RS62799B1

RS62799B1 - Metoda prethodne obrade uzorka za ubrizgavanje korišćenjem mikroekstrakcione cevi

Info

Publication number: RS62799B1
Application number: RS20220018A
Authority: RS
Inventors: Jun Xing; Xiaoyu Ye; Wenyu Huang
Original assignee: Wuhan Sepenrich Technologies Co Ltd
Priority date: 2017-04-17
Filing date: 2018-04-16
Publication date: 2022-02-28
Also published as: EP3611502A1; WO2018192447A1; CN106959349A; CN106959349B; DK3611502T3; HUE057787T2; ES2903367T3; US20200049672A1; US11287401B2; EP3611502B1; PT3611502T; EP3611502A4; PL3611502T3

Description

OBLAST TEHNIKE

[0001] Predmetni pronalazak spada u oblast prethodne obrade uzorka, a posebno se odnosi na ubrizgavanje u mikroekstrakcionu cev.

STANJE TEHNIKE

[0002] Prethodna obrada uzorka uglavnom ima za cilj stvaranje ciljnih jedinjenja u uzorku kako bi se dostigao merljivi nivo ekstrahovanjem, preþišüavanjem i koncentrisanjem ciljnih jedinjenja i uklanjanjem ometajuüe supstance u matrici uzorka. Tradicionalna metoda prethodne obrade uzorka obuhvata ekstrakciju soksletom, ekstrakciju teþnost-teþnost (LLE) i sliþno. Meÿutim, ove metode imaju nedostatke dugog vremena obrade, složenog rada, velike potrošnje organskih rastvaraþa i sliþno u razliþitoj meri. Kako bi se rešili problemi, pojavio se niz novih metoda za prethodnu obradu uzorka, kao što je ultrazvuþna ekstrakcija (USAE), ekstrakcija uz pomoü mikrotalasne peünice (MVAE), ekstrakcija teþnosti pod pritiskom (PLE) i superkritiþna ekstrakcija teþnosti (SCFE), pomoüu kojih se efikasnost ekstrakcije ciljnih jedinjenja u uzorku u þvrstom stanju može efikasno poboljšati. Ekstrakcija þvrste faze, mikro-ekstrakcija þvrste/teþne faze i sliþno su reprezentativne metode za ekstrakciju, preþišüavanje i koncentrisanje teþnog uzorka. Pošto metoda otkrivena pronalaskom nije povezana sa ekstrakcijom þvrstog uzorka, sledeüe samo predstavlja stanje tehnike koje se odnosi na prethodnu obradu teþnog uzorka.

(1) Ekstrakcija þvrste faze (SPE)

[0003] Ekstrakcija þvrste faze (SPE) se smatra najšire korišüenom tehnikom prethodne obrade do danas. Princip SPE se zasniva na adsorpciji u þvrstoj fazi, a ciljna jedinjenja se odvajaju od interferirajuüih supstanci selektivnom adsorpcijom ciljnih jedinjenja ili interferirajuüih supstanci. Reprezentativni ureÿaji u SPE su kertridži i diskovi, a kertridži su u najširoj upotrebi. Kasnije se pojavljuju neke nove SPE metode, kao što su ekstrakcija magnetnom þvrstom fazom (MSPE), ekstrakcija matriþnom þvrstom fazom (MSPD) i sliþno. U poreÿenju sa SPE kertridžima, ove nove SPE metode se uglavnom razlikuju u postupku punjenja uzorka, a ostali koraci su u osnovi isti.

[0004] SPE kertridž je ureÿaj za ekstrakciju u kome se þvrsti adsorbent puni u cilindar šprica. Kada uzorak protiþe kroz SPE kertridž, analiti se ekstrahuju u adsorbent. Procedura SPE se uopšteno sastoji od þetiri koraka, naime aktiviranje, punjenje, þišüenje i eluiranje. Za SPE, teorijski faktor obogaüivanja ciljnih jedinjenja zavisi od odnosa zapremine rastvora uzorka i zapremine rastvora koji se koristi za analizu i odreÿivanje. Zbog toga se, u cilju poboljšanja osetljivosti, eluent koji sadrži ciljna jedinjenja koncentriše do odreÿene zapremine pomoüu duvanja azotom i drugim sredstvima, a zatim se vrši ubrizgavanje uzorka pomoüu mikro šprica.

