RS62729B1 - Derivati pirazola korisni kao inhibitori proteina koji aktivira 5-lipoksigenazu (flap) - Google Patents

Derivati pirazola korisni kao inhibitori proteina koji aktivira 5-lipoksigenazu (flap)

Info

Publication number
RS62729B1
RS62729B1 RS20211559A RSP20211559A RS62729B1 RS 62729 B1 RS62729 B1 RS 62729B1 RS 20211559 A RS20211559 A RS 20211559A RS P20211559 A RSP20211559 A RS P20211559A RS 62729 B1 RS62729 B1 RS 62729B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
methyl
pyrazol
mmol
benzoyl
cyclohexanecarboxamide
Prior art date
Application number
RS20211559A
Other languages
English (en)
Inventor
Johan Olof Broddefalk
Hans Fredrik Emtenäs
Kenneth Lars Granberg
Malin Anita Lemurell
Daniel Tor Pettersen
Alleyn Thomas Plowright
Lars Johan Andreas Ulander
Original Assignee
Astrazeneca Ab
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Astrazeneca Ab filed Critical Astrazeneca Ab
Publication of RS62729B1 publication Critical patent/RS62729B1/sr

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D231/38—Nitrogen atoms
    • C07D231/40—Acylated on said nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/4155—1,2-Diazoles non condensed and containing further heterocyclic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/495—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with two or more nitrogen atoms as the only ring heteroatoms, e.g. piperazine or tetrazines
    • A61K31/4985—Pyrazines or piperazines ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P13/00—Drugs for disorders of the urinary system
    • A61P13/12—Drugs for disorders of the urinary system of the kidneys
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00—Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10—Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00—Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10—Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D231/44—Oxygen and nitrogen or sulfur and nitrogen atoms
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/02—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings
    • C07D231/10—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members
    • C07D231/14—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings not condensed with other rings having two or three double bonds between ring members or between ring members and non-ring members with hetero atoms or with carbon atoms having three bonds to hetero atoms with at the most one bond to halogen, e.g. ester or nitrile radicals, directly attached to ring carbon atoms
    • C07D231/44—Oxygen and nitrogen or sulfur and nitrogen atoms
    • C07D231/46—Oxygen atom in position 3 or 5 and nitrogen atom in position 4
    • C07D231/50—Acylated on said nitrogen atom
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings
    • C07D413/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D417/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00
    • C07D417/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings
    • C07D417/12—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D415/00 containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D487/00—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00
    • C07D487/02—Heterocyclic compounds containing nitrogen atoms as the only ring hetero atoms in the condensed system, not provided for by groups C07D451/00 - C07D477/00 in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D487/04—Ortho-condensed systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D498/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D498/02—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms in which the condensed system contains two hetero rings
    • C07D498/04—Ortho-condensed systems

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Vascular Medicine (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Emergency Medicine (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Enzymes And Modification Thereof (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)

