RS63841B1 - Derivati naftiridinona i njihova upotreba u lečenju aritmije - Google Patents

Description

Opis

OBLAST PRONALASKA

[0001] Pronalazak obezbeđuje jedinjenja naftiridinona i njegovo korišćenje za inhibiciju GIRK 1/4 kanala. Opisani su postupci lečenja bolesti korišćenjem istog.

POZADINA PRONALASKA

[0002] Normalni kardijalni ciklus počinje u sino atrijalnom čvoru, koji proizvodi ekscitatorni električni stimulus koji se širi redom kroz atrijalni i vertikularni miokardium da bi se indukovala kontrakcija (sistole). Na ćelijskom nivou, ekscitatorni električni impuls aktivira kardijalni akcijski potencijal. Ovo je karakterizovano inicijalnom, brzom depolitizacijom membrane za kojom sledi plato faza i posledična repolarizacija da bi se vratio mirovni membranski potencijal. Kardijalni akcijski potencijal upravlja širenjem signala kroz srce. Na primer, stopa početne depolarizacije ćelije određuje brzinu pri kojoj se širi ekscitatorni stimulus. Trajanje faze repolarizacije određuje trajanje akcijskog potencijala (APD) i refraktornog perioda ili vreme za koje kardiomiocit ne može da odgovori na drugi električni stimulus.

[0003] Abnormalnosti u kardijalnom akcijskom potencijalu povezane su sa aritmijom. Na primer, prekomerna redukcija trajanja akcijskog potencijala i povezanog refraktornog perioda može da dovede do supstrata za takozvanu re-entrantnu tahikardiju. U ovakvom stanju, umesto normalnog širenja, kardijalni impuls se vraća sebi preko ekscitabilnog tkiva da bi se formiralo re-entrantno kolo (Waldo and Wit, 1993. Mechanism of cardiac arrhythmias.

Lancet 341, 1189-1193). Postojeća III klasa antiaritmijskih lekova predviđena je da radi produžujući APD i povezani efektivni refraktorni period (ERP), stoga minimizirajući rizik od ponove ekscitacije i posledičnog formiranja fibrilatornih reentri kola (Singh B.N. and Vaughan Williams, E.M., 1970. A third class of anti-arrhythmic action. Effects on atrial and ventricular intracellular potentials, and other pharmacological actions on cardiac muscle, of MJ 1999 and AH3474. British Journal of pharmacology 39, 675-687).

[0004] Određeni antiaritmijski lekovi III klase (npr. sotalol) koriste se u lečenju atrijalne fibrilacije (AF). AF je najčešći oblik trajne srčane aritmije kod ljudi i karakterisan je fibrilatorim kontrakcijama koje sadrže atrijalnu funkciju. AF je povezana sa neželjenim kardiovaskularnim događajima. Konkretno, prisustvo AF je nezavisan faktor rizika za tromboembolijski moždani udar, srčane insuficijencije i mortaliteta zbog bilo kog uzroka (Estes et al., (2008). Journal of the American College of Cardiology 51, 865-884) (Fang et al., 2008. Comparison of risk stratification schemes to predict thromboembolism in people with nonvalvular atrial fibrillation. Journal of the American College of Cardiology 51, 810-815). AF takođe može da umanji kvalitet života kod nekih pacijenata indukujući palpitacije i smanjujući toleranciju na vežbanje (Thrall et al., 2006. Quality of life in patients with atrial fibrillation: a systematic review. The American journal of medicine 119, 448.e441-419). Cilj antiaritmijske terapije za AF je izbegavanje ovih neželjenih efekata i ishoda.

[0005] Nedostatak postojećih antiaritmijskih lekova klase III je u tome što deluju na produžavanje efektivnog refraktornog perioda i u atriji i u ventrikulama. Prekomerno produžavanje u ventrikularnom tkivu produžava QTc interval i može da bude proaritmijsko, a određeni lekovi sa ovim mehanizmom akcije (npr. dofetilide) poznati su po indukovanju ventrikularnih aritmija potencijalno opasnih po život poput Torsades de Pointes (Redfern et al., 2003. Relationships between preclinical cardiac electrophysiology, clinical QT interval prolongation and torsade de pointes for a broad range of drugs: evidence for a provisional safety margin in drug development. Cardiovascular research 58, 32-45). Stoga postoji potreba za novom antiaritmijskom terapijom za AF koja selektivno cilja na atrijalno, a ne ventrikularno tkivo.

[0006] Konfiguracija i trajanje kardijalnog akcijskog potencijala kontrolisano je na ćelijskom nivou akcijom višestrukih različitih transmembranskih jonskih kanala. Na primer, početna faza depolarizacije je posredovana influksom natrijumskih jona preko kardijačno-specihičnog kanala Nav1.5. Kalijumski kanali su odgovorni za kasniju fazu repolarizacije i stoga pomažu regulisanju sveukupnog trajanja akcijskog potencijala. Zaista, antiaritmijski lekovi klase III koji ciljaju kalijumske kanale (npr. dofetilide) produžavaju i trajanje akcijskog potencijala i efektivni refraktorni period. Postoji nekoliko različitih vrsta transmembranskih kalijumskih kanala (Schmitt et al., 2014. Cardiac potassium channel subtypes: new roles in repolarization and arrhythmia. Physiological reviews 94, 609-653; Tamargo et al., 2004. Pharmacology of cardiac potassium channels. Cardiovascular research 62, 9-33), uključujući:

● Kanali regulisani naponom (Kv1-9)

● Kanali aktivirani kalcijumom (KCa1-2)

● Kanali sa domenom tandema pora (npr. TASK)

● Unutrašnje-ispravljajući kanali (Kir1-6)

[0007] Dok većina srčanih kalijumskih kanala doprinosi repolarizaciji i u atrijalnim i u ventrikularnim tkivima kod ljudi, za dva – Kv1.5 i GIRK1/4 (tj. G-protein-spregnuti unutrašnje-ispravljajući kalijumski kanal od 1/4) – se smatra da se izražavaju samo atriji (Gaborit et al., 2007. Regional and tissue specific transcript signatures of ion channel genes in the non-diseased human heart. The Journal of physiology 582, 675-693). Ovaj obrazac ekspresije specifičan za atrijalno tkivo čini ih naročito atraktivnim metama za nove antiaritmijske terapije za AF, pošto ne bi trebalo da imaju neželjeno dejstvo postojećih lekova klase III, poput dofetilida, na ventrikularno tkivo.

[0008] Sisari izražavaju četiri različita GIRK kanala (GIRK 1, 2, 3 i 4; kodirane KCNJ3, KCNJ6, KCNJ9 i KCNJ5, respektivno). Ovi transmembranski rastežući proteini poređani su kao tetrameri (ili homo ili heterotetrameri) da bi formirali funkcionalan kalijumski kanal (Krapivinsky et al., 1995. The G-protein-gated atrial K+ channel IKACh is a heteromultimer of two inwardly rectifying K(+)-channel proteins. Nature 374, 135-141). Ovi kanali su regulisani lingandom (npr. regulisani vezivanjem lingada za Gi-protein spojen sa receptorima prisutnim u nekim ćelijskim membranama). Na primer, kanal GIRK1/4 je heterotetramer (dve podjedinice, svaka od GIRK1 i GIRK4) izražen snažno u sino atrijalnim i atrioventrikularnim čvorovima, kao i atrijarnom miokardumu (Wickman et al., 1999. Structure, G protein activation, and functional relevance of the cardiac G protein-gated K+ channel, IKACh. Annals of the New York Academy of Sciences 868, 386-398). Jedna funkcija ovog kanala je da posreduje u autonomnoj regulaciji pulsa. Acetilholin oslobođen prilikom parasimpatičke stimulacije vagalnih referentnih neurona koji se vezuju za GI-spojene M2 muskarinske receptore u srcu. Ovo oslobađa Gβγ podjedinice, koje zauzvrat otvaraju kanale GIRK1/4 da bi se omogućio protok kalijuma od kardiomiocita i tako promovisala repolarizacija membrane. U spontano depolarizujućim pejsmejker ćelijama sino atrijalnog čvora, magnituda ove repolarizacije diktira vreme između depolarizacija, a samim tim i puls. Zbog toga što je regulisana acetilholinom, struja kojom posreduju kanali GIRK1/4 naziva se lKAch(Wickman et al., 1999).

[0009] Nekoliko redova kojima se potvrđuje pokazuju na GIRK1/4 kao na poželjnu antiaritmijsku metu za AF. Kod životinja, stimulacija vagalnog nerva promoviše oslobađanje acetilholina iz vagalnih aferenata i porast lKAch. To zauzvrat skraćuje atrijalno (ali ne i ventrikularno) trajanje akcijskog potencijala i efektivnog refraktornog perioda i može da indukuje AF preko reentri mehanizma (Hashimoto et al., 2006. Tertiapin, a selective IKACh blocker, terminates atrial fibrillation with selective atrial effective refractory period prolongation. Pharmacological research: the official journal of the Italian Pharmacological Society 54, 136-141). U atrijalnim tkivima kod ljudi sa trajnom AF kao i kod životinja koje su bile podvrgnute brom atrijalnom pejsingu (izuzev modela za promovisanje električnog preoblikovanja i podložnosti AF), lKAchpokazali su se kao disregularni. Konkretno, kanal ima tendenciju da konstantno bude otvoren, čak i u odsustvu acetilholina (Cha et al., 2006. Kir3-based inward rectifier potassium current: potential role in atrial tachycardia remodeling effects on atrial repolarization and arrhythmias. Circulation 113, 1730-1737; Voigt et al., 2014. Constitutive activity of the acetylcholine-activated potassium current IK,ACh in cardiomyocytes. Advances in pharmacology (San Diego, Calif) 70, 393-409). U ovim studijama, uočeno je kod pacijenata i životinja da je atrijalni APD/ERP kratak. Stoga, razvoj GIRK1/4 blokatora bilo bi ključno u lečenju srčanih aritmija poput atrijalne fibrilacije.

[0010] WO 2009/104819 opisuje jedinjenja benzodiazepina kao blokatore kanala Kv1.5 i/ili GIRK1/4 za sprečavanje i/ili lečenje aritmija.

[0011] WO 03/027113 opisuje derivate 1,6-naftiridina za lečenje dijabetesa i povezanih poremećaja.

SAŽETAK PRONALASKA

[0012] Ostaje potreba za novim lečenjima i terapijama za aritmiju. Pronalazak obezbeđuje jedinjenja, njihove farmaceutski prihvatljive soli, njihove farmaceutski prihvatljive kompozicije i njihove kombinacije, pri čemu su jedinjenja blokatori kanala GIRK1/4.

Jedinjenja blokatora kanala GIRK1/4 obezbeđena su za upotrebu u postupcima lečenja, sprečavanja ili ublažavanja srčane aritmije, atrijalne fibrilacije, primarnog hiperaldosteronizma, hipertenzije i/ili sindroma bolesnog sinusa, sastojeći primenjivanje navedenog blokatora kanala GIRK1/4 u delotvornoj količini na ispitanika kojem je to potrebno.

[0013] Ovde su opisana različita otelotvorenja pronalaska.

[0014] U određenim aspektima, ovde je dato jedinjenje prema patentnom zahtevu 1.

[0015] U drugom otelotvorenju, pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži terapeutski delotvornu količinu jedinjenja prema patentnom zahtevu 1, i jednog ili više farmaceutski prihvatljivih nosača.

[0016] U drugom otelotvorenju, pronalazak obezbeđuje kombinaciju, konkretno farmaceutsku kombinaciju, koja sadrži terapeutski delotvornu količinu jedinjenja prema zahtevu 1, i jedan ili više terapeutski aktivnih agensa.

KRATAK OPIS SLIKA:

[0017]

Sl. 1 ilustruje obrasce rendgenske difrakcije praška primera 1 hidrata forme B.

Sl. 2 ilustruje različitu kalorimetriju skeniranja (DSC) primera 1 hidrata forme B sa pan prikazom uzorka sa rupicama

Sl. 3 ilustruje različitu kalorimetriju skeniranja (DSC) primera 1 hidrata forme B sa pan prikazom hermetičkog uzorka

Sl. 4 Ilustruje termogravimetrijsku analizu (TGA) primera 1 hidrata forme B.

DETALJNI OPIS

[0018] U otelotvorenju 1, pronalazak stoga obezbeđuje jedinjenje:

formule II ili formule III:

naznačeno time što:

R<1>je C1-4alkil, -CH2CN, -CN, C1-4alkoksiC1-4alkil, halo-C1-4alkil, -CH=N-OH, -CH=N-O-C1-4alkil, -CH=N-O-(hidroksiC1-4alkil), hidroksi-C1-4alkil, -CH2OP(O)(OH)2ili C3-5cikloalkil;

R<3>je -OR<a>; -NHR<b>; -C(O)NH2; -C(O)[hidroksiC1-4alkil]; heterociklil opciono supstituisan jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od OH i hidroksiC1-

4alkila; 5- ili

6-člani alkil opciono supstituisan jednim ili više C1-4alkila; ili

R<3>je C1-4alkil supstituisan jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od -C(O)[hidroksiC1-4alkil] i -OR<c>;

R<a>je -C1-6alkil supstituisan jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od - OR<c>, -SO2C1-4alkila, -NHS(O)2C1-4alkila i heterocikliula koji je dalje opciono supstituisan jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od C1-4alkila i hidroksiC1-4alkila; ili R<a>je H, -[CH2-CH2-O]n-H, -[CH2-CH2-O]m-CH3ili heteroaril opciono supstituisan jednim ili više C1-4alkilom; naznačeno time što n je 2-6 i m je 1-6;

R<b>je -C1-6alkil supstituisan jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od - OR<c>, -C(O)NH-C1-4alkila, -C(O)NH-(hidroksiC1-4alkil), hidroksiC1-4alkila, 5- ili 6-članog heteroarila, heterociklila, -SO2C1-4alkila i -NHS(O)2C1-4alkila; ili

R<b>je -S(O)2heteroaril; ili

R<b>je 4- do 7-člani heterociklil opciono supstituisan jednom ili više hidroksi grupa; ili

R<b>je H, -OR<c>; -[CH2-CH2-O]n-H, -[CH2-CH2-O]m-CH3ili heteroaril opciono supstituisan jednim ili više C1-4alkil; naznačeno time što su n i m kao što je definisano ranije;

R<c>je H ili hidroksiC1-4alkil;

R<2>je H, C1-4alkoksi, halo-C1-4alkoksi, halo, C1-4alkil, -S-C1-4alkil ili -NH-C1-4alkil;

R<4>je H, halo, halo-C1-4alkil, C1-4alkil ili C3-5cikloalkil;

R<5>je H, halo, CN, C1-4aloksi, hidroksi-C1-4alkoksi, C1-4aloksi-C1-4aloksi, -CH=NH-O-C1-4alkil ili -CH=NH-O(hidroksiC1-4alkil); ili

R<5>je C2-6alkinil opciono supstituisan OH ili NR<g>R<h>naznačeno time što su R<g>ili R<h>nezavisno H ili C1-4alkil; ili se R<g>i R<h>formiraju zajedno sa azotom za koji su vezani 4- do 7-člani heterociklil koji opciono sadrži dodatni heteroatom izabran od O, S i N, naznačeno time što heteroatom može da bude u svojoj oksidisanoj formi; i naznačeno time što je navedeni heterociklil opciono supstituisan C1-4alkilom; i

R<6>je halo, C1-4alkil ili CN; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0019] Osim ako nije naznačeno drugačije, termin „jedinjenja predmetnog pronalaska“ ili „jedinjenja pronalaska“ odnose se na jedinjenja formule (I) i njihove podformule II ili III i njihove soli, kao i sve stereoizomere (uključujući diastereoizomere i enantiomere), rotamere, tautomere i izotopski obeležena jedinjenja (uključujući supstitucije deuterijuma) kao i svojstveno nastale ostatke.

[0020] U svrhu tumačenja ove specifikacije, važiće sledeće definicije, osim ako nije drugačije naznačeno, i kad god je to moguće, termini koji se upotrebljavaju u jednini takođe će uključivati množinu, i obrnuto.

[0021] Treba imati u vidu da, kako se koristi ovde i u priloženim zahtevima, oblik za jedninu uključuje i množinu, osim ako kontekst jasno ne nalaže drugačije. Stoga, na primer, upućivanje na „jedinjenje“ uključuje referencu na jedno ili više jedinjenja; i tako dalje.

[0022] Termin alkil se odnosi na potpuno zasićeni razgranati ili nerazgranati (ili sa ravnim lancem ili linearni) ugljovodonični ostatak, koji sadrži 1 do 6 atoma ugljenika. Alkil poželjno sadrži od 1 do 4 atoma ugljenika. C1-4alkil se odnosi na alkil lanac koji sadrži 1 do 4 ugljenika. C1-6alkil se odnosi na alkil lanac koji sadrži 1 do 6 ugljenika.

[0023] Kako se ovde koristi, termin „haloalkil“ (tj. halo-C1-4alkil) odnosi se na alkil (tj. C1-

4alkil) kako je ovde definisan, koji je supstituisan sa jednom ili više halo grupa kako su ovde definisane. Poželjno haloalkil može biti monohaloalkil, dihaloalkil ili polihaloalkil, uključujući perhaloalkil. Monohaloalkil može imati jedan jod, brom, hlor ili fluor u alkil grupi. Dihaloalkil i polihaloalkil grupe mogu imati dva ili više istih halo atoma ili kombinaciju različitih halo grupa u alkilu. Poželjno, polihaloalkil sadrži do 12 ili 10 ili 8 ili 6 ili 4 ili 3 ili 2 halo grupe. Reprezentativni primeri za haloalkil su fluormetil, difluormetil, trifluormetil, hlormetil, dihlormetil, trihlormetil, pentafluoretil, heptafluorpropil, difluorhlormetil, dihlorfluormetil, difluoretil, difluorpropil, dihloretil i dihlorpropil. Termin „halo-C1-4alkil“ odnosi se na hidrokarbon koji ima od jednog do četiri atoma ugljenika i koji je supstituisan jednom ili više halo grupa.

[0024] Kako se ovde koristi, termin „hidroksialkil“ (tj. hidroksi-C1-4alkil) odnosi se na alkil (tj. C1-4alkil) kako je ovde definisan, koji je supstituisan sa jednom ili više hidroksi grupa kako su ovde definisane.

[0025] Kako se ovde koristi, termin „alkoksialkil“ (tj. C1-4alkoksiC1-4alkil) odnosi se na alkil (tj. C1-4alkil) kako je ovde definisan, koji je supstituisan sa jednom ili više alkoksi grupa (tj. C1-4alkoksi) kako su ovde definisane.

[0026] Kako se ovde koristi, termin „alkoksi“ (tj. odnosi se na se radikal alkil-O-, naznačeno time što je alkil ovde prethodno definisan. Primeri za alkoksi uključuju, ali nisu ograničeni na, metoksi, etoksi, propoksi, 2-propoksi, butoksi, terc-butoksi, pentiloksi, heksiloksi, ciklopropiloksi-, cikloheksiloksi- i slično. Poželjno, alkoksi grupe imaju oko 1-8, još poželjnije oko 1-4 ugljenika.

[0027] Kako se ovde koristi, termin „haloalkoksi“ (tj. halo-C1-4alkoksi) odnosi se na alkoksi kako je ovde definisan, koji je supstituisan sa jednom ili više halo grupa kako su ovde definisane.

[0028] Kako se ovde koristi, termin odnosi se na zasićene ili nezasićene ali nearomatične monociklične ugljovodonične grupe sa 3-6 atoma ugljenika. Primeri za monociklične ugljovodonične grupe uključuju ciklopropil. ciklobutil, ciklopentil ili ciklopentenil.

[0029] Termin heteroaril uključuje monociklični heteroaril, koji sadrži 5 ili 6 članova prstena izabranih od atoma ugljenika i 1 do 4 heteroatoma, a svaki od heteroatoma je nezavisno izabran od O, N ili S, naznančeno time što S i N mogu biti oksidisani do različitog stepena oksidacije. Radikal heteroaril može da bude vezan preko atoma ugljenika ili heteroatoma (npr. preko N). Tipične monociklične heteroaril grupe uključuju tienil, furil, pirolil, imidazolil, pirazolil, tiazolil, izotiazolil, oksa-2,3-diazolil, oksa-2,4-diazolil, oksa-2,5-diazolil, oksa-3,4-diazolil, tia-2,3-diazolil, tia-2,4-diazolil, tia-2,5-diazolil, tia-3,4-diazolil, 3-, 4- ili 5-izotiazolil, 2-, 4- ili 5-oksazolil, 3-, 4- ili 5-izoksazolil, 3- ili 5-1,2,4-triazolil, 4- ili 5-1,2, 3-triazolil, tetrazolil, 2-, 3- ili 4-piridil, 3- ili 4-piridazinil, 3-, 4- ili 5-pirazinil, 2-pirazinil, 2-, 4- ili 5-pirimidinil.

1

[0030] Kako se ovde koristi i osim ako nije drugačije navedeno, termin „heterociklil“odnosi se na opciono supstituisan, zasićen ili nezasićen nearomatičan (delimično nezasićen) prsten koji je 4-, 5-, 6- ili 7-člani monocikličan prsten i sadrži barem jedan heteroatom izabran od O, S i N, naznačeno time što N i S mogu takođe opciono biti oksidisani do različitog stepena oksidacije. Radikal heterociklil može da bude vezan preko atoma ugljenika ili heteroatoma (npr. preko N). U jednom otelotvorenju, heterociklil ostatak predstavlja zasićeni monociklični prsten koji sadrži od 4-7 atoma prstena i opciono sadrži dodatni heteroatom, izabran od O, S ili N. Heterociklična grupa može biti vezana za heteroatom ili za atom ugljenika. Primeri za heterocikle uključuju dihidrofuranil, dioksolanil, dioksanil, ditianil, piperazinil, pirolidin, dihidroprianil, oksatiolanil, ditiolan, oksatianil, tiomorfolino, oksiranil, arizidinil, oksetanil, oksepanil, azetidinil, tetrahidrofuranil, tetrahidrotiofenil, pirolidinil, tetrahidropiranil, piperidinil, morfolino, piperazinil, azepinil, oksapinil, oksaazepanil, oksatianil, tieoanil, azeoanil, dioxepanil i diazepanil.

[0031] Ovde su opisana različita (numerisana) otelotvorenja pronalaska. Biće prepoznato da svojstva naznačena u svakom otelotvorenju mogu biti kombinovana sa drugim naznačenim svojstvima kako bi se dobila dalja otelotvorenja prema predmetnom pronalasku.

[0032] U otelotvorenju 2, pronalazak se odnosi na jedinjenje prema otelotvorenju 1 koje ima formulu II:

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so naznačena tome što su R<1>i R<3>-R<6>definisani u otelotvorenju 1.

[0033] U otelotvorenju 3, pronalazak se odnosi na jedinjenje prema otelotvorenju 1 koje ima formulu III:

ili njegova farmaceutski prihvatljiva so naznačena time što su R<1>i R<6>-R6 definisani u otelotvorenju 1.

[0034] U otelotvorenju 4, pronalazak se odnosi na jedinjenje prema bilo kom otelotvorenju od 1 do 3 naznačeno time što R<1>je CH3, ciklopropil, -CH2OH ili -CH=NH-OH; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0035] U otelotvorenju 4A, pronalazak se odnosi na jedinjenje prema otelotvorenju 4, naznačeno time što R<1>je CH3ili -CH2OH; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0036] U otelotvorenju 4B, pronalazak se odnosi na jedinjenje prema otelotvorenju 4, naznačeno time što R<1>je -CH2OH; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0037] U otelotvorenju 5, pronalazak se odnosi na jedinjenje prema bilo kom od otelotvorenja 1, 3, 4, 4A i 4B, naznačeno time što R<2>je H ili -NH-CH3; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0038] U otelotvorenju 5A, pronalazak se odnosi na jedinjenje prema otelotvorenju 5, naznačeno time što R<2>je H; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0039] U otelotvorenju 6, pronalazak se odnosi na jedinjenje prema bilo kom od otelotvorenja 1-5, 4A, 4B i 5A, naznačeno time što R<4>je H ili halo; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0040] U otelotvorenju 6A, pronalazak se odnosi na jedinjenje prema otelotvorenju 6, naznačeno time što R<4>je Cl; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0041] U otelotvorenju 7, pronalazak se odnosi na jedinjenje prema bilo kom od otelotvorenja 1-6, 4A, 4B, 5A i 6A naznačeno time što R<5>je H, F, CN, C2-4alkinil supstituisan OH ili tiomorfolinom; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0042] U otelotvorenju 7A, pronalazak se odnosi na jedinjenje prema otelotvorenju 7, naznačeno time što R<5>je H, F ili CN; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0043] U otelotvorenju 8, pronalazak se odnosi na jedinjenje prema bilo kom od otelotvorenja 1-7, 4A, 4B, 5A, 6A i 7A naznačeno time što R<6>je Cl ili CN; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0044] U otelotvorenju 8A, pronalazak se odnosi na jedinjenje prema otelotvorenju 7, naznačeno time što R<6>je Cl; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0045] U otelotvorenju 9, pronalazak se odnosi na jedinjenje prema bilo kojem od otelotvorenja od 1-8, 4A, 4B, 5A, 6A, 7A i 8A naznačeno time što R<3>je hidroksiC1-6alkil, hidroksiC1-6alkoksi, -O-(CH2CH2-O)nH, -O-(CH2CH2-O)mCH3, -NH-(CH2CH2O)nH, -NH-(CH2CH2-O)mCH3, azetidin supstituisan hidroksilom, pirolidin supstituisan jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od hidroksila i hidroksiC1-4alkila; ili piperazin supstituisan hidroksiC1-4alkilom; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0046] U otelotvorenju 10, pronalazak se odnosi na jedinjenje prema bilo kom od otelotvorenja 1-8, 4A, 4B, 5A, 6A, 7A i 8A naznačeno time što R<3>je izabran od sledećih grupa:

1

; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0047] U otelotvorenju 10A, pronalazak se odnosi na jedinjenje prema otelotvorenju 10, naznačeno time što R<3>je izabran od sledećih grupa:

; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0048] U otelotvorenju 11, pronalazak se odnosi na jedinjenje prema otelotvorenju 10 naznačeno time što R<3>je izabran od:

[0049] U otelotvorenju 12, pronalazak se odnosi na jedinjenje formule III naznačeno time što R<1>je CH3ili CH2OH, R<2>je H, R<3>je -OR<a>ili -NHR<b>, R<4>je Cl, R<5>je H ili F i R<6>je Cl; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0050] U otelotvorenju 13, pronalazak se odnosi na jedinjenje izabrano od grupe koja se sastoji od specifičnih jedinjenja opisana u primerima od 1 do 93 ispod; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

1

[0051] U otelotvorenju 13, pronalazak se odnosi na jedinjenje izabrano od grupe koja se sastoji od:

8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-(hidroksimetil)-5-((3-(hidroksimetil)oksetan-3-il)metoksi-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

N-(2-((8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-(hidroksimetil)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-5-il)oxy)etil)metansulfonamid;

8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3-hidroksi-2-(hidroksimetil)propoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-(hidroksimetil)-5-((2-(metilsulfonil)etil)amino)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

8-Hloro-1-(2,6-dihidrofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-2-karbonitril;

8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksi-3-metilbutoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(1,2-dihidroksietil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; i

8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3,4-dihidroksibutil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0052] U otelotvorenju 13B, pronalazak se odnosi na jedinjenje izabrano od grupe koja se sastoji od:

1

(R)- 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksi-3-metilbutoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

(S)- 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksi-3-metilbutoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; i

8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksi-3-metilbutoksi)-2-metil-1,6-nafitiridin-4(1H)-on; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0053] U otelotvorenju 13C, pronalazak se odnosi na jedinjenje izabrano od grupe koja se sastoji od:

(S)-8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

(R)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0054] U otelotvorenju 13D, pronalazak se odnosi na jedinjenje izabrano od grupe koja se sastoji od:

(R)-8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3,4-dihidroksibutil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

(S)- 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3,4-dihidroksibutil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; i

8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3,4-dihidroksibutil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

1

[0055] U otelotvorenju 13E, pronalazak se odnosi na jedinjenje izabrano od grupe koja se sastoji od:

(R)- 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

(S)- 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; i

8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0056] U otelotvorenju 13F, pronalazak se odnosi na jedinjenje izabrano od grupe koja se sastoji od:

(R)- 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(1,2-dihidroksietil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

(S)- 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(1,2-dihidroksietil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; i

8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(1,2-dihidroksietil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0057] U otelotvorenju 14, pronalazak je kristalna forma B hidrata primera 1.

[0058] U otelotvorenju 15, pronalazak je kristalna forma B hidrata primera 1 karakterisana time što se šablon rendgenske difraktometrije praha sadrži od četiri ili više 2θ vrednosti (CuKα λ=1,5418 Å) izabranih od grupe koja se sastoji od 14,294±0,2°, 18,666±0,2°, 22,353±0,2°, 24,878±0,2°, 26,163±0,2°, 27,106±0,2°, 27,744±0,2° i 28,228±0,2° izmereni na temperaturi od oko 22 °C i rendgenskoj dužini talasa λ, od 15418 Å.