[0005] Magnetna ekstrakcija þvrste faze (MSPE) koristi þvrsti adsorbent koji sadrži magnetno jezgro. U postupku MSPE, magnetni adsorbent se direktno raspršuje u teþnom uzorku. Nakon što je ekstrakcija završena, magnetom se izvlaþi adsorbent koji je adsorbovao analite. Naknadno þišüenje, eluiranje i drugi postupci su u osnovi isti sa SPE.

[0006] Ekstrakcija matriþne þvrste faze disperzije (MSPD) se uglavnom koristi za prethodnu obradu uzoraka bioloških tkiva, a ima sledeüe karakteristike: adsorbent se meša sa iseckanim biološkim tkivom, a zatim se smeša umereno melje u malteru, tako da je uzorak dodatno razbijen uz pomoü adsorbenta, i time je poboljšana efikasnost ekstrakcije. Zatim se adsorbovani analiti koji sadrže adsorbent odvajaju od uzorka, a analiti se zatim eluiraju iz adsorbenta prema tradicionalnom SPE.

(2) Mikro-ekstrakcija þvrste faze (SPME)

[0007] Mikro-esltrakcija þvrste faze (SPME) je ekstrakcija bez rastvaraþa koja integriše sakupljanje uzoraka, koncentraciju i ubrizgavanje uzorka, a procedura je jednostavna.

Tipiþan ureÿaj je mikro-ekstrakcija þvrste faze vlakana (Fiber SPME). Pored toga, postoje i neki novi oblici, kao što su mikro-ekstrakcija þvrste faze u epruveti (In-tube SPME) i tehnologija sa mešajuüim šipkama za mikro-ekstrakciju u þvrstoj fazi (Sorptivna ekstrakcija sa šipkom za mešanje, SBSE) i sliþno. Ovi novi oblici imaju svoje karakteristike, ali nijedan od njih nije bez rastvaraþa.

[0008] Mikro-ekstrakcija vlakana u þvrstoj fazi (Fiber SPME) je za adsorbovanje analita na premazu na površini vlakna. Mikro-ekstrakcija vlakana u þvrstoj fazi se može povezati sa gasnom hromatografijom ili teþnom hromatografijom. Kada se spoji na gasnu hromatografiju, vlakno se direktno ubacuje u otvor za ubrizgavanje, a ekstrahovani analiti se oslobaÿaju iz vlakna kroz termiþku desorpciju. Kada se spoji na teþnu hromatografiju, organski rastvaraþ je neophodan za eluiranje analita, a zatim se vrši injekcija pomoüu mikro šprica

[0009] Mikro-ekstrakcija u þvrstoj fazi u epruveti (In-tube SPME) je ekstrakcija analita u materijal za ekstrakciju koji se nalazi u kapilarnoj cevi, a ova tehnologija je uglavnom povezana sa teþnom hromatografijom. Kada se spoji na gasnu hromatografiju, prvo je potrebno eluiranje da bi se dobio eluent koji sadrži analite, a zatim se eluent ubrizgava pomoüu mikro šprica.