Description

Opis
Oblast
[0001] Predmetna prijava se odnosi na nova jedinjenja koja inhibiraju protein koji aktivira 5-lipoksigenazu (FLAP) i, prema tome, proizvodnju leukotriena za njihovu upotrebu pri lečenju i/ili sprečavanju kliničkih stanja uključujući kardiovaskularne bolesti (CVD), kao što su ateroskleroza, bolest koronarne arterije (CAD) koronarna bolest srca (srčana bolest srca), srčana insuficijencija (HF), visoko rizična koronarna arterijska bolest (HRCAD) i aneurizme abdominalne aorte (AAA), na metode za njihovu terapijsku upotrebu, na farmaceutske sastave koji ih sadrže i na postupke za pripremu takvih jedinjenja.
Pozadina
[0002] FLAP, protein koji aktivira 5-lipoksigenazu, ima kritičnu ulogu u proizvodnji leukotriena putem 5-lipoksigenaze (5-LO). Konkretno, FLAP posreduje prenosu supstrata, arahidonske kiseline, oslobođene iz membranskih fosfolipida, na aktivno mesto 5-LO.
Leukotrieni su lipidni posrednici koje oslobađaju leukociti, posebno neutrofili, eozinofili, mastociti i monociti/makrofagi. Pripadaju široj klasi lipidnih posrednika poznatih kao eikosanoidi, formirani od arahidonske kiseline oslobođene iz ćelijskih membrana. Postoje dve različite klase leukotriena LTB4i CysLTs (LTC4, LTD4i LTE4). Funkcije LTB4uključuju hemo-privlačenje i aktiviranje leukocita, inhibiciju neutrofilne apoptoze i aktiviranje ekspresije molekula adhezije. Takvi efekti se posreduju vezanjem na jedan od dva različita receptora vezana za protein (BLT1 i BLT2) koji se razlikuju po afinitetu i specifičnosti za LTB4. Cistein leukotrieni imaju vazo-aktivna svojstva i mogu uticati na protok krvi i vazopermeabilnost, akcije posredovane sa dva CysLT receptora, CysLT1 i CysLT2.
[0003] Da bi pokrenuo biosintezu leukotriena, 5-LO premešta u intracelularne membrane, kao što je nuklearna membrana, gde interaktivno deluje sa FLAP. Arahidonska kiselina oslobođena iz membranskih fosfolipida citoplazmatskim PLA2 (cPLA2) prenosi se preko FLAP na 5-LO koji zatim stereospecifično uključuje kiseonik na petom položaju ugljenika, formirajući 5(S)-HpETE. Ovo se zatim pretvara 5-LO u LTA4, uobičajeni prekursor leukotriena B4(LTB4) i cistein leukotriena (LTC4, LTD4i LTE4). Konverzija LTA4u LTB4posreduje LTA4hidrolaza (LTA4H), epoksidna hidrolaza zavisna od cinka. Formiranje cisteinil leukotriena uključuje konjugaciju LTA4sa glutationom, posredovanu LTC4sintazom u ćelijskim membranama zajedno sa FLAP, a rezultirajući LTC4može se dalje preraditi u LTD4i LTE4preko peptidaznih aktivnosti.
[0004] Jedinjenja koja inhibiraju funkciju bilo 5-LO ili FLAP mogu rezultirati inhibicijom proizvodnje leukotriena. Inhibitori FLAP se direktno vezuju za FLAP u ćelijskim membranama i sprečavaju biosintezu leukotriena sprečavanjem translokacije membrane 5-LO i/ili snabdevanjem supstrata arahidonske kiseline na njeno aktivno mesto. Na ovaj način, inhibicija FLAP sprečava proizvodnju i LTB4 i CysLTs inhibiranjem proizvodnje uobičajenog prekursora LTA4. Za razliku od inhibitora 5-LO, FLAP inhibitori ne suzbijaju oksidaciju arahidonske kiseline 5-LO i ne inhibiraju proizvodnju leukotriena u liziranim ćelijskim ekstraktima.
[0005] Uprkos dostupnosti lekova koji se bave faktorima rizika poput visokog nivoa holesterola i povišenog krvnog pritiska, potrebne su dodatne mogućnosti lečenja da bi se smanjila aterosklerotska kardiovaskularna bolest i njeni nastavci. Uloga taloženja lipida u stvaranju aterosklerotskih plakova je dobro utvrđena. Međutim, drugi ključni faktor aterogeneze je inflamacija, uključujući i regrutovanje inflamatornih ćelija na aterosklerotske lezije i njihovu aktivaciju unutar plakova. Farmakološki pristupi koji ciljaju inflamaciju mogu stoga pružiti nov pristup lečenju pacijenata sa aterosklerozom. Inhibicija proizvodnje leukotriena upotrebom inhibitora FLAP je jedan takav pristup.
[0006] Drugi faktor rizika vezan za kardiovaskularne bolesti je mikrovaskularna disfunkcija. Slabljenjem aktivacije leukocita i interakcijom sa mikrovaskulaturom, pored smanjenja proizvodnje vazoaktivnih cistein leukotriena, farmakološka inhibicija FLAP može poboljšati funkciju mikrovaskularnog sistema kod pacijenata sa kardiovaskularnom bolešću.
[0007] Sledećim dokazima podržava veza između FLAP, aktivnosti 5-LO puta, proizvodnje leukotriena i kardiovaskularnih bolesti.1) ekspresija i aktivnost 5-LO staze se povećava u vezi sa napredovanjem aterosklerotskog plaka i simptomima nestabilnosti plaka koji mogu izazvati rupturu plaka i trombozu što dovodi do infarkta miokarda (MI) (Spanbroek i dr (2003) PNAS 100, 1238; Cipollone i dr. (2005) ATVB 25, 1665); 2) nivo leukotriena u krvi i urinu je povišen u periodu nakon nedavnog događaja akutnog koronarnog sindroma (ACS) (Sanchez-Gala i dr. (2009) kardiovaskularna istraživanja 81, 216; Carry i dr. (1992) Circulation 85, 230); 3) genetski haplotipovi gena FLAP (ALOKS5AP) značajno su povezani sa rizikom od infarkta miokarda (Helgadottir i dr. (2004) Nature Genetics 36, 233).
[0008] Mnoge kompanije su tokom poslednjih nekoliko decenija ostvarile FLAP kao cilj, a prijave patenta povezane sa ovim naporima sumirane su u različitim objavama. Videti npr., Pergola &Werz, Expert Opin. Ther. Patenti (2010) 20(3); i Hofmann & Steinhilber Expert Opin. Ther. Patenti, (2013) 23(7) i Whatling Bioorg. Med Chem. Lett. (2015) 25(2607).
Međutim, ova patentna prijava predstavlja novu klasu jedinjenja koja se razlikuju od prethodnih prijava patenata.
[0009] Trenutna prijava rešava veliku nezadovoljenu potrebu pružanjem jedinjenja, sastava i postupaka za lečenje ili prevenciju kardiovaskularnih bolesti i srodnih stanja.
Kratak opis
[0010] U jednom aspektu, dato je jedinjenje Formule (I):
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde: R<1>je H, C1-C3alkil, halo, C1-C3alkoksi, C1-C3haloalkil ili C1-C3haloalkoksi; svaki od R<2>i R<3>je neovisno H, C1-C3alkil, C1-C3alkoksi, -CN ili halo; R<4>je H, -CH3, -CH2F, -CHF2, -CF3ili halo; prsten A sadrži 2 dvostruke veze; svaki X1, X2, X3i X4iz prstena A je neovisno CR<5>, CH, O, S, NR<6>ili N; pri čemu najmanje jedan od X1, X2, X3i X4u prstenu A je NR<6>; svaki R<5>je po izboru i neovisno C1-C6alkil, C1-C6alkoksi, C1-C3haloalkil, C1-C3haloalkoksi, -S(O)pR<7>, -CN, -CONR'R", ili C3-C6cikloalkil; svaki p je neovisno 0, 1 ili 2; ili gde kada X4je CR<5>i X3je NR<6>, onda R<5>i R<6>mogu biti uzeti zajedno da formiraju 5 do 6-eročlani heterociklil prsten kondenzovan na prsten A, koji heterociklil može opciono da sadrži dodatni heteroatom odabran između N, O i S; pomenuti kondenzovani heterociklil može dodatno da sadrži karbonil ili -S(O)2direktno pored heteroatoma u njemu; i može dalje biti supstituisan sa jednim ili dva supstituenta izabrana iz grupe koju čine -CH3i halo; R<6>je H, -CH3ili ―CH2CH3; R<7>je -CH3ili ―NR'R"; i svaki R' i R" je nezavisno -H ili ―CH3; pod uslovom da je ukupan broj supstituenata na prstenu A 0, 1 ili 2; i dalje pod uslovom da kada R<5>i R<6>nisu kombinovani da formiraju heterociklil prsten kondenzovan na prsten A, da je ukupan broj R<5>i R<6>supstituenata koji je alkil i/ili haloalkil 0 ili 1.
[0011] U daljem aspektu, obezbeđeni su farmaceutski sastavi koji sadrže terapeutski efikasnu količinu jedinjenja formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljivi rastvarač i farmaceutski prihvatljiv razblaživač, ekscipijense i/ili inertni nosač.
[0012] U još jednom daljem aspektu, obezbeđeno je jedinjenje formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu u lečenju ili profilaksi bolesti i stanja u kojima je inhibicija FLAP korisna. U jednom otelotvorenju, je jedinjenje formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so za upotrebu u lečenju kardiovaskularnih bolesti. U jednom aspektu, kardiovaskularna bolest je koronarna arterijska bolest, naročito visokorizična koronarna bolest.
[0013] U jednom aspektu, je jedinjenje prema formuli (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za upotrebu kao lek.
[0014] Takođe su opisani postupci za dobijanje jedinjenja formule (I) i međujedinjenja koja se koriste u njihovoj pripremi.
[0015] Ovi i drugi aspekti patentne prijave su detaljnije opisani ispod u tekstu.
Detaljni opis
[0016] Cilj patentne prijave je da se obezbede jedinjenja koja su inhibitori proteina koji aktivira 5-lipoksigenazu (FLAP), njihova upotreba kao lekova, farmaceutski sastavi koji ih sadrže i sintetski putevi njihove proizvodnje.
[0017] U jednom otelotvorenju je jedinjenje prema formuli (I), ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, kao što je gore opisano.
[0018] U drugom otelotvorenju je jedinjenje prema formuli (II):
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde: svaki X1, X2i X4iz prstena A je nezavisno CR<5>, CH, ili N; gde je najmanje jedan od X1, X2i X4u prstenu A N; i X3je O, S ili NR<6>; ili gde kada je X4CR<5>i X3je NR<6>, onda R<5>i R<6>mogu biti uzeti zajedno da formiraju 5 do 6-eročlani heterociklil prsten kondenzovan na prsten A, koji heterociklil može opciono da sadrži dodatni heteroatom izabran između N, O i S; pomenuti kondenzovani heterociklil može dodatno da sadrži karbonil ili ―S(O)2direktno pored heteroatoma u njemu; i može dalje biti supstituisan sa jednim ili dva supstituenta izabrana iz grupe koju čine -CH3i halo; R<1>, R<2>, R<4>, R<5>i R<6>su kao što je gore definisano.
[0019] U daljem otelotvorenju je jedinjenje prema formuli (III):
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde: X<1>je CH ili CR<5>; X<2>je N; X<3>je O, S, ili NR<6>; X<4>je CH ili CR<5>; R<2>je ―H ili F; R<5>je ―S(O)2NR'R", -SO2CH3; -C(O)NR'R", -CN, C1-C2alkoksi, C1-C2haloalkoksi ili C1-C2haloalkil; R<6>je H, -CH3ili ―CH2CH3; i svaki R' i R" je nezavisno ―H ili ―CH3; ili gde kada je X4CR<5>i X3je NR<6>, onda R<5>i R<6>mogu biti uzeti zajedno da formiraju 5 do 6-eročlani heterociklil prsten kondenzovan na prsten A, koji heterociklil može opciono da sadrži dodatni heteroatom izabran između N, O i S; pomenuti kondenzovani heterociklil može dodatno da sadrži karbonil ili -S(O)2direktno pored heteroatoma u sebi; i može dalje biti supstituisan sa jednim ili dva odabrana supstituenta iz grupe koju čine -CH3i halo; i R<4>je kao što je gore definisano.
[0020] U daljem otelotvorenju je jedinjenje prema formuli (III) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde: X<1>je CH ili CR<5>; X<2>je N; X<3>je O, S, ili NR<6>; X<4>je CH ili CR<5>;
R<2>je ―H ili F; R<5>je ―S(O)2NR'R", -SO2CH3; -C(O)NR'R", -CN, C1-C2alkoksi, C1-C2haloalkoksi ili C1-C2haloalkil; R<6>je H, -CH3ili ―CH2CH3; i svaki R' i R" je nezavisno – H ili ―CH3; i R<4>je kao što je gore definisano.
[0021] Jedinjenje prema formuli (III), kao što je gore definisano, gde je jedan od X<1>CH, X<2>je N i X<3>je NR<6>; i R<6>je kao što je gore definisano.
[0022] U daljem otelotvorenju je jedinjenje prema formuli (III), kao što je gore definisano, gde R<5>je ―S(O)2CH3, -CHF2or ―OCHF2.
[0023] U daljem otelotvorenju je jedinjenje prema formuli (III), kao što je gore definisano, gde R<5>je ―S(O)2NH2, -C(O)NH2or ―CN; i R<6>je ―H or ―CH3. Jedinjenje prema formuli (III), kao što je gore definisano gde je jedan X<1>CH, X<2>je N i X<3>je NR<6>; i R<6>je kao što je gore definisano.
[0024] Drugo otelotvorenje je jedinjenje prema formuli (V):
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, gde: X<1>je CH ili CR<5>; R<2>je ―H ili ―F; R<4>je ―H ili -CH3; R<5>, ako je prisutan, je ―CH3;i R<6>je ―H ili ―CH3;pod uslovom da R<5>i R<6>nisu oba ―CH3u isto vreme.
[0025] U daljem otelotvorenju je jedinjenje prema formuli (VI):
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, gde: X<1>je CH ili CR<5>; R<2>je ―H ili ―F; R<4>je ―H ili -CH3; R<5>, ako je prisutan, je ―CH3;i R<6>je ―H ili ―CH3;R<7>je -CH3ili -NR'R"; i svaki R' i R" je nezavisno ―H ili ―CH3;pod uslovom da R<5>i R<6>nisu oba -CH3u isto vreme.
[0026] Drugo otelotvorenje je jedinjenje prema formuli (VII):
ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, gde: jedan od X<1>i X<4>je CH, i drugi je CR<5>; R<2>je -H ili ―F; R<4>je ―H ili ―CH3;R<5>je -CH3ili C1-haloalkil; i R<6>je ―H ili ―CH3;pod uslovom da je ukupan broj supstituenata R<5>i R<6>u prstenu A koji je alkil 0 ili 1.
[0027] U jednom aspektu, za bilo koju od formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII), ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, R<1>je ―H.
[0028] U jednom aspektu, za jedinjenje formule (I), ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, R<2>i R<3>su svaki nezavisno -F ili -H. U drugom aspektu za bilo koju od formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII), ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, R<2>je -H ili ―F, a R<3>je ―H. U daljem aspektu, za bilo koju od formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII), ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, R<2>je ―H i R<3>je ―H.
[0029] U jednom aspektu, za bilo koju od formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII), ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, R<4>je ―H. U drugom aspektu za bilo koju od formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII), ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, R<4>je -CH3.
[0030] U jednom aspektu, za bilo koju od formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII), ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, R<1>je ―H; R<2>i R<3>su oba ―H; i R<4>je ―H ili ―CH3.
[0031] U jednom aspektu za bilo koju od formula (II), (III) ili (VII), ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, X<1>je CH ili CR<5>. U drugom aspektu ovog otelotvorenja, X<4>je CR<5>.
[0032] U jednom aspektu, za bilo koju od formula (I), (II) ili (III), ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, prsten A je opciono i nezavisno supstituisani pirazol, triazol, oksazol, tiazol, oksadiazol ili tiadiazol.
[0033] U jednom aspektu, za bilo koju od formula (II) ili (III), ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, jedan od X<2>je N i X<3>je NR<6>.
[0034] U jednom aspektu, za bilo koju od formula (I),(II), (III), (V) ili (VII), ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, R<5>je ―S(O)2NH2, -C(O)NH2ili ―CN; i R<6>je ―H ili ―CH3. U jednom aspektu, za bilo koju od formula (I), (II), (III), (V) ili (VII), ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, R<5>je ―S(O)2CH3, -CHF2ili -OCHF2.
[0035] U jednom aspektu, za bilo koju od formula (I), (II) ili (III), ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, X<4>je CR<5>i X<3>je NR<6>i zajedno R<5>i R<6>supstituenti formiraju 5 do 6-eročlani heterociklil prsten kondenzovan na prsten A, izabran između:
[0036] U drugom aspektu, X<1>je CH i X<2>je N u bicikličnim prstenovima formiranim od prstena A i heterocikličnog prstena formiranog od R<5>i R<6>kao što je gore navedeno.
[0037] U drugom aspektu, za bilo koju od formula (I), (II) ili (III), ili njihovu farmaceutski prihvatljivu so, X<4>je CR<5>i X<3>je NR<6>i zajedno R<5>i R<6>supstituenti formiraju 5 do 6-eročlani heterociklil prsten kondenzovan na prsten A, izabran između:
[0038] U drugom aspektu, X<1>je CH i X<2>je N u bicikličnim prstenovima formiranim od prstena A i heterocikličnog prstena formiranog od R<5>i R<6>kao što je gore navedeno. Bilo koje
1
otelotvorenje ovde opisano može se kombinovati sa bilo kojim drugim pogodnim otelotvorenjem koje je ovde opisano da bi se obezbedila dodatna otelotvorenja. Na primer, gde jedno otelotvorenje pojedinačno ili zajedno opisuje moguće grupe za R<1>a odvojeno otelotvorenje opisuje moguće grupe za R<2>, podrazumeva se da se ova otelotvorenje mogu kombinovati da bi se obezbedilo dodatno otelotvorenje koje koristi moguće grupe za R<1>sa mogućim grupama za R<2>. Sukladno tome, patentna prijava obuhvata bilo koja otelotvorenja koja se pozivaju pojedinačno za R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, R<5>, R<6>, R<7>, R<8>, X<1>, X<2>, X<3>,X<4>, prsten A, R' i R" u kombinaciji sa bilo kojim specifičnim otelotvorenjima pozvanih za svaku od preostalih varijabli.
[0039] Jedinjenja patentne prijave uključuju sledeća:
1
1
1
1
1
1
[0040] Drugi je aspekt proizvod dobijen bilo kojim od ovde opisanih postupaka ili primera.
[0041] Niže su navedene definicije različitih termina koji se koriste u specifikaciji i zahtevi za opis nekih opisanih termina.
[0042] Da bi se izbegla sumnja podrazumeva se da kada je U ovom opisu grupa kvalifikovana po "definisano iznad", pomenuta grupa obuhvata prvu definiciju koja se pojavljuje i najšire, kao i svaku i sve ostale definicije za tu grupu.
[0043] Da bi se izbegla sumnja treba razumeti da U ovom opisu "C1-C6" označava ugljeničnu grupu koja ima 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 atoma ugljenika, "C1-C4" znači ugljenična grupa koja ima 1, 2, 3 ili 4 atoma ugljenika, "C1-C3" označava ugljeničnu grupu koja ima 1, 2 ili 3 atoma ugljenika, a "C1-C2" označava ugljeničnu grupu koja ima 1 ili 2 atoma ugljenika.
[0044] U ovom opisu, osim ako nije drugačije navedeno, termin "alkil" uključuje i alkilne grupe pravog i razgranatog lanca i može biti, ali nije ograničen na, metil, etil, n-propil, ipropil, n-butil, i-butil , s-butil, t-butil, n-pentil, i-pentil, t-pentil, neo-pentil, n-heksil, i-heksil ili t-heksil.
2
[0045] U ovom opisu, ukoliko nije drugačije navedeno, termin "haloalkil" označava alkil grupu koja sadrži jedan ili više atoma halogena i uključuje, ali nije ograničeno na, monofluorometil, difluorometil, trifluorometil, 1-fluoroetil, 2-fluoroetil, 2,2 -difluoroetil, 2,2,2-trifluoroetil, 3-fluoropropil, 3,3-difluoropropil ili 3,3,3-trifluoroetil.
[0046] U ovom opisu, ako nije drugačije navedeno, termin "alkoksi" uključuje i alkilnu grupu ravnoga i razgranatog lanca koja sadrži atom kiseonika, pri čemu tačka vezivanja navedene grupe prolazi kroz atom kiseonika. Primeri uključuju, ali nisu ograničeni na, metoksi, etoksi, propoksi, i-propoksi, butoksi, i-butoksi, s-butoksi, t-butoksi i slično.
[0047] U ovom opisu, ako nije drugačije navedeno, termin "haloalkoksi" označava alkoksi grupu, kao što je iznad opisano, pri čemu je jedan više atoma vodonika na alkil delu zamenjeno atomom halogena. Primeri toga uključuju, ali nisu ograničeni na, monofluorometoksi, difluorometoksi, trifluorometoksi, 2-fluoroetoksi, 2,2-difluoroetoksi, 2,2,2-trifluoroetoksi, 3-monofluoropropoksi, 3,3-difluoropropoksi i 3,3,3-trifluoropropoksi.
[0048] U ovom opisu, osim ako nije drugačije navedeno, termin "halo" se odnosi na fluoro, hloro ili bromo.
[0049] U ovom opisu, ukoliko nije drugačije navedeno, termin "C3-C6cikloalkil" označava zasićenu cikličnu alkil grupu od 3-6 atoma ugljenika i uključuje, ali nije ograničen na, ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil i cikloheksil.
[0050] U ovom opisu, ukoliko nije drugačije navedeno, termin "5 do 6-člani heterociklil" se odnosi na zasićeni ili delimično zasićeni nearomatski monociklični prsten koji sadrži 5 do 6 atoma u prstenu, od kojih je najmanje jedan atom prstena izabran između azota, sumpora i kiseonik, od kojih -CH2- grupa može biti opciono zamenjena sa -C(O)- grupom. Atomi prstena u prstenu mogu biti po izboru oksidovani da bi formirali N-oksid. Atomi sumpora u prstenu mogu biti po izboru oksidovani da formiraju S-okside ili sulfone. Pomenuti heterociklil prsten može opciono biti supstituisan sa jednim ili dva supstituenta izabrana iz grupe koja se sastoji iz metila i halo. Primeri 5-6-članog heterocikličnog prstena uključuju, ali nisu ograničeni na pirolidinil, imidazolidinil, oksazolidin, 4-oksooksazolidinil, tiazolidinil, piperidinil, piperazinil, 2-oksopiperazinil, izoksazolidinil, izotiazolidinil, pirazolidinil, heksahidropiridazinil, heksahidropirimidinil, morfolinil, tiomorfolinil, oksazinanil, 2oksopirolidinil, 1,3-tiazinanil i okso-1,3-tiazolidinil. U kontekstu ove prijave, 5-6-člani heterociklil može biti spojen u prsten A kada je X<3>NR<6>, a X<4>je CR5, a supstituenti R<5>i R<6>su uzeti zajedno da formiraju heterociklil. Sistemi prstenova opisani u ovom paragrafu opisuju samo polovinu bicikličnog sistema prstenova, i uključuju atom azota i atom ugljenika iz prstena A, sa X<1>i X<2>kako je definisano za Formulu (I).
[0051] Da bi se izbegla sumnja, pod „navedeni kondenzovani heterociklil može dodatno da sadrži karbonil ili -S(O)2koji je neposredno pored heteroatoma u njemu“ u definiciji R<5>i R<6>, misli se da je atom prstena pored heteroatoma u prstenu u kondenzovanom heterociklu može biti ugljenik u prstenu supstituisan sa okso ili atomom sumpornog prstena oksidisanim u S(O)2.
[0052] U ovom opisu, osim ako nije drugačije navedeno, pojam "visoko rizična koronarna arterijska bolest", kako se ovde koristi, se odnosi na nedavni akutni koronarni sindrom (ACS) ili na biomarkere mikrovaskularne i srčane funkcije. Takvi biomarkeri mogu da uključuju inflamatorne biomarkere poput leukotriena i interleukina, broj leukocita i/ili markere za rad srca i vaskularnog sistema, kao što su CFR, NT-Pro-BNP i/ili TnT.
[0053] U ovom opisu, ukoliko nije drugačije navedeno, termin "farmaceutski prihvatljiv", kako je ovde korišćen, se odnosi na ta jedinjenja, materijale, sastave i/ili oblike doziranja koji su, u okviru zdrave medicinske procene, pogodni za upotrebu u kontaktu sa tkivima ljudi i životinja bez preterane toksičnosti, iritacije, alergijskog odgovora ili drugog problema ili komplikacije, srazmerni razumnom odnosu korist/rizik.
[0054] U ovom opisu, ukoliko nije drugačije navedeno, termin "efikasna količina" označava količinu jedinjenja ili sastava koji je dovoljan da značajno i pozitivno modifikuje simptome i/ili stanja koja se tretiraju (npr., daju pozitivan klinički odgovor). Efikasna količina aktivnog sastojka za upotrebu u farmaceutskom sastavu će varirati u zavisnosti od određenog stanja koje se tretira, ozbiljnosti stanja, trajanja tretmana, prirode paralelne terapije, određenog aktivnog sastojka koji se koristi, primenjeni određeni farmaceutski prihvatljivi ekscipijens(i)/nosač(i) i slični faktori u okviru znanja i stručnosti lekara.
[0055] Jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) mogu da formiraju stabilne farmaceutski prihvatljive kiselinske ili bazne soli i u takvim slučajevima primena jedinjenja kao soli može biti odgovarajuća. Primeri kiselinskih adicionih soli uključuju acetat, adipat, askorbat, benzoat, benzensulfonat, bikarbonat, bisulfat, butirat, kamforat, kamfor sulfonat, holin, citrat, cikloheksil sulfamat, dietilendiamin, etansulfonat, fumarat, glutamat, glikolat, hemisulfat, 2-hidroksietilsulfonat, heptanoat, heksanoat, hidrohlorid, hidrobromid, hidrojodid, hidroksimaleat, laktat, malat, maleat, metansulfonat, meglumin, 2-naftalensulfonat, nitrat, oksalat, pamoat, persulfat, fenilacetat, fosfat, difosfat, pikrat, pivalat, propionat, kinat, stearat, sukcinat, sulfamat, sulfanilat, sulfat, tartarat, tosilat (ptoluensulfonat), trifluoracetat i undekanoat. Primeri baznih soli obuhvataju amonijum soli; alkalne metalne soli kao što je natrijum, litijum i kalijum soli; soli zemnoalkalnih metala kao što su soli aluminijuma, kalcijuma i magnezijuma; soli sa organskim bazama kao što su soli dicikloheksilamina i N-metil-D-glukamin; i soli sa aminokiselinama kao što su arginin, lizin, ornitin i tako dalje. Takođe, bazne grupe koje sadrže azot mogu biti kvaternizovane sa takvim sredstvima kao što su: niži alkil halidi, kao što su metil, etil, propil i butil halidi; dialkil sulfati kao što su dimetil, dietil, dibutil; diamil sulfati; halidi dugog lanca kao što su decil, lauril, miristil i stearil halidi; arilalkil halidi kao što su benzil bromid i drugi. Poželjne su netoksične fiziološki prihvatljive soli, iako druge soli mogu biti korisne, kao što je izolovanje ili prečišćavanje proizvoda.
[0056] Soli se mogu formirati na konvencionalan način, kao što je reakcija slobodnog baznog oblika proizvoda sa jednim ili više ekvivalenata odgovarajuće kiseline u rastvaraču ili medijumu u kome je so nerastvorna, ili u rastvaraču kao što je voda, koji se uklanja in vacuo ili liofilizacijom ili zamenom anjona postojeće soli za drugi anjon na pogodnoj smoli za jonsku izmenu.
[0057] Jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) imaju jedan ili više hiralnih centara, i treba razumeti da aplikacija obuhvata sve takve stereoizomere, uključujući enantiomere i dijastereoizomere. Stoga, treba razumeti da, ukoliko neki od jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) mogu postojati u optički aktivnim ili racemskim oblicima zahvaljujući jednom ili više asimetričnih atoma ugljenika, prijava uključuje u svoju definiciju bilo koji takav optički aktivan ili racemični oblik koji poseduje iznad pomenutu aktivnost. Predmetna patentna prijava obuhvata sve takve stereoizomere koji imaju aktivnost kao što je ovde definisano.
2
[0058] Sinteza optički aktivnih oblika može se izvesti standardnim tehnikama organske hemije koje su dobro poznate u tehnici, na primer sintezom iz optički aktivnih početnih materijala ili rezolucijom racemičnog oblika. Racemati se mogu razdvojiti na pojedinačne enantiomere koristeći poznate procedure (videti, na primer, Advanced Organic Chemistry: 3. izdanje: autor J. March, p104-107). Pogodna procedura uključuje formiranje dijastereomernih derivata reakcijom racemičnog materijala sa hiralnim pomoćnim sredstvom, nakon čega sledi separacija, na primer hromatografijom, dijastereomera i zatim odvajanje pomoćnih vrsta. Slično tome, gore pomenuta aktivnost može se proceniti korišćenjem standardnih laboratorijskih tehnika koje se ovde navode.
[0059] Stoga se kroz opis, gde se upućuje na jedinjenje Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII), podrazumeva da termin jedinjenje uključuje izomere, smeše izomera i stereoizomere koji su inhibitori FLAP.
[0060] Stereoizomeri se mogu razdvojiti pomoću konvencionalnih tehnika, npr. hromatografijom ili frakcionom kristalizacijom. Enantiomeri se mogu izolovati razdvajanjem racemata, na primer frakcionom kristalizacijom, rezolucijom ili HPLC. Diastereoizomeri se mogu izolovati razdvajanjem na osnovu različitih fizičkih svojstava diastereoizomera, na primer, frakcionom kristalizacijom, HPLC ili fleš hromatografijom. Alternativno, određeni stereoizomeri mogu biti napravljeni hiralnom sintezom iz hiralnih polaznih materijala pod uslovima koji neće prouzrokovati racemizaciju ili epimerizaciju ili derivatizacijom, sa hiralnim reagensom.
[0061] Kada je obezbeđen specifični stereoizomer (bilo da je obezbeđen separacijom, hiralnom sintezom, ili drugim metodama), povoljno je da se obezbedi u suštini izolovan od drugih stereoizomera istog jedinjenja. U jednom aspektu, smeša koja sadrži određeni stereoizomer jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) može da sadrži manje od 30%, naročito manje od 20%, a naročito manje od 10% težine drugog stereoizomera istog jedinjenja. U drugom aspektu, smeša koja sadrži određeni stereoizomer jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) može da sadrži manje od 6%, naročito manje od 3%, a naročito manje od 2% težine drugog stereoizomera istog jedinjenja. U drugom aspektu, smeša koja sadrži određeni stereoizomer jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) može da sadrži manje od 1%, naročito manje od 0.5%, a naročito manje od 0.3%, i još naročito manje od 0.1% po težini drugi stereoizomer jedinjenja.
[0062] Podrazumeva se, ukoliko neki od iznad navedenih jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) mogu postojati u tautomernim oblicima, prijava uključuje u svoju definiciju bilo koji takav tautomerni oblik koji poseduje iznad pomenutu aktivnost. Stoga, obelodanjivanje se prema tome odnosi na sve tautomerne oblike jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII), bilo da su izričito detaljno opisani u opisu ili ne.
[0063] Takođe treba razumeti da određena jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) i njihove farmaceutske soli mogu postojati u solvatisanim i u nesolvatisanim oblicima, kao što su, na primer, vodeni i bezvodni oblici. Treba razumeti da jedinjenja ovde obuhvataju sve takve solvatisane oblike. Radi jasnoće, ovo uključuje i solvatne (npr., hidrirane) oblike slobodnog oblika jedinjenja, kao i solvatisane (npr., hidrirane) oblike soli jedinjenja.
[0064] Radi jasnoće treba razumeti da atomi jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) i bilo kog ovde prikazanog primera ili otelotvorenja treba da obuhvate sve izotope atoma. Na primer, H (ili vodonik) uključuje bilo koji izotopni oblik vodonika, uključujući<1>H,<2>H (D), i<3>H (T); C uključuje bilo koji izotopni oblik ugljenika, uključujući<12>C,<13>C i<14>C; O uključuje bilo koji izotopni oblik kiseonika, uključujući<16>O,<17>O i<18>O; N uključuje bilo koji izotopni oblik azota, uključujući<13>N,<14>N i<15>N; P uključuje bilo koji izotopni oblik fosfora, uključujući<31>P i<32>P; S uključuje bilo koji izotopni oblik sumpora, uključujući<32>S i<35>S; F uključuje bilo koji izotopni oblik fluora, uključujući<19>F i<18>F; Cl uključuje bilo koji izotopni oblik hlora, uključujući<35>Cl ,<37>Cl i<36>Cl; i slično. U jednom aspektu, jedinjenja Formula (I), (Ia), (II), (III), (IV) ili (V) uključuju izotope atoma obuhvaćenih u njima u količinama koje odgovaraju njihovom prirodnom obilju. Međutim, u nekim slučajevima može biti poželjno obogaćivanje jednog ili više atoma u određenom izotopu koji bi inače bio prisutan u manjem obilju. Na primer,<1>H bi obično bio prisutan u većem broju od 99.98%; međutim, u jednom aspektu, jedinjenje bilo koje formule ovde predstavljeno može biti obogaćeno u<2>H ili<3>H na jednom ili više položaja gde je H prisutan. U drugom aspektu, kada je jedinjenje bilo koje formule predstavljeno ovde obogaćeno radioaktivnim izotopom, na primer<3>H i<14>C, jedinjenje može biti korisno u ispitivanju raspodele leka i/ili supstrata u tkivu. Treba razumeti da ova patentna prijava obuhvata sve takve oblike izotopa.
[0065] Predmetna prijava dalje obezbeđuje postupak za dobijanje jedinjenja formule (I) kako je iznad definisano koji sadrži reakcione šeme 1-10.
2
Postupak pripremanja
[0066] Reakcije u šemama 1-10 ilustruju sintetske puteve do određenih molekula formule (I), pri čemu su R<1>, R<2>, R<3>, R<4>, i Prsten A su definisani u formuli (I), R<9>je alkilna grupa, npr., metil ili etil, L1, L2, L3, i L4 su napuštajuće grupe, npr., Br, I, OTf, i PG1 je zaštitna grupa npr., 2-metiltetrahidro-2H-piril.
Šema 1
Reakcije u Šemi 1 ilustruju dva sintetska puta do određenih molekula formule (I).
[0067] Jedinjenje formule (3) može da reaguje sa jedinjenjem formule (4) da bi se dobilo jedinjenje formule (2), ili jedinjenje formule (3) može da reaguje sa jedinjenjem formule (5) da se dobije jedinjenje formule (I). Bilo koja reakcija se može izvesti u prisustvu baze, npr. K2CO3ili Na2CO3, i može se izvesti u temperaturnom intervalu od sobne temperature do refluksa u organskom rastvaraču, kao što je dioksan ili DMF, koji se mogu mešati sa H2O. Reakcija se može katalizirati pomoću paladijevog reagensa, kao što je Pd(dtbpf)Cl2ili Pd(dppf)Cl2. Jedinjenje formule (2), može se tretirati sa kiselinom, npr. HCl u organskom rastvaraču, npr. MeOH ili dioksan opciono u prisustvu vode, u temperaturnom intervalu od 0°C do 10°C, da bi se dobilo jedinjenje Formule (I).
2
Šema 2
Reakcije u Šemi 2 ilustruju dva sintetska puta do određenih molekula Formule (I).
[0068] Jedinjenje formule (6), može da se dobije reakcijom jedinjenja formule (7), sa sintetičkim ekvivalentom amonijaka, npr. NH4Cl, i može se izvesti u temperaturnom intervalu od sobne temperature do refluksa u inertnom organskom rastvaraču, kao što je DMF, EtOAc, dihloretan ili NMP, i u prisustvu baze, npr. Et3N, DIPEA ili DMAP. Reakcija se može olakšati spojnim reagensom, poput HATU, TBTU ili T3P. Zatim, jedinjenje formule (6) može da reaguje sa jedinjenjem formule (8). Reakcija se može izvesti u prisustvu baze, npr. Cs2CO3ili NaOt-Bu, i može se izvesti u temperaturnom intervalu od sobne temperature do refluksa u organskom rastvaraču, kao što je dioksan. Reakcija može da se katalizuje pogodnim Pd reagensom, kao što je ili Pd(dppf)Cl2ili Pd(OAc)2koristeći pogodan ligand, npr. Xantphos, za dobijanje jedinjenja Formule (I).
[0069] Alternativno, jedinjenje formule (7) može da reaguje sa jedinjenjem formule (9), koje reakcija može da se izvede u intervalu temperature od sobne temperature do refluksa u inertnom organskom rastvaraču, kao što su DMF, EtOAc, dihloretan ili NMP i u prisustvu baze, npr Et3N, DIPEA ili DMAP. Reakcija se može olakšati spojnim reagensom, kao što je HATU, TBTU ili T3P da bi se dobilo jedinjenje Formule (I).
Šema 3
2
Reakcija u šemi 3 ilustruje sintetski put do određenih molekula formule (3).
[0070] Jedinjenje formule (10) može da reaguje sa jedinjenjem formule (11), i može da se izvede u intervalu temperature od sobne temperature do refluksa u inertnom organskom rastvaraču, kao što su DMF, EtOAc, dihloretan ili NMP i u prisustvu baze, npr Et3N, DIPEA ili DMAP. Reakcija se može olakšati spojnim reagensom, kao što je HATU, TBTU ili T3P da bi se dobilo jedinjenje formule (3).
Šema 4
Reakcije u Šemi 4 ilustruju dva sintetska puta do određenih molekula formule (7).
[0071] Jedinjenje formule (10) može reagovati sa jedinjenjem formule (4) ili formule (5). Reakcija se može izvesti u uslovima opisanim za analogne reakcije opisane u Šemi 1.
Šema 5
Reakcije u šemi 5 ilustruju sintetički put do određenih molekula formule (I).
[0072] Jedinjenje formule (31), može se dobiti reakcijom jedinjenja formule (13), sa jedinjenjem formule (8), (9) ili (11), opisanim u Šemama 2 i 3, korišćenjem istog ili sličnog stanja kao što je opisano za reakcije jedinjenja (7) ili (10) u Šemi 2 i Šemi 3.
2
[0073] Jedinjenje formule (32), može se dobiti reakcijom jedinjenja formule (31), sa jedinjenjem formule (4) ili (5), opisanim u Šemi 1, korišćenjem istog ili sličnog stanja kao što je opisano za reakcije jedinjenja (3) u Šemi 1.
[0074] Jedinjenje formule (I) može se dobiti reakcijom ili jedinjenja formule (31) ili jedinjenja formule (32) korišćenjem istih ili sličnih uslova kao što je opisano za reakcije pretvaranja jedinjenja formule (13) u jedinjenje formule (10) u Šemi 5.
Šema 6
Reakcije u šemi 6 ilustruju sintetički put do određenih molekula formule (12).
[0075] Jedinjenje formule (15), može se dobit reakcijom jedinjenja formule (16), sa prethodno formiranim metalo anjonom, npr., anjon litijuma, jedinjenja formule (17). Reakcija se može izvesti u organskom rastvaraču kao što je npr. THF i može se izvesti na pogodnoj temperaturi kao što je ispod -70°C. Takođe može da se formira korišćenjem sintetičkih postupaka opisanih u literaturi npr. Synlett 12 (2004) 2165-2166 ili Tetrahedron 67 (2011) 3881-3886.
[0076] Jedinjenje formule (14) može da se dobije tretiranjem jedinjenja formule (15) sa bazom, npr. Et3N, i može se izvesti u organskom rastvaraču, npr. dioksanu. Reakcija se može izvesti na povišenim temperaturama, npr.60°C. Jedinjenje formule (14) može se dobiti komercijalno ili može biti formirano analogno sintetičkim postupcima analognim onima opisanim u literaturi, npr. Synlett 12 (2004) 2165-2166 or J.Org.Chem.71 (2006) 6254-6257.
[0077] Jedinjenje formule (12) može se dobit reakcijom jedinjenja formule (14), sa jedinjenjem formule (18). Reakcija se može izvesti u inertnom organskom rastvaraču, npr. toluen i može se izvesti u temperaturnom intervalu od sobne temperature do 220°C i opciono se može izvesti u prisustvu stabilizatora, npr., hidrokinon ili se može izvesti u temperaturnom
2
intervalu od -30°C do sobne temperature, opciono u prisustvu katalizatora, npr., Luisova kiselina kao što je AlCl3.
Šema 7
Reakcije u šemi 7 ilustruju sintetički put do određenih molekula formule (10).
[0078] Jedinjenje formule (20) može da se dobije reakcijom jedinjenja formule (21) sa sredstvom za hlorisanje, npr., SOCl2u organskom rastvaraču, npr., DCM i u temperaturnom intervalu od -20°C do refluksa, i opciono u prisustvu katalizatora, npr. DMF, ili korišćenjem drugih postupaka opisanih u literaturi i poznatih stručnjacima.
[0079] Jedinjenje formule (19) može se dobit reakcijom jedinjenja formule (20), sa jedinjenjem formule (22). Reakcija se može izvesti u prisustvu katalizatora, npr., katalizator Luisove kiseline, npr., AlC13i opciono se može izvesti u prisustvu inertnog organskog rastvarača, npr. DCM i može se izvoditi u temperaturnom intervalu od 0°C do 100°C
[0080] Jedinjenje formule (10) može se dobiti reakcijom jedinjenja formule (19) sa bazom, npr., NaOH ili LiOH u organskom rastvaraču, npr., THF ili MeOH, ili njihove smeše i opciono u prisustvu vode. Reakcija se može izvesti u temperaturnom intervalu od 0°C do refluksa.
Šema 8
[0081] Reakcija u Šemi 8 ilustruje sintetski put do određenih molekula formule (23), pri čemu su X1 i X2 kao što je opisano u formuli (II), Xs je opciono i nezavisno izabran, npr. H, NO2ili NHPG2; gde je PG2 zaštitna grupa, npr., terc-butilkarbamata, X6 je nezavisno izabran iz heteroatoma, npr., N, O ili S, i n je 1 ili 2.
[0082] Jedinjenje formule (23) može se formirati reakcijom jedinjenja formule (24), sa jedinjenjem formule (25), pri čemu je L4 napuštajuća grupa, npr. halogenid ili sulfonil ester, npr. OTf, u prisustvu baze, npr. K2CO3, i u prisustvu organskog rastvarača, npr. MeCN ili DMF, a reakcija se može izvesti u temperaturnom intervalu od 0°C do refluksa.
Šema 9
[0083] Reakcije u šemi 9 ilustruju sintetički put do određenih molekula formule (26), X6 i n su definisani u Šemi 8.
[0084] Jedinjenje formule (28), može se dobiti reakcijom jedinjenja formule (27), sa izvorom nitrita, npr. nitritna so, npr. NaNO2, u rastvaraču, npr. vode i u prisustvu kiseline, npr., HCl ili CH3CO2H. Reakcija se može izvesti u temperaturnom intervalu od -5°C do sobne temperature. Jedinjenje formule (29), može se dobiti reakcijom jedinjenja formule (28), sa kiselinskim anhidridom, npr. trifluoroacetinski anhidrid, u organskom rastvaraču, npr. THF i u temperaturnom intervalu od -5°C do sobne temperature. Jedinjenje formule (26), može se dobiti reakcijom jedinjenja formule (29), sa alkinil etrom, npr. etil propionat ili metil propionate, u organskom rastvaraču, npr., ksilenu ili o-ksilenu. Reakcija se može izvesti na povišenim temperaturama, npr. od sobne temperature do refluksa.
Šema 10
[0085] Reakcije u Šemi 10 ilustruju sintetički put do određenih molekula formule (30), pri čemu je R<8>opciono izabran iz H ili alkilne grupe, npr. metil i X5je nezavisno izabran, npr. H, NO2ili NHPG2.
[0086] Jedinjenje formule (33), gde je L4kao što je definisano u Šemi 8, može da se formira reakcijom jedinjenja formule (31), sa jedinjenjem formule (32), u prisustvu baze, npr. K2CO3,
1
i u prisustvu organskog rastvarača, npr. MeCN ili DMF, a reakcija se može izvesti u temperaturnom intervalu od 0°C do refluksa.
[0087] Jedinjenje formule (30), može da se dobije reakcijom jedinjenja formule (33), sa primarnim aminom, npr. amonijak ili alkilamin, npr. amonijak, amonijak hidrat ili metilamin, u organskom rastvaraču, npr. MeCN ili THF, a reakcija se može izvesti u temperaturnom intervalu od 0°C do refluksa.
[0088] Različite permutacije prstena A mogu se kupiti ili sintetizovati korišćenjem standardnih reakcionih uslova.
[0089] Podrazumeva se da su ovde opisane organske reakcije izvedene u skladu sa laboratorijskom praksom poznatom stručnjaku. Podrazumeva se da neke ovde opisane reakcije mogu opciono da se odvijaju drugačijim redosledom nego što je ovde navedeno. Podrazumeva se da hiralni izomeri ovde opisanih jedinjenja mogu biti razrešeni u bilo kojoj fazi sintetičkog postupka korišćenjem hiralnih razdvajajućih sredstava opisanih u literaturi i poznatih stručnjacima ove oblasti ili upotrebom postupka hiralne hromatografije opisane u literaturi i poznatih stručnjacima u struci ili kako je dalje opisano u primerima.
[0090] Podrazumeva se da mogu biti potrebne dodatne zaštitne grupe u nekim od iznad opisanih koraka, a dalje se podrazumeva da se stoga može ukloniti korak uklanjanja zaštite, koristeći postupke opisane u literaturi i dobro poznate stručnjacima iz ove oblasti. Zaštita i uklanjanje zaštite funkcionalnih grupa je opisana u 'Protective Groups in Organic Synthesis' 2nd Ed, E.W. Greene i P.G.M. Wuts, Wiley-Interscience (1991) i 'Protecting Groups', P.J. Kocienski, Georg Thieme Verlag (1994).
Medicinska i farmaceutska upotreba
[0091] Jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) mogu biti korisna u prevenciji ili lečenju kardiovaskularnih bolesti kod sisara, naročito kod čoveka. Kardiovaskularna bolest uključuje, ali nije ograničena na, stanja povezana sa srčanom disfunkcijom i/ili mikrovaskularnom disfunkcijom i/ili makrovaskularnom patologijom, kao što su ateroskleroza, arterioskleroza, bolest koronarne arterije, uključujući stabilnu i visokorizičnu bolest koronarne arterije (definisana kao nedavni akutni koronarni sindrom (ACS) ili biomarkeri mikrovaskularne i srčane disfunkcije), infarktom miokarda, restenozom nakon
2
revaskularizacionih postupaka, zatajenja srca, aneurizme abdominalne aorte (AAA), bolesti periferne arterije (PAD), uključujući erektilnu disfunkciju usled vaskularne bolesti, moždanog udara, prolaznog ishemijskog napada (TIA) i reverzibilna ishemijska neurološka bolest (RIND), multiinfarktna demencija i bubrežna arterijska bolest.
[0092] Jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) mogu biti korisna u prevenciji ili lečenju pacijenata sa preostalim rizikom od kardiovaskularnog događaja i pored tretmana standardne nege (SoC), kao što su, ali bez ograničenja na, statini koji snižavaju lipide, antitrombociti, ACS inhibitori i beta blokatori.
[0093] Jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) mogu biti korisna u prevenciji ili lečenju hroničnog oboljenja bubrega.
[0094] Jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) mogu biti korisna u prevenciji ili lečenju dijabetes melitusa tipa II i komplikacija šećerne bolesti tipa II kod sisara, naročito kod čoveka. To uključuje i nije ograničeno na dijabetičku mikro i makrovaskularnu patologiju, neuropatiju i nefropatiju.
[0095] Jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) mogu biti korisna u prevenciji ili lečenju respiratornih inflamatornih bolesti i komplikacija povezanih sa respiratornim inflamatornim bolestima kod sisara, naročito kod čoveka. Respiratorna inflamatorna bolest uključuje, ali nije ograničena na astmu, hroničnu opstruktivnu bolest pluća, emfizem i rinitis.
[0096] Jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) mogu biti korisna u prevenciji ili lečenju bubrežnih inflamatornih i vaskularnih bolesti i komplikacija povezanih sa bubrežnom bolešću kod sisara, naročito kod čoveka. Bubrežna inflamatorna i vaskularna bolest uključuje, ali nije ograničena na hroničnu bolest bubrega, nefrotoksičnost izazvanu lekovima i toksinima, glomerulonefritis, nefrotski sindrom, IgA nefritis, refluksnu nefropatiju, fokalnu segmentalnu glomerulosklerozu, Henoh-Šonlejnova purpura i dijabetičku nefropatiju.
[0097] Jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) mogu biti korisna u prevenciji ili lečenju bezalkoholnih bolesti masne jetre (NAFLD) i bezalkoholnog steatohepatitis (NASH).
[0098] Tretman jedinjenjima Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) može smanjiti kardiovaskularnu i/ili cerebrovaskularnu i/ili bubrežnu i/ili perifernu arterijsku bolest i smrtnost povezane sa srčanom disfunkcijom i/ili mikrovaskularnom disfunkcijom i/ili makrovaskularnom patologijom zbog njihovih anti-inflamatornih svojstava i uticaj na vazoaktivne mehanizme.
[0099] Jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) mogu služiti za sprečavanje ili smanjenje rizika od razvoja srčane disfunkcije i/ili mikrovaskularne disfunkcije i/ili makrovaskularne patologije, kao i za zaustavljanje ili usporavanje napredovanja i/ili pospešivanje regresije aterosklerotske kardiovaskularne bolesti jednom postalo je klinički očigledno, obuhvatajući davanje profilaktički ili terapeutski efikasne količine, prema potrebi, jedinjenja formule (I) sisaru, uključujući čoveka, koji je u riziku od razvoja ateroskleroze ili koji već ima aterosklerotsku kardiovaskularnu bolest.
[0100] Jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) mogu biti korisna u sprečavanju ili smanjenju učestalosti ili težine akutnih događaja povezanih sa rušenjem ili erozijom aterosklerotskog plaka, uključujući, ali ne ograničavajući se na infarkt miokarda, nestabilnu anginu i moždani udar.
[0101] Jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) mogu biti korisna u sprečavanju ili smanjenju učestalosti ili težine akutnih događaja poboljšanjem mikrovaskularne funkcije, makrovaskularne patologije i/ili srčane funkcije.
[0102] Jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) mogu biti korisna u sprečavanju ili smanjenju napredovanja aneurizmi abdominalne aorte (AAA) i učestalosti ruptura.
[0103] Da bi se izbegla sumnja, kako se ovde koristi, termin "lečenje" uključuje terapijski i/ili profilaktički tretman. "Lečenje" takođe uključuje davanje jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII) da bi se ublažili simptomi kardiovaskularne bolesti (uključujući bolest koronarnih arterija i visoko rizičnu bolest koronarne arterije) i/ili da bi se smanjila ozbiljnost ili progresija iste.
[0104] Jedinjenja obelodanjena ovde mogu se na taj način naznačiti i u terapijskom i/ili profilaktičkom tretmanu ovih stanja.
