RS62732B1

RS62732B1 - Inhibitori creb vezujućeg proteina (cbp)

Info

Publication number: RS62732B1
Application number: RS20211321A
Authority: RS
Inventors: Shawn E R Schiller; Torsten Herbertz; Hongbin Li; Bradford Graves; Steven Mischke; Angela V West; Anna Ericsson; Jennifer R Downing
Original assignee: Forma Therapeutics Inc
Priority date: 2018-06-29
Filing date: 2019-07-01
Publication date: 2022-01-31
Also published as: MA50675B1; AU2019295790B2; BR112020026783A2; US12378242B2; AU2019295790A1; KR20250067962A; US20200002332A1; AU2023226653A1; IL313466B2; KR20210025631A; IL313466A; MA50675A; HRP20211698T1; CY1124762T1; ZA202100509B; HUE056885T2; JP6781806B2; JP2020128426A; MX2023013508A; LT3587418T

Description

Opis

Polje istraživanja

[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na nove hemijske kompozicije za inhibiciju CREB vezujućeg proteina (CBP), koji se koristi u tretmanu lečenja bolesti ili poremećaja vezanih za inhibiciju CBP/p300 familije bromodomena.

Pozadina

[0002] CBP/p300 su lizinske acetil transferaze koje katalizuju vezivanje acetil grupe na bočni lanac lizina histina i drugih proteinskih supstrata. p300 (takođe poznat kao EP300 i KAT3B) je protein sa više domena koji se vezuju za različite proteine uključujući mnoge transkripcione faktore koji vezuju DNK. Elementi odgovora na ciklični AMP - vezujući protein (CREB) (CPB, takođe poznat kao KAT3A) je ćelijski paralog p300. p300 i CBP dele široku sekvencu identiteta i funkcionalne sličnosti, i često se spominju kao CBP/p300. Katalizovana acetilizacija histona i drugih proteina CBP/p300 je ključna za aktivaciju gena. Povećana ekspresija i aktivnost p300 je praćena kod humanih karcinoma koji su uznapredovali, poput primera karcinoma prostate i karcinoma dojke. Hemijska inhibicija CBP/p300 koja poseduje unutrašnju enzimsku aktivnost acetil transferaze je izvodljivija nego blokiranje transkripcionih faktora sa malim molekulima, jer se otkriće hemijskih inhibitora sa transkripcionim faktorima pokazalo kao zahtevno. Shodno tome, postoji potreba za novim i moćnim jedinjenjima za inhibiciju CBP/p300, korisnim u tretmanu lečenja određenih srodnih oblika karcinoma.

[0003] 4,5,6,7-tetrahidro-1H-pirazol[4,3-C]piridin-3-amin jedinjenja, farmaceutske kompozicije koje sadrže pomenuto jedinjenje ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, i postupci primene takvih jedinjenja i njihovih soli u lečenju poremećaja posredovanih CBP i/ili EP300 su opisani u WO 2016/086200.

Sažetak

[0004] Prvi aspekt ovog pronalaska odnosi se na jedinjenja Formule (I):

Ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, enantiomer, hidrat, solvat, stereoizomer ili tautomer, pri čemu:

R<1>je -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OR<5>, -N(R<5>)2, ili -NHR<5>;

R<5>je -C1-C6alkil, -C3-C8cikloalkil, heterocikl, aril, ili heteroaril;

R<6>je -C1-C6alkil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, aril, spirocikoalkil, spiroheterocikl, heteroaril, halogen, oxo, -(CH2)n-OR<8>,-C(O)R<8>’, -C(O)OR<8>, ili -C(O)NR<8>R<9>, pri čemu je svaki alkil, cikloalkil, heterocikl, spirocikloalkil, spiroheterocikl, heteroaril ili aril opcionio supstituisan sa jednim ili više R<10>;

R<8>i R<9>su svaki nezavisno, pri svakoj pojavi, -H, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, aril, heteroaril, pri čemu je svaki alkil, alkekil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, heterocikl, aril ili heteroaril opcionio supstituisan sa jednim ili više R<10>ili R<11>; ili

R<8>i R<9>mogu se kombinovati sa atomom na koji su vezana oba kako bi formirali spiroheterocikl, heterocikl ili heteroaril, pri čemu je formiran spiroheterocikl, heterocikl ili heteroaril opcionio supstituisan sa jednim ili više R<10>or R<11>;

R<8>' je svaki nezavisno, pri svakoj pojavi, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, aril, heteroaril, pri čemu je svaki alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, heterocikl, aril ili heteroaril opcionio supstituisan sa jednim ili više R<10>ili R<11>; ili

R<10>je nezavisan, pri svakoj pojavi, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OH, halogen, -okso, -NO2, -CN, -NH2, -OC1-C6alkil, -OC3-C6cikloalkil, -O aril, -O heteroaril, -NHC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6alkil), -S(O)2N(C1-C6alkil)2, -S(O)2C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6alkil), -C(O)N(C1-C6alkil)2, -C(O)OC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)SO2C1-C6alkil, -S(O)(C1-C6alkil), -S(O)N(C1-C6 alkil)2 ili -N(C1-C6 alkil)S(O)(C1-C6alkil), pri čemu je svaki alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, heterocikl, heteroaril ili aril opcionio supstituisan sa jednim ili više -R<12>;

Pri čemu bilo koja dva R<10>kada su na nesusednim atomima mogu se kombinovati da formiraju cikloalkil ili heterociklil za premošćenje; pri čemu bilo koja dva R<10>kada su na susednim atomima mogu se kombinovati da formiraju cikloalkil, heterocikl, aril ili heteroaril; i R<12>je nezavisan, pri svakoj pojavi, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OH, halogen, -okso, -NO2, -CN, -NH2, -OC1-C6alkil, -NHC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6alkil), -S(O)2N(C1-C6alkil)2, -S(O)2C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6alkil), -C(O)N(C1-C6alkil)2, -C(O)OC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)SO2C1-C6alkil, -S(O)(C1-C6alkil), -S(O)N(C1-C6alkil)2ili -N(C1-C6alkil)S(O)(C1-C6alkil).

[0005] Poželjno je da su jedinjenja Formule (I) jedinjenja Formule (IV):

Ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu:

n je 0, 1, 2, 3, 4 ili 5;

svaki R<10>je nezavisan, pri svakoj pojavi, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OH, halogen, -okso, -NO2, -CN, -NH2, -OC1-C6alkil, -OC3-C6cikloalkil, -O aril, -O heteroaril, -NHC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6alkil), -S(O)2N(C1-C6alkil)2, -S(O)2C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6alkil), -C(O)N(C1-C6alkil)2, -C(O)OC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)SO2C1-C6alkil, -S(O)(C1-C6alkil), -S(O)N(C1-C6alkil)2ili -N(C1-C6alkil)S(O)(C1-C6alkil), pri čemu je svaki alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, heterocikl, heteroaril ili aril opcionio supstituisan sa jednim ili više -R<12>;

pri čemu bilo koja dva R<10>kada su na nesusednim atomima mogu se kombinovati da formiraju cikloalkil ili heterociklil za premošćenje; pri čemu bilo koja dva R<10>kada su na susednim atomima mogu se kombinovati da formiraju cikloalkil, heterocikl, aril ili heteroaril; i R<12>je nezavisan, pri svakoj pojavi, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterociklil, heteroaril, aril, -OH, halogen, oxo, -NO2, -CN, -NH2, -OC1-C6alkil, -NHC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6alkil), -S(O)2N(C1-C6alkil)2, -S(O)2C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6alkil), -C(O)N(C1-C6alkil)2, -C(O)OC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)SO2C1-C6alkil, -S(O)(C1-C6alkil), -S(O)N(C1-C6alkil)2ili -N(C1-C6alkil)S(O)(C1-C6alkil).

Kratak opis nacrta

[0006] Slika 1 je tabela jedinjenja u skladu sa različitim izvođenjima pronalaska.

Detaljan opis

[0007] Predstavljeni pronalazak se odnosi na jedinjenja inhibitore CBP i ovde su definisana jedinjenja koja imaju jedanu ili više karakteristika pri testiranju prema HTRF biohemijskog test protokola, koje su opisani u daljem tekstu u Primeru 5: (1) CBP IC50vrednosti manje od 1 µM; i (2) CBP IC50vrednosti između 0,001 i 1 µM.

Jedinjenja pronalaska

[0008] Jedan aspekt ovog pronalaska opisuje jedinjenja Formule (I):

Ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, enantiomeri, hidrati, solvati, prolekovi, izomer ili tautomer, pri čemu su R<1>i R<6>opisani u prethodnom tekstu.

[0009] U nekim primerima jedinjenje Formule (I) je stereoizomer ili enantiomer Formule (I) odabran iz grupe koju čine Formule (I-a), (I-b), (I-c), (I-d), (I-e), (I-f), (I-g), (I-h), (I-i), (I-j), (I-k), (I-l), (I-m), (I-n), (I-o) i (I-p):

[0010] Jedinjenje Formule (I) može biti njegov stereoizomer (npr. jedinjenja Formule (I-a), (I-b), (I-c), (I-d), (I-e), (I-f), (I-g), (I-h), (I-i), (I-j), (I-k), (I-l), (I-m), (I-n) ili (I-o) pri čemu R<1>je metil i R<6>je fenil opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>).

[0011] U nekim poželjnim izvođenjima, jedinjenje Formule (I) je jedinjenje Formule (IV), uključujući njegove stereoizomere:

Ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu je n ceo broj 0, 1, 2, 3, 4 ili 5 (poželjno, 0, 1 ili 2) i R<10>je definisan u prethodnom tekstu. Poželjno, jedinjenje Formule (IV) je jedinjenje (IV-a) (uključujući, na primer, jedinjenja Formule (IV-b), Formule (IV-c) ili njihove smeše), ili njegove farmaceutske prihvatljive soli, pri čemu je n ceo broj 0, 1, 2, 3, 4 ili 5 (poželjno 0, 1 ili 2) i R<10>je kako je opisano u prethodnom tekstu.

[0012] U određenim jedinjenjima Formule (IV-a) uključuje jedinjenja Formule (IV-b) i i jedinjenja Formule (IV-c) pri čemu je n 0, 1, 2, 3, 4 ili 5 isvaki R<10>je nezavisni halogen ili -OC1-C6alkil, i gde je -OC1-C6alkil opciono supstituisan sa jednim ili više halogena. Na primer, u određenim jedinjenima Formule (IV-a), n je 0, 1 ili 2 i svaki R<10>je nezavisan halogen, ili -OC1alkil opciono supstituisan sa jednim ili više halogena (npr., fluorom ili hlorom). U nekim jedinjenjima Formule (IV-a), n je 2 isvaki R<10>je nezavisni halogen (npr., fluor ili hlor), -OC1alkil supstituisansa 1, 2 ili 3 halogen (npr., fluorom ili hlorom), ili metoksi.

[0013] Drugi aspekt ovog otkrića je obezbediti farmaceutsku kompoziciju koja sadrži terapeutski efikasnu količinu najmanje jednog jedinjenja Formule (I). Aspekt ovog pronalaska odnosi se na jedinjenja koja su, ili mogu biti, inhibitori jedne ili više familije bromodomena CBP/p300 (npr. Jedinjenja Formule (I)).

[0014] U nekim pronalascima, jedinjenja pronalaska imaju Formulu (I)

Ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, enantiomeri, hidrati, solvati, izomer ili tautomer, pri čemu:

R<1>je -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OR<5>, -N(R<5>)2 ili -NHR<5>;

R<5>je -C1-C6alkil, -C3-C8cikloalkil, heterocikl, aril ili heteroaril;

R<6>je -C1-C6alkil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, aril, spirocikloalkil, spiroheterocikl, heteroaril, halogen, okso, -(CH2)n-OR<8>, -C(O)R<8>’, -C(O)OR<8>ili -C(O)NR<8>R<9>, gde je svaki alkil, cikloalkil, heterocikl, spirocikloalkil, spiroheterocikl, heteroaril ili aril opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>;

R<8>i R<9>su nezavisani, pri svakoj pojavi, -H, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterociklil, aril, heteroaril, gde je svaki alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, heterocikl, aril ili heteroaril opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>ili R<11>; ili

R<8>i R<9>se mogu kombinovati sa atomom na koji su oba vezana radi formiranja spiroheterocikla, heterocikla ili heteroarila, pri čemu je formirani spiroheterocikl, heterocikl ili heteroaril opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>ili R<11>;

R<8>' je nezavisan, pri svakoj pojavi, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, aril, heteroaril, gde je svaki alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, heterocikl, aril ili heteroaril opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>ili R<11>; ili

R<10>je nezavisan, pri svakoj pojavi, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OH, halogen, okso, -NO2, -CN, -NH2, -OC1-C6alkil, -OC3-C6cikloalkil, -O aril, -O heteroaril, -NHC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6alkil), -S(O)2N(C1-C6alkil)2, -S(O)2C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6alkil), -C(O)N(C1-C6alkil)2, -C(O)OC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)SO2C1-C6alkil, -S(O)(C1-C6alkil), -S(O)N(C1-C6alkil)2ili -N(C1-C6alkil)S(O)(C1-C6alkil), pri čemu je svaki alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, heterocikl, heteroaril ili aril opciono supstituisan sa jednim ili više -R<12>;

Pri čemu bilo koja dva R<10>kada su na nesusednim atomima mogu se kombinovati da formiraju cikloalkil ili heterociklil za premošćenje; pri čemu bilo koja dva R<10>kada su na susednim atomima mogu se kombinovati da formiraju cikloalkil, heterocikl, aril ili heteroaril; i R<12>je nezavisan, pri svakoj pojavi, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OH, halogen, okso, -NO2, -CN, -NH2, -OC1-C6alkil, -NHC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6alkil), -S(O)2N(C1-C6alkil)2, -S(O)2C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6alkil), -C(O)N(C1-C6alkil)2, -C(O)OC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)SO2C1-C6alkil, -S(O)(C1-C6alkil), -S(O)N(C1-C6alkil)2ili -N(C1-C6alkil)S(O)(C1-C6alkil).