[0010] Sorptivna ekstrakcija sa šipkom za mešanje (SBSE) je adsorbovanje analita u ekstrakcioni materijal prekriven površinom šipke za mešanje. SBSE se može prepisati u gasnu hromatografiju ili teþnu hromatografiju. Kada se spoji na gasnu hromatografiju, uzorak se može ubrizgati na dve metode. U prvoj metodi, analiti se prvo eluiraju, a zatim se eluent koncentriše kroz duvanje azotom, i na kraju se koncentrovani rastvor ubrizgava pomoüu mikro šprica. U drugoj metodi, šipka za mešanje koja je ekstrahovala analite stavlja se u posebno napravljen ureÿaj i vrši se zagrevanje radi gasifikacije analita, a zatim se analiti uvode sa gasom nosaþem u otvor za ubrizgavanje gasne hromatografije kroz poseban gasovod. Kada se spajaju na teþnu hromatografiju, analiti se eluiraju sa šipke za mešanje, zatim se eluent suši duvanjem azota, a koncentrovani rastvor se ponovo rastvara mobilnom fazom, a dobijeni rastvor se konaþno ubrizgava pomoüu mikro šprica.

(3) Mikro ekstrakcija teþnost-teþnost

[0011] Princip mikro ekstrakcije teþnost-teþnost (mLLE) je u osnovi isti sa tradicionalnom ekstrakcijom teþnost-teþnost. Meÿutim, u mLLE se vrlo malo koliþine organskog rastvaraþa (stotine mikrolitara) koristi za ekstrakciju nekoliko stotina mililitara uzoraka, a postupak mLLE je u osnovi isti sa tradicionalnim LLE. Na osnovu toga, pojavile su se neke nove metode, kao što su mikro-ekstrakcija sa jednom kapi (SDME), disperziona mikro ekstrakcija teþnostteþnost (DLLME) i mikro-ekstrakcija u teþnoj fazi šupljih vlakana (HF-LPME).

[0012] Mikro-ekstrakcija sa jednom kapi (SDME) se karakteriše time što se odgovarajuüa koliþina organskog rastvaraþa istiskuje iz mikro šprica, a organski rastvaraþ formira kap koja se suspenduje na vrhu igle mikro šprica, a zatim je kap stavljena u rastvor uzorka ili deo uzorka u prostoru iznad da bi se izvršila ekstrakcija. Nakon što je ekstrakcija završena, kap se povlaþi u mikro špric i ubrizgava se organski rastvaraþ koji sadrži analite.

[0013] Disperziona mikro ekstrakcija teünost-teþnost (DLLME) ukljuþuje korišüenje male koliþine organskog rastvaraþa (sa odreÿenim udelom solubilizatora) kao agensa za ekstrakciju koji se raspršuje u uzorku da bi se izvršila ekstrakcija. Nakon završene ekstrakcije, agens za ekstrakciju se odvaja centrifugiranjem i sl., zatim je ekstrakcijski agens usisan mikrošpricom, a deo agensa za ekstrakciju se uzima za ubrizgavanje.

[0014] Mikro ekstrakcija u teþnoj fazi šupljih vlakana (HF-LPME) ukljuþuje korišüenje poroznog šupljeg vlakna koje ima pore u svojim zidovima kao cev za ekstrakciju (rastvaraþ za ekstrakciju je smešten unutar kanala šupljeg vlakna i pora njegovih zidova), a jedan njegov kraj je povezan sa iglom mikro šprica, zatim se rastvaraþ za ekstrakciju ubrizgava u ekstrakcionu cev iz mikro šprica, a cev za ekstrakciju se uroni u rastvor uzorka, tako da se analiti mogu ekstrahovati u organski rastvaraþ. Nakon što je ekstrakcija završena, rastvaraþ za ekstrakciju se povlaþi u mikro špric, zatim se cev za ekstrakciju uklanja i ubrizgava rastvaraþ za ekstrakciju koji sadrži analite.

[0015] EL-BEQQALI A ET AL: "Fast and sensitive environmental analysis utilizing microextraction in packed syringe online with gas chromatography-mass spectrometry", JOURNAL OF CHROMATOGRAPHY A, ELSEVIER, AMSTERDAM, NL, vol.1114, no.2, 12 May 2006 (2006-05-12), strane 234-238, XP024967448, otkriva automatizovanu ekstrakciju uzorka unutar igle šprica nakon þega sledi eluiranje rastvaraþa u GC otvor za injekciju.

