RS62596B1 - Derivati spojenih pentacikličnih imidazola kao modulatori aktivnosti tnf - Google Patents

Description

Opis

[0001] Predmetni pronalazak se odnosi na izolovanu klasu derivata spojenih pentacikličnih imidazola, i na njihovu upotrebu u terapiji. Određenije, ovaj prolazak se odnosi na farmakološki aktivne supstituisane derivate spojenih pentacikličnih benzimidazola. Ova jedinjenja deluju kao modulatori signalizacije TNFα, i prema tome su korisna kao farmaceutska sredstva za upotrebu, naročito u lečenju neželjenih inflamatornih i autoimunih poremećaja, neuroloških i neurodegenerativnih poremećaja, bola i nociceptivnih poremećaja, kardiovaskularnih poremećaja, metaboličkih poremećaja, očnih poremećaja, i onkoloških poremećaja.

[0002] TNFα je prototipski član superfamilije faktora nekroze tumora (TNF) proteina koji dele zajedničku funkciju u regulaciji preživljavanja ćelija i ćelijske smrti. Jedna strukturna karakteristika zajednička svim poznatim članovima superfamilije TNF je obrazovanje trimernih kompleksa koji se vezuju za, i aktiviraju, specifične receptore superfamilije TNF. Kao primer, TNFα se nalazi u rastvorljivom i transmembranskim oblicima i signalizira kroz dva receptora, poznata kao TNFR1 i TNFR2, sa različitim funkcionalnim krajnjim tačkama.

[0003] Komercijalno su već dostupni različiti proizvodi koji su sposobni da modulišu aktivnost TNFα Svi su odobreni za lečenje inflamatornih i autoimunih poremećaja kao što je reumatoidni artritis i Kronova bolest. Svi trenutno odobreni proizvodi su makromolekuli i deluju preko inhibiranja vezivanja humanog TNFα za njegov receptor. Uobičajeni maktomolekularni inhibitori TNFα uključuju anti-TNFα antitela; i rastvorljive spojene proteine receptora TNFα. Primeri komercijalno dostupnih anti-TNFa antitela uključuju puna humana antitela kao što je adalimumab (Humira®) i golimumab (Simponi®), himerna antitela kao što je infliksimab (Remicade®), i pegilovane Fab’ fragmente kao što su certolizumab pegol (Cimzia®). Primer komercijalno dostupnog rastvorljivog spojenog proteina TNFα receptora je etanercept (Enbrel®).

[0004] Članovi superfamilije TNF, uključujući sam TNFα, su uključeni u različitim fiziološkim i patološkim funkcijama za koje se veruje da imaju udeo u opsegu stanja od značajne medicinske važnosti (videti, na primer, M.G. Tansey & D.E. Szymkowski, Drug Discovery Today, 2009, 14, 1082-1088; i F.S. Cameiro et al., J. Sexual Medicine, 2010, 7, 3823-3834).

[0005] Jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom, su potentni modulatori aktivnosti humanog TNFα, i prema tome su korisna u lečenju i/ili prevenciji različitih humanih bolesti. Bolesti uključuju autoimune i inflamatorne poremećaje; neurološke i neurodegenerativne poremećaje; bol i nociceptivne poremećaje; kardiovaskularne poremećaje; metaboličke poremećaje; očne poremećaje; i onkološke poremećaje.

[0006] Pored njihove aktivnosti kao potentnih modulatora signalizacije humanog TNFα, jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom takođe sadrže značajne prednosti u smislu njihove niske podložnosti neželjenim kardiovaskularnim efektima nuspojava (kao što je pokazano slabom aktivnosti u standardnom hERG testu kao što je ovde opisano). Jedinjenja iz pronalaska takođe pokazuju slab metabolički klirens, i minimalnu sklonost u izazivanju interakcija lek-lek (kao što je pokazano slabom inhibicijom enzima citohroma P450, uključujući CYP3A4).

[0007] Dalje, jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom mogu biti korisna kao farmakološki standardi za upotrebu u razvoju novih bioloških testova i u pretrazi za novim farmakološkim sredstvima. Prema tome, u jednom izvođenju, jedinjenja iz ovog pronalaska mogu biti korisna kao radioligandi u testovima za detekciju farmakološki aktivnih jedinjenja. U alternativnom izvođenju, određena jedinjenja iz ovog pronalaska mogu biti korisna za kuplovanje sa fluoroforom da bi se obezbedili fluorescentni konjugati koji se mogu koristiti u testovima (npr. test fluorescentne polarizacije) za detekciju farmakološki aktivnih jedinjenja.

[0008] WO 2013/186229 se odnosi na supstituisane derivate benzimidazola koji su modulatori signalizacije TNFα.

[0009] WO 2015/086525 se odnosi na spojene derivate tricikličnih imidazola koji su modulatori signalizacije TNFα.

[0010] WO 2016/050975 se odnosi na spojene derivate tricikličnih imidazola koji su modulatori signalizacije TNFα.

[0011] Predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so:

gde

X predstavlja N ili C-F;

<1>R predstavlja vodonik ili metil;

R<2>predstavlja vodonik, metil ili trifluorometil; i

R<3>predstavlja vodonik, cijano, hidroksi ili hidroksimetil.

[0012] Jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom su obuhvaćena generičkim obimom WO 2016/050975. Ovde međutim, ne postoji, određeni prikaz jedinjenja formule (I) kao što je gore definisano, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0013] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenje formule (I) kao što je gore definisano, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u terapiji.

[0014] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenje formule (I) kao što je definisano gore u tekstu, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u lečenju i/ili prevenciji poremećaja za koje je namenjeno davanje modulatora funkcije TNFα.

[0015] U drugom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenje formule (I) kao što je gore definisano, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, za upotrebu u lečenju i/ili prevenciji inflamatornog ili autoimunog poremećaja, neurološkog ili neurodegenerativnog poremećaja, bola ili nociceptivnog poremećaja, kardiovaskularnog poremećaja, metaboličkog poremećaja, očnog poremećaja, ili onkološkog poremećaja.

[0016] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje upotrebu jedinjenja formule (I) kao što je gore definisano, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, za dobijanje leka za lečenje i/ili prevenciju poremećaja za koje je naznačeno davanje modulаtora funkcije TNFα.

[0017] U drugom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje upotrebu jedinjenja formule (I) kao što je gore definisano, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, za dobijanje leka za lečenje i/ili prevenciju inflamatornog ili autoimunog poremećaja, neurološkog ili neurodegenerativnog poremećaja, bola ili nociceptivnog poremećaja, kardiovaskularnog poremećaja, metaboličkog poremećaja, očnog poremećaja, ili onkološkog poremećaja.

[0018] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje postupak za lečenje i/ili prevenciju poremećaja za koje je naznačeno davanje modulatora funkcije TNFα koje obuhvata davanje pacijentu kome je potreban takav tretman efikasne količine jedinjenja formule (I) kao što je gore definisano, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0019] U drugom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje postupak za lečenje i/ili prevenciju inflamatornog ili autoimunog poremećaja, neurološkog ili neurodegenerativnog poremećaja, bola ili nociceptivnog poremećaja, kardiovaskularnog poremećaja, metaboličkog poremećaja, očnog poremećaja, ili onkološkog poremećaja, koji obuhvata davanje pacijentu kome je potreban takav tretman efikasne količine jedinjenja formule (I) kao što je gore definisano, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli.

[0020] Za upotrebu u medicini, soli jedinjenja formule (I) će biti farmaceutski prihvatljive soli. Druge soli mogu, međutim, biti korisne u dobijanju jedinjenja formule (I) ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli. Opisani su standarni principi na kojima se zasniva odabir i dobijanje farmaceutski prihvatljivih soli, na primer, u Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties, Selection and Use, ed. P.H. Stahl & C.G. Wermuth, Wiley-VCH, 2002.

[0021] Gde jedinjenja formule (I) imaju jedan ili više asimetričnih centara, ona u skladu sa tim mogu postojati kao enantiomeri. Gde jedinjenja u skladu sa pronalaskom sadrže dva ili više asimetrična centra, onda mogu dodatno postojati kao diastereoizomeri. Treba razumeti da se pronalazak proteže do upotrebe svih takvih enantiomera i diastereoizomera, i na njihovu mešavinu u bilo kom odnosu, uključujući racemate. Formula (I) i formule koje su ovde prikazane su namenjene da predstave sve individualne stereoizomere i sve moguće njihove mešavine, osim ukoliko nije drugačije naznačeno ili pokazano.

[0022] Treba razumeti da svaki individualni atom koji je predstavljen u formuli (I), ili u formulama prikazanim u nastavku, mogu u stvari biti prisutni u obliku bilo kojem od njegovih prirodnih izotopa, pri čemu su najpoželjniji najzastupljeniji izotop(i). Prema tome, kao primer, svaki zasebni atom vodonika koji se nalazi u formuli (I), ili u formulama prikazanim u nastavku, može biti prisutan kao 1H, 2H (deuterijum; D) ili 3H (tricijum; T) atom, poželjno 1H. Slično tome, kao primer, svaki individualni atom vodonika koji je prisutan u formuli (I), ili u formulama prikazanim u nastavku, može biti prisutan 2 13 14 12

kao 1 C, C ili C atom, poželjno C.

[0023] U prvom izvođenju, X predstavlja N. U drugom izvođenju, X predstavlja C-F.

[0024] U prvom izvođenju , R<1>predstavlja vodnik. U drugom izvođenju, R1. predstavlja metil.

[0025] U prvom izvođenju , R2predstavlja vodonik. U drugom izvođenju, R<2>predstavlja metil. U tećem izvođenju, R<2>predstavlja trifluorometil.

[0026] Pogodno , R<2>predstavlja vodonik ili metil.

2

[0027] Pogodno, R predstavlja vodonik ili trifluorometil.

3

[0028] U prvom izvođenju, R predstavlja vodonik. U drugom izvođenju, R<3>predstavlja cijano. U trećem izvođenju, R3predstavlja hidroksi. U četvrtom izvođenju, R3predstavlja hidroksimetil (uključujući -CD2OH).

[0029] Pogodno , R<2>i R<3>oba predstavljaju vodonik.

[0030] Pogodno , R2predstavlja metil, i R<3>predstavlja vodonik.

[0031] Pogodno , R<2>predstavlja metil, i R3predstavlja cijano.

2 3

[0032] Pogodno , R predstavlja metil, i R predstavlja hidroksi.

2 3

[0033] Pogodno , R predstavlja metil, i R predstavlja hidroksimetil (uključujući -CD2OH).

[0034] Pogodno , R2predstavlja trifluorometil, i R3 predstavlja hidroksi.

[0035] Posebne podklase jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom uključuju jedinjenja formule (IIA) i (IIB), i njihove farmaceutski prihvatljive soli:

1<2>3

gde X, R , R i R su kao što je gore definisano.

[0036] Specifična nova jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom uključuju svako od jedinjenja čije je dobijanje opisano u sledećim Primerima, i njihove farmaceutski prihvatljive soli.

[0037] Jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom su korisna u lečenju i/ili prevenciji različitih humanih bolesti. One uključuju autoimune i inflamatorne poremećaje; neurološke i neurodegenerativne poremećaje; bol i nociceptivne poremećaje; kardiovaskularne poremećaje; metaboličke poremećaje; očne poremećaje; i onkološke poremećaje.

[0038] Inflamatorni i autoimunski poremećaji uključuju sistemske autoimunske poremećaje, autoimune endokrine poremećaje i organo-specifične autoimune poremećaje. Sistemski autoimuni poremećaji uključuju sistemski lupus eritematozus (SLE), psorijazu, psorijaznu artropatiju, vaskulitis, inflamatornu miopatiju (uključujući polimiozitis, dermatomiozitis i miozitis inkluzionih tela), sklerodermu, multiple sklerozu, sistemsku sklerozu, ankilozirajući spondilitis, reumatoidni artritis, nespecifični inflamatorni artritis, juvenilni inflamatorni artritis, juvenilni idiopatski artritis (uključujući njegove oligoartikularne i poliartikularne oblike), anemiju hronične bolesti (ACD), Stilovu bolest (juvenilna i/ili početak kod odraslih), Behčetova bolest i Sjogrenov sindrom. Autoimuni endokrini poremećaji uključuju tiroiditis. Autoimuni poremećaji koji su specifični za organ uključuju Adisonovu bolest, hemolitičnu ili pernicioznu anemiju, akutnu povredu bubrega (AKI; uključujući akutnu povredu bubrega indukovanu cisplatinom), dijabetsku nefopatiju (DN), opstruktivnu uropatiju (uključujući opstruktivnu uropatiju indukovanu cisplatinom), glomerulonefritis (uključujući Goodpasture-ov sindrom, glomerulonefritis posredovаn imunskim kompleksom i glomerulonefritis u vezi sa antineutrofilnim citoplazmatskim antitelima (ANCA)), lupus nefritis (LN), bolest minimalne promene, Graves-ovu bolest, idiopatsku trombocitopenijsku purpuru, inflamatornu bolest creva (uključujući Kronovu bolest, ulcerativni kolitis, neodređeni kolitis i puhitis), pemfigus, atopični dermatitis, autoimuni dermatitis, primarna bilijarna ciroza, autoimuni pneumonitis, autoimuni karditis, mijastenija gravis, spontana neplodnost, osteoporoza, osteopenija, erozivna bolest kostiju, hondritis, degeneracija i/ili destrukcija hrskavice, fibrozni poremećaji (uključujući različite oblike hepatične i plućne fibroze), astma, rinitis, hronična opstruktivna bolest pluća (COPD), respiratorni distres sindrom, sepsa, groznica, mišićna distrofija (uključujući Dišenovu mišićnu distofiju), odbacivanje transplanta organa (uključujući odbacivanje alografta bubrega), skleritis (uključujući skleritis arteritis džinovskih ćelija), Takayasu arteritis, hidradenitis suppurativa, pioderma gangrenosum, sarkoidoza, polimijalgija reumatski i aksijalni spondiloartritis.

[0039] Neurolološki i neurodegenerativni poremećaji uključuju Alchajmerovu bolest, Parkinsonovu bolest, Hantingtonovu bolest, ishemiju, šlog, amiotrofnu lateralnu sklerozu, povredu kičmene moždine, traumu glave, napade i epilepsiju.

[0040] Kardiovaskularni poremećaji uključuju trombozu, kardijalnu hipertofiju, hipertenziju, nepravilnu kontraktilnost srca (npr. tokom prestanka rada srca), i seksualne poremećaje (uključujuči erektilnu disfunkciju i funkcionalnu disfunkciju kod žena). Modulatori funkcije TNFα mogu takođe biti za upotrebu u lečenju i/ili prevenciji infarkta miokarda (videti J.J. Wu et al., JAMA, 2013, 309, 2043-2044).

[0041] Metabolički poremećaji uključuju dijabetes (uključujući dijabetes melitus zavisan od insulina i juvenilni dijabetes), dislipidemiju i metabolički sindrom.

[0042] Očni poremećaji uključuju retinopatiju (uključujući dijabetesnu retinopatiju, proliferativnu retinopatiju, ne-proliferativnu retinopatiju i retinopatiju kod prevremeno rođene dece), makularni edem (uključujući diabetesni makularni edem), makularnu degeneraciju u vezi sa starosti (ARMD), vaskularizaciju (uključujući vaskularizaciju mrežnjače i neovaskularizaciju), okluziju vene mrežnjače, i različite oblici uveitisa (uključujući iritis) i keratitis.

[0043] Onkološki poremećaji, koji mogu biti akutni ili hronični, uključuju proliferativne poremećaje, posebno kancer, i komplikacije u vezi sa kancerom (uključujući skeletne komplikacije, kaheksiju i anemiju). Određene kategorije kancera uključuju hematološki malignitet (uključujući leukemiju i limfom) i ne-hematološki malignitet (uključujući kancer solidnog tumora, sarkom, meningiom, glioblastom multiform, neuroblastom, melanom, karcinom želuca i karcinom bubrežne ćelije). Hronična leukemija može biti mijeloidna ili limfoidna. Različite leukemije uključuju limfoblastnu leukemiju T ćelija, hroničnu mijelogenu leukemiju (CML), hroničnu limfocitnu/limfoidnu leukemiju (CLL), leukemiju dlakastih ćelija, akutnu limfoblastnu leukemiju (ALL), akutnu mijelogenu leukemiju (AML), mijelodisplastični sindrom, hroničnu neutrofilnu leukemiju, akutnu limfoblastnu leukemiju T ćelija, plazmacitom, immunoblastnu leukemiju velikih ćelija, leukemiju mantle ćelija, multipli mijelom, akutnu megakarioblastnu leukemiju, akutnu megakariocitnu leukemiju, promijelocitnu leukemiju i eritroleukemiju. Različiti limfomi uključujući maligni limfom, Hodčkinov limfom, ne-Hodčkinov limfom, limfoblastni limfom T ćelija, Burkitov limfom, folikularni limfom, MALT1 limfom i limfom marginalne zone. Razni ne-hematološki maligniteti uključuju kancer prostate, pluća, dojke, rektuma, kolona, limfnog čvora, bešike, bubrega, pankreasa, jetre, jajnika, uterusa, grlića materice, mozga, kože, kostiju, stomaka i mišića. Modulatori funkcije TNFα se mogu takođe koristiti da se poveća bezbednost potentnog antikancerogenog efekta TNF (videti F.V. Hauwermeiren et al., J. Clin. Invest., 2013, 123, 2590-2603).

[0044] Predmetni pronalazak takođe obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje formule (I) kao što je ovde definisano, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, zajedno sa jednim ili više farmaceutski prihvatljivih nosača.

[0045] Farmaceutska kompozicija prema pronalasku može imati oblik koji je pogodan za oralno, bukalno, parenteralno, nazalno, lokalno, oftamološko ili rektalno davanje, ili oblik koji je pogodan za davanje inhalacijom ili insuflacijom.

[0046] Za oralno davanje, farmaceutske kompozicije mogu uzeti oblik, na primer, tableta, lozengi ili kapsula koje su dobijene uobičajenim načinima sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijensima kao što su sredstva za vezivanje (npr. preželatinizirani skrob kukuruza, polivinilpirolidon ili hidroksimetilpropil celuloza); punioci (npr. laktoza, mikrokristalna celuloza ili kalcijum hidrogenfosfat); lubrikanti (npr. magnezijum stearat, talk ili silika); dezintegranti (npr. skrob krompira ili natrijum glikolat); ili sredstva za vlaženje (npr. natrijum lauril sulfat). Tablete mogu biti obložene postupcima koji su dobro poznati u oblasti tehnike. Tečni preparati za oralno davanje mogu biti u obliku, na primer, rastvora, sirupa ili suspenzija, ili mogu biti prisutni kao suvi proizvod za konstituciju sa vodom ili sa drugim pogodnim nosačem pre upotrebe. Takvi tečni preparati mogu se dobiti konvencionalnim sredstvima sa farmaceutski prihvatljivim aditivima kao što su sredstva za suspenziju, sredstva za emulgovanje, nevodeni nosači ili konzervansi. Preparati mogu takođe sadržati soli pufera, sredstva za aromu, sredstva za bojenje ili zaslađivače, po potrebi.

[0047] Preparati za oralno davanje mogu biti pogodno formulisani da se dobije kontrolisano oslobađanje aktivnog jedinjenja.

[0048] Za bukalno davanje, kompozicije mogu uzeti oblik tableta ili lozengi formulisanih na uobičajeni način.

[0049] Jedinjenja formule (I) mogu biti formulisana za parenteralno davanje injekcijom, npr. bolusnom injekcijom ili infuzijom. Formulacije za davanje injekcijom mogu se nalaziti u jediničnom doznom obliku, npr. u staklenim ampulama ili više-doznim kontejnerima, npr. staklene bočice. Kompozicije za davanje injekcijom mogu uzeti takve oblike kao što su suspenzije, rastvori ili emulzije u uljanim ili vodenim nosačima, i mogu sadržati sredstva za formulisanje kao što su suspenzija, stabilizacija, konzervisanje i/ili sredstva za dispergovanje. Alternativno, aktivni sastojak može biti u obliku praška za konstituisanje sa pogodnim nosačem, npr. sterilnom vodom bez pirogena, pre korišćenja.

[0050] Pored gore opisanih formulacija, jedinjenja formule (I) mogu takođe biti formulisana kao depo preparat. Takve formulacije sa produženim trajanjem se mogu davati implantacijom ili intramuskularnom injekcijom.

[0051] Za nazalno davanje ili davanje inhalacijom, jedinjenja prema predmetnom pronalasku mogu se pogodno isporučiti u obliku prezentacije spreja aerosola za pakovanja pod pritiskom ili nebulizatorom, sa upotrebom odgovarajućeg propelanta, npr. dihlorodifluorometana, fluorotrihlorometana, dihlorotetrafluoroetana, ugljen dioksida ili drugog pogodnog gasa ili smeše gasova.

[0052] Kompozicije mogu, ukoliko je poželjno, da budu prisutne u pakovanju ili dispenzer spravi koja može sadržati jedan ili više jediničnih doznih oblika koji sadrže aktivni sastojak. Pakovanje ili uređaj za doziranje mogu pratiti instrukcije za davanje.

[0053] Za lokalno davanje jedinjenja koja se koriste u predmetnom pronalasku mogu pogodno biti formulisana u odgovarajućoj masti koja sadrži aktivnu komponentu suspendovanu ili rastvorenu u jednom ili više farmaceutski prihvatljivih nosača. Određeni nosači uključuju, na primer, mineralno ulje, tečni petroleum, propilen glikol, polioksietilen, polioksipropilen, vosak za emulgovanje i vodu. Alternativno, jedinjenja za upotrebu u predmetnom pronalasku mogu biti formulisana u odgovarajućem losionu koji sadrži aktivnu komponentu suspendovanu ili razblaženu u jednom ili više farmaceutski prihvatljivih nosača. Određeni nosači uključuju, na primer, mineralno ulje, sorbitan monostearat, polisorbat 60, vosak cetil estra, cetearil alkohol, benzil alkohol, 2-oktildodekanol i vodu.

