RS64018B1 - Makrocikli kao modulatori transmembranskog regulatora provodnosti cistične fibroze, njihove farmaceutske kompozicije, njihova upotreba u lečenju cistične fibroze i proces njihove izrade - Google Patents

Makrocikli kao modulatori transmembranskog regulatora provodnosti cistične fibroze, njihove farmaceutske kompozicije, njihova upotreba u lečenju cistične fibroze i proces njihove izrade

Info

Publication number
RS64018B1
RS64018B1 RS20230079A RSP20230079A RS64018B1 RS 64018 B1 RS64018 B1 RS 64018B1 RS 20230079 A RS20230079 A RS 20230079A RS P20230079 A RSP20230079 A RS P20230079A RS 64018 B1 RS64018 B1 RS 64018B1
Authority
RS
Serbia
Prior art keywords
group
groups
c2alkyl
independently selected
compound
Prior art date
Application number
RS20230079A
Other languages
English (en)
Inventor
Jeremy J Clemens
Alexander Russell Abela
Corey Don Anderson
Brett B Busch
Weichao George Chen
Thomas Cleveland
Timothy Richard Coon
Bryan Frieman
Senait G Ghirmai
Peter Grootenhuis
Anton V Gulevich
Ruah Sara Sabina Hadida
Clara Kuang-Ju Hsia
Ping Kang
Haripada Khatuya
Jason Mccartney
Mark Thomas Miller
Prasuna Paraselli
Fabrice Pierre
Sara E Swift
Andreas Termin
Johnny Uy
Carl V Vogel
Jinglan Zhou
Original Assignee
Vertex Pharma
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=65529899&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=RS64018(B1) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Vertex Pharma filed Critical Vertex Pharma
Publication of RS64018B1 publication Critical patent/RS64018B1/sr

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/437—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a five-membered ring having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. indolizine, beta-carboline
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/4353—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems
    • A61K31/4375—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom ortho- or peri-condensed with heterocyclic ring systems the heterocyclic ring system containing a six-membered ring having nitrogen as a ring heteroatom, e.g. quinolizines, naphthyridines, berberine, vincamine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/439—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom the ring forming part of a bridged ring system, e.g. quinuclidine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/435—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom
    • A61K31/47—Quinolines; Isoquinolines
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D405/00—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom
    • C07D405/02—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings
    • C07D405/12—Heterocyclic compounds containing both one or more hetero rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, and one or more rings having nitrogen as the only ring hetero atom containing two hetero rings linked by a chain containing hetero atoms as chain links
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D513/18—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D513/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D513/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D515/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen, oxygen, and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D515/12—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen, oxygen, and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains three hetero rings
    • C07D515/18—Bridged systems
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D515/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen, oxygen, and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00
    • C07D515/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed system at least one hetero ring having nitrogen, oxygen, and sulfur atoms as the only ring hetero atoms, not provided for in groups C07D463/00, C07D477/00 or C07D499/00 - C07D507/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
  • Nitrogen And Oxygen Or Sulfur-Condensed Heterocyclic Ring Systems (AREA)
  • Heterocyclic Carbon Compounds Containing A Hetero Ring Having Nitrogen And Oxygen As The Only Ring Hetero Atoms (AREA)
  • Separation Using Semi-Permeable Membranes (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)

Description

Opis
[0001] Ova prijava je sa zahtevom za prioritet od privremene prijave Sjedinjenih Država 62/631,453, podnete 15. februara 2018.
[0002] Ovde je otkriven modulator regulatora transmembranske provodljivosti cistične fibroze (CFTR) i njegova upotreba u metodama lečenja cistične fibroze, farmaceutskim kompozicijama koje sadrže modulator i postupku za izradu modulatora.
[0003] Cistična fibroza (CF) je recesivna genetska bolest koja pogađa oko 70.000 dece i odraslih, širom sveta. Uprkos napretku u lečenju CF, ne postoji lek.
[0004] Kod pacijenata sa CF, mutacije u CFTR endogeno eksprimirane u respiratornom epitelu dovode do smanjene apikalne sekrecije anjona izazivajuć i neravnotežu u transportu jona i tečnosti. Nastalo smanjenje transporta anjona doprinosi poveć anom akumulaciji sluzi u plu ć ima i prate ć im mikrobnim infekcijama koje na kraju izazivaju smrt kod pacijenata sa CF. Pored respiratorne bolesti, pacijenti sa CF obično pate od gastrointestinalnih problema i insuficijencije pankreasa koji, ako se ne leče, dovode do smrti. Pored toga, već ina muškaraca sa cističnom fibrozom je neplodna, a plodnost je smanjena među ženama sa cističnom fibrozom.
[0005] Analiza sekvence CFTR gena je otkrila razne mutacije koje izazivaju bolest (Cutting, G. R. et al. (1990) Nature 346:366-369; Dean, M. et al. (1990) Cell 61:863:870 i Kerem, B-S i saradnici (1989) Science 245:1073-1080; Kerem, B-S i saradnici (1990) Proc. Natl. Acad. Sci. USA 87:8447-8451). Do danas je identifikovano više od 2000 mutacija u CF genu; a trenutno, baza podataka CFTR2 sadrži informacije o samo 322 od ovih identifikovanih mutacija i sa dovoljno dokaza da se 281 mutacija definišu kao uzrok bolesti. Najčešć a mutacija koja izaziva bolest je delecija fenilalanina na poziciji 508 aminokiselinske sekvence CFTR i obično se naziva mutacija F508del. Ova mutacija se javlja u približno 70% slučajeva cistične fibroze i povezana je sa teškom bolešć u.
[0006] Brisanje ostatka 508 u CFTR sprečava pravilno savijanje nastalog proteina. Ovo rezultira nemoguć noš ć u mutantnog proteina da izađe iz endoplazmatskog retikuluma (ER) i da se prometuje do plazma membrane. Kao rezultat toga, broj CFTR kanala za transport anjona prisutnih u membrani je daleko manji nego što je to primeć eno u ć elijama koje eksprimiraju CFTR divljeg tipa, tj. CFTR bez mutacija. Pored poremeć ene trgovine ljudima, mutacija dovodi do neispravnog gajtovanja kanala. Zajedno, smanjeni broj kanala u membrani i neispravna kapija dovode do smanjenog transporta anjona i tečnosti kroz epitel. (Quinton, P. M. (1990), FASEB J.4: 2709-2727). Kanali koji su defektni zbog F508del mutacije su i dalje funkcionalni, iako manje funkcionalni od CFTR kanala divljeg tipa. (Dalemans et al. (1991), Nature Lond. 354: 526-528; Pasyk i Foskett (1995), J. Cell. Biochem. 270: 12347-50). Pored F508del, druge mutacije koje izazivaju bolest u CFTR-u koje dovode do neispravnog prometa, sinteze i/ili gajtanja kanala mogu se regulisati naviše ili naniže da bi se promenila sekrecija anjona i modifikovala progresija i/ili težina bolesti.
[0007] CFTR je cAMP/ATP-posredovani anjonski kanal koji se eksprimuje u različitim tipovima ć elija, uključuju ć i ć elije apsorpcionog i sekretornog epitela, gde reguliše fluks anjona kroz membranu, kao i aktivnost drugih jonskih kanala i proteina . U epitelnim ć elijama, normalno funkcionisanje CFTR-a je kritično za održavanje transporta elektrolita u celom telu, uključuju ć i respiratorno i digestivno tkivo. CFTR se sastoji od približno 1480 aminokiselina koje kodiraju protein koji se sastoji od tandemskog ponavljanja transmembranskih domena, od kojih svaki sadrži šest transmembranskih spirala i domen za vezivanje nukleotida. Dva transmembranska domena su povezana velikim, polarnim, regulatornim (R)-domenom sa višestrukim mestima fosforilacije koja regulišu aktivnost kanala ić elijski promet.
[0008] Transport hlorida se odvija koordinisanom aktivnoš ć u ENaC i CFTR prisutnih na apikalnoj membrani i Na<+>-K<+>-ATPase pumpe i Cl-kanala eksprimiranih na bazolateralnoj površini ć elije. Sekundarni aktivni transport hlorida sa luminalne strane dovodi do akumulacije intracelularnog hlorida, koji onda može pasivno napustitić eliju preko Cl-kanala, što rezultira vektorskim transportom. Raspored Na<+>/2Cl-/K<+>ko-transporteru, Na<+>-K<+>-AT i K<+>kanala bazolateralne membrane na bazolateralnoj površini i CFTR na luminalnoj strani koordinišu lučenje hlorida preko CFTR na luminalnoj strani. Pošto se voda verovatno nikada sama po sebi ne transportuje aktivno, njen tok kroz epitel zavisi od malih transepitelijalnih osmotskih gradijenata koji se stvaraju velikim protokom natrijuma i hlorida.
[0009] US 2016/095858 A1 se odnosi na jedinjenja za lečenje bolesti posredovanih CFTR, kao što je cistična fibroza, kao i na farmaceutske kompozicije, metode lečenja i njihove komplete.
[0010] WO 2017/173274 A1 se odnosi na jedinjenja za lečenje bolesti posredovanih CFTR, kao što je cistična fibroza, kao i na farmaceutske kompozicije, metode lečenja i njihove komplete.
[0011] Shodno tome, postoji potreba za novim tretmanima bolesti posredovanih CFTR. Pronalazak karakteriše jedinjenje formule (III-A) ili (III-B):
ili
ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, kao što je definisano u zahtevima. Pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenja formula (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C) i (VID), njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterovani derivati bilo kog od prethodno navedenih.
[0012] Nisu deo pronalaska, ali su takođe ovde opisana jedinjenja formula (I), (II-A) i (II-B), farmaceutski njihove prihvatljive soli i deuterovani derivati bilo kog od prethodno navedenih.
[0013] U nekim realizacijama, Prsten D u Formuli (I) je piridin-2(1H)-on, pirolidin-2-on ili imidazolidin-2-on.
[0014] Ovaj pronalazak takođe karakteriše farmaceutske kompozicije koje sadrže najmanje jedno od novih jedinjenja formule (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C) ili (VI-D) kako je definisano u zahtevima i/ili najmanje jedna njihova farmaceutski prihvatljiva so, koje kompozicije može dalje da sadrži najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak i/ili najmanje jedan nosač. Ovaj pronalazak takođe sadrži jedinjenja formule (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (V-B), (VI- A), (VI-B), (VI-C) ili (VI-D) kao što je definisano u zahtevima za upotrebu u postupcima lečenja cistične fibroze posredovane CFTR-om koji se sastoji od primene najmanje jednog od novih jedinjenja formule (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C), ili (VI-D) i/ili najmanje jedna njihova farmaceutski prihvatljiva so, opciono kao deo farmaceutske kompozicije koja sadrži najmanje jednu dodatnu komponentu, subjektu kome je to potrebno.
[0015] Ovaj pronalazak takođe karakteriše jedinjenja formule (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (VB), (VI-A), (VI-B), (VI-C) ili (VI-D) kao što je definisano u zahtevima za upotrebu u postupcima lečenja cistične fibroze posredovane CFTR bolesti, koje se sastoje od primene najmanje jednog od novih jedinjenja formule (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (V-B), (VI-A), (VIB), (VI-C) ili (VI-D) i/ili najmanje jedna njihova farmaceutski prihvatljiva so, (R)1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il )-N-(1(2,3-dihidroksipropil)-6-fluoro-2-(1-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-1H-indol-5-il)ciklopropankarboksamid (jedinjenje II), i N -[2,4-bis(1,1-dimetiletil)-5-hidroksifenil]-1,4-dihidro-4oksohinolin-3-karboksamid (Jedinjenje III), opciono kao deo najmanje jedne farmaceutske kompozicije koja sadrži najmanje jednu dodatnu komponentu, pacijentu kome je to potrebno.
[0016] Reference na metode lečenja u narednim paragrafima ovog opisa treba da se tumače kao reference na jedinjenja, farmaceutske kompozicije i lekove ovog pronalaska za upotrebu u postupku lečenja ljudskog (ili životinjskog) tela pomoć u terapija (ili za dijagnozu).
Kratak opis slika
[0017]
Slika 1 prikazuje neograničavajuć e primere struktura novih jedinjenja koja su ovde otkrivena.
Slika 2 je reprezentativna lista CFTR mutacija.
Definicije
[0018] Kako se ovde koristi, termin "alkil grupa" se odnosi na zasić eni alifatični ugljovodonik (koji sadrži, na primer, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11, 12, 13, 14, 15, 16, 17, 18, 19 ili 20 atoma ugljenika). Alkil grupe mogu biti supstituisane ili nesupstituisane i razgranate ili nerazgranate.
[0019] Kako se ovde koristi, izraz "haloalkil grupa" se odnosi na alkil grupu supstituisanu sa jednim ili više atoma halogena.
[0020] Kako se ovde koristi, termin "cikloalkil grupa" se odnosi na ciklični nearomatični ugljovodonik koji sadrži 3 do 12 ugljenika u prstenu (kao što je, na primer, 3 do 10 ugljenika). Cikloalkil grupe obuhvataju monociklične, biciklične, triciklične, policiklične, premoštene, fuzionisane i spiro prstenove, uključujuć i mono spiro i dispiro prstenove. Neograničavaju ć i primeri cikloalkil grupa su ciklopropil, ciklobutil, ciklopentil, cikloheksil, adamantil, norbornil, spiro[2.2]pentan i dispiro[2.0.2.1]heptan. Cikloalkil grupe mogu biti supstituisaneili nesupstituisane.
[0021] Termin "alkoksi grupa" kako se ovde koristi odnosi se na alkil ili cikloalkil grupu kovalentno vezanu za atom kiseonika. Alkoksi grupe mogu biti supstituisane ili nesupstituisane i razgranate ili nerazgranate.
[0022] Kako se ovde koristi, termin "haloalkoksil grupa" se odnosi na alkoksi grupu supstituisanu sa jednim ili više atoma halogena.
[0023] Termin "heteroaril prsten" kako se ovde koristi odnosi se na aromatični prsten koji sadrži najmanje jedan atom u prstenu koji je heteroatom, kao što su O, N ili S.
[0024] Kako se ovde koristi, termin "heterociklil prsten" se odnosi na nearomatični ugljovodonik koji sadrži 3 do 12 atoma u prstenu (kao što je, na primer, 3-10 atoma) koji sadrži najmanje jedan atom u prstenu koji je heteroatom, kao što su O, N ili S. "Heterociklil" prstenovi obuhvataju monociklične, biciklične, triciklične, policiklične, premoštene, spojene i spiro prstenove, uključujuć i mono spiro i dispiro
prstenovi.
[0025] Primeri zaštitnih grupa za azot uključuju, na primer, t-butil karbamat (Boc), benzil (Bn), para-metoksibenzil (PMB), tetrahidropiranil (THP), 9-fluorenilmetil karbamat (Fmoc), benzil karbamat (Cbz), metil karbamat, etil karbamat, 2,2,2-trihloretil karbamat (Troc), 2-trimetilsililetil karbamat (Teoc), alil karbamat (Aloc ili Alloc), formamid, acetamid, benzamid, alilamin, trifluoroacetamid trifluoroacetamid, trifluoroacetamid, metilamin, i p-toluensulfonamid. Sveobuhvatna lista zaštitnih grupa azota može se nać i u Vuts, P. G. M. "Greene’s Protective Groups in Organic Sinthesis: Fifth Edition", 2014, John Wiley and Sons.
[0026] "Supstituisan", bez obzira da li mu prethodi termin "opciono" ili ne, označava da je najmanje jedan vodonik iz "supstituisane" grupe zamenjen supstituentom. Osim ako nije drugačije naznačeno, „opciono supstituisana“ grupa može imati odgovarajuć i supstituent na svakoj zamenljivoj poziciji grupe, a kada više od jednog položaja u bilo kojoj datoj strukturi može biti supstituisano sa više od jednog supstituenta izabranog iz određene grupe, supstituent može biti ili isti ili različiti na svakoj poziciji.
[0027] Kako se ovde koristi, "deuterovani derivat(i)" označava istu hemijsku strukturu, ali sa jednim ili više atoma vodonika zamenjenim atomom deuterijuma.
[0028] Kako se ovde koristi, "CFTR" označava transmembranski regulator provodljivosti cistične fibroze.
[0029] Kako se ovde koristi, "mutacije" se mogu odnositi na mutacije u CFTR genu ili CFTR proteinu. "Mutacija CFTR gena" se odnosi na mutaciju CFTR gena, a "Mutacija CFTR proteina" se odnosi na mutaciju u CFTR proteinu. Genetski defekt ili mutacija, ili promena nukleotida u genu uopšteno dovodi do mutacije CFTR proteina prevedenog sa tog gena, ili promene okvira.
[0030] Termin "F508del" se odnosi na mutantni CFTR protein kome nedostaje aminokiselina fenilalanin na poziciji 508.
[0031] Kako se ovde koristi, pacijent koji je "homozigot" za određenu mutaciju gena ima istu mutaciju na svakom alelu.
[0032] Kako se ovde koristi, pacijent koji je "heterozigotan" za određenu mutaciju gena ima ovu mutaciju na jednom alelu i drugačiju mutaciju na drugom alelu.
[0033] Kako se ovde koristi, termin "modulator" se odnosi na jedinjenje koje poveć ava aktivnost biološkog jedinjenja ili molekula kao što je protein. Na primer, CFTR modulator je jedinjenje koje poveć ava aktivnost CFTR. Pove ć anje aktivnosti koje je rezultat CFTR modulatora uključuje, ali nije ograničeno na jedinjenja koja koriguju, potenciraju, stabilizuju i/ili pojačavaju CFTR.
[0034] Kako se ovde koristi, termin "CFTR korektor" se odnosi na jedinjenje koje olakšava obradu i promet CFTR-a radi poveć anja količine CFTR-a na površini ć elije. Jedinjenja formula (I), (II-A), (II-B), (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), ( V-A), (V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C) i (VI-D), Jedinjenje II, Jedinjenje IV i njihove farmaceutski prihvatljive soli koje su ovde otkrivene su CFTR korektori.
[0035] Kako se ovde koristi, termin "potencator CFTR" odnosi se na jedinjenje koje poveć ava aktivnost kanala CFTR proteina koji se nalazi na površini ć elije, što rezultira pojačanim transportom jona. Jedinjenje III koje je ovde otkriveno je CFTR potenciator.
[0036] Kako se ovde koristi, izraz "aktivni farmaceutski sastojak" ("API") se odnosi na biološki aktivno jedinjenje.
[0037] Kako se ovde koristi, izraz "farmaceutski prihvatljiva so" odnosi se na oblik soli jedinjenja ovog otkrić a gde je so netoksična. Farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja prema ovom pronalasku uključuju one izvedene iz pogodnih neorganskih i organskih kiselina i baza. Farmaceutski prihvatljive soli su dobro poznate u tehnici. Na primer, S. M. Berge, et al. detaljno opisuju farmaceutski prihvatljive soli u J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19.
[0038] Kako se ovde koristi, termin "amorfan" se odnosi na čvrsti materijal koji nema daljinski poredak u položaju svojih molekula. Amorfne čvrste materije su generalno prehlađene tečnosti u kojima su molekuli raspoređeni na nasumičan način tako da nema dobro definisanog rasporeda, na primer, molekularnog pakovanja i reda na daljinu. Amorfne čvrste materije su generalno izotropne, tj. pokazuju slična svojstva u svim pravcima i nemaju određene tačke topljenja. Na primer, amorfni materijal je čvrst materijal koji nema oštre karakteristične kristalne vrhove u svom uzorku difrakcije snage rendgenskih zraka (XRPD) (tj. nije kristalan kako je određeno XRPD). Umesto toga, jedan ili nekoliko širokih vrhova (npr. oreola) se pojavljuju u njegovom XRPD obrascu. Široki vrhovi su karakteristični za amorfnu čvrstu materiju. Videti, US 2004/0006237 za poređenje XRPD-a amorfnog materijala i kristalnog materijala.
[0039] Kako se ovde koristi, izraz "suštinski amorfan" se odnosi na čvrsti materijal koji ima mali ili nikakav dalekosežni poredak u položaju svojih molekula. Na primer, suštinski amorfni materijali imaju manje od 15% kristalnosti (npr. manje od 10% kristalnosti ili manje od 5% kristalnosti). Takođe je primeć eno da izraz 'uglavnom amorfan' uključuje deskriptor, 'amorfan', koji se odnosi na materijale koji nemaju (0%) kristalnosti.
[0040] Kako se ovde koristi, termin "disperzija" se odnosi na disperzni sistem u kome je jedna supstanca, disperzovana faza, raspoređena, u diskretnim jedinicama, kroz drugu supstancu (kontinuirana faza ili nosač). Veličina dispergovane faze može značajno da varira (npr. koloidne čestice nanometarske dimenzije, do veličine od više mikrona). Generalno, dispergovane faze mogu biti čvrste materije, tečnosti ili gasovi. U slučaju čvrste disperzije, i disperzovana i kontinuirana faza su čvrste materije. U farmaceutskim primenama, čvrsta disperzija može uključivati kristalni lek (disperzovanu fazu) u amorfnom polimeru (kontinuirana faza); ili alternativno, amorfni lek (disperzovana faza) u amorfnom polimeru (kontinuirana faza). U nekim realizacijama, čvrsta disperzija uključuje polimer koji čini disperzovanu fazu, a lek čini kontinuiranu fazu. Ili, čvrsta disperzija uključuje lek koji čini dispergovanu fazu i polimer koji čini kontinuiranu fazu.
[0041] Termini "pacijent" i "subjekat" se koriste naizmenično i odnose se na životinju uključujuć i ljude.
[0042] Termini "efikasna doza" i "efikasna količina" se ovde koriste naizmenično i odnose se na onu količinu jedinjenja koja proizvodi željeni efekat zbog kojeg se daje (npr. poboljšanje CF ili simptom CF, ili smanjenje ozbiljnost CF ili simptom CF). Tačna količina efikasne doze zavisić e od svrhe tretmana, a stručnjak ć e je mo ć i utvrditi koriš ć enjem poznatih tehnika (videti, npr., Lloid (1999) The Art, Science and Technology of Pharmaceutical Compounding).
[0043] Kako se ovde koristi, termini "lečenje", "lečenje" i slično generalno označavaju poboljšanje CF ili njegovih simptoma ili smanjenje težine CF ili njegovih simptoma kod subjekta. "Lečenje", kako se ovde koristi, uključuje, ali nije ograničeno na, sledeć e: pove ć an rast subjekta, pove ć ano pove ć anje telesne težine, smanjenje sluzi u plu ć ima, poboljšanu funkciju pankreasa i/ili jetre, smanjenje infekcija grudnog koša i/ili smanjenje kašlja ili kratkog daha. Poboljšanja ili smanjenje težine bilo kog od ovih simptoma mogu se lako proceniti prema standardnim metodama i tehnikama poznatim u nauci.
[0044] Kako se ovde koristi, termin "u kombinaciji sa", kada se odnosi na dva ili više jedinjenja, agenasa ili dodatnih aktivnih farmaceutskih sastojaka, označava davanje dva ili više jedinjenja, agenasa ili aktivnih farmaceutskih sastojaka pacijentu pre do, istovremeno ili naknadno jedno do drugog.
[0045] Termini "oko" i "približno", kada se koriste u vezi sa dozama, količinama ili težinskim procentima sastojaka kompozicije ili doznog oblika, uključuju vrednost određene doze, količine ili procenta težine ili opseg doze, količine ili težinskog procenta koji je prepoznat od strane prosečnog stručnjaka u ovoj oblasti da bi se obezbedio farmakološki efekat ekvivalentan onom koji je dobijen iz specifične doze, količine ili procenta težine.
[0046] Stručnjak u ovoj oblasti bi prepoznao da, kada se otkrije količina "jedinjenja ili njegove farmaceutski prihvatljive soli", onda je količina farmaceutski prihvatljivog oblika soli jedinjenja, količina ekvivalentna koncentraciji slobodne baze jedinjenja. Primeć eno je da su ovde opisane količine jedinjenja ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli zasnovane na njihovom obliku slobodne baze. Na primer, "10 mg najmanje jednog jedinjenja izabranog između jedinjenja formule (I) i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli" uključuje 10 mg jedinjenja formule (I) i koncentraciju farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja formule (I). ) ekvivalentno 10 mg jedinjenja Formule (I).
[0047] Pogodne farmaceutski prihvatljive soli su, na primer, one koje su otkrivene u S. M. Berge, et al. J. Pharmaceutical Sciences, 1977, 66, 1-19. Na primer, Tabela 1 koja je iz tog članka pruža sledeć e farmaceutski prihvatljive soli:
Tabela 1:
[0048] Neograničavajuć i primeri farmaceutski prihvatljivih soli izvedenih iz odgovaraju ć ih kiselina obuhvataju: soli formirane sa neorganskim kiselinama, kao što su hlorovodonična kiselina, bromovodonična kiselina, fosforna kiselina, sumporna kiselina ili perhlorna kiselina; soli formirane sa organskim kiselinama, kao što su sirć etna kiselina, oksalna kiselina, maleinska kiselina, vinska kiselina, limunska kiselina, jantarna kiselina ili malonska kiselina; i soli formirane korišć enjem drugih metoda koje se koriste u tehnici, kao što je razmena jona. Neograničavajuć i primeri farmaceutski prihvatljivih soli obuhvataju adipat, alginat, askorbat, aspartat, benzensulfonat, benzoat, bisulfat, borat, butirat, kamforat, kamforsulfonat, citrat, ciklopentanpropionat, diglukonat, glukonat, dodecetankonsulfat, glukofonat, dodecetankonsulfat , hemisulfat, heptanoat, heksanoat, hidrojodid, 2-hidroksi-etansulfonat, laktobionat, laktat, laurat, lauril sulfat, malat, maleat, malonat, metansulfonat, 2-naftalensulfonat, nikotinat, papektinat nitramit, nikotinat, nitrapetinat oninat persulfat, 3-fenilpropionat, fosfat, pikrat, pivalat, propionat, stearat, sukcinat, sulfat, tartarat, tiocijanat, p-toluensulfonat, undekanoat i valeratne soli. Farmaceutski prihvatljive soli izvedene iz odgovarajuć ih baza uključuju soli alkalnih metala, zemnoalkalnih metala, amonijuma i N<+>(C1-4alkil)4. Ovo otkrić e takođe predviđa kvaternizaciju bilo koje osnovne grupe jedinjenja koja su ovde otkrivena, koja sadrži azot. Pogodni neograničavajuć i primeri soli alkalnih i zemnoalkalnih metala uključuju natrijum, litijum, kalijum, kalcijum i magnezijum. Dalji neograničavajuć i primeri farmaceutski prihvatljivih soli uključuju amonijum, kvaternarni amonijum i amin katjone formirane korišć enjem kontrajona kao što su halid, hidroksid, karboksilat, sulfat, fosfat, nitrat, niži alkil sulfonat i aril sulfonat. Drugi pogodni, neograničavajuć i primeri farmaceutski prihvatljivih soli, uključuju soli bezilata i glukozamina.
[0049] Tačna količina potrebne farmaceutske kompozicije ć e varirati od subjekta do subjekta, u zavisnosti od vrste, starosti i opšteg stanja subjekta, težine bolesti, određenog agensa, načina njegovog davanja i slično. Jedinjenja iz ovog otkrić a mogu biti formulisana u obliku jedinične doze radi lakše primene i uniformnosti doziranja. Izraz "oblik jedinične doze" kako se ovde koristi odnosi se na fizički diskretnu jedinicu agensa prikladnu za pacijenta koji se leči. Podrazumeva se, međutim, da ć e o ukupnoj dnevnoj upotrebi jedinjenja i kompozicija iz ovog otkrić a odlučivati lekar koji prisustvuje u okviru zdravstvene medicinske procene. Specifični nivo efektivne doze za svakog određenog pacijenta ili organizam zavisić e od niza faktora uključuju ć i poremeć aj koji se leči i ozbiljnost poreme ć aja; aktivnost specifičnog upotrebljenog jedinjenja; specifičan sastav koji se koristi; starost, telesna težina, opšte zdravlje, pol i ishranu pacijenta; vreme administracije, put primene i brzinu izlučivanja specifičnog upotrebljenog jedinjenja; trajanje lečenja; lekovi koji se koriste u kombinaciji ili slučajno sa specifičnim upotrebljenim jedinjenjem, i slični faktori dobro poznati u medicinskoj umetnosti. Termin "pacijent", kako se ovde koristi, označava životinju, kao što je sisar, i dalje kao što je čovek.
[0050] U nekim realizacijama, pronalazak je takođe usmeren na metode tretmana korišć enjem jedinjenja obeleženih izotopom gore pomenutih jedinjenja, koja imaju iste strukture kao što je ovde otkriveno osim što je jedan ili više atoma u njima zamenjeno atomom ili atomima koji imaju atomsku masu ili maseni broj koji se razlikuje od atomske mase ili masenog broja atoma koji se obično javlja u prirodi (označen izotopom). Primeri izotopa koji su komercijalno dostupni i pogodni za pronalazak obuhvataju izotope vodonika, ugljenika, azota, kiseonika, fosfora, fluora i hlora, na primer<2>H,<3>H,<13>C,<14>C,<15>N,<18>O,<17>O,<31>P,<32>P,<35>S,<18>F i<36>Cl, respektivno.
[0051] Jedinjenja i soli obeležena izotopom mogu se koristiti na brojne korisne načine. Oni mogu biti pogodni za lekove i/ili različite vrste testova, kao što su testovi distribucije supstratnog tkiva. Na primer, jedinjenja obeležena tricijumom (<3>H) i/ili ugljenikom-14 (<14>C) su posebno korisna za različite tipove testova, kao što su testovi distribucije tkiva supstrata, zbog relativno jednostavne pripreme i odlične detekcije. Na primer, one sa deuterijumom (<2>H) su terapeutski korisne sa potencijalnim terapeutskim prednostima u odnosu na jedinjenja koja nisu obeležena sa<2>H. Generalno, jedinjenja i soli obeležena deuterijumom (<2>H) mogu imati već u metaboličku stabilnost u poređenju sa onima koje nisu obeležene izotopom zahvaljuju ć i kinetičkom izotopskom efektu opisanom u nastavku. Ve ć a metabolička stabilnost se direktno prevodi u produženi poluživot in vivo ili niže doze, što bi se moglo poželjeti. Jedinjenja i soli obeležena izotopom se obično mogu pripremiti izvođenjem postupaka otkrivenih u šemama sinteze i povezanom opisu, u delu za primer i u delu za pripremu u ovom tekstu, zamenjujuć i reaktant koji nije obeležen izotopom, sa lako dostupnim reaktantom obeleženim izotopom.
[0052] U nekim realizacijama, jedinjenja i soli obeležena izotopom su ona obeležena deuterijumom (<2>H). U nekim specifičnim realizacijama, jedinjenja i soli obeležena izotopom su obeležena deuterijumom (<2>H), pri čemu je jedan ili više atoma vodonika u njima zamenjeno deuterijumom. U hemijskim strukturama, deuterijum je predstavljen kao "<2>H" ili "D".
[0053] Jedinjenja i soli obeležena deuterijumom (<2>H) mogu da manipulišu oksidativnim metabolizmom jedinjenja putem primarnog kinetičkog izotopskog efekta. Primarni kinetički izotopski efekat je promena brzine hemijske reakcije koja je rezultat razmene izotopskih jezgara, što je zauzvrat uzrokovano promenom energije osnovnog stanja neophodnog za formiranje kovalentne veze nakon ove izotopske razmene. Razmena težeg izotopa obično dovodi do smanjenja energije osnovnog stanja za hemijsku vezu i na taj način uzrokuje smanjenje kidanja veze koja ograničava brzinu. Ako se prekid veze dogodi u ili u blizini regiona sedišta duž koordinate višeproizvodne reakcije, odnosi distribucije proizvoda mogu se značajno promeniti. Za objašnjenje: ako je deuterijum vezan za atom ugljenika na nezamenljivoj poziciji, tipične su razlike u brzini od kM/kD= 2-7. Za dalju diskusiju, videti S. L. Harbeson i R. D. Tung, Deuterium In Drug Discoveri and Development, Ann. Rep. Med. Chem. 2011, 46, 403-417; i T.G. Gant "Using deuterium in drug discovery: leaving the label in the drug" („Upotreba deuterijuma u otkrivanju lekova: ostavljajuć i etiketu u leku“) J. Med. Chem.2014, 57, 3595-3611.
[0054] Koncentracija izotopa(a) (npr. deuterijuma) ugrađenih u jedinjenja obeležena izotopima i so prema pronalasku može biti definisano faktorom obogać ivanja izotopom. Termin "faktor oboga ć ivanja izotopom" kako se ovde koristi označava odnos između izotopskog izobilja i prirodnog izobilja određenog izotopa. U nekim realizacijama, ako je supstituent u jedinjenju prema pronalasku označen kao deuterijum, takvo jedinjenje ima faktor obogać ivanja izotopom za svaki naznačeni atom deuterijuma od najmanje 3500 (52,5% inkorporacije deuterijuma na svakom naznačenom atomu deuterijuma), najmanje 4000 (60 % ugradnje deuterijuma), najmanje 4500 (67,5% ugradnje deuterijuma), najmanje 5000 (75% ugradnje deuterijuma), najmanje 5500 (82,5% ugradnje deuterijuma), najmanje 6000 (90% ugradnje deuterijuma), najmanje 33 (39%). % inkorporacije deuterijuma), najmanje 6466,7 (97% ugradnje deuterijuma), najmanje 6600 (99% ugradnje deuterijuma), ili najmanje 6633,3 (99,5% ugradnje deuterijuma).
[0055] Kada otkriva i razvija terapeutske agense, osoba verzirana u struci pokušava da optimizuje farmakokinetiku parametara uz zadržavanje poželjnih in vitro svojstava. Može se razumno pretpostaviti da su mnoga jedinjenja sa lošim farmakokinetičkim profilima podložna oksidativnom metabolizmu.
[0056] Stručnjak sa uobičajenim iskustvom u tehnici bi razumeo da deuteracija jednog ili više metabolički labilnih pozicija na jedinjenju ili aktivnom metabolitu, može dovesti do poboljšanja jednog ili više superiornih svojstava DMPK, uz održavanje biološke aktivnosti u poređenju sa odgovarajuć im analozima vodonika. Vrhunska svojstva ili svojstva DMPK mogu imati uticaj na izloženost, poluvreme, klirens, metabolizam i/ili čak potrebe za hranom za optimalnu apsorpciju leka. Deuteracija takođe može da promeni metabolizam na drugim nedeuterisanim pozicijama deuterisanog jedinjenja.
[0057] U nekim realizacijama, otkrić e uključuje deuterisane derivate novih jedinjenja koja su ovde otkrivena i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli. Neograničavajuć i primeri deuteriranih jedinjenja su otkriveni na Sl.1.
[0058] Svako jedinjenje opisano ovde, uključujuć i jedinjenja formula (I), (II-A), (II-B), (III-A), (III-B), (IV-A), (IVB), (IV-C), (V-A), (V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C) i (VI-D), jedinjenja II, III i IV, farmaceutski prihvatljive soli i deuterovani derivati bilo kog od prethodno navedenih mogu se nezavisno davati jednom dnevno, dva puta dnevno ili tri puta dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano između jedinjenja formula (I), (II-A), (IIB), (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B) , (IV-C), (V-A), (V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C) i (VI-D), njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterovani derivati bilo kog gore navedenog se primenjuje jednom dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano između jedinjenja formula (I), (II-A), (II-B), (III-A), (III-B), (IV-A), (IV- B), (IV-C), (V-A), (V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C) i (VI-D), i njihove farmaceutski prihvatljive soli, i deuterisan derivati bilo kog od prethodno navedenih daju se dva puta dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano od Jedinjenja II i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli se primenjuje jednom dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano od Jedinjenja II i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli se primenjuje dva puta dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano od Jedinjenja III i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli se primenjuje jednom dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano od Jedinjenja III i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli se primenjuje dva puta dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano od Jedinjenja IV i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli se primenjuje jednom dnevno. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano od Jedinjenja IV i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli se primenjuje dva puta dnevno. U nekim realizacijama, deuterisani derivat jedinjenja II, III i/ili IV ili njegova farmaceutski prihvatljiva so se koristi u bilo kojoj od ovih realizacija.
[0059] U nekim realizacijama, 10 mg do 1,500 mg ovde otkrivenog jedinjenja, njegove farmaceutski prihvatljive soli ili deuterovanog derivata takvog jedinjenja ili soli se daju dnevno.
[0060] Ovde su opisana jedinjenja formule (I):
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih,
pri čemu:
-Prsten A je fenil, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten;
-Prsten B je piridinilni prsten;
-Prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten, ili 6-člani heteroaril prsten;
-X je O, NH ili N(C1-C4 alkil);
-svaki R<1>se nezavisno bira između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupe, halogeni, cijano grupa i hidroksil grupa;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
-svaki R<2>se nezavisno bira između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksi grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupe, halogeni, cijano grupa i hidroksil grupa;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>se nezavisno bira između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupa, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2 alkil grupa, haloalkil grupa, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; u čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y se nezavisno bira između C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NRa-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R7 nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>se nezavisno biraju između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5 cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso; -svaki od R5 i R6 je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki Ra je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena;
-q je 1, 2, 3 ili 4; i
-Z je dvovalentni linker formule (L)r, gde:
-r je 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki L se nezavisno bira između C(R<8>)(R<9>) grupa, -O- i -NRb-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R<8>i R<9>se nezavisno biraju između vodonika, halogena, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2alkil grupa,
hidroksilnu grupu, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i
-svaki Rb se nezavisno bira između vodonika i C1-C2alkil grupa.
[0061] Jedinjenje formule I opisano ovde može biti jedinjenje formule (II-A) ili (II-B):
ili
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih,
u čemu:
-ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju;
-Prsten A je fenil, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten;
-Prsten B je piridinilni prsten;
-Prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten, ili 6-člani heteroaril prsten;
-svaki R<1>se nezavisno bira između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupe, halogeni, cijano grupa i hidroksil grupa;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
-svaki R<2>se nezavisno bira između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksi grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupe, halogeni, cijano grupa i hidroksil grupa;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>se nezavisno bira između halogena, hidroksilne grupe, okso grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupa, ili opciono dva R4, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupa, haloalkil grupa, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa, pri čemu :
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y se nezavisno bira između C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NRa-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>se nezavisno biraju između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5 cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R5 i R6 je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2 alkil grupa, C1-C2 haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe;
-R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa
jedna ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena;
-q je 1, 2, 3 ili 4;
-Z je dvovalentni linker formule (L)r, gde:
-r je 1,2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki L se nezavisno bira između C(R8)(R9) grupa, -O- i -NRb-grupa, pri čemu je heteroatom u Z
nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
- svaki R<8>i R<9>se nezavisno bira između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki Rb se nezavisno bira između vodonika i C1-C2alkil grupa.
[0062] Pronalazak obezbeđuje jedinjenje formule (III-A) ili (III-B):
ili
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih,
pri čemu:
-ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju;
-Prsten A je fenil, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten;
-Prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten;
- svaki R<1>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
- svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>se nezavisno bira između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R7 grupa ili opciono dva R4, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5 -6-člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupa, haloalkil grupa, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y se nezavisno bira između C(R<5>)(R<6>) grupe, -O- i -NR<a>-grupe, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R7, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>se nezavisno biraju između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2 alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksi grupa i C1-C2haloalkoksil grupe; i -svaki Ra je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe; i
-R7 se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10 cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa
jedna ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe i halogena;
-q je 1 ili 2;
-Z je dvovalentni linker formule (L)r,gde:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L se nezavisno bira između C(R<8>)(R<9>) grupe, -O- i -NR<b>-grupe, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R<8>i R<9>se nezavisno biraju između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupe, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i
-svaki R<b>se nezavisno bira između vodonika i C1-C2alkil grupe.
[0063] Pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenje formule IV-A:
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih,
pri čemu:
-ugljenik označen sa • ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju;
-Prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten;
- svaki R<1>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
- m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
- svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>se nezavisno bira između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupa, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupe, haloalkil grupe, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa, pri čemu :
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y se nezavisno bira između C(R<5>)(R<6>) grupe, -O- i -NR<a>-grupe, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>se nezavisno biraju između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupe i C3-5cikloalkil grupa, ili R5 i R6 na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i
-svaki Ra je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe; i
-R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupe opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupa i halogena
-q je 1 ili 2;
-Z je dvovalentni linker formule (L)r, gde:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L se nezavisno bira između C(R<8>)(R<9>) grupa, -O- i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
- svaki R<8>i R<9>se nezavisno bira između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupe, hidroksilne grupe, C1-C2 alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i
-svaki R<b>se nezavisno bira između vodonika i C1-C2alkil grupe.
[0064] Pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenje formule IV-B:
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih,
u čemu:
-ugljenik označen sa • ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju;
-Prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten;
- svaki R1 je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
- m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
- svaki R2je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>se nezavisno bira između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupe, ili opciono dve R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupe, haloalkil grupe, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupe, pri čemu :
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y se nezavisno bira između C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupe, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>se nezavisno biraju između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4 alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe; i
-R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupe opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe i halogena;
-q je 1 ili 2;
- r je 3 ili 4;
- svaki R<8>i R<9>se nezavisno bira između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupe, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i
-svaki R<b>se nezavisno bira između vodonika i C1-C2alkil grupe.
[0065] Pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenje formule IV-C:
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih,
u čemu:
-ugljenik označen sa • ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju;
-svaki R<1>se nezavisno bira između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupe, halogeni, cijano grupa i hidroksil grupa;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
-svaki R<2>se nezavisno bira između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksi grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupe, halogeni, cijano grupa i hidroksil grupa;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>se nezavisno bira između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R7 grupa, ili opciono dve R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupe, haloalkil grupe, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa, pri čemu :
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y se nezavisno bira između C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>se nezavisno biraju između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i
-svaki Ra je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena;
-q je 1 ili 2;
-r je 3 ili 4;
-svaki R<8>i R<9>se nezavisno biraju između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupa, hidroksilne grupe,
C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksilne grupe; i
-svaki R<b>se nezavisno bira između vodonika i C1-C2alkil grupa.
[0066] Pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenje formule V-A:
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih,
pri čemu:
-ugljenik označen sa • ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju;
-Prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten, ili 6-člani heteroaril prsten;
- svaki R1 je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
-svaki R<2>se nezavisno bira između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>se nezavisno bira između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupe, ili opciono dve R4, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupe, haloalkil grupe, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe, pri čemu :
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y se nezavisno bira između C(R<5>)(R<6>) grupe, -O- i -NR<a>-grupe, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>se nezavisno biraju između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogena, hidroksilne grupe, C1-C2 alkoksi grupe i C1-C2 haloalkoksil grupe; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupe opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe i halogena;
-q je 1 ili 2;
-Z je dvovalentni linker formule (L)r, gde:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L se nezavisno bira između C(R8)(R9) grupa, -O- i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
- svaki R<8>i R<9>se nezavisno bira između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2 haloalkoksil grupa; i
-svaki R<b>se nezavisno bira između vodonika i C1-C2alkil grupa.
[0067] Pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenje formule V-B:
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih,
u čemu:
-ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju;
-Prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten;
-svaki R<1>se nezavisno bira između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksil grupe;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
-svaki R<2>se nezavisno bira između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksi grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogene, cijano grupe i hidroksil grupe;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>se nezavisno bira između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupa, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupe, haloalkil grupe, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe, pri čemu :
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y se nezavisno bira između C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupe, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>se nezavisno biraju između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R5i R6na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe; i
-R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena;
-q je 1 ili 2;
-r je 3, 4 ili 5; i
-svaki R8i R9se nezavisno biraju između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupe, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupe.
[0068] Pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenje formule VI-A ili VI-B:
ili
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih,
pri čemu:
-ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju;
-Prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten, ili 6-člani heteroaril prsten;
-svaki R<1>se nezavisno bira između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe , C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogeni, cijano grupe i hidroksil grupe ;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
-svaki R<2>se nezavisno bira između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>se nezavisno bira između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupe , ili opciono dve R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je izborno i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupe, haloalkil grupe, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y se nezavisno bira između C(R<5>)(R<6>) grupe , -O- i -NR<a>-grupe , pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>se nezavisno biraju između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe , ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe ; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe ; i
-R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10 cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe , C1-C2haloalkil grupe i halogena;
-q je 1 ili 2;
-Z je dvovalentni linker formule (L)r, gde:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L se nezavisno bira između C(R<8>)(R<9>) grupe , -O- i -NR<b>-grupe, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R<8>i R<9>se nezavisno biraju između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupe, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksilne grupe; i
-svaki R<b>se nezavisno bira između vodonika i C1-C2 alkil grupe .
[0069] Pronalazak takođe obezbeđuje jedinjenje formule VI-C ili VI-D:
ili
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih,
u čemu:
-ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju;
-Prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten, ili 6-člani heteroaril prsten;
-svaki R1 se nezavisno bira između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogeni, cijano grupe i hidroksil grupe ;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
-svaki R<2>se nezavisno bira između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksi grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogeni, cijano grupe i hidroksil grupe ;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R3 je metil;
-svaki R4 se nezavisno bira između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R7 grupe , ili opciono dva R4, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2 alkil grupe , haloalkil grupe , hidroksil grupe, C1-C2 alkoksil grupe i C1-C2 haloalkoksil grupe , pri čemu :
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y se nezavisno bira između C(R<5>)(R<6>) grupe, -O- i -NRa-grupe, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>se nezavisno biraju između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe , ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupe izabranih između C1-C2alkil grupe , C1-C2haloalkil grupe, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe ; i
-svaki Ra je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe ; i
-R7 se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10 cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupe izabranih između C1-C2 alkil grupe , C1-C2 haloalkil grupe i halogena;
-q je 1 ili 2;
-r je 3 ili 4; i
-svaki R8 i R9 se nezavisno biraju između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupe , hidroksila grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe
[0070] Ovde su takođe otkrivena jedinjenja koja imaju formulu izabranu između bilo koje od formula prikazanih na Sl. 1 i njihove farmaceutski prihvatljive soli.
[0071] U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano od novih jedinjenja formula (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A) , (V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C) ili (VI-D), njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterovani derivati prethodnog se primenjuju u kombinaciji sa najmanje jednim jedinjenjem izabran između Jedinjenja II, njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuteriranih derivata prethodnog. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano od novih jedinjenja formula (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), ( V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C) ili (VI-D), njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterovani derivati prethodnog daju se u kombinaciji sa najmanje jednim jedinjenjem izabranim od Jedinjenje III i njegove farmaceutski prihvatljive soli. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano od novih jedinjenja formula (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), ( V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C) ili (VI-D), njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterovani derivati prethodnog daju se u kombinaciji sa najmanje jednim jedinjenjem izabranim od Jedinjenje IV i njegove farmaceutski prihvatljive soli. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano od novih jedinjenja formula (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), ( V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C) ili (VI-D), farmaceutski prihvatljive soli i deuterovani derivati prethodno navedenih, daju se u kombinaciji sa jedinjenjima II ili farmaceutski prihvatljivim so ili njegov deuterovani derivat i najmanje jedno jedinjenje izabrano od Jedinjenja III, njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuterovanih derivata bilo kog od prethodno navedenih. U nekim realizacijama, najmanje jedno jedinjenje izabrano od novih jedinjenja formula (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), ( VB), (VI-A), (VI-B), (VI-C) ili (VI-D), farmaceutski prihvatljive soli i deuterovani derivati bilo kog od prethodno navedenih, daju se u kombinaciji sa najmanje jednim jedinjenjem izabranim od Jedinjenja III, njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuteriranih derivata bilo kog od prethodno navedenih i najmanje jednog jedinjenja izabranog od Jedinjenja IV, njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuteriranih derivata bilo kog od prethodno navedenih.
[0072] U nekim realizacijama, najmanje jedno novo jedinjenje formula (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (V-B) ), (VI-A), (VI-B), (VI-C) ili (VI-D) (i/ili najmanje jedna njegova farmaceutski prihvatljiva so i/ili najmanje jedan deuterovani derivat takvog jedinjenja ili soli ) može da se primeni u kombinaciji sa najmanje jednim dodatnim aktivnim farmaceutskim sastojkom. U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak se bira između:
(a) Jedinjenje II:
i njihove farmaceutski prihvatljive soli.
Hemijsko ime za jedinjenje II je (R)-1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)-N-(1-(2,3-dihidroksipropil)-6-fluoro2 -( 1-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-1 H-indol-5-il)ciklopropankarboksamid;
(b) Jedinjenje III:
i njihove farmaceutski prihvatljive soli. Hemijsko ime za jedinjenje III je N-(5-hidroksi-2,4-di-terc-butilfenil)-4-okso-lH-hinolin-3-karboksamid; i
(c) Jedinjenje IV:
i njihove farmaceutski prihvatljive soli.
[0073] Hemijsko ime za jedinjenje IV je 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropan-1-karboksamido)-3-metilpiridin-2 -il)benzojeva kiselina. U nekim realizacijama, jedinjenje formule (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (V-B), (VI-A ), (VI-B), (VI-C) ili (VI-D) i/ili njegova farmaceutski prihvatljiva so mogu se davati u kombinaciji sa jedinjenjem II i/ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli. U nekim realizacijama, jedinjenje formule (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (V-B), (VI-A ), (VI-B), (VI-C), ili (VI-D) i/ili njegova farmaceutski prihvatljiva so mogu se davati u kombinaciji sa jedinjenjem III i/ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli. U nekim realizacijama, jedinjenje formule (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (V-B), (VI-A ), (VI-B), (VI-C) ili (VI-D) i/ili njegova farmaceutski prihvatljiva so mogu se davati u kombinaciji sa jedinjenjem IV i/ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli. U nekim realizacijama jedinjenje formule (IIIA), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (V-B), (VI-A), ( VI-B), (VI-C) ili (VI-D) i/ili njegova farmaceutski prihvatljiva so mogu se davati u kombinaciji sa jedinjenjima II i/ili njihovom farmaceutski prihvatljivom soli i jedinjenjem III i/ili farmaceutski prihvatljivim njihova so. U nekim realizacijama jedinjenje formule (IIIA), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (V-B), (VI-A), ( VI-B), (VI-C) ili (VI-D) i/ili njegova farmaceutski prihvatljiva so mogu se davati u kombinaciji sa jedinjenjima II i/ili njihovom farmaceutski prihvatljivom soli i jedinjenjem IV i/ili farmaceutski prihvatljivim njihova so.
[0074] U jednom aspektu, otkrić e predstavlja farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje Formule (I) i/ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, i farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0075] U jednom aspektu, pronalazak predstavlja farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje Formule (I) i/ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, jedinjenje II i/ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0076] U jednom aspektu, pronalazak predstavlja farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje Formule (I) i/ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, jedinjenje III i/ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so i farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0077] U jednom aspektu, otkrić e predstavlja farmaceutsku kompoziciju koja sadrži jedinjenje formule (I) i/ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, jedinjenje II i/ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so, jedinjenje III i/ili farmaceutski prihvatljivu so od toga i farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0078] Bilo koje od novih jedinjenja koja su ovde otkrivena, kao što su, na primer, jedinjenja formula (III-A), (III-B), (IVA), (IV-B), (IV-C), (V-A) , (V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C) ili (VI-D) i njihove farmaceutski prihvatljive soli, i deuterovani derivati takvih jedinjenja i soli mogu biti sadržani u jednooj farmaceutskoj kompoziciji ili odvojenom farmaceutskim kompozicijama u kombinaciji sa drugim dodatnim aktivnim farmaceutskim sastojkom(sastojcima) (npr., jedinjenje II, III ili IV, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat takvog jedinjenja ili soli). Takve farmaceutske kompozicije se mogu davati jednom dnevno ili više puta dnevno, kao što je dva puta dnevno. U nekim realizacijama, otkrić e sadrži farmaceutsku kompoziciju koja sadrži najmanje jedno jedinjenje odabrano od bilo kojeg od ovde otkrivenih jedinjenja i njihove farmaceutski prihvatljive soli, i najmanje jedno farmaceutski prihvatljiv nosač.
[0079] U nekim realizacijama, otkrić e sadrži farmaceutsku kompoziciju koja sadrži najmanje jedno jedinjenje izabrano od novih jedinjenja koja su ovde otkrivena i njegove farmaceutski prihvatljive soli, najmanje jedno jedinjenje izabrano od Jedinjenja II i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, i najmanje jedno farmaceutski prihvatljiv.
[0080] U nekim realizacijama, otkrić e sadrži farmaceutsku kompoziciju koja sadrži najmanje jedno jedinjenje izabrano od novih jedinjenja koja su ovde otkrivena i njegove farmaceutski prihvatljive soli, najmanje jedno jedinjenje izabrano od Jedinjenja III i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, i najmanje jedno farmaceutski prihvatljiv prevoznik.
[0081] U nekim realizacijama, otkrić e sadrži farmaceutsku kompoziciju koja sadrži najmanje jedno jedinjenje izabrano od novih jedinjenja koja su ovde otkrivena i njegove farmaceutski prihvatljive soli, najmanje jedno jedinjenje izabrano od Jedinjenja II i njegove farmaceutski prihvatljive soli, najmanje jedno jedinjenje koje je izabrano od jedinjenja III i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, i najmanje jednog farmaceutski prihvatljivog nosača.
[0082] U nekim realizacijama, otkrić e sadrži farmaceutsku kompoziciju koja sadrži najmanje jedno jedinjenje izabrano od novih jedinjenja koja su ovde otkrivena i njegove farmaceutski prihvatljive soli, najmanje jedno jedinjenje izabrano od Jedinjenja III i njegove farmaceutski prihvatljive soli, najmanje jedno jedinjenje koje je izabrano od jedinjenja IV i njegovih farmaceutski prihvatljivih soli, i najmanje jednog farmaceutski prihvatljivog nosača.
[0083] U nekim realizacijama, farmaceutske kompozicije koje su ovde otkrivene sadrže najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak. U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je CFTR modulator. U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je CFTR korektor. U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je CFTR potenciator. U nekim realizacijama, farmaceutska kompozicija sadrži (i) jedinjenje formula (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (VA), ( V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C) i (VI-D), ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat takvog jedinjenja ili soli; i (ii) najmanje dva dodatna aktivna farmaceutska sastojka, od kojih je jedan CFTR korektor a jedan CFTR potenciator.
[0084] U nekim realizacijama, najmanje jedan dodatni aktivni farmaceutski sastojak je izabran između mukolitičkih agenasa, bronhodijalatora, antibiotika, antiinfektivnih sredstava i antiinflamatornih agenasa.
[0085] Farmaceutska kompozicija može dalje da sadrži najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač. U nekim realizacijama, najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač se bira između farmaceutski prihvatljivih nosača i farmaceutski prihvatljivih pomoć nih sredstava. U nekim realizacijama, najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv je izabran između farmaceutski prihvatljivih punila, dezintegranata, surfaktanata, veziva ili maziva.
[0086] Takođe ć e biti cenjeno da se farmaceutska kompozicija ovog otkri ć a, uključuju ć i farmaceutsku kompoziciju koja sadrži kombinacije opisane prethodno, može koristiti u kombinovanim terapijama; odnosno, kompozicije se mogu davati istovremeno sa, pre ili posle najmanje jednog dodatnog aktivnog farmaceutskog sastojka ili medicinskih procedura.
[0087] Farmaceutske kompozicije koje sadrže ove kombinacije su korisne za lečenje cistične fibroze.
[0088] Kao što je gore opisano, farmaceutske kompozicije koje su ovde otkrivene mogu opciono dalje da sadrže najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač. Najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač se može izabrati između pomoć nih sredstava i prenosnika. Najmanje jedan farmaceutski prihvatljiv nosač, kako se ovde koristi, uključuje sve rastvarače, razblaživače, druge tečne nosače, disperzionu pomoć , pomo ć na sredstva za suspenziju, površinski aktivne agense, izotonične agense, zgušnjivače, emulgatore, konzervanse, čvrsta veziva i maziva, kako odgovara određenom željenom obliku doze. Remington: Nauka i praksa farmacije, 21. izdanje, 2005, ur. D.B. Troy, Lippincott Williams & Wilkins, Philadelphia, and Encyclopedia of Pharmaceutical Technology, eds. J. Swarbrick i J. C. Boilan, 1988-1999, Marcel Dekker, New York otkrivaju različite nosače koji se koriste u formulisanju farmaceutskih kompozicija i poznate tehnike za njihovu pripremu. Osim u meri u kojoj bilo koji konvencionalni nosač nije kompatibilan sa jedinjenjima iz ovog otkrić a, kao što je stvaranje bilo kakvog neželjenog biološkog efekta ili druga štetna interakcija sa bilo kojom drugom komponentom(ima) farmaceutske kompozicije, smatra se da je njegova upotreba unutar obim ovog otkrivanja. Neograničavajuć i primeri pogodnih farmaceutski prihvatljivih nosača uključuju, ali nisu ograničeni na, jonoizmenjivače, glinicu, aluminijum stearat, lecitin, serumske proteine (kao što je albumin humanog seruma), puferske supstance (kao što su fosfati, glicin, sorbinska kiselina i kalijum sorbat), delimične mešavine glicerida zasić enih biljnih masnih kiselina, vode, soli i elektrolita (kao što su protamin sulfat, dinatrijum hidrogen fosfat, kalijum hidrogen fosfat, natrijum hlorid i soli cinka), koloidni silicijum dioksid, magnezijum poolivin trisilikat, poliakrilati, voskovi, polietilen-polioksipropilen blok polimeri, vunena mast, šeć eri (kao što su laktoza, glukoza i saharoza), skrobovi (kao što su kukuruzni skrob i krompirov skrob), celuloza i njeni derivati (kao što su natrijum-karboksimetilceluloza, karboksimetilceluloza celulozni acetat), tragakant u prahu, slad, želatin, talk, ekscipijenti (kao što su kakao puter i voskovi supozitorija), ulja (kao što je ulje od kikirikija, ulje semena pamuka, šaflo ulje, susamovo ulje, maslinovo ulje, kukuruzno ulje i sojino ulje), glikoli (kao što su propilen glikol i polietilen glikol), estri (kao što su etil oleat i etil laurat), agar, puferska sredstva (kao što su magnezijum hidroksid i aluminijum hidroksid ), alginska kiselina, voda bez pirogena, izotonični fiziološki rastvor, Ringerov rastvor, etil alkohol, rastvori fosfatnog pufera, netoksična kompatibilna maziva (kao što su natrijum lauril sulfat i magnezijum stearat), sredstva za bojenje, agensi za oslobađanje, agensi za oblaganje, zaslađivači, arome, agensi za mirisanje, konzervansi i antioksidansi.
[0089] U nekim realizacijama, ovaj pronalazak karakteriše najmanje jedno jedinjenje izabrano između bilo kog od jedinjenja formula (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV- C), (V-A), (V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C) ili (VI-D) i njihove farmaceutski prihvatljive soli, i najmanje jedno jedinjenje izabrano od Jedinjenja II , Jedinjenje III, Jedinjenje IV i farmaceutski prihvatljive soli bilo kog od prethodno navedenih, za upotrebu u postupcima davanja pacijentu kome je to potrebno najmanje jedno jedinjenje izabrano između bilo kojeg od jedinjenja formula (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (VB), (VI-A), (VI-B), (VI-C) ili (VI-D) i njihove farmaceutski prihvatljive soli, i najmanje jedno jedinjenje izabrano između jedinjenja II, jedinjenja III, jedinjenja IV i farmaceutski prihvatljivih soli bilo čega od prethodnog.
[0090] Bilo koja pogodna farmaceutska kompozicija poznata u tehnici se može koristiti za nova jedinjenja koja su ovde otkrivena, jedinjenje II, jedinjenje III, jedinjenje IV i njihove farmaceutski prihvatljive soli. Neki primeri farmaceutskih kompozicija za jedinjenje II i njegove farmaceutski prihvatljive soli mogu se nać i u WO2011/119984 i WO2014/015841. Neki primeri farmaceutskih kompozicija za jedinjenje III i njegove farmaceutski prihvatljive soli mogu se nać i u WO 2007/134279, WO2010/019239, WO2011/019413, WO2012/027731 i WO/2013/130669. Primeri kompozicija koje sadrže jedinjenje III-d i njegove farmaceutski prihvatljive soli mogu se nać i u, na primer, WO2014/078842 i WO2018/227049. Neki primeri farmaceutskih kompozicija za jedinjenje IV i njegove farmaceutski prihvatljive soli mogu se nać i u WO2010/037066, WO 2011/127241, WO2013/112804 i WO2014/071122.
[0091] U nekim realizacijama, farmaceutska kompozicija koja sadrži najmanje jedno jedinjenje izabrano od novih jedinjenja koja su ovde otkrivena i njihove farmaceutski prihvatljive soli se primenjuje sa farmaceutskom kompozicijom koja sadrži jedinjenje II i jedinjenje III. Farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje II i jedinjenje III su otkrivene u PCT publikaciji br. WO 2015/160787.
[0092] Primer izvođenja je prikazan u sledeć oj tabeli 2:
Tabela 2. Primer tablete koja sadrži 100 mg jedinjenja II i 150 mg jedinjenja III.
[0093] U nekim realizacijama, farmaceutska kompozicija koja sadrži najmanje jedno jedinjenje izabrano od novih jedinjenja koja su ovde otkrivena i njihove farmaceutske soli se primenjuje sa farmaceutskom kompozicijom koja sadrži jedinjenje III. Farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje III su otkrivene u PCT objavi br. WO2010/019239. Primer izvođenja je prikazan u sledeć oj tabeli 3:
Tabela 3: Sastojci za primernu tabletu jedinjenja III
[0094] Dodatne farmaceutske kompozicije koje sadrže jedinjenje III su otkrivene u PCT objavi br. WO2013/130669. Primeri mini tableta (prečnik ~2 mm, debljina ~2 mm, svaka mini tableta teška oko 6,9 mg) je formulisana tako da sadrži približno 50 mg jedinjenja III na 26 mini tableta i približno 75 mg jedinjenja III na 39 mini-tablete koristeć i količine sastojaka navedene u tabeli 4, ispod.
Tabela 4: Sastojci za mini tablete za potenciju od 50 mg i 75 mg
[0095] U nekim realizacijama, farmaceutske kompozicije su tablete. U nekim realizacijama, tablete su pogodne za oralnu primenu.
[0096] Jedinjenja, njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterisani analozi bilo kog od prethodnih, kao i farmaceutski preparati, ovog otkrić a, bilo u monoterapiji ili u kombinovanim terapijama, korisni su za lečenje cistične fibroze.
[0097] U nekim realizacijama, ovde otkriveno je jedinjenje, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani analog bilo kog od prethodno navedenih; ili farmaceutsku kompoziciju, ovog otkrić a, za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze kod pacijenata koji se sastoje od primene efikasne količine jedinjenja, njegove farmaceutski prihvatljive soli ili deuterovanog analoga bilo kog od prethodno pomenuti; ili farmaceutski preparat, ovog pronalaska za pacijenta, kao što je čovek, pri čemu navedeni pacijent ima cističnu fibrozu. U nekim realizacijama, pacijent ima genotip F508del/minimalne funkcije (MF), genotip F508del/F508del (homozigot za mutaciju F508del), genotip F508del/gating ili genotip F508del/rezidualna funkcija (RF). U nekim realizacijama pacijent je heterozigot i ima jednu F508del mutaciju.
[0098] Kako se ovde koristi, "mutacije minimalne funkcije (MF)" odnose se na mutacije CFTR gena povezane sa minimalnom funkcijom CFTR (malo ili bez funkcionisanja CFTR proteina) i uključuju, na primer, mutacije povezane sa ozbiljnim defektima sposobnosti CFTR kanal za otvaranje i zatvaranje, poznat kao defektno gajting kanala ili „mutacije gajta“; mutacije povezane sa teškim defektima u ć elijskoj obradi CFTR i njegovom isporukom na površinu ć elije; mutacije povezane bez (ili minimalne) CFTR sinteze; i mutacije povezane sa ozbiljnim defektima u provodljivosti kanala. Tabela C u nastavku uključuje neekskluzivnu listu mutacija CFTR minimalne funkcije, koje se mogu otkriti testom genotipizacije koji je odobrila FDA. U nekim realizacijama, mutacija se smatra MF mutacijom ako ispunjava najmanje 1 od sledeć a 2 kriterijuma: biološka verodostojnost bez translatiranog proteina (genetska sekvenca predviđa potpuno odsustvo CFTR proteina) ili in vitro testiranje koje podržava nedostatak odziva na jedinjenje II, jedinjenje III ili kombinaciju jedinjenja II i jedinjenja III, i dokaze o kliničkoj ozbiljnosti na populacijskoj osnovi (kao što je prijavljeno u velikim registrima pacijenata).
[0099] U nekim realizacijama, minimalne mutacije funkcije su one koje dovode do malo ili nimalo funkcionalnog CFTR proteina i ne reaguju in vitro na jedinjenje II, jedinjenje III ili kombinaciju Jedinjenja II i Jedinjenja III.
[0100] U nekim realizacijama, minimalne mutacije funkcije su one koje ne reaguju in vitro na jedinjenje II, jedinjenje III ili kombinaciju jedinjenja II i jedinjenja III. U nekim realizacijama, minimalne mutacije funkcije su mutacije zasnovane na in vitro testiranju koje ispunjavaju sledeć e kriterijume u in vitro eksperimentima:
osnovni transport hlorida koji je bio <10% CFTR divljeg tipa, i
poveć anje transporta hlorida za <10% u odnosu na početnu liniju nakon dodavanja jedinjenja II, jedinjenja III ili Jedinjenje II/Jedinjenje III u testu.
[0101] U nekim realizacijama, pacijenti sa najmanje jednom minimalnom mutacijom funkcije pokazuju dokaz kliničke težine definisano kao:
prosečan hlorid znoja >86 mmol/L, i
prevalencija insuficijencije pankreasa (PI) >50%.
[0102] Pacijenti sa genotipom F508del/minimalne funkcije su definisani kao pacijenti koji su heterozigotni F508delCFTR sa drugim CFTR alelom koji sadrži minimalnu mutaciju funkcije. U nekim realizacijama, pacijenti sa genotipom F508del/minimalne funkcije su pacijenti koji su heterozigotni F508del-CFTR sa drugim CFTR alelom koji sadrži mutaciju koja rezultira u CFTR proteinu sa minimalnom CFTR funkcijom (malo ili bez funkcionalnog CFTR proteina) i da ne reaguje in vitro na jedinjenje II, jedinjenje III ili kombinaciju jedinjenja II i jedinjenja III.
[0103] U nekim realizacijama, minimalne mutacije funkcije mogu se odrediti korišć enjem 3 glavna izvora:
• biološka verodostojnost da mutacija reaguje (tj. klasa mutacije)
• dokaz o kliničkoj težini na osnovu populacije (po CFTR2 registru pacijenata; pristup od 15. februara 2016.)
prosečan hlorid znoja >86 mmol/L, i
prevalencija insuficijencije pankreasa (PI) >50%
• in vitro testiranje
<o>mutacije koje su dovele do osnovnog transporta hlorida <10% divljeg tipa CFTR su smatrane za minimalnu funkciju<o>mutacije koje su dovele do transporta hlorida <10% CFTR divljeg tipa nakon dodavanja jedinjenja II i/ili jedinjenja III su smatrane neodgovornim.
[0104] Kao što se ovde koristi, "mutacija rezidualne funkcije" koja se pominje su mutacije klase II do V koje imaju određeni transport zaostalih hlorida i rezultiraju manje ozbiljnim kliničkim fenotipom. Mutacije rezidualne funkcije su mutacije u CFTR genu koje rezultiraju smanjenom količinom proteina ili funkcijom na površini ć elije koja može proizvesti delimičnu aktivnost CFTR.
[0105] Neograničavajuć i primeri mutacija CFTR gena za koje se zna da rezultiraju fenotipom rezidualne funkcije uključuju mutaciju CFTR rezidualne funkcije izabranu između 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272-26A->G, 711+3A->G , E56K, P67L, R74V, D110E, Dl110H, R117C, L206V, R347H, R352K, A455E, D579G, E831Ks, S945L, S977F, F1052V, Dl110H, R117C, L206V, R347H, R352K, A455E, D579G, E831Ks, S945L, S977F, F1052V, F1052V, F1012V, F1015V, F1012K, F1012K, F1012K, F1012H, F10120 Na primer, CFTR mutacije koje izazivaju defektno spajanje mRNA, kao što je 2789+507, dovode do smanjene sinteze proteina, ali isporučuju neki funkcionalni CFTR na površinu ć elije da bi se obezbedila rezidualna funkcija. Druge CFTR mutacije koje smanjuju provodljivost i/ili gajting, kao što je R117H, rezultiraju normalnom količinom CFTR kanala na površini ć elije, ali je funkcionalni nivo nizak, što dovodi do rezidualne funkcije. U nekim realizacijama, mutacija preostale funkcije CFTR je izabrana između R117H, S1235R, I1027T, R668C, G576A, M470V, L997F, R75K, R1070K, R31C, D614G, G1069R, E103K, E106, E106. U nekim realizacijama, mutacija CFTR rezidualne funkcije je izabrana između R117H, S1235R, I1027T, R668C, G576A, M470V, L997F, R75K, R1070K, R31C, D614G, G1069R, E106.
[0106] Preostala CFTR funkcija se može okarakterisati na ć elijskom (in vitro) nivou korišć enjem testova zasnovanih na ć elijama, kao što je FRT test (Van Goor, F. et al. (2009) PNAS Vol. 106, No. 44, 18825- 18830 i Van Goor, F. i saradnici (2011) PNAS Vol. 108, br. 46, 18843-18846), za merenje količine transporta hlorida kroz mutirane CFTR kanale. Mutacije rezidualne funkcije rezultiraju smanjenjem, ali ne i potpunom eliminacijom transporta jona koji zavisi od CFTR. U nekim realizacijama, mutacije rezidualne funkcije dovode do najmanje oko 10% smanjenja CFTR aktivnosti u FRT testu. U nekim realizacijama, mutacije rezidualne funkcije rezultiraju do oko 90% smanjenja aktivnosti CFTR u FRT testu.
[0107] Pacijenti sa genotipom F508del/rezidualne funkcije su definisani kao pacijenti koji su heterozigotni F508delCFTR sa drugim CFTR alelom koji sadrži mutaciju koja rezultira smanjenom količinom proteina ili funkcijom na površinić elije koja može da proizvede delimičnu aktivnost CFTR.
[0108] Pacijenti sa genotipom F508del/gating mutacije su definisani kao pacijenti koji su heterozigotni F508delCFTR sa drugim CFTR alelom koji sadrži mutaciju povezanu sa defektom gajtinga i klinički dokazano da reaguje na jedinjenje III. Primeri takvih mutacija uključuju: G178R, S549N, S549R, G551D, G551S, G1244E, S1251N, S1255P i G1349D.
[0109] U nekim realizacijama, jedinjenja i kompozicije pronalaska mogu da se koriste u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze, od kojih svaki nezavisno dovodi do poveć anja transporta hlorida iznad osnovnog transporta hlorida u pacijent.
[0110] U nekim realizacijama, jedinjenja i kompozicije pronalaska za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze su za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze. kod pacijenta koji je heterozigotan za F508del, a druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija koja izaziva CF. U nekim realizacijama, pacijent je heterozigotan za F508del, a druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija koja izaziva CF, i očekuje se da ć e biti i/ili da reaguje na bilo koje od novih jedinjenja koja su ovde otkrivena, kao što je Jedinjenje formule ( I), genotipovi jedinjenja II, jedinjenja III i/ili jedinjenja IV na osnovu in vitro i/ili kliničkih podataka. U nekim realizacijama, pacijent je heterozigotan za F508del, a druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija koja izaziva CF, i očekuje se da ć e biti i/ili da reaguje na bilo koju kombinaciju (i) novih jedinjenja koja su ovde otkrivena, kao što je Jedinjenje formule (I) i (ii) Jedinjenje II, i/ili Jedinjenje III i/ili Jedinjenje IV genotipovi na osnovu in vitro i/ili kliničkih podataka.
[0111] U nekim realizacijama, jedinjenja i kompozicije pronalaska za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze su za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze. kod pacijenta koji poseduje CFTR genetsku mutaciju izabranu od bilo koje od mutacija navedenih u Tabeli A.
Tabela A. CF Mutacije
[0112] U nekim realizacijama, jedinjenja i kompozicije pronalaska za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze su za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze. kod pacijenta koji poseduje CFTR genetsku mutaciju izabranu između G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V, G1079R, G1079R, D114C, D114C, E355, R140, R140, E325, E325, R145 , D579G, S1235R, S945L, R1070V, F1074L, D110E, D1270N, D1152H, 1717-1G->A, 621+1G->T, 3120+1G->A, 1898+1, 1898+1 T, 2622+1G->A, 405+1G->A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G->A, 712-1G->T , 1248+1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G>A, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272 -26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1.6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A>G, 1717-8G->A, 1342-2A- >C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G->C, 1898+5G->T, 3850-3T->G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005 2T->C, 621+3A->G, 1949del84, 31 41del9, 3195del6, 3199del6, 3905inst, 4209TGTT-> A, A1006E, A120T, A234D, A349V, D192G, D49I, D913G, D436I, D924N, D436I, D924N, D436I, E116K, E588V, E47K, E822K, F10K, E822K, F101 , F1099L, F191V, F311del, F311L, F508C, F575I, G1061R, G1249R, G126D, G149R, G194R, G194V, G27R, G314E, G438V, G458V, G460R, G460R, G69C , H1054D, H1085P, H1085R, H1375P, H139R, H99R, H609R, H939R, I1005R, I1234N, I1269N, I502N, I506S, I502T, I506S, I506T, I601F, 1618T, I807M, I980K, L102R, L1324P, L1335P, L138INS, L1480P , L15P, L165S, L320V, L346P, L453S, L571S, L967S, M1101R, M152V, MIT, M1V, M265R, MIT, M1V, M252T, P574H, P5L, P750L, P9L, P750L, P99L, K1100P, K1291H, K1291R, K237E, K237H, K452P, K98R , R1066C, R1066H, R117G, R117L, R117P, R1283M, R1283S, R170H, R258G, R31L, R334L, R352K, R347L, R352K, R516G, R593K, R516G, R593K, R53L, R593K, R93L, R593G, R933G, S1118F, S1159F, S1159P, S13F, S549R (A ->C),S549R(T->G), S589N, S737F, S912L, T1036N, T1053I, T1246I, T604I, V1153E, V1240G, V1293G, V201M, V232D, V456A, V466F, V18R, V18R, V18R, V18R, V18R, V58R I1014C, I1032C, I109N, I161D, I161S, I563D, I563N, I569C i I913C.
[0113] U nekim izvođenjima, pacijent ima najmanje jednu kombinovanu mutaciju izabranu između: G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V, R317R, R317R, R317R E56K, P67L, L206V, A455E, D579G, S1235R, S945L, R1070V, F1074L, D110E, D1270N, D1152H, 1717-1G->A, 621+1G>A, 621+1G>T+, 8G>T+, 8G>T , 711+1G->T, 2622+1G->A, 405+1G->A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G->A, 712-1G->T, 1248+1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G->A, 2789+5G->A, 3849 10kbC->T, 3272-26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1.6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A->G, 1717-8G ->A, 1342-2A->C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G->C, 1898+5G->T, 3850-3T->G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005+2T>C i 621+3A->G.
[0114] U nekim izvođenjima, pacijent ima najmanje jednu kombinovanu mutaciju izabranu između: 1949del84, 3141del9, 3195del6, 3199del6, 3905InsT, 4209TGTT->A, A1006E, A120T, A243TG, A120T, A2394D, A3394D, A3394D, D134D, D1434D , D836I, D924N, D979V, E116K, E588D, E74K, E822K, F1016S, F1099L, F11L, F311DEL, F311L, F508C, F511L, G1061R, G129R, G126D, G149R, G194R, G194V, G27R, G314E, G458V , G463V, G480C, G622D, G628R, G628R(G->A), G91R, G970D, H1054D, H1085P, H1085R, H1375P, H139R, H199R, H699R, H199R, H699R, H699R, H699R, H699R, H699R, H699R, H699R, H699R, H699R, H699R, H699R, H699R, H699R, H699R, H609R, IV605 IV605 IV605 IV635 , I506T, I601F, 1618T, I807M, I980K, L102R, L1324P, L1335P, L158INS, L1480P, L15P, L165S, L320V, L34PS, L453S, L571S, L453S, MIT101S, M152V, MIT, M1V, M265R, M952I, M952T, P574H , P5L, P750L, P99L, K1100P, K1291H, K1291R, K237E, K237H, K452P, K83R, R1066C, R1066H, R117G, R1286H, R117P, R170H, R1283S, R170H, R258G, R33L, R258L, R334K, R347L, R352K, R347L, R352V, R516G , R553K, R751L, R792G,R933G, S1118F,S1159F,S1159P,S13F,S549R(A->C), S549R(T->G),S589 N, S737F, S912L, T1036N, T1053i, T1246I, T604i, V1253E, V1240G, V1293G, V201M, V232D, V456I, V456F, V562I, V1298C, VM58R, V1282R, V361R, V1282R, V361R, V55G, V57R, I1014C, I1032C, I109N, I161D, I161S, I563D, I563N, I569C i I913C.
[0115] U nekim realizacijama, jedinjenja i kompozicije pronalaska za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze su za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze. kod pacijenta koji poseduje CFTR genetsku mutaciju G551D. U nekim realizacijama, pacijent je homozigot za genetsku mutaciju G551D. U nekim realizacijama, pacijent je heterozigot za genetsku mutaciju G551D. U nekim realizacijama, pacijent je heterozigotan za genetsku mutaciju G551D, ima mutaciju G551D na jednom alelu i bilo koju drugu mutaciju koja izaziva CF na drugom alelu. U nekim realizacijama, pacijent je heterozigotan za G551D genetsku mutaciju na jednom alelu, a druga genetska mutacija koja izaziva CF na drugom alelu je bilo koja od F508del, G542Ks, N1303K, V1282Ks, R117H, R553Ks, 1717-1G , 621+1G>T, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, R1162Ks, G85E, 3120+1G->A, ΔI507, 1898+1G->A, 3659delC, R347T, R53 A455E, 2184delA ili 711+1G->T. U nekim realizacijama, pacijent je heterozigot za G551D genetsku mutaciju, a druga CFTR genetska mutacija je F508del. U nekim realizacijama, pacijent je heterozigot za G551D genetsku mutaciju, a druga CFTR genetska mutacija je R117H.
[0116] U nekim realizacijama, jedinjenja i kompozicije pronalaska za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze su za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze. Fibroza kod pacijenta koji poseduje CFTR genetsku mutaciju F508del. U nekim realizacijama, pacijent je homozigot za F508del genetsku mutaciju. U nekim realizacijama, pacijent je heterozigotan za F508del genetsku mutaciju pri čemu pacijent ima F508del genetsku mutaciju na jednom alelu i bilo koju genetsku mutaciju koja izaziva CF na drugom alelu. U nekim realizacijama, pacijent je heterozigotan za F508del, a druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija koja izaziva CF, uključujuć i, ali ne ograničavaju ć i se na G551D, G542Ks, N1303K, V1282Ks, R117H, R553Ks, 1717-1G-> 1G->T, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, R1162Ks, G85E, 3120+1G->A, ΔI507, 1898+1G->A, 3659delC, R347P, R360T, R45 , 2184delA ili 711+1G->T. U nekim realizacijama, pacijent je heterozigotan za F508del, a druga CFTR genetska mutacija je G551D. U nekim realizacijama, pacijent je heterozigotan za F508del, a druga CFTR genetska mutacija je R117H.
[0117] U nekim realizacijama, pacijent ima najmanje jednu kombinovanu mutaciju izabranu između:
D443I;G576A;R668C,
F508C;S1251N,
G576A; R668C,
G970R; M470V,
R74V;D1270N,
R74V; V201M i
R74V;V201M;D1270N.
[0118] U nekim realizacijama, jedinjenja i kompozicije pronalaska za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze su za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze. Kod pacijenta koji poseduje CFTR genetsku mutaciju izabranu između G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V i G1069R. U nekim realizacijama, pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju izabranu između G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R i S1251N. U nekim realizacijama, pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju izabranu između E193K, F1052V i G1069R. U nekim realizacijama, jedinjenja i kompozicije pronalaska za upotrebu u postupku proizvode poveć anje transporta hlorida u odnosu na osnovni transport hlorida kod pacijenta.
[0119] U nekim realizacijama, jedinjenja i kompozicije pronalaska za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze su za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze. Kod pacijenta koji poseduje CFTR genetsku mutaciju izabranu između R117C, D110H, R347H, R352K, E56K, P67L, L206V, A455E, D579G, S1235R, S945L, R1070V, F1074E, D117.
[0120] U nekim realizacijama, pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju izabranu između 1717-1G->A, 621+1G>T, 3120+1G->A, 1898+1G->A, 711+1G->T, 2622+1G->A, 405+1G->A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G->A, 712-1G->T, 1248 1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G->A, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272- 26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1.6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A->G, 1717-8G->A, 1342-2A- >C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G->C, 1898+5G->T, 3850-3T>G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005+ 2T>C i 621+3A->G. U nekim realizacijama, pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju izabranu između 1717-1G>A, 1811+1.6kbA->G, 2789+5G->A, 3272-26A->G i 3849+10kbC->T. U nekim realizacijama, pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju izabranu između 2789+5G->A i 3272-26A->G.
[0121] U nekim realizacijama, jedinjenja i kompozicije pronalaska za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze su za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze. Kod pacijenta koji poseduje CFTR genetsku mutaciju izabranu između G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V, G1079R, G1079R, D114C, D114C, D114C, E325, R140, R140, E140 , D579G, S1235R, S945L, R1070V, F1074L, D110E, D1270N, D1152H, 1717-1G->A, 621+1G->T, 3120+1G->A, 1898+1, 1898+1 T, 2622+1G->A, 405+1G->A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G->A, 712-1G->T , 1248+1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G>A, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272 -26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1.6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A>G, 1717-8G->A, 1342-2A- >C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G->C, 1898+5G->T, 3850-3T->G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005 2T->C i 621+3A->G, i ljudi CFTR mutacije izabrane između F508del, R117H i G551D.
[0122] U nekim realizacijama, jedinjenja i kompozicije pronalaska za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze, su za upotrebu u postupcima lečenja, smanjenja težine ili simptomatskog lečenja cistične fibroze. Kod pacijenta koji poseduje CFTR genetsku mutaciju izabranu između G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, F1052V, G1079R, G1079R, D114C, D114C, D114C, E325, R140, R140, E140 , D579G, S1235R, S945L, R1070V, F1074L, D110E, D1270N, D1152H, 1717-1G->A, 621+1G->T, 3120+1G->A, 1898+1, 1898+1 T, 2622+1G->A, 405+1G->A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G->A, 712-1G->T , 1248+1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G>A, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272 -26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1.6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A>G, 1717-8G->A, 1342-2A- >C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G->C, 1898+5G->T, 3850-3T->G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005 2T->C, 621+3A->G i CFTR mutacija izabrana između F508del, R117H i G551D; i CFTR mutacije izabrane između F508del, R117H i G551D.
[0123] U nekim realizacijama, pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju izabranu između G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, i G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, i G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R, S1251N, E193K, G551S, G970R i mutacija F1052F, F1052F, F1052F i G551D. U nekim realizacijama, pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju izabranu između G178R, G551S, G970R, G1244E, S1255P, G1349D, S549N, S549R i S1251N, i mutaciju čoveka CFTR izabranu između F508Hdel, G15. U nekim realizacijama, pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju izabranu između E193K, F1052V i G1069R, i ljudsku CFTR mutaciju izabranu između F508del, R117H i G551D.
[0124] U nekim realizacijama, pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju izabranu između R117C, D110H, R347H, R352K, E56K, P67L, L206V, A455E, D579G, S1235R, S945L, R1170H, D1170H, D1170N i D humana CFTR mutacija izabrana između F508del, R117H i G551D.
[0125] U nekim realizacijama, pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju izabranu između 1717-1G->A, 621+1G>T, 3120+1G->A, 1898+1G->A, 711+1G->T, 2622+1G->A, 405+1G->A, 406-1G->A, 4005+1G->A, 1812-1G->A, 1525-1G->A, 712-1G->T, 1248 1G->A, 1341+1G->A, 3121-1G->A, 4374+1G->T, 3850-1G->A, 2789+5G->A, 3849+10kbC->T, 3272- 26A->G, 711+5G->A, 3120G->A, 1811+1.6kbA->G, 711+3A->G, 1898+3A->G, 1717-8G->A, 1342-2A- >C, 405+3A->C, 1716G/A, 1811+1G->C, 1898+5G->T, 3850-3T->G, IVS14b+5G->A, 1898+1G->T, 4005 2T>C i 621+3A->G, i ljudsku CFTR mutaciju izabrano između F508del, R117H i G551D. U nekim realizacijama, pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju izabranu između 1717-1G->A, 1811+1.6kbA->G, 2789+5G->A, 3272-26A>G i 3849+10kbC->T, i humanu CFTR mutaciju izabrano između F508del, R117H i G551D. U nekim realizacijama, pacijent poseduje CFTR genetsku mutaciju izabrano između 2789+5G->A i 3272-26A->G, i ljudsku CFTR mutaciju izabrano između F508del, R117H.
[0126] U nekim realizacijama, pacijent je heterozigot i ima mutaciju koja izaziva CF na jednom alelu i mutaciju koja izaziva CF na drugom alelu. U nekim realizacijama, pacijent je heterozigotan za F508del, a druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija koja izaziva CF, uključujuć i, ali ne ograničavaju ć i se na F508del na jednom CFTR alelu i CFTR mutaciju na drugom CFTR alelu koja je povezana sa minimalnom funkcijom CFTR, rezidualna CFTR funkcija ili defekt u CFTR aktivnosti gajting kanala. U nekim realizacijama, mutacija koja izaziva CF je izabrana iz Tabele A. U nekim realizacijama, mutacija koja izaziva CF je izabrana iz Tabele B. U nekim realizacijama, mutacija koja izaziva CF je izabrana iz Tabele C. U nekim realizacijama, Mutacija koja izaziva CF je izabrana sa Sl. 2. U nekim realizacijama, pacijent je heterozigot i ima mutaciju koja izaziva CF na jednom CFTR alelu odabranom od mutacija navedenih u tabeli sa Sl. 2 i mutacija koja izaziva CF na drugom alelu CFTR je izabrana od CFTR mutacija navedenih u Tabeli B:
Tabela B: CFTR Mutacije
(nastavak)
[0127] U nekim izvođenjima, pacijent je: sa genotipovima F508del/MF (F/MF) (heterozigotni za F508del i MF mutacijom za koju se ne očekuje da ć e odgovoriti-reagovati na CFTR modulatore, kao što je jedinjenje III); sa genotipom F508del/F508del (F/F) (homozigotni za F508del); i/ili sa F508del/gating (F/G) genotipovima (heterozigotnim za F508del i mutacijom za koju se zna da odgovara-reaguje na modulator CFTR (npr., Jedinjenje III-reaguje). U nekim izvođenjima, pacijent sa F508del/MF (F/MF) genotipovima imaju MF mutaciju za koju se ne očekuje da ć e reagovati-odgovoriti na Jedinjenje II, Jedinjenje III i na Jedinjenje II i Jedinjenje III. U nekim izvođenjima, pacijent sa F508del/MF (F/MF) genotipovima ima bilo koju od MF mutacija u Tabeli C.
[0128] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija koja izaziva CF, uključujuć i mutacije skra ć enja, mutacije splajsovanja, malu (≤3 nukleotida) inserciju ili deleciju-brisanje (ins/del) mutacije pomeranja okvira čitanja; ne-malu (>3 nukleotida) inserciju ili deleciju-brisanje (ins/del) mutacija pomeranja okvira čitanja; i mutacije Klase II, III, IV koje ne reaguju na Jedinjenje III samostalno ili u kombinaciji sa Jedinjenjem II ili Jedinjenjem IV.
[0129] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je skrać ena mutacija. U nekim specifičnim izvođenjima, mutacija skrać enja je mutacija skra ć enja navedena u Tabeli C.
[0130] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je mutacija splajsovanja. U nekim specifičnim izvođenjima, mutacija splajsovanja je mutacija splajsovanja navedena u Tabeli C.
[0131] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je mala (≤3 nukleotida) inserciona ili deleciona (ins/del) mutacija pomeranja okvira čitanja. U nekim specifičnim izvođenjima, mala (≤3 nukleotida) inserciona ili deleciona (ins/del) mutacija pomeranja okvira čitanja je mala (≤3 nukleotida) inserciona ili deleciona (ins/del) mutacija pomeranja okvira čitanja navedena u Tabeli C.
[0132] U nekim izvođenjima, jedinjenja Formule (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (V-B), (VI-A), (VI- B), (VI-C) i (VI-D), i farmaceutski prihvatljive soli od njih i njihove deuterisane, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija koja izaziva CF za koju se očekuje da bude i/ ili reaguje na, zasnovanim in vitro i/ili kliničkim podacima, bilo koju kombinaciju (i) novog jedinjenja izabranog od onih koji su ovde otkriveni (npr. jedinjenja Formule (III-A), (III-B), (IV- A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C) i (VI-D), i farmaceutski prihvatljive soli od njih i njihovi deuterisani derivati), i (ii) Jedinjenje II, i/ili Jedinjenje III, i/ili Jedinjenje IV.
[0133] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija koja izaziva CF za koju se očekuje da ć e biti i/ili da reaguje, na osnovu in vitro i/ili kliničkih podataka, na trostruku kombinaciju novog jedinjenja izabranog od onih koji su otkriveni ovde (npr. derivati), i Jedinjenje II i Jedinjenje III.
[0134] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je ne-mala (>3 nukleotida) insercija ili delecija (ins/del) mutacija pomeranja okvira čitanja. U nekim specifičnim izvođenjima, ne mala (>3 nukleotida) umetanje-inserciona ili deleciona (ins/del) mutacija pomeranja okvira čitanja koja nije mala (>3 nukleotida) inserciona ili deleciona (ins/del) mutacija pomeranja okvira čitanja je navedena u Tabeli C.
[0135] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je mutacija Klase II, III, IV koja ne reaguje samo na Jedinjenje III ili u kombinaciji sa Jedinjenjem II ili Jedinjenjem IV. U nekim specifičnim izvođenjima, mutacije Klase II, III, IV koje ne reaguju samo na Jedinjenje III ili u kombinaciji sa Jedinjenjem II ili Jedinjenjem IV su mutacije Klase II, III, IV koje ne reaguju samo na Jedinjenje III ili u kombinaciji sa Jedinjenjem II ili Jedinjenjem IV navedeno u Tabeli C.
[0136] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija navedena u Tabeli C.
[0137] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija, ali drugačija od F508del, navedena u Tabeli A, B, C i SL.2.
[0138] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija navedena u Tabeli A. U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, a druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija navedena u Tabeli B. U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija navedena u Tabeli C. U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del, i druga CFTR genetska mutacija je bilo koja mutacija navedena na Sl. 2.
[0139] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan za F508del.
[0140] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan imajući jednu mutaciju koja izaziva CF na jednom CFTR alelu izabranom od mutacija navedenih u tabeli sa Sl. 2 i drugu mutaciju koja izaziva CF na drugom alelu CFTR je izabrana od CFTR mutacija navedenih u Tabeli C.
[0141] U nekim izvođenjima, kompozicija otkrivena ovde je korisna za upotrebu u lečenju, smanjenju ozbiljnosti ili simptomatskom lečenju cistične fibroze kod pacijenata koji pokazuju rezidualnu aktivnost CFTR u apikalnoj membrani respiratornog i nerespiratornog epitela. Prisustvo rezidualne CFTR aktivnosti na površini epitela može se lako otkriti korišć enjem metoda poznatih u tehnici, npr., standardnih elektrofizioloških, biohemijskih ili histohemijskih tehnika. Takve metode identifikuju CFTR aktivnost koriš ć enjem in vivo ili eks vivo elektrofizioloških tehnika, merenja koncentracija Cl u znoju ili pljuvački, ili eks vivo biohemijskih ili histohemijskih tehnika za prać enje površinske gustine ć elije. Koriste ć i takve metode, rezidualna aktivnost CFTR se može lako otkriti za pacijente koji su heterozigotni ili homozigotni za niz različitih mutacija, uključujuć i pacijente heterozigotne za najčeš ć u mutaciju, F508del, kao i druge mutacije kao što su mutacija G551D ili R117H mutacija. U nekim izvođenjima, kompozicije otkrivene ovde su korisne za lečenje, smanjenje težine-ozbiljnosti ili simptomatsko lečenje cistične fibroze kod pacijenata koji pokazuju malo ili nimalo rezidualne aktivnosti CFTR. U nekim izvođenjima, kompozicije otkrivene ovde su korisne za lečenje, smanjenje težine-ozbiljnosti ili simptomatsko lečenje cistične fibroze kod pacijenata koji pokazuju malo ili nimalo rezidualne aktivnosti CFTR u apikalnoj membrani respiratornog epitela.
[0142] U nekim izvođenjima, kompozicije otkrivene ovde su korisne za lečenje ili smanjenje težine cistične fibroze kod pacijenata koji pokazuju rezidualnu CFTR aktivnost korišć enjem farmakoloških metoda. Takve metode pove ć avaju količinu CFTR prisutnog na površini ć elije, indukuju ć i na taj način do sada odsutnu CFTR aktivnost kod pacijenta ili pove ć avaju ć i postojeć i nivo rezidualne CFTR aktivnosti kod pacijenta.
[0143] U nekim izvođenjima, kompozicije otkrivene ovde su korisne za lečenje ili smanjenje težine cistične fibroze kod pacijenata sa određenim genotipovima koji pokazuju rezidualnu aktivnost CFTR.
[0144] U nekim izvođenjima, kompozicije otkrivene ovde su korisne za lečenje, smanjenje težine ili simptomatsko lečenje cistične fibroze kod pacijenata u okviru određenih kliničkih fenotipova, npr. blagog do umerenog kliničkog fenotipa koji tipično korelira sa količinom rezidualne aktivnosti CFTR u apikalnoj membrani epitela. Takvi fenotipovi uključuju pacijente koji pokazuju suficijenciju pankreasa.
[0145] U nekim izvođenjima, kompozicije otkrivene ovde su korisne za lečenje, smanjenje ozbiljnosti ili simptomatsko lečenje pacijenata sa dijagnozom pankreasne suficijencije, idiopatskog pankreatitisa i kongenitalnog bilateralnog odsustva semevda, ili blage bolesti pluć a pri čemu pacijent pokazuje rezidualnu aktivnost CFTR.
[0146] U nekim izvođenjima, ovo otkrić e se odnosi na kompoziciju za upotrebu u metodu pove ć anja ili indukcije aktivnosti anjonskih kanala in vitro ili in vivo, koji obuhvata dovođenje u kontakt kanala sa kompozicijom otkrivenom ovde. U nekim izvođenjima, anjonski kanal je hloridni ili bikarbonatni kanal. U nekim izvođenjima, anjonski kanal je hloridni kanal.
[0147] U nekim izvođenjima, pacijent je heterozigotan i ima mutaciju F508del na jednom alelu i mutaciju na drugom alelu izabranom iz Tabele 5:
Tabela 5: CFTR mutacije
(nastavak)
Mutacija
[0148] Tačna količina potrebne farmaceutske kompozicije ć e varirati od subjekta do subjekta, u zavisnosti od vrste, starosti i opšteg stanja subjekta, težine bolesti, određenog agensa, načina njegovog davanja i slično. Jedinjenja iz ovog otkrić a mogu biti formulisana u obliku jedinične doze radi lakše primene i uniformnosti doziranja. Izraz "oblik jedinične doze" kao što se ovde koristi odnosi se na fizički diskretnu jedinicu agensa odgovarajuću za pacijenta koji se leči. Podrazumeva se, međutim, da ć e o ukupnoj dnevnoj upotrebi jedinjenja i kompozicija iz ovog otkrić a odlučivati lekar koji prisustvuje u okviru zdrave medicinske procene. Specifični nivo efektivne doze za svakog određenog pacijenta ili organizam će zavisiti od niza faktora uključujuć i poremeć aj koji se leči i ozbiljnost poreme ć aja; aktivnost specifičnog upotrebljenog jedinjenja; specifičnu kompoziciju koja se koristi; starost, telesnu težinu, opšte zdravlje, pol i ishranu pacijenta; vreme primene, put primene i brzina izlučivanja specifičnog upotrebljenog jedinjenja; trajanje lečenja; lekove koji se koriste u kombinaciji ili slučajno sa specifičnim upotrebljenim jedinjenjem, i slične faktore dobro poznate u medicinskoj tehnici. Termin "pacijent", kao što se ovde koristi, označava životinju, kao što je sisar, i još dalje kao što je čovek.
[0149] U nekim izvođenjima, otkriće uključuje deuterisane derivate novih jedinjenja otkrivenih ovde i njihovih farmaceutski prihvatljivih soli. Neograničavajuć i primeri deuteriranih jedinjenja su otkriveni na SL.1
[0150] U nekim izvođenjima, Jedinjenje III-d kao što se ovde koristi uključuje deuterisano jedinjenje otkriveno u U.S. Patent br. 8,865,902.8,865,902 kao:
Klinička efikasnost Jedinjenja III-d u kombinaciji sa drugim CFTR korektorima, uključujuć i kombinacije sa Jedinjenjem II, je opisana u Davies et al., New Engl. J. Med. 379(17):1599-1611 (2018) and Davies et al., New Engl. J. Med. 379(17):1612-1620 (2018).
[0151] Primeri izvođenja otkrić a uključuju: Nova jedinjenja otkrivena ovde (npr. jedinjenja Formule (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C) i (VI-D), farmaceutski prihvatljive soli od njih i deuterisani derivati bilo kojeg od prethodno navedenih, uključujuć i jedinjenja na Sl. 1 i ona koja su ovde posebno prikazana) mogu biti pripremljena odgovarajuć im metodama poznatim u tehnici. Na primer, oni mogu biti pripremljeni u skladu sa primerima sinteza opisanim u nastavku u Primerima. Na primer, deuterisani derivati novih jedinjenja Formule (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (V-B), ( VI-A), (VI-B), (VI-C) i (VI-D) i farmaceutski prihvatljive soli od njih mogu biti pripremljeni na sličan način kao oni za jedinjenja Formule (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (V-B), (VI-A), (VI-B) (VI-C) i (VI-D) i farmaceutski prihvatljive soli od njih primenom intermedijara i/ili reagenasa gde je jedan ili više atoma vodonika zamenjeno sa deuterijumom. Na primer, videti T.G. Gant "Using deuterium in drug discovery: leaving the label in the drug," J. Med. Chem. 2014, 57, 3595-3611.
[0152] U nekim izvođenjima, ovde objavljena jedinjenja i farmaceutski prihvatljive soli od njih i deuterisani derivati bilo kojeg od prethodno navedenih su pripremljeni kao što je prikazano u Šemama 1-12, pri čemu su varijable u njima svaka i nezavisno su kao one za Formulu (I). Pogodni uslov (i) poznati u tehnici mogu biti upotrebljeni za svaki korak prikazan na šemama. Metode objavljene ovde mogu biti korišćene za pripremu jedinjenja Formule (I), (IIA), (II-B), (III-A), (III-B), (IV-A), (IV-B), (IV-C), (V-A), (V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C) i (VI-D), i bilo koja jedinjenja prikazana u Tabeli 5 i SL. 1, soli od njih ili deuterisani derivati bilo kojeg od prethodno navedenih.
[0153] U nekim izvođenjima, kao što je prikazano na Šemi 1, metode obuhvataju reagovanje jedinjenja Formule (A) ili njegove soli sa jedinjenjem Formule (B) ili njegove soli da bi se dobilo jedinjenje Formule (Y), njegova so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih. Reakcija Formule (A) i Formule (B) može biti izvedena pod bilo kojom pogodnom reakcijom pripajanja između karboksilne kiseline i sulfonamida, kao što je sa CDI. U nekim izvođenjima, reakcija pripajanja se izvodi u prisustvu baze, kao što je DBU.
Šema 1
[0154] U nekim izvođenjima, kao što je prikazano u Šemi 2, metode obuhvataju uklanjanje zaštite jedinjenja formule (Y) da bi se generisalo –stvorilo jedinjenje formule (Y-1), njegova so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih. Uklanjanje zaštite Formule (I) može biti izvedeno pod bilo kojim pogodnim uslovima uklanjanja zaštite, koji su lako očigledni stručnjaku u ovoj oblasti tehnike u zavisnosti od zaštitne grupe R<10>. U nekim izvođenjima, zaštitna grupa R<10>je Boc, i uslovi uklanjanja zaštite su kiseli. U nekim izvođenjima, kao što je prikazano u Šemi 2, metode obuhvataju reagovanje jedinjenja formule (Y-1) da bi se generisalo –stvorilo jedinjenje Formule (I), njegova so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih. Reakcija Formule (Y-1) može biti izvedena pod bilo kojom pogodnom reakcijom pripajanja između amina i halogena. U nekim izvođenjima, ova reakcija pripajanja se izvodi u prisustvu baze, kao što je K2CO3
Šema 2
[0155] U nekim izvođenjima, kao što je prikazano u Šemi 3, metode obuhvataju reagovanje jedinjenja formule (A) ili njegove soli sa jedinjenjem formule (B-2) ili njegovom soli da bi se stvorilo jedinjenje Formule (Y-2), njegova so , ili deuterisani derivat bilo kojegg od prethodno navedenih. Reakcija Formule (A) i Formule (B-2) može biti izvedena pod bilo kojom pogodnom reakcijom pripajanjaizmeđu karboksilne kiseline i sulfonamida, kao što je CDI. U nekim izvođenjima, reakcija pripajanja se izvodi u prisustvu baze, kao što je DBU.
Šema 3
[0156] U nekim izvođenjima, kao što je prikazano u Šemi 4, metode obuhvataju reagovanje jedinjenja formule (D) ili njegove soli sa jedinjenjem Formule (E-2) ili njegovom soli da bi se stvorilo jedinjenje Formule (B-2), njegova so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenog. Reakcija Formule (D) i Formule (E-2) može biti izvedena pod bilo kojom pogodnom reakcijom pripajanja između amina i R<d>.
Šema 4
[0157] U nekim izvođenjima, kao što je prikazano u Šemi 5, metode obuhvataju reagovanje jedinjenja formule (A) ili njegove soli sa jedinjenjem Formule (B-3) ili njegove soli da bi se stvorilo jedinjenje Formule (Y-3), njegova so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih. Reakcija Formule (A) i Formule (B-3) može biti izvedena pod bilo kojom pogodnom reakcijom pripajanja između karboksilne kiseline i sulfonamida, kao što je CDI. U nekim izvođenjima, reakcija pripajanja se izvodi u prisustvu baze, kao što je DBU.
Šema 5
[0158] U nekim izvođenjima, kao što je prikazano u Šemi 6, metode obuhvataju reagovanje jedinjenja Formule (D) ili njegove soli sa jedinjenjem Formule (E-3) ili njegovom soli da bi se stvorilo jedinjenje Formule (B-3), njegova so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenog. Reakcija Formule (A) i Formule (B-3) se može izvesti pod bilo kojom pogodnom reakcijom pripajanja između alkohola i R<d>.
Šema 6
[0159] U nekim izvođenjima, kao što je prikazano u Šemi 7, metode obuhvataju reagovanje jedinjenja Formule (Z-1) sa jedinjenjem Formule (X) da bi se stvorilo jedinjenje Formule (I), njegova so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih. Reakcija formule (Z-1) sa jedinjenjem Formule (X) može se izvesti pod bilo kojom pogodnom reakcijom pripajanja između azota i halogena.
Šema 7
[0160] U nekim izvođenjima, kao što je prikazano u Šemi 8, metode obuhvataju reagovanje jedinjenja formule (Z-1) sa jedinjenjem formule (X-1) da bi se stvorilo jedinjenje Formule (IV-C), njegova so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih. Reakcija Formule (Z-1) sa jedinjenjem Formule (X-1) može se izvesti pod bilo kojom pogodnom reakcijom pripajanja između azota i halogena.
Šema 8
[0161] U nekim izvođenjima, kao što je prikazano u Šemi 9, metode obuhvataju reagovanje jedinjenja Formule (F) ili njegove soli sa jedinjenjem formule (G) ili njegovom soli da bi se stvorilo jedinjenje Formule (H), njegova so ili deuterisani derivat bilo kojegg od prethodno navedenih. Reakcija Formule (F) i Formule (G) može biti izvedena pod bilo kojom pogodnom reakcijom između amida i atoma sumpora, kao što je sa brom. U nekim izvođenjima, reakcija se izvodi u prisustvu baze, kao što je piridin. Jedinjenje Formule (H) ili njegova so mogu biti oksidisani da bi se formiralo jedinjenje Formule (J) ili njegova so. U nekom izvođenju, oksidacioni agens je meta-hlorperoksibenzojeva kiselina (m-CPBA).
Šema 9
[0162] U nekim izvođenjima, kao što je prikazano u Šemi 10, metode obuhvataju reakciju jedinjenja Formule (J) sa jedinjenjem Formule (L) da bi se dobilo jedinjenje Formule (M), njegova so, ili deuterisani derivat bilo kojegg od prethodno navedenih. U nekim izvođenjima, reakcija se odvija u prisustvu baze, kao što je natrijum hidrid.
Šema 10
[0163] U nekim izvođenjima, kao što je prikazano u Šemi 11, metode obuhvataju reagovanje jedinjenja formule (M) ili njegove soli sa aminom da se proizvede jedinjenje Formule (N), njegova so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu X je NH ili N( C1-C4alkil). U nekim izvođenjima, reakcija Formule (M) i amina može biti izvdena u prisustvu N-hlorosukcinimida. Jedinjenje formule (N) može biti konvertovano u jedinjenje formule (O), njegovu so ili deuterisani derivat bilo kojegg od prethodno navedenih. U nekim izvođenjima, reakcija se izvodi pod redukcionim uslovima. U nekim izvođenjima, reakcija se izvodi u prisustvu paladijuma na ugljeniku i vodoniku.
Šema 11
[0164] U nekim izvođenjima, kao što je prikazano u Šemi 12, metode obuhvataju reagovanje jedinjenja Formule (O) ili njegove soli da bi se stvorilo jedinjenje Formule (P), njegova so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih. U nekim izvođenjima, reakcija Formule (O) može biti izvedena u prisustvu baze. U nekim izvođenjima, baza je trietilamin. U nekim izvođenjima, reakcija Formule (O) se može izvesti uz zagrevanje.
Šema 12
[0165] Predmetni pronalazak je definisan u patentnim zahtevima. Dodatna izvođenja uključuju:
39. Jedinjenje Formule (III-A) ili (III-B):
ili
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih,
pri čemu:
-ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju;
-Prsten A je fenil, 5-člani heteroarilni prsten ili 6-člani heteroarilni prsten;
-Prsten D je fenilni prsten, 5-člani heterociklilni prsten, 6-člani heterociklilni prsten, 5-člani
heteroarilni prsten, ili 6-člani heteroarilni prsten;
-svaki R<1>je nezavisno izabran od C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksil grupe;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
-svaki R<2>je nezavisno izabran od C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksi grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksil grupe;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>je nezavisno izabran od halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupa ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom (atomima) za koje su attached to -vezani, formiraju 5 -6-člani cikloalkilni ili heterociklilni prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od halogena, C1-C2alkil grupa, haloalkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa,
pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5, ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu je heteroatom u
-(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkilgrupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od
C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupa, C1-C2alkoksi grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena;
-q je 1 ili 2;
-Z je dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L se nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupa, -O- i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z
nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika, halogena, C1-C2 alkil grupa, hidroksil
grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa.
40. Jedinjenje iz izvođenja 39, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je Prsten A fenilni prsten, piridil prsten ili pirazolil prsten, pri čemu je Prsten A opciono supstituisan sa (R<1>)m.
41. Jedinjenje iz izvođenja 39 ili 40, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojegg od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<1>nezavisno izabran od deuterijuma, C1-C2alkil grupa i hidroksilne grupe, i m je 0 ili 1.
42. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 39 do 41, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu n je 0.
43. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 39 do 42, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je Prsten D 5-člani heteroarilni prsten supstituisan sa (R<4>)q.
44. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 39 do 42, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je Prsten D pirazolil prsten supstituisan sa (R<4>)q.
45. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 39 do 42, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je Prsten D
,
pri čemu
označava tačku spajanja Prstena D za Prsten B.
46. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 39 do 42, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Prsten D je
pri čemu
označava tačku spajanja Prstena D za Prsten B.
47. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 39 do 46, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<4>nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5, ili 6;
-svaki Y se nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
48. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 39 do 47, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<4>nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5, ili 6;
-svaki Y se nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C<1>-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
49. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 39 do 47, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<4>nezavisno izabran iz okso grupe ili -O-(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, ili 5;
-svaki Y se nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R6na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C<1>-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
50. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 39 do 47, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojegg od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<4>nezavisno izabran od
pri čemu
označava tačku spajanj R<4>za prsten D.
51. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 39 do 50, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo koegg od prethodno navedenih, pri čemu k je 3, 4, 5 ili 6.
52. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 39 do 51, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu q je 1.
53. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 39 do 52, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat od bilo kojegg od prethodno navedenih, pri čemu je Z dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu:
-r je 3, 4, ili 5;
-svaki L je nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupa, -O- i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika i deuterijuma; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa.
54. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 39 do 52, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat od bilo kojegg od prethodno navedenih, pri čemu je Z dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu:
-r je 3, 4, ili 5;
-svaki L se nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupa, i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika i deuterijuma; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i metila.
55. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 39 do 52, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat od bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je Z dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu:
-r je 3, 4, ili 5;
-svaki L je nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupa, i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika i deuterijuma; i
-svaki R<b>je vodonik.
56. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 39 do 52, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat od bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je Z dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu:
-r je 3, 4, ili 5;
-svaki L je nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupa, -O-, i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R<8>i R<9>je vodonik; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa.
57. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 39 do 56, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat iz bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je R<3>nezavisno CD3.
58. Jedinjenje iz izvođenja 39, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat iz bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je jedinjenje Formule (III-A) ili (III-B) jedinjenje Formule IV-A:
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu:
-ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju;
-Prsten D je fenilni prsten, 5-člani heterociklilni prsten, 6-člani heterociklilni prsten, 5-člani heteroarilni prsten ili 6-člani heteroarilni prsten;
- svaki R<1>je nezavisno izabran od C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
-svaki R<2>se nezavisno izabran od C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>se nezavisno izabran od halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupa, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkilni li heterociklilni prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od halogena, C1-C2alkil grupa, haloalkil grupa, hidroksil grupe, C<1>-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa , pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5, ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki Ra je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih
sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena;
-q je 1 ili 2;
-Z is a dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu:
-r je 3, 4, ili 5;
-svaki L se nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupa, -O- i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
- svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika, halogena, C1-C2alkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa.
59. Jedinjenje iz izvođenja 58, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R1nezavisno izabran od deuterijuma, C1-C2alkil grupa i hidroksilne grupe, i m je 0 ili 1.
60. Jedinjenje iz izvođenja 58 ili 59, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu n je 0.
61. Jedinjenje iz izvođenja 58 do 60, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Prsten D je 5-člani heteroarilni prsten supstituisan sa (R<4>)q.
62. Jedinjenje iz izvođenja 58 do 60, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Prsten D je pirazolilni prsten supstituisan sa (R<4>)q.
63. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 58 do 60, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu prsten D je
pri čemu
označava tačku vezivanja prstena D za prsten B.
64. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 58 do 60, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Prsten D je
pri čemu
označava tačku vezivanja prstena D za prsten B.
65. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 58 do 64, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<4>je nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih
sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
66. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 58 do 65, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<4>je nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih
sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
67. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 58 do 66, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<4>je nezavisno izabran iz okso grupe ili -O -(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, ili 5;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih
sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
68. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 58 do 67, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<4>je nezavisno izabran od
pri čemu
označava tačku vezivanja R<4>za Prsten D.
69. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 58 do 68, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu k je 3, 4, 5, ili 6.
70. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 58 do 69, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu q je 1.
71. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 58 do 70, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je Z dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L je nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupa, -O- i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika i deuterijuma; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa.
72. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 58 do 70, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je Z dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L je nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupa, i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika i deuterijuma; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i metila.
73. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 58 do 70, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je Z dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L je nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupa, i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika i deuterijuma; i
-svaki R<b>je vodonik.
74. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 58 do 70, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je Z dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L je nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupa, -O-, i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R<8>i R<9>je vodonik; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa.
75. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 58 do 74, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R3je nezavisno CD3.
76. Jedinjenje od izvođenja 39, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu jedinjenje Formule (III-A) ili (III-B) je jedinjenje Formule IV-B:
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu:
-ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju;
-Prsten D je fenilni prsten, 5-člani heterociklilni prsten, 6-člani heterociklilni prsten, 5-člani
heteroarilni prsten, ili 6-člani heteroarilni prsten;
- svaki R<1>je nezavisno izabran od C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
-svaki R<2>je nezavisno izabran od C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>je nezavisno izabran od halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupa, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkilni ili heterociklilni prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od halogena, C1-C2alkil grupa, haloalkil grupa, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa, pri čemu :
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih
sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena;
-q je 1 ili 2;
-r je 3 ili 4;
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika, halogena, C1-C2alkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa.
77. Jedinjenje iz izvođenja 76, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, C1-C2alkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa.
78. Jedinjenje iz izvođenja 76 ili 77, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<8>i R<9>je H.
79. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 76 do 78, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<1>je nezavisno izabran od deuterijuma, C1-C2 alkil grupa i hidroksil grupe, i m je 0 ili 1.
80. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 76 do 79, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu n je 0.
81. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 76 do 80, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Prsten D je 5-člani heteroarilni prsten supstituisan sa (R<4>)q.
82. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 76 do 80, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je prsten D pirazolil prsten supstituisan sa (R<4>)q.
83. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 76 do 80, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je prsten D
pri čemu
označava tačku vezivanja Prstena D za Prsten B.
84. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 76 do 80, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je prsten D
pri čemu
označava tačku vezivanja Prstena D za Prsten B.
85. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 76 do 84, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<4>je nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih
sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
86. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 76 do 84, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<4>je nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih
sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
87. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 76 do 84, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<4>je nezavisno izabran iz okso grupe ili -O-(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, ili 5;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih
sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
88. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 76 do 84, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<4>je nezavisno
pri čemu
označava tačku spajanja R<4>za prsten D.
89. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 76 do 88, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu k je 3,4,5, ili 6.
90. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 76 do 89, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu q je 1.
91. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 76 do 90, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika i deuterijuma; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa.
92. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 76 do 90, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika i deuterijuma; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i metila.
93. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 76 do 90, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika i deuterijuma; i
-svaki R<b>je vodonik.
94. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 76 do 90, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki R<8>i R<9>je vodonik; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa.
95. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 76 do 94, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<3>je nezavisno CD3.
96. Jedinjenje iz izvođenja 39, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu jedinjenje Formule (III-A) ili (III-B) je jedinjenje Formule IV-C:
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih,
pri čemu:
-ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju;
- svaki R<1>je nezavisno izabran od C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
-svaki R<2>je nezavisno izabran od C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>je nezavisno izabran od halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe, i -(Y)k-R<7>grupa, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkilni ili heterociklilni prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od halogena, C1-C2alkil grupa, haloalkil grupa, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih
sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena;
-q je 1 ili 2;
-r je 3 ili 4;
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika, halogena, C1-C2alkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupe.
97. Jedinjenje iz izvođenja 96, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, C1-C2alkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa.
98. Jedinjenje iz izvođenja 96 ili 97, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<8>i R<9>je H.
99. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 96 do 98, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<1>je nezavisno izabran od deuterijuma, C1-C2 alkil grupa, i hidroksil grupe, i m je 0 ili 1.
100. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 96 do 99, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu n je 0.
101. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 96 do 100, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<4>je nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
- R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih
sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
102. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 96 do 100, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<4>je nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih
sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
103. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 96 do 100, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<4>je nezavisno izabran iz okso grupe ili -O-(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, ili 5;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe, i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih
sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
104. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 96 do 100, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<4>je nezavisno izabran od
pri čemu
označava tačku spajanja R<4>za Prsten D.
105. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 96 do 104, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu k je 3, 4, 5, ili 6.
106. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 96 do 105, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu q je 1.
107. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 96 do 106, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika i deuterijuma; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa.
108. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 96 do 106, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika i deuterijuma; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i metila.
109. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 96 do 106, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika i deuterijuma; i
-svaki R<b>je vodonik.
110. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 96 do 106, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki R<8>i R<9>je vodonik; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa.
111. Jedinjenje bilo kojeg od izvođenja 96 do 110, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<3>je nezavisno CD3.
112. Jedinjenje iz izvođenja 39, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu jedinjenje Formule (III-A) ili (III-B) je jedinjenje Formule V-A:
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih,
pri čemu:
-ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju;
-Prsten D je fenilni prsten, 5-člani heterociklilni prsten, 6-člani heterociklilni prsten, 5-člani heteroarilni prsten ili 6-člani heteroarilni prsten;
- svaki R<1>je nezavisno izabran od C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
- svaki R<2>je nezavisno izabran od C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>je nezavisno zabran od halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupa, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkilni ili heterociklilni prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupa, haloalkil grupa, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili oksio;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena;
-q je 1 ili 2;
-Z je dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L je nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupa, -O- i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika, halogena, C1-C2alkil grupa, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2 alkil grupa.
113. Jedinjenje iz izvođenja 112, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<1>nezavisno izabran od deuterijuma, C1-C2alkil grupa, i hidroksilne grupe, i m je 0 ili 1.
114. Jedinjenje iz izvođenja 112 ili 113, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu n je 0.
115. Jedinjenje iz bilo kojeg iz izvođenja 112 do 114, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Prsten D je 5-člani heteroarilni prsten supstituisan sa (R<4>)q.
116. Jedinjenje iz bilo kojeg iz izvođenja 112 do 114, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Prsten D je pirazolilni prsten supstituisan sa (R<4>)q.
117. Jedinjenje iz bilo kojeg iz izvođenja 112 do 114, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Prsten D je
pri čemu
označava tačku vezivanja Prstena D za Prsten B.
118. Jedinjenje iz bilo kojeg iz izvođenja 112 do 117, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Prsten D je
pri čemu
označava tačku vezivanja Prstena D za Prsten B.
119. Jedinjenje iz bilo kojeg iz izvođenja 112 do 118, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<4>nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih
sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
120. Jedinjenje iz bilo kojeg iz izvođenja 112 do 118, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<4>nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih
sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
121. Jedinjenje iz bilo kojeg iz izvođenja 112 do 118, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<4>nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, ili 5;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih
sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
122. Jedinjenje iz bilo kojeg iz izvođenja 112 do 118, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<4>nezavisno izabran iz
pri čemu
označava tačku vezivanja R<4>za prsten D.
123. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 112 do 122, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu k je 3, 4, 5, ili 6.
124. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 112 do 123, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu q je 1.
125. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 112 do 124, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Z je dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L je nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupa, -O- i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z
nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
- svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika i deuterijuma; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa.
126. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 112 do 124, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Z je dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L je nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupa, i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
- svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika i deuterijuma; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i metila.
127. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 112 do 124, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Z je dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L je nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupa, i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
- svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika i deuterijuma; i
-svaki R<b>je vodonik.
128. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 112 do 124, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Z je dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L je nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupa, -O-, i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
- svaki R<8>i R<9>je vodonik; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa.
129. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 112 do 128, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<3>nezavisno CD3.
130. Jedinjenje iz izvođenja 39, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je jedinjenje Formule (III-A) ili (III-B) jedinjenje Formule V-B:
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih,
pri čemu:
-ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju;
-Prsten D je fenilni prsten, 5-člani heterociklilni prsten, 6-člani heterociklilni prsten, 5-člani
heteroarilni prsten, ili 6-člani heteroarilni prsten;
- svaki R<1>je nezavisno izabran od C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
- svaki R<2>je nezavisno izabran od C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>je nezavisno izabran od halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupa, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkilni ili heterociklilni prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od halogena, C1-C2alkil grupa, haloalkil grupa, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5, ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u
-(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkilgrupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od
C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i -svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena;
-q je 1 ili 2;
-r je 3, 4, ili 5; i
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika, halogena, C1-C2alkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa.
131. Jedinjenje iz izvođenja 130, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<8>i R<9>nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, C1-C2alkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa.
132. Jedinjenje iz izvođenja 130 ili 131, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<8>i R<9>je H.
133. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 130 do 132, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<1>je nezavisno izabran od deuterijuma, C1-C2alkil grupa i hidroksilne grupe, i m je 0 ili 1.
134. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 130 do 133, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu n je 0.
135. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 130 do 134, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Prsten D je 5-člani heteroarilni prsten supstituisan sa (R<4>)q
136. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 130 do 134, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Prsten D je pirazolil prsten supstituisan sa (R<4>)q.
137. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 130 do 134, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Prsten D je
pri čemu
označava tačku vezivanja Prstena D za Prsten B.
138. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 130 do 137, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Prsten D je
pri čemu
označava tačku vezivanja Prstena D za Prsten B.
139. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 130 do 138, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<4>je nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5, ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od
C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i -svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
140. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 130 do 138, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<4>nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5, ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od
C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa, i C1-C2haloalkoksil grupa; i -svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
141. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 130 do 138, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<4>nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, ili 5;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od
C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa, i C1-C2haloalkoksil grupa; i -svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
142. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 130 do 138, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<4>nezavisno izabran od:
pri čemu
označava tačku vezivanja R<4>za prsten D.
143. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 130 do 142, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu k je 3, 4, 5, ili 6.
144. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 130 do 143, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu q je 1.
145. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 130 do 144, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu:
- r je 3, 4 ili 5; i
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika i deuterijuma.
146. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 130 do 144, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu:
- r je 3, 4 ili 5; i
-svaki R<8>i R<9>je vodonik.
147. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 130 do 144, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu:
- r je 3, 4 ili 5; i
-svaki R<8>i R<9>je deuterijum.
148. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 130 do 144, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu:
- r je 3 ili 4;
-svaki R<8>i R<9>je vodonik.
149. Jedinjenje iz bilo kojeg od izvođenja 130 do 148, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<3>je nezavisno CD3.
150. Jedinjenje iz izvođenja 1, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu jedinjenje Formule I je jedinjenje Formule VI-A ili VI-B:
ili
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu:
-ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju;
-Prsten D je fenilni prsten, 5-člani heterociklilni prsten, 6-člani heterociklilni prsten, 5-člani
heteroarilni prsten, ili 6-člani heteroarilni prsten;
- svaki R<1>je nezavisno izabran od C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
- svaki R<2>je nezavisno izabran od C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>je nezavisno izabran od halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupa, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkilni ili heterociklilni prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupa, haloalkil grupa, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili oksio;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena;
-q je 1 ili 2;
-Z je dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L je nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupa, -O- i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran od vodonika, halogena, C1-C2alkil grupa, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<b>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa.
151. Jedinjenje iz izvođenja 150, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<1>je nezavisno izabran od deuterijuma, C1-C2alkil grupa i hidroksilne grupe, i m je 0 ili 1.
152. Jedinjenje iz izvođenja 150 ili 151, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu n je 0.
153. Jedinjenje iz bilo kojeg iz izvođenja 150 do 152, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Prsten D je 5-člani heteroarilni prsten supstituisan sa (R<4>)q.
154. Jedinjenje iz bilo kojeg iz izvođenja 150 do 152, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Prsten D je pirazolilni prsten supstituisan sa (R<4>)q.
155. Jedinjenje iz bilo kojeg iz izvođenja 150 do 152, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Prsten D je
pri čemu
označava tačku vezivanja Prstena D za Prsten B.
156. Jedinjenje iz bilo kojeg iz izvođenja 150 do 152, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu Prsten D je
pri čemu
označava tačku vezivanja Prstena D za Prsten B.
157. Jedinjenje iz bilo kojeg iz izvođenja 150 do 156, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<4>je nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili oksio;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih
sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
158. Jedinjenje iz bilo kojeg iz izvođenja 150 do 156, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<4>je nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih
sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
159. Jedinjenje iz bilo kojeg iz izvođenja 150 do 156, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<4>je nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, ili 5;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran od vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran od vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>je izabran od vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih
sa jednom ili više grupa izabranih od C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
160. Jedinjenje iz bilo kojeg iz izvođenja 150 do 156, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu svaki R<4>je nezavisno izabran od
pri čemu
označava tačku vezivanja R4 za prsten D.
161. Jedinjenje bilo kog od oblika izvođenja 150 do 160, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, gde je k 3, 4, 5 ili 6.
162. Jedinjenje bilo kog od oblika izvođenja 150 do 161, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, gde je q 1.
163. Jedinjenje bilo koje od realizacija 150 do 162, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, gde je Z dvovalentni linker formule (L)r, gde:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L se nezavisno bira između C(R<8>)(R<9>) grupa, -O- i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R<8>i R<9>se nezavisno biraju između vodonika i deuterijuma; i
-svaki Rb se nezavisno bira između vodonika i C1-C2alkil grupa.
164. Jedinjenje bilo koje od realizacija 150 do 162, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, gde je Z dvovalentni linker formule (L)r, gde:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L se nezavisno bira između C(R<8>)(R<9>) grupa i -NR<b>-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R<8>i R<9>se nezavisno biraju između vodonika i deuterijuma; i
-svaki R<b>se nezavisno bira između vodonika i metila.
165. Jedinjenje bilo koje od realizacija 150 do 162, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, gde je Z dvovalentni linker formule (L)r, gde:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L se nezavisno bira između C(R<8>)(R<9>) grupa i -NRb-grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R<8>i R<9>se nezavisno biraju između vodonika i deuterijuma; i
-svaki R<b>je vodonik.
166. Jedinjenje bilo koje od realizacija 150 do 162, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, gde je Z dvovalentni linker formule (L)r, gde:
-r je 3, 4 ili 5;
-svaki L se nezavisno bira između C(R<8>)(R<9>) grupa, -O- i -NR<b>-grupa, pri čemu je heteroatom u Z
nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R<8>i R<9>je vodonik; i
-svaki R<b>se nezavisno bira između vodonika i C1-C2 alkil grupa.
167. Jedinjenje bilo kog od oblika izvođenja 150 do 166, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<3>nezavisno CD3.
168. Jedinjenje realizacije 39, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu je jedinjenje formule (III-A) ili (III-B) jedinjenje formule VI-C ili VI -D:
ili
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih,
u čemu:
-ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju;
-Prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten, ili 6-člani heteroaril prsten;
- svaki R1 je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
- m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
- svaki R2 je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>se nezavisno bira između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R7 grupa, ili opciono dva R4, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupa, haloalkil grupa, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa, pri čemu :
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NRa-grupa, pri čemu je heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu:
-svaki R5 i R6 se nezavisno biraju između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R6 na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R5 i R6 je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogeni, hidroksilna grupa, C1-C2alkoksi grupe, i C1-C2haloalkoksil grupe; i
-svaki Ra je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena;
-q je 1 ili 2;
-r je 3 ili 4; i
-svaki R8 i R9 se nezavisno biraju između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksilne grupe.
169. Jedinjenje realizacije 168, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R8 i R9 nezavisno izabran između vodonika, deuterijuma, halogena, C1-C2alkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksilne grupe.
170. Jedinjenje iz realizacije 169 ili 169, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu su svaki R<8>i R<9>H.
171. Jedinjenje bilo koje od realizacija 168 do 170, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R1 nezavisno izabran između deuterijuma, C1-C2alkil grupa i hidroksilne grupe, i m je 0 ili 1.
172. Jedinjenje bilo koje od realizacija 168 do 171, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, gde n je 0.
173. Jedinjenje bilo kog od oblika izvođenja 168 do 172, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu je Prsten D 5-člani heteroaril prsten supstituisan sa (R<4>)q.
174. Jedinjenje bilo kog od oblika izvođenja 168 do 172, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu je prsten D pirazolil prsten supstituisan sa (R4)k.
175. Jedinjenje bilo koje od realizacija 168 do 172, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu je prsten D
pri čemu
označava tačku pričvršć ivanja prstena D za prsten B.
176. Jedinjenje bilo koje od realizacija 168 do 172, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu je prsten D u kome
i pri čemu
označava tačku pričvršć ivanja prstena D za prsten B.
177. Jedinjenje bilo koje od realizacija 168 do 172, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<4>nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupa, gde :
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y se nezavisno bira između C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>se nezavisno biraju između vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4
alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10 cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
178. Jedinjenje bilo koje od realizacija 168 do 176, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<4>nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R<7>grupe, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y se nezavisno bira između C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>se nezavisno biraju između vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R5i R6na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki Ra je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
179. Jedinjenje bilo koje od realizacija 168 do 176, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R4 nezavisno izabran iz okso grupe ili -O-(Y)k-R<7>grupa, pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4 ili 5;
-svaki Y se nezavisno bira između C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>se nezavisno biraju između vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupa ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki Ra je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena.
180. Jedinjenje bilo koje od realizacija 168 do 176, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od
prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<4>nezavisno izabran od
pri čemu
označava tačku vezivanja R4 za prsten D.
181. Jedinjenje bilo koje od realizacija 168 do 180, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterisana so
derivat bilo kog od prethodno navedenih, gde je k 3, 4, 5 ili 6.
182. Jedinjenje bilo koje od realizacija 168 do 181, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, gde je k 1.
183. Jedinjenje bilo koje od realizacija 168 do 182, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5; i
-svaki R<8>i R<9>se nezavisno biraju između vodonika i deuterijuma.
184. Jedinjenje bilo koje od realizacija 168 do 182, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu:
-r je 3, 4 ili 5; i
-svaki R<8>i R<9>je vodonik.
185. Jedinjenje bilo koje od realizacija 168 do 182, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu:
- r je 3, 4 ili 5; i
-svaki R<8>i R<9>je deuterijum;.
186. Jedinjenje bilo koje od realizacija 168 do 182, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu:
-r je 3 ili 4; i
-svaki R<8>i R<9>je vodonik.
187. Jedinjenje bilo koje od realizacija 168 do 186, pri čemu je svaki R3 nezavisno CD3.
188. Jedinjenje bilo koje od realizacija 39-57, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu je ugljenik označen sa * formule (II-A) ili (III-A) ima S-stereohemiju, i pri čemu je ugljenik označen sa * formule (II-B) ili (III-B) ima R-stereohemiju.
189. Jedinjenje bilo koje od realizacija 58-187, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisana so derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu je ugljenik označen sa • bilo koje od formula (IV-A), (IV-B), (IV-C), (VA), (V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C) i (VI-D) ima S-stereohemiju.
190. Jedinjenje bilo koje od realizacija 58-187, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu je ugljenik označen sa * bilo koje od formula (IV-A), (IV-B), (IV-C), (VA), (V-B), (VI-A), (VI-B), (VI-C) i (VI-D) ima R-stereohemiju.
191. Jedinjenje izabrano između jedinjenja br. 1-97, 99-261, 264, 265, 268-270, 273-302 prikazanih na Slici 1, njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuteriranih derivata bilo kog od prethodno navedenih.
192. Jedinjenje izabrano između jedinjenja br. 304-309 prikazanih na Slici 1, njegovih farmaceutski prihvatljivih soli i deuteriranih derivata bilo kog od prethodno navedenih.
193. Jedinjenje odabrano od:
njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterovani derivati bilo kog od prethodno navedenih.
194. Farmaceutska kompozicija koja sadrži najmanje jedno jedinjenje izabrano između jedinjenja bilo kog od varijante 39-191 njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, i opciono jedan ili više od:
(a) Jedinjenje II:
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih;
(b) Jedinjenje III:
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih; i
(c) farmaceutski prihvatljiv nosač.
195. Jedinjenje bilo kog od oblika 39 do 191 ili farmaceutska kompozicija prema realizaciji 194 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze koji se sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno jedinjenja iz bilo kog od oblika 39 do 191 ili farmaceutske kompozicije prema realizaciji 194.
196. Najmanje jedno jedinjenje izabrano između jedinjenja bilo kog od oblika 39-191, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, i opciono jedno ili više od:
(a) Jedinjenje II:
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih;
(b) Jedinjenje III:
njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih; za upotrebu u lečenju cistične fibroze.
197. Jedinjenje Formule (X):
njegova so ili deuterirani derivat od bilo čega od navedenog,
pri čemu:
-Q<a>je halogen;
-Prsten A je fenil, 5-člani heteroarilni prsten ili 6-člani heteroarilni prsten;
-Prsten B je piridinilni prsten;
-X je O, NH ili N(C1-C4 alkil);
- svaki R<1>je neovisno odabran između C1-C2alkilnih grupa, C1-C2alkoksilnih grupa, C1-C2haloalkilnih grupa, C1-C2haloalkoksilnih grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
- m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
- svaki R<2>je neovisno odabran između C1-C2alkilnih skupina, C1-C2alkoksilnih grupa, C1-C2haloalkilnih grupa, C1-C2haloalkoksilnih grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-Z je dvovalentni veznik formule (L)r, gdje:
-r je 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki L je neovisno odabran između C(R<8>)(R<9>) skupina, -O- i -NR<b>-grupa, gdje je heteroatom u Z nije vezan na drugi heteroatom u Z, gdje:
- svaki R<8>i R<9>je neovisno odabran između vodika, halogena, C1-C2haloalkilnih grupa, C1-C2 alkilne grupe, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksilne grupe i C1-C2haloalkoksilne grupe; i
-svaki R<b>je neovisno odabran između vodonika i C1-C2alkilnih grupa.
198. Jedinjenje formule (Y):
njihova so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih,
u čemu:
-Q<b>je halogen;
-R<10>je vodonik ili zaštitna grupa;
-Prsten A je fenil, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten;
-Prsten B je piridinilni prsten;
-Prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten, ili 6-člani heteroaril prsten;
-X je O, NH ili N(C1-C4alkil);
- svaki R1 je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
- svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>se nezavisno bira između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupa, ili opciono dva R4, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupa, haloalkil grupa, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; u čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu je heteroatom u -(Y)k-R7 nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>se nezavisno biraju između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupa ili okso;
-svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2 haloalkoksil grupa; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10 cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena;
-q je 1, 2, 3 ili 4; i
-Z je dvovalentni linker formule (L)r, gde:
-r je 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki L se nezavisno bira između C(R<8>)(R<9>) grupa, -O- i -NR<b>-grupa, pri čemu je heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R8 i R9 se nezavisno biraju između vodonika, halogena, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2alkil grupe, hidroksil grupu, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i
-svaki R<b>se nezavisno bira između vodonika i C1-C2alkil grupa
199. Postupak za dobijanje jedinjenja formule (I):
njegove farmaceutski prihvatljive soli ili deuterovanog derivata bilo kog od prethodno navedenih, koji obuhvata spajanje NH grupe prstena C i Kb grupe prstena B jedinjenja formule (Y-I):
njegova so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, gde:
-Qb je halogen;
-Prsten A je fenil, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten;
-Prsten B je piridinilni prsten;
-Prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten, ili 6-člani heteroaril prsten;
-X je O, NH ili N(C1-C4alkil);
-svaki R1 se nezavisno bira između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupe, halogeni, cijano grupa i hidroksil grupa;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
-svaki R2 se nezavisno bira između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksi grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupe, halogeni, cijano grupa i hidroksil grupa;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R4 se nezavisno bira između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupa, ili opciono dva R4, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupa, haloalkil grupa, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; u čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R5)(R6) grupa, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu je heteroatom u -(Y)k-R7 nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>se nezavisno biraju između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C2alkila grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupa ili okso;
-svaki od R5 i R6 je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogeni, hidroksilna grupa, C1-C2oksi grupe, i C1-C2haloalkoksil grupe; i
-svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa; i
-R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C1-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2 alkil grupa, C1-C2 haloalkil grupa i halogena;
-k je 1, 2, 3 ili 4; i
-Z je dvovalentni linker formule (L)r, gde:
-r je 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki L se nezavisno bira između C(R<8>)(R<9>) grupa, -O- i -NR<b>-grupa, pri čemu je heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
-svaki R8 i R9 se nezavisno biraju između vodonika, halogena, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2alkil grupe, hidroksil grupu, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i
-svaki Rb se nezavisno bira između vodonika i C1-C2alkil grupa; da se formira jedinjenje formule (I), njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo ;ega od prethodnog.
200. Metoda realizacije 198, gde se pomenuto spajanje izvodi u prisustvu baze.
201. Metoda za dobijanje jedinjenja formule (Y)
njegova so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, koji obuhvata reakciju jedinjenja Formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kog od prethodno navedenih, sa jedinjenjem Formule (B), njegovom soli ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, da bi se formiralo pomenuto jedinjenje formule (I), njegova so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih:
opciono uklanjanje zaštite N-zaštitne grupe prstena C formule (I), pri čemu
Q<b>je halogen;
R<10>formule (I) je vodonik ili N-zaštitna grupa;
R<10>Formule (B) je N-zaštitna grupa, i
Prsten A, Prsten B, Prsten D, X, R1, m, R<2>, n, R<3>, R<4>, k, Z, R1<0>i varijable u njima su kao što je navedeno u realizaciji 39.
202. Metoda realizacije 201, gde pomenuta reakcija jedinjenja Formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kog od prethodno navedenih, sa jedinjenjem Formule (B), njegovom soli ili deuterisanim derivatom bilo čega od prethodnog, izvodi se u prisustvu baze.
203. Metoda realizacije 201, gde pomenuta reakcija jedinjenja Formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo čega od prethodno navedenih, sa jedinjenjem Formule (B), njegovom soli ili deuterisanim derivatom bilo šta od prethodnog, obuhvata reakciju jedinjenja Formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo čega od prethodno navedenih, sa reagensom za kuplovanje i zatim sa jedinjenjem Formule (B), njegovom solju ili derivatom deuterisanog bilo čega od prethodnog, u prisustvu baze.
204. Postupak za dobijanje jedinjenja formule (Y-2):
njegova so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, gde:
- Q<b>je halogen;
- Prsten A je fenil, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten;
- Prsten B je piridinilni prsten;
- Prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten, ili 6-člani heteroaril prsten;
- X je O, NH ili N(C C1-C4alkil);
- svaki R<1>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
- m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
- svaki R2 je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
- n je 0, 1 ili 2;
- svaki R<3>je metil;
- svaki R<4>se nezavisno bira između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupa, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih od halogena, C1-C2alkil grupe, haloalkil grupe, hidroksil grupe, C1-C2alkoksi grupe i C1-C2haloalkoksilne grupe; pri čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NRa-grupa, pri čemu je heteroatom u-(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu:
-svaki R<5>i R<6>se nezavisno biraju između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkila grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupa ili okso;
-svaki od R5 i R6 je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i
-svaki Ra je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2 alkil grupa; i
-R7 se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10 cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2 alkil grupa, C1-C2 haloalkil grupa i halogena;
-q je 1, 2, 3 ili 4;
-r je 1, 2, 3, 4 ili 5;
- svaki R<8>i R<9>se nezavisno bira između vodonika, halogena, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2alkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2 haloalkoksil grupa; i
-R<10>je vodonik ili zaštitna grupa;
obuhvatajući reakciju jedinjenja formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kog od prethodno navedenih, sa jedinjenjem formule (B-2), njegovom solju ili deuterisanim derivatom bilo kog od prethodno navedenih, da se formiraju pomenuto jedinjenje formule (I-2), njegovu so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih:
205. Metoda iz realizacije 204, gde pomenuta reagovanje jedinjenja formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kog od prethodno navedenih, sa jedinjenjem formule (B-2), njegovom soli ili deuterisanim derivat bilo kog od prethodno navedenih, izvodi se u prisustvu baze.
206. Metoda iz realizacije 205, gde pomenuta reakcija jedinjenja formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kog od prethodno navedenih, sa jedinjenjem formule (B-2), njegovom soli ili deuterisani derivat bilo kog od prethodno navedenih, obuhvata reakciju jedinjenja formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kog od prethodno navedenih, sa reagensom za kuplovanje i zatim sa jedinjenjem formule (B-2), a njihova so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, u prisustvu baze.
207. Metoda bilo koje od realizacija 204-206, koja dalje obuhvata reakciju jedinjenja formule (D), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kog od prethodno navedenih, sa jedinjenjem formule (E-2),a njegova so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, da bi se formiralo pomenuto jedinjenje Formule (B-2), njegova so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih:
gde je R<d>halogen.
208. Postupak za dobijanje jedinjenja formule (I-3):
njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kog od prethodno navedenih, koji obuhvata reakciju jedinjenja Formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kog prethodnog, sa jedinjenjem formule (B-3), njegovom soli ili deuterisanim derivatom bilo kog od prethodno navedenih, da bi se formiralo pomenuto jedinjenje formule (I-3), njegova so ili deuterovani derivat bilo čega od prethodnog:
209. Metoda iz realizacije 208 pri čemu navedena reakcija jedinjenja formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kog od prethodno navedenih, sa jedinjenjem formule (B-3), njegovom soli ili deuterisanim derivat bilo kog od prethodno navedenih, izvodi se u prisustvu baze.
210. Metoda realizacije 208, gde pomenuta reakcija jedinjenja Formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kog od prethodno navedenih, sa jedinjenjem Formule (B-3), njegovom soli ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, obuhvata reakciju jedinjenja formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo šta od prethodnog, sa reagensom za kuplovanje i zatim sa jedinjenjem formule (B-3), njegovom solju, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, u prisustvu baze.
211. Metoda bilo koje od realizacija 208-210, koja dalje obuhvata reakciju jedinjenja formule (D), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kog od prethodno navedenih, sa jedinjenjem formule (E-3), a njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kog od prethodno navedenih, da bi se formiralo pomenuto jedinjenje Formule (B-3), njegova so ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih:
212. Metoda za dobijanje jedinjenja formule (I)
njegove farmaceutski prihvatljive soli ili deuterovanog derivata bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu prsten D obuhvata reakciju jedinjenja formule (Ks), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kog od prethodno navedenih, sa jedinjenjem formule ( Z-1), njegovom solju ili deuteriranim derivatom bilo kog od prethodno navedenih:
u čemu:
-Qa je halogen;
-Prsten A je fenil, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten;
-Prsten B je piridinilni prsten;
-Prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani
heteroaril prsten, ili 6-člani heteroaril prsten;
-X je O, NH ili N( C1-C4alkil);
- svaki R<1>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
- svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R<3>je metil;
-svaki R<4>se nezavisno bira između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R7 grupe, ili opciono dva R4, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 članova cikloalkila ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupe, haloalkil grupe, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; u čemu:
-k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupe, -O- i -NR<a>-grupa, pri čemu je heteroatom u -(Y)k-R7 nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R7, pri čemu:
-svaki R5 i R6 se nezavisno biraju između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R5 i R6 na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5 cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R5 i R6 je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i
-svaki Ra je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe; i
-R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupe opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe i halogena;
-q je 1, 2, 3 ili 4; i
-Z je dvovalentni linker formule (L)r, gde:
-r je 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki L se nezavisno bira između C(R<8>)(R<9>) grupe, -O- i -NR<b>-grupe, pri čemu je heteroatom u Z.
nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu:
- svaki R<8>i R<9>se nezavisno bira između vodonika, halogena, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2alkil grupe, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i
-svaki R<b>se nezavisno bira između vodonika i C1-C2alkil grupe
213. Postupak za dobijanje jedinjenja formule (IV-C):
njegove farmaceutski prihvatljive soli ili deuterovanog derivata bilo kog od prethodno navedenih, koji obuhvata reakciju jedinjenja formule (Ks-1), njegove soli ili deuterisani derivat bilo kog od prethodno navedenih sa jedinjenjem formule (Z-1), njegovom solju ili deuterisanim derivatom bilo kog od prethodno navedenih
u čemu:
-Qa je halogen;
-ugljenik označen sa • ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju;
-Prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani
heteroaril prsten, ili 6-člani heteroaril prsten;
- svaki R1 je nezavisno izabran između C1-C2 alkil grupa, C1-C2 alkoksil grupa, C1-C2 haloalkil grupa, C1-C2 haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-m je 0, 1, 2, 3 ili 4;
- svaki R2 je nezavisno izabran između C1-C2 alkil grupa, C1-C2 alkoksil grupa, C1-C2 haloalkil grupa, C1-C2 haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe;
-n je 0, 1 ili 2;
-svaki R3 je metil;
-svaki R4 se nezavisno bira između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R7
grupe, ili opciono dva R4, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6-člani cikloalkil
ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između
halogeni, C1-C2 alkil grupe, haloalkil grupe, hidroksilne grupe, C1-C2 alkoksilne grupe i C1-C2 haloalkoksilne grupe, pri čemu: -k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6;
-svaki Y je nezavisno izabran od C(R5)(R6) grupa, -O- i -NRa-grupa, pri čemu je heteroatom u -(Y)k-R7 nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R7, pri čemu:
-svaki R5 i R6 se nezavisno biraju između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4 alkil grupa i C3-5 cikloalkil grupa, ili R5 i R6 na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5 cikloalkil grupu ili okso;
-svaki od R5 i R6 je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2 alkil grupa, C1-C2 haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2 alkoksil grupa i C1-C2 haloalkoksil grupa; i
-svaki Ra je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2 alkil grupa; i
-R7 se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10 cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2 alkil grupa, C1-C2 haloalkil grupa i halogena;
-k je 1 ili 2;
-r je 3 ili 4;
-svaki R8 i R9 se nezavisno biraju između vodonika, halogena, C1-C2 alkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2 alkoksil grupa i C1-C2 haloalkoksil grupa; i
-svaki Rb se nezavisno bira između vodonika i C1-C2 alkil grupa.
214. Jedinjenje bilo koje od realizacija 39-190, pri čemu je jedinjenje u obliku farmaceutski prihvatljive soli.
215. Jedinjenje iz realizacije 214, pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so natrijumova so, kalcijumova so ili kalijumova so.
216. Jedinjenje realizacije 215, pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so so kalcijuma.
217. Jedinjenje iz realizacije 191, pri čemu je jedinjenje u obliku farmaceutski prihvatljive soli.
218. Jedinjenje iz realizacije 217, pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so natrijumova so, kalcijumova so ili kalijumova so.
219. Jedinjenje iz realizacije 218, pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so so kalcijuma.
220. Jedinjenje iz realizacije 192, pri čemu je jedinjenje u obliku farmaceutski prihvatljive soli.
221. Jedinjenje iz realizacije 220, pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so natrijumova so, kalcijumova so ili kalijumova so.
prihvatljiva so so kalcijuma.
iku kalcijumove soli:
iku kalcijumove soli:
iku kalcijumove soli:
245. Jedinjenje iz realizacije 193, gde je jedinjenje u obliku kalcijumove soli:
246. Jedinjenje za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze iz realizacije 195, pri čemu je jedinjenje u obliku farmaceutski prihvatljive soli.
247. Jedinjenje za upotrebu u postupku realizacije 246, pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so natrijumova so, kalcijumova so ili kalijumova so.
248. Jedinjenje za upotrebu u postupku realizacije 247, pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so so kalcijuma.
249. Jedinjenje realizacije 192 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze koji se sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno jedinjenja rešenja 192.
250. Jedinjenje bilo kog od oblika 193 ili 226-245 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze koji se sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno jedinjenja iz bilo kog od oblika 193 ili 226-245.
251. Jedinjenje za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze iz realizacije 249 ili 250, pri čemu je jedinjenje u obliku farmaceutski prihvatljive soli.
252. Jedinjenje za upotrebu u postupku realizacije 251, pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so natrijumova so, kalcijumova so ili kalijumova so.
253. Jedinjenje za upotrebu u postupku realizacije 252, pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so so kalcijuma.
254. Jedinjenje bilo koje od realizacija 39-190 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze koji se sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno jedinjenja iz bilo kog od oblika 39-190, gde je jedinjenje se primenjuje u kombinaciji sa jedinjenjem III ili farmaceutski prihvatljivom soli ili deuteriranim derivatom od toga.
255. Jedinjenje iz realizacije 191 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze koji se sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno jedinjenja iz realizacije 191, pri čemu se jedinjenje primenjuje u kombinaciji sa jedinjenjem III ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli ili derivatom deuterisanog.
256. Jedinjenje realizacije 192 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze koji se sastoji od ordiniranja pacijentu kome je to potrebno jedinjenja iz realizacije 192, pri čemu se jedinjenje primenjuje u kombinaciji sa jedinjenjem III ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli ili derivatom deuterisan.
257. Jedinjenje bilo kog od oblika 193 ili 226-245 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze koji se sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno jedinjenja iz bilo kog od oblika 193 ili 226-245, pri čemu se jedinjenje primenjuje u kombinacija sa jedinjenjem III ili njegovom farmaceutski prihvatljivom soli ili deuteriranim derivatom.
258. Jedinjenje za upotrebu u postupku prema bilo kom od oblika izvođenja 254-257, pri čemu je deuterovani derivat jedinjenja III Jedinjenje III-d.
259. Jedinjenje bilo kog od oblika 39-190 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze koji se sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno jedinjenja iz bilo kog od oblika 39-190, pri čemu se jedinjenje primenjuje u kombinaciji sa (a ) Jedinjenje II i (b) Jedinjenje III ili njegov deuterovani derivat.
260. Jedinjenje realizacije 191 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze koji se sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno jedinjenja iz realizacije 191, pri čemu se jedinjenje primenjuje u kombinaciji sa (a) jedinjenjem II i (b) jedinjenjem III ili njegov deuterovani derivat.
261. Jedinjenje realizacije 192 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze koji se sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno jedinjenja iz realizacije 192, pri čemu se jedinjenje primenjuje u kombinaciji
sa (a) jedinjenjem II i (b) jedinjenjem III ili njegovim deuterisanim derivatom.
262. Jedinjenje bilo kog od oblika 193 ili 226-245 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze koji se sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno jedinjenja bilo kog od oblika 193 ili 226-245, pri čemu se jedinjenje primenjuje u kombinacija sa (a) jedinjenjem II i (b) jedinjenjem III ili njegovim deuterisanim derivatom.
263. Jedinjenje za upotrebu u postupku prema bilo kom od oblika izvođenja 259-262, pri čemu je deuterovani derivat jedinjenja III Jedinjenje III-d.
264. Jedinjenje za upotrebu u postupku prema bilo kom od oblika izvođenja 254-262, pri čemu je jedinjenje u obliku farmaceutski prihvatljive soli.
265. Jedinjenje za upotrebu u postupku realizacije 264, pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so natrijumova so, kalcijumova so ili kalijumova so.
266. Jedinjenje za upotrebu u postupku realizacije 265, pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so so kalcijuma.
267. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje iz realizacije 191 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
268. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje iz realizacije 192 i farmaceutski prihvatljiv nosač.
269. Farmaceutska kompozicija koja sadrži jedinjenje bilo kog od oblika 193 ili 226-245 i
farmaceutski prihvatljiv nosač.
270. Farmaceutska kompozicija prema bilo kojoj od realizacija 267-269, pri čemu je jedinjenje u obliku farmaceutski prihvatljive soli.
271. Farmaceutska kompozicija realizacije 270, pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so natrijumova so, kalcijumova so ili kalijumova so.
272. Farmaceutska kompozicija realizacije 271, pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so so kalcijuma.
273. Farmaceutska kompozicija bilo kog od oblika 267-272, koja dalje sadrži jedinjenje III ili njegovu farmaceutski prihvatljivu so ili deuterovani derivat.
274. Farmaceutska kompozicija realizacije 273, pri čemu je deuterovani derivat jedinjenja III
Jedinjenje III-d.
275. Farmaceutska kompozicija bilo kog od oblika 267-272, koja dalje sadrži (a) Jedinjenje II i
(b) Jedinjenje III ili njegov deuterovani derivat.
276. Farmaceutska kompozicija realizacije 275, pri čemu je deuterovani derivat jedinjenja III
Jedinjenje III-d.
277. Jedinjenje bilo koje od realizacija 39-190 za upotrebu u lečenju cistične fibroze.
278. Jedinjenje realizacije 191 za upotrebu u lečenju cistične fibroze.
279. Ostvarenje 192 jedinjenja za upotrebu u lečenju cistične fibroze.
280. Jedinjenje bilo koje od realizacija 193 ili 226-245 za upotrebu u lečenju cistične fibroze.
281. Jedinjenje za upotrebu bilo koje od realizacija 277-280, pri čemu je jedinjenje u obliku farmaceutski prihvatljive soli.
282. Jedinjenje za upotrebu iz realizacije 281, pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so natrijumova so, kalcijumova so ili kalijumova so.
283. Jedinjenje za upotrebu iz realizacije 282, pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so so kalcijuma.
284. Jedinjenje za upotrebu bilo koje od realizacija 277-283, pri čemu tretman dalje obuhvata primenu jedinjenja III.
285. Jedinjenje za upotrebu bilo koje od realizacija 277-283, pri čemu tretman dalje obuhvata primenu jedinjenja III-d.
286. Jedinjenje za upotrebu bilo koje od realizacija 277-283, pri čemu tretman dalje obuhvata primenu jedinjenja II i jedinjenja III.
287. Jedinjenje za upotrebu bilo koje od realizacija 277-283, pri čemu tretman dalje obuhvata primenu jedinjenja II i jedinjenja III-d.
[0166] Ostale realizacije uključuju:
A. Jedinjenje formule III-A ili III-B:
B. Farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja formule III-A ili III-B
C. Farmaceutski sastav koji sadrži:
(i) jedinjenje formule III-A ili III-B:
i
(ii) farmaceutski prihvatljiv nosač.
D. Farmaceutska kompozicija realizacije C koja dalje sadrži jedinjenje II:
E. Farmaceutska kompozicija realizacije C koja dalje sadrži farmaceutski prihvatljivu so jedinjenja II:
F. Farmaceutska kompozicija realizacije C koja dalje sadrži jedinjenje III:
G. Farmaceutska kompozicija realizacije C dalje sadrži farmaceutski prihvatljivu so
jedinjenje III:
H. Farmaceutska kompozicija realizacije D koja dalje sadrži jedinjenje III:
I. Farmaceutska kompozicija realizacije D koja dalje sadrži farmaceutski prihvatljivu so Jedinjenja III:
J. Farmaceutska kompozicija realizacije E koja dalje sadrži jedinjenje III:
K. Farmaceutska kompozicija realizacije E koja dalje sadrži farmaceutski prihvatljivu so jedinjenje III:
L. Farmaceutski sastav koji sadrži:
(A) farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja formule III-A ili III-B
i
(B) farmaceutski prihvatljiv nosač.
M. Farmaceutska kompozicija realizacije L koja dalje sadrži jedinjenje II:
N. Farmaceutska kompozicija realizacije L dalje sadrži farmaceutski prihvatljivu so jedinjenje II:
O. Farmaceutska kompozicija realizacije L koja dalje sadrži jedinjenje III:
P. Farmaceutska kompozicija realizacije L koja dalje sadrži farmaceutski prihvatljivu so Jedinjenja III:
Q. Farmaceutska kompozicija realizacije M koja dalje sadrži jedinjenje III:
R. Farmaceutska kompozicija realizacije M koja dalje sadrži farmaceutski prihvatljivu so jedinjenja III:
S. Farmaceutska kompozicija realizacije M koja dalje sadrži jedinjenje III:
T. Farmaceutska kompozicija realizacije M dalje sadrži farmaceutski prihvatljivu so jedinjenje III:
U. Postupak lečenja cistične fibroze koji se sastoji od davanja jedinjenja formule III-A ili III-B pacijentu kome je to potrebno:
ili
V. Postupak lečenja cistične fibroze koji se sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno farmaceutski prihvatljive soli jedinjenja formule III-A ili III-B:
W. Postupak za lečenje cistične fibroze koji se sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno farmaceutske kompozicije koja sadrži:
(A) jedinjenje formule III-A ili III-B
i
(B) farmaceutski prihvatljiv nosač.
X. Metoda lečenja cistične fibroze koja se sastoji od davanja farmaceutskog leka pacijentu kome je to potrebno pozicija koja se sastoji od:
farmaceutski prihvatljiva so jedinjenja formule III-A ili III-B
i
farmaceutski prihvatljiv nosač.
Generalne Eksperimentalne Procedure
[0167] Definicije određenih skrać enica za primere u nastavku su rezimirane u nastavku:
Boc anhidrid ((Boc)2O): di-terc-butil dikarbonat
CDI: karbonil diimidazol
DABCO: 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan
DBU: 1,8-diazabiciklo(5.4.0)undec-7-en
DCM: dihlorometan
DIAD: diizopropil azodikarboksilat
DIEA (DIPEA; N,N-diizopropiletilamin)
DMA: N,N-dimetilacetamid
DMF: N,N-dimetilformamid
DMSO: dimetil sulfoksid
Et2O: dietil etar
EtOH: etanol
HATU: 1-[bis(dimetilamino)metilen]-1H-1,2,3-triazolo[4,5-b]piridinijum 3-oksid heksafluorofosfat
IPA: izoproanol
MeOH: metanol
NMP: N-metil-2-pirolidon
MTBE: metil terc-butil etar
TBS-Cl: terc-butildimetilsilil hlorid
TFA: trifluorosirć etna kiselina
THF: tetrahidrofuran)
p-TsOH: p-toluensulfonska kiselina
TPPO-DIAD kompleks: kompleks trifenilfosfin oksida sa diizopropil azodikarboksilatom
[0168] Reagensi i polazni materijali su dobijeni iz komercijalnih izvora osim ako nije drugačije navedeno i korišć eni su bez prečišć avanja. Protonski i ugljenik NMR spektri su dobijeni na bilo kom od Bruker Biospin DRKS 400 MHz FTNMR spektrometra koji radi na 1H i 13C rezonantnoj frekvenciji od 400 i 100 MHz respektivno, ili na 300 MHz NMR spektrometru. Jednodimenzionalni spektri protona i ugljenika su dobijeni korišć enjem širokopojasne sonde za posmatranje (BBFO) sa rotacijom uzorka od 20 Hz pri digitalnoj rezoluciji 0,1834 i 0,9083 Hz/Pt. Svi spektri protona i ugljenika su dobijeni uz kontrolu temperature na 30°C korišć enjem standardnih, ranije objavljenih impulsnih sekvenci i rutinskih parametara obrade. Konačna čistoć a jedinjenja je određena pomo ć u UPLC reverzne faze koriš ć enjem kolone Ackuiti UPLC BEH C18 (50 32,1 mm, 1,7 mm čestica) koju je napravio Vaters (pn: 186002350), i dvostrukim gradijentom od 1-99% mobilne faze B preko 3.0 minuta. Mobilna faza A = H2O (0,05 % CF<3>CO<2>H). Mobilna faza B=CH3CN (0,035 % CF<3>CO<2>H2H). Brzina protoka = 1,2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1,5 mL i temperatura kolone = 60 °C. Konačna čistoć a je izračunata usrednjavanjem površine ispod krive (AUC) dva UV traga (220 nm, 254 nm). Maseni spektri niske rezolucije su prijavljeni kao [M+H]+ vrste dobijene korišć enjem jednog kvadrupolnog masenog spektrometra opremljenog izvorom elektrosprej jonizacije (ESI) koji može da postigne tačnost mase od 0,1 Da i minimalnu rezoluciju od 1000 (nema jedinica na rezolucija) u celom opsegu detekcije. Optička čistoć a metil (2S)-2,4-dimetil-4-nitro-pentanoata određena je analizom kiralne gasne hromatografije (GC) na instrumentu Agilent 7890A/MSD 5975C, koriš ć enjem Restek Rt-βDEXcs (30m 30,25mm 30,25 um_df) kolona, sa brzinom protoka od 2,0 mL/min (noseć i gas H2), na temperaturi ubrizgavanja od 220°C i temperaturi peć i od 120°C, 15 minuta.
Sintetički primeri
Sinteza jedinjenja II: (R)-1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)-N-(1-(2,3-dihidroksipropil)-6-fluoro-2 -(lhidroksi-2-metilpropan-2-il)-1H-indol-5-il)ciklopropankarboksamid
[0169]
Korak 1: (R)-benzil 2-(1-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)-6-fluoro-5-nitro-1H-indol-2-il) -2-metilpropanoat i ((S)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil 2-(1-(((R)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)-6fluoro-5-nitro-lH-indol-2-il)-2-metilpropanoat
[0170] Cezijum karbonat (8,23 g, 25,3 mmol) je dodat u smešu benzil 2-(6-fluoro-5-nitro-lH-indol-2-il)-2metilpropanoata (3,0 g, 8,4 mmol) i (S )-(2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil 4-metilbenzensulfonat (7,23 g, 25,3 mmol) u DMF (N,N-dimetilformamid) (17 mL). Reakcija je mešana na 80 °C tokom 46 sati u atmosferi azota. Smeša je zatim podeljena između etil acetata i vode. Vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom. Kombinovani etilacetatni slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko MgS04, filtrirani i koncentrovani. Sirovi proizvod, viskozno smeđe ulje koje sadrži oba gore prikazana proizvoda, direktno je odveden u sledeć i korak bez daljeg prečiš ć avanja. (R)-benzil 2-(1-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)-6-fluoro-5-nitro-1H-indol-2-il)2-metilpropanoat, ESI-MS m/z izrač. 470,2, nađeno 471,5 (M+1)+. Vreme zadržavanja 2,20 minuta. ((S)-2,2-dimetil-1,3dioksolan-4-il)metil 2-(1-(((R)-2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)- 6-fluoro-5-nitro-lH-indol-2-il)-2-metilpropanoat, ESI-MS m/z izrač. 494,5, nađeno 495,7 (M+1)+. Vreme zadržavanja 2,01 minuta. Korak 2: (R)-2-(1-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)-6-fluoro-5-nitro-1H-indol-2-il)- 2-metilpropan-1-ol
[0171] Sirova reakciona smeša dobijena u koraku (A) je rastvorena u THF (tetrahidrofuranu) (42 mL) i ohlađena u kupatilu sa ledom i vodom. LiAlH4 (16,8 mL 1 M rastvora, 16,8 mmol) je dodat u kapima. Nakon što je dodavanje završeno, smeša je mešana dodatnih 5 minuta. Reakcija je ugašena dodavanjem vode (1 mL), 15% rastvora NaOH (1 mL) i zatim vode (3 mL). Smeša je filtrirana preko celita, a čvrste materije su isprane sa THF i etil acetatom. Filtrat je koncentrovan i prečišć en hromatografijom na koloni (30-60% etil acetat-heksani) da bi se dobio (R)-2-(1-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil) -6-fluoro-5-nitro-1H-indol-2-il)-2-metilpropan-1-ol kao smeđe ulje (2,68 g, 87 % u 2 koraka). ESI-MS m/z izrač. 366,4, nađeno 367,3 (M+1)+. Vreme zadržavanja 1,68 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.34 (d, J = 7.6 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 6.57 (s, 1H), 4.94 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 4.64 - 4.60 (m, 1H), 4.52 - 4.42(m, 2H), 4.16 - 4.14 (m, 1H), 3.76 - 3.74 (m, 1H), 3.63 - 3.53 (m, 2H), 1.42 (s, 3H), 1.38 - 1.36 (m, 6H) and 1.19 (s, 3H) ppm. (DMSO je dimetilsulfoksid).
Korak 3: (R)-2-(5-amino-1-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)-6-fluoro-1H-indol-2-il)- 2-metilpropan-1-ol
[0172] (R)-2-(1-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4-il)metil)-6-fluoro-5-nitro-lH-indol-2-il)- 2-metilpropan-1-ol (2,5 g, 6,82 mmol) je rastvoren u etanolu (70 mL) i reakcija je isprana sa N2. Zatim je dodat Pd-C (250 mg, 5% tež.). Reakcija je ponovo isprana azotom i zatim mešana pod H2 (atm). Posle 2,5 sata samo delimična konverzija u proizvod je primeć ena pomo ć u LCMS. Reakcija je filtrirana kroz celit i koncentrovana. Ostatak je ponovo podvrgnut gore navedenim uslovima. Posle 2 sata LCMS je pokazao potpunu konverziju u proizvod. Reakciona smeša je filtrirana kroz celit. Filtrat je koncentrovan da bi se dobio proizvod (1,82 g, 79 %). ESI-MS m/z izrač. 336,2, nađeno 337,5 (M+1)<+>. Vreme zadržavanja 0,86 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.17 (d, J = 12.6Hz, 1H), 6.76 (d, J = 9.0 Hz, 1H), 6.03 (s, 1H), 4.79 - 4.76 (m, 1H), 4.46 (s, 2H), 4.37 - 4.31 (m, 3H),4.06 (dd, J = 6.1, 8.3 Hz, 1H), 3.70 - 3.67 (m, 1H), 3.55 - 3.52 (m, 2H), 1.41 (s, 3H), 1.32 (s, 6H) and 1.21 (s, 3H) ppm.
Korak 4: (R)-1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)-N-(1-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4) -il)metil)-6-fluoro-2-(1 hidroksi-2-metilpropan-2-il)-1 H-indol-5-il)ciklopropankarboksamid
[0173] DMF (3 kapi) je dodat u mešavinu 1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksilne kiseline (1,87 g, 7,7 mmol) i tionil hlorida ( 1,30 mL, 17,9 mmol). Posle 1 sata formirao se bistar rastvor. Rastvor je koncentrovan pod vakuumom, a zatim je dodat toluen (3 mL) i smeša je ponovo koncentrovana. Korak toluena je ponovljen još jednom i ostatak je stavljen na visoki vakuum tokom 10 minuta. Hlorid kiseline je zatim rastvoren u dihlorometanu (10 mL) i dodat u smešu (R)-2-(5-amino-1-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan4-il)metil)- 6-fluoro-lH-indol-2-il)-2-metilpropan-1-ol (1,8 g, 5,4 mmol) i trietilamin (2,24 mL, 16,1 mmol) u dihlorometanu (45 mL). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakcija je isprana sa 1N rastvorom HCl, zasić enim rastvorom NaHC03 i slanim rastvorom, osušena preko MgS04i koncentrovana da bi se dobio proizvod (3 g, 100%). ESI-MS m/z izrač. 560,6, nađeno 561,7 (M+1)+. Vreme zadržavanja 2,05 minuta.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.31 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.42 - 7.40 (m, 2H), 7.34 - 7.30 (m, 3H), 6.24 (s, 1H), 4.51 - 4.48 (m, 1H), 4.39 - 4.34 (m,2H), 4.08 (dd, J = 6.0, 8.3 Hz, 1H), 3.69 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 3.58 - 3.51 (m, 2H), 1.48 - 1.45 (m, 2H), 1.39 (s, 3H), 1.34 - 1.33 (m, 6H), 1.18 (s, 3H) i 1.14 - 1.12 (m, 2H) ppm.
Korak 5: (R)-1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)-N-(1-(2,3-dihidroksipropil)-6-fluoro-2-( 1-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-1H-indol-5-il)ciklopropankarboksamid
[0174] (R)-1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)-N-(1-((2,2-dimetil-1,3-dioksolan-4)-il)metil)-6-fluoro-2-(1-hidroksi-2-metilpropan-2-il)-1H-indol-5-il)ciklopropankarboksamid (3,0 g, 5,4 mmol) rastvoren je u metanolu (52 mL). Dodata je voda (5,2 mL), a zatim p-TsOH.H20 (hidrat p-toluensulfonske kiseline) (204 mg, 1,1 mmol). Reakcija je zagrevana na 80°C tokom 45 minuta. Rastvor je koncentrovan i zatim podeljen između etil acetata i zasić enog rastvora NaHC03. Etil acetatni sloj je osušen preko MgS04 i koncentrovan. Ostatak je prečišć en hromatografijom na koloni (50-100 % etil acetat-heksan) da bi se dobio proizvod. (1,3 g, 47 %, ee >98 % prema SFC). ESI-MS m/z izrač. 520,5, nađeno 521,7 (M+1)<+>. Vreme zadržavanja 1,69 minuta.1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.31 (s, 1H), 7.53 (s, 1H), 7.42 - 7.38 (m, 2H), 7.33 - 7.30 (m, 2H), 6.22 (s, 1H), 5.01 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 4.90 (t, J = 5.5 Hz, 1H), 4.75 (t, J = 5.8 Hz, 1H), 4.40 (dd, J = 2.6, 15.1 Hz, 1H), 4.10 (dd, J = 8.7, 15.1 Hz, 1H), 3.90 (s, 1H), 3.65 - 3.54 (m, 2H), 3.48 - 3.33 (m, 2H), 1.48 - 1.45 (m, 2H), 1.35 (s, 3H), 1.32 (s, 3H) i 1.14 - 1.11 (m, 2H) ppm.
Sinteza jedinjenja III: N-(2,4-di-terc-butil-5-hidroksifenil)-4-okso-1,4-dihidrohinolin-3-karboksamid
Deo A: Sinteza 4-okso-1,4-dihidrohinolin-3-karboksilne kiseline
[0175]
Korak 1: Dietil estar 2-fenilaminometilen-malonske kiseline
[0176] Zagrejana je mešavina anilina (25,6 g, 0,275 mol) i dietil 2-(etoksimetilen)malonata (62.4 g, 0.288 mol) je zagrevana na 140-150 °C 2 h. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i osušena pod sniženim pritiskom da se dobije dietil estar 2-fenilaminometilen-malonske kiseline kao čvrsta supstanca, koji je u sledećem koraku korišćen bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (DMSO-d6) δ 11.00 (d, 1H), 8.54 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 7.36-7.39 (m, 2H), 7.13-7.17 (m, 3H), 4.17-4.33 (m, 4H), 1.18-1.40 (m, 6H).
Korak 2: Etil estar 4-hidroksihinolin-3-karboksilne kiseline
[0177] Tikvica od 1 L sa tri grla opremljena mehaničkom mešalicom napunjena je dietil estrom 2-fenilaminometilen-malonske kiseline (26.3 g, 0.100 mol), polifosfornom kiselinom (270 g) i fosforil hloridom (750 g). Smeša je zagrejana na 70 °C i mešana 4 h. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i filtrirana. Ostatak je tretiran vodenim rastvorom Na2CO3, filtriran, ispran vodom i osušen. Etil estar 4-hidroksihinolin-3-karboksilne kiseline je dobijen kao bledosmeđa čvrsta supstanca (15.2 g, 70%). Sirovi proizvod je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak 3: 4-okso-1,4-dihidrohinolin-3-karboksilna kiselina
[0178] Etil estar 4-hidroksihinolin-3-karboksilne kiseline (15 g, 69 mmol) je suspendovan u rastvoru natrijum hidroksida (2N, 150 mL) i mešan 2 h na refluksu. Nakon hlađenja, smeša je filtrirana, a filtrat je zakiseljen do pH 4 sa 2N HCl. Dobijeni talog je sakupljen filtracijom, ispran vodom i osušen pod vakuumom da bi se dobila 4-okso-1,4-dihidrohinolin-3-karboksilna kiselina kao bledobela čvrsta supstanca (10.5 g, 92 %).<1>H NMR (DMSO-d6) δ 15.34 (s, 1H), 13.42 (s, 1H), 8.89 (s, 1H), 8.28 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.88 (m, 1H), 7.81 ( d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.60 (m, 1H).
Deo B: Sinteza N-(2,4-di-terc-butil-5-hidroksifenil)-4-okso-1,4-dihidrohinolin-3-karboks-amida
[0179]
Korak 1: Karbonska kiselina 2,4-di-terc-butil-fenil estar metil estar
[0180] Metil hloroformat (58 mL, 750 mmol) je dodavan u kapima u rastvor 2,4-di-terc-butil-fenola (103.2 g, 500 mmol), Et3N (139 mL), 1000 mmol) i DMAP (3.05 g, 25 mmol) u dihlormetanu (400 mL) ohlađen u ledenom vodenom kupatilu na 0 °C. Smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu uz mešanje preko noći, zatim je filtrirana kroz silika gel (približno 1L) korišćenjem kao eluenta 10% etil acetat - heksane (~4 L). Kombinovani filtrati su koncentrovani da bi se dobio karbonska kiselina 2,4-di-terc-butil-fenil estar metil estar kao žuto ulje (132 g, kvant.).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 7.35 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.29 (dd, J = 8.5, 2.4 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 3.85 (s, 3H), 1.30 (s, 9H), 1.29 (s, 9H).
Korak 2: Karbonska kiselina 2,4-di-terc-butil-5-nitro-fenil estar metil estar i Karbonska kiselina 2,4-di-terc-butil-6-nitrofenil estar metil estar
[0181] U mešanu smešu karbonska kiselina 2,4-di-terc-butil-fenil estar metil estra (4.76 g, 180 mmol) u konc. sumpornoj kiselini (2 mL), ohlađenu u kupatilu led-voda, dodata je ohlađena smeša sumporne kiseline (2 mL) i azotne kiseline (2 mL).
Dodavanje je vršeno polako tako da temperatura reakcije ne pređe 50 °C. Reakcija je ostavljena da se meša 2 h dok se zagrevala na sobnu temperaturu. Reakciona smeša je zatim dodata u ledenu vodu i ekstrahovana u dietil etru. Etarski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen hromatografijom na koloni (0 - 10% etil acetat - heksani) da bi se dobila smeša karbonska kiselina 2,4-di-terc-butil-5-nitro-fenil estar metil estar i karbonska kiselina 2,4-di-terc-butil-6-nitro-fenil estar metil estar kao bledožuta čvrsta supstanca (4.28 g), koja je direktno korišćena u sledećem koraku.
Korak 3: 2,4-Di-terc-butil-5-nitro-fenol i 2,4-Di-terc-butil-6-nitro-fenol
[0182] Smeša karbonske kiseline 2,4-di-terc-butil-5-nitro-fenil estar metil estar i karbonska kiselina 2,4-di-terc-butil-6-nitrofenil estar metil estar (4.2 g, 14.0 mmol) je rastvorena u MeOH (65 mL) pre nego što je dodat KOH (2.0 g, 36 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Reakciona smeša je zatim zakiseljena (pH 2-3) dodavanjem konc. HCl i podeljena između vode i dietil etera. Etarski sloj je osušen (MgSO4), koncentrovan i prečišćen hromatografijom na koloni (0 - 5 % etil acetat -heksani) da bi se dobio 2,4-di-terc-butil-5-nitrofenol (1.31 g, 29% u 2 koraka) i 2,4-di-terc-butil-6-nitro-fenol. 2,4-Di-terc-butil-5-nitro-fenol:<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10.14 (s, 1H, OH), 7.34 (s, 1H), 6.83 (s, 1H), 1.36 (s, 9H), 1.30 (s, 9H).2,4-Di-tercbutil-6-nitro-fenol:<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 11.48 (s, 1H), 7.98 (d, J = 2.5 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 1.47 (s, 9H), 1.34 (s, 9H).
Korak 4: 5-Amino-2, 4-di-terc-butil-fenol
[0183] U refluksni rastvor 2,4-di-terc-butil-5-nitro-fenola (1.86 g, 7.40 mmol) i amonijum formata (1.86 g) u etanolu (75 mL) je dodat Pd-5% mas. na aktivnom uglju (900 mg). Reakciona smeša je mešana pod refluksom 2 h, ohlađena na sobnu temperaturu i filtrirana kroz celit. Celit je ispran metanolom i kombinovani filtrati su koncentrovani da bi se dobio 5-amino-2,4-di-terc-butilfenol kao siva čvrsta supstanca (1.66 g, kvant.).<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 8.64 (s, 1H, OH), 6.84 (s, 1H), 6.08 (s, 1H), 4.39 (s, 2H, NH2), 1.27 (m, 18H); HPLC ret. vreme 2.72 min, 10-99 % CH3CN, 5 min rada; ESI-MS 222,4 m/z [M+H]+.
Korak 5: N-(5-hidroksi-2,4-di-terc-butil-fenil)-4-okso-1H-hinolin-3-karboksamid
[0184]
[0185] U suspenziju 4-okso-1, 4-dihidrohinolin-3-karboksilne kiseline (35.5 g, 188 mmol) i HBTU (85.7 g, 226 mmol) u DMF (280 mL) je dodat Et3N (63.0 mL, 451 mmol) na sobnoj temperaturi. Smeša je postala homogena i ostavljena je da se meša 10 minuta pre nego što je u malim porcijama dodat 5-amino-2,4-di-terc-butil-fenol (50.0 g, 226 mmol). Smeša je ostavljena da se meša preko noći na sobnoj temperaturi. Smeša je postala heterogena tokom reakcije. Nakon što je sva kiselina potrošena (LC-MS analiza, MH<+>190, 1.71 min), rastvarač je uklonjen u vakuumu. EtOH (etil alkohol) je dodat u narandžastu čvrstu materiju da se dobije suspenzija. Smeša je mešana 15 min na rotacionom uparivaču (temperatura kupatila 65 °C) bez stavljanja sistema pod vakuum. Smeša je filtrirana i zadržana čvrsta supstanca je isprana heksanom da bi se dobila bela čvrsta supstanca koja je bila EtOH kristalat. Et2O (dietil etar) je dodavan u gore dobijenu čvrstu supstancu dok se nije formirala suspenzija. Smeša je mešana na rotacionom uparivaču (temperatura kupatila 25 °C) tokom 15 min bez stavljanja sistema pod vakuum. Smeša je filtrirana i čvrsta supstanca je zadržana. Ova procedura je izvedena ukupno pet puta. Čvrsta supstanca dobijena nakon petog taloženja je stavljena pod vakuum preko noći da bi se dobio N-(5-hidroksi-2,4-di-terc-butil-fenil)-4-okso-1H-hinolin-3-karboksamid (38 g, 52 %). HPLC ret. Vreme 3.45 min, 10-99% CH3CN, 5 min rada;<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 12.88 (s, 1H), 11.83 (s, 1H), 9.20 (s, 1H), 8.87 (s, 1H), 8.33 (dd, J = 8.2, 1.0 Hz, 1H), 7.83-7.79 (m, 1H), 7.76 (d, J = 7.7 Hz, 1H), 7.54-7.50 (m, 1H), 7.17 (s, 1H), 7.10 (s, 1H), 1.38 (s , 9H), 1.37 (s, 9H); ESI-MS m/z izračunato 392.21; nađeno 393.3 [M+H]<+>.
Sinteza jedinjenja IV: 3-(6-(1-(2, 2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarboks-amido)-3-metilpiridin-2-il)benzojeva kiselina
[0186] Jedinjenje IV se može dobiti kuplovanjem kiselog hloridnog dela sa aminskim ostatkom prema Šemama IV-A do IV-D.
Šema IV-A. Sinteza dela molekula kiselog hlorida
[0187] Šema IV-A prikazuje pripremu 1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il) ciklopropan- karbonil hlorida, koji se koristi u Shemi IV-C za stvaranje amidne veze Jedinjena IV.
[0188] Polazni materijal, 2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-karboksilna kiselina, komercijalno je dostupan od Saltigo-a (filijala Lanxess Corporation). Redukcija karboksilne kiseline u 2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-karboksilnoj kiselini u primarni alkohol, praćena konverzijom u odgovarajući hlorid upotrebom tionil hlorida (SOCl2), daje 5-(hlorometil)-2,2-difluorobenzo[d] [1,3]dioksol, koji se zatim konvertuje u 2-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)acetonitril korišćenjem natrijum cijanida. Tretman 2-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)acetonitrila sa bazom i 1-bromo-2-hloroetanom daje 1-(2,2-difluorobenzo[d] [1,3]dioksol-5-il) ciklopropan-karbonitril. Nitrilni deo molekula u 1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarbonitrilu se konvertuje u karboksilnu kiselinu korišćenjem baze dajući 1-(2,2-difluorobenzo [d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarboksilnu kiselinu, koja se konvertuje u željeni kiseli hlorid upotrebom tionil hlorida.
Šema IV-B. Alternativna sinteza kiselinskog hloridnog dela.
[0189] Šema IV-B prikazuje alternativnu sintezu potrebnog kiselog hlorida. 5-bromometil-2,2-difluoro-1,3-benzodioksol je kuplovan sa etil cijanoacetatom u prisustvu paladijum katalizatora da bi se formirao odgovarajući alfa cijano etil estar. Saponifikacija estarskog dela molekula u karboksilnu kiselinu daje cijanoetil jedinjenje IV. Alkilacija cijanoetilnog jedinjenja sa 1-bromo-2-hloroetanom u prisustvu baze daje cijanociklopropil jedinjenje. Tretiranje cijanociklopropil jedinjenja bazom daje karboksilatnu so, koja se tretiranjem kiselinom pretvara u karboksilnu kiselinu. Konverzija karboksilne kiseline u kiseli hlorid se zatim postiže upotrebom sredstva za hlorinaciju kao što je tionil hlorid ili slično.
Šema IV-C. Sinteza aminskog dela
[0190] Šema IV-C prikazuje pripremu potrebnog terc-butil 3-(6-amino-3-metilpiridin-2-il) benzoata, koji je kuplovan sa 1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il)ciklopropankarbonil hloridom u Šemi IV-C dajući Jedinjenje IV. Kuplovanje 2-bromo-3-metilpiridina sa 3-(terc-butoksikarbonil)fenilboronskom kiselinom katalizovano paladijumom daje tercbutil 3-(3-metil-piridin-2-il)benzoat, koji se zatim konvertuje u željeno jedinjenje.
Šema IV-D Formiranje kisele soli 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il) ciklopropankarboksamido)-3-metilpiridin-2-il)benzojeve kiseline
[0191] Šema IV-D prikazuje kuplovanje 1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]dioksol-5-il) ciklopropan-karbonil hlorida sa terc-butil 3-(6-amino-3-metilpiridin- 2-il)benzoat korišćenjem trietilamina i 4-dimetilaminopiridina da bi se inicijalno dobio terc-butil estar jedinjenja IV.
Sinteze jedinjenja
Opšte UPLC/HPLC analitičke metode:
[0192] Osim ako nije naznačeno, prinosi enantiomera razdvojenih hiralnim SFC su dati kao procenat teorijskog prinosa za jedan enantiomer racemata.
[0193] LC Metoda A: Analitička reverzno fazna UPLC korišćenjem Acquity UPLC BEH C18kolone (30 x 2.1 mm, čestice 1.7 µm) proizvođača Waters (pn: 186002349), i dvostrukog gradijenta od 1-99% mobilne faze B tokom 1.2 minuta. Mobilna faza A = voda (0.05% trifluorosirćetna kiselina). Mobilna faza B = acetonitril (0.035% trifluorosirćetna kiselina). Brzina protoka = 1.5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1.5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
[0194] LC Metoda B: Analitička reverzno fazna UPLC korišćenjem Acquity UPLC BEH C18kolone (50 x 2.1 mm, čestice 1.7 µm) proizvođača Waters (pn: 186002350), i dvostrukog gradijenta od 1-99% mobilne faze B tokom 3.0 minuta. Mobilna faza A = voda (0.05% trifluorosirćetna kiselina). Mobilna faza B = acetonitril (0.035% trifluorosirćetna kiselina). Brzina protoka = 1.2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1.5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
[0195] LC Metoda C: Analitička reverzno fazna HPLC korišćenjem Kinetex C18kolone (50 x 3.0 mm) i dvostrukog gradijenta od 5-100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% trifluorosirćetna kiselina). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% trifluorosirćetna kiselina). Brzina protoka = 1.5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 2 µL i temperatura kolone = 30 °C.