4
[0105] Ovde obelodanjena jedinjenja mogu imati prednost što mogu biti efikasnija, manje toksična, selektivnija, jača, proizvesti manje nuspojava, lakše se apsorbovati i/ili imati bolji farmakokinetički profil (npr., veća oralna bioraspoloživost i/ili niži klirens), nego jedinjenja poznata u stanju tehnike.
Kombinovane terapije
[0106] Jedinjenja bilo koje Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII), ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, takođe se mogu primeniti zajedno sa drugim jedinjenjima koja se koriste za lečenje iznad navedenih stanja.
Davanje
[0107] Jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII), ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, normalno će se primenjivati oralnim, parenteralnim, intravenskim, intramuskularnim, potkožnim ili na druge načine ubrizgavanja, bukalnim, rektalnim, vaginalnim, transdermalnim i/ili nazalnim putem i/ili inhalacijom, u obliku farmaceutskih sastava koji sadrže aktivni sastojak ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili solvat, ili solvat takve soli, u farmaceutski prihvatljivom obliku doziranja. U zavisnosti od poremećaja i pacijenta koji se leči i načina primene, sastavi se mogu davati pri različitim dozama.
[0108] Pogodne dnevne doze jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII), ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, u terapijskom tretmanu ljudi su oko 0.0001-100 mg/kg telesne težine, poželjno 0.01-30 mg/kg telesne težine.
[0109] Oralne formulacije su poželjne naročito tablete ili kapsule koje mogu biti formulisane postupcima poznatim stručnjacima da se obezbede doze aktivnog jedinjenja u rasponu od 0.1 mg do 1000 mg, na primer 1 mg, 3 mg, 5 mg, 10 mg, 25 mg, 50 mg, 100 mg, 250 mg i 500 mg.
[0110] Ovde opisano je farmaceutski sastav koji uključuje bilo koje od jedinjenja Formula (I), (II), (III), (V), (VI) ili (VII), ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u smeši sa farmaceutski prihvatljivim adjuvansima, razblaživačima i/ili nosačima.
Biološki testovi
[0111] Mogu se koristiti sledeći postupci ispitivanja:
FLAP test vezivanja (Test A)
[0112] Jedinjenja su testirana u testu vezivanja konkurencije koristeći<3>H-MK591 kao tragač. (Pripremanje MK-591 je opisano u Bioorg. Med.Chem. Lett.1999, 9, 2391).100,000 x g pelet iz COS-7 ćelije stabilno transficirane plazmidom koji eksprimira humani ALOX5AP je bio izvor FLAP. Membranski peleti ponovo su suspendovane u puferu (100 mM Tris-HCl, 0.05% Tween-20, 140 mM NaCl, 2 mM EDTA, 0.5 mM DTT, 5% Glicerol, pH 7.5) da bi se dobila konačna koncentracija proteina 12 mg/mL (2 µg/udubljenju). Da bi se izveli testovi, 1.4 µL jedinjenja je raspodeljeno u pločice sa 96 udubljenja u trostrukom razblaženju u tri primerka. Zatim je dodato 84 µL radioliganda (25000 CPM, 2 nM krajnja koncentracija u testu), a zatim suspenzija od 84 µL membrane i inkubacija na sobnoj temperaturi tokom 60 minuta. Posle filtracije, filter ploče su sušene 12h na sobnoj temperaturi (ili 50°C tokom 1 sata). Zatim je dodato 50 µL skintilanta, filter ploče su zapečaćene i merena radioaktivnost u brojaču mikrobeta. Specifično vezivanje definisano je kao ukupno vezivanje minus nespecifično vezivanje. Ukupno vezivanje je definisano kao<3>H-MK591 vezan za membrane u odsustvu konkurenta, nespecifično vezivanje je definisano kao<3>H-MK591 u prisustvu 0.1 mM MK-591. Vrednosti IC50određene su crtanjem % inhibicije u odnosu na koncentraciju jedinjenja log i korišćenjem modela koji odgovora na jednoj lokaciji. Podaci za svako ispitivano jedinjenje prikazani su u Tabeli 1.
FLAP analiza pune krvi (Test B)
[0113] Jedinjenja su testirana na inhibiciju proizvodnje LTB4u svežoj punoj krvi čoveka dobijenoj venepunkcijom primenom heparina za sprečavanje zgrušavanja. 1.5 µL jedinjenja ili DMSO nosač su raspoređeni u udubljenja ploče sa 96 udubljenja ploče sa dubokim udubljenjima u serijskom razblaživanju od 3 puta. Zatim je dodato 500 µL heparnizovane pune krvi, a zatim inkubacija na 37°C tokom 30 minuta (metoda A) ili 4 h (metoda B). Nakon toga je 100 µL krvi pretočeno u trostrukom primerku u prethodno dodeljeni 0.5 µL 2 mM kalcijum-jonofor (kalcimicin; A23187) u drugoj ploči sa 96 udubljenja. Posle inkubacije na 37°C tokom 20 minuta, ispitivanja su zaustavljena dodavanjem 10 µL zaustavnog rastvora (100 mM EGTA, pH 7.4) i ploča je prenešena u led. Ploča je centrifugirana na 3000 o/min na 4°C u trajanju od 10 minuta, a 10 µL plazma je prebačena na svežu ploču sa 96 udubljenja koja sadrži 90 µL prethodno podeljenog EIA pufera (0.1 M fosfatni pufer 0.1% BSA). LTB4je zatim meren korišćenjem reagensa iz komercijalne EIA (Cayman Chemicals).
Proizvodnja LTB4je definisana kao nivo LTB4 u prisustvu date koncentracije ispitivanog jedinjenja minus nivoa LTB4 u prisustvu 50 nM 5-[[4-[(2S, 4R)-4-hidroksi-2-metiltetrahidropiran -4-il]-2-tienil]sulfaml]-1-metil-indolin-2-on. (Pripremanje 5-[[4-[(2S,4R)-4-hidroksi-2-metil-tetrahidropiran-4-il]-2-tienil]sulfanil]-1-metil-indolin-2-on je opisan u Org. Process Res. Dev., 2005, 9, 555-569 ili EP623614 B1). Inhibicija proizvodnje LTB4je definisana kao nivo LTB4u prisustvu date koncentracije ispitivanog jedinjenja izražene u % od nivoa LTB4u prisustvu DMSO. Vrednosti IC50određene su crtanjem % inhibicije u odnosu na koncentraciju jedinjenja log i korišćenjem modela koji odgovora na jednoj lokaciji. Podaci za svaki ispitivani primer prikazani su u Tabeli 2.
Tabela 2
ND = nije određeno
Primeri
[0114] Jedinjenja iz prijave će sada biti objašnjeno pozivanjem na sledeće neograničujuće primere.
[0115] U primerima, maseni spektri visoke rezolucije su zabeleženi na Micromass LCT masenom spektrometru opremljenom sa interfejsom za raspršivanje (LC-HRMS). 1H NMR merenja izvedena su na Varian UNITY plus 400, 500 i 600 spektrometrima ili Varian INOVA 400, 500 i 600 spektrometrima ili Bruker Avance 400, 500 i 600 spektrometrima, koji rade na 1H frekvencijama od 400, 500 i 600 MHz. Eksperimenti su tipično zabeleženi na 25°C. Hemijske promene su date u ppm sa rastvaračem kao unutrašnjim standardom. Fleš hromatografija je izvedena korišćenjem ravnofazne fleš hromatografije na SP1 ™ sistemu za pročišćavanje kompanije Biotage ™ koristeći normalno fazni silika FLASH+™ (40M, 25M ili 12 M) ili SNAP™ KP-Sil patrone (340, 100, 50 ili 10), osim ako nije drugačije navedeno.
Uopšteno, svi rabljeni rastvarači bili su komercijalno dostupni i analitičkog kvaliteta. Za reakcije se rutinski koriste bezvodni rastvarači.. Fazni separatori koji se koriste u primerima su kolone separatora faza ISOLUTE®. Međujedinjenja i primeri navedeni ispod su imenovani korišćenjem ACD/Name 12.01 kompanije Advanced Chemistri Development, Inc. (ACD/Labs).
[0116] Korišćene su sledeće skraćenice
AcOH sirćetna kiselina
vod vodeni
Boc2O di-terc-butil dikarbonat
DCE dihloroetan
DCM dihlorometan
DEA dietilamin
DIPEA N,N-diizopropiletilamin
DMAP dimetilaminopiridin
DME dimetoksietan
DMF N,N-dimetilformamid
DMSO dimetilsulfoksid
DPPA difenil fosforazidat
dppf 1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen
dtbpf 1,1'-bis(ditercbutilfosfino)ferocen
EtOAc etil acetat
EtOH etanol
h sat(i)
HATU (dimetilamino)-N,N-dimetil(3-oksido-1H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridinil)metaniminijum heksafluorofosfat
MeCN acetonitril
MeOH metanol
min minut(i)
MS masena spektrometrija
NMP N-metil-2-pirolidon
NMR nuklearna magnetna rezonanca
Pd(dppf)Cl2*DCM 1,1'-bis(di-terc-butilfosfino)ferocen paladijum dihlorid
4
rt sobna temperatura
zas zasićeni
SFC superkritična tečna hromatografija
T3P 2,4,6-tripropil-1,3,5,2,4,6-trioksatrifosfinan 2,4,6-trioksid
TBTU 2-(1H-benzo[d][1,2,3]triazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametilizouronijum tetrafluoroborat
THF tetrahidrofuran
TLC hromatografija tankog sloja
Xantphos 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten
Sinteza početnih materijala i međujedinjenja
Međujedinjenje 1: (1R,2R i 1S,2S)-2-[4-(1H-Pirazol-3-il)benzoil]-cikloheksankarboksilna kiselina
[0117]
[0118] Smeša (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilna kiselina (200 mg, 0.64 mmol), 1H-pirazol-3-ilboronične kiseline (129 mg, 1.16 mmol) i Pd(dppf)Cl2*DCM (46.5 mg, 0.06 mmol) i K2CO3(266 mg, 1.93 mmol) u dioksanu (4 mL)/vodi (4 mL) je zagrevana do refluksa 90 minuta. Smeša je razblažena sa EtOAc i vodom. Faze su razdvojene i vodena faza je isprana sa EtOAc. Kombinovani vodeni slojevi su zakišeljeni sa HCl (6 M) dok pH ne bude približno 4-5 i proizvod je ekstrahovan u EtOAc. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran i isparen da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (240 mg) kao smeđa čvrsta supstanca.
MS m/z 299 (M+H)<+>
Međujedinjenje 1: 4-({[(1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)cikloheksil]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0119]
[0120] T3P, (50% u EtOAc, 800 µl, 1.34 mmol) je dodat u rastvor (1R, 2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (200 mg, 0.64 mmol), 4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid (180 mg, 1.28 mmol) i Et3N (356 µl, 2.57 mmol) u suvom EtOAc (3 ml) i reakciona smeša je zagrevana na 80°C tokom 4 sata u mikrotalasnom reaktoru. Smeša je razblažena sa EtOAc i isprana dva puta sa NaHCO3(zasićenim, vodenim) i fiziološkim rastvorom. Organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora i rastvarač je isparen. Jedinjenje je prečišćeno preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 30-85% MeCN u sistemu pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2) na pH10 kao pokretna faza. Željene frakcije su sakupljene i rastvarač je isparen da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (130 mg, 47%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.2 - 1.54 (m, 3H), 1.70 (ddd, 1H), 1.81 - 1.98 (m, 2H), 2.02 -2.17 (m, 2H), 2.78 - 2.94 (m, 1H), 3.56 - 3.73 (m, 1H), 4 - 4.1 (m, 3H), 6.11 (d, 2H), 7.55 -7.65 (m, 3H), 7.81 (d, 2H), 8.00 (s, 1H)
MS m/z 433.1 [M+H]<+>
Međujedinjenje 3: 3-Metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol
[0121]
Korak 1 - 3-Metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol
[0122] 3-Metil-lH-pirazol (2 mL, 24.8 mmol) je rastvoren u 3,4-dihidro-2H-piranu (6.8 mL, 74.5 mmol). Trifluoroacetatna kiselina (0.134 mL, 1.74 mmol) je dodata i čisti rastvor je zagrevan na 75°C 18 h. Reakciona smeša je razblažena sa Et2O i organska faza je isprana sa NaHCO3(zasićenim, vodenim), vodom i fiziološkim rastvorom, filtrirana pomoću faznog separatora i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (10%→20% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova. (2.4 g, 58%, 70% tačnog izomera)
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 7.44 (d, 1H), 7.40 (s, 0.3H), 6.04 (d, 1H), 6.00 (s, 0.3H), 5.21-5.28 (m), 3.94 - 4.09 (m), 3.57-3.68 (m), 2.47 (s, 0H), 2.31 (s, 1H), 2.26 (s, 3H), 1.9 - 2.16 (m), 1.59 - 1.75 (m).
Korak 2 - 3-Metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol
[0123] n-Butilitijum (6.1 mL, 15.2 mmol, 2.5M u THF) dodat je tokom 10 minuta u rastvor 3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-lH-pirazola (2.4 g, 14.4 mmol) u THF (20 mL) na -78°C. Tokom perioda od 15 minuta, dodat je u vidu kapi tripropan-2-il borat (3.7 mL, 15.9 mmol) na -78°C i reakciona smeša je mešana tokom 15 minuta, gde je dozvoljeno da dostigne sobnu temperaturu. Dodaje se 2,3-dimetilbutan-2,3-diola (1.88 g, 15.9 mmol), zatim AcOH (1.65 ml, 28.9 mmol) i reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakciona smeša je razblažena heptanom i organska faza je isprana sa NH4Cl (vod.), NaHCO3 (vod.) I slanim rastvorom, filtrirana pomoću faznog separatora i koncentrovana. Ostatak je razblažen heptanom i koncentrovan da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (3.86, 91%).
MS m/z 293.2 [M+H]<+>
Međujedinjenje 4: 1-Metil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-1H-pirazol-5-karboksamid
[0124]
Korak 1 - 4-({[(1R,2R)-2-4(4-bromobenzoil)cikloheksil]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0125] Et3N (5.5 mL, 39.7 mmol) i T3P (50% u EtOAc, 12 mL, 20.2 mmol) je dodato rastvoru (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (3 g, 9.6 mmol), 4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamida (2.7 g, 19.3 mmol) i Et3N (5.5 mL, 39.7 mmol) u EtOAc (45 mL) i reakciona smeša je zagrevana na 75-80°C 2 h. Smeša je razblažena sa
4
EtOAc (100 ml) i isprana četiri puta sa NaHCO3(zas, vod) i dva puta sa NH4Cl (zas, vod) i vodom. Organska faza je osušena korišćenjem separatora faza i rastvarač je uklonjen u vakuumu. Ostatak je rastvoren u EtOAc i organska faza je isprana dva puta sa NaHCO3(zas, vod) i dva puta sa NH4Cl (zas, vod) i na kraju vodom. Organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora, a rastvarač je uklonjen pod vakuumom da bi se dobilo sirovo jedinjenje iz podnaslova (3.55 g) kao ostatak smeđe boje.
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 1.31 - 1.56 (m, 3H), 1.70 (dq, 1H), 1.81 - 1.97 (m, 3H), 2.07 -2.15 (m, 1H), 2.81 - 2.93 (m, 1H), 3.61 - 3.71 (m, 1H), 4.04 (s, 3H), 6.29 (s, 2H), 7.51 - 7.69 (m, 3H), 7.81 (d, 2H), 8.08 (s, 1H).
MS m/z 433 [M+H]<+>
Korak 2 – 1Metil-4-({[(1R,2R)-2-{4(3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-1H-pirazol-5-karboksamid
[0126] 3-Metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (Međujedinjenje 3, 4.2 g, 14.37 mmol) i rastvor K2CO3(3.19 g, 23.08 mmol) u vodi (35 mL) je dodat rastvoru 4-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksil]-karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid (Međujedinjenje 2, 2.5 g, 5.77 mmol) u dioksanu (35 mL) pod atmosferom azota. Dodaje se Pd(dtbpf)Cl2(0.371 g, 0.58 mmol) i dobijena smeša se zagreva na 70-80°C tokom 20 minuta, a zatim na 80°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (200 mL) i isprana fiziološkim rastvorom (zas.). Vodena faza je ekstrahovana dva puta sa EtOAc i kombinovana organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (50→100% EtOAc u heptanu, zatim 100% EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.15 g, 72%).
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 1.29 - 1.46 (m, 2H), 1.75 (dq, 3H), 1.85 - 1.98 (m, 2H), 2.02 (s, 1H), 2.04 (s, 3H), 2.14 (d, 2H), 2.32 (s, 3H), 2.62-2.45 (m, 1H), 2.93 (t, 1H), 3.59 (td, 1H), 3.7 - 3.85 (m, 1H), 4.02 - 4.1 (m, 3H), 5.10 (t, 1H), 6.16 (s, 1H), 6.22-6.45 (bs, 2H), 7.60 (dd, 3H), 8.04 (dd, 2H), 8.13-8.33 (bs, 1H).
MS m/z 519.4 [M+H]<+>
Međujedinjenje 5: Metil 4-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksil]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-3-karboksilat
[0127]
[0128] T3P, (50% u EtOAc, 1.9 ml, 3.2 mmol) je dodat u rastvor (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (674 mg, 2.17 mmol), metil 4-amino-1-metil-1H-pirazol-3-karboksilat hidrohloridu (457 mg, 2.38 mmol) i Et3N (0.63 mL, 4.5 mmol) u EtOAc (9 ml) i reakciona smeša je zagrevana na 80°C tokom 2 sata i zatim na sobnoj temperaturi 2 dana. Reakciona smeša je isprana sa NaHCO3(zas, vod), NH4Cl (zas. vod.) i fiziološkim rastvorom. Organska faza je osušena korišćenjem separatora faza i rastvarač je uklonjen u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (50% EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (640 mg 66%).
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 1.26 - 1.35 (m, 1H), 1.35 - 1.49 (d, 2H), 1.57 - 1.7 (m, 1H), 1.88 (dd, 2H), 1.98 - 2.04 (m), 2.09 - 2.18 (m, 1H), 2.87 - 2.99 (m, 1H), 3.6 - 3.69 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 3.96 (s, 3H), 7.57 (d, 2H), 7.84 (d, 2H), 8.04 (s, 1H), 9.09 (s, 1H).
MS m/z 448 [M+H]<+>
Međujedinjenje 6: 4-({[(1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)cikloheksil]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-3-karboksamid
[0129]
Korak 1 - 4-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksil]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-3-karboksilna kiselina
[0130] LiOH (1 M vod.) (3 mL, 3.00 mmol) je dodat rastvoru metil 4-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksil]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-3-karboksilats (Međujedinjenju 5, 640 mg, 1.43 mmol) u THF (3 mL) i MeOH (3 mL) i reakciona smeša je mešana na rt u trajanju od 2 h.. Reakciona smeša je koncentrovana i dodata je HCl (3.8 M, vod.) (1 mL), a zatim voda (20 mL). Vodena faza je ekstrahovana dva puta sa EtOAc i
4
kombinovana organska faza je filtrirana pomoću faznog separatora i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (640 mg, 103%).
MS m/z 432 [M-H]-
Korak 2 -4-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksil]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-3-karboksamid
[0131] DIPEA (0.68 mL, 3.9 mmol), TBTU (749 mg, 2.33 mmol) i amonijum hlorid (139 mg, 2.59 mmol) su dodati u rastvor 4-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksil]-karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-3-karboksilna kiselina (563 mg, 1.30 mmol) u DMF (5 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa DMSO i prečišćena preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250×50 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-75% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2) kao mobilni faza. Željene frakcije su sakupljene, koncentrovane i ekstrahovane sa EtOAc. Organska faza je filtrirana koristeći fazni separator i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (280 mg, 50%).
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 1.16 (dd, 1H), 1.33 - 1.55 (m, 3H), 1.67 - 1.85 (m, 2H), 1.90 (d, 1H), 2.02 (d, 1H), 2.81 - 2.92 (m, 1H), 3.63 - 3.71 (m, 1H), 3.79 (s, 3H), 7.46 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.93 (d, 2H), 8.04 (s, 1H), 9.75 (s, 1H).
Međujedinjenje 7: (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)-N-(3-cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)cikloheksankarboksamid
[0132]
[0133] T3P (50% u EtOAc, 1.6 g, 4.9 mol) je dodat smeši (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (1.3 g, 4.1 mol), 4-amino- 1-metil-1H-pirazol-3-karbonitril (0.5 g, 4.1 mol) i DMAP (1.0 g, 8.2 mol) u DCE (10 ml) i reakciona smeša je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 100°C 1 h . Smeša je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa DCM. Organska faza je isprana fiziološkom otopinom, osušena i
4
koncentrovana, a ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (naftni eter: EtOAc, 3:1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.4 g, 24%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.49-1.39 (m, 3H), 1.76-1.69 (m, 1H), 1.95-1.86 (m, 2H), 2.12-2.03 (m, 2H), 2.91-2.84 (m, 1H), 3.69-3.62 (m, 1H), 3.85 (s, 3H), 7.59 (d, 2H), 7.64 (s, 1H), 7.83 (d, 2H), δ 7.99 (s, 1H)
Međujedinjenje 8: (1R,2R)-2-{4-[3-Metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksankarboksilna kiselina
[0134]
[0135] K2CO3(4.02 g, 29.05 mmol) i Pd(dtbpf)Cl2(0.28 g, 0.36 mmol) dodati su u rastvor (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (2.26 g, 7.26 mmol) i 3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (Međujedinjenje 3, 3.18 g, 10.89 mmol) rastvoren u 1,4-dioksanu (40 ml) i vodi ( 20 mL). Smeša je evakuisana i pročišćena azotom tri puta, a zatim zagrevana na 80°C tokom 1 sata. Smeša je ohlađena do sobne temperature i razblažena sa EtOAc. NaHCO3(zas, vod) je dodat i smeša je zakišeljena sa KHSO4(1 M, vod.). Faze su razdvojene i vodena faza je ekstrahovana dva puta sa EtOAc. Kombinovana organska faza je osušena korišćenjem separatora faza i rastvarač je uklonjen u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na Kromasil C8 koloni (10 µm 250×50 ID mm) korišćenjem gradijenta od 30% -90% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/AcOH (95/5/0.2) kao pokretna faza. Odabrane frakcije su kombinovane i koncentrovane pod vakuumom, a vodeni ostatak je ekstrahovan dva puta sa DCM. Kombinovana organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora i rastvarač je uklonjen pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.79 g, 97%) kao svetlo smeđa čvrsta supstanca.
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 1.21 - 1.64 (m, 6H), 1.71 - 1.94 (m, 4H), 2.02 - 2.12 (m, 2H), 2.23 - 2.31 (m, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.52 - 2.64 (m, 1H), 2.93 - 3.02 (m, 1H), 3.53 - 3.66 (m, 2H), 4.11 - 4.19 (m, 1H), 5.13 (dd, 1H), 6.18 (s, 1H), 7.56 - 7.63 (m, 2H), 8.01 - 8.07 (m, 2H) MS m/z 395,3 [M-H]-
4
Međujedinjenje 9: Metil 4-[(terc-butoksikarbonil)amino]-1H-pirazol-5-karboksilat [0136]
[0137] Di-terc-Butil dikarbonat (159 mL, 0.68 mol) je dodat metil 4-amino-1H-pirazol-3-karboksilatu (87.6 g, 0.62 mol) i piridinu (100 mL, 1.24 mol) u MeOH (1 L) na 10°C tokom 15 minuta. Reakciona smeša je mešana na rt u trajanju od 5 h. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen kristalizacijom iz MeOH (700 ml) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (80 g, 53%) kao ljubičasta čvrsta supstanca.
MS m/z 228 [M+H]<+>
<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 1.47 (s, 9H), 3.83 (s, 3H), 7.70 - 8.20 (m, 2H), 13.45 (s, 1H)
Međujedinjenje 10: Metil 1-(2-bromoetil)-4-[(terc-butoksikarbonil)amino]-1H-pirazol-5-karboksilat
[0138]
[0139] 1,2-dibromoetan (1.97 mL, 22.8 mmol) je dodat u rastvor metil 4-[(tercbutoksikarbonil)amino]-1H-pirazol-5-karboksilata (Međujedinjenje 9, 5.0 g, 20.7 mmol) i K2CO3(4.3 g, 31.1 mmol) u DMF (50 mL) na 0°C tokom 10 minuta i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 h. Reakciona smeša je dodata voda i vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i isparen, a sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (5%→20% 2-metilpentana u EtOAc). Čiste frakcije su uparene do suvoće da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.5 g, 35%) u obliku bezbojnog ulja.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.47 (s, 9H), 3.80 (t, 2H), 3.87 (s, 3H), 4.79 (t, 2H), 7.86 (s, 1H), 8.24 (s, 1H)
MS m/z 348 [M+H]<+>
4
Međujedinjenje 11: terc-Butil (4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)karbamat
[0140]
[0141] Amonijak hidrat (10 g, 287.2 mmol) je dodat u rastvor metil 1-(2-bromoetil)-4-[(tercbutoksikarbonil)amino]-lH-pirazola-5-karboksilata (Međujedinjenje 10, 10.0 g, 28.7 mmol) u MeCN (100 mL) i reakciona posuda je zapečaćena i zagrevana na 90°C tokom 20 h.
Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, a sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom, gradijentom elucije (1%→10% DCM u MeOH). Čiste frakcije su uparene do suvoće da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (6.0 g, 83%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 1.47 (s, 9H), 3.60 (t, 2H), 4.22 (t, 2H), 7.76 (s, 1H), 7.95 (s, 1H), 8.30 (s, 1H)
MS m/z 253 [M+H]<+>
Međujedinjenje 12: 3-Amino-6,7-dihidropirazolo [1,5-a]pirazin-4(5H)-on hidrohlorid [0142]
[0143] HCl (g) je dodata u rastvor terc-butila (4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazol[1,5-a]pirazin-3-il)karbamata (Međujedinjenje 11, 9 g, 35,68 mmol ) u MeOH (50 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 časa. Talog je sakupljen filtracijom, ispran sa EtOAc i osušen pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (6.00 g, 89%) kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z 153 [M+H]<+>
Međujedinjenje 13: (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N(4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a] pirazin-3-il)cikloheksankarboksamid
[0144]
4
[0145] Smeša 3-amino-6,7-dihidropirazol[1,5-a]pirazin-4(5H)-on hidrohlorida (Međujedinjenje 12, 1.0 g, 5.30 mmol) i Et3N (2.96 ml, 21.21 mmol) u DMF (10 ml) je dodato u mešani rastvor (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (1.82 g, 5.83 mmol) i HATU (4,03 g, 10.60 mmol) u DMF (10 ml), tokom period od 5 minuta.
Reakciona smeša je mešana na 50°C 15 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana uzastopno sa NaHCO3(zas. vod.), slanim rastvorom (zas.) i vodom. Organski sloj je osušen preko MgSO4, filtriran i isparen, a sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (1%→10% DCM u MeOH). Čiste frakcije su uparene do suvoće da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.2 g, 51%) kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z 445 [M+H]<+>
Međujedinjenje 14: (1R,2R)-2-{4-[3-Metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}-N-(4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)cikloheksankarboksamid
[0146]
[0147] Pd(dppf)Cl2*DCM (0.092 g, 0.11 mmol) je dodat rastvoru (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-(4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)cikloheksankarboksamida (Međujedinjenje 13, 1.0 g, 2.25 mmol), 3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (Međujedinjenje 3, 0.984 g, 3.37 mmol) i Na2CO3(0.952 g, 8.98 mmol) u dioksanu (20 mL)i vodi (5 mL) tokom perioda od 10 minuta pod atmosferom azota. Reakciona smeša je mešana na 90°C 3 h. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i ostatak je razblažen sa EtOAc. Organska faza je isprana uzastopno sa NaHCO3(zas. vod.), rastvorom fiziološkog rastvora (zas.) i vodom. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (10%→50% 2-metilpentana u EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.0 g, 84%) kao žuta čvrsta supstanca.
MS m/z 531 [M+H]<+>
Međujedinjenje 15: terc-Butil [1-metil-5-(metilsulfanil)-1H-pirazol-4-il]karbamat [0148]
[0149] Et3N (873 mg, 8.63 mmol) i DPPA (1.19 g, 4.32 mmol) su dodati rastvoru 1-metil-5-(metilsulfanil)-1H-pirazola-4-karboksilne kiseline (400 mg, 2.32 mmol) u terc-butanol (15 mL) u inertnoj atmosferi i reakciona smeša je mešana na 20°C tokom 2 sata, a zatim je zagrevana do refluksa tokom dodatnih 13 h. Dobijena smeša je koncentrovana u vakuumu i ostatak je rastvoren u EtOAc. Organska faza je isprana vodom i slanim rastvorom, osušena iznad Na2SO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (9% EtOAc u naftnom etru) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (330 mg, 58%) kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z 244 [M+H]<+>
Međujedinjenje 16: 1-Metil-5-(metilsulfanil)-1H-pirazol-4-amin hidrohlorid [0150]
[0151] HCl (g) je dodata u vidu mehurova u rastvor terc-butil [l-metil-5-(metilsulfanil)-1H-pirazol-4-il]karbamata (Međujedinjenje 15, 1.6 g, 6.58 mmol) u MeOH (30 mL) na 20°C uz mešanje tokom 1 sata. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.56 g, sirovo) kao svetlo žuta čvrsta supstanca.
MS m/z 144 [M+H]<+>
Međujedinjenje 17: (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-[1-metil-5-(metilsulfanil)-1H-pirazol-4-il]cikloheksankarboksamid
1
[0153] HATU (3.8 g, 9.99 mmol) je dodat u mešani rastvor (1R,2R)-2-[(4-bromofenil)karbonil]cikloheksan-1-karboksilna kiselina (2.3 g, 7.39 mmol) u DMF (20 ml) na 0°C. Rastvor l-metil-5-(metilsulfanil)-1H-pirazol-4-amin hidrohlorida (Međujedinjenje 16, 1.5 g, 8.35 mmol) u DMF (10 ml) i DIPEA (3.24 g, 25.07 mmol) je dodat u kapima u reakciona smeša na 0°C i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i ostatak je rastvoren u EtOAc. Organska faza je isprana sa NaHCO3(zas. vod.) i slanim rastvorom, osušena iznad Na2SO4i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen na koloni silika gela (28% EtOAc u naftnom etru) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.1 g, 65%) kao žuta čvrsta supstanca.
<1>H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 1.19-1.09 (m, 1H), 1.43-1.31 (m, 3H), 1.93-1.73 (m, 3H), 2.11-2.08 (m, 1H), 2.24 (s, 3H), 3.04-2.95 (m, 1H), 3.72-3.64 (t, 1H), 3.81 (s, 3H), 7.57 (s, 1H), 7.75-7.72 (d, 2H), 7.94-7.91 (d, 2H), 9.42 (s, 1H)
MS m/z 436 [M+H]<+>
Međujedinjenje 18: (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-[1-metil-5-(metilsulfonil)-1H-pirazol-4-il]cikloheksankarboksamid
[0154]
[0155] 3-hloroperoksibenzojeva kiselina (356 mg, 2.06 mmol) dodata je u delovima na 0°C u rastvor (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-[l-metil-5-(metilsulfanil)-1H-pirazol-4-il] cikloheksankarboksamid (Međujedinjenje 17, 600 mg, 1.4 mmol) u DCM (10 mL).
Reakciona smeša je mešana na 0°C 40 minuta.3-hloroperoksibenzojeva kiselina (356 mg, 2.06 mmol) je dodata u obrocima na 0°C u reakcionu smešu nakon čega je smeša mešana na sobnoj temperaturi tokom 60 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i organska faza
2
je isprana vodom i fiziološkom otopinom, osušena iznad Na2SO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (96% DCM u MeOH) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (630 mg, 98%) kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z 468 [M+H]<+>
Međujedinjenje 19: terc-Butil [3-(difluorometoksi)-1-metil-1H-pirazol-4-il]karbamat [0156]
[0157] DIPEA (580 mg, 4.49 mmol) je dodata u delovima rastvoru 3-(difluorometoksi)-lmetil-lH-pirazola-4-karboksilne kiseline (575 mg, 2.99 mmol) u terc-BuOH (20 mL) pod atmosfera azota. DPPA (1.0 g, 3.63 mmol) je dodavana u kapima uz mešanje u reakcionu smešu i nakon toga je mešana na 80°C tokom 12 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom, a ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silikagelu (5%→20% EtOAc u nafti) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (630 mg, 80%) kao svetlo žuto ulje. MS m/z 264 [M+H]<+>
Međujedinjenje 20: 3-(Difluorometoksi)-1-metil-1H-pirazol-4-amin hidrohlorid [0158]
[0159] HCl (g) je propuhan u rastvor terc-butil[3-(difluorometoksi)-l-metil-lH-pirazol-4-il]karbamata (Međujedinjenje 19, 500 mg, 1.90 mmol) u EtOAc (20 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom, a ostatak je ispran rastvorom EtOAc/naftnog etra (5 mL, 1:1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (320 mg, 84%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (300MHz, CDCl3) δ 3.77 (s, 3H), 7.32 (t, 1H), 7.95 (s, 1H), 10.37 (bs, 2H) Međujedinjenje 21: (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-[3-(difluorometoksi)-1-metil-1H-pirazol-4-il]cikloheksankarboksamid
[0160]
[0161] DIPEA (778 mg, 6.02 mmol) i T3P (50% u EtOAc, 1.92 g, 6.03 mmol) su dodati u rastvor (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (514 mg, 1.65 mmol) i 3-(difluorometoksi)-l-metil-lH-pirazol-4-amin hidrohlorida (Međujedinjenje 20, 300 mg, 1.50 mmol) u EtOAc (10 mL) i reakciona smeša je mešana na 75°C tokom 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom, a ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silikagelu (5%→20% EtOAc u nafti) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (360 mg, 52%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca.
MS m/z 456 [M+H]<+>
Međujedinjenje 22: 1-Metil-4-nitro-1H-pirazol-3-sulfonil hlorid
[0162]
[0163] Korak 1: CuCl2* 2H2O (4.1 g, 24mmol) dodat je rastvor SO2(g) u AcOH (32%, vod.) (246 g, 3.84 mola) i reakciona smeša je mešana na -10°C tokom 1 h u ledeno/slanoj kupki u vidu mehurova SO2u reakcionu smešu.
[0164] Korak 2: NaNO2(6.9 g, 100 mmol) u vodi (50 mL) dodat je u vidu kapi tokom 1 h u rastvor 1-metil-4-nitro-lH-pirazol-3-amina (13.5 g, 95 mmol) u AcOH/HCO2H (5:1, 180 mL) i HCl (12 M, vod.) (16 mL) na -10°C u atmosferi azota. Nastali žuti rastvor je dodat u delovima u prethodno pripremljeni rastvor iz Koraka 1 tokom 1 h što je rezultiralo trenutnom evolucijom azota. Reakciona smeša je mešana 1h i koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je razblažen sa EtOAc i organska faza je isprana dva puta vodom i dva puta slanim rastvorom.
4
Organski sloj je osušen i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (15 g, 70%) kao žuta polučvrsta supstanca.
MS m/z 227 [M+H]<+>
Međujedinjenje 23: 1-Metil-4-nitro-1H-pirazol-3-sulfonamid
[0165]
[0166] Rastvor l-metil-4-nitro-lH-pirazola-3-sulfonil hlorida (Međujedinjenje 22, 5.1 g, 22.6 mmol) u THF (50 mL) je dodat u kapima tokom 1 h u zasićeni rastvor amonijaka u THF ( 200 mL) na sobnoj temperaturi i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 h. Formirana čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom i isprana sa DCM (100 mL), vodom (50 mL) i MeOH (50 mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.4 g, 51%) kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z 207 [M+H]<+>
Međujedinjenje 24: 4-Amino-1-metil-1H-pirazol-3-sulfonamid
[0167]
[0168] Rastvor l-metil-4-nitro-lH-pirazola-3-sulfonamida (Međujedinjenje 23, 3.1 g, 15.0 mmol) u MeOH (200 mL). Dodaje se Pd/C (10%, 400 mg) i reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi tokom 6 h u atmosferi H2(g). Čvrsti ostaci su filtrirani i reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Dobijene čvrste supstance su isprane sa MeOH (50 ml) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.1 g, 79%) u obliku svetlo roze čvrste supstance.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 3.75 (s, 3H), 4.33 (s, 2H), 7.15 (s, 1H), 7.26 (s, 2H) MS m/z 177 [M+H]<+>
Međujedinjenje 25: (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(1-metil-3-sulfamoil-1H-pirazol-4-il)ciklohesankarbosamid
[0169]
[0170] T3P (50% u EtOAc, 3.61 g, 5.68 mmol), Et3N (861 mg, 8.51 mmol) i (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilna kiselina (500 mg, 1.61 mmol) su dodati rastvoru 4-amino-1-metil-1H-pirazol-3-sulfonamida (Međujedinjenje 24, 884 mg, 5.02 mmol) u EtOAc (50 mL) i reakciona smeša je mešana na 80°C 5 h. Reakciona smeša je isprana sa NaHCO3(zas. vod.), dva puta sa vodom i na kraju dva puta sa slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (720 mg, 31%) kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z 469 [M+H]<+>
Međujedinjenje 26: 2,3-Dihidropirazolo[5,1-b][1,3]oksazol
[0171]
[0172] 1,2-Dibromoetan (73.7 g, 392.5 mmol) je dodat rastvoru 1H-pirazol-3-ola (11 g, 130.83 mmol) i K2CO3(48.3 g, 349.3 mmol) u MeCN (200 mL) na sobnoj temperaturi i reakciona smeša je mešana na 80°C 6 h. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom i prečišćen fleš hromatografijom (1%-2.5% MeOH u DCM) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4.0 g, 28%) kao žuta čvrsta supstanca.
<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 4.30 (t, 2H), 5.06 (t, 2H), 5.34 (s, 1H), 7.36 (s, 1H)
MS m/z 111 [M+H]<+>
Međujedinjenje 27: 7-Nitro-2,3-dihidropirazolo[5,1-b][1,3]oksazol
[0173]
[0174] HNO3(36.1 mL, 802.3 mmol) i H2SO4(36.1 mL, 676.8 mmol) su dodati tokom perioda od 1 sata, rastvoru 2,3-dihidropirazolo[5,1-b][1,3]oksazola (Međujedinjenje 26, 15.89 g, 144.3 mmol) u H2SO4(72 mL) na 0°C pod atmosferom azota, a zatim je reakciona smeša mešana na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Reakciona smeša je dodata ledenoj vodi i vodeni sloj je ekstrahovan dva puta sa DCM. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, filtrirani i evaporisani. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0%→100% EtOAc u naftnom etru) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (12.5 g, 56%) u obliku sivo-bele čvrste supstance.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.44 (t, 2H), 5.35 (t, 2H), 7.90 (s, 1H)
MS m/z 156 [M+H]<+>
Međujedinjenje 28: terc-Butil 2,3-dihidropirazolo[5,1-b][1,3]oksazol-7-ilkarbamat [0175]
[0176] Di-terc-butil dikarbonat (21.1 g, 96.7 mmol) i Pd-C (2.1 g, 19.7 mmol) su dodati rastvoru 7-nitro-2,3-dihidropirazolo[5,1-b][1,3]oksazola (Međujedinjenje 27, 5 g, 32.23 mmol) u MeOH (100 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod atmosferom H2(1 atm) 35 h. Reakciona smeša je filtrirana, filtrat je koncentrovan pod vakuumom, a sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0%→90% EtOAc u naftnom etru) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.55 g, 35%) u obliku bledo žute čvrste supstance. MS m/z 226 [M+H]<+>
Međujedinjenje 29: 2,3-Dihidropirazolo[5,1-b][1,3]oksazol-7-amin hidrohlorid [0177]
[0178] HCl (g) je mešana 1 h na sobnoj temperaturi u rastvor terc-butil 2,3-dihidropirazol [5,1-b][1,3]oksazol-7-ilkarbamata (Međujedinjenje 28, 500 mg, 2.22 mmol) u EtOAc (20 mL). Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (350 mg, 98%) kao sivkasta čvrsta supstanca.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 4.32 (t, 2H), 5.17 (t, 2H), 7.41 (s, 1H)
MS m/z 126 [M+H]<+>
Međujedinjenje 30: (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(2,3-dihidropirazolo[5,1-b][1,3]oksazol-7-il)cikloheksankarbosamid
[0179]
[0180] (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilna kiselina (402 mg, 1.29 mmol) je dodata u rastvor 2,3-dihidropirazolo[5,1-b][1,3]oksazol-7-amina hidrohlorid (Međujedinjenje 29, 209 mg, 1.29 mmol), HATU (738 mg, 1.94 mmol) i DIPEA (0.90 mL, 5.17 mmol) u DMF (6 mL) na sobnoj temperaturi i reakciona smeša je mešana 16 h.
Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i razblažena sa EtOAc. Organska faza je isprana dva puta sa slanim rastvorom, osušena preko Na2SO4, filtrirana i isparena. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom TLC (9% MeOH u DCM) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (200 mg, 37%).
MS m/z 418 [M+H]<+>
Međujedinjenje 31: (5-Metil-1H-pirazol-3-il)hidrohlorid borove kiseline
[0181]
[0182] Rastvor 3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (Međujedinjenje 3, 2.95 g, 10.10 mmol) u MeOH(10 mL) je dodat u vidu kapi na 0°C u HCl (3M u MeOH, 50 mL) i reakciona smeša je mešana na rt preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i ostatak je ispran heksanom (2x20 mL) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.3 g) kao svetlo smeđa čvrsta supstanca. MS m/z 127 [M+H]<+>
Međujedinjenje 32: Etil 5-(benzilsulfanil)-1-metil-1H-pirazol-4-karboksilat
[0183]
[0184] Dibenzil disulfid (101.9 g, 413.57 mmol) je dodat u delovima rastvoru etil 5-amino-lmetil-lH-pirazola-4-karboksilata (10 g, 59.11 mmol) u MeCN (400 ml) u atmosferi azota i na rt. CuCl (293 mg, 7.14 mmol) je dodat u delovima na rt u reakcionu smešu i mešan je na rt tokom 30 minuta. 3-Metil-1-nitrobutan (41.5 g, 354.26 mmol) je dodat u reakcionu smešu i dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta, a zatim 1 sat na 60°C. Reakciona smeša je ostavljena da dostigne sobnu temperaturu i čvrste materije su filtrirane. Filtrat je koncentrovan u vakuumu i ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silikagelu (EtOAc/naftni etar, 1:8) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (11.6 g, 71%) kao žuto ulje.
MS m/z 277 [M+H]<+>
Međujedinjenje 33: 5-(Benzilsulfanil)-1-metil-1H-pirazol-4-karboksilna kiselina [0185]
[0186] Natrijum hidroksid (5.04 g, 126.01 mmol) u vodi (30 mL) je dodat u vidu kapi na 0°C rastvoru etil 5-(benzilsulfanil)-1-metil-1H-pirazol-4-karboksilata (Međujedinjenje 32, 11.6 g, 41.98 mmol) u MeOH (150 mL) i reakciona smeša je mešana na rt 15 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom, ostatak je rastvoren u vodi i vodena faza je isprana EtOAc. pH vodenog sloja je prilagođena 5~6 sa HCl (12 M, vod.) i formirane čvrste supstance su sakupljene filtracijom i sušene pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (8.8 g, 84%) u obliku svetlo žute čvrste supstance.
MS m/z 249 [M+H]<+>= 249
Međujedinjenje 34: terc-Butil [5-(benzilsulfanil)-1-metil-1H-pirazol-4-il]karbamat [0187]
[0188] Boc2O (30 g, 137.61 mmol) i Et3N (10.7 g, 105.74 mmol) su dodati pod atmosferom azota rastvoru 5-(benzilsulfanil)-1-metil-1H-pirazol-4-karboksilne kiseline (Međujedinjenje 33, 8.8 g, 35.44 mmol) u terc-butanolu (200 mL). Difenil fosforil azid (19.5 g, 70.86 mmol) je dodat u kapima u reakcionu smešu i mešan je na sobnoj temperaturi tokom 4 h, a zatim na 88°C tokom 15 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je rastvoren u EtOAc i organska faza je isprana sa NaHCO3(zasićenim, vodenim) i slanim rastvorom, osušena iznad Na2SO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (EtOAc/naftni etar, 1:6) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (9.8 g, 87%) kao žuto ulje.
MS m/z 320 [M+H]<+>
Međujedinjenje 35: 5-(Benzilsulfanil)-1-metil-1H-pirazol-4-amin hidrohlorid [0189]
[0190] HCl (g) je dodata u vidu mehurova rastvoru terc-butil [5-(benzilsulfanil)-1-metil-1H-pirazol-4-il]karbamata (Međujedinjenje 34, 9.8 g, 30.68 mmol) u MeOH (150 mL) na sobnoj temperaturi 6 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (7.5 g, 96%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca.
MS m/z 220 [M+H]<+>
Međujedinjenje 36: (1R,2R)-N-[5-(Benzilsulfanil)-1-metil-1H-pirazol-4-il]-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksamid
[0191]
[0192] HATU (223 mg, 0.59 mmol) i 5-(benzilsulfanil)-1-metil-1H-pirazol-4-amin hidrohlorid (Međujedinjenje 35, 100 mg, 0.39 mmol) su dodati rastvoru (1R,2R)-2-[(4-bromofenill)karbonil]cikloheksan-1-karboksilne kiseline (122 mg, 0.39 mmol) u DMF (10 mL). DIPEA (152 mg, 1.18 mmol) dodavana je u vidu kapi u reakcionu smešu i mešana je na 20°C tokom 15 h. Reakciona smeša je dodata voda i vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran sa NaHCO3(zas. vod.) i slanim rastvorom, osušen iznad Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen preparativnom TLC (EtOAc/naftni eter, 1:5) i sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na Sunfire C18 koloni (150 mm) korišćenjem gradijenta od 55-100% MeCN u H2O/HCO2H (99.5/0.5) puferskog sistema kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (111 mg, 55%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.23-1.12 (m, 1H), 1.52-1.37 (m, 3H), 1.94-1.74 (m, 3H), 2.11-2.07 (m, 1H), 3.06-2.98 (t, 1H), 3.26 (s, 3H), 3.74-3.66 (t, 1H), 3.89 (s, 2H), 7.06-7.03 (m, 2H), 7.25-7.21 (m, 3H), 7.57 (s, 1H), 7.74-7.71 (d, 2H), 7.95-7.92 (d, 2H), 9.36 (s, 1H) MS m/z 512 [M+H]<+>
Međujedinjenje 37: (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(1-metil-5-sulfamoil-1H-pirazol-4-il)ciklohesankarbosamid
[0193]
Korak 1 - 4-({[(1R,2R) -2-(4-Bromobenzonil)cikloheksil]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-sulfonil hlorid
1
[0194] Smeša (1R,2R)-N-[5-(benzilsulfanil)-1-metil-1H-pirazol-4-il]-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksamida (Međujedinjenje 36, 7 g, 13.66 mmol) u AcOH (60 mL) je razblažena sa vodom i ohlađena do -10°C. 1,3-Dihloro-5,5-dimetilimidazolidin-2,4-dion (4.05 g, 20.56 mmol) dodat je u jednom delu na -10°C i reakciona smeša je mešana na -5°C 30 minuta. 1,3-Dihloro-5,5-dimetilimidazolidin-2,4-dion (1.35 g, 6.85 mmol) dodat je na 0°C i reakciona smeša je mešana na 30 minuta.1,3-Dihloro-5,5-dimetilimidazolidin-2,4-dion (1.35 g, 6.85 mmol) dodat je na oko -5°C i reakciona smeša je mešana na 30 minuta. 1,3-Dihloro-5,5-dimetilimidazolidin-2,4-dion (1.35 g, 6.85 mmol) dodat je na oko -5°C i reakciona smeša je mešana na ispod 5°C 60 minuta. Reakciona smeša je razblažena vodom i vodena faza je ekstrahovana sa DCM. Organski sloj je ispran sa NaHCO3(8%, vod.) dok pH vrednost vodenog sloja nije bila 6∼7. Organska faza je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (12 g, sirovo).
MS 488 m/z [M+H]<+>= /490
Korak 2 - (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(1-metil-5-sulfamoil-1H-pirazol-4-il)ciklohesankarbosamid
[0195] NH3(g) je dodat u vidu mehurova THF (300 mL) na -5°C dok rastvarač nije bio blizu zasićenja. Rastvor 4-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksil]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-sulfonil hlorida (19 g, 38.87 mmol) u THF (500 mL) dodat je u vidu kapi uz mešanje na -5°C i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta.
Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom, a ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silikagelu (EtOAc/naftni etar, 1:1), a zatim hromatografijom na srednjem pritisku na silikagelu uz korišćenje gradijenta od 20% -45% MeCN u H2O/HCO2H (99.9/0.1) puferski sistem kao pokretna faza da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (12.0 g, 66%) kao sivkasta čvrsta supstanca.
<1>H NMR(400 MHz, DMSO-d6) δ 1.21-1.10 (m, 1H), 1.52-1.32 (m, 3H), 1.83-1.72 (m, 2H), 2.08-1.90 (m, 2H), 2.90-2.83 (t, 1H), 3.71-3.65 (t, 1H), 3.95 (s, 3H), 7.76-7.74 (d, 2H), 7.79 (s, 1H), 7.95-7.93 (d, 2H), 8.03 (s, 2H), 8.82 (s, 1H)
MS 469 m/z [M+H]<+>
Međujedinjenje 38: 3-(Difluorometil)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-amin
[0196]
2
Korak 1 - Etil 3-(difluorometil)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-karboksilat [0197] 3,4-dihidro-2H-piran (1.3 g, 15.45 mmol) i 4-metilbenzensulfonska kiselina (400 mg, 2.33 mmol) je dodat u rastvor etil 3-(difluorometil)-1H-pirazola-4-karboksilata (2.3 g, 12.10 mmol) u THF (50 ml) i reakciona smeša je mešana preko noći na sobnoj temperaturi.
Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i ostatak je razblažen sa NaHCO3(vod., 50 mL) i ekstrahovan sa EtOAc. Organska faza je isprana slanim rastvorom, osušena iznad Na2SO4i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (5% EtOAc u naftnom etru) da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (5 g, sirovo) kao braon ulje.
Korak 2 - 3-(Difluorometil)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-karboksilna kiselina
[0198] Rastvor natrijum hidroksida (220 mg, 5.50 mmol) u vodi (2 mL) je dodat rastvoru etil 3-(difluorometil)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-karboksilata (300 mg, 1.09 mmol) u EtOH (5 mL) i reakciona smeša je mešana na 60°C 5 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i ostatak je razblažen sa vodom ( 3mL) i vrednost pH rastvora je prilagođena ~3-4 sa HCl (2M. vod.). Talog je sakupljen filtracijom i čvrsta supstanca je osušena u rerni pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (0.15 g, 56%) kao bela čvrsta supstanca.