[0054] Za oftamološko davanje jedinjenja koja se koriste u predmetnom pronalasku mogu pogodno biti formulisana kao mikronizovane suspenzije u izotoničnom, pH-prilagođenom sterilnom rastvoru soli, ili sa ili bez konzervansa kao što je baktericidno ili fungicidno sredstvo, na primer fenilživin nitrat, benzilalkonijum hlorid ili hlorheksidin acetat. Alternativno, jedinjenja za oftalmološko davanje mogu biti formulisana u masti kao što je petrolatum.

[0055] Za rektalno davanje jedinjenja koja se koriste u predmetnom pronalasku mogu pogodno biti formulisana kao supozitorije. One se mogu dobiti mešanjem aktivne komponente sa pogodnim neiritabilnim ekscipijensom koji je čvrst na sobnoj temperaturi ali je tečan na rektalnoj temperaturi i stoga će se istopiti u rektumu kako bi se oslobodila aktivna komponenta. Takvi materijali uključuju, na primer, kakao puter, pčelinji vosak i polietilen glikole.

[0056] Količina jedinjenja koje se koristi u pronalasku koja je potrebna za profilaksu ili lečenje određenog stanja razlikovaće se u zavisnosti od izabranog jedinjenja i stanja pacijenta koji se leči. Generalno, međutim, dnevne doze mogu biti opsega od 10 ng/kg do 1000 mg/kg, uobičajeno od 100 ng/kg do 100 mg/kg, npr. oko 0.01 mg/kg do 40 mg/kg telesne težine, za oralno ili bukalno davanje, od oko 10 ng/kg do 50 mg/kg telesne težine za parenteralno davanje, i od oko 0.05 mg do oko 1000 mg, npr. od oko 0.5 mg do oko 1000 mg, za nazalno davanje ili davanje inhalacijom ili insuflacijom.

[0057] Ukoliko je poželjno, jedinjenje u skladu sa predmetnim pronalaskom može se zajedno dati sa drugim farmaceutski aktivnim sredstvom, npr. anti-inflamatornim molekulom.

[0058] Jedinjenja formule (I) gore navedena mogu se dobiti postupkom koji obuhvata reagovanje

gde X, R1 , R<2>i R<3>su kao što je gore definisano, L1 predstavlja pogodnu odlazeću grupu, M<1>predstavlja ostatak boronske kiseline -B(OH)2ili njegov ciklični estar koji je obrazovan sa organskim diolom, npr.

p

pinakol, 1,3-propan-diol ili neopentil glikol, i R predstavlja N-zaštitnu grupu; u prisustvu katalizatora prelaznog metala; praćeno, kao što je potrebno, uklanjanjem N-zaštitne grupe Rp.

[0059] Odlazeća grupa L<1>je obično atom halogena, npr. brom.

[0060] N-zaštitna grupa R<p>pogodno predstavlja terc-butoksikarbonil (BOC). Alternativno, N-zaštitina grupa R<p>može pogodno predstavljati terc-butilsulfinil.

[0061] Katalizator prelaznog metala za upotrebu u reakciji između jedinjenja (III) i (IV) je pogodno tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0), ili [1,1’-bis(difenilfosfino)-ferocen]dihloropaladijum(II), ili hloro(2-dicikloheksil-fosfino-2’,4’,6’-triizopropil-1,1’-bifenil)[2-(2’-amino-1,1’-bifenil)]paladijum(II) (XPhos Pd G2). Katalizator prelaznog metala može se obično koristiti zajedno sa 2-dicikloheksilfosfino-2’,4’,6’-triizopropilbifenil (XPhos) ili tricikloheksilfosfonijum tetrafluoroboratom. Reakcija je pogodno izvedena u pristustvu kalijum fosfata ili kalijum karbonata. Reakcija je pogodno izvedena na povišenoj temperaturi u odgovarajućem rastvataču, npr. cikličnom etru kao što je 1,4-dioksan, opciono u mešavini sa vodom.

[0062] Gde N-zaštitna grupa R<p>je BOC ili terc-butilsulfinil, njeno naknadno uklanjanje može pogodno biti pogođeno sa tretmanom sa kiselinom, npr. mineralnom kiselinom kao što je hlorovodonična kiselina, ili organska kiselina kao što je trifluorosirćetna kiselina.

[0063] Intermedijeri formule (IV) gore u tekstu gde M1 predstavlja ostatak cikličnog estra boronske kiseline -B(OH)2koji je obrazovan sa pinakol može se dobiti reagovanje bis-(pinakolato)diborona sa jedinjenjem formule (V):

2

gde L predstavlja pogodnu odlazeću grupu; u pristustvu katalizatora prelaznog metala.

[0064] Odlazeća grupa L<2>je obično atom halogena, npr. hloro.

[0065] Katalizator prelaznog metala za upotrebu u reakciji između bis(pinakolato)diborona i jedinjenja (V) je pogodno tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0), koji se može koristiti zajedno sa 2-dicikloheksilfosfino-2’,4’,6’-triizopropilbifenilom (XPhos) ili tricikloheksilfosfonijum tetrafluoroboratom. Reakcija je pogodno izvedena u prisustvu kalijum acetata. Reakcija se pogodno izvodi na povećanoj temperaturi u odgovarajućem rastvaraču, npr. cikličnom etru kao što je 1,4-dioksan.

[0066] Intermedijeri formule (V) gore navedeni gde R<1>je metil se mogu dobiti iz odgovarajućeg jedinjenja formule (V) pri čemu R<1>je vodonik reagovanjem sa metil halogenidom, npr. jodometanom. Reakcija metilacije se generalno izvodi u prisustvu baze, npr. sililamidne baze kao što je kalijum bis(trimetilsilil)amid. Reakcija se može pogodno izvesti u odgovarajućem rastvaraču, npr. Rastvaraču cikličnog etra kao što je tetrahidrofuran.

[0067] Intermedijer formule (V) gore navedeni gde R<1>je vodonik i L2predstavlja hloro je posebno prikazan u WO 2016/050975, kao što je i Intermedijer formule (IV) gore pri čemu R<1>je vodonik i 1

M predstavlja 4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioksa-borolan-2-il.

[0068] Tamo gde nisu komercijalno dostupni, polazni materijali iz formule (III) mogu se dobiti postupcima koji su analogni sa onima koji su opisani u pridruženim Primerma, ili pomoću standardnih postupaka koji su poznati u oblasti tehnike.

[0069] Gde je smeša proizvoda koji su dobijeni prema bilo kojim od gore opisanih postupaka za dobijanje jedinjenja prema pronalasku, željeni proizvod može biti razdvojen od njih na odgovarajućem stadijumu konvencionalnim postupcima kao što je preparativna HPLC; ili hromatografija na koloni korišćenjem, na primer, silicijum dioksida i/ili aluminijum hidroksida zajedno sa odgovarajućim sistemom rastvarača.

[0070] Tamo gde gore opisani procesi dovode do smeša stereoizomera, ovi izomeri mogu biti razdvojeni sa konvencionalnim postupcima. Posebno, gde je poželjno dobiti određeni enantiomer, može se proizvesti iz odgovarajuće smeše enantiomera korišćenjem bilo kog pogodnog postupka za razdvajanje enantiomera. Prema tome, na primer, derivati diastereoizomera, npr. soli, mogu se proizvesti reagovanjem smeše enantiomera, npr. racemata, i odgovarajućeg hiralnog jedinjenja, npr. hiralne kiseline i baze. I pomoću bilo kojih pogodnih sredstava, na primer kristalizacijom, željeni enantiomer je regenerisan, npr. tretmanom sa kiselinom u slučaju gde je stereoisomer so. U drugom procesu razdvajanja racemat može biti razdvojen korišćenjem hiralne HPLC. Osim toga, ukoliko je poželjno, određeni enantiomer se može dobiti korišćenjem odgovarajućeg hiralnog intermedijera u jednom od gore opisanih postupaka. Alternativno, određeni enantiomer se može dobiti sprovođenjem enantiomer-specifične enzimske biotransformacije, npr. hidrolize estara korišćenjem esteraze, i nakon toga prečišćavanjem samo enantiomerno čiste hidrolizovane kiseline sa neizreagovanog antipoda estra. Hromatografija, rekristalizacija i drugi konvencionalni postupci razdvajanja mogu takođe biti korišćeni gde je poželjno da se dobije određeni geometrijski izomer. Alternativno ne-željeni enantiomer može se racemizovati u željeni enantiomer, u prisustvu kiseline ili baze, u skladu sa postupcima koji su poznati stručnjaku iz oblasti tehnike, ili u skladu sa postupcima koji su opisani pridruženim Primerima.

1

[0071] Tokom bilo koje od gore navedenih sekvenci sinteze može biti neophodno i/ili poželjno da se zaštite senzitivne ili reaktivne grupe na bilo kom od molekula od interesa. Ovo se može postići pomoću konvencionalnih zaštitnih grupa, kao što su one koje su opisane u Protective Groups in Organic Chemistry, ed. J.F.W. McOmie, Plenum Press, 1973; i T.W. Greene & P.G.M. Wuts, Protective Groups in Organic Synthesis, John Wiley & Sons, 3rd edition, 1999. Zaštitine grupe mogu bii uklonjene u bilo kojoj pogodnoj narednoj fazi korišćenjem postupaka koji su poznati u oblasti tehnike.

[0072] Jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom potentno neutralizuju aktivnost TNFα u komercijalno dostupnoj HEK-293 izvedenoj reporterskoj ćelijskoj liniji koja je poznata pod imenom HEK-BlueTM CD40L. Ovo je stabilna HEK-293 transfektovana ćelijska linija koja ekspomira SEAP (sekretovanu embionalnu alkalnu fosfatazu) pod kontrolom IPNβ minimalnog promotora spojenog sa pet mesta vezivanja NF-κB. Sekrecija SEAP od strane ovih ćelija je stimulisana na način koji zavisi od koncentracije sa TNFα. Kada su ispitana u HEK-293 biotestu, ovde je takođe naznačen sa testom reporterkog gena, jedinjenja iz predmetnog pronalaska ispoljavaju IC50vredost od 10 nM ili bolju (stručnjak iz oblasti tehnike će razumeti da niža IC50karakteristika označava aktivnije jedinjenje).

[0073] Jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom ispoljavaju slabu aktivnost kada su ispitana u standardnom hERG testu koji se ovde opisuje (što ukazuje na sklonost neželjenim kardiovaskularnim nus-pojavama). Zaista, kada su ispitana u tom testu, jedinjenja iz predmetnog pronalaska ispoljavaju IC50vrednost od najmanje 5 µM (stručnjak iz oblasti tehnike će razumeti da, u hERG testu, veća IC50karakteristika označava superiorno jedinjenje, tj. jedinjenje za koje je manje verovatno da će imati sklonosti ka neželjenim kardiovaskularnim nus-pojavama).

Reporterski genski test

Inhibicija TNFα-indukovane aktivacije NF-κB

[0074] Stimulacija HEK-293 ćelija sa TNFα dovodi do aktivacije puta NF-κB. Reporterska ćelijska linija koja je korišćena da bi se odredila aktivnost TNFα je kupljena od InvivoGen. HEK-BlueTM CD40L je tabilna HEK-293 transfektovana ćelijska linija koja eksprimira SEAP (sekretovanu embionalnu alkalnu fosfatazu) pod kontrolom IFNβ minimalnog promotora spojenog sa pet mesta vezivanja NF-κB. Sekrecija SEAP od strane ovih ćelija stimulisana je na način koji zavisi od koncentracije sa TNFα, sa EC50 od 0.5 ng/mL za humani TNFα. Jedinjenja su razblažena od 10 mM DMSO štokova (finalna koncentracija u testu 0.3% DMSO) da se dobije 3-struka kriva serijskog razblaženja sa 10 tačaka (e.g.

30,000 nM do 2 nM finalne koncentracije). Razblaženo jedinjenje je prethodno inkubirano sa TNFα tokom 60 minuta pre dodavanja u mikrotitarsku ploču sa 384-bunarića i inkubirano je tokom 18 h. Finalna koncentracija TNFα u test ploči bila je 0.5 ng/mL. SEAP aktivnost je određena u supernatantu korišćenjem kolorimetrijskog supstrata, npr. QUANTI-BlueTM ili HEK-Blue<TM>Medijuma za detekciju (InvivoGen). Procenat inhibicija za razblaženja jedinjenja su izračunati između DMSO kontrole i maksimalne inhibicije (sa viškom kontrolnog jedinjenja) i vrednost IC50je izračunata korišćenjem XLfitTM (4 parametarskog logističkog modela) u ActivityBase.

[0075] Kada su ispitana u reporteskom genskom testu, pronađeno je da sva jedinjenja u pridruženim Primerima ispoljavaju IC50vrednosti 10 nM ili bolje.

[0076] Kada su ispitana u reporteskom genskom testu, jedinjenja u pridruženim Primerima ispoljavaju IC50vrednosti generalno su u opsegu od 0.01 nM do 10 nM.

hERG Test

[0077] Farmakološka aktivnost jedinjenja na hERG kanalima srca (Kv11.1) je funkcionalno ispitana korišćenjem automatizovane elektrofiziološke stanice u ravni metodom nametanja voltaže na delić membrane (eng. patch-clamp). CHO ćelije koje stabilno eksprimiraju humane hERG kanale su gajene pod permanentnim pritiskom odgovarajućih antibiotika za selekciju prema specifikacijama proizvođača (hERG-Duo ćelije, B’SYS GmbH, Switzerland). Ćelije su sakupljene na ispod 80% konfluentnosti, suspendovane u medijumu bez seruma I automatski raspršene na ploče za snimanje sa više bunarića za snimanja metodom nametnute voltaže kojom se održava zadati napon na celoj ćeliji (еng. whole-cell voltage-clamp) na QPatch HTX radnoj stanici (Sophion, BiolinScientific AB, Denmark). Kompozicija pufera za vanćelijsko snimanje bila je (u mM): NaCl, 150; KCl, 4; CaCl2, 2; MgCl2, 1; HEPES, 10; i glukoza, 10; podešeno do pH 7.4 sa NaOH. Unutarćelijski pufer je sadržao (u mM): KCl, 120; CaCl2, 5; MgCl2, 2; EGTA, 10; HEPES, 10; i Mg-ATP, 4; podešeno do pH 7.2 sa KOH. Protokol voltaže koji je korišćen za aktivaciju struja hERG koje su se nalazile u prvom koraku depolarizacije sa -80 mV holding potencijala do 20 mV tokom 5 s nakon čega sledi drugi korak repolarizacije do -50 mV. Vreme ciklusa bilo je 15 s, snimanja su sprovedena na sobnoj temperaturi i efekti leka su ispitani na “peak tail-current” koja je pokrenuta drugim korakom repolarizacije. Za farmakologiju, štok rastvori prototipskih proizvoda (eng. test article) na 10 mM su pripremljeni u DMSO. Koncentracioni opseg od 6-tačaka je pripremljen u polipropilenskim mikro-titarskim pločama prvo serijskim razblaženjem početnog 10 mM štoka 1:3 u DMSO i nakon toga razblaženjem svakog od 6 radnih rastvora Intermedijera 1:333 u medijumu vanćelijskog snimanja koji sadrži 0.06% Pluronic F-68 (Gibco/Thermofischer, France). Finalne koncentracije prototipskih proizvoda (tj. 0.12 µM, 0.37 µM, 1.1 ́M, 3.3 µM, 10 µM i 30 µM) su primenjene kumulativno na ćelije u rastućem redu. Pozitivna kontrola (terfenadin, 10 µM) je dodata na kraju svake sekvence snimanja. Vremenski tok od hERG amplitude “tail current” analiziran je “off-line” nakon oduzimanja opcionog curenja struje i kompenzovanja u pražnjenju struje koliko je potrebno. Pola-maksimalnih inhibitornih koncentracija (IC50) je dobijeno uklapanjem izmerenih amplituda struja na kraju svakog perioda izlaganja i normalizovane su u odnosu na bazalni nivo pre izlaganja leku sa sigmoidalnom jednačinom iz četiri parametra.

[0078] Kada su ispitana u hERG testu, pronađeno je da sva jedinjenja iz pridruženih Primera ispoljavaju IC50vrednost od najmanje 5 µM. Specifično, jedinjenje iz Primera 6 ispoljava IC50vrednost od približno 8 µM; jedinjenje iz Primera 9 ispoljava IC50vrednost od približno 20 µM; i Jedinjenja iz primera 1-5, 7, 8 i 10-16 svaki ispoljava IC50vrednost od >30 µM.

[0079] Sledeći Primeri ilustruju dobijanje jedinjenja prema pronalasku.

PRIMERI

Skraćenice

[0080]

DCM: Dihlorometan EtOAc: Etil acetat MeOH: metanol THF: Tetrahidrfofuran DMSO: dimetil sulfoksid DMF: N,N-dimetilformamid TBAF: tetra-n-butilamonijum fluorid LDA: litijum diizopropilamid Dess-Martin 1,1,1-tris(acetiloksi)-1,1-dihidroperiodinane: 1,2-benziodoksol-3-(1H)-on

XPhos: 2-dicikloheksilfosfino-2’,4’,6’-triizopropilbifenil

XPhos Pd hloro(2-dicikloheksilfosfino-2’,4’,6’-triizopropil-1,1’

G2: bifenil)[2-(2’-amino-1,1’-bifenil)]paladijum(II)

r.t.: sobna temperatura h: sat M: masa RT: sobna temperatura HPLC: Tečna hromatografija visokih

performansi

LCMS: Tečna hromatografija masena

spektrometrija

ES+: Elektrospej Pozitivna jonizacija

Analitički uslovi

[0081] Svi NMR spektri su dobijeni na 250 MHz, 300 MHz, 400 MHz ili 500 MHz.

[0082] Sve reakcije koje uključuju reagense koji su osetljivi na vazduh ili vlagu izvedene su pod osušenim rastvaračima i staklenom posuđu.

Određivanje LCMS podataka

Postupak 1

[0083]

Kolona: X-Bridge C18 Waters 2.1 x 20 mm, 2.5 µm kolona

Mobilna Faza A: 10 mM amonijum formijat u vodi 0.1% rastvor amonijaka Mobilna Faza B: acetonitril 5% voda 0.1% rastvor amonijaka

Program gradijenta: Pumpa brzine protoka 1: 1 mL/min; Pumpa brzine protoka 2: 0.5 mL/min Pumpa 1: Pumpa 2:

Vreme A% B% Vreme A% B%

0.00 95.10 4.90 0.10 5.00 95.00 4.00 5.00 95.00 1.00 5.00 95.00 5.00 5.00 95.00 1.10 95.00 5.00

5.10 95.10 4.90

Postupak 2

[0084]

Kolona: X-Bridge C18 Waters 2.1 x 20 mm, 2.5 µm kolona

Mobilna Faza A: 10 mM amonijum formijat u vodi 0.1% mravlja kiselina

Mobilna Faza B: acetonitril 5% voda 0.1% mravlja kiselina

Program gradijenta: Pumpa brzine protoka 1: 1 mL/min; Pumpa brzine protoka 2: 0.5 mL/min

1

Pumpa 1: Pumpa 2:

Vreme A% B% Vreme A% B% 0.00 95.00 5.00 0.10 5.00 95.00 4.00 5.00 95.00 1.00 5.00 95.00 5.00 5.00 95.00 1.10 95.00 5.00 5.10 95.00 5.00

Postupak 3

[0085]

Kolona: X-Bridge C18 Waters 2.1 x 20 mm, 2.5 µm kolona Mobilna Faza A: 10 mM amonijum formijat u vodi 0.1% rastvor amonijaka Mobilna Faza B: acetonitril 5% voda 0.1% rastvor amonijaka

Program gradijenta: Brzina protoka 1 mL/min

Vreme A% B%

0.00 96.00 4.00

1.50 5.00 95.00

2.25 5.00 95.00

2.50 96.00 4.00

Postupak 4

[0086]

Kolona: X-Bridge C18 Waters 2.1 x 20 mm, 2.5 µm kolona Mobilna Faza A: 10 mM amonijum formijat u vodi 0.1% rastvor amonijaka Mobilna Faza B: acetonitril 5% voda 0.1% rastvor amonijaka

Program gradijenta: Brzina protoka 1 mL/min

Vreme A% B%

0.00 96.00 4.00

4.00 5.00 95.00

5.00 5.00 95.00

5.10 96.00 4.00

G

Postupak 5

[0087]

Kolona: X-Bridge C18 Waters 2.1 x 20 mm, 2.5 µm kolona Mobilna Faza A: 10 mM amonijum formijat u vodi 0.1% rastvor amonijaka Mobilna Faza B: acetonitril 5% voda 0.1% rastvor amonijaka

Program gradijenta: Brzina protoka 1 mL/min

Vreme A% B%

0.00 94.00 6.00

1.50 5.00 95.00

2.25 5.00 95.00

2.50 94.00 6.00

Postupak 6

Agilent Technologies 1260 Infinity

[0088]

Deo Model

LC/MSD G6130B

Degazer G4225A

BinPump G1312B

HiP ALS (autosampler) G1367E

Valve Drive G1170A

TCC G1316A

DAD VL G1315D

Interfejs 5900E

Aparat

[0089] Agilent 1260 Bin. Pump: G1312B, degazer; autosampler, ColCom. DAD: Agilent G1315D, 220-320 nm. MSD: Agilent LC/MSD G6130B ESI, pos/neg 100-800, ELSD Alltech 3300.

[0090] Protok gasa: 1.5 mL/minuti; Gas temp.: 40°C; Kolona: Waters XSelect™ C18, 30 x 2.1 mm, 3.5µm; Temperatura: 35°C; Protok: 1 mL/minuti; Gradijent: t0= 5% A, t1.6min= 98%

[0091] A, t3.0min= 98% A; Post-vreme: 1.3 minuta; Eluent A: 0.1% mravlja kiselina u acetonitrilu; Eluent B: 0.1% mravlja kiselina u vodi.