[0196] LC Metoda D: Analitička reverzno fazna UPLC korišćenjem Acquity UPLC BEH C18kolone (50 x 2.1 mm, čestica 1.7 µm) proizvođača Waters (pn: 186002350), i dvostrukog gradijenta od 1-99% mobilne faze B tokom 5.0 minuta. Mobilna faza A = voda (0.05% trifluorosirćetna kiselina). Mobilna faza B = acetonitril (0.035% trifluorosirćetna kiselina). Brzina protoka = 1.2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1.5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
[0197] LC Metoda E: Analitička reverzno fazna UPLC korišćenjem Acquity UPLC BEH C18kolone (50 x 2.1 mm, 1.7 µm čestica) proizvođača Waters (pn: 186002350), i dvostrukog gradijenta od 1-99% mobilne faze B tokom 2.5 minuta. Mobilna faza A = voda (0.05% trifluorosirćetna kiselina). Mobilna faza B = acetonitril (0.035% trifluorosirćetna kiselina). Brzina protoka = 1.2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1.5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
[0198] LC Metoda F: Analitička reverzno fazna UPLC korišćenjem Acquity UPLC BEH C18kolone (50 x 2.1 mm, čestica 1.7 µm) proizvođača Waters (pn: 186002350), i dvostrukog gradijenta od 1-99% mobilne faze B tokom 15.0 minuta. Mobilna faza A = voda (0.05% trifluorosirćetna kiselina). Mobilna faza B = acetonitril (0.035% trifluorosirćetna kiselina). Brzina protoka = 1.2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1.5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
[0199] LC Metoda G: Analitička reverzno fazna UPLC korišćenjem Acquity UPLC BEH C18kolone (50 x 2.1 mm, čestica 1.7 µm) proizvođača Waters (pn: 186002350), i dvostrukog gradijenta od 30-99% mobilne faze B tokom 3.0 minuta. Mobilna faza A = voda (0.05% trifluorosirćetna kiselina). Mobilna faza B = acetonitril (0,035% trifluorosirćetna kiselina). Brzina protoka = 1.2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1.5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
[0200] LC Metoda H: Kinetex C184.6 x 50 mm 2.6 µm. Temperatura: 45°C, Protok: 2.0 mL/min, Vreme rada: 6 min. Mobilna faza: Inicijalno 95% vode (0.1% mravlja kiselina) i 5% acetonitril (0.1% mravlja kiselina) linearni gradijent do 95% acetonitrila (0.1% mravlja kiselina) 4.0 min, a zatim držite na 95% acetonitrila (0.1% mravlja kiselina) tokom 2.0 min.
[0201] LC Metoda I: Kinetex C184.6 x 50 mm 2.6 mm. Temperatura: 45°C, Protok: 2.0 mL/min, Vreme rada: 3 min. Mobilna faza: Inicijalno 95% vode (0.1% mravlja kiselina) i 5% acetonitril (0.1% mravlja kiselina) linearni gradijent do 95% acetonitrila (0.1% mravlja kiselina) 2.0 min, a zatim držite na 95% acetonitrila (0.1% mravlje kiseline) tokom 1.0 min.
[0202] LC Metoda J: Analitička reverzno fazna UPLC korišćenjem Acquity UPLC BEH C18kolone (50 x 2.1 mm, 1.7 µm čestica) proizvođača Waters (pn: 186002350), i dvostrukog gradijenta od 50-99% mobilne faze B tokom 3.0 minuta. Mobilna faza A = voda (0.05% trifluorosirćetna kiselina). Mobilna faza B = acetonitril (0.035% trifluorosirćetna kiselina). Brzina protoka = 1.2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1.5 µL i temperatura kolone = 60°C.
[0203] LC Metoda K: Analitička reverzno fazna UPLC korišćenjem Acquity UPLC BEH C18kolone (50 x 2.1 mm, 1.7 µm čestica) proizvođača Waters (pn: 186002350), i dvostrukog gradijenta od 30-99% mobilne faze B tokom 1.0 minuta. Mobilna faza A = voda (0.05% trifluorosirćetna kiselina). Mobilna faza B = acetonitril (0.035% trifluorosirćetna kiselina). Brzina protoka = 1.2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1.5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
[0204] LC Metoda L: Analitička reverzno fazna UPLC korišćenjem Acquity UPLC BEH C18kolone (50 x 2.1 mm, 1.7 mm čestica) proizvođača Waters (pn: 186002350), i dvostrukog gradijenta od 50-99% mobilne faze B tokom 1.0 minuta. Mobilna faza A = voda (0.05% trifluorosirćetna kiselina). Mobilna faza B = acetonitril (0.035% trifluorosirćetna kiselina). Brzina protoka = 1.2 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1.5 µL i temperatura kolone = 60 °C.
[0205] LC Metoda M: Analitička reverzno fazna HPLC korišćenjem Kinetex C18kolone (50 x 3.0 mm) i dvostrukog gradijenta od 5-100% mobilne faze B tokom 6 min. Mobilna faza A = voda (0.1% trifluorosirćetna kiselina). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% trifluorosirćetna kiselina). Brzina protoka = 1.5 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 10 µL i temperatura kolone = 30 °C.
[0206] LC Metoda N: Zorbax C184.6 x 50 mm 3.5 µm. Protok: 2.0 mL/min, gradijent 95% voda (0.1% trifluorosirćetna kiselina) 5% acetonitril (0.1% trifluorosirćetna kiselina) do 95% acetonitrila (0.1% trifluorosirćetna kiselina) tokom (2.0 min), zatim držite na 95% acetonitrila (0.1% trifluorosirćetna kiselina) tokom 1.0 min.
[0207] LC Metoda O: Zorbax SB-C184.6 x 50 mm 3.5 mm, temperatura: 45 °C, protok 2.0 mL/min, Vreme rada: 4 min. Uslovi Mobilne Faze: Inicijalno 95% vode (0.1% mravlja kiselina) i 5% acetonitril (0.1% mravlja kiselina) linearni gradijent do 95% acetonitrila (0.1% mravlja kiselina) 2.0 min, a zatim držite na 95% acetonitrila (0.1% mravlja kiselina) tokom 2.0 min.
[0208] LC Metoda P: Merckmillipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 x 4.6 mm) i rad sa dvostrukim gradijentom od 5 -100% mobilne faze B tokom 6 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% trifluorosirćetna kiselina). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% trifluorosirćetna kiselina).
[0209] LC Metoda Q: Merckmillipore Chromolith SpeedROD C18kolona (50 x 4.6 mm) i dvostruki gradijent od 5 do 100% mobilne faze B tokom 12 minuta. Mobilna faza A = voda (0.1% trifluorosirćetna kiselina). Mobilna faza B = acetonitril (0.1% trifluorosirćetna kiselina).
[0210] LC Metoda R: Waters Cortex 2.7 µm C18(3.0 mm x 50 mm), Temp: 55 °C; Protok: 1.2 mL/min; Mobilna faza A: 100% voda sa 0.1% trifluorosirćetne kiseline. Mobilna faza B: 100% acetonitril sa 0.1% trifluorosirćetne kiseline. Gradijent: 5% do 100% B tokom 4 min, sa zadržavanjem na 100% B tokom 0.5 min, ekvilibracija na 5% B tokom 1.5 min.
[0211] LC Metoda S: Poroshell 120 EC-C183.0 x 50 mm 2.7 mM, Temp: 45 °C, Protok: 2.0 mL/min, Vreme rada: 6 min. Uslovi mobilne faze: Inicijalno 95% vode (0.1% trifluorosirćetna kiselina) i 5% acetonitrila (0.1% trifluorosirćetna kiselina) linearni gradijent do 95% acetonitrila (0.1% trifluorosirćetna kiselina) tokom 4.0 min zatim držite na 95% acetonitrilu (0.1% trifluorosirćetna kiselina) tokom 2.0 min.
[0212] LC Metoda T: Zorbax C184.6 x 50 mm 3.5 mm, Security Guard: AJO-4287 C18, 4 x 3.0 mm. Temperatura: 45 °C, Protok: 2.0 mL/min, Vreme rada: 6 min. Mobilna faza: 95% vode (0.1% mravlja kiselina) i 5% acetonitril (0.1% mravlja kiselina) linearni gradijent do 95% acetonitrila (0.1% mravlja kiselina) tokom 4.0 min, a zatim držite 2.0 min.
[0213] LC Metoda U: Kinetex EVO C184.6 x 50 mm 2.6 µm, Temp: 45 °C, Protok: 2.0 mL/min, Vreme rada: 4 min. Mobilna faza: Inicijalno 95% vode (0.1% mravlja kiselina) i 5% acetonitril (0.1% mravlja kiselina) linearni gradijent do 95% acetonitrila (0.1% mravlja kiselina) tokom 2.0 min, a zatim držite na 95% acetonitril (0.1% mravlja kiselina) tokom 2.0 min. Jedinjenja 262, 263, 266, 267, 271 i 272, čije sinteze su opisane u Primerima 87 i 90, su data za referencu.
Primer 1: Priprema 12,12,19-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5,7, 9,20(24),21-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 9)
[0214]
Korak 1: terc-Butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat
[0215]
[0216] Rastvor 2,6-dihloropiridin-3-karboksilne kiseline (10 g, 52.08 mmol) u tetrahidrofuranu (210 mL) je tretiran sukcesivno sa di-terc-butil dikarbonatom (17 g, 77.89 mmol) i 4-(dimetilamino)piridinom (3.2 g, 26.19 mmol) i mešan tokom noći na sobnoj temperaturi. U tom trenutku je dodata 1N hlorovodonična kiselina (400 mL) i smeša je snažno mešana oko 10 min. Produkt je ekstrahovan etil acetatom (2 x 300 mL), a kombinovani organski slojevi su isprani vodom (300 mL) i slanim rastvorom (150 mL) i osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da se dobije 12.94 g (96% prinos) terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilata u obliku bezbojnog ulja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1.60 (s, 9H), 7.30 (d, J=7.9 Hz, 1H), 8.05 (d, J=8.2 Hz, 1H). ESI-MS m/z izrač.247.02, nađeno 248.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.79 min (LC Metoda B).
Korak 2: terc-butil 3-okso-2,3-dihidro-1H-pirazol-1-karboksilat
[0217]
[0218] Reaktor od 50 L je pokrenut, a omotač je postavljen na 20 °C, uz mešanje na 150 o/min, refluks kondenzator (10 °C) i produvavanje azotom. Dodati su metanol (2.860 L) i metil (E)-3-metoksiprop-2-enoat (2.643 kg, 22.76 mol), i reaktor je zatvoren. Reakcija je zagrejana na unutrašnju temperaturu od 40 °C i sistem je podešen da održava temperaturu omotača na 40 °C. Hidrazin hidrat (1300 g 55% w/w, 22. 31 mol) je dodavan u porcijama preko levka za dodavanje tokom 30 min. Reakcija je zagrevana na 60 °C 1 h. Reakciona smeša je ohlađena na 20 °C i trietilamin (2.483 kg, 3.420 L, 24.54 mol) je dodat u porcijama, održavajući temperaturu reakcije < 30 °C. Dodat je rastvor Boc anhidrida (4.967 kg, 5.228 L, 22.76 mol) u metanolu (2.860 L) uz održavanje temperature < 45 °C. Reakciona smeša je mešana na 20 °C tokom 16 h. Reakcioni rastvor je delimično koncentrovan da bi se uklonio metanol, što je rezultiralo bistrim, svetlo ćilibarnim uljem. Dobijeno ulje je prebačeno u reaktor od 50 L, mešano i dodati su voda (7.150 L) i heptan (7.150 L). Dodaci su uzrokovali taloženje male količine proizvoda. Vodeni sloj je ispušten u čistu posudu, a međusloj i sloj heptana su filtrirani da se odvoji čvrsta supstanca (proizvod). Vodeni sloj je prebačen nazad u reaktor, a sakupljena čvrsta supstanca je stavljena nazad u reaktor i pomešana sa vodenim slojem. U reaktor je dodat levak za ukapavanje i napunjen je sirćetnom kiselinom (1.474 kg, 1.396 L, 24.54 mol) koja je dodavana u kapima. Obloga je podešen na 0 °C kako bi apsorbovala egzoterma gašenja. Nakon što je dodavanje završeno (pH = 5), reakciona smeša je mešana 1 h. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom i isprana vodom (7.150 L), zatim je isprana drugi put vodom (3.575 L). Kristalna čvrsta supstanca je prebačena u 20 L balon rotacionog uparivača i dodat je heptan (7.150 L). Smeša je suspendovana na 45 °C 30 min i 1-2 zapremine rastvarača je oddestilovano. Suspenzija u balonu rotacionog uparivača je filtrirana i čvrsta supstanca je isprana heptanom (3.575 L). Čvrsta supstanca je dalje osušena u vakuumu (50 °C, 15 mbar) da bi se dobio terc-butil 5-okso-1H-pirazol-2-karboksilat (2921 g, prinos 71%) kao gruba, kristalna čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 10.95 (s, 1H), 7.98 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 5.90 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 1.54 (s, 9H).
Korak 3: 2-benzilsulfanil-6-fluoro-piridin
[0219]
[0220] 2,6-difluoropiridin (200 g, 1.738 mol) je rastvoren u dimetil sulfoksidu (2 L) u tikvici od 5 L sa tri grla i okruglim dnom opremljenom gornjom mešalicom, temperaturnom sondom i levkom za dodavanje. Dodat je cezijum karbonat (572.4 g, 1.757 mol). Fenilmetanetiol (206 mL, 1.755 mol) je dodavan u kapima preko levka za dodavanje. Tokom dodavanja uočena je pojava egzoterme. Temperatura je porasla na oko 40 °C. Reakcija je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je izlivena u vodu i ekstrahovana sa dihlormetanom. Ekstrakt je dva puta ispran vodom i filtriran preko malog čepa silika gela. Čep je eluiran dihlormetanom i filtrat je uparen u vakuumu da bi se dobio 2-benzilsulfanil-6-fluoro-piridin (366 g, 96%) kao ulje boje breskve koje je očvrslo pod vakuumom u velike pločaste blokove.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7.58 (q, J = 7.9 Hz, 1H), 7.48 – 7.41 (m, 2H), 7.36 – 7.25 (m, 4H), 7.06 (dd, J = 7.6, 2). Hz, 1H), 6.62 (dd, J = 7.9, 2.6 Hz, 1H), 4.43 (s, 2H).
Korak 4: 6-fluoropiridin-2-sulfonamidi
[0221]
[0222] U tikvici od 12 L sa tri grla i okruglim dnom opremljenoj gornjom mešalicom i temperaturnom sondom je rastvoren 2-benzilsulfanil-6-fluoro-piridin (303.2 g, 1.383 mol) u hloroformu (2.0 L). Dodata je voda (1.5 L) i smeša je ohlađena u ledenom kupatilu do 0 °C i snažno mešana. Gasoviti hlor iz boce za gas je snažno uvođen u reakciju pomoću Pasterove pipete ubačene kroz septum na trećem vratu tikvice. Brzo se formirao beli talog. Tokom dodavanja uočena je pojava egzoterme. Dodavanje hlora je zaustavljeno kada je temperatura porasla na 20 °C. Reakcija je ostavljena da se ponovo ohladi pre dodavanja još gasovitog hlora. Doziranje je nastavljeno sve dok reakcija nije dobila žućkasto-zelenu boju i tako je ostala nakon mešanja 30 min. U ovom trenutku nisu uočene daljnje egzotermne pojave. Reakcija je izlivena u rastvor 40% vodenog rastvora natrijum bisulfita. Organski sloj je odvojen, a vodeni je ekstrahovan sa drugim delom hloroforma. Organski slojevi su spojeni, osušeni preko magnezijum sulfata, filtrirani i upareni u vakuumu da bi se dobilo žućkasto ulje. Ulje je rastvoreno u dihlormetanu (1.5 L) i dodato u kapima u amonijum hidroksid (1.5 L 40% w/v, 17.12 mol) u tikvicu od 12 L sa tri grla i okruglim dnom opremljenu gornjom mešalicom, temperaturnom sondom i levkom za dodavanje. Rastvor amonijum hidroksida je ohlađen na 0 °C u ledenom kupatilu pre dodavanja. Brzina dodavanja je podešena tako da temperatura reakcije ostane ispod 10 °C. Dobijeni zelenkasto-žuti rastvor je mešan sat vremena i izliven u led. Slojevi su razdvojeni (organski sloj je bio tamnozelen), a vodeni sloj je ekstrahovan sa dodatnim dihlormetanom. Organski slojevi su odbačeni. Vodeni sloj je ohlađen u ledenom kupatilu i koncentrovana vodena hlorovodonična kiselina je dodavana u porcijama u vodeni sloj dok pH nije bio jako kiseo. Dobijena smeša je mešana dok je svaka porcija dodavana. Dobijeni vodeni rastvor je ekstrahovan dva puta sa etil acetatom. Organski slojevi su kombinovani, osušeni preko magnezijum sulfata, filtrirani i upareni u vakuumu da bi se dobila svetlosmeđa čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je pomešana sa dihlorometanom (otprilike 500 mL) i mešana magnetnom mešalicom sve dok većina velikih nakupina nije razbijena. Dodato je približno 1.5 L pentana koji je istaložio dosta svetlosmeđe čvrste supstance. Dobijena smeša je kratko mešana, a zatim filtrirana. Filterski kolač je ispran pentanom i osušen u vakuumu da bi se dobio 6-fluoropiridin-2-sulfonamid (204.1 g, 84%) kao svetlosmeđa čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8.52 – 8.11 (m, 1H), 7.89 (dd, J = 7.8, 2.7 Hz, 1H), 7.67 (s, 2H), 7.57 – 7.44 (m, 1H).
Korak 5: 2-[1-(Trifluorometil)ciklopropil]etanol
[0223]
[0224] U rastvor litijum aluminijum hidrida (293 mg, 7.732 mmol) u tetrahidrofuranu (10.00 mL) u ledenom kupatilu, u kapima je dodavana 2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]sirćetna kiselina (1.002 g, 5.948 mmol) u tetrahidrofuranu (3.0 mL) tokom perioda od 30 minuta održavajući temperaturu reakcije ispod 20 °C. Smeša je ostavljena da se postepeno zagreje na sobnu temperaturu i mešana je 18 h. Smeša je ohlađena u ledenom kupatilu i sekvencijalno je gašena vodom (294 mg, 295 µL, 16.36 mmol), natrijum hidroksidom (297 µL 6 M, 1.784 mmol), a zatim vodom (884.0 µL, 49.07 mmol) da bi se dobila zrnasta čvrsta supstance u smeši. Čvrsta supstanca je filtrirana pomoću celita, a talog je ispran etrom. Filtrat je dalje osušen sa magnezijum sulfatom i filtriran i koncentrovan u vakuumu da se dobije proizvod sa rezidualnim tetrahidrofuranom i etrom. Smeša je direktno preuzeta u sledeći korak bez daljeg prečišćavanja.
Korak 6: terc-Butil 3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-karboksilat
[0225]
terc-butil 5-okso-1H-pirazol-2-karboksilat (1.043 g, 5.660 mmol), 2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etanol (916 mg, 5.943 mmol) i trifenilfosfin (1.624 g, 6 mmol) su pomešani u tetrahidrofuranu (10,48 mL) i reakcija je ohlađena u ledenom kupatilu. Diizopropil azodikarboksilat (1.288 g, 1.254 mL, 6.368 mmol) je dodat u kapima u reakcionu smešu i reakcija je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu tokom 16 h. Smeša je uparena, a rezultirajući materijal je podeljen između etil acetata (30 mL) i 1N natrijum hidroksida (30 mL). Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom (30 mL), osušen preko natrijum sulfata i koncentrovan. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom etil acetata u heksanima (0-30%) da bi se dobio terc-butil 3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-karboksilat (1.03 g, 57%). ESI-MS mlz izračunato 320.13, nađeno 321.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.72 min (LC Metoda A).
Korak 7: 3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]-1H-pirazol
terc-Butil-3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropiletoksilpirazol-1-karboksilat (1.03 g, 3.216) mmol) je rastvoren u dihlrometanu (10.30 mL) sa trifluorosirćetnom kiselinom (2.478 mL, 32.16 mmol), i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Reakcija je uparena, a rezultujuće ulje je podeljeno između etil acetata (10 mL) i zasićenog rastvora natrijum bikarbonata. Organski sloj je odvojen, ispran slanim rastvorom, osušen iznad natrijum sulfata, i uparen da bi se dobio 3-[2-[1-
(trifluorometil)ciklopropil]etoksil-1H-pirazol (612 mg, 86%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 11.86 (s, 1H), 7.50 (t, J = 2.1 Hz, 1H), 5.63 (t, J = 2.3 Hz, 1H), 4.14 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 2.01 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 0.96 – 0.88 (m, 2H), 0.88 – 0.81 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.220,08, nađeno 221,0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0,5 min (LC Metoda A).
Korak 8: terc-Butil 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[0227]
terc-Butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (687 mg, 2.770 mmol), 3-[2-[1-(trifluoro-metil)ciklopropil]etoksi]-1H-pirazol (610 mg, 2.770 mmol) i sveže mleveni kalijum karbonat (459 mg, 3.324 mmol ) su pomešani u bezvodnom dimetil sulfoksidu (13.75 mL). Dodat je 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (62 mg, 0.5540 mmol), i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom 16 h. Reakciona smeša je razblažena vodom (20 mL) i mešana 15 min. Dobijena čvrsta supstanca je sakupljena i isprana vodom. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu i osušena iznad magnezijum sulfata. Smeša je filtrirana i koncentrovana da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (1.01 g, 84%). ESI-MS m/z izrač. 431.12, nađeno 432.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.88 min (LC Metoda A).
Korak 9: 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[0228]
terc-Butil 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (1.01 g, 2.339 mmol) i trifluorosirćetna kiselina (1.8 mL, 23.39 mmol) su pomešani u dihlorometanu (10 mL) i zagrevani 3 h na 40 °C. Reakcija je koncentrovana. Dodati su heksani i smeša je ponovo koncentrovana da bi se dobila 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (873 mg, 99%) ESI-MS m/z izrač. 375.06, nađeno 376.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.69 min (LC Metoda A).
Korak 10: terc-butil 2,2-dimetil-5-oksopirolidin-1-karboksilat
[0229]
[0230] 5,5-Dimetilpirolidin-2-on (4.77 g, 42.1 mmol), 4-N,N-dimetilamino piridin (9.19 g, 42.1 mmol) i trietilamin (4.26 g, 42.1 mmol) su rastvoreni u bezvodnom dihlorometanu (140 mL), a zatim u di-terc-butil dikarbonatu (27.6 g, 0.126 mol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 48 h. Reakcioni rastvor je razređen dihlorometanom (500 mL), ispran sa 1N vodenim rastvorom hlorovodonika (100 mL) i slanim rastvorom (2 X 50 mL). Organski slojevi su osušeni preko magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani. Dobijeni ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu korišćenjem metode gradijenta heksani -etil acetat (0 do 20% etil acetata u heksanu) da bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-5-oksopirolidin-1-karboksilat (5.48 g, 58%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (250MHz, CDCl3) δ 2.48 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 1.85 (t, J = 8.0 Hz, 2H), 1.54 (s, 9H), 1.47 (s, 6H). ESI-MS m/z izrač.213.1, nađeno 214.1 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 2.36 min (LC Metoda C).
Korak 11: terc-butil 5-alil-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0231]
terc-Butil 2,2-dimetil-5-oksopirolidin-1-karboksilat (2.72 g, 12.,8 mmol) je rastvoren u anhidrovanom etru (36 mL) i anhidrovanom tetrahidrofuranu (36 mL), a zatim ohlađen na -78 °C. U gornji rastvor je polako dodat diizobutilaluminijum hidrid (14.1 mmol, 14 mL, 1.0 M u toluenu) i dobijeni rastvor je mešan na -78 °C tokom 4 h, a zatim zagrejan do sobne temperature i dalje mešan 3 h. Zatim je dodat monohidrat p-toluensulfonske kiseline (18 mg) u metil alkoholu (40 mL) i dobijeni rastvor je mešan 19 h. Svi rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom. Dobijenom ostatku je dodat zasićeni vodeni rastvor kalijum natrijum tartarata (100 mL) i mešan je 3 h. Rastvor je ekstrahovan dietil etrom (3 X 150 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (2 X 50 mL), osušeni preko magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio intermedijer kao bledožuto ulje (2.65 g). Ovaj intermedijer i aliltrimetilsilan (2.34 g, 20.5 mmol) su rastvoreni u bezvodnom dihlorometanu (60 mL) i ohlađeni na -78 °C. Zatim je polako dodat bor trifluorid dietileterat (1.72 g, 12.1 mmol). Nakon što je dodavanje završeno, reakcioni rastvor je mešan na -78 °C 2 h, a zatim još 2 h na sobnoj temperaturi. Dodat je 1M vodeni rastvor kalijum karbonata (25 mL). Organski sloj je odvojen, a vodeni sloj je ekstrahovan dihlorometanom (3 X 60 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je podvrgnut hromatografiji na silika gelu korišćenjem metode gradijenta heksani - etil acetat (0 do 15% etil acetata) da bi se dobio terc-butil 5-alil-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (0.92 g, 30% ) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (250MHz, CDCl3) δ 5.76 (m, 1H), 5.08-5.01 (m, 2H), 3.94-3.82 (m, 1H), 2.43 (m, 1H), 2.13 (m, 1H), 2.00 (m, 2H), 1.70 (m, 2H), 1.57 (s, 9H), 1.41 (s, 3H), 1.28 (s, 3H). ESI-MS m/z izrač. 239.2, nađeno 240.1 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 3.83 min (LC Metoda C).
Korak 12: terc-butil 5-(3-hidroksipropil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat
[0232]
[0233] U rastvor terc-butil 5-alil-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilata (920 mg, 3.85 mmol) u bezvodnom tetrahidrofuranu (38 mL) na 0 °C je dodat 9-BBN (15.38 mmol, 30.8 mL, 0.5 M u tetrahidrofuranu). Dobijeni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 3 h. Reakcionom rastvoru ohlađenom na 0 °C je dodat vodeni rastvor vodonik peroksida (38.5 mmol, 4.4 mL, 30% u vodi), a zatim natrijum hidroksid (19.25 mmol, 3.9 mL, 20% u vodi). Zatim je reakcioni rastvor mešan na sobnoj temperaturi 1.5 h. Dodata je voda (50 mL), i vodeni rastvor je ekstrahovan dietil etrom (4 X 80 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni iznad magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu upotrebom heksana i etil acetata (0 do 35% etil acetata u heksanu) da bi se dobio terc-butil 5-(3-hidroksipropil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (834 mg, 84%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (250MHz, dimetil sulfoksid) δ 4.39 (m, 1H), 3.67 (m, 1H), 3.37 (m, 2H), 1.88-1.49 (m, 6H), 1.40 (s, 6H), 1.38 (s, 3H), 1.31-1.28 (m, 2H), 1.24 (s, 3H). ESI-MS m/z izrač. 257.2, nađeno 258.1 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 2.79 min (LC Metoda C).
Korak 13: terc-butil 2,2-dimetil-5-(3-metilsulfoniloksipropil)pirolidin-1-karboksilat
[0234]
terc-Butil 5-(3-hidroksipropil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (3.5 g, 13.6 mmol) i trietilamin (3.8 mL, 27.2 mmol) su rastvoreni u 40 mL dihlorometana i ohlađeni u ledenom kupatilu. Metansulfonil hlorid (1.2 mL, 15.0 mmol) je dodat u kapima tokom perioda od 10 minuta i dobijena smeša je mešana u ledenom kupatilu 20 minuta. Smeša je ugašena zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (10 mL), a organski sloj je ispran vodom (10 mL), osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-5-( 3-((metilsulfonil)oksi)propil)pirolidin-1-karboksilat (4.9 g, kvantitativni prinos) kao narandžasto ulje. Sirovi proizvod je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. ESI-MS m/z izrač. 335.5, nađeno 336.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 4.24 min (LC Metoda Q).
Korak 14: terc-butil 5-(3-aminopropil)-2, 2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0235]
[0236] U rastvor 5-(3-metansulfoniloksi-propil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estra (4.9 g, 13.6 mmol) u 1,4-dioksanu (70 mL) je dodat 30% vodeni rastvor amonijum hidroksida (70 mL) i dobijena smeša je zagrevana u zatvorenoj posudi na 60°C tokom 20 h. Smeša je koncentrovana pod vakuumom i ekstrahovana sa dihlorometanom (3 X 100 mL). Kombinovani organski slojevi su koncentrovani do ulja i prečišćeni hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem 0-15% gradijenta dihlorometan-metanol da bi se dobio terc-butil 5-(3-aminopropil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (2.14 g , 61% prinos u dva koraka) kao bledo ulje.<1>H NMR (500MHz, dimetil sulfoksid) δ 3.66 (d, 1H), 2.85 (br s, 2H), 2.58-2.48 (m, 2H), 1.85-1.18 (m, 22H). ESI-MS m/z izrač. 256.4, nađeno 257.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.50 min (LC Metoda Q).
Korak 15: terc-Butil 5-[3-(terc-butoksikarbonilamino)propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0237]
terc-Butil 5-(3-aminopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (640 mg, 2.496 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (6.4 mL) pod azotom i u njega je dodat trietilamin (1.01 g, 9.981 mmol) a zatim di-terc-butil dikarbonat (1.362 g). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Reakcija je razblažena etrom i zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida i odvojena. Vodeni sloj je ispran još dva puta etrom, kombinovane organske faze su osušene preko natrijum sulfata, filtrirane, i koncentrovane do svetlo žutog ulja koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata dajući tercbutil 5-[3-(terc-butoksikarbonilamino)propil]-2,2-dimetil-pirolidin- 1-karboksilat (720 mg, 81%) kao bistro ulje. ESIMS m/z izrač.356.26752, nađeno 357.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.73 min (LC Metoda B).
Korak 16: terc-butil 5-[3-[terc-butoksikarbonil(metil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0238]
terc-Butil 5-[3-(terc-butoksikarbonilamino)propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (720 mg, 2.020 mmol) je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (14.4 mL). Dodat je kalijum karbonat (837.5 mg, 6.060 mmol), a zatim metil jodid (860.2 mg, 6.060 mmol) i reakciona smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom 16 h. Dodat je kalijum karbonat (1.396 g, 10.10 mmol), a zatim metil jodid (860.2 mg, 6.060 mmol) i reakcija je mešana preko noći. Dodat je natrijum hidrid (404 mg, 10.1 mmol) i mešano je 6 sati. Dodat je natrijum hidrid (121 mg, 5.04 mmol) i reakciona smeša je ostavljena u frižideru na 4 °C tokom 3 dana. Reakcija je zagrejana do sobne temperature, dodat je metil jodid (860.2 mg, 6.060 mmol) i reakcija je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je razblažena dihlorometanom, a zatim isprana vodom (2 X 40 mL). Organski sloj je dva puta ispran slanim rastvorom, a zatim zasićenim vodenim rastvorom natrijum karbonata da se reakciona smeša dovede do pH ~12. Reakciona smeša je zatim ekstrahovana sa dihlorometanom (3 X 75 mL). Kombinovane organske frakcije su osušene preko natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane do žutog ulja. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitkog gradijenta od 100% dihlorometana do 20% metanol/dihlorometana da bi se izdvojio proizvod, terc-butil 5-[3-[tercbutoksikarbonil (metil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (695 mg, 93%) kao žuto ulje. ESI-MS m/z izrač.
370.28317, nađeno 371.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.83 min (LC Metoda A).
Korak 17: 3-(5,5-Dimetilpirolidin-2-il)-N-metil-propan-1-amin (so di-trifluorosirćetna kiselina)
[0239]
[0240] U mešani rastvor terc-butil 5-[3-[terc-butoksikarbonil(metil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata (695 mg, 1.876 mmol) u metilen hloridu (6.95 mL) na 0 °C je dodata trifluorosirćetna kiselina (2.891 mL), 37.52 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 h. Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom i zatim uparene iz etra 3 puta dajući 3-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)-N-metil-propan-1-amin (so di-trifluorosirćetna kiselina) (747.3 mg, 100 %). ESI-MS m/z izrač.
170.1783, nađeno 171.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.09 min (LC Metoda A).
Korak 18: 2-Hloro-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0241]
[0242] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (1.14 g, 3.03 mmol) i karbonil diimidazol (590 mg, 3,639 mmol) su pomešani u tetrahidrofuranu (15.3 mL) i mešani 2 h. U tom trenutku je dodat 6-fluoro-2-piridinsulfonamid (534 mg, 3.03 mmol), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (907 µL, 6.07 mmol) i reakcija je mešana dodatnih 30 min na sobnoj temperaturi. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa 1M rastvorom limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata i upareni da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Ova čvrsta supstanca je tretirana etrom, uklonjena pod sniženim pritiskom i zatim rastvorena u mlakom dihlorometanu. Reakciona smeša je polako ohlađena do sobne temperature, zatim u kupatilu sa ledom i vodom dajući masu bele čvrste supstance koja je filtrirana i isprana heksanom. Čvrsta supstanca je osušena pod sniženim pritiskom da se dobije 2-hloro-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (1.48 g, 89%). ESI-MS m/z izrač.533.05475, nađeno 543.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.72 min (LC Metoda A).
Korak 19: 2-Hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)propil-metil-amino]-2-piridil] sulfonil]-6-[3-[2-[1-( trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0243]
[0244] 2-Hloro-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfonil]-6-[3-[2-[1(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (1.033 g, 1.876 mmol), 3-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)-N-metil-propan-1-amin (so di-trifluorosirćetna kiselina) (747.3 mg, 1.876 mmol), kalijum karbonat (1.556 g, 11.26 mmol) i dimetil sulfoksid (5 mL) du dodati u vial, začepljeni i zagrevani na 50 °C 20 min. Reakcija je zagrevana na 65 °C 90 min. Reakcija je ponovo ohlađena na 50 °C i mešana 32 h. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i dodat je 2-hloro-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (300 mg, 0.5451 mmol) a zatim je ponovo zagrejana na 50 °C i mešana preko noći. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu i izlivena u vodu dajući beli talog. Koncentrovana hlorovodonična kiselina je dodata da se dovede na pH 4, a zatim je bela čvrsta supstanca odfiltrirana i isprana vodom, a zatim heksanom. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu, osušena (magnezijum sulfat), filtrirana i koncentrovana do bele čvrste supstance. Čvrsta supstanca je prečišćena hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitki gradijent od 100% dihlorometana do 20% metanola/dihlorometana dajući 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)propil-metil-amino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (350 mg, 27%) kao belu čvrstu supstancu. ESI-MS m/z izrač.
683.2268, nađeno 684.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.63 min (LC Metoda A).
Korak 20: 12,12,19-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 9)
[0245]
[0246] Kombinovani 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)propil-metil-amino]-2-piridil] sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (350 mg, 0.5116 mmol), kalijum karbonat (353.5 mg, 2.558 mmol), cezijum fluorid (116.6 mg, 28.34µL, 0.7674 mmol), 3 Å molekularna sita i dimetil sulfoksid (7.077 mL) u vialu su produvani azotom, zatvoreni, zagrejani na 150 °C i mešani 25 sati. Ohlađeni su na sobnu temperaturu i sipani u ~150mL vode. pH je podešen na 4 dodavanjem u kapima koncentrovane hlorovodonične kiseline dajući precipitat žutosmeđe boje koji je filtriran i ispran vodom, a zatim heksanom. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu, osušena (magnezijum sulfat), filtrirana i koncentrovana do smeđe čvrste supstance koja je prečišćena hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitki gradijent od 100% dihlorometana do 20% metanola/dihlorometana dajući 12,12,19-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksan-2,2, 4-trion (Jedinjenje 9) (259.5 mg, 78%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.62 (s, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.97 (s, 1H), 7.77 (dd, J = 8.6, 7.3 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.82 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 6.13 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.32 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 2.96 (s, 3H), 2.08 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 1.69 (s, 2H), 1.54 (d, J = 9.7 Hz, 5H), 1.35 (s, 3H), 1.23 (s, 7H), 0.98 - 0.95 (m, 2H), 0.89 (td, J = 5.8, 4.6, 3.0 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač. 647.2502, nađeno 648.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.05 min (LC Metoda B).
Primer 2: Priprema (15S)-12,12,19-trimetil-8-(3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropiletoksi-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-penta-azatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(24),5 (10),6,8,20,22-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 10) i (15R)-12,12,19-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo [18.3.1.05,10.011,15] tetrakoza-1(24),5(10),6,8,20 ,22-heksen-2,2,4-trion (Jedinjenje 11)
[0247]
Korak 1: (15S)-12,12,19-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(24),5(10),6,8, 20,22-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 10) i (15R)-12,12,19-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluoro-metil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo [18.3.1.05, 10.011,15]tetrakoza-1(24),5(10),6,8,20,22-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 11)
[0248]
[0249] Racemski 12,12,19-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5,7, 9, 20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 9) (221.5 mg, 0.3420 mmol) podvrgnut hiralnoj separaciji pomoć u SFC hromatografije koriš ć enjem ChiralPak AS-H (250 X 21.2 mm kolone, veličine čestica 5 µm) sa mobilnom fazom 15% Metanol/85% ugljen-dioksid pri 10 mL/min tokom 8.0 min (zapremina ubrizgavanja = 500 µL 32mg/mL rastvora u Metanolu) je kao prvi enantiomer koji eluira dao (15S)-12,12,19-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(24),5(10),6,8,20,22-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 10) (82.3 mg, 74%) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.64 (s, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.77 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.04 (s, 1H), 6.82 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.13 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.32 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.60 (s, 1H), 2.99 (s, 1H), 2.96 (s, 3H), 2.08 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.96 - 1.84 (m, 1H), 1.69 (s, 3H), 1.52 (s, 6H), 1.35 (s, 3H), 1.02 - 0.83 (m, 5H), ESI-MS m/z izrač.
647.2502, nađeno 648.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.06 min (LC Metoda B), i kao drugi enantiomer je (15R)-12,12,19-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15] tetrakoza-1(24),5 (10),6,8,20, 22-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 11) (81.7 mg, 74%) koji eluira kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.64 (s, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.98 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.77 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.12 (d, J = 7.3 Hz, 1H), 7.03 (s, 1H), 6.81 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.41 (s, 1H), 4.32 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.59 (s, 1H), 3.01 (s, 1H), 2.96 (s, 3H), 2.08 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.92 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 1.69 (s, 3H), 1.52 (s, 6H), 1.35 (s, 3H), 1.01 - 0.83 (m, 5H), ESI-MS m/z izrač.647.2502, nađeno 648.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.06 min (LC Metoda B).
Primer 3: Priprema 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18 ,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8, 19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 12)
[0250]
Korak 1: (E)-(2-oksotetrahidropiran-3-iliden)metanolat (natrijumova so)
[0251]
[0252] Tikvica sa okruglim dnom od 5 L, sa 3 grla je opremljena mehaničkom mešalicom, grejnom oblogom, levkom za dodavanje, i JKem temperaturnom sondom/kontrolerom i ulazom/izlazom azota. Posuda je u atmosferi azota napunjena natrijum hidridom (59.91 g 60% w/w, 1.498 mol), a zatim heptanom (1.5 L) što je dalo sivu suspenziju. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 19 °C. Posuda je zatim napunjena etil alkoholom (3.451 g, 74.91 mmol) dodatim preko šprica što je rezultiralo izdvajanjem gasa. Levak za dodavanje je punjen bistrim bledožutim rastvorom tetrahidropiran-2-ona (150 g, 1.498 mol) i etil formata (111 g, 1.50 mol). Rastvor je dodavan u kapima tokom 1 h što je rezultiralo razvijanjem gasa i postepenom egzotermom do 45 °C. Rezultujuća gusta bela suspenzija je zatim zagrevana na 65 °C tokom 2 h i zatim ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu. Smeša je nastavljena da se meša na sobnoj temperaturi preko noći (oko 10 h). Reakciona smeša je filtrirana pod vakuumom kroz Bihnerov levak od staklene frite (srednje poroznosti) pod strujom azota. Filterski kolač je ispran heptanom (2 X 250 mL) i tečnost je izvlačena nekoliko minuta. Od heptana blago vlažni kolač je prebačen na staklenu tacnu i sušen u vakuum pećnici na 45 °C 15 h da bi se dobila bela čvrsta supstanca (205 g, 1.36 mol, 91% prinos) kao željeni proizvod, (E)-(2-oksotetrahidropiran-3-iliden)metanolat (natrijumova so).
Korak 2: 3-Metilentetrahidropiran-2-on
[0253]
[0254] Tikvica sa okruglim dnom od 5 L, sa 3 grla je opremljena mehaničkom mešalicom, grejnom oblogom, levkom za dodavanje, i JKem temperaturnom sondom/kontrolerom i ulazom/izlazom azota. Posuda je u atmosferi azota napunjena (E)-(2-oksotetrahidropiran-3-iliden)metanolatom (natrijumova so) (205 g, 1..366 mol) (205 g, 1.366 mol) i tetrahidrofuranom (1640 mL) što je dalo belu suspenziju. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 19 °C. Posuda je zatim napunjena paraformaldehidom (136.6 g, 4.549 mol) dodatim kao čvrsta supstanca u jednoj porciji. Dobijena suspenzija je zagrejana na 63 °C i stanje je održavano 15 h. Nakon zagrevanja reakciona smeša je postala blago želatinozna. Bela želatinozna smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da se ukloni veći deo tetrahidrofurana. Preostali ostatak je particioniran sa etil acetatom (1000 mL), zasićenim natrijum hloridom (500 mL) i zasićenim natrijum hidrogen karbonatom (500 mL) u levku za odvajanje. Organski sloj je uklonjen, a zaostali vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (5 X 300 mL). Kombinovani organski sloj je osušen preko natrijum sulfata (500 g) i zatim vakuumski filtriran kroz Buchner levak od staklene frite sa slojem celita od 20 mm. Filterski kolač je ispran etil acetatom (250 mL). Bistri filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo bistro bledožuto ulje (135 g) kao željeni sirovi proizvod. Materijal je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela (tečno punjenje) eluiranjem sa gradijentom od 100% heksana do 60% etil acetata u heksanu tokom 1 h, i sakupljeno je 450 mL frakcija. Proizvod je detektovan TLC analizom na silika gelu eluiranjem sa 3:1 heksani/etil acetat i vizualizovan pod UV. Frakcije proizvoda su kombinovane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo bistro, bezbojno ulje (132 g, 1.18 mol, 72% prinos koje sadrži 16 tež% zaostalog etil acetata prema NMR) kao željeni proizvod, 3-metilentetrahidropiran-2-on.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 6.18 (q, J = 1.9 Hz, 1H), 5.60 (q, J = 1.9 Hz, 1H), 4.40 – 4.26 (m, 2H), 2.61 (ddt, J). = 7.0, 6.3, 2.0 Hz, 2H), 1.90 – 1.75 (m, 2H).
Korak 3: 3-(2-metil-2-nitro-propil)tetrahidropiran-2-on
[0255]
[0256] Tikvica sa okruglim dnom od 5 L, sa 3 grla je opremljena mehaničkom mešalicom, grejnom oblogom, levkom za dodavanje, i JKem temperaturnom sondom/kontrolerom i ulazom/izlazom azota. Posuda je u atmosferi azota napunjena 2-nitropropanom (104.9 g, 1.177 mol). Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 19 °C. Posuda je zatim napunjena sa 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-enom (22.41 g, 147.2 mmol) dodatim u jednoj porciji što je rezultiralo bistrim svetlo žutim rastvorom. Nije primećena pojava egzoterme. U levak za dodavanje napunjen je rastvor 3-metilentetrahidropiran-2-ona (110 g, 981.0 mmol) u acetonitrilu (1100 mL) koji je dodavan u kapima tokom 1 h, što je rezultiralo bistrim svetložutim rastvorom i postepenom egzotermom do 24 °C. Reakciona smeša je i dalje mešana na sobnoj temperaturi 3.5 h, a zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Preostali ostatak je rastvoren u dihlorometanu (1000 mL) i podeljen sa 500 mL smeše 3:2 1 molarnog rastvora limunske kiseline/zasićenog rastvora natrijum hlorida. Rezultirajuća organska faza je bio bistar bledoplav rastvor, a vodena faza je bila blago zamućen, svetlo plavi rastvor. Organski sloj je uklonjen, a zaostali vodeni sloj je ekstrahovan dihlorometanom (300 mL). Kombinovani organski sloj je ispran zasićenim rastvorom natrijum hlorida (300 mL), osušen preko natrijum sulfata (250 g) i zatim filtriran kroz Bihnerov levak od staklene frite. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom do zapremine od oko 200 mL. Bistri bledoplavi rastvor dihlorometana je razblažen metil terc-butil etrom (1500 mL) a zamućeni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom do zapremine od oko 200 mL, čime je dobijena suspenzija. Smeša je ponovo razblažena sa metil terc-butil etrom (1500 mL) i koncentrovana pod sniženim pritiskom do zapremine od oko 250 mL. Dobijena suspenzija je ostavljena da stoji na sobnoj temperaturi preko noći (oko 12 h). Čvrsta supstanca je sakupljena vakuum filtracijom u Bihnerov levak od staklene frite, a filterski kolač je ispran hladnim metil tercbutil etrom (2 X 150 mL), a zatim je tečnost izvlačena 30 min. Materijal je dalje sušen u vakuumskoj peći na 45 °C tokom 5 sati da se dobije (160 g, 0.795 mol, 81% prinos) bele čvrste supstance kao željenog proizvoda, 3-(2-metil-2-nitro-propil) tetrahidropiran-2-ona.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 4.34 (ddd, J = 11.1, 9.3, 4.3 Hz, 1H), 4.20 (dt, J = 11.1, 5.1 Hz, 1H), 2.75 - 2.62 (m, 1H), 2.56 (dd, J = 14.9, 5.2 Hz, 1H), 2.01 - 1.89 (m, 2H), 1.89 - 1.67 (m, 2H), 1.55 (d, J = 6.0 Hz, 6H), 1.44 (dddd, J = 12.8, 11.5, 8.1, 6.6 Hz, 1H).
Korak 4: 3-(3-Hidroksipropil)-5,5-dimetil-pirolidin-2-on
[0257]
[0258] Tikvica od 1000 mL sa okruglim dnom i 3 grla je opremljena teflonskom šipkom za mešanje, grejnom oblogom, i J-Kem temperaturnom sondom/kontrolerom i gumenim septumima. Posuda je napunjena 3-(2-metil-2-nitro-propil)tetrahidropiran-2-onom (25 g, 124.2 mmol) i etil alkoholom (375 mL) koji je dao belu suspenziju. Započeto je mešanje i suspenzija je zagrevana na 40 °C 10 minuta što je dalo bistar bezbojni rastvor. Posuda je zatim opremljena sa cevi za disperziju gasa i rastvor je degaziran azotom 15 minuta. Posuda je zatim napunjena Raney Niklom (8.019 g 50% w/w, 68.31 mmol) i posuda je zatim opremljena septumima. Posuda je evakuisana i stavljena u atmosferu vodonika. Proces je ponovljen u tri ciklusa. Posuda je zatim stavljena pod pritisak vodonika od 1 atmosfere i reakciona smeša je postepeno zagrejana do 60 °C. Reakcija je nastavljena da se meša na 60 °C tokom 24 h. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, posuda je opremljena sa cevi za disperziju gasa i reakciona smeša je degazirana azotom 15 minuta. Smeša je filtrirana pod vakuumom kroz Bihnerov levak od staklene frite sa slojem celita od 20 mm. Filterski kolač je ispran etanolom (2 X 100 mL) i tečnost izvlačena dok nije ostao malo vlažan od etil alkohola i zatim je nakvašen vodom, a korišćeni Raney nikl katalizator je odložen pod vodu. Bistri bledo ćilibarni filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom do bistrog viskoznog svetlo ćilibarnog ulja. Ulje je razređeno metil terc-butil etrom (1500 mL) a zamućeni rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom do zapremine od oko 150 mL što je dalo suspenziju. Smeša je ponovo razblažena sa metil terc-butil etrom (1500 mL) i koncentrovana pod sniženim pritiskom do zapremine od oko 150 mL. Dobijena suspenzija je ostavljena da stoji na sobnoj temperaturi preko noći (oko 12 h). Čvrsta supstanca je sakupljena vakuum filtracijom u Bihnerov levak od staklene frite, a filterski kolač je ispran hladnim metil terc-butil etrom (2 X 50 mL) i zatim je tečnost izvlačena 30 min. Materijal je zatim sušen u vakuumskoj peći na 45 °C tokom 3 h da bi se dobila bela čvrsta supstanca (19 g, 0.111 mol, 89% prinos) kao proizvod, 3-(3-hidroksipropil)-5,5-dimetil- pirolidin-2-on.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7.63 (s, 1H), 3.38 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 2.37 (tdd, J = 9.8, 8.5, 4.4 Hz, 1H), 2.02 (dd, J = 12.3, 8.6 Hz, 1H), 1.72 (tdd, J = 9.6, 7.5, 4.4 Hz, 1H), 1.52 - 1.32 (m, 3H), 1.28 - 1.03 (m, 7H).
Korak 5: 3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propan-1-ol
[0259]
[0260] Tikvica sa okruglim dnom od 5 L, sa 3 grla je opremljena mehaničkom mešalicom, grejnom oblogom, levkom za dodavanje, JKem temperaturnom sondom/kontrolerom i ulazom/izlazom azota. Posuda je napunjena u atmosferi azota sa litijum-aluminijum-hidridnim peletima (19.39 g, 510.9 mmol). Posuda je zatim napunjena tetrahidrofuranom (500 mL, 20 mL/g). Započeto je mešanje i temperatura u sudu je zabeležena na 20 °C. Smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 0.5 h da bi se omogućilo da se peleti rastvore. Temperatura u sudu rezultujuće sive suspenzije je zabeležena na 24 °C. Levak za dodavanje je napunjen rastvorom 3-(3-hidroksipropil)-5,5-dimetil-pirolidin-2-ona (25 g, 146.0 mmol) u tetrahidrofuranu (500 mL) i bistri bledo žuti rastvor je dodavan u kapima tokom 90 min. Za postizanje homogenosti je bilo potrebno lagano zagrevanje. Nakon završenog dodavanja, temperatura u sudu sa dobijenom sivkastom suspenzijom je zabeležena na 24 °C. Smeša je zatim zagrejana do temperature u posudi od 65 °C i ti uslovi su održavani 72 h. Analiza reakcione smeše u ovom trenutku je pokazala da još uvek ima zaostalog polaznog materijala i da nema promena u formiranju proizvoda. Reakcija je nakon toga zaustavljena u ovom trenutku. Obloga za grejanje je uklonjena i posuda je opremljena kupatilom za hlađenje. Suspenzija je ohlađena na 0 °C u kupatilu za hlađenje sa drobljenim ledom/vodom, a zatim je ugašena vrlo sporim dodavanjem vode u kapima (19.93 mL), zatim 15 tež% rastvora natrijum hidroksida (19.93 mL) i na kraju vode (59.79 mL). Temperatura u posudi dobijene bele suspenzije zabležena je na 5 °C. Rashladno kupatilo je uklonjeno i posuda je ponovo opremljena oblogom za grejanje. Suspenzija je zagrejana na 60 °C i stanje je održavano 30 min. Topla suspenzija je vakuumski filtrirana kroz Bihnerov levak od staklene frite sa slojem celita od 20 mm. Filterski kolač je zatim ispran sa tetrahidrofuranom na 60 °C (2 X 250 mL) i zatim je tečnost izvlačena 30 min. Bistri filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo (23.5 g, 0.149 mol, 99% prinos) bistro svetlo žuto viskozno ulje kao željeni proizvod, 3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propan-1-ol.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 3.37 (dt, J = 8.3, 6.4 Hz, 3H), 2.95 (dd, J = 10.6, 7.6 Hz, 1H), 2.40 (dd, J = 10.7, 7.7 Hz, 1H), 2.04 (dt, J = 16.1, 8.1 Hz, 1H), 1.69 (dd, J = 12.2, 8.2 Hz, 1H), 1.50 - 1.24 (m, 5H), 1.11 - 0.94 (m, 7H).
Korak 6: terc-butil 4-(3-hidroksipropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0262] Tikvica sa okruglim dnom od 1 L, 3 grla je opremljena mehaničkom mešalicom, rashladnim kupatilom, levkom za dodavanje, JKem temperaturnom sondom i ulazom/izlazom azota. Posuda je napunjena u atmosferi azota sa 3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propan-1-olom (15 g, 95.39 mmol) i dihlorometanom (225 mL, 15 mL/g) što je dalo bistar svetlo žuti rastvor. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 19 °C. Kupatilo za hlađenje je napunjeno lomljenim ledom/vodom i temperatura posude je spuštena na 0 °C. Levak za dodavanje je napunjen trietilaminom (12.55 g, 124.0 mmol) koji je zatim dodavan u kapima tokom 5 minuta. Nije primećena egzotermna pojava. Levak za dodavanje je zatim napunjen sa di-terc-butil dikarbonatom (22.89 g, 104.9 mmol) rastvorenim u dihlorometanu (225 mL). Bistar bledožuti rastvor je zatim dodavan u kapima tokom 30 minuta što je rezultiralo blagim razvojem gasa. Nije primećena egzotermna pojava. Kupatilo za hlađenje je uklonjena i dobijeni bistri svetlo žuti rastvor je ostavljen da se zagreje na sobnu temperaturu i nastavljeno je sa mešanjem na sobnoj temperaturi 3 h. Reakciona smeša je prebačena u levak za odvajanje i particionirana sa vodom (75 mL). Organski sloj je uklonjen i ispran zasićenim rastvorom natrijum hlorida (75 mL), osušen preko natrijum sulfata (150 g) a zatim filtriran kroz Bihnerov levak od staklene frite. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo (30 g) bistrog svetlo žutog ulja kao željeni sirovi proizvod. Materijal je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela (tečno punjenje sa dihlorometanom) eluiranjem sa gradijentom od 100% dihlorometana do 10% metil alkohola u dihlorometanu tokom 60 minuta sakupljanjem frakcija od 50 mL. Željene frakcije proizvoda su kombinovane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobio terc-butil 4-(3-hidroksipropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (22 g, 0.0855 mol, 90% prinos) kao bistro žućkasto viskozno ulje.<1>H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 4.38 (td, J = 5.2, 1.4 Hz, 1H), 3.54 (dt, J = 10.3, 6.7 Hz, 1H), 3.38 (td, J = 6.6, 3.5 Hz 2H), 2.76 (q, J = 10.3 Hz, 1H), 2.07 (td, J = 11.6, 5.7 Hz, 1H), 1.87 (ddd, J = 16.7, 12.1, 6.0 Hz, 1H), 1.37 (dd, J = 16.7, 12.1, 6.0 Hz, 1H), 2.76 (ddd, J = 10.3 Hz, 1H), 1.37 = 14.2, 10.4 Hz, 17H), 1.24 (s, 3H).
Korak 7: terc-butil 2,2-dimetil-4-(3-metilsulfonil oksipropil)pirolidin-1-karboksilat
[0263]
terc-butil 4-(3-hidroksipropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (50.5 g, 196.22 mmol) i trietilamin (39.711 g, 54.698 mL, 392.44 mmol) je rastvoreno u dihlorometanu (500 mL) i dobijeni rastvor je ohlađen u kupatilu sa ledenom vodom 30 min. Mezil hlorid (24.725 g, 16.706 mL, 215.84 mmol) je dodavan u kapima tokom 30 minuta, zatim je ledeno kupatilo uklonjeno i smeša je mešana na sobnoj temperaturi jedan sat. Reakcija je zatim ugašena zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (200 mL). Faze su razdvojene i organska faza je ekstrahovana sa zasićenim natrijum bikarbonatom (200 mL) i vodom (2 X 100 mL). Vodene faze su odbačene, a organska faza je osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana u vakuumu da bi se dobio tercbutil 2,2-dimetil-4-(3-metilsulfonil oksipropil)pirolidin-1-karboksilat (64.2 g, 93%) kao bledožuto ulje. ESI-MS m/z izrač.
335.1766, nađeno 336.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 5.54 min (LC Metoda Q).
Korak 8: terc-butil 4-(3-aminopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0264]
terc-Butil 2,2-dimetil-4-(3-metilsulfoniloksipropil)pirolidin-1-karboksilat (64.2 g, 191.38 mmol) je rastvoren u dioksanu (650 mL), a zatim je dodat amonijum hidroksid (650 mL) i dobijena smeša je zagrevana na 45 °C tokom 18 h. Nakon 18 h, reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu. Rastvor je razblažen sa 1M natrijum hidroksidom (200 mL), a zatim ekstrahovan dietil etrom (3 X 650 mL). Vodena faza je odbačena, a kombinovane organske faze su ekstrahovane vodom (2 X 200 mL). Vodene faze su odbačene, a organska faza je osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana u vakuumu da bi se dobio terc-butil 4-(3-aminopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (48.9 g, 95% ) kao bledožuto ulje. ESI-MS m/z izrač.256.2151, nađeno 257.
3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.70 min (LC Metoda Q).
Korak 9: terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat
[0265]
[0266] U terc-butil 4-(3 -aminopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (8.91 g, 34.8 mmol) i 6-fluoropiridin-2-sulfonamid (6.13 g, 34.8 mmol) u dimetil sulfoksidu (75 mL) je dodat kalijum karbonat (4.91). g, 35.5 mmol) i smeša je mešana na 100 °C tokom 12 h, a zatim ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu i mešana još 4 h (ukupno 16 h). Reakciona smeša je polako izlivena u hlorovodoničnu kiselinu (35 mL 1 M, 35.00 mmol) u vodi (200 mL) (nešto pene) i razblažena sa etil acetatom (250 mL). Organska faza je odvojena i isprana sa 100 mL slane vode. Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana preko celita, i koncentrovana u vakuumu da se dobije tamno žuto ulje. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0% - 100% etil acetata u heksanu. Sakupljene su i čiste (9.0 g) i nečiste (3 g) frakcije. Prečišćene nečiste frakcije hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0% - 100% etil acetata u heksanu dale su, u totalu, terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino] propil]pirolidin-1-karboksilat (10.0 g, 69%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7.52 (dd, J = 8.5, 7.2 Hz, 1H), 7.07 (s, 2H), 6.95 (dd, J = 7.2, 0.7 Hz, 2H), 6.61 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 3.55 (q, J = 9.1 Hz, 1H), 3.32 -3.24 (m, 2H), 2.79 (q, J = 10.0 Hz, 1H), 2.13 (d, J = 16.1 Hz, 1H), 1.96 - 1.82 (m, 1H), 1.51 (dt, J = 18.0, 9.3 Hz, 2H), 1.37 (dd, J = 12.9, 10.6 Hz, 15H), 1.24 (s, 3H). ESI-MS m/z izrač. 412.21442, nađeno 413.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.34 min (LC Metoda D).
Korak 10: terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil ] sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0268] Deo A: Za 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (11.4 g, 30.34 mmol) u tetrahidrofuranu (150 mL) je polako dodat karbonil diimidazol (5.9 g, 36 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat. Dodat je karbonil diimidazol (0.5 g, 3 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi još 1 h (ukupno 2 h).
[0269] Deo B: U aktivirani estar pripremljen u delu A dodat je terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (10.0 g, 24.24 mmol) u tetrahidrofuranu (50 mL), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (7.5 mL, 50, mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Limunska kiselina (25.1 g, 130.6 mmol) u vodi (200 mL) je polako dodata u reakcionu smešu i zakiseljena do ~pH = 3. Smeša je postala mutna, ali nije nastao talog. Smeša je ekstrahovana sa etil acetatom (400 mL) i organska faza je isprana slanim rastvorom, osušena iznad magnezijum sulfata, filtrirana preko celita i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-80% etil acetat/heksana dajući proizvod u obliku pene, terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[ 2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (13.82 g, 74%)<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.79 (s, 1H), 8.40 (t, J = 2.7 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 8.5, 7.2 Hz, 1H), 7.21 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.19 (t, J = 2.3 Hz, 1H), 4.34 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 3.50 (dt, J = 18.3, 9.0 Hz, 1H), 3.23 (d, J = 6.7 Hz, 2H), 2.80 – 2.69 (m, 1H), 2.09 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.79 (td, J = 12.4, 6.1 Hz, 1H), 1.52 (dt, J = 15.4, 8.0 Hz, 2H), 1.36 (d, J = 11.4 Hz, 10H), 1.33 – 1.25 (m, 5H), 1.17 (s, 2H), 0.99 – 0.92 (m, 2H), 0.89 (d, J = 5.0 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač. 769.2636, nađeno 770.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.48 min (LC Metoda D).
Korak 11: 2-hloro-{N}-[[6-[3-(5, 5-dimetilpirolidin-3-il)propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidro-hloridna so)
[0270]
[0271] U terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il] piridin-3-karbonil] sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (13.8 g, 17.92 mmol) u dihlorometanu (75 mL) je dodata hlorovodonična kiselina (15 mL) 4 M, 60.00 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, a ostatak je razblažen sa 100 mL etil acetata. Rastvarač je uklonjen u vakuumu i postupak je ponovljen sa dodatnih 100 mL etil acetata dajući penu, 2-hloro-{N}-[[6-[3-(5, 5-dimetilpirolidin-3-il)propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so) (13.5 g, 101%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.83 (s, 1H), 9.06 (s, 1H), 8.92 (s, 1H), 8.42 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 8.5, 7.2 Hz, 1H), 7.29 (s, 1H), 7.18 (dd, J = 7.2, 0.7 Hz, 1H), 6.76 (dd, J = 8.5, 0.7 Hz, 1H), 6.21 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.95 (s, 2H), 4.35 (t,J = 7.0 Hz, 2H), 3.41 - 3.28 (m, 1H), 3.24 (p, J = 6.7 Hz, 2H), 2.80 (tt, J = 11.8, 6.7 Hz, 1H), 2.35 (q, J = 7.8, 7.3 Hz, 1H), 2.09 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.91 (dd, J = 12.8, 7.6 Hz, 1H), 1.58 - 1.43 (m, 3H), 1.42 - 1.31 (m, 5H), 1.24 (s, 3H), 1.01 - 0.93 (m, 2H), 0.90 (dd, J = 7.9, 3.2 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač. 669.2112, nađeno 670.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2,26 min (LC Metoda D).
Korak 12: 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23 -pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 12)
[0272]
[0273] U 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so) (12.9 g, 17.36 mmol) u NMP (120 mL) je dodat kalijum karbonat (9.64 g, 69.8 mmol) a zatim cezijum fluorid (2.69 g , 17.7 mmol) i suspenzija je mešana na 150 °C tokom 16 h.
Reakcija je zatim ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu. Smeša je razblažena vodom (100 mL) i sipana u vodu (400 mL) i smeša je polako zakiseljena hlorovodoničnom kiselinom (27.0 mL 6 M, 162.0 mmol). Talog je sakupljen upotrebom srednje frite i ispran 3X sa po 50 mL vode. Čvrsta supstanca je sušena na vazduhu 1 h a zatim rastvorena u etil acetatu (400 mL).
Organska faza je koncentrovana in vacuo i sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-100% etil acetat/heksani. Sakupljeno je 6.3 g čistog proizvoda i 6 g nečistih frakcija. Nečiste frakcije su prečišćene hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 0-5% metanol/ dihlorometan što je omogućilo dobro odvajanje proizvoda od nečistoća. Frakcije čistog proizvoda su kombinovane dajući 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11 , 18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 12) (7.4 g, 67%).
<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.52 (s, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.58 (dd, J = 8.5, 7.2 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 7.00 (s, 1H), 6.92 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 4.02 - 3.81 (m, 1H), 3.15 (dt, J = 10.1, 3.8 Hz, 1H), 2.95 (d, J = 13.7 Hz, 1H), 2.78 - 2.61 (m, 1H), 2.15 (dd, J = 5.7, 2.9 Hz, 1H), 2.07 (d, J = 6.4 Hz, 2H), 1.92 - 1.82 (m, 1H), 1.81 - 1.69 (m, 1H), 1.64 - 1.53 (m, 6H), 1.51 (s, 3H), 1.36 -1.23 (m, 1H), 0.99 - 0.93 (m, 2H), 0.90 (d, J = 10.8 Hz, 2H).ESI-MS m/z izrač.633.2345, nađeno 634.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.23 min (LC Metoda E).
Primer 4: Priprema (14R)-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazo1-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1 (23),5, 7,9,19,21-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 13) i (14S)-12, 12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluoro-metil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazo1-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 14)
[0274]
Korak 1: (14R)-12,12-dimetil-8-(3-12-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 13) i (14S)-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo-propil]etoksi}-1H-pirazo1-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo
[17.3.1.111, 14.05,10] tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 14)
[0275]
[0276] Racemski 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion ( 7,4 g) bilo je rastvoren u 150 mL acetonitrila i podvrgnut hiralnom SFC prečišć avanju. Uzorak je odvojen hiralnom SFC hromatografijom koriste ć i ChiralPak AS-H (kolona 250 X 21.2 mm, veličina čestica 5 µm) sa mobilnom fazom 25% acetonitril:metanol (90:10))/75% ugljen-dioksid pri 70mL/min dajuć i kao prvi enantiomer koji se eluira, (14R)-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 13) (2.91 g, 53%); 1H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.51 (s, 1H), 8.21 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.58 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 5.8 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.93 (s, 1H), 3.16 (s, 1H), 2.95 (d, J = 12.7 Hz, 1H), 2.80 - 2.64 (m, 1H), 2.10 (s, 1H), 2.08 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.86 (dd, J = 11.5, 5.4 Hz, 1H), 1.81 - 1.71 (m, 1H), 1.60 (s, 6H), 1.51 (s, 3H), 1.31 (d, J = 12.8 Hz, 1H), 0.95 (d, J = 4.3 Hz, 2H), 0.89 (s, 2H); ESI-MS m/z izrač. 633.2345, nađeno 634.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.19 min; i kao drugi enantiomer koji eluira, (14S)-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5,7,9, 19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 14) (3.0 g, 54%) 1H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.52(s, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.82(d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.58 (dd, J = 8.5, 7.1 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.99 (s, 1H), 6.92 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.92 (d, J = 12.6 Hz, 1H), 3.15 (s, 1H), 2.95 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 2.78 - 2.64 (m, 1H), 2.08 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.86 (dd, J = 11.9, 5.3 Hz, 1H), 1.77 (s, 1H), 1.60 (s, 6H), 1.51 (s, 3H), 1.31 (q, J = 11.9 Hz, 1H), 1.00 - 0.92 (m, 2H), 0.90 (d, J = 10.4 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač.633.2345, nađeno 634.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.2 min (LC metoda B). Primer 5: Priprema 12,12-dimetil-8-(3-{[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8, 19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 15)
[0277]
Korak 1: terc-butil 3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-karboksilat
[0278]
[0279] Tikvica od 5000 mL, sa okruglim dnom je opremljena mehaničkom mešalicom, grejačem, J-Kem temperaturnom sondom/kontrolerom, levkom za dodavanje, vodeno hlađenim refluks kondenzatorom i ulazom/izlazom azota. Posuda je napunjena u atmosferi azota sa terc-butil 5-okso-1H-pirazol-2-karboksilatom (70 g, 0.3800 mol) i tetrahidrofuranom (840 mL, 12 mL/g) što je dalo bistar bledožuti rastvor. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 19 °C. Posuda je zatim napunjena sa [1-(trifluorometil)ciklopropil]metanolom (58.56 g, 0.4180 mol) dodat čist u jednoj porciji, a zatim trifenilfosfinom (109.6 g, 0.4180 mol) dodatim kao čvrsta supstanca u jednoj porciji. Dobijeni bistar bledožuti rastvor je zatim tretiran sa diizopropil azodikarboksilatom (bistra crvenkasto-narandžasta tečnost) (82.3 mL, 0.4180 mol) dodavanom u kapima tokom 1 h, što je rezultiralo postepenom egzotermnom temperaturom do 40 °C i bistrim svetlo ćilibarnim rastvorom. Reakciona smeša je zatim zagrejana do temperature posude od 50 °C i stanje je održavano 2 h kada je analiza pomoću LC/MS pokazala potpunu potrošnju početnog materijala. Reakciona smeša boje ćilibara je koncentrovana pod sniženim pritiskom i dobijeno bistro tamno ćilibarno ulje je suspendovano u toluenu (560 mL) i mešano na sobnoj temperaturi 1 h za koje vreme se taložila čvrsta supstanca (trifenilfosfin oksid MW = 278.28). Gusta suspenzija je filtrirana kroz Bihnerov levak od staklene frite, a filterski kolač je ispran toluenom (150 mL) i zatim je tečnost izvlačena 30 min. Bistri ćilibarni filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo bistro ulje boje ćilibara. Ovaj materijal je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela (čvrsto punjenje adsorbovano na celitu) eluiranjem sa gradijentom od 100% heksana do 20% etil acetata u heksanima, i prikupljene su frakcije od 450 mL. Proizvod eluira sa oko 5% etil acetata u heksanu. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobilo bistro svetlo žuto ulje kao željeni proizvod, terc-butil 3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-karboksilat (81 g, 0.264 mol, 70%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8.10 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 6.14 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 4.31 (s, 2H), 1.55 (s, 9H), 1.07 (dp, J = 4.9, 1.3 Hz, 4H). ESI-MS m/z izrač.
306.11914, nađeno 307.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.75 min (LC Metoda B).
Korak 2: 3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]-1H-pirazol
[0280]
[0281] Tikvica od 5000 mL, sa 3 grla i okruglim dnom je opremljena mehaničkom mešalicom, grejnom oblogom, J-Kem temperaturnom sondom, vodeno hlađenim refluks kondenzatorom, levkom za dodavanje i ulazom/izlazom azota. Posuda je u atmosferi azota napunjena terc-butil 3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-karboksilatom (80 g, 0.2612 mol), dihloro-metanom (320 mL, 4 mL/g) i metil alkoholom (320 mL, 4 mL/g) što je dalo bistar bledo žuti rastvor. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 19 °C. Levak za dodavanje je napunjen sa 4 M hlorovodoničnom kiselinom u 1,4-dioksanu (195.9 mL, 0.7836 mol) koja je zatim dodavana u kapima tokom 1 h što je rezultiralo postepenom egzotermom do 30 °C. Rezultirajući bistri bledožuti rastvor je zagrejan do temperature posude od 45 °C i stanje je održavano 1 h kada je analiza pomoću LC/MS pokazala završetak reakcije. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu a zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Preostali ostatak je rastvoren u terc-butil metil etru (640 mL), a zatim prebačen u levak za odvajanje i podeljen sa 2 M rastvorom natrijum hidroksida (391.8 mL, 0.7836 mol). Organski sloj je uklonjen, a zaostali vodeni sloj je ekstrahovan sa terc-butil metil etrom (2 X 200 mL). Kombinovani organski sloj je ispran zasićenim rastvorom natrijum hlorida (500 mL), osušen preko natrijum sulfata (300 g) a zatim filtriran kroz Bihnerov levak od staklene frite. Bistri bledožuti filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom kako bi se dobilo bistro svetložuto ulje koje se stvrdnulo stajanjem da bi se dobila bela čvrsta supstanca (49.5 g, 0.240 mol, 92%) kao željeni proizvod, 3-[[1-(trifluorometil) ciklopropil]metoksi]1H-pirazola.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 11,90 (s, 1H), 7.51 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 5.67 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 4.19 (s, 2H), 1.09 – 0.97 (m, 4H). ESI-MS m/z izrač.206.0667, nađeno 207.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.08 min (LC Metoda B).
Korak 3: terc-butil 2-hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[0282]
[0283] Tikvica od 5000 mL, sa okruglim dnom sa 3 grla je opremljena mehaničkom mešalicom, rashladnim kupatilom koje se koristilo kao sekundarna zaštita, J-Kem temperaturnom sondom, vodom hlađenim refluks kondenzatorom, levkom za dodavanje i ulazom/izlazom azota. Posuda je napunjena u atmosferi azota sa 3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]-1H-pirazolom (45 g, 0,2183 mol) i N,N-dimetilformamidom (540 mL, 12 mL/g) što je dalo bistri bledo žuti rastvor. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 17 °C. Posuda je zatim napunjena terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilatom (54.16 g, 0.2183 mol) koji je dodat kao čvrsta supstanca u jednoj porciji. Dobijeni bistri bledožuti rastvor je zatim tretiran sa kalijum karbonatom (39.22 g, 0.2838 mol) koji je dodat kao čvrsta supstanca u jednoj porciji, a zatim je dodat 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (3.67 g, 0.03274 mol) kao čvrsta supstanca u jednoj porciji. Rezultujuća bledožuta suspenzija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 24 h. Reakciona smeša je ohlađena na 10 °C u rashladnom kupatilu sa lomljenim ledom/vodom. Levak za dodavanje je napunjen sa vodom (540 mL) koja je dodavana u kapima tokom 45 minuta, što je rezultiralo gustom suspenzijom i egzotermom do 15 °C. Rezultujuća suspenzija je i dalje mešana na 15 °C tokom 30 minuta, a zatim filtrirana kroz Bihnerov levak od staklene frite. Filterski kolač je ispran vodom (2 X 500 mL) a zatim je tečnost izvlačena kroz Bihnerov levak 2 h. Materijal je zatim ostavljen da se osuši na vazduhu preko noći da se dobije (73 g, 0.175 mol, 80%) belih čvrstih granula, terc-butil 2-hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat. ESI-MS m/z izrač. 417.1067, nađeno 418.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.85 min (LC Metoda A).
Korak 4: 2-Hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[0284]
[0285] Tikvica od 1000 mL, sa 3 grla i okruglim dnom je opremljena mehaničkom mešalicom, grejnom oblogom, J-Kem temperaturnom sondom/kontrolerom, levkom za dodavanje, refluks kondenzatorom hlađenim vodom i ulazom/izlazom azota. Posuda je u atmosferi azota napunjena tercbutil2-hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilatom (70 g, 0.1675 mol) i 2-propanolom (350 mL) što je dalo sivobelu suspenziju. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 19 °C. Ulivnik za dodavanje je napunjen sa 6 M vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (139.6 mL, 0.8375 mol) koji je dodavan u kapima tokom 10 minuta što je rezultiralo egzotermom do 30 °C. Rezultujuća suspenzija je zatim zagrejana do refluksa (temperatura posude ∼ 82 °C). Nakon zagrevanja suspenzija se pretvorila u bistri bledožuti rastvor (temperatura posude ∼ 75 °C u tom trenutku). Nakon mešanja pod refluksom u trajanju od ~30 min, čvrsta supstanca je počela da se taloži. Suspenzija je nastavljena da se meša pod refluksom dodatnih 30 min nakon čega je dodavana voda (210 mL) u kapima tokom 15 min. Toplota je zatim uklonjena i nastavljeno je mešanje suspenzije i ona je ostavljena da se polako ohladi na sobnu temperaturu. Materijal je sakupljen vakuum filtracijom u Bihnerov levak od staklene frite, i filterski kolač je opran mešavinom 1:1 voda/2-propanol (100 mL), a zatim vodom (2 X 100 mL) a zatim je tečnost izvlačena kroz Bihnerov levak tokom 30 min. Materijal je zatim sušen u vakuumskoj peći na 45 °C tokom 24 sata da se dobije 2-hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil) ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (56 g, 0.155 mol, 92%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 13.64 (s, 1H), 8.44 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.41 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.74 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.24 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.41 (s, 2H), 1.16 – 1.07 (m, 4H). ESI-MS m/z izrač. 361.0441, nađeno 362.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.66 min (LC Metoda A).
Korak 5: terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil ]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0286]
[0287] 2-hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (260 mg, 0.6973 mmol) i karbonil diimidazol (113.1 mg, 0.6973 mmol) su pomešani u tetrahidrofuranu (3.783 mL) i mešani 1 h na 45 °C. Dodat je tercbutil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (287.7 mg, 0.6973 mmol), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (212.4 mg, 208.6 µL, 1.395 mmol) i reakcija je zagrevana na 45 °C tokom 4 sata. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa 1M rastvorom limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, upareni, zatim prečišćeni hromatografijom na silika gelu (kolona od 24 grama) korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 70% etil acetata u heksanima da se kao bela čvrsta supstanca dobije terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il] piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (232 mg, 44%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.78 (s, 1H), 8.41 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 8.4, 7.3 Hz, 1H), 7.21 (s, 1H), 7.17 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.23 (s, 1H), 4.39 (s, 2H), 3.58 - 3.46 (m, 1H), 3.24 (s, 2H), 2.74 (t, J = 10.5 Hz, 1H), 2.02 (s, 1H), 1.79 (td, J = 12.2, 6.4 Hz, 1H), 1.50 (ddd, J = 21.4, 10.3, 6.2 Hz, 2H), 1.36 (d, J = 11.7 Hz, 9H), 1.30 (d, J = 13.8 Hz, 6H), 1.17 (s, 3H), 1.11 (s, 2H), 1.09 (s, 2H). ESI-MS m/z izrač.755.248, nađeno 756.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.31 min (LC Metoda E).
Korak 6: 12,12-dimetil-8-(3-{[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2, 4-trion (Jedinjenje 15)
[0289] Deo A: terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (232 mg, 0.3068 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (5.0 mL) i u smešu je dodata hlorovodonična kiselina (4M u dioksanu) (2.5 mL 4 M, 10.00 mmol) i ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 3 h. Reakcija je koncentrovana do suva pod sniženim pritiskom, ponovo rastvorena u etil acetatu, a zatim je dodat vodeni rastvor 2M natrijum karbonata (5 mL) da se rastvor podesi na pH ~10. Organski sloj je ekstrahovan etil acetatom (2 X 10 mL), ispran slanim rastvorom, osušen iznad natrijum sulfata i uparen do suvog pod sniženim pritiskom.
[0290] Deo B: U vial je dodat sirovi amin iz Dela A, kalijum karbonat (235 mg, 1.70 mmol), cezijum fluorid (75.3 mg, 0.4957 mmol), 3 Å molekularna sita i dimetil sulfoksid (7.0 mL). Vial je pročišćen azotom, zatvoren, zagrejan na 150 °C i mešan 16 sati. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa 1M rastvorom limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, upareni i zatim prečišćeni hromatografijom na silika gelu (kolona od 24 grama) korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 80% etil acetata da bi se kao sivobela čvrsta supstanca dobio 12,12-dimetil-8-(3-1[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetra-ciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 15) (101.9 mg, 54%).
<1>H NMR
[0291] (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.51 (s, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.66 - 7.49(m, 1H), 7.05 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.98 (d, J = 5.5 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.16 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.36 (q, J = 11.9 Hz, 2H), 3.92 (dd, J = 24.2, 10.9 Hz, 1H), 3.24 - 3.07 (m, 1H), 2.95 (d, J = 13.0 Hz, 1H), 2.78 - 2.64 (m, 1H), 2.22 - 2.08 (m, 1H), 1.86 (dd, J = 11.8, 5.0 Hz, 1H), 1.76 (dd, J = 15.9, 8.1 Hz, 1H), 1.65 - 1.54 (m, 6H), 1.51 (s, 3H), 1.31 (dd, J = 24.7, 12.0 Hz, 1H), 1.10 (s, 4H). ESI-MS m/z izrač. 619.2189, nađeno 620.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.1 min (LC Metoda E).
Primer 6: Priprema 12,12-dimetil-8-(3-{[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8, 19,21-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 21) i 12 ,12-dimetil-8-(3-{[1-trifluoro- metil)ciklopropil]metoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1. 111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-triona(enantiomer 2) (Jedinjenje 22)
[0292]
Korak 1: 12,12-Dimetil-8-(3-1[1-(trifluorometil)ciklopropilmetoksil-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia -3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 21) i 12,12-dimetil- 8-(3-{[1-(trifluorometil) ciklopropil]metoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111, 14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (jedinjenje 22)
[0293]
[0294] Racemski 12,12-dimetil-8-(3-{[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 15) (82.4 mg, 0.133 mmol) je podvrgnuti hiralnoj SFC hromatografiji koristeć i ChiralPak AS-H (250 X 21.2 mm kolonu, veličina čestica 5 µm) sa mobilnom fazom 20% acetonitril (bez modifikatora)/80% ugljen dioksid pri 70 mL/min dajuć i kao prvi enantiomer koji se eluira, 12,12-dimetil-8-(3-{[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5 (10),6,8,19,21-heksan-2,2, 4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 21) (32.38 mg, 78%) kao prljavo belu čvrstu supstancu; 1H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.51 (s, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.57 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.16 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.36 (q, J = 11.9 Hz, 2H), 4.14 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 3.16 (s, 1H), 2.95 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 2.76 -2.68 (m, 1H), 2.19 - 2.07 (m, 1H), 1.86 (dd, J = 11.8, 5.1 Hz, 1H), 1.75 (s, 1H), 1.60 (s, 3H), 1.51 (s, 3H), 1.28 (d, J = 2.1 Hz, 4H), 1.10 (d, J = 2.7 Hz, 2H), 0.88 (s, 2H), ESI-MS m/z izrač. 619,2189, nađeno 620,2 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.1 min (LC metoda E) i kao drugi enantiomer koji se eluira, 12,12-dimetil-8-(3-{[1-(trifluorometil)ciklopropil] metoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10), 6,8,19,21-heksan-2,2, 4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 22) (34.58 mg, 83%) kao prljavo belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.51 (s, 1H), 8.22 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 3.6 Hz, 1H), 7.57 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.71 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.16 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.36 (q, J = 11.9 Hz, 2H), 4.14 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 3.16 (s, 1H), 2.95 (d, J = 13.4 Hz, 1H), 2.76 - 2.68 (m, 1H), 2.19 - 2.07 (m, 1H), 1.86 (dd, J = 11.8, 5.1 Hz, 1H), 1.75 (s, 1H), 1.60 (s, 3H), 1.51 (s, 3H), 1.28 (d, J = 2.1 Hz, 4H), 1.10 (d, J = 2.7 Hz, 2H), 0.88 (s, 2H), ESI-MS m/z izrač. 619.2189, nađeno 620.2 (M+l)+; Retenciono vreme: 2.1 min (LC metoda E).
Primer 7: Priprema 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20 (24),21-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 28)
[0295]
Korak 1: Etil 1-(bromometil)-2-oksociklopentankarboksilat
[0296]
[0297] Rastvor etil 2-oksociklopentankarboksilata (70 g, 449 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (300 mL) je polako dodat u suspenziju 67.6% suspenzije natrijum hidrida u mineralnom ulju (19.17 g, 540 mmol) u tetrahidrofuranu (7 tetrahidrofuran). heksametilfosforamid (97 g, 540 mmol) na sobnoj temperaturi u atmosferi argona. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Dodat je dibromometan (392 g, 250 mmol) i reakciona smeša je refluksovana na 80 °C tokom 16 h. Reakcija je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu i dodat je dietil etar (1000 mL), a organski sloj je ispran vodom (5 X 500 mL), osušen iznad anhidrovanog natrijum sulfata, koncentrovan i prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem 0-10% heksani-etil acetata da bi se dobio etil 1-(bromometil)-2-oksociklopentankarboksilat (85 g, 76%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 4.18 (q, J = 7.0 Hz, 7.25 Hz, 2H); 3.68 (q, J = 22.5 Hz, J = 9.5 Hz, 2H); 2.58 – 2.00 (m, 6H); 1.25 (t, J = 7.75 Hz, 3H).
Korak 2: Dietil 2-metilenheksandioat
[0298]
[0299] Kalijum karbonat (79 g, 572 mmol) je dodat u rastvor etil 1-(bromometil)-2-okso-ciklopentankarboksilata (85 g, 341 mmol) u suvom etanolu (680 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Smeša je filtrirana, uparena i prečišćena hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem 0-5% heksani-etil acetat da bi se dobio dietil 2-metilenheksandioat (72.7 g, 98%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 6.16 (s, 1H); 5.54 (s, 1H); 4.24 – 4.07 (m, 4H); 2.36 – 2.28 (m, 4H), 1.83 – 1.77 (m, 2H), 1.32 – 1.21 (m, 6H).
Korak 3: Dietil 2-(2-metil-2-nitropropil)heksandioat
[0300]
[0301] 1,8-Diazabicikloundek-7-en (23 g, 151 mmol) je dodat u rastvor dietil 2-metilenheksan- dioata (72.7) g, 340 mmol) i 2-nitropropana (36.3 g, 408 mmol) u suvom acetonitrilu (1000 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Smeša je uparena, a ostatak je rastvoren u etil acetatu (1000 mL) i ispran sa zasićenim amonijum hloridom (500 mL). Organska faza je koncentrovana i prečišćena hromatografijom na koloni silika gela upotrebom 0-10% heksani-etil acetata da bi se dobio dietil 2-(2-metil-2-nitropropil)heksandioat (86 g, 84%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 4.17 – 4.07 (m, 4H); 2.41 – 2.05 (m, 5H), 1.72 – 1.44 (m, 4H), 1.56 (s, 3H), 1.51 (s, 3H), 1.28 – 1.21 (m, 6H).
Korak 4: etil estar 4-(4,4-dimetil-5-okso-pirolidin-2-il)-buterne kiseline
[0302]
[0303] Smeša dietil 2-(2-metil-2-nitropropil)heksandioata (43 g, 141.7 mmol) i suspenzija Raney nikla (12 g) u etanolu (860 mL) je zagrevana na 80 °C tokom 18 h u Parr reaktoru pod pritiskom od 2 bara gasovitog vodonika. Dodat je celit (50 g) i dobijena smeša je filtrirana. Čvrste materije su odbačene i filtrat je koncentrovan da bi se dobio 4-(4,4-dimetil-5-okso-pirolidin-2-il)-buterna kiselina etil estar (31.2 g, 97%) kao narandžasto ulje. Sirovi proizvod je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. ESI-MS m/z izrač.227.3, nađeno 228.3 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 3.23 min (LC Metoda Q).
Korak 5: 4-(4,4-dimetilpirolidin-2-il)-butan-1-ol
[0304]
[0305] U rastvor 4-(4,4-dimetil-5-okso-pirolidin-2-il))-buterne kiseline etil estra (78.8 g, 345.3 mmol) u tetrahidrofuranu (1200 mL) je dodavan litijum aluminijum hidrid (39.3 g, 1036.0 mmol) u porcijama tokom perioda od 45 minuta i rezultujuća suspenzija je zagrevana do refluksa pod azotom 18 h. Ohlađena reakciona smeša je pažljivo ugašena zasićenim rastvorom natrijum sulfata (100 mL) i formirana čvrsta supstanca je filtrirana. Čvrste materije su odbačene i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 4-(4,4-dimetilpirolidin-2-il)-butan-1-ol (51.5 g, 87%) kao smeđe ulje. Sirovi proizvod je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. ESI-MS m/z izrač. 171.28, nađeno 172.3 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 1.05 min (LC Metoda Q).
Korak 6: terc-butil estar 2-(4-Hidroksibutil)-4,4-dimetil-pirolidin-1-karboksilne kiseline
[0306]
[0307] U rastvor 4-(4,4-dimetilpirolidin-2-il)-butan-1-ola (51.5 g, 301 mmol) u dihlormetanu (400 mL) je dodat rastvor natrijum bikarbonata (50.6 g, 602 mmol) u vodi (300 mL) a nakon toga di-terc-butil dikarbonat (65,6 g, 301 mmol). Rezultujuća dvofazna smeša je mešana 18 h na sobnoj temperaturi. Faze su razdvojene, i vodena faza je odbačena. Organska faza je koncentrovana i prečišćena hromatografijom na koloni silika gela upotrebom 0-45% heksani-etil acetat da bi se dobio 2-(4-hidroksibutil)-4,4-dimetil-pirolidin-1-karboksilne kiseline terc-butil estar (57.2 g , 77%) kao bistro ulje.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 4.35 (t, 1H), 3.53 (m, 1H), 3.37 (m, 2H), 2.76 (m, 1H), 2.01-1.81 (m, 2H), 1.40-1.24 (m, 2H), 2.76 (m, 1H), 1.40-1.24 m, 23H). ESI-MS m/z izrač. 271.4, nađeno 272.4 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 4.67 min (LC Metoda Q).
Korak 7: terc-butil 2,2-dimetil-4-(4-metilsulfoniloksibutil)pirolidin-1-karboksilat
[0308]
[0309] U rastvor terc-butil 4-(4-hidroksibutil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata (2.28 g, 8.401 mmol) u dihlorometanu (19 mL) i trietilaminu (8.0 mL, 57 mmol) ohlađen na 0 °C u kapima je dodat metansulfonil hlorid (2.161 mL, 27.92 mmol). Reakciona smeša je mešana 20 h, omogućavajući da se reakcija zagreje na sobnu temperaturu nakon 1 h (bistar rastvor je postao mutno narandžast nakon 10 minuta). Reakciona smeša je ugašena ledenom vodom i dihloro-metanom, a zatim slanim rastvorom. Vodeni sloj je ekstrahovan dalje sa dihlorometanom (2 X 20 mL) i kombinovani organski slojevi su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Dobijeni materijal je sušen pod vakuumom 1 h da bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-(4-metilsulfoniloksibutil)pirolidin-1-karboksilat (2.9 g, 99%) kao žuto ulje. ESI-MS m/z izrač. 349.1923, nađeno 350.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.82 min (LC Metoda E).
Korak 8: terc-butil 4-(4-aminobutil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0310]
terc-Butil 2,2-dimetil-4-(4-metilsulfoniloksibutil)pirolidin-1-karboksilat (2.9 g, 8.298 mmol) je rastvoren u smeši dioksana (60 mL) i amonijum hidroksida (60 mL 30% w/v, 510 mmol). Smeša je zagrevana 18 h na 50 °C u zatvorenom sudu. Dioksan je koncentrovan pod vakuumom i dodat je dihlorometan (50 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod vakuumom. Sirovi materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 80 grama) korišćenjem dihlorometan-metanola (koji sadrži 5 mL/litar 30% amonijum hidroksida) metodom gradijenta (0 do 15% metanola u dihlorometanu) da bi se dobio terc-butil 4-(4-aminobutil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1.44 g, 64%) kao sivobela pena.
<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7.90 (s, 2H), 3.55 (dd, J = 18.7, 11.1 Hz, 1H), 3.34 (s, 2H), 3.17 (s, 1H), 2.76 (dd, J = 17.0, 9.5 Hz, 2H), 2.06 (s, 1H), 1.95 - 1.74 (m, 1H), 1.52 (t, J = 18.4 Hz, 2H), 1.39 (d, J = 9.9 Hz, 9H), 1.35 (s, 1H), 1.34 (s, 2H), 1.31 - 1.18 (m, 6H). ESI-MS m/z izrač.270.23074, nađeno 271.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.21 min (LC Metoda E).
Korak 9: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[4-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilat
[0311]
[0312] U tikvici od 250 mL su kombinovani 6-fluoropiridin-2-sulfonamid (894 mg, 5.07 mmol) u dimetil sulfoksidu (20 mL), zatim kalijum karbonat (1.1 g, 8.0 mmol) i terc-butil 4-(4-aminobutil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1.44 g, 5.33 mmol) pod azotom i refluks kondenzatorom. Posuda je zagrevana na 60 °C u uljnom kupatilu 18 h. Dodat je kalijum karbonat (1.1 g, 8.0 mmol) i temperatura je povećana na 80 °C za dodatna 4 h. Nakon hlađenja, reakciona smeša je filtrirana, zatim razblažena etil acetatom i isprana sa 1 M rastvorom limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani, upareni i prečišćeni hromatografijom na silika gelu (80 grama kolona GOLD) korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 75% etil acetata u heksanima da se kao bela čvrsta supstanca dobije, terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilat (475 mg, 22%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7.51 (dd, J = 8.4, 7.3 Hz, 1H), 7.07 (s, 2H), 6.94 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 6.61 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 3.54 (dd, J = 18.2, 8.5 Hz, 1H), 3.28 (dd, J = 12.6, 6.6 Hz, 2H), 2.78 (dd, J = 19.7, 10.1 Hz, 1H), 2.07 (s, 1H), 1.94 - 1.80 (m, 1H), 1.52 (s, 2H), 1.44 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 1.38 (d, J = 10.4 Hz, 9H), 1.35 (d, J = 10.9 Hz, 6H), 1.21 (d, J = 17.2 Hz, 4H). ESI-MS m/z izrač. 426.23007, nađeno 427.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.76 min (LC Metoda E).
Korak 10: terc-Butil 4-[4-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0313]
[0314] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (425 mg, 1.13 mmol) i karbonil diimidazol (217 mg, 1.34 mmol) su pomešani u tetrahidrofuranu (7 mL) i mešani 90 minuta na 50 °C. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilat (475 mg, 1.11 mmol), a zatim 1,8-diazabiciklo [5.4.0]undek-7-en (350 µL, 2.34 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 18 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa 1 M rastvorom limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni, a zatim pročišćeni hromatografijom na silika gelu (kolona od 80 grama) korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 70% etil acetata u heksanima da bi se dobio terc-butil 4-[4-[[ 6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil] amino]butil]- 2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (613 mg, 83%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.80 (s, 1H), 8.41 (t, J = 3.0 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 8.4, 7.3 Hz, 1H), 7.22 (s, 1H), 7.16 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.18 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.34 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.54 - 3.42 (m, 1H), 3.22 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 2.72 - 2.63 (m, 1H), 2.08 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 2.00 - 1.88 (m, 1H), 1.71 (td, J = 11.2, 5.9 Hz, 1H), 1.53 - 1.45 (m, 2H), 1.40 - 1.34 (m, 9H), 1.25 (t, J = 11.6 Hz, 6H), 1.20 - 1.18 (m, 1H), 1.17 (d, J = 6.0 Hz, 4H), 0.98 - 0.92 (m, 2H), 0.88 (s, 2H). ESI-MS m/z izrač.
783.27924, nađeno 784.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.4 min (LC Metoda E).
Korak 11: 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 28)
[0315]
[0316] Deo A: terc-butil 4-[4-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil ] sulfamoil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (538 mg, 0. 686 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (12 mL) i smeši je dodata hlorovodonična kiselina (4 M u dioksanu) (5 mL 4 M, 20.0 mmol) i mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Smeša do suvog koncentrovana pod sniženim pritiskom, ponovo je rastvorena u etil acetatu, zatim je dodat 2 M vodeni rastvor natrijum karbonata (5 mL), dajući pH -10. Ekstrahovana je etil acetatom (2 X 10 mL), isprana slanim rastvorom, zatim osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i uparena do suvog pod sniženim pritiskom.
[0317] Deo B: Kombinovani materijal iz Dela A i kalijum karbonat (474 mg, 3.43 mmol), cezijum fluorid (156 mg, 1.03 mmol), 3 Å molekularna sita i dimetil sulfoksid (11 mL) u vialu, je produvavan azotom, zatvoren, zagrejan na 150 °C i mešan 18 h. Ohlađen je na sobnu temperaturu. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa 1 M rastvorom limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni, a zatim prečišćeni hromatografijom na silika gelu (40 grama kolona) korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 80% etil acetata u heksanima da bi se dobio 12,12-dimetil-8-(3). -{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 28) (270 mg, 60%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.45 (s, 1H), 8.21 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.69 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.32 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.51 (s, 2H), 3.30 (s, 1H), 2.76 (d, J = 15.3 Hz, 1H), 2.69 - 2.58 (m, 1H), 2.14 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 2.08 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 1.85 (dd, J = 11.6, 5.4 Hz, 1H), 1.56 (s, 2H), 1.55 (d, J = 3.3 Hz, 6H), 1.46 (s, 2H), 1.26 - 1.16 (m, 2H), 0.96 (t, J = 5.7 Hz, 2H), 0.89 (s, 2H). ESI-MS m/z izrač.647.2502, nađeno 648.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.26 min (LC Metoda E).
Primer 8: Priprema 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksil-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19, 24-pentazatetraciklo [18.3.1.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20 (24),21-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 29) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksil-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetra-ciklo [18.3.1.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 30)
[0318]
Korak 1: 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 29) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.111,14. 05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 30)
[0319]
[0320] Racemski 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo [18.3.1.111,14.05,10] pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 28) (204 mg, 0.3150 mmol) je podvrgnuti hiralnoj SFC hromatografiji koristeć i ChiralPak AS-H (250 X 21.2 mm kolona, veličina čestica 5 µm) sa mobilnom fazom 30% acetonitril:metanol (90:10))/70% ugljen-dioksid pri 0.5 mL/min dajuć i kao prvi enantiomer koji se eluira, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5, 7,9,20(24),21-heksan-2,2, 4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 29) (94.1 mg, 91%) kao prljavo belu čvrstu supstancu; ESI-MS m/z izrač.647.2502, nađeno 648.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.27 min (LC metoda E) i kao drugi enantiomer koji se eluira, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo [18.3.1.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 30) (90.0 mg, 87%) kao prljavo bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) d 12.45 (s, 1H), 8.21 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.69 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.23 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.81 (d, J = 8.1 Hz, 2H), 6.12 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.32 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.29 (dd, J = 4.7, 2.4 Hz, 1H), 2.86 - 2.69 (m, 1H), 2.63 (dd, J = 16.0, 11.6 Hz, 1H), 2.13 (s, 1H), 2.08 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.85 (dd, J = 11.9, 5.5 Hz, 1H), 1.68 - 1.56 (m, 2H), 1.55 (d, J = 2.9 Hz, 6H), 1.47 (dd, J = 22.2, 10.1 Hz, 2H), 1.26 - 1.16 (m, 2H), 0.96 (dd, J = 7.7, 3.7 Hz, 2H), 0.93 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 0.88 (t, J = 5.8 Hz, 2H), ESI-MS m/z izrač.647.2502, nađeno 648.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.27 min (LC Metoda E)
Primer 9: Priprema 12,12,17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5 (10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-triona (dijastereomerski par 1) (jedinjenje 35), 12,12,17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1Hpirazol-1-il)-2λ<6>-tia -3,9,11,18,23-pentaaza-tetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-triona (dijastereomerski par 2) (Jedinjenje 36),12,12,17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklo-propil]etoks}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05, 10] tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-triona (dijastereomerski par 1, enantiomer 1) (Jedinjenje 58), 12,12,17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5 (10),6,8, 19,21-heksaen-2,2,4-triona (dijastereomerski par 1, enantiomer 2) (Jedinjenje 59), 12,12,17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-triona (dijastereomerski par 2, enantiomer 1) (Jedinjenje 60) i 12,12, 17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-triona (dijastereomerski par 2, enantiomer 2) (Jedinjenje 61)
[0321]
Korak 1: (3E)-3-(Hidroksimetilen)-6-metil-tetrahidropiran-2-on (natrijumova so)
[0323] U suspenziju natrijum hidrida (60% u mineralnom ulju) (2.63 g 60% w/w, 65.8 mmol) u dietil etru (56 mL) je dodat apsolutni etanol (300 µL) zatim smeša 6-metiltetrahidropiran-2-ona (5.0 g, 43.80 mmol) i etil formata (6.0 mL, 74 mmol) su dodavani u kapima na sobnoj temperaturi tokom 30 min. Nakon što je dodavanje završeno, reakciona smeša je mešana 1 h na sobnoj temperaturi. Čvrsta supstanca nastala u smeši (natrijumova so proizvoda) je sakupljena filtracijom, isprana dietil etrom i osušena pod visokim vakuumom da bi se dobilo (3E)-3-(hidroksimetilen)-6-metil-tetrahidropiran-2-on (natrijumova so) (7.1 g, 99%). ESI-MS m/z izrač.142.06299, nađeno 143.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.64 min (LC Metoda E).
Korak 2: 6-metil-3-metilen-tetrahidropiran-2-on
[0324]
[0325] (3E)-3-(Hidroksimetilen)-6-metil-tetrahidropiran-2-on (natrijumova so) (7.1 g, 43 mmol) je suspendovana u tetrahidrofuranu (100 mL), tretirana paraformaldehidom (4.2 g, 140 mmol) pod azotom i smeša je zagrevana na 65 °C tokom 1 h. Ova smeša je ohlađena u kupatilu led-voda, ugašena zasićenim vodenim rastvorom kalijum karbonata (20 mL) i organska faza je odvojena, a zatim je vodena faza ekstrahovana dietil etrom (4 x 10 mL). Organske frakcije su sastavljene, isprane slanim rastvorom, osušene iznad anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom rotacionim uparavanjem bez zagrevanja. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 120 grama) korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 40% etil acetata u heksanima da se dobije kao bezbojna tečnost 6-metil-3-metilentetrahidropiran-2-on (2.96). g, 55%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 6.48 – 6.38 (m, 1H), 5.57 (dt, J = 2.7, 1.5 Hz, 1H), 4.49 (dqd, J = 10.4, 6.3, 2.6 Hz, 1H), 2.71 (dddt, J = 16.2, 5.0, 3.5, 1.3 Hz, 1H), 2.65 - 2.52 (m, 1H), 2.03 - 1.93 (m, 1H), 1.67 (dddd, J = 13.9, 12.4, 10.5, 5.1 Hz, 1H), 1.40 (d, J = 6.3 Hz, 3H). ESI-MS m/z izrač. 126.06808, nađeno 127.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.66 min (LC Metoda E).
Korak 3: 6-metil-3-(2-metil-2-nitro-propil)tetrahidropiran-2-on
[0326]
[0327] 2-Nitropropan (2.6 mL, 29 mmol) je tretiran sa 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-enom (550 µL, 3.68 mmol) i mešan 5 minuta pod azotom, zatim je u kapima dodavan rastvor 6-metil-3-metilen-tetrahidropiran-2-ona (2.96 g, 23.5 mmol) u acetonitrilu (32 mL) na sobnoj temperaturi tokom 45 min. Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 4 h. Smeša je uparena i ostatak je zatim prečišćen hromatografijom na silika gelu (120 gramska kolona) korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 60% etil acetata u heksanima da bi se izdvojio proizvod koji je zatim osušen pod vakuumom da se dobije bistro ulje koje se nakon stajanja pretvorilo u belu čvrstu supstancu, 6-metil-3-(2-metil-2-nitro-propil)tetrahidropiran-2-on (4.32 g, 85%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 4.57 - 4.37 (m, 1H), 2.71 - 2.58 (m, 1H), 2.51 - 2.32 (m, 1H), 2.24 (dd, J = 15.0, 6.9 Hz, 1H), 2.14 - 2.06 (m, 1H), 2.00 - 1.87 (m, 1H), 1.68 - 1.60 (m, 6H), 1.58 (dd, J = 4.8, 2.7 Hz, 1H), 1.56 - 1.47 (m, 1H), 1.36 (dd, J = 6.2, 3.2 Hz, 3H) ESI-MS m/z calc.215.11575, nađeno 216.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.11 min (LC Metoda E).
Korak 4: 3-(3-Hidroksibutil)-5,5-dimetil-pirolidin-2-on
[0328]
[0329] 6-metil-3-(2-metil-2-nitro-propil)tetrahidropiran-2-on (4.32 g, 20.07 mmol) je rastvoren u etanolu (78 mL) i dodat je vlažni Raney nikl (1.2 g, 20.45 mmol) u atmosferi azota. Izvedena su tri ciklusa vakuum/vodonik i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod vodonikom (1 atmosfera) 10 min. Zatim je suspenzija opremljena refluks kondenzatorom i zagrejana na 60 °C i mešana na ovoj temperaturi pod vodonikom 24 h. Ohlađena je na sobnu temperaturu i filtrirana kroz celit i isprana etil acetatom. Filtrati su sastavljeni i koncentrovani pod sniženim pritiskom, a ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (120 gramska kolona) korišćenjem plitki gradijent od 100% dihlorometana do 10% metanola u dihlorometanu dajući 3-(3-hidroksibutil)-5,5- dimetil-pirolidin-2-on (2,5 g, 67%) kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid d6) δ 7.63 (s, 1H), 4.36 (d, J = 4.7 Hz, 1H), 3.56 (dt, J = 11.9, 6.0 Hz, 1H), 2.35 (qd, J = 9.3, 4.4 Hz, 1H), 2.01 (dd, J = 12.3, 8.6 Hz, 1H), 1.85 - 1.59 (m, 1H), 1.45 - 1.35 (m, 1H), 1.31 (ddd, J = 10.6, 8.1, 4.1 Hz, 2H), 1.28 - 1.20 (m, 1H), 1.18 (s, 3H), 1.13 (s, 3H), 1.03 (dd, J = 6.2, 1.6 Hz, 3H) ESI-MS m/z izrač.185.14159, nađeno 186.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.74 min (LC Metoda E).
Korak 5: 4-(5, 5-dimetilpirolidin-3-il)butan-2-ol
[0330]
[0331] Rastvor 3-(3-hidroksibutil)-5,5-dimetil-pirolidin-2-ona (2.5 g, 13.49 mmol) u bezvodnom tetrahidrofuranu (37 mL) je pažljivo dodat (unutar 20 min) u suspenziju litijum aluminijum hidrida (686.6 mg, 20.24 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (37 mL) na sobnoj temperaturi u atmosferi azota. Nakon što je dodavanje završeno, reakciona smeša je zagrevana pod refluksom tokom 72 h (dve dodatne porcije litijum aluminijum hidrida (200 mg, 7,00 mmol) su dodate u reakcionu smešu nakon 24 h i 48 h refluksa). Smeša je ohlađena u kupatilu led-voda; Smeši je dodato još tetrahidrofurana (25 mL), nakon čega je sledilo lagano dodavanje zasićenog vodenog natrijum-kalijum tartarat tetrahidrata (Rochelle so, 30 mL). Rezultujuća smeša je snažno mešana 2 h na sobnoj temperaturi dok nije postignuto jasno razdvajanje vodene i organske faze; zatim je organski sloj odvojen i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u dihlorometanu (100 mL) i dobijeni rastvor je ispran slanim rastvorom (2 X 15 mL). Organska faza je osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio 4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butan-2-ol (1.6 g, 69%) kao žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.78 (dd, J = 11.9, 5.8 Hz, 1H), 3.14 (ddd, J = 10.4, 7.6, 2.8 Hz, 1H), 2.59 (dd, J = 11.0, 8.1 Hz, 1H), 2.24 - 2.07 (m, 1H), 1.87 - 1.78 (m, 1H), 1.73 (s, 2H), 1.54 -1.37 (m, 4H), 1.37 - 1.21 (m, 1H), 1.21 - 1.13 (m, 9H). ESI-MS m/z izrač. 171.16231, nađeno 172.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.53 min (LC Metoda E).
Korak 6: terc-butil 4-(3-hidroksibutil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0332]
[0333] Di-terc-butil dikarbonat (2.4 mL, 10.45 mmol) i trietilamin (1.7 mL, 12.2 mL) su dodati u rastvor 4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butan-2-ola (1.6 g, 9.341 mmol) rastvorenog u dihlorometanu (40 mL) na 0 °C. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i mešana je 30 min. Smeša je isprana vodom (15 mL), zasićenim natrijum bikarbonatom (15 mL) i slanim rastvorom (15 mL), zatim je organska faza ekstrahovana, osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana smeša.
Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 40 grama) korišćenjem gradijenta od 100% dihlorometana do 10% metanola u dihlorometanu da se kao bistro ulje izoluje terc-butil 4-(3-hidroksibutil)-2,2-dimetil- pirolidin-1-karboksilat (2,4 g, 95%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.79 (s, 1H), 3.75 - 3.56 (m, 1H), 3.00 - 2.77 (m, 1H), 2.18 - 2.04 (m, 1H), 1.89 (td, J = 12.3, 6.0 Hz, 1H), 1.63 (s, 1H), 1.53 (s, 5H), 1.49 - 1.43 (m, 12H), 1.38 (s, 1H), 1.34 (dd, J = 9.1, 4.5 Hz, 2H), 1.20 (t, J = 5.5 Hz, 3H). ESI-MS m/z izrač.271.21475, nađeno 272.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.64 min (LC Metoda E).
Korak 7: terc-butil 2,2-dimetil-4-(3-metilsulfoniloksibutil)pirolidin-1-karboksilat
[0334]
[0335] U rastvor u dihlorometanu (6 mL) ohlađen na 0 °C terc-butil 4-(3-hidroksibutil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata (346 mg, 1.275 mmol) i trietilamina (1.2 mL, 8.6 mmol) u kapima je dodat metansulfonil hlorid (350 µL, 4.52 mmol). Reakciona smeša je mešana 20 h omogućavajući joj da se zagreje na sobnu temperaturu nakon 1 h (nakon 10 min bistri rastvor je postao mutno narandžast). Reakciona smeša je ugašena sa ledenom vodom i dihlorometanom, a zatim slanim rastvorom. Vodeni sloj je ekstrahovan sa dodatnim dihlorometanom (2 X 20 mL) i kombinovani organski slojevi su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Dobijeni materijal je sušen pod vakuumom 1 h da bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-(3-metilsulfoniloksibutil)pirolidin-1-karboksilat (440 mg, 99%) u obliku žutog ulja. ESI-MS m/z izrač. 349.1923, nađeno 350.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.8 min (LC Metoda E).
Korak 8: terc-butil 4-(3-aminobutil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0336]
terc-Butil 2,2-dimetil-4-(3-metilsulfoniloksibutil)pirolidin-1-karboksilat (440 mg, 1.259 mmol) je rastvoren u mešavini dioksana (10 mL) i amonijum hidroksida (10 mL 30% w/v, 85.60 mmol). Smeša je zagrijana na 50 °C u zatvorenoj posudi 72 h. Dioksan je koncentrovan pod vakuumom i dodat je dihlorometan (50 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod vakuumom. Sirovi materijal je pročišćen hromatografijom na silika gelu (kolona od 24 grama) korišćenjem dihlorometan - metanol (koji sadrži 5 mL/litar 30% amonijum hidroksida) metodom gradijenta (0 do 15% metanola) da bi se kao svetlo žuto ulje dobio terc-butil 4-(3-aminobutil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (199 mg, 58%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid) δ 7.86 (s, 2H), 3.62 - 3.49 (m, 1H), 3.14 (dt, J = 17.3, 5.3 Hz, 1H), 2.79 (dd, J = 19.2, 10.2 Hz, 1H), 2.08 - 1.97 (m, 1H), 1.93 - 1.81 (m, 1H), 1.56 (ddd, J = 25.3, 14.2, 6.6 Hz, 1H), 1.49 - 1.43 (m, 1H), 1.42 - 1.33 (m, 15H), 1.24 (d, J = 5.9 Hz, 4H), 1.16 (d, J = 6.5 Hz, 2H).
Korak 9: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilat
[0337]
[0338] U zatvorenom mikrotalasnom vialu od 20 mL, rastvor 6-fluoropiridin-2-sulfonamida (526 mg, 2,986 mmol), terc-butil 4-(3-aminobutil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata (800 mg, 2.958 mmol) i diizopropiletilamina ( 2.6 mL, 14.93 mmol) u dimetil sulfoksidu (8 mL) je mešan na 130 °C tokom 16 h. Rastvarač je uklonjen u vakuumu, a ostatak je rastvoren u dihlorometanu i ispran vodom. Organski ekstrakt je osušen preko natrijum sulfata, uparen i prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem 12g kolone (gradijent od 0-85% etil acetat/heksani) da bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-). sulfamoil-2-piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilat (490 mg, 38%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7.49 (dd, J = 8.4, 7.3 Hz, 1H), 7.03 (s, 2H), 6.93 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.78 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 4.02 (s, 1H), 3.53 (d, J = 10.0 Hz, 1H), 2.78 (dd, J = 18.9, 10.6 Hz, 1H), 2.02 (d, J = 27.8 Hz, 1H), 1.88 (s, 1H), 1.55 - 1.42 (m, 2H), 1.42 - 1.29 (m, 16H), 1.23 (s, 3H), 1.11 (d, J = 6.4 Hz, 3H). ESI-MS m/z izrač.426.23007, nađeno 427.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.66 min (LC Metoda A).
Korak 10: terc-Butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0339]
[0340] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (160 mg, 0.4258 mmol) i karbonil diimidazol (69 mg, 0.4255 mmol) su kombinovani u tetrahidrofuranu (2.5 mL) i mešani 120 minuta na 50 °C. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilat (145 mg, 0.3399 mmol), a zatim 1,8-diazabiciklo [5.4.0]undek-7-en (110 µL, 0.7356 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 18 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa 1 M rastvorom limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni, a zatim prečišćeni reverznom fazom pomoću reverzno-fazne preparativne HPLC upotrebom C18kolone i metode 30-99 A1-B1 (acetonitril-voda+5 mM hlorovodonična kiselina) da se kao bela čvrsta supstanca dobije tercbutil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino] butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (97 mg, 36%). ESI-MS m/z izrač. 783.27924, nađeno 784.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.44 min (LC Metoda E).
Korak 11: 12,12,17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomerni par 1) (Jedinjenje 35),12,12,17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomerni par 2) (Jedinjenje 36), 12,12,17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5 (10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomerni par 1, enantiomer 1) (Jedinjenje 58), 12,12,17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9, 11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomerni par 1, enantiomer 2) (Jedinjenje 59), 12,12,17- trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetra-ciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (dijastereome-rni par 2, enantiomer 1) (Jedinjenje 60) i 12,12,17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111, 14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomerni par 2, enantiomer 2) (Jedinjenje 61)
[0341]
[0342] Deo A: 12,12, terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksi-lat (97 mg, 0.1237 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (2.0 mL) i u smešu je dodata hlorovodonična kiselina (4 M u dioksanu) (1000 µL 4 M, 4.000 mmol) i mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Do suvog koncentrovana smeša pod sniženim pritiskom je ponovo rastvorena u etil acetatu, zatim je dodat vodeni rastvor 2 M natrijum karbonata (5 mL), dajući pH ~10. Organski sloj ekstrahovan etil acetatom (2 X 10 mL) je ispran slanim rastvorom, zatim osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i uparen do suvog pod sniženim pritiskom.
[0343] Deo B: Kombinovani materijal iz Dela A i kalijum karbonat (90 mg, 0.6512 mmol), cezijum fluorida (30 mg, 0.1975 mmol), 3 Å molekularna sita i dimetil sulfoksid (2.0 mL) u vialu, su produvavani azotom, začepljeni, zagrejani na 150 °C i mešani 18 h. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu. Reakciona smeša je filtrirana a zatim prečišćena preparativnom reverzno faznom hromatografijom (C18kolona, 20% do 99% acetonitrila (bez modifikatora) u vodi (5 mM hlorovodonična kiselina)) da bi se dobio kao prvi dijastereomerni par enantiomera koji se eluira, 12,12,17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11, 18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomerni par 1) (Jedinjenje 35) (9.0 mg, 22 %) kao sivobela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.62 (s, 1H), 8.21 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.80 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.57 (dd, J = 8.5, 7.2 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.97 (d, J = 9.2 Hz, 1H), 6.91 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.68 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 4.17 (s, 1H), 3.10 (d, J = 9.4 Hz, 1H), 2.74 - 2.66 (m, 1H), 2.20 - 2.10 (m, 1H), 2.08 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.85 (dd, J = 11.9, 5.2 Hz, 1H), 1.64 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 1.62 - 1.59 (m, 3H), 1.56 (d, J = 12.9 Hz, 2H), 1.51 (s, 3H), 1.36 -1.24 (m, 2H), 1.04 (d, J = 6.3 Hz, 3H), 0.95 (d, J = 4.6 Hz, 2H), 0.90 (d, J = 11.1 Hz, 2H); ESI-MS m/z izrač. 647.2502, nađeno 648.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.25 min (LC Metoda E); i kao drugi dijastereomerni par enantiomera koji se eluira, 12,12,17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza -1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomerni par 2) (Jedinjenje 36) (33.6 mg, 82%) kao sivobela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksidisid d6) δ 12.41 (s, 1H), 8.21 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.65 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.58 (dd, J = 8.5, 7.3 Hz, 1H), 7.20 (dd, J = 12.2, 7.3 Hz, 2H), 6.89 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.65 (d, J = 5.0 Hz, 1H), 3.23 - 2.97 (m, 2H), 2.27 (dd, J = 10.1, 5.1 Hz, 1H), 2.07 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.89 (dd, J = 11.8, 5.8 Hz, 2H), 1.78 - 1.67 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 1.58 (d, J = 12.0 Hz, 1H), 1.52 (s, 3H), 1.45 (dd, J = 14.0, 6.8 Hz, 1H), 1.22 (d, J = 6.6 Hz, 3H), 1.15 - 1.06 (m, 1H), 0.97 - 0.93 (m, 2H), 0.89 (d, J = 11.4 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač.647.2502, nađeno 648.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.29 min (LC Metoda E).
[0344] Deo C: 12,12,17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomerni par 1) (11.5 mg) je podvrgnut hiralnoj separaciji SFC hromatografijom korišćenjem ChiralPak AS-H (250 X 10 mm) kolone (veličina čestica 5 µm) sa mobilnom fazom 16% acetonitril/metanol (90:10)/84% ugljen dioksid pri 10 mL/min tokom 8.0 min [zapremina ubrizgavanja = 70 µL 24 mg/mL rastvora u acetonitril/metanol (90:10)]dajući kao prvi enantiomer koji se eluira, 12,12,17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5 (10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomerni par 1, enantiomer 1) (Jedinjenje 58) (2.6 mg, 45%; >98% ee) kao prljavo belu čvrstu supstancu; ESI-MS m/z izrač. 647.2502, nađeno 648.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.25 min (LC Metoda E) i kao drugi enantiomer za eluiranje, 12,12,17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11, 18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomerni par 1, enantiomer 2) (Jedinjenje 59) (3.6 mg, 62%; >98% ee) kao sivobela čvrsta supstanca; ESI-MS m/z izrač. 647.2502, nađeno 648.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.25 min (LC Metoda E).
[0345] Deo D: 12,12,17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomerni par 2) (55 mg) je podvrgnut hiralnoj separaciji SFC hromatografijom korišćenjem ChiralPak AS-H (250 x 10 mm) kolone (veličina čestica 5 µm) sa mobilnom fazom 16% acetonitril/metanol (90:10)/84% ugljen dioksid pri 10 mL/min tokom 8.0 min [zapremina ubrizgavanja = 70 µL 24 mg/mL rastvora u acetonitril/metanolu (90:10)] dajući kao prvi enantiomer koji se eluira, 12,12 ,17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5 (10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomerni par 2, enantiomer 1) (Jedinjenje 60) (17.9 mg, 64%, >98% ee) kao sivobela čvrsta supstanca; ESI-MS m/z izrač. 647.2502, nađeno 648.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.3 min (LC Metoda E) i kao drugi enantiomer koji se eluira, 12,12,17-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11, 18,23-pentaaztetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomerni par 2, enantiomer 2) (Jedinjenje 61) (18.1 mg, 65%, >98% ee) kao sivobela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.40 (s, 1H), 8.21 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.59 (dd, J = 20.6, 12.9 Hz, 2H), 7.18 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 6.89 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 6.70 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.63 (s, 1H), 3.12 (d, J = 30.7 Hz, 2H), 2.28 (dd, J = 21.3, 12.6 Hz, 1H), 2.07 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.03 - 1.81 (m, 2H), 1.79 - 1.67 (m, 1H), 1.62 (s, 3H), 1.57 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 1.52 (s, 3H), 1.49 - 1.39 (m, 1H), 1.21 (d, J = 6.5 Hz, 3H), 1.10 (dd, J = 12.8, 4.4 Hz, 1H), 0.99 - 0.93 (m, 2H), 0.88 (s, 2H), ESI-MS m/ sa izrač.647.2502, nađeno 648.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.3 min (LC Metoda E).
Primer 10: Priprema 12,12-dimetil-8-{3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil) metoksi]-1H-pirazol-1-il}-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7, 9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 42)
[0346]
Korak 1 : terc-Butil 3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-karboksilat
[0347]
[0348] U degazirani rastvor trifenilfosfina (51.28 g, 195.5 mmol) u toluenu (360 mL) pod azotom na 0 °C u kapima je dodat DIAD (39.53 g, 37.86 mL, 195.5 mmol). Smeša je mešana na 0 °C 30 min dajući belu suspenziju. U smešu je u kapima dodat rastvor (2,2,3,3-tetrametilciklopropil) metanola (29.84 g 70% w/w, 162.9 mmol) i terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilata (30 g, 162.9 mmol) u toluenu (600.0 mL) na ~ 5 °C tokom 2 h. Smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i mešana je 18 h. Smeša je zagrevana na 75 °C ukupno 6 h, a zatim ostavljena da se ohladi na temperaturu okoline. Suspenzija je razblažena heptanom (900 mL) i mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Suspenzija je filtrirana preko celita i talog je ispran 3X sa 100 mL heptana. Filtrat je koncentrovan u vakuumu dajući gusto žuto ulje. Sirovi proizvod je hromatografisan na 750 gramskoj koloni silika gela napunjenoj dihlorometanom i eluiran sa gradijentom 0-20% etil acetat/heksani. Sakupljene frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane u vakuumu dajući prljavo belu čvrstu supstancu, terc-butil 3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-karboksilat (30.1 g, 63%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7.82 (d, J = 3.0 Hz, 1H), 5.88 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.30 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 1.61 (s , 9H), 1.12 (s, 6H), 1.04 (s, 6H), 0.70 (t, J = 7.8 Hz, 1H). ESI-MS m/z izrač.
294.19434, nađeno 295.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.19 min (LC Metoda B).
Korak 2: 3-[(2,2,3,3-Tetrametilciklopropil)metoksi]-1H-pirazol
[0349]
[0350] U rastvor terc-butil 3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-karboksilata (127 g, 431.4 mmol) u tetrahidrofuranu (317.5 mL) i etil alkoholu (635.0 mL) je polako dodat natrijum hidroksid (431.4 mL 2 M, 862.8 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Većina rastvarača je uklonjena pod sniženim pritiskom. Vodeni ostatak je razblažen vodom (400 mL) i ekstrahovan sa metil terc-butil etrom (762.0 mL). Organska faza je dva puta isprana slanim rastvorom (2 x 300 mL), a vodene faze su ponovo ekstrahovane sa metil terc-butil etrom (250 mL). Kombinovane organske faze su osušene, filtrirane i uparene da se dobije 3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]-1H-pirazol (75 g, 89%) kao viskozno ulje.
<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 11.78 (s, 1H), 7.48 (t, J = 2.1 Hz, 1H), 5.65 (s, 1H), 4.05 (d, J = 7.7 Hz, 2H), 1.08 (s, 6H), 1.00 (s, 6H), 0.67 (t, J = 7.7 Hz, 1H). ESI-MS m/z izrač. 194.1419, nađeno 195.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.43 min (LC Metoda B).
Korak 3: 2,6-dihloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propilaminol-2-piridil]sulfonil] piridin-3-karboksamid
[0351]
[0352] Deo A: U rastvor 2,6-dihloropiridin-3-karboksilne kiseline (200 mg, 1.042 mmol) u tetrahidrofuranu (5 mL) dodat je di(imidazol-1-il)metanon (169.0 mg, 1.042 mmol) i reakciona smeša je mešana 90 minuta na 50 °C. Dodat je terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil) amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (343.9 mg, 0.8336 mmol), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0] undek-7-en (237.9 mg, 233.7 µL, 1.563 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 18 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni. Dobiveni smeđi ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem plitki gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio terc-butil 4-[3-[[6-[(2,6-dihloropiridin-3-karbonil)sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (284 mg, 46%) kao beli lepljivi materijal. ESI-MS m/z izrač.585.15796, nađeno 586.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.79 min (LC Metoda A).
[0353] Deo B: Materijal iz Dela A je rastvoren u dihlorometanu (6 mL) i trifluorosirćetnoj kiselini (1.782 g, 1.204 mL, 15.63 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi 5 sati. Rastvarač je uklonjen, a ostatak je rastvoren u etil acetatu i organski slojevi su isprani zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i rastvarač je uklonjen. Materijal je osušen pod vakuumom preko noći da bi se dobio 2,6-dihloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il) propilaminol-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (233 mg, 100%) kao sivobijeli ljepljivi materijal.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 9.31 (s, 1H), 9.15 (s, 1H), 8.06 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.1 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 8.5, 7.2 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.79 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 3.34 (dq, J = 14.6, 5.7 Hz, 1H), 3.24 (dq, J = 6.6, 4.1 Hz, 2H), 2.89 - 2.75 (m, 1H), 2.45 - 2.29 (m, 1H), 1.93 (dd, J = 12.8, 7.7 Hz, 1H), 1.60 - 1.45 (m, 3H), 1.43 -1.33 (m, 5H), 1.29 (s, 3H). ESI-MS m/z izrač.485.10553, nađeno 486.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.5 min (LC Metoda A).
Korak 4: 8-Hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaaztetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9, 19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (hidrohloridna so) (Jedinjenje C)
[0354]
[0355] Rastvor 2,6-dihloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propilamino]-2-piridil]sulfonil] piridin-3-karboksamid (200 mg, 0.4112 mmol) u dimetil sulfoksidu (5.0 mL) i 3 Å molekularnih sita je mešan na sobnoj temperaturi 10 min. Zatim su dodati cezijum fluorid (194 mg, 1.277 mmol) i kalijum karbonat (1703 mg, 12.32 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 140 °C preko noći. Reakciona smeša je filtrirana kroz Whatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišćen HPLC-MS metodom reverzne faze korišćenjem Luna C18(2) kolone (75 x 30 mm, veličina čestica 5 µm) Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX) i dvostrukog gradijenta mobilne faze B od 30-99% tokom 15.0 min. Mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina). Mobilna faza B = acetonitril. Brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 µL i temperatura kolone = 25 °C da bi se dobio 8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (hidrohloridna so) (76 mg, 38%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 7.69 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.54 (dd, J = 8.5, 7.3 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.67 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.56 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 4.14 - 3.93 (m, 1H), 3.26 - 3.15 (m, 1H), 3.09 - 2.98 (m, 1H), 2.78 (t, J = 10.0 Hz, 1H), 2.19 (dd, J = 15.6, 5.6 Hz, 1H), 1.92 - 1.77 (m, 2H), 1.72 1.60 (m, 2H), 1.61 (s, 3H),1.51 (s, 3H), 1.49 - 1.34 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 449.12885, nađeno 450.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.92 min (LC Metoda B).
Korak 5: 12,12-dimetil-8-{3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]-1H-pirazol-1-il1-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 42)
[0356]
[0357] U rastvor 3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]-1H-pirazola (11.98 mg, 0.06168 mmol) u dimetil sulfoksidu (1 mL) su dodati skandijum triflat (6.073 mg, 0.01234 mmol) natrijum hidrid (10.2 mg 50% w/w, 0.2125 mmol) na 0 °C u atmosferi azota. Reakcija je mešana 30 min. Zatim je dodat 8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (hidrohloridna so) (30 mg, 0.06168 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 120 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i ugašena sa nekoliko kapi vode. Dobijena smeša je filtrirana kroz Whatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišćen metodom reverzne fazne HPLC-MS korištenjem dvostrukog gradijenta od 50-99% mobilne faze B tokom 15.0 minuta (mobilna faza A = voda (bez modifikatora), Mobilna faza B = acetonitril) da bi se dobio 12,12-dimetil-8-{3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]-1H-pirazol-1-il}-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetra-ciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 42) (2.6 mg, 7%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8.19 (s, 1H), 8.07 (s, 1H), 7.57 (s, 2H), 7.51 (s, 1H), 6.58 (s, 1H), 5.96 (s, 1H), 4.28 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 3.88 (brs, 1H), 3.41 - 3.27 (m, 2H), 3.21 (brs, 1H), 3.07 (brs, 1H), 2.61 (brs, 1H), 2.08 (brs, 1H), 1.63 (s, 6H), 1.71 - 1.53 (m, 3H), 1.26 (brs, 1H), 1.14 (d, J = 2.5 Hz, 6H), 1.07 (s, 6H), 0.75 (t, J = 7.7 Hz, 1H)ESI-MS m/z izrač.
607.29407, nađeno 608.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.86 min (LC Metoda B).
Primer 11: Priprema 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 43)
[0358]
Korak-1: (1- Ciklopropil-2-metoksi-vinil)ciklopropan
[0359]
[0360] Tikvica od 5000 mL, sa okruglim dnom je opremljena mehaničkom mešalicom, kupatilom za hlađenje koja se koristi kao sekundarna zaštita, J-Kem temperaturnom sondom, levkom za dodavanje, vodeno hlađenim refluks kondenzatorom i ulazom/izlazom azota. Posuda je napunjena u atmosferi azota sa (metoksimetil)trifenilfosfonijum hloridom (97.3 g, 284 mmol) i tetrahidrofuranom (375 mL) što je dalo belu suspenziju. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 19 °C. Posuda je zatim napunjena kalijum terc-butoksidom (31.85 g, 0.2838 mol) koji je tokom 10 minuta dodavan kao čvrsta supstanca u porcijama, što je rezultiralo crvenkasto narandžastim rastvorom i egzotermom do 21 °C. Smeša je nastavljena da se meša na sobnoj temperaturi 30 min. Ulivnik za dodavanje je napunjen diciklopropil ketonom (diciklopropilmetanonom) (25.0 g, 227.0 mmol) koji je naknadno dodavan u čistom obliku, u kapima tokom 25 minuta, što je rezultiralo postepenom egzotermom do 35 °C. Dobijeni crvenkasto narandžasti rastvor je ostavljen da se postepeno ohladi do sobne temperature, a zatim je nastavljeno sa mešanjem na sobnoj temperaturi 4 h. Reakcija je zatim ugašena hladnom vodom (375 mL) koja je dodavana u kapima tokom 25 minuta. Dobijena dvofazna smeša je prebačena u levak za odvajanje i ostavljena da stoji 5 min. Vodeni sloj je osušen, a preostali organski sloj je ispran zasićenim rastvorom natrijum hlorida (375 mL). Organski deo je uklonjen i koncentrovan pod sniženim pritiskom kako bi se dobilo bledožuto ulje koje je još uvek sadržalo malo vode. Smeša je razblažena etil acetatom (500 mL), a zatim prebačena u levak za odvajanje i particionirana sa vodom (150 mL). Organski deo je uklonjen, osušen preko natrijum sulfata (150 g) a zatim filtriran kroz Buchner levak sa staklenom fritom. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom kako bi se dobilo bledožuto ulje sa malo suspendovanih čvrstih čestica (trifenilfosfin oksid). Smeša je razblažena heksanom (500 mL), a zatim filtrirana kroz stakleni Buchner levak sa slojem silika gela od 40 mm. Filterski kolač je ispran heksanom (2 x 500 mL). Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio (1-ciklopropil-2-metoksi-vinil)ciklopropan kao bistro svetlo žuto ulje (27 g, 0.1953 mol, 86% prinos). ESI-MS m/z izrač. 138.10446, nađeno 138.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.73 min (LC Metoda B).
Korak 2: 2,2-diciklopropilacetaldehid
[0361]
[0362] U rastvor (1-ciklopropil-2-metoksi-vinil)ciklopropana (128 g, 709.4 mmol) u tetrahidro- furanu (700 mL) je dodata vodena hlorovodonična kiselina (250 mL od 3 M, 750.0 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h, zatim je mešana na 55 °C 4 h i zatim ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu tokom 12 h. Smeša je razblažena sa 500 mL slanog rastvora i vodena faza je odvojena. Vodena faza je ekstrahovana sa 500 mL MTBE i organske faze su kombinovane. Organske faze su isprane sa 500 mL slanog rastvora, osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrovane u vakuumu. Dobijeno ulje je razređeno sa 250 mL MTBE i zaostala voda je uklonjena pomoću levka za odvajanje. Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana in vacuo dajući 2,2-diciklopropilacetaldehid (99.2 g, 96%) kao svetlo narandžasto ulje.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 9.74 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 1.06 (td, J = 8.9, 2.9 Hz, 1H), 0.94 - 0.81 (m, 2H), 0.64 - 0.49 (m, 4H), 0.32 - 0.20 (m, 4H).
Korak 3: [(E)-1-Ciklopropil-3-metoksi-alil]ciklopropan
[0363]
[0364] Tikvica sa okruglim dnom od 5000 mL je opremljena mehaničkom mešalicom, grejnom oblogom, J-Kem temperaturnom sondom, levkom za dodavanje, vodeno hlađenim refluks kondenzatorom i ulazom/izlazom azota. Posuda je napunjena u atmosferi azota sa (metoksimetil) trifenilfosfonijum hloridom (116.8 g, 340.7 mmol) i tetrahidrofuranom (423 mL) koji je dao belu suspenziju. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 19 °C. Posuda je zatim napunjena kalijum tercbutoksidom (38.22 g, 340.6 mmol) koji je dodavan kao čvrsta supstanca u porcijama tokom 30 minuta (porcija od 12.74 g je dodavana svakih 10 minuta) što je rezultovalo crvenkasto narandžastim rastvorom i egzotermom do 40 °C. Smeša je dalje mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Temperatura lonca je u ovom trenutku zabeležena na 36 °C. Levak za dodavanje je zatim napunjen 2,2-diciklopropilacetaldehidom (47 g 60%tež. kontaminiranog trifenilfosfin oksidom iz prethodnog koraka, 227.1 mmol) koji je naknadno dodavan u kapima tokom 25 minuta, što je rezultiralo postupnom egzotermom do 47° C. Dobijeni crvenkasto narandžasti rastvor je ostavljen da se postepeno ohladi na sobnu temperaturu i zatim je nastavljeno sa mešanjem na sobnoj temperaturi 15 h. Reakciona smeša (temperatura posude = 19 °C) je zatim ugašena hladnom vodom (1000 mL) što je rezultiralo egzotermom do 22 °C. Smeša je mešana još 10 min. Dobijena dvofazna smeša je prebačena u levak za odvajanje i ostavljena da stoji 5 min. Organski sloj je uklonjen, a zaostali vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (2 x 300 mL). Kombinovani organski slojevi su koncentrovani pod sniženim pritiskom kako bi se dobilo tamno ulje boje ćilibara koje je još uvek sadržalo malo vode. Smeša je razblažena etil acetatom (500 mL), a zatim prebačena u levak za odvajanje i particionirano vodom (150 mL). Organski sloj je uklonjen, ispran zasićenim rastvorom natrijum hlorida (200 mL), osušen preko natrijum sulfata (200 g) i zatim filtriran kroz Buchner levak od staklene frite. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom kako bi se dobilo bledo ćilibarno ulje sa nešto suspendovane čvrste materije (trifenilfosfin oksid). Smeša je razblažena heptanom (500 mL) i zatim ostavljena da stoji na sobnoj temperaturi 30 min. Suspenzija je filtrirana kroz Bihnerov levak od staklene frite, a filterski kolač je ispran heptanom (2 x 100 mL). Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom do zapremine od oko 200 mL. Rastvor bledo ćilibarne boje je ohlađen na 0 °C u kupatilu za hlađenje drobljeni led/voda tokom 30 minuta za koje vreme se istaložilo više čvrstih materija. Suspenzija je filtrirana kroz Bihnerov levak od staklene frite, a filterski kolač je ispran heptanom (2 3 50 mL). Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio [(E)-1-ciklopropil-3-metoksialil]ciklopropan (30 g, 87%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 6.31 (dd, J = 12.7, 1.1 Hz, 1H), 4.68 (dd, J = 12.7, 7.6 Hz, 1H), 3.51 (s, 3H), 0.77 (qt, J = 8.1, 5.0 Hz, 2H), 0.54 - 0.32 (m, 2H), 0.28 - 0.12 (m, 5H), 0.08 (ddd, J = 9.3, 5.3, 4.1 Hz, 2H).
Korak 4: 3,3-Diciklopropilpropanal
[0365]
[0366] U rastvor [(E)-1-ciklopropil-3-metoksi-alil]ciklopropana (141 g, 555.7 mmol) u tetrahidrofuranu (500 mL) dodat je vodeni rastvor hlorovodonične kiseline (100 mL 3 M, 300.0 mmol) i smeša je zagrejana na 50 °C 2 h. Smeša je ohlađena do sobne temperature i tetrahidrofuran je uklonjen u vakuumu. Ostatak je razređen dihlorometanom (700 mL) i vodena faza je odvojena (blaga emulzija). Organska faza je isprana sa 500 mL slane vode, osušena iznad magnezijum sulfata i filtrirana. Filtratu je dodat MgCl2(50 g, 525.1 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 12 h. Mulj je filtriran preko celita (začepio je celit i trebalo gs je ostrugati). Filtrat je bio blago zamućen i ispran je slanim rastvorom, osušen iznad magnezijum sulfata, filtriran i koncentrovan da bi se dobio 3,3-diciklopropilpropanal (76.8 g, 100%),<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9.83 (t, J = 2.7 Hz, 1H), 2.71 - 2.39 (m, 2H), 0.73 (ddt, J = 5.5, 4.2, 2.9 Hz, 3H), 0.56 - 0.47 (m, 2H), 0.42 (dddd, J = 9.2, 7.6, 4.0, 2.6 Hz, 2H), 0.28 -0.21 (m, 2H), 0.11 - 0.04 (m, 2H).
Korak 5: 3,3-diciklopropilpropan-1-ol
[0368] U suspenziju litijum-aluminijum hidrida (10.4 g, 266.9 mmol) u tetrahidrofuranu (500 mL) dodavan je u kapima rastvor 3,3-diciklopropilpropana (76 g, 549.9 mmol) u tetrahidrofuranu (150 mL) omogućavajući blagi refluks. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Reakcija je ohlađena u ledenom kupatilu i ugašena je laganim dodavanjem vode (10.4 mL, 577.3 mmol), zatim vodenog rastvora natrijum hidroksida (10.4 mL 4 M, 41.60 mmol), a zatim vode (31.2 mL, 1.732 mol). Suspenzija je filtrirana preko celita, isprana tetrahidrofuranom i koncentrovana in vacuo da se dobije 3,3-diciklopropilpropan-1-ol (112 g, 73%),<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 3.81 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.76 (q, J = 6.9 Hz, 2H), 0.63 (dtt, J = 8.8, 8.0, 5.1 Hz, 2H), 0.50 - 0.34 (m, 4H), 0.27 - 0.14 (m, 3H), 0.14 - 0.02 (m, 2H).
Korak 6: terc-butil 3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-karboksilat
[0369]
[0370] U terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilat (36.5 g, 198.2 mmol) u tetrahidrofuranu (L450) pod azotom je dodat 3,3-diciklopropilpropan-1-ol (28.0 g, 199.7 mmol) i trifenilfosfin (57.0 g, 217.3 mmol). Smeši je u kapima dodavan DIAD (43.0 mL, 218.4 mmol) omogućavajući joj da se postepeno zagreje do 45 °C. Nakon dodavanja, smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Reakciona smeša je razblažena heksanom (450 mL) i približno 50% rastvarača je uklonjeno u vakuumu dajući suspenziju. Suspenzija je filtrirana korišćenjem srednje frite i čvrsta supstanca je isprana heksanom (3 x 50 mL). Filtrat je koncentrovan u vakuumu dajući ulje boje ćilibara. Sirovo ulje je razređeno dihlorometanom i hromatografisano na koloni silika gela od 750 g eluiranjem sa gradijentom od 0% - 40% etil acetata u heksanima. Sakupljene su dve glavne frakcije, druga frakcija je čist proizvod. Prva frakcija je sadržala trifenilfosfin i ponovo je hromatografisana na koloni silika gela od 750 g, eluiranjem sa gradijentom od 0% - 25% etil acetata u heksanima. Kombinovanje proizvoda iz druge kolone sa proizvodom dobijenim iz prve kolone je dalo kao bistro ulje terc-butil 3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-karboksilat (39.0 g, 64%). ESI-MS m/z izrač.
306.19434, nađeno 307.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.26 min (LC Metoda B).
Korak-7: 3-(3, 3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol (trifluoroacetatna so)
[0371]
[0372] Rastvor terc-butil 3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-karboksilata (255 mg, 0.8322 mmol) i trifluorosirć etne kiseline (325.0 µL, 4.218 mmol) u dihlorometanu (1 mL) je mešan 5 h. Volatili su uklonjeni pod vakuumom, dajuć i 3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-lH-pirazol (trifluoroacetatna so) (266 mg, 100%) kao bezbojno ulje koje je direktno korišć eno u slede ć oj reakciji. ESI-MS m/z izrač.206.1419, nađeno 207.2 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.59 minuta (LC metoda A).
Korak 8: terc-butil 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi) pirazol-1-il] piridin-3-karboksilat
[0373]
[0374] Smeša terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilata (220.0 mg, 0.8867 mmol), 3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol (trifluoroacetatna so) (266.0 mg, 0.8305 mmol), kalijum karbonat (230 mg, 1.664 mmol) i 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (20 mg, 0.1783 mmol) u dimetil sulfoksidu (10 mL) su mešani na sobnoj temperaturi 15 h. Reakcija je razblažena vodom i ekstrahovana etil acetatom. Kombinovani organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni. Ostatak je pročišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 20% etil acetata u heksanima da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (245 mg, 71%) kao bezbojno ulje. ESI-MS m/z izrač.417.18192, nađeno 418.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.28 min (LC Metoda J).
Korak 9: 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi) pirazol-1-il] piridin-3-karboksilna kiselina
[0375]
[0376] Rastvor terc-butil 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi) pirazol-1-il] piridin-3-karboksilat (245.0 mg, 0.5862 mmol) u trifluorosirćetnoj kiselini (500.0 µL, 6.490 mmol) i dihlorometan (1,5 mL) su mešani na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uparen, a ostatak je dva puta preuzet u tetrahidrofuranu i koncentrovan pod vakuumom da se dobije 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (204 mg, 96%) kao bela čvrsta supstanca koja je direktno korišćena u sledećoj reakciji.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 8.47 - 8.32 (m, 2H), 7.73 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 6.03 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.45 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 1.98 (q, J = 7.0 Hz, 2H), 0.75 - 0.64 (m, 2H), 0.50 - 0.39 (m, 4H), 0.35 - 0.26 (m, 1H), 0.26 - 0.19 (m, 2H), 0.15 - 0.06 (m, 2H). ESI-MS m/z calc.361.11932, nađeno 362.3 (M+1)+; Retenciono vreme: 0.8 min (LC Method A).
Korak-10: terc-Butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0377]
[0378] U rastvor 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (505.1 mg, 1.382 mmol) u tetrahidrofuranu (5 mL) dodata je karbonil diimidazol (224.1 mg, 1.382 mmol) i smeša je mešana 120 minuta na 50 °C. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (380 mg, 0.9211 mmol) u tetrahidrofuranu (5 mL),a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (280.4 mg, 275.4 µL, 1.842 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 16 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana malom količinom 1:1 zasićenog vodenog amonijum hlorida/slanog rastvora. Organska jedinjenja su odvojena, osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i uparena. Dobijeni smeđi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitki gradijent od 100% dihlorometana do 20% metanola u dihlorometanu da bi se dobio terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-di-metil-pirolidin-1-karboksilat (356 mg, 51%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8.31 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.02 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.58 - 7.50 (m, 2H), 6.55 (dd, J = 7.7, 1.6 Hz, 1H), 5.95 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.92 (s, 1H), 4.42 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 4.02 (dd, J = 10.7, 7.3 Hz, 1H), 3.64 -3.54 (m, 1H), 3.17 (t, J = 11.7 Hz, 1H), 2.88 (t, J = 10.7 Hz, 1H), 2.19 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 1.97 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 1.82 (dt, J = 15.1, 7.6 Hz, 2H), 1.55 (tdd, J = 16.3, 10.8, 5.0 Hz, 1H), 1.40 (s, 11H), 1.30 (s, 3H), 1.25 (s, 3H), 0.76 - 0.60 (m, 2H), 0.55 -0.40 (m, 4H), 0.33 (ddd, J = 15.9, 9.0, 6.9 Hz, 1H), 0.20 (dtd, J = 9.5, 4.9, 3.6 Hz, 2H), 0.14 - 0.04 (m, 2H).ESI-MS m/z izrač.
755.3232, nađeno 756.5 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.6 min (LC Metoda L).
Korak 11: 8-[3-(3,3-Diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18, 23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 43)
[0380] Rastvor terc- butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata (350 mg, 0.4627 mmol) u dihlorometanu (2.917 mL) i trifluorosirćetnoj kiselini (527.6 mg, 354.1 µL, 4.627 mmol) je mešan 4 sata na sobnoj temperaturi. Rastvarači su uklonjeni in vacuo, a ostatak je rastvoren u etil acetatu. Opran je sa 2 mL zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata i organski slojevi su sakupljeni, a rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Materijal je rastvoren u dimetil sulfoksidu (17.50 mL) i dodati su 3 Å molekularna sita, cezijum fluorid (210.8 mg, 1.388 mmol) i kalijum karbonat (191.8 mg, 1.388 mmol) i reakciona smeša je zagrevana preko noći na 130 °C. Reakciona smeša je filtrirana kroz Whatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišćen reverzno faznom HPLC-MS korišćenjem dvostrukog gradijenta od 20% - 80% mobilne faze B tokom 15.0 minuta (mobilna faza A = voda (0.05 % hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril) da bi se dobio 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9, 19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 43) (158 mg, 55 %) kao sivobeličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9.99 (s, 1H), 8.19 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.05 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.57 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.50 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 7.31 - 7.19 (m, 1H), 6.60 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.91 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.43 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.91 (s, 1H), 3.35 (t, J = 8.7 Hz, 1H), 3.18 (d, J = 13.9 Hz, 1H), 3.03 (t, J = 9.9 Hz, 1H), 2.60 (d, J = 18.4 Hz, 1H), 2.07 (dd, J = 12.2, 7.8 Hz, 1H), 1.97 (q, J = 6.8 Hz, 2H), 1.62 (d, J = 6.2 Hz, 11H), 0.73 - 0.61 (m, 2H), 0.51 - 0.38 (m, 4H), 0.38 - 0.29 (m, 1H), 0.24 - 0.16 (m, 2H), 0.15 - 0.06 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 619.29407, nađeno 620.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.32 min (LC Metoda J)
Primer 12: Priprema 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,23-tetraazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22) ,5,7,9,19 (23),20-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 48) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,23-tetraaza-tetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 49)
Korak 1: terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)oksi]propil]pirolidin-1-karboksilat
[0382]
[0383] U terc-butil 4-(3-hidroksipropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (257 mg, 0.9986 mmol) uz mešanje u atmosferi azota u N,N-dimetilformamidu (2.056 mL) je u porcijama dodat natrijum hidrid (79.87 mg, 1.997 mmol) (Oprez: razvijanje gasa) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 min. Zatim je dodat 6-fluoropiridin-2-sulfonamid (175.9 mg, 0.9986 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h i 20 minuta, a zatim je dodat natrijum hidrid (23.96 mg, 0.9984 mmol) (Oprez: razvijanje gasa) i rezultujuća smeša je mešana 20 min, zatim izlivena u 1N limunsku kiselinu i ekstrahovana etil acetatom (2X). Kombinovane organske frakcije, osušene (natrijum sulfat), filtrirane i koncentrovane do bistrog ulja koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitki gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata dajući terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)oksi]propil] piroldin-1-karboksilat (275.2 mg, 67%). ESI-MS m/z izrač. 413.19846, nađeno 414.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.69 min (LC Metoda A).
Korak 2: terc-Butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]oksi]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0384]
[0385] U vial od 20 mL, 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (96.86 mg, 0.2578 mmol) i karbonil diimidazol (45.81 mg, 0.2825 mmol) su pomešani u tetrahidrofuranu (1.53 mL) i mešani na 12° min. C sa labavim poklopcem. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)oksi]propil]pirolidin-1-karboksilat (193.8 mg, 0.2578 mmol) u tetrahidrofuranu (2.04 mL), praćen sa 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-enom (80.81 mg, 79.38 µL, 0.5308 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 16 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa 1M rastvorom limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni, a zatim prečišćeni hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitki gradijent od 100% dihlorometana do 20% metanol/dihlorometana. Proizvod je koeluiran sa nekim nečistoćama. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i ponovo prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitki gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata dajući terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi] pirazol-1-il] piridin-3-karbonil] sulfamoil]-2-piridil] oksi]propil]-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (64.7 mg, 33%). ESI-MS m/z izrač. 770.2476, nađeno 771.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.94 min (LC Metoda A).
Korak 3: 2-hloro-N-[[6-[3-(5, 5-dimetilpirolidin-3-il)propoksi]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0386]
terc-Butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]- 2-piridil] oksi]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (132.5 mg, 0.1718 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (578.2 µL) i smeši je dodata trifluorosirćetna kiselina (898.7 mg, 607,2 µL, 7.882 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 60 min. Smeša je koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom, preuzeta u zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetata i slojevi su razdvojeni. Organski sloj je ispran sa malom količinom slanog rastvora, zatim osušen (natrijum sulfat), filtriran i koncentovan do bele čvrste supstance, 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propoksi]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluoro-metil)ciklo-propil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (110 mg, 95%). ESI-MS m/z izrač. 670.1952, nađeno 671.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.64 min (LC Metoda A).
Korak 4: 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,23-tetraazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23), 20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 40)
[0387]
[0388] U rastvor 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propoksil-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida (126.6 mg, 0.1886 mmol) u dimetil sulfoksidu (5.063 mL) je dodat kalijum karbonat (130.3 mg, 0.9430 mmol), cezijum fluorid (34.38 mg, 0.2263 mmol) i mala količina 3 A molekularnih sita. Dobijena smeša je zatvorena i zagrevana na 150 °C tokom 6.5 sati, zatim ohlađena na sobnu temperaturu i mešana preko noći. Smeša je zatim zagrevana na 165 °C tokom 90 minuta, a zatim ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena etil acetatom i isprana sa 1:1 zasićenim vodenim rastvorom NH4Cl/1M limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organska faza je osušena (natrijum sulfat), filtrirana i koncentrovana do narandžastog ulja koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitki gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata (proizvod eluira nakon postizanja 100% etil acetata) da se dobije 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,23-tetraazatetraciklo[17.3.1.111, 14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 40) (58.2 mg, 48%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 634.2185, nađeno 635.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.29 min (LC Metoda B).
Korak 5: 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,23-tetraazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20 -heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 48) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluoro-metil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,23–tetraazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 49)
[0389]
[0390] Racemski 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3, 9,11,23-tetraazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23), 20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 40) (45.3 mg, 0.07052 mmol) podvrgnut hiralnom razdvajanju SFC hromatografijom upotrebom ChiralPak AS-H (kolone 250 x 10 mm, veličina čestica 5 µm) sa mobilnom fazom 25% acetonitril/metanol (90:10)/75% ugljen dioksid pri 10mL/min tokom 8.0 min (zapremina ubrizgavanja = 70 µL 24 mg/mL rastvora u acetonitril/metanolu (90:10) dao je kao prvi enantiomer koji se eluira 12,12-dimetil-8-(3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,23-tetraazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22) ,5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 48) (22.20 mg, 97%) kao bela čvrsta supstanca; ESI-MS m/z izrač.634.2185, nađeno 635.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.30 min (LC Metoda B) i kao drugi enantiomer koji se eluira 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il) -18-oksa-2λ<6>-thia-3,9,11,23-tetraazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1 (22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 49) (22.33 mg, 100%) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.81 (s, 1H), 8.21 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.01 (t, J = 7.9 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.63 (d, J = 7.4 Hz, 1H), 7.13 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.93 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 5.17 (t, J = 12.1 Hz, 1H), 4.32 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 4.11 (d, J = 6.5 Hz, 1H), 3.93 (d, J = 11.1 Hz, 1H), 3.19 - 3.15 (m, 4H), 2.18 (s, 1H), 2.08 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 1.86 (dd, J = 11.9, 5.3 Hz, 1H), 1.68 (t, J = 13.6 Hz, 2H), 1.60 (s, 3H), 1.51 (s, 3H), 1.00 - 0.93 (m, 2H), 0.92 - 0.85 (m, 2H), ESI-MS m/z izrač. 634.2185, nađeno 635.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.29 min (LC Metoda B).
Primer 13: Priprema 12, 12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23), 20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 53)
[0391]
Korak 1: terc-butil 2,2-dimetil- 4-(3-oksopropil)pirolidin-1-karboksilat
[0392]
[0393] Dess-Martin Perjodinan (9.95 g, 23.46 mmol) je dodat u mešani rastvor terc-butil 4-(3-hidroksipropil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (5,20 g, 20,20 mmol) u anhidrovanom CH2Cl2(40 mL) na 0 °C (kupatilo led-voda) pod azotom. Nakon 15 min, reakcija je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i mešanje je nastavljeno još 2 h. Reakcija je razblažena etrom (200 mL) i polako je dodavan zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (100 mL) (da bi se ublažilo razvijanje gasa ugljendioksida). Zatim je dodat 10% natrijum tiosulfat (50 mL) i mešano je na sobnoj temperaturi 30 min. Slojevi su razdvojeni, a vodeni sloj je ekstrahovan etrom (2 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (100 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi materijal. Sirovi proizvod je prečišćen hromatografijom srednjeg pritiska na silika gelu (silika gel kolona 330 g, 5-35% etil acetata u heksanima tokom 35 minuta) da bi se dobio željeni terc-butil 2,2-dimetil-4-(3-oksopropil)pirolidin-1-karboksilat (3.96 g, 77%) kao bistri viskozni materijal, terc-butil 2,2-dimetil-4-(3-oksopropil)pirolidin-1-karboksilat (3.96 g, 77%).<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 4.48 (t, J = 5.4 Hz, 1H), 3.66 (dd, J = 11.2, 6.9 Hz, 1H), 2.87 (q, J = 10.7 Hz, 1H), 2.31 (t, J = 7.6 Hz, 1H), 2.22 - 2.07 (m, 1H), 1.95 (ddt, J = 17.2, 12.1, 6.1 Hz, 1H), 1.66 (q, J = 7.9 Hz, 1H), 1.62 - 1.55 (m, 1H), 1.54 - 1.48 (m, 2H), 1.47 (s, 4H), 1.43 (s, 6H), 1.41 (s, 2H), 1.31 (s, 3H). ESI-MS m/z izrač.255.18344, nađeno 256.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.57 min (LC Metoda B).
Korak 2: terc-butil 4-but-3-inil-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0394]
[0395] U rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-(3-oksopropil)pirolidin-1-karboksilat (1.33 g, 5.208 mmol) u metanolu (31 mL) na 0 °C je dodat kalijum karbonat (1.62 g, 11.72 mmol) nakon čega je u kapima dodavan (1-dimetoksifosforil-2-okso-propil)-iminoamonijum (12.5 mL 10% w/v, 6.473 mmol). Po završetku dodavanja, smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana 4 sata. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom, a ostatak je rastvoren u etil acetatu i ispran zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (1X). Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan dva puta sa etil acetatom, i organski slojevi su kombinovani, osušeni (natrijum sulfat), filtrirani i koncentrovani do bistrog ulja koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 50% etil acetata u heksanima dajući kao bistro ulje terc-butil 4-but-3-inil-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1.15 g, 88%). ESI-MS m/z izrač. 251.18852, nađeno 252.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.96 min.
<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 3.82 - 3.56 (m, 1H), 2.99 - 2.80 (m, 1H), 2.35 - 2.23 (m, 1H), 2.21 (dd, J = 9.5, 4.6 Hz, 2H), 1.96 (s, 1H), 1.95 - 1.86 (m, 1H), 1.63 - 1.55 (m, 2H), 1.53 - 1.36 (m, 13H), 1.30 (t, J = 10.8 Hz, 3H).
Korak 3: terc-butil 2, 2-dimetil-4-[4-(3-sulfamoilfenil)but-3-inil]pirolidin-1-karboksilat
[0396]
[0397] Azot je produvavan kroz mešanu smešu 3-jodobenzensulfonamida (308.0 mg, 1.088 mmol), terc-butil4-but-3-inil-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata (156.3 mg, 0.6218 mmol), Pd(PPh3)2Cl2(26.19 mg, 0.03731 mmol), jodobakra (11.84 mg, 0.06218 mmol) i N,N-dimetilformamida (1.563 mL) u vialu tokom 5 minuta, a zatim je dodat N-izopropilpropan-2-amin (69.21 mg, 95.86 µL, 0.6840 mmol) i vial je zatvoren i mešan na 50 °C tokom 2.5 h, a zatim ohlađen na sobnu temperaturu i mešan preko noći. Ohlađen je na sobnu temperature, izliven u vodu (200 mL) i ekstrahovan dihlorometanom (2 x 100 mL), kombinovani organski slojevi, isprani vodom (2 x 100 mL), osušeni (magnezijum sulfat), filtrirani i koncentrovani do narandžastog ulja koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata dajući terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(3-sulfamoilfenil)but-3- inil]pirolidin-1-karboksilat (307.9 mg, 92%) kao žuto ulje. ESI-MS m/z izrač.406.19263, nađeno 407.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.71 min (LC Metoda A).
Korak 4: terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(3-sulfamoilfenil)butil]pirolidin-1-karboksilat
[0398]
[0399] U terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(3-sulfamoilfenil)but-3-inil]pirolidin-1-karboksilat (307.9 mg, 0.5744 mmol) je dodat oksid platine (65.20 mg, 0.2871 mmol), a zatim EtOH (2.188 mL) i smeša je produvavana azotom 1 min, a zatim i vodonikom 5 min. Smeša je zatim zatvorena u balonu sa vodonikom i mešana 3 sata. Produvana je azotom, dodat je celit, mešan 1 min, a zatim filtrirana preko jastučića od celita. Filtrat je koncentrovan u terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(3-sulfamoilfenil)butil]pirolidin-1-karboksilat (320.4 mg, 82%), narandžasto ulje koje je direktno uzeto za sljedeći korak. ESI-MS m/z izrač. 410.22394, nađeno 411.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.73 min (LC Metoda A).
Korak 5: terc-Butil 4-[4-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]fenil]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0400]
[0401] U vialu od 20 mL 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il] piridin-3-karboksilna kiselina (95.96 mg, 0.2554 mmol) i karbonil diimidazol (41.41 mg, 0.2554 mmol) su kombinovani u tetrahidrofuranu (1.00 mL) i mešani 120 minuta na 50°C labavo poklopljeni. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(3-sulfamoilfenil)butil]pirolidin-1-karboksilat (69.9 mg, 0.1703 mmol) u tetrahidrofuranu (1.338 mL), a zatim 1,8-diazabiciklo [5.4.0]undek-7-en (50.93 µL, 0.3406 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 16 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa malom količinom 1:1 zasićenog vodenog amonijum hlorida/slanog rastvora. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni, a zatim prečišćeni hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitki gradijent od 100% dihlorometana do 20% metanol/dihlorometan dajući terc-butil 4-[4-[3-[[2-hloro]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]fenil]butil]-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (110.5 mg, 84%) kao belu čvrstu supstancu. ESI-MS m/z izrač.
767.27313, nađeno 768.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.95 min (LC Metoda A).
Korak 6: 2-Hloro-N-[3-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butil]fenil]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluoro-metil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (so trifluorosirćetna kiselina)
[0402]
terc-butil 4-[4-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]fenil]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (110.5 mg, 0.1438 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (482.2 µL) i u smešu je dodata trifluorosirćetna kiselina (508.3 µL, 6.598 mmol) i mešana na sobnoj temperaturi 40 min. Smeša koncentrovana pod sniženim pritiskom do suvog, je preuzeta u zas. vod. natrijum bikarbonatu i etil acetatu i slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je neutralisan zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida i ekstrahovan etil acetatom. Organska frakcija je osušena (natrijum sulfat), filtrirana i koncentrovana do narandžastog ulja koje je filtrirano i prečišćeno pomoću metode reverzno fazne HPLC-MS korišćenjem Luna C18(2) kolone (75 x 30 mm, veličina čestica 5 µm) koju prodaje Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX) i dvostrukog gradijenta od 1-99% mobilne faze B tokom 15.0 min (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, volumen injekcije = 950 µL i temperatura kolone = 25 °C) da se dobije 2-hloro-N-[3-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butil]fenil] sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi] pirazol-1-il]piridin-3karboksamid (so trifluorosirćetna kiselina) (104.5 mg, 93%). ESI-MS m/z izrač. 667.2207, nađeno 668.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.67 min (LC Metoda A).
Korak 7: 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4- trion (Jedinjenje 53)
[0403]
[0404] U rastvor 2-hloro-N-[3-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butil]fenil]sulfonil -6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid so trifluoroctene kiseline (112.5 mg, 0.1438 mmol) u dimetil sulfoksidu (4.499 mL) je dodat kalijum karbonat (119.2 mg, 0.8625 mmol), cezijum fluorid (26.22 mg, 0.1438 mmol) i mala količina 3 A molekularnih sita. Dobijena smeša je zatvorena i zagrevana 6 sati na 165 °C. Smeša je zatim ohlađena do sobne temperature, razblažena etil acetatom i isprana zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida i slanim rastvorom. Organska faza je osušena (natrijum sulfat), filtrirana i koncentrovana do narandžastog ulja koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitki gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata da se dobije 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksietoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 53) (46.5 mg, 51%) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.44 (s, 1H), 8.21 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.84 (s, 1H), 7.81 (s, 1H), 7.78 - 7.74 (m, 1H), 7.59 (s, 2H), 6.93 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.75 (s, 3H), 2.65 (s, 1H), 2.08 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.82 (td, J = 13.9, 12.7, 6.0 Hz, 2H), 1.59 (s, 3H), 1.53 (s, 1H), 1.51 (s, 3H), 1.47 (s, 2H), 1.14 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 1.01 - 0.93 (m, 3H), 0.90 - 0.86 (m, 2H), 0.72 (s, 1H). ESI-MS m/z izrač.
631.244, nađeno 632.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.44 min (LC Metoda B).
Primer 14: Priprema 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(21),5,7,9,19,22-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 54) i 12,12-dimetil- 8-(3-{2-[1-(trifluoro- metil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10] tetrakoza-1(21),5,7,9,19,22-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 55)
[0405]
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[ 4-(4-sulfamoilfenil)but-3-inil]pirolidin-1-karboksilat
[0406]
[0407] Azot je produvavan kroz mešanu smešu 4-bromobenzensulfonamida (256.9 mg, 1.088 mmol), terc-butil 4-but-3-inil-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata (156.3 mg, 0.6218 mmol), Pd(PPh3)2Cl2(26.19 mg, 0.03731 mmol), jodobakra (11.84 mg, 0.06218 mmol) i N,N-dimetilformamida (1.563 mL) u vialu 5 minuta, a zatim je dodat N-izopropilpropan-2-amin (69.21 mg, 95.86 µL, 0.6840 mmol) i vial je zatvoren i mešan na 50 °C tokom 75 minuta, a zatim ohlađen na sobnu temperaturu i mešan preko noći. Ohlađen je na sobnu temperaturu i izliven u vodu (200 mL) i ekstrahovan dihlorometanom (2 x 100 mL), organski slojevi su kombinovani, isprani vodom (2 x 100 mL), osušeni (magnezijum sulfat), filtrirani i koncentrovani do narandžastog ulja koje je pročišćeno hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata dajući tercbutil 2,2-dimetil-4-[4-(4-sulfamoilfenil)but-3-inil]pirolidin-1-karboksilat (192.5 mg, 76%) kao belu čvrstu supstancu. ESI-MS m/z izrač. 406.19263, nađeno 407.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.71 min (LC Metoda A).
Korak 2: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[4-(4-sulfamoilfenil)butil]pirolidin-1-karboksilat
[0408]
[0409] U terc-butil 2,2-dimetil-4-[4- (4-sulfamoilfenil)but-3-inil]pirolidin-1-karboksilat (192.5 mg, 0.4735 mmol) je dodat paladijum oksid (53.75 mg, 0.2367 mmol), a zatim EtOH (1.804 mL) i azot je propuštan kroz smešu 1 min nakon čega je vodonik produvavan kroz smešu 5 min. Smeša je zatim zatvorena u balonu vodonika i mešana 3 sata. Pročišćena je azotom, dodat je celit, mešana je 1 min, a zatim filtrirana preko celit jastučića. Filtrat je koncentrovan do terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(4-sulfamoilfenil)butil]pirolidin-1-karboksilata (179.5 mg, 92%), sivobele čvrste supstance. ESI-MS m/z izrač. 410.22394, nađeno 411.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.75 min (LC Metoda A).
Korak 3: terc-butil 4-[4-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]fenil ]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0410]
[0411] U vialu od 20 mL, 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il] piridin-3-karboksilna kiselina (164.3 mg, 0.4372 mmol) i karbonil diimidazol (77.70 mg, 0.4792 mmol) su pomešani u tetrahidrofuranu (2.576 mL) i mešani 120 minuta na 50°C sa poklopcem. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(4-sulfamoilfenil)butil]pirolidin-1-karboksilat (179.5 mg, 0.4372 mmol) u tetrahidrofuranu (3.436 mL), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (137.0 mg, 134.6 µL, 0.9002 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 16 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida, a zatim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, uparen i zatim prečišćen upotrebom metode reverzno fazne HPLC-MS korišćenjem Luna C18(2) kolone (75 x 30 mm, veličina čestica 5 µm) koju prodaje Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX) i dvostrukog gradijenta od 30-99% mobilne faze B tokom 15.0 min (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 µL i temperatura kolone = 25 °C). Frakcije željenog proizvoda su spojene i acetonitril je uklonjen pod sniženim pritiskom. Materijal je zatim razblažen etil acetatom i ispran zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom (1X) i slanim rastvorom (1X), osušen (natrijum sulfat), filtriran i koncentrovan da se dobije terc-butil 4-[4-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]fenil]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (132.8 mg, 40%), kao bistro ulje. ESI-MS m/z izrač.767.27313, nađeno 768.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.96 min (LC Metoda A).
Korak 4: 2-Hloro-N-[4-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butil]fenil]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluoro-metil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0412]
terc-Butil 4-[4-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol -1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]fenil]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (132.8 mg, 0.1729 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (579.5 µL) i u smešu je dodata trifluorosirćetna kiselina (904.5 mg, 611.1 µL, 7.933 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 60 min. Smeša je koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom, preuzeta u zasićeni vodeni rastvor natrijum bikarbonata i etil acetata i slojevi su razdvojeni. Osušen je organski sloj (natrijum sulfat), filtriran i koncentrovan do bele čvrste supstance, 2-hloro-N-[4-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butil]fenil] sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida (99.8 mg, 86%). ESI-MS m/z izrač.667.2207, nađeno 668.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.66 min (LC Metoda A).
Korak 5: 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(21),5,7,9,19,22-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 52)
[0413]
[0414] U rastvor 2-hloro-N-[4-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butil]fenil]sulfonil-6- [3-[2-[1-(tri-fluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il] piridin-3-karboksamid (99.8 mg, 0.1494 mmol) u dimetil sulfoksid (3.991 mL) je dodat kalijum karbonat (103.2 mg, 0.7470 mmol), cezijum fluorid (27.24 mg, 0.1793 mmol) i mala količina 3 Å molekularnih sita. Dobijena smeša je zatvorena i zagrevana na 155 °C preko noći. Ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena etil acetatom i isprana zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida i slanim rastvorom. Organska faza je osušena (natrijum sulfat), filtrirana i koncentrovana do narandžastog ulja koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitki gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata da se dobije 12,12-dimetil-8-(3-){2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo [17.2.2.111,14.05,10] tetrakoza-1(21),5,7,9,19,22-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 51) (25 mg, 26%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.21 (s, 1H), 8.17 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.76 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 16.6 Hz, 2H), 6.89 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.92 - 2.80 (m, 1H), 2.74 (dt, J = 13.9, 6.9 Hz, 1H), 2.19 (s, 1H), 2.07 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.94 - 1.85 (m, 2H), 1.80 (s, 1H), 1.70 (dd, J = 11.7, 5.3 Hz, 1H), 1.60 - 1.52 (m, 1H), 1.49 (s, 6H), 1.44 - 1.34 (m, 2H), 1.02 (dt, J = 12.8, 6.7 Hz, 1H), 0.98 - 0.93 (m, 2H), 0.89 (d, J = 10.8 Hz, 2H), 0.77 (q, J = 11.6 Hz, 1H), 0.36 (s, 1H). ESI-MS m/z izrač. 631.244, nađeno 632.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.46 min (LC Metoda B).
Korak 6: 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2)l6-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(21),5,7,9,19,22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (jedinjenje 54) i 12,12-dimetil- 8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(21),5,7,9,19, 22 -heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 55)
[0415]
[0416] Racemski 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo [17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(21),5,7,9,19,22-heksaen-2,2,4-trion (21.9 mg, 0.03411 mmol) podvrgnut hiralnom razdvajanju pomoć u SFC hromatografije koriš ć enjem ChiralPak AS-H (250 x 10 mm kolone, veličina čestica 5 µm) sa mobilnom fazom 25% acetonitril/metanol (90:10)/75% ugljen dioksid pri 10 mL/min tokom 6.0 min (zapremina ubrizgavanja = 70 µL 24 mg/mL rastvora u 85% acetonitril/metanolu (90:10)/15% dimetil sulfoksid) dao je kao prvi enantiomer koji je eluirao, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10] tetra-koza-1(21),5,7,9,19,22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 54) (10.01 mg, 92%) kao bela čvrsta supstanca; ESI-MS m/z izrač. 631.244, nađeno 632.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.44 min (LC Metoda B) i kao drugi enantiomer koji je eluirao, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)- 2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo [17.2.2.111, 14.05,10]tetrakoza-1(21),5,7,9,19,22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 55) (8.59 mg, 80%) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.20 (s, 1H), 8.17 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.07 (dd, J = 8.0, 2.1 Hz, 1H), 7.86 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 8.1, 2.0 Hz, 1H), 7.49 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.87 (dt, J = 13.4, 6.4 Hz, 1H), 2.74 (dt, J = 14.0, 7.0 Hz, 1H), 2.19 (t, J = 10.4 Hz, 1H), 2.07 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.89 (dt, J = 13.4, 6.0 Hz, 2H), 1.80 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 1.70 (dd, J = 11.8, 5.4 Hz, 1H), 1.55 (dt, J = 14.0, 7.0 Hz, 1H), 1.49 (s, 6H), 1.39 (t, J = 12.3 Hz, 2H), 1.02 (dt, J = 12.8, 6.5 Hz, 1H), 0.96 (td, J = 4.9, 4.4, 3.1 Hz, 2H), 0.91 - 0.85 (m, 2H), 0.77 (q, J = 10.7 Hz, 1H), 0.36 (s, 1H), ESI-MS m/z izrač. 631.244, nađeno 632.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.44 min (LC Metoda B).
Primer 15: Priprema 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23), 20-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje
56) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(tri-fluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo
[17.3.1.111, 14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer2) (Jedinjenje 57)
[0417]
Korak 1: 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 56) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo-propil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 57) [0418]
[0419] Podložni racemski 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (41.7 mg, 0.06575 mmol) do hiralne separacije pomoć u SFC hromatografije koriš ć enjem ChiralPak AS-H (250 x 10 mm kolone, veličine čestica 5 µm) sa mobilnom fazom 25% acetonitril/metanol (90:10)/75% ugljen-dioksid pri 10 mL/min tokom 8.0 min (zapremina ubrizgavanja = 70 µL 24mg/mL rastvora u 85% acetonitril/metanolu (90:10)/15% dimetil sulfoksid) dajuć i kao prvi enantiomer za eluiranje, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7, 9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 56) (20.2 mg, 97%); ESI-MS m/z izrač. 631.244, nađeno 632.2 (M+l)+; Retenciono vreme: 2.44 min (LC metoda B) i kao drugi enantiomer za eluiranje, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 57) (15.9 mg,
75%);<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.44 (s, 1H), 8.21 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.87 - 7.75 (m, 3H), 7.63 - 7.57 (m, 2H), 6.93 (dd, J = 8.2, 1.2 Hz, 1H), 6.12 (dd, J = 2.8, 0.9 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.75 (d, J = 6.0 Hz, 2H), 2.68 - 2.62 (m, 1H), 2.11 - 2.05 (m, 3H), 1.83 (dt, J = 12.6, 6.3 Hz, 2H), 1.58 (s, 3H), 1.51 (s, 6H), 1.15 (t, J = 8.9 Hz, 1H), 0.97 (d, J = 3.4 Hz, 1H), 0.97 - 0.95 (m, 2H), 0.91 (s, 1H), 0.90 (s, 2H), 0.72 (s, 1H). ESI-MS m/z izrač. 631.244, nađeno 632. 2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.43 min (LC Metoda B).
Primer 16: Priprema 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,20,25-pentaazatetraciklo[19.3.1.111,14.05,10]heksakoza-1(24),5, 7,9,21(25),22-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 63) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,20,25-pentaazatetraciklo [19.3.1.111,14.05,10]heksakoza-1(24),5,7,9,21(25),22-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 64)
[0420]
Korak 1: Etil 1-(bromometil)-2-okso-cikloheksankarboksilat
[0421]
[0422] Rastvor etil 2-cikloheksankarboksilata (84.0 g, 493 mmol) u tetrahidrofuranu (350 mL) dodavan je u kapima u suspenziju 60% natrijum hidrida (25.7 g, 641 mmol) i heksametilfosforamida (112 mL, 641 mmol) u tetrahidrofuranu (850 mL) tokom perioda od četiri sata i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi jedan sat. Dibromometan (173 mL, 2470 mmol) je zatim dodavan u kapima tokom perioda od jednog sata i smeša je refluksovana na 70 °C tokom 16 sati. Reakciona smeša je razblažena dietil etrom (6 L) i organski sloj je ispran vodom (5 x 850 mL), vodene faze su odbačene, a organska faza je osušena preko natrijum sulfata i koncentrovana. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta 0-15% heksani/etil acetat da bi se dobio etil 1-(bromometil)-2-okso-cikloheksan-karboksilat (68 g, 52%) kao bistro ulje. Utvrđeno je da je čistoća cca. 80% pomoću<1>H NMR.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 4.35-4.15 (m, 2H), 3.88-3.50 (dd, 2H), 2.75-2.64 (dd, 1H), 2.49-2.41 (m, 2H), 2.30-2.1, 2H), 2.10-1.75 (m, 2H), 1.74-1.53 (m, 2H), 1.32-1.22 (m, 3H). Sirovi materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljnjeg pročišćavanja.
Korak 2: Dietil 2-metilenheptandioat
[0423]
[0424] Kaša etil 1-(bromometil)-2-okso-cikloheksankarboksilata (68 g, 258 mmol) i kalijum karbonata (71.4 g, 517 mmol) u etanolu (600 mL) je mešana 16 h na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je filtrirana, čvrste materije su odbačene i filtrat je koncentrovan i prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijent 0-15% heksani/etil acetat da bi se dobio dietil 2-metilenheptandioat (45.2 g, 77%) kao bistro ulje.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 6.17 (s, 1H), 5.54 (s, 1H), 4.23-4.06 (m, 4H), 2.35-2.15 (t, 4H), 1.73-1.40 (m, 4H), 1.29-1.07 (m, 6H). ESI-MS m/z izrač. 228.29, nađeno 229.0 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 4.97 min (LC Metoda Q).
Korak 3: Dietil 2-(2-metil-2-nitro-propil)heptandioat
[0425]
[0426] Smeša dietil 2-metilenheptandioata (48.6 g, 213 mmol), 2-nitropropana (58 mL, 639 mmol) i 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-ena (3.2 mL, 21 mmol) je zagrevana na 85 °C tokom pet sati. Smeša je koncentrovana i prečišćena hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta 0-15% heksani/etil acetat da bi se dobio dietil 2-(2-metil-2-nitropropil) heptandioat (58 g, 85%) kao bistro ulje. ESI-MS m/z izrač. 317.38, nađeno 318.1 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 5.19 min (LC Metoda Q).
Korak 4: Etil 5-(5,5-dimetil-2-okso-pirolidin-3-il)pentanoat
[0427]
[0428] U rastvor dietil 2-(2-metil-2-nitro-propil)heptandioata (19 g, 59.8 mmol) u etanolu (400 mL) je dodata Raney Nikl suspenzija (9 g) i rezultujuća smeša je zagrevana na 80 °C tokom 22 h u Parr reaktoru pod pritiskom od 2 bara vodonika. U reaktor je dodat celit (50 g) i smeša je filtrirana. Čvrste materije su odbačene, a filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio etil 5-(5,5-dimetil-2-oksopirolidin-3-il)pentanoat (13.2 g, 91% prinos) kao bledo ulje. ESI-MS m/z izrač. 241.33, nađeno 242.1 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 3.79 min (LC Metoda Q). Sirovi proizvod je koriš’en u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak 5: 5-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)pentan-1-ol
[0429]
[0430] U rastvor etil 5-(5,5-dimetil-2-okso-pirolidin-3-il)pentanoata (13.2 g, 54.7 mmol) u tetrahidrofuranu (200 mL) je dodat litijum aluminijum hidrid (6.2 g, 164.1 mmol) u porcijama, a zatim je rezultujuća suspenzija refluksovana u atmosferi azota 17 h. Smeša je pažljivo ugašena zasićenim vodenim rastvorom natrijum sulfata (50 mL) i filtrirana. Čvrste materije su odbačene, a vodena faza je odvojena i odbačena. Organska faza je koncentrovana da se dobije 5-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)-pentan-1-ol (8.8 g) kao bledožuto ulje. ESI-MS m/z izrač. 185.31, nađeno 186.3 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 1.98 min (LC Metoda Q). Sirovi proizvod je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak 6: terc-butil 4-(5-hidroksipentil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0431]
[0432] U rastvor 5-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)-pentan-1-ola (27.0 g, 145.7 mmol) u dihlorometanu (200 mL) je dodat u rastvor natrijum bikarbonata (24.5 g, 291.4 mmol) u vodi (150 mL), nakon čega je usledilo dodavanje di-terc-butil dikarbonata (31.8 g, 145.7 mmol). Dobijena heterogena smeša je mešana na sobnoj temperaturi dva sata. Faze su razdvojene, a vodena faza je odbačena. Organska faza je koncentrovana pod vakuumom i pročišćena hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta 0-45% heksani/etil acetat da bi se dobio terc-butil 4-(5-hidroksipentil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (32.0 g, 77%) kao bistro ulje.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 4.29 (q, 1H), 3.53 (s, 1H), 3.37 (q, 2H), 2.75 (q, 1H), 2.05 (s, 2H), 1.87 (m, 1H), 1.43-1.17 (m, 23H). ESI-MS m/z izrač. 285.43, nađeno 286.4 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 5.20 min (LC Metoda Q).
Korak 7: terc-butil 2,2-dimetil-4-(5-metilsulfoniloksipentil)pirolidin-1-karboksilat
[0433]
[0434] Rastvor terc-butil 4-(5-hidroksipentil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (10.5 g, 36.8 mmol) i trietilamin (10.3 mL, 73.6 mmol) u dihlorometanu (100 mL) su ohlađeni u kupatilu led- voda. Zatim je u kapima dodavan metansulfonil hlorid (3.2 mL, 40.5 mmol) tokom perioda od 15 minuta i dobijena smeša je mešana jedan sat u ledenom kupatilu. Reakcija je ugašena zasićenim rastvorom natrijum bikarbonata (50 mL). Vodena faza je odbačena, a organska faza je koncentrovana da se dobije terc-butil 2,2-dimetil-4-(5-metilsulfoniloksipentil) pirolidin-1-karboksilat (13.3 g, 99%) kao žuto ulje. ESI-MS m/z izrač. 363.16, nađeno 364.3 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 5.77 min Sirovi proizvod je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja (LC Metoda Q).
Korak 8: terc-Butil 4-(5-aminopentil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0435]
[0436] Rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-(5-metilsulfoniloksipentila) pirolidin-1-karboksilat (13,3 g, 36.6 mmol) u tetrahidrofuranu (275 mL) i 28% vodeni rastvor amonijum hidroksida (275 mL) je mešan na 50 °C tokom 24 h. Tetrahidrofuran i amonijak su uklonjeni pod vakuumom, a preostala vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (3 x 100 mL), i kombinovani organski slojevi su koncentrovani do ulja i prečišćeni hromatografijom na silika gelu upotrebom gradijenta 0-15% dihlormetan/metanol (0.25% amonijum hidroksid) da se dobije terc-butil 4-(5-aminopentil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (5.4 g, 52%) kao bledo ulje.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 3.53 (q, 1H), 2.75 (q, 1H), 2.05 (s, 2H), 1.86 (m, 1H), 1.43-1.10 (m, 23H). ESI-MS m/z izrač.284.45, nađeno 285.4 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 4.07 min (LC Metoda Q).
Korak 9: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[5-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]pentil]pirolidin-1-karboksilat
[0437]
[0438] Tikvica od 100 mL sa okruglim dnom je napunjena sa terc-butil 4-(5-aminopentil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatom (1.028 g, 3.614 mmol), 6-fluoropiridin-2-sulfonamidom (636 mg, 3.610 mmol) i bezvodnim dimetil sulfoksidom (10 mL). Dodat je kalijum karbonat (519 mg, 3.755 mmol) (sveže mleveni u avanu) i smeša je mešana 20 sati na 100°C. Nakon hlađenja, reakcija je razblažena etil acetatom (50 mL) i izlivena u zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida (50 mL). Dve faze su bile razdvojene. Vodena faza je ekstrahovana etil acetatom (20 mL), a kombinovani ekstrakti su isprani slanim rastvorom (40 mL). Nakon sušenja preko natrijum sulfata i isparavanja, ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta etil acetata (0 do 100% tokom 30 minuta) u heksanima. Čiste frakcije su sakupljene i rastvarači su upareni da bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[5-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]pentil]pirolidin-1-karboksilat (1.184 g, 74%) kao bela čvrsta pena. ESI-MS m/z izrač.440.24573, nađeno 441.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.86 min (LC Metoda B).
Korak 10: terc-butil 4-[5-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]pentil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0439]
[0440] U vialu od 20 mL, 2-hloro-6-[3-[2-[1]-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il] piridin-3-karboksilna kiselina (19.8 mg, 0.8511 mmol) i karbonil diimidazol (138.0 mg, 0.8511 mmol) su pomešani u tetrahidrofuranu (3.588 min 0 mmol) na 50 °C sa labavim poklopcem. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[5-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]pentil]pirolidin-1-karboksilat (250 mg, 0.5674 mmol) u tetrahidrofuranu (4.785 mL), a zatim i 1,8-diazabiciklo [5.4.0]undek-7-en (169.7 µL, 1.135 mmol) i reakcija je zagrevana 16 sati na 50 °C. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni, a zatim prečišćeni hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata dajući terc-butil 4-[5-[[6-[[2-hloro]-6-[3-[2-[1-(trifluoro-metil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]pentil]2,2-di-metil-pirolidin-1-karboksilat (416.8 mg, 92%). ESI-MS m/z izrač. 797.2949, nađeno 798.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.92 min (LC Metoda A).
