RS62932B1

RS62932B1 - Postupak pripreme sterilne nanokristalne suspenzije oftamološkog vodenog flutikazon propionata forme a

Info

Publication number: RS62932B1
Application number: RS20220142A
Authority: RS
Inventors: Jean-Michel Bukowski; Akshay Nadkarni; José L Boyer; Brigitte Duquesroix-Chakroun; Tomas Navratil
Original assignee: Nicox Ophthalmics Inc
Priority date: 2019-07-23
Filing date: 2020-07-21
Publication date: 2022-03-31
Also published as: MX2022000928A; SI3769753T1; US20220241296A1; HUE057416T2; MX420447B; PT3769753T; KR20220038443A; US11406596B2; US20210023001A1; JP2022062172A; PL3769753T3; US20220323352A1; CN111821261B; TW202116326A; AU2020317084A1; HRP20220165T1; JP2021017449A; CN115120557A; CA3145055A1; CN115120557B

Description

Opis

Oblast pronalaska

[0001] Ovaj pronalazak se odnosi na proces za pripremu sterilnih oftalmoloških nanosuspenzija za lokalnu upotrebu, a koji sadrže nanokristale flutikazon propionata Forme A u vodenom nosaču. Ovaj proces se lako prilagodjava za pripremu u proizvodnji velikih razmera i dobijanju homogenih vodenih nanosuspenzija koje imaju stabilnu raspodela veličine čestica.

[0002] Sterilne topikalne oftalmološke vodene nanosuspenzije koje sadrže nanokristale flutikazon propionata Forme A su korisni u lečenju bolesti zapaljenja oka ili inflamatornih stanja oka, putem lokalne primene navedenih nanosuspenzija (ili suspenzija nanokristala) na očne kapke (npr. gornji i donji kapak), trepavice i kapke.

Stanje tehnike

[0003] Nanokristali flutikazon propionata Forme A su nanoploče koje imaju [001] kristalografsku osu suštinski normalno na površine koje definišu debljinu nanoploča. Nanokristali flutikazon propionata Forme A se pripremaju od komercijalno dostupnog polimorfa flutikazon propionata 1 sonokristalizacijom prema rastvaraču, a koji proces je otkriven u spisu WO 2013/169647.

[0004] Spis WO 2013/169647 otkriva pripremu nanokristala morfnog oblika flutikazon propionata (Oblik A), njihovo prečišć avanje i takodje priprema vodenih suspenzija koje sadrže navedene nanokristale.

[0005] Ukratko, u skladu sa kontinuiranim sonikacionim procesom poveć anja protoka koji je opisan u WO 2013/169647 (Primer 11 i Slika 38) nanokristali flutikazon propionata se pripremaju primenom kristalizacije antirastvarača pod sonikacijom prać enom termičkim žarenjem nanosuspenzije; generisani nanokristali se prečišć avaju pomo ć u centrifugiranja kontinuiranog protoka, nosač nanosuspenzije se centrifugira, pelet se ponovo raspršuje u rastvor za pranje i disperzija se ponovo centrifugirana. Ovaj postupak ispiranja se ponavlja nekoliko puta da bi se postiglo željeni nivo prečišć avanja. Pelet se zatim raspršuje u finalnu kompoziciju formulacije da bi se dobio konačni proizvod pri potrebnoj jačini doze. Medjutim, VO 2013/169647 ne navodi nikakve podatke u vezi sa testovima sterilnosti nanosuspenzija.

[0006] Podnosilac prijave je otkrio da kontinuirani protočni proces sonikacije otkriven u WO 2013/169647 omoguć ava pripremu velikih količina nanokristala flutikazon propionata Forme A, ali i da i nije pogodan za velike serije priprema sterilnih oftalmoloških vodenih nanosuspenzija zbog disperzije prečišć enih nanokristala (peleta) u finalni vodeni nosač (videti sliku 38) ne dozvoljavajući da se proizvede finalni proizvod koji ima zahteve sterilnosti koje moraju da ispune farmaceutske formulacije za očnu isporuku. Šta više, tokom pripreme velikih zapremine nanosuspenzije utvrdjeno je da su tokom mešanja prečišć enih nanokristala sa konačnim vodenim vozilo, nanokristali su imali tendenciju da formiraju aglomerate koje je bilo teško deaglomerirati, što je otežavalo da se dobiju homogene nanosuspenzije. Šta više, čak i kada je neka efikasna deagregacija i homogene nanosuspenzije dobijene ekstemporano, ove nanosuspenzije su pokazale izvesnu sklonost ka reagregaciji i da bude nestabilne.

[0007] Kao što je dobro poznato, nanočestice imaju veliku sklonost ka aglomeraciji zbog svoje visoke površinske energije koja izazivaju formiranje aglomerata tokom pripreme i skladištenja nanosuspenzija,

[0008] Agregacija nanočestica nije samo kritični aspekt tokom proizvodnje suspenzija; aglomeracija može izazvati niz problema, na primer, nedosledno doziranje i neusaglašenost pacijenata. Naročito, kod nanosuspenzije namenjenih za nanošenje na kapke, trepavice i ivice kapaka, aglomeracija može uticati na podnošljivost kod pacijenata i potencijalnu sigurnost.

[0009] Dobro je poznato nekoliko strategija za obezbedjivanje odgovarajuć e fizičke stabilnosti nanosuspenzija lekova.

[0010] Na primer, obično se koriste stabilizatori, pri čemu, izbor odgovarajuć eg stabilizatora za odredjeni lek može biti izazovan.

[0011] Spis US 2018/0117064 otkriva pripremu vodenih suspenzija koje sadrže nanočestice jedinjenja glukokortikosteroida i stabilizator disperzije. US 2018/0117064 otkriva i da je glavna funkcija stabilizatora da se čestice leka dobro navlaže kako bi se sprečilo Ostvaldovo sazrevanje i aglomeracija nanosuspenzije i da se formira fizički stabilna formulacija obezbedjujuć i asteričnu ili jonsku barijeru. Tipični primeri stabilizatora koji se koriste u nanosuspenzijama su celuloze, poloksamer, polisorbati, lecitin, polioleat i povidoni.

[0012] WO 2010/141834 otkriva lokalne oftalmološke formulacije flutikazon propionata za lečenje alergijskog konjunktivitisa i/ili alergijskog rinokonjunktivitisa. WO 2010/141834 otkriva različite formulacije uključujuć i suspenzije koje imaju veličinu čestica ne već u od 30 m m; primer nosača sadrži fosfatni pufer, propilen glikol, hipromeloza, polisorbat 80, dinatrijum edetat i benzalkonijum hlorid (strana 14, redovi, 7-15).

[0013] Medjutim, WO 2010/141834 ne navodi nijedan metod pripreme oftalmoloških formulacija i bilo koji eksperimentalni rezultat koji se odnose na stabilnost oftalmoloških formulacija.

[0014] WO 2013/025696 otkriva upotrebu homogenizacije pod visokim pritiskom da bi se sprečilo stvaranje agregata leka u oftalmološkoj formulaciji koja sadrži oftalmološki lek suspendovan u vodenom nosaču koji sadrži najmanje jedno sredstvo za vlaženje. Konkretno, korak homogenizacije pod visokim pritiskom se može koristiti za sprečavanje formiranja agregata leka u oftalmološkoj formulaciji kada su čestice leka već prisutne u mikronizovanom obliku sa česticama veličine koja je pogodna za lokalnu primenu. Zaista WO 2013/025696 otkriva da homogenizacija pod visokim pritiskom može biti naneta na suspenziju koja sadrži prethodno mikronizovani lek u vodenom rastvoru sredstva za vlaženje i pod visokim pritiskom homogenizacija ne dovodi do smanjenja veličine čestica, već umesto toga stabilizuje ve ć mikronizovani lek, i na taj način se sprečava stvaranje agregata lekova.

[0015] Medjutim, postupak iz WO 2013/025696 podrazumeva upotrebu skupih instrumenata koji poveć avaju cenu dozne forme, a pored toga, upotreba homogenizacije pod visokim pritiskom može izazvati degradaciju nanokristala.

[0016] Proces sonikacije se obično koristi za deaglomeraciju i dispergovanje nanomaterijala u vodenoj bazi medija, neophodnih za poboljšanje homogenosti i stabilnosti suspenzije. Uprkos širokoj upotrebi, tretman ultrazvukom testirano tokom postavljanja procesa za pripremu nanosuspenzija ovog pronalaska nije bio efikasan za deaglomeraciju nanokristala flutikazon propionata.

Suština pronalaska

[0017] Zbog toga postoji potreba da se obezbedi proces velikih razmera za pripremu oftalmoloških nanosuspenzija (suspenzija nanokristala) koja sadrži nanokristale flutikazon propionata Forme A, u vodenom nosaču.

[0018] Kao rezultat studija sprovedenih da bi se rešio gore pomenuti problem kao iznenadjujuć e je otkriveno da mešanje nanokristala flutikazon propionata Forme A sa vodenim nosačem koji sadrži glicerin (glicerol) i bornu kiselinu pod uslovima visokog strizanja (smicanja), velikom brzinom, stabilizuje nanokristale. Bez želje da se bude vezan bilo kakvom teorijom, veruje se da glicerin i borna kiselina formiraju kompleks koji se ponaša kao stabilizator nanokristala; borna kiselina/glicerol kompleks sprečava stvaranje agregata nanokristala tokom pripreme nanosuspenzija i takodje stabilizuje nanosuspenziju tokom skladištenja. Rezultati studija su takodje pokazali da dodavanje nanokristala od flutikazon propionat Forme A u konačno sredstvo koje sadrži prethodno formirani kompleks borne kiseline/glicerol, dovodi do rezidualne agregacije koja se ne primeć uje kada se nanosuspenzija priprema prema sadašnjem postupku gde se glicerol dodaje nakon što su nanokristali flutikazon propionata suspendovani i deaglomerisani u vozilu koje sadrži borovu kiselinu, ali ne sadrži glicerol. Kada su nanokristali flutikazon propionata direktno suspendovan i deaglomerisan u konačnom nosaču koji sadrži prethodno formiran kompleks borne kiseline/glicerola koji stabilizuje efekat se gubi i deaglomeracija nanokristala je teže postić i i održavati tokom skladištenja.

[0019] Kompleksi borne kiseline sa polihidroksil jedinjenjima (borat-poliol kompleksi) su dobro poznati i opšte poznata upotreba kompleksa borat-poliol u oftalmološkoj kompoziciji za poboljšanje antimikrobne aktivnosti.

[0020] WO 93/21903 otkriva komplekse borat-poliola, kao što su manitol, glicerol i propilen glikol, kao pomoć ne sredstvo za i dezinfekconi agens koji se koristi za kontaktna sočiva.

[0021] WO 2010/148190 otkriva komplekse borat-poliol uključujuć i dva različita poliola za poboljšanje očuvanja višedozne oftalmološke kompozicije.