[0015] U nekim izvođenjima, jedinjenja pronalaska imaju Formulu (I)

R<1>je -OR<5>;

R5 je -C1-C6alkil;

R<6>je fenil opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>;

R<10>je nezavisan, pri svakoj pojavi, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OH, halogen, -NO2, -CN, -NH2, -OC1-C6alkil, -OC3-C6cikloalkil, -O aril, -O heteroaril, -NHC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6alkil), -S(O)2N(C1-C6alkil)2, -S(O)2C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6alkil), -C(O)N(C1-C6alkil)2, -C(O)OC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)SO2C1-C6alkil, -S(O)(C1-C6alkil), -S(O)N(C1-C6alkil)2ili -N(C1-C6alkil)S(O)(C1-C6alkil), gde je svaki alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, heterocikl, heteroaril ili aril opciono supstituisan sa jednim ili više -R<12>;

Pri čemu bilo koja dva R<10>kada su na nesusednim atomima mogu se kombinovati da formiraju cikloalkil ili heterocikl; pri čemu bilo koja dva R<10>kada su na susednim atomima mogu se kombinovati da formiraju cikloalkil, heterocikl, aril ili heteroaril; i

R<12>je nezavisan, pri svakoj pojavi, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OH, halogen, okso, -NO2, -CN, -NH2, -OC1-C6alkil, -NHC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6alkil), -S(O)2N(C1-C6alkil)2, -S(O)2C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6alkil), -C(O)N(C1-C6alkil)2, -C(O)OC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)SO2C1-C6alkil, -S(O)(C1-C6alkil), -S(O)N(C1-C6alkil)2ili -N(C1-C6alkil)S(O)(C1-C6alkil).

[0016] U nekim izvođenjima, jedinjenja pronalaska imaju Formulu (I)

R<1>je -OR<5>;

R<5>je -C1-C3alkil;

R<6>je fenil je opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>;

R<10>je nezavisan, pri svakoj pojavi, halogen, -OC1-C6alkil, -OC3-C6cikloalkil, -O aril ili –O heteroaril, gde je svaki alkil, cikloalkil, aril ili heteroaril opciono supstituisan sa jednim ili više-R<12>;

R<12>je halogen.

[0017] U nekim izvođenjima, jedinjenja pronalaska imaju Formulu (III)

Ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu:

<1>5

R je -OR ;

<5>

R je -C1-C6alkil, -C3-C8 cikloalkil, heterocikl, aril ili heteroaril;

<6>

R je -C -C cikloalkil, -C -C cikloalkenil, heterociklil, heteroaril, aril, gde je svaki cikloalkil, cikloalkenil, heterocikl, 3 8 4 8

10

heteroaril ili aril opciono supstituisan sa jednim ili više -R ;

<6>

R<’>je -H ili -C1-C6alkil;

<7>

R je -H, halogen, -OH, -CN, -OC1-C6 alkil, -NH2, -NHC1-C6 alkil, -N(C1-C6 alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6 alkil), -S(O) N(C -C 2 1 6 alkil) , -S(O) C -C alkil, -S(O) OH, -C(O)C -C alkil, -C(O)NH , -C(O)NH(C -C alkil), -C(O)N(C -C alkil) , -C(O)OH, -2 2 1 6 2 1 6 2 1 6 1 6 2

C(O)OC -C alkil, -N(C -C alkil)SO C -C alkil, -S(O)(C -C alkil), -S(O)N(C C

1 6 1 6 2 1 6 1 6 1- 6<alkil)>2<, -S(O)>2<NH>2<, -N(C>1<-C>6<alkil)S(O)(C>1<-C>6alkil) ili tetrazol;

R<10>je nezavisan, pri svakoj pojavi, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OH, halogen, -okso, -NO2, -CN, -NH2, -OC1-C6alkil, -OC3-C6cikloalkil, -O aril, -O heteroaril, -NHC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6alkil), -S(O)2N(C1-C6alkil)2, -S(O)2C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6alkil), -NHC(O)C1-C6alkil, -C(O)N(C1-C6alkil)2, -C(O)OC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)SO2C1-C6alkil, -S(O)(C1-C6alkil), -S(O)N(C1-C6alkil)2ili -N(C1-C6alkil)S(O)(C1-C6alkil), gde je svaki alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, heterocikl, heteroaril ili aril opciono supstituisan sa jednim ili više -R<12>;

R<12>je nezavisan, pri svakoj pojavi, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OH, halogen, -okso, -NO2, -CN, -NH2, -OC1-C6alkil, -NHC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6alkil), -S(O)2N(C1-C6alkil)2, -S(O)2C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6alkil), -C(O)N(C1-C6alkil)2, -C(O)OC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)SO2C1-C6alkil, -S(O)(C1-C6alkil), -S(O)N(C1-C6alkil)2ili -N(C1-C6alkil)S(O)(C1-C6alkil);

m je ceo broj od 0 do 5; i

q je ceo broj od 0 do 4.

[0018] Ovde su data različita izvođenja jedinjenja sa Formulom (III). U nekim izvođenjima R<12>je halogen. U nekim izvođenjima m je 3. U nekim izvođenjima R<6>’ je H. U nekim izvođenjima R<6>je aril. U nekim izvođenjima R<7>je -C(O)OH. U nekim izvođenjima R<5>je metil.

[0019] U nekim izvođenjima, jedinjenja pronalaska imaju Formulu (III)

Ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu:

R<1>je -OR<5>;

R<5>je -C1-C6alkil; i

R<6>je fenil opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>;

R<10>je nezavisan, pri svakoj pojavi, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OH, halogen, -NO2, -CN, -NH2, -OC1-C6alkil, -OC3-C6cikloalkil, -O aril, -O heteroaril, -NHC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6alkil), -S(O)2N(C1-C6alkil)2, -S(O)2C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6alkil), -NHC(O)C1-C6alkil, -C(O)N(C1-C6alkil)2, -C(O)OC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)SO2C1-C6alkil, -S(O)(C1-C6alkyl), -S(O)N(C1-C6alkil)2ili -N(C1-C6alkil)S(O)(C1-C6alkil), gde je svaki alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, heterocikl, heteroaril ili aril opciono supstituisan sa jednim ili više -R<12>; i

R<12>je nezavisan, pri svakoj pojavi, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OH, halogen, -okso, -NO2, -CN, -NH2, -OC1-C6alkil,-NHC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6alkil), -S(O)2N(C1-C6alkil)2, -S(O)2C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6alkil), -C(O)N(C1-C6alkil)2, -C(O)OC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)SO2C1-C6alkil, -S(O)(C1-C6alkil), -S(O)N(C1-C6alkil)2ili -N(C1-C6alkil)S(O)(C1-C6alkil).

[0020] U nekim izvođenjima, jedinjenja pronalaska imaju Formulu (I)

Ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, pri čemu:

R<1>je -OR<5>;

R<5>je -C1-C3alkil;

R<6>je fenil opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>;

R<10>je nezavisan, pri svakoj pojavi halogen, -OC1-C6alkil, -OC3-C6cikloalkil, - O aril ili –O heteroaril, pri čemu je svaki alkil, cikloalkil, aril ili heteroaril opciono supstituisan sa jednim ili više -R<12>; i

R<12>je halogen.

[0021] U nekim izvođenjima, R<6>je aril opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>. U nekim izvođenjima, R<6>je fenil opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>.

[0022] U nekim izvođenjima R<5>je -C1-C3alkil. U nekim izvođenjima, R<5>je metil.

[0023] U nekim izvođenjima, R<10>je nezavisan, pri svakoj pojavi, halogen ili -OC1-C6alkil, gde je -OC1-C6alkil opciono supstituisan sa halogenom.

[0024] U nekim izvođenjima, R<1>je -OR<5>.

[0025] U nekim izvođenjima, R<1>je -OR<5>, -N(R<5>)2, -NHR<5>, ili -C1-C6alkil. U nekim izvođenjima, R<1>je -OR<5>. U nekim izvođenjima, R<1>je -OR<5>ili -C1-C6alkil. U nekim izvođenjima, R<5>od R<1>je -C1-C6alkil. U nekim izvođenjima, R<1>je -OR<5>; i R<5>je -C1-C6alkil. U nekim izvođenjima R<1>je -OCH3. U nekim izvođenjima, R<1>je -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril ili aril. U nekim izvođenjima, R<1>je -C1-C6alkil. U nekim izvođenjima, R<1>je metil, etil ili propil. U nekim izvođenjima, R<1>je metil. U nekim izvođenjima, R<1>je -C2-C6alkenil. U nekim izvođenjima, R<1>je aril.

[0026] U nekim izvođenjima, R<5>je -C1-C6alkil, -C3-C8cikloalkil, heterocikl, aril ili heteroaril. U nekim izvođenjima, R<5>je -C1-C6alkil. U nekim izvođenjima, R<5>je -C1-C3alkil. U nekim izvođenjima, R<5>je metil. U nekim izvođenjima, R<5>je etil.

[0027] U nekim izvođenjima, R<6>je -C1-C6alkil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl ili aril. U nekim izvođenjima, R<6>je -C1-C6alkil opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>. U nekim izvođenjima, R<6>je aril opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>. U nekim izvođenjima, R<6>je heteroaril opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>. U nekim izvođenjima, R<6>je -C(O)OH. U nekim izvođenjima, R<6>je halogen. U nekim izvođenjima, R<6>je -C1-C6alkil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, aril, spirocikloalkil, spiroheterocikl, heteroaril, halogen, okso, -(CH2)n-OR<8>, -C(O)R<8>’, -C(O)OR<8>ili -C(O)NR<8>R<9>, gde je svaki alkil, cikloalkil, heterocikl, spirocikloalkil, spiroheterocikl, heteroaril ili aril opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>.

[0028] U nekim izvođenjima, R<8>je -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, aril, heteroaril, gde je svaki alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, heteroikl, aril ili heteroaril opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>ili R<11>. U nekim izvođenjima, R<8>je -H. U nekim izvođenjima, R<8>je -C1-C6alkil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl ili aril, gde je R<8>opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>ili R<11>. U nekim izvođenjima, R<8>je -C1-C6alkil opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>ili R<11>. U nekim izvođenjima, R<8>je aril opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>ili R<11>. U nekim izvođenjima, R<8>je heteroaril opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>ili R<11>.

[0029] U nekim izvođenjima, R<8>` je -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, aril, heteroaril, gde je svaki alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, heteroikl, aril ili heteroaril opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>ili R<11>U nekim izvođenjima, R<8>` je -C1-C6alkil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl ili aril, gde je R<8>` opciono supstituisan sa R<10>ili R<11>. U nekim izvođenjima, R<8>` je --C1-C6alkil opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>ili R<11>. U nekim izvođenjima, R<8>` je aril opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>ili R<11>. U nekim izvođenjima, R<8>` je heteroaril opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>ili R<11>.

[0030] U nekim izvođenjima, R<9>je -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, aril, heteroaril, gde je svaki alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, heteroikl, aril ili heteroaril opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>ili R<11>. U nekim izvođenjima, R<9>je -H. U nekim izvođenjima, R<9>je -C1-C6alkil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl ili aril, gde je R<9>opciono supstituisan sa R<10>ili R<11>. U nekim izvođenjima, R<9>je -C1-C6alkil opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>ili R<11>. U nekim izvođenjima, R<9>je aril opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>ili R<11>. U nekim izvođenjima, R9 je heteroaril opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>ili R<11>.

[0031] U nekim izvođenjima, R<10>je -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OH, halogen, -okso, -NO2, -CN, -NH2, -OC1-C6alkil, -NHC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6alkil), -S(O)2N(C1-C6alkil)2, -S(O)2C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6alkil), -C(O)N(C1-C6alkil)2, -C(O)OC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)SO2C1-C6alkil, -S(O)(C1-C6alkil), -S(O)N(C1-C6alkil)2ili -N(C1-C6alkil)S(O)(C1-C6alkil), gde je svaki alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, heterocikl, heteroaril ili aril opciono supstituisan sa jednim ili više -R<12>. U nekim izvođenjima, R<10>je -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, gde je R<10>opciono supstituisan sa R<12>. U nekim izvođenjima, R<10>je halogen. U nekim izvođenjima, R<10>je nezavisan, pri svakoj pojavi -C1-C6 alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OH, halogen, -okso, -NO2, -CN, -NH2, -OC1-C6 alkil, -OC3-C6 cikloalkil, -O aril, -O heteroaril, -NHC1-C6 alkil, -N(C1-C6alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6alkil), -S(O)2N(C1-C6alkil)2, -S(O)2C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6alkil), -C(O)N(C1-C6alkil)2, -C(O)OC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)SO2C1-C6alkil, -S(O)(C1-C6alkil), -S(O)N(C1-C6alkil)2ili -N(C1-C6alkil)S(O)(C1-C6alkil), gde je svaki alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, heterocikl, heteroaril ili aril i opciono supstituisan sa jednim ili više -R<12>; pri čemu bilo koja dva R<10>kada su na

1

nesusednim atomima mogu se kombinovati da formiraju cicloalkil ili heterocikl za premošćenje; pri čemu bilo koja dva R<10>kada su na susednim atomima mogu se kombinovati da formiraju cikloalkil, heterocikl, aril ili heteroaril. U nekim izvođenjima, R<10>je nezavisan, pri svakoj pojavi halogena ili -OC1-C6alkil, -OC3-C6cikloalkil, -O aril, -O heteroaril, gde je svaki alkil, cikloalkil, aril ili heteroaril opciono supstituisan sa jednim ili više -R<12>.