Korak 11: 2-hloro-N-[[6-[5-(5, 5-dimetilpirolidin-3-il)pentilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0441]
terc-Butil 4-[5-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]-2 -piridil]amino]pentil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (416.8 mg, 0.5221 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (1.189 mL) i u smešu je dodata trifluorosirćetna kiselina (1.845 mL, 95 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 60 min. Smeša je koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom, rastvorena u zasićenom vodenom rastvoru natrijum bikarbonata i etil acetatu i razdvojeni su slojevi. Organski sloj je osušen (natrijum sulfat), filtriran i koncentrovan do bele čvrste supstance, 2-hloro-N-[[6-[5-(5,5-dimetilpirolidin-3-il) pentilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (361 mg , 91%). ESI-MS m/z izrač.697.2425, nađeno 698.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.64 min (LC Metoda A).
Korak 12: 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,20,25-pentaazatetraciklo[19.3.1.111,14.05,10]heksakoza-1(24),5,7,9,21(25),22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 63) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,20,25-pentaazatetraciklo [19.3.1.111, 14.05,10]heksakoza-1(24),5,7,9,21(25),22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 64)
[0442]
[0443] U rastvor 2-hloro-N-[[6-[5-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)pentilaminol-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida (361 mg, 0.4736 mmol) u dimetil sulfoksidu (13.22 mL) je dodat kalijum karbonat (392.6 mg, 2.841 mmol), cezijum fluorid (86.33 mg, 0.5683 mmol) i mala količina 3 Å molekularnih sita.
Dobijena smeša je zatvorena i zagrevana 16 sati na 165 °C. Smeša je zatim ohlađena do sobne temperature, razblažena etil acetatom i isprana zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida i slanim rastvorom. Organska faza je osušena (natrijum sulfat), filtrirana i koncentrovana do 422 mg tamnosmeđe amorfne čvrste supstance koja je podvrgnuta hiralnoj separaciji SFC hromatografijom korišćenjem LUX 3 (250 x 21 mm kolone, veličine čestica 5 µm) sa mobilnom fazom 60% metanol (20mM NH3aditiva))/40% ugljen dioksid pri 30mL/min dajući kao prvi enantiomer koji se eluira, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,20,25-pentaazatetraciklo[19.3.1.111,14.05,10]heksakoza-1(24),5,7,9, 21(25),22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 63) (74.4 mg, 47%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.69 (bs, 1H), 8.19 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.48 (s, 1H), 7.08 (d, J = 6.9 Hz, 2H), 6.85 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 6.58 (s, 1H), 6.07 (d, J = 2.6 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.84 (d, J = 14.2 Hz, 1H), 3.06 (s, 1H), 2.89 (s, 1H), 2.79 (s, 1H), 2.08 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.81 (dd, J = 11.6, 5.4 Hz, 1H), 1.60 (d, J = 9.1 Hz, 1H), 1.55 (d, J = 6.2 Hz, 6H), 1.47 (d, J = 12.5 Hz, 3H), 1.27 (d, J = 26.3 Hz, 3H), 1.01 (s, 1H), 0.98 - 0.93 (m, 2H), 0.93 - 0.84 (m, 3H), ESI-MS m/z izrač. 661.2658, nađeno 662.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.29 min (LC Metoda B) i kao drugi enantiomer koji se eluira, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il )-2λ<6>-tia-3,9,11,20, 25-pentaazatetraciklo [19.3.1.111,14.05,10]heksakoza-1(24), 5, 7, 9, 21(25), 22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 64) (79,2 mg, 50%) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.50 (s, 1H), 8.21 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.56 (s, 1H), 7.14 (s, 1H), 6.91 (d, J = 7.8 Hz, 2H), 6.70 (s, 1H), 6.11 (s, 1H), 4.31 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.88 (s, 1H), 3.06 (s, 1H), 2.74 (s, 1H), 2.62 (d, J = 32.1 Hz, 1H), 2.08 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.83 (dd, J = 11.8, 5.3 Hz, 1H), 1.67 - 1.57 (m, 1H), 1.55 (d, J = 10.5 Hz, 6H), 1.48 (t, J = 12.1 Hz, 3H), 1.30 (s, 2H), 1.23 (s, 1H), 1.01 (d, J = 9.5 Hz, 1H), 0.98 - 0.95 (m, 2H), 0.95 -0.87 (m, 3H), ESI-MS m/z izrač.661.2658, nađeno 662.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.29 min (LC Metoda B).
Primer 17: Priprema (14S)-8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 66)
[0444]
Korak 1: terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat
[0445]
[0446] Racemski terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (7 g, 16.97 mmol) je podvrgnut hiralnom odvajanju SFC hromatografijom korišćenjem ChiralPak IG (250 x 21.2 mm kolona, veličine čestica 5 µm) sa mobilnom fazom 40% metanol/60% ugljen dioksid pri 70 µL/min tokom 11.0 min (zapremina ubrizgavanja = 500 µL 32 mg/mL rastvora u metanolu) dajući kao prvi pik za eluiranje terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (3.4481 g, 99%). ESI-MS m/z izrač. 412.21442, nađeno 413.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.63 min (LC Metoda A).
Korak 2: terc-Butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il] piridin-3-karbonil]sulfamoil ]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0447]
[0448] Deo A: U 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (8.9 g, 24.60 mmol) u tetrahidrofuranu (80 mL) je polako dodat karbonil diimidazol (4.4 g, 27.14 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 sat.
[0449] Deo B: U terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (10.1 g, 24.48 mmol) u tetrahidrofuranu (40 mL) je dodat 2,3,4,6,7,8,9,10-oktahidropirimido[1,2-a]azepin (11.0 mL, 73.56 mmol), a zatim aktivirani estar iz Dela A i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Reakcija je ugašena sa 50 mL vode i većina tetrahidrofurana je uklonjena pod vakuumom. Preostala smeša je razblažena vodom (250 mL) koja sadrži hlorovodoničnu kiselinu (26 mL 6 M, 156.0 mmol) i zakiseljena do pH = 2-3. Bistri tamnožuti rastvor je ekstrahovan etil acetatom (400 mL). Organska faza je isprana sa 300 mL slanog rastvora, osušena iznad magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana pod vakuumom dajući gusto žuto ulje. Sirova reakciona smeša je hromatografisana na koloni reverzne faze C18415g eluiranjem sa 50-100% voda/acetonitril da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[6-[[2-hloro-6-[3] -(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (11.2 g, 60%). ESI-MS m/z izrač. 755.3232, nađeno 756.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.53 min (LC Metoda B).
Korak 3: 2-Hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetil-pirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (so trifluoro-sirćetne kiseline)
[0450]
[0451] U terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6- [3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (16.7 g, 22.08 mmol) u dihlorometanu (80 mL) i toluenu (40 mL) je dodata trifluorosirćetna kiselina (10 mL, 129.8 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 22 h. Rastvarač je uklonjen rotacionim uparavanjem na 35 °C dajući gusto žuto ulje. Ulje je razređeno dihlorometanom (80 mL) i toluenom (120 mL), a rastvarač je uklonjen rotacionim uparavanjem na 55 °C. Proces je ponovljen sa dihlorometanom i toluenom dajući 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-[[6-[3-[(3S)-5,5- dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (trifluoracetatna so) (22.6 g, 133%, proizvod kontaminiran rezidualnim toluenom i trifluorosirćetnom kiselinom) kao gusto ulje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.73 (s, 1H), 8.60 (s, 2H), 8.39 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.11 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.71 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.63 (dd, J = 8.5, 7.2 Hz, 1H), 7.26 - 7.22 (m, 1H), 6.75 (dd, J = 8.5, 0.7 Hz, 1H), 6.20 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.40 (t, J = 6.8 Hz, 2H), 3.36 (dq, J = 12.0, 5.3 Hz, 1H), 3.24 (hept, J = 6.7 Hz, 2H), 2.80 (td, J = 11.8, 10.8, 6.1 Hz, 1H), 2.41 - 2.32 (m, 1H), 2.02 - 1.85 (m, 3H), 1.61 - 1.28 (m, 8H), 1.24 (d, J = 6.2 Hz, 4H), 0.69 (qt, J = 8.3, 5.0 Hz, 2H), 0.49 - 0.34 (m, 3H), 0.34 - 0.25 (m, 1H), 0.25 - 0.14 (m, 2H), 0.11 - 0.00 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 655.27075, nađeno 656.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.71 min (LC Metoda B).
Korak 4: (14S)-8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 66)
[0452]
[0453] U rastvor 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (17.5 g, 22.72 mmol) u NMP (300 mL) je dodat kalijum karbonat (15.3 g, 110.7 mmol) zatim cezijum fluorid (3.8 g, 25.02 mmol). Smeša je produvavana azotom 5 min. Smeša je zagrevana 20 sati na 150 °C. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, dodata je u vodu (1200 mL) (korišćena je boca od 5 L ohlađena u ledenom kupatilu) i zakišeljena pažljivim dodavanjem hlorovodonične kiseline (20 mL 6 M, 120.0 mmol) a zatim čvrste limunske kiseline (45 g, 234.2 mmol). Smeša je mešana u ledenom kupatilu 1 sat. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom korišćenjem srednje frite (spora filtracija), a vlažni filterski kolač je rastvoren u etil acetatu (1000 mL) i ispran sa 500 mL slanog rastvora. Vodena faza je odvojena, a organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana preko celita i koncentrovana pod vakuumom dajući svetlo žutu penu. Sirovi proizvod je razblažen acetonitrilom i podeljen u 3 jednake zapremine (15 mL) i hromatografisan na koloni reverzne faze C18415g, eluiranjem sa 50-100% acetonitril/voda da se dobije (14S)-8-[3-(3,3)- diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia- 3, 9, 11, 18, 23- pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22), 5, 7, 9, 19(23), 20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 66) (8.91 g, 63%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.48 (s, 1H), 8.20 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 7.81 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.57 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.05 (d, J = 7.0 Hz, 1H), 6.97 (s, 2H), 6.71 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 3.2 Hz, 1H), 4.37 (t, J = 6.7 Hz, 2H), 3.91 (s, 1H), 3.15 (s, 1H), 2.95 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 2.71 (s, 1H), 2.12 (s, 1H), 1.95 - 1.71 (m, 4H), 1.60 (d, J = 3.3 Hz, 6H), 1.51 (s, 3H), 1.39 - 1.25 (m, 1H), 0.67 (dt, J = 8.5, 4.1 Hz, 2H), 0.47 - 0.33 (m, 4H), 0.30 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 0.20 (dd, J = 9.7, 4.4 Hz, 2H), 0.04 (d, J = 8.3 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač.619.29407, nađeno 620.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 10.3 min (LC Metoda F).
Primer 18: Priprema 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,20-pentaazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7, 9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 72) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,20-pentaazatetra-ciklo [17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 73)
[0454]
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[3-[(5-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat
[0455]
[0456] U terc-butil 4-(3 -aminopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (400 mg, 1.560 mmol) i 6-hloropiridin-3-sulfonamid (300.5 mg, 1.560 mmol) u dimetil sulfoksidu (3.368 mL) je dodat kalijum karbonat (219 mg, 1.591 mmol) i smeša je mešana na 100°C tokom 20 sati, a zatim ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu. Razblažena je etil acetatom i izlivena u zasićeni vodeni rastvor amonijum hlorida. Slojevi su razdvojeni a zatim je ispran organski sloj sa zasićenim vodenim rastvorom soli, osušen (natrijum sulfat), filtriran i koncentrovan do žute pene koja je prečišćena hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata dajući terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(5-sulfamoil-2-piridil)amino] propil]pirolidin-1-karboksilat (347 mg, 54%) kao belu čvrstu supstancu. ESI-MS m/z izrač. 412.21442, nađeno 413.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.52 min (LC Metoda A).
Korak 2: terc-butil 4-[3-[[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0457]
[0458] U vialu od 20 mL su pomešani 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il] piridin-3-karboksilna kiselina (474.2 mg, 1.262 mmol) i karbonil diimidazol (204.6 mg, 1.262 mmol) u tetrahidrofuranu (4.979 mL) i mešani 120 minuta na 50 °C sa labavim poklopcem. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(5-sulfamoil-2-piridil)amino]propil] pirolidin-1-karboksilat (347 mg, 0.8411 mmol) u tetrahidrofuranu (6.642 mL), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (251.6 zapremina, 1.682 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 16 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni, a zatim prečišćeni hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitki gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata dajući čist proizvod kao i mešane frakcije. Mešane frakcije su koncentrovane i ponovno prečišćene korišćenjem metode reverzno fazne HPLC-MS korišćenjem Luna C18(2) kolone (75 x 30 mm, veličina čestica 5 µm) koju prodaje Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX) i dvostrukog gradijenta od 30-99% mobilne faze B tokom 15.0 min (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 µL i temperatura kolone = 25 °C). Čiste frakcije iz preparativnog reverzno faznog prečišćavanja su spojene i acetonitril je uklonjen rotacionim uparavanjem. Ostatak je rastvoren u etil acetatu i ispran sa malom količinom zasićenog vodenog rastvora natrijum bikarbonata, a zatim osušen (natrijum sulfat), filtriran i koncentrovan do bele čvrste supstance koja je kombinovana sa čistim proizvodom iz kolone silika gela da bi se dobio terc-butil 4 -[3-[[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]-2-piridil ]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (539.2 mg, 83%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.769.2636, nađeno 770.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.84 min (LC Metoda A).
Korak 3: 2-hloro-N-[[6-[3-(5, 5-dimetilpirolidin-3-il)propilamino]-3-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0459]
terc-Butil 4-[3-[[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (539.2 mg, 0.700 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (2.353 mL) i u smešu je dodata trifluorosirćetna kiselina (2.474 mL, 32.11 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 60 min.
Koncentrovana smeša do suvog pod sniženim pritiskom je rastvorena u zasićenom vodenom rastvoru natrijum bikarbonata i etil acetata i slojevi su razdvojeni (rastvorljivost proizvoda u etil acetatu pod ovim uslovima je loša, dodavanje malo metanola pomaže, potrebno za isparavanje organskog sloja bez upotrebe čvrstog sredstva za sušenje). Organski sloj je koncentrovan rotacionim uparavanjem a zatim sušenjem pod vakuumom dajući 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il) propilamino]-3-piridil] sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (423.3 mg, 90%) kao sivobelu čvrstu supstancu. ESI-MS m/z izrač.669.2112, nađeno 670.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.56 min (LC Metoda A).
Korak 4: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol- -il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,20-pentaazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen- 2,2,4-trion (Jedinjenje 62)
[0460]
[0461] U rastvor 2-hloro-N-[[6-[3-(5, 5-dimetilpirolidin-3-il)propilamino]-3-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida (423.3 mg, 0.6317 mmol) u dimetil sulfoksidu (16.93 mL) je dodat kalijum karbonat (523.8 mg, 3.790 mmol), cezijum fluorid (115.1 mg, 0.7577 mmol) i mala količina 3 Å molekularnih sita. Dobijena smeša je zatvorena i zagrevana 16 sati na 165 °C. Temperatura je povećana na 175 °C i mešana 3 sata, zatim je ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena etil acetatom i isprana zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida i slanim rastvorom. Organska faza je osušena (natrijum sulfat), filtrirana i koncentrovana do 500 mg tamnosmeđe amorfne čvrste supstance koja je filtrirana i prečišćena pomoću metode reverzno fazne HPLC-MS korišćenjem Luna C18(2) kolone (75 x 30 mm, veličina čestica 5 µm) koju prodaje Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX) i dvostrukog gradijenta od 30-99% mobilne faze B tokom 15.0 min (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min , zapremina ubrizgavanja = 950 µL i temperatura kolone = 25 °C) dajući 12,12-dimetil-8-(3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,20-pentaazatetraciklo[17.2. 2.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 62) (24.2 mg, 6%) kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.13 (s, 1H), 8.38 (s, 1H), 8.17 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.91 - 7.64 (m, 2H), 7.42 (s, 1H), 6.63 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 6.09 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.30 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 3.64 (s, 1H), 2.88 (s, 1H), 2.07 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 2.03 - 1.92 (m, 2H), 1.80 -1.71 (m, 1H), 1.54 (s, 3H), 1.48 (s, 3H), 1.38 (q, J = 13.8, 11.4 Hz, 4H), 0.98 - 0.92 (m, 2H), 0.92 - 0.85 (m, 3H). ESI-MS m/z izrač. 633.2345, nađeno 634.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.03 min (LC Metoda B).
Korak 5: 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,20-pentaazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 72) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,20-pentaazatetraciklo[17.2.2.111,14.05, 10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 73)
[0462]
[0463] Racemski 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,20-pentaazatetraciklo [17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19 (23),20-heksaen-2,2,4-trion (17 mg, 0.02565 mmol) je podvrgnut hiralnom razdvajanju pomoć u SFC hromatografije koriš ć enjem ChiralPak AS-H (250 x 10 mm kolone, veličine čestica 5 µm) sa mobilnom fazom 18% metanol (20mM NH3aditiv)/82% ugljen dioksid pri 10mL/min tokom 8.0 min (zapremina ubrizgavanja = 70 µL 24mg/mL rastvora u 90% metanol/10% dimetil sulfoksid dajuć i kao prvi enantiomer koji se eluira, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi} -1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia- 3,9,11,18,20-pentaazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1 (22),5,7,9,19(23),20-heksen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 72) (6.34 mg, 78 %) kao bela čvrsta supstanca; ESI-MS m/z izrač. 633.2345, nađeno 634.4 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.08 min (LC metoda B) i kao drugi enantiomer koji se eluira, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,20-pentaazatetraciklo [17.2.2.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 73) (5.54 mg, 68%) kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.13 (s, 1H), 8.63 (s, 1H), 8.43 (s, 1H), 8.18 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.89 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.54 (s, 1H), 6.90 (dd, J = 8.3, 3.5 Hz, 1H), 6.67 (dd, J = 9.0, 3.1 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.31 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.66 (s, 1H), 2.90 (s, 1H), 2.08 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 1.92 (s, 3H), 1.77 (d, J = 12.5 Hz, 1H), 1.64 (d, J = 13.8 Hz, 1H), 1.55 (s, 3H), 1.48 (s, 3H), 1.46 - 1.34 (m, 3H), 1.34 (s, 1H), 0.97 - 0.94 (m, 2H), 0.88 (s, 2H).ESI-MS m/z izrač. 633.2345, nađeno 634.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.08 min (LC Metoda B).
Primer 19: Priprema (14S)-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5 (10),6, 8,19,21-heksen-2,2,4-trion (Jedinjenje 77)
[0464]
Od: (3S)-3-(3-hidroksipropil)-5,5-dimetil-pirolidin-2-ona
[0465]
[0466] Racemski 3-(3-hidroksipropil)-5,5-dimetil-pirolidin-2-on (100 g, 566,5 mmol) je odvojen hiralnom SFC hromatografijom korišć enjem ChiralPak AD-H (2 x 25 cm kolone) sa mobilnom fazom 30% metanol/ugljen-dioksid pri 60 mL/min (zapremina ubrizgavanja = 1 mL od 20 mg/mL rastvora u metanolu dajuć i kao prvi enantiomer koji se eluira, (3S)-3-(3-hidroksipropil)-5,5-dimetil-pirolidin-2-on (47 g, 48%) kao prljavo belu čvrstu supstancu 1H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid d6) δ 7.63 (s, 1H), 4.38 (t, J = 5.1 Hz, 1H), 3.39 (t, J = 5.6 Hz, 2H), 2.37 (ddt, J = 13.9, 9.6, 4.4 Hz, 1H), 2.02 (dd, J = 12.3, 8.6 Hz, 1H), 1.78 - 1.64 (m, 1H), 1.42 (td, J = 12.8, 12.3, 8.4 Hz, 3H), 1.16 (d, J = 17.9 Hz, 7H). ESI-MS m/z izrač. 171.12593, nađeno 172.0 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.61 min (LC Metoda B).
Korak 2: 3-[(3S)-5,5-Dimetilpirolidin-3-il]propan-1-ol
[0467]
[0468] Tikvica sa okruglim dnom sa 3 grla je opremljena mehaničkom mešalicom, grejnom oblogom, levkom za dodavanje, JKem temperaturnom sondom/kontrolerom i ulazom/izlazom azota. Posuda je napunjena u atmosferi azota sa granulama litijum aluminijum hidrida (46.53 g, 1.226 mol). Posuda je zatim napunjena tetrahidrofuranom (500 mL, 20 mL/g). Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 20 °C. Smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 0.5 h da bi se omogućilo da se peleti rastvore. Temperatura lonca rezultujuće sive suspenzije je zabeležena na 24 °C. Levak za dodavanje je napunjen rastvorom (3S)-3-(3-hidroksipropil)-5,5-dimetil-pirolidin-2-ona (60 g, 350.4 mmol) u tetrahidrofuranu (600 mL) i bistar bledo žuti rastvor je dodavan u kapima tokom 90 min. Bilo je potrebno lagano zagrevanje da bi se ušlo u rastvor. Nakon završenog dodavanja, temperatura lonca rezultujuće sivkaste suspenzije je zabeležena na 24 °C. Smeša je zatim zagrejana do temperature lonca od 65 °C i ovi uslovi su održavani 72 h. Analiza reakcione smeše u ovom trenutku je pokazala da je još uvek preostalo zaostalog polaznog materijala i da nema promena u formiranju proizvoda. Reakcija je nakon toga zaustavljena u tom trenutku. Obloga za grejanje je uklonjena i posuda je opremljena kupatilom za hlađenje. Suspenzija je ohlađena na 0 °C u kupatilu za hlađenje sa drobljenim ledom/vodom, a zatim je ugašena vrlo sporim dodavanjem vode u kapima (46.53 mL), nakon čega sledi 15 tež% rastvora natrijum hidroksida (46.53 mL) i na kraju voda (139.59 mL). Temperatura lonca rezultujuće bele suspenzije je zabeležena na 5 °C. Kupatilo za hlađenje je uklonjeno i posuda je ponovo opremljena grejnom oblogom. Suspenzija je zagrejana na 60 °C i stanje je održavano 30 min. Topla suspenzija je vakuumski filtrirana kroz Bihnerov levak od staklene frite sa slojem celita od 25 mm. Filterski kolač je zatim ispran sa 60 °C tetrahidrofuranom (2 x 350 mL) a zatim je tečnost izvlačena 30 min. Bistri filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo (55 g, 0.349 mol, prinos 99%) bistro svetložuto viskozno ulje kao željeni proizvod, 3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propan-1-ol (55 g, 100%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 3.36 (t, J = 6.3 Hz, 3H), 2.95 (dd, J = 10.6, 7.6 Hz, 1H), 2.40 (dd, J = 10.6, 7.7 Hz, 1H), 2.12 - 1.97 (m, 1H), 1.69 (dd, J = 12.1, 8.2 Hz, 1H), 1.47 - 1.25 (m, 5H), 1.08 (s, 3H), 1.02 (s, 3H).
Korak 3: terc-butil (4S)-4-(3-hidroksipropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0469]
[0470] Tikvica od 1 L sa okruglim dnom i 3 grla je opremljena mehaničkom mešalicom, kupatilom za hlađenje, levkom za dodavanje, JKem temperaturnom sondom i ulazom/izlazom azota. Posuda je napunjena u atmosferi azota sa 3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propan-1-olom (25 g, 159.0 mmol) i dihlorometanom (250 mL) što je dalo bistar rastvor svetlo žute boje. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 19 °C. Kupatilo za hlađenje je napunjeno mrvljenim ledom/vodom i temperatura posude je spuštena na 0 °C. Levak za dodavanje je napunjen trietilaminom (22.16 mL, 159.0 mmol) koji je zatim dodavan čist u kapima tokom 5 minuta. Nije primećena egzotermna pojava. Levak za dodavanje je zatim napunjen sa di-tercbutil dikarbonatom (31.32 g, 143.5 mmol) rastvorenim u dihlorometanu (150 mL). Bistar bledožuti rastvor je zatim dodavan u kapima tokom 30 minuta što je rezultovalo blagim razvijanjem gasa. Nije primećena egzotermna pojava. Kupatilo za hlađenje je uklonjeno i dobijeni bistar svetlo žuti rastvor je ostavljen da se zagreje na sobnu temperaturu i dalje je mešan na sobnoj temperaturi 3 h. Reakciona smeša je prebačena u levak za odvajanje i particionirana vodom (75 mL). Organski sloj je uklonjen i ispran zasićenim rastvorom natrijum hlorida (75 mL), osušen preko natrijum sulfata (150 g) i zatim filtriran kroz Bihnerov levak od staklene frite. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo (45 g) bistro svetlo žuto ulje kao željeni sirovi proizvod. Materijal je prečišćen fleš hromatografijom na koloni silika gela (tečno punjenje sa dihlorometanom) eluiranjem sa gradijentom od 100% dihlorometana do 10% metil alkohola u dihlorometanu tokom 60 minuta sakupljanjem frakcija od 50 mL. Željene frakcije proizvoda su kombinovane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobio terc-butil(4S)-4-(3-hidroksipropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (39 g, 95%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 4.35 (t, J = 5.2 Hz, 1H), 3.54 (dt, J = 12.2, 6.3 Hz, 1H), 3.38 (t, J = 5.8 Hz, 2H), 2.76 (q, J = 10.2 Hz, 1H), 1.47 (s, 3H), 1.44 - 1.28 (m, 18H), 1.24 (s, 3H).ESI-MS m/z izrač. 257.1991, nađeno 258.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.55 min (LC Metoda B).
Korak 4: terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-(3-metilsulfoniloksipropil)pirolidin-1-karboksilat
[0471]
[0472] Tikvica od 500 mL sa okruglim dnom i sa 3 grla je opremljena mehaničkom mešalicom, kupatilom za hlađenje, levkom za dodavanje, J-Kem temperaturnom sondom i ulazom/izlazom azota. Posuda je napunjena u atmosferi azota sa tercbutil (4S)-4-(3-hidroksipropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatom (25 g, 97.14 mmol) i dihlorometanom (250 mL) što je dalo bistar bezbojni rastvor. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 19 °C. Kupatilo za hlađenje je napunjeno mrvljenim ledom/vodom i temperatura posude je spuštena na 0 °C. U levak za dodavanje napunjen je trietilamin (17.60 mL, 126.3 mmol) koji je dodavan čist ukapavanjem tokom 5 minuta. Nije primećena egzotermna pojava. Levak za dodavanje je zatim napunjen metansulfonil hloridom (8.277 mL, 106.9 mmol) koji je dodavan u kapima tokom 15 minuta što je rezultiralo svetlo žutom suspenzijom i egzotermnom temperaturom do 4 °C. Smeša je nastavljena da se meša na <5 °C tokom 1 h kada je analiza pomoću LC/MS pokazala potpunu potrošnju početnog materijala. Reakciona smeša je dalje razblažena sa dihlorometanom (200 mL), a zatim izlivena u zasićeni rastvor amonijum hlorida (250 mL). Dvofazna smeša je zatim prebačena u levak za odvajanje. Organski sloj je uklonjen, ispran zasićenim rastvorom amonijum hlorida (150 mL), osušen preko natrijum sulfata (150 g) a zatim filtriran kroz Buchner-ov levak od staklene frite. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-(3-metilsulfoniloksipropil)pirolidin-1-karboksilat (29 g, 89%) kao bistro ulje boje ćilibara.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 4,19 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,16 (s, 3H), 2,79 (q, J = 10,2 Hz, 1H), 2,11 (s, 1H), 1,90 (td, J = 13,5, 6,0 Hz, 1H), 1,66 (ddd, J = 15,8, 7,6, 4,0 Hz, 2H), 1,51 - 1,22 (m, 20H). ESI-MS mlz izrač. 335.17664, nađeno 336.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.74 min (LC Metoda B).
Korak 5: terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-(3-sulfamoilfenoksi)propil]pirolidin-1-karboksilat
[0473]
[0474] U bocu od 100 mL dodat je 3-hidroksibenzensulfonamid (750 mg, 4.331 mmol) i N,N-dimetilformamid (15 mL). U smešu je dodat kalijum karbonat (1.8 g, 13.02 mmol) i terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-(3-metilsulfoniloksipropil)pirolidin-1-karboksilat (1.5 g, 4.471 mmol) na sobnoj temperaturi. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 48 h, a zatim zagrevana na 50 °C 5 h. Smeša je zatim izlivena u 1N limunskoj kiselini i ekstrahovana etil acetatom (2X). Kombinovane organske frakcije, osušene (natrijum sulfat), filtrirane i koncentrovane do žutog ulja koje je prečišćeno hromatografijom na koloni silika gela (kolona od 80 grama) korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 65% etil acetata u heksanima da bi se dobio terc-butil(4S)-2,2-dimetil-4-[3-(3-sulfamoilfenoksi)propil]pirolidin-1-karboksilat (868 mg, 49%) kao svetlo žuta pena.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7.47 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.40 - 7.36 (m, 1H), 7.34 (d, J = 3.7 Hz, 3H), 7.15 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 4.02 (t, J = 6.1 Hz, 2H), 3.58 (dd, J = 17.4, 7.1 Hz, 1H), 2.81 (q, J = 10.3 Hz, 1H), 2.15 (s, 1H), 1.99 - 1.85 (m, 1H), 1.74 (dt, J = 13.3, 6.4 Hz, 2H), 1.46 (dd, J = 14.6,9.4 Hz, 3H), 1.38 (t, J = 10.4 Hz, 12H), 1.25 (s, 3H) ESI-MS m/z izrač. 412.2032, nađeno 413.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.86 min (LC Metoda E).
Korak 6: terc-butil (4S)-4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi] pirazol-1-il] piridin- 3-karbonil] sulfamoil] fenoksi] propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0475]
[0476] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (342 mg, 0.9102 mmol) i karbonil diimidazol (148 mg, 0.9127 mmol) su kombinovani u tetrahidrofuranu (5.5 mL) i mešani 1 h na 50 °C. Zatim je dodat terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-(3-sulfamoilfenoksi)propil]pirolidin-1-karboksilat (250 mg, 0.6060 mmol), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (230 µL, 1.538 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 18 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa 1 M rastvorom limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni, a zatim prečišćeni hromatografijom na silika gelu (40 gramska kolona) korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 75% etil acetata u heksanima da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi] pirazol-1-il] piridin-3-karbonil] sulfamoil] fenoksi]propil]-2 ,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (368 mg, 79%) kao sivobela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.769.2524, nađeno 770.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.12 min (LC Metoda G).
Korak 7: (14S)-12, 12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 77)
[0477]
[0478] Deo A: terc-Butil (4S)-4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil ]fenoksi]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (368 mg, 0.4778 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (7.6 mL) i u smešu je dodata hlorovodonična kiselina (4 M u dioksanu) (4.0 mL 4 M, 16.00 mmol) i mešano je na sobnoj temperaturi 30 min. Smeša je koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom, ponovo rastvorena u etil acetatu, zatim je dodat 2 M vodeni rastvor natrijum karbonata (5 mL) da se dobije pH -10. Organski sloj je ekstrahovan etil acetatom (2 X 10 mL), ispran slanim rastvorom, zatim osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen do suvog pod sniženim pritiskom.
[0479] Deo B: Kombinovani materijal iz Dela A i kalijum karbonat (345 mg, 2.496 mmol), cezijum fluorid (115 mg, 0.7571 mmol), 3 Å molekularna sita i dimetil sulfoksid (7.6 mL) u vialu, su produvani azotom, zatvoreni, zagrejani na 150 °C i mešani 20 h. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu. Smeša je filtrirana, zatim prečišćena reverzno faznom preparativnom HPLC korišćenjem C18kolone i metode 30-99 A1-B1 (acetonitril-voda 5 mM hlorovodonična kiselina) da bi se dobilo (14S)-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10), 6, 8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 77) (62.1 mg, 20%) kao sivobela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.40 (s, 1H), 8.21 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.85 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.57 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 7.50 (s, 1H), 7.46 - 7.32 (m, 1H), 6.94 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 6.12 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.34 (dt, J = 14.1, 5.6 Hz, 3H), 4.21 - 4.04 (m, 1H), 2.90 - 2.78 (m, 1H), 2.71 (dd, J = 19.5, 9.2 Hz, 1H), 2.26 - 2.12 (m, 1H), 2.08 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.85 (dd, J = 11.8, 5.5 Hz, 1H), 1.75 - 1.64 (m, 2H), 1.55 (s, 6H), 1.50 (d, J = 12.4 Hz, 1H), 1.47 - 1.36 (m, 1H), 1.28 -1.19 (m, 1H), 0.98 - 0.93 (m, 2H), 0.88 (t, J = 5.2 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač. 633.22327, nađeno 634.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.3 min (LC Metoda E).
Primer 20: Priprema (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 79)
[0480]
Korak 1: 3-(3,3-dimetilbutil)pirolidin-2-on
[0481]
[0482] U rastvor 2-pirolidona (32.0 g, 0.376 mol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (900 mL) je dodat n-butillitijum (2.3 M u heksanu, 343 mL, 0.790 mol) na -78 °C. Reakciona smeša je mešana na istoj temperaturi 1 h. Rastvor 1-hloro-3,3-dimetilbutana (45.3 g, 0.376 mol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (100 mL) je ukapavanjem dodat u reakcionu smešu na -78 °C. Reakcija je mešana 10 min na -78 °C, a zatim je polako podignuta na sobnu temperaturu. Reakcija je ugašena sa 20% vodenim rastvorom amonijum hlorida (500 mL). Dva sloja su odvojena i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (2 X 250 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (300 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je triturisan sa heksanom (50 mL) da bi se dobio 3-(3,3-dimetilbutil)pirolidin-2-on (9.091 g, 14%) kao bela kristalna čvrsta supstanca. 1H-NMR (250 MHz, CDCl3) δ 5.70 (s, br, 1H), 3.32 (m, 2H), 2.29 (m, 2H), 1.86 (m, 1H), 1.79 (m, 1H), 1.26 (m, 3H), 0.90 (s, 9H). ESI-MS m/z: izračunato 169.1, nađeno 169.9 (M+1)<+>.
Korak 2: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[(2,6-dihloropiridin-3-karbonil)sulfamoil]-2-piridil]amino] propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0483]
[0484] Tikvica s okruglim dnom od 250 mL pod azotom je napunjena sa 2,6-dihloropiridin-3-karboksilnom kiselinom (1.14 g, 5.937 mmol) i bezvodnim tetrahidrofuranom (20 mL). Dodat je karbonil diimidazol (964 mg, 5. 945 mmol) i smeša je mešana pod azotom 2 sata na sobnoj temperaturi. U posebnoj tikvici od 100 mL je pripremljen rastvor terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilata (1.529 g, 3.706 mmol) u anhidrovanom tetra-hidrofuranu (10 mL) u atmosferi azota, koji je zatim preko šprica dodat u rastvor aktiviranog estra. Preko šprica je dodat i 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (1.2 mL, 8.024 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u atmosferi azota 16 h. Rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom i nastalo gusto ulje je tretirano etil acetatom (50 mL) i vodom (30 mL). Dodata je hlorovodonična kiselina (4 mL 6 M, 24.00 mmol) i dve faze su razdvojene. Vodena faza je isprana slanim rastvorom (30 mL) i osušena preko natrijum sulfata. Nakon uparavanja rastvarača, ostatak je rastvoren u dihlorometanu i prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (80 gramska kolona) korišćenjem gradijenta etil acetata (0 do 100% tokom 30 minuta) u heksanima. Uparavanjem rastvarača dobijen je terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[(2,6-dihloropiridin-3-karbonil)sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1.934 g, 89%) kao bela penasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.90 (broad s, 1H), 8.06 (dt, J = 8.0, 3.1 Hz, 1H), 7.69 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 8.5, 7.2 Hz, 1H), 7.22 (broad s, 1H), 7.16 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.74 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 3.61 - 3.41 (m, 1H), 3.31 - 3.13 (m, 2H), 2.76 (td, J = 10.5, 4.8 Hz, 1H), 2.11 - 1.99 (m, 1H), 1.83 (td, J = 14.1, 13.5, 5.9 Hz, 1H), 1.60 - 1.44 (m, 2H), 1.44 - 1.26 (m, 15H), 1.21 (s, 3H). ESI-MS m/z izrač. 585.15796, nađeno 586.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.02 min (LC Metoda B). Proizvod je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak 3: 2,6-dihloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil] sulfonil]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so )
[0485]
U tikvici od 100 mL, sa okruglim dnom terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[(2,6-dihloropiridin-3-karbonil) sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1.923 g, 3.279 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi u dihlorometanu (10 mL) i hlorovodoničkoj kiselini (3 mL 4 M u rastvoru dioksana, 12.00 mmol). Brzo je formiran beli gumasti talog. Dodato je još dihlorometana (10 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi dodatnih 2.5 h. Dodato je još 2 mL hlorovodonične kiseline i mešavina je mešana još 2 h. Volatili su uklonjeni uparavanjem, a ostatak je uparen u prisustvu tetrahidrofuran/etil acetat/dihlorometan/metanol/heksana dok nije dobijena penasta čvrsta supstanca. Sušenjem pod visokim vakuumom tokom vikenda dobijen je 2,6-dihloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3 -karboksamid (dihidrohloridna so) (1.933 g, 105%) kao penasta sivobela čvrsta supstanca (približno 90% čistoće prema LCMS).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid d6) δ 9.13 (broad s, 1H), 8.98 (broad s, 1H), 8.06 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.0 Hz, 1H), 7.62 (dd, J = 8.5, 7.2 Hz, 1H), 7.17 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 6.77 (dd, J = 8.5, 0.8 Hz, 1H), 3.34 (dq, J = 11.2, 5.6 Hz, 1H), 3.24 (q, J = 6.0 Hz, 2H), 2.80 (td, J = 11.8, 11.1, 6.0 Hz, 1H), 2.42 - 2.29 (m, 1H), 2.14 (tt, J = 7.8, 6.9 Hz, 1H), 1.93 (dd, J = 12.8, 7.8 Hz, 1H), 1.56 - 1.32 (m, 7H), 1.28 (s, 3H).ESI-MS m/z izrač. 485.10553, nađeno 486.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.89 min (LC Metoda B).
Korak 4: (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111, 14.05,10]tetrakoza-1(23),5, 7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje D)
[0486]
[0487] U mikrotalasni vial od 20 mL pod azotom je dodat 2,6-dihloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so) (859 mg, 1.536 mmol), bezvodni NMP (13.5 mL), kalijum karbonat (1.4 g, 10.13 mmol) (325 mesh), 3 Å molekularna sita i cezijum fluorid (285 mg, 1.876 mmol). Vial je zatvoren pod azotom i smeša je snažno mešana u uljnom kupatilu na 150 °C tokom 22 h. Smeša je izlivena u ohlađenu vodu (85 mL) i zakišeljena dodavanjem hlorovodonične kiseline (2.1 mL 6 M, 12.60 mmol) (blago penjenje). Dobijena suspenzija je filtrirana kroz keramički levak korišćenjem papirnog filtera i čvrsta supstanca je kratko osušena na vazduhu. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu i osušena preko natrijum sulfata. Nakon koncentrovanja, rastvor je razblažen dihlorometanom i pročišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta etil acetata (0 do 100% tokom 30 minuta) u heksanima. Proizvod je eluirao između 55-65% etil acetata u heksanima. Uparavanjem rastvarača i daljim koncentrovanjem se dobio (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23), 5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (320 mg, 54%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9.19 (s, 1H), 7.80 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 7.56 (t, J = 7.8 Hz, 1H), 7.44 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.66 (d, J = 7.9 Hz, 1H), 6.59 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 3.93 (d, J = 11.0 Hz, 1H), 3.25 (dd, J = 10.1, 7.2 Hz, 1H), 3.17 (d, J = 13.6 Hz, 1H), 2.96 (t, J = 10.1 Hz, 1H), 2.39 (d, J = 9.7 Hz, 1H), 1.96 (dd, J = 12.1, 6.8 Hz, 1H), 1.63 (d, J = 8.1 Hz, 3H), 1.57 (d, J = 15.4 Hz, 7H), 1.47 (d, J = 9.5 Hz, 1H). ESI-MS m/z izrač.449.12885, nađeno 450.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.76 min (LC Metoda E).
Korak 5: (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18, 23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 79)
[0488]
[0489] Bočica od 4 mL je napunjena sa (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trionom (25 mg, 0.05556 mmol), 3-(3,3-dimetilbutil)pirolidin-2-onom (12 mg, 0.07090 mmol), Pd2(dba)3(8 mg, 0.008736 mmol), Xantfos-om (5 mg, 0.008641 mmol), cezijum karbonatom (99 mg, 0.3038 mmol) i bezvodnim dioksanom (400 µL). Smeša je barbotirana azotom 1-2 min, zatvorena i mešana 21 h na 120 °C. Reakcija je razblažena sa dimetil sulfoksidom (900 µL), mikrofiltrirana i podvrgnuta preparativnoj reverzno faznoj HPLC (C18) korišćenjem gradijenta acetonitrila u vodi (1 do 99% tokom 15 minuta) i hlorovodonične kiseline kao modifikatora. Čiste frakcije su sakupljene i rastvarači su upareni da bi se dobilo 4.3 mg sivobele čvrste supstance. Produkt je dalje prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (4 gramska kolona) korišćenjem gradijenta metanola (0 do 5% tokom 30 min) u dihlorometanu. Čiste frakcije su sakupljene, a rastvarači su upareni da bi se dobio (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9 ., 6%) kao sivobela čvrsta supstanca (smeša dijastereomera).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.41 (s, 1H), 7.68 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.63 - 7.44 (m, 2H), 7.04 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 6.97 (broad s, 1H), 6.70 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.16 - 3.64 (m, 3H), 3.10 (br s, 1H), 2.94 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 2.74 - 2.54 (m, 2H), 2.29 - 2.17 (m, 1H), 2.10 (br s, 1H), 1.87 - 1.43 (m, 11H), 1.37 - 1.12 (m, 6H), 0.88 (d, J = 3.6 Hz, 9H).ESI-MS m/z izrač. 582.2988, nađeno 583.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.25 min (LC Metoda B).
Primer 21: Priprema 12,12-dimetil-8-(4-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]-pirazol}-1H -1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20 (24), 21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (jedinjenje 82) i 12,12-dimetil-8-(4-{2-[1-(trifluoro-metil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.111, 14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion(enantiomer 2) (Jedinjenje 83)
Korak 1: terc-butil 4-hidroksipirazol-1-karboksilat
[0491]
[0492] Natrijum hidroksid (16.32 g, 408.0 mmol) je dodat u hladan rastvor (0 °C) terc-butil 4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolan-2-il)pirazol-1-karboksilata (60 g, 204.0 mmol) u tetra-hidrofuranu (450 mL) nakon čega je usledilo lagano dodavanje vodonik peroksida (46.26 g, 41.68 mL 30 % w/v, 408.0 mmol). Reakciona smeša je mešana 10 min na 0 °C, a zatim 45 min na sobnoj temperaturi. Reakcija je ohlađena na 0 °C i razblažena dihlorometanom (800 mL). Dodata je 3M hlorovodonična kiselina do pH = 2 i organski sloj je odvojen, osušen preko magnezijum sulfata i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je triturisan u maloj količini dihlorometana i čvrsta supstanca je filtrirana pod vakuumom, dobro isprana sa još dihlorometana i osušena pod sniženim pritiskom da se dobije terc-butil 4-hidroksipirazol-1-karboksilat (19.904 g, 53%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 1.52 (s, 9H), 7.45 (d, J=0.9 Hz, 1H), 7.51 (d, J=0.9 Hz, 1H), 9.28 (s, 1H). ESI-MS m/z izrač.184.0848, nađeno 129.1 (M-C4H8+1)+; Retenciono vreme: 1.73 min (LC Metoda H).
Korak 2: terc-butil 4-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-karboksilat
[0493]
[0494] 2-[1-(Trifluorometil)ciklopropil]etanol (28.2 g, 183.0 mmol) je dodat u rastvor terc-butil 4-hidroksipirazol-1-karboksilata (23.7 g, 128.7 mmol) i trifenilfosfina (50.6 g, 192.9 mmol) u tetrahidrofuranu (250 mL) na 0 °C. Polako je dodat diizopropil azodikarboksilat (39.03 g, 38.00 mL, 193.0 mmol) na 0 °C i reakciona smeša je mešana na 0 °C 10 min. Reakcija je zatim zagrevana na 70 °C tokom noći. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i reakciona smeša je razblažena dihlorometanom (300 mL) i ugašena dodatkom 5% vodene limunske kiseline (150 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom (155 g žutog ulja). Ostatak je triturisan sa heptanima i malom količinom etil acetata (manje od 10%). Čvrsta supstanca je filtrirana i isprana heptanom. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom (55 g žutog ulja). Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 0% do 20% etil acetata u heptanima da bi se dobio terc-butil 4-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-karboksilat (27.31 g , 66%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 0.80-0.97 (m, 4H), 1.54 (s, 9H), 2.00 (t, J=6.9 Hz, 2H), 3.99 (t, J=6.8 Hz, 2H), 7.61-7.70 (m, 1H), 7.90 (s, 1H).<19>F NMR (282 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ -68.6 (s, 3F). ESI-MS m/z izrač.
320.1348, nađeno 265.1 (M-C4H8+1)<+>; Retenciono vreme: 2.18 min (LC Metoda I).
Korak 3: 4-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]-1H-pirazol (so hlorovodonične kiseline)
[0495]
[0496] Hlorovodonik (80 mL 4 M, 320.0 mmol) je dodat u rastvor terc-butil 4-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-karboksilata (10.63 g, 33.19 mmol) u dihlorometanu (50 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio 4-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]-1H-pirazol (so hlorovodonične kiseline) (8.71 g, 100%) kao sivo-bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 0.77-0.96 (m, 4H), 1.98 (t, J=6.9 Hz, 2H), 3.91 (t, J=6.9 Hz, 2H), 7.41 (s, 2H). ESI-MS m/z izrač. 220.0823, nađeno 221.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.43 min (LC Metoda H).
Korak 4: terc-butil 2-hloro-6-[4-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[0498] 4-[2-[1-(Trifluorometil)ciklopropil]etoksi]-1H-pirazol (so hlorovodonične kiseline) (10 g, 38.963 mmol) je dodat N,N-dimetilformamidu (80 mL). Reakcija je ohlađena na 0 °C i natrijum hidrid (1.87 g, 60% tež, 46.754 mmol) je dodat u porcijama i ostavljen da se meša 10 minuta. Rastvor terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilata (9.67 g, 38.975 mmol) u N,N-dimetilformamidu je dodat i reakcija je zagrejana na 75 °C i ostavljena da se meša preko noći. Kada je ohlađena na sobnu temperaturu, reakcija je ugašena slanim rastvorom (100 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3 X 50 mL). Organski slojevi su kombinovani, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 0% do 10% etil acetata u heptanima da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[4-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol -1-il]piridin-3-karboksilat (7.68 g, 46%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 0.73 (s, 2H), 0.98-1.10 (m, 2H), 1.62 (s, 9H), 2.03-2.13 (m, 2H), 4.09 (t, J=7.0 Hz, 2H), 7.51 (s, 1H), 7.84 (d, J=8.5 Hz, 1H), 8.12 (s, 1H), 8.21 (d, J=8.5 Hz, 1H). 19F NMR (282 MHz, CDCl3) δ -69.9 (br. s., 3F). ESI-MS m/z izrač.
431.1224, nađeno 432.1 (M+1)<+>+; Retenciono vreme: 2.56 min (LC Metoda I).
Korak 5: 2-Hloro-6-[4-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi] pirazol-1-il] piridin-3-karboksilna kiselina
[0499]
[0500] Trifluorosirćetna kiselina (46.620 g, 31.5 mL, 408.86 mmol) je dodata u rastvor terc-butil 2-hloro-6-[4-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilata (17.59 g, 40.733 mmol) u dihlorometanu (150 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 4 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je razblažen etil acetatom (175 mL) i organski sloj je ispran slanim rastvorom (2 X 100 mL). Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi proizvod 2-hloro-6-[4-[2-[1(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (14,82 g, 77%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 0.81-0.97 (m, 4H), 2.04 (t, J=6.9 Hz, 2H), 4.04-4.13 (m, 2H), 7.77 (s, 1H), 7.86 (d, J=8.5 Hz, 1H), 8.25 (s, 1H), 8.37 (d, J=8.5 Hz, 1H). ESI-MS m/z izrač. 375.0598, nađeno 376.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.14 min (LC Metoda H).
Korak 6: terc-butil 4-[4-[[6-[[2-hloro-6-[4-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0501]
[0502] U tikvicu sa okruglim dnom su dodati 2-hloro-6-[4-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (97 mg, 0.2582 mmol), karbonil diimidazol (45 mg, 0.2775 mmol) i tetrahidrofuran (3.0 mL). Reakcija je zagrevana 90 min na 40 °C. Rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilata (95 mg, 0.2227 mmol) u tetrahidrofuranu (2 mL) je dodavan u kapima, a zatim 2,3,4,6,7,8,9,10- oktahidropirimido[1,2-a]azepin (120 µL, 0.8024 mmol). Reakcija je mešana preko noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena sa 1N limunskom kiselinom i ekstrahovana sa etil acetatom. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Sirova reakciona smeša je prečišćena pomoću HPLC (20%-99% acetonitril:voda sa 0.1% HCL modifikatorom) dajući terc-butil 4-[4-[[6-[[2-hloro-6-[4]-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il] piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (82.7 mg, 49%) kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.81 (s, 1H), 8.24 (s, 1H), 8.11 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.87 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.77 (d, J = 0.9 Hz, 1H), 7.61 (dd, J = 8.5, 7.2 Hz, 1H), 7.20 (d, J = 4.9 Hz, 1H), 7.16 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.73 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.09 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 3.54 - 3.41 (m, 1H), 3.22 (q, J = 6.5 Hz, 2H), 2.74 -2.63 (m, 1H), 2.05 (t, J = 6.9 Hz, 2H), 1.96 (s, 1H), 1.73 (td, J = 11.5, 6.0 Hz, 1H), 1.49 (p, J = 7.7, 7.3 Hz, 2H), 1.37 (d, J = 12.8 Hz, 9H), 1.30 - 1.12 (m, 11H), 0.98 - 0.84 (m, 4H). ESI-MS m/z izrač. 783.27924, nađeno 784.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.28 min (LC metoda B).
Korak 7: 2-Hloro-N-[[6-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[4-[2-[1-(trifluorometil ) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0503]
[0504] U tikvicu sa okruglim dnom koja sadrži terc-butil 4-[4-[[6-[[2-hloro-6-[4]-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino] butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (118 mg, 0.1505 mmol) je dodat dihlorometan (5 mL) i trifluorosirćetna kiselina (650 µL, 8.437 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 1 h. Reakcija je uparena do suvog. Dodat je rastvor zasićenog natrijum bikarbonata, a zatim etil acetat. Reakcija je ekstrahovana 3 puta sa etil acetatom, osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i uparena dajući 2-hloro-N-[[6-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[4-[2-[1-(trifluoro-metil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (102 mg , 99%) koji je preuzet bez daljeg prečišćavanja. ESI-MS m/z izrač. 683.2268, nađeno 684.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.51 min (LC Metoda B).
Korak 8: 12,12-dimetil-8-(4-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 70)
[0505]
[0506] U mikrotalasni vial je dodat kalijum karbonat (92 mg, 0.6657 mmol), cezijum fluorid (45 mg, 0.2962 mmol), pet 3 Å molekularnih sita i rastvor 2-hloro-N-[[6-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[4-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il] piridin -3-karboksamid (90 mg, 0.1315 mmol) u dimetil sulfoksidu (0.8 mL). Reakcija je zatvorena i stavljena u prethodno zagrijano uljno kupatilo na 150 °C preko noći. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, filtrirana i prečišćena pomoću HPLC (10%-99% acetonitril:voda sa 0.1% modifikatorom HCL) dajući 12,12-dimetil-8-(4-{2-[1- (trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo [18.3.1.111,14.05,10] pentakoza-1(23),5,7, 9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 70) (20.8 mg, 24%) kao belu čvrstu supstancu. ESI-MS m/z izrač. 647.2502, nađeno 648.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.1 min (LC Metoda B).
Korak 9: 12,12-dimetil-8-(4-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 82) i 12,12-dimetil-8-(4-{2-[1-(trifluoro- metil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.111, 14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 83)
[0507]
[0508] Racemski 12,12-dimetil-8-(4-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19, 24-pentaazatetraciklo [18.3.1.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20 (24),21-heksaen-2,2,4-trion (17 mg, 0.02625 mmol) je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji korišćenjem ChiralPak AS-H (250 X 21.2 mm kolona, veličina čestica 5 µm) sa mobilnom fazom 20%-25% metanola (modifikator NH3)/ugljen dioksid pri 50 mL/min dajuć i kao prvi enantiomer koji se eluira, 12,12-dimetil-8-(4-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo [18.3.1.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9, 20(24),21-heksen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 82) (7.7 mg, 90%); ESI-MS m/z izrač. 647.2502, nađeno 648.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.18 min (LC Metoda D) i kao drugi enantiomer koji se eluira, 12,12-dimetil-8-(4-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1Hpirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20 (24), 21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 83) (7.6 mg, 89%);<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.49 (s, 1H), 7.96 (d, J = 1.0 Hz, 1H), 7.82 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.62 (d, J = 26.0 Hz, 2H), 7.14 (s, 1H), 6.98 (s, 1H), 6.69 (d, J = 44.0 Hz, 2H), 4.06 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 2.86 (s, 1H), 2.04 (t, J = 7.0 Hz, 3H), 1.88 - 1.78 (m, 1H), 1.65 - 1.47 (m, 7H), 1.21 (d, J = 14.6 Hz, 3H), 1.01 - 0.82 (m, 4H), ESI-MS m/z izrač. 647.2502, nađeno 648.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 3.18 min (LC Metoda D).
Primer 22: Priprema (18R)-20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22), 12-pentaen-8,10,10-triona (Jedinjenje 84) i (18S)-20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02 ,7] dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 85)
[0509]
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil -4-[3-(3-sulfamoilpirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat
[0511] Deo A: U tikvicu od 250 mL, sa okruglim dnom terc-butil 4-(3-hidroksipropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatu (10 g, 38.85 mmol) u suvom dihlorometanu (100 mL) je dodat trietilamin (8.3 mL, 59.55 mmol). Reakcija je ohlađena na 0 °C tokom 10 minuta i metansulfonil hlorid (3.7 mL, 47.80 mmol) je dodavan u kapima (egzotermna reakcija, formirana bela suspenzija) i reakcija je mešana 1 h uz zagrevanje do sobne temperature. Reakcija je zatim ugašena hladnom vodom (150 mL) i ekstrahovana dva puta sa dihlorometanom (200 mL). Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen da bi se dobio mezilat kao žućkasto ulje.
[0512] Deo B: Sirovi mezilat iz Dela A je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (50 mL) i dodat je 1H-pirazol-3-sulfonamid (5.8 g, 39.41 mmol), a zatim kalijum karbonat (16.3 g, 117.9) mmol) i reakciona smeša je mešana na 70 °C tokom 20 h. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i izlivena u drobljeni led i ekstrahovana etil acetatom (3 x 100 mL), organski slojevi su kombinovani, isprani vodom (2 X 100 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Smeđi ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (kolona 330 grama) korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(3-sulfamoilpirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (7.6 g, 51%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.386.19876, nađeno 387.25 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.61 min (LC Metoda A).
Korak 2: terc-butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi] pirazol-1-il] piridin-3-karbonil] sulfamoil] pirazol-1-il] propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0513]
[0514] 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (458 mg, 1.219 mmol) i di(imidazol-1-il)metanon (208 mg, 1.283 mmol) su kombinovani u tetrahidrofuranu (5 mL) i mešani 120 min na 50 °C. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(3-sulfamoilpirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (388 mg, 1.004 mmol), a zatim 1,8-diazabiciklo[5,4.0]undek-7-en (300 µL, 2.006 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 20 h. Reakciona smeša je razblažena etil acetatom i isprana zasićenim rastvorom amonijum hlorida, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni, a zatim prečišćeni hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 90% etil acetata u heksanima da bi se dobio terc-butil 4-[3-[3-[[2]-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (247 mg, 33%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9.82 (s, 1H), 8.30 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.22 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.47 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.04 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 5.96 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.39 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 4.19 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 3.75 - 3.51 (m, 1H), 2.83 (t, J = 10.3 Hz, 1H), 2.08 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.87 (ddt, J = 19.6, 12.7, 6.9 Hz, 3H), 1.67 (s, 2H), 1.43 (s, 9H), 1.33 (s, 3H), 1.30 (d, J = 13.3 Hz, 2H), 1.23 (s, 3H), 1.05 - 1.00 (m, 2H), 0.76 - 0.70 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 743.248, nađeno 744.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.86 min (LC Metoda A).
Korak 3: 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10 -trion
[0515]
[0516] Deo A: Rastvor terc-butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata (247 mg, 0.3319 mmol) u dihlorometanu (1 mL) i trifluorosirćetna kiselina (260 µL, 3.398 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi 4 h. Rastvarači su zatim upareni. Ostatak je rastvoren u etil acetatu, ispran sa 2 mL zasićenog rastvora natrijum bikarbonata, a rastvarač je uklonjen i osušen pod visokim vakuumom.
[0517] Deo B: Ostatak iz Dela A je rastvoren u dimetil sulfoksidu (6 mL) i dodata su 3 Å molekularna sita i reakciona smeša je mešana 10 min. Zatim su dodati cezijum fluorid (153 mg, 1.007 mmol) i kalijum karbonat (142 mg, 1.027 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 130 °C preko noći. Reakciona smeša je filtrirana kroz Whatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišćen metodom reverzno fazne HPLC-MS korišćenjem dvostrukog gradijenta od 50-90% mobilne faze B tokom 15.0 minuta (mobilna faza A = voda (0.05% HCL), mobilna faza B = acetonitril) da bi se dobio 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22), 12-pentaen-8,10,10-trion (80 mg, 40%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 607.2189, nađeno 608.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.07 min (LC Metoda B).
Korak 4: (18R)-20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 84) i (18S)-20, 20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111, 14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 85)
[0518]
[0519] Racemski 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (80 mg) je podvrgnut hiralnoj separaciji pomoć u SFC hromatografije koriš ć enjem Chiral Pak AS-H (250 X 10 mm), kolone, veličina čestica 5 µm) sa mobilnom fazom 27% acetonitril:metanol, 73% ugljen-dioksid pri 10 mL/min tokom 8.0 min (zapremina ubrizgavanja = 70 µL od 24 mg/mL u acetonitril:metanolu (90:10) dajuć i kao prvi enantiomer koji se eluira (18R)-20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10 -trion (jedinjenje 84) (27 mg, 27%);<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8.82 (s, 1H), 8.16 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 7.66 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.46 (d, J = 2.4 Hz, 1H), 7.06 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 6.96 (d, J = 8.2 Hz, 2H), 5.86 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.39 (d, J = 7.1 Hz, 2H), 4.31 (dt, J = 13.3, 3.3 Hz, 1H), 3.91 (td, J = 12.8, 2.7 Hz, 2H), 2.81 - 2.66 (m, 2H), 2.19 - 2.07 (m, 3H), 1.97 (t, J = 10.1 Hz, 1H), 1.75 (dd, J = 11.7, 5.3 Hz, 1H), 1.57 (s, 3H), 1.54 (s, 3H), 1.46 (t, J = 12.2 Hz, 1H), 1.08 -0.99 (m, 2H), 0.81 - 0.71 (m, 4H), ESI-MS m/z izrač.607.2189, nađeno 608.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.07 min (LC metoda B) i kao drugi enantiomer za eluiranje (18S)-20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 85) (31.5 mg, 31%);<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) 58.44 (s, 1H), 8.17 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 7.68 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 7.48 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.07 (d, J = 2.3 Hz, 1H), 7.00 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 5.86 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.39 (d, J = 7.2 Hz, 2H), 4.33 (d, J = 3.5 Hz, 1H), 3.93 (t, J = 12.3 Hz, 1H), 2.74 (s, 1H), 2.22 - 2.12 (m, 2H), 2.09 (t, J = 7.2 Hz, 2H), 1.99 (t, J = 10.3 Hz, 2H), 1.76 (dd, J = 11.9, 5.3 Hz, 1H), 1.59 (s, 3H), 1.55 (s, 3H), 1.47 (t, J = 12.2 Hz, 1H), 1.06 - 1.00 (m, 2H), 0.89 - 0.68 (m, 4H), ESI-MS m/z izrač.
607.2189, nađeno 608.1 (M+1)+; Retenciono vreme: 2.07 minuta (LC metoda B).
Primer 23: Priprema 12,12-dimetil-8-(3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(22),5, 7,9,20,23-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 95) i 12,12-dimetil-8-(3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetra-ciklo [18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(22),5,7,9,20,23-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 96)
[0520]
Korak 1: terc-Butil 2, 2-dimetil-4-[4-(4-sulfamoilfenoksi)butil]pirolidin-1-karboksilat
[0522] U bocu od 50 mL je dodat 4-hidroksibenzensulfonamid (319 mg, 1.842 mmol) i N,N-dimetilform (12.88 mL). U smešu su dodati terc-butil 2,2-dimetil-4-(4-metilsulfoniloksibutil) pirolidin-1-karboksilat (643.8 mg, 1.842 mmol) i kalijum karbonat (891 mg, 6.447 mmol) na sobnoj temperaturi i mešani na 50°C preko noći. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i izlivena u vodu (100 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 X 100 mL), organski slojevi su kombinovani, isprani vodom (2 X 100 mL), osušeni (natrijum sulfat), filtrirani i koncentrovani do ostatka smeđe boje koji je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata da se dobije terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(4-sulfamoilfenoksi) butil]pirolidin-1-
karboksilat (416.1 mg, 53%) kao svetlo narandžasto ulje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7.46 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.39 - 7.33 (m, 2H), 7.31 (s, 2H), 7.13 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.02 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.85 - 3.67 (m, 1H), 1.88 (dd, J = 11.8, 6.6 Hz, 2H), 1.79 - 1.61 (m, 4H), 1.51 (dd, J = 37.7, 5.8 Hz, 2H), 1.38 (s, 12H), 1.24 (s, 3H). ESI-MS m/z izrač. 426.21884, nađeno 427.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.75 min (LC Metoda A).
Korak 2: terc-butil 4-[4-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]fenoksi]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0523]
[0524] U vialu od 20 mL, 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il] piridin-3-karboksilna kiselina (549.7 mg, 1.463 mmol) i karbonil diimidazol (237.2 mg, 1.463 mmol) su pomešani u tetrahidrofuranu (5,971 mL) i mešani 120 minuta na 50 °C labavo poklopljeni. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(4-sulfamoilfenoksi)butil]pirolidin-1-karboksilat (416.1 mg, 0.9755 mmol) u tetrahidrofuranu (7.964 mL), a zatim 1,8-diazabiciklo [5.4.0]undek-7-en (297,0 mg, 291.7 µL, 1.951 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 16 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su razdvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni, a zatim prečišćeni hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitki gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata dajući vrlo slabo razdvajanje. Frakcije koje sadrže proizvod su spojene i koncentrovane, a zatim ponovo prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitki gradijent od 100% dihlorometana do 20% metanol/dihlorometan dajući terc-butil 4-[4-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi] pirazol-1-il] piridin-3-karbonil]sulfamoil]fenoksi]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (596 mg, 78%) kao svetlo žutu čvrstu supstancu. ESI-MS m/z izrač. 783.268, nađeno 784.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.54 min (LC Metoda B).
Korak 3: 2-hloro-N-[4-[4-(5, 5-dimetilpirolidin-3-il)butoksi]fenil]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0525]
terc-Butil 4-[4-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]fenoksi]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (596 mg, 0.7599 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (2.600 mL) i u smešu je dodata trifluorosirćetna kiselina (3.975 g, 2.686 mL, 34.86 mmol na sobnoj temperaturi) i mešana 60 min. Smeša je koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom, rastvorena u zasićenom vodenom rastvoru natrijum bikarbonata i etil acetata koji sadrži malu količinu metanola radi rastvorljivosti i slojevi su razdvojeni. Organski sloj je koncentrovan rotacionim uparavanjem a zatim pompom sa visokom vakuumom dajući 2-hloro-N-[4-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butoksi]fenil]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluoro-metil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (403.3 mg, 78%) kao prljavo belu čvrstu supstancu. ESI-MS m/z izrač.
683.2156, nađeno 684.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.66 min (LC Metoda A).
Korak 4: 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(22),5,7,9,20,23-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 89)
[0526]
[0527] U rastvor 2-hloro-N-[4-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butoksi]fenil]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (403.3 mg, 0.5895 mmol) u dimetil sulfoksidu (16.13 mL) je dodat kalijum karbonat (488.7 mg, 3.536 mmol), cezijum fluorid (107.5 mg, 0.7077 mmol) i mala količina molekularnih sita.
Dobijena smeša je zatvorena i zagrevana na 165 °C 18 sati. Smeša je zatim ohlađena do sobne temperature, razblažena etil acetatom i isprana zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida i slanim rastvorom. Organska faza je osušena (natrijum sulfat), filtrirana i koncentrovana do smeđe amorfne čvrste supstance koja je prečišćena hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitki gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata dajući 12,12-dimetil-8-(3-) {2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo [18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1 (22),5,7,9,20,23-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 89) (80 mg, 21%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.22 (s, 1H), 8.19 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.08 (dd, J = 8.6, 2.5 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.77 (dd, J = 8.7, 2.5 Hz, 1H), 7.34 (ddd, J = 16.6, 8.7, 2.5 Hz, 2H), 6.92 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.40 (t, J = 4.8 Hz, 2H), 4.31 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 2.40 (s, 1H), 2.07 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.95 (d, J = 29.5 Hz, 2H), 1.76 (t, J = 6.5 Hz, 2H), 1.59 (s, 1H), 1.52 (d, J = 6.7 Hz, 6H), 1.46 (d, J = 12.3 Hz, 1H), 1.33 (s, 1H), 1.24 (s, 1H), 1.08 - 1.00 (m, 1H), 0.96 (q, J = 4.7, 4.0 Hz, 2H), 0.88 (s, 2H), 0.67 (s, 1H). ESI-MS m/z izrač.647.23895, nađeno 648.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.37 min (LC Metoda B).
Korak 5: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(22),5,7,9,20,23-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 95) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo [18.2.2.111,14.05, 10]pentakosa-1(22),5,7,9,20,23-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2)
(Jedinjenje 96)
[0528]
[0529] Racemski 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksil-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(22),5,7,9,20,23-heksaen -2,2,4-trion (Jedinjenje 89) (72.1 mg, 0.1101 mmol) je podvrgnut hiralnom razdvajanju SFC hromatografijom korišć enjem ChiralCel OD-H (250 X 10 mm kolone, veličine čestica 5 µm) sa mobilnom fazom 35% acetonitril/metanol (90:10)/65% ugljendioksid pri 10 mL/min tokom 8.0 min (zapremina ubrizgavanja = 70 µL rastvora od 24 mg/mL u acetonitril/metanol (90:10) dajuć i kao prvi enantiomer koji se eluira, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi} -1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo [18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(22),5, 7,9, 20,23-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 95) (21.9 mg, 61 %); 1H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.23 (s, 1H), 8.19 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.08 (dd, J = 8.6, 2.4 Hz, 1H), 7.88 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.76 (dd, J = 8.7, 2.4 Hz, 1H), 7.34 (ddd, J = 16.3, 8.7, 2.5 Hz, 2H), 6.92 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.11 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.40 (t, J = 4.9 Hz, 2H), 4.31 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 3.17 (d, J = 5.2 Hz, 1H), 2.40 (d, J = 10.3 Hz, 1H), 2.07 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.92 (d, J = 5.4 Hz, 2H), 1.81 - 1.72 (m, 2H), 1.58 (d, J = 15.1 Hz, 1H), 1.53 (s, 3H), 1.51 (s, 3H), 1.33 (t, J = 13.3 Hz, 1H), 1.12 - 0.98 (m, 2H), 0.98 - 0.94 (m, 2H), 0.88 (tt, J = 5.6, 2.4 Hz, 2H), 0.66 (d, J = 13.0 Hz, 1H). ESI-MS m/z izrač. 647.23895, nađeno 648.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.34 min (LC Metoda B) i kao drugi enantiomer koji se eluira, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[18.2. 2.111,14.05,10] pentakoza-1(22),5,7,9,20,23-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 96) (18.75 mg, 52%); ESI-MS m/z izrač. 647.23895, nađeno 648.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.33 min (LC Metoda B).
Primer 24: Priprema (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutil)-4,4-dimetil-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19 (23),20-hexaene-2,2,4-trion (so hlorovodonične kiseline) (Jedinjenje 98)
[0530]
Korak 1: 1-Benzil-4,4-dimetil-pirolidin-2-on
[0531]
[0532] U tikvicu od 100 mL sa okruglim dnom napunjenu sa 4,4-dimetilpirolidin-2-onom (524 mg, 4.631 mmol) je dodat tetrahidrofuran (25 mL), a zatim 2-metilpropan-2-olat natrijumova so) (590 mg, 6.139 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Dodat je bromometilbenzen (1000 µL, 8.408 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 h. Reakcija je ugašena vodom (-15 mL) i sirova smeša je ekstrahovana etil acetatom (3 X 30 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko magnezijum sulfata i koncentrovani u vakuumu. Sirova reakciona smeša je prečišćena hromatografijom na silika gelu (gradijent 0%-60% etil acetata u heksanima) dajući 1-benzil-4,4-dimetil-pirolidin-2-on (834 mg, 89%) kao bistro ulje. ESI-MS m/z izrač.203.13101, nađeno 204.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.3 min (LC Metoda B).
Korak 2: 1-Benzil-3-(3,3-dimetilbutil)-4,4-dimetil-pirolidin-2-on
[0533]
[0534] Tikvica od 100 mL sa okruglim dnom je napunjen 1-benzil-4,4 -dimetil-pirolidin-2-onom (834 mg, 4.103 mmol) i tetrahidrofuranom (20 mL) i reakciona boca je produvavana azotom 5 min. Reakciona boca je ohlađena na -78 °C i u kapima je dodavan butillitijum (2.1 mL 2.5 M, 5.250 mmol) u heksanima i smeša je mešana na -78 °C tokom 1 sata. 1-bromo-3,3-dimetilbutan (700 µL, 4.970 mmol) je dodavan u kapima i reakciona smeša je mešana i polako zagrejana do sobne temperature tokom perioda od 18 sati. Reakcija je ugašena vodom (10 mL) i slanim rastvorom (10 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3 X 40 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko magnezijum sulfata i koncentrovani u vakuumu. Sirova reakciona smeša je prečišćena hromatografijom na silika gelu (gradijent 0%-40% etil acetat u heksanima) dajući 1-benzil-3-(3,3-dimetilbutil)-4,4-dimetil-pirolidin-2-on (107 mg, 9%) kao bistro ulje. ESI-MS m/z izrač. 287. 2249, nađeno 288.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.15 min (LC Metoda B).
Korak 3: 3-(3,3-dimetilbutil)-4,4-dimetil-pirolidin-2-on
[0535]
[0536] Tikvica od 50 mL prečišćena azotom napunjenu 1-benzil-3-(3,3)-dimetilbutil)-4,4-dimetil-pirolidin-2-onom (107 mg, 0.3723 mmol) je dodat propan-1-amin (3 mL) i etan-1,2-diamin (200 µL, 2.992 mmol). Rastvor je ohlađen na -30 °C, dodata je traka litijumske žice (4 cm isečena na 4 manja dela i ispran je heksanom da bi se uklonio višak ulja). Tikvica je ponovo opremljena septumom i reakciona smeša je snažno mešana, uz lagano zagrevanje do -20 °C. Oko litijumske žice se konačno formirala plava boja, sa plavom bojom koja je nakratko curila u rastvor i reakcija je ostavljena da se meša dok rastvor nije dobio tamnoplavu boju (~20 min). Dodata je voda (~15 mL), veći komadi litijuma su uklonjeni i smeša je zagrejana do sobne temperature i mešana 10 min. Sirova smeša je ekstrahovana etil acetatom (3 X 20 mL), kombinovani organski ekstrakti su isprani vodom (15 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovan i u vakuumu dajući sirovi 3-(3,3-dimetilbutil)-4 , 4-dimetil-pirolidin-2-on (115 mg, 157% (sirov proizvod sa nečistoćama)) kao žuto ulje, koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja. ESI-MS m/z izrač.197.17796, nađeno 198.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 1.58 min (LC Metoda B).
Korak 4: (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutil)-4,4-dimetil-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (so hlorovodonične kiseline) (Jedinjenje 98)
[0537]
[0538] U vial od 4 mL napunjen sirovim 3-(3,3-dimetilbutil)-4,4-dimetil-pirolidin-2-onom (45 mg, 0.2281 mmol) je dodat (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (25 mg, 0.05373 mmol), (5-difenilfosfanil-9,9-dimetil-ksanten-4-il)-difenil-fosfan(8 mg, 0.01383 mmol), tris (dibenzilidenaceton)dipaladij(0) (13 mg, 0.01420 mmol), cezijum karbonat (25 mg, 0.07673 mmol) i dioksan (1 mL). Prostor iznad je pročišćen azotom, vial je zatvoren i reakciona smeša je mešana na 120 °C 18 sati. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, sirova smeša je razblažena etil acetatom (-30 mL) i isprana sa 1.0 M vodenim rastvorom limunske kiseline (5 mL). Organski sloj je osušen preko magnezijum sulfata, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Sirovi ostatak je stavljen u minimalnu količinu dimetil sulfoksida (0.4-1 mL) i podvrgnut HPLC prečišćavanju (C18reverzna faza, 99:1-1:99 voda:acetonitril, HCl modifikator). Frakcije su zatim koncentrovane u vakuumu, a ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu gradijent (0%-70%) etil acetata u heksanima dajući (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutil)-4,4-dimetil-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (so hlorovodonične kiseline) (Jedinjenje 98) (4 mg, 11%) kao prljavo-belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.42 (s, 1H), 7.66 (dd, J = 8.3, 3.2 Hz, 1H), 7.52 (ddd, J = 22.6, 14.8, 8.2 Hz, 2H), 7.03 (d, J = 7.2 Hz, 1H), 6.92 (d, J = 32.0 Hz, 1H), 6.69 (d, J = 8.7 Hz, 1H), 4.46 - 3.82 (m, 3H), 3.83 - 3.41 (m, 3H), 3.09 (s, 1H), 2.93 (d, J = 13.3 Hz, 1H), 2.80 - 2.63 (m, 1H), 2.40 - 2.23 (m, 1H), 2.17 - 1.98 (m, 1H), 1.90 - 1.68 (m, 2H), 1.68 - 1.38 (m, 8H), 1.28 (d, J = 40.1 Hz, 5H), 1.18 (d, J = 5.6 Hz, 2H), 1.02 - 0.70 (m, 9H).ESI-MS m/z izrač. 610.33014, nađeno 611.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.38 min (LC Metoda B).
Primer 25: Priprema 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]-pirazol}-1H-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(21),5,7,9,19,22-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 99) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluoro- metil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo [17.2.2.111, 14.05,10]tetrakoza-1(21),5,7,9,19,22-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 100)
[0539]
Korak 1: terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(4-sulfamoilfenoksi)propil]pirolidin-1-karboksilat
[0541] U vial od 50 mL su dodati 4-hidroksibenzensulfonamid (471.1 mg, 2.720 mmol) i N,N-dimetilformamid (13.69 mL). U smešu na sobnoj temperaturi su dodati terc-butil 2,2-dimetil-4-(3-metilsulfonil-oksipropil)pirolidin-1-karboksilat (912.4 mg, 2.720 mmol) i kalijum karbonat (1.316 g, 9.520 mmol) i mešani su na sobnoj temperaturi 3 h, a zatim zagrevani na 50 °C preko noći. Ohlađeni su na sobnu temperaturu i izliveni u vodu (100 mL) i ekstrahovano etil acetatom (2 X 100 mL), organski slojevi su kombinovani, isprani vodom (2 X 100 mL), osušeni (natrijum sulfat), filtrirani i koncentrovani do smeđeg ostatka koji je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(4-sulfamoilfenoksi)propil]pirolidin-1-karboksilat (578.3 mg, 52%) kao svetlo narandžasto ulje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7.46 (t, J = 8.0 Hz, 1H), 7.39 - 7.33 (m, 2H), 7.31 (s, 2H), 7.13 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 4.02 (t, J = 6.0 Hz, 2H), 3.85 - 3.67 (m, 1H), 1.88 (dd, J = 11.8, 6.6 Hz, 2H), 1.79 - 1.61 (m, 4H), 1.51 (dd, J = 37.7, 5.8 Hz, 2H), 1.38 (s, 12H), 1.24 (s, 3H). ESI-MS m/z izrač.412.2032, nađeno 413.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.71 min (LC Metoda A).
Korak 2: terc-butil 4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]fenoksi]propil]-2, 2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0542]
[0543] U vialu od 20 mL 2-[3-hloro-[6- [1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (790.2 mg, 2.103 mmol) i karbonil diimidazol (341.0 mg, 2.103 mmol) su pomešani u tetrahidrofuranu (6 mL) i mešani 120 min na 50 °C labavo poklopljueni. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(4-sulfamoilfenoksi)propil]pirolidin-1-karboksilat (578.3 mg, 1.402 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (426.9 mg, 419.4 µL, 2.804 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 16 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani, upareni, a zatim prečišćeni hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitki gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata dajući vrlo slabo razdvajanje. Frakcije koje sadrže proizvod su spojene i koncentrovane, a zatim ponovo prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitkog gradijenta od 100% dihlorometana do 20% metanol/dihlorometana dajući terc-butil 4-[3-[4-[[2-hloro-6
[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il] piridin-3-karbonil] sulfamoil] fenoksi]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (953.1 mg, 88%) kao svetlo žutu čvrstu supstancu. ESI-MS m/z izrač. 769.2524, nađeno 770.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.49 min (LC Metoda B).
Korak 3: 2-hloro-N-[4-[3-(5, 5-dimetilpirolidin-3-il)propoksi]fenil]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0544]
terc-butil 4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil] fenoksi]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (953.1 mg, 1.237 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (4.158 mL) i u smešu je dodata trifluorosirćetna kiselina (6.471 g, 4.372 mL, 56.75 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 60 min. Smeša je koncentrovana do suvog pod sniženim pritiskom, rastvorena u zasićenom vodenom rastvoru natrijum bikarbonata i etil acetata koji sadrži malu količinu metanola radi rastvorljivosti i razdvojeni su slojevi. Organski sloj jr koncentrovan rotacionim uparavanjem nakon čega je usledilo sušenje u vakuumu dajući 2-hloro-N-[4-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propoksi]fenil] sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (738.1 mg, 89%) kao prljavo belu čvrstu supstancu. ESI-MS m/z izrač. 669.19995, nađeno 670.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.65 min (LC Metoda A).
Korak 4: 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(21),5,7,9,19,22-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 88)
[0545]
[0546] U rastvor 2-hloro-N-[4-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propoksi]fenil]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamida (738.1 mg, 1.101 mmol) u dimetil sulfoksidu (29.52 mL) je dodat kalijum karbonat (912.8 mg, 6.605 mmol), cezijum fluorid (200.7 mg, 1.321 mmol) i mala količina 3 Å molekularnih sita. Dobijena smeša je zatvorena i zagrevana 16 sati na 130 °C. Nastavljeno je zagrevanje na 150 °C tokom 16h. Smeša je zagrejana na 170 °C i mešana 3 sata, zatim ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena etil acetatom i isprana zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida i slanim rastvorom. Organska faza je osušena (natrijum sulfat), filtrirana i koncentrovana do smeđe amorfne čvrste supstance koja je prečišćena hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata dajući 12,12-dimetil-8-(3-){2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksil-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10] tetrakoza-1 (21),5,7,9,19,22-heksaen-2,2,4-trion (30 mg, 4%) kao belu čvrstu supstancu.
<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.13 (s, 1H), 8.17 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.06 (d, J = 7.8 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.78 (d, J = 8.6 Hz, 1H), 7.30 (dd, J = 8.8, 2.4 Hz, 1H), 7.19 (dd, J = 8.6, 2.4 Hz, 1H), 6.89 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 2.7 Hz, 1H), 4.52 (d, J = 12.1 Hz, 1H), 4.30 (t, J = 7.0 Hz, 2H), 4.27 - 4.17 (m, 1H), 2.07 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.96 (s, 2H), 1.75 (s, 1H), 1.69 (d, J = 12.2 Hz, 1H), 1.53 (s, 5H), 1.46 (s, 3H), 1.44 - 1.36 (m, 2H), 1.05 (s, 1H), 0.98 - 0.93 (m, 2H), 0.90 - 0.84 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 633.22327, nađeno 634.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.28 min (LC Metoda B).
Korak 5: 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(21),5,7,9,19,22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 99) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklo-propil]etoksi]-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10] tetrakoza-1(21),5,7,9,19,22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 100)
[0547]
[0548] Racemski 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo [17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(21),5,7,9,19,22-heksaen-2,2,4-trion (27,2 mg, 0,04292 mmol) je podvrgnut hiralnoj separaciji pomoć u SFC hromatografije koriš ć enjem ChiralCel OD-H (kolona 250 X 10 mm, veličina čestica 5 µm) sa mobilnom fazom 42% acetonitril/metanol (90:10)/58% ugljen-dioksid pri 10mL/min tokom 8.0 min (zapremina ubrizgavanja = 70 µL od 24mg/ mL rastvora u acetonitril/metanolu (90:10) dajuć i kao prvi enantiomer koji se eluira, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10] tetrakoza-1(21),5,7, 9,19,22-heksan-2,2, 4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 99) (10.22 mg, 75%) kao belu čvrstu supstancu;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.13 (s, 1H), 8.17 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.07 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.83 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 7.79 (d, J = 8.8 Hz, 1H), 7.31 (dd, J = 8.8, 2.5 Hz, 1H), 7.20 (dd, J = 8.6, 2.4 Hz, 1H), 6.90 (d, J = 8.3 Hz, 1H), 6.10 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.52 (d, J = 11.9 Hz, 1H), 4.30 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 4.26 - 4.16 (m, 1H), 2.07 (t, J = 7.1 Hz, 2H), 1.96 (s, 2H), 1.77 - 1.64 (m, 2H), 1.55 (s, 1H), 1.53 (s, 3H), 1.48 (s, 1H), 1.46 (s, 3H), 1.38 (dd, J = 22.7, 11.1 Hz, 2H), 1.04 (d, J = 8.2 Hz, 1H), 0.99 - 0.92 (m, 2H), 0.89 (d, J = 11.6 Hz, 2H),Hz, 2H), ESI-MS m/z izrač. 633.22327, nađeno 634.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.25 min (LC Metoda B) i kao drugi enantiomer koji se eluira, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo [17.2.2.111,14.05,10] tetrakoza-1(21),5,7,9, 19,22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 100) (9.72 mg, 71%) kao belo čvrsto; ESI-MS m/z izrač. 633.22327, nađeno 634.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.25 min (LC Metoda B).
Primer 26: Priprema (14S)-8-[3-(4,4-dimetilpentil)-2-oksopirolidin-1,il]- 12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen- 2,2,4-triona (Jedinjenje 102)
[0549]
Korak 1: 3-(4,4-Dimetilpentil)pirolidin-2-on
[0550]
[0551] U rastvor pirolidin-2-ona (4.64 g, 54.52 mmol) u bezvodnom tetrahidrofuranu (300 mL) na -78 °C dodat je 2,5 M rastvor n-butillitijuma u heksanu (43.6 mL, 0.109 mol) ukapavanjem i reakcioni rastvor je mešan na ovoj temperaturi 1 h. Polako je dodavan rastvor 1-hloro-4,4-dimetilpentana (7.34 g, 54.52 mmol) u bezvodnom tetrahidrofuranu (20 mL). Nakon što je dodavanje završeno, rastvor je mešan na -78 °C tokom 20 minuta pre nego što je postepeno zagrejan do sobne temperature. Dodat je 20% vodeni rastvor amonijum hlorida (100 mL) i organski sloj je odvojen. Vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom (3 X 150 mL) i kombinovani organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko natrijum sulfata i koncentrovan. Dobijeni ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem gradijenta 0-100% etil acetata u heksanima da bi se dobio 3-(4,4-dimetilpentil)pirolidin-2-on (3.86 g, 39%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (250MHz, CDCl3) δ (ppm): 7.51 (s, 1H), 3.12 (m, 2H), 2.15 (m, 2H), 1.60 (m, 2H), 1.29-1.11 (m, 5H), 0.86 (s, 9H). ESI-MS m/z izrač.183.16, nađeno 184.2 (M+1)<+>. Retenciono vreme: 4.66 min (LC Metoda Q).
Korak 2: (14S)-8-[3-(4,4-dimetilpentil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18, 23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 102)
[0552]
[0553] Vial od 4 mL je napunjen sa (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trionom (25 mg, 0.05373 mmol), 3-(4,4-dimetilpentil)pirolidin-2-ononom (29 mg, 0.1582 mmol) (sirov materijal, čistoća nepoznata), Pd2(dba)3(10 mg, 0.01092 mmol), Xantfos-om (6 mg, 0.01037 mmol), cezijum karbonatom (87.52 mg, 0.2686 mmol) i anhidrovanim dioksanom (0.4 mL). Smeša je barbotirana azotom 1-2 min, zatvorena i mešana na 120 °C 21 h. Reakcija je razblažena sa dimetil sulfoksidom (700 µL), mikrofiltrirana i podvrgnuta preparativnoj reverzno faznoj HPLC (C18) korišćenjem gradijenta acetonitrila u vodi (1 do 99% tokom 15 minuta) i hlorovodonične kiseline kao modifikatora. Čiste frakcije su sakupljene, dodato je malo slanog rastvora i organski rastvarači su upareni. Produkt je ekstrahovan dihlorometanom i organska faza je osušena preko natrijum sulfata. Uparavanje rastvarača je dalo 8 mg čvrste supstance. Produkt je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (4 gramska kolona) korišćenjem gradijenta metanola (0 do 5% tokom 30 min) u dihlorometanu. Čiste frakcije su sakupljene i rastvarači su upareni da se dobije (14S)-8-[3-(4,4-dimetilpentil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaaza-tetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 102) (5.5 mg, 17%) kao bela čvrsta mešavina dijastereomera.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12.42 (s, 1H), 7.68 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.61 - 7.48 (m, 2H), 7.04 (d, J = 7.1 Hz, 1H), 6.96 (broad s, 1H), 6.70 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 4.08 - 3.72 (m, 3H), 3.10 (br d, J = 8.8 Hz, 1H), 2.94 (d, J = 13.2 Hz, 1H), 2.74 - 2.60 (m, 2H), 2.33 - 2.18 (m, 1H), 2.10 (br s, 1H), 1.86 - 1.66 (m, 4H), 1.65 - 1.44 (m, 9H), 1.37 - 1.15 (m, 6H), 0.87 (d, J = 1.8 Hz, 9H).ESI-MS m/z izrač. 596.31445, nađeno 597.4 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.29 min (LC Metoda B).
Primer 27: Sinteza 8-[3-({dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19 (23),20-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 106) i 8-[3-({dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 107)
Korak 1: 1-Ciklopropilciklopropanol
[0555]
[0556] U rastvor metil ciklopropankarboksilata (75 g, 749.1 mmol) u etru (450 mL) je dodat titan (IV) izopropoksid (55.3 mL, 187.4 mmol). U smešu je polako dodavan etil magnezijum bromid (1.6 L 1 M, 1.60 mol) tokom 2 h. Dodavanje je egzotermno i kontroliše se praćenjem brzine dodavanja i korišćenjem kupatila za hlađenje. Reakciona temperatura je održavana između 21 °C - 26 °C tokom dodavanja. Nakon dodavanja, smeša je mešana dodatna 2 h na sobnoj temperaturi. Zatim je smeša ohlađena na -5 °C korišćenjem kupatila aceton/suvi led i polako ugašena sumpornom kiselinom (970 g 10% tež, 990 mmol). Reakciona smeša je ohlađena u kupatilu suvi led/aceton da bi se reakciona posuda održala ispod 0 °C tokom gašenja. Kako je gašenje napredovalo, formirala se siva/ljubičasta čvrsta supstanca. Nakon potpunog dodavanja vodenog rastvora sumporne kiseline, smeša je mešana na 0 °C 1 h. Precipitat je filtriran kroz Celite korišćenjem srednje frite i talog je ispran dietil etrom (900 mL). Filtrat je prebačen u levak za odvajanje, a organska faza je isprana slanim rastvorom (1 L), zasićenim natrijum bikarbonatom (1 L) i slanim rastvorom (1 L). Organska faza je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana preko celita i rastvarač je uparen rotacionim uparavanjem na 100 tora i vodeno kupatilo podešeno na 20 °C. Sirovi proizvod je držan na -23 °C preko noći i korišćen bez daljeg prečišćavanja. Utvrđeno je da proizvod, 1-ciklopropilciklopropanol (61 g, 83%) sadrži -50% rastvarača (tetrahidrofuran i<i>PrOH) i kao takav je korišćen u sledećem koraku.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 1.32 (tt, J = 8.2, 5.1 Hz, 1H), 0.71 – 0.61 (m, 2H), 0.51 - 0.43 (m, 2H), 0.43 - 0.33 (m ), 0.23 – 0.14 (m, 2H).
Korak 2: 1-bromo-1-ciklopropil-ciklopropan
[0557]
[0558] Rastvor trifenilfosfina (56.1 g, 213.9 mmol) u dihlorometanu (200 mL) je ohlađen na -10 °C. Rastvor broma (11.0 mL, 214 mmol) u dihlorometanu (40 mL) je dodat i reakcija je mešana na -10 °C dodatnih 15 min. Reakcija je zatim ohlađena na -30 °C i dodat je piridin (3.3 mL, 41 mmol). Ukapavanjem je dodat rastvor 1-ciklopropilciklopropanola (20.0 g, 204 mmol), piridina (17.3 mL, 214 mmol) i dihlorometana (100 mL) uz održavanje temperature između -15 °C do -20 °C. Nakon 30 minuta, dodavanje je završeno i reakcija je ostavljena da se postepeno zagreje na sobnu temperaturu. Reakcija je zatim ostavljena da se meša na 40 °C preko noći. Reakcija je zatim ohlađena na sobnu temperaturu i ugašena vodom (100 mL). Reakcija je zatim mešana 10 min i faze su razdvojene. Organska faza je sukcesivno isprana sa 1 M hlorovodoničnom kiselinom (102 mL), zatim zasićenim natrijum bikarbonatom (50 mL), osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana (30 °C/vakuum -300 tora) da se ukloni veći deo dihlorometana. Sirova reakciona smeša je destilovana (40 °C/20 torr) da bi se uklonilo još dihlorometana. Čvrsti ostatak (Ph3PO i proizvod) je ponovo zagrejan i destilovan (50 - 60 °C/20 torr) da bi se dobilo 21.5 g (prinos 65%) 1-bromo-l-ciklopropil-ciklopropana kao zamućene, bezbojne tečnosti.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 1.61 (tt, J = 8.2, 5.0 Hz, 1H), 1.07 – 1.02 (m, 2H), 0.78 – 0.66 (m, 2H), 0.67 - 0,2H (m ), 0.35 – 0.21 (m, 2H).
Korak 3: Ciklopropilidenciklopropan
[0559]
[0560] Rastvor kalijum terc-butoksida (16.7 g, 148.8 mmol) u dimetil sulfoksidu (100 mL) je mešan na sobnoj temperaturi u tikvici od 250 mL sa okruglim dnom i 3 grla. 1-Bromo-1-ciklopropil-ciklopropan (20.0 g, 124.2 mmol) je dodavan ukapavanjem i reakcija je odmah postala tamna, a zatim smeđa. Reakcija je bila blago egzotermna (održavana temperatura između 18 °C i 22 °C u kupatilu led-voda). Nakon 10 minuta dodavanje je završeno. Kupatilo led-voda je uklonjeno i reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi. Nakon 90 minuta, reakciona smeša je destilovana u vakuumu korišćenjem destilacije balon-ubalon. Destilacija se odvijala od 60 °C do 80 °C između 40 i 100 tora. Destilat se polako sakupljao u prijemniku da bi se dobila bezbojna tečnost 18.2 g (7.3 g proizvoda kao 42 %tež rastvor u t-BuOH). Destilat je dalje ispran vodom (5 X 10 mL). Dodat je dihlorometan (4 g) i smeša je osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana (ispiranje sa 2 dodatne porcije od po 3 g dihlorometana svaka) da bi se dobila bezbojna tečnost 17.30 g (6.9 g proizvoda kao 39.6 tež% rastvor u dihlorometanu prinos 69%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 1.19 (s, 8H).<1>H NMR potvrđuje prisustvo dihlorometana i male količine terc-butanola.
Korak 4: Etil dispiro[2.0.2.1]heptan-7-karboksilat
[0561]
[0562] U rastvor ciklopropilidenciklopropana (49.5 g, 617.8 mmol) u dihlorometanu (110 mL) na 0 °C u atmosferi azota je dodat rodijum (II) acetat (4.2 g, 9.503 mmol). U smešu na 0 °C je dodat etil 2-diazoacetat (106.8 mL, 1.016 mol) korišćenjem seta pumpe za špric pri brzini dodavanja od 0.02 mL/min (1.2 mL/h). Dodavanje je bilo kontinuirano 89 sati. Sirova reakciona smeša je filtrirana kroz čep od silike, isprana sa 3 X 150 mL dihlorometana. Isparljivi materijali su uklonjeni in vacuo dajući sirovo, tamno žuto ulje, etil dispiro[2.0.2.1]heptan-7-karboksilat (100 g, 97%, koje sadrži 20% dihlorometana, dietil (E)-but-2-enedioat i dietil (Z)-but-2-enodioat kao kontaminante) koji je direktno korišćen u sledećem koraku.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 4.13 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 2.23 (s, 1H), 1.24 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.08 - 0.93 (m, 4H), 0.90 - 0.82 (m, 2H), 0.77 (ddd, J = 8.2, 5.0, 3.5 Hz, 2H).
Korak 5: Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il metanol
[0563]
[0564] U suspenziju litijum aluminijum hidrida (7.8 g, 200.2 mmol) u dietil eteru (300 mL) ohlađenu u kupatilu led-voda polako je dodat etil dispiro[2.0.2.1]heptan-7-karboksilat (10.77 g, 64.79 mmol). Smeša je ostavljena da se zagreje do blagog refluksa tokom dodavanja i nastavljeno je mešanje na sobnoj temperaturi 1 h. Reakcija je ohlađena u kupatilu led-voda i polako ugašena dodavanjem vode (8.0 mL, 440 mmol), zatim natrijum hidroksida (8.0 mL 2 M, 16 mmol) i zatim vode (24.0 mL, 1.33 mol) . Svetložuta suspenzija je filtrirana preko celita i isprana 3X sa 150 mL metil terc-butil etra. Filtrat je koncentrovan in vacuo dajući 8.87 g bistrog ulja, dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il metanola (8,87 g, kvantitativni prinos).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 3.71 (dd, J = 6.7, 5.5 Hz, 2H), 1.76 – 1.65 (m, 1H), 1.46 (t, J = 5.6 Hz, 1H), 0.87 (q, J = 1.9 Hz, 4H), 0.72 – 0.61 (m, 2H), 0.60 – 0.50 (m, 2H).
Korak 6: terc-Butil 3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol-1-karboksilat
[0565]
[0566] Rastvor dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il metanola (1.36 g, 11.0 mmol), terc-butil 3- hidroksipirazol-1-karboksilat (2.3 g, 12 mmol) i trifenilfosfina (3.2 g, 12 mmol) u tetrahidrofuranu (28 mL) ohlađen je u ledenom kupatilu i polako je dodat diizopropil azodikarboksilat (2.4 mL, 12 mmol). Kupatilo za hlađenje je uklonjeno i reakcija je mešana 15 h. Reakcija je razblažena etil acetatom, isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i uparena pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom od 0-20% etil acetata u heksanima da bi se dobio terc-butil 3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il metoksi)-1H-pirazol-1-karboksilat (1.57 g, prinos 49%) kao bezbojno ulje. ESI-MS m/z izrač.290.16306, nađeno 291.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.76 min (LC Metoda A).
Korak 7: 3-(Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol
[0567]
[0568] Rastvor terc-butil 3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il metoksi) -1H-pirazol-1-karboksilata (1.57 g, 5.41 mmol) i trifluorosirćetna kiselina (2.2 mL, 29 mmol) u dihlorometanu (20 mL) su mešani tri sata. Isparljive supstance su uklonjene pod vakuumom, a ostatak je zalužen zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovan etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni da bi se dobio 3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol (0.94 g, prinos 91%) kao bledožuto ulje. ESI-MS m/z izrač. 190.11061, nađeno 191.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.52 min (LC Metoda A).
Korak 8: Etil 2-hloro-6-(3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinat
[0569]
[0570] Mešavina 3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazola (0.94 g, 4.9 mmol), etil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilata (1.15 g, 5.23 mmol), kalijum karbonata (0.83 g, 6.0 mmol) i 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktana (0.12 g, 1.1 mmol) u dimetil sulfoksidu (16 mL) je mešana 24 h. Reakcija je razblažena vodom i ekstrahovana etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani slanim rastvorom i vodom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni pod vakuumom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela eluiranjem sa gradijentom od 0-20% etil acetata u heksanima da bi se dobio etil 2-hloro-6-(3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H- pirazol-1-il)nikotinat (1.39 g, prinos 75%) kao bezbojna čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8.36 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 8.27 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 7.72 (d, J = 8.5 Hz, 1H), 5.96 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 4.41 (q, J = 7.1 Hz, 2H), 4.30 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 1.94 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 1.42 (t, J = 7.1 Hz, 3H), 1.02-0.89 (m, 4H), 0.75-0.65 (m, 2H), 0.65-0.53 (m, 2H).ESI-MS m/z izrač.373.11932, nađeno 374.2 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.87 min (LC Metoda A).
Korak 9: 2-Hloro-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[0571]
[0572] Rastvor etil 2-hloro-6-(3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)-1H-pirazol-1-il)nikotinata (1.39 g, 3.72 mmol) i natrijum hidroksida (7.5 mL 1 M rastvora, 7.5 mmol) u tetrahidrofuranu (6 mL) i etanolu (3 mL) je mešan 90 min. Volatili su uklonjeni pod vakuumom i dodata je voda. Reakcija je ohlađena u ledenom kupatilu i polako je dodata hlorovodonična kiselina (7.5 mL 1 M rastvora, 7.5 mmol). Reakcija je razblažena vodom i ekstrahovana etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni da bi se kao bezbojna čvrsta supstanca dobila 2-hloro-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (1.16 g, prinos 82%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8.41 (d, J = 2.9 Hz, 1H), 8.38 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 7.73 (d, J = 8.4 Hz, 1H), 6.19 (d, J = 2.8 Hz, 1H), 4.27 (d, J = 7.0 Hz, 2H), 1.93 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 0.97 - 0.79 (m, 4H), 0.76 - 0.66 (m, 2H), 0.65 - 0.56 (m, 2H).ESI-MS m/z izrač. 345.088, nađeno 346.1 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 0.73 min (LC Metoda A).
Korak 10: terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il] piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2, 2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0573]
[0574] Boca od 100 mL je pod azotom napunjena sa 2-hloro-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilnom kiselinom (300 mg, 0.8676 mmol) i bezvodnim tetrahidrofuranom (4 mL). Dodat je karbonil diimidazol (214 mg, 1.320 mmol) i smeša je mešana pod azotom na sobnoj temperaturi 2 h. U posebnom vialu od 20 mL koji se održava u atmosferi azota je pripremljen rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino] propil]pirolidin-1-karboksilata (358 mg , 0.8678 mmol) u bezvodnom tetrahidrofuranu (2 mL) i dodat je preko šprica u aktivirani estarski rastvor. Dodat je 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (0.29 mL, 1.939 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 19 h. Rastvarač je uparen, a ostatak je tretiran vodom (50 mL), etil acetatom (50 mL) i hlorovodoničnom kiselinom (1 mL 6 M, 6.000 mmol). Dve faze su razdvojene. Vodena faza je dalje ekstrahovana etil acetatom (25 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (30 mL), osušeni preko natrijum sulfata i rastvarači su upareni. Produkt je rastvoren u dihlorometanu i prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta etil acetat (0 do 100% tokom 30 minuta) u heksanima. Čiste frakcije su sakupljene, a rastvarači su upareni da bi se dobilo 408 mg proizvoda u obliku penaste čvrste supstance. LCMS je pokazao da materijal sadrži 6% početne karboksilne kiseline. Proizvod je prečišćen drugi put korišćenjem iste metode da bi se dobio tercbutil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil] -2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (364 mg, 57%) kao bezbojna smola. ESI-MS m/z izrač. 739.2919, nađeno 740.3 (M+1)<+>; Retenciono vreme: 2.45 min (LC Metoda B).
Korak 11: 2-Hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid(dihidrohloridna so)
[0575]
[0576] Tikvica od 100 mL sa okruglim dnom je napunjena terc-butil 4-[3-[[6-[[2] -hloro-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino] propil]-2,2-dimetil -pirolidin-1-karboksilatom (364 mg, 0.4917 mmol), dihlorometanom (5 mL) i hlorovodoničnom kiselinom (0.5 mL 4 M, 2.000 mmol) (4 M u dioksanu). Bočica je zatvorena i mešana na sobnoj temperaturi 5 h. Dodata je dodatna količina hlorovodonične kiseline (0.5 mL 4 M, 2.000 mmol) i smeša je mešana još h. Isparljive supstance su uklonjene rotacionim uparavanjem pod vakuumom na sobnoj temperaturi. Ostatak je triturisan sa dihlorometanom/heksanom i rastvarači su upareni. Operacija se ponavlja sve dok se ne dobije bela čvrsta supstanca. Sušenjem pod vakuumom dobija se 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(dispiro[2.0.2.1] heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so) (325 mg, 93%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.639,23944, nađeno 640,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,58 min (LC metoda B).
Korak 12: 8-[3-({Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11, 18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) ( Jedinjenje 106) i 8-[3-({dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9 ,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje
107)
[0577]
[0578] Balon sa okruglim dnom od 100 mL opremljen magnetnom mešalicom je napunjen pod azotom sa 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propilaminol-2-piridil]sulfonil ]-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so) (325 mg, 0,4557 mmol), anhidrovani NMP (3 mL), kalijum karbonat (269 mg, 1,946 mmol) (sveže mleven u malteru) i cezijum fluorid (70 mg, 0,4608 mmol). Smeša je snažno mešana na 140 °C pod azotom tokom 15 h. Smeša je razblažena vodom (20 mL) i zakiseljena je polaganim dodavanjem hlorovodonične kiseline (500 mL 6 M, 3.000 mmol, krajnji pH = 4 - 5). Dobijena čvrsta supstanca je filtrirana i kratko osušena na vazduhu. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu/etil acetatu (ukupna zapremina 75 mL), osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana da bi se dobio rastvor koji je prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta metanola (0 do 5% preko 30°C). min ) u dihlorometanu. Isparavanjem rastvarača dobija se racemski 8-[3-({dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3 ,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza- 1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 105) (102 mg, 36%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,51 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,58 (dd, J = 8,5 , 7,2 Hz, 1H), 7,05 (široki d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,97 (s, 1H), 6,92 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H) , 6,11 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,24 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 4,0-3,85 (m, 1H), 3,15 (br s, 1H), 2,95 (br d, J = 13,3 Hz, 1H), 2.75-2.65 (m, 1H), 2.12 (br s, 1H), 1.91 (t, J = 7.0 Hz, 1H), 1.89 - 1.67 (m, 2H), 1.67 - 1.41 (m, 9H ), 1,37-1,26 (m, 1H), 0,97-0,81 (m, 4H), 0,74-0,65 (m, 2H), 0,66-0,53 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 603,26276, nađeno 604,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,26 min (LC metoda B). Ovaj racemični materijal (97 mg) je podvrgnut hiralnom SFC razdvajanju (ChiralPak kolona AS-H (250 X 10 mm), 5 mm, 35 °C, mobilna faza 38% acetonitril:metanol (90:10 bez modifikatora), 62% ugljenik dioksid, 10 mL/min, 24 mg/mL u acetonitrilu:metanolu (90:10 bez modifikatora), zapremina injekcije 70 mL, 100 bara). Prvi enantiomer koji je eluiran je sakupljen i rastvarači su upareni, a ostatak je triturisan u dihlorometanu/heksanu. Uparavanjem se dobija 8-[3-({dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23 pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 106) (46 mg, 32%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,50 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,57 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,98 (široki d, J = 7,3 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,5 Hz , 1H), 6,10 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,23 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 3,99 - 3,82 (m, 1H), 3,15 (br s, 1H), 2,95 (br d, J = 13,4 Hz, 1H), 2,80 - 2,62 (m, 1H), 2,12 (br s, 1H), 1,91 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 1,89 - 1,68 (m, 2H), 1,68 - 1,44 ( m, 9H), 1,38 - 1,24 (m, 1H), 0,98-0,81 (m, 4H), 0,75-0,64 (m, 2H), 0,66-0,53 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 603,26276, nađeno 604,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,27 min (LC metoda E). Drugi enantiomer za eluiranje je sakupljen i rastvarači su upareni, a ostatak je triturisan u dihlorometanu/heksanu. Uparavanjem se dobija 8-[3-({dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 107) (43 mg, 31%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,50 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,57 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,98 (široki d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,5 Hz , 1H), 6,10 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,23 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 4,02 - 3,82 (m, 1H), 3,23 - 3,06 (m, 1H), 2,95 (br d , J = 13,1 Hz, 1H), 2,80 - 2,62 (m, 1H), 2,12 (br s, 1H), 1,91 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 1,88 - 1,68 (m, 2H), 1,68 - 1,42 (m, 9H), 1,39-1,24 (m, IH), 0,96-0,81 (m, 4H), 0,74-0,64 (m, 2H), 0,64-0,53 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 603,26276, nađeno 604,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,27 min (LC metoda B).
Primer 28: Priprema 12,12,20-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11 ,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-tri-on (enantiomer 1) (Jedinjenje 114) i 12,12,20-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heks-en-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 115)
Korak 1: 2-hloro-6-jodo-3-metil-piridin
[0580]
[0581] Rastvor 2-(dimetilamino)etanola (13,02 g, 14,7 mL, 146,1 mmol) u heksanu (120 mL) je ohlađen na -5°C i tretiran butillitijumom (132 mL 2,5 M u heksanu, 330,0 mmol) tokom perioda od 45 min. Balon je držan na temperaturi između -5 i 0 °C 1 h, a zatim ohlađen na -78 °C. Rastvor 2-hloro-3-metil-piridina (7 g, 54,87 mmol) u heksanu (70 mL 10 mL ispiranje) je dodat u kapima tokom 30 min i smeša je mešana na -78 °C tokom 2 h. Ukapavanjem je dodat rastvor joda (56 g, 11,36 mL, 220,6 mmol) u tetrahidrofuranu (200 mL) tokom perioda od oko 1 h i reakciona smeša je ostavljena da se postepeno zagreva do sobne temperature preko noć i. Smeša je ohlađena u ledenom kupatilu i polako ugašena vodom (250 mL). Prebačen u levak za odvajanje od 1000 mL i slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (2 X 250 mL) i organski slojevi su kombinovani, isprani vodom koja sadrži 10% vodenog rastvora natrijum tiosulfata (organski sloj postaje bistar), vodom (200 mL) i slanim rastvorom (200 mL). Organski sloj je osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu na koloni od 220 g, eluiranjem od 0% do 15% etil acetata u heptanima da bi se dobile čiste i mešane frakcije. Pomešane frakcije su dalje prečišć ene hromatografijom na silika gelu na koloni od 120 g, eluiranjem od 0% do 15% etil acetata u heptanima, zatim triturisane u heptanima, osušene i kombinovane do prethodnih čistih frakcija iz prve kolone silika gela da bi se dobilo 2- hloro-6-jodo-3-metil-piridin (9,7 g, 68%) kao bledo žuta čvrsta supstanca. 'H NMR (300 MHz, CDCl3) ppm 2,32 (s, 3H), 7,18 (d, J=7,6 Hz, IH), 7,56 (d, J=7,6 Hz, 1H). ESI-MS m/z izrač. 252,9155, nađeno 254,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,71 min (LC metoda H).
Korak 2: 2-etilheksil 3-[(6-hloro-5-metil-2-piridil)sulfanil]propanoat
[0582]
[0583] Rastvor 2-hloro-6-jodo-3-metil-piridina (15,4 g, 60,76 mmol) i diizopropiletilamina (15,73 g, 21,2 mL, 121,7 mmol) u toluenu (300 mL) je degaziran azotom za stvaranje mehurić a. 10 min. Dodati su tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (1,7 g, 1,856 mmol), ksanfos (2,1 g, 3,629 mmol) i 2-etilheksil 3-sulfanilpropanoat (14,6 g, 66,86 mmol) i smeša je zagrejana na 11° C preko noć i. Ostatak je koncentrovan pod sniženim pritiskom i prečiš ć en hromatografijom na koloni od silika gela na koloni od 220 g, eluiranjem od 0% do 20% etil acetata u heptanima da bi se dobio 2-etilheksil 3-[(6-hloro-5-metil-2-). piridil)sulfanil]propanoat (15,8 g, 76%) kao žuto ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) ppm 0,88 (t, J=7,3 Hz, 6H), 1,20-1,44 (m, 9H), 2,30 (s, 3H), 2,77 (t, J=7,0 Hz, 2H), 3,40 (t, J=6,9 Hz, 2H), 3,97-4,06 (m, 2H), 7,00 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,33 (d, J=7,9 Hz, IH). ESI-MS m/z izrač.343.912, nađeno 344.2 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 2,76 min (LC metod I).
Korak 3: 2-etilheksil 3-[(6-hloro-5-metil-2-piridil)sulfonil]propanoat
[0584]
m-
hloroperbenzoeva kiselina (21,6 g, 96,38 mmol) je polako dodata u rastvor 2-etilheksil 3-[(6-hloro-5-metil-2-piridil)sulfanil]propanoata (15,8 g, 45,94 mmol) u dihlorometanu ( 135 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na ovoj temperaturi 5 h. Dodat je etil acetat (500 mL) i dobijena smeša je isprana zasić enim rastvorom natrijum bikarbonata (250 mL), zatim 0,5 M rastvorom natrijum hidroksida (2 X 250 mL). Organska faza je osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika-gel koloni na koloni od 220 g, eluiranjem od 0% do 40% etil acetata u heptanima da bi se dobio 2-etilheksil 3-[(6-hloro-5-metil-2-piridil)sulfonil] propanoat (12,36 g, 72%) kao bistro ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) ppm 0,82-0,94 (m, 6H), 1,20-1,41 (m, 9H), 2,49 (s, 3H), 2,78-2,89 (m, 2H), 3,66-3,76 (m, 2H) ), 4,01 (dd, J=6,0, 1,9 Hz, 2H), 7,77-7,84 (m, IH), 7,89-7,96 (m, 1H). ESI-MS m/z izrač. 375.911, nađeno 376.1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,43 min (LC metod I).
Korak 4: 6-hloro-5-metil-piridin-2-sulfonamid
[0585]
[0586] Natrijum metoksid (7,1 g, 131,4 mmol) je dodat u rastvor 2-etilheksil 3-[(6-hloro-5-metil-2-piridil)sulfonil]propanoata (12,36 g, 32,88 mmol) u tetrahidrofuran (100 mL) i metanol (35 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana 4 h, a zatim je smeša koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio beli čvrsti intermedijer. Ovom intermedijeru je dodata hidroksilamin-O-sulfonska kiselina (7,4 g, 65,43 mmol) i natrijum acetat (8,1 g, 98,74 mmol) u vodi (240 mL) na 0 °C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noć i, a zatim ekstrahovana etil acetatom (2 X 300 mL). Organska faza je osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gel koloni na koloni od 120 g, eluiranjem od 20% do 80% etil acetata u heptanima da bi se dobio 6-hloro-5-metil-piridin-2-sulfonamid (5,9 g, 86%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, dimetil sulfoksid-d6) ppm 2,40 (s, 3H), 7,59 (s, 2H), 7,82 (d, J=7,6 Hz, 1H), 8,04 (d, J=7,6 Hz, 1H). ESI-MS m/z izrač.206,65, nađeno 207,1 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 1,44 min (LC metod I).
Korak 5: terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(3-metil-6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat:
[0587]
[0588] U mikrotalasnoj bočici od 5 mL, 6-hloro-5-metil-piridin-2-sulfonamid (460 mg, 2.226 mmol), terc-butil 4-(3-aminopropil)-2,2-dimetil-pirolidin- 1-karboksilat (380 mg, 1.482 mmol) i diizopropiletilamin (1.3 mL, 7.463 mmol) rastvoreni su u n-BuOH (3 mL). Bočica je zatvorena i mešana na 160 °C preko noć i. Smeša je filtrirana i direktno prečiš ć ena preparativnom HPLC reverzne faze (C18): 1-99% gradijent acetonitrila u modifikatoru voda/hlorovodonična kiselina (15 min) da bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[ (3-metil-6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (130 mg, 21%). ESI-MS m/z izrač.
426,23007, nađeno 427,36 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,36 min (LC metoda B).
Korak 6: terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-kar -bonil]sulfamoil]-3-metil-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat:
[0589]
[0590] U mikrotalasnoj bočici od 20 mL, 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (345 mg, 0,9182 mmol) i karbonil diimidazol (150 mg, 0,9251 mmol) su evakuisani/napunjeni azotom (3 puta). Dodat je suvi tetrahidrofuran (4 mL) i smeša je mešana 90 min na 50 °C. Zatim, rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(3-metil-6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilata (260 mg, 0,6095 mmol) i dodat je 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (228 mL, 1,525 mmol) u tetrahidrofuranu (4 mL) i smeša je mešana na 50 °C preko noć i. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa 1M vodenim rastvorom limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organski ekstrakt je osušen, uparen i prečišć en preparativnom HPLC reverzne faze (C18): 1-99% gradijent acetonitrila u modifikatoru voda/hlorovodonična kiselina (15 min) da bi se dobio terc-butil 4-[3-[[6-[[ 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3metil-2-piridil]amino]pro-pil ]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (290 mg, 61%) ESI-MS m/z izrač. 783,27924, nađeno 784,31 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,42 min (LC metoda B).
Korak 7: 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propilamino]-5-metil-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[ 1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (hidrohloridna so):
[0591]
[0592] Rastvor terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin- 3-karbonil]sulfamoil]-3-metil-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (290 mg, 0,3698 mmol) u dihlorometanu (6 mL) je tretiran hlorovodoničnom kiselinom (4M u dioksanu) (3 mL 4 M, 12,00 mmol) i mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Smeša je uparena do suva pod sniženim pritiskom da bi se dobio2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propilamino]-5-metil-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (hidrohloridna so) (265 mg, 99%). Proizvod je upotrebljen u sledeć em koraku bez dodatnog prečiš ć avanja.
Korak 8: 12,12,20-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18 ,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion:
[0593]
[0594] U mikrotalasnoj bočici od 5 mL, smeša 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propilamino]-5-metil-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (hidrohloridna so) (265 mg), kalijum karbonat (260 mg, 1,881 mmol), cezijum fluorid (87 mg, 0,5727 mmol) i 4A MS (300 mg) su evakuisani/napunjeni azotom (3 puta). Dodat je dimetil sulfoksid (6 mL) i smeša je mešana na 140 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana i prečišć ena preparativnom HPLC reverzne faze (C18): 1-99% gradijent acetonitrila u modifikatoru voda/hlorovodonična kiselina (15 min) da bi se dobio 12,12,20-trimetil-8-(3-). {2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza - 1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (100 mg, 42%). ESI-MS mlz izrač.
647,2502, nađeno 648,31 (M+1)+
Korak 9: 12,12,20-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18 ,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 114) i 12,12,20-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18 ,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111, 14.05,10] tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 115)
[0595]
[0596] Racemski 12,12,20-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11, 18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (100 mg, 0,07052 mmol) je podvrgnut hiralnoj separaciji pomoć u SFC hromatografije koriste ć i ChiralPak AS-H (250 X 10 mm, veličina čestica 5 mm) sa 18% metanola (20 mM NH3)/82% mobilnom fazom ugljen-dioksida pri 10 mL/min tokom 8,0 min (zapremina injekcije = 70 mL rastvora od 24 mg/mL u metanolu/dimetil sulfoksidu (90:10)) dajuć i kao prvi enantiomer koji se eluira, 12,12,20-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10) ,6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 114) (25,8 mg, 10%);<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,19 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,42 (d , J = 7,3 Hz, 1H), 7,24-7,27 (m, 1H), 5,90 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,56 (s, 1H), 4,39 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,93 (s, 1H), 3,44 - 3,32 (m, 1H), 3,23 (d, J = 19,8 Hz, 1H), 3,06 (t, J = 9,3 Hz, 1H), 2,72 - 2,53 (m, 1H), 2,14 ( s, 3H), 2,09 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,25 (s, 2H), 1,05 - 0,99 (m, 2H), 0,81 (dd, J = 12,6, 6,6 Hz, 1H), 0,74 (t , J = 3,1 Hz, 2H), dve metil grupe i jedna C-H preklapaju se sa zaostalom vodom; ESI-MS m/z izrač. 647,2502, nađeno 648,34 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,25 min. (LC metoda A) i kao drugi enantiomer za eluiranje, 12,12,20-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il) -2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2 ,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 115) (24,7 mg, 25%);<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,19 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,09 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,28 (s, 1H), 5,91 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,58 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 4,39 (t, J = 7,2 Hz , 2H), 3,97 (d, J = 5,8 Hz, IH), 3,43 - 3,31 (m, 1H), 3,28 - 3,15 (m, 1H), 3,06 (t, J = 9,8 Hz, 1H), 2,65 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 2,14 (s, 3H), 2,09 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,25 (s, 2H), 1,04 - 1,00 (m, 2H), 0,82 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 0,74 (t, J = 3,2 Hz, 2H). Dve Me-grupe i jedna C-H preklapaju se sa zaostalom vodom; ESI-MS m/z izrač.
647,2502, nađeno 648,31 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,85 min (LC metoda A).
Primer 29: Priprema 8-[3-({dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9, 11,19,21-pentaazatetraciklo [18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksan-2,2,4-tri-on (enantiomer 1 ) (Jedinjenje 120) i 8-[3-({dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,21-pentaazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23), 5,7,9,20(24),21-heks-en-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 121)
Korak 1: terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-[(5-sulfamoil-2-piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilat
[0598]
[0599] Balon sa okruglim dnom od 100 mL je napunjen pod azotom sa terc-butil 4-(4-aminobutil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatom (1,33 g, 4,918 mmol), 6-hloropiridin- 3-sulfonamid (945 mg, 4,906 mmol), anhidrovani dimetil sulfoksid (15 mL) i kalijum karbonat (695 mg, 5,029 mmol) (sveže samleveni u malteru) i smeša je mešana na 100°C tokom 20 h. Posle hlađenja, reakcija je razblažena etil acetatom (50 mL) i sipana u zasić eni vodeni rastvor amonijum hlorida (50 mL). Dve faze su bile razdvojene. Vodena faza je ekstrahovana etil acetatom (20 mL) i kombinovani ekstrakti su isprani slanim rastvorom (40 mL). Posle sušenja preko natrijum sulfata i uparavanja, ostatak je prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu (80 g kolona) korišć enjem gradijenta etil acetata (0 do 100% tokom 30 min) u heksanu. Uparavanje rastvarača dalo je terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-[(5-sulfamoil-2-piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilat (1,165 g, 56%) kao prljavo beli čvrsta pena. ESI-MS m/z izrač.
426,23007, nađeno 427,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,4 min (LC metoda B).
Korak 2: terc-butil 4-[4-[[5-[[2-hloro-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-ugljenik -il]sulfamoil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0600]
[0601] Balon od 100 mL je napunjen pod azotom sa 2-hloro-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilnom kiselinom (355 mg, 1,027 mmol) i anhidrovani tetrahidrofuran (5 mL). Dodat je karbonil diimidazol (183 mg, 1,129 mmol) i smeša je mešana pod azotom na sobnoj temperaturi 3,5 h. U posebnoj bočici od 20 mL koja se održava u atmosferi azota, rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-[(5-sulfamoil-2-piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilata ( Pripremljeno je 438 mg, 1,027 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (2,5 mL) i dodato preko šprica u rastvor aktiviranog estra. Dodat je 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (0,35 mL, 2,340 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 19 h. Rastvarač je uparen, a ostatak je tretiran vodom (50 mL), etil acetatom (50 mL) i hlorovodoničnom kiselinom (1 mL od 6 M, 6.000 mmol). Dve faze su bile razdvojene. Vodena faza je dalje ekstrahovana etil acetatom (25 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (30 mL), osušeni preko natrijum sulfata i rastvarači su upareni. Proizvod je rastvoren u dihlorometanu i prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu (40 g zlatne kolone) korišć enjem gradijenta etil acetata (0 do 100% tokom 30 min) u heksanu. Frakcije čistih proizvoda su sakupljene, a rastvarači upareni da bi se dobio terc-butil 4-[4-[[5-[[2-hloro-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (467 mg, 60%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 753,30756, nađeno 754,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,34 min (LC metoda B).
Korak 3: 2-hloro-N-[[6-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butilamino]-3-piridil]sulfonil]-6-[3-(dispiro [2.0.2.1]hep - tan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so).
[0602]
[0603] Balon sa okruglim dnom od 100 mL je napunjen terc-butil 4-[4-[[5-[[2-hloro-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-metoksi) pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil] -2-piridil] amino]butil] -2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (467 mg, 0,6191 mmol), dihlorometan (6 mL) i hlorovodonična voda kiselina (0,63 mL 4 M, 2,520 mmol) (4 M u dioksanu). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Dodata je dodatna količina hlorovodonične kiseline (0.5 mL 4 M, 2.000 mmol) i smeša je mešana još h. Isparljive materije su uklonjene isparavanjem pod vakuumom. Ostatak je triturisan sa dihlorometanom/heksanom i rastvarači su upareni. Ova operacija je ponavljana dok se ne dobije bela čvrsta supstanca. Sušenjem pod vakuumom dobija se 2-hloro-N-[[6-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butilamino]-3-piridil]sulfonil]-6-[3-(dispiro[2.0.2.1] heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so) (420 mg, 93%) kao bela čvrsta supstanca. Proizvod je korišć en za slede ć i korak bez daljeg prečišć avanja. ESI-MS m/z izrač. 653,2551, nađeno 654,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,58 min (LC metoda B).
Korak 4: 8-[3-({Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11, 19,21-pentaazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) ( Jedinjenje
120) i 8-[3-({dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,21-pentaazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 121)
[0604]
[0605] Balon sa okruglim dnom od 100 mL opremljen magnetnom mešalicom je napunjen pod azotom sa 2-hloro-N-[[6-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butilamino]-3-piridil] sulfonil]-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so) (420 mg, 0,5776 mmol), anhidrovani NMP (5 mL) , kalijum karbonat (343 mg, 2,482 mmol) (sveže mleven u malteru) i cezijum fluorid (89 mg, 0,5859 mmol). Smeša je snažno mešana u suvom kupatilu na 145 °C pod azotom tokom 13 h, a zatim na 165 °C tokom 8 h. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je razblažena vodom (30 mL) i zakiseljena je polaganim dodavanjem hlorovodonične kiseline (600 mL 6 M, 3.600 mmol) (konačni pH = 4-5). Dobijena čvrsta supstanca je filtrirana i kratko osušena na vazduhu. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometan/etil acetatu (ukupna zapremina 50 mL), osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana da bi se dobio rastvor koji je prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu (zlatna kolona 24 g) korišć enjem gradijenta metanola ( 0 do 5% tokom 30 min) u dihlorometanu. Uparavanje rastvarača, trituracija u dihlorometanu/heksanu i uparavanje rastvarača ponovo su dali racemski proizvod (79 mg, 22%) kao belu čvrstu supstancu. Ovaj racemski materijal je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji (ChiralPak AS-H (250 X 10 mm), 5 mM kolona; mobilna faza 38% acetonitril/metanol (90:10, bez modifikatora), 62% ugljen-dioksid, 10 mL/min koncentracija 24 mg/mL u acetonitrilu/metanolu/dimetilsulfoksidu (80:10:10; bez modifikatora); zapremina ubrizgavanja = 70 mL, 100 bara). Prvi enantiomer koji je eluiran bio je 8-[3-({dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,21-pentaazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 120) (25 mg, 14%), bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,13 (široki s, 1H, zamenljiv sa D2O), 8,50 (br s, 1H), 8,17 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,88 - 7,70 (m, 2H), 7,34 (br s, 1H, eksh.), 6,90 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,57 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 6,10 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,23 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 2,54 (s, 4H), 2,08 (br s, 2H), 1,91 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 1,73 (d, J = 10,4 Hz, 1H) , 1,57-1,53 (m, 9H), 1,34-1,15 (m, 1H), 1,05 (br s, 2H), 0,95-0,83 (m, 4H), 0,75-0,64 (m, 2H), 0,59 (d, J = 9,0 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač. 617,27844, nađeno 618,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,15 min (LC metoda B). Drugi enantiomer koji je eluiran bio je 8-[3-({dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,21-pentaazatetraciklo [18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 121) (24 mg, 13%), bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,11 (s, 1H), 8,51 (široki s, 1H), 8,17 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 8,3 Hz, preklapa se sa širok s, 2H), 7,33 (br s, 1H), 6,90 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,57 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 6,10 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,23 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 2,62 - 2,49 (m, preklapa se sa signalom rastvarača, verovatno 4H), 2,08 (br s, 2H), 1,91 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 1,72 (br s, 1H), 1,54 (m, 9H), 1,24 (br s, 1H), 1,05 (br s, 2H), 0,92 - 0,82 (m, 4H), 0,75 - 0,64 (m, 2H), 0,59 (d, J = 9,1 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač.617,27844, nađeno 618,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,15 min (LC metoda B).
Primer 30: Priprema 8-[3-({dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9, 11,19,24-pentaazatetraciklo [18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,20(24),21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 124) i 8-[3-({Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,20(24),21-heks-an-2,2,4 -trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 125)
[0606]
Korak 1: terc-butil 2,2-dimetil-5-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat
[0607]
[0608] U rastvor terc-butil 5-(3-aminopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata (500 mg, 1.950 mmol) u N,N-dimetilformamidu (5 mL) dodat je 6- fluoropiridin-2-sulfonamid (343, 1.950 mmol), a zatim kalijum karbonat (808 mg, 5.850 mmol). Balon je zatvoren pregradom i zagrevan na 70 °C pod balonom azota u uljnom kupatilu 18 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, zatim razblažena etil acetatom i isprana rastvorom soli. Organski slojevi su razdvojeni, sušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni, a zatim prečišć eni hromatografijom na silika gelu (kolona od 80 grama) koriš ć enjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-5- [3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (428 mg, 53%) kao bela penasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,51 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,51 (s , 1H), 5,05 (s, 2H), 3,90 (s, 1H), 3,57 - 3,42 (m, 1H), 3,32 (d, J = 9,8 Hz, 2H), 1,91 (s, 2H), 1,77 (d, J = 30,5 Hz, IH), 1,62 (d, J = 2,9 Hz, 3H), 1,48 (s, 10H), 1,27 (t, J = 3,6 Hz, 3H). ESI-MS m/z izrač.412,21442, nađeno 413,25 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,65 min (LC metoda B).
Korak 2: terc-butil 5-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-ugljenik -il]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0609]
[0610] Balon od 100 mL je napunjen pod azotom sa 2-hloro-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilnom kiselinom (327 mg, 0,9457 mmol) i anhidrovani tetrahidrofuran (5 mL). Dodat je karbonil diimidazol (168 mg, 1.036 mmol) i smeša je mešana pod azotom na sobnoj temperaturi 2 h (potpuna aktivacija pomoć u LCMS alikvota u sek-butil aminu). U posebnoj bočici od 20 mL koja se održava u atmosferi azota, rastvor terc-butil 2,2-dimetil-5-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilata (390 mg , 0,9453 mmol) u bezvodnom tetrahidrofuranu (2,5 mL) je pripremljen i dodat preko šprica u rastvor aktiviranog estra. Dodat je 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (0,32 mL, 2,140 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 13 h. Rastvarač je uparen, a ostatak je tretiran vodom (50 mL), etil acetatom (50 mL) i hlorovodoničnom kiselinom (1 mL od 6 M, 6.000 mmol). Dve faze su bile razdvojene. Vodena faza je dalje ekstrahovana etil acetatom (25 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (30 mL), osušeni preko natrijum sulfata i rastvarači su upareni. Proizvod je rastvoren u dihlorometanu i prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu (40 g zlatne kolone) korišć enjem gradijenta etil acetata (0 do 100% tokom 30 min) u heksanu. Čiste frakcije su sakupljene i rastvarači su upareni da bi se dobio terc-butil 5-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (435 mg, 62%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 739,2919, nađeno 740,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,47 min (LC metoda B).
Korak 3: 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(dispiro[2.0.2.1 ]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so).
[0611]
[0612] Balon sa okruglim dnom od 100 mL je napunjen terc-butil 5-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-metoksi) pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (435 mg, 0,5876 mmol), dihlorometan (6 mL) i hlorovodonična voda kiselina (0,6 mL 4 M, 2,400 mmol) (4 M u dioksanu). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Dodata je dodatna količina hlorovodonične kiseline (500 mL 4 M, 2.000 mmol) i smeša je mešana još h. Isparljive materije su uklonjene isparavanjem pod vakuumom. Ostatak je triturisan sa dihlorometanom/heksanom i rastvarači su upareni. Operacija se ponavlja sve dok se ne dobije bela čvrsta supstanca. Sušenjem pod vakuumom dobija se 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)propilamino]-2-piridil] sulfonil]-6-[3-(dispiro[2.0.2.1] heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so) (439 mg, 105%) kao bela čvrsta supstanca. Proizvod je korišć en za slede ć i korak bez daljeg prečišć avanja. ESI-MS m/z izrač. 639,23944, nađeno 640,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,7 min (LC metoda B).
Korak 4: 8-[3-({Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11, 19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,20(24),21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 124) i 8-[3-({Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3, 9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,20(24),21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 125)
[0613]
[0614] Boca sa okruglim dnom od 100 mL opremljena magnetnom mešalicom je napunjena pod azotom sa 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)propilaminol-2-piridil] sulfonil ]-6-[3-(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilmetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so) (439 mg, 0,6156 mmol), anhidrovani NMP (5 mL), kalijum karbonat (410 mg, 2,967 mmol) (sveže mleven u malteru) i cezijum fluorid (94,82 mg, 23,04 mL, 0,6242 mmol). Smeša je snažno mešana u suvom kupatilu na 145 °C pod azotom tokom 46 h, a zatim na 155 °C tokom 14 h. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je razblažena vodom (30 mL) i zakiseljena je polaganim dodavanjem hlorovodonične kiseline (500 mL 6 M, 3.000 mmol) (konačni pH = 4 - 5). Dobijena čvrsta supstanca je filtrirana i kratko osušena na vazduhu. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu (ukupna zapremina 50 mL), osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana, a zatim prečišć ena fleš hromatografijom na silika gelu (4 g kolona) korišć enjem gradijenta metanola (0 do 5% tokom 30 min) u dihlorometan. Uparavanje rastvarača, trituracija u dihlorometanu/heksanu i uparavanje rastvarača ponovo su dali očekivani racemski proizvod u vidu beličaste čvrste supstance (154 mg, 41%). Racemični materijal je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji (ChiralPak IG kolona (250 Ks 21,2 mm), 5 mm, mobilna faza 38% acetonitril:metanol (90:10 bez modifikatora), 62% ugljen dioksid, 70 mL/min, 30 mg/ mL u acetonitril:metanolu (90:10 bez modifikatora), injekciona zapremina 500 mL, 100 bara). Posle uparavanja rastvarača, ostatak je triturisan u dihlorometanu/heksanu i rastvarači su uklonjeni. Prvi enantiomer koji je eluiran bio je 8-[3-({dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,20(24),21-heksan-2,2,4- trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 124) (62 mg, 33%) izolovan kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,70 (široki s, 1H), 8,21 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,00 (široki d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,58 (dd, J = 8,5, 7,2 Hz, 1H), 7,28 (br s, 1H), 7,08 (br s, 1H), 7,03 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,12 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,24 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 3,71 (br s, 2H), 3,11 (br s, 1H), 2,00 - 1,80 (m, 3), 1,73 ( br s, 2H), 1,63 - 1,43 (m, 5H), 1,42 - 1,31 (m, 4H), 1,09 - 0,88 (m, 1H), 0,94 - 0,80 (m, 4H), 0,76 - 0,64 (m, 2H) 0,66-0,53 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 603,26276, nađeno 604,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,95 min (LC metoda B). Drugi enantiomer koji je eluiran bio je 8-[3-({dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}metoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,20(24),21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 125) (54 mg, 28%) izolovan kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,67 (široki s, 1H), 8,21 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,00 (br d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,58 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,37 - 7,21 (m, 1H), 7,08 (br s, 1H), 7,03 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,12 ( d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,24 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 3,71 (br s, 2H), 3,10 (br s, 1H), 2,02 - 1,79 (m, 3H), 1,73 (s , 2H), 1,64 - 1,45 (m, 5H), 1,42 - 1,28 (m, 4H), 0,99 (br s, 1H), 0,94 - 0,77 (m, 4H), 0,77 - 0,65 (m, 2H), 0,64 - 0,54 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.603,26276, nađeno 604,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,96 min (LC metoda B).
Primer 31: Priprema (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23 -pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,101 tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 126) i (14S) -8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05 ,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 127)
[0615]
Korak 1: (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetra -ciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 126) i (14S)- 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111, 14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 127)
[0616]
[0617](14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23 pentaazatetracik -lo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion je podvrgnut hiralnom SFC razdvajanju (separaciji (ChiralCel OJ -H (250 Ks 10 mm), 5 mM kolona; mobilna faza 25% acetonitril/metanol (90:10, bez modifikatora), 75% ugljendioksid, 10 mL/min; koncentracija 24 mg/mL u acetonitrilu/metanolu (90 :10); zapremina ubrizgavanja 70 mL, 100 bara).
[0618] Za čisto sakupljene frakcije, rastvarači su upareni, a ostatak razmuć en u dihlorometanu/heksanu. Prvi dijastereomer koji je eluiran bio je (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18, 23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 126) (19 mg, 36%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,42 (s, 1H), 7,68 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,62 - 7,46 (m, 2H), 7,03 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 7,62 - 7,46 (m, 2H), 7,03 (d, J = 7,0 Hz, 1H). ), 6,97 (široki s, 1H), 6,70 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 4,04 (t, J = 9,3 Hz, 1H), 3,99 - 3,83 (m, 1H), 3,74 (k, J = 10,3 , 9,7 Hz, 1H), 3,10 (br s, 1H), 2,94 (d, J = 13,5 Hz, 1H), 2,76 - 2,63 (m, 1H), 2,24 (dd, J = 17,4, 7,7 Hz, 1H), 2,10 (br s, 1H), 1,88-1,64 (m, 4H), 1,65-1,40 (m, 9H), 1,40-1,13 (m, 4H), 0,88 (s, 9H). ESI-MS m/z izrač.
582,2988, nađeno 583,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,13 min (LC metoda B). Drugi dijastereomer koji je eluiran bio je (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18, 23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 127) (17 mg, 32%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,42 (s, 1H), 7,68 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,61 - 7,49 (m, 2H), 7,04 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 1H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) . ), 6,97 (široki d, J = 7,0 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 3,96-3,79 (m, 3H), 3,09 (br s, 1H), 2,93 (br d, J = 13,3 Hz, 1H), 2,75 -2,55 (m, 2H), 2,30 - 2,18 (m, 1H), 2,09 (br s, 1H), 1,88 - 1,69 (m, 3H), 1,69 - 1,41 (m, 10H) , 1,34-1,15 (m, 4H), 0,88 (s, 9H). ESI-MS m/z izrač.582,2988, nađeno 583,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,14 min (LC metoda B).
Primer 32: Priprema 12,12,22-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-tri-on (Jedinjenje 129)
[0619]
Korak 1: 2-benzilsulfanil-6-hloro-3-metil-piridin
[0620]
[0621] 2,6-dihloro-3-metil-piridin (5,05 g, 31,17 mmol) i fenilmetanetiol (3,871 g, 3,659 mL, 31,17 mmol) rastvoreni su u tetrahidrofuranu (50,50 mL tertl3-but. 2 M, 62,34 mmol). Reakcija je mešana 16 h i podeljena između vode i etil acetata. Organski slojevi su odvojeni, isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni. Sirovi materijal je korišć en bez daljeg prečiš ć avanja, 2-benzilsulfanil-6-hloro-3-metil-piridin (7,15 g, 92%). ESI-MS m/z izrač. 249,0379, nađeno 250,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,81 min (LC metoda A).
Korak 2: 6-hloro-3-metil-piridin-2-sulfonamid
[0623] Dvofazna smeša 2-benzilsulfanil-6-hloro-3-metil-piridina (7,15 g, 28,63 mmol) u dihlorometanu (42,90 mL), vodi (14,30 mL) i hlorovodonične kiseline (2,863 mL od 1 M 2,863 mmol) je ohlađeno u ledenom kupatilu sa slanom vodom. (dodata je hlorovodonična kiselina da bi se izbegla inače odložena egzoterma nakon dodavanja Cl2). Cl2(8,119 g, 114,5 mmol) je propušten kroz rastvor (3 puta u intervalima od 2 min) tokom h. Reakcija je mešana na 0 °C. Posle 1,5 h, reakcija je dodata u kapima u rastvor NH4OH ohlađen u ledenom kupatilu (43,01 mL 28% v/v, 343,6 mmol). Reakcija je zagrejana do sobne temperature i mešana 15 min. Reakciona smeša je podeljena između etil acetata (60 mL) i vode (20 mL). Organski slojevi su odvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (2 3 60 mL). Organski slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni. Dobijena čvrsta supstanca je triturisana sa dihlorometanom (30 mL) i filtrirana. Čvrsta supstanca je isprana sa minimalnom količinom dihlorometana da bi se dobila čvrsta supstanca bele boje, 6-hloro-3-metilpiridin-2-sulfonamid (2,95 g, 50%). 1H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7,94 (d, J = 8,1, 0,9 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,63 (s, 2H), 2,55 (s, 3H ). ESI-MS m/z izrač.205,99167, nađeno 207,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,3 min (LC metoda A).
Korak 3: terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(5-metil-6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat
[0624]
[0625] U mikrotalasnu reakcionu bočicu pročišć enu azotom dodat je 6-hloro-3-metilpiridin-2-sulfonamid (1,12 g, 5,420 mmol), terc-butil 4-(3-aminopropil)-2,2-dimetil-pirolidin- 1-karboksilat (1 g, 3.900 mmol)), diizopropiletilamin (2.520 g, 3.396 mL, 19.50 mmol) i n-BuOH (11 mL). Bočica je zatvorena i ostavljena da se meša na 125 °C tokom 20 h. Rastvarač je uklonjen in vacuo i ostatak je rastvoren u dihlorometanu i ispran vodom. Organski ekstrakt je osušen preko natrijum sulfata, uparen i prečišć en hromatografijom na silika gelu (gradijent od 0% do 85% etil acetata u heksanu) da bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(5-metil- 6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (360 mg, 22%). ESI-MS m/z izrač. 426,23007, nađeno 427,29 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,67 min (LC metoda A).
Korak 4: terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-kar -bonil]sulfamoil]-5-metil-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0627] 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (317,1 mg, 0,8439 mmol) i karbonil diimidazol (136,8 mg , 0,8439 mmol) su kombinovani u anhidrovanom tetrahidrofuranu (8,5 mL) i mešani 90 min na 50 °C. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(5-metil-6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil] pirolidin-1-karboksilat (360 mg, 0,8439 mmol), a zatim sa 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-enom (128,5 mg, 126,2 mL, 0,8439 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 15 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa 1M rastvorom limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni i zatim prečišć eni silika gelom koriš ć enjem gradijenta od 100% heksana do 75% etil acetata u heksanu da bi se dobio kao prljavo bela čvrsta supstanca terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6- [3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-5-metil-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil- pirolidin-1-karboksilat (326 mg, 49%). ESI-MS m/z izrač. 783,27924, nađeno 784,42 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,89 min (LC metoda A).
Korak 5: 12,12,22-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18 ,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 129)
[0628]
[0629] Deo A: terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin- 3-karbonil]sulfamoil]-5-metil-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (186 mg, 0,2372 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (3 mL) i smeši je dodata hlorovodonična kiselina (4M u dioksanu) (2,2 mL 4 M, 8,800 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Koncentrovana smeša do suva pod sniženim pritiskom i preneta direktno na sledeć i korak.
[0630] Deo B: Kombinovani materijal iz dela A i kalijum karbonata (197 mg, 1,425 mmol), cezijum fluorida (60 mg, 0,3950 mmol), 3 A molekularna sita i dimetil sulfoksida (3 mL) u bočici, pročišć enoj azotom , zatvoren, zagrejan na 140 °C i mešan 16 h. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu, filtrirana je i zatim prečišć ena preparativnom HPLC hromatografijom reverzne faze koristeć i C18 kolonu i 30-99 A1-B1 gradijent (acetonitril-voda 5 mM hlorovodonična kiselina 30 min, Ks 2 injekcije) da bi se kao bela čvrsta supstanca dobio 12,12,22-trimetil-8-(3-{2-[1-(tri-fluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6 -tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tet-racosa-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2 ,4-trion (Jedinjenje 129) (53 mg, 34%). ESI-MS m/z izrač.647,2502, nađeno 648,31 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,29 min (LC metoda B).
Primer 33: Priprema 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,21-pentaazatetraciklo[18.2 .2.111,14.05,10] pentakoza-1(22),5,7,9,20,23-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 130)
[0631]
Korak 1: terc-butil 4-[4-[[5-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]- 2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0632]
[0633] 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (356,3 mg, 0,9846 mmol) i karbonil diimidazol (159,7 mg, 0,9846 mmol) su kombinovani u tetrahidrofuranu (5 mL) i mešano na sobnoj temperaturi 16 h. Zatim terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-[(5-sulfamoil-2-piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilat (350 mg, 0,8205 mmol) i 1,8-diazabiciklo[5.4. Dodat je 0]undec-7-en (187,4 mg, 184,1 mL, 1,231 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 6 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasić enim vodenim rastvorom amonijum hlorida, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni, a zatim prečišć eni hromatografijom na silika gelu koristeć i gradijent od 100% dihlorometana do 20% metanola u dihlorometanu da bi se dobio terc-butil 4-[4-[[5-[[2]-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1 -karboksilat (423 mg, 67%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,70 (s, 1H), 8,27 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 8,9 Hz , 1H), 7,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,41 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 5,95 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 5,48 (brs, 1H), 4,41 (t , J = 6,8 Hz, 2H), 3,64 (dt, J = 40,0, 9,2 Hz, 1H), 3,34 (s, 2H), 2,85 (k, J = 11,1 Hz, 1H), 2,06 (d, J = 14,5 Hz , 1H), 1,96 (k, J = 6,8 Hz, 2H), 1,86 (t, J = 9,4 Hz, 1H), 1,63 (s, 2H), 1,44 (d, J = 6,4 Hz, 10H), 1,36 (d , J = 5,8 Hz, 7H), 1,27 (d, J = 18,6 Hz, 3H), 0,65 (tk, J = 8,3, 5,0, 4,1 Hz, 2H), 0,51 - 0,36 (m, 4H), 0,35 - 0,26 m, 1H), 0,24-0,14 (m, 2H), 0,13-0,04 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.769,3388, nađeno 770,45 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,91 min (LC metoda A).
Korak 2: 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,21-pentaazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(22),5,7,9,20,23-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 130)
[0634]
[0635] Rastvor terc-butil 4-[4-[[5-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfa- moil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (415 mg, 0,5387 mmol) u dihlorometanu (2 mL) i trifluorosirć etnoj kiselini (614,2 mg, 412,2 mL, 5,38) mešano na sobnoj temperaturi 4 h. Rastvarači su zatim upareni. Ostatak je rastvoren u etil acetatu, ispran sa 2 mL zasić enog rastvora natrijum bikarbonata i rastvarač je uparen daju ć i ostatak koji je rastvoren u dimetil sulfoksidu (5 mL). Dodata su 3 A molekularna sita i smeša je mešana 10 min. Zatim su dodati cezijum fluorid (245,5 mg, 1,616 mmol) i kalijum karbonat (223,3 mg, 1,616 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 160 °C tokom 24 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Vhatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišć en HPLC-MS metodom reverzne faze koriš ć enjem dvostrukog gradijenta od 50-90% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilna faza A = voda (0,05% hlorovodonične kiseline), mobilna faza B = acetonitril da bi se dobio 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,21-pentaazatetraciklo [18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(22),5,7,9,20,23-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 130) (52 mg, 15%) kao bela čvrsta supstanca 1H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,65 (s, 1H), 8,18 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 8,4 Hz, 1H ), 7,01 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,52 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 5,89 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 5,24 (s, 1H), 4,41 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,36 (s, 1H), 2,69 (s, 1H), 2,23 (s, 1H), 2,06 (brs, 1H), 1,97 (k, J = 6,8 Hz, 2H), 1,78 - 1,71 (m, 3H), 1,66 (brs, 1H), 1,63 (brs, 1H), 1,60 (s, 3H), 1,58 (s, 3H), 1,20 (brs, 2H), 1,00 (brs, 2H), 0,66 ( tk, J = 8,7, 5,0, 4,3 Hz, 2H), 0,50 - 0,38 (m, 4H), 0,32 (dd, J = 9,0, 6,9 Hz, IH), 0,23 - 0,17 (m, 2H), 0,11 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 633,30975, nađeno 634,22 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,66 min (LC metoda B).
Primer 34: Priprema 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3 .1.05,10.011,15] tetrakoza-1(23),5(10),6,8,20(24),21-heksen-2,2,4-trion (Jedinjenje 131)
Korak 1: terc-butil 5-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]- 2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0637]
[0638] 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (300 mg, 0,8291 mmol) i di(imidazol-1-il)metanon (117,9) mg, 0,7272 mmol) su kombinovani u tetrahidrofuranu (2,5 mL) i mešani na sobnoj temperaturi 16 h. Zatim, terc-butil 2,2-dimetil-5-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (250,0 mg, 0,6060 mmol) i 1,8-diazabiciklo[5,4 .0]undec-7-en (138.4 mg, 136.0 mL, 0.9090 mmol) je dodat i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 4 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasić enim rastvorom amonijum hlorida, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni. Dobijeni smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu korišć enjem gradijenta od 100% dihlorometana do 20% metanola u dihlorometanu da bi se dobio terc-butil 5-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(3) ,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (356 mg, 78%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 755,3232, nađeno 756,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,63 min (LC metoda A).
Korak 2: 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3. 1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,20(24),21-heksen-2,2,4-trion (Jedinjenje 131)
[0639]
[0640] Rastvor terc-butil 5-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfa- moil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (356 mg, 0,4707 mmol) u dihlorometanu (2 mL) i trifluorosirć etnoj kiselini (536,7 mg, 360,2 mL, 4,707 mmol) mešano na sobnoj temperaturi 4 h. Rastvarači su zatim upareni. Ostatak je rastvoren u etil acetatu, ispran sa 2 mL zasić enog vodenog rastvora natrijum bikarbonata, a rastvarač je uparen i osušen pod visokim vakuumom. Dobijeni ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (5 mL) i dodata su 3 A molekularna sita i reakciona smeša je mešana 10 min. Zatim su dodati cezijum fluorid (214,5 mg, 1,412 mmol) i kalijum karbonat (195,1 mg, 1,412 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 150 °C preko noć i. Reakciona smeša je filtrirana kroz Vhatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišć en HPLC-MS metodom reverzne faze koriš ć enjem dvostrukog gradijenta od 50-90% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilna faza A = voda (0,05% hlorovodonične kiseline), mobilna faza B = acetonitril) da bi se dobio 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,20(24),21-heksan-2,2,4- trion (Jedinjenje 131) (115 mg, 39%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ (s, 1H), 8,47 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,26 - 8,06 (m, 1H), 7,66 (d, J = 15,1 Hz, 1H), 7,51 - 7,40 (m, 2H), 6,45 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 5,95 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,82 (s, 1H), 4,43 (t, J = 6,8 Hz, 2H ), 4,16 (d, J = 72,4 Hz, 1H), 3,34 (s, 1H), 3,09 (s, 1H), 2,38 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 1,97 (k, J = 6,8 Hz, 2H ), 1,65 (d, J = 42,4 Hz, 8H), 1,15 (s, 2H), 0,95 (s, 1H), 0,66 (kt, J = 8,3, 5,0 Hz, 2H), 0,53 - 0,37 (m, 4H) , 0,32 (tt, J = 9,0, 6,8 Hz, IH), 0,23 - 0,16 (m, 2H), 0,09 (dtd, J = 9,0, 4,9, 3,4 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač. 619,29407, nađeno 620,17 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,61 min (LC metoda B).
Primer 35: Priprema 12,12,19-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropiletoksi-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,19, 21-pentaazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 132)
[0641]
Korak 1: terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(metilamino)butil]pirolidin-1-karboksilat
[0642]
[0643] U balon sa okruglim dnom od 50 mL napunjen terc-butil 4-(4-aminobutil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatom (850 mg, 3.143 mmol) u dihlorometanu (15 mL) dodata je sirć etna kiselina anhidrid (400 mL, 4.239 mmol) a zatim trietilamin (1000 mL, 7.175 mmol). Posuda je zatvorena i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 45 min. Reakcija je ugašena zasić enim vodenim rastvorom natrijum karbonata (∼ 10 mL) i ekstrahovana sa dihlorometanom (3 X -15 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani zasić enim vodenim rastvorom natrijum karbonata (2 X -10 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani in vacuo dajuć i bistro ulje koje je sipano u balon sa okruglim dnom od 100 mL i N,N-dimetilformamidom (dodato je 15 mL), a zatim natrijum hidrid (200 mg 60% v/v, 5.000 mmol) i reakciona smeša je mešana 30 min na sobnoj temperaturi. Dodat je jodometan (800 mL, 12,85 mmol), posuda je zatvorena i reakciona smeša je mešana na 50 °C tokom 48 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je ugašena vodom (315 mL). Sirova smeša je ekstrahovana dihlorometanom (3 X 25 mL) i kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Sirova reakciona smeša je prečišć ena hromatografijom na koloni silika gela (0%-30% etilacetat u heksanu gradijent) daju ć i žuto ulje koje je sipano u balon sa okruglim dnom od 100 mL i metanol (30 mL) i kalijum hidroksid (1,5 g, 26,74 mmol). Balon je opremljen refluks kondenzatorom i reakciona smeša je mešana na 80 °C tokom 96 h. Posle hlađenja na sobnu temperaturu, rastvarač je uklonjen u vakuumu i ostatak je rastvoren u etil acetatu (∼ 70 mL) i vodi ( ∼ 30 mL). Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj ekstrahovan etil acetatom (3 X 20 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani vodom (2 X 25 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani in vacuo dajuć i sirovi terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(metilamino)butil]pirolidin-1- karboksilat (873 mg, 98%) kao narandžasto/žuto ulje, koje je korišć eno bez daljeg prečiš ć avanja. ESI-MS m/z izrač. 284,24637, nađeno 285,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,19 min (LC metoda B).
Korak 2: terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-[metil-(5-sulfamoil-2-piridil)amino] butil]pirolidin-1-karboksilat
[0644]
[0645] U bočicu od 20 mL napunjenu terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(metilamino)butil]pirolidin-1-karboksilatom (350 mg, 1.230 mmol) dodat je 6-hloropiridin-3-sulfonamid (249 mg, 1,293 mmol), kalijum karbonat (250 mg, 1,809 mmol) i dimetil sulfoksid (4 mL). Prostor iznad je pročišć en azotom, bočica je zatvorena i reakciona smeša je mešana na 120 °C tokom 18 h. Posle 18 h, reakcija je ohlađena do sobne temperature i razblažena etil acetatom (∼ 40 mL). Sirova smeša je isprana vodom (10 mL) i slanim rastvorom (5 mL), a organski sloj je osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Sirova reakciona smeša je prečišć ena hromatografijom na koloni silika gela (0%-100% etil acetat u heksanu gradijent) da bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-[metil-(5-sulfamoil-2). - piridil)amino]butil] pirolidin-1-karboksilat (143 mg, 26%) kao prljavo bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.440,24573, nađeno 441,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,6 min (LC metoda B).
Korak 3: terc-butil 4-[4-[[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-kar -bonil]sulfamoil]-2-piridil]-metil-amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0646]
[0647] U bočicu od 20 mL napunjenu 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilnom kiselinom (136 mg, 0,3620 mmol ) je dodat karbonil diimidazol (59 mg, 0,3639 mmol) i tetrahidrofuran (2 mL). Bočica je zatvorena i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. U ovom trenutku, terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-[metil-(5-sulfamoil-2-piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilat (143 mg, 0,3246 mmol) u tetrahidrofuranu (2 mL) je dodat, a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (75 mL, 0,5015 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 h. Reakcija je zatim ugašena vodom (∼ 4 mL) i 1 M vodenim rastvorom limunske kiseline ( ∼ 4 mL) i sirova smeša je ekstrahovana etil acetatom (3 X 10 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Ostatak je prečišć en hromatografijom na koloni silika gela (gradijent 0%-100% etil acetata u heksanu) da bi se dobio terc-butil 4-[4-[[5-[[2-hloro-6-[3-[2] -[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]-metil-amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin- 1-karboksilat (167 mg, 64%) kao sivobela čvrsta supstanca. ESI-MS mlz izrač. 797,2949, nađeno 798,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,35 min (LC metoda B).
Korak 4: 2-hloro-N-[[6-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butil-metil-amino]-3-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[ 1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so)
[0649] U bočicu od 20 mL napunjenu terc-butil 4-[4-[[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]-metil-amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (167 mg, 0,2092 mmol) je dodat CH2Cl2(5 mL) i hlorovodonična kiselina kiselina (1 mL 4.0 M, 4.000 mmol) u dioksanu. Bočica je zatvorena i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Rastvarač je uklonjen dajuć i sirovi 2-hloro-N-[[6-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butil-metilamino]-3-piridil]sulfonil]-6-[3 -[2-[1-(trifluorometil)ciklo-propil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so) (147 mg, 91%) kao bledo žuta čvrsta supstanca koja je korišć ena bez daljeg prečiš ć avanja. ESI-MS m/z izrač. 697,2425, nađeno 698,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,69 min (LC metoda B).
Korak 5: 12,12,19-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,19 ,21-pentaazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10] pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 132)
[0650]
[0651] U bočicu od 20 mL napunjenu 2-hloro-N-[[6-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butil-metil-amino]-3-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so) (147 mg, 0,2105 mmol) je dodat kalijum karbonat (152 mg, 1,100 mmol ), CsF (96 mg, 0,6320 mmol) i dimetil sulfoksid (5 mL). Prostor iznad je pročišć en azotom, bočica je zatvorena, a reakciona smeša je mešana na 150 °C tokom 18 h. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, čvrste materije su filtrirane eluentom etil acetata, sirova smeša je razblažena etil acetatom (∼ 35 mL), isprana sa 1,0 M vodenim rastvorom limunske kiseline (2 X 5 mL), slanim rastvorom (5 mL), organski sloj osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan u vakuumu. Kromatografija na koloni (silicijum dioksid, gradijent od 0% do 5% metanola u dihlorometanu) dala je 12,12,19-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropiletoksil-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,19,21-pentaazatetraciklo [18.2.2.111,14.05,10] pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksan-2,2, 4-trion (dihidrohloridna so) (Jedinjenje 132) (64 mg, 39%) kao sivobela čvrsta supstanca. 1H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,19 (s, 1H), 8,18 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,81 (s, 1H), 6,10 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,31 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,98 (d, J = 7,8 Hz, 3H), 2,37 ( s, 1H), 2,07 (t, J = 7,1 Hz, 4H), 1,78 - 1,68 (m, 1H), 1,52 (s, 8H), 1,39 (d, J = 51,3 Hz, 2H), 1,27 - 1,05 (m , 2H), 1,04-0,75 (m, 6H). ESI-MS m/z izrač.661,2658, nađeno 662,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,84 min (LC metoda B).
Primer 36: Priprema 12,12,18-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropiletoksi-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18, 23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-tri-on (Jedinjenje 133)
Korak 1: terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(metilamino)propil]pirolidin-1-karboksilat
[0653]
[0654] U balon od 50 ml napunjen terc-butil 4-(3-aminopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatom (869 mg, 3,389 mmol) u dihlorometanu (15 mL) dodat je anhidrid sirć etne kiseline ( 527,3 mg, 487,3 mL, 5,165 mmol), a zatim Et3N (884,8 mg, 1,219 mL, 8,744 mmol). Posuda je zatvorena i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 45 min, a zatim je ugašena zasić enim vodenim rastvorom natrijum karbonata ( ∼ 10 mL) i ekstrahovana dihlorometanom (3 X ~ 15 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani zasić enim vodenim rastvorom natrijum karbonata (2 X ~ 10 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani in vacuo dajuć i sirovi acetat koji je kombinovan sa N,N-dimetilformamidom (15 mL), a zatim dodavanjem NaH (225 mg 60% v/v, 5,626 mmol) i reakciona smeša je mešana 30 mi na sobnoj temperaturi. Dodat je jodometan (1000 mL, 16,06 mmol), posuda je zatvorena i reakciona smeša je mešana na 50 °C tokom 48 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je ugašena vodom (∼ 15 mL) i sirova smeša je ekstrahovana dihlorometanom (3 X 25 mL). Kombinovani organski ekstrakti su sušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani u vakuumu. Hromatografija na koloni (silika gel, 0% do 30% etil acetata u heksanu) dala je metilovani intermedijer acetat kome je dodat metanol (30 mL) i KOH (1.5 g, 26.74 mmol). Balon je opremljen refluks kondenzatorom i reakciona smeša je mešana na 80 °C tokom 96 h. Posle hlađenja do sobne temperature, rastvarač je uklonjen u vakuumu i ostatak je rastvoren u etil acetatu (∼ 70 mL) i vodi ( ∼ 30 mL). Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj ekstrahovan etil acetatom (3 X 20 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani vodom (2 X 25 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani in vacuo dajuć i terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(metilamino)propil]pirolidin-1-karboksilat (889 mg, 97%) kao narandžasto/žuto ulje koje je korišć eno bez daljeg prečiš ć avanja. ESI-MS m/z izrač.270,23074, nađeno 271,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,1 min (LC metoda B).
Korak 2: terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[metil-(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat
[0655]
[0656] U rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(metilamino)propil]pirolidin-1-karboksilata (154 mg, 0,5695 mmol) u dimetil sulfoksidu (2 mL) dodat je 6-fluoropiridin -2-sulfonamid (103 mg, 0,5847 mmol), a zatim di-izopropiletilamin (500 mL, 2,871 mmol). Balon je zatvoren pregradom i zagrevan na 90 °C pod balonom azota u uljnom kupatilu 14 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, zatim razblažena etil acetatom i isprana rastvorom soli. Organski slojevi su razdvojeni, sušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni, a zatim prečišć eni hromatografijom na silika gelu (80 grama kolona) koriš ć enjem sistema gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4 -[3-[metil-(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (141 mg, 58%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7,65 (dd, J = 8,6, 7,2 Hz, 1H), 7,12 (s, 2H), 7,01 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 3,53 (k, J = 7,8, 7,4 Hz, 3H), 3,17 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 3,04 (s, 3H), 2,84 - 2,72 (m, 1H), 2,09 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 1,88 (td, J = 12,8, 5,7 Hz, 1H), 1,53 (dt, J = 14,6, 7,4 Hz, 2H), 1,36 (dd, J = 15,0, 10,6 Hz, 14H), 1,23 (s, 3H). ESI-MS m/z izrač. 426,23007, nađeno 427,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,47 min (LC metoda A).
Korak 3: terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-kar -bonil]sulfamoil]-2-piridil]-metil-amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0657]
[0658] U bočici za scintilaciju od 20 mL, 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (264 mg, 0,7026 mmol) i karbonil diimidazol (114 mg, 0,7031 mmol) su kombinovani u tetrahidrofuranu (2,2 mL) i mešani 120 min na 50 °C sa labavim poklopcem. Zatim, terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[metil-(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (130 mg, 0,3048 mmol) u tetrahidrofuranu (3 mL) je dodat, a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (92,80 mg, 91,16 mL, 0,6096 mmol). Reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 16 h. Reakcija je razblažena etil acetatom (25 mL) i isprana zasić enim vodenim rastvorom amonijum hlorida (25 mL), a zatim slanim rastvorom (25 mL). Organski sloj je odvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Sirovi materijal je zatim prečišć en hromatografijom na silika gelu koristeć i plitki gradijent od 100% dihlorometana do 20% metanola u dihlorometanu. Proizvod (još uvek kontaminiran sa 7% SM) je rastvoren u etil acetatu (50 mL) i ispran zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 X 50 mL), osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan da bi se dobio terc-butil 4-[3 -[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]-metil -amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (141 mg, 55%, čisto ć a 93%) kao svetlo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,40 (k, J = 4,2, 3,6 Hz, 1H), 8,16 - 8,06 (m, 1H), 7,79 - 7,67 (m, 2H), 7,22 (d, J =). 7,3 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,22 - 6,14 (m, 1H), 4,35 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 3,49 (dd, J = 32,6, 9,1 Hz, 3H), 3,03 (s, 3H), 2,71 (t, J = 10,5 Hz, 1H), 2,10 (k, J = 7,3 Hz, 3H), 2,00 (s, 2H), 1,85 - 1,66 (m, 1H), 1,50 (k, J = 7,7 Hz, 1H), 1,43-1,31 (m, 9H), 1,27 (t, J = 10,5 Hz, 4H), 1,05-0,82 (m, 5H). ESI-MS m/z izrač.783,27924, nađeno 784,42 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,52 min (LC metoda B).
Korak 4: 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil-metil-amino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[ 1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0659]
[0660] U rastvor terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridina - 3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]-metil-amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (141 mg, 0,168 mmol, 93% čistoć e) u dihlorometanu (2 mL) je dodat trifluorosirć etna kiselina (1,390 g, 939,2 mL, 12,19 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 2 h i smeša je zatim koncentrovana do suva. Sirovi materijal je tretiran zasić enim natrijum bikarbonatom i zatim ekstrahovan dihlorometanom. Organski sloj je osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil-metil-amino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (100 mg, 48%). ESI-MS m/z izrač. 683,2268, nađeno 684,32 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,72 min (LC metoda B).
Korak 5: 12,12,18-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18 ,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 133)
[0661]
[0662] Mešavina 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil-metil-amino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[ 2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (83 mg, 0,1213 mmol), kalijum karbonat (100 mg, 0,7236 mmol), cezijum fluorid (22 mg, 0,1448 mmol) i mala količina 3 A molekularnih sita u dimetil sulfoksidu (4 mL) je zatvorena i zagrevana na 165 °C tokom 4 h. Smeša je zatim ohlađena do sobne temperature, razblažena etil acetatom i isprana zasić enim vodenim rastvorom amonijum hlorida i slanim rastvorom. Organska faza je osušena (natrijum sulfat), filtrirana i koncentrovana do narandžastog ulja koje je prečišć eno silika hromatografijom sa plitkim gradijentom od 100% dihlorometana do 20% metanola u dihlorometanu da bi se dobio 12,12,18-trimetil-8-( 3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza
1(23),5(10), 6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 133) (32,9 mg, 42%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,22 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,78 (dd, J = 12,5, 8,0 Hz, 2H), 7,19 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 6,91 (t, J = 8,2 Hz, 2H), 6,12 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,52 (s, 1H), 4,32 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 3,14 (m, 1H), 2,92 (m, 4H), 2,70 (d, J = 17,7 Hz, 1H), 2,08 (m, J = 7,1 Hz, 3H), 1,94 - 1,75 (m, 1H), 1,61 (s, 3H), 1,49 (m , J = 13,1 Hz, 5H), 1,34 (m, IH), 1,15 - 0,77 (m, 5H). ESI-MS m/z izrač.
647,2502, nađeno 648,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,29 min (LC metoda B).
Primer 37: Priprema 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3 .1.05,10.011,151 tetrakoza-1(23),5(10),6,8,20(24),21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 136) i 8-[ 3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza -1(23),5(10),6,8,20(24),21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 137)
[0663]
Korak 1: 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3. 1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,20(24),21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 136) i 8- [3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011, 15]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,20(24),21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 137)
[0664]
[0665] Podvrgnuti racemski 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3 .1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,20(24),21-heksan-2,2,4-trion (115 mg) do hiralne separacije pomoć u SFC hromatografije koriš ć enjem kolona Phenomenex LUX-4 (250 X 21,2 mm), veličine čestica 5 mm sa 60% metanola, 40% mobilne faze ugljen-dioksida pri 70 mL/min tokom 8,0 min (zapremina injekcije = 500 mL od -30 mg/mL u metanolu: acetonitril:dimetil sulfoksid (40:40:20)) dajuć i kao prvi enantiomer za eluiranje 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo [18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza- 1(23),5(10),6,8,20(24),21-heksan-2, 2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 136) (34,1 mg, 29%) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 14,55 (s, 1H), 8,47 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 33,0 Hz, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,53 - 7,39 (m, 2H), 6,45 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 5,96 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,77 (s, 1H), 4,44 (t, J = 6,8 Hz, 2H) , 4,16 (d, J = 64,7 Hz, 1H), 3,36 (s, 1H), 3,20 - 2,90 (m, 1H), 2,38 (d, J = 8,1 Hz, 2H), 1,97 (k, J = 6,8 Hz, 3H), 1,72 (s, 1H), 1,57 (br s, 4H), 1,36-1,02 (m, 3H), 1,01-0,82 (m, 2H), 0,66 (ddt, J = 13,4, 8,8, 4,2 Hz, 2H), 0,66 (ddt, J = 13,4, 8,8, 4,2 Hz, 2H), 1,72 (s, 1H), 1,36-1,02 (m, 3H), 1,01-0,82 (m, 2H), ), 0,52 - 0,38 (m, 4H), 0,37 -0,29 (m, 1H), 0,23 - 0,16 (m, 2H), 0,10 (dt, J = 9,4, 4,5 Hz, 2H), ESI-MS m/z izrač. . 619,29407, nađeno 620,17 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,82 min (LC metoda B) i kao drugi enantiomer za eluiranje 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,20(24),21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 137) (24,5 mg, 17%) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 14,55 (s, 1H), 8,47 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 32,4 Hz, 1H), 7,68 (s, 1H), 7,52 - 7,40 (m, 2H), 6,45 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,96 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,77 (s, 1H), 4,44 (t, J = 6,8 Hz, 2H) , 4,16 (d, J = 70,4 Hz, 1H), 3,49 (s, 1H), 3,03 (d, J = 51,3 Hz, 1H), 1,97 (k, J = 6,8 Hz, 2H), 1,72 (s, 2H) , 1,56 (s, 4H), 1,27 (d, J = 15,3 Hz, 5H), 1,02 - 0,85 (m, 2H), 0,66 (ddt, J = 13,4, 8,6, 4,2 Hz, 2H), 0,51 - 0,38 (m, 2H) , 4H), 0,36-0,27 (m, 1H), 0,25-0,15 (m, 2H), 0,15-0,05 (m, 2H), ESI-MS m/z izrač. 619,29407, nađeno 620,17 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,82 min (LC metoda B).
Primer 38: Priprema (14S)-8-[3-(4,4-dimetilpentil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23 -pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,101 tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 145) i (14S)-8-[3-(4,4-dimetilpentil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3. 1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 146)
[0666]
Korak 1: (14S)-8-[3-(4,4-dimetilpentil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatet -raciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 145) i ( 14S)-8-[3-(4,4-dimetilpentil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111 , 14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 146)
[0667]
[0668] Bočica od 4 mL je napunjena sa (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza- 1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (148 mg, 0,3181 mmol), 3-(4,4-dimetil-pentil)pirolidin-2-on (86 mg, 0,4692 mmol), Pd2(dba)3(92 mg, 0,1005 mmol), Xanfos (58 mg, 0,1002 mmol), cezijum karbonat (623 mg, 1,912 mmol) i anhidrovani dioksan (3 mL). Smeša je prskana azotom 2 min, zatvorena i mešana na 120 °C tokom 21 h. Posle hlađenja na sobnoj temperaturi, čvrste materije su filtrirane i isprane etil acetatom i dobijeni filtrat je koncentrisan in vacuo. Sirova reakciona smeša je prečišć ena hromatografijom na koloni silika gela (0%-5% metanola u gradijentu dihlormetana) da bi se dobilo 54 mg proizvoda kao smeše dijastereomera, prljavo bela čvrsta supstanca. Smeša dijastereomera je prečišć ena hiralnim SFC koriš ć enjem ChiralCel OJ-H (250 X 10 mm kolona, veličina čestica 5 mm) sa 18% acetonitril/metanol (90:10; bez modifikatora)/82% mobilna faza ugljen-dioksida na 10 mL/min tokom 10,0 min (zapremina injekcije = 70 mL 24mg/mL rastvora u metanolu:dimetil sulfoksid (90:10)) dajuć i kao prvi dijastereomer koji se eluira, (14S)-8-[3-(4,4-dimetilpentil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pen-taazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5 ,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 145) (19 mg, 10%);<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksidd6) δ 12,38 (s, 1H), 7,67 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,57 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,96 (široki d, J = 8,0 Hz, 1H ), 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,05 (t, J = 9,4 Hz, 1H), 3,91 (široki d, J = 10,7 Hz, 1H) , 3,75 (k, J = 9,3, 8,7 Hz, 1H), 3,11 (br s, 1H), 2,94 (br d, J = 13,3 Hz, 1H), 2, 82 - 2,56 (m, 2H), 2,30 - 2,17 (m, 1H), 2,10 (br s, 1H), 1,87 - 1,67 (m, 4H), 1,64 - 1,41 (m, 9H), 1,47 - 1,2 m, 4H), 1,25-1,13 (m, 2H), 0,87 (s, 9H). ESI-MS mlz izrač.596,31445, nađeno 597,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,32 min (LC metoda B), a kao drugi dijastereomer za eluiranje, (14S)-8-[3-(4,4-dimetilpentil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2, 2,4-trion (diastereomer 2) (Jedinjenje 146) (15 mg, 8%);<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,41 (s, 1H), 7,68 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,61 - 7,50 (m, 2H), 7,03 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,61 - 7,50 (m, 2H), 7,03 (d, J = 7,2 Hz, 1H). ), 6,92 (d, J = 27,7 Hz, 1H), 6,69 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 3,94 (t, J = 9,4 Hz, 2H), 3,82 (k, J = 9,1 Hz, 1H), 3,09 (s, 1H), 2,93 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 2,68 (t, J = 10,9 Hz, 2H), 2,25 (k, J = 8,8 Hz, 1H), 2,08 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 1,86 - 1,63 (m, 4H), 1,57 (s, 4H), 1,52 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 1,46 (s, 3H), 1,41 - 1,08 (m, 7H), 0,86 (s, 9H); ESI-MS m/z izrač.596,31445, nađeno 597,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,33 min (LC metoda B).
Primer 39: Priprema 12,12,22-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11 ,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-tri-on (enantiomer 1) (Jedinjenje 148) i 12,12,22-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropiletoksil-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18, 23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heks-en-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 149 )
[0669]
Korak 1: 12,12,22-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18 ,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 148) i 12,12,22-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18 ,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 149)
[0671] Racemski 12,12,22-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11, 18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (85 mg, 0,1299 mmol) je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji. Korišć en je slede ć i SFC protokol: ChiralPak AS-3 (150 X 2,1 mm), 3 mm; 35 °C mobilna faza: 30% acetonitril:metanol (90:10), 70% ugljen-dioksid. Prvi enantiomer koji je eluiran bio je 12,12,22-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9, 11,18,23- pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) ( Jedinjenje 148) (34 mg, 40%). ESI-MS m/z izrač. 647,2502, nađeno 648,34 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,24 min (LC metoda B). Drugi enantiomer koji je eluiran bio je 12,12,22-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) ( Jedinjenje 149) (35 mg, 41%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,46 (s, 1H), 8,23 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,65 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 6,12 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,32 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 4,00 - 3,79 (m, 1H), 3,27 - 3,14 (m, 1H), 2,93 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 2,84 (t, J = 10,5 Hz, 1H), 2,36 (s, 3H ), 2,08 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,87 (dd, J = 11,6, 5,2 Hz, 1H), 1,77 (m, 1H), 1,57 (d, J = 35,9 Hz, 8H), 1,44 - 1,29 (m, IH), 0,96 (d, J = 4,4 Hz, 2H), 0,91 (d, J = 13,2 Hz, 3H). ESI-MS m/z izrač.647,2502, nađeno 648,34 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,25 min (LC metoda B).
Primer 40: Priprema 4-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2 .1.111,14.02,7]docosa-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 153) i 4-[3-(3,3- diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokosa-2,4,6, 11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 154)
[0672]
Korak 1: terc-butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi) pirazol-1-il] piridin-3-karbonil] sulfamoil] pirazol- 1-il] propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0673]
[0674] 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (521 mg, 1.440 mmol) i karbonil diimidazol (237 mg, 1.462 mmol) Kombinovani su u tetrahidrofuranu (5.0 mL) i mešani 2 h na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(3-sulfamoilpirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (460 mg, 1.190 mmol), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4 .0]undec-7-en (280 mL, 1.872 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 18 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasić enim rastvorom amonijum hlorida, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 100% dihlorometana do 20% metanola u dihlorometanu da bi se dobio terc-butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-(3,3-)diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (270 mg, 31%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9,61 (d, J = 95,1 Hz, 1H), 8,30 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,24 (t, J = 8,9 Hz, 1H), 7,75 (d , J = 8,4 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 5,97 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,43 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 4,20 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 3,78 - 3,54 (m, 1H), 2,84 (t, J = 10,1 Hz, 1H), 2,07 (s, 1H), 1,97 (k , J = 6,8 Hz, 2H), 1,93 - 1,81 (m, 1H), 1,63 (s, 5H), 1,43 (d, J = 4,7 Hz, 9H), 1,37 - 1,23 (m, 6H), 0,72 - 0,61 ( m, 2H), 0,50 - 0,38 (m, 4H), 0,33 (tt, J = 9,0, 6,8 Hz, 1H), 0,20 (dtd, J = 8,2, 4,9, 3,5 Hz, 2H), 0,10 (ddd, J = 9,3, 4,8, 3,5 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač.729,30756, nađeno 730,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,92 min (LC metoda A).
Korak 2: 4-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2. 1.111,14.02,7]docosa-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion
[0675]
[0676] Rastvor terc-butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil ]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (270 mg, 0,3697 mmol) u dihlorometanu (1,862 mL) i trifluorosirć etna kiselina (300 mL, 3,920 mmol) su mešani na sobnoj temperaturi. 4 č. Rastvarači su zatim uklonjeni u vakuumu. Ostatak je rastvoren u etil acetatu, ispran sa 2 mL zasić enog rastvora natrijum bikarbonata i rastvarač je uparen. Dobijeni ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (5,586 mL) i dodata su 3 A molekulska sita i reakciona smeša je mešana 10 min. Zatim su dodati cezijum fluorid (171 mg, 1,126 mmol) i kalijum karbonat (158 mg, 1,143 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 150 °C preko noć i. Reakciona smeša je filtrirana kroz Vhatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišć en HPLC-MS metodom reverzne faze koriš ć enjem dvostrukog gradijenta od 50-99% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilna faza A = voda (0,05% hlorovodonične kiseline), Mobilna faza B = acetonitril) da bi se dobio racemski 4-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10l6-tia-1,3 , 9,14,22 pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (50 mg, 23%) kao belo čvrst. ESI-MS m/z izrač.593,27844, nađeno 594,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,36 min (LC metoda B).
Korak 3: 4-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2. 1.111,14.02,7]docosa-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 153) i 4-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]docosa-2,4, 6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 154)
[0677]
[0678] Podvrgnuti racemski 4-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10l6-tia-1,3,9,14,22 pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]docosa-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (50 mg) do hiralne separacije pomoć u SFC hromatografije korišć enjem ChiralPak AS-H (250 X 10 mm) kolona, veličine čestica 5 mm) sa 28% acetonitril/metanol (90:10)/72% mobilna faza ugljen-dioksida pri 10mL/min tokom 8,0 min (zapremina injekcije = 70 mL∼ 24mg/mL rastvora u acetonitrilu/metanolu/ dimetil sulfoksid (82:8:10)) koji daje kao prvi enantiomer za eluiranje 4-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10l6-tia-1 ,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 153 ) (20 mg, 18%);<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,63 (s, 1H), 8,17 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,67 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 2,3 Hz , 1H), 7,07 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,42 (t, J = 6,8 Hz, 2H ), 4,33 (dt, J = 13,3, 3,4 Hz, 1H), 4,00 - 3,85 (m, 1H), 2,74 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 2,12 (ttd, J = 14,6, 10,0, 8,8, 8,8, 8,8, td, J = 13,3; Hz, 2H), 2,01 - 1,94 (m, 2H), 1,81 - 1,70 (m, 1H), 1,58 (s, 3H), 1,55 (s, 3H), 1,47 (t, J = 12,2 Hz, 1H), 0,87 - 0,71 (m, 0H), 0,71 - 0,61 (m, 2H), 0,53 - 0,39 (m, 4H), 0,37 - 0,30 (m, 1H), 0,24 - 0,15 (m, 2H), 0,15 - 0,07 (m, 0,07 (m, 1H), 0,24 - 0,15 (m, 2H), 0,15 - 0,07 (m, 1H), 0,37 - 0,30 (m, 1H), 0,71 - 0,61 (m, 2H), 0,53 - 0,39 (m, 4H), 0,37 - 0,30 (m, 1H), 2H), ESI-MS m/z izrač.593,27844, nađeno 594,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,39 min (LC metoda B) i kao drugi enantiomer za eluiranje 4-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10l6-tia-1 ,3,9,14,22 pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 154) (23,6 mg, 47%) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,16 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,46 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,06 (d , J = 2,3 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,42 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 4,32 (d, J = 13,5 Hz, 1H), 4,00 - 3,83 (m, 1H), 2,73 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 2,23 - 2,09 (m, 2H), 1,97 (k, J = 6,9 Hz, 3H), 1,74 (dd, J = 11,9, 5,2 Hz, 1H), 1,58 (s, 4H), 1,54 (s, 3H), 1,51 - 1,41 (m, 2H), 0,86 - 0,72 (m, 1H), 0,71 - 0,61 (m , 2H), 0,45 (dddd, J = 15,6, 8,1, 4,9, 3,7 Hz, 4H), 0,38 - 0,30 (m, 1H), 0,25 - 0,18 (m, 2H), 0,12 (ddtd, J, J = 11,4.3.7, 3.1, 1.9 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač.
593,27844, nađeno 594,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,39 min (LC metoda B).
Primer 41: Priprema 12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-15-oksa-2l6-tia-3,9 , 11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 159 ) i 12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-15-oksa-2l6-tia-3,9,11, 18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 160)
[0679]
Korak 1: 2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etil metansulfonat [0680]
[0681] Balon sa okruglim dnom od 1000 mL sa 3 grla je opremljen mehaničkom mešalicom, kupatilom za hlađenje, J-Kem temperaturnom sondom, levkom za dodavanje i ulazom/izlazom azota. Posuda je napunjena u atmosferi azota sa 2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etanolom (125 g, 811,0 mmol) i 2-metiltetrahidrofuranom (625 mL) koji je dao bistar bezbojni rastvor. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 19 °C. Posuda je tada napunjena sa trietilaminom (124,3 mL, 891,8 mmol) dodatom čistom u jednoj porciji. Kupatilo za hlađenje je zatim napunjeno usitnjenim ledom/vodom i temperatura posude je spuštena na 0 °C. Levak za dodavanje je napunjen sa rastvorom metansulfonil hlorida (62,77 mL, 811,0 mmol) u 2-metiltetrahidrofuranu (125 mL, 2 mL/g) koji je zatim dodat u kapima tokom 90 minuta što je rezultiralo belom suspenzijom i egzotermnom do 1 °C. Smeša je ostavljena da se polako zagreje do sobne temperature i nastavljena sa mešanjem na sobnoj temperaturi tokom 1 h, nakon čega je smeša izlivena u ledeno hladnu vodu (250 mL) i zatim prebačena u levak za odvajanje. Organski sloj je uklonjen i ispran sa 20 % mase rastvora kalijum bikarbonata (250 mL), osušen preko natrijum sulfata (200 g) i zatim filtriran kroz Buhnerov levak od staklene frite. Bistri filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio 2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etil metansulfonat (185 g, 98%) kao bistro bledo žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 4,36 (ddt, J = 7,1, 6,4, 0,7 Hz, 2H), 3,02 (s, 3H), 2,03 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,11 - 0,98 m, 2H), 0,81-0,66 (m, 2H).
Korak 2: 3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propannitril
[0682]
[0683] Balon sa okruglim dnom od 1000 mL sa 3 grla je opremljen mehaničkom mešalicom, grejnim poklopcem, J-Kem temperaturnom sondom/kontrolorom, vodom hlađenim refluks kondenzatorom i ulazom/izlazom azota. Posuda je napunjena u atmosferi azota sa 2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etil metansulfonatom (50 g, 215,3 mmol) i dimetil sulfoksidom (250 mL) koji je dao bistar bledo žuti rastvor. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 19 °C. U posudu je napunjen natrijum cijanid (13,19 g, 269,1 mmol), dodat kao čvrsta supstanca u jednoj porciji. Smeša je zagrejana do temperature posude od 70 °C i stanje je održavano 24 h. Nakon zagrevanja sav natrijum cijanid se rastvorio i reakciona smeša se pretvorila u svetlo žutu suspenziju. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je sipana u vodu (500 mL), a zatim prebačena u levak za odvajanje i podeljena sa metil terc-butil etrom (500 mL). Organski sloj je uklonjen, a zaostali vodeni sloj je ekstrahovan sa metil terc-butil etrom (3 X 250 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 X 250 mL), osušeni preko natrijum sulfata (200 g) i zatim filtrirani kroz Buhnerov levak od staklene frite. Bistri filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio 3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propannitril (30 g, 85%) kao bistro ulje boje ć ilibara.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 2,55 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 1,93 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 1,11 - 1,04 (m, 2H), 0,78 - 0,70 (m, 2H).