[0022] Ovaj pronalazak se odnosi na proces za pripremu sterilnih topikalnih oftalmoloških vodenih suspenzija koja sadrži nanokristale forme A flutikazon propionata koji se lako prilagodjavaju proizvodnje većeg obima a za komercijalnu upotrebu i ostvaruje stabilne nanosuspenzije sa homogenom ponovljivom distribucijom veličine čestica.

[0023] Za potrebe ovog pronalaska "nanokristali flutikazon propionata Forme A" odnose se na nanokristale flutikazon propionata Forme A koji imaju srednju veličinu čestica od 100 nm do 1000 nm, uzorak difrakcije rendgenskog praha uključujuć i vrhove na oko 7,8, 15,7, 20,8, 23,7, 24,5 i 32,5 stepeni 2Θ, uključujuć i i vrhove na oko 9,9, 13,0, 14,6, 16,0, 16,9, 18,1 i 34,3 stepena 2Θ, i pri čemu su navedeni nanokristali nanoploče koje imaju [001] kristalografsku osu suštinski normalno na površine koje definišu debljinu nanoploča.

Opis slika

[0024]

Slika 1: KSRPD uzorak nanokristala flutikazon propionata Forme A;

Slika 2: Grafički prikaz raspodele veličine čestica na T = 1 nedelja na 40°C; 0,25% nanokristala flutikazon propionata Forme A u nosaču koji sadrži prethodno formiran 1% w/w borne kiseline / 0,25% w/w glicerol kompleks (uporedni primer).

Slika 3: Grafički prikaz raspodele veličine čestica na T = 1 nedelja na 40°C; 0,25% nanokristala flutikazon propionata Forme A nanokristali u nosaču koji sadrži prethodno formirano 1% w/w borne kiseline 1% w/w glicerola (uporedni primer).

Slika 4: Grafički prikaz raspodele veličine čestica na T = 1 nedelja na 40°C, u frižideru 20 sati skladištenja na 5°C nakon početnog analiza na 40°C; 0,25% w/w flutikazon propionat Forme A nanokristali u vozilu sa 0,25% w/w glicerola (komparativni primer).

Opis pronalaska

[0025] Ovaj pronalazak se odnosi na proces za pripremu sterilnih topikalnih oftalmoloških vodenih nanosuspenzija koje sadrže nanokristale flutikazon propionata Forme A srednje veličine čestica od 100 nm do 1000 nm i koncentraciju flutikazon propionata od 0,001% w/w do 1% w/w, a navedeni proces obuhvata:

a) priprema vodenog nosača 1 koji sadrži: 0,5% w/w metilceluloze 4000 mPa·s (cP), 1,0% w/w borne kiseline, 0,1% w/w edetat dinatrijum dihidrata, 0,055% w/w natrijum hlorida, 0,01% w/w benzalkonijum hlorida, 0,2% w/w polisorbata 80, hlorovodoničnu kiselina IN i/ili natrijum hidroksid IN za podešavanje pH na 7,3 -7,5 i voda do 100% w/w;

b) mešanje količine nanokristala flutikazon propionata Forme A čija je srednja veličina čestica od 100 nm do 1000 nm sa količinom vodenog nosača 1 da bi se dobila suspenzija koja sadrži koncentraciju flutikazon propionata od 2% w/w; c) primenom mešanja viskokog strizanja, velike brzine, na suspenziju iz koraka b) u trajanju od najmanje 10 minuta; d) priprema vodenog nosača 2 koji sadrži: 1,8% w/w glicerina, 0,5% w/w metilceluloze 4000 mPa·s (cP), 1,0% w/w borne kiseline, 0,1% w/w edetat dinatrijum dihidrata, 0,055% w/w natrijum hlorida, 0,01% w/w benzalkonijum hlorida, 0,2% w/w polisorbata 80, hlorovodoničnu kiselinu IN i/ili natrijum hidroksid IN za podešavanje pH na 7,3 -7,5 i vodu q.s. do 100% w/w;

e) dodavanje alikvota vodenog nosača 2 u suspenziju iz koraka c) da bi se dobila koncentracija flutikazon propionata od oko 1% w/w;

f) primenom mešanja viskokog strizanja i velike brzine na suspenziju iz koraka e) sve dok se ne dobije ciljana srednja veličina čestica;

g) sterilizaciju nanosuspenzije iz koraka f) autoklavingom;

h) priprema vodenog nosača 3 koji sadrži: 0,9% w/w glicerina, 0,5% w/w metilceluloze 4000 mPa·s (cP), 1,0% w/w borne kiseline, 0,1% w/w edetat dinatrijum dihidrata, 0,055% w/w natrijum hlorida, 0,01% w/w benzalkonijum hlorida, 0,2% w/w polisorbata 80, hlorovodoničnu kiselinu IN i/ili natrijum hidroksida IN za podešavanje pH na 7,3 -7,5 i vodu q..s. do 100% w/w; i sterilizaciju vodenog nosača 3 filtracijom;

i) aseptično dodavanje alikvota sterilnog vodenog nosača 3 u sterilizovanu nanosuspenziju iz koraka g) da se pripreme sterilne topikalne oftalmološke vodene nanosuspenzije koje sadrže ciljanu koncentraciju nanokristala flutikazon propionata Forme A;

pri čemu nanokristali flutikazon propionata forme A imaju rendgensku difrakciju praha navedenih nanokristala uključujući vrhove na oko 7,8, 15,7, 20,8, 23,7, 24,5 i 32,5 stepeni 2Θ, uključujuć i i vrhove na oko 9,9, 13,0, 14.6, 16.0, 16.9, 18.1 i 34.3 stepena 2Θ, i pri čemu su nanokristali nanoploče sa [001] kristalografskom osom suštinski normalnom na površine koje definišu debljinu nanoploča.

[0026] U koraku c) mešanje suspenzije visokima strizanjem i velikom brzinom i pri čemu suspenzija sadrži nanokristale flutikazon propionata Forme A i vodeni nosač 1, koji ne sadrži glicerin, koje se sprovodi da bi se obezbedila ravnomerna distribucija nanokristala flutikazon propionata za poboljšanje homogenosti konačne nanosuspenzije.

[0027] Poželjno u koraku c) i u koraku f) mešanje sa visokim strizanjem i velikom brzinom se izvodi pri 6000 RPM.

[0028] Poželjno je da se mešanje viskokim strizanjem i velikom brzinom iz koraka f) primenjuje najmanje 10 minuta.

[0029] Poželjno sterilizacija koraka g) nanosuspenzije iz koraka f) koja sadrži koncentraciju flutikazona propionata od 1% w/w se izvodi autoklavingom nanosuspenzije u staklene boce na oko 122°C , u trajanju od oko 40 minuta.

[0030] Poželjno je da se vodeni nosači 1 i 2 filtriraju kroz filter od 0,2 mm pre upotrebe u koraku b) i koraku d), respektivno.

[0031] Opciono, vodeni nosač 2 koji sadrži glicerin 1,8% w/w može se pripremiti dodavanjem u alikvotu, od nosača 1 filtrirano kroz filter od 0,2 m m količine glicerina, da bi se dobila konačna koncentracija glicerina od 1,8% w/w.

[0032] Poželjno, u konačnim sterilnim topikalnim oftalmološkim vodenim nanosuspenzijama pripremljenim prema postupku iz pronalaska koncentracija flutikazon propionata je od 0,001% do 0,5% w/w; poželjnije koncentracija flutikazon propionata je 0,5% w/w, 0,25% w/w, 0,20% w/w, 0,10% w/w, 0,05% w/w, 0,03% w/w, 0,01% w/w ili 0,005% w/w; najpoželjnije je da je koncentracija flutikazon propionata 0,20% w/w ili 0,10% w/w ili 0,05% w/w.

[0033] Alternativno, postupak prema ovom pronalasku se može izvesti u potpuno aseptičnim uslovima proizvodnje korišć enjem sterilisanih nanokristala flutikazon propionata Forme A i sterilizovanih nosačima 1 do 3, u skladu sa tim, druga realizacija. Predmetni pronalazak se odnosi na proces za pripremu sterilnih topikalnih oftalmoloških vodenih nanosuspenzija koji sadrže nanokristale forme A flutikazon propionata srednje veličine čestica od 100 nm do 1000 nm i koncentracijom flutikazon propionata od 0,001% w/w do 1% w/w, a navedeni proces obuhvata:

a-1) sterilizaciju nanokristala flutikazon propionata Forme A srednje veličine čestica od 100 nm do 1000 nm;

b-1) pripremu vodenog nosača 1 koji sadrži: 0,5% w/w metilceluloze 4000 mPa·s (cP), 1,0% w/w borne kiseline, 0,1% w/w dinatrijum dihidrata, 0,055% w/w natrijum hlorida, 0,01% w/w benzalkonijum hlorida, 0,2% w/w polisorbata 80, hlorovodonične kiseline IN i/ili natrijum hidroksida IN za podešavanje pH na 7,3 -7,5 i vode q.s. do 100% w/w; i sterilizaciju filtracijom, pomenutog vodenog nosača 1;

c-1) aseptično mešanje količine sterilisanih nanokristala flutikazon propionata oblika A sa odredjenom količinom sterilizovanog vodeni vehikulum 1 da bi se dobila suspenzija koja sadrži koncentraciju flutikazon propionata od 2% w/w;

d-1) primenu mešanja velike brzine i velike brzine na suspenziju iz koraka c-1) u trajanju od najmanje 10 minuta; e-1) pripremu vodenogog nosača 2 koji sadrži: 1,8% w/w glicerina, 0,5% w/w metilceluloze 4000 mPa·s (cP), 1,0% w/w borne kiseline, 0,1% w/w edetat dinatrijum dihidrata, 0,055% w/w natrijum hlorida, 0,01% w/w benzalkonijum hlorida, 0,2% w/w polisorbata 80, hlorovodonične kiseline IN i/ili natrijum hidroksida IN za podešavanje pH na 7,3 -7,5 i vodu q.s. do 100% w/w; i sterilizaciju pomenutog vodenog nosača 2, filtracijom;

f-1) aseptično dodavanje alikvota sterilisanog vodenog nosača 2 u suspenziju iz koraka d-1) da bi se dobila koncentracija flutikazon propionata od oko 1% w/w;

g-1) primenu mešanja viskokog strizana, velike brzine na suspenziju iz koraka f-1) sve dok se ne dobije ciljana srednja veličina čestica;

h-1) pripremu vodenog nosača 3 koji sadrži: 0,9% w/w glicerina, 0,5% w/w metilceluloze 4000 mPa·s (cP), 1,0% w/w borna kiselina, 0,1% w/w edetat dinatrijum dihidrat, 0,055% w/w natrijum hlorid, 0,01% w/w benzalkonijum hlorida, 0,2% w/w polisorbata 80, hlorovodonične kiseline IN / natrijum hidroksid IN za podešavanje pH na 7,3 -7,5 i vodu do 100% w/w; i sterilizaciju pomenutog vodenog nosača 3 filtracijom;

i-1) aseptično dodavanje alikvota sterilisanog vodenog nosača 3 u nanosuspenziji iz koraka g-1) da se pripreme sterilne topikalne oftalmološke vodene nanosuspenzije koje sadrže konačnu koncentraciju nanokristala flutikazon propionata Forma A;

pri čemu nanokristali flutikazon propionata Forme A imaju rendgensku difrakciju praha, uključujuć i pikove na oko 7,8, 15,7, 20,8, 23,7, 24,5 i 32,5 stepeni 2Θ, uključujuć i i vrhove na oko 9,9, 13,0, 14,6, 16,0, 16,9, 18,1, i 34,3 stepena 2 Θ, i pri čemu su nanokristali nanoploče koje imaju [001] kristalografsku osu suštinski normalne na površine koje definišu debljinu nanoploča.