1

[0059] U otelotvorenju 16, pronalazak je kristalna forma B hidrata primera 1 karakterisana time što se šablon rendgenske difraktometrije praha sadrži od pet ili više 2θ vrednosti (CuKα λ=1,5418 Å) izabranih od grupe koja se sastoji od 14,294±0,2°, 18,666±0,2°, 22,353±0,2°, 24,878±0,2°, 26,163±0,2°, 27,106±0,2°, 27,744±0,2° i 28,228±0,2° izmereni na temperaturi od oko 22 °C i rendgenskoj dužini talasa λ, od 15418 Å.

[0060] U otelotvorenju 17, pronalazak je kristalna forma B hidrata primera 1 koja ima spektar rendgenske difraktometrije suštinski isti kao spektar rendgenske difraktometrije praha prikazan na Sl.1.

[0061] Termin „suštinski isto“ sa referencom na položaje pika rendgenske difrakcije znači da su tipičan položaj pika i varijabilnost intenziteta uzeti u obzir. Na primer, stručnjak u predmetnoj oblasti će znati da će položaji pika (2Θ) pokazati neke varijabilnosti među aparatima, tipično do 0,2°. Povremeno, varijabilnost može da bude veća od 0,2° u zavisnosti od razlika u kalibraciji aparata. Dalje, stručnjak u predmetnoj oblasti će znati da će intenziteti relativnog pika prikazati varijabilnost među aparatima kao i varijabilnost usled stepena kristalisanosti, željene orijentacije površine pripremljenog uzorka i drugih faktora poznatim stručnjacima u oblasti i treba se uzeti samo kao kvalitativna mera.

[0062] U otelotvorenju 18, pronalazak je kristalna forma B hidrata primera 1 kojem je termogram različite kalorimetrije skeniranja (DSC) suštinski isti kao što je prikazan na Sl.2 (sa pan prikazom uzorka sa rupicama) i Sl.3 (sa pan prikazom hermetičkog uzorka).

[0063] U otelotvorenju 19, pronalazak je kristalna forma B hidrata primera 1 kojem je dijagram termogravimetrijske analize (TGA) suštinski isti kao što je prikazano na Sl.4.

[0064] U zavisnosti od izbora polaznih supstanci i postupaka, jedinjenja mogu biti prisutna u obliku jednog od mogućih stereoizomera ili njihove smeše, na primer, kao optički čisti izomeri, ili kao smeše stereoizomera, kao što su racemske i dijastereomerne smeše, u zavisnosti od broja asimetričnih atoma ugljenika. Predmetni pronalazak treba da uključi sve takve moguće stereoizomere, uključujući racemske smeše, dijastereomerne smeše i optički čiste oblike. Optički aktivni (R)- i (S) stereoizomeri mogu biti pripremljeni upotrebom hiralnih sintona ili hiralnih reagenasa ili ponovo rastvoreni upotrebom konvencionalnih

1

tehnika. Ukoliko jedinjenje sadrži dvostruku vezu, supstituent može biti E ili Z konfiguracija. Ukoliko jedinjenje sadrži disupstituisani cikloalkil, cikloalkil supstituent može imati cis ili trans konfiguraciju. Svi tautomerni oblici takođe treba da budu obuhvaćeni.

[0065] Kao što se ovde koriste, termini "so" ili "soli" odnose se na kiselu adicionu ili baznu adicionu so jedinjenja iz pronalaska. „Soli“ obuhvataju posebno „farmaceutski prihvatljive soli“. Termin „farmaceutski prihvatljive soli“ odnosi se na soli koje zadržavaju biološku delotvornost i osobine jedinjenja iz ovog pronalaska, i koje tipično nisu biološki ili drugačije nepoželjne. U mnogim slučajevima, jedinjenja iz predmetnog pronalaska su u stanju da grade kisele i/ili bazne soli zbog prisustva amino i/ili karboksilnih grupa ili njima sličnih grupa.

[0066] Farmaceutski prihvatljive kiselinske adicione soli mogu da se formiraju sa neorganskim kiselinama i organskim kiselinama.

[0067] Neorganske kiseline iz kojih soli mogu da se dobiju uključuju, na primer, hlorovodoničnu kiselinu, bromovodoničnu kiselinu, sumpornu kiselinu, azotnu kiselinu, fosfornu kiselinu i slične.

[0068] Organske kiseline iz kojih soli mogu da se dobiju uključuju, na primer, acetatnu kiselinu, propionsku kiselinu, glikolnu kiselinu, oksalnu kiselinu, maleinsku kiselinu, malonsku kiselinu, sukcinsku kiselinu, fumarnu kiselinu, vinsku kiselinu, limunsku kiselinu, benzoevu kiselinu, mandelinsku kiselinu, metansulfonsku kiselinu, etansulfonsku kiselinu, toluensulfonsku kiselinu, sulfosalicinsku kiselinu i slične.

[0069] U drugom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje jedinjenja formule I u obliku soli acetata, askorbata, adipata, aspartata, benzoata, besilata, bromida/hidrobromida, bikarbonata/karbonata, bisulfata/sulfata, kamfor sulfonata, kaprata, hlorida/hidrohlorida, hlorteofilonata, citrata, etandisulfonata, fumarata, gluceptata, glukonata, glukuronata, glutamata, glutarata, glikolata, hipurata, hidrojodida/jodida, izetionata, laktata, laktobionata, laurilsulfata, malata, maleata, malonata, mandelata, mezilata, metilsulfata, mukata, naftoata, napsilata, nikotinata, nitrata, oktadekanoata, oleata, oksalata, palmitata, pamoata, fosfata/hidrogen fosfata/dihidrogen fosfata, poligalakturonata, propionata, sebakata, stearata, sukcinata, sulfosalicilata, sulfata, tartarata, tozilata trifenatata, trifluoracetata ili ksinafoata.

2

[0070] Bilo koja ovde data formula takođe je namenjena da predstavlja neobeležene oblike, kao i izotopski obeležene oblike jedinjenja. Izotopski obeležena jedinjenja imaju strukture prikazane ovde datim formulama, osim što je jedan ili više atoma zamenjeno atomom koji ima izabranu atomsku masu ili maseni broj. Izotopi koji mogu da se inkorporiraju u jedinjenja pronalaska uključuju, na primer, izotope vodonika.

[0071] Dalje, supstitucija težim izotopima, naročito deuterijumom (tj.<2>H ili D) može da priušti određene farmaceutske prednosti koje proizilaze iz veće metaboličke stabilnosti, na primer povećano in vivo poluvreme eliminacije ili smanjene potrebe za dozom ili poboljšanje terapeutskog indeksa ili podnošljivosti. Podrazumeva se da deuterijum u ovom kontekstu posmatra kao supstituent jedinjenja formule (I), (II) ili (III). Koncentracija deuterijuma može da se definiše faktorom obogaćenja izotopa. Termin „faktor obogaćenja izotopa“ kao što se ovde koristi označava odnos između količine izotopa i prirodne količine naznačenog izotopa. Ako je supstituent u jedinjenju ovog pronalaska predstavljen kao deuterijum, takvo jedinjenje ima faktor obogaćenja izotopa za svaki označeni atom deuterijuma od barem 3500 (52,5% inkorporacije deuterijuma na svakom označenom atomu deuterijuma), barem 4000 (60% inkorporacije deuterijuma), barem 4500 (67,5% inkorporacije deuterijuma , barem 5000 (75% inkorporacije deuterijuma), barem 5500 (82,5% inkorporacije deuterijuma), barem 6000 (90% inkorporacije deuterijuma), barem 6333,3 (95% inkorporacije deuterijuma), barem 6466,7 (97% inkorporacije deuterijuma), barem 6600 (99% inkorporacije deuterijuma), ili barem 6633,3 (99,5% inkorporacije deuterijuma). Potrebno je podrazumevati da termin „faktor obogaćenja izotopa“ može da se primeni na bilo koji izotop na isti način kao što je opisano za deuterijum.

[0072] Ostali primeri izotopa koji mogu da se inkorporiraju u jedinjenja pronalaska uključuju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, fluora i hlora, poput<3>H,<11>C,<13>C,<14>C,<15>N,<18>F<31>P,<32>P,<35>S,<36>Cl,<123>I,<124>I,<125>I respektivno. U skladu sa tim potrebno je podrazumevati da pronalazak obuhvata jedinjenja koja inkorporiraju jedan ili više bilo kog od malopre pomenutih izotopa, uključujući na primer, radioaktivne izotope, poput<3>H i<14>C ili one u kojima su prisutni neradioaktivni izotopi poput<2>H i<13>C. Takva izotopski označena jedinjenja su od koristi pri metaboličkim ispitivanjima (sa<14>C), reakcionim kinetičkim ispitivanjima (na primer, sa<2>H ili<3>H), detekciji ili tehnikama obrade slike, kao što je pozitronska emisiona tomografija (PET) ili jednofotonska emisiona kompjuterska tomografija (SPECT), uključujući testove distribucije leka ili supstrata u tkivu ili radioaktivno tretiranje pacijenata. Naročito,<18>F ili obeleženo jedinjenje mogu biti posebno poželjni za PET ili SPECT ispitivanja. Jedinjenja obeležena izotopom formule (I) mogu uopšteno da se pripreme konvencionalnim tehnikama poznatim stručnjacima u predmetnoj oblasti ili procesima analognim onima koji su opisani u pratećim primerima i pripremama korišćenjem odgovarajućeg reagensa obeleženog izotopom umesto prethodno korišćenog neobeleženog reagensa.

[0073] Farmaceutski prihvatljivi solvati u skladu sa pronalaskom uključuju one gde rastvarač kristalizacije može da bude izotopski supstituisan, npr. D2O, d6-aceton, d6-DMSO.

[0074] Kako se ovde koristi, termin „farmaceutska kompozicija“ odnosi se na jedinjenje pronalaska, ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, zajedno sa barem jednim farmaceutski prihvatljivim nosačem, u obliku odgovarajućem za oralnu ili parenteralnu primenu.

[0075] Kako se ovde koristi, termin „farmaceutski prihvatljivi nosač“ odnosi se na supstancu korisnu prlikom pripreme ili upotrebe farmaceutske kompozicije i uključuje, na primer, odgovarajuće razblaživače, rastvarače, pomoćna sredstva za disperziju, surfaktante, antioksidanse, konzervanse, izotonične agense, sredstva za puferovanje, emulgatore, sredstva za odlaganje apsorpcije, soli, stabilizatore lekova, veziva, escipijense, agense za dezintegraciju, lubrikante, kvašljivce, agense za zaslađivanje, agense za aromatizovanje, boje i njihove kombinacije, kao što je poznato stručnjacima u predmetnoj oblasti (videti, na primer, Remington The Science and Practice of Pharmacy, 22nd Ed. Pharmaceutical Press, 2013, pp.

1049-1070).

[0076] Termin „terapeutski delotvorna količina“ jedinjenja predmetnog pronalaska odnosi se na količinu jedinjenja predmetnog pronalaska koja će izneti biološki ili medicinski odgovor ispitanika, na primer, smanjenje ili inhibiciju aktivnosti enzima ili proteina ili ublažiti simptome, poboljšati stanje, usporiti ili odložiti napredak bolesti ili sprečiti bolest itd. U jednom neograničavajućem otelotvorenju, termin „terapeutski delotvorna količina“ odnosi se na količinu jedinjenja predmetnog pronalaska koje je, kada se primeni na ispitanika, delotvorno da (1) barem delimično ublaži, inhibira, spreči i/ili poboljša stanje ili poremećaj ili bolest (i) posredovano kanalom GIRK1/4 ili (ii) povezano sa aktivnošću kanala GIRK1/4 ili (iii) karakterizovano aktivnošću (normalnom ili abnormalnom) kanala GIRK1/4; ili (2) umanji ili inhibira aktivnost kanala GIRK1/4; ili (3) umanji ili inhibira ekspresiju kanala GIRK1/4. U drugim neograničavajućim otelotvorenjima, termin „terapeutski delotvorna količina“ odnosi se na količinu jedinjenja predmetnog pronalaska koje, kada se primeni na ćeliju ili tkivo ili nećelijski biološki materijal ili posredno sredstvo ima dejstvo barem delimičnog smanjenja ili inhibiranja aktivnosti kanala GIRK1/4; ili barem delimičnog smanjenja ili inhibiranja ekspresije kanala GIRK1/4.

[0077] Kako se ovde koristi, termin „ispitanik“ odnosi se na ljude, muškog ili ženskog pola. U drugim primerima izvođenja, ispitanik je čovek.

[0078] Kako se ovde koristi, termin „inhibiranje“, „inhibicija“ ili „inhibirajući“ odnosi se na smanjenje ili suzbijanje datog stanja, simptoma ili poremećaja ili bolesti ili značajnog smanjenja osnovne aktivnosi biološke aktivnosti ili procesa.

[0079] Kako se ovde koristi, termin „lečenje“ bilo koje bolesti ili poremećaja odnosi se na poboljšanje ili ublažavanje bolesti ili poremećaja (npr, usporavanje ili zaustavljanje razvoja bolesti ili barem jednog od njenih kliničkih simptoma); ili na poboljšanje ili ublažavanje barem jednog fizičkog parametra ili biomarkera povezanog sa bolešću ili poremećajem, uključujući i one koji možda nisu uočljivi pacijentu.

[0080] Kako se ovde koristi, termin „sprečavanje“ bilo koje bolesti ili poremećaja odnosi se na profilaktičko lečenje bolesti ili poremećaja; ili odlaganje početka ili napretka bolesti ili poremećaja.

[0081] Kao što se ovde koriste, oblike za jedninu i množinu korišćene u kontekstu predmetnog pronalaska (naročito u kontekstu patentnih zahteva) bi trebalo protumačiti tako da pokrivaju i jedninu i množinu, ukoliko ovde nije drugačije naznačeno ili nije u suprotnosti sa kontekstom.

[0082] Svi ovde opisani postupci mogu biti izvršeni prema bilo kom pogodnom redosledu, ukoliko ovde nije drugačije naznačeno ili na drugačiji način nije u suprotnosti sa kontekstom. Korišćenje bilo kog ili svih primera ili egzemplarnog jezika (npr.. „poput“) pruženog ovde

2

namenjeno je samo boljem osvetljavanju pronalaska i ne predstavlja ograničenje u slučaju da pronalazak drugačije tvrdi.

[0083] Bilo koji asimetrični atom (npr. ugljenik i slični) jedinjenja predmetnog pronalaska može da se predstavi racemski ili enantiomerski obogaćen, na primer (R)-, (S)- ili (R,S)-konfiguracija. U određenim otelotvorenjima, svaki asimetrični atom ima barem 50% enantiomerskog viška, barem 60% enantiomerskog viška, barem 70% enantiomerskog viška, barem 80% enantiomerskog viška, barem 900% enantiomerskog viška, barem 95% enantiomerskog viška ili barem 99% enantiomerskog viška u (R)- ili (S)-konfiguraciji.

Supstituenti kod atoma sa nezasićenim dvostrukim vezama mogu, ako je moguće, da budu prisutni u cis- (Z)- ili trans- (E)- obliku.

[0084] U skladu sa tim, kako se ovde koristi jedinjenje predmetnog pronalaska može da bude u obliku jednog od mogućih stereoizomera, rotamera, atropizomera, tautoizomera ili njihove mešavine, na primer, kao suštinski čist geometrijski (cis ili trans) stereoizomeri, diastereoizomeri, optički izomeri (antipodi), racemati ili njihove mešavine.

[0085] Bilo koje dobijene mešavine stereoizomera mogu da se odvoje na osnovu psihohemijskih razlika konstituenata, u čiste ili suštinski čiste geometrijske ili optičke izomere, diastereomere, racemate, na primer, hromatografijom i/ili frakcionom kristalizacijom.

[0086] Bilo koji dobijeni racemati konačnih proizvoda ili intermedijata mogu da se poznatim postupcima rastvore u optičke antipode, npr., razdvajanjem njihovih diastereomerskih soli, dobijenih optički aktivnom kiselinom ili bazom i oslobađanjem optički aktivnog kiselog ili baznog jedinjenja. Naročito, osnovni ostatak može stoga da bude angažovan za rastvaranje jedinjenja predmetnog pronalaska na njihove optičke antipode, npr. frakcionom kristalizacijom soli formiranih optički aktivnom kiselinom, npr. vinsku kiselinu, dibenzoil vinske kiseline, diacetil vinske kiseline, di-O,O'-p-toluoil vinske kiseline, mandelinsku kiselinu, jabučnu kiselinu ili kamfor-10-sulfonsku kiselinu. Racemski proizvodi mogu takođe da se rastvore hiralnom hromatografijom, npr. tečnom hromatografijom pod visokim pritiskom (HPLC) pomoću hiralnog adsorbenta.

[0087] Predmetni pronalazak takođe pruža predlekove jedinjenja predmetnog pronalaska koji se konvertuju in vivo u jedinjenja predmetnog pronalaska. Predlek je aktivno ili neaktivno jedinjenje koje je hemijski modifikovano kroz in vivo fiziološku radnju, poput hidrolize, metabolizma i slično, u jedinjenje ovog pronalaska za kojim sledi primena predleka na ispitanika. Pogodnost i tehnike uključene u pravljenje i korišćenje predlekova dobro su poznate stručnjacima u predmetnoj oblasti. Predlekovi mogu da se konceptualno podele u dve neisključive kategorije, predlekovi bioprekursori i predlekovi sa nosačem. Pogledajte The Practice of Medicinal Chemistry, Ch.31-32 (Ed. Wermuth, Academic Press, San Diego, Calif., 2001). Uopšteno, predlekovi bioprekusori su jedinjenja, koja su neaktivna ili imaju slabu aktivnost u poređenju sa jedinjenjima aktivnih lekova, koja sadrže jednu ili više zaštitnih grupa i koje se konvertuju u aktivan oblik metabolizmom ili solvilozom. I oblik aktivnih lekova i bilo koji oslobođeni metabolički proizvodi treba da imaju prihvatljivo nisku toksičnost.

[0088] Predlekovi sa nosačem su jedinjenja lekova koja sadrže transportni ostatak, npr. koji poboljšavaju primanje i/ili lokalizovanu isporuku do mesta akcije. Poželjno je za takav predlek sa nosačem, da veza između ostatka leka i ostatka transporta bude kovalentna veza, predlek bude neaktivan ili manje aktivan nego jedinjenje leka i bilo koji ispušten transportni ostatak bude prihvatljivo netoksičan. Za predlekove gde je ostatak transporta namenjen poboljšanju upotrebe, tipično oslobađanje ostatka transporta treba da bude brzo. U ostalim slučajevima, poželjno je da se iskoristi ostatak koji omogućava sporo oslobađanje, npr. određeni polimeri ili drugi ostaci, poput ciklodekstrina. Predlekovi nosači mogu da se, na primer, koriste za poboljšanje jednog ili više od sledećih svojstava: povećanje lipofilnosti, povećanje trajanja farmakoloških efekata, povećanje specifičnosti mesta, smanjenje toksičnosti i neželjenih reakcija i/ili poboljšanje formulacije leka (npr. stabilnost, rastvorljivost u vodi, supresija neželjenih organoleptičkih ili psihohemijskih karakteristika). Na primer, lipofilnost može da se poveća esterifikacijom (a) hidroksil grupa pomoću lipofilnih karboksilnih kiselina (npr. karboksilna kiselina ima barem jedan lipofilni ostatak) ili (b) karboksilna kisela grupa sa lipofilnim alkoholom (npr. alkohol ima barem jedan lipofilni ostatak, na primer alfatični alkoholi). Na primer, rastvorljivost može da se poveća esterifikacijom hidroksi grupe sa fosfornom kiselinom.

[0089] Primeri predleka su, npr. O-acil ili O-fosfat derivati alkohola ili fenola, naznačeno time što acil ima značenje kako je definisano ovde. Pogodne kiseline za formiranje

2

predlekova O-acila su npr. supstituisane ili nesupstituisane alkil-, cikloalkil- ili benzilkarboksilne kiseline. Amini su maskirani kao arilkarboniloksimetil supstituisani derivati koji su pocepani esterazom in vivo oslobađajući slobodan lek i formaldehide (Bundgaard, J. Med. Chem. 2503 (1989)). Štaviše, lekovi koji sadrže kiselu NH grupu, poput imidazola, imida, indola i slični, maskirani su N.aciloksimetil grupama (Bundgaard, Design of Prodrugs, Elsevier (1985)). Hidroksi grupe su maskirane kao estri i etri, vicinal dioli su maskirani kao ciklični acetali ili ketali. Dalje, jedinjenja predmetnog pronalaska, uključujući njihove soli, takođe mogu da se dobiju u obliku njihovih hidrata, ili da sadrže druge rastvarače korišćene za njihovu kristalizaciju. Jedinjenja iz predmetnog pronalaska mogu suštinski ili namenski da formiraju solvate sa farmaceutski prihvatljivim rastvaračima (uključujući vodu); stoga, nameravano je da pronalazak obuhvati i solvatne i nesolvatne forme. Termin „solvat“ se odnosi na molekulski kompleks jedinjenja iz predmetnog pronalaska (uključujući njegove farmaceutski prihvatljive soli) sa jednim ili više molekula rastvarača. Takvi molekuli rastvarača su oni koji se obično koriste u farmaceutskoj struci, za koje je poznato da nisu štetni za primaoca, npr. voda, etanol i slično. Termin „hidrat“ se odnosi na kompleks gde je molekul rastvarača voda.

[0090] U jednom otelotvorenju, jedinjenje formule (II) ili (III) je u hidratnom obliku.

[0091] Tipično, jedinjenja formula (II) ili (III) mogu da se pripreme u skladu sa šemama B, C i D obezbeđenim ispod. Neophodni intermedijati J pripremaju se kao što je opisano ispod u šemi A.

2

[0092] U šemi A polazna aromatična supstanca A deporteniše se jakom bazom (npr. LDA ili n-BuLi) i reaguje sa npr. alkil formatima ili DMF da bi proizveo aromatični aldehid. Aldehid B može da reaguje sa deportanisanim alkinom (npr. Grinjarov reagens ili litirane vrste) da obezbedi benzil alkohole C koji su oksidiraju na ketone u odgovarajućim uslovima oksidacije poput Des-Martinovog perjodinan reagensa. Alternativno, ketoni D mogu da se pripreme od aromatičnih kiselina E koje se povezuju sa aminom da bi formirale amide F koji se supstituišu za reakciju sa odgovarajućim Grinjarovim reagensima. Reakcija anilina u Luiskatalizi (npr. AlCl3, BF3*Et2O, Sc(OTf)3) omogućava intermedijate H koji mogu da se ciklizuju do aneliranih 4-piridona pod uslovima baze (npr. kalijum-karbonat).

[0093] X<2>, X<3>kao što su definisani u odeljku Sažetak pronalaska i R<1*>, R<4*>, R<5*>i R<6*>uključuju definicije za R<1>, R<4>, R<5>i R<6>kao što je definisano u odeljku Sažetak pronalaska ali takođe može biti i supstituent koji može da se transformiše u R<1>, R<4>, R<5>i R<6>.

2

[0094] Šema B opisuje sintezu jedinjenja pronalaska, konkretno jedinjenja naznačena time što R<1>je CH2OH, CHF2, CHO, CN, CH3, R<3>je -OR<a>ili -NHR<b>i/ili R<2>je C1-4alkoksi, haloC1-

4alkoksi i -NH-C1-4alkil.

[0095] Primeri opšte formule Ia i Ib mogu da se pripreme kao što je opisano u šemi B.

Intermedijati J mogu da se konvertuju direktno u jedinjenja Ia nukleofilnom aromatičnom supstitucijom pomoću amina i alkohola i – ako je neophodno – posledičnim manipulacijama zaštitne grupe. Za intermedijate K supstituent R<4>može da se predstavi npr. reakcijom sa cink reagensima ili Suzuki vezom sa boronskim kiselinama. Za intermedijate L metil grupa može da oksidira omoću selenijum oksida u aldehide koji mogu da se konvertuju u primarni alkohol čineći npr. NaBH4redukciju. Funkcionalnost aldehida takođe može da se prenese u difluorometil grupu fluorinacijom pomoću odgovarajućeg agensa za fluorinaciju. Dalje, aldehid grupa može da se transformiše u nitril sekvencom reakcija koje uključuju oksidaciju u kiselinu, formaciju amida i dehidraciju. Za intermedijate N sa X<2>= CCI druga nukleofilna

2

aromatična supstitucija sa alkoholima, aminima, Grinjarovim ili cink reagensima može da dovede do jedinjenja opšte formule lb. Šema C opisuje uvod raznih R<3>grupa različitih od onih opisanih u šemi B.

[0096] Prema šemi C, intermedijati J mogu da se povežu preko Pd-katalizovane Suzuki veze sa boronskim kiselinama sa primerima opšte formule Ic gde je R povezan sa sistemom prstenova preko C-C veze. Alternativno, intermedijati J mogu takođe da reaguju sa Grinjarovim reagenisma sa jedinjenjima P koja mogu da se transformišu u primere formule Id i Ie uslovima naznačenim u šemi. Reakcija intermedijata J sa stananima pruža npr. intermedijate O i Q koji mogu da se transformišu preko skupa uslova u dalje primere opšte formule If i Ig.

[0097] Šema D opisuje sintezu jedinjenja formule I naznačene time što R<5>je C2-6alkinil.

2

[0098] Intermedijati J mogu da se transformišu u jedinjenja R nekleofilnom aromatičnom supstracijom. Reakcija sa terminalnim alkinima preko Pd/Cu-katalize (Sonogashira veza) i – ako je neophodno – posledičnim manipulacijama zaštitne grupe doprinosi primere opšte formule Ih.

[0099] Predmetni procesi obuhvataju varijante u kojima je proizvod intermedijata dobavljiv u bilo kojoj fazi stoga se koristi kao polazne supstance, a preostali koraci se izvode, ili u kojim se formiraju početni materijali in situ pod uslovima reakcije ili u kojima se komponente reakcije koriste u obliku njihovih soli ili optički čistih materijala. Jedinjenja pronalaska i intermedijata mogu takođe da se konvertuju jedna u druge u skladu sa opšte poznatim metodama stručnjacima u predmetnoj oblasti.

[0100] U drugom aspektu, predmetni pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje predmetnog pronalaska ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljivog nosača. U daljem otelotvorenju, kompozicija sadrži najmanje dva farmaceutski prihvatljiva nosača, kao što su oni koji su ovde opisani. Za svrhe predmetnog pronalaska, ako nije drugačije naznačeno, solvati i hidrati se uopšteno smatraju kompozicijama. Poželjno, farmaceutski prihvatljivi nosači su sterilni. Farmaceutska kompozicija može biti formulisana za posebne puteve primene, kao što je oralna primena, parenteralna primena i rektalna primena, itd. Pored toga, farmaceutske kompozicije iz predmetnog pronalaska mogu biti načinjene u čvrstom obliku (uključujući, između ostalog, kapsule, tablete, pilule, granule, praškove ili supozitorije) ili u tečnom obliku (uključujući, između ostalog, rastvore, suspenzije ili emulzije). Farmaceutske kompozicije se mogu podvrgnuti konvencionalnim farmaceutskim operacijama, kao što je sterilizacija i/ili mogu da sadrže konvencionalne inertne razblaživače, lubrikanse ili sredstva za puferovanje, kao i adjuvanse, kao što su konzervansi, stabilizatori, kvašljivci, emulgatori i puferi, itd.

[0101] Tipično, farmaceutske kompozicije su tablete ili želatinaste kapsule koje sadrže aktivni sastojak zajedno sa jednim ili više:

a) razblaživača, npr. laktozu, dekstrozu, sukrozu, manitol, sorbitol, celulozu i/ili glicin;

b) lubrikante, npr. silicijum, talk, searinsku kiselinu, magnezijumove ili kalcijumove soli i/ili polietilenglikol; za tablete takođe

c) veziva, npr. magnezijum aluminijum silikat, skrobnu pastu, želatin, tragakant, metilceluloza, natrijum karboksimetil celuloza i/ili polivinilpirolidon; po želji

d) dezintegranse, npr. skrobovi, agar, aglininska kiselina ili njene natrijumove soli ili šumeće smeše; i

e) apsorbente, boje, arome i zaslađivače.

[0102] Tablete mogu biti ili filmom obložene ili gastrorezistentne obložene tablete prema postupcima poznatim u struci.