Korak 3: 3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanoična kiselina
[0684]
[0685] Balon sa okruglim dnom od 1000 mL sa 3 grla je opremljen mehaničkom mešalicom, poklopcem za grejanje, J-Kem temperaturnom sondom/kontrolorom, vodom hlađenim refluks kondenzatorom i ulazom/izlazom azota. Posuda je zatim napunjena u atmosferi azota sa 3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propannitrilom (25 g, 153,2 mmol) i etil alkoholom (375 mL) koji je dao bistar rastvor ć ilibara. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 19 °C. U posudu je zatim napunjen natrijum hidroksid (102,1 mL 6 M, 612,6 mmol), dodat u jednoj porciji. Dobijeni bistri rastvor ć ilibara je zagrejan do temperature posude od 70 °C i stanje je održavano 24 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana da bi se uklonio etil alkohol. Preostali vodeni rastvor je razblažen vodom (150 mL), a zatim prebačen u levak za odvajanje i podeljen sa metil terc-butil etrom (50 mL). Vodeni sloj je uklonjen i pH je podešen na pH ~ 1 sa 6 M rastvorom hlorovodonične kiseline. Dobijeni vodeni rastvor je prebačen u levak za odvajanje i podeljen sa metil terc-butil etrom (250 mL). Organski sloj je uklonjen, a zaostali vodeni sloj je ekstrahovan sa metil terc-butil etrom (2 X 150 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko natrijum sulfata (150 g) i zatim filtrirani kroz Buhnerov levak od staklene frite. Bistri filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobila 3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanoična kiselina (26 g, 93%) kao bistro ulje boje ć ilibara.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 2,63 - 2,50 (m, 2H), 1,96 - 1,84 (m, 2H), 1,03 - 0,95 (m, 2H), 0,66 – 0,58 (m, J = 1.7 Hz, 2H).
Korak 4: 3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-1-ol
[0686]
[0687] Balon sa okruglim dnom od 1000 mL sa 3 grla je opremljen mehaničkom mešalicom, kupatilom za hlađenje, levkom za dodavanje, J-Kem temperaturnom sondom i ulazom/izlazom azota. Posuda je napunjena u atmosferi azota sa litijumaluminijum-hidridnim peletima (6,775 g, 178,5 mmol). Posuda je zatim napunjena u atmosferi azota sa tetrahidrofuranom (250 mL). Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 20 °C. Smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 0,5 h da bi se omoguć ilo da se pelete rastvore. Temperatura lonca dobijene sive suspenzije je zabeležena na 24 °C. Kupatilo za hlađenje je zatim napunjeno usitnjenim ledom/vodom i temperatura posude je spuštena na 0 °C. Levak za dodavanje je napunjen sa rastvorom 3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanoične kiseline (25 g, 137,3 mmol) u tetrahidrofuranu (75 mL, 3 mL/g) i bistri bledo žuti rastvor je dodat u kapima tokom 1 h. Nakon što je dodavanje završeno, temperatura lonca rezultujuć e sivkasto-braon suspenzije je zabeležena na 5 °C. Smeša se ostavi da se polako zagreje do sobne temperature i nastavi da se meša na sobnoj temperaturi tokom 24 h. Suspenzija je ohlađena na 0 °C u kupatilu za hlađenje zdrobljenog leda/vode, a zatim ugašena veoma sporim dodavanjem vode u kapima (6,775 mL), prać eno 15 % mase rastvora natrijum hidroksida (6,775 mL) i na kraju vodom (20,32 mL). Temperatura lonca dobijene bele suspenzije je zabeležena na 5 °C. Suspenzija je nastavljena da se meša na -5 °C tokom 30 min, a zatim je filtrirana kroz Buchner levak od staklene frite sa slojem celita od 20 mm. Filterski kolač je ispran tetrahidrofuranom (2 X 150 mL) i zatim osušen pod vakuumom 15 min. Filtrat je osušen iznad natrijum sulfata (250 g) i zatim filtriran kroz Buhnerov levak od staklene frite. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo bistro svetlo žuto ulje kao željeni proizvod, 3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-1-ol (21,2 g, 92%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 3,65 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 1,78 - 1,59 (m, 4H), 0,99 - 0,91 (m, 2H), 0,59 (dp, J = 4,7, 1), 1,78 - 1,59 (m, 4H), 0,99 - 0,91 (m, 2H), 0,59 (dp, J = 7,7, 1H),<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d). Hz, 2H).
Korak 5: terc-butil 3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-karboksilat
[0688]
[0689] Balon sa okruglim dnom od 5000 mL sa 3 grla je opremljen mehaničkom mešalicom, grejnim omotačem, J-Kem temperaturnom sondom/kontrolorom, dodatnim lejevkom, vodom hlađenim refluks kondenzatorom i ulazom/izlazom azota. Posuda je napunjena u atmosferi azota sa terc-butil 5-okso-lH-pirazol-2-karboksilatom (175 g, 950,1 mmol) i tetrahidrofuranom (2100 mL) koji je dao bistar bledo žuti rastvor. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 19 °C. Posuda je zatim napunjena sa 3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-1-olom (175,7 g, 1,045 mol), dodat čist u jednom obroku, a zatim trifenilfosfin (274,1 g, 1,045 mol) dodat kao čvrsta supstanca u jednom porcija. Dobijeni bistri bledo žuti rastvor je zatim tretiran sa diizopropil azodikarboksilatom (205,7 mL, 1,045 mol) dodat u čistom kap po kap tokom 2 h, što je rezultiralo postepenom egzotermom do 40 °C i bistrim rastvorom svetlo ć ilibara. Reakciona smeša je zatim zagrejana do temperature posude od 50 °C i stanje je održavano 2 h. Reakciona smeša prozirnog ć ilibara je koncentrovana pod sniženim pritiskom i dobijeno bistro ulje tamne boje ć ilibara je suspendovano u toluenu (1400 mL) i mešano na sobnoj temperaturi 1 h tokom kojeg vremena se taloži čvrsti trifenilfosfin oksid. Gusta suspenzija je filtrirana kroz Buchner levak od staklene frite i filterski kolač je ispran toluenom (2 X 500 mL). Čisti filtrat boje ć ilibara je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo bistro svetlo žuto ulje (320 g). Materijal je prečišć en fleš hromatografijom na silika gel koloni (čvrsto optere ć enje na celitu) eluiranjem sa gradijentom od 100% heksana do 20% etil acetata u heksanu. Željene frakcije su kombinovane i koncentrovane pod sniženim pritiskom da bi se dobio terc-butil 3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-karboksilat (280 g, 88%) kao bistro bledo žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,07 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 6,09 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,15 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 1,91 - 1,75 (m, 2H), 1,76-1,63 (m, 2H), 1,55 (s, 9H), 0,98-0,84 (m, 2H), 0,74 (dt, J = 3,3, 1,9 Hz, 2H).
Korak 6: 3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]-1H-pirazol
[0690]
[0691] Balon sa okruglim dnom od 5000 mL sa 3 grla je opremljen mehaničkom mešalicom, poklopcem za grejanje, J-Kem temperaturnom sondom/kontrolorom, vodom hlađenim refluks kondenzatorom, levkom za dodavanje i ulazom/izlazom azota. Posuda je napunjena u atmosferi azota sa terc-butil 3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-karboksilatom (280 g, 837,5 mmol), dihlorometanom (840 mL) i metil alkoholom (840). mL) koji je dao bistar bledo žuti rastvor. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 19 °C. Levak za dodavanje je napunjen sa hlorovodonikom u 1,4-dioksanu (628 mL 4 M, 2,512 mol) koji je zatim dodat ukapavanjem tokom 2 h, što je rezultiralo postepenom egzotermom do 30 °C. Dobijeni bistri bledo žuti rastvor je zagrejan do temperature posude od 45 °C i stanje je održavano 1 h. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom. Preostali ostatak je rastvoren u metil terc-butil etru (2,24 L), a zatim prebačen u levak za odvajanje i podeljen sa ledeno hladnim natrijum hidroksidom (1,256 L od 2 M, 2,512 mol). Organski sloj je uklonjen, a zaostali vodeni sloj je ekstrahovan sa terc-butil metil etrom (2 x 500 mL). Kombinovani organski sloj je ispran zasić enim rastvorom natrijum hlorida (2 X 500 mL), osušen preko natrijum sulfata (500 g) i zatim filtriran kroz Buhnerov levak od staklene frite. Bistri bledo žuti filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio 3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]-1H-pirazol (190 g, 97%) kao bistro svetlo žuto ulje. ESI-MS m/z izrač. 234,09799, nađeno 235,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,37 min (LC metoda B).
Korak 7: terc-butil 2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[0692]
[0693] Balon sa okruglim dnom od 5000 mL sa 3 grla je opremljen mehaničkom mešalicom, kupatilom za hlađenje koje se koristi kao sekundarni kontejner, J-Kem temperaturnom sondom, vodom hlađenim refluks kondenzatorom, levkom za dodavanje i ulazom/izlazom azota. Posuda je napunjena u atmosferi azota sa 3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]-1H-pirazolom (188,8 g, 806,1 mmol) i N,N-dimetilformamidom (2,40 L) koji je dao bistru bledu boju. žuti rastvor. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 17 °C. Sud je zatim napunjen sa terc-butil 2,6-dihloro-piridin-3-karboksilatom (200 g, 806.1 mmol) dodat kao čvrsta supstanca u jednoj porciji. Dobijeni bistri bledo žuti rastvor je zatim tretiran sa kalijum karbonatom (144,8 g, 1,048 mol) koji je dodat kao čvrsta supstanca u jednoj porciji, a zatim je dodat 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (13,56 g, 120,9 mmol) kao čvrsta supstanca u jednoj porciji. Dobijena bledo žuta suspenzija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom 24 h. Reakciona smeša je ohlađena na 10 °C sa kupkom za hlađenje smrvljenog leda/vode. Levak za dodavanje je napunjen vodom (2,40 L) koja je dodavana kap po kap tokom 2 h i rezultirala je gustom suspenzijom i egzotermnom temperaturom do 15 °C. Dobijena suspenzija je nastavljena da se meša na 15 °C tokom 30 min, a zatim je filtrirana kroz Buhnerov levak od staklene frite. Kolač na filteru je ispran vodom (3 Ks 500 mL) i zatim osušen pod vakuumom u Buhnerovom levuku 2 h. Materijal je zatim ostavljen da se osuši na vazduhu preko noć i da bi se dobio tercbutil 2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (305 g , 85%) kao bela zrnasta čvrsta supstanca. Materijal je korišć en u slede ć em sintetičkom koraku bez daljeg prečiš ć avanja. ESI-MS m/z izrač. 445,138, nađeno 446,2 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 2,54 min (LC metoda B).
Korak 8: 2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[0695] Balon sa okruglim dnom od 1000 mL sa 3 grla je opremljen mehaničkom mešalicom, poklopcem za grejanje, J-Kem temperaturnom sondom/kontrolorom, levkom za dodavanje, vodom hlađenim refluks kondenzatorom i ulazom/izlazom azota. Posuda je napunjena u atmosferi azota sa terc-butil 2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilatom (50 g , 112,1 mmol) i 2-propanol (250 mL) koji je dao sivo-belu suspenziju. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 19 °C. Levak za dodavanje je napunjen hlorovodoničnom kiselinom (93,42 mL 6 M, 560,5 mmol) koja je dodavana kap po kap tokom 30 minuta i rezultirala je egzotermom do 30 °C. Dobijena suspenzija je zatim zagrejana do refluksa (temperatura posude ∼ 82 °C). Nakon zagrevanja, suspenzija se pretvara u bistar bledo žuti rastvor (temperatura posude ∼ 75 °C u ovom trenutku). Posle mešanja na refluksu oko 30 min, čvrsta supstanca je počela da se taloži. Suspenzija je nastavljena da se meša na refluksu dodatnih 30 min, nakon čega je dodavana voda (150 mL) u kapima tokom 45 min. Toplota je zatim uklonjena i suspenzija je nastavljena sa mešanjem i ostavljena da se polako ohladi do sobne temperature. Materijal je sakupljen vakuum filtracijom u Buhnerov levak od staklene frite, a kolač od filtera je ispran sa 1:1 voda/2-propanol (250 mL), a zatim vodom (2 X 250 mL) i zatim osušen pod vakuumom u Buchner-u. levak 30 min. Materijal je dalje sušen u vakuum peć nici na 45 °C tokom 24 h da bi se dobio 2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3- karboksilna kiselina (41,5 g, 95%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 513,59 (s, 1H), 8,50 - 8,28 (m, 2H), 7,72 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,20 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 1H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6)), 4,23 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 1,86 (dk, J = 10,8, 6,3 Hz, 2H), 1,78 - 1,66 (m, 2H), 0,98 - 0,87 (m, 2H), 0,76 (dt, J = 4,9, 1,7 Hz, 2H).
Korak 9: terc-butil 2,2-dimetil-4-okso-pirolidin-1-karboksilat
[0696]
di-terc-butil dikarbonat (22,9 g, 24,11 mL, 104,9 mmol) je dodat u rastvor 5,5-dimetilpirolidin-3-ona (hidrohlorida) (13,08 g, 87,42 mmol), trietilamina (17,74 g, 17,74 g). mL, 175.0 mmol) i DMAP (1.1 g, 9.004 mmol) u dihlorometanu (325 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noć i. Reakciona smeša je isprana sa 1N hlorovodoničnom kiselinom (300 mL) i vodeni sloj je ekstrahovan dihlorometanom (2 X 250 mL). Organski slojevi su kombinovani, isprani sa 5% natrijum bikarbonatom (250 mL) i slanim rastvorom (150 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-okso-pirolidin -1-karboksilat (18,5 g, 99%) kao bela čvrsta supstanca. 'H NMR (300 MHz, CDC13) ppm 1,33-1,66 (m, 15H), 2,51 (s, 2H), 3,85 (br. s., 2H). ESI-MS mlz izrač. 213,27, nađeno 158,2 (M-C4H8)+; Vreme zadržavanja: 1,91 min (LC metod I).
Korak 10: terc-butil 4-hidroksi-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0697]
terc-butil 2,2-dimetil-4-okso-pirolidin-1-karboksilat (150 mg, 0,7033 mmol) rastvoren je u suvom metanolu (2,5 mL) i ohlađen u ledenom kupatilu. Pažljivo je dodat NaBH4(30 mg, 0,7930 mmol) i reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 1,5 h. Reakciona smeša je razblažena vodom (25 mL) i 1M vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (0.5 mL). Vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (2 X 25 mL), a organski slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvorom (10 mL), osušeni natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani u vakuumu dajuć i terc-butil 4-hidroksi-2,2- dimetil-pirolidin-1-karboksilat (150 mg, 99%) koji je direktno korišć en u koraku koji sledi. ESI-MS m/z izrač.215.15215, pronađeno 216.2 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 0,48 min (LC metoda A).
Korak 11: terc-butil 4-(2-hidroksietoksi)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat:
[0698]
[0699] U posudi od 250 mL, terc-butil 4-hidroksi-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (3 g, 13,93 mmol) je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (15 mL) na 0 °C i pažljivo je dodat natrijum hidrid (1,8 g 60% v/v u mineralnom ulju, 45,00 mmol). Smeša je mešana na 0 °C tokom 15 min, a zatim je 2-bromoetoksi-terc-butildimetil-silan (9 mL, 41.95 mmol) dodat u kapima na 0 °C i smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Smeša je mešana 16 h. Smeša je zatim ohlađena na 0 °C, ugašena vodom i ekstrahovana etrom. Organski ekstrakt je ispran vodom, osušen (natrijum sulfat), filtriran i koncentrovan in vacuo. Dobijeno narandžasto ulje je prečišć eno hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom od 0-30% etil acetata u heksanu da bi se dobio terc-butil(dimetil)silil zaštić en intermedijer koji je rastvoren u tetrahidrofuranu (20 mL), tretiran sa tetrahidrofuranski rastvor TBAF (28 mL 1 M, 28,00 mmol) i mešan 2 h na sobnoj temperaturi. Smeša je koncentrovana i ostatak je rastvoren u dihlorometanu, ispran vodom, osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i uparen u vakuumu. Dobijeni sirovi materijal je prečišć en hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom od 0-20% metanola u dihlorometanu da bi se dobio terc-butil 4-(2-hidroksietoksi)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1,6 g, 44% prinos).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 3,97 (d, J = 4,0 Hz, 1H), 3,80 - 3,34 (m, 6H), 2,05 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 1,97 (d, J = 16,4 Hz, 2H), 1,52-1,30 (m, 15H). ESI-MS m/z izrač. 259,17834, nađeno 260,17 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,55 min (LC metoda A).
Korak 12: terc-butil 4-(2-azidoetoksi)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0700]
[0701] U rastvor terc-butil 4-(2-hidroksietoksi)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata (1,6 g, 6,169 mmol) u dihlorometanu (20 mL) dodat je trietilamin (5,2 mL, 37,31). mmol) a zatim metansulfonil hlorid (1,4 mL, 18,09 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 h. Reakciona smeša je ugašena sa ledenom vodom i dihlorometanom i dobijeni slojevi su razdvojeni i organski sloj je osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan u vakuumu da bi se dobio sirovi mezilat koji je kombinovan sa natrijum azidom (1,2 g, 18,46 mmol) u N,N-dimetilformamidu (10 mL) i smeša je mešana na 50 °C tokom 2 h. Reakcija je ugašena vodom i ekstrahovana etrom. Organski ekstrakt je osušen iznad natrijum sulfata, uparen in vacuo i ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom od 0-50% etil acetata u heksanu da bi se dobio terc-butil 4-(2-azidoetoksi)-2,2- dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1,33 g, 76%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 3,96 (k, J = 4,6 Hz, IH), 3,69 - 3,31 (m, 6H), 2,06 - 1,91 (m, 2H), 1,53 - 1,32 (m, 15H).
Korak 13: terc-butil 4-(2-aminoetoksi)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat:
[0702]
[0703] U rastvor terc-butil 4-(2-azidoetoksi)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata (1,33 g, 4,677 mmol) u metanolu (20 mL) dodat je paladijum na ugljeniku (500 mg). Od 10 % v/v, 0,4698 mmol). Smeša je zasić ena gasovitim vodonikom i mešana na sobnoj temperaturi uz prskanje vodonika kroz reakcionu smešu tokom 2 h. Smeša je filtrirana i uparena u vakuumu da bi se dobio terc-butil 4-(2-aminoetoksi)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1,188 g, 98%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 4,00 -3,87 (m, 1H), 3,69 - 3,35 (m, 4H), 2,94 - 2,71 (m, 2H), 2,07 - 1,83 (m, 2H), k1, J = 9,4, 8,4 Hz, 15H).
Korak 14: terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etoksi] pirolidin-1-karboksilat
[0704]
[0705] U zatvorenoj mikrotalasnoj bočici od 20 mL, rastvor terc-butil 4-(2-aminoetoksi)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata (1,188 mg, 4,598 mmol), 6-fluoropiridin- 2-sulfonamid (810 mg, 4,598 mmol) i diizopropiletilamin (4 mL, 22,96 mmol) u n-BuOH (10 mL) su mešani na 150 °C tokom 16 h. Rastvarač je uklonjen in vacuo i ostatak je rastvoren u dihlorometanu i ispran vodom. Organski ekstrakt je osušen preko natrijum sulfata, uparen i prečišć en hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom od 0-40% etil acetata u heksanu da bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-[(6-sulfamoil- 2-piridil)amino]etoksi]pirolidin-1-karboksilat (1.500 g, 66%). ESI-MS m/z izrač. 414.1937, nađeno 415.3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,61 min (LC metoda A).
Korak 15: terc-butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil ] sulfamoil]-2-piridil]amino]etoksi]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0706]
[0707] Balon od 50 mL napunjen karbonil diimidazolom (208 mg, 1,283 mmol) i 2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin -3-karboksilna kiselina (500 mg, 1.283 mmol) je uklonjena i ponovo napunjena azotom (3X). Dodat je tetrahidrofuran (8 mL) i smeša je mešana na 50 °C 1 h. Zatim, rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etoksi]pirolidin-1-karboksilata (483 mg, 1,165 mmol) i 1,8- Dodat je diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (450 mg, 2,956 mmol) u tetrahidrofuranu (6 mL) i smeša je mešana preko noć i na 50 °C. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana vodom. Organska faza je osušena preko natrijum sulfata, uparena in vacuo i prečišć ena hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom od 0 - 50% etil acetata u heksanu da bi se dobile neke čiste frakcije. Mešane frakcije su prečišć ene preparativnom HPLC reverzne faze (C18): 1-99% gradijent acetonitrila u vodi/modifikator hlorovodonične kiseline. Čiste frakcije iz oba prečišć avanja su kombinovane da bi se dobio terc-butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il ]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]etoksi]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (483 mg, 53%). ESI-MS m/z izrač.785,25854, nađeno 786,33 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,88 min (LC metoda A).
Korak 16: 2-hloro-N-[[6-[2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)oksietilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[3-[1-(trifluor -ometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0708]
[0709] Rastvor terc-butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin- 3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]etoksi]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (483 mg, 0,61 mmol) u dioksanu (5 mL) je tretiran hlorovodoničnom kiselinom u dioksanu (6 mL) 6 M, 36,00 mmol) i mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Smeša je uparena in vacuo i ostatak je ugašen sa vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Formirani beli talog je filtriran i ispran etil acetatom. Vodena faza je dodatno ekstrahovana etil acetatom, kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni do dodatnog čvrstog proizvoda koji je kombinovan sa ranije istaloženom čvrstom materijom i osušen u vakuumu da bi se dobio 2-hloro-N-[[6-[2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)oksietilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il] piridin-3-karboksamid (350 mg, 83%). ESI-MS m/z izrač. 685,2061, nađeno 686,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,64 min (LC metoda A).
Korak 17: 12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-15-oksa-2l6-tia-3,9,11 ,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion
[0710]
[0711] U mikrotalasnoj bočici od 5 mL, cezijum fluorid (162 mg, 1,066 mmol), kalijum karbonat (367 mg, 2,655 mmol) i 4 A molekularna sita (300 mg) su kombinovani i bočica je evakuisana/napunjena azotom. Zatim, rastvor 2-hloro-N-[[6-[2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)oksietilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[3-[1- Dodat je (trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (360 mg, 0,5247 mmol) u dimetil sulfoksidu (5 mL) i smeša je mešana na 150 °C preko noć i. Smeša je filtrirana i prečišć ena preparativnom HPLC reverzne faze (C18): gradijent od 1-99% acetonitrila u vodi/modifikator hlorovodonične kiseline (15 min) da bi se dobio 12,12-dimetil-8-(3-{3-[1 -(tri-fluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (118,2 mg, 34%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9,51 (s, 1H), 8,16 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,90 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,60 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,65 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 5,90 (d, J = 2,7 Hz , 1H), 4,82 (s, 1H), 4,33 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 4,24 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 4,06 (s, 1H), 3,82 (t, J = 9,5 Hz , 1H), 3,58 (d, J = 12,1 Hz, IH), 3,43 - 3,28 (m, 2H), 3,15 - 3,03 (m, IH), 2,23 - 2,14 (m, 1H), 1,95 (dk, J = 11), 6,3 Hz, 3H), 1,75 (dd, J = 10,0, 6,2 Hz, 2H), 1,64 (s, 3H), 1,60 (s, 3H), 0,99 - 0,95 (m, 2H), 0,60 (d, J = 4,8 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač.649,22943, nađeno 650,29 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,12 min (LC metoda B).
Korak 18: 12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-15-oksa-2l6-tia-3,9,11 ,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 159 ) i 12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksil-1H-pirazol-1-il)-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18 ,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 160)
[0712]
[0713] Racemski 12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-15-oksa-2l6-tia-3,9, 11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (116 mg, 0,18 mmol) je podvrgnuti hiralnoj separaciji pomoć u SFC hromatografije koriste ć i ChiralPak AS-H (250 Ks 21,2 mm, veličina čestica 5 mm) sa 28% acetonitril/metanol (90:10)/72% mobilna faza ugljen-dioksida pri 70 mL/min tokom 8,0 min ( zapremina injekcije = 500 mL rastvora od 32 mg/mL u acetonitrilu/metanolu (90:10)) dajuć i kao prvi enantiomer za eluiranje, 12,12-dimetil-8-(3-13-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5 ,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 159) (48,3 mg, 28%); ESI-MS m/z izrač. 649,22943, nađeno 650,32 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,12 min (LC metoda B) i kao drugi enantiomer za eluiranje 12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il) -15-oksa- 2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2, 2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 160) (56,0 mg, 48%);<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,57 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,58 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 6,93 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,11 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,19 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 4,17 - 3,99 (m, 2H), 3,88 (t, J = 11,7 Hz, 1H), 3,60 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 3,27 - 2,75 (m, 3H), 2,07 (dd, J = 11,7, 6,0 Hz, 1H), 1,89 - 1,70 (m, 5H), 1,57 (d, J = 9,3 Hz, 6H), 0,93 - 0,85 (m, 2H) , 0,75 (s, 2H). ESI-MS m/z izrač. 649,22943, nađeno 650,43 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,12 min (LC metoda B).
Primer 42: Priprema (14S)-12,12-dimetil-8-(3-13-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksil-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11 , 18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 161)
[0714]
Korak 1: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin - 3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0715]
[0716] U rastvor 2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (10 g, 25,66 mmol) u tetrahidrofuranu (100 mL) je dodat karbonil diimidazol (4,7 g, 27,71 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 90 min. U ovu smešu je zatim dodat terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (12,0 g, 29,09 mmol) u tetrahidrofuranu (50 mL), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (11,5 mL, 76,90 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 h. Reakcija je razblažena vodom (250 mL) i smeša je polako zakiseljena vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (23 mL 6 M, 138,0 mmol). Smeša je ekstrahovana etil acetatom (500 mL) i organska faza je odvojena. Organska faza je isprana sa 300 mL slanog rastvora, osušena iznad magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana u vakuumu. Sirovi proizvod je podeljen na 3 jednaka dela sa acetonitrilom i hromatografisan na koloni 415 reverzne faze C18 eluiranjem sa gradijentom od 50% - 100% acetonitrila u vodi dajuć i proizvod, terc-butil (4S)-4-[3-[ [6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino] propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (13,63 g, 68%) kao voštana čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,75 (s, 1H), 8,39 (t, J = 2,2 Hz, 1H), 8,10 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 8,5, 7,2 Hz, 1H), 7,24 - 7,14 (m, 2H), 6,74 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,20 (dd, J = 8,6, 2,9 Hz , 1H), 4,23 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 3,51 (dt, J = 18,4, 9,2 Hz, 1H), 3,24 (s, 2H), 2,74 (t, J = 10,5 Hz, 1H), 2,05 - 1,96 (m, 1H), 1,91 - 1,69 (m, 5H), 1,51 (dt, J = 15,6, 7,1 Hz, 2H), 1,40 - 1,27 (m, 15H), 1,18 (s, 3H), 0,87 - (m, 2H), 0,80-0,71 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.783,27924, nađeno 784,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,38 min (LC metoda B).
Korak 2: 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[3-[ 1-(trifluorometil) ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so)
[0718] U rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil) ciklopropil] propoksi]pirazol-1 - il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (13,5 g, 17,21 mmol) u dihlorometanu (100 mL) i toluenu (50 mL ) dodata je hlorovodonična kiselina u dioksanu (20 mL 4 M, 80,00 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Rastvarač je uklonjen in vacuo, a ostatak je dalje uparen iz 200 mL toluena dajuć i 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sul-fonil]-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so) (12,7 g, 97%) koji je korišć en bez daljeg prečiš ć avanja. 1H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,80 (s, 1H), 9,31 (s, 1H), 9,14 (s, 1H), 8,41 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,63 (dd, J = 8,5, 7,2 Hz, 1H), 7,19 - 7,15 (m, 3H), 6,78 (dd, J = 8,6, 0,7 Hz, 1H), 6,21 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,24 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 3,28 (dh, J = 27,2, 6,6, 6,1 Hz, 3H), 2,82 (tk, J = 11,8, 7,2, 5,9 Hz, 1H), 2,43-2,32 (m, 1H), 1,95-1,81 (m, 3H), 1,77-1,68 (m, 2H), 1,61-1,31 (m, 8H), m. s, 3H), 0,96-0,88 (m, 2H), 0,81-0,70 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 683,2268, nađeno 684,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,47 min (LC metoda D).
Korak 3: (14S)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11 ,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 161)
[0719]
[0720] U rastvor 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3- [3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so) (12,7 g, 16,77 mmol) u NMP (200 mL) dodat je kalijum karbonat (11,47 g, 82,99). mmol), a zatim cezijum fluorid (2,75 g, 18,10 mmol). Smeša je propuhana azotom 5 min. Smeša je zagrevana na 150 °C tokom 22 h. Reakciona smeša je zatim ohlađena do sobne temperature i dodata u ohlađenu vodu (600 mL). Smeša je pažljivo zakiseljena vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (26 mL 6 M, 156.0 mmol) dajuć i kremastu penastu suspenziju. Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom korišć enjem Buchnerovog levka srednje frite. Vlažni filter kolač je razblažen acetonitrilom i hromatografisan na C18 koloni reverzne faze eluiranjem sa sistemom gradijenta od 50% - 100% acetonitrila u vodi dajuć i beličastu penu koja je dalje sušena u vakuumu na 45 °C tokom 3 dana dajuć i (14S)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 161) (6,0 g, 55 %).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,48 (s, 1H), 8,21 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,57 (dd, J = 8,5 , 7,2 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,12 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,20 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 3,92 (d, J = 12,5 Hz, 1H), 3,16 (s, 1H), 2,95 ( d, J = 13,3 Hz, 1H), 2,71 (t, J = 11,1 Hz, 1H), 2,12 (s, 1H), 1,84 (k, J = 7,8, 6,3 Hz, 3H), 1,80 - 1,67 (m, 3H ), 1,60 (s, 6H), 1,51 (s, 3H), 1,31 (k, J = 12,0 Hz, 1H), 0,97 - 0,87 (m, 2H), 0,76 (k, J = 3,0, 1,7 Hz, 2H) . ESI-MS m/z izrač. 647,2502, nađeno 648,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 9,64 min (LC metoda F).
Primer 43: Priprema 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23 -pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 162) i 8- [3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 163)
[0721]
Korak 1: 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-[[6-[2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)oksietil-amino] -2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid
[0722]
[0723] U posudi od 50 mL 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (400 mg, 1,106 mmol) i karbonil diimidazol (270 mg, 1,665 mmol) je evakuisano i napunjeno azotom (3Ks). Dodat je suvi tetrahidrofuran (10 mL) i reakcija je mešana 90 min na 50 °C. Zatim, rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etoksi]pirolidin-1-karboksilata (158 mg, 0,3812 mmol) i 1,8- Dodan je diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (430 mg, 2,825 mmol) u tetrahidrofuranu (4 mL). Reakcija je zagrevana na 50 °C preko noć i. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana vodom. Organska faza je osušena preko natrijum sulfata, uparena u vakuumu i prečišć ena hromatografijom na silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 0 - 50% etil acetata u heksanu da bi se dobio intermedijer koji je rastvoren u dihlorometanu (5 mL) i tretiran trifluoroacetatom. kiseline (1,000 mL, 12,98 mmol) i mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Rastvarač je uklonjen in vacuo i ostatak je ugašen sa vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i etil acetatom. Formira se beli čvrsti talog. Dvofazna smeša je filtrirana i čvrsti proizvod je ispran etil acetatom. Organski ekstrakt je odvojen od vodenog i osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i uparen in vacuo. Čvrsti materijal iz filtera i ostatak od isparavanja su kombinovani i osušeni u vakuumu da bi se dobio 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-[[6-[2-(5 ,5-dimetilpirolidin-3-il)oksietilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (310 mg, 43%). ESI-MS m/z izrač. 657,25, nađeno 658,32 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 0,68 min (LC metoda B).
Korak 2: 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 156)
[0724]
[0725] 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-[[6-[2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)oksietilamino]-2 kombinovani su piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (320 mg, 0,4862 mmol), kalijum karbonat (340 mg, 2,460 mmol), cezijum fluorid (150 mg, 0,9875 mmol) i 3 A molekularna sita (300 mg). i pročišć en azotom. Dodat je dimetil sulfoksid (4 mL) i smeša je mešana na 150 °C preko noć i. Smeša je filtrirana i prečiš ć ena preparativnom HPLC reverzne faze (C18): gradijent od 1-99% acetonitrila u vodi/modifikator hlorovodonične kiseline da bi se dobio 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il ]-12,12-dimetil-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9 ,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 156) (92,5 mg, 30%). ESI-MS m/z izrač.621,2733, nađeno 622,31 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,26 min (LC metoda B).
Korak 3: 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaaza -tetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 162) i 8-[3 -(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111, 14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 163)
[0726]
[0727] Racemski 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23- pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 156) (90 mg, 0,145 mmol) je podvrgnuti hiralnoj separaciji pomoć u SFC hromatografije koriš ć enjem ChiralPak AS-H (250 Ks 10 mm, veličina čestica 5 mm) sa 40% acetonitril/metanol (90:10)/60% mobilne faze ugljen-dioksida pri 10 mL/min tokom 8,0 min ( zapremina injekcije = 70 mL 24 mg/mL rastvora u acetonitrilu/metanolu (90:10)) dajuć i kao prvi enantiomer za eluiranje, 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9, 19,21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 162) (28,4 mg, 19%); ESI-MS m/z izrač. 621,2733, nađeno 622,38 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,26 min (LC metoda B) i kao drugi enantiomer za eluiranje 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23-pen-taazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4- trion (Jedinjenje 163) (enantiomer 2) (35,4 mg, 39%);<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,58 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,62 - 7,55 (m, 1H ), 7,11 (dd, J = 16,4, 5,9 Hz, 2H), 6,94 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,10 (d, J = 2,7 Hz, 1H ), 4,36 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 4,19 - 4,00 (m, 2H), 3,88 (t, J = 11,3 Hz, 1H), 3,60 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 3,22 (s , 1H), 2,86 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 2,07 (dd, J = 11,8, 5,9 Hz, 1H), 1,89 (k, J = 6,8 Hz, 2H), 1,78 (t, J = 10,9 Hz , 1H), 1,57 (d, J = 10,0 Hz, 6H), 0,68 (kt, J = 8,4, 5,0 Hz, 2H), 0,39 (k, J = 5,9 Hz, 4H), 0,34 - 0,24 (m, 1H) , 0,20 (dt, J = 10,4, 5,2 Hz, 2H), 0,03 (dt, J = 8,0, 4,0 Hz, 2H), ESI-MS m/z izrač.621,2733, nađeno 622,42 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,25 min (LC metoda B).
Primer 44: Priprema 20,20-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10l6-tia-1,3,9,14 ,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 165) i 20 ,20-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil) ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 166)
[0728]
Korak 1: terc-butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0729]
[0730] 2-Hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (275 mg, 0,7056 mmol) i karbonil diimidazol (130 mg , 0,8017 mmol) su kombinovani u anhidrovanom tetrahidrofuranu (5 mL) i mešani 60 min na 50 °C. Zatim rastvor tetrahidrofurana (7 mL) terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(3-sulfamoilpirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilata (206 mg, 0,5330 mmol) i 1,8 dodat je -diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (200 mL, 1,337 mmol). Reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 4 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa 1M rastvorom limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su razdvojeni, sušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni, a zatim prečišć eni hromatografijom na silika gelu koriste ć i gradijent od 100% heksana do 75% etil acetata u heksanu da bi se dobila prljavo bela čvrsta supstanca, terc-butil 4-[3- [3-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]- 2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (226 mg, 56%). ESI-MS m/z izrač. 757,2636, nađeno 758,32 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,88 min (LC metoda A).
Korak 2: 20,20-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10l6-tia-1,3,9,14,22 -pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 155)
terc-butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil ]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (226 mg, 0,2981 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (5 mL) i u smešu je dodata hlorovodonična kiselina u dioksanu (2 mL 4 M, 8.000 mmol) i mešano na sobnoj temperaturi 30 min. Smeša je koncentrovana do suva pod sniženim pritiskom i kombinovani ostatak sa kalijum karbonatom (250 mg, 1,809 mmol), cezijum fluoridom (73 mg, 0,4806 mmol), 3 A molekulskim sitom i dimetil sulfoksidom (6 mL) u bočici, pročišć enom sa azot, zatvoren, zagrejan na 140 °C i mešan 16 h. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature, filtrirana i zatim prečišć ena preparativnom hromatografijom reverzne faze (C18 kolona, 30% do 99% acetonitrila (bez modifikatora) u vodi (5 mM hlorovodonična kiselina) tokom 30 minuta) da bi se dobilo bela čvrsta supstanca okarakterisana kao 20,20-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10l6-tia-1,3,9,14, 22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 155) (96 mg, 51%) .<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,69 (s, 1H), 8,18 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,04 - 6,80 (m, 2H), 6,10 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,30 -4,05 (m, 4H), 2,07 (s, 3H), 1,99 - 1,66 (m, 6H) , 1,55 (s, 3H), 1,47 (s, 3H), 1,33 (t, J = 12,3 Hz, IH), 0,98-0,87 (m, 2H), 0,75 (s, 2H), 0,64 (s, 1H). ESI-MS m/z izrač.621,2345, nađeno 622,24 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,22 min (LC metoda B).
Korak 3: 20,20-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10l6-tia-1,3,9,14,22 -pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 165) i 20 ,20-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2 .1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 166)
[0732]
[0733] Racemski 20,20-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 155) (88 mg, 0,1401 mmol) je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji. Korišć en je slede ć i SFC protokol: ChiralPak AS-3 (150 X 2,1 mm), 3 mm; 35 °C, Mobilna faza: 28% acetonitril:metanol (90:10), 72% ugljen-dioksid sa brzinom protoka od 0,5 mL/min. Prvi enantiomer koji je eluiran bio je 20,20-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) ( Jedinjenje 165) (36 mg, 82%). ESI-MS m/z izrač. 621,2345, nađeno 622,24 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,21 min (LC metoda B). Drugi enantiomer koji je eluiran bio je 20,20-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 166 ) (34 mg, 77%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,69 (s, 1H), 8,18 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,04 - 6,80 (m, 2H), 6,10 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,30 - 4,05 (m, 4H), 2,74 - 2,63 (m, 1H), 2,07 (s, 3H) , 1,99 - 1,66 (m, 7H), 1,55 (s, 3H), 1,47 (s, 3H), 1,33 (t, J = 12,3 Hz, 1H), 0,98 - 0,87 (m, 2H), 0,75 (s, 2H) ), 0,64 (s, IH). ESI-MS m/z izrač.
621,2345, nađeno 622,35 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,21 min (LC metoda B).
Primer 45: Priprema (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propil}pirolid-in-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion
( dijastereomer 1) (Jedinjenje 174) i (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{3-[1-(trifluorometil)ciklo-propil]propil}pirolidin-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza- 1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4 -trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 175)
[0734]
Korak 1: 1-(3-bromopropil)-1-(trifluorometil)ciklopropan
[0735]
[0736] U mešani rastvor trifenilfosfina (655 mg, 2.497 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (10 mL) pod atmosferom azota na -15 °C ukapavanjem je dodat rastvor molekularnog broma (130 mL, 2.524 mmol) u diklorometu. (2 mL) tokom 8 min i po završetku dodavanja (bledožuti rastvor) smeša je mešana dodatnih 15 min na -15 °C. Smeša je zatim ohlađena na -30 °C i rastvor 3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-1-ola (500 mg, 2,379 mmol) i piridina (202 mL, 2,498 mmol) u dihlorometanu (3 mL ) je dodavan kap po kap tokom 5 min i po završetku dodavanja smeša je zagrejana na -5 °C i mešana 1 h. Reakciona smeša je zatim sipana u pentan (250 mL) što je rezultiralo masom belog taloga. Ova suspenzija je filtrirana preko celita i filtrat je redukovan uz rotaciono isparavanje (250 mbar i 30°C vodeno kupatilo) da bi se dobila bela čvrsta supstanca. U ovu čvrstu supstancu je dodat pentan i smeša je kratko sonikirana i filtrirana. Koncentrovanje ovog filtrata dalo je belu čvrstu supstancu koja je ponovo kratko sonikirana pentanom i filtrirana dajuć i sirovi 1-(3-bromopropil)-1-(trifluorometil)ciklopropan (500 mg, 64%) kao bistro ulje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ, 3,42 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 2,09 - 1,95 (m, 2H), 1,71 (d, J = 5,8 Hz, 2H), 1,36 - 1,20 (m , 2H), 1,02-0,93 (m, 2H), 0,61-0,58 (m, 2H). NMR je pokazao čistoć u ~ 70%. Proizvod je koriš ć en za slede ć i korak bez daljeg prečišć avanja.
Korak 2: 1-benzil-3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propil]pirolidin-2-on
[0738] Balon sa tri grla od 100 mL je osušen toplotnim pištoljem pod vakuumom i napunjen azotom. Balon je napunjen sa 1-benzilpirolidin-2-onom (0,21 mL, 1,312 mmol) i anhidrovanim tetrahidrofuranom (2 mL). Posle hlađenja do -78 °C, u kapima je dodat rastvor n-butillitijuma (0,59 mL 2,5 M, 1,475 mmol) (2,5 M u heksanu) izazivajuć i formiranje ružičastog rastvora. Posle mešanja na -78 °C tokom 20 min (rastvor je postao bledožut), dodat je rastvor 1-(3-bromopropil)-1-(trifluorometil)ciklopropana (500 mg, 1,515 mmol) u tetrahidrofuranu (0,5 mL) kap po kap (boja je postala tamnije žuta). Smeša je mešana u kupatilu za hlađenje koje je ostavljeno da se polako zagreje do sobne temperature. Posle 14 h, smeša je ugašena dodatkom zasić enog vodenog rastvora amonijum hlorida (50 mL). Proizvod je ekstrahovan etil acetatom (2 X 30 mL). Organski sloj je osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišć en hromatografijom na silika gelu korišć enjem gradijenta etil acetata (0 do 100% tokom 30 min) u heksanima daju ć i 1-benzil-3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propil]pirolidin-2- jedan (227 mg, 53%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,37 -7,16 (m, 5H), 4,49 (d, J = 14,7 Hz, 1H), 4,41 (d, J = 14,7 Hz, 1H), 3,22 - 3,14 (m 2H), 2,45 (kd, J = 8,9, 4,3 Hz, 1H), 2,23 - 2,10 (m, 1H), 1,94 - 1,80 (m, 1H), 1,72 - 1,32 (m, 6H), 0,99 - 0,88 (m, 1H), 1,72 - 1,32 (m, 6H), 0,99 - 0,88 (m, 1H), 2,45 (kd, J = 8,9, 4,3 Hz, 1H), 1,94 - 1,80 (m, 1H). 2H), 0,61-0,51 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 325,16534, nađeno 326,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,9 min (LC metoda B).
Korak 3: 3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propil]pirolidin-2-on
[0739]
[0740] Balon od 100 mL je napunjen pod azotom sa 1-benzil-3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propil]pirolidin-2-onom (227 mg, 0,6977 mmol), propilaminom (3 mL) i 1 ,2-etandiamin (0,3 mL, 4,488 mmol). Smeša je ohlađena na -20 °C (temperatura kupatila za spoljašnje hlađenje) i dodat je litijum (47 mg, 6,771 mmol) (žica, nakratko isprana heksanom, a zatim sveže isečena na male komade). Plava boja se razvila oko malih komada litijuma, a zatim je brzo nestala na cikličan način. Posle 20 minuta na -20 °C, plava boja je postala trajna. Reakcija je ugašena dodavanjem metanola (400 mL) i vode (10 mL) na -10 °C. Proizvod je ekstrahovan etil acetatom (2 X 25 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata, a rastvarači su upareni da bi se dobio sirov materijal koji je prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta metanola (0%-15% tokom 30 minuta) u dihlorometanu dajuć i 192 mg sirovog materijala. Ovaj materijal je rastvoren u etil acetatu (30 mL) i organska faza je isprana sa 0,1 N hlorovodoničnom kiselinom (2 X 20 mL) i 1N hlorovodoničnom kiselinom (2 X 20 mL). Organska faza je zatim osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i rastvarači upareni da bi se dobio 3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propil]pirolidin-2-on (108 mg, 66%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 5,76 (široki s, 1H), 3,41 - 3,28 (m, 2H), 2,40 - 2,23 (m, 2H), 1,88 - 1,73 (m, 2H), 1,447 - m, 4H), 1,42-1,30 (m, IH), 0,97-0,90 (m, 2H), 0,61-0,47 (m, 2H).
[0741] ESI-MS m/z izrač.235,1184, nađeno 236,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,43 min (LC metoda B).
Korak 4: (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propil} pirolidin-1-il)-2l6-tia-3,9, 11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1 ) (Jedinjenje 174) i (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{3-[1-(trifluorometil) ciklopropil]propil}pirolidin-1-il)-2l6-tia -3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heks-an-2,2,4 -trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 175)
[0742]
[0743] Bočica od 4 mL je napunjena sa (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (100 mg, 0,2222 mmol), 3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propil ] pirolidin-2-on (54 mg, 0,2295 mmol), Pd2(dba)3(33 mg, 0,03604 mmol), ksanfos (21 mg, 0,03629 mmol), cezijum karbonat (430 mg, 1,320 mmol) i anhidrovani 5 dioksan mL). Smeša je prskana azotom oko 5 min (pretvorena u gel), zatvorena i mešana na 120 °C tokom 14 h. Organski rastvarač je uparen duvanjem azota u bočicu. Reakcija je zatim razblažena sa dimetil sulfoksidom (3 mL), mikrofiltrirana i podvrgnuta preparativnoj HPLC reverzne faze (C18) korišć enjem gradijenta acetonitrila u vodi (1% do 99% tokom 15 minuta) i hlorovodonične kiseline kao modifikatora (4 X 950 mL injekcije, 400 mL). Čiste frakcije su sakupljene i organski rastvarači su upareni. Dobijeni vodeni rastvor je ekstrahovan dihlorometanom i organska faza je osušena preko natrijum sulfata. Filtracija prać ena isparavanjem filtrata rastvarača daje 74 mg čvrste supstance. Proizvod je zatim dalje prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta metanola (0% do 5% tokom 30 min) u dihlorometanu da bi se dobila smeša dijastereomera koja je podvrgnuta hiralnom SFC razdvajanju (ChiralCel OJ-H (250 X 10 mm), 5 mM kolona; mobilna faza 22% acetonitril/metanol (90:10, bez modifikatora), 78% ugljen dioksid, 10 mL/min; koncentracija 24 mg/mL u acetonitrilu/metanolu/dimetil sulfoksidu (85:9 :6); zapremina ubrizgavanja 70 mL, 100 bara). Prvi dijastereomer koji je eluiran bio je (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propil}pirolidin-1-il)-2l6-tia-3 ,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 174) (12,4 mg, 17%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksidd6) δ 12,39 (s, 1H), 7,67 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,56 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,96 (široki d, J = 5,3 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,04 (t, J = 9,1 Hz , 1H), 3,91 (k, J = 12,6 Hz, 1H), 3,80 - 3,67 (m, 1H), 3,11 (bt s, 1H), 2,94 (br d, J = 13,3 Hz, 1H), 2,77 - 2,57 (m, 2H), 2,31 - 2,19 (m, 1H), 2,10 (br s, 1H), 1,87 - 1,66 (m, 4H), 1,64 - 1,22 (m, 15H), 0,92 - 0,83 (m, 2H), 0,76-0,68 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 648,27057, nađeno 649,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,14 min (LC metoda B). Drugi dijastereomer koji je eluiran bio je (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-13-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propil}pirolidin-1-il)-2l6-tia- 3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heks-an-2,2,4- trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 175) (12,2 mg, 17%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,39 (s, 1H), 7,68 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,63 - 7,48 (m, 2H), 7,04 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,63 - 7,48 (m, 2H), 7,04 (d, J = 7,1 Hz, 1H). ), 6,95 (br d, J = 5,1 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,04 - 3,87 (m, 2H), 3,82 (k, J = 9,9, 9,0 Hz, 1H), 3,09 (široki s, 1H), 2,94 (d, J = 13,4 Hz, 1H), 2,75 - 2,61 (m, 2H), 2,24 (k, J = 8,7, 7,9 Hz, 1H), 2,17 - 1,96 (br m, 1H), 1,87-1,64 (m, 4H), 1,64-1,41 (m, 12H), 1,41-1,15 (m, 3H), 0,92-0,84 (m, 2H), 0,71 (s, 2H). ESI-MS m/z izrač. 648,27057, nađeno 649,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,12 min (LC metoda B).
Primer 46: Priprema 4-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il]etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 176)
[0744]
Korak 1: 7-(bromometil)dispiro[2.0.2.1]heptan
[0745]
[0746] Balon sa okruglim dnom od 1000 mL sa 3 grla je opremljen mehaničkom mešalicom, kupatilom za hlađenje, levka za dodavanje, J-Kem temperaturnom sondom i ulazom/izlazom azota. Posuda je napunjena u atmosferi azota sa trifenilfosfinom (102,7 mL, 443,2 mmol) i dihlorometanom (1 L) koji je dao bistar bezbojni rastvor. Započelo je mešanje i rashladno kupatilo je napunjeno acetonom. Suvi led je dodavan u porcijama u kupatilo za hlađenje dok se ne postigne temperatura posude od -15 °C. Levak za dodavanje je napunjen sa rastvorom broma (22,82 mL, 443,0 mmol) u dihlorometanu (220 mL, 10 mL/g) koji je zatim dodat u kapima tokom 1 h. Suvi led je dodat u porcije u kupatilo za hlađenje tokom dodavanja da bi se održala temperatura posude na -15 °C. Nakon što je dodavanje broma završeno, bledo žuta suspenzija je nastavljena da se meša na -15 °C tokom 15 minuta u kom trenutku je suspenzija ohlađena na -30 °C. Levak za dodavanje je napunjen sa rastvorom dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il metanola (50 g, 402,6 mmol), piridina (35,82 mL, 442,9 mmol) i dihlorometana (250 mL, 5 mL/g). Bistri bledo žuti rastvor je zatim dodat u kapima tokom 1,5 h održavajuć i temperaturu posude na -30 °C. Dobijena bistra svetlo žuta reakciona smeša je ostavljena da se postepeno zagreje do temperature posude od -5 °C, a zatim je nastavljena sa mešanjem na -5 °C tokom 1 h. Reakciona smeša je zatim sipana u heksan (2000 mL) što je rezultiralo formiranjem precipitata. Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi 30 min, a zatim filtrirana kroz Buhnerov levak od staklene frite sa slojem celita od 20 mm. Bistri filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom (temperatura vodenog kupatila na 20 °C) da bi se dobilo žuto ulje sa prisutnim precipitatom. Ulje je razblaženo sa malo heksana, ostavljeno da stoji na sobnoj temperaturi 15 min i zatim filtrirano kroz stakleni frit Buchner levak sa slojem celita od 20 mm. Bistri filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom (temperatura vodenog kupatila na 20 °C) da bi se dobio 7-(bromometil)dispiro[2.0.2.1]heptan (70 g, 93%) kao bistro žuto ulje.
<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 3,49 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 1,90 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 1,06 - 0,84 (m, 4H), 0,71 (ddd, J = 9.1, 5.1, 4.0 Hz, 2H), 0.54 (dddd, J = 8.6, 4.8, 3.8, 1.0 Hz, 2H).
Korak 2: 2-Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilacetonitril
[0747]
[0748] Balon sa okruglim dnom od 1000 mL sa 3 grla je opremljen mehaničkom mešalicom, kupatilom za hlađenje koje se koristi kao sekundarni kontejner, J-Kem temperaturnom sondom i ulazom/izlazom azota. Posuda je napunjena u atmosferi azota sa 7-(bromometil)dispiro[2.0.2.1]heptanom (35 g, 187,1 mmol) i dimetil sulfoksidom (245 mL) koji je dao bistar rastvor ć ilibara. Započeto je mešanje i temperatura posude je zabeležena na 19 °C. Posuda je zatim napunjena natrijum cijanidom (11,46 g, 233,8 mmol) koji je dodat kao čvrsta supstanca u jednom delu, što je rezultiralo tamnim rastvorom i postepenom egzotermnom temperaturom do 49 °C tokom 15 min. Posle nekoliko minuta temperatura posude je počela da opada i smeša je nastavljena da se meša na sobnoj temperaturi preko noć i (oko 15 h). Tamna reakciona smeša je ugašena ledeno hladnim zasić enim rastvorom natrijum karbonata (500 mL), a zatim prebačena u levak za odvajanje i podeljena dietil etrom (500 mL). Organski sloj je uklonjen, a zaostali vodeni sloj je ekstrahovan dietil etrom (2 Ks 250 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (500 mL), osušeni preko natrijum sulfata (200 g) i zatim filtrirani kroz Buhnerov levak od staklene frite. Čisti filtrat boje ć ilibara je koncentrovan pod sniženim pritiskom (temperatura vodenog kupatila 20 °C) da bi se dobio 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilacetonitril (21 g, 84%) kao bistro ulje tamne boje ć ilibara.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 2,42 (d, J =6,6 Hz, 2H), 1,69 (t, J =6,6 Hz, 1H), 1,02 - 0,88 (m, 4H), 0,79 - 0,70 (m, 2H), 0,66-0,55 (m, 2H).
Korak 3: 2-Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iloctena kiselina
[0749]
[0750] U rastvor 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilacetonitrila (2,1 g, 14,19 mmol) u EtOH (32 mL) dodat je natrijum hidroksid (5,12 g, 128,0 mmol), a zatim L vode (13 mL). ) i dobijeni rastvor je mešan i zagrevan na 70 °C preko noć i. Smeša je zatim ohlađena do sobne temperature, razblažena vodom i ekstrahovana dietil etrom. Vodena faza je podešena na pH = 1 dodatkom 6 N hlorovodonične kiseline (što rezultira mutnim precipitatom) i ekstrahovana dietil etrom (3X). Organske faze su osušene (magnezijum sulfat), filtrirane i koncentrovane dajuć i 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iloctenu kiselinu (2,19 g, 99% prinos, 98% čistoć e) kao narandžastu čvrstu supstancu koja je koriš ć ena u slede ć em korak bez daljeg prečiš ć avanja. 1H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 2,44 (d, J = 6,9 Hz, 2H), 1,67 (t, J = 6,9 Hz, 1H), 0,91 (ddd, J = 9,0, 5,2, 3,9 Hz, 2H) , 0,81 (dddd, J = 8,9, 5,2, 3,9, 0,5 Hz, 2H), 0,69 (ddd, J = 8,9, 5,2, 3,9 Hz, 2H), 0,56 - 0,44 (m, 2H).
Korak 4: 2-Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletanol
[0751]
[0752] Litijum aluminijum hidridu (827,4 mg, 902,3 mL, 21,80 mmol) rastvorenom u tetrahidrofuranu (33,71 mL) ohlađenom u kupatilu led/voda dodata je 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ila55cetinska kiselina , 16,77 mmol) u tetrahidrofuranu (7,470 mL) ukapavanjem tokom 15 minuta održavajuć i temperaturu reakcije < 20 °C. Smeša je ostavljena da se meša ukupno 18 h, postepeno zagrevajuć i do sobne temperature. Smeša je ohlađena u kupatilu led/voda i uzastopno ugašena sporim dodavanjem vode (838,4 mg, 838,4 mL, 46,54 mmol), zatim natrijum hidroksida (1,006 mL 5 M, 5,031 mmol), zatim vode (2,493 g, 2,493 mL, 138,4 mmol) dajuć i belu, zrnastu suspenziju koja je filtrirana preko celita. Filtrirana čvrsta supstanca je isprana dietil etrom. Filtrat je koncentrovan in vacuo na ~ 300 mbar i vodeno kupatilo na 30 °C. Ostatak je razblažen dietil etrom, osušen (magnezijum sulfat), filtriran i koncentrovan u vakuumu na ~ 300 mbar i 30 °C u vodenom kupatilu, a zatim ~ 30 sekundi pod vakuumom da bi se dobio 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletanol (2,318 g, 100%) koji je korišć en direktno u slede ć em koraku bez daljeg prečiš ć avanja. 1H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 3,64 (s, 2H), 1,68 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 1,39 (s, 1H), 1,31 (s, 1H), 0,82 (d, J = 14,0 Hz, 4H), 0,65 (s, 2H), 0,50 (d, J = 3,6 Hz, 2H).
Korak 5: terc-butil 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-karboksilat
[0753]
[0754] U rastvor terc-butil 5-okso-1H-pirazol-2-karboksilata (2,942 g, 15,97 mmol) i 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletanola (2,318 g, 16,77 mmol) in. tetrahidrofuran (36.78 mL) je dodat trifenilfosfin (4.399 g, 16.77 mmol). U smešu je polako dodat diizopropil azodikarboksilat (3,391 g, 3,302 mL, 16,77 mmol) kap po kap tokom 10 min (zabeležena blaga egzotermna reakcija). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min, a zatim na 50 °C tokom 30 min. Tetrahidrofuran je uklonjen u vakuumu. Sirovom ostatku je dodat toluen (23,54 mL) i smeša je mešana preko noć i dok je talog postepeno kristalisao. Razmu ć en sa celitom, a zatim je talog odfiltriran i ispran toluenom (8,705 mL) i ponovo toluenom (8,705 mL). Filtrat je koncentrovan in vacuo. Sirovi proizvod je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata dajuć i terc-butil 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-karboksilat (3.449 g, 71%). ESI-MS m/z izrač.
304,17868, nađeno 305,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,82 min (LC metoda A).
Korak 6: 3-(2-Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)-1H-pirazol
[0755]
terc-butil 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-karboksilat (5,304 g, 17,43 mmol) rastvoren je u dihlorometanu (53,04 mL) sa trifluorosirć etnom kiselinom (1,8,1,49). mL, 261,4 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 120 min. Reakcija je uparena i dobijeno ulje je podeljeno između etil acetata i zasić enog rastvora natrijum bikarbonata i slojevi su razdvojeni. Vodeni deo je ekstrahovan još dva puta etil acetatom, zatim su organski slojevi kombinovani, isprani slanim rastvorom, osušeni iznad natrijum sulfata, filtrirani i upareni da bi se dobilo ulje, 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7- iletoksi)-1H-pirazol (3,56 g, 100%). ESI-MS m/z izrač.204,12627, nađeno 205,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,59 min (LC metoda A).
Korak 7: terc-butil 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[0756]
terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (4,322 g, 17,42 mmol), 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)-1H-pirazol (3,559 g, 17,42 mmol) i kalijum karbonat (2,891 g, 20,92 mmol) su kombinovani u anhidrovanom dimetil sulfoksidu (71,18 mL). Dodat je 1,4-Diazabiciklo[2.2.2]oktan (391,1 mg, 3,487 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom 16 h. Reakciona smeša je razblažena vodom (136,9 mL) i mešana 15 min. Dobijena bela čvrsta supstanca je filtrirana i isprana vodom. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu i osušena iznad magnezijum sulfata. Smeša je filtrirana i uparena da bi se dobio tercbutil 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (5,69 g, 79%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,35 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,18 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,94 (d , J = 2,9 Hz, 1H), 4,25 (s, 2H), 1,90 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 1,62 (s, 9H), 1,49 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 0,85 (d, J = 1,5 Hz, 4H), 0,65 (d, J = 1,5 Hz, 2H), 0,52 (d, J = 1,1 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač. 415,16626, nađeno 360,0 (M-tBu)+; Vreme zadržavanja: 2,09 min (LC metoda B).
Korak 8: 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[0757]
terc-butil 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (5,85 g, 14,07 mmol) rastvoren je u dihlorometanu ( 58,5 mL) sa trifluorosirć etnom kiselinom (16,26 mL, 211,1 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakcija je uparena i u rezultujuć u čvrstu supstancu je dodat etar, a zatim je etar uklonjen pod sniženim pritiskom. Ovo isparavanje iz etra je ponovljeno još dva puta dajuć i belu čvrstu supstancu, 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (5,06 g, 100%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,41 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,37 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,97 (d , J = 2,9 Hz, 1H), 4,27 (s, 2H), 1,91 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 1,50 (s, 1H), 0,85 (d, J = 1,5 Hz, 4H), 0,71 - 0,62 (m, 2H), 0,52 (d, J = 1,1 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač. 359,10367, nađeno 360,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,16 min (LC metoda B).
Korak 9: terc-butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0758]
[0759] 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7 -iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (400 mg, 1.112 mmol) i karbonil diimidazol (273.5 mg, 1.687 mmol) su kombinovani u tetrahidrofuranu (2 mL) i mešani 90 minuta na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(3-sulfamoilpirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (429,5 mg, 1,111 mmol), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4. 0]undec-7-en (430,8 mg, 2,830 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 1 h, zatim zagrevana do 50 °C i mešana preko noć i. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasi ć enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su razdvojeni, sušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni, a zatim prečišć eni hromatografijom na silika gelu koriste ć i gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio terc-butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil- pirolidin-1-karboksilat (350 mg, 43%) kao sivobela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksidd6) δ 8,34 (s, 1H), 8,08 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,62 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,71 - 6,49 (m, 1H), 6,10 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,23 (s, 2H), 4,13 (s, 2H), 3,52 (s, 1H), 2,73 (d, J = 6,0 Hz , 1H), 2,08 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 1,81 (k, J = 6,6 Hz, 5H), 1,47 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 1,40 - 1,21 (m, 18H), 0,83 (d, J = 2,0 Hz, 4H), 0,66-0,60 (m, 2H), 0,52-0,46 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 727,2919, nađeno 728,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,92 min (LC metoda A).
Korak 10: 2-hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]pirazol-3-il]sulfonil-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1] hep-tan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0760]
terc-butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil ]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (350 mg, 0,4806 mmol) rastvoren je u dihlorometanu (1,527 mL) i u smešu je dodata trifluorosirć etna kiselina (2,192 g, 1,481 mL, 19,22 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 60 min. Smeša je koncentrovana do suva pod sniženim pritiskom, rastvorena u zasić enom vodenom rastvoru natrijum bikarbonata i etil acetata koji sadrži malu količinu metanola radi rastvorljivosti i razdvojeni slojevi. Koncentrovan organski sloj rotacionim isparavanjem prać eno visokom vakuum pumpom daju ć i 2-hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]pirazol-3-il]sulfonil-6-[3 -(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (301,9 mg, 100%) kao sivobela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,28 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,21 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,44 (s, 1H ), 6,67 (s, 1H), 5,88 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,22 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 4,17 (s, 2H), 3,55 (s, 1H), 3,03 (s , 1H), 2,23 (s, 1H), 1,88 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 1,83 (s, 3H), 1,48 (s, 1H), 1,46 - 1,35 (m, 5H), 1,35 - 1,24 ( m, 4H), 0,84 (t, J = 1,9 Hz, 4H), 0,63 (d, J = 1,6 Hz, 2H), 0,51 (d, J = 1,1 Hz, 2H).
Korak 11: 4-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10l6-tia-1,3, 9,14,22-pentazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 176)
[0761]
[0762] Kombinovani 2-hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]pirazol-3-il]sulfonil-6-[3-(2-dispiro[2.0 .2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (310 mg, 0,4935 mmol), kalijum karbonat (341,1 mg, 2,468 mmol), cezijum fluorid (112,8 mg, 0,7426 mmol), molekulska sita i dimetil sulfoksid (9,3 mL) u bočici, pročišć eni azotom, zatvoreni poklopcem, zagrejani na 155 °C i mešani 20 h. Ohlađena do sobne temperature, zatim je smeša filtrirana, razblažena etil acetatom i isprana zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su razdvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, upareni i zatim prečišć eni hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio 4-[3-(2-[dispiro[] kao bela čvrsta supstanca 2.0.2.1]heptan-7-il]etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 176) (117 mg, 40%).<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 8,37 (s, 1H), 8,16 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 2,3 Hz, 1H ), 7,26 (s, 1H), 7,07 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,86 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,36 (d, J = 13,5 Hz, 1H), 4,24 (s, 2H), 3,95 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 2,74 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 2,15 (d, J = 4,2 Hz, 2H), 2,08-1,93 (m, 3H), 1,89 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 1,76 (dd, J = 11,9, 5,3 Hz, 1H), 1,59 (s, 3H), 1,55 (s, 5H), 0,85 (k, J = 2,0 Hz, 4H), 0,64 (d, J = 1,7 Hz, 2H), 0,51 (d, J = 1,2 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač.591,26276, nađeno 592,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,37 min (LC metoda B).
Primer 47: Priprema (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil- 2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2, 4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 177) i (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etil)-2-oksopirolidin-1-il]-12 ,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen -2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 178)
[0763]
Korak 1: 7-(2-bromoetil)dispiro[2.0.2.1]heptan
[0764]
[0765] U mešani rastvor trifenilfosfina (1,07 g, 4,080 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (15 mL) u atmosferi azota na -15° dodat je u kapima rastvor molekularnog broma (0,22 mL, 4,271 mmol) u dihanu. 3 mL) tokom 10 min i po završetku dodavanja (bledo narandžasti rastvor) smeša je mešana dodatnih 15 min na -15 °C. Smeša je zatim ohlađena na -30 °C i rastvor 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletanola (537 mg, 3.885 mmol) i piridina (330 mL, 4.080 mmol) u dihlorometanu (4 mL) je dodavan kap po kap tokom 5 min i po završetku dodavanja smeša je zagrejana na -5 °C i mešana 2 h. Reakciona smeša je zatim sipana u pentan (350 mL) što je rezultiralo masom žutog taloga. Ova suspenzija je filtrirana i filtrat je redukovan uz rotaciono isparavanje (250 mbar i 30 °C vodeno kupatilo) da bi se dobila bela čvrsta supstanca. U ovu čvrstu supstancu je dodat pentan i smeša je kratko sonikirana i filtrirana. Koncentrovanjem ovog filtrata dobija se 7-(2-bromoetil)dispiro[2.0.2.1]heptan (634 mg, 81%) kao bledo žuto ulje koje je koriš ć eno za slede ć i korak bez daljeg prečiš ć avanja.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 3,37 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 2,02 - 1,96 (m, 2H), 1,46 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 0,91 - 0,78 (m, 4H), 0,66 (ddd, J = 8,1, 4,8, 3,6 Hz, 2H), 0,50 (dddd, J = 9,0, 4,9, 3,7, 0,9 Hz, 2H).
Korak 2: 1-benzil-3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletil)pirolidin-2-on
[0767] Balon sa tri grla od 100 mL je osušen toplotnim pištoljem pod vakuumom i napunjen azotom. Balon je napunjen sa 1-benzilpirolidin-2-onom (0,46 mL, 2,875 mmol) i anhidrovanim tetrahidrofuranom (5 mL). Posle hlađenja na -78 °C, u kapima je dodat rastvor n-butillitijuma (1,3 mL 2,5 M, 3,250 mmol) (2,5 M u heksanu) izazivajuć i formiranje narandžastog rastvora. Posle mešanja na -78 °C tokom 20 min, u kapima je dodat rastvor 7-(2-bromoetil)dispiro[2.0.2.1]heptana (611 mg, 3,038 mmol) u tetrahidrofuranu (1 mL). Smeša je mešana u kupatilu za hlađenje koje je ostavljeno da se polako zagreje do sobne temperature. Posle 17 h, smeša je ugašena dodatkom zasić enog vodenog rastvora amonijum hlorida (50 mL). Proizvod je ekstrahovan etil acetatom (2 Ks 30 mL). Organski sloj je osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu koriste ć i gradijent etil acetata (0 do 100% tokom 30 min) u heksanu. Uparavanjem rastvarača dobija se 1-benzil-3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletil)pirolidin-2-on (352 mg, 41%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,38 - 7,17 (m, 5H), 4,45 (k, J = 14,7 Hz, 2H), 3,22 - 3,10 (m, 2H), 2,42 (kd, J = 8,1,8, 2H), 3,22 - 3,10 (m, 2H) Hz, 1H), 2,21 - 2,07 (m, 1H), 2,00 - 1,85 (m, 1H), 1,62 (dk, J = 12,7, 8,4 Hz, 1H), 1,51 - 1,42 (m, 2H), 1,42 - 1 m, 2H), 0,88-0,71 (m, 4H), 0,68-0,55 (m, 2H), 0,51-0,39 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 295.1936, nađeno 296.3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,08 min (LC metoda B).
Korak 3: 3-(2-Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletil)pirolidin-2-on
[0768]
[0769] Balon od 100 mL je napunjen pod azotom sa 1-benzil-3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletil)pirolidin-2-onom (350 mg, 1,185 mmol), propilaminom (4 mL). ) i 1,2-etandiamin (510 mL, 7.629 mmol). Smeša je ohlađena na -20 °C (temperatura spoljašnjeg rashladnog kupatila) i dodat je litijum (72 mg, 10,37 mmol) (žica, kratko isprana heksanom, zatim sveže isečena na male komade). Plava boja se razvila oko malih komada litijuma i zatim brzo nestala. Posle 2 h na -20 °C, plava boja je postala trajna. Reakcija je ugašena dodavanjem metanola (400 mL) na -20 °C i vode (40 mL). Posle zagrevanja do sobne temperature, bela čvrsta supstanca u suspenziji je filtrirana, isprana vodom i kratko osušena na vazduhu (200 mg). Materijal je prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu korišć enjem gradijenta metanola (0 do 15% tokom 30 min) u dihlorometanu daju ć i 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletil)pirolidin-2-on ( 173 mg, 71%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 5,69 (široki s, 1H), 3,41 - 3,24 (m, 2H), 2,37 - 2,20 (m, 2H), 1,88 (dddd, J = 13,4, 9,1, 7,8. Hz, 1H), 1,83 - 1,67 (m, 1H), 1,53 - 1,41 (m, 2H), 1,41 - 1,29 (m, 2H), 0,86 - 0,74 (m, 4H), 0,67 - 0,59 (m, 2H), 0,51-0,39 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 205,14667, nađeno 206,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,61 min (LC metoda B).
Korak 4: (14S)-8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia- 3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion ( dijastereomer 1) (Jedinjenje 177) i (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2 ,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 178)
[0771] Bočica od 4 mL je napunjena sa (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (100 mg, 0,2222 mmol), 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7 -iletil)pirolidin-2-on (47 mg, 0,2289 mmol), Pd2(dba)3(32 mg, 0,03495 mmol), ksanfos (19 mg, 0,03284 mmol), cezijum karbonat (365 mg, 1,120 mmol) i anhidrovani dioksan (1,5 mL). Smeša je prskana azotom oko 5 min, zatvorena i mešana na 120 °C tokom 16 h. Organski rastvarač je uparen duvanjem azota u bočicu. Reakcija je razblažena sa dimetil sulfoksidom (3 mL), mikrofiltrirana i podvrgnuta preparativnoj HPLC reverzne faze (C18) korišć enjem gradijenta acetonitrila u vodi (1 do 99% tokom 15 min) i hlorovodonične kiseline kao modifikatora. Čiste frakcije su sakupljene i organski rastvarači su upareni. Dobijeni vodeni rastvor je ekstrahovan dihlorometanom i organska faza je osušena preko natrijum sulfata. Uparavanjem rastvarača dobija se ostatak koji je prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta metanola (0 do 5% tokom 30 min) u dihlorometanu. Dobijeni proizvod je rastvoren u dimetil sulfoksidu (2 mL) i dalje prečišć en preparativnom HPLC korišć enjem 50 do 99% gradijenta acetonitrila tokom 15 minuta u vodi (hlorovodonična kiselina kao modifikator). Čiste frakcije su sakupljene i organski rastvarači su upareni. Dobijeni vodeni rastvor je ekstrahovan dihlorometanom i organska faza je osušena preko natrijum sulfata. Uparavanje rastvarača dalo je dijastereomernu smešu koja je podvrgnuta SFC razdvajanju (ChiralCel OJ-H (250 X 10 mm), 5 mM kolona; mobilna faza 24% acetonitril/metanol (90:10, bez modifikatora), 76% ugljen dioksid , 10 mL/min, koncentracija 24 mg/mL u acetonitrilu/metanolu/dimetil sulfoksidu (72:8:20), zapremina injekcije 70 mL, 100 bara). Frakcije čistih proizvoda su kombinovane i rastvarači su upareni, a ostatak je triturisan u dihlorometanu/heksanu. Prvi dijastereomer koji je eluiran bio je (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.24.13]heptan-7-il}etil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaa-zatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2 ,4-trion (diastereomer 1) (Jedinjenje 177) (6,3 mg, 9%). 1H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) 5 12,38 (s, 1H), 7,67 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,62 - 7,45 (m, 2H), 7,03 (d, J = 7,2 Hz, 1H),<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ, 6,95 (široki s, 1H), 6,70 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 4,04 (t, J = 8,9 Hz, 1H), 3,91 (br dd, J = 25,4, 13,2 Hz, 1H), 3,74 (k, J = 9,0, 8,4 Hz, 1H), 3,11 (br s, 1H), 2,94 (br d, J = 13,5 Hz, 1H), 2,76 - 2,63 (m, 1H), 2,64 - 2,54 (m, 1H ), 2,22 (k, J = 9,0, 8,2 Hz, 1H), 2,10 (br s, 1H), 1,92 - 1,63 (m, 4H), 1,64 - 1,18 (m, 14H), 0,89 - 0,70 (m, 4H) 0,68-0,57 (m, 2H), 0,53-0,39 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 618,2988, nađeno 619,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,37 min (LC metoda B). Drugi dijastereomer koji je eluiran bio je (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etil)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heks-en-2,2 ,4-trion (diastereomer 2) (Jedinjenje 178) (5,2 mg, 7%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,38 (s, 1H), 7,67 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,62 - 7,45 (m, 2H), 7,03 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 7,62 -7,45 (m, 2H), 7,03 (d, J = 7,0 Hz, 1H). ), 6,95 (široki s, 1H), 6,70 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 3,93 (t, J = 9,3 Hz, 2H), 3,82 (k, J = 9,9, 8,9 Hz, 1H), 3,10 ( br s, 1H), 2,93 (br d, J = 13,0 Hz, 1H), 2,76 - 2,55 (m, 2H), 2,31 - 2,17 (m, 1H), 2,09 (br s, 1H), 1,86 - 1,63 (m , 4H), 1,61-1,29 (m, 14H), 0,86-0,73 (m, 4H), 0,67-0,58 (m, 2H), 0,51-0,40 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 618,2988, nađeno 619,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,37 min (LC metoda B).
Primer 48: Priprema (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19 (23),20-heksan-2,2, 4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 179) i (14S)-8-[3-(2-[dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il]etoksi)-2-oksopirolidin-1-il]-12 ,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen -2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 180)
Korak 1: 3-(2-Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirolidin-2-on
[0773]
[0774] Balon od 100 mL je napunjen pod azotom sa 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletanolom (502 mg od 65% v/v, 2,361 mmol) (sadrži 35% v/v zaostalog tetrahidrofurana), 3-bromopirolidin-2-on (390 mg, 2,378 mmol) i anhidrovani tetrahidrofuran (12 mL). Smeša je ohlađena do -50 °C, zatim je [bis(trimetilsilil)amino]kalijum (10 mL 0,5 M u toluenu, 5.000 mmol) dodat u kapima i smeša je mešana na -50 °C tokom 15-20 minuta, zatim u ledenom kupatilu na 0 °C tokom 3 h. Reakcija je ostavljena da se polako zagreje do sobne temperature (ružičasta reakciona smeša). Posle 14 h, smeša je ohlađena do 0 °C, a zatim je u reakciju dodata glacijalna sirć etna kiselina (210 mL, 3.693 mmol) daju ć i narandžastu suspenziju. Dodati su slani rastvor (75 mL) i etil acetat (75 mL) i dve faze su razdvojene. Vodena faza je dalje ekstrahovana etil acetatom (2 x 25 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i rastvarači su upareni. Sirovi ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu (0-15% metanola u gradijentu dihlorometana tokom 30 min) da bi se dobio željeni 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirolidin-2-on (399 mg, 76%) kao bledo narandžasta smola koja se polako očvršć ava. 1H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7,74 (široki s, 1H), 3,84 (dd, J = 7,7, 7,1 Hz, 1H), 3,71 (dt, J = 9,2, 6,7 Hz, 1H), 3,44 dt, J = 9.3, 6.8 Hz, 1H), 3.22 - 3.01 (m, 2H), 2.27 (dtd, J = 12.8, 7.4, 3.7 Hz, 1H), 1.78 (ddt, J = 12.8, 8.4 Hz, 71H), 1,57 (k, J = 6,7 Hz, 2H), 1,35 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 0,87 - 0,70 (m, 4H), 0,67 - 0,55 (m, 2H), 0,54 - 0,36 (m , 2H). ESI-MS m/z izrač. 221,14159, nađeno 222,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,35 min (LC metoda B).
Korak 2: terc-butil 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)-2-okso-pirolidin-1-il]piridin-3-karboksilat
[0775]
[0776] Balon od 100 mL je napunjen pod azotom sa terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilatom (424 mg, 1.709 mmol) i 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirolidinom -2-on (376 mg, 1.699 mmol) u anhidrovanom N,N-dimetilformamidu (4 mL). Dodan je kalijum karbonat (724 mg, 5.239 mmol) (325 mesh), a zatim 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (62 mg, 0.5527 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom. Posle 16 h, reakcija je ugašena dodatkom vode (50 mL) i zatim ekstrahovana etil acetatom (3 X 40 mL). Organska faza je osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i isparljive supstance su uparene. Proizvod je prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu koriste ć i gradijent etil acetata (0 do 50% tokom 30 min) u heksanu. Čiste frakcije su sakupljene i rastvarači su upareni da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)-2-okso-pirolidin-1-il]pirid - ine-3-karboksilat (555 mg, 75%) kao bezbojna smola.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,33 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,24 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 4,32 (dd, J = 8,8, 7,9 Hz, 1H), 4,07 - 3,94 (m, 1H), 3,86 - 3,64 (m, 2H), 3,56 (dt, J = 9,2, 6,8 Hz, 1H), 2,49 - 2,38 (m, 1H), 1,89 (dk, J = 12,85. Hz, 1H), 1,62 (k, J = 6,7 Hz, 2H), 1,55 (s, 9H), 1,39 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 0,88 - 0,71 (m, 4H), 0,69 - 0,57 (m , 2H), 0,46 (d, J = 8,8 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač. 432,18158, nađeno 433,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,43 min (LC metoda B).
Korak 3: 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)-2-okso-pirolidin-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[0777]
[0778] Balon od 100 mL je napunjen terc-butil 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)-2-okso-pirolidin-1-il]piridin- 3-karboksilat (533 mg, 1,231 mmol), dihlorometan (5 mL) i trifluorosirć etna kiselina (1,4 mL, 18,17 mmol) (boja se brzo promenila u braon). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Reakcija je razblažena dihlorometanom i heksanom i isparljive supstance su uparene pod sniženim pritiskom. Ostatak je triturisan sa dihlorometanom/heksanom i isparljive supstance su uparene (ciklus ponovljen 3 puta) da bi se dobio 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)-2-oksopirolidin-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (479 mg, 103% prinos, 93% čisto ć a) kao bledo siva čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 13,51 (s, 1H), 8,34 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,31 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,32 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 4,01 (ddd, J = 11,2, 8,8, 2,8 Hz, 1H), 3,88 - 3,63 (m, 2H), 3,56 (dt, J = 9,3, 6,7 Hz, 1H), 2,47 - 2,37 (m, 2H), 3,56 (dt, J = 9,3, 6,7 Hz, 1H), 2,47 - 2,37 (m, 2H), 4,01 (ddd, J = 11,2, 8,8, 2,8 Hz, 1H), 3,88 - 3,63 (m, 2H), 3,56 (dt, J = 9,3, 6,7 Hz, 1H). 1H), 1,89 (dk, J = 12,2, 8,6 Hz, 1H), 1,62 (k, J = 6,7 Hz, 2H), 1,39 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 0,93 - 0,69 (m, 4H), 0,69-0,56 (m, 2H), 0,46 (d, J = 8,6 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač.376.119, nađeno 377.1 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 1,83 min (LC metoda B).
Korak 4: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)-2-okso- pirolidin-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0779]
[0780] Balon sa okruglim dnom od 100 mL je napunjen pod azotom sa 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)-2-oksopirolidin-1-il]piridina -3-karboksilna kiselina (475 mg, 1.261 mmol) i anhidrovani tetrahidrofuran (8 mL). Dodat je karbonil diimidazol (225 mg, 1.388 mmol) (sveže rekristalizovan iz tetrahidrofurana) i smeša je mešana pod azotom na sobnoj temperaturi 2 h. Dodato je još 150 mg karbonil diimidazola i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. U posebnoj posudi od 20 mL, rastvor terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilata (520 mg , 1.260 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (4 mL) je pripremljen u atmosferi azota i zatim je dodat preko šprica u rastvor aktiviranog estra. Dodat je 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (0,95 mL, 6,353 mmol) kroz špric i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u atmosferi azota preko noć i. Posle 18 h, rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom i dobijeno gusto ulje je tretirano etil acetatom (30 mL) i vodom (30 mL). Polako je dodavan vodeni rastvor hlorovodonične kiseline (1.4 mL 6 M, 8.400 mmol) (konačni pH = 5) i dve faze su razdvojene. Vodena faza je ponovo ekstrahovana etil acetatom (30 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom (30 mL) i osušeni preko natrijum sulfata. Posle filtracije i uparavanja rastvarača, ostatak (1,34 g) je rastvoren u dihlorometanu i prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu koriste ć i gradijent etil acetata (0 do 100% tokom 30 min) u heksanima dajuć i još uvek nečist proizvod. Ovaj materijal je dalje prečiš ć en fleš hromatografijom na silika gelu korišć enjem gradijenta etil acetata (0 do 100% tokom 30 min) u heksanu da bi se dobio tercbutil (4S)-4-[3-[[6-[[2- hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)-2-oksopirolidin-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2 ,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (449 mg, 46%) kao bela penasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.
770,3229, nađeno 771,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,43 min (LC metoda B).
Korak 5: 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(2-dis - piro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)-2-okso-pirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so)
[0781]
[0782] 100 mL je napunjeno sa terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi )-2-okso-pirolidin-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (440 mg, 0,5704 mmol), dihlorometan (5 mL) i hlorovodonične kiseline (800 mL 4 M u dioksanu, 3.200 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi skoro 3 h. Isparljive materije su uklonjene isparavanjem pod vakuumom. Ostatak je triturisan sa dihlorometanom/heksanom i rastvarači su upareni. Operacija se ponavlja sve dok se ne dobije bela čvrsta supstanca. Sušenjem pod vakuumom dobija se 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)-2-okso-pirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so) (453 mg, 107%) kao bela čvrsta supstanca. Proizvod je upotrebljen u sledeć em koraku bez daljeg prečiš ć avanja.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,75 (široki s, 1H), 9,12 (br s, 1H), 8,99 (br s, 1H), 8,32 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 8,02 ( dd, J = 8,5, 0,8 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 8,5, 7,2 Hz, 1H), 7,26 (br s, 1H) 7,19 - 7,11 (m, 1H), 6,75 (dd, J = 8,5, 0,7 Hz, 1H), 4,32 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 3,97 (td, J = 8,8, 8,3, 4,7 Hz, 1H), 3,84 - 3,65 (m, 2H), 3,56 (dt, J = 9,2). , 6,7 Hz, 1H), 3,35-3,28 (m, 1H) 3,29 - 3,15 (m, 2H), 2,88 - 2,73 (m, 1H), 2,49 - 2,25 (m, 2H), 1,98 - 1,81 (m, 2H) , 1,62 (k, J = 6,7 Hz, 2H), 1,56 - 1,44 (m, 3H), 1,44 - 1,33 (m, 6H), 1,28 - 1,26 (m, 3H), 0,82 - 0,76 (m, 4H), 0 -0,57 (m, 2H), 0,53-0,39 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.670,27045, nađeno 671,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,65 min (LC metoda B).
Korak 6: (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia- 3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion
[0783]
[0784] Boca sa okruglim dnom od 50 mL opremljena magnetnom mešalicom je napunjena pod azotom sa 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1] heptan-7-iletoksi)-2-okso-pirolidin-1-il]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so) (446 mg , 0,5993 mmol), anhidrovani NMP (25 mL), bezvodni kalijum karbonat (615 mg, 4,450 mmol) (325 mesh). Smeša je snažno mešana u suvom kupatilu na 150 °C pod azotom tokom 14 h, zatim na 155 °C tokom 3 h, zatim na 160 °C tokom 3,5 h. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je sipana u hladnu vodu (200 mL) i zakiseljena dodavanjem vodenog rastvora hlorovodonične kiseline (1,5 mL 6 M, 9,000 mmol) (blago penjenje). Dobijena čvrsta supstanca je filtrirana i kratko osušena na vazduhu. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu i dobijeni zamuć eni rastvor je dekantovan da bi se odvojila preostala voda i osušen iznad natrijum sulfata. Posle koncentracije, ostatak je prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu korišć enjem gradijenta metanola (0 do 5% tokom 30 min) u dihlorometanu. Uparavanje rastvarača, prać eno trituracijom u dihlorometanu/heksanu i uparavanjem rastvarača dalo je (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9, 19(23),20-heksan-2,2,4-trion (198 mg, 52%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.634,29376, nađeno 635,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,17 min (LC metoda B).
Korak 7: (14S)-8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia- 3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion ( dijastereomer 1) (Jedinjenje 179) i (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12 - dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2 ,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 180)
[0785]
[0786] (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia- 3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion ( 200 mg, 0,3088 mmol) je podvrgnuto hiralnoj separaciji SFC hromatografijom koristeć i ChiralPak OJ-H (250 Ks 10 mm) kolonu (veličina čestica 5 mm) sa 20% acetonitril/metanol (90:10)/80% mobilna faza ugljen-dioksida pri 10 mL/min tokom 8,0 min [zapremina injekcije = 70 mL 24 mg/mL rastvora u acetonitrilu/metanolu/dimetil sulfoksidu (85:9:6)] dajuć i kao prvi dijastereomer koji se eluira, (14S)-8-[3 -(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 179) (86 mg, 43%, >98% ee) kao bela čvrsta supstanca,<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,43 (s, 1H), 7,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,57 (dd, J = 8,5, 7,2 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 8,4 H z, 1H), 7,04 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,22 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 4,02 (ddd, J = 10,9, 8,6, 3,2 Hz, 1H), 3,91 (k, J = 11,4 Hz, 1H), 3,79 (dt, J = 9,2, 6,7 Hz, 1H), 3,70 (dt, J = 11,4 Hz, 1H), 3,79 (dt, J = 9,2, 6,7 Hz, 1H), 3,70 (dt, J = 1H), 4,02 (ddd, J = 10,9, 8,6, 3,2 Hz, 1H), 3,91 (k, J = 11,4 Hz, 1H), 4,02 (ddd, J = 10,9, 8,6, 3,2 Hz, 1H) = 10,5, 7,5 Hz, 1H), 3,55 (dt, J = 9,2, 6,7 Hz, 1H), 3,18 - 3,06 (m, 1H), 2,94 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 2,76 - 2,62 (m, 1H), 2,76 - 2,62 (m, 1H), 2,94 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 1H), 2,40 (dtd, J = 12,3, 7,2, 2,9 Hz, 1H), 2,18 - 2,01 (m, 1H), 1,97 - 1,86 (m, 1H), 1,82 (dd, J = 12,1, 1H) Hz, 1H , 1,79 - 1,68 (m, 1H), 1,62 (k, J = 6,7 Hz, 4H) (zapravo dva tripleta, 2 X 2H), 1,57 (s, 3H), 1,55 - 1,49 (m, 1H), 1,46 (s , 3H), 1,38 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 1,30 - 1,23 (m, 1H), 0,84 - 0,77 (m, 4H), 0,67 - 0,57 (m, 2H), 0,50 -0,41 (m, 2H); ESI-MS m/z izrač.634,29376, nađeno 635,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,19 min (LC metoda B); i kao drugi dijastereomer za eluiranje, (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il]etoksi)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2 ,4-trion (diastereomer 2) (Jedinjenje 180) (76 mg, 38%, >98%) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,41 (s, 1H), 7,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,57 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,27 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 3,91 ( t, J = 9,9 Hz, 2H), 3,78 (t, J = 8,2 Hz, 2H), 3,54 (k, J = 8,2 Hz, 1H), 3,14 - 3,04 (m, 1H), 2,98 - 2,89 (m, 1H ), 2,72 - 2,63 (m, 1H), 2,16 - 2,03 (m, 1H), 1,89 - 1,72 (m, 3H), 1,61 (dva tripleta, 2 Ks 2H), 1,57 (s, 3H), 1,58 - 1,48 m, 1H), 1,46 (s, 3H), 1,41 - 1,35 (m, 1H), 1,35 - 1,19 (m, 2H), 0,83 - 0,76 (m, 4H), 0,62 (d, J = 8,9 Hz, 2H) , 0,46 (d, J = 8,8 Hz, 2H); ESI-MS m/z izrač. 634,29376, nađeno 635,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,18 min (LC metoda B).
Primer 49: Priprema (14S)-12,12-dimetil-8-{3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]-1H-pirazol-1-il]-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion ( Jedinjenje 185)
Korak 1: 1-hloro-2,2,3,3-tetrametil-1-(1,2,2-trihlorovinil)ciklopropan
[0788]
[0789] U mikrotalasnu bočicu dodat je 2,3-dimetilbut-2-en (20,5 mL, 172,5 mmol) i 1,2,3,3-tetrahlorociklopropen (29,1 g, 163,6 mmol). Reakcioni sud je zatvoren i zagrevan na 155 °C tokom 16 h. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i prebačena u balon. Sirova reakcija je podvrgnuta destilaciji između sijalica pod vakuumom na 195 °C da bi se dobio 1-hloro-2,2,3,3-tetrametil-1-(1,2,2-trihlorovinil)ciklopropan (37,49 g, 87%) kao narandžasta tečnost.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 1,25 (s, 3H), 1,22 (s, 3H), 1,20 (s, 3H), 1,18 (s, 3H).
Korak 2: 3-etinil-1,1,2,2-tetrametil-ciklopropan
[0790]
[0791] U balon sa okruglim dnom od 500 mL dodat je 1-hloro-2,2,3,3-tetrametil-1-(1,2,2-trihlorovinil)ciklopropan (17,4 g, 66,41 mmol) i dietil etar (300 mL). Reakcija je ohlađena do -78 °C i reakcija je mešana 15 min. Rastvor n-butillitijuma (118 mL 2,5 M, 295,0 mmol) je dodat u kapima tokom 30 min i ostavljena smeša da se zagreje do sobne temperature tokom 2 h i dodatno mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Reakcija je ohlađena na -10 °C i dodata je voda (35 mL, 1,943 mol) u kapima i ostavljena da se smeša meša i zagreje do sobne temperature tokom 30 min. Reakcija je ekstrahovana etrom, osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i uparena. Sirova reakciona smeša je prečišć ena destilacijom na 80 °C pod vakuumom da bi se dobio 3-etinil-1,1,2,2-tetrametil-ciklopropan (6,059 g, 75%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 1,96 (d, J = 2,2 Hz, IH), 1,11 (d, J = 3,8 Hz, 12 H), 0,86 (d, J = 0,9 Hz, IH).
Korak 3: 2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etanol
[0792]
[0792] U balon sa suvim okruglim dnom dodat je 3-etinil-1,1,2,2-tetrametil-ciklopropan (4,1 g, 33,55 mmol) i tetrahidrofuran (25 mL). Reakcija je ohlađena u kupatilu od -30 °C 5 min. U kapima je dodat rastvor borana u tetrahidrofuranu (33,6 mL 1 M, 33,60 mmol) i reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature tokom 30 min. Reakcija je ohlađena na -10 °C i oprezno je dodat natrijum hidroksid (28,5 mL 6 M, 171,0 mmol), a zatim vodonik peroksid (38 mL 30% v/v, 335,1 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša 30 min dok se zagreva na sobnu temperaturu. Reakcija je ekstrahovana etrom, osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i uparena da bi se dobio sirovi aldehidni intermedijer. U sirovi aldehid je dodat metanol (40 mL). Reakcija je ohlađena do 0 °C i dodat je natrijum borohidrid (2,54 g, 67,14 mmol) u porcijama. Reakcija je ostavljena da se meša 1 h dok se zagreva na sobnu temperaturu. Reakcija je ugašena rastvorom zasić enog amonijum hlorida i rastvora soli i ekstrahovana etrom. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen da bi se dobio 2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etanol (1.800 g, 38%) kao ulje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 3,64 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 1,54 (k, J = 7,0 Hz, 2H), 1,06 (s, 6H), 0,93 (s, 6H), 0,13 (t, J = 7,1 Hz, IH). ESI-MS m/z izrač. 142,13577, nađeno 143,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,49 min (LC metoda B).
Korak 4: terc-butil 3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksilpirazol-1-karboksilat
[0794]
[0795] U rastvor terc-butil 5-okso-lH-pirazol-2-karboksilata (884 mg, 4.799 mmol) i 2-(2,2,3,3-tetrametil-ciklopropil)etanol (650 mg, 4.570 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) je dodat trifenilfosfin (1.26 g, 4.804 mmol). U smešu je polako dodat diizopropil azodikarboksilat (970 mg, 4.797 mmol) u kapima tokom 2 minuta na sobnoj temperaturi (zabeležena egzotermna). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Tetrahidrofuran je uklonjen in vacuo i dodat je toluen (30 mL) i smeša je mešana preko noć i. Nije prime ć en talog i smeša je uparena i prečiš ć ena hromatografijom na silika gelu (gradijent od 0% do 50% etil acetata u heksanu) da bi se dobio terc-butil 3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi] pirazol-1-karboksilat (700 mg, 50%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,82 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 5,86 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,27 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,72 (k , J = 7,2 Hz, 2H), 1,61 (s, 10H), 1,05 (s, 6H), 0,95 (s, 6H), 0,22 (t, J = 7,2 Hz, IH). ESI-MS m/z izrač. 308,21, nađeno 309,24 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,89 min (LC metoda A).
Korak 5: 3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]-1H-pirazol
[0796]
[0797] U rastvor terc-butil 3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]pirazol-1-karboksilata (700 mg, 2.270 mmol) u metanolu (7.0 mL) dodat je natrijum hidroksid (2,35 mL 2 M, 4,700 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Već ina metanola je uklonjena u vakuumu, a ostatak je razblažen vodom (14 mL) i vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (4.5 mL 1 M, 4.500 mmol). Smeša je ekstrahovana etil acetatom i organska faza je isprana slanim rastvorom, osušena iznad natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana u vakuumu dajuć i bledo žuto ulje, 3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]- 1H-pirazol (471 mg, 100%) koji je direktno upotrebljen u sledeć em koraku. ESI-MS m/z izrač. 208,15756, nađeno 209,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,77 min (LC metoda E).
Korak 6: Etil 2-hloro-6-[3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[0798]
[0799] Etil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (494 mg, 2.245 mmol), 3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi-1H-pirazol (471 mg, 2.261 mmol) i kalijum karbonat (373 mg, 2.699 mmol) su kombinovani u anhidrovanom dimetil sulfoksidu (10 mL). Dodat je 1,4-Diazabiciklo[2.2.2]oktan (50,5 mg, 0,4502 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom 20 h. Reakciona smeša je razblažena vodom (16 mL) i mešana 15 min. Dobijena bela čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom i isprana vodom. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu i osušena iznad natrijum sulfata. Smeša je filtrirana i uparena da bi se dobio kao beličasta čvrsta supstanca, etil 2-hloro-6-[3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]pirazol-1-il]piridin-3 -karboksilat (800 mg, 91%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,36 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,27 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,72 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,97 (d , J = 2,9 Hz, 1H), 4,41 (k, J = 7,2 Hz, 2H), 4,25 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,77 (k, J = 7,2 Hz, 2H), 1,42 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,08 (s, 6H), 0,97 (s, 6H), 0,25 (t, J = 7,2 Hz, IH). ESI-MS m/z izrač. 391,16626, nađeno 392,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,25 min (LC metoda E).
Korak 7: 2-hloro-6-[3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[0800]
[0801] Etil 2-hloro-6-[3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksilpirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (800 mg, 2.041 mmol) u tetrahidrofuranu (4.000 mL ) i etanol (1.600 mL) je tretiran sa natrijum hidroksidom (2.0 mL 2 M, 4.000 mmol) i rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 1 h. Već ina rastvarača je uklonjena pod sniženim pritiskom i rastvor je zakiseljen sporim dodavanjem limunske kiseline (8.0 mL 10% v/v, 4.164 mmol) uz hlađenje ledom. Formirana gusta suspenzija (~ pH = 3) je mešana u ledenom kupatilu 1 h, filtrirana i isprana sa viškom vode. Sakupljena čvrsta supstanca je potpuno rastvorena u dihlorometanu, osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana do suva koristeć i toluen kao azeotrop i dalje sušena pod vakuumom 21 h da bi se dobio 2-hloro-6-[3-[2-(2,2) ,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (710 mg, 96%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 13,56 (s, 1H), 8,52 - 8,29 (m, 2H), 7,72 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,18 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 1H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) ), 4,23 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 1,72 (k, J = 7,0 Hz, 2H), 1,04 (s, 6H), 0,95 (s, 6H), 0,27 (t, J = 7,2 Hz, 1H ).ESI-MS m/z izrač. 363,13498, nađeno 364,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,35 min (LC metoda G).
Korak 8: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil) etoksilpirazol-1-il] piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0802]
[0803] 2-hloro-6-[3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (255 mg, 0,7009 mmol) i karbonil diimidazol (125 mg, 0,7709 mmol) su kombinovani u tetrahidrofuranu (5,738 mL) i mešani 90 min na sobnoj temperaturi. dodat je terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (350 mg, 0,8484 mmol), a zatim anhidrovanog 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-ena (275 mL, 1,839 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 20 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su razdvojeni, sušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni pod sniženim pritiskom, a zatim prečišć eni hromatografijom na silika gelu koriste ć i gradijent od 100% heksana do 80% etil acetata u heksanu da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3- [[6-[[2-hloro-6-[3-[2-(2,2,3,3-tetram-etilciklopropil)etoksilpirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil] amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (261 mg, 49%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 757,3388, nađeno 758,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,43 min (LC metoda G).
Korak 9: (14S)-12,12-dimetil-8-[3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]-1H-pirazol-1-il}-2l6-tia-3, 9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 185)
[0804]
terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksilpirazol-1-il]piridin-3 -karbonil]sulfa-moil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (115 mg, 0,1516 mmol), kalijum karbonat (125 mg, 0,9045 mmol), 3 A molekulska sita i dimetil sulfoksid (4 mL) su kombinovani u bočici, pročišć eni azotom, zatvoreni poklopci, zagrevani na 160 °C i mešani 72 h. Ohlađen na sobnu temperaturu. Smeša je filtrirana i filtrat je razblažen etil acetatom i ispran zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su razdvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, upareni i zatim prečišć eni hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 100% heksana do 70% etil acetata u heksanu da bi se dobila kao prljavo bela čvrsta supstanca (14S)-12,12-dimetil – 8-{3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]-1H-pirazol-1-il}-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 185) (18,14 mg, 19%).1H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9,96 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,60 - 7,49 (m, 2H) , 7,36 - 7,23 (m, 2H), 6,56 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,92 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,82 - 4,58 (m, 1H), 4,25 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 4,00 - 3,76 (m, 1H), 3,35 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 3,17 (d, J = 14,3 Hz, 1H), 3,07 (t, J = 9,8 Hz, 1H), 2,73 - 2,50 (m, 1H), 2,09 (dd, J = 12,3, 7,9 Hz, 1H), 1,76 (k, J = 7,1 Hz, 2H), 1,65 - 1,59 (m, 6H), 1,53 - 1,41 (m 2H), 1,08 (s, 6H), 0,97 (s, 6H), 0,90-0,81 (m, 2H), 0,25 (t, J = 7,2 Hz, IH). ESI-MS m/z izrač.621,30975, nađeno 622,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,22 min (LC metoda B).
Primer 50: Priprema (18S)-4-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10l6- tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 187)
[0805]
Korak 1: terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-(3-sulfamoilpirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat
[0806]
[0807] Racemski terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(3-sulfamoilpirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (3,24 g, 8,383 mmol) podvrgnut je hiralnom razdvajanju pomoć u SFC hromatografije pomo ć u ChiralPak IG (kolona 250 Ks 21,2 mm, veličina čestica 5 mm) sa mobilnom fazom od 28% metanola/72% ugljen-dioksida pri 70mL/min tokom 14,0 min (zapremina injekcije = 500 mL rastvora od 32mg/mL u metanolu koji daje kao drugi enantiomer za eluirati, terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-(3-sulfamoilpirazol-1-il)propilpirolidin-1-karboksilat (1,45 g, 90%).1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 7,42 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 6,72 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 5,08 (s, 2H), 4,22 - 4,12 (m, 2H), 3,64 (t, J = 9,1 Hz, 1H), 2,80 (t, J = 10,8 Hz, 1H), 2,05 (s, 1H), 1,99 - 1,80 (m, 3H), 1,58 (s, 1H), 1,45 (d, J = 2,3 Hz, 9H ), 1,40 (d, J = 11,4 Hz, 4H), 1,27 (s, 4H). ESI-MS m/z izračunato 386,19876, nađeno 387,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,52 min (LC metoda B).
Korak 2: terc-butil (4S)-4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il] piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0808]
[0809] 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (1,35 g, 3,752 mmol) i karbonil diimidazol ( 761,1 mg, 4,694 mmol) (sveže rekristalizovano iz tetrahidrofurana, isprano hladnim etrom i osušeno na visokom vakuumu) je kombinovano u tetrahidrofuranu (17,55 mL) i mešano 50 min na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat tercbutil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-(3-sulfamoilpirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (1,45 g, 3,752 mmol) u tetrahidrofuranu (6,75 mL). zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (2,857 g, 18,77 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Tetrahidrofuran je uklonjen rotacionim uparavanjem i rastvoren u etil acetatu i ispran zasić enim vodenim rastvorom amonijum hlorida (1X), zatim slanim rastvorom (1X), osušen (natrijum sulfat), filtriran i koncentrovan do bele čvrste supstance koja je hromatografisana na 275 g C18 reverzne faze kolona eluiranjem sa gradijentom od 50-100% acetonitril/voda. Proizvod je eluiran iu čistim frakcijama iu mešanim frakcijama sa kiselinom polaznog materijala. Čiste frakcije su kombinovane, koncentrovane i zatim podeljene između 6N hlorovodonične kiseline i etil acetata. Slojevi su razdvojeni, vodeni još jednom ispran etil acetatom, a zatim spojene organske faze, osušene (natrijum sulfat), filtrirane i koncentrovane do bele čvrste supstance. Mešane frakcije iz kolone reverzne faze su kombinovane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Ostatak je podeljen između 6N hlorovodonične kiseline i etil acetata. Slojevi su razdvojeni, vodeni sloj još jednom ispran etil acetatom, a zatim kombinovane organske faze, osušene (natrijum sulfat), filtrirane i koncentrovane do bele čvrste supstance koja je hromatografisana na 275 g C18 kolone reverzne faze eluiranjem sa gradijentom od 50-100% acetonitril/voda. Čiste frakcije su kombinovane, koncentrovane i dodate čistom materijalu iz prve kolone da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0].2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1,96 g, 72%) .<1>H NMR (400 MHz, CDCl3) δ 9,50 (s, 1H), 8,30 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,26 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,5 Hz, 1H ), 7,47 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 5,96 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,25 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 4,20 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 3,66 (s, 1H), 2,83 (t, J = 10,6 Hz, 1H), 2,06 (d, J = 9,7 Hz, 1H), 1,90 (p, J = 7,2 Hz, 5H), 1,48 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 1,44 (s, 9H), 1,37 (s, 3H), 1,35 - 1,29 (m, 2H), 1,26 (s, 3H), 0,87 - 0,82 (m, 4H), 0,69 - 0,64 (m, 2H), 0,51 (d, J = 8,8 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač. 727,2919, nađeno 728,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,91 min (LC metoda A).
Korak 3: 2-Hloro-N-[1-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propil]pirazol-3-il]sulfonil-6-[3-(2-dis-piro [2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0810]
terc-butil(4S)-4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3 -karbonil]sulfa-moil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1,96 g, 2,691 mmol) rastvoren je u dihlorometanu (8,553 mL) i u smešu je dodata trifluorosirć etna kiselina (8.291 mL, 107.6 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 60 min. Koncentrovana smeša do suva pod sniženim pritiskom, rastvorena u zasić enom vodenom rastvoru natrijum bikarbonata i etil acetata koji sadrži malo metanola radi rastvorljivosti i razdvojeni slojevi. Koncentrovan organski sloj rotacionim isparavanjem prać eno visokom vakuum pumpom dajuć i 2-hloro-N-[1-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propil]pirazol-3-il] sulfonil-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (1,84 g, 109%) kao žuta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 627,23944, nađeno 628,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,65 min (LC metoda A).
Korak 4: (18S)-4-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10l6-tia- 1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 187)
[0811]
[0812] Kombinovani 2-hloro-N-[1-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propil]pirazol-3-il]sulfonil-6-[3-(2-dis - piro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (1,69 g, 2,690 mmol), kalijum karbonat (1,859 g, 13,45 mmol), cezijum fluorid (614,9 mg, 4. ), 3 A molekularna sita i dimetil sulfoksid (102,5 mL) u bočici, ispuhana azotom, zatvorena, zagrejana na 155 °C i mešana 18 h. Ohlađena do sobne temperature i smeša je filtrirana, razblažena etil acetatom i isprana zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su razdvojeni, sušeni preko natrijum sulfata, upareni i zatim prečišć eni hromatografijom na silika gelu koriste ć i gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobila bela čvrsta supstanca, (18S)-4-[3-(2-{ dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 187) (1,14 g, 72%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,69 (s, 1H), 8,17 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,91-6,84 (m, 2H), 6,06 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,21 (kd, J = 7,2, 6,6, 2,7 Hz, 3H), 4,13 (dd, J = 13,7, 11,3 Hz, 1H), 2,72-2,62 (m, 1H), 2,09 (d, J = 12,0 Hz, 2H), 1,94-1,84 (m, 1H), 1,84-1,75 (m, 5H), 1,55 (s, 1H) ), 1,47 (s, 3H), 1,47 - 1,43 (m, 1H), 1,33 (t, J = 12,3 Hz, 1H), 0,82 (k, J = 2,6 Hz, 4H), 0,68 - 0,58 (m, 3H) , 0,49 (dd, J = 7,8, 4,2 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač.
591,26276, nađeno 592,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,34 min (LC metoda B).
Primer 51: Priprema 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12,18-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 189)
[0813]
Korak 1: terc-butil 2,2-dimetil-4-(3-oksopropil)pirolidin-1-karboksilat
[0814]
[0815] U rastvor terc-butil 4-(3-hidroksipropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata (1,0 g, 3,885 mmol) u dihlorometanu (25 mL) je polako dodat Dess-Martin periodinan ( 2,0 g, 4,715 mmol) na 0 °C u atmosferi azota. Dobijena heterogena reakciona smeša je polako zagrejana do sobne temperature i mešana dodatna 2 h. Reakciona smeša je razblažena dietil etrom i filtrirana kroz sloj celita. Filtrat je koncentrovan, a ostatak je prečišć en kratkim čepom silika gela koriste ć i 1:1 smešu heksana i etra da bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-(3-oksopropil)pirolidin-1-karboksilat (992 mg, 100%) kao bezbojno, viskozno ulje. ESI-MS m/z izrač. 255,18344, nađeno 256,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,64 min (LC metoda A).
Korak 2: terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(metilamino)propil]pirolidin-1-karboksilat
[0817] Rastvoru terc-butil 2,2-dimetil-4-(3-oksopropil)pirolidin-1-karboksilata (500 mg, 1.958 mmol) u dihlorometanu (10 mL) dodat je natrijum acetat (241 mg, 2.938). mmol), a zatim metilamin (1,2 mL 2 M, 2,400 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h i ohlađena na 0 °C i dodat je natrijum cijanoborhidrid (372 mg, 5.920 mmol) u atmosferi azota. Heterogena reakciona smeša je polako zagrejana do sobne temperature i mešana dodatnih 16 h. Reakciona smeša je ugašena vodom i polako ekstrahovana dietil etrom. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani. Reakciona smeša je prečišć ena HPLC-MS metodom reverzne faze koriš ć enjem dvostrukog gradijenta od 20-80% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina). mobilna faza B = acetonitril) da se dobije terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(metilamino) propil] pirolidin-1-karboksilat (154 mg, 29%) kao viskozno ulje.
<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 3,80 - 3,53 (m, 1H), 3,04 - 2,81 (m, 3H), 2,69 (k, J = 4,8 Hz, 3H), 2,13 (s, 1H), 1,89 ( s, 3H), 1,80 (s, 2H), 1,45 (d, J = 10,5 Hz, 12H), 1,38 (s, 2H), 1,29 (s, 3H). ESI-MS m/z izrač. 270,23074, nađeno 271,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,47 min (LC metoda A).
Korak 3: terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[metil-(6-sulfamoil-2-piridil) amino] propil] pirolidin-1-karboksilat
[0818]
[0819] U rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(metilamino) propil] pirolidin-1-karboksilata (154 mg, 0,5695 mmol) u dimetil sulfoksidu (2 mL) dodat je 6-fluoropiridin -2-sulfonamid (103 mg, 0,5847 mmol), a zatim di-izopropiletilamin (500 mL, 2,871 mmol). Balon je zatvoren pregradom i zagrevan na 90 °C pod azotom (balon) u uljanom kupatilu 14 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature, zatim razblažena etil acetatom i isprana rastvorom soli, osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i uparena. Dobijeni ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[metil-(6-sulfamoil-2-piridil)amino ]propil]pirolidin-1-karboksilat (141 mg, 58%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7,65 (dd, J = 8,6, 7,2 Hz, 1H), 7,12 (s, 2H), 7,01 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,78 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 3,53 (k, J = 7,8, 7,4 Hz, 3H), 3,17 (d, J = 3,6 Hz, 1H), 3,04 (s, 3H), 2,84 - 2,72 (m, 1H), 2,09 (d, J = 9,5 Hz, 1H), 1,88 (td, J = 12,8, 5,7 Hz, 1H), 1,53 (dt, J = 14,6, 7,4 Hz, 2H), 1,36 (dd, J = 15,0, 10,6 Hz, 14H), 1,23 (s, 3H). ESI-MS m/z izrač. 426,23007, nađeno 427,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,47 min (LC metoda A).
Korak 4: terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]- 2-piridil]-metil-amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0820]
[0821] U bočici za scintilaciju od 20 mL, 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (141 mg, 0,3858 mmol) i karbonil diimidazol (65 mg, 0,4009 mmol) su kombinovani u tetrahidrofuranu (2 mL) i mešani 2 h na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[metil-(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (134 mg, 0,3141 mmol), a zatim 1,8 -diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (100 mL, 0,6687 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa malom količinom 1:1 zasić enog vodenog rastvora amonijum hlorida/fiziološke otopine. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni. Dobijeni smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriste ć i plitki gradijent od 100% dihlorometana do 20% metanola u dihlorometanu da bi se dobio terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]-metil-amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (158 mg, 65%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,29 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,77 - 7,60 (m, 2H), 7,52 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,64 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 5,98 - 5,91 (m, 1H), 4,42 (dt, J = 8,3, 6,8 Hz, 2H), 4,14 - 4,04 (m, 1H), 3,91 (d, J = 13,9 Hz, 1H), 3,32 -3,21 (m, 1H), 3,01 (s, 3H), 2,91 (t, J = 10,7 Hz, 1H), 2,18 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 2,18 (d, J = 12,8 Hz, 1H). ), 2,02 - 1,93 (m, 2H), 1,79 (td, J = 16,6, 14,4, 6,6 Hz, 2H), 1,65 - 1,48 (m, 2H), 1,37 (s, 9H), 1,30 (s, 3H), 1,25 (s, 3H), 1,22 - 1,14 (m, 2H), 0,67 (tdd, J = 13,3, 6,7, 3,6 Hz, 2H), 0,49 - 0,39 (m, 4H), 0,37 - 0,30 (m, 1H), 0,23-0,17 (m, 2H), 0,10 (dtd, J = 9,4, 5,1, 4,5, 2,3 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač.769,3388, nađeno 770,45 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,67 min (LC metoda A).
Korak 5: 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12,18-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetra-ciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 189)
[0822]
[0823] Rastvor terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfa- moil]-2-piridil]-metil-amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (153 mg, 0,1986 mmol) u dihlorometanu (1,2 mL) i trifluorosirć etnoj kiselini (150,0 mL, 1,960 mmol) mešano na sobnoj temperaturi 4 h. Rastvarači su zatim uklonjeni pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu, ispran sa 2 mL zasić enog rastvora natrijum bikarbonata, a rastvarač je uklonjen i osušen pod visokim vakuumom. Dobijeni ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (8 mL) i dodata su 4A molekulska sita i reakciona smeša je mešana 10 min. Zatim su dodati cezijum fluorid (98 mg, 0,6451 mmol) i kalijum karbonat (91 mg, 0,6584 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 130 °C preko noć i. Reakciona smeša je filtrirana kroz Whatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišć en HPLC-MS metodom reverzne faze koriš ć enjem dvostrukog gradijenta od 20-80% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilna faza A = voda (0,05% hlorovodonične kiseline), mobilna faza B = acetonitril) da bi se dobio 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12,18-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 189) (76 mg, 60%) kao sivobela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 10,54 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,13 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,67 (dd, J = 8,6, 7,3 Hz, 1H), 7,60 - 7,54 (m, 1H), 7,37 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,69 (dd, J = 8,7, 0,8 Hz, 1H), 5,92 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,43 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 4,37 (s, 1H), 3,37 (dd, J = 9,8, 7,2 Hz, 1H), 3,13 - 3,05 (m, 1H), 3,01 (s, 3H ), 2,87 (d, J = 26,3 Hz, 1H), 2,24 (dd, J = 12,5, 9,1 Hz, 1H), 1,97 (k, J = 6,8 Hz, 2H), 1,70 (s, 1H), 1,65 (s , 3H), 1,61 (s, 3H), 1,55 (dd, J = 12,5, 8,5 Hz, 1H), 1,50 - 1,40 (m, 4H), 0,72 - 0,59 (m, 2H), 0,50 - 0,39 (m, 4H), 1,50 - 1,40 (m, 4H), 0,72 - 0,59 (m, 2H), 0,50 - 0,39 (m, 4H), 1,61 (s, 3H), 1,55 (dd, J = 12,5, 8,5 Hz, 1H). ), 0,34 (ddd, J = 15,9, 9,0, 6,9 Hz, IH), 0,23 - 0,16 (m, 2H), 0,15 - 0,07 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 633,30975, nađeno 634,22 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,55 min (LC metoda J).
Primer 52: Priprema (14R)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6- tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4- trojedan (Jedinjenje 194)
[0824]
Korak 1: terc-butil (4R)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)aminol propil]pirolidin-1-karboksilat
[0825]
[0826] Racemski terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (7 g, 16,97 mmol) podvrgnut hiralnom razdvajanju pomoć u SFC hromatografija koriste ć i ChiralPak IG (250 X 21,2 mm kolona, veličina čestica 5 mm) sa 40% metanola/60% mobilne faze ugljen-dioksida pri 70 mL/min tokom 11,0 min (zapremina injekcije = 500 mL rastvora od 32 mg/mL u metanolu dajuć i kao drugi enantiomer za eluiranje, terc-butil (4R)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (3,167 g, 90%) ESI -MS m/z izračunato 412,21442, nađeno 413,2 (M+1)+ Vreme retencije: 0,63 min (LC metoda A).
Korak 2: terc-butil (4R)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il ]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0828] U rastvor 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (1,95 g, 5,420 mmol) u tetrahidrofuran (20 mL) je dodat karbonil diimidazol (1,03 g, 6,073 mmol) i smeša je mešana na temperaturi okoline 1 h. Ovoj smeši je dodat terc-butil (4R)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)ami-no]propil]pirolidin-1-karboksilat (1,95 g, 4,301 mmol ) u tetrahidrofuranu (9 mL), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]un-dek-7-en (2,0 mL, 13,37 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakcija je razblažena vodom (50 mL) i smeša je zakiseljena hlorovodoničnom kiselinom (5 mL 6 M, 30,00 mmol). Smeša je ekstrahovana etil acetatom (200 mL) i organska faza je odvojena. Organska faza je isprana slanim rastvorom i kombinovane vodene faze ponovo ekstrahovane sa 50 mL etil acetata. Kombinovane organske faze su osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrovane u vakuumu. Dobijeni sirovi proizvod je hromatografisan na 275 g C18 koloni reverzne faze eluiranjem sa 50-100% acetonitril/voda. Frakcije proizvoda su sakupljene i koncentrovane u vakuumu dajuć i terc-butil (4R)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin -3-karbonil]sulfa-moil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (2,73 g, 65%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,76 (s, 1H), 8,38 (t, J = 2,3 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 8,5, 7,2 Hz, 1H), 7,18 (dd, J = 12,6, 6,3 Hz, 2H), 6,74 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,16 (dd , J = 2,9, 1,4 Hz, 1H), 4,24 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 3,57 - 3,44 (m, 1H), 3,24 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 2,74 (t, J = 10,5 Hz, 1H), 2,01 (tt, J = 11,9, 6,5 Hz, 1H), 1,82 (k, J = 6,6 Hz, 3H), 1,49 (dt, J = 13,0, 6,9 Hz, 3H), 1,36 (d, J = 11,6 Hz, 10H), 1,33 - 1,24 (m, 6H), 1,17 (s, 3H), 0,89 - 0,75 (m, 4H), 0,71 - 0,60 (m, 2H), 0,54 - 0,44 (m, 2H) . ESI-MS m/z izrač.753,30756, nađeno 754,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,69 min (LC metoda D).
Korak 3: 2-hloro-N-[[6-[3-[(3R)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(2-dis - piro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so)
[0829]
[0830] U rastvor terc-butil (4R)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazola -1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (2,73 g, 3,619 mmol) u dihlorometanu (15 mL ) i toluen (5 mL) je dodata trifluorosirć etna kiselina (3 mL, 38.94 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 48 h. Rastvarač je uklonjen u vakuumu sa temperaturom kupatila postavljenom na 45 °C dajuć i gusto žuto ulje. Ulje je razblaženo toluenom (20 mL) i rastvarač je uklonjen in vacuo sa temperaturom kupatila postavljenom na 45 °C dajuć i 2-hloro-N-[[6-[3-[(3R)-5,5-dimetilpirolidin- 3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) ( 2,78 g, 100%) kao ulje koje je koriš ć eno bez daljeg prečiš ć avanja.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksidd6) δ 12,78 (s, 1H), 8,61 (s, 2H), 8,39 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,63 (dd, J = 8,5, 7,2 Hz, 1H), 7,34 - 7,11 (m, 5H), 6,75 (dd, J = 8,6, 0,7 Hz, 1H), 6,18 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,24 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,36 (dt, J = 11,6, 6,1 Hz, 1H), 3,25 (k, J = 6,6 Hz, 2H), 2,89 - 2,71 (m, 1H), 2,30 (s, 2H), 1,93 (dd, J = 12,9, 7,6 Hz, 1H), 1,89 - 1,71 (m, 2H), 1,48 (k, J = 7,2, 6,3 Hz, 4H), 1,48 (k, J = 7,2, 6,3 Hz, 4H). ), 1,34 (s, 5H), 1,24 (d, J = 6,0 Hz, 4H), 0,89 - 0,75 (m, 4H), 0,70 - 0,62 (m, 2H), 0,55 - 0,46 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.653,2551, nađeno 654,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,49 min (LC metoda D).
Korak 4: (14R)-8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia- 3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 194)
[0831]
[0832] U rastvor 2-hloro-N-[[6-[3-[(3R)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3- (2-dipiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (2,78 g, 3,619 mmol) u NMP (50 mL) dodat je kalijum karbonat ( 2,5 g, 18,09 mmol). Smeša je propuhana azotom 5 min. Smeša je zagrevana na 135 °C tokom 22 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i dodata u vodu (150 mL). Smeša je pažljivo zakiseljena hlorovodoničnom kiselinom (7 mL 6 M, 42,00 mmol) dajuć i penušavu suspenziju. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom koriš ć enjem srednje frite. Vlažni filterski kolač je rastvoren u etil acetatu (200 mL), ispran sa 100 mL slanog rastvora, a zatim koncentrovan u vakuumu. Sirovi proizvod je razblažen acetonitrilom i hromatografisan na koloni C18 sa reverznom fazom od 250 g eluiranjem sa 50-100% vode/acetonitrila dajuć i penu koja je sušena u vakuum pe ć nici na 45 °C tokom 48 h daju ć i (14R)-8-[3-(2-{dispiro[ 2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 194) (1,3 g, 57%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,51 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,58 (dd, J = 8,5 , 7,2 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,09 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,21 (td, J = 6,6, 1,4 Hz, 2H), 3,92 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 3,15 (s, 1H), 2,95 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 2,78 - 2,64 (m, 1H), 2,12 (s, 1H), 1,90 - 1,70 (m, 4H), 1,60 (s, 6H), 1,51 (s, 3H) , 1,47 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 1,31 (k, J = 12,0 Hz, 1H), 0,89 - 0,78 (m, 4H), 0,70 - 0,61 (m, 2H), 0,55 - 0,44 (m, 2H), 0,89 - 0,78 (m, 4H), 0,70 - 0,61 (m, 2H), 0,55 - 0,44 (m, 2H). ). ESI-MS m/z izrač.
617,27844, nađeno 618,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,38 min (LC metoda D).
Primer 53: Priprema (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4- trojedan (Jedinjenje 195)
[0833]
Korak 1: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il ]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0834]
[0835] U rastvor 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (5,2 g, 14,45 mmol) u tetrahidrofuran (100 mL) je dodat karbonil diimidazol (2,8 g, 16,51 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Ovoj smeši je dodat terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)ami-no]propil]pirolidin-1-karboksilat (6,0 g, 14,54 mmol). ) u tetrahidrofuranu (15 mL), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]un-dek-7-en (6,5 mL, 43,47 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakcija je razblažena vodom (150 mL) i smeša je zakiseljena vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (15 mL 6 M, 90,00 mmol). Smeša je ekstrahovana etil acetatom (300 mL) i organska faza je odvojena. Organska faza je isprana slanim rastvorom, osušena iznad magnezijum sulfata, filtrirana preko celita i koncentrovana in vacuo dajuć i beli talog. Precipitat je razmuć en sa acetonitrilom i čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom pomo ć u srednje staklene frite i isprana acetonitrilom. Filtrat je koncentrovan in vacuo dajuć i žuto ulje. Sirovo ulje je razblaženo acetonitrilom i nešto N-metil-2-pirolidona i hromatografisano na koloni C18 sa reverznom fazom od 415 g eluiranjem sa 50% - 100% acetonitrila u vodi dajuć i terc-butil (4S)-4-[3-[ [6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfa-moil]-2-piridil] amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (4,5 g, 41%). ESI-MS m/z izrač. 753.30756, pronađeno 754,4 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 3,79 min (LC metoda D).
Korak 2: 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(2-dis - piro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so)
[0836]
[0837] U rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazola -1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (5,9 g, 7,821 mmol) u dihloromktancu (30 mL ) i toluen (15 mL) je dodata trifluorosirć etna kiselina (6.0 mL, 77.88 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 h. Rastvarač je uklonjen in vacuo sa temperaturom kupatila postavljenom na 45 °C dajuć i gusto, žuto ulje. Ulje je razblaženo toluenom (125 mL) i rastvarač je uklonjen in vacuo sa temperaturom kupatila podešenom na 45 °C. Ulje je razblaženo toluenom i rastvarač je uklonjen in vacuo dajuć i gusto, viskozno žuto ulje, 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (6,0 g, 100 %) koji je korišć en u slede ć em koraku bez daljeg prečiš ć avanja. ESI-MS m/z izrač. 653,2551, nađeno 654,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,6 min (LC metoda B).
Korak 3: (14S)-8-[3-(2-[Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il]etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia- 3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion ( Jedinjenje 195)
[0838]
[0839] U rastvor 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3- (2-dipiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (6,0 g, 7,810 mmol) u NMP (140 mL) dodat je kalijum karbonat ( 5,3 g, 38,35 mmol). Smeša je propuhana azotom 5 min. Smeša je zatim zagrevana na 150 °C tokom 22 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i dodata u vodu (300 mL) dajuć i prljavo beli čvrsti talog. Smeša je pažljivo zakiseljena vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (12 mL 6 M, 72,00 mmol) dajuć i penastu suspenziju. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom korišć enjem srednje staklene frite. Vlažni filter kolač je rastvoren u etil acetatu (500 mL) i ispran sa 200 mL slanog rastvora. Vodena faza je bila malo zamuć ena pa je zakiseljena sa malom količinom 6N hlorovodonične kiseline i vra ć ena u organsku fazu. Vodena faza je odvojena i organska faza je osušena iznad magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana u vakuumu dajuć i svetlo žuto ulje. Ovaj sirovi proizvod je razblažen acetonitrilom i hromatografisan na 415 g C18 koloni reverzne faze eluiranjem sa 50% - 100% acetonitrila u vodi. Proizvod je izolovan kao pena krem boje. Pena je sušena u vakuumu na 45 °C tokom 48 h dajuć i (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il] – 12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza1(22),5,7, 9,19(23),20-heksen-2,2,4-trion (Jedinjenje 195) (3,32 g, 68%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,48 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,57 (dd, J = 8,5 , 7,2 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,08 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,21 (td, J = 6,7, 1,3 Hz, 2H), 3,92 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,16 (s, 1H), 2,95 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 2,78 - 2,66 (m, 1H), 2,07 (s, 1H), 1,92 - 1,72 (m, 4H), 1,60 (s, 6H), 1,51 (s, 3H) , 1,47 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 1,31 (k, J = 12,2 Hz, 1H), 0,89 - 0,77 (m, 4H), 0,69 - 0,61 (m, 2H), 0,53 - 0,45 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 617,27844, nađeno 618,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 10,29 min (LC metoda F).
[0840] Ca2+, Na+ i K+ soli jedinjenja 195 su napravljene mešanjem Jedinjenja 195 sa Ca(OCH3)2, Na(OCH3) i KOH, respektivno: mešanjem Jedinjenja 195 (1g) i Ca(OCH3)2(83 mg) u metanolu (65 mL) na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta, a zatim na 65 °C tokom 30 minuta; mešanje Jedinjenja 195 (0,6 g (1 mmol)) u MeOH (40 mL) sa 25 tež% Na(OCH3) u MeOH (250 mL (1 molarni ekvivalent)) na 60 °C tokom 20 minuta; i mešanje Jedinjenja 195 (0.6 g) u acetonu (11 mL) sa 1N KOH (1 molarni ekvivalent) na 50 °C tokom 1 sata. Posle filtracije dobijenih vruć ih rastvora, filtrati su upareni do suva da bi se dobile željene amorfne soli, respektivno (PXRD podaci nisu prikazani).
Primer 54: Priprema 8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-15-oksa-2l6- tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4- tri-on (enantiomer 1) (Jedinjenje 196) i 8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 197)
[0841]
Korak 1: terc-butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3 -karbon-il]sulfamoil]-2-piridil]amino]etoksi]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0842]
[0843] 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (412 mg, 1,145 mmol) i karbonil diimidazol ( 185,7 mg, 1,145 mmol) je kombinovano u anhidrovanom tetrahidrofuranu (10,47 mL) i mešano 60 min na 50 °C. Zatim rastvor tetrahidrofurana (7 mL) terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etoksi]pirolidin-1-karboksilata (431,5 mg, 1,041 mmol ) i dodat je 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (400,7 mg, 393,6 mL, 2,632 mmol). Reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 4 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa 1 M vodenim rastvorom limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su razdvojeni, sušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni, a zatim prečišć eni na silika gelu korišć enjem gradijenta od 100% heksana do 75% etil acetata u heksanu da bi se dobio kao prljavo bela čvrsta supstanca, terc-butil 4-[2- [[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2piridil]amino]etoksi]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (452 mg, 57%). ESI-MS m/z izrač. 755,2868, nađeno 756,41 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,92 min (LC metoda A).
Korak 2: 8-[3-(2-[Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il]etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-15-oksa-2l6-tia- 3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 188)
[0844]
terc-butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]-2-piridil]amino]etoksi]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (410 mg, 0,5421 mmol) rastvoren je u dihlorometanu (6 mL) i u smešu je dodata trifluorosirć etna kiselina (800 mL, 10,38 mmol). Reakcioni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 30 min. Reakcioni rastvor je koncentrovan in vacuo do suva pod sniženim pritiskom dajuć i ostatak. Kombinovani ovaj ostatak i kalijum karbonat (450 mg, 3,256 mmol), cezijum fluorid (105 mg, 0,6912 mmol), 3 A molekularna sita i dimetil sulfoksid (5 mL) u bočici, pročišć eni azotom, zatvoreni poklopci, zagrejani na 140 °C i mešano 20 h. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature, filtrirana i zatim prečišć ena preparativnom hromatografijom reverzne faze (C18 kolona, 30% do 99% acetonitrila (bez modifikatora) u vodi (5 mM hlorovodonična kiselina) tokom 30 minuta) da bi se dobilo bela čvrsta supstanca, 8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion ( Jedinjenje 188) (330 mg, 97%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,55 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,59 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,09 (m, 2H), 6,93 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,08 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,21 ( t, J = 6,6 Hz, 2H), 4,10 (s, 2H), 3,88 (t, J = 11,8 Hz, 1H), 3,60 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 2,86 (s, 1H), 2,07 ( dd, J = 11,9, 6,0 Hz, 1H), 1,81 (k, J = 6,6 Hz, 3H), 1,57 (d, J = 9,2 Hz, 6H), 1,47 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 1,23 ( s, 2H), 0,94-0,75 (m, 4H), 0,64 (dd, J = 8,4, 4,5 Hz, 2H), 0,50 (dd, J = 7,8, 4,3 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač.619,2577, nađeno 620,33 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,25 min (LC metoda B).
Korak 3: 8-[3-(2-[Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il]etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-15-oksa-2l6-tia- 3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion ( enantiomer 1) (Jedinjenje 196) i 8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2 ,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 197)
[0845]
[0846] Racemsko jedinjenje 8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4 -trion (Jedinjenje 188) (320 mg, 0,5112 mmol) je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji. Korišć en je slede ć i SFC protokol: ChiralPak AS-3 (150 X 2,1 mm), 3 mm; 35 °C mobilna faza: 30% acetonitril:metanol (90:10), 70% ugljen-dioksid. Prvi enantiomer koji je eluiran bio je 8-[3-(2{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen- 2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 196) (63 mg, 39%). ESI-MS m/z izrač. 619,2577, nađeno 620,33 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,18 min (LC metoda B). Drugi enantiomer koji je eluiran bio je 8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza- 1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4 -trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 197) (62 mg, 39%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,56 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,59 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,09 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,08 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,21 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,88 (t, J = 11,9 Hz, 1H), 3,60 (d, J = 13,0 Hz, 1H), 3,17 (d, J = 4,3 Hz, 3H) , 2,86 (s, 1H), 2,08 (dd, J = 11,8, 5,9 Hz, 1H), 1,81 (k, J = 6,5 Hz, 3H), 1,57 (d, J = 9,4 Hz, 6H), 1,47 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 1,42 - 1,33 (m, 1H), 1,24 (s, 1H), 0,96 - 0,78 (m, 4H), 0,72 - 0,57 (m, 2H), 0,57 - 0,42 (m, 2H) . ESI-MS m/z izrač. 619,2577, nađeno 620,33 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,18 min (LC metoda B).
Primer 55: Priprema 20,20-dimetil-4-{3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklo propil)etoksi]-1H-pirazol-1-il}-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) ( Jedinjenje 206) i 20,20-dimetil-4-{3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 207)
[0847]
Korak 1: terc-butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]pirazol-1-il]piridin-3 -karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0848]
[0849] 2-hloro-6-[3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (350 mg, 0,9620 mmol) i karbonil diimidazol (188 mg, 1.159 mmol) su kombinovani u tetrahidrofuranu (8.0 mL) i mešani 90 min na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(3-sulfamoilpirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (446 mg, 1,154 mmol), a zatim bezvodni 1,8-diazabiciklo [5.4.0]undec-7-en (360 mL, 2,407 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 30 min, nakon čega je usledilo zagrevanje na 40 °C tokom 20 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su razdvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, upareni i zatim prečišć eni hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijent od 100% heksana do 80% etil acetata u heksanu, a zatim druga kolona silika gela koristeć i gradijent od 100% dihlorometana do 15% metanola u dihlorometanu da bi se dobio terc-butil 4-[3-[3[[2- hloro-6-[3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2- dimetilpirolidin-1-karboksilat (360 mg, 51%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 731,3232, nađeno 732,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,14 min (LC metoda G).
Korak 2: 20,20-dimetil-4-{3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]-1H-pirazol-1-il}-10l6-tia-1,3,9, 14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 198)
[0850]
terc-butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil) etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (360 mg, 0,4916 mmol), kalijum karbonat (400 mg, 2,894 mmol), 3 A molekulska sita i NMP (10 mL) su dodati u mikrotalasnu bočicu od 20 mL, ispuhati azotom, zatvoriti poklopcem, zagrejati na 160 °C i mešati 96 h. Reakcioni sud je ohlađen do sobne temperature i filtriran, a filtrat je razblažen etil acetatom i ispran zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su razdvojeni, sušeni preko natrijum sulfata, upareni i zatim prečišć eni hromatografijom na silika gelu koriste ć i gradijent od 100% heksana do 90% etil acetata u heksanu da bi se dobio 20,20-dimetil-4-{3-[2- (2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksil-1H-pirazol-1-il}-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]docosa-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 198) (59,7 mg, 20%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,42 (s, 1H), 8,17 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,88 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,43 - 4,29 (m, 1H) , 4,24 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 4,00 - 3,87 (m, 1H), 2,75 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 2,16 - 2,12 (m, 1H), 2,03 - 1,94 (m, 2H), 2,16 - 2,12 (m, 2H). ), 1,76 (k, J = 7,1 Hz, 3H), 1,57 (d, J = 15,2 Hz, 6H), 1,47 (t, J = 12,3 Hz, 2H), 1,10 - 1,05 (m, 6H), 0,97 (s , 6H), 0,91-0,75 (m, 2H), 0,25 (t, J = 7,2 Hz, IH). ESI-MS m/z izrač.595,29407, nađeno 596,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,94 min (LC metoda E).
Korak 3: 20,20-dimetil-4-{3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]-1H-pirazol-1-il}-10l6-tia-1,3,9, 14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 206) i 20,20-dimetil-4-{3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]-1H-pirazol-1-il}-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 207)
[0851]
[0852] Racemski 20,20-dimetil-4-{3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksi]-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia-1,3,9 ,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 198) (45,4 mg, 0,07544 mmol) je odvojeno hiralnom SFC hromatografijom korišć enjem ChiralPak AS-H (250 X 21,2 mm kolone, veličine čestica 5 mm) sa 32% acetonitril:metanol (90:10; bez modifikatora))/68% mobilne faze ugljen-dioksida na 0,5%. mL/min dajuć i kao prvi enantiomer za eluiranje, 20,20-dimetil-4-13-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksil-1H-pirazol-1-il}-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen - 8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 206) (18,9 mg, 84%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 595,29407, nađeno 596,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,94 min (LC metoda E). Drugi enantiomer koji je eluiran bio je 20,20-dimetil-4-{3-[2-(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)etoksil-1H-pirazol-1-il}-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) ( Jedinjenje 207) (19,2 mg, 85%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,38 (s, 1H), 8,17 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 2,3 Hz , 1H), 7,12 - 6,99 (m, 2H), 5,88 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,43 - 4,30 (m, 1H), 4,24 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,93 (t, J = 12,1 Hz, 1H), 2,74 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 2,17 - 2,11 (m, 1H), 2,04 - 1,96 (m, 2H), 1,76 (k, J = 7,2 Hz, 3H), 1,59 (s, 6H), 1,47 (t, J = 12,1 Hz, 2H), 1,08 (s, 6H), 0,97 (s, 6H), 0,92 - 0,71 (m, 2H), 0,25 (t, J = 7,2 Hz , 1H). ESI-MS m/z izrač. 595,29407, nađeno 596,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,94 min (LC metoda E).
Primer 56: Priprema (14S)-12,12-dimetil-8-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 208)
[0853]
Korak 1: 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propan-1-ol
[0854]
[0855] Balon sa okruglim dnom od 1 L sa 3 grla je opremljen mehaničkom mešalicom, kupatilom za hlađenje, levka za dodavanje i J-Kem temperaturnom sondom. Posuda je napunjena peletima litijum aluminijum hidrida (6,3 g, 0,1665 mol) u atmosferi azota. Posuda je zatim napunjena tetrahidrofuranom (200 mL) u atmosferi azota. Smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 0,5 h da bi se omoguć ilo da se pelete rastvore. Rashladno kupatilo je zatim napunjeno usitnjenim ledom u vodi i reakciona temperatura je snižena na 0 °C. Levak za dodavanje je napunjen sa rastvorom 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropanoične kiseline (20 g, 0,1281 mol) u tetrahidrofuranu (60 mL) i bistri bledo žuti rastvor je dodat u kapima tokom 1 h.
Nakon što je dodavanje završeno, smeša je ostavljena da se polako zagreva na sobnu temperaturu i mešanje je nastavljeno tokom 24 h. Suspenzija je ohlađena na 0 °C korišć enjem ledenog kupatila, a zatim ugašena veoma sporim dodavanjem vode u kapima (6,3 mL), zatim rastvorom natrijum hidroksida (15 težinskih %; 6,3 mL) i na kraju vodom (18,9). mL). Reakciona temperatura dobijene bele suspenzije je zabeležena na 5 °C. Suspenzija je mešana na ~5 °C tokom 30 min, a zatim filtrirana kroz 20 mm sloj celita. Filterski kolač je ispran tetrahidrofuranom (2 x 100 mL). Filtrat je osušen preko natrijum sulfata (150 g) i zatim filtriran. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobilo bistro, bezbojno ulje (15 g) koje sadrži smešu proizvoda 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propan-1-ola u tetrahidrofuranu (73% težine proizvod (10,95 g) i 27 tež% tetrahidrofurana kao što je određeno 1H-NMR). Destilat iz rotacionog isparavanja je destilovan na atmosferskom pritisku korišć enjem Vigreuk kolone od 30 cm da bi se dobilo 8,75 g ostatka koji sadrži 60% težine tetrahidrofurana i 40% težine proizvoda (3,5 g). Ove smeše proizvoda u tetrahidrofuranu su kombinovane dajuć i 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propan-1-ol (14,45 g 61 tež% u tetrahidrofuranu, 79% prinos).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 4,99 (t, J = 5,7 Hz, 1H), 3,38 (dd, J = 5,8, 0,9 Hz, 2H), 1,04 (d, J = 0,9 Hz, 6H).
Korak 2: terc-butil 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-karboksilat
[0856]
[0857] Mešavina 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propan-1-ola (10 g, 70,36 mmol) i terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilata (12,96 g, 70,36 mmol) u toluenu (130 mL) je tretiran trifenilfosfinom (20,30 g, 77,40 mmol), a zatim izopropil N-izopropoksikarboniliminokarbamatom (14,99 mL, 77,40 mmol) i smeša je mešana na 116 °C. Žuti rastvor je koncentrovan pod sniženim pritiskom, razblažen heptanom (100 mL) i istaloženi trifenilfosfin oksid je uklonjen filtracijom i ispran sa heptan/toluenom 4:1 (100 mL). Žuti filtrat je uparen, a ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu sa linearnim gradijentom etil acetata u heksanu (0-40%) da bi se dobio terc-butil 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil- propoksi)pirazol-1-karboksilat (12,3 g, 57%) kao prljavo bela čvrsta supstanca. 1H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,10 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 6,15 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,18 (s, 2H), 1,55 (s, 9H), 1,21 (s, 6H). ESI-MS m/z izrač. 308,13477, nađeno 309,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,92 min (LC metoda B).
Korak 3: 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)-1H-pirazol
[0858]
terc-butil 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-karboksilat (13,5 g, 43,79 mmol) je tretiran sa 4 M hlorovodonika u dioksanu (54,75 mL, 219,0). mmol) i smeša je mešana na 45 °C tokom 1 h. Reakciona smeša je uparena do suva, a ostatak je ekstrahovan sa 1 M vodenim rastvorom natrijum hidroksida (100 mL) i metil terc-butil etrom (100 mL), ispran slanim rastvorom (50 mL) i ekstrahovan sa metil terc-butil etrom (50 mL). mL). Kombinovane organske faze su osušene preko natrijum sulfata, filtrirane i uparene da bi se dobio 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)-1H-pirazol (9,0 g, 96%) kao beli vosak čvrst.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 11,91 (s, 1H), 7,52 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 5,69 (t, J = 2,3 Hz, 1H), 4,06 (s, 2H), 1,19 (s, 6H). ESI-MS m/z izrač.208,08235, nađeno 209,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,22 min (LC metoda B).
Korak 4: terc-butil 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[0859]
[0860] U rastvor terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilata (10,4 g, 41,9 mmol) i 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)-1H-pirazola (9,0 g, 41,93 mmol) u N,N-dimetilformamidu (110 mL) dodat je kalijum karbonat (7,53 g, 54,5 mmol) i 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (706 mg, 6,29 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Suspenzija kreme je ohlađena u hladnom vodenom kupatilu i polako je dodavana hladna voda (130 mL). Gusta suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi 1 h, filtrirana i isprana vodom da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol- 1-il]piridin-3-karboksilat (17,6 g, 99%) kao prljavo bela čvrsta supstanca nakon sušenja pod vakuumom.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksidd6) δ 8,44 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,31 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,26 ( d, J = 2,9 Hz, IH), 4,27 (s, 2H), 1,57 (s, 9H), 1,24 (s, 6H). ESI-MS m/z izrač.419,12234, nađeno 420,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,36 min (LC metoda B).
Korak 5: 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[0861]
terc-butil 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (17,6 g, 40,25 mmol) je suspendovan u izopropanol (85 mL) tretiran hlorovodoničnom kiselinom (34 mL od 6 M, 201 mmol) i zagrevan do refluksa 3 h (prešao je skoro do kraja u rastvor pri refluksu i ponovo počeo da se taloži). Suspenzija je razblažena vodom (51 mL) na refluksu i ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu uz mešanje tokom 2,5 h. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, isprana sa izopropanol/voda 1:1 (50 mL), dodatnom količinom vode i osušena u ormanu za sušenje pod vakuumom na 45-50 °C uz ispuštanje azota preko noć i da se dobije 2-hloro-6-[ 3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (13,7 g, 91%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 13,61 (s, 1H), 8,44 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,39 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 8,4 Hz, IH), 6,25 (d, J = 2,9 Hz, IH), 4,28 (s, 2H), 1,24 (s, 6H). ESI-MS m/z izrač.
363,05975, nađeno 364,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,79 min (LC metoda B).
Korak 6: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1 -il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0862]
2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (174,5 mg, 0,4702 mmol) i karbonil diimidazol (95.31 mg, 0.5878 mmol) je kombinovan u tetrahidrofuranu (2.223 mL) i mešan 90 min na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (194 mg, 0,4702 mmol) kao rastvor u tetrahidrofuranu (855 mL) prać eno 1,8-diazabiciklom-10[5.4.0]undec-7-en (357,9 mg, 2,351 mmol) i reakcija je mešana na 50 °C tokom 2,5 h. Nastaviti sa mešanjem na sobnoj temperaturi 4 dana. Reakcija je zatim razblažena etil acetatom i isprana zasić enim vodenim rastvorom amonijum hlorida, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su razdvojeni, sušeni preko natrijum sulfata, upareni i zatim prečišć eni hromatografijom na silika gelu koriste ć i plitki gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata dajuć i čisti proizvodni materijal i frakcije pomešane sa kiselinom početnog materijala. Mešane frakcije sa početnom kiselinom su kombinovane, uparene i prečišć ene koriš ć enjem HPLC-MS metode reverzne faze koriste ć i Luna C18 (2) kolonu (75 X 30 mm, veličina čestica 5 mm) koju prodaje Phenomenek (pn: 00C-4252-U0-AX) i dvostruki gradijent od 30-99% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 mL i temperatura kolone = 25 °C) i frakcije čistih proizvoda su kombinovane sa čistim materijalom iz originalne kolone silicijum dioksida da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3] -(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (110,4 mg, 31%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 757,2636, nađeno 758,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,9 min (LC metoda A).
Korak 7: 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[0864]
[0865] U balon sa okruglim dnom koji sadrži terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil -propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (110,4 mg, 0,1456 mmol) je dodat dihlorometan (2 mL) i trifluorosirć etne kiseline (450 mL, 5.841 mmol). Posle 1 h na sobnoj temperaturi, reakcija je uparena do suva. Sirova reakciona smeša je neutralizovana zasić enim natrijum bikarbonatom i ekstrahovana etil acetatom. Proizvod se srušio i malo metanola je korišć eno da pomogne u ekstrakciji. Organski sloj je odvojen i uparen da bi se dobio 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (95 mg, 99%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 657,2112, nađeno 658,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,62 min (LC metoda B).
Korak 8: (14S)-12,12-dimetil-8-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-2l6-tia-3,9 ,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 208)
[0866]
[0867] U bočicu je dodat cezijum fluorid (33,5 mg, 0,2205 mmol), kalijum karbonat (100 mg, 0,7236 mmol), 3 A molekulska sita i rastvor 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1- il]piridin-3-karboksamid (95 mg, 0,1443 mmol) u dimetil sulfoksidu (2,5 mL). Reakcija je zatvorena i stavljena u prethodno zagrejano na 150 °C uljno kupatilo preko noć i. Reakcija je ohlađena do sobne temperature, filtrirana i prečišć ena pomo ć u HPLC (30%-99% acetonitril:voda sa 0,1% modifikatorom hlorovodonične kiseline daju ć i (14S)-12,12-dimetil-8-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 208) (45,5 mg, 51%) kao tan čvrst.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,49 (s, 1H), 8,23 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,58 (dd, J = 8,5 , 7,2 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,95 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 6,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,18 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,27 - 4,19 (m, 2H), 3,92 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 3,16 (s, 1H), 2,95 (d, J = 13,5 Hz, 1H), 2,71 (t, J = 10,8 Hz, 1H), 2,13 (s, 1H), 1,86 (dd, J = 11,8, 5,2 Hz, 1H), 1,77 (s, 1H), 1,65 - 1,48 (m, 9H), 1,35 (dd, J = 25,8, 14,3 Hz, IH), 1,24 (s, 6H). ESI-MS m/z izrač. 621,2345, nađeno 622,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,24 min (LC metoda B).
Primer 57: Priprema (14S)-12,12-dimetil-8-[3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetilbutoksi)-1H-pirazol-1-il]-2l6-tia-3 ,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-tri-on (Jedinjenje 212)
[0868]
Korak 1: (3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propil) metansulfonat
[0869]
[0870] U rastvor 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propan-1-ola (17 g, 104,1 mmol) u suvom dihlorometanu (150 mL) dodat je trietilamin (45,0 mL, 322,9 mmol) . Reakcija je ohlađena do 0 °C i metansulfonil hlorid (10 mL, 129.2 mmol) je dodat polako ukapavanjem u atmosferi azota. Dobijena heterogena smeša je mešana tokom 1 h uz zagrevanje do sobne temperature. Reakcija je zatim ugašena hladnom vodom (150 mL) i ekstrahovana sa dihlorometanom (200 mL) dva puta. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen (temperatura kupatila 20 °C na 300 mbar) da bi se dobio 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propil metansulfonat (18,4 g, 80%) kao bistro žu ć kasto tečnost.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 4,13 (d, J = 2,4 Hz, 2H), 3,03 (d, J = 2,4 Hz, 3H), 1,21 (d, J = 2,4 Hz, 6H).
Korak 2: 4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butannitril
[0871]
[0872] U rastvor (3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propil) metansulfonata (30,00 g, 136,2 mmol) u dimetil sulfoksidu (150 mL) dodat je cijanonatijum (20,05 g, 409,1 mmol). Reakcija je opremljena refluks kondenzatorom i zagrevana na 120 °C tokom 3 dana. Reakcija je zatim ohlađena na 0 °C i dodata je ledena voda, a zatim slani rastvor. Reakciona smeša je zatim ekstrahovana etrom dva puta, organski slojevi su kombinovani i sušeni iznad natrijum sulfata, filtrirani i upareni da bi se dobio 4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butannitril (18,43 g, 90%) kao narandžasta. tečnost.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 2,56 (s, 2H), 1,33 (s, 6H).
Korak 3: 4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butanska kiselina
[0873]
[0874] U rastvor 4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butannitrila (12 g, 39.70 mmol) u etanolu (100 mL) dodat je natrijum hidroksid (35 mL 6 M, 210.0 mmol). Dobijeni bistri rastvor ć ilibara je zagrevan na 70 °C preko no ć i. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i u reakcionu smešu je dodata voda (30 mL) i ekstrahovana etrom. Etarski sloj je ispran sa 6M natrijum hidroksidom. Vodeni slojevi su kombinovani i vodeni rastvor je podešen na pH = 1 sa koncentrovanom hlorovodoničnom kiselinom oprezno na 0 °C. Smeša je zatim ekstrahovana etrom (3 X 100 mL). Organski ekstrakti su kombinovani i osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani (temperatura kupatila 20 °C na 300 mbar) da bi se dobila 4,4,4-trifluoro-3,3-dimetilbutanska kiselina (3,8 g, 28%). 'H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 2,48 (s, 2H), 1,27 - 1,26 (s, 6H).
Korak 4: 4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butan-1-ol
[0876] U suspenziju litijum aluminijum hidrida (438 mg, 11,24 mmol) u etru (30 mL) u kapima je dodat preko levka za dodavanje rastvor 4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butanoične kiseline ( 3,8 g, 11,17 mmol) u etru (30 mL) na 0 °C u atmosferi azota. Dobijena suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi 24 h. Reakciona smeša je ohlađena u ledenom kupatilu i uzastopno ugašena vodom (450 mL, 24,98 mmol) (polako), zatim natrijum hidroksidom (450 mL 6 M, 2,700 mmol), zatim vodom (1,35 mL, 74,94 mmol) dajuć i belu, granulisanu suspenziju koja je dalje mešana sa anhidrovanim magnezijum sulfatom 30 min, a zatim filtrirana preko celita. Talog je ispran etrom i filtrat je koncentrovan (na -400 mbar i 20°C vodenog kupatila) da bi se dobio 4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butan-1-ol (1,5 g, 86% ) kao bezbojna tečnost.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 3,77 (td, J = 7,3, 0,8 Hz, 2H), 1,79 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 1,15 (d, J = 0,8 Hz, 6H).
Korak 5: terc-butil 3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butoksi) pirazol-1-karboksilat
[0877]
[0878] Rastvor 4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butan-1-ola (1,0 g, 6,404 mmol), terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilata (1,2 g, 6,515 mmol), trifenilfosfin (1,9 g, 7,244 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (10 mL) je ohlađen u ledenom kupatilu i DIAD (1,5 mL, 7,618 mmol) je polako dodat u atmosferi azota. Reakcija je ostavljena da se polako zagreje do sobne temperature i mešana je preko noć i. Reakciona smeša je razblažena etil acetatom, isprana zasi ć enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, zatim slanim rastvorom i osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i uparena pod vakuumom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gel koloni korišć enjem gradijenta od 100% heksana do 50% etil acetata u heksanu da bi se dobio terc-butil 3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butoksi)pirazol-1 -karboksilat (650 mg, 31%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,83 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 5,84 (d, J = 3,1 Hz, 1H), 4,38 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,98 (t , J = 7,1 Hz, 2H), 1,61 (s, 9H), 1,18 (s, 6H). ESI-MS m/z izrač. 322,15042, nađeno 323,18 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,74 min (LC metoda A).
Korak 6: 3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butoksi)-1H-pirazol
[0879]
[0880] Rastvor terc-butil 3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butoksi)pirazol-1-karboksilata (650 mg, 2,017 mmol) i trifluorosirć etne kiseline (1 mL, 12,98 mmol) u dihlorometanu (4 mL) je mešana 4 h na sobnoj temperaturi. Isparljive supstance su uklonjene pod vakuumom, a ostatak je bazifikovan zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata i ekstrahovan etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni da bi se dobio 3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetilbutoksi)-lH-pirazol (448 mg, 100%) kao bezbojno ulje. ESI-MS m/z izrač. 222,09799, nađeno 223,09 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,53 min (LC metoda A).
Korak 7: terc-butil 2-hloro-6-[3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[0881]
[0882] Smeša 3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butoksi)-1H-pirazola (448 mg, 2,016 mmol), terc-butil 2,6-dihloro-piridin-3-karboksilat (501 mg, 2.019 mmol), kalijum karbonat (336 mg, 2.431 mmol) i 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (46 mg, 0.4101 mmol) u dimetil sulfoksidu (5 mL) su mešani na sobnoj temperaturi. temperatura 15 h. Reakcija je razblažena vodom i ekstrahovana etil acetatom. Kombinovani organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gel koloni koriš ć enjem gradijenta od 100% heksana do 20% etil acetata u heksanu da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[3-(4,4,4-trifluoro-3,3- dimetil-bu-toksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (471 mg, 54%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,36 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,19 (dd, J = 8,2, 1,8 Hz, 1H), 7,69 (dd, J = 8,2, 1,8 Hz, 1H) , 5,94 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,38 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 2,03 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,62 (d, J = 2,1 Hz, 9H), 1,22 (s, 6H). ESI-MS m/z izrač.433.138, nađeno 434.2 (M+l)+;Vreme zadržavanja: 0,91 min (LC metoda A).
Korak 8: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0883]
[0884] Rastvor terc-butil-2-hloro-6-[3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilata (150 mg , 0,3457 mmol) u trifluorosirć etnoj kiselini (150 mL, 1,947 mmol) i dihlorometan (1 mL) su mešani na sobnoj temperaturi 2 h. Rastvarač je uklonjen i ostatak osušen pod visokim vakuumom da bi se dobila bela čvrsta supstanca. U rastvor ove čvrste supstance u tetrahidrofuranu (2 mL) dodat je karbonil diimidazol (68 mg, 0,4194 mmol) i reakciona smeša je mešana 4 h na sobnoj temperaturi. Zatim, terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)ami-no]propil]pirolidin-1-karboksilat (146 mg, 0,3539 mmol) u tetrahidrofuranu Dodat je (2 mL), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (110 mL, 0,7356 mmol) i reakcija je mešana 16 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana smešom zasić enog amonijum hlorida i rastvora soli (1:1). Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni. Dobijeni smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koristeć i plitki gradijent od 100% dihlorometana do 20% metanola/dihlorometana da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (82 mg, 31%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 771,27924, nađeno 772,36 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,89 min (LC metoda A).
Korak 9: (14S)-12,12-dimetil-8-[3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetilbutoksi)-1H-pirazol-1-il]-2l6-tia-3,9 ,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 212)
[0885]
[0886] Rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butoksi) pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (82 mg, 0,1062 mmol) u dihlorometanu (500 mL) i trifluorosirć etna kiselina (100 mL, 1.307 mmol) je mešana na sobnoj temperaturi 4 h. Rastvarači su zatim uklonjeni i ostatak je osušen pod vakuumom. Ovaj ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (5 mL) i dodata su 3 A molekularna sita osušena u peć nici i reakciona smeša je mešana 10 min. Zatim su dodati cezijum fluorid (51 mg, 0,3357 mmol) i kalijum karbonat (48 mg, 0,3473 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 130 °C preko noć i. Reakciona smeša je filtrirana kroz Vhatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišć en HPLC-MS metodom reverzne faze koriš ć enjem dvostrukog gradijenta od 50-99% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilna faza A = voda (0,05% hlorovodonične kiseline). mobilna faza B = acetonitril) da bi se dobio (14S)-12,12-dimetil-8-[3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetilbutoksi)-1H-pirazol-1-il]-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111, 14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20 -heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 212) (34,5 mg, 51%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9,84 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,54 (dt, J = 15,1, 7,2 Hz, 2H), 7,27 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,57 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 5,91 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,38 (t, J = 7,2 Hz , 2H), 3,91 (s, 1H), 3,41 - 3,31 (m, 1H), 3,17 (d, J = 14,5 Hz, 1H), 3,06 (t, J = 9,7 Hz, 1H), 2,62 (s, 1H) , 2,09 (dd, J = 12,3, 7,9 Hz, 1H), 2,03 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,62 (d, J = 3,6 Hz, 11H), 1,22 (d, J = 0,8 Hz, 6H) . ESI-MS m/z izrač. 635.2502, pronađeno 636,2 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 1,14 min (LC metoda J).
Primer 58: Priprema 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomerni par 1) (Jedinjenje 209), 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111, 14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomerni par 2) (Jedinjenje 210), 8-[3- (3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza -1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomerski par 1, enantiomer 1) (Jedinjenje 215), 8-[3-(3 ,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza -1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomerski par 1, enantiomer 2) (Jedinjenje 216), 8-[3-(3,3 -dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12 ,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20 - heksaen-2,2,4-trion (dijastereomerski par 2, enantiomer 1) (Jedinjenje 218) i 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12 ,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen -2,2,4-trion (dijastereomerski par 2, enantiomer 2) (Jedinjenje 219)
[0887]
Korak 1: terc-butil N-[2-(3,3-dimetilbutilamino)etil]karbamat
[0888]
U rastvor terc-butil N-(2-aminoetil)karbamata (25 g, 156.04 mmol) u metanolu (400 mL) dodat je 3,3-dimetilbutanal (20 mL, 159.35 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Ohlađen na 0 °C i polako dodat natrijum borohidrid (6,2 g, 163,88 mmol). Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakcija je koncentrovana, a zatim je ostatak ponovo rastvoren u etil acetatu (500 mL). Dobijeni rastvor je dva puta ispran zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 X 300 mL) i slanim rastvorom (13500 mL), a zatim osušen iznad natrijum sulfata. Rastvor je filtriran i koncentrovan da bi se dobio tercbutil N-[2-(3,3-dimetilbutilamino)etil]karbamat (37,5 g, 96%) kao ulje. ESI-MS m/z: 244,37, nađeno 245,5 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 2,25 min (LC metoda P).
Korak 2: 1-(3,3-dimetilbutil)imidazolidin-2-on
[0891] U terc-butil N-[2-(3,3-dimetilbutilamino)etil]karbamat (15,8 g, 64,65 mmol) dodat je tetrahidrofuran (200 mL) u balonu od 1000 mL. Doda se čvrsti kalijum terc-butoksid (21,77 g, 194,0 mmol) i dobijeni žuti rastvor je zagrevan na 60 °C tokom 3 h. Smeša je ohlađena do sobne temperature i zakiseljena do pH = 1-2 sa vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (1 M) i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Vodeni ostatak je ekstrahovan sa etil acetatom (2 X 200 mL), organska faza je isprana dva puta slanim rastvorom (100 mL), osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobila bež čvrsta supstanca koja je prečišć ena pomo ć u silika gela. hromatografija na koloni (0% do 10% metanola u etil acetatu) daju ć i 1-(3,3-dimetilbutil)imidazolidin-2-on (8,3 g, 72%) kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (300 MHz, dimetil sulfoksid-d6) ppm 0,89 (s, 9H), 1,26-1,37 (m, 2H), 2,97-3,09 (m, 2H), 3,14-3,22 (m, 2H), 3,24-3,3. m, 2H), 6,12-6,32 (m, 1H). ESI-MS m/z izrač.170.252, nađeno 171.2 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 2,17 min (LC metoda H).
Korak 3: terc-butil 4-[3-[[6-[(2,6-dihloropiridin-3-karbonil)sulfamoil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1 -karboksilat
[0892]
[0893] U balon sa okruglim dnom pročišć enom azotom od 100 mL je pod azotom stavljena 2,6-dihloropiridin-3-karboksilna kiselina (220 mg, 1.146 mmol), karbonil diimidazol (185 mg, 1.141 mmol) i anhidrovani tetrahidro furan ). Smeša je mešana pod azotom na sobnoj temperaturi 1 h. U posebnoj posudi od 100 mL, rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilata (485 mg, 1,137 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (3 mL) je pripremljen u atmosferi azota i zatim je dodat preko šprica u rastvor aktiviranog estra. Kroz špric je dodat 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (373 mL, 2,494 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u atmosferi azota tokom 6 h. Rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom i dobijeno gusto ulje je tretirano vodenim rastvorom limunske kiseline. Dve faze su bile razdvojene. Vodena faza je ekstrahovana etil acetatom (30 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom (30 mL) i osušen preko natrijum sulfata. Posle filtracije i uparavanja rastvarača, ostatak je rastvoren u dihlorometanu i prečišć en hromatografijom na silika gelu korišć enjem gradijenta etil acetata (0% do 100% tokom 30 minuta) u heksanima daju ć i terc-butil 4-[3-[ [6-[(2,6-dihloropiridin-3-karbonil)sulfamoil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (412 mg, 60%) kao beli čvrsta penasta mešavina dijastereomera. ESI-MS m/z izrač. 599,1736, nađeno 600,21 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,77 min (LC metoda A).
Korak 4: 8-hloro-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7, 9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion
[0895] Rastvor terc-butil 4-[3-[[6-[(2,6-dihloropiridin-3-karbonil)sulfamoil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin- 1-karboksilat (412 mg, 0,6860 mmol) u dihlorometanu (4 mL) i trifluorosirć etnoj kiselini (0,55 mL, 7,187 mmol) su mešani na sobnoj temperaturi 4 h. Rastvarači su uklonjeni, a ostatak rastvoren u etil acetatu (100 mL). Ovaj rastvor je zatim ispran zasić enim rastvorom natrijum bikarbonata i vodom. Organski ekstrakt je koncentrovan i osušen pod vakuumom. Dobijeni ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (3 mL) i dodata su 3 A molekularna sita i reakciona smeša je mešana 10 min. Zatim su dodati cezijum fluorid (312,5 mg, 2,057 mmol) i kalijum karbonat (288,4 mg, 2,087 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 140 °C preko noć i. Reakciona smeša je filtrirana i u filtrat je dodata voda. Ovaj rastvor je ekstrahovan etil acetatom i organski ekstrakt je ispran slanim rastvorom, osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovan. Dobijeni smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na koloni silika gela koriste ć i gradijent od 100% dihlorometana do 50% dihlorometana/metanola da bi se dobio 8-hloro-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9, 19(23),20-heksan-2,2,4-trion (98 mg, 31%) . ESI-MS m/z izrač. 463,1445, nađeno 464,19 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,74 min (LC metoda A).
Korak 5: 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetra-ciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomerni par 1) (Jedinjenje 209) i 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111, 14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9, 19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomerni par 2) (Jedinjenje 210)
[0896]
[0897] Bočica od 4 mL je napunjena sa 8-hloro-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,ll,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza- 1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (89 mg, 0,1918 mmol), 1-(3,3dimetil-butil)imidazolidin-2- jedan (46 mg, 0,2702 mmol), Pd2(dba)3 (46 mg, 0,05023 mmol), Ksanfos (29 mg, 0,05012 mmol), cezijum karbonat (314 mg, 0,9637 mmol) i anhidrovani dioksan (3 mL). Smeša je prskana azotom 1-2 min, zatvorena i mešana na 120 °C tokom 14 h. Rastvarač je uparen, reakcija je razblažena sa dimetil sulfoksidom (900 mL), mikrofiltrirana i podvrgnuta preparativnoj HPLC reverzne faze (C18) korišć enjem gradijenta acetonitrila u vodi (1 do 99% tokom 15 minuta) i hlorovodonične kiseline kao modifikatora da bi se kao prvi dijastereomerni par eluirao, 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11, 18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomerni par 1) (Jedinjenje 209) (34 mg, 59%); ESI-MS m/z izrač.597,30975, nađeno 598,36 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,04 min (LC metoda B); i kao drugi dijastereomerni par za eluiranje, 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18 ,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomerski par 2) ( Jedinjenje 210) (63,5 mg, kvantitativno); ESI-MS m/z izrač. 597,30975, nađeno 598,36 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,07 min (LC metoda B).
Korak 6: 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomerski par 1, enantiomer 1) (Jedinjenje 215) i 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111 ,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomerski par 1, enantiomer 2) (Jedinjenje 216)
[0898]
[0899] 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksen-2,2,4-trion (dijastereomerski par 1) (Jedinjenje 209) (31 mg , 0,05134 mmol) je podvrgnuto hiralnoj SFC hromatografiji. Korišć en je slede ć i SFC protokol: ChiralPak AS-3 (1503 2,1 mm), 3 mm; 35 °C mobilna faza: 30% acetonitril:metanol (90:10), 70% ugljen-dioksid. Prvi enantiomer koji je eluiran bio je 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7, 9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomerski par 1, enantiomer 1 ) (Jedinjenje 215) (8,1 mg, 52%). ESI-MS m/z izrač. 597,30975, nađeno 598,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,06 min (LC metoda B). Drugi enantiomer koji je eluiran bio je 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomerski par 1, enantiomer 2) (Jedinjenje 216 ) (9,1 mg, 58%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,39 (s, 1H), 7,57 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,38 (s, 1H), 7,10 - 6,82 (m, 2H), 6,68 (d , J = 30,7 Hz, 1H), 4,17 (s, 1H), 4,03 - 3,79 (m, 2H), 3,46 (p, J = 8,5, 7,9 Hz, 2H), 3,21 (dd, J = 10,3, 6,1 Hz, 2H), 3,00 (s, 2H), 2,10 (s, 1H), 1,79 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 1,52 (d, J = 50,3 Hz, 9H), 1,40 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 1,28 (d, J = 40,1 Hz, 3H), 1,03 (d, J = 6,3 Hz, 3H), 0,92 (s, 9H). ESI-MS m/z izrač. 597,30975, nađeno 598,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,06 min (LC metoda B).
Korak 7: 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomerski par 2, enantiomer 1) (Jedinjenje 218) i 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111 ,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomerski par 2, enantiomer 2) (Jedinjenje 219)
[0900]
[0901] 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomerni par 2) (Jedinjenje 210) (60 mg ) je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji. Korišć en je slede ć i SFC protokol: Phenomenek LUKS- 4 AS-H (250 3 10 mm), 5 mm; mobilna faza: 42% metanol (bez modifikatora), 58% ugljen-dioksid; 70 mL injekcija pri 24 mg/mL u metanolu pri 10 mL/min. Prvi enantiomer koji je eluiran bio je 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heks-en-2,2,4-trion (dijastereomerski par 2, enantiomer 1) ( Jedinjenje 218) (9 mg, 30%). 1H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,11 (s, 1H), 7,56 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,51 - 7,31 (m, 2H), 7,15 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,51 - 7,31 (m, 2H), 7,15 (d, J = 7,3 Hz, 2H). ), 6,68 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,03 -3,80 (m, 1H), 3,45 (t, J = 8,3 Hz, 2H), 3,25 - 3,16 (m, 2H), 3,08 (s, 2H) , 2,25 (d, J = 21,1 Hz, 1H), 1,84 (dd, J = 11,9, 5,8 Hz, 1H), 1,71 (s, 1H), 1,57 (s, 3H), 1,49 (s, 4H), 1,47 - 1,33 (m, 3H), 1,29-1,17 (m, 7H), 0,92 (s, 9H). ESI-MS m/z izrač. 597,30975, nađeno 598,36 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,82 min (LC metoda A). Drugi enantiomer koji je eluiran bio je8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12,17-trimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23- pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomerski par 2, enantiomer 2) ( Jedinjenje 219) (14 mg, 46%). ESI-MS m/z izrač. 597,30975, nađeno 598,33 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,11 min (LC metoda B).
Primer 59: Priprema (14S)-8-{3-[(4,4-dimetilcikloheksil)metil]-2-oksoimidazolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11, 18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-tri-on (Jedinjenje 217)
[0902]
Korak 1: terc-butil N-[2-[(4,4-dimetilcikloheksil)metilamino] etil]karbamat
[0903]
[0904] U mešani rastvor 4,4-dimetilcikloheksankarbaldehida (250 mg, 1.783 mmol) u anhidrovanom metanolu (10 mL) dodat je rastvor terc-butil N-(2-aminoetil)karbamata (286 mg, 1.785 mmol) i anhidrovani metanol (1 mL) pod azotom. Nakon što je žuti rastvor mešan na sobnoj temperaturi 1 h, ohlađen je na 0 °C (ledeno-vodeno kupatilo). Zatim je natrijum borohidrid (142 mg, 3.753 mmol) polako dodat u dve serije i smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešanje je nastavljeno 15 h. Isparljive materije su uklonjene pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (30 mL) i ispran zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata rastvor (2 X 15 mL) i slani rastvor (15 mL), osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio terc-butil N-[2-[(4,4-dimetilcikloheksil)metilamino]etil]karbamat (481 mg, 95%) kao žuta guma. Sirovi materijal je korišć en u slede ć em koraku bez daljeg prečiš ć avanja. ESI-MS m/z izrač. 284,24637, nađeno 285,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,04 min (LC metoda B).
Korak 2: 1-[(4,4-dimetilcikloheksil)metil]imidazolidin-2-on
[0905]
[0906] Čvrst kalijum terc-butoksid (300 mg, 2,674 mmol) je dodat u rastvor terc-butil N-[2-[(4,4-dimetilcikloheksil)metilamino]etil]karbamata (240 mg, 0,8438 mmol) ) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (12 mL) pod azotom i reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom 13 h. Heterogena smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i zakišeljena je hlorovodoničnom kiselinom (3,5 mL 1,0 M, 3,500 mmol). Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom (ne do suva). Vodeni ostatak je ekstrahovan etil acetatom (3 x 10 mL) i organski slojevi su kombinovani, isprani slanim rastvorom (10 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu (gradijent od 0-10% metanola u dihlorometanu tokom 30 minuta) da bi se dobio 1-[(4,4-dimetilcikloheksil)metil]imidazolidin-2-on (62 mg, 35%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, benzen-d6) δ 5,42 (s, 1H), 3,10 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 2,84 - 2,77 (m, 2H), 2,77 - 2,71 (m, 2H), 1,58 - 1,52 (m, 2H), 1,46 - 1,42 (m, 2H), 1,38 (dk, J = 10,7, 3,5 Hz, 1H), 1,27 - 1,20 (m, 2H), 1,19 - 1,12 (m, 2H), 1. s, 3H), 0,92 (s, 3H). ESI-MS m/z izrač. 210,17322, nađeno 211,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,17 min (LC metoda B).
Korak 3: (14S)-8-[3-[(4,4-dimetilcikloheksil)metil]-2-oksoimidazolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18, 23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 217)
[0907]
[0908] U bočicu od 4 mL je napunjen (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10 ] tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (50 mg, 0,1111 mmol), 1-[(4,4-dimetilcikloheksil)metil]imidazolidin -2-on (26 mg, 0,1236 mmol), cezijum karbonat (130 mg, 0,3990 mmol), 4,5-bis(difenil-fosfino)-9,9-dimetilksanten (10 mg, 0,01728 mmol) (ksantfos) i anhidrovani dioksan (1,5 mL), tim redosledom. Azot se propušta kroz heterogenu smešu 2 min. Zatim je dodat tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (10 mg, 0,01092 mmol) pod azotom i azot je propušten kroz smešu još 2 minuta i bočica je zatvorena pod azotom. Smeša je mešana na 115 °C preko noć i. Smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i neutralizovana sa glacijalnom sirć etnom kiselinom (60 mL, 1,055 mmol). Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom, a ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (1,5 mL) i filtriran kroz Vhatman 0,45 mm PTFE filter za špric. Uzorak je prečišć en upotrebom preparativne reverzne faze HPLC-MS (Luna C18 (2) kolona (75 X 30 mm, veličina čestica 5 mm) koju prodaje Phenomenek (pn: 00C-4252-U0-AX), rad sa dvostrukim gradijentom od 30 -99% acetonitrila u vodi tokom 15 min (hlorovodonična kiselina kao modifikator)). Željene frakcije proizvoda su kombinovane i koncentrovane pod sniženim pritiskom, a ostatak je stavljen u etil acetat (25 mL) i ispran sa slanim rastvorom (10 mL). Organski sloj je osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. dajuć i (14S)-8-{3-[(4,4-dimetilcikloheksil)metil]-2-oksoimidazolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 217) (7,5 mg, 11 %) bledo žu ć kasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ 7,70 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,52 (dd, J = 8,5, 7,2 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,15 (dd, J = 7,2, 0,8 Hz, 1H), 6,65 (dd, J = 8,5, 0,8 Hz, 1H), 4,10 - 4,07 (m, 1H), 4,07 - 4,02 (m, 1H), 4,02 - 3,95 (m , 1H), 3,56 - 3,52 (m, 1H), 3,51 - 3,47 (m, 1H), 3,23 (dd, J = 10,2, 6,7 Hz, 1H), 3,18 - 3,09 (m, 2H), 3,087 - 2,9 , 1H), 2,86 (t, J = 10,4 Hz, 1 H), 2,21 - 2,07 (m, 1 H), 1,83 (dd, J = 11,7, 5,4 Hz, 2H), 1,64 (s, 3H), 1,63 - 1,55 ( m, 5H), 1,55 (s, 3H), 1,48-1,35 (m, 3H), 1,31-1,27 (m, 2H), 1,22-1,16 (m, 3H), 0,91 (s, 6H). ESI-MS m/z izrač.623,3254, nađeno 624,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,13 min (LC metoda B).
Primer 60: Priprema 12,12-dimetil-8-{3-[3-metil-2-(propan-2-il)butoksi]-1H-pirazol-1-il}-2l6-tia-3,9, 11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 220 )
[0909]
Korak 1: terc-butil 3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-karboksilat
[0910]
[0911] Rastvor 2-izopropil-3-metil-butan-1-ola (500 mg, 3.839 mmol), terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilata (705 mg, 3.828 mmol) i trifenilfosfina (1.16 g, 4,423 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (20 mL) je ohlađeno u ledenom kupatilu i DIAD (830 mL, 4,216 mmol) je polako dodat u atmosferi azota. Reakcija je ostavljena da se polako zagreje do sobne temperature i mešana je preko noć i. Reakciona smeša je razblažena etil acetatom, isprana zasi ć enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, slanim rastvorom, osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i uparena pod vakuumom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu sa gradijentom 0-50% etil acetata u heksanu da bi se dobio terc-butil 3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-karboksilat (980 mg, 86%) kao bistro ulje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,82 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 5,84 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,29 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 1,91 (pd , J = 6,9, 5,6 Hz, 2H), 1,61 (s, 9H), 1,44 - 1,24 (m, 1H), 0,98 (d, J = 6,8 Hz, 6H), 0,92 (d, J = 6,9 Hz, 6H) . ESI-MS m/z izrač.296,21, nađeno 297,21 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 0,84 min (LC metoda A).
Korak 2: 3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)-1H-pirazol
[0912]
[0913] U balon sa okruglim dnom od 250 mL stavljen je terc-butil 3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-karboksilat (980 mg, 3.306 mmol), dihlorometan (10 mL) i metil alkohol ( 10 mL). Ovom bistrom rastvoru je dodat hlorovodonik u 1,4-dioksanu (4,1 mL 4 M, 16,40 mmol) preko šprica. Homogeni rastvor je mešan na 45 °C tokom 19 h. Dodata su dva dodatna ekvivalenta 4 M hlorovodonika u 1,4-dioksanu i mešana još jedan sat. Isparljive materije su uklonjene pod sniženim pritiskom. Ostatak je stavljen u etil acetat (50 mL) i ispran sa 1N vodenim rastvorom natrijum hidroksida. Slojevi su razdvojeni i vodena faza je ekstrahovana etil acetatom (20 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum sulfata i rastvarači su upareni da bi se dobio 3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)-lH-pirazol (490 mg, 76%) kao bezbojno ulje. ESI-MS m/z izrač. 196,15756, nađeno 197,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,72 min (LC metoda A).
Korak 3: Etil 2-hloro-6-[3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[0914]
[0915] Etil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (547 mg, 2.486 mmol), 3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)-1H-pirazol (488 mg, 2.486 mmol) i kalijum karbonat (412 mg, 2.981 mmol) su kombinovani u anhidrovanom dimetil sulfoksidu (6 mL). Dodat je 1,4-Diazabiciklo[2.2.2]oktan (56 mg, 0,4992 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom 16 h. Reakciona smeša je razblažena vodom (80 mL) i mešana 15 min. Dobijena bela čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom i isprana vodom. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu i osušena iznad magnezijum sulfata. Smeša je filtrirana i filtrat je uparen da bi se dobio etil 2-hloro-6-[3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (900 mg, 95%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,42 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,39 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,20 ( d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,34 (k, J = 7,1 Hz, 2H), 4,26 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 2,02 - 1,76 (m, 2H), 1,45 - 1,29 (m, 4H ), 0,98 (d, J = 6,8 Hz, 6H), 0,92 (d, J = 6,8 Hz, 6H). ESI-MS m/z izrač.379,16626, nađeno 380,21 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,56 min (LC metoda B).
Korak 4: 2-hloro-6-[3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[0916]
[0917] U balon sa okruglim dnom je dodat etil 2-hloro-6-[3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (900 mg, 2.369 mmol), tetrahidrofuran (6 mL) i vodeni rastvor natrijum hidroksida (1.4 mL 5 M, 7.000 mmol). Reakcioni rastvor je ostavljen da se meša 4 h na sobnoj temperaturi. Reakcioni rastvor je razblažen etil acetatom (100 mL) i dodat je vodeni rastvor hlorovodonične kiseline (12 mL 1 M, 12,00 mmol). Faze su razdvojene i vodena je ekstrahovana etil acetatom (2 X 30 mL). Kombinovane organske faze su osušene preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan in vacuo da bi se dobila 2-hloro-6-[3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (655 mg, 79%) koja je korišć ena bez dalje prečiš ć avanje. ESI-MS m/z izrač.351,13498, nađeno 352,19 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,87 min (LC metoda A).
Korak 5: terc-butil 5-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfa -moil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0918]
[0919] 2-hloro-6-[3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (170 mg, 0,4832 mmol) i karbonil diimidazol (81 mg, 0,4995) mmol) su kombinovani u anhidrovanom tetrahidrofuranu (4 mL) i mešani 75 min na 40 °C. Zatim rastvor tetrahidrofurana (7 mL) terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilata (165 mg, 0,400 mmol ) i dodat je 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (152 mL, 1,016 mmol). Reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 4 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa 1 M vodenim rastvorom limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen, a zatim prečišć en hromatografijom na silika gelu koriste ć i gradijent od 100% heksana do 75% etil acetata u heksanu da bi se dobio kao prljavo bela čvrsta supstanca, terc-butil 5-[3- [[6-[[2-hloro-6-[3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfa-moil]-2-piridil]amino]propil ]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (200 mg, 67%). ESI-MS m/z izrač.745,3388, nađeno 746,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,87 min (LC metoda K).
Korak 6: 12,12-dimetil-8-{3-[3-metil-2-(propan-2-il)butoksi]-1H-pirazol-1-il}-2l6-tia-3,9,11, 18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 220)
[0921] terc-butil 5-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil ]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (200 mg, 0,2680 mmol) rastvoren je u dihlorometanu (3,5 mL) i u smešu je dodata hlorovodonična kiselina (4 mL od 4 M u dioksanu, 16,00 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana do suva pod sniženim pritiskom do ostatka. Kombinovani ovaj ostatak i kalijum karbonat (223 mg, 1,614 mmol), cezijum fluorid (66 mg, 0,4345 mmol), 3 A molekularna sita i dimetil sulfoksid (3,2 mL) u bočici, pročišć eni azotom, zatvoreni poklopci, zagrejani na 140 °C i mešano 16 h. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature, filtrirana i zatim prečišć ena preparativnom hromatografijom reverzne faze (C18 kolona, 30% do 99% acetonitrila (bez modifikatora) u vodi (5 mM hlorovodonična kiselina) tokom 30 minuta) gradijentom da bi se dobilo kao bela čvrsta supstanca, 12,12-dimetil-8-{3-[3-metil-2-(propan-2-il)butoksil-1H-pirazol-1-il}-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2, 4-trion (Jedinjenje 220) (65 mg, 39%). ESI-MS m/z izrač.609,30975, nađeno 610,47 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,52 min (LC metoda B).
Primer 61: Priprema (18S)-20,20-dimetil-4-[3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetilbutoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia-1 ,3,9,14,22-pentaazatetra ciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 221)
[0922]
Korak 1: terc-butil (4S)-4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butoksi)pirazol-1- il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0923]
terc-butil 2-hloro-6-[3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (150 mg, 0,3457 mmol) u rastvoru trifluorosirć etne kiseline (150 mL, 1.947 mmol) u dihlorometanu (400 mL) je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Rastvarač je uklonjen i ostatak osušen pod vakuumom. Ovaj materijal je rastvoren u tetrahidrofuranu (2 mL) i dodat je karbonil diimidazol (69 mg, 0,4255 mmol) i reakciona smeša je mešana 4 h na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-(3-sulfamoilpirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (136 mg, 0,3519 mmol) u tetrahidrofuranu (2 mL). zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (110 mL, 0,7356 mmol) i reakcija je mešana 16 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana smešom zasić enog amonijum hlorida/fiziološkog rastvora (1:1). Organski sloj je odvojen, osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriste ć i plitki gradijent od 100% dihlorometana do 20% metanola/dihlorometana da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[3-[[2-hloro-6-[ 3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin- 1-karboksilat (82 mg, 32%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.745,2636, nađeno 746,14 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,87 min (LC metoda A).
Korak 2: (18S)-20,20-dimetil-4-[3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetilbutoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia-1,3 ,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 221)
[0924]
[0925] Rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butoksi)pirazola -1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (82 mg, 0,1099 mmol) u dihlorometanu (400 mL) i trifluorosirć etnoj kiselini ( 100 mL, 1.307 mmol) je mešano na sobnoj temperaturi 2 h. Po završetku reakcije, rastvarači su upareni pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu i ispran zasić enim rastvorom natrijum bikarbonata (2 mL), a organski sloj je sakupljen i rastvarač uparen. Dobijeni ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (5 mL) i dodata su 3 A molekularna sita i reakciona smeša je mešana 10 min. Zatim su dodati cezijum fluorid (54 mg, 0,3555 mmol) i kalijum karbonat (48 mg, 0,3473 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 130 °C preko noć i. Reakciona smeša je filtrirana kroz Vhatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišć en pomo ć u HPLC-MS reverzne faze koriš ć enjem dvostrukog gradijenta od 50-99% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilna faza A = voda (0,05% hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril) da bi se dobio (18S)-20,20-dimetil-4-[3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetilbutoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 221) (14,3 mg, 21%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,40 (s, 1H), 8,18 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 2,3 Hz , 1H), 7,07 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,36 (k, J = 7,0 Hz, 3H ), 3,94 (t, J = 12,0 Hz, 1H), 2,74 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 2,14 (s, 2H), 2,02 (t, J = 7,2 Hz, 3H), 1,76 (dd, J = 11,8, 5,2 Hz, 1H), 1,59 (s, 5H), 1,55 (s, 3H), 1,47 (t, J = 12,1 Hz, 1H), 1,24 - 1,21 (m, 6H), 0,90 - 0,73 (m, 1H). ESI-MS m/z izrač. 609,2345, nađeno 610,07 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,17 min (LC metoda B).