[0034] Poželjno, nanokristali flutikazon propionata Forme A koji se koriste u koraku a-1) se sterilišu autoklavingom u suspenziji nanokristala flutikazon propionata forme A u vodi za injekcije, sa koncentracijom flutikazona propionata izmedju 2 % do 20 % w/w; poželjno suspenzija nanokristala flutikazon propionata Forme A u vodi se autoklavinguje na oko 122°C oko 30 minuta.

[0035] Poželjno je da se u koraku d-1) i koraku g-1) mešanje sa visokim smicanjem i velikom brzinom izvodi na 6000 RPM.

[0036] Poželjno je da se mešanje velike brzine i velike brzine iz koraka g-1) primenjuje najmanje 10 minuta.

[0037] Poželjno u sterilnim topikalnim oftalmološkim vodenim nanosuspenzijima pripremljenim postupkom prema pronalasku koncentracija flutikazon propionata je od 0,001% do 0,5% w/w; poželjnije koncentracija flutikazon propionata je 0,5% w/w, 0,25% w/w, 0,20% w/w, 0,10% w/w, 0,05% w/w, 0,03% w/w, 0,01% w/w ili 0,005% w/w; najpoželjnije je da je 0,20% w/w ili 0,10% w/w ili 0,05% w/w.

[0038] Poželjno se pripremaju nanokristali flutikazon propionata Forme A koji se koriste u procesu ovog pronalaska prema opštoj metodi koja je navedena u nastavku koja se sastoji od sledeć ih koraka:

1) priprema rastvora faze I koji sadrži: 0,45% w/w polimorf flutikazon propionata 1, 23,2% w/w polietilen glikol 400 (PEG 400), 68,8% w/w polipropilen glikol 400 (PPG 400) i 7,6% w/w polisorbat 80 (Tween 80); i filtriranje rastvora faze I kroz 0,8/0,2 mm polietersulfonski (PES) filter;

2) pripremu rastvora faze II koja sadrži: 0,01% w/w benzalkonijum hlorida, 0,40% w/w metil celuloze 15 mPa·s (cP), 0,1% w/w polietilen glikola 40 stearat (PEG-40 stearat), citratni pufer do pH 3,4 do 3,8 i voda q.s. do 100% w/w, i filtriranje rastvora faze II kroz 0,8/0,2 mm polietersulfonski (PES) filter;

3) hladjenje filtriranih rastvora faze I i faze II na temperaturi od 0 do 4°C;

4) mešanje rastvora faze I i faze II u reaktoru opremljenom ultrazvučnim pretvaračem (na primer KSonica K2000 ultrazvučni pretvarač) za dobijanje suspenzije nanokristala faze III, pri čemu:

- rastvor faze I i rastvor faze II se neprekidno pumpaju u reaktor pri protoku od 600 ml/min (rastvor faze I) i 2400 ml/min (rastvor faze II) respektivno da bi se dobila suspenzija faze III;

-odnos zapremina faza I i faza II je 1:4;

- sonikacija se primenjuje tokom mešanja sa izlaznom snagom od 60%;

-srednja temperatura suspenzije faze III je oko 11 °C;

5) suspenzija faze III mešanja sa malim smicanjem iz koraka 4) pri dovoljnoj brzini da stvori vrtlog, na sobnoj temperaturi za najmanje 30 minuta u odsustvu sonikacije;

6) žarenje suspenzije faze III na 40°C u periodu ne krać em od 16 sati;

7) priprema puferskog rastvora koji sadrži: 0,2% w/w polietilen glikol 40 stearat (PEG-40 stearat), 0,2% w/w polisorbat 80 (Tveen 80), 0,001% w/w benzalkonijum hlorid, 0,05% w/w natrijum fosfat monobazni monohidrat, 0,02% w/w natrijum fosfat dvobazni dihidrat i voda q.s. do 100% w/w, sa pH 6,360,2; i filtriranje puferskog rastvora kroz 0,8/0,2 mm polietersulfonski (PES) filter;

8) razblaživanje suspenzije faze III iz koraka 6) sa filtriranim puferskim rastvorom pri čemu je odnos zapremina puferskog rastvora i faza III je 1:1;

9) centrifugiranje razblažene suspenzije faze III da bi se povratili nanokristali flutikazon propionata Forme A i ispiranje dobijenih nanokristala;

10) ispiranje sakupljenih nanokristala vodom za injekcije.

[0039] Kada se postupak prema pronalasku izvodi u potpuno aseptičnim uslovima proizvodnje, isprani nanokristali iz koraka 10) se sterilišu pre upotrebe za pripremu sterilnih topikalnih oftalmoloških vodenih nanosuspenzija; na primer, isprani nanokristali su suspendovani u vodi za injekcije u flutikazon propionatu koncentracija izmedju 2% do 20% w/w, i autoklavirana na oko 122°C tokom 30 minuta.

[0040] Još jedna druga realizacija ovog pronalaska se odnosi na oftalmičku vodenu nanosuspenziju koja se može primeniti lokalno na očne kapke, trepavice ili rub kapaka i sastoji se od:

(a) 0,001% do 1% w/w nanokristala flutikazon propionat Forme A ;

(b) 0,50% w/w metilceluloze 4000 mPa·s (cP);

(c) 0,2% w/w polisorbata 80;

(d) 0,10% w/w edetat dinatrijum dihidrata;

(e) 1,0 % w/w borne kiseline;

(f) 0,9% w/w glicerina;

(g) 0,01% w/w benzalkonijum hlorida;

(h) 0,055% w/w natrijum hlorida;

(i) hlorovodonične kiseline (IN) i/ili natrijum hidroksida (IN) kao sredstva za podešavanje u količini dovoljnoj pH od 7,3-7,5; i

(j) vode q.s. do 100% w/w,

pri čemu navedeni nanokristali flutikazon propionata Forme A imaju srednju veličinu čestica od 100 nm do 1000 nm i Difrakcijski uzorak rendgenskog praha uključujuć i vrhove na oko 7,8, 15,7, 20,8, 23,7, 24,5 i 32,5 stepeni 2 Θ, dalje uključujuć i pikove na oko 9,9, 13,0, 14,6, 16,0, 16,9, 18,1 i 34,3 stepeni 2Θ, i gde su nanokristali nanoploče koje imaju [001] kristalografsku osu suštinski normalnu na površine koje definišu debljinu nanoploče.

[0041] Poželjno, u topikalnoj oftalmološkoj vodenoj nanosuspenziji koncentracija flutikazon propionata je od 0,001% do 0,5% w/w, poželjnije je da koncentracija flutikazon propionata 0,5% w/w, 0,25% w/w, 0,20% w/w, 0,1% w/w, 0,05% w/w, 0,03% w/w, 0,01% w/w ili 0,005% w/w. Najpoželjnije je da je u lokalnoj oftalmološkoj vodi nanosuspenzija sa koncentracijom flutikazon propionata bude 0,1% w/w, 0,20% w/w ili 0,05% w/w.

[0042] Jedna druga realizacija ovog pronalaska se odnosi na oftalmičku vodenu nanosuspenziju koja se može primeniti lokalno na očne kapke, trepavice ili rub kapaka i sastoji se od:

(a) 0,1% w/w, ili 0,5% w/w, ili 0,25% w/w, ili 0,20% w/w ili 0,05% w/w nanokristala flutikazon propionata Forme A; (b) 0,50% w/w metilceluloze 4000 mPa·s (cP);

(c) 0,2% w/w polisorbata 80;

(d) 0,10% w/w edetat dinatrijum dihidrata;

(e) 1,0 % w/w borne kiseline;

(f) 0,9% w/w glicerina;

(g) 0,01% w/w benzalkonijum hlorida;

(h) 0,055% w/w natrijum hlorida;

(j) vode q.s. do 100% w/w,

[0043] Još jedna poželjna realizacija ovog pronalaska se odnosi na oftalmičku vodenu nanosuspenziju koja se može primeniti lokalno na kapke, trepavice ili ivice kapaka i sastoji se od:

(a) 0,1% w/w, ili 0,20% w/w ili 0,05% w/w nanokristala flutikazon propionata Forme A;

(b) 0,50% w/w metilceluloze 4000 mPa·s (cP);

(c) 0,2% w/w polisorbata 80;

(d) 0,10% w/w edetat dinatrijum dihidrata;

(e) 1,0 % w/w borne kiseline;

(f) 0,9% w/w glicerina;

(g) 0,01% w/w benzalkonijum hlorida;

(h) 0,055% w/w natrijum hlorida;

(i) hlorovodoničnu kiselinu (IN) i/ili natrijum hidroksid (IN) kao sredstva za podešavanje u količini dovoljnoj pH od 7,3-7,5; i

(j) vodu q.s. do 100% w/w,

[0044] Sterilne topikalne oftalmološke vodene nanosuspenzije pripremljene prema postupku iz ovog pronalaska imaju neke prednosti kao što su naprimer bolju podnošljivost pri primeni na očne kapke (npr. gornji i donji kapci), trepavice ili ivicu kapaka, a zbog malih čestica i održavanja oslobadjanja leka tokom produženog vremenskog perioda koji omoguć ava smanjenje količine aktivnog principa koji se primenjuje i, posledično, smanjenje sistemske izloženosti flutikazon propionatu kao i smanjenje izloženosti drugim strukturama oka. Kao što je poznato, kortikosteroidi imaju neželjena dejstva kao što su poveć anje intraokularnog pritiska (IOP), pove ć anje debljine rožnjače, midrijazu, ptozu, katarakte, glaukom, supresije nadbubrežne žlezde, smanjenje mineralne gustine kostiju; te je s toga niža sistemska izloženost celom oku važna prednost oftalmoloških vodenih nanosuspenzija pripremljenih u skladu sa postupkom iz ovog pronalaska, a posebno za terapeutske primene koje zahtevaju dugotrajno terminski ili ponavljajuć i tretman kortikosteroidima.

