(0.528 g, 0.457 mmol) i natrijum karbonat (0.726 g, 6.85 mmol) u 1,4-dioksan (6 ml) i vodi (1.500 ml). Reakciona smeša je gazirana azotom 3 puta i mešana na 80°C 16 h. Dobijena smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (300 mL) i isprana vodom (250 mL). Zatim je organski sloj koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela sa etil acetatom/petroletrom (1/1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 856; 1H NMR (300 MHz, d-DMSO): δ 8.57-8.54 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.92-7.89 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.06-6.73 (m, 13H), 6.52-6.39 (m, 1H), 6.23-6.10 (m, 1H),4.79-4.45 (m, 2H), 4.30-4.11(m, 2H), 4.08-3.88 (m, 4H), 3.724 (s, 12H), 1.09-0.80 (m, 2H), 0.029 (s, 9H).
Korak B: N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3-(2-(trihlorometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzensulfonamid U posudu sa okruglim dnom sipan je 2',3'-diamino-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-sulfonamid (1.1
12
g, 1.285 mmol) i benzil 2,2,2-trihloroacetimidat (0.324 g, 1.285 mmol) u sirćetnoj kiselini (6 ml). Zatim je smeša mešana na sobnoj temperaturi 6 časova. Zatim je smeša koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 982, 984,985(3: 4: 2).
Korak C: metil 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-karboksilat U posudu od 50 mL sa okruglim dnom sipan je N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3-(2-(trihlorometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid (500 mg, 0.508 mmol) i natrijum karbonat (162 mg, 1.525 mmol) u metanolu (0.5 ml). Smeša je mešana na 80°C preko noći, zatim je rastvarač uklonjen pod vakuumom. Ostatak je ekstrahovan sa etil acetatom (200 mL) i ispran hlorovodonikom (1 mol) u vodi (5*100 mL). Organski sloj je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela sa etil acetatom/petroletrom (2/1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 924; 1H NMR (300 MHz, d-DMSO): δ 8.70-8.58 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.14-8.11 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.74-7.40 (m, 3H), 7.10-6.79 (m, 12H), 5.66 (s, 1H), 5.07-4.51 (m, 2H), 4.09-3.87 (m, 7H), 3.73 (s, 9H), 3.21-2.90 (m, 2H), 1.09-0.81 (m, 2H), 0.03 (s, 9H).
Korak D: 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-(2-(metoksikarbonil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)benzensulfinska kiselina
U rastvor metil 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-karboksilata (300 mg, 0.325 mmol) u THF (2 ml) dodat je tetrabutilamonijum fluorid (1.623 ml, 1.623 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa, zatim je ekstrahovana sa etil acetatom (50 mL) i isprana vodom (50 mL). Organski sloj je sušen preko natrijum sulfata 2 časa i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 824.
Korak E: metil 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-sulfamoilfenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-karboksilat
U posudu od 50 mL sa okruglim dnom sipana je 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-(2-(metoksikarbonil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)benzensulfinska kiselina (300 mg, 0.364 mmol) i 1-hloropirolidin-2,5-dion (72.9 mg, 0.546 mmol) u THF (2 ml). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa, i dodat je amonijak (0.350 ml, 0.699 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa, ekstrahovana sa etil acetatom (50 mL) i isprana vodom (50 mL). Organski sloj je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela sa etil acetatom/petroletrom (1/1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 479; 1H NMR (300 MHz, d-DMSO): δ 8.70-8.51 (d, J = 8.4 Hz,
12
1H), 8.12-8.03 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.74-7.40 (m, 3H), 7.10-6.65 (m, 12H), 5.66 (s, 2H), 4.12-3.98 (m, 2H), 3.97-3.80 (m, 5H), 3.80-3.59 (m, 9H).
Korak F: metil 4-(3,4-disulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-karboksilat
U posudu od 50 mL sa okruglim dnom sipan je metil 4-(3-(N,N-bi s(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-sulfamoilfenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-karboksilat (90 mg, 0.107 mmol) i trifluorosirćetna kiselina (2 ml). Smeša je mešana na 60°C 2 časa, zatim je koncentrovana pod vakuumom. Ostatku je podešena pH sa natrijum karbonatom (50 mg). Zatim je prečišćen pomoću „flash“ hromatografije na siliki sa metanolom/DCM (procenat metanola: 5-60% 25 min) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 465.
Korak G: 4-(3,4-disulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-karboksilna kiselina
U rastvor metil 4-(3,4-disulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-karboksilata (40 mg, 0.084 mmol) u metanolu (1 ml) dodat je natrijum hidroksid (13.38 mg, 0.334 mmol) u vodi (0.500 ml). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas i koncentrovana pod vakuumom. Ostatku je podešena pH sa hlorovodonikom (3 mol u metanolu, 0.15 mL). Smeša je rastvorena u N,N-dimetilfonnamidu i prečišćena pomoću Pre-HPLC (uslovi: Kolona: XSelect CSH Prep C18 OBD Kolona, 5µM, 19* 150mm; Pokretna faza A:voda sa 10mmolNH4HCO3, Pokretna faza B: MeCN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 8% B do 35% B 8 min; 254/220 nm) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LCMS [M H]+: 346; 1H NMR (300 MHz, d-DMSO): δ 8.59-8.50 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.07-8.04 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.56 (s, 2H), 7.51-7.49 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.30 (s, 2H), 7.20-7.15 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 6.75-6.72 (d, J = 7.8 Hz, 1H).
PRIMER 9
N1-(2-aminoetil)-4-(1H-indazol-7-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: terc-butil 2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etilkarbamat
U rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfonil hlorida i 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzensulfonil hlorida (sinteza opisana u prethodnom tekstu, 1.4 g, 1.73 mmol)
12
u THF (20 ml) dodat je terc-butil (2-aminoetil)karbamat (0.554 g, 3.46 mmol) i trietilamin (0.525 g, 5.18 mmol) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je zagrevan do sobne temperature i mešan 1 čas. Reakciona smeša je hlađena do temperature sredine, razblažena vodom (20 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (50 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio proizvod kao ulje. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 20 g, eluiranjem sa EtOAc/petrol etrom (2/1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (kao smeša zaštićenih tetrazol regioizomera): LCMS [M H]<+>: 934.
Korak B: terc-butil 2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(1H-indazol-7-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etilkarbamat
U rastvor terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamata (200 mg, 0.214 mmol) u dioksanu (4 ml) i vodi (1 ml) dodat je Na2CO3 (91 mg, 0.857 mmol) (1H-indazol-7-il)boronska kiselina (69.4 mg, 0.428 mmol) i Pd(dppf)Cl2(49.5 mg, 0.043 mmol) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana sa azotom 3 puta. Dobijena smeša je zagrevana do 80°C i mešana 3 časa. Reakciona smeša je hlađena do temperature sredine, razblažena vodom (5 mL) i ekstrahovana sa etil acetatom (2 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (5 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo ulje. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 12 g, eluiran sa EtOAc/ petroletrom (2/1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao smeša PMB tetrazol regioizomera: LCMS [M H]+: 924.
Korak C: N1-(2-aminoetil)-4-(1H-indazol-7-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1-2-disulfonamid U rastvor terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(1H-indazol-7-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamata (120 mg, 0.130 mmol) u DCM (3 ml) dodat je TFA (0.100 ml, 1.299 mmol) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je zagrevan do sobne temperature i mešan 1 čas. Ostatak je koncentrovan da bi se dobio N<1>-(2-aminoetil)-4-(1H-indazol-7-il)-N2-(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid kao ulje. Sastvor N1-(2-aminoetil)-4-(1H-indazol-7-il)-N2-(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida (80 mg, 0.114 mmol) u TFA (0.876 ml, 11.37 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je zagrevan do 80°C i mešan 2 časa. Proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18 OBD Prep Kolona , 100Å, 5 µm, 19 mm X 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol NH4HCO3, Pokretna faza B: MeCN; Stopa protoka: 15 mL/min;
1
Gradijent: 10% B do 35% B 8 min; 254/220 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 464; 1H NMR (300 MHz, DMSO): δ 8.23 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 12 Hz, 1H), 7.91-7.89 (m, 6H), 6.80 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.48 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.16-3.14 (m, 2H), 3.05-3.01 (m, 2H).
PRIMERI 10-12 u donjoj Tabeli su pripremljeni na ančin analogan kao što je opisano za PRIMER 9 počevši od terc-butil 2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etilkarbamata i boronskih kiselina ili boronskih estara pripremljenih kao što je ovde opisano ili dostupno iz komercijalnih izvora.
Pr. br. Struktura Naziv MM LC/MS
PRIMER 13
4-(4-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)benzo[d]oksazol-2-karboksilna kiselina
1 1
Korak A : etil 4-bromobenzo[d]oksazol-2-karboksilat
2-amino-3-bromofenol (1.0 g, 5.3 mmol) dodat je u etil 2-hloro-2-oksoacetat (1.1 g, 8.0 mmol) u 1,4-dioksanu (12.0 ml) na sobnoj temperaturi. Reakcioni rastvor je mešan 1 čas na 150°C pod mikrotalasima, hlađen i koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu, eluiranjem sa etil acetatom/petroletrom (1 /10). Kombinovane organske frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]<+>: 270 / 272. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7.64 (dd, J = 8.4 Hz, 2H), 7.42 (dd, J = 8.0 Hz, 1H), 4.60-4.55 (m, 2H), 1.51-1.37 (m, 3H).
Korak B: (2-(etoksikarbonil)benzo[d]oksazol-4-il)boronska kiselina
Kalijum acetat (0.36 g, 3.7 mmol) je dodat u mešanu smešu 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolana) (1.9 g, 7.4 mmol), etil 4-bromobenzo[d]oksazol-2-karboksilata (1.0 g, 3.7 mmol) i PdCl2(dppf) (0.54 g, 0.74 mmol) u 1,4-dioksanu (15.0 ml) na sobnoj temperaturi pod uslovima Ar. Reakciona smeša je mešana 1 čas na 80°C, praćena pomoću LCMS da bi se našao proizvod. Reakciona smeša je ugašena vodom (25.0 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 30 mL). Proizvod je prečišćen pomoću Prep-MPLC sa sledećim uslovima: Kolona, C-18, 120g, pokretna faza: voda (0.05% TFA) i acetonitril; Detektor, UV 210 i 254 nm. Kombinovane organske frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 236. 1H NMR (400 MHz, DMSO d6) 88.27 (brs,2 H),7.95 (dd, J = 7.6 Hz, 1H), 7.87 (dd, J = 8.0 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 7.6 Hz, 1H), 4.49-4.41 (m, 2H), 1.41-1.35 (m, 1H).
Korak C: etil 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(N-(2-((terc-butoksikarbonil) amino)etil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)benzo[d]oksazol-2-karboksilat
Na2CO3 (68 mg, 0.64 mmol) dodat je u mešanu smešu terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamata (200 mg, 0.21 mmol), (2-(etoksikarbonil)benzo[d]oksazol-4-il)boronske kiseline (100 mg, 0.42 mmol) i Pd(PPh3)4(5 mg, 0.004 mmol) u dioksanu (10.0 ml) na sobnoj temperaturi pod uslovima Ar. Reakciona smeša je mešana 13 časova na 80°C. Reakciona smeša je ugašena vodom (20 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 20 mL). Kombinovani
1 2
organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 x 20 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu, eluiranjem sa PE/EA (3/1). Kombinovane organske frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+ : 997; 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.45 (dd, J = 8.0 Hz, 1H), 7.89 (dd, J = 8.4 Hz, 1H), 7.70-7.65 (m, 2H), 7.53-7.34 (m, 5H), 7.05-6.91 (m, 4H), 6.81 (dd, J = 8.8 Hz, 3H), 6.70 (dd, J = 8.8 Hz, 2H), 6.67-6.46 (m, 1H), 5.43-5.40 (m, 1H), 5.10-4.90 (m, 1H), 4.50-4.40 (m, 2H), 4.30-4.20 (m, 2H), 4.15-4.10 (m, 2 H), 3.78 (brs, 9H), 3.40-3.10 (m, 3 H), 1.47 (brs, 9H), 1.38-1.24 (m, 3 H).
Korak D: etil 4-(4-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)benzo[d]oksazol-2-karboksilat
TFA (2.0 ml) dodat je ukapavanjem u mešani rastvor etil 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(N-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)benzo[d]oksazol-2-karboksilata (160 mg, 0.16 mmol) u CH2Cl2(2.0 ml) na 0°C. Reakcioni rastvor je mešan 1 čas na sobnoj temperaturi, zatim je koncentrovan da bi se dobio etil 4-(4-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3-(N-(4-metoksibenzil)sulfamoil)fenil)benzo[d]oksazol-2-karboksilat 200mg (sirovi) kao ulje. TFA (1.5 ml) dodat je u mešani rastvor etil 4-(4-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3-(N-(4-metoksibenzil)sulfamoil)fenil)benzo[d]oksazol-2-karboksilata (160 mg, sirov) na 0°C. Reakcioni rastvor je mešan 2 časa na 80°C, zatim je koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M+]+: 537.
Korak E: 4-(4-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)benzo[d] oksazol-2-karboksilna kiselina
NaOH (54 mg, 1.3 mmol) je dodat u mešani rastvor etil 4-(4-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)benzo[d]oksazol-2-karboksilata (120 mg, 0.224 mmol) u MeOH (1.5 ml) na 0°C. Reakciona smeša je mešana 3 časa na sobnoj temperaturi, podešena do pH = 6.0 sa HCl (~1M vodeni rastvor). Proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona, Xbridge C 18, 19*150 mm; pokretna faza: voda (0.05% NH4HCO3) i acetonitril (zadržavanje 34% acetonitrila 8 min, zadržavanje 100% 2 min, zatim do 34% 2 min); Detektor, UV 220 i 254 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 509; 1H NMR (400 MHz, DMSO d6) δ 8.28-8.20 (m, 1H), 7.93 (dd, J= 8.4 Hz, 1H), 7.51 (dd, J= 8.0 Hz, 1H), 7.06 (dd, J= 8.0 Hz, 1H), 6.52 (dd, J= 7.2 Hz, 1H),3.25-3.21 (m, 2H), 2.96-2.92 (m, 2H).
PRIMERI 14-84
1
Opšti postupak za paralelnu pripremu sulfonamida Primera 14-84:
U grupu bočica od kojih svaka sadrži potreban komercijalno dostupan ili poznati amin (0.13 mmol) dodat je rastvor sulfonil hlorida (45 mg, 0.044 mmol), a zatim Et3N (0.018 mL, 0.13 mmol). Bočice su zatvorene poklopcem i smeše su mešane na sobnoj temperaturi 5 časova. U reakcionu smešu je zatim dodat TFA (0.5 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1.5 čas. Posle tog vremena, toluen (1 mL) je dodat u svaku bočicu i smeše su koncentrovane in vacuo. U svaku bočicu je zatim dodat TFA (1.0 mL) i anizol (0.019 mL, 0.17 mmol). Bočice su zatvorene poklopcem i reakcione smeše su zagrevane do 80°C uz mešanje 45 minuta. Nakon tog vremena, reakcione smeše su koncentrovane in vacuo. Sirovi ostaci su zatim rastvoreni u DMSO (1.0 mL) i filtrirani. Sirovi proizvodi su prečišćeni pomoću masom pokrenute preparativne HPLC [Waters Sunfire C18 kolona, 5µm, 19x100 mm, upotrebom opsega gradijenta od 8-10% početno do 21-36% finalno MeCN (0.1% TFA) u vodi (0.1% TFA), 25 mL/min, 8-12 min vreme hromatografije da bi se dobili PRIMERI 14-84.
1 4
LC/MS Pr.
HNRaRb Struktura Naziv m/e br.
]+
1
LC/MS Pr.
HNRaRb Struktura Naziv m/e br.
]+
1
LC/MS Pr.
HNRaRb Struktura Naziv m/e br.
]+
1
LC/MS Pr.
HNRaRb Struktura Naziv m/e br.
]+
1
LC/MS Pr.
HNRaRb Struktura Naziv m/e br.
]+
1
LC/MS Pr.
HNRaRb Struktura Naziv m/e br.
]+
14
LC/MS Pr.
HNRaRb Struktura Naziv m/e br.
]+
14
LC/MS Pr.
HNRaRb Struktura Naziv m/e br.
]+
14
LC/MS Pr.
HNRaRb Struktura Naziv m/e br.
]+
14
PRIMERI 85-127
Opšti postupak za paralelnu pripremu sulfonamida primera 85-127:
U grupu bočica od kojih svaka sadrži traženi amin (komercijalno dostupan, poznat, ili pripremljen kao što je ovde opisano, 0.13 mmol) dodat je rastvor sulfonil hlorida (45 mg, 0.044 mmol), a zatim Et3N (0.018 mL, 0.13 mmol). Bočice su zatvorene poklopcem i smeše su mešane na sobnoj temperaturi 5 časova. U reakcionu smešu je zatim dodat TFA (0.5 mL) i smeše su mešane na sobnoj temperaturi 1.5 čas. Nakon tog vremena, toluen (1 mL) je dodat u svaku bočicu i smeše su koncentrovane in vacuo. U svaku bočicu je zatim dodat TFA (1.0 mL) i anizol (0.019 mL, 0.17 mmol). Bočice su zatvorene poklopcem i reakcione smeše su zagrevane do 80°C uz mešanje 45 minuta. Nakon tog vremena, reakcione smeše su koncentrovane in vacuo. Sirovi ostaci su zatim rastvoreni u DMSO (1.0 mL) i filtrirani. Sirovi proizvodi su prečišćeni
14
pomoću masom pokretnute preparativne HPLC [Waters Sunfire C18 kolona, 5 µm, 19x100 mm, upotrebom opsega gradijenta od 8% početno do 30% finalno MeCN (0.1% TFA) u vodi (0.1% TFA), 25 mL/min, 8 min vreme hromatografije]. Svaki izolovani proizvod je rastvoren u MeOH (1 mL) i sipan na jono-izmenjivački kertridž [Agilent Bond Elut SCX (2 grama)]. TFA je eluiran sa kolone sa MeOH (20 mL). Proizvodi su zatim eluirani upotrebom rastvora NH3u MeOH (7N, 20 mL). Ova frakcija je zatim koncentrovana u vacuo. Ostatak je rastvoren u 1:1 MeCN:destilovanoj vodi (2 mL). Ove frakcije su zatim zamrznute i liofilizovane preko noći da bi se dobili Primeri 85-127.
14
14
1
11
12
1
14
1
1
PRIMER 128
Metil (2R,4R)-4-((4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-2-karboksilat
(4R)-4-({[4-(2-amino-1,3-benzotiazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(1H-tetrazol-5-il)fenil]sulfonil}amino)-D-prolin (TFA so) je rastvoren u MeOH (1 mL) i sipan na jonoizmenjivački kertridž [Agilent Bond Elut SCX (2 gram)]. TFA je eluiran iz kolone sa MeOH (20 mL). Proizvod je zatim eluiran upotrebom rastvora NH3u MeOH (7N, 20 mL). Frakcija je zatim koncentrovana u vacuo. Ostatak je rastvoren u 1:1 MeCN:destilovanoj vodi (2 mL). Ove frakcije su zatim zamrznute i liofilizovane preko noći. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću masom pokrenute HPLC [Waters Sunfire C18 kolona, 5 µm, 19x100 mm, upotrebom opsega gradijenta od 10% početno do 40% finalno MeCN (0.1% TFA) u vodi (0.1% TFA), 25 mL/min, 12 min vreme hromatografije] da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS m/e [M+H]+ 579.9.
PRIMERI 129-141
1
Opšti postupak za paralelnu pripremu Primera 129-141: U grupu bočica od kojih svaka sadrži traženi boronska kiselina/estar (komercijalno dostupan, poznat ili pripremljen kao što je ovde opisano, 0.31 mmol) dodat je Pd(dppf)Cl2-CH2Cl2(8.5 mg, 0.010 mmol). Bočice su zatvorene poklopcima i prebačene u pregradu pod atmosferom azota. U svaku bočicu je zatim dodat rastvor jodida (100 mg, 0.104 mmol) u dioksanu (1 mL). U svaku bočicu je zatim dodat rastvor Na2CO3(1M, 0.156 mL, 0.313 mmol). Bočice su zatvorene poklopcima i postavljene u prethodno zagrejani blok za zagrevanje na 80°C. Reakcione smeše su mešane na toj temperaturi preko noći. Smeše su uklonjene iz pregrade i ostavljene da se hlade do sobne temperature. U svaku bočicu je dodata voda (2 mL), a zatim DCM (2 mL). Smeše su prebačene u grupu fritovanih bačvastih filtera i organski slojevi su sušeni u grupi bočica.
U svaku smešu je dodat dodat dodatni DCM (1 mL). Organski slojevi su ponovo sušeni u bočice da bi se ekstrakti spojili. Reakcione smeše su zatim koncentrovani in vacuo. Reakcione smeše su rastvorene u DMSO (1.0 mL) i filtrirane. Sirovi intermedijeri su prečišćeni pomoću mase pokrenute preparativne HPLC [Waters XBridge C18 kolona, 5 µm, 19 x100 mm, opsezi gradijenta 50-55% početno do 80-90% MeCN(0.1% NH4OH) u vodi (0.1% NH4OH) 25 mL/min, 8 min vreme hromatografije] da bi se dobili traženi intermedijeri. U grupu bočica koje sadrže intermedijere dodat je TFA (1.0 mL) i smeše su mešane na sobnoj temperaturi 1 čas. Nakon tog vremena, smeše su koncentrovane in vacuo. U svaku bočicu je zatim dodat TFA (1.0 mL) i anizol (0.055 mL, 0.50 mmol). Bočice su zatvorene poklopcem i reakcione smeše su zagrevane do 80°C uz mešanje 1 čas. Nakon tog vremena, reakcione smeše su koncentrovane in vacuo. Sirovi ostaci su zatim rastvoreni u DMSO (1.0 mL) i filtrirani. Sirovi proizvodi su prečišćenio pomoću masom pokrenute preparativne HPLC [Waters Sunfire C18 kolona, 5µm, 19x100 mm, upotrebom opsega gradijenta od 5-8% početno do 15-35% finalno MeCN (0.1% TFA) u vodi (0.1% TFA), 25 mL/min, 8 min vreme hromatografije] da bi se dobili Primeri 129-141
1
1
PRIMER 142
3-(2-Aminobenzo[d]tiazol-4-il)-6-(piperazin-1-ilsulfonil)-2-(2H-tetrazol-5-il)benzensulfonamid
1
Korak A: benzil 4-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(N,N-bis(tercbutoksikarbonil)amido)benzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonil)piperazin-1-karboksilat
Rastvor benzil piperazin-1-karboksilata (1.14 mL, 5.81 mmol)), i terc-butil (4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(hlorosulfonil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)benzo[d]tiazol-2-il)(terc-butoksikarbonil)karbamati (1.5 g, 1.45 mmol) u DCM (25 mL) je mešan na sobnoj temperaturi 1 h. Smeša je razblažena sa EtOAc (50 mL), isprana zasićenim vodenim rastvorom KHSO4i fiziološkim rastvorom, sušena (MgSO4) i koncentrovana. LCMS [M+1]: 1216.71.
Korak B: 3-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-6-(piperazin-1-ilsulfonil)-2-(2H-tetrazol-5-il)benzensulfonamid
Sirovi benzil 4-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(N,N-bis(tercbutoksikarbonil)amido)benzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonil)piperazin-1-karboksilat je rastvoren u DCM (10 ml), mešan na sobnoj temperaturi 2 h sa TFA (3 ml) i nekoliko kapi anizola. Smeša je koncentrovana, i ostatak je zagrevan na 80°C u 2 ml TFA 40 minuta. TFA je uklonjen, i sirovi materijal je prečišćen pomoću RP-HPLC (7-42% ACN u vodi sa 0.1% TFA). LCMS [M+1]: 522.28.
Sledeći PRIMERI 143-154 su pripremljeni prema reprezentativnom postupku opisanom u prethodnom tekstu za PRIMER 142 od terc-butil (4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(hlorosulfonil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)benzo[d]tiazol-2-il)(tercbutoksikarbonil)karbamata i odgovarajućih amina. Amini mogu izborno biti zaštićeni kao njihovi terc-butoksi karbonil karbamati koji su slično uklonjeni pod uslovima finalne deprotekcije sa TFA. Isto je tačno kada su karboksilati prisutni i zaštićeni su kao terc-butil estri.
1 1
12
PRIMER 155
4-(6-Aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: 5-jodo-N1,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Pod N2, TBAF (9.13 ml, 9.13 mmol) je dodat u rastvor 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (2.0 g, 2.283 mmol) u THF (40 ml). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas pod N2. Dodat je natrijum acetat (1.873 g, 22.83 mmol) u vodi (10 ml), a zatim čvrsta (aminooksi)sulfonska kiselina (2.58 g, 22.83 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod N23 dana. 30% početnog materijala nije potrošeno. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, isprana fiziološkim
1
rastvorom, sušena (MgSO4) i koncentrovana. Sirovi materijal je prečišćen pomoću ISCO (0-100% EtOAc u heksanu) da bi se dobio 5-jodo-N1,N1-bi s(4-metoksibenzil)-6-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid. LCMS [M+1]: 791.57.
Korak B: 5-(6-aminopiridin-3-il)-N1,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Suspenzija 5-jodo-N1 ,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida (0.1 g, 0.126 mmol), (6-aminopiridin-3-il)boronske kiseline (0.035 g, 0.253 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma(0) (0.015 g, 0.013 mmol) i natrijum karbonata (0.040 g, 0.379 mmol) u dioksanu (2 mL) i vodi (0.6 mL) je zagrevana na 80°C 17 časova pod N2. Smeša je filtrirana kroz čep od CELIT-a. Filtrat je koncentrovan i ostatak je rastvoren u EtOAc (30 mL), ispran fiziološkim rastvorom, sušen (MgSO4) i koncentrovan. Sirovi materijal je direktno korišćen za sledeću deprotekciju. LCMS [M+1]: 757.80.
Korak C: 4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
5-(6-Aminopiridin-3-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-6-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid (0.08 g, 0.106 mmol) je zagrevan na 80°C u 2 mL TFA 40 minuta. TFA je isparavan in vacuo, i sirovi materijal je prečišćen pomoću reverzno-fazne HPLC (2-30% acetonitril u vodi sa 0.05% TFA). LCMS [M+1]: 397.23.
PRIMER 156
3-(2-(Metilsulfonamido)benzo[d]tiazol-4-il)-6-(piperazin-1-ilsulfonil)-2-(2H-tetrazol-5-il)benzensulfonamid
Benzil 4-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(N,N-bis(terc-butoksikarbonil)amido) benzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonil)piperazin-1-karboksilat (0.185 g, 0.116) je rastvoren u DCM (30 mL), i mešan na sobnoj temperaturi 2 časa sa 3 mL TFA i nekoliko kapi anizola. Smeša je koncentrovana. U smešu ostatka dobijenog gore i metansulfonil hlorida (0.018 ml, 0.232 mmol) u DMF (10 mL) dodat je natrijum hidrid (4.64 mg, 0.116 mmol) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas, ugašena vodom i razblažena etrom. Organski sloj je odvojen, ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSO4, i koncentrovan. Sirovi materijal je zagrevan u 5 mL TFA na 80°C 40 minuta. TFA je isparavan
1 4
pod vakuumom, i ostatak je prečišćen pomoću reverzno-fazne HPLC (10-75% voda u AcCN sa 0.1% TFA. LCMS [M+1]: 600.28.
PRIMER 157
3-(2-amino-3H-benzo[d]imidazol-4-il)-6-(piperazin-1-ilsulfonil)-2-(2H-tetrazol-5-il)benzensulfonamid
Korak A: terc-butil 4-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonil)piperazin-1-karboksilat
U rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1-sulfonil hlorida (1.8 g, 2.222 mmol) u THF (34 ml) dodat je terc-butil piperazin-1-karboksilat (0.828 g, 4.44 mmol) i Et3N (0.619 ml, 4.44 mmol) na temperaturi sredine. Reakcija je održavana 30 minuta na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa EA (300 mL), ispran fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušen i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela za hromatografiju sa etil acetatom / petroletrom (1:1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 960;1H NMR (400 MHz, 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): 8.15-8.13 (m, 1H), 7.91-7.89 (m, 1H), 7.03-6.95 (m, 6H), 6.89-6.82 (m, 2H), 6.81-4.71 (m, 4H), 4.54-4.45 (m, 2H), 4.15-4.09 (m, 4H), 3.88-3.77 (m, 9H), 3.61-3.45 (m, 8H), 1.46-1.45 (m, 9H).
Korak B: terc-butil 4-((4-(2-amino-1H-benzo[dlimidazol-7-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonil)piperazin-1-karboksilat
U rastvor terc-butil 4-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonil)piperazin-1-karboksilata (200 mg, 0.208 mmol) u dioksanu (1.2 ml)/vodi (0.300 ml) (4:1) dodati su (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-7-il)boronska kiselina (11.06 mg, 0.063 mmol), Na2CO3 (66.3 mg, 0.625 mmol) i Pd(Ph3P)4(72.2 mg, 0.063 mmol) na temperaturi sredine. Posuda je degazirana azotom tri puta. Zatim je smeša mešana 16 h na 80°C pod atmosferom azota. Reakciona smeša je ugašena vodom (5 mL) i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 15 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (1 x 15 mL) i fiziološkim rastvorom (1 x 15 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtriran. Filtrat je
1
koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela za hromatografiju sa CH2Cl2/ MeOH (1:10) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 965.
Korak C: 3-(2-amino-3H-benzo[dlimidazol-4-il)-6-(piperazin-1-ilsulfonil)-2-(2H-tetrazol-5-il)benzensulfonamid
U posudu od 10 mL sa dva grlića i sa okruglim dnom span je rastvor terc-butil 4-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-7-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonil)piperazin-1-karboksilata (200 mg, 0.207 mmol) u DCM (3 ml) i TFA (1 ml) na 0°C i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Reakcioni rastvor je filtriran i rastvarač je isparavan pod sniženim pritiskom. Ostatak je dodat u mešani, ohlađeni TFA (4 ml). Smeša je mešana na 80°C 1 h. Smeša je isparavana pod sniženim pritiskom. Proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge RP18, 19 x 150 mm, 5 µm; Pokretna faza A: voda (0.05% NH4HCO3), Pokretna faza B: MeCN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 57% B do 92% B u 10 min; Detekcija: UV 254 nm. Sakupljene frakcije su koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M - H]+: 503; 1H NMR (400 MHz, DMSO): δ 8.09 (d, J= 15.0 Hz, 1H), 7.93-7.91 (m, 1H), 7.58 (brs, 2H), 6.94-6.91 (m, 1H), 6.576.53 (m, 1H), 6.47 (brs, 2H), 6.12-6.11 (m, 1H), 3.45-3.42 (m, 4H), 3.16-3.13 (m, 4H).
PRIMERI u donjoj Tabeli su pripremljeni na način analogan onome opisanom za 3-(2-amino-3H-benzo[d]imidazol-4-il)-6-(piperazin-1-ilsulfonil)-2-(2H-tetrazol-5-il)benzensulfonamid (PRIMER 157) počevši od terc-butil 4-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonil)piperazin-1-karboksilata (PRIMER 157, Korak A) i odgovarajućih boronskih kiselina ili boronskih estara koji su pripremljeni kao što je ovde opisano ili koji su komercijalno dostupni.
1
PRIMER 161
4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: terc-butil (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat i terc-butil (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor regioizomera 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline i 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (REFERENTNI PRIMER 4, 0.45 g, 0.58 mmol) u THF (30 mL) dodat je rastvor NCS (0.16 g, 1.2 mmol) u THF (10 mL) na 0°C pod azotom. Reakciona smeša je mešana na 0°C 0.5 časa. U dobijenu smešu je dodat (R)-terc-butil 3-aminopirolidin-1-karboksilat (90 mg, 0.48 mmol) i TEA (0.16 mL, 1.2 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana 0.5 časa na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću
1
hromatografije na koloni silika gela, eluiranjem sa EtOAc/PE (1/1). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 960.
Korak B: terc-butil (R)-3-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat i terc-butil (R)-3-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor regioizomera terc-butil (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilata i terc-butil (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1karboksilata (0.20 g, 0.21 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL) i vodi (0.5 mL) dodata je (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina (92 mg, 0.52 mmol), Na2CO3(66 mg, 0.63 mmol) i Pd(PPh3)4(48 mg, 0.04 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana sa argonom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 3 časa pod argonom. Dobijena smeša je hlađena do sobne temperature i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiranjem sa MeOH/DCM (1/10). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 965.
Korak C: 4-(2-amino-1H-benzo[d]midazol-4-il)-N1-((R)-pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfoamid
Rastvor regioizomera terc-butil (R)-3-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilata i terc-butil (R)-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (100 mg, 0.10 mmol) u TFA (2 mL) je mešan 0.5 časa na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je ko-isparavan sa anizolom (3 x 10 mL) pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u TFA (2 mL) i reakciona smeša je mešana na 80°C 1 čas. Dobijeni rastvor je hlađen do sobne temperature i sipan u vodu (50 mL). Vodena faza je isprana sa EtOAc (2 x 30 mL). Vodena faza je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XSelect CSH Prep C18 OBD, 5 µm, 19 x 150 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 33% B 8 min; Detektor: UV 254/220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i
1
koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]<+>: 505; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.20 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 8.01 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.49 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.18 (brs, 2H), 6.07 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.13-4.06 (m, 1H), 3.29-3.04 (m, 4H), 2.15-2.04 (m, 1H), 1.94-1.85 (m, 1H).
PRIMERI u donjoj Tabeli su pripremljeni na način analogan kao što je opisano za (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid (PRIMER 161) počevši od (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (Korak A, ili enantiomerni odgovarajući pirolidin, pripremljen na isti način) i odgovarajućih boronskih kiselina ili boronskih estara koji su pripremljeni kao što je ovde opisano ili koji su komercijalno dostupni.
L
PRIMER 165
4-(4-aminocikloheksil)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
1
Korak A: terc-butil (3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2'-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-4'-sulfamoil-2,3,4,5-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-il)karbamat
terc-Butil (4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)cikloheks-3-en-1-il)karbamat (82 mg, 0.25 mmol) i natrijum karbonat (26.8 mg, 0.253 mmol), i tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (17.5 mg, 0.015 mmol) dodati su u mešani rastvor početnog materijala regioizomera 5-jodo-N1 ,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida i 5-jodo-N1 ,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida (PRIMER 1, Korak A; 100 mg, 0.126 mmol) u dioksanu na sobnoj temperaturi. I smeša je degazirana sa N210 minuta, zatim mešana na 80°C preko noći. Pošto je reakcija ohlađena do sobne temperature, reakciona smeša je filtrirana kroz CELIT. Tečnost je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela (12 g) i eluiran sa EtOEt/heksanom da bi se dobio željeni proizvod.
Korak B: terc-butil (4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-4-sulfamoilfenil)cikloheksil)karbamat
Platina(IV) oksid (46.5 mg, 0.205 mmol) je dodat u mešani rastvor početnog materijala terc-butil (3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2'-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-4'-sulfamoil-2,3,4,5-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-il)karbamata (176 mg, 0.205 mmol) u EtOAc(2 ml) i MeOH (0.5 ml) na sobnoj temperaturi. Rastvor je degaziran pomoću sniženog pritiska, zatim je hidrogenizovan (upotrebom malog balona) na sobnoj temperaturi 2 časa. Reakciona smeša je filtrirana kroz CELIT i isprana sa MeOH, koncentrovana i ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 12 g, eluiranjem sa EtOAc/izheksanom da bi se dobilo jedinjenje kao čvrsta supstanca.
Korak C: 4-(4-aminocikloheksil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
TFA (1.5 ml, 19.47 mmol) i anizol (1 ml, 9.15 mmol) su dodati u mešani rastvor početnog materijala terc-butil (4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-4-sulfamoilfenil)cikloheksil)karbamata (160 mg, 0.186 mmol) u DCM na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Smeša je koncentrovana. Ostatak je ponovo rastvoren u EtOAc (3 ml) i toluenu (5 ml). Smeša je koncentrovana ponovo, i ovaj
1
postupak je ponovljen još dva puta. Ostatak je postavljen na visoki vakuum 3 časa i korišćen u datom stanju za sledeći korak.
Korak D: 4-(4-aminocikloheksil)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
TFA (2 mL, 26.0 mmol) i anizol (1 mL, 9.15 mmol) su dodati u početni materijal 4-(4-aminocikloheksil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na 80°C 2 časa. Smeša je koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne reverzno-fazne HPLC (C-18), eluiranjem sa acetonitrilom/vodom 0.1% TFA da bi se dobio da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LCMS: 402.35 [M+H]+ PRIMERI 166 i 167
(S)-5-(6-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(N-(1,1-dimetilpirolidin-1-ijum-3-il)sulfamoil)-2-sulfamoilfenil)tetrazol-2-id i (S)-5-(6-(2-amino-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(N(1,1-dimetilpirolidin-1-ium-3-il)sulfamoil)-2-sulfamoilfenil)tetrazol-2-id
Korak A: (S)-3-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2-(N-(4-metoksibenzil)sulfamoil)fenil)sulfonamido)-1,1-dimetilpirolidin-1-ijum 2,2,2-trifluoroacetat i (S)-3-((4-(2-amino-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4 metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2-(N-(4-metoksibenzil)sulfamoil)fenil)sulfonamido)-1,1-dimetilpirolidin-1-ijum
TFA (23.5 g, 206 mmol) je dodat u smešu (S)-terc-butil 3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (iz sinteze PRIMERA 162, Korak B, prema postupcima za pripremu PRIMERA 161; 1.99 g, 2.06 mmol) u DCM (10.3 mL) i anizola (1.13 g, 10.29 mmol) i hlađen u ledenom kupatilu uz barbotiranje struje azota kroz rastvor. Kada je dodavanje završeno, smeša je mešana 1 čas. Isparljive materije su uklonjene pod sniženim pritiskom. U dobijeni sirovi materijal (0.4 g, 0.27 mmol) u THF (1 mL) dodat je CH3I (114 mg, 0.8 mmol), a zatim Cs2CO3(175 mg, 0.54 mmol) i mešan na 50°C 30 minuta. Posle hlađenja, reakciona smeša je filtrirana i dobijenom filtratu je uklonjen rastvarač pod sniženim pritiskom da bi se dobila smeša proizvoda. LC/MS [M+H]<+>: 773.55 i 787.57
1 1
Korak B: (S)-5-(6-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(N-(1,1-dimetilpirolidin-1-ijum-3-il)sulfamoil)-2-sulfamoilfenil)tetrazol-2-id i (S)-5-(6-(2-amino-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(N-(1,1-dimetilpirolidin-1-ijum-3-il)sulfamoil)-2-sulfamoilfenil)tetrazol-2-id Proizvodi dobijeni u Koraku A (gore) su tretirani sa TFA na 80°C i sirovi reakcioni proizvod je prečišćen pomoću reverzno-fazne HPLC upotrebom gradijenta acetonitrila (koji sadrži 0.1% TFA) u vodi (koja sadrži 0.1% TFA) da bi se dobila jedinjenja iz naslova. LC/MS [M+H]<+>: 533.4 i 547.36
PRIMER 168
4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((3S,4R)-4-hidroksipirolidin-3-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-benzensulfonamid Suspenzija 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (2.0 g, 2.283 mmol), (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (0.808 g, 4.57 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)-ferocen]dihloropaladijuma(II) (0.251 g, 0.343 mmol) i natrijum karbonata (0.726 g, 6.85 mmol) u dioksanu (30 mL) i vodi (6 ml) je degazirana i zagrevana na 120°C 2 časa. Smeša je razblažena sa EtOAc, isprana fiziološkim rastvorom. Organski sloj je sušen (MgSO4) i koncentrovan. Sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji preko silika gela (ISCO, 80 g kolona, 0-20% MeOH u DCM) da bi se dobio željeni proizvod. LC/MS (M+H)<+>: 881.53.
Korak B: terc-butil 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilat.
U rastvor Suzuki kuplujućeg proizvoda 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-benzensulfonamida (1.4 g, 1.59 mmol) u DCM (20.00 mL), dodat je N,N-dimetilpiridin-4-amin (0.582 g, 4.77 mmol) i di-terc-butil dikarbonat (1.04 g, 4.77 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Isparljive materije su uklonjene in vacuo i ostatak je
1 2
podvrgnut hromatografiji preko silika gela (ISCO 80 g, 0-100% EtOAc u heksanima) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS (M+H)+: 1181.87.
Korak C: terc-butil4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(N-((3S,4R)-1-(tercbutoksikarbonil)-4-hidroksipirolidin-3-il)sulfamoil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilat
U rastvor tri-Boc intermedijera terc-butil 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-2-((tercbutoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilata (0.2 g, 0.169 mmol) u THF (10 mL) dodat je tetrabutilamonijum fluorid (1.0 M u THF, 0.372 ml, 0.372 mmol) na 0°C pod N2. Posle mešanja od 1 časa, reakciona smeša je razblažena sa 20 mL EtOAc, ispirana redom sa 5 mL zasićenog vodenog rastvora KHSO4, 5 mL fiziološkog rastvora, sušena (MgSO4) i koncentrovana. Ostatak je rastvoren u 20 mL DCM, hlađen do 0°C, zatim je u reakcionu smešu dodat (3S,4R)-terc-butil 3-amino-4-hidroksipirolidin-1-karboksilat (0.034 g, 0.169 mmol), N,N-dimetilpiridin-4-amin (0.021 g, 0.169 mmol) i 1-hloropirolidin-2,5-dion (0.045 g, 0.339 mmol). Reakciona smeša je mešana 2 časa. Posle uklanjanja isparljivih materija in vacuo, ostatak je podvrgnut hromatografiji preko silika gela (ISCO, 40g, 0-20% EtOAc u heksanima) da bi se dobio željeni proizvod. LC/MS (M+H)<+>: 1281.50.
Korak D: 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((3S,4R)-4-hidroksipirolidin-3-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Rastvor terc-butil 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(N-((3S,4R)-1-(tercbutoksikarbonil)-4-hidroksipirolidin-3-il)sulfamoil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilata (400 mg, 3.70 mmol) u DCM (200 µl) je koncentrovan u vacuo. Ostatak je rastvoren u anizolu (400 mg, 3.7 mmol) i TFA (1000 mg, 8.77 mmol) na 0°C. Posle mešanja na sobnoj temperaturi 0.5 časa, isparljiva materija je uklonjena in vacuo. Ostatak je rastvoren u 2 mL TFA i mešan na 80°C 1.0 čas. Posle uklanjanja isparljivih materija, ostatak je rastvoren u 4 mL DMSO i prečišćen pomoću reverzno-fazne HPLC direktno (3-60% acetonitril u vodi) da bi se dobio proizvod. LC/MS (M+2H)2+: 261.28.
Sledeći PRIMERI 169-177 su pripremljeni prema opštem postupku opisanom u prethodnom tekstu za PRIMER 168 upotrebom derivata pirolidina koji su komercijalno dostupni, poznati, ili pripremljeni kao što je ovde opisano. Zapaziti da su sve grupe amina tipično zaštićene tercbutoksikarbonil grupom, koja je istovremeno uklonjena finalnim korakom PMB deprotekcije sa TFA i anizolom. Alternativno, Boc zaštiićeni amin može biti de-protektovan tretmanom sa TFA
1
na sobnoj temperaturi, nakon čega sledi deprotekcija PMB grupe uz zagrevanje kao što je ovde opisano.
1 4
PRIMER 178
(R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(piperidin-3-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
1
Korak A: (R)-terc-butil 3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)piperidine-1-karboksilat
U rastvor 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (1.0 g, 1.142 mmol) u THF (10 ml) dodat je tetrabutilamonijum fluorid (1.0 M u THF, 2.51 ml, 2.51 mmol) na 0°C pod N2. Posle mešanja od 1 časa, reakciona smeša je razblažena sa 20 mL EtOAc, ispirana redom sa 5 mL zasićenog vodenog rastvora KHSO4, 5 mL fiziološkog rastvora, sušena (MgSO4) i koncentrovana. Ostatak je rastvoren u 20 mL DCM i hlađen do 0°C. U reakcionu smešu je dodat (R)-terc-butil 3-aminopiperidin-1-karboksilat (0.343 g, 1.713 mmol) i N,N-dimetilpiridin-4-amin (0.209 g, 1.713 mmol), a zatim 1-hloropirolidin-2,5-dion (0.305 g, 2.283 mmol). Reakciona smeša je mešana 2 časa. Posle uklanjanja isparljivih materija in vacuo, ostatak je podvrgnut hromatografiji preko silika gela (ISCO, 40 g, 0-20% EtOAc u heksanima) da bi se dobio željeni proizvod. LC/MS (M+H)+: 974.53.
Korak B: (R)-terc-butil 3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)piperidine-1-karboksilat
Suspenzija (R)-terc-butil3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)piperidine-1-karboksilata (935 mg, 0.960 mmol), (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (340 mg, 1.920 mmol), [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloroPd(II) (0.157 g, 0.192 mmol) i natrijum karbonata (0.305 g, 2.88 mmol) u dioksanu (10.00 mL) i vodi (2 ml) je degazirana i zagrevana na 120°C 2 časa. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, zatim je isprana fiziološkim rastvorom. Organski sloj je sušen (MgSO4) i koncentrovan. Sirovi proizvod je podvrgnut hromatografiji na silika gelu (ISCO, 40 g kolona, 0-20% MeOH u DCM) da bi se dobio željeni proizvod. LC/MS (M+H)<+>: 979.73.
Korak C: (R)-4-(2-amino-1H-benzor[d]imidazol-4-il)-N1-(piperidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Rastvor (R)-terc-butil 3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,Nbis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-piperidin-1-karboksilata (520mg, 0.531 mmol) u DCM (200 µl) je koncentrovan u vakuumu. Ostatak je rastvoren u anizolu (400 mg, 3.7 mmol) i TFA (1000 mg, 8.77 mmol) na 0°C. Posle mešanja na sobnoj temperaturi 0.5 časa, isparljive materije su uklonjene in vacuo. Ostatak je rastvoren u 2 mL TFA i mešan na 80°C 1.0 čas. Posle uklanjanja isparljivih materija, ostatak je rastvoren u 4
1
mL DMSO i prečišćen pomoću reverzno-fazne HPLC direktno (3-60% acetonitril u vodi) da bi se dobio proizvod. LC/MS (M+2H)2+: 260.20.
Sledeći PRIMERI 179-181 su pripremljeni prema opštem postupku opisanom u prethodnom tekstu za PRIMER 178 upotrebom amina koji su komercijalno dostupni, poznati, ili pripremljeni kao što je ovde opisano. (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina ili (2-amino-6-fluoro-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina su korišćene za reakcije Suzuki kuplovanja. Zapaziti da su sve grupe amina tipično zaštićene sa terc-butoksikarbonil grupom, koja je istovremeno uklonjena u koraku finalne PMB deprotekcije sa TFA i anizolom. Alternativno, Boc zaštićeni amin može biti deprotektovan tretmanom sa TFA na sobnoj temperaturi, nakon čega je usledila deprotekcija PMB grupe uz zagrevanje kao što je ovde opisano.
PRIMER 182
4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3-aminopropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
1
Korak A: terc-butil-(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-fenilsulfonamido)propil)karbamat
U rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1-sulfonil hlorida (1.50 g, 1.48 mmol) u THF (10 mL) dodat je terc-butil 3-aminopropilkarbamat (0.52 g, 2.96 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je mešan na 25°C 30 minuta i zatim koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je razblažen vodom (50 mL) i ekstrahovan sa etil acetatom (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela za hromatografiju sa etil acetatom/petroletrom (1:50 do 1:1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]+ 948; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.57-8.52 (m, 1H), 8.12-8.07 (m, 1H), 7.35-7.21 (m, 2H), 6.99-6.81 (m, 10H), 5.99 (brs, 1H), 5.45-5.09 (m, 1H), 4.95-4.52 (m, 2H), 4.29-4.12 (m, 1H), 3.96-3.92 (m, 2H), 3.83-3.79 (m, 9H), 2.95-2.91 (m, 4H), 1.61-1.55 (m, 2H), 1.34 (s, 9H).
Korak B: terc-butil (3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propilkarbamat.
Rastvor terc-butil (3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)karbamata (0.30 g, 0.32 mmol), (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (0.14 g, 0.79 mmol), Na2CO3(0.10 g, 0.95 mmol) i Pd(PPh3)4(73 mg, 0.06 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL) i vodi (0.5 mL) je mešan na 80°C 3 časa pod argonom. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3 x 70 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 70 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu, eluiranjem sa metanolom/DCM (1/10). Kombinovane organske frakcije su koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>953;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.82 (s, 1H), 8.46 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.09-6.80 (m, 12H), 6.77-6.75 (m, 2H), 6.45-6.42
1
(m, 1H), 6.35 (s, 2H), 5.76 (brs, 1H), 5.70 (brs, 1H), 4.70-4.52 (m, 2H), 4.10-4.08 (m, 4H), 3.73 (s, 6H), 3.70 (s, 3H), 3.02-2.98 (m, 4H), 1.63-1.61 (m, 2H), 1.36 (s, 9H).