Primer 62: Priprema (14S)-12,12-dimetil-8-[2-okso-3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetilbutil)imidazolidin-1-il]-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetra ciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-tri - jedan (Jedinjenje 223)
[0926]
Korak 1: terc-butil N-[2-[(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butil)amino]etil]karbamat
[0927]
[
0928] Dess-Martin periodinan (660 mg, 1.556 mmol) je dodat u mešani rastvor 4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butan-1-ola (210 mg, 1.345 mmol) u anhidrovanom metilenu hlorid (7 mL) na 0 °C (ledeno-vodeno kupatilo) pod azotom. Posle 15 min, kupatilo je uklonjeno i reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešanje je nastavljeno još 2 h. Reakcija je razblažena etrom (60 mL) i polako je dodat zasić eni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (20 mL) (uočeno je razvijanje gasa ugljendioksida). Zatim je dodat natrijum tiosulfat (10 mL) i mešan na sobnoj temperaturi 30 min. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan etrom (2 X 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i delimično koncentrovani pod sniženim pritiskom (do oko 2 mL zapremine) da bi se dobio intermedijer aldehida kao sirovi rastvor. Zatim, u mešani rastvor terc-butil N-(2-aminoetil)karbamata (216 mg, 1,348 mmol) u anhidrovanom metanolu (7 mL) dodat je prethodno dobijeni etarski rastvor intermedijarnog aldehida u anhidrovanom metanolu (1 mL) pod azot. Nakon što je žuti rastvor mešan na sobnoj temperaturi 1 h, ohlađen je na 0 °C (ledeno-vodeno kupatilo). Zatim je natrijum borohidrid (110 mg, 2.908 mmol) dodat polako u dve serije i smeša je ostavljena da se zagreje do temperature okoline i mešanje je nastavljeno 15 h. Isparljive materije su uklonjene pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (30 mL) i ispran zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 X 15 mL) i slanim rastvorom (15 mL), osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio terc-butil N- [2-[(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butil)amino]etil]karbamat (380 mg, 95%) kao bistro viskozno ulje. ESI-MS m/z izrač. 298.1868, nađeno 299.2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,82 min (LC metoda B).
Korak 2: 1-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butil)imidazolidin-2-on
[0929]
[0930] Čvrsti kalijum terc-butoksid (440 mg, 3.921 mmol) je dodat u mešani rastvor terc-butil N-[2-[(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butil)amino] etil]karbamata (380 mg, 1.274 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (12 mL) pod azotom i reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom 13 h. Heterogena smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i zakiseljena je vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (5,0 mL 1,0 M, 5,000 mmol) i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Vodeni ostatak je ekstrahovan etil acetatom (3 x 10 mL) i kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (10 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu (0-10% metanola u gradijentu dihlorometana tokom 30 minuta) da bi se dobio 1-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butil)imidazolidin-2-on (172 mg , 60%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, benzen-d6) δ 5,50 (s, 1H), 3,23 - 3,12 (m, 2H), 2,71 - 2,66 (m, 2H), 2,65 - 2,59 (m, 2H), 1,634 - 1. , 2H), 1.01 (s, 6H).19F NMR (376 MHz, metanol-d4) 8 -79,87. ESI-MS m/z izrač.224,11365, nađeno 225,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,08 min (LC metoda B).
Korak 3: (14S)-12,12-dimetil-8-[2-okso-3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetilbutil)imidazolidin-1-il]-2l6-tia-3, 9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 223)
[0931]
[0932] U bočicu od 4 mL, (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza -1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (51 mg, 0,1133 mmol), 1-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil- butil)imidazolidin-2-on (31 mg, 0,1383 mmol), cezijum karbonat (130 mg, 0,3990 mmol), 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten (10 mg, 0,01728 mmol) i anhidrovani tim redosledom je dodat dioksan (1,5 mL). Azot je propuštan kroz heterogenu smešu 2 min. Zatim je dodat tris(benzilidenaceton)dipaladijum(0) (10 mg, 0,01092 mmol) pod azotom i azot je pušten u mehurić e još 2 minuta i reakcija je zatvorena pod azotom. Smeša je mešana na 115 °C preko noć i. Smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i neutralisana sa glacijalnom sirć etnom kiselinom (50 mL, 0,8792 mmol). Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom, a ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (1,2 mL), filtriran kroz Vhatman 0,45 mm PTFE filter za špric. Uzorak je prečišć en upotrebom preparativne HPLC reverzne faze [Luna C18 (2) kolona (75 X 30 mm, veličina čestica 5 mm) koju prodaje Phenomenek (pn: 00C-4252-U0-AX), (dvostruki gradijent od 30- 99% acetonitrila u vodi tokom 15 min (hlorovodonična kiselina kao modifikator)]. Željene frakcije proizvoda su kombinovane i koncentrovane pod sniženim pritiskom, a ostatak je stavljen u etil acetat (25 mL) i ispran slanim rastvorom (10 mL) Organski sloj je osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio (14S)-12,12-dimetil-8-[2-okso-3-(4,4,4-trifluoro-3,3). -dimetilbutil)imidazolidin-1-il]-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19 (23),20-heksen-2,2,4-trion (Jedinjenje 223) (37 mg, 51%) kao žu ć kasta čvrsta supstanca<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,70 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,52 (dd, J = 8,5, 7,2 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,15 (dd, J = 7,2, 0,8 Hz, 1H), 6,65 (dd, J = 8,5, 0,8 Hz, IH), 4,10 - 4,07 (m, 1H), 4. 07 - 4,01 (m, 1H), 4,01 - 3,95 (m, 1H), 3,58 - 3,46 (m, 2H), 3,42 - 3,34 (m, 2H), 3,23 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 3,08 - 2,97 (m, 1H), 2,85 (t, J = 10,4 Hz, IH), 2,22 - 2,07 (m, 1H), 1,89 - 1,73 (m, 4H), 1,71 - 1,64 (m, 1H), 1,63 (s, 3H), 1,62-1,55 (m, 2H), 1,54 (s, 3H), 1,47-1,35 (m, IH), 1,19 (s, 6H). ESI-MS m/z izrač. 637,2658, nađeno 638,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,9 min (LC metoda B).
Primer 63: Priprema (14S)-8-[3-fluoro-5-(2-metilpropoksi)fenil]-12,12-dimetil-2)l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[ 17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksen-2,2,4-trion (Jedinjenje 224)
[0933]
Korak 1: terc-butil 2-hloro-6-(3-fluoro-5-izobutoksi-fenil)piridin-3-karboksilat
terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (15,0 g, 60,5 mmol) i (3-fluoro-5-izobutoksi-fenil)borna kiselina (13,46 g, 63,48 mmol) su kombinovani i potpuno rastvoreni u etanolu (150 mmol) ) i toluen (150 mL). Dodata je suspenzija natrijum karbonata (19,23 g, 181,4 mmol) u vodi (30 mL). Pod azotom je dodat tetrakis(trifenilfosfin)paladijum(0) (2,096 g, 1,814 mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se meša na 60 °C tokom 16 h. Isparljive materije su uklonjene pod sniženim pritiskom. Preostale čvrste materije su podeljene između vode (100 mL) i etil acetata (100 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom (1 3 100 mL), osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Materijal je podvrgnut hromatografiji na koloni silika gela (gradijent od 0% do 20% etil acetata u heksanu). Materijal je ponovo prečišć en hromatografijom na silika gelu (izokratski 100% heksan tokom 10 minuta, zatim 0 do 5% etil acetat u heksanu gradijent) da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-(3-fluoro-5-izobutoksi-fenil )piridin-3-karboksilat (18,87 g, 49,68 mmol, 82%), dobijen kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,24 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,16 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,48 (dd, J = 9,4, 2,0 Hz, 2H), 6,99 (dt, J = 10,8, 2,2 Hz, 1H), 3,86 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 2,05 (dt, J = 13,3, 6,6 Hz, 1H), 1,57 (d, J = 9,3 Hz, 9H), 1,57 (d, J = 9,3 Hz, 9H). ), 1,00 (t, J = 5,5 Hz, 6H). ESI-MS mlz izrač.379,13504, nađeno 380,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,57 min (LC metoda B).
Korak 2: 2-hloro-6-(3-fluoro-5-izobutoksi-fenil)piridin-3-karboksilna kiselina
[0935]
terc-butil 2-hloro-6-(3-fluoro-5-izobutoksi-fenil)piridin-3-karboksilat (18,57 g, 48,89 mmol) rastvoren je u dihlorometanu (200 mL). Dodata je trifluorosirć etna kiselina (60 mL, 780 mmol) i reakciona smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 1 h. Reakciona smeša je mešana na 40 °C tokom 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i stavljena u etil acetat (100 mL). Ovaj rastvor je ispran zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (1 X 100 mL) i slanim rastvorom (1 X 100 mL), osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je suspendovan u etil acetatu (75 mL) i ispran vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (1 N, 13 75 mL). Organski sloj je osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Dobijena čvrsta supstanca (17,7 g) je mešana kao suspenzija u dihlorometanu (35 mL) na 40 °C tokom 30 min. Posle hlađenja do sobne temperature, suspenzija je filtrirana i zatim isprana hladnim dihlorometanom da bi se dobila 2-hloro-6-(3-fluoro-5-izobutoksi-fenil)piridin-3-karboksilna kiselina (11,35 g, 35,06 mmol, 72% ) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 13,76 (s, 1H), 8,31 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,17 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,54 - 7,47 (m, 2H), 8,17 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,54 - 7,47 (m, 2H). ), 7,00 (dt, J = 10,8, 2,3 Hz, 1H), 3,87 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 2,05 (dt, J = 13,3, 6,6 Hz, 1H), 1,01 (d, J = 6,7 Hz , 6H). ESI-MS m/z izrač. 323,1, nađeno 324,1 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 1,96 min (LC metoda B).
Korak 3: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-(3-fluoro-5-izobutoksi-fenil)piridin-3-karbonil] sulfamoil]-2-pi -ridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0936]
[0937] U bočici za scintilaciju od 20 mL, 2-hloro-6-(3-fluoro-5-izobutoksi-fenil) piridin-3-karboksilna kiselina (156 mg, 0,3751 mmol) i karbonil diimidazol (61 mg, 0,3762 mmol) pomešani u tetrahidrofuranu (2 mL) i mešani na sobnoj temperaturi 2 h. Zatim, terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (100 mg, 0,2424 mmol) u tetrahidrofuranu (2 mL) je dodat, a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (110 mL, 0,7356 mmol) i reakcija je mešana 16 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa malom količinom 1:1 zasić enog vodenog rastvora amonijum hlorida/fiziološke otopine. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni. Dobijeni smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koristeć i plitki gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-(3-fluoro-5-izobutoksi-fenil)piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (116 mg, 67%). ESI-MS m/z izrač.717,2763, nađeno 718,38 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,95 min (LC metoda A).
Korak 4: (14S)-8-[3-Fluoro-5-(2-metilpropoksi)fenil]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.
1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 224)
[0938]
[0939] Rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-(3-fluoro-5-izobutoksi-fenil)piridin-3-karbonil]sulfamoil]- 2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (110 mg, 0,1531 mmol) u dihlorometanu (1 mL) i trifluorosirć etna kiselina (200 mL, 2,614 mmol) su mešani na sobnoj temperaturi za 4 h. Rastvarači su zatim upareni. Ostatak je rastvoren u etil acetatu, ispran sa 2 mL zasić enog rastvora natrijum bikarbonata, a rastvarač je uparen i osušen pod vakuumom. Dobijeni ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (5 mL) i dodata su 3 A molekularna sita i reakciona smeša je mešana 10 min. Zatim su dodati cezijum fluorid (76 mg, 0,5003 mmol) i kalijum karbonat (64 mg, 0,4631 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 150 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Vhatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišć en HPLC-MS metodom reverzne faze korišć enjem dvostrukog gradijenta od 20-80% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilna faza A = voda (0,05% hlorovodonične kiseline), mobilna faza B = acetonitril) da bi se dobilo (14S)-8-[3-fluoro-5-(2-metilpropoksi)fenil]-12,12-dimetil-2l6-tia-3, 9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 224 ) (12,5 mg, 14%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 10,39 (s, 1H), 8,08 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,60 - 7,46 (m, 2H), 7,36 (t, J = 1,9 Hz, 1H) , 7,33 - 7,21 (m, 2H), 6,68 (dt, J = 10,4, 2,3 Hz, 1H), 6,57 (dd, J = 7,8, 1,4 Hz, 1H), 4,75 (s, 1H), 3,90 (s, 1H), 7,33 - 7,21 (m, 2H), 6,68 (s, 1H), 6,57 (dd, J = 7,8, 1,4 Hz, 1H). ), 3,77 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 3,36 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 3,17 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 3,08 (t, J = 9,6 Hz, 1H), 2,69 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 2,12 (dt, J = 13,3, 6,7 Hz, 2H), 1,68 (d, J = 2,6 Hz, 6H), 1,65 - 1,54 (m, 5H), 1,04 (d , J = 6,7 Hz, 6H). ESI-MS m/z izrač. 581,2472, nađeno 582,34 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,24 min (LC metoda J).
Primer 64: Priprema (18S)-4-[3-fluoro-5-(2-metilpropoksi)fenil]-20,20-dimetil-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2. 1.111,14.02,7]docosa-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion
[0940]
Korak 1: terc-butil (4S)-4-[3-[3-[[2-hloro-6-(3-fluoro-5-izobutoksi-fenil) piridin-3-karbonil] sulfamoil] pirazol-1 -il] propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0941]
[0942] U bočici za scintilaciju od 20 mL, 2-hloro-6-(3-fluoro-5-izobutoksi-fenil) piridin-3-karboksilna kiselina (71 mg, 0,1707 mmol) i karbonil diimidazol (27 mg, 0,1665 mmol) pomešani u tetrahidrofuranu (2 mL) i mešani 6 h na sobnoj temperaturi. Zatim je terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-(3-sulfamoilpirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (50 mg, 0,1294 mmol) u tetrahidrofuranu (2 mL) dodat, a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (42 mL, 0,2809 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa malom količinom 1:1 zasić enog vodenog rastvora amonijum hlorida/fiziološke otopine. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni. Dobijeni smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriste ć i plitki gradijent od 100% dihlorometana do 20% metanola/dihlorometana da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[3-[[2-hloro-6-( 3-fluoro-5-izobutoksi-fenil)piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (52 mg, 58%) kao beli čvrst. ESI-MS m/z izrač.
691,2607, nađeno 692,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,92 min (LC metoda A).
Korak 2: (18S)-4-[3-Fluoro-5-(2-metilpropoksi)fenil-20,20-dimetil-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111 , 14.02,7]docosa-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion
[0943]
[0944] Rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[3-[[2-hloro-6-(3-fluoro-5-izobutoksi-fenil)piridin-3-karbonil]sulfamoil] pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (52 mg, 0,07512 mmol) u dihlorometanu (500 mL) i trifluorosirć etna kiselina (100 mL, 1,307 mmol) su mešani na sobnoj temperaturi4. h. Rastvarači su zatim upareni. Ostatak je rastvoren u etil acetatu, ispran sa 2 mL zasić enog rastvora natrijum bikarbonata, a rastvarač je uklonjen i osušen pod visokim vakuumom daju ć i ostatak koji je rastvoren u dimetil sulfoksidu (5 mL) i dodata su 3 A molekularna sita i reakcija smeša je mešana 10 min. Zatim su dodati cezijum fluorid (38 mg, 0,2502 mmol) i kalijum karbonat (34 mg, 0,2460 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 150 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Vhatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišć en HPLC-MS metodom reverzne faze korišć enjem dvostrukog gradijenta od 50-99% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilna faza A = voda (0,05% hlorovodonične kiseline), mobilna faza B = acetonitril) dajuć i (18S)-4-[3-fluoro-5-(2-metilpropoksi)fenil]-20,20-dimetil-10l6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111, 14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (14,0 mg, 34%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,65 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,35 - 7,32 (m, 1H), 7,28 - 7,23 (m, 1H), 7,08 (s, 1H), 6,95 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 6,64 (dt, J = 10,4, 2,3 Hz, 1H), 4,33 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 3,92 ( dd, J = 13,9, 11,2 Hz, 1H), 3,75 (d, J = 6,6 Hz, 2H), 2,75 (s, 1H), 2,21 - 2,07 (m, 3H), 1,98 (dd, J = 19,3, 10,6 Hz , 1H), 1,80 - 1,72 (m, 1H), 1,63 (s, 3H), 1,61 (s, 3H), 1,48 (t, J = 12,2 Hz, 1H), 1,38 - 1,21 (m, 1H), 1,03 ( s, 3H), 1,02 (s, 3H), 0,93 - 0,70 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 555,23157, nađeno 556,14 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,09 min (LC metoda J).
Primer 65: Priprema (14S)-12,12-dimetil-8-{3-[3-metil-2-(propan-2-il)butoksi]-1H-pirazol-1-il]-2l6-tia- 3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-tri- jedan (Jedinjenje 227)
[0945]
Korak 1: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3 -karbon-il]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0946]
[0947] Balon od 50 mL napunjen karbonil diimidazolom (76 mg, 0,4687 mmol) i 2-hloro-6-[3-(2-izopropil-3-metilbutoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilnom kiselinom kiselina (164 mg, 0,4661 mmol) je evakuisana/dopunjena azotom (3X). Dodat je tetrahidrofuran (5 mL) i smeša je mešana na 50 °C 1 h. Zatim, rastvor terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilata (160 mg, 0,3878 mmol) i dodat je 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (150 mg, 0,9853 mmol) u tetrahidrofuranu (5 mL) i smeša je mešana na 50 °C preko noć i. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana vodom. Organska faza je osušena preko natrijum sulfata, uparena u vakuumu i prečišć ena preparativnom HPLC reverzne faze ((C18): 1-99% acetonitril u vodi/modifikator hlorovodonične kiseline (15 min)) da bi se dobio terc-butil (4S)-4 -[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino ]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (90 mg, 31%). ESI-MS mlz izrač.745,3388, nađeno 746,47 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,96 min (LC metoda B).
Korak 2: 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(2-izopropil -3-metilbutoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (hidrohloridna so)
[0948]
[0949] Rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-il] piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (90 mg, 0,12 mmol) u dioksanu (5 mL) je tretiran sa 6 M rastvor dioksana hlorovodonične kiseline (1.3 mL, 7.800 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi 3 h. Smeša je uparena in vacuo da bi se dobio 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6- [3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (hidrohloridna so) (100 mg, 38%). ESI-MS mlz izrač. 645,2864, nađeno 646,36 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,27 min (LC metoda A).
Korak 3: (14S)-12,12-dimetil-8-{3-[3-metil-2-(propan-2-il)butoksi]-1H-pirazol-1-il]-2l6-tia-3, 9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion ( Jedinjenje 227)
[0950]
[0951] U bočici od 5 mL, kalijum karbonat (102 mg, 0,7380 mmol), cezijum fluorid (45 mg, 0,2962 mmol) i 4A molekularna sita (300 mg) su zatvoreni i pročišć eni azotom. Rastvor 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(2 dodat je -izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (hidrohloridna so) (100 mg, 0,1465 mmol) u dimetil sulfoksidu (2 mL) i smeša je mešana na 150° C preko noć i. Smeša je filtrirana i prečiš ć ena preparativnom HPLC reverzne faze ((C18): 50-99% acetonitril u vodi/modifikator hlorovodonične kiseline (15 min)) da bi se dobilo (14S)-12,12-dimetil-8-[3-[3-metil-2-(propan-2-il)butoksi]-1H-pirazol-1-il}-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-tri-on (Jedinjenje 227) (18,0 mg, 20%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9,99 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,60 - 7,48 (m, 2H) , 7,30 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,61 - 6,52 (m, 1H), 5,91 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,6-4,9 (br. s, 1H), 4,28 (d, J = 4,9 Hz, 2H), 3,89 (s, 1H), 3,35 (dd, J = 9,9, 7,6 Hz, 1H), 3,17 (dd, J = 10,7, 6,7 Hz, 1H), 3,06 (t, J = 9,7 Hz , 1H), 2,62 (s, 1H), 2,09 (dd, J = 12,3, 8,0 Hz, 1H), 1,99 - 1,87 (m, 2H), 1,62 (d, J = 2,9 Hz, 11H), 1,39 (p, J = 5,2 Hz, IH), 1,01 (d, J = 6,9 Hz, 6H), 0,96 (d, J = 6,9 Hz, 6H). ESI-MS m/z izrač. 609,30975, nađeno 610,39 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,59 min (LC metoda J).
Primer 66: Priprema (14S)-8-{3-[2-(adamantan-1-il)etil]-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9, 11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-tri-on (Jedinjenje 228 )
Korak 1: 2-(1-Adamantil)acetaldehid
[0953]
[0954] Čvrst Dess-Martin periodinan (825 mg, 1.945 mmol) je dodat u mešani rastvor 2-(1-adamantil)etanola (300 mg, 1.664 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (10 mL) na 0 °C (led -vodeno kupatilo) pod azotom. Posle 15 min, kupatilo je uklonjeno i reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešanje je nastavljeno još 2 h. Reakcija je razblažena etrom (60 mL) i polako je dodat zasić eni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (20 mL) (da bi se ublažilo razvijanje gasa ugljen-dioksida). Zatim je dodat natrijum tiosulfat (10 mL) i mešan na sobnoj temperaturi 30 min. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan etrom (23 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio 2-(1-adamantil)acetaldehid (149 mg, 50%) kao bezbojna polu čvrsta supstanca. Koriš ć en je u slede ć em koraku bez daljeg sušenja ili prečiš ć avanja.<1>H NMR (400 MHz, benzend6) δ 9,70 (t, J = 3,1 Hz, 1H), 1,95 - 1,93 (m, 1H), 1,89 - 1,87 (m, 2H), 1,85 (d, J = 3,1 Hz, 2H), 1,68 (d, J = 3,0 Hz, 3H), 1,59 (dk, J = 4,0, 2,0 Hz, 2H), 1,56 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 1,49 (d, J = 2,8 Hz, 6H).
Korak 2: terc-butil N-[2-[2-(1-adamantil)etilamino]etil]karbamat
[0955]
[0956] U mešani rastvor 2-(1-adamantil)acetaldehida (130,0 mg, 0,7292 mmol) u anhidrovanom metilen hloridu (10 mL) dodat je rastvor terc-butil N-(2-aminoetil)karbamata (117 mg), 0,7303 mmol) u anhidrovanom metilen hloridu (1 mL) nakon čega sledi dodavanje glacijalne sirć etne kiseline (50 mL, 0,8792 mmol) na sobnoj temperaturi pod azotom. Zamu ć ena reakcija je mešana 30 min, zatim je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (242 mg, 1.142 mmol) u jednom delu na sobnoj temperaturi i mešanje je nastavljeno preko noć i (13 h). Isparljive materije su uklonjene pod sniženim pritiskom. Ostatak je stavljen u etil acetat (30 mL) i ispran zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 X 15 mL) i slanim rastvorom (15 mL), osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio terc-butil N-[2-[2-(1-adamantil)etilamino]etil]karbamat (209 mg, 89%) kao žuta guma. Sirovi materijal je korišć en u slede ć em koraku bez daljeg prečišć avanja. ESI-MS m/z izrač. 322,26202, nađeno 323,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,19 min (LC metoda B).
Korak 3: 1-[2-(1-adamantil)etil]imidazolidin-2-on
[0957]
[0958] Čvrsti kalijum terc-butoksid (212 mg, 1,889 mmol) je dodat u mešani rastvor terc-butil N-[2-[2-(1-adamantil)etilamino]etil]karbamata (200 mg, 0,6202 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (12 mL) pod azotom i reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom 13 h. Heterogena smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i zakiseljena je vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (3,0 mL 1,0 M, 3,000 mmol) i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Vodeni ostatak je ekstrahovan etil acetatom (3 x 10 mL) i kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (10 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu (0-10% metanola u gradijentu dihlorometana tokom 30 minuta) da bi se dobio 1-[2-(1-adamantil)etil]imidazolidin-2-on (53 mg, 34%) kao bela čvrsta materija.<1>H NMR (400 MHz, benzen-d6) δ 4,92 (s, 1H), 3,35 - 3,25 (m, 2H), 2,85 - 2,76 (m, 2H), 2,74 - 2,66 (m, 2H), 1,99 (p, J = 3,0 Hz, 3H), 1,80 - 1,73 (m, 3H), 1,69 (dk, J = 12,3, 2,3 Hz, 3H), 1,55 (d, J = 2,8 Hz, 6H), 1,32 - 1,21 (m, 2H) . ESI-MS m/z izrač. 248,18886, nađeno 249,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,67 min (LC metoda B).
Korak 4: (14S)-8-[3-[2-(Adamantan-1-il)etil]-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11, 18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 228)
[0959]
[0960] U bočicu od 4 mL, (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza -1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (20 mg, 0,04298 mmol), 1-[2-(1-ada-mantil)etil]imidazolidin-2 -on (13 mg, 0,05234 mmol), cezijum karbonat (52 mg, 0,1596 mmol), 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten (4 mg, 0,006913 mmol) i anhidrovani dioksan (1,0) dodavane su tim redosledom. Azot je propuštan kroz heterogenu smešu 2 min. Zatim je dodat tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (4 mg, 0,004368 mmol) pod azotom i azot je pušten u mehurić e još 2 minuta i reakcija je zatvorena u atmosferi azota. Smeša je mešana na 115 °C preko noć i. Smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i neutralizovana sa glacijalnom sirć etnom kiselinom (20 mL, 0,3517 mmol). Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom, a ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (1,0 mL) i filtriran kroz Vhatman 0,45 mm PTFE filter za špric. Uzorak je prečišć en upotrebom preparativne HPLC-MS reverzne faze [Luna C18 (2) kolona (75 3 30 mm, veličina čestica 5 mm) koju je prodao Phenomenek (pn: 00C-4252-U0-AKS), (dvostruki gradijent od 30-99% acetonitrila u vodi tokom 15 minuta (hlorovodonična kiselina kao modifikator)] dajuć i (14S)-8-13-[2-(adamantan-1-il)etil]-2-oksoimidazolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heks- aen-2,2,4-trion (Jedinjenje 228) (13,0 mg, 44%) kao žu ć kasta čvrsta supstanca<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,29 (s, 1H), 7,59 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,57 - 7,53 (m, 1H), 7,41 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,00 - 3,82 (m, 3H), 3,49 - 3,42 (m, 2H), 3,26 - 3,16 (m, 2H), 3,13 - 3,03 (m, 1H), 2,9 d, J = 13,3 Hz, 1H), 2,73 - 2,64 (m, 1H), 2,18 - 2,01 (m, 2H), 1,93 (s, 3H), 1,80 (dd, J = 12,1, 5,6 Hz, 2H), 1,71 - 1,59 (m, 7H), 1,58 (s, 3H), 1,55 - 1,53 (m, 1H), 1,51 (dve s, 6H), 1,46 (s, 3H ), 1,31-1,22 (m, 3H). ESI-MS m/z izrač. 661.341, nađeno 662.5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,92 min (LC metoda G).
Primer 67: Priprema (14S)-8-[3-(adamantan-1-il)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23 -pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 230)
[0961]
Korak 1: terc-butil N-[2-(1-adamantilamino)etil]karbamat
[0962]
[0963] U mešani rastvor terc-butil N-(2-oksoetil)karbamata (505 mg, 3.172 mmol) u anhidrovanom metilen hloridu (20 mL) dodat je čvrsti adamantan-1-amin (hidrohloridna so) (475 mg, 3,141 mmol) nakon čega je usledilo dodavanje trietilamina (500 mL, 3,587 mmol) i glacijalne sirć etne kiseline (200 mL, 3,517 mmol) tim redosledom i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom. Heterogena (bela suspenzija) reakcija je mešana 30 min, zatim je dodat natrijum triacetoksiborohidrid (1.0 g, 4.718 mmol) u jednom delu na sobnoj temperaturi i mešanje je nastavljeno preko noć i. Isparljive materije su uklonjene pod sniženim pritiskom. Ostatak je stavljen u etil acetat (30 mL) i ispran zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 3 15 mL) i slanim rastvorom (15 mL), osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio terc-butil N-[2-(1-adamantilamino)etil]karbamat (731 mg, 79%) kao žuta guma. Sirovi materijal je korišć en u slede ć em koraku bez daljeg prečiš ć avanja. ESI-MS m/z izrač. 294,23074, nađeno 295,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,91 min (LC metoda B).
Korak 2: 1-(1-Adamantil)imidazolidin-2-on
[0965] Čvrsti kalijum terc-butoksid (465 mg, 4.144 mmol) je dodat u mešani rastvor terc-butil N-[2-(1-adamantilamino)etil]karbamata (400 mg, 1.359 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (12 mL) pod azotom i reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom 13 h. Heterogena smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i zakiseljena sa vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (5,5 mL 1,0 M, 5,500 mmol) do pH = 4 - 5 i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Vodeni ostatak je ekstrahovan etil acetatom (3 k 10 mL) i kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (10 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu (0-10% metanola u gradijentu dihlorometana tokom 30 min) da bi se dobio 1-(1-adamantil)imidazolidin-2-on (69 mg, 23%) kao sivobela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, benzen-d6) δ 4,91 (s, 1H), 2,90 (dd, J = 8,5, 6,7 Hz, 2H), 2,64 (ddd, J = 8,5, 6,7, 1,2 Hz, 2H), 2,21 d, J = 2,9 Hz, 6H), 2,06 (dd, J = 5,9, 3,0 Hz, 3H), 1,75 - 1,68 (m, 3H), 1,67 - 1,60 (m, 3H). ESI-MS m/z izrač.220,15756, nađeno 221,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,36 min (LC metoda B).
Korak 3: (14S)-8-[3-(Adamantan-1-il)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetra -ciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 230)
[0966]
[0967] U bočicu od 4 mL, (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza -1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (20 mg, 0,04298 mmol), 1-(1-adamantil)imidazolidin-2-on (13 mg , 0,05901 mmol), cezijum karbonat (52 mg, 0,1596 mmol), 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten (4 mg, 0,006913 mmol) i anhidrovani dioksan (1,0 mL) dodani su tim redosledom. Azot je propuštan kroz heterogenu smešu 2 min. Zatim je dodat tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (4 mg, 0,004368 mmol) pod azotom i azot je pušten u mehurić e još 2 minuta i bočica je zatvorena u atmosferi azota. Smeša je mešana na 115 °C preko noć i. Smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i neutralizovana sa glacijalnom sirć etnom kiselinom (20 mL, 0,3517 mmol). Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom, a ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (1,0 mL), filtriran kroz Watman 0,45 mm PTFE filter za špric. Uzorak je prečišć en upotrebom preparativne HPLC-MS reverzne faze [Luna C18 (2) kolona (75 3 30 mm, veličina čestica 5 mm) koju je prodao Phenomenek (pn: 00C-4252-U0-AX), (dvostruki gradijent od 30-99% acetonitrila u vodi tokom 15 min (hlorovodonična kiselina kao modifikator))] dajuć i (14S)-8-[3-(adamantan-1-il)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza 1(22),5,7,9,19(23) ,20-heksaen-2 ,2,4-trion (Jedinjenje 230) (9 mg, 33%) kao žu ć kasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,28 (s, 1H), 7,61 - 7,57 (m, 1H), 7,57 - 7,52 (m, 1H), 7,38 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,7 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 3,96 - 3,74 (m, 3H), 3,53 - 3,46 (m, 2H), 3,12 - 3,03 (m, 1H), 2,93 (d, J = 13,4 Hz, 1H), 2,73 - 2,65 (m, 1H), 2,12 - 2,02 (m, 8H), 1,83 - 1,71 (m, 2H) , 1,65 (s, 5H), 1,62-1,59 (m, 1H), 1,57 (s, 3H), 1,55-1,48 (m, 3H), 1,46 (s, 3H), 1,36-1,22 (m, 3H). ESI-MS m/z izrač. 633,30975, nađeno 634,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,66 min (LC metoda G).
Primer 68: Priprema (14S)-8-[3-(3,3-diciklobutilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 231)
Korak 1: 2,2-di(ciklobutil)etil metansulfonat
[0969]
[0970] U balon sa okruglim dnom od 100 mL koji sadrži 2,2-di(ciklobutil)etanol (1,0 g, 6,483 mmol) u dihlorometanu (11,0 mL) dodat je trietilamin (2,72 mL, 19,51 mmol). Reakcija je ohlađena na 0 °C u ledenom kupatilu. U kapima je dodat metansulfonil hlorid (891 mg, 7,778 mmol) (egzotermno, formirana bleda žuć kasta suspenzija) i reakcija je mešana 1 h uz zagrevanje do sobne temperature. Posle 1 h mešanja, reakcija je zatim ugašena hladnom vodom (15 mL) (smeša je pretvorena u bistar, slabo žuti rastvor) i ekstrahovana dihlorometanom (20 mL) dva puta, organski sloj je ispran slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen da bi se dobio sirovi 2,2-di(ciklobutil)etil metansulfonat (1,5 g, 100%) kao bistra bezbojna do bleda žu ć kasta tečnost. Ovaj proizvod je koriš ć en za slede ć u reakciju bez daljeg prečiš ć avanja.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 4,03 (d, J = 4,6 Hz, 2H), 2,97 (s, 3H), 2,37 - 2,12 (m, 2H), 2,09 -1,47 (m, 13H).
Korak 2: 3,3-Di(ciklobutil)propannitril
[0971]
[0972] U rastvor 2,2-di(ciklobutil)etil metansulfonata (1,75 g, 7,532 mmol) u dimetil sulfoksidu (23 mL) dodat je čvrsti cijanonatijum (290 mL, 9,468 mmol) u atmosferi azota. Smeša je mešana na 70 °C. Reakcija se nakon zagrevanja pretvorila u svetlo žutu suspenziju, a zatim u svetlo žutu suspenziju tokom vremena. Reakcija je dozvoljena da se meša 17 h na 70 °C. Reakciona smeša je zatim sipana u hladnu vodu (25 mL) i ekstrahovana dietil etrom (3 x 25 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 X 25 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani da bi se dobio sirovi proizvod, 3,3-di(ciklobutil)propannitril (1,2 g, 98%) u vidu bistrog, slabog ć ilibara tečnost koja je koriš ć ena bez daljeg prečiš ć avanja.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 3,48 (k, J = 7,0 Hz, 1H), 2,38 - 2,21 (m, 2H), 2,10 - 1,92 (m, 2H), 1,92 - 1,64 (m, 8H), 1,63-1,48 (m, 2H), 1,21 (t, J = 7,0 Hz, 2H).
Korak 3: 3,3-di(ciklobutil)propanoična kiselina
[0973]
U rastvor 3,3-di(ciklobutil)propanitrila (1,2 g, 7,350 mmol) u etanolu (18 mL) dodat je natrijum hidroksid (12,5 mL od 6 M, 75,00 mmol). Dobijeni bistri rastvor ć ilibara je zagrevan na 70 °C tokom 3 dana. Dodan je čvrsti natrijum hidroksid (3 g, 75,01 mmol) i reakcija je mešana 3 dodatna dana na 100 °C. Etanol je uparen i pH vodenog sloja je podešen na 1 sa 5 M hlorovodoničnom kiselinom. Smeša je zatim ekstrahovana dietil etrom (3 X 20 mL). Organski ekstrakt je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan da bi se dobila 3,3-di(ciklobutil)propanoična kiselina (1 g, 75%) kao svetlo narandžasto gusto ulje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 2,16 (dddd, J = 13,0, 9,0, 5,4, 2,5 Hz, 2H), 2,10 (d, J = 6,3 Hz, 2H), 1,99 - 1,87 (m, 5H), 1,86-1,60 (m, 8H).
Korak 4: 3,3-Di(ciklobutil)propan-1-ol
[0975]
[0976] Litijum aluminijum hidrid (300 mg, 8.844 mmol) (pelete) je suspendovan u tetrahidrofuranu (15 mL) i mešan na sobnoj temperaturi 30 min, kada su pelete formirale suspenziju. Smeša je zatim ohlađena u kupatilu led/voda i 3,3-di(ciklobutil)propanoična kiselina (988 mg, 5,421 mmol) u tetrahidrofuranu (7,2 mL) je dodata u kapima tokom 15 minuta održavajuć i temperaturu reakcije < 20°C. Smeša je ostavljena da se meša ukupno 72 h, postepeno zagrevaju ć i do sobne temperature. Smeša je ohlađena u ledenom kupatilu i uzastopno polako ugašena vodom (830 mL, 46,07 mmol), a zatim natrijum hidroksidom (830 mL 6 M, 4,980 mmol) i zatim vodom (2,5 mL, 138,8 mmol). Smeša je mešana sve dok se siva suspenzija nije potpuno pretvorila u belu, granulisanu suspenziju koja je filtrirana preko celita. Čvrsta supstanca je isprana etrom. Filtrat je koncentrovan in vacuo na ~ 90 mbar i vodeno kupatilo na 30 °C, razblažen dietil etrom, osušen (magnezijum sulfat), filtriran i koncentrovan u vakuumu daju ć i 3,3-di(ciklobutil)propan-1-ol (868 mg , 95%) kao bezbojna tečnost.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 3,64 - 3,54 (m, 2H), 2,11 (m, J = 13,9, 9,8, 7,4, 6,0, 2,0 Hz, 2H), 2,01 - 1,84 (m, 83 H), -1,59 (m, 8H), 1,50-1,37 (m, 2H).
Korak 5: terc-butil 3-[3,3-di(ciklobutil)propoksi]pirazol-1-karboksilat
[0977]
[0978] U rastvor terc-butil 5-okso-lH-pirazol-2-karboksilata (530 mg, 2.877 mmol) i 3,3-di(ciklobutil)propan-1-ola (536 mg, 3.185 mmol) u tetrahidrofuran (8 mL) je dodat trifenilfosfin (830 mg, 3.164 mmol). Ovoj smeši je polako dodat diizopropil azodikarboksilat (680 mL, 3.454 mmol) u kapima tokom 10 min. Reakciona smeša je mešana na 50 °C tokom 16 h. Tetrahidrofuran je uklonjen u vakuumu. Toluen je dodat u sirovu smešu da bi se istaložio trifenilfosfin oksid. Smeša nije formirala talog. Bistri rastvor je zatim koncentrovan do suva. Gusto žuto ulje je rastvoreno u dihlorometanu i prečišć eno hromatografijom na silika gelu sa gradijentom od 0% do 20% etil acetata u heksanu. Čiste frakcije su spojene zajedno i koncentrovane do suva dajuć i željeni proizvod, terc-butil 3-[3,3-di(ciklobutil)propoksi]pirazol-1-karboksilat (560 mg, 58%) kao belu čvrstu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,82 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 5,85 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,21 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 2,24 - 2,11 (m, 2H), 2,02-1,86 (m, 3H), 1,84-1,64 (m, 4H), 1,61 (s, 11H), 1,51-1,29 (m, 1H). ESI-MS m/z izrač. 334,22565, nađeno 335,24 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,47 min (LC metoda B).
Korak 6: 3-[3,3-Di(ciklobutil)propoksi]-1H-pirazol
[0979]
[0980] U rastvor terc-butil 3-[3,3-di(ciklobutil)propoksi]pirazol-1-karboksilata (200 mg, 0,5980 mmol) u dihlorometanu (2 mL) dodata je trifluorosirć etna kiselina (700 mL). 9,086 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Trifluorosir ć etna kiselina je uklonjena pod sniženim pritiskom i dobijeni sirovi rastvor je razblažen etil acetatom. Organski rastvor je ispran vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Vodeni sloj je dalje ekstrahovan etil acetatom (2 X). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani do suva da bi se dobio 3-[3,3-di(ciklobutil)propoksi]-lH-pirazol (140 mg, 100%). ESI-MS m/z izrač.234,17322, nađeno 235,15 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,9 min (LC metoda B).
Korak 7: terc-butil 2-hloro-6-[3-[3,3-di(ciklobutil)propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (275 mg, 1,108 mmol), 3-[3,3-di(ciklobutil)propoksi]-1H-pirazol (260 mg, 1,110 mmol) i kalijum karbonat (185 mg , 1,339 mmol) su kombinovani u anhidrovanom dimetil sulfoksidu (5,2 mL). Dodat je 1,4-Diazabiciklo[2.2.2]oktan (25 mg, 0,2229 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom 16 h. Reakciona smeša je razblažena vodom (10 mL) i mešana 15 min. Dobijena bela čvrsta supstanca je sakupljena i isprana vodom. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu i osušena iznad magnezijum sulfata. Smeša je filtrirana i uparena da bi se dobio proizvod kao bezbojno ulje, terc-butil 2-hloro-6-[3-[3,3-di(ciklobutil)propoksi]pirazol-1-il]piridin-3- karboksilat (367 mg, 74%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,35 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,18 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,95 (d , J = 2,8 Hz, 1H), 4,20 (t, J = 7,5 Hz, 2H), 2,18 (tt, J = 9,6, 4,4 Hz, 2H), 2,07 - 1,86 (m, 4H), 1,87 - 1,35 (m, 20H). ESI-MS m/z izrač. 445,21323, nađeno 446,29 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,88 min (LC metoda L).
Korak 8: 2-hloro-6-[3-[3,3-di(ciklobutil)propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[0982]
terc-butil 2-hloro-6-[3-[3,3-di(ciklobutil)propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (367 mg, 0,8229 mmol) rastvoren je u dihlorometanu (4 mL ) i dodata je trifluorosirć etna kiselina (1,5 mL, 19,47 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakcija je uparena i dobijena čvrsta supstanca je suspendovana u etru i etar je zatim uklonjen pod sniženim pritiskom. Ovaj postupak isparavanja iz etra je ponovljen dva puta, dajuć i belu čvrstu supstancu 2-hloro-6-[3-[3,3-di(ciklobutil)propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (300 mg , 94%). ESI-MS m/z izrač. 389,1506, nađeno 390,22 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,45 min (LC metoda J).
Korak 9: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[3,3-di(ciklobutil)propoksi]pirazol-1-il]piridin-3 -karbonil]sulfa-moil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[0983]
[0984] U bočici za scintilaciju od 20 mL, 2-hloro-6-[3-[3,3-di(ciklobutil)propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (71 mg, 0,1821 mmol) i karbonil diimidazol (30 mg, 0,1850 mmol) su kombinovani u tetrahidrofuranu (550 mL) i mešani 60 min na 50 °C sa labavim poklopcem. Zatim, terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]pro-pil]pirolidin-1-karboksilat (50 mg, 0,1212 mmol) u tetrahidrofuranu (850 mL), a zatim je dodat 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (36 mL, 0,2407 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature, a zatim koncentrovana do uljastog ostatka koji je razblažen etil acetatom, ispran zasić enim vodenim rastvorom amonijum hlorida, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, sušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni, a zatim prečišć eni hromatografijom na silika gelu koristeć i plitki gradijent od 100% dihlorometana do 20% metanola u dihlorometanu daju ć i tercbutil (4S)-4-[3-[[6- [[2-hloro-6-[3-[3,3-di(ciklobutil)propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (64,5 mg, 66%) kao svetlo žuto gusto ulje. ESI-MS m/z izrač. 783,3545, nađeno 784,46 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,21 min (LC metoda J).
Korak 10: 2-Hloro-6-[3-[3,3-di(ciklobutil)propoksi]pirazol-1-il]-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin- 3-il]pro-pilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so)
[0985]
terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[3,3-di(ciklobutil)propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]-2-piridil] amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (64,5 mg, 0,082 mmol) rastvoren je u dihlorometanu (1,5 mL). Dodata je trifluorosirć etna kiselina (235 mL, 3.050 mmol) i dobijena reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom i dobijeni sirovi proizvod je dalje osušen pod visokim vakuumom da bi se dobio 2-hloro-6-[3-[3,3-di(ciklobutil)propoksi]pirazol-1-il]-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (53 mg, 52%, 97% čistoć e) ESI -MS m/z izrač. 683,30206, nađeno 684,39 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,86 min (LC metoda J).
Korak 11: (14S)-8-[3-(3,3-diciklobutilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaaza -tetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 231)
[0986]
[0987] Mešavina 2-hloro-6-[3-[3,3-di(ciklobutil)propoksilpirazol-1-il]-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidina -3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (52 mg, 0,07599 mmol), kalijum karbonat (55 mg, 0,3980 mmol), cezijum fluorid (25 mg, 0,1646 mmol), 3 A molekularna sita i dimetil sulfoksid (3,6 mL) su stavljeni u bočicu, pročišć eni azotom, zatvoreni poklopcem, zagrejani na 165 °C i mešani 16 h. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i smeša je filtrirana. Filtrat je prečišć en pomo ć u HPLC-MS reverzne faze koriste ć i Luna C18 (2) kolonu (75 X 30 mm, veličina čestica 5 mm) koju je prodao Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX) i dvostrukim gradijentom od 30 -99% mobilna faza B tokom 15,0 min (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 1300 mL i temperatura kolone = 25 °C) do daje kao belu čvrstu supstancu (14S)-8-[3-(3,3-diciklobutilpropoksi)1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18, 23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 231) (15,5 mg , 32%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9,96 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,07 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,60 - 7,48 (m, 2H) , 7,28 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,56 (dd, J = 8,1, 1,1 Hz, 1H), 5,91 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,70 (d, J = 7,0 Hz, 1H) , 4,20 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 3,90 (s, 1H), 3,35 (dd, J = 10,1, 7,5 Hz, 1H), 3,17 (d, J = 14,1 Hz, 1H), 3,06 (t, J = 9,8 Hz, 1H), 2,26 - 2,11 (m, 2H), 2,09 (dd, J = 12,3, 7,9 Hz, 1H), 2,03 -1,86 (m, 3H), 1,80 (s, 1H), 1,82 - 1,7. (m, 2H), 1,76 - 1,62 (m, 3H), 1,62 (d, J = 3,3 Hz, 7H), 1,46 (ddd, J = 14,2, 9,0, 5,2 Hz, 1H), 1,26 (s, 1H), nekoliko alifatskih protona zaklonjenih vrhom vode. ESI-MS m/z izrač.647,3254, nađeno 648,38 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,89 min (LC metod J).
Primer 69: Priprema 7,7-dimetil-11-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi}-1H-pirazol-1-il)-17l6-tia-2,8,10,16 ,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(22),9,11,13,18,20-heksan-15,17,17-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 234) i 7, 7-dimetil-11-(3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo [16.3.1.15,8.09,14]tricosa-1(22),9,11,13,18,20-heksan-15,17,17-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 235)
[0988]
Korak 1: 3-(2-metil-2-nitropropil)-dihidrofuran-2-on
[0989]
[0990] Smeši 2-nitropropana (49 mL, 2,2 mol) i 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-ena (4,1 mL, 0,1 mol) u atmosferi azota, dodat je 3-metilendihidrofuran -2(3H)-on (75 g, 776 mmol) ukapavanjem tokom perioda od 45 min. Dodavanje je egzotermno: temperatura je održavana ispod 90 °C kontrolisanjem brzine dodavanja tokom reakcije. Smeša je mešana još 4 h na 85 °C, ohlađena do sobne temperature i razblažena etil acetatom (500 mL) i 1M hlorovodoničnom kiselinom (60 mL). Organska faza je odvojena, osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana pod vakuumom da bi se dobilo tamno obojeno ulje.
Trituracija sa malom količinom metil terc-butil etra dala je obilnu količinu belog taloga koji je sakupljen filtracijom da bi se dobio 3-(2-metil-2-nitropropil)-dihidrofuran-2-on (75,6 g, 73% prinos) kao bela čvrsta supstanca. Materijal je korišć en u sledeć em koraku bez daljeg prečiš ć avanja. ESI-MS m/z izrač. 187,2, nađeno 188,0 (M+1)+. Vreme zadržavanja: 2,34 min (LC metoda M).
Korak 2: 3-(2-Hidroksietil)-5,5-dimetilpirolidin-2-on
[0991]
[0992] Parov reaktor od 1,5 litara je napunjen sa suspenzijom Ranei nikla (10 g), 3-(2-metil-2-nitropropil)-dihidrofuran-2-onom (75,6 g, 0,86 mol) i etanolom (1,2 L). Reaktor je zatvoren i zagrevan na 60 °C pod 2 bara vodonika tokom 16 h, a zatim ohlađen na sobnu temperaturu. Približno 100 g celita je dodato u reaktor. Dobijena suspenzija je filtrirana kroz tanak sloj silika gela i isprana etanolom (200 mL). Kombinovani filtrati su koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio 3-(2-hidroksietil)-5,5-dimetilpirolidin-2-on (64,5 g, kvantitativni prinos) kao bela čvrsta supstanca. Sirovi materijal je korišć en u slede ć em koraku bez daljeg prečišć avanja. ESI-MS m/z izrač. 157,2, nađeno 158,1 (M+1)+. Vreme zadržavanja: 1,38 min (LC metoda M).
Korak 3: (4-(2-hidroksietil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar
[0993]
[0994] Litijum aluminijum hidrid (53,9 g, 1,4 mol) je dodat u smešu 3-(2-hidroksietil)-5,5-dimetilpirolidin-2-ona (55,8 g, 0,36 mol) i tetrahidrofurana (710 mL). Dodavanje je vršeno u malim porcijama tokom perioda od 45 minuta kako bi se izbeglo prekomerno razvijanje vodonika. Smeša je refluksovana u atmosferi azota 22 h. Smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i pažljivo ugašena dodatkom natrijum sulfat dekahidrata (300 g). Dobijena siva suspenzija je filtrirana i čvrsta supstanca je isprana tetrahidrofuranom (500 mL). Kombinovanim filtratima (1.2 L) je dodat di-terc-butil dikarbonat (52.3 g, 225 mmol). Dobijena smeša je mešana 24 h na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je koncentrovana i prečišć ena hromatografijom na silika gelu koristeć i 0% - 100% gradijent etil acetata u heksanu da bi se dobio terc-butil estar (4-(2-hidroksietil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilne kiseline kao svetlo obojeno ulje (40,8 g, 74% prinos) ESI-MS m/z izračunato 243,3, nađeno 244,1 (M+1)+ Vreme zadržavanja: 4,01 min (LC metoda M).
Korak 4: 4-(2-Metansulfoniloksietil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar
[0995]
[0996] 4-(2-Hidroksietil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (32,1 g, 132 mmol) i trietilamin (36,8 mL 264 mmol) rastvoreni su u dihlorometanu L (400 mL) i dobijena smeša je ohlađena u kupatilu sa ledenom vodom 15 min. U kapima je dodat metansulfonil hlorid (11,3 mL, 145 mmol) i reakcija je mešana 30 min. Reakcija je ugašena dodatkom zasić enog vodenog rastvora natrijum bikarbonata (100 mL). Organski sloj je odvojen, ispran vodom (100 mL), osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan da bi se dobio terc-butil estar 4-(2-metansulfoniloksietil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilne kiseline kao narandžasto ulje (41,6 g, prinos 98%). Materijal je korišć en u slede ć em koraku bez daljeg prečišć avanja. ESI-MS m/z izrač. 321,4, nađeno 322,2 (M+1)+. Vreme zadržavanja: 4,88 min (LC metoda M).
Korak 5: terc-butil estar 4-(2-Aminoetil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilne kiseline
[0997]
[0998] Parov reaktor od 1,5 litara je napunjen sa 4-(2-metansulfoniloksietil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilne kiseline tercbutil estra (32,4 g, 101 mmol), dioksana (640 mL) i 30% amonijum hidroksid (640 mL). Reaktor je zatvoren i zagrevan na 50 °C tokom 18 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom sve dok već ina dioksana nije uklonjena, a zatim je dodat dihlorometan (1 L). Dobijena smeša je prebačena u levak za odvajanje i faze su razdvojene. Vodena faza je ekstrahovana dihlorometanom (2 3 250 mL) i odbačena. Kombinovane organske faze su osušene preko natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane. Sirovi materijal je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem 0% - 15% metanola u gradijentu dihlorometana koji sadrži 5 mL/litar 30% amonijum hidroksida da bi se dobila 4-(2-aminoetil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (20,6 g, 66% prinos) kao svetlo obojeno ulje.<1>H NMR (500 MHz, CDCl3) δ (ppm): 3,66 (dt, 1H), 2,88 (p, 1H), 2,69 (m, 2H), 2,15 (m, 1H), 1,88 (m, 1H), 1,48- 1,14 (m, 20 H). ESI-MS m/z izrač. 242,3, nađeno 243,0 (M+1)+. Vreme zadržavanja: 3.06 min (LC metoda M).
Korak 6: terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etil]pirolidin-1-karboksilat
[0999]
[1000] 6-fluoropiridin-2-sulfonamid (2,089 g, 11,86 mmol) i dimetil sulfoksid (24 mL) su dodati u posudu od 20 mL za mikrotalasnu peć nicu. Dodati su kalijum karbonat (8,60 g, 62,23 mmol) i terc-butil 4-(2-aminoetil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (3,00 g, 12,38 mmol), a bočica je zatvorena poklopcem i zagrejana do 100°C. °C na vruć oj ploči 4 h. Reakciona smeša je filtrirana, zatim razblažena etil acetatom i isprana sa 1M rastvorom limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organski sloj je odvojen, osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i uparen, a zatim prečišć en hromatografijom na silika gelu koristeć i gradijent od 100% heksana do 80% etil acetata u heksanu da bi se dobila kao bela čvrsta supstanca, terc-butil 2,2-dimetil- 4-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etil]pirolidin-1-karboksilat (1,475 g, 31%). ESI-MS m/z izrač. 398.19876, nađeno 399.2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,55 min (LC metoda B).
Korak 7: terc-butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-kar -bonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1001]
[1002] U balon sa okruglim dnom dodata je 2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (361 mg, 0,9262 mmol) i sveže rekristalizovani karbonil diimidazol (188 mg, 1,159 mmol). Dodat je tetrahidrofuran (5,5 mL) i reakcija je zagrevana na 40 °C tokom 2 h. Rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etil]pirolidin-1-karboksilata (370 mg, 0,9284 mmol) u tetrahidrofuranu (2 mL) je bio dodat, a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (450 mL, 3.009 mmol). Reakcija je postala bledo žuta i ostavljena je da se meša preko noć i na sobnoj temperaturi. Reakcija je ugašena zasić enim natrijum bikarbonatom i rastvorom soli i ekstrahovana etil acetatom. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i uparen. Sirovi ostatak je zatim prečišć en hromatografijom na silika gelu korišć enjem gradijenta od 0% - 100% etil acetata u heksanu daju ć i terc-butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino] etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (400 mg, 56 %) kao bela pena. ESI-MS m/z izrač. 769,2636, nađeno 770,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,01 min (LC metoda G).
Korak 8: 2-hloro-N-[[6-[2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etilaminol-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[3-[1-(trifluoromtil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[1003]
[1004] U balon sa okruglim dnom koji sadrži terc-butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1 -il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (400 mg, 0,5193 mmol) je dodat dihlorometan (10 mL) i trifluorosirć etna kiselina ( 2,0 mL, 25,96 mmol). Reakcija je mešana 90 min na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim uparena do suva. Sirova reakciona smeša je neutralizovana zasić enim natrijum bikarbonatom i ekstrahovana etil acetatom. Proizvod se srušio i malo metanola je korišć eno da pomogne u ekstrakciji. Organski sloj je odvojen (nije osušen preko natrijum sulfata) i uparen da bi se dobio 2-hloro-N-[[6-[2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etilamino]-2-piridil]sulfonil]- 6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksil]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (344 mg, 99%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 669,2112, nađeno 670,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,94 min (LC metoda G).
Korak 9: 7,7-dimetil-11-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-17l6-tia-2,8,10,16,22 -pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(22),9,11,13,18,20-heksan-15,17,17-trion (Jedinjenje 233)
[1006] U mikrotalasnu bočicu dodat je kalijum karbonat (355 mg, 2.569 mmol), cezijum fluorid (156 mg, 1.027 mmol), nekoliko 3 A molekulskih sita i rastvor 2-hloro-N-[[6-[2] -(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin- 3-karboksamid (344 mg, 0,5133 mmol) u dimetil sulfoksidu (4 mL). Reakcija je zatvorena i stavljena u prethodno zagrejano na 150 °C uljno kupatilo preko noć i. Reakcija je ohlađena do sobne temperature, filtrirana i prečišć ena preko HPLC 50% - 99% acetonitrila u vodi (0,1% modifikator hlorovodonične kiseline) gradijent dajuć i 7,7-dimetil-11-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo [16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(22),9,11,13 ,18,20-heksan-15,17,17-trion (Jedinjenje 233) (138,6 mg, 43%) kao beli prah. ESI-MS m/z izrač.633,2345, nađeno 634,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,22 min (LC metoda B).
Korak 10: 7,7-dimetil-11-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-17l6-tia-2,8,10,16,22 -pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(22),9,11,13,18,20-heksan-15,17,17-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 234) i 7, 7-dimetil-11-(3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]tricosa-1(22),9,11,13, 18,20-heksan-15,17,17-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 235)
[1007]
[1008] Racemski 7,7-dimetil-11-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-17l6-tia-2,8,10,16, 22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]tricoza-1(22),9,11,13,18,20-heksan-15,17,17-trion (Jedinjenje 233) (138,6 mg, 0,2187 mmol) je bio. odvojeno hiralnom SFC hromatografijom korišć enjem ChiralPak AS-H (250 X 21,2 mm kolona, veličine čestica 5 mm) sa 28% acetonitril:metanol (90:10, bez modifikatora))/72% mobilna faza ugljen-dioksida pri 70 mL/min dajuć i kao prvi enantiomer za eluiranje, 7,7-dimetil-11-(3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]-1H-pirazol-1-il)-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14 ]tricosa-1(22),9,11,13,18,20-heksan-15,17,17-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 234) (68,1 mg, 98%). ESI-MS m/z izrač. 633,2345, nađeno 634,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,22 min (LC metoda B). Drugi enantiomer koji je eluiran bio je 7,7-dimetil-11-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropilpropoksil-1H-pirazol-1-il)-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo [16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(22),9,11,13,18,20-heksan-15,17,17-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 235) (59,3 mg , 86%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,46 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 33,8 Hz, 2H), 7,18 (s, 1H), 6,90 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,82 (s, 1H), 6,11 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,20 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 3,72 - 3,46 (m, 1H ), 2,26 (s, 1H), 1,99 - 1,65 (m, 6H), 1,55 (s, 6H), 1,49 - 1,15 (m, 2H), 0,95 - 0,87 (m, 2H), 0,79 - 0,70 (m, 2H), 0,95 - 0,70 (m, 2H), 2,26 (s, 1H), 1,99 - 1,65 (m, 6H), 1,49 - 1,15 (m, 2H). ), neki protoni zamagljeni rastvaračem. ESI-MS m/z izrač. 633,2345, nađeno 634,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,22 min (LC metoda B).
Primer 70: Priprema (14S)-12,12-dimetil-8-[2-okso-3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetilbutoksi)pirolidin-1-il]-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-tri- jedan (Jedinjenje 237)
Korak 1: 3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butoksi)pirolidin-2-on
[1010]
[1011] U mešani rastvor 4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butan-1-ola (280 mg, 1,793 mmol, sadrži 29 mol% preostalog dietil etra) i 3-bromopirolidin-2-ona (275 mg, 1,677 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (12 mL) je dodat [bis(trimetilsilil)amino]kalijum (7,1 mL 0,5 M u toluenu, 3,550 mmol) kap po kap na -50 °C do -60 °C tokom 2 min. pod azotom. Posle mešanja tokom 15 minuta na toj temperaturi, kupatilo za hlađenje je uklonjeno i balon je odmah stavljen u kupatilo sa ledom i vodom na 0 °C. Reakcija je zatim ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešanje je nastavljeno preko noć i pod azotom. U reakciju je dodata glacijalna sirć etna kiselina (200 mL, 3,517 mmol) i isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu (0% - 10% metanola u gradijentu dihlorometana tokom 25 min) da bi se dobio 3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetil-butoksi)pirolidin-2-on (238 mg, 59%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, benzen-d6) δ 5,87 (s, 1H), 4,13 (dt, J = 9,6, 7,0 Hz, 1H), 3,42 (dt, J = 9,6, 6,8 Hz, 1H), 3,33 - 3. m, 1H), 2,52 - 2,41 (m, 1H), 2,25 (dt, J = 9,6, 7,0 Hz, 1H), 1,72 (td, J = 6,9, 1,5 Hz, 2H), 1,57 - 1,43 (m, 2H) , 0,94 (d, J = 3,6 Hz, 6H). 19F NMR (376 MHz, benzen-d6) 8 -78,62. ESI-MS m/z izrač.239,11331, nađeno 240,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,16 min (LC metoda B).
Korak 2: (14S)-12,12-dimetil-8-[2-okso-3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetilbutoksi)pirolidin-1-il]-2l6-tia-3, 9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 237)
[1012]
[1013] U bočicu od 4 mL je dodat (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10 ] tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (20 mg, 0,04445 mmol), 3-(4,4,4-trifluoro-3,3- dimetil-butoksi)pirolidin-2-on (13 mg, 0,05434 mmol), cezijum karbonat (52 mg, 0,1596 mmol), 4,5-bis(difenil-fosfino)-9,9-dimetilksanten (4 mg, 0,006913 mmol) i anhidrovani dioksan (0,7 mL) tim redosledom. Azot je propušten kroz heterogenu smešu 3 min. Zatim je dodat tris(benzilidenaceton)dipaladijum(0) (4 mg, 0,004368 mmol) pod azotom i azot je propušten kroz smešu još 2 minuta i zatvoren u atmosferi azota. Smeša je mešana na 108 °C preko noć i. Smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i neutralizovana sa glacijalnom sirć etnom kiselinom (20 mL, 0,3517 mmol). Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom, a ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (1,5 mL) i filtriran kroz Whatman 0,45 mm PTFE filter za špric. Uzorak je prečišć en koriš ć enjem preparativne reverzne faze HPLC-MS [Luna C18 (2) kolona (75 X 30 mm, veličina čestica 5 mm) koju prodaje Phenomenek (pn: 00C-4252-U0-AKS), sa dvostrukim gradijentom od 30 % - 99% acetonitrila u vodi tokom 15 min (hlorovodonična kiselina kao modifikator)] dajuć i (14S)-12,12-dimetil-8-[2-okso-3-(4,4,4-trifluoro-3,3-dimetilbutoksi)pirolidin-1-il]-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19( 23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 237) (8 mg, 27%) kao žu ć kasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,42 (s, 1H), 7,71 (dd, J = 8,4, 1,9 Hz, 1H), 7,57 (dd, J = 8,5, 7,2 Hz, 1H), 7,52 (dd , J = 8,4, 6,3 Hz, 1H), 7,04 (dt, J = 7,3, 0,9 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,70 (dd, J = 8,5, 0,8 Hz, 1H) , 4,31 (dva t, J = 8,3 Hz, 1H), 4,08 - 3,87 (m, 3H), 3,81 - 3,64 (m, 2H), 3,17 - 3,04 (m, 1H), 2,94 (d, J = 13,2 Hz 1H), 2,73-2,63 (m, 1H), 2,47-2,38 (m, 1H), 2,15-2,02 (m, 1H), 1,98-1,86 (m, 1H), 1,82 (dd, J = 11,7, 5,1 Hz 1H), 1,76 (td, J = 7,0, 1,8 Hz, 3H), 1,69 - 1,57 (m, 2H), 1,57 (s, 3H), 1,50 (t, J = 12,4 Hz, 1H), 1,46 (s, 3H) ), 1,29 (dd, J = 13,6, 12,8 Hz, IH), 1,14 (t, J = 1,9 Hz, 6H). 19F NMR (376 MHz, dimetil sulfoksid-d6) 5 - 77,59. ESI-MS m/z izrač. 652,2655, nađeno 653,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,1 min (LC metoda B).
Primer 71: Priprema 12,12-dimetil-8-{3-[3-metil-2-(propan-2-il)butoksi]-1H-pirazol-1-il}-15-oksa-2l6-tia- 3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion(Jedinjenje 238)
[1014]
Korak 1: terc-butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfa -moil]-2-piridil]amino]etoksi]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1016] 2-hloro-6-[3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (225 mg, 0,6395 mmol) i karbonil diimidazol (111 mg, 0,6846) mmol) su kombinovani u anhidrovanom tetrahidrofuranu (8 mL) i mešani 75 min na 40 °C. Zatim rastvor tetrahidrofurana (7 mL) terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etoksi]pirolidin-1-karboksilata (265 mg, 0,6393 mmol ) i dodat je 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (200 mL, 1,337 mmol). Reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 4 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa 1 M rastvorom limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organski slojevi su odvojeni, sušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni, a zatim prečišć eni hromatografijom na silika gelu koriste ć i gradijent od 100% heksana do 75% etil acetata u heksanu da bi se dobio kao prljavo bela čvrsta supstanca, terc-butil 4-[2 -[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfa-moil]-2-piridil]amino] etoksi]-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (176 mg, 37%). ESI-MS m/z izrač. 747,3181, nađeno 748,41 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,67 min (LC metoda A).
Korak 2: 12,12-dimetil-8-[3-[3-metil-2-(propan-2-il)butoksi]-1H-pirazol-1-il}-15-oksa-2l6-tia-3, 9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion ( Jedinjenje 238)
[1017]
terc-butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-izopropil-3-metil-butoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2 -piri-dil]amino]etoksi]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (176 mg, 0,2352 mmol) rastvoren je u dihlorometanu (3 mL) i u smešu je dodata trifluorosirć etna kiselina (550 mL, 7,14 mmol). ). Reakcioni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 30 min. Reakciona smeša je koncentrovana do suva pod sniženim pritiskom. Dobijeni ostatak je kombinovan sa kalijum karbonatom (195 mg, 1,41 mmol), cezijum fluoridom (53,6 mg, 0,353 mmol), 3 A molekularnim sitom i dimetil sulfoksidom (3 mL) u bočici i pročišć en azotom. Bočica je zatvorena, zagrejana na 140 °C i mešana 20 h. Smeša je ohlađena do sobe. Reakciona smeša je filtrirana i zatim prečišć ena preparativnom hromatografijom reverzne faze (C18 kolona, 30% do 99% acetonitrila (bez modifikatora) u vodi (5 mM hlorovodonična kiselina) tokom 30 minuta) da bi se dobila bela čvrsta supstanca, 12,12 -dimetil-8-{3-[3-metil-2-(propan-2-il)butoksi]-1H-pirazol-1-il}-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18, 23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 238) (64 mg, 44 %).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,59 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,79 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,59 (dd, J = 8,5 , 7,2 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,11 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,23 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 4,10 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 3,88 (t, J = 11,9 Hz, 1H), 3,61 (d, J = 12,7 Hz, 1H), 3,22 (s, 1H), 2,87 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 2,08 (dd, J = 11,4, 6,0 Hz, 1H), 1,89 (dk, J = 13,2, 6,6 Hz, 2H), 1,79 (t, J = 10,9 Hz, 1H), 1,58 (d, J = 9,7 Hz, 6H), 1,42 - 1,30 (m, 2H), 0,98 (d , J = 6,8 Hz, 6H), 0,92 (d, J = 6,8 Hz, 6H). ESI-MS m/z izrač.611.289, nađeno 612.2 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 2,29 min (LC metoda B).
Primer 72: Priprema (14S)-8-{3-[2-(adamantan-1-il)etoksi]-2-oksopirolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9, 11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1 ) (Jedinjenje 240) i (14S)-8-{3-[2-(adamantan-1-il)etoksi]-2-oksopirolidin-1-il}-12,12-dimetil-l6-tia-3,9 ,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-tri-on (dijastereomer 2) (Jedinjenje 241)
[1018]
Korak 1: 3-[2-(1-Adamantil)etoksi]pirolidin-2-on
[1019]
[1020] U rastvor 1-adamantanetanola (1,099 g, 6,098 mmol) i 3-bromopirolidin-2-ona (1,00 g, 6,098 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (50 mL) je dodat kalijum bis(amid-metil)-M (trimetil) u tetrahidrofuranu, 12,8 mL, 12,8 mmol) na -50 °C kap po kap. Reakcija je mešana na istoj temperaturi 20 min, zatim u ledenom kupatilu 3 h. Reakcija je ugašena zasić enim vodenim rastvorom amonijum hlorida (50 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3350 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (50 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je razmuć en sa heksanom i formirana čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom da bi se dobio 3-(2-adamantan-1-il-etoksi)-pirolidin-2-on (1,192 g, 74%) kao sivo-bela čvrsta supstanca.<1>H-NMR (250 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ (ppm): 7,78 (s, br, 1H), 3,81 (m, 2H), 3,51 (k, t = 8,8 Hz, 1H), 3,11 (m, 2H) ), 2,27 (m, IH), 1,90-1,40 (m, 16H), 1,30 (t, J = 7,3 Hz, 2H). ESI-MS m/z: izrač. 263,19, nađeno 263,8 (M+1)+. Vreme zadržavanja: 5,24 min (LC metoda K).
Korak 2: (14S)-8-{3-[2-(Adamantan-1-il)etoksi]-2-oksopirolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11, 18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1)
( Jedinjenje 240) i (14S)-8-{3-[2-(adamantan-1-il)etoksi]-2-oksopirolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9 ,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 241)
[1022] Bočica od 4 mL je napunjena (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (35 mg, 0,07779 mmol), 3-[2-(1-adamantil)etoksi]pirolidin- 2-on (29 mg, 0,1101 mmol), Pd2(dba)3 (11 mg, 0,01201 mmol), Ksanfos (9 mg, 0,01555 mmol), cezijum karbonat (129 mg, 0,3959 mmol) i anhidrovani dioksan (0,5 mL). Smeša je prskana azotom oko 3 min, zatvorena i mešana na 120 °C tokom 14 h. Organski rastvarač je koncentrovan duvanjem azota u bočicu. Ostatak je razblažen dimetil sulfoksidom (900 mL), mikrofiltriran i podvrgnut preparativnoj HPLC reverzne faze (C18) korišć enjem gradijenta acetonitrila u vodi (30 do 99% tokom 15 min) i hlorovodonične kiseline kao modifikatora. Čiste frakcije su sakupljene i organski rastvarači su upareni. Dobijeni vodeni rastvor je ekstrahovan dihlorometanom (1Ks) i etil acetatom (2Ks) i organske faze su kombinovane i osušene iznad natrijum sulfata. Filtracijom i uparavanjem rastvarača dobijena je čvrsta supstanca koja je dalje prečišć ena fleš hromatografijom na silika gelu korišć enjem gradijenta metanola (0% do 5% tokom 30 min) u dihlorometanu. Čiste frakcije su kombinovane i rastvarači su upareni. Ostatak je trituriran sa dihlorometanom/heksanom i rastvarači su upareni da bi se dobila smeša dijastereomera koji su razdvojeni hiralnim SFC (chiralCel OJ-H (250X10 mm), 5 mM kolona; mobilna faza: 24% acetonitril/metanol (90:10). , 20 mM NH3), 76% ugljen-dioksid, 10 mL/min; 14 mg/mL u acetonitril:metanol:dimetil sulfoksid (81:9:10); zapremina injekcije 70 mL, 100 bar).
[1023] Prvi dijastereomer koji je eluiran bio je (14S)-8-{3-[2-(adamantan-1-il)etoksi]-2-oksopirolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23), 20-heksan-2,2,4- tri-on (dijastereomer 1) (Jedinjenje 240) (6,1 mg, 22%, 98% ee).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,45 (široki s, 1H), 7,69 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,60 - 7,44 (m, 2H), 7,03 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,94 (br s, IH), 6,68 (br d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,21 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,02 (t, J = 9,5 Hz, 1H), 3,97 - 3,82 (m, 2H), 3,74 - 3,65 (m, IH), 3,64 - 3,53 (m, 1H), 3,12 (br s, 1H), 2,93 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 2,77 - 2,64 (m 1H), 2,45-2,34 (m, IH), 2,17-2,03 (m, 1H), 2,00-1,71 (m, 6H), 1,70-1,39 (m, 19H), 1,40-1,13 (m, 5H). ESI-MS mlz izrač.
676,3407, nađeno 677,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,42 min (LC metoda B). Drugi dijastereomer koji je eluiran bio je (14S)-8-{3-[2-(adamantan-1-il)etoksi]-2-oksopirolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9 ,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksen-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 241) (5,1 mg, 17%, 93% ee).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,44 (široki s, 1H), 7,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,61 - 7,49 (m, 2H), 7,04 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,00 - 6,89 (br m, 1H), 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,26 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 3,98 - 3,82 (m, 3H), 3,76 (k, J = 8,5 Hz, 1H), 3,58 (k, J = 7,7 Hz, 1H), 3,10 (br s, 1H), 2,94 (br d, J = 13,3 Hz, 1H), 2,74 - 2,63 (m, 1H), 2,47-2,34 (m, 1H), 2,10 (br s, 1H), 1,95-1,69 (m, 6H), 1,68-1,39 (m, 19H), 1,37-1,18 (m, 5H). ESI-MS m/z izrač. 676,3407, nađeno 677,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,41 min (LC metoda B).
Primer 73: Priprema (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-[3-[1-(trifluorometil) ciklopropil]propoksi] pirolidin-1-il)-2)l6- tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4- trion (dijastereomer 1) (jedinjenje 242) i (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{3-[1-(trifluorometil)ciklo-propil]propoksi}pirolidin-1-il) -2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza- 1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2 ,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 243)
[1024]
Korak 1: 3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirolidin-2-on
[1025]
[1026] Balon od 100 mL je napunjen pod azotom sa 3-[1-(trifluorometil)ciklo propil]propan-1-olom (450 mg, 2.676 mmol), 3-bromopirolidin-2-onom (442 mg, 2.695 mmol) i anhidrovani tetrahidrofuran (12 mL). Smeša je ohlađena na -50 °C.
[bis(trimetilsilil)amino]kalijum (11,3 mL 0,5 M u toluenu, 5,650 mmol) je dodat u kapima tokom 5 minuta i žuta smeša je mešana na -50 °C tokom 15 - 20 minuta, zatim u ledenom kupatilu na 0 °C najmanje 3 h. Reakcija je mešana u ledenom kupatilu koje je ostavljeno da se polako zagreje do sobne temperature. Posle 16 h, smeša je ohlađena na 0 °C, a zatim je u reakciju dodata glacijalna sirć etna kiselina (250 mL, 4.396 mmol) daju ć i bledo braon suspenziju. Dodati su slani rastvor (75 mL) i etil acetat (75 mL) i dve faze su razdvojene. Vodena faza je dalje ekstrahovana etil acetatom (2 X 25 mL). Kombinovani organski ekstrakti su osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i rastvarači su upareni. Sirovi ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu (0% - 15% metanol u gradijentu dihlorometana tokom 30 min) da bi se dobio željeni 3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirolidin-2-on ( 555 mg, 83%) kao sivobela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 6,65 (široki s, 1H), 3,95 (dd, J = 7,7, 7,0 Hz, 1H), 3,84 (dt, J = 9,2, 6,2 Hz, 1H), 3,54 (dt , J = 9,2, 6,3 Hz, 1H), 3,41 (dddd, J = 9,7, 8,5, 3,7, 1,1 Hz, 1H), 3,33 - 3,23 (m, 1H), 2,40 (dtd, J = 13,1, 3,7 Hz), 3,33 - 3,23 (m, 1H), 2,40 (dtd, J = 13,1, 3,7,6 Hz).
1H), 2,09-1,96 (m, 1H), 1,80-1,69 (m, 2H), 1,69-1,52 (m, 2H), 0,98-0,85 (m, 2H), 0,64-0,47 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.
251,11331, nađeno 252,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,32 min (LC metoda B).
Korak 2: (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi} pirolidin-1-il)-2l6-tia-3,9, 11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1 ) (Jedinjenje 242) i (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi} pirolidin-1-il)-2l6-tia-3 , 9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 243)
[1028] Bočica od 4 mL je napunjena (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (32 mg, 0,07112 mmol), 3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi ] pirolidin-2-on (25 mg, 0,09950 mmol), Pd2(dba)3(11 mg, 0,01201 mmol), Ksanfos (11 mg, 0,01901 mmol), cezijum karbonat (110 mg, 0,3376 mmol) i anhidrovani O.6. mL). Smeša je prskana azotom oko 3 min, zatvorena i mešana na 120 °C tokom 16 h. Organski rastvarač je koncentrovan duvanjem azota u bočicu. Reakcija je razblažena sa dimetil sulfoksidom (900 mL), mikrofiltrirana i podvrgnuta preparativnoj HPLC reverzne faze (C18) korišć enjem gradijenta acetonitrila u vodi (30% do 99% tokom 15 minuta) i hlorovodonične kiseline kao modifikatora. Čiste frakcije su sakupljene i organski rastvarači su upareni. Dobijeni vodeni rastvor je ekstrahovan etil acetatom (3X) i kombinovane organske faze su osušene iznad natrijum sulfata. Filtracijom i uparavanjem rastvarača dobija se čvrsta supstanca koja je prečišć ena fleš hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta metanola (0% do 5% tokom 30 min) u dihlorometanu. Čiste frakcije su kombinovane i rastvarači su upareni. Ostatak je triturisan sa dihlorometanom/heksanom i rastvarači su upareni da bi se dobila smeša dijastereomera koji su razdvojeni hiralnim SFC (ChiralCel OJ-H (250310 mm), 5 mM kolona; mobilna faza: 24% acetonitril/metanol (90:10).20 mM NH3), 76% ugljen-dioksid, 10 mL/min; koncentracija: 23 mg/mL: u acetonitrilu/metanolu (90:10; 20 mM NH3); zapremina ubrizgavanja 70 mL, 100 bara). Prvi dijastereomer koji je eluiran bio je (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{3-[1-(tri-fluorometil)ciklopropil]propoksi}pirolidin-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05, 10]tetra-koza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4 -trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 242) (6,3 mg, 26%). ESI-MS m/z izrač. 664,2655, nađeno 665,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,05 min (LC metoda B). Drugi dijastereomer koji je eluiran bio je (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksilpirolidin-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaaza-tetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 243) (5,2 mg, 22%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,45 (široki s, 1H), 7,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,61 -7,47 (m, 2H), 7,04 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,96 (s, IH), 6,69 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 4,30 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 3,92 (t, J = 9,8 Hz, 2H), 3,82 - 3,70 ( m, 2H), 3,60 - 3,49 (m, 1H), 3,10 (br s, 1H), 2,93 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 2,74 - 2,64 (m, 1H), 2,48 - 2,36 (m, 1H) ), 2,10 (br s, 1H), 1,93-1,68 (m, 3H), 1,68-1,40 (m, 12H), 1,38-1,20 (m, 2H), 0,93-0,83 (m, 2H), 0,67-0. m, 2H). ESI-MS m/z izrač.664,2655, nađeno 665,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,06 min (LC metoda B).
Primer 74: Priprema (14S)-8-13-[(adamantan-1-il)metoksi]-2-oksopirolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18 ,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-tri-on (dijastereomer 1) (Jedinjenje 244) i (14S)-8-{3-[(adamantan-1-il)metoksi]-2-oksopirolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18, 23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05, 10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksen-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 245)
[1029]
Korak 1: 3-(1-Adamantilmetoksi)pirolidin-2-on
[1030]
[1031] U rastvor 1-adamantanmetanola (0,500 g, 3,007 mmol) i 3-bromopirolidin-2-ona (0,493 g, 3,007 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (20 mL), dodat je 1 M kalijum bisilamida (1 M trimetilsilijum bisil) rastvor u tetrahidrofuranu (6,3 mL, 6,30 mmol) na -60 °C. Reakcija je mešana na ovoj temperaturi 20 min, zatim je podignuta na 0 °C i mešana još 2 h. Reakcija je ugašena zasić enim vodenim rastvorom amonijum hlorida (20 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je triturisan sa heksanom (30 mL) i formirana čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom da bi se dobio 3-(adamantan-1-ilmetoksi)-pirolidin-2-on (0,594 g, 79%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H-NMR (250 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ (ppm): 7,77 (s, br, 1H), 3,82 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 3,31 (m, 1H), 3,11 (m, 2H ), 3,30 (d, J = 9 Hz, IH), 2,26 (m, IH), 1,92-1,48 (m, 16 H). ESI-MS m/z: izrač. 249,17, nađeno 250,2 (M+1)+. Vreme zadržavanja: 4,97 min (LC metoda K).
Korak 2: (14S)-8-{3-[(Adamantan-1-il)metoksi]-2-oksopirolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18, 23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1) (Com- funta 244) i (14S)-8-{3-[(adamantan-1-il)metoksi]-2-oksopirolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18 ,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 245)
[1033] Bočica od 4 mL je napunjena sa (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetracikllo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (35 mg, 0,07779 mmol), 3-(1-adamantilmet) -oksi)pirolidin-2-on (30 mg, 0,1203 mmol), Pd2(dba)3(10 mg, 0,01092 mmol), ksanfos (12 mg, 0,02074 mmol), cezijum karbonat (130 mg, 0,3990 mmol) i anhidrovani dioksan (0,6 mL). Smeša je prskana azotom oko 3 min, zatvorena i mešana na 120 °C tokom 22 h. Organski rastvarač je koncentrovan duvanjem azota u bočicu. Reakcija je razblažena sa dimetil sulfoksidom (900 mL), mikrofiltrirana i podvrgnuta preparativnoj HPLC reverzne faze (C18) korišć enjem gradijenta acetonitrila u vodi (30% do 99% tokom 15 minuta) i hlorovodonične kiseline kao modifikatora (950 mL injekcija ). Čiste frakcije su sakupljene i organski rastvarači su upareni. Čvrsta supstanca je ekstrahovana etil acetatom (2X) i organska faza je osušena preko natrijum sulfata. Filtracijom, zatim uparavanjem rastvarača, dobija se čvrsta supstanca koja je prečišć ena fleš hromatografijom na silika gelu korišć enjem gradijenta metanola (0% do 5% tokom 30 min) u dihlorometanu. Čiste frakcije su sakupljene i rastvarači su upareni. Ostatak je triturisan sa dihlorometanom/heksanom i rastvarači su upareni da bi se dobila smeša dijastereomera koji su razdvojeni hiralnim SFC ((ChiralCel OJ-H (250 X 10 mm), 5 mM kolona; mobilna faza 31% acetonitril/metanol (90:10, 20 mM NH3), 69% ugljen-dioksid, 10 mL/min; koncentracija 23 mg/mL u acetonitrilu/metanolu (90:10; 20 mM NH3); zapremina ubrizgavanja 70 mL, 100 bar). dijastereomer za eluiranje je (14S)-8-{3-[(adamantan-1-il)metoksi]-2-oksopirolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18 ,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 244) (6,3 mg, 23%)<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,46 (široki s, 1H), 7,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,56 (t, J = 7,9 Hz, 1H ), 7,50 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,95 (br s, 1H), 6,69 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,19 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 4,02 (t, J = 9,3 Hz, 1H), 3,98 - 3,84 (m, 1H), 3,69 (dt, J = 10,4, 7,5 Hz, 1H), 3,41 (d, J = 9,0 H z, 2H), 3,11 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 2,93 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 2,76 - 2,64 (m, 1H), 2,45 - 2,36 (m, 1H), 2,10 (br s, IH), 1,98-1,85 (m, 4H), 1,85-1,41 (m, 22H), 1,34-1,26 (m, 1H). ESI-MS m/z izrač. 662.325, nađeno 663.5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,41 min (LC metoda B). Drugi dijastereomer koji je eluiran bio je (14S)-8-{3-[(adamantan-1-il)metoksi]-2-oksopirolidin-1-il}-12,12-dimetill6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetra-koza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 245) (5,6 mg, 20%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,45 (široki s, 1H), 7,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,61 -7,48 (m, 2H), 7,04 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,95 (br s, IH), 6,69 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,24 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 3,92 (t, J = 9,5 Hz, 2H), 3,77 (k , J = 9,4, 8,8 Hz, 1H), 3,41 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 3,10 (d, J = 9,0 Hz, 2H), 2,93 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 2,77 - 2,64 (m, 1H), 2,46-2,38 (m, IH), 2,10 (br s, 1H), 1,96-1,72 (m, 6H), 1,72-1,42 (m, 20H), 1,38-1,25 (m, 1H).
[1034] ESI-MS m/z izrač.662.325, nađeno 663.5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,41 min (LC metoda B).
Primer 75: Priprema (14S)-8-{3-[(4,4-dimetilpentil)oksi]-2-oksopirolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11, 18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1)
( Jedinjenje 246) i (14S)-8-{3-[(4,4-dimetilpentil)oksi]-2-oksopirolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18 ,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-tri-on (dijastereomer 2) (Jedinjenje 247)
[1035]
Korak 1: 3-(4,4-dimetilpentoksi)pirolidin-2-on
[1036]
[1037] Balon od 100 mL je napunjen pod azotom sa 4,4-dimetilpentan-1-olom (0,97 g, 8,348 mmol), 3-bromopirolidin-2-onom (1,41 g, 8,598 mmol) i anhidrovanim tetrahidrofuranom (5 mL). Smeša je ohlađena u kupatilu led-voda i rastvor KHMDS (17 mL 1 M, 17,00 mmol) je dodat tokom 10 min (rastvor je brzo postao braon). Smeša je mešana u kupatilu za hlađenje koje je ostavljeno da se zagreje na sobnu temperaturu preko noć i. Posle 24 h, reakcija je ohlađena u kupatilu sa ledom i vodom i tretirana sirć etnom kiselinom (1 mL, 17,58 mmol) i slanim rastvorom (50 mL). Proizvod je ekstrahovan etil acetatom (2 X 40 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani preko natrijum sulfata, filtrirani i rastvarači su upareni da bi se dobio sirovi materijal (430 mg). Ostatak je podvrgnut fleš hromatografiji na silika gelu korišć enjem gradijenta metanola (0% do 15% tokom 20 minuta) u dihlorometanu daju ć i 3-(4,4-dimetilpentoksi)pirolidin-2-on (239 mg, 14% ) kao blago čvrstu supstancu.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 5,85 (široki s, 1H), 3,97 (dd, J = 7,7, 6,9 Hz, 1H), 3,83 (ddd, J = 8,9, 7,4, 6,6 Hz, 1H), 3. (dt, J = 9,0, 7,1 Hz, 1H), 3,43 (dddd, J = 9,6, 8,4, 3,8, 1,2 Hz, 1H), 3,29 (dddd, J = 9,6, 7,5, 6,7, 0,8 Hz, 1H), 1H (dtd, J = 13,1, 7,6, 3,9 Hz, 1H), 2,09 (ddt, J = 13,0, 8,4, 6,8 Hz, 1H), 1,68 - 1,49 (m, 2H preklapa se sa preostalim rastvaračem), 1,28 (m, 1. 2H), 0,88 (s, 9H). ESI-MS m/z izrač.199,15723, nađeno 200,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,3 min (LC metoda B).
Korak 2: Etil 2-hloro-6-[3-(4,4-dimetilpentoksi)-2-okso-pirolidin-1-il]piridin-3-karboksilat
[1038]
[1039] Balon od 100 mL je napunjen pod azotom sa etil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilatom (336 mg, 1.527 mmol) i 3-(4,4-dimetilpentoksi)pirolidin-2-onom (287 mg, 1.440 mmol ) u anhidrovanom N,N-dimetilformamidu (6 mL). Dodan je kalijum karbonat (271 mg, 1,961 mmol) (325 mesh), a zatim 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (25 mg, 0,2229 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom. Posle 2 dana, reakcija je ugašena dodatkom vode (50 mL), a zatim ekstrahovana etil acetatom (2 X 25 mL). Organska faza je osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i rastvarači su upareni. Proizvod je prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu koristeć i gradijent etil acetata (0% do 50% tokom 20 min) u heksanu. Čiste frakcije su sakupljene, a rastvarači upareni da bi se dobio etil 2-hloro-6-[3-(4,4-dimetilpentoksi)-2-okso-pirolidin-1-il]piridin-3-karboksilat (358 mg, 65% ) kao bezbojna smola koja se polako očvrš ć ava.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,36 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,32 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 4,38 - 4,26 (m, 3H), 4,02 (ddd, J). = 11,1, 8,9, 2,6 Hz, 1H), 3,81 - 3,67 (m, 2H), 3,54 (dt, J = 9,3, 6,6 Hz, 1H), 2,49 - 2,39 (m, 1H), 1,92 (dk., J = , 8,8 Hz, 1H), 1,58-1,44 (m, 2H), 1,32 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 1,25-1,16 (m, 2H), 0,87 (s, 9H). ESI-MS m/z izrač.382,16592, nađeno 383,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,26 min (LC metoda B).
Korak 3: 6-[[3-karboksi-3-(4,4-dimetilpentoksi)propil]amino]-2-hloro-piridin-3-karboksilna kiselina
[1040]
[1041] U posudi od 100 mL, etil 2-hloro-6-[3-(4,4-dimetilpentoksi)-2-oksopirolidin-1-il]piridin-3-karboksilat (335 mg, 0,8749 mmol) u metanolu ( 5 mL) i tetrahidrofuran (5 mL) su mešani do homogenosti. U smešu je dodat natrijum hidroksid (1 mL 2 M, 2.000 mmol) (2 M vodeni rastvor) i zamuć ena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 9 h. Dodato je još natrijum hidroksida (1 mL 6 N) i smeša je mešana preko noć i. Reakcija je razblažena vodom (40 mL). Rastvor je zakiseljen uz sporo dodavanje 6 N hlorovodonične kiseline do pH = 2. Čvrsta supstanca je ekstrahovana etil acetatom (2 X 50 mL, 1 3 25 mL) i kombinovane organske faze su osušene preko natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane. u vakuumu. Ostatak je trituriran sa dihlorometanom/heksanom i rastvarači su upareni da bi se dobila 6-[[3-karboksi-3-(4,4-dimetilpentoksi)propil]amino]-2-hloropiridin-3-karboksilna kiselina (333 mg, kvantitativno prinos) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,60 (s, 2H), 7,87 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,61 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 6,44 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 3,83 (dd, J = 8,9, 3,8 Hz, 1H), 3,50 (dt, J = 8,9, 6,6 Hz, 1H), 3,42-3,36 (m, 1 H), 3,34 (široki s, delimično preklapajuć i se sa signalom vode, 1H), 3,25 (dt, J = 8,9, 6,7 Hz, 1H), 2,00 - 1,85 (m, 1H), 1,85 - 1,73 (m, 1H), 1,52 - 1,39 (m, 2H), 1,20 - 1,12 (m, 2H), 0,84 (s, 9H). ESI-MS m/z izrač. 372,1452, nađeno 373,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,47 min (LC metoda B).
Korak 4: 2-hloro-6-[3-(4,4-dimetilpentoksi)-2-okso-pirolidin-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[1042]
[1043] Balon od 100 mL je napunjen pod azotom sa 6-[[3-karboksi-3-(4,4-dimetilpentoksi)propil]amino]-2-hloro-piridin-3-karboksilnom kiselinom (281 mg, 0,7537 mmol ), HATU (292 mg, 0,7680 mmol) i anhidrovani tetrahidrofuran (6 mL) (delimična suspenzija). Dodan je trietilamin (0,34 mL, 2,439 mmol) (brzo pretvoren u žuti homogeni rastvor) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 dana. Dodata je voda (30 mL), a zatim hlorovodonična kiselina (200 mL 6 M, 1.200 mmol) (6 N vodeni, krajnji pH = 4). Dobijena bela čvrsta supstanca je filtrirana i isprana vodom da bi se dobila čista 2-hloro-6-[3-(4,4-dimetilpentoksi)-2-oksopirolidin-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (196 mg, 73%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 13,51 (s, 1H), 8,34 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 8,31 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 4,33 (dd, J = 8,9 , 7,9 Hz, 1H), 4,01 (ddd, J = 11,2, 8,8, 2,6 Hz, 1H), 3,82 - 3,67 (m, 2H), 3,54 (dt, J = 9,2, 6,6 Hz, 1H), 2,47 - m, 1H), 1,91 (dk, J = 12,4, 8,9 Hz, IH), 1,58 - 1,44 (m, 2H), 1,27 -1,14 (m, 2H), 0,87 (s, 9H). ESI-MS m/z izrač.354,13464, nađeno 355,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,91 min (LC metoda B).
Korak 5: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(4,4-dimetilpentoksi)-2-okso-pirolidin-1-il]piridin- 3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1044]
[1045] Balon sa okruglim dnom od 100 mL je napunjen pod azotom sa 2-hloro-6-[3-(4,4-dimetilpentoksi)-2-okso-pirolidin-1-il]piridin-3-karboksilnom kiselinom (182 mg , 0,5129 mmol) i anhidrovani tetrahidrofuran (3 mL). Dodat je karbonil diiidazol (102 mg, 0,6291 mmol) (sveže rekristalizovan iz tetrahidrofurana) i smeša je mešana pod azotom na sobnoj temperaturi 3 h. Dodato je još 35 mg karbonil diimidazola i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. U posebnoj posudi od 20 mL, rastvor terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilata (211 mg , 0,5115 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (1,5 mL) je pripremljen u atmosferi azota i zatim je dodat preko šprica u rastvor aktiviranog estra. Dodat je 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (0,38 mL, 2,541 mmol) kroz špric i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u atmosferi azota preko noć i. Posle 2 dana, rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom i dobijeno gusto ulje je tretirano etil acetatom (20 mL) i vodom (20 mL). Polako je dodavana hlorovodonična kiselina (600 mL 6 M, 3.600 mmol) (konačni pH = 5) i dve faze su razdvojene. Vodena faza je ekstrahovana etil acetatom (30 mL). Kombinovani ekstrakti su isprani slanim rastvorom (30 mL) i osušeni preko natrijum sulfata. Posle uparavanja rastvarača, ostatak je rastvoren u dihlorometanu i prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu koriste ć i gradijent etil acetata (0% do 100% tokom 30 minuta) u heksanu daju ć i terc-butil (4S)-4-[3 -[[6-[[2-hloro-6-[3-(4,4-dimetilpentoksi)-2-okso-pirolidin-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil ]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (138 mg, 36%, čistoć a 90%) kao bezbojna smola. ESI-MS m/z izrač.
748,3385, nađeno 749,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,42 min (LC metoda B).
Korak 6: 2-hloro-6-[3-(4,4-dimetilpentoksi)-2-okso-pirolidin-1-il]-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin -3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so)
[1046] Balon od 100 mL je napunjen terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(4,4-dimetilpentoksi)-2-okso-pirolidin - 1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (138 mg, 0,1842 mmol), dihlorometan (2 mL) i hlorovodonična kiselina (300 mL 4 M u dioksanu, 1.200 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 3,5 h (60% konverzija). Dodata je dodatna količina hlorovodonične kiseline (300 mL 4 M, 1.200 mmol) i reakcija je mešana dodatna 2 h. Isparljive materije su uklonjene isparavanjem pod vakuumom. Ostatak je triturisan sa dihlorometanom/heksanom i rastvarači su upareni. Operacija se ponavlja sve dok se ne dobije bela čvrsta supstanca. Sušenjem pod vakuumom dobija se 2-hloro-6-[3-(4,4-dimetilpentoksi)-2-okso-pirolidin-1-il]-N-[[6-[3-[(3S)-5,5- dimetilpirolidin-3-il]propilaminol-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so) (125 mg, 94%) kao bela čvrsta supstanca. Proizvod je korišć en za slede ć i korak bez daljeg prečišć avanja. ESI-MS m/z izrač. 648,2861, nađeno 649,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,62 min (LC metoda B).
Korak 7: (14S)-8-[3-[(4,4-dimetilpentil)oksi]-2-oksopirolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18, 23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1) (Com- funta 246) i (14S)-8-{3-[(4,4-dimetilpentil)oksi]-2-oksopirolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18 ,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9, 19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 247)
[1048] Balon sa okruglim dnom od 50 mL opremljen magnetnom mešalicom je napunjen pod azotom sa 2-hloro-6-[3-(4,4-dimetilpentoksi)-2-okso-pirolidin-1-il]-N-[ [6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (dihidrohloridna so) (125 mg, 0,1731 mmol), anhidrovani NMP (7 mL) i kalijum karbonat (465 mg, 3.365 mmol) (325 mesh). Smeša je snažno mešana u suvom kupatilu na 155 °C pod azotom tokom 20 h. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je sipana u ohlađenu vodu (50 mL) i zakiseljena je dodavanjem hlorovodonične kiseline (1 mL 6 M, 6.000 mmol) (blago penjenje). Dobijena čvrsta supstanca je filtrirana i kratko osušena na vazduhu. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu i prečišć ena fleš hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta metanola (0% do 5% tokom 30 minuta) u dihlorometanu dajuć i smešu dijastereomera koja je podvrgnuta hiralnom SFC razdvajanju (ChiralCel OJ-H (250 X 10 mm), 5 mM kolona, mobilna faza 24% acetonitril/metanol (90:10, 20 mM NH3), 76% ugljen-dioksid, 10 mL/min, koncentracija 23 mg/mL u acetonitrilu/metanolu (90:10; 20 mM NH3); zapremina injekcije 70 mL, 100 bara) dajuć i kao prvi dijastereomer za eluiranje, (14S)-8-13-[(4,4-dimetilpentil)oksi]-2-oksopirolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen - 2,2,4-trion (diastereomer 1) (Jedinjenje 246) (22 mg, 20%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,43 (s, 1H), 7,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,56 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,96 (široki s, 1H), 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,24 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 4,03 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 3,95-3,87 (br m, 1H), 3,81 - 3,64 (m, 2H), 3,52 (dt, J = 9,2, 6,6 Hz, 1H), 3,12 (br s, 1H) ), 2,94 (d, J = 13,5 Hz, 1H), 2,78 - 2,61 (m, 1H), 2,42 (dk, J = 13,0, 7,9, 6,3 Hz, 1H), 2,11 (široki s, 1H), 1,92 (dk , J = 12,3, 8,6 Hz, 1H), 1,85-1,68 (m, 2H), 1,64-1,41 (m, 10H), 1,36-1,13 (m, 4H), 0,87 (s, 9H). ESI-MS m/z izrač.612,3094, nađeno 613,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,17 min (LC metoda B). Drugi dijastereomer koji je eluiran bio je (14S)-8-{3-[(4,4-dimetilpentil)oksi]-2-oksopirolidin-1-il}-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (jedinjenje 247) (21 mg, 19%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,41 (s, 1H), 7,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,59-7,51 (m, 2H), 7,04 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 1H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) ), 6,96 (široki s, 1H), 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,28 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 3,92 (t, J = 9,8 Hz, 2H), 3,83 - 3,68 ( m, 2H), 3,52 (dt, J = 9,2, 6,6 Hz, 1H), 3,10 (br s, 1H), 2,94 (br d, J = 13,4 Hz, 1H), 2,80 - 2,59 (m, 1H), 2,48 -2,37 (m, 1H), 2,10 (br s, 1H), 1,95-1,68 (m, 3H), 1,64-1,42 (m, 10H), 1,36-1,14 (m, 4H), 0,87 (s, 9H). ESI-MS m/z izrač.612,3094, nađeno 613,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,17 min (LC metoda B).
Primer 76: Priprema 12,12-dimetil-8-{3-[3-metil-2-(propan-2-il)butoksi]-1H-pirazol-1-il}-15-oksa-2l6-tia- 3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-tri- jedan (enantiomer 1) (jedinjenje 248) i 12,12-dimetil-8-{3-[3-metil-2-(propan-2-il)butoksi]-1H-pirazol-1-il]-15-oksa -2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2 ,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 249)
[1049]
Korak 1: 12,12-dimetil-8-{3-[3-metil-2-(propan-2-il)butoksi]-1H-pirazol-1-il}-15-oksa-2l6-tia-3, 9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion ( enantiomer 1) (jedinjenje 248) i 12,12-dimetil-8-{3-[3-metil-2-(propan-2-il)butoksi]-1H-pirazol-1-il]-15-oksa -2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2 ,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 249)
[1050]
[1051] Racemski 12,12-dimetil-8-{3-[3-metil-2-(propan-2-il)butoksi]-1H-pirazol-1-il}-15-oksa-2l6-tia-3 ,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (60 mg, 0,09612 mmol) je podvrgnuto hiralnoj SFC hromatografiji. Korišć en je slede ć i SFC protokol: ChiralPak AS-3 (150 X 2,1 mm), 3 mm; 35 °C Mobilna faza: 30% acetonitril:metanol (90:10), 70% ugljen-dioksid. Prvi enantiomer koji je eluiran bio je 12,12-dimetil-8-{3-[3-metil-2-(propan-2-il)butoksi]-1H-pirazol-1-il}-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23-pen-taazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4 -trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 248) (21 mg, 71%). ESI-MS m/z izrač. 611.289, nađeno 612.2 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 2,30 min (LC metoda B). Drugi enantiomer koji je eluiran bio je 12,12-dimetil-8-{3-[3-metil-2-(propan-2-il)butoksi]-1H-pirazol-1-il]-15-oksa-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 249) (22 mg, 74%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,56 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,59 (dd, J = 8,5 , 7,2 Hz, 1H), 7,10 (t, J = 7,4 Hz, 2H), 6,95 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,11 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,23 (d, J = 4,8 Hz, 2H), 4,11 (t, J = 8,3 Hz, 2H), 3,88 (t, J = 12,0 Hz, 1H), 3,60 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 3,23 (s, 1H), 3,07 (s, 1H), 2,87 (d, J = 9,4 Hz, 1H), 2,08 (dd, J = 11,7, 5,9 Hz, 1H), 1,96 - 1,85 (m, 2H ), 1,79 (t, J = 10,9 Hz, 1H), 1,58 (d, J = 9,2 Hz, 6H), 1,35 (p, J = 5,2 Hz, 1H), 0,98 (d, J = 6,8 Hz, 6H), 0,92 (d, J = 6,8 Hz, 6H). ESI-MS m/z izrač.611.289, nađeno 612.2 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 2,29 min (LC metoda B).
Primer 77: Priprema 11-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-7,7-dimetil-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3 .1.15,8.09,14]tricosa-1(22),9,11,13,18,20-heksan-15,17,17-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 251)
[1052]
Korak 1: terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etil]pirolidin-1-karboksilat
[1053]
[1054] Racemski terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etil]pirolidin-1-karboksilat (1,475 g, 3,701 mmol) je odvojen hiralnim SFC korišć enjem ChiralPak IG (250 3 21,2 mm kolona, veličina čestica 5 mm) sa 32% metanola (bez modifikatora))/68% mobilna faza ugljen-dioksida pri 70 mL/min dajuć i kao prvi enantiomer koji se eluira, terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etil]pirolidin-1-karboksilat (enantiomer 1) (670 mg, 91%) kao bela pena. ESI-MS m/z izrač. 398.19876, nađeno 399.3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,59 min (LC metoda B).
Korak 2: terc-butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]- 2-piridil]amino]etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (enantiomer 1)
[1055]
[1056] U balon je dodata 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (147,7 mg, 0,4082 mmol), rekristalisani karbonil diimidazol (66,2 mg). , 0,4083 mmol) i tetrahidrofuran (4 mL). Reakcija je mešana na 40 °C tokom 90 min. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etil]pirolidin-1-karboksilat (enantiomer 1) (130 mg, 0,3262 mmol), a zatim 1 ,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (150 mL, 1,003 mmol). Reakcija je mešana 2 dana. Reakcija je filtrirana i prečišć ena pomo ć u HPLC (30% - 99% acetonitril:voda gradijent sa 0,1% modifikatorom hlorovodonične kiseline) da bi se dobio terc-butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3] -(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (enantiomer 1 ) (30,4 mg, 13%). ESI-MS m/z izrač. 741,30756, nađeno 742,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,2 min (LC metoda G).
Korak 3: 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-[[6-[2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etilamino]-2 -piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (enantiomer 1)
[1057]
[1058] U balon koji sadrži terc-butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil ]sulfamoil]-2-piridil]amino]etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (enantiomer 1) (30,4 mg, 0,04095 mmol) je dodat dihlorometan (3 mL) i trifluorosirć etna kiselina (126 mL2, 1. mmol). Reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi 30 min. Reakcija je uparena do suva i isprana zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom, osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i uparena da bi se dobio 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-[[6-[ 2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etil-amino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (enantiomer 1) (24 mg, 91%). ESI-MS m/z izrač.
641,2551, nađeno 642,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,76 min (LC metoda B).
Korak 4: 11-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-7,7-dimetil-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3. 1.15,8.09,14]tricoza-1(22),9,11,13,18,20-heksan-15,17,17-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 251)
[1060] U bočicu je dodat kalijum karbonat (35 mg, 0,2532 mmol), cezijum fluorid (12 mg, 0,07900 mmol), 3 A molekularna sita i rastvor 2-hloro-6-[3-(3,3-) diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-[[6-[2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (enantiomer 1) (24 mg , 0,03737 mmol) u dimetil sulfoksidu (1,5 mL). Reakcija je stavljena u uljno kupatilo na 150 °C i ostavljena da se meša preko noć i. Reakcija je ohlađena do sobne temperature, filtrirana i prečišć ena pomo ć u HPLC (10% - 99% gradijent acetonitril:voda sa 0,1% modifikatorom hlorovodonične kiseline) daju ć i 11-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-7,7-dimetil-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo [16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(22),9,11,13,18 ,20-heksan-15,17,17-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 251) (9,3 mg, 41%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksidd6) δ 12,45 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 33,0 Hz, 2H), 7,17 (s, 1H), 6,90 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,82 (s, 1H), 6,10 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,37 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,25 (s, 3H), 1,90 (k, J = 6,8 Hz, 4H), 1,56 (s, 6H), 1,49 (s, 2H), 0,68 (dtd, J = 13,4, 8,6, 5,0 Hz, 2H), 0,46 - 0,34 (m, 5H) , 0,30 (ddd, J = 15,8, 8,9, 6,7 Hz, 1H), 0,25-0,15 (m, 2H), 0,09-0,02 (m, 2H). Dva protona zamagljena rastvaračem. ESI-MS m/z izrač.605,27844, nađeno 606,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,3 min (LC metoda B).
Primer 78: Priprema (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-2,2-dideuterio-etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12 ,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen -2,2,4-trion (Jedinjenje 252)
[1061]
Korak 1: Dideuterio(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)metanol
[1062]
[1063] Rastvor etil dispiro [2.0.2.1] heptan-7-karboksilata (2,8 g, 16,84 mmol) u tetrahidrofuranu (35 mL) je hlađen u kupatilu sa ledom i vodom. Litijum aluminijum deuterid (678 mg, 16,14 mmol) je dodat u malim porcijama u roku od 3 min i reakciona smeša je mešana u atmosferi azota na temperaturi okoline 5 h. Reakcija je ohlađena u kupatilu led-voda i reakciona smeša je razblažena etrom (40 mL) i polako ugašena dodavanjem zasić enog vodenog rastvora Rochelle-ove soli (-30 mL) dok se slojevi jasno ne razdvoje. Donji vodeni sloj je ekstrahovan dietil etrom (2 X 30 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (30 mL), osušeni preko magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani da bi se dobio dideuterio (dispiro[2.0.2.1] heptan-7-il)metanol (2,5 g, 98%) kao svetlo žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 4,82 (bs, IH), 1,62 (s, 1 H), 0,87 (m, 4 H), 0,65-0,48 (m, 4 H).
Korak 2: 7-[bromo(dideuterio)metil]dispiro[2.0.2.1]heptan
[1065] U rastvor trifenilfosfina (5,3 g, 20,1 mmol) u dihlorometanu (74 mL) u atmosferi azota na -15 °C dodat je rastvor broma (1,1 mL, 21,3 mmol) u dihlorometanu (9 mL) tokom 15 min. Reakciona smeša je mešana dodatnih 15 min na -15 °C i zatim ohlađena na -30 °C. U kapima je dodat rastvor dideuterio(dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)metanola (2,5 g, 16,6 mmol) i piridina (1,65 mL, 20,5 mmol) u dihlorometanu (18 mL). Smeša je zagrejana na -5 °C i mešana 1 h i sipana u pentan (1 L). Formirani talog je filtriran i filtrat je koncentrovan. Pentan (300 mL) je dodat u ostatak i smeša je sonikirana i filtrirana. Filtrat je koncentrovan da bi se dobila bela čvrsta supstanca koja je ponovo tretirana pentanom (300 mL) i filtrirana. Filtrat je koncentrovan i ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem 0% - 5% dietil etra u pentanskom gradijentu. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane i koncentrovane na 300 mbar u vodenom kupatilu na 30 °C da bi se dobio 7-[bromo(dideuterio)metil]dispiro[2.0.2.1]heptan (2 g, 58%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (250MHz, hloroform-d) δ 1,88 (s, 1H), 0,8-1,0 (m, 4 H), 0,63-0,72 (m, 2H), 0,48-0,6 (m, 2H).
Korak 3: 2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-acetonitril
[1066]
[1067] U rastvor 7-[bromo(dideuterio)metil]dispiro[2.0.2.1]heptana (2,3 g, 22,02 mmol) u dimetil sulfoksidu (30 mL) dodat je natrijum cijanid (753 mg, 27,53 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Smeša je razblažena slanim rastvorom (40 mL) i ekstrahovana pentanom (2 X 50 mL). Kombinovani pentanski slojevi su osušeni preko magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani da bi se dobio 2,2-dideuterio-2-dispiro [2.0.2.1] heptan-7-il-acetonitril (1,8 g, 77%) kao bezbojno ulje.
<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 1,68 (s, 1H), 0,8-1,05 (m, 4 H), 0,65-0,8 (m, 2H), 0,54-0,62 (m, 2H).
Korak 4: 2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-sir ć etna kiselina
[1068]
[1069] 2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-acetonitril (7,7 g, 56,951 mmol) rastvoren je u CH3CvaterD (105 mL) na sobnoj temperaturi. Dodan je natrijum deuteroksid (52,2 g, 40% v/v, 509,23 mmol), a zatim CH3CvaterD (105 mL). Smeša je zagrevana na 72 °C u uljnom kupatilu u atmosferi azota (balon) tokom 16 h. Smeša je ohlađena u kupatilu sa ledom i vodom 15 min. Dodan je D20(-20 mL). Za ekstrakciju vodene smeše korišć en je etar (2 X 50 mL). Vodeni sloj je zadržan i tretiran hlorovodoničnom kiselinom (6 N) do pH ~ 2. Smeša je ekstrahovana sa etrom (3 X 50 mL). Kombinovani etarski slojevi su osušeni preko anhidrovanog magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani da bi se dobila 2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-ilsir ć etna kiselina (6 g, 65%) kao bleda žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 1,64 (s, 1H), 1,01 - 0,73 (m, 4H), 0,67 (ddd, J = 8,3, 4,9, 3,5 Hz, 2H), 0,58 - 0,2H (m).
Korak 5: 2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etanol
[1070]
[1071] Litijum aluminijum hidrid (2,84 g, 74,827 mmol) je izmeren u posudi sa okruglim dnom i ohlađen u kupatilu sa ledenom vodom u atmosferi azota (balon). Dodat je tetrahidrofuran (150 mL) i smeša je mešana na 0 °C 10 min. Zatim je u kapima dodavan rastvor 2,2-dideuterio-2-dispiro [2.0.2.1] heptan-7-il-sirć etne kiseline (8,1 g, 52,528 mmol) u tetrahidrofuranu (20 mL, 10 mL za ispiranje) tokom 20 minuta. Smeša je polako zagrejana do sobne temperature i mešana 15 h. Zatim je ohlađena u kupatilu sa ledenom vodom i polako ugašena rastvorom soli Rochelle. Dodat je etar (200 mL) i slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa još etra (2 X 150 mL). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani da bi se dobio 2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etanol (7,5 g, 89%) kao bledo žuto ulje.<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 3,62 (s, 2H), 1,69 (s, 1H), 0,73-1,0 (m, 4 H), 0,60-0,75 (m, 2H), 0,45-0,59 (m, 2H).
Korak 6: terc-butil 3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-karboksilat
[1072]
[1073] U rastvor terc-butil 5-okso-1H-pirazol-2-karboksilata (10,25 g, 55,65 mmol) i 2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il -etanol (8,193 g, 58,43 mmol) u tetrahidrofuranu (128,1 mL) je dodat trifenilfosfin (15,33 g, 58,45 mmol). U smešu je polako dodat diizopropil azodikarboksilat (11,82 g, 58,45 mmol) u kapima tokom 10 min. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Tetrahidrofuran je uklonjen pod sniženim pritiskom, a ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koristeć i plitki gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio terc-butil 3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1] ] heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-karboksilat (11,57 g, 68%) kao bistar sirup. ESI-MS m/z izrač. 306,19125, nađeno 307,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,8 min (LC metoda A).
Korak 7: 3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)-1H-pirazol
[1074]
terc-butil 3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-karboksilat (11,57 g, 37,76 mmol) rastvoren je u dihlorometanu (115,7 mL) sa trifluorosirć etnom kiselinom (43,64 mL, 566,4 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Rastvarač je uparen i dobijeno ulje je podeljeno između etil acetata i zasić enog rastvora natrijum bikarbonata. Vodeni deo je ekstrahovan još dva puta sa etil acetatom, zatim su organski slojevi kombinovani, isprani slanim rastvorom, osušeni iznad natrijum sulfata, filtrirani i upareni da bi se dobio 3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)-1H-pirazol (7,789 g, 100%) kao ulje. ESI-MS m/z izrač.206,13881, nađeno 207,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,59 min (LC metoda A).
Korak 8: terc-butil 2-hloro-6-[3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[1075]
terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (9,368 g, 37,76 mmol), 3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)-1H-pirazol ( 7,789 g, 37,76 mmol) i kalijum karbonata (6,268 g, 45,35 mmol) su kombinovani u anhidrovanom dimetil sulfoksidu (155,8 mL). 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (848 mg, 7.560 mmol) je dodat i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom 16 h. Reakciona smeša je razblažena vodom (300 mL) i mešana 15 min. Čvrsta supstanca se filtrira i ispere vodom. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu, osušena iznad magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il- etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (15,54 g, 98%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.417,17883, nađeno 418,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,97 min (LC metoda A).
Korak 9: 2-hloro-6-[3-(2,2-dideuterio-2-dispiro [2.0.2.1] heptan-7-il-etoksi) pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[1076]
terc-butil 2-hloro-6-[3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (15,54 g, 37,18 mmol) je rastvoreno u dihlorometanu (155,4 mL) sa trifluorosirć etnom kiselinom (42,97 mL, 557,7 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Rastvarač je uparen i u rezultujuć u čvrstu supstancu je dodat etar i etar je zatim uklonjen pod sniženim pritiskom. Ovo je ponovljeno još dva puta dajuć i belu čvrstu supstancu koja je rekristalizovana iz dihlorometana da bi se dobio čist proizvod kao čvrsta supstanca. Proizvod je ostao u filtratu koji je uparen dajuć i beličastu čvrstu supstancu, rastvoren je u etil acetatu i ispran sa 5N natrijum hidroksidom (2X), zatim 1N hlorovodoničnom kiselinom (1X), zatim osušen (natrijum sulfat), filtriran i koncentrovan do bele boje čvrste supstance koja je prečišć ena HPLC-MS metodom reverzne faze korišć enjem kolone Luna C18 (2) (75 X 30 mm, veličina čestica 5 mm) koju prodaje Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AKS) i ispitivanjem sa dvostrukim gradijentom od 20% - 80% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 mL i temperatura kolone = 25 ° C) davanje čistog materijala proizvoda koji je kombinovan sa prvobitno kristalizovanim materijalom da bi se dobio 2-hloro-6-[3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol- 1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (10,43 g, 78%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 361,1162, nađeno 362,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,78 min (LC metoda A).
Korak 10: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il -etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1077]
[1078] U rastvor 2-hloro-6-[3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-kar - boksilna kiselina (2 g, 5.528 mmol) u tetrahidrofuranu (13.66 mL) je dodat karbonil diimidazol (1.12 g, 6.907 mmol) (sveže rekristalizovan iz tetrahidrofurana) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Zatim je kao rastvor dodat terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (2,383 g, 5,776 mmol) u tetrahidrofuranu (5 mL), a zatim u 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (2,594 mL, 17,35 mmol) i dobijena smeša je mešana 3 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je razblažena vodom i etil acetatom, a zatim je hlorovodonična kiselina (6,178 mL 6 M, 37,07 mmol) dodata u vodeni sloj (pH = 1). Slojevi su razdvojeni i organski sloj je ispran vodom (1X) i slanim rastvorom (1X), zatim osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan do bele pene koja je prečišć ena na 275 g C18 kolone reverzne faze eluiranjem sa gradijentom od 50% - 100% acetonitril/voda da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (3,0854 g, 74%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.755.32007, nađeno 756.1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,93 min (LC metoda A).
Korak 11: 2-hloro-6-[3-(2,2-dideuterio-2-dispiro [2.0.2.1] heptan-7-il-etoksi) pirazol-1-il]-N-[[6-[3 -[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid
[1079]
terc-butil(4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (3,0854 g, 4,079 mmol) rastvoren je u dihlorometanu (13,46). mL) i dodata je trifluorosirć etna kiselina (12,57 mL, 163,2 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 90 min. Smeša je koncentrovana do suva pod sniženim pritiskom. Doda se toluen (50 mL) i smeša se upari rotacionim uparavanjem (45 °C vodeno kupatilo). Ponovo je dodat toluen (50 mL) i uklonjen rotacionim isparavanjem (45 °C vodeno kupatilo), a zatim osušen pod vakuumom dajuć i 2-hloro-6-[3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1] heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (3,142 g, 100%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 655,26764, nađeno 656,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,65 min (LC metoda A).
Korak 12: (14S)-8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-2,2-dideuterio-etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12 -dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2 ,2,4-tri-on (Jedinjenje 252)
[1081] U rastvor 2-hloro-6-[3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-il]-N-[[ 6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (3,142 g, 4,079 mmol) u NMP (188,5 mL) ) je dodat kalijum karbonat (3,946 g, 28,55 mmol). Smeša je propuhana azotom 5 min. Smeša je zagrevana na 150 °C tokom 24 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i dodata u vodu (~200 mL) dajuć i beličastu čvrstu supstancu. Smeša je pažljivo zakiseljena hlorovodoničnom kiselinom (6,798 mL 6 M, 40,79 mmol) dajuć i penušavu suspenziju. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom, a vlažno filtrirani kolač je rastvoren u etil acetatu i ispran slanim rastvorom (13) i malom količinom 6N hlorovodonične kiseline da bi se održala bistrina u slojevima. Organski sloj je osušen preko magnezijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod vakuumom dajuć i svetlo žuto ulje koje je hromatografisano na koloni reverzne faze od 275 g C18 eluiranjem sa 50% - 100% acetonitrilom/vodom da bi se dobilo (14S)-8-[3 -(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-2,2-dideuterioetoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 252 ) (2,16 g, 85%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,50 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,58 (dd, J = 8,5 , 7,2 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,98 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,08 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,20 (d, J = 1,4 Hz, 2H), 3,92 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 3,17 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 2,95 (d, J = 13,1 Hz, 1H), 2,69 (d, J = 13,8 Hz, 1H), 2,13 (s, 1H), 1,86 (dd, J = 11,6, 5,2 Hz, 1H), 1,77 ( s, 1H), 1,59 (d, J = 7,7 Hz, 6H), 1,51 (s, 3H), 1,46 (s, 1H), 1,38 - 1,24 (m, 1H), 0,83 (s, 4H), 0,69 - 0,60 (m, 2H), 0,55-0,44 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 619,29095, nađeno 620,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,37 min (LC metoda B).
Primer 79: Priprema (14S)-8-(3-{2-[(7-deuterio)dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il]etoksil-1H-pirazol-1-il)-12,12- dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2, 2,4-trion (Jedinjenje 253)
[1082]
Korak 1: Etil 7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-karboksilat
[1083]
[1084] Rastvor ciklopropilidenciklopropana (5,3 g, 66,1 mmol) u dihlorometanu (15 mL) je hlađen u kupatilu sa ledom i vodom. Dimer rodijum (II) acetata (600 mg, 5,2038 mmol) je dodat u jednoj porciji. Smeša je mešana u atmosferi azota na 0-5 °C tokom 5 min. Etil 2-deuterio-2-diazo-acetat (20 mL, 152 mmol), pripremljen prema JACS, 1993, 115, 2239, je zatim dodat pomoć u špriceve pumpe brzinom od 0,11 mL/h. Dodavanje je trajalo 26 h. Smeša je mešana još 10 min nakon što je dodavanje završeno. Smeša je koncentrovana do zapremine od 50 mL i filtrirana kroz podlogu od silika gela. Uložak je ispran dihlorometanom (200 mL) i kombinovani filtrat je koncentrovan do zapremine od 50 mL, ponovo je filtriran i ispran dihlorometanom (300 mL). Filtrat je koncentrovan da bi se dobio etil 7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-karboksilat (9 g, 66,25%) kao svetlo žuto ulje.<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 4,13 (k, J = 7,1 Hz, 2H), 1,39 - 1,14 (m, 4H), 1,11 - 0,92 (m, 3H), 0,91 - 0,67 (m, 4H).
Korak 2: (7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)metanol
[1085]
[1086] Rastvor etil 7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-karboksilata (9 g, 53,82 mmol) u tetrahidrofuranu (100 mL) je hlađen u kupatilu sa ledom i vodom. Litijum aluminijum hidrid (2,5 g, 65,78 mmol) je dodat u malim porcijama u roku od 5 min i smeša je mešana u atmosferi azota na sobnoj temperaturi 5 h. Reakcija je ohlađena u kupatilu led-voda 5 minuta, razblažena etrom (200 mL) i polako ugašena dodavanjem zasić enog vodenog rastvora Rochelle-ove soli (približno 30 mL) sve dok se slojevi jasno ne razdvoje. Vodeni sloj je ekstrahovan dietil etrom (2350 mL). Kombinovani etarski slojevi su isprani slanim rastvorom (50 mL), osušeni preko magnezijum sulfata i koncentrovani da bi se dobio (7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)metanol (4,7 g, 98%) kao svetlo žuto ulje.<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 3,72 (s, 2H), 1,00-0,75 (m, 4H), 0,74-0,44 (m, 4H).
Korak 3: 7-(bromometil)-7-deuterio-dispiro[2.0.2.1]heptan
[1087]
[1088] Rastvor trifenilfosfina (9,38 g, 35,65 mmol) u dihlorometanu (130 mL) u atmosferi azota je ohlađen na -15 °C korišć enjem kupatila sa suvim ledom i acetonom. Rastvor broma (1,85 mL, 35,65 mmol) u dihlorometanu (17 mL) je dodat tokom 15 min i reakciona smeša je mešana dodatnih 15 min na -15 °C. Smeša je ohlađena na -30 °C i rastvor (7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)metanola (4,5 g, 35,95 mmol) i piridina (2,9 mL, 36 mmol) u dihlorometanu (34 mL ) je dodavan kap po kap. Zatim je smeša zagrejana na -5 °C i mešana 1 h. Reakciona smeša je sipana u pentan (1 L) što je rezultiralo formiranjem belog taloga. Čvrsta supstanca je filtrirana preko celita i filtrat je koncentrovan (250 mbar sa vodenim kupatilom na približno 30 °C) da bi se dobila bela čvrsta supstanca. Dodat je pentan (300 mL) i smeša je sonikirana i filtrirana. Filtrat je koncentrovan da bi se dobila bela čvrsta supstanca koja je ponovo tretirana pentanom (300 mL) i filtrirana. Filtrat je koncentrovan i ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gel koloni koriš ć enjem 0% - 5% dietil etra u pentanu. Frakcije koje sadrže proizvod su koncentrovane na 300 mbar u vodenom kupatilu na 30 °C da bi se dobio 7-(bromometil)-7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan (6,4 g, 95%) kao bistro ulje.<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 3,49 (s, 2H), 1,42 - 1,17 (m, 2H), 1,12 -0,81 (m, 2H), 0,79 -0,64 (m, 2H), 0,62 - 0,42 (m, 2H), 2H).
Korak 4: 2-(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)acetonitril
[1089]
[1090] U rastvor 7-(bromometil)-7-deuterio-dispiro[2.0.2.1]heptana (2,3 g, 22,02 mmol) u dimetil sulfoksidu (30 mL) dodat je natrijum cijanid (753 mg, 27,53 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Smeša je razblažena slanim rastvorom (40 mL) i ekstrahovana pentanom (2350 mL). Kombinovani pentanski sloj je osušen preko magnezijum sulfata, filtriran i koncentrovan da bi se dobio 2-(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)acetonitril (4 g, 87%) kao bistro ulje.<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 2,42 (s, 2H), 1,04 - 0,79 (m, 4H), 0,79 - 0,65 (m, 2H), 0,65 - 0,44 (m, 2H).
Korak 5: 2-(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il) sir ć etna kiselina
[1091]
[1092] U rastvor 2-(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)acetonitrila (4 g, 29,8 mmol) u etanolu (60 mL) dodat je rastvor natrijum hidroksida (12 g, 300 mL). mmol) u vodi (25 mL) i dobijeni rastvor je mešan na 73 °C tokom 15 h. Smeša je ohlađena do sobne temperature, razblažena vodom (-40 mL) i ekstrahovana dietil etrom (2325 mL). Vodena faza je podešena na pH = 1 dodavanjem 6 M hlorovodonične kiseline i zatim ekstrahovana dietil etrom (2340 mL). Kombinovani etarski slojevi su osušeni preko magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani da bi se dobila 2-(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il) sirć etna kiselina (2,6 g, 57%) kao blago žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 2,44 (s, 2H), 1,03 - 0,73 (m, 4H), 0,75 - 0,61 (m, 2H), 0,59 - 0,38 (m, 2H).
Korak 6: 2-(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)etanol
[1093]
[1094] Suspenzija litijum aluminijum hidrida (836 mg, 22 mmol) u tetrahidrofuranu (35 mL) je hlađena u kupatilu sa ledom i vodom. 2-(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)sirć etna kiselina (2,59 g, 16,9 mmol) u tetrahidrofuranu (15 mL) je dodavana kap po kap tokom 10 min. Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana u atmosferi azota 15 h. Reakciona smeša je ohlađena u kupatilu led-voda 5 minuta, zatim razblažena dietil etrom (60 mL) i polako ugašena dodatkom zasić enog vodenog rastvora Rochelle-ove soli (-40 mL) sve dok slojevi nisu jasno razdvojeni. Donji vodeni sloj je ekstrahovan dietil etrom (2 X 50 mL). Kombinovani etarski slojevi su isprani slanim rastvorom (40 mL), osušeni preko magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani da bi se dobio 2-(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)etanol (2,4 g, kvantitativni prinos) kao svetlo žuto ulje.<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 3,63 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 1,68 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 0,94 - 0,72 (m, 4H), 0,72 - 0,57 (m, 2H), 0,57-0,38 (m, 2H).
Korak 7: terc-butil 3-[2-(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)etoksi]pirazol-1-karboksilat
[1095]
[1096] U rastvor terc-butil 5-okso-1H-pirazol-2-karboksilata (1,26 g, 6,84 mmol) i 2-(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)etanola ( 1 g, 6,48 mmol), trifenilfosfin (1,78 g, 6,8 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) je dodat diizopropil azodikarboksilat (1,34 mL, 7,18 mmol) u kapima i reakciona smeša je mešana na 120 °C tokom 50°C. Smeša je koncentrovana i ostatak je prečišć en hromatografijom na koloni silika gela koriste ć i gradijent od 100% heksana do 10% etil acetata u heksanu da bi se dobio terc-butil 3-[(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il )metoksi]pirazol-1-karboksilat (1,75 g, 80%) kao bela čvrsta supstanca.
<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 7,82 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 5,84 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,26 (s, 2H), 1,58 (s, 9H), 1,44 (d, J = 6,2 Hz, 2H), 0,93 - 0,73 (m, 4H), 0,65 (d, J = 9,2 Hz, 2H), 0,49 (d, J = 8,8 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač. 306,2, nađeno 307,3 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 4,85 min (LC metoda P).
Korak 8: 3-[2-(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)etoksi]-1H-pirazol
[1097]
[1098] U rastvor terc-butil 3-[(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)metoksi]pirazol-1-karboksilata (1,75 g, 5,72 mmol) u dihlorometanu (20 mL) je dodat trifluorosirć etne kiseline (10 mL) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Smeša je koncentrovana i ostatak je podeljen između etil acetata (50 mL) i zasić enog vodenog rastvora natrijum bikarbonata (25 mL). Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (2 X 25 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani da bi se dobio 3-[(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)metoksi]-1H-pirazol (1,2 g, kvantitativno prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 7,35 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 5,71 (d, J = 1,4 Hz, 1H), 4,12 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 1,87 (t , J = 6,7 Hz, 2H), 0,96-0,73 (m, 4H), 0,70-0,58 (m, 2H), 0,56-0,39 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 205,1, nađeno 206,4 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 2,95 min (LC metoda P).
Korak 9: terc-butil 2-hloro-6-[3-[2-(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[1099]
[1100] Za smešu terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilata (1,44 g, 5,8 mmol) i 3-[(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)metoksi]- 1H-pirazol (1.2 g, 3.93 mmol) u anhidrovanom dimetil sulfoksidu (24 mL) je dodat kalijum karbonat (965 mg, 6.97 mmol) i 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (130 mg, 1.16 mmol). Dobijena smeša je mešana u atmosferi azota na sobnoj temperaturi 16 h. Smeša je zatim razblažena vodom (45 mL) i mešana 15 min. Dobijena bela čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom i isprana vodom (2 3 20 mL). Čvrsta supstanca je osušena i prečišć ena hromatografijom na silika gel koloni koriš ć enjem gradijenta od 100% heksana do 60% etil acetata u heksanu da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[3-[(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan -7-il)metoksilpirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (1,8 g, kvantitativni prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 8,34 (dd, J = 2,9, 1,1 Hz, 1H), 8,18 (dd, J = 8,4, 1,1 Hz, 1H), 7,69 (dd, J = 8,4, 1,0 Hz, 1H), 5,93 (dd, J = 2,9, 1,1 Hz, 1H), 4,24 (s, 2H), 1,74-1,52 (m, 10H), 1,48 (s, 1H), 0,93-0,77 (m, 4H), 0,71 -0,60 (m, 2H), 0,55-0,44 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.416,2, nađeno 417,5 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 4,87 min (LC metoda P).
Korak 10: 2-hloro-6-[3-[2-(7-deuteriodispiro [2.0.2.1] heptan-7-il)etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[1102] U rastvor terc-butil 2-hloro-6-[3-[(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)metoksi]pirazol-1-il]piridin-dodata je 3-karboksilat (1.8 g, 4.32 mmol) u dihlorometanu (20 mL) trifluorosirć etna kiselina (5 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 h. Smeša je koncentrovana i ostatak je triturisan sa smešom dietil etar/pentan (20 mL svaki). Precipitirana čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom da bi se dobila 2-hloro-6-[3-[(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (1.19 g, 76% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (250 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,46 -8,34 (m, 2H), 7,72 (dd, J = 8,4, 0,8 Hz, 1H), 6,17 (dd, J = 2,9, 0,8 Hz, 1H), 4H (s, 2H), 1,46 (s, 2H), 0,92-0,74 (m, 4H), 0,64 (dd, J = 7,6, 4,3 Hz, 2H), 0,50 (dd, J = 7,1, 4,2 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač.361,1, nađeno 361,3 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 3,85 min (LC metoda P).
Korak 11: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1103]
[1104] U rastvor 2-hloro-6-[3-[2-(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (100 mg, 0.2772 mmol) u tetrahidrofuran (2 mL) dodat je karbonil diimidazol (54 mg, 0.3330 mmol) i smeša je mešana u atmosferi azota (balon) na sobnoj temperaturi 2 h. Zatim je dodat terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil] pirolidin-1-karboksilat (121 mg, 0,2933 mmol) fol- snižen sa 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-enom (130 mL, 0,8693 mmol) i reakcija je mešana 16 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa 1:1 zasić enim rastvorom amonijum hlorid/fiziološki rastvor. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni. Dobijeni smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu korišć enjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il)etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2, 2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (77 mg, 31%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 754,3138, nađeno 755,46 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,67 min (LC metoda G).
Korak 12: (14S)-8-(3-{2-[(7-deuterio)dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il]etoksil-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil- 2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2, 4-trion (Jedinjenje 253)
[1105]
[1106] Rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-(7-deuteriodispiro[2.0.2.1]heptan-7-il )etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (77 mg, 0,1019 mmol) u dihlorometanu (400 mL ) i trifluorosirć etna kiselina (100 mL, 1.307 mmol) je mešana na sobnoj temperaturi 4 h. Rastvarači su uklonjeni isparavanjem i dobijeni ostatak je rastvoren u etil acetatu. Opran sa 2 mL zasić enog rastvora natrijum bikarbonata i organski sloj je sakupljen i rastvarač uparen. Dobijena gusta ulje je dalje sušeno pod vakuumom. Dobijeni ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (5 mL) i dodata su 3 A molekularna sita i reakciona smeša je mešana 10 min. Zatim su dodati cezijum fluorid (49 mg, 0,3226 mmol) i kalijum karbonat (47 mg, 0,3401 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 150 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Vhatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišć en HPLC-MS metodom reverzne faze koriš ć enjem dvostrukog gradijenta od 50% -99% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilna faza A = voda (0,05% hlorovodonične kiseline), mobilna faza B = acetonitril) dajuć i (14S)-8-(3-{2-[(7-deuterio)dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il]etoksi}-1H- pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 253) (26,9 mg, 43%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,18 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,05 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,58 -7,47 (m, 2H), 7,26 (s, 1H), 6,56 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,89 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,71 (s, 1H), 4,24 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,85 (d, J = 37,1 Hz, 1H), 3,32 (s, 1H), 3,15 (d, J = 13,6 Hz, 1H), 3,02 (d, J = 27,8 Hz, 1H), 2,56 (s, 1H), 2,06 (t, J = 10,0 Hz, 1H), 1,89 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 1,74 - 1,37 (m, 10H), 0,85 (k, J = 2,4 Hz, 4H), 0,75 - 0,58 (m, 2H), 0,55-0,42 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.
618,2847, nađeno 619,15 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,96 min (LC metoda G).
Primer 80: Priprema (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20-hidroksi-12,12- dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heks-an-2,2 ,4-trion (Jedinjenje 254)
[1107]
Korak 1: 3-benziloksi-6-bromo-2-nitro-piridin [1108]
[1109] Rastvor 6-bromo-2-nitro-piridin-3-ola (12 g, 54,796 mmol) u suvom N,N-dimetilformamidu (100 mL) pod azotom je hlađen u kupatilu sa ledom i vodom. U jednoj porciji je dodat natrijum hidrid (2,49 g, 62,256 mmol, 60% u mineralnom ulju) i reakcija je mešana 10 min. Zatim je dodat benzil hlorid (7,5900 g, 6,9 mL, 59,961 mmol) i reakcija je ostavljena da se zagreje do sobne temperature. Reakcija je mešana na 60 °C dva dana. Reakcija je ostavljena je da se ohladi do sobne temperature, ugašena vodom (200 mL) i ekstrahovana etil acetatom (5 x 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (3 x 70 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je triturisan u smeši heptana/etil acetata 4:1 (50 mL). Dobijena čvrsta supstanca je filtrirana, isprana heptanima i osušena pod sniženim pritiskom da bi se dobio 3-benziloksi-6-bromo-2-nitro-piridin (13,643 g, 81%) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDC13) δ 5,23 (s, 2H), 7,33-7,43 (m, 6H), 7,60 (d, J = 8,7 Hz, 1H). ESI-MS m/z izrač. 307,9797, nađeno 309,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,155 min (LC metod I).
Korak 2: 2-etilheksil 3-[(5-benziloksi-6-nitro-2-piridil)sulfanil]propanoat
[1110]
[1111] U degazirani rastvor 3-benziloksi-6-bromo-2-nitro-piridina (13,143 g, 42,518 mmol) i diizopropiletilamina (11,130 g, 15 mL, 86,117 mmol) u suvom toluenu (26) je dodati ksanfos (1,49 g, 2,5751 mmol), tris(dibenzilideneaceton)dipaladijum(0) (1,155 g, 1,2613 mmol) i diizopropiletilamin (11,130 g, 15 mL, 86,117 mmol). Reakcija je opremljena refluks kondenzatorom i mešana preko noć i na 110 °C. Reakcija je ohlađena do sobne temperature, filtrirana i isprana etil acetatom. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu. Pratilac napunjen heptanom (gradijent od 100% heptana do 30% etil acetata u heptanu) da bi se dobio 2-etilheksil 3-[(5-benziloksi-6-nitro-2-piridil)sulfanil]propanoat (18,977 g, 95%). ESI-MS m/z izrač. 446,1875, nađeno 447,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,262 min (LC metod I).
Korak 3: 2-etilheksil 3-[(5-benziloksi-6-nitro-2-piridil)sulfonil]propanoat
[1112]
-hloroperbenzoeva kiselina (19,795 g, 88,326 mmol) je dodata u porcijama u rastvor 2-etilheksil 3-[(5-benziloksi-6-nitro-2-piridil)sulfanil]propanoata (19,65 g, 44,003 mmol) u dihlorometanu 170 mL). Reakcija je bila egzotermna i postala mutna. Reakcija je mešana preko noć i na sobnoj temperaturi. Dodat je etil acetat (200 mL) i reakcija je isprana uzastopno sa vodenim 5% rastvorom natrijum bikarbonata (200 mL) i 0,5 M vodenim rastvorom natrijum hidroksida (2 x 200 mL). Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio 2-etilheksil 3-[(5-benziloksi-6-nitro-2-piridil)sulfonil]propanoat (20,905 g, 99%) kao žuto ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDC13) δ 0,83-0,94 (m, 6H), 1,22-1,32 (m, 6H), 1,50-1,64 (m, 2H), 2,87 (t, J=7,6 Hz, 2H), 3,70 ( t, J=7,6 Hz, 2H), 4,01 (dd, J=6,0, 2,2 Hz, 2H), 5,37 (s, 2H), 7,35-7,48 (m, 5H), 7,69 (d, J=8,5 Hz, 1H ), 8,22 (d, J=8,5 Hz, IH). ESI-MS m/z izrač. 478,1774, nađeno 367,1 (M-C8H16+1)+; Vreme zadržavanja: 2,419 min (LC metod I).
Korak 4: 2-etilheksil 3-[(6-amino-5-benziloksi-2-piridil)sulfonil]propanoat
[1113]
[1114] U rastvor 2-etilheksil 3-[(5-benziloksi-6-nitro-2-piridil)sulfonil]propanoata (6,24 g, 13,039 mmol) u etanolu (250 mL) i vode (50 mL) je dodat gvožđe (2,525 g, 45,214 mmol) i amonijum hlorid (2,021 g, 37,782 mmol). Reakcija je mešana na 100 °C 1,5 h, ohlađena do sobne temperature, filtrirana preko celita i isprana dihlorometanom (200 mL). Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, razblažen u dihlorometanu (100 mL) i ispran vodom (2 x 50 mL). Organski sloj je osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio 2-etilheksil 3-[(6-amino-5-benziloksi-2-piridil)sulfonil]propanoat (6,25 g, kvantitativni prinos) kao žuti ulje. ESI-MS m/z izrač. 448,2032, nađeno 449,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,565 min (LC metoda N).
Korak 5: 2-etilheksil 3-[(5-benziloksi-6-fluoro-2-piridil)sulfonil]propanoat
[1115]
[1116] Rastvor 2-etilheksil 3-[(6-amino-5-benziloksi-2-piridil)sulfonil]propanoata (6,25 g, 13,933 mmol) u vodonik-fluoridu u piridinu (71,500 g, 65 mL, 721. mmol) je ohlađen na -40 °C. Dobijeni crveni rastvor je tretiran natrijum nitritom (1,92 g, 27,828 mmol) i ostavljen da se zagreje do sobne temperature. Primeć eno je oslobađanje gasa i reakcija je postala narandžasta i zamuć ena. Reakcija je mešana preko no ć i na sobnoj temperaturi i polako sipana preko leda i vode (400 mL). Smeša je neutralizovana pažljivim dodavanjem vodenog rastvora natrijum bikarbonata i ekstrahovana etil acetatom (4 x 150 mL). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu napunjenom heptanom (gradijent od 100% heptana do 40% etil acetata u heptanu) da bi se dobio 2-etilheksil 3-[(5-benziloksi-6-fluoro-2-piridil)sulfonil. ]propanoat (3,691 g, 59%) kao žuto ulje. ESI-MS m/z izrač.451,1829, nađeno 452,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,648 min (LC metod O).
Korak 6: 5-benziloksi-6-fluoro-piridin-2-sulfonamid
[1117]
[1118] U rastvor 2-etilheksil 3-[(5-benziloksi-6-fluoro-2-piridil)sulfonil]propanoata (3,09 g, 6,8431 mmol) u dimetilsulfoksidu (19 mL) dodat je 1,8-diazabiciklo( 5.4.0)undec-7-en (2,0200 g, 2 mL, 13,269 mmol). Reakcija je mešana 1 h na sobnoj temperaturi i dodat je rastvor hidroksilamin-O-sulfonske kiseline (3,873 g, 34,246 mmol) i natrijum acetata (2,246 g, 27,379 mmol) u vodi (12 mL). Reakcija je mešana 1 h na sobnoj temperaturi, razblažena vodom (50 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3 X 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (30 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu napunjenom heptanom (heptan/etil acetat 100:0 do 50:50 gradijent) da bi se dobio 5-benziloksi-6-fluoro-piridin-2-sulfonamid (1,58 g, 80%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 5,33 (s, 2H), 7,34-7,52 (m, 7H), 7,79-7,95 (m, 2H).19F NMR (282 MHz, dimetil sulfoksid-d6) 5 -83,6 (d, J=12,2 Hz, IF). ESI-MS m/z izrač. 282,0474, nađeno 283,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,33 min (LC metoda H).
Korak 7: terc-butil (4S)-4-[3-[(3-benziloksi-6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1119]
[1120] U mešani rastvor terc-butil (4S)-4-(3-aminopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata (200 mg, 0,7801 mmol) u anhidrovanom dimetil sulfoksidu (2,5 mL) je dodao 5-benziloksi-6-fluoro-piridin-2-sulfonamid (221 mg, 0,7829 mmol) i N,N-diizopropiletilamin (200 mL, 1,148 mmol), tim redosledom, pod azotom. Dobijeni žuti rastvor je mešan na 85 °C tokom 9 h, zatim na 40 °C tokom 13 h. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature, razblažena etil acetatom (60 mL) i dodata je voda (50 mL). Rastvor je zatim zakiseljen sa 10% limunske kiseline (10 mL) i slojevi su razdvojeni. Organska faza je isprana slanim rastvorom (20 mL), osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom dajuć i žuti viskozni materijal. Sirova reakciona smeša je prečiš ć ena hromatografijom na silika gelu (40 g silika gela, eluiranjem sa gradijentom od 10-60% etil acetata u heksanu tokom 30 min) da bi se dobio željeni terc-butil (4S)-4-[3-[ (3-benziloksi-6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (370 mg, 91%) kao bela pena. ESI-MS m/z izrač.
518,2563, nađeno 519,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,75 min (LC metoda B).
Korak 8: terc-butil (4S)-4-[3-[[3-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol -1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1121]
[1122] U mešani rastvor 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (150 mg, 0,4169 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (3 mL) dodat je karbonil diimidazol (75 mg, 0,4625 mmol) i mešanje je nastavljeno na temperaturi sredine pod azotom tokom 2 h. Za reakciju, rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[(3-benziloksi-6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata (dodato je 196 mg, 0,3779 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (1 mL), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (220 mL, 1,471 mmol) i smeša je mešana na temperaturi okoline. za 15 h. Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom, a ostatak je stavljen u etil acetat (20 mL) i vodu (10 mL) i smeša je polako zakiseljena hlorovodoničnom kiselinom (1,6 mL od 1,0 M, 1,600 mmol) do oko pH = 4,0 . Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (10 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom (15 mL), osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišć en hromatografijom na silika gelu (24g kolona silika gela, gradijent 0-70% etil acetata u heksanu tokom 35 minuta) da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[3-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]-2-piridil]amino]propil ]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (171 mg, 37%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 859,34937, nađeno 860,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,49 min (LC metoda G).
Korak 9: N-[[5-benziloksi-6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilaminol-2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3-( 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so)
[1123]
[1124] U mešani rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[3-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan- 7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (75 mg, 0,08716 mmol) u anhidrovanom metilen hloridu (3 mL) je dodata trifluorosirć etna kiselina (350 mL, 4.543 mmol) na sobnoj temperaturi pod azotom. Narandžasti rastvor je mešan 1 h, a zatim su isparljive materije uklonjene pod sniženim pritiskom. Ostatku je dodat toluen (20 mL) i koncentrovan pod sniženim pritiskom do suva. Proces je ponovljen još jednom da bi se uklonio ostatak trifluorosirć etne kiseline i konačno sušen pod vakuumom 2 h da bi se dobio sirovi N-[[5-benziloksi-6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi) pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (66 mg, 87%). Materijal je odveden direktno u sledeć i korak bez daljeg prečiš ć avanja. ESI-MS m/z izrač.
759,29694, nađeno 760,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,43 min (LC metoda B).
Korak 10: (14S)-20-(benziloksi)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12- dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4 -trione
[1125]
[1126] Bočica od 20 mL je napunjena sa N-[[5-benziloksi-6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoracetatna so) (60 mg, 0,06862 mmol), kalijum karbonat ( 60 mg, 0,4341 mmol), cezijum fluorida (21 mg, 0,1382 mmol) i anhidrovanog dimetil sulfoksida (4 mL), tim redosledom. Bočica je isprana strujom azota tokom 2 min, zatvorena i mešana na 160 °C tokom 15 h. Reakcija je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i heterogena smeša je razblažena etil acetatom (30 mL) i vodom (20 mL) i zakiseljena hlorovodoničnom kiselinom (1,0 mL od 1,0 M, 1,000 mmol). Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan sa dodatnim etilacetatom (20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i upareni pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišć en hromatografijom na silika gelu (0% - 10% metanola u dihlorometanu tokom 30 min) dajuć i (14S)-20-(benziloksi)-8-[3-(2-[dispiro[2.0.2.1]heptan- 7-il]etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (41 mg, 83%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 723,3203, nađeno 724,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,27 min (LC metoda G).
Korak 11: (14S)-8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20-hidroksi-12,12-dimetil- 2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 254)
[1127]
[1128] U mešani rastvor (14S)-20-(benziloksi)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il] - 12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen- 2,2,4-trion (30 mg, 0,04144 mmol) u anhidrovanom metanolu (6 mL) je dodat 10% Pd na ugljeniku (vlažan, Degussa) (16 mg, 0,01503 mmol) pod azotom. Heterogena smeša je mešana u atmosferi vodonika (sa balona) 2,5 h na sobnoj temperaturi. Balon vodonika je uklonjen i boca je pročišć ena azotom i crna heterogena reakciona smeša je filtrirana preko sloja celita. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (1,5 mL) i filtriran kroz Vhatman 0,45 mm PTFE filter za špric. Uzorak je prečišć en upotrebom preparativne HPLC-MS reverzne faze [Luna C18 (2) kolona (75 3 30 mm, veličina čestica 5 mm) koju je prodao Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX), (dvostruki gradijent od 30% - 99% acetonitrila u vodi tokom 15 min (bez modifikatora)] dajuć i (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20-hidroksi-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111, 14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9 ,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 254) (20 mg, 75%) kao bledo plavo-zelena čvrsta supstanca<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,24 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 7,8 Hz , 1H), 5,94 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,24 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 4,04 (t, J = 13,2 Hz, 1H), 3,37 - 3,32 (m, 1H), 3,14 (dt, J = 13,6, 4,4 Hz, 1H), 2,86 (t, J = 10,4 Hz, 1H), 2,30 - 2,13 (m, 1H), 1,88 (k, J = 6,7 Hz, 4H), 1,78 - 1,66 ( m, 2H), 1,66 (s, 3H), 1,63 - 1,60 (m, 1H), 1,60 (s, 3H), 1,48 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 1,44 - 1,33 (m, 1H), 0,92 -0,78 (m, 4H), 0,66 (ddd, J = 8,7, 4,6, 3,3 Hz, 2H), 0,56 - 0,47 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.633,2733, nađeno 634,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,9 min (LC metoda G).
Primer 81: Priprema (14S)-20-hidroksi-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 255)
Korak 1: terc-butil (4S)-4-[3-[[3-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil) ciklopropil]propoksi]pirazol-1 -il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1130]
[1131] U mešani rastvor 2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (150 mg, 0,3849 mmol ) u anhidrovani tetrahidrofuran (3 mL) dodat je karbonil diimidazol (68 mg, 0,4194 mmol) i mešanje je nastavljeno na temperaturi okoline pod azotom tokom 2 h. Za tu reakciju, rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[(3-benziloksi-6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata ( Dodato je 180 mg, 0,3470 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (1 mL), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (200 mL, 1,337 mmol) i smeša je mešana na temperaturi okoline 15 h. Isparljive supstance su uklonjene pod sniženim pritiskom, a ostatak je stavljen u etil acetat (20 mL) i vodu (10 mL) i smeša je polako zakiseljena hlorovodoničnom kiselinom (1,5 mL od 1,0 M, 1,500 mmol) do oko pH = 4,0 . Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (10 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom (15 mL), osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišć en hromatografijom na silika gelu (0% - 70% gradijent etil acetata u heksanu tokom 35 minuta) da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[3-benziloksi-6-[[2]-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksilpirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin -1-karboksilat (170 mg, 22%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 889,3211, nađeno 890,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,32 min (LC metoda G).
Korak 2: N-[[5-benziloksi-6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3- [3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so)
[1132]
[1133] U mešani rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[3-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] pro-poksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (80 mg, 0,08985 mmol) u anhidrovanom metilen hloridu (2.0 mL) je dodata trifluorosirć etna kiselina (350 mL, 4.543 mmol) na sobnoj temperaturi pod azotom. Narandžasti rastvor je mešan 1 h, a zatim su isparljive materije uklonjene pod sniženim pritiskom. Ostatku je dodat toluen (20 mL) i zatim koncentrovan pod sniženim pritiskom do suva. Proces je ponovljen još jednom da bi se uklonio ostatak trifluorosirć etne kiseline i konačno sušen u vakuumu 2 h da bi se dobio sirovi N-[[5-benziloksi-6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilaminol-2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil) iklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) ( 81 mg, 100%). Materijal je odveden direktno u sledeć i korak bez ikakvog prečiš ć avanja. ESI-MS m/z izrač. 789,2687, nađeno 790,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,9 min (LC metoda B).
Korak 3: (14S)-20-(benziloksi)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion
[1134]
[1135] Bočica od 20 mL je napunjena sa N-[[5-benziloksi-6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propilamino]-2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklo propil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (80 mg, 0,08846 mmol), kalijum karbonat (75 mg, 0,5427 mmol ), cezijum fluorida (27 mg, 0,1777 mmol) i anhidrovanog dimetil sulfoksida (5 mL), tim redosledom. Bočica je ispuhana strujom azota tokom 2 minuta i zatvorena je i mešana na 160 °C tokom 15 h. Reakcija je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i heterogena smeša je razblažena etil acetatom (30 mL) i vodom (20 mL) i zakiseljena hlorovodoničnom kiselinom (1,5 mL od 1,0 M, 1,500 mmol). Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i upareni pod sniženim pritiskom. Sirovi ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu (0% - 10% metanola u gradijentu dihlorometana tokom 30 minuta) dajuć i (14S)-20-(benziloksi)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1 -(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (55 mg, 82%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 753,29205, nađeno 754,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,11 min (LC metoda G).
Korak 4: (14S)-20-hidroksi-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-tri-on (Jedinjenje 255)
[1136]
[1137] U mešani rastvor (14S)-20-(benziloksi)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heks-aen- 2,2,4-trion (42 mg, 0.05572 mmol) u anhidrovanom metanolu (5 mL) je dodat 10% Pd na ugljeniku (vlažan, Degussa) (8 mg, 0.007517 mmol) pod azotom. Heterogena smeša je mešana pod vodonikom (sa balona) 2,5 h na sobnoj temperaturi. Balon vodonika je uklonjen i boca je pročišć ena azotom i crna heterogena reakciona smeša je filtrirana preko sloja celita. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (1,5 mL) i filtriran kroz Vhatman 0,45 mm PTFE filter za špric. Uzorak je prečišć en upotrebom preparativne HPLC-MS reverzne faze [Luna C18 (2) kolona (75330 mm, veličina čestica 5 mm) koju je prodao Phenomenek (pn: 00C-4252-U0-AKS), (dvostruki gradijent od 30% - 99% acetonitrila u vodi tokom 15 minuta (bez modifikatora)] dajuć i (14S)-20-hidroksi-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}- 1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9, 19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 255) (27 mg, 72%) kao bledo plavo-zelena čvrsta supstanca<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,25 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,98 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 7,8 Hz , 1H), 5,97 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,24 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 4,03 (t, J = 12,8 Hz, 1H), 3,42 - 3,32 (m, 1H), 3,14 (dt, J = 13,9, 4,4 Hz, 1H), 2,85 (s, 1H), 2,32-2,09 (m, 1H), 1,99-1,83 (m, 4H), 1,80-1,74 (m, 2H), 1,76-1,74-1 (m, 2H), 1,66 (s, 3H), 1,63 - 1,60 (m, 1H), 1,59 (s, 3H), 1,40 (dd, J = 13,3, 10,1 Hz, 1H), 0,98 - 0,92 (m, 2H), 0,69 (ddd, J = 6,0, 4,2, 3,0 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač. 663,24506, nađeno 664,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,7 min (LC metoda G).
Primer 82: Priprema (14S)-8-(3-hidroksi-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaaza-tetraciklo[17.3 .
1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 256)
[1138]
Korak 1: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il] piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1139]
[1140] 2-hloro-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (200 mg, 0,5717 mmol) i karbonil diimidazol (116 mg, 0,7154 mmol) (sveže rekristalizovano iz tetrahidrofurana, isprano hladnim etrom i osušeno na visokom vakuumu) spojeno je u tetrahidrofuranu (2 mL) i mešano 2 h na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (275 mg, 0,6666 mmol), a zatim 1 ,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (500 mL, 3,343 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 14 h. Reakciona smeša je ugašena zasić enim amonijum hloridom i ekstrahovana etil acetatom. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (magnezijum sulfat), filtriran i koncentrovan. Dobijeni smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na koloni silika gela koristeć i plitki gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio terc-butil(4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1 -karboksilat (172 mg, 40%) kao sivobela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 743,3232, nađeno 744,45 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,97 min (LC metoda A).
Korak 2: (14S)-8-(3-hidroksi-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111 ,
14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 256)
[1141]
[1142] Rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1 -il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (172 mg, 0,2311 mmol) u dihlorometanu (1,5 mL) i trifluorosirć etnoj kiselini (500 mL, 6.534 mmol) je mešana na sobnoj temperaturi 4 h. Rastvarači su uklonjeni i ostatak je rastvoren u etil acetatu. Opran sa 2 mL zasić enog vodenog rastvora natrijum bikarbonata i organski sloj je sakupljen i rastvarač uklonjen u vakuumu. Ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (10 mL) i dodata su molekularna sita od 3 A i reakciona smeša je mešana 10 min. Zatim su dodati cezijum fluorid (115 mg, 0,7571 mmol) i kalijum karbonat (107 mg, 0,7742 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 150 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i filtrirana kroz celit i filtratu je dodat zasić eni rastvor amonijum hlorida. Smeša je ekstrahovana etil acetatom, organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Dobijeni smeđi ostatak je prečišć en metodom HPLC-MS reverzne faze koristeć i Luna C18 (2) kolonu (75 3 30 mm, veličina čestica 5 mm) koju prodaje Phenomenek (pn: 00C-4252-U0-AKS) i dvostruku gradijent od 30% - 99% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril Brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 mL i temperatura kolone = 25 °C) da bi se dobio (14S)-8-(3-hidroksi-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9, 19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 256) (19,5 mg, 17%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,58 (s, 1H), 10,63 (s, 1H), 8,22 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,65 (s, 1H), 7,13 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,79 (s, 1H), 6,00 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,02 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 3,27 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 3,04 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 2,90 - 2,73 (m, 0H), 2,18 (d, J = 4,1 Hz, 1H), 1,95 (dd, J = 11,7, 5,2 Hz, 1H), 1,86 (s, 0H), 1,70 (s, 3H), 1,66 (d, J = 13,3 Hz, 5H), 1,61 (s , 3H), 1,49-1,36 (m, IH). ESI-MS m/z izrač. 497,1845, nađeno 498,33 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,47 min (LC metoda B).
Primer 83: Priprema (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-2-hidroksietoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22), 5,7,9,19(23),20-heksan-2,2 ,4-trion (Jedinjenje 257)
[1143]
Korak 1: terc-butil 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-okso-etoksi)pirazol-1-karboksilat
[1144]
[1145] Rastvor n-BuLi (16 mL 2,5 M u heksanu, 40 000 mmol) je dodat u tetrahidrofuran (50 mL) rastvor diizopropil amina (4,0432 g, 5,6 mL, 39,957 mmol) koji je prethodno uparen u -39,957 mmol. °C (boca 1). Smeša je mešana 20 min u kupatilu sa ledom i vodom pre nego što je ohlađena na -78 °C. U posebnoj posudi, etil dispiro[2.0.2.1]heptan-7-karboksilat (1,66 g, 9,9869 mmol) je rastvoren u 100 mL tetrahidrofurana. Dodat je hloro(jodo)metan (8,8112 g, 3,7 mL, 48,956 mmol) i rastvor je ohlađen na -78 °C pod balonom sa azotom (boca 2). Sadržaj balone 1 je prebačen preko kanile u roku od -15 min (veoma brzo kap po kap) u balon 2. Dobijena smeša je dalje mešana na -78 °C tokom 1 h. Ukapavanjem je dodata smeša sirć etne kiseline/tetrahidrofurana (15 mL/15 mL). Kupatilo sa suvim ledom je uklonjeno i smeša je ostavljena da se zagreje do ~ 0 °C. Zatim je podeljen između vode i etil acetata. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj još jednom ispran etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani. Ostatak je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (15 mL) na sobnoj temperaturi. Dodat je terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilat (810 mg, 4,3976 mmol), a zatim kalijum karbonat (1,25 g, 9,0445 mmol) i kalijum jodid (62 mg, 0,3735 mmol). Smeša je mešana na 60 °C tokom 48 h. Zatim je ohlađena do sobne temperature i razblažena etil acetatom/vodom (30 mL svaki). Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan još jednom etil acetatom (20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (20 mL), slanim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovani. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koristeć i gradijent od 5% do 40% etil acetata u heksanu. Dobijen je željeni proizvod (manje polarni izomer), terc-butil 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-okso-etoksi)pirazol-1-karboksilat (620 mg, 47%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 7,85 (s, 1H), 5,96 (s, 1H), 4,95 (s, 2H), 2,62 (s, 1H), 1,60 (s, 1H), 1,34 - 1,16 (m , 2H), 1,14 - 0,63 (m, 6H).ESI-MS m/z izrač. 318.158, nađeno 319.5 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 3,59 min (LC metoda P).
Korak 2: terc-butil 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-hidroksi-etoksi)pirazol-1-karboksilat
[1146]
terc-butil 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-okso-etoksi)pirazol-1-karboksilat (620 mg, 1,7527 mmol) rastvoren je u etanolu (10 mL) i smeša je ohlađen u kupatilu sa ledenom vodom. Dodan je natrijum borohidrid (66,309 mg, 0,0702 mL, 1,7176 mmol). Posle 5 min, dodat je metanol (0,5 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Zatim je ugašena zasić enim vodenim rastvorom amonijum hlorida i podeljena između etil acetata i vode (po 20 mL). Slojevi su razdvojeni i organski sloj je filtriran kroz anhidrovani sloj natrijum sulfata i koncentrovan. Sirovi materijal je korišć en u slede ć em koraku bez daljeg prečiš ć avanja, terc-butil 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-hidroksi-etoksi)pirazol-1-karboksilat (600 mg, 91%). ESI-MS m/z izrač. 320,1736, nađeno 321,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,44 min (LC metoda P).
Korak 3: terc-butil-[1-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-(1H-pirazol-3-iloksi)etoksi]-dimetil-silan
[1147]
terc-butil 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-hidroksi-etoksi)pirazol-1-karboksilat (300 mg, 0,8896 mmol) rastvoren je u dihlorometanu (10 mL) i smeša je mešana u kupatilu sa ledom i vodom pod balonom sa azotom. Dodan je 2,6-Lutidin (686,96 mg, 0,75 mL, 6,3469 mmol), a zatim TBDMSOTf (1,2408 g, 1,1 mL, 4,6001 mmol). Smeša je mešana 30 min. Dodato je još 2,6-lutidina (551 mg, 0,6 mL, 5 mmol), a zatim TBDMSOTf (1,2408 g, 1,1 mL, 4,6001 mmol). Smeša je mešana 12 h. Zatim je razblažen dihlorometanom (40 mL) i tretiran zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (30 mL). Slojevi su razdvojeni i dihlorometanski sloj je osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koristeć i gradijent od 0% do 30% etil acetata u heksanu da bi se dobio terc-butil-[1-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-(1H-pirazol-3-). iloksi)etoksi]-dimetil-silan (300 mg, 81%) kao bezbojno ulje. ESI-MS m/z izrač.
334,2077, nađeno 335,6 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 4,55 min (LC metoda P).
Korak 4: terc-butil 6-[3-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi]pirazol-1-il]-2- hloro-piridin-3-karboksilat
[1148]
terc-butil-[1-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-(1H-pirazol-3-iloksi)etoksi]-dimetil-silan (300 mg, 0,8071 mmol) rastvoren je u dimetil sulfoksidu (8 mL) na sobnoj temperaturi. Dodat je terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (210 mg, 0,8464 mmol), a zatim kalijum karbonat (138 mg, 0,9985 mmol) i 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (18 mg, 0,16 mg, 0,16). mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 24 h. Dodat je etil acetat (-25 mL), a zatim voda (-20 mL). Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan još jednom (-20 mL) sa etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su koncentrovani, a ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu, koristeć i gradijent od 0% - 10% etil acetata u heksanu da bi se dobio terc-butil 6-[3-[2-[tercbutil(dimetil)silil]oksi -2-dispiro[2.0.2.1]hep-tan-7-il-etoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilat (490 mg, 100%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 8,35 (dd, J= 2,8, 0,9 Hz, 1H), 8,19 (dd, J = 8,4, 0,9 Hz, 1H), 7,68 (dd, J = 8,4, 0,9 Hz, 1H), 5,93 (dd, J= 2,9, 0,9 Hz, 1H), 4,17 (dd, J = 5,5, 0,9 Hz, 2H), 4,01 - 3,80 (m, 1H), 1,78 - 1,43 (m, 13H) , 1,38-1,16 (m, 4H), 1,15-0,45 (m, 22H), 0,20-0,01 (m, 6H).
Korak 5: 6-[3-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-pirid - ine-3-karboksilna kiselina
[1149]
terc-butil 6-[3-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin -3-karboksilat (200 mg, 0,3296 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (4 mL) i ohlađen u kupatilu sa ledom i vodom. Dodan je trietilamin (200,11 mg, 0,2756 mL, 1,9776 mmol), a zatim TBDMSOTf (609,88 mg, 2,3072 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 h i razblažena dihlorometanom (10 mL). Dodata je voda (-10 mL) i slojevi su razdvojeni. Dihlorometanski sloj je koncentrovan, a ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu, koriste ć i gradijent 0% - 10% metanol/dihlorometan, da bi se dobio 6-[3-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-2- dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilna kiselina (50 mg, 22%).
<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 8,49 - 8,17 (m, 2H), 7,70 (d, J= 8,4 Hz, 1H), 5,94 (d, J=2,9 Hz, 1H), 4,16 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 3,89 (dt, J = 8,6, 5,4 Hz, 1H), 1,65 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 1,12 - 0,41 (m, 19H), 0,06 (d, J = 2,2 Hz, 6H). ESI-MS m/z izrač.
489,1851, nađeno 490,7 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 4,53 min (LC metoda P).
Korak 6: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[6-[3-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-2-dispiro[2.0.2.1]heptan- 7-il-etoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1151] 6-[3-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin -3-karboksilna kiselina (750 mg, 1,5304 mmol) rastvorena je u tetrahidrofuranu (5 mL) na sobnoj temperaturi pod balonom sa azotom. Dodat karbonil diimidazol (345 mg, 2,0851 mmol) u jednoj porciji. Reakcija je mešana 4 h. U posebnoj posudi je izmeren terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (695 mg, 1,6847 mmol) i dodat je tetrahidrofuran (5 mL), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (249,90 mg, 0,25 mL, 1,6087 mmol). Smeša aktivirane kiseline je zatim preko pipete preneta u rastvor 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-ena. Dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 14 h. Smeša je zatim koncentrovana, stavljena u etil acetat (-30 mL) i isprana slanim rastvorom. Organska frakcija je osušena (natrijum sulfat), filtrirana i koncentrovana. Prečišć en hromatografijom na silika gelu korišć enjem gradijenta od 25% - 80% etil acetata u heksanima dajuć i terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[6-[3-[2-[tert-butil( dimetil)silil]oksi-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino] propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (500 mg, 35%) kao ulje. ESI-MS m/z izrač. 883,3889, nađeno 884,8 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 5,39 min (LC metoda P).
Korak 7: 6-[3-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-N -[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid
[1152]
terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[6-[3-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il -etoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (500 mg, 0,5370 mmol) rastvoren u dihlorometanu (15 mL) i ohlađen u kupatilu sa ledom i vodom. Dodat je trietilamin (232,32 mg, 0,3200 mL, 2,2500 mmol), a zatim je dodat TBDMSOTf (1,1510 g, 1,0000 mL, 4,2672 mmol) ukapavanjem. Smeša je zatim mešana na sobnoj temperaturi 15 h i zatim razblažena dihlorometanom (~ 20 mL) i ugašena zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (20 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu, korišć enjem gradijenta 0% - 5% metanola u dihlorometanu da bi se dobio 6-[3-[2-[tercbutil(dimetil)silil]oksi-2-dispiro[2.0.2.1]heptan -7-il-etoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil ]piridin-3-karboksamid (310 mg, 70%). ESI-MS m/z izrač.783,3365, nađeno 785,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,29 min (LC metoda P).
Korak 8: (14S)-8-(3-{2-[(terc-butildimetilsilil)oksi]-2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi}-1H-pirazol-1-il) - 12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heks- aen-2,2,4-trion
[1153]
[1154] 6-[3-[2-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-N -[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (310 mg, 0,3952 mmol) je rastvoren u dimetilu. sulfoksid (40 mL). Dodat je kalijum karbonat (329 mg, 2,3805 mmol), a zatim molekularna sita (0,3952 mmol). Smeša je degazirana i zaštić ena pod balonom azota. Zatim je zagrevan u uljnom kupatilu na 140 °C tokom 12 h. Posle hlađenja do sobne temperature, smeša je razblažena slanim rastvorom (20 mL) i ekstrahovana dihlorometanom (2 X 20 mL). Rastvarač je uklonjen i ostatak je prečišć en kratkim slojem silika gela eluiranjem etil acetatom da bi se dobio (14S)-8-(3-{2-[(tercbutildimetilsilil)oksi]-2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi}-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heks-en-2,2,4-trion (170 mg, 55%) (170 mg, 55%).<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,67 - 7,42 (m, 2H), 7,33 -7,19 (s, 1H), 6,57 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 5,90 (d, 1H), 4,69 (s, 1H), 4,17 (d, J = 5,4 Hz, 2H), 4,02 - 3,73 (m, 2H), 3,54 -2,88 (m, 3H), 2,61 (m, 1H), 2,05 (m, 1H), 1,77 -1,40 (m, 8H), 1,26 (s, 6H), 1,11 - 0,45 (m, 17H), 0,08 ( 2s, 6H). ESI-MS m/z izrač. 747,3598, nađeno 748,8 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 4,9 min (LC metoda P).
Korak 9: (14S)-8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-2-hidroksietoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6 -tia- 3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4 -trion (Jedinjenje 257)
[1155]
[1156] (14S)-8-(3-{2-[(terc-butildimetilsilil)oksi]-2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi}-1H-pirazol-1-il) -12,12- dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen- 2,2,4-tri-on (170 mg, 0,2273 mmol) je rastvoren u tetrahidrofuranu (5 mL) u plastičnoj boci i ohlađen u kupatilu sa ledenom vodom. Dodato je 70% v/v vodonikfluorid-piridin (0,5 mL). Smeša je mešana 10 min na sobnoj temperaturi i ponovo ohlađena u kupatilu sa ledenom vodom. Dodat je još jedan deo 70% v/v vodonik-fluorid-piridin (-0,5 mL) i smeša je mešana 10 min sa uklonjenim kupatilom sa ledenom vodom. Dodata je treć a porcija 70% v/v piridina fluorovodonika (~ 0,5 mL) i smeša je mešana 10 min. Zatim je razblažen etil acetatom (30 mL) i slanim rastvorom (20 mL). Slojevi su razdvojeni i organski slojevi su koncentrovani pod vakuumom. Videlo se da se beli talog približava kraju uklanjanja rastvarača. Ostatak je tretiran smešom etil acetata i vode (30 mL svaki) i ostavljen da stoji na sobnoj temperaturi oko 2 h. Slojevi su razdvojeni i organski sloj je koncentrovan, a ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu korišć enjem 0% - 5% metanola u dihlorometanu gradijentom da bi se dobio (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1)]heptan-7-il}-2-hidroksietoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion(Jedinjenje 257) (63 mg, 44%).<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,03 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,65 - 7,36 (m, 2H), 7,18 (d, J = 8,3 Hz , 1H), 6,55 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,94 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,71 (s, IH), 4,38 - 4,03 (m, 3H), 4,03 - 3,70 (m, 2H), 3,33 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 3,25 -2,89 (m, 2H), 2,56 (s, 2H), 2,05 (s, 2H), 1,62 (m, 6H, preklapanje sa pikom vode), 1,38-1,16 (m, 4H), 1,08 (dd, J= 8,6, 4,1Hz, 1H), 1,04-0,76 (m, 5H), 0,67 (d, J= 12,8 Hz, 4H).ESI-MS m/z calc. 633,2733, nađeno 634,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,87 min (LC metoda R).
Primer 84: Priprema (14S)-8-(3-{2-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksil-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10), 6,8,19(23),20-heksaen-2,2, 4-trion (Jedinjenje 259)
Korak 1: Dimetil({2-okso-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propiliden})-l6-sulfanon
[1158]
[1159] U reakcioni sud je dodata 2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]sirć etna kiselina (3,0 g, 17,85 mmol) i rastvorena u dihlorometanu (30 mL). Smeša je ohlađena na 0 °C i dodat je N,N-dimetilformamid (50 mL, 0,6457 mmol) i oksalil hlorid (1,9 mL, 21,78 mmol). Rezultujuć a reakcija je mešana tokom 2 h na početku na 0 °C dozvoljavaju ć i da se zagreje na sobnu temperaturu tokom tog perioda. Isparljive materije su zatim uklonjene rotacionim isparavanjem (vakuum podešen na 100 mbar i vodeno kupatilo na 20 °C) da bi se dobio željeni čisti kiseli hlorid. Rastvor kiselog hlorida je korišć en direktno bez daljeg prečišć avanja. U poseban sud dodat je trimetilsulfoksonijum jodid (12,2 g, 55,44 mmol) i rastvoren u tetrahidrofuranu (30 mL). Kalijum t-butoksid (6,2 g, 55,25 mmol) je dodat kao 1 M rastvor u tetrahidrofuranu i dobijena smeša je zagrevana do refluksa 2 h. Smeša je ohlađena na 0 °C i dodat je prethodno pripremljen kiseli hlorid kao rastvor u tetrahidrofuranu (30 mL), održavajuć i temperaturu ispod 5 °C. Smeša je mešana na 0 °C tokom 1 h. Celit je dodat u smešu, a zatim filtriran preko celita (ispiranje čvrstih materija etil acetatom i koncentrovanje isparljivih materija rotacionim uparavanjem). Dobijena smeša se opere u levak za odvajanje sa vodom i ekstrahuje etil acetatom (2 X 100 mL). Kombinovani etilacetatni slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani u vakuumu da bi se dobio dimetil({2-okso-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propiliden})-l6-sulfanon (1,9 g, 44%) kao ulje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 3,39 (s, 6H), 2,99 (s, 1H), 2,40 (s, 2H), 1,01 (d, J = 2,0 Hz, 2H), 0,94 - 0,81 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 242,05884, nađeno 243,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,72 min (LC metoda E).
Korak 2: 1-hloro-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-2-on
[1160]
[1161] U balon sa okruglim dnom od 100 mL dodat je dimetil({2-okso-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propiliden})-l6-sulfanon (1,9 g, 7,843 mmol) pod azotom rastvorenim u suvom tetrahidrofuranu ( 16,0 mL), a zatim je dodata hlorovodonična kiselina (4 M u dioksanu) (2,5 mL 4 M, 10,00 mmol). Dobijena smeša je zagrejana na 60 °C i mešana 3 h. Rastvarač je uparen u vakuumu (130 mbar i vodeno kupatilo na 20 °C) i rezultujuć i ostatak je podeljen između etil acetata i vode, zatim je dodato malo rastvora soli i razdvojeni slojevi. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan u vakuumu (100 mbar i vodeno kupatilo na 30 °C) da bi se dobio 1-hloro-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-2-on (1,57 g, 100%) kao ulje pomorandže.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 3,70 (s, 2H), 2,04 (s, 2H), 1,17 - 1,05 (m, 2H), 0,85 (tt, J = 3,8, 2,8, 2,2 Hz, 2H).
Korak 3: terc-butil 3-[2-okso-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-karboksilat
[1162]
[1163] U balon od 100 mL napunjen azotom dodat je terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilat (1,20 g, 6,515 mmol), kalijum karbonat (1,81 g, 13,10 mmol) i natrijum jodid, 0,1 mmol33 mg (10,9 mmol33). rastvoren u N,N-dimetilformamidu (15 mL). Smeša je mešana 5 min, a zatim je dodat 1-hloro-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-2-on (1,57 g, 7,827 mmol) kao rastvor u N,N-dimetilformamidu (10 mL) . Dobijena smeša je zagrevana na 65 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je sipana u rastvor zasić enog rastvora soli. Materijal je ekstrahovan etil acetatom (2 X 150 mL), kombinovani organski slojevi, ispran vodom (23 150 mL), osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Narandžasti ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu korišć enjem gradijenta od 100% heksana do 60% etil acetata u heksanu da bi se dobio terc-butil 3-[2-okso-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1 -karboksilat (700 mg, 31%) kao svetlo žuto ulje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,86 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 5,96 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,93 (s, 2H), 2,77 (s, 2H), 1,60 (s, 9H), 1,15-1,07 (m, 2H), 0,91-0,86 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.348,1297, nađeno 349,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,73 min (LC metoda E).
Korak 4: 1-(1H-pirazol-3-iloksi)-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-2-on
[1164]
[1165] U rastvor terc-butil 3-[2-okso-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-karboksilata (700 mg, 2,010 mmol) u dihlorometanu (14 mL) je dodat trifluorosirć etna kiselina kiseline (3.1 mL, 40.24 mmol) i smeša je mešana 1 h. Rastvarač je uklonjen i dobijeno ulje je upareno i osušeno pod vakuumom da bi se dobila svetlo žuta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je rastvorena u etil acetatu i dodat je zasić eni vodeni rastvor natrijum bikarbonata i razdvojeni slojevi. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio 1-(1H-pirazol-3-iloksi)-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-2-on (498 mg, 100%) . ESI-MS m/z izrač.248,07726, nađeno 249,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,11 min (LC metoda E).
Korak 5: terc-butil 2-hloro-6-[3-[2-okso-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[1166]
terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (497 mg, 2,003 mmol), 1-(1H-pirazol-3-iloksi)-3-[1-(trifluorometil)ciklo-propil]propan-2-on ( 498 mg, 2.006 mmol) i kalijum karbonata (625 mg, 4.522 mmol) su kombinovani u anhidrovanom dimetil sulfoksidu (14 mL). 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (45 mg, 0.4012 mmol) je dodata i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom 16 h. Reakciona smeša je razblažena vodom (16 mL) i mešana 15 min. Dobijena smeša je razblažena etil acetatom i isprana vodom (3 X 50 mL). Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Narandžasti ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 100% heksana do 60% etil acetata u heksanu da bi se dobilo svetlo žuto ulje koje je zatim osušeno pod vakuumom da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[3 -[2-okso-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (500 mg, 54%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,38 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,18 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,59 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,04 (d , J = 2,8 Hz, 1H), 4,87 (s, 2H), 2,79 (s, 2H), 1,62 (s, 10H), 1,14 - 1,09 (m, 2H), 0,85 (dd, J = 3,0, 1,7 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač. 459,11728, nađeno 460,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,21 min (LC metoda E).
Korak 6: 2-hloro-6-[3-[2-okso-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[1167]
terc-butil 2-hloro-6-[3-[2-okso-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (500 mg, 1,087 mmol) je rastvoren u dihlorometana (11 mL) i ohlađen na 0 °C u ledenom kupatilu. U smešu je polako dodata hlorovodonična kiselina (1.5 mL 4 M u dioksanu, 6.000 mmol) i smeša je mešana na 0 °C tokom 1 h. Dodata je dodatna hlorovodonična kiselina (5,5 mL 4 M u dioksanu, 22,00 mmol) i mešana 30 min na 0 °C, a zatim 2 h na sobnoj temperaturi. Dodata je dodatna hlorovodonična kiselina (5,435 mL 4 M u dioksanu, 21,74 mmol) i mešana na sobnoj temperaturi tokom 17 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom do bele čvrste supstance koja je zatim razmuć ena u dietil etru, filtrirana i ponovo razmu ć ena u dietil etru. Čvrsta supstanca je sakupljena vakuum filtracijom i sušena pod vakuumom 20 h da bi se dobio 2-hloro-6-[3-[2-okso-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin- 3-karboksilna kiselina (237,5 mg, 54%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 403,05466, nađeno 404,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,59 min (LC metoda E).
Korak 7: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-okso-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol- 1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1168]
[1169] 2-hloro-6-[3-[2-okso-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (166 mg, 0,4112 mmol) i karbonil diimidazol (75 mg, 0,4625 mmol) su kombinovani u tetrahidrofuranu (4,0 mL) i mešani 110 min na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (187 mg, 0,4533 mmol), a zatim bezvodni 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (160 mL, 1,070 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 20 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, a zatim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, filtriran, uparen i zatim prečišć en hromatografijom na silika gelu koristeć i gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata, a zatim drugu kolonu silika gela koriste ć i gradijent od 100% dihlorometana do 15% metanola u dihlorometan da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-okso-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol -1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (173,7 mg, 53%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 797,25854, nađeno 798,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,21 min (LC metoda E).
Korak 8: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1 -il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1170]
[1171] U mešani rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-okso-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] pro-poksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (80 mg, 0,1002 mmol) u metanolu (1,25 mL) pod azotom je dodat natrijum borohidrid (10 mg, 0,2643 mmol) u porcijama da bi se kontrolisala značajna efervescencija. Posle potpunog dodavanja (koje je trajalo 1 min) reakcija je bila rastvor. Reakcija je koncentrovana rotacionim isparavanjem i zatim razblažena etil acetatom i isprana vodom (2 X 20 mL), a zatim slanim rastvorom (1X). Organski sloj je zatim odvojen, osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Ostatak je osušen pod vakuumom da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] pro-poksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (80 mg, 100%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 799,2742, nađeno 800,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,15 min (LC metoda E).
Korak 9: (14S)-8-(3-{2-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3 , 9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10),6,8, 19(23),20-heksan-2,2,4- trion (Jedinjenje 259)
[1172]
[1173] U balon koji sadrži terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]pro - poksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (80 mg, 0,09996 mmol) je dodat dihlorometan (2,5 mL ) i hlorovodonične kiseline (500 mL 4 M u dioksanu, 2.000 mmol). Posle 90 min mešanja, smeša je uparena do suva, zatim razblažena etrom (5 mL) i ponovo koncentrisana rotacionim uparavanjem. Ostatak je zatim razblažen etrom (5 mL) i ponovo koncentrovan rotacionim uparavanjem. Osušen u vakuumu preko noć i do ostatka koji je kombinovan sa kalijum karbonatom (139 mg, 1,006 mmol), 3 A molekularnim sitom i dimetil sulfoksidom (3,5 mL) u bočici, ispuhan azotom, zatvoren, zagrejan na 155 °C i mešan tokom 4 č. Ohlađena na sobnu temperaturu i smeša je filtrirana, razblažena etil acetatom i isprana vodom (2 X 20 mL), a zatim slanim rastvorom. Organski sloj je dalje ispran vodom, zatim osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio (14S)-8-(3-{2-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-12,12-dime-til-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 259) (27,91 mg, 42%) kao sivobela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,49 (s, 1H), 8,22 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,58 (dd, J = 8,5 , 7,2 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,99 (s, 1H), 6,92 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,13 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 5,03 (s, 1H), 4,10 (dd, J = 4,9, 2,4 Hz, 2H), 3,97 (d, J = 4,7 Hz, 2H), 3,16 (s, 1H ), 2,95 (d, J = 13,4 Hz, 1H), 2,73 - 2,65 (m, 1H), 2,47 - 2,29 (m, 1H), 2,13 (s, 1H), 1,98 (dd, J = 13,7, 3,4 Hz, 1H), 1,86 (dd, J = 11,6, 3,6 Hz, 1H), 1,77 (s, 1H), 1,70 - 1,63 (m, 1H), 1,61 (s, 3H), 1,57 (d, J = 12,4 Hz, 2H ), 1,52 (s, 3H), 1,37-1,27 (m, IH), 1,01-0,90 (m, 2H), 0,90-0,78 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.663,24506, nađeno 664,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,88 min (LC metoda E).
Primer 85: Priprema (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-22-hidroksi-12,12- dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9, 19(23),20-heksaen-2, 2,4-trion (Jedinjenje 260)
Korak 1: 2-bromo-6-nitro-piridin-3-ol
[1175]
[1176] U rastvor 2-bromopiridin-3-ola (46 g, 264,38 mmol) u sumpornoj kiselini (230 mL) dodata je azotna kiselina (24,989g, 17,685 mL, 277,60 mmol) (70%) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na 0 °C 30 min, zatim na sobnoj temperaturi 48 h, zatim sipana u hladnu vodu (200 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 X 100 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (150 mL) i slanim rastvorom (150 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i filtrat je koncentrovan in vacuo. Ostatak je prečišć en hromatografijom (silika gel, 0% do 20% etil acetata u heptanu) da bi se dobio 2-bromo-6-nitro-piridin-3-ol (9,2 g, 16%) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,24 (d, J=8,5 Hz, IH), 7,54 (d, J=8,5 Hz, 1H), 6,37 (br. s., 1H). ESI-MS m/z izrač. 217,9327, nađeno 221,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,492 min (LC metoda N).