[0045] Sterilna topikalna oftalmološka vodena nanosuspenzija ovog pronalaska ima visoku efikasnost i lokalnu podnošljivost bez neželjenih nuspojava povezanih sa sistemskom apsorpcijom aktivnog sastojka flutikazon propionata.

[0046] U drugom aspektu ovog pronalaska, nanosuspenzija prema ovom pronalasku se može koristiti u postupku za lečenje ili smanjenje simptoma i/ili kliničkih znakova povezanih sa zapaljenjem oka ili inflamatornim stanjima oka kao što su blefaritis, zadnji blefaritis, disfunkcija meibomske žlezde ili bolest suvog oka pri lokalnoj primeni pomenuti sastav na kapcima, trepavicama ili ivici očnih kapaka subjekta kome je potrebna.

[0047] Takav metod za lečenje blefaritisa, zadnjeg blefaritisa, disfunkcije meibomske žlezde ili bolesti suvog oka obuhvata korak lokalnog davanja efektivne količine na kapke subjekta, trepavice ili ivice kapaka nanosuspenziju ovog pronalaska.

[0048] Druga realizacija pronalaska obezbedjuje kompoziciju za upotrebu u postupku lečenja i/ili redukcije simptomi i/ili kliničkih znakova povezanih sa blefaritisom, zadnjim blefaritisom, disfunkcijom meibomske žlezde ili suvom bolest oka, postupak koji obuhvata davanje efikasne količine farmaceutske kompozicije subjektu u potreba za tim pri čemu se farmaceutska kompozicija oftalmološka vodena nanosuspenzije sastoji od: 0,001% do 1% w/w nanokristala flutikazon propionata Forme A, 0,50% w/w metilceluloze 4000 mPa·s (cP),

[0049] 0,2% w/w polisorbat 80, 0,10% w/w edetat dinatrijum dihidrat, 1,0% w/w borna kiselina, 0,9% w/w glicerin, 0,01% w/w benzalkonijum hlorida, 0,055% w/w natrijum hlorida, hlorovodonične kiseline IN i/ili natrijum hidroksida IN kao sredstva za podešavanje u količini dovoljnoj pH od 7,3-7,5, i voda k.s. do 100% w/w, pri čemu su navedeni nanokristali od flutikazon propionat Forme A ima srednju veličinu čestica od 100 nm do 1000 nm i uzorak difrakcije rendgenskog praha uključujuć i vrhove na oko 7,8, 15,7, 20,8, 23,7, 24,5 i 32,5 stepeni 2Θ, uključujuć i i vrhove na oko 9,9, 13,0, 14.6, 16.0, 16.9, 18.1 i 34.3 stepena 2, i pri čemu su nanokristali nanoploče sa [001] kristalografskom osom suštinski normalnom na površine koje definišu debljinu nanoploča, pri čemu se oftalmološka vodena nanosuspenzija se primenjuje lokalno na gornje i/ili donje ivice očnih kapaka, kanale Meibomove žlezde trepavice ili bilo koji deo anatomije očnog kapka. Poželjno, oftalmološka vodena nanosuspenzija koja se koristi u metodi pronalaska sadrže koncentraciju nanokristala flutikazon propionata Forme A od 0,5% w/w, 0,25% w/w, 0,20% w/w, 0,10% w/w, 0,05% w/w, 0,03% w/w, 0,01% w/w ili 0,005% w/w; poželjnije koncentraciju nanokristala flutikazon propionata Forme A u oftalmološkoj vodenoj nanosuspenziji je 0,1% w/w, 0,20% w/w 0,25% w/w, 0,5% w/w, 0,05% w/w ili 0,01% w/w; a kao najpoželjnije je da je koncentracija nanokristala forme A flutikazon propionata bude 0,1% w/w, 0,20% w/w ili 0,05% w/w.

[0050] Tipični klinički znaci povezani sa blefaritisom i disfunkcijom meibomske žlezde uključuju ostatke kapaka, crvenilo ruba očnih kapaka, otoka očnih kapaka, opstrukcije meibomske žlezde i/ili kvalitativnih/kvantitativnih promena lučenja meibomske žlezde.

[0051] Najčešć i simptomi povezani sa suvim okom, koji je takodje poznat kao keratokonjunktivitis sika, uključuju suvo ć u očiju, nelagodnost u očima, crvenilo očiju, oseć aj peckanja, peckanja ili grebanja u očima, suzenje očiju, osetljivost na svetlost, zamagljen vid, bol ili zamor očiju.

[0052] Kompozicija je poželjno za upotrebu u postupku za lečenje neinfektivnog, inflamatornog blefaritisa ili meibomskog blefaritisa. disfunkcija žlezde kod subjekta.

[0053] U drugom aspektu, subjektu se daje lokalna oftalmološka vodena nanosuspenzija predmetnog pronalaska najmanje jednom dnevno, a poželjno je da se subjektu daje farmaceutska formulacija jednom dnevno.

[0054] U drugom aspektu, subjektu se daje lokalna oftalmološka vodena nanosuspenzija predmetnog pronalaska najmanje jednom dnevno tokom najmanje dve nedelje, više od dve nedelje, najmanje tri nedelje ili najmanje četiri nedelje.

[0055] Još jedna realizacija (koja nije deo traženog pronalaska) se odnosi na komplet koji sadrži (a) gore navedene elemente oftalmološke vodene nanosuspenzije koja sadrži nanokristale flutikazon propionata Forme A i (b) a bris ili sundjer za nanošenje nanosuspenzija na kapke, trepavice ili rub kapaka.

Primeri

[0056] Procenat (%) kako se ovde koristi u kompozicijama i u primerima odnosi se na težinski procenat (w/w) i ukoliko nije drugačije naznačeno, pojmovi glicerin i glicerol u tekstu i u primerima se koriste kao sinonimi.

Primer 1

Priprema nanokristala flutikazon propionata oblika A

Priprema rastvora I faze

[0057] U procesnoj posudi od 2 L, 106,26 g polisorbata 80 (Tveen 80), 963,34 g polipropilen glikola 400 (PPG 400) je dodato 324,10 g polietilen glikola 400 (PEG 400), i mešano na sobnoj temperaturi dok sve komponente budu rastvorene, zatim je 6,3 g flutikazon propionat polimorfa 1 dodato u rastvor i mešano do bistre dobijeno rešenje. Dobijeni rastvor je filtriran korišć enjem 0,8/0,2 mm polietersulfonskog (PES) filtera i čuvan hladjen na 2-8 °C do upotrebe.

Priprema rastvora faze II

[0058] U procesu posude od 8 L dodaje se inicijalna količina od oko 5.276 g prečišć ene vode i meša sa tzv. gornjim ("overhead") mikserom tako da se generiše vrtlog.

[0059] Dodato je 6,01 g polietilen glikol 40 stearata (PEG-40 stearat), 5,98 g benzalkonijum hlorida (rastvor 10%) i 24,02 g metil celuloze 15 mPa·s (cP) i mešano dok se metil ć elija potpuno rastvori. Dodat je citrat pufer da se pH podesi na 3,5 -4,0 i dodato je 585,8 g vode. Konačni pH rastvora faze II bio je 3,83.

[0060] Faza II je zatim filtrirana korišć enjem 0,8/0,2 mm polietersulfonskog (PES) filtera i držana u frižideru na 2-8°C do upotrebe.

Priprema rastvora pufera za razblaživanje

[0061] U procesnu posudu od 20 L uneseno je 12,0 g polisorbata 80 (Tveen 80), dodato je 5374 g prečišć ene vode i mešano tzv. gornjim mikserom tako da se stvori vrtlog.

[0062] Dodati su 3,24 g natrijum fosfat monobazni monohidrata, 1,14 g natrijum fosfat dvobazni dihidrata, 12,00 g polietilen glikol 40 stearat (PEG-40 stearat), 0,6 g benzalkonijum hlorida (rastvor 10%) i mešani do potpunog rastvaranja, a dodato je i 597 g vode. Konačni pH puferskog rastvora bio je 6,4. Ovaj rastvor je filtriran koristeć i 0,8/0,2 mm polietersulfonski (PES) filter i čuvati u frižideru na 2-8 °C do upotrebe.

Priprema nanokristala futikazon propionata Forme A

[0063] 480 g faze II je uneto u komoru reaktora, a 940 g faze I i 3780 g faze II su bile ostavljene da se ohlade na ciljnu temperaturu od 2-4 °C u njihovim posudama sa omotačem povezanim sa rashladnim uredjajima.

[0064] Pomoć u peristaltičkih kalibriranih pumpi su pumpane faze I i faze II (brzine protoka pumpe za fazu I i fazu II su bile 600 ml/min i 2400 ml/min), kroz reaktor opremljen ultrazvučnim pretvaračem sa amplitudom podešenom na 60% (K Sonica K1375 W).

[0065] Odliv iz reaktora (faza III: 5201,7 g) je sakupljen u čist sud na sobnoj temperaturi. Temperatura faze III je bila oko 11°C.

[0066] Zatim je faza III mešana na sobnoj temperaturi oko 30 minuta u posudi za sakupljanje da bi se dobila uniformna suspenzija nanokristala flutikazon propionata (završna faza III).

Proces žarenja

[0067] Finalna faza III je prebačena u zatvoreni kontejner. Kontejner je stavljen u inkubator i održavati na 40°C najmanje 16 sati.

Prečišć avanje i izolacija nanokristala

[0068] 5.167 grama faze III žarenja je prebačeno u procesnu posudu i ekvivalentna količina razblaženja dodat je puferski rastvor, tako da je odnos faze III prema puferskom rastvoru za razblaživanje bio 1:1. Dobijena smeša je bila mešana mikserom sa niskim smicanjem 30 minuta da bi se postigla homogena suspenzija nanokristala (razredjena faza III).

[0069] Razblažena faza III je držana u frižideru na 2-8°C do centrifugiranja.

[0070] Nanokristali flutikazon propionata Forme A su prvo sakupljeni diskontinuiranim centrifugiranjem razblažena faza III. Nanokristali su zatim isprani nekoliko puta (4 ciklusa pranja) vodom za injekcije.

[0071] Veličina čestica izolovanih nanokristala je procenjena korišć enjem laserskog rasejanja raspodele veličine čestica analizatora (Horiba LA-950). D50 je bio 0,2153 mm, a D900,6073 mm.

[0072] Karakterizacija nanokristala je izvedena KSRPD i Rietveld prečišć avanjem. Rezultati su dati na slici 1 (KSRPD) koja prikazuje tipičan obrazac flutikazon propionata Forme A, koji ima kristalnu strukturu sa jakim poželjna orijentacija i c-osa u suštini normalna na površinu, kao što je definisano u WO 2013/169647 potvrdjeno stubom figura dobijena Ritveldovim prečišć avanjem.