[0032] U nekim izvođenjima, R<11>je -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OH, halogen, -okso, -NO2, -CN, -NH2, -OC1-C6alkil, -NHC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6alkil), -S(O)2N(C1-C6alkil)2, -S(O)2C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6alkil), -C(O)N(C1-C6alkil)2, -C(O)OC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)SO2C1-C6alkil, -S(O)(C1-C6alkil), -S(O)N(C1-C6alkil)2ili -N(C1-C6alkil)S(O)(C1-C6alkil), gde je svaki alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, heterocikl, heteroaril ili aril opciono supstituisan sa jednim ili više - R<12>. U nekim izvođenjima, R<11>je -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, pri čemu je R<11>opciono supstituisan sa R<12>. U nekim izvođenjima, R<11>je halogen.

[0033] U nekim izvođenjima, R<12>je -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OH, halogen, -okso, -NO2, -CN, -NH2, -OC1-C6alkil, -NHC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6alkil), -S(O)2N(C1-C6alkil)2, -S(O)2C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6alkil), -C(O)N(C1-C6alkil)2, -C(O)OC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)SO2C1-C6alkil, -S(O)(C1-C6alkil), -S(O)N(C1-C6alkil)2ili -N(C1-C6alkil)S(O)(C1-C6alkil). U nekim izvođenjima, R<12>je -H. U nekim izvođenjima, R<12>je halogen.

[0034] U nekim izvođenjima, n je 1. U nekim izvođenjima, n je 2. U nekim izvođenjima, n je 3. U nekim izvođenjima, n je 4.

[0035] U nekim izvođenjima, R<1>je -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikloalkil, heteroaril ili aril.

[0036] Poželjno je, jedinjenje Formule (I) je inhibitor CBP pri čemu R<1>je -OCH3. U nekim izvođenjima, inhibitor CBP jedinjenje Formule (I) uključuje R<1>koji je -OCH3i R<6>koji je -C6aril (fenil) opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>. U nekim izvođenjima, inhibitor CBP jedinjenje Formule (I) uključuje R<1>koji je -OCH3i R<6>koji je -C6aril (fenil) opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>koji je izabran iz grupe koju čine halogen (npr. fluor) i metoksi, pri čemu je metoksi opciono supstituisan sa jednim ili više R<12>.U nekim izvođenjima, inhibitor CBP jedinjenje Formule (I) uključuje R<1>koji je -OCH3i R<6>koji je -C6 aril (fenil) opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>koji je izabran iz grupe koju čine halogen (npr. fluor) i metoksi, pri čemu je metoksi opciono supstituisan sa jednim ili više R<12>i R<12>je halogen (poželjno, fluor).

[0037]U nekim izvođenjima, jedinjenje pronalaska je jedinjenje odabrano sa Slike 1 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

Postupci sinteze jedinjenja

[0038] Jedinjenja ovog pronalaska se mogu dobiti razlićitim postupcima, uključujući i standardnu hemiju. Pogodni sintetski putevi su prikazani u Primerima navedenim u daljem tekstu.

[0039] Jedinjenja ovog pronalaska, npr. jedinjenje Formule (I) ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, enantiomeri, hidrati, solvat, prolek, izomer ili tautomer, mogu se dobiti postupcima poznatim u oblasti organskih sinteza kao skup sintetskih šema koje se mogu pratiti. U šemama opisanim u narednom tekstu, dobro se razume da se koriste zaštitne grupe za osetljive ili reaktivne grupe gde je to neophodno prema opštim principima ili hemiji. Zaštitnim grupama se manipuliše prema standardnim metodama organskih sinteza (T. W. Greene i P. G. M. Wuts, "Protective Groups in Organic Synthesis", Trećeizdanje, Wiley, Njujork 1999). Ove grupe se uklanjaju u pogodnoj fazi sinteze jedinjenja korišćenjem metoda koje su lako vidljive stručnjacima u ovoj oblasti. Odabir postupaka, kao što su reakcioni uslovi i redosled njihovog izvođenja, moraju biti u skladu sa pripremom jedinjenja Formule (I).

[0040] Stručnjaci u ovoj oblasti će prepoznati ukoliko postoji stereoizomer u jedinjenju Formule (I). Shodno tome, ovaj pronalazak uključuje oba moguća stereoizomera (osim ako nije navedeno u sintezi) i uključuje ne samo racemska jedinjenja već individualne enantiomere i/ili dijastereoizomere. Kada je jedinjenje poželjno kao pojedinačni enantiomer ili dijastereoizomer onda se može dobiti stereospecifičnom sintezom ili razlaganjem finalnog produkta ili bilo kog konvencionalnog intermedijera. Razlaganje finalnog proizvoda, intermedijera ili početnog materijala može biti pod uticajem bilo koje pogodne metode poznate u struci. Pogledati na primer "Stereochemistry of Organic Compounds" E. L. Eliel, S. H. Wilen, i L. N. Mander (Wiley-lnterscience, 1994).

[0041] Jedinjenja opisana ovde mogu biti napravljena od komercijalno dostupnih početnih materijala ili sintetisanih korišćenjem poznatim organski, neorganskim i/ili enzimskim postupcima.

[0042] Pronalazak takođe uključuje farmaceutske kompozicije koje sadrže jedno ili više jedinjenja inhiibitora CBP, kako je ovde opisano, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljivu pomoćnu supstancu. U nekim izvođenjima, ovde opisane farmaceutske kompozicije se mogu dati u jedinice oblika doziranja (npr. kapsula, tableta ili slično). Farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje Formule (I) se mogu primenjivati kao oralni oblici doziranja poput kapsule ili tablete. Oralni oblici doziranja opciono sadrže jednog ili više punioca, dezificijensa, lubrikanta, sredstva za klizanje, sredstva protiv lepljenja i anti-statika. U nekim izvođenjima, oralni oblik doziranja je pripremljen suvim mešanjem. U nekim izvođenjima, oralni oblik doziranja je tableta i pripremljena je suvom granulacijom. Na primer, jedinjenje inhibitor CBP ovog pronalaska može biti doziran od 1 mg do 1 g u terapeutski efikasnoj učestalosti. Farmaceutske kompozicije oralno mogu biti primenjivane u bilo kom prihvatljivom oralnom obliku doziranja. Prema tome, pacijent i/ili subjekat može biti odabran za tretman korišćenjem ovde opisanog jedinjenja tako što će se uraditi procena pacijenta i/ili subjekta kako bi se utvrdilo da li mu je potrebna inhibicija CBP, a onda se jedinjenje ovde opisano primenjuje na subjekta.

[0043] Farmaceutske kompozicije mogu sadržati jedno ili više jedinjenja Formule (I) uključujući bilo koje jedinjenje predstavljeno u primerima u narednom tekstu, kako je dato. U jednom primeru, aktivni farmaceutski sastojak (API) može sadržati oko 90% ili više jedinjenja Formule (I) i do oko 10% (poželjno do oko 5%, najbolje do oko 2,5% uključujući oko 1,5%) jedinjenja Formule (I). Oralni oblici doziranja koji sadrže jedinjenja Formule (I) mogu se pripremiti kao lek-ukapsuli (DiC), inkapsuliranjem jednostavnog suvo mešanog granulata i rastvora na bazi lipida u kapsulu sa tvrdom ljuskom. Kapsule mogu sadržati farmaceutski prihvatljive pomoćne supstance i kapsulirane kapsule mogu biti pakovane u zapečaćene bočice od polietilena visoke gustine.

PRIMERI

Definicije koje se koriste u narednim Šemama i i na drugim mestima ovde su:

[0044]

ACN Acetonitril

Ac2O acet anhidrid

(±) BINAP (±)-2,2’-Bis(difenilfosfin)-1,1’-binaftalen

Boc tert-butoksikarbonil

n-BuOH Butanol

cm Centimetar

DCE 1,2-dihloroetan

DCM dihlorometan ili metilen hlorid

DEA Dietilamin

DMC 2-hloro-4,5-dihidro-1,3-dimetil-1H-imidazol hlorid

DMP Des-Martinov perjodinan

DMTMM 4-(4,6-dimetoksi-1,3,5-triazin-2-yl)-4-metilmorfolin hlorid

DIEA N,N-diizopropiletilamin

DMAP 4-(dimetilamino)piridin

DMF N,N-dimetilformamid

DMSO Dimetilsulfoksid

DPPA difenilfosforil azid

dppf bis(difenilfosfino)ferocen

ES elektrosprej jonizacija

Et3N Trietilamin

EtOAc etil acetat

EtOH Etanol

FA mravlja kiselina

FCC flash kolonska hromatografija

h Sati

HATU 2-(3H-[1,2,3]triazolo[4,5-b]piridin-3-yl)-1,1,3,3 tetrametilizouronium heksafluorofosfat

HCl hlorovodonična kiselina

HOAc sirćetna kiselina

HPLC tečna hromatografija visokih preformansi

<(i-Pr)>2<NEt>

N,N-diizopropiletilamin

L Litar

LC/MS tečna hromatografija sa masenom spektrometrijom

LDA Litijum diizopropilamin

K2CO3 kalijum karbonat

MeOH Metanol

mL Millilitar

mmol Milimol

mg Milligram

MHz Megaherc

MS masena spektrometrija

m/z odnos masa/naelektrisanje

NBS N-bromosukcinimid

nm Nanometar

NMM 4-metilmorfolin

NMR nuklearna magnetna rezonanca

Pd2(dba)3 tris(dibenzilideneaceton)dipaladijum

Ph3P Trifenilfosfine

PhCHO Benzoaldehid

PhMe Toluen

ppm parts per million

rt sobna temperatura

RT retenciono vreme

1

SFC superkritična fluidna hromatografija

STAB natrijum triacetoksiborohidrid

p-TSA para-toluenesulfonski anhidrid

p-TsOH para-toluenesulfonska kiselina

TFA trifluorosirćetna kiselina

TFAA trifluorosirćetni anhidrid

THF Tetrahidrofuran

UV ultraljubičasti zraci

XPhos 2-dicikloheksilfosfino-2’,4’,6’-triizopropilbifenil

Materijali

[0045] Osim ako nije drugačije naznačeno, svi materijali su nabavljeni od komercijalnih dostavljača i korišćeni bez dodatnog prečišćavanja. Anhidrovani rastvarači su nabavljeni od firme Sigma-Aldrich (Milwaukee, WI) i direktno korišćeni. Sve reakcije sa reagensima koji su osetljivi na vazduh ili vlagu su izvođenje u atmosferi azota i za sve reakcije su korišćena mikrotalasna zračenje sa instrumenta Biotage Initiator EXP EU.

[0046] Osim ako nije drugačije naznačeno, “mass-triggered HPLC prečišćavanje i/ili čistoća i podaci masenog spektra sa niskom rezolucijom se mereni korišćenjem: (1) Waters Acquity sistema tečne hromatografije visokih preformansi (UPLC)(Waters Acquity UPLC sa Sample Organizer and Waters Micromass ZQ masenom spektrometrijom) sa UV detekcijomna 220 nm u režimu pozitivne elektronsprej jonizacije niske rezonance (ESI) (kolona: Acquity UPLC BEH C18 1,7mm 2,1x50 mm; gradijent: 5-100% Rastvarača B (95/5/0.09%: Acetonitril/Voda/Mravlja kiselina) u Rastvaraču A (95/5/0.1%: 10 µM Amonijum Format/Acetonitril/Mravlja kiselina) 2,2 min, a nakon toga 100-5% Rastvarača B u Rastvaraču A za 0,01 min, i onda se drži na 5% Rastvarača B u Rastvarača A 0,29 min) ili (2) Waters HT2790 Alliance tečna hromatografija visokih preformansi (HPLC) (Waters 996 PDA i Waters ZQ Single Quad Maseni Spektrometar) sa UV detekcijom na 220 nm i 254 nm i režimom (pozitivne/negativne) elektronsprej jonizacije niske rezonance (ESI) (kolona: XBridge Phenyl ili C18, 5 mm 4.6x50 mm; gradijent: 5-95% Rastvarača B (95% metanol/5% voda sa 0.1% mravlje kiseline) u Rastvaraču A (95% voda/5% metanol sa 0.1% mravlje kiseline) 2,5 min, a onda držati na 95% Rastvarač B u Rastvaraču A 1 min (čistoća i niska rezolucija samo MS).

Opšti postupci pripreme jedinjenja

[0047] Ovde su opisani postupci za sintezu jedinjenja predstavljenog pronalaska. Jedinjenja ovog pronalaska mogu biti sintetisana prema šemama koje su date u nastavku. Priprema polaznih materijala za Šeme 1 i 2 (“Intermedijer 1”) je opisana u narednom tekstu. Priprema polaznih materijala za Šeme 3 i 4 se može pronaći u Primeru 1, Delu A U.S. Patenta No. 4,404,207.

[0048] Ukoliko ako nije drugačije naznačeno, substituenti R<2>i R<3>u sledećim reakcionim šemama su definisani na sledeći način, a R<6>je definisan u opisu i patentnim zahtevima.