Korak C: 4-(2-amino-1H-benzor[d]imidazol-4-il)-N1-(3-aminopropil)-N2,N2-bis(4-metoksibenzil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Smeša terc-butil-(3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)-sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)karbamata (0.16 g, 0.17 mmol) u TFA (2 mL) je mešana na 25°C 30 minuta. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>733.
Korak D: 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3-aminopropil)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Smeša 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3-aminopropil)-N2,N2-bis(4-metoksibenzil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida (0.10 g, 0.09 mmol) u TFA (2 mL) je mešana na 80°C 1 čas. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom, Ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC. Kolona, Xbridge C18, 19 x 150 mm; pokretna faza: acetonitril u vodi (0.05% NH4HCO3), 5%-40% 8 min; Detektor, UV 254 nm. RT: 5.5 min. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>493;<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 8.49 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.03 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.02 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.52 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.16-3.12 (m, 2H), 2.85 (t, J = 7.5 Hz, 2H), 1.88-1.83 (m, 2H).
PRIMER 183
4-(2-amino-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3-aminopropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: terc-butil (3-(4-(2-amino-1-metil-1H-benzor[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)karbamat
Rastvor terc-butil (3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)karbamata (100 mg, 0.106 mmol), (2-amino-1-metil-1H-
1
benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (60.5 mg, 0.317 mmol), Pd(PPh3)4(24.38 mg, 0.021 mmol) i Na2CO3(22.36 mg, 0.211 mmol) u 1,4-dioksanu (1 mL) i vodi (0.3 mL) je mešan na 80°C 2 časa pod argonom. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu, eluiran sa metanolom/DCM (10/90). Kombinovane organske frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 967;<1>H NMR (CDCl3, 400 MHZ):
Korak B: 4-(2-amino-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3-aminopropil)-N2-(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid.
Rastvor terc-butil (3-(4-(2-amino-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)karbamata (70 mg, 0.072 mmol) i TFA (1 mL, 12.98 mmol) u DCM (5 mL) je mešan na temperaturi sredine 2 časa. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ulje: LCMS [M 1]+: 967;
Korak C: 4-(2-amino-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3-aminopropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid.
Rastvor 4-(2-amino-1-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3-aminopropil)-N2-(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida (40 mg, 0.054 mmol) u TFA (5 mL, 64.9 mmol) je mešan na 80°C 1 čas. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod. Proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge Prep C18 OBD Kolona 19 x 150mm 5µM 13nm; Pokretna faza A: voda sa 10mmol NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 3% B do 30% B 8 min; 254/220 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 507; 1H NMR (DMSO-d6, 400 MHz): 8.16 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.00 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.70-7.20 (m, 3H), 6.92 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 6.50 (t, J= 8.4 Hz, 1H), 6.43 (brs, 2H), 6.06 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 3.49 (s, 3H), 3.12 (t, J= 6.8 Hz, 2H), 2.86 (t, J= 7.6 Hz, 2H), 1.80-1.76 (m, 2H).
PRIMER 184
4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((S)-2-aminopropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
1
Korak A: (S)-terc-butil(1-amino-1-oksopropan-2-il)karbamat
U posudi od 250 mL sa okruglim dnom, di-terc-butil dikarbonat (13.14 g, 60.2 mmol) dodat je ukapavanjem u mešanu smešu trietilamina (12.18 g, 120 mmol), (S)-2-aminopropanamid hidrohlorida (5.00 g, 40.1 mmol) u DCM (150 ml). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa DCM (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x50 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa etil acetatom/petroletrom (1/20) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS [M H]<+>: 189.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6):7.20 (brs, 1H), 6.90 (brs, 1H), 6.70 (d, J= 6.4 Hz, 1H), 3.90-3.85 (m, 1H), 1.40 (s, 9 H), 1.18 (d, J = 7.2 Hz, 3H)
Korak B: (S)-terc-butil(1-aminopropan-2-il)karbamat
U posudi od 250 sa okruglim dnom, boran (6 ml, 60.0 mmol) je dodat ukapavanjem u smešu (S)-terc-butil (1-amino-1-oksopropan-2-il)karbamata (6.50 g, 34.5 mmol) u THF (100 ml) na sobnoj temperaturi. Pošto je reakciona smeša mešana na 70°C 4 časa, hlađena je do sobne temperature, ugašena vodom/ledom (100 mL), i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 40 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa etil acetatom/petroletrom (1/10) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ulje. LCMS [M H]+: 175. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): 4.97 (s, 1H), 3.46 (d, J= 6.6 Hz, 2H), 2.25 (s, 3H), 1.39 (s, 9H), 1.28 (s, 6H). LCMS [M H]+: 189.1H NMR (300 MHz, DMSO-d6):7.22 (brs, 1H), 6.93 (brs, 1H), 6.58 (d, J= 1.2 Hz, 1H,, 3.88-3.81 (m, 1H), 2.48 (d, J= 3.3 Hz, 2H), 1.37 (s, 9H), 1.16 (d, J= 5.7 Hz, 3H).
Korak C: (S)-terc-butil(1-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-il)karbamat.
U posudi od 50 mL sa okruglim dnom, 1-hloropirolidin-2,5-dion (0.15 g, 1.160 mmol) dodat je u mešanu smešu regioizomera 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline i 2-(N,N-bis(4-
1 1
metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (REFERENTNI PRIMER 4; 0.45 g, 0.580 mmol) u THF (20 ml) na sobnoj temperaturi. Pošto je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 1 čas, dodat je (S)-terc-butil (1-aminopropan-2-il)karbamat (0.15 g, 0.870 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i zatim razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 20 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa etil acetatom/petroletrom (1/5) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS [M H]+: 948. 1H NMR (300 MHz, CDCl3): 8.23-8.12 (m, 6H), 7.33-7.26 (m, 4H), 6.96-6.86 (m, 4H), 5.80 (s, 2H), 4.10-3.70 (m, 4H), 3.79 (s, 9H), 3.70-3.68 (m, 3H), 1.47 (s, 9H), 1.16 (d, J = 3.0Hz, 3H).
Korak D: (S)-terc-butil(1-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-il)karbamat
U posudi od 50 mL sa tri grlića i okruglim dnom, [1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen]dihoropaladijum(II) (46.20 mg, 0.063 mmol) je dodat u mešanu smešu natrijum karbonata (0.10 g, 0.947 mmol), (S)-terc-butil1-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) propan-2-ilkarbamata (0.30 g, 0.316 mmol), (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (0.112 g, 0.632 mmol) u dioksanu/vodi ((1:1)4/1) (12 ml) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 80°C 2 časa pod azotom. Čvrste supstance su otfiltrirane. Filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa etil acetatom/petroletrom (1/1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS [M H]+: 953<1>H NMR (300 MHz, MeOD): δ 8.32-(d, J= 8.4 Hz, 1H), 8.19 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.45-7.40 (m, 4H), 7.29-7.22 (m, 6H), 6.87-6.64 (m, 4H), 5.75-5.12 (m, 2H), 4.73-4.68 (m, 2H), 4.21-4.13 (m, 2H), 3.94-3.73 (m, 1H), 3.76 (s, 9 H), 3.73 (s, 2H), 1.43 (s, 9H), 0.85 (d, J= 6.9 Hz, 3H).
Korak E: 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((S)-2-aminopropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid.
U posudi od 50 mL sa okruglim dnom, 2,2,2-trifluorosirćetna kiselina (2 ml) je dodata u mešanu smešu (S)-terc-butil(1-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-il)karbamata (80.00 mg, 0.083 mmol) u DCM (1 ml) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na
1 2
80°C 1 čas i zatim je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio ostatak (sirovi) koji je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona, Xbridge C<18>, 19 x 150mm; pokretna faza: faza A: voda sa 10mmol NH4HCO3, faza B: MeCN 11 min, zadržavanje 80% do 85% 11 min); Detektor, UV 220 i 254 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LCMS [M H]+: 493. 1H NMR (300 MHz, CD3OD): 8.38 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.87 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.00 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 6.74-6.69 (m, 1H), 6.41 (d, J= 7.8Hz, 1H), 3.44-3.28 (m, 2H), 3.09-3.03 (m, 1H), 1.13 (d, J = 6.6Hz, 3H).
PRIMER 185
4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-2-aminopropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-terc-butil (1-amino-1-oksopropan-2-il)karbamat
U posudi od 250 mL sa okruglim dnom, di-terc-butil dikarbonat (35.0 g, 161 mmol) dodat je ukapavanjem u mešanu smešu trietilamina (16.25 g, 161 mmol), (S)-2-aminopropanamid hidrohlorida u MeOH (150 ml). Pošto je dobijena smeša mešana na sobnoj temperaturi preko noći, ona je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa DCM (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa etil acetatom/petrole etrom (1/20) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS [M H]<+>: 189.<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): 7.21 (brs, 1H), 6.89 (brs, 1H), 6.74 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 3.89-3.84 (m, 1H), 1.39 (s, 9 H), 1.18 (d, J = 7.2 Hz, 3H).
Korak B: (R)-terc-butil (1-aminopropan-2-il)karbamat
U posudi od 500 mL sa okruglim dnom, boran (20ml, 200 mmol) je dodat ukapavanjem u mešanu smešu (R)-terc-butil (1-amino-1-oksopropan-2-il)karbamata (15.00 g, 80 mmol) u THF (150 ml) na sobnoj temperaturi. Pošto je dobijena smeša mešana na 70°C 4 časa, ona je hlađena do sobne temperature, ugašena natrijum hidroksidom (1N) i ekstrahovana etil acetatom (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 40 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je
1
prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa etil acetatom/petroletrom (1/1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ulje. LCMS [M H]+: 175. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): 3.88-3.79 (m, 2H), 2.66-2.62 (m, 1H), 1.49 (s, 9H), 1.16 (d, J = 5.7 Hz, 3H).
Korak C: (R)-terc-butil (1-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-il)karbamat
U posudi od 50 mL sa okruglim dnom, 1-hloropirolidin-2,5-dion (172 mg, 1.289 mmol) dodat je u mešanu smešu 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (500mg, 0.645 mmol) u THF (20 ml) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. (R)-terc-butil 1-aminopropan-2-ilkarbamat (0.17 g, 1.289 mmol) dodat je u reakcionu smešu na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa etil acetatom (3x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (1 x 60 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiranjem sa etil acetatom/petroletrom (1/5) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS [M H]<+>: 948.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): 8.42-8.24 (m, 4H), 7.33-7.26 (m, 4H), 6.96-6.86 (m, 6H), 5.80 (s, 2H), 4.10-3. 70 (m, 4H), 3.79 (s, 9H), 3.70-3.68 (m, 3H), 1.47 (s, 9H), 1.16 (d, J= 3.0Hz, 3H).
Korak D: (R)-terc-butil (1-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-il)karbamat
U posudi od 50 mL sa tri grlića i sa okruglim dnom, tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (0) (36.60 mg, 0.032 mmol) dodat je u mešanu smešu natrijum karbonata (0.10 g, 0.950 mmol), (R)-tercbutil (1-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-il)karbamata (0.40 g, 0.422 mmol, (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (0.11 g, 0.633 mmol) u dioksanu/vodi (4/1) (4 ml) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 80°C 2 časa pod azotom. Čvrste supstance su otfiltrirane. Filtrat je koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa metanolom/DCM (1/10) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.97 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.88 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.48-7.42 (m, 1H), 7.32-7.26 (m, 1H), 6.94-6.90 (m, 4H), 6.82-6.75 (m, 6H), 5.75-5.12 (m, 1H), 4.73-4.68 (m, 2H), 4.21-4.13 (m, 2H), 3.94-3.89 (m, 1H), 3.76 (s, 9 H), 3.73 (s, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.26 (s, 6H).
Korak E: (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2-aminopropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid.
1 4
U posudi od 50 mL sa okruglim dnom, 2,2,2-trifluorosirćetna kiselina (5 ml, 0.168 mmol) je dodata u mešanu smešu (R)-terc-butil (1-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-il) karbamata (0.16 g, 0.168 mmol) u DCM (3 ml) na sobnoj temperaturi. Pošto je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi 1 čas, koncentrovana je pod vakuumom da bi se dobio ostatak. Zatim je 3 mL CF3COOH dodato u ostatak i dobijeni rastvor je mešan 1 čas na 80°C. Reakciona smeša je hlađena do sobne temperature i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: Atlantis Prep T3 OBD Kolona 19 × 150mm 5µM 10nm; Pokretna faza A: voda sa 50mmolNH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 28% B 10 min; 254 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca.: LCMS [M H]+: 493. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): 8.18 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.96 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.91-7.10 (brs, 4H), 6.90 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 6.50-6.45 (m, 1H), 6.11-6.00 (m, 3H), 3.36-3.32 (m, 12H), 3.09-3.03 (m, 2H), 1.17(d, J = 5.4Hz, 3H).
PRIMER 186
4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((S)-1-aminopropan-2-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: benzil terc-butil propan-1,2-diil(S)-dikarbamat
U posudi od 100 mL sa okruglim dnom, benzil karbonohloridat (2.94 g, 17.22 mmol) je dodat ukapavanjem u mešanu smešu trietilamina (1.16 g, 11.48 mmol) i terc-butil (S)-(1-aminopropan-2-il)karbamata (1.00 g, 5.74 mmol) u DCM (20 ml) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Reakciona smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 x 25 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa etil acetatom/petroletrom (1/10) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS [M H]+: 309.1H NMR (300 MHz, CDCl3): 7.29-7.21 (m, 5H), 5.03 (s, 2H), 4.63-4.55 (m, 1H), 3.69-3.51 (m, 1H), 3.25-3.18 (m, 1H), 1.35 (s, 8H), 1.06 (d, J = 6.9 Hz 3 H).
1
Korak B: (S)-benzil (2-aminopropil)karbamat 2,2,2-trifluoroacetat.
U posudi od 50 mL sa okruglim dnom, 2,2,2-trifluorosirćetna kiselina (2 ml, 1.621 mmol) dodata je u mešanu smešu benzil terc-butil propan-1,2-diil(S)-dikarbamata (0.50 g, 1.621 mmol) u DCM (1 ml) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LCMS [M H]+: 209.
Korak C: benzil (S)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)karbamat.
U posudi od 50 mL sa okruglim dnom, 1-hloropirolidin-2,5-dion (0.15 g, 1.160 mmol) dodat je u mešanu smešu 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (0.45 g, 0.580 mmol) u THF (20 ml) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Trietilmin (2 ml), (S)-benzil (2-aminopropil)karbamat 2,2,2-trifluoroacetat (0.15 g, 0.870 mmol) dodat je u reakcionu smešu sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa i zatim je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 x 30 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa etil acetatom/petroletrom (1/5) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS [M H]<+>: 982;<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.40-7.91 (m, 7H), 7.34-7.28 (m, 6H), 6.98-6.71 (m, 6H), 5.91 (s, 2H), 5.19-5.12 (m, 2H), 4.21-4.13 (m, 2H), 3.94-3.89 (m, 1H), 3.77 (s, 9 H), 3.68-3.51 (m, 2H), 3.31-3.28 (m, 2H), 0.91 (d, J = 6.6 Hz, 3H).
Korak D: Benzil (S)-2-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propilkarbamat.
U posudi od 50 mL sa tri grlića i sa okruglim dnom, tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (0) (0.259 g, 0.224 mmol) dodat je u mešanu smešu natrijum karbonata (23.75 mg, 0.224 mmol), benzil (S)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)karbamata (0.22 g, 0.224 mmol), (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (39.70 mg, 0.224 mmol) u dioksanu/vodi (4/1) (12 ml) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 80°C 2 časa pod azotom. Čvrste supstance su otfiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa metanolom/DCM (1/20) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS [M H]<+>: 987;<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ8.26 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.88 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.48-7.42 (m, 1H), 7.32-7.26 (m, 5H), 6.94-6.90 (m, 5H), 6.82-6.75 (m,
1
6H), 5.75-5.12 (m, 2H), 5.56-5.41 (m, 2H), 5.21-4.40 (m, 2H), 4.21-4.13 (m, 2H), 3.94-3.89 (m, 1H), 3.76 (s, 9 H), 3.73 (s, 2H), 1.24 (d, J= 7.2 Hz, 3H).
Korak E: (S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N-(1-aminopropan-2-il)-3-(2H-tetrazol-5-il) benzen-1,2-disulfonamid.
U posudi od 50 mL sa okruglim dnom, paladijum hidroksid na uglju (49.80 mg, 0.071 mmol) dodat je u mešanu smešu benzil (S)-2-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propilkarbamata (0.14 g, 0.14 mmol) u MeOH (3 ml) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći pod vodonikom (2 atm). Čvrsta supstanca je otfiltrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio ostatak. 2,2,2-trifluorosirćetna kiselina (2 ml, 0.094 mmol) je dodata u ostatak i dobijena smeša je mešana na 80°C. Posle mešanja 1 čas, reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge Shield RP18 OBD Kolona, 5 µM, 19 x 150mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol NH4HCO3Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 0% B do 15% B 15 min; 254/220 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS [M H]<+>: 493.<1>H NMR (300 MHz, CD3OD): 8.41 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.88 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 6.99 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 6.76-6.70 (m, 1H), 6.43-6.40 (m, 1H), 3.69-3.64 (m, 1H), 2.86-2.78 (m, 2H), 1.11 (d, J=6.9Hz, 3H).
PRIMER 187
4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-1-aminopropan-2-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-benzil terc-butil propan-1,2-diildikarbamat
U posudi od 100 mL sa okruglim dnom, benzil karbonohloridat (5.87 g, 34.4 mmol) dodat je ukapavanjem u mešanu smešu trietilamina (5.23 g, 51.7 mmol), (R)-terc-butil 1-aminopropan-2-ilkarbamata (4.00 g, 22.00 mmol) u DCM (20 ml) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa i zatim je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 x 25
1
mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa etil acetatom/petroletrom (1/10) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS [M H]+: 309. 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): 7.41-715 (m, 5H), 5.04 (s, 2H), 4.63-4.55 (m, 1H), 3.69-3.51 (m, 1H), 3.25-3.18 (m, 1H), 1.35 (s, 8H), 1.06 (d, J = 6.9 Hz 3 H).
Korak B: (R)-benzil (2-aminopropil)karbamat 2,2,2-trifluoroacetat
U posudi od 50 mL sa okruglim dnom, 2,2,2-trifluorosirćetna kiselina (2 ml) je dodata u mešanu smešu (R)-benzil terc-butil propan-1,2-diildikarbamata (1.2 g,3.8 mmol) u DCM (1 ml) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas i zatim je koncentrovana pod vakuumom do jedinjenja iz naslova kao ulje. LCMS [M H]+: 209.
Korak C: benzil (R)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)karbamat
U posudi od 50 mL sa okruglim dnom, 1-hloropirolidin-2,5-dion (0.15 g, 1.160 mmol) dodat je u mešanu smešu 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (0.45 g, 0.580 mmol) u THF (20 ml) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Trietilamin (2 mL), (R)-benzil (2-aminopropil)karbamat 2,2,2-trifluoroacetat (0.15 g, 0.870 mmol) dodati su u reakcionu smešu na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći, razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 20 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa etil acetatom/petroletrom (1/5) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS [M H]<+>: 982;<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 8.23 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 7.88 (d, J = 8.7 Hz, 4H), 7.48-7.42 (m, 4H), 7.32-7.26 (m, 1H), 6.95-6.85 (m, 4H), 6.76-6.74 (m, 4H), 5.81 (s, 2H), 5.21-5.12 (m, 2H), 4.21-4.13 (m, 2H), 3.94-3.89 (m, 1H), 3.68-3.51 (m, 2H), 3.76 (s, 9 H), 0.95 (d, J= 6.6 Hz, 3H).
Korak D: benzil (R)-(2-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)karbamat
U posudi od 50 mL sa tri grlića i sa okruglim dnom, tetrakis(trifenilfosfin)paladijum (0) (0.25 g, 0.224 mmol) dodat je u mešanu smešu natrijum karbonata (23.75 mg, 0.224 mmol), benzil (R)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)karbamata (0.22 g, 0.224 mmol), (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (39.70 mg, 0.224 mmol) u 12 ml dioksana/vode (4/1) na sobnoj temperaturi.
1
Pošto je reakciona smeša mešana na 80°C 2 časa pod azotom, čvrste supstance su otfiltrirane. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa metanolom/DCM (1/20) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS [M H]+: 987.
Korak E: (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N-(1-aminopropan-2-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
U posudi od 50 mL sa okruglim dnom, konc. HCl (10 mL) je dodata u mešanu smešu benzil (R)-(2-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)karbamata (0.16 g, 0.162 mmol) u 20 ml MeOH na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 80°C preko noći i zatim je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio ostatak. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona, Kolona: XBridge Shield RP18 OBD Kolona, 5µM, 19 x 150 mm; Pokretna faza A:voda sa 10mmol NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 0% B do 15% B 15 min; 254/220 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS [M H]<+>: 493.
1H NMR (300 MHz, CD3OD): 8.42 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 7.88 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.00 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 6.76-6.70 (m, 1H), 6.50-6.42 (m, 1H), 3.77-3.71 (m, 2H), 2.99-2.83 (m, 2H), 1.19 (d, J = 9.0Hz, 3H).
PRIMER 188
(2R)-2-amino-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propanamid
Korak A: (R)-terc-butil (1-amino-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-oksopropan-2-il(karbamat.
Rastvor (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)propionske kiseline (pripremljena na analogan način kao što je opisano u PRIMERU 189, Korak A počevši od 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1-sulfonil hlorida i (R)-3-amino-2-((terc-butoksikarbonil)amino)propionske kiseline; 300 mg, 0.307
1
mmol), amonijum hidrohlorida (65.6 mg, 1.227 mmol), HATU (175 mg, 0.460 mmol) i DIEA (0.107 ml, 0.614 mmol) u DMF (10 ml) je mešan na temperaturi sredine 3 časa. Reakciona smeša je ugašena vodom (30 mL), razblažena vodom (70 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 10 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 10 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 977. Korak B: (R)-terc-butil (1-amino-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-oksopropan-2-il)karbamat
Rastvor (R)-terc-butil (1-amino-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-oksopropan-2-il)karbamata (300 mg, sirov), (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (36.2 mg, 0.205 mmol), Pd(Ph3P)4(237 mg, 0.205 mmol) i Na2CO3(21.7 mg, 0.21 mmol) u 1,4-Dioksanu (3 ml) i vodi (0.6 ml) je mešan na 80°C 2 časa. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu, eluiran sa metanolom/DCM (10/90). Kombinovane organske frakcije su koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 982.
Korak C: (S)-2-amino-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazol-5-il)-fenilsulfonamido)-propanamid.
Rastvor (R)-terc-butil (1-amino-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-oksopropan-2-il)karbamata (200 mg, sirovi) i TFA (2 ml, 26.0 mmol) u DMC (10 ml) je mešan na temperaturi sredine 2 časa. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo 150 mg sirovog (R)-2-amino-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2-(N-(4-metoksibenzil)sulfamoil)fenilsulfonamido)propanamida kao ulje: LCMS [M 1]+: 762. Ovo ulje je dodato u 20 ml TFA i dobijeni rastvor je mešan na 80°C 1 čas. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X-Bridge BEH130 Prep C18 OBD Kolona 19 × 150mm 5µM 13nm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 3% B do 25% B 8 min; 254 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca LCMS [M 1]+: 522. 1H NMR (DMSO-d6/D2O, 400 MHZ): 8.22 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.93 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.59-6.55 (m, 1H), 6.13 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 3.64-3.53 (m, 1H), 3.35-3.30 (m, 1H), 3.21-3.16 (m, 1H).
1
PRIMER 189
(2S)-2-amino-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propanamid
Korak A: (S)-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)propionska kiselina Rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1-sulfonil hlorida (1.5 g, 1.85 mmol), (S)-3-amino-2-((tercbutoksikarbonil)amino)propionske kiseline (1.14 g, 5.56 mmol) i TEA (0.77 ml, 5.56 mmol) u THF (15 ml) je mešan na temperaturi sredine 30 minuta. Reakciona smeša je ugašena vodom (40 mL), razblažena vodom (30 mL) i ekstrahovana sa DCM (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 x 30 mL) i fiziološkim rastvorom (2 x 30 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu i eluiran sa metanolom/DCM (1/10). Kombinovane organske frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS [M H]<+>: 978; R (400 MHz, CDCl3) : δ 8.27-8.16 (m, 2H), 6.94-6.65 (m, 12H), 5.85-5.65 (m, 2H), 5.60-5.48 (m, 1H), 4.5-3.5 (m, 15H), 1.44 (s, 9H).
Korak B: (S)-terc-butil(1-amino-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-oksopropan-2-il)karbamat Rastvor (S)-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)propionske kiseline (300 mg, 0.31 mmol), amonijum hidrohlorida (65.6 mg, 1.23 mmol), HATU (175 mg, 0.46 mmol) i DIEA (0.11 ml, 0.61 mmol) u DMF (10 ml) je mešan na temperaturi sredine 3 časa. Reakciona smeša je ugašena vodom (30 mL), razblažena vodom (70 mL) i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 x 30 mL) i fiziološkim rastvorom (2 x 30 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS [M H]<+>: 977;<1>H
1 1
NMR (400 MHz, CDCl3) : δ 8.32-8.15 (m, 2H), 7.00-6.74 (m, 12H), 5.85-5.75 (m, 2H), 5.60-5.50 (m, 1H), 4.5-3.5 (m, 15H), 1.48 (s, 9H).
Korak C: (S)-terc-butil(1-amino-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-oksopropan-2-il)karbamat
Rastvor (S)-terc-butil (1-amino-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-oksopropan-2-il)karbamat (200 mg, 0.21 mmol), (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (36.2 mg, 0.205 mmol), Pd(Ph3P)4(237 mg, 0.205 mmol) i Na2CO3(21.70 mg, 0.205 mmol) u 1,4-Dioksanu (3 ml) i vodi (0.6 ml) je mešan na 80°C 2 časa. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom i ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu, eluiranjem sa metanolom/DCM (10/90). Kombinovane organske frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS [M H]<+>: 982
Korak D: (S)-2-amino-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propanamid
Rastvor (S)-terc-butil (1-amino-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-oksopropan-2-il)karbamata (160 mg, 0.163 mmol) i TFA (2 ml, 26.0 mmol) u DCM (10 ml) je mešan na temperaturi sredine 2 časa. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ulje. LCMS [M H]+: 762.
Rastvor (S)-2-amino-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2-(N-(4-metoksibenzil)sulfamoil)fenilsulfonamido)propanamida (120 mg, 0.158 mmol) u TFA (20 ml, 260 mmol) je mešan na 80°C 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod. Proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge BEH130 Prep C18 OBD Kolona 19 x 150 mm 5µM 13nm; Pokretna faza A:voda sa 10mmol NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 3% B do 25% B 8 min; 254 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LCMS [M H]<+>: 977;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) : δ 8.23 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 6.97 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.64 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.50 (brs, 1H), 6.14 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 3.66-3.64 (m, 1H), 3.36-3.31 (m, 1H), 3.18-3.13 (m, 1H).
PRIMER 190
4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-2-amino-3-hidroksipropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
1 2
Korak A: (R)-terc-butil(1-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropan-2-il)karbamat TEA (248 mg, u 0.2 ml THF) dodat je ukapavanjem u mešani rastvor (R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)propionske kiseline (800 mg, 0.82 mmol) i izobutil karbonohloridata (223 mg, 1.64 mmol) u 6.0 ml THF na 0°C. Reakciona smeša je mešana 2 časa na sobnoj temperaturi, i zatim je NaBH4(93 mg, 2.45 mmol) dodat na 0°C. Pošto je dobijena smeša mešana 2 časa na sobnoj temperaturi, ona je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu, eluiran sa DCM/MeOH (20/1). Kombinovane organske frakcije su koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao pena: LCMS [M 1]+: 964.
Korak B: (R)-terc-butil(1-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropan-2-il)karbamat
Pd(Ph3P)4(27.0 mg, 0.023 mmol) dodat je u mešanu smešu (R)-terc-butil (1-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropan-2-il)karbamata (210 mg, sirovi) i (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (83 mg, 0.47 mmol) i Na2CO3(74.2 mg, 0.70 mmol) u 1,4-dioksanu (3.0 ml)/vodi (0.6 ml) na sobnoj temperaturi pod uslovima Ar. Pošto je dobijena smeša degazirana dva puta, ona je zgrevana 12 časa na 80°C. Dobijena smeša je hlađena do sobne temperature, filtrirana i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-TLC (DCM / MeOH = 20 / 1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 969.
Korak C: (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2-amino-3-hidroksipropil)-N2-(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid.
TFA (1.0 ml) dodat je ukapavanjem u mešani rastvor (R)-terc-butil (1-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropan-2-il)karbamata (150 mg, sirov) u 1.0 ml DCM na 0°C. Reakcioni rastvor je mešan 2 časa na sobnoj temperaturi i zatim koncentrovan pod
1
sniženim pritiskom da bi se dobilo 110 mg sirovog (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2-amino-3-hidroksipropil)-N2-(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida kao pena: LCMS [M 1]+: 749. 2.0 ml TFA je dodato u ovu penu na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je mešan 2 časa na 80°C i zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona, Xbridge C18 , 19 x 150 mm; pokretna faza: voda (0.05% NH4HCO3) i acetonitril (zadržavanje 30% acetonitril 8 min, zadržavanje 100% 2 min, zatim 30% 2 min); Detektor, UV 220 i 254 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 509.<1>H NMR (MDOD, 400 MHZ): 7.62 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 7.09 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 6.21 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 6.00-5.90 (m, 1H), 5.62 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 2.78-2.75 (m, 2H), 2.49-2.40 (m, 1H), 2.30-2.20 (m, 1H).
PRIMER 191
4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((S)-2-amino-3-hidroksipropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (S)-benzil terc-butil(3-hidroksipropan-1,2-diil)dikarbamat
TEA (4.1 ml) dodat je ukapavanjem u mešani rastvor (S)-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)propionske kiseline (5.0 g, 14.9 mmol) i izobutil karbonohloridata (2.42 g, 17.7 mmol) u THF (50.0 ml) na 0°C. Dobijeni rastvor je mešan 1 čas na sobnoj temperaturi, i zatim hlađen do 0°C i dodat je NaBH4(1.12 g, 29.6 mmol). Pošto je dobijena smeša mešana 2 časa na sobnoj temperaturi, ugašena je ledom/vodom (100 ml), razblažena vodom (50 ml) i ekstrahovana sa EA (3 x 80 ml). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 x 50 ml), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu, eluiran sa DCM/MeOH (15 /1). Kombinovane organske frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao pena: LCMS [M 1]+: 325. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) :δ 7.67 (m, 5H), 5.53-5.33 (m, 2H), 4.07 (brs, 1H), 4.04-3.78 (m, 5H), 3.79-3.53 (m, 1H), 1.76 (brs, 9H), 1.38-1.16 (m, 1H).
Korak B: (S)-terc-butil (1-amino-3-hidroksipropan-2-il)karbamat
1 4
U mešanu smešu Pd(OH)2/C (0.46 g) u 20 ml MeOH, dodat je (S)-benzil terc-butil (3-hidroksipropan-1,2-diil)dikarbamat (2.1g, 6.47 mmol) na temperaturi sredine. Dobijena smeša je degazirana azotom 3 puta i mešana pod vodonikom (1.5 atm) 12 časa na temperaturi sredine. Smeša je filtrirana. Filter kolač je ispran metanolom (3 x 20 ml). Spojeni organski slojevi su koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu, eluiran sa DCM/metanolom (4/3). Kombinovane organske frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao pena: LCMS [M 1]<+>: 191.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) : δ 5.76-5.23 (m, 3H), 4.02-3.79 (m, 2H), 3.80 -3.63 (m, 1H), 3.39-3.17 (m, 1H), 1.44 (brs, 9H).
Korak C: (S)-terc-butil (1-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropan-2-il)karbamat
1-Hloropirolidin-2,5-dion (207 mg, 1.55 mmol) dodavan je šaržno u mešani rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (600 mg, 0.77 mmol) u THF (5.0 ml) na 0°C. Pošto je dobijeni rastvor mešan 2 časa na sobnoj temperaturi, dodat je (S)-terc-butil (1-amino-3-hidroksipropan-2-il)karbamat (294 mg, 1.55 mmol) i zatim je dodat trietilamin (235 mg, 2.32 mmol) ukapavanjem na 0°C. Dobijena smeša je mešana 1 čas na sobnoj temperaturi i zatim koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu, eluiran sa metanolom/DCM (1 / 50). Kombinovane organske frakcije su koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao pena: LCMS [M 1]+: 963.
Korak D: (S)-terc-butil (1-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropan-2-il)karbamat
Pd(PPh3)4(73.1 mg, 0.06 mmol) dodat je u mešanu smešu (S)-terc-butil (1-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropan-2-il)karbamata (610 mg, 0.633 mmol) i (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (224 mg, 1.27 mmol) i Na2CO3(201 mg, 1.90 mmol) u 1,4-dioksanu (5.0 ml)/vodi (1.0 ml) na sobnoj temperaturi pod uslovima Ar. Dobijena smeša je zagrevana 12 časova na 80°C, i zatim je hlađena do sobne temperature, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-TLC(DCM / MeOH = 20/1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 969.
Korak E: (S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2-amino-3-hidroksipropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)-benzen-1,2-disulfonamid.
1
TFA (2.0 ml) dodat je ukapavanjem u mešani rastvor (S)-terc-butil (1-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropan-2-il)karbamata (300 mg, sirov) u DCM (2.0 ml) na 0°C. Reakcioni rastvor je mešan 2 časa na sobnoj temperaturi, i zatim koncentrovan da bi se dobio sirovi (S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2-amino-3-hidroksipropil)-N2-(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid kao pena: LCMS [M 1]+: 749.
TFA (2.0 ml) je dodat u ovu penu i dobijena smeša je zagrevana 2 časa na 80°C. Pošto je dobijena smeša hlađena do sobne temperature, ona je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona, Xbridge C18, 19 x 150mm; pokretna faza: voda (0.05% NH4HCO3) i acetonitril (zadržavanje 34% acetonitril 8 min, zadržavanje 100% 2 min, zatim do 34% 2 min); Detektor, UV 220 i 254 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]+: 509.1H NMR (CD3OD, 400 MHZ): δ 8.45 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.92 (d, J= 8.2 Hz, 1H), 7.05 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 6.79 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 6.49 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 3.74 - 3.67 (m, 1H), 3.63 (m, 1H), 3.30 - 3.20 (m, 3H).
PRIMER 192
4-(3,4-disulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)benzo[d]tiazol-2-karboksimidamid
Korak A: 5-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-N1,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
U posudu of 50-mL sa okruglim dnom prečišćenu i održavanu sa inertnom atmosferom argona, sipan je rastvor 5-jodo-N1,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida (1g, 1.01 mmol), Pd(dppf)Cl2CH2Cl2(0.16 g, 0.20 mmol) i (2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)boronske kiseline (0.393 g, 2.024 mmol) u dioksanu (10 mL). Nakon ovoga je usledilo dodavanje natrijum karbonata (0.32 g, 3.04 mmol) u vodi (1.5 mL) na temperaturi sredine. Pošto je dobijena smeša mešana na 80°C 16 časova pod argonom, ona je hlađena do 20°C i zatim ugašena vodom (50 mL), ekstrahovana etil acetatom (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko
1
anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je isparavan pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu, eluiran sa EA/DCM (2/3) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M H]<+>: 813.0;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.55 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.99 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.61 (s, 2H), 7.53-7.51 (m, 3H), 6.93 (d, J= 8.4 Hz, 5H), 6.83 (d, J= 8.8 Hz, 5H), 6.76 (d, J= 7.6 Hz, 2H), 6.64 (br, 1H), 6.48 (br, 1H), 5.67 (s, 2H), 4.04-3.96 (m, 4H), 3.73 (s, 6H), 3.69 (s, 3H).
Korak B: 5-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-N1,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
U posudu od 25 mL sa okruglim dnom koja je prečišćena i održavana sa inertnom atmosferom argona, sipan je rastvor terc-butil nitrita (81 mg, 0.79 mmol) i bakar (II) bromida (0.13 g, 0.59 mmol) u acetonitrilu (2 ml). Nakon ovoga je usledilo dodavanje 5-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-N1,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida (0.40 g, 0.49 mmol) u acetonitrilu (5 mL) na 0°C. Dobijena smeša je mešana na 0°C 16 časova pod argonom, i zatim je reakcija ugašena vodom (30 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 70 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je isparavan pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu, eluiran sa EA/PE (2/3) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M H]<+>: 878;<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8.72 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.88 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.54 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 8.4 Hz, 7H), 6.82 (d, J = 8.8 Hz, 5H), 6.71 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 5.99 (s, 2H), 5.47-05.45 (m, 2H), 4.31-4.05 (m, 4H), 3.77 (s, 6H), 3.75 (s, 3H).
Korak C: 5-(2-cijanobenzo[d]tiazol-4-il)-N1,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
U posudu od 25 mL sa okruglim dnom koja je prečišćena i održavana sa inertnom atmosferom argona, sipan je rastvor 5-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-N1,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida (0.40 g, 0.39 mmol) i bakar (I) cijanida (0.10 g, 1.16 mmol) u DMSO (4 mL). Dobijena smeša je mešana na 100°C 6 časova pod argonom. Reakcija je ugašena vodom (30 mL), ekstrahovana sa EA (3 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 70 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je isparavan pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu, eluiran sa EA/PE (2/3) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M H]<+>: 823.0;<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.74 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.81 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.15-6.95 (m, 8H), 6.82-6.68 (m,
1
5H), 6.57-6.55 (m, 1H), 5.99-5.94 (m, 2H), 5.41 (brs, 2H), 4.31-4.05 (m, 4H), 3.77 (s, 6H), 3.74 (s, 3H).
Korak D: 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-sulfamoilfenil)benzo[d]tiazol-2-karboksimidamid
U posudu od 25 mL sa okruglim dnom koja je prečišćena i održavana sa inertnom atmosferom argona, sipan je rastvor 5-(2-cijanobenzo[d]tiazol-4-il)-N1,N1-bis(4-metoksibenzil)-6-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida (0.15 g, 0.18 mmol) u MeOH (3 mL) i THF (0.5 mL). Nakon ovoga je usledilo dodavanje natrijum metanolata (0.02 mL, 0.02 mmol) na temperaturi sredine. Dobijena smeša je mešana na 20°C 0.5 časa pod argonom, i zatim je usledilo dodavanje NH4Cl (0.98 g, 1.82 mmol) na temperaturi sredine. Dobijena smeša je mešana na 40°C 16 časova pod argonom. Reakcija je ugašena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je isparavan pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću Prep-TLC, eluiran sa EA/PE (5/1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 840;<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 8.74 (d, J= 8.7 Hz, 1H), 7.88 (d, J= 7.5 Hz, 1H), 7.69 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.05-6.88 (m, 9H), 6.79-6.76 (m, 5H), 6.70-6.67 (m, 2H), 6.52 (brs, 1H), 5.39 (brs, 2H), 4.85-4.61 (m, 1H), 4.25-4.23 (m, 3H), 3.77 (s, 6H), 3.74 (s, 3H), 3.73-3.65 (m, 2H).
Korak E: 4-(3,4-disulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)benzo[d]tiazol-2-karboksimidamid U posudu od 25 mL sa okruglim dnom, sipan je rastvor 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-sulfamoilfenil)benzo[d]tiazol-2-karboksimidamida (0.80 g, 0.10 mmol) u TFA (3 mL). Dobijena smeša je mešana na 80°C 1 čas. Rastvarač je isparavan i ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: Kolona: XBridge BEH130 Prep C18 OBD Kolona 19 × 150 mm 5µM 13nm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol NH4HCO3, Pokretna faza B: MeCN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 15% B 8 min; RT: 5.0 Min; 254/220 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 480.0;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 9.47 (br, 3H), 8.32 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 8.21 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.72 (br, 2H), 7.48 (t, J= 8.0 Hz, 1H), 7.35 (br, 2H), 7.07 (d, J= 7.6 Hz, 1H).
PRIMER 193
4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
1
Korak A: terc-butil (R)-3-((4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor terc-butil (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (300 mg, 0.349 mmol) u dioksanu (6 ml) i vodi (2 ml) dodat je Na2CO3(148 mg, 1.396 mmol) (1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina (141 mg, 0.872 mmol) i Pd(dppf)Cl2(51.0 mg, 0.070 mmol) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zagrevana do 80°C i mešana preko noći. Pošto je reakciona smeša hlađena do temperature sredine, ona je razblažena vodom (15 mL) i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 15 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 30 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 20 g, eluiran sa EtOAc/petroletrom (1/2) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M H]+: 950.
Korak B: (R)-4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-] N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
U rastvor terc-butil (R)-3-((4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilata u DCM (5 ml) dodat je TFA (1 ml) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana 1 čas i zatim koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo ulje. U ulje je dodat TFA (5 ml) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je zagrevan do 80°C i mešan 1 čas. Rastvor je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18 OBD Prep Kolona, 100Å, 5 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 30% B 8 min; 254 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca : LCMS [M H]+: 490;<1>H NMR (300 MHz, DMSO): δ 9.76 (s, 1H), 8.58-5.55 (m, 1H), 8.12-8.09 (m, 1H), 7.81-7.78 (m, 1H), 7.44-7.41 (m, 1H), 6.99 (s, 1H), 4.16-4.11 (m, 1H), 3.41-3.14 (m, 4H), 2.21-1.94 (m, 2H).
1
PRIMER 194
(R)-4-(6-aminopiridin-3-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-terc-butil 3-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat.
U rastvor (R)-terc-butil 3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (250 mg, 0.260 mmol) u dioksanu (2.7 ml)/vodi (0.3 ml) dodati su 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-amin (143 mg, 0.651 mmol), Na2CO3(83 mg, 0.781 mmol) i PdCl2(dppf) (57.2 mg, 0.078 mmol) na temperaturi sredine. Posuda je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je zračena mikrotalasnim zračenjem na 130°C 0.5 časa pod atmosferom azota. Reakciona smeša je ugašena vodom (20 mL) i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 15 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 15 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 15 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela sa CH2Cl2/ MeOH (1:10) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca LCMS [M H]<+>: 926;
Korak B: (R)-4-(6-aminopiridin-3-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid.
U rastvor (R)-terc-butil 3-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (140 mg, 0.151 mmol) u DCM (3 ml) dodat je TFA (1.00 ml) uz mešanje na 0°C. Dobijeni rastvor je zagrevan do sobne temperature i mešan 1 čas. Reakcioni rastvor je filtriran i rastvarač je isparavan pod sniženim pritiskom. U ostatak je dodat TFA (4 mL) i smeša mešana na 80°C 1 čas. Smeša je isparavana pod sniženim pritiskom. Proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Select CSH Prep C18 OBD Kolona, 5µM, 19<∗>150mm; Pokretna faza A: voda sa 10mmol NH4HCO3, Pokretna faza B: MeCN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 35% B u 8 min; 254/220 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M - H]<+>: 464.<1>H NMR (400 MHz, MeOD): δ 8.64 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.03-8.00 (m, 1H), 7.74-7.71 (m, 1H), 7.53
2
(d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.91-6.81 (m, 1H), 4.29-4.23 (m, 1H),3.45-3.40 (m, 2H), 3.33-3.30 (m, 2H), 2.30-2.21 (m, 1H), 2.03-1.98 (m, 1H).
PRIMER 195
(S)-4-(6-aminopiridin-3-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (S)-terc-butil 3-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat.
U rastvor (S)-terc-butil 3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (REFERENTNI PRIMER 72, 2 g, 2.084 mmol) u dioksanu (9 ml)/vodi (3 ml) dodat je 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-amin (0.917 g, 4.17 mmol), Na2CO3(0.663 g, 6.25 mmol) i PdCl2(dppf) (0.305 g, 0.417 mmol) na temperaturi sredine. Posuda je ispražnjena i ponovo napunjena azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod atmosferom azota. Reakciona smeša je ugašena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 100mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela za hromatografiju sa CH2Cl2/ MeOH (1:10) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M H]<+>: 926
Korak B: (S)-4-(6-aminopiridin-3-il)-N-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid.
U rastvor (S)-terc-butil 3-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N, N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (150 mg, 0.162 mmol) u DCM (3 ml) dodat je TFA (1.00 ml) uz mešanje na 0°C. Dobijeni rastvor je zagrevan do sobne temperature i mešan 1 čas. Reakcioni rastvor je filtriran i rastvarač je isparavan pod sniženim pritiskom. U ostatak je dodat TFA (4 ml) i smeša je mešana na 80°C 1 čas. Smeša je isparavana pod sniženim pritiskom. Proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge BEH130 Prep C18 OBD Kolona 19× 150mm 5µM 13nm; Pokretna faza A: voda sa 10mmol NH4HCO3, Pokretna faza B: MeCN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 3% B do 20% B 8 min; 254 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovanei pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M - H]<+>: 464.<1>H
2 1
NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.20 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.76-7.74 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.53 (s, 1H), 6.68-6.67 (m, 1H), 6.15-6.13 (m, 1H), 5.99-5.96 (brs, 2H), 4.08-4.02 (m, 1H), 3.30-3.22 (m, 2H), 3.19-3.10 (m, 2H), 2.08-2.01 (m, 1H), 1.89-1.80 (m, 1H).
PRIMER 196
N1-(2-aminoetil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: terc-butil 2-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etilkarbamat.
U rastvor (S)-terc-butil 3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (250 mg, 0.260 mmol) u dioksanu (2.7ml)/vodi (0.300 ml) dodat je 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-amin (115 mg, 0.521 mmol), Na2CO3(83 mg, 0.781 mmol) i PdCl2(dppf) (38.1 mg, 0.052 mmol) na temperaturi sredine. Posuda je ispražnjena i ponovo napunjena azotom tri puta. Reakciona smeša je zračena mikrotalasnim zračenjem na 80°C 3 časa pod atmosferom azota. Reakciona smeša je ugašena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa etil acetatom (3 x 15 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 15 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 15 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je nanet na kolonu silika gela za hromatografiju sa MeOH / CH2Cl2(1:10) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M H]<+>: 900.
Korak B: N1-(2-aminoetil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-12-disulfonamid
U rastvor terc-butil (2-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamata (150 mg, 0.167 mmol) u DCM (3 ml) dodat je TFA (1.00 ml) uz mešanje na 0°C. Dobijeni rastvor je zagrevan do sobne temperature i mešan 1 čas. Reakcioni rastvor je filtriran i rastvarač je isparavan pod sniženim pritiskom. U ostatak je dodat TFA (4 ml) i smeša je mešana na 80°C 1 čas. Smeša je isparavana pod sniženim pritiskom. Proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona, 100Å, 5 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10mmol NH4HCO3, Pokretna faza B: MeCN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 3% B do 20% B 8 min; 254 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da
2 2
bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M H]<+>: 440.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.18 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.53-7.52 (m, 1H), 6.71-6.68 (m, 1H), 6.15-6.13 (m, 1H), 5.99 (brs, 1H), 3.20-3.17 (m, 2H), 3.94-3.93 (m, 2H).
PRIMER 197
4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((S)-pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: 1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina.
4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (5.16 g, 20.30 mmol), Pd(dppf)Cl2(1.485 g, 2.030 mmol) i kalijum acetat (2.99 g, 30.5 mmol) dodati su u mešanu smešu 4-bromo-1H-benzo[d]imidazola (2 g, 10.15 mmol) u dioksanu (10 ml) i smeša je degazirana 3 puta sa N2. Reakciona smeša je mešana na 80°C preko noći. Dobijena smeša je hlađena do sobne temperature, razblažena etil acetatom (50 mL), isprana fiziološkim rastvorom (3 x 30 mL), sušena preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Rastvarač je isparavan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiranjem sa MeOH/AcOH da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ulje: LCMS [M H]+: 163; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.26 (s, 1H), 8.07-8.04 (m, 1H), 7.91-7.89 (m, 1H), 7.53-7.49 (m, 1H).
Korak B: (S)-terc-butil 3-(4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat.
(S)-terc-butil 3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat (300mg,0.313 mmol), Pd(dppf)Cl2(45.7 mg, 0.063 mmol) i Na2CO3(99 mg, 0.938 mmol) dodati su u mešanu smešu (1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (152 mg, 0.938 mmol) u dioksanu (10 ml) i vodi (2.5 ml). Reakciona smeša je degazirana 3 puta sa N2, i mešana na 80°C 16 časova. Smeša je hlađena, razblažena etil acetatom (30 mL), isprana fiziološkim rastvorom (3 x 20 mL), sušena preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirana i rastvarač je isparavan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiranjem sa EA/PE (30-90%) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M H]<+>: 950.