Postupak 7

Agilent Technologies 1260 Infinity

[0092]

Deo Model

LC/MSD G6130B

Degazer G4225A

BinPump G1312B

HiP ALS (autosampler) G1367E

Valve Drive G1170A

TCC G1316A

DAD VL G1315D

Interfejs 5900E

1

Aparat

[0093] Agilent 1260 Bin. Pumpa: G1312B, degazer: autosampler, ColCom. DAD: Agilent G1315D, 220-320 nm. MSD: Agilent LC/MSD G6130B ESI, pos/neg 100-800, ELSD Alltech 3300.

[0094] Protok gada 1.5 mL/minuti; Gas temp.: 40°C; Kolona: Waters XSelect™ C18, 50 x 2.1 mm, 3.5µm; Temperature: 35°C; Flow: 0.8 mL/minute; Gradient: t0= 5% A, t3.5min= 98% A, t6.0min= 98% A; Post-vreme: 2.0 minuta; Eluent A: 0.1% mravlja kiselina u acetonitrilu; Eluent B: 0.1% mravlja kiselina u vodi.

Postupak 8

[0095]

Kolona: Kinetex Core-Shell C18, 50 x 2.1 mm, 5 µm kolona zaštićena sa Phenomenex ’Security Guard’ kolonom

Mobilna Faza A: 0.1% mravlja kiselina u vodi

Mobilna Faza B: 0.1% mravlja kiselina u acetonitrilu

Program gradijenta: Brzina protoka 1.2 mL/min

Temperatura kolone:<40°C>

Vreme A% B%

0.00 95.00 5.00

1.20 0.00 100.00

1.30 0.00 100.00

1.31 95.00 5.00

Postupak 9

[0096]

Kolona: Kinetex Core-Shell C18, 50 x 2.1 mm, 5 µm kolona zaštićena sa Phenomenex ’Security Guard’ kolonom

Mobilna Faza A: 0.1% mravlja kiselina u vodi

Mobilna Faza B: 0.1% mravlja kiselina u acetonitrilu

Program gradijenta: Brzina protoka 1.2 mL/min

Temperatura kolone:<40°C>

Vreme A% B%

0.00 95.00 5.00

1.83 0.00 100.00

2.25 0.00 100.00

2.26 95.00 5.00

Postupak 10

1

Kolona: Phenomenex Gemini C18, 2.0 mm x 50 mm, 3 µm kolona

Mobilna Faza A: 2 mM amonijum bikarbonat, pH 10

Mobilna Faza B: acetonitril

Program gradijenta: Brzina protoka 1.0 mL/minuti

Temperatura kolone: 60°C

Vreme A% B%

0.00 99.00 1.00

1.80 0.00 100.00

2.10 0.00 100.00

2.30 99.00 1.00

Postupak 11

[0098]

Kolona: Phenomenex Kinetex-XB C18, 2.1 mm x 100 mm, 1.7 µm kolona

Mobilna Faza A: 0.1% mravlja kiselina u vodi

Mobilna Faza B: 0.1% mravlja kiselina u acetonitrilu

Program gradijenta: Brzina protoka 0.6 mL/minuti

Temperatura kolone: 40°C

Vreme A% B%

0.00 95.00 0.00

5.30 0.00 100.00

5.80 0.00 100.00

5.82 95.00 5.00

GCMS Određivanje podataka

Postupak 12

Agilent Technologies

[0099]

Deo Model

5973 MSD G2577A

autosampler G2614A

7683B injektor G2913A

6890N GC sistem G1530N

[0100] Instrument: GC: Agilent 6890N, FID: Temp. detekcije.: 300°C i MS: 5973 MSD, EI-pozitivna, Temp. detekcije.: 280°C; Maseni opseg: 50-550; Kolona: RXi-5MS 20 m, ID 180 µm, df 0.18 µm; Srednja vrednost brzine: 50 cm/s; Zapr. injekcije.: 1 µL; Temp. injektora.: 250°C; Odnos podele: 20/1; Nosač gas: He; Početna temperatura temperatura: 100°C; Početno vreme: 1.5 minut; Kašenjenje rastvarača: 1.3 minut; Brzina: 75°C/minut; Finalna temp.: 250°C; Finalno vreme: 2.5 minuta.

1

INTERMEDIJER 1

(R)-N-(3-Cijano-3-Metil ciklobutiliden)-2-Metil propan-2-sulfinamid

[0101] U 1-Metil-3-oksociklobutankarbonitril (532 mg, 4.63 mmol) koji je rastvoren u THF (35 mL) dodat je (R)-(+)- 2-Metil-2-propansulfinamid (570 mg, 4.61 mmol), nakon čega je dodat titanijum(IV) etoksid (1.8 mL, 8.7 mmol). Reakciona smeša je zagrejana na 75°C pod prisustvom azota preko noći sa mešanjem, nakon čega je ohlađena do st. Dodat je zasićeni vodeni rastvor bikarbonatnog rastvora (50 mL). Reakciona smeša je proceđena kroz celit, ispiranjem sa EtOAc. Organski sloj je razdvojen i sekvencijalno je ispran sa vodom (50 mL), zatim sa rastvorom soli (50 mL). Organski sloj je razdvojen i proceđen je kroz separator faza, nakon čega je organski sloj koncentrovan in vacuo. Dobijeno narandžasto ulje je prečišćeno sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 100% izoheksanom do 100% EtOAc). Dobijeno ulje boje slame se stvrdnjava po stajanju da se dobije jedinjenje iz naslova (863 mg, 88%) kao beličasta čvrsta supstanca.<δ>H(300 MHz, DMSO-d6) 3.95-3.59 (m, 2H), 3.60-3.36 (m, 1H), 3.25 (ddt, J 17.6, 9.8, 3.3 Hz, 1H), 1.58 (d, J 1.4 Hz, 3H), 1.16 (d, J 1.2 Hz, 9H).

INTERMEDIJER 2

(R)-N-[1-(5-Bromopirimidin-2-il)-3-cijano-3-Metil ciklobutil]-2-Metil propan-2-sulfinamid

[0102] Dve odvojene serije 5-bromo-2-jodopirimidina (1.6 g, 5.62 mmol) su rastvorene u DCM (50 mL) i DCM (100 mL). Dve odvojene reakcione smeše su ohlađene do -78°C pod prisustvom azota, zatim je dodat 2.5M n-butilitijum (2.26 mL, 5.65 mmol) u svaku reakcionu smešu u kapima tokom 5 minuta. Reakcione smeše su mešane na -78°C pod prisustvom azota tokom2 minuta, pre sporog dodavanja Intermedijera 1 (1 g, 4.71 mmol) rastvorenog u DCM (5 mL) pomoću šprica u svaku reakcionu smešu. Reakcione smeše su mešane na -78°C tokom 2 h. Veća (100 mL) serija je mešana u ledenom kupatilu tokom 3 h, dok je manja (50 mL) serija mešana u kupatilu na suvom ledu/acetonu tokom 3 h. Reakcine smeše su kombinovane i zaustavljene sa zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida (50 mL), nakon čega je organski sloj razdvojen, proceđen kroz separator faza i proceđen in vacuo. Dobijeno sirovo žuto ulje je prečišćeno sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 100% izoheksanom do 100% EtOAc) da se dobije jedinjenje iz naslova (530 mg, 14%) (60:40 smeša trans:cis izomera) kao žuta guma. LCMS (ES+) [M+H]<+>371.0, RT 1.66 i 1.69 minuta, čistoća 68.1 % (Postupak 4).

1

INTERMEDIJER 3

(7R,14R)-11-hloro-1-(difluorometoksi)-6-Metil-6,7-dihidro-7,14-metano-benzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-on

[0103] U rastvor -(7R,14R)-11-hloro-1-(difluorometoksi)-6,7-dihidro-7,14 metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-on (WO 2016/050975, Primer 11) (10 g, 26.6 mmol) u suvom THF (135 mL), ohlađenom do -78°C pod prisustvom azota, dodat je kalijum bis(trimetil silil)amid (1M u THF, 30 mL, 30 mmol) u kapima tokom 15 minuta. Dobijena smeša je mešana na -78°C tokom 1 h pre dodavanja jodometana (2.5 mL, 40 mmol) u kapima tokom 5 minuta. Reakciona smeša je mešana na -78°C tokom 1 h, zatim je omogućeno da se polako zagreje do sobne temperature preko noći. Reakciona smeša je sipana u zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida (600 mL) i ekstrahovana je sa EtOAc (2 x 800 mL). Organski ekstrakti su osušeni (Na2SO4), proceđeni i koncentrovani in vacuo. Prečišćavanje sa fleš hromatografijom na siliki (elucija sa 5% MeOH/DCM) dala je jedinjenje iz naslova (9.12 g, 88%) kao bež čvrsta supstanca.<δ>H(300 MHz, DMSO-d6) 8.33-8.21 (m, 1H), 7.87-7.33 (m, 5H), 7.22 (dd, J 8.7, 2.1 Hz, 1H), 6.23 (d, J 7.1 Hz, 1H), 5.22 (d, J 7.1 Hz, 1H), 3.55-3.41 (m, 1H), 3.33 (s, 3H), 2.81 (d, J 13.8 Hz, 1H). LCMS (ES+) [M+H]+390.0, RT 1.10 minuta (Postupak 3).

INTERMEDIJER 4

(7R,14R)-1-(Difluorometoksi)-6-Metil-11-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-on

[0104] Intermedijer 3 (4 g, 10.3 mmol) u 1,4-dioksanu (42 mL) je tretiran sa bis-(pinakolato)diboronom (3.9 g, 15 mmol) i kalijum acetatom (3 g, 30.6 mmol). Reakcina smeša je degazirana i isprana je sa azotom. Dodati su tris(dibenzilidenaceton)-dipaladijum(0) (484 mg, 0.51 mmol) i tricikloheksilfosfonijum tetrafluoroborat (390 mg, 1.03 mmol), zatim je reakciona smeša degazirana i isprana sa azotom, pre nego što je preko noći zagrevana do 140°C. Dalje, dodat je bis(pinakolato)diboron (2.6 g, 10.3 mmol). Reakciona smeša je zagrejana na 140°C tokom 24 h, zatim je podeljena između EtOAc i rastvora soli. Organska faza je razdvojena i koncentrovana in vacuo, zatim je prečišćena sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-10% EtOAc/MeOH),

1

da se dobije jedinjenje iz naslova (2.5 g, 50%) kao bela čvrsta supstanca. LCMS (ES+) [M+H]<+>482.2, RT 2.40 minuta (Postupak 4).

INTERMEDIJER 5

(R)-N-(3-Cijano-1-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-6-Metil-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]pirimidin-2-il}-3-Metilciklobutil)-2-Metilpropan-2-sulfinamid

[0105] U tribazni kalijum fosfat (171 mg, 0.80 mmol), tricikloheksilfosfonijum tetrafluoroborat (18.8 mg, 0.050 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (16.7 mg, 0.018 mmol) i Intermedijer 4 (126 mg, 0.263 mmol) dodat je Intermedijer 2 (83 mg, 0.225 mmol) rastvoren u degaziranom 1,4-dioksanu (1.5 mL). Dodata je degazirana voda (0.04 mL) i reakciona smeša je degazirana pod tri ciklusa vakuuma i azota, nakon čega je preneta u zatvorenu epruvetu i postavljena je u prethodno zagrejan blok na 110°C tokom 3 h. Reakcinoj smeši je dozvoljeno da se ohladi do sobne temperature, zatim je razblažena sa EtOAc (20 mL) i vodom (20 mL). Organski sloj je razdvojen i vodeni sloj je ekstrahovan sa dodatnim EtOAc (20 mL). Organski slojevi su kombinovani i isprani sa slanim rastvorom (20 mL), zatim osušeni (Na2SO4) i proceđeni. Rastvarač je uklonjen in vacuo. Dobijeno braon ulje je prečišćeno sa fleš hromatografijom na koloni od silke (gradijentna elucija sa 100% izoheksanom do 100% EtOAc, praćeno sa 100% DCM do 25% Me-OH/DCM) da se dobije jedinjenje iz naslova (178 mg, 92%) (smeša trans i cis izomera) kao braon ulje. LCMS (ES+) [M+H]<+>646.2, RT 1.11 minuta (Postupak 3).

INTERMEDIJER 6

(R)-N(3-Cijano-1-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]pirimidin-2-il}-3-Metilciklobutil)-2-Metil propan-2-sulfinamid

[0106] U smešu tribaznog kalijum fosfata (80 mg, 0.377 mmol), Intermedijera 2 (50 mg, 0.121 mmol) i (7R,14R)-1-(difluorometoksi)-11-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-ona (WO 2016/050975, Intermedijer 171) (60 mg, 0.128 mmol) pod prisustvom azota dodati su tricikloheksilfosfonijum tetrafluoroborat (5 mg,

2

0.013 mmol) i tris-(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (6 mg, 0.0064 mmol). Reagensi su rastvoreni u 1,4-dioksanu (3 mL) i dodata je voda (0.2 mL), zatim je reakcina smeša degazirana pod vakuumom i azotom, pre nego što su zagrejani na refluksu preko noći. Reakcina smeša je razblažena sa EtOAc (20 mL) i vodom (20 mL). Organski sloj je razdvojen i vodeni sloj je ekstrahovan dalje sa EtOAc (20 mL). Organski sloj je razdvojen i proceđen je kroz separator faza , nakon čega je koncentrovan in vacuo. Dobijeno sirovo braon ulje je prečišćeno sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-100% DCM/EtOAc, praćeno sa 1-10% MeOH/EtOAc) da se dobije jedinjenje iz naslova (51 mg,

57%) kao žuta čvrsta supstanca . LCMS (ES+) [M+H] 632.0, RT 1.85 minuta (Postupak 1). LCMS (ES+) [M+H]<+>632.1, RT 1.81 minuta (Postupak 2).

INTERMEDIJER 7

(R)-N-[trans-1-(5-Bromo-3-fluoropiridin-2-il)-3-cijano-3-Metilciklobutil]-2-Metilpropan-2-sulfinamid

[0107] 2,5-Dibromo-3-fluoropiridin (536 mg, 2.11 mmol) je rastvoren u DCM (100 mL) i ohlađen pod azotom do -78°C. n-Butilitijum (2.5M, 0.9 mL, 2 mmol) je dodat u kapima, i reakcina smeša je mešana na -78°C pod azotom tokom 5 minuta, pre sporog dodavanja Intermedijera 1 (390 mg, 1.84 mmol) rastvorenog u DCM (10 mL) pomoću šprica. Reakciona smeša je mešana na -78°C tokom 1 h, zatim tokom 2 h u ledenom kupatila. Reakcina smeša je zaustavljena zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida (50 mL), zatim organski sloj je razdvojen i ispran sa slanim rastvorom (50 mL). Organski sloj je razdvojen i proceđen je kroz separator faza, zatim je rastvarač je uklonjen in vacuo. Dobijeno sirovo tamno crveno/braon ulje je prečišćeno fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 100% izoheksanom do 100% EtOAc) da se dobije jedinjenje iz naslova (220 mg, 28%). LCMS (ES+) [M+H]<+>388.0/390.0, RT 0.961 minuta (Postupak 3).

INTERMEDIJER 8

(R)-N-(cis-3-Cijano-1-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-6-Metil-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]-3-fluoropiridin-2-il}-3-metilciklobutil)-2-metil propan-2-sulfinamid

[0108] U smešu Intermedijera 4 (113 mg, 0.241 mmol) i tribaznog kalijum fosfata (167 mg, 0.773 mmol) dodat je rastvor Intermedijera 7 (75 mg, 0.193 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL). Reakciona smeša je degazirana i isprana sa azotom. Tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (9.1 mg, 0.0097 mmol) i tricikloheksilfosfonijum tetrafluoroborat (8.8 mg, 0.023 mmol) u 1,4-dioksanu su dodati sa nekoliko kapi vode. Reakcina smeša je zagrevana pod mikrotalasnim zračenjem tokom 4 h na 120°C, zatim seu razdvojeni između EtOAc i rastvora soli. Organski sloj je proceđen kroz separator faza ai organska faza je koncentrovana in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 100% izoheksanom do 100% EtOAc, koje prati 1-15% MeOH/DCM) da se dobije jedinjenje iz naslova (102 mg, 81%) kao beličasta čvrsta supstanca. LCMS (ES+) [M+H]<+>663, RT 1.32 minuta (Postupak 5).

INTERMEDIJER 9

(R)-N-(cis-3-Cijano-1-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2- b][2,5]benzodiazocin-11-il]-3-fluoropiridin-2-il}-3-metilciklobutil)-2-Metil propan-2-sulfinamid

[0109] (7R,14R)-1-(Difluorometoksi)-11-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-on (WO 2016/050975, Intermedijer 171) (297 mg, 0.636 mmol) je tretiran sa tribaznim kalijum fosfatom (441 mg, 2.04 mmol), zatim je dodat Intermedijer 7 (220 mg, 0.510 mmol), koje prati 1,4-dioksan (3 mL). Reakciona smeša je degazirana i isprana sa azotom. Dodati su tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (24 mg, 0.025 mmol) i tricikloheksilfosfonijum tetrafluoroborat (23 mg, 0.061 mmol), zajedno sa nekoliko kapi vode. Smeša je zagrejana pod mikrotalasnim zračenjem na 120°C tokom 4 h. U reakcionu smešu su dodati EtOAc i rastvor soli, koji su mešani pre ceđenja kroz separator faza. Organska faza je koncentrovana in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija 100% izoheksanom do 100% EtOAc, koje prati 1-15% MeOH u DCM) da se dobije jedinjenje iz naslova (189 mg, 54%) kao beličasta čvrsta supstanca. LCMS (ES+) [M+H]<+>649.2, RT 1.32 minuta (Postupak 5).

INTERMEDIJER 10

(S)-2-Metil -N-(2-Metil ciklobutiliden)propan-2-sulfinamid

[0110] 2-Metil ciklobutan-1-on (1.00 g, 11.3 mmol) je rastvoren u THF (30 mL) i dodat je (S)-2-Metil -2-propansulfinamid (1.20 g, 9.60 mmol), koje prati titanijum(IV) etoksid (4.0 mL, 19 mmol). Reakciona smeša je mešana na s.t. tokom 48 h. Voda(5 mL) je dodata i smeša je mešana, zatim je dodat EtOAc (100 mL), koje prati Na2SO4(10 g). Nakon 15 minuta smeša je proceđena, i čvrste supstance su isprane sa EtOAc (3 x 15 mL). Kombinovani organski slojevi su koncentrovani in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-40% EtOAc u izoheksanu) da se dobije jedinjenje iz naslova (1.55 g, 86%) kao bezbojno ulje. LCMS (ES+) [M+H]<+>188.2, RT 1.37 minuta i 1.41 minuta (Postupak 4).

N-[(1S,2R)-1-(5-Bromo-3-fluoropiridin-2-yl)-2-Metilciklobutil]-2-Metilpropan-2-sulfinamid ili N-[(1R,2S)-1-(5-Bromo-3-fluoropiridin-2-il)-2-Metil ciklobutil]-2-Metilpropan-2-sulfinamid

[0111] 2,5-Dibromo-3-fluoropiridin (2.34 g, 8.81 mmol) je rastvoren u DCM (30 mL) i ohlađen do -78°C pod azotom, zatim je dodat N-butilitijum (2.5M, 3.5 mL, 8.8 mmol). Reakciona smeša je mešana tokom 10 minuta pre dodavanja rastvora Intermedijera 10 (1.50 g, 8.01 mmol) u DCM (3 mL). Smeša je mešana na -78°C tokom 2 h, zatim je zaustavljena sa zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida (30 mL) i mešana je tokom 5 minuta. Organski sloj je razdvojen i osušen (Na2SO4), zatim je proceđen i koncentrovan in vacuo. Dobijeni sirovi ostatak je prečišćen sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-45% EtOAc u izoheksanima) da se dobije jedinjenje iz naslova (800 mg, 27%; cis-isomer), plus 3:1 smeša predominantno trans-izomera sa drugim cis-izomerom (650 mg, 22%). Jedinjenje iz naslova:<δ>H(300 MHz, CDCl3) 8.49-8.39 (m, 1H), 7.54 (dd, J 9.9, 1.9 Hz, 1H), 3.87 (s, 1H), 2.92 (dtt, J 12.3, 9.0, 1.6 Hz, 1H), 2.71 (h, J 7.4 Hz, 1H), 2.45-2.32 (m, 1H), 2.11-1.97 (m, 1H), 1.86-1.69

(m, 1H), 1.28-1.23 (m, 12H). LCMS (ES+) [M+H] 363.0 i 365.0, RT 2.28 minuta (Postupak 4).

INTERMEDIJER 12

1S,2R)-1-{5-[(7R,14R)-1-(Difluorometoksi)-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]-3-fluoropiridin-2-il}-2-Metilciklobutil]-2-Metilpropan-2-sulfinamid ili N-[(1R,2S)-1-{5-[(7R,14R)-1-(Difluorometoksi)-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-11-il]-3-fluoropiridin-2-il}-2-Metilciklobutil]-2-Metil propan-2-sulfinamid

[0112] U Intermedijer 11 (187 mg, 0.51 mmol), (7R,14R)-1-(difluorometoksi)-11-(4,4,5,5-tetrametil -1,3,2-dioksaborolan-2-il)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-on (WO 2016/050975, Intermedijer 171) (200 mg, 0.43 mmol), tricikloheksilfosfonijum tetrafluoroborat (16 mg, 0.042 mmol) i tris-(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (20 mg, 0.021 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL) pod azotom dodat je tribazni kalijum fosfat (278 mg, 1.28 mmol) u vodi (1 mL). Reakciona smeša je degazirana pod azotom, zatim je zatvorena u epruveti pod pritiskom i zagrejana na 105°C tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena do s.t., zatim je podeljena između DCM i vode. Organski sloj je

2

razdvojen i osušen (Na2SO4), zatim je proceđen i koncentrovan in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija 0-10% MeOH u DCM) da se dobije jedinjenje iz naslova (145 mg, 54%) kao žuta čvrsta supstanca. LCMS (ES+) [M+H]<+>624.2, RT 2.44 minuta (Postupak 4).