[0103] Pogodna jedinjenja za oralnu primenu uključuju delotvornu količinu jedinjenja iz pronalaska u obliku tableta, lozengi, vodenih ili uljanih suspenzija, disperzivnih praškova ili granula, emulzija, tvrdih ili mekih kapsula ili sirupa ili eliksira. Kompozicije namenjene za oralnu upotrebu pripremaju se prema bilo kom postupku poznatom u struci za proizvodnju farmaceutskih kompozicija, i takve kompozicije mogu da sadrže jedan ili više agenasa odabranih iz grupe koja se sastoji od zaslađivača, aroma, boja i konzervanasa kako bi se dobili farmaceutski elegantni i ukusni preparati. Tablete mogu da sadrže aktivni sastojak u smeši sa netoksičnim farmaceutski prihvatljivim ekscipijensima koji su pogodni za proizvodnju tableta. Ti ekscipijensi su, na primer, inertni razblaživači, kao što je kalcijum karbonat, natrijum karbonat, laktoza, kalcijum fosfat ili natrijum fosfat; agensi za granulaciju i dezintegraciju, na primer, kukuruzni skrob ili alginska kiselina; vezujući agensi, na primer,

1

skrob, želatin ili akacija; i lubrikansi, na primer magnezijum stearat, stearinska kiselina ili talk. Tablete su neobložene ili obložene poznatim tehnikama da bi se usporila dezintegracija i apsorpcija u gastrointestinalnom traktu i tako obezbedilo odloženo dejstvo u dužem periodu. Na primer, mogu se koristiti supstance za vremensko odlaganje, kao što je gliceril monostearat ili gliceril distearat. Formulacije za oralnu upotrebu mogu da se predstave kao tvrde želatinske kapsule naznačeno time što je aktivni sastojak pomešan sa inertnim čvrstim razblaživačem, na primer, kalcijum karbonat, kalcijum fosfat ili kaolin, ili meke želatinske kapsule gde je aktivni sastojak pomešan sa vodenim ili uljnim medijumom, na primer, uljem o kikirikija, tečnim parafinom ili maslinovim uljem.

[0104] Neke injektabilne kompozicije su vodeni izotonični rastvori ili suspenzije, i supozitorije se pogodno pripremaju iz masnih emulzija ili suspenzija. Pomenute kompozicije mogu biti sterilisane i/ili sadržati adjuvanse, kao što su agensi za konzervisanje, stabilizaciju, kvašenje ili emulgovanje, promoteri rastvora, soli za regulisanje osmotskog pritiska i/ili puferi. Pored toga, one takođe mogu da sadrže druge terapeutski vredne supstance. Pomenute kompozicije se dobijaju prema konvencionalnim postupcima za mešanje, granulaciju, odnosno oblaganje, i sadrže oko 0,1-75% ili sadrže oko 1-50%, aktivnog sastojka.

[0105] Predmetni pronalazak dalje obezbeđuje anhidrovane farmaceutske kompozicije i dozne oblike koji uključuju jedinjenja iz predmetnog pronalaska kao aktivne sastojke, jer voda može da olakša degradaciju nekih jedinjenja.

[0106] Anhidrovane farmaceutske kompozicije i dozni oblici iz pronalaska mogu se dobiti pomoću anhidrovanih sastojaka ili sastojaka sa malim sadržajem vlage, u uslovima sa malo vlage i male vlažnosti vazduha. Anhidrovana farmaceutska kompozicija se može dobiti i čuvati tako da se očuva njena anhidrovana priroda. U skladu sa tim, anhidrovane kompozicije se pakuju koristeći materijale za koje se zna da sprečavaju izloženost vodi, tako da se mogu uključiti u pogodne komplete za formulaciju. Primeri pogodnih pakovanja uključuju, ali nisu ograničeni na, hermetički zatvorene folije, plastike, kontejnere sa jedinicama doze .(npr. epruvete), blister pakovanja i pakovanja u traci

[0107] Pronalazak dalje obezbeđuje farmaceutske kompozicije i dozne oblike koji sadrže jedan ili više agenasa koji smanjuju brzinu kojom će se jedinjenje iz predmetnog pronalaska

2

kao aktivni sastojak razlagati. Takvi agensi, koji se ovde pominju kao „stabilizatori“, uključuju, između ostalog, antioksidanse, kao što je askorbinska kiselina, pH pufere ili puferske soli, itd.

Postupak pronalaska:

[0108] Jedinjenja bilo koje od formula II i III u slobodnom obliku ili u obliku farmaceutski prihvatljive soli, pokazuju vredne farmakološke karakteristike, npr. karakteristike moduliranja kanala GIRK1/4, npr. kao što je naznačeno in vitro i in vivo testovima koji su obezbeđeni u sledećim odeljcima, npr. kao alatna jedinjenja.

[0109] Kao što je prethodno opisano, GIRK1/4 je prepoznat kao željeni antiaritmični cilj za artijalnu fibriaciju.

[0110] Dodatno, blokatori GIRK1/4 su opisani kao potencijalno korisni kod disfunkcije sinoatrijalnog/atrijalnoventrikularnog čvora: kanali GIRK1/4 posreduju u repolarizaciji spontano depolarizujućim ćalijama sinoatrijalnih (SAN) i atrioventrikularnih (AVN) čvorova. Acetilholin oslobođen iz eferentnih vagalnih nerava vezuje se za M2 muskarinske receptore prisutne u ovim tkivima, što zauzvrat deluje na kanale GIRK1/4 da se otvore i omoguće protok kalijuma iz ćelija. Ova repolarizacija (ili hiperpolarizacija u zavisnosti od magnitude protoka) određuje vreme između spontanih depolarizacija, a stoga i puls i stopu provodnosti AV čvorova. Blokada kanala GIRK1/4 očekivana je nasuprot negativnim hronotropskim efektima acetilholina, i to se posmatralo sa selektivnim peptidnim blokatorom GIRK1/4 tertiapinom (Drici et al., 2000. The bee venom peptide tertiapin underlines the role of I(KACh) in acetylcholine-induced atrioventricular blocks. British journal of pharmacology 131, 569-577). Kod ljudskih oboljenja pejsmejkera (npr. sindrom bolesnog sinusa) sinoatrijalni ili atrioventrikularni čvorovi su disfunkcionalni, što može da indukuje razne aritmije uključujući i bradikardiju i asistoliju. Blokada GIRK1/4 može biti očekivana radi ublažavanja takvih aritmija. Na primer, u nedavnoj studiji, genetsko brisanje GIRK1/4 je pokazalo da spašava od generisanja insuficijencije srčanog pulsa i stanja koja indukuje utišavanje takozvane „funny current“ struje koje je specifično za srce, što posreduje spontanoj depolarizaciji u sinoatrijalnom i atrioventikularnom tkivu (Mesirca et al., 2014.

Cardiac arrhythmia induced by genetic silencing of 'funny' (f) channels is rescued by GIRK4 inactivation. Nature communications 5, 4664).

[0111] Dalje, blokatori GIRK1/4 su pisani kao potencijalno korisni kod primarnog hiperaldosteronizma: Somatsko i nasledno sticanje funkcija mutacije u KCNJ5 (šifrovano GIRK4) nedavno je umešano u primarni aldosteronizam, stanje koje indukuje hipertenziju. Ove mutacije menjaju selektivnost filtera kanala GIRK4 i dozvoljavaju protok natrijumskih jona u određene adrenalne ćelije. Dobijena depolarizacija ćelija dozvoljava protok kalcijuma, što zauzvrat pojačava proizvodnju aldosterona i sekreciju i takođe može da indukuje ćelijsku proliferaciju da proizvede aldenom koji luči aldosteron (Scholl and Lifton, 2013. New insights into aldosterone-producing adenomas and hereditary aldosteronism: mutations in the K+ channel KCNJ5. Current opinion in nephrology and hypertension 22, 141-147). Stoga je moguće da selektivni blokator GIRK4 može da spreči protok natrijumskih jona i njegovo prateće lučenje aldosterona kod takvih pacijenata.

[0112] Stoga, jedinjenja pronalaska mogu da budu korisna u lečenju indikacija izabranih od srčane aritmije, atrijalne fibrilacije, primarnog hiperaldosteronizma, hipertenzije i sindroma bolesnog sinusa.

[0113] Stoga, kao dalje otelotvorenje, predmetni pronalazak pruža jedinjenje bilo koje od formula od (II) do (III) za korišćenje u terapiji. U daljem otelotvorenju, terapija je izabrana od bolesti koje mogu da se leče inhibicijom kanala GIRK1/4. U drugom otelotvorenju, bolest je izabrana od srčane aritmije, atrijalne fibrilacije, primarnog hiperaldosteronizma, hipertenzije i sindroma bolesnog sinusa, pogodno atrijalne fibrilacije.

[0114] Jedinjenje formule (II) ili (III) može da se koristi u postupku lečenja bolesti koja se leči inhibicijom kanala GIRK1/4. Bolest može da se izabere od srčane aritmije, atrijalne fibrilacije, primarnog hiperaldosteronizma, hipertenzije i sindroma bolesnog sinusa, pogodno atrijalne fibrilacije.

[0115] Jedinjenje bilo koje formule od (II) do (III) može da se koristi za proizvodnju medikamenta. Medikament može da bude za lečenje bolesti i koja može da se leči inhibicijom kanala GIRK1/4. Bolest može da se izabere od srčane aritmije, atrijalne

4

fibrilacije, primarnog hiperaldosteronizma, hipertenzije i sindroma bolesnog sinusa, pogodno atrijalne fibrilacije.

[0116] U jednom otelotvorenju predmetnog pronalaska, obezbeđen je 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za korišćenje u lečenju srčane aritmije, atrijalne fibrilacije, primarnog hiperaldosteronizma, hipertenzije i sindroma bolesnog sinusa, pogodno atrijalne fibrilacije.

[0117] U još jednom otelotvorenju predmetnog pronalaska, obezbeđen je (R)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za korišćenje u lečenju srčane aritmije, atrijalne fibrilacije, primarnog hiperaldosteronizma, hipertenzije i sindroma bolesnog sinusa, pogodno artijalne fibrilacije.

[0118] U još jedom otelotvorenju predmetnog pronalaska, obezbeđen je 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za korišćenje u lečenju srčane aritmije, atrijalne fibrilacije, primarnog hiperaldosteronizma, hipertenzije i sindroma bolesnog sinusa, pogodno atrijalne fibrilacije.

[0119] U još jednom otelotvorenju predmetnog pronalaska, obezbeđen je (R)-8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3,4-dihidroksibutil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za korišćenje u lečenju srčane aritmije, atrijalne fibrilacije, primarnog hiperaldosteronizma, hipertenzije i sindroma bolesnog sinusa, pogodno atrijalne fibrilacije.

[0120] U još jednom otelotvorenju predmetnog pronalaska, obezbeđen je (S)-8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3,4-dihidroksibutil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za korišćenje u lečenju srčane aritmije, atrijalne fibrilacije, primarnog hiperaldosteronizma, hipertenzije i sindroma bolesnog sinusa, pogodno atrijalne fibrilacije.

[0121] U još jednom otelotvorenju predmetnog pronalaska, obezbeđen je 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3,4-dihidroksibutil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za korišćenje u lečenju srčane aritmije, atrijalne fibrilacije, primarnog hiperaldosteronizma, hipertenzije i sindroma bolesnog sinusa, pogodno atrijalne fibrilacije.

[0122] U još jednom otelotvorenju, predmetni pronalazak , odnosi se na jedinjenje bilo kog od prethodnih otelotvorenja 1-13F, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za korišćenje u lečenju srčane aritmije, atrijalne fibrilacije, primarnog hiperaldosteronizma, hipertenzije i/ili sindroma bolesnog sinusa.

[0123] Farmaceutska kompozicija ili kombinacija predmetnog pronalaska mže da bude u jedinici doze od oko 1-1000 mg aktivnih sastojaka za ispitanika od oko 50-70 kg ili oko 1-500 mg ili oko 1-250 mg ili oko 1-150 mg ili oko 0,5-100 mg ili oko 1-50 mg aktivnih sastojaka. Terapeutski delotvorna doza jedinjenja, farmaceutske kompozicije ili njihove kombinacije zavisi od vrste ispitanika, telesne mase, starosti, individualnog stanja, poremećaja ili bolesti koja se leči ili njihove ozbiljnosti. Lekar, klinički lekar ili veterinar prosečne stručnosti može lako da odredi delotvornu količinu svakog od aktivnih sastojaka neophodnih da se spreči, leči ili inhibira napredak poremećaja ili bolesti.

[0124] Karakteristike gorenavedenih doza su dokazive in vitro i in vivo testovima pomoću pogodnih sisara, npr. miševa, pacova pasa, majmuna, mini prasića ili izolovanih organa, tkiva i njihovih preparata. Jedinjenja predmetnog pronalaska mogu da se primene in vitro u obliku rastvora, npr. vodenih rastvora i in vivo bilo enteralno, parenteralno, intravenozno, npr. kao suspenzija, emulzija ili vodeni rastvor. Doziranje in vitro može da bude u rasponu između 10<-2>molarne koncentracije i 10<-9>molarne koncentracije. Terapeutski delotvorna količina in vivo može da bude u rasponu u zavisnosti od načina primene, između 0,1-500 mg/kg ili između oko 1-100 mg/kg.

[0125] Aktivnost jedinjenja u skladu sa predmetnim pronalaskom može da se odredi prema sledećem in vitro postupku.

1. Puferi:

a. Spoljni pufer: 10 mM NaCl, 50 mM Na glukonat, 80 mM K glukonat, 1,8 mM CaCl2, 1 mM MgCI2, 10 mM HEPES, 10 mM glukoza, pH 7.4; osmolalnost 300-310 Osm/L.

b. Unutrašnji pufer: 30 mM KCI, 100 mM K glukonat, 1 mM MgCl2, 10 mM HEPES, 1 mM EGTA, 10 mM NaCl, pH 7,2; osmolalnost 284-292 Osm/L.

jenja:

a. Pripremiti rastvor u procesu sedam serija razblaživanja (10 mM do 20 uM) u 100% DMSO u polipropilenskim pločama sa 384 bunarčića.

b. Propafenon (Sigma Aldrich, kataloški broj P4670) koristi se kao pozitivna kontrola, a DMSO kao neutralna kontorla

c. Resuspendovati 1 ul jedinjenja u DMSO u 65,7 ul spoljnog pufera u polipropilenskoj ploči sa 384 bunarčića i postaviti u odeljak za ploču 1 uređaja Molecular Devices Quattro

vka uređaja Quattro:

a. Postaviti ploču Population Patch Plate sa 384 bunarčića (Molecular Devices # 9000-0902) u uređaj Quattro

b. Napuniti F-soak uređaja Quattro sa 20% DMSO i 50% EtOH

c. Napuniti pufer uređaja Quattro spoljnim puferom

d. Priključiti bočicu pufera za cevovod internog pufera uređaja Quattro

e, Priključiti PBS (fosfatni pufer, minus Ca<++>i Mg<++>, pH7,4) bocu za F-head i E-head wash uređaja Quattro

4. Antibiotici:

a. Resuspendovati 5,6 mg amfotericina B (Sigma Aldrich, kataloški broj A2411) u 175 ul DMSO

b. Dodati dobijeni rastvor u 50 ml unutrašnjeg pufera, pomešati i priključiti za priključak cevi za antibiotike na uređaju Qauttro

5. Ćelije:

a. Koristiti GIRK 1/4 HEK293 stabilne ćelije (dobijene od ChanTest, 14656 Neo Parkway, Cleveland, Ohio 44128) narasle do ~ 80% konfluencije u sledećem medijumu ćelijske kulture: DMEM koji sadrži 10% (v/v) Fetal Bovine Serum, penicilin/streptomicin (pri „1X“ koncentraciji od 100X pripreme), 0,5 mg/ml G418 i 0,1 mg/ml Zeocin.

b. Isprati ćelije pomoću PBS (minus Ca<++>i Mg<++>), odvojiti ćelije pomoću Detachin (Genlantis, 11011 Torreyana, San Diego, CA 92121) i resuspendovati spoljni pufer (5 ml konačnog rastvora na 2,0 – 2,1 × 10<6>ćelija/ml)

c. Postavite u ćelije preko uređaja Quattro

6. Protokol testa:

Uređaj Quattro se kontroliše pomoću IonWorks v2 softvera da bi se obavili sledeći koraci:

a. Dodati 3,5 ul ćelija plus 3,5 ul spoljnog pufera bunarčićima na ploči Patch Plate uređaja Quattro

b. Cirkulisati amfotericin B i unutrašnji pufer na ćelije

c. Primenite sledeći naponski protokol: Puls 1: 15 mV na 300 milisekundi (ms), nakon čega sledi Puls 2: -120 mV na 400 ms, zatim Puls 3: -15 mV na 400 ms i konačno Puls 4: -120 mV do 40 mV preko 500 ms (ovo je naponska rampa).

s. Izmeriti magnitudu unutrašnje struje kalijuma u tački vremena između 1200 – 1220 ms od početka Pulsa 1 (tj. tokom faze naponske rampe).

e. Dodati 3,5 ul razblaženih jedinjenja (ili DMSO) sa bunarima i ponovite korake c-d (konačna koncentracija jedinjenja je 50 uM do 0,1 uM, za potentna jedinjenja 0,5 mM do 0,01 uM i svaka koncentracija je testirana u kvadriplikatu – tj. u četiri zasebna bunarčića).

f. Razlika između magnitude struje pre i posle jedinjenja daje meru inhibicije GIRK1/4.

7. Analiza podataka:

[0126] IC50vrednosti su izračunate prikazivanjem procenta inhibicije struje (normalizovane samo za DMSO kontrolu) kao funkcija koncentracije jedinjenja pomoću standardnog softvera za analizu podataka.

[0127] Korišćenje testa br.1 (kao što je opisano u ovoj prijavi) jedinjenja pronalaska pokazuje inhibitornu efikasnost u skladu sa Tabelom 1 datom ispod.

Tabela 1 Inhibitorska aktivnost jedinjenja

4

Kombinacija pronalaska:

[0128] Jedinjenje iz predmetnog pronalaska može biti primenjivano istovremeno sa jednim ili više terapeutskih agenasa ili pre ili posle jednog ili više terapeutskih agenasa. Jedinjenje iz predmetnog pronalaska može biti primenjivano odvojeno, istim ili različitim putem primene ili zajedno u istoj farmaceutskoj kompoziciji kao drugi agensi. Terapeutski agens je, na primer, hemijsko jedinjenje, peptid, antitelo, fragment antitela ili nukleinska kiselina, koji su terapeutski aktivni ili pojačavaju terapeutsku aktivnost kada se primene na pacijentu u kombinaciji sa jedinjenjem iz pronalaska.

[0129] U jednom otelotvorenju, pronalazak obezbeđuje proizvod koji sadrži jedinjenje bilo koje formule (II) do (III) i barem još jedan terapeutski agens kao kombinovani preparat sa istovremeno, zasebno ili uzastopno korišćenje u terapiji. U jednom otelotvorenju, terapija je lečenje bolesti ili stanja koji reaguju na inhibiciju kanala GIRK1/4. Proizvodi obezbeđeni kao kombinovani preparati uključuju kompoziciju koja sadrži jedinjenje bilo koje formule (II) do (III) i ostale terapeutske agense zajedno u istoj farmaceutskoj kompoziciji, ili jedinjenju bilo

4

koje formule (II) do (III) i drugih farmaceutskih agenasa u zasebnom obliku, tj. u obliku kompleta.

[0130] U jednom otelotvorenju, pronalazak obezbeđuje farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje bilo koje formule (II) do (III) i ostalih terapeutskih agenasa. Opciono, farmaceutska supstanca može obuhvatiti farmaceutski prihvatljiv nosač, kao što je opisano gore u tekstu.

[0131] U jednom otelotvorenju, pronalazak obezbeđuje komplet koji sadrži dva ili više jedinjenja bilo koje formule (II) do (III) U jednom otelotvorenju, komplet sadrži sredstva za zasebno zadržavanje navedene kompozicije, poput kontejnera, podeljenih boca ili paketa podeljenih folijom. Primer za takav komplet je blister pakovanje, koje se tipično koristi za pakovanje tableta, kapsula, i slično.

[0132] Komplet iz pronalaska može da se koristi za davanje različitih doznih oblika, na primer, oralnih i parenteralnih, za davanje odvojenih kompozicija u različitim doznim intervalima ili za titraciju odvojenih kompozicija jednih prema drugima. Da bi se pomoglo usaglašenosti, komplet pronalaska tipično sadrži uputstvo za primenu.

[0133] U kombinaciji terapija pronalaska, jedinjenje pronalaska i drugi terapeutski agensi mogu da budu proizvedeni i/ili formulisano od strane istog ili različitog proizvođača. Pored toga, jedinjenje iz ovog pronalaska i drugi lek mogu biti uzeti zajedno u kombinovanoj terapiji: (i) pre puštanja kombinovanog proizvoda lekarima (npr. u slučaju kompleta koji obuhvata jedinjenje iz ovog pronalaska i drugi terapeutski agens); (ii) od strane samog lekara (ili prema smernicama lekara) neposredno pre isporuke; (iii) kod samih pacijenata, npr. tokom sekvencijalne isporuke jedinjenja iz ovog pronalaska i drugog terapeutskog agensa.

[0134] U skladu sa tim, upotreba jedinjenja bilo koje od formula (II) ili (III) za lečenje bolesti ili stanja koja reaguju na inhibiciju kanala GIRK1/4, naznačeno time što su medikamenti pripremljeni za primenu sa drugim terapeutskim agensom. Takođe je obezbeđena i potreba sa drugim terapeutskim agensima za lečenje bolesti ili stanja koja reaguju na inhibiciju kanala GIRK1/4 , naznačeno time što je medikament primenjen sa jedinjenjem bilo koje formule (II) do (III).

[0135] Pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenje bilo koje formule (II) do (III) za korišćenje u postupku lečenja bolesti ili stanja koja reaguju na inhibiciju kanala GIRK1/4, naznačeno time što je jedinjenje formule (II) ili (III) pripremljeno za primenu sa drugim terapeutskim agensom. Pronalazak takođe obezbeđuje drugi terapeutski agens za primenu u postupku za lečenje bolesti ili stanja koja reaguju na inhibiciju kanala GIRK1/4, naznačeno time što je drugi terapeutski agens pripremljen za primenu sa bilo kojim jedinjenjem formule (II) ili (III). Pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenje formule (II) do (III) za korišćenje u postupku lečenja bolesti ili stanja koja reaguju na inhibiciju kanala GIRK1/4, naznačeno time što je jedinjenje formule (II) ili (III) primenjeno sa drugim terapeutskim agensom. Pronalazak takođe obezbeđuje drugi terapeutski agens za upotrebu u postupku lečenja bolesti ili stanja koja reaguju na inhibiciju kanala GIRK1/4, naznačeno time što se terapeutski agens primenjuje sa jedinjenjem bilo koje formule (II) do (III).

[0136] Upotreba jedinjenja bilo koje od formula (II) ili (III) za lečenje bolesti ili stanja koja reaguju na inhibiciju kanala GIRK1/4, naznačeno time što je pacijent prethodno (npr. u roku od 24 sata) lečen drugim terapeutskim agensom. Takođe je obezbeđena upotreba sa drugim terapeutskim agensima za lečenje bolesti ili stanja koja reaguju na inhibiciju kanala GIRK1/4, naznačeno time što je pacijent prethodno (npr. u roku od 24 sata) lečen jedinjenjem formule (II) ili (III).

[0137] U jednom otelotvorenju, drugi terapeutski agensi su odabrani od:

bilo kog drugog antiaritmijskog agensa, kao što su agensi klase I (npr. kvinidin, lidokain i propafenon), agensi klase II (npr. propranolol), agensi klase III (npr. sotalol, dofetilid, amiodaron, dronedaron, budiodaron, amizid i ibutilid), agensi klase IV (npr. diltiazem i verapamil), „agensi klase V“ (npr. adenozin), kardiotonični glikozidi (npr. digitalis i uabajin) i drugi lekovi koji utiču na atrijalnu refraktornost (npr. blokatori /Na,Latekao što su opisani u WO2013112932); modulatori homeostaza, uključujući antitromotike kao što su aktivatori fibrinolize; inhibitori trombina; inhibitori faktora VIIa; antikoagulansi, kao što su antagonisti vitamina K (npr. varfarin), heparin i njegovi analozi male molekulske težine (npr. dalteparin), inhibitori faktora Ksa (npr. rivaroksaban i apiksaban) i direktni inhibitori trombina (npr. argatroban); antiagregacioni agensi, kao što su inhibitori ciklooksigenaze (npr. aspirin i NSAID), inhibitori receptora adenozin difosfata (ADP) (npr. klopidogrel), inhibitori fosfodiesteraze (npr. cilostazol), inhibitori glikoproteina IIB/IIA (npr. tirofiban); sredstva

4

protiv dislipidemije, kao što su inhibitori HMG-CoA reduktaze (statini) i drugi agensi za snižavanje holesterola; PPARa agonisti (fibrati, npr. gemfibrozil i fenofibrat); sekvestranti žučne kiseline (npr. holestiramin); inhibitori apsorpcije holesterola (npr. biljni steroli (tj. fitosteroli), sintetički inhibitori); inhibitori proteina transfera holesteril estra (CETP); inhibitori ilealnog transportnog sistema žučne kiseline (IBAT inhibitori); smole koje vezuju žučnu kiselinu; nikotinska kiselina (niacin) i njeni analozi; antioksidansi; i omega-3 masne kiseline; antihipertenzivni agensi, uključujući antagoniste adrenergičkih receptora, kao što su beta blokatori (npr. atenolol), alfa blokatori (npr. doksazosin) i mešani alfa/beta blokatori (npr. labetalol); agoniste adrenergičkih receptora, uključujući alfa-2 agoniste (npr. klonidin); inhibitori enzima koji konvertuje angiotenzin (ACE) (npr. lizinopril), blokatori kalcijumovih kanala, kao što su dihidropiridini (npr. nifedipin), fenilalkilamini (npr. verapamil) i benzotiazepini (npr. diltiazem); antagonisti receptora angiotenzina II (npr. losartan); antagonisti receptora aldosterona (npr. eplerenon); adrenergički lekovi centralnog delovanja, kao što su centralni alfa agonisti (npr. klonidin); i diuretički agensi (npr. furosemid); agensi protiv gojaznosti, kao što su sredstva za suzbijanje apetita (npr. efedrin), uključujući noradrenergičke agense (npr. fentermin) i serotonergičke agense (npr. sibutramin), inhibitore pankreasne lipaze (npr. orlistat), mikrozomalni transfer proteina, modulatore proteina za mikrosomalni transfer (MTPL) ATG-modulatore (MTP-lacci-transferaze) inhibitore i antagoniste kanabinoidnog (CBI) receptora (npr. rimonabant); insulin i analozi insulina; sekretagoge insulina, uključujući sulfoniluree (npr. glipizid) i regulatore glukoze u prandijalnom režimu (ponekad se nazivaju „sekretagozi kratkog dejstva“), kao što su meglitinidi (npr. repaglinid i nateglinid); sredstva koja poboljšavaju delovanje inkretina, na primer inhibitori dipeptidil peptidaze IV (DPP-4) (npr. vildagliptin, sitagliptin, LAF237, MK-431) i agonisti peptida-I sličnih glukagonu (GLP-1) (npr. eksenatid); agensi za senzibilizaciju insulina uključujući agoniste gama receptora aktiviranog proliferatorom peroksizoma (PPARi), kao što su tiazolidindioni (npr. pioglitazon i rosiglitazon), i agense sa bilo kojom kombinacijom PPAR alfa, gama i delta aktivnosti; agensi koji moduliraju balans glukoze u jetri, na primer bigvanidi (npr. metformin), inhibitori fruktoze 1,6-bisfosfataze, inhibitori glikogen fosforilaze, inhibitori kinaze glikogen sintaze i aktivatori glukokinaze; sredstva dizajnirana da smanje/uspore apsorpciju glukoze iz creva, kao što su inhibitori alfaglukozidaze (npr. miglitol i akarboza); sredstva koja antagoniziraju delovanje ili smanjuju lučenje glukagona, kao što su analozi amilina (npr. pramlintid); sredstva koja sprečavaju reapsorpciju glukoze u bubrezima, kao što su inhibitori transportera glukoze 2 (SGLT-2) zavisne od natrijuma.

4

[0138] Termin „inhibitor reduktaze HMG-Co-A“ (takođe nazivan i inhibitor reduktaze betahidroksi-beta-metilglutaril-ko-enzima-A) uključuje aktivne agense koji mogu da se koriste da bi se spustili nivoi lipida uključujući holesterol u krvi. Primeri uključuju atorvatastin, cerivastatin, kompaktin, dalvastatin, dihidrokompaktin, pravastatin, rivastatin, simvastatin i velostatin ili njihove farmaceutski prihvatljive soli.

[0139] Termin „ACE inhibitor“ (takođe nazivan i enzimi inhibitora za konverziju angiotensina) obuhvata molekule koji prekidaju enzimsku degradaciju angiotensina I u angiotensin II.