[0049] Šema 1 daje postupke korisne za sintezu jedinjenja Formule I.

Šema 1

[0050] Šema 2 daje postupke korisne za sintezu jedinjenja Formule I.

Šema 2

[0051] Alternativno, Šema 3 daje postupke korisne za sintezu jedinjenja Formule I.

Šema 3

[0052] Alternativno, Šema 3 daje postupke korisne za sintezu određenih jedinjenja Formule I. Šema 4

1

Priprema Intermedijera 1: metil(S)-5-amino-6-bromo-2-metil-3,4-dihidrokvinolin-1(2H)-karboksilat

[0053]

Korak 1: 8-hloro-5-metoksi-2-metilkvinolin hidrohloride

[0054] U tikvici od 5L sa okruglim dnom i 4 grla, očišćenu i držanu u inertnoj atmosferi azota, rastvoren je 2-hloro-5-metoksianilin (250 g, 1,59 mol) u 1-butanolu (1200 ml). Onda su dodate hlorovodonična kiselina (vod, 36,5%, 526,5 ml) i hloranil (456,5 g, 1.86 mol). Dobijena smeša je mešana 1h na 100°C u atmosferi azota. Onda je kapanjem dodat rastvor (E)-but-2-enal (169 ml, 2,06 mol) u 1-butanolu (300 mL). Dobijeni rastvor je mešan 1h na 100°C u atmosferi azota. Uljano kupatilo je ohlađeno na 70°C i dodat je tetrahidrofuran (1500ml). Onda je dobijena smeša mešana 1h na 70°C. Reakciona smeša je ohlađena na 0°C i čvrsta materija je filtrirana. Čvrsta materija je isprana tetrahidrofuranom (3L) na 0°C. Dobijeno je jedinjenje iz naslova (300g, 77%) kao žuta čvrsta supstanca. MS: (ES, m/z): 208, 210 [M+H]+.

1

Zatim se osuši u sušnici i dobije se 8-hloro-5-methoksi-2-metilkvinolin hidrohlorid (83.0 g, 74%) kao žuta čvrsta supstanca. MS (ES, m/z): 208 [M+H]+.

Korak 2: 5-metoksi-2-metilkvinolin

[0055] U tikvici od 1000 ml sa okruglim dnom i 3 grla je rastvoren 8-hloro-5-metoksi-2-metilkvinolin hidrohloride (50 g, 204,82 mmol) u metanolu (300 ml). Onda su dodati natrijum-hidroksid (3M, 205 ml) i 10% paladijum na ugljeniku (25 g). U reakcionu smešu je dodat vodonik (g). Reakciona smeša je mešana 3h sata na sobnoj temperaturi u atmosferi vodonika. Reakcija je ispuštena u azot i čvrsta supstanca je filtrirana preko celita. Filtrirani rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću FCC eluiranja sa etil acetat/petroleum eter (1:5). Dobijeno je jedinjenje iz naslova (28.5 g, 80%) kao žuto ulje. MS: (ES, m/z): 174 [M+H]+.

Korak 3: (2S)-5-metoksi-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin

[0056] U reaktoru rezervoara pod pritiskom (50 atm) od 30 ml je rastvoren 5-metoksi-2-metilkvinolin (4,0 g, 23,09 mmol) u metanol (10 ml). Onda je dodat Ru(OTf)(η6-heksametilbenzen)((S,S)-TsDPEN)([N-[(1S,2S)-2-(amino-κN)-1,2-difeniletil]-4-metilbenzenesulfonamidat-κN][(1,2,3,4,5,6-η)-1,2,3,4,5,6-heksametilbenzen](1,1,1-trifluorometanesulfonato-κO)-rutenijum, pripremljen prema proceduri iz J. Am. Chem. Soc. 2011, 133, 9878-9891) (150 mg, 0,23 mmol). Zatim je uveden vodonik. Dobijeni rastvor je mešan 6h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncetrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću FCC eluiranja sa etil acetat/petroleum eter (1:4). Dobijeno je jedinjenje iz naslova (3.0 g, 73%) u obliku žutog ulja. MS: (ES, m/z): 178 [M+H]+.

Korak 4: Metil(S)-5-metoksi-2-metil-3,4-dihidrokvinolin-1(2H)-carboksilat

[0057]U tikvici od 250 ml sa okruglim dnom je rastvoren (2S)-5-metoksi-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin (18 g, 99,52 mmol) u dihlorometanu (100 ml). Onda je dodat piridin (23,6 g, 298,36 mmol), a nakon njega metil karbonhlorid (9,4 g, 99,47 mmol). Dobijeni rastvor je mešan 1h na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je razblazen sa 100 ml dihlormetana i ispran vodom 3x200 ml. Organski slojevi su spojeni, osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću FCC eluiranja sa etil acetat/petroleum eter (1:3). Dobijeno je jedinjenje iz naslova (21 g, 89%) kao žuto ulje. MS: (ES, m/z): 236 [M+H]+.

Korak 5. Metil(S)-5-hidroksi-2-metil-3,4-dihidrokvinolin-1(2H)-karboksilat

[0058] U tikvici od 500 ml sa okruglim dnom i 3 grla je rastvoren metil (2S)-5-metoksi-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat (21 g, 89,36 mmol) u dihlormetanu (150 ml). Onda je dodat bor-tribromid (150 mL, 0,15 mol, 1 M u CH2Cl2). Dobijeni rastvor je mešan 1h na sobnoj temperaturi. Reakcija je onda prekinuta dodatkom 300 ml vode. Dobijena smeša je ekstrahovana sa 3x300 ml dihlormetana. Organski slojevi su spojeni, osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću FCC eluiranja sa etil acetat/petroleum eter (1:2). Dobijeno je jedinjenje iz naslova (13.5 g, 68%) kao žuta čvrsta supstanca. MS: (ES, m/z): 222 [M+H]+.

Korak 6. Metil(S)-2-metil-5-(((trifluorometil)sulfonil)oksi)-3,4-dihidrokvinolin-1(2H)-karboksilat

[0059] U tikvici od 250 ml sa okruglim dnom je rastvoren metil (2S)-5-hidroksi-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat (5 g, 18,08 mmol) u dihlorometan (50 ml). Onda je dodat piridin (14.3 g, 180,78 mmol) ianhidrid trifluorometansulfonske kiseline (10,2 g, 36,15 mmol). Dobijeni rastvor je mešan 1h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je isprana sa 3x100 ml vode. Organski slojevi su spojeni, osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću FCC eluiranja sa etil acetat/petroleum eter (1:3). Dobijeno je jedinjenje iz naslova (5.5 g, 86%) u obliku žutog ulja. MS: (ES, m/z): 354 [M+H]+.

Korak 7. Metil(S)-5-((difenilmetile)amino)-2-metil-3,4-dihidrokvinolin-1(2H)-karboksilat

[0060] U tikvici od 500 ml sa okruglim dnom, očišćenoj i držanoj u inertnoj atmosferi azota, rastvoren je metil(2S)-2-metil-5-[(trifluorometan)sulfoniloksi]-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat (23,5 g, 65,18 mmol) u toluenu (100 ml). Zatim su dodati difenilmetanimin (17,9 g, 97,78 mmol), tris(dibenzilideneaceton)dipaladijum-hloroform adukt (1,19 g, 1,30 mmol), (+/-)-2,2’-Bis(difenilfosfin)-I,I’-binaftil (2,43 g, 3,90 mmol) i cezijum-karbonat (42,4 g, 130,13 mmol). Dobijeni rastvor je mešan preko noći na 100°C u atmosferi azota. Reakciona smeša je ohlađena i čvrsta materija je filtrirana. Ostatak je prečišćen pomoću FCC eluiranja sa etil acetat/petroleum eter (1:3). Dobijeno je jedinjenje iz naslova (33 g, 80%) kao žuto ulje. MS: (ES, m/z): 385 [M+H]+.

Korak 8. Metil (S)-5-amino-2-metil-3,4-dihidrokvinolin-1(2H)-karboksilat

[0061] U tikvici od 500 ml sa okruglim dnom je rastvoren metil(2S)-5-[(difenilmetiliden)amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat (33 g, 85,93 mmol) u metanolu (200 ml). Onda je dodat natrijum acetat (17 g, 207,23 mmol) i hidroksilamin hidrohlorid (12.3 g, 177,00 mmol). Dobijeni rastvor je mešan 2h na sobnoj temperaturi. Čvrsta materija je profiltrirana. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću FCC eluiranja sa etil acetat/petroleum eter (1:2). Dobijeno je jedinjenje iz naslova (12,5 g, 66%) kao žuta čvrsta supstanca. MS: (ES, m/z): 221 [M+H]+.

1

Korak 9. Metil(S)-5-amino-6-bromo-2-metil-3,4-dihidrokvinolin-1(2H)-karboksilate (Intermedijer 1)

[0062] U tikvici od 100 ml sa okruglim dnom i 3 grla je rastvoren metil(2S)-5-amino-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat (1 g, 4,09 mmol) u acetonitrilu (20 ml). Onda je dodat N-bromosucinimid (730 mg, 4,10 mmol). Dobijeni rastvor je mešan 30 min na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću FCC eluiranja sa etil acetat/petroleum eter (1:1). Dobijeno je jedinjenje iz naslova (1.1 g, 90%) kao žuta čvrsta supstanca. MS: (ES, m/z): 299, 301 [M+H]+.

H-NMR: (400 MHz, CD30D, ppm): 7,19(d, J= 8,8 Hz, 1H), 6,84(d, J= 8,8 Hz, 1H), 4,73-4,69(m, 1H), 3,74(s, 3H), 2,64-2,57(m, 1H), 2,55-2,44(m, 1H), 2,12-2,05(m, 1H), 1,82-1,79(m, 1H), 1,17(d, J=6,9 Hz, 3H).

[0063] Šeme sinteze su predstavljene za sintezu određenih jedinjenja koja su ovde otkrivena. Opisani su postupak i rezultati testova koji testiraju inhibiciju BET porodice bromodomena.

Primer 1: Metil(S)-2-(2-(1H-pirazol-1-yl)etil)-7-metil-3-(2-(((1-metil-1H-pirazol-3-yl)metil)amino)etil)-3,7,8,9-tetrahidro-6H-imidazo[4,5-f]kvinolin-6-karboksilat

[0064]

Korak 1. 6-fluoro-2-metil-5-nitrokvinolin

[0065] Rastvor trifluorometansulfonske kiseline (82,0 ml, 0,923 mol) u HNO3 (19,6 ml, 0,437 mol) je mešan 20 min na 0°C. Nakon toga je dodat 6-fluoro-2-metilkvinolin (50,0 g, 0,310 mol) u dihlorometanu (300 ml) na 0°C. Dobijena smeša je mešana 15 sati na sobnoj temperaturi (25°C). Reakciona smeša je razblažena sa vodom (300 ml). pH vrednost rastvora je natrijum-bikarbonatom (zasićen vodeni rastvor) podešena na 8. Dobijena rastvor je ekstrahovan sa dihlormetanom (3x300 ml). Organski slojevi su spojeni, osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (eluirano sa 1:4 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio 6-fluoro-2-metil-5-nitrokvinolin kao svetlo žuta čvrsta supstanca (60.0 g, 94%). LCMS (ES, m/z): 207 [M+H]+. Korak 2. (2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin

[0066] Rastvor (S)-(-)-MeO-BIPHEP (1,03 g, 1,77 mmol), hloro(1,5-ciklooktadien)iridium(I) dimera (538 mg, 0,80 mmol) u toluenu (100 ml) je mešan 30 min na sobnoj temperaturi (25 °C) u atmosferi azota. Nakon toga je dodat I2(410 mg,

1

1,62 mmol) i 6-fluoro-2-metil-5-nitrokvinolin (33,0 g, 0,160 mol) u toluenu (100 ml).Dobijena smeša je mešana 20 sati na sobnoj temperaturi (25°C) u atmosferi vodonika (50 atm). Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom i prečišćen pomoću silika gel hromatografije (eluirano sa 1:1 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio sirov proizvod (35,0g). Sirov proizvod je rastvoren u etil acetatu (230 ml), zatim je dodata D-kamforsulfonska kisekina (36,9 g, 0,158 mol). Dobijena rastvor je mešan 1 h na 60°C i onda ohlađen na sobnu temperaturu. Čvrsta materija je skupljena filtracijom i isprana sa etil acetatom (120 ml). Čvrsta materija je rastvorena u vodi (50 ml). pH vrednost rastvora je natrijum-bikarbonatom (zasićen vodeni rastvor) podešena na 8. Dobijena rastvor je ekstrahovan sa etil acetatom (3x120 ml). Organski slojevi su spojeni, osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio (2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin kao čvrsta crvena supstanca (25,5 g, 76%). LCMS (ES, m/z): 211 [M+H]+.

Korak 3. Metil(2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat

[0067] Rastvor (2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolina (25,3 g, 0,120 mol), piridin a(39,0 ml, 0,484 mol) i metil karbonhlorida (18,7 mL, 0,242 mol) u dihlorometanu (150 ml) je mešano 3 h na sobnoj temperaturi (25 °C). Reakcija je isprana hlorovodoničnom (vod., 2 x 70 mL). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio metil(2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat kao žuta čvrsta supstanca (29.8 g, 92%). LCMS (ES, m/z): 269 [M+H]+.