INTERMEDIJER 13

N-(Ciklobutiliden)-2-Metil propan-2-sulfinamid

[0113] Rastvor ciklobutanona (100 g, 1.43 mol) u THF (722 mL) je ohlađen do 15-20°C. Dodat je 2-metil-2-propanesulfinamid (144 g, 1.19 mol), koji je ohlađen do 15-20°C, koje prati titanijum(IV) izopropoksid (847 g, 2.98 mol). Reakciona smeša je zagrejana na 60°C tokom 16 h, nakon čega je koncentrovana in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija, 0-20% EtOAc/petroleum etar) da se dobije jedinjenje iz naslova (kombinovani prinos iz 19 serija: 2.14 kg, 55%) kao žuto ulje.<δ>H(400 MHz, DMSO-d6) 3.37-3.17 (m, 1H), 3.14-3.07 (m, 3H),

INTERMEDIJER 14

N-[1-(5-Bromopirimidin-2-il)ciklobutil]-2-Metilpropan-2-sulfinamid

[0114] 5-Bromo-2-jodopirimidin (345 g, 1.21 mol) je ohlađen do 15-20°C i rastvoren u anhidrovanom DCM (6 L). Reakciona smeša je ohlađena do između -60°C i -70°C, gde oko 2.5M n-butilitijuma (450 mL, 1.13 mol) je dodato u kapima. Reakciona smeša je mešana tokom 2 h na temperaturi između -60°C i -70°C, zatim je dodat rastvor Intermedijera 13 (150 g, 866 mmol) u anhidrovanom DCM (150 mL). Temperatura je održavana između -60°C i -70°C tokom 2 h sa mešanjem, pre zagrevanja do 15-20°C. Reakciona smeša je još dalje mešana 12 h, zatim je zaustavljena sa vodom (100 mL). Jedanaest serija je kombinovano i ekstrahovano sa DCM (2 x 3330 mL). Organski sloj je ispran sa rastvorom soli (1650 mL), razdvojen i osušen (Na2SO4), zatim je proceđen i koncentrovan in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 1:0:10 do 1:1:3 EtOAc/DCM/petroleum etar) da se dobije jedinjenje iz naslova (kombinovani prinos iz 11 serija: 1.38 kg, 44%) kao žuta čvrsta supstanca .<δ>H(400 MHz, DMSO-d6) 9.00 (s, 2H), 2.65-2.45 (m, 2H), 2.44-2.42 (m, 2H), 1.99-1.94 (m, 1H), 1.73-1.70 (m, 1H), 1.07 (s, 9H).

INTERMEDIJER 15

1-(5-Bromopirimidin-2-il)ciklobutanamin hidrohlorid

[0115] U šest odvojenih serija Intermedijer 14 (302 g, 909 mmol) je rastvoren u MeOH (1.2 L) na 15-20°C. U smešu je dodat MeOH/hlorovodonična kiselina(600 mL), i reakciona smeša je mešana na 15-20°C tokom 2 h. Šest serija je kombinovano i koncentrovano. U sirovi ostatak su dodati izopropil etar (9 L) i MeOH (1 L). Smeša je mešana tokom 1 h na 15-20°C. Čvrsta supstanca je proceđena, isprana sa DCM (3 L) i osušena, da se dobije jedinjenje iz naslova (1.21 kg, 84%) kao žuta čvrsta supstanca .<δ>H(400 MHz, CD3OD) 9.02 (s, 2H), 2.84-2.82 (m, 2H), 2.81-2.78 (m, 2H), 2.60-2.27 (m, 2H).

INTERMEDIJER 16

terc-Butil N-[1-(5-bromopirimidin-2-il)ciklobutil]karbamat

[0116] U suspenziju Intermedijera 15 (202 g, 764 mmol) u THF (400 mL), koja je ohlađena na ledenom kupatilu, dodati su di-terc-butil dikarbonat (183 g, 832 mmol) i trietilamin (154 g, 212 mL, 1.51 mol). Smeša je mešana na 0-5°C tokom 30 minuta, zatim je ledeno kupatilo uklonjeno i dozvoljeno je da reakciona smeša dostigne sobnu temperaturu. Reakciona smeša je podeljena između EtOAc (1000 mL) i vode (600 mL). Vodena faza je razdvojena, nakon čega je organska faza sekvencijalno isprana sa vodom (600 mL) i slanim rastvorom (2 x 200 mL). Organska faza je osušena (Na2SO4), proceđena i koncentrovana in vacuo. Dobijena sirova čvrsta supstanca je osušena preko noći in vacuo na 50°C da se dobije jedinjenje iz naslova (254 g, kvantitativno) kao beličasta čvrsta supstanca. LCMS (ES+) [M+Na]<+>350.0, RT 2.20 minuta (Postupak 4).

2

INTERMEDIJER 17

terc-Butil (1-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-6-Metil-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2- b][2,5]benzodiazocin-11-il]pirimidin-2-il}ciklobutil)-karbamat

[0117] Balon koji je osušen plamenom pod azotom koji je opremljen sa refluks kondenzatorom je napunjen sa Intermedijerom 3 (13.3 g, 34.0 mmol), tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (1.61 g, 1.71 mmol), XPhos (1.63 g, 3.43 mmol), bis(pinakolato)diboronom (9.85 g, 38.8 mmol) i kalijum acetatom (8.5 g, 87 mmol), nakon čega je dodat 1,4-dioksan (136 mL). Dobijena smeša je mešana na 100°C tokom 22 h pre nego što su dodati Intermedijer 16 (12.3 g, 37.4 mmol) i vodeni rastvor tribaznog kalijum fosfata (1.27 mol/L, 40 mL, 50.8 mmol). Reakciona smeša je zagrejana pod refluksom u trajanju od 3 h pre nego što je napunjena sa dodatnim tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (500 mg, 0.53 mmol), XPhos (510 mg, 1.07 mmol) i vodenim rastvororm tribaznog kalijum fosfata (1.27 mol/L, 20 mL, 25.4 mmol). Smeša je mešana u trajanju od 1 h, nakon čega je ohlađena do sobne temperature, razblažena sa DCM (600 mL) i isprana sa slanim rastvorom (400 mL). Vodena faza je ekstrahovana sa DCM (500 mL), zatim su kombinovani organski ekstrakti provedeni kroz separator faza i koncentrovani in vacuo. Prečišćavanje fleš hromatografijom na siliki (elucija sa 0-5% MeOH/DCM) dalo je jedinjenje iz naslova (18.0 g, 88%) kao beličastu čvrstu supstancu .<δ>H(400 MHz, CDCl3) 8.93 (s, 2H), 8.49 (dd, J 8.2, 1.3 Hz, 1H), 7.84 (dd, J 8.5, 0.7 Hz, 1H), 7.74-7.63 (m, 1H), 7.48-7.38 (m, 2H), 7.34-7.29 (m, 1H), 6.84 (t, J 72.8 Hz, 1H), 6.31 (d, J 7.2 Hz, 1H), 5.92 (s, 1H), 5.01 (d, J 7.1 Hz, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.51-3.43

(m, 1H), 2.90 (d, J 13.6 Hz, 1H), 2.84-2.57 (m, 3H), 2.22-2.07 (m, 3H), 1.43 (s, 9H). LCMS (ES+) [M+H] 603.2, RT 1.25 minuta (Postupak 3).

INTERMEDIJER 18

3-Benziloksi-1-Metilciklobutanol

[0118] Metil magnezijum jodid je pripremljen sporim dodavanjem jodometana (42.6 mL, 681 mmol) u smešu magnezijuma (20.7 g, 851 mmol) u dietiletru (500 mL). Smeša je zagrejana na toplom vodenom kupatilu tokom 30 minuta. Rastvor metil magnezijum jodida je ohlađen u kupatilu na suvom ledu/acetonu do unutrašnje temperature -25°C, nakon čega je polako dodavan rastvor 3-benziloksiciklobutan-1-ona (94 mL, 567 mmol) u dietil etru (100 mL), održavajući unutrašnju temperaturu ispod -10°C. Nakon što je dodavanje završeno, smeša je mešana na -10°C, zagrevanjem do 15°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je ohlađena do 0°C, zatim je razblažena sa dietil etrom i zaustavljena sa zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida. Organski sloj je razdvojen i vodeni sloj je ekstrahovan sa dietil etrom (2 x 300 mL). Kombinovani organski slojevi su proceđeni i isprani sa

2

zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida, zatim osušeni (Na2SO4), proceđeni i koncentrovani in vacuo, da se dobije jedinjenje iz naslova (109 g, 100%) (∼3:1 smeša stereoizomera) kao žuto ulje. GCMS: glavni izomer RT 3.664 (74.6%), [M-C7H7]<+>101, [M-C5H9O2]<+>91; manji izomer RT 3.630 (25.4%), [M-C7H7]<+>101, [M-C5H9O2]<+>91 (Postupak 12).

INTERMEDIJER 19

(3-Benziloksi-1-Metil ciklobutoksi)-terc-butil(dimetil)silan

[0119] Imidazol (190 g, 2.79 mol) je dodat u rastvor Intermedijera 18 (107 g, 558 mmol) u DMF (1 L). terc-Butil(hloro)dimetilsilan (252 g, 1.67 mmol) je dodat. Reakciona smeša je mešana na s.t. preko noći, zatim je sipana u lednu vodu. Vodena faza je ekstrahovana sa dietil etrom (3 x 500 mL). Organski slojevi su kombinovani i isprani sa vodom, zatim osušeni (Na2SO4), proceđeni i koncentrovani in vacuo. Dobijeno sirovo žuto ulje (291 g) je prečišćeno fleš hromatografijom na koloni od silike (heptan, koji prati 2% EtOAc u heptanu) da se dobije jedinjenje iz naslova (121 g, 46%) (∼3:1 smeša stereoizomera). Glavni izomer:<δ>H(400 MHz, CDCl3) 7.38-7.24 (m, 5H), 4.40 (s, 2H), 3.70-3.62 (m, 1H), 2.41-2.33 (m, 2H), 2.18-2.09 (m, 2H), 1.28 (s, 3H), 0.87 (s, 9H), 0.07 (s, 6H).

INTERMEDIJER 20

3-[terc-Butil(dimetil)silil]oksi-3-Metilciklobutanol

[0120] Smeša Intermedijera 19 (121 g, 257 mmol) u etanolu (500 mL) je tretirana sa Norit (ili aktivnim ugljem) (13 g) i mešana je tokom 1 h. Smeša je kroz diatomejsku zemlju (engl.kieselguhr) i isprana je sa etanolom (500 mL). Filtrat je prenet u 3-grli balon sa okruglim dnom (4 L) i smeša je evakuisana i ponovo napunjena tri puta sa argonom. Suspenzija paladijuma na aktivisanom ugljeniku (10%, 6.1 g, 5.73 mmol) u vodi je dodata i smeša je evakuisana i ponovo napunjena sa argonom. Smeša je evakuisana i ponovo napunjena tri puta sa vodonikom, zatim je mešana preko noći na s.t. Smeša je proceđena kroz kieselguhr pod protokom azota, zatim je isprana sa etanolom. Filtrat je koncentrovan in vacuo. Sirovi ostatak (68 g) je kombinovan sa dodatnim serijama (62 g i 63 g), zatim je prečišćen sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 10-20% EtOAc u heptanu), da se dobije jedinjenje iz naslova (164 g, 85%) (∼8:2 smeša izomera) kao bezbojno ulje.<δ>H(400 MHz, CDCl3) 4.52-4.43 (m, 0.2H), 3.98-3.87 (m, 0.8H), 2.50-2.40 (m, 2H), 2.10-2.02 (m, 1.6H), 1.98-1.91 (m, 0.4H), 1.64-1.58 (m, 0.8H), 1.58-1.52 (m, 0.2H), 1.44 (s, 0.6H), 1.28 (s, 2.4H), 0.88 (s, 7H), 0.87 (s, 2H), 0.07 (s, 6H).

2

INTERMEDIJER 21

3-[terc-Butil(dimetil)silil]oksi-3-Metilciklobutanon

[0121] U rastvor Intermedijera 20 (192 g, 887 mmol) u DCM (2 L) na 5°C dodat je Dess-Martin perjodinan (452 g, 1.07 mmol). Suspenzija je mešana na 10°C tokom 1 h, nakon čega je omogućeno da se zagreje na s.t. tokom 1 h. Reakciona smeša je sipana u zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (∼1 L) i mešana je sve do prestanka razvijanja gasa. Vodeni rastvor natrijum tiosulfata (10%) je dodat, i smeša je mešana u trajanju od 1 h. Slojevi su razvijeni i vodena faza je ekstrahovana sa DCM. Organski slojevi su kombinovani i osušeni (Na2SO4), zatim su proceđeni i koncentrovani in vacuo. Dobijeno sirovo žuto ulje je prečišćeno sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-20% EtOAc u heptanu) da se dobije jedinjenje iz naslova (186 g, 98%) kao bezbojno ulje.<δ>H(400 MHz, CDCl3) 3.25-3.13 (m, 2H), 3.03-2.90 (m, 2H), 1.59 (s, 3H), 0.89 (s, 9H), 0.11 (s, 6H).

INTERMEDIJER 22

(S)-N-{3-[terc-Butil(dimetil)silil]oksi-3-Metilciklobutiliden}-2-metilpropan-2-sulfinamid

[0122] U rastvor Intermedijera 21 (186 g, 0.87 mol) u THF (2 L) dodat je (S)-(-)-terc-butilsulfinamid (126 g, 1.04 mol), koje prati titanijum(IV) etoksid (367 mL, 1.74 mol). Reakciona smeša je mešana preko noći na s.t.,nakon čega je koncentrovana in vacuo. Ostatak je razblažen sa acetonitrilom. Voda (47 mL) je dodata i reakciona smeša je mešana tokom 10 minuta, zatim je proceđena kroz kieselguhr i isprana je sa acetonitrilom. Filtrat je koncentrovan in vacuo. Dobijeno sirovo žuto ulje (264 g) je prečišćeno fleš hromatografijom na koloni od silike (10% EtOAc u heptanu) da se dobije jedinjenje iz naslova (223 g, 81%) (∼1:1 smeša izomera) kao bezbojno ulje.<δ>H(400 MHz, CDCl3) 3.59-3.41 (m, 1H), 3.34-3.11 (m, 2H), 3.05-2.92 (m, 1H), 1.52-1.41 (m, 3H), 1.21 (s, 9H), 0.85 (s, 9H), 0.06 (s, 6H). LCMS [M+H]<+>318, RT 2.34 minuta (Postupak 6).

INTERMEDIJER 23

2

(S)-N-{cis-1-(5-Bromo-3-fluoropiridin-2-il)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-3-Metilciklobutil}-2-Metil propan-2-sulfinamid

[0123] Trogrli balon sa okruglim dnom (2 L) je napunjen sa 2,5-dibromo-3-fluoropiridinom (26.9 g, 106 mmol) i DCM (750 mL). Dobijeni rastvor je ohlađen sa suvim ledom/izopropanolom do -70°C, zatim je u kapima dodavan n-butilitijum (2.5M u heksanima; 46 mL, 115 mmol), da se dobije tamni rastvor na -50°C. Temperatura je snižena do -66°C i rastvor Intermedijera 22 (30.5 g, 96 mmol) u DCM (150 mL) je dodavan u kapima. Nakon dodavanja, smeša je mešana tokom 1.5 h, vreme za koje je temperature porasla do -30°C. Reakcina smeša je zaustavljena zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida, i dodata je voda da bi se rastvorile istaložene soli. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa DCM. Kombinovani organski slojevi su isprani sa rastvorom soli i osušeni (Na2SO4), zatim proceđeni i koncentrovani in vacuo. Dobijeno sirovo tamno braon ulje (49.7 g) je prečišćeno fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 10-60% EtOAc u heptanu) da se dobije jedinjenje iz naslova (9.71 g, 21%).<δ>H(400 MHz, CDCl3) 8.47-8.41 (m, 1H), 7.56 (dd, J 9.9, 1.9 Hz, 1H), 3.91 (s, 1H), 3.35 (dd, J 12.6, 3.6 Hz, 1H), 2.97-2.87 (m, 1H), 2.73 (d, J 12.6 Hz, 1H), 2.54 (d, J 12.6 Hz, 1H), 1.15 (s, 9H), 1.11 (s, 3H), 0.90 (s, 9H), 0.10 (s, 6H). LCMS [M+H]<+>493/495 (Br-patern), RT 2.50 minuta (Postupak 6).

INTERMEDIJER 24

(S)-N-(cis-3-[terc-Butil(dimetil)silil]oksi-1-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-6-Metil-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]-3-fluoropiridin-2-il}-3-metil ciklobutil)-2-Metil propan-2- sulfinamid

[0124] Trogrli balon sa okruglim dnom (2 L) je napunjen sa Intermedijerom 3 (25.6 g, 65.7 mmol), kalijum acetatom (16.1 g, 164 mmol), bis(pinakolato)diboronom (20.0 g, 79 mmol) i anhidrovanim 1,4-dioksanom (400 mL). Reakciona smeša je evakuisana i ponovo napunjena tri puta sa argonom. Tris(dibenzilidneaceton)dipaladijum(0) (5 mol %, 3.01 g, 3.28 mmol) i XPhos (10 mol %, 3.13 g, 6.57 mmol) su dodati. Aparat je evakuisan i ponovo napunjen dva puta sa argonom, zatim je postavljen u prethodno zagrejano uljano kupatilo na 110°C tokom 2.5 h. Reakciona smeša je ohlađena do s.t. i dodat je Intermedijer 23 (32.4 g, 65.7 mmol), rastvoren u 1,4-dioksanu (400 mL). Trikalijumfosfat (20.9 g, 99 mmol) i voda (200 mL) su dodati, koje prati [1,1’-bis(difenilfosfino)-ferocen]dihloro paladijum(II) (5 mol %, 2.40 g, 3.28 mmol). Reakciona smeša je evakuisana i ponovo napunjena dva puta sa argonom, zatim je postavljena u prethodno zagrejano uljano kupatilo na 115°C tokom 1 h. Reakciona smeša je ohlađena do s.t., nakon čega su dodati tritiocijanurinska kiselina (5.24 g, 29.6 mmol) i aktivirani ugalj (12 g). Smeša je mešana preko noći, nakon čega je proceđena kroz uložak od kieselguhr. Uložak filtera je ispran sa EtOAc i MeOH. Filtrat je razblažen sa vodom (600 mL) i slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc (2 x 400 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa rastvorom soli i osušeni (Na2SO4), zatim su proceđeni i koncentrovani in vacuo. Dobijena sirova tamna gusta polučvrsta materija (∼130 g) je prečišćena fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-20% MeOH u EtOAc), koje prati ponovo prečišćavanje fleš hromatografijom na koloni od silike (0-10% MeOH u EtOAc), da se dobije jedinjenje iz naslova (44.6 g, 88%).<δ>H(400 MHz, CDCl3) 8.63 (t, J 1.5 Hz, 1H), 8.52-8.48 (m, 1H), 7.79 (d, J 8.5 Hz, 1H), 7.69 (d, J 1.3 Hz, 1H), 7.56 (dd, J 11.9, 1.7 Hz, 1H), 7.46 (dd, J 8.5, 1.7 Hz, 1H), 7.43 (t, J 8.2 Hz, 1H), 7.35 (d, J 8.1 Hz, 1H), 6.88 (t, J 72.7 Hz, 1H), 6.28 (d, J 7.2 Hz, 1H), 4.98 (d, J 7.1 Hz, 1H), 4.00 (s, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.51-3.40 (m, 1H), 3.07-2.99 (m, 1H), 2.89

2

(d, J 13.6 Hz, 1H), 2.78 (d, J 12.5 Hz, 1H), 2.62 (d, J 12.6 Hz, 1H), 1.63 (s, 1H), 1.17 (s, 9H), 1.16 (s, 3H), 0.92 (s, 9H), 0.12 (s, 6H). LCMS [M+H]<+>768, RT 2.44 minuta (Postupak 6).

INTERMEDIJER 25

(S)-N-(cis-3-[terc-Butil(diMetil)silil]oksi-1-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]-3-fluoropiridin-2-il}-3-Metil ciklobutil)-2-Metilpropan-2-sulfinamid

[0125] (7R,14R)-1-(Difluorometoksi)-11-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-on (WO 2016/050975, Intermedijer 171) (1.3 g, 2.78 mmol), Intermedijer 23 (900 mg, 1.82 mmol) i tribazni kalijum fosfat (1.58 g, 7.29 mmol) su suspendovani u smeši 1,4-dioksana (22 mL) i vodi (2 mL). Reakciona smeša je degazirana tri puta sa azotom, zatim je dodat tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (90 mg, 0.095 mmol). Reakciona smeša je dalje degazirana sa azotom i zagrejana je na 120°C tokom 2.5 h. Smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana je dva puta sa EtOAc. Organske faze su kombinovane i osušene (natrijum sulfat), zatim proceđene i koncentrovane in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-100% EtOAc/heksan, koje prati 0-10% MeOH/DCM) da se dobije jedinjenje iz naslova (930 mg, 65%). LCMS (ES+) [M+H]<+>754.2, RT 3.26 minuta (Postupak 4).

INTERMEDIJER 26

Metil 3,3-dimetoksiciklobutankarboksilat

[0126] Metil3-oksociklobutankarboksilat (45 g, 394 mmol), trimetilortoformijat (259 mL, 2.37 mol) i p-toluensulfonska kiselina monohidrat (7.50 g, 39.4 mmol) su kombinovani u MeOH (500 mL). Rastvor je mešan na refluksu tokom 2 h, zatim je ohlađen do s.t. i koncentrovan in vacuo. Ostatak je rastvoren u dietil etru (500 mL) i ispran je sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata (500 mL). Vodena faza je ekstrahovana sa dietil etrom (500 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa rastvorom soli i osušeni (Na2SO4), zatim su proceđeni i koncentrovani in vacuo, da se dobije jedinjenje iz naslova (74.4 g).<δ>H(400 MHz, CDCl3) 3.70 (s, 3H), 3.17 (s, 3H), 3.15 (s, 3H), 2.94-2.83 (m, 1H), 2.48-2.34 (m, 4H).