Korak 2: 3-benziloksi-2-bromo-6-nitro-piridin
[1177]
[1178] Rastvor 2-bromo-6-nitro-piridin-3-ola (9 g, 41,097 mmol) u dimetilformamidu (60 mL) je dodat u kapima u rastvor natrijum hidrida (2 g, 50,005 mmol) na 0°C. °C u dimetilformamidu (30 mL). Posle 30 min, dodat je benzil bromid (7,4776 g, 5,2 mL, 43,720 mmol), hladno kupatilo je uklonjeno i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Sirova smeša je razblažena vodom (75 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3 X 75 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 X 75 mL), slanim rastvorom (100 mL), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Čvrsti ostatak je triturisan u smeši etil acetat/heptan (9/1) (50 mL), zatim filtriran i ispran sa dodatnim etil acetatom/heptanom (9/1) (50 mL) da bi se dobio 3-benziloksi-2- bromo-6-nitro-piridin (8,7 g, 68%) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, dimetil sulfoksidd6) δ 8,42 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,90 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,30-7,59 (m, 5H), 5,43 (s, 2H ). ESI-MS m/z izrač. 307,9797, nađeno 311,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,956 min (LC metoda S).
Korak 3: 2-etilheksil 3-[(3-benziloksi-6-nitro-2-piridil)sulfanil]propanoat
[1179]
[1180] U rastvor 3-benziloksi-2-bromo-6-nitro-piridina (14,5 g, 46,908 mmol), ksanfosa (1,7 g, 2,9380 mmol), Pd2(dba)3(1,35 g, 1,4743 mmol) u dodat je toluen (300 mL) 2-etilheksil 3-sulfanilpropanoat (11,5 g, 52,666 mmol) nakon čega je usledilo dodavanje N,N-diizopropiletilamina (12,614 g, 17 mL, 97,599 mmol). Dobijeni rastvor je evakuisan i ponovo napunjen azotom tri puta, a zatim refluksovan na 110 °C preko noć i. Posle hlađenja do sobne temperature, reakcija je filtrirana kroz sloj celita i isprana etil acetatom (75 mL). Kombinovani filtrati su koncentrovani i dobijeni ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu (0% do 15% gradijent etil acetata u heptanima) da bi se dobio 2-etilheksil 3-[(3-benziloksi-6-nitro-2-piridil)sulfanil ] propanoat (20 g, 95%).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 7,94 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,32-7,51 (m, 5H), 7,09-7,17 (m, 1H), 5,25 (s, 2H), 3,97-4,12 (m, 1H), 7,09-7,17 (m, 1H), 3,97-4,12 m, 2H), 3,51 (t, J=6,9 Hz, 2H), 2,89 (t, J=6,8 Hz, 2H), 1,51-1,67 (m, 1H), 1,20-1,43 (m, 8H), 0,81-0,96 (m, 6H). ESI-MS m/z izrač. 446,1875, nađeno 447,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 4,181 min (LC metoda T).
Korak 4: 2-etilheksil 3-[(3-benziloksi-6-nitro-2-piridil)sulfonil]propanoat
[1181]
m-hloroperbenzoeva kiselina (21 g, 77% v/v u tetrahidrofuranu, 93,703 mmol) je polako dodata u rastvor 2-etilheksil 3-[(3-benziloksi-6-nitro-2-piridil)sulfanil] propanoata (20 g, 44,787 mmol) u dihlorometanu (400 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana na ovoj temperaturi preko noć i. Čvrsta supstanca je filtrirana i smeša je isprana sa 10% rastvorom natrijum tiosulfata (150 mL), 5% rastvorom natrijum bikarbonata (2 X 100 mL), vodom (100 mL) i slanim rastvorom (100 mL). Organska faza je osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio 2-etilheksil 3-[(3-benziloksi-6-nitro-2-piridil)sulfonil]propanoat (20,5 g, 96%) kao žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDC13) δ 8,39 (d, J=9,1 Hz, 1H), 7,64 (d, J=9,1 Hz, 1H), 7,31-7,52 (m, 5H), 5,45 (s, 2H), 4,03 (dd, J=5,7, 2,5 Hz, 2H), 3,89-4,00 (m, 2H), 3,04 (t, J=7,5 Hz, 2H), 1,50-1,66 (m, 1H), 1,22-1,41 (m, 8H) ), 0,83-0,95 (m, 6H).
Korak 5: 2-etilheksil 3-[(6-amino-3-benziloksi-2-piridil)sulfonil]propanoat
[1182]
[1183] U rastvor 2-etilheksil 3-[(3-benziloksi-6-nitro-2-piridil)sulfonil] propanoata (5 g, 10,448 mmol) u etanolu (280 mL) i vode (80 mL) je dodat gvožđe (2,4 g, 42,976 mmol) i amonijum hlorid (1,7 g, 31,781 mmol). Reakcija je mešana na 100 °C tokom 1,5 h. Tamni rastvor je ostavljen da se ohladi do sobne temperature, filtriran preko celita i ispran dihlorometanom (150 mL). Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je razblažen u vodi (100 mL) i ekstrahovan dihlorometanom (2 3 75 mL). Kombinovani organski slojevi su sušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Dobijeni sirovi proizvod je prečišć en trituracijom u terc-butil metil etru (50 mL), suspenzija je filtrirana i isprana sa terc-butil metil etrom (50 mL). Dobijena beličasta čvrsta supstanca je sušena pod vakuumom preko noć i da bi se dobio 2-etilheksil 3-[(6-amino-3-benziloksi-2-piridil)sulfonil]propanoat (4,5 g, 96%). ESI-MS m/z izrač. 448,2032, nađeno 449,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,35 min (LC metod I).
Korak 6: 2-etilheksil 3-[(3-benziloksi-6-fluoro-2-piridil)sulfonil]propanoat
[1184]
[1185] Rastvor 2-etilheksil 3-[(6-amino-3-benziloksi-2-piridil)sulfonil]propanoata (4,5 g, 10,032 mmol) u fluorovodoniku piridinu (55,0 g, 50 mL, 554,96 mmol) ) je ohlađen na -52 °C. Dobijeni crveni rastvor je tretiran natrijum nitritom (1,4 g, 20,291 mmol) i ostavljen je da se zagreje do sobne temperature. Primeć eno je oslobađanje gasa i reakcija je postala narandžasta i zamu ć ena. Reakcija je mešana preko noć i na sobnoj temperaturi i polako sipana preko leda i vode (50 mL). Smeša je neutralizovana pažljivim dodavanjem vodenog rastvora natrijum bikarbonata i ekstrahovana etil acetatom (3 X 50 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi 2-etilheksil 3-[(3-benziloksi-6-fluoro-2-piridil)sulfonil]propanoat (4 g, 88%). ESI-MS m/z izrač. 451,1829, nađeno 452,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,46 min (LC metod I).
Korak 7: 3-benziloksi-6-fluoro-piridin-2-sulfonamid
[1186]
[1187] U rastvor 2-etilheksil 3-[(3-benziloksi-6-fluoro-2-piridil)sulfonil]propanoata (8 g, 17,717 mmol) u
dimetilsulfoksidu (48 mL) dodat je 1,8-diazabiciklo( 5.4.0)undec-7-en (5,5550 g, 5,5 mL, 36,489 mmol). Reakcija je mešana 1 h na sobnoj temperaturi i dodat je rastvor hidroksilamin-O-sulfonske kiseline (10,1 g, 89,307 mmol) i natrijum acetata (6 g, 73,141 mmol) u vodi (32 mL). Reakcija je mešana 1 h na sobnoj temperaturi, razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana sa etil acetatom (3 X 75 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (30 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu (gradijent od 10% do 40% etil acetata u heptanu) da bi se dobio 3-benziloksi-6-fluoro-piridin-2-sulfonamid (4,1 g, 82%) kao prljavo beli čvrst.<1>H NMR (300 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 5,38 (s, 2H), 7,25-7,48 (m, 4H), 7,49-7,57 (m, 4H), 7,96 (dd, J=9,0, 6,0 Hz, 1H) ; 19F NMR (282 MHz, dimetil sulfoksid-d6) 5 - 78,5-78,2 (m, IF). ESI-MS m/z izrač. 282,0474, nađeno 283,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,14 min (LC metoda H).
Korak 8: terc-butil (4S)-4-[3-[(5-benziloksi-6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1188]
[1189] Bočica od 20 mL je napunjena pod azotom sa terc-butil (4S)-4-(3-aminopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatom (291 mg, 1,135 mmol), 3-benziloksi- 6-fluoro-piridin-2-sulfonamid (321 mg, 1,137 mmol), anhidrovani dimetil sulfoksid (3 mL) i N,N-diizopropilehtilamin (0,3 mL, 1,722 mmol). Bočica je zatvorena i mešana na 85 °C tokom 3 h, zatim na 110 °C tokom 16 h, a zatim na 120 °C tokom 29 h. Smeša je razblažena etil acetatom (50 mL), vodom (50 mL) i 10% limunskom kiselinom (10 mL). Dve faze su bile razdvojene. Organska faza je isprana slanim rastvorom (30 mL), osušena preko natrijum sulfata i rastvarači su upareni. Proizvod je prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta etil acetata (0% do 60% tokom 30 min.) u heksanu dajuć i terc-butil (4S)-4-[3-[(5-benziloksi-6- sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (342 mg, 58% prinosa, 92% čisto ć e) kao penasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6)57,54 - 7,47 (m, 2H), 7,44 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,41 - 7,33 (m, 2H), 7,33 - 7,22 (m, 1H) , 6,94 (s, 2H), 6,60 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 6,49 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 5,11 (s, 2H), 3,55 (k, J = 8,7 Hz, 1H) , 3,27-3,16 (m, 2H), 2,79 (k, J = 10,1 Hz, 1H), 2,10 (široki s, 1H), 1,93-1,85 (m, 1H), 1,54-1,43 (m, 2H), 1,43- 1,37 (m, 15H), 1,24 (s, 3H). ESI-MS m/z izrač.518,2563, nađeno 519,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,88 min (LC metoda B).
Korak 9: terc-butil (4S)-4-[3-[[5-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi) pirazol -1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1190]
[1191] Bočica od 20 mL je napunjena pod azotom sa 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilnom kiselinom (100 mg, 0,2779 mmol) i anhidrovani tetrahidrofuran (2 mL). Dodat je karbonil diimidazol (45 mg, 0,2775 mmol) i smeša je mešana pod azotom na sobnoj temperaturi 4 h. Dodata je druga količina karbonil diimidazola (45 mg, 0,2775 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 h. U posebnoj posudi od 20 mL, rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[(5-benziloksi-6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (121 mg, 0,2333 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (1 mL) je pripremljen u atmosferi azota i zatim je dodat preko šprica u rastvor aktiviranog estra. Dodat je 1,8-diazabiciklo[5.4.0]un-dek-7-en (0,18 mL, 1,204 mmol) kroz špric i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u atmosferi azota. Posle 17 h, rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom i dobijeno gusto ulje je tretirano etil acetatom (25 mL) i vodom (25 mL). Polako je dodavan vodeni rastvor hlorovodonične kiseline (250 mL 6 M, 1.500 mmol) (konačni pH = 5) i dve faze su razdvojene. Vodena faza je ekstrahovana etil acetatom (30 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom (30 mL) i osušeni preko natrijum sulfata. Posle filtracije i uparavanja rastvarača, ostatak je rastvoren u dihlorometanu i prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu koriste ć i gradijent etil acetata (0% do 100% tokom 30 minuta) u heksanu dajuć i terc-butil (4S)-4- [3-[[5-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil ]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (99 mg, 49% prinosa, 93% čistoć e) kao bezbojni film. ESI-MS m/z izrač. 859,34937, nađeno 860,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,82 min (LC metoda B).
Korak 10: N-[[3-benziloksi-6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilaminol-2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3-( 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so).
[1192]
[1193] U rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[5-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7 -iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (99 mg, 0,1151 mmol) u dihlorometanu ( 0,5 mL) i toluena (0,2 mL) je dodata trifluorosirć etna kiselina (100 mL, 1,298 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 23 h. Rastvarač je uklonjen in vacuo sa temperaturom kupatila postavljenom na 40 °C dajuć i gusto žuto ulje. Ulje je razblaženo toluenom (5 mL) i rastvarač je uklonjen in vacuo na 40 °C dajuć i N-[[3-benziloksi-6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilaminol -2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3-(2-dipiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) ( 100 mg, 99%) kao žuta smola. ESI-MS m/z izrač. 759,29694, nađeno 760,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,9 min (LC metoda B).
Korak 11: (14S)-22-(benziloksi)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12- dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2, 2,4-tri-on
[1194]
[1195] U rastvor N-[[3-benziloksi-6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-2-hloro- -6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (100 mg, 0,1144 mmol) u NMP (2 mL) je dodat kalijum karbonat (180 mg, 1.302 mmol). Smeša je propuhana azotom 5 min. Smeša je zagrevana na 150 °C tokom 20 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i dodata u vodu (8 mL). Smeša je pažljivo zakiseljena vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (500 mL 6 M, 3.000 mmol) do pH = 1 dajuć i penastu suspenziju. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom na papiru. Vlažna čvrsta supstanca je rastvorena u etil acetatu i rastvor je osušen preko natrijum sulfata, a zatim filtriran. Rastvarači su uklonjeni, a ostatak je prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu koriste ć i gradijent metanola (0% do 5% tokom 30 minuta) u dihlorometanu dajuć i (14S)-22-(benziloksi)-8-[3-(2 -[dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (31 mg, 37%) kao sivobela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 723,3203, nađeno 724,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,19 min (LC metoda B).
Korak 12: (14S)-8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-22-hidroksi-12,12-dimetil- 2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19 (23),20-heksan-2,2, 4-trion (Jedinjenje 260)
[1196]
[1197] Balon od 100 mL je napunjen sa (14S)-22-(benziloksi)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1- il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23) ,20-heksan-2,2,4-trion (31 mg, 0,04282 mmol) i metanol (6 mL). Rastvor je poprskan azotom. Dodat je 10% paladijum na ugljeniku (vlažan, Degussa, 21 mg, 0,01973 mmol) i smeša je mešana u atmosferi vodonika (balon) 3 h. Rastvor je poprskan azotom, razblažen metanolom i filtriran kroz celit. Posle uparavanja rastvarača, ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (1 mL). Rastvor je mikrofiltriran i prečišć en preparativnom HPLC reverzne faze (C18) koriš ć enjem gradijenta acetonitrila u vodi (30% do 99% tokom 15 minuta, injekcija 950 mL, bez modifikatora). Čiste frakcije su sakupljene, a rastvarači uklonjeni uparavanjem. Ostatak je tretiran sa dihlorometanom/heksanom i rastvarači su upareni da bi se dobio (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-22-hidroksi-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7 ,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 260) (10 mg, 36%) kao sivobela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,39 (br s, 1H), 9,07 (br s, 1H, eksh.), 8,21 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,80 (br d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,20 (br s, 1H), 6,91 (br d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,69 (br d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,28 (br s, 1H, eksh.) , 6,08 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 4,21 (t, J = 6,7 Hz, 2H),
[1198] 3,77 (br s, 1H), 3,20 (br s, 1H), 2,96 - 2,79 (m, 2H), 2,12 (br s, 1H), 1,91 - 1,50 (m, 13H), 1,47 (t, J = 6,5 Hz, IH), 1,42 -1,29 (m, IH), 0,89 - 0,78 (m, 4H), 0,68 - 0,60 (m, 2H), 0,53 - 0,44 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 633,2733, nađeno 634,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,39 min (LC metoda B).
Primer 86: Priprema (14S)-22-hidroksi-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia -3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 261)
[1199]
Korak 1: terc-butil (4S)-4-[3-[[5-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1 -il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1200]
[1201] Bočica od 20 mL je napunjena pod azotom sa 2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilnom kiselinom (188 mg, 0,4824 mmol) i anhidrovani tetrahidrofuran (3 mL). Dodat je karbonil diimidazol (75 mg, 0,4625 mmol) i smeša je mešana pod azotom na sobnoj temperaturi 4 h. Dodata je druga količina karbonil diimidazola (75 mg, 0,4625 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. U posebnoj posudi od 20 mL, rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[(5-benziloksi-6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1 -karboksilat (204 mg, 0,3933 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (2 mL) je pripremljen u atmosferi azota i zatim je dodat preko šprica u rastvor aktiviranog estra. Dodat je 1,8-diazabiciklo[5.4.0]un-dek-7-en (0,31 mL, 2,073 mmol) kroz špric i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi u atmosferi azota tokom 5 dana. Rastvarači su uklonjeni pod sniženim pritiskom i dobijeno gusto ulje je tretirano etil acetatom (50 mL) i vodom (50 mL). Polako je dodavana hlorovodonična kiselina (450 mL 6 M, 2.700 mmol) (konačni pH = 5) i dve faze su razdvojene. Vodena faza je ekstrahovana etil acetatom (30 mL). Kombinovani organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom (30 mL) i osušeni preko natrijum sulfata. Posle filtracije i uparavanja rastvarača, ostatak je rastvoren u dihlorometanu i prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu koristeć i gradijent etil acetata (0% do 100% tokom 30 min) u heksanu. Proizvod je ko-eluiran sa nečistoć om koja je uklonjena drugim prečiš ć avanjem hromatografijom na silika gelu pod istim uslovima kao i prva kolona. Frakcije koje sadrže očekivani materijal su kombinovane i rastvarači su upareni da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[5-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1]-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (109 mg, 31 % prinosa, 86% čistoć e) kao prljavo beli film. ESI-MS m/z izrač. 889,3211, nađeno 890,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,49 min (LC metoda B).
Korak 2: N-[[3-benziloksi-6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilaminol-2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3-[ 3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (ditrifluoroacetatna so)
[1202]
[1203] U rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[5-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil) ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (109 mg, 0,1224 mmol) u dihlorometanu (0,5 mL ) i toluen (0,2 mL) je dodata trifluorosirć etna kiselina (100 mL, 1,298 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 23 h. Rastvarači su uklonjeni u vakuumu sa temperaturom kupatila postavljenom na 40 °C. Ostatak je razblažen toluenom (5 mL) i rastvarač je uklonjen in vacuo sa temperaturom kupatila podešenom na 40 °C. Ostatak je tretiran sa dihlorometanom/heksanom i rastvarači su upareni da bi se dobio N-[[3-benziloksi-6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (ditrifluoracetatna so) (130 mg, kvantitativni prinos) kao prljavo bela čvrsta materija. ESI-MS m/z izrač. 789,2687, nađeno 790,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,85 min (LC metoda B).
Korak 3: (14S)-22-(benziloksi)-12,12-dimetil-8-(3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil}propoksil-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9, 19(23),20-heksan-2,2,4-tri- jedno
[1204]
[1205] U rastvor N-[[3-benziloksi-6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-2-hloro--6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (ditrifluoroacetatna so) (130 mg, 0,1277 mmol) u NMP (3 mL) je dodat kalijum karbonat (230 mg, 1.664 mmol). Smeša je propuhana azotom 5 min. Smeša je zagrevana na 150 °C tokom 22 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i dodata u vodu (10 mL). Smeša je pažljivo zakiseljena vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (500 mL 6 M, 3.000 mmol) do pH = 1, dajuć i penastu suspenziju. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom na papiru. Vlažna čvrsta supstanca je rastvorena u etil acetatu i rastvor je osušen preko natrijum sulfata i filtriran. Rastvarači su upareni, a ostatak je prečišć en fleš hromatografijom na silika gelu koriste ć i gradijent metanola (0% do 5% tokom 30 min) u dihlorometanu dajuć i (14S)-22-(benziloksi)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (38 mg, 39%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 753,29205, nađeno 754,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,38 min (LC metoda B).
Korak 4: (14S)-22-hidroksi-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3 , 9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-tri-on (Jedinjenje 261)
[1206]
[1207] Balon od 100 mL je napunjen sa (14S)-22-(benziloksi)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksil-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen -2,2,4-trion (39 mg, 0,05174 mmol) i metanol (8 mL). Rastvor je poprskan azotom. Dodat je 10% paladijum na ugljeniku (vlažan, Degussa, 27 mg, 0,02537 mmol) i smeša je mešana u atmosferi vodonika (balon) 4 h. Rastvor je poprskan azotom, razblažen metanolom i filtriran kroz celit. Posle uparavanja rastvarača, ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (1 mL). Rastvor je mikrofiltriran i prečišć en preparativnom HPLC reverzne faze (C18) koriš ć enjem gradijenta acetonitrila u vodi (30% do 99% tokom 15 minuta, injekcija 950 mL, bez modifikatora). Čiste frakcije su sakupljene, a rastvarači uklonjeni uparavanjem. Ostatak je tretiran sa dihlorometanom/heksanom, a rastvarači su upareni da bi se dobilo (14S)-22-hidroksi-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20 -heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 261) (22 mg, 63%) kao sivobela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,38 (široki s, 1H), 9,07 (br s, 1H), 8,21 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,79 (br s, 1H), 7,20 ( br s, 1H), 6,90 (br s, 1H), 6,68 (br s, 1H), 6,28 (br s, 1H), 6,10 (br s, 1H), 4,20 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 3,76 (br s, 1H), 3,21 (br s, 1H), 2,98 - 2,75 (m, 2H), 2,12 (br s, 1H), 1,93 - 1,77 (m, 3H), 1,78 - 1,66 (m, 3H) , 1,68-1,46 (m, 8H), 1,37 (br m, 2H), 0,95-0,88 (m, 2H), 0,79-0,68 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 663,24506, nađeno 664,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,24 min (LC metoda B).
Primer 87: Priprema 2-imino-12,12-dimetil-8-(3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9 , 11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,4-di-on (dijastereomerni par 1) (Jedinjenje 262) i 2-imino-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo pro-pil]etoksil-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9 , 11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,4-dion (dijastereomerni par 2) (Jedinjenje 263)
[1208]
Ċ
Korak 1: terc-butil 2,6-difluoropiridin-3-karboksilat
[1210] U rastvor 2,6-difluoropiridin-3-karboksilne kiseline (10 g, 62,858 mmol) i BF3·Et2O (0,4 mL, 3,2 mmol, 0,05 ekv.) u suvom tetrahidrofuranu (60 mL) na 0 °C. je polako dodat terc-butil 2,2,2-trihloretanimidat (10 g, 45,8 mmol) tokom 10 min. Reakcioni rastvor je mešan na sobnoj temperaturi 2 h u atmosferi azota. Dodato je još terc-butil 2,2,2-trihloretanimidata (20 g, 91,5 mmol) i BF3·Et2O (0,4 mL) na sobnoj temperaturi. Reakcija je mešana 1 h. Zatim je ostavljeno da odstoji preko vikenda pre nego što se ugasi zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Smeša je ekstrahovana etil acetatom (23 60 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 0% - 20% etil acetata u heptanima da bi se dobio terc-butil 2,6-difluoropiridin-3-karboksilat (12 g, 89%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.
215,0758, nađeno 216,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,13 min (LC metod I).
Korak 2: terc-butil 2-fluoro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[1211]
[1212] 1,4-Diazabiciklo[2.2.2]oktan (125 mg, 1,1144 mmol) je dodat u rastvor terc-butil 2,6-difluoropiridin-3-karboksilata (1,2 g, 5,5763 mmol) i 3-[ 2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]-1H-pirazol (1,29 g, 5,8585 mmol). Smeša je mešana 10 min i dodat je kalijum karbonat (1.2 g, 8.6827 mmol). Smeša je mešana na 20 °C pod azotom 16 h. Reakciona smeša je razblažena etil acetatom (100 mL), isprana vodom (3 X 30 mL), slanim rastvorom (30 mL), osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i uparena. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silicijum dioksidu, eluiranjem sa gradijentom etil acetata u heptanima (0% - 15%) da bi se dobio terc-butil 2-fluoro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (1,46 g, 63% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDC13) δ 0,71-0,78 (m, 2H), 1,01-1,05 (m, 2H), 1,60 (s, 9H), 2,10 (t, J=7,1 Hz, 2H), 4,41 (t, J=7,1 Hz, 2H), 5,95 (d, J=2,9 Hz, 1H), 7,63 (dd, J=8,2, 1,2 Hz, 1H), 8,29 (d, J=2,8 Hz, 1H), 8,32-8,38 ( m, 1H).19F NMR (282 MHz, CDC13) 8 -69,9 (s, 3F), -62,4 (d, J=9,2 Hz, IF). ESI-MS m/z izrač.415,1519, nađeno 416,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,69 min (LC metod U).
Korak 3: 2-fluoro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[1213]
[1214] Trifluorosirć etna kiselina (3 mL) je dodata u rastvor terc-butil 2-fluoro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin- 3-karboksilat (1,46 g, 3,5148 mmol) u dihlorometanu (12 mL). Smeša je mešana na 40 °C tokom 4 h. Smeša je zatim koncentrovana pod sniženim pritiskom i osušena pod vakuumom da bi se dobila 2-fluoro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (1,26). g, 100%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 0,84-.091 (m, 2H), 0,93-0,99 (m, 2H), 2,09 (t, J=7,0 Hz, 2H), 4,35 (t, J=7,0 Hz, 2H ), 6,21 (d, J=2,7 Hz, 1H), 7,67 (d, J=9,3 Hz, 1H), 8,42 (d, J=3,1 Hz, 1H), 8,50 (dd, J=9,3, 8,5 Hz, 1H ), 13,48 (br. s., 1H). 19F NMR (282 MHz, CDC13) 8 -68,38 (s, 3F), -63,25 (d, J=9,5 Hz, IF). ESI-MS m/z izrač. 359,0893, nađeno 360,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,19 min (LC metod I).
Korak 4: 2-Fluoro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[1215]
[1216] U suspenziju 2-fluoro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (1,26 g, 3,5071 mmol) u dihlorometanu (20 mL) dodata je jedna kap N,N-dimetilformamida (0,015 mL), a zatim kap po kap oksalil hlorida (625,65 mg, 0,43 mL, 4,9293 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 2 h sve dok mehurić i nisu prestali. Rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom. Dobijena bela čvrsta supstanca je rastvorena u anhidrovanom tetrahidrofuranu (10 mL) i dodata u smešu 28% vodenog rastvora amonijum hidroksida (10 mL) i tetrahidrofurana (5 mL) koja je ohlađena u kupatilu sa ledom i vodom. Reakcija je zatim mešana na sobnoj temperaturi 1 h i zatim razblažena etil acetatom (100 mL), isprana vodom (20 mL), osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio 2-fluoro-6- [3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (1,3 g, kvantitativni prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 0,70-0,79 (m, 2H), 0,99-1,08 (m, 2H), 2,10 (t, J=7,2 Hz, 2H), 4,42 (t, J=7,1 Hz, 2H) , 5,80 (br.s, 1H), 5,97 (d, J=2,9 Hz, 1H), 6,61-6,71 (m, 1H), 7,74 (dd, J=8,3, 2,0 Hz, 1H), 8,28 (d, J =2,8 Hz, IH), 8,62 (dd, J=9,8, 8,3 Hz, 1H). 19F NMR (282 MHz, CDC13) 8 -69,86 (s, 3F), -65,44 (t, J=8,8 Hz, IF). ESI-MS m/z izrač. 358,1053, nađeno 359,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,08 min (LC metod I).
Korak 5: 2-terc-butilsulfanil-6-fluoro-piridin
[1218] 2-metilpropan-2-tiol (9,0400 g, 11,3 mL, 100,24 mmol) je dodat u suspenziju natrijum hidrida (4,8 g, 120 mmol, 60% u ulju, ispran sa 20 mL) u anhidrovanom furunu. (200 mL) na 0 °C. Siva suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi 30 min, a zatim je dodat 2,6-difluoropiridin (10 mL, 110,3 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noć i. Smeša je zatim ohlađena u kupatilu sa ledom i vodom i zatim ugašena vodom. Dobijena smeša je razblažena etil acetatom (60 mL), isprana vodom (20 mL), slanim rastvorom (20 mL), osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio 2-terc-butilsulfanil-6-fluoro - piridin (22 g, 96% prinos, 81% čistoć a) kao bledo žuto ulje koje je uzeto direktno u koraku koji sledi.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1,55 (s, 9 H), 6,64 (ddd, J=8,1, 2,9, 0,5 Hz, 1 H), 7,12 (dd, J = 7,6, 2,2, 0,5 Hz, 1 H) , 7,57 (k, J = 8,0 Hz, IH). ESI-MS m/z izrač.185,0674, nađeno 186,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,21 min (LC metod I).
Korak 6: 6-fluoropiridin-2-tiol
[1219]
[1220] Na sobnoj temperaturi (oko 20 °C), 100 mL (100 mmol) 1 M rastvora bor tribromida u dihlorometanu je dodat u kapima u rastvor 2-terc-butilsulfanil-6-fluoro-piridina (22 g, 81% čistoć e, 96,188 mmol) u 150 mL dihlorometana. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2,5 h. Dodat je bor tribromid (50,00 mL 1 M u dihlorometanu, 50 mmol). Posle 10 min, reakcija je razblažena sa 100 mL dihlorometana, isprana vodom (2 X100 mL), snažno muć kana dok se ne dobiju dve bistre faze, osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi 6-fluoropiridin -2-tiol (28 g, 100% prinos, 45% čisto ć a) kao žuto ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDC13) δ 6,65 (dd, J=8,1, 2,5Hz, 1H), 7,07 (dd, J=7,6, 2,2Hz, 1H), 7,60 (k, J=7,9 Hz, 1H). 19F NMR (282 MHz, CDC13) 8 -66,78 (s, IF).
Korak 7: 2-fluoro-6-[(6-fluoro-2-piridil)disulfanil]piridin
[1221]
[1222] Brom (17,063 g, 5,5 mL, 106,77 mmol) je polako dodat u rastvor 6-fluoropiridin-2-tiola (28 g, 45% čistoć e, 97,557 mmol) u etil etru (160 mL) na sobnoj temperaturi do ostala je narandžasta boja. Dodavanje je zaustavljeno i reakciona smeša je razblažena etil acetatom (100 mL), isprana 1:1 smešom zasić enog natrijum bikarbonata i 10% rastvora natrijum tiosulfata, slanim rastvorom, i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom etil acetata u heptanima (0% - 20%) da bi se dobio 2-fluoro-6-[(6-fluoro-2-piridil)disulfanil]piridin (10,5 g, 84). %) kao smeđa čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDC13) δ 6,75 (dd, J=8,0, 2,6 Hz, 1H), 7,49 (dd, J=7,7, 2,1 Hz, 1H), 7,72 (k, J=7,7 Hz, 1H),<19>F NMR (282 MHz, CDC13) δ -66,37 (d, J=6,8 Hz, IF). ESI-MS m/z izrač. 255.994, nađeno 257.1 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 2,12 min (LC metod I).
Korak 8: 2-fluoro-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfanil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin- 3-karboksamid
[1223]
[1224] Brom (310,25 mg, 0,1000 mL, 1,9414 mmol) je polako dodat u rastvor 2-fluoro-6-[(6-fluoro-2-piridil)disulfanil]piridina (520 mg, 2,0289 mmol) u anhidrovani acetonitril (4 mL) na 0 °C. Posle mešanja 2 minuta na istoj temperaturi, crveni rastvor je dodat u rastvor 2-fluoro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin- 3-karboksamid (720 mg, 2,0095 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (4 mL) i piridinu (6 mL) na 0 °C. Dobijena tamna smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noć i. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je zajedno uparen sa toluenom i prečišć en hromatografijom na silika gelu, koristeć i gradijent od 0% - 30% etil acetata u heptanima da bi se dobio 2-fluoro-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfanil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (700 mg, 72%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.
485,0945, nađeno 486,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,36 min (LC metod I).
Korak 9: 2-fluoro-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfinil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin- 3-karboksamid
[1225]
[1226] meta-hloroperoksibenzoeva kiselina (355 mg, 77% čistoć e, 1,58 mmol) je dodata u rastvor 2-fluoro-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfanil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (700 mg, 1,4420 mmol) u dihlorometanu (20 mL) na 0 °C i reakcija je mešana na istoj temperaturi 1 h. Reakciona smeša je razblažena dihlorometanom (70 mL), isprana uzastopno sa 10% v/v vodenim rastvorom natrijum tio-sulfata, 5% v/v vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 0% - 40% etil acetata u heptanima da bi se dobio racemski 2-fluoro-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfinil]-6-[3- [2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (700 mg, 97%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 501,0894, nađeno 502,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,25 min (LC metod I).
Korak 10: 4-(3-azidopropil)-2,2-dimetil-pirolidin (hidrohloridna so)
[1227]
[1228] Hlorovodonična kiselina (2 mL 4 M u 1,4-dioksanu, 8,0 mmol) je dodata u rastvor terc-butil 4-(3-azidopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata ( 1,2 g, 4,2496 mmol) u dihlorometanu (10 mL) ohlađeno u kupatilu sa ledom i vodom. Smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi preko noć i. Smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je uparen sa toluenom (40 mL) dva puta da bi se dobio sirovi 4-(3-azidopropil)-2,2-dimetil-pirolidin (hidrohloridna so) (930 mg, 100%) kao svetlo žuto ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDC13) δ 1.29 (s, 3H), 1.38-1.54 (m, 8H), 1.99 (dd, J=12.7, 7.7Hz, 1H), 2.31-2.42 (m, 1H), 2.76- 2,89 (m, 1H), 3,32-3,36 (m, 3H), 9,00 (br.s., IH), 9,11 (br.s., 1H). ESI-MS m/z izrač. 182,1531, nađeno 183,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,94 min (LC metod I).
Korak 11: 2-[4-(3-azidopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-il]-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfinil]-6-[3-[2- [1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[1229]
[1230] Natrijum hidrid (193 mg, 60% v/v disperzija u mineralnom ulju, 2,6 mmol) je dodat u rastvor 4-(3-azido-propil)-2,2-dimetil-pirolidina (hidrohloridna so) ( 528 mg, 2,4 mmol) u anhidrovanom N,N-dimetilformamidu (10 mL) ohlađenom u kupatilu sa ledom i vodom. Smeša je mešana 5 minuta i 2-fluoro-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfinil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (930 mg, 1.85 mmol) je dodat. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min, a zatim stavljena u uljno kupatilo (50 °C) i mešana 4 h. Nakon toga, smeša je ostavljena da se ohladi i stoji preko noć i. Smeša je razblažena etil acetatom (100 mL). Dobijena smeša je isprana vodom (3 x 30 mL), slanim rastvorom (30 mL), osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu korišć enjem gradijenta od 0% - 70% etil acetata u heptanima da bi se dobio 2-[4-(3-azidopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-il]-N-[ (6-fluoro-2-piridil)sulfinil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (600 mg, 49%) kao bela čvrsta materija. ESI-MS m/z izrač. 663,2363, nađeno 664,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,61 min (LC metod I).
Korak 12: 2-[4-(3-azidopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-il]-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfonimidoil]-6-[3-[2- [1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[1231]
[1232] Amonijak (10 mL 0,5 M rastvora u 1,4-dioksanu, 5 mmol) je dodat u rastvor 2-[4-(3-azidopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-il]-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfinil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (580 mg, 0,87 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (5 mL) na 0 °C. U jednom delu je dodat N-hlorosukcinimid (140 mg, 1,05 mmol) (smeša je postala narandžasta) i reakcija je mešana na 0 °C tokom 1 h. Dodato je još N-hlorosukcinimida (100 mg, 0,75 mmol) i reakcija je mešana na istoj temperaturi 30 min. Reakcija je zatim ugašena sa 10% v/v vodenim rastvorom natrijum tiosulfata i ekstrahovana etil acetatom (50 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom (20 mL), osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu, eluiranjem sa gradijentom od 0% - 55% etil acetata u heptanima da bi se dobio2-[4-(3-azidopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-il]-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfonimidoil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (400 mg, 67%) kao žuta gumena čvrsta materija.
Korak 13: 2-[4-(3-Aminopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-il]-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfonimidoil]-6-[3-[2- [1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[1233]
[1234] Smeša 2-[4-(3-azidopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-il]-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfonimidoil]-6-[3- [2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (360 mg, 0,5304 mmol), rastvor amonijaka u metanolu (7 N, 1 mL) i 10% paladijum na ugljenik (vlažan, Degussa, 200 mg, 0,094 mmol) u metanolu (10 mL) je hidrogenizovan pod 1 atm H2 (balon) na sobnoj temperaturi tokom 3 h. Balon je evakuisan i ponovo napunjen azotom. Reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio sirovi 2-[4-(3-aminopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-il]-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfonimidoil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (380 mg, 81% prinos, 74% čistoć e) kao žuta čvrsta supstanca. Sirovi proizvod je direktno upotrebljen u slede ć em koraku bez prečiš ć avanja. ESI-MS m/z izrač. 652,2567, nađeno 653,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,70 min (LC metod I).
Korak 14: 2-Imino-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11 ,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,4-dion (dijastereomerski par 1) (Jedinjenje 262) i 2-imino-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18 , 23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,4-dion (dijastereomerni par 2) (Jedinjenje 263)
[1236] Smeša 2-[4-(3-aminopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-il]-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfonimidoil]-6-[3- [2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (380 mg, 0,5822 mmol), trietilamin (239,58 mg, 0,33 mL, 2,3676 mmol) i suvi dimetil sulfoksid (25) je mešan u zaptivnoj cevi na 100 °C tokom 4 h. Smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature, zatim je razblažena vodom (100 mL) i ekstrahovana etil acetatom (3 X 40 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 x 30 mL), slanim rastvorom (30 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 0% - 60% etil acetata u heptanima da bi se kao prvi dijastereomerni par enantiomera za eluiranje dobio 2-imino-12,12-dimetil-8-(3-{2).-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23 ),5,7,9,19,21-heksan-2,4-dion (dijastereomerski par 1) (jedinjenje 262) (88,76 mg, 23% prinos) kao bela čvrsta supstanca,<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) ppm 0,72-0,80 (m, 2H), 0,96-1,05 (m, 2H), 1,13-1,23 (m, 1H), 1,29-1,44 (m, 1H), 1,59 (s, 3H), 1,67-1,71 (m , 1H), 1,75 (s, 3H), 1,82-1,94 (m, 2H), 2,00-2,31 (m, 4H), 3,09-3,34 (m, 2H), 3,60 (t, J=11,0 Hz, 1H), 3,75-3,94 (m, 1H), 4,39 (t, J=7,0 Hz, 2H), 4,70-4,80 (m, 1H), 5,86 (d, J=2,6 Hz, 1H), 6,47 (d, J=8,5 Hz , 1H), 6,97 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,02 (br. s., 2H), 7,30 (d, J=7,0 Hz, 1H), 7,47 (dd, J=8,2, 7,3 Hz, 1H ), 8,17 (d, J=8,2 Hz, IH), 8,24 (d, J=2,6 Hz, IH). 19F NMR (282 MHz, CDC13) ppm -70,0 (br. s., 3F). ESI-MS m/z izrač. 632,2505, nađeno 633,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,98 min (LC metoda H) i kao drugi dijastereomerni par enantiomera za eluiranje, 2-imino-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksil -1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21 -heksan-2,4-dion (dijastereomerni par 2) (Jedinjenje 263) (97,02 mg, 25% prinos) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 0.70-0.78 (m, 2H), 0.97-1.05 (m, 2H), 1.34-1.46 (m, 2H), 1.58-1.63 (m, 7H), 1.64-1.7 , 2H), 1,82 (dd, J=11,3, 5,4 Hz, 1H), 2,08-2,12 (m, 3H), 2,96-3,11 (m, 2H), 3,29-3,42 (m, 1H), 4,16-4,25 (m , 1H), 4,32-4,41 (m, 3H), 5,09 (br. s., 2H), 5,84 (d, J=2,6 Hz, 1H), 6,53 (d, J=8,5 Hz, 1H), 6,96 (d , J=8,2 Hz, 1H), 7,35 (d, J=7,0 Hz, 1H), 7,53 (dd, J=8,5, 7,3 Hz, 1H), 8,07 (d, J=8,2 Hz, 1H), 8,20 (d J=2,6 Hz, IH).<19>F NMR (282 MHz, CDC13) δ -70,0 (s, 3F). ESI-MS m/z izrač. 632,2505, nađeno 633,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,77 min (LC metoda H).
Primer 88: Priprema (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-21-hidroksi-12,12- dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heks-an-2,2 ,4-trion (Jedinjenje 264)
[1237]
Korak 1: 4-benziloksi-2-hloro-6-fluoro-piridin
[1238]
[1239] U rastvor 2-hloro-6-fluoro-piridin-4-ola (4,62 g, 31,315 mmol) u acetonitrilu (90 mL) dodat je cezijum karbonat (15,3 g, 46,959 mmol) i benzil bromid (5,8958 g). , 4,1 mL, 34,472 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi preko noć i. Rastvor je rastvoren u etil acetatu (350 mL) i vodi (100 mL). Vodena faza je uklonjena, a organska faza je isprana vodom (100 mL) i slanim rastvorom (75 mL). Organska faza je osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana. Sirovi proizvod je prečišć en hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa gradijentom od 0% do 10% etil acetata u heptanima da bi se dobio 4benziloksi-2-hloro-6-fluoro-piridin (7,01 g, 94%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 237,0357, nađeno 238,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,38 min (LC metoda N).
Korak 2: 2-etilheksil 3-[(4-benziloksi-6-fluoro-2-piridil)sulfanil]propanoat
[1240]
[1241] Rastvor 4-benziloksi-2-hloro-6-fluoro-piridina (6,77 g, 28,486 mmol) i diizopropiletilamina (7,4200 g, 10 mL, 57,411 mmol) u toluenu (250 mL) je detrogenisan azotom. 5 min. Tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (783 mg, 0,8551 mmol), ksantfos (990 mg, 1,7110 mmol) i 2-etilheksil 3-sulfanilpropanoat (6,5280 g, 6,8 mL) i dodato je 6 mmol, 29 smeša je toplota. na 125 °C preko noć i. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečiš ć en hromatografijom na silika gelu korišć enjem gradijenta od 0% - 10% etil acetata u heptanu da bi se dobio 2-etilheksil 3-[(4-benziloksi-6-fluoro-2-piridil)sulfanil]propanoat (12,06 g, kvantitativni prinos) kao narandžasto ulje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 0,80-0,95 (m, 6H), 1,19-1,43 (m, 8H), 1,51-1,63 (m, 1H), 2,77 (t, J=7,0 Hz, 2H), 3,37 ( t, J=6,9 Hz, 2H), 4,02 (dd, J=5,9, 1,2 Hz, 2H), 5,07 (s, 2H), 6,18 (d, J=1,8 Hz, 1H), 6,65 (d, J=1,2 Hz, IH), 7,28-7,49 (m, 5H).<19>F NMR (282 MHz, CDC13) δ -65,7 (s, IF). ESI-MS m/z izrač.
419.193, nađeno 420.2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,8 min (LC metod I).
Korak 3: 2-etilheksil 3-[(4-benziloksi-6-fluoro-2-piridil)sulfonil]propanoat
[1242]
m-hloroperbenzoeva kiselina (12,9 g, 57,561 mmol) je polako dodata na 0 °C u rastvor 2-etilheksil 3-[(4-benziloksi-6-fluoro-2-piridil)sulfanil]propanoata (12,06 g, 28,745 mmol) ) u dihlorometanu (150 mL). Smeša je mešana na ovoj temperaturi preko noć i. Etil acetat (150 mL) je dodat i ispran zasi ć enim rastvorom natrijum bikarbonata (100 mL) i 0,5 M rastvorom natrijum hidroksida (2 X 100 mL). Organska faza je osušena preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana pod sniženim pritiskom da bi se dobio 2-etilheksil 3-[(4-benziloksi-6-fluoro-2-piridil)sulfonil]propanoat (12,05 g, 93%) kao bezbojno ulje. ESI-MS m/z izrač.451,1829, nađeno 452,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,54 min (LC metod I).
Korak 4: 4-benziloksi-6-fluoro-piridin-2-sulfonamid
[1243]
[1244] U rastvor 2-etilheksil 3-[(4-benziloksi-6-fluoro-2-piridil)sulfonil]propanoata (10,69 g, 23,674 mmol) u dimetilsulfoksidu (60 mL) dodat je 1,8-diazabiciklo[ 5.4.0]undec-7-en (7,0700 g, 7 mL, 46,441 mmol). Reakcija je mešana 1 h na sobnoj temperaturi i dodat je rastvor hidroksilamin-O-sulfonske kiseline (13,3 g, 117,60 mmol) i natrijum acetata (7,7 g, 93,864 mmol) u vodi (40 mL) na 10 °C. Reakcija je mešana 1 h na sobnoj temperaturi, razblažena vodom (300 mL) i ekstrahovana etil acetatom (2 X 300 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (300 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je triturisan preko noć i sa mešavinom heptan:etil acetat 9:1 (100 mL). Proizvod je izolovan filtracijom. Proizvod je ponovo rastvoren u etil acetatu i filtriran preko sloja silika gela, eluiranjem etil acetatom (500 mL) i koncentrovan da bi se dobio 4-benziloksi-6-fluoro-piridin-2-sulfonamid (5,56 g, 83%).<1>H NMR (300 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 5,34 (s, 2H), 7,15 (d, J=2,1 Hz, 1H), 7,30-7,54 (m, 6H), 7,62 (s, 2H). 19F NMR (282 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ -66,0 (s, IF). ESI-MS m/z izrač. 282,0474, nađeno 283,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,75 min (LC metod I).
Korak 5: terc-butil (4S)-4-[3-[(4-benziloksi-6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1245]
[1246] Bočica od 20 mL je napunjena pod azotom sa terc-butil (4S)-4-(3-aminopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatom (312 mg, 1,217 mmol), 4-benziloksi- 6-fluoro-piridin-2-sulfonamid (344 mg, 1,219 mmol), anhidrovani dimetil sulfoksid (3,5 mL) i diizopropiletilamin (0,32 mL, 1,837 mmol). Bočica je zatvorena i mešana na 85 °C tokom 16 h. Smeša je razblažena etil acetatom (50 mL), vodom (50 mL) i 10% limunskom kiselinom (10 mL). Dve faze su bile razdvojene. Organska faza je isprana slanim rastvorom (30 mL), osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i rastvarači su upareni. Proizvod je prečišć en hromatografijom na silika gelu korišć enjem gradijenta etil acetata (0% do 70% tokom 30 min) u heksanima daju ć i terc-butil (4S)-4-[3-[(4-benziloksi-6-sulfamoil- 2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (427 mg, 68%) kao bela penasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7,47 - 7,29 (m, 5H), 7,07 (s, 2H), 6,83 (t, J = 5,4 Hz, 1H), 6,66 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,66 (d, J = 2,0 Hz, 1H). ), 6,15 (d, J = 1,8 Hz, 1H), 5,14 (s, 2H), 3,55 (k, J = 9,5 Hz, 1H), 3,25 (široki k, J = 6,4 Hz, 2H), 2,78 (k, J = 9,9 Hz, IH), 2,10 (br s, IH), 1,94 - 1,81 (m, 1 H), 1,57 - 1,43 (m, 2H), 1,45 - 1,29 (m, 15 H), 1,24 (s, 3H). ESI-MS m/z izrač. 518,2563, nađeno 519,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,92 min (LC metoda B).
Korak 6: terc-butil (4S)-4-[3-[[4-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi) pirazol -1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1247]
[1248] U mešani rastvor 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (130 mg, 0,3613 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (2 mL) dodat je karbonil diimidazol (60 mg, 0,3700 mmol) i mešanje je nastavljeno na temperaturi sredine pod azotom tokom 2 h. Za reakciju, rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[(4-benziloksi-6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata (dodato je 160 mg, 0,3085 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (1 mL), zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (200 mL, 1,337 mmol) i smeša je mešana na temperaturi okoline 15 h. Isparljive materije su uklonjene pod sniženim pritiskom, a ostatak je razblažen etil acetatom (20 mL) i vodom (20 mL) i smeša je polako zakiseljena sa 4 M vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (350 mL 4 M, 1.400 mmol) do oko pH = 4.0. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (15 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom (20 mL), osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišć en hromatografijom na silika gelu (gradijent od 0% - 70% etil acetata u heksanu tokom 35 min) da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[4-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]-2-piridil]amino]propil] -2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (72 mg, 27%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 859.34937, pronađeno 860.6 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 2,41 min (LC metoda G).
Korak 7: N-[[4-benziloksi-6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilaminol-2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3-( 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so)
[1249]
[1250] U mešani rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[4-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan- 7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (70 mg, 0,08135 mmol) u anhidrovanom metilen hloridu (2 mL) je dodata trifluorosirć etna kiselina (300 mL, 3.894 mmol) na sobnoj temperaturi pod azotom. Narandžasti rastvor je mešan 1 h, a zatim su isparljive materije uklonjene pod sniženim pritiskom. Ostatku je dodat toluen (20 mL) i koncentrovan pod sniženim pritiskom do suva. Proces je ponovljen još jednom da bi se uklonio ostatak trifluorosirć etne kiseline i konačno sušen u vakuumu 2 h da bi se dobio sirovi N-[[4-benziloksi-6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi) pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetat soli) (71 mg, 100%). ESI-MS m/z izrač.759,29694, nađeno 760,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,01 min (LC metoda B).
Korak 8: (14S)-21-(benziloksi)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12- dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trione
[1251]
[1252] Bočica od 20 mL je napunjena sa N-[[4-benziloksi-6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoracetatna so) (67 mg, 0,07663 mmol), kalijum karbonat ( 65 mg, 0,4703 mmol), cezijum fluorida (24 mg, 0,1580 mmol) i anhidrovanog dimetil sulfoksida (5 mL), tim redosledom. Bočica je isprana strujom azota tokom 2 min, zatvorena i mešana na 160 °C tokom 15 h. Reakcija je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i heterogena smeša je razblažena etil acetatom (30 mL) i vodom (20 mL) i zakiseljena hlorovodoničnom kiselinom (1,0 mL od 1,0 M, 1,000 mmol). Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ponovo ekstrahovan etil acetatom (20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i upareni pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišć en hromatografijom na silika gelu (0% - 10% metanola u dihlorometanu tokom 30 minuta) dajuć i (14S)-21-(benziloksi)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23 ),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (34 mg, 61%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 723,3203, nađeno 724,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,22 min (LC metoda G).
Korak 9: (14S)-8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-21-hidroksi-12,12-dimetil- 2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 264)
[1253]
[1254] U mešani rastvor (14S)-21-(benziloksi)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il] - 12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen- 2,2,4-trion (25 mg, 0,03454 mmol) u anhidrovanom metanolu (5 mL) je dodat 10% paladijum na ugljeniku (vlažan, Degussa, 12 mg, 0,01128 mmol) pod azotom. Heterogena smeša je mešana pod vodonikom (balon) 3 h na sobnoj temperaturi. Balon vodonika je uklonjen i boca je pročišć ena azotom i crna heterogena reakciona smeša je filtrirana preko sloja celita. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (1,5 mL) i filtriran kroz Whatman 0,45 mm PTFE filter za špric. Uzorak je prečišć en upotrebom preparativne HPLC-MS reverzne faze [Luna C18 (2) kolona (75 X 30 mm, veličina čestica 5 mm) koju je prodao Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX), (dvostruki gradijent od 30% - 99% acetonitrila u vodi tokom 15 min (bez modifikatora)] da bi se dobio (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-21-hidroksi-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7, 9,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 264) (8 mg, 36%) kao beličasta čvrsta supstanca<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,24 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,85 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,75 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 6,00 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 5,94 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,24 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 4,02 (t, J = 13,1 Hz, 1H), 3,38 - 3,32 (m, 2H) , 3,08 - 2,97 (m, 1H), 2,92 (t, J = 10,5 Hz, 1H), 2,24 - 2,09 (m, 1H), 1,88 (k, J = 6,6 Hz, 3H), 1,85 - 1,76 (m, 1H) ), 1,66 (s, 3H), 1,63 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 1,60 (s, 3H), 1,49 (d, J = 6,5 Hz, 1H), 1,47 - 1,39 (m, 1H), 0,91 -0,79 (m, 4H), 0,66 (ddd, J = 8,8, 4,7, 3,4 Hz, 2H), 0,58 - 0,48 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.633,2733, nađeno 634,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,27 min (LC metoda B).
Primer 89: Priprema (14S)-21-hidroksi-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia -3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 265)
[1255]
Korak 1: terc-butil (4S)-4-[3-[[4-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil) ciklopropil] propoksi]pirazol-1 -il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1256]
[1257] U mešani rastvor 2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (130 mg, 0,3335 mmol ) u anhidrovani tetrahidrofuran (2 mL) dodat je karbonil diimidazol (55 mg, 0,3392 mmol) i mešanje je nastavljeno na temperaturi sredine pod azotom tokom 2 h. Za reakciju, rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[(4-benziloksi-6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilata ( Dodato je 150 mg, 0,2892 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (1 mL), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (200 mL, 1,337 mmol) i smeša je mešana na temperaturi okoline 15 h. Isparljive materije su uklonjene pod sniženim pritiskom, a ostatak je razblažen etil acetatom (20 mL) i vodom (20 mL) i smeša je polako zakiseljena sa 4 M vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (350 mL 4 M, 1.400 mmol) do oko pH = 4.0. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (15 mL). Kombinovane organske faze su isprane slanim rastvorom (20 mL), osušene preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirane i koncentrovane pod sniženim pritiskom. Sirovi materijal je prečišć en hromatografijom na silika gelu (gradijent od 0% - 70% etil acetata u heksanu tokom 35 minuta) da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[4-benziloksi-6-[[2] -hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksilpirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfa-moil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil -pirolidin-1-karboksilat (128 mg, 50%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 889,3211, nađeno 890,6 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,25 min (LC metoda G).
Korak 2: N-[[4-benziloksi-6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilaminol-2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3-[ 3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so)
[1258]
[1259] U mešani rastvor terc-butil 4-[3-[[4-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (121 mg, 0,1359 mmol) u anhidrovanom metilen hloridu (3 mL) dodata je trifluorosirć etna kiselina (500 mL, 6.490 mmol) na sobnoj temperaturi pod azotom. Narandžasti rastvor je mešan 1 h, a zatim su isparljive materije uklonjene pod sniženim pritiskom. Ostatku je dodat toluen (20 mL) i koncentrovan pod sniženim pritiskom do suva. Proces je ponovljen još jednom da bi se uklonio ostatak trifluorosirć etne kiseline i konačno sušen u vakuumu 2 h da bi se dobio sirovi N-[[4-benziloksi-6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (122 mg, 99%). Materijal je odveden direktno u sledeć i korak bez ikakvog prečiš ć avanja. ESI-MS m/z izrač. 789,2687, nađeno 790,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,9 min (LC metoda B).
Korak 3: (14S)-21-(benziloksi)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia -3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-tri - on
[1260]
[1261] Bočica od 20 mL je napunjena sa N-[[4-benziloksi-6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (115 mg, 0,1272 mmol), kalijum karbonat (110 mg, 0,7959 mmol), cezijum fluorida (39 mg, 0,2567 mmol) i anhidrovanog dimetil sulfoksida (9 mL), tim redosledom. Bočica je isprana strujom azota tokom 2 min, zatvorena i mešana na 160 °C tokom 15 h. Reakcija je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i heterogena smeša je razblažena etil acetatom (40 mL) i vodom (30 mL) i zakiseljena hlorovodoničnom kiselinom (1,6 mL od 1,0 M, 1,600 mmol). Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ponovo ekstrahovan etil acetatom (20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i upareni pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišć en hromatografijom na silika gelu (gradijent od 0% - 10% metanola u dihlorometanu tokom 30 minuta) dajuć i (14S)-21-(benziloksi)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22) ,5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (54 mg, 56%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 753,29205, nađeno 754,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,51 min (LC metoda J).
Korak 4: (14S)-21-hidroksi-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3 , 9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-tri-on (Jedinjenje 265)
[1263] U mešani rastvor (14S)-21-(benziloksi)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heks-aen- 2,2,4-trion (40 mg, 0,05306 mmol) u anhidrovanom metanolu (5 mL) je dodat 10% paladijum na ugljeniku (vlažan, Degussa, 19 mg, 0,01785 mmol) pod azotom. Heterogena smeša je mešana pod vodonikom (balon) 2,5 h na sobnoj temperaturi. Balon vodonika je uklonjen i boca je pročišć ena azotom i crna heterogena reakciona smeša je filtrirana preko sloja celita. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom, a ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (1,5 mL) i filtriran kroz Vhatman 0,45 mm PTFE filter za špric. Uzorak je prečišć en upotrebom preparativne HPLC-MS reverzne faze [Luna C18 (2) kolona (75 X 30 mm, veličina čestica 5 mm) koju je prodao Phenomenek (pn: 00C-4252-U0-AKS), (dvostruki gradijent od 30% - 99% acetonitrila u vodi tokom 15 minuta (bez modifikatora)] da bi se dobio (14S)-21-hidroksi-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksil- 1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 265) (16 mg, 45%) kao bledo plavo-zelena čvrsta supstanca<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ 8,25 (d, J = 2,8 Hz , 1H), 7,85 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,76 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 6,00 (d, J = 1,9 Hz, 1H ), 5,97 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,24 (t, J = 6,1 Hz, 2H), 4,01 (t, J = 12,8 Hz, 1H), 3,36 - 3,32 (m, 1H), 3,02 (d , J = 13,6 Hz, 1H), 2,94 (t, J = 10,5 Hz, 1H), 2,24 - 2,08 (m, 1H), 1,94 (dk, J = 11,0, 6,3 Hz, 2H), 1,90 - 1,79 (m 2H), 1,78 (d, J = 4,6 Hz, 1H), 1,77 - 1,74 (m, 1H), 1,66 (s, 3H), 1,63 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 1,60 (s, 3H), 1,58 (d, J = 7,9 Hz, IH), 1,51 - 1,36 (m, IH), 0,98 - 0,92 (m, 2H), 0,73 - 0,65 (m, 2H).<19>F NMR (376 MHz, metanol-d4) δ -70,92. ESI-MS m/z izrač.663,24506, nađeno 665,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,13 min (LC metoda B).
Primer 90: Priprema 2-imino-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9 , 11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,4-di-on (dijastereomerski par 1, enantiomer 1 ) (Jedinjenje 266), 2-imino-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia -3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,4-dion (dijastereomerni par 1, enantiomer 2) (Jedinjenje 267), 2-imino-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6- tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7, 9,19,21-heksan-2,4-dion (dijastereomer par 2, enantiomer 1) (jedinjenje 271) i 2-imino-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il) - 2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,4-dion (di-astereomer pa ir 2, enantiomer 2) (Jedinjenje 272)
[1264]
Korak 1: 2-Imino-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11 ,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,4-dion (dijastereomerski par 1, enantiomer 1) ( Jedinjenje 266) i 2-imino-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9, 11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,4-dion (dijastereomerski par 1, enantiomer 2) (Jedinjenje 267)
[1265]
[1266] Racemski 2-imino-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9, 11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,4-dion (81 mg, 0,1248 mmol) (dijastereomerni par 1) (81 mg) je podvrgnut hiralnom SFC (ChiralPak AD-H (250 x 10 mm), 5 mM kolona; mobilna faza 34% acetonitril/metanol (50:50, 20 mM NH3), 66% ugljen dioksid, 10 mL/min; koncentracija 12 mg/mL u acetonitrilu/metanolu (50:50 20 mM NH3); zapremina injekcije 70 mL, 100 bara) dajuć i kao prvi enantiomer za eluiranje, 2-imino-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaaza-tetraciklo [17.3.1.111, 14.05, 10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,4-dion (dijastereomerski par 1, enantiomer 1) (Jedinjenje 266) (15,2 mg, 38%),<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,14 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,54 - 7,43 (m, 1H), 7,03 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 6,77 (d, J = 8,1 Hz, IH), 6,54 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,00 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 4,24 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 3,17 (dd, J = 10,8, 7,3 Hz, 1H), 2,12 (s, 1H), 2,05-1,99 (m, 2H), 1,82 (s, 2H), 1,53 (d, J = 26,0 Hz, 9H), 1,23 (d, J = 51,9 Hz, 4H), 0,85 (d , J = 28,0 Hz, 4H); ESI-MS m/z izrač. 632,2505, nađeno 633,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,16 min (LC metoda D); i kao drugi enantiomer za eluiranje, 2-imino-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(tri-fluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6- tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetra-koza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,4-dion (dijastereomer par 1, enantiomer 2) (Jedinjenje 267) (15 mg, 38%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,21 (s, 1H), 7,82 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,09 (s, 2H), 6,83 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,07 (s, 1H), 4,30 (s, 2H), 3,48 (s, 1H), 3,24 (s, 1H), 2,20 (s, 1H), 2,07 (d, J = 14,1 Hz, 2H), 1,87 (s, 2H), 1,59 (d, J = 25,3 Hz, 8H), 1,35 (s, 1H), 1,23 (s, 2H), 0,92 (d, J = 27,7 Hz, 4H). ESI-MS m/z izrač. 632,2505, nađeno 633,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,18 min (LC metoda D).
Korak 2: 2-Imino-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11 ,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,4-dion (dijastereomerski par 2, enantiomer 1) ( Jedinjenje 271) i 2-imino-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9, 11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,4-dion (dijastereomerski par 2, enantiomer 2) (Jedinjenje 272)
[1267]
[1268] Racemski 2-imino-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9, 11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,4-dion (dijastereomerni par 2) (91 mg) je podvrgnuti hiralnom SFC (Phenomenek LUKS-4 (250 X 21,2 mm), 5 mM kolona; mobilna faza 40% acetonitril/metanol (90:10, 20 mM NH3), 60% ugljen-dioksid, 70 mL/min; koncentracija 15 mg /mL u acetonitrilu/metanolu (90:10; 20 mM NH3); zapremina injekcije 700 mL, 100 bara). Prvi enantiomer koji je eluiran dalje je preparativnom hromatografijom reverzne faze koristeć i C18 kolonu i 15 min. gradijent eluent od 50% do 99% acetonitrila u vodi koja sadrži 10 mM amonijum formata da bi se dobio 2-imino-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol -1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,4-dion (dijastereomerski par 2, enantiomer 1) (Jedinjenje 271) (22,4 mg, 50%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,19 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,59 - 7,53 (m, 1H), 7,41 (s, 2H), 7,41 (s, 2H). ), 7,05 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,86 (t, J = 9,5 Hz, 2H), 6,65 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,31 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 4,08 - 3,92 (m, 1H), 3,20 (s, 1H), 2,89 (t, J = 10,8 Hz, 2H), 2,08 (k, J = 7,0, 6,0 Hz, 3H), 1,86 - 1,72 (m, 2H) , 1,55 (d, J = 27,1 Hz, 10H), 1,31 (d, J = 11,4 Hz, IH), 0,92 (d, J = 28,7 Hz, 5H). ESI-MS m/z izrač. 632,2505, nađeno 633,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,02 min (LC metoda D). Drugi enantiomer koji je eluiran iz SFC razdvajanja bio je 2-imino-12,12-dimetil-8-(3-12-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,4-dion (dijastereomerni par 2, enantiomer 2) (Jedinjenje 272) (29,8 mg, 67%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,19 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,60 - 7,52 (m, 1H), 7,41 (s, 2H), 7,41 (s, 2H). ), 7,05 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,85 (dd, J = 12,7, 8,7 Hz, 2H), 6,64 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,06 (d, J = 2,6 Hz, 1H ), 4,31 (s, 2H), 3,99 (d, J = 11,5 Hz, 1H), 3,20 (s, 1H), 2,91 (d, J = 10,9 Hz, 2H), 2,08 (t, J = 7,0 Hz, 3H ), 1,88-1,71 (m, 2H), 1,55 (d, J = 27,0 Hz, 9H), 1,31 (d, J = 11,2 Hz, IH), 0,92 (d, J = 29,2 Hz, 4H). ESI-MS m/z izrač. 632,2505, nađeno 633,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,07 min (LC metoda D).
Primer 91: Priprema (14S)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]-3,3-dideuterio-propoksil-1H-pirazol-1-il )-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19(23),20-heksan -2,2,4-trion (Jedinjenje 269)
[1269]
Korak 1: Dideuterio-[1-(trifluorometil)ciklopropil]metanol
[1271] U suspenziju litijum-aluminijum-deuterida (2,86 g, 71,563 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (100 mL) dodat je rastvor 1-(trifluorometil)ciklopropankarboksilne kiseline (10 g, 64,898 mmol)-hidrohidro-5mol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (100 mL) na 0 °C kap po kap. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakcija je razblažena dietil etrom (100 mL) i ugašena vodom (2,9 mL), 15% natrijum hidroksidom (2,9 mL) i vodom (8,7 mL) uzastopno na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Bela čvrsta supstanca je filtrirana kroz sloj celita. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio dideuterio-[1-(trifluorometil)ciklopropil]metanol (10,855 g, 86%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (250 MHz, CDC13) δ 1,72 (s, IH), 1,03 (m, 2H), 0,79 (m, 2H).
Korak 2: [dideuterio-[1-(trifluorometil)ciklopropil]metil]metansulfonat
[1272]
[1273] U rastvor dideuterio-[1-(trifluorometil)ciklopropil]metanola (8,537 g, 54,064 mmol) i trietilamina (10,942 g, 15,072 mL, 108,13 mmol) u dihlorometan dodat je hlorometan (108,13 mmol) (10,537 g, 54,064 mmol). , 5,0215 mL, 64,877 mmol) kap po kap na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša je isprana sa 10% limunske kiseline (50 mL), zasić enim natrijum bikarbonatom (50 mL) i slanim rastvorom (50 mL). Organski rastvor je osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriste ć i gradijent od 0% do 70% dietil etra u heksanu da bi se dobio [dideuterio-[1-(trifluorometil)ciklopropil]metil] metansulfonat (11,203 g, 88%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (250 MHz, CDC13) δ 3,06 (s, 3H), 1,21 (m, 2H), 1,02 - 0,81 (m, 2H).
Korak 3: 2,2-dideuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]acetonitril
[1274]
[1275] U rastvor [dideuterio-[1-(trifluorometil)ciklopropil]metil] metansulfonata (11.203 g, 47.823 mmol) u dimetil sulfoksidu (55 mL) dodat je natrijum cijanid (2.9296 g, 59.77). Reakciona smeša je mešana na 70 °C tokom 24 h. Posle hlađenja do sobne temperature, u reakcionu smešu su dodati voda (50 mL) i dietil etar (50 mL). Dva sloja su bila razdvojena. Vodeni sloj je ekstrahovan dietil etrom (2 X 70 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 X 50 mL) i slanim rastvorom (50 mL), osušeni preko anhidrovanog magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio 2,2-dideuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] acetonitril (6,828 g, 84%) kao žuta tečnost.<1>H NMR (250 MHz, CDC13) δ 1,18 (m, 2H), 0,93 (s, 2H).
Korak 4: 2,2-dideuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]sir ć etna kiselina
[1277] U rastvor 2,2-dideuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]acetonitrila (6,828 g, 40,211 mmol) u CH3CvaterD (70 mL) dodat je rastvor natrijum deuteroksida (16,487 g, v/v, 160,84 mmol) u deuterijum oksidu (16 mL). Reakciona smeša je mešana na 70 °C tokom 24 h. Posle hlađenja do sobne temperature, CH3CvaterD je uklonjen pod sniženim pritiskom. Rastvarač je razblažen vodom (70 mL) i ispran dietil etrom (2 X 50 mL). Vodeni sloj je zakiseljen sa 6N hlorovodoničnom kiselinom do pH = 1, a zatim je ekstrahovan dietil etrom (3 X 70 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (50 mL), osušeni preko anhidrovanog magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobila 2,2-dideuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]sir ć etna kiselina (6,387 g, 83). %) kao žuta tečnost.<1>H NMR (250 MHz, CDC13) δ 1,18 - 1,05 (m, 2H), 0,93 - 0,79 (m, 2H).
Korak 5: 2,2-dideuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etanol
[1278]
[1279] U suspenziju litijum aluminijum hidrida (952,12 mg, 1,0383 mL, 25,086 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (50 mL) dodat je rastvor 2,2-dideuterio-2-[1-(trifluoro-ciklometil) sirć etne kiseline (3,35 g, 19,297 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (50 mL) na 0 °C kap po kap. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakcija je razblažena dietil etrom (50 mL) i ohlađena do 0 °C. Voda (1 mL), 15% vodeni rastvor natrijum hidroksida (1 mL) i voda (3 mL) su dodavani uzastopno i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 min. Dodat je anhidrovani magnezijum sulfat i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi još 15 min. Čvrste materije su filtrirane i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 2,2-dideuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etanol (3,154 g, 84%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (250 MHz, CDC13) δ 3,79 (s, 2H), 1,05 - 0,78 (m, 2H), 0,78 - 0,41 (m, 2H).
Korak 6: [2,2-dideuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etil]metansulfonat
[1280]
[1281] U rastvor 2,2-dideuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etanola (3.154 g, 16.160 mmol) u dihlorometanu (32 mL) dodat je trietilamin (4.9057 g, 6.7572 mL). mmol). Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i dodat je metansulfonil hlorid (2,2214 g, 1,5009 mL, 19,392 mmol) u kapima. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 dana. Reakcija je razblažena dihlorometanom (50 mL) i isprana sa 10% vodenim rastvorom limunske kiseline (50 mL), zasić enim natrijum bikarbonatom (50 mL) i slanim rastvorom (50 mL). Rastvor je osušen iznad anhidrovanog magnezijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 0% do 50% dietil etra u heksanu da bi se dobio [2,2-dideuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etil] metansulfonat (3,28 g, 82). %) kao bistra tečnost.<1>H NMR (250 MHz, CDC13) δ 4,36 (s, 2H), 3,20-2,87 (s, 3H), 1,15-0,94 (m, 2H), 0,79-0,59 (m, 2H).
Korak 7: 3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propannitril
[1283] U rastvor [2,2-dideuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etil] metansulfonata (3,28 g, 13,303 mmol) u dimetil sulfoksidu (17 mL) dodat je natrijum cijanid (858 mg, 16,6). mmol). Reakciona smeša je mešana na 70 °C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je sipana u vodu (30 mL). Smeša je ekstrahovana dietil etrom (3 x 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 X 30 mL) i slanim rastvorom (50 mL), osušeni preko anhidrovanog magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobio 3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil ]propannitril (2,267 g, 99%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (250 MHz, CDC13) δ 2,54 (s, 2H), 1,14 - 1,00 (m, 2H), 0,80 - 0,66 (m, 2H).
Korak 8: 3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanska kiselina
[1284]
[1285] U rastvor 3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propannitrila (2,267 g, 13,178 mmol) u etanolu (34 mL) dodat je rastvor natrijum hidroksida (2,1083 g, 52,712 mmol) u vodi (9 mL). Reakciona smeša je mešana na 70 °C tokom 20 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je koncentrovana pod vakuumom, a zatim je razblažena vodom (30 mL). Vodeni rastvor je ispran dietil etrom (2 X 30 mL), a zatim je zakiseljen sa 6 N hlorovodoničnom kiselinom (vodeni) do pH = 1. Vodeni rastvor je ekstrahovan dietil etrom (3 X 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (30 mL), osušeni preko anhidrovanog magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobila 3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanoična kiselina (2,652 g, 92). %) kao svetložuta tečnost.<1>H NMR (250 MHz, CDC13) δ 2,55 (s, 2H), 1,07 - 0,82 (m, 2H), 0,61 (m, 2H).
Korak 9: 3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-1-ol
[1286]
[1287] U suspenziju litijum aluminijum hidrida (628 mg, 14,940 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (20 mL) dodat je rastvor 3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanske kiseline (2,652 g). , 12,097 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (20 mL) na 0 °C kap po kap. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakcija je razblažena dietil etrom (20 mL) i ohlađena na 0 °C. Voda (0,63 mL), 15% vodeni rastvor natrijum hidroksida (0,63 mL) i voda (1,9 mL) su dodavani u reakcionu smešu uzastopno. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 min, zatim je dodat magnezijum sulfat i reakcija je mešana još 15 min na sobnoj temperaturi. Beli talog je filtriran. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio 3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-1-ol (1,78 g, 82%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (250 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 4,45 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 3,46 - 3,36 (m, 2H), 1,50 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 0,86 (m, 2H), 1,50 (t, J = 6,2 Hz, 2H),<1>H NMR (250 MHz, dimetil sulfoksid-d6), 0,69 (m, 2H).
Korak 10: terc-butil 3-[3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi] pirazol-1-karboksilat
[1289] U rastvor terc-butil 5-okso-1H-pirazol-2-karboksilata (910 mg, 4,940 mmol) i 3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-1 -ol (880 mg, 5.171 mmol) u tetrahidrofuranu (11.25 mL) je dodat trifenilfosfin (1.36 g, 5.185 mmol). U smešu je polako dodat diizopropil azodikarboksilat (1,05 g, 5,193 mmol) u kapima tokom 5 min. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Tetrahidrofuran je uklonjen u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišć en hromatografijom na silika gelu koristeć i plitki gradijent od 100% heksana do 20% etil acetata u heksanu daju ć i terc-butil 3-[3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-karboksilat (1,1 g, 66%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,83 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 5,85 (d, J = 3,0 Hz, 1H), 4,27 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 1,90 (t , J = 6,4 Hz, 2H), 1,61 (s, 9H), 1,00 - 0,91 (m, 2H), 0,64 - 0,50 (m, J = 1,6 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač. 336.163, nađeno 337.2 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 2,03 min (LC metoda E).
Korak 11: 3-[3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]-1H-pirazol
[1290]
[1291] U balon koji sadrži terc-butil 3-[3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklo propil]propoksi]pirazol-1-karboksilat (1,1 g, 3,270 mmol) dodat je dihlorometan ( 22 mL) i trifluorosirć etne kiseline (6,3 mL, 81,77 mmol). Posle 30 min, smeša je uparena do suvoće i neutralizovana zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata. Reakcija je ekstrahovana etil acetatom i organski sloj je osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i uparen da bi se dobio 3-[3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]-1H-pirazol (762 mg, 99%) kao bezbojno ulje. ESI-MS m/z izrač. 236,11055, nađeno 237,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,43 min (LC metoda E).
Korak 12: terc-butil 2-hloro-6-[3-[3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[1292]
terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (800 mg, 3.224 mmol), 3-[3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]-1H-pirazol (762 mg 3,226 mmol) i kalijum karbonat (1,1 g, 7,959 mmol) su kombinovani u anhidrovanom dimetil sulfoksidu (22,0 mL). 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (72,5 mg, 0,6463 mmol) je dodat i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom 18 h. Reakciona smeša je razblažena vodom (16 mL) i mešana 15 min. Dobijena čvrsta supstanca je filtrirana, sakupljena i osušena na visokom vakuumu. Preostali filtrat je razblažen etil acetatom i ispran vodom (3 X 20 mL). Organski slojevi su kombinovani i isprani slanim rastvorom. Organski sloj je odvojen, osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 100% heksana do 60% etil acetata u heksanu da bi se dobilo svetlo žuto ulje koje je zatim osušeno pod vakuumom da bi se dobila bledo žuta čvrsta supstanca. Ova prečišć ena čvrsta supstanca i čvrsta supstanca od početne filtracije su kombinovani da bi se dobilo terc-butil 2-hloro-6-[3-[3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1 -il]piridin-3-karboksilat (1,36 g, 94%).<1>H NMR (400 MHz, hloroformd) δ 8,35 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,18 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,95 (d , J = 2,8 Hz, 1H), 4,26 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 1,95 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 1,62 (s, 9H), 1,02 - 0,94 (m, 2H), 0,66 - 0,55 (m, J = 1,8 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač. 447,15054, nađeno 448,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,49 min (LC metoda E).
Korak 13: 2-hloro-6-[3-[3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[1293]
terc-butil 2-hloro-6-[3-[3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (1,36 g, 3,037 mmol) je bio rastvoren u dihlorometanu (30 mL). U smešu je polako dodata trifluorosirć etna kiselina (5.0 mL, 64.90 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom do čvrste supstance koja je zatim suspendovana u dietil etru i filtrirana, a zatim je čvrsta supstanca ponovo razmuć ena u dietil etru i filtrirana dajuć i čvrstu supstancu koja je rekristalizovana iz dihlorometana, a zatim sušena pod vakuumom 20 h da bi se dobilo 2 -hloro-6-[3-[3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (1,055 g, 89%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.391,08795, nađeno 392,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,35 min (LC metoda E).
Korak 14: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil) ciklopropil] propoksi]pira - zol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1294]
[1295]2-hloro-6-[3-[3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (250 mg, 0,6381 mmol) i sveže rekristalizovani karbonil diimidazol (120 mg, 0,7401 mmol) su kombinovani u tetrahidrofuranu (6,0 mL) i mešani 2 h na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (303 mg, 0,7345 mmol), a zatim anhidrovani 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (240 mL, 1,605 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 24 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata, a zatim slanim rastvorom. organski sloj je odvojen, osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i uparen, a zatim prečišć en hromatografijom na silika gelu koriste ć i gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata koji je dao terc-butil(4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (259 mg, 52%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 785,2918, nađeno 786,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,06 min (LC metoda E).
Korak 15: (14S)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]-3,3-dideuterio-propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6- tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5 (10),6,8,19(23),20-heksan-2,2 ,4-trion (Jedinjenje 269)
[1296]
terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[3,3-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1- il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (228 mg, 0,2900 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (7 mL) i smeši je dodata trifluorosirć etna kiselina (900 mL, 11,68 mmol) i mešana na sobnoj temperaturi 15 min. Koncentrovana smeša do suva pod sniženim pritiskom, ponovo rastvorena u etil acetatu i zatim dodat zasić eni vodeni rastvor natrijum bikarbonata (10 mL). Razdvojeni su slojevi i dalje ekstrahovan vodeni sloj etil acetatom (2 X 10 mL). Kombinovani organski slojevi, isprani slanim rastvorom, zatim sušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni do suva pod sniženim pritiskom. Kombinuje se dobijeni materijal, kalijum karbonat (205 mg, 1.483 mmol), 3 A molekularna sita i dimetil sulfoksid (9.5 mL) u bočici, propušta azotom, zatvara se, zagreva se na 150 °C i meša 16 h. Ohlađena do sobne temperature i smeša je filtrirana, razblažena etil acetatom i isprana vodom (2 X 20 mL), a zatim slanim rastvorom. Organski sloj je dalje ispran vodom (1X), zatim osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i uparen. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata, nakon čega je usledila druga kolona za hromatografiju na silika gelu koristeć i gradijent od 100% dihlorometana do 10% metanola u dihlorometanu da bi se dobilo (14S)-12.-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]-3,3-dideuterio-propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 269) (44,8 mg, 24%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,51 (s, 1H), 8,21 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,57 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,98 (s, 1H), 6,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,12 ( d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,20 (t, J = 6,3 Hz, 2H), 3,92 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 3,17 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 2,95 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 2,69 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 2,10 (d, J = 18,7 Hz, 1H), 1,83 (t, J = 6,2 Hz, 3H), 1,79 - 1,69 (m, 1H), 1,60 (s, 4H), 1,57 (d, J = 12,5 Hz, 2H), 1,51 (s, 3H), 1,37 - 1,22 (m, 2H), 0,93 - 0,89 (m, 2H), 0,75 (t , J = 1,6 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač. 649,2627, nađeno 650,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,27 min (LC metoda E).
Primer 92: Priprema (14S)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]-2,2-dideuterio-propoksi}-1H-pirazol-1- il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2 ,2,4-trion (Jedinjenje 270)
Korak 1: 1,1-dideuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etanol
[1298]
[1299] U suspenziju litijum aluminijum deuterida (1,0265 g, 25,684 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (50 mL) dodat je rastvor 2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]sirć etne kiseline (3,954 g, 19,75 mmol) u 75 anhidrovanom rastvoru. tetrahidrofuran (50 mL) kap po kap na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi dodatnih 16 h. Reakciona smeša je razblažena dietil etrom (50 mL) i ohlađena na 0 °C. Voda (1 mL), 15% natrijum hidroksid (vod.) (1 mL) i voda (3 mL) su dodati u reakcionu smešu na 0 °C. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 15 min. U reakcionu smešu je dodat anhidrovani magnezijum sulfat. Reakcija je mešana još 15 min. Beli talog je uklonjen usisnom filtracijom, a rastvarač je uklonjen pod sniženim pritiskom da bi se dobio 1,1-dideuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etanol (3,629 g, 82%) kao svetlo žuto ulje.<1>H NMR (250 MHz, hloroformd) δ 1,83 (s, 2H), 1,43 (s, 1H), 1,04-0,91 (m, 2H), 0,72-0,62 (m, 2H).
Korak 2: [1,1-dideuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etil]metansulfonat
[1300]
[1301] U rastvor 1,1-dideuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etanola (3,629 g, 16,269 mmol) u dihlorometanu (36 mL) dodat je trietilamin (4,9388 g, 6,8028 mL). mmol). Smeša je ohlađena na 0 °C. metansul-fonil hlorid (2,2364 g, 1,5111 mL, 19,523 mmol) je dodat u kapima u reakcionu smešu. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Reakciona smeša je razblažena dihlorometanom (100 mL) i isprana sa 10% vodenim rastvorom limunske kiseline (30 mL), zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (30 mL) i slanim rastvorom (30 mL). Organski rastvor je osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Sirovi proizvod je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 0% do 70% dietil etra u heksanu da bi se dobio [1,1-dideuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etil] metansulfonat (3,413 g, 90%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 3,02 (s, 3H), 2,02 (s, 2H), 1,14-0,95 (m, 2H), 0,81-0,63 (m, 2H).
Korak 3: 2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propannitril
[1302]
[1303] U rastvor [1,1-dideuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etil] metansulfonata (3,413 g, 14,571 mmol) u dimetil sulfoksidu (17 mL) dodat je natrijum cijanid (892,62 mg, 1418). mmol). Reakciona smeša je mešana na 70 °C tokom 16 h. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je razblažena vodom (30 mL) i ekstrahovana dietil etrom (3 X 30 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 x 30 mL) i slanim rastvorom (30 mL), osušeni preko anhidrovanog magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 0% do 50% dietil etra u pentanu da bi se dobio 2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propannitril (2,181 g, 81%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 1,92 (s, 2H), 1,14-1,01 (m, 2H), 0,74 (m, 2H).
Korak 4: 2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanska kiselina
[1304]
[1305] U rastvor 2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propannitrila (2,181 g, 11,753 mmol) u CH3CvaterD (30 mL) dodat je D2O (4 mL) i natrijum deuteroksid (D2O 4,8191 g, 40% v/v, 47,012 mmol). Reakciona smeša je mešana na 70 °C tokom 20 h. CH3CvaterD je uklonjen pod sniženim pritiskom. Dobijeni rastvor je razblažen sa D20 (20 mL) i ispran dietil etrom (2 X 20 mL). Vodeni rastvor je zatim zakišeljen sa 6N hlorovodoničnom kiselinom do pH = 1 i zatim je ekstrahovan dietil etrom (3 x 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (20 mL), osušeni preko anhidrovanog magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod sniženim pritiskom da bi se dobila 2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanoična kiselina (1,945 g, 89). %) kao tečnost boje ć ilibara.<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 1,89 (s, 2H), 1,10-0,88 (m, 2H), 0,75-0,52 (m, 2H).
Korak 5: 2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-1-ol
[1306]
[1307] Za suspenziju litijum aluminijum hidrida (521,15 mg, 0,5683 mL, 13,731 mmol) u anhidrovanom tetrahidro-furan (20 mL) je dodat rastvor 2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanoične kiseline (1,945 g, 10,562 mmol) u tetrahidrofuranu (20 mL) na 0 °C kap po kap. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakcija je razblažena dietil etrom (30 mL) i ugašena vodom (0,53 mL), 15% vodenim rastvorom natrijum hidroksida (0,53 mL) i vodom (1,59 mL) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min, a zatim je dodat anhidrovani magnezijum sulfat i mešan dodatnih 15 min. Čvrsta supstanca je filtrirana i filtrat je koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-1-ol (1,423 g, 75%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (250 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 4,44 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 3,38 (s, 2H), 1,57 (s, 2H), 0,87 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 0,69 (s, 2H).
Korak 6: terc-butil 3-[2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi] pirazol-1-karboksilat
[1308]
[1309] U rastvor terc-butil 5-okso-1H-pirazol-2-karboksilata (775 mg, 4,208 mmol) i 2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-1 -ol (750 mg, 4.407 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) je dodat trifenilfosfin (1.156 g, 4.407 mmol). U smešu je polako dodat diizopropil azodikarboksilat (870 mL, 4.419 mmol) u kapima tokom 10 min. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 30 min, a zatim na 50 °C tokom 30 min. Tetrahidrofuran je uklonjen, a ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriste ć i plitki gradijent od 100% heksana do 20% etil acetata u heksanu daju ć i tercbutil 3-[2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil ] propoksi]pirazol-1-karboksilat (0,998 g, 71%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,83 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 5,85 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,26 (s, 2H), 1,70 (s, 2H), 1,61 (s, 9H), 0,99-0,93 (m, 2H), 0,62-0,56 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.336.163, nađeno 337.2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,96 min (LC metoda B).
Korak 7: 3-[2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]-1H-pirazol
[1310]
[1311] U balon sa okruglim dnom koji sadrži terc-butil 3-[2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-karboksilat (998 mg, 2,967 mmol) dodat je dihlorometan (20 mL) i trifluorosirć etne kiseline (5,7 mL, 73,98 mmol). Posle 5 min, reakcija je uparena do suva i neutralizovana zasić enim rastvorom natrijum bikarbonata. Reakcija je ekstrahovana etil acetatom, organski sloj je osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i uparen da bi se dobio 3-[2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]-1H-pirazol (700 mg , 100%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,36 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 5,73 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 4,13 (d, J = 1,6 Hz, 2H), 1,72 (s , 2H), 0,99-0,93 (m, 2H), 0,63-0,56 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 236,11055, nađeno 237,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,41 min (LC metoda B).
Korak 8: terc-butil 2-hloro-6-[3-[2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil) ciklopropil]propoksilpirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[1312]
[1313] Smeša 3-[2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]-1H-pirazola (700 mg, 2,963 mmol), terc-butil 2,6-dihloropiridin-3- karboksilat (742 mg, 2,991 mmol), kalijum karbonat (501 mg, 3,625 mmol) i 1,4-diazabiciklo[2.2.2] oktan (71 mg, 0,6330 mmol) u dimetil sulfoksidu (5 mL) su mešani na sobnoj temperaturi tokom 15 č. Reakcija je razblažena vodom i ekstrahovana etil acetatom. Kombinovani ekstrakti su isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni. Dobijeni ostatak je prečišć en hromatografijom na koloni silika gela sa gradijentom od 100% heksana do 20% etil acetata u heksanu da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[3-[2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (472 mg, 36%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,35 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,18 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,95 (d , J = 2,8 Hz, 1H), 4,25 (s, 2H), 1,74 (s, 2H), 1,61 (s, 9H), 1,02 - 0,94 (m, 2H), 0,63 - 0,57 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.447,15054, nađeno 448,23 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,95 min (LC metoda A).
Korak 9: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil) ciklopropil] propoksi] pira - zol-1-il] piridin-3-karbonil] sulfamoil]-2-piridil] amino] propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1314]
[1315] Rastvor terc-butil 2-hloro-6-[3-[2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilata (250 mg, 0,5582 mmol) u dihlorometanu (1,5 mL) i trifluorosirć etnoj kiselini (500 mL, 6,490 mmol) su mešani na sobnoj temperaturi 4 h. Rastvarači su zatim uklonjeni i ostatak je osušen pod vakuumom. Dobijeni ostatak je rastvoren u tetrahidrofuranu (2 mL) i dodat je karbonil diimidazol (102 mg, 0,6291 mmol) i smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (255 mg, 0,6181 mmol), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (130 mL, 0,8693 mmol) i reakcija je mešana 16 h. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa malom količinom 1:1 zasić enog vodenog rastvora amonijum hlorida/fiziološke otopine. Organski slojevi su odvojeni, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni. Dobijeni smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koristeć i plitki gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[ 3-[2,2-didevterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2 -dimetilpirolidin-1-karboksilat (172 mg, 39%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 785,2918, nađeno 786,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,93 min (LC metoda A).
Korak 10: (14S)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]-2,2-dideuterio-propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6- tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10), 6,8,19,21-heksan-2,2,4- trion (Jedinjenje 270)
[1316]
[1317] Rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2,2-dideuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] pro-poksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (170 mg, 0,2162 mmol) u dihlorometanu (1.2 mL) i trifluorosirć etna kiselina (400 mL, 5.227 mmol) je mešana na sobnoj temperaturi 4 h. Rastvarači su zatim uklonjeni i ostatak je rastvoren u etil acetatu. Smeša je isprana sa 2 mL zasić enog rastvora natrijum bikarbonata i organski sloj je sakupljen i rastvarač je uklonjen pod vakuumom. Dobijeni ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (8 mL) i dodata su 3 A molekularna sita i reakciona smeša je mešana 10 min. Zatim su dodati cezijum fluorid (101 mg, 0,6649 mmol) i kalijum karbonat (96 mg, 0,6946 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 150 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Vhatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišć en HPLC-MS metodom reverzne faze koriš ć enjem dvostrukog gradijenta od 30% - 99% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilna faza A = voda (0,05% hlorovodonične kiseline), mobilna faza B = acetonitril) da bi se dobio (14S)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]-2,2-dideuterio-propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza- 1(23),5(10),6,8, 19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 270) (62,4 mg, 44%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9,87 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,04 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,56 - 7,44 (m, 2H) , 7,23 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,55 (dd, J = 8,2, 1,0 Hz, 1H), 5,91 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,71 (dd, J = 8,6, 3,4 Hz, 1H), 4,24 (s, 2H), 3,89 (s, 1H), 3,33 (dd, J = 10,1, 7,4 Hz, 1H), 3,15 (dd, J = 14,0, 3,6 Hz, 1H), 3,05 (t, J = 9,8 Hz, 1H), 2,56 (s, 1H), 2,06 (dd, J = 12,2, 7,7 Hz, 1H), 1,74 (s, 2H), 1,61 (t, J = 4,0 Hz, 10H), 1,01 - 0,93 (m, 2H), 0,64-0,57 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.649,2627, nađeno 650,12 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,75 min (LC metoda G).
Primer 93: Priprema (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-di (trideute- rio)metil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2 ,4-trion (Jedinjenje 274)
[1318]
Korak 1: 3-[3,3,3-trideuterio-2-nitro-2-(trideuteriometil)propil]tetrahidropiran-2-on
[1319]
[1320] 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (7,7 mL, 51,3 mmol) je dodat u smešu 1,1,1,3,3,3-heksadeuterio-2-nitro-propana (CDN Isotopes, Kvebek, Kanada) (23,4 g, 246,2 mmol) i 3-metilen-tetrahidropiran-2-on (23,0 g, 205,2 mmol). Reakcija je bila egzotermna: nakon što se početno razvijanje toplote raspršilo, smeša je zagrevana u uljnom kupatilu na 80 °C tokom 18 h, a zatim ohlađena do sobne temperature i razblažena sa 1M hlorovodoničnom kiselinom (100 mL) i dihlorometanom (500 mL). Faze su razdvojene. Vodena faza je odbačena, a organska faza je osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana u vakuumu da bi se dobio 3-[3,3,3-trideuterio-2-nitro-2-(trideuteriometil)propil] tetrahidropiran-2-on ( 41,8 g, 98%) kao žuto ulje. Materijal je korišć en u slede ć em koraku bez daljeg prečiš ć avanja. ESI-MS m/z izrač. 207,22, nađeno 208,10 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,29 min (LC metoda K).
Korak 2: 3-(3-Hidroksipropil)-5,5-bis(trideuteriometil)pirolidin-2-on
[1322] U rastvor 3-[3,3,3-trideuterio-2-nitro-2-(trideuteriometil)propil]tetrahidropirana dodata je suspenzija Ranei nikla (5 g, 85 mmol) u vodi (10 mL). -2-on (41,8 g, 201,8 mmol) u etanolu (600 mL). Dobijena suspenzija je hidrogenizovana pod 60 PSI H2 na 80 °C tokom 22 h, ohlađena do sobne temperature, filtrirana kroz celit i zatim koncentrovana u vakuumu da bi se dobilo narandžasto ulje. Narandžasto ulje je prečišć eno hromatografijom na silika gelu (0% - 50% etilacetat u heksanu gradijentu) da bi se dobio čist 3-(3-hidroksipropil)-5,5-bis(trideuteriometil)pirolidin-2-on (7 g, 20 %) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (250 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7,62 (s, 1H), 4,39 (t, 1H), 3,81 (m, 2H), 2,37 (m, 2H), 2,01 (dd, 1H), 1,73 (m, IH), 1,43 (m, 3H), 1,17 (m, 1 H). ESI-MS m/z izrač.177,20, nađeno 178,00 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,91 min (LC metoda K).
Korak 3: (3S)-3-(3-hidroksipropil)-5,5-bis(trideuteriometil)pirolidin-2-on
[1323]
[1324] Racemski 3-(3-hidroksipropil)-5,5-bis(trideuteriometil)pirolidin-2-on (6,78 g) podvrgnut je hiralnom razdvajanju SFC hromatografijom koristeć i ChiralPak IA (250 Ks 21,2 mm kolona, veličina čestica 5 mm ) sa 10% metanola (bez modifikatora)/90% mobilne faze ugljen-dioksida pri 70 mL/min tokom 7,0 min (zapremina injekcije = 500 mL rastvora od 32 mg/mL u metanolu) dajuć i kao prvi enantiomer koji se eluira, (3S)- 3-(3-hidroksipropil)-5,5-bis(trideuteriometil)pirolidin-2-on (2,4 g, 70,7%) kao prljavo bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.177,20, nađeno 178,00 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,91 min (LC metoda B).
Korak 4: 3-[(3S)-5,5-bis(trideuteriometil)pirolidin-3-il]propan-1-ol
[1325]
[1326] U suspenziju litijum aluminijum hidrida (1,37 g, 35,16 mmol) (2 peleta) u tetrahidrofuranu (22 mL) na sobnoj temperaturi, u atmosferi azota, dodat je čvrst (3S)-3-(3-hidroksipropil) -5,5-bis(trideuteriometil)pirolidin-2-on (2,4 g, 13,54 mmol) tokom 20 minuta u porcijama. Unutrašnja temperatura je održavana ispod 32 °C tokom dodavanja. Reakcija je zatim zagrevana do refluksa i mešana u atmosferi azota. Posle 19 h, reakcija je postala gusta i više se nije mešala. Reakcija je ohlađena do sobne temperature. Dodati tetrahidrofuran (10 mL) i metil terc-butil etar (10 mL) u smešu, nakon čega je usledilo dodavanje zasić enog natrijum sulfata (vodenog) dok se više ne stvaraju mehuri ć i. Dodatnih 10 mL zasi ć enog rastvora natrijum sulfata je dodato zamuć enom rastvoru. Smeša je filtrirana kroz celit i isprana metil terc-butil etrom. Filtrat je koncentrovan da bi se dobio 3-[(3S)-5,5-bis(trideuteriometil)pirolidin-3-il]propan-1-ol (1,85 g, 83%) kao bistro ulje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 4,32 (t, J = 5,2 Hz, 1H), 3,36 (k, J = 6,2 Hz, 3H), 2,95 (dd, J = 10,6, 7,5 Hz, 1H), 2,40 (dd, J = 10,6, 7,6 Hz, 1H), 2,03 (hept, J = 7,7 Hz, 1H), 1,86 (m, 1H), 1,68 (dd, J = 12,1, 8,2 Hz, 1H), 1,427-1. (m, 5H), 1,01 (dd, J = 12,1, 8,8 Hz, IH).
Korak 5: terc-butil (4S)-4-(3-hidroksipropil)-2,2-bis(trideuteriometil)pirolidin-1-karboksilat
[1327]
[1328] U rastvor 3-[(3S)-5,5-bis(trideuteriometil)pirolidin-3-il]propan-1-ola (1,85 g, 11,33 mmol) (1,85 g) u metil terc-butil etru (11.5 mL) je dodat terc-butoksikarbonil terc-butil karbonat (2.60 g, 11.91 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi u atmosferi azota. Posle 17 h, reakcija je razblažena vodom i ekstrahovana. Vodeni sloj je ponovo ekstrahovan metil terc-butil etrom. Organski slojevi su kombinovani, osušeni sa natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani da bi se dobilo bistro ulje (2,94 g). Bistro ulje je prečišć eno fleš hromatografijom (silicijum dioksid, 30% etil acetat u heksanu) da bi se dobio terc-butil (4S)-4-(3-hidroksipropil)-2,2-bis(trideuteriometil)pirolidin-1-karboksilat (2,41 g, 81%) kao bistro ulje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 4,36 (t, J = 5,2 Hz, 1H), 3,61 - 3,48 (m, 1H), 3,37 (k, J = 6,0 Hz, 2H), 2,76 (k, J = 10,1 Hz, IH), 2,14 - 1,96 (m, IH), 1,95 - 1,77 (m, IH), 1,48 - 1,24 (m, 14 H).
Korak 6: terc-butil (4S)-4-(3-metilsulfoniloksipropil)-2,2-bis(trideuteriometil) pirolidin-1-karboksilat
[1329]
[1330] U rastvor terc-butil (4S)-4-(3-hidroksipropil)-2,2-bis(trideuterio metil)pirolidin-1-karboksilata (2,41 g, 9,149 mmol) u metil terc-butil etru ( 15 mL) je dodat trietilamin (1.111 g, 1.530 mL, 10.98 mmol), a zatim metansulfonil hlorid (781 mL, 10.09 mmol) u kupatilu sa ledenom vodom tokom 5 minuta. Odmah se formira beli talog. Reakciona smeša je dovedena do sobne temperature. Reakciona smeša je zatim razblažena metil terc-butil etrom, filtrirana, isprana vodom, osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana. Posle stajanja preko noć i, terc-butil (4S)-4-(3-metilsulfoniloksipropil)-2,2-bis(trideuteriometil)pirolidin-1-karboksilat (2,64 g, 81%) se očvrsnuo da bi postao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 4,19 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,63 - 3,50 (m, 1H), 3,16 (s, 3H), 2,79 (k, J = 10,3 Hz, 1H), 3,63 - 3,50 (m, 1H), 3,16 (s, 3H), 2,79 (k, J = 10,3 Hz, 1H). ), 2,17-2,02 (m, 1H), 1,97-1,80 (m, IH), 1,73-1,58 (m, 2H), 1,47-1,26 (m, 12H).
Korak 7: terc-butil (4S)-4-(3-azidopropil)-2,2-bis(trideuteriometil)pirolidin-1-karboksilat
[1331]
[1332] U rastvor terc-butil (4S)-4-(3-metilsulfoniloksipropil)-2,2-bis(trideuteriometil)pirolidin-1-karboksilata (2,64 g, 7,576 mmol) u N,N-dimetilformamidu (26 mL) na sobnoj temperaturi je dodat natrijum-azid (1,07 g, 16,46 mmol). Reakcija je zagrejana do 50 °C i mešana u atmosferi azota. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i ekstrahovana etil acetatom (200 mL) i isprana vodom (50 mL). Organski sloj je osušen natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan. Heptan je dodat i koncentrovan da bi se uklonio sav višak N,N-dimetilformamida dajuć i terc-butil (4S)-4-(3-azidopropil)-2,2-bis(trideuterio metil)pirolidin-1-karboksilat (1,77 g, 80,2% ).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 3,55 (dt, J = 10,7, 7,1 Hz, 1H), 3,32 (t, 2H), 2,85 - 2,70 (m, 1H), 2,20 - 2,01 (m, 1H) , 1,88 (td, J = 14,0, 13,5, 6,1 Hz, 1H), 1,61-1,28 (m, 14H).
Korak 8: terc-butil (4S)-4-(3-aminopropil)-2,2-bis(trideuteriometil)pirolidin-1-karboksilat
[1333]
[1334] U rastvor terc-butil (4S)-4-(3-azidopropil)-2,2-bis(trideuterio metil)pirolidin-1-karboksilata (1,77 g, 6,137 mmol) u etil acetatu (330,8 mL) dodat je oksid platine (50,68 mg, 0,2232 mmol). Reakciona smeša je hidrogenizovana korišć enjem Buchiglasuster aparata za hidrogenaciju. Smeša je pročišć ena tri puta iz vakuuma sa azotom, zatim tri puta iz vakuuma sa vodonikom (0,4 L). Reakcija je mešana u atmosferi vodonika na 930 rpm pri pritisku vodonika od oko 2,18 bara na 25 °C tokom 18 h. Potrošeno je 337 mL gasovitog vodonika. Reakciona smeša je filtrirana kroz celit i isprana vodom (25 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom (25 mL), osušen natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan da bi se dobio terc-butil (4S)-4-(3-aminopropil)-2,2-bis(trideuteriometil)pirolidin-1 -karboksilat (1,66 g, kvantitativni prinos) kao tamno ulje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 3,53 (dt, J = 12,2, 6,5 Hz, 1H), 2,76 (k, J = 10,2 Hz, 1H), 2,18 - 1,99 (m, 1H), 1. , J = 15,8, 14,2, 6,1 Hz, IH), 1,55 - 1,21 (m, 16H).
Korak 9: terc-butil (4S)-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-bis(trideuterio metil)pirolidin-1-karboksilat
[1335]
[1336] U rastvor terc-butil (4S)-4-(3-aminopropil)-2,2-bis(trideuteriometil) pirolidin-1-karboksilata (1,61 g, 6,135 mmol) u dimetil sulfoksidu (30 mL) je dodat diizopropiletilamin (1,28 mL, 7,349 mmol) a zatim 6-fluoropiridin-2-sulfonamid (1,31 g, 7,436 mmol). Reakcija je stavljena u atmosferu azota i mešana na 85 °C tokom 18 h. Reakciona smeša je razblažena metil tercbutil etrom (50 mL) i ekstrahovana vodom (20 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Ostatak je rastvoren u dihlorometanu i prečišć en hromatografijom na silika gelu (60% etil acetat u heksanu). Za kombinovane frakcije koje sadrže proizvod, drugo prečišć avanje je završeno hromatografijom na silika gelu (gradijent od 0% - 5% metanola u dihlorometanu) da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[(6-sulfamoil-2-).piridil)amino]propil]-2,2-bis(trideuteriometil)pirolidin-1-karboksilat (1,72g, 67%) kao bela lepljiva čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksidd6) δ 7,51 (t, J = 8,5, 7,2 Hz, 1H), 7,06 (s, 2H), 7,01 - 6,88 (m, 2H), 6,61 (d, J = 8,4 Hz , 1H), 3,55 (k, J = 9,2 Hz, 1H), 3,30 -3,21 (m, 2H), 2,88 - 2,71 (m, 1H), 2,19 - 2,00 (m, 1H), 2,01 - 1,78 (m, 1H), 2,19 - 2,00 (m, 1H), 3,55 (k, J = 9,2 Hz, 1H), ), 1,66-1,27 (m, 14H).
Korak 10: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi) pirazol-1-il ]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-bis(trideuteriometil)pirolidin-1-karboksilat
[1338] U rastvor 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (250 mg, 0,6892 mmol) u tetrahidrofuran (2.058 mL) je dodat karbonil diimidazol (134 mg, 0.8264 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Dodat je karbonil diimidazol (11,8 mg, 0,07277 mmol) i ostavljen da se meša još 30 min. Rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-bis(trideuteriometil)pirolidin-1-karboksilata (307 mg, 0,7334 mmol) u tetrahidrofuranu (420 mL) je dodat u kapima, a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (310 mL, 2,073 mmol). Reakcija je nastavljena da se meša na sobnoj temperaturi pod gasom azota. Posle 18 h dodaju se voda (8,2 mL), etil acetat (25 mL) i hlorovodonična kiselina (710 mL 6 M, 4,260 mmol) dajuć i pH = 3 u vodenom sloju. Reakciona smeša je ekstrahovana etil acetatom, osušena preko natrijum sulfata, filtrirana i koncentrovana. Prečišć avanje je izvedeno fleš hromatografijom (50% etil acetata u heksanu) da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0).2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-bis(trideuteriometil)pirolidin-1-karboksilat (308 mg , 59%). ESI-MS m/z izrač.
759,35, nađeno 760,4 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 2,20 min (LC metoda G).
Korak 11: N-[[6-[3-[(3S)-5,5-bis(trideuteriometil)pirolidin-3-il]propilaminol-2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3-( 2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[1339]
[1340] U rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazola -1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-bis(trideuteriometil)pirolidin-1-karboksilat (308 mg, 0,3565 mmol) u dihlorometanu (1,26 mL ) i toluen (624 mL) je dodata trifluorosirć etna kiselina (411 mL, 5.335 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2.5 h. Reakciona smeša je koncentrovana, razblažena toluenom (4,989 mL) i koncentrovana na 45 °C da bi se dobio N-[[6-[3-[(3S)-5,5-bis(trideuteriometil)pirolidin-3-il]propilamino ]-2-piridil]sul-fonil]-2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (276 mg, 100%). ESI-MS m/z izrač.
659,2928, nađeno 660,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,11 min (LC metoda G).
Korak 12: (14S)-8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-di(trideuterio) metil- 2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 274)
[1341]
[1342] U rastvor N-[[6-[3-[(3S)-5,5-bis(trideuteriometil)pirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-2-hloro- -6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (356 mg, 0,4598 mmol) u NMP (8,6 mL) je dodat kalijum karbonat (322 mg, 2.330 mmol). Smeša je pročišć ena azotom 3 puta i zagrevana na 150 °C preko no ć i. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i dodata u vodu (18 mL). Smeša je pažljivo zakiseljena hlorovodoničnom kiselinom (5 mL 1 M, 5.000 mmol) dajuć i penastu suspenziju. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom koriš ć enjem srednje frite. Filtrat nije sadržao proizvod i odbačen je. Vlažni filter kolač je rastvoren u etil acetatu (21 mL) i ispran sa 10 mL slanog rastvora. Vodena faza je odvojena i organska faza je osušena iznad magnezijum sulfata, filtrirana i koncentrovana u vakuumu dajuć i svetlo žuto ulje. Sirovi proizvod je razblažen acetonitrilom i hromatografisan na 30 g reverzne faze C18 kolone eluiranjem sa gradijentom od 60% - 100% acetonitrila u vodi dajuć i (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]) heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-di(trideuterio)metil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7, 9,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 274) (135 mg, 47%) kao pena krem boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,50 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,57 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,19 - 6,81 (m, 3H), 6,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,08 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,21 (t, J = 6,7, 1,4 Hz, 2H ), 4,08 - 3,81 (m, 1H), 3,24 - 3,03 (m, 1H), 2,95 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 2,80 -2,57 (m, 1H), 2,18 (d, J = 50,0 Hz, 1H), 1,97-1,68 (m, 4H), 1,68-1,42 (m, 4H), 1,42-1,11 (m, 1H), 0,95-0,72 (m, 4H), 0,72-0,56 (m, 2H), 0,72-0,56 (m, 6H-) 0,33 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 623,32, nađeno 624,3 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 1,98 min (LC metoda G).
Primer 94: Priprema 20,20,22-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia-1,3 ,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (racemski atropizomer 1) (Jedinjenje 280), 12,20,20-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia-1,3,9 ,13,14-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-tri-on (Jedinjenje 281) i 20,20, 22-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (racemski atropizomer 2) (Jedinjenje 282)
[1343]
Korak 1: terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(5-metil-4-sulfamoil-pirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat i terc-butil 2,2-dimetil-4 -[3-(3-metil-4-sulfamoil-pirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (2:1 mešavina neodvojivih regioizomera)
[1344]
[1345] U balon sa okruglim dnom koji sadrži terc-butil 2,2-dimetil-4-(3-metilsulfoniloksipropil)pirolidin-1-karboksilat (1,97 g, 5,873 mmol) dodat je N,N-dimetilformamid (20 mL), kalijum karbonat (2,44 g, 17,65 mmol) i 5-metil-lH-pirazol-4-sulfonamid (947 mg, 5,875 mmol). Reakcija je zagrevana na 65 °C tokom 24 h. Reakcija je filtrirana, a balon i filter kolač su dalje isprani etil acetatom. Filtrat je uparen i prečišć en pomo ć u HPLC (20% - 80% acetonitril u gradijentu vode sa 0,1% modifikatorom hlorovodonične kiseline). Prečišć ene frakcije su uparene zajedno da bi se dobila bela pena. Nerazdvojni regioizomerni proizvodi, terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(5-metil-4-sulfamoil-pirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat i terc-butil 2,2-dimetil -4-[3-(3-metil-4-sulfamoil-pirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (972 mg kombinovani prinos, 41%), ESI-MS m/z izrač. 400,21442, nađeno 345,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,51 min (LC metoda B) potvrđeno je da je prisutno u smeši proizvoda u odnosu 2:1 pomo ć u<1>H NMR analize.
Korak 2: terc-butil 4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin- 3-karbonil]sulfamoil]-5-metil-pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat i terc-butil 4-[3-[4-[[2-hloro -6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3-metil-pirazol-1-il] propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (2:1 mešavina neodvojivih regioizomera)
[1346]
[1347] U balon sa okruglim dnom dodata je 2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (952 mg, 2,565 mmol), karbonil diimidazol (469 mg, 2,892 mmol) i tetrahidrofuran (10 mL). Reakcija je zagrevana na 35 °C i mešana 2 h. 2:1 mešavina terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(5-metil-4-sulfamoil-pirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilata i tercbutil 2,2- dimetil-4-[3-(3-metil-4-sulfamoil-pirazol-1-il)pro-pil]pirolidin-1-karboksilat (965 mg, 2.409 mmol) i 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec -7-en (1.10 mL, 7.356 mmol) je dodat i reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi preko noć i. Reakcija je direktno prečiš ć ena hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 20% - 100% etil acetata u heksanu. Nerazdvojni regioizomerni proizvodi, terc-butil 4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il] piridin-3-karbonil] sulfamoil]-5-metil-pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat i terc-butil 4-[3-[4-[[2]-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3-metil-pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1,073 g kombinovanog prinosa, 60%) je izolovan kao bela pena. ESI-MS m/z izrač. 745,2636, nađeno 746,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,85 min (LC metoda G). Regiohemijski odnos smeše (2:1) je potvrđen 1H NMR.
Korak 3: 2-hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]-5-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-(3,3 ,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid i 2-hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin -3-il)propil] -3-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (2 :1 mešavina neodvojivih regioizomera)
[1348]
[1349] U posudu sa okruglim dnom koja sadrži 2:1 smešu terc-butil 4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2- dimetilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-5-metil-pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat i terc-butil 4 -[3-[4-[[2-hloro-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil ]-3-metil-pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1,068 g, 1,431 mmol) je dodat dihlorometan (15 mL) i trifluorosirć etna kiselina (4,4 mL, 57,11). mmol). Reakcija je ostavljena da se meša 1 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je uparena do suva. Dodati su zasić eni natrijum bikarbonat i rastvor soli i reakcija je ekstrahovana etil acetatom. Organski sloj je uparen da bi se dobio proizvod, međutim, značajna količina proizvoda nakon još 2 ekstrakcije etil acetatom je još uvek bila u vodenom sloju. Prema tome, vodeni sloj je uparen do suva i suvi aceton je dodat u čvrstu supstancu i filtriran. Rastvoreni rastvor acetona je uparen i kombinovan sa organskim slojevima da bi se dobio 2-hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]-5-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid i 2-hloro-N-[1-[3-(5, 5-dimetilpirolidin-3-il)propil]-3-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid(2:1 mešavina neodvojivih regioizomera) (920 mg, 100%). ESI-MS m/z izrač.645,2112, nađeno 646,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,45 min (LC metoda B).
Korak 4: 20,20,22-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia-1,3,9 ,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (racemski atropizomer 1) (Jedinjenje 280) , 12,20,20-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia-1,3,9,13 ,14-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 281) i 20,20,22trimetil- 4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111, 14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (racemski atropizomer 2) (Jedinjenje 282)
[1350]
[1351] U balon sa okruglim dnom od 250 mL dodat je cezijum fluorid (432 mg, 2.844 mmol), kalijum karbonat (984 mg, 7.120 mmol), 3 A molekularna sita i rastvor smeše regioizomera, 2-hloro-N -[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]-5-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2 ,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid i 2-hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]-3-metil -pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (2:1 mešavina neodvojivih regioizomera ) (920 mg, 1.424 mmol) u dimetil sulfoksidu (55 mL). Reakcija je pročišć ena azotom i zagrevana na 150 °C preko noć i. Reakcija je ohlađena do sobne temperature, filtrirana, isprana slanim rastvorom i ekstrahovana etil acetatom. Organski sloj je osušen preko natrijum sulfata, filtriran i prečišć en pomo ć u HPLC (10% - 70% acetonitrila u vodi sa 0,1% modifikatorom hlorovodonične kiseline) da bi se kao prvi atropizomer/regioizomer eluirao, 20,20,22-trimetil- 4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]docosa-2,4,6,11 (22),12-pentaen-8,10,10-trion (racemski atropizomer 1) (Jedinjenje 280) (45 mg, 10%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,41 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,93 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,16 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,38 (d, J = 14,2 Hz, 1H), 4,23 (s, 2H), 4,01 (t, J = 13,7 Hz, 1H), 2,05 (s, 3H), 1,89 - 1,70 (m, 3H), 1,55 (s, 3H), 1,48 (s, 3H), 1,44 - 1,28 (m, 2H), 1,23 (s, 6H) , 1,08 (d, J = 11,1 Hz, IH). ESI-MS m/z izrač. 609,2345, nađeno 610,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,01 min (LC metoda D). Drugi atropizomer/regioizomer koji je eluiran bio je 12,20,20-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia- 1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 281) (73 mg, 17%). ESI-MS m/z izrač. 609,2345, nađeno 610,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,07 min (LC metoda D). Treć i atropizomer/regioizomer koji je eluiran bio je 20,20,22-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia- 1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion(racemski atropizomer 2) (Jedinjenje 282) (19 mg, 4%). ESI-MS m/z izrač. 609,2345, nađeno 610,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,14 min (LC metoda D).
Primer 95: Priprema (14S)-8-(3-{2-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia -3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10), 6,8,19(23),20-heksaen-2,2, 4-trion (dijastereomer 1) (jedinjenje 284) i (14S)-8-(3-{2-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklo-propil]propoksi}-1H-pirazol-1-il) -12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11, 18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19(23 ),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 283)
Korak 1: (14S)-8-(3-{2-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3 , 9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10),6,8, 19(23),20-heksan-2,2,4- trion (dijastereomer 1) (jedinjenje 284) i (14S)-8-(3-{2-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-12,12- dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza- 1(22),5(10),6,8,19(23), 20-heksen -2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 283)
[1353]
[1354] Subjekti (14S)-8-(3-{2-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksil-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3 , 9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19(23),20-heksan-2,2,4- tri-on (3,24 g, 8,383 mmol) radi hiralne separacije pomoć u SFC hromatografije koriste ć i ChiralPak IG kolonu (250 X 10 mm, veličina čestica 5 mm) sa 44% acetonitril/metanol (90:10)/56% mobilne faze ugljen -dioksida na 10 mL/min tokom 12,0 min (zapremina injekcije = 70 mL rastvora od 22 mg/mL u acetonitrilu/metanolu (90:10)) dajuć i kao prvi dijastereomer koji se eluira, (14S)-8-(3 -{2-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[ 17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 284) (6 ,8 mg, 49% ) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,52 (s, 1H), 8,22 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,57 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,98 (s, 1H), 6,92 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,13 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 5,07 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 4,10 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 4,00 - 3,72 (m, 2H), 3,16 (s, 1H), 2,95 ( d, J = 13,5 Hz, 1H), 2,71 (s, 1H), 2,35 (d, J = 17,2 Hz, 1H), 2,18 - 2,07 (m, 1H), 1,98 (dd, J = 14,9, 4,0 Hz). , 1H), 1,86 (dd, J = 11,5, 5,2 Hz, 1H), 1,76 (s, 1H), 1,68 (s, 1H), 1,67 - 1,60 ( m, 3H), 1,57 (d, J = 12,6 Hz, 2H), 1,52 (s, 3H), 1,33 (t, J = 12,0 Hz, IH), 1,05- 0,90 (m, 2H), 0,90-0,70 (m, 2H); ESI-MS m/z izrač. 663,24506, nađeno 664,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,9 min (LC metoda E). i kao drugi dijastereomer za eluiranje, (14S)-8-(3-{2-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 283) (7,62 mg, 54%) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,52 (s, 1H), 8,22 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,58 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,04 - 6,94 (m, 1H), 6,92 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,14 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,14 - 4,06 (m, 2H), 3,96 (dp, J = 15,9, 6,0, 5,0 Hz, 2H), 3,16 (s, 1H), 2,95 (d, J = 15,9, 6,0, 5,0 Hz, 2H), 3,16 (s, 1H), 2,95 (d, J = 15,9, 6,0, 5,0 Hz, 1H).13,3 Hz, 1H), 2,70 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 2,50 - 2,36 (m, 1H), 2,13 (s, 1H), 1,98 (dd, J = 15,0, 4,0 Hz, 1H), 1,86 ( dd, J = 11,8, 5,2 Hz, 1H), 1,77 (s, 1H), 1,71 - 1,65 (m, 1H), 1,63 (s, 1H), 1,61 (s, 3H), 1,57 (d, J = 12,3 Hz , 2H), 1,52 (s, 3H), 1,31 (k, J = 13,6, 12,7 Hz, 1H), 1,04-0,91 (m, 2H), 0,90-0,77 (m, 2H); ESI-MS m/z izrač. 663,24506, nađeno 664,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,9 min (LC metoda E).
Primer 96: Priprema (14S)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]-2,2,3,3-tetradeuterio-propoksi}-1H-pirazol-1 -il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza- 1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 287)
[1355]
Korak 1: 1,1,2,2-Tetradeuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etanol
[1356]
[1357] U suspenziju litijum aluminijum deuterida (1,0872 g, 27,204 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (50 mL), dodat je rastvor 2,2-dideuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]sirć etne kiseline (4 g, 20,926 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (50 mL) kap po kap na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakcija je razblažena dietil etrom (50 mL) i ohlađena na 0 °C, a zatim je ugašena uzastopno vodom (1,1 mL), 15% natrijum hidroksidom (vodeni, 1,1 mL) i vodom (3,3 mL). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 30 min, a zatim je filtrirana kroz sloj celita i osušena preko anhidrovanog magnezijum sulfata. Filtriran i filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio 1,1,2,2-tetradeuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etanol (3,288 g, 92%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (250 MHz, CDC13) δ 1,42 (s, IH), 1,03 - 0,89 (m, 2H), 0,67 (m, 2H).
Korak 2: [1,1,2,2-tetradeuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etil] metansulfonat
[1358]
[1359] U rastvor 1,1,2,2-tetradeuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etanola (3,288 g, 19,334 mmol) i trietilamina (5,8692 g, 8,0843 mL, 58,002 mmol) u dihlorometanol 35 mL) je dodat metansulfonil hlorid (2,6577 g, 1,7957 mL, 23,201 mmol) kap po kap na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h, a zatim je razblažena dihlorometanom (50 mL) i 10% limunskom kiselinom (50 mL). Dva sloja su razdvojena i organski sloj je ispran zasić enim natrijum bikarbonatom (50 mL) i slanim rastvorom (50 mL). Organski rastvor je osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata i koncentrovan pod vakuumom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem 0% do 70% dietil etra u gradijentu heksana da bi se dobio [1,1,2,2-tetradeuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etil] metansulfonat (3,982 g, 83%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (250 MHz, CDC13) δ 3,01 (s, 3H), 1,03 (m, 2H), 0,71 (m, 2H).
Korak 3: 2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propannitril
[1360]
[1361] U rastvor [1,1,2,2-tetradeuterio-2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etil] metansulfonata (3,982 g, 16,013 mmol) u dimetil sulfoksidu (20 mL) dodat je natrijum cijanid ( 980,93 mg, 20,016 mmol). Reakciona smeša je mešana na 70 °C tokom 2 dana. Posle hlađenja do sobne temperature, reakciona smeša je sipana u vodu (50 mL). Vodeni rastvor je ekstrahovan dietil etrom (3 X 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani vodom (2 X 50 mL) i slanim rastvorom (50 mL), osušeni preko anhidrovanog magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobio 2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-( trifluorometil)ciklopropil]propannitril (2,769 g, 96%) kao svetlo žuto ulje.<1>H NMR (250 MHz, CDC13) δ 1,12 - 1,00 (m, 2H), 0,78 - 0,66 (m, 2H).
Korak 4: 2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanska kiselina
[1362]
[1363] U rastvor 2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propannitrila (2,769 g, 15,405 mmol) u CH3CvaterD (30 mL) dodat je natrijum deuteroksid (6,3166 g, 6,4166 g). % v/v, 61,620 mmol) i deuterijum oksid (6 mL). Reakciona smeša je mešana na 70 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i koncentrovana pod vakuumom. Vodeni rastvor je razblažen vodom (50 mL) i ispran dietil etrom (2 X 50 mL). Vodena faza je zatim zakiseljena do pH ~1 i ekstrahovana dietil etrom (3 x 50 mL). Ovi kombinovani etarski slojevi su isprani slanim rastvorom (50 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom da bi se dobila 2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1(trifluorometil)ciklopropil]propanoična kiselina (2,737). g, 91%) kao žuta tečnost.<1>H NMR (250 MHz, CDC13) δ 1,08 - 0,83 (m, 2H), 0,72 - 0,49 (m, 2H).
Korak 5: 2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-1-ol
[1364]
[1365] U suspenziju litijum aluminijum hidrida (689,14 mg, 0,7515 mL, 18,157 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (20 mL) dodat je rastvor 2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-( trifluorometil)ciklopropil]propanoična kiselina (2,737 g, 13,967 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (20 mL) kap po kap na 0 °C. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakciona smeša je razblažena dietil etrom (20 mL) i ohlađena na 0 °C. Voda (0.7 mL), 15% natrijum hidroksid (vod.) (0.7 mL) i voda (2.1 mL) su dodavani uzastopno. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min i filtrirana kroz sloj celita. Filtrat je osušen preko anhidrovanog magnezijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio 2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-1-ol (2,04 g, 84%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (250 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 4,44 (t, J = 5,1 Hz, 1H), 3,38 (s, 2H), 0,95 - 0,79 (m, 2H), 0,68 (dd, J = 2,2, 1,2 Hz). , 2H).
Korak 6: terc-butil 3-[2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-karboksilat
[1366]
[1367] U rastvor terc-butil 5-okso-1H-pirazol-2-karboksilata (2,08 g, 11,29 mmol) i 2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propana -1-ol (2,04 g, 11,85 mmol) u tetrahidrofuranu (26 mL) je dodat trifenilfosfin (3,108 g, 11,85 mmol). U smešu je polako dodat diizopropil azodikarboksilat (2,396 g, 11,85 mmol) u kapima tokom 10 minuta (zabeležena egzotermna). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Tetrahidrofuran je uklonjen u vakuumu. U sirovu reakcionu smešu je dodat toluen (16.64 mL) i smeša je mešana preko noć i. Rastvor je koncentrovan in vacuo. Sirovi proizvod je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata daju ć i terc-butil 3-[2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil ]propoksi]pirazol-1-karboksilat (2,43 g, 64%) kao bistar sirup. ESI-MS m/z izrač. 338,17554, nađeno 339,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,75 min (LC metoda A).
Korak 7: 3-[2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]-1H-pirazol
[1368]
[1369] terc-butil 3-[2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi] pirazol-1-karboksilat (2,43 g, 7,182 mmol) rastvoren je u dihlorometanu (24,3 mL) ) sa trifluorosirć etnom kiselinom (8,297 mL, 107,7 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 120 min. Reakcija je uparena i dobijeno ulje je podeljeno između etil acetata i zasić enog rastvora natrijum bikarbonata. Vodeni deo je ekstrahovan još dva puta sa etil acetatom, a zatim su organski slojevi kombinovani, isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni da bi se dobio 3-[2,2,3,3-tetradeuterio-3-u obliku ulja. [1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]-1H-pirazol (1,711 g, 100%). ESI-MS m/z izrač. 238,12311, nađeno 239,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,54 min (LC metoda A).
Korak 8: terc-butil 2-hloro-6-[3-[2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[1370]
terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (1,782 g, 7,182 mmol), 3-[2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]-1H- pirazol (1,711 g, 7,182 mmol) i kalijum karbonat (1,192 g, 8,625 mmol) su kombinovani u anhidrovanom dimetil sulfoksidu (34,22 mL). 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (161.3 mg, 1.438 mmol) je dodat i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom 16 h. Reakciona smeša je razblažena vodom (65,81 mL) i mešana 15 min. Dobijena bela čvrsta supstanca je filtrirana i isprana vodom. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu i osušena iznad magnezijum sulfata. Smeša je filtrirana i filtrat je uparen da bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[3-[2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il ]piridin-3-karboksilat (2,58 g, 80%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.
449,16312, nađeno 450,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,91 min (LC metoda A).
Korak 9: 2-hloro-6-[3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[1371]
terc-butil 2-hloro-6-[3-[2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat ( 2,58 g, 5,735 mmol) je rastvoreno u dihlorometanu (25,8 mL) sa trifluorosirć etnom kiselinom (6,627 mL, 86,02 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Dodata je trifluorosirć etna kiselina (2,209 mL, 28,67 mmol) i nastavljeno je mešanje 30 min. Reakcija je uparena i u rezultujuć u čvrstu supstancu je dodat etar i etar je zatim uklonjen pod sniženim pritiskom. Ovo je ponovljeno još dva puta dajuć i belu čvrstu supstancu koja je rekristalizovana iz dihlorometana da bi se dobio čist proizvod kao čvrsta supstanca (prinos 1). Proizvod je ostao u filtratu koji je uparen dajuć i beličastu čvrstu supstancu koja je rastvorena u etil acetatu i isprana sa 5N natrijum hidroksidom (2X), zatim 1N hlorovodoničnom kiselinom (1X), zatim osušena (natrijum sulfat), filtrirana i koncentrovana do bele čvrste supstance koji je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem plitkog gradijenta od 100% dihlorometana do 20% metanola u dihlorometanu dajuć i loše odvajanje. Frakcije koje sadrže proizvod su kombinovane, koncentrovane, filtrirane i prečišć ene koriš ć enjem HPLC-MS metode reverzne faze koriste ć i Luna C18 (2) kolonu (75 X 30 mm, veličina čestica 5 mm) koju prodaje Phenomenex (pn: 00C-4252-U0- AX) i dvostruki gradijent od 20% - 80% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 mL i temperatura kolone = 25 °C) dajuć i čisti proizvodni materijal koji je kombinovan sa prvobitno kristalizovanim čvrstim materijalom da bi se dobio 2-hloro-6-[3-[2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-( trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (1,75 g, 78%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 393,10052, nađeno 394,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,72 min (LC metoda A).
Korak 10: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil ]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1372]
[1373] U rastvor 2-hloro-6-[3-[2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3 -karboksilna kiselina (1 g, 2,539 mmol) u tetrahidrofuranu (6,832 mL) je dodat karbonil diimidazol (514,7 mg, 3,174 mmol) (rekristalizovan iz tetrahidrofurana) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 h, a zatim terc-4S-buti - 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (1,047 g, 2,538 mmol) je dodat kao rastvor u tetrahidrofuranu (2,5 mL), a zatim sa 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-enom (1,192 mL, 7,971 mmol) i dobijena smeša je mešana 6 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je razblažena vodom i etil acetatom, a zatim je dodata hlorovodonična kiselina (1,418 mL 12 M, 17,02 mmol), vodeni sloj je tada bio pH = 1. Slojevi su razdvojeni i organski sloj je ispran vodom (1X) i slanim rastvorom (1X) zatim osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan do bele pene koja je prečišć ena na 275 g C18 kolone reverzne faze eluiranjem sa gradijentom od 50% - 100% acetonitrila u vodi dajuć i terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklo pro-pil]propoksi]pirazol-1-il]piridin -3-karbonil] sulfamoil] -2-piridil] amino] propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1,261 g, 63%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.787,3044, nađeno 788,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,89 min (LC metoda A).
Korak 11: 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilaminol-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2,2, 3,3-tetra-deuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so)
[1374]
terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1,409 g, 1,787 mmol) rastvoren je u dihlorometanu (6,147). mL) i u smešu je dodata trifluorosirć etna kiselina (5.509 mL, 71.51 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 90 min. Smeša je koncentrovana do suva pod sniženim pritiskom, dodato je 50 mL toluena i uklonjeno rotacionim uparavanjem (45 °C vodeno kupatilo). Ponovo je dodato 50 mL toluena i uklonjeno rotacionim isparavanjem (45 °C vodeno kupatilo), a zatim osušeno u vakuumu dajuć i 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (1.434 g, 100%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 687,25195, nađeno 688,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,62 min (LC metoda A).
Korak 12: (14S)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]-2,2,3,3-tetradeuterio-propoksi}-1H-pirazol-1 -il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7, 9,19(23),20-heksaen- 2,2,4-trion (Jedinjenje 287)
[1375]
[1376] U rastvor 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3- [2,2,3,3-tetradeuterio-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (1,434 g, 1,788 mmol) u NMP ( 86,04 mL) je dodat kalijum karbonat (1,73 g, 12,52 mmol). Smeša je propuhana azotom 5 min. Smeša je zatim zagrevana na 155 °C tokom 18 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i dodata u vodu (-200 mL) dajuć i beličastu čvrstu supstancu. Smeša je pažljivo zakiseljena hlorovodoničnom kiselinom (2,235 mL 12 M, 26,82 mmol) dajuć i penušavu suspenziju. Čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom i isprana vodom. Filtrat je odbačen. Vlažni filter kolač je rastvoren u etil acetatu i osušen iznad magnezijum sulfata, filtriran i koncentrovan u vakuumu dajuć i svetlo žuto ulje koje je hromatografisano na 275 g reverzne faze C18 kolone eluiranjem sa gradijentom od 50% - 100% acetonitrila u voda koja daje (14S)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]-2,2,3,3-tetradeuterio-propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2 ,2,4-trion (Jedinjenje 287) (845,2 mg, 73%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,50 (s, 1H), 8,21 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,58 (dd, J = 8,5 , 7,2 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,99 (s, 1H), 6,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,12 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,19 (s, 2H), 3,92 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 3,15 (s, 1H), 2,95 (d, J = 13,5 Hz, 1H), 2,71 (s, 1H), 2,12 (s, 1H), 1,86 (dd, J = 11,9, 5,3 Hz, 1H), 1,77 (s, 1H), 1,60 (s, 4H), 1,57 (d, J = 13,9 Hz , 2H), 1,51 (s, 3H), 1,37-1,23 (m, IH), 0,93-0,86 (m, 2H), 0,75 (s, 2H). ESI-MS m/z izrač.651,27527, nađeno 652,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,25 min (LC metoda B).
Primer 97: Priprema 20,20,22-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia-1,3 ,9,13,14-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (atropisomer 1, enantiomer 1) (Jedinjenje 288) i 20,20,22-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia-1,3 ,9,13,14-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (atropizomer 1, enantiomer 2) (Jedinjenje 289)
Korak 1: 20,20,22-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia-1,3,9 ,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (atropizomer 1, enantiomer 1) (Jedinjenje 288) i 20,20,22-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia-1,3,9 ,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (atropizomer 1, enantiomer 2) (Jedinjenje 289)
[1378]
[1379] Racemski 20,20,22-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia-1,3, 9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (45 mg, 0,07381 mmol) (racemijski atropizomer 1) je odvojen hiralnom SFC hromatografijom korišć enjem ChiralPak AS-H (250321,2 mm kolone, veličine čestica 5 mm) sa 24% acetonitril:metanol (90:10, 20 mM NH3))/76% mobilne faze ugljen-dioksida na 70 mL/min dajuć i kao prvi enantiomer za eluiranje, 20,20,22-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (atropi - somer 1, enantiomer 1) (Jedinjenje 288) (18,6 mg, 83%). ESI-MS m/z izrač. 609,2345, nađeno 610,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,0 min (LC metoda D). Drugi enantiomer koji je eluiran bio je 20,20,22-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propoksi)-1H-pirazol-1-il]-10l6-tia1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (atropizomer 1, enantiomer 2) (Jedinjenje 289) (15,5 mg, 69%).<1>H NMR (500 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,16 (bs, 1H), 8,19 (d, J=2,8 Hz, 1H), 7,82 (s, 1H), 7,81 (d, J=7,9 Hz, 1H), 6,92 (d, J=7,9 Hz, 1H), 6,10 (d, J=2,8 Hz, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,22 (bs, 2H), 4,02 (m, 1H), 2,53 (s, 3H ), 2,02 (m, 3H), 1,83 (m, 2H), 1,75 (dd, J=12,1 Hz, 5,6 Hz, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,47 (s, 3H), 1,36 (k, J =15,6 Hz, 12,4 Hz, 2H), 1,22 (s, 6H), 1,12 (m, 1H). ESI-MS m/z izrač.609,2345, nađeno 610,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,0 min (LC metoda D).
Primer 98: Priprema (14S)-12,12-di(trideuterio)metil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia -3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 292)
[1380]
Korak 1: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]piridin - 3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-bis(trideuteriometil)pirolidin-1-karboksilat
[1381]
[1382] U rastvor 2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (175 mg, 0,4490 mmol) u tetrahidrofuranu (1.5 mL) je dodat karbonil diimidazol (86 mg, 0.5070 mmol) i smeša je mešana na temperaturi okoline 90 min. Ovom rastvoru je dodat terc-butil (4S)-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-bis(trideuteriometil)pirolidin-1-karboksilat (140 mg , 0,3345 mmol) u tetrahidrofuranu (1 mL), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0] undek-7-en (135 mL, 0,9027 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 16 h. Reakcija je razblažena vodom (5 mL) i smeša je polako zakiseljena hlorovodoničnom kiselinom (1,7 mL 1 M, 1,700 mmol). Smeša je ekstrahovana etil acetatom (10 mL) i organska faza je odvojena. Organska faza je koncentrovana in vacuo. Sirovi proizvod je hromatografisan na koloni reverzne faze od 30 grama eluiranjem sa 50% - 100% acetonitrilom u vodi dajuć i terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopro-pil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-bis(trideuteriometil)pirolidin-1 - karboksilat (200 mg, 76%). ESI-MS m/z izrač. 789,31696, nađeno 790,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,47 min (LC metoda D).
Korak 2: N-[[6-[3-[(3S)-5,5-bis(trideuteriometil)pirolidin-3-il]propilaminol-2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3-[ 3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so)
[1383]
[1384] Za terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il] piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-bis(trideuteriometil)pirolidin-1-karboksilat (200 mg, 0,2531 mmol) u dihlorometanu (3 mL) i toluenu (1 mL) je dodata trifluorosirć etna kiselina (200 mL, 2.596 mmol). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 h. Rastvarač je uklonjen in vacuo, a ostatak je tretiran sa 10 mL toluena i koncentrovan u vakuumu dajuć i N-[[6-[3-[(3S)-5,5-bis(trideuteriometil)pirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil) ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (204 mg, 100%). ESI-MS m/z izrač. 689,2645, nađeno 690,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,23 min (LC metoda D).
Korak 3: (14S)-12,12-Di(trideuterio)metil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3 , 9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-tri-on (Jedinjenje 292)
[1385]
[1386] U rastvor N-[[6-[3-[(3S)-5,5-bis(trideuteriometil)pirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-2-hloro- Dodat je -6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklo propil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (200 mg, 0,2487 mmol) u NMP (6 mL) kalijum karbonat (180 mg, 1.302 mmol). Smeša je pročišć ena 5 min azotom, a zatim zagrevana na 135 ° C tokom 22 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i razblažena vodom (10 mL). Smeša je pažljivo zakiseljena hlorovodoničnom kiselinom (500 mL 6 M, 3.000 mmol). Suspenzija je ekstrahovana etil acetatom (15 mL) i organska faza je isprana slanim rastvorom. Organska faza je koncentrovana in vacuo. Sirovi proizvod je hromatografisan na koloni reverzne faze od 30 g eluiranjem sa gradijentom od 50% - 100% acetonitrila u vodi dajuć i penu koja je sušena u vakuum pe ć nici na 45 °C tokom 48 h dajuć i (14S)-12,12-di (trideuterio)metil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 292) (45,2 mg, 27%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,51 (s, 1H), 8,21 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,63 - 7,51 (m, 1H ), 7,05 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,99 (s, 1H), 6,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,12 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,20 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 3,92 (s, 1H), 3,15 (s, 1H), 2,95 (d, J = 13,4 Hz, 1H), 2,75 - 2,65 (m , 1H), 2,10 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 1,85 (dd, J = 11,1, 5,2 Hz, 3H), 1,79 - 1,67 (m, 3H), 1,54 (t, J = 12,5 Hz, 3H) , 1,39-1,25 (m, IH), 0,91 (t, J = 3,3 Hz, 2H), 0,75 (s, 2H). ESI-MS m/z izrač.653,28784, nađeno 654,4 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,21 min (LC metoda B).
Primer 99: Priprema (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-2-hidroksietoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil -2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2 ,4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 294) i (14S)-8-[3-(2-[dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il]-2-hidroksietoksi)-1H-pirazol-1- il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23) ,20-heksen-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 293)
[1387]
Korak 1: (14S)-8-[3-(2-[Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-2-hidroksietoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6 -tia- 3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4 -trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 294) i (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-2-hidroksietoksi)-1H-pirazol-1- il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23) ,20-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 293)
[1389] Subjekti (14S)-8-[3-(2-[dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il]-2-hidroksietoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil- 2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2, 4-trion (62 mg, 0,09030 mmol) do hiralne separacije pomoć u SFC hromatografije koriš ć enjem ChiralCel AS-H (250 3 10 mm kolone, veličine čestica 5 mm) sa 38% acetonitrila/metanola (90:10)/62% mobilnog ugljen-dioksida faza pri 10 mL/min tokom 28,0 min (zapremina injekcije = 70 mL rastvora od 23 mg/mL u acetonitrilu/metanolu (90:10) dajuć i kao prvi dijastereomer koji se eluira, (14S)-8-[3-(2-{dispiro) [2.0.2.1]heptan-7-il}-2-hidroksietoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.
1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 294) (16,4 mg, 55 %) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,51 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,58 (t, J = 7,8 Hz, IH), 7,05 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,09 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,87 (dd, J = 5,2, 1,3 Hz, 1H), 4,09 (d, J = 5,5 Hz, 2H), 3,92 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 3,57 (dt, J = 9,2, 5,3 Hz, 1H), 3,16 (d, J = 10,0 Hz, 1H), 2,95 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 2,69 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 2,12 (s, 1H), 1,86 ( dd, J = 11,9, 5,2 Hz, 1H), 1,76 (s, 1H), 1,60 (s, 3H), 1,59 - 1,53 (m, 3H), 1,52 (s, 3H), 1,31 (k, J = 9,4, 7,1 Hz, 1H), 1,08 (ddd, J = 8,9, 5,3, 3,6 Hz, 1H), 0,95 -0,88 (m, 1H), 0,84 (ddd, J = 8,8, 5,2, 3,7 Hz, 1H), 0,7 , J = 8,0, 4,8, 3,3 Hz, 1H), 0,63 (ddd, J = 8,7, 5,2, 3,6 Hz, 2H), 0,60 -0,54 (m, 2H), 0,52 (dt, J = 8,4, 3,8 Hz), 0,60 - 0,54 (m, 2H), 0,52 (dt, J = 8,4, 3,8 Hz). ); ESI-MS m/z izrač. 633,2733, nađeno 634,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,95 min (LC metoda B) i kao drugi dijastereomer za eluiranje, (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-2-hidroksietoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 293) (17,3 mg, 60%) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,52 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,58 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,09 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,88 (d, J = 5,2 Hz, 1H), 4,15 - 4,05 (m, 2H), 3,92 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 3,57 ( ddd, J = 9,2, 4,8, 1,8 Hz, 1H), 3,16 (d, J = 9,6 Hz, 1H), 2,95 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 2,70 (s, 1H), 2,12 (s, 1H ), 1,85 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 1,76 (s, 1H), 1,61 (s, 3H), 1,59 - 1,53 (m, 3H), 1,51 (d, J = 2,2 Hz, 3H), 1,31 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 1,08 (ddd, J = 8,9, 5,3, 3,6 Hz, 1H), 0,92 (dd, J = 8,6, 4,2 Hz, 1H), 0,84 (ddt, J = 7,4, 5,2). , 3,5 Hz, 2H), 0,74 - 0,70 (m, 1H), 0,63 (ddd, J = 8,9, 5,3, 3,8 Hz, 1H), 0,59 - 0,54 (m, 2H), 0,54 - 0,48 (m, 1H); ESI-MS m/z izrač. 633,2733, nađeno 634,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,95 min (LC metoda B).
Primer 100: Priprema (14S)-8-(3-{3-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20- heksaen-2,2,4- trion (Jedinjenje 295)
[1390]
Korak 1: Etil 3-okso-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanoat
[1391]
[1392] U suspenziju (3-etoksi-3-okso-propanoil)oksikalijum (23,197 g, 136,29 mmol) u acetonitrilu (200 mL) dodat je trietilamin (21,014 g, 28,945 mL, 207 g, 136,29 mmol) i 207 g dihlorijuma. 162,25 mmol). Smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Mešavina karbonil diimidazola (12.628 g, 77.878 mmol) i 1-(trifluorometil)ciklopropankarboksilne kiseline (10 g, 64.898 mmol) u acetonitrilu (40 mL) je dodata u smešu i kombinovana smeša je mešana preko noć i. Smeša je razblažena etil acetatom (250 mL) i isprana vodom (500 mL) i slanim rastvorom (500 mL) pre nego što je osušena preko natrijum sulfata, a zatim filtrirana. Nakon koncentriranja filtrata u vakuumu, organski ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 30% heksani-etil acetatom da bi se dobio etil 3-okso-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanoat (3,875 g, 25%) .<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 4,17 (kd, J = 7,1, 0,6 Hz, 2H), 3,73 (s, 2H), 1,41 - 1,32 (m, 3H), 1,24 (td, J = 7,1, 0,64H).
Korak 2: Etil 3-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanoat
[1394] U rastvor etil 3-okso-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanoata (3,513 g, 15,671 mmol) u EtOH
(35,130 mL) je dodat NaBH4(652,16 mg, 0,6901 mL, 17,238 mmol) na -78 °C. Smeša je mešana na 0 °C pre nego što je ugašena sa 1M vodenim rastvorom hlorovodonične kiseline (35 mL). Organski sloj je ekstrahovan etil acetatom (3 x 100 mL) pre nego što je ispran slanim rastvorom (100 mL) i osušen iznad natrijum sulfata. Smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan in vacuo da bi se dobio etil 3-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanoat (3,31 g, 63%).<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 4,09 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 3,89 (s, 1H), 2,70 (d, J =3,1 Hz, 2H), 1,26 - 1,21 (m, 3H), 0,96 (d, J = 6,9 Hz, 4H).
Korak 3: Etil 3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propanoat
[1395]
[1396] U rastvor etil 3-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanoata (3,19 g, 14,103 mmol) u dihlorometanu (63,800 mL) dodat je 2,6-lutidin (3,1734 g, 3,1734 g, 3,103 mmol) u dihlorometanu (63,800 mL) . mL, 29,616 mmol) i [tercbutil(dimetil)silil] trifluorometansulfonat (5,5918 g, 4,8624 mL, 21,154 mmol) na 0 °C. Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Rastvor je razblažen dietil etrom (60 mL) i ispran sa 1 M hlorovodoničnom kiselinom (60 mL), zasić enim natrijum bikarbonatom (60 mL) i slanim rastvorom (60 mL). Organski sloj je osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod vakuumom da bi se dobio etil 3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanoat (3,51 g, 72%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 4,12 (k, J = 7,2 Hz, 2H), 3,95 (ddd, J = 8,5, 3,9, 1,1 Hz, 1H), 2,71 - 2,59 (m, 2H), 1,39 - m, 3H), 0,89-0,87 (m, 3H), 0,88-0,82 (m, 6H), 0,11-0,05 (m, 4H), 0,04-0,01 (m, 6H).
Korak 4: 1-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-1,3-diol
[1397]
[1398] U rastvor etil 3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanoata (3,51 g, 10,310 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (50 mL) dodat je litijum aluminijum hidrid (469,57 mg, 0,5121 mL, 12,372 mmol) na 0 °C.
Reakcija je mešana na 0 °C tokom 1 h. Reakcija je razblažena dietil etrom (50 mL), a zatim je ugašena vodom (0,5 mL), 15% natrijum hidroksidom (0,5 mL) i vodom (1,5 mL) na 0 °C i mešana je 30 min. Dodat je magnezijum sulfat i čvrsta supstanca je uklonjena filtracijom. Filtrat je koncentrovan pod vakuumom i prečišć en hromatografijom na silika gelu koriste ć i gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio 1-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-1,3-diol (1,493 g, 73). %) kao bistra tečnost.<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 4,03 - 3,67 (m, 3H), 2,83 (d, J = 4,2 Hz, 1H), 2,16 (s, 1H), 1,96 - 1,74 (m, 2H), 1,13 -0,93 (m, 2H), 0,93-0,69 (m, 2H).
Korak 5: terc-butil 3-[3-hidroksi-3-[1-(trifluorometil) ciklopropil]propoksi]pirazol-1-karboksilat
[1399]
[1400] U rastvor 1-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-1,3-diola (1,493 g, 7,5397 mmol), terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilata (1,4582 g, 7,9167 mmol). ) i trifenilfosfin (3,9550 g, 15,079 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (30 mL) je dodat DIAD (3,0491 g, 15,079 mmol) u kapima na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 h. Reakcija je ugašena vodom (30 mL) i tetrahidrofuran je uklonjen pod sniženim pritiskom. Ostatak je ekstrahovan etil acetatom (3 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom (30 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 0% - 50% etil acetata u heksanu da bi se dobio terc-butil 3-[3-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-karboksilat (1,04 g, 37%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 7,84 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 5,85 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,58 (ddd, J = 10,9, 9,4, 3,8 Hz, 1H) , 4,37 (dt, J = 10,6, 4,6 Hz, 1H), 3,79 (d, J = 10,6 Hz, 1H), 3,70 (s, 1H), 2,31 - 2,07 (m, 1H), 1,97 - 1,75 (m, 1H) ), 1,60 (s, 9H), 1,06-0,68 (m, 4H). ESI-MS m/z izrač. 350,1453, nađeno 351,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 4,97 min (LC metoda K).
Korak 6: terc-butil-dimetil-[3-(1H-pirazol-3-iloksi)-1-[1-(trifluorometil) ciklopropil]propoksi]silan
[1401]
[1402] U rastvor terc-butil 3-[3-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-karboksilata (1,04 g, 2,9686 mmol) i 2,6-lutidina (1,5905 g) , 1,7191 mL, 14,843 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (50 mL) dodat je [terc-butil(dimetil)silil] trifluorometansulfonat (3,1387 g, 2,7269 mL, 11,874 mmol) u kapima na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 dana, a zatim je ugašena sa 1N hlorovodoničnom kiselinom (50 mL). Dva sloja su odvojena. Vodeni sloj je ekstrahovan dihlorometanom (2 X 50 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (50 mL), osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani pod vakuumom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 0% do 30% acetona u heksanu da bi se dobio terc-butildimetil-[3-(1H-pirazol-3-iloksi)-1-[1-(trifluorometil)ciklo propil]propoksi]silan (895,1 mg, 82%) kao svetlo žuto ulje.<1>H NMR (250 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 11,84 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 5,62 (s, 1H), 4,16 - 3,98 (m, 2H), 3,64 - 3,55 (m, 1H) , 2,12-1,85 (m, 2H), 1,07-0,94 (m, 2H), 0,85 (s, 9H), 0,79-0,62 (m, 2H), 0,06 (s, 3H), -0,02 (s, 3H). ESI-MS m/z izrač. 364,1794, nađeno 365,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 6,52 min (LC metoda K).
Korak 7: terc-butil 6-[3-[3-[terc-butil (dimetil) silil] oksi-3-[1-(trifluorometil) ciklopropil] propoksi] pirazol-1-il]-2-hloropiridin- 3-karboksilat
[1403]
[1404] U rastvor terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilata (378 mg, 1,524 mmol) i terc-butil-dimetil-[3-(1H-pirazol-3-iloksi)-1-[1-(trifluorometil) ciklopropil]propoksi]silan (500 mg, 1.372 mmol) u dimetil sulfoksidu (10 mL) je dodat kalijum karbonat (234 mg, 1.693 mmol), a zatim 1,4-diazabiciklo[2.2.2] oktan ( 37 mg, 0,3298 mmol). Heterogena smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom 16 h. Reakciona smeša je ugašena ledom i mešana 15 min. Dobijena bela čvrsta supstanca je sakupljena filtracijom i isprana vodom. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu i osušena iznad magnezijum sulfata. Smeša je filtrirana i filtrat je uparen, a dobijeni smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na koloni silika gela koriš ć enjem plitkog gradijenta 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio terc-butil 6-[3-[3-[tert-butil(dimetil)silil]oksi-3-[1-(trifluorometil)ciklo-propil]propoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilat (640 mg, 81%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 575,2194, nađeno 576,36 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,85 min (LC metoda L).
Korak 8: 6-[3-[3-[terc-butil (dimetil) silil] oksi-3-[1-(trifluorometil) ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilna kiselina kiselina
[1405]
terc-butil 6-[3-[3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3- karboksilat (640 mg, 1.111 mmol) je rastvoren u prethodno mešanoj smeši dihlorometana (2 mL) sa trifluorosirć etnom kiselinom (500 mL, 6.490 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 60 min. Reakcija je uparena i dobijeno ulje je podeljeno između etil acetata i zasić enog rastvora natrijum bikarbonata. Vodeni deo je ekstrahovan još dva puta etil acetatom, zatim su organski slojevi kombinovani, isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i upareni da bi se dobio 6-[3-[3-[tercbutil(dimetil)silil]oksi -3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilna kiselina (540 mg, 93%). ESI-MS m/z izrač.519,1568, nađeno 520,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,6 min (LC metoda L).
Korak 9: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[6-[3-[3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] pro-poksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1407] 6-[3-[3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karboksilna kiselina kiselina (540 mg, 1,038 mmol) i karbonil diimidazol (204 mg, 1,258 mmol) (sveže rekristalizovan iz tetrahidrofurana, ispran hladnim etrom i osušen u vakuumu) su kombinovani u tetrahidrofuranu (5 mL2) i mešani na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (431 mg, 1,045 mmol), a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (800 mL, 5.350 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 14 h. Reakciona smeša je ugašena zasić enim amonijum hloridom i ekstrahovana etil aktatom. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko magnezijum sulfata, filtrirani i koncentrovani do svetlo braon ulja koje je prečišć eno hromatografijom na silika gelu koristeć i plitki gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio terc-butil (4S)-4 -[3-[[6-[[6-[3-[3-[tercbutil(dimetil)silil]oksi-3-[1-(tri-fluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil] amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (572 mg, 60%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 913,36066, nađeno 914,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,79 min (LC metoda L).
Korak 10: (14S)-8-(3-{3-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3 , 9,11,18,23-pentaazatetra ciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-tri- jedan (Jedinjenje 295)
[1408]
[1409] Rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[6-[3-[3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-3-[1-(trifluorometil) )ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]-2-hloro-piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat ( 572 mg, 0,6254 mmol) u dihlorometanu (4,8 mL) i trifluorosirć etnoj kiselini (1,2 mL, 15,68 mmol) je mešano na sobnoj temperaturi 4 h. Rastvarači su upareni i ostatak je rastvoren u etil acetatu, ispran sa 2 mL zasić enog rastvora natrijum bikarbonata, a rastvarač je uklonjen i osušen pod vakuumom. Dobijeni ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (15 mL) i dodata su 3 A molekularna sita i reakciona smeša je mešana 10 min. Zatim su dodati cezijum fluorid (301 mg, 1,982 mmol) i kalijum karbonat (284 mg, 2,055 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 150 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i filtrirana kroz celit i filtratu je dodat zasić eni rastvor amonijum hlorida. Smeša je ekstrahovana etil acetatom i organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen iznad anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Dobijeni smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na koloni silika gela korišć enjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio (14S)-8-(3-{3-hidroksi-3-[1-(trifluorometil) ciklopropil] propoksi]-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion(Jedinjenje 295) (192 mg, 46%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9,77 (s, 1H), 8,20 (dd, J = 2,7, 1,1 Hz, 1H), 8,02 (dd, J = 8,4, 0,9 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 7,47 (dt, J = 7,4, 1,1 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,54 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,92 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,70 (s, 1H), 4,57 (dddd, J = 11,1, 9,1, 4,0, 2,1 Hz, 1H), 4,40 (dt, J = 10,5, 5,1 Hz, 1H), 3,90 (s , 1H), 3,80 (dd, J = 10,0, 2,5 Hz, 1H), 3,32 (dd, J = 10,1, 7,4 Hz, 1H), 3,16 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 3,08 - 2,94 (m, 1H), 2,53 (d, J = 11,2 Hz, 1H), 2,28 - 2,16 (m, 1H), 2,11 - 1,89 (m, 2H), 1,70 - 1,49 (m, 10H), 1,09 - 0,93 (m, 2H) 0,92-0,80 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.
663,24506, nađeno 664,17 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,93 min (LC metoda B).
Primer 101: Priprema (14S)-8-(3-{3-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9, 19(23),20- heksaen-2,2,4- trion (dijastereomer 1) (jedinjenje 296) i (14S)-8-(3-{3-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklo-propil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-12, 12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20- heksen-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 297)
[1410]
Korak 1: (14S)-8-(3-{3-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3 , 9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9, 19(23),20-heksan-2,2,4-tri-on (dijastereomer 1) (Jedinjenje 296) i (14S)-8-(3-{3-hidroksi-3-[1-(trifluorometil) ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-12,12- dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2, 2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 297)
[1411]
[1412] Subjekti (14S)-8-(3-{3-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksil-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3 , 9,11,18,23-pentaazatetra ciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion ( 187 mg) do hiralne separacije pomoć u SFC hromatografije koriste ć i Chiral Pak IG (250321,2 mm) kolonu (veličina čestica 5 mm) sa 38% metanola, 62% mobilne faze ugljen-dioksida pri 70 mL/min tokom 8,0 min (zapremina ubrizgavanja = 500 mL od ~31 mg/mL u acetonitrilu:metanolu (90:10)) dajuć i kao prvi dijastereomer za eluiranje (14S)-8-(3-13-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksil -1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5 ,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 296) (59,2 mg, 32%) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,50 (s, 1H), 8,21 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,58 (dd, J = 8,5 , 7,2 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,98 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,13 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 5,23 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 4,31 (dd, J = 8,2, 5,6 Hz, 2H), 3,92 (d, J = 12,8 Hz, 1H), 3,69 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 3,17 (d, J = 4,7 Hz, 1H), 2,95 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 2,76 - 2,66 (m, 1H), 2,08 (dd, J = 12,4, 7,7 Hz, 2H), 1,82 (dtd, J = 16,6, 11,7, 6,2 Hz, 3H), 1,61 (s, 3H), 1,60 - 1,53 (m, 2H), 1,523H), 1,30 (dt, J = 24,6, 12,0 Hz, IH), 0,93 -0,81 (m, 4H); ESI-MS m/z izrač. 663,24506, nađeno 664,11 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,94 min (LC metoda B) i kao drugi dijastereomer za eluiranje (14S)-8-(3-{3-hidroksi-3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23), 20-heksan-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 297) (57,8 mg, 31%) kao bela čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,51 (s, 1H), 8,21 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,63 - 7,54 (m, 1H ), 7,05 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,98 (s, 1H), 6,92 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,12 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 5,24 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 4,31 (dd, J = 7,6, 5,0 Hz, 2H), 3,92 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 3,69 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 3,17 (d, J = 5,0 Hz, 1H), 2,95 (d, J = 13,4 Hz, 1H), 2,69 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 2,20 - 2,01 (m, 2H ), 1,83 (ddd, J = 25,2, 11,4, 6,3 Hz, 3H), 1,61 (s, 3H), 1,57 (d, J = 12,7 Hz, 2H), 1,52 (s, 3H), 1,31 (k, J = 12,5, 12,1 Hz, IH), 0,87 (d, J = 8,1 Hz, 4H); ESI-MS m/z izrač.663,24506, nađeno 664,11 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,94 min (LC metoda B).
Primer 102: Priprema (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-1,1,2,2-tetradeuterio-etoksi)-1H-pirazol-1- il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19 (23),20-heksen-2,2,4-trion (Jedinjenje 299)
[1413]
Korak 1: 1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etanol
[1414]
[1415] Litijum aluminijum deuterid (2,8120 g, 68,955 mmol) je izmeren u reakcionom balonu postavljenom u kupatilo sa ledom i vodom pod balonom sa azotom. Polako je dodat tetrahidrofuran (160 mL). Smeša je ostavljena da se meša u kupatilu sa ledom i vodom 10 min. 2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-sirć etna kiselina (10,85 g, 63,326 mmol), odvojeno rastvorena u tetrahidrofuranu (40 mL) je dodata brzo putem šprica i kap po kap. Smeša je ostavljena da se zagreje do sobne temperature i mešana je 15 h na sobnoj temperaturi. Zatim je ponovo ohlađen u kupatilu sa ledenom vodom. Rastvor Rochelle-ove soli je dodat u malim porcijama da se ugasi neizreagovani litijum aluminijum deuterid. Nakon završetka gašenja, dodato je još Rochelle-ovog rastvora (200 mL). Smeša je mešana na sobnoj temperaturi 10 min i slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je ekstrahovan etrom (3 X 60 mL). Kombinovani organski slojevi su zatim isprani slanim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani na 30 °C, 100 mbar da bi se dobio 1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etanol (9,72 g, 97%, 90% čisto ć e) kao blago žuta tečnost.<1>H NMR (250 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 1,34 (s, 1H), 0,76 (k, J = 8,6, 7,1 Hz, 4H), 0,67 - 0,53 (m, 2H), 0,53-0,33 (m, 2H) .
Korak 2: terc-butil 3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-karboksilat
[1416]
[1417] U rastvor terc-butil 5-okso-1H-pirazol-2-karboksilata (6,235 g, 33,85 mmol) i 1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7 -il-etanol (5,0 g, 35,15 mmol) u tetrahidrofuranu (80 mL) je dodat trifenilfosfin (9,37 g, 35,72 mmol). U smešu je polako dodat diizopropil azodikarboksilat (7,0 mL, 35,55 mmol) u kapima tokom 10 minuta (zabeležena egzotermna). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Tetrahidrofuran je uklonjen u vakuumu. Sirovi proizvod je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriste ć i plitki gradijent od 100% heksana do 20% etil acetata u heksanu daju ć i tercbutil 3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan). -7-il-etoksi)pirazol-1-karboksilat (7,4 g, 71%) kao bistar sirup.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,82 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 5,84 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 1,61 (s, 9H), 1,44 (s, 1H), 0,83 (k, J = 1,9 Hz, 4H), 0,68-0,61 (m, 2H), 0,52-0,45 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 308,2038, nađeno 309,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,08 min (LC metoda E).
Korak 3: 3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)-1H-pirazol
[1418]
[1419] U balon koji sadrži terc-butil 3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-karboksilat (7,4 g, 23,99 mmol) je dodat dihlorometan (125 mL) i trifluorosirć etna kiselina (45 mL, 584,1 mmol). Posle 30 min, smeša je uparena do suva i neutralizovana zasić enim natrijum bikarbonatom. Reakcija je ekstrahovana etil acetatom i organski sloj je osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i uparen da bi se dobilo bezbojno ulje, 3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan- 7-iletoksi)-lH-pirazol (4,95 g, 99%). ESI-MS m/z izrač. 208,15137, nađeno 209,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,46 min (LC metoda E).
Korak 4: terc-butil 2-hloro-6-[3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-il]piridin- 3-karboksilat
[1420]
terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (6,05 g, 24,38 mmol), 3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)-1H-pirazol (5,04 g, 24,20 mmol) i kalijum karbonat (7,4 g, 53,54 mmol) su kombinovani u anhidrovanom dimetil sulfoksidu (125 mL). Dodat je 1,4-Diazabiciklo[2.2.2]oktan (545 mg, 4,859 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom 18 h. Reakciona smeša je razblažena vodom (75 mL) i mešana 15 min. Dobijena čvrsta supstanca je filtrirana, sakupljena i osušena pod vakuumom preko noć i. Preostali filtrat je razblažen etil acetatom i ispran vodom (3 k 50 mL). Organski slojevi su kombinovani i isprani slanim rastvorom. Organski sloj je odvojen, osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan pod sniženim pritiskom. Ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 100% heksana do 60% etil acetata u heksanu da bi se dobilo svetlo žuto ulje koje je osušeno pod vakuumom da bi se dobila bledo žuta čvrsta supstanca koja je kombinovana sa prethodno filtriranom čvrstom materijom da bi se dobilo tert. -butil 2-hloro-6-[3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3- karboksilat (9,95 g, 98%).<1>H NMR (400 MHz, hloroformd) δ 8,35 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,19 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,94 (d , J = 2,8 Hz, 1H), 1,62 (s, 9H), 1,48 (s, 1H), 0,88 - 0,81 (m, 4H), 0,70 - 0,62 (m, 2H), 0,51 (dt, J = 10,7, 1,5). Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač. 419,19138, nađeno 420,2 (M+1) ; Vreme zadržavanja: 2,58 min (LC metoda E).
Korak 5: 2-hloro-6-[3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[1421]
terc-butil2-hloro-6-[3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (13,15 g, 31,31 mmol) je rastvoreno u dihlorometanu (250 mL). U smešu je polako dodata trifluorosirć etna kiselina (50 mL, 649.0 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 5 h. Reakciona smeša je koncentrovana pod sniženim pritiskom do čvrste supstance, koja je zatim razmuć ena u dietil etru i filtrirana (2X) daju ć i čvrstu supstancu koja je rekristalizovana iz dihlorometana i sakupljena filtracijom da bi se dobila bela čvrsta supstanca (prinos 1). Proizvod je ostao u dihlorometanskom filtratu koji je uparen dajuć i beličastu čvrstu supstancu koja je rastvorena u etil acetatu i isprana sa 5N natrijum hidroksidom (2X), zatim 1N hlorovodoničnom kiselinom (1X), zatim osušena (natrijum sulfat), filtrirana i koncentrovana. koncentrisan do bele čvrste supstance koja je hromatografisana na 150 g reverzne faze C18 kolone sa punjenjem dimetil sulfoksida i eluiranjem sa gradijentom od 50% - 100% acetonitrila u vodi dajuć i (nakon kombinacije sa filtriranim usevom 1 čvrste supstance) 2-hloro-6- [3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (9,05 g, 79%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 13,61 (s, 1H), 8,53 - 8,28 (m, 2H), 7,72 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,17 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 1H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ, 1,46 (s, 1H), 0,87-0,79 (m, 4H), 0,68-0,61 (m, 2H), 0,53-0,45 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.363,12878, nađeno 364,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,45 min (LC metoda G).
Korak 6: terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan -7-il-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1423] U rastvor 2-hloro-6-[3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-il]piridina - 3-karboksilna kiselina (200 mg, 0,5497 mmol) u tetrahidrofuranu (1,5 mL) je dodat karbonil diimidazol (110 mg, 0,6784 mmol) (rekristalizovan iz tetrahidrofurana) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 h, zatim (tert. 4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (240 mg, 0,5818 mmol) je dodat kao rastvor u tetrahidrofuranu (500 mL). ) a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (250 mL, 1,672 mmol) i dobijena smeša je mešana 18 h na sobnoj temperaturi. Reakcija je razblažena vodom i etil acetatom, a zatim je dodata hlorovodonična kiselina (600 mL 6 M, 3.600 mmol) (vodeni sloj je tada bio pH = 1). Slojevi su razdvojeni i organski sloj je ispran vodom (1X) i slanim rastvorom (1X), zatim osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan do bele pene koja je prečišć ena na C18 koloni reverzne faze eluiranjem sa gradijentom od 50% - 100% acetonitrila u vodi dajuć i terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0. 2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (190 mg, 46 %) kao prljavo bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 757,33264, nađeno 758,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,14 min (LC metoda G).
Korak 7: (14S)-8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-1,1,2,2-tetradeuterio-etoksi)-1H-pirazol-1-il] -12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10), 6,8,19(23 ),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 299)
[1424]
terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7- il-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (160 mg, 0,2110 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (5 mL) i u smešu je dodata trifluorosirć etna kiselina (525 mL, 6.814 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 min. Smeša je koncentrovana do suva pod sniženim pritiskom, dodato je 25 mL toluena i uklonjeno rotacionim uparavanjem. Ponovo je dodato 25 mL toluena i uklonjeno rotaciono isparavanje zatim osušeno pod vakuumom preko noć i dajuć i ostatak koji je kombinovan sa kalijum karbonatom (205 mg, 1,483 mmol), 3 A molekulskim sitom i NMP (9,5 mL) u bočici, ispuhan azotom, zatvoren, zagrejan na 155 °C i mešano 5 h. Ohlađena na sobnu temperaturu i smeša je filtrirana, razblažena etil acetatom i isprana vodom (2 X 20 mL), a zatim slanim rastvorom. Organski sloj je dalje ispran vodom, osušen iznad natrijum sulfata, filtriran i uparen. Ostatak je prečišć en na C18 koloni reverzne faze eluiranjem sa gradijentom od 50% - 100% acetonitrila u vodi dajuć i materijal koji je zatim podvrgnut hromatografiji na koloni silika gela koriste ć i plitki gradijent od 100% dihlorometana do 10% metanola u dihlorometanu da bi se dobilo kao prljavo bela čvrsta supstanca, (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-1,1,2,2-tetradeuterio-etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11, 18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 299) (79,04 mg, 60%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,51 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,57 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,99 (s, 1H), 6,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,08 ( d, J = 2,8 Hz, 1H), 3,92 (d, J = 12,7 Hz, 1H), 3,15 (s, 1H), 2,95 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 2,78 - 2,63 (m, 1H), 2,12 (s, 1H), 1,85 (dd, J = 11,8, 5,2 Hz, 1H), 1,77 (s, 1H), 1,60 (s, 5H), 1,55 (s, 1H), 1,51 (s, 3H), 1,45 (s, 1H), 1,30 (dt, J = 23,8, 11,4 Hz, IH), 0,87 - 0,79 (m, 4H), 0,69 - 0,60 (m, 2H), 0,53 - 0,46 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.621,3035, nađeno 622,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,87 min (LC metoda G).
Primer 103: Priprema (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-2,2-dideuterio-etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12 ,12-dimetil(20-deuterio)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza- 1(23),5,7,9,19,21 -heksen-2,2,4-trion (Jedinjenje 298)
[1425]
Korak 1: terc-butil (4S)-4-[3-[[3-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan -7-il-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1427] 2-hloro-6-[3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (1,5 g , 4,146 mmol) i karbonil diimidazol (831 mg, 5,125 mmol) (sveže prekristalizovan iz tetrahidrofurana, ispran hladnim etrom i osušen na visokom vakuumu) su kombinovani u tetrahidrofuranu (10 mL) i mešani na sobnoj temperaturi 2 sata. Zatim, terc-butil (4S)-4-[3-[(3-benziloksi-6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1,5 g, 2,892 mmol) je dodato, a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (3,2 mL, 21,40 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 14 h. Reakciona smeša je ugašena zasić enim rastvorom amonijum hlorida i ekstrahovana etil acetatom. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen iznad magnezijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Dobijeni smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na koloni silika gela korišć enjem plitkog gradijenta 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[3-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-(2,2-dideuterio-2-dis-piro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (2,2 g, 62%) kao prljavo bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 861,36194, nađeno 862,3 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,76 min (LC metoda L).
Korak 2: (14S)-20-(benziloksi)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}(2,2-dideuterio)etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23) ,20-heksan-2,2,4-trion
[1428]
[1429] Rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[3-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-(2,2-dideuterio-2-dispiro[2.0. 2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (2,2 g, 2,551 mmol) u dihlorometanu (16 mL) i trifluorosirć etnoj kiselini (4 mL, 52,27 mmol) je mešana na sobnoj temperaturi 2 h. Reakcioni rastvarači su uklonjeni isparavanjem. Ostatak je rastvoren u etil acetatu i ispran zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 mL), a organski sloj je sakupljen i rastvarač uklonjen. Dobijeni ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (50 mL) i dodat je osušen u peć nici 4 A MS i smeša je mešana 10 min. Zatim su dodati cezijum fluorid (1,2 g, 7,900 mmol) i kalijum karbonat (1,1 g, 7,959 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 150 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je ohlađena do sobne temperature i filtrirana kroz celit i isprana etil acetatom i dodat je zasić eni rastvor amonijum hlorida. Smeša je odvojena i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom. Kombinovani organski slojevi, isprani slanim rastvorom, osušeni preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani. Dobijeni smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na koloni silika gela koriš ć enjem plitkog gradijenta 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio (14S)-20-(benziloksi)-8-[3-(2-{dispiro[2.0). 2.1]heptan-7-il}(2,2-dideuterio)etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3 .1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (1,26 g, 68%) kao sivobela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9,99 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,05 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,0 Hz , 1H), 7,47 - 7,36 (m, 5H), 7,27 - 7,23 (m, 1H), 6,98 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 5,89 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 5,30 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,23 (s, 2H), 3,92 (s, 1H), 3,35 (dd, J = 10,1, 7,4 Hz, 1H), 3,19 (d, J = 14,1 Hz, 1H), 3,05 (t, J = 9,9 Hz, 1H), 2,63 (s, 1H), 2,14 - 2,05 (m, 1H), 1,62 (t, J = 3,2 Hz, 11H), 1,48 (s, 1H ), 0,85 (k, J = 2,5 Hz, 4H), 0,71-0,60 (m, 2H), 0,55-0,43 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 725,3328, nađeno 726,45 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,7 min (LC metoda L).
Korak 3: (14S)-8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}(2,2-dideuterio)etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20-hidroksi -12,12- dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetra ciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan - 2,2,4-trion
[1430]
[1431] U mešani rastvor (14S)-20-(benziloksi)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}(2,2-dideuterio)etoksi)-1H - pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9 ,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (500 mg, 0,6888 mmol) u EtOH (10 mL) je dodat 10% paladijum na ugljeniku (vlažan, Degussa, 155 mg, 0,1456 mmol) pod azotom . Heterogena smeša je mešana pod balonom vodonika 2 h na sobnoj temperaturi i crna heterogena reakciona smeša je filtrirana preko sloja celita. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}(2,2-dideuterio)etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20-hidroksi-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5, 7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (156 mg, 36%) kao svetlo braon čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,31 (s, 1H), 10,84 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 6,91 (dd, J = 9,6, 7,9 Hz, 2H), 6,17 (s, 1H), 6,07 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,20 (d, J = 1,5 Hz, 2H), 3,92 (s, 1H), 3,18 (s, 1H), 2,99 (d, J = 13,1 Hz, 1H), 2,68 (s, 1H), 2,11 (d, J = 6,6 Hz, 1H ), 1,97-1,81 (m, 2H), 1,66-1,48 (m, 9H), 1,45 (s, 1H), 1,24 (k, J = 11,7 Hz, 1H), 0,87-0,79 (m, 4H), 0,69- 0,59 (m, 2H), 0,56-0,43 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 635,2859, nađeno 636,39 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,54 min (LC metoda L).
Korak 4: (14S)-8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}(2,2-dideuterio)etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12 -dimetil-2,2,4-triokso-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19 ,21-heksan-20-il 4-metilbenzen-1-sulfonat
[1432]
[1433] U mešani rastvor (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}(2,2-dideuterio)etoksi)-1H-pirazol-1-il ]-20-hidroksi-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19 ,21-heksan-2,2,4-trion (50 mg, 0,07864 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (2 mL) dodat je 4-metilbenzensulfonil hlorid (17,8 mg, 0,09337 mmol), trietilamin (30 mL, 152 mmol). katalitička količina N,N-dimetilpiridin-4-amina (2,7 mg, 0,02210 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noć i. Reakcija je ugašena zasi ć enim vodenim rastvorom amonijum hlorida i ekstrahovana etil acetatom. Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani. Dobijeni smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na koloni silika gela koriš ć enjem plitkog gradijenta 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}(2,2-dideuterio)etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2,2,4-triokso-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-20-il4-metilbenzen-1-sulfonat (36 mg, 58%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,56 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,92 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,80 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,12 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,76 (s, 1H), 6,08 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,20 (d, J = 1,1 Hz, 2H), 3,77 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 3,34 (m, 1H), 3,03 (s, 1H), 2,79 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 2,50 (p, J = 1,8 Hz, 1H), 2,42 (s, 3H), 2,03 (s, 1H), 1,83 ( dd, J = 11,8, 5,3 Hz, 2H), 1,58 (s, 3H), 1,51 (s, 3H), 1,48 - 1,32 (m, 4H), 0,88 - 0,76 (m, 4H), 0,68 - 0,59 (m, 2H), 0,54-0,40 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.789,29474, nađeno 690,18 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,67 min (LC metoda L).
Korak 5: (14S)-8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-2,2-dideuterio-etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12 -dimetil(20-deuterio)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan - 2,2,4-trion (Jedinjenje 298)
[1434]
[1435] Rastvor (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}(2,2-dideuterio)etoksi)-1H-pirazol-1-il]- 12,12-dimetil-2,2,4-triokso-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7 ,9,19,21-heksaen-20-il 4-metilbenzen-1-sulfonat (70 mg, 0,088 mmol) u suvom N,N-dimetilformamidu (2 mL) je propuhan azotom 5 minuta korišć enjem balona. Zatim su dodati dihloronnikl;trifenilfosfan (15 mg, 0,023 mmol) i tricikloheksilfosfan (18 mg, 0,064 mmol). Dobijeni zeleni rastvor je mešan 5 min u atmosferi azota i dodat je tetradeuterioboranuid (natrijumova so) (50 mg, 1.195 mmol) u jednoj porciji. Dobijena tamnocrvenkasto smeđa smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Dodato je još dihloronnikl; trifenilfosfana (15 mg, 0,023 mmol), tricikloheksilfosfana (18 mg, 0,064 mmol) i tetradeuterioboranuida (natrijumova so) (50 mg, 1,195 mmol) i smeša je mešana preko noć i na sobnoj temperaturi pod azotom Reakciona smeša je razblažena vodom, ekstrahovana etil acetatom, organski sloj osušen preko magnezijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu i filtriran kroz Vhatman filter disk (puradisc 25 TF), a filtrat je prečišć en HPLC-MS reverzne faze koriš ć enjem dvostrukog gradijenta od 50% - 99% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilno faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril) dajuć i (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-2,2 -dideuterio-etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil(20-deuterio)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111, 14.05,10] tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 298) (22,8 mg, 41%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,51 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,00 (s, 1H), 6,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,08 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,20 ( d, J = 1,4 Hz, 2H), 3,92 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 3,16 (s, 1H), 2,95 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 2,71 (t, J = 10,8 Hz, 1H), 2,13 (s, 1H), 1,86 (dd, J = 11,8, 5,3 Hz, 1H), 1,77 (s, 1H), 1,60 (s, 5H), 1,51 (s, 3H), 1,46 (s, 1H ), 1,31 (k, J = 12,6, 12,2 Hz, IH), 0,90 - 0,78 (m, 5H), 0,68 - 0,62 (m, 2H), 0,53 - 0,46 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 620,29, nađeno 621,24 (M+l) ; Vreme zadržavanja: 1,3 min (LC metoda J).
Primer 104: Priprema (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil( 20-deuterio)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heks-en- 2,2,4-trion (Jedinjenje 300)
[1436]
Korak 1: (14S)-8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2,2, 4-triokso-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-20-il 4-metilbenzen-1-sulfonat
[1437]
[1438] U mešani rastvor (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20-hidroksi-12 ,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2, 2,4-tri-on (150 mg, 0,2367 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (3,000 mL) je dodat 4-metilbenzensulfonil hlorid (58 mg, 0,3042 mmol), trietilamin (80 mL, 0,5740 mmol) i količina N -dimetilpiridin-4-amin (10 mg, 0,08185 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noć i. Reakciona smeša je ugašena zasi ć enim vodenim rastvorom amonijum hlorida i ekstrahovana etil acetatom. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen iznad natrijum sulfata i koncentrovan. Dobijeni smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na koloni silika gela korišć enjem plitkog gradijenta 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio (14S)-8
[3-(2-[dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2,2,4-triokso-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-20-il 4-metilbenzen-1-sulfonat (120 mg, 51%) kao bela čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač.787,28217, nađeno 788,42 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,39 min (LC metoda J).
Korak 2: (14S)-8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il]etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil(20-deuterio) -2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4- trion (Jedinjenje 300)
[1439]
[1440] Rastvor (14S)-8-[3-(2-[dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il]etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2 ,2,4-triokso-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen- 20-il 4-metilbenzen-1-sulfonat (120 mg, 0,1523 mmol) u suvom N,N-dimetilformamidu (1 mL) je propuhan azotom 5 minuta korišć enjem balona. Zatim su dodati dihloronnikl; trifenil-fosfan (30 mg, 0,04586 mmol) i tricikloheksilfosfan (34 mg, 0,1212 mmol). Dobijeni zeleni rastvor je mešan 5 min u atmosferi azota i dodat je tetradeuterioboranuid (natrijumova so) (87 mg, 2.079 mmol) u jednoj porciji. Dobijena tamnocrvenkasto smeđa smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 1 h. Dodatno dihloronnikl; trifenilfosfan (30 mg, 0,04586 mmol), tricikloheksilfosfan (34 mg, 0,1212 mmol) i tetradeuterioboranuid (77 mg, 9 mmol)28. Dodati su i smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom preko noć i. Reakciona smeša je razblažena vodom i ekstrahovana etil acetatom. Organski sloj je osušen preko magnezijum sulfata, filtriran i uparen. Dobijeni ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu i filtriran kroz Vhatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišć en HPLC-MS reverzne faze koriš ć enjem dvostrukog gradijenta od 50% - 99% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilno faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril) dajuć i (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H -pirazol-1-il]-12,12-dimetil(20-deuterio)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9, 19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 300) (35 mg, 37%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,52 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,98 (s, 1H), 6,90 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,08 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,25 - 4,17 (m, 2H), 3,92 (d, J = 12,5 Hz, 1H), 3,17 (s, 1H), 2,94 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 2,72 (s, 1H), 2,20 - 2,06 (m , 1H), 1,81 (k, J = 6,6 Hz, 4H), 1,60 (s, 3H), 1,56 (d, J = 13,5 Hz, 2H), 1,51 (s, 3H), 1,46 (d, J = 6,5 Hz , 1H), 1,36-1,26 (m, 1H), 1,23 (s, 1H), 0,87-0,76 (m, 4H), 0,70-0,59 (m, 2H), 0,50 (dd, J = 8,0, 4,3 Hz, 2H), 0,70-0,59 (m, 2H), 0,50 (dd, J = 8,0, 4,3 Hz, 2H). ). ESI-MS m/z izrač.
618,2847, nađeno 619,25 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,28 min (LC metoda J).
Primer 105: Priprema (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-1,1,2,2-tetradeuterio-etoksi)-1H-pirazol-1- il]-12,12-dimetil(20-deuterio)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111, 14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9 ,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 301)
Korak 1: terc-butil (4S)-4-[3-[[3-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0 .2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat.
[1442]
[1443] U rastvor 2-hloro-6-[3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-etoksi)pirazol-1-il]piridina - 3-karboksilna kiselina (500 mg, 1.374 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (5 mL) je dodat karbonil diimidazol (207 mg, 1.277 mmol) i smeša je mešana 2 h na sobnoj temperaturi. Zatim terc-butil (4S)-4-[3-[(3-benziloksi-6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (410 mg, 0,7905 mmol) je dodat, a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (600 mL, 4,012 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 14 h. Reakciona smeša je ugašena zasić enim vodenim rastvorom amonijum hlorida i ekstrahovana etil acetatom. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen (magnezijum sulfat), filtriran i koncentrovan. Dobijeni smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na koloni silika gela koriš ć enjem plitkog gradijenta 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[3-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7il-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]-2- piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (436 mg, 37%) kao beličasta penasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izrač. 863,3745, nađeno 864,47 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,74 min (LC metoda L).
Korak 2: (14S)-20-(benziloksi)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-1,1,2,2-tetradeuterio-etoksi)-1H- pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9, 19(23),20- heksaen-2,2,4-trion
[1444]
[1445] Rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[3-benziloksi-6-[[2-hloro-6-[3-(1,1,2,2-tetradeuterio-2- dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat ( 436 mg, 0,5043 mmol) u trifluorosirć etnoj kiselini (400 mL, 5,192 mmol) i dihlorometanu (1,6 mL) je mešano na sobnoj temperaturi 2 h. Rastvarači su upareni i dobijeni ostatak je rastvoren u etil acetatu i ispran zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata (2 mL), a organski sloj je sakupljen i rastvarač uklonjen. Dobijeni ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (5 mL) i dodat je osušen u peć nici 4 A MS i dobijena smeša je mešana 10 min. Zatim je dodat kalijum karbonat (231 mg, 1.671 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 140 °C tokom 16 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz Whatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišć en pomo ć u HPLC-MS reverzne faze koriš ć enjem dvostrukog gradijenta od 50% - 99% mobilne faze B tokom 15.0 min. (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril) da bi se dobio (14S)-20-(benziloksi)-8-[3-(2-[dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il]-1,1,2,2-tetradeuterio-etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23 -pentaazatetraciklo[17.3.1.111 ,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (184 mg, 44%) kao prljavo bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9,96 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 8,0 Hz , 1H), 7,46 - 7,36 (m, 5H), 7,27 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 5,90 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 5,32 (d, J = 6,3 Hz, 1H), 5,11 (s, 2H), 3,91 (s, 1H), 3,42 - 3,31 (m, 1H), 3,19 (d, J = 14,1 Hz, 1H), 3,05 (t, J = 9,7 Hz, 1H), 2,67 (s, 1H), 2,10 (dd, J = 12,2, 8,2 Hz, 1H), 1,62 (s, 3H), 1,61 (s, 3H), 1,58 (br s, 4H) , 1,25 (s, IH), 0,85, (k, J = 2,5 Hz, 4H), 0,69 - 0,61 (m, 2H), 0,54 -0,46 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 727,3454, nađeno 728,47 (M+1) ; Vreme zadržavanja: 1,43 min (LC metoda J).
Korak 3: (14S)-8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-1,1,2,2-tetradeuterio-etoksi)-1H-pirazol-1-il] -20-hidroksi-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19, 21-heks-en-2,2,4-trion
[1446]
[1447] U mešani rastvor (14S)-20-(benziloksi)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-1,1,2,2-tetradeuterio-etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111, 14.05,10]tetrakoza-1(22),5 ,7,9,19(23),20-heksan-2,2,4-trion (184 mg, 0,2528 mmol) u EtOH (5 mL) je dodat 10% paladijum na ugljeniku (vlažan, Degussa, 27 mg, 0,02537 mmol) pod azotom. Heterogena smeša je mešana pod vodonikom (iz balona) približno 2 h na sobnoj temperaturi i crna heterogena reakciona smeša je filtrirana preko sloja celita. Filtrat je koncentrovan pod sniženim pritiskom da bi se dobio (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-1,1,2,2-tetradeuterio-etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20-hidroksi-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23), 5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (160 mg, 83%) kao svetlo braon čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,42 (s, 1H), 11,02 (s, 1H), 8,30 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,86 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,17 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,06 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,27 (s, 1H), 6,18 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,01 (s, 1H), 3,28 (s, 1H), 3,09 (d, J = 12,9 Hz, 1H), 2,86 - 2,69 (m, 1H), 2,22 (s, 1H), 2,01 (s , 1H), 1,99 -1,90 (m, 1H), 1,65 (d, J = 34,6 Hz, 9H), 1,55 (s, 1H), 1,40 - 1,28 (m, 1H), 0,97 - 0,89 (m, 4H), 0,77-0,70 (m, 2H), 0,62-0,53 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač.637,29846, nađeno 638,33 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,91 min (LC metoda J).