Primer 2

Priprema sterilne topikalne oftalmološke vodene nanosuspenzije flutikazon propionata Forme A

[0073]

Korak 1) Priprema nosoča 1 (nosač bez glicerina)

[0074] U procesnoj posudi od 20 L, 17.600 grama vode za injekcije je zagrejano na 80°C, i 100,0 g metilceluloze 4000 mPa·s (cP) su polako dodavani i smeša je mešana dok se metilceluloza ne rastvori.

[0075] Rastvor je ohladjen na 40°C, dodato je 200,0 g borne kiseline i pH je podešen na 7,4 sa natrijumom hidroksid (IN).

[0076] Sledeć i ekscipijenti su dodati specifičnim slede ć im redosledom: 20,0 g dinatrijum dihidrata edetat, 11,0 g natrijum hlorida, 4,0 g benzalkonijum hlorida (rastvor 50%), 40,0 g polisorbata 80 (Tveen 80); svaki je onda ekscipijentno potpuno rastvoren pre dodavanja sledeć eg ekscipijenta i priprema rastvora se vrši na temperaturi od oko 40°C do sobne temperature. pH je testiran i opciono podešen na 7,3 -7,5 sa hlorovodoničnom kiselinom (IN) ili natrijum hidroksidom (IN); nakon podešavanja pH, dodata je voda za injekcije da se konačna težina dovede do 19.800 g. Tako dobijeni rastvor je mešan najmanje 10 minuta da bi se dobio uniforman rastvor koji je čuvan na 2-8°C.

Korak 2) Priprema suspenzije nanokristala od 2% flutikazon propionata

[0077] 4.000 grama nosača 1 je uneto u procesnu posudu od 10 L koja sadrži šipku za mešanje, filtriranjem kroz PES 0,2 mm medijum i ostavljeno za dalju upotrebu.

[0078] U čašu od 2 L, 15,04 g nanokristala flutikazon propionata Forme A je uvedeno zajedno sa nekim vehikulum 1. Ova suspenzija je pomešana radi homogenosti i ispitana na sadržaj flutikazon propionata (31,6 mg/g), zatim je dalje razblažen sa nosačem 1 tako da se postigne ciljna koncentracija flutikazon propionata od 20 mg/ml (2% tež./tež. kaša). Ova koncentrovana suspenzija je bila podvrgnuta mešanju visokim smicanjem i velikom brzinom na 6000610 RPM tokom 10 minuta i distribucija veličine čestica je testirana laserskom difrakcijom na Horiba LA-950S2 PSD analizatoru.

[0079] Rezultati su bili sledeć i:

Korak 3) Priprema nosača 2 (vozilo koje sadrži glicerin 1,8% w/w)

[0080] U čašu od 4 L stavljeno je 1600 g filtriranog nosača 1 i uz mešanje je dodato 36 g glicerina, do raspadanja.

[0081] pH je testiran i podešen na 7,3 -7,5 sa natrijum hidroksidom (IN) i nosač 1 je dalje dodat u podesnu konačnu težinu na 2.000 g, što dovodi do 1,8% w/w rastvora glicerina.

Korak 4) Priprema 1% suspenzije nanokristala flutikazon propionata

[0082] Suspenzija nanokristala od 1% flutikazon propionata je pripremljena daljim razblaživanjem 2% koncentrovane suspenzije pripremljene u koraku 2) sa nosačem 2 do koncentracije flutikazon propionata od 1% w/w.

[0083] 1% w/w flutikazon propionat Forme A nanokristala suspenzija je bila podvrgnuta mešanju velikom smicanjem i velikom brzinom na 6000 ± 10 RPM tokom 10 minuta i distribucija veličine čestica je testirana laserskom difrakcijom koristeć i Horiba LA 950S2 PSD Analizator.

[0084] Rezultati su bili sledeć i:

[0085] Alikvoti 1% koncentrovane suspenzije su punjeni u staklene boce od 500 ml koje su sadržale šipku za mešanje i sterilisane autoklavingom 121,5°C tokom 40 minuta.

Korak 5) Priprema nosača 3 (vozilo koje sadrži glicerin 0,9% w/w)

[0086] U kontejner od 20 L uneseno je 11.200 g nosača 1, dodato je 126 g glicerina, uz mešanje, a pH je zatim podešen natrijum hidroksidom na 7,3-7,5 i dalje je dodat alikvot nosača 1 da bi se podesila konačna težina do 14.000 g, što dovodi do 0,9% w/w rastvora glicerola. Ovaj rastvor je mešan najmanje 10 minuta do ujednačenosti i sterilno filtriran u drugi prijemni sud.

Korak 6) Priprema nanosuspenzije 0,1% w/w flutikazon propionata.

[0087] U okruženju ISO 5, sadržaj boca koji sadrži sterilni 1% m/v flutikazon propionat u autoklavingu, nanokristali iz Koraka 4) su aseptički preneti i spojeni u finalnu posudu za mešanje.

[0088] Zabeležena je težina suspenzije nanokristala od 1% flutikazon propionata preneta u posudu (1366,3 g).

[0089] Konačna 0,1% sterilna nanokristalna suspenzija flutikazon propionata dobijena je dodavanjem 11774,2 g sterilno vozilonosač 3.

[0090] Konačna sterilna nanosuspenzija je mešana najmanje 15 minuta na ploči za mešanje.

[0091] Raspodela veličine čestica je testirana laserskom difrakcijom korišć enjem Horiba LA-950S2 PSD analizatora.

[0092] Rezultati su bili sledeći:

[0093] Nanosuspenzije prema pronalasku koje sadrže različite koncentracije flutikazon propionata oblika A kao što su 0,5% w/w, 0,25% w/w, 0,20% w/w, 0,1% w/w, 0,05% w/w, 0,03% w/w, 0,01% w/w i 0,005% w/w su dobijeni razblaživanjem deaglomerisane nanosuspenzije 1% flutikazon propionata iz koraka 4) sa alikvotima vodenog nosača 3 kao što je otkriveno u koraku 6) da bi se dobio konačni flutikazon propionat koncentracija.

Primer 3

Procena stabilnosti nanosuspenzije Primera 2

[0094] Kompozicija nanosuspenzije pripremljena u primeru 2 je podvrgnuta testiranju stabilnosti skladištenja, skladištenjem nanosuspenzije na tri različite temperature i uslova vlažnosti (5°C, 25°C/40% RH; 40°C/25% RH), a resuspendabilnost nanosuspenzije, sadržaj flutikazon propionata, distribucija veličine čestica i sadržaj benzalkonijum hlorida je procenjen u vremenskom periodu od 1 i 3 meseca.

[0095] Rezultati prikazani u tabelama 2 i 3 pokazuju da je nanosuspenzija bila fizički i hemijski stabilna po proizvodnji i skladištenju. Nije primeć ena promena u fizičkom izgledu nanosuspenzije nakon skladištenja. Nanosuspenzija nije pokazala nikakve znake hemijske degradacije i kao hemijski test flutikazon propionata je bio u granicama od 90% -110% , zahtevano na etiketi nakon skladištenja. Srodne supstance i ukupne nečistoć e ostaju u navedenim granicama od najviše 4%, nakon skladištenja.

Primer 4 (Uporedni primer)

[0096] Rezultati ove studije pokazuju da nanokristali nanosuspenzije flutikazon propionata Forme A koji sadrže bornu kiselinu, ali bez glicerina nisu stabilni i agregatni.

[0097] Nanokristali flutikazon propionata Forme A su suspendovani u nosaču koji sadrži potpuno iste koncentracije borne kiseline i metilceluloze kao u prethodnom primeru 2, ali ne sadrži glicerol.

[0098] Kompozicije testiranih nanosuspenzija su prikazane u tabeli 4.

Priprema nanokristalne suspenzije flutikazon propionata Forme A

[0099] Količina nanokristala flutikazon propionata Forme A suspendovana je u alikvotima nosača koji se sastoji od: 0,50% w/w metilceluloze 4000 mPa·s (cP), 0,2% w/w polisorbata 80, 0,10% w/w edetat dinatrijum dihidrata, 1,0 % w/w borne kiseline; 0,01% w/w benzalkonijum hlorida i vode q.s do 100% w/w (videti tabelu 4), da bi se postigao cilj koncentracije flutikazon propionata (videti tabelu 4). Kada su nanokristali suspendovani, suspenzija je sipana u staklenu čašu od 500 mL za deaglomeraciju koristeć i Silverson aparat za mešanje velike brzine i velikog smicanja. Suspenzija je mešana na 6000 RPM dok se ne ispune specifikacije za raspodelu veličine čestica. Raspodela veličine čestica je izmeren kao i viskozitet nanosuspenzija.

[0100] Nanosuspenzije su ostavljene na stabilno i na 40°C, distribucija veličine čestica (PDS) i viskozitet su mereni u vremenskom periodu od 2 nedelje.

[0101] Rezultati prikazani u tabelama 5a i 5b pokazuju da je u kratkom periodu od samo dve nedelje došlo do poveć anja srednje veličine čestica i D90, što odražava formiranje agregata u nanosuspenzijama; obrnuto, rezultati stabilnosti prikazani u Primeru 3 pokazuju da je nanosuspenzija pripremljena u skladu sa postupkom pronalaska bila stabilna u ubrzanim uslovima do 3 meseca.

Primer 5 (Uporedni primer)

[0102] Rezultati ove studije su potvrdili da dodavanje nanokristala Flutikazon propionat Forme A u vozilo koji sadrži prethodno formiran kompleks borne kiseline/glicerola dovodi do rezidualne agregacije koja se ne primeć uje kada se nanosuspenzija priprema u skladu sa postupkom prema ovom pronalasku gde se glicerol dodaje, pri mešanju visokim smicanju i velikom brzinom, deaglomerisane 2% suspenzije nanokristala flutikazon propionata (videti Primer 2 - Korak 4).

[0103] Nanokristali flutikazon propionata Forme A su suspendovani i deaglomerisani u nosaču koji sadrži prethodno formirani kompleks borna kiselina/glicerol (borna kiselina 1,0% w/w/glicerol 0,25% w/w i borna kiselina 1,0% w/w/glicerol 1,0% w/w) da bi se dobila konačna koncentracija flutikazon propionata od 0,25% w/w.

[0104] Kompozicije nosača dve testirane nanosuspenzije su prikazane u tabeli 6.

Priprema nanokristalnih nanosuspenzija flutikazon propionata Forme A

[0105] Nanokristali flutikazon propionata Forme A suspendovani su u dva nosača navedena u tabeli 6 koja sadrže prethodno formiran kompleks borne kiseline/glicerola i mešani preko noć i na ploči sa magnetnom mešalicom, koriste ć i šipku za mešanje. Kada se nanokristali su suspendovani, suspenzija je sipana u staklenu čašu od 500 mL radi deaglomeracije pomoć u Silverson aparata za mešanje velikom brzinom sa visokim smicanjem. Suspenzija je mešana na 6000 RPM do distribucije veličine čestica specifikacije su ispunjene.