INTERMEDIJER 27

Metil 3,3-dimetoksi-1-Metilciklobutankarboksilat

[0127] n-Butillitijum u heksanima (2.5M, 133 mL, 332 mmol) je dodat u ohlađeni rastvor diizopropilamina (56 mL, 398 mmol) u THF (1 L) na -78°C. Smeša je mešana tokom 15 minuta pre dodavanja u kapima Intermedijera 26 (68 g, 332 mmol) u THF (50 mL). Reakciona smeša je mešana tokom 30 minuta pre dodavanja jodometana u kapima (41 mL, 664 mmol), što je uzrokovalo povećanje unutrašnje temperature do -60°C. Reakciona smeša je mešana na -78°C tokom 30 minuta, nakon čega je zagrejana do sobne temperature. Reakciona smeša je sipana u zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida (1 L) i ekstrahovana je sa dietil etrom (2 x 500 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa rastvorom soli i osušeni (Na2SO4), zatim proceđeni i koncentrovani in vacuo. Sirovi ostatak (64.7 g) je prečišćen fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 10-40% EtOAc u heptanu) da se dobije jedinjenje iz naslova (52.5 g).<δ>H(400 MHz, CDCl3) 3.71 (s, 3H), 3.16 (s, 3H), 3.13 (s, 3H), 2.67-2.58 (m, 2H), 2.10-2.01 (m, 2H), 1.44 (s, 3H).

INTERMEDIJER 28

(3,3-Dimetoksi-1-Metilciklobutil)metanol

[0128] U rastvor Intermedijera 27 (42 g, 224 mmol) u THF (800 mL), ohlađenom u ledenom kupatilu, dodat je 2.4M rastvor litijum aluminijum hidrida u THF (94 mL, 235 mmol). Reakciona smeša je mešana na s.t. tokom 60 minuta. Voda (8 mL) je dodata u kapima, koju prati 10% vodeni rastvor natrijum hidroksida (8 mL). U suspenziju je dodata voda (24 mL) i smeša je mešana. Dodaje se natrijum sulfat i granularna suspenzija je proceđena. Filtrat je ispran sa dietil etrom, i kombinovan filtrat je koncentrovan in vacuo, da se dobije jedinjenje iz naslova (38 g, 15%) kao svetlo ulje.<δ>H(400 MHz, CDCl3) 3.50 (d, J 5.6 Hz, 2H), 3.15 (s, 3H), 3.14 (s, 3H), 2.11 (d, J 13.2 Hz, 2H), 1.94-1.82 (m, 2H), 1.19 (s, 3H). GCMS [M-CH3O]<+>129, RT 2.325 (90.2%) (Postupak 12).

1

INTERMEDIJER 29

3-(Hidroksimetil )-3-Metilciklobutanon

[0129] U mešani rastvor Intermedijera 28 (44.8 g, 280 mmol) u acetonu (600 mL) i vodi (200 mL) dodat je p-toluenesulfonska kiselina monohidrat (53.2 g, 280 mmol). Reakciona smeša je zagrejana na 65°C tokom 1 h, zatim je ohlađena do s.t. Aceton je uklonjen koncentrovanjem in vacuo. Dobijena smeša je razblažena sa DCM i isprana je sa vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata. Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan tri puta sa DCM. Kombinovani organski slojevi su osušeni (MgSO4), zatim proceđeni i koncentrovani in vacuo, da se dobije jedinjenje iz naslova (30.8 g, 78%).<δ>H(400 MHz, CDCl3) 3.69 (d, J 5.1 Hz, 2H), 3.09-2.97 (m, 2H), 2.76-2.64 (m, 2H), 1.36 (s, 3H).

3-({[terc-Butil(dimetil)silil]oksi}Metil)-3-Metilciklobutanon

INTERMEDIJER 30

3-({[terc-Butil(dimetil)silil]oksi}metil)-3-metilciklobutanon

[0130] Imidazol (0.63 g, 9.29 mmol) je dodat u rastvor Intermedijera 29 (10.6 g, 55.0 mmol) u DMF (150 mL), zatim je dodat terc-butil(hloro)dimetilsilan (24.9 g, 165 mmol). Reakciona smeša je mešana na s.t. preko noći. Dodaje se dietil etal, koji prati dodavanje rastvora soli. Organski sloj je razdvojen i ispran tri puta sa rastvorom soli. Organski slojevi su osušeni i koncentrovani in vacuo. Sirovi ostatak (62 g) je prečišćen fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-10% EtOAc u heptanu) da se dobije jedinjenje iz naslova (59.5 g) kao žuto ulje.<δ>H(400 MHz, CDCl3) 3.59 (s, 2H), 3.08-2.98 (m, 2H), 2.66-2.56 (m, 2H), 1.30 (s, 3H), 0.89 (s, 9H), 0.06 (s, 6H).

INTERMEDIJER 31

2

(S)-N-[3-({[terc-Butil(dimetil)silil]oksi}Metil)-3-Metilciklobutiliden]-2-Metilpropan-2-sulfinamid

[0131] U rastvor Intermedijera 30 (54.5 g, 205 mmol) u THF (500 mL) dodati su (S)-2-Metil propan-2-sulfinamid (29.8 g, 246 mmol) i titanijum(IV) etoksid (87 mL, 410 mmol). Reakciona smeša je mešana preko noći na s.t., nakon čega je koncentrovana in vacuo. Ostatak je razblažen sa acetonitrilom, zatim je dodata voda (47 mL). Smeša je mešana tokom 10 minuta, zatim je proceđena kroz kieselguhr i isprana sa acetonitrilom. Filtrat je koncentrovan in vacuo. Dobijeno sirovo žuto ulje (71.5 g) je prečišćeno fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-20% EtOAc u heptanu) da se dobije jedinjenje iz naslova (66.9 g, 98%) kao žuto ulje (∼1:1 smeša izomera).<δ>H(400 MHz, CDCl3) 3.50 (d, J 1.6 Hz, 2H), 3.46-3.38 (m, 0.5H), 3.24-3.00 (m, 2H), 2.92-2.82 (m, 0.5H), 2.71-2.55 (m, 1H), 1.29-1.19 (m, 12H), 0.90-0.88 (m, 9H), 0.05 (s, 6H).

INTERMEDIJER 32

(S)-N-[cis-1-(5-Bromopirimidin-2-il)-3-({terc-butil(dimetil)silil]oksi}metil)-3-metilciklobutil]-2-metil propan-2- sulfinamid

[0132] Rastvor 5-bromo-2-jodopirimidina (58.6 g, 206 mmol) u DCM (500 mL) je ohlađen do -78°C. n-Butilitijum (2.5M u heksanima, 90 mL, 226 mmol) je dodat u kapima tokom 10 minuta, pri čemu se dobija gusta suspenzija. Smeša je mešana tokom 40 minuta na -78°C. Rastvor Intermedijera 31 (56.8 g, 171 mmol) u DCM (500 mL) je dodavan u kapima. Reakciona smeša je mešana tokom 2.5 h na -78°C, zatim je omogućeno da se zagreje na s.t. i mešana je tokom 1 h. Smeša je sipana u zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida i mešan je tokom 5 minuta. Nakon razblaženja sa vodom, slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan dva puta sa DCM. Organski slojevi su kombinovani, isprani sa rastvorom soli i osušeni (Na2SO4), zatim proceđeni i koncentrovani in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 1:1 do 0:1 heptan:EtOAc), koje prati dodatno prečišćavanje sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 20-80% EtOAc u heptanu), da se dobije jedinjenje iz naslova (16 g, 17%).<δ>H(400 MHz, CDCl3) 8.76 (s, 2H), 4.40 (s, 1H), 3.58 (d, J 9.6 Hz, 1H), 3.52 (d, J 9.5 Hz, 1H), 2.84 (d, J 12.7 Hz, 1H), 2.54-2.38 (m, 2H), 2.30 (d, J 12.3 Hz, 1H), 1.20 (s, 9H), 1.04 (s, 3H), 0.91 (s, 9H), 0.07 (s, 6H). LCMS [M+H]<+>490/492 (Br-patern), RT 2.49 minuta (Postupak 6).

INTERMEDIJER 33

(S)-N-[cis-3-({[terc-Butil(dimetil)silil]oksi}Metil)-1-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-6-Metil-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-11-il]pirimidin-2-il}-3-Metil ciklobutil]-2-Metil propan-2-sulfinamid

[0133] Balon sa okruglim dnom (2 L) je napunjen sa Intermedijerom 3 (11.1 g, 28.4 mmol), kalijum acetatom (6.97 g, 71.0 mmol), bis(pinakolato)diboronom (8.65 g, 34.1 mmol) i 1,4-dioksanom (170 mL). Aparat je ispran tri puta sa argonom, zatim su dodati tris-(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (1.30 g, 1.42 mmol) i XPhos (1.35 g, 2.84 mmol). Aparat je evakuisan i ponovo napunjen dva puta sa argonom, zatim je zagrejan na 115°C tokom 3 h. Reakciona smeša je ohlađena do s.t. Intermedijer 32 (16.2 g, 28.4 mmol) rastvoren u 1,4-dioksanu (170 mL) je dodat, koje prati voda (70 mL) i anhidrovani tribazni kalijum fosfat (9.04 g, 42.6 mmol). Aparat je ponovo degaziran dva puta sa argonom, zatim je dodat [1,1’-bis(difenilfosfino)ferocen]dihloropaladijum(II) (1.04 g, 1.42 mmol). Reakciona smeša je zagrejana na 115°C tokom 5 h, zatim je mešana na s.t. preko noći. Tritiocijnurinska kiselina (2.27 g, 12.78 mmol) i aktivni ugalj (5.19 g) su dodati. Smeša je mešana na s.t. preko noći, zatim je razblažena sa vodom i EtOAc i proceđena, ispiranjem čvrstih supstanci sa EtOAc. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan dva puta sa EtOAc. Organski slojevi su kombinovani i isprani sa rastvorom soli, zatim osušeni (Na2SO4), proceđeni i mešani preko noći. Organski slojevi su koncentrovani in vacuo, i ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-10% MeOH u EtOAc) da se dobije jedinjenje iz naslova (17.5 g, 81%). LCMS [M+H]<+>765, RT 2.46 minuta (Postupak 6).

INTERMEDIJER 34

(S)-N-[cis-1-(5-Bromo-3-fluoropiridin-2-il)-3-({[terc-butil(dimetil)silil]oksimetil)-3-metilciklobutil]-2-metilpropan-2-sulfinamid

[0134] 2,5-Dibromo-3-fluoropiridin (2.4 g, 9.23 mmol) je rastvoren u DCM (120 mL) i reakciona smeša je ohlađena do -65°C u kupatilu aceton-suvi led. n-Butilitijum (2.5M u heksanima, 3.8 mL, 9.5 mmol) je dodat u kapima i smeša je mešana na -65°C tokom15 minuta. Intermedijer 31 (2.4 g, 7.2 mmol) u DCM (20 mL) je dodat. Reakciona smeša je mešana na -65°C tokom 1 h, nakon čega je zagrevana do s.t. i mešana je tokom 2 h. Reakcina smeša je zaustavljena sa vodenim rastvorom amonijum hlorida na 0°C i ekstrahovana je dva puta sa DCM. Organske faze su kombinovane i koncentrovane in vacuo, zatim su prečišćene fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-50% EtOAc/heksan) da se dobije jedinjenje iz naslova (1.15 g, 31%).<δ>H(300 MHz, CDCl3) 8.47 (dd, J 1.9, 1.2 Hz, 1H), 7.56 (dd, J 9.9, 1.9 Hz, 1H), 3.85 (s, 1H), 3.60-3.46 (m, 2H), 2.87-2.73 (m, 1H), 2.54-2.47 (m, 2H), 2.47-2.38 (m, 1H), 1.16 (s, 9H), 0.96 (s, 3H), 0.94 (s, 9H), 0.09 (s, 6H).

4

INTERMEDIJER 35

(S)-N-[cis-3-({[terc-Butil(dimetil)silil]oksi}metil)-1-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-11-il]-3-fluoropiridin-2-il}-3-Metilciklobutil]-2-Metilpropan-2-sulfinamid

[0135] (7R,14R)-1-(Difluorometoksi)-11-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-6,7-dihidro-7,14-met-anobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-on (WO 2016/050975, Intermedijer 171) (405 mg, 0.87 mmol), Intermedijer 34 (400 mg, 0.79 mmol), tribazni kalijum fosfat (734 mg, 3.39 mmol) i tricikloheksilfosfonijum tetrafluoroborat (40 mg, 0.11 mmol) su suspendovani u smeši 1,4-dioksana (10 mL) i vode (1 mL). Smeša je degazirana tri puta sa azotim pre dodavanja tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (40 mg, 0.042 mmol). Smeša je dalje degazirana sa azotom i zagrejana je na 110°C tokom 2.5 h. Reakciona smeša je razblažena sa vodom i ekstrahovana je dva puta sa EtOAc. Kombinovane organske faze su osušene (Na2SO4), proceđene i koncentrovane in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-100% EtOAc/heksan, koje prati 0-10% MeOH/DCM) da se dobije jedinjenje iz naslova (280 mg, 46%). LCMS (ES+) [M+H]<+>768.2, RT 3.42 minuta (Postupak 4).

INTERMEDIJER 36

3-(Benziloksi)-1-(trifluorometil)ciklobutan-1-ol

[0136] TBAF u THF (1M, 2.84 mL) je dodat u kapima u mešani rastvor 3-(benziloksi)ciklobutan-1-ona (5 g, 28.4 mmol) i trimetil (trifluorometil )silana (5.03 mL, 34.1 mmol) u THF (50 mL) na 0°C (spoljna temperatura). Dobijena smeša je mešana na 0°C tokom 2 h, zatim preko noći na s.t. Dalje TBAF u THF (25.5 mL) je dodat i smeša je mešana na s.t. tokom 2 h. Voda (50 mL) je dodata i smeša je sipana na rastvor soli (50 mL). Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc (3 x 75 mL). Kombinovane organske faze su isprane sa rastvorom soli (25 mL) i osušene (MgSO4), zatim proceđene i koncentrovane in vacuo. Dobijeno sirovo narandžasto ulje je prečišćeno fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-100% EtOAc in heptanima) da se dobije jedinjenje iz naslova (6.5 g, 92%) kao bledo narandžasto ulje.<δ>H(250 MHz, CDCl3) 7.42-7.27 (m, 5H), 4.44 (s, 2H), 3.88 (p, J 6.7 Hz, 1H), 2.91-2.74 (m, 2H), 2.56 (s, 1H), 2.32-2.15 (m, 2H).

INTERMEDIJER 37

[3-(Benziloksi)-1-(trifluorometil)ciklobutoksi](terc-butil)dimetilsilan

[0137] terc-Butildimetilsililtrifluorometansulfonat (6.16 mL, 30 mmol) je dodat u kapima u mešani rastvor Intermedijera 36 (6 g, 24.4 mmol) i 2,6-dimetilpiridina (8.16 mL, 70 mmol) u DCM (60 mL) na -78°C. Smeša je mešana na -78°C tokom 30 minuta, zatim je omogućeno sporo zagrevanje do s.t. preko noći. Smeša je tretirana sa zasićenim vodenim rastvorom natrijum hidrogen karbonata (60 mL) i slojevi su razdvojeni. Vodena faza je dalje ekstrahovana sa DCM (60 mL). Kombinovana organska faza je osušena (MgSO4), proceđena i koncentrovana in vacuo. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-100% EtOAc u heptanima) da se dobije jedinjenje iz naslova (8.14 g, 93%) kao bledo žuto ulje.<δ>H(250 MHz, CDCl3) 7.45-7.27 (m, 5H), 4.43 (s, 2H), 3.82 (p, J 6.8 Hz, 1H), 2.92-2.74 (m, 2H), 2.35-2.17 (m, 2H), 0.90 (s, 9H), 0.14 (s, 6H).

INTERMEDIJER 38

3-{[terc-Butil(dimetil)silil]oksi}-3-(trifluorometil)ciklobutan-1-ol

[0138] Mešana smeša Intermedijera 37 (8.14 g, 22.6 mmol) i 10% paladijuma na ugljeniku (50% u vodi, 2.41 g, 11.3 mmol) u etanolu (163 mL) je postavljena u atmosferu koja sadrži gasoviti vodonik. Reakciona smeša je mešana na s.t. tokom 24 h, zatim je proceđena kroz celit. Kolač nakon ceđenja je ispran sa MeOH (3 x 50 mL). Filtrat je koncentrovan in vacuo. Dobijeni tamni ostatak je proceđen preko celita celite i kolač nakon ceđenja je ispran sa MeOH (3 x 50 mL). Filtrat je koncentrovan in vacuo da se dobije jedinjenje iz naslova (6.2 g, 98%) kao neproziran vosak svetlo žute boje.<δ>H(250 MHz, CDCl3) 4.21-4.01 (m, 1H), 2.99-2.84 (m, 2H), 2.34-2.14 (m, 2H), 1.89 (s, 1H), 0.90 (s, 9H), 0.14 (s, 6H).

INTERMEDIJER 39

3-{[terc-Butil(dimetil)silil]oksi}-3-(trifluorometil)ciklobutan-1-on

[0139] Dess-Martin-ov perjodinan (11.3 g, 26.9 mmol) je dodat u mešani rastvor Intermedijera 38 (6.2 g, 22.2 mmol) u DCM (175 mL) na s.t. Smeša je mešana na s.t. preko noći, zatim je razblažena sa DCM (50 mL) i proceđena preko uloška od celita. Kolač nakon ceđenja je dalje ispran sa DCM (25 mL), i filtrat je sipan na zasićeni vodeni rastvor natrijum hidrogen karbonata (100 mL). Slojevi su razdvojeni, i vodena faza je dalje ekstrahovana sa DCM (50 mL). Kombinovane organske faze su osušene (MgSO4), proceđene i koncentrovane in vacuo. Dobijena voštana kristalna čvrsta supstanca je prečišćena fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-100% EtOAc u heptanima) da se dobije jedinjenje iz naslova (5.71 g, 86%) kao bledo žuto ulje.<δ>H(250 MHz, CDCl3) 3.61-3.40 (m, 2H), 3.31-3.15 (m, 2H), 0.91 (s, 9H), 0.20-0.13 (m, 6H).

INTERMEDIJER 40

(R)-N-(3-{[terc-Butil(dimetil)silil]oksi}-3-(trifluorometil)ciklobutiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid

[0140] Titanijum(IV) etoksid (24.4 mL, 38.1 mmol) je dodat u mešani rastvor Intermedijera 39 (5 g, 18.6 mmol) u THF (100 mL) na s.t. pod azotom. Smeša je mešana tokom 10 minuta, zatim je dodat (R)-2-Metilpropan-2-sulfinamid (4.52 g, 37.3 mmol). Smeša je zagrejana na 65°C tokom 1.5 h, nakon čega je ohlađena do s.t. Smeša je razblažena sa rastvorom soli (70 mL), EtOAc (200 mL) i vodom (35 mL), zatim je intenzivno mešana u trajanju od 15 minuta. Organski sloj je odliven i preostala emulzija je proceđena preko filter papira. Filtrat je dalje ekstrahovan sa EtOAc (100 mL). Kombinovane organske faze su isprane sa slanim rastvorom (50 mL) i osušene (MgSO4), zatim su proceđene i koncentrovane in vacuo. Preostali sirovi žuti sirup je prečišćen fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-50% EtOAc u heptanima) da se dobije jedinjenje iz naslova (5.5 g, 80%) kao svetlo žuto ulje. δH(250 MHz, CDCl3) 4.18-3.11 (m, 4H), 1.29-1.20 (m, 9H), 0.90 (s, 9H), 0.15 (s, 6H). LCMS (ESI) [M+H]+ 372.15, RT 1.52 minuta (Postupak 8).

INTERMEDIJER 41

(R)-N-[1-(5-Bromo-3-fluoropiridin-2-il)-3-{[terc-butil(dimetil)silil]oksi}-3-(trifluorometil)ciklobutil]-2-Metilpropan-2-sulfinamid

[0141] n-Butilitijum u heksanima (2.5M, 3.47 mL, 8.66 mmol) je dodat u kapima u mešani rastvor 2,5-dibromo-3-fluoropiridina (2.17 g, 8.51 mmol) u DCM (140 mL) na -70°C (unutršanja temperatura). Nakon mešanja tokom 15 minuta, rastvor Intermedijera 40 (2.75 g, 7.4 mmol) u DCM (14 mL) je dodavan u kapima. Mešanje je održavano na -70°C tokom 2 h. Smeša je polako zagrevana do s.t. tokom približno 1.5 h, nakon čega je ponovo ohlađena do 0°C. Zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida (100 mL) je dodat i smeša je intenzivno mešana u trajanju od 10 minuta. Slojevi su razdvojeni i vodena faza je dalje ekstrahovana sa DCM (2 x 100 mL). Kombinovane organske faze su osušene (MgSO4), proceđene i koncentrovane in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-50% EtOAc u heptanima) da se dobije jedinjenje iz naslova (1.68 g, 42%) kao bledo narandžasta guma. δH(250 MHz, CDCl3) 8.46 (d, J 6.7 Hz, 1H), 7.65-7.50 (m, 1H), 3.86 (s, 1H), 3.50-3.33 (m, 1H), 3.13-2.89 (m, 2H), 2.88-2.59 (m, 1H), 1.19-1.11 (m, 9H), 0.95-0.69 (m, 9H), 0.24 do -0.07 (m, 6H). LCMS (ESI) [M+H]+547.2, RT 1.91 minuta (Postupak 9).