Korak 3 - Benzil [3-(difluorometil)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il]karbamat
[0199] DPPA (5.4 g, 19.62 mmol) i Et3N (3.2 g, 31.62 mmol) dodati su 3-(difluorometil)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-karboksilnoj kiselini (4 g, 16.25 mmol) rastvorenoj u smeši benzil-alkohola i toluena (60 mL, 5:1) u atmosferi azota i reakciona smeša je zagrevana do refluksa tokom 2 sata. Reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc i kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom.
Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (5→33% EtOAc u naftnom etru) da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (6 g, sirovo) kao žuto ulje.
Korak 4 - 3-(Difluorometil)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-amin
[0200] Pd/C (1 g) je dodat u rastvor benzil [3-(difluorometil)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il]karbamata (4.2 g, 11.95 mmol ) u EtOH (50 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći u atmosferi H2(g). Čvrsti ostaci su filtrirani i filtrat je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (3→50% EtOAc u naftnom etru) 3da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.4 g, 92%) kao crveno ulje.
<1>H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.40 - 1.75 (m, 3H), 1.75 - 2.05 (m, 3H), 3.50 - 3.70 (m, 1H), 4.30 (bs, 2H), 5.25 (d, 1H), 6.90 (t, 1H), 7.25 (s, 1H).
MS m/z 218 [M+H]<+>
Međujedinjenje 39: (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-[5-(difluorometil)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il]cikloheksankarboksamid
[0201]
[0202] HATU (2 g, 7.9 mmol) i DIPEA (2.2 g, 17 mmol) su dodati rastvoru (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (2g, 6.45mmol) u DMF (40 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 minuta. 3-(Difluorometil)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-amin (Međujedinjenje 38, 1.68 g, 7.74 mmol) je dodat i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 h. Ledena voda (100 mL) je dodata u reakcionu smešu i talog je filtriran i ispran vodom. Sirova čvrsta supstanca je rastvorena u DCM (200 mL), osušena iznad Na2SO4i koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.5 g, 45%) kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z 532 [M+Na]<+>
Međujedinjenje 40: terc-Butil (5-metik-4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)karbamat
[0203]
4
[0204] Metil 1-(2-bromoetil)-4-[(terc-butoksikarbonil)amino]-1H-pirazol-5-karboksilat (Međujedinjenje 10, 5 g, 14.36 mmol) je dodat rastvoru metilamina (30 mL, 60.00 mmol) u THF (30 mL) na 25°C i reakciona smeša je mešana na 70°C 15 h. Reakciona smeša je filtriran kroz Celite i filtrat je koncentrovan u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0%→1% MeOH u DCM) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (3.20 g, 84%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 1.46 (s, 9H), 2.98 (s, 3H), 3.75 (t, 2H), 4.30 (t, 2H), 7.75 (s, 1H), 8.01 (s, 1H)
MS m/z 267 [M+H]<+>
Međujedinjenje 41: 3- Amino-5- metil-6,7- dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-4(5H)-on hidrohlorid
[0205]
[0206] HCl gas je dodat u vidu mehurova u rastvor terc-butil (5-metil-4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)karbamata (Međujedinjenje 40, 3.1 g, 11.64 mmol) u EtOAc (100 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2 h. Talog je sakupljen filtracijom, ispran sa EtOAc (50 mL) i osušen pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.2 g, 93 %) kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z 167 [M+H]<+>
Međujedinjenje 42: (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(5-metil-4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a] pirazin-3-il)cikloheksankarboksamid
[0207]
[0208] T3P (50% u EtOAc, 14.58 g, 22.92 mmol) je dodat smeši (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (1.78 g, 5.73 mmol), 3-amino-5-metil-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-4(5H)-on hidrohlorida (Međujedinjenje 41, 1 g, 6.02 mmol) i Et3N (3.20 mL, 22.92 mmol) u butil acetatu (1 mL) na 25°C i reakciona smeša je mešana na 60°C 15 h. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom i sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0%→75% MeOH u DCM) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.69 g, 26%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 1.55-1.10 (m, 4H), 1.83-1.70 (m, 2H), 2.10-1.88 (m, 2H), 2.98 (t, 1H), 3.01 (s, 3H), 3.70 (t, 1H), 3.78 (t, 2H), 4.30 (t, 2H), 7.75 (d, 2H), 7.81 (s, 1H), 7.92 (d, 2H), 9.20 (s, 1H)
MS m/z 459 [M+H]<+>
Međujedinjenje 43: (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(5-cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)cikloheksankarboksamid
[0209]
[0210] (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-Bromobenzoil)cikloheksankarboksilna kiselina (2.0 g, 6.4 mol) je dodata smeši 4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-karbonitrila (2.0 g, 6.4 mol), T3P (50% u EtOAc, 2.0 g, 9.4 mol) i DMAP (1.8 g, 1.5 mol) u DCE (10 mL) i reakciona smeša je mešana u mikrotalasnom reaktoru na 100°C 1 h. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen i koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (17% EtOAc u naftnom etru) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.4 g, 17%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.39 - 1.49 (m, 3H), 1.69 - 1.76 (m, 1H), 1.85 - 1.94 (m, 2H), 2.04 - 2.10 (m, 2H), 2.83 - 2.90 (m, 1H), 3.64 - 3.71 (m, 1H), 3.95 (s, 3H), 7.56 (s, 1H), 7.59 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.83 (d, J =8.4 Hz, 2H), 7.89 (s, 2H)
MS m/z 415.1 [M+H]<+>
Međujedinjenje 44: 1-Etil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-1H-pirazol-5-karboksamid
[0211]
[0212] T3P (50% u EtOAc, 293 µL, 0.98 mmol) i Et3N (422 µL, 3.03 mmol) su dodati rastvoru (1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksankarboksilne kiseline (Međujedinjenje 8, 300 mg, 0.76 mmol) i 4-amino-1-etil-1H-pirazol-5-karboksamida (152 mg, 0.98 mmol) u EtOAc (2.3 mL) i reakciona smeša je zagrevana u zatvorenoj bočici na 80°C 1.5 h.4-Amino-1-etil-1H-pirazol-5-karboksamid (152 mg, 0.98 mmol), Et3N (422 µL, 3.03 mmol) i T3P (50% u EtOAc, 293 µL, 0.98 mmol) dodati su u reakcionu smešu i grejani na 80°C tokom 1 h, a zatim mešati na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakciona smeša je prečišćena fleš hromatografijom koristeći EtOAc kao pokretnu fazu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (150 mg, 37%).
MS m/z 531,3 [M-H]-
Međujedinjenje 45: Metil 4-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksil]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-karboksilat
[0213]
[0214] Et3N (1.8 mL, 12.99 mmol) i T3P (50% u EtOAc, 4 mL, 6.72 mmol) su dodati rastvoru (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (1 g, 3.21 mmol) i metil 4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-karboksilata (1 g, 6.45 mmol) u EtOAc (15 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi na 73-77°C 2h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (100 ml), a organska faza je isprana sa NaHCO3(zas. vod.), osušena upotrebom faznog separatora i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (30%→100% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.22 g, 85%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 1.25 - 1.40 (m, 1H), 1.43 (dqt, 2H), 1.71 (qd, 1H), 1.84 - 1.95 (m, 2H), 1.99 - 2.08 (m, 1H), 2.11 (dd, 1H), 2.92 (ddd, 1H), 3.67 (ddd, 1H), 4.03 (s, 3H), 4.07 (s, 3H), 7.56 - 7.63 (m, 2H), 7.8 - 7.87 (m, 2H), 8.12 (s, 1H), 8.88 (s, 1H).
MS m/z 448 [M+H]<+>
Međujedinjenje 46: Metil 1-metil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-1H-pirazol-5-karboksilat [0215]
[0216] Rastvor K2CO3(1.44 g, 10.44 mmol) u vodi (15 mL) praćen sa Pd(dtbpf)Cl2(168 mg, 0.26 mmol) je dodat rastvoru metil 4-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksil]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-karboksilata (Međujedinjenje 45, 1.17 g, 2.61 mmol) i 3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (Međujedinjenje 3, 1.91 g, 6.52 mmol) u dioksanu (15 mL) pod atmosferom azota i reakciona smeša je zagrevana do 80°C tokom 1 sata. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (200 ml), a organska faza je isprana sa slanim rastvorom (zas.), osušena upotrebom faznog separatora i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (20%→100% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.85 g 61%).
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 1.23 - 1.6 (m, 6H), 1.69 (tdd, 3H), 1.8 - 1.93 (m, 2H), 2.08 (dd, 2H), 2.39 (d, 1H), 2.52 (tdt, 1H), 2.87 - 3.01 (m, 1H), 3.55 (qd, 1H), 3.72 (ddd, 1H), 3.98 (s, 3H), 3.99 - 4.04 (m, 3H), 5.06 (dt, 1H), 6.12 (s, 1H), 7.54 (d, 2H), 8.02 (d, 2H), 8.09 (d, 1H), 8.88 (s, 1H).
MS m/z 534.2 [M+H]<+>
Međujedinjenje 47: N,1-Dimetil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-1H-pirazol-5-karboksamid [0217]
Korak 1 - 1-Metil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-1H-pirazol-5-karboksilna kiselina
[0218] LiOH (1M u H2O, 3 mL, 3.00 mmol) je dodata u vidu kapi tokom 10 minuta rastvoru 1-metil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-1H-pirazol-5-karboksilata (Međujedinjenje 46, 0.78 g, 1.46 mmol) u THF (3 mL) i MeOH (3 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 50 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i mešana na sobnoj temperaturi tokom 5 minuta, a zatim koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.75 g, 99%).
MS m/z 519.0 [M+H]<+>
Korak 2 - N,1-Dimetil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-1H-pirazol-5-karboksamid
[0219] T3P (50% u EtOAc, 344 µL, 0.58 mmol), metilamin hidrohlorid (22 µL, 0.38 mmol) i DIPEA (134 µL, 0.77 mmol) su dodati suspenziji 1-metil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]-karbonil}-amino)-1H-pirazol-5-karboksilne kiseline (0.1 g, 0.19 mmol) u EtOAc (0.8 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 sata, a zatim je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 60°C tokom 1 sata. Metilamin hidrohlorid (22 µL, 0.38 mmol) i DIPEA (134 µL, 0.77 mmol) su dodavani u reakcionu smešu i zagrevani su u mikrotalasnom reaktoru na 60°C 1 zas.
Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i NaHCO3(zas., vod.), a organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (100% EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.067 g 65%).
MS m/z 531.4 [M-H]-
Međujedinjenje 48: 5-Metil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-1H-pirazol-3-karboksamid [0220]
[0221] DIPEA (352 µL, 2.02 mmol) i HATU (230 mg, 0.61 mmol) su dodati rastvoru (1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}-cikloheksankarboksilne kiseline (Međujedinjenje 8, 200 mg, 0.50 mmol) u DMF (4 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 minuta. Reakciona smeša je dodata 4-amino-5-metil-lH-pirazol-3-karboksamidu (106 mg, 0.76 mmol) i mešana je na sobnoj temperaturi tokom 15 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je isprana sa NaHCO3(zas., vod.), NH4Cl (zas., vod.) i slanim rastvorom. Organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (0%→10% EtOH u EtOAc), frakcije koje sadrže jedinjenje su sakupljene, koncentrovane u vakuumu, a ostatak je rastvoren u DCM i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (190 mg, 73%) kao bež čvrsta supstanca.
MS m/z 417.1 [M-H]-
Međujedinjenje 49: 1 4-({[(1R,2R)-2-{4-[1-(Tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-1H-pirazol-5-karboksamid
[0222]
[0223] Rastvor (1R,2R)-2-{4-[1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5 il]benzoil}cikloheksankarboksilne kiseline (Međujedinjenje 69, 300 mg, 0.78 mmol) u DMF (3.0 mL) je dodat rastvoru 4-amino-1H-pirazol-5-karboksamid hidrohlorida (255 mg, 1.57 mmol) i Et3N (381 µL, 2.75 mmol) u EtOAc (3 mL). T3P (50% u EtOAc, 0.70 mL, 1.18 mmol) dodaje se i reakciona smeša se zagreva na 80°C tokom 1 h, a zatim meša na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa NaHCO3(8%, vod.) i EtOAc. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc i kombinovani organski sloj je osušen pomoću faznog separatora i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 10-80% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (97 mg 25%).
MS m/z 489.3 [M-H]-
Međujedinjenje 50: (1R,2R)-N-(4-Okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)-2-{4-[1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksankarboksamid [0224]
[0225] Rastvor 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (0.511 g, 1.84 mmol) u dioksanu (5 mL) je dodat (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-(4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)cikloheksankarboksamidu (Međujedinjenje 13, 0.545 g, 1.22 mmol). Rastvor K2CO3(0.677 g, 4.90 mmol) u vodi (5 mL) je dodat u reakcionu smešu i evakuisan i pročišćen sa azotom tri puta. Reakciona smeša je zagrevana do 50°C i Pd(dtbpf)Cl2(0.040 g, 0.06 mmol) je dodat i reakciona smeša zagrevana na 50°C 10 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (5 ml) i organska faza je isprana vodom. Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc i zatim je kombinovana organska faza isprana fiziološkim rastvorom, osušena korišćenjem faznog separatora i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.460 g, 72.8%) kao ulje.
1
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.31 - 1.53 (m, 3H), 1.63 - 1.99 (m, 6H), 2.06 - 2.25 (m, 3H), 2.47 - 2.71 (m, 1H), 2.93 - 3.08 (m, 1H), 3.63 (q, 1H), 3.80 (d, 3H), 4.13 (q, 2H), 4.31 (t, 2H), 5.21 (d, 1H), 5.91 (s, 1H), 6.33 - 6.46 (m, 1H), 7.62 (dd, 3H), 8.10 (d, 2H), 8.16 (s, 1H), 8.84 (s, 1H).
MS m/z 515.6 [M-H]-
Međujedinjenje 51: Etil 1-metil-5-(metilsulfamoil)-1H-pirazol-4-karboksilat
[0226]
[0227] Rastvor etil 5-(hlorosulfonil)-l-metil-lH-pirazol-4-karboksilata (10.0 g, 39.6 mmol) u THF (20 mL) je dodat u kapima uz mešanje na 0-2°C tokom 20 minuta u smešu metilamina (33% vod., 20.4 g, 217 mmol) i K2CO3(5.4 g, 38.79 mmol). Reakciona smeša je mešana na 0-2°C u vodeno/ledenoj kupki 40 minuta. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je ekstrahovan terc-butil metil etrom i organski sloj je osušen preko Na2SO4i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (9.5 g, 97%) u obliku žutog ulja.
<1>H NMR (300MHz, CDCl3) δ 1.35 (t, 3H), 2.67 (d, 3H), 4.20 (s, 3H), 4.32 (q, 2H), 6.85-6.74 (m, 1H), 7.92 (s, 1H)
Međujedinjenje 52: 1-Metil-5-(metilsulfamoil)-1H-pirazol-4-karboksilna kiselina [0228]
[0229] Rastvor NaOH (3.9 g, 97.5 mmol) u vodi (20 mL) je dodat rastvoru etil 1-metil-5-(metilsulfamoil)-1H-pirazol-4-karboksilata (Međujedinjenje 51, 9.5 g, 38.4 mmol) u MeOH (10 mL) i reakciona smeša je mešana na 40°C 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i dobijena smeša je isprana dva puta terc-butil metil etrom. PH vrednost rastvora podešena je na 2-3 pomoću HCl (6 M, vod.). Čvrsti ostaci su sakupljeni filtracijom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (5.7 g, 68%) kao sivkasta čvrsta supstanca.
2
<1>H NMR (300MHz, DMSO-d6) δ 2.53 (s, 3H), 4.08 (s, 3H), 7.50 (s, 1H), 7.94 (s, 1H), 13.20 (s, 1H).
Međujedinjenje 53: 2,7-Dimetil-4,7-dihidropirazolo[4,3-e][1,2,4]tiadiazin-3(2H)-on 1,1-dioksid
[0230]
[0231] DIPEA (3.67 g, 28.40 mmol) je dodat rastvoru 1-metil-5-(metilsulfamoil)-1H-pirazol-4-karboksilne kiseline (Međujedinjenje 52, 4.8 g, 21.90 mmol) u toluenu (25 mL). DPPA (7.83 g, 28.45 mmol) dodavana je u vidu kapi u reakcionu smešu uz mešanje na 80-85°C tokom 20 minuta i reakciona smeša je mešana na 85°C tokom 3 sata. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom, a ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (50% EtOAc u naftnom etru) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (3.2 g, 68%) u obliku sivobele čvrste supstance.
<1>H NMR (400MHz, CDCl3,) δ 3.40 (s, 3H), 4.12 (s, 3H), 7.34 (s, 1H), 9.28 (s, 1H).
Međujedinjenje 54: 4-Amino-N,1-dimetil-1H-pirazol-5-sulfonamid hidrohlorid [0232]
[0233] HCl (6M, vod., 43 mL) je dodata rastvoru 2,7-dimetil-4,7-dihidropirazolo[4,3-e][1,2,4]tiadiazin-3(2H)-on 1,1-dioksida (Međujedinjenje 53, 3.5 g, 16.19 mmol) u 1,4-diokdanu (2 mL) i reakciona smeša je mešana na 95°C tokom 3 dana. Reakciona smeša je ostavljena da dostigne sobnu temperaturu i pH vrednost rastvora je podešena na 9-10 sa K2CO3(zas., vod.). Dobijeni rastvor je ekstrahovan sa EtOAc i organski sloj je osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (50% EtOAc u naftnom etru) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.8 g, 91%) kao svetlo žuta supstanca.
<1>H NMR (400MHz, DMSO-d6) δ 2.43 (s, 3H), 3.81 (s, 3H), 4.66 (s, 2H), 7.05 (s, 1H), 7.67 (s, 1H)
MS m/z 191 [M+H]<+>
Međujedinjenje 55: (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-[1-metil-5-(metilsulfamoil)-1H-pirazol-4-il]cikloheksankarboksamid
[0234]
[0235] T3P (50% u EtOAc, 2.73 g, 8.58 mmol) i Et3N (870 mg, 8.60 mmol) su dodati u rastvor (1R,2R)-2-[(4-bromofenil)karbonil]cikloheksan-1-karboksilne kiseline (533 mg, 1.71 mmol) i 4-amino-N,1-dimetil-1H-pirazol-5-sulfonamid hidrohlorida (Međujedinjenje 54, 327 mg, 1.72 mmol) u EtOAc (10 mL) i reakciona smeša je mešana na 70°C 4 h. Reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc i kombinovani organski sloj je ispran natrijum hidroksidom (2N, vod.), osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (17%→33% EtOAc u naftnom etru) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (350 mg, 42%) kao bela čvrsta supstanca.
MS m/z 483 [M+H]<+>
Međujedinjenje 56: (1R,2R)-N-[1-Metil-5-(metilsulfamoil)-1H-pirazol-4-il]-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksan-karboksamid [0236]
[0237] Pd(dppf)Cl2*DCM (33.8 mg, 0.05 mmol) i K2CO3(171 mg, 1.24 mmol) je dodat u smešu (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-[1-metil-5-(metilsulfamoil)-1H-pirazol-4-il]cikloheksankarboksamida (Međujedinjenje 55, 200 mg, 0.41 mmol) i 3-metil-1-
4
(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3-dioksolan-2-il)-1H-pirazol (Međujedinjenje 3, 218 mg, 1.04 mmol) u dioksanu/H2O (1:1, 5 mL) i reakciona smeša je mešana na 50°C 30 min. Reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc i kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom.
Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (11%→50% EtOAc u naftnom etru) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (240 mg, 97%) kao crvena čvrsta supstanca.
MS m/z 569 [M+H]<+>
Međujedinjenje 57: Etil 5-(dimetilsulfamoil)-1-metil-1H-pirazol-4-karboksilat [0238]
[0239] Etil 5-(hlorosulfonil)-1-metil-1H-pirazol-4-karboksilat (10 g, 39.58 mmol) je dodat rastvoru dimetilamina (2 M u THF, 45 mL, 89.45 mmol) u THF (30 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 10 min. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc (100 ml) i organska faza je isprana vodom, slanim rastvorom i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (8 g, 77%) u vidu crvenog ulja.
MS m/z 262 [M+H]<+>
Međujedinjenje 58: 5-(Dimetilsulfamoil)-1-metil-1H-pirazol-4-karboksilna kiselina [0240]
[0241] Rastvor NaOH (3.8 g, 95.01 mmol) u vodi (50 mL) je dodat rastvoru etil 5-(dimetilsulfamoil)-1-metil-1H-pirazol-4-karboksilata (Međujedinjenje 57, 5 g, 19.14 mmol) u MeOH (100 mL) i reakciona smeša je mešana na 40°C 2 h. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i pH vrednost rastvora je podešena na 2-3 sa HCl (1M, vod.). Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom i filtrat je ekstrahovan sa EtOAc (2x20 mL). Organski sloj je koncentrovan, a čvrste supstance su kombinovane i sušene u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (3.8 g, 85%) u obliku crvene čvrste supstance.
MS m/z 234 [M+H]<+>
Međujedinjenje 59: terc-Butil [5-(dimetilsulfamoil)-1-metil-1H-pirazol-4-il]karbamat [0242]
[0243] DPPA (6.1 g, 22.3 mmol) i DIPEA (3.8 g, 29.40 mmol) je dodat u rastvor 5-(dimetilsulfamoil)-1-metil-1H-pirazol-4-karboksilne kiseline (Međujedinjenje 58, 3.7 g, 15.86 mmol) u terc-BuOH (50 mL) i reakciona smeša je mešana na 85°C 15 h. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i ostatak je rastvoren u EtOAc. Organska faza je isprana vodom, koncentrovana u vakuumu i ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (33% EtOAc u naftnom etru) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.5 g, 52%) u obliku žute čvrste supstance.
MS m/z 305 [M+H]<+>
Međujedinjenje 60: 4-Amino-N,N,1-trimetil-1H-pirazol-5-sulfonamid hidrohlorid [0244]
[0245] Rastvor terc-butil [5-(dimetilsulfamoil)-1-metil-1H-pirazol-4-il]karbamata (Međujedinjenje 59, 500 mg, 1.64 mmol) u EtOAc (20 mL), je tretiran sa HCl (g) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (390 mg, 99%) kao ružičasta čvrsta supstanca.
MS m/z 205 [M+H]<+>
Međujedinjenje 61: (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-[5-(dimetilsulfamoil)-1-metil-1H-pirazol-4-il]cikloheksankarboksamid
[0246]
[0247] HATU (844 mg, 2.22 mmol) i DIPEA (573 mg, 4.43 mmol) je dodat rastvoru (1R,2R)-2-[(4-bromofenil)karbonil]cikloheksan-1-karboksilne kiseline (358 mg, 1.15 mmol) i 4-amino-N,N,1-trimetil-1H-pirazol-5-sulfonamid hidrohlorida (Međujedinjenje 60, 280 mg, 1.16 mmol) u DMF (8 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 4 h. Rastvarač je uklonjen pod vakuumom, a ostatak je prečišćen preparativnom TLC (4.7% MeOH u DCM) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (130 mg, 23%) u obliku žute čvrste supstance.
MS m/z 497 [M+H]<+>
Međujedinjenje 62: Etil 4-amino-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat
[0248]
[0249] Pd-C (500 mg, 4.70 mmol) je dodat u rastvor etil 3-metil-4-nitro-1H-pirazola-5-karboksilata (4.75 g, 23.85 mmol) u MeOH (50 ml) i reakciona smeša je mešana pod atmosferom vodonika na sobnoj temperaturi tokom 20 h. Čvrsta supstanca je odfiltrirana, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (3.8 g, 94%). MSm/z 170 [M+H]<+>
Međujedinjenje 63: Etil 4-[(terc-butoksikarbonil)amino]-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat
[0250]
[0251] Boc2O (2.13 mL, 9.16 mmol) je dodat rastvoru etil 4-amino-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilata (Međujedinjenje 62, 1.5g, 8.87 mmol) i piridina (1.42 mL, 17.57 mmol) u MeOH (40 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.1 g, 88%).
MS m/z 270 [M+H]<+>
Međujedinjenje 64: Etil 1-(2-bromoetil)-4-[(terc-butoksikarbonil)amino]-3-metil-1H-pirazol-5-karrboksilat
[0252]
[0253] 1,2-Dibromoetan (1.6g, 8.52 mmol) je dodat u rastvor etil 4-[(tercbutoksikarbonil)amino]-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilata (Međujedinjenje 63, 2.1g, 7.80 mmol) i K2CO3(2.1g, 15.19 mmol) u DMF (80 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Čvrsti ostaci su izfiltrirani i filtrat je koncentrovana u vakuumu.
Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (20% EtOAc u naftnom etru) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1 g, 34%).
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1.30 (t, 3H), 1.43 (s, 9H), 2.08 (s, 3H), 3.78 (t, 2H), 4.25 (q, 2H), 4.73 (t, 2H)
MS m/z 376 [M+H]+
Međujedinjenje 65: terc-Butil (2-metik-4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)karbamat
[0254]
[0255] Etil 1-(2-bromoetil)-4-[(terc-butoksikarbonil)amino]-3-metil-1H-pirazol-5-karboksilat (Međujedinjenje 64, 1 g, 2.66 mmol) je suspendovan u MeCN (9 mL) i amonijaku (25%, vod., 3 mL, 77.04 mmol) u reaktoru pod pritiskom i reaktor je grejan u uljnoj kupki na 60°C tokom 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom, a dobijena smeša je isprana smešom EtOAc/naftni etar (1:2). Čvrsti ostaci su sakupljeni filtracijom i sušeni pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (650 mg, 92%) kao sivkasta čvrsta supstanca. MS m/z 267 [M+H]<+>
Međujedinjenje 66: 3- Amino-2-metil-6,7- dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-4(5H)-on hidrohlorid
[0256]
[0257] HCl (gas) je dodata u vidu mehurova u rastvor terc-butil (2-metil-4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)karbamata (Međujedinjenje 65, 650 mg, 2.44 mmol) u MeOH (15 mL) na sobnoj temperaturi 20 minuta. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (460 mg, 93%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz DMSO-d6) δ 2.23 (s, 3H), 3.63-3.58 (m, 2H), 4.23-4.19 (t, 2H), 7.49-7.15 (m, 2H), 8.46 (s, 1H), 9.78-8.78 (br, 1H)
MS m/z 167 [M+H]<+>
Međujedinjenje 67: (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(2-metil-4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a] pirazin-3-il)cikloheksankarboksamid
[0258]
[0259] 3-Amino-2-metil-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-4(5H)-on hidrohlorid (Međujedinjenje 66, 460 mg, 2.27 mmol) i DIPEA (1.18 g, 9.13 mmol) su dodati smeši (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (708 mg, 2.28 mmol) i HATU (1.73 g, 4.55 mmol) u DMF (20 mL) i reakciona smeša je zagrevana na 50°C tokom 16 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i ostatak je rastvoren u EtOAc. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je isprana sa NaHCO3(vod.) I slanim rastvorom, osušena iznad Na2SO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (4.7% MeOH u DCM) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (630 mg, 60%) kao svetlo žuta supstanca.
MS m/z 441 [M+H]<+>
Međujedinjenje 68: (1R,2R)-N-[5-(Difluorometil)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H pirazol-4-il]-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0260]
[0261] 1H-Pirazol-3-ilborna kiselina (169 mg, 1.51 mmol), K2CO3(568 mg, 4.11 mmol) i Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (112 mg, 0.14 mmol) su dodati rastvoru (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-[5-(difluorometil)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il]cikloheksankarboksamida (Međujedinjenje 39, 700 mg, 1.37 mmol) u smeši dioksana i vode (4:1, 15 mL) u atmosferi azota i reakciona smeša je mešana na 50°C tokom 2 sata. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je isprana vodom, slanim rastvorom (zas.), osušena iznad Na2SO4i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (33% EtOAc u naftnom etru) 3da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (520 mg, 76%) kao braon ulje. MS m/z 498 [M+H]<+>
Međujedinjenje 69: (1R,2R)-2-{4-[1-(Tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksankarboksilna kiselina
[0262]
[0263] K2CO3(3.94 g, 28.5 mmol) i Pd(dtbpf)Cl2(232 mg, 0.36 mmol) dodati su u rastvor (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (2.22 g, 7.12 mmol) i 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (2.97 g, 10.68 mmol) u 1,4-dioksanu (40 ml) i vodi (20 mL). Reakciona smeša je evakuisana i pročišćena azotom tri puta, a zatim zagrevana na 80°C tokom 1 sata. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc isprana KHSO4(1M, vod.). Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc (x2), a kombinovana organska faza je osušena korišćenjem separatora faza i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na koloni Kromasil C8 (10µm 250×50 ID mm) korišćenjem gradijenta od 30-90% MeCN u sistemu pufera H2O/MeCN/AcOH (95/5/0.2) da bi se dobio proizvod iz naslova (2.72 g, 100%) kao smeđa čvrsta supstanca.
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 1.23 - 1.34 (m, 1H), 1.36 - 1.47 (m, 2H), 1.47 - 1.66 (m, 3H), 1.71 - 1.83 (m, 1H), 1.83 - 1.94 (m, 3H), 2.05 - 2.12 (m, 2H), 2.24 - 2.31 (m, 1H), 2.54 - 2.65 (m, 1H), 2.95 - 3.02 (m, 1H), 3.54 - 3.68 (m, 2H), 4.12 - 4.18 (m, 1H), 5.22 (dd, 1H), 6.38 -6.41 (m, 1H), 7.61 - 7.67 (m, 3H), 8.03 - 8.09 (m, 2H).MS m/z 381.3 [M-H]-
Međujedinjenje 70: Etil 4-(4-bromo-2- hlorofenil)-4-hidroksibut-2-inoat
[0264]
[0265] n-Butilitijum (1.6M u heksanu, 44 mL, 70.4 mmol) je dodat u rastvor DIPEA (10 mL, 69.2 mmol) u THF (100 mL) u atmosferi azota na -78°C tokom 30 minuta. U reakciju je dodat u vidu kapi etil prop-2-inota(6.5 ml, 64.3 mmol), a zatim je dodat rastvor 4-bromo-2-hlorobenzaldehida (14.11 g, 64.3 mmol) u THF (25 ml) i reakciona smeša je mešana na -78°C tokom noći. Reakciona smeša je dodata AcOH (12 mL) u THF (50 mL) i ona je potom izlivena u vodu (800 mL). Reakciona smeša je ekstrahovana četiri puta sa DCM.
Kombinovana organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (20%→50% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (11.0 g 54%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.31 (t, 3H), 2.70 (d, 1H), 4.24 (q, 2H), 5.86 (d, 1H), 7.47 (dd, 1H), 7.55 - 7.61 (m, 2H)
1
MS m/z 316.9 [M-H]-
Međujedinjenje 71: Etil (2E)-4-(4-bromo-2-hlorofenil)-4-oksobut-2-enoat
[0266]
[0267] Et3N (5 mL, 36.07 mmol) je dodat rastvoru etil 4-(4-bromo-2-hlorofenil)-4-hidroksibut-2-inoat (Međujedinjenje 70, 11 g, 34.6 mmol) u 1,4-dioksanu (50 mL) i reakciona smeša je mešana na 60°C 4 h. Reakciona smeša je koncentrovana in vacuo, ostatak je ponovo rastvoren u EtOAc i organska faza je isprana HCl (1M, vod.). Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0%→25% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (7.8 g 71%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.33 (t, 3H), 4.28 (q, 2H), 6.66 (d, 1H), 7.38 (d, 1H), 7.46 -7.54 (m, 2H), 7.64 (d, 1H).
Međujedinjenje 72: Etil (1R,6R i 1S,6S)-6-(4-bromo-2-hlorobenzoil)cikloheks-3-en-1-karboksilat
[0268]
[0269] Buta-1,3-dien (14 mL, 165.65 mmol), kondenzovan na -78°C, dodat je smeši etil (2E)-4-(4-bromo-2-hlorofenil)-4-oksobut-2-enoata (Međujedinjenje 71, 4.04 g, 12.72 mmol) i hidrohinona (0.011 g, 0.10 mmol) u toluenu (15 mL) na -78°C i reakciona posuda je zapečaćena i mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h, a zatim je zagrevana na 210°C tokom 15 h. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (5%→25% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4.47 g 95%).
2
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.24 (t, 3H), 2.08 (dddd, 1H), 2.21 (dddd, 1H), 2.26 - 2.39 (m, 1H), 2.52 (dd, 1H), 3.02 (td, 1H), 3.63 (td, 1H), 4.12 (qd, 2H), 5.63 - 5.77 (m, 2H), 7.47 (dd, 1H), 7.56 (d, 1H), 7.60 (d, 1H).
Međujedinjenje 73: 4-({[(1R,6R i 1S,6S)-6-(4-Bromo-2-hlorobenzoil)cikloheks-3-en-1-il]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0270]
Korak 1 (1R,6R i 1S,6S)-6-(4-Bromo-2-hlorobenzoil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina
[0271] Voda (20 mL) i LiOH (1.0 g, 41.76 mmol) su dodati rastvoru etil (1R,6R i 1S,6S)-6-(4-bromo-2-hlorobenzoil)cikloheks-3-en-1-karboksilata (Međujedinjenje 72, 4.43 g, 11.92 mmol) u THF (40 mL) i MeOH (40 mL) i reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i ostatak je zakišeljen dodatkom HCl (2M, vod.). Vodena faza je ekstrahovana tri puta sa dietil etrom i kombinovana organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (3.69 g, 90%).
Korak 2: 4-({[(1R,6R i 1S,6S)-6-(4-Bromo-2-hlorobenzoil)cikloheks-3-en-1-il]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0272] T3P (50% u EtOAc, 640 mg, 2.01 mmol) i DMAP (300 mg, 2.46 mmol) su dodati rastvoru (1R,6R i 1S,6S)-6-(4-bromo-2-hlorobenzoil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline (Međujedinjenje 73 Korak 1, 571 mg, 1.16 mmol) i 4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamida (280 mg, 2.0 mmol) u THF (12 mL) i DCM (1 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 h. Dodata je voda (5 mL) i reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je razblažen vodom i vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc. Organska faza je isprana slanim rastvorom i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u DCM, osušen korišćenjem faznog separatora i sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (20% aceton u EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (470 mg, 87%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2.04 - 2.15 (m, 1H), 2.31 - 2.56 (m, 3H), 2.98 (td, 1H), 3.74 (td, 1H), 4.09 (s, 3H), 5.76 (d, 2H), 6.17 (s, 2H), 7.44 - 7.49 (m, 1H), 7.54 (d, 1H), 7.61 (d, 1H), 7.70 (s, 1H), 8.09 (s, 1H).
MS m/z 465.1 [M-H]-
Međujedinjenje 74: 4-[({(1R,6R i 1S,6S)-6-[2-Hloro-4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheks-3-en-1-il}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0273]
[0274] 4-({[(1R,6R i 1S,6S)-6-(4-Bromo-2-hlorobenzoil)cikloheks-3-en-1-il]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid (Međujedinjenje 73, 230 mg, 0.49 mmol), 1H-pirazol-5-ilborna kiselina (112 mg, 1 mmol), K2CO3(140 mg, 1.01 mmol) i Pd(dtbpf)Cl2(20 mg, 0.03 mmol) suspendovani su u smeši dioksana (8 ml) i vode (2 ml). Reakciona posuda je evakuisana i pročišćena azotom (g), a zatim je zagrevana na 90°C tokom 1.5 sata. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i ostatak je razblažen sa EtOH (50 mL). Doda se NaHCO3(zas., vod.) do pH 8 i reakciona smeša se koncentriše do suvoće pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-95% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (28 mg 13%).
MS m/z 451.1 [M-H]-
Međujedinjenje 75: 4-[({(1R,6R i 1S,2S)-6-[2-Hloro-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheks-3-en-1-il}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0275]
4
Korak 1: 4-({[(1R,6R i 1S,6S)-6-{2-Hloro-4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheks-3-en-1-il]karbonil}amino-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0276] 4-({[(1R,6R i 1S,6S)-6-(4-Bromo-2-hlorobenzoil)cikloheks-3-en-1-il]karbonil}-amino)-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid (Međujedinjenje 73, 230 mg, 0.49 mmol), 3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (Međujedinjenje 3, 300 mg, 1.03 mmol), K2CO3(150 mg, 1,09 mmol) i Pd(dtbpf)Cl2(20 mg, 0.03 mmol) suspendovani su u smešu dioksana (8 mL) i vode (2 mL). Reakciona posuda je evakuisana i površinski pročišćena azotom (g) i zagrevana na 90°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je korišćena direktno nakon hlađenja u sledećem koraku.
Korak 2: 4-[({(1R,6R i 1S,2S)-6-[2-Hloro-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheks-3-en-1-il}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0277] HC1 (4M u dioksanu, 0.5 mL, 2.00 mmol) je dodat u reakcionu smešu iz Međujedinjenja 75 Korak 1 i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 10 minuta. Reakciona smeša je koncentrovana pri sniženom pritisku, na ostatak je dodan NaHCO3(zas., vod.) do pH 8 i vodena faza je ekstrahovana dva puta sa DCM. Kombinovana organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora i koncentrovana do suva pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (EtOAc) i zatim preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-95% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (100 mg 59%).
MS m/z 465.2 [M-H]-
Međujedinjenje 76: Metil 4-(4-bromo-2-fluorofenil)-4-hidroksibut-2-inoat
[0278]
[0279] n-Butilitijum (1.6 M u heksanu, 45 mL, 72.0 mmol) je dodat u rastvor DIPEA (10 mL, 69.2 mmol) u THF (100 mL) u atmosferi azota na -78°C i reakciona smeša je mešati na -78°C tokom 30 minuta. Kapi je dodat metil prop-2-inoat (5.7 mL, 64.5 mmol), zatim je dodat rastvor 4-bromo-2-fluorobenzaldehida (13.1 g, 64.5 mmol) u THF (20 mL) i reakciona smeša je mešana na -78°C tokom noći. U reakcionu smešu je dodan AcOH (10 ml) i sipana je u vodu. Reakciona smeša je ekstrahovana sa DCM i kombinovana organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (20%→50% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (12.9 g 70%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 2.62 (s, 1H), 3.79 (s, 3H), 5.78 (s, 1H), 7.29 (dd, 1H), 7.35 (dd, 1H), 7.49 (t, 1H).
MS m/z 285.0 [M-H]-
Međujedinjenje 77: Metil (2E)-4-(4-bromo-2-fluorofenil)-4-oksobut-2-enoat
[0280]
[0281] Et3N (12.5 mL, 90.2 mmol) dodat je rastvor metil 4-(4-bromo-2-fluorofenil)-4-hidroksibut-2-inoata (Međujedinjenje 76, 12.9 g, 44.9 mmol) u 1,4-dioksanu (40 mL) i reakciona smeša mešana je na sobnoj temperaturi preko noći i zatim zagrevana na 60°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je koncentrovana in vacuo i sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0%→25% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (9.7 g, 75%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.84 (s, 3H), 6.85 (dd, 1H), 7.31 - 7.49 (m, 2H), 7.65 - 7.8 (m, 2H).
Međujedinjenje 78: Metil (1R,6R i 1S,6S)-6-(4-bromo-2-hlorobenzoil)cikloheks-3-en-1-karboksilat
[0282]
[0283] Buta-1,3-dien (20 mL, 236.6 mmol), kondenzovan na -78°C, dodat je smeši metil (2E)-4-(4-bromo-2-hlorofenil)-4-oksobut-2-enoata (Međujedinjenje 77, 5.5 g, 19.2 mmol) i hidrohinona (0.020 g, 0.18 mmol) u toluenu (15 mL) na -78°C i reakciona posuda je zapečaćena i mešana na 210°C tokom 14 h. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (5%→30% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (5.69 g 87%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.95 - 2.14 (m, 1H), 2.14 - 2.27 (m, 1H), 2.49 (ddd, 2H), 3.07 (tdd, 1H), 3.56 - 3.77 (m, 4H), 5.73 (s, 2H), 7.29 - 7.46 (m, 2H), 7.72 (t, 1H).
Međujedinjenje 79: (1R,6R i 1S,6S)-6-(4-Bromo-2-fluorobenzil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina
[0284]
[0285] Rastvor LiOH (0.40 g, 16.7 mmol) u vodi (50 mL) je dodat u rastvor metil (1R,6R i 1S,6S)-6-(4-bromo-2-fluorobenzoil)cikloheks-3-en -1-karboksilat (Međujedinjenje 78, 5.6 g, 16.41 mmol) u THF (50 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. LiOH (0.33 g, 13.8 mmol) je dodat u reakcionu smešu i mešan je na sobnoj temperaturi tokom 4 h. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod redukovanim pritiskom. Sirovi ostatak je zakišeljen pomoću HCl (2M, vod.) i vodena faza je ekstrahovana tri puta sa EtOAc. Kombinovana organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i malo koncentrovana in vacuo. Dodat je heptan i formirane čvrste supstance su filtrirane i osušene da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (4.19 g, 78%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) 81.92 - 2.08 (m, 1H), 2.12 - 2.36 (m, 1H), 2.33 - 2.6 (m, 2H), 3.06 (td, 1H), 3.64 (td, 1H), 5.72 (s, 2H), 7.3 - 7.47 (m, 2H), 7.70 (t, 1H).
Međujedinjenje 80: (1R,6R ili 1S,6S)-6-(4-Bromo-2-fluorobenzil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina
[0286]
[0287] Enantiomeri (1R,6R i 1S,6S)-6-(4-bromo-2-fluorobenzoil)cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina (Međujedinjenje 79, 8.0 g, 24.5 mmol) su razdvojeni hiralnom SFC hromatografijom na koloni Lux C2 (5 µm, 250x30mm).500 mg (200 mg/mL u MeOH) ubrizgan je i eluiran sa 20% MeOH u CO2(g) (175 bara) pri brzini protoka od 100 ml/min i otkriven na 265 nm. Prvo eluirano jedinjenje je sakupljeno i ispareno da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (3.95 g, 49%, 99.9% ee).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.92 - 2.06 (m, 1H), 2.19 - 2.31 (m, 1H), 2.39 - 2.6 (m, 2H), 2.96 - 3.12 (m, 1H), 3.64 (td, 1H), 5.72 (s, 2H), 7.29 - 7.44 (m, 2H), 7.71 (t, 1H). Optičke rotacije: -29.9° (1g/100mL u MeCN, 589 nm, 20°C).
Međujedinjenje 81: 4-({[(1R,6R ili 1S,6S)-6-(4-Bromo-2-fluorobenzoil)cikloheks-3-en-1-il]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0288]
(-)-trans ili (+)-trans
[0289] T3P (50% u EtOAc, 1 ml, 1.68 mmol) je dodat rastvoru (1R,6R ili 1S,6S)-6-(4-bromo-2-fluorobenzoil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline (Međujedinjenje 80, 250 mg, 0.76 mmol), 4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamida (215 mg, 1.53 mmol) i Et3N (411 µl, 2.96 mmol) u EtOAc (3.5 mL) i reakciona smeša je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 80°C tokom 60 minuta, a zatim je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana dva puta sa NaHCO3(zas., vod.) i fiziološkim rastvorom. Organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 30-85% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (140 mg 41%).
MS m/z 451 [M+2]<+>
Međujedinjenje 82: 4-[({(1R,6R ili 1S,6S)-6-[2-Fluoro-4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheks-3-en-1-il}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0290]
(-)-trans ili (+)-trans
[0291] Pd(dtbpf)Cl2(20 mg, 0.03 mmol) je dodat smeši 4-({[(1R,6R ili 1S,6S)-6-(4-bromo-2-fluorobenzoil)cikloheks-3-en-1-il]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamida (Međujedinjenje 81, 140 mg, 0.31 mmol), 1H-pirazol-5-ilborna kiselina (70 mg, 0.63 mmol), K2CO3(170 mg, 1.23 mmol) u dioksanu (2.5 mL) i vodi (1.2 mL). Reakciona smeša je pročišćena azotom (g) i zatim zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 80°C tokom 45 minuta. Reakciona smeša je dodata NaHCO3(zas., vod.) i smeša je ekstrahovana sa EtOAc. Organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora, koncentrovana u vakuumu i sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 uM, 250x19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 20-65% MeCN u H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2) puferski sistem kao pokretna faza da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (52 mg, 38%).
MS m/z 435.2 [M-H]-
Međujedinjenje 83: (1R,2R ili 1S,2S)-2-(4-Bromo-2-fluorobenzil)cikloheksenkarboksilna kiselina
[0292]
(-)-trans ili (+)-trans
[0293] Rotijum katalizator (5% Rh/C, 628 mg, 0.31 mmol) je dodat u rastvor (1R,6R ili 1S,6S)-6-(4-bromo-2-fluorobenzoil)cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline (Međujedinjenje 80, 10 g, 30.57 mmol) u THF (100 mL) i reakciona smeša je mešana u atmosferi vodonika (2 bara) na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Sirovi proizvod je filtriran kroz jastučić od celita i čvrste supstance su isprane THF. Filtrat je koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo ulje koje se očvrslo stajanjem. Čvrsti proizvod je rastvoren i istaložen iz metil terc-butiletera i heptana i osušen u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (9.16 g, 91%).
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3, 23°C) δ 0.98 - 1.09 (m), 1.13 - 1.38 (m, 3H), 1.67 - 1.79 (m, 2H), 1.94 (d, 1H), 2.04 - 2.13 (m, 1H), 2.73 (t, 1H), 3.19 - 3.29 (m, 1H), 7.18 - 7.3 (m, 2H), 7.60 (t, 1H).
Međujedinjenje 84: 4-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-(4-Bromo-2-fluorobenzoil)cikloheksil]-karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-3-karboksamid
[0294]
(-)-trans ili (+)-trans
4-Amino-1-metil-1H-pirazol-3-karboksamid (358 mg, 2.55 mmol) je dodat rastvoru (1R, 2R ili 1S, 2S)-2-(4-bromo-2-fluorobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (Međujedinjenje 83, 560 mg, 1.70 mmol), HATU (647 mg, 1.70 mmol) i DIPEA (593 µL, 3.40 mmol) u DMF (3 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-80% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (640 mg 83%).
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 1.24 (qd, 1H), 1.41 (q, 2H), 1.59 (qd, 1H), 1.84 - 1.92 (m, 2H), 2.07 - 2.2 (m, 2H), 2.81 - 2.99 (m, 1H), 3.47 - 3.62 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 5.43 (s, 1H), 6.64 (s, 1H), 7.3 - 7.42 (m, 2H), 7.74 (t, 1H), 8.03 (s, 1H), 9.53 (s, 1H).
Međujedinjenje 85: 4-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-{2-Fluoro-4-[1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-3-karboksamid [0295]
[0296] K2CO3(262 mg, 1.90 mmol) i Pd(dtbpf)Cl2(27 mg, 0.04 mmol) su dodati rastvoru 4-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-(4-bromo-2-fluorobenzoil)cikloheksil]karbonil}-amino)-1-metil-1H-pirazol-3-karboksamid (Međujedinjenje 84, 214 mg, 0.47 mmol) i 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (198 mg, 0.71 mmol) u dioksanu (1.5 mL) i vodi (1.5 mL). Reakciona smeša je evakuisana i pročišćena azotom (g) tri puta, a zatim je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 80°C tokom 60 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je isprana sa NaCl (zas., vod.). Vodena faza je izvađena sa EtOAc. Kombinovana organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora i koncentrovana do suvoće pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (75%→100% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (273 mg).
MS m/z 521.4 [M-H]-
Međujedinjenje 86: 4-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-{2-Fluoro-4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-3-karboksamid
[0297]
1
[0298] K2CO3(213 mg, 1.54 mmol) i Pd(dtbpf)Cl2(22 mg, 0.03 mmol) su dodati rastvoru 4-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-(4-bromo-2-fluorobenzoil)cikloheksil]karbonil}-amino)-1-metil-1H-pirazol-3-karboksamida (Međujedinjenje 84, 174 mg, 0.39 mmol) i 3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (Međujedinjenje 3, 169 mg, 0.58 mmol) u dioksanu (1.5 mL) i vodi (1.5 mL). Reakciona smeša je evakuisana i pročišćena azotom (g) tri puta, a zatim je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 80°C tokom 60 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je isprana sa NaCl (zas., vod.). Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc a kombinovana organska faza je osušena korišćenjem separatora faza i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (75%→100% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (216 mg 100%).
MS m/z 535.5 [M-H]-
Međujedinjenje 87: Etil 4-(4-bromo-2-fluorofenil)-4-hidroksibut-2-inoat
[0299]
[0300] n-Butilitijum (1.6M u heksanu, 44 mL, 70.4 mmol) je dodat u rastvor DIPEA (10 mL, 69.2 mmol) u THF (100 mL) u atmosferi azota i reakciona smeša je mešana na -78°C tokom 30 minuta. U reakciju je dodata u vidu kapi etilprop-2-inota (6.5 mL, 64.3 mmol), posle čega je dodat rastvor 4-bromo-2-fluorobenzaldehida (13.1 g, 64.5 mmol) u THF (20 mL).
