RS62156B1 - Selektivni antagonisti/parcijalni agonisti dopaminskih d3 receptora; postupci izrade i njihova upotreba - Google Patents

Selektivni antagonisti/parcijalni agonisti dopaminskih d3 receptora; postupci izrade i njihova upotreba

Info

Publication number
RS62156B1
RS62156B1 RS20210938A RSP20210938A RS62156B1 RS 62156 B1 RS62156 B1 RS 62156B1 RS 20210938 A RS20210938 A RS 20210938A RS P20210938 A RSP20210938 A RS P20210938A RS 62156 B1 RS62156 B1 RS 62156B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
chloro
piperazin
carboxamide
ethylphenyl
ethyl
Prior art date
Application number
RS20210938A
Other languages
English (en)
Inventor
Amy Hauck Newman
Vivek Kumar
Anver Basha Shaik
Original Assignee
The United States Of America As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by The United States Of America As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services filed Critical The United States Of America As Represented By The Secretary Department Of Health And Human Services
Publication of RS62156B1 publication Critical patent/RS62156B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D209/00—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom
    • C07D209/02—Heterocyclic compounds containing five-membered rings, condensed with other rings, with one nitrogen atom as the only ring hetero atom condensed with one carbocyclic ring
    • C07D209/04—Indoles; Hydrogenated indoles
    • C07D209/30—Indoles; Hydrogenated indoles with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, directly attached to carbon atoms of the hetero ring
    • C07D209/42—Carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/18—Antipsychotics, i.e. neuroleptics; Drugs for mania or schizophrenia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/24—Antidepressants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/30—Drugs for disorders of the nervous system for treating abuse or dependence
    • A61P25/36—Opioid-abuse
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Addiction (AREA)
  • Pain & Pain Management (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Opis
OBLAST PRONALASKA
[0001] Sadašnji pronalazak je usmeren na nova jedinjenja selektivnih antagonista/parcijalnih agonista dopaminskih D3 receptora.
POZADINA
[0002] Dopamin je glavni neurotransmiter u centralnom nervnom sistemu odgovoran za mnoge neurološke procese, uključujući emocije, spoznaju, nagradu, motivaciju i finu motoričku kontrolu. Dopaminsko signaliziranje je posredovano D1-sličnim (podtipovi D1 i D5 receptora) i D2-sličnim (podtipovi D2, D3i D4receptora). Dopaminski D3receptori (D3R) su uključeni kao potencijalni farmakoterapijski ciljevi za poremećaje zloupotrebe supstanci zbog njihove ograničene lokalizacije u limbičkim regionima mozga, efikasnosti na životinjskim modelima korišćenja droga i ushodne regulacije u mozgu kod kokainskih zavisnika.
[0003] Visok stepen homologije aminokiselina unutar mesta vezivanja dopaminskih D2-nalik receptora, a posebno između podtipova D2i D3dopaminskih receptora, obezbedio je veliki izazov u potrazi za otkrićem dopaminskih D3-selektivnih jedinjenja koja imaju svojstva slična lekovima.
[0004] Stoga, u struci postoji prepoznata potreba za visoko D3-selektivnim antagonistima ili delimičnim agonistima koji su metabolički stabilni i imaju odgovarajuća svojstva slična leku za potencijalno prevođenje u lečenju neuropsihijatrijskih stanja, uključujući poremećaje zloupotrebe supstanci. Napomena da WO2014059265 opisuje derivate uree i amida aminoalkilpiperazina i njihovu upotrebu, WO03028728 opisuje 4-(4-supstituisane piperazinil-1il)-butilkarboksamide i selektivne ligande D3dopaminskih podtipova, Ananthan i sar (J. Med. Chem.2014, 57, 16, 7042-7060) opisuju dizajn, sintezu i studije odnosa struktura-aktivnost serija [4-(4-karboksamidobutil)]-1-arilpiperazina i Kumar i sar. (J. Med. Chem.2016, 59, 16, 7634-7650) opisuju visoko selektivne Dopamin D3receptorske (D3R) antagoniste i parcijalne agoniste na bazi etikloprida i D3R kristalne strukture.
SAŽETAK
[0005] Zahtevani pronalazak obezbeđuje jedinjenje Formule (I), njegov stereoizomer, njegov radioizotop ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so
pri čemu je Ar heteroaril koji može biti opciono supstituisan sa 1, 2 ili 3 supstituenta, gde je svaki supstituent nezavisno C1-C6alkil, C1-C6haloalkil, C1-C6alkoksi, C1-C6haloalkoksi, -OH, -COOH, amino, nitro, C2-C3alkanoil grupa, mono- ili di- C1-C3alkilamino ili halogen; n je 1 ili 2; m je 1 ili 2; R<1>je H ili halogen; R<2>je H, C1-C3 alkoksi ili halogen; R<3>je H, halogen ili C1-C3 alkoksi; R<4>je H, -OH ili halogen; R<5>je H, -OH ili halogen; i
je jednostruka veza ili dvostruka veza, pod uslovima a) i b): a) kada je R<1>H, onda bar jedan
od R<2>i R<3>nije H; i b) kada su jedan ili oba R<2>i R<3>H, onda R<1>nije H.
[0006] Zahtevani pronalazak obezbeđuje farmaceutski preparat koji sadrži jedinjenje Formule (I), njegov stereoizomer, njegov radioizotop ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i dalje sadrži najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0007] Zahtevani pronalazak dalje, obezbeđuje navedeno jedinjenje ili navedeni farmaceutski preparat za upotrebu u postupku za lečenje poremećaja zloupotrebe supstanci, šizofrenije i srodnog mentalnog poremećaja, kognitivnog poremećaja, impulsivnosti, gojaznosti, depresije, bipolarnog poremećaja ili diskinezije povezane sa Parkinsonovom bolešću (PD) ili lečenjem PD sa L-DOPA Takođe su opisana farmaceutska pakovanja koja sadrže farmaceutske preparate.
KRATAK OPIS CRTEŽA
[0008]
SL. 1 ilustruje komparativne rezultate jedinjenja 29 naspram klasičnog antagoniste D3 receptora PG648, jedinjenja 1 u ispitivanju mikrozomske stabilnosti jetre majmuna.
SL. 2 ilustruje poredbene rezultate jedinjenja 29 naspram PG648, jedinjenja 1 u ispitivanju mikrozomske stabilnosti jetre pacova.
SL. 3A ilustruje umanjujuće efekte sistemskog injektovanja jedinjenja (±)-29 (5-25 mg/ kg, i.p.) na uzimanje oksikodona (samo-primena) kod pacova (N = 6-7 u svakoj grupi. #, P <0,05 naspram nivoa bazalnog uzimanja leka; * i **, P <0,05, odnosno 0,01, u odnosu na grupu nosača).
SL. 3B ilustruje efekte sistemskog injektovanja jedinjenja (±)-19 (1-5 mg/kg, i.p.) na uzimanje oksikodona (samo-primena) kod pacova (N = 6-7 u svakoj grupi. #, P <0,05 naspram bazalnih nivoa uzimanja leka; * i **, P <0,05 odnosno 0,01, u odnosu na grupu nosača).
SL. 4 ilustruje umanjujuće efekte sistemskog injektovanja jedinjenja (±)-29 na ponovno uspostavljanje potrebe za lekom kod pacova izazvano oksikodonom.
SL. 5 opisuje postupak za uslovljenu averziju mesta izazvano naloksonom kod pacova hronično tretiranih oksikodonom.
SL. 6 ilustruje inhibiciju uslovljene averzije mesta izazvanu naloksonom kod pacova hronično tretiranih oksikodonom sa jedinjenjem (±)-29.
SL. 7 ilustruje slabljenje samo-primene THC kod veveričastih majmuna sa primenom jedinjenja (±)-29.
SL. 8 ilustruje da jedinjenje (±)-29 nema uticaja na samo-primenu hrane kod veveričastih majmuna.
SL. 9 ilustruje slabljenje THC-indukovanog vraćanja u potrazi za drogom kod veveričastih majmuna sa primenom jedinjenja (±)-29.
SL.10 ilustruje efekte jedinjenja (±)-29 na uslovljeno preferiranje mesta izazvano oksikodonom kod pacova.
SL.11 ilustruje efekte jedinjenja (±)-29 (0, 5, 15 mg/kg, ip) na bazalna i oksikodonindukovana povećanja lokomotorne aktivnosti kod miševa; (SL. 11 grafikon A) efekti oksikodona na sposobnost kretanja tokom vremena (od 2. do 9. dana) u prisustvu ili odsustvu tretmana jedinjenjem (±)-29; (SL.11 grafikon B) vremenski tok (±)-29-indukovanih promena u lokomociji (1. dan), ukazuje da ono samo po sebi nema uticaja na lokomotornu aktivnost; (SL. 11 grafikon C) vremenski tok promena kretanja izazvanih oksikodonom nakon prve injekcije oksikodona (akutni efekat 2. dana), što ukazuje da je (±) -29 predtretman u zavisnosti od doze inhibirao hiperaktivnost izazvanu oksikodonom (akutni efekat); (SL.11, grafikon D) vremenski tok promena u kretanju izazvanih oksikodonskom aktivacijom kod miševa nakon 2 dana povlačenja iz poslednje (nosač / (±)-29 oksikodon) zajedničke primene (dan 9), ukazujući da je ponovljeni (±)-29 predtretman od 2. do 6. dana proizveo dugotrajnu inhibiciju povećanja lokomocije izazvane oksikodonom.
SL. 12A i 12B: Farmakokinetičke studije na R- i S-29 (slika 12A) i R- i S-19 (slika 12B) kod Long Evans pacova nakon oralne primene 10 mg/kg, prikazuju da su sva četiri enantiomera visoko penetrabilna u mozak.
SL. 13 Predtretman jedinjenja (±)-29 nije pokazao značajne efekte na termički odgovor životinja testiran 30 minuta nakon izazivanja fiziološkim rastvorom (1 ml/kg, i.p.) ili oksikodonom (2 mg/kg, i.p.), što ukazuje da (±)-29 ima nema efekta na analgeziju izazvanu oksikodonom i nema sopstvene analgetičke efekte.
DETALJAN OPIS
[0009] Otkrivena su nova jedinjenja selektivnih antagonista/delimičnih agonista dopaminskih D3 receptora prema Formuli (I) koja neočekivano imaju i visoki afinitet za D3 receptor i odličnu metaboličku stabilnost koja nije postignuta prethodnim selektivnim antagonistima/delimičnim agonistima dopaminskih D3 receptora. Mnoga jedinjenja Formule (I) ispoljavaju visoku selektivnost u odnosu na homologne članove familije D2 receptora, npr. D2 i D4 receptora. Ovde otkrivena jedinjenja Formule (I) pokazuju poboljšana farmakološka svojstva, bioraspoloživost i metaboličku stabilnost in vivo u odnosu na prethodne ligande D3 receptora derivate 4-fenilpiperazina. Jedinjenja Formule (I) su korisna za lečenje neuropsihijatrijskih poremećaja. Utvrđeno je da su nova jedinjenja efikasna u modelima ponašanja kod zloupotrebe droga i povlačenja, uključujući oksikodon i kanabis. Zbog njihove visoke jačine i selektivnosti D3 receptora, niže doze jedinjenja Formule (I) mogu biti efikasne i samim tim je potencijal neželjenih efekata ograničen.
[0010] Takođe su obezbeđeni farmaceutski preparati koji sadrže jedinjenje Formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljiv nosač. Takvi farmaceutski preparati mogu sadržati jedinjenje formule (I) kao jedino aktivno sredstvo ili mogu sadržati kombinaciju jedinjenja Formule (I) i drugog farmaceutski aktivnog sredstva. Opisane su metode za lečenje neuropsihijatrijskog poremećaja kod pacijenta kome je potreban takav tretman, primenom jedinjenja Formule (I) ili njegove farmaceutski prihvatljive soli ili njegovog farmaceutskog preparata.
[0011] Jedinjenje Formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, njegov radioizotop ili njegov stereoizomer:
pri čemu je Ar heteroaril koji može biti opciono supstituisan sa 1, 2 ili 3 supstituenta, gde je svaki supstituent nezavisno C1-C6alkil, C1-C6haloalkil, C1-C6alkoksi, C1-C6haloalkoksi, -OH, -COOH, amino, nitro, C2-C3alkanoil grupa, mono- ili di- C1-C3alkilamino ili halogen; specifično Ar je benzofuranil, benzotienil, imidazolil, imidazo [1,2-a] piridinil, imidazo [2,1-b] tiazolil ili indolil; i specifičnije Ar je benzofuranil, benzotienil, 4-etil-1H-imidazolil, 4-metil-1H-imidazolil, imidazo [1,2-a] piridinil, 6-metilimidazo [2,1-b] tiazolil ili indolil;
n je 1 ili 2;
m je 1 ili 2;
R<1>je H ili halogen (Cl, F, Br, J), specifično H ili Cl;
R<2>je H, C1-C3alkoksi ili halogen (Cl, F, Br, J), specifično H ili -OMe;
R<3>je H, halogen (Cl, F, Br, J), ili C1-C3alkoksi, specifično H ili Cl;
R<4>je H, -OH ili halogen, specifično H, -OH ili -F;
R<5>je H, -OH ili halogen, specifično H, -OH ili -F; i
je jednostruka veza ili dvostruka veza (npr. trans ili cis dvostruka veza, poželjno trans),
pod uslovima a) i b)
a) kada je R<1>H, onda bar jedan od R<2>i R<3>nije H, specifično R<2>je C1-C3alkoksi (npr. -OMe) i R<3>je halogen (npr. Cl); i
b) kada su jedan ili oba R<2>i R<3>H, onda R<1>nije H, specifično R<1>je halogen (npr. Cl).
[0012] U jednoj realizaciji, jedinjenje Formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde je R<1>je H, R<2>je -OMe i R<3>je Cl.
[0013] U jednoj realizaciji, jedinjenje Formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde R<1>je Cl, R<2>je H i R<3>je H.
[0014] U izvesnoj realizaciji, jedinjenje Formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde R<1>je H, R<2>je -OMe, R<3>je Cl, a Ar je benzofuranil, benzotienil, imidazolil, imidazo [1,2-a] piridinil, imidazo [2,1b] tiazolil, ili indolil, gde je Ar dalje opciono supstituisan sa 1, 2 ili 3 supstituenta, gde je svaki supstituent nezavisno C1-C6alkil, C1-C6haloalkil, C1-C6alkoksi, C1-C6haloalkoksi, -OH, -COOH, amino, nitro, C2-C3alkanoil grupa, ili halogen.
[0015] U jednoj realizaciji, jedinjenje Formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde R<1>je Cl, R<2>je H, R<3>je H i Ar je benzofuranil, benzotienil, imidazolil, imidazo [1,2-a] piridinil, imidazo [2,1b] tiazolil ili indolil, gde je Ar dalje opciono supstituisan sa 1, 2 ili 3 supstituenta, gde je svaki supstituent nezavisno C1-C6alkil, C1-C6haloalkil, C1-C6alkoksi, C1-C6haloalkoksi, -OH, -COOH, amino, nitro, C2-C3alkanoil grupa ili halogen.
[0016] U jednoj realizaciji, jedinjenje Formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde R<1>je H, R<2>je -OMe, R<3>je Cl i Ar je benzofuranil, benzotienil, 4-etil-1H-imidazolil, 4-metil-1Himidazolil, imidazo [1,2-a] piridinil, 6-metilimidazo [2,1b] tiazolil ili indolil. Dalje u okviru ove realizacije, m je 1 i n je 1.
[0017] U jednoj realizaciji, jedinjenje Formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde R<1>je Cl, R<2>je H, R<3>je H i Ar je benzofuranil, benzotienil, 4-etil-1H-imidazolil, 4-metil-1H-imidazolil, imidazo [1,2-a] piridinil, 6-metilimidazo [2, 1-b] tiazolil ili indolil. Dalje u okviru ovog izvođenja, m je 1 i n je 1.
[0018] U jednoj realizaciji, jedinjenje Formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde R<1>je H, R<2>je -OMe, R<3>je Cl i Ar je benzofuranil, benzotienil, 4-etil-1H-imidazolil, 4-metil-1H-imidazolil, imidazo [1,2-a] piridinil, 6-metilimidazo [2,1b] tiazolil ili indolil. Dalje u okviru ovog izvođenja jedan od R<4>i R<5>je H, a drugi je -OH ili -F.
[0019] U jednoj realizaciji, jedinjenje Formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde R<1>je Cl, R<2>je H, R<3>je H i Ar je benzofuranil, benzotienil, 4-etil-1H-imidazolil, 4-metil-1H-imidazolil, imidazo [1,2-a] piridinil, 6-metilimidazo [2,1-b] tiazolil ili indolil. Dalje u okviru ovog izvođenja jedan od R<4>i R<5>je H, a drugi je -OH ili -F.
[0020] U jednoj realizaciji, jedinjenje Formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde R<1>je H; R<2>je -OMe; R<3>je Cl; Ar je benzofuranil ili indolil; n je 1 ili 2; m je 1 ili 2; R<4>je H, -OH ili halogen, specifično H, -OH ili F; R<5>je H, -OH ili halogen, specifično H, -OH ili F; i predstavlja jednostruku vezu ili dvostruku vezu (npr. trans ili cis dvostruku vezu, poželjno trans).
[0021] U jednoj realizaciji, jedinjenje Formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde R<1>je Cl; R<2>je H; R<3>je H; Ar je benzofuranil ili indolil; n je 1 ili 2; m je 1 ili 2; R<4>je H, -OH ili halogen, specifično H, -OH ili F; R<5>je H, OH ili halogen, specifično H, -OH ili F; i je jednostruka veza, dvostruka veza (npr. trans ili cis dvostruka veza, poželjno trans).
[0022] Takođe su u ovom pronalasku uključena jedinjenja Formule (I) koja imaju specifične strukture kako su ovde date u Tabelama 1A i 1B i date u donjoj tabeli.
( ) ( ( ( )pp ) ) (( )
(nastavak)
1
(nastavak)
(nastavak)
[0023] Jedinjenja su opisana korišćenjem standardne nomenklature. Ukoliko nije drugačije definisano, svi ovde korišćeni tehnički i naučni izrazi imaju isto značenje kao što je to uobičajeno razumljivo prosečnom stručnjaku u struci kojoj ovaj pronalazak pripada. Ukoliko nije jasno kontraindikovano kontekstom, svaki naziv jedinjenja uključuje slobodni kiselinski ili slobodni bazni oblik jedinjenja, kao i hidrate jedinjenja i sve farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja.
[0024] Izraz "Formula (I)", kako se ovde koristi, obuhvata sva jedinjenja koja zadovoljavaju Formulu (I), uključujući bilo koje enantiomere, racemate i stereoizomere, kao i sve farmaceutski prihvatljive soli i radioizotope takvih jedinjenja. Izraz "jedinjenje Formule (I)" uključuje sve podgeneričke grupe Formule (I) i tako dalje, kao i sve oblike takvih jedinjenja, uključujući soli i hidrate, osim ukoliko nije jasno kontraindikovano kontekstom u kojem se ova fraza koristi.
[0025] Formula (I) uključuje sve njene podformule. U određenim situacijama, jedinjenja Formule (I) mogu sadržati jedan ili više asimetričnih elemenata kao što su stereogeni centri, stereogene ose i slično, npr. asimetrični atomi ugljenika, tako da jedinjenja mogu postojati u različitim stereoizomernim oblicima. Ova jedinjenja mogu biti, na primer, racemati ili optički aktivni oblici. Za jedinjenja sa dva ili više asimetričnih elemenata, ova jedinjenja mogu dodatno biti smeše dijastereomera. Za jedinjenja koja imaju asimetrične centre, treba razumeti da su obuhvaćeni svi optički izomeri i njihove smeše. U ovim situacijama, pojedinačni enantiomeri, tj. optički aktivni oblici, mogu biti dobijeni asimetričnom sintezom, sintezom iz optički čistih prekursora ili rezolucijom racemata. Razdvajanje racemata se takođe može postići, na primer, konvencionalnim metodama, kao što su kristalizacija u prisustvu sredstva za rastvaranje ili hromatografija, koristeći, na primer, hiralnu kolonu tečne hromatografije pod visokim pritiskom (HPLC).
[0026] Tamo gde jedinjenje postoji u različitim tautomernim oblicima, jedinjenje nije ograničeno na bilo koji od specifičnih tautomera, već uključuje sve tautomerne oblike. Razmatrani su svi izotopi atoma koji se javljaju u sadašnjim jedinjenjima. Izotopi uključuju one atome koji imaju isti atomski broj, ali različite masene brojeve. Kao opšti primer, i bez ograničenja, izotopi vodonika uključuju tricijum i deuterijum; izotopi ugljenika uključuju<11>C,<13>C i<14>C; a izotop fluora uključuje
<18>F.
[0027] Izraz "aktivno sredstvo", kako se ovde koristi, označava jedinjenje Formule (I) koje kada se primenjuje kod pacijenta, samostalno ili u kombinaciji sa drugim jedinjenjem, elementom ili smešom, daje direktno ili indirektno fiziološki efekat na pacijentu. Indirektni fiziološki efekat se
1
može javiti putem metabolita ili drugog indirektnog mehanizma. Kada je aktivno sredstvo jedinjenje, tada su uključene soli, solvati (uključujući hidrate) slobodnog jedinjenja, kristalni oblici, nekristalni oblici i bilo koji polimorfi jedinjenja. Ovde se razmatraju svi oblici, bez obzira na metode korišćene za njihovo dobijanje.
[0028] Crtica („-“) koja se ne nalazi između dva slova ili simbola koristi se za označavanje mesta vezivanja za supstituent. Na primer, -(CH2)C3-C8cikloalkil je vezan preko ugljenika metilen (CH2) grupe.
[0029] "Alkanoil" je alkil grupa kao što je ovde definisano, kovalentno vezana za grupu koju zamenjuje keto (- (C = 0) -) mostom. Alkanoil grupe imaju naznačeni broj atoma ugljenika, s tim što je ugljenik keto grupe uključen u numerisane ugljenikove atome. Na primer, C2alkanoil grupa je acetil grupa koja ima formulu CH3(C = 0) -.
[0030] Izraz "alkil", kako se ovde koristi, označava razgranat ili ravan lanac zasićene alifatične ugljovodonične grupe koja ima specifičan broj atoma ugljenika, obično od 1 do oko 12 atoma ugljenika. Izraz C1-C6alkil, kako se ovde koristi, označava alkil grupu koja ima od 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 atoma ugljenika. Druge realizacije uključuju alkilne grupe koje imaju od 1 do 8 atoma ugljenika, 1 do 4 atoma ugljenika ili 1 ili 2 atoma ugljenika, npr. C1-C6alkil, C1-C4alkil i C1-C2alkil. Kada se ovde koristi C0-Cn alkil zajedno sa drugom grupom, na primer, (cikloalkil) C0-C4alkil, naznačena grupa, u ovom slučaju cikloalkil, ili je direktno vezana jednom kovalentnom vezom (C0), ili je vezana alkilnim lancem koji ima specifičan broj atoma ugljenika, u ovom slučaju 1, 2, 3 ili 4 atoma ugljenika. Primeri alkila uključuju, ali nisu ograničeni na, metil, etil, n-propil, izopropil, n-butil, 3-metilbutil, t-butil, n-pentil i sek-pentil.
[0031] Izraz "alkoksi" predstavlja alkil grupu, kao što je gore definisano sa naznačenim brojem atoma ugljenika vezanim preko mosta kiseonika. Primeri alkoksi uključuju metoksi, etoksi, npropoksi, i-propoksi, n-butoksi, 2-butoksi, t-butoksi, n-pentoksi, 2-pentoksi, 3-pentoksi, izopentoksi, neopentoksi, n-heksoksi, 2-heksoksi, 3-heksoksi i 3-metilpentoksi.
[0032] Izraz "aril", kako se ovde koristi, označava aromatične grupe koje sadrže samo ugljenik u aromatičnom prstenu ili prstenovima. Tipične aril grupe sadrže 1 do 3 odvojena, spojena ili privezana prstena i od 6 do oko 18 atoma u prstenu, bez heteroatoma kao članova prstena. Kada je naznačeno, takve aril grupe mogu biti dalje supstituisane ugljenikovim atomima ili neugljenikovim atomima ili grupama. Biciklične aril grupe mogu biti dalje supstituisane ugljenikovim ili ne-ugljenikovim atomima ili grupama. Biciklične aril grupe mogu sadržati dva fuzionisana aromatična prstena (naftil) ili aromatični prsten spojen sa 5- do 7-članom nearomatičnom cikličnom grupom koja opciono sadrži 1 ili 2 heteroatoma nezavisno izabrana od N, O i S, na primer, 3,4-metilendioksi-fenil grupa. Aril grupe uključuju, na primer, fenil, naftil, uključujući 1-naftil i 2-naftil, i bi-fenil.
[0033] Izraz "cikloalkil", kako se ovde koristi, označava zasićenu ugljovodoničnu grupu prstena, koja ima samo atome ugljeničnog prstena i ima određeni broj atoma ugljenika, obično od 3 do oko 8 atoma ugljenika u prstenu, ili od 3 do oko 7 atoma ugljenika. Primeri cikloalkil grupa uključuju ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil ili cikloheksil, kao i premošćene ili zatvorene zasićene prstenaste grupe kao što su norboran ili adamantan.
[0034] Izraz "cikloalkenil", kako se ovde koristi, označava zasićenu ugljovodoničnu prstenastu grupu, koja sadrži jednu ili više nezasićenih veza ugljenik-ugljenik, koje se mogu javiti u bilo kojoj stabilnoj tački prstena, i koji ima specifičan broj atoma ugljenika. Monociklične cikloalkenil grupe obično imaju od 3 do oko 8 atoma ugljeničnog prstena ili od 3 do 7 (3, 4, 5, 6 ili 7) atoma ugljeničnog prstena. Cikloalkenil supstituenti mogu biti privezak od supstituisanog atoma azota ili ugljenika, ili supstituisani atom ugljenika koji može imati dva supstituenta, može imati cikloalkenil grupu, koja je vezana kao spiro grupa. Primeri cikloalkenil grupa uključuju ciklopropenil, ciklobutenil, ciklopentenil ili cikloheksenil, kao i premošćene ili zatvorene zasićene prstenaste grupe kao što su norbornen.
[0035] Izraz "heteroaril", kako se ovde koristi, označava stabilan 5- do 7-člani monociklični ili 7-do 10-člani biciklični heterociklični prsten koji sadrži najmanje 1 aromatični prsten koji sadrži od 1 do 4, ili specifično od 1 do 3, heteroatoma izabrana između N, O i S, a preostali atomi u prstenu su ugljenik. Kada ukupan broj S i O atoma u heteroarilnoj grupi pređe 1, ti heteroatomi nisu susedni. Specifično, ukupan broj S i O atoma u heteroarilnoj grupi nije veći od 2, specifičnije ukupan broj S i O atoma u heteroarilnoj grupi nije veći od 1. Atom azota u heteroarilnoj grupi može opciono biti kvaternizovan. Kada je naznačeno, takve heteroarilne grupe mogu biti dalje supstituisane ugljenikovim ili ne-ugljenikovim atomima ili grupama. Takva supstitucija može uključivati fuziju sa 5 do 7-članom zasićenom cikličnom grupom koja opciono sadrži 1 ili 2 heteroatoma nezavisno izabrana između N, O i S, da bi se obrazovala, na primer, [1,3] dioksolo [4,5-c] piridil grupa. U određenim realizacijama, korišćene su 5- do 6-člane heteroarilne grupe. Primeri heteroaril grupa uključuju, ali nisu ograničeni na, piridil, indolil, pirimidinil, piridizinil, pirazinil, imidazolil, oksazolil, furanil, tiofenil, tiazolil, triazolil, tetrazolil, izoksazolil, hinolinil,
1
pirolil, pirazolil, benz [b] tiofenil, izohinolinil, hinazolinil, hinoksalinil, tienil, izoindolil i 5,6,7,8-tetrahidroizohinolin.
[0036] "Haloalkil" uključuje i razgranate i ravno-lančane alkil grupe sa određenim brojem atoma ugljenika, supstituisanih sa 1 ili više atoma halogena, do maksimalno dozvoljenog broja atoma halogena. Primeri haloalkila uključuju, ali nisu ograničeni na, trifluorometil, difluorometil, 2-fluoroetil i penta-fluoroetil.
[0037] "Haloalkoksi" je haloalkil grupa, kao što je ovde definisano, povezana preko kiseoničnog mosta (kiseonik alkoholnog radikala).
[0038] "Halo" ili "halogen" je bilo koji od fluoro, hloro, bromo i jodo.
[0039] "Mono- i / ili di-alkilamino" je sekundarna ili tercijarna alkil amino grupa, pri čemu su alkil grupe nezavisno odabrane alkil grupe, kako su ovde definisane, sa naznačenim brojem atoma ugljenika. Tačka vezivanja alkilamino grupe je na azotu. Primeri mono- i di-alkilamino grupa uključuju etilamino, dimetilamino i metil-propil-amino.
[0040] Izraz "supstituisan", kako se ovde koristi, znači da je bilo koji ili više vodonika na naznačenom atomu ili grupi zamenjen izborom iz naznačene grupe, pod uslovom da normalna valenca naznačenog atoma nije prekoračena. Kada je supstituent okso (tj. = 0), tada su zamenjena 2 vodonika na atomu. Kada okso grupa supstituiše aromatične ostatke, odgovarajući delimično nezasićeni prsten zamenjuje aromatični prsten. Na primer, piridil grupa supstituisana sa okso je piridon. Stabilno jedinjenje ili stabilna struktura podrazumeva jedinjenje koje je dovoljno robusno da preživi izolaciju iz reakcione smeše i naknadnu formulaciju u efikasno terapijsko sredstvo.