2
Korak C: (S)-4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid.
(S)-terc-butil 3-(4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat (220 mg, 0.232 mmol) dodat je u DCM (3 ml) i TFA (1 ml) na 0°C i rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 1 čas. Reakcioni rastvor je isparavan pod sniženim pritiskom. U ostatak je dodat TFA (4 ml) i smeša je mešana na 80°C 1 čas. Reakcioni rastvor je isparavan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18 OBD Prep Kolona, 100Å, 5 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol NH4HCO3, Pokretna faza B: MeCN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 30% B 8 min; 254 nm. Sakupljene frakcije su koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M H]+: 490; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.71 (s, 1H), 8.54 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.09 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.79-7.77 (m, 1H), 7.42-7.38 (m, 1H), 6.97-6.94 (m, 1H), 4.17-4.10 (m, 1H), 3.38-3.26 (m, 2H), 3.18-3.11 (m, 2H), 2.14-2.06 (m, 1H), 1.96-1.87 (m, 1H).
PRIMER 198
N1-(3-aminopropil)-4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: 3-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid.
3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid (1 g, 1.142 mmol), Pd(dppf)Cl2(0.167 g, 0.228 mmol) i Na2CO3(0.363 g, 3.43 mmol) dodati su u mešanu smešu (1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (0.555 g, 3.43 mmol) u dioksanu (10 ml) i vodi (2.5 ml). Smeša je ispražnjena i ponovo napunjena 3 puta sa N2, i mešana na 80°C 6 časova. Smeša je hlađena, razblažena etil acetatom (30 mL), isprana fiziološkim rastvorom (3 x 20 mL), sušena (Na2SO4), filtrirana i rastvarač je isparavan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu, eluiran sa EA/PE (30-90%) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca.: LCMS [M H]<+>: 866.
2 4
Korak B: 4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina.
TBAF (1M u THF) (3.00 ml, 3.00 mmol) dodat je u mešanu smešu 3-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (650 mg, 0.750 mmol) u THF (10 ml) na 0°C. Pošto je dobijena smeša mešana na 0°C 1 čas, ona je razblažena etil acetatom (30 mL), isprana zasićenim vodenim rastvorom KHSO4(5 x 30 mL), sušena preko anhidrovanog Na2SO4, zatim je filtrirana. Filtrat je isparavan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koje je korišćeno za sledeći korak direktno bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M H]<+>: 766.
Korak C: terc-butil (3-(4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)karbamat.
terc-butil (3-aminopropil)karbamat (150 mg, 0.862 mmol) i Et3N (0.160 ml, 1.149 mmol) dodati su u mešanu smešu 4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (220 mg, 0.287 mmol) u THF (20 ml) na 0°C. Dobijena smeša je mešana na 0°C 5 minuta i zatim je dodat NCS (77 mg, 0.575 mmol). Pošto je dobijena smeša mešana na 0°C 16 časova, ona je razblažena etil acetatom (40 mL), isprana fiziološkim rastvorom (3 x 30 mL), sušena preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirana. Filtrat je isparavan pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu, eluiran sa EA/PE (0-80%) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M H]+: 938.
Korak D: N1-(3-aminopropil)-4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
terc-butil 3-(4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propilkarbamat (220 mg, 0.235 mmol) dodat je u DCM (3 ml) i TFA (1 ml) na 0°C i rastvor je mešan na sobnoj temp. 1 čas. Reakcioni rastvor je isparavan pod sniženim pritiskom. U ostatak je dodat TFA (4 ml) i smeša je mešana na 80°C 1 čas. Reakcioni rastvor je isparavan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18 OBD Prep Kolona, 100Å, 5 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10mmol NH4HCO3, Pokretna faza B: MeCN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 30% B 8 min; 254 nm. Sakupljene frakcije su koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M H]+: 478; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 9.75 (s, 1H), 8.51 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.82-7.76 (m, 1H), 7.41-7.37 (m, 1H), 6.95-6.93 (m, 1H), 3.14-3.11 (m, 2H), 2.79-2.85 (m, 2H), 1.87-1.80 (m, 2H).
2
PRIMER 199
N1-(2-aminoetil)-4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: terc-butil (2-(4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamat.
U rastvor terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamata (300 mg, 0.321 mmol) u dioksanu (6 ml) i vodi (2 ml) dodat je Na2CO3(1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina i Pd(dppf)Cl2uz mešanje na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zagrevana do 80°C i mešana preko noći. Reakciona smeša je hlađena do temperature sredine, razblažena vodom (10 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 20 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio ostatak. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 20 g, eluiran sa etil acetatom/petroletrom (1/1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M H]<+>: 924.
Korak B: N1-(2-aminoetil)-4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid.
U rastvor terc-butil (2-(4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamata u DCM (2 ml) dodat je TFA (0.5 ml) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Pošto je dobijeni rastvor mešan na sobnoj temperaturi 1 čas, on je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo ulje. U ulje je dodat TFA (2 ml) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je zagrevan do 80°C i mešan 1 čas. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio ostatak. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge BEH130 Prep C18 OBD Kolona 19 × 150 mm 5µM 13nm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 3% B do 25% B 8 min; 254 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M H]+: 464; 1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 9.43 (s, 1H), 8.70 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.10-8.08 (m, 1H), 7.81 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.25-7.24 (m, 1H), 3.46-3.41 (m, 2H), 3.24-3.20 (m, 1H).
2
PRIMER 200
N1-((1r,3r)-3-aminociklobutil)-4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: terc-butil ((1r,3r)-3-(4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)ciklobutil)karbamat.
terc-Butil ((1R,3R)-3-aminociklobutil)karbamat (107 mg, 0.575 mmol) i Et3N (0.160 ml, 1.149 mmol) dodati su u mešanu, hlađenu 0°C smešu 4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (0.19 mmol) u THF (10 ml) i smeša je mešana na 0°C 5 minuta. U dobijenu reakcionu smešu, dodat je NCS (77 mg, 0.575 mmol) i smeša je mešana na 0°C 16 časova. Smeša je hlađena, razblažena etil acetatom (30 mL), isprana fiziološkim rastvorom (3 x 30 mL), sušena preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirana. Rastvarač je isparavan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela Isolute Flash Si; 10 g prethodno pakovana, eluiranjem sa EA/PE (0-80%) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca.: LCMS [M H]<+>: 950.
Korak B: N1-((1r,3r)-3-aminociklobutil)-4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid.
terc-butil((1R,3R)-3-(4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)ciklobutil)karbamat (230 mg, 0.242 mmol) dodat je u DCM (3 ml) i TFA (1 ml) na 0°C i rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 1 čas. Reakcioni rastvor je isparavan pod sniženim pritiskom. U ostatak je dodat TFA (4 ml) i smeša je mešana na 80°C 1 čas. Reakcioni rastvor je isparavan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge BEH130 Prep C18 OBD Kolona 19 × 150 mm 5µM 13nm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol NH4HCO3, Pokretna faza B: MeCN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 3% B do 23% B 8 min; 254 nm. Sakupljene frakcije su koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M H]+: 490;<1>H NMR (400 MHz, MeOD): δ 9.43 (s, 1H), 8.65 (d, J = 8.0
2
Hz, 1H), 8.07 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.56-7.52 (m, 1H), 7.26 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.45-4.41 (m, 1H), 3.85-3.83 (m, 1H), 2.59-2.47 (m, 4H).
PRIMER 201
(S)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: terc-Butil (S)-(2-amino-3-hidroksipropil)karbamat
U rastvor (S)-2-amino-3-((terc-butoksikarbonil)amino)propionske kiseline (888 mg, 4.35 mmol) u THF (1.67E+04 µl), dodat je rastvor BH3THF (13 mL, 13.04 mmol). Dobijena smeša je mešana na 70°C 1 čas i zatim hlađena do sobne temp. Reakcija je ugašena ukapavanjem MeOH i smeša je mešana sa CELIT-om i zatim filtrirana. Filtrati su koncentrovani do sušenja. Ostatak je ponovo rastvoren u MeOH, propušten kroz Agilent scx jono-izmenjivački kertridž. Kertridž je ispran amonijačnim rastvorom MeOH. Eluenti su koncentrovani da bi se dobilo ulje, koje je liofilizovano iz CH3CN/vode da bi se dobio terc-butil (S)-(2-amino-3-hidroksipropil)karbamat.
Korak B: terc-Butil (S)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat i terc-butil (S)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat
2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina i 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina (4.25 g, 5.48 mmol) su rastvoreni u THF (54.8 ml) i hlađeni do 0°C. NCS (1.464 g, 10.96 mmol) je dodat kao čvrsta supstanca. Smeša je održavana na 0°C 1 čas. Reakciona smeša je korišćena direktno za sledeći korak. U 18 mL gore navedene reakcione smeše dodat je (S)-terc-butil (2-amino-3-hidroksipropil)karbamat (381 mg, 2.002 mmol) i DIEA (699 µl, 4.00 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod N212 časova. Reakciona smeša je koncentrovana i ponovo rastvorena u MeOH, i prečišćena hromatografijom na koloni (0-70% EtOAc/heksan) da bi se dobila jedinjenja iz naslova. LC-MS [M+H]+: 964.5.
Korak C: terc-Butil (S)-(2-((4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-
2
hidroksipropil)karbamat i terc-butil (S)-(2-((4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat
(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)boronska kiselina (127 mg, 0.656 mmol), terc-butil ((S)-2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat i terc-butil (S)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat (527 mg, 0.547 mmol), natrijum karbonat (116 mg, 1.094 mmol), Pd(dppf)Cl2(40.0 mg, 0.055 mmol) su sipani u reakcionu bočicu. Dodati su dioksan (4101 µl) i voda (1367 µl). Reakciona smeša je degazirana i zagrevana na 80°C 12 časova. Reakciona smeša je prečišćena hromatografijom na koloni silika gela (0-15% meOH/EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje iz naslovas. LC-MS [M+H]+: 986.7.
Korak D: (S)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
(S)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid je pripremljen na sličan način sintezi 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida (PRIMER 161, Korak C) od terc-butil (S)-(2-((4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata i terc-butil (S)-(2-((4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata. LC-MS [M+H]+: 526.4.
PRIMER 202
(R)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
(R)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid je pripremljen na način analogan (S)-N<1>-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamidu (PRIMER
2
201) upotrebom (R)-2-amino-3-((terc-butoksikarbonil)amino)propionske kiseline. LC-MS [M+H]+: 526.4.
PRIMER 203
4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-N1-(2-(2-aminoetoksi)etil)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način PRIMERIMA 85-127 upotrebom tercbutil (2-(2-aminoetoksi)etil)karbamata. LC-MS [M+H]+: 540.
PRIMER 204
2-amino-N-(2-aminoetil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-5'-sulfamoil-6'-(2H-tetrazol-5-il)bifenil-3-karboksamid
Korak A: metil 2-amino-3-(4,4,5,5-tetrametil-1.3.2-dioksaborolan-2-il)benzoat
U rastvor metil 2-amino-3-bromobenzoata (15 g, 65.2 mmol) u dioksanu (150 ml) dodat je PCy3katalizator druge generacije (11.55 g, 19.56 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (33.1 g, 130 mmol) i kalijum acetat (19.20 g, 196 mmol) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Smeša je ispražnjena i ponovo napunjena azotom 3 tri puta i mešana na 80°C 16 časova. Reakciona smeša je hlađena do temperature sredine, razblažena vodom (200 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 500 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 120 g, eluiran sa EtOAc / petroletrom (1/20) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao ulje: 1H NMR (300 MHz, CDCl3): δ 7.97 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 6.3 Hz, 1H), 6.58-6.53 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 1.34 (s, 12H).
21
Korak B: metil 2-amino-5'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-(tercbutoksikarbonilamino)etil)sulfamoil)-6'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)bifenil-3-karboksilat
U rastvor terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamata (850 mg, 0.910 mmol) u dioksanu (20 ml) i vodi (7 ml) dodat je Pd(PPh3)4(210 mg, 0.182 mmol), metil 2-amino-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoat (757 mg, 2.73 mmol) i Na2CO3(289 mg, 2.73 mmol) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zagrevana do 80°C i mešana preko noći. Reakciona smeša je hlađena do temperature sredine, razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa etil acetatom/petroletrom (1 / 1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M H]<+>: 957.
Korak C: 2-amino-5'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-(tercbutoksikarbonilamino)etil)sulfamoil)-6'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)bifenil-3-karboksilna kiselina
U rastvor metil 2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilata (600 mg, 0.627 mmol) u THF (3.00 ml) i MeOH (3 ml) dodat je natrijum hidroksid uz mešanje na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je zagrevan do sobne temperature i mešan preko noći. pH vrednost aktivnog rastvora je podešena do 4 sa hlorovodoničnom kiselinom (20 %). Smeša je filtrirana i filtrat je ispran vodom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca, koje je korišćeno u sledećoj reakciji bez dodatnog prečišćavanja. LCMS [M H]+: 943.
Korak D: terc-butil N-[2-({[(4-{2-amino-3-[(2-{[(terc-butoksi)karbonil]amino}etil) karbamoil]fenil}-2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-3-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-{3}-oksidan]sulfinil}amino)etil]karbamat
U rastvor 2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilne kiseline (500 mg, 0.530 mmol), HATU (302 mg, 0.795 mmol) i terc-butil (2-aminoetil)karbamata (340 mg, 2.121 mmol) u DMF (2 ml) dodat je DIEA (0.139 ml, 0.795 mmol) uz mešanje na 0°C. Dobijeni rastvor je degaziran azotom 3 puta i zatim je zagrevan do 0°C i mešan 4 časa. Reakcioni rastvor je hlađen do temperature sredine, razblažen vodom (5 mL) i ekstrahovan etil acetatom (3 x 10 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 20 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom i ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa EtOAc/izoheksanom (1/1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 1085.
Korak E: 2-amino-N-(2-aminoetil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
U rastvor terc-butil N-[2-({[(4-{2-amino-3-[(2-{[(terc-butoksi)karbonil]amino}etil) karbamoil]fenil}-2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-3-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentan-3-il]fenil)-{3}-oksidan]sulfinil}amino)etil]karbamata (300 mg, 0.276 mmol) u DCM (5 ml) dodat je TFA (1 ml) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana 1 čas. Rastvor je koncentrovan pod vakuumom. U ostatak je dodat TFA (5 ml) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je zagrevan do 80°C i mešan 1 čas. Rastvor je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio ostatak. Proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge Prep C18 OBD Kolona 19 x 250 mm 10µM; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol NH4HCO3, Pokretna faza B: MeCN; Stopa protoka: 25 mL/min; Gradijent: 5% B do 30% B 8 min; 254/220 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LCMS [M H]+: 525; 1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.64 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.39-6.97 (m, 1H), 3.73-3.69 (m, 2H), 3.68-3.66 (m, 2H), 3.21-3.18 (m, 2H).
PRIMER 205
3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-6-(((3R,4R)-3-amino-4-fluoropiperidin-1-il)sulfonil)-2-(2H-tetrazol-5-il)benzensulfonamid
Korak A: terc-butil (4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(((3R,4R)-3-((tercbutoksikarbonil)amino)-4-fluoropiperidin-1-il)sulfonil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamat
Trietilamin (0.15 mL, 1.02 mmol), terc-butil ((3R,4R)-4-fluoropiperidin-3-il)karbamat (149 mg, 0.681 mmol) i 1-hloropirolidin-2,5-dion (91 mg, 0.681 mmol) dodati su u mešani, hlađeni 0°C rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (300 mg, 0.341 mmol) u DCM (3 mL) i smeša je mešana na 0°C 30 minuta. Smeša je razblažena vodom (30 mL) i ekstrahovana sa DCM (2 x 30 mL). Kombinovane organske frakcije su isprane fiziološkim rastvorom, sušen (MgSO4), filtriran i rastvarač je isparavan pod sniženim pritiskom. LC/MS [M+H]+: 1097.
Korak B: 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-6-(((3R,4R)-3-amino-4-fluoropiperidin-1-il)sulfonil)-2-(2H-tetrazol-5-il)benzensulfonamid
U terc-butil (4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(((3R,4R)-3-((tercbutoksikarbonil)amino)-4-fluoropiperidin-1-il)sulfonil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamat (222 mg, 0.202 mmol) u CH2Cl2(2 mL) na sobnoj temperaturi dodat je anizol (0.2 mL, 1.83 mmol) i TFA (2 mL, 28.3 mmol). Reakciona smeša je mešana 2 časa. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ponovo rastvoren u toluenu i MeOH, i ponovo koncentrovan. Ostatak je postavljen na visoki vakuum 4 časa i ponovo rastvoren u anizolu (0.2 mL) i TFA (2 mL) na sobnoj temperaturi i mešan na 80°C 2 časa. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne RP-HPLC (C-18), eluiranjem sa acetonitrilom/vodom 0.1% NH4OH da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca posle liofilizacije preko noći. LC/MS [M+H]+: 537.
PRIMER 206
4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(morfolin-3-ilmetil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na način analogan onome opisanom za 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-6-(((3R,4R)-3-amino-4-fluoropiperidin-1-il)sulfonil)-2-(2H-tetrazol-5-il)benzensulfonamid, počevši od 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-
21
il)benzensulfinske kiseline i komercijalno dostupnog terc-butil 3-(aminometil)morfolin-4-karboksilata. LC/MS [M+H]+: 535
PRIMER 207
4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(azetidin-2-ilmetil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na način analogan onome opisanom za 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-6-(((3R,4R)-3-amino-4-fluoropiperidin-1-il)sulfonil)-2-(2H-tetrazol-5-il)benzensulfonamid, počevši od 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline i komercijalno dostupnog terc-butil 2-(aminometil)azetidin-1-karboksilata. LC/MS [M+H]+: 505.
PRIMER 208
(S)-3-amino-N-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonil)butanamid
Korak A: terc-butil (4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-sulfamoilfenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamat
Trietilamin (0.351 g, 3.47 mmol) i amonijak (0.496 mL, 3.47 mmol) su dodati u mešani rastvor početnog materijala 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (1.02 g, 1.158 mmol) u DCM (10 mL) na 0°C i dodat je 1-hloropirolidin-2,5-dion (0.340 g, 2.55 mmol). Smeša je mešana na 0°C 1 čas. Smeša je razblažena vodom (30 mL) i ekstrahovana sa DCM (2 x 25 mL). Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 24 g, eluiranjem heptanom/etanolom od 0 - 40% 30 min da bi se dobio željeni proizvod kao čvrsta supstanca posle koncentrovanja. LC/MS [M+H]+: 896.
Korak B: terc-butil (S)-(4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(N-(3-((tercbutoksikarbonil)amino)butanoil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamat
N1-((etilimino)metilen)-N3,N3-dimetilpropan-1,3-diamine hidrohlorid (141 mg, 0.738 mmol) i N,N-dimetilpiridin-4-amin (30.1 mg, 0.246 mmol) dodati su u mešani rastvor (S)-3-((tercbutoksikarbonil)amino)buterne kiseline (50 mg, 0.246 mmol) u dimetilformamidu (2 mL) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na 60°C 1 čas. Smeša je hlađena do sobne temperature. terc-butil (4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-sulfamoilfenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamat (110 mg, 0.123 mmol) je dodat u reakciju i mešan 15 minuta pre dodavanja DBU u suvom THF. Reakcija je mešana preko noći. Smeša je razblažena vodom (30 mL) i smeša je ekstrahovana etil acetatom (2 x 30 mL). Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 12 g, eluiranjem sa EtOAc/izoheksanom od 0 - 100 % 30 min da bi se dobio željeni proizvod kao čvrsta supstanca posle koncentrovanja. LC/MS [M+H]+: 1081.
Korak C: (S)-3-amino-N-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazo1-5-il)fenil)sulfonil)butanamid
U terc-butil (S)-(4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(N-(3-((tercbutoksikarbonil)amino)butanoil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)karbamat (112 mg, 0.104 mmol) u CH2Cl2 (2 mL) na sobnoj temperaturi dodat je anizol (0.2 mL, 1.83 mmol) i TFA (2 mL, 26 mmol). Reakciona smeša je mešana 2 časa. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ponovo rastvoren u toluenu i MeOH, i ponovo koncentrovan. Ostatak je postavljen ba visoki vakuum 4 časa i ponovo rastvoren u anizolu (0.2 mL) i TFA (2 mL) na sobnoj temperaturi i mešan na 80°C 2 časa. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne RP-HPLC (C-18), eluiranjem acetonitrilom/vodom 0.1% NH4OH da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca posle liofilizacije preko noći. LC/MS [M+H]+: 521. PRIMER 209
(R)-4-(2-aminopiridin-3-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
21
Korak A: terc-butil (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
TEA (0.100 mL, 0.720 mmol) i (R)-(+)-1-boc-3-aminopirolidin (0.122 mL, 0.720 mmol) dodati su u mešani rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline, (202 mg, 0.240 mmol) u DCM (2 mL) na 0°C i smeša je mešana na 0°C 30 minuta. Smeša je razblažena vodom (40 mL), ekstrahovana etil acetatom (2 x 50 mL). Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 12 g, eluiranjem heptanom/etanolom da bi se dobio željeni proizvod kao pena posle koncentrovanja. LC/MS [M+H]+: 1026.
Korak B: (R)-4-(2-aminopiridin-3-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il(benzen-1,2-disulfonamid
U terc-butil (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat (220 mg, 0.214 mmol) u CH2Cl2 (2 mL) na sobnoj temperaturi dodat je anizol (0.2 mL, 1.83 mmol) i TFA (2 mL, 28.3 mmol). Reakciona smeša je mešana 2 časa. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je ponovo rastvoren u toluenu i MeOH, i ponovo koncentrovan. Ostatak je ponovo rastvoren u anizolu (0.2 mL) i TFA (2 mL) na sobnoj temperaturi i mešan na 80°C 2 časa. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne RP-HPLC (C-18), eluiranjem acetonitrilom/vodom 0.1% NH4OH da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca posle liofilizacije preko noći. LC/MS [M+H]+: 466.
PRIMERI 210-216 u donjoj Tabeli su pripremljeni na analogan način onome koji je opisan za (R)-4-(2-aminopiridin-3-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid (PRIMER 209) upotrebom 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline, pripremljen kao što je opisano u prethodnom tekstu i naznačenih na desnoj strani
21
zaštićenih amina, koji su pripremljeni kao što je ovde opisano, ili koji su dostupni iz komercijalnih izvora.
21
PRIMER 217
N1-(2-(1H-imidazol-4-il)etil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: terc-butil (5-(4-(N-(2-(IH-imidazol-4-il)etil)sulfamoil)-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)piridin-2-il)karbamat Trietilamin (0.15 ml, 1.09 mmol), 2-(1H-imidazol-4-il)etanamin (81 mg, 0.732 mmol) i DMAP (44.7 mg, 0.366 mmol) dodati su u mešani rastvor početnog materijala 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(6-((terc-butoksikarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (308 mg, 0.366 mmol) u CH2Cl2na 0°C. 1-hloropirolidin-2,5-dion (107 mg, 0.805 mmol) je zatim dodat i smeša je mešana na 0°C 45 minuta. Smeša je razblažena vodom (40 mL), ekstrahovana sa EtOAc (2 x 30 mL). Kombinovane organske faze su isprane fiziološkim rastvorom, sušene (MgSO4) i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 12g, eluiranjem heptanom/etanolom, 0 - 60% 40 minuta da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 951.
21
Korak B: N1-(2-(1H-imidazol-4-il)etil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-N2-(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
1,4-dimetoksibenzen (129 mg, 0.936 mmol) i TFA (2 mL, 26.0 mmol) dodati su u mešani rastvor terc-butil (5-(4-(N-(2-(1H-imidazol-4-il)etil)sulfamoil)-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)piridin-2-il)karbamata (89 mg, 0.094 mmol) u CH2Cl2(2 mL) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Smeša je koncentrovana. Ostatak je korišćen u datom stanju za sledeći korak. LC/MS [M+H]+: 731.
Korak C: N1-(2-(1H-imidazol-4-il)etil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
1,4-dimetoksibenzen (111 mg, 0.804 mmol) i TFA (3 mL, 38.9 mmol) dodati su u mešani rastvor N1-(2-(1H-imidazol-4-il)etil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-N2-(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida (68.4 mg, 0.094 mmol) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na 70°C 2 časa. Smeša je koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću preparative RP-HPLC (C-18), eluiranjem acetonitrilom/vodom 0.05% NH3da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 491.
PRIMER 218
N1-(2-(1H-imidazol-2-il)etil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način onome opisanom za N<1>-(2-(1H-imidazol-4-il)etil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid od 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(6-((terc-butoksikarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline. Odgovarajući desni amin, 2-(1H-imidazol-2-il)etan-1-amin je dostupan iz komercijalnih izvora. LC/MS [M+H]+: 491.
PRIMER 219
(R)-4-(5-aminopiridin-3-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
21
Korak A. terc-butil (R)-3-((4-(5-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
Smeša (R)-terc-butil 3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (588 mg, 0.613 mmol), 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-3-amina (337 mg, 1.531 mmol), Na2CO3(195 mg, 1.838 mmol) i 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen-paladijum(ii)dihlorid dihlorometan kompleksa (100 mg, 0.123 mmol) u dioksanu (3 mL) i vodi (0.7 mL) je degazirana sa N210 minuta. Dobijena smeša je zagrevana na 95°C 16 časova. Ova reakcija je filtrirana i ekstrahovana sa EtOAc (2 × 50 mL), organska faza je sušena (MgSO4), i koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 12 g, eluiranjem heptanom/etanolom, 0 - 50% 25 minuta da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LC/MS [M+H]+: 926.
Korak B. (R)-4-(5-aminopiridin-3-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(pirolidin-3-il)benzen-1,2-disulfonamid
Anizol (0.3 mL, 2.75 mmol) i TFA (3 mL, 38.9 mmol) su dodati u mešani rastvor (R)-terc-butil 3-(4-(5-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (377 mg, 0.407 mmol) u CH2Cl2(3 mL) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 90 minuta. Smeša je koncentrovana i korišćena u datom stanju. LC/MS [M+H]+: 585.
Korak C. (R)-4-(5-aminopiridin-3-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazo1-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Anizol (0.3 mL, 2.75 mmol) i TFA (4 mL, 0.406 mmol) dodati su u mešani rastvor (R)-4-(5-aminopiridin-3-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(pirolidin-3-il)benzen-1,2-disulfonamida (238 mg, 0.406 mmol) u TFA na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na 80°C 90 minuta. Smeša je koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne RP-HPLC (C-18), eluiranjem acetonitrilom/vodom 0.05% NH3, 0 - 30% da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca posle liofilizacije preko noći. LC/MS [M+H]+: 466.
PRIMER 220
(R)-4-(2-(piperazin-1-il)piridin-3-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
22
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na analogan način onome opisanom za (R)-4-(5-aminopiridin-3-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid od (R)-tercbutil 3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata. Odgovarajuća leva boronska kiselina, (2-(piperazin-1-il)piridin-3-il)boronska kiselina je dostupna iz komercijalnih izvora. LC/MS [M+H]+: 535. PRIMER 221
(R)-N1-(1-aminopropan-2-il)-4-(5-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A. terc-butil (R)-(2-((4-(5-aminopyiidin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)karbamat
(R)-terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)karbamat (REFERENTNI PRIMER 69, 315 mg, 0.332 mmol), 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-3-amin (146 mg, 0.665 mmol), Na2CO3(106 mg, 0.997 mmol), 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen-paladijum(ii)dihlorid dihlorometan kompleks (54.3 mg, 0.066 mmol) dodati su u posudu od 100 mL sa okruglim dnom u dioksanu (2 mL) i vodi (0.5 mL) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na 90°C preko noći. Smeša je filtrirana, isprana sa EtOAc, ekstrahovana sa EtOAc (2 x 50 mL). Kombinovane organske frakcije su isprane fiziološkim rastvorom (60 mL), sušene (MgSO4), filtrirane i rastvarač je isparavan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 12g, eluiranjem heptanom/etanolom, 0 - 50% 30 minuta da bi se dobio proizvod posle koncentrovanja. LC/MS [M+H]+: 914.
Korak B. (R)-N1-(1-aminopropan-2-il)-4-(5-aminopiridin-3-il)-N2-(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Anizol (0.2 mL, 1.831 mmol) i TFA (2 mL, 26.0 mmol) dodati su u mešani rastvor početnog materijala (R)-terc-butil (2-(4-(5-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)karbamata (240 mg, 0.263 mmol) u CH2Cl2(2 mL) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Smeša je koncentrovana i korišćena u datom stanju za sledeći korak. LC/MS [M+H]+: 694.
Korak C. (R)-N1-(1-aminopropan-2-il)-4-(5-aminopiridin-3 -il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Anizol (0.2 mL, 1.831 mmol) i TFA (2 mL, 26.0 mmol) dodati su u mešani rastvor (R)-N1-(1-aminopropan-2-il)-4-(5-aminopiridin-3-il)-N2-(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida (182 mg, 0.263 mmol) u CH2Cl2na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Smeša je koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću preparative RP-HPLC (C-18), eluiranjem acetonitrilom/vodom 0.05% NH3, 0- 30% 10 minuta da bi se dobio proizvod kao čvrsta supstanca. LC/MS [M+H]+: 454.
PRIMER 222
(S)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-4-(3-aminopiridin-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A. terc-butil (S)-(3-((4-(3-aminopiridin-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamat terc-butil 2-(4-(4,4,5,5-tetrametil-l,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-3-il)hydrazinekarboksilat (250 mg, 0.747 mmol) i natrijum karbonat (119 mg, 1.120 mmol) i Pd(dppf)Cl2(61.0 mg, 0.075 mmol) dodati su u mešani rastvor (S)-terc-butil (3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (REFERENTNI PRIMER 75, 360 mg, 0.373 mmol) u dioksanu (2 mL) i vodi (0.5 mL) na sobnoj temperaturi i smeša je degazirana 10 minuta i zatim mešana na 90°C preko noći. Smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 50 mL). Spojene organske faze su isprane fiziološkim rastvorom, sušene (MgSO4) i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 12 g, eluiranjem heptanom/etanolom, 0 - 90% 30 min da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 930.
Korak B. (S)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-4-(3-aminopiridin-4-il)-N2-(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
1,4-dimetoksibenzen (322 mg, 2.330 mmol) i TFA (2 mL, 26.0 mmol) dodati su u mešani rastvor terc-butil (S)-(3-((4-(3-aminopiridin-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (240 mg, 0.233 mmol) u CH2Cl2(2 mL) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 90 minuta. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je korišćen u datom stanju u sledećem koraku. LC/MS [M+H]+: 710.
Korak C.(S)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-4-(3-aminopvridin-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-12-disulfonamid
1,4-dimetoksibenzen (321 mg, 2.323 mmol) i TFA (2 mL, 26.0 mmol) dodati su u mešani rastvor (S)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-4-(3-aminopiridin-4-il)-N2-(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida (165 mg, 0.232 mmol) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na 90°C 90 min. Smeša je koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne reverzno-fazne HPLC (C-18), eluiranjem acetonitrilom/vodom 0.05% NH3, 0 - 30% 10 minuta da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 470.
PRIMER 223
(S)-4-(4-aminopiridin-3-il)-N1-(2,3-diaminopropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A. benzil terc-butil (3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(4-((tercbutoksikarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-1,2-diil)(S)-dikarbamat
U (4-((terc-butoksikarbonil)amino)piridin-3-il)boronsku kiselinu (130 mg, 0.547 mmol) i (S)-benzil terc-butil (3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,2-diil)dikarbamat (300 mg, 0.273 mmol), Na2CO3(87 mg, 0.820 mmol) i Pd(dppf)Cl2(44.7 mg, 0.055 mmol) dodati su dioksan (2.4 mL) i voda (0.6 mL) na sobnoj temperaturi i smeša je degazirana 10 minuta i mešana na 90°C preko noći. Smeša je razblažena vodom (50 mL), ekstrahovana sa EtOAc (2 x 50 mL). Spojene organske faze su isprane fiziološkim rastvorom, sušene (MgSO4) i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 12g, eluiranjem heptanom/etanolom, 0 - 30% 30 min da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 1163.
Korak B. (S)-4-(4-aminopiridin-3-il)-N1-(2,3-diaminopropil)-N2,N2-bis(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
22
1,4-dimetoksibenzen (166 mg, 1.203 mmol) i TFA (2 mL, 26.0 mmol) dodati su u mešani rastvor benzil terc-butil (3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(4-((tercbutoksikarbonil)amino)piridin-3-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-1,2-diil)(S)-dikarbamata (140 mg, 0.120 mmol) u CH2Cl2(2 mL) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 90 minuta. Smeša je koncentrovana i korišćena u datom stanju. LC/MS [M+H]+: 829.
Korak C. (S)-4-(4-aminopiridin-3-il)-N1-(2,3-diaminopropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
1,4-dimetoksibenzen (167 mg, 1.206 mmol) i TFA (2.5 mL, 32.4 mmol) dodati su u mešani rastvor početnog materijala (S)-4-(4-aminopiridin-3-il)-N1-(2,3-diaminopropil)-N2,N2-bis(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida, od (100 mg, 0.121 mmol) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na 80°C preko noći. Smeša je koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne reverzno-fazne HPLC (C-18), eluiranjem acetonitrilom/vodom 0.05% NH3, 0-25% 11 minuta da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 469.
PRIMER 224
N4-(2-aminoetil)-2-(2H-tetrazol-5-il)-3'(1H-1,2,4-triazol-3-il)-[1,1'-bifenil]-3,4-disulfonamid
Korak A: (3-(1H-1,2,4-triazol-3-il)fenil)boronska kiselina
Kalijum acetat (1.314 g, 13.39 mmol) i PCy3 Pd G2 (0.395 g, 0.669 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolan) (2.267 g, 8.93 mmol), dodati su u mešani rastvor 3-(3-bromofenil)-1H-1,2,4-triazola (1.0 g, 4.46 mmol) u dioksanu (10 mL) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na 90°C preko noći. Smeša je filtrirana kroz čep od CELIT-a, razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3 x 100 mL). Ostatak je prečišćen pomoću reverzno-fazne hromatografije nakoloni silika gela 86 g C18, eluiranjem acetonitrilom/vodom, 0 - 50% 45 minuta da bi se dobio proizvod kao čvrsta supstanca posle koncentrovanja. LC/MS [M+H]+: 190.
Korak B: N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenal)-2H-tetrazol-5-il)-3'-(1H-1,2,4-triazol-3-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-sulfonamid
Smeša 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (2.0 g, 2.283 mmol), (3-(1H-1,2,4-triazol-3-il)fenil)boronske kiseline (0.777 g, 4.11 mmol), Na2CO3(0.726 g, 6.85 mmol) i 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen-paladijum(ii)dihlorid dihlorometan kompleksa (0.280 g, 0.343 mmol) u dioksanu (20 mL) i vodi (5 mL) degazirana je sa N25 minuta. Dobijena smeša je zagrevana na 95°C 16 časova. Reakciona smeša je filtrirana i ekstrahovana sa EtOAc (2 × 100 mL). Kombinovane organske faze su sušene (MgSO4), i koncentrovane. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 120 g, eluiranjem sa EtOAc/izoheksanom, 0 - 100% 45 minuta da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca. LC/MS [M+H]+: 893.
Korak C: 3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3'-(1H-1,2,4-triazol-3-il)-[1,1'-bifenil]-4-sulfinska kiselina
TBAF (0.719 mL, 0.719 mmol) dodat je u mešani rastvor početnog materijala N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3'-(1H-1,2,4-triazol-3-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-sulfonamida (292 mg, 0.327 mmol) u THF (4 mL) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 45 min. Smeša je razblažena sa AcOEt (30 mL), isprana vodenim rastvorom KHSO4(2 × 30 mL), sušena preko MgSO4, i koncentrovana. LC/MS [M+H]+: 793.
Korak D: terc-butvl (2-((3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3'-(1H-1,2,4-triazol-3-il)-[1,1'-bifenil])-4-sulfonamido)etil)karbamat
terc-butil (2-aminoetil)karbamat (100 mg, 0.626 mmol) i TEA (0.131 mL, 0.938 mmol) i NCS (92 mg, 0.688 mmol) dodati su u mešani rastvor 3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3'-(1H-1,2,4-triazol-3-il)-[1,1'-bifenil]-4-sulfinske kiseline (248 mg, 0.313 mmol) u DCM (2 mL) na 0°C. Smeša je mešana na 0°C 45 minuta, razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 x 50 mL). Spojene organske faze su sušene (MgSO4) i koncentrovane. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela 12 g, eluiranjem heptanom/etanolom, 0 - 60% 45 minuta da bi se dobio proizvod iz naslova kao čvrsta supstanca. LC/MS [M+H]+: 951.
Korak E: N4-(2-aminoetil)-N3-(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3'-(1H-1,2,4-triazol-3-il)-[1,1'-bifenil]-3,4-disulfonamid
Anizol (0.276 mL, 2.52 mmol) i TFA (2 mL, 26.0 mmol) dodati su u mešani rastvor terc-butil (2-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3'-(1H-1,2,4-triazol-3-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)karbamata (240 mg, 0.252 mmol) u DCM (2 mL) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakciona smeša je koncentrovana. LC/MS [M+H]+: 731.
22
Korak F: N4-(2-aminoetil)-2-(2H-tetrazol-5-il)-3'-(1H-1,2,4-triazol-3-il)-[1,1'-bifenil]-3,4-disulfonamid
Anizol (0.3 mL, 2.75 mmol) i TFA (3 mL, 38.9 mmol) dodati su u N4-(2-aminoetil)-N3-(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3'-(1H-1,2,4-triazol-3-il)-[1,1'-bifenil]-3,4-disulfonamid (184 mg, 0.252 mmol) na sobnoj temperaturi i smeša je mešana na 80°C 90 min. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak je prečišćen pomoću preparativne reverznofazne HPLC (C-18) na koloni, eluiranjem acetonitrilom/vodom 0.05% NH3, 3 - 40% da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca posle liofilizacije preko noći. LC/MS [M+H]+: 491.
PRIMERI 225-231 u donjoj Tabeli su pripremljeni na analog način onome koji je opisan za N<4>-(2-aminoetil)-2-(2H-tetrazol-5-il)-3'-(1H-1,2,4-triazol-3-il)-[1,1'-bifenil]-3,4-disulfonamid počevši od 3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3'-(1H-1,2,4-triazol-3-il)-[1,1'-bifenil]-4-sulfinske kiseline (PRIMER 224, Korak C) ili 3'-(5-amino-1H-1,2,4-triazol-3-il)-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-sulfinske kiseline, pripremljen kao što je ovde opisano. Naznačeni desni zaštićeni amini su pripremljeni kao što je ovde opisano, ili su dostupni iz komercijalnih izvora.
22
PRIMER 232
(R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(1-metilpirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-45-il)benzen-1,2-disulfonamid
22
Korak A: (R)-4-jodo-N2,N2-bis(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(1-metilpirolidin-3-il)benzen-1,2-disulfonamid i (R)-4-jodo-N2,N2-bis(4-metoksibenzil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-N1-(1-metilpirolidin-3-il)benzen-1,2-disulfonamid U rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline i 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (3 g, 3.87 mmol) u THF (38.7 mL) dodat je (R)-1-metilpirolidin-3-amin (komercijalno dostupan iz Synnovator) (0.775 g, 7.74 mmol), trietilamin (1.078 mL, 7.74 mmol) i NCS (1.033 g, 7.74 mmol) redom na 0°C pod azotom. Smeša je mešana na istoj temperaturi 30 minuta, i praćena pomoću LCMS. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, i isprana rastvorom NaHCO3i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je sušen preko MgSO4, isparavan i sirovi proizvod je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela eluiranjem sa 0-20% MeOH/DCM da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 874.50.
Korak B: (R)-4-(2-Amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N2,N2-bis(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(1-metilpirolidin-3-il)benzen-1,2-disulfonamid i (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N2,N2-bis(4-metoksibenzil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-N1-(1-metilpirolidin-3-il)benzen-1,2-disulfonamid
Posuda je napunjena (R)-4-jodo-N2 ,N2-bis(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(1-metilpirolidin-3-il)benzen-1,2-disulfonamidom i (R)-4-jodo-N2 ,N2-bis(4-metoksibenzil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-N1-(1-metilpirolidin-3-il)benzen-1,2-disulfonamidom (2.2 g, 2.52 mmol), (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronskom kiselinom (0.891 g, 5.04 mmol), Na2CO3(0.801 g, 7.55 mmol) i PdCl2(dppf) (0.184 g, 0.252 mmol). Bočica je hermetički zatvorena, degazirana i napunjena dioksanom (21 mL) i vodom (4.2 mL). Dobijena smeša je zagrevana preko noći na 80°C. Reakciona smeša je filtrirana preko CELIT-a da bi se uklonio paladijum. Filtrat je koncentrovan i prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom (0-10)% MeOH/DCM kao pokretna faza da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 879.58.
Korak C: (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(1-metilpirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
22
U rastvor (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N2 ,N2-bis(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(1-metilpirolidin-3-il)benzen-1,2-disulfonamida i (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N2 ,N2-bis(4-metoksibenzil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-N1-(1-metilpirolidin-3-il)benzen-1,2-disulfonamida (250 mg, 0.284 mmol) u DCM (2.84 mL) dodat je TFA (2.19 mL, 28.4 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je mešana na 80°C 1.0 čas. Posle uklanjanja isparljivih materija, ostatak je prečišćen pomoću reverznofazne HPLC (3-40% MeCN/voda kao eluent, 0.1% TFA kao aditiv) da bi se dobila TFA so. TFA so je tretirana sa HCl u MeOH da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao HCl so. LC/MS [M+H]+: 519.47.
PRIMER 233
(R)-3-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-1, 1-dimetilpirolidin-1-ijum hlorid
Korak A: (R)-3-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-1,1-dimetilpirolidin-1-ijum i (R)-3-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-1,1-dimetilpirolidin-1-ijum hlorid
U rastvor (R)-4-(2-Amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N2 ,N2-bis(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(1-metilpirolidin-3-il)benzen-1,2-disulfonamida i (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N2 ,N2-bis(4-metoksibenzil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-N1-(1-metilpirolidin-3-il)benzen-1,2-disulfonamida (PRIMER 232, Korak B; 250 mg, 0.284 mmol) u acetonu (2.84 mL) dodat je K2CO3(118 mg, 0.853 mmol) i Mel (0.021 mL, 0.341 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 90 minuta. Posle filtracije i koncentrovanja ostatak je prečišćen na RP-HPLC upotrebom 10-100% acetonitrila/vode (0.05% TFA kao modifikator) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M]+: 893.75.
Korak B: (R)-3-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-1,1-dimetilpirolidin-1-ijum
Jedinjenje iz naslova je dobijen na sličan način onome iz PRIMERA 232, Korak C počevši od (R)-3-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-
22
metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-1,1-dimetilpirolidin-1-ijum trifluoroacetata i (R)-3-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-1,1-dimetilpirolidin-1-ijum trifluoroactetata osim što je finalno jedinjenje tretirano viškom HCl u MeOH (1.25 M) i zatim koncentrovano. LC/MS [M]+: 533.24.
PRIMER 234
(R)-4-(2-amino-6-jodo-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
U rastvor (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida (200 mg, 0.396 mmol) u trifluorometansulfonsku kiselinu (1.76 mL, 19.82 mmol) dodat je NIS (134 mg, 0.595 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na 0°C 30 minuta. Upotrebom jono-izmenjivačkog kertridža uklonjena je trifluorometansulfonska kiselina, čime se dobija sirovi materijal pre HPLC prečišćavanja. Posle uklanjanja isparljivih materija, ostatak je prečišćen pomoću reverzno-fazne HPLC (3-50% MeCN/voda kao eluent, 0.1% NH4OH kao aditiv) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 631.16.
PRIMER 23 5
(R)-4-(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-4-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: terc-butil (R)-3-((4-(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat i terc-butil (R)-3-((4-(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
2
Posuda je napunjena terc-Butil (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilatom i terc-butil (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilatom (0.4 g, 0.417 mmol), (1H-benzo[d][1,2,3]triazol-4-il)boronskom kiselinom (0.122 g, 0.750 mmol), Na2CO3(0.133 g, 1.250 mmol) i PdCl2(dppf) (0.030 g, 0.042 mmol). Bočica je hermetički zatvorena, degazirana i filtrirana dioksanom (3.47 mL) i vodom (0.695 mL). Dobijena smeša je zagrevana preko noći na 80°C. Reakciona smeša je filtrirana preko CELIT-a da bi se uklonio paladijum. Filtrat je koncentrovan i prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom (0-10)% MeOH/DCM kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 951.70.
Korak B: (R)-4-(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-4-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
U rastvor terc-butil (R)-3-((4-(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilata i terc-butil (R)-3-((4-(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (280 mg, 0.294 mmol) u DCM (2.9 mL) dodat je anizol (0.32 mL, 2.94 mmol) i TFA (2.27 mL, 29.4 mmol) na 0°C. Reakcija je ostavljena da se nastavi na 0°C 30 minuta. Posle uklanjanja isparljivih materija, ostatak je tretiran sa SCX jono-izmenjivačkom kolonom (sipati uzorak i isprati sa MeOH, isprati proizvod sa 7 M NH3u MeOH) da bi se dobio slobodan amin. Ostatak je rastvoren u TFA (2.27 mL, 29.4 mmol). Dobijena smeša je mešana na 80°C 1.0 čas. Posle uklanjanja isparljivih materija, ostatak je prečišćen pomoću reverzno-fazne HPLC (3-40% ACN/voda kao eluent, 0.1% TFA kao aditiv) da bi se dobila TFA so. TFA so je tretirana sa HCl u MeOH dva puta da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao HCl so. LC/MS [M+H]+: 491.31. Sledeći PRIMERI 236-243 u donjoj Tabeli su pripremljeni na analogan način onome opisanom za PRIMER 235, počevši od odgovarajuće boronske kiseline ili boronskog estra (komercijalno dostupan ili pripremljen kao što je ovde opisano) i naznačenih aril jodida koji su pripremljeni kao što je ovde opisano. Zaštitne grupe na aminima su istovremeno uklonjeni pod uslovima finalne deprotekcije za para-metoksibenzi, zaštitne grupe.
2 1
22
2
PRIMER 244
(S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-7-il)-N1-metil-N1-(pirolidin-3-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (3S)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-N-metilfenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
2 4
U rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (6.0 g, 7.74 mmol) u THF (30 mL) dodat je NCS (2.0 g, 15.47 mmol) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas pod azotom. U reakcionu smešu je dodat (S)-terc-butil 3-(metilamino)pirolidin-1-karboksilat (1.0 g, 4.94 mmol) i TEA (0.25 g, 2.50 mmol) na sobnoj temperaturi pod azotom. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta pod azotom. Dobijena smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 38% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 974.
Korak B: (3S)-terc-butil-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-7-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-N-metilfenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U mešani rastvor (3S)-terc-butil 3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-N-metilfenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.50 g, 0.51 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL) i vodi (0.50 mL) dodata je (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-7-il)boronska kiselina (0.27 g, 1.54 mmol), prekatalizator XPhos druge generacije (81 mg, 0.10 mmol) i Na2CO3(0.16 g, 1.54 mmol) pod azotom na sobnoj temperaturi. Mešana smeša je degazirana azotom na sobnoj temperaturi tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Posle hlađenja do sobne temperature, dobijena smeša je razblažena sa EA (50 mL) i isprana vodom (3 x 80 mL). Odvojeni organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom (3 x 80 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 4% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 979.
Korak C: (S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-7-il)-N1-metil-N1-(pirolidin-3-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Rastvor (3S)-terc-butil-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-7-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-N-metilfenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.23 g, 0.24 mmol) u TFA (5mL) je mešan na sobnoj temperaturi 1 čas. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je koisparavan sa anizolom (3 x 3 mL) i korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. Sirovi proizvod je rastvoren u TFA (4 mL) i mešan na 80°C 1 čas. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: Xbridge C18, 19 x 150 mm; Pokretna faza: ACN u vodi (10 mmol/L NH4HCO3), 5%-
2
35% 8 min; Detektor: UV 254 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 519; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6+ D2O): δ 8.02 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 6.53-6.49 (m, 1H), 6.07 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.69-4.64 (m, 1H), 3.30-3.17 (m, 2H), 3.09-3.05 (m, 2H), 3.02 (s, 3H), 2.11-2.03 (m, 2H).