[0140] Takva jedinjenja mogu da se koriste za regulaciju krvnog pritiska i za lečenje kongestivne srčane insuficijencije. Primeri uključuju alakepril, benzapril, benzaprilat, katopril, ceronapril, cilazapril, delapril, enalapril, enaprilat, fosinopril, imidapril, lisinopril, moveltopril, perindopril, kvinapril, ramipril, spirapril, temokapril i trandolapril ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so.

[0141] Antagonista receptora angiotenzin II ili njegova farmaceutski prihvatljiva so podrazumeva se kao aktivni sastojak koji vezuje AT1-receptora podtip receptora angiotenzina II ali ne dovodi do aktivacije receptora. Kao posledica inhibicije receptora AT1, ovi antagonisti mogu, na primer, da budu angažovani kao antihipertenzitivi ili za lečenje kongestivne srčane insuficijencije.

[0142] Termin „diuretik“ uključuje derivate tazida (npr. hlorotazide, hidrohlorotazid, metilklotazid i hlorotalidon).

[0143] DPP-IV je odgovoran za deaktiviranje GLP-1. Konkretnije, DPP-IV generiše antagoniste receptora GLP-1 i tako skraćuje fiziološki odgovor na GLP-1. GLP-1 je glavni stimulator lučenja pankreasnog insulina i ima direktne korisne efekte od odlaganja glukoze. Inhibitor DPP-IV može da bude peptidan ili, poželjno, nepeptidan. DPP-IV inhibitori su u svakom slučaju generički i konkretno objavljeni npr. u WO 98/19998, DE 19616 486 A1, WO 00/34241 i WO 95/15309, u svakom konkretnom slučaju u patentnim zahtevima jedinjenja i u radnim primerima konačnih proizvoda, pitanjima koja se tiču ispitanika za konačne proizvode, farmaceutskim preparatima i patentnim zahtevima koji su ovim

4

inkorporirani u predmetnu prijavu referencom na ove publikacije. Poželjna su ona jedinjenja koja su konkretno objavljena u primeru 3 publikacije WO 98/19998 i primeru 1 publikacije WO 00/34241, respektivno.

[0144] GLP-1 je insulinotropski protein koji je opisan npr. od strane W.E. Schmidt et al. u Diabetologia, 28, 1985, 704-707 i u US 5,705,483. Termin „antagonisti GLP-1“ obuhvataju varijante i analoge GLP-1(7-36)NH2koji su konkretno objavljeni u US 5,120,712, US 5,118666, US 5,512,549, WO 91/11457 i od strane C. Orskov et al u J. Biol. Chem.264 (1989) 12826. Dalji primeri uključuju GLP-1(7-37), u kojima je jedinjenje karboksiterminalne funkcionalnosti amida Arg<36>zamenjeno sa Gly na 37. položaju GLP-1(7-36)NH2molekula i varijantama i analogima i stoga uključuje GLN<9>-GLP-1(7-37), D-GLN<9>-GLP-1(7-37), acetil LYS<9>-GLP-1(7-37), LYS<18>-GLP-1(7-37) i, konkretno, GLP-1(7-37)OH, VAL<8>-GLP-1(7-37), GLY<8>-GLP-1(7-37), THR<8>-GLP-1(7-37), MET<8>-GLP-1(7-37) i 4-imidazopropionil-GLP-1. Posebna prednost je takođe data antagonisti GLP analoga egzendin-4, koji je opisano od strane Greig et al. u Diabetologia 1999, 42, 45-50.

[0145] Inhibitor sintaze aldosterona ili njegove farmaceutski prihvatljive soli se podrazumeva kao aktivni sastojak koji ima karakteristiku da inhibira proizvodnju aldosterona. Sintaza aldosterona (CYP11B2) je enzim mitohondrijskiog citohroma P450 koji katalizuje poslednji korak proizvodnje aldosterona u adrenalnom korteksu, tj. konverziju 11-deoksikorikosterona u aldosteron. Inhibiranje proizvodnje aldosterona sa takozvanim inhibitorima sintaze aldosterona poznata je kao uspešna varijanta lečenja hipokalemije, hipertenzije, kongestivne srčane insuficijencije, atrijalne fibrilacije ili bubrežne insuficijencije. Takvu aktivnost inhibicije aldosteron sintaze lako određuju stručnjaci u ovoj oblasti prema standardnim testovima (npr. US 2007/0049616).

[0146] Klasa inhibitora sintaze aldosterona sadrži i steroidne i nesteroidne inhibitore sitaze aldosterona, od kojih su drugi poželjniji.

[0147] Prednost je data komercijalno dostupnim inhibitorima sintaze aldosterona ili onim inhibitorima sintaze aldosterona koji su odobreni od strane zdravstvenih organa.

4

[0148] Klasa inhibitoria sintaze aldosterona sadrži jedinjenja koja imaju različite strukturne karakteristike. Na primer, mogu se spomenuti jedinjenja koja su izabrana iz grupe koja sadrži nesteroidne aromatične inhibitore anastrozola, fadarozola (uključujući njihov (+)-enantiomer), kao i steroidne aromatične inhibitore egzamestana ili u svakom slučaju, gde je primenjivo, njegovu farmaceutski prihvatljivu so.

[0149] Najpoželjniji nesteroidni inhibitor sintaze aldosterona je (+)-enantiomer hidrohlorida fadrozola (US patents 4617307 i 4889861) formule

ili, ako je primenjivo, njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0150] Poželjni antagonista steroidalnog aldosterona je eplerenon (cf. EP 122232 A) formule

ili spironolakton ili, u svakom slučaju, ako je odgovarajuće, njegova farmaceutrski prihvatljiva so.

[0151] Inhibitori sintaze aldosterona korisni u navedenim kombinacijama su jedinjenja i analogi generično i konkretno objavljeni npr. u US2007/0049616, konkretno u patentnim zahtevima jedinjenja i u radnim primerima konačnih proizvoda, pitanjima koja se tiču ispitanika za konačne proizvode, farmaceutskim preparatima i patentnim zahtevima koji su ovim inkorporirani u predmetnu prijavu referencom na publikaciju.

4

[0152] Termin inhibitora sintaze aldosterona takođe uključuje jedinjenja i analoge objavljene u WO2008/076860, WO2008/076336, WO2008/076862, WO2008/027284, WO2004/046145, WO2004/014914, WO2001/076574.

[0153] Dalje, inhibitori sintaze aldosterona takođe uključuju jedinjenja i analoge objavljenje u U.S. patentnim prijavama US2007/0225232, US2007/0208035, US2008/0318978, US2008/0076794, US2009/0012068, US20090048241 i u PCT prijavama WO2006/005726, WO2006/128853, WO2006128851, WO2006/128852, WO2007065942, WO2007/116099, WO2007/116908, WO2008/119744 i u evropskim patentnim prijavama EP 1886695.

[0154] Termin „inhibitori CETP“ odnosi se na jedinjenje koje inhibira transfer proteina holesteril estrom (CEPT) posredovanim transportom raznih holesteril estara i triglicerida od HDL do LDL i VLDL. Takva aktivnost inhibicije CETP lako utvrđuju stručnjaci u predmetnoj oblasti u skladu sa standardnim testovima (npr. U.S. Pat. br.6,140,343). Primeri uključuju jedinjenja objavljena u U.S. Pat. br.6,140,343 i U. S. Pat. br.6,197,786 (npr.,

[2R,4S]4-[(3,5-bis-trifluorometil-benzil)-metoksikarbonil- amino]-2-etil-6-trifluorometil-3,4-dihidro-2H-kvinolin-1-karboksilna kiselina etil estra (torcetrapib); jedinjenja objavljena u U.S. Pat. No.6,723,752 (npr.., (2R)-3-{[3-(4-Hloro-3-etil-fenoksi)-fenil]-[[3-(1,1,2,2-tetrafluoro-etoksi)-fenil]-metil]-amino}-1,1,1-trifluoro-2-propanol); jedinjenja objavljena u U.S. patentnoj prijavi Ser. br.10/807,838; derivati polipeptida objavljeni u U.S. Pat. br.

5,512,548; derivati i fosfati roseninilaktona – koji sadrže amalogef holesteril estra objavljeni u J. Antibiot., 49(8): 815- 816 (1996) i Bioorg. Med. Chem. Lett.; 6:1951-1954 (1996), respektivno. Dalje, inhibitori CETP takođe uključuju objavljene u WO2000/017165, WO2005/095409 i WO2005/097806.

[0155] U drugom otelotvorenju, drugi terapeutski agensi su odabrani od:

bilo kog drugog antiaritmijskog agensa, kao što su agensi klase I (npr. kvinidin, lidokain i propafenon), agensi klase II (npr. propranolol), agensi klase III (npr. sotalol, dofetilid, amiodaron, dronedaron, budiodaron, amizid i ibutilid), agensi klase IV (npr. diltiazem i verapamil), „agensi klase V“ (npr. adenozin), srčani glikozidi (npr. digitalis i uabajin) i drugi lekovi koji utiču na atrijalnu refraktiornost (npr. blokatori lNa,Latekao što su opisani u

WO2013112932).

Primer pronalaska:

[0156] Sledeći primeri su namenjeni ilustraciji pronalaska i ne treba ih tumačiti kao ograničavajuće. Temperature su date u stepenima Celzijusa. Ako nije drugačije navedeno, sva uparavanja se izvode pod sniženim pritiskom, obično od oko 15 mm Hg do 100 mm Hg (= 20-133 mbar). Struktura finalnih proizvoda, intermedijera i polaznih supstanci je potvrđena standardnim analitičkim postupcima, npr. mikroanalizom i spektroskopskim karakteristikama, npr. MS, NMR. Skraćenice koje su korišćene su uobičajene u struci.

[0157] Sve polazne supstance, gradivni blokovi, reagensi, kiseline, baze, sredstva za dehidrataciju, rastvarači i katalizatori koji se koriste da sintetišu jedinjenja iz predmetnog pronalaska su komercijalno dostupni ili se mogu proizvesti postupcima organske sinteze koji su poznati stručnjacima u ovoj oblasti (Houben-Weyl 4. izd.1952, Methods of Organic Synthesis, Thieme, sveska 21). Dalje, jedinjenja iz predmetnog pronalaska mogu da se proizvedu postupcima organske sinteze koji su poznati osobi sa uobičajenim znanjem u struci, kako je pokazano u sledećim primerima.

[0158] Otkriveno je da jedinjenja u primeru ispod imaju IC50vrednosti u rasponu od oko 0,1 nM do oko 50.000 nM za GIRK1/4, poželjnije 1 nM do 10.000 nM.

Lista skraćenica

[0159]

ACN

acetonitril

aq.

vodeni

BOC

1

terc-butiloksikarbonil

br

široki

bs

široki singlet

°C

stepeni Celzijusa

konc.

koncentrisano

δ

NMR hemijska pomeranja u ppm na terenu od tetrametilsilana d

dublet

DCE

1,2-dihloroetan

DCM

dihlorometan

2

DEA

dietilamin

DIPEA

N,N-diizopropiletilamin

DMA

deimetilacetamid

DMAP

4-(dimetilamino)piridin

DME

dimetoksietan

DMEM

Dulbecco modifikovan Eagle-ov medijum DMF

N,N-dimetilformamid

DMSO

dimetilsulfoksid

DPPF

1,1'-bis(difenilfosfino)ferocen

Et

etil

EtOAc

etil acetat

g

gram

h(r)

sat

HEPES

(4-(2-hidroksietil)-1-piperazinetansulfonična kiselina

HATU

O-(7-azabenzotriazol-1-il)-N,N,N',N'-tetrametiluronijum heksafluorofosfat HRMS

masena spektometrija visoke rezolucije

i-Pr

izopropil

4

litra

LDA

litijum diizopropilamid

LC/MS

tečna hromatografija sa masenom spektrometrijom M

molarnost

m

multiplet

Me

metil

mg

miligram

MHz

megaherc

min

minut

mL

mililitar

µL

mikrolitar mmol

milimol

N

normalni

NBS

N-bromosukcinimid NCS

N-hlorosukcinimid n-Bu

normalni butil n-BuLi

n-butillitijum NMM

N-metilmorfolin

NMR

nuklearna magnetna rezonanca NMP

N-metil-2-pirolidon

NMO

N-metilmorfolin-N-oksid o/n

preko noći

Ph

fenil

pH

-log10H<+>koncentracije

ppm

delova na milion

q

kvartet

Rt

retenciono vreme

RP-HPLC

reverzno-fazna tečna hromatografija visokih performansi s

singlet

SFC

superkritična fluidna hromatografija

sat.

zasićeno

t

triplet

t-Bu

terc-butil

TBAF

terc-butilamonijum fluorid

trifluorometansulfonil

TFA

trifluorosirćetna kiselina TFAA

trifluosirćetni anhidrid TBDMS

terc-butildimetilsilil

TEA

trietilamin

temp.

temperatura

THF

tetrahidrofuran

TLC

tankoslojna hromatografija Postupci tečne hromatografije (LC)

[0160] LC postupak 1: Retenciono vreme u minutima (Rt) dobijeno je u sistemu Agilent 1100 sa kolonom XBridge C18 Column, 3,5 µm, 3,0×30 mm. Gradijent H2O (+0,05% amonijum hidroksida)/CH3CN (+0,05% amonijum hidroksida) 98/2 do 2/98 primenjen je preko 1,7 min. i zatim zadržan na 0,3 min. (2,0 mL/min. kao tok rastvarača) na temperaturi u pećnici od 40 °C.

[0161] LC postupak 2: Retenciono vreme u minutima (Rt) dobijeno je u sistemu Agilent 1100 sa kolonom Sunfire C18 Column, 3,5 µm, 3,0×30 mm. Gradijent H2O (+0,05% trifluorosirćetne kiseline)/CH3CN (+0,05% trifluorosirćetne kiseline) 95/5 do 5/95 primenjen je preko 1,7 min. i zatim zadržan na 0,3 min. (2,0 mL/min. kao tok rastvarača) na temperaturi u pećnici od 40 °C.

[0162] LC postupak 3: Retenciono vreme u minutima (Rt) dobijeno je u sistemu Agilent 1100 sa kolonom XBridge C18 Column, 3,5 µm, 3,0×30 mm. Gradijent H2O (+0,05% amonijum hidroksida)/CH3CN (+0,05% amonijum hidroksida) 98/2 do 2/98 primenjen je preko 1,7 min. i zatim zadržan na 0,3 min. (2,0 mL/min. kao tok rastvarača) na temperaturi u pećnici od 40 °C.

[0163] LC postupak 4: Retenciono vreme u minutima (Rt) dobijeno je u sistemu Waters Acquity UPLC sa kolonom AcQuity UPLC BEH C18, 1,7 µm, 2,1×30 mm. Gradijent H2O (+0,05% amonijum hidroksida)/CH3CN (+0,05% amonijum hidroksida) 98/2 do 2/98 primenjen je preko 1,7 min. i zatim zadržan na 0,3 min. (1,0 mL/min. kao tok rastvarača) na temperaturi u pećnici od 50 °C.

Sinteza intermedijara od 1 do 13

5,8-Dihloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on (intermedijar 1)

[0164]

Korak 1: 2,4,5-Trihloronikotinaldehid

[0165]

[0166] U rastvor 2,4,5-trihloropiridin (5 g, 27.4 mmol) u THF (150 ml) dodat je LDA (2 M u heptanu, 20,56 ml, 41,1 mmol) na -78 °C. Smeša je mešana na -78 °C tokom 1 sata. Metil format (8,23 g, 137 mmol) u THF (20 mL) dodat je brzo u reakcionu smešu i zatim mešan na -78 °C tokom 1 sata. Reakciona smeša je deaktivirana vodenim zasićenim rastvorom NH4Cl i tri puta ekstrahovana pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi osušeni su iznad anhidrovanog Na2SO4i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (10-100% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo naslovno jedinjenje kao čvrsta supstanca (4,2 g, 73% prinosa). ESI-MS m/z: 211,8 [M+H]<+>(Rt= 0,86 min, LC-postupak 1)

[0167]<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 10.43 (s, 1H), 8.61 (s, 1H).

Korak 2: 1-(2,4,5-Trihloropiridin-3-il)but-2-in-1-ol

[0168]

[0169] U rastvor 2,4,5-trihloronikotinaldehida (2,11 g, 10,03 mmol) u THF (30 ml) dodat je prop-1-in-1-ilmagnezijum bromid (0,5 M u THF, 26,1 ml, 13,03 mmol ) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 1 sata. U smešu je dodat vodeni zasićeni rastvor NH4Cl i zatim je ekstrahovana pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi su oprani vodom i zasićenim vodenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod

1

sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (10-100% EtOAc u heptanu) da bi dao naslovno jedinjenje (1,95 g, 78% prinosa). ESI-MS m/z: 250,0 [M+H]<+>(Rt = 0,94 min, LC-postupak 1)

[0170]<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 8.42 (s, 1H), 6.13 (s, 1H), 3.11 (bs, 1H), 1.90 (s, 3H).

Korak 3: 1-(2,4,5-Trihloropiridin-3-il)but-2-n-1-on

[0171]

[0172] 1-(2,4,5-Trihloropiridin-3-il)but-2-in-1-ol (3,4 g, 13,57 mmol) u DCM (60 ml) ohlađen je na 0 °C. Zatim je dodat Des-Martinov reagens (6,91 g, 16,29 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 1 sata. Zatim je pažljivo deaktiviran vodenim rastvorom sa vodenim zasićenim rastvorom NaHCO3nakon čega je razblažen sa DCM. Organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom soli, osušen iznad anhidrovanog MgSO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (10-100% EtOAc u heptanu) da bi dao naslovno jedinjenje (2,6 g, 77% prinosa). ESI-MS m/z: 248,0 [M+H]<+>(Rt = 1,15 min, LC-postupak 1)

[0173]<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 8.51 (s, 1H), 2.16 (s, 3H).

Korak 4: (E)-3-((2,6-Dihidrofenil)amino)-1-(2,4,5-trihloropiridin-3-il)but-2-en-1-on

[0174]

2

[0175] U rastvor 1-(2,4,5-trihloropiridin-3-il)but-2-in-1-on (2,36 g, 9,50 mmol) i 2,6-dihloroanilin(1,69 g, 10,45 mmol) i 50 ml DCM dodat je lCl3(1,52 g, 11,40 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći.2N NaOH rastvoru dodata je reakciona smeša i on je tri puta ekstrahovan pomoću DCM. Kombinovani organski slojevi su osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (10-100% EtOAc u heptanu) da bi dao naslovno jedinjenje (2,99 g, 77%).

[0176] ESI-MS m/z: 410,9 [M+H]<+>(Rt = 1,39 min, LC-postupak 1)

Korak 5: 5,8-Dihloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0177]

[0178] U rastvor 3-((2,6-dihlorofenil)amino)-1-(2,4,5-trihloropiridin-3-il)but-2-en-1-ona (2,99 g, 7,28 mmol) u 45 ml DMF dodat je K2CO3(3,02 g, 21,85 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je mešan preko noći. Reakcija je razblažena vodom i tri puta ekstrahovana pomoću EtOAc. Kombinovani organski slojevi su oprani vodom i zasićenim vodenim rastvorom soli i osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (10-100% EtOAc u heptanu) da bi dao naslovno jedinjenje (1,8 g, 66% prinosa). ESI-MS m/z: 375,0 [M+H]<+>(Rt = 1,06 min, LC-postupak 1)

[0179]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 8.51 (s, 1H), 7.83 - 7.72 (m, 3H), 6.63 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 1.94 (s, 3H).

5,8-Dihloro-1-(2,6-dihloro-4-fluorofenil)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on (intermedijer 2)

[0180]

[0181] Intermedijer 2 je pripremljen na način analogan intermedijeru 1, ali pomoću 2,6-dihloro-4-fluoroanalina u koraku 4 sintetičkog postupka da bi se dobio beli prašak kao naslovno jedinjenje.

[0182] 2:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 8.32 - 8.76 (m, 1 H), 7.92 (d, J=8.31 Hz, 2 H), 6.63 (d, J=0.73 Hz, 1 H), 1.96 (s, 3 H).

3,5-Dihloro-4-(5,8-dihloro-2-metil-4-okso-1,6-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril (intermedijer 3)

[0183]

[0184] Intermedijer 3 je pripremljen na način analogan intermedijeru 1, ali pomoću 2,6-dihloro-4-cijano anilina i BF3*OEt2u koraku 4 sintetičkog postupka da bi se dobio žuti prašak.

[0185] 3:<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 8.33 (s, 1H), 7.80 (s, 2H), 6.49 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 1.95 (d, J = 0.6 Hz, 3H).

1-(4-Bromo-2,6-dihlorofenil)-5,8-dihloro-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on (intermedijer 4)

[0186]

4

[0187] Intermedijer 4 je pripremljen na način analogan intermedijeru 1, ali pomoću 4-bromo-2,6-dihloroanilina u koraku 4 sintetičkog postupka da bi se dobio beli prašak kao naslovno jedinjenje.

[0188] 4:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 8.53 (s, 1H), 8.16 (s, 2H), 6.62 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 1.96 (s, 3H)

3-Hloro-2-(5,8-dihloro-2-metil-4-okso-1,6-naftiridin-1(4H)-il)benzonitrile (intermedijer 5)

[0189]

[0190] Intermedijer 5 je pripremljen na način analogan intermedijeru 1, ali pomoću 2-cijano-6-hloro anilina i skandium triflata u koraku 4 sintetičkog postupka kao što je opisano u nastavku.

Korak 4: 3-Hloro-2-((4-okso-4-(2,4,5-trihloropiridin-3-il)but-2-en-2-il)amino)benzonitril

[0191]

[0192] U smešu rastvora 1-(2,4,5-trihloropiridin-3-il)but-2-in-1-ona (600 mg, 2,415 mmol) i 2-amino-3-hlorobenzonitrila (0,368 g, 2,415 mmol) u DCM (15 ml) pažljivo je dodat skandijum trifluorometansulfonat (1.12g, 2.415 mmol) na rt. Nakon mešanja na rt preko noći, smeša je deaktivirana pomoću vodenog rastvora 1N NaOH, a proizvod je ekstrahovan pomoću DCM. Organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom soli, osušen iznad anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran , i koncentrovan vakuumom. Sirovi ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-50% EtOAc u heptanu da bi se dobili proizvodi: 3-hloro-2-((4-okso-4-(2,4,5-trihloropiridin-3-il)but-2-en-2-il)amino)benzonitril (0,166 g, 17,2%), ESI-MS m/z: 400,2 [M+H]<+>i 3-hloro-2-(5,8-dihloro-2-metil-4-okso-1,6-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril (0,143 g, 16,2% yield) ESI-MS m/z: 364,2 [M+H]<+>

[0193]<1>H NMR (400 MHz, MeCN-d3) δ ppm = 8.36 (s, 1 H) 7.87 - 8.06 (m, 2 H) 7.62 - 7.85 (m, 1 H) 6.47 (d, J=0.63 Hz, 1 H) 1.98 (s, 3 H)

Korak 5: 3-Hloro-2-(5,8-dihloro-2-metil-4-okso-1,6-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril

[0194]

[0195] Smeša 3-hloro-2-((4-okso-4-(2,4,5-trihloropiridin-3-il)but-2-en-2-il)amino)benzonitril (0,49 g, 1,22 mmol) i kalijum karbonat (0,422 g, 3,05 mmol) u DMF (10 mL) mešana je na 95 °C tokom 1 h. Nakon hlađenja do rt, smeša je razblažena vodom, a proizvod je ekstrahovan pomoću EtOAc. Organski sloj je ispran vodom, zasićenim vodenim rastvorom soli, osušen iznad anhidrovanog sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen brzom hromatografijom sa silicijumskim gelom pomoću 0-100% EtOAc/ u heptanu kao eluent da bi se dobilo naslovno jedinjenje (0,31 g, 70%).

[0196] 5: ESI-MS m/z: 364,2 [M+H]<+>.<1>H NMR (400 MHz, MeCN-d3) δ ppm = 8.36 (s, 1 H) 7.87 - 8.06 (m, 2 H) 7.62 - 7.85 (m, 1 H) 6.47 (d, J=0.63 Hz, 1 H) 1.98 (s, 3 H)

3-Hloro-2-(5,8-dihloro-2-metil-4-okso-1,6-naftiridin-1(4H)-il)-5-fluorobenzonitril (intermedijer 6)

[0197]

[0198] Intermedijer 6 je pripremljen na način analogan intermedijeru 5, ali pomoću 2-amino-3-hloro -5-fluorobenzonitril, koje sintetiše sledeći postupak da bi se dobio beli prašak.

[0199] 6: ESI-MS m/z: 382,2 [M+H]<+>

Priprema 2-amino-3-hloro-5-fluorobenzonitrila

[0200]

[0201] NCS (4,75 g, 35,6 mmol) je dodat u rastvor of 2-amino-5-fluorobenzenitrila (4,4 g, 32,3 mmol) u MeCN (92 ml). Dobijen smeša je mešana na 80 °C preko noći. Nakon što se zapremina smanji za pola pod vakuumom, ostaci se sipaju u vodu, talog je prikupljen filtracijom, ispran vodom, osušen da bi se pružila željeni anilin (4 g, 73%).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 7.64 (dd, J=8.40, 2.97 Hz, 1 H) 7.50 (dd, J=8.40, 2.97 Hz, 1 H) 6.08 (br s, 2 H)

2-(((terc-Butilmetilsilil)oksi)metil)-5,8-dihloro-1-(2,6-dihlorofenil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on (intermedijer 7)

[0202]

Korak 1: 2,4,5-Trihloronikotinaldehid

[0203]

[0204] U rastvor 2,4,5-trihloropiridin (5 g, 27.4 mmol) u 150 ml THF dodat je LDA (2 M u heptanu, 20,56 ml, 41,1 mmol) na -78 °C. Smeša je mešana na -78 °C tokom 1 sata. Metil format (8,23 g, 137 mmol) u THF (20 mL) dodat je brzo u reakcionu smešu i zatim mešan na -78 °C tokom 1 sata. Reakciona smeša je deaktivirana vodenim zasićenim rastvorom NH4Cl i tri puta ekstrahovana sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi osušeni su iznad anhidrovanog Na2SO4i , isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (10-100% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo naslovno jedinjenje kao čvrsta supstanca (4,2 g, 73% prinosa). ESI-MS m/z: 211,8 [M+H]<+>(Rt= 0,86 min, LC-postupak 1),

[0205]<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 10.43 (s, 1H), 8.61 (s, 1H).

Korak 2: 4-((terc-butildimetilsilil)oksi)-1-(2,4,5-trihloropiridin-3-il)but-2-in-1-ol

[0206]

[0207] Terc-butildimetil (prop-2-in-1-iloksi)salin (11,14 g, 65,4 mmol) u 20 ml THE ohlađen je na -78 °C i n-BuL(1,6 M, 24,52 ml, 39,2 mmol) dodato je u kapima. Smeša je mešana na -78 °C tokom 45 minuta i zatim tretirana rastvorom 2,4,5-trihloronikotinaldehid (6,88 g, 32,7 mmol) u 40 ml THF. Smeša je ostavljena da se meša na -78 °C tokom 2h. Napredak reakcije prati se pomoću LC-MS koji pokauje dovršenu potrošnju polazne supstance aldehida.

Mešavina je deaktivirana zasićenom NH4Cl i ekstrahovana pomoću EtOAc. Organski sloj je ispran vodom, zasićenim vodenim rastvorom soli, osušen pod Na2SO4, filtriran i kopncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo sirovo jedinjenje kao žuta tečnost koja se dalje koristi bez ikakvog prečišćavanja. ESI-MS m/z: 382 [M+H]<+>(Rt = 1,47 min, LC-postupak 1)

[0208]<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 8.32 (s, 1H), 6.27 - 5.96 (m, 1H), 4.40 - 4.15 (m, 2H), 0.93 (s, 9H), 0.02 (s, 6H).

Korak 3: 4-((terc-butildimetilsilil)oksi)-1-(2,4,5-trikloropiridin-3-il)but-2-in-1-on

[0209]

[0210] U mešani rastvor 4-((terc-butildimetilsilil)oksi)-1-(2,4,5-trihloropiridin-3-il)but-2-in-1-ola (12,45 g, 32,7 mmol) u DCM (131 ml), Des-Martinov perjodinan (16,64 g, 39,2 mmol) dodat je na 0 °C. Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 30 minuta. Napredak reakcije je praćen pomoću LC-MS koji je pokazao potpunu potrošnju polaznog materijala. Reakciona smeša je pažljivo deaktivirana zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3nakon čega je razblažena sa DCM. Talog je filtriran. Organski sloj je ispran zasićenim NaHCO3i zasićenim vodenim rastvorom soli, osušen iznad anhidrovanog Na2SO4. Organski sloj je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovo jedinjenje je prečišćeno kolonskom hromatografijom sa silicijumskim gelom (10-100% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo željeno jedinjenje (7,5 g, 61%). ESI-MS m/z: 380 [M+H]<+>(Rt = 1,66 min, LC-postupak 1)

[0211]<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 8.38 (s, 1H), 4.44 (s, 2H), 0.82 (s, 9H), 0.01 (s, 6H).