KRATAK OPIS PRONALASKA

[0016] Predmetni pronalazak ima za cilj da obezbedi novu metodu prethodne obrade uzorka ubrizgavanjem tragova analita u uzorak u cev za mikroekstrakciju.

[0017] Shodno tome, dat je postupak prethodne obrade uzorka za ubrizgavanje u cev za mikroekstrakciju, koji obuhvata:

obezbeÿivanje kapilarne mikro-ekstrakcione cevi sa medijumom za ekstrakciju u njoj kao injektorom,

propuštanje uzorka kroz kapilarnu mikro-ekstrakcionu cev, tokom kojeg se analit ekstrahuje u medijum za ekstrakciju unutar kapilarne mikro-ekstrakcione cevi; zatim, punjenje kapilarne mikro-ekstrakcione cevi organskim rastvaraþem i zadržavanje punjenja tokom odreÿenog vremenskog perioda, tako da se ekstrahovani analit rastvori u organskom rastvaraþu unutar kapilarne mikro-ekstrakcione cevi da bi se formirao rastvor za injekciju; i

konaþno, držeüi jedan kraj kapilarne mikro-ekstrakcione cevi zapeþDüenim, a drugi kraj ubacujuüi direktno u otvor za ubrizgavanje gasnog hromatografa, tako

da se rastvor za ubrizgavanje automatski izbacuje iz kapilarne mikro-ekstrakcione cevi u otvor za ubrizgavanje da bi se završila operacija ubrizgavanja za gasnu hromatografiju; pri þemu metoda prethodne obrade uzorka obuhvata:

(1) priprema injektora za mikroekstrakciju iz kapilarne mikro-ekstrakcione cevi þvrstim povezivanjem injektora za mikroekstrakciju sa buretom šprica;

(2) aktiviranje kapilarne mikroekstrakcione cevi propuštanjem teþnosti za aktivaciju kroz kapilarnu mikroekstrakcionu cev uz pomoü pumpe šprica;

(3) punjenje rastvora uzorka propuštanjem rastvora uzorka kroz kapilarnu mikroekstrakcionu cev pri odreÿenoj brzini protoka uz pomoü pumpe šprica;

(4) ispiranje kapilarne mikro-ekstrakcije cevi propuštanjem teþnosti za þišüenje kroz kapilarnu mikro-ekstrakciju uz pomoü pumpe šrpica i uklanjanjem vode unutar kapilarne mikro-ekstrakcije cevi što je više moguüe propuštanjem vazduha kroz kapilarnu mikro-ekstrakciju cevi;

(5) potpuno punjenje kapilarne mikro-ekstrakcione cevi organskim rastvaraþem pomoüu pumpe šprica, zaptivanje dva kraja kapilarne mikro-ekstrakcije cevi silikonom septuma na svakom kraju, i stajanje tokom odreÿenog vremenskog perioda, tako da se ekstrahovani analit rastvori u organskom rastvaraþu da bi se formirao rastvor za injekciju; i

(6) konaþno, otvaranje jednog kraja kapilarne mikro-ekstrakcione cevi skidanjem njenog silikonskog septuma, držeüi drugi kraj zatvorenim i umetanjem otvorenog kraja direktno u otvor za ubrizgavanje gasnog hromatografa, tako da se rastvor za injekciju automatski izbacuje iz kapilarne mikro-ekstrakcione cevi u otvor za ubrizgavanje da bi se završila operacija ubrizgavanja uzorka.

[0018] Poželjno, u gore navedenoj metodi, medijum za ekstrakciju unutar kapilarne mikroekstrakcione cevi ne prelazi 90% ukupne unutrašnje zapremine kapilarne mikro-ekstrakcione cevi.

[0019] Poželjno, u gore navedenoj metodi, kapilarna mikro-ekstrakciona cev ima unutrašnji preþnik od 0.05 mm do 0.6 mm, spoljni preþnik od 0.06 mm do 0.7 mm i dužinu od 2 cm do 10 cm.