PRIMER 245
3-(4-(2-Amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)-1,1-dimetilazetidin-1-ijum hidrogenkarbonat
Korak A:4-jodo-N2,N2-bis(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(1-metilazetidin-3-il)benzen-1,2-disulfonamid
U mešani rastvor 1-metilazetidin-3-amina (0.32 g, 3.69 mmol) u THF (10 mL) dodata je 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina (1.3 g, 1.68 mmol) i TEA (0.70 mL, 5.03 mmol) na 0°C pod azotom. Rastvor je mešan 15 minuta na 0°C, zatim NCS (0.45 g, 3.36 mmol) dodat je na 0°C. Smeša je mešana na 0°C 1.5 čas pod azotom. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa EA (100 mL) i ispran fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL). Organski sloj je sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 860.
Korak B:4-(2-Amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N2,N2-bis(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(1-metilazetidin-3-il)benzen-1,2-disulfonamid
U rastvor 4-jodo-N2,N2-bis(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(1-metilazetidin-3-il)benzen-1,2-disulfonamida (1.1 g, 1.28 mmol) u 1,4-dioksanu (7 mL) i vodi (3 mL) dodata je (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina (0.34 g, 1.92 mmol), Na2CO3(0.41 g, 3.84 mmol) i Pd(PPh3)4(0.15 g, 0.13 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL).
2
Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 10% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 865.
Korak C: Terc-butil-4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(N-(terc-butoksikarbonil)-N-(1-metilazetidin-3-il)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)-2-(bis(tercbutoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilat
U rastvor 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N2,N2-bis(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(1-metilazetidin-3-il)benzen-1,2-disulfonamida (0.67 g, 0.78 mmol), TEA (0.34 mL, 2.30 mmol) i DMAP (19 mg, 0.16 mmol) u DCM (10 mL) dodat je Boc2O (0.85 g, 3.87 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Dobijena smeša je sipana u vodu (50 mL). Vodena faza je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL). Organski sloj je sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]+: 1265.
Korak D: 3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(bis(terc-butoksikarbonil)amino)-1-(terc-butoksikarbonil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N-(terc-butoksikarbonil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1,1-dimetilazetidin-1-ijum
U rastvor terc-butil-4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(N-(terc-butoksikarbonil)-N-(1-metilazetidin-3-il)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)-2-(bis(tercbutoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilata (0.90g, 0.71 mmol) u DMF (10 mL) dodati su jodometan (0.15 g, 1.07 mmol) i Cs2CO3(0.70 g, 2.10 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Dobijena smeša je sipana u vodu (50 mL). Vodena faza je ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koje je korišćeno u sledećem koraku direktno bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M]<+>: 1279.
Korak E: 3-(4-(2-Amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1,1-dimetilazetidin-1-ijum hidrogenkarbonat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom 3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(bis(terc-butoksikarbonil)amino)-1-(tercbutoksikarbonil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N-(terc-butoksikarbonil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-
2
2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1,1-dimetilazetidin-1-ijuma (0.7 g, 0.55 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Shield RP18 OBD Kolona, 5 µm, 19 x 150 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 30% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 6.12 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M -HCO -3]+: 519; 1H NMR (400MHz, DMSO-d6): δ 10.76 (s, 1H), 8.27-8.18 (m, 1H), 8.16-8.02 (m, 1H), 7.89 (brs, 3H), 6.92-6.88 (m, 1H), 6.44-6.42 (m, 1H), 6.21 (brs, 2H), 6.04-5.84 (m, 1H), 4.75-4.62 (m,1H), 4.44-4.39 (m, 4H), 3.17 (s, 3H), 3.16 (s, 3H).
PRIMER 246
(R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(1-(2-aminoetil)pirolidin-3-il) -3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-4-jodo-N2-(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(pirolidin-3-il)benzen-1,2-disulfonamid
U mešani rastvor (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (4.0 g, 4.17 mmol) u DCM (40 mL) dodat je TFA (8 mL) na 0°C. Rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan 0.5 časa. pH vrednost reakcionog rastvora je podešena do 8 sa 7% vodenim rastvorom NaHCO3i ekstrahovana sa DCM (2 x 200 mL). Spojeni organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 400 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 10% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 740.
Korak B: (R)-terc-butil (2-(3-(4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2-(N-(4-metoksibenzil)sulfamoil)fenilsulfonamido)pirolidin-1-il)etil)karbamat
U rastvor (R)-4-jodo-N2-(4-metoksibenzil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-N1-(pirolidin-3-il)benzen-1,2-disulfonamida (1.70 g, 2.30 mmol) i terc-butil (2-oksoetil)karbamata (0.73 g, 4.60 mmol) u MeOH (20 mL) dodat je NaBH(OAc)3(1.95 g, 9.19 mmol) na 0°C. Smeša
2
je degazirana azotom tri puta. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas pod azotom. Dobijena smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 40 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 60% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 883.
Korak C: (R)-terc-butil(2-(3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2-(N-(4-metoksibenzil)sulfamoil)fenilsulfonamido)pirolidin-1-il)etil)karbamat
U rastvor (R)-terc-butil(2-(3-(4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2-(N-(4-metoksibenzil)sulfamoil)fenilsulfonamido)pirolidin-1-il)etil)karbamata (0.40 g, 0.45 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL) i vodi (1 mL) dodata je (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina (0.20 g, 1.13 mmol), Na2CO3(0.14 g, 1.36 mmol) i Pd(dppf)Cl2adukt CH2Cl2(74 mg, 0.09 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 10% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 888.
Korak D: (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(1-(2-aminoetil)pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil(2-(3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2-(N-(4-metoksibenzil)sulfamoil)fenilsulfonamido)pirolidin-1-il)etil)karbamata (0.10 g, 0.11 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Select CSH Prep C18 OBD Kolona, 5 µm, 19 x 150 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 25% B 8 min; 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 548; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.23 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.96 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.57 (brs, 3H), 6.94 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.54 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.40 (brs, 2H), 6.10 (d, J = 7.6
2
Hz, 1H), 3.98-3.94 (m, 1H), 2.88-2.81 (m, 2H), 2.75-2.71 (m, 1H), 2.70-2.58 (m, 4H), 2.38-2.32 (m, 1H), 2.11-2.06 (m, 1H), 1.72-1.66 (m, 1H).
PRIMER 247
4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N-1-(1-amino-3-hidroksi-2-(hidroksimetil)propan-2-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: Benzil (1,3-dihidroksi-2-(hidroksimetil)propan-2-il)karbamat
U snažno mešanu smešu 2-amino-2-(hidroksimetil)propan-1,3-diola (25.0 g, 206 mmol) u EA (200 mL) i vodi (100 mL) dodat je NaHCO3(52.0 g, 619 mmol) i Cbz-Cl (59 mL, 413 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 časa pod azotom. Dobijena smeša je razblažena sa EA (300 mL), isprana vodom (3 x 150 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 150 mL), sušena preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]+: 256.
Korak B: Benzil (5-(hidroksimetil)-2,2-dimetil-1,3-dioksan-5-il)karbamat
U rastvor benzil (1,3-dihidroksi-2-(hidroksimetil)propan-2-il)karbamata (35.0 g, 137 mmol) u DMF (100 mL) dodata je 4-metilbenzensulfonska kiselina (4.7 g, 27.41 mmol) i 2,2-dimetoksipropan (28.6 g, 274 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi.
16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena sa EA (500 mL), isprana vodom (3 x 250 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 300 mL), sušena preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 15% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 296.
Korak C: (5-(((benziloksi)karbonil)amino)-2,2-dimetil-1,3-dioksan-5-il)metil metan sulfonat
U rastvor benzil(5-(hidroksimetil)-2,2-dimetil-1,3-dioksan-5-il)karbamata (14.0 g, 47.4 mmol) u DCM (200 mL) dodat je TEA (20 mL, 142 mmol) i MsCl (7.4 mL, 95 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 časa pod azotom. Dobijena smeša je isprana vodom (3 x 300 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 300 mL), sušena preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirana.
24
Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 374.
Korak D: Benzil (5-(aminometil)-2,2-dimetil-1,3-dioksan-5-il)karbamat
U rastvor (5-(((benziloksi)karbonil)amino)-2,2-dimetil-1,3-dioksan-5-il) metil metansulfonata (13.0 g, 34.80 mmol) u DMF (170 mL) dodat je kalijum 1,3-dioksoizoindolin-2-id (12.9 g, 69.60 mmol). Reakciona smeša je mešana na 65°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena sa EA (400 mL). Odvojeni organski sloj je ispran vodom (3 x 300 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 300 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u rastvoru hidrazin hidrata (80%, 100 mL) i EtOH (100 mL). Reakciona smeša je mešana na 80°C 3 časa pod azotom. Dobijena smeša je razblažena sa EA (500 mL) i zatim je isprana vodom (3 x 300 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 300 mL). Organski sloj je sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom do jedinjenja iz naslova, koje je korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: [M 1]<+>: 295.
Korak E: Benzil-N-[5-({[(terc-butoksi)karbonil]amino}metil)-2,2-dimetil-1,3-dioksan-5-il]karbamat
U rastvor benzil(5-(aminometil)-2,2-dimetil-1,3-dioksan-5-il)karbamata (10.0 g, 34.0 mmol) u DCM (150 mL) dodat je TEA (4.8 mL, 34.0 mmol) i Boc2O (7.4 g, 34.0 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena sa DCM (300 mL), i zatim je isprana vodom (3 x 250 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 250 mL). Organski sloj je sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 20% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 395.
Korak F: Terc-butil ((5-amino-2,2-dimetil-1,3-dioksan-5-il)metil)karbamat
U rastvor benzil-N-[5-({[(terc-butoksi)karbonil]amino}metil)-2,2-dimetil-1,3-dioksan-5-il]karbamata (2.6 g, 6.59 mmol) u MeOH (20 mL) dodat je Pd(OH)2/C (20% tež., 0.93 g, 1.32 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 72 časa pod vodonikom. Dobijena smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu, eluiran sa 33% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1 261.
Korak G: Terc-butil ((5-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksi benzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2,2-dimetil-1,3-dioksan-5-il)metil)karbamat U rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (1.73 g, 2.23 mmol) u THF (15 mL) dodat je terc-butil((5-amino-2,2-dimetil-1,3-dioksan-5-il) metil)karbamat (1.2 g, 4.46 mmol) i TEA (0.9 mL, 6.69 mmol) na 0°C 10 min. Smeša je degazirana azotom tri puta. Zatim je dodat NCS (0.60 g, 4.46 mmol) i smeša je mešana na 0°C 1.5 čas pod azotom. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa EA (300 mL). Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 25% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1034.
Korak H: Terc-butil ((5-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2,2-dimetil-1,3-dioksan-5-il)metil)karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom terc-butil((5-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2,2-dimetil-1,3-dioksan-5-il)metil) karbamata (1.24 g, 1.20 mmol) i (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (0.53 g, 3.00 mmol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1039.
Korak I: 4-(2-Amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N-1-(1-amino-3-hidroksi-2-(hidroksimetil) propan-2-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom terc-butil((5-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2,2-dimetil-1,3-dioksan-5-il)metil)karbamata (0.50 g, 0.48 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18 OBD Prep Kolona, 100 Å, 5 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 3% B do 25% B 9 min; Detektor: 254 i 210 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 539; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.19 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.49 (brs, 2H), 6.92 (dd, J = 7.7 Hz, 1.1 Hz, 1H), 6.51 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 6.26 (s, 2H), 6.07 (d, J= 7.7 Hz, 1H), 5.37 (brs, 2H), 3.57-3.39 (m, 4H), 3.19 (s, 2H).
PRIMER 248
(3R)-3-{[4-(2-amino-1H-1,3-benzodiazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-1,2,3,4-tetrazol-5-il)benzen]sulfonamido}-1-(2-aminoetil)-1-metilpirolidin-1-ijum; metanperoksoat
Korak A: (R)-terc-butil(2-(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-il)etil)karbamat
U rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (2.50 g, 3.22 mmol) u THF (40 mL) dodat je NCS (0.86 g, 6.45 mmol) na sobnoj temperaturi pod azotom. Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 1 čas. U dobijeni rastvor dodat je (R)-terc-butil(2-(3-aminopirolidin-1-il)etil)karbamat (1.48 g, 6.45 mmol) i TEA (1.35 mL, 9.67 mmol) na 0°C. Dobijena smeša je mešan 1 čas na sobnoj temperaturi pod azotom. Dobijeni rastvor je razblažen sa EA (100 mL), i zatim je ispran zasićenim Na2SO3(2 x 50 mL). Organski sloj je sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 70% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1003. Korak B: (3R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)-1-metilpirolidin-1-ijum jodid
U rastvor (R)-terc-butil(2-(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-il)etil)karbamata (1.20 g, 1.20 mmol) u acetonu (10 mL) dodat je jodometan (0.68 g, 4.79 mmol). Reakciona smeša je mešana 3 časa na sobnoj temperaturi pod azotom. Dobijeni rastvor je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. LCMS [M-I+H]+: 1017.
Korak C: (3R)-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-(2-(tercbutoksikarbonil)amino)etil)-1-metilpirolidin-1-ijum jodid
U rastvor (3R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)-1-metilpirolidin-1-ijum
24
jodida (1.60 g, 1.40 mmol) u 1,4-dioksanu (20 mL) i vodi (5 mL) dodata je (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina (0.62 g, 3.49 mmol), Pd(PPh3)4(0.32 g, 0.28mmol) i Na2CO3(0.44 g, 4.19 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta i mešana 4 časa na 80°C pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL). Vodena faza je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koje je korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M-I+H]<+>: 1022.
Korak D: (3R)-3-{[4-(2-amino-1H-1,3-benzodiazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-1,2,3,4-tetrazol-5-il)benzen]sulfonamido}}-1-(2-aminoetil)-1-metilpirolidin-1-ijum; metanperoksoat Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (3R)-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)-1-metilpirolidin-1- ijum jodida (1.40 g, 1.22 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona 100 Å, 10 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 25% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 6.72 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M - HCO -3]+: 562;<1>H NMR (400 MHz, DCl): δ 6.59 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.08-5.96 (m, 1H), 5.29 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.10-5.04 (m, 1H), 4.81 (d, J = 7.6 Hz, 0.5H), 4.65 (d, J = 7.6 Hz, 0.5H), 2.53 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 2.13-1.97 (m, 1H), 1.97-1.61 (m, 5H), 1.58-1.55 (m, 2H), 1.32-1.29 (m, 1H), 1.19-1.17 (m, 2H), 0.72-0.65 (m, 1H), 0.50-0.27 (m, 1H).
PRIMER 249
(3S)-3-{[4-(2-amino-1H-1,3-benzodiazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-1,2,3,4-tetrazol-5-il)benzen]sulfonamido}-1-(2-aminoetil)-1-metilpirolidin-1-ijum metanperoksoat
Korak A: (S)-terc-butil(2-(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-il)etil)karbamat
U rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (2.00 g, 2.58 mmol) u THF (40 mL) dodat je NCS (0.69 g, 5.16 mmol) na sobnoj temperaturi pod azotom. Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 1 čas. U dobijeni rastvor je dodat (S)-terc-butil(2-(3-aminopirolidin-1-il)etil)karbamat (1.18 g, 5.16 mmol) i TEA (1.10 mL, 7.74 mmol) na 0°C. Smeša je mešana 1 čas na sobnoj temperaturi pod azotom. Dobijena smeša je razblažena sa EA (100 mL), i zatim je isprana zasićenim Na2SO3(2 x 50 mL). Organski sloj je sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 70% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1003.
Korak B: (3S)-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-(2-(terc-butoksikarbonil)amino)etil)-1-metilpirolidin-1-ijum jodid
U rastvor (S)-terc-butil(2-(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-il)etil)karbamata (1.20 g, 1.20 mmol) u acetonu (10 mL) dodat je jodometan (0.68 g, 4.79 mmol). Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana 3 časa na sobnoj temperaturi pod azotom. Dobijeni rastvor je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M-I+H]<+>: 1017.
Korak C: (3S)-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-(2-((terc-butoksikarbonil)amino-metilpirolidin-1-ijum jodid
U rastvor (3S)-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)-1-metilpirolidin-1-ijum jodida (1.50 g, 1.31 mmol) u 1,4-dioksanu (20 mL) i vodi (5 mL) dodati su (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina (0.58 g, 3.28 mmol), Pd(PPh3)4(0.30 g, 0.26 mmol) i Na2CO3(0.42 g, 3.93 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta i mešana 4 časa na 80°C pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL). Vodena faza je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koje je korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M]<+>: 1022.
Korak D: (3S)-3-{[4-(2-amino-1H-1,3-benzodiazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-1,2,3,4-tetrazol-5-il)benzen]sulfonamido}-1-(2-aminoetil)-1-metilpirolidin-1-ijum metanperoksoat
24
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (3S)-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-1-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)-1-metilpirolidin-1-ijum jodida (1.00 g, 0.87 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona 100Å, 10 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda (10 mmol/L NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 5% B 2 min; Detektor: 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 6.72 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M - HCO -3]+: 562;<1>H NMR (400 MHz, DCl): δ 6.60 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.04 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.31 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 5.13-5.04 (m, 1H), 4.83 (d, J = 8.0 Hz, 0.5H), 4.66 (d, J = 8.0 Hz, 0.5H), 2.55-2.53 (m, 1H), 2.12-1.97 (m, 1H), 1.97-1.61 (m, 5H), 1.58-1.55 (m, 2H), 1.32-1.29 (m, 1H), 1.19-1.15 (m, 2H), 0.72-0.65 (m, 1H), 0.50-0.27 (m, 1H).
PRIMER 250
(S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((3-aminopirolidin-3-il)metil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: 3-(2-Amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (2.0 g, 2.28 mmol) i (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (1.62 g, 9.13 mmol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 881.
Korak B: 4-(2-Amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina
U mešani rastvor 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzen sulfonamida (1.30 g, 1.48 mmol) u THF (13 mL) dodat je TBAF (1.54 g, 5.90 mmol) na 0°C. Reakcioni rastvor je
24
mešan 1 čas na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razblažen sa EA (100 mL), i zatim je ispran zasićenim vodenim rastvorom KHSO4(5 x 100 mL). Organska faza je sušena preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 781.
Korak C: (S)-terc-butil-3-amino-3-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) metil(pirolidin-1-karboksilat
U mešani rastvor 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il) benzensulfinske kiseline (0.50 g, 0.64 mmol) u THF (5 mL) dodati su (R)-terc-butil 3-amino-3-(aminometil)pirolidin-1-karboksilat (0.28 g, 1.28 mmol) i TEA (0.27 mL, 1.92 mmol) na ledenom kupatilu. Dobijeni rastvor je degaziran pod azotom tri puta i mešan 15 minuta. NCS (0.17 g, 1.28 mmol) je dodat je u reakcioni rastvor lagano. Smeša je mešana 2 časa na 15°C pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL) i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Spojeni organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 10% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 994.
Korak D: (S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((3-aminopirolidin-3-il)metil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (S)-terc-butil-3-amino-3-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) metil)pirolidin-1-karboksilata (0.40 g, 0.40 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona 100Å, 10 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 30% B 7 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 534; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.72 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.32 (dd, J = 7.2 Hz, 0.8 Hz, 1H), 7.15 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.84-6.81 (m, 1H), 3.83-3.80 (m, 1H), 3.73-3.70 (m, 1H), 3.63-3.60 (m, 4H), 2.58-2.55 (m, 1H), 2.43-2.40 (m, 1H).
PRIMER 251
24
(R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((3-aminopirolidin-3-il)metil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-terc-butil-3-amino-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)pirolidin-1-karboksilat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 250, Korak C, upotrebom (S)-terc-butil 3-amino-3-(aminometil)pirolidin-1-karboksilata (0.21 g, 0.96 mmol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1] 994.
Korak B: (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3-aminopirolidin-3-il)metil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil-3-amino-3-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) metil)pirolidin-1-karboksilata da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona 100Å, 10 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 30% B 7 min; Detektor: 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 5.81 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 534; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.72 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.32 (dd, J = 7.2 Hz, 1.2 Hz, 1H), 7.15 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.82 (m 1H), 3.83-3.80 (m, 1H), 3.73-3.70 (m, 1H), 3.63-3.60 (m, 4H), 2.58-2.55 (m, 1H), 2.43-2.40 (m, 1H).
PRIMERI 252-268 u donjoj Tabeli su pripremljeni na analogan način onome opisanom za PRIMER 244, počevši od 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline i odgovarajućih boronskih kiselina ili boronskih estara i zaštićenih amina (tipično Boc zaštićenih), koji su pripremljeni kao što je ovde opisano, ili koji su dostupni iz komercijalnih izvora.
24
LC/MS Pr. br. Struktura Hemijski naziv
M+H+
24
LC/MS Pr. br. Struktura Hemijski naziv
M+H+
2
LC/MS Pr. br. Struktura Hemijski naziv
M+H+
21
LC/MS Pr. br. Struktura Hemijski naziv
M+H
PRIMER 269
2-Amino-N-(4'-(N-((R)-pirolidin-3-il)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-3,4,5,6-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-3-il)acetamid
Korak A: (R)-terc-butil-3-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-5'-okso-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (5.0 g, 5.21 mmol) u 1,4-dioksanu (12 mL) i vodi (3 mL) dodat je Na2CO3(2.76 g, 26.00 mmol), 3-oksocikloheks-1-enilboronska kiselina (4.63 g, 33.07 mmol) i Pd(PPh3)4(1.20 g, 1.00 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta i mešana na 80°C 6 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (150 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 500 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 500 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom.
2 2
Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 70% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 928.
Korak B: (3R)-terc-butil-3-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-5'-hidroksi-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-il-sulfonamido) pirolidin-1-karboksilat
U rastvor (R)-terc-butil-3-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-5'-okso-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-il-sulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (3.80 g, 4.09 mmol) u MeOH (20 mL) dodat je NaBH4(0.93 g, 24.60 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodom (150 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 150 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 300 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 300 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 930.
Korak C: (3R)-terc-butil 3-(5'-azido-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksi benzil)-2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-il-sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor (3R)-terc-butil-3-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-5'-hidroksi-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (2.60 g, 2.80 mmol) u toluenu (15 mL) dodat je DBU (3.80 g, 25.20 mmol) i DPPA (4.60 g, 16.77 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodom (100 mL), i zatim je ekstrahovan sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 200 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 20% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: [M 1]+: 955.
Korak D: (3R)-terc-butil-3-(5'-amino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-il-sulfonamido) pirolidin-1-karboksilat
U rastvor (3R)-terc-butil 3-(5'-azido-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-il-sulfonamido)pirolidin-1-
2
karboksilata (2.0 g, 2.09 mmol) u THF (9 mL) i vodi (3 mL) dodat je trifenilfosfin (0.72 g, 2.7 mmol) i kalijum hidroksid (0.18 g, 3.1 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 časa. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 200 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 20% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 929.
Korak E: (3R)-terc-butil-3-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-5'-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)acetamido)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor (3R)-terc-butil-3-(5'-amino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-il-sulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (1.50 g, 1.61 mmol) u THF (15 mL) dodat je TEA (0.70 mL, 4.84 mmol), 2-((tercbutoksikarbonil)amino)sirćetna kiselina (0.28 g, 1.61 mmol) i HATU (1.80 g, 4.80 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta i mešana 16 časa na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 200 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 60% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1086.
Korak F: 2-Amino-N-(4'-(N-((R)-pirolidin-3-il)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-3,4,5,6-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-3-il)acetamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (3R)-terc-butil-3-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-5'-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)acetamido)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (1.40 g, 1.30 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: C18 OBD kolona, 130 Å, 5 µm, 30 mm x 50 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 50 mL/min; Gradijent: 5% B do 17% B 5 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 526; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.51 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 5.36-5.35 (m, 1H), 4.27-4.16 (m, 2H), 3.66
2 4
(s, 2H), 3.40-3.38 (m, 4H), 2.22-2.20 (m, 1H), 2.05-1.92 (m, 3H), 1.73-1.67 (m, 2H), 1.57-1.56 (m, 1H), 1.49-1.39 (m, 1H).
PRIMER 270
2-Amino-N-((3R)-3-(4-(N-((R)-pirolidin-3-il)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)cikloheksil)acetamid
Korak A: 2-Amino-N-((3R)-3-(4-(N-((R)-pirolidin-3-il)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)cikloheksil)acetamid
U suspenziju 2-amino-N-(4'-(N-((R)-pirolidin-3-il)sulfamoil)-3'-sulfamoil -2'-(2H-tetrazol-5-il)-3,4,5,6-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-3-il)acetamida (0.30 g, 0.57 mmol)) u MeOH (15 mL) dodat je PtO2(38.9 mg, 0.17 mmol) i konc. HCl (2.50 mL). Smeša je mešana na 45°C 16 časova pod vodonikom (20 atm). Dobijena smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima :Kolona: X Bridge BEH130 Prep C18 OBD Kolona 19 x 150 mm, 5 µm, 13 nm; Pokretna faza A: voda (10 mmol/L NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 0% B do 4% B 10 min, 4% B do 15% 6 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 528; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.53 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 4.18-4.10 (m, 1H), 3.69-3.59 (m, 2H), 3.59-3.31 (m, 5H), 2.29-2.12 (m, 1H), 2.10-1.60 (m, 6H), 1.60-1.38 (m, 2H), 1.38-1.10 (m, 2H).
PRIMER 271
(R)-4-(4-(N-(pirolidin-3-il)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-karboksamid
2
Korak A: (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.50 g, 0.52 mmol) i (2-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronse kiseline (0.21 g, 1.04 mmol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 993.
Korak B: (R)-4-(4-(N-(pirolidin-3-il)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-karboksamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.24 g, 0.24 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep C18 OBD Kolona 19 x 150 mm, 5 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 22% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 533; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.25 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.99 (brs, 3H), 7.78-7.76 (m, 1H), 7.37-7.35 (m, 1H), 6.97 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.44-6.42 (m, 1H), 4.13-4.09 (m, 1H), 3.33-3.29 (m, 2H), 3.19-3.12 (m, 2H), 2.18-2.09 (m, 1H), 1.95-1.87 (m, 1H).
PRIMER 272
4-(2-((S)-1-aminoetil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-terc-butil-3-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat U rastvor (R)-terc-butil 3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (1.80 g, 1.88 mmol) u 1,4-dioksanu
2
(12 mL) i vodi (3 mL) dodat je 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzen-1,2-diamin (1.76 g, 7.50 mmol), Na2CO3(0.56 g, 5.63 mmol) i Pd(PPh3)4(0.43 g, 0.36 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je zračena mikrotalasnim zračenjem na 100°C 0.5 časa pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (200 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 200 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 940.
Korak B: (R)-terc-butil-3-(2'-amino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3'-((S)-2-((tercbutoksikarbonil)amino)propanamido)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-il-sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U mešani rastvor (R)-terc-butil 3-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-il-sulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.55 g, 0.59 mmol) u THF (5 mL) dodata je (S)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)propionska kiselina (0.13 g, 0.70 mmol), TEA (0.18 g, 1.76 mmol) i HATU (0.45 g, 1.17 mmol). Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana 5 časa na sobnoj temperaturi pod azotom. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je rastvoren sa EA (50 mL), ispran fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 80% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1111.
Korak C: (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((S)-1-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
Rastvor (R)-terc-butil 3-(2'-amino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3'-((S)-2-((tercbutoksikarbonil)amino)propanamido)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.45 g, 0.41 mmol) u AcOH (5 mL) je mešan na 60°C 30 minuta. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 1093.
Korak D: 4-(2-((S)-1-aminoetil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((S)-1-((terc-
2
butoksikarbonil)amino)etil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.35 g, 0.32 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Select CSH Prep C18 OBD Kolona, 5 µm, 19 x 150 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 10% B do 25% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M - 1]-: 531; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.72 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.83-7.81 (m, 1H), 7.52-7.48 (m, 1H), 7.17-7.15 (m, 1H), 5.18-5.15 (m, 1H), 4.34-4.31 (m, 1H), 3.59-3.40 (m, 4H), 2.37-2.34 (m, 1H), 1.97-1.95 (m, 4H).
PRIMER 273
4-(2-((R)-1-aminoetil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-terc-butil-3-(2'-amino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3'-((R)-2-((tercbutoksikarbonil)amino)propanamido)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U mešani rastvor (R)-terc-butil-3-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-il-sulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.55 g, 0.59 mmol) u THF (5 mL) dodata je (R)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)propionske kiseline (0.11 g, 0.59 mmol), TEA (0.18 g, 1.76 mmol) i HATU (0.45 g, 1.17 mmol). Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana 5 časa na sobnoj temperaturi pod azotom. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u EA (50 mL), i zatim je ispran fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 80% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1111.
2
Korak B: (R)-terc-butil3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((R)-1-((terc-butoksi karbonil)amino)etil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
Rastvor (R)-terc-butil 3-(2'-amino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3'-((R)-2-((tercbutoksikarbonil)amino)propanamido)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.48 g, 0.43 mmol) u AcOH (5 mL) je mešan na 60°C 30 minuta. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 1093.
Korak C: 4-(2-(R)-1-aminoetil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((R)-1-((terc-butoksi karbonil)amino)etil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.38 g, 0.35 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Select CSH Prep C18 OBD Kolona, 5 µm, 19 x 150 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 10% B do 25% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 533; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.72 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.14 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.83-7.81 (m, 1H), 7.52-7.48 (m, 1H), 7.17-7.15 (m, 1H), 5.18-5.15 (m, 1H), 4.34-4.31 (m, 1H), 3.59-3.40 (m, 4H), 2.37-2.34 (m, 1H), 1.97-1.95 (m, 4H).
PRIMER 274
(R)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-5-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-terc-butil-3-(3',4'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-
2
tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (1.50 g, 1.56 mmol) i 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzen-1,2-diamina (0.55 g, 2.34 mmol), Na2CO3(0.50 g, 4.69 mmol): LCMS [M 1]+: 940.
Korak B: (R)-terc-butil-3-(3'-amino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)acetamido)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor 2-((terc-butoksikarbonil)amino)sirćetne kiseline (0.22 g, 1.23 mmol) u DMF (15 mL) dodati su (R)-terc-butil 3-(3',4'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-il-sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat (1.49 mL, 1.17 mmol), HATU (0.53 g, 1.40 mmol) i DIEA (0.23 g, 1.76 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je for 2 časa na sobnoj temperaturi pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL), i zatim je ekstrahovan sa EA (3 x 80 mL). Kombinovani organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom (100 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 70% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1097.
Korak C: (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(((tercbutoksikarbonil)amino)metil)-1H-benzo[d]imidazol-5-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
Rastvor (R)-terc-butil 3-(3'-amino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)acetamido)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.55 g, 0.50 mmol) u AcOH (10 mL) je mešan 2 časa na 55°C. Dobijeni rastvor je razblažen vodom (50 mL), i zatim je ekstrahovan sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom (50 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 70% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1079.
Korak D: (R)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-5-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
U rastvor (R)-terc-butil 3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(((tercbutoksikarbonil)amino)metil)-1H-benzo[d]imidazol-5-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.38 g, 0.35 mmol) u DCM (6 mL) dodat je TFA (3
2
mL). Reakciona smeša je mešana 1 čas na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ko-isparavana sa anizolom (3 x 5 mL) pod vakuumom. Sirovi proizvod je rastvoren u TFA (10 mL). Rastvor je mešan na 80°C 1 čas. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom do sušenja, zatim je rastvorena u EA (30 mL), ekstrahovana vodenim rastvorom HCl (1.0 M, 3 x 30 mL). Spojeni vodeni slojevi su koncentrovani pod vakuumom do sušenja. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima. Kolona: X Bridge Prep OBD C18 Kolona 30 x 150 mm, 5 µm; Pokretna faza A: voda (10 mmol/L NH4HCO3+ 0.1% NH3H2O), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 30 mL/min; Gradijent: 5% B do 25% B 6 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 519; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6+ DCl): δ 8.50 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.63-7.52 (m, 1H), 7.11 (dd, J= 8.5 Hz, 1.6 Hz, 1H), 4.54 (s, 2H), 4.08-4.06 (m, 1H), 3.36-3.18 (m, 2H), 3.13-3.07 (m, 2H), 2.14-1.96 (m, 1H), 1.87-1.82 (m, 1H).
PRIMER 275
(R)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-5-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-terc-butil-3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-5-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (4.10 g, 4.27 mmol) i 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzo[d]tiazol-2-amina (2.36 g, 8.54 mmol): LCMS [M 1]+: 982.
Korak B: (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-5-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat U rastvor (R)-terc-butil-3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-5-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil sulfonamido) pirolidin-1-karboksilata (3.3 g, 3.36 mmol) u ACN (40 mL) dodat je CuBr2(0.90 g, 4.03 mmol). terc-butil nitrit (0.55 g, 5.38 mmol) je zatim dodat ukapavanjem na 0°C. Reakciona smeša je mešana 2 časa na sobnoj temperaturi pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodom (100 mL), i zatim je
2 1
ekstrahovana sa EA (3 x 80 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 40% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1045, 1047 (1 : 1).
Korak C: (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-cijanobenzo[d]tiazol-5-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat U rastvor (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-5-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (1.50 g, 1.43 mmol) u DMF (20 mL) dodat je t-BuXPhos paladijum (II) bifenil-2-amin mezilat (0.46 g, 0.57 mmol) i Zn(CN)2(0.51 g, 4.30 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta i mešana 16 časova na 55°C pod nitrgonom. Dobijena smeša je razblažena zasićenim Na2CO3(100 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 80 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom FeSO4(3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (2 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 40% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 992.
Korak D: (R)-terc-butil-3-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-5-il)-2-(N,N-bis(4-metoksi benzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-cijanobenzo[d]tiazol-5-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.85 g, 0.86 mmol) u MeOH (10 mL) i EA (5 mL) dodat je Pd(OH)2/C (20% Pd, 0.12 g, 0.86 mmol) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodato 4 kapi konc. HCl. Reakciona smeša je degazirana vodonikom tri puta i mešana 16 časova na 25°C pod vodonikom (30 atm). Dobijeni rastvor je filtriran. Filter kolač je ispran sa MeOH (3 x 30 mL). Spojeni organski slojevi su koncentrovani pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 996.
Korak E: (R)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-5-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 274 Korak D upotrebom (R)-terc-butil-3-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-5-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.70 g, 0.70
2 2
mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima. Kolona: XBridge Prep Amide OBD Kolona 19 x 150 mm, 5 µm 13 nm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 90% B do 65% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 6.43 min. Frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 536; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.27 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 7.40 (s, 1H), 6.88 (dd, J = 8.3 Hz, 1.7 Hz, 1H), 6.70 (brs, 3H), 4.13 (s, 2H), 4.09-4.03 (m, 1H), 3.27-3.15 (m, 2H), 3.14-2.97 (m, 2H), 2.10-2.01 (m, 1H), 1.89-1.81 (m, 1H).
PRIMER 276
(R)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-terc-butil3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat U rastvor (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (3.0 g, 3.13 mmol) u 1,4-dioksanu (30 mL) i vodi (6 mL) dodati su (2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)boronska kiselina (1.52 g, 7.81 mmol), Na2CO3(0.99 g, 9.38 mmol) i Pd(PPh3)4(0.72 g, 0.63 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 h pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodom (70 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 982.
Korak B: (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat U rastvor (R)-terc-butil-3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamid)pirolidin-1-
2
karboksilata (2.30 g, 2.34 mmol) u ACN (20 mL) dodati su bakar(II) bromid (0.63 g, 2.81 mmol) i terc-butil nitrit (0.39 g, 3.75 mmol) ukapavanjem na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodom (50 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 40% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat kao čvrsto jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1045, 1047.
Korak C: Terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-cijanobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (1.80 g, 1.72 mmol) u DMSO (8 mL) dodat je cijanobakar (0.46 g, 5.16 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 100°C 4 časa pod azotom. Dobijena smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom Na2CO3(100 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 992
Korak D: (R)-terc-butil-3-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksi benzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-cijanobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.70 g, 0.71 mmol) u EA (5 mL) i konc. HCl (2 kapi) dodat je Pd(OH)2/C (20% tež., 0.14 g, 0.20 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana vodonikom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 25°C 16 časova pod vodonikom (20 atm). Dobijena smeša je filtriran i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 80% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 996.
2 4
Korak E: (R)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil-3-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.30 g, 0.30 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: X Bridge Prep C18 OBD Kolona, 19 x 150 mm, 5 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 25% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 536; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6+ D2O): δ 8.28 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 8.0 Hz, 2H), 7.10 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.15-4.12 (m, 1H), 4.09 (s, 2H), 3.35-3.24 (m, 2H), 3.17-3.09 (m, 2H), 2.20-2.06 (m, 1H), 1.94-1.86 (m, 1H).
PRIMER 277
(R)-4-(6-aminopiridin-2-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil 3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.50 g, 0.52 mmol) i (6-bromopiridin-2-il)boronske kiseline (0.21 g, 1.04 mmol): LCMS [M 1]+: 989, 991 (1 : 1).
Korak B: (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(6-((tercbutoksikarbonil)amino)piridin-2-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor (R)-terc-butil3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.30 g, 0.30 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL) dodat je terc-butil karbamat (0.07 g, 0.61 mmol), Brettphos Pd G 3 (0.06 g, 0.06 mmol) i K3PO4(0.19 g, 0.91 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 4 časa pod azotom. Dobijena smeša je ugašena
2
vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio (R)-terc-butil3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(6-((terc-butoksikarbonil)amino)piridin-2-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 1026.
Korak C: (R)-4-(6-aminopiridin-2-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(6-((terc-butoksikarbonil) amino)piridin-2-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.18 g, 0.18 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: X Bridge Prep C18 OBD Kolona, 5 µm, 19 x 150 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 0% B do 5% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 466; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.30 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.97 (brs, 3H), 6.99 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 6.27 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.93 (brs, 2H), 5.50 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.19-4.13 (m, 1H), 3.27-3.16 (m, 2H), 3.09-3.00 (m, 2H), 1.92-1.85 (m, 1H), 1.79-1.71 (m, 1H).
PRIMERI 278-291 u donjoj Tabeli su pripremljeni na analogan način onome opisanom za PRIMER 277, počevši od (R)-terc-butil 3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata i odgovarajućih boronskih kiselina ili boronskih estara, koji su pripremljeni kao što je ovde opisano, ili koji su dostupni iz komercijalnih izvora. U slučajvima gde intermedijeri boronske kiseline ili boronskog estra imaju Boc-zaštićene amine, pri čemu su Boc grupe uklonjene u toku finalne TFA deprotekcije PMB grupa kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C.
2
LC/MS Pr. br. Struktura Hemijski naziv MM
]+
2
2
PRIMER 292
(S)-4-(4-(N-(pirolidin-3-il)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-karboksamid
2
Korak A: (S)-terc-butil 3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-7-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor (S)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.60 g, 0.63 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL) i vodi (1 mL) dodata je (2-karbamoil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina (0.26 g, 1.25 mmol), Na2CO3(0.23 g, 2.19 mmol) i Pd(PPh3)4(0.14 g, 0.13 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 3% MeOH u EA. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 993.
Korak B: (S)-4-(4-(N-(pirolidin-3-il)sulfamoil)-3-sulfamoil-2-(2H-tetrazol-5-il)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-karboksamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (S)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-karbamoil-1H-benzo [d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.20 g, 0.20 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep C18 OBD Kolona 19 x 150 mm, 5 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 25% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 533; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.25 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.03 (brs, 3H), 7.79 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.38 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.98 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 6.45 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.14-4.11 (m, 1H), 3.32-3.20 (m, 2H), 3.15-3.09 (m, 2H), 2.19-2.08 (m, 1H), 1.97-1.89 (m, 1H).
PRIMERI 293-295 u donjoj Tabeli su pripremljeni na analogan način onome koji je opisan za PRIMER 292, počevši od (S)-terc-butil 3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata i odgovarajućih boronskih kiselina ili boronskih estara, koji su pripremljeni kao što je ovde opisano, ili koji su dostupni iz komercijalnih izvora.
2
LC/MS Pr. br. Struktura Hemijski naziv MM
PRIMER 296
(S)-N1-(2-amino-3-hidroksipropil)-4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (S)-terc-butil(1-(4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropan-2-il)karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (S)-terc-butil(1-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropan-2-il)karbamata (1.1 g, 1.14 mmol) i (1H-
2 1
benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (0.37 g, 2.30 mmol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS (ESI) [M 1]+: 954.
Korak B: (S)-N1-(2-amino-3-hidroksipropil)-4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (S)-terc-butil(1-(4-(1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropan-2-il)karbamata (0.64 g, 0.67 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je rastvoren u TFA (4 mL). Rastvor je mešan na 80°C 1 čas. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18, 19 x 150 mm, 5 µm; Pokretna faza A: voda (0.05% NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 30% B do 70%B 10 min; Detektor: 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 8.25 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 494; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.25 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 8.17 (s, 1H), 8.00 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 7.77 (brs, 3H), 7.28 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 6.85 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 6.34 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 5.38 (s, 1H), 3.64-3.53 (m, 2H), 3.28-3.20 (m, 3H).
PRIMER 297
(S)-N1-(2-amino-3-hidroksipropil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (S)-terc-butil(1-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropan-2-il)karbamat U smešu (S)-terc-butil(1-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropan-2-il) karbamata (0.80 g, 0.83 mmol), 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-amina (0.46 g, 2.08 mmol) i Pd(PPh3)4(0.20 g, 0.17 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL) dodat je rastvor Na2CO3(0.27 g, 2.49 mmol) u vodi (2.5 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta i mešana 12 časa na 80°C. Dobijena smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (150 mL) i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim
2 2
rastvorom (200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 10% MeOH u EA da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 930.
Korak B: (S)-N1-(2-amino-3-hidroksipropil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen -1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (S)-terc-butil(l-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropan-2-il) karbamata (0.61 g, 0.66 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona 100 Å, 10 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda (10 mmol/L NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 2% B do 20% B 10 min; Detektor: 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 8.3 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 470; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.18 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.75 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 7.49 (brs, 3H), 6.71 (d, J = 6.4 Hz, 1H), 6.15 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.99 (brs, 2H), 5.29 (brs, 1H), 3.59-3.46 (m, 2H), 3.21-3.01 (m, 3H). PRIMER 298
(R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)-benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-terc-butil(3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil) karbamat
U mešani rastvor (R)-terc-butil (3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil) -4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil) karbamata (1.0 g, 1.00 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL) i vodi (1 mL) dodata je (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina (0.37 g, 2.10 mmol), Na2CO3(0.33 g, 3.10 mmol) i Pd(PPh3)4(0.12 g, 0.10 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana 12 časova na 80°C pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL), i zatim je
2
ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 5% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 969.
Korak B: (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)-benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil(3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (0.55 g, 0.57 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep C18 OBD Kolona 19 x 250 mm 10 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 25 mL/min; Gradijent: 5% B do 35% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 6.8 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 509; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.64 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.11-7.97 (m, 1H), 7.33 (dd, J= 8.0 Hz, 1.0 Hz, 1H), 7.28-7.12 (m, 1H), 6.89 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.16-3.92 (m, 1H), 3.31-3.16 (m, 3H), 2.98-2.80 (m, 1H).
PRIMER 299
(R)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: Terc-butil-N-{[4-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-{[(2R)-3-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}-2-hidroksipropil]sulfamoil}-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil}karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil) karbamata (0.70 g, 0.73 mmol) i terc-butil ((4-
2 4
(5,5-dimetil-1,3,2-dioksaborinan-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)karbamata (0.53 g, 1.48 mmol): LCMS [M 1]+: 1083.
Korak B: (R)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom terc-butil-N-{[4-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-{[(2R)-3-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}-2-hidroksipropil]sulfamoil}-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil}karbamata (0.60 g, 0.55 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18, 19 x 150 mm; Pokretna faza: ACN u vodi (10 mmol/L NH4HCO3), 5%-30% 7 min; Detektor: UV 254 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 523; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6+ D2O): δ 8.24 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.34 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.84 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.35 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 3.97 (s, 2H), 3.90-3.81 (m, 1H), 3.17-3.12 (m, 1H), 3.09-3.03 (m, 1H), 2.96-2.93 (m, 1H), 2.76-2.71 (m, 1H).
PRIMER 300
(R)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-terc-butil (3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil) karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil-(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (2.0 g, 2.08 mmol) i (2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)boronske kiseline (1.01 g, 5.19 mmol): LCMS [M 1]+: 986.
2
Korak B: (R)-terc-butil (3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo [d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 275, Korak B, upotrebom (R)-terc-butil(3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis (4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (1.37 g, 1.39 mmol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1049, 1051 (1 : 1).
Korak C: (R)-terc-butil(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-cijanobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamat Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 275, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (0.86 g, 0.82 mmol): LCMS [M 1]+: 996.
Korak D: (R)-terc-butil(3-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil) karbamat
U rastvor (R)-terc-butil (3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-cijanobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil sulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (0.60 g, 0.60 mmol) u EA (4 mL) i MeOH (8 mL) dodat je Pd(OH)2/C (20% Pd, 0.40 g, 0.60 mmol) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodato 4 kapi konc. HCl. Reakciona smeša je degazirana vodonikom tri puta i mešana 16 časova na 25°C pod vodonikom (oko 30 atm). Dobijena smeša je filtrirana i filter kolač je ispran sa MeOH (3 x 20 mL). Spojeni organski slojevi su koncentrovani pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koje je korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 1000.
Korak E: (R)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 274, Korak D, upotrebom (R)-terc-butil(3-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (0.55 g, 0.55 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima. Kolona: X Bridge Prep C18 OBD Kolona, 30 x 100 mm, 5 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 25 mL/min; Gradijent: 5% B do 25% B 10 min; Detektor: 254 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+:
2
540; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.19 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.93-7.74 (m, 2H), 7.02 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 6.54 (dd, J= 7.6 Hz, 1.2 Hz, 1H), 6.31 (brs, 3H), 4.04 (s, 2H), 3.84-3.78 (m, 1H), 3.17-3.13 (m, 1H), 3.06-3.01 (m, 1H), 2.96-2.92 (m, 1H), 2.74-2.69 (m, 1H).
PRIMERI 301-303 u donjoj Tabeli su pripremljeni na analogan način onome koji je opisan za PRIMER 298, počevši od (R)-terc-butil (3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata i odgovarajućih boronskih kiselina ili boronskih estara, koji su pripremljeni kao što je ovde opisano, ili koji su dostupni iz komercijalnih izvora.
PRIMER 304
(S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)-benzen-1,2-disulfonamid
2
Korak A: (S)-terc-butil(3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 298, Korak A, upotrebom (S)-terc-butil(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil) karbamata (1.00 g, 1.00 mmol): LCMS [M 1]+: 969.
Korak B: (S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)-benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (S)-terc-butil(3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep C18 OBD Kolona 19 x 250 mm 10 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 25 mL/min; Gradijent: 5% B do 35% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 509; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.64 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.11-7.97 (m, 1H), 7.33 (dd, J= 8.0 Hz, 1.0 Hz, 1H), 7.28-7.12 (m, 1H), 6.89 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 4.16-3.92 (m, 1H), 3.31-3.16 (m, 3H), 2.98-2.82 (m, 1H).
PRIMER 305
(S)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
2
Korak A: Terc-butil-N-{[4-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-{[(2S)-3-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}-2-hidroksipropil]sulfamoil}-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil}karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (S)-terc-butil(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (0.56 g, 0.58 mmol) i terc-butil((4-(5,5-dimetil-1,3,2-dioksaborinan-2-il)-1H-benzo [d]imidazol-2-il)metil)karbamata (0.52 g, 1.45 mmol): LCMS [M 1]+: 1083.
Korak B: (S)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom terc-butil-N-{[4-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-{[(2S)-3-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}-2-hidroksipropil]sulfamoil}-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil}karbamata (0.5 g, 0.46 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X bridge C18, 19 x 150 mm; Pokretna faza: ACN u vodi (10 mmol/L NH4HCO3), 5%-30% 7 min; Detektor: UV 254 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 523; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6+ D2O): δ 8.23 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.92 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.81 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.30 (d, J= 7.2 Hz, 1H), 3.91 (s, 2H), 3.82-3.76 (m, 1H), 3.18-3.13 (m, 1H), 3.06-3.00 (m, 1H), 2.92-2.89 (m, 1H), 2.73-2.68 (m, 1H).
PRIMER 306
(S)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
2
Korak A: (S)-terc-butil (3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksi propil)karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (S)-terc-butil(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (2.00 g, 2.08 mmol) i (2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)boronske kiseline (1.01 g, 5.19 mmol): LCMS [M 1]+: 986.
Korak B: (S)-terc-butil(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamat Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 275, Korak B, upotrebom (S)-terc-butil-3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (1.50 g, 1.52 mmol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1049, 1051 (1 : 1).
Korak C: (S)-terc-butil(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-cijanobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamat Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 275, Korak C, upotrebom (S)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (0.98 g, 0.93 mmol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 996.