Korak 4: (E)-4-((terc-butildimetilsilil)oksi)-3-((2,6-dihlorofenil)amino)-1-(2,4,5-trikloropiridin-3-il)but-2-en-1-on

[0212]

[0213] U mešani rastvor 4-((terc-butildimetilsilil)oksi)-1-(2,4,5-trihloropiridin-3-il)but-2-in-1-on (7,41 g, 19,56 mmol) i DCM (185 ml), dodat je 2,6-dihloroanilin (3,49 g, 21,52 mmol), a zatim i AlCl3(2,87 g, 21,52 mmol) odjednom na 0 °C i reakciona smeša je mešana još 2 sata na sobnoj temperaturi. Napredak reakcije je praćen pomoću LC-MS koji je pokazao potpunu potrošnju polaznog materijala. Reakciona smeša 2N NaOH (20 mL) je dodata i smeša je mešana 30 minuta na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ekstrahovana pomoću DCM i kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom soli i osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4. Organski sloj je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovo jedinjenje je prečišćeno kolonskom hromatografijom sa silicijumskim gelom (10-100% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo naslovno jedinjenje (6,4 g, 61% prinos). ESI-MS m/z:

540,9 [M+H]<+>(Rt = 2,01 min, LC-postupak 1)

Korak 5: 2-(((terc-Butilmetilsilil)oksi)metil)-5,8-dihloro-1-(2,6-dihlorofenil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0214]

[0215] U mešani rastvor (E)-4-((terc-butildimetilsilil)oksi)-3-((2,6-dihlorofenil)amino)-1-(2,4,5-trihloropiridin-3-il)but-2-en-1-on (6,37 g, 11,78 mmol) u DMF (47 ml) dodat je kalijum karbonat (8,14 g, 58,9 mmol) i reakciona smeša je mešana na 80 °C tokom 3 sata. Reakciona smeša je sipana u hladnu vodu i ekstrahovana pomoću EtOAc. Organski slojevi su oprani vodom i zasićenim vodenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4i upareni pod sniženim pritiskom. Sirovo jedinjenje je prečišćeno kolonskom hromatografijom sa silicijumskim gelom (10-100% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo željeno jedinjenje (4,6 g, 77% prinos).

[0216] 7: ESI-MS m/z: 504,9 [M+H]<+>(Rt = 1,62, LC-postupak 1)<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 8.26 (s, 1H), 7.48 (d, J = 2.0 Hz, 3 H), 6.73 (s, 1H), 4.05 - 3.90 (m, 2H), 0.85 (s, 9H).0.01 (s, 6H).

5,8-Dihloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-(metoksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on (intermedijer 8)

[0217]

[0218] Intermedijer 8 je pripremljen na način analogan intermedijeru 7 ali pomoću 3-metoksiprop-1-ina u koraku 2 sintetičkog postupka da bi se dobio beli prašak.8: ESI-MS m/z: 405,2 [M+H]<+>(Rt = 1,08 min, LC-postupak 1);<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 8.33 (s, 1H), 7.63 - 7.49 (m, 3H), 6.71 (s, 1H), 3.88 (s, 2H), 3.32 (s, 3H).

3-Hloro-2-(5,8-dihloro-2-ciklopropil-4-okso-1,6-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril (intermedijer 9)

1

[0220] Intermedijer 9 je pripremljen na način analogan intermedijeru 7 ali pomoću etinilciklopropana u koraku 2 i 2-amino-3-hlorobenzonitrila u koraku 4 sintetičkog postupka da bi se dobio beli prašak.

[0221] 9: ESI-MS m/z: 392,0 [M+H]<+>(Rt = 1,01 min, LC-postupak 1)

8-Bromo-5-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on (intermedijer 10)

[0222]

[0223] Intermedijer 10 je pripremljen na način analogan intermedijeru 1 pomoću 5-bromo-2,4-dihloropiridina kao polazne supstance da bi se dobio beli prašak.

[0224] 10:<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 8.50 (s, 1H), 7.50 (s, 3H), 6.51 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 1.96 (dd, J = 2.5, 0.7 Hz, 3H).

5,7-Dihloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on (intermedijar 1\1)

[0225]

2

Korak 1: 2,4,6-Trihloronikotinaldehid

[0226]

4,6-Trihloropiridin (5 g, 27,4 mmol) u anhidrovanom THF (100 ml) je ohlađen na -78 °C. Polako je dodat rastvor n-butillitijuma (22,27 ml, 28,8 mmol) (1,6 M u heksanu) na -78 °C. Rastvor je mešan na -78 °C tokom 30 minuta, zatim tretiran rastvorom etil formata (10,15 g, 137 mmol) održavajući unutrašnju temperaturu ispod -74 °C. Dobijeni rastvor je mešan na -78 °C dok se sav početni materijal ne potroši (praćeno TLC, 9:1 heptan/EtOAC), zatim je deaktiviran na -78 °C rastvorom zasićenog amonijum hlorida i 50 ml 0,5 N aq. HCI uz snažno mešanje. Tad je bilo dozvoljeno da se zagreje do r.t. Deaktivirana smeša je ekstrahovana pomoću EtOAc, organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom soli, osušena uznad MgSO4i koncentrovana. Ostatak sirovine (svetložuta čvrsta materija) prečišćen je brzom hromatografijom sa silicijumskom gelom pomoću 0- 20% EtOAc/heptan da bi se dobilo 4,1 g (88% prinosa) željenog 2,4,6-trihloronikotinaldehida kao bela čvrsta materija.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 10.42 (s, 1H), 7.45 (s, 1H).

[0228] Preostali koraci su pripremljeni na način analogan opisanom za intermedijer 1.

Intermedijer 11 se proizvodi kao beli prašak.

[0229] 11:<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 7.75 - 7.53 (m, 3H), 6.42 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 6.29 (s, 1H), 1.97 (d, J = 0.8 Hz, 3H).

3,5-Dihloro-4-(5-fluoro-2-metil-4-okso-1,7-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril (intermedijar 12)

Korak 1: 3,5-Difluoro-N-metoksi-N-metilizonikotinamid

[0231]

[0232] 3,5-difluoroizonikotinska kiselina (18,78 g, 118 mmol), N,O-dimetilhidroksilamin hidrohlorid (12,09 g, 124 mmol), HATU (47,1 g, 124 mmol) i DIPEA (61,9 ml, 354 mmol) su suspendovani u DCM (236 ml). Smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom 24 sata. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je ekstrahovan pomoću EtOAc ispiranja pomoću zasićenog vodenog rastvora NH4Cl (2x), vode, zasićenog NaHCO3i zasićenog vodenog rastvora soli. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata i koncentrovan. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom korišćenjem 0-75% EtOAc u heptanima kao eluenta da bi se dobilo naslovno jedinjenje (18,9 g, 79% prinos). ESI-MS m/z: 203,1 [M+H]<+>(Rt = 0,81 min, LC-postupak 2)

[0233]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 9.16 (s, 2H), 4.03 (s, 3H), 3.82 (s, 3H).

Korak 2: 3,5-Difluoro-N-metoksi-N-metilizonikotinamid

[0234]

4

[0235] 3,5-difluoro-N-metoksi-N-metilsonikotinamid (10,25 g, 50,7 mmol) rastvoren je u THF (127 ml) i reakciona smeša je ohlađena do 0 °C. Prop-1-in-1-ilmagnezijum bromid (0,5 M u THF ,304 ml, 152 mmol) je zatim polako dodat (-30 minuta) pomoću dodatnog levka i mešavina je ostavljena da se preko noći zagreje do sobne temperature. Sledećeg dana je deaktivirana dodavanjem u 0.5N HCl rastvor na 0 °C uz mešanje i ekstrahovana sa DCM (3Ks). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (0-50% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo naslovno jedinjenje kao čvrsta supstanca (7,22 g, 79% prinosa). ESI-MS m/z: 182,0 [M+H]<+>(Rt = 1,11 min, LC-postupak 2);<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 8.74 (s, 2H), 2.22 (s, 3H).

Korak 3: 3-(2,6-dihloro-4-cijanofenil)-6-(3,5-difluoropiridin-4-il)-2,2-difluoro-4-metil-2,3-dihidro-1,3,2- oksazaborinin-1-ijum-2-uid

[0236]

[0237] 1-(3,5-difluoropiridin-4-il)but-2-in-1-on (7,86 g, 43,4 mmol) i 4-amino-3,5-dihlorobenzonitril (9,74 g, 52,1 mmol) rastvoreni su u DCM (174 ml) i smeša je tretirana sa BF3*OEt2(16,50 ml, 130 mmol). Reakciona smeša je mešana na 50 °C preko noći. Sledećeg dana je ugašena laganim dodavanjem u zasićeni. Rastvor NaHCO3Neki MeOH su korišćeni za dovršavanje rastvora i prenos reakcione smeše. Smeša je ekstrahovan pomoću DCM (3x). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom sa silicijumskim gelom (10-100% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo naslovno jedinjenje (10,05 g, 55,7 % prinos).

[0238] ESI-MS m/z: 368,0 [M+H]<+>(Rt = 1,43 min, LC-postupak 2)

Korak 4: 3,5-dihloro-4-(5-fluoro-2-metil-4-okso-1,7-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril

[0240] Smeša 3-(2,6-dihloro-4-cijanofenil)-6-(3,5-difluoropiridin-4-il)-2,2-difluoro-4-metil-2,3-dihidro-1,3 ,2-oksazaborinin-1-ijum-2-uid (17,16 g, 41,3 mmol) i K2CO3(28,5 g, 206 mmol) u THF (110 ml) i MeOH (55 mL) je zagrevan na 50 °C tokom 1,5 sati. U reakcionu smešu je dodat EtAOc. Rastvor je ispran vodom i zasićenim vodenim rastvorom soli, osušen iznad Na2SO4, filtriran i koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen brzom kolonskom hromatografijom sa silicijumskim gelom (0-100% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo naslovno jedinjenje (8,26 g, 57%).

[0241] 12: HRMS kalk.348,0095 [M+H]<+>; pronađeno 348,0102;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 9.06 (s, 2H), 8.99 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 8.61 (s, 1H), 6.92 (s, 1H).

3,5-Dihloro-4-(5 bromo -2-metil-4-okso-1,7-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril (intermedijer 13)

[0242]

Korak 1: 3-bromo-5-fluoroizonikotinaldehid

[0243]

[0244] U rastvor LDA (1M u heksanu/THF, 12,55 mL, 12,55 mmol) dodat je u kapima rastvor 3-bromo-5-fluoropiridina (1,84 g, 10,46 mmol) u THF (20 ml) na -78 °C. Reakciona smeša je mešana na -78 °C tokom 1 h. Zatim je DMF (1,62 mL, 1,53 g, 20,91 mmol) dodat reakcionoj smeši. Nakon mešanja na -78 °C tokom 30 minuta, reakciona smeša je deaktivirana pomoću saturacije vodom. Rastvor NaHCO3sledi ekstrakcija sa EtOAC tri puta i DCM dva puta. Svi organski slojevi su kombinovani i osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4. Čvrsta materija je filtrirana. Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (DCM) da bi se dobilo naslovno jedinjenje (0,478 g, 22%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 10.36 (s, 1H), 8.75 (s, 1H), 8.63 - 8.57 (m, 1H).

Korak 2: 1-(3-bromo-5-fluoropiridin-4-il)but-2-in-1-ol

[0245]

[0246] U rastvor 3-bromo-5-fluoroizonikotinaldehida (0,656 g, 3,22 mmol) u THF (5 mL) dodat je rastvor prop-1-in-1-ilmagnezijum bromida (0,5 M u THF, 8,36 mL, 4,18 mmol) na 0 °C. Nakon mešanja na 0 °C tokom 2 h, višak sat. aq. rastvora NaHCO3dodat je deaktiviranoj reakcionoj smeši koja je zatim dva puta ekstrahovana pomoću EtOAc i DCM. Svi organski slojevi su kombinovani i osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4. Čvrsta materija je filtrirana. Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom radi dobijanja naslovnog jedinjenja (0,78 g, 99%).. Korišćen je direktno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. ESI-MS m/z: 245,9 [M+H]<+>(Rt = 0,92 min., LC-postupak 3)

Korak 3: 1-(3-bromo-5-fluoropiridin-4-il)but-2-in-1-on

[0248] U rastvor -(3-bromo-5-fluoropiridin-4-il)but-2-in-1-ola (0,78 g, 3,2 mmol) u DCM (30 mL) dodat je Des-Martinov reagens (1,63 g, 3,84 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min. nakon čega je deaktivirana pomoću viška sat. aq. rastvora NaHCO3. Smeša je ekstrahovana sa DCM tri puta. Sci DCM slojevi su kombinovani, koncentrovani i zatim prečišćeni pomoću hromatografije sa sijicijumskim gelom (10% EtOAc/heptan) da bi se dobilo naslovno jedinjenje. ESI-MS m/z: 244,2 [M+H]<+>(Rt = 1,17 min, LC-postupak 3).

Korak 4: 4-((4-(3-bromo-5-fluoropiridin-4-il)-4-oksobut-2-en-2-il)amino)-3,5-dihlorobenzonitril

[0249]

i 6-(3-bromo-5-fluoropiridin-4-il)-3-(2,6-dihloro-4-cijanofenil)-2,2-difluoro-4-metil-2H-1,3,2-oksazaborinin-3-ium-2-uide

[0250] Smeša 1-(3-bromo-5-fluoropiridin-4-il)but-2-in-1-ona (2,50 g, 10,33 mmol), 4-amino-3,5-dihlorobenzonitrila (2,22 g, 11,88 mmol) ) i BF3*OEt2(8.80 g, 62.0 mmol) u DCE (120 mL) je mešan na 80 °C preko noći. Reakciona smeša je deaktivirana pomoću 1 N aq. rastvora NaOH nakon čega je tri puta ekstrahovan pomoću DCM. Svi DCM slojevi su kombinovani i osušeni preko anhidrovanog Na2SO4. Čvrsta materija je filtrirana. Isparljive supstance su uklonjene pod siženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (10-50% EtOAc/heptan) da bi se dobila smeša 4-((4-(3-bromo-5-fluoropiridin-4-il)-4-oksobut-2-en-2-il)amino)-3,5-dihlorobenzonitrila (ESI-MS m/z: 429,7 [M+H]<+>(Rt= 1,22 min, LC-postupak 3)) i njegov BF2kompleks 6-(3-bromo-5-fluoropiridin-4-il)-3-(2,6-dihloro-4-cijanofenil)-2,2-difluoro-4-metil-2H-1,3,2-oksazaborinin-3-ijum-2-uid (ES--MS m/z: 475,9 [M-H]<->(Rt= 1,37 min, LC-postupak 3)) (3,84 g ukupno). Smeša je direktno korišćena u sledećem koraku.

Korak 5: 4-(5-Bromo-2-metil-4-okso-1,7-naftiridin-1(4H)-il)-3,5-dihlorobenzonitril

[0251]

[0252] U rastvor smeše (2,50 g) dobijene u koraku 4 i DMF (15 mL) dodat je K2CO3(3,22 g, 23,31 mmol). Reakciona smeša je mešana na 100 °C tokom 25 min. Čvrsta materija je filtrirana. Isparljive supstance su uklonjene pod siženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (20-50% EtOAc/heptan) da bi se dobila smeđa čvrsta supstanca kao naslovno jedinjenje (1,2 g).

[0253] 13: ESI-MS m/z: 410,0 [M+H]<+>

[0254]<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 8.69 (s, 1 H), 8.58 (s, 2 H), 8.24 (s, 1 H), 6.50 (s, 1 H), 2.00 (s, 3 H).

Sinteza primera

Sinteza primera od 1 do 57

[0255] Sledeći primeri formule Ia, Ib su pripremljeni od intermedijera 1 do 13 nukleofilnom aromatičnom supstitucijom sa alkoholima i aminima. Po potrebi, kao krajnji korak urađeno je uklanjanje zaštitnih grupa na dodatnoj funkciji alkohola u molekulima.

Opšti postupak:

[0256] U reakcionoj bočici, intermedijeri 1 do 13 (obično 0,1-0,25 mmol, 1 ekv.), alkohol (5-10 ekv.) ili amin (1,2 ekv.), K2CO3(5-10 ekv.) i DMAP (0,1- 0,5 ekv.) su pomešani u MeCN (1-3 mL). Drugi rastvarači koji se koriste u slučaju loše rastvorljivosti su THF ili NMP ili DMF. Dobijena reakciona smeša je zagrevana tokom 1-16 h na 80 °C. Reakciona smeša je razblažena pomoću EtOAc i isprana vodom. Organska faza je osušena preko Na2SO4, filtrirana i koncentrovana in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom ili u slučaju veoma polarnih proizvoda pomoću HPLC reverzne faze (0,1% amonijaka u MeCN/vodi) da bi se dobili željeni proizvodi Ia, Ib (40-80% prinos) kao bela ili beličasta čvrsta materiija. U slučajevima kada alkohol ili amin ima nekoliko reaktivnih nukleofilnih centara, korišćeni su reagensi gde su dodatne funkcionalne grupe bile zaštićene sa TBDMS, Boc grupom ili kao ketal. U ovom slučaju zaštitna grupa je uklonjena tretmanom sa TFA u DCM na sobnoj temperaturi, TBAF u THF na 0°C ili AcOH/voda (∼2/1) na sobnoj temperaturi. Nakon vodene obrade kao što je gore opisano, sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom ili u slučaju veoma polarnih proizvoda HPLC-om reverzne faze (0,1% amonijaka u MeCN/vodi) da bi se dobili željeni proizvodi la, Ib a kao bela ili beličasta čvrsta materija.

Primer 1: (S)-8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0257]

Korak 1: (R)-2-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-) il)metoksi)-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0258] 2-(((terc-Butilmetilsilil)oksi)metil)-5,8-dihloro-1-(2,6-dihlorofenil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on (intermedijer 7, 1,3 g, 2,58 mmol) je rastvoreno u MeCN (15 mL). Ovaj rastvor je tretiran kalijum karbonatom (1,069 g, 7,73 mmol), DMAP (0,157 g, 1,289 mmol) i (R)-(2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metanolom (1,022 g 7,73 mmol). Dobijena smeša je zagrevana na 80 °C preko noći. Sledećeg dana reakciona smeša je filtrirana i isprana pomoću ACN.

Organski sloj je koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom sa silicijumskim gelom (10-50% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo naslovno jedinjenje (0,8 g, 52% prinos). ESI-MS m/z: 601, [M+H]<+>(Rt = 3,3 min, LC-postupak 1);<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 8.03 (s, 1H), 7.47 (s, 3H), 6.67 (s, 1H), 4.60 - 4.39 (m, 3H), 4.24 - 4.10 (m, 1H), 4.10 - 3.93 (m, 3H), 1.40 (s, 3H), 1.36 (s, 3H), 0.85 (s, 9H), 0.0 (s, 6H).

Korak 2: (S)-8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0259] Voda (2 ml) i sirćeta kiselina (3 ml) su prethodno pomešani i dodati u balon koji sadrži (R)-2-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-8-hloro-1-(2,6). -dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-1,6-naftiridin-4(1H)-on (0,280 g, 0,467 mmol). Da bi se rastvorio početni materijal, boca je sonikirana 5-10 minuta. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći i zatim pomoću LC/MS. Koncentrisana je vacuo na temperaturi kupatila od 26°C i vakuumu od 20mbar. Većina sirćetne kiseline je uklonjena, a preostali vodeni rastvor je ohlađen u ledenom kupatilu i razblažen sa EtOAc. Polako je dodavan 10% vodeni rastvor natrijum karbonata do pH 7. Slojevi su odvojeni i organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom soli, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom sa silicijumskim gelom (0-10% MeOH u DCM) da bi se dobilo naslovno jedinjenje sa 97% ee (0,15 g, 72% prinos) (uočeno je formiranje oko 3% regioizomera iz primera 9).

[0260] 1: ESI-MS m/z: 446,9 [M+H]<+>(Rt = 0,74 min, LC-postupak 4)

1

[0261]<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 8.13 (s, 1H), 7.58 - 7.43 (m, 3H), 6.94 (s, 1H), 4.70 (dd, J = 11.2, 1.7 Hz, 1H), 4.39 (dd, J = 11.2, 3.8 Hz, 1H), 4.07 (s, 2H), 4.04 - 3.97 (m, 1H), 3.91 (dd, J = 11.7, 2.1 Hz, 1H), 3.78 (dd, J = 11.6, 5.2 Hz, 1H).

[0262] Alternativno, primer 1 se može pripremiti sledećim postupcima:

HPLC postupak:

[0263] Kolona: Waters Acquity BEH C18 Dužina100 mm, unutrašnji prečnik 2,1 mm, veličine čestice: 1,7 µm.

[0264] Mobilna faza: A: 0,05% TFAu vodi, B: 0,05% TFA u metanolu

Gradijent:

[0265]

2

[0266] Temperatura kolone: 30 stepeni celzijusa.

[0267] Rastvarač za pripremu uzorka: acetonitril

Hiralni postupak:

[0268] Kolona: Daicel Chiralpak IE-3. Dužina 150 mm, unutrašnji prečnik 4,6 mm, veličina čestice: 3,0 µm.

[0269] Mobilna faza: A: 0,1% TFA u heptanu, B: Ethanol. (izokratski program: A/B=70/30; vreme trajanja:25 min)

Korak 1: 2-{[(terc-butildimetilsilil)oksi]metil}-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-{[(4R)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4- il]metoksi}-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-4-on

[0270] U rastvor ((R)-2,2-dimetil-[1,3]dioksolan-4-il)-metanol(6,3 g, 47,59 mmol) u THF (140 mL) dodat je litijum diizopropilamid (2 M u THF, 24 mL, 47,59 mmol) u kapima na -10 °C to - 5 °C. Reakcija je ostavljena da se meša od - 5 °c do 0 °C tokom 1h. Zatim je rastvor 2-{[(terc-butilmetilsilil)oksi]metil}-5,8-dihloro-1-(2,6-dihlorofenil)-1,4-naftiridin-1,6--4-on (intermedijer 7 20 g, 39,658 mmol) u THF (60 mL) dodat je u kapima na -10 °C do -5 °C. Reakciona smeša je polako zagrevana do sobne temperature tokom 30 min. i mešana tokom 2 h. Napredak reakcije praćen je pomoću HPLC. Ako je početni materijal bio <0,5%, započeta je obrada, u suprotnom reakcija je mešana još 4-16 h praćeno HPLC. U reakcionu smešu dodat je THF/H2O=20 mL/2 mL sa internom temperaturom od 20∼25 °C, zatim 20% rastvora NH4Cl (100 mL) dodato je sa internom temperaturom od 20-25 °C. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan pomoću etil acetata (2 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani sa vodom (100 mL) i zatim zasićenim vodenim rastvorom soli (100 mL).

[0271] Kristalizacija: Organski sloj je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio ostatak od oko 40 g, zatim je n-heptan (2 k 400 ml) korišćen za pokretanje azeotropne destilacije dok se ne dobije 50 g ostatka. U ostatak je dodat n-heptan (400 mL) i smeša je zagrevana do unutrašnje temperature od 60 °C za 30 min, držana 1-2 h, a zatim je vruća smeša filtrirana. Filtrat je ohlađen do 0 °C za 10 h i mešan 6 h. Formirani precipitat je odvojen filtracijom. Ova vlažna pogača je suspendovana u etil acetatu (20 mL) i n-heptanu (200 mL) i zagrevan do 55 °C za 30 min. Dobijeni rastvor je mešan 30 min na 55°C. Rastvor je polako ohlađen na 0 °C za 6 h i držan najmanje 3 h. Talog je filtriran i osušen da bi se dobila bela čvrsta supstanca kao naslovno jedinjenje (13,8 g, 57% prinos).

[0272] ESI-MS m/z: 601,0 [M+H]<+>; HPLC čistoća: 98,9%, enantomerski višak: 99,1%;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 8.26 (s, 1 H), 7.82 - 7.68 (m , 3H), 6.53 (s, 1H), 4.53 -4.38 (m, 3H), 4.17-4.08 (m, 1H), 4.06 - 3.98 (m, 3H), 1.37 (s, 3H), 1.33 (s, 3H), 0.85 (s, 9H), 0.02 - -0.05 (m, 6H);<13>C NMR (101 MHz, DMSO-d6) δ ppm = -5.22, 18.37, 26.05, 26.20, 27.02, 60.72, 66.30, 67.09, 73.85, 109.20,110.04, 111.18, 114.93, 129.48, 133.07, 133.90, 136.12, 145.07, 150.45, 151.56, 162.57, 175.16

Korak 2: -8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0273] U rastvor 2-{[(terc-butildimetilsilil)oksi]metil}-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-{[(4R)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il]metoksi}-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-4-on (15 g, 25 mmol) u

4

THF (50 mL) dodat je rastvor tetrabutilamonijum fluorid trihidrata (9,5 g, 30 mmol) u THF (25 mL) u kapima sa internom temperaturom od 20-25 °C. Reakciona smeša je ostavljena da se meša tokom 2 h. Napredak reakcije je praćen pomoću HPLC. HPLC pokazuje 96,8% proizvoda sa potpunom potrošnjom početnog materijala. Reakciona smeša je ohlađena do interne temperature od 0-5 °C, i zatim je dodata ledena voda (75 ml) u kapima sa internom temperaturom od 0-5 °C, a za njom izopropil acetat (75 ml).

[0274] Slojevi su odvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa izopropil acetatom (75 mL).

[0275] Kombinovani organski slojevi su isprani sa vodom (1× 75 mL) i zatim sa 20% zasićenog vodenog rastvora soli (1× 75 mL)

Kristalizacija:

[0276] Organski sloj je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobilo 40 g ostatka, a zatim je dodat izopropil acetat (5 k 150 mL) da bi se pokrenula azeotropna destilacija dok se ne dobije 50 g ostatka. Smeša je ohlađena na 20-25°C i dodato je seme proizvoda (6 mg). Smeša je držana 2 h na unutrašnjoj temperaturi od 20-25°C, zatim je smeša zagrejana do unutrašnje temperature od 35 ± 3°C za 30 min, držana 30 min i n-heptan (150 mL) je dodat za 6 h.

Smeša je ohlađena na unutrašnju temperaturu od 0 ± 3 °C za 5 h i odležana najmanje 3 h. Željeni proizvod je dobijen filtracijom, a vlažna pogača je ispran n-heptanom (15 mL), a zatim osušen u vakuumu na 40°C da bi se dobilo naslovno jedinjenje kao svetlo žuta čvrsta supstanca (10,5 g, 86,5% prinos).

[0277] ESI-MS m/z: 486,9 [M+H]<+>; HPLC čistoća: 98,3%, enantomerski višak: 99,6%;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 8.23 (s, 1 H), 7.78 - 7.68 (m , 3H), 6.54 (s, 1H), 5.85 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.49 - 4.37 (m, 3H), 4.14 - 4.08 (m, 1H), 4.04 - 3.97 (m, 1H), 3.78 (d, J = 5.26 Hz, 2H), 1.36 (s, 3H), 1.31 (s, 3H).<13>C NMR (101 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 26.20, 27.00, 58.86, 66.33, 67.11, 73.86, 109.21, 110.00, 111.16, 114.06, 129.48, 133.15, 133.80, 135.98, 136.01, 145.00, 150.25, 153.49, 162.58, 175.10

Korak 3: (S)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1, 6-naftiridin-4(1H)-on

[0278] U Flexy cube od 400 ml napunjen je acetonitril (67,9 g) i 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on (13,1 g, 1,0 eq). U drugi balon od 100 ml dodat je acetonitril /29,1 g), voda (1,96 g) i Bi(OTf)3(4,42 g, 0,25 eq). Odgovarajući rastvor Bi(OTf)3dodat je u Flexy cube na 20±3 C °C tokom 15 min. Reakciona smeša je ohlađena do 10±3 °C tokom 40 min. i držana na 10±3 °C tokom 45 min. Nakon toga je reakciona smeša ohlađena do 0±3 °C tokom 30 min. i držana na 0±3 °C tokom 30 min. kada je reakcija dovršena UPLC analizom. U reakcionu smešu je polako dodato 5% wt NaHCO3aq. rastvora (67 g) da bi se temperatura održala ispod 10 °C. Etil acetat (120 g) je dodat i smeša zagrejana do sobne temperature. Faze su odvojene i vodeni rastvor je ekstrahovan pomoću etil acetata (59 g) i izopropil alkohola (5,1 g). Kombinovana organska faza je isprana sa 20% wt zasićenog vodenog rastvora soli (75 g). Organski rastvarač je zamenjen izopropil alkoholom i koncentrovan pod 50-100 mbar na 50 °C da bi preostalo 32,6 grama ostatka. Ostatku je dodat metil-terc-butiletar (20 g) na 50±3°C tokom 30 min. Smeša je mešana još 30 min dok se nije istaložila čvrsta materija. Metil-terc-butiletar (80 g) je dodat tokom 1 h. Temperatura je ohlađena na 23 ±3°C tokom 2 h, dodat je metil-terc-butiletar (60 g) tokom 1 h i držan 2 h. Čvrsta supstanca je filtrirana; vlažna pogača je dva puta isprana mešanim rastvaračem izopropil alkohola (3,9 g) i metil-terc-butiletra (37 g). Sirovi materijal je zatim rastvoren u acetonitrilu (27,2 g) i vodi (103 g) na 25 ±3 °C da bi postao bistar rastvor. Dodato je seme (48 mg) i mešano 30 min, nakon čega je usledilo dodavanje vode (137,5 g) tokom 2 h. Smeša je držana na 25 ±3 °C tokom 1 h, a zatim ohlađena na 0 ±3 °C tokom 7 h. Proceđen je i vlažna pogača je isprana vodom. Vlažna pogača je sušena u vakuumu na 60 °C tokom 16 h da bi se dobio (S)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)- 1,6-naftiridin-4(1H)-on kao svetlo žuta čvrsta supstanca (7,95 g, 66% prinos).