[0041] Ukoliko nije drugačije naznačeno, supstituenti su imenovani u strukturi jezgra. Na primer, treba razumeti da kada je (cikloalkil) alkil naveden kao mogući supstituent, tačka vezivanja ovog supstituenta za strukturu jezgra nalazi se u alkilnom delu, ili kada je arilalkil naveden kao mogući supstituent, tačka vezivanja za strukturu jezgra je alkilni deo.
[0042] Pogodne grupe koje mogu biti prisutne na "supstituisanom" ili "opciono supstituisanom" položaju uključuju, ali nisu ograničene na, halogen; cijano; hidroksil; nitro; azido; alkanoil (kao što je C2-C6alkanoil grupa kao što je acil ili slično); karboksamido; alkil grupe (uključujući cikloalkil grupe) koje imaju 1 do oko 8 atoma ugljenika, ili 1 do oko 6 atoma ugljenika; alkenil i alkinil grupe, uključujući grupe koje imaju jednu ili više nezasićenih veza i od 2 do oko 8, ili 2 do oko 6 atoma ugljenika; alkoksi grupe koje imaju jednu ili više kiseoničnih veza i od 1 do oko 8, ili
1
od 1 do oko 6 atoma ugljenika; ariloksi kao što je fenoksi; alkiltio grupe, uključujući one koje imaju jednu ili više tioetarskih veza i od 1 do oko 8 atoma ugljenika, ili od 1 do oko 6 atoma ugljenika; alkilsulfinilne grupe, uključujući one koje imaju jednu ili više sulfinilnih veza i od 1 do oko 8 atoma ugljenika, ili od 1 do oko 6 atoma ugljenika; alkilsulfonil grupe, uključujući one koje imaju jednu ili više sulfonil veza i od 1 do oko 8 atoma ugljenika, ili od 1 do oko 6 atoma ugljenika; aminoalkil grupe, uključujući grupe koje imaju jedan ili više N atoma i od 1 do oko 8, ili od 1 do oko 6 atoma ugljenika; aril koji ima 6 ili više ugljenika i jedan ili više prstenova (npr. fenil, bifenil, naftil ili slično, svaki prsten bilo supstituisan ili nesupstituisan aromatični); arilalkil koji ima 1 do 3 odvojena ili spojena prstena i od 6 do oko 18 atoma ugljenika u prstenu, pri čemu je benziloksi primer arilalkil grupe; arilalkoksi koji ima 1 do 3 odvojena ili spojena prstena i od 6 do oko 18 atoma ugljenika u prstenu, pri čemu je benziloksi primer arilalkoksi grupe; ili zasićena, nezasićena ili aromatična heterociklična grupa koja ima 1 do 3 odvojena ili spojena prstena sa 3 do oko 8 članova po prstenu i jednim ili više N, O ili S atoma, npr. kumarinil, hinolinil, izohinolinil, hinazolinil, piridil, pirazinil, pirimidinil, furanil, pirolil, tienil, tiazolil, triazinil, oksazolil, izoksazolil, imidazolil, indolil, benzofuranil, benzotienil, benzotiazolil, tetrahidrofuranil, tetrahidropiranil, piperidinil, morfolinil, piperazinil i pirolidinil. Takve heterociklične grupe mogu biti dalje supstituisane, npr. sa hidroksi, alkil, alkoksi, halogenom i amino.
[0043] Izraz "dozni oblik", kako se ovde koristi, označava jedinicu primene aktivnog agensa. Primeri oblika doziranja uključuju tablete, kapsule, injekcije, suspenzije, tečnosti, emulzije, kreme, masti, supozitorije, oblike za inhalaciju, transdermalne oblike i slično. Primerni oblik doziranja je čvrsti oralni oblik doziranja.
[0044] Izraz "farmaceutski preparati", kako se ovde koristi, su preparati koji sadrže najmanje jedno aktivno sredstvo, poput jedinjenja ili soli Formule (I), i najmanje jednu drugu supstancu, poput nosača. Farmaceutski preparati zadovoljavaju američke FDA GMP (dobra proizvođačka praksa) standarde za lekove koji se koriste kao humani ili nehumani. Farmaceutski preparati mogu biti formulisani u dozni oblik.
[0045] Izraz "farmaceutski prihvatljiva so", kako se ovde koristi, uključuje derivate otkrivenih jedinjenja u kojima je matično jedinjenje modifikovano izradom njihovih neorganskih i organskih, kiselinskih ili baznih adicionih soli. Soli sadašnjih jedinjenja, mogu biti sintetizovane iz matičnog jedinjenja koje sadrži bazni ili kiseli ostatak, uobičajenim hemijskim metodama. Generalno, takve soli se mogu dobiti reakcijom slobodnih kiselinskih oblika ovih jedinjenja sa stehiometrijskom
1
količinom odgovarajuće baze (kao što su Na, Ca, Mg ili K hidroksid, karbonat, bikarbonat ili slično), ili reakcijom slobodnih baznih oblika ovih jedinjenja sa stehiometrijskom količinom odgovarajuće kiseline. Takve reakcije se tipično izvode u vodi ili u organskom rastvaraču, ili u njihovoj smeši. Generalno se koriste nevodeni medijumi poput etra, etil acetata, etanola, izopropanola ili acetonitrila, gde je to izvodljivo. Soli sadašnjih jedinjenja dalje uključuju solvate jedinjenja i njihove soli.
[0046] Primeri farmaceutski prihvatljivih soli uključuju, ali nisu ograničeni na, soli mineralnih ili organskih kiselina baznih ostataka kao što su amini; alkalne ili organske soli kiselih ostataka kao što su karboksilne kiseline; i slično. Farmaceutski prihvatljive soli uključuju konvencionalne netoksične soli i kvaternarne amonijumove soli matičnog jedinjenja nastalog, na primer, od netoksičnih neorganskih ili organskih kiselina. Na primer, konvencionalne netoksične kisele soli uključuju one izvedene iz neorganskih kiselina kao što su hlorovodonična, bromovodonična, sumporna, sulfaminska, fosforna, azotna i slično; i soli pripremljene od organskih kiselina kao što su sirćetna, propionska, jantarna, glikolna, stearinska, mlečna, jabučna, vinska, limunska, askorbinska, pamoična, maleinska, hidroksimaleinska, fenilsirćetna, glutaminska, benzojeva, salicilna, mesilna, esilna, besilna, sulfanilna, 2-acetoksibenzojeva, fumarna, toluensulfonska, metansulfonska, etan disulfonska, oksalna, izetonska, HOOC-(CH2)n-COOH gde je n 0-4, i slično. Liste dodatnih pogodnih soli mogu se naći, na primer, u Remington's Pharmaceutical Sciences, 17. izdanje, Mack Publishing Company, Easton, Pa., str. 1418 (1985).
[0047] Izraz "nosač", kako se ovde koristi, koji se primenjuje na farmaceutske preparate, odnosi se na razblaživača, pomoćnu supstancu ili vehikulum sa kojim se obezbeđuje aktivno jedinjenje.
[0048] Izraz "pacijent", kako se ovde koristi, je čovek kome je potreban medicinski tretman. Medicinski tretman može uključivati lečenje postojećeg stanja, poput bolesti ili poremećaja, profilaktički ili preventivni tretman ili dijagnostički tretman.
[0049] Izraz "obezbeđivanje", kako se ovde koristi, znači davanje, primenu, prodaju, distribuciju, prenos (za profit ili ne), proizvodnju, mešanje ili izdavanje.
[0050] Izraz "obezbeđivanje jedinjenja Formule (I) sa najmanje jednim dodatnim terapeutskim agensom", kako se ovde koristi, znači da se jedinjenje formule (I) i dodatni aktivni sastojak (-ci) primenjuju istovremeno u jednom obliku doziranja, obezbeđeni istovremeno u odvojenim doznim oblicima, ili obezbeđeni u odvojenim doznim oblicima za primenu odvojeni određenim vremenskim periodom unutar vremena u kome su i jedinjenje formule (I) i bar jedno dodatno
1
aktivno sredstvo u krvotoku pacijent. Jedinjenje formule (I) i dodatni aktivni agens ne mora da prepiše pacijentu isti medicinski radnik. Dodatni aktivni agens ili agensi ne zahtevaju recept. Primena jedinjenja formule (I) ili bar jednog dodatnog aktivnog agensa, može se izvršiti bilo kojim odgovarajućim putem, na primer, oralne tablete, oralne kapsule, oralne tečnosti, inhalacija, injekcija, supozitorije ili lokalni kontakt.
[0051] Izraz "lečenje", kako se ovde koristi, uključuje obezbeđivanje jedinjenja Formule (I), bilo kao jedino aktivno sredstvo ili zajedno sa najmanje jednim dodatnim aktivnim sredstvom dovoljnim da: (a) spreči bolest ili simptom bolesti od pojave kod pacijenta koji može biti predisponiran za bolest, ali još uvek nije dijagnostikovan da ima bolest; (b) inhibiranje bolesti, tj. zaustavljanje njenog razvoja; i (c) ublažavanje bolesti, tj. izazivanje regresije bolesti. "Lečenje" i "tretman" takođe podrazumeva obezbeđivanje terapijski efikasne količine jedinjenja Formule (I), kao jedinog aktivnog agensa ili zajedno sa najmanje jednim dodatnim aktivnim sredstvom, pacijentu koji pati od poremećaja upotrebe supstanci, šizofrenije i srodnih mentalnih poremećaja, kognitivnih poremećaja, impulsivnosti, gojaznosti, depresije, bipolarnog poremećaja ili diskinezije povezane sa Parkinsonovom bolešću (PD) ili lečenje PD sa L-DOPA.
[0052] Izraz "terapijski efikasna količina" farmaceutskog preparata, kako se ovde koristi, označava količinu efikasnu, kada se primenjuje pacijentu, za pružanje terapijske koristi kao što je ublažavanje simptoma, npr. za lečenje pacijenta koji pati od poremećaja zloupotrebe supstanci, šizofrenije i srodnog mentalnog poremećaja, kognitivnog poremećaja, impulsivnosti, gojaznosti, depresije, bipolarnog poremećaja ili diskinezije povezana sa Parkinsonovom bolešću (PD) ili lečenje PD sa L-DOPA.
[0053] Jedinjenja se mogu primenjivati u obliku čiste hemikalije ili u obliku farmaceutskog preparata. Shodno tome, jedna realizacija obezbeđuje farmaceutske preparate koji sadrže jedinjenje ili farmaceutski prihvatljivu so Formule (I), zajedno sa farmaceutski prihvatljivim nosačem. Farmaceutski preparat može sadržati jedinjenje ili so Formule (I) kao jedino aktivno sredstvo ili može sadržati jedno ili više dodatnih aktivnih sredstava.
[0054] Jedinjenja se mogu primenjivati oralno, lokalno, parenteralno, inhalacijom ili sprejom, sublingvalno, transdermalno, putem bukalne primene, rektalno, u obliku oftalmološkog rastvora, ili na drugi način, u formulacijama doznih jedinica koje sadrže konvencionalne farmaceutski prihvatljive nosače. Farmaceutski preparat, može biti formulisan kao bilo koji farmaceutski koristan oblik, npr. kao aerosol, krema, gel, pilula, kapsula, tableta, sirup, transdermalni flaster ili
1
oftalmološki rastvor. Neki oblici doziranja, kao što su tablete i kapsule, podeljeni su u odgovarajuće veličine jediničnih doza koje sadrže odgovarajuće količine aktivnih komponenata, npr. efikasnu količinu za postizanje željene svrhe.
[0055] Nosači uključuju pomoćne supstance i razblaživače i moraju biti dovoljno visoke čistoće i dovoljno niske toksičnosti da bi bili pogodni za primenu kod pacijenta koji se leči. Nosač može biti inertan ili može imati sopstvene farmaceutske prednosti. Količina nosača korišćena zajedno sa jedinjenjem je dovoljna da obezbedi praktičnu količinu materijala za primenu po jedinici doze jedinjenja.
[0056] Klase nosača uključuju, na primer, puferska sredstva, agense za bojenje, razblaživače, sredstva za dezintegraciju, emulgatore, arome, sredstva za klizanje, lubrikanse, konzervanse, stabilizatore, površinski aktivne supstance, sredstva za tabletiranje i sredstva za vlaženje. Neki nosači mogu biti navedeni u više klasa, na primer biljno ulje se može koristiti kao lubrikans u nekim formulacijama, a kao razblaživač u drugima. Primeri farmaceutski prihvatljivih nosača uključuju šećere, skrobove, celuloze, tragakantu u prahu, slad, želatin, talk i biljna ulja. Opcionalna aktivna sredstva, mogu biti uključena u farmaceutski preparat, koja u suštini ne ometaju aktivnost jedinjenja Formule (I).
[0057] Farmaceutski preparati mogu biti formulisani za oralnu primenu. Ovi preparati sadrže između 0,1 i 99 masenih procenata ("mas.%") jedinjenja Formule (I), i obično najmanje oko 5 mas. %. Neke realizacije sadrže od oko 25 mas.% do oko 50 mas. % ili od oko 5 mas.% do oko 75 mas.% jedinjenja Formule (I).
[0058] Farmaceutski preparat može biti formulisan u pakovanju koje sadrži farmaceutski preparat koji sadrži jedinjenje Formule (I) ili njegovu so u kontejneru i koje dalje sadrži uputstva za upotrebu preparata kako bi se proizveo terapijski efekat kod pacijenta.
[0059] Farmaceutski preparat takođe, može biti formulisan u pakovanju koje sadrži farmaceutski preparat Formule (I) ili njegovu so u kontejneru, i dalje sadrži uputstva za upotrebu preparata za lečenje pacijenta koji pati od, na primer, od poremećaja upotrebe supstanci, šizofrenije i srodnih mentalnih poremećaja, kognitivnih poremećaja, impulsivnosti, gojaznosti, depresije, bipolarnog poremećaja ili diskinezije povezane sa Parkinsonovom bolešću (PD) ili lečenje PD sa L-DOPA.
[0060] U jednoj realizaciji, postupak lečenja poremećaja upotrebe supstanci, šizofrenije ili srodnog mentalnog poremećaja, kognitivnog poremećaja, impulsivnosti, gojaznosti, depresije, bipolarnog
2
poremećaja ili diskinezije povezane sa Parkinsonovom bolešću (PD) ili lečenje PD sa L-DOPA kod pacijenta uključuje obezbeđivanje efikasne količine jedinjenja ili soli Formule (I) za pacijenta kome je potreban takav tretman. Alternativno, jedinjenje Formule (I), može biti obezbeđeno u obliku farmaceutskog preparata.
[0061] U jednoj realizaciji, postupak za lečenje poremećaja zloupotrebe supstanci (npr. kokain, heroin, metamfetamin, opioidi (uključujući hidromorfon, hidrokodon, oksikodon, oksimorfon, etilmorfin buprenorfin, morfijum, kodein, itd.), kanabis, alkohol, nikotin i slično), šizofrenije i srodnih mentalnih poremećaja, kognitivnih poremećaja, impulsivnosti, gojaznosti, depresije, bipolarnog poremećaja ili diskinezije povezane sa Parkinsonovom bolešću (PD) ili lečenje PD sa L-DOPA obuhvata obezbeđivanje efikasne količine jedinjenja ili soli formule (I) za pacijenta kome je takav tretman potreban. Alternativno, jedinjenje Formule (I), može biti obezbeđeno u obliku farmaceutskog preparata.
[0062] Jedinjenja formule (I) mogu se koristiti kao istraživački alati u proučavanju podtipova dopaminskih receptora ili kao biomarkeri ili medicinski dijagnostički alati, npr. razvojem liganda preko pozitronske emisione tomografije (PET) ili magnetne rezonance (MRI). U izvesnoj realizaciji, jedinjenja Formule (I) sadrže radioizotop, kao što je ovde opisan (<11>C,<18>F, itd.), za upotrebu da bi se jedinjenje pretvorilo u pogodan PET ligand.
[0063] Ovaj pronalazak je dalje ilustrovan sledećim primerima koje ne treba tumačiti kao ograničavajuće.
PRIMERI
Primer 1: Sinteza derivata piperazin butandiil/2-butendiil arilkarboksamida
[0064] Anhidrovani rastvarači su nabavljeni od kompanije Aldrich i korišćeni su bez daljeg prečišćavanja, izuzev tetrahidrofurana, koji je sveže destilovan iz natrijum-benzofenon ketila. Sve ostale hemikalije i reagensi nabavljeni su od kompanije Sigma-Aldrich Co. LLC, Combi-Blocks, TCI America, Acros Organics, Maybridge i Alfa Aesar. Svi konačni proizvodi amina pretvoreni su u oksalatnu so. Spektroskopski podaci i prinosi odnose se na oblik slobodnih baza jedinjenja.
Teledyne ISCO CombiFlash Rf ili staklena fleš hromatografija na koloni je izvedena korišćenjem silikagela (EMD Chemicals, Inc.; 230-400 mesh, 60 Å).<1>H i<13>C NMR spektri dobijeni su pomoću Varian Mercury Plus 400 spektrometra na 400 MHz i 100 MHz, respektivno. Hemijska pomeranja su zabeležena u delovima na milion (ppm) i referencirana prema deuterisanom rastvaraču za<1>H spektre (CDCl3, 7,26, CD3OD, 3,31 ili DMSO-d6, 2,50) i<13>C spektre (CDCl3, 77,2, CD3OD, 49,0 ili DMSO-d6, 39,5). Podaci gasne hromatografije-masene spektrometrije (GC / MS) pribavljeni su (gde se mogu dobiti) upotrebom Agilent Technologies (Santa Clara, CA) 6890N GC, opremljen HP-5MS kolonom (umreženi 5% PH ME siloksan, 30 m x 0,25 mm i.d. x 0,25 μm debljina filma) i 5973 maseno selektivnim jonskim detektorom u režimu elektronskog udara. Kao gas-nosač korišćen je ultračisti helijum pri brzini protoka od 1,2 mL/minut (min). Temperatura otvora za ubrizgavanje i prenosne linije bila je 250, odnosno 280 ° C, a korišćeni gradijent temperature peći bio je sledeći: početna temperatura (100 ° C) održavana je 3 min, a zatim povećana na 295 ° C na 15 ° C / min tokom 13 min, i na kraju održavana na 295 ° C tokom 10 min. Analiza sagorevanja je izvedena od strane Atlantic Microlab, Inc. (Norcross, GA) i rezultati se slažu u okviru ± 0,4% od izračunatih vrednosti. Vrednosti cLogP i polarne površine (PSA) izračunate su primenom ChemDraw Professional Ultra 15.0. Određivanje tačke topljenja izvršeno je korišćenjem Thomas-Hooverovog aparata za tačku topljenja i nije korigovano. Na osnovu NMR i podataka o sagorevanju, sva konačna jedinjenja su ≧ 95% čista.
[0065] Korišćene skraćenice: CDI, 1,1’-karbonildiimidazol; DMF, dimetilformamid; h, sat; min, minut; RT, sobna temperatura; THF, tetrahidrofuran.
[0066] Generalizovane sintetičke strategije koje se koriste za derivate piperazin-butandiil/2-butendiil-arilkarboksamida su prikazane u šemama 1-5.
Šema 1. Sinteza (±), (R) i (S)-29
Hiralna preparativna HPLC
Reagensi i uslovi: (a) isparljiva HNO3, 0 ° C do sobne temperature, 2h; (b) BH3.CS2, 12h; (c) PCC, CH2Cl2, preko noći; (d) Ph3P CH3Br, Litijum-terc-butoksid, THF-78 do 0, zatim sobna temperatura, 8h; (e) 10% Pd/C, H2, 50 psi, EtOAc, 45 min; (f) bis (2-hloroetil) amin. HCl, dietilenglikol monoetiletar, 150 ° C, 7h; (g) 1) IPA, refluks, 3h 2) hidrazin, EtOH, refluks, preko noći; (h) ArCOOH, EDC/HoBt, DIPEA, DCM/DMF, 0 ° C do st; (i) (Salen)Co(III)(OAc) kompleks, H2O, THF, 72 h.
2
Šema 2. Sinteza (±), (R) i (S)-19
Hiralna preparativna HPLC
Reagensi i uslovi: (a) BH3.CS2, 12h; (b) PCC, CH2Cl2, preko noći; (c) Ph3P CH3Br, litijum tercbutoksid, THF-78 do 0, zatim sobna temperatura, 8h; (d) 10% Pd/C, H2, 50 psi, EtOAc, 45 min; (e) bis (2-hloroetil) amin. HCl, dietilenglikol monoetiletar, 150 ° C, 7h; (f) 1) IPA, refluks, 3h 2) hidrazin, EtOH, refluks, preko noći; (g) ArCOOH, EDC/HoBt, DIPEA, DCM/DMF, 0 ° C do st; (h) (Salen) Co (III) (OAc) kompleks, H2O, THF, 72 h.
Šema 3. Sinteza C4a-b i C5a-b
Reagensi i uslovi: (a) DAST, suvi DCM, -78 ° C, preko noći (b) hidrazin, EtOH, refluks, preko noći; (c) ArCOOH, EDC/Hobt, DIPEA, DCM/DMF, 0 ° C do sobne temperature.
Šema 4. Sinteza 35
2
Reagensi i uslovi: (a) B6, K2CO3, aceton, refluks, preko noći; (b) hidrazin, EtOH, refluks, preko noći; (c) 4-metil-1H-imidazol-2-karboksilna kiselina, CDI, THF, 0 ° C do ST, preko noći.
Šema 5. Sinteza 40
Reagensi i uslovi: (a) B6, K2CO3, aceton, refluks, preko noći; (b) NaN3, NH4Cl, DMF, 100 ° C, 6 h; (c) 10% Pd/C, H2, 50 psi, 2 h; (d) Indol-2-COOH, CDI, THF, 0 ° C do ST.
2
[0067] 3-Hloro-4-metoksi-5-nitrobenzojeva kiselina (A2): 3-hloro-4-metoksibenzojeva kiselina (5,0 g, 26,79 mmol) dodata je u malim porcijama u hladnu isparljivu HNO3(90%, 25 mL) na 0 -5 ° C. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na 20 ° C i mešana još dodatna 2 sata. Dodata je hladna voda (50 mL), a istaloženi proizvod je ekstrahovan u CHCl3i ispran slanim rastvorom i koncentrovan. Proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 8% MeOH/CHCl3 kao eluens da se dobije 5,28 g (85%) proizvoda.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) 8,27 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 4,02 (s, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CD3OD) δ 165,9, 153,9, 146,4, 136,3, 131,56, 125,9, 63,2; GC-MS (EI) m/z 231 (M<+>).
[0068] (3-Hloro-4-metoksi-5-nitrofenil) metanol (A3): Boran dimetil sulfid kompleks (10 M, 3,072 g, 40,44 mmol) dodat je u kapima u rastvor A2 (5,28 g, 22,85 mmol) u THF (60 mL) na 0-5 ° C. Smeša je ostavljena da dođe na sobnu temperaturu i mešana je preko noći. Reakciona smeša je ohlađena na 0-5 ° C i pažljivo ugašena dodavanjem MeOH u kapima. Reakciona smeša je uparena da bi se dobilo 4,7 g sirovog proizvoda i korišćen je direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 8,49-8,38 (m, 2H), 5,50 (s, 2H), 4,82 (m 3H), 3,70 (bs, 1H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 148,9, 145,2, 137,9, 132,5, 130,6, 121,3, 63,1, 62,5; GC-MS (EI) m/z 217 (M<+>).
[0069] 3-Hloro-4-metoksi-5-nitrobenzaldehid (A4) (Mizuhara i sar. Studija odnosa odnosa strukture i aktivnosti derivata fenilpirazola kao nove klase anti-HIV agenasa. Bioorg. Med. Chem. Lett. 2013, 23, 4557-61): Piridinijum hlorohromat (PCC, 9,31 g, 43,20 mmol) je dodat rastvoru A3 (4,7 g, 21,60 mmol) u CH2Cl2(100 mL). Reakciona smeša je mešana preko noći i filtrirana kroz celitni sloj. Proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 20% EtOAc/heksane kao eluens dajući 4.0 g (85%) proizvoda u obliku žute, čvrste supstance<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 9,94 (s, 1H), 8,19 (d, J= 2,0 Hz, 1H), 8,13 (d, J= 2,0 Hz, 1H), 4,10 (s, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 187,8, 154,4, 145,7, 134,5, 132,2, 131,9, 124,8, 63,0; GC-MS (EI) m/z 215 (M<+>).
[0070] 1-Hloro-2-metoksi-3-nitro-5-vinilbenzen (A5): Litijum-terc-butoksid (4,46 g, 55,81 mmol) je dodat u kapima u suspenziju metiltrifenilfosfonijum bromida (7,90 g, 22,32 mmol) u suvom THF (100 mL) na -78 ° C pod argonom. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na 0-20 ° C i mešana tokom 3 sata i primećeno je obrazovanje žutog taloga. Rastvor A4 (4,0 g, 18,60 mmol) u THF (50 ml) dodat je u kapima p tokom 30 minuta. Reakciona smeša je održavana na 20 ° C i mešana 8 h. Reakciona smeša je ugašena sa zas. rastvorom NH4Cl (50 mL) i THF je uklonjen pod vakuumom. Sirovi proizvod je ekstrahovan sa EtOAc (3 x 25 mL). Organski sloj je
2
kombinovan, osušen, koncentrovan i prečišćen korišćenjem fleš hromatografije sa 5% dietil etra/ heksana kao eluensom da bi se dobilo 3,17 g (85%) proizvoda u obliku žute čvrste supstance.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 7,59 (s, 1H), 7,51 (s, 1H), 6,55-6,47 (m, 1H), 5,69 (d, J = 16 Hz, 1H), 5,32 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 3,92 (s, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 148,7, 145,2, 134,5, 133,1, 131,6, 130,5, 120,8, 117,2, 62,3. GC-MS (EI) m/z 213 (M<+>).
[0071] 3-Hloro-5-etil-2-metoksianilin (A6): Smeša A5 (3,17 g, 14,8 mmol) i 10% Pd/C (0,350 g) u etil acetatu (30 mL) mešana je u atmosferi vodonika (45 psi) na sobnoj temperaturi tokom 45 minuta. Reakciona smeša je filtrirana kroz celitni sloj i uparena u vakuumu. Reakciona smeša je bila dovoljno čista da se koristi u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 6,60 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,44 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,96 (bs, 2H), 3,83 (s, 3H), 2,48 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 1,19 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 141,3, 141,0, 140,9, 127,0, 118,3, 113,7, 59,4, 28,1, 15,2. GC-MS (EI) m/z 185 (M<+>).
[0072] 1-(3-Hloro-5-etil-2-metoksifenil) piperazin (A7): Reakciona smeša od A6 (2,8 g, 15,13 mmol) i bis (2-hloroetil) amin hidrohlorida (2,69 g, 15,13 mmol) u dietilenglikol monometil etru (4,0 mL) zagrevana je na 150 ° C, tokom 7 sati u inertnoj atmosferi. Reakciona smeša je ostavljena da dođe na sobnu temperaturu, dodat je drobljeni led i smeša je neutralisana sa 2M NaOH do pH 8-9, praćena ekstrakcijom sa etil acetatom (250 mL). Organski sloj je sakupljen, ispran dva puta ledeno hladnom vodom, koncentrovan i prečišćen hromatografijom na koloni koristeći 5% MeOH /CHCl3kao eluens da bi se dobilo 2,7 g (70%) čvrstog proizvoda.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6,84 (d, J = 2 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,85 (s, 3H), 3,08-3,01 (m, 8H), 2,55 (q, J = 8 Hz, 2H), 1,20 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 146,8, 146,6, 140,9, 128,4, 122,4, 116,9, 59,2, 51,9, 46,8, 28,6, 15,6. GC-MS (EI) m/z 254,2 (M<+>). Oksalatna so je istaložena iz acetona; T.t. 190-191 ° C. Anal. C13H19ClN2O•C2H2O4•0,5H2O) C, H, N.
[0073] 4-amino-1-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)butan-2-ol (A9) 2-(2-(oksiran-2-il) etil) izoindolin-1,3-dion A8 (0,768 g, 3,54 mmol) je dodat u reakcionu smešu od A7 (0,90 g, 3,54 mmol) u 2-propanolu (15 mL) i mešana je 3 sata pod refluksom. Stvaranje 2-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil) piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)izoindolin-1,3-diona je potvrđeno tankoslojnom hromatografijom (Kumar i sar., J. Med. Chem., 2016, 59 (16), str. 7634-7650.) Reakciona smeša je ohlađena na 20 ° C i dodat je hidrazin i ponovo je reakciona smeša zagrevana 7 sati pod refluksom na 90 °. Reakcija je praćena pomoću TLC i kada je reakcija završena, rastvarač je uparen i alkalizovan sa 20% rastvora K2CO3(20 mL), praćeno ekstrakcijom sa
2
hloroformom (250 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko anhidrovanog Na2SO4, a rastvarač je uparen da bi se dobio proizvod u obliku ulja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6,77 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 3,85-3,81 (m, 1H), 3,76 (s, 3H), 3,06 (bs, 4H), 2,86 (m, 2H), 2,72-2,70 (m, 2H), 2,53-2,44 (m, 4H), 2,37-2,28 (m, 3H), 1,53-1,44 (m, 2H), 1,13 (t, J = 8,0 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 146,3, 146,0, 140,7, 128,1, 122,2, 116,6, 66,2, 64,6, 58,9, 53,8, 50,3, 39,6, 37,7, 28,4, 15,4.
[0074] (S)-4-amino-1-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)butan-2-ol (A9S) pripremljen je postupkom opisanim za A9 koristeći (S)-2-(2-(oksiran-2-il) etil) izoindolin-1,3-dion (A8S);<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6,99 (s, 1H), 6,88 (dd, J = 19,1, 8,2 Hz, 2H), 6,61 (s, 1H), 3,97 - 3,76 (m, 4H), 3,14 (s, 4H), 2,91 (d, J = 3,4 Hz, 6H), 2,79 (s, 3H), 2,55 (dt, J = 14,5, 7,3 Hz, 6H), 2,47 - 2,32 (m, 4H), 1,67 - 1,46 (m, 4H), 1,20 (t, J = 7,6 Hz, 4H).