Korak D: (S)-terc-butil(3-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksi benzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil) karbamat
U rastvor (S)-terc-butil(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil) -4-(2-cijanobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil sulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (0.60 g, 0.60 mmol) u EA (4 mL) i MeOH (8 mL) dodat je Pd(OH)2/C (20% Pd, 0.40 g, 0.60 mmol) na sobnoj temperaturi. Zatim je dodato 4 kapi konc. HCl. Reakciona smeša je degazirana vodonikom tri puta i mešana 16 časova na 25°C pod vodonikom (oko 30 atm.). Dobijena smeša je filtrirana i filter kolač je ispran sa MeOH (3 x 20 mL). Spojeni organski slojevi su koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio (S)-terc-butil(3-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil) karbamat kao čvrsta supstanca, koja je korišćena u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 1000.
Korak E: (S)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
2
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 274, Korak D, upotrebom (S)-terc-butil(3-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (0.58 g, 0.57 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima. Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona 100 Å, 10 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 3% B do 30% B 10 min; Detektor: 254 nm. Frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 540; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.19 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.94-7.78 (m, 2H), 7.02 (t, J= 7.6 Hz, 1H), 6.54 (dd, J= 7.4 Hz, 1.2 Hz, 1H), 6.51-5.45 (brs, 5H), 4.04 (s, 2H), 3.84-3.81 (m, 1H), 3.18-3.12 (m, 1H), 3.08-3.02 (m, 1H), 2.98-2.92 (m, 1H), 2.75-2.71 (m, 1H).
PRIMERI 307-309 u donjoj Tabeli su pripremljeni na analogan način onome koji je opisan za PRIMER 299, počevši od (S)-terc-butil (3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata i odgovarajućih boronskih kiselina ili boronskih estara, koji su pripremljeni kao što je ovde opisano, ili koji su dostupni iz komercijalnih izvora.
2 1
PRIMER 310
(S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(piperazin-2-ilmetil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A:(S)-di-terc-butil 2-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksi benzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)piperazin-1,4-dikarboksilat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (S)-di-terc-butil-2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)piperazin-1,4-dikarboksilata (1.00 g, 0.92 mmol) i (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (0.41 g, 2.30 mmol): LCMS [M 1]+: 1094.
Korak B: (S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(piperazin-2-ilmetil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (S)-di-terc-butil-2-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksi benzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) metil)piperazin-1,4-dikarboksilata (0.70 g, 0.64 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep C18 OBD Kolona 19 x 250 mm 10 µm; Pokretna faza A: voda sa 5 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 25% B 7 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz
2 2
naslova: LCMS [M 1]+: 534; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.17 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.55 (brs, 3H), 6.90 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.48 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.15 (brs, 2H), 6.04 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 3.23-3.16 (m, 1H), 3.06-2.89 (m, 5H), 2.73 (d, J = 8.4 Hz, 2H), 2.69-2.53 (m, 1H).
PRIMER 311
(S)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N-(piperazin-2-ilmetil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (2S)-di-terc-butil-2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(((terc-butoksi karbonil)amino)metil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(1-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)piperazin-1,4-dikarboksilat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (2S)-di-terc-butil-2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)piperazin-1,4-dikarboksilata (0.50 g, 0.46 mmol) i terc-butil ((4-(5,5-dimetil-1,3,2-dioksaborinan-2-il)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)karbamata (0.66 g, 1.84 mmol): LCMS [M 1]+: 1208.
Korak B: (S)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(piperazin-2-ilmetil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (2S)-di-terc-butil-2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(((tercbutoksikarbonil)amino)metil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(1-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)piperazin-1,4-dikarboksilata (0.3 g, 0.25 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep C18 OBD Kolona 19 x 250 mm, 10 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 3% B do 25% B 7 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova LCMS [M 1]+: 548; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.22 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 7.90 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.80 (t, J= 7.9 Hz, 1H), 6.30 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 3.97 (s, 2H), 3.22-2.80 (m, 5H), 2.71-2.67 (m, 2H); 2.55-2.51 (m, 2H).
2
PRIMERI 312-313 u donjoj Tabeli su pripremljeni na analogan način onome koji je opisan za PRIMER 310, počevši od (S)-di-terc-butil 2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)piperazin-1,4-dikarboksilata i odgovarajućih boronskih kiselina ili boronskih estara, koji su pripremljeni kao što je ovde opisano, ili koji su dostupni iz komercijalnih izvora.
PRIMER 314
(R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(piperazin-2-ilmetil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-di-terc-butil 2-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksi benzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) metil)piperazin-1,4-dikarboksilat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (R)-di-terc-butil-2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-
2 4
tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)piperazin-1,4-dikarboksilata (1.00 g, 0.92 mmol) i (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (0.33 g, 1.84 mmol): LCMS [M 1]+: 1094.
Korak B: (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(piperazin-2-ilmetil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (R)-di-terc-butil-2-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksi benzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) metil)piperazin-1,4-dikarboksilata (0.60 g, 0.55 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep C18 OBD Kolona 19 x 250 mm, 10 µm; Pokretna faza A: voda sa 5 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 25% B 7 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 534; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.17 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.97 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.50 (brs, 3H), 6.90 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 6.48 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.15 (brs, 2H), 6.04 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 3.19-3.09 (m, 1H), 3.06-3.03 (m, 3H), 2.98-2.89 (m, 2H), 2.76-2.72 (m, 2H), 2.58-2.54 (m, 1H).
PRIMERI 315-316 u donjoj Tabeli su pripremljeni na analogan način onome koji je opisan za PRIMER 314, počevši od (R)-di-terc-butil 2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)piperazin-1,4-dikarboksilata i odgovarajućih boronskih kiselina ili boronskih estara, koji su pripremljeni kao što je ovde opisano, ili koji su dostupni iz komercijalnih izvora.
2
PRIMER 317
(R)-N1-(1-aminopropan-2-il)-4-(2-aminopiridin-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A:(R)-benzil(2-(4-(2-aminopiridin-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil(karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (R)-benzil 2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)karbamata (0.70 g, 0.71 mmol) i 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-amina (0.39 g, 1.78 mmol): LCMS [M 1]+: 948.
Korak B: (R)-N1-(1-aminopropan-2-il)-4-(2-aminopiridin-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Rastvor (R)-benzil(2-(4-(2-aminopiridin-4-il)-2-(N,N-bis (4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)propil)karbamata (0.40 g, 0.42 mmol) u TFA (5 mL) je mešan na 80°C 3 časa. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep C18, 19 mm x 250 mm, 10 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 20% B 6 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 454; 1 H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.74 (d, J =
2
8.4 Hz, 1H), 8.07 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.77 (d, J= 6.8 Hz, 1H), 6.86 (s, 1H), 6.54 (dd, J= 6.4 Hz, 1.6 Hz, 1H), 3.92-3.87 (m, 1H), 3.15-3.11 (m, 1H), 3.05-3.00 (m, 1H), 1.13 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
PRIMER 318
(R)-N1-(1-aminopropan-2-il)-4-(6-aminopiridin-2-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-benzil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (R)-benzil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksi benzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)karbamata (0.65 g, 0.66 mmol) i (6-bromopiridin-2-il)boronske kiseline (0.13 g, 0.66 mmol): LCMS [M 1]+: 1011, 1013.
Korak B: (R)-benzil (2-(4-(6-aminopiridin-2-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)karbamat
U rastvor (R)-benzil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) propil)karbamata (0.20 g, 0.15 mmol) u 1,4-dioksanu (2 mL) dodat je 2,2,2-trifluoroacetamid (0.08 g, 0.74 mmol), bakar (I) jodid (14.11 mg, 0.07 mmol), Cs2CO3(0.15 g, 0.45 mmol) i N1,N2-dimetiletan-1,2-diamin (13.07 mg, 0.15 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 4 časa pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodom (50 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 10% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 948.
Korak C: (R)-N1-(1-aminopropan-2-il)-4-(6-aminopiridin-2-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Rastvor (R)-benzil(2-(4-(6-aminopiridin-2-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil) karbamata (0.12 g, 0.13 mmol) u TFA (3 mL) je mešan na 80°C 2 časa. Dobijeni rastvor je koncentrovana pod vakuumom. Sirovi
2
proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep C18 OBD Kolona 19 x 250 mm, 10 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 25% B 7 min; Detektor: 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 5.51 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 454; 1 H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.26 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.91 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.19 (brs, 3H), 6.97 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.25 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 5.88 (brs, 2H), 5.49 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 3.61-3.51 (m, 1H), 2.85-2.83 (m, 2H), 1.05 (d, J = 6.4 Hz, 3H).
PRIMER 319
N1-((3R,4S)-4-aminopirolidin-3-il)-4-(2-aminohinolin-8-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (3R,4S)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-(2-((4-metoksibenzil)amino)hinolin-8-il)fenilsulfonamido)-4-((terc-butoksikarbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (3R,4S)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-4-((terc-butoksikarbonil)amino)pirolidin-1-karboksilata (0.45 g, 0.42 mmol) i (2-((4-metoksibenzil) amino)hinolin-8-il)boronske kiseline (0.15 g, 0.50 mmol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1211.
Korak B: N1-((3R,4S)-4-aminopirolidin-3-il)-4-(2-aminohinolin-8-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (3R,4S)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-(2-((4-metoksibenzil)amino)hinolin-8-il)fenilsulfonamido)-4-((tercbutoksikarbonil)amino)pirolidin-1-karboksilata (0.29 g, 0.24 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD, 100 Å, 5 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda (10 mmol/L NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 7% B do 30% B 7
2
min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 531; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.19 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.46 (d, J= 6.6 Hz, 1H), 6.84-6.79 (m, 1H), 6.75-6.72 (m, 2H), 6.32 (brs, 2 H), 3.86-3.77 (m, 1H), 3.52-3.23 (m, 4H), 2.90-2.83 (m, 1H).
PRIMER 320
N1-((3R,4S)-4-aminopirolidin-3-il)-4-(1H-pirolo[3,2-b]piridin-6-il-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (3R,4S)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-(1H-pirolo[3,2-b]piridin-6-il)fenilsulfonamido)-4-((tercbutoksikarbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (3R,4S)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-4-((terc-butoksikarbonil) amino)pirolidin-1-karboksilata (0.80 g, 0.74 mmol) i (1H-pirolo[3,2-b] piridin-6-il)boronske kiseline (0.27 g, 1.64 mmol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1065.
Korak B: N1-((3R,4S)-4-aminopirolidin-3-il)-4-(1H-pirolo[3,2-b]piridin-6-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 274, Korak D, (3R,4S)-tercbutil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-(1H-pirolo[3,2-b]piridin-6-il)fenilsulfonamido)-4-((terc-butoksikarbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat (0.49 g, 0.46 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen sa sledećim uslovima: Kolona: Sunfire Prep C18 OBD Kolona, 10 µm, 19 x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 6% B do 22% B 9 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 505; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 11.42 (s, 1H), 8.27 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.96-7.76 (m, 2H), 7.58 (t, J= 7.3 Hz, 1H), 7.20 (d, J= 7.6 Hz, 1H), 6.45-6.41 (m, 1H), 3.77-3.72 (m, 1H), 3.54-3.37 (m, 1H), 3.23-3.07 (m, 3H), 2.79-2.74 (m, 1H).
2
PRIMER 321
N1-((3R,4S)-4-aminopirolidin-3-il)-4-(2-aminotiazol-5-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (3R,4S)-terc-butil-3-(4-(2-aminotiazol-5-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-4-((tercbutoksi karbonil)amino) pirolidin-1-karboksilat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (3R,4S)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-4-((terc-butoksikarbonil)amino) pirolidin-1-karboksilata (0.80 g, 0.74 mmol) i terc-butil (5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)tiazol-2-il)karbamata (0.36 g, 1.12 mmol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1147.
Korak B: N1-((3R,4S)-4-aminopirolidin-3-il)-4-(2-aminotiazol-5-il)-3-(2H-tetrazol-5-il) benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 274, Korak D, upotrebom (3R,4S)-terc-butil-3-(4-(2-aminotiazol-5-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-4-((terc-butoksikarbonil)amino)pirolidin-1-karboksilata (0.56 g, 0.54 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep Amide OBD Kolona 19 x 150 mm, 5 µm 13 nm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 90% B do 60% B 10 min; Detektor: 254 nm. Frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 487; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6+ DCl): δ 8.13 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.87 (d, J= 8.6 Hz, 1H), 6.68 (s, 1H), 3.68-3.60 (m, 1H), 3.46-3.40 (m, 1H), 3.22-3.09 (m, 3H), 2.80-2.76 (m, 1H).
PRIMER 322
4-(2-Amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((3S,4R)-4-aminopirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
2
Korak A: (3S,4R)-terc-butil 3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-4-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor (3R,4S)-terc-butil 3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-(2-(N,N-bis (4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (9.50 g, 8.60 mmol) u 1,4-dioksanu (100 mL) i vodi (25 mL) dodata je (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina (3.79 g, 21.4 mmol), Na2CO3(2.72 g, 25.7 mmol) i Pd(PPh3)4(1.98 g, 1.70 mmol). Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta i mešana na 80°C 4 časa pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Spojeni organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 80% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1114.
Korak B: 4-(2-Amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((3S,4R)-4-aminopirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 274, Korak D, (3S,4R)-tercbutil-3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-4-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat (5.80 g, 5.20 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: Atlantis Prep C18 Kolona, Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3; Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 100 mL/min; Gradijent: 5% B do 5% B 5 min, 5% B do 20% B 15 min; Detektor: 254 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 520; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.20 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.89 (dd, J= 7.7 Hz, 1.1 Hz, 1H), 6.46 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 6.13 (brs, 2H), 6.03 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 3.79 (q, J = 5.9 Hz, 1H), 3.52 (q, J= 6.2 Hz, 1H), 3.30-3.21 (m, 3H), 2.94-2.82 (m, 1H).
2 1
PRIMER 323
4-(2-((S)-1-amino-2-hidroksietil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((3S,4R)-4-aminopirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (3R,4S)-terc-butil-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor (3R,4S)-terc-butil-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirolidin-1-karboksilata (2.0 g, 1.80 mmol) u 1,4-dioksanu (12 mL) i vodi (3 mL) dodat je 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzen-1,2-diamin (1.67 g, 7.21 mmol), Na2CO3(0.57 g, 5.41 mmol) i Pd(PPh3)4(0.42 g, 0.36 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je zračena mikrotalasnim zračenjem na 100°C 0.5 časa pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS ([M 1]+: 1089.
Korak B: (3S,4R)-terc-butil 3-(2'-amino-3'-((R)-3-(benziloksi)-2-((terc-butoksikarbonil) amino)propanamido)-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)-4-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat
U mešani rastvor (3R,4S)-terc-butil-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.75 g, 0.69 mmol) u THF (7 mL) dodata je (R)-3-(benziloksi)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)propionska kiselina (0.22 g, 0.76 mmol), HATU (0.52 g, 1.38 mmol), TEA (0.29 mL, 2.07 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana 3 časa na 50°C pod azotom. Dobijena smeša je razblažena
2 2
vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1366. Korak C: (3S,4R)-terc-butil-3-(4-(2-((S)-2-(benziloksi)-1-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-4-(((benziloksi)karbonil)amino)pirolidin-1-karboksilat Rastvor (3S,4R)-terc-butil-3-(2'-amino-3'-((R)-3-(benziloksi)-2-((terc-butoksikarbonil)amino) propanamido)-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)-4-(((benziloksi)karbonil) amino) pirolidin-1-karboksilata (0.70 g, 0.51 mmol) u AcOH (8 mL) je mešan na 60°C 30 minuta. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobio (3S,4R)-terc-butil-3-(4-(2-((S)-2-(benziloksi)-1-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-4-(((benziloksi)karbonil) amino)pirolidin-1-karboksilat kao čvrsta supstanca, koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 1348.
Korak D: (3R,4S)-terc-butil-3-amino-4-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((S)-1-((terc-butoksikarbonil)amino)-2-hidroksietil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U rastvor (3S,4R)-terc-butil 3-(4-(2-((S)-2-(benziloksi)-1-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-4-(((benziloksi) karbonil)amino)pirolidin-1-karboksilata (0.55 g, 0.48 mmol) u MeOH (7 mL) dodat je Pd(OH)2/C (20% Pd, 0.8 g, 1.05 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana vodonikom tri puta. Smeša je mešana tri dana pod vodonikom na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1124.
Korak E: 4-(2-((S)-1-amino-2-hidroksietil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((3S,4R)-4-amino pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (3R,4S)-terc-butil-3-amino-4-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((S)-1-((tercbutoksikarbonil)amino)-2-hidroksietil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.30 g, 0.27 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X
2
Bridge Shield RP18 OBD Kolona 19 x 250 mm, 10 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 1% B do 23% B 16 min; Detektor: 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 14.0 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio 4-(2-((S)-1-amino-2-hidroksietil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((3S,4R)-4-aminopirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 564;<1>H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.79 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 8.17 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.84 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.50 (m, 1H), 7.16 (m, 1H), 4.61 (m, 1H), 4.22 (m, 3H), 3.89 (m, 1H), 3.80 (m, 1H), 3.55 (m, 1H), 3.35 (m, 2H).
PRIMERI 324-328 u donjoj Tabeli su pripremljeni na analogan način onome koji je opisan za PRIMER 323, počevši od (3R,4S)-terc-butil 3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido) pirolidin-1-karboksilata i odgovarajućih boronskih kiselina ili boronskih estara, koji su pripremljeni kao što je ovde opisano, ili koji su dostupni iz komercijalnih izvora.
2 4
LC/MS Pr. br. Struktura Hemijski naziv
M+H
PRIMER 329
4-(2-Amino-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2-aminoetil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: Terc-butil (2-(4-(2-amino-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil sulfonamido)etil)karbamat
U rastvor terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamata (0.9 g, 0.96 mmol) u 1,4-dioksanu (6 mL) i vodi (2 mL) dodata je (2-amino-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina (0.33 g, 1.73 mmol), Pd(PPh3)4(0.17 g, 0.15 mmol), Na2CO3(0.31 g, 2.89 mmol). Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je zračena mikrotalasnim zračenjem na 100°C 50 minuta. Dobijena smeša je razblažena vodom (30 mL), i zatim je ekstrahovan sa EA (3 x 30 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 30 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 30 mL), sušeni preko Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je
2
prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 10% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio terc-butil (2-(4-(2-amino-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil) karbamat kao čvrsta supstanca: [M 1]+: 953.
Korak B: 4-(2-Amino-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2-aminoetil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom terc-butil(2-(4-(2-amino-7-metil-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil) karbamata (0.50 g, 0.53 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep C18 OBD Kolona 19 x 250 mm 10 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 25 mL/min; Gradijent: 5% B do 25% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm: Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 493; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6+ D2O): δ 8.17 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.80 (d, J= 8.3 Hz, 1H), 6.36 (d, J= 7.9 Hz, 1H), 6.03 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 3.20 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.92 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 2.19 (s, 3H).
PRIMER 330
(S)-4-(2-(1-amino-2-hidroksietil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2-aminoetil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-terc-butil(1-((2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-il)amino)-3-hidroksi-1-oksopropan-2-il)karbamat
U mešani rastvor 2',3'-diamino-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-sulfonamida (2.0 g, 2.34 mmol) u DCM (20 mL) dodata je (R)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)-3-hidroksipropionska kiselina (0.53 g, 2.57 mmol), HATU (1.78 g, 4.67 mmol), TEA (0.98 mL, 7.01 mmol). Smeša je degazirana azotom tri
2
puta. Smeša je mešana 5 časova na sobnoj temperaturi pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (200 mL), i zatim je ekstrahovana sa DCM (3 x 200 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 200 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1043.
Korak B:(S)-terc-butil(1-(4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil) 2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-hidroksietil)karbamat
Rastvor (R)-terc-butil(1-((2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-il)amino)-3-hidroksi-1-oksopropan-2-il)karbamata (2.0 g, 1.92 mmol) u AcOH je mešan na 60°C 30 min. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 1025.
Korak C: 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((S)-1-((terc-butoksikarbonil) amino)-2-hidroksietil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina
U mešani rastvor (S)-terc-butil(1-(4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)-2-hidroksietil)karbamata (1.50 g, 1.50mmol) u THF (10 mL) dodat je TBAF (1.90 g, 6 mmol) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Smeša je razblažena sa EA (100 mL), isprana zasićenim vodenim rastvorom KHSO4(5 x 100 mL), sušena preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koje je korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 925.
Korak D: Terc-butil-N-[(1S)-1-[4-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]-2-hidroksietil]karbamat
U mešani rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((S)-1-((tercbutoksikarbonil)amino)-2-hidroksietil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (0.50 g, 0.54 mmol) dodat je terc-butil (2-aminoetil)karbamat (0.17 g, 1.10 mmol), TEA (0.22 mL, 1.60 mmol) na 0°C 10 minuta. Smeša je degazirana azotom tri puta. Zatim je NCS (0.15 g, 1.10 mmol) dodat u smešu. Smeša je
2
mešana na 0°C 1.5 čas pod azotom. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je rastvoren sa EA (50 mL), ispran fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 75% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1083.
Korak E: (S)-4-(2-(1-amino-2-hidroksietil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2-aminoetil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom terc-butil-N-[(1S)-1-[4-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]-2-hidroksietil]karbamata (0.50 g, 0.46 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep C18 OBD Kolona, 5 µm, 19 x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 25 mL/min; Gradijent: 5% B do 25% B 10 min; Detektor: 254 i 220 nm;. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 523; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.69-8.67 (m, 1H), 8.15-8.10 (m, 1H), 7.83-7.77 (m, 1H), 7.51-7.44 (m, 1H), 7.33-7.14 (m, 1H), 4.90-4.81 (m, 1H), 4.21-4.17 (m, 2H), 3.46 (t, J= 6.0 Hz, 2H), 3.20 (t, J= 6.0 Hz, 2H).
PRIMER 331
(R)-4-(2-(1-amino-2-hidroksietil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2-aminoetil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: Terc-butil-N-[(1S)-1-{[2-amino-3-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)fenil]karbamoil}-2-(benziloksi)etil]karbamat
2
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 274, Korak D, upotrebom terc-butil(2-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)karbamata i (S)-3-(benziloksi)-2-((tercbutoksikarbonil)amino)propionske kiseline da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]+: 1191.
Korak B: Terc-butil-N-[(1R)-2-(benziloksi)-1-[4-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]etil]karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 323, Korak C, upotrebom terc-butil-N-[(1S)-1-{[2-amino-3-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)fenil]karbamoil}-2-(benziloksi)etil]karbamata da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1173.
Korak C: Terc-butil-N-[(1R)-1-[4-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]-2-hidroksietil]karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 323, Korak D, upotrebom terc-butil-N-[(1R)-2-(benziloksi)-1-[4-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]etil]karbamata da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1083.
Korak D: (R)-4-(2-(1-amino-2-hidroksietil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2-aminoetil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom terc-butil-N-[(1R)-1-[4-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]-2-hidroksietil]karbamata da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 523; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.69 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 8.12 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.81 (d, J= 8.8 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.90-4.81 (m, 1H), 4.21-4.18 (m, 2H), 3.46 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.19 (t, J = 5.6 Hz, 2H).
PRIMER 332
2
(R)-2-amino-N-(2-amino-3-hidroksipropil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
Korak A: Metil-2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilat
U rastvor terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamata (0.85 g, 0.91mmol) u 1,4-dioksanu (6 mL) i vodi (1.5 mL) dodati su Pd(PPh3)4(0.21 g, 0.18 mmol), metil 2-amino-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il) benzoat (0.76 g, 2.73 mmol), pripremljeni praćenjem detalja opisanih u Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, 2012, 22: 3327-3331) i Na2CO3(0.29 g, 2.73 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta. Dobijena smeša je zagrevana do 80°C i mešana 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio metil-2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilat kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]+: 957.
Korak B: 2-Amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilna kiselina
U mešani rastvor metil-2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilata (0.6 g, 0.63 mmol) u THF (3 mL) i MeOH (3 mL) dodat je NaOH (0.40 g, 10 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakcioni rastvor je mešan 16 časova. pH vrednost rastvora je podešena do 4 sa HCl (20%). Smeša je filtrirana. Filtrat je ispran vodom da bi se dobila 2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)- 4'-(N-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilna kiselina kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]+: 943.
Korak C: Benzil-N-[(2R)-1-{[2-amino-3-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)fenil]formamido}-3-hidroksipropan-2-il]karbamat
U rastvor 2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilne kiseline (0.48 g, 0.51 mmol) u DMF (5 mL) dodati su (R)-benzil (1-amino-3-hidroksipropan-2-il)karbamat (0.23 g, 1.02 mmol), HATU (0.39 g, 1.02 mmol) i DIEA (0.13 g, 1.02 mmol) uz mešanje na 0°C. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta. Dobijena smeša je zagrevana do sobne temperature i mešana 3 časa na sobnoj temp. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL), i zatim je ekstrahovan sa EA (3 x 50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 67% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1149.
Korak D: (R)-2-amino-N-(2-amino-3-hidroksipropil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom benzil N-[(2R)-1-{[2-amino-3-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)fenil]formamido}-3-hidroksipropan-2-il]karbamata (0.29 g, 0.25 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona 100 Å, 10 µm, 19 x 250 mm; 0°C Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 3% B do 3% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 5.6 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova : LCMS [M 1]+: 555; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.63 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.95 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.73 (dd, J= 7.6 Hz, 1.6 Hz, 1H), 7.08-7.00 (m, 2H), 3.82 (dd, J= 11.6 Hz, 4.0 Hz, 1H), 3.70 (dd, J = 11.6
1
Hz, 6.0 Hz" 1H), 3.66-3.63 (m, 2H), 3.50-3.48 (m, 1H), 3.43-3.39 (m, 2H), 3.18 (t, J= 6.0 Hz, 2H).
PRIMER 333
(S)-2-amino-N-(2-amino-3-hidroksipropil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
Korak A: Terc-butil N-[(2S)-1-{[2-amino-3-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-{2-[(4-metoksifenil)metil]-2H-1,2,3,4-tetrazol-5-il}fenil)fenil]formamido}-3-hidroksipropan-2-il] karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 332, Korak C, upotrebom (S)-terc-butil (1-amino-3-hidroksipropan-2-il)karbamata da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1115.
Korak B: (S)-2-amino-N-(2-amino-3-hidroksipropil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom terc-butil N-[(2S)-1-{[2-amino-3-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-{2-[(4-metoksifenil)metil]-2H-1,2,3,4-tetrazol-5-il}fenil)fenil]formamido}-3-hidroksipropan-2-il]karbamata da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 555; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.65 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.84-7.82 (m, 1H), 7.14-7.13 (m, 2H), 3.85-3.81 (m, 1H), 3.74-3.66 (m, 3H), 3.53-3.40 (m, 3H), 3.19-3.18 (m, 2H).
PRIMER 334
N-(2-aminoetil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
2
Korak A: Metil-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc-butoksikarbonil) amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilat U rastvor terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamata (0.6 g, 0.64 mmol) u 1, 4-dioksanu (20 mL) i vodi (7 mL) dodati su Pd(PPh3)4(0.15 g, 0.13 mmol), (3-(metoksikarbonil)fenil)boronska kiselina (0.35 g, 1.93 mmol), pripremljeni praćenjem detalja opisanih u Organic Letters, 2006, 8: 305-307) i Na2CO3(0.20 g, 1.93 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (200 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 200 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 200 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 942.
Korak B: 3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc-butoksikarbonil)amino) etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilna kiselina U mešani rastvor metil 3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilata (0.5 g, 0.53 mmol) u THF (5 mL) i MeOH (5 mL) dodat je vodeni rastvor LiOH (1 M) (5 mL, 5.00 mmol) na sobnoj temperaturi. Rastvor je mešan 16 časova na sobnoj temperaturi. pH vrednost reakcionog rastvora je podešena do 4 sa vodenim rastvorom HCl (20%). Dobijena smeša je filtrirana. Filter kolač je ispran vodom i sušen u peći da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 928.
Korak C: Terc-butil-N-[2-({[(2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-{3-[(2-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}etil)karbamoil]fenil}-3-[(2E,4E)-1-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1{3}-oksidan]
sulfinil}amino)etil]karbamat
U mešani rastvor 3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilne kiseline (0.2 g, 0.22 mmol), HATU (0.12 g, 0.32 mmol) i terc-butil (2-aminoetil)karbamata (0.14 g, 0.86 mmol) u DMF (2 mL) dodat je DIEA (0.06 mL, 0.32 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta. Rastvor je mešan na 0°C 4 časa pod azotom. Dobijeni rastvor je razblažen vodom (50 mL) i ekstrahovan sa EA (3 x 50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 45% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1070.
Korak D: N-(2-aminoetil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom terc-butil-N-[2-({[(2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-{3-[(2-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}etil)karbamoil]fenil}-3-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1{3}-oksidan]sulfinil}amino)etil]karbamata (0.2 g, 0.20 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona, 100 Å, 5 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda (0.05% TFA), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 30% B 8 min; Detektor: 254 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio N-(2-aminoetil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 510;<1>H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.58 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.97 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.84-7.82 (m, 1H), 7.69-7.68 (m, 1H), 7.41-7.37 (m, 1H), 7.21-7.19 (m, 1H), 3.67-3.64 (m, 2H), 3.67-3.64 (m, 2H), 3.18-3.12 (m, 4H).
PRIMER 335
(R)-N1-(2-aminoetil)-4-(2-(1,2-diaminoetil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
4
Korak A: Terc-butil (2-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)karbamat
U rastvor 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzen-1,2-diamina (2.51 g, 10.71 mmol, pripremljen kao što je opisano u WO2006/005915 ili komercijalno dostupan) u 1,4-dioksanu (25 mL) i vodi (12 mL) dodati su Na2CO3(1.70 g, 16.06 mmol), terc-butil(2-(2-(N,N bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamat (5.00 g, 5.35 mmol) i Pd(PPh3)4(0.62 g, 0.54 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta i mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (200 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 250 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 500 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 500 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 65% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+ : 914.
Korak B: Terc-butil-N-{2-[(4-{2-amino-3-[(2R)-2,3-bis({[(terc-butoksi)karbonil]amino}) propanamido]fenil}-2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-3-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]benzen)sulfonamido]etil} karbamat
U rastvor terc-butil (2-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-il-sulfonamido)etil)karbamata (1.10 g, 1.20 mmol) u THF (15 mL) dodata je (R)-2,3-bis((terc-butoksikarbonil)amino)propionska kiselina (0.55 g, 1.8 mmol), TEA (0.5 mL, 3.60 mmol) i HATU (1.60 g, 4.21 mmol) na 0°C 10 minuta. Smeša je degazirana azotom tri puta i mešana na 0°C 1.5 čas pod azotom. Dobijena smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa EA (100 mL), i ispran vodom (3 x 40 mL) i fiziološkim rastvorom (40 mL). Spojeni organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1200.
Korak C: Terc-butil N-[(2R)-2-[4-(3-{bis[(4-metoksifenil)metillsulfamoil]-4-[(2-{[(tercbutoksi)karbonillamino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]-2-{[(terc-butoksi)karbonil]amino}etil]karbamat
Rastvor terc-butil-N-{2-[(4-{2-amino-3-[(2R)-2,3-bis({[(terc-butoksi)karbonil]amino}) propanamido]fenil}-2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-3-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]benzen)sulfonamido]etil}karbamata (1.10 g, 0.92 mmol) u AcOH (10 mL) je mešan 0.5 časa na 60°C. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koje je korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 1182.
Korak D: (R)-N1-(2-aminoetil)-4-(2-(1,2-diaminoetil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Rastvor terc-butil-N-[(2R)-2-[4-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]-2-{[(terc-butoksi)karbonil]amino}etil]karbamata (1.00 g, 0.85 mmol) u TFA (10 mL) je mešan 1 čas na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je koisparavan sa anizolom (3 x 8 mL) pod vakuumom i korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. Sirovi proizvod je dodat u TFA (10 mL). Rastvor je mešan na 80°C 1 čas. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom i korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. Sirovi proizvod je rastvoren u THF (10 mL) i vodi (10 mL). U smešu je dodat NaOH (0.40 g, 10 mmol). Reakciona smeša je mešana 2 časa na sobnoj temp. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge BEH C18 OBD Prep Kolona, 19 x 250 mm, 10 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 3% B do 20% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 522; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.58 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.62-7.55 (m, 1H), 7.33-7.24 (m, 1H), 7.04 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.86-4.81 (m, 1H), 3.69-3.64 (m, 1H), 3.54-3.47 (m, 1H), 3.43-3.40 (m, 2H), 3.18-3.12 (t, J = 5.6 Hz, 2H).
PRIMER 336
(S)-N1-(2-aminoetil)-4-(2-(1,2-diaminoetil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A:Terc-butil-N-{2-[(4-{2-amino-3-[(2S)-2,3-bis({[(terc-butoksi)karbonil]amino}) propanamido]fenil}-2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-3-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il] benzen)sulfonamido]etil}karbamat
U rastvor terc-butil(2-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)karbamata (1.00 g, 1.10 mmol) u THF (15 mL) dodata je (S)-2,3-bis((terc-butoksikarbonil)amino)propionska kiselina (0.50 g, 1.60 mmol), TEA (0.45 mL, 3.30 mmol) i HATU (1.45 g, 3.80 mmol) na 0°C 10 minuta. Smeša je degazirana azotom tri puta i mešana na 0°C 1.5 čas pod azotom. Dobijena smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa EA (100 mL). Organska faza je isprana vodom (3 x 60 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 40 mL). Organski sloj je sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1200.
Korak B: Terc-butil-N-[(1S)-1-[4-(3-ibis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-1[(tercbutoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]1-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]-2-{[(terc-butoksi)karbonil]amino}etil]karbamat
Rastvor terc-butil-N-{2-[(4-{2-amino-3-[(2S)-2,3-bis({[(terc-butoksi) karbonil]amino})propanamido]fenil}-2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-3-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]benzen)sulfonamido]etil}karbamata (1.00 g, 0.83 mmol) u AcOH (10 mL) je mešan 0.5 časa na 60°C. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz naslova, koje je korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 1182.
Korak C: (S)-N1-(2-aminoetil)-4-(2-(1,2-diaminoetil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Rastvor terc-butil-N-[(1S)-1-[4-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]-2-{[(terc-butoksi)karbonil]amino}etil]karbamata (0.90 g, 0.76 mmol) u TFA (10 mL) ke mešan 1 čas na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je koisparavan a anizolom (3 x 8 mL) pod vakuumom i korišćen direktno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. Sirovi proizvod dodat je TFA (10 mL). Rastvor je mešan na 80°C 1 čas. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom i korišćen direktno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. Sirovi proizvod je rastvoren u THF (10 mL) i vodi (10 mL). U smešu je dodat NaOH (400 mg, 10 mmol). Reakciona smeša je mešana 2 časa na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge BEH C18OBD Prep Kolona, 19 x 250 mm, 10 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 3% B do 20% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 522; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.57 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.57 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.28 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 4.72-4.70 (m, 1H), 3.64-3.59 (m, 1H), 3.42-3.40 (m, 2H), 3.20-3.18 (m, 3H).
PRIMER 337
N1-(2-aminoetil)-4-(2-(2-aminoetil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A:Terc-butil (3-((2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksi benzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-il)amino)-3-oksopropil)karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 331, Korak A, upotrebom 3-((terc-butoksikarbonil)amino)propionske kiseline da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1027.
Korak B: Terc-butil (2-(4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 331, Korak B, upotrebom terc-butil(3-((2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-il)amino)-3-oksopropil)karbamata da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 1009.
Korak C: 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 331, Korak C, upotrebom terc-butil(2-(4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)etil)karbamata da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 909.
Korak D: Terc-butil-N-{2-[4-(3-{bis(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]etil}karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 331, Korak D, upotrebom 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca LCMS [M 1]<+>: 1067.
Korak E: N1-(2-aminoetil)-4-(2-(2-aminoetil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom terc-butil-N-{2-[4-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]etil}karbamata da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 507; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.70 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.43 (t, J = 8.1 Hz, 1H), 7.11 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 3.67-3.62 (m, 2H), 3.58-3.53 (m, 2H), 3.47-3.43 (m, 2H), 3.20-3.16 (m, 2H).
PRIMER 338
5'-Amino-N4-(2-aminoetil)-2-(2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-3,4-disulfonamid
Korak A: terc-butil(2-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-5'-okso-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil) karbamat U rastvor terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamata (3.00 g, 3.20 mmol) u 1,4-dioksanu (35 mL) i vodi (8 mL) dodata je (3-oksocikloheks-1-en-1-il)boronska kiselina (1.80 g, 12.80 mmol), Na2CO3(1.02 g, 9.60 mmol) i Pd(PPh3)4(0.74 g, 0.64 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 24 časa pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL) i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio terc-butil (2-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-5'-okso-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)karbamat kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 902.
Korak B: Terc-butil(2-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-5'-((S)-1,-dimetiletil sulfinamido)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)karbamat
U rastvor terc-butil(2-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-5'-okso-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)karbamata (2.50 g, 2.80 mmol) u THF (20 mL) dodat je (S)-2-metilpropan-2-sulfinamid (1.68 g, 12.80 mmol), Ti(OiPr)4(40 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 80°C 2 časa. Zatim je reakciona smeša hlađena do sobne temperature. Dodat je NaBH4(0.42 g, 11.10 mmol) i reakciona smeša je mešana 1 čas. Dobijena smeša je ugašena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan
1
pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 30% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio terc-butil(2-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-5'-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)karbamat kao ulje: LCMS [M 1]+: 1007.
Korak C: 5'-Amino-N4-(2-aminoetil)-2-(2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-3,4-disulfonamid
U mešani rastvor terc-butil(2-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-5'-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)karbamata (1.15 g, 1.31 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL) dodat je rastvor zasićenog HCl u dioksanu (20 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi.1 čas. Dobijeni rastvor je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je ko-isparavan sa anizolom (3 x 3 mL) pod vakuumom i korišćen direktno us ledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. U sirovi proizvod je dodat TFA (10 mL). Rastvor je mešan na 80°C 1 čas. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep C18 OBD Kolona 19 x 250 mm 10 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 25 mL/min; Gradijent: 5% B do 35% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 6.51 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobio 5'-amino-N4-(2-aminoetil)-2-(2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-3,4-disulfonamid kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]+: 443; 1H NMR (400 MHz, D2O DCl): δ 6.42 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.85 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 3.48 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 1.77 (s, 1H), 1.37 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 1.21 (t, J = 5.6 Hz, 2H), -0.38- -0.14 (m, 6H).
PRIMERI 339 i 340
(R)-5'-amino-N4-((R)-pirolidin-3-il)-2-(2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-3,4-disulfonamid i (S)-5'-amino-N4-((R)-pirolidin-3-il)-2-(2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro -[1,1'-bifenil]-3,4-disulfonamid
11
Korak A: (R)-terc-butil-3-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-5'-okso-2'3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 338, Korak A, upotrebom (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (1.00 g, 1.04 mmol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 928.
Korak B: (3R)-terc-butil-3-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-5'-((S)-1,1-dimetiletil sulfinamido)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 338, Korak B, upotrebom (R)-terc-butil-3-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-5'-okso-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.60 g, 0.65 mmol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao pena: LCMS [M 1]+: 1033.
Korak C: (R)-5'-amino-N4-((R)-pirolidin-3-il)-2-(2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-3,4-disulfonamid i (S)-5'-amino-N4-((R)-pirolidin-3-il)-2-(2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-3,4-disulfonamid
Jedinjenja iz naslova su pripremljena kao što je opisano za PRIMER 338, Korak C, upotrebom (3R)-terc-butil-3-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-5'-((S)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.50 g, 0.50 mmol) da bi se dobili sirovi izomeri. Izomeri su odvojeni pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona 100 Å, 10 µm 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 25 mL/min; Gradijent: 2% B do 18% B 12 min; 254 nm/220nm; Vreme zadržavanja 6.50 min i 6.80 min; Temperatura: 25°C. Dobijen je brže eluirajući enantiomer (R)-5'-amino-N4-((R)-pirolidin-3-il)-2-(2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-3,4-disulfonamida: LCMS [M 1]+: 469; 1H NMR (400 MHz, D2O DCl): δ 5.91 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.30 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 2.93 (d, J = 16.4 Hz, 1H), 1.65-1.60 (m, 1H), 1.20 (brs, 1H), 0.96-0.72 (m, 4H), -0.34- -0.39 (m, 1H), -0.41- -0.43 (m, 4H), -0.80- -1.20 (m, 3H). Dobijen je sporije eluirajući enantiomer (S)-5'-amino-N4-((R)-pirolidin-3-il)-2-(2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-3,4-disulfonamida: LCMS [M 1]+: 469; 1H NMR (400 MHz, D2O DCl): δ 5.91 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 5.30 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 2.93 (d, J = 15.2 Hz, 1H), 1.67-1.61 (m, 1H), 1.23 (brs, 1H), 0.95-0.91 (m, 2H), 0.90-0.72 (m, 2H), -0.34- -0.41 (m, 1H), -0.49- -0.59 (m, 2H), -0.61- -1.30 (m, 5H).
12
PRIMER 341
4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-N-(3-aminopropil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
Korak A: Terc-butil-N-{2-[(2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-{3-[(3-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}propil)karbamoil]fenil}-3-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]benzen)sulfonamido] etil}karbamat
U mešani rastvor 3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilne kiseline (0.20 g, 0.22 mmol) u DMF (2 mL) dodat je terc-butil(3-aminopropil)karbamat (0.15 g, 0.86 mmol), HATU (0.12 g, 0.32 mmol) i DIEA (0.06 mL, 0.32 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta. Smeša je mešana 4 časa na sobnoj temp. pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL) i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1084.
Korak B: 4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-N-(3-aminopropil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom terc-butil-N-{2-[(2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-{3-[(3-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}propil)karbamoil]fenil}-3-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]benzen)sulfonamido]etil}karbamata (0.15 g, 0.14 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Select CSH Prep C18 OBD Kolona, 5 µm 19 x 150 mm; Pokretna faza A: voda sa 0.05% NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min;
1
Gradijent: 5% B do 35% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 6.78 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 524.1H NMR (300 MHz, CD3OD DCl): δ 8.60 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.81-7.78 (m, 1H), 7.60-7.58 (m, 1H), 7.43-7.38 (m, 1H), 7.26-7.23 (m, 1H), 3.54-3.47 (m, 2H), 3.51-3.38 (m, 2H), 3.20-3.16 (m, 2H), 3.08-2.98 (m, 2H), 2.09-1.93 (m, 2H).
PRIMER 342
4-((3S)-3-aminocikloheksil)-N1-(2-aminoetil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: 4-((3S)-3-aminocikloheksil)-N1-(2-aminoetil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
U mešani rastvor 5'-amino-N4-(2-aminoetil)-2-(2H-tetrazol-5-il)-2',3',4',5'-tetrahidro-[1,1'-bifenil]-3,4-disulfonamida (0.10 g, 0.22 mmol) u konc. HCl (1 mL) anid MeOH (6 mL) dodat je PtO2(30 mg, 0.13 mmol). Reakciona smeša je degazirana vodonikom tri puta i mešana 18 časova na 45°C pod vodonikom (20 atm). Dobijeni rastvor je filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep C18 OBD Kolona 19 x 250 mm, 10 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 25 mL/min; Gradijent: 5% B do 35% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M - 1]-: 443; 1HNMR (400 MHz, D2O DCl): δ 6.41 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.03 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 1.67 (s, 1H), 1.32 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 1.17 (d, J = 70 Hz, 2H), 0.10 (s, 1H), -0.08 (s, 2H), -0.25 (s, 2H), -0.37 (d, J = 17.0 Hz, 3H), -0.60 (d, J = 12.8 Hz, 1H).
PRIMER 343
N1-(2-aminoetil)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
14
Korak A: 2',3'-Diamino-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-sulfonamid
U mešani rastvor 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzen-1,2-diamina (2.7 g, 11.4 mmol) u dioksanu (30 mL) i vodi (10 mL) dodat je Na2CO3(1.8 g, 17.13 mmol), 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil) benzensulfonamid (5.00 g, 5.71 mmol) i Pd(PPh3)4(1.98 g, 1.71 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (200 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 200 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova LCMS [M 1]+: 856.
Korak B: Terc-butil(2-((2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-il)amino)-2-oksoetil)karbamat
U rastvor 2',3'-diamino-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil) -2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-sulfonamida (2.00 g, 2.34 mmol) u DMF (10 mL) dodata je 2-((terc-butoksikarbonil)amino)sirćetna kiselina (0.82 g, 4.67 mmol), HATU (1.33 g, 3.50 mmol) i DIEA (1.83 mL, 10.50 mmol) uz mešanje na 0°C. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 0°C 4 časa pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 20 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 20 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 20 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 75% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1013.
1
Korak C: Terc-butil ((4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H -tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-1H-benzo[d]imidazo1-2-il)metil)karbamat
U AcOH (20 mL) dodat je terc-butil(2-((2-amino-3'-(N,N-bis (4-metoksibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-il)amino)-2-oksoetil)karbamat (2.4 g, 2.37 mmol) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 60°C 30 minuta. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 70% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 995.
Korak D: 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(((terc-butoksikarbonil)amino)metil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina U rastvor terc-butil((4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)karbamata (1.20 g, 1.21 mmol) u THF (10 mL) dodat je TBAF (1 M rastvor u THF) (4.84 mL, 4.84 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na 0°C 1 čas. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 20 mL). Spojeni organski slojevi su isprani sa KHSO4(zasićeni, 5 x 30 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 20 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 895.
Korak E: Terc-butil-N-{[4-(3-{bis[(4-metoksifenil)metillsulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoksi) karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.]dodeka-1(11)2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil} karbamat
U rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(((terc-butoksikarbonil)amino)metil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksi benzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (0.5 g, 0.56 mmol) u THF (20 mL) dodat je NCS (0.12 g, 1.12 mmol), TEA (0.24 mL, 1.68 mmol) i terc-butil (2-aminoetil)karbamat (90 mg, 0.56 mmol) uz mešanje na 0°C. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 časa pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 90% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1053.
1
Korak F: N1-(2-aminoetil)-4-(2-(aminometil)-1H-benzordlimidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom terc-butil-N-{[4-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoksi) karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil}karbamata (0.37 g, 0.35 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona, 100 Å, 5 µm 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda (0.05% NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 30% B 8 min; Detektor: 254 nm; Vreme zadržavanja: 6.82 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 493; 1HNMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.70 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 8.12 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.84-7.81 (m, 1H), 7.50-7.48 (m, 1H), 7.18-7.16 (m, 1H), 4.75 (s, 2H), 3.46-3.44 (m, 2H), 3.30-3.19 (m, 2H).
PRIMER 344
4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-N-((3R,4R)-4-hidroksipirolidin-3-il)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
Korak A: (3R,4R)-terc-butil-3-(3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-ilkarboksamido)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 341, Korak A, upotrebom (3R,4R)-terc-butil 3-amino-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 1112.
Korak B: 4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-N-((3R,4R)-4-hidroksipirolidin-3-il)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (3R,4R)-terc-butil-3-(3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-
1
ilkarboksamido)-4-hidroksipirolidin-1-karboksilata da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 552;<1>H NMR (400 MHz, CD3OD+ DCl): δ 8.58 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.33 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.48-4.32 (m, 2H), 3.78-3.50 (m, 3H), 3.40-3.37 (m, 2H), 3.33-3.31 (s, 1H), 3.16-3.13 (m, 2H).
PRIMER 345
N1-(2-aminoetil)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: Terc-butil (2-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil) karbamat
U rastvor terc-butil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamata (3.0 g, 3.21 mmol) u 1,4-dioksanu (30 mL) i vodi (6 mL) dodata je (2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)boronska kiselina (1.56 g, 8.03 mmol), Na2CO3(1.02 g, 9.64 mmol) i Pd(PPh3)4(0.74 g, 0.64 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (70 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 956.
Korak B: Terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamat
U rastvor terc-butil(2-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il) fenilsulfonamido)etil)karbamata (2.0 g, 2.09 mmol) i Cu2Br (0.56 g, 2.51 mmol) u ACN (20 mL) dodat je terc-butil nitrit (0.35 g, 3.35 mmol) ukapavanjem na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i
1
filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 40% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1019, 1021 (1 : 1).
Korak C: Terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-cijanobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamat
U rastvor terc-butil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil sulfonamido)etil)karbamata (1.20 g, 1.18 mmol) u DMSO (8 mL) dodat je cijanobakar (0.32 g, 3.53 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 100°C 4 časa pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodenim rastvorom Na2CO3(100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 966.