[0279] ESI-MS m/z: 445,011 [M+H]<+>; HPLC čistoća: 99,34%, enantomerski višak: 99,3%;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 8.28 (s, 1 H), 7.91 - 7.70 (m , 3H), 6.62 (s, 1H), 5.91 (s, 1H), 5.24 (t, J = 5.38 Hz, 1H), 4.85 (t, J = 5.75 Hz, 2H), 3.85 (br d, J = 5.38 Hz, 2H), 3.75 (t, J = 5.56 Hz, 4H);<13>C NMR (101 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 58.27, 63.36,68.90, 69.03, 109.24 , 110.52, 113.35, 128.93, 132.48, 133.29, 135.35, 144.26, 149.95, 153.26, 162.20, 174.94

Primer 1A (hidratna forma B):

Rekristalizacija:

[0280] U 200 mg amorfnog materijala iz primera 1, dodat je 1 ml acetonitril/voda (9:1, v/v) da bi se dobio bistar rastvor na 50°C uz mešanje. Posle 1 h mešanja na ovoj temperaturi, rastvor je polako ohlađen do 5°C i pojavio se beli talog. Precipitat je odvojen centrifugiranjem i sušen na 40°C tokom 12 sati. Dobija se beli kristalni prah (modifikacija hidrata forme B) jedinjenja.

[0281] Alternativno, hidrat B se može proizvesti izlaganjem (S)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4 (1H)-on (bilo koji oblik iz primera 1) do 92% relativne vlažnosti duže od 72h na 25°C ili mešanjem (S)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2, 3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on (bilo koji oblik iz primera 1) u čistoj vodi na 25°C tokom najmanje 72 h.

a) Opis postupka rendegnske difraktometrije praška (XRPD)

[0282] Rendgenska difrakcija praška je snimljena na Bruker<™>D8

[0283] Napredni difraktometar sa CuKα anodom (CuKα zračenje (l = 1,5418 A). Uzorak od oko 75-100 mg se stavlja na držač uzorka Si-wafer bez pozadine i centrira u snopu rendgenskih zraka. Ovako određena difrakciona šema rendgenskih zraka prikazana je na slici 1 i predstavljena u tabeli 2 ispod refleksijskih linija najvažnijih linija.

Tabela 2.

b) Diferencijalna skenirajuća kalorimetrija (DSC) i termogravimetrijska analiza (TGA)

[0284] Diferencijalnom skenirajućom kalorimetrijom (DSC) i termogravimetrijskom analizom (TGA) trag forme B je dobijen korišćenjem TA Instruments K2000 (DSC) i K5000 (TGA) korišćenjem opsega grejanja prikazanog na slikama 2 do 3.

Opis DSC postupka

[0285] Precizno odmeriti 0,5-1,5 mg ispitivane supstance svaki u posudu za uzorke sa rupicama i zatvorenu (hermetičku) posudu za uzorke. Prazne posude za uzorke se koriste kao referenca. DSC termogram se beleži na sledeći način: temperatura aparata se podešava na oko -40°C i zagreva na 300°C brzinom zagrevanja od 10°C/min, pod protokom azota od 50 mL/min. Instrument je kalibrisan za temperaturu i entalpiju sa Indijom, čistoće od najmanje 99,9999% do 300°C pri brzini zagrevanja od 10°C/min, pod protokom azota od 50 mL/min. Tačnost izmerene temperature uzorka ovom metodom je unutar oko ± 1°C, a toplota fuzije se može meriti u okviru relativne greške od oko ±5%.

[0286] Sa posudom za uzorke sa rupicama (Slika 2.) I Početak temperature stakla: Tpočetak= 38,77 °C, Početak endotermnog topljenja: Tpočetak= 113,69

[0287] Sa pan prikazom hermetičkih uzoraka (Sl.3); Početak endotermskog topljenja: Tpočetak= 82,30

Ops TGA postupka

[0288] Precizno izmerite 10-20 mg ispitivane supstance u AI pan prikaz uzorka. TGA termogram se snima na sledeći način: Da biste izbegli gubitak težine, pan prikaz za uzorke ima hermetički zatvoren poklopac koji se automatski probija samo nekoliko trenutaka pre nego što se uzorak ubaci u peć. Temperatura je uravnotežena na 30 °C i zagrejana na 200 °C pri brzini zagrevanja od 10 °C/min, pod protokom azota od 25 mL/min.

[0289] Instrument je kalibrisan za temperaturu sa niklom i aluminijumom, a kalibrisan za težinu sa standardom od 5 i 10 mg. (Sl.4)

[0290] Sledeći primeri u tabeli 1 su pripremljeni korišćenjem metode A:

Tabela 1: Promeri 2 - 58

1

2

4

1

11

12

1

14

1

1

1

1

1

11

11

11

11

11

11

11 Hiralna separacija racemskih jedinjenja u primeru 40

Primeri 58 i 59: Jedan od primera 58 i 59 je (R)- 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksi-3-metilbutoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on, a drugi je (S)- 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksi-3-metilbutoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0291] 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksi-3-metilbutoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on je rastvoren u metanolu i podnet u višestrukim injekcijama od po 1,6 ml u hiralnu preparativnu SFC (ChiralPak AD-H kolona, 250 x 330 mm ID, 5 µm, brzina protoka od 80 ml/min na 38 °C) koristeći 35% 2-propanol u ugljen-dioksidu kao mobilnu fazu. Posle hiralne separacije, frakcije su osušene rotacionim isparavanjem da bi se dobio primer 58 kao prvi elucioni pik (>99% ee) i primer 59 kao drugi elucioni pik (>99% ee) kao bele čvrste materije. Vremena zadržavanja su dobijena na ChiralPak AD-H koloni, 4,6 k 100 mm, 5 µm koloni, Gradijent 5-55% 2-propanola u ugljen-dioksidu kao mobilnoj fazi je primenjen tokom 5,5 minuta, a zatim držan 0,1 min (5,0 ml /min kao protok rastvarača) na temperaturi rerne od 38°C (Primer 58: Rt = 4,23 min; Primer59: Rt = 4,68 min

Sledeći primeri su pripremljeni kao što je opisano u Šemi B

Primer 60: 8-Hloro-1-(2,6-dihloro-47-fluorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0292]

Korak 1: 8-Hloro-1-(2,6-dihloro-4-fluorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-diksolan-4-il)metoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0293]

12

[0294] Smeša 5,8-Ddhloro-1-(2,6-dihloro-4-fluorofenil)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on (intermedijer 2, 0,4 g, 1,02 mmol), (2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metanol(0,674 g, 5,10 mmol), K2CO3(0,423 g, 3,06 mmol) i DMAP (0,037 g, 0,306 mmol) u acetonitrilu (10 mL) je promešana na 80 °C za 2 dana. Čvrsta materija je filtrirana i reakciona smeša je zatim pročišćena pomoću hromatografije sa silicijumskim gelom (0-50% EtOAc/heptan) da bi se dobila bela čvrsta materija naslovnog jedinjenja (0,436 g, 88%). ESI-MS m/z: 489,1 [M+H]<+>(Rt = 1,42 min, LC-postupak 3)

Korak 2: 8-Hloro-1-(2,6-dihloro-4-fluorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-2-aldehid

[0295]

[0296] Smeša 8-hloro-1-(2,6-dihloro-4-fluorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-diksolan-4-il)metoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-ona (0,104 g, 0,213 mmol) i SeO2(0,036 g, 0,32 mmol) u 1, 4-dioksanu (2 mL) mešan je na 90 °C preko noći. Druga šarža SeO2(0,030 g, 0,27 mmol) dodata je reakcionoj smeši nakon čega je mešana preko noći na 100 °C. Čvrsta materija je filtrirana. Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom da bi se dobila sirovina proizvoda. LC-MS indicira da je naslovno jedinjenje glavno jedinjenje proizvoda sirovine. ESI-MS m/z: 463,1 [M+H]<+>(Rt= 1,02 min, LC-postupak 3)

Korak 3: 8-Hloro-1-(2,6-dihloro-47-fluorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0297]

[0298] U rasrvor osovine 8-hloro-1-(2,6-dihloro-4-fluorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-2-aldehid (0,.098 g, 0,213 mmol) u (5 mL) dodat je NaBH4(0,04 g, 1,07 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60 °C tokom 5 min. Čvrsta materija je filtrirana pročišćavanjem reverzno-faznom HPLC (X-bridge 30x50 mm 5 um kolone, ACN/H2O sa 10 mM NH4OH, 75 mL/min, 1,5 mL injekcije, gradijenta: 15-40% ACN za 3,5 min.) da bi se dobila bela čvrsta supstanca kao naslovno jedinjenje (0,027 g, 26%).

[0299] 60: HRMS: kalk.463,0031 [M+H]<+>, pronađeno 463,0036;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 8.26 (s, 1H), 7.88 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.55 (s, 1H), 5.85 (bs, 1H), 4.88 (bs, 1H), 4.75 (bs, 1H), 4.38 (dd, J = 10.7, 5.5 Hz, 1H), 4.30 (dd, J = 10.7, 5.8 Hz, 1H), 3.78-3.91 (m, 3H), 3.58 (m, 2H)

[0300] Sledeći primer je pripremljen analognom metodom kao što je opisano za gornji primer korišćenjem etan-1,2-diola u koraku 1.

Primer 61: 8-Hloro-1-(2,6-dihloro-4-fluorofenil)-5-(2-hidroksietoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0301]

[0302] 61: HRMS: kalk.432,9925 [M+H]<+>, pronađeno 432,9919;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 8.23 (s, 1H), 7.88 (d, J = 8.3 Hz, 2H), 6.52 (s, 1H), 5.82 (bs, 1H), 4.77 (bs, 1H), 4.42 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.81 (s, 2H), 3.76 (q, J = 4.4 Hz, 2H)

Primer 62: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-(difluorometil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0303]

Korak 1: 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H )-on

[0304] U rastvor 5,8-dihloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-ona (0,250 g, 0,668 mmol) u NMP (1 ml) dodat je (2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metanol (0,883 g, 6,68mmol), K2CO3(0,277 g, 2,005 mmol) i DMAP (0,008 g 0,067 mmol). Dobijeni rastvor je zagrevan na 75 °C tokom 1 sata. Reakciona smeša je uračunata u EtOAc/vodenu smešu. Vodeni sloj je ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su osušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i upareni. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (10-100% EtOAc u heptanu) da bi dao naslovno jedinjenje (0,277 g, 79%). ESI-MS m/z: 471,1 [M+H]<+>(Rt = 1,17 min, LC-postupak 1),<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 8.09 (s, 1H), 7.61 - 7.41 (m, 3H), 6.40 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 4.62 - 4.45 (m,

12

3H), 4.20 (dd, J = 8.5, 6.1 Hz, 1H), 4.04 (dd, J = 8.4, 6.2 Hz, 1H), 1.95 (s, 3H), 1.47 (s, 3H), 1.41 (s, 3H).

Korak 2: 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-4-okso-1,4-dihidro-1,6 -naftiridin-2-karbaldehid

[0305] Smeša 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3-hidroksi-2-(hidroksimetil)propoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-ona (0,123 g, 0,262 mmol) i selen-dioksid (0,035 g, 0,314 mmol) u 1,4-dioksanu (5 mL) je refluksovan preko noći. Nerastvorne supstance su filtrirane i isprane sa EtOAc Organski sloj je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatku je dodat EtOAc i voda. Organski sloj je odvojen i ak. sloj je ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski sloj je osušen preko anhidrovanog Na2SO4, filtriran i uparen. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (10-100% EtOAc u heptanu) da bi dao naslovno jedinjenje (0,057 g, 45%).

Korak 3: 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-(difluorometil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-1,6-naftiridin-4 (1H)-on

[0306] U rasrtvor 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-2-karbaldehid (0,056 g, 0,116 mmol) u 2 ml DCM detektovan je DeoxoFluor (0,320 ml, 1,737 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom vikenda. Deaktiviran je sa rastvorom NaHCO3od 10% na 0 °C, i ekstrahovana pomoću CH2Cl2. Kombinovani organski slojevi su isprani vodom i zasićenim vodenim rastvorom soli, osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom do suvoće. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (10-100% EtOAc u heptanu) da bi dao naslovno jedinjenje (0,025 g, 43% prinosa). ESI-MS m/z: 505,1 [M+H]<+>(Rt = 1,23 min, LC-postupak 1).

Korak 4: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-(difluorometil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0307] U rastvor 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-(difluorometil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-1,6-naftiridin-4(1H)-ona (0,025 g, 0,049 mmol) u 0,5 ml DCM dodato je 0,5 ml TFA. Reakciona smeša je mešana tokom 1,5 sata. Onda je bila koncentrovana. Ostatak je razblažen sa ACN i filtriran kroz LP-HCO3 smolu da bi se neutralisala TFA so. Filtrat je koncentrovan da bi se dobilo naslovno jedinjenje (0,020 g, 78% prinos).

[0308] 62: ESI-MS m/z: 467,1 [M+H]<+>(Rt = 1.91 min, LC-postupak 1);<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 8.09 (s, 1H), 7.56 - 7.36 (m, 3H), 6.78 (s, 1H), 5.99 (t, J = 53.0 Hz, 1H), 4.64 (ddd, J = 11.2, 2.4, 1.2 Hz, 1H), 4.27 (dd, J = 11.2, 3.7 Hz, 1H), 3.98 - 3.79 (m, 2H), 3.77 - 3.61 (m, 1H).

Primer 63: 8-Hloro-1-(2,6-dihidrofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-2-karbontril

[0309]

[0310] 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-4-okso-1,4-dihidro-1,6 -naftiridin-2-karbaldehid je pripremljen kao što je opisano u primeru 63 u koraku 1 i 2.

Korak 3: 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-2-karboksilna kiselina

[0311]

12

[0312] U rastvor 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-2-karbaldehid (0,358 g, 0,740 mmol) u smeši acetona (1 ml) i vodie(1 ml) dodat je natrijum hlorit (0,134 g, 1,48 mmol) i sulfaminska kiselina (0,216 g, 2,22 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Rastvarač je uklonjen.

Ostatak je ispran vodom, filtriran i osušen pod vakuumom. Koristilo se za sledeći korak. ESI-MS m/z: 460,9

[0313] [M+H]<+>(Rt = 0.46 min, LC-postupak 4),<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 8.19 (s, 1H), 7.48 (d, J = 4.2 Hz, 3H), 6.14 (s, 1H), 4.97 - 4.79 (m, 2H), 4.38 (dd, J = 10.6, 5.5 Hz, 1H), 4.26 (dd, J = 10.6, 6.0 Hz, 1H), 3.92 - 3.79 (m, 1H), 3.57 (dq, J = 10.8, 5.5 Hz, 2H).

Korak 4: 8-Hloro-1-(2,6-dihidrofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-2- karboksamidne

[0314]

[0315] U rastvor 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenik)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-4-oko-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-2-karboksilna kiselina (0,160 g, 0,348 mmol), HATU (0,397 g, 1,044 mmol) i DIEA (0,304 ml, 1,74 mmol) u DMF (4 ml) dodat je amonijak hlorid (0,056 g, 1,044 mmol).

12

Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je razblažena pomoću EtOAc i isprana vodom. Vodeni sloj je ekstrahovan pomoću EtOAc. Kombinovani organski sloj je osušen iznad anhidrovanog Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (0-10% MeOH u DCM) da bi dao naslovno jedinjenje (0,132 g, 83%). ESI-MS m/z: 458, [M+H]<+>(Rt = 0.68 min, LC-postupak4),<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 8.38 (s, 1H), 8.29 (s, 1H), 7.79 (s, 1H), 7.66 - 7.50 (m, 3H), 6.42 (s, 1H), 4.88 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 4.71 (t, J = 5.9 Hz, 1H), 4.44 -4.21 (m, 2H), 3.87 (q, J = 5.3 Hz, 1H), 3.66 - 3.48 (m, 2H).

Korak 5: 8-Hloro-1-(2,6-dihidrofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-2-karbontril

[0316]

[0317] U rastvor 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-2-karboksamid (0,130 g, 0,283 mmol) u THF (3 mL) i TEA (0,099ml, 0,709 mmol) dodat je TFAA (0,140 mL, 0,992 mmol) kapanjem na 0 °C (interna temperatura nije premašila 15 °C - prati se pomoću termometra). Reakcija je mešana na 0°C tokom 2 sata. Zatim je sipana u vodu i proizvod je ekstrahovan sa EtOAc (3X). Kombinovani organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3, zasićenim vodenim rastvorom soli i osušeni iznad anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (0-10% MeOH u DCM) da bi dao naslovno jedinjenje (0,09 g, 72%).

[0318] 63: ESI-MS m/z: 442, [M+H]<+>(Rt = 0,6 min, LC-postupak<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 8.25 (s, 1H), 7.61 (d, J = 4.5 Hz, 3H), 6.99 (s, 1H), 4.70 - 4.59 (m, 4H), 4.52 (dd, J = 10.9, 5.6 Hz, 1H), 4.39 (dt, J = 11.1, 5.6 Hz, 2H).

12

Primer 64: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-hidroksi-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0319]

[0320] U rastvor 2-(((terc-butilmetilsilil)oksi)metil)-5,8-dihloro-1-(2,6-dihlorofenil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on (intermedijer 7, 0,1 g, 0,198 mmol) u vodi (5 ml) dodat je 1N HCl (5 ml). Dobijen smeša je mešana na 80 °C preko noći. Neutralizovan je zasićenim vodenim rastvorom NaHCO3i željeni proizvod je ekstrahovan sa EtOAc. Kombinovani organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog Na2SO4, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je triturisan sa smešom MeCN i heptana da bi se dobilo naslovno jedinjenje (0,043 g, 55% prinos).

[0321] 64: ESI-MS m/z: 372,8 [M+H]<+>(Rt = 0,88 min, LC-postupak 1),<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 8.19 (s, 1H), 7.57 (d, J = 2.8 Hz, 3H), 7.01 (s, 1H), 4.23 - 4.08 (m, 2H).

Primer 65: 1-(2,6-Dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-metil-7-(metilamino)-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0322]

Korak 1: 7-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H )-on

12

[0324] U rastvor intermedijera 11 (1 g, 2,67 mmol) u NMP (8 ml) dodat je DMAP (0,163 g, 1,337 mmol), K2CO3(1,108 g, 8,02 mmol) i 2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metanol (1,060 g, 8,02 mmol) at rt. Dobijeni rastvor je mešan na 75<0>C tokom 1 sata. Reakcija je ohlađena na rt, deaktivirana zasićenim vodenim rastvorom soli, ekstrahovana pomoću EtOAC. Organska faza je isprana vodom, zasićenim vodenim rastvorom soli, osušena iznad NgSO4i koncentrovana in vacuo. Ostatak sirovine je prečišćen kolonskom hromatografijom sa silicijumskom gelom uz elutiranje pomoću 0-100% EtOAc/heptan, zatim 5 % MeOH/EtOAc, da bi se dobilo naslovno jedinjenje kao bela čvrsta materija (0,51 g, 40,6% prinosa). LC/MS (m/z, [M+H]<+>): 471,1

Korak 2: 1-(2,6-Dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-metil-7-(metilamino)-1,6-naftiridin-4(1H)-on.

[0325] U rastvor 7-Hloro-1-(2,6-dihlorofrnil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on (20 mg, 0,043 mmol) u Hunigovoj bazi (0,074 mlm 0.426 mmol) i NMP (0,5 ml) dodat je metilamin hidrohlorid i reakcija je zagrevana na 90 °C preko noći., Reakcija je filtrirana i prečišćena bazičnom preparativnom HPLC (Waters Xbridge 5um 30k100mm, voda/acetonitril sa 10mM NH4OH, 75mL/min, 1.5mL injekcija, 30-45% ACN na 11.5min) da bi se dobio željeni proizvod u obliku belog praška. Ovaj beli prašak je rastvoren u DCM (1 ml) i dodat je TFA (1 ml). Dobijeni rastvor je mešan na rt preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana, neutralizovana konc. amonijakom i zatim pročišćena osnovnim preparativnim HPLC (Waters Xbridge 5 um 30x100 mm, voda/acetonitril sa 10 mM NH4OH, 75 mL/min, 1,5 mL injekcijom, 20-35% ACN tokom11,5 min) da bi se dobilo naslovno jedinjenje kao beličastog praška (8,9 mg, 0,021 mmol)

12

[0326] 65: HRMS: kalk.424,0844 [M+H]+, pronađeno 424,0830;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 7.56 - 7.46 (m, 2H), 7.40 (dd, J = 8.6, 7.5 Hz, 1H), 6.09 - 5.99 (m, 1H), 5.67 (s, 1H), 4.72 - 4.51 (m, 3H), 4.18 (d, J = 9.8 Hz, 1H), 4.02 - 3.70 (m, 4H), 2.64 (d, J = 5.1 Hz, 3H), 1.88 - 1.76 (m, 3H).

Primer 66: 1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-7-etil-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on i primer 67: 1-(2-hloro-6-etilfenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-7-etil-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0327]

[0328] Korak 1: 1-(2,6-Dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-7-etil-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on i 1-(2-hloro-6-etilfenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-7-etil-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on Dietil cink (3,55 ml, 3,55 mmol) rastvor (1M u heptanu) dodat je u smešu 7-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on (0,833 g, 1,774 mmol), DPPF (0,197 g, 0,355 mmol), i Pd(OAC)2(0,040 g 0,177 mmol) u toluenu (10 ml) u kapima na -78 °C u azotnoj atmosferi. Posle dodavanja, reakcija je zagrevana na 90 °C tokom 1 sata. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i ugašena sa zas. aq. NH4Cl, razblažen sa EtOAc i filtriran kroz celit. Organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom soli, osušena iznad anhidrovanog MgSO4i koncentrovana in vacuo. Ostatak sirovine je prečišćen kolonskom hromatografijom uz elutiranje sa 0-100% EtOAc/heptan da bi se dobilo 1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-7-etil-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on (0,7 g žute čvrste materije, 1,44 mmol) i 1-(2-hloro-6-etilfenil)-5-(2,3-dihydroxypropoxy)-7-etil-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on (0,012 g bele čvrse materije, 0,025 mmol).

1

Korak 2: 1-(2,6-Dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-7-etil-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on jedinjenje i 1-(2-hloro-6) -etilfenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-7-etil-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0329] Dva gornja jedinjenja su odvojeno rastvorena u 1:1 smeši DCM i TFA i mešana na rt tokom 1 sata. Posle uklanjanja isparljivih materija i prečišćavanja bazičnom preparativnom HPLC, frakcije koje sadrže primere 66 i 67 su dobijene kao beli prašak.

[0330] 66: HRMS: kalk.423,0878 [M+H]<+>, pronađeno 423,0897;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 7.67 - 7.46 (m,3H), 6.34 (s, 1H), 5.74 (s, 1H), 4.84 (d, J = 11.5 Hz, 1H), 4.38 (dd, J = 11.4, 3.3 Hz, 1H), 4.07 - 3.94 (m, 2H), 3.87 (dd, J = 11.7, 5.4 Hz, 1H), 2.56 (q, J = 7.5 Hz, 2H), 1.95 (s, 3H), 1.16 (t, J = 7.5 Hz, 3H).

[0331] 67: HRMS: kalk.417,1581 [M+H]<+>, pronađeno 417,1626;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 7.59 - 7.32 (m, 3H), 6.37 (d, J = 15.1 Hz, 1H), 5.83 (d, J = 41.9 Hz, 1H), 4.97 - 4.74 (m, 1H), 4.37 (ddd, J = 10.9, 7.1, 3.1 Hz, 1H), 4.11 - 3.69 (m, 3H), 2.56 (dq, J = 15.1, 7.6 Hz, 2H), 2.29 (dddd, J = 30.2, 22.7, 15.0, 7.3 Hz, 2H), 1.93 (d, J = 9.4 Hz, 3H), 1.12 (dt, J = 11.1, 7.6 Hz, 6H).

Primer 68: 1-(2,6-Dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-7-metoksi-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0332]

67 Smeša 7-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-2-metil-1,6-naftiridin- 4(1H)-on (29 mg, 0,062 mmol), Na2CO3(19,63 mg, 0,185 mmol), Ks-Phos (5,75 mg, 0,012 mmol) i Pd(OAc)2(1,386 mg, 6,17 µmol)0 u toluenu (0,5 mlml) i MeOH

1 1

(0,050 ml, 1,235 mmol) je pročišćen azotom i zagrevan na 80 °C preko noći. Posle hlađenja, smeša je koncentrovana, stavljena u etil acetat i filtrirana kroz čep od silicijumskog gela. Rastvarač je uklonjen i ostatak sirovine je tad rastvoren u HOAc (1ml). Dodata je voda (1 ml). Dobijeni rastvor je mešan na rt preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana, neutralizovana konc. amonijakom i prečišćena osnovnim preparativnim HPLC (Waters Xbridge 5 um 30x100 mm, voda/acetonitril sa 10 mM NH4OH 75 mL/min, 1,5 mL injekcijom, 15-30% ACN tokom 11,5 min) da bi se dobilo naslovno jedinjenje kao beličasti prah (11,8 mg, 0,027 mmol)

[0334] 68: HRMS: kalk.425,0671 [M+H]<+>, pronađeno 425,0685;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 7.64 - 7.43 (m, 3H), 6.27 - 6.18 (m, 1H), 5.28 (s, 1H), 4.84 (dd, J = 11.2, 1.5 Hz, 1H), 4.35 (dd, J = 11.2, 3.3 Hz, 1H), 4.10 - 3.96 (m, 3H), 3.96 - 3.82 (m, 5H), 1.93 (s, 3H).

Primer 69: 1-(2,6-Dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-8-etil-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0335]

Primer 69 je pripremljen na način analogan intermedijeru 66 pomoću Intermedijere 10 kao polazne supstance da bi se dobio beli prašak.

[0336] 69: HRMS: kalk.423,0878 [M+H]<+>, pronađeno 423,0888;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 7.96 (s, 1H), 7.59 - 7.44 (m, 3H), 6.42 (s, 1H), 5.23 (s, 1H), 4.77 (d, J = 10.8 Hz, 1H), 4.37 (dd, J = 11.1, 3.4 Hz, 1H), 3.93 (dd, J = 55.4, 11.9 Hz, 4H), 1.97 - 1.79 (m, 5H), 0.95 (t, J = 7.4 Hz, 3H).

1 2

Primer 70: N-(1-(2,6-Dihloro-4-cijanofenil)-2-metil-4-okso-1,4-dihidro-1,7-naftiridin-5-il)-1H-pirazol-4-sulfonamid;

[0337]

Korak 1: 4-(5-Amino-2-metil-4-okso-1,7-naftiridin-1(4H)-il)-3,5-dihlorobenzonitril

[0338]

[0339] Smeša intermedijera 12 (0,028 g, 0,080 mmol), aq koncentrisani amonijak (0,035 ml, 0,402 mmol) u THF (0,5 ml) zagrajana je na 80 °C u zatvorenoj epruveti tokom 1h.

Reakciona smeša je koncentrovana in vacuo a ostatak je prečišćen osnovnim preparativnim HPLC (Waters X-bridge 30x50 mm 5 um kolone, ACN/H2O sa 10 mM NH4OH, 75 mL/min, 1,5 mL injekcijom, gradijenta: 25-50% ACN za 4,5 min) da bi se dobilo naslovno jedinjenje (0,015 g, 54% prinos) u obliku belog praška.