[0020] Poželjno, u gornjoj metodi, uzorak teþe kroz kapilarnu mikro-ekstrakcionu cev pri brzini protoka koja ne prelazi 1mL/min.

[0021] Poželjno, u gore navedenoj metodi, organski rastvaraþ se drži u kapilarnoj mikroekstrakcionoj cevi tokom perioda ne dužeg od 45 min.

[0022] Predmetni pronalazak ima sledeüe delotvorne efekte:

(1) Metoda otkrivena predmetnim pronalaskom integriše funkcije kao što su odvajanje, obogaüivanje i ubrizgavanje u jedan ureÿaj injektora cevi za mikroekstrakciju, þime se poboljšava efikasnost prethodne obrade uzorka i smanjuje greška merenja. U tradicionalnoj proceduri ekstrakcije u þvrstoj fazi, obiþno je potrebno nekoliko mililitara organskog rastvaraþa za eluiranje adsorbovanih ciljnih jedinjenja, a zatim se eluent koji sadrži ciljna jedinjenja koncentriše da se osuši duvanjem azotom kada su koncentracije analita u eluentu ispod granice detekcije gasne hromatografije, a koncentrovani rastvor se zatim ponovo rastvara do odreÿene zapremine (desetine do sto mikrolitara) da bi se formirao rastvor za injekciju, a na kraju se odreÿena zapremina rastvora za injekciju usisava i ubrizgava pomoüu mikro šprica. Nasuprot tome, u postupku otkrivenom u predmetnom pronalasku, postupak koncentracije više nije potreban, a radna efikasnost prethodne obrade uzorka može biti poboljšana. Pored toga, pošto je operacija duvanja azotom izostavljena, greška merenja koja je uneta operacijama kao što su duvanje azota i ponovno rastvaranje može se nužno izbeüi.

(2) Kada se uzorak prethodno obradi metodom predmetnog pronalaska, može se postiüi veüa efikasnost obogaüivanja od konvencionalnog SPE koji je usvojen ako je zapremina punjenja identiþna. U prethodnom stanju tehnike, kada se ubrizgavanje uzorka vrši pomoüu mikro šprica, koncentrovani rastvor uzorka obiþno ima zapreminu od desetine do sto mikrolitara, kako bi se obezbedilo dovoljno rastvora uzorka za þišüenje mikro šprica, a u meÿuvremenu se obezbedila pogodnost uzimanja rastvor za injekciju sa mikro špricem. Nasuprot tome, u skladu sa metodom otkrivenom u predmetnom pronalasku, uzorak se direktno ubrizgava pomoüu kapilarne mikro-ekstrakcione cevi, a samo oko dva mikrolitra organskog rastvaraþa se može držati u kapilarnoj mikroekstrakcionoj cevi koja služi kao injektor, stoga se može dobiti veüi faktor obogaüivanja što su dokazali naši eksperimenti.

(3) Metoda otkrivena predmetnim pronalaskom je više ekološka i ekološki prihvatljiva. U poreÿenju sa tradicionalnom metodom ekstrakcije u þvrstoj fazi, metoda otkrivena pronalaskom ima sledeüe prednosti: upotreba organskog rastvaraþa je smanjena sa mililitara na mikrolitre, a proces koncentracije duvavanjem azota više nije potreban, tako da su opasnosti isparenja organskog rastvaraþa za operatere i okolinu može se znaþajno smanjiti.

(4) Metoda predviÿena predmetnim pronalaskom je pogodnija za prethodnu obradu uzorka male zapremine. Metoda predviÿena predmetnim pronalaskom ima veüu efikasnost obogaüivanja, tako da je potrebna manja koliþina uzorka korišüenjem metode otkrivene predmetnim pronalaskom nego korišüenjem drugih metoda ako analit mora biti koncentrisan na identiþan nivo.