Korak D: Terc-butil (2-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil) karbamat
U rastvor terc-butil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-cijanobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamata (0.55 g, 0.57 mmol) u EA (5 mL) i konc. HCl (2 kapi) dodat je Pd(OH)2/C (20% tež., 0.11 g, 0.16 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana vodonikom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 25°C 16 h pod vodonikom (20 atm). Dobijena smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 80% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 970.
Korak E: N1-(2-aminoetil)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il) benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom terc-butil(2-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamata (0.20 g, 0.21 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: X Bridge Prep C 18 OBD Kolona, 19 x 150 mm, 5 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L
1
NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 25% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 510; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6+ D2O): δ 8.23 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.88 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 7.05 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.61 (d, J = 7.5 Hz, 1H), 4.06 (s, 2H), 3.26 (t, J = 6.3 Hz, 2H), 2.98 (t, J = 6.0 Hz, 2H).
PRIMER 346
(R)-N-(3-amino-2-hidroksipropil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
Korak A: Terc-butil-N-{2-[(2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-(3-H(2S)-3-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}-2-hidroksipropil]karbamoil}fenil)-3-[(4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]benzen)sulfonamido]etil}karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 341, Korak A, upotrebom (S)-terc-butil (3-amino-2-hidroksipropil)karbamata da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 1100.
Korak B: (R)-N-(3-amino-2-hidroksipropil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bipheny]-3-karboksamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 341, Korak B, upotrebom terc-butil-N-{2-[(2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-(3-{[(2S)-3-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}-2-hidroksipropil]karbamoil}fenil)-3-[(4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]benzen)sulfonamido]etil}karbamata da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>. 540;<1>H NMR (300 MHz, CD3OD DCl): δ 8.61 (d,J= 8.1 Hz, 1H), 7.99 (d,J= 8.1 Hz, 1H), 7.83-7.80 (m, 1H), 7.64-7.63 (m, 1H), 7.43-7.37 (m, 1H), 7.28-7.24 (m, 1H), 4.05-3.99 (m, 1H), 3.54-3.52 (m, 2H), 3.49-3.41 (m, 2H), 3.25-3.08 (m, 3H), 2.91-2.85 (m, 1H).
PRIMER 347
2
(S)-N-(3-amino-2-hidroksipropil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
Korak A: terc-butil-N-{2-[(2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-(3-{[2S)-3-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}-2-hidroksipropil]karbamoil}fenil)-3-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]odeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il] benzen)sulfonamido]etil}karbamat
U rastvor 3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilne kiseline (0.25 g, 0.26 mmol) u DMF (5 mL) dodat je (R)-terc-butil (3-amino-2-hidroksipropil)karbamat (0.2 g, 1.08 mmol) i HATU (0.2 g, 0.54 mmol). DIEA (70 mg, 0.54 mmol) je dodat na 0°C. Dobijena smeša je mešana na 50°C 3 časa pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 60% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]+: 1100.
Korak B: (R)-N-(3-amino-2-hidroksipropil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom terc-butil-N-{2-[(2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-(3-{[(2S)-3-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}-2-hidroksipropil]karbamoil}fenil)-3-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il] benzen)sulfonamido]etil}karbamata (0.27 g, 0.25 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge Prep C18 OBD Kolona 19 x 150 mm, 5 µm; Pokretna faza A: voda (50 mmol/L NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20
21
mL/min; Gradijent: 5% B do 25% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 540; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.41-8.39 (m, 1H), 8.27 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.81 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 7.66 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.51 (s, 1H), 7.21 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.50 (brs, 3H), 3.89-3.69 (m, 1H), 3.32-3.28 (m, 3H), 3.04 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.91-2.82 (m, 1H), 2.75-2.58 (m, 2H).
PRIMER 348
N1-(2-aminoetil)-4-(1-(2-aminoetil)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: terc-butil (2-((4'-amino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3'-((2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)amino)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil])-4-sulfonamido)etil)karbamat
U mešanu smešu terc-butil (2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)etil)karbamata (2 g, 2.14 mmol) u 1,4-dioksanu (15 mL) i vodi (4 mL) dodati su Pd(PPh3)4(0.50 g, 0.43 mmol), terc-butil (2-((2-amino-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)amino)etil)karbamat (2.02 g, 5.35 mmol) i Na2CO3(0.68 g, 6.43 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 80% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1057. Korak B: terc-butil(2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(1-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)etil)karbamat
U mešanu smešu terc-butil(2-((4'-amino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3'-((2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)amino)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil])-4-
22
sulfonamido)etil)karbamata (0.7 g, 0.66 mmol) u trimetil ortoformatu (5 mL, 45.2 mmol) dodato je nekoliko kapi AcOH na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na 60°C 1 čas. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 65% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1067. Korak C: N1-(2-aminoetil)-4-(1-(2-aminoetil)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom terc-butil (2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(1-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)-1H-benzo[d]imidazol-6-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)etil) karbamata (0.5g, 0.47 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona 100Å, 10 µm 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda (10 mmol/L NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 1% B do 3% B 10 min; Detektor: 254 i 210 nm; Vreme zadržavanja: 6.31 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 507; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 9.64 (s, 1H), 8.62 (d, J= 10.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.77 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 7.31 (d, J = 11.2 Hz, 1H), 4.90-4.80 (m, 2H), 3.60-3.56 (m, 2H), 3.47-3.44 (m, 2H), 3.17-3.13 (m, 2H).
PRIMERI 349-361 u donjoj Tabeli su pripremljeni na analogan način onome koji je opisan za PRIMER 329, počevši od terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamata i odgovarajućih boronskih kiselina ili boronskih estara, koji su pripremljeni kao što je ovde opisano, ili koji su dostupni iz komercijalnih izvora.
2
24
2
PRIMER 362
(R)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(2-aminopiridin-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-terc-butil(2-(4-(2-aminopiridin-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil) karbamat Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata (1.0 g, 1.04 mmol) i 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-amina (0.46 g, 2.08 mmol): LCMS [M 1]+: 930.
Korak B: (R)-3-amino-2-(4-(2-aminopiridin-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazol-5-il)fenil sulfonamido)propil 2,2,2-trifluoroacetat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil(2-(4-(2-aminopiridin-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil) karbamata (0.39 g, 0.42 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod (R)-3-amino-2-(4-(2-aminopiridin-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-
2
tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil 2,2,2-trifluoroacetata kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]+: 806.
Korak C: (R)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(2-aminopiridin-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
U rastvor (R)-3-amino-2-(4-(2-aminopiridin-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil 2,2,2-trifluoroacetata (0.15 g, 0.265 mmol) u MeOH (3 mL) dodat je rastvor NaOH (42.4 mg, 1.061 mmol) u vodi (3 mL) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 časa pod azotom. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge Shield RP18 OBD Kolona, 5 µm 19 x 150 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 2% B do 19% B 8 min; Detektor: 254 nm; Vreme zadržavanja: 6.67 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 470; 1HNMR (400 MHz, CD3OD DCl) δ 8.37 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.54 (d, J = 5.6Hz, 1H), 6.15 (s, 1H), 6.05 (d, J = 5.6Hz, 1H), 3.76-3.62 (m, 1H), 3.49-3.41 (m, 1H), 3.39-3.31 (m, 1H), 3.11-3.01 (m, 1H), 3.01-2.89 (m, 1H).
PRIMER 363
(R)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-terc-butil(2-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata (2.80 g, 2.90 mmol) i 2-aminobenzo[d]tiazol-4-ilboronske kiseline (1.60 g, 5.81 mmol): LCMS [M 1]+: 986.
2
Korak B: (R)-terc-butil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat (0.65 g, 0.62 mmol) u 1,4-dioksanu
U suspenziju terc-butil nitrita (0.22 g, 2.11 mmol) i bakar (II) kromida (0.36 g, 1.58 mmol) u ACN (15 mL) dodat je (R)-terc-butil (2-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat (1.30 g, 1.32 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 časa pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 200 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1049, 1051 (1: 1).
Korak C: (R)-terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-cijanobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat
U rastvor (R)-terc-butil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata (0.65 g, 0.62 mmol) u 1,4-dioksanu (6.0 mL) dodat je Zn(CN)2(0.22 g, 1.86 mmol), prekatalizator t-Bu XPhos druge generacije (98 mg, 0.12 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 55°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 996.
Korak D: (R)-terc-butil(2-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksi benzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat
U rastvor (R)-terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-cijanobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil sulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata (0.20 g, 0.20 mmol) u MeOH (2.5 mL) i EA (2.5 mL) dodat je Pd(OH)2/C (20% tež., 28.2 mg, 0.04 mmol). Smeša je degazirana vodonikom tri puta. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 časa pod vodonikom. Dobijena smeša je filtriran i filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 91%
2
EAin MeOH. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1000.
Korak E: (R)-3-amino-2-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil 2,2,2-trifluoroacetat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil(2-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata (0.10 g, 0.10 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod (R)-3-amino-2-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil 2,2,2-trifluoroacetata kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]+: 636.
Korak F: (R)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazo1-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
U rastvor (R)-3-amino-2-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2-sulfamoil-3-(2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil 2,2,2-trifluoroacetata (75 mg, 0.12 mmol) u MeOH (1 mL) dodat je rastvor NaOH (19 mg, 0.47 mmol) u vodi (1 mL) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18 OBD Prep Kolona 100 Å, 10 µm 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 4% B do 23% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 540; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6+ DCl): δ 8.24 (d, J = 4.5 Hz, 1H), 7.87-7.82 (m, 2H), 7.02 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.06 (s, 2H), 3.20-3.15 (m, 2H), 2.90-2.80 (m, 2H), 2.68-2.72 (m, 1H).
PRIMER 364
(R)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(6-aminopiridin-2-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A:(R)-terc-butil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil) karbamat
2
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (R)-terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata (1.50 g, 1.56 mmol) i 2-bromo-6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridina (0.89 g, 3.11 mmol): LCMS [M 1]+: 993, 995 (1 : 1).
Korak B: (R)-terc-butil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-(6-(2,2,2-trifluoroacetamido)piridin-2-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat
U rastvor (R)-terc-butil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata (0.72 g, 0.72 mmol) u 1,4-dioksanu (6 mL) dodat je 2,2,2-trifluoroacetamid (0.41 g, 3.62 mmol), N1,N2-dimetiletan-1,2-diamin (63.9 mg, 0.72 mmol), CuI (69.0 mg, 0.36 mmol) i Na2CO3(0.23 g, 2.17 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta i zračena mikrotalasnim zračenjem na 120°C 1.5 čas. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 60% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1026.
Korak C: (R)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(6-aminopiridin-2-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Rastvor (R)-terc-butil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-(6-(2,2,2-trifluoroacetamido)piridin-2-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata (0.23 g, 0.22 mmol) u TFA (2 mL) je mešan 1 čas na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je ko-isparavan sa anizolom (3 x 5 mL) pod vakuumom i korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. TFA (2 mL) je dodat u sirovi proizvod. Rastvor je mešan na 80°C 1 čas. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u THF (2 mL), i u smešu je dodat NaOH (2 mL, 2 M). Reakciona smeša je degazirana azotom 3 puta i mešana 2 časa na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona 100Å, 10 µm 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 25% B 7 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 470; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl) δ 8.46 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.15 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.39 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.01 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 3.74-3.71 (m, 1H), 3.57-3.39 (m, 2H), 3.05 (d, J = 8.3 Hz, 2H).
PRIMER 365
(R)-N1-(2-amino-3-hidroksipropil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-benzil (1-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropan-2-il)karbamat U smešu (R)-benzil (1-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropan-2-il)karbamata (0.8 g, 0.8 mmol), 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il) piridine-2-amina (0.44 g, 2.0 mmol) i Pd(PPh3)4(0.19 g, 0.16 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL) dodat je rastvor Na2CO3(0.26 g, 2.4 mmol) u vodi (2.5 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta i mešana 12 časova na 80°C pod azotom. Dobijena smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, razblažena vodom (150 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL).Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 10% MeOH u EA da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 964.
Korak B: (R)-N1-(2-amino-3-hidroksipropil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il) benzen-1,2-disulfonamid
Rastvor (R)-benzil(1-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropan-2-il)karbamata (0.54 g, 0.56 mmol) u TFA (5 mL) je mešan na 80°C 1 čas. Dobijena smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature. Ostatak je rastvoren sa HCl ((30 mL, 1 mol/L). Vodena faza je ekstrahovana sa EA (10 mL) i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona 100Å, 10 µm 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 3% B do 20% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 470; 1HNMR (400 MHz, DMSO-d6): δ 8.18 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.75 (d, J =
1
8.4 Hz, 1H), 7.55 (s, 1H), 7.49-7.15 (brs, 3H), 6.72(d, J = 6.0 Hz, 1H), 6.15 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 5.99 (brs, 2H), 5.29-5.09 (brs, 1H), 3.59-3.42 (m, 2H), 3.21-3.15 (m, 2H), 3.11-3.02 (m, 1 H). PRIMER 366
(S)-4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-N1-((3-aminopirolidin-3-il)metil)-3-(2H-tetrazol-5-il) benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: 3-(2-Aminobenzo[d]tiazol-4-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 250, Korak A, upotrebom (2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)boronske kiseline (2.99 g, 15.41 mmol) da bi se dobilo željeno jedinjenje kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 898.
Korak B: 4-(2-Aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 250, Korak B, upotrebom 3-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (3.0 g, 3.34 mmol): LCMS [M 1]+: 798. Korak C: (S)-terc-butil-3-amino-3-((4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil sulfonamido)metil)pirolidin-1-karboksilat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 250, Korak C, upotrebom 4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (0.50 g, 0.63 mmol): LCMS [M 1]+: 1011.
Korak D: (S)-4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-N1-((3-aminopirolidin-3-il)metil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 250, Korak D, upotrebom (S)-terc-butil-3-amino-3-((4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksi benzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)pirolidin-1-karboksilata (0.35 g, 0.35 mmol) da bi se dobilo željeno jedinjenje kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]+: 551; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.73 (dd, J = 8.2 Hz, 2.4 Hz, 1H), 8.06 (d,
2
J = 8.2 Hz, 1H), 7.78 (dd, J = 8.1 Hz, 1.0 Hz, 1H), 7.29-7.26 (m, 1H), 7.10-7.16 (m, 1H), 3.86-3.55 (m, 6H), 2.58 (m, 1H), 2.41 (m, 1H).
PRIMER 367
(R)-4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-N1-((3-aminopirolidin-3-il)metil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A:(R)-terc-butil-3-amino-3-((4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksi benzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)pirolidin-1-karboksilat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 250, Korak C, upotrebom 4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (500 mg, 0.627 mmol) i (S)-terc-butil 3-amino-3-(aminometil)pirolidin-1-karboksilata (202 mg, 0.940 mmol): LCMS (ESI) [M 1]+: 1011.
Korak B: (R)-4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-N1-((3-aminopirolidin-3-il)metil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 250, Korak D, upotrebom (R)-terc-butil 3-amino-3-((4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksi benzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)pirolidin-1-karboksilata (0.35 g, 0.35 mmol) da bi se dobilo željeno jedinjenje kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]+: 551; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.73 (dd, J = 8.2 Hz, 2.3 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.78 (dd, J =8.1 Hz, 1.0 Hz, 1H), 7.29-7.25 (m, 1H), 7.13-7.04 (m, 1H), 3.81 (dd, J = 13.4 Hz, 3.6 Hz, 1H), 3.72-3.69 (m, 1H), 3.68-3.53 (m, 4H), 2.65-2.49 (m, 1H), 2.42-2.38 (m, 1H)
PRIMER 368
(S)-4-(6-aminopiridin-3-il)-N1-((3-aminopirolidin-3-il)metil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: 3-(6-Aminopiridin-3-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 250, Korak A, upotrebom 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-amina (2.83 g, 12.84 mmol): LCMS ([M 1]+: 842.
Korak B: 4-(6-Aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 250, Korak B, upotrebom 3-(6-aminopiridin-3-il)-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamido (2.4 g, 2.85 mmol): LCMS [M 1]+: 742.
Korak C: (S)-terc-butil-3-amino-3-((4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)pirolidin-1-karboksilat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 250, Korak C, upotrebom 4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (0.40 g, 0.54 mmol) da bi se dobilo željeno jedinjenje kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]+: 955.
Korak D: (S)-4-(6-aminopiridin-3-il)-N1-((3-aminopirolidin-3-il)metil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 250, Korak D, upotrebom (S)-terc-butil-3-amino-3-((4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil) pirolidin-1-karboksilata (0.28 g, 0.29 mmol): LCMS [M 1]+: 495; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.69 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 80 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 20 Hz, 1H), 7.51 (dd, J = 9.2 Hz, 20 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 3.78 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 3.71 (m, 1H), 3.59 (m, 4H), 2.54 (m, 1H), 2.41 (m, 1H).
PRIMER 369
(R)-4-(6-aminopiridin-3-il)-N1-((3-aminopirolidin-3-il)metil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
4
Korak A: (R)-terc-butil 3-amino-3-((4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil)pirolidin-1-karboksilat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 250, Korak C, upotrebom 4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (0.40 g, 0.54 mmol) i (S)-terc-butil 3-amino-3-(aminometil)pirolidin-1-karboksilata (0.17 g, 0.81 mmol) da bi se dobilo željeno jedinjenje kao čvrsta supstanca: LCMS [M 1]<+>: 955.
Korak B: (R)-4-(6-aminopiridin-3-il)-N1-((3-aminopirolidin-3-il)metil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 250, Korak D, upotrebom (R)-terc-butil-3-amino-3-((4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)metil) pirolidin-1-karboksilata (0.26 g, 0.27 mmol): LCMS [M 1]+: 495; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.69 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 8.04 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.73-7.70 (m, 1H), 7.51 (dd, J = 9.2 Hz, 2.0 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 3.78 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 3.71 (m, 1H), 3.64-3.54 (m, 4H), 2.54 (m, 1H), 2.46-2.35 (m, 1H).
PRIMER 370
(S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2,3-diaminopropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (S)-benzil-terc-butil(3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il(fenilsulfonamido)propan-1,2-diil)dikarbamat
U rastvor (S)-benzil-terc-butil (3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,2-diil)dikarbamata (1.0 g, 0.91 mmol) u 1,4-dioksanu (7 mL) i vodi (3 mL) dodata je (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina (0.32 g, 1.82 mmol), Na2CO3(0.29 g, 2.73 mmol) i Pd(PPh3)4(0.21 g, 0.18 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 10% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1102.
Korak B: (S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2,3-diaminopropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
U rastvor (S)-benzil terc-butil (3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,2-diil)dikarbamata (0.68 g, 0.62 mmol) dodata je konc. HCl (1 mL, 12.3 mmol). Smeša je mešana na 80°C 3 hours. Dobijeni rastvor je koncentrovana pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18 OBD Prep Kolona 100 Å, 10 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 5% B 12 min; Detektor: 254 nm; Vreme zadržavanja: 6.54 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 508; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6+ D2O): δ 8.24 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.96-7.81 (m, 1H), 6.95 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 6.62-6.53 (m, 1H), 6.13-6.07 (m, 1H), 3.14-2.80 (m, 4H), 2.54-2.53 (m, 1H).
PRIMER 371
(S)-4-(2-aminohinolin-8-il)-N1-(2,3-diaminopropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (S)-di-terc-butil(3-(4-(2-aminohinolin-8-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,2-diil)dikarbamat Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246, Korak C, upotrebom (S)-di-terc-butil (3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksi benzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,2-diil)dikarbamata (0.80 g, 0.75 mmol) i (2-aminohinolin-8-il)boronske kiseline (0.35 g, 1.80 mmol): LCMS [M 1]+: 1079.
Korak B: (S)-4-(2-aminohinolin-8-il)-N1-(2,3-diaminopropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (S)-di-terc-butil(3-(4-(2-aminohinolin-8-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,2-diil) dikarbamata (0.17 g, 0.16 mmol) u DCM (6.0 mL). Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep C18 OBD Kolona 19 x 250 mm 10 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 30% B 8 min; 254/220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 519; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.10 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.41 (dd, J = 7.9 Hz, 1.5 Hz, 1H), 6.77 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.67-6.58 (m, 1H), 6.39-6.27 (m, 2H), 5.85 (brs, 3H), 3.12-2.64 (m, 3H), 2.66-2.51 (m, 2H).
PRIMERI 372-374 u donjoj Tabeli su pripremljeni na analogan način onome koji je opisan za PRIMER 371, počevši od (S)-di-terc-butil (3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,2-diil)dikarbamata ili (S)-benzil terc-butil(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,2-diil)dikarbamata i odgovarajućih boronskih kiselina ili boronskih estara, koji su pripremljeni kao što je ovde opisano, ili koji su dostupni iz komercijalnih izvora.
LC/MS Pr. br. Struktura Hemijski naziv
M+H
PRIMER 375
(R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2,3-diaminopropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-di-terc-butil(3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksi benzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,2-diil)dikarbamat
U rastvor (R)-di-terc-butil(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,2-diil)dikarbamata (1.0 g, 0.94 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL) i vodi (2.5 mL), dodata je (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina (0.5 g, 2.82 mmol), Na2CO3(0.29 g, 2.81 mmol) i Pd(PPh3)4(0.22 g, 0.20 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Dobijena smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (1 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 10% MeOH u EA. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1068.
Korak B: (R)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2,3-diaminopropil)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom (R)-di-terc-butil (3-(4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksi benzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,2-diil)dikarbamata (0.80 g, 0.75 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je dodat u TFA (4 mL). Smeša je mešana na 80°C1 čas. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: Atlantis Prep T3 OBD Kolona, 19 x 250 mm, 10 µm; Pokretna faza A: voda\ sa 50 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 0% B do 5% B 5 min; 254 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS ([M 1]+: 508; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.17 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 6.44 (t, J = 7.5 Hz, 1H), 6.20 (brs, 3H), 6.02 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 3.09-2.83 (m, 4H), 2.65-2.61 (m, 1H).
PRIMERI 376-378 u donjoj Tabeli su pripremljeni na analogan način onome koji je opisan za PRIMER 375, počevši od (R)-di-terc-butil (3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,2-diil)dikarbamata i odgovarajućih boronskih kiselina ili boronskih estara, koji su pripremljeni kao što je ovde opisano, ili koji su dostupni iz komercijalnih izvora.
PRIMER 379
(S)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: terc-butil (S)-((4-(4-(N-(1-(((benziloksi)karbonil)amino)-3-hidroksipropan-2-il)sulfamoil)-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)karbamat
U mešani rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(((tercbutoksikarbonil)amino)metil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (0.60 g, 0.89 mmol) u THF (6 mL) dodat je (S)-benzil (3-hidroksi-2-(2,2,2-trifluoroacetamido)propil)karbamat (0.43 g, 1.33 mmol) i TEA (0.37 mL, 2.67 mmol) na 0°C. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana 10 min 0°C. Zatim je dodat NCS (0.24 g, 1.78mmol) i smeša je mešana na 0°C 1.5 čas pod azotom. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je rastvoren sa EA (100 mL), ispran fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL), sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 40% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1117.
Korak B: (S)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
4
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom terc-butil (S)-((4-(4-(N-(1-(((benziloksi)karbonil)amino)-3-hidroksipropan-2-il)sulfamoil)-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)metil)karbamata (0.35 g, 0.31 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona 100 Å, 10 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 25 mL/min; Gradijent: 3% B do 15% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1523; 1H NMR (400 MHz, CD3COCD3+ DCl): δ 7.22 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.63 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.15-6.12 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.83-5.80 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 5.58-5.56 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 2.89 (s, 2H), 2.55-2.53 (m, 1H), 2.34-2.32 (m, 1H), 2.28-2.22 (m, 1H), 1.97-1.94 (m, 1H), 1.88-1.85 (m, 1H).
PRIMER 380
(S)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(2-aminopiridin-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (S)-benzil(2-(4-(2-aminopiridin-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat
U rastvor (S)-benzil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata (1.0 g, 1.00 mmol) u 1,4-dioksanu (7 mL) i vodi (3 mL) dodat je 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-amin (0.41 g, 2.0 mmol), Na2CO3(0.32 g, 3.01 mmol) i Pd(PPh3)4(0.23 g, 0.20 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2CO3i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 10% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 964.
41
Korak B: (S)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(2-aminopiridin-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Rastvor (S)-benzil(2-(4-(2-aminopiridin-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata (0.50 g, 0.52 mmol) u TFA (5 mL) je mešan na 80°C 2 časa. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Select CSH Prep C18 OBD Kolona, 5 µm, 19 x 150 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 35% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 470; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.47 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 5.6 Hz, 1H), 6.23 (d, J = 1.6 Hz, 1H), 6.15 (dd, J = 5.6 Hz, 1.6 Hz, 1H), 3.74-3.71 (m, 1H), 3.55-3.52 (m, 1H), 3.45-3.42 (m, 1H), 3.18-3.14 (m, 1H), 3.08-3.03 (m, 1H).
PRIMER 381
(S)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (S)-benzil(2-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksi propil)karbamat
U rastvor (S)-benzil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata (1.7 g, 1.70 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL) i vodi (2.5 mL) dodata je (2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)boronska kiselina (0.66 g, 3.41 mmol), PdCl2(dppf) adukt CH2Cl2(0.28 g, 0.34 mmol) i Na2CO3(0.54 g, 5.11 mmol). Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 80% EA u PE.
42
Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1020.
Korak B: (S)-benzil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil) karbamat Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 275, Korak B, upotrebom (S)-benzil(2-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata (0.90 g, 0.88 mmol) LCMS [M 1]+: 1083, 1085 (1 : 1).
Korak C: (S)-benzil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-cijanobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil) karbamat U rastvor (S)-benzil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata (0.60 g, 0.55 mmol) i prekatalizatora t-BuXPhos treće generacije (0.09 g, 0.11 mmol) u DMF (5 mL) dodat je dicijanocink (0.13 g, 1.11 mmol). Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je zračena mikrotalasnim zračenjem na 55°C 6 časova pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1030.
Korak D: (S)-benzil(2-(4-(2-(aminometil)benzordltiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksi propil)karbamat
U rastvor (S)-benzil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-cijanobenzo[d]tiazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata (0.20 g, 0.19 mmol) u MeOH (10 mL) dodat je Pd(OH)2/C (20% Pd, 1.48 mg, 9.71 µmol). Smeša je degazirana vodonikom tri puta i mešana na sobnoj temperaturi 6 časova pod vodonikom (30 atm). Dobijena smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koje je korišćeno direktno za sledeći korak bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]+: 900.
Korak E: (S)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
4
Rastvor (S)-benzil(2-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata (0.14 g, 0.13 mmol) u TFA (4 mL) je mešan na 60°C 1 čas. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep C18 OBD Kolona 19 x 250 mm 10 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 3% B do 21% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 540; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.25 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.93-7.82 (m, 2H), 7.02 (t, J = 7.7 Hz, 1H), 6.57 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 4.07 (s, 2H), 3.82-3.39 (m, 3H), 2.96-2.79 (m, 2H). PRIMER 382
(S)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(6-aminopiridin-2-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (S)-benzil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 246 ,Korak C, upotrebom (S)-benzil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata (1.50 g, 1.50 mmol) i (6-bromopiridin-2-il)boronske kiseline (0.61 g, 3.01 mmol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1027, 1029.
Korak B: benzil((2S)-2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-((tetrahidro-2H-piran-2-il)oksi)propil)karbamat
U rastvor (S)-benzil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata (1.10 g, 1.07 mmol) u DCM (10 mL) dodati su 3,4-dihidro-2H-piran (0.18 g, 2.14 mmol) i 4-metilbenzensulfonska kiselina (37 mg, 0.214 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta i mešana 3 časa na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom i razblažena sa EA (200 mL). Organski sloj je isprani vodom (3 x
44
150 mL) i fiziološkim rastvorom (150 mL). Organski sloj je sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 60% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1111,1113 (1 : 1).
Korak C: Benzil((2S)-2-(4-(6-aminopiridin-2-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-((tetrahidro-2H-piran-2-il)oksi)propil)karbamat
U rastvor benzil ((2S)-2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-((tetrahidro-2H-piran-2-il)oksi)propil)karbamata (0.60 g, 0.540 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL) dodat je 2,2,2-trifluoroacetamid (0.61 g, 5.40 mmol), CuI (0.10 g, 0.54 mmol), Cs2CO3(0.88 g, 2.70 mmol) i N1,N2-dimetiletan-1,2-diamin (95 mg, 1.08 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta i zračena mikrotalasnim zračenjem 3 časa na 100°C. Dobijena reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom, razblažena sa EA (150 mL). Organski sloj je ispran vodom (3 x 100 mL) i fiziološkim rastvorom (150 mL). Organski sloj je sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 80% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1048. Korak D: (S)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-4-(6-aminopiridin-2-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom benzil((2S)-2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(6-bromopiridin-2-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-3-((tetrahidro-2H-piran-2-il)oksi)propil)karbamata (0.40 g, 0.360 mmol). Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona 100 Å, 10 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 25% B 7 min; Detektor: 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 4.75 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 470; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl) δ 8.46 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.93 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.15 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.38 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.02 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 3.70-3.69 (m, 1H), 3.56-3.40 (m, 2H), 3.14-2.97 (m, 2H).
PRIMER 383
4
(R)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(1-aminopropan-2-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: Benzil-N-[(2R)-2-[(2-{bis[(4-metoksifenil)metil)sulfamoy}-4-[2-({[(tercbutoksi)karbonil]amino}metil)-1H-1,3-benzodiazol-4-il]-3-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11)2,4,8(12),9-pentaen-3-il]benzen) sulfonamido]propil]karbamat
U mešani rastvor 4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2-(N-(4-metoksibenzil)sulfamoil) benzensulfinske kiseline (0.60 g, 0.89 mmol) u THF (6 mL) dodat je (R)-benzil 2-aminopropilkarbamat (0.28 g, 1.34 mmol) i TEA (0.36 mL, 2.67 mmol) na 0°C. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana 10 minuta na 0°C. Zatim je dodat NCS (0.24 g, 1.78mmol) i smeša je mešana na 0°C 1.5 čas pod azotom. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je rastvoren sa EA (100 mL) i zatim je ispran fiziološkim rastvorom (3 x 100 mL). Spojeni organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 70% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1101.
Korak B: (R)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(1-aminopropan-2-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom benzil-N-[(2R)-2-[(2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[2-({[(tercbutoksi)karbonil]amino}metil)-1H-1,3-benzodiazol-4-il]-3-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]benzen)sulfonamido]propil] karbamata (0.30 g, 0.27 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Shield RP18 OBD Kolona, 5 µm, 19 x 150mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 5% B 8 min; Detektor: 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 5.4 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod
4
vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 507. 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.48 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.92 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.39 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 7.03-7.01 (d, J= 8.0 Hz, 1H), 6.75-6.72 (m, 1H), 3.97 (s, 2H), 3.95-3.92 (m, 1H), 2.99-2.98 (m, 1H), 2.92-2.86 (m, 1H), 1.18 (d, J = 6.8 Hz, 3H).
PRIMER 384
(R)-N1-(1-aminopropan-2-il)-4-(imidazo[1,2-a]piridin-8-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-benzil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(imidazo[1,2-a]piridin-8-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)karbamat
U rastvor (R)-benzil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)karbamata (0.75 g, 0.76 mmol) u 1,4-dioksanu (10.0 mL) i vodi (2.5 mL) dodata je imidazo[1,2-a]piridin-8-ilboronska kiselina (0.25 g, 1.53 mmol), Na2CO3(0.24 g, 2.29 mmol) i Pd(dppf)Cl2adukt CH2Cl2(0.13 g, 0.15 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je zračena mikrotalasnim zračenjem na 130°C 1 čas pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 200 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa EA. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 972.
Korak B: (R)-N1-(1-aminopropan-2-il)-4-(imidazo[1,2-a]piridin-8-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Mešani rastvor (R)-benzil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(imidazo[1,2-a]piridin-8-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propil)karbamata (0.30 g, 0.31 mmol) u TFA (2 mL) je mešan 1 čas pod azotom. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je ko-isparavan sa anizolom (3 x 3 mL) pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep Amide OBD Kolona 19 x 150 mm, 5 µm, 13 nm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmo/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 90% B do 80% B 8 min; Detektor: 254 i
4
220 nm; Vreme zadržavanja: 6.15 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 478; 1H NMR (300 MHz, CD3OD DCl) δ 8.40 (d, J= 8.1 Hz, 1H), 8.39 (d, J= 5.4 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.93-7.91 (m, 1H), 7.61-7.58 (m, 1H), 6.95-6.79 (m, 2H), 3.98-3.69 (m, 1H), 3.10 (dd, J= 13.2 Hz, 4.2 Hz, 1H), 3.06-2.91 (m, 1H), 1.18 (d, J = 6.9 Hz, 3H).
PRIMER 385
4-(2-(Aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(1,3-diaminopropan-2-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: Di-terc-butil(2-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)propan-1,3-diil)dikarbamat U rastvor di-terc-butil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil) -4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,3-diil)dikarbamata (4.00 g, 3.80 mmol) u 1,4-dioksanu (40 mL) i vodi (10 mL) dodat je Pd(PPh3)4(0.87 g, 0.75 mmol), 3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzen-1,2-diamin (2.20 g, 9.41 mmol) i Na2CO3(1.20 g, 11.3 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom 3 puta i mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 200 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 400 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 400 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 60% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1043.
Korak B: Terc-butil-N-[2-({4-[2-amino-3-(2-{[(terc-butoksi)karbonil]amino}acetamido) fenil]-2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-3-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]benzen}sulfonamido)-3-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}propil]karbamat
U rastvor di-terc-butil(2-(2',3'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-il sulfonamido)propan-1,3-diil)dikarbamata (1.0 g, 0.96 mmol) u THF (10 ml) dodata je 2-((terc-butoksikarbonil)amino)sirćetna kiselina (0.17 g,
4
0.96 mmol), HATU (1.10 g, 2.9 mmol) i TEA (0.40 mL, 2.88 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je degazirana azotom 3 puta i mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je ugašena vodom (100 mL) i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 200 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL). Organski sloj je sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 60% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1200.
Korak C: Terc-butil N-{[4-(4-1[1,3-bis({[(terc-butoksi)karbonil]amino})propan-2-il]sulfamoil}-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]-3-{[(4-metoksifenil)metoksi]({[(4-metoksifenil)metil]amino})sulfinil}fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil}karbamat
Rastvor terc-butil N-[2-({4-[2-amino-3-(2-{[(terc-butoksi)karbonil]amino} acetamido)fenil]-2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-3-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]benzenlsulfonamido)-3-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}propil]karbamata (0.89 g, 0.74 mmol) u AcOH (8 mL) je mešan 0.5 časa na 60°C. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod, koji je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 1182.
Korak D: 4-(2-(Aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(1,3-diaminopropan-2-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom terc-butil-N-{[4-(4-{[1,3-bis({[(terc-butoksi)karbonil]amino})propan-2-il]sulfamoil}-3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil}karbamata (0.85 g, 0.72 mmol). Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18OBD Prep Kolona 100 Å, 10 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 17.5% B 6 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 522; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DCl): δ 8.49 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.91 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.39 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.02 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 6.75 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 4.02 (s, 2H), 3.68 (t, J= 6.5 Hz, 1H), 2.93-2.75 (m, 4H).
PRIMER 386
4
N1-(1,3-diaminopropan-2-il)-4-(imidazo[1,2-a]piridin-8-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: Di-terc-butil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(imidazo[1,2-a]piridin-8-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-13-diil)dikarbamat U rastvor di-terc-butil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,3-diil) dikarbamata (0.70 g, 0.66 mmol) u 1,4-dioksanu (8 mL) i vodi (2 mL) dodata je imidazo[1,2-a]piridin-8-ilboronska kiselina (0.11 g, 0.66 mmol), Na2CO3(0.21 g, 1.98 mmol) i Pd(dppf)Cl2(0.11 g, 0.13 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je zračena mikrotalasnim zračenjem na 130°C 1.5 časa pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodom (50 mL), i zatim je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL). Organski sloj je sušen preko anhidrovanog Na2SO4i filtriran. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 80% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1054. Korak B: N1-(13-diaminopropan-2-il)-4-(imidazo[1,2-a]piridin-8-il)-3-(2H-tetrazol-5-il) benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 244, Korak C, upotrebom di-terc-butil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(imidazo[1,2-a]piridin-8-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,3-diil)dikarbamata (0.24 g, 0.23 mmol). Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep C18 OBD Kolona 19 x 250 mm, 10 µm; Pokretna faza A: voda sa 10 mmol/L NH4HCO3, Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 3% B do 33% B 10 min; Detektor: 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 493; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6+ DCl): δ 8.88-8.84 (m, 1H), 8.69 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.43 (d, J = 2.1 Hz, 1H), 8.29-8.12 (m, 2H), 7.41-7.27 (m, 2H), 4.09-4.18 (m, 1H), 3.14-3.09 (m, 2H), 2.98-2.90 (m, 2H).
PRIMERI 387-392
Opšti postupak za paralelnu pripremu sulfonamida Primera 387-392:
U grupu bočica od kojih svaka sadrži traženi komercijalno dostupan ili poznati amin (0.13 mmol) dodat je rastvor sulfonil hlorida (45 mg, 0.044 mmol), a zatim Et3N (0.018 mL, 0.13 mmol). Bočice su zatvorene poklopcima i smeše su mešane na sobnoj temperaturi 5 časova. U reakcionu smešu je zatim dodat TFA (0.5 mL) i smeše su mešane na sobnoj temperaturi 1.5 čas. Nakon tog vremena, toluen (1 mL) je dodat u svaku bočicu i smeše su koncentrovane in vacuo. U svaku bočicu je zatim dodat TFA (1.0 mL) i anizol (0.019 mL, 0.17 mmol). Bočice su zatvorene poklopcem i reakcione smeše su zagrevane do 80°C uz mešanje 45 min. Nakon tog vremena, reakcione smeše su koncentrovane u vacuo. Sirovi ostaci su zatim rastvoreni u DMSO (1.0 mL) i filtrirani. Sirovi proizvodi su prečišćeni pomoću masom pokrenute preparativne HPLC [Waters Sunfire C18 kolona, 5µm, 19x100 mm, upotrebom opsega gradijenta od 8-10% početno do 21-36% finalno MeCN (0.1% TFA) u vodi (0.1% TFA), 25 mL/min, 8-12 min vreme hromatografije] da bi se dobili PRIMERI 387-392.
1
PRIMER 393
(R)-N1-(1-aminopropan-2-il)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
2
Korak A: terc-butil(R)-(2-((4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil(karbamat i terc-butil (R)-(2-((4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)karbamat
Posuda napunjena terc-butil (R)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)karbamatom i terc-butil (R)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)karbamatom (4 g, 4.22 mmol), 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-aminom (1.857 g, 8.44 mmol), natrijum karbonatom (1.342 g, 12.66 mmol) i PdCl2(dppf) (0.689 g, 0.844 mmol), dioksanom (20 mL) i vodom (5 mL) je hermetički zatvorena i degazirana. Dobijena smeša je zagrevana preko noći na 80°C. Reakciona smeša je filtrirana preko CELIT-a da bi se uklonio paladijum. Filtrat je koncentrovan i prečišćen hromatografijom na koloni silika gela upotrebom (0-10)% MeOH/DCM kao pokretna faza da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 914.80.
Korak B: (R)-N1-(1-aminopropan-2-il)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
U rastvor terc-butil (R)-(2-((4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)karbamata i terc-butil (R)-(2-((4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propil)karbamata (3.5 g, 3.83 mmol) u DCM (2 mL) dodat je anizol (2 g, 18.5 mmol) i TFA (10 g, 87.7 mmol) na 0°C. Reakcija je mešana na 0°C 30 minuta. Posle uklanjanja isparljivih materija ostatak je tretiran sa SCX jono-izmenjivačkom kolonom (sipati uzorak i isprati sa MeOH, isprati proizvod sa 7 N amonijakom u MeOH) da bi se dobio slobodan amin. Ostatak je rastvoren u TFA (10 g, 87.7 mmol). Dobijena smeša je mešana na 80°C 1.0 čas. Posle uklanjanja isparljivih materija, ostatak je prečišćen pomoću reverzno-fazne HPLC (0-30% ACN/voda kao eluent, 0.05% amonijum hidroksid kao aditiv) da bi se dobio željeni proizvod. LC/MS [M+H]+: 454.30.
Sledeći PRIMERI u donjoj Tabeli su pripremljeni na analogan način onome koji je opisan za PRIMER 393, počevši od odgovarajuće boronske kiseline ili boronskog estra i aril jodida koji su pripremljeni kao što je ovde opisano, ili koji su dostupni iz komercijalnih izvora.
4
1
2
PRIMER 425
4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((3R,5S)-5-(aminometil)pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: terc-butil (2S,4R)-4-(((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfinil)amino)-2-((1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil)pirolidin-1-karboksilat i terc-butil (2S,4R)-4-(((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfinil)amino)-2-((1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil)pirolidin-1-karboksilat
Suspenzija (2S,4R)-terc-butil 4-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-((1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil)pirolidin-1-karboksilata i (2S,4R)-terc-butil 4-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-((1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil)pirolidin-1-karboksilata (REFERENTNI PRIMER 101, 1400 mg, 1.251 mmol), natrijum karbonata (398
4
mg, 3.75 mmol), (2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronske kiseline (332 mg, 1.877 mmol) i PdCl2(dppf) (204 mg, 0.250 mmol) u dioksanu (10 ml) i vodi (2.5 ml) je zagrevana na 100°C 17 časova. Smeša je razblažena sa EtOAc, isprana fiziološkim rastvorom. Organski sloj je sušen (MgSO4) i koncentrovan. Sirovi materijal je podvrgnut hromatografiji preko silika gela eluiranjem sa 0-20% MeOH u DCM da bi se dobili željeni proizvodi. LCMS: 1124.9.
Korak B: 3-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-6-((((3R,5S)-5-(aminometil)pirolidin-3-il)amino)sulfinil)-2-(2H-tetrazol-5-il)benzensulfonamid
U rastvor terc-butil (2S,4R)-4-(((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfinil)amino)-2-((1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil)pirolidin-1-karboksilata i terc-butil (2S,4R)-4-(((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfinil)amino)-2-((1,3-dioksoizoindolin-2-il)metil)pirolidin-1-karboksilata (200 mg, 0.179 mmol) u EtOH (10 ml) dodat je hidrazin (17.18 mg, 0.536 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do 60°C 2 časa. Rastvarač je uklonjen in vacuo. Ostatak je rastvoren u 5 ml metanola i filtriran kroz kolonu 10 ml Agilent BE-SCX jono-izmenjivačke smole i ispran sa 7N amonijakom u metanolu. Filtrat je koncentrovan, zatim je rastvoren u TFA (5 ml), zagrevan 80°C 1 h. LC-MS pokazuje da je deprotekcija završena. Reakciona smeša je koncentrovana i prečišćena preko Gilson (3-60% Acetonitril u vodi sa 0.1% amonijakom) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 534.37.
PRIMER 426
(S)-4-(2-Amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: terc-Butil (S)-(2-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat i terc-butil (S)-(2-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat
(2-Amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)boronska kiselina (445 mg, 2.51 mmol), terc-butil (S)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5il)fenil)sulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat i terc-butil (S)-(2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamat (REFERENTNI PRIMER 88; 1010 mg, 1.048 mmol), natrijum karbonat (222 mg, 2.096 mmol), Pd (dppf)Cl2(153 mg, 0.210 mmol) su sipani u reakcionu bočicu. Dodati su dioksan (7859 µl) i voda (2620 µl). Reakcija je degazirana i zatim zagrevana na 80°C 12 časova. Reakciona smeša je prečišćena hromatografijom na koloni (0-100% EtOAc/EtOH (3/1) do heksana) da bi se dobila jedinjenja iz naslova (smeša dva regioizomera tetrazola). LC/MS [M+H]+: 969.8.
Korak B : (S)-4-(2-Amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Rastvor terc-Butil (S)-(2-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata i terc-butil (S)-(2-((4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)-3-hidroksipropil)karbamata (283 mg, 0.292 mmol) je mešan u TFA/DCM (1/1, 2 mL) na sobnoj temperaturi 1 čas. Reakcija je koncentrovana i ko-isparavana sa toluenom 3 puta. Ostatak je ponovo rastvoren u TFA i zagrevan na 80°C 1 čas, i zatim hlađen do sobne temperature i koncentrovan. Ostatak je rastvoren u DMSO (4 mL) i prečišćen pomoću Gilson (3-45% CH3CN/vode sa 0.05% TFA). Ispravne frakcije su spojene i koncentrovane, ponovo rastvorene u CH3CN, i dodato je 300 uL 1.25 M HCl u MeOH. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas i zatim je dodata voda. Proizvod je liofilizovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 509.3.
PRIMERI u donjoj Tabeli su pripremljeni na analogan način onome koji je opisan za (S)-4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(1-amino-3-hidroksipropan-2-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid (neposredno u prethodnom tekstu), počevši od odgovarajućih boronskih kiselina ili boronskih estara i odgovarajućih jodoaril sulfonamida, koji su pripremljeni kao što je ovde opisano, ili koji su dostupni iz komercijalnih izvora.
PRIMER 437
4-(2-(2-Amino-1H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-N1-(1,3-diaminopropan-2-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: di-terc-Butil (2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-hloropiridin-4-il)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-1,3-diil)dikarbamat i diterc-butil (2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-hloropiridin-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-1,3-diil)dikarbamat Pd(dppf)Cl2(103 mg, 0.141 mmol), natrijum karbonat (299 mg, 2.82 mmol), (2-hloropiridin-4-il)boronska kiselina (244 mg, 1.552 mmol) i di-terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,3-diil)dikarbamat i di-terc-butil (2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-1,3-diil)dikarbamat (1500 mg, 1.411 mmol) su sipani u reakcionu bočicu. Dodati su dioksan (10 mL) i voda (3.5 mL). Reakcija je degazirana i zagrevana na 80°C 4 časa. Reakcija je prečišćena pomoću hromatografije na koloni (0-60% heksan/EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 1048.9.
Korak B: 3-(Tributilstanil)imidazo[1,2-a]pirimidin
3-Bromoimidazo[1,2-a]pirimidin (1.27 g, 6.41 mmol) je rastvoren u anhidrovanom THF (32.1 ml) i hlađen do -78°C. Izopropilmagnezijum hlorid (3.53 ml, 7.05 mmol) je dodat ukapavanjem. Dobijena smeša je mešana na -78°C 10 minuta, zatim je dodat tributilhlorostanan (2.422 g, 7.44 mmol). Smeša je mešana na -78°C 10 minuta, zatim je ostavljena da se zagreva do sobne temperature. Reakciona smeša je prečišćena hromatografijom na koloni (100% heksan do 90% EtOAc/EtOH (3/1) preko heksana) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 410.4.
Korak C: di-terc-Butil (2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(imidazo[1,2-a]pirimidin-3-il)piridin-4-il)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-1,3-diil) i di-terc-butil (2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(imidazo[1,2-a]pirimidin-3-il)piridin-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-1,3-diil)dikarbamat
di-terc-Butil (2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(imidazo[1,2-a]pirimidin-3-il)piridin-4-il)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-1,3-diil) i diterc-butil (2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(imidazo[1,2-a]pirimidin-3-il)piridin-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-1,3-diil)dikarbamat (0.899 g, 0.857 mmol) u DMF (3 mL) dodati su u 3-(tributilstanil)imidazo[1,2-a]pirimidin (0.25 g, 0.612 mmol), a zatim paladijumtetrakis (0.071 g, 0.061 mmol). Reakciona smeša je degazirana i zagrevana na 90°C 3 časa. Reakcija je prečišćena pomoću hromatografije na koloni (100% heksan do 90% EtOAc/EtOH ((3/1) preko heksana) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 1132.1.
1
Korak D: di-terc-Butil (2-((4-(2-(2-amino-1H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-1,3-diil)dikarbamat i di-terc-butil (2-((4-(2-(2-amino-1H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-1,3-diil)dikarbamat
di-terc-Butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(imidazo[1,2-a]pirimidin-3-il)piridin-4-il)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,3-diil)dikarbamat i di-terc-butil (2-((2-(N,N-(bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(imidazo[1,2-a]pirimidin-3-il)piridin-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-1,3-diil)dikarbamat (89 mg, 0.079 mmol) je rastvoren u EtOH (1 mL). Dodati su hidrazin (24.69 µl, 0.787 mmol) i voda (25 uL). Smeša je zagrevana na 80°C 30 minuta. Sirova reakciona smeša je koncentrovana i korišćena direktno u sledećem koraku. LC/MS [M+H]+: 1096.1.