Korak 4. Metil(2S)-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat

[0068] Rastvor metil(2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilata (29,6 g, 0,110 mol), piridina (29,6 ml, 0,368 mol), kalijum-karbonata (30,5 g, 0,220 mol) i metil(1R,3R)-3-aminocikloheksan-1-karboksilata (25,6 g, 162,84 mmol) u DMSO (270 ml) je mešan 15 h na 90°C i onda ohlađen na sobnu temperaturu. Reakcija je prekinuta dodatkom vode (200 ml) i ekstrahovana sa etil acetatom (3x300 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (eluirano sa 1:1 etil acetat/petroleum eter) da bi sedobio metil (2S)-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat u obliku crvenog ulja (32 g, 72%). LCMS (ES, m/z): 406 [M+H]+.

Korak 5. Metil(2S)-5-amino-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat

[0069] Rastvor metil(2S)-2-metil-5-nitro-6-[[(1R,3R)-4-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilata (31,0 g, 76,46 mmol), NH4Cl (24,3 g, 454,28 mmol) i Fe (prah, 64,3 g, 1,15 mol) u tetrahidrofuranu (300 ml), etanolu (300 ml), vodi (100 ml) jemešan 1 h na 80°C i onda ohlađen na sobnu temperaturu. Čvrsta matarija je profiltrirana. Dobijeni rastvor je razblažen vodom (300 ml) i ekstrahovan etil acetatom (3x400 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio metil(2S)-5-((R)-2-hidroksi-2-fenilacetamid)-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat kao tamno zelena čvrsta supstanca (27,5 g, 92%). LCMS (ES, m/z): 376 [M+H]+.

Korak 6. Metil(2S)-5-[2-(4-hlorofenil)-2-hidroksiacetamid]-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat

[0070] Rastvor 2-(4-hlorofenil)-2-hidroksisirćetnekiseline (112 mg, 0,60 mmol), HATU (304 mg, 0,80 mmol), metil(2S)-5-amino-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilata (150 mg, 0,40 mmol) i DIEA (155 mg, 1,20 mmol) u N,N-dimetilformamidu (2 ml) je mešan 15 h na sobnoj temperaturi (25°C). Dobijeni rastvor je razblažen vodom (300 ml) i ekstrahovan sa etil acetatom (3x50 ml). Organski slojevi su spojeni i isprani sa slanim rastvorom (2x25 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncetrovani pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (eluirano sa 1:1 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio metil(2S)-5-[2-(4-hlorofenil)-2-hidroksiacetamid]-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat kao žuto ulje (70,0 mg, 32%). LCMS (ES, m/z): 544 [M+H]+.

Korak 7. Metil(7S)-2-[(4-hlorofenil)(hidroksi)metil]-3-[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-6-karboksilat

[0071] Rastvor metil(2S)-5-[2-(4-hlorofenil)-2-hidroksiacetamid]-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilata (60,0 mg, 0,11 mmol) u AcOH (2 ml) je mešan 15 h na 40°C i onda ohlađen na sobnu temperaturu. Reakciona smeša je razblažena vodom (10 ml). pH vrednost rastvora je natrijumbikarbonatom (zasićen vodeni rastvor) podešena na 8. Dobijena rastvor je ekstrahovan sa etil acetatom (3x15 ml). Organski slojevi su spojeni, osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Dobijeni sirovi produkt je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (eluirano sa 1:1 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio metil(7S)-2-[(4-hlorofenil)(hidroksi)metil]-3-[(1R,3R)- 3-(metoksikarbonil)cikloheksil]-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-6-karboksilat u obliku žutog ulja (46,0 mg, 79%). LCMS (ES, m/z): 526 [M+H]+.

1

Korak 8. (1R,3R)-3-[(7S)-2-[(R)-(4-hlorofenil)(hidroksi)metil]-6-(metoksikarbonil)-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-3-yl]cikloheksan-1-karboksilnakiselina; (1R,3R)-3-[(7S)-2-[(S)-(4-hlorofenil)(hidroksi)metil]-6-(metoksikarbonil)-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-3-yl]cikloheksan-1-karboksilna kiselina

[0072] Rastvor metil(7S)-2-[(4-hlorofenil)(hidroksi)metil]-3-[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-6-karboksilat (50,0 mg, 0,10 mmol) i LiOH (11,4 mg, 0,48 mmol) u tetrahidrofuranu (1 ml) i vodi (1 ml) je mešan 15 h na 25°C. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Sirov proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC (kolona: XBridge Shield RP18 OBD kolona, 5um, 19x150 mm; mobilna faza, A: voda (sadrži 10 mmol/L NH4HCO3) i B: ACN (10% do 37% za 12 min); detektor: UV 254 nm). Frakcija proizvoda je liofilizovana kako bi se dobila (1R,3R)-3-[(7S)-2-[(R)-(4-hlorofenil)(hidroksi)metil]-6-(metoksikarbonil)-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-3-yl]cikloheksan-1-karboksilna kiselina (413) kao bela čvrsta supstanca (10,5 mg, 43%); i (1R,3R)-3-[(7S)-2-[(S)-(4-hlorofenil)(hidroksi)metil]-6-(metoksikarbonil)-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-3-yl]cikloheksan-1-karboksilna kiselina (501) kao bela čvrsta supstanca (7,0 mg, 29%).

Prvi eluirani izomer (413): 1H-NMR (CD3OD, 400 MHz) δ (ppm): 7,49 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,42-7,33 (m, 5H), 6,19 (s, 1H), 4,92-4,90 (m, 1H), 4,82-4,72 (m, 1H), 3,79 (s, 3H), 3,34-3,20 (m, 1H), 3,02-2,94 (m, 1H), 2,90-2,87 (m, 1H), 2,36-2,09 (m, 4H), 1,99-1,96 (m, 1H), 1,80-1,42 (m, 5H), 1,16 (d, J = 6,6 Hz, 3H). LCMS (ES, m/z): 512 [M+H]+.

Drugi eluirani izomer (501): 1H-NMR (CD3OD, 400 MHz) δ (ppm): 7,52-7,33 (m, 6H), 6,22 (s, 1H), 4,84-4,73 (m, 2H), 3,78 (s, 3H), 3,27-3,16 (m, 1H), 3,04-2,92 (m, 1H), 2,90-2,88 (m, 1H), 2,46-2,35 (m, 2H), 2,30-2,22 (m, 1H), 2,15-2,02 (m, 2H), 1,82-1,71 (m, 1H), 1,63-1,55 (m, 2H), 1,40-1,28 (m, 1H), 1,15 (d, J = 6,6 Hz, 4H). LCMS (ES, m/z): 512 [M+H]+.

[0073] Jedinjenja navedena na Slici 1 su pripremljena korišćenjem standardnih hemijskih postupaka i procedura sličnih onim koje su ovde opisane. Na Slici 1 “Eluirani Izomer” se odnosi na redosled kojim su jedinjenja eluirana pomocu preparativne HPLC.

Primer 2: Jedinjenja 424 i 660: (1R,3R)-3-[(7S)-2-[(R)-(5-fluoro-2-metoksifenil)(hidroksi)metil]- 6-(metoksikarbonil)-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-3-yl]cikloheksan-1-karboksilna kiselina (424); (1R,3R)-3-[(7S)-2-[(S)-(5-fluoro-2-metoksifenil)(hidroksi)metil]-6-(metoksikarbonil)-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-3-yl]cikloheksan-1-karboksilna kiselina (660)

[0074]

2

Korak 1. 2-(5-fluoro-2-metoksifenil)-2-[(trimetilsilil)oksilacetonitril

[0075] Rastvor ZnI2(1,6 mg, 0,01 mmol), 5-fluoro-2-metoksibenzaldehida (1,54 g, 9,99 mmol) u trimetilsilil karbonitrilu (1,5 mL, 11,25 mmol) je mešan 1 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (eluirano sa 1:1 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio 2-(5-fluoro-2-metoksifenil)-2-[(trimetilsilil)oksi]acetonitril kao bela čvrsta supstanca (2,0 g, 79%).

Korak 2. 2-(5-fluoro-2-metoksifenil)-2-hidroksi sirćetnakiselina

[0076] Rastvor 2-(5-fluoro-2-metoksifenill)-2-[(trimetillsilil)oksi]acetonitril (1,50 g, 5,92 mmol) u hlorovodoničnoj kiselini (10 ml, 12M) je mešan 1 h na 25°C i onda 2 h na 70°C. Reakciona smeša je ohlađena i koncentrovana pod vakuumom. Sirovi proizvod je prečišćen pomoću reversno fazne hromatografije (kolona: C18; mobilna faza, A: voda (sadrži 0.05% TFA) i B: ACN (5% do 20% tokom 30 min); detektor, UV 254 nm) da bi se dobio 2-(5- fluoro-2-metoksifenil)-2-hidroksisirćetna kiselina kao bela čvrsta supstanca (1,10 g, 93%).

Korak 3. 6-fluoro-2-metil-5-nitrokvinolin

[0077] Rastvor trifluorometansulfonske kiseline (82,0 ml, 0,923 mol) u HNO3(19,6 ml, 0,437 mol) je mešan 20 min na 0°C. Nakon toga je dodat 6-fluoro-2-metilkvinolin (50,0 g, 0,310 mol) u dihlorometanu (300 ml) na 0°C. Dobijena smeša je mešana 15 h na sobnoj temperaturi (25°C). Reakciona smeša je razblažena vodom (300 ml). pH vrednost rastvora je natrijum-bikarbonatom (zasićen vodeni rastvor) podešena na 8. Dobijena rastvor je ekstrahovan sa dihlormetanom (3x300 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen silika gel hromatografije (eluirano sa 1:4 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio 6-fluoro-2-metil-5-nitrokvinolinkao svetlo žutu čvrstu tečnost (60,0 g, 94%). LCMS (ES, m/z): 207 [M+H]+.

Korak 4. (2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin

[0078] Rastvor (S)-(-)-MeO-BIPHEP (1,03 g, 1,77 mmol), hloro(1,5-ciklooctadien)iridium(I) dimera (538 mg, 0,80 mmol) u toluenu (100 ml) je mešan 30 min na sobnoj temperaturi (25°C) u atmosferi azota. Nakon toga su dodati I2(410 mg, 1,62 mmol), 6-fluoro-2-metil-5-nitrokvinolin (33,0 g, 0,160 mol) u toluenu (100 ml). Dobijena smeša je mešana 20 h na sobnoj temperaturi (25°C) u atmosferi vodonika (50 atm). Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom i prečišćena pomoću silika gel hromatografije (eluirano sa 1:1 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio sirov proizvod (35,0 g). Sirov proizvod je razblažen etil acetatom (230 ml), zatim je dodata D-Camforsulfonska kiselina (36,9 g, 0,158 mol). Dobijeni rastvor je mešan 1 h na 60°C i ohlađen na sobnu temperaturu. Čvrsta materija je skupljena filtracijom i isprana sa etil acetatom (120 ml). Čvrsta materija je rastvorena uvodi (50 ml). pH vrednost rastvora je natrijum-bikarbonatom (zasićen vodeni rastvor) podešena na 8. Dobijena rastvor je ekstrahovan sa etil acetatom (3x120 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio (2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin kao crvena čvrsta supstanca (25,5 g, 76%). LCMS (ES, m/z): 211 [M+H]+.

Korak 5. Metil(2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat

[0079] Rastvor (2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolina (25,3 g, 0,120 mol), piridina (39,0 ml, 0,484 mol), metil karbonhlorida (18.7 ml, 0.242 mol) u dihlorometanu (150 ml) je mešan 3 h na sobnoj temperaturi (25°C). Reakcija je isprana sa 1M hlorovodoničnom kiselinom (2x70 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio (2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat u obliku žute čvrste supstance (29,8 g, 92%). LCMS (ES, m/z): 269 [M+H]+.

Korak 6. Metil(2S)-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat

[0080] Rastvor metil(2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilata (29,6 g, 0,110 mol), piridina (29,6 ml, 0,368 mol), kalijum-karbonata (30,5 g, 0,220 mol), metil(1R,3R)-3-aminocikloheksan-1-karboksilata (25,6 g, 162,84 mmol) u DMSO (270 ml) je mešan 15 h na 90°C i onda ohlađen na sobnu temperaturu. Reakcija je ugašena dodatkom vode (200 ml) i ektrahovana etil acetatom (3x300 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen silika gel hromatografije (eluirano sa 1:1 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio metil(2S)- 6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat u obliku crvenog ulja (32 g, 72%). LCMS (ES, m/z): 406 [M+H]+.

Korak 7. Metil(2S)-5-amino-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat

[0081] Rastvor metil(2S)-6-[[(lR,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilata (31,0 g, 76,46 mmol), NH4Cl (24,3 g, 454,28 mmol), Fe (64.3 g, 1.15 mol) u tetrahidrofuranu (300 ml), etanolu (300 ml) i vodi (100 ml) je mešan 1 h na 80°C i onda ohlađen na sobnu temperaturu. Čvrsta materija je filtrirana. Dobijeni rastvor je razblažen vodom (300 ml) i ekstrahovan sa etil acetatom (3x400 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio metil(2S)-5-amino-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat u obliku tamno zelene čvrste supstance (27,5 g, 92%). LCMS (ES, m/z): 376 [M+H]+.