[0075] (R)-4-amino-1-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)butan-2-ol (A9R) je pripremljen postupkom opisanim za A9 koristeći (R)-2-(2-(oksiran-2-il) etil) izoindolin-1,3-dion (A8R). Dobijeni proizvod kao takav je preuzet za sledeći korak.
[0076] Opšti postupak amidacije A. Karboksilna kiselina (1,0 mmol) je rastvorena u rastvoru hloroforma i dimetilformamida (8: 2) i ohlađena na 0 ° C. Ovom rastvoru je dodat l-Etil-3-(3-dimetilaminopropil) karbodiimid (EDCI) (1,3 mmol) i Hidroksibenzotriazol (Hobt) (1,2 mmol). (Org Biomol Chem. 2015; 13(40):10162-78). Nakon 30 min, dodat je 1 ekv. aril amina na 0 ° C. Ovoj reakcionoj smeši je dodat diizopropiletilamin (DIPEA) (1,5 mmol) i nastavljeno je mešanje reakcione smeše na sobnoj temperaturi tokom 8 sati. Napredak reakcije je praćen pomoću TLC. Po završetku dodat je zasićeni rastvor natrijum bikarbonata (NaHCO3) i konačna jedinjenja su ekstrahovana iz hloroforma (50 ml X 4). Dobijeni organski sloj je uparen da bi se dobio sirovi amid, koji je prečišćen fleš hromatografijom na koloni da bi se dobio željeni čisti proizvod. Svi enantiomeri i racemska jedinjenja su okarakterisana hiralnom HPLC.
[0077] N-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)-1H-indol-2-karboksamid (±)-29 je pripremljen iz indol-2-karboksilne kiseline i A9 u skladu sa opštim postupkom amidacije A. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom korišćenjem 30% acetona/CHCl3kao eluensa da se dobije željeni proizvod sa prinosom od 60,0%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,21 (s, 1H), 7,64 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,42 (t, J = 10,3 Hz, 2H), 7,37 (s, 1H), 7,27 (dd, J = 11,1, 4,0 Hz, 1H), 7,13 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 10,7 Hz, 1H), 6,62 (s, 1H), 4,10 -3,87 (m, 2H), 3,84 (s, 3H), 3,57 - 3,49 (m, 1H), 3,16 (s, 3H), 2,84 (s, 2H), 2,55 (dd, J = 15,1, 7,6
2
Hz, 3H), 2,48 - 2,37 (m, 2H), 1,94 - 1,74 (m, 1H), 1,72 - 1,52 (m, 3H), 1,21 (t, J = 7,5 Hz, 3H).
<13>C NMR (101 MHz, CDCl3) δ 162,89, 162,02, 161,43, 146,41, 145,72, 140,79, 136,06, 131,10, 128,25, 127,76, 124,27, 122,44, 121,72, 120,54, 116,59, 111,86, 101,69, 66,42, 63,67, 58,99, 53,61, 50,30, 38,06, 33,24, 28,40, 15,31; Hidrohloridna sol je istaložena iz acetona; Anal (C26H33ClN4O3 •HCl•2H2O) C, H, N.
[0078] (S)-N-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil) piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)-1H-indol-2-karboksamid ((S)-29) je pripremljen od indol-2-karboksilne kiseline i A9S prema opštem postupku amidacije A. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći eluent 30% aceton/CHCl3da bi se dobio željeni proizvod sa prinosom od 55%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,42 (s, 1H), 7,64 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,43 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 7,40 (s, 1H), 7,31 - 7,22 (m, 1H), 7,13 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 6,89 - 6,81 (m, 1H), 6,62 (d, J = 1,5 Hz, 1H), 4,02 - 3,86 (m, 2H), 3,85 (d, J = 10,7 Hz, 3H), 3,50 (ddd, J = 13,1, 8,3, 3,9 Hz, 1H), 3,15 (s, 3H), 2,84 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 2,55 (dd, J = 15,1, 7,6 Hz, 3H), 2,48 - 2,34 (m, 2H), 1,91 - 1,77 (m, 1H), 1,64 (dtd, J = 13,8, 8,9, 4,6 Hz, 3H), 1,21 (t, J = 7,6 Hz, 3H).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3) δ 161,47, 146,41, 145,76, 140,76, 136,16, 131,14, 128,16, 127,61, 124,18, 122,44, 121,84, 120,38, 116,67, 111,77, 101,69, 66,48, 63,74, 58,98, 53,68, 50,39, 37,96, 33,10, 28,46, 28,21, 15,42. Hidrohloridna so je istaložena iz acetona; Anal (C26H33ClN4O3• HCl) C, H, N. [α]<23>D+ 34,54 (CHCl3, c 0,16) ee > 98%.
[0079] (R)-N-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil) piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)-1H-indol-2-karboksamid ((R)-29) je pripremljen od indol-2-karboksilne kiseline i A9R u skladu sa opštim postupkom amidacije A. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom uz korišćenje 30% acetona/CHCl3kao eluensa da bi se dobio željeni proizvod sa prinosom od 51%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,33 (s, 1H), 7,64 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,43 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,32 - 7,22 (m, 1H), 7,13 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,62 (s, 1H), 3,91 (dd, J = 13,1, 6,2 Hz, 2H), 3,84 (s, 3H), 3,58 - 3,41 (m, 1H), 3,16 (s, 3H), 2,85 (s, 2H), 2,56 (dd, J = 15,1, 7,6 Hz, 3H), 2,45 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 1,82 (s, 1H), 1,64 (d, J = 9,2 Hz, 3H), 1,21 (t, J = 7,6 Hz, 3H);
<13>C NMR (101 MHz, CDCl3) δ 161,52, 146,26, 145,95, 140,77, 136,06, 131,15, 128,30, 127,72, 124,25, 122,33, 121,73, 120,52, 116,67, 111,87, 101,88, 66,43, 63,75, 59,09, 53,69, 50,39, 38,05, 33,26, 28,47; Hidrohloridna so je istaložena iz acetona; Anal (C26H33ClN4O3•HCl•H2O) C, H, N.
[α]<23>D-27,89 (CHCl3, c 0,23) ee > 98%.
[0080] 2-Hloro-1-nitro-3-vinilbenzen (B4): Korišćen je isti postupak kao što je opisano za A5, polazeći od B3 (Kumar i sar. J. Med. Chem., 2016, 59 (16), str. 7634-7650) da se dobije željeni proizvod sa 70% prinosa.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 7,74 (dd, J = 8,0, 1,6 Hz, 1H), 7,64 (dd, J = 8,0, 1,6 Hz, 1H), 7,37 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,12 (dd, J = 17,2, 11,0 Hz, 1H), 5,81 (dd, J = 17,2, 0,8 Hz, 1H), 5,54 (dd, J = 10,8, 0,8 Hz, 1H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 149,6, 138,9, 132,1, 129,9, 127,2, 124,8, 123,9, 119,6.
[0081] 2-Hloro-3-etilanilin (B5): Korišćen je isti postupak kao što je opisano za A6, koristeći B4 u EtOAc kao rastvaraču. Proizvod je bio dovoljno čist da bude korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 6,99 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,66-6,62 (m, 2H), 4,04 (bs, 2H), 2,72 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 1,22 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 143,1, 142,4, 126,9, 119,2, 118,9, 113,4, 27,1, 13,9.
[0082] 1-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin (B6): Korišćen je isti postupak kao što je opisano za A7, polazeći od B5. Proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 2% MeOH/CHCl3kao eluens da se dobije željeni proizvod sa 46% prinosa<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,16-7,12 (m, 1H), 6,94-6,89 (m, 2H) , 3,05-2,95 (m, 8H), 2,76 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 1,21 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 150,0, 143,2, 128,7, 126,9, 123,9, 118,0, 53,0, 46,3, 27,5, 14,1. Oksalatna so je istaložena iz acetona; T.t. 166-167 ° C. Anal. (C12H17ClN2 • 1,5 C2H2O4 • H2O) C, H, N.
[0083] 4-Amino-1-(4-(2-hloro-3-etilfenil)piperazin-1-il) butan-2-ol (B8): Korišćen je isti postupak kao što je opisano za A9, primenom B7 da se dobije B8 sa prinosom od 90% i bio je dovoljno čist da se koristi u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 7,03-7,0 (m, 1H), 6,82-6,77 (m, 2H), 3,80-3,71 (m, 1H), 2,92-2,61 (m, 10H), 2,49-2,24 (m, 7H), 1,46-1,40 (m, 2H), 1,10 (t, J = 7,6, 0,8 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 149,2, 142,8, 128,3, 126,6, 123,6, 117,7, 65,8, 64,4, 51,3, 39,3, 37,5, 27,1, 13,8.
[0084] (S)-4-amino-1-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) butan-2-ol (B8S) je pripremljen postupkom opisanim za B8 koristeći (S)-2-(2-(oksiran-2-il) etil) izoindolin-1,3-dion B7S.
[0085] (R)-4-amino-1-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) butan-2-ol (B8R) je pripremljen postupkom opisanim za A9, koristeći (R)-2-(2-(oksiran-2-il) etil) izoindolin-1,3-dion B7R.
[0086] N-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)-1H-indol-2-karboksamid (±)-19 je pripremljen od indol-2-karboksilne kiseline i B8 prema opštem postupku amidacije A. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 30% aceton/CHCl3kao eluens da bi se dobio željeni proizvod u prinosu od 60%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,20 (s, 1H), 7,64 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,43 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,40 (s, 1H), 7,31 - 7,23 (m, 1H), 7,20 - 7,09 (m, 1H), 7,00 - 6,88 (m, 2H), 6,84 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 3,91 (ddd, J = 13,5, 10,7, 5,2 Hz, 3H), 3,57 - 3,41 (m,
1
1H), 3,07 (s, 3H), 2,88 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 2,78 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 2,61 (s, 2H), 2,51 - 2,39 (m, 2H), 1,89 - 1,76 (m, 1H), 1,64 (ddd , J = 18,9, 9,1, 4,4 Hz, 1H), 1,22 (q, J = 7,5 Hz, 3H).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3) δ 161,36, 149,36, 143,15, 136,05, 131,04, 128,50, 127,81, 126,90, 124,19, 124,14, 121,76, 120,53, 117,96, 111,76, 101,73, 66,52, 63,62, 51,65, 51,34, 38,00, 33,11, 27,46, 27,32, 14.07. Hidrohloridna so je istaložena iz acetona; Anal (C25H31ClN4O2 •HCl • H2O) C, H, N.
[0087] (R)-N-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)-1H-indol-2-karboksamid (R)-19 je pripremljen iz indol-2-karboksilne kiseline i 8R prema opštem postupku amidacije A. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 30% aceton/CHCl3kao eluens da bi se dobio željeni proizvod sa prinosom od 50%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,44 (s, 1H), 7,64 (d, J = 7,7 Hz, 2H), 7,44 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,33 - 7,21 (m, 1H), 7,15 (dt, J = 14,9, 7,5 Hz, 1H), 6,95 (dd, J = 17,8, 7,6 Hz, 2H), 6,85 (s, 2H), 4,01 - 3,82 (m, 3H), 3,51 (s, 1H), 3,07 (s, 3H), 2,89 (s, 2H) ), 2,78 (dd, J = 14,8, 7,3 Hz, 2H), 2,63 (s, 2H), 2,52 - 2,40 (m, 2H), 1,83 (s, 1H), 1,64 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 1,23 (t, J = 7,4 Hz, 3H).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3) δ 161,54, 149,26, 143,23, 136,18, 131,14, 128,72, 127,64, 126,78, 124,22, 121,70, 120,49, 117,97, 111,85, 101,83, 66,45, 63,70, 51,63, 38,09, 33,26, 27,46, 14,02. Hidrohloridna so je istaložena iz acetona; Anal (C25H31ClN4O2•HCl • H2O) C, H, N. [α]<23>D-45.29 (CHCl3, c 0,23), ee > 98%.
[0088] (S)-N-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)-1H-indol-2-karboksamid (S)-19 je pripremljen od indol-2-karboksilne kiseline i B8S prema opštem postupku amidacije A. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 30% aceton/CHCl3kao eluens da bi se dobio željeni proizvod u prinosu od 55%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,52 (s, 1H), 7,64 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,45 (dd, J = 8,3, 0,7 Hz, 2H), 7,33 - 7,21 (m, 1H), 7,14 (dt, J = 7,9, 4,3 Hz, 1H), 6,95 (ddd, J = 18,5, 7,8, 1,4 Hz, 2H), 6,86 (d, J = 1,3 Hz, 2H), 4,07 - 3,82 (m, 3H), 3,51 (ddd, J = 13,2, 8,4, 4,1 Hz, 1H), 3,07 (s, 3H), 2,89 (dd, J = 10,6, 5,0 Hz, 2H), 2,78 (q, J = 7,5 Hz, 2H), 2,62 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 2,51 - 2,38 (m, 2H), 1,84 (ddd, J = 13,5, 5,6, 3,3 Hz, 1H), 1,73 - 1,55 (m, 1H), 1,24 (dd, J = 12,8, 5,3 Hz, 3H).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3) δ 161,56, 149,36, 143,16, 136,20, 131,02, 128,66, 127,76, 126,90, 124,20, 121,92, 120,48, 117,97, 111,92, 101,82, 66,40, 63,70, 51,64, 38,11, 33,17, 27,47, 14,08. Hidrohloridna so je istaložena iz acetona; Anal (C25H31ClN4O2•HCl • H2O) C, H, N. [α]<23>L+48,13 (CHCl3, c 0,25), ee > 98%
[0089] 2-(4-(4-(3-Hloro-5-etil-2-metoksifenil) piperazin-1-il) butil) izoindolin-1,3-dion (14a):
N-(4-bromobutil) ftalimid (0,378 g, 1,34 mmol) je dodat u reakcionu smešu od A7 (0,310 g, 1,22
2
mmol) i K2CO3(0,505 g, 3,65 mmol) u acetonu (15 mL) i mešano pod refluksom preko noći. Sirovi proizvod je filtriran, koncentrovan i prečišćen fleš hromatografijom koristeći 12% EtOAc/ heksane kao eluens dajući 0,465 g (83,6%) proizvoda u obliku ulja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,68 (dd, J = 5,6, 2,8 Hz, 2H), 7,57 (dd, J = 5,6, 3,2 Hz, 2H), 6,68 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 6,49 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,69 (s, 3H), 3,60 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 3,01 (bs, 4H), 2,48 (bs, 4H), 2,40 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,32 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,62 (kvintet, J = 7,6 Hz, 2H), 1,48-1,45 (m, 2H), 1,06 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 168,2, 146,3, 146,0, 140,6, 133,8, 132,0, 128,0, 123,0, 122,0, 116,6, 58,8, 57,9, 53,6, 50,0, 37,7, 28,3, 26,5, 23,9, 15,3.
[0090] 2-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) butil) izoindolin-1,3-dion (14b): Korišćen je isti postupak kao što je opisano za 14a, angažovanjem B6. Proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 20% EtOAc/heksane kao eluens da se dobije 14b sa 64,2% prinosa.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 7,85-7,82 (m, 2H), 7,71-7,69 (m, 2H), 7,15 (dt, J = 7,6, 2,4 Hz, 1H), 6,95-6,91 (m, 2H), 3,75 (dt, J = 6,4, 0,8 Hz, 2H), 3,06 (bs, 4H), 2,77 (dq, J = 7,6, 2,0 Hz, 2H), 2,64 (bs, 4H), 2,47 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 1,80-1,75 (m, 2H), 1,63-1,59 (m, 2H), 1,27-1,21 (m, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 167,9, 149,4, 142,8, 133,6, 131,9, 128,4, 126,6, 123,6, 122,8, 117,7, 57,8, 53,2, 51,3, 37,6, 27,2, 26,4, 24,0, 13,9.
[0091] 4-(4-(3-Hloro-5-etil-2-metoksifenil) piperazin-1-il) butan-1-amin (16a): Hidrazin (0,097 g, 3,02 mmol) je dodat rastvoru jedinjenja 14a (0,460 g, 1,00 mmol) u EtOH (15 mL) i mešano je 7 sati pod refluksom. Rastvarač je uparen i reakciona smeša je razblažena sa 20% vod. rastvorom K2CO3(15 mL) i ekstrahovana u CHCl3(2 x 15 ml). Organski sloj je kombinovan, osušen i koncentrovan da bi se dobio žuti uljani proizvod, koji je bio dovoljno čist da se koristi u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6,70 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,49 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,70 (s, 3H), 3,01 (bs, 4H), 2,59 (s, 2H), 2,47-2,38 (m, 6H), 2,27 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,46-1,33 (m, 4H), 1,07 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 146,3, 146,1, 140,6, 128,0, 122,0, 116,5, 58,8, 58,5, 53,7, 50,2 , 28,3, 24,2, 15,3.
[0092] 4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) butan-1-amin (16b): Korišćen je isti postupak kao što je opisano za 16a, angažovanjem 14b da se dobije 16b sa prinosom od 85,1% i bio je dovoljno čist za upotrebu u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 6,99-6,95 (m, 1H), 6,77-6,74 (m, 2H), 2,89 (bs, 4H), 2,63-2,54 (m, 4H), 2,47 (bs, 4H), 2,27-2,23 (m, 2H), 1,43-1,28 (m, 4H), 1,08-1,04 (m, 5H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 149,3, 142,7, 128,3, 126,5, 123,5, 117,6, 58,2, 53,1, 51,2, 41,8, 31,5, 27,1, 24,0, 13,8.
[0093] Opšti postupak amidacije B. CDI (1 ekv.) je dodat rastvoru karboksilne kiseline (1 ekv.) u suvom THF-u (10 ml / mmol) i mešan 3 sata na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ohlađena na 0 ° C i ukapavanjem je dodat određeni amin (1 ekv.) nakon razblaživanja sa suvim THF (10 ml / mmol). Reakciona smeša je ostavljena da dođe do sobne temperature i mešana je preko noći, koncentrovana, razblažena sa H2O (20 ml) i ekstrahovana u CHCl3 (3 x 10 mL). Organski sloj je koncentrovan i proizvod je prečišćen fleš hromatografijom na koloni da bi se dobio odgovarajući amid.
[0094] N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) butil)-1H-indol-2-karboksamid (18): 18 je pripremljen od indol-2-karboksilne kiseline i 16b prema opštem postupku amidacije B. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 30% aceton/CHCl3kao eluens da bi se dobio željeni proizvod sa prinosom od 51,0%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 10,35 (s, 1H), 7,63 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,27 (dt, J = 8,0, 1,2 Hz, 1H), 7,13 (sekstet, J = 4,0 Hz, 2H), 6,96-6,87 (m, 4H), 3,56 (dd, J = 12,8, 6,4 Hz, 2H), 3,06 (bs, 4H), 2,78 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,65 (bs, 4H), 2,47 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,72 - 1,64 (m, 4H), 1,23 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 162,1, 149,6, 143,3, 136,7, 131,1, 128,7, 127,6, 127,0, 124,3, 124,1, 121,9, 120,6, 118,1, 112,2, 102,2, 58,1 53,5, 51,5, 39,8, 27,7, 27,6, 24,5, 14,2. Oksalatna sol je istaložena iz acetona; T.t. 228-229 ° C. Anal (C25H31ClN4O2• C2H2O4• 0,75 H2O) C, H, N.
[0095] N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) butil) benzofuran-2-karboksamid (20): 20 je pripremljen iz benzofuran-2-karboksilne kiseline i 16b u skladu sa opštim postupkom amidacije B. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 25% EtOAc/heksan kao eluens da bi se dobio željeni proizvod sa prinosom od 76,5%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 7,65-7,63 (m, 1H), 7,46 (bs, 1H), 7,44 (d, J = 0,8 Hz, 1H), 7,38 (dt, J = 7,2, 1,2 Hz, 1H), 7,29-7,25 (m, 1H), 7,15-7,11 (m, 2H), 6,91 (dq, J = 7,2, 1,6 Hz, 2H), 3,53 (dd, J = 12,4, 6,4 Hz, 2H), 3,08 (bs, 4H), 2,77 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,67 (bs, 4H), 2,48 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,74-1,65 (m, 4H), 1,22 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 158,9, 154,7, 149,6, 149,0, 143,2, 128,7 , 127,7, 126,9, 126,8, 124,0, 123,7, 122,7, 118,0, 111,7, 110,2, 58,0, 53,5, 51,5, 39,2, 27,6, 27,5, 24,4, 14,1. Oksalatna so je precipitirana iz acetona; T.t. 119-120 ° C. Anal (C25H30ClN3O2• C2H2O4• 0,5 H2O) C, H, N.
[0096] N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-hidroksibutil) benzofuran-2-karboksamid (21): 21 je pripremljen od benzofuran-2-karboksilne kiseline i B8 prema generalnom postupku amidacije B. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 25% aceton/
4
CHCl3kao eluens dajući željeni proizvod sa 52,1% prinosa.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 7,64 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,58 (t, J = 5,0 Hz, 1H), 7,50-7,45 (m, 2H), 7,38 (dt, J = 7,2, 1,2 Hz, 1H), 7,28-7,24 (m, 1H), 7,15 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,92 (dq, J = 8,0, 1,2 Hz, 2H), 3,94-3,84 (m, 3H), 3,55-3,50 (m, 1H), 3,06 (bs, 4H), 2,87- 2,85 (m, 2H), 2,76 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,62-2,61 (m, 2H), 2,48-02,43 (m, 2H), 1,85-1,80 (m, 1H), 1,66-1,63 (m, 1H), 1,22 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 159,0, 154,8, 149,4, 149,1, 143,3, 128,7, 127,7, 127,0, 126,7, 124,2, 123,6, 122,7, 118,0, 111,9, 110,1, 66,0, 63,9, 51,7, 37,5, 33,7, 27,5, 14,2. Oksalatna so je precipitirana iz etra; T.t.147-148 ° C. Anal (C25H30ClN3O3•C2H2O4•H2O) C, H, N.
[0097] N-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) butil) imidazo [1,2-a] piridin-2-karboksamid (22): 22 je pripremljen od imidazo [1,2-a] piridin-2-karboksilne kiseline i 16b u skladu sa opštim postupkom amidacije B. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 3% MeOH/CHCl3kao eluens da bi se dobio željeni proizvod sa prinosom od 78,4%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,11-8,09 (m, 2H), 7,53-7,49 (m, 2H), 7,21-7,17 (m, 1H), 7,10 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,89 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 6,81-6,77 (m, 1H), 3,48 (q, J = 6,0 Hz, 2H), 3,03 (bs, 4H), 7,72 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,62 (m, 4H), 2,45-2,42 (m, 2H), 1,65 (m, 4H), 1,18 (t, J = 7,6 Hz, 3H);
<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 162,7, 149,6, 144,4, 143,1, 140,0, 128,6, 126,9, 126,5, 126,0, 123,9, 118,0, 114,1, 113,3, 58,1, 53,4, 51,4, 39,0, 27,7, 27,4, 24,3, 14,1. Oksalatna so je precipitirana iz acetona; T.t. 144-145 ° C. Anal (C24H30ClN5O •2C2H2O4•1,5H2O) C, H, N.
[0098] N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-hidroksibutil) imidazo [1,2-a] piridin-2-karboksamid (23): 23 pripremljen je iz imidazo [1,2-a] piridin-2-karboksilne kiseline i B8 prema opštem postupku amidacije B. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 2% MeOH/CHCl3kao eluens da bi se dobio željeni proizvod sa prinosom od 46,3%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,13-8,11 (m, 2H), 7,90 (bt, J = 6,0 Hz, 1H), 7,56 (dd, J = 7,2, 0,8 Hz, 1H), 7,23-7,19 (m, 1H), 7,14 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,93 (dq, J = 7,6, 1,6 Hz, 2H), 6,82 (dt, J = 6,4, 1,2 Hz, 1H), 3,91-3,78 (m, 2H), 3,56-3,48 (m, 1H), 3,04 (bs, 4H), 2,86-2,83 (m, 2H), 2,75 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,62-2,60 (m, 2H), 2,45-2,40 (m, 2H), 1,84 - 1,76 (m, 1H), 1,70-1,61 (m, 1H), 1,21 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 162,9, 149,5, 144,6, 143,2, 140,2, 128,7, 126,9, 126,4, 125,8, 124,0, 118,2, 118,0, 114,1, 113,3, 65,3, 63,9, 53,5, 51,6, 36,6, 34,4, 27,4, 14,1. Oksalatna so je precipitirana iz acetona; T.t. 137- 138 ° C. Anal (C24H30ClN5O2•2C2H2O4•H2O•0,75CHCl3) C, H, N.
[0099] N-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) butil)-6-metilimidazo [2,1-b] tiazol-5-karboksamid (24): 24 je pripremljen iz 6- metilimidazo [2,1-b] tiazol-5-karboksilne kiseline i 16b prema opštem postupku amidacije B. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 3% MeOH/CHCl3kao eluens da se dobije željeni proizvod u prinosu od 48,9%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,19 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 7,13-7,09 (m, 1H), 6,92-6,82 (m, 3H), 5,98 (m, 1H), 3,50-3,45 (m, 2H), 3,03 (bs, 4H), 2,73 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,64 (bs, 4H), 2,58 (s, 3H), 2,48-2,45 (m, 2H), 1,66 (m, 4H), 1,19 (t, J = 8,0 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 160,7, 150,9, 149,4, 145,1, 143,2, 128,7, 126,9, 124,0, 121,4, 118,7, 117,9, 112,4, 58,1, 53,4, 51,3, 39,4, 27,9, 27,4, 24,2, 16,5, 14,1. Oksalatna so je istaložena iz acetona; T.t.113-114 ° C. Anal (C23H30ClN5OS •2C2H2O4•2,5H2O) C, H, N.
[0100] N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) butil)-4-etil-1H-imidazol-2-karboksamid (25): Rastvor trimetilaluminijuma (2M u heksanu) (0,18 mL, 3,54 mmol) je dodat u kapima rastvoru 16b (0,105 g, 3,54 mmol) u CH2Cl2(10 mL) pod argonom na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta i dodat je u kapima rastvor etil 4-etil-1H-imidazol-2-karboksilata u CH2Cl2 (10 mL) i mešano tokom 6 h. Reakciona smeša je ugašena sa razblaženim rastvorom HCl (15 mL). Organski sloj je ekstrahovan, osušen preko Na2SO4, koncentrovan i prečišćen korišćenjem fleš hromatografije sa 4% MeOH/CHCl3kao eluensom da bi se dobilo 0,148 g (14,9%) proizvoda.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,56 (bs, 1H), 7,13 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,92 (t, J = 8,0 Hz, 2H), 6,82 (s, 1H), 3,46-3,43 (m, 2H), 3,06 (s, 4H), 2,75 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,66 (m, 5H), 2,48-2,46 (m, 2H), 2,18-2,15 (m, 1H), 1,65 (s, 5H), 1,29-1,18 (m, 6H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 159,1, 149,5, 143,2, 140,0, 128,7, 126,9, 124,0, 118,0, 58,0, 53,4, 51,2, 39,1, 27,5, 27,4, 24,1, 14,1, 13,5. Oksalatna so je istaložena iz acetona; T.t.
167- 168 ° C. Anal (C22H32ClN5O •2,5C2H2O4•H2O) C, H, N.
[0101] N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) butil)-4-metil-1H-imidazol-2-karboksamid (26): 26 je pripremljen iz 4-metil-1H-imidazol-2-karboksilne kiseline i 16b u skladu sa opštim postupkom amidacije B. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 3% MeOH/CHCl3kao eluens da bi se dobio željeni proizvod sa prinosom od 65,2%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,76 (bs, 1H), 7,13 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,94-6,89 (m, 2H), 6,82 (s, 1H), 3,46 (q, J = 6,4 Hz, 2H), 3,06 (bs, 4H), 2,75 (q, J = 8,0 Hz, 2H), 2,64 (bs, 4H), 2,45 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,28 (s, 3H), 1,68-1,61 (m, 4H), 1,20 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 159,3, 149,5, 143,2, 140,1, 128,6, 126,9, 124,0, 118,0, 58,1, 53,4, 51,4, 39,2, 27,5, 24.2, 14.1. Oksalatna so je istaložena iz acetona; T.t. 175-176 ° C. Anal (C21H30ClN5O •2C2H2O4•H2O) C, H, N.
[0102] N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)-4-metil-1H-imidazol-2-karboksamid (27): 27 je pripremljen iz 4- metil-1H-imidazol-2-karboksilne kiseline i B8 prema opštem postupku amidacije B. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom uz korišćenje 3% MeOH/CHCl3kao eluensa da se dobije željeni proizvod sa prinosom 39,8%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 12,40 (bs, 1H), 8,11 (bs, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,14 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,95-6,88 (m, 2H), 6,83 (bs, 1H), 3,90-3,84 (m, 1H), 3,79-3,70 (m, 1H), 3,57-3,49 (m, 1H), 3,03 (bs, 4H), 2,83-2,81 (m, 2H), 2,75 (q, J = 8,0 Hz, 2H), 2,58 (bs, 2H), 2,42 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 2,29 (bs, 3H), 1,81-1,73 (m, 1H), 1,68-1,59 (m, 1H), 1,20 (t, J = 8,0 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 162,6, 159,3, 149,4, 143,2, 140,0, 128,6, 126,9, 124,1, 118,0, 65,0, 63,9, 53,5, 51,6, 36,8, 34,1, 27,5, 14,1. Oksalatna sol je precipitirana iz acetona; T.t.130-131 ° C. Anal (C21H30ClN5O2•2C2H2O4•3H2O) C, H, N.