Korak E: 4-(2-(2-Amino-1H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-N1-(1,3-diaminopropan-2-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
di-terc-Butil (2-(4-(2-(2-amino-1H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,3-diil)dikarbamat i di-terc-butil (2-((4-(2-(2-amino-1H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-1,3-diil)dikarbamat (86 mg, 0.079 mmol) su mešani u DCM/TFA (2mL/1mL) na sobnoj temperaturi 0.5 časa. Reakciona smeša je koncentrovana i ko-isparavana sa toluenom 3 puta. Ostatak je zagrevan u čistom TFA (2 mL) na 80°C 45 minuta. Reakcija je koncentrovana i ostatak je prečišćen sa Gilson (2-30% CH3CN/voda sa 0.1% TFA), i ispravne frakcije su koncentrovane i pretvorene u slobodnu bazu ponovnim prečišćavanjem sa Gilson (2-30% CH3CN/voda sa 0.1%NH4OH). Ispravne frakcije su koncentrovane i liofilizovane da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 535.7.
PRIMER 438
4-(6-(2-Amino-1H-imidazol-5-il)piridin-2-il)-N1-(1,3-diaminopropan-2-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
2
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na sličan način sintezi 4-(2-(2-amino-1H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-N1-(1,3-diaminopropan-2-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida (PRIMER 437) počevši od (6-hloropiridin-2-il)boronske kiseline i di-terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-1,3-diil)dikarbamata i di-terc-butil (2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)propan-1,3-diil)dikarbamata. LC/MS [M+H]+: 535.4.
PRIMER 439
(R)-4-(6-(2-Amino-1H-imidazol-5-il)piridin-2-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na sličan način sintezi 4-(2-(2-amino-1H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-N1-(1,3-diaminopropan-2-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid, počevši od (6-hloropiridin-2-il)boronske kiseline i terc-butil (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilata i terc-butil (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilata. LC/MS [M+H]+: 532.5.
PRIMER 440
(R)-4-(2-(2-Amino-1H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-N1-(pirolidin-3-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno na sličan način sintezi 4-(2-(2-amino-1H-imidazol-5-il)piridin-4-il)-N1-(1,3-diaminopropan-2-il)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamida (PRIMER 12), počevši od (2-hloropiridin-4-il)boronske kiseline i terc-butil (R)-3-((2-(N,Nbis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilata i terc-butil (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilata. LC/MS [M+H]+: 532.2.
PRIMER 441
4-(2-((S)-2-Aminopropil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: 2',3'-Diamino-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-sulfonamid
Suspenzija 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (8 g, 9.13 mmol), 2-nitro-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)anilina (7.24 g, 27.4 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma(0)(1.055 g, 0.913 mmol) i natrijum karbonata (2.90 g, 27.4 mmol) u dioksanu (100 ml) i vodi (30 ml) je degazirana i zagrevana na 80°C 17 časova. Smeša je razblažena sa AcOEt. Organski sloj je odvojen, ispran fiziološkim rastvorom, sušen (MgSO4) i koncentrovan da bi se dobila oko 1: 1 smeša 3'-amino-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-2'-nitro-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-sulfonamida i 2',3'-diamino-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-sulfonamida koja je odvojena pomoću ISCO kolone (220 g, 0-30%, 30%, 30-100% EtOAc u heksanu). LC/MS [M+H]+: 856 i 886.
Korak B: terc-butil (S)-(4-((2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]1-3-il)amino)-4-oksobutan-2-il)karbamat
2',3'-Diamino-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-sulfonamid (1.5 g, 1.752 mmol), (S)-3-((tercbutoksikarbonil)amino)buterna kiselina (0.5 g, 2.46 mmol) i EDC (0.381 g, 2,452 mmol) dodati su u posudu od 100 ml sa 50 ml DCM sa izuzetkom N,N-dimetilpiridin-4-amina (0.321 g, 2.63mmol) koji je dodat posle jedne minute mešanja. Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 2 časa. Zatim je reakcioni rastvor ispran sa KHSO4i sušen sa magnezijum sulfatom. Rastvarač je
4
uklonjen da bi se dobila čvrsta supstanca koja je korišćena dalje u sledećem koraku. LC/MS [M+H]+: 1042
Korak C: terc-Butil (S)-(1-(4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)propan-2-il)karbamat
terc-Butil (S)-(4-((2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-il)amino)-4-oksobutan-2-il)karbamat (1.752 g, 1.824 mmol) je rastvoren u sirćetnoj kiselini (40 ml) i mešan na 60°C dva časa. Rastvarač je uklonjen i sirovi materijal je prečišćen preko hromatografije na koloni, eluiran sa heksanom/EtOAc. LC/MS [M+H]+: 1024
Korak D: 2-(N,N-Bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((S)-2-((tercbutoksikarbonil)amino)propil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina
terc-Butil (S)-(1-(4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-1H-benzo[d]imidazol-2-il)propan-2-il)karbamat (1.43 g, 1.397 mmol) je rastvoren u 40 ml THF u koji je dodat 1M TBAF (7 ml, 7 mmol) i mešan 30 minuta. Reakcija je isprana sa KHSO4i ekstrahovana sa etil acetatom i sušena (MgSO4). Rastvarač je uklonjen da bi se dobila čvrsta supstanca. LC/MS [M+H]<+>: 924
Korak E: terc-Butil (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((S)-2-((tercbutoksikarbonil)amino)propil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
2-(N,N-Bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((S)-2-((terc-butoksikarbonil)amino)propil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina (0.2 g, 0.217 mmol), terc-butil (R)-3-aminopirolidin-1-karboksilat (0.121 g, 0.65o mmol), TEA (0.091 ml, 0.650 mmol) i NCS (0.087 g, 0.650 mmol) dodati su u 50 ml posudu sa 15 ml THF i mešani 30 minuta na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana sa vodenim rastvorom Na2S2O330 minuta, razblažena etrom. Organski sloj je odvojen, ispran vodenim rastvorom KHSO4i sušen preko MgSO4i koncentrovan da bi se dobila čvrsta supstanca koja je korišćena u sledećem koraku. LC/MS [M+H]+: 1108.
Korak F: 4-(2-((S)-2-Aminopropil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
terc-Butil (R)-3-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((S)-2-((tercbutoksikarbonil)amino)propil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-karboksilat (240 mg, 0.217 mmol) je rastvoren u 10 ml DCM u koji je dodato 3 kapi anizola. Nakon ovoga, dodato je 2 ml TFA i mešano na sobnoj temperaturi dva časa kao rastvor. Rastvarač je uklonjen i dodat je toluen i rastvarač je ponovo uklonjen pod vakuumom. Dodato je 5 ml TFA i reakcija je mešana na 80°C 1 čas. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio sirovi proizvod kao mulj koji je prečišćen preko HPLC RP HPLC Gilson (3-37% voda u acetonitrilu sa 0.05% NH4OH). LC/MS [M+H]+:274 (dikatjon).
Jedinjenja u donjoj Tabeli su sintetisana upotrebom postupka opisanog u prethodnom tekstu za za 4-(2-((S)-2-Aminopropil)-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((R)-pirolidin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid upotrebom naznačenih karboksilnih kiselina kao početnog materijala.
Pr. br. Početni Struktura Naziv LC/MS
PRIMER 447
2-Amino-N-(2-aminoetil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-5-hloro-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
Korak A: Metil 2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilat
Suspenzija 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (7 g, 7.99 mmol), metil 2-amino-3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoata (6.64 g, 23.98 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma(0) (0.924 g, 0.799 mmol) i natrijum karbonata (2.54 g, 23.98 mmol) u dioksanu (120 ml) i vodi (40 ml) je degazirana i zagrevana na 80°C 17 časova. Smeša je razblažena sa AcOEt. Organski sloj je ispran fiziološkim rastvorom, sušen (MgSO4) i koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO kolone (220 g, 0-30%, 30%, 30%-100% EtOAc u heksanu). LC/MS [M+H]+: 899.53.
Korak B: 2-Amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilna kiselina
U rastvor metil 2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilata (1.8 g, 2.002 mmol) u THF (20.00 ml) i MeOH (20 ml) dodat je LiOH (10.01 ml, 20.02 mmol) uz mešanje na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je zagrevan do sobne temperature i mešan preko noći. Smeša je razblažena sa EtOAc (100 ml), Organski sloj je odvojen, ispran vodenim rastvorom KHSO4i fiziološkim rastvorom, sušen (MgSO4) i koncentrovan. Sirovi materijal je direktno korišćen u sledećem koraku. LC/MS [M+H]<+>: 885.52
Korak C: terc-Butil (2-(2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]1-3-karboksamido)etil)karbamat
U rastvor N1-((etilimino)metilen)-N3,N3-dimetilpropan-1,3-diamine hidrohlorida (0.650 g, 3.39 mmol), 2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilne kiseline (1.5 g, 1.695 mmol) i terc-butil (2-aminoetil)karbamata (0.543 g, 3.39 mmol) u DCM (30 ml) dodat je N,N-dimetilpiridin-4-amin (0.207 g, 1.695 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 časa, razblažena etrom (80 ml). Organski sloj je odvojen, ispran vodenim rastvorom KHSO4i fiziološkim rastvorom, sušen (MgSO4) i koncentrovan. Sirovi materijal je korišćen direktno u sledećem koraku. LC/MS [M+H]+: 1027.73
Korak D: 2'-Amino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3'-((2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)karbamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-sulfinska kiselina
Rastvor terc-butil (2-(2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4'-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)-[1,1'-bifenil]-3-ilkarboksamido)etil)karbamata (1.73g, 1.684 mmol) u THF (50 ml) je mešan sa tetrabutilamonijum fluoridom (6.74 ml, 6.74 mmol) na sobnoj temperaturi pod N2 u trajanju od 0.5 časa. Smeša je razblažena sa AcOEt. Organski sloj je odvojen, ispran vodenim rastvorom KHSO4i fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSO4i koncentrovan. Sirovi materijal je direktno korišćen u sledećem koraku. LC/MS [M+H]+: 927.59.
Korak E: terc-Butil (2-(2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-5-hloro-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamido)etil)karbamat
U rastvor 2'-amino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3'-((2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)karbamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-sulfinske kiseline (0.8 g, 0.863 mmol), terc-butil (2-aminoetil)karbamata (0.415 g, 2.59 mmol) i trietilamina (0.361 ml, 2.59 mmol) u THF (20 ml) dodat je NCS (0.346 g, 2.59 mmol) na 0°C pod azotom. Smeša je mešana na istoj temperaturi 30 minuta. Reakciona smeša je razblažena etrom (60 ml). Organski sloj je odvojen, ispran sa 1 M Na2CO3, vodenim rastvorom KHSO4i fiziološkim rastvorom, sušen (MgSO4) i koncentrovan. LC/MS [M+H]+: 1085.75. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni (80 g ISCO, 0-40%, 40%, zatim 40-100% EtOAc u heksanu). Prečišćeno jedinjenje je pokazalo LC/MS [M+H]+: 1119.79: višak NCS je reagovao u koloni sa terc-butil (2-(2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamido)etil)karbamatom da bi se formirao terc-butil (2-(2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-5-hloro-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamido)etil)karbamat.
Korak F: 2-Amino-N-(2-aminoetil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-5-hloro-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
terc-Butil (2-(2-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-5-hloro-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamido)etil)karbamat (0.41 g, 0.366 mmol) je rastvoren u DCM (20 ml) i mešan sa 5 ml TFA u prisustvu 0.2 ml anizola 3 časa. Isparljive materije su uklonjene pod sniženim pritiskom. Ostatak je odvojen na jono-izmenjivačkoj koloni (ispran oprvo metanolom, zatim je ispran sa 7N NH3u metanolu da bi se sakupio željeni proizvod). Jedinjenje iz jono-izmenjivačke kolone je zagrevano na 90°C u TFA (10 ml) u hermetički zatvorenoj epruveti 60 minuta. TFA je uklonjen i sirovi materijal je prečišćen pomoću Gilson (5-47% AcCN u voda sa 0.05% TFA) da bi se dobila smeša 2-amino-N-(2-aminoetil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-5-hloro-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamida i N1-(2-aminoetil)-4-(3-(2-aminoetil)-6-hloro-4-okso-2-(trifluorometil)-3,4-dihidrohinazolin-8-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid. Rastvor je koncentrovan. Ostatak je odvojen pomoću preparativne TLC (1:1 DCM : 7N NH3 u metanolu). LC/MS [M+H]+: 559.38 u 637.43.
PRIMER 448
4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((1R,2R)-2-aminociklopropil)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: terc-butil 4-(3-(NN-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-((((1R,2R)-2-((tercbutoksikarbonil)amino)ciklopropil)amino)sulfonil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)-2-(bis(terc-butoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilat i terc-butil 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-((((1R,2R)-2-((terc
butoksikarbonil)amino)ciklopropil)amino)sulfonil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)-2-(bis(terc-butoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilat
U rastvor terc-butil 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-2-(bis(terc-butoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilata i terc-butil 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)-2-(bis(tercbutoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilata (0.2 g, 0.169 mmol) u THF (10 ml) dodat je tetrabutilamonijum fluorid (0.372 ml, 0.372 mmol) (1.0 M u THF) na 0°C pod N2. Reakciona smeša je razblažena sa 10 mL EtOAc, isprana fiziološkim rastvorom, sušena preko MgSO4 i koncentrovana. Ostatak je rastvoren u 20 mL DCM, zatim je usledilo uzastopno dodavanje terc-butil ((1R,2R)-2-aminociklopropil)karbamata (0.044 g, 0.254 mmol), trietilamina (0.034 g, 0.339 mmol), N,N-dimetilpiridin-4-amina (4.14 mg, 0.034 mmol) i 1-hloropirolidin-2,5-diona (0.045 g, 0.339 mmol). Reakciona smeša je koncentrovana i podvrgnuta hromatografiji preko silika gela eluiranjem sa 0-10% metanolom u DCM da bi se dobilo jedinjenje iz naslovas.
[M+H]+: 1251.56.
Korak B: 4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-((1R,2R)-2-aminociklopropil)-3-(1H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
U rastvor terc-butil 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-((((1R,2R)-2-((tercbutoksikarbonil)amino)ciklopropil)amino)sulfonil)-2-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)-2-(bis(terc-butoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilata i terc-butil 4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-((((1R,2R)-2-((tercbutoksikarbonil)amino)ciklopropil)amino)sulfonil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)fenil)-2-(bis(terc-butoksikarbonil)amino)-1H-benzo[d]imidazol-1-karboksilata (98 mg, 0.078 mmol) u DCM (0.5 mL) dodat je anizol (85 mg, 0.783 mmol) i TFA (893 mg, 7.83 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana na 0°C 30 minuta. Posle uklanjanja isparljivih materija, ostatak je tretiran sa SCX jono-izmenjivačkom kolonom (sipati uzorak i isprati sa MeOH, isprati proizvod sa 7 N amonijakom u MeOH) da bi se dobio slobodan amin. Ostatak je rastvoren u TFA (893 mg, 7.83 mmol). Dobijena smeša je mešan na 80°C 0.5 časa. Posle uklanjanja isparljivih materija ostatak je prečišćen pomoću reverzno-fazne HPLC (0-30% ACN/voda as kao eluent, 0.05% amonijum hidroksid kao aditiv) da bi se dobio željeni proizvod. LC/MS [M+H]<+>: 491.37.
PRIMER 449
4-(2-amino-1H-benzo[d]imidazol-4-il)-N1-(2-aminoetil)-N1-metil-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Ovo jedinjenje je pripremljeno na analogan način PRIMERU 448, počevši od terc-butil (2-(metilamino)etil)karbamata. LC/MS [M+H]+: 493.38.
PRIMER 450
(R)-2-Amino-N-(2-aminoetil)-5-hloro-4'-(N-(pirolidin-3-il)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
Ovo jedinjenje je pripremljeno praćenjem istog postupka za PRIMER 447 upotrebom terc-butil (R)-3-aminopirolidin-1-karboksilata da bi se izgradio sulfonamid. LC/MS [M+H]+: 586.
PRIMER 451
4-Amino-N-(2-aminoetil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
Korak A: Metil 4-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilat
terc-Butil (2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)etil)karbamat (1 g, 1.071 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0.025g, 0.021 mmol), natrijum karbonat (0.34 g, 3.21 mmol) i metil 2-amino-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzoat (0.891 g, 3.21 mmol)
1
dodati su u posudu od 50 ml opremljenu šipkom za mešanje i refluksnim kondenzatorom. Posuda je zatim postavljena pod azot i dodat je rastvarač. Reakcija je mešana preko noći na 80°C. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana vodom. Organski sloj je sušen magnezijum sulfatom i rastvarač je uklonjen da bi se dobio mulj koji je prečišćen preko kolone (etil acetat u heksanu 0 - 30 zadržavanje 30 - 100%) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 958
Korak B: 4-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilna kiselina
Metil 4-amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilat (1 g, 1.025 mmol) je rastvoren u metanolu i dioksanu i dodat je 1M LiOH (5.22 ml, 5.22 mmol) i mešan na 70°C preko noći. Rastvor je zakišeljen sa 2M HCl i organski rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Organske materije su zatim ekstrahovane etil acetatom, sušene i rastvarač je uklonjen da bi se dobila čvrsta supstanca. LC/MS [M+H]+: 943.
Korak C: terc-Butil (2-((4'-amino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3'-((2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)karbamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil])-4-sulfonamido)etil)karbamat
4-Amino-3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksilna kiselina (0.13 g, 0.138 mmol), terc-butil (2-aminoetil)karbamat (0.055 g, 0.345 mmol), N,N-dimetilpiridin-4-amin (0.025 g, 0.207 mmol), N1-((etilimino)metilene)-N3,N3-dimetilpropan-1,3-diamin (0.053 g, 0.345 mmol) dodati su u posudu od 50 ml sa 20 ml DCM sa izuzetkom N,N-dimetilpiridin-4-amina koji je dodat posle jedne minute mešanja. Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 2 časa. Zatim je reakcioni rastvor ispran sa KHSO4i sušen magnezijum sulfatom. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom da bi se dobio proizvod koji je korišćen dalje za sledeći korak. LC/MS [M+H]+: 1086
Korak D: 4-Amino-N-(2-aminoetil)-4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-karboksamid
terc-Butil (2-((4'-amino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3'-((2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)karbamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil])-4-sulfonamido)etil)karbamat (0.15 g, 0.138 mmol) je rastvoren u 10 ml DCM u koji je sipano 3 kapi anizola. Nakon ovoga, dodato je 2 ml TFA i rastvor je mešan na sobnoj temp. dva časa. Rastvarač je uklonjen, dodat je toluen i rastvarač je ponovo uklonjen. Dodato je 5 ml TFA i
2
reakcija je mešana na 80°C 1 čas. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio sirovi proizvod kao mulj koji je prečišćen preko RP HPLC Gilson (3-37% voda u acetonitrilu sa 0.05% NH4OH) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LC/MS [M+H]+: 263 (dikatjon).
PRIMER 452
2-Amino-N-(4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-2-il)acetamid
Korak A: terc-Butil (2-((2'-amino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil])-4-sulfonamido)etil)karbamat
Natrijum karbonat (0.17 g, 1.606 mmol), terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamat (0.50 g, 0.535 mmol), (2-aminofenil)boronska kiselina (0.220 g, 1.606 mmol), i tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0.0069 g, 0.0054 mmol) dodati su posudu od 50 ml opremljenu šipkom za mešanje i refluksnim kondenzatorom. Posuda je zatim postavljena pod azot i dodat je rastvarač. Reakcija je mešana preko noći na 80°C. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana vodom. Organski sloj je sušen magnezijum sulfatom i rastvarač je uklonjen da bi se dobio mulj koji je prečišćen preko kolone (etil acetat u heksanu 0 -30 zadržavanje 30 -100%) da bi se dobio čisti proizvod kao čvrsta supstanca. LC/MS [M+H]+: 899
Korak B: terc-Butil (2-((3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2'-(2-((terc butoksikarbonil)amino)acetamido)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil])-4-sulfonamido)etil)karbamat
2-((terc-butoksikarbonil)amino)sirćetna kiselina (0.146 g, 0.834 mmol), N1-((etilimino)metilen)-N3,N3-dimetilpropan-1,3-diamin (0.13 g, 0.834 mmol) i terc-butil (2-(2'-amino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)karbamat (0.25 g, 0.278 mmol) dodati su u posudu od 50 ml sa 25 ml DCM sa izuzetkom N,N-dimetilpiridin-4-amina (0.051 g, 0.417 mmol), koji je dodat posle jedne minute mešanja. Rastvarač je mešan na sobnoj temperaturi tokom vikenda. Reakcioni rastvor je ispran sa KHSO4i sušen sa magnezijum sulfatom. Rastvarač je uklonjen da bi se dobila tečnost koja je prečišćena pomoću hromatografije na koloni da bi se dobio čisti proizvod LC/MS [M+H]<+>: 1056 Korak C: 2-Amino-N-(4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-2-il)acetamid
terc-Butil (2-((3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2'-(2-((terc-butoksikarbonil)amino) acetamido)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil])-4-sulfonamido)etil)karbamat (0.206 g, 0.195 mmol) je rastvoren u 10 ml DCM u koji je dodato 3 kapi anizola. Dodato je 2 ml TFA i rastvor je mešan na sobnoj temperaturi dva časa. Rastvarač je uklonjen, dodat je toluen i rastvarač je ponovo uklonjen. Dodato je 5 ml TFA i reakcija je mešana na 80°C 1 čas. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio sirovi proizvod kao mulj koji je prečišćen preko RP HPLC Gilson (3-37% vode u acetonitrilu sa 0.05% NH4OH) da bi se dobila čvrsta supstanca. LC/MS [M+H]+: 248 (dikatjon).
PRIMER 453
(S)-2,3-Diamino-N-(4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-il)propanamid
Korak A: terc-Butil (2-((3'-amino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil])-4-sulfonamido)etil)karbamat
Natrijum karbonat (0.34 g, 3.21 mmol), terc-Butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamat (1 g, 1.071 mmol), (3-aminofenil)boronska kiselina (0.440 g, 3.21 mmol), i tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (0.012 g, 0.0107 mmol) dodati su u posudu od 100 ml opremljenu šipkom za mešanje i refluksnim kondenzatorom. Posuda je postavljena pod azot i dodat je rastvarač. Reakcija je mešana 5 časova na 80°C. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana vodom. Organski sloj je sušen magnezijum sulfatom i rastvarač je uklonjen da bi se dobila pena koja je prečišćena preko kolone (etil acetat u heksanima 0 -30 zadržavanje 30 -100%) da bi se dobila čvrsta supstanca LC/MS [M+H]+: 899.
Korak B: di-terc-Butil (3-((3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-il)amino)-3-oksopropan-1,2-diil)(S)-dikarbamat
4
(S)-2,3-bis((terc-butoksikarbonil)amino)propionska kiselina (0.169 g, 0.556 mmol), N1-((etilimino)metilen)-N3,N3-dimetilpropan-1,3-diamin (0.080 g, 0.556 mmol) i terc-butil (2-(3'-amino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)karbamat (0.2 g, 0.222 mmol) dodati su u posudu od 50 ml sa 25 ml DCM sa izuzetkom N,N-dimetilpiridin-4-amina (0.041 g, 0.334 mmol), koji je dodat posle jedne minute mešanja. Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 2 časa. Reakcioni rastvor je ispran sa KHSO4i sušen sa magnezijum sulfatom. Rastvarač je uklonjen da bi se dobilo ulje. LC/MS [M+H]+: 1186
Korak C: (S)-2,3-Diamino-N-(4'-(N-(2-aminoetil)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-il)propanamid
Di-terc-butil (3-((3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-il)amino)-3-oksopropan-1,2-diil)(S)-dikarbamat (0.263g, 0.222 mmol) je rastvoren u 10 ml DCM u koji je dodato 3 kapi anizola. Zatim je dodato 2 ml TFA i rastvor je mešan na sobnoj temperaturi dva časa. Rastvarač je uklonjen, dodat je toluen i rastvarač je ponovo uklonjen. Dodato je 5 ml TFA i reakcija je mešana na 80°C 1 čas. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio sirovi proizvod kao mulj. LC/MS [M+H]+: 263 i 291. Proizvod je prečišćen sa RP HPLC Gilson (3-37% voda u acetonitrilu sa 0.05% NH4OH) da bi se dobio proizvod kao čvrsta supstanca. Jedinjenje u donjoj Tabeli je sintetisano upotrebom postupka opisanog u prethodnom tekstu i naznačene karboksilne kiseline.
PRIMER 455
N1-(2-Aminoetil)-4-(1,2,3,4-tetrahidrohinolin-5-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,2,3,4-tetrahidrohinolin
Smeša 5-bromo-1,2,3,4-tetrahidrohinolina (1.5 g, 7.07 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolana) (5.39 g, 21.22 mmol), PCy3 PdG2 (0.835 g, 1.415 mmol) i kalijum acetata (2.082 g, 21.22 mmol) u dioksanu (150 ml) je degazirana i zagrevana na 80°C 17 časova. Smeša je filtrirana i u filtrat je dodato 100 ml vode i etar (100 ml). Organski sloj je odvojen, sušen (MgSO4), i koncentrovan. LC/MS [M+H]+: 260 (dikatjon).
Korak B: N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3-(1,2,3,4-tetrahidrohinolin-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamid
Suspenzija 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1,2,3,4-tetrahidrohinolina (1.775 g, 6.85 mmol), 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (3 g, 3.43 mmol), tetrakis(trifenilfosfin) paladijuma(0) (0.396 g, 0.343 mmol) i natrijum karbonata (1.089 g, 10.28 mmol) u 1,4-dioksanu (80 ml) i vodi (25.00 ml) je degazirana i zagrevana na 80°C 17 časova. Smeša je razblažena sa AcOEt. Organski sloj je odvojen, ispran fiziološkim rastvorom, sušen (MgSO4) i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću kolone (80 g, 0-30% EtAOc, zatim 30 % EtOAc i 30-100% EtOAc u heksanu). LC/MS [M+H]+: 811.85
Korak C: 2-(N,N-Bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-(1,2,3,4-tetrahidrohinolin-5-il)benzensulfinska kiselina
Rastvor N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-3-(1,2,3,4-tetrahidrohinolin-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (2.3g, 2.61 mmol) i THF (100 ml) je mešan sa tetrabutilamonijum fluoridom (7.83 ml, 7.83 mmol) na sobnoj temperaturi pod N20.5 časa. Smeša je razblažena sa AcOEt, isprana vodenim rastvorom KHSO4i fiziološkim rastvorom, sušena preko MgSO4i koncentrovana. Sirovi materijal je direktno korišćen u sledećem koraku LC/MS [M+H]+: 781.
Korak D: terc-Butil (2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-(1,2,3,4-tetrahidrohinolin-5-il)fenil)sulfonamido)etil)karbamat
U rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-(1,2,3,4-tetrahidrohinolin-5-il)benzensulfinske kiseline (0.2 g, 0.256 mmol) i terc-butil (2-aminoetil)karbamata (0.123 g, 0.768 mmol) u THF (30 ml) dodat je NCS (0.103 g, 0.768 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana 30 minuta. Reakciona smeša je mešana sa vodenim rastvorom Na2S2O3 30 minuta i razblažena sa etrom 60 ml. Organski sloj je odvojen, ispran vodenim rastvorom KHSO4i fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSO4i koncentrovan. LC/MS [M+H]+: 939.94.
Korak E: N1-(2-aminoetil)-4-(1,2,3,4-tetrahidrohinolin-5-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-(1,2,3,4-tetrahidrohinolin-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamat (0.21 g, 0.224 mmol) je rastvoren u DCM (10 ml). Rastvor je mešan na sobnoj temp. 2 časa sa TFA (10 ml) i dve kapi anizola i koncentrovan. Ostatak je zagrevan na 80°C u 10 ml TFA 40 minuta. TFA je uklonjen i sirovi materijal je prečišćen pomoću Gilson (5-42% AcCN u voda sa 0.05% NH4OH). Rastvor je koncentrovan. Proizvod je sušen na vakuumu (0.010 psi) LC/MS [M+H]+: 479.33.
PRIMER 456
N1-(2-Aminoetil)-4-(2-((2-aminoetil)amino)piridin-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: terc-butil (2-((4-bromopiridin-2-il)amino)etil)karbamat
3-Bromo-2-fluoropiridin (3.46 g, 19.66 mmol), terc-butil (2-aminoetil)karbamat (3.15 g, 19.66 mmol) i K2CO3(8.15 g, 59.0 mmol) u DMSO (40 ml) su mešani na 80°C preko noći. Višak karbonata je otfiltriran i ispran sa EtOAc. Smeša je razblažena vodom (60 ml), ekstrahovana sa etrom (100ml). Ekstrakt je ispran fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSO4, i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen pomoću kolone (120 g ISCO, 0-30, 30, 30-100% EtOAc u heksanu) LC/MS [M+H]+: 375.20, 373.25.
Korak B: (2-((2-((terc-Butoksikarbonil)amino)etil)amino)piridin-4-il)boronska kiselina Smeša terc-butil (2-((4-bromopiridin-2-il)amino)etil)karbamata (4.515 g, 14.28 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolana) (10.88 g, 42.8 mmol), PCy3 PdG2 (1.686 g, 2.86 mmol) i kalijum acetata (4.20 g, 42.8 mmol) u dioksanu (100 ml) je degazirana i zagrevana na 80°C 17 časova. Smeša je filtrirana i u filtrat je dodato 100 ml zasićenog vodenog rastvora KHSO4i etar (100 ml). Organski sloj je odvojen, ispran fiziološkim rastvorom, sušen (MgSO4) i koncentrovan. LC/MS [M+H]+: 282.39
Korak C: terc-Butil (2-((4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)piridin-2-il)amino)etil)karbamat Suspenzija 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (7.45 g, 8.51 mmol), (2-((2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)amino)piridin-4-il)boronske kiseline (7.17 g, 25.5 mmol), natrijum karbonata (2.70 g, 25.5 mmol) i tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma(0) (0.983 g, 0.851 mmol) u dioksanu (100 ml) i vodi (30 ml) je degazirana i zagrevana na 80°C 17 časova. Smeša je razblažena sa EtOAc i isprana vodenim rastvorom KHSO4i fiziološkim rastvorom. Organski sloj je sušen (MgSO4) i koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO (120 g, 0-30, 30, 30-100, 100 % EtOAc u heksanu). LC/MS [M+H]+: 986.09.
Korak D: 2-(N,N-Bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil) amino)piridin-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina Rastvor terc-Butil (2-((4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)piridin-2-il)amino)etil)karbamata (5.6 g, 5.68 mmol) i THF (100 ml) je mešan sa tetrabutilamonijum fluoridom (17.05 ml, 17.05 mmol) na sobnoj temperaturi 0.5 časa. Smeša je razblažena sa AcOEt, isprana zasićenim vodenim rastvorom KHSO4i fiziološkim rastvorom, sušena preko MgSO4, i koncentrovana. LC/MS [M+H]+: 885.86
Korak E: terc-Butil (2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)amino)piridin-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)etil)karbamat
terc-Butil (2-aminoetil)karbamat (0.0543, 0.339 mmol), NCS (0.0453 g, 0.339 mmol) i 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)amino)piridin-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina (0.1 g, 0.113 mmol) dodati su u posudu od 50 ml sa 15 ml THF i mešani 30 minuta na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana sa vodenim rastvorom Na2S2O330 minuta i razblažena etil acetatom. Organski sloj je odvojen, ispran vodenim rastvorom KHSO4, sušen preko MgSO4i koncentrovan da bi se dobila čvrsta supstanca koja je korišćena u sledećem koraku. LC/MS [M+H]+: 1044
Korak F: N1-(2-Aminoetil)-4-(2-((2-aminoetil)amino)piridin-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
terc-Butil (2-((2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-((2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)amino)piridin-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5il)fenil)sulfonamido)etil)karbamat (0.118 g, 0.113 mmol) je rastvoren u 10 ml DCM u koji je dodato 3 kapi anizola. Dodato je 2 ml TFA i smeša je mešana na sobnoj temperaturi dva časa. Rastvarač je uklonjen, dodat je toluen i rastvarač je ponovo uklonjen. Dodato je 5 ml TFA i reakcija je mešana na 80°C 1 čas. Rastvarač je uklonjen da bi se dobio sirovi proizvod kao mulj koji je prečišćen preko HPLC da bi se dobila čvrsta supstanca. LC/MS [M+H]+: 242 (dikatjon). Jedinjenja u donjoj Tabeli su sintetisana upotrebom postupka opisanog u prethodnom tekstu za PRIMER 456, i odgovarajućih intermedijera pripremljenih kao što je ovde opisano.
PRIMER 461
N1-(2-Aminoetil)-4-(2-(aminometil)piridin-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (2-(((terc-butoksikarbonil)amino)metil)piridin-4-il)boronska kiselina
Smeša terc-butil ((4-bromopiridin-2-il)metil)karbamata (0.8 g, 2.79 mmol), 4,4,4',4',5,5,5',5'-oktametil-2,2'-bi(1,3,2-dioksaborolana) (2.122 g, 8.36 mmol), PCy3 PdG2 (0.329 g, 0.557 mmol) i kalijum acetata (0.820 g, 8.36 mmol) u dioksanu (40 ml) je degazirana i zagrevana na 80°C 17 časova. Smeša je filtrirana i u filtrat je dodato 100 ml zasićenog vodenog rastvora KHSO4i etar (100 ml). Organski sloj je odvojen, ispran fiziološkim rastvorom, sušen (MgSO4), i koncentrovan. LC/MS [M+H]+: 253,28.
Korak B: terc-Butil ((4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)piridin-2-il)metil)karbamat Suspenzija 3-jodo-N,N-bis(4-metoksibenzil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-6-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)benzensulfonamida (2 g, 2.283 mmol), (2-(((tercbutoksikarbonil)amino)metil)piridin-4-il)boronske kiseline (1.727 g, 6.85 mmol), tetrakis(trifenilfosfin)paladijuma(0) (0.264 g, 0.228 mmol) i natrijum karbonata (0.726 g, 6.85 mmol) u dioksanu (70 ml) i vodi (20 ml) je degazirana i zagrevana na 80°C 17 časova. Smeša je razblažena sa AcOEt i isprana fiziološkim rastvorom. Organski sloj je sušen (MgSO4) i koncentrovan. Ostatak je prečišćen pomoću ISCO kolone (80 g, 0-30%, 30%, 30-100% EtOAc u heksanu). Željeni proizvod je eluiran na 100% EtOAc. LC/MS [M+H]+: 956.96.
Korak C: 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-(((terc-butoksikarbonil)amino)metil) piridin-4-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinska kiselina
Rastvor terc-butil ((4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-4-((2-(trimetilsilil)etil)sulfonil)fenil)piridin-2-il)metil)karbamata (0.6 g, 0.627 mmol) u THF (20 ml) je mešan sa tetrabutilamonijum fluoridom (1.882 ml, 1.882 mmol) na sobnoj temperaturi 0.5 časa. Smeša je razblažena sa AcOEt, isprana zasićenim vodenim rastvorom KHSO4i fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSO4i koncentrovan. LC/MS [M+H]+: 856.85.
Korak D: N1-(2-Aminoetil)-4-(2-(aminometil)piridin-4-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
U rastvor terc-butil ((4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-hydrosulfonil-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)piridin-2-il)metil)karbamata (0.15 g, 0.175 mmol) i tercbutil (2-aminoetil)karbamata (0.112 g, 0.701 mmol) u THF (20 ml) dodat je NCS (0.068 g, 0.508 mmol) na sobnoj temperaturi.. Smeša je mešana 30 minuta. Reakciona smeša je mešana sa vodenim rastvorom Na2S2O3 30 minuta i razblažena etrom 60 ml. Organski sloj je odvojen, ispran vodenim rastvorom KHSO4i fiziološkim rastvorom, sušen preko MgSO4i koncentrovan. LC/MS [M+H]+: 1015.11. Ostatak je rastvoren u DCM (5 ml) i mešan na sobnoj temperaturi sa 2 ml TFA i dve kapi anizola 2 časa i koncentrovan. Ostatak je zagrevan na 80°C u 2 ml TFA 40 minuta. TFA je uklonjen i sirovi materijal je prečišćen pomoću Gilson (3-37% AcCN u vodi sa 0.05% amonijum hidroksidom). Rastvor je koncentrovan. LC/MS [M+H]+: 454.25.
PRIMER 462
(R)-3'-(2-(aminometil)-1H-imidazol-4-il)-N4-(2-aminopropil)-2-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil] -3,4-di sulfonamid
Korak A: (3R,4S)-terc-butil-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3'-(2-(((terc-butoksikarbonil)amino)metil)-1H-imidazol-4-il)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat U rastvor (3R,4S)-terc-butil-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-(2-(N,N-bis (4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.9 g, 0.81 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL) i vodi (2.5 mL) dodat je terc-butil ((5-(3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)-1H-imidazol-2-il)metil)karbamat (0.5 g, 1.21 mmol), Na2CO3(0.26 g, 2.43 mmol) i Pd(dppf)Cl2adukt CH2Cl2(132 mg, 0.16 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodom (25 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 15 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 20 mL), sušeni preko Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 60% EA u PE da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1254.
1
Korak B: 3'-(2-(Aminometil)-1H-imidazol-4-il)-N4-((3S,4R)-4-aminopirolidin-3-il)-2-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3,4-disulfonamid
U mešani rastvor (3R,4S)-terc-butil-3-(((benziloksi)karbonil)amino)-4-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3'-(2-(((terc-butoksikarbonil)amino)metil)-1H-imidazol-4-il)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.48 g, 0.38 mmol) u DCM (5 mL) dodat je TFA (2 mL) na 0°C. Rastvor je ostavljen da se zagreva do sobne temperature i mešan 1 čas. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je ko-isparavan sa anizolom (3 x 3 mL) pod vakuumom i korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. Sirovi proizvod je rastvoren u TFA (4 mL). Rastvor je mešan na 80°C 1 čas. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18 OBD Prep Kolona 100 Å, 10 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda (10 mmol/L NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 25% B 6 min; Detektor: UV 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 560; 1H NMR (400 MHz, CD3OD DC1): δ 8.74 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 8.08 (d, J= 8.4 Hz, 1H), 8.03 (s, 1H), 7.81 (d, J= 7.8 Hz, 1H), 7.66 (s, J= 1.7 Hz, 1H), 7.49 (t, J= 7.8 Hz, 1H), 7.21-7.17 (m, 1H), 4.65 (s, 2H), 4.63-4.59 (m, 1H), 4.26-4.21 (m, 1H), 3.93-3.88 (m, 1H), 3.73-3.68 (m, 1H), 3.60-3.55 (m, 1H), 3.51-3.46 (m, 1H).
Upotrebom istih opštih postupaka opisanih u PRIMERU 462, supstitucijom odgovarajućih reaktanata i reagenasa, pripremljenih kao što je ovde opisano ili komercijalno dostupnih, sledeća jedinjenja su sintetisana i okarakterisana pomoću LC/MS.
2
PRIMER 463
(R)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-5-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-terc-butil(3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-5-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamat
U rastvor (R)-terc-butil (3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (2.5 g, 2.59 mmol) u 1,4-dioksanu (30 mL) i vodi (7 mL) dodat je 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzo[d]tiazol-2-amin (1.3 g, 4.67 mmol), Na2CO3(0.83 g, 7.78 mmol) i PdCl2(dppf) adukt CH2Cl2(0.43 g, 0.52 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom 3 puta i mešana 12 časova na 80°C pod azotom. Dobijena smeša je ostavljena da se hladi do sobne temperature, ugašena vodom (150 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 150 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 80 % EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 986.
Korak B: (R)-terc-butil(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-bromobenzo[d] tiazol-5-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamat
U rastvor (R)-terc-butil (3-(4-(2-aminobenzo[d]tiazol-5-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (2.0 g, 2.03 mmol) u ACN (20 mL) dodat je CuBr2(0.54 g, 2.43 mmol) i terc-butil nitrit (0.34 g, 3.24 mmol) na 0°C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas. Dobijena smeša je ugašena vodom (150 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 150 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (150 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiranjem sa 35% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1049 : 1051.
Korak C: (R)-terc-butil(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-cijanobenzo[d]tiazol-5-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamat U rastvor (R)-terc-butil(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil) -4-(2-bromobenzo[d]tiazol-5-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (0.85 g, 0.81 mmol) u DMF (10 mL) dodat je Zn(CN)2(0.19 g, 1.62 mmol) i t-BuXPhos G3 prekatalizator (0.13 g, 0.16 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je degazirana sa azotom 3 puta i mešana 1 čas na 55°C. Dobijena smeša je ostavljena da se hladi do sobne
4
temperature, ugašena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 100 mL). Spojeni organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom Na2CO3(2 x 100 mL) i FeSO4(2 x 100 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiranjem sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 996.
Korak D: (R)-terc-butil(3-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-5-il)-2-(N,N-bis(4-metoksi benzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamat
U rastvor (R)-terc-butil(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-(2-cijanobenzo[d]tiazol-5-il)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (0.54 g, 0.11 mmol) u MeOH (6 mL) dodat je Pd(OH)2/C (20% tež., 0.3 g, 2.14 mmol, 20%) pod azotom. Ova smeđa je degazirana vodonikom tri puta. Smeša je mešana na 25°C 2 časa pod vodonikom na 15 atm. Dobijena smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koje je korišćeno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]+: 1000.
Korak E: (R)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-5-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 462, Korak B, upotrebom (R)-terc-butil(3-(4-(2-(aminometil)benzo[d]tiazol-5-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (0.34 g, 0.34 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge C18 OBD Prep Kolona 100Å, 10 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda (10 mmol/L, NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 5% B do 25% B 8 min; Detektor: UV 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 540; 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6+ DCl): δ 8.52 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 8.2-8.05 (m, 2H), 7.63 (s, 1H), 7.2 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 4.58 (s, 2H), 3.97-3.85 (m, 1H), 3.19-2.91 (m, 3H), 2.74 (t, J= 10.8 Hz, 1H).
Upotrebom istih opštih postupaka opisanih u PRIMERU 463, supstitucijom odgovarajućih reaktanata i reagenasa, pripremljenih kao što je ovde opisano ili komercijalno dostupnih, sledeća jedinjenja su sintetisana i okarakterisana pomoću LC/MS.
PRIMER 464
(R)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-5-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-terc-butil(3-(3',4'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamat U rastvor (R)-terc-butil (3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo -3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil) karbamata (1.50 g, 1.56 mmol) u 1,4-dioksanu (15 mL) i vodi (3 mL) dodat je PdCl2(dppf) adukt CH2Cl2(0.25 g, 0.31 mmol), 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)benzen-1,2-diamin (0.55 g, 2.33 mmol) i Na2CO3(0.50 g, 4.67 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta.
Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 70% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane da bi se dobilo jedinjenje iz naslova kao čvrsta supstanca: LCMS [M H]<+>: 944.
Korak B: terc-Butil-N-[(2R)-3-({4-[3-amino-4-(2-{[(terc-butoksi)karbonil]amino}acetamido) fenil]-2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-3-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]benzen}sulfonamido)-2-hidroksipropil]karbamat
U rastvor 2-((terc-butoksikarbonil)amino)sirćetne kiseline (0.23 g, 1.28 mmol) i HATU (0.53 g, 1.40 mmol) u DMF (10 mL) dodat je (R)-terc-butil (3-(3',4'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamat (1.10 g, 1.17 mmol) i DIEA (0.31 mL, 1.75 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 časa pod azotom. Dobijena smeša je ugašena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 70% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 1101.
Korak C: terc-Butil-N-{[5-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-{[(2R)-3-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}-2-hidroksipropil]sulfamoil}-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil}karbamat
Rastvor terc-butil-N-[(2R)-3-({4-[3-amino-4-(2-{[(terc-butoksi)karbonil]amino}acetamido) fenil]-2-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-3-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]benzen}sulfonamido)-2-hidroksipropil]karbamata (0.70 g, 0.64 mmol) u HOAc (10 mL) je mešan 2 časa na 55°C. Dobijena smeša je ugašena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 1083.
Korak D: (R)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-5-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 462, Korak B, upotrebom terc-butil-N-{[5-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-{[(2R)-3-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}-2-hidroksipropil]sulfamoil}-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil}karbamata (0.50 g, 0.46 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona 100Å, 10 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda (10 mmol/L NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 0% B do 25% B 8 min; Detektor: UV 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 3.5 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 523; 1 H NMR (300 MHz, CD3OD DCl): δ 8.58 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.99 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.34 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.74 (s, 2H), 4.00-3.95 (m, 1H), 3.29-3.22 (m, 3H), 2.95-2.87 (m, 1H).
Jedinjenja u donjoj Tabeli su sintetisana upotrebom postupka opisanog u prethodnom tekstu za PRIMER 464, i odgovarajućih intermedijera pripremljenih kao što je ovde opisano.
PRIMER 466
N1-(2-aminoetil)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-5-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: terc-Butil(2-(3',4'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 464, Korak A, upotrebom terc-butil (2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)karbamata (1.40 g, 1.50 mmol): LCMS [M H]+: 914.
Korak B: 2-Metoksibuta-1,3-dien; terc-butil N-({[2-amino-4-(3-{bis[(4-metoksifenil) metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il] fenil)fenil]karbamoil}metil)karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 464, Korak B, upotrebom terc-butil (2-(3',4'-diamino-3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)etil)karbamata (1 g, 1.09 mmol): LCMS [M H]+: 1071.
Korak C: terc-Butil-N-{[5-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoksi) karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil} karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 464, Korak C, upotrebom terc-butil-N-({[2-amino-4-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(tercbutoksi)karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)fenil] karbamoil}metil)karbamata (0.65 g, 0.61 mmol): LCMS [M H]+: 1053.
Korak D: N1-(2-aminoetil)-4-(2-(aminometil)-1H-benzo[d]imidazol-5-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 462, Korak B, upotrebom terc-butil-N-{[5-(3-{bis[(4-metoksifenil)metil]sulfamoil}-4-[(2-{[(terc-butoksi) karbonil]amino}etil)sulfamoil]-2-[(2E,4E)-11-metoksi-2,4,5,6-tetraazabiciklo[6.3.1]dodeka-1(11),2,4,8(12),9-pentaen-3-il]fenil)-1H-1,3-benzodiazol-2-il]metil}karbamata (0.46 g, 0.44 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge Prep C18 OBD Kolona 19 x 250 mm 5 µm; Pokretna faza A: voda (10 mmol/L NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 1% B do 20% B 7 min; Detektor: UV 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 493; 1 H NMR (300 MHz, CD3OD DCl): δ 8.61 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 8.01 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.33 (dd, J = 8.7 Hz, 1.5 Hz, 1H), 4.75 (s, 2H), 3.39 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.15 (t, J = 6.0 Hz, 2H).
PRIMER 471
(R)-2-((4'-(N-(pirolidin-3-il)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-il)amino)tiazol-4-karboksamid
Korak A: (R)-metil-2-((3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(1-(terc-butoksi karbonil)pirolidin-3-il)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-il)amino)tiazol-4-karboksilat
U rastvor (R)-terc-butil-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (2.0 g, 2.084 mmol) u 1,4-dioksanu (16 mL) i vodi (4 mL) dodat je metil-2-((3-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)fenil)amino)tiazol-4-karboksilat (0.75 g, 2.08 mmol), Na2CO3(0.221 g, 2.08 mmol) i Pd(dppf)Cl2adukt CH2Cl2(1.7 g, 2.084 mmol)) na sobnoj temperaturi. Smeša je degazirana azotom tri puta. Reakciona smeša je mešana na 80°C 16 časova pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (200 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 200 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 200 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 200 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 70% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 1066.
Korak B: (R)-2-((3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(1-(terc-butoksikarbonil) pirolidin-3-il)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-il)amino)tiazol-4-karboksilna kiselina
U rastvor (R)-metil 2-((3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(1-(tercbutoksikarbonil)pirolidin-3-il)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-
4
3-il)amino)tiazol-4-karboksilata (0.89 g, 0.84 mmol) u THF (4 mL) i MeOH (4 mL) lagano je dodat vodeni rastvor NaOH (2 N, 1.67 mL, 3.34 mmol). Reakcioni rastvor je mešan 5 časa na sobnoj temperaturi. pH vrednost rastvora je podešena do 6∼7 sa 1 N vodenim rastvorom HCl. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobila čvrsta supstanca. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge Prep C18 OBD Kolona, 30 x 100 mm, 5 µm; Pokretna faza A: voda (10 mmoL/L NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 40 mL/min; Gradijent: 0% B do 100% B 30 min; Detektor: UV 254 i 280 nm; Vreme zadržavanja: 8 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova. LCMS [M H]+: 1052. Korak C: (R)-terc-butil-3-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3'-((4-karbamoiltiazol-2-il)amino)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilat
U mešani rastvor (R)-2-((3'-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4'-(N-(1-(tercbutoksikarbonil)pirolidin-3-il)sulfamoil)-2'-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-il)amino)tiazol-4-karboksilne kiseline (0.4 g, 0.38 mmol) u THF (4 mL) dodat je amonijum hlorid (0.10 g, 1.90 mmol), HATU (0.29 g, 0.76 mmol) i TEA (0.16 mL, 1.14 mmol) u ledenom kupatilu. Dobijena smeša je mešan na sobnoj temperaturi 16 časova. Dobijena smeša je razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (3 x 50 mL) i fiziološkim rastvorom (3 x 50 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela i eluiran sa 80% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 1051.