Korak 8. Metil(2S)-5-[2-(5-fluoro-2-metoksifenil)-2-hidroksiacetamido]-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinollin-1-karboksilat

[0082] Rastvor 2-(5-fluoro-2-metoksifenil)-2-hidroksisirćetnekiseline (240 mg, 1,20 mmol), HATU (228 mg, 0,60 mmol), metil(2S)-5-amino-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilata (150 mg, 0,40 mmol), DIEA (0,19 ml, 1,20 mmol) u N,N-dimetilformamidu (10 ml) je mešan 1 h na 25°C. Dobijeni rastvor je razblažen vodom (10 ml). Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil acetatom (3x15 ml) i spojeni su organski slojevi. Dobijena smeša je isprana visoko koncentrovanim rastvorom natrijum-hlorida (2x20 ml). Smeša je osušena anhidrovanim natrijum sulfatom i koncentrovana pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen silika gel hromatografije (eluirano sa 3:2 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio metil(2S)-5-[2-(5-fluoro-2-metoksifenil)-2-hidroksiacetamido]-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karkoksilat u obliku žute čvrste supstance (180 mg, 81%). LCMS (ES, m/z): 558 [M+H]+.

Korak 9. Metil(7S)-2-[(5-fluoro-2-metoksifenil)(hidroksi)metil]-3-[(1R,3R)-3-(metoksicarbonil)cikloheksil]- 7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-6-karboksilat

[0083] Rastvor metil(2S)-5-[2-(5-fluoro-2-metoksifenil)-2-hidroksiacetamid]-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilata (180 mg, 0,32 mmol) u AcOH (8 ml) je mešan preko noci na 60°C. Reakciona smeša je ohlađena i koncentrovana pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen silika gel hromatografije (eluirano sa 1:1 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio metil(7S)-2-[(5-fluoro-2-metoksifenil)(hidroksi)metil]-3-[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-6-karboksilat u obliku žute čvrste supstance (120 mg, 69%). LCMS (ES, m/z): 540 [M+H]+.

Korak 10. (1R,3R)-3-[(7S)-2-[(R)-(5-fluoro-2-metoksifenill)(hidroksi)metil]-6-(metoksikarbonil)-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-3-yl]cikloheksan-1-karboksilna kiselina; (1R,3R)-3-[(7S)-2-[(S)-(5-fluoro-2-metoksifenil)(hidroksi)metil]-6-(metoksikarbonil)-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-3- yl]cikloheksan-1-karboksilna kiselina

[0084] Rastvor metil(7S)-2-[(5-fluoro-2-metoksifenil)(hidroksi)metil]-3-[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-6-karboksilata (120 mg, 0,22 mmol) i LiOH (16 mg, 0,67 mmol) u tetrahidrofuranu (2,0 ml), metanolu (2,0 ml) i vodi (2,0 ml) je mešan preko noci na 25°C. Reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen Prep-HPLC (kolona: X Bridge Prep C18 OBD kolona, 19x150 mm, 5um; mobilna faza, A: voda (sadrži 10 mmol/L NH4HCO3) i B: ACN (15.0% do 29,0% tokom 14 min); detektor: UV 220/254nm). Proizvod je razdvojen pomoću Chiral-Prep-HPLC (kolona: CHIRALPAK IE, 2x25cm, 5 um; mobilna faza, A: Hex (sadrži 0.1%FA) i B: etanol (konstantno 50.0% etanol tokom 12 min); detektor: UV 220/254 nm). Frakcije proizvoda su koncentrovane da bi se dobili (1R,3R)-3-[(7S)-2-[(R)-(5-fluoro-2-metoksifenil)(hidroksi)metil]-6-(metoksikarbonil)-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo [4,5-f]kvinolin-3-yl]cikloheksane-1-karboksilna kiselina u obliku bele čvrste supstance (23,6 mg, 20%); i (1R,3R)-3-[(7S)-2-[(S)-(5-fluoro-2-metoksifenil)(hydroxy)methyl]- 6-(methoxycarbonyl)-7-methyl-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]quinolin-3-yl]cikloheksan-1-karboksilna kiselina u obliku bele čvrste supstance (23,8 mg, 20%). Čistoća stereoizomera je određena pomoću HPLC: kolona: CHIRALPAK IE-3, dimenzije kolone: 0.46x5 cm; 3 mm; mobilna faza: Hex (0.1%FA):EtOH = 50:50, protok: 1.0 ml/min.

Prvi eluirani izomer (424): 1H-NMR (CD30D, 400 MHz) δ (ppm): 7,56-7,47 (m, 1H), 7,47-7,31 (m, 1H), 7,21-7,09 (m, 1H), 7,09-6,89 (m, 2H), 6,53(s, 1H), 4,81-4,61(m, 2H), 3,85(s, 3H), 3,78(s, 3H), 3,31-3,18(m, 1H), 3,06-2,82 (m, 2H), 2,57-2,41 (m, 1H), 2,41-2,31 (m, 1H), 2,31-2,09 (m, 3H), 1,83-1,58 (m, 3H), 1,49-1,21 (m, 2H), 1,16 (d, J = 6,8 Hz, 3H). LCMS (ES, m/z): 526 [M+H]+.

Drugi eluirani izomer (660): 1H-NMR (CD30D, 400 MHz) δ (ppm): 7,69-7,44 (m, 2H), 7,44-7,29 (m, 1H), 7,12-6,99 (m, 1H), 6,98-6,82 (m, 1H), 6,37(s, 1H), 5,03-4,91(m, 1H), 4,81-4,69(m, 1H), 3,78(s, 3H), 3,61(s, 3H), 3,22-3,04(m, 1H), 3,02-2,87 (m, 2H), 2,54-2,41 (m, 1H), 2,41-2,27 (m, 1H), 2,27-2,08 (m, 3H), 1,82-1,58 (m, 3H), 1,58-1,41 (m, 2H), 1,14 (d, J = 6,4 Hz, 3H). LCMS (ES, m/z): 526 [M+H]+.

[0085] U poželjnim izvođenjima pronalazak daje prvi eluirani izomer u Koraku 10 procesa opisanog u prethodnom tekstu u Primeru 2, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so. U poželjnom izvođenju pronalazak daje jedinjenje 424 sledeće strukture:

Ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, hidrat, solvat ili tauntomer.

[0086] U nekim izvođenjima, pronalazak daje farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje 424 prethodne strukture ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so čistoće najmanje 90%, na primer više od 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% ili 99% u odnosu na jedan ili više povezanih izomera. Na primer, pronalazak daje jedinjenje 424 prethodne strukture ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so čistoće najmanje 90%, npr. više od 90%, 91%, 92%, 93%, 94%, 95%, 96%, 97%, 98% ili 99% u odnosu na jedinjenje 660 i opciono drugih stereoizomera jedinjenja 424, prikazanih u narednom tekstu. U nekim izvođenjima, pronalazak daje farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje 424 prethodne strukture ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so čistoće najmanje 95%.

[0087] Kompozicija Formule (I) može da sadrži jedno ili više jedinjenja Formule (I-a), (I-b), (I-c), (I-d), (I-e), (I-f), (I-g), (I-h), (I-i), (I-j), (I-k), (I-1), (I-m), (I-n) i/ili (I-o). Na primer, u nekim izvođenjima, pronalazak daje kompozicije koje sadrže jedinjenje 424 prethodne strukture ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so čistoće najmanje 90%, pri čemu kompozicija sadrži manje od 10%, npr. manje od %, manje od 8%, manje od 7%, manje od 6%, manje od 5%, manje od 4%, manje od 3%, manje od 2% ili manje od 1%, zajedno jednog ili više sledećih stereoizomera jedinjenja 424, predstavljenih kao Formule (II-a) - (II-o) u narednom tekstu:

2

[0088] U bilo kom od prethodnih izvođenja, navedeni procenat čistoće se može odrediti HPLC metodom. U nekim izvođenjima procenat čistoće se određuje sledećom HPLC metodom:

Priprema uzorka:

Pripremiti 0,2 mg/mL u 70/30 voda/acetonitril

LCMS Informacije:

Instrumenti:

MS: Waters QDa MS

HPLC: Waters Alliance e2595

UV: Waters 2998 PDA

Uslovi:

Mobilna Faza A: 10mM Ammonijum acetat

Mobilna Faza B: Acetonitril

Kolona: Waters XSelect Phenyl-Hexyl, 3,5 mikrom, 4,6x150 mm Column Temperatura: 35°C LC Gradient:

Runtime: 25 min

LC Flow Rate: 1 ml/min

UV Wavelength: 238 nm

Ionization Mode: Electrospray Ionization+ive

Injection Volume: 8 µl

[0089] Na primer, pronalazak daje farmaceutsku kompoziciju koja sadrže jedinjenje 424 prethodne strukture ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so čistoće najmanje 95% kako je određeno gore navedenom HPLC metodom. Pronalazak takođe daje farmaceutsku kompoziciju koja sadrže jedinjenje 424 prethodne strukture ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so čistoće najmanje 95% kako je određeno gore navedenom HPLC metodom.

[0090] Pronalazak daje jedinjenje Formule II dobijeno postupkom koji je prethodno naveden u Primeru 2:

Ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, hidrat, solvat ili tauntomer.

[0091] Čitaocu koji je iskusan u struci će biti jasno da se svaki od stereoizomera Formule (II) može dobiti pomoću različitih odgovarajućih stereohemijskih reagenasa primenjenih u postupku iz gore navedenog Primera 2. Na primer, prilagođavanjem reagensa korišćenog u Koraku 4 Primera 2, jedinjenja kao što su ona Formula (II-m) i (II- n) mogu biti sintetisana. Slično, u Koraku 6 Primera 2, reagens methil(1S,3R)-3-aminocikloheksan-1-karboksilatmože biti iskorišćen umesto metil(1R,3R)-3-aminocikloheksan-1-karboksilatakako bi se dobila jedinjenja Formule (II-b) i (II-e).Čitaocu koji je iskusan u struci će biti jasno da se kombinacijom ovih vrsta modifikacija u postupku opisanom u Primeru 2 svako od jedinjenja (II-a) do (II-o), opisanih u prethodnom tekstu, može sintetisati.

Primer 3: (1R,3R)-3-[(7S)-2-[(R)-hidroksi(fenil)metil]-6-(metoksikarbonil)-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-3-yl]cikloheksan-1-karboksilna kiselina (462)

[0092] Kompozicije koje sadrže Jedinjenje 462 mogu biti pripremljene postupkom koji je u nastavku opisan:

2

Korak 1. 6-fluoro-2-metil-5-nitrokvinolin

[0093] Rastvor trifluorometansulfonske kiseline (82,0 ml, 0,923 mol) u HNO3(19,6 ml, 0,437 mol) je mešan 20 min na 0°C. Nakon toga je dodat 6-fluoro-2-metilkvinolin (50,0 g, 0,310 mol) u dihlormetanu (300 ml) na 0°C. Dobijena smeša je mešana 15 h na sobnoj temperaturi (25°C). Reakciona smeša je razblažena vodom (300 ml). pH vrednost rastvora je natrijum-bikarbonatom (zasićen vodeni rastvor) podešena na 8. Dobijena rastvor je ekstrahovan sa dihlormetanom (3x300 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen silika gel hromatografije (eluirano sa 1:4 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio 6-fluoro-2-metil-5-nitrokvinolin kao svetlo žuta čvrstu supstanca (60,0 g, 94%). LCMS (ES, m/z): 207 [M+H]+.

Korak 2. (2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin

[0094] Rastvor (S)-(-)-MeO-BIPHEP (1,03 g, 1,77 mmol), hloro(1,5-ciklooktadien)iridium(I) dimera (538 mg, 0,80 mmol) u toluenu (100 ml) je mešan 30 min na sobnoj temperaturi (25°C) u atmosferi azota. Nakon toga je dodat I2(410 mg, 1,62 mmol), 6-fluoro-2-metil-5-nitrokvinolin (33,0 g, 0,160 mol) u toluenu (100 ml). Dobijena smeša je mešana 20 h na sobnoj temperaturi (25°C) u atmosferi vodonika (50 atm). Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom i prečišćena silika gel hromatografijom (eluirano sa 1:1 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio sirovi proizvod (35,0 g). Sirovi proizvod je rastvoren u etil acetatu (239 ml), a zatim je dodata D-Camforsulfonska kiselina (36,9 g, 0,158 mol). Dobijeni rastvor je mešan 1 h na 60°C i onda ohlađen na sobnu temperaturu. Čvrsta materija je skupljena filtracijom i isprana sa etil acetatom (120 ml). Čvrsta materija je rastvorena u vodi (50 ml). pH vrednost rastvora je natrijum-bikarbonatom (zasićen vodeni rastvor) podešena na 8. Dobijena rastvor je ekstrahovan sa etil acetatom (3x120 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio (2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin kao crvena čvrsta supstanca (25,5 g, 76%). LCMS (ES, m/z): 211 [M+H]+.

[0095] Rastvor (2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolina (25,3 g, 0,120 mol), piridina (39,0 ml, 0,484 mol), metil karbonhlorida (18,7 ml, 0,242 mol) u dihlorometanu (150 ml) je mešan 3 h na sobnoj temperaturi (25°C). Reakcija je isprana 1M hlorovodoničnom kiselinom (2x70 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio metil(2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat kao žuta čvrsta supstanca (29,8 g, 92%). LCMS (ES, m/z): 269 [M+H]+.

2

[0096] Rastvor (2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolina-1-karboksilata (29,6 g, 0,110 mol), piridina (29,6 ml, 0,368 mol), kalijum-karbonata (30,5 g, 0,220 mol), metil(1R,3R)-3-aminocikloheksan-1-karboksilata (25,6 g, 162,84 mmol) u DMSO (270 ml) je mešan 15 h na 90°C i onda ohlađen na sobnu temperaturu. Reakcija je ugašena dodatkom vode (200 ml) i ekstrahovana etil acetatom (3x300 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (eluirano sa 1:1 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio metil(2S)-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat u obliku crvenog ulja (32 g, 72%). LCMS (ES, m/z): 406 [M+H]+.