Reakciona smeša je mešana na -78°C tokom noći. Reakciona smeša je zagrevana do 0°C, dodat je AcOH (15 ml) rastvoren u THF (50 ml), a zatim voda (800 ml). Reakciona smeša je ekstrahovana tri puta sa DCM i kombinovana organska faza je osušena preko MgSO4,
2
filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (20%→50% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (14.7 g 76%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.31 (t, 3H), 2.57 (bs, 1H), 4.25 (q, 2H), 5.78 (s, 1H), 7.29 (dd, 1H), 7.35 (d, 1H), 7.50 (t, 1H).
Međujedinjenje 88: Etil (2E)-4-(4-bromo-2-fluorofenil)-4-oksobut-2-enoat
[0301]
[0302] Et3N (14 mL, 101 mmol) je dodat rastvoru etil 4-(4-bromo-2-fluorofenil)-4-hidroksibut-2-inoat (Međujedinjenje 87, 14,6 g, 48.5 mmol) u 1,4-dioksanu (40 mL) i reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 6 sati i koncentrovan in vacuo. Ostatak je rastvoren u EtOAc i organska faza je isprana HCl (1M, vod.) i koncentrovana u vacuo. Sirovo jedinjenje je prečišćeno fleš hromatografijom (0%→25% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (10.4 g 71%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.33 (t, 3H), 4.29 (q, 2H), 6.83 (dd, 1H), 7.35 - 7.45 (m, 2H), 7.67 - 7.74 (m, 2H).
Međujedinjenje 89: Etil (1R,6R i 1S,6S)-6-(4-bromo-2-fluorobenzil)cikloheks-3-en-1-karboksilat
[0303]
[0304] Buta-1,3-dien (15 mL, 177.5 mmol), kondenzovan na -78°C, dodat je smeši etil (2E)-4-(4-bromo-2-fluorofenil)-4-oksobut-2-enoata (Međujedinjenje 88, 5.59 g, 18.56 mmol) i hidrohinona (0.035 g, 0.32 mmol) u toluenu (15 mL) na -78°C i reakciona posuda je zapečaćena i mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h, a zatim je zagrevana na 200°C tokom 20 h. Reakciona posuda je ohlađena do -78°C i reakcionoj smeši je dodat buta-1,3-dien (12 mL, 142 mmol), kondenzovan na -78°C. Reakcioni sud je zapečaćena i zagrevana na 200°C tokom noći. Reakciona smeša je uparena u vakuumu i sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0%→25% EtOAc u heptanu) da bi se dobio proizvod iz naslov (5.7 g, 86%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.19 (t, 3H), 1.89 - 2.13 (m, 1H), 2.14 - 2.26 (m, 1H), 2.37 -2.66 (m, 2H), 3.06 (tdd, 1H), 3.68 (td, 1H), 4.08 (q, 2H), 5.73 (s, 2H), 7.3 - 7.46 (m, 2H), 7.72 (t, 1H).
Međujedinjenje 90: Etil (1R,6R i 1S,6S)-6-{2-fluoro-4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheks-3-en-1-karboksilat
[0305]
[0306] Rastvor K2CO3(0.553 g, 4.00 mmol) u degaziranoj vodi (8 mL) je dodat smeši etil (1R,6R i 1S,6S)-6-(4-bromo-2-fluorobenzoil)cikloheks-3-en-1-karboksilata (Međujedinjenje 89, 0.355 g, 1.0 mmol), 3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (Međujedinjenje 3, 0.438 g, 1.50 mmol) i Pd(dtbpf)Cl2(0.064 g, 0.10 mmol) u degasiranom dioksanu (8 mL). Reakciona smeša je zagrevana na 90°C tokom 1 h, a zatim je podeljena između EtOAc i NaCl (zas., vod.). Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc i kombinovana organska faza je osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom na koloni (15%→60% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.355 g 81 %).
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 1.23 (t, 3H), 1.53 - 1.63 (m), 1.64 - 1.67 (m, 2H), 2.02 - 2.15 (m, 2H), 2.20 - 2.29 (m, 1H), (d, 1H), 2.34 (s, 3H), 2.44 - 2.64 (m, 3H), 3.05 - 3.16 (m, 1H), 3.62 (t, 1H), 3.78 (td, 1H), 4.08 - 4.19 (m, 3H), 5.09 - 5.15 (m, 1H), 5.76 (s, 2H), 6.20 (s, 1H), 7.31 - 7.41 (m, 2H), 7.89 - 7.96 (m, 1H).
4
Međujedinjenje 91: 4-({[(1R,6R i 1S,6S)-6-{2-Fluoro-4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheks-3-en-1-il]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0307]
Korak 1: (1R,6R i 1S,6S)-6-{2-Fluoro-4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheks-3-en-1-karboksilna kiselina
[0308] Rastvor LiOH (0.041 g, 1.70 mmol) u vodi (2 mL) je dodat rastvoru (1R,6R i 1S,6S)-6-{2-fluoro-4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheks-3-en-1-karboksilat (Međujedinjenje 90, 0.374 g, 0.85 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 60°C 6 h. Voda je dodata i reakciona smeša i pH vrednost je podešena na ~4 koristeći KHSO4(1M, vod.). Vodena faza je ekstrahovana dva puta sa EtOAc i kombinovana organska faza je osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (347 mg, 99%).
MS m/z 411.2 [M-H]-
Korak 2: 4-({[(1R,6R i 1S,6S)-6-{2-Fluoro-4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheks-3-en-1-il]karbonil}-1-amino)-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0309] Et3N (464 µL, 3.35 mmol) i T3P (50% in EtOAc, 598 µL, 1.00 mmol) su dodati suspenziji (1R,6R i 1S,6S)-6-{2-fluoro-4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheks-3-en-1-karboksilne kiseline (Međujedinjenje 91 Korak1, 0.345 g, 0.84 mmol) i 4-amino-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamida (234 mg, 1.67 mmol) u EtOAc (8 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. DMF (1 mL) je dodata i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5.5 h. Reakciona smeša je podeljena između EtOAc i NaHCO3(zas., vod.). Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc i kombinovana organska faza je osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana in vacuo. Sirovo jedinjenje je prečišćeno fleš hromatografijom (EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (191 mg, 43%).
MS m/z 535.1 [M+H]<+>
Međujedinjenje 92: 4-[({(1R,2R i 1S,2S)-2-[2-Hloro-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0310]
Korak 1: 4-[({(1R,6R i 1S,6S)-6-[2-Fluoro-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheks-3-en-1-il}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0311] HCl (4M u dioksanu, 59 µL, 0.23 mmol) je dodata rastvoru 4-({[(1R,6R i 1S,6S)-6-{2-fluoro-4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheks-3-en-1-il]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid (Međujedinjenje 91, 157 mg, 0.29 mmol) u dioksanu (8 mL) i vodi (2 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 80 minuta. NaHCO3(zas., vod.) i EtOAc su dodati u reakcionu smešu i faze su razdvojene. Organska faza je isprana sa NaHCO3(zas., vod.). Vodena faza je ekstrahovana dva puta sa EtOAc i kombinovana organska faza je osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (132 mg, 100%).
MS m/z 449.2 [M-H]-
Korak 2: 4-[({(1R,2R i 1S,2S)-2-[2-Fluoro-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0312] Paladijum katalizator (5% Pd/C, 62 mg, 0.03 mmol) je dodat rastvoru 4-[({(1R,6R i 1S,6S)-6-[2-fluoro-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheks-3-en-1-il}carbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamida (Međujedinjenje 92 Korak 1, 0.131 g, 0.29 mmol) u MeOH (4 mL) i EtOAc (4 mL) i reakciona smeša je tretirana sa H2(g) na 1 atm i na sobnoj temperaturi tokom noći. Katalizator je filtrirana i isprana sa MeOH. Filtrat je koncentrovan in vacuo i sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-70% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.046 g 35.0%).
<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 1.22 (s, 1H), 1.36 - 1.68 (m, 3H), 1.88 - 1.94 (m, 2H), 2.10 -2.20 (m, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.87 (s, 1H), 3.61 (d, 1H), 4.01 (s, 3H), 6.54 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.59 (d, 2H), 7.86 (d, 1H).
Međujedinjenje 93: (1R,2R ili 1S,2S)-2-{2-Fluoro-4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksankarboksilna kiselina
[0313]
[0314] 3-Metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (Međujedinjenje 3, 2.08 g, 7.11 mmol) i degasirani rastvor K2CO3(1.96 g, 14.22 mmol) u vodi (5 mL) su dodati rastvoru (1R,2R ili 1S,2S)-2-(4-bromo-2-fluorobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (Međujedinjenje 83, 1.17 g, 3.55 mmol) u dioksanu (5 mL). Dodaje se Pd(dtbpf)Cl2(0.080 g, 0.12 mmol) i dobijena reakciona smeša se zagreva u mikrotalasnom reaktoru na 60°C tokom 50 minuta. Reakciona smeša je razblažena vodom i EtOAc. KHSO4(1%, vod.) dodat je u vodeni sloj do pH 5 i vodeni sloj je ekstrahovan dva puta sa EtOAc. pH vodenog sloja je podešen na 3-4 i vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski sloj je osušen korišćenjem faznog separatora i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na Kromasil C8 koloni (10 µm 250x50 ID mm) korišćenjem gradijenta od 10-85% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/HCO2H (95/5/0.2), kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1,2 g 81%).
MS m/z 413.3 [M-H]-
Međujedinjenje 94: 4-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-{2-Fluoro-4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-1H-pirazol-5-karboksamid
[0316] T3P (50% u EtOAc, 194 µL, 0.33 mmol) je dodat suspenziji (1R,2R ili 1S,2S)-2-{2-Fluoro-4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}-cikloheksankarboksilne kiseline (Međujedinjenje 93, 90 mg, 0.22 mmol), 4-amino-1H-pirazol-5-karboksamid hidrohlorida (71 mg, 0.43 mmol) i Et3N (105 µL, 0.76 mmol) u EtOAc (1 mL). DMF (1 mL) dodat je i reakciona smeša je zagrevana na 80°C tokom 3 sata. Reakciona smeša je razblažena sa NaHCO3(8%, vod.) i EtOAc. Organski sloj je ispran tri puta sa NaHCO3(8%, vod.), osušen koristeći separator faza i koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 10-80% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (24 mg 21%).
MS m/z 521.3 [M-H]-
Međujedinjenje 95: (1R,2R ili 1S,2S)-2-(4-bromo-2-fluorobenzoil)-N-(4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)cikloheksankarboksamid
[0317]
(-)-trans ili (+)-trans
[0318] 3-Amino-6,7-dihidropirazolo[1,5-a]pirazin-4(5H)-on hidrohlorid (Međujedinjenje 12, 300 mg, 1.97 mmol), HATU (1.16 g, 3.05 mmol) i Et3N (768 mg, 7.59 mmol) je dodat rastvoru (1R,2R ili 1S,2S)-2-(4-bromo-2-fluorobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (Međujedinjenje 83, 500 mg, 1.52 mmol) u DMF (20 mL) i reakciona smeša je mešana na 38°C 12 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (3.8% MeOH u DCM) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (300 mg, 43%).
MS m/z 463 [M+H]<+>
Međujedinjenje 96: 4-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-(4-bromo-2-fluorobenzoil)cikloheksil]-karbonil}amino)-1,2,5-oksadiazol-3-karboksamid
[0319]
(-)-trans ili (+)-trans
[0320] T3P (50% in EtOAc, 0.75 ml, 1.26 mmol) dodat je rastvoru 4-amino-1,2,5-oksadiazol-3-karboksamida (0.178 g, 1.39 mmol), (1R,2R ili 1S,2S)-2-(4-bromo-2-fluorobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (Međujedinjenje 83, 0.20 g, 0.61 mmol) i DMAP (0.22 g, 1.80 mmol) u THF (2.5 mL) i DCM (0.5 mL) i reakciona smeša je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 100°C tokom 1 h. Reakciona smeša je razblažena sa THF i sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na koloni Kromasil C18, koristeći MeCN u sistemu pufera H2O/HOAc (100/0.2) kao pokretnu fazu. Frakcije koje sadrže proizvod su sakupljene, koncentrovane u vakuumu i osušene smrzavanjem da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (87 mg, 33%).
MS m/z 439.1 [M-H]-
Međujedinjenje 97: (1R,2R ili 1S,2S)-2-(4-Bromo-2-fluorobenzil)cikloheksankarbonil fluorid
[0321]
(-)-trans ili (+)-trans
[0322] (1R,2R ili 1S,2S)-2-(4-Bromo-2-fluorobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (Međujedinjenje 83, 100 mg, 0.30 mmol) i piridina (0.052 mL, 0.61 mmol) rastvoreni su u suvom DCM (1 mL) u atmosferi azota. Reakciona smeša je ohlađena do -10°C, dodat je 2,4,6-trifluoro-1,3,5-triazin (0.051 mL, 0.61 mmol) i reakciona smeša je mešana na -10°C tokom 2 sata. Reakciona smeša je razblažena sa DCM i dodata je voda i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta. Dodata je voda i DCM i faze su razdvojene. Kombinovana organska faza je odvojena od čvrstih supstanci, isprana hladnom vodom, osušena korišćenjem faznog separatora i isparena na sobnoj temperaturi u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (107 mg, 106%).
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 1.19 (qd, 1H), 1.3 - 1.5 (m, 2H), 1.50 - 1.63 (m), 1.83 - 1.97 (m, 2H), 2.14 (d, 1H), 2.23 - 2.36 (m, 1H), 3.00 (dddd, 1H), 3.43 (td, 1H), 7.33 - 7.45 (m, 2H), 7.75 (t, 1H).
Međujedinjenje 98: 4-({[(1R,2R i 1S,2S)-2-(4-Bromobenzoil)cikloheksil]karbonkl}-amino)-1-etil-1H-pirazol-3-karboksamid
[0323]
[0324] Et3N (178 µL, 1.29 mmol) i T3P (50% u EtOAc, 230 µL, 0.39 mmol) su dodati suspenziji (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (100 mg, 0.32 mmol) i 4-amino-1-etil-1H-pirazol-3-karboksamida (67 mg, 0.43 mmol) u EtOAc (2 mL) i reakciona smeša je zagrevana na 80°C 2 h i zatim mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je podeljena između EtOAc i NaHCO3(zas., vod.). Vodena faza je ekstrahovana dva puta sa EtOAc i kombinovana organska faza je osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (119 mg, 83%). MS m/z 449 [M+2]<+>
Međujedinjenje 99: Etil 5-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksil]karbonil}amino)-1,3,4-oksadiazol-2-karboksilat
[0325]
1
[0326] Etil 5-amino-1,3,4-oksadiazol-2-karboksilat (1.11 g, 7.06 mmol), T3P (50% u EtOAc, 8.18 g, 25.72 mmol) i Et3N (2.6 g, 25.69 mmol) su dodati rastvoru (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (2 g, 6.43 mmol) u EtOAc (25 mL) i reakciona smeša je zagrevana na 80°C 12 h. Reakciona smeša je isprana dva puta vodom i kombinovana vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (2.85 g, 98%).
MS m/z 450 [M+H]<+>
Međujedinjenje 100: (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(3-metil-1,2-tiazol-5-il)cikloheksankarboksamid
[0327]
[0328] T3P (50% u EtOAc, 383 µL, 0.64 mmol) je dodat smeši (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (100 mg, 0.32 mmol), 3-metil-1,2-tiazol-5-amin hidrohlorida (97 mg, 0.64 mmol), i Et3N (134 µL, 0.96 mmol) u EtOAc (3 mL) i reakciona smeša je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 150°C 30 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je ekstrahovana sa NaHCO3(zasićenim, vodenim) i slanim rastvorom, osušena korišćenjem faznog separatora i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (25% EtOAc u toluenu) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (24 mg 18%).
MS m/z 407.2 [M-H]-
1 1
Međujedinjenje 101: (1R,2R i 1S,1S)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(4-cijano-3-metil-1,2-tiazol-5-il)cikloheksankarboksamid
[0329]
[0330] T3P (50% u EtOAc, 383 µL, 0.64 mmol) je dodat smeši (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (100 mg, 0.32 mmol), 5-amino-3-metil-1,2-tiazol-4-karbonitril (89 mg, 0.64 mmol), i Et3N (134 µL, 0.96 mmol) u EtOAc (3 mL) i reakciona smeša je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 150°C 30 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je ekstrahovana sa NaHCO3(zasićenim, vodenim) i slanim rastvorom, osušena korišćenjem faznog separatora i koncentrovana u vakuumu. Trituriranjem ostatka iz DCM dobijeno je jedinjenje iz naslova (51 mg, 37%). MS m/z 432.2 [M-H]-
Primer 1: 1-Metil-4-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1H-pirazol-3-karboksamid
[0331]
(+)-trans ili (-)-trans
Korak 1 - Metil 1-metil-4-[({(1R,2R i 1S,2S) -2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1H-pirazol-3-karboksilat
[0332] Rastvor (1R,2R i 1S,2S) -2-(4-(1H-pirazol-3-il)benzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (Međujedinjenje 1, 200 mg, 0.67 mmol), TBTU (387 mg, 1.21 mmol), metil 4-amino-1-metil-1H-pirazol-3-karboksilata (208 mg, 1.34 mmol) i DIPEA (0.351 mL, 2.01 mmol) u NMP (8 mL) je mešan na 50°C preko noći. Reakcija je ugašena dodavanjem NaHCO3(zas, vod). Smeša je razblažena sa EtOAc i faze su odvojene. Organski sloj je ispran
1 2
slanim rastvorom, NH4Cl (sat, voden) i na kraju slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran i isparen ostavljajući jedinjenje iz podnaslova (292 mg) kao žutu čvrstu supstancu.
Korak 2 - Metil 1-metil-4-[({(1R,2R i 1S,2S) -2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1H-pirazol-3-karboksilna kiselina
[0333] Rastvor LiOH (1 M vod., 0.80 mL, 0.80 mmol) u vodi (1.0 mL) dodat je rastvor sirovog proizvoda iz koraka 1 (292 mg, 0.67 mmol) u MeOH (2.5 mL) i THF (2.5 mL).
Dobijeni rastvor je mešan na 50°C 1 h. Smeša je razblažena sa EtOAc i vodom i faze su razdvojene i vodena faza je isprana sa EtOAc. Kombinovani vodeni slojevi su zakišeljeni sa HCl (6 M) dok pH ne bude između 4-5 i proizvod je ekstrahovan u EtOAc. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran i isparen da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (155 mg, 55%) kao braonkasta čvrsta supstanca.
MS m/z 420 [M-H]-
Korak 3 - (1R,2R i 1S,2S) -1-Metil-4-[({2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1H-pirazol-3-karboksamid
[0334] Rastvor proizvoda iz koraka 2 (155 mg, 0.37 mmol), TBTU (213 mg, 0.66 mmol), amonijum hlorid (39.3 mg, 0.74 mmol) i DIPEA (0.193 ml, 1.10 mmol) u NMP (4 ml) mešana je na 50°C tokom 2 h. Reakcija je ugašena dodavanjem NaHCO3(zas, vod). Smeša je razblažena sa EtOAc i faze su odvojene. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, NH4Cl (sat, voden) i na kraju slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko Na2SO4, filtriran i isparen ostavljajući žutu čvrstu supstancu koja je prečišćena preparativnom HPLC reverzne faze na XBridge C18 koloni (5µm OBD 19×150 mm) korsteći gradijent 5-95% MeCN u H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2) puferskom sistemu na pH10 kao pokretna faza da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (73 mg, 48%).
<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 1.21 (d, 1H), 1.44 (t, 1H), 1.52 (td, 2H), 1.80 (dd, 2H), 2.01 (dd, 2H), 2.82 - 2.94 (m, 1H), 3.69 - 3.78 (m, 1H), 3.80 (s, 3H), 6.86 (t, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.66 (s, 1H), 7.85 (d, 1H), 7.98 (d, 2H), 8.03 (d, 2H), 8.07 (s, 1H), 9.77 (s, 1H), 13.09 (s, glavni rotamer), 13.50 (s, mali rotamer). Smeše rotamera u odnosu glavni:mali 1:0.25.
MS m/z 421.2 [M+H]<+>
Korak 4 - 1-Metil-4-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1H-pirazol-3-karboksamid
1
[0335] Enantiomeri (1R,2R i 1S,2S) -1-metil-4-[({2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksil}karbonil)amino]-1H-pirazol-3-karboksamida (50 mg, 0.12 mmol) razdvojeni su hiralnom hromatografijom na Chiralpak IA HPLC koloni (5µm, 250×20mm).
50 mg (8 mg/ mL u EtOH:DCM, 4:2) je ubrizgano i eluirano sa EtOH: DCM (4:2) pri brzini protoka od 15 mL/min i otkriven je na 245nm. Prvo eluirano jedinjenje je sakupljeno i ispareno da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.019g, 99.6% ee).
HRMS m/z 841.3857 [2M+H]<+>
Primer 2: 1-Metil-4-[({(1R,2R)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1H-pirazol-5-karboksamid
[0336]
[0337] 4-({[(1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)cikloheksil]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid (Međujedinjenje 2, 130 mg, 0.30 mmol), 1H-pirazol-3-ilborna kiselina (70 mg, 0.63 mmol), K2CO3(170 mg, 1.23 mmol) i Pd(dtbpf)Cl2(20 mg, 0.03 mmol) su umešani u dioksan (2.5 mL) i H20 (1.2 mL) i reakciona smeša je prečišćena sa azotom. Reakciona smeša je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 80°C tokom 45 minuta. NaHCO3(zas, vod) se dodaje i smeša je izvađena sa EtOAc. Organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora i rastvarač je isparen. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 20-65% acetonitrila u sistemu pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2) kao pokretna faza. Željene frakcije su sakupljene i rastvarač je isparen da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (36 mg, 28%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.19 - 1.43 (m, 3H), 1.50 (dd, 1H), 1.73 (dt, 1H), 1.8 - 1.97 (m, 2H), 2.10 (d, 2H), 2.84 - 2.96 (m, 1H), 4.02 (s, 3H), 6.66 (dd, 4H), 7.53 (s, 1H), 7.6 - 7.66 (m, 1H), 7.80 (d, 2H), 7.94 (t, 2H), 8.23 (s, 1H).
MS m/z 421 [M+H]<+>
Primer 3: 1-Metil-4-[({(1R,2R)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1H-pirazol-5-karboksamid
1 4
[0339] HCl u MeOH (6.0 mL, 7.20 mmol) se dodaje rastvoru 1-metil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]-karbonil}amino)-1H-pirazol-5-karboksamida (Međujedinjenje 4, 1.39 g, 2.68 mmol) u MeOH (230 mL).
Dobijeni rastvor je isparen u vakuumu na 5°C. Ostatak je rastvoren u 230 ml MeOH i ponovo uparen na 5°C, a sirovi proizvod je odmah prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-70% MeCN u H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2) puferski sistem kao pokretna faza. Željene frakcije su sakupljene i zamrznute, osušene i ponovo oformljene preparativnom SFC na Luna HILIC koloni (5 µm 250×30 ID mm) koristeći 25% MeOH/DEA (100/0.5) u CO2(g) (150 bara) kao pokretnu fazu. Željene frakcije su sakupljene, uparene i osušene smrzavanjem iz MeCN/H2O (1:1) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.71 g, 67%).
<1>H NMR (500 MHz, DMSO) δ 1.17 (dd, 1H), 1.29 - 1.39 (m, 1H), 1.42 - 1.57 (m, 2H), 1.72 -1.88 (m, 2H), 1.97 (d, 1H), 2.07 (d, 1H), 2.78 - 2.91 (m, 1H), 3.29 (s, 3H), 3.65 - 3.74 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 6.56 (s, 1H), 7.89 (d, 2H), 7.99 (d, 2H), 9.49 (s, 1H), 12.74 (s, 1H)
Primer 4: 1-Metil-4-[({(1R,2R)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1H-pirazol-3-karboksamid
[0340]
Korak 1 - 1-Metil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-1H-pirazol-3-karboksamid
1
[0341] 3-Metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (Međujedinjenje 3, 283 mg, 0.97 mmol) i degasirani rastvor K2CO3(89 mg, 0.65 mmol) u vodi (35 mL) je dodat rastvoru 4-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksil]-karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamida (Međujedinjenje 6, 70 mg, 0.16 mmol) u dioksanu (1 mL). Dodaje se Pd(dtbpf)Cl2(10.40 mg, 0.02 mmol) i dobijena smeša se zagreva u mikrotalasnom reaktoru na 85°C tokom 60 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana fiziološkim rastvorom (zas.). Vodena faza je izvađena dva puta sa EtOAc. Kombinovana organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora i koncentrovana. Ostatak je prečišćen fleš hromatografijom (100% EtOAc) da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (118 mg 141 %).
MS m/z 517 [M-H]-
Korak 2 - 1-Metil-4-[({(1R,2R)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1H-pirazol-3-karboksamid
[0342] HCl (1.2 M in MeOH) (1 mL, 1.20 mmol) je dodata u rastvor proizvoda iz koraka 1 (118 mg, 0.23 mmol) u MeOH (10 mL) i reakciona smeša je koncentrovana na 5°C. Ostatak je rastvoren u 10 ml MeOH i koncentrovan na 5°C . Jedinjenje je odmah prečišćeno preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-70% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (46 mg, 46 %).
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 1.19 (q, 1H), 1.35 - 1.56 (m, 3H), 1.75 (d, 2H), 1.81 (d, 1H), 1.95 (d, 1H), 2.01 (d, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.8 - 2.93 (m, 1H), 3.68 - 3.77 (m, 1H), 3.78 (s, 3H), 6.56 (s, 1H), 7.47 (s, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.89 (d, 2H), 8.00 (d, 2H), 8.05 (s, 1H), 9.75 (s, 1H), 12.75 (s, glavni rotamer), 13.08 (s, mali rotamer). Smeša rotamera u odnosu glavni:mali 1:0.19.
MS m/z 435.3 [M+H]<+>
Primer 5a: (1S,2S ili 1R,2R)-N-(3-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid i
Primer 5b: (1R,2R ili 1S,2S)-N-(3-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0343]
1
Korak 1 - (1R,2R i 1S,2S)-N-(3-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksankarboksamid
[0344] ((1R,2R i 1S,2S)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(3-cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)cikloheksankarboksamid (Međujedinjenje 7, 150 mg, 0.36 mmol) i 3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (Međujedinjenje 3, 106 mg, 0.36 mmol) su rastvoreni u dioksanu:DMF (2 mL, 95:5). Dodati su Pd(dtbpf)Cl2(7.0 mg, 11 umol) i rastvor K2CO3(200 mg, 1.44 mmol) u vodi (1.5 mL), a reakciona smeša je evakuisana i pročišćena tri puta azotom, a zatim zagrevana na 80°C tokom 45 minuta.
Reakciona smeša je direktno korišćena u koraku 2.
Korak 2 - (1R,2R i 1S,2S)-N-(3-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0345] HCl (2 M u dioksanu:vodi, 1:1, 1 mL) je dodat u reakcionu smešu iz Koraka 1 i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 15 minuta. Reakciona smeša je koncentrovana i ostatak je razblažen sa EtOAc i ispran sa NaHCO3(zas. vod.). Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc i kombinovana organska faza je isprana sa NH4Cl (vod.) i slanim rastvorom. Organski sloj je osušen korišćenjem separatora faza i rastvarač je uklonjen u vakuumu. Jedinjenje je prečišćeno preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 20-65% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), kao pokretne faze da bi se dobila jedinjenja iz podnaslova Koraka 2 (102 mg, 68%) kao bele čvrste supstance.
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 1.1 - 1.23 (m, 1H), 1.33 (t, 1H), 1.37 - 1.58 (m, 2H), 1.72 -1.80 (m), 1.83 (d, 1H), 1.97 (d, 1H), 2.07 (d, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.88 - 3.01 (m, 1H), 3.74 (t, 1H), 3.81 (s, 3H), 6.56 (s, 1H), 7.88 (d, 2H), 8.00 (d, 2H), 8.10 (s, 1H), 10.41 (s, 1H), 12.75 (s, 1H)
MS m/z 417.1 [M+H]<+>
1
Korak 3 - (1R,2R ili 1S,2S)-N-(3-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid i (1S,2S ili 1R,2R)-N-(3-cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheksankarboksamid
[0346] Enantiomeri (1R,2R i 1S,2S)-N-(3-cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid (77 mg, 0.18mmol) razdvojeni su hiralnom hromatografijom na Chiralpak AD koloni (5µm, 250x20mm).52 mg (26 mg/mL u EtOH:DCM, 2:1) ubrizgan je i eluiran sa heptanom:EtOH (30:70) sa protokom od 18 mL/min i detektovan na 260 nm. Prvo eluirano jedinjenje je sakupljeno i ispareno dajući Primer 5a (31 mg, 40%, 98.2% ee).
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 1.26 - 1.6 (m, 3H), 1.72 (td, 1H), 1.83 - 1.98 (m, 2H), 2.11 (td, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.92 (ddd, 1H), 3.68 - 3.79 (m, 1H), 3.83 (s, 3H), 5.31 (s, 1H), 6.44 (s, 1H), 7.80 - 7.86 (m, 3H), 7.98 - 8.03 (m, 3H)
Optičke rotacije: -138.9° (1 g/100 mL u MeCN, 589 nm, 20°C).
[0347] Drugo eluirano jedinjenje je sakupljeno i ispareno dajući Primer 5b (30 mg, 39%, 98.6% ee).
[0348] Optičke rotacije: 136.8° (1 g/100 mL u MeCN, 589 nm, 20°C).
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 1.27 - 1.56 (m, 3H), 1.65 - 1.76 (m, 1H), 1.85 - 1.97 (d, 2H), 2.11 (t, 2H), 2.39 (s, 3H), 2.87 - 2.95 (m, 1H), 3.69 - 3.78 (m, 1H), 3.84 (s, 3H), 5.31 (s, 2H), 6.44 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.83 (d, 2H), 7.98 - 8.04 (m, 3H)
Primer 6: (1R,2R)-2-[4-(3-Metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-N-(1H-pirazol-4-il)cikloheksankarboksamid
[0349]
Korak 1 - (1R,2R)-2-{4-[3-Metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}-N-(1H-pirazol-4-il)cikloheksankarboksamid
[0350] (1R,2R)-2-{4-[3-Metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}-cikloheksankarboksilna kiselina (Međujedinjenje 8, 0.167 g, 0.42 mmol) je dodata smeši
1
1H-pirazol-4-amina (0.074 g, 0.89 mmol), T3P (50% u EtOAc, 0.37 mL, 0.63 mmol) i Et3N (0.23 mL, 1.68 mmol) u EtOAc (8 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. DMF (1 mL) je dodata i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći.. Dodat je 1H-pirazol-4-amin (0.040 g), T3P (50% u EtOAc, 0.150 mL, 0.25 mmol) i DMF (2 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je isprana dva puta sa NaHCO3(zas. vod.). Organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu kako bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.194 g 100 %).
MS m/z 460.3 [M-H]-
Korak 2 - (1R,2R)-2-[4-(3-Metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-N-(1H-pirazol-4-il)cikloheksankarboksamid
[0351] HCl (2 M HCl u dioksanu/vodi, 1:1, 2 ml) je dodat jedinjenju iz koraka 1 (194 mg, 0.42 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je isprana sa NaHCO3(zas. vod.). Vodena faza je ekstrahovana jednom sa EtOAc i kombinovana organska faza je osušena preko MgSO4, filtrirana i koncentrovana in vacuo. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (5µm 19×150 OBD mm) korišćenjem gradijenta od 5-95% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (52 mg, 33%).
<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 1.08 - 1.2 (m, 1H), 1.27 - 1.37 (m, 1H), 1.40 - 1.54 (m, 2H), 1.71 - 1.79 (m, 1H), 1.79 - 1.86 (m, 1H), 1.92 - 1.98 (m, 1H), 1.99 - 2.07 (m, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.75 - 2.83 (m, 1H), 3.68 - 3.76 (m, 1H), 6.56 (s, 1H), 7.38 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.90 (d, 2H), 7.99 (d, 2H), 9.99 (s, 1H), 12.45 (s, 1H), 12.75 (s, major rotamer), 13.10 (s, minor rotamer). Smeše rotamera u odnosu glavni:mali 1:0.18.
MS m/z 378.2 [M+H]<+>
Primer 8: (1R,2R)-N-[1-Metil-5-(metilsulfonil)-1H-pirazol-4-il]-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0352]
1
[0353] (1H-Pirazol-3-il)borna kiselina (108 mg, 0.97 mmol), Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (105 mg, 0.13 mmol) i rastvor K2CO3(266 mg, 1.92 mmol) u vodi (1.5 mL) je dodat rastvoru (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-[1-metil-5-(metilsulfonil)-1H-pirazol-4-il]cikloheksankarboksamida (Međujedinjenje 18, 300 mg, 0.66 mmol) u dioksanu (10 mL) pod atmosferom azota.
Reakciona smeša je mešana na 100°C tokom 1.5 h u atmosferi azota. Rastvor vode/EtOAc (1:10) je dodat u reakcionu smešu, a čvrste supstance su filtrirane. Organski sloj je ispran vodom i slanim rastvorom, osušena iznad Na2SO4, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom TLC (95% DCM u MeOH). Jedinjenje je prečišćeno preparativnom HPLC na Sunfire C18 koloni (19x150 mm) korišćenjem gradijenta od 5-40% MeCN u sistemima pufera H2O/HCO2H (99.9/5/0.1), kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenja iz naslova (120 mg, 41 %) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1.11 - 1.23 (m, 1H), 1.53-1.32 (m, 3H), 1.73 - 1.85 (m, 2H), 1.94 (d, 1H), 2.07 - 2.11 (m, 1H), 2.86 - 2.93 (t, 1H), 3.41 (s, 3H), 3.71-3.76 (t, 1H), 3.99 (s, 3H), 6.83 (s, 1H), 7.73 (s, 1H), 7.83 - 8.13 (m, 5H), 9.19 (s, 1H), 13.07 (s, major rotamer), 13.51 (s, minor rotamer). Smeša rotamera u odnosu glavni:mali 1:0.23.
MS m/z 456 [M+H]<+>
Primer 9: (1R,2R)-N-[3-(Difluorometoksi)-1-metil-1H-pirazol-4-il]-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0354]
11
[0355] Rastvor K2CO3(121 mg, 0.88 mmol) u vodi (2 mL), 1H-pirazol-3-ilborne kiseline (74 mg, 0.66 mmol) i Pd(dppf)Cl2*DCM (72 mg, 0.09 mmol) su dodati rastvoru (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-[3-(difluorometoksi)-1-metil-1H-pirazol-4-il]cikloheksankarboksamida (Međujedinjenje 21, 200 mg, 0.44 mmol) u dioksanu (10 mL) i reakciona smeša je mešana na 80°C 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom, a ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (10%→50% EtOAc u naftnom etru), a zatim preparativnom HPLC na T3 koloni, koristeći MeCN u H2O/HCO2H (99.9/0.1) kao pokretna faza da se dobije jedinjenje iz naslova (125 mg, 64%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400MHz, CDCl3,): δ1.26 - 2.10 (m, 8H); 2.86 (t, 1H), 3.66 (s, 3H), 3.75 (t, 1H), 6.26 (br, 1H), 6.72 (s, 1H), 6.78 (t,1H), 7.25 (s, 3H), 7.66 (s, 1H), 7.75 (s, 1H), 7.87 (d, 2H), 8.05 (d, 2H)
MS m/z 444 [M+H]<+>
Primer 10: (1R,2R)-2-[4-(3-Metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-N-(1-metil-3-sulfamoil-1H-pirazol-4-il)cikloheksankarboksamid
[0356]
[0357] (5-Metil-1H-pirazol-3-il)borna kiselina hidrohlorid (Međujedinjenje 31, 209 mg, 1.29 mmol), Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (70 mg, 0.09 mmol) i K2CO3(206 mg, 1.49 mmol) su dodati rastvoru (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-(1-metil-3-sulfamoil-1H-pirazol-4-il)ciklohesankarbosamida (Međujedinjenje 25, 200 mg, 0.43 mmol) u smeši dioksana H2O (15 mL) pod atmosferom azota i reakciona smeša je mešana na 50°C tokom 3 sata.
Reakciona smeša je ekstrahovana dva puta sa EtOAc i kombinovani organski sloj je ispran tri puta vodom, osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod vakuumom. Sirovi ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 OBD koloni (5 µm 150×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 18-90% MeCN u NH4HCO3(0.010 M, vod.) puferskom sistemu kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (54 mg, 27%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.10- 1.26 (m, 1H), 1.37-1.55 (m, 3H), 1.77-1.87 (m, 2H), 1.96-2.05 (m, 2H), 2.30 (s, 3H), 2.51 (t, 1H), 2.93 (t, 1H), 3.80 (s, 3H), 6.57 (s, 1H), 7.58 (s, 2H), 7.92 (d, 2H), 8.03 (d, 2H), 8.12 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 12.74 (s, major rotamer), 13.1 (s, minor rotamer). Unknown ratio of rotamers.
MS m/z 471 [M+H]<+>
Primer 11: (1R,2R)-N-(2,3-Dihidropirazolo[5,1-b][1,3]oksazol-7-il)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0358]
[0359] K2CO3(132 mg, 0.96 mmol) i Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (78 mg, 0.10 mmol) su dodati rastvoru (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-(2,3-dihidropirazolo[5,1-b][1,3]oksazol-7-il)cikloheksankarbosamida (Međujedinjenje 30, 200 mg, 0.48 mmol) i (5-metil-1H-pirazol-3-il)borne kiseline (60 mg, 0.48 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL) i vodi (1 mL) na sobnoj temperaturi i reakciona smeša je zagrevana na 80°C tokom 5 h u atmosferi azota. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i ostatak je rastvoren u EtOAc. Organski sloj je ispran dva puta sa vodom, osušena preko Na2SO4, filtrirana i isparena. Ostatak je prečišćen preparativnom TLC (9% MeOH u DCM), zatim C18 fleš hromatografijom (0%→50% MeCN u vodi) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (60 mg, 30%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1.20-1.01 (m, 1H).1.41 - 1.49 (m, 3H), 1.73 - 1.82 (m, 2H), 1.90 - 2.03 (m, 2H), 2.50(s, 3H), 2.78(t, 1H), 3.68(t, 1H), 4.18(t, 2H), 4.99(t, 2H), 6.56(s, 1H), 7.21(s, 1H), 7.89(d, 2H), 7.98(d, 2H), 9.35(s, 1H), 12.75(s, major rotamer), 13.1 (s, minor rotamer). Nepoznati odnos rotamera.
MS m/z 420 [M+H]<+>
Primer 12: (1R,2R ili 1S,2S)-N-(3-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0360]
Korak 1 - (1R,2R i 1S,2S)-N-(3-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0361] (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(3-cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)cikloheksankarboksamid (Međujedinjenje 7, 150 mg, 0.36 mmol) je rastvoren u dioksanu (1.5 mL).1H-Pirazol-3-ilborna kiselina (73 mg, 0.65 mmol), Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (29 mg, 0.04 mmol) i rastvor K2CO3(0.065 mL, 1.1 mmol) u vodi (1.5 mL) dodati su i reakciona smeša je evakuisana i pročišćena azotom tri puta, a zatim je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 60°C tokom 30 minuta, a zatim na 80°C tokom 50 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je isprana dva puta fiziološkim rastvorom (zas.). Vodena faza je izvađena dva puta sa EtOAc. Kombinovana organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora i koncentrovana, a ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250x19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 20-65% MeCN u H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2) puferskog sistema kao pokretne faze da bi se dobila jedinjenja podnaslova (45 mg 31%).
<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 1.16 (qd, 1H), 1.27 - 1.38 (m, 1H), 1.39 - 1.55 (m, 2H), 1.72 - 1.79 (m, 1H), 1.82 (d, 1H), 1.95 (d, 1H), 2.02 (d, 1H), 2.28 (s, 3H), 2.74 - 2.84 (m, 1H), 3.65 - 3.78 (m, 1H), 6.56 (s, 1H), 7.40 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.89 (d, 2H), 7.99 (d, 2H), 9.99 (s, 1H), 12.45 (s, 1H), 12.75 (s, rotamer), 13.09 (s, rotamer)
MS m/z 403.1 [M+H]<+>
Korak 2 - (1R,2R ili 1S,2S)-N-(3-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0362] Enantiomeri iz koraka 1 (30 mg, 0.07 mmol) su razdvojeni hiralnom hromatografijom na Chiralpak AD koloni (5µm, 250×20mm).30 mg (30 mg/mL u EtOH:DCM, 91:9) ubrizgan je i eluiran sa heptanom:EtOH (30:70) sa protokom od 18 mL/min i detektovan na 260 nm. Drugo eluirano jedinjenje je sakupljeno i ispareno da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (11 mg, 37%, 99.9% ee).
11
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 1.25 - 1.45 (m, 2H), 1.50 (ddd, 1H), 1.69 (qd, 1H), 1.84 - 1.95 (m, 2H), 2.05 - 2.17 (m, 2H), 2.96 (ddd, 1H), 3.73 - 3.83 (m, 4H), 6.70 (d, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.87 (d, 2H), 7.99 (s, 1H), 8.04 (d, 2H), 8.22 (s, 1H).
[0363] Optičke rotacije: -153.8° (1 g/100 mL u MeCN, 589 nm, 20°C).
Primer 13: (1R,2R)-2-[4-(3-Metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-N-(1-metil-5-sulfamoil-1H-pirazol-4-il)cikloheksankarboksamid
[0364]
[0365] PdCl2(dppf)-DCM (4.87 g, 5.97 mmol) je dodat smeši (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-(1-metil-5-sulfamoil-1H-pirazol-4-il)karboksilata (Međujedinjenje 37, 28 g, 59.7 mmol), (5-metil-1H-pirazol-3-il)borna kiselina (15.02 g, 119.31 mmol) i natrijum karbonat (25.3 g, 238.63 mmol) u dioksanu (500 mL) i vodi (125 mL) pod atmosferom azota i reakciona smeša je mešana na 85°C 4 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom i razblažena sa EtOAc i organska faza je isprana fiziološkim rastvorom (zas., vod.), Osušena preko Na2SO4, filtrirana i isparena. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom na koloni C18 (32µm, 400 g), korišćenjem gradijenta od 0→40% MeCN u vodi kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (12.73 g, 45.3%) kao smeđa čvrsta supstanca.
<1>H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.13 - 1.22 (m, 1H), 1.36 - 1.52 (m, 3H), 1.74 - 1.84 (m, 2H), 1.96 - 2.08 (m, 2H), 2.22 (d, 3H), 2.84 - 2.90 (m, 1H), 3.35 - 3.75 (m, 1H), 3.92 (d, 3H), 6.57 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.89 - 7.96 (t, 2H), 8.01 - 8.16 (m, 4H), 8.82 (s, 1H), 12.78 (s, 1H). MS m/z 471 [M+H]<+>
Primer 14: (1R,2R i 1S,2S)-N-(5-Metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0366]
Korak 1 - (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)-N-(5-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)cikloheksankarboksamid
[0367] (1R,2R i 1S, 2S)-2-(4-Bromobenzoil)cikloheksankarboksilna kiselina (59 mg, 0.19 mmol), 3-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-amin hidrohlorid (61.3 mg, 0.37 mmol) i Et3N (105 µl, 0.76 mmol) su suspendovani u EtOAc (2.1 mL). T3P (50% in EtOAc, 135 µL, 0.23 mmol) je dodat i reakciona smeša je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 100°C 20 minuta. Smeša je podeljena između EtOAc i NaHCO3(zas., vod.), a organska faza je isprana sa NH4Cl (zas., vod.) i slanim rastvorom. Organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora i koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (63 mg, 79%).
MS m/z 420 [M+H]<+>
Korak 2 - (1R,2R i 1S,2S)-N-(5-metoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0368] K2CO3(83 mg, 0.60 mmol) i Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (12 mg, 0.01 mmol) su dodati rastvoru proizvoda iz koraka 1 (63 mg, 0.15 mmol) i 1H-pirazol-3-ilborne kiseline (25 mg, 0.22 mmol) u dioksanu (0.7 mL) i vodi (0.7 mL). Reakciona smeša je evakuisana i pročišćena azotom tri puta, a zatim je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 100°C tokom 30 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i vodom i vodena faza je ekstrahovana jednom sa EtOAc. Kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom, NH4C1 (zas., vod.), slanim rastvorom, osušen pomoću faznog separatora i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (5 µm 150×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 10-95% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (11 mg 18%).
<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 1.1 - 1.2 (m, 1H), 1.26 - 1.35 (m, 1H), 1.36 - 1.44 (m, 1H), 1.45 - 1.54 (m, 1H), 1.72 - 1.83 (m, 2H), 1.91 - 1.97 (m, 1H), 2 - 2.06 (m, 1H), 2.91 - 2.97
11
(m, 1H), 3.56 (s, 3H), 3.69 - 3.75 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 6.85 (d, 1H), 7.64 (s, 1H), 7.83 (s, 1H), 7.92 - 8.07 (m, 4H), 9.44 (s, 1H), 13.08 (s, 1H).
MS m/z 408.2 [M+H]<+>
Primer 15: (1R,2R)-N-[5-(Difluorometil)-1H-pirazol-4-il]-2-[4-(5-metil-1H-pirazol-3-il]benzoil]cikloheksankarboksamid
[0369]
Korak 1 - (1R,2R)-N-[5-(Difluorometil)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H pirazol-4-il]-2-[4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0370] (5-Metil-1H-pirazol-3-il)borna kiselina (237 mg, 1.88 mmol), K2CO3(650 mg, 4.70 mmol), i Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (128 mg, 0.16 mmol) 0.16 mmol) su dodati rastvoru (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-[5-(difluorometil)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il]cikloheksankarboksamida (Međujedinjenje 39, 800 mg, 1.57 mmol) u smeši dioksana i vode (4:1, 15 mL) u atmosferi azota i reakciona smeša je mešana na 50°C tokom 2 sata. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je isprana vodom, slanim rastvorom (zas.), osušena iznad Na2SO4i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela (33% EtOAc u naftnom etru) da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (620 mg, 77%) kao žuta supstanca.
MS m/z 512 [M+H]<+>
Korak 2 - (1R,2R)-N-[5-(Difluorometil)-1H-pirazol-4-il]-2-[4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0371] HCl (3M in MeOH, 5.9 mL) je dodat u rastvor proizvoda iz koraka 1 (600 mg, 1.17 mmol) u MeOH (30 ml) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. pH vrednost reakcione smeše je prilagođena na ~8 koristeći NaHCO3(vod.), i reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc. Organski sloj je ispran slanim rastvorom (zas.), osušen iznad Na2SO4i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge Prep C18 OBD koloni (5 µm, 150×19 ID mm) korišćenjem gradijenta 25-55% MeCN u vodi
11
(0.03% NH4OH) kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (69 mg, 14%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H-NMR (300 MHz, DMSO-d6) δ 1.34 - 1.38 (m, 1H), 1.41 - 1.53 (m, 3H), 1.73 - 1.84 (m, 2H), 1.94 - 2.07 (m, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.93 - 2.96 (m, 1H), 3.69 - 3.76 (m, 1H), 6.56 (s, 1H), 6.99 (t, J=54.0 Hz, 1H), 7.89 - 8.07 (m, 5H), 9.67 (s, 1H), 12.74 (s, 1H), 13.04 (s, 1H).
MS m/z 428 [M+H]<+>
Primer 18a: (1R,2R ili 1S,2S)-N-(5-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid i
Primer 18b: (1S,2S ili 1R,2R)-N-(5-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0372]
Korak 1 - (1R,2R i 1S,2S)-N-(5-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0373] 1H-Pirazol-3-ilborna kiselina (73 mg, 0.65 mmol), Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (8.8 mg, 10.8 µmol) i rastvor K2CO3(149 mg, 1.08 mmol) u vodi (1.5 mL) su dodati smeši (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)-N-(5-cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)cikloheksankarboksamida (Međujedinjenje 43, 150 mg, 0.36 mmol) u dioksanu (1.5 mL) i reakciona smeša je evakuisana i pročišćena azotom i zatim zagrevana na 80°C 3.5 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je isprana dva puta fiziološkim rastvorom (zas.).
Vodena faza je ekstrahovana dva puta sa EtOAc i kombinovana organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na Waters Sunfire C18 OBD koloni (5 µm, 19×150 mm ID) korišćenjem gradijenta od 5-95% MeCN u HCO2H (0.1M, vod.) pufernom sistemu kao pokretne faze. Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane i rastvorene u EtOAc.
Organska faza je isprana fiziološkim rastvorom, osušena upotrebom separatora faza i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (46 mg, 32%).
11
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 1.1 - 1.23 (m, 1H), 1.33 (t, 1H), 1.39 - 1.62 (m, 2H), 1.80 (dd, 2H), 1.94 - 2.02 (m, 1H), 2.06 (d, 1H), 2.83 - 2.98 (m, 1H), 3.69 - 3.79 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 6.84 (d, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.9 - 8.13 (m, 4H), 10.52 (s, 1H), 13.08 (s, 1H) MS m/z 403 [M+H]<+>
Korak 2 - (1R,2R ili 1S,2S)-N-(5-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid (18a) i (1S,2S ili 1R,2R)-N-(5-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid (18b)
[0374] Enantiomeri iz koraka 1 (34 mg, 0.08 mmol) su razdvojeni hiralnom hromatografijom na Chiralpak AD koloni (5µm, 250×20mm).34 mg (17 mg/mL u EtOH) ubrizgan je i eluiran sa heptanom:EtOH (30:70) sa protokom od 18 mL/min i detektovan na 260 nm. Prvo eluirano jedinjenje je sakupljeno i ispareno dajući Primer 18a (13 mg, 38%, 98% ee).
[0375] Optičke rotacije: -131° (1 g/100 mL u MeCN, 589 nm, 20°C).
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 1.23 - 1.43 (m, 2H), 1.51 (ddd, 1H), 1.76 (qd, 1H), 1.83 - 1.95 (m, 2H), 2.06 - 2.16 (m, 2H), 2.92 - 3.01 (m, 1H), 3.77 - 3.86 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 6.70 (d, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.83 - 7.91 (m, 3H), 8.04 (d, 2H), 8.37 (s, 1H).
[0376] Drugo eluirano jedinjenje je sakupljeno i ispareno dajući Primer 18b (13 mg, 38%, 96.0% ee).
[0377] Optičke rotacije: 127° (1 g/100 mL u MeCN, 589 nm, 20°C).
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 1.22 - 1.44 (m, 2H), 1.51 (ddd, 1H), 1.76 (qd, 1H), 1.92 (d, 2H), 2.02 - 2.22 (m, 2H), 2.96 (td, 1H), 3.73 - 3.87 (m, 1H), 3.92 (s, 3H), 6.70 (d, 1H), 7.67 (d, 1H), 7.82 - 7.93 (m, 3H), 8.04 (d, 2H), 8.32 (s, 1H)