[0106] Dve formulacije su stavljene na stabilno, na 40°C i distribucija veličine čestica je izmerena a uzorci izvučeni u vremenskoj tački od 1 nedelje. Uzorci su analizirani ubrzo nakon što su izvučeni iz komore za stabilnost. Rezultati pokazuju veliku količinu agregacije u uzorcima (videti slike 2 i 3).

[0107] Agregacija je bila delimično reverzibilna kada su uzorci hladjeni, ali je i dalje bilo značajno rezidualni nivo agregacije (videti sliku 4); ovo termo-reverzibilno agregiranje je bilo povezano sa smanjenjem rastvorljivosti metilceluloze kada se temperatura poveć a. Poznato je da iako su rastvori metilceluloze vizuelno čisti bez čestica koje se mogu detektovati u opsegu od 30-50°C, polimerni lanci se formiraju labavo povezani klasteri koji rastu u veličini kako temperatura raste. Ovi klasteri su verovatno odgovorni za deo agregacije nanokristala na 40°C.

[0108] Kao što je gore navedeno, rezultati ove studije su pokazali da glicerol deluje kao stabilizator formiranjem kompleksa sa bornom kiselinom koja sprečava agregaciju izolovanih nanokristala. Ako je nanosuspenzija pripremljena suspendovanjem nanokristala u vehiklu koji sadrži prethodno formiran kompleks borne kiseline/glicerola, stabilizujuć i efekat kompleksa je smanjen.

Primer 6

In vitro test rastvaranja

[0109] Brzina rastvaranja nanosuepenzije nanokristala flutikazon propionata forme A prema pronalasku je procenjena i uporedjena sa brzinom rastvaranja standardnog flutikazon propionata oblika 1 mikronizovanog materijala (referentni uzorak).

[0110] Profili rastvaranja nanokristala flutikazon propionata forme A dve nanosuspenzije pronalaska i mikronizovani flutikazon propionat Forme 1 izvedeni su metodom rastvaranja.

[0111] Veličina čestica nanokristala flutikazon propionata Forme A je 0,434 mm (D50 -medijana) i čestica veličina mikronizovanog materijala flutikazon propionata Forme 1 je 4,64 mm (D50 -medijana).

[0112] Studija je izvedena korišć enjem tzv. kompartmentne difuzione analize kroz membranu za dijalizu i posudu za ispiranje. Posuda za ispiranje je sa upotrebom receptorske tečnosti koja sadrži 30 mM fosfatnog pufera, pH 7,4 sa 5% HP•CD ciklodekstrina i takodje potpunom zamenom pufera na svaka 24 sata da bi ostao ispod tačka zasić enja. Tačka zasi ć enja je procenjena na 5 mg/g i pod takvim eksperimentalnim uslovima i izvedenim merenjima, kao i zamena pufera su pokazali maksimalnu koncentraciju od 1,5 mg/g. Studija je bila sprovedeno na temperaturi od 37°C. Detalji metode ispitivanja rastvaranja su dati u nastavku: Sprovedeno je petostruko razblaživanje sa nosačem formulacije (placebo rastvor koji sadrži sve ekscipijente formulacije uključujuć i surfaktanat) dve nanosuspenzije 0,1% w/w flutikazon propionata Forme A, da bi se dobila konačna koncentracija od 0,02% w/w flutikazon propionata unutar uredjaja za dijalizu.

[0113] Flutikazon propionat Forme 1 mikronizovan je kao suspendovan u istom fosfatnom puferu koji je korišć en u prijemnom tzv. kompartmentu/odeljku za dijalizu.

[0114] Oslobadjanje flutikazon propionata je vršeno pri 1-2 RPM.

[0115] Alikvoti za uzorkovanje od 1 mL su povučeni u unapred odredjenim vremenskim intervalima (1, 3, 5, 20, 24, 48, 72 sata), i zamenjeni jednakom zapreminom medijuma za rastvaranje da bi se održala konstantna ukupna zapremina od 39 ml u epruveti od 50 ml.

[0116] Ovi alikvoti su odmah centrifugirani i merenja su izvedena pomoć u HPLC.

[0117] Rezultati prikazani u tabelama od 7 do 9 pokazuju da su profili rastvaranja nanokristala flutikazon propionata Forme A i mikronizovani materijal flutikazon propionata Forme 1 bili slični uprkos tome što su dva testna uzorka i referentni uzorak imali različite veličine čestica. Tačnije, veličina čestica flutikazon propionata Forme A nanokristala su deset puta manji (D50 = 0,434 mm) od veličine čestica mikronizovanog oblika flutikazon propionata 1 (D50 = 4,64 mm).

[0118] Pošto je rastvorljivost jedinjenja često suštinski povezana sa veličinom čestica, kako čestica postaje manja, odnos površine prema zapremini se poveć ava što dovodi do ve ć e interakcije sa rastvaračem što izaziva pove ć anje u rastvorljivost, rezultati ove studije pokazuju jedinstveno svojstvo oftalmološkog vodenog rastvora nanokristala flutikazon propionata Forme A prema pronalasku, naime s jedne strane mala veličina čestica (nanočestice) poboljšava udobnost i podnošljivost oftalmološke formulacije, a sa druge strane spora brzina rastvaranja aktivnog flutikazon propionata u principu omoguć ava da se izbegne brza i visoka apsorpcija flutikazon propionata u korelaciji sa neželjenim nuspojavama povezan sa sistemskom apsorpcijom steroida.

Primer 7

Četrnaestodnevno ispitivanje ponovljenih doza topikalnih oftalmoloških vodenih suspenzija nanokristala flutikazon propionata forme A kod pasa rase Bigl.

[0119] Svrha ove studije je bila da se proceni toksikokinetika nanosuspenzije flutikazon propionata Forme A prema ovom pronalasku (videti tabelu 10 u nastavku) primenjeno lokalno nanošenjem direktno na ivicu (ivice) gornjeg i donjeg kapka oba oka, pasa rase Bigl.

Metode

[0120] Pedeset malih pasa (štenadi) rase Bigl (25 mužjaka i 25 ženki), starih oko 5-6 meseci i težine od 5,7 do 8,8 kg za mužjake i za ženke, na početku studije dodeljeni su grupama za lečenje (grupe 1-4) i nosećoj grupi.

[0121] Muški i ženski psi Bigl su dobijali dozu flutikazonpropionata u dozi od 1,6, 9,6 i 32 mg/dnevno (bilateralno KD lokalna primena) ili 64 mg/dan (bilateralno BID lokalna primena) preko aplikatora za kapke, direktno na gornji i donji deo kapaka oba oka, jednom ili dva puta dnevno (minimalno 6 sati izmedju doza) tokom 14 uzastopnih dana. Krv za toksikokinetičku procenu je sakupljena od svih životinja u odabranim vremenskim tačkama prvog i četrnaestog dana.

[0123] Oftalmološki pregledi su obavljeni pre početka lečenja, tokom prve i druge nedelje doziranja i tokom poslednje nedelje oporavka. Oči su procenjivane jednom dnevno prema modifikovanoj Draize skali.

[0124] Reverzibilnost efekata flutikazon propionat nanosuspenzije je procenjena razdobljem četrnaestodnevnog oporavka.

Rezultati i zaključci

[0125] Grupni srednji toksikokinetički parametri plazme su sumirani u tabeli 11 koja je niže prikazana.

[0126] Rezultati pokazuju da je izloženost flutikazon propionatu zavisila od doze, poveć avaju ć i se sa pove ć anjem doze. Nije bilo jasnih dokaza o akumulaciji kod mužjaka ili ženki životinja. Nije bilo vidljivih rodno povezanih razlika u ekspoziciji. Sistemska izloženost (AUC) na najnižem uočenom nivou neželjenih efekata povezanih sa kortikosteroidima koja se nalazi u četrnaestodnevnoj studiji inhalacione toksičnosti kod pasa bili su 14 i 9 puta već i od onog uočenog na okularnoj dozi od 0,1% KD i BID, u četrnaestodnevnoj studiji lokalne očne toksičnosti kod pasa (Advair-Diskuss-NDA-021077).

[0127] Nije bilo dokaza o lokalnoj ili sistemskoj toksičnosti.

Primer 8

Procena efikasnosti i bezbednosti flutikazon propionat forme A nanosuspenzije za lečenje akutne egzacerbacije blefaritisa

[0128] Cilj ove studije je bio da se uporedi efikasnost i bezbednost vodene oftalmološke formulacije flutikazon propionata u obliku nanosuspenzija prma pronalasku u odnosu na placebo u smanjenju znakova i simptoma kod subjekti sa blefaritisom.

Testna formulacija (u daljem tekstu FP-Obrazac A-NS)

[0129] 0,1% w/w nanokristala flutikazon propionata Forme A (srednje veličine čestica od 100 nm do 1000 nm) 0,50% w/w metilceluloza 4000 mPa·s (cP), 0,2 % w/w polisorbata 80, 0,10 % w/w edetat dinatrijum dihidrata, 1,0 % w/w borne kiseline, 0,9% w/w glicerina, 0,01% w/w benzalkonijum hlorida, 0,055% w/w natrijum hlorida, hlorovodonične kiseline (IN) i/ili natrijum hidroksida (IN) kao sredstva za podešavanje u količini dovoljnoj za pH od 7,3-7,5, i voda q.s. do 100% w/w.

Placebo formulacija

[0130] 0,50% w/w metilceluloze 4000 mPa·s (cP), 0,2% w/w polisorbata 80, 0,10% w/w edetat dinatrijum dihidrata, 1,0 % w/w borne kiseline, 0,9 % w/w glicerina, 0,01 % w/w benzalkonijum hlorida, 0,055 % w/w natrijum hlorida, hlorovodonična kiselina (IN) i/ili natrijum hidroksid (IN) kao sredstva za podešavanje u količini dovoljnoj za pH od 7,3-7,5, i voda q.s. do 100% w/w.

Studija dizajna

[0131] Ovo je bila multicentrična faza 2, randomizovana, dvostruko maskirana i placebo kontrolisana studija koja je procenjivala bezbednost i efikasnost nanosuspenzije flutikazon propionata Forme A 0,1% jednom dnevno, za lečenje znakova i simptoma blefaritisa.

[0132] Ciljna populacija u ovoj studiji bili su odrasli muškarci i žene sa dokumentovanom istorijom blefaritisa koji du imali pogoršanje akutnog blefaritisa definisano kao minimalni rezultat '1' (na tački 4 skale) za svako crvenilo očnih kapaka, ostaci očnih kapaka i nelagodnost na oba oka tokom skrininga i osnovnih poseta. Ukupno je u studiju uključeno 15 ispitanika. Starost ispitanika bila je izmedju 55 i 80 godina, sa prosečnom starošć u od 70,8 godina.

[0133] Petnaest pacijenata je randomizirano na tri klinička mesta širom SAD. Deset pacijenata je primilo FP-Form A-NS i 5 pacijenata su primali placebo, jednom dnevno uveče za oba oka.