[0103] N-(4-(4-(3-Hloro-5-etil-2-metoksifenil) piperazin-1-il) butil)-1H-indol-2-karboksamid (28): 28 je pripremljen od indol-2-karboksilne kiseline i 16a prema opštem postupku amidacije B. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 25% aceton/CHCl3kao eluens da bi se dobio željeni proizvod sa prinosom od 57,6%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 10,25 (s, 1H), 7,62 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,45 (dd, J = 8,0, 0,8 Hz, 1H), 7,28-7,24 (m, 1H), 7,14-7,10 (m, 1H), 6,93 (m, 1H), 6,90 (s, 1H), 6,84 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 6,58 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 3,83 (s, 3H), 3,54 (q, J = 6,0 Hz, 2H), 3,14 (bs, 4H), 2,60 (bs, 4H), 2,53 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,45 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 1,73-1,64 (m, 4H), 1,19 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 162,0, 146,4, 146,0, 140,9, 136,6, 131,0, 128,2, 127,6, 124,3, 122,3, 121,8, 120,5, 116,7, 112,1, 102,3, 59,0, 58,0, 53,7, 50,1, 39,6, 28,4, 27,5, 24,2, 15,4. Oksalatna sol se istaloži iz acetona i kristališe u MeOH/etru; T.t.220-221 ° C. Anal (C26H33ClN4O2• C2H2O4•0,5H2O) C, H, N.
[0104] N-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil) piperazin-1-il) butil) benzofuran-2-karboksamid (30): 30 je pripremljen iz benzofuran-2-karboksilne kiseline i 16a prema opštem postupku amidacije. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom uz korišćenje 20% acetona/CHCl3kao eluensa da se dobije željeni proizvod u prinosu od 76,5%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,63 (dd, J = 7,2, 1,2 Hz, 1H), 7,44 -7,42 (m, 2H), 7,36 (dt, J = 7,0, 1,2 Hz, 1H), 7,28-7,24 (m, 1H), 7,13 (m, 1H), 6,82 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,59 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,82 (s, 3H), 3,51 (q, J = 6,4 Hz, 2H), 3,15 (bs, 4H), 2,61 (bs, 4H), 2,51 (q, J = 7,6 Hz, 2H ), 2,45 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,73-1,63 (m, 4H), 1,17 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 158,9, 154,7, 149,0, 146,4 , 146,1, 140,8, 128,2, 127,7, 126,7, 123,7, 122,7, 122,2, 116,7, 111,6, 110,2, 59,0, 58,0, 53,8, 50,2, 39,2, 28,4, 27,5, 24,3, 15,4. Oksalatna sol se istaloži iz acetona i kristališe u MeOH/etru; T.t.126-127 ° C. Anal (C26H32ClN3O3• 2C2H2O4•H2O) C, H, N.
[0105] N-(4-(4-(3-Hloro-5-etil-2-metoksifenil) piperazin-1-il)-3-hidroksibutil) benzofuran-2-karboksamid (31): 31 pripremljen je iz benzofuran-2-karboksilne kiseline i A9 prema opštem postupku amidacije. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 20% aceton/ CHCl3kao eluens dajući željeni proizvod sa 50,5% prinosa.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,64 (dd, J = 7,6, 0,8 Hz, 1H), 7,53 (m, 1H), 7,49 (dd, J = 8,4. 0,8 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 0,8 Hz, 1H), 7,40-7,36 (m, 1H), 7,29- 7,25 (m, 1H), 6,85 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,95-3,81 (m, 5H), 3,56-3,48 (m, 1H), 3,14 (bs, 4H), 2,84-2,81 (m, 2H), 2,62-2,51 (m, 4H), 2,46 -2,42 (m, 2H), 1,87-1,80 (m, 1H), 1,68-1,61 (m, 1H), 1,20 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 159,0, 154,8, 149,0, 146,4, 146,0, 140,8, 128,3, 127,7, 126,7, 123,6, 122,6, 122,4, 116,7, 111,8, 110,1, 65,9, 63,8, 59,1, 53,7, 50,4, 37,3, 33,7, 28,5, 15,4. Oksalatna sol je precipitirana iz acetona i kristalisana u 2-PrOH/etru; T.t.154-155 ° C. Anal (C26H32ClN3O4 • 1,5C2H2O4 •H2O) C, H, N.
[0106] (E)-2-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) but-2-en-1-il) izoindolin-1,3-dion (33): 32 (0,592 g, 2,11 mmol) je dodat u reakcionu smešu B6 (0,475 g, 2,11 mmol) i K2CO3(0,1,458 g, 10,56 mmol) u acetonu (25 mL) i mešano pod refluksom preko noći. Reakciona smeša je filtrirana, koncentrovana i prečišćena korišćenjem fleš hromatografijom sa 15% acetona/CHCl3kao eluensom da bi se dobilo 0,880 g (98,2%) proizvoda u obliku ulja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,67 (dd, J = 5,2, 3,2 Hz, 2H), 7,53 (dd, J = 5,2, 3,2 Hz, 2H), 6,98 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,76 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 5,63 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 5,61 (d, J = 4,4 Hz, 1H), 4,16 (d, J = 4,0 Hz, 2H), 2,90 (m, 6H), 2,59 (q, J = 8,0 Hz, 2H), 2,47 (bs, 4H), 1,06 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 167,6, 149,5, 142,9, 133,8, 132,0, 130,1, 128,5, 126,9, 126,8, 123,8, 123,1, 117,9, 60,1, 53,3, 51,4, 38,9, 27,4, 14,1.
[0107] (E)-4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)but-2-en-1-amin (34): Korišćen je isti postupak kao što je opisano za 16a. Proizvod je izolovan sa prinosom od 91,2% i bio je dovoljno čist za korišćenje u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6,96 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,75 (dd, J = 8,0, 1,6 Hz, 2H), 5,63-5,57 (m, 1H), 5,53-5,46 (m, 1H), 3,13 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 2,88-2,87 (m, 6H), 2,59 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,47 (bs, 4H), 1,16 (bs, 2H), 1,05 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 149,5, 142,9, 135,3, 128,5, 126,8, 126,0, 123,8, 117,9, 60,4, 53,2, 51,4, 43,7, 27,4, 14,1. GC-MS (EI) m/z 293,1 (M<+>).
[0108] (E)-N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) but-2-en-1-il)-4-metil-1H-imidazol-2-karboksamid (35): 35 je pripremljen od 4-metil-1H-imidazol-2-karboksilne kiseline i 34 prema opštem postupku amidacije. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 3% MeOH/CHCl3kao eluens dajući željeni proizvod sa 54,7% prinosa.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 12,70-12,63 (m, 1H), 7,90 (bs, 1H), 7,13 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,94-6,89 (m, 2H), 6,80 (s, 1H), 5,76 (d, J = 5,0, 1H), 5,73 (d, J = 5,0, 1H), 4,06 (t, J = 5,0, 2H), 3,05-3,04 (m, 6H), 2,75 (q, J = 7,6, 2H), 2,62 (bs, 4H), 2,31 (s, 2H), 2,24 (s, 1H), 1,20 (t, J = 8,0, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 159,1, 149,5, 143,2, 139,9, 129,3, 129,2, 128,7, 126,9, 124,0, 118,0, 60,3, 53,4, 51,4, 40,8, 27,5, 14,1. Oksalatna sol se istaloži iz acetona i kristališe u MeOH/etru; T.t. 166-167 ° C. Anal (C21H28ClN5O • 2C2H2O4•1,25H2O) C, H, N.
[0109] 1-(2-Hloro-3-etilfenil)-4-(2-(oksiran-2-il) etil) piperazin (37): 2-(2-Bromoetil) oksiran (0,269 g, 1,78 mmol) je dodat u reakcionu smešu od B6 (0,266 g, 1,18 mmol) i K2CO3(0,491 g, 3,56 mmol) u acetonu (20 mL) i mešano pod refluksom preko noći. Sirovi proizvod je filtriran, koncentrovan i prečišćen fleš hromatografijom koristeći 12% aceton/CHCl3kao eluens da bi se dobilo 0,145 g (41,4%) proizvoda u obliku ulja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,15 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,95-6,91 (m, 2H), 3,06 (bs, 4H), 3,02-2,95 (m, 1H), 2,80-2,73 (m, 3H), 2,66 (bs, 4H), 2,62-2,55 (m, 2H), 2,53-2,51 (m, 1H), 1,87-1,79 (m, 1H), 1,76-1,67 (m, 1H), 1,22 (t, J = 7,6 Hz, 3H);
<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 149,6, 143,2, 128,7, 126,9, 124,0, 118,0, 55,0, 53,5, 51,6, 50,9, 47,1, 30,2, 27,5, 14,2. GC-MS (EI) m/z 294,1 (M<+>).
[0110] 1-Azido-4-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) butan-2-ol (38): Reakciona smeša od 37 (0,170 g, 0,57 mmol), NaN3(0,056 g, 0,86 mmol) i NH4Cl (0,062 g, 1,15 mmol) u DMF-u (5 mL) je zagrevana na 100 ° C tokom 6 h. Rastvarač je uparen, a reakciona smeša je razblažena sa vodom (15 mL) i ekstrahovana u EtOAc (3 x 15 mL). Organski sloj je kombinovan, osušen, koncentrovan i prečišćen fleš hromatografijom koristeći 7% aceton/CHCl3kao eluens da se dobije 0,103 g (52,9%) proizvoda u obliku ulja<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,17 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,97 (dd, J = 7,6, 1,2 Hz, 1H), 6,91 (dd, J = 7,6, 1,2 Hz, 1H), 4,07-4,02 (m, 1H), 3,28 (m, 2H), 3,07 (bs, 4H), 2,85-2,71 (m, 6H), 2,64-2,61 (m, 2H), 1,87-1,77 (m, 1H), 1,60-1,54 (m, 1H), 1,26 -1,22 (m, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 149,2, 143,3, 128,7, 127,0, 124,3, 118,1, 73,0, 57,3, 56,6, 53,4, 51,5, 28,5, 27,5, 14,1.
[0111] 1-Amino-4-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) butan-2-ol (39): Smeša od 38 (0,123 g, 0,36 mmol) i 10% Pd/C (0,050 g) u EtOAc (10 mL) je mešana u atmosferi vodonika (50 psi) na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona smeša je filtrirana kroz celitni sloj i uparena u vakuumu. Reakciona smeša je bila dovoljno čista da se koristi u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CD3OD CDCl3) δ 7,07 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,89 (dd, J = 13,6, 8,4 Hz, 2H), 4,89 (bs, 2H), 4,11 (bs, 1H), 3,33-3,17 (m, 10H), 3,04-2,99 (m, 1H), 2,64 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 2,06-1,97 (m, 2H), 1,12 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 147,5, 143,3, 128,5, 127,1, 125,1, 118,3, 65,5, 54,2, 52,7, 48,7, 44,8, 28,8, 27,2, 13,8.
[0112] N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-2-hidroksibutil)-1H-indol-2-karboksamid (40): 40 je pripremljen od indol-2-karboksilne kiseline i 39 prema opštem postupku amidacije B koristeći DMF kao rastvarač. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 2% MeOH/CHCl3kao eluens dajući željeni proizvod sa prinosom od 16,4%.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,73 (s, 1H), 7,63 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,43 (dd, J = 8,4, 0,8 Hz, 1H), 7,28-7,23 (m, 1H), 7,16-7,09 (m, 2H), 6,95 (dd, J = 7,6, 1,2 Hz, 2H), 6,91 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 6,86 (dd, J = 7,6, 1,6 Hz, 1H), 4,10-4,06 (m, 1H), 3,76-3,71 (m, 1H), 3,43-3,37 (m, 1H), 3,04 (bs, 4H), 2,93-2,81 (m, 2H), 2,79-2,69 (m, 4H), 2,62 (m, 2H), 1,82-1,78 (m, 1H), 1,62-1,57 (m, 1H), 1,21 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 161,9, 149,1, 143,3, 136,3, 130,8, 128,7, 127,7, 126,9, 124,3, 124,3, 121,9, 120,5, 118,0, 112,0 102,3, 72,6, 57,3, 53,4, 51,4, 45,3, 30,9, 28,6, 27,4, 14,0. Oksalatna sol je precipitirana iz acetona; T.t.225-226 ° C. Anal (C25H31ClN4O2• 1,5C2H2O4•1,75H2O) C, H, N.
[0113] 2-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil) piperazin-1-il)-3-hidroksibutil) izoindolin-1,3-dion (C1a). Smeša jedinjenja A7 (1 mmol) i 2-(2-(oksiran-2-il) etil) izoindolin-1,3-dion (A8, 1 mmol) je mešana pod refluksom u 2-PrOH (20 mL) tokom 3h. Reakciona smeša je koncentrovana i prečišćena fleš hromatografijom koristeći 20% EtOAc/heksane kao eluens da bi se dobilo 0,523 g (91%) proizvoda.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,85 (dd, J = 5,2, 3,2 Hz, 2H), 7,71 (dd, J = 5,6, 2,8 Hz, 2H), 6,84 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,93-3,79 (m, 6H), 3,13 (bs, 4H), 2,81-2,79 (m, 2H), 2,60-2,58 (m, 2H), 2,55 (q, J = 8,0 Hz, 2H), 2,45-2,41 (m, 2H), 1,79 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 1,19 (t, J = 8,0 Hz, 3H);<13>C NMR (100 MHz, CDCl3) δ 168,5, 146,4, 145,9, 140,8, 133,9, 132,2, 128,2, 123,2, 122,4, 116,7, 64,5, 63,9, 59,1, 53,8, 50,3, 35,1, 33,6, 28,4, 15,4.
[0114] 2-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-hidroksibutil) izoindolin-1,3-dion (C1b):
Korišćen je isti postupak kao što je opisano za C1a, angažovanjem B6 (1 mmol) i 2-(2-(oksiran-
4
2-il) etil) izoindolin-1,3-diona (B7, 1 mmol). Proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 30% EtOAc/heksane kao eluens da bi se dobio C1b sa 57% prinosa.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 7,85 (dd, J = 7,2, 5,6 Hz, 2H), 7,71 (dd, J = 5,6, 3,2 Hz, 2H), 7,15 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,92 (dq, J = 7,6, 1,6 Hz, 2H), 3,94-3,77 (m, 4H), 3,03 (bs, 4H), 2,84-2,81 (m, 2H), 2,76 (q, J = 7,6 Hz, 2H), 2,59 (m, 2H), 2,46-2,38 (m 2H), 1,79 (q, J = 7,0, 2H), 1,22 (t, J = 7,6 Hz, 3H);<13>H NMR (100 MHz, CDCl3) δ 168,7, 151,7, 149,6, 143,4, 134,0, 132,4, 128,8, 127,0, 124,2, 123,4, 118,1, 64,6, 64,0, 51,8, 35,3, 33,8, 27,6, 14,2.
[0115] 2-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil) piperazin-1-il)-3-fluorobutil) izoindolin-1,3-dion (C2a): Jedinjenju C1a (1 mmol) dodat je suvi dihlorometan i reakciona smeša je ohlađena na -78 C. Održavajući istu temperaturu, dodat je u kapima (Dietilamino) sumporni trifluorid (DAST, 1,5 mmol) rastvoren u suvom dihlorometanu i mešanje je nastavljeno na 20 ° C tokom 8 sati. Tankoslojna hromatografija je korišćena za praćenje napredovanja reakcije. Po završetku reakcije, reakcionoj smeši je dodata ledeno hladna voda i proizvod je ekstrahovan u etilacetatu i prečišćen fleš kolonom koristeći 20% etilacetata i heksana, kao eluens.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,95 - 7,80 (m, 2H), 7,79 - 7,62 (m, 2H), 6,82 (t, J = 10,6 Hz, 1H), 6,57 (t, J = 16,3 Hz, 1H), 4,92 - 4,66 (m, 1H), 3,97 - 3,83 (m, 2H), 3,83 - 3,74 (m, 3H), 3,64 - 3,41 (m, 2H), 3,11 (d, J = 3,0 Hz, 4H), 2,80 - 2,59 (m, 4H), 2,54 (td, J = 7,5, 4,4 Hz, 2H), 2,18 - 1,78 (m, 2H), 1,20 (dt, J = 12,1, 5,0 Hz, 3H).
[0116] 2-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-fluorobutil)izoindolin-1,3-dion (C2b) je pripremljen sa C2b prema proceduri opisanoj za C2a.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,90 - 7,80 (m, 2H), 7,77 - 7,66 (m, 2H), 7,14 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 6,92 (ddd, J = 14,9, 7,8, 1,5 Hz, 1H), 4,94 -4,65 (m, 1H), 4,12 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,95 - 3,76 (m, 2H), 3,04 (s, 2H), 2,74 (ddd, J = 13,8, 12,9, 7,4 Hz, 2H), 2,64 - 2,44 (m, 2H), 2,20 - 1,92 (m, 4H), 1,58 (s, 2H), 1,24 (dt, J = 16,2, 7,3 Hz, 3H).
[0117] 4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil) piperazin-1-il)-3-fluorobutan-1-amin (C3a) Hidrazin (3 mmol) je dodat rastvoru jedinjenja C2a (1 mmol ) u EtOH (15 mL) i mešano 7 sati pod refluksom. Rastvarač je uparen i reakciona smeša je razblažena sa 20% vod. rastvorom K2CO3(15 mL) i ekstrahovan u CHCl3(2 x 15 ml). Organski sloj je kombinovan, osušen i koncentrovan da bi se dobio žuti uljani proizvod, koji je bio dovoljno čist da se koristi u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6,85 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,86 (d, J = 49,8 Hz, 1H), 3,83 (d, J = 6,6 Hz, 3H), 3,15 (s, 2H), 2,89 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 2,72 (dt, J = 19,2, 10,6 Hz, 2H), 2,59 - 2,48 (m, 2H), 1,56 (s, 10H), 1,20 (t, J = 7,6 Hz, 3H).
[0118] 4-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-fluorobutan-1-amin (C3b) je pripremljen sa C2b korišćenjem postupka opisanog za C3a.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,15 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,95 (dd, J = 19,8, 11,6 Hz, 2H), 4,92 (d, J = 49,8 Hz, 1H), 3,07 (s, 2H), 2,89 (dd, J = 13,0, 6,2 Hz, 2H), 2,81 - 2,67 (m, 2H), 2,17 (s, 4H), 1,54 (s, 8H), 1,22 (t, J = 7,5 Hz, 3H).
[0119] N-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-karboksamid (C4a) je pripremljen iz indol-2-karboksilne kiseline i C3a u skladu sa opštim postupkom amidacije A. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 30% aceton/ CHCl3kao eluens da bi se dobio željeni proizvod u prinosu od 50%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,16 (s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,66 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,34 - 7,22 (m, 1H), 7,15 (dd, J = 13,2, 6,1 Hz, 1H), 6,84 (dd, J = 7,6, 1,7 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,55 (s, 1H), 4,90 (d, J = 49,1 Hz, 1H), 3,83 (s, 2H), 3,79 - 3,58 (m, 1H), 3,15 (s, 2H), 2,95 (s, 1H), 2,92 -2,84 (m, 2H), 2,75 - 2,64 (m, 3H), 2,56 (dt, J = 15,2, 5,6 Hz, 2H), 2,02 (dd, J = 17,8, 14,3 Hz, 2H), 1,59 (s, 2H), 1,20 (t, J = 7,6 Hz, 3H). Oksalatna so je precipitirana iz acetona; Anal (C26H32ClFN4O2• 1,2C2H2O4• H2O) C, H, N.
[0120] N-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)benzofuran-2-karboksamid (C4b) je pripremljen iz benzofuran-2-karboksilne kiseline i C3a prema opštem postupku amidacije A. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 30% aceton/ CHCl3kao eluens da bi se dobio željeni proizvod u prinosu od 55%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,02 (s, 1H), 7,72 - 7,64 (m, 1H), 7,51 - 7,44 (m, 1H), 7,44 - 7,36 (m, 1H), 7,33 - 7,26 (m, 1H), 7,01 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 4,89 (d, J = 49,9 Hz, 1H), 3,84 (s, 3H), 3,74 - 3,61 (m, 2H), 3,16 (s, 4H), 2,95 (s, 1H), 2,88 (d, J = 0,5 Hz, 1H), 2,79 -2,64 (m, 5H), 2,59 - 2,48 (m, 2H), 2,24 - 1,97 (m, 2H), 1,59 (s, 4H), 1,19 (t, J = 7,6 Hz, 3H).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3) δ 159,00, 154,65, 148,55, 146,26, 146,01, 140,71, 128,23, 127,61, 126,79, 123,60, 122,72, 122,33, 116,60, 111,69, 110,41, 106,50, 92,03, 90,30, 61,99, 59,24, 54,36, 50,18, 35,88, 33,14, 28,53, 15,39. Oksalatna so je istaložena iz acetona;. Anal (C26H31ClFN3O3 • 1,1C2H2O4• H2O) C, H, N.
[0121] N-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-karboksamid (ABS01-113 (C5a) je pripremljen iz indol-2-karboksilne kiseline i C3b prema opštem postupku amidacije A. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom koristeći 30% aceton/CHCl3kao eluens da se dobije željeni proizvod sa prinosom od 60%.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,11 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,19 - 7,06 (m, 1H), 7,06 - 6,93 (m, 1H), 6,85 - 6,73 (m, 2H), 6,68 (s, 1H), 6,48 (s, 1H), 4,76 (d, J = 48,0 Hz, 1H), 3,53 (d, J = 25,1 Hz, 2H), 2,92 (s, 1H), 2,80 (ddd, J = 6,7, 3,6, 1,8 Hz, 3H), 2,73 (ddd, J = 5,1, 3,6, 1,8 Hz, 3H), 2,67 - 2,54 (m, 3H), 1,85 (s, 2H), 1,51 (s, 3H), 1,16 - 0,98 (m, 3H).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3) δ 162,50, 161,68, 149,42, 143,22, 136,16, 130,50, 128,69, 127,62, 126,88, 124,31, 124,10, 121,84, 120,67, 117,97, 111,80, 101,97, 92,45, 90,77, 62,04, 54,00, 51,27, 36,39, 32,99, 31,46, 27,45, 14.08. Oksalatna so je istaložena iz acetona; T.t. 228-229 ° C. Anal (C25H29C1FN3O2• C2H2O4• 0,5 H2O) C, H, N.
[0122] N-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)benzofuran-2-karboksamid (C5b) je pripremljen od benzofuron-2-karboksilne kiseline i C3b prema generalnom postupku amidacije A. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom korišćenjem 30% acetona/CHCl3kao eluens da bi se dobio željeni proizvod sa prinosom od 60%.<1>H NMR (400 MHz, CDC13) δ 8,02 (s, 1H), 7,67 (ddd, J = 7,8, 1,2, 0,7 Hz, 1H), 7,48 (ddd, J = 5,4, 4,5, 3,0 Hz, 1H), 7,41 (ddd, J = 8,3, 7,2, 1,3 Hz, 1H), 7,32 - 7,26 (m, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,15 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,01 (s, 1H), 6,93 (ddd, J = 15,4, 7,8, 1,5 Hz, 1H), 5,03 - 4,75 (m, 1H), 3,75 - 3,61 (m, 3H), 3,08 (s, 2H), 2,95 (s, 1H), 2,88 (d, J = 0,5 Hz, 3H), 2,83 - 2,71 (m, 3H), 2,18 - 1,88 (m, 2H), 1,61 (s, 3H), 1,27 - 1,13 (m, 3H).<13>C NMR (101 MHz, CDCl3) δ 158,92, 154,70, 149,48, 148,62, 143,22, 128,59, 127,50, 126,81, 124,02, 123,68, 122,71, 117,81, 111,69, 110,39, 92,14, 90,36, 62,21, 61,96, 54,09, 51,40, 35,88, 33,17, 32,92, 27,34, 14.08. Oksalatna sol je precipitirala iz acetona; Anal (C25H29ClFN3O2• 1,3C2H2O4• H2O) C, H, N.
[0123] Ostale skraćenice korišćene u sledećim primerima: DA, dopamin; TM, transmembranski; D2R, dopaminski D2 receptor; D3R, dopaminski D3 receptor; D4R, dopaminski D4 receptor; 5-HT, 5-hidroksi triptamin (serotonin); i.p., intraperitonealno; PPB, kalijum fosfatni pufer; s.c. potkožno; i THC, (6aR, 10aR)-delta-9-tetrahidrokanabinol.
Primer 2. Analize vezivanja radioliganda
[0124] Vezivanje za dopaminske receptore nalik D2 je određeno korišćenjem prethodno opisanih metoda. (Chen i sar. " Tranilcipromin supstituisani cis-hidroksiciklobutilnaftamidi kao snažni i selektivni dopaminski D(3) receptorni antagonisti." J. Med. Chem. 2014, 57, 4962-4968) Membrane su pripremljene od ćelija HEK293 koje eksprimiraju humane D2R, D3R ili D4R, gajene u 50:50 mešavini DMEM i Ham-ovog F12 medijuma za kulturu, dopunjene sa 20 mM HEPES, 2 mM L-glutamina, 0,1 mM ne-esencijalnih aminokiselina, 1X antibiotik/antimikotik,
4
10% termički inaktiviranog fetalnog goveđeg seruma i 200 μg/mL higromicina (Life Technologies, Grand Island, NY) i držane u inkubatoru na 37 ° C i 5% CO2. Po dostizanju 80-90% spoja, ćelije su sakupljene pomoću prethodno pomešanog Earle-ovog uravnoteženog rastvora soli (EBSS) sa 5 μΜ EDTA (Life Technologies) i centrifugirane na 3000 o/min, tokom 10 min na 21 ° C. Supernatant je uklonjen i pelet je resuspendovan u 10 mL hipotoničnog pufera za lizu (5 mM MgCl2· 6 H2O, 5 mM Tris, pH 7,4 na 4 ° C) i centrifugiran na 20,000 o/min, tokom 30 minuta na 4 ° C. Pelet je zatim resuspendovan u svežem EBSS puferu izrađenom od 8,7 g/L Earle-ove uravnotežene soli bez fenol crvene (US Biological, Salem, MA), 2,2 g/L natrijum bikarbonata, pH do 7,4. Bradford-ov proteinski test (Bio-Rad, Hercules, CA) je korišćen za određivanje koncentracije proteina i membrane su razblažene na 500 μg/mL i čuvane u zamrzivaču na -80 ° C za kasniju upotrebu.
[0125] Eksperimenti kompetitivnog vezivanja radioliganda su sprovedeni korišćenjem odmrznutih membrana. Ispitivana jedinjenja su sveže rastvorena u 30% DMSO i 70% H2O do koncentracije štoka od 100 μΜ. Da bi se pomogla solubilizacija slobodnih-baznih jedinjenja, dodato je 10 μl glacijalne sirćetne kiseline zajedno sa DMSO. Svako ispitivano jedinjenje je zatim razblaženo u 13 polu-log serijskih razblaženja, koristeći 30% DMSO nosač; krajnje ispitivane koncentracije su bile u opsegu od 10 μΜ do 10 pM. Prethodno zamrznute membrane su razblažene u svežem EBSS do 100 μg/mL (za hD2R ili hD3R) ili 200 μg/mL (hD4R) koncentrovanog rastvora za vezivanje. Eksperimenti kompeticije radioliganda su sprovedeni u staklenim epruvetama koje su sadržale 300 μl svežeg EBSS pufera sa 0,2 mM natrijum metabisulfita, 50 μl razblaženog ispitivanog jedinjenja, 100 μl membrana (10 μg ukupnog proteina za hD2R ili hD3R, 20 μg ukupnog proteina za hD4R) i 50 μl [<3>H] N-metilspiperona (0,4 nM krajnja koncentracija; Perkin Elmer). Nespecifično vezivanje je određeno korišćenjem 10 μΜ butaklamola (Sigma-Aldrich, St. Louis, MO), a ukupno vezivanje je određeno sa 30% DMSO vehikuluma. Sva razblaženja jedinjenja su testirana u triplikatu i reakcija je inkubirana jedan sat na sobnoj temperaturi. Reakcija je završena filtracijom kroz Whatmanove GF/B filtere, prethodno natopljene tokom jednog sata u 0,5% polietileniminu, koristeći Brandel R48 razdelnik za filtriranje (Brandel Instruments, Gaithersburg, MD). Filteri su isprani 3 puta sa 3 ml ledeno hladnog EBSS pufera i premešteni u scintilacione bočice. Dodato je 3 mL tečnog scintilacionog koktela CytoScint (MP Biomedicals, Solon, OH) i bočice su prebrojane korišćenjem tečnog scintilacionog brojača Perkin Elmer Tri-Carb 2910 TR (Waltham, MA). Vrednosti IC50za svako jedinjenje su određene iz krivih doza-odgovor i Kivrednosti su izračunate korišćenjem Cheng-Prusoff-ove jednačine; ove analize su izvršene korišćenjem GraphPad Prism verzije 5,00 za Windows (GraphPad Softver, San Diego, CA). Prijavljene Kivrednosti utvrđene su iz najmanje tri nezavisna eksperimenta.
4
�
� T l 1B
4 (nastavak)
<a>Vrednosti predstavljaju aritmetičku sredinu ± SEM određivanja u triplikatu od najmanje tri nezavisna eksperimenta. IC50vrednosti za svako jedinjenje su određene iz krivih doza-odgovor i Kivrednosti su izračunate Cheng-Prusoff jednačinom korišćenjem GraphPad Prism verzije 6.00 za Macintosh. Kompeticioni eksperimenti su izvršeni, slično onom prethodno prijavljenom, u prisustvu 0,4 nM [<3>H]-N-metilspiperona, 10 polu-log serijskih razblaženja ispitivanih lekova u triplikatu i pripreme membrana iz stabilno transficiranih HEK293 ćelija koje izražavaju D2LR ili D3R (D2LR 20 μg/bazenčić i D3R 20 μg/bazenčić). Eksperimenti vezivanja su izvršeni u pločama sa 96 bazenčića koji sadrže 300 μl svežeg vezivnog pufera (EBSS na pH 7,4), 50 μl razblaženog ispitivanog jedinjenja, 100 μl membrana i 50 μl radioliganda. Vezivne reakcije su inkubirane tokom 1 sata na sobnoj temperaturi i zatim okončane filtracijom preko Perkin Elmer UniFilter-96 GF/B filtera, prethodno natopljenog tokom 1 sata u 0,5 % polietileniminu.
FARMAKOLOŠKI REZULTATI I DISKUSIJA
[0126] Vezivni afiniteti jedinjenja su procenjeni izvođenjem studija kompetitivnog vezivanja sa
[<3>H] N-metilspiperonom, koristeći membrane pripremljene od ćelija HEK293 koje eksprimiraju
bilo humani D2R ili D3R.
[0127] Podaci o vezivanju za supstituisane ligande pune dužine su prikazani su u Tabelama 1A i
1B. Pored toga, izračunate su vrednosti cLogP i polarne površine (PSA) da bi se obezbedila
merenja lipofilnosti i predviđene moždane penetracije, respektivno, za jedinjenja pune dužine.
Većina analoga je pokazala afinitete vezivanja za D3R u niskom do subnanomolarnom opsegu. U
serijama na bazi 1-(2-hloro-3-etilfenil) piperazina (18-27), oba 18 i 19 su ispoljili visoke afinitete
4
vezivanja za D3R (Ki= 0,14, odnosno 0,36 nM). Štaviše, 19 je pokazao D2R/D3R selektivnost od > 400 puta. Kada je indolski ostatak od 18 i 19 zamenjen sa benzofuranom, afiniteti subnanomolarnog vezivanja su održavani za oba 20 i 21, ali je selektivnost D3R smanjena zbog poboljšanja afiniteta prema D2R. Kada je indolski prsten takođe, zamenjen drugim heteroarilnim prstenastim sistemima, kao što su 2-(imidazo [1,2-a] piridin) (22 i 23), 5-(6-metilimidazo [2,1-b] tiazol) (24), 2-(4-etil-1H-imidazol) (25), 2-(4-metil-1H-imidazol) (26 i 27). U većini slučajeva, iako su zadržani visoki afiniteti vezivanja za D3R, relativna poboljšanja u afinitetima za vezivanje za D2R smanjila su selektivnost za D3R. Nije uočena nijedna veća promena u afinitetu i selektivnosti 26 kada je uveden trans-butenil linker između aril amida i piperazinskog ostatka da bi se dobio 35.