Primer 19: 1-Etil-4-[({(1R,2R)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1H-pirazol-5-karboksamid
[0378]
11
[0379] HCl u MeOH (1.2M, 0.3 mL, 0.36 mmol) se dodaje rastvoru 1-etil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]-karbonil}amino)-1H-pirazol-5-karboksamida (Međujedinjenje 44, 150 mg, 0.28 mmol) u MeOH (20 mL). Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu na 18°C. Ostatak je rastvoren u MeOH (25 mL), a zatim koncentrovan na 16°C . Sirovi proizvod je odmah prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250x19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-70% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (78 mg 62%).
<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 1.12 - 1.22 (m, 1H), 1.25 (t, 3H), 1.35 (t, 1H), 1.42 - 1.57 (m, 2H), 1.76 (d, 2H), 1.83 (d, 1H), 1.97 (d, 1H), 2.08 (d, 1H), 2.75 - 2.96 (m, 1H), 3.69 (t, 1H), 4.28 (q, 2H), 6.56 (s, 1H), 7.38 (s, 2H), 7.89 (d, 2H), 8.00 (d, 2H), 9.48 (s, 1H), 12.74 (s, major rotamer), 13.09 (minor rotamer) Smeša rotamera u odnosu glavni:mali 1:0.12 MS m/z 449.3 [M+H]<+>
Primer 20: N,1-Dimetil-4-[({(1R,2R i 1S,2S)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1H-pirazol-3-karboksamid
[0380]
Korak 1 - 4-({[(1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)cikloheksil]karbonil}amino)-N-1-metilpirazol-3-karboksamid
[0381] T3P (50% u EtOAc, 268 µL, 0.45 mmol) i Et3N (0.094 mL, 0.67 mmol) su dodati smeši (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (70 mg, 0.22 mmol) i 4-
11
amino-N,1-dimetil-1H-pirazol-3-karboksamid hidrohlorida (86 mg, 0.45 mmol) u EtOAc (2 mL) i reakciona smeša je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 150°C tokom 45 minuta. T3P (50% in EtOAc, 268 µL, 0.45 mmol) i Et3N je dodat i reakciona smeša je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 150°C 20 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je isprana sa NaHCO3(vod.) i slanim rastvorom. Organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora i koncentrovana da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (87 mg, sirovo).
Korak 2 - N,1-Dimetil-4-[({(1R,2R)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1H-pirazol-3-karboksamid
[0382] Rastvor proizvoda iz koraka 1 (86 mg, 0.19 mmol) u DME (1.5 mL) i etanolu (0.5 mL) je dodat Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (16 mg, 0.02 mmol) i 1H-pirazol-3-ilbornoj kiselini (21.64 mg, 0.19 mmol) pod atmosferom azota. Dodat je kalijum fosfat (vod., 12M, 0.047 mL, 0.58 mmol) u vodi (0.5 mL) i reakciona smeša je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 140°C tokom 15 minuta. 1H-pirazol-3-karboksamid (16 mg, 0.035 mmol) i Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (10 mg, 0.012 mmol) dodati u reakcionu smešu i grejani u mikrotalasnom reaktoru na 140°C 10 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, a organska faza je isprana sa vodom, osušena upotrebom faznog separatora i koncentrovana u vakuumu. Sirovi ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (5 µm 19x150 mm ID) korišćenjem gradijenta od 10-95% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), na ph10 kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (23 mg 27%).
<1>H NMR (600 MHz, DMSO-d6) δ 1.20 (q, 1H), 1.43 (t, 1H), 1.52 (q, 2H), 1.72 - 1.88 (m, 2H), 1.97 (d, 1H), 2.04 (d, 1H), 2.77 (d, 3H), 2.84 - 2.94 (m, 1H), 3.74 (t, 1H), 3.80 (s, 3H), 6.86 (s, 1H), 7.85 (s, major rotamer), 7.91 (s, minor rotamers), 7.97 (d, major rotamer), 8 -8.1 (m, 3H), 8.28 (d, 1H), 9.80 (s, 1H), 13.09 (s, major rotamer), 13.53 (s, minor rotamer). Smeše rotamera u odnosu glavni:mali 1:0.21.
MS m/z 422.2 [M+H]<+>
Primer 21: N,1-Dimetil-4-[({(1R,2R)-2-[4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1H-pirazol-5-karboksamid
[0383]
12
[0384] Ledeno hladna HCl (2M u dioksanu/vodi, 1:1, 2 mL, 4.00 mmol) je dodata u vidu kapi rastvoru N,1-dimetil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-1H-pirazol-5-karboksamida (Međujedinjenje 47, 0.069 g, 0.13 mmol) u dioksanu (3 mL) na 0°C. Reakciona smeša je ostavljena da dostigne sobnu temperaturu i zatim mešana na istoj 50 minuta. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu na 10-15°C. Ostatak je isparen pod vakuumom na 10-15°C sa dioksanom (3 × 3 ml). Dodat je metilamin (2 M u THF, 1 ml) i reakciona smeša je isparena. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 10-60% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.044 g 75.0 %).<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ 1.26 - 1.46 (m, 2H), 1.52 (q, 1H), 1.68 - 1.79 (m, 1H), 1.91 (dd, 2H), 2.12 (t, 2H), 2.36 (s, 3H), 2.72 - 2.91 (m, 4H), 3.7 - 3.82 (m, 1H), 4.01 (s, 3H), 6.43 (s, 1H), 7.12 (d, 1H), 7.41 (s, 1H), 7.83 (d, 2H), 7.88 (s, 1H), 7.98 (d, 2H).
MS m/z 447.3 [M-H]-
Primer 22: 5-Metil-4-[({(1R,2R)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1H-pirazol-3-karboksamid
[0385]
[0386] HCl (3.8M u vodi, 145 µL, 0.55 mmol) je dodata rastvoru 5-metil-4-({[(1R,2R)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]-karbonil}amino)-1H-pirazol-3-karboksamida (Međujedinjenje 48, 190 mg, 0.37 mmol) u smeši 1,4-dioksana (3 mL) i vode (0.75 mL). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 2.5 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i vodom, a organska faza je isprana sa NaHCO3(zas. vod.), slanim rastvorom, osušena upotrebom faznog separatora i koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnim SFC na Viridis-2-EP koloni (5 µm, 30x250 mm ID) koristeći MeOH/DEA (100:0.5) u CO2(g) kao pokretnu fazu, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (94 mg, 59.1 %)
<1>H NMR(600 MHz, DMSO-d6) δ 1.14 - 1.24 (m, 1H), 1.29 - 1.58 (m, 3H), 1.71 - 2.04 (m, 6H), 2.12 - 2.33 (m, 4H), 2.78 - 2.92 (m, 1H), 3.59 - 3.77 (m, 1H), 6.64 (d, 1H), 7.21 (d, 1H), 7.76 - 8.11 (m, 4H), 9.30 (d, 1H), 12.66 - 13.18 (m, 2H)
Primer 23: 4-[({(1R,2R)-2-[4-(1H-Pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}karbonil)amino]-1H-pirazol-5-karboksamid
[0387]
[0388] HCl (1.25 M u MeOH, 0.2 mL, 0.25 mmol) se dodaje rastvoru 4-({[(1R,2R)-2-{4-[1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-1H-pirazol-5-karboksamida (Međujedinjenje 4, 90 mg, 0.18 mmol) u MeOH (10 mL). Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu na 19°C. Ostatak je rastvoren u MeOH (10 mL), i koncentrovan u vakuumu na 17°C . Ostatak je odmah prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-80% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (56 mg 75%).
<1>H NMR (500 MHz, DMSO) δ 1.11 - 1.27 (m, 1H), 1.34 - 1.59 (m, 3H), 1.69 - 1.84 (m, 2H), 1.99 (dd, 2H), 2.78 - 2.92 (m, 1H), 3.67 - 3.78 (m, 1H), 6.84 (d, 1H), 7.39 - 8.16 (m, 8H), 9.76 (s, 1H), 13.07 (s, 2H), 13.51 (s, 0H).
MS m/z 405.3 [M-H]-
Primer 24: (1R,2R)-N-(4-Okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo [1,5-α]pirazin-3-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0389]
[0390] HCl (3.8M u vodi, 5 mL, 19 mmol) je dodata u vidu kapi rastvoru (1R,2R)-N-(4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-α]pirazin-3-il)-2-{4-[1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksankarboksamida (Međujedinjenje 50, 0.46 g, 0.89 mmol) u dioksanu (5 mL) ohlađena u ledenoj kupki i reakciona smeša je mešana tokom hlađenja tokom 1 sata. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i NaHCO3(zas., vod.) i vodena faza je ekstrahovana četiri puta sa EtOAc. Kombinovana organska faza je isprana sa NaHCO3(zas., vod.), osušena pomoću faznog separatora i isparena u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250x50 ID mm) korišćenjem gradijenta od 15-55% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.298g 77%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.14 - 1.56 (m), 1.6 (m, 2H), 1.88 (m, 2H), 2.12 (t, 2H), 2.95 (m, 1H), 3.69 (m, 3H), 4.30 (t, 2H), 6.70 (d, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.86 (d, 2H), 8.05 (d, 2H), 8.15 (s, 1H), 8.82 (s, 1H)
Primer 25 :(1R,2R)-N-[1-Metil-5-(metilsulfamoil)-1H-pirazol-4-il]-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0391]
[0392] HCl (1.25N u MeOH, 0.76 mL) je dodata rastvoru (1R,2R)-N-[1-metil-5-(metilsulfamoil)-1H-pirazol-4-il]-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksankarboksamid (Međujedinjenje 56, 180 mg, 0.32 mmol) u MeOH (5 mL) na 0°C i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge Prep
12
C18 OBD koloni (5 µm, 19×150 mm) korišćenjem gradijenta 17-55% MeCN u vodi (NH4OH 0.03%) kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (67 mg, 44%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ 1.05- 1.29 (1H, m), 1.29- 1.60 (3H, m),1.69- 1.84 (2H, m),1.94- 2.07 (2H, m),2.25 (3H, s), 2.87-2.95 (1H, m), 3.67-3.74 (1H, m), 3.93 (3H, s), 6.57 (1H, s), 7.80 (1H, s), 7.87-7.90 (2H, m), 7.98-8.01 (4H, m), 8.08-8.13 (1H, m), 8.84 (1H, s), 12.75 (1H,bs)
MS m/z 485 [M+H]<+>
Primer 26 :(1R,2R)-N-(1-Metil-5-(metilsulfamoil)-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0393]
[0394] 1H-Pirazol-5-ilborna kiselina hidrohlorid (108 mg, 0.73 mmol), K2CO3(353 mg, 2.56 mmol) i Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (104 mg, 0.13 mmol) su dodati rastvoru (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-(1-metil-3-sulfamoil-1H-pirazol-4-il)ciklohesankarbosamida (Međujedinjenje 25, 300 mg, 0.64 mmol) u smeši dioksana/H2O (1:1,15 mL) i reakciona smeša je zagrevana na 70°C tokom 3 sata u atmosferi azota.
Reakciona smeša je ekstrahovana sa EtOAc i kombinovani organski sloj je ispran vodom, osušen preko Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge Prep C18 OBD koloni (5 µm, 19x150 mm) korišćenjem gradijenta 19-55% MeCN u vodi (NH4OH 0.03%) kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (71 mg, 24%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (300 MHz, DMSO-d6): δ1.10- 1.26 (m, 1H), 1.37-1.56 (m, 3H), 1.77-1.87 (m, 2H), 1.97-2.09 (m, 2H), 2.89-2.96 (m, 1H), 3.72-3.80 (t, 4H), 6.86 (d, 1H), 7.57 (s, 2H), 7.85-8.12 (m, 6H), 13.07 (s, 1H)
MS m/z 457 [M+H]<+>
Primer 27: (1R,2R)-N-[5-(Dimetilsulfamoil)-1-metil-1H-pirazol-4-il]-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0395]
[0396] Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (43 mg, 0.06 mmol), K2CO3(108 mg, 0.78 mmol, 3.00 equiv) i voda (1 mL) su dodati rastvoru (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-[5-(dimetilsulfamoil)-1-metil-1H-pirazol-4-il]cikloheksankarboksamida (Međujedinjenje 61, 130 mg, 0.26 mmol) i 1H-pirazol-5-ilbornoj kiselini (59 mg, 0.53 mmol) u 1,4-dioksanu (10 mL) i reakciona smeša je mešana na 85°C 15 h. Smeša je razblažena sa EtOAc i organski sloj je koncentrovan u vakuumu. Ostatak je prečišćen preparativnom TLC (50% MeOH u DCM), zatim C18 hromatografijom na koloni (20% MeCN u vodi) da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (18.7 mg, 15%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, CD3OD) δ 1.72-1.28 (m, 4H), 1.90 (t, 2H), 2.11 (t, 2H), 2.84 (s, 6H), 2.96 (t, 1H), 3.79 (t, 1H), 4.01 (s, 3H), 6.80 (s, 1H), 7.72 (s, 1H), 7.99-7.89 (m, 3H), 8.06 (d, 2H)
MS m/z 485 [M+H]<+>
Primer 28: (1R,2R)-N-(2-Metil-4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)-2-[4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid;
[0397]
[0398] (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(2-metil-4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)cikloheksankarboksamid (Međujedinjenje 67, 330 mg, 0.72 mmol,),
12
Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (117 mg, 0.14 mmol), K2CO3(298 mg, 2.16 mmol) i (5-metil-1H-pirazol-3-il)borna kiselina (136 mg, 1.08 mmol) su suspendovani u smeši 1,4-dioksana i vode (10:1, 11 mL). Reakciona smeša je prečišćena azotom i zatim zagrevana na 100°C tokom 1 h u atmosferi azota. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i vodom. Čvrsti ostaci su filtrirani i organski sloj je ispran vodom i fiziološkim rastvorom, osušen iznad Na2SO4i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom na koloni na C18 koloni (30µm, 20 g) korišćenjem gradijenta od 0%→39% MeCN u vodenom/NH4HCO3(99.5/0.5) sistemu pufera kao pokretne faze, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (181 mg, 55%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR(300 MHz DMSO-d6) δ 1.19 (m, 1H), 1.48-1.38 (m, 3H), 1.82-1.74 (m, 5H), 1.99-1.93 (m,1H), 2.28-2.16 (m, 4H), 2.90 (t, 1H), 3.51 (s, 2H), 3.68 (t, 1H), 4.14-4.10 (t, 2H), 6.55 (s, 1H), 7.89-7.87 (d, 2H), 8.04-7.97 (m, 3H), 9.27 (s, 1H), 12.74 (s, 1H)
MS m/z 461 [M+H]<+>
Primer 29: (1R,2R)-N-(2-Metil-4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0399]
[0400] (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(2-metil-4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)cikloheksankarboksamid (Međujedinjenje 67, 300 mg, 0.65 mmol), Pd(dtbpf)Cl2(107 mg, 0.13 mmol), K2CO3(271 mg, 1.96 mmol) i (1-metil-1H-pirazol-3-il)borna kiselina (110 mg, 0.98 mmol) su suspendovani u smeši 1,4-dioksana i vode (6,7:1, 11,5 mL). Reakciona smeša je prečišćena azotom, i zatim zagrevana na 100°C tokom 1 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i vodom, a čvrste supstance su filtrirane. Organski sloj je ispran vodom i slanim rastvorom, osušen iznad Na2SO4i koncentrovan u vakuumu. Ostatak se prečisti fleš hromatografijom na koloni na C18 koloni (30µm, 20 g) korišćenjem gradijenta od 0%→37% MeCN u vodenom/NH4HCO3(99.5/0.5) sistemu pufera kao pokretne faze, da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1745 mg, 60%) kao bela čvrsta supstanca.
12
<1>H NMR (300 MHz DMSO-d6) δ 1.48-1.10 (m, 4H), 1.80-1.70 (m, 2H), 1.80 (s, 3H), 2.00-1.93 (m, 1H), 2.19-2.16 (m, 1H), 2.90 (t, 1H), 3.51 (s, 2H), 3.70 (t, 1H), 4.14-4.10 (m, 2H), 6.83 (s, 1H), 8.04-7.83 (m, 6H), 9.27 (s, 1H), 13.06 (s, 1H)
MS m/z 447 [M+H]<+>
Primer 30: (1R,2R)-N-[5-(Difluorometil)-1H-pirazol-4-il]-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0401]
[0402] HCl u MeOH (3 M in MeOH, 5 mL) je dodata smeši (1R,2R)-N-[5-(difluorometil)-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-4-il]-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoi]cikloheksankarboksamid (Međujedinjenje 68, 520 mg, 1.05 mmol) u MeOH (26 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. PH vrednost rastvora podešena je na 8 sa NaHCO3(vod.) i reakciona smeša je razblažena sa EtOAc. Organska faza je isprana sa vodom, slanim rastvorom (zas.), osušen iznad Na2SO4i koncentrovana u vakuumu.
Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge Prep C 18 OBD koloni (5 µm, 19x150mm) korišćenjem gradijenta 37-46% MeCN u vodi (0.03% NH4OH) kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (80.5 mg, 19%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 1.32 - 1.38 (m, 1H), 1.41 - 1.57 (m, 3H), 1.75 - 1.85 (m, 2H), 1.96 - 2.05 (m, 2H), 2.91 - 3.03 (m, 1H),), 3.72 - 3.78 (m, 1H), 6.85 (s, 1H), 7.02 (t, J=53.6Hz, 1H), 7.84 - 8.04 (m, 6H), 9.71 (s, 1H), 13.09 (s, 1H).
MS m/z 414 [M+H]<+>
Primer 31: 4-[({(1R,2R i 1S,2S)-2-[2-Hloro-4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0403]
12
[0404] Paladijum (10 % Pd/C hidratizirano 50 % vodom, 200 mg, 0.09 mmol) i DMSO (40 mg, 0.51 mmol) je dodat rastvoru 4-[({(1R,6R i 1S,6S)-6-[2-hloro-4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheks-3-en-1-il}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid (Međujedinjenje 74, 50 mg, 0.11 mmol) rastvoren u EtOH (20 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi. Trietilsilan (2 g, 17.20 mmol) je dodat u vidu kapi tokom 5 minuta i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 10 minuta. Reakciona smeša je filtrirana kroz filter špriceva, filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0%→33% aceton u EtOAc). Frakcije koje sadrže proizvod su sakupljene i koncentrovane do suvoće pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u tercbutanolu i osušen smrzavanjem da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (28.0 mg, 56%).
<1>H NMR (600 MHz, MeOD) δ 1.29 - 1.35 (m), 1.42 (t, 2H), 1.5 - 1.64 (m, 1H), 1.88 (d, 2H), 2.01 (d, 1H), 2.15 (d, 1H), 2.8 - 2.88 (m, 1H), 3.51 - 3.6 (m, 1H), 4.02 (s, 3H), 6.78 (d, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.73 (d, 2H), 7.81 (s, 1H), 7.91 (s, 1H).
MS m/z 453.2 [M-H]-
Primer 32: 4-[({(1R,2R i 1S,2S)-2-[2-Hloro-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0405]
[0406] Paladijum (10 % Pd/C hidratizirano 50% vodom, 200 mg, 0.09 mmol) i DMSO (40 mg, 0.51 mmol) je dodat rastvoru 4-[({(1R,6R i 1S,6S)-6-[2-hloro-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheks-3-en-1-il}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid (Međujedinjenje 75, 40 mg, 0.09 mmol) u EtOH (20 mL). Trietilsilan (2.5 g, 21.5 mmol) je
12
dodat u vidu kapi na sobnoj temperaturi tokom 5 minuta i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 10 minuta. Reakciona smeša je filtrirana; filtrat je koncentrovan in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (0%→33% aceton u EtOAc) i proizvod je osušen smrzavanjem iz terc-butanola da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (20 mg, 50%).<1>H NMR (600 MHz, MeOD) δ 1.28 - 1.34 (m), 1.41 (t, 2H), 1.52 - 1.62 (m, 1H), 1.88 (d, 2H), 2.00 (d, 1H), 2.14 (d, 1H), 2.79 - 2.88 (m, 1H), 3.52 - 3.59 (m, 1H), 4.02 (s, 3H), 6.51 (s, 1H), 7.52 (s, 1H), 7.71 (d, 2H), 7.85 (s, 1H).
MS m/z 467.3 [M-H]-
Primer 33: (1R,2R i 1S,2S)-N-(5-Ciklopropil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0407]
Korak 1: (1R,2R i 1S,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(5-ciklopropil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)cikloheksankarboksamid
[0408] T3P (50% u EtOAc, 383 µL, 0.64 mmol) je dodat smeši (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (100 mg, 0.32 mmol), 5-ciklopropil-1-metil-1H-1,2,4-triazol-4-amin (89 mg, 0.64 mmol), i Et3N (134 µL, 0.96 mmol) u EtOAc (3 mL) i reakciona smeša je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 150°C 30 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je izvađena dva puta sa NaHCO3(vod.) i slanim rastvorom. Organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora i koncentrovana in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (148mg).
MS m/z 433,1 [M+2]<+>
Korak 2: (1R,2R i 1S,2S)-N-(5-Ciklopropil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0409] 1H-Pirazol-5-ilborna kiselina (35.8 mg, 0.32 mmol), i Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (25.9 mg, 0.03 mmol) su dodati smeši (1R,2R i 1S,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-(5-ciklopropil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)cikloheksankarboksamida (Primer 33 Korak 1, 138 mg, 0.32 mmol) u DME (2.4 mL) i vodi (0.8 mL). Rastvor K3PO4(204 mg, 0.96 mmol) u vodi (0.90 mL) dodati
12
u reakcionu smešu i grejati u mikrotalasnom reaktoru na 140°C tokom 15 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, a organska faza je izvađena sa vodom, osušena upotrebom faznog separatora i koncentrovana in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (5µm, 150×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-95% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2, pH10), kao pokretna faza da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (45 mg 33%).
<1>H NMR (600 MHz, DMSO) δ 0.56 (tt, 2H), 0.67 - 0.79 (m, 2H), 1.13 - 1.24 (m, 1H), 1.37 (t, 1H), 1.45 - 1.58 (m, 2H), 1.61 (tt, 1H), 1.78 (d, 1H), 1.87 (d, 1H), 1.96 (d, 1H), 2.17 (d, 1H), 2.88 - 2.96 (m, 1H), 3.74 (t, 1H), 3.92 (s, 3H), 6.84 (d, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.96 (d, major rotamer),7.97 - 8.97 (m, minor rotamer), 8.03 (d, 2H), 9.70 (s, 1H), 13.08 (s, major rotamer), 13.5 (s, minor rotamer). Smeša rotamera u odnosu glavni:mali 1:0.19.
Primer 34: 4-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[2-Fluoro-4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0410]
(-)-trans ili (+)-trans
[0411] Paladijum (10% Pd/C, 25 mg, 0.02 mmol) je dodat rastvoru 4-[({(1R,6R or 1S,6S)-6-[2-fluoro-4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheks-3-en-1-il}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamida (Međujedinjenje 82, 52 mg, 0.12 mmol) u MeOH (5 mL) i reakciona smeša je mešana u atmosferi vodonika (1 atm) na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz jastučić od celita i filtrat je koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 20-65% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (13 mg 25%).
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 1.17 (tt, 1H), 1.24 - 1.39 (m, 1H), 1.39 - 1.56 (m, 1H), 1.68 (tt, 1H), 1.86 (t, 2H), 2.03 - 2.19 (m, 2H), 2.81 (t, 1H), 3.56 - 3.69 (m, 1H), 4.04 (s, 3H), 6.61 (d, 1H), 6.92 (s, 2H), 7.47 (d, 1H), 7.52 - 7.64 (m, 3H), 7.78 (t, 1H), 8.22 (s, 1H).
MS m/z 437.2 [M-H]-
1
Primer 35: 4-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[2-Fluoro-4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-3-karboksamid
[0412]
(-)-trans ili (+)-trans
[0413] HCl (1.25 M in MeOH, 0.5 mL, 0.63 mmol) je dodata rastvoru 4-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-{2-fluoro-4-[1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil[cikloheksil]-karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-3-karboksamid (Međujedinjenje 85, 270 mg, 0.52 mmol) u MeOH (10 mL) i reakciona smeša je koncentrovana in vacuo na 16°C. Ostatak je rastvoren u MeOH (10 mL), i koncentrovan in vacuo na 16°C . Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10µm 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-80% MeCN u sistemima pufera H2O/ACN/NH3(95/5/0.2), kao pokretna faza da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (120 mg 53%).
<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 1.18 - 1.33 (m, 1H), 1.37 - 1.52 (m, 2H), 1.52 - 1.64 (m, 1H), 1.88 (d, 2H), 2.04 - 2.17 (m, 2H), 2.8 - 2.94 (m, 1H), 3.53 - 3.65 (m, 1H), 3.81 (s, 3H), 6.78 (d, 1H), 7.5 - 7.79 (m, 3H), 7.84 (t, 1H), 7.98 (s, 1H).
MS m/z 437.3 [M-H]-
Primer 36: 4-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[2-Fluoro-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-3-karboksamid
[0414]
(-)-trans ili (+)-trans
[0415] HCl (1.25 M u MeOH, 0.5 mL, 0.63 mmol) je dodata rastvoru 4-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-{2-fluoro-4-[3-metil-1(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-
1 1
il]benzoil[cikloheksil]karbonil}amino)-1-metil-1H-pirazol-3-karboksamid (Međujedinjenje 86, 216 mg, 0.40 mmol) u MeOH (10 mL) i reakciona smeša je koncentrovana in vacuo na 16°C. Ostatak je rastvoren u MeOH (10 mL), i koncentrovan in vacuo na 16°C . Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-80% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (126 mg 69%).
<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 1.19 - 1.33 (m, 1H), 1.45 (q, 2H), 1.52 - 1.62 (m, 1H), 1.88 (d, 2H), 2.05 - 2.17 (m, 2H), 2.33 (s, 3H), 2.86 (ddd, 1H), 3.54 - 3.65 (m, 1H), 3.82 (s, 3H), 6.52 (s, 1H), 7.58 (dd, 2H), 7.82 (t, 1H), 7.98 (s, 1H).
Primer 37: 4-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[2-Fluoro-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid
[0416]
[0417] Enantiomeri trans-racemata 4-[({(1R,2R i 1S,2S)-2-[2-fluoro-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamida (Međujedinjenje 92, 44 mg, 0.10 mmol) su razdvojeni hiralnom SFC hromatografijom na Chiralpak IC HPLC koloni (5µm, 250x20 ID mm). Ubrizgano je 23 mg (16 mg/ml u EtOH) i eluirano je sa 35% EtOH/DEA (100/0.5) u CO2(175 bara) pri protoku od 70 ml/min i otkriveno je na 260 nm. Drugo eluirano jedinjenje je sakupljeno i liofilizirano iz smeše MeCN/H2O (1:1). Ostatak je rastvoren u EtOAc i ispran sa KHSO4(0.01M, vod.). Vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc i kombinovana organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (0.019 g, 99.7% ee).
[0418] Optičke rotacije: 73° (0.5 g/100 mL u MeCN, 589 nm, 20°C).
<1>H NMR (500 MHz, MeOD) δ 1.31 - 1.68 (m, 4H), 1.91 (s, 2H), 2.15 (s, 2H), 2.34 (s, 3H), 2.89 (d, 1H), 3.60 (t, 1H), 4.01 (s, 3H), 6.54 (s, 1H), 7.41 - 7.76 (m, 3H), 7.87 (t, 1H).
HRMS m/z 453.2079 [M+H]<+>
1 2
Primer 38: 4-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[2-Fluoro-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1H-pirazol-5-karboksamid
[0419]
(-)-trans ili (+)-trans
[0420] HCl (1.25 M u MeOH) (0.1 mL, 0.12 mmol) je dodata rastvoru 4-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-{2-fluoro-4-[3-metil-1(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil[cikloheksil]karbonil}amino)-1H-pirazol-5-karboksamid (Međujedinjenje 94, 24 mg, 0.05 mmol) u MeOH (10 mL) i reakciona smeša je koncentrovana in vacuo na 17°C. Ostatak je rastvoren u MeOH (10 mL), i koncentrovan in vacuo na 17°C . Ostatak je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-70% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (10 mg 46%).<1>H NMR (500 MHz, DMSO) δ 1.17 (q, 1H), 1.41 (dd, 3H), 1.79 (d, 2H), 2.01 (d, 2H), 2.27 (s, 3H), 2.73 - 2.91 (m, 1H), 3.42 -3.55 (m, 1H), 6.62 (s, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.57 - 7.78 (m, 3H), 7.84 (t, 1H), 8.03 (s, 1H), 9.76 (s, 1H), 12.96 (d, 2H).
Primer 40: 4-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[2-Fluoro-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1,2,5-oksadiazol-3-karboksamid
[0421]
(-)-trans ili (+)-trans
Korak 1: 4-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-{2-Fluoro-4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-1,2,5-oksadiazol-3-karboksamid
1
[0422] Rastvor K2CO3(110 mg, 0.80 mmol) u vodi (2 mL) je dodat rastvoru 3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (Međujedinjenje 3, 139 mg, 0.48 mmol) i 4-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-(4-bromo-2-fluorobenzoil)cikloheksil]karbonil}amino)-1,2,5-oksadiazol-3-karboksamida (Međujedinjenje 96, 87 mg, 0.20 mmol) u 1,4-dioksanu (3 mL) i reakciona smeša je isprana sa N2(g). Pd(dtbpf)Cl2(15 mg, 0.02 mmol) je dodat u reakcionu smešu i grejao je u mikrotalasnom reaktoru na 90°C 1 zas. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi i korišćena je direktno u sledećem koraku.
Korak 2: 4-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[2-Fluoro-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1,2,5-oksadiazol-3-karboksamid
[0423] HCl (2M, vod., 2 mL) je dodata sirovoj reakcionoj smeši 4-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-{2-fluoro-4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}-cikloheksil]karbonil}amino)-1,2,5-oksadiazol-3-karboksamida (Primer 40 Korak 1 iznad) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana u vakuumu i vodena faza je ekstrahovana sa DCM. Organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora i koncentrovana u vakuumu. Sirovo jedinjenje je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (5µm 150×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-95% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), kao pokretna faza da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.4 mg 2%).
MS m/z 441.17 [M+H]<+>
Primer 41: 3-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[2-Fluoro-4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-5-metil-1,2-oksazol-4-karboksamid
[0424]
(-)-trans ili (+)-trans
Korak 1: 3-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-(4-Bromo-2-fluorobenzoil)cikloheksil]karbonil}amino)-5-metil-1,2-oksazol-4-karboksilna kiselina [0425] (1R,2R ili 1S,2S)-2-(4-Bromo-2-fluorobenzoil)cikloheksankarbonil fluorid (Međujedinjenje 97, 107 mg, 0.32 mmol) rastvoren u DCM (1 mL) je dodat u refluksovani
1 4
rastvor 3-amino-5-metilizoksazol-4-karboksilnu kiselinu (50 mg, 0.36 mmol) i kuinolin (0.046 mL, 0.39 mmol) u DCM (1 mL) i reakciona smeša je mešana uz refluks 2 dana.
Reakciona smeša je razblažena terc-butil metil etrom, a pH reakcione smeše je podešen na 12-14 pomoću NaOH (1M, vod.). Organski sloj je ispran slanim rastvorom, NH4Cl (vod.) i slanom vodom, osušen pomoću faznog separatora i koncentrovan in vacuo. Ostatku je dodan DCM i smeša je koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (107 mg).
Korak 2: 3-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-(4-Bromo-2-fluorobenzoil)cikloheksil]karbonil}amino)-5-metil-1,2-oksazol-4-karboksamid [0426] DIPEA (124 µL, 0.71 mmol) i TBTU (114 mg, 0.35 mmol) su dodati rastvoru sirove 3-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-(4-bromo-2-fluorobenzoil)cikloheksil]karbonil}amino)-5-metil-1,2-oksazol-4-karboksilne kiseline (Primer 41 Korak 1, 107 mg) u DMF (3 mL) i reakciona smeša je mešana 5 minuta. NH4Cl (30 mg, 0.57 mmol) se dodaje i reakciona smeša se meša na sobnoj temperaturi tokom 2 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je isprana sa NaHCO3(zas., vod.), Slanim rastvorom, NH4C1 (zas., vod.) i slanim rastvorom, osušena pomoću faznog separatora i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (96 mg).
Korak 3: 3-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-{2-Fluoro-4-[1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-5-metil-1,2-oksazol-4-karboksamid
[0427] Rastvor K2CO3(117 mg, 0.85 mmol) u degasiranoj vodi (1 mL) je dodat degasiranom rastvoru 3-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-(4-bromo-2-fluorobenzoil)cikloheksil]-karbonil}amino)-5-metil-1,2-oksazol-4-karboksamid (Primer 41 Korak 2, 96 mg) i 1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazol (83 mg, 0.30 mmol) u dioksanu (1 mL). Rastvor je evakuisan i prečišćen azotom(g). Pd(dtbpf)Cl2(3 mg, 4 µmol) se dodaje i reakciona smeša je zagrevana na 60°C 2 h. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i korišćena je direktno u sledećem koraku.
Korak 4: 3-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[2-Fluoro-4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-5-metil-1,2-oksazol-4-karboksamid
[0428] Rastvor HCl (4M u dioksanu, 2.5 mL, 10.0 mmol) u vodi (2.5 mL) je dodat u vidu kapi reakcionoj smeši 3-({[(1R,2R ili 1S,2S)-2-{2-fluoro-4-[1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksil]karbonil}amino)-5-metil-1,2-oksazol-4-karboksamida (Primer 41 Korak 3 iznad) i zatim je mešan na sobnoj temperaturi 10 minuta. Reakciona
1
smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je isprana dva puta sa NaHCO3(zas. vod.). Kombinovana vodena faza je izvađena sa EtOAc. Kombinovani organski sloj je osušen korišćenjem faznog separatora i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10 µm 250x19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-45% MeCN u sistemu pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2) kao pokretna faza. Frakcije koje sadrže jedinjenje su sakupljene, isparene i podeljene između EtOAc i vode. Organska faza je osušena korišćenjem faznog separatora i koncentrovana in vacuo da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (1.5 mg, 1%).
MS m/z 440.2 [M+H]<+>
Primer 42: 1-Etil-4-[({(1R,2R i 1S,2S)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1H-pirazol-3-karboksamid
[0429]
[0430] Rastvor K2CO3(147 mg, 1.06 mmol) u degasiranoj vodi (1.5 mL) je dodat smeši 4-({[(1R,2R i 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksil]karbonil}amino)-1-etil-1H-pirazol-3-karboksamida (Međujedinjenje 98, 119 mg, 0.27 mmol), 1H-pirazol-5-ilborne kiseline (45 mg, 0.40 mmol) i Pd(dppf)Cl2∗DCM (22 mg, 0.03 mmol) u degasiranom dioksanu (1.5 mL), i reakciona smeša je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 100°C 1 h. Reakciona smeša je podeljena između EtOAc i NaCl (zas., vod.), i vodena faza je ekstrahovana dva puta sa EtOAc. Kombinovana organska faza je osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge Prep C18 koloni (5µm 150×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-95% MeCN u sistemima pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2), kao pokretna faza da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (39 mg 34%).
<1>H NMR (600 MHz, DMSO) δ 1.13 - 1.25 (m, 1H), 1.31 (t, 3H), 1.43 (t, 1H), 1.51 (t, 2H), 1.79 (dd, 2H), 2.00 (dd, 2H), 2.82 - 2.91 (m, 1H), 3.73 (t, 1H), 4.08 (q, 2H), 6.85 (d, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.63 (s, 1H), 7.79 - 8.11 (m, 6H), 9.77 (s, 1H), 13.09 (s, 1H).
MS m/z 433.2 [M-H]-
1
Primer 43: (1R,2R)-2-[4-(3-Metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-N-(1,3,4-oksadiazol-2-il)cikloheksankarboksamid
[0431]
Korak 1: (1R,2R)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(1,3,4-oksadiazol-2-il)cikloheksankarboksamid [0432] LiOH (213 mg, 8.89 mmol) je dodat rastvoru etil 5-({[(1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksil]karbonkl}amino)-1,3,4-oksadiazol-2-karboksilata (Međujedinjenje 99, 1 g, 2.22 mmol) u MeOH (15 mL)i vode (15 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u trajanju od 1 h. Reakciona smeša je koncentrovana in vacuo. Ostatak je rastvoren u vodi (50 mL) i pH rastvora je podešen na 1-2 korišćenjem HCl (1M, vod.). Vodena faza je ekstrahovana tri puta sa DCM. Kombinovana organska faza je osušen preko Na2SO4, filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (1 g).
MS m/z 378 [M+H]<+>
Korak 2: (1R,2R)-2-[4-(3-Metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-N-(1,3,4-oksadiazol-2-il)cikloheksankarboksamid
[0433] (3-Metil-1H-pirazol-5-il)borna kiselina (666 mg, 5.29 mmol), K2CO3(730 mg, 5.28 mmol), Pd(dppf)Cl2*DCM (432 mg, 0.53 mmol) i voda (1 mL) su dodati rastvoru (1R,2R)-2-(4-bromobenzoil)-N-(1,3,4-oksadiazol-2-il)cikloheksankarboksamida (Primer 43 Korak 1, 1 g, 2.64 mmol) u dioksanu (10 mL) i reakciona smeša je mešana na 80°C 4 sata pod atmosferom azota. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i isprana dva puta vodom i kombinovana vodena faza je ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko Na2SO4, filtrirani i koncentrovani in vacuo. Jedinjenje je prečišćeno preparativnom HPLC na XBridge Shield C18 koloni (5um mm, 150×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-85% MeCN u sistemima pufera H2O/HCO2H (100/5/0.1), kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenja iz naslova (84 mg, 8%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca.
1
<1>H NMR (300 MHz, DMSO): δ 1.03-1.57 (m, 4H), 1.69-1.87 (m, 2H), 1.90-2.13 (m, 2H), 2.28 (s, 3H), 2.96 (s, 1H), 3.72 (t, 1H), 6.57 (s, 1H), 7.90 (d, 2H), 8.02 (d, 2H), 8.92 (s, 1H), 11.79 (s, 1H), 12.76 (s, 1H).
MS m/z 380 [M+H]<+>
Primer 44: (1R,2R i 1S,2S)-N-(3-Metil-1,2-oksazol-5-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0434]
Korak 1: (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(3-metil-1,2-oksazol-5-il)cikloheksankarboksamid
[0435] T3P (50% u EtOAc, 383 µL, 0.64 mmol) je dodat smeši (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (100 mg, 0.32 mmol), 3-metil-1,2-oksazol-5-amina (63.1 mg, 0.64 mmol), i Et3N (134 µL, 0.96 mmol) u EtOAc (3 mL) i reakciona smeša je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 150°C 30 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je isprana dva puta sa NaHCO3(zas., vod.),i slanim rastvorom, osušena pomoću faznog separatora i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (95 mg, 76%).
MS m/z 391.2 [M-H]-
Korak 2: (1R,2R i 1S,2S)-N-(3-Metil-1,2-oksazol-5-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0436] Rastvor K3PO4(155 mg, 0.73 mmol) u vodi (0.6 mL) je dodat smeši (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)-N-(3-metil-1,2-oksazol-5-il)cikloheksankarboksamida (Primer 44 Korak 1, 95 mg, 0.24 mmol), 1H-pirazol-5-ilborne kiseline (27 mg, 0.24 mmol) i Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (20 mg, 0.02 mmol) u smeši DME (1.8 mL) i EtOH (0.6 mL) i reakciona smeša je zagrevana na 140°C 15 minuta. 1H-Pirazol-5-ilborna kiselina (27 mg, 0.24 mmol) i Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (20 mg, 0.02 mmol) su dodati i reakciona smeša je zagrevana na 140°C 15 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, a organski sloj je ispran sa vodom, osušena
1
upotrebom faznog separatora i koncentrovana in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge C18 OBD koloni (5µm, 150x19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 10-60% MeCN u sistemu pufera H2O/NH3(100/0.2, pH10) kao mobilna faza i zatim pomoću preparativnog HPLC na Sunfire Prep C18 koloni (5µm, 150×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-95% MeCN u sistemu pufera HCO2H/H2O (0.1M) kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (10 mg, 11%) .
<1>H NMR (600 MHz, DMSO) δ 1.11 - 1.21 (m, 1H), 1.32 (d, 1H), 1.39 - 1.5 (m, 1H), 1.55 (d, 1H), 1.77 (d, 1H), 1.85 (d, 1H), 2.01 (d, 1H), 2.11 (s, 4H), 2.82 - 2.97 (m, 1H), 3.66 - 3.85 (m, 1H), 5.97 (s, 1H), 6.86 (d, 1H), 8.04 (d, 5H), 11.64 (s, 1H), 13.10 (s, 1H).
MS m/z 379.2 [M+H]<+>
Primer 45: (1R,2R i 1S,2S)-N-(4-Metil-1,3-oksazol-2-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0437]
Korak 1: (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(4-metil-1,3-oksazol-2-il)cikloheksankarboksamid
[0438] DIPEA (336 µL, 1.93 mmol), i TBTU (371 mg, 1.16 mmol) su dodati mešanom rastvoru (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (300 mg, 0.96 mmol) i 4-metil-1,3-oksazol-2-amina (113 mg, 1.16 mmol) u DCM (5 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 dana. Reakciona smeša je isprana sa Na2CO3(1M, vod.) i faze su odvojene. Organski sloj je osušen korišćenjem faznog separatora i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (40% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (85 mg 23%).
Korak 2: (1R,2R i 1S,2S)-N-(4-Metil-1,3-oksazol-2-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0439] K2CO3(113 mg, 0.82 mmol) rastvoren u vodi (1 mL) je dodat smeši (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)-N-(4-metil-1,3-oksazol-2-il)cikloheksankarboksamida (Primer 45
1
Korak 1, 80 mg, 0.20 mmol), 1H-pirazol-5-ilborna kiselina (46 mg, 0.41 mmol) i Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (13.2 mg, 0.02 mmol) u dioksanu (2 mL). Reakciona smeša je evakuisana i pročišćena azotom (g), a zatim je zagrevana na 80°C tokom 2.5 sata. Reakciona smeša je podeljena između EtOAc i NaHCO3(zas., vod.). Organska faza je filtrirana korišćenjem faznog separatora, koncentrovana u vakuumu, a sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (80% EtOAc u heptanu). Frakcije koje sadrže proizvod su sakupljene, isparene i triturirane sa Et2O. Sirovi proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (80% EtOAc u heptanu) i frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i isparene do suvoće i konačno triturirane sa Et2O da bi se dobilo naslovljeno jedinjenje (21 mg, 28%).
<1>H NMR (500 MHz, CDCl3, 28°C) δ 1.15 - 1.38 (m, 2H), 1.38 - 1.57 (m, 1H), 1.77 - 1.94 (m, 3H), 2.07 (d, 5H), 2.92 (d, 1H), 3.69 - 3.87 (m, 1H), 6.69 (d, 1H), 7.09 (s, 1H), 7.65 (d, 1H), 7.86 (d, 2H), 8.02 (d, 2H).
MS m/z 377.2 [M-H]-
Primer 46: (1R,2R i 1S,2S)-N-(5-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0440]
Korak 1: (1R,2R i 1S,2S)-N-(3-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksankarboksamid
[0441] Pd(dtbpf)Cl2(6.97 mg, 10.84 µmol) i rastvor K2CO3(150 mg, 1.08 mmol) u vodi (1.5 mL) su dodati smeši (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)-N-(5-cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)cikloheksankarboksamida (Međujedinjenje 43, 150 mg, 0.36 mmol) i 3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-5-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)-1H-pirazola (Međujedinjenje 3, 106 mg, 0.36 mmol) u dioksanu (2 mL) a reakciona smeša je evakuisana i pročišćena azotom (g) tri puta, a zatim je zagrevana na 80°C tokom 1 h. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je isprana dva puta sa NaCl (zas., vod.). Kombinovana vodena faza je izvađena dva puta sa EtOAc. Kombinovani organski sloj je osušen
14
korišćenjem faznog separatora i koncentrovan in vacuo radi dobijanja jedinjenja iz podnaslova (180 mg).
MS m/z 499.3 [M-H]-
Korak 2: (1R,2R i 1S,2S)-N-(5-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0442] Rastvor HCl (4M u dioksanu, 0.5 mL) u vodi (0.5 mL) je dodat rastvoru (1R,2R i 1S,2S)-N-(5-cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-{4-[3-metil-1-(tetrahidro-2H-piran-2-il)-1H-pirazol-5-il]benzoil}cikloheksankarboksamida (Primer 45 Korak 1, 180 mg) u dioksanu (2 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Reakciona smeša je koncentrovana, a sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na Waters Sunfire C18 OBD koloni (5µm, 150×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-95% MeCN u HCO2H/H2O (0.1M, pH3) pufernom sistemu a zatim preparativnom HPLC na XBridge C18 koloni (10µm, 250×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 20-60% MeCN u sistemu pufera H2O/MeCN/NH3(95/5/0.2) kao pokretne faze da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (28 mg, 19%).
<1>H NMR (500 MHz, DMSO) δ 1.09 - 1.23 (m, 1H), 1.33 (t, 1H), 1.4 - 1.57 (m, 2H), 1.76 (d, 1H), 1.84 (d, 1H), 1.98 (d, 1H), 2.05 (d, 1H), 2.27 (s, 3H), 2.86 - 2.94 (m, 1H), 3.69 - 3.78 (m, 1H), 3.89 (s, 3H), 6.56 (s, 1H), 7.70 (s, 1H), 7.88 (d, 2H), 8.00 (d, 2H), 10.51 (s, 1H), 12.7 (s, 1H).
MS m/z 417.1 [M+H]<+>
Primer 47: (1R,2R i 1S,2S)-N-(3-Ciklopropil-1,2,4-tiadiazol-5-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0443]
Korak 1: (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-Bromobenzoil)-N-(3-ciklopropil-1,2,4-tiadiazol-5-il)cikloheksankarboksamid
[0444] T3P (50% u EtOAc, 383 µL, 0.64 mmol) je dodat smeši (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)cikloheksankarboksilne kiseline (100 mg, 0.32 mmol), 3-ciklopropil-1,2,4tiazol-5-amin (91 mg, 0.64 mmol), i Et3N (134 µL, 0.96 mmol) u EtOAc (3 mL) i reakciona smeša je zagrevana u mikrotalasnom reaktoru na 150°C 30 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc i organska faza je izvađena sa NaHCO3(zas., vod.),i slanim rastvorom, osušena pomoću faznog separatora i koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo jedinjenje iz podnaslova (151 mg).
MS m/z 434,2 [M+H]+
Korak 2: (1R,2R i 1S,2S)-N-(3-Ciklopropil-1,2,4-tiadiazol-5-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0445] Rastvor K3PO4(204 mg, 0.96 mmol) u vodi (0.9 mL) je dodat smeši (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)-N-(3-ciklopropil-1,2,4-tiadiazol-5-il)cikloheksankarboksamida (Primer 47 Korak 1, 139 mg, 0.32 mmol), 1H-pirazol-5-ilborne kiseline (36 mg, 0.32 mmol) i Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (26 mg, 0.03 mmol) u smeši DME (2.4 mL) i EtOH (0.6 mL) i reakciona smeša je zagrevana na 140°C 15 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, a organska faza je isprana sa vodom, osušena upotrebom faznog separatora i koncentrovana in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge Prep OBD C18 koloni (5µm 150×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-95% MeCN u sistemima pufera H2O/NH3(100/0.2, pH10), kao pokretna faza da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (35 mg 26%).
<1>H NMR (600 MHz, DMSO) δ 0.85 - 1.05 (m, 4H), 1.09 - 1.24 (m, 1H), 1.32 (d, 1H), 1.39 -1.51 (m, 1H), 1.81 (dd, 2H), 1.96 - 2.21 (m, 3H), 2.95 - 3.09 (m, 1H), 3.72 - 3.87 (m, 1H), 6.86 (d, 1H), 7.85 (s, 1H), 7.89 - 8.14 (m, 4H), 13.10 (s, 2H).
MS m/z 422.2 [M+H]<+>
Primer 48: (1R,2R i 1S,2S)-N-(3-Metil-1,2-tiazol-5-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0446]
[0447] Rastvor K3PO4(38 mg, 0.18 mmol) u vodi (0.2 mL) je dodat smeši (1R,2R i 1S,2S)-2-(4-bromobenzoil)-N-(3-metil-1,2-oktiazolsazol-5-il)cikloheksankarboksamida (Međujedinjenje 100, 24 mg, 0.06 mmol), 1H-pirazol-5-ilborne kiseline (7 mg, 0.06 mmol) i Pd(dppf)Cl2(5 mg, 5.89 µmol) u smeši DME (0.6 mL) i EtOH (0.2 mL) i reakciona smeša je zagrevana na 140°C 15 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, a organska faza je izvađena sa vodom, osušena upotrebom faznog separatora i koncentrovana in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge Prep C18 OBD koloni (5µm 150×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-95% MeCN u sistemima pufera H2O/NH3(100/0.2, pH10), kao pokretna faza da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (8 mg 35%).
<1>H NMR (600 MHz, DMSO) δ 1.1 - 1.3 (m, 1H), 1.3 - 1.44 (m, 1H), 1.44 - 1.64 (m, 2H), 1.78 (d, 1H), 1.86 (d, 1H), 1.97 - 2.12 (m, 2H), 2.29 (s, 3H), 2.84 - 3.04 (m, 1H), 3.81 (s, 1H), 6.69 (s, 1H), 6.86 (d, 1H), 7.73 - 8.15 (m, 5H), 11.96 (s, 1H), 13.10 (s, 1H).
MS m/z 395.2 [M+H]<+>
Primer 49: (1R,2R i 1S,1S)-N-(4-Cijano-3-metil-1,2-tiazol-5-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid
[0448]
[0449] Rastvor K3PO4(74 mg, 0.35 mmol) u vodi (0.3 mL) dodat je smeši (1R,2R i 1S,1S)-2-(4-bromobenzoil)-N-(4-cijano-3-metil-1,2-tiazol-5-il)cikloheksankarboksamida (Međujedinjenje 101, 51 mg, 0.12 mmol), 1H-pirazol-5-ilborne kiseline (13 mg, 0.12 mmol), i Pd(dppf)Cl2<∗>DCM (10 mg, 0.01 mmol) u smeši DME (1 mL) i EtOH (0.3 mL) i reakciona smeša je zagrevana na 140°C 15 minuta. Reakciona smeša je razblažena sa EtOAc, a organska faza je isprana sa vodom, osušena upotrebom faznog separatora i koncentrovana in vacuo. Sirovi proizvod je prečišćen preparativnom HPLC na XBridge Prep C18 OBD koloni (5µm 150×19 ID mm) korišćenjem gradijenta od 5-95% MeCN u sistemima pufera H2O/NH3(100/0.2, pH10), kao pokretna faza da bi se dobilo jedinjenje iz naslova (14 mg 29%).
14
<1>H NMR (600 MHz, DMSO) δ 1.15 - 1.24 (m, 1H), 1.28 - 1.39 (m, 1H), 1.46 (d, 1H), 1.59 (d, 1H), 1.78 (s, 1H), 1.87 (d, 1H), 2.05 (s, 1H), 2.12 (d, 1H), 2.41 (s, 3H), 3.21 (s, 1H), 3.84 (s, 1H), 6.86 (d, 1H), 7.76 - 8.2 (m, 5H), 12.83 (s, 1H), 13.10 (s, 1H).
MS m/z 420.1 [M+]<+>