[0134] Studijske posete su bile sledeć e: skrining (dan -7 do -3), polazna linija/dan 1., dan 4. ( ±1 dan), dan 8 (±11 dan), dan 11 (±11 dan), 14. dan (±1 dan; poslednji dan lečenja) i 28. dan/izlaz (±12 dana; naknadna poseta).

[0135] Testna nanosuspenzija (16 mg flutikazon propionata po oku) ili placebo su primenjivani jednom dnevno uveče. Ispitanici su sami sebi administrirali ispitivani lek.

Procena efikasnosti i bezbednosti nanosuspenzije flutikazon propionata Forme A

[0136] Efikasnost i bezbednost flutikazon propionata forme A nanosuspenzije (FP-Form A-NS) su uporedjene sa placebo pri svakoj poseti posle doze tokom studije. Pored znakova i simptoma blefaritisa, ova studija je procenila znake i simptome karakteristične za bolest suvog oka, koji se takodje često primeć uju kod osoba sa blefaritisom.

Efikasnost

[0137] Rezultati studije prikazane u tabelama 12 i 13 su pokazali da je tretman nanosuspenzijom flutikazon propionata Forme A je dosledno poboljšavao znake i simptome kod subjekata sa blefaritisom kao i da je kod onih koji su lečeni sa flutikazon propionat formom nanosuspenzija smanjenje kompozitnog rezultata ostataka, crvenila i nelagodnost od početne vrednosti i u odnosu na subjekte koji su lečeni placebom.

[0138] Rezultati predstavljeni u tabelama 12 i 13 odnose se na znakove i simptome blefaritisa u ispitivanom oku procenjeno nakon 14 dana lečenja i sprovedeno pre svakodnevnih procedura pilinga očnih kapaka.

[0139] Subjekti su takodje procenili sledeć e simptome suvog oka pomo ć u vizuelnih analognih skala (VAS): suvoću oka, tzv. peckanje-peckanje, oseć aj stranog tela, svrab, fotofobija, bol i zamagljen vid. Kompozitni VAS skor (prosek pojedinačnih rezultata ovih simptoma) prijavljeno u tabeli 14 pokazao je da tretman nanosuspenzijom flutikazon propiona Forme A bio efikasan u smanjenju simptoma suvog oka u odnosu na placebo.

Sigurnost

[0140] Tretman nanosuspenzijom flutikazon propionata Forme A pronalaska se veoma dobro toleriše i sve pacijenti su završili lečenje. Nije bilo ozbiljnih neželjenih dogadjaja (SAE), a posebno klinički relevantnih promene intraokularnog pritiska subjekta su primeć ene tokom lečenja ili do dve nedelje nakon prekida terapije.

[0141] Rezultati ove studije pokazuju da je nanosuspenzija flutikazon propionata Forme A prema pronalasku u stanju da umanji i znake i simptome blefaritisa i suvog oka i da metoda lečenja, a primene imaju profil bezbedne podnošljivosti.

Primer 9

Procena stabilnosti nanosuspenzije Primera 2

[0142] Kompozicija nanosuspenzije pripremljena u primeru 2 je podvrgnuta testiranju stabilnosti skladištenja skladištenjem nanosuspenziju na tri različite temperature i uslova vlažnosti (5°C, 25°C/40% RH; 40°C/25% RH) resuspendabilnost nanosuspenzije, sadržaj flutikazon propionata, distribuciju veličine čestica i sadržaj benzalkonijum hlorida je procenjen u vremenskom periodu od 1 i 3 meseca (pogledajte rezultate prikazane u Primeru 3 i tabele 2 i 3), u vremenskoj tački od 5 meseci na 40 °C (tabela 15) do 12 meseci na 5°C i 25°C (tabela 16).

[0143] Rezultati prikazani u tabelama 15 i 16 pokazuju da je nanosuspenzija bila fizički i hemijski stabilna pri skladištenju. Nije primeć ena promena u fizičkom izgledu nanosuspenzije nakon skladištenja. Nanosuspenzija nije pokazala nikakve znake hemijske degradacije jer je hemijski test flutikazon propionata bio u granicama od 90% -110% etikete kako je označeno/zahtevano pri skladištenju. Srodne materije i ukupne nečistoć e su ostale unutar navedenog granice ne više od 4%, pri skladištenju.

[0144] Distribucija veličine čestica je analizirana upotrebom instrumenta Horiba LA-950.

Claims

Patentni zahtevi

1. Postupak za pripremu sterilnih topikalnih oftalmoloških vodenih nanosuspenzija koje sadrže nanokristale flutikazon propionata Forme A, srednje veličine čestica od 100 nm do 1000 nm i koncentracije flutikazon propionata od 0,001% w/w do 1% w/w i navedeni postupak obuhvata:

a) pripremu vodenog nosača 1 koji sadrži: 0,5 % w/w metilceluloze 4000 mPa·s, 1,0 % w/w borne kiseline, 0,1% w/w edetat dinatrijum dihidrata, 0,055% w/w natrijum hlorida, 0,01% w/w benzalkonijum hlorida, 0,2% w/w polisorbata 80, hlorovodonične kiseline IN i/ili natrijum hidroksida IN za podešavanje pH na 7,3 -7,5 i vode do 100% w/w;

b) mešanje količine nanokristala flutikazon propionata Forme A, srednje veličine čestica od 100 nm do 1000 nm sa količinom vodenog nosača 1 da bi se dobila suspenzija koja sadrži koncentraciju flutikazon propionata od 2% w/w; c) primenom mešanja visokim strizanjem i velikom brzinom, na suspenziju iz koraka b), u trajanju od najmanje 10 minuta;

d) pripremu vodenog nosača 2 koji sadrži: 1,8% w/w glicerina, 0,5% w/w metilceluloze 4000 mPa·s, 1,0% w/w borne kiseline, 0,1% w/w edetat dinatrijum dihidrata, 0,055% w/w natrijum hlorida, 0,01% w/w benzalkonijum hlorida, 0,2% w/w polisorbata 80, hlorovodoničnu kiselinu IN i/ili natrijum hidroksid IN, za podešavanje pH na 7,37.5 i vodu q.s. do 100% w/w;

f) primenom mešanja visokim strizanjem i velikom brzinom na suspenziju iz koraka e) sve dok se ne dobije ciljana srednja veličina čestica;

g) sterilizaciju nanosuspenzije iz koraka f) autoklavingom;

h) priprema vodenog nosača 3 koji sadrži: 0,9% w/w glicerina, 0,5% w/w metilceluloze 4000 mPa·s, 1,0% w/w borne kiseline, 0,1% w/w edetat dinatrijum dihidrata, 0,055% w/w natrijum hlorida, 0,01% w/w benzalkonijum hlorida, 0,2% w/w polisorbat 80, hlorovodoničnu kiselinu IN i/ili natrijum hidroksid (IN), za podešavanje pH na 7,3 -7,5 i vodu do 100% w/w; te sterilizacija vodenog nosača 3 filtracijom;

i) aseptično dodavanje alikvota sterilnog vodenog nosača 3 u sterilizovanu nanosuspenziju iz koraka g) u pripremu sterilne vodene nanosuspenzije za oftalmologiju, za lokalnu upotrebu, koje sadrže ciljanu koncentraciju nanokristala flutikazon propionata Forme A;

pri čemu nanokristali flutikazon propionata forme A imaju rendgensku difrakciju praha navedenih nanokristala uključujuć i vrhove na oko 7,8, 15,7, 20,8, 23,7, 24,5 i 32,5 stepeni 2θ, dalje uključujuć i vrhove na oko 9,9, 13,0, 14,6, 16,0, 16,9, 18,1 i 34,3 stepena 2θ, i pri čemu su nanokristali nanoploče koje imaju [001] kristalografsku osu, u suštini normalnu na površine koje definišu debljinu nanoploča.

2. Postupak prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je koncentracija flutikazon propionata u konačnoj sterilnoj topikalnoj oftalmološkoj vodenoj nanosuspenziji, od 0,001% do 0,5% w/w.

3. Postupak prema patentnom zahtevu 1, pri čemu je koncentracija flutikazon propionata u konačnoj sterilnoj topikalnoj oftalmološkoj vodenoj nanosuspenziji 0,5% w/w, 0,25%w/w, 0,2% w/w, 0,1% w/w, 0,05% w/w, 0,03% w/w, 0,01% w/w ili 0,005% w/w.

4. Postupak prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 3 pri čemu je mešanje visokim strizanjem, velikom brzinom koraka c) i f) izvedeno na 6000 RPM.

5. Postupak prema patentnom zahtevu 4, naznačen time, što se u koraku f) mešanje visokim strizanjem, velikom brzinom, primenjuje najmanje 10 minuta.

6. Postupak prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 5 pri čemu se se vodeni nosači 1 i 2, pre njihove upotrebe, filtriraju kroz 0,2 ηm filter.

7. Postupak prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 6 pri čemu se sterilizacija iz koraka g) izvodi autoklavingom nanosuspenzije iz koraka f) na oko 122°C i u trajanju od oko 40 minuta.

8. Postupak za pripremu sterilnih topikalnih oftalmoloških vodenih nanosuspenzija koje sadrže nanokristale flutikazon propionata Forme A imajući srednju veličine čestica od 100 nm do 1000 nm i koncentracije flutikazon propionata od 0,001% w/w do 1% w/w, a navedeni postupak obuhvata:

a-1) sterilizacija nanokristala flutikazon propionata Forme A srednje veličine čestica od 100 nm do 1000 nm;

b-1) priprema vodenog nosača 1 koji sadrži: 0,5 % w/w metilceluloze 4000 mPa·s, 1,0 % w/w borne kiseline, 0,1% w/w edetat dinatrijum dihidrata, 0,055% w/w natrijum hlorida, 0,01% w/w benzalkonijum hlorida, 0,2% w/w polisorbata 80, hlorovodoničnu kiselinu IN i/ili natrijum hidroksid IN, a za podešavanje pH na 7,3 -7,5 i vodu q.s. do 100% w/w; i sterilizaciju pomenutog vodenog nosača 1 putem filtracije;

c-1) aseptično mešanje količine sterilisanih nanokristala flutikazon propionata Forme A sa količinom sterilisanog vodenog nosača 1 da se dobije suspenzija koja sadrži koncentraciju flutikazon propionata od 2% w/w;

d-1) primena mešanja visokim strizanjem, velikom brzinom u suspenziju iz koraka c-1) u trajanju od najmanje 10 minuta;

e-1) priprema vodenog nosača 2 koji sadrži: 1,8% w/w glicerina, 0,5% w/w metilceluloze 4000 mPa·s, 1,0% w/w borne kiseline, 0,1% w/w edetat dinatrijum dihidrata, 0,055% w/w natrijum hlorida, 0,01% w/w benzalkonijum hlorida, 0,2% w/w polisorbata 80, hlorovodoničnu kiselinu IN / natrijum hidroksid IN, za podešavanje pH na 7,3 -7,5 i vodu q.s. do 100% w/w; i sterilizaciju pomenutog vodenog nosača 2, filtracijom;