KRATAK OPIS SLIKE

[0023]

FIG.1 prikazuje hromatogram (a) dobijen direktnim ubrizgavanjem rastvora fluorena u dihlorometanu (1 µg/L) mikrošpricom i (b) dobijen tretiranjem vodenog rastvora fluorena (100 ng/L) i ubrizgavanjem sa cevnim injektorom za mikro ekstrakciju prema postupku predmetnog pronalaska.

DETALJAN OPIS

[0024] U cilju boljeg razumevanja predmetnog pronalaska, sledeüa izvoÿenja dodatno pojašnjavaju sadržaj predmetnog pronalaska, ali sadržaj predmetnog pronalaska nije ograniþen na sledeüa izvoÿenja.

Izvoÿenje 1

[0025] Fluoren, policikliþni aromatiþni ugljovodonik, je korišüen kao jedinjenje za ispitivanje da bi se istražio efekat obogaüivanja metode.

I. Priprema injektora cevi za mikro ekstrakciju pomoüu kapilarne cevi za mikro ekstrakciju

1. Prethodna obrada kapilarne kolone

[0026]

(1) Kvarcna kapilarna cev (320 µm, I.D.) je isprana sa NaOH rastvorom (1 mol/L) pri brzini protoka od 0.1 mL/min tokom 2 sata. Kada je cev napunjena sa rastvorom NaOH, njena dva kraja su zatvorena sa silikonskom gumom i cev je postavljena u rernu gasnog hromatografa postavljenog na 50°C tokom 2 sata;

(2) Cev je isprana sa ultraþistom vodom pri brzini protoka od 0.2 mL/min; Posle ispiranja sa rastvorom HCl (1 mol/L) pri brzini protoka od 0.1 mL/min tokom 1h, kolona je potom isprana sa ultra þistom vodom do neutralne;

(3) Cev je osušena na 160°C tokom 10 h pod atmosferom azota.

2. Priprema oktil kapilarne mickro-ekstrakcione cevi

[0027] 140 mL tetraetoksisilana (TEOS) i 100 mL n-oktiltrietoksisilana (C8-TEOS) su dodati u izmešani rastvor od 300 mL metanola, 20 mL vode i 20 mL hlorovodoniþne kiseline (0.5 mol/L), zatim je dobijena smeša mešana i þuvana u vodenom kupatilu postavljenom na 60°C 3 sata; zatim je rezultujuüa smeša ohlaÿena do sobne temperature, i dodato je 10 mg dodecilamina i dobro izmešana, a zatim je dobijeni rastvor ubrizgan pomoüu šprica za jednokratnu upotrebu u prethodno obraÿenu kvarcnu kapilarnu cev ukupne dužine 25 cm. Dva kraja cevi su zapeþDüena silikonskom gumom, a reakcija je izvedena na 40°C tokom 12 sati. Zatim je kapilarna cev isprana apsolutnim etil alkoholom tokom 3 sata da bi se uklonio dodecilamin i neizreagovani agens za spajanje silana, i na kraju je cev osušena u sušnici na 60°C tokom 48 sati. Osušena cev je s iseþena na male cevi od 5 cm za kasniju upotrebu, pri þemu medijum za ekstrakciju þini 50% unutrašnje zapremine kapilarne mikro-ekstrakcione cevi.

3. Priprema injektora pomoüu kapilarne mikro-ekstrakcione cevi

[0028] Obezbeÿena je igla šprica koja se sastoji od metalne cevi igle i držaþa igle. Metalna cev igle se uklanja sa igle šprica, a silikonski septum odgovarajuüe veliþine i debljine oko 2.0 mm se gura na dno držaþa igle. Zatim kapilarna mikro-ekstrakciona cev dužine 5 cm vertikalno prodire kroz silikonski septum gurnut u držaþ igle, tako da se kapilarna mikroekstrakciona cevþica može fiksirati na držaþ igle kako bi se dobio injektor za ubrizgavanje cevi za mikro-ekstrakciju.

II. Analiza uzorka

1. Uzorak: vodeni rastvor fluorena (100 ng/L) je korišüen kao rastvor uzorka; a rastvor fluorena u dihlorometanu (1 mg/L) je korišüen kao kontrolna grupa.