INTERMEDIJER 42

(R)-N-[3-{[terc-Butil(dimetil)silil]oksi}-1-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-6-Metil-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]-3-fluoropiridin-2-il}-3-(trifluorometil)ciklobutil]-2-Metil propan-2-sulfinamid

[0142] Intermedijer 4 (886 mg, 1.84 mmol) je dodat u mešani rastvor Intermedijera 41 (840 mg, 1.53 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL) na s.t. u posudi pod pritiskom koja se može zatvoriti. Smeša je tretirana sa 2M vodenim rastvorom kalijum karbonata (2.3 mL) i pročišćena je sa azotom tokom 15 minuta. XPhos (73 mg, 0.15 mmol) i XPhos Pd G2 (121 mg, 0.15 mmol) su dodati i posuda je zatvorena. Smeša je mešana na 100°C tokom 4 h, zatim je ohlađena do s.t. Tamna smeša je razblažena sa EtOAc (30 mL) i sipana je na rastvor soli (50 mL). Slojevi su razdvojeni i vodena faza je dalje ekstrahovana sa EtOAc (2 x 25 mL). Kombinovana organska faza je isprana sa rastvorom soli (25 mL) i osušena (MgSO4), zatim je proceđena i koncentrovana in vacuo. Dobijeni tamni ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-10% MeOH u DCM). Dobijena sirova bledo braon pena je prečišćena dalje sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-100% EtOAc u heptanima) da se dobije jedinjenje iz naslova (1.00 g, 76%) kao beličasta pena.<δ>H(250 MHz, CDCl3) 8.64 (dd, J 3.4, 1.7 Hz, 1H), 8.49 (d, J 8.1 Hz, 1H), 7.82-7.30 (m, 6H), 7.19-6.53 (m, 1H), 6.35-6.21 (m, 1H), 5.04-4.94 (m, 1H), 3.94 (s, 1H), 3.53 (s, 3H), 3.49-3.39 (m, 1H), 3.17-2.67 (m, 4H), 1.30-1.22 (m, 1H), 1.22-1.12 (m, 9H), 1.00-0.63 (m, 9H), 0.25 do -0.05 (m, 6H). LCMS (ESI) [M+H]<+>822.4, RT 2.22/2.26 minuta (Postupak 10).

INTERMEDIJER 43

(R)-N-[1-{5-[(7R,14R)-1-(Difluorometoksi)-6-Metil-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2- b][2,5]benzodiazocin-11-il]-3-fluoropiridin-2-il}-3-hidroksi-3-(trifluorometil)ciklobutil]-2-Metilpropan-2-sulfinamid

[0143] TBAF u THF (1M, 2.33 mL, 2.32 mmol) je dodat u mešani rastvor Intermedijera 42 (1 g, 1.16 mmol) u THF (15 mL) na s.t. Smeša je zagrejana i mešana na 35°C tokom 2 h. Nakon hlađenja do s.t., smeša je sipana na vodu (25 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 25 mL). Kombinovana organska faza je isprana sa rastvorom soli (30 mL) i osušena (MgSO4), zatim proceđena i koncentrovana in vacuo. Dobijena beličasta čvrsta supstanca (0.9 g) je suspendovana u DMSO-MeOH (1:1; 6 mL). Dobijena gusta pasta je koncentrovana in vacuo da se dobije sirovo jedinjenje iz naslova (0.82 g) kao beličasta čvrsta supstanca, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja. LCMS (ESI) [M+H]<+>708.4, RT 3.11 minuta (Postupak 11).

INTERMEDIJER 44

(R)-N-[1-(5-Bromopirimidin-2-il)-3-{[terc-butil(dimetil)silil]oksi}-3-(trifluorometil)ciklobutil]-2-metil propan-2- sulfinamid

[0144] n-Butilitijum u heksanima (2.5M, 5.09 mL, 12.7 mmol) je dodat u kapima u mešani rastvor 5-bromo-2-jodopirimidina (3.56 g, 12.51 mmol) u DCM (230 mL) na -70°C (unutrašnja temperatura). Nakon mešanja tokom 15 minuta, rastvor Intermedijera 40 (4.04 g, 10.9 mmol) u DCM (20 mL) je dodavan u kapima. Mešanje je održavano na -70°C tokom 2 h. Dok je na ovoj temperaturi, smeša je zaustavljena sa zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida (150 mL) i dobijena suspenzija je polako zagrevana do s.t. Slojevi su razdvojeni i vodena faza je dalje ekstrahovana sa DCM (100 mL). Kombinovana organska faza je osušena (MgSO4), proceđena i koncentrovana in vacuo. Dobijeno tamno braon ulje/čvrsta supstanca je prečišćeno fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-100% EtOAc u heptanima). Dalje prečišćavanje za rezultat je imalo parcijalno prečišćeno žuto ulje sa fleš hromatografijom na reverzno faznoj koloni na siliki (gradijentna elucija sa 10-100% acetonitril u vodi obogaćen. sa 0.1% mravljom kiselinom) dajući jedinjenje iz naslova (0.51 g, 9%) kao bledo narandžasto ulje.<δ>H(250 MHz, CDCl3) 8.81-8.74 (m, 2H), 4.48 (d, J 33.1 Hz, 1H), 3.90-2.64 (m, 4H), 1.23-1.15 (m, 9H), 0.97-0.70 (m, 9H), 0.22 do -0.05 (m, 6H). LCMS (ESI) [M+H]<+>530/532, RT 1.53 minuta (Postupak 8).

INTERMEDIJER 45

(R)-N-[3-{[terc-Butil(dimetil)silil]oksi}-1-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-6-Metil-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]-pirimidin-2-il}-3-(trifluorometil )ciklobutil]-2-Metilpropan-2-sulfinamid

[0145] Intermedijer 4 (552 mg, 1.15 mmol) je dodat u mešani rastvor Intermedijera 44 (507 mg, 0.96 mmol) u 1,4-dioksanu (7 mL) na s.t. u posudi pod pritiskom koja se može zatvoriti. Smeša je tretirana sa 2M vodenim rastvorom kalijum karbonata (1.44 mL) i smeša je prečišćena sa azotom tokom 15 minuta. XPhos (46 mg, 0.1 mmol) i XPhos Pd G2 (75 mg, 0.1 mmol) su dodati i posuda je zatvorena. Smeša je mešana na 100°C tokom 4 h, zatim je ohlađena do s.t. Tamna smeša je razblažena sa EtOAc (30 mL) i sipana je na rastvor soli (50 mL). Slojevi su razdvojeni i vodena faza je dalje ekstrahovana sa EtOAc (2 x 25 mL). Kombinovane organske faze su isprane sa slanim rastvorom (25 mL) i osušene (MgSO4), zatim proceđene i koncentrovane in vacuo. Dobijeni tamni ostatak (1.18 g) je prečišćen fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-100% EtOAc u heptanima). Dobijena sirova bleda narandžasta pena je dalje prečišćena sa hromatografijom na reverzno faznoj koloni na siliki (gradijentna elucija sa 10-100% acetonitril vodi obogaćen sa 0.1% mravljom kiselinom) da se dobije jedinjenje iz naslova (0.61 g, 79%) kao beličasto staklo.<δ>H(250 MHz, CDCl3) 9.04-8.87 (m, 2H), 8.50 (d, J 8.1 Hz, 1H), 7.92-7.79 (m, 1H), 7.71 (s, 1H), 7.56-7.31 (m, 3H), 6.89 (t, J 72.7 Hz, 1H), 6.31 (d, J 7.2 Hz, 1H), 5.04 (d, J 7.2 Hz, 1H), 4.66-4.40 (m, 1H), 3.64 (d, J 14.8 Hz, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.20-2.70 (m,

5H), 1.36-1.14 (m, 9H), 1.02-0.66 (m, 9H), 0.26 do -0.11 (m, 6H). LCMS (ESI) [M+H] 805.4, RT 1.54 minuta (Postupak 8).

INTERMEDIJER 46

(R)-N-[1-{5-[(7R,14R)-1-(Difluorometoksi)-6-Metil-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]pirimidin-2-il}-3-hidroksi-3-(trifluorometil)ciklobutil]-2-Metilpropan-2-sulfinamid

4

[0146] TBAF u THF (1M, 1.52 mL) je dodat u mešani rastvor Intermedijera 45 (0.61 g, 0.76 mmol) u THF (10 mL) na s.t. Smeša je mešana na s.t. preko noći, zatim je sipana na vodu (35 mL). Ostatak je ekstrahovan sa EtOAc (3 x 35 mL). Kombinovane organske faze su isprane sa vodom (30 mL) I rastvorom soli (30 mL), zatim osušene (MgSO4), proceđene i koncentrovane in vacuo, da se dobije jedinjenje iz naslova (0.474 g, 90%) kao beličasta čvrsta supstanca.<δ>H(250 MHz, CD3OD) 9.14-9.04 (m, 2H), 8.47-8.35 (m, 1H), 7.96-7.89 (m, 1H), 7.82 (d, J 8.5 Hz, 1H), 7.65 (dd, J 8.6, 1.7 Hz, 1H), 7.63-7.03 (m, 3H), 6.49 (d, J7.1 Hz, 1H), 5.26 (d, J 7.1 Hz, 1H), 4.59 (s, 1H), 3.73-3.57 (m, 1H), 3.52 (s, 3H), 3.43-3.36 (m, 1H), 3.10-2.87 (m, 3H), 2.75 (d, J 14.4 Hz, 1H), 1.33-1.19 (m, 9H). LCMS (ESI) [M+H]<+>691.25, RT 1.10 & 1.13 minuta (Postupak 8).

INTERMEDIJER 47

(R)-N-[3-{[terc-Butil(dimetil)silil]oksi}-1-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]-3-fluoro-piridin-2-il}-3-(trifluorometil)ciklobutil]-2-Metilpropan-2-sulfinamid

[0147] U mešani rastvor Intermedijera 41 (400 mg, 0.73 mmol) i (7R,14R)-1-(difluorometoksi)-11-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-ona (WO 2016/050975, Intermedijer 171) (383 mg, 0.8 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL) je dodat 2M vodeni rastvor kalijum karbonata (1.1 mL). Reakciona smeša je degazirana sa azotom, zatim su dodati XPhos (35 mg, 0.07 mmol) i XPhos Pd G2 (57 mg, 0.07 mmol). Reakciona smeša je zagrejana u zatvorenoj epruveti na 100°C tokom 2.5 h. Reakcionoj smeši je omogućeno da se ohladi, zatim je razblažena sa EtOAc (50 mL) i isprana sa rastvorom soli (2 x 25 mL). Organski sloj je osušen (Na2SO4), proceđen i koncentrovan in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-100% EtOAc/heptanima koje prati 0-20% MeOH/EtOAc), zatim sa hromatografijom na reverzno faznoj koloni od silike (gradijentna elucija sa 10-100% acetonitril/voda 0.1% mravlja kiselina), da se dobije jedinjenje iz naslova (469 mg, 72%) (4:5 smeša cis/trans izomera) kao bela čvrsta supstanca.<δ>H(500 MHz, CDCl3) 8.62 (dd, J 7.2, 1.6 Hz, 1H), 8.42 (dt, J 7.9, 1.8 Hz, 1H), 7.79 (dd, J 8.3, 6.6 Hz, 1H), 7.66 (dd, J 5.3, 1.4 Hz, 1H), 7.61-7.52 (m, 1H), 7.49-7.36 (m, 3H), 7.09 (t, J 5.9 Hz, 1H), 6.87 (t, J 72.6 Hz, 1H), 6.37 (dd, J 7.2, 4.2 Hz, 1H), 4.99-4.87 (m, 1H), 3.94 (s, 1H), 3.91-3.83 (m, 0.56H, veće), 3.55-3.48 (m, 2H), 3.14-3.05 (m, 1H), 3.03-2.99 (m, 0.44H, manje), 2.90-2.86 (m, 1H), 2.86-2.69 (m, 1H), 1.18 (s, 4H, manje), 1.17 (s, 5H, veće), 0.94 (s, 4H, manje), 0.70 (s, 5H, veće), 0.19 (d, J 11.3 Hz, 2.67H, manje), -0.01 (d, J 11.3 Hz, 3.33H, veće).

INTERMEDIJER 48

(R)-N-[1-{5-[(7R,14R)-1-(Difluorometoksi)-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metano-benzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]-3-fluoropiridin-2-il}-3-hidroksi-3-(trifluoroMetil)ciklobutil]-2-Metil propan-2-sulfinamid

[0148] U rastvor Intermedijera 47 (469 mg, 0.56 mmol) u THF (6 mL) je dodat TBAF u THF (1M, 1.11 mL). Reakciona smeša je mešana na 35°C tokom 2 h, zatim je ohlađena, razblažena sa rastvorom soli (50 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (2 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa rastvorom soli (3 x 50 mL) i osušeni (Na2SO4), zatim su proceđeni i koncentrovani in vacuo, da se dobije sirovo jedinjenje iz naslova (440 mg, kvantitativno) kao beličasti prah, koji je korišćen bez daljeg prečišćavanja.<δ>H(500 MHz, CDCl3) 8.49 (d, J23.5 Hz, 1H), 8.41-8.28 (m, 1H), 7.67 (dd, J31.2, 8.5 Hz, 1H), 7.57 (dd, J 13.3, 1.4 Hz, 1H), 7.47 (ddd, J 12.0, 6.2, 1.8 Hz, 1H), 7.39-7.26 (m, 3H), 7.10-7.00 (m, 1H), 6.78 (td, J 72.7, 4.2 Hz, 1H), 6.28 (d, J 7.2 Hz, 1H), 4.86 (t, J 6.5 Hz, 1H), 4.43-4.04 (m, 1H), 3.52-3.33 (m, 3H), 3.06-2.55 (m, 4H), 1.11 (d, J 4.1 Hz, 9H). LCMS (ESI) [M+H]<+>694.3, RT 1.35 i 1.40 minuta (Postupak 9).

INTERMEDIJER 49

Metil 3,3-dimetoksiciklobutankarboksilat

[0149] Etil 3-oksociklobutankarboksilat (53 g, 372.8 mmol), trimetilortoformijat (200 mL, 1830 mmol) i 4-metilbenzensulfonska kiselina hidrat (1:1) (7.09 g, 37.3 mmol) su kombinovani u metanolu (500 mL) i zagrevani su pod refluksom, sa mešanjem, tokom 1 h. Reakciona smeša je ohlađena do s.t. I koncentrovana je pod redukovanim pritiskom. Ostatak je rastvoren u dietil etru (500 mL) I ispran je sa zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3(400 mL). Vodena faza je ekstrahovana sa dietil etrom (500 mL). Kombinovane organske faze su osušene (MgSO4), proceđene i koncentrovane in vacuo. Ostatak je azeotropiran sa heptanom, da bi se uklonio preostali trimetilortoformijat, da se dobije jedinjenje iz naslova (71.5 g, 99%) kao svetlo bež ulje.<δ>H(500 MHz, CDCl3) 3.69 (s, 3H), 3.17 (s, 3H), 3.15 (s, 3H), 2.88 (m, 1H), 2.48-2.32 (m, 4H).

INTERMEDIJER 50

Metil 3,3-dimetoksi-1-metilciklobutankarboksilat

[0150] U atmosferi koja sadrži azot, 2M rastvor LDA (108.5 mL, 217 mmol in THF) je dodat u THF (300 mL) na -78°C. Rastvor Intermedijera 49 (90%, 35 g, 180.8 mmol) u THF (50 mL) je dodat u kapima tokom 25 minuta, održavajući unutrašnju temperaturu na -78°C. Nakon završenog dodavanja, smeše je mešana u trajanju od 30 minuta, zatim je u kapima dodat jodometan (15 mL, 241 mmol). Smeša je mešana na -78°C tokom 30 minuta, nakon čega je omogućeno da se zagreje do s.t. tokom 1 h. smeša je sipana u zasićeni vodeni rastvor NH4Cl (300 mL) i ekstrahovana sa dietil etrom (2 x 500 mL). Kombinovane organske faze su isprane sa rastvorom soli i osušene (Na2SO4), zatim proceđene i uparene do isušivanja. Ostatak je prečišćen fleš fromatografijom na koloni (40% EtOAc u heptanu) da se dobije jedinjenje iz naslova (23 g, 57%) kao svetlo žuto ulje.<δ>H(250 MHz, CDCl3) 3.70 (s, 3H), 3.16 (s, 3H), 3.13 (s, 3H), 2.68-2.55 (m, 2H), 2.13-1.99 (m, 2H), 1.43 (s, 3H).

INTERMEDIJER 51

Dideuterio(3,3-dimetoksi-1-metilciklobutil)metanol

[0151] U atmosferi koja sadrži azot, u suspenziju LiAlD4(5 g, 119 mmol) u THF (400 mL) na 0°C (ledeno kupatilo) u kapima je dodat rastvor Intermedijera 50 (27.2 g, 118.5 mmol) u THF (100 mL). Kada je dodavanje završeno, reakciona smeša je mešana na s.t. preko noći, zatim je ohlađena u ledenom kupatilu. Voda je dodata u kapima (5 mL) uz mešanje. Suspenzija koja je obrazovana razblažena je sa THF (150 mL), koje prati dodavanje 15% vodenog rastvora NaOH (5 mL) i vode (15 mL). U dobijenu suspenziju je dodat Na2SO4(40 g), i smeša je mešana u trajanju od 30 minuta. Granularna suspenzija je procenjena i isprana sa diietil etrom, zatim su kombinovani filtrati koncentrovani pod smanjenim pritiskom, da se dobije jedinjenje iz naslova (23.8 g, 99%) kao svetlo žuto ulje.<δ>H(250 MHz, CDCl3) 3.22-3.07 (m, 6H), 2.17-2.03 (m, 2H), 1.93-1.78 (m, 2H), 1.18 (s, 3H).

4

INTERMEDIJER 52

3-[Dideuterio(hidroksi)metil]-3-Metilciklobutanon

[0152] U mešani rastvor Intermedijera 51 (23.8 g, 117.3 mmol) u acetonu (240 mL) i vodi (80 mL) je dodat 4-Metilbenzensulfonska kiselina hidrat (1:1) (5 g, 26.3 mmol). Reakciona smeša je zagrejana na 65°C tokom 2 h, nakon čega je omogućeno da ostoji na s.t. preko noći. Aceton je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Dobijena smeša je zabažena sa čvrstim NaHCO3do pH 8 i ekstrahovana sa DCM (5 x 130 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4i proceđeni su kroz porozni levak, nakon čega su koncentrovani pod smanjenim pritiskom, da se dobije jedinjenje iz naslova (16 g, 94%) kao svetlo braon ulje.<δ>H(250 MHz, CDCl3) 3.12-2.92 (m, 2H), 2.79-2.57 (m, 2H), 1.69 (s, 1H), 1.36 (s, 3H).

INTERMEDIJER 53

3-{[terc-Butil(dimetil)silil]oksi(dideuterio)metil}-3-metilciklobutanon

[0153] U rastvor Intermedijera 52 (16 g, 110 mmol) u DMF (100 mL) dodat je 1H-imidazol (15 g, 220 mmol) i terc-butil(hloro)dimetilsilan (22 g, 146 mmol). Smeša je mešana na s.t. preko noći, zatim je razblažena sa ditil etrom (250 mL) i vodom (200 mL). Slojevi su razdvojeni, zatim je vodeni sloj ekstrahovan sa dietil etrom (250 mL). Kombinovane organske faze su isprane sa rastvorom soli (3 x 80 mL) i osušene su preko MgSO4, zatim proceđene i koncentrovane in vacuo, da se dobije jedinjenje iz naslova (30 g, 97%) kao svetlo braon ulje.<δ>H(250 MHz, CDCl3) 3.13-2.94 (m, 2H), 2.70-2.51 (m, 2H), 1.29 (s, 3H), 0.89 (s, 9H), 0.06 (s, 6H).

INTERMEDIJER 54

N-(3-{[terc-butil(dimetil)sililoksi(dideuterio)metil}-3-metilciklobutiliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid

[0154] U rastvor Intermedijera 53 (30 g, 107 mmol) u anhidrovanom THF (250 mL) u atmosferi koja sadrži azot dodat je (R)-2-metilpropan-2-sulfinamid (15.53 g, 128.1 mmol), koje prati titanijum(IV) etoksid (50 mL, 202.7 mmol). Smeša je mešana na s.t. tokom 24 h. Dalje procije (R)-2-metilpropan-2-sulfinamida (2.8 g, 23.1 mmol) i titanijum(IV) etoksida (5 mL, 20.27 mmol) su dodavane u reakcionu smešu, koja je nakon toga mešana na 65°C tokom 4 h. Reakciona smeša je ohlađena do s.t. i dodata je voda (13 mL), koju prati EtOAc (200 mL). Reakciona smeša je proceđena preko celita i čvrsta supstanca je intenzivno isprana sa EtOAc. Filtrat je osušen preko Na2SO4, zatim je proceđen i uparen in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (5-20% EtOAc u heptanu) da se dobije jedinjenje iz naslova (31.5 g, 84%) kao žuto ulje.<δ>H(500 MHz, CDCl3) 3.47-3.16 (m, 1H), 3.13-2.83 (m, 2H), 2.71-2.55 (m, 1H), 1.25-1.21 (m, 12H), 0.91-0.87 (m, 9H), 0.05 (s, 6H) (1:1 smeša E/Z izomera).