Claims (15)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (I):
    ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, gde: R<1>je H, C1-C3alkil, halo, C1-C3alkoksi, C1-C3haloalkil ili C1-C3haloalkoksi; svaki od R<2>i R<3>je neovisno H, C1-C3alkil, C1-C3alkoksi, -CN ili halo; R<4>je H, -CH3, -CH2F, -CHF2, -CF3ili halo; Prsten A sadrži 2 dvostruke veze; svaki X1, X2, X3i X4iz prstena A je neovisno CR<5>, CH, O, S, NR<6>ili N; pri čemu najmanje jedan od X1, X2, X3i X4u prstenu A je NR<6>; svaki R<5>je po izboru i neovisno C1-C6alkil, C1-C6alkoksi, C1-C3haloalkil, C1-C3haloalkoksi, -S(O)pR<7>, -CN, -CONR'R", ili C3-C6cikloalkil; svaki p je neovisno 0, 1 ili 2; R<6>je H, -CH3ili ―CH2CH3; ili gde kada X4je CR<5>i X3je NR<6>, onda R<5>i R<6>mogu biti uzeti zajedno da formiraju 5 do 6-eročlani heterociklil prsten kondenzovan na Prsten A, koji heterociklil može opciono da sadrži dodatni heteroatom odabran između N, O i S; pomenuti kondenzovani heterociklil može dodatno da sadrži karbonil ili -S(O)2direktno pored heteroatoma u njemu; i može dalje biti supstituisan sa jednim ili dva supstituenta izabrana iz grupe koju čine -CH3i halo; R<7>je -CH3ili ―NR'R"; i svaki R' i R" je nezavisno -H ili ―CH3; pod uslovom da je ukupan broj supstituenata na prstenu A 0, 1 ili 2; i dalje pod uslovom da kada R<5>i R<6>nisu kombinovani da formiraju heterociklil prsten kondenzovan na prsten A, da je ukupan broj R<5>i R<6>supstituenata koji je alkil i/ili haloalkil 0 ili 1.
  2. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, gde R<4>je ―H ili -CH3.
  3. 3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili 2, gde svaki od R<2>i R<3>je neovisno ―F ili –H.
  4. 4. Jedinjenje prema bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 3, gde je R<1>―H.
  5. 5. Jedinjenje prema bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 4, s formulom (II):
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde: svaki X1, X2i X4iz prstena A je nezavisno CR<5>, CH, ili N; gde najmanje jedan od X1, X2i X4u prstenu A je N; i X3je O, S ili NR<6>; ili gde kada je X4CR<5>i X3je NR<6>, onda R<5>i R<6>mogu biti uzeti zajedno da formiraju 5 do 6-eročlani heterociklil prsten kondenzovan na prsten A, koji heterociklil može opciono da sadrži dodatni heteroatom izabran između N, O i S; pomenuti kondenzovani heterociklil može dodatno da sadrži karbonil ili ―S(O)2direktno pored heteroatoma u njemu; i može dalje biti supstituisan sa jednim ili dva supstituenta izabrana iz grupe koju čine -CH3i halo; R<1>, R<2>, R<4>, R<5>i R<6>su kao što je definisano u zahtevu 1.
  6. 6. Jedinjenje prema bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 5, gde X<1>je CH ili CR<5>, gde R<5>je kao što je definisano u zahtevu 1. 14
  7. 7. Jedinjenje prema bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 6, gde X<4>je CR<5>i R<5>kao što je definisano u zahtevu 1.
  8. 8. Jedinjenje prema bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 7, gde prsten A je opciono i nezavisno supstituisani pirazol, triazol, oksazol, tiazol, oksadiazol ili tiadiazol.
  9. 9. Jedinjenje prema bilo kojim od patentnih zahteva 1 do 8, s formulom (III):
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde: X<1>je CH ili CR<5>; X<2>je N; X<3>je O, S, ili NR<6>; X<4>je CH ili CR<5>; R<2>je ―H ili F; R<5>je ―S(O)2NR'R", -SO2CH3; -C(O)NR'R", -CN, C1-C2alkoksi, C1-C2haloalkoksi ili C1-C2haloalkil; R<6>je H, -CH3ili ―CH2CH3; svaki R' i R" je nezavisno ―H ili ―CH3; ili gde kada je X4CR<5>i X3je NR<6>, onda R<5>i R<6>mogu biti uzeti zajedno da formiraju 5 do 6-eročlani heterociklil prsten kondenzovan na prsten A, koji heterociklil može opciono da sadrži dodatni heteroatom izabran između N, O i S; pomenuti kondenzovani heterociklil može dodatno da sadrži karbonil ili -S(O)2direktno pored heteroatoma u sebi; i može dalje biti supstituisan sa jednim ili dva odabrana supstituenta iz grupe koju čine -CH3i halo; i 14 R<4>je kao što je definisano u zahtevu 1.
  10. 10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, s formulom (V):
    ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, gde: X<1>je CH ili CR<5>; R<2>je ―H ili ―F; R<4>je ―H ili -CH3; R<5>, ako je prisutan, je ―CH3; R<6>je ―H ili ―CH3; pod uslovom da R<5>i R<6>nisu oba -CH3u isto vreme.
  11. 11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, s formulom (VI):
    ili farmaceutski prihvatljivu so, gde: X<1>je CH ili CR<5>; R<2>je ―H ili ―F; R<4>je ―H ili ―CH3; R<5>, ako je prisutan, je ―CH3;i R<6>je ―H ili ―CH3; pod uslovom da R<5>i R<6>nisu oba -CH3u isto vreme.
  12. 12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, s formulom (VII):
    ili farmaceutski prihvatljivu so, gde: jedan od X<1>i X<4>je CH, i drugi je CR<5>; R<2>je ―H ili ―F; R<4>je ―H ili ―CH3; R<5>je -CH3ili C1-haloalkil; i R<6>je ―H ili ―CH3; pod uslovom da je ukupan broj supstituenata R<5>i R<6>u prstenu A koji je alkil 0 ili 1.
  13. 13. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 gde je izabrano iz skupine koja sadrži: Trans(+) ili Trans(-) 1-Metil-4-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1H-pirazol-3-karboksamid; 1-Metil-4-[({(1R,2R)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksil}karbonil)amino]-1H-pirazol-5-karboksamid; 14 1-Metil-4-[({(1R,2R)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}karbonil)amino]-1H-pirazol-5-karboksamid; 1-Metil-4-[({(1R,2R)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}karbonil)amino]-1H-pirazol-3-karboksamid; Trans(-) (1S,2S ili 1R,2R)-N-(3-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; Trans(+) (1R,2R ili 1S,2S)-N-(3-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; (1R,2R)-2-[4-(3-Metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-N-(1H-pirazol-4-il)cikloheksankarboksamid; ((1R,2R)-N-[1-Metil-5-(metilsulfonil)-1H-pirazol-4-il]-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; (1R,2R)-N-[3-(Difluormethoksi)-1-metil-1H-pirazol-4-il]-2-(4-(1H-pirazol-5-il)benzoil)-cikloheksankarboksamid; (1R,2R)-2-[4-(3-Metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-N-(1-metil-3-sulfamoil-1H-pirazol-4-il)cikloheksankarboksamid; (1R,2R)-N-(2,3-Dihidropirazolo[5,1-b][1,3]oksazol-7-il)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; Trans(-) (1R,2R ili 1S,2S)-N-(3-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; (1R,2R)-2-[4-(3-Metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-N-(1-metil-5-sulfamoil-1H-pirazol-4-il)cikloheksankarboksamid; Trans (+/-) (1R,2R i 1S,2S)-N-(5-Methoksi-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; (1R,2R)-N-[5-(Difluormetil)-1H-pirazol-4-il]-2-[4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; Trans(-) (1R,2R ili 1S,2S)-N-(5-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; Trans(+) (1S,2S ili 1R,2R)-N-(5-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; 1-Etil-4-[({(1R,2R)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1H-pirazol-5-karboksamid; Trans(±)-N,1-Dimetil-4-[({(1R,2R i 1S,2S)-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1H-pirazol-3-karboksamid; 1 N,1-Dimetil-4-[({(1R,2R)-2-[4-(5-metil-1H-pirazol-3-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1H-pirazol-5-karboksamid; 5-Metil-4-[({(1R,2R)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1H-pirazol-3-karboksamid; 4-[({(1R,2R)-2-[4-(1H-Pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}karbonil)amino]-1H-pirazol-5-karboksamid; (1R,2R)-N-[1-Metil-5-(metilsulfamoil)-1H-pirazol-4-il]-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; (1R,2R)-N-(1-Metil-3-sulfamoil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; (1R,2R)-N-[5-(Dimetilsulfamoil)-1-metil-1H-pirazol-4-il]-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; (1R,2R)-N-[5-(Difluormetil)-1H-pirazol-4-il]-2-[4-(1H-pirazol-3-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; Trans(±)-4-[({(1R,2R i 1S,2S)-2-[2-Hloro-4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid; Trans(±)-4-[({(1R,2R i 1S,2S)-2-[2-Hloro-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid; Trans(±)- (1R,2R i 1S,2S)-N-(5-Ciklopropil-1-metil-1H-1,2,3-triazol-4-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; 4-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[2-Fluor-4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid; 4-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[2-Fluor-4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-3-karboksamid; 4-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[2-Fluor-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-cikloheksil}karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-3-karboksamid; 4-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[2-Fluor-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1-metil-1H-pirazol-5-karboksamid; 4-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[2-Fluor-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1H-pirazol-5-karboksamid; (1R,2R ili 1S,2S)-2-[2-Fluor-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-N-(4-okso-4,5,6,7-tetrahidropirazolo[1,5-a]pirazin-3-il)cikloheksankarboksamid; 4-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[2-Fluor-4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1,2,5-oksadiazol-3-karboksamid; 1 1 3-[({(1R,2R ili 1S,2S)-2-[2-Fluor-4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}karbonil)-amino]-5-metil-1,2-oksazol-4-karboksamid; Trans(±)-1-Etil-4-[({(1R,2R i 1S,2S)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksil}-karbonil)amino]-1H-pirazol-3-karboksamid; (1R,2R)-2-[4-(3-Metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-N-(1,3,4-oksadiazol-2-il)cikloheksankarboksamid; Trans(±)- (1R,2R i 1S,2S)-N-(3-Metil-1,2-oksazol-5-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; Trans(±)- (1R,2R i 1S,2S)-N-(4-Metil-1,3-oksazol-2-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; Trans(±)- (1R,2R i 1S,2S)-N-(5-Cijano-1-metil-1H-pirazol-4-il)-2-[4-(3-metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; Trans(±)- (1R,2R i 1S,2S)-N-(3-Ciklopropil-1,2,4-tiadiazol-5-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; Trans(±)- (1R,2R i 1S,2S)-N-(3-Metil-1,2-tiazol-5-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; i Trans(±)- (1R,2R i 1S,1S)-N-(4-Cijano-3-metil-1,2-tiazol-5-il)-2-[4-(1H-pirazol-5-il)benzoil]cikloheksankarboksamid; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  14. 14. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, koje je (1R,2R)-2-[4-(3-Metil-1H-pirazol-5-il)benzoil]-N-(1-metil-5-sulfamoil-1H-pirazol-4-il)cikloheksankarboksamid; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.
  15. 15. Farmaceutski sastav koji sadrži jedinjenje Formule (I) ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, kao što je definisano u zahtevu 1, i najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač, razblaživač ili ekscipijens. Izdaje i štampa: Zavod za intelektualnu svojinu, Beograd, Kneginje Ljubice 5 1 2
RS20211559A 2015-05-04 2016-05-03 Derivati pirazola korisni kao inhibitori proteina koji aktivira 5-lipoksigenazu (flap) RS62729B1 (sr)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201562156424P 2015-05-04 2015-05-04
EP19199606.5A EP3670499B1 (en) 2015-05-04 2016-05-03 Pyrazole derivatives useful as 5-lipoxygenase activating protein (flap) inhibitors