2. Prethodna obrada uzorka i ubrizgavanje uzorka

[0029] Igla za injekciju u tubu za mikroekstrakciju (igla) je þvrsto povezana sa buretom šprica zapremine 1 ml.0.5 ml metanola i 0.3 ml dejonizovane vode su sekvencijalno pokrenuti da protiþu kroz kapilarnu mikro-ekstrakcionu cev pomoüu špric pumpe, tako da se aktivira kapilarna mikro-ekstrakciona cev.1 mL rastvora uzorka se dodaje u cev šprica i protiþe kroz kapilarnu mikro-ekstrakcionu cev pri brzini od 60 µL/min koju pokreüe šprica pumpa, tako da se uzorak puni. Zatim, 0.2 ml dejonizovane vode se dodaje u cev šprica da se opere kapilarna mikro-ekstrakciona cev koju pokreüe špric pumpa, a nešto vazduha se primorava da protiþe kroz kapilarnu mikro-ekstrakciju cev uz pomoü špriceve pumpe da bi se uklonilo voda u njemu. Kapilarna mikroekstrakciona cev je u potpunosti napunjena izopropil alkoholom uz pomoü špriceve pumpe, a dva kraja kapilarne mikro-ekstrakcijske cevi su zapeþDüena silikonskom pregradom i ostavljena 20 minuta. Konaþno, jedan kraj kapilarne mikro-ekstrakcione cevi se otvara uklanjanjem njenog silikonskog septuma, a otvoreni kraj se direktno ubacuje u otvor za ubrizgavanje gasnog hromatografa, kako bi se ispunio postupak ubrizgavanja.

3. Analiza

[0030] Instrumentacija: Analiza se vrši na gasnom hromatografu, opremljenom detektorom jonizacije plamena vodonika (GC-FID). Glavni hromatografski uslovi su sledeüi: otvor za ubrizgavanje je podešen na 250 °C, usvojeno je ubrizgavanje bez razdvajanja i vreme ubrizgavanja je 2 minuta, a temperatura detektora je 260 °C. Temperatura rerne se programira na sledeüi naþin: poþetna temperatura je 80 °C i održava se 3 minuta, poveüava se na 270 °C pri 10 °C/min i na kraju se poveüava na 290 °C pri 40°C/min i drži 1 min.

4. Procena i rezultati

[0031] Rastvor uzorka (100 ng/L) je tretiran ubrizgavanjem u cev za mikro ekstrakciju (METI) u skladu sa metodom predmetnog pronalaska pre analize pomoüu GC-FID.

[0032] Za potrebe poreÿenja, standardni rastvor (1 mg/L, zapremina injekcije je 1 µL) je takoÿe analiziran sa GCFID, a rezultati su prikazani na Slici 1. Površine pikova ciljnog jedinjenja u hromatogramima su integrisane respektivno, i izraþunava se odnos površina vrhova. Kao rezultat toga, METI nudi faktor obogaüivanja od oko 230 puta za koncentraciju Fluorena.

1

Izvoÿenje 2

[0033] Sedam vrsta organohlornih pesticida se koristi kao jedinjenja za ispitivanje rezultata primene metode.

I. Priprema injektora cevi za mikro-ekstrakciju pomoüu kapilarne mikro-ekstrakcione cevi: Postupak pripreme je isti kao u Izvoÿenju 1.

II. Analiza uzorka

1. Uzorak: Izmešani vodeni rastvor sedam organohlornih pesticida (Į-HCH, ȕ-HCH, Ȗ-HCH, į-HCH, P,P-DDE, P,P-DDD i O,P-DDT) je pripremljen za korišüenje kao rastvor uzorka, pri þemu svaki pesticid ima koncentraciju od 100 ng/L u izmešanom vodenom rastvoru. Rastvor dihlorometana od sedam gore navedenih organohlornih pesticida priprema se za upotrebu kao kontrolna grupa, pri þemu svaki pesticid ima koncentraciju od 100 µg/L u rastvoru dihlormetana.