Korak 2: N-(1-(2,6-Dihloro-4-cijanofenil)-2-metil-4-okso-1,4-dihidro-1,7-naftiridin-5-il)-1H-pirazol-4-sulfonamid;

[0340] Smeša 4-(5-amino-2-metil-4-okso-1,7-naftiridin-1(4H)-il)-3,5-dihlorobenzonitrila (0,015 g, 0,043 mmol) i 1H-pirazola-4-sulfonil hlorid (0,015 g, 0,087 mmol) u piridinu (0,5 ml) je mešan na 80 °C preko noći. Reakcija je koncentrisana in vacuo. Ostatak je prečišćen

1

baznom preparativnom HPLC (Waters X-bridge 30x50 mm 5um kolona, ACN/H2O sa 10 mM NH4OH, 75 mL/min, 1,5 mL injekcija, gradijent: 25-50% ACN za 4,5 min) da bi se dobilo naslovno jedinjenje (4,8 mg) kao prljavo beli prašak.

[0341] 70: HRMS: kalk.475,0147 [M+H]<+>, pronađeno 475,0142;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 13.01 (s, 1H), 8.78 (s, 1H), 8.05 (s, 2H), 7.94 (s, 2H), 7.58 (s, 1H), 6.40 (s, 1H), 2.05 (s, 3H).

Primer 71: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-5-(1H-1,2,4-triazol-1-il)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0342]

[0343] Smeša intermedijera 1 (20 mg, 0,053 mmol) i natrijuma 1,2,4-triazol-1-ide (7,30 mg, 0,080 mmol) i THF (1 ml) je zagrejan na 70 °C tokom 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana. Ostatak sirovine je prečišćen osnovnim preparatornim HPLC(Waters X-bridge 30x50 mm 5 um kolona, ACN/H2O sa 10 mM NH4OH, 75 mL/min, 1,5 mL injekcija, gradijenta: 25-50% ACN za 4,5 min) da bi se dobilo naslovno jedinjenje kao beli prah (17 mg).

[0344] 71: HRMS: kalk.406,0029 [M+H]<+>, pronađeno 406,0036;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 8.54 (s, 1H), 8.49 (s, 1H), 8.16 (s, 1H), 7.53 (d, J = 2.4 Hz, 3H), 6.43 (s, 1H), 1.99 (s, 3H).

Jedinjenja u nastavku su pripremljena kao što je opisano u Šemi C

Primer 72: 3,5-dihloro-4-(2-metiul-4-okso-5-(1H-pirazol-3-il)-1,7-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril;

1 4

[0346] Smeša 4-(5-bromo-2-metil-4-okso-1,7-naftiridin-1(4H)-il)-3,5-dihlorobenzonitril (intermedijer13, 0,040 g, 0,098 mmol), (1H-pirazol-3-il)boronska kiselina (0,044 g, 0,391 mmol), Pd(PPh3)4(0,011 g, 9,78 umol) i Cs2CO3(0,096 g, 0,293 mmol) u dioksan (2 mL) pomešano je u mikrotalasnoj na 140 °C tokom 10 h. Dobijena je čvrsta materija. Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (0-5% MeOH/DCM) da bi se dobio sirovi proizvod koji se dalje prečišćava reverzno faznim HPLC (X-bridge 30x50 mm 5 um kolona, ACN/H2O sa 5 mM NH4OH, 75 mL/min, 1,5 mL injekcijom, gradijenta: 15-40% ACN za 3,5 min) da bi se dobio beli prašak kao naslovno jedinjenje (10 mg, 25% prinos).

[0347] 72: HRMS: kalk.396,0419 [M+H]<+>, pronađeno 396,0422;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 12.77 (bs, 1H), 8.60 (s, 2 H), 8.47 (s, 1 H), 8.25 (s, 1 H), 7.65 (bs., 1 H), 6.45 (d, J=2.02 Hz, 1 H), 6.40 (s, 1 H), 2.01 (s, 3 H).

[0348] Sledeće jedinjenje je pripremljeno korišćenjem analognih metoda kao gorenavedeno jedinjenje.

Primer 73: 3,5-Dihloro-4-(2-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-1,7-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril;

[0349]

1

[0350] 73: HRMS: kalk.410,0575 [M+H]<+>, pronađeno 410,0564;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 8.59 (s, 2H), 8.41 (s, 1H), 8.10 (s, 1H), 7.99 (s, 1H), 7.65 (s, 1H), 6.38 (s, 1H), 3.89 (s, 3H), 2.00 (s, 3H).

Primer 74: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-(hidroksimetil)-5-(3-hidroksipropil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0351]

Korak 1: 5-(2-(1,3-Dioksan-2-il)etil)-2-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-1,6 -naftiridin-4(1H)-on

[0352]

[0353] U rastvoru 2-(((terc-Butilmetilsilil)oksi)metil)-5,8-dihloro-1-(2,6-dihlorofenil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on (intermedijer 7, 0,2 g, 0,397 mmol) u THF (4 mL) je dodato (2-(1,3-

1

dioksan-2-il)etil)magnezijum bromid (0,5 M u THF, 1,03 mL, 0,516 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h, a zatim je dodata još jedna serija (2-(1,3-dioksan-2-il)etil)magnezijum bromida (0,5 M u THF, 1,0 mL, 0,50 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperatura tokom još 1 h. Voda je zatim dodata u deaktiviranu reakcionu smešu. THF je uklonjen pod sniženim pritiskom, a ostatak je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (10-40% EtOAc/heptan) da bi se dobilo naslovno jedinjenje (0,083 g, 36% prinos). ESI-MS m/z: 585,2 [M+H]<+>(Rt = 1,84 min, LC-postupak 3)

Korak 2: 3-(8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-(hidroksimetil)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-5-il)propanal

[0354]

[0355] Smeša 5-(2-(1,3-dioksan-2-il)etil)-2-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-1,6-naftiridin-4(1H)-ona (0,044 g, 0075 mmol) i aq. HCl (1 N, 0,678 mL, 0,678 mmol) u THF (1 mL) je mešana na 60 °C tokom 3 h. Reakciona smeša je zatim deaktivirana pomoću aq. sat. NaHCO3dok više nije bilo mehurića (CO2) se generisao. Ova reakciona smeša je direktno korišćena u sledećem koraku. LC-MS indicira da je naslovno jedinjenje jedini proizvod u ovom koraku. ESI-MS m/z: 412,8 [M+H]<+>(Rt = 1,12 min, LC-postupak 3)

Korak 3: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-(hidroksimetil)-5-(3-hidroksipropil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0356]

1

[0357] U reakcionu smešu iz koraka 2 dodat je EtOH (1 mL) i zatim NaBH4(0,023 g, 0,60 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 min. Čvrsta supstanca je filtrirana. THF je uklonjen pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen pomoću HPLC reverzne faze (Waters X-bridge 30k50 mm 5um kolona, ACN/H2O sa 10 mM NH4OH,, 75 mL/min, 1,5 mL injekcija, gradijent: 35-60% ACN za 4,5 min) da bi se dobila bela čvrsta supstanca kao naslovno jedinjenje (0,025 g, 77% ukupan prinos za korake 2 i 3).

[0358] 74: HRMS: kalk.413,0227 [M+H]<+>, pronađeno 413,0213;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 8.53 (s, 1H), 7.79 - 7.66 (m, 3H), 6.63 (s, 1H), 5.88 (s, 1H), 4.44 (t, J = 4.9 Hz, 1H), 3.85 - 3.78 (m, 2H), 3.54-3.46 (m, 2H), 3.46 - 3.37 (m, 2H), 1.83 (dq, J = 9.7, 6.7 Hz, 2H)

Primer 75: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3,4-dihidroksibutil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0359]

Korak 1: 5-(But-3-en-1-il)-2-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-1,6-naftiridin-4( 1H)-on

[0360]

1

[0361] U rastvor 2-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-5,8-dihloro-1-(2,6-dihlorofenil)-1,6-naftiridin-4(1H)-oneina (0,3 g, 0,595 mmol) THF (6 mL) je dodat but-3-en-1-ilmagnezijum bromid (0,5 M u THF, 1,78 ml, 0,892 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi tokom 3 sata. Reakciona smeša je deaktivirana sa par kapi vode i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (0-50% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo naslovno jedinjenje (0,151 g, 48% prinos). ESI-MS m/z: 525,1 [M+H]<+>(Rt = 1,99 min, LC-postupak 1),<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 8.38 (s, 1H), 7.47 (s, 3H), 6.68 (t, J = 1.1 Hz, 1H), 6.04 - 5.87 (m, 1H), 5.14 - 4.87 (m, 2H), 4.00 (d, J = 1.2 Hz, 2H), 3.54 (dd, J = 8.5, 7.0 Hz, 2H), 2.54 - 2.40 (m, 2H), 0.86 (s, 9H), 0.0 (s, 6H).

Korak 2: 2-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3,4-dihidroksibutil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0362]

[0363] Osmijum tetroksid (2,5 wt % rastvora u terc-butanolu, 0,133 ml, 10,59 mmol) je dodat u rastvor 5-(but-3-en-1-il)-2-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil) -8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on (0,111 g, 0,212 mmol) i N-metilmorfolin N-oksid (0,027 g, 0,233 mmol) u smeša terc-butanol/voda (2 ml/2 ml). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 4 sati. Ovaj proizvod bio je razdvojen između EtOAc i zasićenog vodenog rastvora soli i kombinovano sa organskim ekstraktom osušen iznad anhidrovanog Na2SO4,

1

filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (0-100% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo naslovno jedinjenje (0,077 g, 65% prinos). ESI-MS m/z: 558,9 [M+H]<+>(Rt = 1,55 min, LC-postupak 1),<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 8.40 (s, 1H), 7.52 - 7.45 (m, 3H), 6.74 (t, J = 1.1 Hz, 1H), 4.04 -3.95 (m, 2H), 3.68 - 3.43 (m, 5H), 1.97 - 1.75 (m, 2H), 0.85 (s, 9H), 0.0 (s, 6H).

Korak 3: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3,4-dihidroksibutil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0364] 2-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3,4-dihidroksibutil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on (0,077 g, 0,138 mmol) u THF (2 ml) dodat je 1 M rastvor TBAF u THF (0,207 ml, 0,207 mmol) na 0 °C. Reakcija je mešana na 0°C tokom1 sata. Deaktivirana je vodom i razblažena u EtOAc. Vodeni sloj je ekstrahovan pomoću EtOAc. Kombinovani organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom soli, osušen iznad Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (0-5% MeOH u DCM) da bi se dobilo naslovno jedinjenje (0,031 g, 46% prinos).

[0365] 75: ESI-MS m/z: 443,2 [M+H]<+>(Rt = 0,75, LC-postupak 1),<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 8.47 (s, 1H), 7.55 (d, J = 1.9 Hz, 3H), 6.87 (t, J = 1.1 Hz, 1H), 4.11 (s, 2H), 3.78 - 3.45 (m, 5H), 2.08 - 1.84 (m, 2H).

Hiralno odvajanje gornjeg racemata

Primeri 76 i 77: Jedan od primera 76 i 77 je (R)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3,4-dihidroksibutil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H )-jedan a drugi je (S)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3,4-dihidroksibutvl)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H )-on

[0366] 218 mg 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3,4-dihidroksibutil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-ona (primer 75) je bilo rastvoren u 20 ml metanola i dostavljen u višestrukim injekcijama od po 1,6 ml u hiralni preparativni SFC (ChiralPak AD kolona, 250 x 330 mm ID, 5 µm, brzina protoka od 50 ml/min na 38°C) korišćenjem 40% etanola u ugljen-dioksidu sa 0,1% aq. amonijak kao mobilna faza. Posle hiralne separacije, frakcije su osušene rotacionim

14

isparavanjem na temperaturi kupatila od 40°C da bi se dobio primer 76 kao prvi pik eluiranja (82 mg, 100% ee) i primer 77 kao drugi pik za eluiranje (40 mg, 98,8 % ee) kao bele čvrste materije. Vremena zadržavanja su dobijena na koloni ChiralPak IA, 4,6 x 100 mm, 5 µm koloni Gradijent od 5-55% 1:1 MeOH/2-propanola u ugljen-dioksidu sa 10 mM NH4OH kao mobilnom fazom je primenjen tokom 5,5 min, a zatim je držan 0,1 min (5,0 ml/min kao protok rastvarača) na temperaturi rerne od 38°C. (Primer 76: Rt = 3,63 min; Primer 77: Rt = 4,24 min

Primer 78: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0367]

Korak 1: 5-alil-2-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0368]

[0369] U rastvor intermedijera 7 (0,65 g, 1,289 mmol) u toluenu (10 ml) dodat je alitrinbutiltin (0,799 ml, 2,58 mmol) i PdCl2(dppf)*CH2Cl2adukta (0,105 g , 0,129 mmol) na sobnoj temperaturi u azotnoj atmosferi. Dobijeni rastvor je pročišćen azotom i zagrevan na 80°C jedan sat. Prečišćavanjem kolonskom hromatografijom (punjenje u čvrstom stanju, 0-30% etil acetata u heptanu) dobija se 5-alil-2-(((tertbutildimetilsilil)oksi)metil)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-1, 6-naftiridin-4(1H)-on (0,6 g 1,18 mmol) kao bledo žuto ulje. ESI-MS m/z: 511,0 [M+H]+

Korak 2: 2-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0370]

[0371] U rastvor 5-Allyl-2-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-1,6-daftiridi,-4(1H)-ona (0,6 g, 1.,77 mmol) iu 1,4-dioksan (8 ml) i voda (1,6 ml) tretirana osmijum tetroksidom (2,991 g, 0,235 mmol) i NMO (0,414 g, 3,53 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 2 sati. Dodat je rastvor zasićenog natrijum metabisulfita i smeša je mešana još 30 minuta. Dodata je voda i smeša je ekstrahovana etil acetatom.

Kombinovani organski ekstrakti su osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani in vacuo. Prečišćavanjem kolonskom hromatografijom (0-100% etil acetat u heptanu) dobijeno je 2-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3- dihidroksipropil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on (0,5 g, 0,92 mmol) u obliku čvrste bele pene. ESI-MS m/z: 544,8 [M+H]<+>

Korak 3: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0372]

[0373] U rastvor jedinjenja iznad (0,5 g, 0,919 mmol) u sirćetnoj kiselini (5 ml) dodata je voda (5 ml) na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakcija je koncentrovana, neutralizovana konc. NH3, i prečišćen baznom preparativnom RP-HPLC (Waters X-bridge 30k50 mm 5um kolona, ACN/H2O sa 10 mM NH4OH, 75 mL/min, 1,5 mL injekcija, gradijent: 25-50% ACN za 4,5 min) da bi se dobilo naslovno jedinjenje (0,3 g, 0,66 mmol) u obliku belog praška.

[0374] 78: HRMS: kalk.429,0176 [M+H]<+>, pronađeno 429,0169,<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 8.45 (s, 1H), 7.49 (s, 3H), 6.94 (s, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.26 (s, 1H), 4.05 (s, 2H), 3.66 (qd, J = 15.8, 14.3, 6.0 Hz, 5H), 2.91 (s, 1H).

Hiralno odvajanje gornjeg racemata

Primeri 79 i 80: Jedan od primera 79 i 80 je (R)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-jedan, a drugi je (S)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-jedan.

[0375] Racemat 78 je u višestrukim injekcijama od po 1,6 ml dostavljen u hiralnu preparativnu SFC (kolona celuloze-2, 250 k 330 mm I.D., 5 µm, brzina protoka od 50 ml/min na 38°C) korišćenjem 40% etanola u ugljen-dioksidu sa 0,1% ak. amonijak kao mobilna faza. Nakon hiralnog odvajanja, frakcije su osušene rotacionim isparavanjem na temperaturi kupatila od 40°C da bi se dobio primer 79 kao prvi eluirajući pik (>98% ee) i primer 80 kao drugi pik za eluiranje (>98% ee) kao bele čvrste materije. Vremena zadržavanja su dobijena na koloni Celulose-2, 4,6x 150 mm, 5 µm koloni. Primenjena je mobilna faza od 40% MeOH (sa 0,05% DEA) u ugljen-dioksidu (2,4 ml/min kao protok rastvarača) na temperaturi rerne od 35°C (Primer 79: Rt = 6,93 min ; Primer 80: Rt = 7,68 min

14

[0376] 79: HRMS: kalk.429,0176 [M+H]<+>, pronađeno 429,0171; 1H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 8.46 (s, 1H), 7.49 (d, J = 4.8 Hz, 3H), 6.94 (s, 1H), 4.15 (m, 4H), 3.84 - 3.56 (m, 6H).

[0377] 80: HRMS: kalk.429,0176 [M+H]<+>, pronađeno 429,0169;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 8.45 (s, 1H), 7.49 (d, J = 4.6 Hz, 3H), 6.94 (s, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.26 (s, 1H), 4.05 (s, 2H), 3.66 (qd, J = 15.8, 14.3, 6.0 Hz, 5H), 2.91 (s, 1H).

[0378] Sledeće jedinjenje bilo je pripremljeno pomoću analogne metode jedinjenja iznad od intermedijera1.

Primer 81: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropil)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0379]

[0380] 81: HRMS: kalk.413,0227 [M+H]<+>, pronađeno 413,0230;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 8.45 (s, 1H), 7.49 (s, 3H), 4.98 - 4.81 (m, 1H), 4.27 (s, 1H), 3.82 -3.53 (m, 4H), 2.96 (s, 1H), 1.98 (s, 3H).

Primer 82: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(1,2-dihidroksietil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0381]

Korak 1: 2-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-vinil-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0382]

[0383] U rastvor intermedijera 7 (0,47 g, 0,932 mmol) u acetonitrilu (5 ml) i vodi (1 ml) dodat je vinilboronski anhidrid Piridin kompleks (0,317 g, 1,864 mmol), Na2CO3(0,198 g, 1,864 mmol) i PdCl2(dppf)*CH2Cl2adukta (0,076 g, 0,093 mmol) na sobnoj temperaturi u azotnoj atmosferi. Dobijena reakciona smeša je pročišćena azotom i zagrevana na 80°C u zaptivnoj cevi jedan sat. Prečišćavanjem kolonskom hromatografijom (punjenje u čvrstom stanju, 0-40% etil acetata u heptanu) dobija se 2-(((tertbutildimetilsilil)oksi)metil)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-vinil-1, 6-naftiridin-4(1H)-on (0,4 g, 0,81 mmol) kao bledo žuto ulje. ESI-MS m/z: 497.0.0 [M+H]<+>)

[0384] Korak 2 i 3 su urađeni na isti način kao što je opisano za prethodni primer da bi se dobio 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(1,2-dihidroksietil)-2-(hidroksimetil)-1, 6-naftiridin-4(1H)-on kao bela čvrsta supstanca.

[0385] 82: HRMS: kalk.415,0019 [M+H]<+>, pronađeno 415,0016;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 8.50 (s, 1H), 7.50 (s, 3H), 6.93 (s, 1H), 5.80 (d, J = 4.3 Hz, 1H), 5.30 (d, J = 6.0 Hz, 1H), 4.17 - 3.82 (m, 5H), 3.40 (s, 1H), 2.97 (s, 1H).

14

Hiralno odvajanje racemata

Primeri 83 i 84: Jedan od primera 83 i 84 je (R)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(1,2-dihidroksietil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H )-on, a drugi je (S)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(1,2-dihidroksietil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H )-on

[0386] Racemat 82 je rastvoren u metanolu i dostavljen u višestrukim injekcijama od po 1,6 ml u hiralni preparativni SFC (kolona celuloze-2, 250 k 330 mm I.D., 5 µm, brzina protoka od 50 ml/min na 38°C) korišćenjem 40% etanola. u ugljen-dioksidu sa 0,1% amonijaka rastvorenog u vodi kao mobilna faza. Nakon hiralnog odvajanja, frakcije su osušene rotacionim isparavanjem na temperaturi kupatila od 40°C da bi se dobio primer 83 kao prvi eluirajući pik (>98% ee) i primer 84 kao drugi pik za eluiranje (>98% ee) kao bele čvrste materije. Vremena zadržavanja su dobijena na ChiralPak AI koloni, 4,6 x 150 mm, 3 µm koloni. Primenjena je mobilna faza od 50% 2-propanola (sa 0,05% DEA) u ugljen-dioksidu (2 ml/min kao protok rastvarača) na temperaturi rerne od 35°C (Primer 83: Rt = 3,13 min; Primer 84: Rt = 4,32 min

Primer 85: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(1,2-dihidroksietil)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0387]

Korak 1: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-5-vinil-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0388]

14

[0389] U rastvor intermedijera 1 (1 g, 2,67 mmol) u acetonitrilu (10 ml) dodat je vinilboronski anhidrid piridnog kompleksa (0,772 g, 3,21 mmol), 2,0 M aq.K3PO4(2,67 ml, 5,35 mmol). Reakcija je degazirana i stavljena pod azot pre nego što je dodat PdCl2(dppf).CH2Cl2adukt (0,218 g, 0,267 mmol). Smeša je ponovo pročišćena azotom, zagrevana na refluksu na 80°C u uljanom kupatilu 1,5 sata. Smeša je ohlađena do rt, rastvarač je uklonjen. Ostatak je stavljen u EtOAC. Organska faza je i isprana zasićenim vodenim rastvorom soli, osušenna iznad MgSO4, filtrirana i koncentrovana in vacuo. Sirovi ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom uz elutiranje pomoću 0-50% EtOAC/heptan da bi se dobilo 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-5-vinil-1,6-naftiridin-4(1H)-on (0,85 g,

8.32 mmol) kao žuta čvrsta materija.

Korak 2: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(1,2-dihidroksietil)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0390] Rastvor proizvoda iz koraka 1 (0,8 g, 2,188 mmol) u acetonu (10 mL) i vodi (2 mL) je tretiran sa NMO (0,769 g, 6,56 mmol) i osmijum tetroksidom (0,278 g, 0,044 mmol) na srt. Reakcija je mešana pod azotom na sobnoj temperaturi 16h da bi se dobila dva proizvoda. Posle ovog vremena, dodat je rastvor zasićenog Na2S2O3i mešanje je nastavljeno 30 minuta. Dodata je voda i smeša je ekstrahovana etil acetatom (2x). Kombinovani organski ekstrakti su isprani zasićenim vodenim rastvorom soli, osušeni (Na2SO4), filtrirani i koncentrovani in vacuo. Ostatak sirovine je prečišćen kolonskom hromatografijom uz elutiranje pomoću 0-100% EtOAC/heptan da bi se dobila dva proizvoda naslovnog jedinjenja (0,6 g, 1,43 mmol) i 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2-hidroksiacetil)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on (0,05 g, 0,13 mmol).

[0391] 85: HRMS: kalk.399,0070 [M+H]<+>, pronađeno 399,0089;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 8.50 (s, 1H), 7.50 (m, 3H), 6.60 - 6.40 (s, 1H), 5.82 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 4.14 - 3.92 (m, 2H), 2.01 - 1.91 (s, 3H).

14

Primer 86: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2-hidroksiacetil)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0392]

[0393] Ovo jedinjenje je formirano kao nusproizvod tokom sinteze primera 85 opisanog iznad.

[0394] 86: HRMS: kalk.396,9915 [M+H]<+>, pronađeno 396,9914;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 8.58 (s, 1H), 7.53 (s, 3H), 6.49 (s, 1H), 4.68 (s, 2H), 2.04 (s, 3H).

Primer 87: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,3-dihidroksipropoksi)metil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0395]

[0396] Priprema stanana potrebnog u koraku 1: tributil(((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)metil)stannan

14

[0397] U rastvor (2,2-dimetil-1,3-dioksan-4-il)metanol (0,207 g, 1,566 mmol) uTHF (2ml) i DMSO ( 2 ml) dodat je NaH (0,046 g, 1,149 mmol) na 0°C u atmosferi azota. Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 30 min i dodat je tributil(jodometil) stanan (0,45 g, 1,044 mmol). Dobijeni rastvor je mešan na rt preko noći. Smeša je koncentrovana, stavljena u heptan/EtOAC (7:1). Organska faza je i isprana zasićenim vodenim rastvorom soli, osušenna iznad MgSO4, filtrirana i koncentrovana in vacuo. Ostatak sirovine (bezbojno ulje) korišćeno je u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

[0398] Stille spojnica između gornjeg stanana i intermedijera 7 su posledični koraci skidanja zaštite izvršeni u analognom maniru ta primer 78 da bi se odredio naslov.

[0399] 87: HRMS: kalk.459,0281 [M+H]<+>, pronađeno 459,0277;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 8.48 (s, 1H), 7.60 - 7.40 (m, 3H), 6.93 (s, 1H), 5.37 - 5.18 (m, 2H), 4.80 (s, 1H), 4.42 (s, 1H), 4.04 (d, J = 5.5 Hz, 2H), 3.93 (s, 1H), 3.77 (ddd, J = 38.5, 9.8, 4.8 Hz, 4H), 3.54 (s, 1H).

Primer 88: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(((1,3-dihidroksipropan-2-il)oksi)metil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0400]

14

[0401] Ovo jedinjenje je pripremljeno analogno gornjem primeru koristeći 2,2-dimetil-1,3-dioksan-5-ol u pripremi potrebno stanana.

[0402] 88: HRMS: kalk.459,0281 M+H]<+>, pronađeno 459,0280;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 8.47 (s, 1H), 7.48 (d, J = 1.3 Hz, 3H), 6.92 (s, 1H), 5.42 (s, 2H), 4.04 (s, 2H), 3.81 - 3.57 (m, 5H).

Primer 89: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,4-dihidroksi-3-oksobutan-2-il)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0403]

Korak 1: 5-Acetil-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0404]

[0405] Smeša intermedijera 1 (0,5 g, 1,337 mmol), tributil(1-etoksivinil)tin (0,628 g, 1,738 mmol) i PdCl2(dppf).CH2Cl2adukta (0.109 g, 0.134 mmol) u toluenu (2 ml) je produvana azotom i zagrevano na 80 °C preko noći.. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je stavljen u EtOAc i filtriran kroz čep od silicijumskog gela. Rastvarač je uklonjen i sirovi etoksivinil intermedijer (500 mg) je zatim

1

rastvoren u rastvoru tetrahidrofurana (50 mL) i 1N HCl (20 mL). Posle mešanja smeše na sobnoj temperaturi tokom dva sata, tetrahidrofuran je uklonjen u vakuumu i bela čvrsta supstanca (željeni ketonski proizvod, 0,3 g) je sakupljena filtracijom. Preostala vodena faza je ekstrahovana etil acetatom. Organski slojevi su kombinovani, osušeni (MgS04 i koncentrovani. Prečišćavanje kolonskom hromatografijom (0-100% etil acetat u heptanu) dalo je dodatni ketonski proizvod (žuta čvrsta supstanca, 0,08 g). HRMS: kalk.380,0064 [M+H]<+>, pronađeno 380,9960;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 8.53 (s, 1H), 7.52 (d, J = 2.7 Hz, 3H), 6.46 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 2.64 (s, 3H)

Korak 2: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2-hidroksibut-3-en-2-il)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0406]

[0407] U ledeno hladan rastvor ketonskog intermedijera iz koraka 1 (0,2 g, 0,524 mmol) u THF (1 ml) dodat je 1M vinilmagnezijum bromid (0,681 ml, 0,681 mmol) u THF (3 ml) u kapima u atmosferi azota. Reakcija je mešana na 0°C tokom 5 sati, zatim ugašena sa zasićenim NH4Cl na 0°C i ekstrahovana sa EtOAC. Organska faza je isprana zasićenim vodenim rastvorom soli, osušena iznad MgSO4i koncentrovana. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na koloni eluiranjem sa 0-100% EtOAC/heptanom da bi se dobio željeni proizvod (0,048 g, 0,11 mmol) kao žuta čvrsta supstanca, ESI-MS m/z: 411,1 [M+H]<+>

Korak 3: 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,4-dihidroksi-3-oksobutan-2-il)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0408]

1 1

[0409] U rastvor proizvoda koraka 2 (50 mg, 0,122 mmol) u dioksanu (3 ml) a voda (0,2 ml) je dodata osmijum tetroksidu (7,66 µl, 0,024 mmol) i NMO (42,9 mg, 0,366 mmol) na rt. Dobijeni rastvor je mešan na rt preko noći. Reakcija je koncentrovana i uzeta u EtOAC.

Organska faza je isprana vodom, zasićenim vodenim rastvorom soli, osušena (iznad MgSO4), filtrirana i koncentrovana in vacuo. Ostatak sirovine prečišćen je osnovni preparativnim HPLC (Waters X-bridge 30x50 mm 5 um kolona, ACN/H2O sa10 mM NH4OH, 75 mL/min, 1,5 mL injekcija, gradijenta: 25-50% ACN za 4,5 min) da bi se dobio 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,4-dihidroksi-3-oksobutan-2-il)-2-metil-1,6 -naftiridin-4(1H)-on (4,6 mg, 9,37 umol)

[0410] 89: HRMS: kalk.441,0175 [M+H]<+>, pronađeno 441,0191;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d3) δ ppm = 8.08 (s, 1H), 7.56 - 7.41 (m, 3H), 6.42 (s, 1H), 5.13 (s, 1H), 4.76 (dd, J = 10.7, 4.1 Hz, 1H), 4.63 (dd, J = 10.7, 4.6 Hz, 1H), 4.42 (s, 1H), 2.49 (s, 3H), 1.94 (s, 3H).