[0097] Rastvor (2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolina-1-karboksilata (31,0 g, 76,46 mmol), NH4Cl (24,3 g, 454,28 mmol), Fe (64,3 g, 1,15 mol) u tetrahidrofuranu (300 ml), etanolu (300 ml), vodi (100 mL) je mešan 1 h na 80°C i onda ohlađen na sobnu temperaturu. Čvrsta matarija je profiltrirana. Dobijeni rastvor je razblažen vodom (300 ml) i ekstrahovan etil acetatom (3x400 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio metil(2S)-5-amino-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat kao tamno zelena čvrsta supstanca (27,5 g, 92%). LCMS (ES, m/z): 376 [M+H]+.

Korak 6. Metil(2S)-5-((R)-2-hidroksi-2-fenilacetamido)-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2- metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat

[0098] Rastvor (R)-2-hidroksi-2-fenil sirćetne kiseline (972 mg, 6,39 mmol), HATU (1,20 g, 3,16 mmol), metil(2S)-5-amino-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilata (800 mg, 2,13 mmol), DIEA (1,08 ml, 6,20 mmol) u N,N-dimetilformamidu (10 ml) je mešan 5 h na sobnoj temperaturi (25°C). Dobijeni rastvor je razblažen vodom (30 ml) i ekstrahovan etil acetatom (3x50 ml). Organski slojevi su spojeni i isprani sa visoko koncentrovanim rastvorom natrijum-hlorida (2x25 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvoidi je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (eluirano sa 1:1 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio metil(2S)-5-((R)-2-hidroksi-2-fenilacetamido)-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat u obliku bezbojnog ulja (600 mg, 55%). LCMS (ES, m/z): 510 [M+H]+.

Korak 7. Metil(7S)-2-[(R)-hidroksi(fenil)metil]-3-[(1R,3R)-3-(metoksicarbonil)cikloheksil]-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-6-karboksilat

[0099] Rastvor metil(2S)-5-((R)-2-hidroksi-2-fenilacetamido)-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilata (600 mg, 1,18 mmol) u glacijalnoj sirćetnoj kiselini (5 ml, 98%) je mešan preko noći na 40°C, a zatim ohlađen na sobnu temperaturu. Reakciona smeša je razblažena vodom (10 ml). pH vrednost rastvora je natrijum-bikarbonatom (zasićen vodeni rastvor) podešena na 8. Dobijena rastvor je ekstrahovan sa etil acetatom (3x15 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvoidi je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (eluirano sa 1:1 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio metil(7S)-2-[(R)-hidroksi(fenil)metil]-3-[(1R,3R)-3-(metoksicarbonil)cikloheksil]-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-6-karboksilat (400 mg, 69%) obliku bezbojnog ulja. LCMS (ES, m/z): 492 [M+H]+.

Korak 8. (1R,3R)-3-[(7S)-2-[(R)-hidroki(fenil)metil]-6-(metoksikarbonil)-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-3-yl]cikloheksan-1-karboksilna kiselina

[0100] Rastvor metil(7S)-2-[(R)-hidroksi(fenil)metil]-3-[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-6-karboksilata (400 mg, 0,81 mmol), LiOH (100 mg, 4,17 mmol) u tetrahidrofuranu (5 ml) i vodi (2 ml) je mešan preko noći na sobnoj temperaturi (25°C). Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Sirov proizvod je prečišćen pomoću Prep-HPLC (kolona: XBridge Shield RP18 OBD Column, 5um, 19 x 150 mm; mobilna faza, A: voda (sadrži 10 mmol/L NH4HCO3) i B: ACN (3% do 30% tokom 21 min); detektor: UV 254 nm). Frakcije proizvoda su liofilizovane da bi se dobio (1R,3R)-3-[(7S)-2-[(R)-hidroksi(fenil)metil]-6-(metoksikarbonil)-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-3-yl]cikloheksan-1-carboksilna kiselina kao bela čvrsta supstanca (83,7 mg, 22%). Enantiomerni višak je određen pomoću HPLC: kolona: CHIRALPAK IE-3, dimenzije kolone: 0.46x5 cm; 3 mm; mobilna faza: Hex (0.1%FA): EtOH = 85:15, protok:1.0ml/min. 1H-NMR (CD3OD, 400 MHz) δ (ppm): 7,47-7,28 (m, 7H), 6,12(s, 1H), 4,84-4,74(m, 2H), 3,79(s, 3H), 3,33-3,25(m, 1H), 3,03-2,96 (m, 1H), 2,86-2,82 (m, 1H), 2,38-2,25 (m, 2H), 2,25-2,07 (m, 3H), 1,79-1,72 (m, 1H), 1,64-1,57 (m, 2H), 1,40-1,29 (m, 2H), 1,16 (d, J = 6,8 Hz, 3H). LCMS (ES, m/z): 478 [M+H]+; 99,13% ee.

Primer 4: (1R,3R)-3-[(7S)-2-[(S)-[2-(difluorometoksi)-5-fluorofenil](hidroksi)metil]-6-(metoksikarbonil)-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-3-yl]cikloheksan-1-karboksilnakiselina (452), (1R,3R)-3-

2

[(7S)-2-[(R)-[2-(difluorometoksi)-5-fluorofenil](hidroksi)metil]-6-(metoksikarbonil)-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-3-yl]cikloheksan-1-karboksilna kiselina (515)

[0101]

Korak 1. 2-(difluorometoksi)-5-fluorobenzaldehid

2

[0102] Rastvor 5-fluoro-2-hidroksibenzaldehida (2,0 g, 14,3 mmol), dietil(bromodifluorometil)fosfonata (5,69 g, 21,3 mmol), kalijum hidroksida (16,0 g, 285 mmol) u MeCN (100 mL) ivodi (50 mL) je mešan 1 h na -30°C. Reakciona smeša je razblažena vodom (20 ml). Dobijeni rastvor je ekstrahovan etil acetatom (3x100 ml) i organski slojevi su spojeni i osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom. Čvrsta materija je profiltrirana. Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (eluirano sa 1:1 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio 2-(difluorometoksi)-5-fluorobenzaldehid u obliku žute čvrste supstance (1,46 g, 54%). LCMS (ES, m/z): 191 [M+H]+.

Korak 2. 2-[2-(difluorometoksi)-5-fluorofenil]-2-[(trimetilsilil)oksi]acetonitril

[0103] Rastvor 2-(difluorometoksi)-5-fluorobenzaldehid (1,46 g, 7,68 mmol), TMSCN (760 mg, 7,66 mmol), ZnI2(50 mg, 0,16 mmol) u dihlorometanu (3 ml) je mešan 2 h na sobnoj temperaturi (25°C). Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (eluirano sa 1:1 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio 2-[2-(difluorometoksi)-5-fluorofenil]-2-[(trimetilsilil)oksi]acetonitril u obliku žute čvrste supstance (800 mg, 36%) . LCMS (ES, m/z):290 [M+H]+.

Korak 3. 2-[2-(difluorometoksi)-5-fluorofenil]-2-hidroksi sirćetna kiselina

[0104] Rastvor 2-[2-(difluorometoksi)-5-fluorofenil]-2-[(trimetilsilil)oksi] acetonitrila (800 mg, 2,77 mmol), 1,4- dioksana (2,0 mL), hlorovodonične kiseline (1,0 ml, 12M) u vodi (2 ml) je mešan 12 h na 70°C, a zatim ohlađen na sobnu temperaturu. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen pomoću reversno fazne hromatografije (voda (sadrži 0,05%TFA)/MeCN) da bi se dobila 2-[2-(difluorometoksi)-5-fluorofenil]-2-hidroksi sirćetne kiseline (400 mg, 61%). LCMS (ES, m/z): 237 [M+H]+.

Korak 4. 6-fluoro-2-metil-5-nitrokvinolin

[0105] Rastvor trifluorometanesulfonske kiseline (82,0 ml, 0,923 mol) u HNO3(19,6 ml, 0,437 mol) je mešan 20 min na 0°C. Nakon toga je dodat 6-fluoro-2-metilkvinolin (50,0 g, 0,310 mol) u dihlorometanu (300 ml) na 0°C. Dobijena smeša je mešana 15 h na sobnoj temperaturi (25°C). Reakciona smeša je razblažena vodom (300 ml). pH vrednost rastvora je natrijum-bikarbonatom (zasićen vodeni rastvor) podešena na 8. Dobijena rastvor je ekstrahovan sa dihlormetanom (3x300 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (eluirano sa 1:4 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio 6-fluoro-2-metil-5-nitrokvinolin obliku svetlo žute čvrste supstance (60.0 g, 94%). LCMS (ES, m/z): 207 [M+H]+.

Korak 5. (2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin

[0106] Rastvor (S)-(-)-MeO-BIPHEP (1,03 g, 1,77 mmol), hloro(1,5-ciklooctadien)iridium(I) dimera (538 mg, 0,80 mmol) u toluenu (100 ml) je mešan 30 min na sobnoj temperaturi (25°C) u atmosferi azota. Nakon toga je dodat I2(410 mg, 1,62 mmol), 6-fluoro-2-metil-5-nitrokvinolin (33,0 g, 0,160 mol) u toluenu (100 ml). Dobijena smeša je mešana 20 h na sobnoj temperaturi (25°C) u atmosferi vodonika (50 atm). Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom i prečišćena pomoću silika gel hromatografije (eluirano sa 1:1 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio sirovi proizvod (35,0 g). Sirovi proizvod je rastvoren u etil acetatu (230 ml), a zatim je dodata D-Camforsulfonska kiselina (36,9 g, 0,158 mol). Dobijeni rastvor je mešan 1 h na 60°C i onda ohlađen na sobnu temperaturu. Čvrsta materija je skupljena filtracijom i isprana sa etil acetatom (120 ml). Čvrsta materija je rastvorena u vodi (50 ml). pH vrednost rastvora je natrijumbikarbonatom (zasićen vodeni rastvor) podešena na 8. Dobijena rastvor je ekstrahovan sa etil acetatom (3x120 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio (2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin kao crvena čvrsta supstanca (25,5 g, 76%). LCMS (ES, m/z): 211 [M+H]+.

Korak 6. Metil(2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat

[0107] Rastvor (2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolina (25,3 g, 0,120 mol), piridina (39,0 mć, 0,484 mol), metil karbonhlorida (18,7 ml, 0,242 mol) u dihlorometanu (150 ml) je mešan 3 h na sobnoj temperaturi (25°C). Reakcija je isprana sa 1M hlorovodoničnom kiselinom (2x70 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio metil(2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat kao žuta čvrsta supstanca (29,8 g, 92%). LCMS (ES, m/z): 269 [M+H]+.

Korak 7. Metil(2S)-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat

[0108] Rastvor metil(2S)-6-fluoro-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilata (29,6 g, 0,110 mol), piridina (29,6 ml, 0,368 mol), kalijum-karbonata (30,5 g, 0,220 mol), metil(1R,3R)-3-aminocikloheksan-1-karboksilata (25,6 g, 162,84 mmol) u DMSO (270 ml) je mešan 15 h na 90°C, a zatim ohlađen na sobnu temperaturu. Reakcija je ugašena dodatkom vode (200 ml) i ektrahovana etil acetatom (3x300 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen silika gel hromatografijom (eluirano sa 1:1 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio metil(2S)-6-[[(1R,3R)-3-

2

(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat u obliku crvenog ulja (32 g, 72%). LCMS (ES, m/z): 406 [M+H]+.

Korak 8. Metil(2S)-5-amino-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat

[0109] Rastvor metil(2S)-6-[[(lR,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-5-nitro-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilata (31,0 g, 76,46 mmol), NH4Cl (24,3 g, 454,28 mmol), Fe (64,3 g, 1,15 mol) u tetrahidrofuranu (300 ml), etanolu (300 ml), vodi (100 ml) je mešan 1 h na 80°C, a zatim ohlađen na sobnu temperaturu. Čvrsta matarija je profiltrirana. Dobijeni rastvor je razblažen vodom (300 ml) i ekstrahovan etil acetatom (3x400 ml). Spojeni organski slojevi su osušeni anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio metil(2S)-5-amino-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat kao tamno zelena čvrsta supstanca (27,5 g, 92%). LCMS (ES, m/z): 376 [M+H]+.

Korak 9. Metil(2S)-5-[2-[2-(difluorometoksi)-5-fluorofenil]-2-hidroksiacetamido]-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat

[0110] Rastvor metil(2S)-5-amino-6-[[(lR,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilata (200 mg, 0,53 mmol), 2-[2-(difluorometoksi)-5-fluorofenill]-2-hidroksisirćetne kiseline (220 mg, 0,93 mmol), DMTMM (350 mg, 1.26 mmol) u dihlorometanu (5 ml) je mešan 1 h na sobnoj temperaturi (25°C). Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (eluirano sa 1:1 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio metil(2S)-5-[2-[2-(difluorometoksi)-5-fluorofenil]-2-hidroksiacetamido]-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilat u obliku žute čvrste supstance (70,0 mg, 22%). LCMS (ES, m/z): 594 [M+H]+.