2. Prethodna obrada uzorka i ubrizgavanje uzorka: Prethodna obrada i ubrizgavanje uzorka se izvode istom metodom kao Izvoÿenje 1.

3. Analiza

[0034] Instrumentacija: Analiza se vrši na gasnom hromatografu opremljenom sa detektorom masene spektrometrije (GC-MS).

[0035] Glavni hromatografski uslovi su sledeüi: otvor za ubrizgavanje je podešen na 250 °C, usvojeno je ubrizgavanje bez razdvajanja i vreme ubrizgavanja je 2 min. Temperatura peünice se programira na sledeüi naþin: poþetna temperatura je 100 °C i održava se 1 min, a zatim se poveüava na 280 °C pri 10 °C/min i drži 2 min. Podaci se snimaju u selektivnom monitoringu jona (SIM).

4. Procena i rezultati

[0036] Mešani vodeni rastvor sedam organohlornih pesticida (100 ng/L) se tretira sa METI u skladu sa metodom ovog pronalaska pre analize pomoüu GC-MS (SIM). Za potrebe poreÿenja, standardni rastvor (100 µg/L, zapremina injekcije je 1 µL) je takoÿe analiziran pomoüu GC-MS (SIM). Odnos signal-šum za svako jedinjenje je pojedinaþno izraþunat, a rezultati su prikazani u Tabeli 1. Tabela 1 pokazuje da, kada je odnos koncentracije ciljnog jedinjenja 1000, odnos signal-šum sedam organohlornih pesticida u dihlorometanu koji se direktno ubrizgava korišüenjem mikro šprica i odnos signal-šum sedam ciljnih jedinjenja u vodenom rastvoru uzorka tretiranog sa METI prema ovom pronalasku ima odnos u opsegu od 3.8 do 25.1. Prema tome, dokazano je da metoda prethodne obrade uzorka ubrizgavanja u cev za mikroekstrakciju (METI) otkrivena ovim pronalaskom ima veoma dobar efekat obogaüivanja.

Tabela 1 Odnos signal-šum pesticida organskog hlora pre i posle METI

[0037] Oþigledno, gore opisana izvoÿenja su samo primeri u svrhu jasnoüe i nemaju nameru da budu ograniþavajuüa.

[0038] Za osobu sa uobiþajenom veštinom u ovoj oblasti, drugi razliþiti oblici varijacija ili promena koje spadaju u obim zahteva mogu se napraviti na osnovu gornjeg opisa.

Claims

Patentni zahtevi

1. Metoda prethodne obrade uzorka za ubrizgavanje u cev za mikro-ekstrakciju, sadrži:

da se rastvor za ubrizgavanje automatski izbacuje iz kapilarne mikro-ekstrakcione cevi u otvor za ubrizgavanje da bi se završila operacija ubrizgavanja za gasnu hromatografiju; metod prethodne obrade uzorka obuhvata:

2. Metoda prethodne obrade uzorka prema zahtevu 1, pri þemu

medijum za ekstrakciju unutar kapilarne mikro-ekstrakcione cevi ne prelazi 90% ukupne unutrašnje zapremine kapilarne mikro-ekstrakcione cevi.

3. Metoda prethodne obrade uzorka prema zahtevu 1, pri þemu

kapilarna mikro-ekstrakciona cev ima unutrašnji preþnik od 0.05 mm do 0.6 mm, spoljašnji preþnik od 0.06 mm do 0.7 mm i dužinu od 2 cm do 10 cm.

4. Metoda prethodne obrade uzorka prema zahtevu 1, pri þemu

uzorak teþe kroz kapilarnu mikro-ekstrakcionu cev pri brzini protoka koja ne prelazi 1 mL/min.

5. Metoda prethodne obrade uzorka prema zahtevu 1, pri þemu

organski rastvaraþ se drži u kapilarnoj mikro-ekstrakcionoj cevi ne duže od 45 min.