Primeri u nastavku su pripremljeni kako je opisano u šemi D

Primer 90: 1-(4-(3-Amino-3-metilbut-1-in-1-il)-2,6-dihlorofenil)-8-hloro-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0411]

1 2

Korak 1: 1-(4-bromo-2,6-dihlorofenil)-8-hloro-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-2-metil-1,6-naftiridin -4(1H)-on

[0412]

[0413] Smeša 1-(4-bromo-2,6-dihlorofenil)-5,8-dihloro-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on (intermedijer 4, 0,2 g, 0,442 mmol), (2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metanol (0,875 g, 6,62 mmol), K2CO3(0,366 g, 2,65 mmol) i DMAP (11 mg, 0,088 mmol) u acetonitrilu (24 mL) je mešana na 75 °C tokom noći. Čvrsta materija je filtrirana. Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (20-50% EtOAc/heptan) da bi se dobilo naslovno jedinjenje (0,212 g, 88%).

[0414] ESI-MS m/z: 548,9 [M+H]<+>(Rt = 1,50 min, LC-postupak 3)

Korak 2: 1-(4-(3-Amino-3-metilbut-1-in-1-il)-2,6-dihlorofenil)-8-hloro-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan- 4-il)metoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0415]

1

[0416] U smešu 1-(4-bromo-2,6-dihlorofenil)-8-hloro-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-ona (46 mg, 0,084 mmol), 2-metilbut-3-in-2-amine (21 mg, 0,252 mmol), Pd(PPh3)4(19 mg, 0,017 mmol) i CuI (6,4 mg, 0,034 mmol) u DMF (prethodno produvan pomoću N2tokom 30 min.) dodat je TEA (42 mg, 0,419 mmol).

Reakciona smeša je mešana na 70 °C pod N2zaštitom tokom 1h. Isparljive supstance su uklonjene pod smanjenim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (1-5% MeOH/DCM) da bi se dobilo naslovno jedinjenje. ESI-MS m/z: 552,0 [M+H]<+>(Rt = 1,37 min, LC-postupak 3)

Korak 3: 1-(4-(3-Amino-3-metilbut-1-in-1-il)-2,6-dihlorofenil)-8-hloro-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0417]

[0418] Smeša 1-(4-(3-amino-3-metilbut-1-in-1-il)-2,6-dihlorofenil)-8-hloro-5-((2,2-dimetil-1,3) -dioksolan-4-il)metoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on (46 mg, 0,084 mmol) i ak. HCl

1 4

(1N, 1.0 mL, 1.0 mmol) u THF (2 mL) je mešan na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je zatim deaktivirana pomoću aq. NaOH (1 N, 1 mL, 1,0 mmol). THF je zatim uklonjen pod sniženim pritiskom, a ostatak je prečišćen pomoću HPLC reverzne faze (Waters X-bridge 30k50 mm 5 um kolona, ACN/H2O sa 10 mM NH4OH, 75 mL/min, 1,5 mL injekcija, gradijent: 25-50% ACN za 4,5 min) da bi se dobila bela čvrsta supstanca kao naslovno jedinjenje (26 mg, 58% prinos).

[0419] 90: HRMS: kalk.510,0749 [M+H]<+>, pronađeno 510,0752;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 8.25 (s, 1H), 7.75 (s, 2H), 6.47 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 4.87 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 4.76 (t, J = 6.0 Hz, 1H), 4.37 (dd, J = 10.7, 5.5 Hz, 1H), 4.28 (dd, J = 10.7, 5.8 Hz, 1H), 3.86 (q, J = 5.3 Hz, 1H), 3.64 - 3.49 (m, 2H), 1.90 (s, 3H), 1.40 (s, 6H)

Primer 91: 8-Hloro-1-(2,6-dihloro-4-(3-morfolinprop-1-in-1-il)fenil)-5-(2-hidroksietoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on;

[0420]

[0421] Ovo jedinjenje je pripremljeno analogno gornjem primeru koristeći nezaštićeni etan-1,2-diol u koraku 1 i izbegavajući nepotreban korak skidanja zaštite 91: HRMS: kalk.

522,0754 [M+H]<+>, pronađeno 522,0751;<1>H-NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 8.23 (s, 1H), 7.88 (s, 2H), 6.45 (d, J = 0.8 Hz, 1H), 4.76 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 4.41 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.75 (q, J = 5.5 Hz, 2H), 3.65 - 3.60 (m, 4H), 3.59 (s, 2H), 2.58 - 2.53 (m, 4H), 1.95 - 1.82 (m, 3H)

1

Primer 92: 8-Hloro-1-(2,6-dihloro-4-(3-(1,1-dioksidotiomorfolino)prop-1-in-1-il)fenil)-5-(2-hidroksietoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0422]

[0423] Ovo jedinjenje je pripremljeno analogno gornjem primeru koristeći nezaštićeni etan-1,2-diol u koraku 1 i izbegavajući nepotreban korak skidanja zaštite 92: HRMS: kalk.

570,0424 [M+H]<+>, pronađeno 570,0422;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 8.23 (s, 1H), 7.87 (s, 2H), 6.45 (d, J = 0.7 Hz, 1H), 4.76 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.41 (t, J = 5.5 Hz, 2H), 3.76 (d, J = 10.0 Hz, 4H), 3.23 - 3.13 (m, 4H), 3.05 (dd, J = 6.6, 3.5 Hz, 4H), 1.90 (s, 3H)

Primer 93: 8-Hloro-1-(2,6-dihloro-4-(3-(dimetilamino)prop-1-in-1-il)fenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0424]

1

[0425] Ovo jedinjenje je pripremljeno analogno gornjem primeru koristeći N,N-dimetilprop-2-in-1-amine u koraku 2 i izbegavajući nepotrebno skidanje zaštite u koraku 3.

[0426] 93: HRMS: kalk.550,1067 [M+H]<+>, pronađeno 550,1076;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm = 8.23 (s, 1H), 7.86 (s, 2H), 6.50 - 6.39 (m, 1H), 4.51 - 4.32 (m, 3H), 4.10 (td, J = 6.0, 3.2 Hz, 1H), 4.03 - 3.94 (m, 1H), 3.53 (s, 2H), 2.27 (s, 6H), 1.90 (s, 3H), 1.35 (s, 3H), 1.31 (s, 3H)

Priprema fosfatnih prolekova:

[0427] Primeri sa slobodnom hidroksi grupom mogu se konvertovati u fosfatne prolekove kao što je pokazano u primeru 3:

Predlek primera 3 (8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-2-il)metil dihidrogen fosfat

[0428]

Korak 1: 2-(((terc-Butildimetilsilil)oksi)metil)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi) -1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0429] Smeša 2-(((terc-butildimetilsilil)oksi)metil)-5,8-dihloro-1-(2,6-dihlorofenil)-1,6-naftiridin-4(1H)-ona (3,5 g, 6,94) mmol), (2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metanol (4,59 g, 34,7 mmol), K2CO3 (2,88 g, 20,82 mmol) i DMAP (0,848 g, 6,94 mmol) u ACN (40 mL) je zagrevan na 80 °C preko noći. Reakciona seša je filtrirana i isprana pomoću ACN. Filtrat je koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (10-50% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo naslovno jedinjenje (2,99 g, 72% prinos). ESI-MS m/z: 601,1 [M+H]<+>(Rt = 1,62 min, LC-postupak 1),<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 8.03

1

(s, 1H), 7.47 (s, 3H), 6.67 (t, J = 1.1 Hz, 1H), 4.60 - 4.40 (m, 3H), 4.22 - 3.92 (m, 4H), 1.40 (s, 3H), 1.36 (s, 3H), 0.85 (s, 9H), 0.0 (s, 6H).

Korak 2: 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on

[0430] U rastvor 2-(((tert-butildimetilsilil)oksi)metil)-8-hloto-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-1,6-naftiridin-4(1H)-ona (2,9 g, 4,83 mmol) u THF (20 ml) dodat je 1 M rešenje zs TBAF u THF (7,25 ml, 7,25 mmol) na 0 °C. Reakcija je bila mešanje na 0 °C tokom 1 sada. Deaktivirana je vodom i razblažena u EtOAc. Vodeni sloj je ekstrahovan pomoću EtOAc. Kombinovani organski sloj je ispran zasićenim vodenim rastvorom soli, osušen iznad, Na2SO4, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom.

Ostatak je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (10-100% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo naslovno jedinjenje (1,74 g, 74% prinos). ESI-MS m/z: 487 [M+H]<+>(Rt = 1,06 min, LC-postupak 1),<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 8.14 (s, 1H), 7.54 (d, J = 1.9 Hz, 3H), 6.99 (s, 1H), 4.66 - 4.46 (m, 3H), 4.28 - 4.17 (m, 1H), 4.15 - 3.96 (m, 3H), 1.47 (s, 3H), 1.41 (s, 3H).

[0431] Korak 3: Dibenzil ((8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-4-okso-1,4-dihidro- 1,6-naftiridin-2-il)metil) fosfat Hinigova baza (0,027 ml, 0,154 mmol) i tetrabenzil pirofosfat (0,078 g, 0,144 mmol) dodati u rastvor 8-hloro-1-(2,6-dihlor) -5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on (0,05 g, 0,103 mmol) u DCM (0,5 ml) na sobnoj temperaturi, a zatim MgCl2 (9,80 mg, 0,103 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći Smeša je filtrirana kroz 20:1 čep silicijum dioksid/MgS04 i isprana sa EtOAc/etrom. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom sa silicijumskim gelom (0-100% EtOAc u heptanu) da bi se dobilo naslovno jedinjenje (0,061 g, 79% prinos). ESI-MS m/z: 747,0 [M+H]<+>(Rt = 1.43 min, LC-postupak 1),<1>H NMR (400 MHz, DCM-d2) δ ppm = 8.10 (s, 1H), 7.52 - 7.28 (m, 13H), 6.61 - 6.48 (m, 1H), 5.03 (d, J = 8.6 Hz, 4H), 4.66 - 4.48 (m, 3H), 4.37 (dd, J = 6.7, 0.8 Hz, 2H), 4.22 (dd, J = 8.5, 6.1 Hz, 1H), 4.06 (dd, J = 8.4, 6.2 Hz, 1H), 1.49 (s, 3H), 1.43 (s, 3H).

1

Koraci 4 i 5: (8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-2-il)metil dihidrogen fosfat

[0432] U rastvor dibenzil ((8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksan-4-il)metoksi)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-2-il)metil) fosfata (40 mg, 0,054 mmol) i 1,4-cikloheksadina (0,228 g, 2,84 mmol) u MeOH (5 ml) u atmosferi azota dodato je 10% paladijuma na aktivnom uglju (količina) i smeša je promešana na sobnoj temperaturi u atmosferi azota tokom 4 sata. Zatim je filtrirana kroz filter (najlonski od 0,45 um), a filtrat je koncentrovan do suvoće pod sniženim pritiskom. Dietiletar je dodat čvrstoj materiji, smeša je promešana i organski sloj je dekantovan. Ostatak je osušen u vakuumu da bi se obezbedila smeša dva proizvoda. Ova smeša je rastvorena u 0,5 ml MeOH i TFA (0,044 ml, 0,566 mmol) je dodata na sobnoj temperaturi. Dobijeni rastvor je mešan 2 sata i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je liofizovan od ACN i vode da bi se obezbedio naslovni proizvod kao čvrsta vela materija (0,026 g, prinos 87%). Naslovno jedinjenje takođe je sadržalo nešto 3-((8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-4-okso-2-((fosfonooksi)metil)-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-5-il)oksi)-2-hidroksipropil 2,2,2-trifluoroacetata kako je uočeno LC-Mass metodom pod kiselim uslovima.

Korak 6: (8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-2-il)metil dihidrogen fosfat soli natrijuma

[0433] Smeša (0,026 g) iz prethodnog koraka rastvorena je u MeOH (1 ml). Rastvor NaHCO3(0,015 g, 0,183 mmol) u H2O (1 ml) dodat je u balon. Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 5 minuta i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je liofizovan od ACN i vode da bi se obezbedilo naslovno jedinjenje (0,26 g, prinos 99%). ESI-MS m/z: 524,9 [M+H]<+>(Rt = 0,66 min, LC-postupak 2)<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ ppm = 8.16 (s, 1H), 7.60 (s, 3H), 7.14 (t, J = 1.2 Hz, 1H), 4.61 - 4.47 (m, 2H), 4.35 (dd, J = 4.4, 1.2 Hz, 2H), 4.06 (p, J = 5.2 Hz, 1H), 3.81 - 3.66 (m, 2H).

1

Claims (1)

1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje prema formuli II ili formuli III:

   naznačeno time što: R<1>je C1-4alkil, -CH2CN, -CN, C1-4alkoksiC1-4alkil, halo-C1-4alkil, -CH=N-OH, -CH=N-O-C1-4alkil, -CH=N-O-(hidroksiC1-4alkil), hidroksi-C1-4alkil, -CH2OP(O)(OH)2ili C3-5cikloalkil; R<3>je -OR<a>; -NHR<b>; -C(O)NH2; -C(O)[hidroksiC1-4alkil]; heterociklil opciono supstituisan jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od OH i hidroksiC1- 4alkila; 5- ili 6-člani alkil opciono supstituisan jednim ili više C1-4alkila; ili R<3>je C1-4alkil supstituisan jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od -C(O)[hidroksiC1-4alkila] i -OR<c>; R<a>je -C1-6alkil supstituisan jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od -OR<c>, - SO2C1-4alkila, -NHS(O)2C1-4alkila, i heterociklila koji je dalje opciono supstituisan jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od C1-4alkila i hidroksiC1-4alkila; ili R<a>je H, -[CH2-CH2-O]n-H, -[CH2-CH2-O]m-CH3ili heteroaril opciono supstituisan jednim ili više C1-4alkilom; naznačeno time što n je 2-6 i m je 1-6; R<b>je -C1-6alkil supstituisan jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od -OR<c>, - C(O)NH-C1-4alkila, -C(O)NH-(hidroksiC1-4alkila), hidroksiC1-4alkila, 5- ili 6-članih heteroarila, heterociklila, -SO2C1-4alkila i -NHS(O)2C1-4alkila; ili R<b>je -S(O)2heteroaril; ili R<b>je 4- do 7-člani heterociklil opciono supstituisan jednom ili više hidroksi grupa; ili R<b>je H, -OR<c>; -[CH2-CH2-O]n-H, -[CH2-CH2-O]m-CH3ili heteroaril opciono supstituisan jednim ili više C1-4alkil; naznačeno time što n je 2-6 i m je 1-6; R<c>je H ili hidroksiC1-4alkil; R<2>je H, C1-4alkoksi, halo-C1-4alkoksi, halo, C1-4alkil, -S-C1-4alkil ili -NH-C1-4alkil; R<4>je H, halo, halo-C1-4alkil, C1-4alkil ili C3-5cikloalkil; R<5>je H, halo, CN, C1-4aloksi, hidroksi-C1-4alkoksi, C1-4aloksi-C1-4aloksi, -CH=NH-O-C1-4alkil ili -CH=NH-O(hidroksiC1-4alkil); ili R<5>je C2-6alkinil opciono supstituisan OH ili NR<g>R<h>naznačeno time što su R<g>ili R<h>nezavisno H ili C1-4alkil; ili se R<g>i R<h>formiraju zajedno sa azotom za koji su vezani 4- do 7-člani heterociklil koji opciono sadrži dodatni heteroatom izabran od O, S i N, naznačeno time što heteroatom može da bude u svojoj oksidisanoj formi; i naznačeno time što je navedeni heterociklil opciono supstituisan C1-4alkilom; i R<6>je halo, C1-4alkil ili CN; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. 1 1 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, naznačeno time što R<1>je CH3, ciklopropil, -CH2OH ili -CH=NH-OH; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. 3. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva 1 ili 2, naznačeno time što R<2>je H ili -NH-CH3; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. 4. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 3, naznačeno time što R<4>je H ili halo; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. 5. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 4, naznačeno time što R<5>je H, F, CN, C2-4alkinil supstituisan sa OH ili tiomorfolin; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. 6. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 5, naznačeno time što R<6>je Cl ili CN; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. 7. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 6, naznačeno time što R<3>je hidroksiC1-6alkil, hidroksiC1-6alkoksi,-O-(CH2CH2-O)nH, -O-(CH2CH2-O)mCH3, -NH-(CH2CH2O)nH, -NH-(CH2CH2-O)mCH3, azetidin supstituisan hidroksilom, pirolidin supstituisan jednim ili više supstituenata nezavisno izabranih od hidroksila i hidroksiC1-4alkila; ili piperazin supstituisan hidroksiC1-4alkilom; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. 1 2 8. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, formule III, naznačeno time što R<1>je CH3ili CH2OH, R<2>je H, R<3>je -OR<a>ili -NHR<b>, R<4>je Cl, R<5>je H ili F i R<6>je Cl; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. 9. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1 izabrano iz grupe koja se sastoji od: (S)-8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; (R)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksi-3-metilbutoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-(hidroksimetil)-5-((3-(hidroksimetil)oksetan-3-il)metoksi-1,6-naftiridin-4(1H)-on; N-(2-((8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-(hidroksimetil)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-5-il)oxy)etil)metansulfonamid; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(-2-(2-(2-(2-hidroksietoksi)etoksi)etoksi)etoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3-hidroksi-2-(hidroksimetil)propoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((1,3-dihidroksipropan-2-il)oksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 1 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-(hidroksimetil)-5-(oksetan-3-ilmetoksi)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-(hidroksimetil)-5-(2-(2-metoksietoksi)etoksi)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2-hidroksietoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2-(2-(2-(2-hidroksietoksi)etoksi)etoksi)etil)amino)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((14-hidroksi-3,6,9,12-tetraoksatetradecil)oksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 5-(2,5,8,11,14,17-heksaoksanonadekan-19-iloksi)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 3-hloro-2-(8-hloro-5-((2-(2-(2-(2-hidroksietoksi)etoksi)etoksi)etil)amino)-2-metil-4-okso-1,6-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril; 3-((8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-5-il)amino)-2-hidroksi-N-(2-hidroksietil)propanamid; 3,5-dihloro-4-(5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-metil-4-okso-1,7-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((17-hidroksi-3,6,9,12,15-pentaoksaheptadecil)oksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-hidroksipropoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 3-hloro-2-(8-hloro-5-(2-(2-(2-(2-hidroksietoksi)etoksi)etoksi)etoksi)-2-metil-4-okso-1,6-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril; 1 4 N-(2-((1-(2,6-dihloro-4-cijanofenil)-2-metil-4-okso-1,4-dihidro-1,7-naftiridin-5-il)amino)etil)metansulfonamid; 3-hloro-2-(8-hloro-5-(2-(2-(2-(2-hidroksietoksi)etoksi)etoksi)etoksi)-2-metil-4-okso-1,6-naftiridin-1(4H)-il)-5-fluorobenzonitril; 8-hloro-1-(2,6-dihloro-4-fluorofenil)-5-((17-hidroksi-3,6,9,12,15-pentaoksaheptadecil)oksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 3,5-dihloro-4-(8-hloro-5-(4-(2-hidroksietil)piperazin-1-il)-2-metil-4-okso-1,6-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-5-(2,3,4-trihidroksibutoksi)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 3,5-dihloro-4-(5-((2-hidroksietil)amino)-2-metil-4-okso-1,7-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3-hidroksi-2,2-bis(hidroksimetil)propoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 3,5-dihloro-4-(5-(3-hidroksiazetidin-1-i)-2-metil-4-okso-1,7-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2-(2-(2-(2-hidroksietoksi)etoksi)etoksi)etoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2R,4S)-4-hidroksi-2-(hidroksimetil)pirolidin-1-il)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihloro-4-fluorofenil)-5-(2-(2-(2-(2-hidroksietoksi)etoksi)etoksi)etoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((3R,4S)-3,4-dihidroksipirolidin-1-il)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 3-hloro-2-(8-hloro-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-metil-4-okso-1,6-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril; 1 5-((2-(1H-imidazol-4-il)etil)amino)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; N-(2-((8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-5-ol)oksi)etil)metansulfonamid; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2-(2-(2-(2-hidroksietoksi)etoksi)etoksi)etil)amino)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidropropoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; (S)-8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,3-dihidroksipropil)amino)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksi-3-metilbutoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3-hidroksi-2-(hidroksimetil)-2-metilpropoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2-hidroksi-2-metilpropoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 3,5-dihloro-4-(8-hloro-5-(((3R,4S)-4-hidroksitetrahidrofuran-3-il)amino)-2-metil-4-okso-1,6-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril; 3,5-dichloro-4-(8-chloro-5-((2-hidroksietoksi)amino)-2-metil-4-okso-1,6-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-5-((1-metil-1H-tetrazol-5-il)amino)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-5-((1-metil-1H-tetrazol-5-il)oksi)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 1 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-5-((2-metil-2H-tetrazol-5-il)amino)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2-hidroksietoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2-hidroksietoksi)amino)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-5-(oksetan-3-ilmetoksi)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-(hidroksimetil)-5-((2-(metilsulfonil)etil)amino)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-ciklopropil-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3-hidroksi-2-(hidroksimetil)propoksi)-2-(metoksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-diihidroksipropoksi)-2-(metoksimetol)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 3-hloro-2-(8-hloro-2-ciklopropil-5-(2,3-dihidroksipropil)-4-okso-1,6-naftiridin-1 (4H)-il)benzonitril; 4-(5-((2-(1H-imidazol-4-il)etil)amino)-2-metil-4-okso-1 ,7-naftiridin-1(4H)-il)-3,5-dihlorobenzonitril; 8-hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; (R)- 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksi-3-metilbutoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 1 (S)- 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksi-3-metilbutoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-Hloro-1-(2,6-dihloro-47-fluorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-Hloro-1-(2,6-dihloro-4-fluorofenil)-5-(2-hidroksietoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-(difluorometil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-Hloro-1-(2,6-dihidrofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-2-karbonitril; 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-hidroksi-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 1-(2,6-Dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-metil-7-(metilamino)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 1-(2,6-Dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-7-etil-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 1-(2-Hloro-6-etilfenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-7-etil-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 1-(2,6-Dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-7-metoksi-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 1-(2,6-Dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-8-etil-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; N-(1-(2,6-Dihloro-4-cijanofenil)-2-metil-4-okso-1,4-dihidro-1,7-naftiridin-5-il)-1H-pirazol-4-sulfonamid; 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-metil-5-(1H-1,2,4-triazol-1-il)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 1 3,5-dihloro-4-(2-metiul-4-okso-5-(1H-pirazol-3-il)-1,7-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril; 3,5-Dihloro-4-(2-metil-5-(1-metil-1H-pirazol-4-il)-4-okso-1,7-naftiridin-1(4H)-il)benzonitril; 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-2-(hidroksimetil)-5-(3-hidroksipropil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3,4-dihidroksibutil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; (R)-8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3,4-dihidroksibutil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; (S)- 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(3,4-dihidroksibutil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; (R)- 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; (S)-8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropil)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(1,2-dihidroksietil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; (R)- 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(1,2-dihidroksietil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 1 (S)- 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(1,2-dihidroksietil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(1,2-dihidroksietil)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2-hidroksiacetil)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-((2,3-dihidroksipropoksi)metil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(((1,3-dihidroksipropan-2-il)oksi)metil)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,4-dihidroksi-3-oksobutan-2-il)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 1-(4-(3-Amino-3-metilbut-1-in-1-il)-2,6-dihlorofenil)-8-hloro-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-Hloro-1-(2,6-dihloro-4-(3-morfolinprop-1-in-1-il)fenil)-5-(2-hidroksietoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-Hloro-1-(2,6-dihloro-4-(3-(1,1-dioksidotiomorfolino)prop-1-in-1-il)fenil)-5-(2-hidroksietoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; 8-Hloro-1-(2,6-dihloro-4-(3-(dimetilamino)prop-1-in-1-il)fenil)-5-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metoksi)-2-metil-1,6-naftiridin-4(1H)-on; i (8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-4-okso-1,4-dihidro-1,6-naftiridin-2-il)metil dihidrogen fosfat; ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. 1 10. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 9, naznačeno time što je jedinjenje (S)-8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so. 11. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 10, naznačeno time što je jedinjenje kristalni oblik hidrata (S)-8-Hloro-1-(2,6-dihlorofenil)-5-(2,3-dihidroksipropoksi)-2-(hidroksimetil)-1,6-naftiridin-4(1H)-on karakterisan time što šablon rendgenske difraktometrije praha (XRPD) sadrži jedan ili više pikova izabranih od 7,0 ± 0.2 °2θ, 14.1 ± 0,2 °2θ, 18,5 ± 0,2 °2θ, 24,7 ± 0,2 °2θ, 26,0 ± 0,2 °2θ i 26,9 ± 0,2 °2θ, kada se meri pomoću CuKα radijacije sa dužinom talasa od 1,5418 Å i na temperaturi od oko 22 °C. 12. Farmaceutska kompozicija koja sadrži terapeutski delotvornu količinu jedinjenja prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 11 ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i jedan ili više farmaceutski prihvatljivih nosača. 13. Kombinacija koja sadrži terapeutski delotvornu količinu jedinjenja prema bilo kom od patentnih zahteva 1 do 11 i jedan ili više terapeutski aktivnih koagenasa. 14. Kombinacija prema patentnom zahtevu 13, naznačena time što su koagensi izabrani od agenasa antiaritmije I klase, agenasa antiaritmije II klase, agenasa antiaritmije III klase, agenasa antiaritmije IV klase, agenasa antiaritmije V klase, kardijačkih glikozida, ostalih lekova koji utiču na atrijalnu refaktornost; modulatore hemostaza, antitrombotika; inhibitora trombina;inhibitora faktora VIIa; antikoagulanata, inhibitora faktora Xa, direktnih inhibitora trombina; antitrombocitni agensi, inhibitori ciklooksigenaze, inhibitori receptora adenozin difosfata (ADP), inhibitori fosfodiesteraze, glikoprotein IIB/IIA, inhibitori ponovnog preuzimanja adenozina; sredstva protiv dislipidemije, inhibitori HMG-CoA reduktaze, drugi agensi za snižavanje holesterola; PPARa agonisti; sekvestranti žučne kiseline; inhibitori apsorpcije holesterola; inhibitori proteina transfera holesteril estra (CETP); inhibitori ilealnog transportnog sistema žučne kiseline (IBAT inhibitori); smole koje vezuju žučnu kiselinu; nikotinska kiselina i njeni analozi; antioksidansi; omega-3 masne kiseline; antihipertenzivi, antagonisti adrenergičkih receptora, beta blokatori, alfa 1 1 blokatori, mešani alfa/beta blokatori; agonisti adrenergičkih receptora, alfa-2 agonisti; inhibitori angiotenzin konvertujućeg enzima (ACE), blokatori kalcijumskih kanala; antagonisti receptora angiotenzina II; antagonisti receptora aldosterona; adrenergički lekovi centralnog delovanja, centralni alfa agonisti; diuretički agensi; agensi protiv gojaznosti, inhibitori pankreasne lipaze, modulatori proteina mikrozomalnog transfera (MTP), inhibitori diacil glicerolaciltransferaze (DGAT), antagonisti kanabinoidnog (CBI) receptora; insulin i analozi insulina; sekretagozi insulina; agensi koji poboljšavaju delovanje inkretina, inhibitori dipeptidil peptidaze IV (DPP-4), agonisti peptida-I sličnih glukagonu (GLP-1); agensi za senzibilizaciju insulina, agonisti gama receptora aktiviranog proliferatorom peroksizoma (PPARi), agensi koji moduliraju balans glukoze u jetri, inhibitori fruktoze 1,6-bisfosfataze, inhibitori glikogen fosforilaze, inhibitori glikogen sintaze kinaze, glukokinazni inhibitori; sredstva dizajnirana da smanje/uspore apsorpciju glukoze iz creva, inhibitori alfa-glukozidaze; sredstva koja antagoniziraju delovanje ili smanjuju sekreciju glukagona, analoga amilina; agensi koji sprečavaju reapsorpciju glukoze u bubrezima i inhibitori natrijum-zavisnog transportera glukoze 2 (SGLT-2). 15. Jedinjenje prema bilo kom od patentnih zahteva od 1 do 11 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za primenu kao lek. 16. Jedinjenje prema bilo kom patentnom zahtevu od 1 do 11 ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za primenu pri lečenju ili prevenciji bolesti ili poremećaja koji reaguju na inhibiciju receptora G-protein-spregnutih unutrašnje-ispravljajućih kalijumskih kanala (GIRK), naznačeno time što su bolesti ili poremećaj izabrani od srčane aritmije, artijalne fibrilacije, hiperadlerosteronizma, hipertenzije i sindroma bolesnog sinusa. 17. Jedinjenje za primenu prema patentnom zahtevu 16, naznačeno time što je bolest ili poremećaj atrijalna fibrilacija. 1 2