Korak 10. Metil(7S)-2-[[2-(difluorometoksi)-5-fluorofenil](hidroksi)metil]-3-[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-6-karboksilat

[0111] Rastvor metil(2S)-5-[2-[2-(difluorometoksi)-5-fluorofenil]-2-hidroksiacetamido]-6-[[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]amino]-2-metil-1,2,3,4-tetrahidrokvinolin-1-karboksilata (70,0 mg, 0,12 mmol) u glacijalnoj sirćetnoj kiselini (2,0 ml) je mešan preko noći na 40°C, a zatim ohlađen na sobnu temperaturu. Dobijeni rastvor je koncentrovan pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen pomoću silika gel hromatografije (eluirano sa 1:2 etil acetat/petroleum eter) da bi se dobio metil(7S)-2-[[2-(difluorometoksi)-5-fluorofenil](hidroksi)metil]-3-[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-6-karboksilatu obliku žute čvrste supstance (50.0 mg, 74%). LCMS (ES, m/z): 576 [M+H]+.

Korak 11. (1R,3R)-3-[(7S)-2-[(S)-[2-(difluorometoksi)-5-fluorofenil](hidroksi)metil]-6-(metoksicarbonil)-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-3-yl]cikloheksan-1-karboksilna kiselina; (1R,3R)-3-[(7S)-2-[(R)-[2-(difluorometoksi)-5-fluorofenil](hidroksi)metil]-6-(metoksikarbonil)-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-3-yl]cikloheksan-1-karboksilna kiselina

[0112] Rastvor metil(7S)-2-[[2-(difluorometoksi)-5-fluorofenil](hidroksi)metil]-3-[(1R,3R)-3-(metoksikarbonil)cikloheksil]-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-6-karboksilata (50,0 mg, 0,09 mmol), LiOH (10,0 mg, 0,42 mmol) u tetrahidrofuranu (2,0 ml) i vodi (2,0 ml) je mešan preko noći na sobnoj temperaturi (25°C).Dobijena smeša je koncentrovana pod vakuumom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišćen Prep-HPLC(kolona, XBridge Shield RP18 OBD Column, 30x150 mm, 5 um; mobilnafaza, A: voda (sadrži 10 mmol/L NH4HCO3) i B: ACN (25,0% do 35,0% tokom 8 min); detektor, UV 254/220 nm). Frakcije proizvoda su koncentrovane da bi se dobili (1R,3R)- 3-[(7S)-2-[(S)-[2-(difluorometoksi)-5-fluorofenil](hidroksi)metil]-6-(metoksikarbonil)-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-3-yl]cikloheksan-1-karboksilnakiselina (452) u obliku bele čvrste supstance (4,50 mg, 9%), i ((1R,3R)-3-[(7S)-2-[(R)-[2-(difluorometoksi)-5-fluorofenil](hidroksi)metil]-6-(metoksikarbonil)-7-metil-3H,6H,7H,8H,9H-imidazo[4,5-f]kvinolin-3-yl]cikloheksan-1-karboksilna kiselina (515) u obliku bele čvrste supstance (4,30 mg, 9%).Enantiomernivišakjeodređenpomoću HPLC: kolona: CHIRALPAK IE-3, dimenzije kolone: 0.46x5 cm; 3 mm; korastvarač: IPA (20 mM NH3) gradijent (B%) : 10% do 50% u 4.0min, držati 2.0 min na 50%.

Prvi eluirani izomer (452): 1H-NMR (CD3OD, 400 MHz) δ (ppm): 7,63-7,61 (m, 1H), 7,53 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,41(d, J = 9,2Hz, 1H) 7,20-7,13 (m, 2H), 6,67-6,30 (m, 2H), 4,98-4,95 (m, 1H), 4,76-4,71 (m, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,15-2,86 (m, 3H), 2,46-2,20 (m, 5H), 1,81-1,53 (m, 5H), 1,13 (d, J = 6,8 Hz, 3H). LCMS (ES, m/z): 562 [M+H]+.

Drugi eluirani izomer (515): 1H-NMR (CD3OD, 400 MHz) δ (ppm): 7,55-7,53 (m, 1H), 7,47-7,42 (m, 2H), 7,40-7,12 (m, 2H), 6,85-6,44 (m, 2H), 4,94-4,91 (m, 1H), 4,76-4,71 (m, 1H), 3,78 (s, 3H), 3,22-2,84 (m, 3H), 2,46-2,23 (m, 5H), 1,84-1,61 (m, 5H), 1,14 (d, J = 6,4 Hz, 3H). LCMS (ES, m/z): 562 [M+H]+ ; >99.99% ee.

[0113] U nekim izvođenjima, pronalazak daje prvi eluirani izomer dobijen u Koraki 11 procesa opisanog u Primeru 4. U nekim izvođenjima, pronalazak daje drugi eluirani izomer dobijen u Koraku 11 procesa opisanog u Primeru 4.

Primer 5: HTRF biohemijski test ispitivanja aktivnosti CBP i BRD4

Claims

[0114] Sposobnost jedinjenja Formule (I) da selektivno inhibira CBP određena je korišćenjem sledećeg biohemijskog testa aktivnosti CBP i BRD4. Test je rađen sa finalnom zapreminom od 6 ml u puferu za ispitivanje koji sadrži 50 mM Hepes ((pH 7,5, (0,5M Hepes, pH 7,5 solution; Teknova H1575)), 0,5 mM GSH, 0,01% BGG (0,22 Mm filtrirano, Sigma, G7516-25G), 0,005% BSA (0,22 mM filtrirano, EMD Millipore Cosporation, 126575) i 0,01% Triton X-100 (Sigma, T9284-10L). Količina nanolitara od 10 tački, trostruko serijsko razlaženje u DMSO prethodno su dozirane u 1536 pločica za ispitivanje (Corning, #3724BC) za finalni test koncentracije od 33 µM do 1,7 nM, najveću od najnižih doza, tim redom. 3 ml x2 protein i 3 ml x2 peptidnog liganda je dodato na pločice za testiranje (prethodno utisnitog jedinjenja). Pločice su inkubirane u različito vreme na sobnoj temperaturi pre merenja signala. TR-FRET (Time-Resolved Fluorescence Resonance Energy Transfer) je meren na PHERAstar disk čitaču (BMG, opremljenim sa HTRF optičnim modulom [337/520/490]) or on an Envision plate reader (PerkinElmer, equipped with the TRF Laser unit, TRF duplog ogledala D400/D505 i emisionim filtrima M520 i M495). Podaci su prikazani kao procenat inhibicije u poređenju sa kontrolnim bunarićima na osnovu sledeće jednačine: %inh=1-((TR-FRET odnos – Ave niska)/(Ave visoka – Ave niska)) gde je TR-FRET odnos=(fluorescencija na 520nm/fluorescencija na 490nm)*10000), Ave nisko=srednja vrednost TR-FRET odnosa neenzimske kontrole (n=32) i Ave visoka=srednja vrednost TR-FRET odnosa DMSO kontrole (n=32). IC50vrednosti su određene pomoću standarda 4 parametra čpgističkog uklapanja algoritma uključenog u softverski paket Activity Base: IDBS XE Designer Model205. Podaci su dobijeni pomoću Levenburg Marquardt algoritma. Za sve formate testova podaci su izveštavani u procentima inhibicije u odnosu na kontrolne bunariće na osnovu sledeće jednačine: %inh = 100*((FLU – Ave niska)/(Ave visoka – Ave niska)) gde je FLU=izmerena fluorescencija, Ave niska=srednja vrednost fluorescencije neenzimske kontrole (n=32), i Ave visoka=srednja vrednost fluorescencije DMSO kontrole (n=32). IC50vrednosti su određene pomoću standarda 4 parametra čpgističkog uklapanja algoritma uključenog u softverski paket Activity Base: IDBS XE Designer Model 205. Podaci su dobijeni pomoću Levenburg Marquardt algoritma. IC50vrednosti su prikazane na Slici 1. Kao sto se vidi sa Slike 1, IC50vrednosti manje ili jednake 0,01 µM su označene "++++"; vrednosti veće od 0,01 µM i manje ili jednake 0,1 µM su označeni sa "+++"; vrednosti veće od 0,1 µM i manje ili jednake 1 µM su označeni sa "++"; i vrednosti veće od 1 µM su označeni sa "+". Jedinjenja koja nisu testirana u određenom testu imaju naznaku "NT". [0115] Unekim izvođenjima, CBP Inhibitor Jedinjenje je takođe selektivan za aktivnost CBP u poređenju sa aktivnošću BRD4, kako je utvrđeno dobijanjem IC50vrednosti za CBP inhibiciju u HTRF testu za CBP koja je niža od odgovarajuće IC50vrednosti dobijene u HTRF biohemijskom testu za aktivnost BRD4 prema Primeru 5. U sastavu CBP inhibitora se nalazi količina jedinjenja iz ovog pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i količine jednog ili više stereoizomera jedinjenja do količina koje zadržavaju dovoljnu aktivnost sastava u odnosu na inhibiciju CBPi selektivnost CBP u odnosu na BRD4. Koristeći ovde primenjene metode, kompozicija inhibitora CBP može sadržati 95% pomoću HPLC ili više jedinjenja pronalaska, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, i do 5% pomoću HPLC jedan ili više stereoizomera jedinjenja. [0116] U poželjnim izvođenjima, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenje 424 koje ima IC50vrednost manju ili jednaku 0,01 µM za inhibiciju CBP i IC50vrednost veću od 0,1µM i manju ili jednaku 1 µM za inhibiciju BRD4, kako je određeno pomoću HTRF biohemijskog testa za aktivnost CBP i BRD4 opisanog ovde u Primeru 5. [0117] U nekim izvođenjima, ovaj pronalazak se odnosi na jedinjenje Formule (II) odabrane iz grupe koja sadrži jedinjenje 424 i njegove srodne stereoizomere struktura (II-a) do (II-o), prikazanih u prethodnom tekstu, koji imaju IC50vrednost manju ili jednaku 0,01 µM za inhibiciju CBP i IC50vrednost veću od 0,1µM i manju ili jednaku 1 µM za inhibiciju BRD4, kako je određeno pomoću HTRF biohemijskog testa za aktivnost CBP i BRD4 opisanog ovde u Primeru 5. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje Formule (I):

Ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, enantiomer, hidrat, solvat, stereoizomer ili tautomer, pri čemu: R<1>je -OR<5>; R5 je -C1-C6alkil; R<6>je fenil opciono supstituisan sa jednim ili više R<10>; R<10>je nezavisan, pri svakoj pojavi, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OH, halogen, -NO2, -CN, -NH2, -OC1-C6alkil, -OC3-C6cikloalkil, -O aril, -O heteroaril, -NHC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6alkil), -S(O)2N(C1-C6alkil)2, -S(O)2C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6alkil), -C(O)N(C1-C6alkil)2, -C(O)OC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)SO2C1-C6alkil, -S(O)(C1-C6alkil), -S(O)N(C1-C6alkil)2ili -N(C1-C6alkil)S(O)(C1-C6alkil), gde je svaki alkil, alkenil, alkinil, cikloalkil, cikloalkenil, heterocikl, heteroaril ili aril opciono supstituisan sa jednim ili više -R<12>; Pri čemu bilo koja dva R<10>kada su na nesusednim atomima mogu se kombinovati da formiraju cikloalkil ili heterocikl; pri čemu bilo koja dva R<10>kada su na susednim atomima mogu se kombinovati da formiraju cikloalkil, heterocikl, aril ili heteroaril; i R<12>je nezavisan, pri svakoj pojavi, -C1-C6alkil, -C2-C6alkenil, -C2-C6alkinil, -C3-C8cikloalkil, -C4-C8cikloalkenil, heterocikl, heteroaril, aril, -OH, halogen, okso, -NO2, -CN, -NH2, -OC1-C6alkil, -NHC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)2, -S(O)2NH(C1-C6alkil), -S(O)2N(C1-C6alkil)2, -S(O)2C1-C6alkil, -C(O)C1-C6alkil, -C(O)NH2, -C(O)NH(C1-C6alkil), -C(O)N(C1-C6alkil)2, -C(O)OC1-C6alkil, -N(C1-C6alkil)SO2C1-C6alkil, -S(O)(C1-C6alkil), -S(O)N(C1-C6alkil)2ili -N(C1-C6alkil)S(O)(C1-C6alkil).
2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 ili farmaceutski prihvatljiva so, enantiomer, hidrat, solvat, stereoizomer ili tautomer, pri čemu: R<5>je -C1-C3alkil; R<10>je nezavisan, pri svakoj pojavi halogen, -OC1-C6alkil, -OC3-C6cikloalkil, -O aril ili -O heteroaril, pri črmu svaki alkil, cikloalkil, aril ili heteroaril je opciono supstituisan sa jednim ili više -R<12>; R<12>je halogen.
3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu bilo kojij od dva R<10>kada su na nesusednim atomima mogu se kombinovati da formiraju cikloalkil ili heterocikl za premošćavanje.
4. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu bilo kojij od dva R<10>kada su na susednim atomima mogu se kombinovati da formiraju cikloalkil, heterocikl, aril ili heteroaril.
5. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je R<5>metil.
6. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 5, pri čemu je najmanje jedan R<10>-OC1-C6alkil.
7. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 5, pri čemu je najmanje jedan R<10>-C1-C6alkil.
8. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 5, pri čemu je najmanje jedan R<10>-OC3-C6cikloalkil.
9. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu je jedinjenje odabrano od
10. Jedinjenje zahteva 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu je jedinjenje ima strukturu
11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu je jedinjenje ima strukturu
12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu je jedinjenje ima strukturu
13. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu je jedinjenje ima strukturu
14. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu je jedinjenje ima strukturu
15. Farmaceutska kompozicija sadrži jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva od 1 do 14, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so i farmaceutski prihvatljivi nosač.