INTERMEDIJER 55

N-[1-(5-Bromopirimidin-2-il)-3-{[terc-butil(dimetil)silil]oksi(dideuterio)metil}-3-metilciklobutil]-2-metilpropan-2-sulfinamid

[0155] U atmosferi koja sadrži azot, rastvor 5-bromo-2-jodopirimidina (71.2 g, 250 mmol) u anhidrovanom DCM (1.25 L) je ohlađen do -78°C. U rastor je dodat 2.5M rastvor butilitijuma (100 mL, 250 mmol u heksanu) preko kanile, održavajući unutrašnju temperaturu ispod -68°C. Gusta suspenzija je mešana tokom 20 minuta na -78°C. Rastvor Intermedijera 54 (24 g, 68.3 mmol) u anhidrovanom DCM (100 mL) je dodat, održavajući unutrašnju temperaturu ispod -68°C. Nakon dodavanja, smeša je mešana tokom 10 minuta, nakon čega su dodati zasićen vodeni rastvor NH4Cl (400 mL) i vode (100 mL). Smeši je dozvoljeno da se zagreje do sobne temperature, zatim je organska faza razdvojena i vodena faza je ekstrahovana sa DCM (2 x 300 mL). Kombinovane organske faze su osušene preko Na2SO4, zatim su proceđene i uparene in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen sa fleš hromatografijom (20-100% EtOAc u heptanu), zatim rekristalizovan u heptanu. Ostatak je dalje prečišćen sa fleš hromatografijom na koloni (20-35% EtOAc u heptanu) da se dobije jedinjenje iz naslova (0.93 g) kao

4

belu čvrstu supstacu.<δ>H(500 MHz, CDCl3) 8.70 (s, 2H), 4.34 (s, 1H), 2.80-2.74 (m, 1H), 2.44-2.35 (m, 2H), 2.26-2.20 (m, 1H), 1.13 (s, 9H), 0.97 (s, 3H), 0.86-0.83 (m, 9H), 0.00 (s, 6H).

INTERMEDIJER 56

N-(cis-3-{[terc-butil(dimetil)silil]oksi(dideutero)metil}-1-{5-[(7R,14R)-1-(difluoro-metoksi)-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-11-il]pirimidin-2-il}-3-metil ciklobutil)-2-metilpropan-2-sulfinamid

[0156] Rastvor Intermedijera 55 (1.36 g, 2.51 mmol), (7R,14R)-1-(difluoro-metoksi)-11-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-6,7-dihidro-7,14-metano-benzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-ona (WO 2016/050975, Intermedijer 171) (1.32 g, 2.51 mmol) i tribaznog kalijum fosfata (2.13 g, 10 mmol) u 1,4 dioksanu (5 mL) i vodi (1.5 mL) je degaziran sa azotom, zatim su dodati tris(dibenzilidenaceton)-dipaladijum(0) (0.12 g, 0.13 mmol) i tricikloheksilfosfonijum tetrafluoroborat (0.11 g, 0.3 mmol). Reakciona smeša je zagrejana na 100°C tokom 16 h, zatim je razblažena sa vodom (5 mL) i ekstrahovana sa EtOAc (3 x 15 mL). Organske faze su kombinovane, isprane sa zasićenim rastvorom soli (10 mL) i osušene preko Na2SO4, zatim su proceđene i uparene in vacuo. Dobijeno braon ulje je prečišćeno sa hromatografijom na koloni korišćenjem 55 g KP-NH kolone (50-100% EtOAc u heptanu, koje prati 0-15% MeOH u EtOAc) da se dobije jedinjenje iz naslova (1.68 g, 94%) kao žuti prah.<δ>H(500 MHz, DMSO-d6) 9.15 (d, J 6.8 Hz, 1H), 9.08 (s, 2H), 8.23 (dd, J 7.7, 1.6 Hz, 1H), 7.84-7.67 (m, 3H), 7.64 (dd, J 8.6, 1.7 Hz, 1H), 7.55-7.47 (m, 2H), 6.37 (d, J 7.1 Hz, 1H), 5.64 (s, 1H), 4.90 (t, J 6.8 Hz, 1H), 3.54-3.45 (m, 1H), 2.75 (d, J 13.3 Hz, 1H), 2.70 (d, J 12.3 Hz, 1H), 2.46-2.40 (m, 3H), 1.07 (s, 9H), 0.94 (s, 3H), 0.89 (s, 9H), 0.07 (d, J 0.8 Hz, 6H). LCMS (ESI+) [M+H]<+>753.4, RT 1.87 minuta (Postupak 1).

INTERMEDIJER 57

N-[cis-3-({[terc-butil(dimetil)silil]oksi}metil)-1-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]-pirimidin-2-il}-3-metil ciklobutil]-2-metilpropan-2-sulfinamid

4

[0157] Dobijeno iz Intermedijera 32 i (7R,14R)-1-(difluorometoksi)-11-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksa borolan-2-il)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-5(14H)-on (WO 2016/050975, Intermedijer 171) prateći eksperimentalnu proceduru koja je opisana za Intermedijer 56. LCMS (ESI+) [M+H]<+>751.2, RT 3.20 minuta (Postupak 1).

INTERMEDIJER 58

N-[1-(5-bromo-3-fluoropiridin-2-il)-3-{[terc-butil(dimetil)silil]oksi(dideuterio)-metil}-3-metil ciklobutil]-2-metilpropan-2-sulfinamid

[0158] Dobijeno iz Intermedijera 54 i 2,5-dibromo-3-fluoropiridina prateći eksperimentalnu proceduru koja je opisana za Intermedijer 55.<δ>H(500 MHz, CDCl3) 8.41-8.35 (m, 1H), 7.47 (dd, J 9.9, 1.9 Hz, 1H), 3.76 (s, 1H), 2.70 (d, J 12.9 Hz, 1H), 2.48-2.38 (m, 2H), 2.37-2.30 (m, 1H), 1.07 (s, 9H), 0.87 (s, 3H), 0.85 (s, 9H), 0.00 (s, 6H). LCMS (ESI+) [M+H]<+>509.05, RT 1.67 minuta (Postupak 1).

INTERMEDIJER 59

N-(cis-3-{[terc-butil(dimetil)silil]oksi(dideutero)metil}-1-{5-[(7R,14R)-1-(difluoro-metoksi)-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-11-il]-3-fluoropiridin-2-il}-3-metilciklobutil)-2-metilpropan-2-sulfinamid

[0159] Dobijeno iz Intermedijera 58 i (7R,14R)-1-(difluorometoksi)-11-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksa borolan-2-il)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-5(14H)-on (WO 2016/050975, Intermedijer 171) prateći eksperimentalnu proceduru koja je opisana za Intermedijer 56.<δ>H(500 MHz, DMSO-d6) 9.14 (d, J 6.8 Hz, 1H), 8.73-8.62 (m, 1H), 8.23 (dd, J 7.8, 1.5 Hz, 1H), 7.89 (dd, J 12.2, 1.8 Hz, 1H), 7.86-7.54 (m, 4H), 7.54-7.47 (m, 2H), 6.36 (d, J 7.1 Hz, 1H), 5.46 (s, 1H), 4.89 (t, J 6.8 Hz, 1H), 3.49 (dt, J 13.4, 6.9 Hz, 1H), 2.74 (d, J 13.3 Hz, 1H), 2.68-2.57 (m, 2H), 2.48-2.41 (m, 2H), 1.04 (s, 9H), 0.90 (s, 9H), 0.87 (s, 3H), 0.07 (d, J 1.2 Hz, 6H). LCMS (ESI+) [M+H]<+>770.3, RT 1.60 minuta (Postupak 1).

4

PRIMER 1

cis-3-Amino-3-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-6-Metil-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]pirimidin-2-il}-1-metilciklobutankarbonitril

[0160] U Intermedijer 5 (178 mg, 0.24 mmol) koji je rastvoren u MeOH (5 mL) je dodat 4M hlorovodonična kiselina u 1,4-dioksanu (0.31 mL). Reakciona smeša je mešana na s.t. tokom 90 minuta, zatim je rastvarač je uklonjen in vacuo. Dobijeno braon staklo je prečišćeno fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 100% DCM do 25% MeOH/DCM). Dobijena smeša cis i trans izomera je prečišćena preparativnom HPLC da se dobije jedinjenje iz naslova (9 mg, 7%) kao bela čvrsta supstanca.<δ>H(300 MHz, DMSO-d6) 9.07 (s, 2H), 8.32-8.20 (m, 1H), 7.96-7.40 (m, 6H), 6.31 (d, J 7.1 Hz, 1H), 5.26 (d, J 7.1 Hz, 1H), 3.52 (dt, J 14.1, 7.4 Hz, 1H), 3.36 (s, 3H), 2.88-2.75 (m, 3H), 2.64-2.57 (m, 2H), 1.46 (s, 3H). LCMS (ES+) [M+H]<+>542.0, RT 1.766 minutes (Postupak 1). LCMS (ES+) [M+H]<+>542.2, RT 1.43 minuta (Postupak 2).

PRIMER 2

cis-3-Amino-3-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]pirimidin-2-il}-1-metilciklobutankarbonitril

[0161] U Intermedijer 6 (50 mg, 0.079 mmol) koji je rastvoren u 1,4-dioksanu (5 mL) je dodat 4M hlorovodonična kiselina u 1,4-dioksanu (5 mL). Reakciona smeša je mešana na s.t. tokom 1 h, zatim je razdvojena između EtOAc (10 mL) i 0.5M vodenog rastvora hlorovodnonične kiseline (10 mL). Vodeni sloj je ispran sa DCM (2 x 10 mL), zatim je zabažen sa vodenim rastvorom natrijum karbonata I ekstrahovan je u DCM. Organski sloj je koncentrovan in vacuo. Dobijena sirova bela čvrsta supstanca (smeša cis i trans izomera) je prečišćena preparativnom HPLC da se dobije jedinjenje iz naslova (12 mg, 29%).<δ>H(300 MHz, DMSO-d6) 9.15 (d, J 6.8 Hz, 1H), 9.07 (s, 2H), 8.23 (dd, J 5.7, 3.7 Hz, 1H), 7.97-7.43 (m, 6H), 6.36 (d, J 6.9 Hz, 1H), 4.90 (t, J6.8 Hz, 1H), 3.59-3.39 (m, 1H), 2.85-2.68 (m, 3H), 2.65-2.57 (m, 2H), 1.46 (s, 3H). LCMS (ES+) [M+H]<+>528.0, RT 1.69 minuta (Postupak 1).

4

PRIMER 3

cis-3-Amino-3-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-6-metil-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]-3-fluoropiridin-2-il}-1-metil ciklobutankarbonitril

[0162] Intermedijer 8 (120 mg, 0.181 mmol) je rastvoren u 4M hlorovodoničnoj kiselini u 1,4-dioksanu (5 mL). Reakciona smeša je mešana tokom 1 h. Dietil etar je dodat, i precipitat je proceđen, da se dobije jedinjenje iz naslova (82 mg, 81%) kao bela čvrsta supstanca (koji sadrži 7% trans izomera).<δ>H(300 MHz, DMSO-d6) 8.99 (s, 3H), 8.84 (t, J 1.8 Hz, 1H), 8.28 (p, J 4.3 Hz, 1H), 8.20 (dd, J 12.3, 1.8 Hz, 1H), 7.95-7.43 (m, 6H), 6.31 (d, J7.1 Hz, 1H), 5.28 (d, J 7.0 Hz, 1H), 3.61-3.49 (m, 1H), 3.36 (s, 3H), 3.33-3.13 (m, 4H), 2.86 (d, J 13.8 Hz, 1H), 1.29 (s, 3H). LCMS (ES+) [M+H]<+>559.0, RT 1.93 minuta (Postupak 1). LCMS (ES+) [M+H]<+>559.0, 1.71 minuta (Postupak 2).

PRIMER 4

cis-3-amino-3-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]-3-fluoropiridin-2-il}-1-metilciklobutankarbonitril

[0163] Intermedijer 9 (102 mg, 0.157 mmol) je rastvoren u 1,4-dioksanu (5 mL) i tretiran je sa 4M hlorovodoničnom kiselinom u 1,4-dioksanu (5 mL). Reakciona smeša je mešana tokom 1 h. Dietil etil je dodat, i precipitat koji je obrazovan je proceđen. Sirovi ostatak (smeša cis i trans izomera, 81 mg) je prečišćen preparativnom HPLC da se dobije jedinjenje iz naslova (11 mg, 13%).<δ>H(300 MHz, DMSO-d6) 9.15 (d, J 6.9 Hz, 1H), 8.62 (t, J 1.8 Hz, 1H), 8.23 (dd, J 6.4, 3.0 Hz, 1H), 7.99-7.44 (m, 7H), 6.35 (d, J 7.1 Hz, 1H), 4.89 (t, J 6.7 Hz, 1H), 3.49 (dt, J 13.4, 7.2 Hz, 1H), 2.85-2.71 (m, 3H), 2.68-2.59 (m, 2H), 2.38 (s, 2H), 1.35 (s, 3H). LCMS (ES+) [M+H]<+>545.0, RT 1.79 minuta (Postupak 1). LCMS (ES+) [M+H]<+>545.2, RT 1.38 minuta(Postupak 2).

4

(7R,14R)-11-{6-[(1S,2R)-1-Amino-2-metilciklobutil]-5-fluoropirin-3-il}-1-(difluorometoksi)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-on ili (7R,14R)-11-{6-[(1R,2S)-1-amino-2-Metilciklobutil]-5-fluoropiridin-3-il}-1-(difluorometoksi)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-5(14H)-on

[0164] U Intermedijer 12 (135 mg, 0.22 mmol) koji je rastvoren u acetonitrilu (10 mL) dodat je 2M vodeni rastvor hlorovodnične kiseline (10 mL). Reakcina smeša je koncentrovana in vacuo i tretirana je sa 2M vodenim rastvorom natrijum hidroksida (30 mL). Smeša je ekstrahovana sa DCM (3 x 20 mL). Organski slojevi su kombinovani i koncentrovani in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-20% MeOH u DCM) da se dobije jedinjenje iz naslova (112 mg, 100%) kao bela čvrsta supstanca.<δ>H(300 MHz, DMSO-d6) 9.15 (d, J 6.8 Hz, 1H), 8.60 (t, J 1.9 Hz, 1H), 8.23 (dd, J 6.5, 3.0 Hz, 1H), 7.95-7.42 (m, 7H), 6.36 (d, J 7.1 Hz, 1H), 4.89 (t, J 6.8 Hz, 1H), 3.48 (dq, J 13.9, 7.0 Hz, 1H), 2.83-2.67 (m, 2H), 2.61-2.52 (m, 1H), 2.01-1.82 (m, 4H), 1.80-1.63 (m, 1H), 1.14 (d, J 6.8 Hz, 3H). LCMS (ES+) [M+H]<+>520.0, RT 1.68 minuta (Postupak 1). LCMS (ES+) [M+H]<+>520.2, RT 1.45 minuta (Postupak 2).

PRIMER 6

(7R,14R)-11-[2-(1-Aminociklobutil)pirimidin-5-il]-1-(difluorometoksi)-6-metil-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-on

[0165] U rastvor Intermedijera 17 (18.0 g, 29.9 mmol) u 1,4-dioksanu (25 mL) dodat je 4M hlorovodonična kiselina u 1,4-dioksanu (40 mL). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h, nakon čega je koncentrovana in vacuo. Ostatak je rastvoren u vodi (500 mL) I ispran sa EtOAc (2 x 300 mL). Vodeni sloj je yabažen do pH 9 sa 2N vodenim rastvorom natrijum hidroksida, što je rezultovalo precipitacijom čvrste supstance. EtOAc (500 mL) je dodat I smeša je mešana sve dok sve čvrste supstance nisu rastvorene. Ostatak je podeljen, zatim je vodeni sloj dalje ekstrahovan sa EtOAc (500 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4i proceđeni, nakon čega su koncentrovani in vacuo i osušeni preko noći pod visokim vakuumom. Penasti ostatak je suspendovan u smeši dietil etra I heksana (150 mL), zatim je mešan i intenzivno mućkan pre koncentrovanja in vacuo, da se dobije jedinjenje iz naslova (12.4 g, 83%) kao bela amorfna čvrsta supstanca.<δ>H(400 MHz, DMSO-d6) 9.05 (s, 2H), 8.32-8.22 (m, 1H), 7.91-7.66 (m, 3H), 7.62 (dd, J8.5, 1.8 Hz, 1H), 7.53-7.46 (m, 2H), 6.31 (d, J 7.1 Hz, 1H), 5.26 (d, J 7.2 Hz, 1H), 3.52 (dt, J 14.2, 7.3 Hz, 1H), 3.36 (s, 3H), 2.84 (d, J 13.8 Hz, 1H), 2.63 (dtd, J 11.5, 5.6, 2.5 Hz, 2H), 2.38 (s, 2H), 2.16-2.05 (m, 2H), 2.04-1.91 (m, 1H), 1.87-1.73 (m, 1H). LCMS (ES+APCI) [M-NH2]<->486.0, RT 1.66 minuta (Postupak 2). LCMS (ES+) [M+H]<+>503.0, RT 1.71 minuta (Postupak 1).

PRIMER 7

(7R,14R)-11-[6-(cis-1-Amino-3-hidroksi-3-Metil ciklobutil)-5-fluoropiridin-3-il]-1-(difluorometoksi)-6-metil -6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-5(14H)-on

[0166] Hlorovodonična kiselina u 1,4-dioksanu (4.0M, 100 mL, 400 mmol) je dodata u mešani rastvor Intermedijera 24 (44.6 g, 58.1 mmol) u MeOH (290 mL). Reakciona smeša je mešana na s.t. tokom 3 h, zatim je razblažena sa DCM (400 mL). Voda (400 mL) je dodata, zatim su slojevi razdvojeni. Organski sloj je ekstrahovan sa 2N vodenim rastvorom hlorovodnične kiseline (2 x 200 mL). Kombinovani organski ekstrakti s isprani dva puta sa DCM. Vodeni sloj je održavan baznim pomoću čvrstog kalijum karbonata, i dodata je voda u višku. Vodena suspenzija je ekstrahovana tri puta sa DCM/MeOH mixture (∼1:1). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni (Na2SO4), proceđeni i koncentrovani in vacuo. Sirovi ostatak je triturisan sa dietil etrom i smeša je mešana u trajanju od 60 h. Bež čvrste supstance su sakupljene ceđenjem, zatim su isprane sa dietil etrom i osušene nad strujom vazduha, da se dobije jedinjenje iz naslova (26.5 g, 83%).<δ>H(400 MHz, DMSO-d6) 8.62 (s, 1H), 8.31-8.23 (m, 1H), 7.92-7.86 (m, 1H), 7.77-7.72 (m, 2H), 7.70 (t, J 71.9 Hz, 1H), 7.60 (d, J 9.3 Hz, 1H), 7.52-7.48 (m, 2H), 6.30 (d, J 7.1 Hz, 1H), 5.25 (d, J 7.1 Hz, 1H), 5.01 (s, 1H), 3.56-3.47 (m, 1H), 3.36 (s, 3H), 2.86 (t, J 13.3 Hz, 3H), 2.26-2.18 (m, 4H), 1.00 (s, 3H). LCMS [M+H]<+>550, RT 2.37 minuta (Postupak 7).

PRIMER 8

1

(7R,14R)-11-[6-(cis-1-Amino-3-hidroksi-3-metilciklobutil)-5-fluoropiridin-3-il]-1-(difluorometoksi)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-on

[0167] Intermedijer 25 (930 mg, 1.23 mmol) je rastvoren u etanolu (20 mL) i 4M hlorovodonična kiselina u 1,4-dioksanu (5 mL) je dodata na 0°C. Reakciona smeša je zagrejana do s.t. i mešana preko noći, nakon čega je koncentrovana in vacuo. Ostatak je ponovo rastvoren u vodenom rastvoru 1M hlorovodonične kiseline i ispran je dva puta sa DCM. Vodeni sloj je zabažen do pH 10 sa 2M vodenim rastvorom natrijum hidroksida i ekstrahovan sa tri porcije DCM. Organske faze su kombinovane I koncentrovane in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen sa fleš hromatografijom na koloni od silike (gradijentna elucija sa 0-100% EtOAc/heksan, koje prati 0-20% MeOH/[10% 7N amonijak u MeOH/DCM]) da se dobije jedinjenje iz naslova (580 mg, 88%).<δ>H(300 MHz, DMSO-d6) 9.15 (d, J 6.8 Hz, 1H), 8.62 (d, J 2.3 Hz, 1H), 8.23 (dd, J 6.7, 2.8 Hz, 1H), 7.98-7.80 (m, 1H), 7.79-7.65 (m, 3H), 7.64-7.38 (m, 3H), 6.36 (d, J 7.0 Hz, 1H), 5.00 (s, 1H), 4.89 (t, J 6.7 Hz, 1H), 3.49 (dt, J 13.4, 7.1 Hz, 1H), 2.87 (d, J 11.7 Hz, 2H), 2.75 (d, J 13.3 Hz, 1H), 2.22 (t, J 6.0 Hz, 4H), 1.00 (s, 3H). LCMS (ES+) [M+H]<+>536.0, RT 1.52 minuta (Postupak 1). LCMS (ES+) [M+H]<+>536.2, RT 1.26 minuta (Postupak 2).

PRIMER 9

(7R,14R)-11-{2-[cis-1-Amino-3-(hidroksimetil)-3-metil ciklobutil]pirimidin-5-il}-1-(difluorometoksi)-6-metil-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-5(14H)-on

[0168] Hlorovodonična kiselina u 1,4-dioksanu (4.0M, 34.3 mL, 137 mmol) je dodata u mešani rastvor Intermedijera 33 (17.5 g, 22.9 mmol) u MeOH (114 mL). Reakciona smeša je mešana na s.t. tokom 2 h, zatim su dodati DCM (200 mL) I voda (200 mL). Slojevi su razdvojeni i organski sloj je ekstrahovan sa vodenim rastvorom 2N hlorovodonične kiseline (2 x 100 mL). Kombinovane organske faze su isprane sa DCM (2 x 100 mL), zatim su održavane baznim sa čvrstim kalijum karbonatom. Vodena suspenzija je ekstrahovana sa DCM/MeOH smešom (∼1:1; 4 x 150 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni (Na2SO4), proceđeni i koncentrovani in vacuo. Sirovi ostatak je triturisan sa dietil etrom i mešan je preko noći. Suspenzija je proceđena i osušena na vazduhu da se dobije jedinjenje iz naslova (11.3 g, 90%) kao bledo bež čvrsta supstanca.<δ>H(400 MHz, DMSO-d6) 9.06 (s, 2H), 8.30-8.25 (m, 1H), 7.78 (d, J 8.5 Hz, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.69 (t, J 73.3 Hz, 1H), 7.63 (d, J 8.5 Hz, 1H), 7.50 (d, J 5.7 Hz, 2H), 6.31 (d, J 7.1 Hz, 1H), 5.26 (d, J 7.1 Hz, 1H), 3.57-3.48 (m, 1H), 3.45 (s, 2H), 3.36 (s, 3H), 2.84 (d, J 13.8 Hz, 1H), 2.46 (d, J 12.6 Hz, 2H), 2.09 (d, J 12.8 Hz, 2H), 1.07 (s, 3H). LCMS [M+H]<+>547, RT 2.45 minuta (Postupak 7).