[0128] U visoko supstituisanim serijama na bazi 1-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil) piperazina (28-31), indol 28 je pokazao sličan profil vezivanja kao i njegov analog 18. Jedinjenje 29 je ispoljilo visok afinitet (Ki= 6,29 nM) i najveću selektivnost vezivanja D3R naspram D2R, (~2700 puta) od svih 4-fenilpiperazina. Derivati benzofurana 30 i 31 su pokazali smanjene afinitete vezivanja za D3R i bilo slične ili niže selektivnosti za D3R, u poređenju sa 20 i 21, respektivno. Uvođenje 3-ΟΗ grupe u lanac vezivanja butila rezultiralo je nižim vrednostima cLogP, predviđajući smanjenu lipofilnost, u poređenju sa odgovarajućim matičnim alifatičnim jedinjenjima. U poređenju sa svim analozima 3-OH-butila, derivat 2-OH-butil 40 je ispoljio visok afinitet za D3R (Ki= 0,20 nM), ali je pokazao nižu selektivnost za D3R, slično jedinjenjima koja nisu imala OH supstituciju u vezivnom lancu. Nijedno od jedinjenja nije pokazalo visok afinitet vezivanja za D4R.
[0129] Molekuli pune dužine zasnovani na 3-hloro-5-etil-2-metoksifenilpiperazinu i 2-hloro-3-etilfenilpiperazinu pokazali su visoke afinitete vezivanja i selektivnosti za D3R u odnosu na D2R.
[0130] Zamena indola sa drugim sistemima heteroarilnih prstenova nije pokazala poboljšanje u selektivnosti D3R.
Primer 3. Studije mikrozomskog metabolizma: mikrozomi pacova, rezus majmuna i ljudske jetre
[0131] Jedinjenje (±)-29 je analizirano u testu mikrozomske stabilnosti jetre majmuna u odnosu na kontrolu. Dodatne studije uporedne stabilnosti između jedinjenja (±)-29 i PG648 (jedinjenje 1) su takođe sprovedene u testovima mikrozomske stabilnosti jetre pacova i jetre majmuna. Jedinjenje 29 je pokazalo poboljšanu metaboličku stabilnost u poređenju sa Jedinjenjem 1 kod obe vrste.
Jedinjenje 1, PG648
[0132] Metode: Faza I Ispitivanje metaboličke stabilnosti je sprovedeno u mikrozomima jetre pacova i rezus majmuna. Za metabolizam faze I, reakcija je izvedena sa 100 mM kalijum-fosfatnog pufera, pH 7,4, u prisustvu sistema za obnavljanje NADPH (1,3 mM NADPH, 3,3 mM glukoza-6-fosfata, 3,3 mM MgCl2, 0,4 U/mL glukoze-6-fosfat dehidrogenaze, 50 μΜ natrijum citrata). Reakcije u triplikatu su pokrenute dodavanjem mikrozoma jetre u inkubacionu smešu (konačna koncentracija jedinjenja je 10 μΜ; 0,5 mg/mL mikrozoma). Negativne kontrole u odsustvu kofaktora su sprovedene da bi se utvrdila specifična razgradnja bez kofaktora. Nestanak jedinjenja praćen je putem LC/MS/MS. Hromatografska analiza izvršena je korišćenjem sistema Accela ™ ultra visokih performansi koji se sastoji od analitičke pumpe i autotestera spojenog sa TSQ Vantage masenim spektrometrom (Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham MA). Odvajanje analita od potencijalno interferirajućeg materijala postignuto je na sobnoj temperaturi korišćenjem kolone Agilent Eclipse Plus (100 x 2,1 mm i.d.) upakovane sa stacionarnom fazom C18 od 1,8 μm. Korišćena mobilna faza se sastojala od 0,1% mravlje kiseline u acetonitrilu i 0,1% mravlje kiseline u H2O sa gradijentnom elucijom, polazeći od 10% (organska) linearno povećavajući na 99% do 2 min, održavajući na 99% (2-2,5 min ) i ponovno uravnoteženje na 10% za 2,7 min. Ukupno vreme proticanja svakog analita je bilo 5,0 min.
[0133] Uporedni rezultati testa mikrozomske stabilnosti majmunske jetre pokazuju da jedinjenje 29 ispoljava iznenađujuće visoku metaboličku stabilnost, posebno u poređenju sa PG648 (SL. 1). Rezultati dalje pokazuju da jedinjenje 29 ispoljava odličan metabolizam faze I u mikrozomima jetre pacova (SL.2) i značajno je stabilnije od PG648.
[0134] Analiza mikrozomske stabilnosti miša. Analiza metaboličke stabilnosti faze I za jedinjenje 29 takođe je sprovedena u mikrozomima jetre miša. Reakcija je izvedena sa 100 mM kalijumfosfatnog pufera, pH 7,4, u prisustvu sistema za regeneraciju NADPH (konačna koncentracija
1
jedinjenja je bila 10 μΜ; 0,5 mg/mL mikrozoma). Takođe su procenjene pozitivne kontrole metabolizma faze I (testosteron). Nestanak jedinjenja praćen je tokom vremena korišćenjem metode tečne hromatografije i tandemske masene spektrometrije (LC/MS/MS). Sve reakcije su uzorkovane u triplikatu. Hromatografska analiza je izvedena korišćenjem sistema Accela ultra visokih performansi koji se sastoji od analitičke pumpe i autotestera u kombinaciji sa TSQ Vantage masenim spektrometrom (Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham, MA). Odvajanje analita od potencijalno ometajućeg materijala postignuto je na sobnoj temperaturi korišćenjem kolone Agilent Eclipse Plus (100 mm x 2,1 mm i.d.) upakovane sa stacionarnom fazom C18 od 1,8 μm. Korišćena mobilna faza sastojala se od 0,1% mravlje kiseline u acetonitrilu i 0,1% mravlje kiseline u H2O sa gradijentnim eluiranjem, počevši od 10% (organske) linearno povećavajući na 99% do 2 min, održavajući na 99% (2-2,5 min ) i ponovno uravnoteženje na 10% za 2,7 min.
Ukupno vreme proticanja svakog analita bilo je 4,5 min. Rezultati su otkrili da je jedinjenje 29 pokazalo odličnu metaboličku stabilnost sa > 80% preostalog tokom 1 sata.
[0135] Dalja ispitivanja metaboličke stabilnosti faze I su sprovedena na racemskom jedinjenju (±) -29 i svakom enantiomeru (R)-29 i (S)-29. Rezultati dati u donjoj tabeli ilustruju metaboličku stabilnost faze I u mikrozomima humane jetre gde 70-76% netaknutog leka ostaje nakon 1 sata za sva jedinjenja.
Primer 4. Studije samo-administracije oksikodona na pacovima sa jedinjenjem 29 i jedinjenjem 19
2
[0136] Standardne metode intravenske samo-administracije oksikodona korišćene su za procenu efekata DA D3 receptornih antagonista jedinjenja 29 i jedinjenja 19 na samo-administraciju oksikodona kod pacova.
[0137] MATERIJALI I METODE: Korišćeni su mužjaci Long-Evans pacova (Charles-River, Raleigh, N.C.). Smešteni su pojedinačno pod reverznim 12-satnim ciklusom svetlo-tama (svetlo je uključeno u 19:00 h) po dolasku, sa slobodnim pristupom hrani i vodi, i bilo im je dozvoljeno da se prilagode novoj sredini najmanje 7 dana pre početka eksperimenta. Svi eksperimentalni postupci su bili u skladu sa „Principima Laboratorijske nege životinja“, objavljenim od strane Nacionalnog instituta za zdravlje (publikacija NIH 86-23, 1996), i bili su odobreni od strane NIDA Odbora za negu i upotrebu životinja.
[0138] Hirurška intervencija: Pacovi (300-350g) koji se koriste za samo-primenu oksikodona su prvo implantirani sa intravenskim kateterom. Anestezirani su sa pentobarbitalom (30 mg/ kg i.p.), dopunjenim sa hloral hidratom (140 mg/kg, i.p.). Sledeće je napravljen mali rez desno od srednje linije vrata i spoljašnja vratna vena je eksternalizovana i i.v. kateter napravljen od mikrorenatana (Braintree Scientific Inc., Braintree, MA, USA) je ubačen svojim vrhom do desne pretkomore. Kateter je pričvršćen za venu svilenim šavom, a drugi kraj je potkožno pohranjen oko zadnjeg dela vrata da bi izašao blizu zadnjeg dela lobanje. Kraj je navučen preko savijene kanile od nerđajućeg čelika kalibra 24 (Plastic One Inc., Roanoke, VA, SAD) sa navojnom glavom koja se koristi za pričvršćivanje modela kanile i, tokom eksperimentisanja, infuzione linije. Kateter i kanila za vođstvo su zatim pričvršćeni za lobanju pomoću četiri nosiva konektora od nerđajućeg čelika navijenih u lobanju i zubni cement i rana je zašivena.
[0139] Nakon operacije, kateteri su svakodnevno ispirani rastvorom gentamicin-heparin-fiziološki rastvor (30 IU/ml heparina; ICN Biochemicals, Cleveland, OH, USA) kao predostrožnost protiv začepljenja katetera i infekcije. Životinjama je dozvoljeno da se oporave tokom najmanje 5 dana pre nego što je započeo trening ponašanja.
[0140] Aparati za samo-administraciju i trening za samo-administraciju oksikodona: Pacovi su u 3 eksperimentalna testa prvo bili obučeni za samo-administraciju oksikodona. Aparati i postupci za samo-administraciju su prethodno opisani (Xi i sar., 2004, 2005). Nakon oporavka od operacije, svaki pacov je povezan polietilenskim cevima (zaštićen čeličnom spiralnom oprugom) i jednokanalnim tečnim okretnim mehanizmom za pumpu šprica (Razel Sci., Stamford, Conn) kojim upravlja mikroprocesor i postavljen u operantnu komoru (Med Associates, Georgia, VT) opremljenu sa kućnim svetlom 15V i dvema polugama za odgovor (jedna aktivna i jedna neaktivna) 6,5 cm iznad poda komore. Signalna lampica i zvučnik su bili opremljeni 12 cm iznad aktivne poluge. Svaka sesija je započinjala umetanjem aktivne poluge u komoru i osvetljavanjem kućnog svetla koje je držano upaljeno do kraja sesije. Svaki pacov je bio obučen u trosatnim dnevnim sesijama da pritisne aktivnu polugu na fiksnom odnosu-1 (FR-1) rasporeda pojačanja za i.v. infuziju oksikodona. Prvo su trenirani u jediničnoj dozi od 0,1 mg/kg/infuziji tokom 2 nedelje, a zatim 0,5 mg/kg/infuziji tokom sledeće nedelje. Svaki aktivni pritisak poluge rezultirao je aktivacijom svetlosnog signala reda jedinjenja i isporukom 0,08 ml oksikodona tokom 4,6 sek. Ovo vreme infuzije služilo je i kao vremenski period isteka tokom kojeg je signal svetlosti bio aktiviran i zabeleženi su odgovori životinja na aktivnoj ručici, ali nisu imali predviđene posledice. Reakcije životinja na neaktivnoj poluzi su takođe zabeležene, ali nisu nagrađene.
Eksperiment 1. Efekti blokade receptora D3 od strane jedinjenja 29 na samo-administraciju oksikodona. Efekti jedinjenja 29 na samo-administraciju oksikodona su bili testirani sledećeg dana nakon završetka treninga za samo-administraciju. Pacovi su prvo bili podeljeni u 4 eksperimentalne grupe i injektovani bilo sa jednom dozom leka (5, 15 ili 25 mg/kg) ili nosača (25% 2-hidroksipropil-β-ciklodekstrin) koji je korišćen za rastvaranje leka. Petnaest minuta nakon ubrizgavanja, pacovi su stavljeni u komore za samo-administraciju i omogućena im je još jedna sesija samo-administracije u poslednjoj treniranoj dozi oksikodona. Snimljeni su odgovori životinja na aktivnim i neaktivnim polugama i infuzijama oksikodona tokom sesije od 3 sata. Odgovarajući eksperiment je izveden sa jedinjenjem 19. Eksperiment 2. Efekti blokade D3 receptora jedinjenjem 29 na reakciju životinja tokom ispitivanja supstitucije fiziološkim rastvorom. Po završetku ispitivanja samo-administracije, pacovima je bilo dozvoljeno da samostalno primene oksikodon još 4 dnevne sesije. Petog dana ujutro, rastvor oksikodona u špricevima za infuziju je zamenjen fiziološkim rastvorom i životinjama je ubrizgano jedinjenje 29 (5 ili 15 mg/kg) ili nosač. Petnaest minuta nakon injekcije stavljeni su u komore i pušteni da pritiskaju polugu za infuziju fiziološkog rastvora tokom 3 sata. Zabeleženi su odgovori životinja na aktivne i neaktivne poluge i broj infuzija fiziološkog rastvora tokom 3 sata ispitivane sesije.
Eksperiment 3. Efekti blokade receptora D3 jedinjenjem 29 na ponovno uspostavljanje traženja leka izazvanog prajmiranjem oksikodona. Po završetku obuke za samo-
4
administraciju, tri dodatne grupe životinja bile su izložene uslovima slabljenja, u kojima je kokain zamenjen fiziološkim rastvorom, a svetlo i ton povezani sa kokainom su bili isključeni. Aktivno pritiskanje poluge dovodilo je samo do infuzije fiziološkog rastvora. Svakodnevne sesije gašenja od 3 sata za svakog pacova nastavljene su do pritisaka poluge ≦10 puta na 3 sata sesije tokom najmanje 3 uzastopna dana. Na dan ispitivanja, grupe pacova su primile ili nosač ili jednu od 2 doze jedinjenja 29 (5 ili 15 mg/kg). Petnaest minuta nakon injekcije, data im je početna injekcija oksikodona (1 mg/kg i.p.) i odmah su stavljeni u komore za samo-administraciju. Životinjama je bilo dozvoljeno da pritisnu ručice za još jednu sesiju gašenja i zabeleženi su njihovi odgovori na polugama.
[0141] Aparat za kondicioniranje mesta i efekti jedinjenja 29 na uslovljenu averziju mesta izazvanu naloksonom (CPA). Uređaj za kondicioniranje mesta (Med Associates, St Albans, VT) sastojao se od dva odeljka (21 x 28 cm<2>) povezanih sivom površinom za povezivanje (21 x 12,5 cm<2>); klizna vrata odvajala su svaki odeljak od područja spajanja. Dva krajnja odeljka su se razlikovala u boji zida (crna u odnosu na belu), tipu poda (rešetka u odnosu na mrežu) i osvetljenosti; preferiranje krajnjih odeljaka je uravnoteženo korišćenjem slabijeg osvetljenja u reflektujućem (i obično manje poželjnom) belom odeljku i jačeg osvetljenja u nereflektujućem crnom odeljku. Paradigma je dalje „uravnotežena“ povezivanjem injekcija za trening sa belom stranom kod polovine životinja i sa crnom stranom kod preostalih životinja.
[0142] CPA postupci u ovoj studiji bili su slični onima koje su opisali drugi (Azar i sar., 2003; Olmstead i Burns 2005; 2012). Ukratko, jedan dan pre početka lečenja lekovima, pacovi (200-250g) su nasumično podeljeni u 6 grupa i dozvoljeno im je da istražuju dodeljeni uređaj za kondicioniranje tokom 15 minuta (preduslov). Tretmani su započeti sledećeg dana ujutru: 3 grupe su injektirane oksikodonom (3 mg/kg, ip.) i ostale 3 sa fiziološkim rastvorom (1 ml/kg) dva puta dnevno, tokom 7 dana. Dve injekcije dnevno date su u 8 ujutru, odnosno u 18 sati. Fiziološki rastvor (1 ml/kg, s.c.) i nalokson (0.3 mg/kg, s.c.) su davani 4 sata nakon jutarnje injekcije oksikodona 4., 6. i 5., 7. dana. Pacovi tretirani oksikodonom smešteni su u jedan odeljak na 30 minuta neposredno nakon svake od 2 injekcije naloksona, dok su u drugi odeljak sledili nakon svake injekcije fiziološkog rastvora. Nosač ili jedna doza jedinjenja 29 (5 ili 15 mg/kg, i.p.) su dati 1 sat pre svake sesije uslovljavanja naloksonom. 3 grupe pacova tretiranih fiziološkim rastvorom bile su kondicionirane naloksonom, nosačem i jedinjenjem 29 (15 mg/kg), respektivno u danima uparivanja lekova. CPA je testiran 24 sata nakon poslednje sesije kondicioniranja i životinjama je omogućeno da istražuju aparat tokom 15 minuta. CPA skor je izračunat kao životinjsko vreme provedeno u odeljcima uparenim sa lekom minus odeljci upareni sa fiziološkim rastvorom, Oksikodon HCl i nalokson HCl su nabavljeni od Sigma Chemical Co. (Saint Louis, MO, USA) i rastvoreni u fiziološkom slanom rastvoru.
[0143] Svi podaci su predstavljeni kao srednje vrednosti (± SEM) i analizirani su korišćenjem jednofaktorske ili dvofaktorske analize varijanse (ANOVA) sa ili bez ponovljenog merenja kada je to prikladno. Post-hoc poređenja među grupama izvršena su korišćenjem Newman-Keuls testa.
REFERENCE:
[0144]
Azar MR, Jones BC, Schulteis G (2003) Uslovljena averzija mesta je visoko osetljiv indeks akutne opioidne zavisnosti i povlačenja. Psihofarmakologija (Berl) 170: 42-50.
Olmstead MC, Burns LH (2005) Ultra-niske doze naltreksona potiskuju nagrađujuće efekte opijata i averzivne efekte opijatnog povlačenja kod pacova. Psihofarmakologija (Berl) 181: 576-581.
Yu H, Wen D, Ma C, Meng Y, Li S, Ni Z, Cong B (2012) Efekti egzogenog holocistokinin oktapeptida na sticanje naloksonom izazvanog povlačenja indukovanog uslovljenom averzijom mesta kod pacova. PLoS One 7: e41860.
Xi ZX, Gilbert J, Campos AC, Kline N, Ashby CR Jr, Hagan JJ, Heidbreder CA, Gardner EL (2004) Blokada mezolimbičnih dopaminskih D3 receptora inhibira vraćanje traženja kokaina izazvanog stresom kod pacova. Psychopharmacol (Berl) 176: 57-65
Xi ZX, Gilbert JG, Pak AC, Ashby CR Jr, Heidbreder CA, Gardner EL (2005) Selektivni antagonizam dopaminskih D3 receptora od strane SB-277011A umanjuje kokainsko pojačanje kao što je procenjeno pomoću progresivnog odnosa i promenljive cene/promenljive isplate samoprimene kokaina sa fiksnim odnosom kod pacova. Eur J Neurosci 21: 3427-3438 SL.3A prikazuje efekte sistemskom injektovanja jedinjenja 29 (5-25 mg/kg, i.p.) na uzimanje oksikodona (samo-primena) kod pacova. Dvofaktorska ANOVA sa ponovljenim merenjem tokom sesije (analiza sirovih podataka) je otkrila značajan efekat grupe (F (3,30) = 5,54, P < 0,01), ali ne i sesije (F (1, 10) = 0,77, P = 0.39) i Sesija x Grupna interakcija (F (3,30) = 1,76, P = 0,18). Analiza% promena jednofaktorske ANOVA takođe je otkrila značajan efekat ((F (3,30) = 5,54, P <0,01). N = 6 u svakoj grupi. #, P, 0,05 naspram nivoa bazalnog uzimanja leka; * i **, P <0,05, odnosno 0,01, u poređenju sa grupom nosača.
SL. 3B prikazuje efekte sistemskog injektovanja jedinjenja 19 (1-5 mg/kg, i.p.) na uzimanje oksikodona (samo-primena) kod pacova. N = 6-7 u svakoj grupi. #, P <0,05 naspram nivoa bazalnog uzimanja leka; * i **, P <0,05, odnosno 0,01, u poređenju sa grupom nosača. SL. 4 prikazuje efekte sistemskog ubrizgavanja jedinjenja 29 (5-15 mg/kg, i.p.) na ponovno uspostavljanje traženja oksikodona indukovano početnom injekcijom oksikodona (1 mg/kg, i.p.) u prethodno obučenoj samoprimeni oksikodona i naknadno gašenju ponašanja pacova. N = 7-8 u svakoj grupi. **, P <0,01 naspram grupe nosača.
SL. 5 opisuje postupak za uslovljenu averziju mesta izazvanu naloksonom kod hroničnih pacova tretiranih oksikodonom.
SL. 6 ilustruje rezultate gde jedinjenje 29 (5, 15 mg/kg, 1 sat pre naloksona) inhibira uslovljenu averziju mesta izazvanu naloksonom kod pacova hronično tretiranih oksikodonom. # i ##, P <0,05 i 0,01, u odnosu na grupe tretirane fiziološkim rastvorom; * i **, P <0,05 i 0,01, u poređenju sa Nalx grupom nosača, respektivno. N = 8 u svakoj grupi.
[0145] Jedinjenje 29 je ocenjeno na njegovu in vivo efikasnost kod pacova koji su sami primenjivali prepisani opioidni analgetik, oksikodon. Prema FR1 rasporedu, jedinjenje 29 je umanjilo samo-primenu pri 15 i 25 mg/kg (SL. 3A), inhibiralo je traženje oksikodona tokom ispitivanja gašenja (SL. 4) i blokiralo ponovno uspostavljanje potrage za drogom izazvano oksikodonom. Jedinjenje 29 takođe značajno umanjuje uslovljenu averziju mesta izazvanu naloksonom kod hroničnih pacova tretiranih oksikodonom (SL 6). Rezultati pokazuju da je jedinjenje 29, visoko selektivni antagonist D3R, efikasan u ovim modelima zloupotrebe opijata. Ovi podaci sugerišu da D3R antagonisti Formule (I) mogu biti pogodna alternativa ili dodatak lekovima koji su posredovani opioidnim receptorima (npr. buprenorfin, metadon ili nalokson) koji se trenutno klinički koriste u lečenju zavisnosti od opijata.
[0146] Jedinjenje 29 se ne vezuje za opijatne (mu, delta, kappa) receptore.
[0147] Prethodni tretman bilo jedinjenjem (±)-29 (15 mg/kg i 25 mg/kg) ili jedinjenjem (±)-19 (1 mg/kg i 5 mg/kg) nije pokazao značajne efekte na samo-primenu saharoze.
[0148] Predtretmani jedinjenjem (±)-29 (5-15 mg/kg i.p.) na sticanje samo-primene oksikodona (0,05 mg/kg/infuzija; N = 8 u svakoj grupi) pokazali su da su životinje same primenjivale značajno manji broj infuzija oksikodona kada su prethodno tretirane sa 15 mg/kg jedinjenja (±)-29 i ovaj efekat se zadržao nekoliko iskaza nakon prethodnog tretmana.
Primer 5. Studije samo-primene THC na veveričastim majmunima sa jedinjenjem 29
[0149] Jedinjenje 29 je ispitivano u THC modelu samo-primene kod veveričastih majmuna koji sami administriraju THC prema FR10 rasporedu.
[0150] Subjekti: Sedam odraslih mužjaka veveričastih majmuna (Saimiri sciureus) težine 0,8 do 1,1 kg je bilo smešteno u pojedinačne kaveze u prostoriji sa kontrolom temperature i vlažnosti sa neograničenim pristupom vodi. Svaka životinja je imala jedinstven numerički ili alfanumerički identifikator (THC samo-administrirajuća grupa: 434, 25B, 37B; grupa koja sama primenjuje hranu: 1549, 570, 27B, 535). Majmuni su bili obučeni da samostalno primenjuju THC ili pelete sa hranom pre studije. Majmuni su hranjeni (otprilike dva sata nakon sesije) dnevnim obrokom hrane koji se sastojao od keksa sa visokoproteinskom ishranom majmuna (Lab Diet 5045, PMI Nutrition International, Richmond, Indiana). Broj keksa (8-14) je određivan za svakog majmuna pojedinačno da bi održao telesnu težinu na konstantnom nivou tokom studije. Majmuni koji su sami administrirali pelete sa hranom imali su prilagođen broj biskvita da bi se održala motivacija za izvršenje zadatka ojačanog hranom. Sveže voće, povrće i obogaćivanje životne sredine obezbeđivani su svakodnevno. Sve životinje korišćene u ovoj studiji držane su u objektima u potpunosti akreditovanim od strane Udruženja za procenu i Akreditaciju laboratorijske nege životinja, a eksperimenti su sprovedeni u skladu sa smernicama Institucionalnog odbora za negu i upotrebu životinja Intramuralnog programa istraživanja, Nacionalnog instituta za zloupotrebu droga, Nacionalnog instituta za zdravlje i Smernica za negu i upotrebu sisara u neuronauci i bihevioralnom istraživanju (Nacionalni istraživački savet 2003).
[0151] Majmuni su hirurški pripremljeni sa hronično implantiranim venskim kateterima (polivinilhlorid; unutrašnji prečnik 0,38 mm; spoljni prečnik 0,76 mm) (Goldberg 1973) koji su prolazili subkutano do leđa majmuna gde su izlazili iz kože. Majmuni su nosili jakne od najlonske mreže (Lomir Biomedical, Kanada) kako bi zaštitili svoje katetere.
[0152] Aparati: Eksperimentalne komore i drugi uređaji korišćeni u ovoj studiji bili su isti kao što je prethodno opisano (Justinova i sar. 2003). Ispitivane sesije su sprovedene u izolacionim komorama za prigušivanje zvuka opremljenim stolicom od pleksiglasa, belim kućnim svetlom i belim šumom za maskiranje spoljnog zvuka. Stolica je sadržala jednu polugu odgovora (Med Associates., SAD) postavljenu na prozirni prednji zid; svaki pritisak na polugu snagom većom od 0,2 N proizveo je zvučni klik i zabeležen je kao odgovor. Par ćilibarnih stimulusa svetlosti, postavljenih iza prozirnog zida stolice, mogao bi da se osvetli i koristi kao vizuelni stimulus.
[0153] Procedura samo-administracije: Svakodnevne jednosatne eksperimentalne sesije obično su se izvodile od ponedeljka do petka sa svakim majmunom. Tokom svake sesije majmuni su postavljani na stolice od pleksiglasa i držali u sedećem položaju sa bravama oko struka. Pre početka sesije, kateteri su isprani sa 1 ml fiziološkog rastvora i isporučena je jedna injekcija (izračunato da popuni mrtvi prostor katetera koji je iznosio oko 0,2 ml). Kateteri majmuna su bili povezani sa polietilenskim cevima, koje su izlazile iz izolacionih komora gde su se prikačivale na pumpe za špriceve na motorni pogon. Pumpe špriceva su kalibrisane tako da je trajanje svake injekcije bilo 0,2 s, a zapremina injekcije je bila 0,2 ml. Na početku sesije, belo kućno svetlo je isključeno i uključeno je zeleno stimulativno svetlo. U prisustvu zelenog svetla, od majmuna se zahtevalo da učini 10 odgovora na polugu (10 odgovora, raspored ojačanja sa fiksnim odnosom; FR10) da bi proizveli injekciju THC-a. Završetak od 10 odgovora na ručici je gasio zeleno svetlo i proizveo intravensku (i.v.) injekciju od 4 μg/kg THC-a. Svaka injekcija je bila uparena sa 2-s osvetljenjem ćilibarnog stimulusa svetla. Nakon svake injekcije usledio je period od 60 sekundi, tokom kojeg je komora bila mračna, a prese ručica nisu imale programirane posledice.
[0154] Studija samo-administracije: Kada je odgovarala dozi treninga THC-a (4 μg/kg/ injekcija), bila je stabilna najmanje pet uzastopnih sesija (varijabilnost manja od 15%), zatim je sprovedeno testiranje sa selektivnim D3 antagonistom Jedinjenjem 29. Nakon 3 sesije sa predtretmanom nosačem, prethodno tretiranje sa svakom dozom jedinjenja 29 (1, 3 i 10 mg/kg, i.m.) je testirano tokom tri uzastopne sesije, praćeno oporavkom THC početne reakcije. Isti raspored pojačavanja i eksperimentalni protokol je bio korišćen i u grupi majmuna koji su sami sebi davali pelete sa hranom.
[0155] Studije ponovnog uspostavljanja: Da bismo odvojeno utvrdili efekte ponovnog uspostavljanja osnovne injekcije i znakova povezanih sa lekovima, koristimo dva različita protokola gašenja (opisani u nastavku) koji nam omogućavaju da izolujemo efekte ovih nezavisnih promenljivih.
[0156] Vraćanje indukovano prajmingom: Pre nego što je počelo testiranje ponovnog vraćanja indukovano osnovnim pripravkom, majmunima je bilo dozvoljeno da sami upravljaju dozom THC-a za trening dok ne postignu stabilnu osnovnu liniju (5-10 sesija). U narednim sesijama gašenja, prese poluge dovele su do i.v. infuzije fiziološkog rastvora plus vizuelni znaci koji su prethodno bili povezani sa THC-om. Nakon najmanje dve sesije gašenja, kada je odgovor dostigao nizak, stabilan nivo, osnovna injekcija THC-a (0,04 mg/kg i.v.) je data neposredno pre sledeće sesije, tokom koje je reagovanje (FR10) nastavilo da proizvodi samo i.v. injekcije soli i diskretne vizuelne znake. Efekti jedinjenja 29 (1, 3 i 10 mg/kg, i.m.) ili vehikuluma proučavani su kao predtretmani dati pre THC početnih sesija. Nekontigent i.v. injekcija nosača je takođe, dat pre svake sesije gašenja kao kontrola za tretman početnog leka. Doza od 10,0 mg/kg Jedinjenja 29 je takođe data i.m. pre punjenja nosača kako bi se utvrdilo da li će jedinjenje 29 samostalno uticati na suzbijeno traženje droge. Vraćanje izazvano THC prajmingom sa prethodnom tretmanom nosačem je ponovljeno nakon završetka ispitivanja jedinjenja 29 da bi se utvrdila pouzdanost efekta vraćanja završenim ponovljenim testovima.