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS62729B1 true RS62729B1 (sr) 2022-01-31

Family

ID=55910253

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20211559A RS62729B1 (sr) 2015-05-04 2016-05-03 Derivati pirazola korisni kao inhibitori proteina koji aktivira 5-lipoksigenazu (flap)
RS20191604A RS59671B1 (sr) 2015-05-04 2016-05-03 Derivati pirazola korisni kao inhibitori proteina koji aktivira 5-lipoksigenazu (flap)

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20191604A RS59671B1 (sr) 2015-05-04 2016-05-03 Derivati pirazola korisni kao inhibitori proteina koji aktivira 5-lipoksigenazu (flap)

Country Status (38)

Country Link
US (6) US10183947B2 (sr)
EP (2) EP3292105B1 (sr)
JP (1) JP6564062B2 (sr)
KR (1) KR102623474B1 (sr)
CN (1) CN107646036B (sr)
AR (1) AR104512A1 (sr)
AU (1) AU2016258874B2 (sr)
BR (1) BR112017022757B1 (sr)
CA (1) CA2983668C (sr)
CL (1) CL2017002660A1 (sr)
CO (1) CO2017011506A2 (sr)
CR (1) CR20170513A (sr)
CY (2) CY1122689T1 (sr)
DK (2) DK3292105T3 (sr)
DO (1) DOP2017000244A (sr)
EA (1) EA032221B1 (sr)
ES (2) ES2902139T3 (sr)
GT (1) GT201700220A (sr)
HR (2) HRP20211993T1 (sr)
HU (2) HUE056875T2 (sr)
IL (1) IL255069B (sr)
LT (1) LT3670499T (sr)
ME (1) ME03663B (sr)
MX (1) MX372755B (sr)
MY (1) MY186647A (sr)
PE (1) PE20180247A1 (sr)
PH (1) PH12017502112B1 (sr)
PL (2) PL3670499T3 (sr)
PT (2) PT3670499T (sr)
RS (2) RS62729B1 (sr)
SG (1) SG11201708558RA (sr)
SI (2) SI3292105T1 (sr)
SM (2) SMT202100722T1 (sr)
SV (1) SV2017005549A (sr)
TN (1) TN2017000458A1 (sr)
TW (1) TWI718146B (sr)
WO (1) WO2016177703A1 (sr)
ZA (1) ZA201708189B (sr)

Families Citing this family (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SMT202100722T1 (it) 2015-05-04 2022-01-10 Astrazeneca Ab Derivati di pirazolo utili come inibitori di proteina attivante la 5-lipossigenasi (flap)
EA201990957A1 (ru) * 2016-10-28 2019-09-30 Астразенека Аб Кристаллическая форма (1r,2r)-2-[4-(3-метил-1h-пиразол-5-ил)бензоил]-n-(4-оксо-4,5,6,7-тетрагидропиразоло[1,5-a]пиразин-3-ил)циклогексанкарбоксамида
GB201905721D0 (en) 2019-04-24 2019-06-05 Univ Dundee Compounds
CN110169969B (zh) * 2019-06-28 2022-05-27 南京医科大学 Mk571在制备预防和治疗心脏病药物中应用
CN111084775A (zh) * 2020-02-17 2020-05-01 牡丹江医学院 一种用于治疗癫痫的药物组合物
CN111419800B (zh) * 2020-04-23 2021-03-19 温州医科大学附属第二医院、温州医科大学附属育英儿童医院 用于治疗红斑狼疮的药物制剂及其制备方法
CN111643498B (zh) * 2020-07-20 2021-05-07 黑龙江中医药大学 一种治疗肾结石的药物组合物及其用途
CN111714499B (zh) * 2020-07-27 2021-05-11 黑龙江中医药大学 一种用于治疗多囊卵巢综合征的药物组合物

Family Cites Families (11)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IL109254A (en) 1993-04-29 1999-03-12 Zeneca Ltd Tetrahydropyran and tetrahydrofuran ether derivatives their preparation and pharmaceutical compositions comprising them
US5773422A (en) 1996-01-29 1998-06-30 Komer; Gene Avermectin formulation
WO2005023818A2 (en) * 2003-09-10 2005-03-17 Gpc Biotech Ag Heterobicyclic compounds as pharmaceutically active agents
GB2431927B (en) * 2005-11-04 2010-03-17 Amira Pharmaceuticals Inc 5-Lipoxygenase-activating protein (FLAP) inhibitors
TW200815351A (en) * 2006-05-02 2008-04-01 Astrazeneca Ab Novel compounds
WO2008097930A1 (en) * 2007-02-05 2008-08-14 Amira Pharmaceuticals, Inc. Reverse indoles as 5-lipoxygenase-activating protein (flap) inhibitors
GB0702456D0 (en) * 2007-02-08 2007-03-21 Astrazeneca Ab New combination
WO2008130615A1 (en) * 2007-04-20 2008-10-30 Schering Corporation Tetrahydropyrido[4,3-d]pyrimidinone derivatives and methods of use thereof
JP2010526825A (ja) * 2007-05-10 2010-08-05 エーエムアール テクノロジー インコーポレイテッド アリール置換およびヘテロアリール置換テトラヒドロベンゾ−１，４−ジアゼピンならびにノルエピネフリン、ドーパミンおよびセロトニンの再取り込みを遮断するためのその使用
US20100298343A1 (en) * 2007-10-05 2010-11-25 John Howard Hutchinson 5-lipoxygenase-activating protein (flap) inhibitors
SMT202100722T1 (it) * 2015-05-04 2022-01-10 Astrazeneca Ab Derivati di pirazolo utili come inibitori di proteina attivante la 5-lipossigenasi (flap)

Also Published As

Publication number Publication date
PT3670499T (pt) 2021-12-24
AR104512A1 (es) 2017-07-26
US20210355127A1 (en) 2021-11-18
EA032221B1 (ru) 2019-04-30
MY186647A (en) 2021-08-03
ES2760466T3 (es) 2020-05-14
JP6564062B2 (ja) 2019-08-21
WO2016177703A1 (en) 2016-11-10
EP3292105B1 (en) 2019-10-02
SI3670499T1 (sl) 2022-02-28
US11691978B2 (en) 2023-07-04
US10508119B2 (en) 2019-12-17
PL3670499T3 (pl) 2022-02-14
LT3670499T (lt) 2021-12-27
SMT202100722T1 (it) 2022-01-10
RS59671B1 (sr) 2020-01-31
HUE056875T2 (hu) 2022-03-28
US20180237439A1 (en) 2018-08-23
JP2018514535A (ja) 2018-06-07
IL255069B (en) 2019-12-31
CR20170513A (es) 2018-02-13
TN2017000458A1 (en) 2019-04-12
SI3292105T1 (sl) 2020-01-31
DOP2017000244A (es) 2017-11-15
PL3292105T3 (pl) 2020-04-30
TWI718146B (zh) 2021-02-11
GT201700220A (es) 2018-12-19
TW201713625A (zh) 2017-04-16
US12024523B2 (en) 2024-07-02
KR20180002784A (ko) 2018-01-08
US20200157113A1 (en) 2020-05-21
BR112017022757B1 (pt) 2023-02-23
CY1125179T1 (el) 2023-03-24
US20230219967A1 (en) 2023-07-13
AU2016258874B2 (en) 2020-04-30
PH12017502112B1 (en) 2021-07-02
EP3670499A1 (en) 2020-06-24
DK3670499T3 (da) 2022-01-03
AU2016258874A1 (en) 2017-12-14
SG11201708558RA (en) 2017-11-29
EP3670499B1 (en) 2021-09-29
US10183947B2 (en) 2019-01-22
HUE047445T2 (hu) 2020-04-28
PE20180247A1 (es) 2018-02-02
PH12017502112A1 (en) 2018-05-07
CY1122689T1 (el) 2021-03-12
CO2017011506A2 (es) 2018-01-31
EP3292105A1 (en) 2018-03-14
HRP20211993T1 (hr) 2022-04-01
CN107646036B (zh) 2020-05-19
SMT201900691T1 (it) 2020-01-14
EA201792341A1 (ru) 2018-05-31
CN107646036A (zh) 2018-01-30
MX2017013571A (es) 2018-02-26
ES2902139T3 (es) 2022-03-25
CA2983668C (en) 2023-06-27
SV2017005549A (es) 2018-03-12
ZA201708189B (en) 2018-11-28
PT3292105T (pt) 2019-12-13
KR102623474B1 (ko) 2024-01-09
CL2017002660A1 (es) 2018-04-13
HRP20192172T1 (hr) 2020-02-21
US20190084991A1 (en) 2019-03-21
MX372755B (es) 2020-06-29
NZ737672A (en) 2020-11-27
ME03663B (me) 2020-07-20
US11001589B2 (en) 2021-05-11
IL255069A0 (en) 2017-12-31
DK3292105T3 (da) 2019-12-09
BR112017022757A2 (pt) 2018-07-17
CA2983668A1 (en) 2016-11-10
HK1245255A1 (en) 2018-08-24
US20240317767A1 (en) 2024-09-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US12024523B2 (en) Pyrazole derivatives useful as 5-lipoxygenase activating protein (FLAP) inhibitors
IL272089B2 (en) Compounds, preparations and methods
KR20190003650A (ko) 방향족 술폰아미드 유도체
JP2023533851A (ja) Ｌｐａ受容体阻害剤としてのアミドシクロヘキサン酸誘導体
US20110312941A1 (en) 1,4-disubstituted piperidines as vasopressin receptor via antagonists
US20220348555A1 (en) Chemical Compounds
WO2018109642A1 (en) N-aryl pyrazoles as nrf2 regulators
CN121399112A (zh) Sarm1调节剂、其制备和用途
HK1245255B (en) Pyrazole derivatives useful as 5-lipoxygenase activating protein (flap) inhibitors
NZ737672B2 (en) Pyrazole derivatives useful as 5-lipoxygenase activating protein (flap) inhibitors
TW202529740A (zh) Ｐｈｄ抑制劑化合物、組成物及使用方法