Korak D: (R)-2-((4'-(N-(pirolidin-3-il)sulfamoil)-3'-sulfamoil-2'-(2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-3-il)amino)tiazol-4-karboksamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 462, Korak B, upotrebom (R)-terc-butil-3-(3-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3'-((4-karbamoiltiazol-2-il)amino)-2-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)-[1,1'-bifenil]-4-ilsulfonamido)pirolidin-1-karboksilata (0.32 g, 0.30 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: Atlantis Prep T3 OBD Kolona, 19 x 250 mm, 10 µm; Pokretna faza A: voda (10 mmoL/L NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 15% B do 30% B 8 min; Detektor: UV 254 i 220 nm. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 591; 1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.61 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.97 (d, J = 8.2
4 1
Hz, 1H), 7.62 (s, 1H), 7.50 (s, 1H), 7.37-7.34 (m, 2H), 6.91 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 4.33-4.18 (m, 1H), 3.55-3.42 (m, 2H), 3.43-3.34 (m, 2H), 2.27-2.24 (m, 1H), 2.05-1.94 (m, 1H).
PRIMER 477
(R)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-4-(6-amino-5-metilpiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-terc-butil(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksi benzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamat
U rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksi benzil)-2H-tetrazol-5-il) benzensulfinske kiseline (2.20 g, 2.84 mmol) u THF (20 mL) dodat je NCS (0.78 g, 7.51 mmol) na 0°C. Reakciona smeša je mešana 2 časa na sobnoj temperaturi pod azotom. U reakcionu smešu je dodat (S)-terc-butil (3-amino-2-hidroksipropil)karbamat (1.10 g, 5.79 mmol) i TEA (1.46 mL, 8.74 mmol) ukapavanjem na 0°C. Reakciona smeša je mešana još 1 čas na sobnoj temperaturi pod azotom. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na silika gelu, eluiranjem sa 50% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 964.
Korak B: (R)-terc-butil(3-(4-(6-amino-5-metilpiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksi propil)karbamat
U rastvor (R)-terc-butil(3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil) karbamata (1.10 g, 1.14 mmol), 3-metil-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-amina (0.40 g, 1.72 mmol) u 1,4-dioksanu (8 mL) i vodi (2 mL) dodat je Pd(dppf)Cl2adukt CH2Cl2(0.19 g, 0.23 mmol) i Na2CO3(0.36 g, 3.42 mmol). Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta i mešana 4 časa na 80°C. Dobijena smeša je razblažena vodom (20 mL), ekstrahovana sa EA (3 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 30 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 80% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 944.
4 2
Korak C: (R)-N1-(3-amino-2-hidroksipropil)-4-(6-amino-5-metilpiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 462, Korak B, upotrebom (R)-terc-butil(3-(4-(6-amino-5-metilpiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil) sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)-2-hidroksipropil)karbamata (0.69 g, 0.73 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona 100 Å, 10 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda (10 mmol/L NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 0% B do 30% B 8 min; Detektor: UV 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 5.82 min. Sakupljene frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 484; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 8.17 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.35 (m, 4H), 6.63 (s, 1H), 5.79 (s, 2H), 3.78 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 3.12-3.04 (m, 1H), 3.03-2.82 (m, 2H), 2.74-2.67 (m, 1H), 1.86 (s, 3H).
PRIMER 479
(S)-N1-(2-aminopropil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (S)-terc-butil(1-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksi benzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-il)karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 477, Korak A, upotrebom (S)-terc-butil (1-aminopropan-2-il)karbamata (0.27 g, 1.55 mmol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 2]+: 949.
Korak B: (S)-terc-butil (1-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil) -3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-il)karbamat Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 477, Korak B, upotrebom (S)-terc-butil(1-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-il)karbamata (0.81 g, 0.68 mmol) i 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-amina (0.28 g, 1.28 mmol: LCMS [M H]+: 914.
Korak C: (S)-N1-(2-aminopropil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
4
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 462, Korak B, upotrebom (S)-terc-butil(1-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-il)karbamata (0.70 g, 0.76 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona 100 Å, 10 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda (10 mmol/L NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 0% B do 25% B 8 min; Detektor: UV 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 6.67 min. Sakupljene frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 454; 1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.42 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.82 (dd, J = 8.5 Hz, 1.5 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H), 6.97 (dd, J = 8.6 Hz, 2.4 Hz, 1H), 6.36 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 3.25-2.88 (m, 1H), 3.28-3.11 (m, 2H), 1.30 (d, J = 6.5 Hz, 3H). PRIMER 480
(R)-N1-(2-aminopropil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: (R)-terc-butil(1-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksi benzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-il)karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 477, Korak A, upotrebom 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (1.00 g, 1.29 mmol) i (R)-terc-butil (1-aminopropan-2-il)karbamata (0.34 g, 1.94 mmol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 948.
Korak B: (R)-terc-butil(1-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-il)karbamat Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 477, Korak B, upotrebom (R)-terc-butil(1-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-il)karbamata (0.9 g, 0.95 mmol) i 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-amina (0.39 g, 1.78 mmol): LCMS [M 2]+: 915.
Korak C: (R)-N1-(2-aminopropil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 462, Korak B, upotrebom (R)-terc-butil(1-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-
4 4
metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)propan-2-il)karbamata (0.84 g, 0.92 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona 100 Å, 10 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda (10 mmol/L NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 0% B do 35% B 8 min; Detektor: UV 254 i 220 nm. Sakupljene frakcije su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 454; 1H NMR (400 MHz, CD3OD): δ 8.42 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H), 6.97 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.36 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 3.45 (d, J = 6.7 Hz, 1H), 3.33-3.13 (m, 2H), 1.30 (d, J = 6.6 Hz, 3H).
PRIMER 482
N1-(2-(-2-amineoetilamino)etil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Korak A: terc-Butil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)(2-((tercbutoksikarbonil)amino)etil)karbamat
U rastvor 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline (1.0 g, 1.29 mmol) u THF (4 mL) dodat je NCS (0.35 g, 2.59 mmol). Mešana smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 čas pod azotom. U reakcionu smešu je dodat terc-butil (2-aminoetil)(2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil)karbamat (0.59 g, 1.94 mmol) i TEA (0.35 g, 3.43 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Dobijena smeša je filtrirana i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 40% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1077.
Korak B: terc-Butil(2-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)(2-((terc-butoksikarbonil)amino) etil)karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 477, Korak B upotrebom terc-butil(2-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)(2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil) karbamata (0.90 g, 0.86 mmol) i 5-
4
(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il) piridin-2-amina (0.27 g, 1.34 mmol) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 1043.
Korak C: N1-(2-(-2-amineoetilamino)etil)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 462, Korak B, upotrebom terc-butil(2-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)etil)(2-((terc-butoksikarbonil)amino)etil) karbamata (0.60 g, 0.58 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: XBridge Prep C18 OBD Kolona, 30 x 100 mm, 5 µm; Pokretna faza A: voda (10 mmoL/L NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 0% B do 30% B 11 min; Detektor: UV 254 i 210 nm; Vreme zadržavanja: 9.73 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 483; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6+ DCl) δ 8.50 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 8.00 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 2.2 Hz, 1H), 7.35 (dd, J = 9.3 Hz, 2.3 Hz, 1H), 6.87 (d, J = 9.3 Hz, 1H), 3.30-3.13 (m, 8H).
PRIMERI 483-499 u donjoj Tabeli su pripremljeni na analogan način onome koji je opisan za PRIMER 482, počevši od 2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(1-(4-metoksibenzil)-1H-tetrazol-5-il)benzensulfinske kiseline i odgovarajućih boronskih kiselina ili boronskih estara i amina i Boc-zaštićenih diamina, koji su svi pripremljeni kao što je ovde opisano, ili koji su dostupni iz komercijalnih izvora.
4
LC/MS Pr. br. Struktura Hemijski naziv
M+H+
4
LC/MS Pr. br. Struktura Hemijski naziv
M+H+
4
LC/MS Pr. br. Struktura Hemijski naziv
M+H
PRIMER 500
(R)-N1-(1-(2-aminoetil)pirolidin-3-il)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-
1,2-disulfonamid
Korak A: Benzil-N-[(3R)-1-(2-{[(terc-butoksi)karbonil]amino}etil)pirolidin-3-il]karbamat
4
U smešu (R)-benzil-pirolidin-3-ilkarbamata (1.92 g, 8.72 mmol) i anhidrovanog K2CO3(3.61 g, 26.2 mmol) u DMF (35 mL) dodat je terc-butil (2-bromoetil)karbamat (4.88 g, 21.79 mmol) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana 18 časova na sobnoj temperaturi pod azotom. Dobijena smeša je sipana u vodu (100 mL). Vodena faza je ekstrahovana sa EA (3 x 50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (2 x 30 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 75% EA u PE. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 364.
Korak B: (R)-terc-butil (2-(3-aminopirolidin-1-il)etil)karbamat
U rastvor benzil-N-[(3R)-1-(2-{[(terc-butoksi)karbonil]amino}etil)pirolidin-3-il]karbamata (2.28 g, 6.28 mmol) u MeOH (35 mL) dodat je Pd(OH)2/C (20% tež., 0.42 g, 2.95 mmol) pod azotom na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana 24 časa na sobnoj temperaturi pod vodonikom (1.5 atm). Dobijena smeša je filtrirana. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova, koje je korišćeno u sledećem koraku bez bilo kakvog dodatnog prečišćavanja: LCMS [M 1]<+>: 230.
Korak C: terc-Butil (2-((3R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfinamido)pirolidin-1-il)etil)karbamat
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 477, Korak A, upotrebom (R)-terc-butil (2-(3-aminopirolidin-1-il)etil)karbamata (1.38 g, 6.02 mmol): LCMS [M 1]+: 1003.
Korak D: terc-butil (R)-(2-(3-((4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenil)sulfonamido)pirolidin-1-il)etil)karbamat
U rastvor terc-butil (2-((3R)-3-(2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-4-jodo-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfinamido)pirolidin-1-il)etil)karbamata (0.70 g, 0.70 mmol), 5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)piridin-2-amina (0.38 g, 1.74 mmol) u 1,4-dioksanu (8.5 mL) i vodi (1.5 mL) dodat je Pd(PPh3)4(0.16 g, 0.14 mmol) i Na2CO3(0.22 g, 2.09 mmol). Reakciona smeša je degazirana azotom tri puta i mešana 4 časa na 80°C pod azotom. Dobijena smeša je razblažena vodom (15 mL), ekstrahovana sa EA (3 x 20 mL). Spojeni organski slojevi su isprani fiziološkim rastvorom (3 x 30 mL), sušeni preko anhidrovanog Na2SO4i filtrirani. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću hromatografije na koloni silika gela, eluiran sa 10% MeOH u DCM. Frakcije koje sadrže željeni
41
proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M 1]+: 969.
Korak E: (R)-N1-(1-(2-aminoetil)pirolidin-3-il)-4-(6-aminopiridin-3-il)-3-(2H-tetrazol-5-il)benzen-1,2-disulfonamid
Jedinjenje iz naslova je pripremljeno kao što je opisano za PRIMER 462, Korak B upotrebom (R)-terc-butil(2-(3-(4-(6-aminopiridin-3-il)-2-(N,N-bis(4-metoksibenzil)sulfamoil)-3-(2-(4-metoksibenzil)-2H-tetrazol-5-il)fenilsulfonamido)pirolidin-1-il)etil) karbamata (0.68 g, 0.70 mmol) da bi se dobio sirovi proizvod. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC sa sledećim uslovima: Kolona: X Bridge C18 OBD Prep Kolona 100 Å, 10 µm, 19 mm x 250 mm; Pokretna faza A: voda (10 mmol/L NH4HCO3), Pokretna faza B: ACN; Stopa protoka: 20 mL/min; Gradijent: 0% B do 25% B 9 min; Detektor: UV 254 i 220 nm; Vreme zadržavanja: 8.05 min. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova: LCMS [M H]+: 509; 1H NMR (300 MHz, DMSO-d6+ D2O): δ 8.25 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 7.70 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.45 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 6.78-6.67 (m, 1H), 6.17 (dd, J = 8.8 Hz, 2.0 Hz, 1H), 2.76-2.70 (m, 2H), 2.65-2.58 (m, 1H), 2.56-2.48 (m, 3H), 2.42-2.36 (m, 2H), 2.32-2.21 (m, 1H), 2.09-1.93 (m, 1H), 1.58-1.54 (m, 1H).
BIOLOŠKE ANALIZE
Enzimska Aktivnost: Određivanje IC50
Aktivnosti enzima klase B su merene u prisustvu test inhibitora u fluorescentnoj analizi protiv komercijalno dostupnog supstrata koji se sastoji od jezgra cefalosporina koji vezuje 7-hidroksikumarin za fluorescein (CCF2-FA). Enzim (NDM-1, IMP-1 ili VIM-1; za prikaz, videti: Meine, M.-R.; Llarrull, L. I.; Vila, A. J. Antibiotics, 2014, 3, 285-316) i supstrat je razblažen u 100 mM KH2PO4puferu (pH 7) koji sadrži 0.005% Tween-20 i 10 µM ZnSO4. U analizi, finalna koncentracija enzima je bila 1 pM, 2 pM i 30 pM za NDM-1, IMP-1 i VIM-1, respektivno, i finalna koncentracija CCF2-FA je bila 1.25 µM. Test inhibitor je rastvoren u dimetilsulfoksidu i razblažen 1:50 u analizi, rezultujući u finalnom opsegu koncentracija od 20 µM do 0.00063 µM. U 384-komornoj mikroploči, test inhibitor je inkubiran sa enzimom metalo-β-laktamazom i supstratom 2 časa na 25°C. Merena je fluorescencija na 460 nm posle ekscitacije na 405 nm. IC50vrednost je određena iz polu-logaritamskih grafikona inhibicije enzima naspram koncentracije inhibitora, sa krivom generisanom upotrebom 4-parametarske aproksimacije.
Reprezentativna jedinjenja predmetnog pronalaska ispoljavaju inhibiciju β-laktamaza klase B u ovoj analizi. Na primer, jedinjenja Primera 1-500 su testirana u ovoj analizi i zabeleženo je da imaju IC50vrednosti prikazane u Tabeli analize 1.
Aktivnost jačanja antibiotika: Određivanje sinergističke koncentracije
Koncentracije inhibitora metalo-β-laktamaze potrebne za ponovno uspostavljanje podložnosti različitih sojeva bakterija neaktivnim koncentracijama antibiotika su određene u analizi koja procenjuje bakterijski rast merenjem optičke gustine na 600 nm (OD600). Testirani bakterijski sojevi obuhvatali su kliničke sojeve Escherichia coli koji eksprimiraju NDM-1 (CLB30005, CLB30016), Serratia marcescens koji eksprimiraju IMP-1 (CL5741), i Klebsiella pneumoniae koji eksprimiraju VIM-1 (IHMA599644). Inhibitorna aktivnost je merena u prisustvu u odsustvu imipenema u 384-komornoj mikroploči.
Klinički sojevi CLB30016, CL5741 i IHMA599644 su gajeni na triptikaze sojinom agaru koji sadrži 5% ovčje krvi. Bakterije na agaroznim pločama su inkubirane na 35°C sa vlažnošću preko noći. Sledećeg dana, pojedinačne kolonije od svakog kliničkog soja su sakupljene i resuspendovane u 5 ml fiziološkog rastvora da bi se održala OD600od 0.14, 0.11, 0.15 i 0.13, za CLB30016, CL5741 i IHMA599644, respektivno. Oni su dalje razblaženi 1:100 u 1.1X CAMHB i korišćeni za inokulaciju test komorica kao što je opisano u daljem tekstu.
Imipenem u 10 mM 3-(N-morfolino)propansulfonskoj kiselini (MOPS, pH 7) je čuvan u alikvotama za pojedinačnu upotrebu na -80°C. Test inhibitori su rastvoreni u dimetilsulfoksidu i razblaženi 1:50 u analizi, rezultujući u finalnom opsegu koncentracija od 200 µM do 0.195 µM. Na dan analize, 4 µl antibiotika je dodato u 45 ul bakterija, a zatim 1 µl test jedinjenja i mešano pipetiranjem i orbitalnom mućkalicom. Koncentracija antibiotika korišćena u analizi je bila 1 µg/ml. Mikroploče su pokrivene i inkubirane na 35°C 22 časa do 24 časa. Na kraju inkubacije, apsorbanca je određena upotrebom spektrofotometra. Sinergistička koncentracija MBLI je određena identifikacijom najniže koncentracije test jedinjenja u prisustvu date koncentracije antibiotika od koje je potrebno da inhibira 95% rasta bakterija. Rezultati za Primere 1-500 su objavljeni u Tabeli 1, izraženi kao koncentracija jedinjenja koja pojačava aktivnost antibiotika (imipenem) koja postiže 95% inhibiciju bakterijskog rasta (MITC95).
Reprezentativna jedinjenja predmetnog pronalaska nemaju nikakvu ili imaju minimalnu intrinzičku antibakterijsku aktivnost, ali ispoljavaju sinergistički efekat kada su korišćena u kombinaciji sa beta-laktamskim antibiotikom. Na primer, uopšteno, jedinjenja Primera 1-500 su određena tako da vraćaju podložnost imipenemu za jedan ili više test organizama u koncentracijama od 100 µM ili manje.
Tabela analize 1. Inhibicija metalo-β-laktamaza (IMP-1, NDM-1, VIM-1) i pojačanja antibiotika naspram bakterija koje eksprimiraju MBL Primerima 1-500.
41
41
41
41
41
41
42
42
42
42
42
42
42
4
41
42
4
44
4
Efluks
U cilju procene doprinosa efluksa nedostatku inhibicije inhibitora metalo-beta-laktamaze formule I celih ćelija, konstruisani su sojevi alati. Osnova soja je bio Pseudomonas aeruginosa PAO1. Korišćenis u divlji tip (MB5919) i izogeni soj u kome su višestruke efluksne pumpe genetički prekinute. MBL imipenem beta-laktamaza-1 (IMP-1), dobijena iz kliničkog izolata je uvedena u par soja pomoću sledećeg postupka:
4
Plazmidna DNK (koja kodira IMP-1) je ekstrahovana iz CL 5673 (IMP-1, P. aeruginosa klinički soj) pomoću standardnih tehnika. Plazmidna DNK je transformisana u parentalne MB5919 (oprD+, efluks+, inducibilni AmpC) i MB5890 (oprD+, efluks-, inducibilni AmpC) izogene sojeve elektroporacijom. Ovi transformisani sojevi su postavljeni na katjonom-podešene Muller-Hinton agarozne ploče koje sadrže ceftazidim u 32 µg/ml (MB5919) i 16 µg/ml (MB5890) da bi se selekcionisale one ćelije u koje je IMP-1-eksprimirajući plazmid uspešno uveden, rezultujući u rezistenciji na ceftazidim. Elektroforeza PCR proizvoda za IMP-1 na agaroznom gelu iz uspešnih transformanata je korišćena za poređenje sa kontrolom i sa originalnim sojem iz koga je plazmid dobijen, potvrđujući transfer IMP-1 gena (podaci nisu prikazani).
Minimalne inhibitorne koncentracije sentinel antibiotika su izvedene za kontrolu kvaliteta novih sojeva. Imipenem MIC je dramatično porasla, kao što je očekivano, zbog prisustva IMP-1, takođe meropenema (MEM) i ceftazidima (CAZ). Efluks /- set se ponašao slično sa ne-BL antibioticima kao što bi trebalo sa efluks- sojem koji ispoljava povećanu osetljivost na hloramfenikol (CAM) i ciprofloksacin (Cipro).
4
C
C
A
Set soja je zatim korišćen kao par za određivanje efekta inhibitora metalo-β-laktamaze formule I u MIC imipenema i/ili ceftazidima. Fiksna koncentracija antibiotika je uključena u standardne testove MIC mikrobujona, obično na CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute) graničnoj koncentraciji. Fiksna količina inhibitora beta-laktamaze klase A/C je takođe uključena za inhibiciju AmpC enzima rezidentnog Pseudomonas-a. Uključena je serijska titracija inhibitora metalo-β-laktamaze i zabeležena je koncentracija inhibitora metalo-β-laktamaze koja ponovo uspostavlja podložnost soja na uključeni antibiotik. Koncentracija inhibitora metalo-β-laktamaze je zatim upoređivana između dva soja da bi se odredila višestruka razlika između efluks+ (MB9798) i efluks- (MB9799) sojeva. Ovo je uzeto kao indikacija stepena do koga je MBLi podvrgnut efluksu.
Tabela analize 2: Koncentracija inhibitora metalo-β-laktamaze formule I koja ponovo uspostavlja podložnost efluks+ (MB9798) i efluks- (MB9799) sojevima na imipenem u 2 µg/mL u prisustvu inhibitora serin β-laktamaze klase A, C, D blisko srodnom relebaktamu. U donjoj Tabeli, efluksni odnos je odnos MITC95 PA_9798/MITC95 PA_9799
4
4
44
44
44
44
44
44
44
Reprezentativna jedinjenja formule I ovog pronalaska generalno imaju niži odnos efluksa Pseudomonas-a od jedinjenja u kojima atom ili linker na C-6 položaju je ugljenik ili vodonik umesto -SO -2.
4

Claims (31)

  1. DERIVATI 3-TETRAZOLIL-BENZEN-1,2-DISULFONAMIDA KAO INHIBITORI METALO-BETA-LAKTAMAZE Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule I
    ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, u kome: X1 je N ili CH; X2 je N ili CH; Z je tetrazolil, gde Z je vezan preko veze ugljenik-ugljenik za šestočlano jezgro prstena koje ima X1i X2; RA je -(CH2)n-AryA1, -(CH2)n-HetA1, -(CH2)n-C4-C6cikloalkil, ili -(CH2)n-C4-C6cikloalkenil, gde su navedeni -(CH2)n-C4-C6cikloalkil i -(CH2)n-C4-C6cikloalkenil izborno supstituisani sa 1, 2 ili 3 supstituenta nezavisno izabrana od -NH2, -OH, -F i -NRaC(O)C1-C6alkil izborno supstituisana sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od -F, -CF3, -NRaRb i -ORa; R1 je 1) -NH2; 2) -NRa-C1-C6alkil izborno supstituisan sa 1, 2, 3, ili 4 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: -F, -CF3, C1-C6alkil, -CH(NH2)C(O)NH2, - C(O)NRaRb, -C(O)OH, -(CH2)1-2NH2, -NRa(CH2)2-3NH2, -NRaRb, -N+RaRbCH3, -NHCH2CH2OCH3, -ORa i -O(CH2)2-3NH2; 3) -NRaC(O)C1-C6alkil izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: -F, -CF3, -C(O)NRaRb, -C(O)OH, -NRaRb, -N+RaRbCH3, - NHCH2CH2OCH3, -ORa i -O(CH2)2-3NH2; 4) -NRa(CH2)n-C3-C6cikloalkil, gde je C3-C6cikloalkil izborno supstituisan sa -CH2OH ili -NH2; 5) azotom-vezani 4-6 -člani monocikličan heterocikloalkil sa 0, 1 ili 2 dodatna heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N, O i S, ili azotom-vezani 6- do 10-člani biciklični heterocikloalkil sa 0, 1, 2 ili 3 dodatna heteroatoma u prstenu izabrana od N, O i S gde biciklični prsten može biti premošćen, fuzionisan ili spirocikličan, gde su 4-6 -člani monocikličan heterocikloalkil i 6- do 10-člani biciklični heterocikloalkil izborno supstituisani sa jednim do tri supstituenta, nezavisno izabrana od sledećih: -F, -NR<a>R<b>, okso, -(CH2)1-2OH, -CH2NH2, -SO2CH3, i C1-C6alkil i pri čemu je atom sumpora u prstenu izborno supstituisan sa jednim ili dva okso; 6) -NRa-(C1-C3alkil)n-AryB1, gde je C1-C3alkil izborno supstituisan sa -NH2; i 7) -NRa-(C1-C3alkil)n-HetB1; AryA1 je aromatičan sistem prstena iizabran od sledećih: 1) 5-6 -člani monociklični prsten sa 0, 1, 2, ili 3 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N, O i S, izborno supstituisan sa 1, 2, ili 3 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: a) halogen, b) -C1-C6alkil, c) -CN, d) -CH2OH, e) -C(O)NRaRb, f) -C(O)NH(CH2)2-4NH2izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od -NRaRb i -(CH2)nORa, g) -C(O)ORa, h) -(CH2)pNHRa izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od -NRaRb ili -ORa, i) -(CH2)pNRaC(=NH)NH2, j) -NRaC(O)C1-C6alkil izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od -NRaRb ili -ORa, k) -NRaSO2-C1-C6alkil, l) -NRaSO2-ciklopropil, m) -ORa, n) okso, o) -SC1-C6alkil izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od -NRaRb ili -ORa; p) -SO2Ra, q) -SO2NRaRb, r) -SO2NH-ciklopropil, s) -AryA2, t) -(CH2)nNRaAryA2, u) -C(O)NRaHetA2 i v) -HetA2, i 2) 8- do 10-člani biciklični prsten sa 1, 2, 3 ili 4 heteroatoma u prstenu izabrana od N, O i S, gde S atom izborno ima jedan ili dva okso supstituenta i N atom je izborno u obliku N-oksida i pri čemu je prsten izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih a) halogen; b) C1-C6alkil izborno supstituisan sa jednim do tri supstituenta nezavisno izabrana od -NRaRb, -F i -ORa; c) -(CH2)nCF3; d) -C(=NH)NH2; e) -CN; f) -C(O)CF3; g) -C(O)NRaRb; h) -C(O)NHCH2C(O)ORa; i) -C(O)NH-C2-C4alkil-NH2, j) -C(O)ORa; k) -NRaRb; l) -NHCH2SO3H; m) -(CH2)nNHC(=NH)NH2; n) -NHC(O)C1-C6alkil; o) -NHC(O)NH2; p) -NHC(O)ORa; q) -NHSO2CH3; r) -ORa; s) okso; t) -SO2Ra, u) -CH2-fenil-OCH3; i v) -HetA2; HetA1 je dihidrotiopiranil ili tetrahidropiranil; AryA2 je 5-6-člani aromatični monociklični prsten sa 1, 2 ili 3 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N, N kao kvaternarne soli i S, ili 4 N atoma prstena, izborno supstituisan sa -CH2OH, -COOH, -CONH2, -C(O)OC1-C6alkil i -(CH2)pNHRa izborno supstituisan sa jednim ili dva supstituenta nezavisno izabrana od -NRaRb i -ORa; HetA2 je a 4-6-člani zasićeni monociklični prsten sa 1 ili 2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N, O i S, pri čemu je S izborno supstituisan sa dve okso grupe i pri čemu je prsten izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od C1-C6alkil, -CN, -OH i okso; 4 AryB1 je aromatičan prstena izabran od sledećih: 1) 5-6 -člani monociklični aromatični prsten sa 0, 1, 2, ili 3 N atoma u prstenu, izborno supstituisan sa 1 supstituentom izabranim od -CF3, C1-C6alkil, -(CH2)nNH2i -OCH3; ili 2) 9-člani biciklični prsten sa 2 N atoma u prstenu; HetB1 je zasićeni prsten izabran od sledećih: 1) 4-6 člani zasićeni monociklični prsten sa 1 ili 2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N, O i S, gde je N atom u prstenu izborno u obliku kvaternarnog amina, gde je S supstituisan sa dve okso grupe, i gde je prsten izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: -F, C1-C6alkil, C1-C6hidroksialkil, -C(O)ORa,-(CH2)kNRaRb, -ORa i okso; ili 2) 6-10-člani biciklični prsten sa 1 ili 2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N i O, izborno supstituisan sa -OH ili -NH2, gde je biciklični prsten premošćen ili fuzionisan; Ra i Rb su nezavisno H ili C1-C6alkil; k je 0, 1, 2, 3, ili 4; svaki n je nezavisno 0 ili 1; i svaki p je nezavisno 0, 1, 2, ili 3.
  2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što X<1>i X<2>su CH.
  3. 3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili 2, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, koje ima formulu IA
    gde: RA je AryA1, C4-C6cikloalkil, ili C4-C6cikloalkenil, pri čemu su navedeni C4-C6cikloalkil i C4-C6cikloalkenil izborno supstituisani sa -NH2ili NHC(O)(CH2)1-3NH2; AryA1 je aromatični sistem prstena izabran od sledećih: 1) 5-6 -člani monociklični prsten sa 0, 1, ili 2 heteroatoma u prstenu nezavisno izabrana od N i S, izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: a) F, b) -C1-C6alkil, c) -CN, d) -CH2OH, e) -C(O)NRaRb, f) -C(O)NH(CH2)2-4NH2, g) -C(O)ORa, h) -(CH2)nNHRa, i) -NHC(=NH)NH2; j) -NHC(O)CH3; k) -NRaSO2-C1-C6alkil, l) -NHSO2-Ciklopropil, m) -ORa, n) -SO2NRaRb, o) -SC1-C6alkil, p) -SO2NH-ciklopropil, q) -AryA2, r) -(CH2)nNRaAryA2, s) -C(O)NRaHetA2 i t) -HetA2, i 2) 8- do 10-člani biciklični prsten sa 1, 2, 3 ili 4 heteroatoma u prstenu izabrana od N, O i S, gde je S atom izborno supstituisan sa jednim ili dva okso supstituenta i N atom je izborno u obliku N-oksida, i pri čemu je prsten izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: F, C1-C6alkil, -CH2CF3, -CF2CH2NH2, -CF3, -C(=NH)NH2, -CH(NH2)CH3, - CN, -C(O)CF3, -C(O)NRaRb, -C(O)NHCH2C(O)ORa, -C(O)ORa, -(CH2)0-2NRaRb, -NHC(O)CH3, -NHC(O)NH2, -NHC(O)ORa, -NHCH2SO3H, - NHSO2CH3, -ORa, okso, -CH2-fenil-OCH3, i -HetA2; i sve ostale promenljive su definisane u patentnom zahtevu 1.
  4. 4. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-3, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što R<A>je AryAl.
  5. 5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 4, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što AryA1 je 1) piridil izborno supstituisan sa -NH2, 2) benzoimidazolil supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od F, -CH3i -(CH2)nNH2; ili 3) benzotiazolil supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od -CH3i -(CH2)nNH2. 4
  6. 6. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-5, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što R<1>je: 1) -NH2; 2) -NRa-C1-C6alkil izborno supstituisan sa 1, 2, 3 ili 4 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: -F, -CF3, C1-C6alkil, -CH(NH2)C(O)NH2, -C(O)NRaRb, -C(O)OH, -(CH2)1-2NH2, -NRaRb, -N+RaRbCH3, -NHCH a 2CH2OCH3, -OR , -NRa(CH2)2-3NH2, i -O(CH2)2-3NH2; 3) -NRa(CH2)n-C3-C6cikloalkil, gde je C3-C6cikloalkil izborno supstituisan sa -CH2OH ili -NH2; 4) -NRa-(C1-C3alkil)n-AryB1, gde je C1-C3alkil izborno supstituisan sa -NH2; i 5) -NRa-(C1-C3alkil)n-HetB1.
  7. 7. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-5, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, naznačeno time što R<1>je: -NH2, -NH-HetB1 izborno supstituisan sa -NH2, ili -NH-C2-C3alkilNH2, izborno supstituisan sa -CH3, -OH ili -NH2.
  8. 8. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, koje ima formulu IB:
    gde: AryA1 je aromatičan sistem prstena izabran od sledećih: 1) 5-6 -člani monociklični prsten sa 0 ili 1 N atoma u prstenu supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: F, -C1-C6alkil, -CONH-C2-4alkil-NH2, ili - NHRa; ili 2) 9-člani biciklični prsten sa 2 heteroatoma u prstenu izabrana od N i S, pri čemu je prsten izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih F, C1-C6alkil i -(CH2)xNRaRb; R1 je 1) -NH2; 2) -NRa-C1-6alkil izborno supstituisan sa 1 ili 2 F supstituenta i izborno supstituisan sa 1 ili 2 supstituenta nezavisno izabrana od sledećih: -CF3, -CH(NH2)C(O)NH b 2; -C(O)NRaR ; -C(O)OH; -NRa(CH - N+ 2)2-3NH2, -NRaRb, RaRbCH3, -NHCH2CH2OCH3, -ORa i -O(CH2)2-3NH2; 4 3) -NRa(CH2)n-C3-C6cikloalkil, gde je C3-C6cikloalkil izborno supstituisan sa -CH2OH ili -NH2; 4) -NRa-(C1-C3alkil)n-AryB1; i 5) -NRa-(C1-C3alkil)n-HetB1; Ra i Rb su H ili -CH3; i x je 0, 1 ili 2.
  9. 9. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 koje ima strukturu
    4
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  10. 10. Cviterjon jedinjenja prema patentnom zahtevu 9, u kome tetrazol nosi negativno naelektrisanje i amin nosi pozitivno naelektrisanje.
  11. 11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, koje ima strukturu
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. 4
  12. 12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, koje ima strukturu
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  13. 13. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, koje ima strukturu
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  14. 14. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, koje ima strukturu
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  15. 15. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, koje ima strukturu
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  16. 16. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, koje ima strukturu 4
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  17. 17. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1 do 16, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv nosač.
  18. 18. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 17, koja dalje sadrži efikasnu količinu beta-laktamskog antibiotika.
  19. 19. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 17 ili 18, koja dalje sadrži efikasnu količinu jednog ili više jedinjenja inhibitora beta-laktamaze.
  20. 20. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 19, naznačena time što kompozicija sadrži jedinjenje inhibitor beta-laktamaze izabrano iz grupe koja se sastoji od: relebaktama, avibaktama, vaborbaktama, tazobaktama, sulbaktama i klavulanske kiseline.
  21. 21. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 20, naznačena time što jedinjenje inhibitor beta-laktamaze je tazobaktam i beta-laktamski antibiotik je ceftolozan.
  22. 22. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 20, naznačena time što jedinjenje inhibitor beta-laktamaze je relebaktam.
  23. 23. Farmaceutska kompozicija prema bilo kojem od patentnih zahteva 18 -20, naznačena time što je beta-laktamski antibiotik izabran iz grupe koja se sastoji od imipenema, ertapenema, meropenema, doripenema, biapenema, panipenema, tikarcilina, ampicilina, amoksicilina, karbenicilina, piperacilina, azlocilina, mezlocilina, cefoperazona, cefotaksima, ceftriaksona, cefipima, ceftolozana i ceftazidima.
  24. 24. Farmaceutska kompozicija prema bilo kojem od patentnih zahteva 18-20 i 22-23, naznačena time što beta-laktamski antibiotik je imipenem. 4
  25. 25. Farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 24, koja dalje sadrži cilastatin ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.
  26. 26. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-16 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u lečenju u ljudskog tela terapijom.
  27. 27. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1 do 16, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, u kombinaciji sa beta-laktamskim antibiotikom ili farmaceutska kompozicija prema bilo kojem od patentnih zahteva 17 do 25 za upotrebu u lečenju bakterijske infekcije.
  28. 28. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 27, naznačeno time što je betalaktamski antibiotik izabran iz grupe koja se sastoji od imipenema, ertapenema, meropenema, doripenema, biapenema, panipenema, tikarcilina, ampicilina, amoksicilina, karbenicilina, piperacilina, azlocilina, mezlocilina, cefoperazona, cefotaksima, ceftriaksona, cefipima, ceftolozana i ceftazidima.
  29. 29. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 27, naznačeno time što beta-laktamski antibiotik je imipenem.
  30. 30. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1 do 16, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, i terapeutski efikasna količina imipenema, cilastatina i relebaktama za upotrebu u lečenju bakterijske infekcije.
  31. 31. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 27-30, naznačeno time što je bakterijska infekcija posledica Pseudomonas spp., Klebsiella spp., Enterobacter spp., Escherichi spp., Morganella spp., Citrobacter spp., Serratia, spp. ili Acintetobacter spp. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5 4 1
RS20210436A 2015-06-26 2016-06-24 Derivati 3-tetrazolil-benzen-1,2-disulfonamida kao inhibitori metalo-beta-laktamaze RS61696B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
PCT/CN2015/082514 WO2016206101A1 (en) 2015-06-26 2015-06-26 Metallo-beta-lactamase inhibitors
PCT/US2016/039156 WO2016210215A1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors
EP16734151.0A EP3313832B1 (en) 2015-06-26 2016-06-24 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS61696B1 true RS61696B1 (sr) 2021-05-31

Family

ID=56297156

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20210436A RS61696B1 (sr) 2015-06-26 2016-06-24 Derivati 3-tetrazolil-benzen-1,2-disulfonamida kao inhibitori metalo-beta-laktamaze

Country Status (37)

Country Link
US (3) US10221163B2 (sr)
EP (2) EP3313832B1 (sr)
JP (2) JP6409141B2 (sr)
KR (1) KR102089878B1 (sr)
CN (1) CN107922394B (sr)
AR (1) AR105122A1 (sr)
AU (1) AU2016281710B2 (sr)
BR (1) BR112017027719B1 (sr)
CA (1) CA2990234C (sr)
CL (1) CL2017003325A1 (sr)
CO (1) CO2017013360A2 (sr)
CR (1) CR20170605A (sr)
CY (1) CY1124086T1 (sr)
DK (1) DK3313832T3 (sr)
DO (1) DOP2017000310A (sr)
EA (1) EA032698B1 (sr)
EC (1) ECSP18005828A (sr)
ES (1) ES2865284T3 (sr)
GE (2) GEP20207169B (sr)
HR (1) HRP20210481T1 (sr)
HU (1) HUE054410T2 (sr)
IL (1) IL256265B (sr)
JO (1) JO3588B1 (sr)
LT (1) LT3313832T (sr)
MA (1) MA42244B1 (sr)
MD (1) MD3313832T2 (sr)
MX (1) MX385838B (sr)
PE (1) PE20180600A1 (sr)
PH (1) PH12017502418A1 (sr)
PL (1) PL3313832T3 (sr)
PT (1) PT3313832T (sr)
RS (1) RS61696B1 (sr)
SI (1) SI3313832T1 (sr)
SV (1) SV2017005604A (sr)
TN (1) TN2017000509A1 (sr)
TW (1) TWI715595B (sr)
WO (3) WO2016206101A1 (sr)

Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2016206101A1 (en) 2015-06-26 2016-12-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Metallo-beta-lactamase inhibitors
CN106892845B (zh) * 2017-02-28 2018-10-30 四川同晟生物医药有限公司 一种2,4-二氨基丁酸衍生物及其制备方法
US11207312B2 (en) * 2017-07-17 2021-12-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Metallo-beta-lactamase inhibitors and methods of use thereof
JP7250687B2 (ja) 2017-10-06 2023-04-03 武田薬品工業株式会社 複素環化合物
US20200375987A1 (en) * 2018-01-03 2020-12-03 Merck Sharp & Dohme Corp. Metallo-beta-lactamase inhibitors and methods of use thereof
EP3795149A4 (en) * 2018-05-14 2022-01-05 National University Corporation Tokai National Higher Education and Research System BETA-LACTAMASE INHIBITOR
AR117788A1 (es) 2019-01-14 2021-08-25 Pi Industries Ltd Compuestos de fenilamidina 3-sustituida, preparación y uso
JP2022543460A (ja) * 2019-08-06 2022-10-12 ドメイン・セラピューティクス 神経ペプチドｆｆ受容体アンタゴニストとしての５－ヘテロアリール－ピリジン－２－アミン化合物
JP7433415B2 (ja) * 2019-08-15 2024-02-19 福建▲広▼生中霖生物科技有限公司 オキサゼピン系化合物の調製方法
WO2021066149A1 (ja) * 2019-10-04 2021-04-08 富士フイルム株式会社 新規なペナム誘導体又はその塩ならびにβ－ラクタマーゼ阻害化合物及び抗菌性化合物又はそれらの塩から選ばれる１つ以上の化合物を含有することを特徴とする医薬組成物及びキット
CN110840897B (zh) * 2019-11-28 2023-08-08 河北旺发生物科技有限公司 金属β-内酰胺酶抑制剂
US20230141433A1 (en) 2020-04-14 2023-05-11 Basf Se Tricyclic pesticidal compounds
CN111484506A (zh) * 2020-04-16 2020-08-04 天津大学 添加表面活性剂改进美罗培南侧链中间体硫醇内酯的制备方法
US20230183215A1 (en) * 2020-05-21 2023-06-15 Stemsynergy Therapeutics, Inc. Notch Inhibitors and Uses Thereof
UA130412C2 (uk) * 2020-06-22 2026-02-11 Ф. Хоффманн-Ля Рош Аг Похідні сульфону
UY39543A (es) 2020-11-30 2022-05-31 Pi Industries Ltd Una nueva composición agroquímica que comprende compuestos de fenilamidina 3-sustituidos
CN114349711B (zh) * 2022-02-28 2023-08-15 四川依维欣医药科技有限公司 一种（R）-1-Boc-3-羟甲基哌嗪的合成方法
WO2023250467A2 (en) * 2022-06-24 2023-12-28 Baylor College Of Medicine Inhibitors of antimicrobial resistance and methods using same
CN117342983B (zh) * 2023-12-05 2024-02-06 康羽生命科学技术(苏州)有限公司 过乙酰化GalNAc-L96合成方法

Family Cites Families (26)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4880793A (en) 1978-07-24 1989-11-14 Merck & Co., Inc. Combination of thienamycin-type antibiotics with dipeptidase inhibitors
US4616038A (en) 1978-07-24 1986-10-07 Merck & Co., Inc. Combination of thienamycin-type antibiotics with dipeptidase inhibitors
US5071843A (en) 1978-07-24 1991-12-10 Merck & Co., Inc. Combination of 2-substituted carbapenems with dipeptidase inhibitors
US4539208A (en) 1980-09-17 1985-09-03 Merck & Co., Inc. Combination of thienamycin-type antibiotics with dipeptidase inhibitors
US4786311A (en) 1985-05-30 1988-11-22 E. I. Du Pont De Nemours And Company Herbicidal sulfonamides
CA1231336A (en) 1985-05-30 1988-01-12 George Levitt Herbicidal sulfonamides
JPS62242679A (ja) 1986-04-11 1987-10-23 イ−・アイ・デユポン・デ・ニモアス・アンド・カンパニ− スルホニル尿素化合物
US4838925A (en) 1986-04-25 1989-06-13 E. I. Du Pont De Nemours And Company Heterocyclic acyl sulfonamides
CA1273336A (en) 1986-04-25 1990-08-28 Chi-Ping Tseng Herbicidal heterocyclic carbonyl sulfonamides
US4927453A (en) * 1986-10-17 1990-05-22 E. I. Du Pont De Nemours And Company Herbicidal sulfonamides
CN1095549A (zh) 1986-11-24 1994-11-30 纳幕尔杜邦公司 除草磺酰胺组合物及其制法和应用
DK0508234T3 (da) 1991-04-11 1996-10-28 Hoffmann La Roche Beta-lactamer
KR100686988B1 (ko) 1999-07-06 2007-02-27 메틸진, 인크. β-락타마제의 술폰아미도메틸 포스포네이트 저해제
FR2812635B1 (fr) 2000-08-01 2002-10-11 Aventis Pharma Sa Nouveaux composes heterocycliques, preparation et utilisation comme medicaments notamment comme anti- bacteriens
US7439253B2 (en) 2002-12-06 2008-10-21 Novexel Heterocyclic compounds, their preparation and their use as medicaments, in particular as antibacterials and beta-lactamase inhibitors
WO2008039420A2 (en) 2006-09-27 2008-04-03 Merck & Co., Inc. Novel inhibitors of beta-lactamase
CN103130686B (zh) 2011-12-02 2016-09-14 天津市国际生物医药联合研究院 N，n′-不对称二芳基取代脲类化合物及其制备方法和用途
CN103191091B (zh) 2012-01-04 2016-12-14 天津市国际生物医药联合研究院 磺酰胺类化合物在抑制ndm-1活性中的应用
CA2860672A1 (en) * 2012-01-06 2013-07-11 University Of South Florida Compositions, methods of use, and methods of treatment
GB201310542D0 (en) 2013-06-13 2013-07-31 Antabio Sas Compounds
EP3054944B1 (en) 2013-10-07 2019-12-04 Merck Sharp & Dohme Corp. Factor xia inhibitors
EP3096754B1 (en) 2014-01-22 2018-08-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Metallo-beta-lactamase inhibitors
WO2015171474A1 (en) 2014-05-09 2015-11-12 Merck Sharp & Dohme Corp. Beta-tetrazolyl-propionic acids as metallo-beta-lactamase inhibitors
WO2016206101A1 (en) 2015-06-26 2016-12-29 Merck Sharp & Dohme Corp. Metallo-beta-lactamase inhibitors
KR20180019234A (ko) 2015-06-26 2018-02-23 다케다 야쿠힌 고교 가부시키가이샤 콜린성 무스카린 m1 수용체의 조절제로서의 2,3-디히드로-4h-1,3-벤족사진-4-온 유도체
US11207312B2 (en) 2017-07-17 2021-12-28 Merck Sharp & Dohme Corp. Metallo-beta-lactamase inhibitors and methods of use thereof

Also Published As

Publication number Publication date
EP3313828A4 (en) 2019-01-09
MA42244A (fr) 2018-05-02
CR20170605A (es) 2018-05-15
CL2017003325A1 (es) 2018-05-11
US20180244656A1 (en) 2018-08-30
ECSP18005828A (es) 2018-04-30
EP3313828B1 (en) 2023-07-12
HUE054410T2 (hu) 2021-09-28
KR20180015267A (ko) 2018-02-12
EP3313832A1 (en) 2018-05-02
LT3313832T (lt) 2021-05-10
TW201713633A (en) 2017-04-16
US20190144432A1 (en) 2019-05-16
JO3588B1 (ar) 2020-07-05
SV2017005604A (es) 2018-12-14
TWI715595B (zh) 2021-01-11
JP2018522864A (ja) 2018-08-16
BR112017027719A2 (pt) 2018-09-11
CN107922394A (zh) 2018-04-17
JP2018104463A (ja) 2018-07-05
KR102089878B1 (ko) 2020-03-16
MA42244B1 (fr) 2021-04-30
US10227331B2 (en) 2019-03-12
MD3313832T2 (ro) 2021-06-30
MX2017016672A (es) 2018-07-06
CY1124086T1 (el) 2022-05-27
GEAP202014683A (en) 2020-05-11
US10221163B2 (en) 2019-03-05
WO2016210215A1 (en) 2016-12-29
EA032698B1 (ru) 2019-07-31
AR105122A1 (es) 2017-09-06
PT3313832T (pt) 2021-04-21
JP6670333B2 (ja) 2020-03-18
ES2865284T3 (es) 2021-10-15
DOP2017000310A (es) 2018-04-30
PH12017502418A1 (en) 2018-07-02
PL3313832T3 (pl) 2021-07-05
EP3313828A1 (en) 2018-05-02
US10544130B2 (en) 2020-01-28
US20180179190A1 (en) 2018-06-28
SI3313832T1 (sl) 2021-05-31
PE20180600A1 (es) 2018-04-09
AU2016281710B2 (en) 2018-10-11
EA201890150A1 (ru) 2018-05-31
CN107922394B (zh) 2021-07-13
AU2016281710A1 (en) 2017-12-21
BR112017027719A8 (pt) 2023-04-11
WO2016206101A1 (en) 2016-12-29
IL256265A (en) 2018-02-28
IL256265B (en) 2021-08-31
BR112017027719B1 (pt) 2024-02-06
DK3313832T3 (da) 2021-04-19
EP3313832B1 (en) 2021-02-24
JP6409141B2 (ja) 2018-10-17
CA2990234C (en) 2020-07-21
HRP20210481T1 (hr) 2021-08-20
GEP20207169B (en) 2020-10-12
CO2017013360A2 (es) 2018-03-20
CA2990234A1 (en) 2016-12-29
TN2017000509A1 (en) 2019-04-12
MX385838B (es) 2025-03-18
WO2016210234A1 (en) 2016-12-29

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US10544130B2 (en) Metallo-beta-lactamase inhibitors
KR102667828B1 (ko) 베타-락타마제 억제제 화합물
WO2015112441A1 (en) Metallo-beta-lactamase inhibitors
AU2016357927B2 (en) Macrocyclic broad spectrum antibiotics
KR102671585B1 (ko) 거대환형 광범위 항생제
HK1246289B (en) 3-tetrazolyl-benzene-1,2-disulfonamide derivatives as metallo-beta-lactamase inhibitors