[0157] Vraćanje indukovano znakom: Nakon završetka testiranja ponovnog uspostavljanja izazvanog osnovnom praksom, majmuni su vraćeni u osnovnu samo-primenu THC-a tokom 5-10 sesija. U narednim sesijama gašenja uklonjene su injekcije lekova i svi znakovi povezani sa injekcijama lekova. Ovo znači da kateteri nisu bili povezani sa pumpom, a majmuni nisu primali infuzije ili vizuelne prezentacije signala. Nakon dva ili tri dana gašenja, testirali smo da li je indukovano ponovno uspostavljanje ugašenog ponašanja u potrazi za drogom nakon prethodnog tretmana nosačem (i.m.) omogućavanjem isporuke injekcije fiziološkog rastvora uparenog sa znakovima povezanim sa lekovima. Zatim je proučavan efekat predtretmana sa Jedinjenjem 29 (0,3, 1 i 3 mg/kg) na ponovno uspostavljanje indukovano znakom. Svaki test ponovnog uspostavljanja je bio pojedinačna sesija, kojoj su prethodile i pratile sesije gašenja sa predtretmanom nosačem (i.m.), 30 minuta pre sesija. Jedinjenje 29 (3 mg/kg) je takođe dato i.m. pre sesije gašenja radi proučavanja efekata Jedinjenja 29 na ugašenu potragu za drogom. Vraćanje indukovano znakom sa prethodnim tretmanom nosačem je ponovljeno nakon završetka ispitivanja jedinjenja 29 da bi se utvrdila pouzdanost efekta vraćanja nad ponovljenim testovima.
[0158] △<9>-tetrahidrokanabinol (THC, NIDA Program za snabdevanje lekovima, Bethesda, MD, SAD) je rastvoren u nosaču koji sadrži 1% Tween 80, 1% etanola i fiziološki rastvor da bi se dobio štok rastvor (0,4 mg/ml) i dalje razblažen sa fiziološkim rastvorom. U testovima za ponovno vraćanje, THC je injektovan i.v. (1 ml/kg) neposredno pre sesije. Jedinjenje 29 je rastvoreno u nosaču koji sadrži 15% DMSO, 10% ciklodekstrina u fiziološkom rastvoru i injektovano i.m. (0,33 ml/kg) 30 min pre sesije.
[0159] Analiza podataka: Broj pojačanja (injekcija ili peleta) po sesiji predstavlja ukupan broj injekcija datih tokom svake jednosatne sesije. Stope odgovora izražene su kao odgovori u sekundi u proseku tokom sesije od 1 sata, a vreme i odziv tokom tajm-auta nisu obuhvaćeni proračunima. Podaci su izraženi kao srednje brzine odgovora i brojevi pojačanja po sesiji ± SEM. Za statističku procenu efekata tokom uzastopnih sesija, prosek poslednje tri sesije pre eksperimentalne manipulacije je korišćen kao kontrolna vrednost kako bi se omogućilo poređenje sa narednim sesijama. Statistička analiza je izvršena korišćenjem jednofaktorske ili dvofaktorske ANOVA sa ponavljanjem (podaci su zadovoljili pretpostavke testa). Post hoc analiza je izvedena bilo Tukey u paru višestrukim poređenjima ili Bonferroni t-testom (višestruka poređenja u odnosu na kontrolnu grupu). Statistički značaj je prihvaćen na nivou p <0,05. Za sve statističke analize korišćen je softver SigmaStat (Systat Software Inc.).
[0160] Reference (metode): Goldberg SR (1973) Uporedivo ponašanje održano u rasporedima sa fiksnim odnosom i rasporedom drugog reda prezentacije hrane, injekcija kokaina ili injekcije damfetamina kod veveričastih majmuna. J Pharmacol Exp Ther 186: 18-30.
[0161] Justinova Z, Tanda G, Redhi GH, Goldberg SR (2003) Samo-administracija delta9-tetrahidrokanabinola (THC) od strane veveričastih majmuna. Psychopharmacology (Berl) 169: 135-140.
[0162] SL. 7, grafikoni A i B pokazuju rezultate koji utvrđuju to jedinjenje 29 umanjuje THC samo-primenu kod veveričastih majmuna kada se primenjuje intramuskularno u dozi od 1, 3 i 10 mg/kg.
[0163] SL. 8, grafikoni A i B pokazuju rezultate koji utvrđuju da jedinjenje 29 nema efekta na samo-primenu hrane kod veveričastih majmuna kada se primenjuje intramuskularno u dozi od 1, 3 i 10 mg/kg.
1
[0164] SL. 9, grafikoni A i B pokazuju rezultate koji utvrđuju da jedinjenje 29 umanjuje THC-indukovano vraćanje u potrazi za drogom kod veveričastih majmuna kada se primenjuje intramuskularno u dozi od 1, 3 i 10 mg/kg.
[0165] Jedinjenje 29 se ne vezuje za kanabinoidne CB1 ili CB2 receptore.
[0166] Rezultati pokazuju da je jedinjenje 29, visoko D3R-selektivni antagonist, efikasno u modelu zloupotrebe THC-a. Jedinjenje 29 u zavisnosti od doze je blokiralo samo-primenu THC-a (4 μg/kg/inf) u opsegu od 1-10 mg/kg, bez uticaja na samo-primenu hrane. Pored toga, jedinjenje 29 u istom opsegu doza, blokiralo je THC-indukovano ponovno uspostavljanje traženja leka kod ovih životinja, što sugeriše da D3R antagonisti Formule (I) mogu biti korisni u lečenju zloupotrebe marihuane.
[0167] Jedinjenje (±)-29 je oslabilo signalno-indukovano ponovno uspostavljanje ponašanja u potrazi za drogom kod veveričastih majmuna.
[0168] Tabele 2 i 3 pružaju dodatne funkcionalne podatke za izabrana jedinjenja Formule (I).
Tabela 2. Funkcionalni podaci za izabrana jedinjenja formule (I) korišćenjem stimulacije ili inhibicije mitogeneze stimulisane kvinpirolom u CHO ćelijama sa humanim dopaminskim D3R<a>
2
Tabela 3. Dodatni in vitro podaci o vezivanju i funkcionalni podaci za izabrana jedinjenja formule (I) na receptorima<a>5HT1A, 5HT2Ai 5HT2C
Primer 6. Studija preferencijalno uslovljenog mesta (CPP) izazvana oksikodonom kod pacova
[0169] Pedeset mužjaka pacova Long-Evans (275-300 g) kupljeno je od Charles River Laboratories (Raleigh, NC) i smešteno u pogon za životinje u NIDA IRP pod reverznim 12-časovnim ciklusom svetlo-tamno (svetlo uključeno u 19:00) sa slobodnim pristupom hrani i vodi. Svi postupci su bili u skladu sa „Načelima nege laboratorijskih životinja“ koje je izneo Nacionalni institut za zdravlje (publikacija NIH 86-23, 1996).
[0170] CPP je testiran u uređaju za kondicioniranje mesta (Med Associates, St Albans, VT) koji se sastoji od dva bočna odeljka (21 x 28 cm<2>) i centralnog sivog područja za povezivanje (21 x 12,5 cm<2>); klizna vrata odvajala su svaki odeljak od područja spajanja. Dva bočna odeljka razlikovala su se u boji zida (crna u odnosu na belu), tipu poda (rešetka u odnosu na mrežu) i osvetljenosti. Životinje su zatim nasumično podeljene u pet grupa za lečenje, kao što je prikazano na SL. 10 legende. Svaki pacov je prvo izložen u CPP aparatu tokom 15 minuta (predkondicioniranje), a zatim je praćeno oksikodonskim CPP kondicioniranjem. Životinje su pokazale značajne predrasude u jednom odeljku (definisano vremenskom razlikom između dva odeljka > 200 s) tokom predkondicioniranja su isključene iz studije. Postupci oksikodonske CPP sastojali su se od 2 dana kondicioniranja oksikodonom (3 mg/kg, ip) u jednom odeljku i 2 dana kondicioniranja fiziološkim rastvorom u drugom odeljku, alternativno (npr. oksikodon-fiziološki rastvor-oksikodon-fiziološki rastvor). Odeljci upareni sa oksikodonom ili fiziološkim rastvorom su bili kontra-uravnoteženi. U danima kondicioniranja, svaka životinja je primila fiziološki rastvor ili jedinjenje 29 (5, 15 mg/kg, ip) predtretman 15 minuta pre injekcije oksikodona. Nakon injekcije oksikodona, životinje su odmah zatvorene u dodeljene odeljke u trajanju od 40 minuta. Da bi se pojačalo obrazovanje oksikodona CPP, životinje su dobijale 4 dana tretmana oksikodonom (3 mg/kg ip, dva puta dnevno u 8:00 i 18:00) u kućnim kavezima. U grupi (29 nosač) fiziološki rastvor je uparen sa jednim odeljkom, a jedinjenje 29 (15 mg/kg) je upareno sa drugim odeljkom. U grupi (nosač nosač) fiziološki rastvor je uparen sa svakim odeljkom. Zatim 24 sata nakon poslednje injekcije fiziološkog rastvora ili oksikodona, životinje su smeštene u isti trokomorski CPP aparat tokom 15 minuta i evidentirano je vreme provedeno u svakom odeljku. CPP rezultat je izračunat prema vremenskoj razlici (sekundama) koju je životinja provela u odeljku uparenom sa drogom naspram odeljka uparenog fiziološkim rastvorom.
[0171] SL.10 prikazuje efekte jedinjenja 29 na CPP izazvan oksikodonom. Četiri dana oksikodona (npr. nosač oksikodonska grupa) (3 mg/kg, ip) u odnosu na kondicioniranje fiziološkim rastvorom je proizvelo značajan CPP u poređenju sa (nosač fiziološki rastvor) kontrolnom grupom pacova. Predtretman sa jedinjenjem 29 (5, 15 mg/kg, ip, 15 minuta pre svake injekcije oksikodona) u zavisnosti od doze umanjuje CPP izazvan oksikodonom (SL 10). Jednofaktorska ANOVA je otkrila statistički značajan glavni efekat lečenja (F4,45= 4,29, p < 0,01). Post-hoc poređenja pojedinačnih grupa ukazala su na značajno smanjenje CPP-a izazvanog oksikodonom nakon 15 mg/kg jedinjenja 29 (p < 0,05) u poređenju sa grupom (nosač oksikodon). Samo jedinjenje 29, pri 15 mg/kg, nije proizvelo CPP, što sugeriše nedostatak nagrade samo po sebi. Na SL. 10, ** p < 0,01, u poređenju sa grupom (nosač nosač); ## p <0,01, u poređenju sa grupom (nosač oksikodon); broj na svakoj traci pokazuje broj životinja u svakoj eksperimentalnoj grupi.
Primer 7. Studije lokomotorne aktivnosti na miševima
4
[0172] Kao i drugi opioidni agonisti poput morfina ili heroina, akutna (ili pojedinačna doza) primena oksikodona proizvodi značajno povećanje lokomotorne aktivnosti kod miševa. Štaviše, ponovljena primena ovih opioidnih agonista proizvodi progresivno povećanje sposobnosti kretanja tokom vremena, tj. lokomotornu senzibilizaciju. Ova studija bila je usmerena na (1) utvrđivanje da li samo jedinjenje 29 ima bilo kakav efekat na bazalnu lokomotornu aktivnost, (2) da li će umanjiti lokomotornu aktivnost stimulisanu oksikodonom i senzibilizaciju i (3) da li je ovaj efekat dugotrajan. Dvadeset i četiri mužjaka miša (22-25 g) sa genetskim poreklom C57BL/6J kupljena su od Charles River Laboratories (Raleigh, NC). Po dolasku, bili su grupisani u objekat za životinje pod obrnutim 12-časovnim ciklusom svetlo-tamno (svetlo upaljeno u 19:00 h) sa slobodnim pristupom hrani i vodi i dozvoljeno im je da se aklimatizuju u novom okruženju 7 dana pre početka eksperimenta. Svi postupci su bili u skladu sa „Principima laboratorijske nege životinja“ koje je izneo Nacionalni institut za zdravlje (publikacija NIH 86-23, 1996).
[0173] Testovi lokomotorne aktivnosti su sprovedeni u komorama sa otvorenim poljem (43 X 43 X 30 cm<3>) (Accuscan Instruments, Inc., Columbus, OH, USA). Pre testiranja, miševi su naviknuti na lokomotornu komoru (2 h/dan tokom 3 uzastopna dana), a zatim su nasumično podeljeni u tri dozne grupe (nosač, 5, 15 mg/kg jedinjenja 29). U danima navikavanja životinje su premeštene u prostoriju za testiranje, tamo su aklimatizovane tokom 10 minuta, a zatim smeštene u dodeljene im lokomotorne komore.1. dana ispitivanja, svaka grupa miševa je prethodno tretirana ili nosačem (25% 2-hidroksipropil-β-ciklodekstrina) ili jednom dozom jedinjenja 29 (5, 15 mg/kg, ip) bez injekcije oksikodona. Zatim 15 minuta kasnije, životinje su smeštene u test komore. Njihove lokomotorne aktivnosti su beležene na svakih 20 minuta tokom 2 sata pomoću softvera VersaMax verzije 3.0 (Accuscan Instruments, Inc.). U danima ispitivanja 2-6, tri grupe miševa su prvo dobile nosač ili jednu dozu jedinjenja 29, praćeno injekcijom oksikodona 15 minuta nakon prethodnog tretmana jedinjenjem 29. Posle 72 sata povlačenja u kućnim kavezima u objektu za životinje, svaka životinja je ponovo izazvana injekcijom oksikodona od 4 mg/kg (dan 9), ali bez prethodnog tretmana jedinjenjem 29. Lokomotorne aktivnosti beležene su 2 h/dan nakon svake injekcije oksikodona. Podaci o lokomotornom ponašanju su izraženi kao srednje vrednosti (± SEM). Pređena razdaljina (cm) unutar 2 sata (SL. 11, grafikon A) ili svakih 20 minuta (SL. 11B-D) je korišćena za procenu lokomotornih efekata 29 i/ili oksikodona kod miševa. Dvofaktorska ANOVA sa ponovljenim merenjima tokom vremena je korišćena za procenu statističke značajnosti promena u lokomotornoj aktivnosti nakon primene jedinjenja 29 i/ili oksikodona. Posthoc Fišerova najmanje značajna razlika je korišćena za višestruka poređenja, p <0,05 se smatra statistički značajnim.
[0174] SL. 11 grafikona A-D ilustruje efekte jedinjenja 29 (0, 5, 15 mg/kg, ip) na bazalna i oksikodon-indukovana povećanja lokomotorne aktivnosti kod miševa. SL.11 grafikon A prikazuje efekte oksikodona na lokomociju tokom vremena (od 2. do 9. dana) u prisustvu ili odsustvu tretmana jedinjenjem 29. Prvog dana, primenjeno je samo jedinjenje 29 (5, 15 mg/kg, 15 minuta pre fiziološkog rastvora) i nije imalo efekta na kretanje. Od 2. do 6. dana, svaka životinja je primila jednu dnevnu dozu od 29 (nosač, 5, 15 mg/kg, 15 minuta pre oksikodona) i oksikodon (4 mg/kg). U grupi za tretiranje nosačem, ponovljena dnevna primena oksikodona proizvela je progresivno povećanje lokomocije (tj. senzibilizaciju lokomotornog sistema) (#p <0,05, ## p <0,01, u poređenju sa nivoom lokomotorne aktivnosti 2. dana). Ova senzibilizacija lokomotorne funkcije je zavisno od doze blokirana sa 29 (* p <0,05, ** p <0,01, u poređenju sa kontrolnom grupom nosača u svakoj označenoj tačci). Nakon 5 dana koadmininacije (nosač / 29 oksikodon), životinje su podvrgnute 2 dana povlačenja, nakon čega je usledio izazov injektovanjem 4 mg/kg oksikodona (bez 29 prethodnog tretmana) 9. dana, što ukazuje da je i dalje prisutna lokomotorna senzibilizacija izazvana oksikodonom. u kontrolnoj grupi nosača, koja je bila blokirana u grupama sa prethodnim tretmanom 29. SL. grafikon B prikazuje vremenski tok promena u kretanju indukovanih 29 (1. dan), što ukazuje da ono samo po sebi nema uticaja na lokomotornu aktivnost. SL. 11 grafikon C prikazuje vremenski tok promena u kretanju izazvanih oksikodonom nakon prve injekcije oksikodona (akutni efekat 2. dana), što ukazuje na to da je predtretman 29 zavisno od doze inhibirao hiperaktivnost izazvanu oksikodonom (akutni efekat). SL. 11 grafikon D prikazuje vremenski tok promena u kretanju izazvanih osnovnim oksikodonom kod miševa nakon 2 dana povlačenja iz poslednje koadministracije (nosač / 29 oksikodon) (dan 9), što ukazuje na to da je ponovljeni prethodni tretman 29 od 2. dana do 6. dana proizveo dugotrajna inhibiciju povećanja lokomocije izazvane oksikodonom. N = 8 miševa u svakoj grupi.
[0175] Rezultati ove evaluacije su prikazani na SL.11, grafikoni A-D. SL 11 grafikon A prikazuje ukupne lokomotorne efekte ponovljene svakodnevne primene oksikodona (4 mg/kg, ip) u prisustvu nosača (25% β-ciklodekstrina) ili jedne doze jedinjenja 29 (5, 15 mg/kg, ip) primenjene 15 minuta pre injekcije oksikodona). Samo jedinjenje 29 nije imalo efekta na bazalnu lokomotornu aktivnost kod miševa kada je testirano prvog dana (SL. 11, grafikoni A, B). Suprotno tome, oksikodon je prouzrokovao značajno povećanje lokomotorne aktivnosti (SL. 11, grafikoni A, C). Ponovljena primena oksikodona je proizvela progresivno povećanje kretanja (senzibilizacija) tokom vremena (od 2. do 6. dana u grupi prethodnim tretmanom nosačem). Zanimljivo je da je prethodni tretman sa jedinjenjem 29 ne samo umanjio akutnu hiperaktivnost izazvanu oksikodonom (SL. 11, grafikon A, 2. dan), već je takođe blokirao sticanje ponovljene oksikodonindukovane lokomotorne senzibilizacije (SL. 11, grafikon A, dan 2-dan 6) i ekspresija oksikodonske primarno indukovane lokomotorne senzibilizacije nakon 2 dana povlačenja (slika 11, grafikon A, dan 9). Dvofaktorska ANOVA za ponovljena merenja tokom vremena (SL. 11, grafikon A) je otkrila statistički značajan glavni efekat lečenja lekom (F2,21= 12,24, p <0,001), glavni efekat vremena (F6,49= 9,14, p < 0,001) , i interakciju tretman x vreme lečenja (F12, 98= 31,51, p < 0,001). SL. 11 grafikona B-D prikazuju vremenske tokove promene lokomotorne aktivnosti izazvane oksikodonom kada je ispitivana 1. dana (SL 11, grafikon B: F2,21= 0,12, p = 0,88), 2. dana (SL.11 grafikon C: F2,21= 5,22, p < 0,05) i 9. dana (SL.11, grafikon D: F2,21= 5,95, p < 0,01), što ukazuje da je predtretman jedinjenjem 29 značajno umanjio porast kretanja izazvan oksikodonom svakog ispitivanog dana.
Primer 8. Metode za farmakokinetičku studiju novih antagonista dopaminskih D3 receptora kod pacova
[0176] U ovoj studiji korišćeni su mužjaci Long-Evans pacova telesne težine ~250 grama (Charles River Laboratories, Raleigh, NC, USA). Svi pacovi su bili smešteni pojedinačno u klimatski kontrolisanoj sobi pod 12 h ciklusom svetlo/mrak. Hrana i voda su bile dostupne ad libitum tokom eksperimenata. Svi eksperimentalni postupci sprovedeni su u skladu sa Vodičem za negu i upotrebu laboratorijskih životinja, odobrenim od strane Odbora za negu i upotrebu životinja Nacionalnog instituta za zloupotrebu droga američkog Nacionalnog instituta za zdravlje.
[0177] Eksperimentalni postupci (oralna gavaža): Životinje su bile nežno obuzdane (uhvatiti životinju za opuštenu kožu vrata i leđa) da se imobiliše glava, ali ne tako da životinje vokaliziraju ili pokazuju druge znakove nevolje. Održavati životinju u uspravnom (vertikalnom) položaju i prolaskom igle cevčice (kalibra 19) uz bok usta. Prateći krov usta, isturiti iglu u jednjak i prema stomaku. Nakon što je igla prosleđena na tačnu dužinu, jedinjenje je ubrizgano. Zatim su životinje duboko anestezirane sa 100 mg/kg pentobarbitala (ip), a zatim je srčanom punkcijom dobijena krv (~ 1 ml) i izvršeno sekciranje mozga u različitim vremenskim tačkama (15 min, 30 min, 60 min, 2 h, 4 h i 8 h, n = 3 pacova po vremenskoj tački) nakon oralne primene leka. Tri dodatna pacova su primila nosač (25% beta-hidroksi-ciklodekstrina) kao kontrolu vremenske tačke „0 min“ (tj. osnovno stanje pre injekcije leka, u kome nivoi leka u uzorcima treba da budu nula).
[0178] Metoda analize uzoraka; Priprema standardnog i internog standarda (IS) osnovnog rastvora: Ispitivana jedinjenja (R- i S-29 i R- i S-19) su rastvorena u odgovarajućoj količini DMSO da bi se dobio matični rastvor od 10 mM. Ovi rastvori su čuvani na -20 ° C. Losartan (IS) je rastvoren u DMSO pri koncentraciji od 10 mM koja je dalje razblažena u acetonitrilu da bi se dobila konačna koncentracija od 500 nM i rastvori su čuvani na -20 ° C.
[0179] Priprema uzorka za standardnu krivu i kontrolu kvaliteta (QC): Uzorci plazme sa standardnom krivom pripremljeni su koristeći naivnu plazmu pacova, serijskim razblaživanjem osnovnog rastvora, sa 8 standarda i 4 QC, u rasponu od 10-50,000 pmol/mL.
[0180] Standardne krive moždanih uzoraka pripremljene su korišćenjem naivnog mozga pacova. Tkivo je homogenizovano u acetonitrilu (faktor razblaživanja; DF = 3), usitnjeno i centrifugirano na 10.000 obrtaja u minuti tokom 10 minuta. Dobijeni supernatant je korišćen kao standardna matrica krivih. Standardna kriva je naknadno pripremljena serijskim razblaživanjem matičnog rastvora, sa 7 standarda i 4 QC, u rasponu od 30-50000 pmol/mL.
[0181] Postupak ekstrakcije: Ispitivana jedinjenja su ekstrahovana iz uzoraka plazme precipitacijom proteina primenom acetonitrila. Jedinjenja su ekstrahovana iz uzoraka mozga stavljanjem izmerenog tkiva u 2 puta m/v acetonitrila (DF = 3), usitnjenog, centrifugiranog na 10.000 obrtaja u minuti tokom 10 minuta, a dobijeni supernatant je korišćen kao rastvor uzorka. Ukratko, standardi, QC i uzorci (25 μL) pomešani su sa 100 μL acetonitrila koji sadrži 0,5 μΜ Losartana (interni standard; IS) u epruvetama za mikrocentrifugiranje sa niskim zadržavanjem. Smeša je izmešana na vorteksu 1 min i centrifugirana na 10.000 o/min tokom 10 min na 5 ° C. 50 μL supernatanta je prebačeno u bočice od 250 μL polipropilenskog autotestera i pomešano sa 50 μL vode i zatvoreno teflonskim poklopcem. Zapremina od 3 μL je injektovana u instrument za ultra efikasnu tečnu hromatografiju (UPLC) za kvantitativnu analizu pomoću autotestera sa kontrolisanom temperaturom koji radi na 10 ° C.
[0182] Hromatografski i maseno spektrometrijski uslovi:
Uslovi LC
UHPLC sistem: Accela pumpa 1250 i Accela autotester AS sa otvorenim krakom Kolona: Eclipse Plus C18 RRHD 1,8um, 2,1 x 100 mm
Brzina protoka: 0,4 mL/min
Mobilna faza A: 0,1% FA u ACN, faza B: 0,1% FA u vodi.
LC gradijentni uslov
[0184]
MS Uslov
[0185]
[0186] Masenim spektrometrom se radilo sa ESI interfejsom u režimu pozitivne jonizacije za sva jedinjenja koja su testirana i kontrolisana softverom Xcalibur 2.3 (Thermo Scientific). Uzorci su uvedeni u međupovršinu putem Turbo jonskog spreja sa podešenom kapilarnom temperaturom na 350 ° C. Azot je korišćen kao omotač i pomoćni gas, a argon kao sudarni gas sa podešavanjima od 40, 5, odnosno 1,4. Kvantifikacija je izvršena u režimu praćenja sa više reakcija (MRM).
[0187] Hromatografska analiza je izvršena korišćenjem sistema Accela™ ultra visokih performansi koji se sastoji od analitičke pumpe i autotestera spojenog sa TSQ Vantage masenim spektrometrom (Thermo Fisher Scientific Inc., Waltham MA). Odvajanje analita od potencijalno interferirajućeg materijala je postignuto na sobnoj temperaturi korišćenjem kolone Agilent Eclipse Plus (100 x 2,1 mm i.d.) pakovane sa stacionarnom fazom C18 od 1,8 μm. Korišćena mobilna faza se sastojala od 0,1% mravlje kiseline (FA) u acetonitrilu (ACN) i 0,1% mravlje kiseline u H2O sa gradijentnom elucijom, polazeći sa 10% organske linearno povećavajući na 99% za 2 min, održavajući pri 99% (2 -2,5min), ponovno uravnotežavanje na 10% za 2,7 min i održavanje 10% organske do kraja proticanja. Ukupno vreme proticanja svakog analita je bilo 5,00 min.
[0188] Kalibracione krive za sva ispitivana jedinjenja su izračunate korišćenjem odnosa površine pika analita prema internom standarda, korišćenjem kvadratne regresije sa 1/x težinom. Parametri svake kalibracione krive su korišćeni za ponovno izračunavanje koncentracija i dobijanje vrednosti za QC uzorke i nepoznate uzorke interpolacijom.
[0189] SL. 12A otkriva farmakokinetičke rezultate kod pacova za svaki enantiomer jedinjenja 29 oralno primenjen u dozi od 10 mg/kg. Oba enantiomera su oralno dostupna i prodiru u mozak. R-29 u istoj dozi je pokazao dvostruko veću izloženost i u mozgu i u plazmi, ali je odnos u mozgu i plazmi bio sličan za oba enantiomera.
[0190] SL.12B pokazuje da je svaki enantiomer jedinjenja 19 oralno primenjen u dozi od 10 mg/ kg oralno dostupan i visoko penetrabilan u mozak sa R-19 pokazujući bolji odnos mozak/plazma (11 naspram 6) u poređenju sa S enantiomerom.
Primer 9. Proučavanje uticaja jedinjenja (+)-29 na termički odgovor pacova
[0191] Metode: Jedinjenje (±)-29 je primenjeno 15 minuta pre izazivanja fiziološkim rastvorom ili oksikodonom. Ispitivanja su izvedena nakon što je pacov stavljen u prozirni kružni kavez na zagrejanu ploču (52 ± 0,2 ° C). Lizanje zadnje šape ili skakanje smatrano je znakom termalne nocicepcije. Pacov je zatim odmah uklonjen sa ringle i zabeleženo je vreme kašnjenja. SL. 13 ilustruje da prethodni tretman jedinjenjem (±)-29 nije pokazao značajne efekte na termički odgovor životinje testiran 30 minuta nakon izazivanja fiziološkim rastvorom (1 ml/kg, i.p.) ili oksikodonom (2 mg/kg, i.p.). Stoga je pronađeno da jedinjenje blokira pojačavajuće efekte oksikodona koji mogu dovesti do zavisnosti, a neće sprečiti analgeziju koju proizvodi lek.
[0192] Izrazi "jedan" i "izvestan" ne označavaju ograničenje količine, već označavaju prisustvo najmanje jedne od navedenih stavki. Izraz "ili" znači "i / ili". Upućivanje kroz specifikaciju na „jednu realizaciju“, „drugu realizaciju“, „izvesnu realizaciju“ i tako dalje, znači da je određeni element (npr. svojstvo, struktura i/ili karakteristika) opisan u vezi sa realizacijom uključen u najmanje jednu ovde opisanu realizaciju, a može i ne mora biti prisutan u drugim realizacijama. Pored toga, treba razumeti da se opisani elementi mogu kombinovati na bilo koji pogodan način u različitim realizacijama. Modifikator „oko“ koji se koristi u vezi sa količinom uključuje navedenu vrednost i ima značenje koje diktira kontekst (npr. uključuje stepen greške povezan sa merenjem određene količine).
[0193] Završne tačke svih opsega usmerenih na istu komponentu ili svojstvo uključuju krajnje tačke, mogu se nezavisno kombinovati i uključuju sve međutačke i opsege (npr. opsezi od „do oko 25 mas.% ili, specifičnije, oko 5 mas.% do oko 20 mas.%, "uključuje krajnje tačke i sve intermedijerne vrednosti opsega od" oko 5 mas.% do oko 25 mas.%, "kao što je oko 10 mas.% do oko 23 mas.%, itd.).
[0194] Sve metode, ovde opisane, mogu se izvoditi u pogodnom redosledu, ukoliko ovde nije drugačije naznačeno ili na drugi način ukoliko je kontekstom jasno protivrečno. Upotreba bilo kog i svih primera, ili primernog jezika (npr. „kao što je„), namenjena je samo boljoj ilustraciji pronalaska i ne predstavlja ograničenje obima pronalaska, osim ukoliko je drugačije zahtevano. Nijedan jezik u specifikaciji ne bi trebalo tumačiti tako da ukazuje na bilo koji element koji nije zaštićen kao suštinski važan za praksu pronalaska kako se ovde koristi. Ukoliko nije drugačije definisano, tehnički i naučni izrazi koji se ovde koriste imaju isto značenje kao što je uobičajeno razumljivo stručnjaku u tehnici kojoj ovaj pronalazak pripada.
[0195] Iako je pronalazak opisan sa referencom na primernu realizaciju, stručnjaci će razumeti da se mogu izvršiti razne promene i da se njihovi elementi mogu zameniti ekvivalentima, a da se ne odstupa od obima pronalaska. Pored toga, mogu se izvršiti mnoge modifikacije kako bi se određena situacija ili materijal prilagodili učenjima pronalaska bez odstupanja od njegovog
1
suštinskog obima. Stoga, namera je da pronalazak ne bude ograničen na određenu realizaciju koja je otkrivena kao najbolji način predviđen za izvođenje ovog pronalaska, već da će pronalazak obuhvatiti sve realizacije koje spadaju u obim priključenih zahteva.
2