g-1) primenom mešanja visokim strizanjem, velike brzine, na suspenziju iz koraka f-1) sve dok se ne dobije ciljana srednja veličina čestica;

h-1) priprema vodenog nosača 3 koji sadrži: 0,9% w/w glicerina, 0,5% w/w metilceluloze 4000 mPa·s, 1,0% w/w borne kiseline, 0,1% w/w edetat dinatrijum dihidrata, 0,055% w/w natrijum hlorida, 0,01% w/w benzalkonijum hlorida, 0,2% w/w polisorbata 80, hlorovodoničnu kiselinu IN i/ili natrijum hidroksid IN za podešavanje pH na 7,3 -7,5 i vodu do 100% w/w; i sterilizaciju pomenutog vodenog nosača 3, filtracijom;

i-1) aseptično dodavanje alikvota sterilisanog vodenog nosača 3 u nanosuspenziju iz koraka g-1) u pripremu sterilne oftalmičku vodene nanosuspenzije za lokalnu upotrebu koja sadrži konačnu koncentraciju nanokristala flutikazon propionat Forme A;

pri čemu nanokristali flutikazon propionata forme A imaju rendgensku difrakciju praha, uključujuć i pikove na oko 7,8, 15,7, 20,8, 23,7, 24,5 i 32,5 stepeni 2θ, uključujuć i i vrhove na oko 9,9, 13,0, 14,6, 16,0, 16,9, 18,1 i 34,3 stepena 2 θ, i pri čemu su nanokristali nanoploče sa [001] kristalografskom osom suštinski normalnom na površine koje definišu debljinu nanoploča.

9. Postupak prema patentnom zahtevu 8, pri čemu je koncentracija flutikazon propionata u konačnoj sterilnoj topikalnoj oftalmološkoj vodenoj nanosuspenziji od 0,001% do 0,5% w/w.

10. Postupak prema patentnom zahtevu 8, pri čemu je koncentracija flutikazon propionata u konačnoj sterilnoj topikalnoj oftalmološkoj vodenoj nanosuspenziji 0,5% w/w, 0,25% w/w, 0,2% w/w, 0,1% w/w, 0,05% w/w, 0,03% w/w, 0,01% w/w ili 0,005% w/w.

11. Postupak prema bilo kom od patetnih zahteva od 8 do 10 pri čemu se u koraku a-1)nanokristali flutikazon propionata Forme A sterilišu autoklavingom suspenzije nanokristala flutikazon propionata Forme A u vodi za injekcije sa koncentracijom flutikazon propionata izmedju 2% i 20% w/w.

12. Postupak prema patentnom zahtevu 11 naznačen time što se suspenzija nanokristala flutikazon propionata Forme A autoklavinguje u vodi na oko 122°C oko 30 minuta.

13. Postupak prema bilo kom od patentnih zahteva od 8 do 12, pri čemu je u koraku d-1) i koraku g-1) mešanje visokim strizanjem, velikom brzinom, izvodi na 6000 RPM.

14. Postupak prema patentnom zahtevu 13, pri čemu se u koraku g-1) mešanje visokim stiranjem i velikom brzinom primenjuje najmanje 10 minuta.

15. Postupak prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 14 pri čemu se nanokristali flutikazon propionata forme A pripremaju prema sledeć im koracima:

1) priprema rastvora faze I, koji sadrži 0,45% w/w polimorfa flutikazon propionata 1, 23,2% w/w polietilen glikola 400 (PEG 400), 68,8% w/w polipropilen glikola 400 (PPG 400), 7,6% w/w polisorbata 80 (Tveen 80); i filtriranje rastvora faze I kroz 0,8/0,2 ηm polietersulfonski (PES) filter;

2) priprema rastvora faze II koji sadrži 0,01% w/w benzalkonijum hlorida, 0,40% (w/w) metil celuloze 15 mPa·s, 0,1% w/w polietilen glikol 40 stearata (PEG-40 stearat), citratni pufer do pH 3,4 do 3,8 i vodu q.s. do 100% w/w; i filtriranje rastvora faze II kroz 0,8/0,2 ηm polietersulfonski (PES) filter;

3) hladjenje filtriranih rastvora iz faze I i faze II na temperaturi od 0 do 4°C;

4) mešanje rastvora faze I i faze II u reaktoru opremljenom ultrazvučnim pretvaračem (QSonic K2000 ultrazvučni pretvarač) da se dobije suspenzija nanokristala faze III, pri čemu:

- rastvor faze I i rastvor faze II se neprekidno pumpaju u reaktor pri protoku od 600 ml/min (rastvor faze I) i 2400 ml/min (rastvor faze II) za dobijanje suspenzije faze III;

- odnos zapremina faza I i faza II je 1:4;

- sonikacija se primenjuje tokom mešanja sa izlaznom snagom od 60%;

- prosečna temperatura suspenzije iz faze III je oko 11°C; i

5) suspenzija faze III mešanja sa niskim strizanjem iz koraka 4) pri dovoljnoj brzini da stvori vrtlog, na sobnoj temperaturi, najmanje 30 minuta, a u odsustvu sonikacije;

6) žarenje suspenzije faze III na 40°C u periodu koji nije kraći od 16 sati;

7) priprema puferskog rastvora koji sadrži 0,2% w/w polietilen glikol 40 stearat (PEG-40 stearat), 0,2% w/w polisorbat 80 (Tween 80), 0,001% w/w benzalkonijum hlorid, 0,05% w/w natrijum fosfat monobazni monohidrat, 0,02% w/w natrijum fosfat dvobazni dihidrat i voda q.s. do 100% w/w, sa pH 6,360,2; i filtriranje puferskog rastvora kroz 0,8/0,2 mm polietersulfonski (PES) filter;

8) razblaživanje suspenzije faze III iz koraka 6) sa filtriranim rastvorom pufera pri čemu je odnos zapremina pufera rastvor i faza III je 1:1;

10) ispiranje sakupljenih nanokristala vodom za injekcije.

16. Oftalmološka vodena nanosuspenzija koja se može primeniti lokalno na kapke, trepavice ili ivice kapaka koja se sastoji od:

(a) 0,001% do 1% w/w nanokristala flutikazon propionata Forme A;

(b) 0,50% w/w metilceluloze 4000 mPa·s;

(c) 0,2% w/w polisorbata 80;

(d) 0,10% w/w edetat dinatrijum dihidrata;

(e) 1,0 % w/w borne kiseline;

(f) 0,9% w/w glicerina;

(g) 0,01% w/w benzalkonijum hlorida;

(h) 0,055% w/w natrijum hlorida;

(i) hlorovodonične kiseline IN i/ili natrijum hidroksida IN kao sredstva za podešavanje u količini dovoljnoj za pH 7,3-7,5; i

(j) vode q.s. do 100% w/w,

pri čemu navedeni nanokristali flutikazon propionata forme A imaju srednju veličinu čestica od 100 nm do 1000 nm i uzorak difrakcije rendgenskog praha uključujuć i pikove na oko 7,8, 15,7, 20,8, 23,7, 24,5 i 32,5 stepeni 2θ, dalje uključuju ć i pikove na oko 9,9, 13,0, 14,6, 16,0, 16,9, 18,1 i 34,3 stepeni 2θ, pri čemu su nanokristali nanoploče koje imaju [001] kristalografsku osu suštinski normalnu na površine koje definišu debljinu nanoploča.

17. Oftalmološka vodena nanosuspenzija prema patentnom zahtevu 16, pri čemu je koncentracija flutikazon propionata od 0,001% do 0,5% w/w.

18. Oftalmološka vodena nanosuspenzija prema patentnom zahtevu 16, pri čemu je koncentracija flutikazon propionata 0,5% w/w, 0,25% w/w, 0,2% w/w, 0,1% w/w, 0,05% w/w, 0,03% w/w, 0,01% w/w ili 0,005% w/w.

19. Oftalmološka vodena nanosuspenzija prema patentnom zahtevu 16, pri čemu je koncentracija flutikazon propionata 0,2% w/w ili 0,1% w/w ili 0,05% w/w.

20. Oftalmološka vodena nanosuspenzija prema bilo kom od patentnih zahteva od 16 do 19 za upotrebu u postupku lečenja blefaritisa, posteriornog blefaritisa, disfunkcija meibomske žlezde ili bolesti suvog oka pri čemu metoda obuhvata lokalno nanošenje efektivne količine oftalmološke vodene nanosuspenzije na očne kapke, trepavice ili ivice kapaka.

21. Oftalmološka vodena nanosuspenzija prema bilo kom od patentnih zahteva od 16 do 19 za upotrebu u postupku redukcije simptoma i/ili kliničkih znakova povezanih sa blefaritisom, posterironim blefaritisom, disfunkcijom meibomske žlezde ili bolesti suvog oka gde se metoda sastoji od lokalnog nanošenja, efektivne količina oftalmološke vodene nanosuspenzije, na kapke, trepavice ili ivice kapaka.

22. Oftalmološka vodena nanosuspenzija prema patentnom zahtevu 16 za upotrebu u postupku prema patentnom zahtevu 20 ili 21 pri čemu se oftalmološka vodena nanosuspenzija sastoji od:

(a) 0,1% w/w nanokristala flutikazon propionata Forme A;

(b) 0,50% w/w metilceluloze 4000 mPa·s;

(c) 0,2% w/w polisorbata 80;

(d) 0,10% w/w edetat dinatrijum dihidrata;

(e) 1,0 % w/w borne kiseline;

(f) 0,9% w/w glicerina;

(g) 0,01% w/w benzalkonijum hlorida;

(h) 0,055% w/w natrijum hlorida;

(i) hlorovodonične kiselina IN i/ili natrijum hidroksid IN kao sredstva za podešavanje u količini dovoljnoj za pH 7,3-7,5;

i (j) vode q.s. do 100% w/w,

pri čemu navedeni nanokristali flutikazon propionata forme A imaju srednju veličinu čestica od 100 nm do 1000 nm i uzorak difrakcije rendgenskog praha uključujuć i pikove na oko 7,8, 15,7, 20,8, 23,7, 24,5 i 32,5 stepeni 2θ, dalje uključuju ć i pikove na oko 9,9, 13,0, 14,6, 16,0, 16,9, 18,1 i 34,3 stepeni 2θ, i gde su nanokristali nanoploče koje imaju [001] kristalografsku osu suštinski normalnu na površine koje definišu debljinu nanoploče.

23. Oftalmološka vodena nanosuspenzija za upotrebu, iz postupka prema bilo kom od patentnih zahteva od 20 do 22, pri čemu se metod sastoji od lokalnog nanošenja oftalmološke vodene nanosuspenzije na kapke, trepavice ili ivice kapaka, najmanje jednom dnevno, a u periodu od najmanje dve nedelje.