Korak 4: (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-1,1,2,2-tetradeuterio-etoksi)-1H-pirazol-1-il] -12,12-dimetil-2,2,4-triokso-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7, 9,19,21-heksaen-20-il 4-metilbenzen-1-sulfonat
[1448]
[1449] U mešani rastvor (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-1,1,2,2-tetradeuterio-etoksi)-1H-pirazola-1-il]-20-hidroksi-12,12-dimetil-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111, 14.05,10] tetrakoza-1(23),5 ,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (160 mg, 0,2107 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (2 mL) dodat je 4-metilbenzensulfonil hlorid (45 mg, 0,2360 mmol), trietilamin (60). , 0,4305 mmol) i katalitičku količinu N,N-dimetilpiridin-4-amina (6 mg, 0,04911 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi preko noć i. Reakcija je ugašena zasi ć enim vodenim rastvorom amonijum hlorida i ekstrahovana etil acetatom. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen iznad natrijum sulfata i koncentrovan. Dobijeni smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na koloni silika gela koriste ć i plitki gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il }-1,1,2,2-tetradeuterio-etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2,2,4-triokso-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-20-il 4-metilbenzen-1-sulfonat (147 mg, 88%) kao bela čvrsta materija.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,51 (s, 1H), 8,14 (s, IH), 7,85 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,73 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,59 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,41 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,05 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,70 (s, 1H), 6,02 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 3,76 - 3,64 (m, 1H), 3,24 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 2,96 (tt, J = 11,8, 5,3 Hz, 1H), 2,73 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 2,35 (s, 3H ), 2,02 - 1,92 (m, 1H), 1,79 (t, J = 11,9 Hz, 2H), 1,52 (s, 4H), 1,45 (s, 3H), 1,39 (s, 1H), 1,34 (d, J = 12,1 Hz, 2H), 1,19 (d, J = 12,7 Hz, 1H), 0,76 (t, J = 3,5 Hz, 4H), 0,57 (dd, J = 8,1, 4,4 Hz, 2H), 0,43 (d, J = 9,2 Hz, 2H). ESI-MS m/z izrač. 791,3073, nađeno 792,17 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 0,65 min (LC metoda L).
Korak 5: (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-1,1,2,2-tetradeuterio-etoksi)-1H-pirazol-1-il] -12,12-dimetil(20-deuterio)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9 ,19,21-heks-en-2,2,4-trion (Jedinjenje 301)
[1450]
[1451] Rastvor (14S)-8-[3-(2- [dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il]-1,1,2,2-tetradeuterio-etoksi)-1H-pirazol-1 -il]-12,12-dimetil-2,2,4-triokso-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5 ,7,9,19,21-heks-an-20-il 4-metilbenzen-1-sulfonat (145 mg, 0,1831 mmol) u suvom N,N-dimetilformamidu (2 mL) je propuhan azotom 5 minuta korišć enjem balon. Zatim su dodati dihloronnikl; trifenil-fosfan (42 mg, 0,06420 mmol) i tricikloheksilfosfan (46 mg, 0,1640 mmol). Dobijeni zeleni rastvor je mešan 5 min pod atmosferom azota i dodat je tetradeuterioboranuid (natrijumova so) (108 mg, 2.580 mmol) u jednoj porciji. Dobijena tamnocrvenkasto smeđa smeša je mešana na sobnoj temperaturi 1 h. Dodati su dihloronnikl; trifenilfosfan (42 mg, 0,06420 mmol), tricikloheksilfosfan (46 mg, 0,1640 mmol) i tetradeuterioboranuid (natrijumova so) (108 mg, 2,580 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je razblažena vodom, ekstrahovana etil acetatom, osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana i uparena. Dobijeni ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu i filtriran kroz Vhatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišć en HPLC-MS reverzne faze koriš ć enjem dvostrukog gradijenta od 50% - 99% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilno faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina). mobilna faza B = acetonitril) dajuć i (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-1,1 ,2,2-tetradeuterio-etoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil(20-deuterio)-2l6-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111, 14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksan-2,2,4-trion (Jedinjenje 301) (26,9 mg, 24%) kao bela čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,60 (s, 1H), 8,30 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,70 - 7,66 (m, 1H), 7,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), ), 7,15 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,08 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 7,01 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,18 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,02 (d, J = 12,1 Hz, 1H), 3,26 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 3,05 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 2,83 - 2,76 (m, 1H), 2,20 (d, J = 19,9 Hz, 1H), 1,99 - 1,93 (m, 1H), 1,87 (s, 1H), 1,70 (s, 6H), 1,61 (s, 3H), 1,55 (s, 1H), 1,46 - 1,37 (m, 1H), 0,97-0,90 (m, 4H), 0,76-0,72 (m, 2H), 0,63-0,57 (m, 2H). ESI-MS m/z izrač. 622,3098, nađeno 623,26 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,3 min (LC metoda J).
Primer 106: Priprema 11-[3-(2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-7,7-dimetil-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3 .1.15,8.09,14]tricoza-1(21),9(14),10,12,18(22),19-heksen-15,17,17-trion (Jedinjenje 1)
[1452]
Korak 1: 1-benzil-5,5-dimetilpirolidin-2-on
[1453]
[1454] 5,5-dimetilpirolidin-2-on (19,6 g, 0,174 mol) rastvoren je u N,N-dimetilformamidu (100 ml) i ohlađen na 0 °C, nakon čega je usledilo sporo dodavanje NaH (10,4 g, 0,261 mol). Reakciona smeša je mešana 10 min nakon čega je dodat benzil hlorid (22 mL, 0.19 mol). Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na 21 °C tokom perioda od 16 h. Reakcija je ugašena dodatkom zasić enog vodenog rastvora NH4CI, nakon čega je usledilo dodavanje etil acetata. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (3 X 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani. Sirovi proizvod je prečišć en brzom filtracijom preko silicijum dioksida (20% etil acetata u heptanima) dajuć i čisti 1-benzil-5,5-dimetilpirolidin-2-on (30 g, 85%) kao bezbojno ulje. 'H NMR (300 MHz, CDC13): 57,3 (m, 5H); 4,4 (s, 2H); 2,42 (t, 2H); 1,9 (t, 2H); 1.1 (s, 6H).
Korak 2: 1-benzil-5,5-dimetil-2-oksopirolidin-3-karboksilat
[1455]
[1456] Diizopropil amin (27,6 ml, 197 mmol) je rastvoren u tetrahidrofuranu (200 mL) u atmosferi azota i ohlađen na -78 °C. n-BuLi (79 mL, 197 mmol, 2,5 M rastvor u heksanu) je dodat u kapima i mešanje je nastavljeno dodatnih 90 min uz ostavljanje da se zagreje na -20 °C. Reakciona smeša je ponovo ohlađena na -78 °C i dodat je 1-benzil-5,5-dimetilpirolidin-2-on (20 g, 98,4 mmol) rastvoren u tetrahidrofuranu (20 mL) uz održavanje temperature ispod -78 °C. Mešanje je nastavljeno još 1 h u kom trenutku je temperatura korigovana na -80 °C i dodat je dimetil karbonat (17.4 mL, 206.6 mmol). Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na -20°C. Polako je dodavana voda (20 mL), a zatim je dodat 4N vodeni rastvor hlorovodonične kiseline (20 mL). Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (2 X 20 mL). Kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani. Čisti metil 1-benzil-5,5-dimetil-2-oksopirolidin-3-karboksilat (7,8 g, 30%) je dobijen kao žuto ulje posle hromatografskog prečišć avanja na silika gelu (40% etil acetata u heptanima).<1>H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,3 (m, 5H); 4,4 (dd, 2H); 3,8 (s, 3H); 3,6 (t, IH); 2,2 (m, 2H); 1,2 (s, 3H); 1.1 (s, 3H).
Korak 3: 2-(1-benzil-5,5-dimetilpirolidin-3-il)acetonitril
[1457]
[1458] Litijum aluminijum hidrid (4,2 g, 110,4 mmol) je suspendovan u tetrahidrofuranu (100 mL) i ohlađen na 0 °C, nakon čega je u kapima dodavan metil 1-benzil-5,5-dimetil-2-oksopirolidin-3- karboksilat (7,8 g, 29,8 mmol) rastvoren u tetrahidrofuranu (20 mL). Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na 20 °C tokom perioda od 16 h, ugašena vodom i ekstrahovana etil acetatom (3 x 30 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani. Sirovi (1-benzil-5,5-dimetilpirolidin-3-il)metanol (6,6 g, kvant.) je korišć en bez daljeg prečiš ć avanja u slede ć em koraku.<1>H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,3 (m, 5H); 3,8 (d, IH); 3,5 (m, 2H); 3,2 (d, IH); 2,8 (bs, 1 H); 2,6 (m, 2H); 2,2 (m, IH); 1,9 (m, IH); 1,6 (m, IH); 1,3 (s, 3H); 1,03 (s, 3H).
Korak 4: 2-(1-benzil-5,5-dimetilpirolidin-3-il)acetonitril
[1459]
[1460] (1-benzil-5,5-dimetilpirolidin-3-il)metanol (5 g, 22,8 mmol) rastvoren je u tetrahidrofuranu (60 mL) i ohlađen na -23 °C, nakon čega je dodat Et3N (4,74). mL, 34,2 mmol) i MsCl (2,1 mL, 27,4 mmol). Reakciona smeša je mešana na ovoj temperaturi 15 min, a zatim je rashladno kupatilo uklonjeno i mešanje je nastavljeno dodatnih 30 min. Dodata je voda, a zatim etil acetat. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ispran etil acetatom (2 X 30 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani. Sirovi materijal je dalje rastvoren u dimetil sulfoksidu (40 mL) i dodat je natrijum cijanid (1,7 g, 34,2 mmol). Ostatak je mešan na 60 °C tokom 5 h, nakon čega je dodata druga količina natrijum cijanida (770 mg) i mešanje je nastavljeno još 5 h. Reakciona smeša je ohlađena, dodata je voda, a zatim etil acetat. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstrahovan etil acetatom (2 X 20 mL). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko natrijum sulfata i koncentrovani. Čisti 2-(1-benzil-5,5-dimetilpirolidin-3-il)acetonitril (3 g, 58%) je dobijen kao žuto ulje posle prečišć avanja hromatografijom na silika gelu (30% etil acetata u heptanima).<1>H NMR (300 MHz, CDC13) δ 7,3 (m, 5H); 3,7 (d, IH); 3,4 (d, IH); 2,78 (t, IH); 2,4 (m, 2H); 2,0 (m, IH); 1,6 (m, 2H); 1,2 (s, 3H); 1,05 (s, 3H).
Korak 5: 2-(1-benzil-5,5-dimetilpirolidin-3-il)etan-1-amin hidrohlorid
[1461]
[1462] Litijum aluminijum hidrid (1,25 g, 32,8 mmol) je suspendovan u tetrahidrofuranu (30 mL) i ohlađen na 0 °C, a zatim sporo dodavanje 2-(1-benzil-5,5-dimetilpirolidin-3-il)acetonitrila (3 g, 13,1 mmol) rastvoren u tetrahidrofuranu (5 mL). Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje na 20 °C tokom perioda od 15 h. Reakcija je ugašena vodom (20 mL) i 15% vodenim rastvorom natrijum hidroksida (10 mL). Dobijeni talog je filtriran preko sloja celita. Filterski kolač je ispran etil acetatom i slojevi su razdvojeni. Organski sloj koji sadrži sirovi amin je koncentrovan i ostatak je tretiran sa 4N hlorovodoničnom kiselinom u dioksanu, a zatim uparen, dajuć i čisti 2-(1-benzil-5,5-dimetilpirolidin-3-il)etan-1-amin hidrohlorid ( 3,8 g, 98%) kao žu ć kasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, D20) δ 7,4 (m, 5H); 4,4 (m, IH); 3,9 (m, IH); 3,6 (m, IH); 3,4 i 3,0 (m, 1 H); 2,8 (m, 2H); 2,6 (m, IH); 2,2 (m, IH); 1,6 (m, IH); 1,42 (s, 3H); 1,3 (s, 3H).
Korak 6: 2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etan-1-amin dihidrohlorid
[1463]
[1464] U rastvor 2-(1-benzil-5,5-dimetilpirolidin-3-il)etan-1-amin hidrohlorida (1 g, 3,720 mmol) u metanolu (10 mL) dodat je paladijum hidroksid ( 653,0 mg, 0,9300 mmol) i hlorovodonične kiseline (155,0 mL 6 M, 0,9300 mmol). Reakciona boca je evakuisana i isprana sa H2 korišć enjem balona sa trosmernim adapterom i ponovljena 3 puta. Mešano pod H2atm na sobnoj temperaturi 48 h. Reakciona smeša je filtrirana kroz sloj celita i ispran sloj metanolom. Filtrat je uparen da bi se dobio 2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etanamin dihidrohlorid (557 mg, 70%). ESI-MS m/z izrač.142,147, nađeno 143,2 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 0,09 min (LC metoda A).
Korak 7: terc-butil 3-(2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-karboksilat
[1465]
[1466] U terc-butil 3-hidroksipirazol-1-karboksilat (40 g, 217,2 mmol) u tetrahidrofuranu (480,0 mL) pod azotom je dodat 2,2-dimetilpropan-1-ol (21,06 g, 238,9 mmol) i trifenilfos. 62,66 g, 55,35 mL, 238,9 mmol). U smešu je dodat DIAD (48,31 g, 47,04 mL, 238,9 mmol) u kapima, dozvoljavajuć i smeši da se postepeno egzotermna do 45 °C. Posle dodavanja, smeša je zagrevana na 50 °C tokom 5 h. Smeša je zatim ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu. Reakciona smeša je razblažena sa 200 mL etil acetata i organska faza je isprana sa 500 mL 1N natrijum hidroksida, 500 mL slanog rastvora, osušena preko magnezijum sulfata, filtrirana preko celita i koncentrovana u vakuumu do zapremine od približno 300 mL. Započela je kristalizacija trifenilfosfin oksida i svetlocrvena suspenzija je ostavljena da stoji preko noć i. Suspenzija je filtrirana koriš ć enjem srednje frite i isprana 3Ks sa 100 mL 50% etil acetata/heksana. Filtrat je koncentrovan in vacuo. Sirovo ružičasto ulje je razblaženo dihlorometanom i hromatografisano na koloni od 750 g silika gela eluiranjem sa gradijentom 0-25% etil acetat/heksani. Sakupljene nečiste frakcije su ponovo hromatografisane na koloni od 330 g silika gela eluiranjem sa 0 - 25% etil acetat/heksana. Čiste frakcije iz obe kolone su kombinovane i koncentrovane dajuć i terc-butil 3-(2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-karboksilat (45,8 g, 83%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,83 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 5,88 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 3,95 (s, 2H), 1,62 (d, J = 2,2 Hz , 9H), 1,01 (d, J = 2,7 Hz, 9H). ESI-MS m/z izrač. 254,16304, nađeno 199,1 (M+1-tBu)+; Vreme zadržavanja: 1,89 min (LC metoda B).
Korak 8: 3-(2,2-dimetilpropoksi)-lH-pirazol
[1467]
[1468] U terc-butil 3-(2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-karboksilat (111 g, 436,4 mmol) u dihlorometanu (450 mL) i metanolu (450 mL) dodata je hlorovodonična kiselina (330 mL 4 M u dioksanu, 1,320 mol) (postepena egzotermna do -35 °C) i smeša je mešana na 45 °C tokom 1 h. Rastvarač je uklonjen in vacuo, a ostatak je razblažen sa MTBE (900 mL) i ispran sa natrijum hidroksidom (650 mL 2 M, 1.300 mol). Vodena faza je ekstrahovana sa 500 mL MTBE, a kombinovane organske faze su isprane sa 800 mL slanog rastvora, osušene iznad magnezijum sulfata, filtrirane i koncentrovane u vakuumu dajuć i kao beličastu čvrstu supstancu 3-(2,2-dimetilpropoksi) -1H-pirazol (65 g, 97%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 11,81 (s, 1H), 7,48 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 5,65 (t, J = 1,9 Hz, 1H), 3,70 (s, 2H), 0,96 (s, 9H). ESI-MS m/z izrač.154,11061, nađeno 155,1 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,48 min (LC metoda D).
Korak 9: terc-butil 2-hloro-6-[3-(2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
[1469]
[1470] U terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (12,75 g, 51,39 mmol) i 3-(2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol (7,925 g, 51,39 mmol) u N,N -dimetilformamid (95,10 mL) je dodat pod azot-kalijum karbonata (9,232 g, 66,80 mmol) i 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktana (864,6 mg, 7,708 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 18 A. h. Fina suspenzija kreme je razblažena vodom (95,10 mL) što je rezultiralo precipitacijom gume koja je počela da se očvršć ava. Smeša je ostavljena da odstoji i bistri rastvor je dekantovan iz gumene čvrste supstance. Čvrsta supstanca je razblažena sa 200 mL vode i 25 mL izopropil alkohola. Smeša se zagreva dok rastvor ne postane homogen. Smeša je ostavljena da se ohladi i zatim stavljena u ledeno kupatilo dajuć i polučvrstu kremu boje. Čvrsta supstanca je sakupljena koriš ć enjem srednje frite i isprana 3X sa 10 mL vode. Čvrsta supstanca je sušena na vazduhu 18 h dajuć i terc-butil 2-hloro-6-[3-(2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (18 g, 95%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,41 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,30 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,73 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,22 (d, J = 2,9 Hz, IH), 3,92 (s, 2H), 1,57 (s, 9H), 1,01 (s, 9H). ESI-MS m/z izrač. 365,1506, nađeno 366,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 3,53 min (LC metoda D).
Korak 10: 2-hloro-6-[3-(2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[1471]
[1472] U terc-butil 2-hloro-6-[3-(2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (18 g, 49,20 mmol) u izo-propil alkoholu (90,00 mL) dodata je vodena hlorovodonična kiselina (41,00 mL 6 M, 246,0 mmol) i smeša je zagrevana do refluksa 90 min (temperatura uljnog kupatila = 100 °C). Smeša je ostavljena da se ohladi do sobne temperature i zatim je razblažena vodom (90.00 mL). Suspenzija je blago ohlađena u kupatilu sa ledom i vodom i talog je sakupljen korišć enjem srednje frite. Talog je ispran 3X sa 10 mL vode i sušen u vakuumu na 45 °C tokom 2 dana dajuć i 2-hloro-6-[3-(2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilnu kiselinu (12,72 g, 83%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 13,62 (s, 1H), 8,42 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,38 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 8,4 Hz, IH), 6,22 (d, J = 2,9 Hz, IH), 3,93 (s, 2H), 1,01 (s, 9H). ESI-MS m/z izrač.309.088, nađeno 310.2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,61 min (LC metoda D).
Korak 11: 2-hloro-6-[3-(2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfonil]piridin-3-karboksamid
[1473]
[1474] Bočica od 40 mL je napunjena pod azotom sa 2-hloro-6-[3-(2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilnom kiselinom (1,0 g, 3,228 mmol) i karbonil diimidazol (785,1 mg, 4,842 mmol). Dodat je N,N-dimetilformamid (9.615 mL) i smeša je mešana na 45 °C pod azotom 1 h. U posebnoj bočici od 40 mL, rastvor 6-fluoro-2-piridinsulfonamida (682,5 mg, 3,874 mmol) rastvoren je pod azotom u anhidrovanom N,N-dimetilformamidu (9,615 mL). U porcijama je dodat natrijum hidrid (154,9 mg, 3,874 mmol) (60% uljna suspenzija) i smeša je mešana pod azotom dok se ne zaustavi oslobađanje gasa. Bočica je zatvorena i mešana na 45 °C tokom 45 minuta. Dve smeše su kombinovane i mešane na sobnoj temperaturi 2 h. Dodati su voda i led. Ukapavanjem je dodavana koncentrovana hlorovodonična kiselina sve dok nije postojao beli talog, a zatim ispran etil acetatom (2X), kombinovani organski slojevi, osušeni (natrijum sulfat), filtrirani i koncentrovani do žutog ostatka. Ostatak je rastvoren u etil acetatu i ispran sa 1:1 zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata/1N natrijum hidroksida (3X), osušen preko natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan. Materijal je dalje prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se izolovao kao bledo žuta pena 2-hloro-6-[3-(2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il ]-N-[(6-fluoro-2-piridil)sul-fonil]piridin-3-karboksamid (1,01 g, 67%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6)58,36 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,21 - 8,10 (m, 2H), 7,89 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,15 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 3,92 (s, 2H), 1,00 (s, 9H) ESI-MS m/z calc.467,08304, nađeno 468,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,92 min (LC metoda E).
Korak 12: 11-[3-(2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-7,7-dimetil-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo [16.3.
1.15,8.09,14]tricoza-1(21),9(14),10,12,18(22),19-heksen-15,17,17-trion (Jedinjenje 1)
[1476] U bočici od 5 mL pomešan je 2-hloro-6-[3-(2,2-dimetilpropoksi)pirazol-1-il]-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfonil]piridin -3-karboksamid (330 mg, 0,6065 mmol) u dimetil sulfoksidu (2,980 mL), kalijum karbonatu (419,2 mg, 3,033 mmol) i 2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etanamin dihidrohlorid (108,4 mg, 108,4 mg ). Bočica je zatvorena i zagrevana na 120 °C na vruć oj ploči 20 h. Dodat je još 2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etanamin dihidrohlorida (108,4 mg, 0,504 mmol) i zagrevan na 125 °C na vruć oj ploči 24 h. Reakciona smeša je filtrirana i zatim prečišć ena direktno preparativnom hromatografijom reverzne faze koriš ć enjem kolone C18 (10-99 acetonitril-voda 5 mM hlorovodonična kiselina) da bi se dobila beličasta čvrsta supstanca kojoj je dodat višak kalijum karbonata (419,2). mg, 3,033 mmol) i dimetil sulfoksida (2,980 mL) i smeša je zagrevana 18 h na 155 °C. Reakciona smeša je filtrirana i zatim prečišć ena direktno preparativnom hromatografijom reverzne faze koriš ć enjem kolone C18 (10-99 acetonitril-voda 5 mM hlorovodonične kiseline) da bi se dobio kao polarniji regioizomer, 11-[3-(2,2- dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-7,7-dimetil-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(21),9(14),10,12, 18(22),19-heksan-15,17,17-trion (Jedinjenje 1) (34,5 mg, 10%) kao bledo žuta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,45 (s, 1H), 8,27 - 8,16 (m, 1H), 7,74 (d, J = 30,7 Hz, 2H), 7,17 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 30,7 Hz, 1H), ), 6,96 - 6,88 (m, 1H), 6,88 - 6,74 (m, 1H), 6,17 - 6,10 (m, 1H), 3,89 (s, 2H), 3,61 (dd, J = 15,1, 8,4 Hz, 1H), 3,35 (s, 1H), 2,48 - 2,29 (m, 1H), 2,25 (s, 1H), 1,91 (dd, J = 10,8, 5,3 Hz, 2H), 1,56 (s, 6H), 1,50 (s, 1H) , 1,43-1,28 (m, 1H), 1,19 (dd, J = 30,9, 7,8 Hz, 1H), 1,00 (s, 9H).ESI-MS m/z izrač.553,24713, nađeno 554,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,14 min (LC metoda E).
Primer 107: Priprema 11-[3-(2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-7,7-dimetil-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3 .1.15,8.09,14]tricosa-1(21),9(14),10,12,18(22),19-heksan-15,17,17-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 2) i 11- [3-(2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-7,7-dimetil-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09, 14]tricosa-1(21),9(14),10,12,18(22),19-heksan-15,17,17-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 3)
[1477]
Korak 1: 11-[3-(2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-7,7-dimetil-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.
1.15,8.09,14]tricosa-1(21),9(14),10,12,18(22),19-heksan-15,17,17-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 2) i 11- [3-(2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-7,7-dimetil-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09, 14]tricosa-1(21),9(14),10,12,18(22),19-heksan-15,17,17-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 3)
[1479] Racemski 11-[3-(2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-7,7-dimetil-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[ 16.3.1.15,8.09,14]tricosa-1(21),9(14),10,12,18(22),19-heksan-15,17,17-trion (28,4 mg) je podvrgnut hiralnom SFC prečišć avanju koriš ć enjem ChiralPak AS-H (250310 mm kolone, 5 mm veličine čestica) sa 28% metanola/72% mobilne faze ugljen-dioksida pri 10mL/min dajuć i kao prvi enantiomer za eluiranje,11-[3-(2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-7,7-dimetil-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo [16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(21),9(14),10,12,18(22),19-heks-en-15,17,17-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 2) (4,4 mg, 32%), ESI-MS m/z izrač.553,24713, nađeno 554,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,14 min (LC metoda E); i kao drugi enantiomer za eluiranje, 11-[3-(2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-7,7-dimetil-17l6-tia-2,8,10,16,22- pentaazatetraciklo [16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(21),9(14),10,12,18(22),19-heksan-15,17,17-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 3) (5,6 mg, 41%), ESI-MS m/z izrač. 553,24713, nađeno 554,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,15 min (LC metoda E).
Primer 108: Priprema 7,7-dimetil-11-(3-{[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]-1H-pirazol-1-il)-17l6-tia-2,8,10,16,22 -pentaazatetraciklo [16.3.1.1(5,8).0(9,14)]tricosa-1(21),9(14),10,12,18(22),19-heksan-15,17,17- trion (Jedinjenje 4)
[1480]
Korak 1: 2-hloro-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfonil]-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[1481]
[1482] Rastvor 2-hloro-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilne kiseline (3,5 g, 9,386 mmol) i karbonil diimidazola (2,283). g, 14,08 mmol) u dimetilformamidu (32,64 mL) je mešano na 60 °C tokom 60 min i odvojen rastvor 6-fluoro-2-piridinsulfonamida (1,984 g, 11,26 mmol) i natrijum hidrida (450,4 mg6 mmol) u. dimetilformamid (32,64 mL) je mešan na 45 °C tokom 45 min. Dva rastvora su kombinovana i mešana na 60 °C tokom 1 h. Ohlađeno na sobnu temperaturu i sipano u vodu. Ukapavanjem je dodavana koncentrovana hlorovodonična kiselina sve dok nije postojao beli talog, a zatim je ispran etil acetatom (2X), kombinovani organski slojevi, osušeni (natrijum sulfat), filtrirani i koncentrovani do bele čvrste supstance. Rastvoren u etil acetatu i ispran sa 1:1 zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata/1N natrijum hidroksidom (3X), osušen (natrijum sulfat), filtriran i koncentrovan do sivobele pene. Razmuć en u etru i uklonjen etar pod sniženim pritiskom. Ostatak je rastvoren u minimalno toplom dihlorometanu, zasić en 5 min, a zatim ohlađen na 4 °C preko no ć i. Masa bele čvrste supstance je filtrirana i isprana dihlorometanom. Filtrat je redukovan do žute čvrste supstance, rastvoren u minimalno toplom dihlorometanu i polako ohlađen na 4 °C preko noć i. Formirana masa bele čvrste supstance je filtrirana i isprana dihlorometanom dajuć i 2-hloro-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfonil]-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol- 1-il]piridin-3-karboksamid (3,339 g, 62%). ESI-MS m/z izrač. 519,86, nađeno 520,2 (M+l)+; Vreme zadržavanja: 1,75 min (LC metoda B).
Korak 2: 7,7-dimetil-11-(3-{[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi}-1H-pirazol-1-il)-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo [16.3.1.1(5,8).0(9,14)]tricosa-1(21),9(14),10,12,18(22),19-heksan-15,17,17-trion ( jedinjenje 4)
[1483]
[1484] U bočici od 5 mL pomešan je 2-hloro-N-[(6-fluoro-2-piridil)sulfonil]-6-[3-[[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]pirazol-1 -il]piridin-3-karboksamid (400 mg, 0,7310 mmol) u dimetil sulfoksidu (3,040 mL), a zatim kalijum karbonat (505,1 mg, 3,655 mmol) i 2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etanamin dihidrohlorid 137,2 mg, 0,64 mmol). Bočica je zatvorena i zagrevana na 75 °C na vruć oj ploči tokom 92 h, a zatim 20 h na 125 °C. Reakciona smeša je filtrirana, a zatim prečiš ć ena direktno preparativnom hromatografijom reverzne faze korišć enjem kolone C18 (10-99 acetonitril-voda 5 mM hlorovodonične kiseline) da bi se dobio proizvod izolovan kao žuć kastosmeđa čvrsta supstanca, 7,7-dimetil-11-(3-{[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi}-1H-pirazol-1-il)-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.1(5,8).0(9,14)]trikoza-1(21),9(14),10,12,18(22),19-heksan-15,17,17-trion (Jedinjenje 4) (35,2 mg, 9%) .<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,43 (s, 1H), 8,43-8,41 (m, 1H), 8,21 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,74 (d, J = 33,4 Hz , 2H), 7,17 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,82 (s, 1H), 6,15 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,37 (k , J = 11,9 Hz, 2H), 3,61 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 3,41 (d, J = 3,9 Hz, 1H), 3,19 (d, J = 26,6 Hz, 2H), 2,26 (d, J = 5,9 Hz, 1H), 1,91 (d, J = 3,5 Hz, 1H), 1,55 (s, 6H), 1,48 (d, J = 11,0 Hz, 1H), 1,34 (d, J = 12,7 Hz, 1H), 1,18 (d, J = 11,8 Hz, IH), 1,11 - 1,06 (m, 4H). ESI-MS m/z izrač.605.2032, nađeno 606.2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,02 min (LC metoda E).
Primer 109: Priprema 7,7-dimetil-11-(3-{[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi]-1H-pirazol-1-il)-17l6-tia-2,8,10,16,22 -pentaazatetraciklo [16.3.1.1(5,8).0(9,14)]tricosa-1(21),9(14),10,12,18(22),19-heksan-15,17,17- trion (enantiomer 1) (jedinjenje 5) i 7,7-dimetil-11-(3-{[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi}-1H-pirazol-1-il)-17l6-tia-2,8 ,10,16,22-pentaazatetraciklo [16.3.1.1(5,8).0(9,14)]tricosa- 1(21),9(14),10,12,18(22),19-heksan- 15,17,17-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 6)
Korak 1: 7,7-dimetil-11-(3-{[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi}-1H-pirazol-1-il)-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo [16.3.1.1(5,8).0(9,14)]tricosa-1(21),9(14),10,12,18(22),19-heksan-15,17,17-trion ( enantiomer 1) (jedinjenje 5) i 7,7-dimetil-11-(3-{[1-(trifluorometil) ciklopropil]metoksi}-1H-pirazol-1-il)-17l6-tia-2,8, 10,16,22-pentaazatetraciklo [16.3.1.1(5,8).0(9,14)]tricoza-1(21),9(14),10,12,18(22),19-heksan-15 ,17,17-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 6)
[1486]
[1487] Racemski 7,7-dimetil-11-(3-{[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi}-1H-pirazol-1-il)-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.1(5,8).0(9,14)] trikoza-1(21),9(14),10,12,18(22),19-heksan-15,17,17-trion (31 mg, 0,05119 mmol) je podvrgnut hiralnom SFC prečišć avanju koriš ć enjem ChiralPak AS-H (250 X 10 mm kolone, veličine čestica 5 mm) sa 20% metanola/80% ugljen-dioksida mobilne faze pri 10 mL/min dajuć i kao prvu enantiomer za eluiranje, 7,7-dimetil-11-(3-{[1-(trifluorometil)ciklopropil] metoksil-1H-pirazol-1-il)-17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetracija-clo[16.3.1.1(5,8).0(9,14)]trikozal(21),9(14),10,12,18(22),19-heksan-15,17,17- trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 5) (11,5 mg, 74%); ESI-MS m/z izrač. 605.2032, nađeno 606.2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,02 min (LC metoda E), a kao drugi enantiomer za eluiranje, 7,7-dimetil-11-(3-{[1-(trifluorometil)ciklopropil]metoksi}-1H-pirazol-1-il) -17l6-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.1(5,8).0(9,14)]trikoza-1(21),9(14),10,12,18(22),19-heksan-15,17,17-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 6) (11,4 mg, 72%); ESI-MS m/z izrač. 605.2032, nađeno 606.2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,02 min (LC metoda E).
Primer 110: Priprema 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2l6-tia-3,9 ,11-triazatetraciklo [18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(24),5(10),6,8,20,22-heksan-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 7) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropiletoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2l6-tia-3,9,11-triazatetraciklo[18.3 .
1.05,10.011,15] tetrakoza-1(24),5(10),6,8,20,22-heksan-2,2,4-tri-on (enantiomer 2) (Jedinjenje 8)
[1488]
Korak 1: terc-butil 2,2-dimetil-5-[3-(3-sulfamoilfenoksi)propil]pirolidin-1-karboksilat
[1489]
[1490] U balon sa okruglim dnom od 50 mL dodat je 3-hidroksibenzensulfonamid (510 mg, 2.945 mmol) i N,N-dimetilformamid (10.20 mL). U smešu su dodati kalijum karbonat (1,425 g, 10,31 mmol) i terc-butil 2,2-dimetil-5-(3-metilsulfoniloksipropil)pirolidin-1-karboksilat (1,017 g, 3,033 mmol) na sobnoj temperaturi i mešan na sobnoj temperaturi. temperatura tokom 3 h, a zatim zagrevana na 50 °C preko noć i. Ohlađeno na sobnu temperaturu i sipano u vodu (100 mL) i ekstrahovano etil acetatom (2 X 100 mL), kombinovani organski slojevi, isprani vodom (2 X 100 mL), osušeni (natrijum sulfat), filtrirani i koncentrovani. Smeđi ostatak je prečišć en hromatografijom na silika gelu koriš ć enjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata da bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-5-[3-(3-sulfamoilfenoksi) kao svetlo narandžasto ulje. propil]pirolidin-1-karboksilat (770 mg, 63%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7,46 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,39 - 7,33 (m, 2H), 7,31 (s, 2H), 7,13 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,39 - 7,33 (m, 2H), 7,31 (s, 2H), 7,13 (d, J = 7,8 Hz, 1H). ), 4,02 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,85 - 3,67 (m, 1H), 1,88 (dd, J = 11,8, 6,6 Hz, 2H), 1,79 - 1,61 (m, 4H), 1,51 (dd, J = 37,7, 5,8 Hz, 2H), 1,38 (s, 12H), 1,24 (s, 3H). ESI-MS m/z izrač. 412,2032, nađeno 413,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,81 min (LC metoda E).
Korak 2: terc-butil 5-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboonil]sulfamoil]fenoksi]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1492] Balon od 100 mL je napunjen pod azotom sa 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilnom kiselinom (650 mg, 1,730 mmol) i karbonil diimidazol (345 mg, 2,128 mmol). Dodat je N,N-dimetilformamid (5.850 mL) i smeša je mešana na 40 °C pod azotom 1 h. U posebnoj posudi od 100 mL, terc-butil 2,2-dimetil-5-[3-(3-sulfamoilfenoksi)propil] pirolidin-1-karboksilat (750 mg, 1,818 mmol) je rastvoren pod azotom u anhidrovanom N,N-dimetilformamid (5.850 mL). U porcijama je dodat NaH (77,0 mg, 1,925 mmol) (60% uljna suspenzija) i smeša je mešana pod azotom dok se ne zaustavi razvijanje gasa. Bočica je zatvorena i mešana na sobnoj temperaturi 45 min. Dve smeše su kombinovane i mešane na sobnoj temperaturi 20 h. Zagreva se na 55 °C još 4 h. Dodati su voda i led, a zatim u kapima koncentrovana hlorovodonična kiselina sve dok se beli talog nije zadržao. Smeša je zatim isprana etil acetatom, a kombinovani organski slojevi su isprani slanim rastvorom, zatim isprani 1:1 zasić enim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata/1N natrijum hidroksida (3X), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani pod vakuumom i koncentrovani. Zatim je ostatak rastvoren u 10 mL dihlorometana i prečišć en hromatografijom na silika gelu koriste ć i plitki gradijent od 100% heksana do 65% etil acetata u heksanu da bi se dobio kao bela čvrsta supstanca, terc-butil 5-[3-[3- [[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]fenoksi]propil]-2,2-dimetil -pirolidin-1-karboksilat (450 mg, 34%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6)<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid) δ 8,39 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,68 (d , J = 8,4 Hz, 1H), 7,62 - 7,51 (m, 2H), 7,46 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 6,18 (d, J = 2,9 Hz , 1H), 4,48 - 4,25 (m, 2H), 4,06 (s, 2H), 3,74 (s, 1H), 2,08 (dd, J = 9,0, 5,1 Hz, 2H), 1,88 (s, 2H), 1,71 ( dd, J = 25,9, 15,0 Hz, 4H), 1,55 (d, J = 5,7 Hz, 2H), 1,36 (s, 12H), 1,23 (s, 3H), 0,96 (dd, J = 7,7, 3,8 Hz, 2H ), 0,88 (s, 2H). ESI-MS m/z izrač.
769,2524, nađeno 770,5 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 2,11 min (LC metoda G).
Korak 3: 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2l6-tia-3,9,11 -triazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(24),5(10),6,8,20,22-heksan-2,2,4-trion
[1493]
[1494] U tikvici sa okruglim dnom od 50 mL je kombinovan terc-butil 5-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]fenoksi]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (445 mg, 0,5777 mmol) rastvoren u dihlorometanu (2,225 mL) prać en dodavanjem hlorovodonične kiseline (4M u dioksanu) (1.589 mL 4 M, 6.355 mmol) i smeša je mešana 2 h. Zatim je materijal koncentrovan pod sniženim pritiskom do suva da bi se dobio materijal koji je rastvoren u dimetil sulfoksidu (9 mL), a zatim je dodat višak kalijum karbonata (1,0 g, 7,236 mmol). Bočica je zatvorena i zagrevana na 150 °C na vruć oj ploči 20 h. Dodat je cezijum fluorid (131,6 mg, 31,98 mL, 0,8666 mmol) i reakcija je zagrevana na 170 °C dodatnih 4 h. Reakciona smeša je filtrirana i zatim prečišć ena preparativnom hromatografijom reverzne faze korišć enjem kolone C18 (40-70 acetonitril-voda 5 mM trifluorosir ć etne kiseline) daju ć i kao beličastu čvrstu supstancu 12,12-dimetil-8-(3- {2-[1-(trifluorometil)ciklopro-pil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2l6-tia-3,9,11-triazatetraciklo[18.3.1.05, 10.011,15]tetrakoza - 1(24),5(10),6,8,20,22-heksan-2,2,4-trion (15,3 mg, 4%). ESI-MS m/z izrač. 633,22327, nađeno 634,2 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,83 min (LC metoda E).
Korak 4: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ6-tia-3,9,11-triazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(24),5(10),6,8,20,22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 7) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ6-tia-3,9,11-triazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(24),5(10),6,8,20,22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 8)
[1495]
[1496] Racemski 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi} - 1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(24),5(10),6,8,20,22-heksaen-2,2,4-trion (15,3 mg, 0,02414 mmol) je podvrgnut hiralnom SFC prečišćavanju korišćenjem ChiralPak AS-H (250 x 10 mm kolona, 5um veličina čestice) sa 18% metanol/82% ugljen dioksid mobilna fazom pri 10 mL/min čime je dobijen prvi enantiomer koji se eluira kao beličasta čvrsta supstanca, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(24),5(10),6,8,20,22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 7) (3,4 mg, 44%), ESI-MS m/z izračunato 633,22327, pronađeno 634,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,84 min (LC metod E), a kao drugi enantiomer koji se eluira kao beličasta čvrsta supstanca, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11-triazatetraciklo [18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(24),5(10),6,8,20,22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 8) (3,4 mg, 44%), ESI-MS m/z izračunato 633,22327, pronađeno 634,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,84 min (LC metod E).
Primer 111: Pripremanje 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo [18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 16)
[1497]
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-5-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat
[1498]
[1499] U bočicu su dodati kalijum karbonat (495 mg, 3,582 mmol), terc-butil 5-(3-aminopropil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (304 mg, 1,19 mmol), 6-fluoropiridin-2-sulfonamid (208,9 mg, 1,186 mmol) i dimetil sulfoksid (3 mL). Reakcija je mešana na 80 °C tokom noći. Reakcija je filtrirana i prečišćena sa HPLC (1% - 99% acetonitril/voda sa gradijentom modifikatora 0,1% hlorovodonične kiseline) čime je dobijen terc-butil 2,2-dimetil-5-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (224,7 mg, 46%) kao pena bele boje. ESI-MS m/z izračunato 412,21442, pronađeno 413,8 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,94 min (LC metod B).
Korak 2: terc-Butil 5-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1500]
[1501] U bocu sa okruglim dnom su dodati 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (204 mg, 0,5429 mmol), karbonil diimidazol (93 mg, 0,5735 mmol) i tetrahidrofuran (3 mL). Reakcija je pročišćena azotom i postavljena u prethodno zagrejanu na 45 °C uljanu kupku na 90 minuta. Dodat je terc-Butil 2,2-dimetil-5-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (224 mg, 0,5430 mmol) praćeno sa 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-enom (250 mL, 1,672 mmol) i reakcija je ostavljena da se meša tokom noći na sobnoj temperaturi. Reakcija je filtrirana i prečišćena sa HPLC (30%- 99% acetonitril/voda sa 0,1% gradijent modifikatora hlorovodonične kiseline) čime je dobijen terc-butil 5-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (196,5 mg, 47%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 769,2636, pronađeno 770,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,98 min (LC metod B).
Korak 3: 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)propilamino] -2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[1502]
[1503] U bocu sa okruglim dnom su dodati terc-butil 5-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (195 mg, 0,2532 mmol) i dihlorometan (5 mL). Ukapavanjem je dodata hlorovodonična kiselina (1,3 mL 4 M u dioksanu, 5,200 mmol) i reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi sat vremena. Reakcija je uparena do suvog stanja. Reakcija je razblažena sa 3 M kalijum karbonata na pH = 10 i ekstraktovana tri puta etil acetatom. Spojeni organski slojevi su osušeni nad natrijum sulfatom, filtrirani i upareni čime je dobijen 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (169 mg, 100%). ESI-MS m/z izračunato 669,2112, pronađeno 670,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,78 min (LC metod B).
Korak 4: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 16)
[1505] U bočicu su dodati kalijum karbonat (175 mg, 1,266 mmol), cezijum fluorid (58 mg, 0,3818 mmol) i rastvor 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (169 mg, 0,2522 mmol) u dimetil sulfoksidu (3,0 mL). Reakcija je zagrevana u zapečaćenoj tubi tokom noći na 150 °C. Reakcija je ugašena slanim rastvorom i ekstraktovana etil acetatom. Organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i uparen. Sirova reakciona smeša je prečišćena hromatografijom na silika gelu (0% - 50% etil acetata u gradijentu dihlorometana) čime je dobijen 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11, 19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 16) (93 mg, 58%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,75 (s, 1H), 8,23 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,58 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,29 (s, 1H), 7,03 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 6,63 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,13 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,32 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 3,72 (s, 2H), 3,10 (s, 1H), 2,08 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,86 (s, 2H), 1,73 (s, 2H), 1,51 (s, 4H), 1,35 (s, 3H), 1,24 (s, 2H), 1,02 - 0,93 (m, 3H), 0,90 - 0,85 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 633,2345, pronađeno 634,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,85 min (LC metod B).
Primer 112: Priprema 20,20,22-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (Jedinjenje 18) i 12,20,20-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 19)
[1506]
Korak 1: 2-hloro-N-[(5-metil-1H-pirazol-4-il)sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[1507]
[1508] U bočicu su dodati 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (100 mg, 0,2661 mmol), karbonil diimidazol (48 mg, 0,30 mmol) i tetrahidrofuran (1 mL). Reakcija je mešana na 45 °C sat vremena. Dodati su 5-metil-1H-pirazol-4-sulfonamid (43 mg, 0,2668 mmol) i 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (125 mL, 0,836 mmol) i reakcija je ostavljena da se meša tokom noći na 45 °C. Sirova reakcija je filtrirana i prečišćena sa HPLC (10%-99% acetonitril/voda sa 0,1% gradijent modifikatora hlorovodonične kiseline) čime je dobijen 2-hloro-N-[(5-metil-1H-pirazol-4il)sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (80,0 mg, 58%). ESI-MS m/z izračunato 518,0751, pronađeno 519,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,7 minuta (LC metod B).
Korak 2: terc-Butil 4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)cIklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3-metil-pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat i terc-butil 4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-5-metilpirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (smeša regioizomera)
[1509]
[1510] U bocu sa okruglim dnom koja sadrži 2-hloro-N-[(5-metil-1H-pirazol-4-il)sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (80 mg, 0,1542 mmol) su dodati N,N-dimetilformamid (2 mL), kalijum karbonat (65 mg, 0,47 mmol) i terc-butil 2,2-dimetil-4-(3-metilsulfoniloksipropil)pirolidin-1-karboksilat (68 mg, 0,20 mmol) u N,N-dimetilformamidu (2 mL). Reakcija je zagrevana na 60 °C i mešana 4 dana. Reakcija je filtrirana i prečišćena sa HPLC (30% - 99% acetonitril/voda sa 0,1% gradijent modifikatora hlorovodonične kiseline) čime su dobijeni terc-butil 4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]-3-metil-pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat i terc-butil 4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]-5-metil-pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (smeša regioizomera) (49,9 mg, 43%) kao pena bele boje. ESI-MS m/z izračunato 757,2636, pronađeno 758,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,82 minuta (LC metod G).
Korak 3: 2-hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]-3-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid i 2-hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]-5-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (smeša regioizomera)
[1511]
[1512] U bocu sa okruglim dnom su dodati terc-butil 4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3-metil-pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat i terc-butil 4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]-5-metil-pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (smeša regioizomera) (49,9 mg, 0,0658 mmol), dioksan (1 mL) i hlorovodonična kiselina (165 mL 4 M u dioksanu, 0,660 mmol). Reakcija je zagrevana na 35°C tokom noći. Reakcija je ugašena zasićenim natrijum bikarbonatom i ekstraktovana etil acetatom. Organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i uparen kako bi se dobili 2-hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]-3-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid i 2-hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]-5-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (smeša regioizomera) (42 mg, 97%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 657,2112, pronađeno 658,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,74 minuta (LC metoda B).
Korak 4: 20,20,22-Trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 18) i 12,20,20-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 19)
[1513]
[1514] U bocu sa okruglim dnom koja sadrži 2-hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]-3-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid i 2-hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]-5-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin- 3-karboksamid (smeša regioizomera) (42 mg, 0,06382 mmol) su dodati kalijum karbonat (44 mg, 0,32 mmol), cezijum fluorid (50 mg, 0,33 mmol), dimetil sulfoksid (2 mL) i četiri 3 Å molekularna sita. Reakcija je zagrevana na 150 °C tokom noći. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, filtrirana i prečišćena sa HPLC (10%-99% acetonitril/voda sa 0,1% gradijent modifikatora hlorovodonične kiseline) čime je dobijen kao prvi izomer za eluiranje 20,20,22-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 18) (2,8 mg, 7%) kao čvrsta supstanca narandžaste boje;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,39 (s, 1H), 8,18 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,77 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,09 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,43 - 4,34 (m, 1H), 4,30 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 4,08 - 3,96 (m, 1H), 2,06 (q, J = 7,4 Hz, 6H), 1,95 - 1,69 (m, 4H), 1,55 (s, 3H), 1,47 (s, 3H), 1,40 - 1,08 (m, 4H), 0,96 (td, J = 4,9, 4,4, 3,1 Hz, 2H), 0,90 - 0,85 (m, 2H), ESI-MS m/z izračunato 621,2345, pronađeno 622,6 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,48 minuta (LC metoda B) i kao drugi izomer za eluiranje, 12,20,20-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 19) (3,7 mg, 9%) kao čvrsta supstanca narandžaste boje;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,18 (s, 1H), 8,41 (s, 1H), 8,18 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,10 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,31 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 4,22 (dt, J = 13,6, 3,8 Hz, 1H), 3,97 (t, J = 12,4 Hz, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,20 (s, 1H), 2,07 (t, J = 7,1 Hz, 4H), 2,02 - 1,68 (m, 4H), 1,51 (d, J = 13,0 Hz, 6H), 1,38 (t, J = 12,3 Hz, 1H), 1,03 (s, 1H), 0,96 (td, J = 5,0, 4,5, 3,2 Hz, 2H), 0,93 - 0,84 (m, 2H), ESI-MS m/z izračunato 621,2345, pronađeno 622,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,54 minuta (LC metoda B).
Primer 113: Pripremanje 7,7-dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo [16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(21),9,11,13,18(22),19-heksaen-15,17,17-triona (Jedinjenje 20)
[1515]
Korak 1: terc-Butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1516]
[1517] U bočicu su dodati 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (615 mg, 1,64 mmol), karbonil diimidazol (279 mg, 1,72 mmol) i tetrahidrofuran (3 mL). Reakcija je mešana na 45 °C tokom 2 sata. Dodat je terc-Butil 2,2-dimetil-4-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etil]pirolidin-1-karboksilat (654 mg, 1,641 mmol) a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (750 mL, 5,02 mmol) i reakcija je ostavljena da se meša na 45 °C tokom noći. Reakcija je ugašena sa 1 N limunske kiseline i ekstraktovana etil acetatom. Organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i uparen. Sirova reakciona smeša je prečišćena hromatografijom na silika gelu (10% - 100% etil acetata u gradijentu heksana) čime je dobijen terc-butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (830 mg, 67%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 755,248, pronađeno 756,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,8 minuta (LC metoda G).
Korak 2: 2-hloro-N-[[6-[2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[1518]
[1519] U bocu sa okruglim dnom koja sadrži terc-butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (830 mg, 1,098 mmol) su dodati dihlorometan (2 mL) i hlorovodonična kiselina (2,75 mL 4 M u dioksanu, 11,00 mmol). Nakon 40 minuta, reakcija je ugašena zasićenim natrijum bikarbonatom i ekstraktovana dva puta etil acetatom. Spojeni organski slojevi su osušeni nad natrijum sulfatom, filtrirani i upareni kako bi se dobio 2-hloro-N-[[6-[2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (715 mg, 99%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,35 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,11 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,62 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,44 (dd, J = 8,3, 7,3 Hz, 1H), 6,98 (dd, J = 7,2, 0,8 Hz, 1H), 6,84 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 6,47 (dd, J = 8,3, 0,8 Hz, 1H), 6,12 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,33 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 3,81 - 3,69 (m, 1H), 3,17 (dq, J = 12,3, 5,8 Hz, 1H), 3,09 - 2,97 (m, 1H), 2,39 (p, J = 8,0 Hz, 1H), 2,08 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,95 (dd, J = 12,8, 7,7 Hz, 1H), 1,62 (dp, J = 19,9, 6,4 Hz, 2H), 1,35 (dd, J = 12,8, 10,2 Hz, 1H), 1,26 (d, J = 32,0 Hz, 6H), 1,01 - 0,84 (m, 4H). ESI-MS m/z izračunato 655,19556, pronađeno 656,6 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,78 minuta (LC metoda B).
Korak 3: 7,7-Dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(21),9,11,13,18(22),19-heksaen-15,17,17-trion (Jedinjenje 20)
[1520]
[1521] U bočicu su dodati kalijum karbonat (263 mg, 1,90 mmol), cezijum fluorid (133 mg, 0,876 mmol), četiri 3 Å molekularna sita, 2-hloro-N-[[6-[2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (250 mg, 0,381 mmol), i dimetil sulfoksid (7 mL). Reakcija je poklopljena i postavljena tokom noći u prethodno zagrejanu uljanu kupku na 155 °C. Reakcija je razblažena etil acetatom i ugašena sa 1N limunskom kiselinom a zatim slanim rastvorom. Reakcija je ekstraktovana dva puta etil acetatom, osušena nad natrijum sulfatom, filtrirana i uparena. Sirova reakciona smeša je prečišćena hromatografijom na silika gelu (0% - 100% etil acetata u gradijentu heksana) kako bi se dobio 7,7-dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1Hpirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(21),9,11,13,18(22),19-heksaen-15,17,17-trion (Jedinjenje 20) (101 mg, 43%). ESI-MS m/z izračunato 619,2189, pronađeno 620,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,07 minuta (LC metoda B).
Primer 114: Pripremanje 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,22-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (hidrohloridna so) (Jedinjenje 23)
[1522]
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[3-[(2-sulfamoil-4-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat
[1523]
[1524] Rastvoru terc-butil 2,2-dimetil-4-(3-metilsulfoniloksipropil) pirolidin-1-karboksilat (300 mg, 0,894 mmol) u N,N-dimetilformamidu (5 mL) su dodati 4-aminopiridin-2-sulfonamid (310 mg, 1,79 mmol) i cezijum karbonat (900 mg, 2,76 mmol). Reakciona smeša je mešana na 70 °C tokom 4 sata. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i sipana u vodu (100 mL) i ekstraktovana etil acetatom (2 x 100 mL), spojeni organski slojevi, isprana sa slanim rastvorom, osušena (natrijum sulfat), filtrirana i koncentrovana čime je dobijen terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(2-sulfamoil-4-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat koji je korišćen direktno u sledećem koraku (369 mg, kvant.).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,32 (brs, 2H), 8,12 (dd, J = 6,6, 1,6 Hz, 1H), 7,24 (dd, J = 6,3, 2,4 Hz, 1H), 6,87 (dt, J = 6,7, 2,0 Hz, 1H), 3,50 (q, J = 9,0 Hz, 2H), 3,40 - 3,28 (m, 1H), 2,96 (p, J = 7,0, 6,4 Hz, 2H), 2,83 - 2,68 (m, 1H), 2,07 - 1,96 (m, 1H), 1,89 - 1,74 (m, 2H), 1,45 - 1,26 (m, 14H), 1,23 (s, 3H). ESI-MS m/z izračunato 412,21442, pronađeno 413,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,52 minuta (LC metoda A).
Korak 2: terc-Butil 4-[3-[[2-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-4-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1525]
[1526] Rastvor 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (300 mg, 0,798 mmol) i karbonil diimidazol (130 mg, 0,802 mmol) u tetrahidrofuranu (5 mL) je mešan 45 minuta. Zatim su dodati terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(2-sulfamoil-4-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (330 mg, 0,800 mmol) i 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (150 mL, 1,00 mmol) i reakciona smeša je mešana tokom noći na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je ugašena zasićenim vodenim rastvorom amonijum hlorida i ekstraktovana etil acetatom. Organski sloj je ispran slanim rastvorom, osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i uparen kako bi se dobio uljani materijal koji je prečišćen reverznom fazom HPLC-MS upotrebom Luna C18(2) kolona (75 x 30 mm, 5 um veličina čestice) kupljeno od Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX), i dualni gradijent kreće od 1% - 99% mobilna faza B tokom 15,0 minuta (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 uL i temperatura kolone = 25 °C) čime je dobijen željeni proizvod terc-butil 4-[3-[[2-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-4-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (23 mg, 4%) kao beličasti lepljivi materijal.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,40 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,15 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,66 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,00 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 6,80 (s, 2H), 6,69 (dd, J = 5,7, 2,2 Hz, 1H), 6,18 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,34 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 3,81 - 3,71 (m, 1H), 3,54 (q, J = 8,3 Hz, 1H), 2,77 (q, J = 10,0 Hz, 1H), 2,18 - 2,02 (m, 4H), 1,90 - 1,77 (m, 1H), 1,74 - 1,65 (m, 1H), 1,43 - 1,32 (m, 14H), 1,22 (s, 3H), 1,01 - 0,94 (m, 2H), 0,91 - 0,87 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 769,2636, pronađeno 770,7 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,87 min (LC metoda A).
Korak 3: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,22-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (hidrohloridna so) (Jedinjenje 23)
[1527]
terc-Butil 4-[3-[[2-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-4-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (20 mg, 0,026 mmol) je rastvoren u dioksanu (1,0 mL) i smeši je dodata hlorovodonična kiselina (4M u dioksanu) (250 uL 4 M, 1,0 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 3 sata. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom, ponovo rastvorena u etil acetatu a zatim je dodat vodeni 2 M natrijum karbonat (5 mL), pH -10. Organski sloj je ekstraktovan etil acetatom (2 x 10 mL), ispran sa slanim rastvorom, zatim osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i uparen do suvoće pod redukovanim pritiskom čime je dobijen materijal koji je spojen sa kalijum karbonatom (20 mg, 0,14 mmol), cezijum fluoridom (10 mg, 0,066 mmol) i dimetil sulfoksidom (2.0 mL) u bočici. Bočica je pročišćena sa azotom, poklopljena, zagrevana do 150 °C i mešano tokom 16 sati. Ohlađeno na sobnu temperaturu i reakciona smeša je filtrirana kroz Whatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišćen metodom reverzne faze HPLC-MS upotrebom Luna C18(2) kolone (75 x 30 mm, 5 um veličina čestice) kupljeno od Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX), i dualnog gradijenta koji se kreće od 50% - 99% mobilne faze B tokom 15 minuta (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril. Brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 uL i temperatura kolone = 25 °C) kako bi se dobio 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,22-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (hidrohloridna so) (Jedinjenje 23) (1,6 mg, 9%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 633,2345, pronađeno 634,6 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,15 minuta (LC metoda B).
Primer 115: Pripremanje 6,6-dimetil-10-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-16λ<6>-tia-2,7,9,15,21-pentaazatetraciklo [15.3.1.14,7.08,13]dokoza-1(20),8,10,12,17(21),18-heksaen-14,16,16-trion (Jedinjenje 17)
[1528]
Korak 1: terc-Butil 4-(hidroksimetil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat
[1530] (1-Benzil-5,5-dimetilpirolidin-3-il)metanol (1 g, 4,56 mmol) je rastvoren u EtOH (40 mL), dodato je 20% Pd(OH)2na ugljeniku (400 mg) i reakciona smeša je mešana pod atmosferom vodonika na 20 °C tokom 24 sata. Katalizator je isfiltriran preko celita. Filterski sadržaj je ispran etil acetatom i filtrat je koncentrovan. Sirov intermedijer je rastvoren u tetrahidrofuran/voda (50 mL/50 mL) i dodat je kalijum karbonat (3,1 g, 22,8 mmol) praćeno sa Boc2O (1,22 g, 4,56 mmol) na 0 °C. Reakciona smeša je ostavljena da se zagreje do 20 °C tokom 16 sati a zatim sipana u vodu i ekstraktovana etil acetatom (3 x 20 mL). Spojeni organski slojevi su osušeni nad natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani. Dobijen je čist terc-butil 4-(hidroksimetil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (1,04 g, kvant.) kao bezbojno ulje nakon prečišćavanja silika gelom (30% etil acetata u eluentu heptana).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): d 3,6 (m, 4H); 3,1 (m, 1H); 2,4 (m, 1H); 1,9 (m, 1H); 1,4 (m, 15H).
Korak 2: terc-Butil 4-(aminometil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat
[1531]
[1532] MsCl (0,57 mL, 7,3 mmol) je polako dodavan rastvoru terc-butil 4-(hidroksimetil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (1,4 g, 6,1 mmol) i DIPEA (1,6 mL, 9,15 mmol) u dihlorometanu (30 mL) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana sat vremena, dodata je voda, slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstraktovan dihlorometanom (2 x 10 mL). Spojeni organski slojevi su osušeni nad natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani. Sirov mezilat je rastvoren u N,N-dimetilformamidu (20 mL), dodato je NaN3(600 mg, 9,15 mmol) i reakciona smeša je mešana u zatvorenoj posudi na 100 °C tokom 16 sati. Reakciona smeša je sipana u vodu i ekstraktovana etil acetatom (3 x 20 mL). Spojeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni nad natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani. Sirov azid je rastvoren u tetrahidrofuran/voda (18/2 mL), dodato je PPh3(2,4 g, 9,15 mmol) i reakciona smeša je mešana na 50 °C tokom 3 sata. Reakciona smeša je ohlađena, pažljivo zakiseljena na pH = 3 sa 4 N vodene hlorovodnične kiseline i brzo isprana etil acetatom (2 x 20 mL). Vodeni sloj je bazifikovan na pH = 10 i ekstraktovan etil acetatom (3 x 10 mL). Spojeni organski slojevi su osušeni nad natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani čime je dobijen tercbutil 4-(aminometil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (600 mg, 43%) kao ulje žute boje nakon prečišćavanja silika gelom (5% metanola u eluentu dihlorometana).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3): d 3,7 (m, 1H); 3,0 (m, 1H); 2,7 (m, 2H); 2,2 (m, 1H); 1,9 (m, 1H); 1,4 (m, 15H).
Korak 3: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]metil]pirolidin-1-karboksilat
U bočici od 20 mL su spojeni 6-fluoropiridin-2-sulfonamid (340 mg, 1,9 mmol) u dimetil sulfoksidu (4,0 mL) praćeno sa kalijum karbonatom (1,3 g, 9,4 mmol) i terc-butil 4-(aminometil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatom (460 mg, 2,0 mmol). Bočica je poklopljena i zagrevana do 100 °C na vrućoj ploči tokom 16 sati. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu a zatim filtrirana i razblažena etil acetatom i isprana sa 1 M rastvora limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a zatim prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 80% etil acetata u heksanima kako bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]metil]pirolidin-1-karboksilat (222 mg, 30%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksidd6) δ 7,53 (dd, J = 8,4, 7,3 Hz, 1H), 7,10 (s, 2H), 7,06 (d, J = 5,5 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 6,64 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 3,65 - 3,54 (m, 1H), 3,17 (d, J = 5,2 Hz, 2H), 2,95 (t, J = 10,1 Hz, 1H), 2,47 - 2,35 (m, 1H), 2,00 - 1,86 (m, 1H), 1,55 (dt, J = 32,7, 12,1 Hz, 1H), 1,42 - 1,36 (m, 12H), 1,25 (s, 3H). ESI-MS m/z izračunato 384,18314, pronađeno 385,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,46 minuta (LC metoda E).
Korak 4: terc-Butil 4-[[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]metil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1534]
[1535] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (202 mg, 0,538 mmol) i karbonil diimidazol (87,5 mg, 0,540 mmol) su spojeni u tetrahidrofuranu (3,0 mL) i mešani 2 sata na 45 °C. Onda je dodat tercbutil 2,2-dimetil-4-[[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]metil]pirolidin-1-karboksilat (207 mg, 0,538 mmol) a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (175 mL, 1,17 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 16 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa 1 M rastvora limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a zatim prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 70% etil acetata u heksanima kako bi se dobio terc-butil 4-[[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]metil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (234 mg, 59%) kao čvrsta supstanca svetlo žute boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,79 (s, 1H), 8,40 (m, 1H), 8,09 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,70 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 7,63 (m, 1H), 7,28 (s, 1H), 7,19 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 6,19 (dd, J = 4,4, 2,9 Hz, 1H), 4,34 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 3,55 (m, 1H), 3,26 (m, 2H), 2,91 (t, J = 10,4 Hz, 1H), 2,41 (m, 1H), 2,09 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 1,86 (m, 1H), 1,50 (m, 1H), 1,35 (t, J = 13,2 Hz, 12H), 1,18 (s, 3H), 0,95 (m, 2H), 0,89 (s, 2H). ESI-MS m/z izračunato 741,2323, pronađeno 742,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,25 minuta (LC metoda E).
Korak 5: 6,6-Dimetil-10-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-16λ<6>-tia-2,7,9,15,21-pentaazatetraciklo[15.3.1.14,7.08,13]dokoza-1(20),8,10,12,17(21),18-heksaen-14,16,16-trion (Jedinjenje 17)
[1536]
terc-Butil 4-[[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]metil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (234 mg, 0,315 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (5,0 mL) i smeši je dodata hlorovodonična kiselina (3,0 mL 4 M u dioksanu, 12,0 mmol) i mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom, ponovo rastvorena u etil acetatu a zatim je dodat vodeni 2 M natrijum karbonat (2 mL), pH ~ 10. Organski sloj je ekstraktovan etil acetatom (2 x 5 mL), ispran sa slanim rastvorom, zatim osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i uparen do suvog stanja pod redukovanim pritiskom. U bočici su spojeni ovaj materijal i kalijum karbonat (220 mg, 1,59 mmol), cezijum fluorid (72,0 mg, 0,474 mmol), 3 Å molekularna sita i dimetil sulfoksid (7,0 mL), pročišćeni azotom, poklopljeni, zagrevani do 155 °C i mešani tokom 16 sati. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu i razblažena etil acetatom i isprana sa 1 M rastvora limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a zatim prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 80% etil acetata u heksanima kako bi se dobio 6,6-dimetil-10-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-16λ<6>-tia-2,7,9,15,21-pentaazatetraciklo[15.3.1.14,7.08,13]dokoza-1(20),8,10,12,17(21),18-heksaen-14,16,16-trion (Jedinjenje 17) (111 mg, 57%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,52 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,67 - 7,50 (m, 2H), 7,47 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,73 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,09 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,52 (t, J = 9,8 Hz, 1H), 4,30 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 3,54 - 3,42 (m, 1H), 3,27 - 3,16 (m, 1H), 3,02 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 2,32 (dt, J = 12,3, 5,7 Hz, 1H), 2,07 (dd, J = 8,7, 5,4 Hz, 2H), 1,97 (dd, J = 11,4, 5,8 Hz, 1H), 1,68 (s, 3H), 1,64 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 1,45 (s, 3H), 0,95 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 0,87 (s, 2H). ESI-MS m/z izračunato 605,2032, pronađeno 606,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,02 minuta (LC metoda E).
Primer 116: Pripremanje 6,6-dimetil-10-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-16λ<6>-tia-2,7,9,15,21-pentaazatetraciklo [15.3.1.14,7.08,13]dokoza-1(20),8,10,12,17(21),18-heksaen-14,16,16-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 24) i 6,6-dimetil-10-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-16λ<6>-tia-2,7,9,15,21-pentaazatetraciklo [15.3.1.14,7.08,13]dokoza-1(20),8,10,12,17(21),18-heksaen-14,16,16-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 25)
Korak 1: 6,6-Dimetil-10-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-16λ<6>-tia-2,7,9,15,21-pentaazatetraciklo[15.3.1.14,7.08,13]dokoza-1(20),8,10,12,17(21),18-heksaen-14,16,16-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 24) i 6,6-dimetil-10-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-16λ<6>-tia-2,7,9,15,21-pentaazatetraciklo[15.3.1.14,7.08,13]dokoza-1(20),8,10,12,17(21),18-heksaen-14,16,16-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 25)
[1538]
[1539] Racemski 6,6-dimetil-10-(3-12-[l1(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-16λ<6>-tia-2,7,9,15,21-pentaazatetraciklo[15.3.1.14,7.08,13]dokoza-1(20),8,10,12,17(21),18-heksaen-14,16,16-trion (131 mg) je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji upotrebom ChiralPak AS-H (250 x 21,2 mm kolona, 5um veličina čestice) sa 15% acetonitril:metanol (90:10)/85% mobilna faza ugljen dioksid pri 10 mL/min dobijajući kao prvi enantiomer za eluiranje 6,6-dimetil-10-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-16λ<6>-tia-2,7,9,15,21-pentaazatetraciklo [15.3.1.14,7.08,13]dokoza-1(20),8,10,12,17(21),18-heksaen-14,16,16-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 24) (29,04 mg, 69%) kao beličasta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,52 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 10,5, 5,2 Hz, 2H), 7,47 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,73 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,09 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,51 (t, J = 10,0 Hz, 1H), 4,30 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 3,58 - 3,38 (m, 1H), 3,22 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 3,09 - 2,95 (m, 1H), 2,40 - 2,20 (m, 1H), 2,07 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,97 (dd, J = 12,2, 6,2 Hz, 1H), 1,74 - 1,60 (m, 4H), 1,45 (s, 3H), 0,95 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 0,89 (d, J = 11,5 Hz, 2H), ESI-MS m/z izračunato 605,2032, pronađeno 606,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,03 minuta (LC metoda E) i kao drugi enantiomer za eluiranje, 6,6-dimetil-10-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-16λ<6>-tia-2,7,9,15,21-pentaazatetraciklo [15.3.1.14,7.08,13]dokoza-1(20),8,10,12,17(21),18-heksaen-14,16,16-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 25) (28,84 mg, 68%) kao beličasta čvrsta supstanca;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,52 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,61 (dd, J = 10,3, 5,4 Hz, 2H), 7,47 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,73 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,09 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,51 (t, J = 9,9 Hz, 1H), 4,30 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 3,58 - 3,41 (m, 1H), 3,22 (dd, J = 12,0, 5,7 Hz, 1H), 3,02 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 2,31 (dd, J = 15,2, 6,3 Hz, 1H), 2,07 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,97 (dd, J = 12,1, 6,3 Hz, 1H), 1,71 -1,59 (m, 4H), 1,45 (s, 3H), 0,95 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 0,89 (d, J = 11,5 Hz, 2H), ESI-MS m/z izračunato 605,2032, pronađeno 606,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,03 minuta (LC metoda E).
Primer 117: Pripremanje 7,7-dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo [16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(21),9,11,13,18(22),19-heksaen-15,17,17-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 26) i 7,7-dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1Hpirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo [16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(21),9,11,13,18(22),19-heksaen-15,17,17-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 27)
[1540]
Korak 1: 7,7-Dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(21),9,11,13,18(22),19-heksaen-15,17,17-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 26) i 7,7-dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(21),9,11,13,18(22),19-heksaen-15,17,17-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 27)
[1541]
[1542] Racemski 7,7-dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(21),9,11,13,18(22),19-heksaen-15,17,17-trion (85 mg, 0,1372 mmol) je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji korišćenjem ChiralPak AS-H (250 x 21,2 mm kolona, 5um veličina čestice) sa 20% metanola (bez modifikatora))/80% mobilna faza ugljen dioksida pri 10 mL/min dobijajući kao prvi enantiomer za eluiranje7,7-dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi1-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(21),9,11,13,18(22),19-heksaen-15,17,17-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 26) (24,1 mg, 28%); ESI-MS m/z izračunato 619,2189, pronađeno 620,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,07 minuta (LC metoda B) i kao drugi enantiomer za eluiranje, 7,7-dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(21),9,11,13,18(22),19-heksaen-15,17,17-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 27) (26 mg, 31%); ESI-MS m/z izračunato 619,2189, pronađeno 620,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,06 minuta (LC metoda B).
Primer 118: Pripremanje 4-hloro-20,20-dimetil-10λ6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje A) i 4-hloro-21,21-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,15-pentaazatetraciklo[17.2.1.02,7.011,15]dokoza-2,4,6,11,13-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje B)
[1543]
Korak 1: 2,6-Dihloro-N-(1H-pirazol-3-ilsulfonil)piridin-3-karboksamid
[1544]
[1545] 2,6-Dihloropiridin-3-karboksilna kiselina (1 g, 5,208 mmol) i karbonil diimidazol (1,690 g, 10,42 mmol) u N,N-dimetilformamidu (10,00 mL) su mešani na 50 °C tokom sat vremena. Kaša natrijum hidrida (312,5 mg, 7,812 mmol) u N,N-dimetilformamidu je dodata rastvoru 1H-pirazol-5-sulfonil hlorid (194,5 mg, 1,16 mmol, 1,5 ekv.) u N,N-dimetilformamidu i mešana 30 minuta na sobnoj temperaturi u odvojenoj boci. Dve smeše su spojene i mešane na sobnoj temperaturi tokom sat vremena. Reakciona smeša je sipana preko leda i zakiseljena na pH = 2 dodavanjem vodene 4 M hlorovodonične kiseline. Dobijena smeša je ekstraktovana etil acetatom, organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i isparljive supstance su uklonjene rotacionim uparavanjem. Sirov materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 10% metanola u dihlorometanu čime je dobijen 2,6-dihloro-N-(1H-pirazol-3-ilsulfonil)piridin-3-karboksamid (1,341 g, 68%). ESI-MS m/z izračunato 319,95377, pronađeno 321,0 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,34 minuta (LC metoda A).
Korak 2: terc-Butil 4-[3-[3-[(2,6-dihloropiridin-3-karbonil)sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1546]
[1547] Rastvoru terc-butil 2,2-dimetil-4-(3-metilsulfoniloksipropil) pirolidin-1-karboksilat (300 mg, 0,894 mmol) u N,N-dimetilformamidu (6,00 mL) je dodat 2,6-dihloro-N-(1H-pirazol-3-ilsulfonil)piridin-3-karboksamid (300 mg, 0,934 mmol) a zatim cezijum karbonat (875 mg, 2,69 mmol) i reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 16 sati. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i sipana u vodu (100 mL) i ekstraktovana etil acetatom (2 x 100 mL). Organski slojevi su spojeni, isprani sa vodom (2 x 100 mL), osušeni (natrijum sulfat), filtrirani i koncentrovani. Dobijeni braon ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata kako bi se dobio kao prvi regioizomer za eluiranje, terc-butil 4-[3-[3-[(2,6-dihloropiridin-3-karbonil)sulfamoil] pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (327 mg, 65%) kao čvrsta supstanca bele boje;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7,92 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,51 - 7,46 (m, 1H), 6,48 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,14 - 4,05 (m, 2H), 3,53 (dt, J = 14,7, 10,3 Hz, 1H), 2,78 - 2,67 (m, 1H), 2,08 (dq, J
= 11,7, 5,9, 5,3 Hz, 1H), 1,39 (s, 4H), 1,34 (q, J = 11,5, 8,4 Hz, 12H), 1,22 (s, 3H), ESI-MS m/z izračunato 559,1423, pronađeno 560,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,71 minuta (LC metoda A) i kao drugi regioizomer za eluiranje, terc-butil 4-[3-[5-[(2,6-dihloropiridin-3-karbonil)sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (126 mg, 25%) kao viskozno bezbojno ulje;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,01 (dd, J = 8,0, 5,0 Hz, 1H), 7,95 (s, 1H), 7,50 (dd, J = 7,9, 1,5 Hz, 1H), 7,37 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 6,50 (d, J = 1,9 Hz, 1H), 4,34 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 3,46 (dt, J = 14,4, 9,9 Hz, 1H), 2,66 (td, J = 10,4, 4,7 Hz, 1H), 1,99 (s, 0H), 1,76 (dt, J = 17,9, 8,3 Hz, 3H), 1,38 (d, J = 12,7 Hz, 9H), 1,30 (d, J = 10,5 Hz, 3H), 1,17 (d, J = 2,3 Hz, 3H), ESI-MS m/z izračunato 559,1423, pronađeno 560,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,74 minuta (LC metoda A).
Korak 3: 4-Hloro-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje A)
[1548]
[1549] Rastvor terc-butil 4-[3-[5-[(2,6-dihloropiridin-3-karbonil)sulfamoil] pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (100 mg, 0,1784 mmol) u dihlorometanu (2 mL) i trifluoroacetatnoj kiselini (150 uL, 1,960mmol) je mešan na sobnoj temperaturi 4 sata. Rastvarači su uklonjeni uparavanjem i dodato je 2 M NH3 u metanolu i reakciona smeša je mešana 30 minuta nakon čega je koncentrovana i osušena pod vakuumom. Gore naveden ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (2 mL) i dodata su 3 Å molekularna sita, i reakciona smeša je mešana 10 minuta. Zatim su dodati cezijum fluorid (85 mg, 0,5596 mmol) i kalijum karbonat (78 mg, 0,5644 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 140 °C tokom noći. Reakciona smeša je filtrirana kroz Whatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišćen reverzno faznom HPLC-MS (Luna C18(2) kolona (75 x 30 mm, 5 um veličina čestice) kupljeno od Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX), a dualni gradijent se kreće od 50% - 99% mobilne faze B tokom 15,0 minuta, mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril. Brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 uL i temperatura kolone = 25 °C) kako bi se dobio 4-hloro-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (28 mg, 12%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 8,77 (s, 1H), 7,54 - 7,44 (m, 2H), 7,07 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 6,48 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 4,36 - 4,24 (m, 1H), 4,06 - 3,85 (m, 1H), 2,67 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 2,14 (ddt, J = 17,7, 12,1, 6,2 Hz, 2H), 2,07 - 2,01 (m, 1H), 1,98 - 1,84 (m, 2H), 1,73 (ddd, J = 12,1, 5,5, 1,5 Hz, 1H), 1,55 (s, 3H), 1,50 (s, 3H), 1,44 (t, J = 12,3 Hz, 1H), 0,86 -0,69 (m, 1H). ESI-MS m/z izračunato 423,1132, pronađeno 424,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,76 minuta (LC metoda B).
Korak 4: 4-Hloro-21,21-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,15-pentaazatetraciklo [17.2.1.02,7.011,15]dokoza-2,4,6,11,13-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje B)
[1550]
[1551] Rastvor terc-butil 4-[3-[3-[(2,6-dihloropiridin-3-karbonil)sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (100 mg, 0,1784 mmol) u dihlorometanu (2 mL) i trifluoroacetatnoj kiselini (150 uL, 1,960 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi 4 sata. Nakon završetka reakcije rastvarači su uklonjeni uparavanjem i dodato je 2 M NH3u metanolu (10 mL), i reakciona smeša je mešana 30 minuta i koncentrovana a zatim osušena pod vakuumom. Ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (2 mL) i dodata su 3 Å molekularna sita, i reakciona smeša je mešana 10 minuta. Zatim su dodati cezijum fluorid (85 mg, 0,5596 mmol) i kalijum karbonat (78 mg, 0,5644 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 140 °C tokom noći. Reakciona smeša je filtrirana kroz Whatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišćen reverzno faznom HPLC-MS (Luna C18(2) kolona (75 x 30 mm, 5 um veličina čestice) kupljeno od Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX), a dualni gradijent se kreće od 50% -99% mobilne faze B tokom 15,0 minuta, mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonične kiseline), mobilna faza B = acetonitril. Brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 uL i temperatura kolone = 25 °C) kako bi se dobio 4-hloro-21,21-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,15-pentaazatetraciklo[17.2.1.02,7.011,15]dokoza-2,4,6,11,13-pentaen-8,10,10-trion (10,2 mg, 4%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, Hloroform-d) δ 9,16 (s, 1H), 7,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,35 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,78 (dt, J = 13,8, 4,0 Hz, 1H), 4,41 - 4,29 (m, 1H), 3,20 (t, J = 9,7 Hz, 1H), 2,62 - 2,56 (m, 1H), 2,52 (s, 1H), 2,21 - 2,06 (m, 1H), 1,91 (s, 1H), 1,81 - 1,69 (m, 3H), 1,63 (s, 4H), 1,45 (s, 3H). ESI-MS m/z izračunato 423,1132, pronađeno 424,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,9 minuta (LC metoda B).
Primer 119: Pripremanje 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksil-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 32)
[1552]
Korak 1: 20,20-Dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 32)
[1553]
[1554] Rastvor 4-hloro-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (20 mg, 0,04718 mmol), skandijum triflat, 3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]-1H-pirazol (31,16 mg, 0,1415 mmol) i NaH (9,435 mg 60% w/w, 0,2359 mmol) u dimetil sulfoksidu (2,0 mL) je mešan na 140 °C tokom 16 sati. Reakciona smeša je ugašena sa nekoliko kapi vode i filtrirana kroz Whatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišćen metodom reverzno fazne HPLC-MS korišćenjem Luna C18(2) kolona (75 x 30 mm, 5 um veličina čestice) kupljeno od Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX), a dualni gradijent se kreće od 1-99% mobilne faze B tokom 15,0 minuta (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonične kiseline), mobilna faza B = acetonitril. Brzina protoka = 50 mL/min i temperatura kolone = 25 °C) kako bi se dobio 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 32) (2,4 mg, 8%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, Hloroformd) δ 8,49 (s, 1H), 8,17 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,08 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,01 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,39 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 4,35 (s, 1H), 3,94 (t, J = 12,9 Hz, 1H), 2,78 - 2,72 (m, 1H), 2,20 - 2,13 (m, 2H), 2,10 (d, J = 7,0 Hz, 2H), 1,99 (t, J = 10,3 Hz, 3H), 1,79 - 1,74 (m, 1H), 1,59 (s, 3H), 1,55 (s, 3 H), 1,47 (t, J = 12,0 Hz, 2H), 1,04 - 1,00 (m, 2H), 0,77 - 0,73 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 607,2189, pronađeno 608,6 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,18 minuta (LC metoda E).
Primer 120: Pripremanje (15S)-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1Hpirazo1-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaaza tetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 33) i (15R)-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksil-1Hpirazo1-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo [18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 34)
[1555]
Korak 1: (15S)-12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15] tetrakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 33) i (15R)-12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 34)
[1556]
[1557] Racemski 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15] tetrakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (90 mg, 0,1420 mmol) je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji korišćenjem ChiralPak AS-H (250 x 10 mm kolona, 5um veličina čestice) sa 18% acetonitril:metanol (90:10; bez modifikatora))/82% ugljen dioksid mobilna faza pri 10 mL/min dajući kao prvi enantiomer za eluiranje, (15S)-12,12-dimetil-8-(3-12-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 33) (28,6 mg, 64%);<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,73 (s, 1H), 8,23 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,58 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,29 (t, J = 6,2 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 6,63 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,13 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,32 (t, J = 6,9 Hz, 2H), 3,72 (s, 2H), 3,10 (s, 1H), 2,11 - 2,05 (m, 2H), 1,85 (s, 2H), 1,74 (d, J = 8,9 Hz, 2H), 1,43 (d, J = 65,6 Hz, 9H), 1,01 - 0,85 (m, 5H), ESI-MS m/z izračunato 633,2345, pronađeno 634,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,85 minuta (LC metoda B) a kao drugi enantiomer za eluiranje, (15R)-12,12-dimetil-8-(3-12-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15] tetrakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 34) (29,1 mg, 65%);<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,73 (s, 1H), 8,23 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,58 (dd, J = 8,4, 7,2 Hz, 1H), 7,29 (d, J = 6,9 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 6,63 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,13 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,38 - 4,28 (m, 2H), 3,72 (s, 2H), 3,10 (s, 1H), 2,08 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,96 - 1,68 (m, 4H), 1,51 (s, 5H), 1,35 (s, 4H), 0,99 - 0,85 (m, 5H), ESI-MS m/z izračunato 633,2345, pronađeno 634,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,85 minuta (LC metoda B).
Primer 121: Pripremanje 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,20,25-pentaazatetraciklo [19.3.1.05,10.011,15]pentakoza-1(24),5,7,9,21(25),22-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 37)
[1558]
Korak 1: terc-Butil 5-(3-cijanopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1559]
[1560] U bocu sa okruglim dnom su dodati terc-butil 2,2-dimetil-5-(3-metilsulfoniloksipropil)pirolidin-1-karboksilat (650 mg, 1,938 mmol), dimetil sulfoksid (2 mL) i natrijum cijanid (100 mg, 2,041 mmol). Reakcija je zagrevana na 80 °C tokom noći. Reakcija je filtrirana i prečišćena sa HPLC (1% - 99% acetonitrila u vodi sa 0,1% modifikatora hlorovodonične kiseline) čime je dobijen terc-butil 5-(3-cijanopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (272 mg, 53%). ESI-MS m/z izračunato 266,19943, pronađeno 211,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,67 minuta (LC metoda B).
Korak 2: terc-Butil 5-(4-aminobutil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1561]
[1562] U bocu sa okruglim dnom su dodati terc-butil 5-(3-cijanopropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (271 mg, 1,017 mmol), metanol (1,50 mL), Raney nikl (100 mg od 50% w/v) i amonijak (2,80 mL 7 M, 19,60 mmol). Reakcija je pročišćena azotom i balon vodonika (2,050 mg, 1,017 mmol) je prikačen, i smeša je mešana tokom noći na sobnoj temperaturi. Dodatni Raney nikl (100 mg od 50% w/v) i amonijak (2,80 mL od 7 M, 19,60 mmol) su dodati i reakcija je mešana 4 sata. Reakcija je filtrirana i filter sadržaj je ispran dodatnim metanolom i dihlorometanom. Rastvor filtrata je uparen do suvog stanja kako bi se dobio terc-butil 5-(4-aminobutil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (270 mg, 98%) kao bistro bezbojno ulje. ESI-MS m/z izračunato 270,23074, pronađeno 271,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,1 minuta (LC metoda B).
Korak 3: terc-Butil 2,2-dimetil-5-[4-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilat
[1563]
[1564] U bočicu su dodati kalijum karbonat (415 mg, 3,003 mmol), 6-fluoropiridin-2-sulfonamid (170 mg, 0,9650 mmol) i rastvor terc-butil 5-(4-aminobutil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (270 mg, 0,9985 mmol) u dimetil sulfoksidu (3 mL). Reakcija je postavljena u prethodno zagrejanu uljanu kupku na 80 °C i ostavljena da se meša tokom noći. Reakcija je filtrirana i prečišćena preko HPLC (1% - 99% acetonitrila u vodi sa 0,1% modifikatora hlorovodonične kiseline) kako bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-5-[4-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilat (155,2 mg, 38%). ESIMS m/z izračunato 426,23007, pronađeno 427,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,71 minuta (LC metoda B).
Korak 4: terc-Butil 5-[4-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1565]
[1566] U bocu sa okruglim dnom su dodati 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (166,0 mg, 0,4418 mmol), karbonil diimidazol (71 mg, 0,4379 mmol) i tetrahidrofuran (2,0 mL). Reakcija je zagrevana do 45 °C tokom 2 sata a zatim je dodat rastvor terc-butil 2,2-dimetil-5-[4-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilat (155,2 mg, 0,3638 mmol) u tetrahidrofuranu (2,0 mL) praćeno sa 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (165 mL, 1,103 mmol) i reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakcija je filtrirana i prečišćena preko HPLC (30% - 99% acetonitrila u vodi sa 0,1% modifikatora hlorovodonične kiseline) kako bi se dobio terc-butil 5-[4-[[6-[[2-chloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (126 mg, 44%) izolovan kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 783,27924, pronađeno 784,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,9 minuta (LC metoda G).
Korak 5: 2-Hloro-N-[[6-[4-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)butilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[1567]
[1568] U bocu sa okruglim dnom su dodati terc-butil 5-[4-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (126 mg, 0,1607 mmol), dihlorometan (2 mL) i hlorovodonična kiselina (400 uL 4 M u dioksanu, 1,600 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi sat vremena. Reakcija je ugašena zasićenim natrijum bikarbonatom i ekstraktovana etil acetatom. Organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i uparen kako bi se dobio 2-hloro-N-[[6-[4-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)butilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (105 mg, 96%). ESI-MS m/z izračunato 683,2268, pronađeno 684,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,79 minuta (LC metoda B).
Korak 6: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,20,25-pentaazatetraciklo[19.3.1.05,10.011,15] pentakoza-1(24),5,7,9,21(25),22-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 37)
[1569]
[1570] U bočicu su dodati kalijum karbonat (107 mg, 0,7742 mmol), cezijum fluorid (35 mg, 0,2304 mmol) i rastvor 2-hloro-N-[[6-[4-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)butilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (105 mg, 0,1535 mmol) u dimetil sulfoksidu (1,8 mL). Reakcija je zagrevana u zapečaćenoj tubi tokom noći na 150 °C. Reakcija je ugašena slanim rastvorom i ekstraktovana etil acetatom. Organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i uparen. Sirov proizvod je prečišćen putem HPLC (30% - 99% acetonitrila u vodi sa 0,1% modifikatora hlorovodonične kiseline) čime je dobijen 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,20,25-pentaazatetraciklo[19.3.1.05,10.011,15]pentakoza-1(24),5,7,9,21(25),22-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 37) (27 mg, 25%). ESI-MS m/z izračunato 647,2502, pronađeno 648,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,97 minuta (LC metoda B).
Primer 122: Pripremanje 8-(3-hidroksi-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (so hidrohlorida)
(Jedinjenje 38)
[1571]
Korak 1: terc-Butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1572]
[1573] 2-Hloro-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (200 mg, 0,5431 mmol) i karbonil diimidazol (88,06 mg, 0,5431 mmol) su spojeni u tetrahidrofuranu (2 mL) i mešani tokom 90 minuta na 50 °C. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (179,3 mg, 0,4345 mmol) a nakon toga 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (124,0 mg, 121,8 uL, 0,8147 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 18 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasićenim rastvorom amonijum hlorida, a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a nakog toga prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 70% etil acetata u heksanima kako bi se dobio terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1 karboksilat (206 mg, 51%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 743,3232, pronađeno 744,7 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,95 minuta (LC metoda A).
Korak 2: 2-Hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-(3-hidroksipirazol-1-il)piridin-3-karboksamid
[1574]
[1575] Rastvoru terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (25 mg, 0,03359 mmol) u dihlorometanu (1 mL) je dodata trifluoroacetatna kiselina (19,16 mg, 12,95 uL, 0,1680 mmol) na 0 °C i smeša je mešana 30 minuta (reakciona smeša 1). Odvojeno, rastvoru terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (25 mg, 0,03359 mmol) u dioksanu (1 mL) je dodata hlorovodonična kiselina (42,00 uL 4 M, 0,1680 mmol) na 0 °C i smeša je mešana 30 minuta (reakciona smeša 2). Odvojeno, rastvor terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3 - [(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (25 mg, 0,03359 mmol) u 2,2,2-trifluoroetanolu (1,680 g, 1,224 mL, 16,79 mmol) koji sadrži 1% trifluoroacetatne kiseline je mešan 30 minuta (reakciona smeša 3). Odvojeno, rastvoru terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[(2,2,3,3-tetrametilciklopropil)metoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (25 mg, 0,03359 mmol) u toluenu (1 mL) je dodat silika gel (100 mg) i smeša je zagrevana na 90 °C tokom 24 sata (reakciona smeša 4). Spajanjem sve četiri reakcione smeše i prečišćavanjem metodom reverzno fazne HPLC-MS korišćenjem Luna C18(2) kolone (75 x 30 mm, 5 um veličina čestice) kupljeno od Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX) a dualni gradijent počinje od 20% - 80% mobilne faze B tokom 15,0 minuta (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 uL i temperatura kolone = 25 °C) je dobijen 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-(3-hidroksipirazol-1-il)piridin-3-karboksamid (42 mg, 47%).<1>H NMR (400 MHz, metanol-d4) δ 8,31 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,72 - 7,63 (m, 2H), 7,30 (dd, J = 7,2, 0,8 Hz, 1H), 6,84 (dd, J = 8,6, 0,8 Hz, 1H), 5,97 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 3,50 (dd, J = 11,8, 8,4 Hz,21H), 3,41 (dp, J = 20,3, 6,7 Hz, 2H), 2,93 (dd, J = 11,8, 9,1 Hz, 1H), 2,54 (dt, J = 16,6, 8,3 Hz, 1H), 2,09 (dd, J = 13,1, 7,5 Hz, 1H), 1,70 - 1,59 (m, 2H), 1,59 - 1,48 (m, 2H), 1,45 (s, 3H), 1,37 (s, 3H). ESI-MS m/z izračunato 533,1612, pronađeno 534,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,45 minuta (LC metoda A).
Korak 3: 8-(3-Hidroksi-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111, 14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (so hidrohlorida) (Jedinjenje 38)
[1576]
[1577] Rastvoru 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-(3-hidroksipirazol-1-il)piridin-3-karboksamid (42 mg, 0,07865 mmol) u dimetil sulfoksidu (2,0 mL) je dodato 3 Å molekularna sita i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Zatim su dodati cezijum fluorid (11,95 mg, 0,07865 mmol) i kalijum karbonat (10,87 mg, 0,07865 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 140 °C tokom noći. Reakciona smeša je filtrirana kroz Whatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišćen metodom reverzno fazne HPLC-MS korišćenjem Luna C18(2) kolone (75 x 30 mm, 5 um veličina čestice) kupljeno od Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX), i dualnog gradijenta od 30% - 80% mobilne faze B tokom 15,0 minuta (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 uL i temperatura kolone = 25 °C) kako bi se dobio 8-(3-hidroksi-1H-pirazol-1-il)-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (so hidrohlorida) (Jedinjenje 38) (2,5 mg, 17%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,21 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,84 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,57 - 7,51 (m, 1H), 7,16 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,67 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,10 - 4,00 (m, 1H), 3,66 - 3,49 (m, 1H), 3,09 - 3,00 (m, 1H), 2,90 - 2,82 (m, 1H), 2,66 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 2,24 - 2,12 (m, 1H), 1,92 - 1,82 (m, 1H), 1,66 (s, 3H), 1,59 (s, 3H), 1,49 - 1,39 (m, 2H), 0,95 - 0,83 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 497,1845, pronađeno 498,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,48 minuta (LC metoda E).
Primer 123: Pripremanje 21,21-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo [17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 39)
[1578]
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[4-(3-sulfamoilpirazol-1-il)butil]pirolidin-1-karboksilat
[1579]
terc-Butil 2,2-dimetil-4-(4-metilsulfoniloksibutil)pirolidin-1-karboksilat (848 mg, 2,426 mmol) i 1H-pirazol-3-sulfonamid (361,5 mg, 2,457 mmol) praćeno kalijum karbonatom (1,2 g, 8,683 mmol) su rastvoreni u N,Ndimetilformamidu (9,0 mL) i mešani na 60 °C u zapečaćenoj bočici od 20 mL tokom 20 sati (UPLC označava konverziju u ciljani proizvod plus manji manje polarni drugi pik sa istom masom što je manji sporedni proizvod regioizomera). Ohlađena do sobne temperature, sipana u vodu (100 mL) i ekstraktovana etil acetatom (2 x 100 mL), spojeni organski slojevi, isprana sa vodom (2 x 100 mL), osušena (natrijum sulfat), filtrirana i koncentrovana. Braon ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata kako bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(3-sulfamoilpirazol-1-il)butil]pirolidin-1-karboksilat (427 mg, 44%) kao bezbojno ulje koje se pod vakuumom pretvorilo u čvrstu supstancu bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7,87 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,37 (s, 2H), 6,56 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,15 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 3,53 (dd, J = 11,2, 5,4 Hz, 1H), 2,76 (dd, J = 22,3, 10,8 Hz, 1H), 2,05 (s, 1H), 1,94 - 1,83 (m, 1H), 1,82 - 1,73 (m, 2H), 1,40 - 1,35 (m, 12H), 1,33 (s, 3H), 1,30 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 1,23 (s, 4H). ESI-MS m/z izračunato 400,21442, pronađeno 401,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,64 min (LC metoda E).
Korak 2: terc-Butil 4-[4-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1580]
[1581] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (500 mg, 1,331 mmol) i karbonil diimidazol (215 mg, 1,326 mmol) su spojeni u tetrahidrofuranu (8,0 mL) i mešani tokom 120 minuta na 50 °C. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(3-sulfamoilpirazol-1-il)butil]pirolidin-1-karboksilat (423 mg, 1,056 mmol) a nakon toga 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (350 mL, 2,340 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 20 sati. Reakciona smeša je razblažena etil acetatom i isprana sa rastvorom 1M limunske kiseline, a zatim sa slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene, a zatim prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 90% etil acetata u heksanima kako bi se dobio terc-butil 4-[4-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (587 mg, 73%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 757,2636, pronađeno 758,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,37 minuta (LC metoda E).
Korak 3: 21,21-Dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 39)
[1582]
terc-Butil4-[4-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (580 mg, 0,7649 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (12 mL) i smeši je dodata hlorovodonična kiselina (6,0 mL 4M u dioksanu, 24,00 mmol) i mešana na sobnoj temperaturi sat vremena. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom, ponovo rastvorena u etil acetatu nakon čega je dodat vodeni 2M natrijum karbonat (5 mL), dajući pH -10. Uklonjen je organski sloj i dalje je ispran vodeni sloj etil acetatom (2 x 10 mL), organski slojevi su spojeni, isprani slanim rastvorom, zatim osušeni nad natrijum sulfatom, filtrirani i upareni do suvog stanja pod redukovanim pritiskom. U bočici su spojeni ovaj materijal, kalijum karbonat (550 mg, 3,980 mmol), cezijum fluorid (185 mg, 1,218 mmol), 3 Å molekularna sita i dimetil sulfoksid (12 mL), prečišćeni azotom, poklopljeni, zagrevani do 150 °C i mešani tokom 18 sati. Reakcija je ohlađena do sobne temperature i razblažena etil acetatom i isprana sa rastvorom 1M limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a zatim prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 80% etil acetata u heksanima kako bi se dobio 21,21-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion kao čvrsta supstanca bele boje (Jedinjenje 39) (176,9 mg, 37%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,59 (s, 1H), 8,21 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,99 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,97 - 6,81 (m, 2H), 6,12 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,30 (dd, J = 15,9, 9,0 Hz, 4H), 2,73 (dt, J = 22,6, 11,0 Hz, 2H), 2,31 - 2,18 (m, 1H), 2,18 - 2,03 (m, 3H), 2,02 - 1,92 (m, 1H), 1,89 (dd, J = 11,9, 5,5 Hz, 1H), 1,67 (s, 1H), 1,61 (s, 3H), 1,60 - 1,54 (m, 1H), 1,52 (s, 3H), 1,48 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 1,16 - 1,03 (m, 1H), 0,99 - 0,93 (m, 2H), 0,90 (d, J = 10,9 Hz, 2H), 0,77 (s, 1H). ESI-MS m/z izračunato 621,2345, pronađeno 622,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,2 minuta (LC metoda E).
Primer 124: Pripremanje 7,7-dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo [16.3.1.04,8.09,14]dokoza-1(22),9,11,13,18,20-heksaen-15,17,17-trion (Jedinjenje 41)
[1583]
Korak 1: 5,5-Dimetil-1-trimetilsililoksi-pirolidin-2-karbonitril
[1584]
[1585] Trimetilsililformonitril (30,93 g, 39 mL, 311,8 mmol) je dodat 2,2-dimetil-1-oksido-3,4-dihidropirol-1-ijumu (23,31 g, 206,0 mmol) u dihlorometanu (920 mL) i smeša je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod redukovanim pritiskom pod bezbednim uslovima kako bi se dobio željeni proizvod 5,5-dimetil-1trimetilsililoksi-pirolidin-2-karbonitril (44,04 g, 101%) kao sirovo ulje od ćilibara koje je korišćeno direktno u sledećem koraku. ESI-MS m/z izračunato 212,13, pronađeno 213,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,325 minuta (LC metoda I).
Korak 2: 1-Hidroksi-5,5-dimetil-pirolidin-2-karboksamid
[1586]
[1587] 5,5-Dimetil-1-trimetilsililoksi-pirolidin-2-karbonitril (13 g, 61,22 mmol) je polako dodat sumpornoj kiselini (160,1 g, 87 mL, 1,632 mol), ohlađeno u ledenoj kadi i ostavljeno da se meša na sobnoj temperaturi 3 sata. Reakciona smeša je razblažena sa ledom (400 mL) i dobijena smeša je polako neutralizovana sa čvrstim natrijum hidroksidom (125 g, 3,125 mol) podeljeno u 3 porcije (poslednje dve porcije su rastvorene u vodi (75 mL)) i pH je verifikovana kao slabo bazična ka neutralnoj. Smeša je ekstraktovana etil acetatom (3 x 500 mL). Organske faze su spojene, osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirane i zatim koncentrovane pod redukovanim pritiskom nakon čega su osušene pod vakuumom kako bi se dobio željeni proizvod 1-hidroksi-5,5-dimetil-pirolidin-2-karboksamid (8,51 g, 88%) kao bledo žuti prah.<1>H NMR (300 MHz, dimetil sulfokside-d6) ppm 0,92 (s, 3H), 1,07 (s, 3H), 1,38-1,59 (m, 3H), 1,91-2,09 (m, 1H), 3,13-3,22 (m, 1H), 6,92 (br, s,, 1H), 7,08 (br, s,, 1H), 7,62 (s, 1H). ESI-MS m/z izračunato 158,198, pronađeno 159,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,561 minuta (LC metoda I).
Korak 3: 5,5-Dimetilpirolidin-2-karboksamid
[1588]
[1589] 1-Hidroksi-5,5-dimetil-pirolidin-2-karboksamid (8,51 g, 53,79 mmol) rastvoren u metanolu (200 mL) je mešan tokom noći sa Raney niklom (8,7 g, 148,2 mmol) i vodonik gasom iz naduvanog balona koji ima kapacitet 8L gasa. Nakon 5 sati, dodato je još Raney nikla (8 g, 136,3 mmol) i smeša je mešana tokom noći. Dodatni Raney nikl (9,69 g, 165,1 mmol) je stavljen u smešu i smeša je dodatno mešana 3 dana. Još Raney nikla (9,5 g, 161,9 mmol) je dodato reakcionoj smeši i smeša je mešana 4 sata. Reakciona smeša je dekantirana i čvrsti nikl je ispran metanolom (3 x 250 mL) a kombinovanoj metanol frakciji je dodato nešto Celita zatim je filtrirano preko Celita i sadržaj je ispran metanolom. Spojeni filtrat je koncentrovan pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio željeni proizvod 5,5-dimetilpirolidin-2-karboksamid (7,29 g, 95%) kao čvrsta supstanca bež boje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) ppm 1,16 (s, 3H), 1,19 (s, 3H), 1,45-1,72 (m, 2H), 1,81 (br. s., 1H), 1,92-2,09 (m, 1H), 2,18-2,40 (m, 1H), 3,78 (dd, J=9,4, 6,2 Hz, 1H), 5,70 (br. s., 1H), 7,45 (br. s., 1H). ESI-MS m/z izračunato 142,1106, pronađeno 143,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,31 minuta (LC metoda I).
Korak 4: terc-Butil 5-karbamoil-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1590]
[1591] Di-terc-butil dikarbonat (21 g, 96,22 mmol) je dodat 5,5-dimetilpirolidin-2-karboksamidu (7,25 g, 50,98 mmol) rastvoreno u dioksanu (140 mL) i vodi (50 mL) je dodato smeši koja je zatim ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom noći. Smeši je dodat natrijum hidroksid (1,84 g, 46,00 mmol) rastvoren u vodi (100 mL) i smeša je ostavljena da se meša 2 minuta nakon čega je dodat etil acetat (200 mL) i vodena faza je odbačena. Organska frakcija je osušena nad anhidrovanim magnezijum sulfatom, filtrirana a zatim koncentrovana pod redukovanim pritiskom. Dobijeno ulje je delimično očvrsnulo stajanjem pod vakuumom. Čvrsta supstanca je triturirana u heptanu (50 mL), filtrirana i isprana sa još heptana (3 x 100 mL) a zatim osušena pod vakuumom kako bi se dobio terc-butil 5-karbamoil-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (10,95 g, 89%) kao prah bele boje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) ppm 1,33 (br. s., 3H), 1,48 (br. s., 12H), 1,70-2,34 (m, 4H), 4,16-4,48 (m, 1H), 5,30-5,58 (m, 1H), 5,71-7,03 (m, 1H). ESI-MS m/z izračunato 242,163, pronađeno 143,2 = (M+1-Boc)<+>; Vreme zadržavanja: 1,67 minuta (LC metoda I).
Korak 5: terc-Butil 5-(aminometil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1592]
terc-Butil 5-karbamoil-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (5,3 g, 21,87 mmol) je dodat boran-tetrahidrofuranu (102 mL 1 M u tetrahidrofuranu, 102,0 mmol) i nakon evolucije vodonika zaustavljena reakciona smeša je zagrevana do 70 °C tokom noći. Reakciona smeša je polako ugašena koncentrovanim amonijum hloridom (1 mL). Smeša je zatim prebačena u bocu od 1 L sa okruglim dnom koja sadrži dejonizovanu vodu (110 mL). Uz snažno mešanje je dodat je jod (100 mg, 0,020 mL, 0,394 mmol) i smeša je ostavljena da se meša na vazduhu tokom 2 sata. Reakciona smeša je koncentrovana pod redukovanim pritiskom i dobijen ostatak je prečišćen na silika gelu korišćenjem gradijenta od 10% - 100% metanola u dihlorometanu. Dodatni materijal je dobijen nanošenjem amonijum hidroksida (2 mL) na vrh kolone praćeno eluiranjem sa čistim metanolom (urađeno 3 puta). Time je dobijen terc-butil 5-(aminometil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (1,19 g, 24%) kao ulje ćilibara.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) ppm 1,27 (br. s., 3H), 1,33-1,51 (m, 14H), 1,62-1,76 (m, 2H), 1,78-2,03 (m, 2H), 2,53 (dd, J=12,6, 8,2 Hz, 1H), 2,73-3,00 (m, 1H), 3,61-3,99 (m, 1H). ESIMS m/z izračunato 228,331, pronađeno 229,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,33 minuta (LC metoda I).
Korak 6: terc-Butil 2,2-dimetil-5-[[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]metil]pirolidin-1-karboksilat
[1594] terc-butil 5-(aminometil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatu (140 mg, 0,6131 mmol) i 6-fluoropiridin-2-sulfonamidu (108,0 mg, 0,6131 mmol) u dimetil sulfoksidu (1,179 mL) je dodat kalijum karbonat (86,43 mg, 0,6254 mmol) i smeša je mešana na 100 °C tokom 20 sati nakon čega je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu. Razblažena je etil acetatom i sipana u 1 M limunske kiseline. Slojevi su razdvojeni nakon čega je organski sloj ispran zasićenim vodenim slanim rastvorom, osušen (natrijum sulfat), filtriran i koncentrovan u penu žute boje koja je prečišćena hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata čime je dobijen terc-butil 2,2-dimetil-5-[[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]metil]pirolidin-1-karboksilat (115,6 mg, 49%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 384,18314, pronađeno 385,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,62 minuta (LC metoda A).
Korak 7: terc-Butil 5-[[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]metil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1595]
[1596] U bočici zapremine 20 mL su spojeni 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (113,0 mg, 0,3007 mmol) i karbonil diimidazol (53,44 mg, 0,3296 mmol) u tetrahidrofuranu (1,659 mL) i mešani 120 minuta na 50 °C sa labavim poklopcem. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-5-[[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]metil]piroldin-1-karboksilat (115,6 mg, 0,3007 mmol) u tetrahidrofuranu (2,213 mL) praćeno sa 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undec-7-en (94,25 mg, 92,58 uL, 0,6191 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 16 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasićenim vodenim amonijum hloridom pa zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a zatim prečišćene korišćenjem metode reverzno fazne HPLC-MS upotrebom Luna C18(2) kolone (75 x 30 mm, 5 um veličina čestice) kupljeno od Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX) i dualnog gradijenta koji se kreće od 30% - 99% mobilne faze B tokom 15,0 minuta (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 uL i temperatura kolone = 25 °C) čime je dobijen terc-butil 5-[[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]metil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (119,2 mg, 53%). ESI-MS m/z izračunato 741,2323, pronađeno 742,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,88 minuta (LC metoda A).
Korak 8: 2-Hloro-N-[[6-[(5,5-dimetilpirolidin-2-il)metilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)
ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[1597]
terc-Butil 5- [[[6-[[2-hloro-6-[3- [2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil] -2-piridil]amino] metil] -2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (119,2 mg, 0,1606 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (520,2 mL) i smeši je dodata trifluoroacetatna kiselina (840,1 mg, 567,6 uL, 7,368 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 60 minuta. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom, ponovo rastvorena u dihlorometanu i heksanima (1:1) nakon čega je materijal uparen do suvog stanja pod redukovanim pritiskom i postavljen u vakuum tokom noći kako bi se dobio 2-hloro-N-[[6-[(5,5-dimetilpirolidin-2-il)metilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (92,9 mg, 90%). ESI-MS m/z izračunato 641,1799, pronađeno 642,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,63 minuta (LC metoda A).
Korak 9: 7,7-Dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.04,8.09,14]dokoza-1(22),9,11,13,18,20-heksaen-15,17,17-trion (Jedinjenje 41)
[1598]
[1599] Rastvoru 2-hloro-N-[[6-[(5,5-dimetilpirolidin-2-il)metilamino]-2-piridil] sulfonil]-6- [3 - [2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (92,9 mg, 0,1447 mmol) u dimetil sulfoksidu
(3,716 mL) je dodat kalijum karbonat (99,99 mg, 0,7235 mmol), CsF (26,37 mg, 0,1736 mmol) i mala količina 3 Å molekularnih sita. Dobijena smeša je poklopljena, zagrevana do 150 °C i mešana tokom noći. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, filtrirana i prečišćena korišćenjem metode reverzno fazne HPLC-MS upotrebom Luna C18(2) kolone (75 x 30 mm, 5 um veličina čestice) kupljeno od Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX), i dualni gradijent se kreće od 30% - 99% mobilne faze B tokom 15,0 minuta (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 uL i temperatura kolone = 25 °C). Frakcije koje sadrže proizvod su spojene, uklonjen je acetonitril rotirajućim uparavanjem, razblažene etil acetatom i isprane zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom (jednom), osušene (natrijum sulfat), filtrirane i koncentrovane čime je dobijen 7,7-dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.04,8.09,14]dokoza-1(22),9,11,13,18,20-heksaen-15,17,17-trion (Jedinjenje 41) (27,6 mg, 31%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 605,2032, pronađeno 606,0 (M+1)+; Vreme zadržavanja: 1,89 minuta (LC metoda B).
Primer 125: Pripremanje 21,21-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo [17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 44) i 21,21-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo [17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 45)
[1600]
Korak 1: 21,21-Dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 44) i 21,21-dimetil-4-(3-12-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 45)
[1601]
[1602] Racemski 21,21-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (160 mg, 0,2548 mmol) je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji korišćenjem ChiralPak AS-H (250 x 21,2 mm kolona, 5um veličina čestice) sa 25% acetonitril:metanol (90:10)/75% ugljen dioksid mobilne faze pri 70 mL/min dajući kao prvi enantiomer za eluiranje, 21,21-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo [17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 44) (65,8 mg, 82%) kao čvrsta supstanca bele boje; ESI-MS m/z izračunato 621,2345, pronađeno 622,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,2 minuta (LC metoda E) a kao drugi enantiomer za eluiranje, 21,21-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 45) (70,8 mg, 89%) kao čvrsta supstanca bele boje;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,59 (s, 1H), 8,21 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,99 (s, 1H), 7,77 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,02 - 6,80 (m, 2H), 6,12 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,44 - 4,19 (m, 4H), 2,70 (d, J = 21,3 Hz, 2H), 2,20 (s, 1H), 2,08 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 2,00 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 1,89 (dd, J = 11,9, 5,6 Hz, 1H), 1,67 (d, J = 5,7 Hz, 1H), 1,61 (s, 3H), 1,61 - 1,53 (m, 2H), 1,52 (s, 3H), 1,48 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 1,18 - 1,04 (m, 1H), 1,00 - 0,93 (m, 2H), 0,89 (s, 2H), 0,77 (s, 1H). ESI-MS m/z izračunato 621,2345, pronađeno 622,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,2 minuta (LC metoda E).
Primer 126: Pripremanje 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropiletoksil-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,20,25-pentaazatetraciklo[19.3.1.05,10.011,15]pentakoza-1(24),5,7,9,21(25),22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 46) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,20,25-pentaazatetraciklo[19.3.1.05,10.011,15]pentakoza-1(24),5,7,9,21(25),22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 47)
[1603]
Korak 1: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,20,25-pentaazatetraciklo[19.3.1.05,10.011,15]pentakoza-1(24),5,7,9,21(25),22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 46) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,20,25-pentaazatetraciklo[19.3.1.05,10.011,15]pentakoza-1(24),5,7,9,21(25),22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 47)
[1604]
[1605] 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,20,25-pentaazatetraciklo[19.3.1.05,10.011,15]pentakoza-1(24),5,7,9,21(25),22-heksaen-2,2,4-trion (23 mg, 0,03320 mmol) je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji korišćenjem ChiralPak AS-H (250 x 10 mm kolona, 5um veličina čestice) sa 18% acetonitril:metanol (90:10; bez modifikatora))/82% ugljen dioksid mobilna faza pri 10 mL/min dajući kao prvi enantiomer za eluiranje, 12,12-dimetil-8-(3-12-1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksil-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,20,25-pentaazatetraciklo[19.3.1.05,10.011,15]pentakoza-1(24),5,7,9,21(25),22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 46) (6,9 mg, 64%); ESI-MS m/z izračunato 647,2502, pronađeno 648,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,97 minuta (LC metoda B) i kao drugi enantiomer za eluiranje, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,20,25-pentaazatetraciklo[19.3.1.05,10.011,15] pentakoza-1(24),5,7,9,21(25),22-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 47) (6,8 mg, 63%); ESI-MS m/z izračunato 647,2502, pronađeno 648,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,97 minuta (LC metoda B).
Primer 127: Pripremanje 7,7-dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo [16.3.1.04,8.09,14]dokoza-1(22),9,11,13,18,20-heksaen-15,17,17-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 50) i 7,7-dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.04,8.09,14]dokoza-1(22),9,11,13,18,20-heksaen-15,17,17-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 51)
[1606]
Korak 1: 7,7-Dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.04,8.09,14]dokoza-1(22),9,11,13,18,20-heksaen-15,17,17-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 50) i 7,7-dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.04,8.09,14]dokoza-1(22),9,11,13,18,20-heksaen-15,17,17-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 51)
[1607]
[1608] Racemski 7,7-dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksil-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo [16.3.1.04,8.09,14]dokoza-1(22),9,11,13,18,20-heksaen-15,17,17-trion (26 mg, 0,04246 mmol) podvrgnut hiralnoj separaciji putem SFC hromatografije korišćenjem ChiralPak AS-H (250 x 10 mm kolona, 5um veličina čestice) sa 32% acetonitril/metanol (90:10; bez modifikatora)/68% ugljen dioksid mobilna faza pri 10mL/min (zapremina ubrizgavanja = 70 uL 24mg/mL rastvora u acetonitril/metanol (90:10)) dajući kao prvi enantiomer za eluiranje 7,7-dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.04,8.09,14]dokoza-1(22),9,11,13,18,20-heksaen-15,17,17-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 50) (11,8 mg, 92%) kao čvrstu supstancu bele boje; ESI-MS m/z izračunato 605,2032, pronađeno 606,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,93 minuta (LC metoda B) i kao drugi enantiomer za eluiranje 7,7-dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.04,8.09,14]dokoza-1(22),9,11,13,18,20-heksaen-15,17,17-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 51) (12,8 mg, 100%) kao čvrstu supstancu bele boje; ESI-MS m/z izračunato 605,2032, pronađeno 606,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,93 minuta (LC metoda B).
Primer 128: Pripremanje (14R)-8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 65)
[1609]
Korak 1: (14R)-8-[3-(3,3-Diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 65)
[1610]
[1611] Racemski 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion je podvrgnut hiralnoj separaciji SFC hromatografijom korišćenjem ChiralPak AS-H (250 x 21,2 mm kolona, 5um veličina čestice) sa 38% acetonitril:metanol (90:10))/62% ugljen dioksid mobilna faza pri 70 mL/min dajući kao prvi enantiomer za eluiranje, (14R)-8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 65) (51,2 mg, 36%) kao čvrstu supstancu bele boje.<1>H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 10,10 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,06 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,50 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,57 (s, 1H), 5,91 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,69 (s, 1H), 4,43 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,92 (s, 1H), 3,34 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 3,17 (s, 1H), 3,06 (s, 1H), 2,07 (dd, J = 12,1, 7,5 Hz, 1H), 1,97 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 1,62 (d, J = 4,7 Hz, 10H), 0,67 (ddt, J = 13,3, 8,5, 4,2 Hz, 2H), 0,44 (tdd, J = 8,1, 5,0, 3,7 Hz, 4H), 0,37 - 0,29 (m, 1H), 0,20 (dq, J = 6,5, 4,2, 3,6 Hz, 2H), 0,11 (dp, J = 9,7, 4,7 Hz, 2H). ESI-MS m/z izračunato 619,29407, pronađeno 620,23 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,94 minuta (LC metoda G).
Primer 129: Pripremanje 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,21-pentaazatetraciklo [18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 67) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,21-pentaazatetraciklo [18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 68)
[1612]
Korak 1: terc-Butil 4-[4-[[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1613]
[1614] U bočici zapremine 20 mL su spojeni 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (353,0 mg, 0,9396 mmol) i karbonil diimidazol (152,4 mg, 0,9396 mmol) u tetrahidrofuranu (3,834 mL) i mešani 120 minuta na 50 °C sa olabavljenim poklopcem. Nakon toga je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-[(5-sulfamoil-2piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilat (267,2 mg, 0,6264 mmol) u tetrahidrofuranu (5,114 mL) a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (187,4 mL, 1,253 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 16 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasićenim vodenim amonijum hloridom a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a nakon toga prečišćene hromatografijom na silika gelu korišećenjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata čime je dobijen terc-butil 4-[4-[[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (422,4 mg, 86%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 783,27924, pronađeno 784,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,86 minuta (LC metoda A).
Korak 2: 2-Hloro-N-[[6-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butilamino]-3-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[1615]
terc-Butil 4-[4-[[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (422,4 mg, 0,5386 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (1,843 mL) i smeši je dodata trifluoroacetatna kiselina (1,904 mL, 24,71 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 60 minuta. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom, stavljena u zasićen vodeni natrijum bikarbonat i etil acetat, i slojevi su razdvojeni. (OPREZ, rastvorljivost proizvoda u etil acetatu pod ovim uslovima je slaba, dodavanje nešto metanola pomaže, potrebno je da se organski sloj upari bez korišćenja čvrstog agensa za sušenje.). Organski sloj je koncentrovan rotirajućim uparavanjem nakon čega je sušen pod vakuumom čime je dobijen 2-hloro-N-[[6-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butilamino]-3-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (323,6 mg, 88%) ) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 683,2268, pronađeno 684,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,58 minuta (LC metoda A).
Korak 3: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,21-pentaazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 67) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,21-pentaazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 68)
[1616]
[1617] Rastvoru 2-hloro-N-[[6-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butilamino]-3-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (323,6 mg, 0,4730 mmol) u dimetil sulfoksidu (12,94 mL) su dodati kalijum karbonat (392,2 mg, 2,838 mmol), CsF (86,22 mg, 0,5676 mmol) i mala količina 3 Å molekularnih sita. Dobijena smeša je poklopljena i zagrevana do 165 °C tokom 16 sati. Smeša je zatim ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena etil acetatom i isprana zasićenim vodenim NH4Cl i slanim rastvorom. Organska faza je osušena (natrijum sulfat), filtrirana i koncentrovana u 422 mg amorfne čvrste supstance preplanule boje koja je podvrgnuta hiralnoj SFC hromatografiji korišćenjem ChiralPak OD-3 kolona eluiranjem sa izokratskim 30% metanola (20 mM NH3 modifikator)/70% ugljen dioksid mobilna faza tokom 2 minuta kako bi se dobio pojedinačni enantiomer očekivanog proizvoda (prvo eluiranje, pik 1) koji je i dalje sadržao neke nečistoće i drugi pojedinačni enantiomer očekivanog proizvoda (drugo eluiranje, pik 2) koji je i dalje sadžao neke nečistoće, oba kao čvrste supstance bele boje.
[1618] Prvi pik 1 eluiranja iz SFC hiralne separacije (50,2 mg) je filtriran i prečišćen korišćenjem metoda reverzne faze HPLC-MS upotrebom Luna C18(2) kolone (75 x 30 mm, 5 um veličina čestice) kupljeno od Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX) i dualnog gradijenta koji se kreće od 1% - 99% mobilne faze B tokom 15,0 min (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 uL i temperatura kolone = 25 °C) čime je dobijen 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,21-pentaazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 67) (27,7 mg, 18%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,15 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,81 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,30 (s, 1H), 6,89 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,56 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 6,10 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,31 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,45 (s, 1H), 2,07 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 1,99 (s, 1H), 1,72 (s, 1H), 1,54 (s, 10H), 1,25 (d, J = 9,7 Hz, 2H), 1,05 (s, 2H), 0,99 - 0,92 (m, 2H), 0,92 - 0,84 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 647,2502, pronađeno 648,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,12 minuta (LC metoda B).
[1619] Drugi pik 2 eluiranja iz SFC hiralne separacije (46,5 mg) je filtriran i prečišćen korišćenjem metoda reverzne faze HPLC-MS upotrebom Luna C18(2) kolone (75 x 30 mm, 5 um veličina čestice) kupljeno od Phenomenex (pn: 00C-4252-U0-AX) i dualnog gradijenta koji se kreće od 1% - 99% mobilne faze B tokom 15,0 minuta (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 uL i temperatura kolone = 25 °C) čime je dobijen 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,21-pentaazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 68) (29,4 mg, 19%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,15 (s, 1H), 8,46 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,88 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,55 (d, J = 8,9 Hz, 1H), 6,10 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,31 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,07 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 1,99 (s, 1H), 1,72 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 1,54 (d, J = 1,3 Hz, 10H), 1,29 - 1,14 (m, 2H), 1,04 (s, 2H), 0,97 - 0,94 (m, 2H), 0,91 - 0,86 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 647,2502, pronađeno 648,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,11 minuta (LC metoda B).
Primer 130: Pripremanje 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-15-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 69)
Korak 1: terc-Butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]etoksi]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1621]
[1622] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (154 mg, 0,4099
mmol) i karbonil diimidazol (66 mg, 0,4070 mmol) su spojeni u tetrahidrofuranu (2,0 mL) i mešani 90 minuta na 50 °C. Nakon toga je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etoksi]pirolidin-1-karboksilat (94 mg, 0,2268 mmol) a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (85,0 uL, 0,5684 mmol) i reakcije je zagrevana na 50 °C tokom 36 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa rastvorom 1 M limunske kiseline a zatim slanim rastvorom. Organske supstance su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a zatim prečišćene reverznom fazom preparativne hromatografije korišćenjem C18 kolone (30% - 99% acetonitril u vodi (5 mM hlorovodonične kiseline) kako bi se dobio terc-butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]etoksi]2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat kao čvrsta supstanca bele boje (77 mg, 44%). ESI-MS m/z izračunato 771,24286, pronađeno 772,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,28 minuta (LC metoda E).
Korak 2: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-15-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 69)
[1623]
terc-Butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]etoksi]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (77 mg, 0,09971 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (1,6 mL) i smeši je dodata hlorovodonična kiselina (800 uL 4 M u dioksanu, 3,200 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom, ponovo rastvorena u etil acetatu a zatim je dodat vodeni 2 M natrijum karbonat (5 mL), dajući pH -10. Organski sloj je ekstraktovan etil acetatom (2 x 10 mL), ispran slanim rastvorom, zatim osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i uparen do suvog stanja pod redukovanim pritiskom. U bočici su spojeni dobijen materijal i kalijum karbonat (72 mg, 0,5210 mmol), cezijum fluorid (25,0 mg, 0,1646 mmol), 3 Å molekularna sita i dimetil sulfoksid (1,6 mL), pročišćeni azotom, poklopljeni, zagrevani do 150 °C i mešani 20 sati. Ohlađeno na sobnu temperaturu, filtrirano i zatim prečišćeno reverznom fazom preparativne hromatografije korišćenjem C18kolone (30% - 99% acetonitrila u vodi (5 mM hlorovodonična kiselina) kako bi se dobio 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-15-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 69) (38,8 mg, 61%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,59 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,80 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,59 (dd, J = 8,5, 7,3 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 7,10 (d, J = 7,0 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,11 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,31 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 4,11 (td, J = 12,8, 5,9 Hz, 2H), 3,88 (t, J = 11,6 Hz, 1H), 3,61 (dd, J = 8,7, 4,2 Hz, 1H), 3,32 - 3,20 (m, 1H), 3,06 (dd, J = 10,6, 5,0 Hz, 1H), 2,92 - 2,77 (m, 1H), 2,08 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 1,79 (t, J = 10,9 Hz, 1H), 1,57 (d, J = 9,8 Hz, 6H), 1,00 - 0,93 (m, 2H), 0,88 (s, 2H). ESI-MS m/z izračunato 635,21375, pronađeno 636,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,0 minuta (LC metoda E).
Primer 131: Pripremanje 21,21,23-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi]-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-triona (Jedinjenje 76) i 12,21,21-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo [17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-triona (Jedinjenje 71)
[1624]
Korak 1: terc-Butil 4-[4-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3-metil-pirazol-1-il]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat i terc-butil 4-[4-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-5-metilpirazol-1-il]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (smeša regioizomera)
[1626] U bočicu su dodati 2-hloro-N-[(5-metil-1H-pirazol-4-il)sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (454 mg, 0,8749 mmol), N,N-dimetilformamid (4 mL) i kalijum karbonat (424 mg, 3,068 mmol). Reakcija je mešana 5 minuta na sobnoj temperaturi a zatim je ukapavanjem dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-(4-metilsulfoniloksibutil)pirolidin-1-karboksilat (410 mg, 1,173 mmol) u N,N-dimetilformamidu (2 mL). Reakcija je postavljena u uljanu kupku od 80 °C tokom noći. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, filtrirana i prečišćena preko HPLC (10%-99% acetonitril:voda sa 0,1% modifikatora hlorovodonične kiseline) čime je dobijen terc-butil 4-[4-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3-metilpirazol-1-il]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat i terc-butil 4-[4-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]-5-metil-pirazol-1-il]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (smeša regioizomera) (184,3 mg, 27%). ESI-MS m/z izračunato 771,27924, pronađeno 772,7 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,85 minuta (LC metoda G).
Korak 2: 2-Hloro-N-[1-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butil]-3-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid i 2-hloro-N-[1-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butil]-5-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (smeša regioizomera)
[1627]
[1628] U bocu su dodati terc-butil 4-[4-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3-metil-pirazol-1-il]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat i terc-butil 4-[4-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]-5-metilpirazol-1-il]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (smeša regioizomera) (81 mg, 0,1049 mmol), dihlorometan (3 mL) i trifluoroacetatna kiselina (450 uL, 5,841 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 90 minuta. Reakcija je uparena. Ostatak je ispran sa 2 M kalijum karbonata i ekstraktovan etil acetatom. Organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i uparen kako bi se dobio 2-hloro-N-[1-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butil]-3-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid i 2-hloro-N-[1-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butil]-5-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (smeša regioizomera) (70 mg, 99%). ESI-MS m/z izračunato 671,2268, pronađeno 672,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,64 minuta (LC metoda B).
Korak 3: 21,21,23-Trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7] trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 76) i 12,21,21-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 71)
[1630]2-Hloro-N-[1-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butil]-3-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamidu i 2-hloro-N-[1-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butil]-5-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamidu (smeša regioizomera) (70 mg, 0,1041 mmol) su dodati kalijum karbonat (72 mg, 0,5210 mmol), cezijum fluorid (36 mg, 0,2370 mmol) i dimetil sulfoksid (800 uL). Reakcija je zagrevana na 150 °C tokom noći. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, filtrirana i prečišćena putem HPLC (20% - 80% acetonitrila u vodi sa 0,1% modifikatora hlorovodnične kiseline) dajući kao prvi pik za eluiranje, 12,21,21-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 71) (16,6 mg, 50%);<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,25 (s, 1H), 8,63 (s, 1H), 8,21 (dd, J = 4,5, 2,8 Hz, 1H), 7,85 - 7,74 (m, 1H), 6,92 (dd, J = 8,3, 4,4 Hz, 1H), 6,11 (dd, J = 2,7, 1,5 Hz, 1H), 4,31 (q, J = 6,4, 5,9 Hz, 3H), 4,10 (dd, J = 11,9, 6,8 Hz, 1H), 2,85 (t, J = 10,1 Hz, 1H), 2,67 (bs, 1H), 2,39 (s, 3H), 2,15 - 2,02 (m, 4H), 1,83 (dd, J = 11,8, 5,6 Hz, 1H), 1,58 (d, J = 6,7 Hz, 4H), 1,51 (d, J = 5,9 Hz, 5H), 1,19 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 1,02 - 0,93 (m, 2H), 0,93 - 0,85 (m, 2H), 0,13 (s, 1H). ESI-MS m/z izračunato 635,2502, pronađeno 636,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,14 minuta (LC metoda B) i kao drugi pik za eluiranje, 21,21,23-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 76) (4,2 mg, 13%); ESI-MS m/z izračunato 635,2502, pronađeno 636,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,08 min (LC metoda B).
Primer 132: Pripremanje 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-15-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 74) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-15-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 75)
Korak 1: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-15-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 74) i 12,12-dimetil-8-(3-{ 2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-15-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 75)
[1632]
[1633] Racemski 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-15-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (36 mg, 0,05607 mmol) je podvrgnut hiralnoj separaciji SFC hromatografijom korišćenjem ChiralPak AS-H (250 x 21,2 mm kolona, 5um veličina čestice) sa gradijentom od 5% do 60% metanola (20 mM NH3) u ugljen dioksid mobilnoj fazi pri 50 mL/min dajući kao prvi enantiomer za eluiranje, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1Hpirazol-1-il)-15-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 74) (9,76 mg, 54%) kao beličastu čvrstu supstancu; ESI-MS m/z izračunato 635,21375, pronađeno 636,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,0 minuta (LC metoda E) i kao drugi enantiomer za eluiranje, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-15-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5(10),6,8,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 75) (11,29 mg, 63%) kao beličastu čvrstu supstancu; ESI-MS m/z izračunato 635,21375, pronađeno 636,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,0 minuta (LC metoda E).
Primer 133: Pripremanje 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,23-tetraazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 78)
[1634]
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[4-(6-sulfamoil-2-piridil)but-3-inil]pirolidin-1-karboksilat
[1635]
[1636] 6-Bromopiridin-2-sulfonamid (840 mg, 3,543 mmol), trans-dihlorobiz(trifenilfosfin)paladijum(II) (125
mg, 0,1781 mmol) i jodobakar (34 mg, 0,1785 mmol) su dodati u sekvencu u boci sa okruglim dnom. Sudu je zatim dodat anhidrovani N,N-dimetilformamid (11 mL), zapečaćen gumenim septumom pod azotom praćeno dodavanjem diizopropilamina (1000 uL, 7,135 mmol). Zatim je dodat terc-butil 4-but-3-inil-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1,15 g, 4,575 mmol) u 3 mL N,N-dimetilformamida i reakciona smeša je zagrevana do 100°C u uljanoj kupki pod atmosferom azota tokom 2 sata. Ostatak je razblažen etil acetatom i ispran vodom (2 x 50 mL) a zatim slanim rastvorom (50 mL). Organski slojevi su spojeni, osušeni (natrijum sulfat), filtrirani i koncentrovani u ostatak narandžaste boje koji je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 90% etil acetata u heksanima kako bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(6-sulfamoil-2-piridil)but-3-inil]pirolidin-1-karboksilat (1,4 g, 97%) kao pena svetlo žute boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksidd6) δ 8,04 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,85 (dd, J = 7,9, 0,8 Hz, 1H), 7,67 (dd, J = 7,7, 3,5 Hz, 1H), 7,53 (s, 2H), 3,63 (dd, J = 18,0, 9,0 Hz, 1H), 2,88 (q, J = 10,5 Hz, 1H), 2,58 - 2,52 (m, 1H), 2,24 (s, 1H), 1,94 (dd, J = 20,1, 6,4 Hz, 1H), 1,64 (dd, J = 14,1, 7,0 Hz, 2H), 1,50 (dd, J = 22,0, 9,7 Hz, 1H), 1,39 (dd, J = 18,3, 9,6 Hz, 13H), 1,26 (s, 3H). ESI-MS m/z izračunato 407,18787, pronađeno 408,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,77 minuta (LC metoda E).
Korak 2: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[4-(6-sulfamoil-2-piridil)butil]pirolidin-1-karboksilat
[1637]
[1638] terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(6-sulfamoil-2-piridil)but-3-inil]pirolidin-1-karboksilatu (1,1 g, 2,699 mmol) je dodat oksid platine (61,29 mg, 0,2699 mmol) a zatim metanol (11,00 mL) i smeša je pročišćena azotom praćeno sa vodonikom nakon čega je poklopljena sa balonom vodonika i mešana 4 sata. Dodat je dodatni oksid platine (61,29 mg, 0,2699 mmol) i mešana je sat vremena. Reakciona smeša je filtrirana nad celitom i isprana sa viškom metanola nakon čega je filtrat koncentrovan. Ostatak je onda prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata kako bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(6-sulfamoil-2-piridil)butil]pirolidin-1-karboksilat (1,10 g, 99%) kao pena žute boje, koja je kontaminirana malom količinom olefin intermedijera i korišćena je direktno u sledećem koraku. ESI-MS m/z izračunato 411,21918, pronađeno 412,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,85 minuta (LC metoda E).
Korak 3: terc-Butil 4-[4-[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1639]
[1640] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (685 mg, 1,823 mmol) i karbonil diimidazol (296 mg, 1,825 mmol) su spojeni u tetrahidrofuranu (11 mL) i mešani 90 minuta na 50 °C. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(6-sulfamoil-2-piridil)butil]pirolidin-1-karboksilat (500 mg, 1,215 mmol) a nakon toga 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (455 mL, 3,043 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 18 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa rastvorom 1 M limunske kiseline a nakon toga slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a zatim prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 75% etil acetata u heksanima kako bi se dobio terc-butil 4-[4-[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (165 mg, 35%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 768,2684, pronađeno 769,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,13 minuta (LC metoda G).
Korak 4: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,23-tetraazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 78)
[1641]
terc-Butil 4-[4-[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (125 mg, 0,1625 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (2,5 mL) i smeši je dodata hlorovodonična kiselina (1,5 mL 4 M u dioksanu, 6,000 mmol) i mešana je na sobnoj temperaturi 30 minuta. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom i u bočici spojena sa kalijum karbonatom (135
mg, 0,9768 mmol), cezijum fluoridom (40 mg, 0,2633 mmol), 3 Å molekularnim sitama i dimetil sulfoksidom (2,5 mL), pročišćena azotom, poklopljena, zagrevana do 150 °C i mešana 20 sati. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i filtrirana a zatim prečišćena reverznom fazom preparativne hromatografije korišćenjem C18kolone (30% - 99% acetonitrila u vodi (5 mM hlorovodonične kiseline) kako bi se dobio 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,23-tetraazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 78) kao čvrsta supstanca bele boje (37,67 mg, 37%). ESI-MS m/z izračunato 632,23926, pronađeno 633,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,92 minuta (LC metoda G).
Primer 134: Pripremanje 21,21,23-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetra ciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 80) i 21,21,23-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo [17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 81)
[1642]
Korak 1: 21,21,23-Trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7] trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 80) i 21,21,23-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 81)
[1643]
[1644] 21,21,23-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7] trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (12 mg, 0,01888 mmol) je podvrgnut hiralnoj separaciji SFC hromatografijom korišćenjem ChiralPak AS-H (250 x 21 mm kolona, 5um veličina čestice) sa 20% - 25% metanola (20 mM NH3) u ugljen dioksid mobilnoj fazi pri 50 mL/min (zapremina ubrizgavanja = 950 uL 4mg/mL rastvora u 50% metanola u dimetil sulfoksidu) dajući kao prvi enantiomer za eluiranje, 21,21,23-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo
[17.2.1.111,14.02,7] trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 80) (3,3 mg, 55%); ESI-MS m/z izračunato 635,2502, pronađeno 636,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,95 minuta (LC metoda D) i kao drugi enantiomer za eluiranje,21,21,23-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 81) (3,8 mg, 63%); ESI-MS m/z izračunato 635,2502, pronađeno 636,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,95 minuta (LC metoda D).
Primer 135: Pripremanje 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,23-tetraazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 86) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,23-tetraazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 87)
[1645]
Korak 1: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,23-tetraazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 86) i 12,12-dimetil-8-(3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia
3,9,11,23-tetraazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 87)
[1646]
[1647] Racemski 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,23-tetraazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (34,9 mg, 0,05516 mmol) je podvrgnut hiralnoj separaciji SFC hromatografijom korišćenjem Chiral Pak AS-H (250 x 10 mm), kolona, 5um veličina čestice) sa 25% acetonitril:metanol (90:10; bez modifikatora), 75% ugljen dioksid mobilna faza pri 10 mL/min (zapremina ubrizgavanja = 70 uL -24 mg/mL u acetonitril:metanol (90:10)) dajući kao prvi enantiomer za eluiranje, 12,12-dimetil-8-(3-12-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,23-tetraazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 86) (13,11 mg, 74%) kao čvrstu supstancu bele boje;<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,74 (s, 1H), 8,21 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,08 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 8,01 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,64 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,12 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,32 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,87 (s, 2H), 2,84 - 2,77 (m, 1H), 2,67 (t, J = 12,6 Hz, 1H), 2,16 (dd, J = 11,5, 5,3 Hz, 1H), 2,08 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,98 - 1,85 (m, 2H), 1,61 (s, 1H), 1,53 (t, J = 24,3 Hz, 8H), 1,45 (s, 1H), 1,03 (dd, J = 12,9, 7,3 Hz, 1H), 0,96 (t, J = 5,7 Hz, 2H), 0,92 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 0,89 (s, 2H), ESI-MS m/z izračunato 632,23926, pronađeno 633,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,88 minuta (LC metoda G) i kao drugi enantiomer za eluiranje, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,23-tetraazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 87) (12,96 mg, 74%) kao čvrstu supstancu bele boje; ESI-MS m/z izračunato 632,23926, pronađeno 633,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,92 minuta (LC metoda G).
Primer 136: Pripremanje 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,20-tetraazatetraciklo [17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(21),5(10),6,8,19,22-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 90)
[1648]
Korak 1: terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(5-sulfamoil-2-piridil)oksi]propil]pirolidin-1-karboksilat
[1649]
[1650] terc-butil 4-(3-hidroksipropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatu (400 mg, 1,554 mmol) koji se meša pod atmosferom azota u N,N-dimetilformamidu (4,0 mL) je u delovima dodat NaH (125 mg, 3,125 mmol) (OPREZ: evolucija gasa) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 minuta. Zatim je dodat 6-hloropiridin-3-sulfonamid (296 mg, 1,537 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 140 minuta nakon čega je dodat NaH (62 mg, 1,550 mmol) (OPREZ: evolucija gasa) i dobijena smeša je zagrevana do 100 °C nakon opremanja sa refluks kondenzatorom tokom 20 sati. Dodato je još 6-hloropiridin-3-sulfonamida (145 mg, 0,750 mmol, NaH (62 mg, 1,55 mmol) i zagrevana do 105 °C tokom 20 sati. Smeša je zatim sipana u 1 N limunske kiseline i ekstraktovana etil acetatom (2 puta). Organske frakcije su spojene, osušene (natrijum sulfat), filtrirane i koncentrovane u ulje žute boje koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 65% etil acetata u heksanima kako bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(5-sulfamoil-2-piridil)oksi]propil]pirolidin-1-karboksilat (50,36 mg, 8%). ESI-MS m/z izračunato 413,19846, pronađeno 414,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,81 minuta (LC metoda E).
Korak 2: terc-Butil 4-[3-[[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]oksi]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1651]
[1652] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (69 mg, 0,1836 mmol) i karbonil diimidazol (30 mg, 0,1850 mmol) su spojeni u tetrahidrofuranu (1,108 mL) i mešani 90 minuta na sobnoj temperaturi. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(5-sulfamoil-2-piridil)oksi]propil]pirolidin-1-karboksilat (50,36 mg, 0,1218 mmol) praćeno sa 1,8-diazabiciklo[5.4.0] undek-7-enom (50 mL, 0,3343 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 18 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa rastvorom 1 M limunske kiseline, a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a nakon toga prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 75% etil acetata u heksanima kako bi se dobio terc-butil 4-[3-[[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]oksi]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (71 mg, 76%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 770,2476, pronađeno 771,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,11 minuta (LC metoda E).
Korak 3: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,20-tetraazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(21),5(10),6,8,19,22-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 90)
[1653]
terc-Butil 4-[3-[[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]oksi]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (71 mg, 0,09206 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (1,5 mL) i smeši je dodata hlorovodonična kiselina (4M u dioksanu) (800 uL 4 M, 3,200 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom, ponovo rastvorena u etil acetatu a zatim je dodat vodeni 2 M natrijum karbonat (5 mL), dajući pH -10. Organski sloj je ekstraktovan etil acetatom (2 x 10 mL), ispran slanim rastvorom zatim osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i uparen do suvog stanja pod redukovanim pritiskom. U bočici su spojeni dobijen materijal sa kalijum karbonatom (69 mg, 0,4993 mmol), cezijum fluoridom (23 mg, 0,1514 mmol), 3 Å molekularnim sitama i dimetil sulfoksidom (1,5 mL), pročišćeni azotom, poklopljeni, zagrevani do 155 °C i mešani 24 sata. Ohlađena je na sobnu temperaturu, filtrirana i zatim prečišćena reverznom fazom preparativne hromatografije korišćenjem C18kolone (30% - 99% acetonitrila u vodi (5 mM hlorovodonične kiseline) kako bi se dobio 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,20-tetraazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(21),5(10),6,8,19,22-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 90) kao beličasta čvrsta supstanca (3,95 mg, 7%). ESI-MS m/z izračunato 634,2185, pronađeno 635,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,27 minuta (LC metoda E).
Primer 137: Pripremanje 12,21,21-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo [17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 91) i 12,21,21-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo [17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 92)
[1654]
Korak 1: 12,21,21-Trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7] trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 91) i 12,21,21-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 92)
[1655] Racemski 12,21,21-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7] trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (35 mg, 0,05506 mmol) je podvrgnut hiralnoj separaciji putem SFC hromatografije korišćenjem Chiral Pak AS-H (250 x 10 mm), kolona, 5um veličina čestice) sa 20% -30% metanola (20 mM NH3) u ugljen dioksid mobilnoj fazi dajući kao prvi enantiomer za eluiranje,12,21,21-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 91) (12,1 mg, 69%); ESI-MS m/z izračunato 635,2502, pronađeno 636,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,04 minuta (LC metoda G) i kao drugi enantiomer za eluiranje, 12,21,21-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 92) (8,9 mg, 51%); ESI-MS m/z izračunato 635,2502, pronađeno 636,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,03 minuta (LC metoda G).
Primer 138: Pripremanje 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksil-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,20-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 93)
[1656]
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[3-[(4-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat
[1657]
[1658] Rastvor 2-hloropiridin-4-sulfonamid (300 mg, 1,557 mmol), terc-butil 4-(3-aminopropil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (399,2 mg, 1,557 mmol), natrijum terc-butoksid (224,4 mg, 2,335 mmol) i hloro(2-di-terc-butilfosfino-2’,4’,6’-tri-ipropil-1,1’-bifenil)[2-(2-aminoetil)fenil] paladijum(II) (202,8 mg, 0,3114 mmol) u dioksanu (5,000 mL) je degaziran produvavanjem azotom i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. Reakciona smeša je razblažena etil acetatom i isprana slanim rastvorom. Organski sloj je osušen nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan. Dobijen braon ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% dihlorometana do 20% metanola u dihlorometanu kako bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(4-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (175 mg, 27%, 1:1 smeša sa terc-butil 4-[3-[biz(4-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatom) kao svetlo braon lepljiva čvrsta supstanca koja je korišćena direktno u sledećem koraku. ESI-MS m/z izračunato 412,21442, pronađeno 413,6 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,5 minuta (LC metoda A).
Korak 2: terc-Butil 4-[3-[[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1659]
[1660] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (154,8 mg, 0,4120 mmol) i karbonil diimidazol (66,81 mg, 0,4120 mmol) su spojeni u tetrahidrofuranu (2,0 mL) i mešani 90 minuta na 50 °C. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(4-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (85 mg, 0,2060 mmol) a nakon toga 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (47,04 mg, 46,21 uL, 0,3090 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 18 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasićenim rastvorom amonijum hlorida, a nakon toga slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene. Dobijen braon ostatak je prečišćen metodom reverzno fazne HPLC-MS korišćenjem dualnog gradijenta koji se kreće od 20% - 99% mobilne faze B tokom 15,0 minuta (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 uL i temperatura kolone = 25 °C) kako bi se dobio terc-butil-4-[3-[[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil] -2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1 -karboksilat (45,6 mg, 29%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,33 - 8,28 (m, 1H), 8,28 - 8,12 (m, 2H), 7,70 (dd, J = 8,2, 4,3 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 6,1 Hz, 1H), 7,21 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,95 (t, J = 2,7 Hz, 1H), 4,39 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 3,77 - 3,68 (m, 1H), 3,68 - 3,52 (m, 1H), 3,38 (s, 2H), 2,85 (t, J = 11,7 Hz, 1H), 2,23 - 2,11 (m, 1H), 2,09 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,94 - 1,79 (m, 1H), 1,75 - 1,56 (m, 2H), 1,43 (s, 12H), 1,35 (s, 2H), 1,26 (s, 3H), 1,07 - 0,97 (m, 2H), 0,73 (s, 2H). ESI-MS m/z izračunato 769,2636, pronađeno 770,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,77 minuta (LC metoda A).
Korak 3: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,20-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 93)
[1662] Rastvor terc-butil 4-[3-[[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (50 mg, 0,06491 mmol) u dihlorometanu (416,7 uL) i trifluoroacetatna kiselina (74,01 mg, 49,67 uL, 0,6491 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi 4 sata. Rastvarači su uklonjeni i ostatak je rastvoren u etil acetatu. Ispran sa 2 mL rastvora zasićenog natrijum bikarbonata i organski sloj je prikupljen i rastvarač je uklonjen a zatim osušen pod vakuumom. Dobijen ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (2,500 mL) i dodata su 3 Å molekularna sita, i reakciona smeša je mešana 10 minuta. Zatim su dodati cezijum fluorid (29,58 mg, 0,1947 mmol) i kalijum karbonat (26,91 mg, 0,1947 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 130 °C tokom noći. Reakciona smeša je filtrirana kroz Whatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišćen metodom reverzno fazne HPLC-MS korišćenjem dualnog gradijenta od 20% - 80% mobilne faze B tokom 15,0 minuta (mobilna faza A = voda (0,05% hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril) kako bi se dobio 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksil-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,20-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 93) (12,3 mg, 30%) kao čvrsta supstanca svetlo žute boje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,39 - 8,22 (m, 1H), 8,16 (s, 1H), 7,94 (s, 2H), 7,61 (s, 1H), 7,20 (s, 1H), 6,98 (s, 1H), 5,91 (s, 1H), 4,37 (s, 2H), 3,47 (d, J = 13,7 Hz, 2H), 3,01 (d, J = 43,7 Hz, 2H), 2,20 (s, 1H), 2,08 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 1,86 (s, 2H), 1,71 (s, 2H), 1,65 (s, 3H), 1,61 (s, 3H), 1,30 (d, J = 39,7 Hz, 2H), 1,05 - 0,98 (m, 2H), 0,74 (s, 2H). ESI-MS m/z izračunato 633,2345, pronađeno 634,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,75 minuta (LC metoda B).
Primer 139: Pripremanje 12,12-dimetil-8-(3-2-{1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,21-tetraazatetraciklo [18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 94)
[1663]
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[4-[(5-sulfamoil-2-piridil)oksi]butil]pirolidin-1-karboksilat
[1664]
[1665] terc-butil 4-(4-hidroksibutil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatu (800 mg, 2,948 mmol) koji se meša pod atmosferom azota u N,N-dimetilformamidu (8 mL) je u porcijama dodat NaH (240 mg, 6,001 mmol) (OPREZ: evolucija gasa) u bočici zapremine 20 mL i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 minuta. Zatim je dodat 6-hloropiridin-3-sulfonamid (570 mg, 2,959 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi sat vremena nakon čega je dodat NaH (120 mg, 3,000 mmol) (OPREZ: evolucija gasa), bočica je poklopljena i dobijena smeša je zagrevana do 100 °C tokom 20 sati. Dodati su dodatni 6-hloropiridin-3-sulfonamid (145 mg, 0,750 mmol) i NaH (62 mg, 1,55 mmol) i zagrevana je do 105 °C tokom 48 sati. Smeša je zatim sipana u 1 N limunske kiseline i ekstraktovana etil acetatom (2 puta). Organske frakcije su spojene, osušene (natrijum sulfat), filtrirane i koncentrovane u ulje žute boje koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 65% etil acetata u heksanima a nakog toga drugo prečišćavanje na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% dihlorometana do 15% metanola u dihlorometanu kako bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-[(5-sulfamoil-2-piridil)oksi]butil]pirolidin-1-karboksilat (335 mg, 27%) kao bistro viskozno ulje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,54 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 8,10 - 7,95 (m, 1H), 7,44 (d, J = 6,2 Hz, 2H), 6,98 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 4,32 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 3,55 (dd, J = 17,1, 6,9 Hz, 1H), 2,78 (q, J = 10,5 Hz, 1H), 2,19 - 2,01 (m, 1H), 1,95 - 1,80 (m, 1H), 1,76 - 1,68 (m, 2H), 1,44 (d, J = 12,1 Hz, 2H), 1,40 - 1,36 (m, 12H), 1,32 (d, J = 17,3 Hz, 3H), 1,24 (s, 3H). ESI-MS m/z izračunato 427,21408, pronađeno 428,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,87 minuta (LC metoda E).
Korak 2: terc-Butil 4-[4-[[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-l-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]oksi]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1666]
[1667] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (437,0 mg, 1,163 mmol) i karbonil diimidazol (190,0 mg, 1,172 mmol) su spojeni u tetrahidrofuranu (7,260 mL) i mešani 90 minuta na 50 °C. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-[(5-sulfamoil-2-piridil)oksi]butil]pirolidin-1-karboksilat (330 mg, 0.7718 mmol) a nakon toga 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (322,6 mg, 316,9 uL, 2,119 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 20 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a zatim prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 55% etil acetata u heksanima a nakon toga ponovo prečišćene na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% dihlorometana do 15% metanola u dihlorometanu kako bi se dobio terc-butil 4-[4-[[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]oksi]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (350 mg, 58%) kao čvrsta supstanca svetlo žute boje. ESI-MS m/z izračunato 784,2633, pronađeno 785,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,19 minuta (LC metoda G).
Korak 3: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,21-tetraazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 94)
[1668]
terc-Butil 4-[4-[[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]oksi]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (350 mg, 0,4457 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (7,5 mL) i smeši je dodata hlorovodonična kiselina (4,0 mL 4 M u dioksanu, 16,00 mmol) i mešana je na sobnoj temperaturi 30 minuta. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom, ponovo rastvorena u etil acetatu nakon čega je dodat vodeni 2 M natrijum karbonat (5 mL), dajući pH -10. Ekstraktovano etil acetatom (2 x 10 mL), organski slojevi su spojeni, isprani slanim rastvorom i osušeni nad natrijum sulfatom, filtrirani i upareni do suvog stanja pod redukovanim pritiskom. Dobijen materijal je u bočici spojen sa kalijum karbonatom (310 mg, 2,243 mmol), cezijum fluoridom (105 mg, 0,6912 mmol), 3 Å molekularnim sitama i dimetil sulfoksidom (7,5 mL), pročišćen azotom, poklopljen, zagrevan do 150 °C i mešan 20 sati. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i filtrirana, razblažena etil acetatom i isprana zasićenim vodenim rastvorom natrijum bikarbonata a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a zatim prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 55% etil acetata u heksanima kako bi se dobio 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,21-tetraazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 94) (76,3 mg, 26%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 648,2342, pronađeno 649,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,41 minuta (LC metoda E).
Primer 140: Pripremanje (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutil)-4-metil-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (so hidrohlorida) (Jedinjenje 97)
Korak 1: 1-Benzil-4-metil-pirolidin-2-on
[1670]
[1671] Boca zapremine 100 mL je pod azotom napunjena sa 4-metilpirolidin-2-onom (1,52 g, 15,33 mmol) i anhidrovanim tetrahidrofuranom (30 mL). Smeša je ohlađena u ledenoj kadi i u malim porcijama je dodat NaH (811,9 mg 60% w/w, 20,30 mmol). Uočeno je značajno penjenje i reakcija se pretvorila u kašu koja se teško meša. Mešanje je olakšano dodavanjem dodatne količine tetrahidrofurana (10 mL). Smeša je mešana u kadi za hlađenje tokom sat i po vremena. Ukapavanjem kroz špric je dodat benzil bromid (2,2 mL, 18,50 mmol). Smeša je mešana u kadi za hlađenje koja je ostavljena da se polako zagreje na sobnu temperaturu tokom noći. Nakon 29 sati, reakcija je sipana na led/vodu. Proizvod je ekstraktovan etil acetatom (2 x 75 mL) i organska faza je osušena nad natrijum sulfatom, filtrirana i rastvarači su upareni. Ostatak je rastvoren u dihlorometanu i prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta etil acetata (0% do 100%) u heksanima čime je dobijen 1-benzil-4-metil-pirolidin-2-on (2,52 g, 87%) kao ulje blago braon boje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,37 - 7,17 (m, 5H), 4,44 (s, 2H), 3,36 (dd, J = 9,6, 7,7 Hz, 1H), 2,82 (dd, J = 9,6, 6,0 Hz, 1H), 2,61 (dd, J = 16,6, 8,6 Hz, 1H), 2,40 (ddtd, J = 8,6, 7,8, 6,9, 6,0 Hz, 1H), 2,08 (dd, J = 16,6, 6,9 Hz, 1H), 1,07 (d, J = 6,8 Hz, 3H). ESI-MS m/z izračunato 189,11537, pronađeno 190,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,16 minuta (LC metoda B).
Korak 2: 1-Benzil-3-(3,3-dimetilbutil)-4-metil-pirolidin-2-on
[1673] Boca zapremine 100 mL sa okruglim dnom je osušena toplotnim pištoljem pod vakuumom i napunjena azotom. Boca je napunjena 1-benzil-4-metil-pirolidin-2-onom (542 mg, 2,864 mmol) i anhidrovanim tetrahidrofuranom (8 mL). Nakon hlađenja do -78 °C, ukapavanjem je dodat rastvor n-butillitijum (1,3 mL 2,5 M u heksanima, 3,250 mmol) indukujući formiranje crvenog rastvora. Nakon mešanja na -78 °C tokom 30 minuta, ukapavanjem je dodat 1-bromo-3,3-dimetil-butan (450 uL, 3.195 mmol). Smeša je mešana u kadi za hlađenje koja je onda ostavljena da se polako zagreje na sobnu temperaturu. Nakon 22 sata, smeša je ugašena dodavanjem zasićenog vodenog amonijum hlorida (50 mL). Proizvod je ekstraktovan etil acetatom (3 x 20 mL) i spojeni organski ekstrakti su osušeni nad natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani in vacuo. Kolonskom hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 0% do 40% etil acetata u heksanima je dobijen 1-benzil-3-(3,3-dimetilbutil)-4-metilpirolidin-2-on (342 mg, 44%) kao bezbojno ulje. ESI-MS m/z izračunato 273,20926, pronađeno 274,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,03 minuta (LC metoda B).
Korak 3: 3-(3,3-Dimetilbutil)-4-metil-pirolidin-2-on
[1674]
[1675] U azotom pročišćenu bocu zapremine 50 mL napunjenu 1-benzil-3-(3,3-dimetilbutil)-4-metil-pirolidin-2-onom (342 mg, 1,251 mmol) su dodati propan-1-amin (6 mL) i etan-1,2-diamin (500 uL, 7,479 mmol). Rastvor je ohlađen do -30 °C i dodata je traka litijumske žice (6 cm, isečena na 6 manjih delova i isprana heksanima kako bi se uklonio višak ulja). Boca je ponovo opremljena septumom i reakciona smeša je snažno mešana, uz blago zagrejavanje na
-20 °C. Plava boja se na kraju formirala oko litijumske žice, sa plavom bojom koja je na kratko izašla u rastvor i reakcija je ostavljena da se meša sve dok rastvor nije postao tamno plave boje (∼20 minuta). Dodata je voda (∼15 mL), veći delovi litijuma su uklonjeni i smeša je zagrejana na sobnu temperaturu i mešana 10 minuta. Sirova smeša je ekstraktovana etil acetatom (3 x 25 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani vodom (15 mL), osušeni nad natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani in vacuo čime je dobijen sirov 3-(3,3-dimetilbutil)-4-metil-pirolidin-2-on (388 mg, 169%) kao ulje žute boje koje je korišćeno bez daljeg prečišćavanja. ESI-MS m/z izračunato 183,16231, pronađeno 184,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,43 minuta (LC metoda B). Korak 4: (14S)-8-[3-(3,3-Dimetilbutil)-4-metil-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakosa-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (so hidrohlorida) (Jedinjenje 97)
[1676]
[1677] U bočicu napunjenu sirovim 3-(3,3-dimetilbutil)-4-metil-pirolidin-2-onom (22 mg, 0,1200 mmol) su dodati (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (25 mg, 0,05373 mmol), (5-difenilfosfanil-9,9-dimetil-ksanten-4-il)-difenil-fosfan (8 mg, 0,01383 mmol), (1E,4E)-1,5-difenilpenta-1,4-dien-3-on;paladijum (13 mg, 0,01420 mmol), Cs2CO3(23 mg, 0,07059 mmol) i dioksan (1 mL). Prostor iznad je pročišćen azotom, bočica je poklopljena i reakciona smeša je mešana na 120 °C tokom 18 sati. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, sirova smeša je razblažena etil acetatom (~30 mL) i isprana sa 1,0M vodenom limunskom kiselinom (5 mL). Organski sloj je osušen nad magnezijum sulfatom, filtriran i koncentrovan in vacuo. Sirov ostatak je stavljen u minimalnu količinu dimetil sulfoksida (0,4 - 1 mL) i podvrgnut HPLC prečišćavanju (C18reverzna faza, 1% do 99% acetonitrila u vodi sa modifikatorom hlorovodonične kiseline). Čiste frakcije su nakon toga koncentrovane in vacuo i ostatak je dalje prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% do 70% etil acetata u heksanima) kako bi se dobio (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutil)-4-metil-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (so hidrohlorida) (Jedinjenje 97) (2 mg, 6%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 596,31445, pronađeno 597,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,32 minuta (LC metoda B).
Primer 141: Pripremanje (14S)-12,12-dimetil-8-{3-[(1-metilcikloheksil)metil]-2-oksopirolidin-1-il]-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 101)
[1678]
Korak 1: 1-Benzil-3-dietoksifosforil-pirolidin-2-on
[1679]
[1680] U boci zapremine 250 mL je mešanom rastvoru LDA (30 mL 2,0 M, 60,00 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (140 mL) na -78 °C pod azotom, ukapavanjem tokom 5 minuta dodat rastvor 1-benzilpirolidin-2-on (5,000 g, 28,53 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (5 mL). Rastvor narandžaste boje je mešan sat vremena a zatim je ukapavanjem tokom 5 minuta dodat rastvor 1-[hloro(etoksi)fosforil]oksietan (5,170 g, 29,96 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (5 mL). Reakcija je ostavljena da se zagreje na temperaturu okruženja i mešana 18 sati. Reakcija je ugašena hladnom ledenom vodom (50 mL) i zakiseljena na približno pH = 2,0 dodavanjem vodene 1.0 M hlorovodonične kiseline. Vodeni sloj je razdvojen i ekstraktovan etil acetatom (3 x 50 mL). Spojeni organski ekstrakti su osušeni (natrijum sulfat), filtrirani i koncentrovani pod redukovanim pritiskom kako bi se proizveo sirov proizvod (8,74 g). Prečišćavanjem fleš kolonskom hromatografijom na silika gelu (prvo pokušano sa 10% do 100% etil acetata u heksanima tokom 40 minuta ali se materijal nije pojavio, zatim prebačeno na 0% do 10% metanola u CH2Cl2da bi se eluirao proizvod) je dobijen željeni 1-benzil-3-dietoksifosforil-pirolidin-2-on (3,31 g, 37%) kao viskozno ulje narandžaste boje.
<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7,38 - 7,31 (m, 2H), 7,31 - 7,25 (m, 1H), 7,25 - 7,21 (m, 2H), 4,49 (dd, J = 15,1, 1,4 Hz, 1H), 4,30 (d, J = 15,1 Hz, 1H), 4,15 - 3,98 (m, 4H), 3,31 - 3,14 (m, 3H), 2,34 - 2,19 (m, 1H), 2,19 - 2,04 (m, 1H), 1,22 (dva seta t, J = 7,2 Hz, 6H). ESI-MS m/z izračunato 311,12863, pronađeno 312,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,93 minuta (LC metoda B).
Korak 2: 1-Benzil-3-[(1-metilcikloheksil)metilen]pirolidin-2-on
[1681]
[1682] U boci zapremine 50 mL, mešanom rastvoru 1-benzil-3-dietoksifosforil-pirolidin-2-on (300 mg, 0,9637 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (10 mL) je dodat natrijum hidrid (42,40 mg, 47,11 uL, 1,060 mmol, 60% dispergovano u mineralnom ulju) u tri porcije (za ublažavanje evolucije gasa) na 5 °C (kada sa ledenom vodom) pod azotom. Nakom mešanja tokom 10 minuta, ukapavanjem tokom 3 minuta je dodat rastvor 1-metilcikloheksankarbaldehid (182,5 mg, 1,446 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (2 mL). Zatim je mešano na toj temperaturi 3 sata i ugašeno zasićenim NH4Cl rastvorom (15 mL). Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstraktovan etil acetatom (3 x 20 mL). Spojene organske materije su uspešno isprane vodom (15 mL) i slanim rastvorom (15 mL), osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio sirov olefinski proizvod. Sirov materijal je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu eluiranjem sa 5% - 60% etil acetata u heksanima. Izomeri E i Z su eluirani zajedno. Uklanjenjem isparljivih materija je dobijen 1-benzil-3-[(1-metilcikloheksil)metilen]pirolidin-2-on (265 mg, 97%) kao viskozno ulje žute boje i smeša izomera E i Z. ESI-MS m/z izračunato 283,1936, pronađeno 284,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,98 minuta (LC metoda B).
Korak 3: 1-Benzil-3-[(1-metilcikloheksil)metil]pirolidin-2-on
[1683]
[1684] Trogrla boca zapremine 50 mL pod azotom je napunjena sa 1-benzil-3-[(1-metilcikloheksil)metilen]pirolidin-2-onom (260 mg, 0,9174 mmol) kao mešavinom izomera E i Z, i anhidrovanim metanolom (15 mL). Boca je pročišćena azotom a zatim je dodat paladijum (100 mg, 0,09397 mmol, 10% na aktiviranom ugljeniku) pod azotom i mešano je pod vodonikom (balon) na 50 °C tokom 2 dana. Reakcija je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja i boca je pročišćena vodonikom a zatim filtrirana kroz sloj celita. Filtrat je koncentrovan kako bi se dobio sirov 1-benzil-3-[(1-metilcikloheksil)metil]pirolidin-2-on (138 mg, 53%) kao guma braon boje koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
[1685] ESI-MS m/z izračunato 285,20926, pronađeno 286,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,98 minuta (LC metoda B).
Korak 4: 3-[(1-Metilcikloheksil)metil]pirolidin-2-on
[1686]
[1687] Boca zapremine 50 mL je pod azotom napunjena sa I-benzil-3-[(1-metilcikloheksil)metil]pirolidin-2-onom (164 mg, 0,5746 mmol), propan-1-aminom (5 mL) i etan-1,2-diaminom (250 uL, 3,740 mmol), tim redosledom, na temperaturi okruženja. Rastvor je ohlađen do -35 °C (kada sa suvim ledom-acetonom, gde su 1 ili 2 palete suvog leda dodavane naizmenično da bi se temperatura održavala stabilnom) i odjednom je dodat litijum (40 mg, 5,763 mmol, žica, kratko isprana sa heksanima, zatim sveže isečena u male komade). Počela je da se pojavljuje plava boja oko komadića litijuma a tamno plava boja je postala stalna nakon sat vremena. Reakcija je ugašena zasićenim amonijum hloridom (5 mL) na -35 °C i reakcija je ostavljena da se zagreje na temperaturu okruženja. Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom i vodeni ostatak je ekstraktovan etil acetatom (3 x 20 mL). Spojene organske materije su isprane slanim rastvorom (10 mL), osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom i isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom. Nakon sušenja pod vakuumom, dobijen je sirov 3-[(1-metilcikloheksil)metil]pirolidin-2-on (78 mg, 70%) kao polučvrsta supstanca bele boje, koja je korišćena bez daljeg prečišćavanja. ESI-MS m/z izračunato 195,16231, pronađeno 196,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,47 minuta (LC metoda B). Korak 5: (14S)-12,12-dimetil-8-[3-[(1-metilcikloheksil)metil]-2-oksopirolidin-1-il]-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 101)
[1688]
[1689] Bočica zapremine 4 mL je napunjena sa (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,2l-heksaen-2,2,4-trionom (25 mg, 0,05373 mmol), 3-[(1-metilcikloheksil)metil]pirolidin-2-onom (10 mg, 0,05120 mmol), Pd2(dba)3 (8 mg, 0,008736 mmol), ksantfosom (5 mg, 0,008641 mmol), cezijum karbonatom (87,52 mg, 0,2686 mmol) i anhidrovanim dioksanom (0,4 mL). Smeša je prskana azotom tokom 1 do 2 minuta, poklopljena i mešana na 120 °C tokom 15 sati. Reakcija je razblažena dimetil sulfoksidom (1000 uL), mikrofiltrirana i podvrgnuta reverzno faznoj preparativnoj HPLC (C18) korišćenjem gradijenta acetonitrila u vodi (1% do 99% tokom 15 minuta) i hlorovodoničnoj kiselini kao modifikatoru. Čiste frakcije su prikupljene i spojene, dodato je malo slanog rastvora i organski rastvarači su upareni. Proizvod je ekstraktovan dihlorometanom i organska faza je osušena nad natrijum sulfatom a zatim filtrirana. Evaporacijom filtrata je dobijeno 10 mg čvrste supstance. Proizvod je dalje prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta metanola (0% do 5% tokom 30 minuta) u dihlorometanu čime je dobijen (14S)-12,12-dimetil-8-{3-[(1-metilcikloheksil)metil]-2-oksopirolidin-1-il}-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 101) (6,4 mg, 19%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,41 (s, 1H), 7,68 (dd, J = 8,5, 1,4 Hz, 1H), 7,61 - 7,47 (m, 2H), 7,04 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,97 (broad d, J = 9,0 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,11 - 3,65 (m, 3H), 3,10 (br s, 1H), 2,94 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 2,75 - 2,57 (m, 2H), 2,43 - 2,28 (m, 1H), 2,10 (br s, 1H), 2,02 - 1,93 (m, 1H), 1,89 - 1,64 (m, 3H), 1,64 - 1,37 (m, 13H), 1,35 - 1,10 (m, 8H), 0,89 (d, J = 1,7 Hz, 3H). ESI-MS m/z izračunato 608,31445, pronađeno 609,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,34 minuta (LC metoda B).
Primer 142: Pripremanje 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi]-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,21-tetraazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 103) i 12,12-dimetil-8-(3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1Hpirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,21-tetraazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 104)
[1690]
Korak 1: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,21-tetraazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 103) i 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,21-tetraazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 104)
[1691]
[1692] Racemski 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,21-tetraazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10] pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (71 mg, 0,1095 mmol) je podvrgnut hiralnoj separaciji SFC hromatografijom korišćenjem ChiralCel OD-H (250 X 10 mm kolona, 5um veličina čestice) sa 42% acetonitril/metanol (90:10)/58% ugljen dioksid mobilne faze pri 10mL/min tokom 8.0 minuta (zapremina ubrizgavanja = 70 uL 24 mg/mL rastvora u acetonitrilu/metanolu (90:10) dajući kao prvi enantiomer za eluiranje, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,21-tetraazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 103) (19,77 mg, 56%) kao čvrstu supstancu bele boje; ESI-MS m/z izračunato 648,2342, pronađeno 649,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,38 minuta (LC metoda E) i kao drugi enantiomer za eluiranje, 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,21-tetraazatetraciklo [18.2.2.111,14.05,10] pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 104) (20,25 mg, 57%) kao čvrstu supstancu bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,46 (s, 1H), 8,77 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,8 Hz, 2H), 7,88 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,11 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,31 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,41 (dd, J = 8,3, 5,3 Hz, 1H), 2,07 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 2,04 - 1,98 (m, 1H), 1,73 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 1,67 (dd, J = 7,9, 4,9 Hz, 1H), 1,64 - 1,55 (m, 1H), 1,51 (d, J = 11,5 Hz, 9H), 1,16 (dd, J = 9,6, 1,7 Hz, 1H), 1,06 - 0,97 (m, 1H), 0,95 (d, J = 4,3 Hz, 2H), 0,88 (s, 2H), 0,86 - 0,77 (m, 1H). ESI-MS m/z izračunato 648,2342, pronađeno 649,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,38 minuta (LC metoda E).
Primer 143: Pripremanje 8,8-dimetil-12-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18λ<6>-tia-2,9,11,17,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.05,9.010,15]trikoza-1(23),10(15),11,13,19,21-heksaen-16,18,18-triona (Jedinjenje108),8,8-dimetil-12-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18λ<6>-tia-2,9,11,17,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.05,9.010,15]trikoza-1(23),10(15),11,13,19,21-heksaen-16,18,18-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 116) i 8,8-dimetil-12-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18λ<6>-tia-2,9,11,17,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.05,9.010,15]trikoza-1(23),10(15),11,13,19,21-heksaen-16,18,18-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 117)
[1693]
Korak 1: 2-(1-Hidroksi-5,5-dimetil-pirolidin-2-il)acetonitril
[1694]
n-Butillitijum (127 mL 2,5 M, 317,5 mmol) je ukapavanjem dodat suvom tetrahidrofuranu (270 mL) ohlađen na -78 °C. Unutrašnja temperatura je održavana ispod -65 °C tokom dodavanja. Zatim je polako dodat acetonitril (13,13 g, 16,7 mL, 319,8 mmol), održavajući unutrašnju temperaturu ispod -70 °C. Uočen je beli precipitat litizovanog acetonitrila nakon što je polovina acetonitrila dodata. Nakon 30 minuta na -78 °C, dodat je rastvor 2,2-dimetil-1-oksido-3,4-dihidropirol-1-ijum (11,20 g, 99 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (15 mL) pri takvoj brzini da unutrašnja temperatura nije povećana iznad -70 °C. Suspenzija žute boje je mešana na -78 °C sat vremena nakon čega je ugašena zasićenim rastvorom amonijum hlorida (150 mL). Nakon zagrejavanja na sobnu temperaturu, razdvojena su dva sloja. Vodeni sloj je ekstraktovan etil acetatom (2 x 150 mL). Spojeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio sirov 2-(1-hidroksi-5,5-dimetil-pirolidin-2-il)acetonitril (17 g, ~ 80% čistoće sa<1>H NMR, 89% prinos) kao ulje braon boje koje je direktno korišćeno u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 1,04 (s, 3H), 1,18 (s, 3H), 1,48-1,67 (m, 3H), 1,99-2,06 (m, 1H), 2,59 (d, J = 5,2Hz, 2H), 3,17-3,26 (m, 1H), 4,59 (br. s., 1H).
Korak 2: 2-(5,5-Dimetilpirolidin-2-il)acetonitril
[1695]
[1696] Cink (4,9 g, 0,6869 mL, 74,935 mmol) je u nekoliko porcija dodat rastvoru 2-(1-hidroksi-5,5-dimetilpirolidin-2-il)acetonitril (1,8 g, 8,1707 mmol) u acetatnoj kiselini (21 mL) u kadi sa ledenom vodom i smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i energično je mešana i zagrevana do 30 °C tokom 6 sati. Sirova smeša je filtrirana i koncentrovana pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio sirov proizvod koji je neutralizovan sa 5% natrijum bikarbonata (100 mL) i ekstraktovan dihlorometanom (2 x 100 mL). Organske supstance su spojene i osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio sirov proizvod 2-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)acetonitril (0,9 g, 70%) kao bledo žuta polučvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 138,1157, pronađeno 139,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,312 min (LC metoda I).
Korak 3: terc-Butil 5-(cijanometil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1698] Di-terc-butil dikarbonat (17,4 g, 18,32 mL, 79,73 mmol) je dodat rastvoru 2-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)acetonitril (12 g, 51% čistoće, 44,28 mmol) i trietilamin (8,712 g, 12 mL, 86,10 mmol) u tetrahidrofuranu (100 mL). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom vikenda. Reakciona smeša je koncentrovana pod redukovanim pritiskom kako bi se uklonio tetrahidrofuran. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 0% - 20% etil acetata u heptanima kako bi se dobio terc-butil 5-(cijanometil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (9,5 g, 63%) kao svetlo žuto ulje. ESI-MS m/z izračunato 238,326, pronađeno 261,2 (M+Na)<+>; Vreme zadržavanja: 2,12 minuta (LC metoda I).
Korak 4: terc-Butil 5-(2-aminoetil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1699]
[1700] Boca zapremine 250 mL sa okruglim dnom je napunjena sa terc-butil 5-(cijanometil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatom (9,1 g, 38,2 mmol), amonijakom (10 mL 7 M rastvora u metanolu, 70 mmol), metanolom (70 mL) i Raney Nickel (talog u vodi, približno 4 g, uzeto spatulom bez preciznog merenja). Smeša je energično mešana na sobnoj temperaturi pod 1 atmosferom H2 (balon) tokom tri dana. Dodati su dodatni Raney-Nickel (talog u vodi, približno 6 g, uzeto spatulom bez preciznog merenja) i amonijak (10 mL 7 M rastvora u metanolu, 70 mmol). Reakcija je mešana tokom noći. Smeša je filtrirana kroz jastučić celita ispiranjem sa etil acetatom. Filtrat je koncentrovan pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio terc-butil 5-(2-aminoetil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (8,16 g, 83% prinos) kao ulje žute boje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) ppm 1,16-1,34 (m, 3H), 1,34-1,59 (m, 16H), 1,63-2,00 (m, 4H), 2,60-2,75 (m, 2H), 3,73-3,90 (m, 0,3H), 3,90-4,05 (m, 0,6H). Uočena su dva rotamera. ESI-MS m/z izračunato 242,358, pronađeno 243,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,74 minuta (LC metoda H).
Korak 5: terc-Butil 2,2-dimetil-5-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etil]pirolidin-1-karboksilat
[1701]
[1702] Rastvoru terc-butil 5-(2-aminoetil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (500,0 mg, 2,063 mmol) u N,N-dimetilformamidu (5 mL) je dodat 6-fluoropiridin-2-sulfonamid (302,8 mg, 1,719 mmol) a zatim kalijum karbonat (712,9 mg, 5,158 mmol). Boca je zatvorena septom i zagrevana na 90 °C pod balonom azota u uljanoj kadi tokom 14 sati. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i nakon toga razblažena etil acetatom i isprana slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a zatim prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata kako bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-5-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etil]piroldin-1-karboksilat (428 mg, 62%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,48 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,18 (dd, J = 7,2, 3,3 Hz, 1H), 6,53 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,68 (d, J = 5,8 Hz, 1H), 5,50 (s, 2H), 4,00 (q, J = 6,6 Hz, 1H), 3,48 (dq, J = 13,0, 6,9 Hz, 1H), 3,20 - 3,06 (m, 1H), 2,03 - 1,86 (m, 1H), 1,77 (t, J = 5,3 Hz, 1H), 1,59 (dq, J = 14,4, 7,1 Hz, 1H), 1,46 (s, 9H), 1,39 (s, 3H), 1,28 (s, 3H). ESI-MS m/z izračunato 398,19876, pronađeno 399,24 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,63 minuta (LC metoda A).
Korak 6: terc-Butil 5-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1703]
[1704] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (237,6 mg, 0,6323 mmol) i karbonil diimidazol (102,5 mg, 0,6323 mmol) su spojeni u tetrahidrofuranu (3,0 mL) i mešani 90 minuta na 50 °C. Zatim je dodat terc-butil 2,2-dimetil-5-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etil]pirolidin-1-karboksilat (210 mg, 0,5269 mmol) praćeno sa 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (120,3 mg, 118,2 uL, 0,7904 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasićenim rastvorom amonijum hlorida a zatim sa slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a nakon toga prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% dihlorometana do 20% metanola u dihlorometanu kako bi se dobio terc-butil 5-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (321 mg, 81%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,22 (s, 1H), 8,14 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 14,9 Hz, 2H), 7,39 (d, J = 19,1 Hz, 1H), 6,54 (s, 1H), 6,06 (s, 1H), 5,89 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,36 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,90 (s, 1H), 3,29 (s, 1H), 3,09 (s, 1H), 2,08 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 1,86 (s, 4H), 1,69 (s, 1H), 1,52 (s, 1H), 1,37 (d, J = 37,2 Hz, 12H), 1,22 (s, 3H), 1,06 - 0,99 (m, 2H), 0,78 - 0,70 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 755,248, pronađeno 756,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,87 minuta (LC metoda A).
Korak 7: 8,8-Dimetil-12-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18λ<6>-tia-2,9,11,17,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.05,9.010,15]trikoza-1(23),10(15),11,13,19,21-heksaen-16,18,18-trion (Jedinjenje 108)
[1705]
[1706] Rastvor terc-butil 5-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (320 mg, 0,4231 mmol) u dihlorometanu (2,667 mL) i trifluoroacetatna kiselina (482,4 mg, 323,8 uL, 4,231 mmol) su mešani na sobnoj temperaturi 4 sata. Rastvarači su uklonjeni i ostatak je rastvoren u etil acetatu. Isprano je sa 2 mL rastvora zasićenog natrijum bikarbonata, organski sloj je sakupljen i rastvarač uklonjen, i ostatak je osušen pod vakuumom. Prethodno navedeni ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (5 mL) i dodata su 3 Å molekularna sita i reakciona smeša je mešana 10 minuta. Zatim su dodati cezijum fluorid (192,8 mg, 1,269 mmol) i kalijum karbonat (175,4 mg, 1,269 mmol), i reakciona smeša je zagrevana na 130 °C tokom 24 sata. Reakciona smeša je filtrirana kroz celit i uložak celita je ispran etil acetatom. Filtrat je ponovo ispran slanim rastvorom i rastvarač je uklonjen. Dobijen braon ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata kako bi se dobio 8,8-dimetil-12-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18λ<6>-tia-2,9,11,17,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.05,9.010,15]trikoza-1(23),10(15),11,13,19,21-heksaen-16,18,18-trion (Jedinjenje 108) (145 mg, 55%) čvrsta supstanca svetlo žute boje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 13,95 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,24 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,52 (dd, J = 8,3, 7,3 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 6,49 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,96 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,85 (s, 1H), 4,42 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 4,24 (s, 1H), 3,01 (s, 2H), 2,59 (d, J = 19,1 Hz, 1H), 2,32 (s, 1H), 2,10 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,91 (s, 2H), 1,60 (s, 3H), 1,13 (s, 3H), 1,06 - 1,00 (m, 2H), 0,77 - 0,70 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 619,2189, pronađeno 620,06 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,87 minuta (LC metoda B).
Korak 8: 8,8-Dimetil-12-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18λ<6>-tia-2,9,11,17,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.05,9.010,15]trikoza-1(23),10(15),11,13,19,21-heksaen-16,18,18-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 116) i 8,8-dimetil-12-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18λ<6>-tia-2,9,11,17,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.05,9.010,15]trikoza-1(23),10(15),11,13,19,21-heksaen-16,18,18-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 117)
[1707]
[1708] Racemski 8,8-dimetil-12-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18λ<6>-tia-2,9,11,17,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.05,9.010,15]trikoza-1(23),10(15),11,13,19,21-heksaen-16,18,18-trion (Jedinjenje 108) (145 mg) je podvrgnut hiralnoj separaciji SFC hromatografijom korišćenjem ChiralPak AS-H (250 X 21,2 mm kolona, 5um veličina čestice) sa 25% acetonitril/metanol (90:10)/75% ugljen dioksid mobilna faza pri 70 mL/min (zapremina ubrizgavanja = 500 uL 32mg/mL rastvora u acetonitril/metanol (90:10)) dajući kao prvi enantiomer za eluiranje, 8,8-dimetil-12-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18λ<6>-tia-2,9,11,17,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.05,9.010,15]trikoza-1(23),10(15),11,13,19,21-heksaen-16,18,18-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 116) (46,5 mg, 34%);<1>H NMR (400 MHz, Chloroform-d) δ 13,88 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,24 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,64 (s, 1H), 7,52 (dd, J = 8,4, 7,3 Hz, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,50 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,96 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,89 (s, 1H), 4,48 - 4,38 (m, 2H), 4,24 (s, 1H), 3,01 (s, 2H), 2,59 (d, J = 23,4 Hz, 1H), 2,32 (s, 1H), 2,11 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,92 (brs, 2H), 1,61 (d, J = 6,7 Hz, 6H), 1,14 (brs, 2H), 1,07 - 1,00 (m, 2H), 0,79 -0,71 (m, 2H), ESI-MS m/z izračunato 619,2189, pronađeno 620,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,86 minuta (LC metoda B) i kao drugi enantiomer za eluiranje, 8,8-dimetil-12-(3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18λ<6>-tia-2,9,11,17,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.05,9.010,15] trikoza-1(23),10(15),11,13,19,21-heksaen-16,18,18-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 117) (66,1 mg, 50%);<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 13,87 (s, 1H), 8,50 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,63 (s, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,28 (s, 1H), 6,52 (s, 1H), 5,96 (s, 1H), 4,81 (s, 1H), 4,42 (s, 2H), 4,25 (s, 1H), 3,04 (s, 2H), 2,58 (s, 1H), 2,33 (s, 1H), 2,11 (t, J = 5,0 Hz, 2H), 1,92 (s, 2H), 1,60 (s, 6H), 1,14 (s, 2H), 1,03 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 0,75 (s, 2H). ESI-MS m/z izračunato 619,2189, pronađeno 620,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,86 minuta (LC metoda B).
Primer 144: Pripremanje (14S)-12,12,20-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,23-tetraazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 109)
[1709]
Korak 1: terc-Butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(3-metil-6-sulfamoil-2-piridil)oksi] propil]pirolidin-1-karboksilat
[1710]
[1711] terc-butil (4S)-4-(3-hidroksipropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatu (496 mg, 1,927 mmol) koji se meša pod atmosferom azota u N,N-dimetilformamidu (6 mL) je u porcijama dodato NaH (154,1 mg, 171,2 uL, 3,854 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Dodat je 6-hloro-5-metilpiridin-2-sulfonamid (398,2 mg, 1,927 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 80 minuta. Mešajućem rastvoru na sobnoj temperaturi je dodat dodatni NaH (77,07 mg, 85,63 uL, 1,927 mmol) i reakciona tuba je poklopljena. Dobijena smeša je mešana na 100 °C tokom 14 sati. Ohlađena reakciona smeša je sipana u 1 N limunske kiseline i ekstraktovana etil acetatom (2 puta). Organske frakcije su spojene, osušene (natrijum sulfat), filtrirane i koncentrovane in vacuo u bistro ulje koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta mobilne faze od 100% heksana do 100% etil acetata čime je dobijen terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(3-metil-6-sulfamoil-2-piridil)oksi]propil]pirolidin-1-karboksilat (336 mg, 41%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7,74 (dd, J = 7,4, 1,0 Hz, 1H), 7,39 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,29 (s, 2H), 4,36 (s, 2H), 3,58 (q, J = 8,4, 7,9 Hz, 1H), 2,81 (q, J = 10,1 Hz, 1H), 2,20 (t, J = 1,8 Hz, 4H), 1,96 (d, J = 26,1 Hz, 1H), 1,75 (dt, J = 14,2, 6,9 Hz, 2H), 1,46 (q, J = 7,6, 7,1 Hz, 2H), 1,37 (t, J = 10,7 Hz, 13H), 1,25 (s, 3H). ESI-MS m/z izračunato 427,21408, pronađeno 428,21 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,72 minuta. (LC metoda A).