Claims (15)

  1. PATENTNI ZAHTEVI 1. Jedinjenje formule (I), njegov stereoizomer, njegov radioizotop, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so
    pri čemu Ar je heteroaril koji može biti opciono supstituisan sa 1, 2 ili 3 supstituenta, gde je svaki supstituent nezavisno C1-C6alkil, C1-C6haloalkil, C1-C6alkoksi, C1-C6haloalkoksi, -OH, -COOH, amino, nitro, C2-C3alkanoil grupa, mono- ili di- C1-C3alkilamino ili halogen; n je 1 ili 2; m je 1 ili 2; R<1>je H ili halogen; R<2>je H, C1-C3alkoksi ili halogen; R<3>je H, halogen ili C1-C3alkoksi; R<4>je H, -OH ili halogen; R<5>je H, -OH ili halogen; i je jednostruka veza ili dvostruka veza, pod uslovima a) i b) a) kada je R<1>H, onda bar jedan od R<2>i R<3>nije H; i b) kada su jedan ili oba R<2>i R<3>H, onda R<1>nije H.
  2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, da: (a) R<1>je H; R<2>je -OMe; i R<3>je Cl ili (b) R<1>je Cl; R<2>je H; i R<3>je H.
  3. 3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, da R<1>je H; R<2>je -OMe; R<3>je Cl; i Ar je benzofuranil, benzotienil, imidazolil, imidazo [1,2-a] piridinil, imidazo [2,1-b] tiazolil ili indolil, gde je Ar dalje opciono supstituisan sa 1, 2 ili 3 supstituenta, gde je svaki supstituent nezavisno C1-C6 alkil, C1-C6 haloalkil, C1-C6 alkoksi, C1-C6 haloalkoksi, -OH, -COOH, amino, nitro, C2-C3alkanoil grupa ili halogen.
  4. 4. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, da R<1>je Cl; R<2>je H; R<3>je H; i Ar je benzofuranil, benzotienil, imidazolil, imidazo [1,2-a] piridinil, imidazo [2,1-b] tiazolil ili indolil, gde je Ar dalje opciono supstituisan sa 1, 2 ili 3 supstituenta, gde je svaki supstituent nezavisno C1-C6alkil, C1-C6haloalkil, C1-C6alkoksi, C1-C6haloalkoksi, -OH, -COOH, amino, nitro, C2-C3alkanoil grupa ili halogen.
  5. 5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, da R<1>je H; R<2>je -OMe; R<3>je Cl; Ar je benzofuranil, 4-etil-1H-imidazolil, 4-metil-1H-imidazolil, imidazo [1,2-a] piridinil, 6-metilimidazo [2,1-b] tiazolil ili indolil; m je 1; i n je 1.
  6. 6. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, da R<1>je Cl; R<2>je H; R<3>je H; Ar je benzofuranil, 4-etil-1H-imidazolil, 4-metil-1H-imidazolil, imidazo [1,2-a] piridinil, 6-metilimidazo [2,1-b] tiazolil ili indolil; m je 1; i n je 1.
  7. 7. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, da R<1>je H; R<2>je -OMe; R<3>je Cl; Ar je benzofuranil, 4-etil-1H-imidazolil, 4-metil-1H-imidazolil, imidazo [1,2-a] piridinil, 6-metilimidazo [2,1-b] tiazolil ili indolil; i jedan od R<4>i R<5>je H, a drugi je -OH ili -F.
  8. 8. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, da R<1>je Cl; R<2>je H; R<3>je H; Ar je benzofuranil, 4-etil-1H-imidazolil, 4-metil-1H-imidazolil, imidazo [1,2-a] piridinil, 6-metilimidazo [2,1-b] tiazolil ili indolil; i jedan od R<4>i R<5>je H, a drugi je -OH ili -F. 4
  9. 9. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, da R<1>je H; R<2>je -OMe; R<3>je Cl; Ar je benzofuranil ili indolil; n je 1 ili 2; m je 1 ili 2; R<4>je H, -OH ili halogen; R<5>je H, -OH ili halogen; i je jednostruka veza ili dvostruka veza.
  10. 10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, da R<1>je Cl; R<2>je H; R<3>je H; Ar je benzofuranil ili indolil; n je 1 ili 2; m je 1 ili 2; R<4>je H, -OH ili halogen; R<5>je H, OH ili halogen; i je jednostruka veza ili dvostruka veza.
  11. 11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, da je jedinjenje N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) butil)-1H-indol-2-karboksamid (18); N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)-1H-indol-2-karboksamid (19); N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) butil) benzofuran-2-karboksamid (20); N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)benzofuran-2-karboksamid (21); N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil)piperazin-1-il) butil) imidazo [1,2-a] piridin-2-karboksamid (22); N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)imidazo[1,2-a]piridin-2-karboksamid (23); N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)butil)-6-metilimidazo[2,1-b]tiazol-5-karboksamid (24); N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) butil)-4-etil-1H-imidazol-2-karboksamid (25); N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) butil)-4-metil-1H-imidazol-2-karboksamid (26) N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)-4-metil-1H-imidazol-2-karboksamid (27); N-(4-(4-(3-Hloro-5-etil-2-metoksifenil) piperazin-1-il) butil)-lH-indol-2-karboksamid (28); N-(4-(4-(3-Hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)-1H-indol-2-karboksamid (29); N-(4-(4-(3-Hloro-5-etil-2-metoksifenil) piperazin-1-il) butil) benzofuran-2-karboksamid (30); N-(4-(4-(3-Hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)benzofuran-2karboksamid (31); (E)-N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil)piperazin-1-il)but-2-en-l-il)-4-metil-1H-imidazol-2-karboksamid (35); N-(4-(4-(2-Hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-2-hidroksibutil)-1H-indol-2-karboksamid (40); N-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-karboksamid (C4a); N-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)benzofuran-2-karboksamid (C4b); N-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-karboksamid (C5a); N-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-fluorobutil) benzofuran-2-karboksamid (C5b); njegov stereoizomer; njegov radioizotop; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  12. 12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time, da je jedinjenje N-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)-1H-indol-2-karboksamid; (R)-N-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)-1H-indol-2-karboksamid; (S)-N-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)-1H-indol-2-karboksamid; N-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)-1H-indol-2-karboksamid; (R)-N-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)-1H-indol-2-karboksamid; (S)-N-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-hidroksibutil)-1H-indol-2-karboksamid; N-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-karboksamid; (R)-N-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-karboksamid; (S)-N-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2karboksamid; N-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)benzofuran-2-karboksamid; (R)-N-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)benzofuran-2-karboksamid; (S)-N-(4-(4-(3-hloro-5-etil-2-metoksifenil)piperazin-1-il)-3-fluorobutil)benzofuran-2-karboksamid; N-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il) -3-fluorobutil)-1H-indol-2-karboksamid; (R)-N-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-karboksamid; (S)-N-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-fluorobutil)-1H-indol-2-karboksamid; N-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-fluorobutil) benzofuran-2-karboksamid; (R)-N-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-fluorobutil) benzofuran-2-karboksamid; (S)-N-(4-(4-(2-hloro-3-etilfenil) piperazin-1-il)-3-fluorobutil) benzofuran-2-karboksamid; njegov radioizotop; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  13. 13. Jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, koje sadrži tricijum, deuterijum, <11>C,<13>C,<14>C,<18>F ili njihovu kombinaciju.
  14. 14. Farmaceutski preparat koji sadrži jedinjenje prema bilo kom od prethodnih patentnih zahteva, dalje sadrži najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač.
  15. 15. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1-13, ili farmaceutski preparat prema patentnom zahtevu 14, za upotrebu u postupku za lečenje poremećaja zavisnosti, šizofrenije i srodnog mentalnog poremećaja, kognitivnog poremećaja, impulsivnosti, gojaznosti, depresije, bipolarnog poremećaja ili diskinezije povezane sa Parkinsonovom bolešću (PD) ili lečenje PD sa L-DOPA.
RS20210938A 2016-03-14 2017-03-08 Selektivni antagonisti/parcijalni agonisti dopaminskih d3 receptora; postupci izrade i njihova upotreba RS62156B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201662307600P 2016-03-14 2016-03-14
EP17711971.6A EP3429993B1 (en) 2016-03-14 2017-03-08 Dopamine d3 receptor selective antagonists/partial agonists; method of making; and use thereof
PCT/US2017/021328 WO2017160552A1 (en) 2016-03-14 2017-03-08 Dopamine d3 receptor selective antagonists/partial agonists; method of making; and use thereof