2

PRIMER 10

(7R,14R)-11-{6-[cis-1-Amino-3-(hidroksimetil)-3-metilciklobutil]-5-fluoropiridin-3-il}-1-(difluorometoksi)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][[2,5]-benzodiazocin-5(14H)-on

[0169] Intermedijer 35 (347 mg, 0.45 mmol) je rastvoren u etanolu (10 mL) i 4M hlorovodonična kiselina u 1,4-dioksanu (2.5 mL) je dodata na 0°C. Reakciona smeša je zagrejana do s.t. i mešana je preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana in vacuo, ponovo je rastvorena u 1M vodenom rastvoru hlorovodonične kiseline i isprana je dva puta sa DCM. Vodeni sloj je zabažen do pH 10 sa 2M vodenim rastvorom natrijum hidroksida i ekstrahovan sa tri porcije DCM. Organske faze su kombinovane I koncentrovane in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen na siliki (gradijentna elucija sa 0-100% EtOAc/ heksan, zatim 0-50% DCM/[10% 7N amonijak u MeOH]) da se dobije jedinjenje iz naslova (194 mg, 78%).<δ>H(300 MHz, DMSO-d6) 9.15 (d, J 6.8 Hz, 1H), 8.62 (t, J 1.8 Hz, 1H), 8.23 (dd, J 6.5, 2.8 Hz, 1H), 7.96-7.39 (m, 7H), 6.36 (d, J 7.1 Hz, 1H), 4.89 (t, J 6.8 Hz, 1H), 3.57-3.45 (m, 1H), 3.43 (s, 2H), 2.75 (d, J 13.2 Hz, 1H), 2.49-2.43 (m, 2H), 2.14 (d, J 12.6 Hz, 2H), 0.94 (s, 3H). LCMS (ES+) [M+H]<+>550.0, RT 1.68 minuta (Postupak 1). LCMS (ES+) [M+H<]+>550.2, RT 1.46 minuta (Postupak 2).

PRIMER 11

(7R,14R)-11-{6-[cis-1-Amino-3-hidroksi-3-(trifluorometil)ciklobutil]-5-fluoropiridin-3-il} -1-(difluorometoksi)-6-metil-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-5(14H)-on

[0170] Hlorovododnik u 1,4-dioksanu (4M, 8.72 mL) je dodat u mešani rastvor Intermedijera 43 (823 mg, 1.16 mmol) u 1,4-dioksanu (15 mL) na s.t. Smeša je mešanja u trajanju od 0.5 h, nakon čega je koncentrovana in vacuo. Dobijena beličasta čvrsta supstanca je rastvorena u MeOH (10 mL) i naneta je na jonoizmenjivačku kasetu (SCX-2), koja je isprana sa MeOH (2 x 15 mL). Materijal je eluiran sa 2.0M amonijakom u MeOH (3 x 15 mL). Filtrat je koncentrovan in vacuo. Fleš hromatografija na reverzno faznoj koloni sirovog ostatka (smeša trans i cis izomera, 642 mg) na siliko (gradijentna elucija sa 10-23% acetonitrilom u vodi sa unetom 0.1% mravljom kiselinom) dalo je prvu frakciju eluiranja (trans izomer, 295 mg) kao neprozirnu gumu, koja je suspendovana u 1:1 acetonitrilu-vodi (4 mL) i tretirana je sa 1M vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (538 µL). Dobijeni rastvor je osušen zamrzavanjem da se dobije trans izomer (298 mg, 42%) kao bezbojna čvrrsta supstanca. Druga frakcija eluiranja (cis izomer) je koncentrovana in vacuo i ponovo je prečišćena sa preparativnim HPLC (elucijom sa 0-100% acetonitrilom u vodi koja je obogaćena sa 0.1% mravljom kiselinom). Dobijena beličasta čvrsta supstanca (mono-formijatna so) je rastvorena u MeOH (15 mL) i naneta je na jonoizmenjivačku kolonu (SCX-2). Materijal je ispran sa MeOH (2 x 15 mL) i eluiiran sa 2.0M amonijakom u MeOH (3 x 15 mL). Filtrat je koncentrovan in vacuo. Dobijeno neprozirno staklo (slobodna baza, 147 mg) je suspendovano u 1:1 acetonitrilu-vodi (4 mL) i tretirano je sa 1M vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (268 µL). Dobijeni rastvor je osušen zamrzavanjem da se dobije jedinjenje iz naslova (cis izomer, 144 mg, 21%) kao bezbojna čvrsta supstanca.<δ>H(500 MHz, CD3OD) 8.84 (d, J 1.5 Hz, 1H), 8.46-8.39 (m, 1H), 8.07 (dd, J 12.1, 1.8 Hz, 1H), 8.04 (d, J 1.3 Hz, 1H), 7.90 (d, J 8.6 Hz, 1H), 7.83 (dd, J 8.6, 1.6 Hz, 1H), 7.57-7.52 (m, 2H), 7.51-7.21 (m, 1H), 6.64 (d, J 7.2 Hz, 1H), 5.48 (d, J 7.2 Hz, 1H), 3.75-3.65 (m, 1H), 3.58 (d, J 15.1 Hz, 2H), 3.51 (s, 3H), 3.05 (d, J 13.9 Hz, 1H), 2.76 (d, J 15.3 Hz, 2H). LCMS (ESI) [M+H]<+>604.2, RT 2.04 minuta (Postupak 11).

PRIMER 12

(7R,14R)-11-{2-[cis-1-Amino-3-hidroksi-3-(trifluorometil)ciklobutil]pirimidin-5-il}-1-(difluorometoksi)-6-metil -6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-5(14H)-on

[0171] Hlorovodnik u 1,4-dioksanu (4M, 5.15 mL) je dodat u mešani rastvor Intermedijera 46 (474 mg, 0.69 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana u trajanju od 2 h, nakon čega je koncentrovana in vacuo. Dobijena sirova beličasta čvrsta supstanca je rastvorena u MeOH (10 mL) i naneta je na jonoizmenjivačku kolonu (SCX-2), koja je isprana sa MeOH (2 x 25 mL). Materijal je eluiran sa 2.0M amonijakom u MeOH (3 x 15 mL). Filtrat je koncentrovan in vacuo. Prečišćavanje sirovog ostatka (smeša trans i cis izomera, 396 mg) preparativnom HPLC (eluiranje sa 0-100% mravljom kiselinom u acetonitrilu) dalo je prvu frakciju elucije (trans izomer), koja je koncentrovana in vacuo, zatim je razblažena u MeOH (5 mL) i naneta na jonoizmenjivačku kolonu (SCX-2). Kolona je isprana sa MeOH (2 x 15 mL) i materijal je eluiran 2.0M amonijakom u MeOH (3 x 15 mL). Filtrat je koncentrovan in vacuo. Dobijeno neprozirno staklo (slobodna baza, 215 mg) je suspendovano u 1:1 acetonitrilu-vodi (4 mL) i tretirano je sa 1M vodenim rastvorom hlorovodnične kiseline (400 µL). Dobijeni rastvor je osušen zamrzavanjem da se dobije trans izomer (203 mg, 47%) kao bezbojna čvrsta supstanca. Druga frakcija elucije (cis izomer) je koncentrovana in vacuo, zatim je razblažena u MeOH (5 mL) i naneta je na jonoizmenjivačku kolonu (SCX-2). Kolona je isprana sa MeOH (2 x 15 mL) I material je eluiran sa 2.0M amonijakom u MeOH (3 x 15 mL). Filtrat je koncentrovan in vacuo. Dobijeno neprozirno staklo (slobodna baza, 118 mg) je suspendovano u 1:1 acetonitril-vodi (2 mL) i tretirano je sa 1M vodenim rastvorom hlorovoodnične kiseline (222 µL). Dobijeni rastvor je osušen zamrzavanjem da se dobije jedinjenje iz naslova (cis izomer, 118 mg, 24%) kao bezbojna čvrsta supstanca.<δ>H(500 MHz, CD3OD) 9.19 (s, 2H), 8.44-8.36 (m, 1H), 8.00 (d, J 1.2 Hz, 1H), 7.89 (d, J 8.6 Hz, 1H), 7.81-7.72 (m, 1H), 7.54-7.49 (m, 2H), 7.49-7.21 (m, 1H), 6.59 (d, J 7.1 Hz, 1H), 5.42 (d, J 7.2 Hz, 1H), 3.72-3.64 (m, 1H), 3.58-3.53 (m, 2H), 3.51 (s, 3H), 3.01 (d, J 13.9 Hz, 1H), 2.67-2.59 (m, 2H). LCMS (ESI) [M+H]<+>587.2, RT 1.95 minuta (Postupak 11).

4

PRIMER 13

(7R,14R)-11-{6-[cis-1-Amino-3-hidroksi-3-(trifluorometil)ciklobutil]-5-fluoropiridin-3-il}-1-(difluorometoksi)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-5(14H)-on

[0172] U rastvor Intermedijera 48 (440 mg, 0.55 mmol) u 1,4-dioksanu (8 mL) je dodat 4M hlorovodonik u 1,4-dioksanu (4.14 mL). Reakciona smeša je mešana na s.t. tokom 1 h, nakon čega je koncentrovana in vacuo. Sirovi ostatak je nanet na jonoizmenjivačku kolonu (SCX-2) u DCM/MeOH. Kolona je isprana sa MeOH (50 mL), i proizvod je eluiran sa 2M amonijakom u MeOH (50 mL). Sirovi materija (smeša trans i cis izomera, 350 mg) je prečišćena preparativnom HPLC. Frakcija koja sadrži cis izomer je suspendovana u 1:1 acetonitril-vodi (4 mL) I tretirana je sa 4M hlorovodonikom u 1,4-dioksanu (300 µL). Rastvor je osušen zamrzavanjem da se dobije jedinjenje iz naslova (hidrohloridna so, 132 mg, 38%) kao beličasti prašak.<δ>H(500 MHz, CD3OD) 8.82 (t, J 1.6 Hz, 1H), 8.36 (dd, J 7.2, 2.2 Hz, 1H), 8.04 (dd, J 12.2, 1.8 Hz, 1H), 7.95 (d, J 1.3 Hz, 1H), 7.82 (d, J 8.5 Hz, 1H), 7.70 (dd, J 8.6, 1.7 Hz, 1H), 7.58-7.17 (m, 3H), 6.60 (d, J 7.1 Hz, 1H), 5.15-5.05 (m, 1H), 3.66-3.53 (m, 3H), 2.93 (d, J 13.5 Hz, 1H), 2.79-2.71 (m, 2H). LCMS (ESI) [M+H]<+>590.1, RT 1.65 minuta (Postupak 11).

PRIMER 14

(7R,14R)-11-(2-{cis-1-Amino-3-[hidroksi(dideutero)metil]-3-metilciklobutil}-pirimidin-5-il)-1-(difluorometoksi)- 6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-5(14H)-on

[0173] U mešani rastvor Intermedijera 56 (500 mg, 0.66 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL) je dodat 4M hlorovodnik u 1,4-dioksanu (0.66 mL). Reakciona smeša je mešana na s.t. tokom 18 h, nakon čega je koncentrovana pod smanjenim pritiskom. Dobijena beličasta čvrsta supstanca je prečišćena korišćenjem 20 g SCX-2 kasete (eluiranjem sa 2M amoniijakom u metanolu). Dobijena beličasta čvrsta supstanca je dalje prešćišćena sa reverzno faznom hromatografijom na koloni (10-60% acetonitril u vodi (+ 0.1% mravlja kiselna)). Relevantne frakcije su kombinovane i rastvarač je uklonjen pod redukovanim pritiskom. Dobijena bezbojna guma je suspendovana u 1:1 acetonitril:vodi i 1M HCl (1.3 ekvivalenata) je dodato. Dobijeni rastvor je osušen zamrzavanjem da se dobije Jedinjenje iz naslova, hidrohloridna so (199 mg) kao beličasti prašak.<δ>H(500 MHz, DMSO-d6) 9.22 (s, 2H), 9.19 (d, J 6.9 Hz, 1H), 8.77 (s, 3H), 8.26-8.20 (m, 1H), 7.87-7.54 (m, 4H), 7.55-7.49 (m, 2H), 6.40 (d, J 7.1 Hz, 1H), 4.96 (t, J6.9 Hz, 1H), 3.54-3.48 (m, 1H), 2.78 (d, J 13.3 Hz, 1H), 2.62 (d, J 14.0 Hz, 2H), 2.53-2.51 (m, 2H), 1.21 (s, 3H). LCMS (ESI+) [M+H]<+>535.3, RT 2.25 minuta (Postupak 1).

PRIMER 15

(7R,14R)-11-{2-[cis-1-Amino-3-(hidroksimetil)-3-Metilciklobutil]pirimidin-5-il}-1-(difluorometoksi)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-on

[0174] U rastvor Intermedijera 57 (180 mg, 0.24 mmol) u etanolu (12 mL) na 0°C je dodata 4M hlorovodnična kiselina u 1,4-dioksanu (2.5 mL, 10 mmol). Reakciona smeša je zagrejana do s.t. i mešana je preko noći, nakon čega je koncentrovana in vacuo. Ostatak je ponovo rastoren u 1M vodenom rastvoru HCl i ispran je sa DCM (2 x 2.5 mL). Vodeni sloj je zabažen do pH 10 sa 2M vodenim rastvorom NaOH i ekstrahovan sa DCM (2 x 2.5 mL). Organske faze su kombinovane i koncentrovane in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen sa hromatografijom na koloni (0-100% EtOAc u heksanu, koje prati 0-20% MeOH i 10% 7N amonijak u DCM) da se dobije jedinjenje iz naslova (62 mg, 49%) kao bela čvrsta supstanca.<δ>H(300 MHz, DMSO-d6) 9.15 (d, J 6.8 Hz, 1H), 9.05 (s, 2H), 8.23 (dd, J 5.9, 3.6 Hz, 1H), 7.81-7.66 (m, 2H), 7.77 (t, J 48 Hz, 1H), 7.61 (dd, J 8.5, 1.8 Hz, 1H), 7.55-7.41 (m, 2H), 6.37 (d, J 7.1 Hz, 1H), 5.50 (br s, 1H), 4.90 (t, J 6.7 Hz, 1H), 3.50 (dd, J 13.6, 6.9 Hz, 1H), 3.45 (s, 2H), 2.75 (d, J 13.5 Hz, 1H), 2.44 (d, J 12.9 Hz, 2H), 2.09 (d, J 12.9 Hz, 2H), 1.07 (s, 3H). LCMS (ESI+) [M+H]<+>533, RT 1.51 minuta (Postupak 1).

PRIMER 16

(7R,14R)-11-(6-{cis-1-Amino-3-[hidroksi(dideutero)metil]-3-metilciklobutil}-5-fluoropiridin-3-il)-1-(difluorometoksi)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b]-[2,5]benzodiazocin-5(14H)-on

[0175] Intermedijer 59 (130 mg, 0.17 mmol) je rastvoren u 1,4-dioksanu (3 mL) i dodata je 4M hlorovodonična kiselina u 1,4- dioksanu (0.9 mL). Smeša je mešana tokom 10 minuta, zatim je razblažena sa metanolom (3 mL) i mešana je tokom 2 h. Smeša je koncentrovana in vacuo i ostatak je prečišćen na 10 g SCX kaseti (elucijom sa 2M amonijakom u metanolu). Ostatak je razblažen u 1:1 acetonitril:vodi(∼5 mL), nakon čega je tretiran sa vodenim HCl (1.2 ekvivalenata) i osušen zamrzavanjem, da se dobije Jedinjenje iz naslova, hidrohloridna so (80 mg, 79%) kao beličasta čvrsta supstanca .<δ>H(500 MHz, DMSO-d6) 9.16 (d, J 6.9 Hz, 1H), 8.85-8.77 (m, 1H), 8.67 (s, 3H), 8.24 (dd, J 6.3, 3.1 Hz, 1H), 8.15 (dd, J 12.7, 1.8 Hz, 1H), 7.87-7.54 (m, 4H), 7.54-7.48 (m, 2H), 6.37 (d, J 7.1Hz, 1H), .93 (t, J 6.8 Hz, 1H), 3.53-3.48 (m, 1H), 2.77 (d, J 13.3 Hz, 1H), 2.75-2.69 (m, 2H), 2.57 (d, J 13.5 Hz, H), 1.08 (s, 3H). LCMS (ESI+) [M+H]<+>552.5, RT 1.99 minuta (Postupak 1).

Claims (8)

1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so:

   gde X predstavlja N ili C-F; R<1>predstavlja vodonik ili metil ; R<2>predstavlja vodonik, metil ili trifluorometil ; i R<3>predstavlja vodonik, cijano, hidroksi ili hidroksimetil.
2. 2. Jedinjenje prema zahtevu 1 predstavljeno formulom (IIA), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so:

   gde X, R<1>, R<2>i R<3>su kao što je definisano u zahtevu 1.
3. 3. Jedinjenje prema zahtevu 1 predstavljeno formulom (IIB), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so:

   gde X, R<1>, R<2>i R<3>su kao što je definisano u zahtevu 1.
4. 4. Jedinjenje prema zahtevu 1 koje je izabrano od sledećih: cis-3-amino-3-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-6-metil-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]pirimidin-2-il}-1-Metil ciklobutankarbonitrila; cis-3-amino-3-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]pirimidin-2-il}-1-metil ciklobutankarbonitrila; cis-3-amino-3-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-6-metil-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]-3-fluoropiridin-2-il}-1-metil ciklobutankarbonitrila; cis-3-amino-3-{5-[(7R,14R)-1-(difluorometoksi)-5-okso-5,6,7,14-tetrahidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-11-il]-3-fluoropiridin-2-il}-1-metil ciklobutankarbonitrila; (7R,14R)-11-{6-[(1S,2R)-1-amino-2-metilciklobutil]-5-fluoropiridin-3-il}-1-(diflourometoksi)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-ona; (7R,14R)-11-{6-[(1R,2S)-1-amino-2-metilciklobutil]-5-fluoropiridin-3-il}-1-(diflourometoksi)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-5(14H)-ona; (7R,14R)-11-[2-(1-aminociklobutil)pirimidin-5-il]-1-(difluorometoksi)-6-metil-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-ona; (7R,14R)-11-[6-(cis-1-amino-3-hidroksi-3-metilciklobutil)-5-fluoropiridin-3-il]-1-(difluorometoksi)-6-metil-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-5(14H)-ona; (7R,14R)-11-[6-(cis-1-amino-3-hidroksi-3-metilciklobutil)-5-fluoropiridin-3-il]-1-(difluorometoksi)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-ona; (7R,14R)-11-{2-[cis-1-amino-3-(hidroksimetil)-3-metilciklobutil]pirimidin-5-il}-1-(difluorometoksi)-6-metil-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-5(14H)-ona; (7R,14R)-11-(6-[cis-1-amino-3-(hidroksimetil)-3-metilciklobutil]-5-fluoropiridin-3-il}-1-(difluorometoksi)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-5(14H)-ona; (7R,14R)-11-(6-[cis-1-amino-3-hidroksi-3-(trifluorometil)ciklobutil]-5-fluoropiridin-3-il}-1-(difluorometoksi)-6-metil-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-5(14H)-ona; (7R,14R)-11-{2-[cis-1-amino-3-hidroksi-3-(trifluorometil)ciklobutil]pirimidin-5-il}-1-(difluorometoksi)-6-metil-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-5(14H)-ona; (7R,14R)-11-(6-[cis-1-amino-3-hidroksi-3-(trifluorometil)ciklobutil]-5-fluoropiridin-3-il}-1-(difluorometoksi)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-5(14H)-ona; (7R,14R)-11-(2-{cis-1-amino-3-[hidroksi(dideutero)metil ]-3-metil ciklobutil}-pirimidin-5-il)-1-(difluorometoksi)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]-benzodiazocin-5(14H)-ona; (7R,14R)-11-{2-[cis-1-amino-3-(hidroksimetil)-3-metilciklobutil]pirimidin-5il}-1-(difluorometoksi)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b][2,5]benzodiazocin-5(14H)-ona; i (7R,14R)-11-(6-{cis-1-amino-3-[hidroksi(dideutero)metil]-3-metilciklobutil}-5-fluoropiridin-3-il)-1-(difluorometoksi)-6,7-dihidro-7,14-metanobenzimidazo[1,2-b]-[2,5]benzodiazocin-5(14H)-ona.
5. 5. Jedinjenje formule (I) kao što je definisano u zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu terapiji.
6. 6. Jedinjenje formule (I) kao što je definisano u zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u lečenju i/ili prevenciji inflamatornog ili autoimunog poremećaja, neurološkog ili neurodegenerativnog poremećaja, bola ili nociceptivnog poremećaja, kardiovaskularnog poremećaja, metaboličkog poremećaja, očnog poremećaja, ili onkološkog poremećaja.
7. 7. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje formule (I) kao što je definisano u zahtevu 1, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, zajedno sa farmaceutski prihvatljivim nosačem.
8. 8. Farmaceutska kompozicija prema zahtevu 7, koja dalje sadrži dodatni farmaceutski aktivni sastojak. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5