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS62156B1 true RS62156B1 (sr) 2021-08-31

Family

ID=58358971

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20210938A RS62156B1 (sr) 2016-03-14 2017-03-08 Selektivni antagonisti/parcijalni agonisti dopaminskih d3 receptora; postupci izrade i njihova upotreba

Country Status (13)

Country Link
US (1) US12162861B2 (sr)
EP (2) EP3848351B1 (sr)
AU (1) AU2017233716B2 (sr)
CA (1) CA3017342A1 (sr)
DK (1) DK3429993T3 (sr)
ES (1) ES2881267T3 (sr)
HR (1) HRP20211182T1 (sr)
HU (1) HUE055634T2 (sr)
PL (1) PL3429993T3 (sr)
PT (1) PT3429993T (sr)
RS (1) RS62156B1 (sr)
SI (1) SI3429993T1 (sr)
WO (1) WO2017160552A1 (sr)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2020055725A1 (en) 2018-09-11 2020-03-19 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Dopamine d3 receptor selective antagonists/partial agonists and uses thereof
US20240336604A1 (en) * 2021-08-03 2024-10-10 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Dept. Of Health And Human Services D3 dopamine receptor-selective negative allosteric modulators
CN114409621B (zh) * 2022-02-09 2023-09-08 江苏省原子医学研究所 一种靶向多巴胺d3受体的诊疗药物及其应用
JP2025510800A (ja) * 2022-03-30 2025-04-15 ザ ユナイテッド ステイツ オブ アメリカ， アズ リプレゼンテッド バイ ザ セクレタリー， デパートメント オブ ヘルス アンド ヒューマン サービシーズ ドーパミンｄ３受容体選択性拮抗薬／部分作動薬の合成
WO2025006982A1 (en) * 2023-06-30 2025-01-02 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Potent and selective dopamine d3 receptor antagonists

Family Cites Families (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5710274A (en) 1996-02-28 1998-01-20 Neurogen Corporation N-aminoalkyldibenzofurancarboxamides; new dopamine receptor subtype specific ligands
US5763609A (en) 1996-03-21 1998-06-09 Neurogen Corporation Certain pyrrolo pyridine-3-carboxamides; a new class of gaba brain receptor ligands
US5892041A (en) 1996-08-12 1999-04-06 Neurogen Corporation Fused indolecarboxamides: dopamine receptor subtype specific ligands
HUP0103987A3 (en) * 2001-09-28 2004-11-29 Richter Gedeon Vegyeszet Phenylpiperazinylalkyl carboxylic acid amid derivatives, process for their preparation, pharmaceutical compositions containing them and their intermediates
WO2004004729A1 (de) 2002-07-04 2004-01-15 Schwarz Pharma Ag Heteroarencarboxamide zur verwendung als dopamin-d3 liganden zur behandlung von zns-erkrankungen
AU2003267201B2 (en) 2002-09-14 2009-04-23 The Gov't Of The U.S.A. As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services Structurally rigid dopamine D3 receptor selective ligands and process for making them
DE502005003491D1 (de) 2004-08-02 2008-05-08 Sanol Arznei Schwarz Gmbh Carboxamide des indolizins und seiner aza- und diazaderivate
DE102004054634A1 (de) 2004-11-12 2006-05-18 Schwarz Pharma Ag Azaindolcarboxamide
NZ555491A (en) 2005-01-03 2010-01-29 Univ Siena Aryl piperazine derivatives for the treatment of neuropsychiatric disorders
FR2903986A1 (fr) 2006-07-21 2008-01-25 Pierre Fabre Medicament Sa Nouveaux derives chromenes ou thiochromenes carboxamides, leur procede de preparation et leurs applications en therapeutique
WO2008153573A1 (en) 2007-06-15 2008-12-18 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary Of The Department Of Health And Human Services 4-phenylpiperazine derivatives with functionalized linkers as dopamine d3 receptor selective ligands and methods of use
DK2906221T3 (da) * 2012-10-11 2019-07-22 Southern Res Inst Urinstof og amidderivater af aminoalkylpiperaziner og anvendelse deraf
WO2020055725A1 (en) 2018-09-11 2020-03-19 The United States Of America, As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services Dopamine d3 receptor selective antagonists/partial agonists and uses thereof

Also Published As

Publication number Publication date
ES2881267T3 (es) 2021-11-29
HRP20211182T1 (hr) 2021-10-15
US20220185798A1 (en) 2022-06-16
EP3848351A1 (en) 2021-07-14
EP3429993B1 (en) 2021-05-26
US12162861B2 (en) 2024-12-10
EP3848351B1 (en) 2025-01-15
WO2017160552A1 (en) 2017-09-21
HUE055634T2 (hu) 2021-12-28
AU2017233716B2 (en) 2020-10-29
SI3429993T1 (sl) 2021-09-30
DK3429993T3 (da) 2021-08-09
CA3017342A1 (en) 2017-09-21
PT3429993T (pt) 2021-07-19
AU2017233716A1 (en) 2018-10-04
EP3429993A1 (en) 2019-01-23
PL3429993T3 (pl) 2021-11-15

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US12162861B2 (en) Dopamine D3 receptor selective antagonists/partial agonists; method of making; and use thereof
US11633390B2 (en) 5-HT2A agonists for use in treatment of depression
AU2019340675B2 (en) Dopamine D3 receptor selective antagonists/partial agonists and uses thereof
US20180354957A1 (en) Substituted 4-phenylpiperidines, their preparation and use
WO2018188641A1 (zh) 一种mor激动剂与kor激动剂的药物组合物及其用途
US11352316B2 (en) Opioid receptor modulators and products and methods related thereto
TW202527937A (zh) 多環化合物及其用途
WO2019109937A1 (zh) Kor激动剂与mor激动剂联合在制备治疗疼痛的药物中的用途
CN107922340B (zh) 1,2,3,4-四氢异喹啉衍生物、其制备方法和应用
WO2014138518A2 (en) Potent and selective inhibitors of monoamine transporters; method of making; and use thereof
US11299476B2 (en) Dopamine D3 receptor selective antagonists/partial agonists; method of making; and use thereof
CA3215916A1 (en) 2-((4-((s)-2-(4-chloro-2-fluorophenyl)-2-methylbenzo[d][1,3]dioxol-4-yl)piperidin-1-yl)methyl)-1-(((s)-oxetan-2-yl)methyl)-1h-imidazole derivatives as activators of the glp1 receptor for the treatment of obesity
WO2024186915A1 (en) Dual-target mu opioid and dopamine d3 receptors ligands preparation and use thereof
AU2016346558A1 (en) Morphinan derivative and medical usage thereof