Korak 2: terc-Butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksilpirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3-metil-2-piridil]oksi]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1712]
[1713] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (175,8 mg, 0,4678 mmol) i karbonil diimidazol (75,85 mg, 0,4678 mmol) su spojeni u tetrahidrofuranu (4,678 mL) i mešani 60 minuta na 50 °C. Nakon toga je dodat terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(3-metil-6-sulfamoil-2-piridil)oksi]propil] pirolidin-1-karboksilat (200 mg, 0,4678 mmol) a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (71,22 mg, 69,96 uL, 0,4678 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 15 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa rastvorom 1 M limunske kiseline pa sa slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a nakon toga prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 75% etil acetata u heksanima kako bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3-metil-2-piridil]oksi]propil]-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (296 mg, 81%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 784,2633, pronađeno 785,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,84 minuta (LC metoda A).
Korak 3: (14S)-12,12,20-Trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,23-tetraazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 109)
[1714]
terc-Butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3-metil-2-piridil]oksi]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (296 mg, 0,3769 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (5 mL) i smeši je dodata hlorovodonična kiselina (3,5 mL 4 M u dioksanu, 14,00 mmol) i mešana je na sobnoj temperaturi 30 minuta. Reakcioni rastvor je koncentrovan in vacuo do suvog stanja. Dobijen materijal je u bočici spojen sa kalijum karbonatom (313 mg, 2,265 mmol), cezijum fluoridom (93 mg, 0,6122 mmol), 3 Å molekularnim sitama i dimetil sulfoksidom (6 mL), pročišćen azotom, poklopljen, zagrevan do 140 °C i mešan 16 sati. Reakciona smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i filtrirana pa zatim prečišćena reverzno faznom peparativnom hromatografijom korišćenjem C18kolone (20% - 99% acetonitril-voda 5 mM hlorovodonična kiselina) kako bi se dobio (14S)-12,12,20-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,23-tetraazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Compound 109) (78 mg, 32%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,73 (s, 1H), 8,21 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,86 (dd, J = 8,3, 7,0 Hz, 2H), 7,58 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 6,94 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,12 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 5,18 (t, J = 12,2 Hz, 1H), 4,32 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 3,96 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 3,14 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 2,56 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 2,18 (s, 3H), 2,11 - 2,01 (m, 3H), 1,85 (dd, J = 11,9, 5,3 Hz, 1H), 1,70 (t, J = 12,9 Hz, 2H), 1,55 (d, J = 39,3 Hz, 8H), 1,22 (q, J = 12,6, 12,2 Hz, 1H), 1,03 - 0,92 (m, 2H), 0,92 - 0,84 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 648,2342, pronađeno 649,41 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,38 minuta (LC metoda B).
Primer 145: Pripremanje 20,20-dimetil-4-(3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (Jedinjenje 110)
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[3-(4-sulfamoilpirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat
[1716]
[1717] terc-Butil 2,2-dimetil-4-(3-metilsulfoniloksipropil)pirolidin-1-karboksilat (490 mg, 1,461 mmol) i 1H-pirazol-4-sulfonamid (215 mg, 1,461 mmol) praćeno sa kalijum karbonatom (710 mg, 5,137 mmol) su rastvoreni u N,N-dimetilformamidu (15 mL) i mešani na 50 °C u zapečaćenom sudu zapremine 150 mL tokom 48 sati. Ohlađena je na sobnu temperaturu a zatim sipana u vodu (100 mL) i ekstraktovana etil acetatom (2 x 100 mL), organski slojevi su spojeni, isprani vodom (2 x 100 mL), osušeni (natrijum sulfat), filtrirani i koncentrovani. Ostatak narandžaste boje je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata kako bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(4-sulfamoilpirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (400 mg, 71%) kao bezbojno ulje koje se nakon sušenja vakuumom pretvorilo u čvrstu supstancu bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,20 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,23 (s, 2H), 4,14 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,54 (dd, J = 18,0, 10,3 Hz, 1H), 2,74 (q, J = 10,2 Hz, 1H), 2,10 (dt, J = 10,1, 6,4 Hz, 1H), 1,87 (td, J = 13,0, 6,1 Hz, 1H), 1,81 - 1,69 (m, 2H), 1,38 (d, J = 10,5 Hz, 10H), 1,34 (d, J = 10,7 Hz, 3H), 1,24 (s, 5H). ESI-MS m/z izračunato 386,19876, pronađeno 387,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,49 minuta (LC metoda E).
Korak 2: terc-Butil 4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1718]
[1719] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (335 mg, 0,8916 mmol) i karbonil diimidazol (143 mg, 0,8819 mmol) su spojeni u tetrahidrofuranu (4,5 mL) i mešani 60 minuta na sobnoj temperaturi. Nakon toga je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(4-sulfamoilpirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (200 mg, 0,5175 mmol) a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (225 uL, 1,505 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 18 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana rastvorom zasićenog vodenenog natrijum bikarbonata, a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a zatim prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata kako bi se dobio terc-butil 4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (201 mg, 52%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 743,248, pronađeno 744,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,84 minuta (LC metoda E).
Korak 3: 20,20-Dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 110)
[1720]
terc-Butil4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (200 mg, 0,2687 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (5,0 mL) i smeši je dodata hlorovodonična kiselina (2,5 mL 4 M u dioksanu, 10,00 mmol) i mešana je na sobnoj temperaturi 30 minuta. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom, ponovo rastvorena u etil acetatu nakon čega je dodat vodeni 2 M natrijum karbonat (5 mL), dajući pH -10. Rastvor je ekstraktovan etil acetatom (2 x 10 mL), ispran slanim rastvorom, zatim osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i uparen do suvog stanja pod redukovanim pritiskom. Dobijen materijal je u bočici spojen sa kalijum karbonatom (190 mg, 1,375 mmol), cezijum fluoridom (65 mg, 0,4279 mmol), 3 Å molekularnim sitama i dimetil sulfoksidom (6 mL), pročišćeno azotom, poklopljeno, zagrevano do 155 °C i mešano tokom 20 sati. Ohlađena je na sobnu temperaturu i filtrirana, razblažena etil acetatom i isprana rastvorom zasićenog vodenog natrijum bikarbonata a zatim sa slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a zatim prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% dihlorometana do 10% metanola u dihlorometanu kako bi se dobio 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksil-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 110) (59,6 mg, 36%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,24 (s, 1H), 8,55 (s, 1H), 8,18 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,74 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,10 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,31 (t, J = 7,0 Hz, 3H), 4,07 (t, J = 11,5 Hz, 1H), 2,17 (dd, J = 7,3, 5,2 Hz, 1H), 2,07 (t, J = 7,1 Hz, 4H), 1,93 (t, J = 9,3 Hz, 1H), 1,87 - 1,69 (m, 2H), 1,60 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 1,49 (s, 6H), 1,37 (t, J = 12,1 Hz, 1H), 1,09 - 0,99 (m, 1H), 0,98 - 0,93 (m, 2H), 0,89 (d, J = 11,2 Hz, 2H). ESI-MS m/z izračunato 607,2189, pronađeno 608,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,07 minuta (LC metoda E).
Primer 146: Pripremanje (18S)-20,20,22-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetra ciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (atropizomer 1) (Jedinjenje 111), (18S)-12,20,20-trimetil-4-(3-12-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetra ciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (Jedinjenje 112) i (18S)-20,20,22-trimetil-4-(3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (atropizomer 2) (Jedinjenje 113)
[1721]
Korak 1: terc-Butil (4S)-4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3-metil-pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat i terc-butil (4S)-4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-5-metil-pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (smeša regioizomera)
[1722]
[1723] U bocu koja sadrži 2-hloro-N-[(5-metil-1H-pirazol-4-il)sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (900 mg, 1,734 mmol), kalijum karbonat (720 mg, 5,210 mmol) i dimetil sulfoksid (14 mL) je dodat rastvor terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-(3-metilsulfoniloksipropil)pirolidin-1-karboksilat (699 mg, 2,084 mmol) u dimetil sulfoksidu (2 mL) i reakcija je ostavljena da se meša na 95 °C tokom noći. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, filtrirana i prečišćena sa HPLC (30% - 99% acetonitril/voda sa 0,1% modifikatora hlorovodonične kiseline) kako bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3-metil-pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat i terc-butil (4S)-4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-5-metil-pirazol- 1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (smeša regioizomera) (524,1 mg, 40%). ESI-MS m/z izračunato 757,2636, pronađeno 758,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,93 minuta (LC metoda G).
Korak 2: 2-Hloro-N-[1-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propil]-3-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid i 2-hloro-N-[1-[3-[(3S)-5,5-dimetil-pirolidin-3-il]propil]-5-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (smeša regioizomera)
[1725] U boci sa terc-butil (4S)-4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3-metil-pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatom i terc-butil (4S)-4-[3-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-5-metil-pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatom (smeša regioizomera) (524 mg, 0,6911 mmol) su dodati dihlorometan (10 mL) i trifluoroacetatna kiselina (2,7 mL, 35,05 mmol). Reakcija je mešana sat vremena na sobnoj temperaturi. Reakcija je zatim uparena do suvog stanja i ugašena zasićenim natrijum bikarbonatom. Reakcija je ekstraktovana rastvorom dihlorometan:metanol (9:1) 3 puta, osušena nad natrijum sulfatom i uparena kako bi se dobio 2-hloro-N-[1-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propil]-3-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid i 2-hloro-N-[1-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propil]-5-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (smeša regioizomera) (435 mg, 96%). ESI-MS m/z izračunato 657,2112, pronađeno 658,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,61 minuta (LC metoda E).
Korak 3: (18S)-20,20,22-Trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (atropizomer 1) (Jedinjenje 111), (18S)-12,20,20-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 112) i (18S)-20,20,22-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (atropizomer 2) (Jedinjenje 113)
[1727] U 20 dram bočicu su dodati kalijum karbonat (458 mg, 3,314 mmol), cezijum fluorid (302 mg, 1,988 mmol) i rastvor 2-hloro-N-[1-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propil]-3-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid i 2-hloro-N-[1-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propil]-5-metil-pirazol-4-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (smeša regioizomera) (435 mg, 0,6610 mmol) u dimetil sulfoksidu (17,50 mL). Reakcija je zagrevana na 160 °C tokom noći. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, filtrirana i prečišćena putem HPLC (30% - 80% acetonitrila u vodi sa modifikatorom hlorovodonične kiseline) dajući kao prvi proizvod za eluiranje, (18S)-20,20,22-trimetil-4-(3-12-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (atropizomer 1) (Jedinjenje 111) (32,5 mg, 16%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,39 (s, 1H), 8,18 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,77 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,90 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,10 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,38 (dt, J = 14,1, 3,1 Hz, 1H), 4,31 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 4,01 (td, J = 14,0, 2,8 Hz, 1H), 2,06 (q, J = 8,0, 7,6 Hz, 5H), 1,90 - 1,71 (m, 3H), 1,55 (s, 3H), 1,47 (s, 3H), 1,45 - 1,30 (m, 2H), 1,10 (s, 1H), 0,99 - 0,93 (m, 2H), 0,93 - 0,85 (m, 2H). Tri protona su zaklonjena preostalim rastvaračem. ESI-MS m/z izračunato 621,2345, pronađeno 622,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,96 minuta (LC metoda D). Drugi proizvod za eluiranje je bio (18S)-12,20,20-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 112) (53,9 mg, 26%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,18 (s, 1H), 8,41 (s, 1H), 8,18 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,10 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,31 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 4,22 (dt, J = 13,6, 3,8 Hz, 1H), 4,03 - 3,92 (m, 1H), 2,40 (s, 3H), 2,22 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 2,11 - 1,91 (m, 5H), 1,83 (dt, J = 15,7, 7,4 Hz, 1H), 1,75 (dd, J = 11,9, 5,0 Hz, 1H), 1,51 (d, J = 13,0 Hz, 7H), 1,38 (t, J = 12,2 Hz, 1H), 1,03 (s, 1H), 0,99 - 0,84 (m, 4H). ESI-MS m/z izračunato 621,2345, pronađeno 622,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,01 minuta (LC metoda D). Treći proizvod za eluiranje je bio (18S)-20,20,22-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetra ciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (atropizomer 2) (Jedinjenje 113) (12,4 mg, 6%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,10 (s, 1H), 8,18 (d, J = 2,8 Hz,, 1H), 7,81-7,70 (m, 2H), 6,88 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,10 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,40 - 4,26 (m, 3H), 4,00 (ddd, J = 13,5, 10,2, 2,7 Hz, 1H), 2,68 (s, 3H), 2,43 - 2,32 (m, 1H), 2,07 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 1,96 - 1,57 (m, 5H), 1,57 -1,41 (m, 8H), 1,00-0,84 (m, 4H). (2 zaklonjena preostalim rastvaračem). ESI-MS m/z izračunato 621,2345, pronađeno 622,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,08 minuta (LC metoda D).
Primer 147: Pripremanje 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi}-1R-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetra ciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 118) i 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 119)
[1728]
Korak 1: 20,20-Dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 118) i 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 119)
[1729]
[1730] Racemski 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (57 mg, 0,09287 mmol) je podvrgnut hiralnoj separaciji SFC hromatografijom korišćenjem ChiralPak AS-H (250 X 10 mm, 5um veličina čestice) sa 26% acetonitril:metanol (90:10; bez modifikatora)/74% ugljen dioksid mobilna faza pri 10 mL/min tokom 8,0 minuta (zapremina ubrizgavanja = 70 uL 24mg/mL rastvora u metanolu/dimetil sulfoksidu (90:10)) dajući kao prvi enantiomer za eluiranje, 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 118) (20,76 mg, 74%) kao čvrstu supstancu bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,24 (s, 1H), 8,53 (s, 1H), 8,18 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,87 (s, 1H), 7,73 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,09 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,30 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 4,06 (t, J = 11,7 Hz, 1H), 2,25 - 2,10 (m, 1H), 2,05 (dt, J = 9,6, 5,0 Hz, 4H), 1,93 (dd, J = 16,2, 7,1 Hz, 1H), 1,82 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 1,76 - 1,68 (m, 1H), 1,54 (s, 1H), 1,51 (d, J = 15,5 Hz, 6H), 1,37 (t, J = 12,0 Hz, 1H), 1,08 - 0,99 (m, 1H), 0,98 - 0,92 (m, 2H), 0,91 - 0,84 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 607,2189, pronađeno 608,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,07 minuta (LC metoda E). Drugi enantiomer za eluiranje je bio 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 119) (17,84 mg, 63%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 607,2189, pronađeno 608,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,07 minuta (LC metoda E).
Primer 148: Pripremanje 21,21-dimetil-4-(3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo [17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 122) [1731]
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[4-(4-sulfamoilpirazol-1-il)butil]pirolidin-1-karboksilat
[1732]
terc-Butil 2,2-dimetil-4-(4-metilsulfoniloksibutil)pirolidin-1-karboksilat (600 mg, 1,717 mmol), 1H-pirazol-4-sulfonamid (256 mg, 1,740 mmol) i kalijum karbonat (850 mg, 6,150 mmol) su spojeni u N,N-dimetilformamidu (15 mL) i mešani na 50 °C u zapečaćenom sudu zapremine 150 mL tokom 22 sata. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, sipana u vodu (100 mL) i ekstraktovana etil acetatom (2 x 100 mL), organski slojevi su spojeni, isprani vodom (2 x 100 mL), osušeni (natrijum sulfat), filtrirani i koncentrovani. Ostatak narandžaste boje je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% dihlorometana do 15% metanola u dihlorometanu kako bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(4-sulfamoilpirazol-1-il)butil]pirolidin-1-karboksilat (499 mg, 73%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,19 (s, 1H), 7,71 (s, 1H), 7,23 (s, 2H), 4,13 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 3,52 (dd, J = 13,9, 8,6 Hz, 1H), 2,06 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 1,85 (dd, J = 16,8, 10,1 Hz, 1H), 1,80 - 1,71 (m, 2H), 1,42 - 1,34 (m, 13H), 1,32 (d, J = 7,2 Hz, 3H), 1,29 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 1,23 (s, 4H). ESI-MS m/z izračunato 400,21442, pronađeno 401,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,61 minuta (LC metoda E).
Korak 2: terc-Butil 4-[4-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1733]
[1734] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (410 mg, 1,091 mmol) i karbonil diimidazol (177 mg, 1,092 mmol) su spojeni u tetrahidrofuranu (6,0 mL) i mešani 90 minuta na 50 °C. Nakon toga je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(4-sulfamoilpirazol-1-il)butil]pirolidin-1-karboksilat (257 mg, 0,6416 mmol) a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (240 mL, 1,605 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 16 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana rastvorom zasićenog vodenog natrijum bikarbonata a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a zatim prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% dihlorometana do 10% metanola u dihlorometanu kako bi se dobio terc-butil 4-[4-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (345 mg, 71%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 757,2636, pronađeno 758,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,93 minuta (LC metoda E).
Korak 3: 21,21-Dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02, 7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 122)
[1735]
terc-Butil 4-[4-[4-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (315 mg, 0,4154 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (8,5 mL) i smeši je dodata hlorovodonična kiselina (3,25 mL 4 M u dioksanu, 13,00 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom, ponovo rastvorena u etil acetatu nakon čega je dodat vodeni 2 M natrijum karbonat (5 mL), dajući pH -10. Rastvor je ekstraktovan etil acetatom (2 x 10 mL), ispran slanim rastvorom nakon čega je osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i uparen do suvog stanja pod redukovanim pritiskom. Dobijen materijal je u bočici spojen sa kalijum karbonatom (290 mg, 2,098 mmol), cezijum fluoridom (95 mg, 0,6254 mmol), 3 Å molekularnim sitama i dimetil sulfoksidom (10,0 mL), pročišćeno azotom, poklopljeno, zagrevano do 155 °C i mešano 20 sati. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i filtrirana, razblažena etil acetatom i isprana rastvorom zasićenog vodenog natrijum bikarbonata a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene nakon čega su prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% dihlorometana do 10% metanola u dihlorometanu, a zatim drugom kolonom korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 80% etil acetata u heksanima kako bi se dobio 21,21-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 122) (131 mg, 50%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,34 (s, 1H), 8,83 (s, 1H), 8,21 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,81 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,12 (d, J = 2,6 Hz, 1H), 4,44 (td, J = 11,3, 3,3 Hz, 1H), 4,31 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 4,19 (dd, J = 19,3, 5,9 Hz, 1H), 2,97 (t, J = 9,5 Hz, 1H), 2,33 (dd, J = 12,1, 8,3 Hz, 1H), 2,08 (t, J = 6,9 Hz, 4H), 1,85 (dd, J = 11,6, 5,2 Hz, 1H), 1,59 (s, 4H), 1,54 (d, J = 9,8 Hz, 4H), 1,48 (d, J = 9,2 Hz, 1H), 1,27 (dd, J = 21,2, 8,7 Hz, 2H), 0,95 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 0,90 (d, J = 10,6 Hz, 2H), 0,02 - 0,08 (m, 1H). ESI-MS m/z izračunato 621,2345, pronađeno 622,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,16 minuta (LC metoda E).
Primer 149: Pripremanje 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,22-pentaazatetraciklo [18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(22),5(10),6,8,20,23-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 123)
[1736]
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[4-[(6-sulfamoil-3-piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilat
[1737]
[1738] U zapečaćenoj bočici zapremine 5 mL, rastvor terc-butil 4-(4-aminobutil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (507 mg, 1,875 mmol), 5-fluoropiridin-2-sulfonamid (300 mg, 1,703 mmol) i diizopropil etil amin (1,5 mL, 8,612 mmol) u n-BuOH (3 mL) su mešani na 160 °C tokom 16 sati. Rastvarač je uklonjen in vacuo i ostatak je rastvoren u dihlorometanu i ispran vodom. Organski ekstrakt je osušen nad natrijum sulfatom, filtriran, uparen i prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% do 40% etil acetata u heksanima) kako bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-[(6-sulfamoil-3-piridil)amino]butil] pirolidin-1-karboksilat (210 mg, 29%). ESI-MS m/z izračunato 426,23007, pronađeno 427,26 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,73 minuta (LC metoda B).
Korak 2: terc-Butil 4-[4-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-karbonil]sulfamoil]-3-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1739]
[1740] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (278 mg, 0,7399 mmol) i karbonil diimidazol (120 mg, 0,7401 mmol) su spojeni u tetrahidrofuranu (6 mL) i mešani 90 minuta na 50 °C. Zatim su dodati rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-[(6-sulfamoil-3-piridil)amino]butil]pirolidin-1-karboksilat (210 mg, 0,4923 mmol) i 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (190 mg, 1,248 mmol) u tetrahidrofuranu (3 mL). Reakcija je zagrevana na 50 °C tokom noći. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana vodom. Organska faza je osušena nad natrijum sulfatom, filtrirana i uparena nakon čega je prečišćena preparativno reverznom fazom HPLC (C18, 1% do 99% acetonitrila u vodi sa modifikatorom hlorovodonične kiseline kako bi se dobio terc-butil 4-[4-[[6-[[2-hloro-6-[3 - [2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3-piridil]amino]butil]-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (264,4 mg, 68%). ESI-MS m/z izračunato 783,27924, pronađeno 784,39 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,91 minuta (LC metoda A).
Korak 3: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,22-pentaazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(22),5(10),6,8,20,23-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 123)
[1741]
terc-Butil 4-[4-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3-piridil]amino]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (260 mg, 0,3315 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (5 mL) i rastvoru je dodata hlorovodonična kiselina (2,5 mL 4 M u dioksanu, 10,00 mmol), i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom i dobijen intermedijer je u bočici zapremine 5 mL spojen sa kalijum karbonatom (230 mg, 1,664 mmol), cezijum fluoridom (80 mg, 0,5266 mmol), 3 Å molekularnim sitama (300 mg) i dimetil sulfoksidom (3 mL) nakon čega je pročišćeno azotom i mešano na 150 °C tokom noći. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, filtrirana i prečišćena preparativnom HPLC reverzne faze (C18, 1% do 99% acetonitrila u vodi sa modifikatorom hlorovodonične kiseline) kako bi se dobio 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,19,22-pentaazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(22),5(10),6,8,20,23-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 123) (8,7 mg, 4%). ESI-MS m/z izračunato 647,2502, pronađeno 648,34 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,2 minuta (LC metoda B).
Primer 150: Pripremanje 21,21-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi}-1R-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetra ciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 134) i 21,21-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 135)
[1742]
Korak 1: 21,21-Dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 134) i 21,21-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 135)
[1743]
[1744] Racemski 21,21-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (100 mg, 0,1592 mmol) je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji (ChiralPak AS-H (250 X 10 mm), 5 uM kolona; mobilna faza = 34% acetonitril/metanol (90:10, bez modifikatora), 66% ugljen dioksid, 10 mL/min; koncentracija 24 mg/mL u acetonitril/metanol/dimetil sulfoksidu (80:10:10; bez modifikatora); zapremina ubrizgavanja 70 uL, 100 bara). Prvi enantiomer za eluiranje je bio 21,21-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 134) (24,1 mg, 49%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 621,2345, pronađeno 622,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,16 minuta (LC metoda E). Drugi enantiomer za eluiranje je bio 21,21-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo [17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 135) (25,4 mg, 51%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 621,2345, pronađeno 622,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,16 minuta (LC metoda E).
Primer 151: Pripremanje 12,12,18-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 138) i 12,12,18-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 139)
[1745]
Korak 1: 12,12,18-Trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 138) i 12,12,18-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 139)
[1746]
[1747] Racemski 12,12,18-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (29 mg) je podvrgnut hiralnoj separaciji SFC hromatografijom korišćenjem Phenomenex LUX-4 (250 X 10 mm) kolone, 5um veličina čestice sa 22% metanola (0,1% trifluoroacetatna kiselina), 78% ugljen dioksid mobilna faza pri 10 mL/min tokom 6,0 minuta (zapremina ubrizgavanja = 70 uL -24 mg/mL u metanol:dimetil sulfoksidu (85:15)) dajući kao prvi enantiomer za eluiranje, 12,12,18-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 138) (7,1 mg, 49%); ESI-MS m/z izračunato 647,2502, pronađeno 648,34 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,38 minuta (LC metoda B) i kao drugi enantiomer za eluiranje, 12,12,18-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 139) (9,4 mg, 55%); ESI-MS m/z izračunato 647,2502, pronađeno 648,42 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,38 minuta (LC metoda B).
Primer 152: Pripremanje 12,12,18-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,20-pentaazatetraciklo [17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 140)
[1748]
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[3-[metil-(5-sulfamoil-2-piridil)amino]propil] pirolidin-1-karboksilat
[1749]
[1750] U bočicu zapremine 20 mL napunjenu sa terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(metilamino)propil] pirolidin-1-karboksilatom (350 mg, 1,294 mmol) su dodati 6-hloropiridin-3-sulfonamid (261 mg, 1,355 mmol), kalijum karbonat (256 mg, 1,852 mmol) i dimetil sulfoksid (4 mL). Prostor iznad je pročišćen azotom, bočica poklopljena i reakciona smeša je mešana na 120 °C tokom 18 sati. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, razblažena etil acetatom (~40 mL) i sirova smeša je isprana vodom (10 mL), slanim rastvorom (5 mL) i organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan in vacuo. Kolonskom hromatografijom (silika, plitki gradijent od 100% heksana do 100% etil acetata) je dobijen terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[metil-(5-sulfamoil-2-piridil)amino]propil] pirolidin-1-karboksilat (109 mg, 20%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 426,23007, pronađeno 427,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,49 minuta (LC metoda B).
Korak 2: terc-Butil 4-[3-[[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]-metil-amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1751]
[1752] U bočicu zapremine 20 mL napunjenu sa 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilnom kiselinom (106 mg, 0,2821 mmol) su dodati karbonil diimidazol (47 mg, 0,2899 mmol) i tetrahidrofuran (2 mL). Bočica je poklopljena i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. U ovoj tački je dodat terc-butil-2,2-dimetil-4-[3-[metil-(5-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (109 mg, 0,2555 mmol) u tetrahidrofuranu (2 mL) a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (60 mL, 0,4012 mmol). Reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati a zatim ugašena vodom (~4 mL). Dodata je vodena limunska kiselina (~ 4 mL, 1 M) i sirova smeša je ekstraktovana etil acetatom (3 x 10 mL). Spojeni organski ekstrakti su osušeni nad magnezijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani in vacuo. Kolonskom hromatografijom (silika, 100% heksani do 100% etil acetat gradijent) je dobijen terc-butil 4-[3-[[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]-metil-amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (87 mg, 43%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 783,27924, pronađeno 784,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,42 minuta (LC metoda B).
Korak 3: 2-Hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil-metil-amino]-3-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[1753]
[1754] U bočicu napunjenu sa terc-butil 4-[3-[[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]-metil-amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (87 mg, 0,1109 mmol) je dodat dihlorometan (5 mL) a zatim hlorovodonična kiselina (1 mL 4 M, 4,000 mmol) u dioksanu. Bočica je zapečaćena i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. Rastvarač je uklonjen in vacuo čime je dobijen sirov2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil-metil-amino]-3-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (75 mg, 99%) kao čvrsta supstanca bledo žute boje, koja je korišćena bez daljeg prečišćavanja. ESI-MS m/z izračunato 683,2268, pronađeno 684,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,61 minuta (LC metoda B).
Korak 4: 12,12,18-Trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,20-pentaazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 140)
[1755]
[1756] Bočica opremljena mešalicom je napunjena kalijum karbonatom (140 mg, 1,013 mmol) i CsF (131 mg, 0,8624 mmol). Dodat je rastvor 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil-metil-amino]-3-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (70 mg, 0,1023 mmol) u dimetil sulfoksidu (10 mL), bočica zapečaćena, i reakciona smeša je mešana na 200 °C tokom sat i po vremena u mikrotalasnom reaktoru. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, čvrste supstance su isfiltrirane eluentom etil acetata. Filtrat je razblažen etil acetatom (∼60 mL), ispran sa 1.0 M vodene limunske kiseline (10 mL) i slanim rastvorom (5 mL), i organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan in vacuo. Kolonskom hromatografijom (silika, 0% do 5% metanola u gradijentu dihlorometana) je dobijen 12,12,18-trimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,20-pentaazatetraciklo[17.2.2.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 140) (9 mg, 12%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 647,2502, pronađeno 648,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,21 minuta (LC metoda B).
Primer 153: Pripremanje 4-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 141)
Korak 1: terc-Butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil] pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1758]
[1759] 2-Hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (107,6 mg, 0,2975 mmol) karbonil diimidazol (57,89 mg, 0,3570 mmol) su spojeni u tetrahidrofuranu (2 mL) i mešani 90 minuta na 50 °C. Zatim je dodat tercbutil 2,2-dimetil-4-[3-(3-sulfamoilpirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (115 mg, 0,2975 mmol) a nakog toga 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (67,94 mg, 66,74 uL, 0,4463 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana rastvorom zasićenog amonijum hlorida, pa slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a nakon toga prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana 100% etil acetata kako bi se dobio terc-butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi) pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (145 mg, 67%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 9,75 (s, 1H), 8,30 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,27 - 8,20 (m, 1H), 7,75 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,48 (t, J = 3,1 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 5,97 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,43 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 4,20 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 3,64 (dt, J = 42,1, 9,1 Hz, 1H), 2,91 - 2,75 (m, 1H), 2,07 (s, 1H), 1,97 (q, J = 6,8 Hz, 2H), 1,91 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 1,84 (dd, J = 12,1, 5,9 Hz, 1H), 1,69 - 1,54 (m, 4H), 1,43 (d, J = 4,6 Hz, 11H), 1,37 - 1,22 (m, 6H), 0,67 (qt, J = 8,4, 5,1 Hz, 2H), 0,50 - 0,38 (m, 4H), 0,32 (tt, J = 9,0, 6,8 Hz, 1H), 0,20 (dtd, J = 9,5, 4,9, 3,6 Hz, 2H), 0,14 - 0,06 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 729,30756, pronađeno 730,37 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,91 minuta (LC metoda A).
Korak 2: 4-[3-(3,3-Diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 141)
[1760]
[1761] Rastvor terc-butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi) pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (145 mg, 0,1985 mmol) u dihlorometanu (1 mL) i trifluoroacetatnoj kiselini (150 uL, 1,960 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi 4 sata. Rastvarači su uklonjeni i ostatak je rastvoren u etil acetatu. Isprano sa 2 mL rastvora zasićenog natrijum bikarbonata, organski sloj je prikupljen i rastvarač je uklonjen nakon čega je ostatak sušen pod vakuumom. Pomenuti ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (3 mL) i dodata su 3 Å molekularna sita, i reakciona smeša je mešana 10 minuta. Nakon toga su dodati cezijum fluorid (94 mg, 0,6188 mmol) i kalijum karbonat (86 mg, 0,6223 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 150 °C tokom noći. Reakciona smeša je filtrirana kroz Whatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišćen metodom reverzne faze HPLC-MS korišćenjem dualnog gradijenta od 50% - 99% mobilna faza B tokom 15,0 minuta (mobilna faza A = voda (0,05% hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril) kako bi se dobio 4-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02, 7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 141) (26 mg, 22%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,62 (s, 1H), 8,17 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,67 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,07 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,87 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,41 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 4,35 (dt, J = 13,3, 3,4 Hz, 1H), 4,00 - 3,87 (m, 1H), 2,75 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 2,25 - 1,87 (m, 3H), 1,80 - 1,71 (m, 1H), 1,62 (s, 4H), 1,59 (s, 3H), 1,55 (s, 3H), 1,47 (t, J = 12,3 Hz, 1H), 0,80 (dd, J = 12,5, 6,7 Hz, 1H), 0,73 - 0,60 (m, 2H), 0,52 - 0,38 (m, 4H), 0,38 - 0,28 (m, 1H), 0,24 - 0,15 (m, 2H), 0,11 (dddd, J = 8,6, 7,2, 3,9, 2,6 Hz, 2H). ESI-MS m/z izračunato 593,27844, pronađeno 594,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,82 minuta (LC metoda G).
Primer 154: Pripremanje 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,21-tetraazatetraciklo [18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 142)
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-4-(4-oksobutil)pirolidin-1-karboksilat
[1763]
[1764] Dess-Martin periodinan (9,59 g, 22,61 mmol) je dodat mešanom rastvoru terc-butil 4-(4-hidroksibutil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (5,2 g, 19,16 mmol) u anhidrovanom CH2Cl2(35 mL) na 0 °C (kada sa ledenom vodom) pod azotom. Nakon 15 minuta, reakcija je ostavljena da se zagreje na temperaturu okruženja i mešanje je nastavljeno tokom dodatna 3 sata. Reakcija je razblažena etrom (200 mL) i polako je dodat zasićeni vodeni natrijum bikarbonat (100 mL) (za ublažavanje evolucije gasa ugljen dioksida). Zatim je dodato 10% natrijum tiosulfata (50 mL) i smeša je mešana na temperaturi okruženja 30 minuta. Slojevi nisu jasno razdvojeni pa je smeša filtrirana preko levka za filtriranje. Slojevi su razdvojeni od filtrata i vodeni sloj je ekstraktovan etrom (2 x 100 mL). Spojene organske materije su isprane slanim rastvorom (100 mL), osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio sirov materijal. Sirov materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu (5% - 40% etil acetata u gradijentu heksana) kako bi se proizveo željeni terc-butil 2,2-dimetil-4-(4-oksobutil)pirolidin-1-karboksilat (4,39 g, 85%) kao bistar viskozni materijal.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 4,48 (t, J = 5,5 Hz, 1H), 3,64 (h, J = 4,8 Hz, 1H), 2,86 (td, J = 10,6, 5,2 Hz, 1H), 2,30 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 2,22 -2,06 (m, 1H), 1,95 (ddt, J = 17,2, 11,6, 5,8 Hz, 1H), 1,67 - 1,53 (m, 2H), 1,53 - 1,48 (m, 2H), 1,47 (s, 4H), 1,43 (s, 5H), 1,40 (s, 3H), 1,39 - 1,34 (m, 2H), 1,31 (s, 3H). ESI-MS m/z izračunato 269,1991, pronađeno 270,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,7 minuta (LC metoda B).
Korak 2: terc-Butil 2,2-dimetil-4-pent-4-inil-pirolidin-1-karboksilat
[1765]
[1766] Mešanom rastvoru terc-butil 2,2-dimetil-4-(4-oksobutil)pirolidin-1-karboksilat (3,0 g, 11,14 mmol) u anhidrovanom metanolu (40 mL) na 0 °C (kada sa ledenom vodomn) je dodat kalijum karbonat (3,39 g, 24,53 mmol) a nakon toga ukapavanjem i 1-diazo-1-dimetoksifosforil-propan-2-on (2,1 mL, 13,99 mmol). Nakon završetka dodavanja, smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i mešana ukupno 16 sati (reakcija je kompletirana za 4 sata). Rastvarač je uklonjen pod redukovanim pritiskom i ostatak je rastvoren u etil acetatu (50 mL) i ispran slanim rastvorom (20 mL). Vodeni sloj je ponovo ekstraktovan (2 x 20 mL) etil acetatom i organski slojevi su spojeni, isprani slanim rastvorom (20 mL), osušeni (nad anhidrovanim natrijum sulfatom), filtrirani i koncentrovani u bistro ulje koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu (0% -20% etil acetata u gradijentu heksana) čime je dobijen željeni terc-butil 2,2-dimetil-4-pent-4-inil-pirolidin-1-karboksilat (2,29 g, 77%) kao bistro ulje.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 3,72 - 3,57 (m, 1H), 2,86 (t, J = 10,7 Hz, 1H), 2,27 - 2,07 (m, 4H), 1,95 (ddd, J = 16,7, 12,2, 6,1 Hz, 1H), 1,58 - 1,48 (m, 4H), 1,47 (s, 5H), 1,43 (s, 5H), 1,41 (s, 2H), 1,31 (s, 3H). ESI-MS m/z izračunato 265,2042, pronađeno 266,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,77 minuta (LC metoda B).
Korak 3: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[5-(5-sulfamoil-2-piridil)pent-4-inil]pirolidin-1-karboksilat
[1767]
[1768] Suva bočica zapremine 20 mL je napunjena sa terc-butil 2,2-dimetil-4-pent-4-inil-pirolidin-1-karboksilatom (700 mg, 2,638 mmol), 6-hloropiridin-3-sulfonamidom (900 mg, 4,672 mmol), jodobakrom (51 mg, 0,2678 mmol), bis(trifenilfosfin)paladijum hloridom (112 mg, 0,1596 mmol) i anhidrovanim N,N-dimetilformamidom (6 mL), tim redosledom. Zatim je azot propuštan kroz mešajuću tamnu smešu tokom 3 minuta nakon čega je dodat diizopropilamin (700 uL, 4,995 mmol) i bočica je poklopljena pod azotom. Reakcija je mešana na 52 °C tokom 11 sati nakon čega je ohlađena na temperaturu okruženja, sipana u vodu (100 mL) i ekstraktovana etil acetatom (3 x 50 mL). Spojene organske materije su sukcesivno isprane vodom (2 x 50 mL) i slanim rastvorom (30 mL), osušene (nad anhidrovanim natrijum sulfatom), filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom u ulje narandžaste boje koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 15% - 50% etil acetata u heksanima čime je dobijen željeni terc-butil 2,2-dimetil-4-[5-(5-sulfamoil-2-piridil)pent-4-inil]pirolidin-1-karboksilat (699 mg, 63%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,91 (dd, J = 2,4, 0,9 Hz, 1H), 8,20 (dd, J = 8,3, 2,4 Hz, 1H), 7,60 (dd, J = 8,2, 0,9 Hz, 1H), 3,71 - 3,63 (m, 1H), 2,90 (t, J = 10,7 Hz, 1H), 2,53 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,28 - 2,14 (m, 1H), 2,03 - 1,92 (m, 1H), 1,74 - 1,62 (m, 2H), 1,62 - 1,50 (m, 3H), 1,47 (s, 5H), 1,43 (s, 5H), 1,42 (s, 2H), 1,32 (s, 3H). ESI-MS m/z izračunato 421,20352, pronađeno 422,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,74 minuta (LC metoda B). Koral 4: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[5-(5-sulfamoil-2-piridil)pentil]pirolidin-1-karboksilat
[1769]
[1770] Azot je propušten kroz mešajući rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[5-(5-sulfamoil-2-piridil)pent-4-inil]pirolidin-1-karboksilat (698 mg, 1,656 mmol) u etanolu (20 mL). Zatim je pod azotom dodat oksid platine (76 mg, 0,3347 mmol) i reakcija je mešana pod vodonikom (balon) na temperaturi okruženja. Nakon 2 sata, dodato je još oksida platine (110 mg, 0,4844 mmol) i reakcija je mešana još 3 sata. Nakon toga reakcija je pročišćena azotom, dodato je 5 g celita i mešana je 20 minuta. Heterogena smeša je filtrirana nad jastučetom celita. Filtrat je koncentrovan pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio sirov materijal koji je prečišćen hromatografijom na silika gelu (5% - 50% etil acetata u gradijentu heksana) kako bi se dobio tercbutil 2,2-dimetil-4-[5-(5-sulfamoil-2-piridil)pentil]pirolidin-1-karboksilat (655 mg, 93%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 8,90 (dd, J = 2,4, 0,8 Hz, 1H), 8,17 (dd, J = 8,2, 2,4 Hz, 1H), 7,47 (dd, J = 8,2, 0,8 Hz, 1H), 3,66 - 3,58 (m, 1H), 2,91 - 2,80 (m, 3H), 2,19 - 2,05 (m, 1H), 1,98 - 1,86 (m, 1H), 1,75 (p, J = 7,4 Hz, 2H), 1,47 (s, 5H), 1,43 (s, 4H), 1,42 (s, 2H), 1,40 (s, 2H), 1,36 (s, 6H), 1,30 (s, 3H). ESI-MS m/z izračunato 425,23483, pronađeno 426,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,73 minuta (LC metoda B).
Korak 5: terc-Butil 4-[5-[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]pentil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1771]
[1772] Rastvoru 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]irazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (440 mg, 1,171 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (6 mL) je pod azotom dodat karbonil diimidazol (195 mg, 1,203 mmol) na temperaturi okruženja. Smeša je mešana na toj temperaturi 3 sata kako bi se formirala aktivirana kiselina. Rastvoru aktivirane kiseline je dodat rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[5-(5-sulfamoil-2-piridil)pentil]pirolidin-1-karboksilat (500 mg, 1,175 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (4 mL) a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (400 uL, 2,675 mmol) i smeša je mešana na temperaturi okruženja 15 sati. Isparljive supstance su uklonjene pod redukovanim pritiskom i gusti ostatak je podeljen na vodu (15 mL) i etil acetat (30 mL). Smeša je zakiseljena vodenom 4 M hlorovodoničnom kiselinom na pH ~ 3-4, i slojevi su razdvojeni. Organska faza je isprana slanim rastvorom (20 mL) i spojeni vodeni slojevi su ponovo ekstraktovani etil acetatom (30 mL). Spojene organske materije su osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio sirov materijal. Sirov proizvod je podvrgnut hromatografiji (kolona silika gela, eluiranje sa 0% - 80% etil acetata u gradijentu heksana) kako bi se dobio terc-butil 4-[5-[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridine-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]pentil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (750 mg, 82%) kao pena bele boje.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 9,02 (dd, J = 2,3, 0,8 Hz, 1H), 8,69 (s, 1H), 8,32 (d, J = 1,0 Hz, 1H), 8,32 - 8,29 (m, 1H), 7,98 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,49 (d, J = 1,3 Hz, 1H), 7,45 (dd, J = 8,2, 0,8 Hz, 1H), 5,97 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,43 -4,33 (m, 2H), 3,67 - 3,56 (m, 1H), 2,86 (t, J = 7,7 Hz, 2H), 2,83 (d, J = 11,1 Hz, 1H), 2,10 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 1,92 (td, J = 13,9, 13,4, 6,0 Hz, 1H), 1,80 - 1,69 (m, 2H), 1,46 (s, 5H), 1,42 (s, 4H), 1,41 (s, 2H), 1,39 (s, 3H), 1,36 (s, 6H), 1,29 (s, 3H), 1,03 -0,96 (m, 2H), 0,82 (tt, J = 5,4, 2,9 Hz, 2H). ESI-MS m/z izračunato 782,284, pronađeno 783,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,42 minuta (LC metoda B).
Korak 6: 2-Hloro-N-[[6-[5-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)pentil]-3-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (so dihidrohlorida)
[1773]
[1774] Rastvoru terc-butil 4-[5-[5-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]pentil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (750 mg, 0,9575 mmol) u anhidrovanom CH2Cl2(15 mL) je pod azotom dodata hlorovodonična kiselina (6,0 mL 4.0 M u dioksanu, 24,00 mmol) na 0 °C (kada sa ledenom vodom). Nakon 5 minuta, kada je uklonjena i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi još 20 minuta. Reakcija je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom. Ostatak je stavljen u etil acetat (30 mL) i pH je prilagođena na ~ 5 dodavanjem rastvora zasićenog vodenog natrijum bikarbonata. Slojevi su razdvojeni i vodeni deo je ponovo ekstraktovan etil acetatom (2 x 20 mL). Spojene organske materije su isprane slanim rastvorom, osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom do suvog stanja čime je dobijen 2-hloro-N-[[6-[5-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)pentil]-3-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (so dihidrohlorida) (720 mg, 99%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 682,23157, pronađeno 683,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,65 minuta (LC metoda B).
Korak 7: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,21-tetraazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 142)
[1775]
[1776] Bočica zapremine 20 mL je napunjena sa 2-hloro-N-[[6-[5-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)pentil]-3-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamidom (so dihidrohlorida) (715 mg, 0,9456 mmol), kalijum karbonatom (650 mg, 4,703 mmol), cezijum fluoridom (215 mg, 1,415 mmol) i anhidrovanim dimetil sulfoksidom (15 mL). Bočica je pročišćena azotom tokom 2 minuta, poklopljena i mešano na 165 °C tokom 24 sata. Reakcija je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja nakon čega je razblažena etil acetatom (50 mL) i ledenom vodom (50 mL). Slojevi su razdvojeni i organska faza je isprana rastvorom zasićenog vodenog natrijum bikarbonata (20 mL). Vodeni slojevi su ekstraktovani etil acetatom (50 mL). Spojene organske materije su isprane slanim rastvorom (30 mL), osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane do suvog stanja pod redukovanim pritiskom. Sirova supstanca je prečišćena hromatografijom na silika gelu (0% - 55% etil acetata u gradijentu heksana) a zatim drugom kolonom silika gela (0% -10% metanola u dihlorometanu) čime je dobijen 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,21-tetraazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 142) (221 mg, 36%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,56 (s, 1H), 9,02 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,93 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,63 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,95 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,12 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,32 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 3,08 - 2,93 (m, 1H), 2,91 - 2,78 (m, 1H), 2,49 - 2,41 (m, 1H), 2,08 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,02 - 1,87 (m, 3H), 1,85 - 1,66 (m, 2H), 1,55 (s, 4H), 1,49 (s, 3H), 1,43 (t, J = 11,9 Hz, 1H), 1,33 - 1,22 (m, 2H), 0,96 (q, J = 4,8, 4,2 Hz, 2H), 0,92 - 0,87 (m, 2H), 0,85 (s, 1H), 0,62 (s, 1H), -0,31 (s, 1H). ESI-MS m/z izračunato 646,2549, pronađeno 647,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,94 minuta (LC metoda B).
Primer 155: Pripremanje 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,22-tetraazatetraciklo [18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 143)
[1777]
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[5-(6-sulfamoil-3-piridil)pent-4-inil]pirolidin-1-karboksilat
[1778]
[1779] Suva bočica zapremine 20 mL je napunjena sa terc-butil 2,2-dimetil-4-pent-4-inil-pirolidin-1-karboksilatom (600 mg, 2,261 mmol), 5-bromopiridin-2-sulfonamidom (640 mg, 2,700 mmol), bakar (I) jodidom (44 mg, 0,2310 mmol), biz(trifenilfosfin)paladijum (II) dihloridom (96 mg, 0,1368 mmol) i anhidrovanim N,N-dimetilformamidom (6 mL), tim redosledom. Zatim je propuštan azot kroz mešajuću tamnu smešu tokom 3 minuta nakon čega je dodat diizopropilamin (450 uL, 3,211 mmol) i bočica je poklopljena pod azotom. Reakcija je mešana na 52 °C tokom 12 sati nakon čega je ohlađena na temperaturu okruženja, sipana u vodu (80 mL) i ekstraktovana etil acetatom (3 x 50 mL). Spojene organske materije su sukcesivno isprane vodom (2 x 50 mL) i slanim rastvorom (30 mL), osušene (nad anhidrovanim natrijum sulfatom), filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom u ulje narandžaste boje koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 15% - 50% etil acetata u heksanima kako bi se dobio željeni terc-butil 2,2-dimetil-4-[5-(6-sulfamoil-3-piridil)pent-4-inil]pirolidin-1-karboksilat (889 mg, 93%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 421,20352, pronađeno 422,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,72 minuta (LC metoda A).
Korak 2: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[5-(6-sulfamoil-3-piridil)pentil]pirolidin-1-karboksilat
[1780]
[1781] Azot gas je propušten kroz mešajući rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[5-(6-sulfamoil-3-piridil)pent-4-inil]pirolidin-1-karboksilat (883 mg, 2,095 mmol) u etanolu (20 mL). Zatim je pod azotom dodat oksid platine (IV) (240 mg, 1,057 mmol) i reakcija je mešana pod vodonikom (balon) na temperaturi okruženja. Nakon 2 i po sata mešanja, reakcija je pročišćena azotom, dodato je 5 g celita i mešana tokom 20 minuta. Heterogena smeša je filtrirana nad jastučetom celita. Tamni filtrat je koncentrovan pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u metilen hlorid i ponovo filtriran nad jastučetom silika gela kako bi se uklonio rezidualni platinasto crni materijal. Nakon koncentrovanja pod redukovanim pritiskom, sirova supstanca je prečišćena hromatografijom na silika gelu (5% - 50% etil acetata u heksanima) kako bi se dobio željeni terc-butil 2,2-dimetil-4-[5-(6-sulfamoil-3-piridil)pentil]pirolidin-1-karboksilat (882 mg, 99%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 425,23483, pronađeno 426,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,67 minuta (LC metoda B).
Korak 3: terc-Butil 4-[5-[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3-piridil]pentil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1783] Rastvoru 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (773 mg, 2,057 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (8 mL) je pod azotom dodat karbonil diimidazol (340 mg, 2,097 mmol) na temperaturi okruženja. Smeša je mešana na 45 °C tokom 3 sata kako bi se formirala aktivirana kiselina. Rastvoru aktivirane kiseline je dodat rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[5-(6-sulfamoil-3-piridil)pentil]pirolidin-1-karboksilat (875 mg, 2,056 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (3 mL) a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (650 uL, 4,347 mmol) i smeša je mešana na temperaturi okruženja 48 sati. Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom i gusti ostatak je podeljen na vodu (15 mL) i etil acetat (30 mL). Smeša je zakiseljena vodenom 4 M hlorovodoničnom kiselinom na pH ~ 3-4 i slojevi su razdvojeni. Faza organskog sloja je isprana slanim rastvorom (20 mL) i spojeni vodeni slojevi su ponovo ekstraktovani etil acetatom (30 mL). Spojene organske materije su osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio sirov materijal. Sirov proizvod je podvrgnut hromatografiji (kolona silika gela, eluiranje sa 0% - 80% etil acetata u gradijentu heksana) kako bi se dobio terc-butil 4-[5-[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3-piridil]pentil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (854 mg, 53%) kao pena bele boje. ESI-MS m/z izračunato 782,284, pronađeno 783,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,2 minuta (LC metoda B).
Korak 4: 2-Hloro-N-[[5-[5-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)pentil]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (so hidrohlorida)
[1784]
[1785] Mešanom rastvoru terc-butil 4-[5-[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-3-piridil]pentil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (850 mg, 1,085 mmol) u anhidrovanom metilen hloridu (10 mL) je pod azotom dodata hlorovodonična kiselina u dioksanu (6,8 mL 4.0 M, 27,20 mmol), na 0 °C (kada sa ledenom vodom). Nakon 10 minuta, kada je uklonjena i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi 30 minuta. Nakon toga, isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u etil acetat (30 mL) i ispran zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom (20 mL). Vodeni sloj je ponovo ekstraktovan etil acetatom (25 mL). Spojene organske supstance su isprane slanim rastvorom, osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane do suvog stanja pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio sirov 2-hloro-N-[[5-[5-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)pentil]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid(so hidrohlorida) (781 mg, 100%) kao pena bledo žute boje. ESI-MS m/z izračunato 682,23157, pronađeno 683,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,71 minuta (LC metoda B).
Korak 5: 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,22-tetraazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 143)
[1786]
[1787] Bočica zapremine 20 mL je napunjena sa 2-hloro-N-[[5-[5-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)pentil]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-illpiridin-3-karboksamidom (so hidrohlorida) (0,812 g, 1,128 mmol), kalijum karbonatom (1,11 g, 8,032 mmol), cezijum fluoridom (0,258 g, 1,698 mmol) i anhidrovanim dimetil sulfoksidom (25 mL). Bočica je pročišćena mlazom azota tokom 2 minuta, poklopljena i mešana na 165 °C tokom 17 sati. Reakcija je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja i smeša je razblažena etil acetatom (30 mL) i isprana rastvorom zasićenog vodenog natrijum bikarbonata a zatim slanim rastvorom. Organske supstance su razdvojene, osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirane i uparene pod redukovanim pritiskom. Nakon toga je hromatografijom na silika gelu (0% - 55% etil acetata u gradijentu heksana) a zatim još jednom kolonom silika gela (0% - 10% metanola u dihlorometanu) dobijen 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,22-tetraazatetraciklo[18.2.2.111,14.05,10]pentakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 143) (80 mg, 11%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,59 (s, 1H), 8,69 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,14 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,98 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,91 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,10 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,32 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 3,01 - 2,87 (m, 1H), 2,74 -2,62 (m, 1H), 2,47 - 2,36 (m, 1H), 2,08 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 2,03 - 1,82 (m, 3H), 1,80 - 1,64 (m, 2H), 1,53 (s, 3H), 1,50 (s, 3H), 1,40 (t, J = 12,2 Hz, 1H), 1,33 - 1,27 (m, 1H), 1,23 (s, 2H), 0,98 - 0,92 (m, 2H), 0,92 - 0,86 (m, 2H), 0,82 (d, J = 12,6 Hz, 1H), 0,73 - 0,59 (m, 1H), 0,08 - -0,03 (m, 1H). ESI-MS m/z izračunato 646,2549, pronađeno 647,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,96 minuta (LC metoda B).
Primer 156: Pripremanje 13,20,20-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaaza tetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (Jedinjenje 144)
Korak 1: 1-[(4-Metoksifenil)metil]-5-metil-3-nitro-pirazol
[1789]
[1790] Boca zapremine 100 mL sa okruglim dnom opremljena refluks kondenzatorom je napunjena sa 1-(bromometil)-4-metoksibenzenom (2,7 g, 13,43 mmol), acetonitrilom (20 mL), 5-metil-3-nitro-1H-pirazolom (1,55 g, 12,20 mmol) i kalijum karbonatom (2,53 g, 18,31 mmol). Smeša je mešana na 80 °C tokom 6 sati a nakog toga na sobnoj temperaturi tokom 3 dana pre nego što je koncentrovana pod redukovanim pritiskom. Ostatak je suspendovan u dihlorometanu (80 mL). Nakon 10 minuta mešanja, smeša je filtrirana i filtrat je pomešan sa silika gelom pre koncentrovanja. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 0% - 30% etil acetata u heptanima kako bi se dobio 1-[(4-metoksifenil)metil]-5-metil-3-
nitro-pirazol (2,4 g, 80%) kao čvrsta supstanca žute boje.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 2,25 (s, 3H), 3,79 (s, 3H), 5,28 (s, 2H),
6,67 (s, 1H), 6,87 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,14 (d, J = 8,7 Hz, 2H). ESI-MS m/z 270,1 (M+Na)<+>; Vreme zadržavanja: 1,88 minuta (LC metoda I).
Korak 2: 1-[(4-Metoksifenil)metil]-5-metil-pirazol-3-amin
[1791]
[1792] Smeša 1-[(4-metoksifenil)metil]-5-metil-3-nitro-pirazol (2,4 g, 9,707 mmol), NH4Cl (5 g, 3,268 mL, 93,47 mmol), gvožđe (5 g, 89,53 mmol), EtOH (20 mL) i voda (4 mL) je mešana na 80 °C tokom noći. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reakciona smeša je filtrirana kroz uložak celita, isprana metanolom. Filtrat je koncentrovan i ostatak je suspendovan u vodi (50 mL) i ekstraktovan etil acetatom (80 mL). Organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni nad anhidrovanom natrijum sulfatu, filtrirani i koncentrovani pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio 1-[(4-metoksifenil)metil]-5-metil-pirazol-3-amin kao ulje crvene boje (2 g, 91% čistoće putem LCMS, 86% prinos).<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) δ 2,13 (s, 3H), 3,78 (s, 3H), 5,01 (s, 2H), 5,44 (s, 1H), 6,83 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,04 (d, J = 8,7 Hz, 2H). ESI-MS m/z izračunato 217,1215, pronađeno 218,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,21 minuta (LC metoda I).
Korak 3: 1-[(4-Metoksifenil)metil]-5-metil-pirazol-3-sulfonil hlorid
[1793]
[1794] 1-[(4-Metoksifenil)metil]-5-metil-pirazol-3-amin (20 g, 92 mmol) je rastvoren u AcOH (60 mL) i mravljoj kiselini (20 mL). Smeša je ohlađena kadom sa ledenim metanolom. Zatim je dodata hlorovodonična kiselina (15,2 mL 12 M, 182 mmol). Nakon što je unutrašnja temperatura dostigla približno -8 °C, polako je dodat rastvor natrijum nitrita (6,6 g, 96 mmol) u vodi (10 mL), održavajući unutrašnju temperaturu između -5 °C i -10 °C. Smeša je mešana na istoj temperaturi 5 minuta nakon čega je pipetama u porcijama ova smeša dodata smeši CuCl (2,74 g, 28 mmol), SO2(44 g, 343 mmol) i AcOH (60 mL) na sobnoj temperaturi (SO2rastvor u AcOH je napravljen propuštanjem gasa kroz AcOH na 0 °C). Dobijena smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu tokom sat vremena. Smeša je koncentrovana pod redukovanim pritiskom. Ostatak je pomešan sa dietil etrom (200 mL) i ledenom vodom (50 mL). Bilo je puno crnog ulja koje nije bilo rastvorljivo ni u jednoj fazi. Nakon što je smeša energično mešana 20 minuta, dva sloja su razdvojena. Organski sloj je ispran vodom (2 x 50 mL), slanim rastvorom (30 mL) i koncentrovan pod redukovanim pritiskom i konačno zajedno uparen sa toluenom (60 mL) kako bi se dobio 1-[(4-metoksifenil)metil]-5-metil-pirazol-3-sulfonil hlorid (9 g, 33%) kao ulje braon boje koje je korišćeno direktno u sledećem koraku. ESI-MS m/z izračunato 300,0335, pronađeno 323,0 (M+Na)<+>; Vreme zadržavanja: 2,05 minuta (LC metoda I).
Korak 4: 1-[(4-Metoksifenil)metil]-5-metil-pirazol-3-sulfonamid
[1795]
[1796] Rastvor 1-[(4-metoksifenil)metil]-5-metil-pirazol-3-sulfonil hlorid (586 mg, 1,9484 mmol) u dihlorometanu (4 mL) je dodat rastvoru amonijaka (15 mL 0.5 M u 1,4-dioksanu, 7,5000 mmol) ohlađenom ledenom vodom (delimično zaleđena). Nakon 30 minuta, kada za hlađenje je uklonjena i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata pre nego što je koncentrovana pod redukovanim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem 0% - 70% etil acetata u heptanima kako bi se dobio 1-[(4-metoksifenil)metil]-5-metil-pirazol-3-sulfonamid (200 mg, 36% prinos) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 281,0834, pronađeno 282,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,49 minuta (LC metoda I).
Korak 5: 5-Metil-1H-pirazol-3-sulfonamid
[1797]
[1798] Rastvor 1-[(4-metoksifenil)metil]-5-metil-pirazol-3-sulfonamid (16,3 g, 57,9 mmol) u trifluoroacetatnoj kiselini (80 mL) je mešan na 80 °C (uljana kupka) tokom noći. Smeša je koncentrovana i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem 0% - 100% etil acetata u heptanima. Frakcije koje sadrže željeni proizvod su spojene i koncentrovane. Ostatak je trituriran dihlorometanom (30 mL) kako bi se dobio 5-metil-1H-pirazol-3-sulfonamid kao svetlo žuta čvrsta supstanca (6741 mg, 69% prinos).<1>H NMR (300 MHz, dimetil sulfoksid-d6) ppm 2,25 (s, 3H), 6,32 (s, 1H), 7,28 (s, 2H), 13,11 (br. s., 1H).
Korak 6: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[3-(5-metil-3-sulfamoil-pirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat
[1799]
terc-Butil 2,2-dimetil-4-(3-metilsulfoniloksipropil)pirolidin-1-karboksilat (1,35 g, 4,024 mmol) i 5-metil-1H-pirazol-3-sulfonamid (638 mg, 3,958 mmol) praćeno sa kalijum karbonatom (1,95 g, 14,11 mmol) su rastvoreni u N,N-dimetilformamidu (41,32 mL) i mešani na 80 °C u zapečaćenom sudu zapremine 150 mL tokom 20 sati. Smeša je ohlađena, sipana u vodu (100 mL) i ekstraktovana etil acetatom (2 x 100 mL), organski slojevi su spojeni, isprani vodom (2 x 100 mL), osušeni (natrijum sulfat), filtrirani i koncentrovani. Ostatak narandžaste boje je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata kako bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(5-metil-3-sulfamoil-pirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (419 mg, 52%) kao bezbojno ulje koje se pretvorilo u čvrstu supstancu bele boje nakon sušenja pod vakuumom.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 7,31 (s, 2H), 6,36 (s, 1H), 4,05 (t, J = 6,4 Hz, 2H), 3,54 (dd, J = 18,2, 8,1 Hz, 1H), 2,77 (q, J = 10,2 Hz, 1H), 2,31 (d, J = 15,4 Hz, 3H), 2,12 (d, J = 19,6 Hz, 1H), 1,87 (td, J = 14,0, 6,4 Hz, 1H), 1,78 - 1,65 (m, 2H), 1,41 - 1,28 (m, 15H), 1,24 (s, 3H). ESI-MS m/z izračunato 400,21442, pronađeno 401,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,54 minuta (LC metoda E).
Korak 7: terc-Butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[l-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-5-metil-pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1800]
[1801] 2-Hloro-6-[3-[2-[l-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-l-il]piridin-3-karboksilna kiselina (485 mg, 1,291 mmol) i karbonil diimidazol (210 mg, 1,295 mmol) su spojeni u tetrahidrofuranu (8,0 mL) i mešani 90 minuta na sobnoj temperaturi. Nakon toga je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(5-metil-3-sulfamoil-pirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (342 mg, 0,8539 mmol) a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0] undek-7-en (325 uL, 2,173 mmol) i reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 16 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana rastvorom zasićenog vodenog natrijum bikarbonata pa zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a nakon toga prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata kako bi se dobio terc-butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-5-metil-pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (451 mg, 70%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 757,2636, pronađeno 758,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,32 minuta (LC metoda E).
Korak 8: 13,20,20-Trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 144)
[1802]
terc-Butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-5-metil-pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (451 mg, 0,5948 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (11 mL) i smeši je dodata hlorovodonična kiselina (4,5 mL 4 M u dioksanu, 18,00 mmol) i mešana je na sobnoj temperaturi 45 minuta. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom, ponovo rastvorena u etil acetatu nakon čega je dodato vodenog 2 M natrijum karbonata (5 mL) dajući pH -10. Rastvor je ekstraktovan etil acetatom (2 x 10 mL), ispran slanim rastvorom a zatim osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i uparen do suvog stanja pod redukovanim pritiskom. U bočici su spojeni dobijen materijal i kalijum karbonat (411 mg, 2,974 mmol), cezijum fluorid (136 mg, 0,8953 mmol), 3 Å molekularna sita i dimetil sulfoksid (13,5 mL), pročišćeni azotom, poklopljeni, zagrevani do 155 °C i mešani 20 sati. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i filtrirana, razblažena etil acetatom i isprana rastvorom zasićenog vodenog natrijum bikarbonata a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene, nakon čega su prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 80% etil acetata u heksanima kako bi se dobio 13,20,20-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 144) (141 mg, 38%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,68 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,69 (s, 1H), 6,09 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,30 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 4,10 - 3,94 (m, 2H), 2,82 - 2,71 (m, 1H), 2,34 (d, J = 8,9 Hz, 3H), 2,13 (dd, J = 8,7, 4,0 Hz, 1H), 2,09 - 2,02 (m, 3H), 1,96 - 1,80 (m, 3H), 1,77 (dd, J = 11,9, 5,2 Hz, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,48 (s, 3H), 1,35 (t, J = 12,3 Hz, 1H), 0,99 - 0,92 (m, 2H), 0,89 (d, J = 11,6 Hz, 2H), 0,59 - 0,39 (m, 1H). ESI-MS m/z izračunato 621,2345, pronađeno 622,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,14 minuta (LC metoda E).
Primer 157: Pripremanje 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksil-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,24-tetraazatetraciklo [18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(24),5(10),6,8,20,22-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 147)
[1803]
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-5-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)oksi]propil]pirolidin-1-karboksilat
[1804]
[1805] U bočicu zapremine 20 mL su dodati terc-butil 5-(3-hidroksipropil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (631 mg, 2,452 mmol) i anhidrovani N,N-dimetilformamid (8 mL). Rastvoru je porcijama dodato 60% NaH (196 mg, 4,900 mmol) (OPREZ: evolucija gasa) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 minuta. Nakon toga je dodat 6-fluoropiridin-2-sulfonamid (432 mg, 2,452 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Mešajućem rastvoru na sobnoj temperaturi je dodato dodatnog NaH (98 mg, 2,450 mmol) i reakciona bočica je poklopljena. Dobijena smeša je mešana na 100 °C tokom 14 sati. Reakcioni rastvor je razblažen etil acetatom a zatim sipan u vodenu 1 N limunsku kiselinu i ekstraktovan etil acetatom (2 puta). Spojene organske frakcije su osušene (natrijum sulfat), filtrirane i koncentrovane u bistro ulje koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu korišćenjem mobilne faze gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata čime je dobijen tercbutil 2,2-dimetil-5-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)oksi]propil]pirolidin-1-karboksilat (350 mg, 35%). ESI-MS m/z izračunato 413,19846, pronađeno 414,31 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,69 minuta (LC metoda A).
Korak 2: terc-Butil 5-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]oksi]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1806]
[1807] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (387 mg, 1,030 mmol) i karbonil diimidazol (193 mg, 1,190 mmol) su spojeni u anhidrovanom tetrahidrofuranu (8 mL) i mešani 75 minuta na 50 °C. Zatim su dodati tetrahidrofuranski rastvor (7 mL) terc-butil 2,2-dimetil-5-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)oksi]propil]pirolidin-1-karboksilat (328 mg, 0,7932 mmol) i 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (300 uL, 2,006 mmol). Reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 4 sata. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa rastvorom 1 M limunske kiseline a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a nakon toga prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 75% etil acetata u heksanima kako bi se dobio terc-butil 5-[3-[[6-[[2hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]oksi]propil]-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (409 mg, 67%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 770,2476, pronađeno 771,37 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,92 minuta (LC metoda A).
Korak 3: 12,12-Dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,24-tetraazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(24),5(10),6,8,20,22-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 147)
[1808]
terc-Butil 5-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]oksi]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (408 mg, 0,5290 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (7 mL) i smeši je dodata hlorovodonična kiselina (4 mL 4 M u dioksanu, 16,00 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom i dobijen materijal je u bočici spojen sa kalijum karbonatom (440 mg, 3,184 mmol), cezijum fluoridom (130 mg, 0,8558 mmol), 3 Å molekularnim sitama i dimetil sulfoksidom (8 mL), pročišćeno azotom, poklopljeno, zagrevano do 140 °C i mešano 16 sati. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, filtrirana a zatim prečišćena reverznom fazom preparativne hromatografije korišćenjem C18kolone (30% - 99% acetonitrila u vodi 5 mM hlorovodonične kiseline) kako bi se dobio 12,12-dimetil-8-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-19-oksa-2λ<6>-tia-3,9,11,24-tetraazatetraciklo [18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(24),5(10),6,8,20,22-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 147) (17 mg, 5%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 634,2185, pronađeno 635,29 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,0 minuta (LC metoda B).
Primer 158: Pripremanje 13,20,20-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetra ciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 150) i 13,20,20-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 151)
[1809]
Korak 1: 13,20,20-Trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 150) i 13,20,20-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 151)
[1810]
[1811] Racemski 13,20,20-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropilletoksil-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (114 mg, 0,1815 mmol) je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji. Primenjen je sledeći SFC protokol: ChiralPak AS-H (150 X 21,2mm), 5um; 35 °C mobilna faza: 25% acetonitril:metanol (90:10; bez modifikatora), 75% ugljen dioksida pri 70 mL/min tokom 8,0 minuta (zapremina ubrizgavanja = 70 uL -32 mg/mL u acetonitril:metanol (90:10) dajući kao prvi enantiomer za eluiranje, 13,20,20-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 150) (51,27 mg, 91%) kao čvrstu supstancu bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,66 (s, 1H), 8,19 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,69 (s, 1H), 6,09 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,31 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 4,10 - 3,93 (m, 2H), 2,85 - 2,70 (m, 1H), 2,35 (s, 3H), 2,12 (d, J = 5,6 Hz, 1H), 2,07 (t, J = 7,1 Hz, 3H), 1,97 - 1,81 (m, 3H), 1,77 (dd, J = 11,8, 5,4 Hz, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,48 (s, 3H), 1,35 (t, J = 12,3 Hz, 1H), 0,99 - 0,92 (m, 2H), 0,89 (d, J = 11,9 Hz, 2H), 0,52 (dd, J = 15,5, 8,4 Hz, 1H). ESI-MS m/z izračunato 621,2345, pronađeno 622,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,19 minuta (LC metoda E). Drugi enantiomer za eluiranje je bio 13,20,20-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 151) (31,08 mg, 55%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 621,2345, pronađeno 622,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,19 minuta (LC metoda E).
Primer 159: Pripremanje 21,21-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-10λ<6>-tia-1,3,9,14,15-pentaazatetraciklo [17.2.1.02,7.011,15]dokoza-2(7),3,5,11,13-pentaen-8,10,10-triona (Jedinjenje 152) [1812]
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[2-(3-sulfamoilpirazol-1-il)etoksi]pirolidin-1-karboksilat
[1813]
[1814] U bocu prskanu azotom sa okruglim dnom koja sadrži terc-butil 4-(2-hidroksietoksi)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1,94 g, 7,480 mmol) je dodat dihlorometan (70 mL). Rastvor je ohlađen do 0 °C pre dodavanja Et3N (6 mL, 43,05 mmol) i metansulfonil hlorida (1,7 mL, 21,96 mmol). Reakciona smeša je mešana 20 sati ostavljajući da se zagreje na sobnu temperaturu nakon 1 sata (bistri rastvor je postao mutno narandžast nakon 10 minuta). Reakciona smeša je ugašena dodavanjem vode. Dodat je dihlorometan a nakog toga slani rastvor i organski sloj je razdvojen. Vodeni sloj je ekstraktovan sa dodatnim dihlorometanom (2 x 20 mL) i spojene organske materije su osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom. Dobijeni materijal je sušen pod vakuumom sat vremena kako bi se dobilo ulje žute boje koje je spojeno sa 1H-pirazol-3-sulfonamidom (1,1 g, 7,475 mmol) u boci sa okruglim dnom a zatim je dodat kalijum karbonat (2,23 g, 16,14 mmol) i smeša je rastvorena u N,N-dimetilformamidu (13 mL). Reakciona smeša je mešana na 50 °C u zapečaćenom sudu zapremine 150 mL tokom 48 sati. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, sipana u vodu (100 mL) i ekstraktovana etil acetatom (2 x 100 mL), organski slojevi su spojeni, isprani vodom (2 x 100 mL), osušeni (natrijum sulfat), filtrirani i koncentrovani. Ostatak narandžaste boje je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata kako bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-(5-sulfamoilpirazol-1-il)etoksilpirolidin-1-karboksilat (550 mg, 38%) kao prvi eluirajući, manje polarni regioizomer. ESI-MS m/z izračunato 388,17804, pronađeno 389,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,56 minuta (LC metoda A).
Korak 2: terc-Butil 4-[2-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]etoksi]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1815]
[1816] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (183,5 mg, 0,4884 mmol) i karbonil diimidazol (91,40 mg, 0,5637 mmol) su spojeni u anhidrovanom tetrahidrofuranu (4 mL) i mešani 90 minuta na 50 °C. Zatim su dodati tetrahidrofuranski rastvor (7 mL) terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-(3-sulfamoilpirazol-1-il)etoksi]pirolidin-1-karboksilat (146 mg, 0,3758 mmol) i 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (142,1 uL, 0,9502 mmol). Reakcija je zagrevana na 50 °C tokom 4 sata. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa rastvorom 1 M limunske kiseline a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene natrijum sulfatom, filtrirane i uparene, a zatim prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 75% etil acetata u heksanima kako bi se dobio terc-butil 4-[2-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]etoksi]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (162 mg, 58%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 745,22723, pronađeno 746,22 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,87 minuta (LC metoda A).
Korak 3: 21,21-Dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-10λ<6>-tia-1,3,9,14,15-pentaazatetraciklo[17.2.1.02,7.011,15]dokoza-2(7),3,5,11,13-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 152)
[1817]
terc-Butil4-[2-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]etoksi]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (162 mg, 0,2171 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (3 mL) i smeši je dodata hlorovodonična kiselina (1,6 mL 4 M u dioksanu, 6,400 mmol) nakon čega je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom i u bočici spojena sa kalijum karbonatom (180 mg, 1,302 mmol), cezijum fluoridom (55 mg, 0,3621 mmol), 3 Å molekularnim sitama i dimetil sulfoksidom (3,5 mL), pročišćena azotom, poklopljena, zagrevana do 140 °C i mešana tokom 10 sati. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, filtrirana pa zatim prečišćena reverzno faznom preparativnom hromatografijom korišćenjem C18kolone (30% - 99% acetonitril/voda 5 mM hlorovodonične kiseline) kako bi se dobio 21,21-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropilletoksil-1H-pirazol-1-il)-18-oksa-10λ<6>-tia-1,3,9,14,15-pentaazatetraciklo[17.2.1.02,7.011,15]dokoza-2(7),3,5,11,13-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 152) (45 mg, 34%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 13,14 (s, 1H), 8,28 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 7,25 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 6,14 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,79 -4,63 (m, 1H), 4,61 - 4,46 (m, 1H), 4,32 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 4,17 - 3,98 (m, 2H), 3,89 (ddd, J = 11,1, 6,4, 2,7 Hz, 1H), 3,39 (dd, J = 11,0, 4,4 Hz, 1H), 3,00 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 2,06 (dt, J = 13,1, 6,6 Hz, 3H), 1,91 (dd, J = 13,4, 2,7 Hz, 1H), 1,48 (s, 3H), 1,38 (s, 3H), 1,02 - 0,92 (m, 2H), 0,92 - 0,82 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 609,1981, pronađeno 610,25 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,04 minuta (LC metoda B).
Primer 160: Pripremanje (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}pirolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 158)
[1818]
Korak 1: 3-[2-[1-(Trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirolidin-2-on
[1819]
[1820] Mešajućem rastvoru 3-bromopirolidin-2-on (600 mg, 3,659 mmol) i 2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etanol (665 mg, 4,315 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (15 mL) je tokom 2 minuta pod azotom dodavan kalijum heksametildizilazid (16,0 mL 0.5 M u toluenu, 8,000 mmol) na 0 °C (kada sa ledenom vodom). Reakcija je ostavljena da se zagreje postepeno na temperaturu okruženja tokom noći (14 sati). Reakcija je zakiseljena glacijalnom acetatnom kiselinom (300 uL, 5,275 mmol) i isparljive materije su uklonjene na 20 °C pod redukovanim pritiskom. Vodeni ostatak je stavljen u etil acetat (50 mL) i ispran slanim rastvorom (20 mL). Organski sloj je osušen (anhidrovani natrijum suflat), filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio braonkast sirov materijal. Sirova supstanca je prečišćena hromatografijom na silika gelu (0% - 10% metanola u metilen hlorid gradijentu) kako bi se dobio 3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirolidin-2-on (285 mg, 33%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, Benzen-d6) δ 6,76 (s, 1H), 4,21 (dt, J = 9,4, 6,7 Hz, 1H), 3,73 - 3,64 (m, 1H), 3,55 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 2,67 (dddd, J = 9,3, 7,6, 4,6, 1,2 Hz, 1H), 2,46 (dt, J = 9,6, 7,1 Hz, 1H), 1,95 (dt, J = 14,3, 7,1 Hz, 1H), 1,90 - 1,81 (m, 1H), 1,74 - 1,58 (m, 2H), 0,86 - 0,77 (m, 2H), 0,54 - 0,43 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 237,09766, pronađeno 238,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,9 minuta (LC metoda B).
Korak 2: (14S)-12,12-Dimetil-8-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}pirolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 158)
[1821]
[1822] U bočicu zapremine 5 mL su dodati (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (100 mg, 0,2222 mmol), 3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirolidin-2-on (63 mg, 0,2656 mmol), cezijum karbonat (275 mg, 0,8440 mmol), 4,5-biz(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten (20 mg, 0,03457 mmol) (ksantfos) i suvi dioksan (2 mL), tim redosledom. Azot je produvavan kroz heterogenu smešu tokom 3 minuta. Nakon toga je pod azotom dodato Pd2(dba)3 (20 mg, 0,02184 mmol) i azotom je produvavano još dodatna 2 minuta i poklopljeno pod azotom. Smeša je mešana na 115 °C tokom 15 sati. Smeša je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja i neutralizovana glacijalnom acetatnom kiselinom (150 uL, 2,638 mmol). Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (3,0 mL) i filtriran kroz Whatman 0,45um PTFE špric filter disk. Uzorak je prečišćen preparativno reverzno faznom HPLC-MS (30% - 99 % acetonitrila u vodi tokom 15 minuta (hlorovodonična kiselina kao modifikator)). Frakcije željenog proizvoda su spojene i koncentrovane pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u etil acetat (25 mL) i ispran sukcesivno zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom (2 x 10 mL) i slanim rastvorom (10 mL). Organski sloj je osušen nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}pirolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 158) (31 mg, 19%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,78 (dd, J = 8,4, 2,0 Hz, 1H), 7,59 (dd, J = 8,4, 4,4 Hz, 1H), 7,53 (dd, J = 8,5, 7,1 Hz, 1H), 7,16 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 6,65 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,26 (dt, J = 12,5, 8,0 Hz, 1H), 4,22 - 4,00 (m, 2H), 3,97 (dt, J = 9,1, 6,8 Hz, 1H), 3,92 - 3,71 (m, 2H), 3,29 - 3,21 (m, 1H), 3,03 (d, J = 13,9 Hz, 1H), 2,86 (t, J = 10,2 Hz, 1H), 2,49 (dqd, J = 12,8, 7,7, 3,0 Hz, 1H), 2,24 - 2,07 (m, 1H), 2,04 - 1,90 (m, 3H), 1,84 (dd, J = 11,5, 5,4 Hz, 2H), 1,71 - 1,63 (m, 2H), 1,62 (s, 3H), 1,60 (d, J = 12,0 Hz, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,47 - 1,36 (m, 1H), 0,96 - 0,91 (m, 2H), 0,84 - 0,77 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 650,2498, pronađeno 651,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,04 minuta (LC metoda B).
Primer 161: Pripremanje 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi]-1H-pirazol-1-il)-17-oksa-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (Jedinjenje 164), 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17-oksa-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetra ciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 302) i 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17-oksa-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 167)
[1823]
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[2-(3-sulfamoilpirazol-1-il)etoksi]pirolidin-1-karboksilat
[1824]
[1825] U bocu sa okruglim dnom prskanu azotom koja sadrži terc-butil 4-(2-hidroksietoksi)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1,94 g, 7,480 mmol) je dodat dihlorometan (70 mL). Rastvor je ohlađen do 0 °C pre dodavanja Et3N (6 mL, 43,05 mmol) i metansulfonil hlorida (1,7 mL, 21,96 mmol). Reakciona smeša je mešana 20 sati omogućavajući da se zagreje na sobnu temperaturu nakon 1 sata (bistri rastvor se pretvorio u mutno narandžast nakon 10 minuta). Reakciona smeša je ugašena dodavanjem vode. Dodat je dihlorometan a zatim i slani rastvor, i organski sloj je razdvojen. Vodeni sloj je ekstraktovan dodatnim dihlorometanom (2 x 20 mL) i spojene organske materije su osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom. Dobijen materijal je sušen pod vakuumom tokom sat vremena kako bi se dobilo ulje žute boje, koje je spojeno sa 1H-pirazol-3-sulfonamidom (1,1 g, 7,475 mmol) u boci sa okruglim dnom a zatim je dodat kalijum karbonat (2,23 g, 16,14 mmol) i smeša je rastvorena u N,N-dimetilformamidu (13 mL). Reakciona smeša je mešana na 50 °C u zapečaćenom sudu zapremine 150 mL tokom 48 sati. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, sipana u vodu (100 mL) i ekstraktovana etil acetatom (2 x 100 mL), organski slojevi su spojeni, isprani vodom (2 x 100 mL), osušeni (natrijum sulfat), filtrirani i koncentrovani. Ostatak narandžaste boje je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata kako bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-(3-sulfamoilpirazol-1-il)etoksi]pirolidin-1-karboksilat (475 mg, 33%) kao drugo eluiranje, polarniji regioizomer. ESI-MS m/z izračunato 388,17804, pronađeno 389,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,52 minuta (LC metoda A).
Korak 2: terc-Butil 4-[2-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]etoksi]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1826]
[1827] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (691,7 mg, 1,841 mmol) i karbonil diimidazol (310,0 mg, 1,912 mmol) su spojeni u anhidrovanom tetrahidrofuranu (15 mL) i mešani 60 minuta na 40 °C. Zatim su dodati tetrahidrofuranski rastvor (7 mL) terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-(3-sulfamoilpirazol-1-il)etoksi]pirolidin-1-karboksilat (550 mg, 1,416 mmol) i 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (538,9 mg, 529,4 uL, 3,540 mmol). Reakcija je zagrevana na 40 °C tokom 14 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana sa rastvorom 1 M limunske kiseline a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene, nakon čega su prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 75% etil acetata u heksanima kako bi se dobio tercbutil 4-[2-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]etoksi]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (493 mg, 47%). ESI-MS m/z izračunato 745,22723, pronađeno 746,29 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,83 minuta (LC metoda A).
Korak 3: 20,20-Dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17-oksa-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 164)
[1828]
terc-Butil 4-[2-[3-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]etoksi]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (467 mg, 0,6258 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (10 mL) i smeši je dodata hlorovodonična kiselina (4,5 mL 4 M u dioksanu, 18,00 mmol), i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 30 minuta. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom i u bočici spojena sa kalijum karbonatom (520 mg, 3,763 mmol), cezijum fluoridom (154 mg, 1,014 mmol), 3 Å molekularnim sitama i dimetil sulfoksidom (10 mL), pročišćena azotom, poklopljena, zagrevana do 140 °C i mešana 16 sati. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu, filtrirana a nakon toga prečišćena reverzno faznom preparativnom hromatografijom korišćenjem C18 kolone (30% -99% acetonitril-voda 5 mM hlorovodonična kiselina) kako bi se dobio 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17-oksa-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 164) (115 mg, 30%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,74 (s, 1H), 8,17 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,96 (s, 1H), 7,69 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 6,08 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,42 (t, J = 13,0 Hz, 1H), 4,38 -4,07 (m, 5H), 3,88 (t, J = 11,4 Hz, 1H), 2,88 (s, 1H), 2,18 - 2,03 (m, 2H), 2,01 (dd, J = 11,5, 6,0 Hz, 1H), 1,78 (t, J = 9,1 Hz, 1H), 1,61 (t, J = 11,5 Hz, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,50 (s, 3H), 1,01 - 0,92 (m, 2H), 0,92 - 0,84 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 609,1981, pronađeno 610,36 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,03 minuta (LC metoda B).
Korak 4: 20,20-Dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17-oksa-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 302) i 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17-oksa-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 167)
[1829]
[1830] Racemsko jedinjenje 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17-oksa-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 164) (98 mg, 0,1591 mmol) je podvrgnuto hiralnoj preparatornoj SFC radi separacije enantiomera. Sledeći SFC protokol je primenjen: ChiralPak AS-3 (150 X 2,1mm), 3um; 35 °C, mobilna faza: 30% acetonitril:metanol (90:10), 70% ugljen dioksid. Prvi enantiomer za eluiranje je bio 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17-oksa-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 302) (31 mg, 63%); ESI-MS m/z izračunato 609,1981, pronađeno 610,32 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,01 minuta (LC metoda B). Drugi enantiomer za eluiranje je bio 20,20-dimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17-oksa-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 167) (31 mg, 63%); ESI-MS m/z izračunato 609,1981, pronađeno 610,28 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,0 minuta (LC metoda B).
Primer 162: Pripremanje 4-hloro-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111, 14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 1) i 4-hloro-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 2)
[1831]
Korak 1: 4-Hloro-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje E) i 4-hloro-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje F)
[1832]
[1833] Racemski 4-hloro-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (498 mg) je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji. Sledeći SFC protokol je primenjen: ChiralPak AS-H (250 X 21,2 mm), 5 um; 35 °C, mobilna faza: 18% acetonitril:metanol (90:10), 82% ugljen dioksid uz brzinu protoka 70 mL/min. Prvi enantiomer za eluiranje je bio 4-hloro-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (162 mg, 13%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,73 (s, 1H), 7,57 - 7,45 (m, 2H), 7,06 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 6,49 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,28 (dt, J = 13,4, 3,3 Hz, 1H), 4,02 - 3,85 (m, 1H), 2,67 (s, 1H), 2,13 (dt, J = 11,4, 5,3 Hz, 2H), 2,08 - 1,98 (m, 1H), 1,92 (dt, J = 15,4, 10,2 Hz, 2H), 1,77 - 1,70 (m, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,49 (s, 3H), 1,44 (t, J = 12,3 Hz, 1H), 0,83 - 0,71 (m, 1H). ESI-MS m/z izračunato 423,1132, pronađeno 424,04 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,66 minuta (LC metoda B). Drugi enantiomer za eluiranje je bio 4-hloro-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (163 mg, 13%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,82 (s, 1H), 7,57 - 7,45 (m, 2H), 7,06 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 6,49 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,27 (dt, J = 13,3, 3,4 Hz, 1H), 4,01 - 3,87 (m, 1H), 2,67 (s, 1H), 2,24 - 2,07 (m, 2H), 2,08 - 1,98 (m, 1H), 2,00 - 1,84 (m, 2H), 1,82 - 1,68 (m, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,49 (s, 3H), 1,44 (t, J = 12,3 Hz, 1H), 0,77 (dt, J = 18,8, 9,0 Hz, 1H). ESI-MS m/z izračunato 423,1132, pronađeno 424,04 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,67 minuta (LC metoda B).
Primer 163: Pripremanje 4-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (Jedinjenje 168)
[1834]
Korak 1: 4-[3-(3,3-Dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 168)
[1835]
[1836] Rastvor 4-hloro-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (75 mg, 0,1769 mmol), 1-(3,3-dimetilbutil)imidazolidin-2-on (38 mg, 0,2232 mmol), natrijum tercbutoksid (27 mg, 0,2809 mmol) i hloro(2-di-terc-butilfosfino-2’,4’,6’-tri-i-propil-1,1’ bifenil)[2-(2-aminoetil)fenil] paladijum(II) (31 mg, 0,04760 mmol) u dioksanu (2 mL) u bočici je degaziran produvavanjem azotom tokom 2 minuta. Smeša je nakon toga mešana na sobnoj temperaturi sat vremena. Reakciona smeša je ugašena sa 0,5 mL acetatne kiseline i filtrirana kroz Whatman filter disk (puradisc 25 TF) korišćenjem male količine dimetil sulfoksida, i filtrat je prečišćen metodom reverzne faze HPLC-MS korišćenjem dualnog gradijenta od 50% - 99% mobilne faze B tokom 15,0 minuta (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 uL i temperatura kolone = 25 °C) kako bi se dobio4-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 168) (24 mg, 24%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,38 (s, 1H), 7,55 (s, 2H), 7,46 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,35 (d, J = 11,7 Hz, 1H), 3,96 (dt, J = 36,5, 11,0 Hz, 3H), 3,46 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 3,39 - 3,27 (m, 2H), 2,71 (s, 1H), 2,12 (s, 2H), 2,02 (s, 2H), 1,92 (s, 1H), 1,72 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 1,55 (s, 3H), 1,49 (s, 3H), 1,45 (dd, J = 10,1, 6,6 Hz, 3H), 0,96 (s, 9H), 0,79 (d, J = 9,7 Hz, 1H). ESI-MS m/z izračunato 557,27844, pronađeno 558,17 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,84 minuta (LC metoda B).
Primer 164: Pripremanje 4-[3-(4,4-dimetilpentil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (Jedinjenje 169)
Korak 1: 4,4-Dimetilpentannitril
[1838]
[1839] 1-Bromo-3,3-dimetil-butan (25 g, 151,45 mmol) je polako dodavan suspenziji natrijum cijanid (8,17
g, 166,71 mmol) u dimetil sulfoksidu (80 mL) na 60 °C održavajući unutrašnju temperaturu između 55 °C i 65 °C. Reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom 90 minuta nakon čega je ohlađena na sobnu temperaturu. Reakciona smeša je razblažena vodom (300 mL) i ekstraktovana dietil etrom (3 x 150 mL). Organski slojevi su spojeni, isprani sa 5 N hlorovodoničnom kiselinom (75 mL) i vodom (75 mL), osušeni nad magnezijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio 4,4-dimetilpentannitril (17,82 g, 89%) kao bistro ulje. Sirov materijal je korišćen direktno u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) ppm 0,93 (s, 9H), 1,56-1,67 (m, 2H), 2,28 (dd, J=8,8, 7,3 Hz, 2H).
Korak 2: 4,4-Dimetilpentanal
[1840]
[1841] Diizobutilaluminijum hidrid (226 mL 1 M u dihlorometanu, 226,00 mmol) je dodat rastvoru 4,4-dimetilpentannitril (16,75 g, 150,65 mmol) u dihlorometanu (560 mL) na 0 °C. Reakciona smeša je mešana na 0 °C tokom 90 minuta nakon čega je ugašena sa 3 M hlorovodoničnom kiselinom. Vodeni sloj je razdvojen i ekstraktovan dihlorometanom.
Spojeni organski slojevi su isprani sa 10% hlorovodonične kiseline, vodom i slanim rastvorom, osušeni nad magnezijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio 4,4-dimetilpentanal (16,23 g, 94%) kao ulje žute boje. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja.<1>H NMR (300 MHz, CDCl3) ppm 0,90 (s, 9H), 1,46-1,61 (m, 2H), 2,40 (td, J=8,1, 1,9 Hz, 2H), 9,78 (t, J=1,9 Hz, 1H).
Korak 3: terc-Butil N-[2-(4,4-dimetilpentilamino)etil]karbamat
[1842]
[1843] 4,4-DimetIlpentanal (15,2 g, 133,12 mmol) je dodat rastvoru terc-butil N-(2-aminoetil)karbamat
(20,948 g, 20,7 mL, 130,75 mmol) u metanolu (300 mL) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi sat vremena. Nakon što je reakciona smeša ohlađena na 0 °C, polako je dodat natrijum borohidrid (5,2 g, 137,45 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakcija je koncentrovana pod redukovanim pritiskom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (300 mL) i ispran rastvorom zasićenog vodenog natrijum bikarbonata (2 x 300 mL) i slanim rastvorom (300 mL), osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio terc-butilN-[2-(4,4-dimetilpentilamino)etil]karbamat (21,83 g, 65%) kao ulje žute boje. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. ESI-MS m/z izračunato 258,2307, pronađeno 259,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,39 minuta (LC metoda I). Korak 4: 1-(4,4-Dimetilpentil)imidazolidin-2-on
[1844]
[1845] Čvrsti kalijum terc-butoksid (28,6 g, 254,87 mmol) je dodat rastvoru terc-butil N-[2-(4,4-dimetilpentilamino)etil]karbamat (21,83 g, 84,481 mmol) u tetrahidrofuranu (260 mL) i reakciona smeša je zagrevana na 60 °C tokom 3 sata. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reakciona smeša je zakiseljena na pH = 1 - 2 vodenom hlorovodoničnom kiselinom (1 M) i koncentrovana pod redukovanim pritiskom. Vodeni ostatak je ekstraktovan etil acetatom (3 x 250 mL), organski slojevi su spojeni, isprani slanim rastvorom (2 x 200 mL), osušeni nad natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod redukovanim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 0% do 10% metanola u etil acetatu kako bi se dobio 1-(4,4-dimetilpentil)imidazolidin-2-on (7,36 g, 45%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (300 MHz, dimetil sulfokside-d6) ppm 0,84 (s, 9H), 1,02-1,15 (m, 2H), 1,28-1,43 (m, 2H), 2,96 (t, J=7,2 Hz, 2H), 3,14-3,22 (m, 2H), 3,23-3,31 (m, 2H), 6,20 (br. s., 1H). ESI-MS m/z izračunato 184,1576, pronađeno 185,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,34 minuta (LC metoda H).
Korak 5: 4-[3-(4,4-Dimetilpentil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 169)
[1847] Rastvor 4-hloro-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[116.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (30 mg, 0,07077 mmol), 1-(4,4-dimetilpentil)imidazolidin-2-on (16 mg, 0,08683 mmol), natrijum tercbutoksid (12 mg, 0,1249 mmol) i hloro(2-di-terc-butilfosfino-2’,4’,6’-tri-i-propil-1,1’-bifenil)[2-(2-aminoetil)fenil] paladijum(II) (14 mg, 0,02150 mmol) u dioksanu (2 mL) u bočici je degaziran produvavanjem azotom tokom 2 minuta. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi približno sat vremena. Reakciona smeša je ugašena sa 0,5 mL acetatne kiseline i filtrirana kroz Whatman filter disk (puradisc 25 TF) korišćenjem male količine dimetil sulfoksida, i filtrat je prečišćen metodom reverzne faze HPLC-MS korišćenjem dualnog gradijenta od 50% - 99% mobilna faza B tokom 15,0 minuta (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 uL i temperatura kolone = 25 °C) kako bi se dobio 4-[3-(4,4-dimetilpentil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 169) (6,8 mg, 16%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,54 (s, 1H), 7,54 (s, 2H), 7,46 (d, J = 2,2 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 4,35 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 4,09 - 3,85 (m, 3H), 3,46 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 3,27 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,71 (s, 1H), 2,11 (s, 3H), 1,99 - 1,85 (m, 1H), 1,71 (dd, J = 11,7, 5,3 Hz, 1H), 1,60 (s, 3H), 1,55 (s, 3H), 1,49 (s, 3H), 1,48 - 1,35 (m, 1H), 1,30 - 1,17 (m, 2H), 0,88 (s, 8H), 0,75 (d, J = 19,6 Hz, 2H). ESI-MS m/z izračunato 571,29407, pronađeno 572,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,02 minuta (LC metoda B).
Primer 165: Pripremanje (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutoksi)-2-oksopirolidin-l-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (dijastereomer 1) (Jedinjenje 170) i (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutoksi)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 171)
[1848]
Korak 1: 3-(3,3-Dimetilbutoksi)pirolidin-2-on
[1849]
[1850] Mešanom rastvoru 3,3-dimetilbutan-1-ol (540 mg, 5,285 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (20 mL) je pod azotom dodat [biz(trimetilsilil)amino]kalijum (10,6 mL 0.5 M u toluenu, 5,300 mmol) na temperaturi okruženja. Mlečna reakcija je mešana 30 minuta nakon čega je ukapavanjem dodat rastvor 3-bromopirolidin-2-on (830 mg, 4,808 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (3 mL) na 0 °C (kada sa ledenom vodom). Reakcija je ostavljena da se zagreje postepeno na temperaturu okruženja tokom noći (18 sati). Reakcija je zakiseljena 1 M vodenom hlorovodoničnom kiselinom (1,5 mL) i isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom. Ostatak je stavljen u etil acetat (30 mL) i ispran slanim rastvorom (15 mL). Organski deo je osušen (anhidrovani natrijum sulfat), filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio braonkast sirov materijal. Sirova supstanca je prečišćena hromatografijom na silika gelu (0% - 10% metanola u gradijentu dihlorometana) kako bi se dobio 3-(3,3-dimetilbutoksi)pirolidin-2-on (143 mg, 16%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 185,14159, pronađeno 186,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,95 minuta (LC metoda B).
Korak 2: (14S)-8-[3-(3,3-Dimetilbutoksi)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion
[1851]
[1852] U bočicu su dodati (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (100 mg, 0,2222 mmol), 3-(3,3-dimetilbutoksi)pirolidin-2-on (50 mg, 0,2699 mmol), cezijum karbonat (290 mg, 0,8901 mmol), 4,5-biz(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten (20 mg, 0,03457 mmol) (ksantfos) i suvi dioksan (2 mL), tim redosledom. Azot je produvavan kroz heterogenu smešu 3 minuta. Zatim je pod azotom dodato Pd2(dba)3 (20 mg, 0,02184 mmol) i azot je produvavan u bočicu tokom dodatna 2 minuta nakon čega je poklopljena pod azotom. Smeša je mešana na 115 °C tokom 15 sati. Smeša je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja i neutralizovana je glacijalnom acetatnom kiselinom (130 uL, 2,286 mmol). Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (3,0 mL) i filtriran kroz Whatman 0,45um PTFE špric filter disk. Uzorak je prečišćen korišćenjem preparativne reverzno fazne HPLC-MS (30% - 99 % acetonitrila u gradijentu vode tokom 15 minuta (hlorovodonična kiselina kao modifikator). Željene frakcije proizvoda su spojene i koncentrovane pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u etil acetat (25 mL) i ispran slanim rastvorom (10 mL). Organski sloj je osušen nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutoksi)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimeti1-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (27 mg, 20%) kao beličasta čvrsta smeša dijastereomera.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,78 (dd, J = 8,4, 2,1 Hz, 1H), 7,60 (dd, J = 8,4, 4,3 Hz, 1H), 7,53 (dd, J = 8,5, 7,2 Hz, 1H), 7,16 (dt, J = 7,2, 1,0 Hz, 1H), 6,65 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,25 (dt, J = 12,8, 8,0 Hz, 1H), 4,20 - 3,99 (m, 2H), 3,97 - 3,76 (m, 2H), 3,74 - 3,65 (m, 1H), 3,03 (d, J = 13,8 Hz, 1H), 2,86 (t, J = 9,9 Hz, 1H), 2,56 - 2,44 (m, 1H), 2,17 (s, 1H), 2,04 - 1,93 (m, 1H), 1,84 (dd, J = 11,7, 5,7 Hz, 2H), 1,63 (br, 6H), 1,61 - 1,55 (m, 4H), 1,54 (s, 2H), 1,44 (t, J = 11,6 Hz, 1H), 0,95 (s, 9H). ESI-MS m/z izračunato 598,29376, pronađeno 651,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,04 minuta (LC metoda B).
Korak 3: (14S)-8-[3-(3,3-Dimetilbutoksi)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 170) i (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutoksi)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 171)
[1853]
[1854] Racemski dijastereomerni (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutoksi)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji. Primenjen je sledeći SFC protokol: ChiralCel OJ-H (250 X 10 mm), 5um; mobilna faza: 20% acetonitril:metanol (90:10;bez modifikatora), 80% ugljen dioksid sa brzinom protoka 10 mL/min da bi se dobio kao prvi dijastereomer za eluiranje, (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutoksi)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 170) (11 mg, 8%);<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,43 (s, 1H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,57 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,51 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,23 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 4,07 - 3,98 (m, 1H), 3,88 (dt, J = 8,8, 7,2 Hz, 2H), 3,70 (dt, J = 10,5, 7,6 Hz, 1H), 3,60 (dt, J = 9,2, 7,2 Hz, 1H), 3,20 - 3,03 (m, 1H), 2,94 (d, J = 13,4 Hz, 1H), 2,77 - 2,63 (m, 1H), 2,46 - 2,37 (m, 1H), 2,18 - 2,04 (m, 1H), 1,91 (dq, J = 12,6, 8,4 Hz, 1H), 1,82 (dd, J = 11,8, 5,2 Hz, 1H), 1,80 - 1,68 (m, 1H), 1,64 - 1,57 (m, 2H), 1,57 (s, 3H), 1,52 - 1,48 (m, 2H), 1,46 (s, 3H), 1,34 - 1,26 (m, 1H), 1,24 (s, 1H), 0,91 (d, J = 0,9 Hz, 9H), ESI-MS m/z izračunato 598,29376, pronađeno 599,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,21 minuta (LC metoda B) i kao drugi dijastereomer za eluiranje, (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutoksi)-2-oksopirolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 171) (10 mg, 7%);<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,41 (s, 1H), 7,70 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,57 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,96 (s, 1H), 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,28 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 3,97 -3,92 (m, 1H), 3,92 - 3,89 (m, 1H), 3,89 - 3,84 (m, 1H), 3,77 (dt, J = 10,2, 7,5 Hz, 1H), 3,59 (ddd, J = 9,3, 7,7, 6,7 Hz, 1H), 3,16 - 3,03 (m, 1H), 2,94 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 2,74 - 2,64 (m, 1H), 2,48 - 2,39 (m, 1H), 2,20 - 2,02 (m, 1H), 1,93 - 1,85 (m, 1H), 1,84 - 1,79 (m, 1H), 1,79 - 1,69 (m, 1H), 1,63 - 1,57 (m, 2H), 1,57 (s, 3H), 1,52 - 1,47 (m, 2H), 1,46 (s, 3H), 1,29 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 1,24 (s, 1H), 0,91 (s, 9H). ESI-MS m/z izračunato 598,29376, pronađeno 599,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,18 minuta (LC metoda B).
Primer 166: Pripremanje (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}pirolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetra ciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (dijastereomer 1) (Jedinjenje 172) i (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}pirolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (dijastereomer 2) (Jedinjenje 173)
Korak 1: (14S)-12,12-Dimetil-8-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi} pirolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 172) i (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil) ciklopropil] etoksi}pirolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetracosa-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 173)
[1856]
[1857] Dijastereomerna smeša, (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}pirolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (so dihidrohlorida) (31 mg) je podvrgnuta hiralnom SFC prečišćavanju. Metoda primenjenog SFC prečišćavanja je koristila ChiralCel OJ-H (250 X 10 mm), 5um kolonu; mobilna faza: 20% acetonitril:metanol (90:10;bez modifikatora), 80% ugljen dioksid; protok: 10 mL/min; koncentracija uzorka: ~ 24 mg/mL u acetonitril:metanol:dimetil sulfoksid (85:9:6); zapremina ubrizgavanja: 70 uL; pritisak: 100 bara. Prvi dijastereomer za eluiranje je bio (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}pirolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 172) (7 mg, 5%). ESI-MS m/z izračunato 650,2498, pronađeno 651,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,09 minuta (LC metoda B). Drugi dijastereomer za eluiranje je bio (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}pirolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 173) (7 mg, 5%). ESI-MS m/z izračunato 650,2498, pronađeno 651,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,09 minuta (LC metoda B).
Primer 167: Pripremanje 20,20-dimetil-4-(2-okso-3-{3-[1-(trifluorometil)ciklo propil]propil}pirolidin-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (dijastereomer 1) (Jedinjenje 181) i 20,20-dimetil-4-(2-okso-3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propillpirolidin-1-il)-10),6-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (dijastereomer 2) (Jedinjenje 182)
[1858]
Korak 1: 20,20-Dimetil-4-(2-okso-3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propil} pirolidin-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 181) i 20,20-dimetil-4-(2-okso-3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propil}pirolidin-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 182)
[1859]
[1860] U bočicu su dodati 4-hloro-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (40 mg, 0,09436 mmol), 3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propil]pirolidin-2-on (27 mg, 0,1148 mmol), cezijum karbonat (110 mg, 0,3376 mmol), 4,5-biz(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten (9 mg, 0,01555 mmol) (ksantfos) i suvi dioksan (2 mL), tim redosledom. Azot je produvavan kroz heterogenu smešu 2 minuta. Zatim je pod azotom dodato Pd2(dba)3(9 mg, 0,009960 mmol) i azot je produvavan kroz reakciju još dodatna 2 minuta nakon čega je smeša poklopljena pod azotom. Smeša je mešana na 115 °C tokom 15 sati. Smeša je ostavljena da se ohladi na temperaturu ambijenta i neutralizovana glacijalnom acetatnom kiselinom (50 uL, 0,8792 mmol). Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (1,5 mL) i filtriran kroz Whatman 0,45um PTFE špric filter disk. Uzorak je prečišćen preparativnom reverzno faznom HPLC-MS (30% 99 % acetonitrila u vodi tokom 15 minuta (hlorovodonična kiselina kao modifikator). Željene frakcije proizvoda su spojene i koncentrovane pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u etil acetat (25 mL) i ispran sukcesivno zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom (2 x 10 mL) i slanim rastvorom (10 mL). Organski sloj je osušen nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio 20,20-dimetil-4-(2-okso-3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propil}pirolidin-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (41 mg, 70%) kao beličasta čvrsta smeša dijastereomera koja je podvrgnuta hiralnom SFC prečišćavanju korišćenjem ChiralCel OJ-3H (250 X 10 mm), 5um kolona; mobilna faza: 20% acetonitril:metanol (90:10; bez modifikatora), 80% ugljen dioksid; protok: 10 mL/min; koncentracija: ~ 24 mg/mL u acetonitril:metanol:dimetil sulfoksidu (81:9:10); zapremina ubrizgavanja: 70 uL; pritisak: 100 bara; talasna dužina: 242 nm. Prvi dijastereomer za eluiranje je bio 20,20-dimetil-4-(2-okso-3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propil}pirolidin-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 181) (11 mg, 18%). ESI-MS m/z izračunato 622,2549, pronađeno 623,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,18 minuta (LC metoda B). Drugi dijastereomer za eluiranje je bio 20,20-dimetil-4-(2-okso-3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propil}pirolidin-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 182) (10 mg, 17%). ESI-MS m/z izračunato 622,2549, pronađeno 623,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,19 minuta (LC metoda B).
Primer 168: Pripremanje 20,20-dimetil-4-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}pirolidin-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (Jedinjenje 183), 20,20-dimetil-4-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}pirolidin-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (dijastereomer 1) (Jedinjenje 191) i 20,20-dimetil-4-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi}pirolidin-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (dijastereomer 2) (Jedinjenje 192)
[1861]
Korak 1: 20,20-Dimetil-4-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}pirolidin-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 183)
[1863] U bočicu su dodati 4-hloro-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (40 mg, 0,09436 mmol), 3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirolidin-2-on (23 mg, 0,09696 mmol), cezijum karbonat (102 mg, 0,3131 mmol), 4,5-biz(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten (8 mg, 0,01383 mmol) (ksantfos) i suvi dioksan (1,5 mL), tim redosledom. Azot je produvavan kroz heterogenu smešu 2 minuta. Pod azotom je zatim dodato Pd2(dba)3 (8 mg, 0,008853 mmol) i azot je produvavan kroz reakciju još dodatna 2 minuta a nakon toga je poklopljena pod azotom. Smeša je mešana na 115 °C tokom 15 sati. Smeša je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja i neutralizovana glacijalnom acetatnom kiselinom (50 uL, 0,8792 mmol). Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (1,5 mL) i filtriran kroz Whatman 0,45um PTFE špric filter disk. Uzorak je prečišćen korišćenjem preparativno reverzno fazne HPLC-MS (30% - 99 % acetonitrila u vodi tokom 15 minuta, hlorovodonična kiselina kao modifikator). Željene frakcije proizvoda su spojene i koncentrovane pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u etil acetat (25 mL) i ispran sukcesivno zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom (2 x 10 mL) i slanim rastvorom (10 mL). Organski sloj je osušen nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio 20,20-dimetil-4-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}pirolidin-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 183) (41 mg, 74%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,79 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,64 (dd, J = 8,4, 2,1 Hz, 1H), 7,61 - 7,54 (m, 1H), 6,91 (dd, J = 2,4, 1,1 Hz, 1H), 4,31 - 4,21 (m, 2H), 4,16 (ddd, J = 11,8, 8,8, 3,2 Hz, 1H), 4,12 - 4,00 (m, 1H), 3,96 (q, J = 7,5 Hz, 1H), 3,90 - 3,72 (m, 2H), 2,83 - 2,73 (m, 1H), 2,55 - 2,43 (m, 1H), 2,23 - 2,08 (m, 2H), 2,02 - 1,87 (m, 6H), 1,77 (dd, J = 11,9, 5,4 Hz, 1H), 1,57 (s, 3H), 1,50 (s, 3H), 1,39 (t, J = 12,2 Hz, 1H), 0,96 - 0,90 (m, 2H), 0,84 - 0,76 (m, 2H), 0,76 - 0,68 (m, 1H). ESI-MS m/z izračunato 624,2342, pronađeno 625,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,05 minuta (LC metoda B).
Korak 2: 20,20-Dimetil-4-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi} pirolidin-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 191) i 20,20-dimetil-4-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}pirolidin-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 192)
[1865] 20,20-Dimetil-4-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi} pirolidin-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 183) je podvrgnut hiralnoj SFC korišćenjem ChiralPak IG (250 X 10 mm), 5um kolona; mobilna faza: 42% acetonitril:metanol (90:10; bez modifikatora), 58% ugljen dioksid; protok: 70 mL/min; koncentracija: ~ 24 mg/mL u acetonitril:metanol (90:10, bez modifikatora); zapremina ubrizgavanja: 70 uL; pritisak: 100 bara. Prvi dijastereomer za eluiranje je bio 20,20-dimetil-4-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}pirolidin-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (dijastereomer 1) (Jedinjenje 191) (13,6 mg, 24%). ESI-MS m/z izračunato 624,2342, pronađeno 625,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,87 minuta (LC metoda B). Drugi dijastereomer za eluiranje je bio 20,20-dimetil-4-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}pirolidin-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (dijastereomer 2) (Jedinjenje 192) (13,5 mg, 24%). ESI-MS m/z izračunato 624,2342, pronađeno 625,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,88 minuta (LC metoda B).
Primer 169: Pripremanje 4-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksopirolidin-1-il]-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (Jedinjenje 184)
[1866]
Korak 1: 4-[3-(3,3-Dimetilbutil)-2-oksopirolidin-1-il]-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 184)
[1868] U bočicu su dodati 4-hloro-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (11 mg, 0,02595 mmol), 3-(3,3-dimetilbutil)pirolidin-2-on (8 mg, 0,04726 mmol), cezijum karbonat (32 mg, 0,09821 mmol), 4,5-biz(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten (3 mg, 0,005185 mmol) (ksantfos) i suvi dioksan (0,8 mL), tim redosledom. Azot je produvavan kroz heterogenu smešu 2 minuta. Zatim je pod azotom dodato Pd2(dba)3 (3 mg, 0,003320 mmol) i azot je produvavan kroz smešu još dodatna 2 minuta nakon čega je smeša poklopljena pod azotom. Smeša je mešana na 115°C tokom 13 sati. Smeša je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja i neutralizovana glacijalnom acetatnom kiselinom (20 uL, 0,3517 mmol). Isparljve materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (1,0 mL) i filtriran kroz Whatman 0,45um PTFE špric filter disk. Uzorak je prečišćen preparativno reverzno faznom HPLC-MS (30% - 99 % acetonitrila u vodi tokom 15 minuta (hlorovodonična kiselina kao modifikator). Željene frakcije proizvoda su spojene i koncentrovane pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio 4-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksopirolidin-1-il]-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 184) (7,5 mg, 51%) kao čvrsta supstanca bledo žute boje.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,78 (d, J = 2,5 Hz, 1H), 7,67 - 7,60 (m, 1H), 7,56 (dd, J = 8,5, 7,0 Hz, 1H), 6,91 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,33 - 4,22 (m, 1H), 4,20 - 4,11 (m, 1H), 4,10 - 3,97 (m, 1H), 3,96 - 3,78 (m, 1H), 2,83 - 2,73 (m, 1H), 2,62 (ddd, J = 13,7, 9,4, 5,0 Hz, 1H), 2,31 (q, J = 9,0 Hz, 1H), 2,21 - 2,08 (m, 2H), 2,04 - 1,84 (m, 4H), 1,81 - 1,69 (m, 2H), 1,57 (s, 3H), 1,51 (s, 3H), 1,39 (t, J = 12,4 Hz, 2H), 1,33 -1,27 (m, 2H), 0,92 (s, 9H), 0,79 - 0,66 (m, 1H). ESI-MS m/z izračunato 556,2832, pronađeno 557,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,23 minuta (LC metoda B).
Primer 170: Pripremanje (18R)-4-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (Jedinjenje 186)
[1869]
Korak 1: terc-Butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1870]
[1871] 2-Hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (400 mg, 1,112 mmol) i karbonil diimidazol (273,5 mg, 1,687 mmol) su spojeni u tetrahidrofuranu (2 mL) i mešani 90 minuta na sobnoj temperaturi. Nakon toga je dodat terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(3-sulfamoilpirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (429,5 mg, 1,111 mmol) a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (430,8 mg, 2,830 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi sat vremena nakon čega je zagrejana do 50 °C i mešana tokom noći. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana rastvorom zasićenog vodenog natrijum bikarbonata a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a zatim prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata kako bi se dobio terc-butil 4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil]pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (350 mg, 43%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,34 (s, 1H), 8,08 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,62 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,71 - 6,49 (m, 1H), 6,10 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,23 (s, 2H), 4,13 (s, 2H), 3,52 (s, 1H), 2,73 (d, J = 6,0 Hz, 1H), 2,08 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 1,81 (q, J = 6,6 Hz, 5H), 1,47 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 1,40 - 1,21 (m, 18H), 0,83 (d, J = 2,0 Hz, 4H), 0,66 - 0,60 (m, 2H), 0,52 - 0,46 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 727,2919, pronađeno 728,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,92 minuta (LC metoda A).
Korak 2: 2-Hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]pirazol-3-il]sulfonil-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[1872]
terc-Butil4-[3-[3-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil] pirazol-1-il]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (350 mg, 0,4806 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (1,527 mL) i smeši je dodata trifluoroacetatna kiselina (2,192 g, 1,481 mL, 19,22 mmol), i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi 60 minuta. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom i stavljena u zasićen vodeni natrijum bikarbonat i etil acetat, i slojevi su razdvojeni. (OPREZ, rastvorljivost proizvoda u etil acetatu pod ovim uslovima je slaba, pomaže dodavanje malo metanola, potrebno je da se organski sloj upari bez upotrebe čvrstog agensa za sušenje.). Organski sloj je koncentrovan rotirajućim uparavanjem nakon čega je sušen pod vakuumom čime je dobijen 2-hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]pirazol-3-il]sulfonil-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (301,9 mg, 100%) kao beličasta čvrsta supstanca koja je uzeta direktno za sledeći korak.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,28 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,21 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,61 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,44 (s, 1H), 6,67 (s, 1H), 5,88 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,22 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 4,17 (s, 2H), 3,55 (s, 1H), 3,03 (s, 1H), 2,23 (s, 1H), 1,88 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 1,83 (s, 3H), 1,48 (s, 1H), 1,46 - 1,35 (m, 5H), 1,35 - 1,24 (m, 4H), 0,84 (t, J = 1,9 Hz, 4H), 0,63 (d, J = 1,6 Hz, 2H), 0,51 (d, J = 1,1 Hz, 2H).
Korak 3: 4-[3-(2-[Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il]etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion
[1873]
[1874] U bočici su spojeni 2-hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]pirazol-3-il]sulfonil-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (310 mg, 0,4935 mmol), kalijum karbonat (341,1 mg, 2,468 mmol), cezijum fluorid (112,8 mg, 0,7426 mmol), 3 Å molekularna sita i dimetil sulfoksid (9,3 mL), pročišćeni azotom, poklopljeni, zagrejani do 155 °C i mešani 20 sati. Smeša je nakon toga ohlađena na sobnu temperaturu i filtrirana a zatim razblažena etil acetatom i isprana rastvorom zasićenog vodenog natrijum bikarbonata a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene a zatim prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata (proizvod eluira nakon dostizanja 100% etil acetata) kako bi se dobio 4-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (117 mg, 40%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,37 (s, 1H), 8,16 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,26 (s, 1H), 7,07 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,86 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,36 (d, J = 13,5 Hz, 1H), 4,24 (s, 2H), 3,95 (d, J = 12,4 Hz, 1H), 2,74 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 2,15 (d, J = 4,2 Hz, 2H), 2,08 - 1,93 (m, 3H), 1,89 (d, J = 6,7 Hz, 2H), 1,76 (dd, J = 11,9, 5,3 Hz, 1H), 1,59 (s, 3H), 1,55 (s, 5H), 0,85 (q, J = 2,0 Hz, 4H), 0,64 (d, J = 1,7 Hz, 2H), 0,51 (d, J = 1,2 Hz, 2H). ESI-MS m/z izračunato 591,26276, pronađeno 592,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,37 minuta (LC metoda B).
Korak 4: (18R)-4-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 186)
[1876] 4-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (103 mg, 0,1741 mmol) je podvrgnut hiralnoj separaciji SFC hromatografijom korišćenjem ChiralPak AS-H (250 X 10 mm, 5um veličina čestice) sa 34% acetonitril/metanol (90:10)/66% ugljen dioksid mobilna faza pri 10 mL/min tokom 8,0 minuta (zapremina ubrizgavanja = 70 uL 24 mg/mL rastvora u acetonitril/metanol (90:10)) dajući kao prvi enantiomer za eluiranje, (18R)-4-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-20,20-dimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 186) (40,8 mg, 79%). ESI-MS m/z izračunato 591,26276, pronađeno 593,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,3 minuta (LC metoda B).
Primer 171: Pripremanje (14R)-12,12-dimetil-8-(3-13-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 190)
[1877]
Korak 1: 2-Hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[3-[1-(trifluorometil) ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[1878]
[1879] Boca zapremine 50 mL napunjena karbonil diimidazolom (216 mg, 1,332 mmol) i 2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilnom kiselinom (520 mg, 1,334 mmol) je evakuisana a zatim ponovo napunjena azotom. Dodat je tetrahidrofuran (8 mL) i smeša je mešana na 50 °C sat vremena. Zatim je dodat rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (500 mg, 1,212 mmol) i 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (555 mg, 3,646 mmol) u tetrahidrofuranu (3 mL) i smeša je mešana tokom noći na 50 °C. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana vodom. Organska faza je osušena nad natrijum sulfatom, uparena in vacuo i prečišćena hromatografijom na silika gelu (0% do 50% etil acetata u heksanima) kako bi se dobile neke čiste frakcije. Pomešane frakcije su dodatno prečišćene preparativnom reverzno faznom HPLC (C18): 1% - 99% acetonitrila u vodi sa modifikatorom hlorovodonične kiseline. Čiste frakcije od kolone silika gela i kolone preparatorne HPLC su spojene kako bi se dobio acilsulfonamid intermedijer koji je rastvoren u dioksanu (5 mL) a zatim tretiran dioksan rastvorom hlorovodonične kiseline (2 mL 6 M, 12,00 mmol) nakon čega je mešan na sobnoj temperaturi 2 sata. Smeša je uparena in vacuo i ostatak je ugašen vodenim natrijum bikarbonatom. Beli precipitat proizvoda je isfiltriran i ispran etil acetatom. Vodena faza je dodatno ekstraktovana etil acetatom. Organski ekstrakt je osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i uparen kako bi se, nakon sušenja in vacuo, dobio, 2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propilaminol-2-piridil]sulfonil1-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (343 mg, 41%). ESI-MS m/z izračunato 683,2268, pronađeno 684,32 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,65 minuta (LC metoda A).
Korak 2: (14R)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 190)
[1880]
[1881] U bočici zapremine 5 mL su spojeni cezijum fluorid (160 mg, 1,053 mmol), kalijum karbonat (360 mg, 2,605 mmol) i 4 Å molekularna sita (600 mg) i bočica je evakuisana a zatim ponovo napunjena azotom. Zatim je dodat rastvor2-hloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[3-[1-(trifluorometil) ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (350 mg, 0,5116 mmol) u dimetil sulfoksidu (5 mL) i smeša je mešana na 150 °C tokom noći. Smeša je filtrirana i prečišćena preparativnom reverzno faznom HPLC (C18): 1% - 99% acetonitrila u vodi / modifikatoru hlorovodonične kiseline kako bi se dobio racemski proizvod. Racemat je podvrgnut hiralnoj separaciji SFC hromatografijom korišćenjem ChiralPak AS-H (250 X 10 mm, 5um veličina čestice) sa 28% acetonitril/metanola (90:10)/72% ugljen dioksid mobilna faza (zapremina ubrizgavanja = 500 uL 32 mg/mL rastvora u acetonitril/metanol (90:10)) dajući kao prvi enantiomer za eluiranje (14R)-12,12-dimetil-8-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 190) (82,3 mg, 49%). ESI-MS m/z izračunato 647,2502, pronađeno 648,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,21 minuta (LC metoda B).
Primer 172: Pripremanje (14S)-8-[3-(4,4-dimetilpentil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 193)
[1882]
Korak 1: (14S)-8-[3-(4,4-dimetilpentil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 193)
[1883]
[1884] U bočicu su dodati (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (60 mg, 0,1333 mmol), 1-(4,4-dimetilpentil)imidazolidin-2-on (50 mg, 0,2713 mmol), cezijum karbonat (155 mg, 0,4757 mmol), 4,5-biz(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten (12 mg, 0,02074 mmol) (ksantfos) i anhidrovani dioksan (2,0 mL), tim redosledom. Heterogena smeša je poduvavana azotom 2 minuta. Zatim je pod azotom dodato Pd2(dba)3 (12 mg, 0,01328 mmol) i azot je produvavan kroz smešu još dodatna 2 minuta nakon čega je bočica poklopljena pod azotom. Smeša je mešana na 115 °C tokom 13 sati. Smeša je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja nakon čega je neutralizovana glacijalnom acetatnom kiselinom (70 uL, 1,231 mmol). Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (1,5 mL) i filtriran kroz Whatman 0,45um PTFE špric filter disk. Uzorak je prečišćen preparativno reverzno faznom HPLC-MS [30% - 99 % acetonitrila u vodi (hlorovodonična kiselina kao modifikator)]. Željene frakcije proizvoda su spojene i koncentrovane pod redukovanim pritiskom i dalje osušene pod visokim vakuumom čime je dobijen (14S)-8-[3-(4,4-dimetilpentil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 193) (29 mg, 36%) kao čvrsta supstanca bledo žute boje.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,70 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,52 (dd, J = 8,5, 7,2 Hz, 1H), 7,44 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,15 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,65 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,14 - 3,94 (m, 3H), 3,52 (ddd, J = 9,8, 7,0, 3,2 Hz, 2H), 3,24 (q, J = 7,2 Hz, 3H), 3,09 - 2,97 (m, 1H), 2,86 (t, J = 10,4 Hz, 1H), 2,23 - 2,08 (m, 1H), 1,83 (dd, J = 11,3, 5,1 Hz, 2H), 1,65 - 1,63 (m, 3H), 1,63 - 1,55 (m, 4H), 1,55 (s, 3H), 1,42 (q, J = 11,5 Hz, 1H), 1,29 (s, 1H), 1,26 - 1,19 (m, 2H), 0,92 (s, 9H). ESI-MS m/z izračunato 597,30975, pronađeno 598,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,08 minuta (LC metoda B).
Primer 173: Pripremanje 12,20,20-trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (Jedinjenje 199)
[1885]
Korak 1: 3-Jodo-1-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol i 5-jodo-1-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol (smeša regioizomera)
[1886]
[1887] N-Jodosukcinimid (27,4 g, 121,79 mmol) je dodat rastvoru 4-metil-1H-pirazol (10 g, 121,80 mmol) u dimetilformamidu (100 mL) na sobnoj temperaturi. Smeša je mešana tokom noći a zatim sipana u vodu (700 mL) i ekstraktovana etil acetatom (4 x 150 mL). Organske faze su spojene i isprane vodom (3 x 150 mL) i slanim rastvorom (150 mL), osušene natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio sirov jodirani intermedijer. Rastvoru sirovog jodiranog materijala (2 g, 9,6154 mmol) i kalijum karbonata (2 g, 14,471 mmol) u acetonitrilu (15 mL) je dodat 1-(hlorometil)-4-metoksibenzen (1,5015 g, 1,3 mL, 9,5876 mmol). Smeša je mešana na 80 °C tokom noći pre nego što je koncentrovana pod redukovanim pritiskom. Ostatak je suspendovan u dihlorometanu (80 mL). Nakon mešanja tokom 10 minuta, smeša je pomešana sa silika gelom pre nego što je koncentrovana. Ostatak je postavljen suv na kolonu silika gela i eluiran korišćenjem 0% - 30% etil acetata u heptanima kako bi se dobio 3-jodo-1-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol i 5-jodo-1-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol (smeša regioizomera) (1,36 g, 43%) kao čvrsta supstanca bledo žute boje. ESI-MS m/z izračunato 328,0073, pronađeno 329,0 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,02 minuta (LC metoda I).
Korak 2: 2-Etilheksil 3-[1-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol-3-il]sulfanilpropanoat i 2-etilheksil 3-[2-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol-3-il]sulfanilpropanoat (smeša regioizomera)
[1888]
[1889] U zapečaćenoj tubi, rastvor 3-jodo-1-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol i 5-jodo-1-[(4-metoksifenil)metil]-4-metilpirazol (smeša regioizomera) (1,34 g, 4,0835 mmol) i diizopropiletilamin (1,0685 g, 1,44 mL, 8,2674 mmol) u toluenu (25 mL) su degazirani produvavanjem azota tokom 5 minuta. Dodati su tris(dibenzilidenaceton)dipaladijum(0) (111 mg, 0,1212 mmol), ksantfos (142 mg, 0,2454 mmol) i 2-etilheksil 3-sulfanilpropanoat (986 mg, 4,5156 mmol), bočica je zapečaćena i smeša je zagrevana na 110 °C tokom noći. Reakciona smeša je koncentrovana pod redukovanim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 0% do 20% etil acetata u heptanima kako bi se dobio 2-etilheksil 3-[1-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol-3-il]sulfanilpropanoat i 2-etilheksil 3-[2-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol-3-il]sulfanilpropanoat (smeša regioizomera) (1,54 g, 90%) kao ulje narandžaste boje. ESI-MS m/z izračunato 418,229, pronađeno 419,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,58 minuta (LC metoda I).
Korak 3: [1-[(4-Metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol-3-il]sulfiniloksinatrijum i [2-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol-3-il]sulfiniloksinatrijum (smeša regioizomera)
[1890]
[1891] Natrijum metoksid (750,17 mg, 13,886 mmol) je dodat rastvoru 2-etilheksil 3-[1-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol-3-il]sulfonilpropanoat i 2-etilheksil 3-[2-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol-3-il]sulfonilpropanoat (smeša regioizomera) (1,56 g, 3,4621 mmol) u tetrahidrofuranu (4 mL) i metanolu (1,4 mL) na sobnoj temperaturi. Reakciona smeša je mešana 2 sata nakon čega je koncentrovana pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio [1-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol-3-il]sulfiniloksinatrijum i [2-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol-3-il]sulfiniloksinatrijum (smeša regioizomera) (1,04 g, 104%) kao čvrsta supstanca bež boje. ESI-MS m/z izračunato 288,0545, pronađeno 289,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,5 minuta (LC metoda I).
Korak 4: 1-[(4-Metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol-3-sulfonamid i 2-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol-3-sulfonamid (smeša regioizomera)
[1892]
[1893] Hidroksilamin-O-sulfonska kiselina (9,7 g, 85,770 mmol) je dodata rastvoru [1-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol-3-il]sulfiniloksinatrijum i [2-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol-3-il]sulfiniloksinatrijum (smeša regioizomera) (12,4 g, 43,011 mmol) i natrijum acetat (10,5 g, 128,00 mmol) u vodi (400 mL) na 0 °C. Smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom noći nakon čega je ekstraktovana etil acetatom (2 x 300 mL). Organska faza je osušena nad natrijum sulfatom, filtrirana i koncentrovana pod redukovanim pritiskom. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu eluiranjem od 20% do 60% etil acetata u heptanima kako bi se dobio 1-[(4-metoksifenil) metil]-4-metil-pirazol-3-sulfonamid i 2-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol-3-sulfonamid (smeša regioizomera) (9,72 g, 80%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 281,0834, pronađeno 282,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,51 minuta (LC metoda I).
Korak 5: 4-Metil-1H-pirazol-3-sulfonamid
[1894]
[1895] Rastvor 1-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol-3-sulfonamid i 2-[(4-metoksifenil)metil]-4-metil-pirazol-3-sulfonamid (smeša regioizomera) (270 mg, 0,9597 mmol) u trifluoroacetatnoj kiselini (2 mL) je mešan na 80 °C tokom noći. Smeša je koncentrovana i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 20% - 100% etil acetata u heptanima a zatim izokratski 10% metanola u etil acetatu kako bi se dobio 4-metil-1H-pirazol-3-sulfonamid (120 mg, 78%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (300 MHz, dimetil sulfoksid-d6) ppm 2,12 (s, 3H), 7,29 (s, 2H), 7,64 (s, 1H), 13,11 (br. s., 1H). ESI-MS m/z izračunato 161,0259, pronađeno 162,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,46 minuta (LC metoda I).
Korak 6: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[3-(4-metil-3-sulfamoil-pirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat
[1896]
[1897] Rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-(3-metilsulfoniloksipropil)pirolidin-1-karboksilat (750 mg, 2,236 mmol), kalijum karbonat (772 mg, 5,586 mmol) i 4-metil-1H-pirazol-3-sulfonamid (300 mg, 1,861 mmol) u N,N-dimetilformamidu (3 mL) je mešan na 80 °C tokom 4 sata. Smeša je filtrirana i rastvorena u dietil etru. Smeša je isprana vodom, osušena nad natrijum sulfatom, filtrirana i uparena in vacuo. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% do 30% etil acetata u heksanima) dajući lošu separaciju. Pomešane frakcije su spojene, uparene i razdvojene preparativnom reverzno faznom HPLC (C18, 1% - 99% acetonitrila u vodi / modifikatoru hlorovodonične kiseline) kako bi se dobio kao prvi za eluiranje, glavni regioizomer, terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(4-metil-3-sulfamoil-pirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (200 mg, 27%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,23 - 7,19 (m, 1H), 5,06 (s, 2H), 4,08 (t, J = 7,0 Hz, 2H), 3,65 (dd, J = 10,2, 7,6 Hz, 1H), 2,82 (t, J = 10,6 Hz, 1H), 2,26 (d, J = 0,7 Hz, 3H), 2,11 - 1,97 (m, 1H), 1,92 - 1,82 (m, 3H), 1,66 - 1,58 (m, 1H), 1,46 (s, 9H), 1,39 (s, 3H), 1,37 - 1,30 (m, 2H), 1,27 (s, 3H). ESI-MS m/z izračunato 400,21442, pronađeno 401,26 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,65 minuta (LC metoda A).
Korak 7: 2-Hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]-4-metil-pirazol-3-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (so hidrohlorida)
[1899] Boca zapremine 50 mL napunjena karbonil diimidazolom (73 mg, 0,4502 mmol) i 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilnom kiselinom (170 mg, 0,4525 mmol) je evakuisana/ponovo napunjena azotom. Dodat je tetrahidrofuran (5 mL) i smeša je mešana na 50 °C tokom sat vremena. Zatim je dodat rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(4-metil-3-sulfamoil-pirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (150 mg, 0,3745 mmol) i 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (143 mg, 0,9393 mmol) u tetrahidrofuranu (4 mL) i smeša je mešana tokom noći na 50 °C. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana vodom. Organska faza je osušena nad natrijum sulfatom, uparena in vacuo i prečišćena preparativnom reverzno faznom HPLC (C18, 1% - 99% acetonitrila u vodi / modifikatoru hlorovodonične kiseline) kako bi se dobio acilsulfonamid intermedijer koji je rastvoren u dioksanu (5 mL) i tretiran hlorovodoničnom kiselinom (1,3 mL 6 M u dioksanu, 7,800 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi 3 sata. Smeša je uparena in vacuo kako bi se dobio 2-hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]-4-metil-pirazol-3-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (so hidrohlorida) (57 mg, 22%). ESI-MS m/z izračunato 657,2112, pronađeno 658,32 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,6 minuta (LC metoda A).
Korak 8: 12,20,20-Trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22 -pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 199)
[1900]
[1901] U bočici zapremine 5 mL su zapečaćeni 2-hloro-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]-4-metil-pirazol-3-il]sulfonil-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (so hidrohlorida) (57 mg, 0,08206 mmol), kalijum karbonat (58 mg, 0,4197 mmol), cezijum fluorid (25 mg, 0,1646 mmol) i 3 Å molekularna sita (300 mg) i pročišćeni azotom. Dodat je dimetil sulfoksid (3 mL) i smeša je mešana na 150 °C tokom noći. Smeša je filtrirana i prečišćena preparativnom reverzno faznom HPLC (C18, 1% - 99% acetonitril u vodi / modifikatoru hlorovodonične kiseline) kako bi se dobio 12,20,20-
trimetil-4-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 199) (6,2 mg, 12%). ESI-MS m/z izračunato 621,2345, pronađeno 622,35 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,16 minuta (LC metoda B).
Primer 174: Pripremanje (14S)-8-(3-cikloheksil-2-oksoimidazolidin-1-il)-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 200)
[1902]
Korak 1: (14S)-8-(3-Cikloheksil-2-oksoimidazolidin-1-il)-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 200)
[1903]
[1904] Bočica zapremine 5 mL je napunjena sa (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trionom (50 mg, 0,1075 mmol), 1-cikloheksilimidazolidin-2-onom (26 mg, 0,1545 mmol), Pd2(dba)3(26 mg, 0,02839 mmol), ksantfosom (16 mg, 0,02765 mmol), cezijum karbonatom (180 mg, 0,5525 mmol) i anhidrovanim dioksanom (800 uL). Smeša je produvavana azotom tokom 1 - 2 minuta, poklopljena i mešana na 120 °C tokom 20 sati nakon čega je ohlađena na sobnu temperaturu. Rastvarač je uparen, reakcija je razblažena dimetil sulfoksidom (900 uL), mikrofiltrirana i prečišćena reverznom fazom preparativne hromatografije korišćenjem C18kolone (10% - 99% acetonitrila u vodi 5 mM hlorovodonične kiseline). Frakcije proizvoda su spojene, dodat je slani rastvor i organski rastvarači su upareni. Proizvod je ekstraktovan dihlorometanom, organska faza je osušena nad natrijum sulfatom, filtrirana i uparavanjem rastvarača je dobijena čvrsta supstanca. Proizvod je dodatno prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% dihlorometana do 5% metanola u dihlorometanu čime je dobijen (14S)-8-(3-cikloheksil-2-oksoimidazolidin-1-il)-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 200) (22,5 mg, 36%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 10,79 (s, 1H), 8,01 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,90 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,55 (q, J = 2,9, 2,1 Hz, 2H), 6,54 (dd, J = 5,4, 3,7 Hz, 1H), 4,80 (s, 1H), 3,99 (dd, J = 9,1, 7,1 Hz, 2H), 3,83 (s, 2H), 3,45 (t, J = 8,1 Hz, 2H), 3,32 (t, J = 8,9 Hz, 1H), 3,23 -3,10 (m, 1H), 3,04 (t, J = 9,4 Hz, 1H), 2,71 (s, 1H), 2,12 (dd, J = 12,4, 8,6 Hz, 1H), 1,84 - 1,76 (m, 4H), 1,69 (d, J = 13,2 Hz, 2H), 1,56 (d, J = 5,2 Hz, 8H), 1,43 - 1,36 (m, 4H), 1,15 - 1,06 (m, 1H), 0,91 - 0,85 (m, 1H). ESI-MS m/z izračunato 581,27844, pronađeno 582,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,86 minuta (LC metoda E).
Primer 175: Pripremanje 4-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,20,20-trimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,71 dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 201) i 4-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,20,20-trimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 202)
[1905]
Korak 1: 2-Hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]-4-metil-pirazol-3-il]sulfonil-piridin-3-karboksamid (so hidrohlorida)
[1906]
[1907] Boca zapremine 50 mL napunjena sa karbonil diimidazolom (78 mg, 0,4810 mmol) i 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilnom kiselinom (174 mg, 0,4809 mmol) je ispražnjena/ponovo napunjena azotom. Dodat je tetrahidrofuran (8 mL) i smeša je mešana na 50 °C tokom sat vremena. Zatim je dodat rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[3-(4-metil-3-sulfamoil-pirazol-1-il)propil]pirolidin-1-karboksilat (160 mg, 0,3995 mmol) i 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (160 mg, 1,051 mmol) u tetrahidrofuranu (4 mL) i smeša je mešana tokom noći na 50 °C. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana vodom. Organska faza je osušena nad natrijum sulfatom, uparena in vacuo i prečišćena hromatografijom na silika gelu (0% do 50% etil acetata u heksanima) kako bi se dobile neke čiste frakcije. Pomešane frakcije su ponovo prečišćene preparativnom reverzno faznom HPLC (C18, 1% - 99% acetonitrila u vodi / modifikatoru hlorovodonične kiseline) i dobijen čist materijal je spojen sa čistim frakcijama iz inicijalne kolone silika gela kako bi se dobio acilsulfonamid intermedijer. Rastvor acilsulfonamid intermedijera u dioksanu (5 mL) je tretiran hlorovodoničnom kiselinom (1,3 mL 6 M u dioksanu, 7,800 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi 3 sata. Smeša je uparena in vacuo kako bi se dobio 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]-4-metil-pirazol-3-il]sulfonil-piridin-3-karboksamid (so hidrohlorida) (160 mg, 59%). ESI-MS m/z izračunato 643,27075, pronađeno 644,38 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,65 minuta (LC metoda A).
Korak 2: 4-[3-(3,3-Diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,20,20-trimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion
[1908]
[1909] U bočici zapremine 5 mL su zapečaćeni 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-[1-[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)propil]-4-metil-pirazol-3-il]sulfonil-piridin-3-karboksamid (so hidrohlorida) (160 mg, 0,2351 mmol), kalijum karbonat (165 mg, 1,194 mmol), cezijum fluorid (73 mg, 0,4806 mmol) i 3 Å molekularna sita (300 mg), i pročišćeni azotom. Dodat je dimetil sulfoksid (4 mL) i smeša je mešana na 150 °C tokom noći. Smeša je filtrirana i prečišćena preparativnom reverzno faznom HPLC (C18, 1% - 99% acetonitrila u vodi / modifikatoru hlorovodonične kiseline) kako bi se dobio 4-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,20,20-trimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (53,7 mg, 38%). ESI-MS m/z izračunato 607,29407, pronađeno 608,41 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,36 minuta (LC metoda B).
Korak 3: 4-[3-(3,3-Diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,20,20-trimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 201) i 4-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,20,20-trimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,l0-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 202)
[1910]
[1911] 4-[3-(3,3-Diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,20,20-trimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (53,7 mg) je podvrgnut hiralnoj separaciji SFC hromatografijom korišćenjem ChiralPak AS-3 (150 X 2,1 mm, 3um veličina čestice) sa 32% acetonitril/metanol (90:10)/68% ugljen dioksid mobilna faza pri 0,5 mL/min tokom 6,0 minuta (1,6 mg/mL rastvora u acetonitril/metanol (90:10)) dajući kao prvi enantiomer za eluiranje, 4-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,20,20-trimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 201) (3,5 mg, 5%). ESI-MS m/z izračunato 607,29407, pronađeno 608,38 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,36 minuta (LC metoda B). Drugi enantiomer za eluiranje je bio 4-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,20,20-trimetil-10λ<6>-tia-1,3,9,14,22-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2(7),3,5,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 202) (5,0 mg, 7%). ESI-MS m/z izračunato 607,29407, pronađeno 608,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,49 minuta (LC metoda B).
Primer 176: Pripremanje 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12,18-trimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,101 tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 203) i 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12,18-trimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 204)
[1912]
Korak 1: 8-[3-(3,3-Diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12,18-trimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 203) i 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12,18-trimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 204)
[1913]
[1914] Racemski 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12,18-trimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (76 mg) je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji. Primenjen je sledeći SFC protokol: ChiralPak AS-H (250 X 10mm), 5um; mobilna faza: 38% acetonitril:metanol (90:10), 62% ugljen dioksid, 70 uL injekcija 16 mg/mL rastvora u acetonitril:metanol: dimetil sulfoksid (74:8:18) pri 10 mL/min. Prvi enantiomer za eluiranje je bio 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12,18-trimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 203) (3,5 mg, 6%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 633,30975, pronađeno 634,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,54 minuta (LC metoda J). Drugi enantiomer za eluiranje je bio 8-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12,18-trimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 204) (3,5 mg, 6%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 633,30975, pronađeno 634,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,54 minuta (LC metoda J).
Primer 177: Pripremanje (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropillpropillimidazolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 205)
[1915]
Korak 1: 3-[1-(Trifluorometil)ciklopropil]propanal
[1916]
[1917] Dess-Martin Periodinan (880 mg, 2,075 mmol) je dodat mešajućem rastvoru 3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propan-1-ol (350 mg, 1,665 mmol) u anhidrovanom metilen hloridu (10 mL) na 0 °C (kada sa ledenom vodom) pod azotom. Nakon 15 minuta, uklonjena je kada i reakcija je ostavljena da se zagreje na temperaturu okruženja i mešanje je nastavljeno još 3 sata. Reakcija je razblažena etrom (60 mL) i polako je dodat (da bi se ublažila evolucija gasa ugljen dioksida) zasićeni vodeni natrijum bikarbonat (20 mL). Zatim je dodat natrijum tiosulfat (10 mL) i smeša je mešana na temperaturi okruženja 30 minuta.
Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstraktovan etrom (2 x 20 mL). Spojene organske materije su isprane slanim rastvorom (20 mL), osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom (rotirajući uparivač, pritisak podešen na 300 mbara kako ne bi ispario donekle isparljiv proizvod) kako bi se dobio 3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanal (250 mg, 90%) kao ulje žute boje. Ovaj materijal je korišćen u sledećoj reakciji bez sušenja do čistog materijala i bez dodatnog prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, Benzen-d6) δ 9,15 (s, 1H), 1,99 - 1,90 (m, 2H), 1,52 - 1,44 (m, 2H), 0,68 - 0,59 (m, 2H), 0,00 (dd, J = 2,5, 1,6 Hz, 2H).
Korak 2: terc-Butil N-[2-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propilamino] etil]karbamat
[1918]
[1919] Mešanom rastvoru terc-butil N-(2-aminoetil)karbamat (242 mg, 1,510 mmol) u anhidrovanom metanolu (7 mL) je pod azotom dodat rastvor 3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propanal (250 mg, 1,505 mmol) u anhidrovanom metanolu (1 mL). Nakon što je žuti rastvor mešan na temperaturi okruženja sat vremena, ohlađen je do 0 °C (kada sa ledenom vodom). Zatim je iz dva dela polako dodat natrijum borohidrid (125 mg, 3,304 mmol) i smeša je ostavljena da se zagreje na temperaturu okruženja i mešanje je nastavljeno tokom 13 sati. Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (30 mL) i ispran rastvorom zasićenog vodenog natrijum bikarbonata (2 x 15 mL) i slanim rastvorom (15 mL), osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio sirov terc-butil N-[2-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propilamino]etil]karbamat (467 mg, 100%) kao ulje žute boje kontaminirano nekim biz-aduktom. Ovaj materijal je uzet direktno za sledeći korak. ESI-MS m/z izračunato 310,1868, pronađeno 311,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,17 minuta (LC metoda B).
Korak 3: 1-[3-[1-(Trifluorometil)ciklopropil]propil]imidazolidin-2-on
[1920]
[1921] Čvrst kalijum terc-butoksid (275 mg, 2,451 mmol) je dodat rastvoru sirovog terc-butil N-[2-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propilamino]etil]karbamata (250 mg, 0,8055 mmol, kontaminiran sa nekim biz-aduktom iz prethodnog koraka) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (10 mL) pod azotom i reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom 13 sati. Reakcija je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja i reakciona smeša je zakiseljena do pH = 4 - 5 vodenom hlorovodoničnom kiselinom (2,5 mL 1 M, 2,500 mmol). Nakon uklanjanja isparljivih materija pod redukovanim pritiskom, vodeni ostatak je ekstraktovan etil acetatom (3 x 25 mL). Spojene organske materije su isprane slanim rastvorom (2 x 20 mL), osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% - 10% metanola u gradijentu metilen hlorida) kako bi se dobio 1-[3-[1(trifluorometil)ciklopropil]propil]imidazolidin-2-on (72 mg, 38%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, Benzen-d6) δ 5,35 (s, 1H), 2,84 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 2,54 - 2,41 (m, 4H), 1,33 - 1,25 (m, 2H), 1,23 - 1,17 (m, 2H), 0,63 - 0,54 (m, 2H), 0,05 --0,06 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 236,11365, pronađeno 237,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,93 minuta (LC metoda B).
Korak 4: (14S)-12,12-Dimetil-8-(2-okso-3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propil}imidazolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 205)
[1922]
[1923] U bočicu zapremine 4 mL su dodati (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (50 mg, 0,1111 mmol), 1-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propil]imidazolidin-2-on (32 mg, 0,1355 mmol), cezijum karbonat (130 mg, 0,3990 mmol), 4,5-biz(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten (10 mg, 0,01728 mmol) (ksantfos) i anhidrovani dioksan (1,1 mL), tim redosledom. Kroz heterogenu smešu je produvavan azot tokom 2 minuta. Zatim je pod azotom dodato Pd2(dba)3 (10 mg, 0,01107 mmol) i reakcija je produvavana azotom još dodatna 2 minuta nakon čega je reakcija poklopljena pod azotom. Smeša je mešana na 115 °C tokom 14 sati. Smeša je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja i neutralizovana je glacijalnom acetatnom kiselinom (50 uL, 0,8792 mmol). Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (1,5 mL) i filtriran kroz Whatman 0,45um PTFE špric filter disk. Uzorak je prečišćen preparativnom reverzno faznom HPLC-MS (30% - 99 % acetonitrila u vodi (hlorovodonična kiselina kao modifikator)). Željene frakcije proizvoda su spojene i koncentrovane pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u etil acetat (25 mL) i ispran sukcesivno zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom (2 x 10 mL) i slanim rastvorom (10 mL). Organski sloj je osušen nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propillimidazolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 205) (19,0 mg, 26%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,53 (dd, J = 8,5, 7,2 Hz, 1H), 7,43 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,15 (dd, J = 7,2, 0,8 Hz, 1H), 6,65 (dd, J = 8,5, 0,8 Hz, 1H), 4,14 - 4,07 (m, 1H), 4,07 - 4,02 (m, 1H), 4,02 - 3,95 (m, 1H), 3,56 - 3,45 (m, 2H), 3,29 - 3,19 (m, 3H), 3,03 (d, J = 13,8 Hz, 1H), 2,86 (t, J = 10,4 Hz, 1H), 2,21 - 2,09 (m, 1H), 1,83 (dd, J = 11,7, 5,4 Hz, 2H), 1,78 - 1,69 (m, 2H), 1,69 - 1,63 (m, 4H, delimično zaklonjen pikom rezidualne vode), 1,61 (d, J = 5,6 Hz, 2H), 1,60 - 1,57 (m, 1H), 1,55 (s, 3H), 1,42 (q, J = 11,5 Hz, 1H), 1,32 - 1,26 (m, 1H), 0,96 - 0,90 (m, 2H), 0,72 - 0,66 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 649,2658, pronađeno 650,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,92 minuta (LC metoda B).
Primer 178: Pripremanje (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etil}imidazolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 211)
[1924]
Korak 1: 2-[1-(Trifluorometil)ciklopropil]acetaldehid
[1925]
[1926] Dess-Martin periodinan (2,43 g, 5,729 mmol) je pod azotom dodat mešanom rastvoru 2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etanol (700 mg, 4,542 mmol) u anhidrovanom metilen hloridu (15 mL) na 0 °C (kada sa ledenom vodom). Nakon 15 minuta, kada je uklonjena i reakcija je ostavljena da se zagreje na temperaturu okruženja i mešanje je nastavljeno još 3 sata. Reakcija je razblažena etrom (60 mL) i polako je dodat (da bi se ublažila evolucija gasa ugljen dioksida) zasićen vodeni natrijum bikarbonat (20 mL). Zatim je dodat natrijum tiosulfat (10 mL) i smeša je mešana na temperaturi okruženja 30 minuta. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstraktovan etrom (2 x 20 mL). Spojene organske materije su isprane slanim rastvorom (20 mL), osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom (na 300 mbara kako bi se izbeglo isparavanje donekle isparljivog proizvoda) kako bi se dobio 2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]acetaldehid (500 mg, 72%) kao sirov materijal. Usled isparljivosti, nije dalje sušen ili prečišćavan.<1>H NMR (400 MHz, Benzen-d6) δ 9,24 (tt, J = 2,3, 1,2 Hz, 1H), 1,77 (d, J = 2,4 Hz, 2H), 0,66 - 0,59 (m, 2H), 0,00 (qd, J = 4,4, 2,3 Hz, 2H).<19>F NMR (376 MHz, Benzene-d6) δ - 70,56.
Korak 2: terc-Butil N-[2-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etilamino]etil]karbamat
[1927]
[1928] Mešanom rastvoru terc-butil N-(2-aminoetil)karbamat (527 mg, 3,289 mmol) u anhidrovanom metanolu (15
mL) je pod azotom dodat rastvor 2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]acetaldehid (500 mg, 3,287 mmol) u anhidrovanom metanolu (1 mL). Nakon što je rastvor žute boje mešan na temperaturi okruženja sat vremena, ohlađen je do 0 °C (kada sa ledenom vodom). Zatim je polako iz dva dela dodat natrijum borohidrid (260 mg, 6,872 mmol) i smeša je ostavljena da se zagreje na temperaturu okruženja i mešanje je nastavljeno tokom 15 sati. Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (30 mL) i ispran rastvorom zasićenog vodenog natrijum bikarbonata (2 x 15 mL) i slanim rastvorom (15 mL), osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio tercbutil N-[2-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etilamino]etil] karbamat (970 mg, 100%) kao ulje žute boje. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. ESI-MS m/z izračunato 296,17117, pronađeno 297,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,79 minuta (LC metoda B).
Korak 3: 1-[2-[1-(Trifluorometil)ciklopropil]etil]imidazolidin-2-on
[1929]
[1930] Čvrst kalijum terc-butoksid (460 mg, 4,099 mmol) je dodat rastvoru terc-butil N-[2-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etilamino]etil]karbamat (400 mg, 1,350 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (20 mL) i heterogena reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom 13 sati. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja i zakiseljena glacijalnom acetatnom kiselinom (250 uL, 4,396 mmol). Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom i ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% - 10% metanola u gradijentu metilen hlorida) kako bi se dobio 1-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etil]imidazolidin-2-on (127 mg, 42%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, Benzen-d6) δ 4,99 (s, 1H), 3,35 - 3,20 (m, 2H), 2,71 - 2,56 (m, 4H), 1,70 - 1,59 (m, 2H), 0,86 - 0,73 (m, 2H), 0,46 -0,33 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 222,09799, pronađeno 223,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,78 minuta (LC metoda B).
Korak 4: (14S)-12,12-Dimetil-8-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etil} imidazolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 211)
[1931]
[1932] U bočicu zapremine 4 mL su dodati (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (50 mg, 0.1111 mmol), 1-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etil]imidazolidin-2-on (30 mg, 0,1350 mmol), cezijum karbonat (130 mg, 0,3990 mmol), 4,5-biz(difenilfosfino)-9,9-dimetilksanten (10 mg, 0,01728 mmol) (ksantfos) i anhidrovani dioksan (1 mL), tim redosledom. Kroz heterogenu smešu je produvavan azot 2 minuta. Zatim je pod azotom dodato Pd2(dba)3 (10 mg, 0,01107 mmol) i azot je produvavan kroz smešu još dodatna 2 minuta nakon čega je poklopljena pod azotom. Smeša je mešana na 115 °C tokom 14 sati. Smeša je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja i neutralizovana glacijalnom acetatnom kiselinom (50 uL, 0,8792 mmol). Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (1,5 mL) i filtriran kroz Whatman 0,45um PTFE špric filter disk. Uzorak je prečišćen korišćenjem preparativne reverzno fazne HPLC-MS (30% - 99 % acetonitrila u vodi (hlorovodonična kiselina kao modifikator). Željene frakcije proizvoda su spojene i koncentrovane pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u etil acetat (25 mL) i ispran slanim rastvorom (10 mL). Organski sloj je osušen nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom kako bi se dobila žućkasta čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je dalje prečišćena hromatografijom na silika gelu (0% - 10% metanola u dihlorometanu) kako bi se dobio (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etil}imidazolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 211) (18 mg, 25%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 7,71 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,52 (dd, J = 8,5, 7,2 Hz, 1H), 7,42 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,15 (dd, J = 7,3, 0,8 Hz, 1H), 6,65 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,17 - 4,03 (m, 2H), 3,99 (td, J = 10,2, 9,7, 6,7 Hz, 1H), 3,53 (ddd, J = 9,5, 6,9, 2,5 Hz, 2H), 3,45 - 3,37 (m, 2H), 3,24 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 3,03 (d, J = 13,7 Hz, 1H), 2,87 (t, J = 10,5 Hz, 1H), 2,20 - 2,09 (m, 1H), 1,89 - 1,80 (m, 4H), 1,63 (s, 3H), 1,59 (t, J = 12,2 Hz, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,48 - 1,38 (m, 1H), 1,29 (s, 2H), 1,02 - 0,96 (m, 2H), 0,81 - 0,75 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 635,2502, pronađeno 636,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,85 minuta (LC metoda B).
Primer 179: Pripremanje (14S)-8-{3-[(4,4-difluorocikloheksil)metil]-2-oksoimidazolidin-1-il}-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 214)
[1933]
Korak 1: terc-Butil N-[2-[(4,4-difluorocikloheksil)metilamino]etil]karbamat
[1934]
[1935] Mešanom rastvoru terc-butil N-(2-aminoetil)karbamat (325 mg, 2,029 mmol) u anhidrovanom metanolu (15 mL) je pod azotom dodat rastvor 4,4-difluorocikloheksankarbaldehid (300 mg, 2,025 mmol) u anhidrovanom metanolu (1 mL). Nakon mešanja rastvora žute boje na temperaturi okruženja tokom sat vremena, ohlađen je do 0 °C (kada sa ledenom vodom). Zatim je iz dva dela polako dodat natrijum borohidrid (165 mg, 4,361 mmol) i smeša je ostavljena da se zagreje na temperaturu okruženja i mešanje je nastavljeno 15 sati. Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (30 mL) i ispran rastvorom zasićenog vodenog natrijum bikarbonata (2 x 15 mL) i slanim rastvorom (15 mL), osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio terc-butil N-[2-[(4,4-difluorocikloheksil)metilamino]etil]karbamat (590 mg, 100%) kao ulje žute boje. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR (400 MHz, Benzen-d6) δ 4,76 (s, 1H), 3,16 (q, J = 5,8 Hz, 2H), 2,35 (t, J = 5,9 Hz, 2H), 2,05 (d, J = 6,5 Hz, 2H), 2,03 - 1,97 (m, 1H), 1,59 (s, 9H), 1,54 - 1,42 (m, 4H), 1,16 - 1,03 (m, 2H), 1,02 - 0,84 (m, 1H), 0,48 (s, 2H). ESI-MS m/z izračunato 292,19623, pronađeno 293,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,73 minuta (LC metoda B).
Korak 2: 1-[(4,4-Difluorocikloheksil)metil]imidazolidin-2-on
[1936]
[1937] Čvrst kalijum terc-butoksid (866 mg, 7,718 mmol) je dodat mešanom rastvoru terc-butil N-[2-[(4,4-difluorocikloheksil)metilamino]etil]karbamat (750 mg, 2,565 mmol) u tetrahidrofuranu (12 mL) i heterogena reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom 13 sati. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reakciona smeša je zakiseljena glacijalnom acetatnom kiselinom (500 uL, 8,792 mmol) i koncentrovana pod redukovanim pritiskom. Ostatak je podeljen na vodeni natrijum bikarbonat (15 mL) i etil acetat (25 mL) i slojevi su razdvojeni. Vodeni deo je dalje ekstraktovan etil acetatom (25 mL). Spojene organske materije su isprane slanim rastvorom (20 mL), osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio 1-[(4,4-difluorocikloheksil)metil]imidazolidin-2-on (379 mg, 68%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, Metanol-d4) δ 3,51 - 3,44 (m, 2H), 3,42 - 3,35 (m, 2H), 3,04 (d, J = 7,1 Hz, 2H), 2,09 - 1,98 (m, 2H), 1,83 - 1,65 (m, 5H), 1,33 - 1,20 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 218,12306, pronađeno 219,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,7 minuta (LC metoda B).
Korak 3: (14S)-8-13-[(4,4-Difluorocikloheksil)metil]-2-oksoimidazolidin-1-il}-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 214)
[1938]
[1939] Bočica zapremine 4 mL je napunjena sa (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trionom (50 mg, 0,1111 mmol), 1-[(4,4-difluorocikloheksil)metil]imidazolidin-2-onom (34 mg, 0,1558 mmol), Pd2(dba)3 (15 mg, 0,01638 mmol), ksantfosom (16 mg, 0,02765 mmol), cezijum karbonatom (213 mg, 0,6537 mmol) i anhidrovanim dioksanom (0,75 mL). Smeša je produvavana azotom približno 5 minuta, poklopljena i mešana na 120 °C tokom 22 sata. Reakciona smeša je koncentrovana duvanjem azota u bočicu. Reakcija je razblažena dimetil sulfoksidom (1,5 mL), mikrofiltrirana i podvrgnuta reverznoj fazi preparativne HPLC (C18) korišćenjem gradijenta acetonitrila u vodi (1% do 99%) i hlorovodonične kiseline kao modifikatora. Čiste frakcije su prikupljene i organski rastvarači su upareni. Rastvor je ekstraktovan dihlorometanom i organska faza je osušena nad natrijum sulfatom a zatim filtrirana. Uparavanjem filtrata je dobijena čvrsta supstanca koja je prečišćena fleš hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta metanola (0% do 5%) u dihlorometanu. Čiste frakcije su prikupljene i rastvrači upareni. Ostatak je trituriran dihlorometanom/heksanima i rastvarači su upareni kako bi se dobio (14S)-8-{3-[(4,4-difluorocikloheksil)metil]-2-oksoimidazolidin-1-il}-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 214) (20 mg, 27%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,26 (s, 1H), 7,65 - 7,51 (m, 2H), 7,40 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,94 (broad d, J = 9,1 Hz, 1H), 6,69 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,03 - 3,85 (m, 3H), 3,56 - 3,40 (m, 2H), 3,18 - 3,03 (m, 3H), 2,94 (d, J = 13,3 Hz, 1H), 2,71 (d, J = 10,9 Hz, 1H), 2,12 - 1,96 (m, 3H), 1,86 - 1,69 (m, 7H), 1,63 - 1,43 (m, 9H), 1,36 - 1,27 (m, 1H), 1,23 - 1,10 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 631,2752, pronađeno 632,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,79 minuta (LC metoda B).
Primer 180: Pripremanje (14S)-12,12-dimetil-8-[2-okso-3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropil)imidazolidin-1-il]-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 225)
[1940]
Korak 1: 3,3,3-Trifluoro-2,2-dimetil-propanal
[1941]
[1942] Dess-Martin periodinan (u dihlorometanu) (5,4 g, 12,73 mmol) je pod azotom dodat mešanom rastvoru 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propan-1-ol (2,0 g 75% w/w, 10,55 mmol) u anhidrovanom dihlorometanu (30 mL) na 0 °C (kada ledene vode).
Nakon 15 minuta, kada je uklonjena i reakcija je ostavljena da se zagreje na temperaturu okruženja i mešanje je nastavljeno još dodatna 2 sata. Reakcija je razblažena etrom (80 mL) i polako je dodat (kako bi se ublažila evolucija gasa ugljen dioksida) zasićen vodeni natrijum bikarbonat (30 mL). Zatim je dodat rastvor 10% natrijum tiosulfata (10 mL) i smeša je mešana na temperaturi okruženja 30 minuta tokom kojih su se sve čvrste supstance rastvorile. Slojevi su razdvojeni i vodeni sloj je ekstraktovan etrom (2 x 30 mL). Spojene organske materije su isprane slanim rastvorom (30 mL), osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirane i delimično koncentrovane pod redukovanim pritiskom na približno 3 - 5 mL, kako bi se dobio 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropanal (1,37 g, 93%) kao sirov rastvor u etru koji je direktno korišćen u sledećem koraku. ESI-MS m/z izračunato 140,0449, pronađeno 141,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,42 minuta (LC metoda E).
Korak 2: terc-Butil N-[2-[(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propil)amino]etil]karbamat
[1943]
[1944] Mešanom rastvoru terc-butil N-(2-aminoetil)karbamat (1,2 g, 7,490 mmol) u anhidrovanom metanolu (45 mL) je pod azotom dodat sirov eterični rastvor 3,3,3-trifluoro-2,2-dimetil-propanal (1,37 g, 9,778 mmol) opisan u prethodnom koraku u anhidrovanom metanolu (8 mL). Nakon što je bledo žuti rastvor mešan na temperaturi okruženja tokom sat vremena, ohlađen je do 0 °C (kada sa ledenom vodom). Zatim je polako u dva dela dodat natrijum borohidrid (875 mg, 23,13 mmol) i smeša je ostavljena da se zagreje na temperaturu okruženja i mešanje je nastavljeno 24 sata. Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (100 mL) i ispran rastvorom zasićenog vodenog natrijum bikarbonata (2 x 50 mL) i slanim rastvorom (50 mL), osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio terc-butil N-[2-[(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropil)amino]etil]karbamat (777 mg, 36%) kao bistro viskozno ulje. ESI-MS m/z izračunato 284,17117, pronađeno 285,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,97 minuta (LC metoda E).
Korak 3: 1-(3,3,3-Trifluoro-2,2-dimetil-propil)imidazolidin-2-on
[1945]
[1946] Čvrst kalijum terc-butoksid (860 mg, 7,664 mmol) je dodat rastvoru terc-butil N-[2-[(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropil)amino]etil]karbamat (777 mg, 2,733 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (40 mL) i heterogena reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom 18 sati. Reakciona smeša je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja i zakiseljena do pH ∼ 5 vodenom hlorovodoničnom kiselinom (1 M). Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom i vodeni ostatak je ekstraktovan etil acetatom (3 x 50 mL). Spojene organske materije su isprane slanim rastvorom (2 x 40 mL), osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% - 10% metanola u metilen hloridu) kako bi se dobio 1-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropil)imidazolidin-2-on (19,38 mg, 3%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 3,57 - 3,48 (m, 2H), 3,44 - 3,39 (m, 2H), 3,25 (d, J = 2,5 Hz, 2H), 1,16 (d, J = 5,9 Hz, 6H). ESI-MS m/z izračunato 210,09799, pronađeno 211,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,94 minuta (LC metoda E).
Korak 4: (14S)-12,12-dimetil-8-[2-okso-3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropil) imidazolidin-1-il]-2λ<6>-tia3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,101 tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 225)
[1947]
[1948] Bočica zapremine 5 mL je napunjena sa (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trionom (40 mg, 0,08890 mmol), 1-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropil)imidazolidin-2-onom (20,56 mg, 0,09781 mmol), Pd2(dba)3 (21,5 mg, 0,02348 mmol), ksantfosom (13,5 mg, 0,02333 mmol), cezijum karbonatom (150 mg, 0,4604 mmol) i anhidrovanim dioksanom (800 uL). Smeša je produvavana azotom 1 - 2 minuta, poklopljena i mešana na 120 °C tokom 20 sati nakon čega je ohlađena na sobnu temperaturu. Rastvrač je uparen, reakcija je razblažena dimetil sulfoksidom (900 uL), mikrofiltrirana i prečišćena reverznom fazom preparativne hromatografije korišćenjem C18kolone (10% - 99% acetonitrila u vodi 5 mM hlorovodonična kiselina tokom 15 minuta trajanja). Frakcije proizvoda su spojene, dodat je slani rastvor i organski rastvarači su upareni. Proizvod je ekstraktovan dihlorometanom, organska faza je osušena nad natrijum sulfatom i uparavanjem rastvarača je dobijena čvrsta supstanca. Čvrsta supstanca je prečišćena hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% dihlorometana do 5% metanola u dihlorometanu. Čiste frakcije su sakupljene i rastvarači upareni, međutim nečistoće su ostale. Materijal je razblažen dimetil sulfoksidom (900 uL) i prečišćen reverznom fazom preparativne hromatografije korišćenjem C18kolone (20% -80% acetonitrila u vodi 5 mM hlorovodonične kiseline tokom 30 minuta trajanja) kako bi se dobio (14S)-12,12-dimetil-8-[2-okso-3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropil)imidazolidin-1-il]-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 225) (1,9 mg, 3%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 623,2502, pronađeno 624,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,88 minuta (LC metoda E).
Primer 181: Pripremanje (14S)-8-{3-[(adamantan-1-il)metil]-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 229)
[1949]
Korak 1: terc-Butil N-[2-(1-adamantilmetilamino)etil]karbamat
[1950]
[1951] Mešanom rastvoru terc-butil N-(2-oksoetil)karbamat (494 mg, 3,103 mmol) u anhidrovanom metilen hloridu (20 mL) je dodat rastvor 1-adamantilmetanamin (509 mg, 3,080 mmol) u anhidrovanom metilen hloridu (1 mL) praćeno dodavanjem glacijalne acetatne kiseline (200 uL, 3,517 mmol) na temperaturi okruženja pod azotom. Bistra reakcija je mešana 30 minuta, nakon čega je iz jednog dela dodat natrijum triacetoksiborohidrid (1,0 g, 4,718 mmol) na temperaturi okruženja i mešanje je nastavljeno 13 sati. Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom. Ostatak je stavljen u etil acetat (30 mL) i ispran rastvorom zasićenog vodenog natrijum bikarbonata (2 x 15 mL) i slanim rastvorom (15 mL), osušen nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio terc-butil N-[2-(1-adamantilmetilamino)etil]karbamat (901 mg, 95%) kao guma žute boje. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez dodatnog prečišćavanja. ESI-MS m/z izračunato 308,24637, pronađeno 309,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,09 minuta (LC metoda B).
Korak 2: 1-(1-Adamantilmetil)imidazolidin-2-on
[1952]
[1953] Čvrst kalijum terc-butoksid (520 mg, 4,634 mmol) je pod azotom dodat mešanom rastvoru terc-butil N-[2-(1-adamantilmetilamino)etil]karbamat (470 mg, 1,524 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (13 mL) i reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom 13 sati. Heterogena smeša je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja i zakiseljena je hlorovodoničnom kiselinom (6,0 mL 1.0 M, 6,000 mmol), i isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom. Vodeni ostatak je ekstraktovan etil acetatom (3 x 10 mL) i spojene organske materije su isprane slanim rastvorom (10 mL), osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% - 10% metanola u CH2Cl2) kako bi se dobio 1-(1-adamantilmetil)imidazolidin-2-on (49 mg, 14%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, Benzen-d6) δ 5,31 (s, 1H), 2,90 (dd, J = 8,9, 6,6 Hz, 2H), 2,83 (s, 2H), 2,73 (dd, J = 8,7, 6,7 Hz, 2H), 2,06 - 1,98 (m, 3H), 1,80 - 1,73 (m, 3H), 1,69 (dq, J = 12,4, 2,3 Hz, 3H), 1,61 (d, J = 2,8 Hz, 6H). ESI-MS m/z izračunato 234,17322, pronađeno 235,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,51 minuta (LC metoda B).
Korak 3: (14S)-8-[3-[(adamantan-1-il)metil]-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 229)
[1954]
[1955] U bočicu zapremine 4 mL su dodati (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (20 mg, 0,04298 mmol), 1-(1-adamantilmetil)imidazolidin-2-on (13 mg, 0,05548 mmol), cezijum karbonat (52 mg, 0,1596 mmol), ksantfos (4 mg, 0,006913 mmol) i anhidrovani dioksan (1,0 mL), tim redosledom. Kroz heterogenu smešu je produvavan azot tokom 2 minuta. Zatim je pod azotom dodato Pd2(dba)3 (4 mg, 0,004368 mmol) i azot je produvavan kroz reakcionu smešu tokom dodatna 2 minuta nakon čega je smeša poklopljena pod azotom. Smeša je mešana na 115 °C tokom 15 sati. Smeša je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja i neutralizovana je glacijalnom acetatnom kiselinom (20 uL, 0,3517 mmol). Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (1,0 mL) i filtriran kroz Whatman 0,45um PTFE špric filter disk. Uzorak je prečišćen korišćenjem preparativne reverzno fazne HPLC-MS (30% - 99 % acetonitrila u vodi (hlorovodonična kiselina kao modifikator)) dajući (14S)-8-{3-[(adamantan-1-il)metil]-2-oksoimidazolidin-1-il}-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 229) (12 mg, 43%) as a žućkastu čvrstu supstancu. ESI-MS m/z izračunato 647,3254, pronađeno 648,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,82 minuta (LC metoda G).
Primer 182: Pripremanje 23,23-dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi]-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(22),9,11,13,18,20-heksaen-15,17,17-triona (Jedinjenje 236)
Korak 1: 4-(1-Metil-1-nitroetil)-tetrahidropiran-2-on
[1957]
[1958] 5,6-Dihidropiran-2-on (50 g, 510 mmol) i 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (7,6 mL, 51 mmol) su rastvoreni u 2-nitropropanu (138 mL, 1530 mmol) i dobijena smeša je zagrevana do 100 °C tokom 2 i po sata pod azotom. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu i koncentrovana in vacuo kako bi se uklonio višak isparljivih materija. Preostalo ulje je rastvoreno u etil acetatu (1 L) i ekstraktovano sa 1M hlorovodoničnom kiselinom (100 mL) i vodom (100 mL). Vodene faze su odbačene i organska faza je osušena nad natrijum sulfatom, filtrirana i koncentrovana in vacuo kako bi se dobio 4-(1-metil-1nitroetil)-tetrahidropiran-2-on (85 g, 79%) kao čvrsta supstanca narandžaste boje. ESI-MS m/z izračunato 187,00, pronađeno 188,00 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,62 minuta (LC metoda P).
Korak 2: 4-(2-Hidroksietil)-5,5-dimetilpirolidin-2-on
[1959]
[1960] 4- (1-Metil-1-nitroetil)-tetrahidropiran-2-on (85 g, 454 mmol) je rastvoren u etanolu (1,2 L) nakon čega je dodat Raney nikl (10 g, 170 mmol) i dobijena kaša je hidrogenizovana na pri bara H2/ 80 °C tokom 25 sati. Reakciona smeša je filtrirana, filter kolač je odbačen i filtrat je vraćen u reaktor i zagrevan do 120 °C tokom 23 sata. Smeša je koncentrovana u ulje in vacuo kako bi se dobio 4-(2-hidroksietil)-5,5-dimetilpirolidin-2-on (63,5 g, 89%) kao bledo žuta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 157,00, pronađeno 158,20 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,30 minuta (LC metoda P).
Korak 3: 2-(2,2-Dimetilpirolidin-3-il)-etanol
[1961]
[1962] 4-(2-Hidroksietil)-5,5-dimetilpirolidin-2-on (63,5 g, 404 mmol) je rastvoren u tetrahidrofuranu (2 L).
Dodat je litijum aluminijum hidrid (61,3 g, 1616 mmol) u malim porcijama i dobijena kaša je refluksovana pod azotom tokom 45 sati, ohlađena na sobnu temperaturu i pažljivo ugašena zasićenim rastvorom natrijum sulfata (300 mL). Smeša je razblažena sa MTBE (1 L) i filtrirana. Filter kolač je odbačen i filtrat je osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan in vacuo kako bi se dobio 2-(2,2-dimetilpirolidin-3-il)-etanol (50,8 g, 87%) kao bledo žuto ulje. ESI-MS m/z izračunato 143,00, pronađeno 144,20 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,68 minuta (LC metoda P). Sirov proizvod je korišćen bez daljeg prečišćavanja.
Korak 4: 3-(2-Hidroksietil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar
[1963]
[1964] 2-(2,2-Dimetilpirolidin-3-il)-etanol (50,8 g, 355 mmol) je rastvoren u smeši dihlorometana (350 mL) i vode (350 mL). Dodati su natrijum bikarbonat (59,6 g, 710 mmol) i di- terc butil dikarbonat (73,6 g, 337 mmol) i dobijena smeša je mešana na sobnoj temperaturi tokom 19 sati. Nakon toga su dodati natrijum hidroksid (14 g, 350 mmol) i voda (50 mL) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 18 sati a zatim je razblažena dietil etrom (1 L). Faze su razdvojene i vodena faza je ekstraktovana dietil etrom (2 x 350 mL). Vodena faza je odbačena i spojene organske faze su osušene nad natrijum sulfatom, koncentrovane in vacuo, zatim triturirane heksanom. Dobijena bledo žuta čvrsta supstanca je prikupljena vakuum filtracijom kako bi se dobio 3-(2-hidroksietil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (60,0 g, 69%) kao bledo žuta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 243,00, pronađeno 244,00 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 4,24 minuta (LC metoda P).
Korak 5: 3-(2-Metansulfoniloksietil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar
[1965]
[1966] 3-(2-Hidroksietil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (54,5 g, 224 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (545 mL). Dodat je trietilamin (62,5 mL, 448 mmol) i dobijen rastvor je hlađen u kadi sa ledenom vodom nakon čega je ukapavanjem tokom sat vremena dodavan metansulfonil hlorid (19,2 mL, 247 mmol). Ledena kada je zatim uklonjena i reakcija je mešana sat vremena na sobnoj temperaturi nakon čega je ugašena zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom (200 mL). Faze su razdvojene i organska faza je ekstraktovana vodom (2 x 200 mL). Vodene faze su odbačene i organska faza je osušena nad natrijum sulfatom, filtrirana i koncentrovana in vacuo kako bi se dobio 3-(2-metansulfoniloksietil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (72,2 g, kvant.) kao ulje narandžaste boje. ESI-MS m/z izračunato 321,00, pronađeno 322,20 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 5,24 minuta (LC metoda P).
Korak 6: 3-(2-Aminoetil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar
[1967]
[1968] 3-(2-Metansulfoniloksietil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (10,0 g, 31,1 mmol) je rastvoren u 1,4-dioksanu (100 mL). Dodat je 28% amonijum hidroksid (100 mL) i reakcija je zagrevana do 40 °C u Parr reaktoru tokom 26 sati. 1,4-Dioksan je uklonjen in vacuo, i preostali materijal je ekstraktovan dihlorometanom (2 x 100 mL). Faze su razdvojene i vodena faza je odbačena i spojene organske faze su osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane in vacuo. Preostalo ulje žute boje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu (0% - 15% metanola u gradijentu dihlorometana) kako bi se dobio 3-(2-aminoetil)-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estar (5,1 g, 68%) kao bledo žuta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 242,00, pronađeno 243,20 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,09 minuta (LC metoda P).
Korak 7: terc-Butil 2,2-dimetil-3-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etil]pirolidin-1-karboksilat
[1969]
[1970] 3-(2-aminoetil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilna kiselina terc-butil estru (500 mg, 2,063 mmol) i 6-fluoropiridin-2-sulfonamidu (363,4 mg, 2,063 mmol) u dimetil sulfoksidu (4,21 mL) je dodat kalijum karbonat (290,8 mg, 2,104 mmol) i smeša je mešana na 100 °C tokom 20 sati nakon čega je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu. Razblažena je sa etil acetatom i sipana u zasićen vodeni NH4Cl. Slojevi su razdvojeni nakon čega je organski sloj ispran zasićenim vodenim slanim rastvorom, osušen (natrijum sulfat), filtriran i koncentrovan u penu žute boje koja je prečišćena hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata čime je dobijen terc-butil 2,2-dimetil-3-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etil]pirolidin-1-karboksilat (497,5 mg, 61%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 398,19876, pronađeno 399,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,58 minuta (LC metoda A).
Korak 8: terc-Butil 3-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1971]
[1972] 2-Hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (499,7 mg, 1,330 mmol) i karbonil diimidazol (269,8 mg, 1,664 mmol) (rekristalizovan iz tetrahidrofurana) su spojeni u tetrahidrofuranu (6,89 mL) i mešani 60 minuta na sobnoj temperaturi. Nakon toga je dodat terc-butil 2,2-dimetil-3-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etil]pirolidin-1-karboksilat (530 mg, 1,330 mmol) u tetrahidrofuranu (2,65 mL) a zatim 1,8diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (1,013 g, 6,654 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Rotirajućim uparavanjem je uklonjen tetrahidrofuran a ostatak je rastvoren u etil acetatu i ispran sa 6 N hlorovodoničnom kiselinom (jednom), zatim slanim rastvorom (jednom), osušen (natrijum sulfat), filtriran i koncentrovan u čvrstu supstancu bele boje koja je hromatografisana na 275g C18reverzno faznoj koloni eluiranjem sa gradijentom od 50% - 100% acetonitrila vodi čime je dobijen terc-butil 3-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropilletoksilpirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (497,5 mg, 49%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,75 (s, 1H), 8,40 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,12 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,62 (dd, J = 8,5, 7,2 Hz, 1H), 7,21 (s, 1H), 7,18 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,74 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,18 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,35 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 3,25 (s, 2H), 3,02 (d, J = 9,1 Hz, 1H), 2,09 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,90 - 1,57 (m, 4H), 1,41 - 1,31 (m, 11H), 1,29 (s, 2H), 1,19 (d, J = 1,7 Hz, 1H), 0,98 (d, J = 5,1 Hz, 2H), 0,96 (t, J = 4,2 Hz, 3H), 0,89 (d, J = 5,1 Hz, 2H). ESI-MS m/z izračunato 755,248, pronađeno 756,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,84 minuta (LC metoda A).
Korak 9: 2-Hloro-N-[[6-[2-(2,2-dimetilpirolidin-3-il)etilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid
[1973]
terc-Butil 3-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (498,6 mg, 0,6593 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (2,176 mL) i smeši je dodata trifluoroacetatna kiselina (2,032 mL, 26,37 mmol), i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 60 minuta. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom, stavljena u zasićen vodeni natrijum bikarbonat i etil acetat i slojevi su razdvojeni (rastvorljivost proizvoda u etil acetatu pod ovim uslovima je veoma slaba, pomoći će dodavanje nešto metanola). Sloj etil acetata je ispran 6 N hlorovodoničnom kiselinom a zatim osušen (natrijum sulfat), filtriran i koncentrovan organski sloj rotirajućim uparavanjem a zatim sušenjem pod vakuumom čime je dobijen 2-hloro-N-[[6-[2-(2,2-dimetilpirolidin-3-il)etilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (351,2 mg, 81%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 655,19556, pronađeno 656,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,58 minuta (LC metoda A).
Korak 10: 23,23-Dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(22),9,11,13,18,20-heksaen-15,17,17-trion (Jedinjenje 236)
[1975] U bočici su spojeni 2-hloro-N-[[6-[2-(2,2-dimetilpirolidin-3-il)etilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (351,2 mg, 0,5353 mmol), kalijum karbonat (369,8 mg, 2,676 mmol), 3 Å molekularna sita i dimetil sulfoksid (21,3 mL), produvani azotom, poklopljeni, zagrevani do 180 °C i mešani 18 sati. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, filtrirana, razblažena etil acetatom i isprana rastvorom zasićenog vodenog natrijum bikarbonata a zatim slanim rastvorom. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom i uparene nakon čega su prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata (proizvod eluira nakon dostizanja 100% etil acetata) kako bi se dobio 23,23-dimetil-11-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(22),9,11,13,18,20-heksaen-15,17,17-trion (Jedinjenje 236) (5,7 mg, 2%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 619,2189, pronađeno 620,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,08 minuta (LC metoda B).
Primer 183: Pripremanje (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{[4-(trifluorometil)cikloheksil]metil]imidazolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 239)
[1976]
Korak 1: terc-Butil N-[2-[[4-(trifluorometil)cikloheksil]metilamino] etil]karbamat
[1977]
[1978] Mešanom rastvoru 4-(trifluorometil)cikloheksankarbaldehid (250 mg, 1,388 mmol) u anhidrovanom metanolu (10 mL) je pod azotom dodat rastvor terc-butil N-(2-aminoetil)karbamat (223 mg, 1,392 mmol) u anhidrovanom metanolu (1 mL). Nakon mešanja rastvora žute boje na sobnoj temperaturi tokom sat vremena, ohlađen je do 0 °C (kada sa ledenom vodom). Zatim je polako iz dva dela dodat natrijum borohidrid (112 mg, 2,960 mmol) i smeša je ostavljena da se zagreje na temperaturu okruženja i mešanje je nastavljeno tokom 15 sati. Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (30 mL) i ispran rastvorom zasićenog vodenog natrijum bikarbonata (2 x 15 mL) i slanim rastvorom (15 mL), osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio terc-butil N-[2-[[4-(trifluorometil)cikloheksil]metilamino]etil]karbamat (400 mg, 89%) kao guma žute boje. Sirov materijal je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. ESI-MS m/z izračunato 324,20245, pronađeno 325,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,9 minuta (LC metoda B).
Korak 2: 1-[[4-(Trifluorometil)cikloheksil]metil]imidazolidin-2-on (cis/trans izomer 2)
[1979]
[1980] Čvrst kalijum terc-butoksid (270 mg, 2,406 mmol) je pod azotom dodat mešanom rastvoru terc-butil N-[2-[[4-(trifluorometil)cikloheksil]metilamino]etil]karbamat (260 mg, 0,8015 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (10 mL), i reakciona smeša je zagrevana na 70 °C tokom 13 sati. Heterogena smeša je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja nakon čega je zakiseljena vodenom hlorovodoničnom kiselinom (3,0 mL 1.0 M, 3,000 mmol) i isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom. Vodeni ostatak je ekstraktovan etil acetatom (3 x 10 mL). Spojene organske materije su isprane slanim rastvorom (10 mL), osušene nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirane i koncentrovane pod redukovanim pritiskom. Ostatak je prečišćen preparativnom reverzno faznom HPLC-MS (0% - 70% acetonitrila u vodi (hlorovodonična kiselina kao modifikator) čime je dobijen kao drugi cis/trans izomer za eluiranje, 1-[[4-(trifluorometil)cikloheksil]metil]imidazolidin-2-on (cis/trans izomer 2) (52 mg, 26%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, Benzen-d6) δ 4,93 (s, 1H), 2,89 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 2,77 - 2,63 (m, 4H), 1,80 (dd, J = 13,4, 3,6 Hz, 2H), 1,72 - 1,57 (m, 1H), 1,52 (dd, J = 13,4, 3,5 Hz, 2H), 1,22 - 1,06 (m, 3H), 0,66 (qd, J = 13,3, 3,6 Hz, 2H). ESI-MS m/z izračunato 250,1293, pronađeno 251,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,3 minuta (LC metoda B).
Korak 3: (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{[4-(trifluorometil)cikloheksil]metil} imidazolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 239)
[1981]
[1982] U bočicu su dodati (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trion (20 mg, 0,04445 mmol), 1-[[4-(trifluorometil)cikloheksil]metil]imidazolidin-2-on (13 mg, 0,05195 mmol), cezijum karbonat (52 mg, 0,1596 mmol), ksantfos (4 mg, 0,006913 mmol) i anhidrovani dioksan (0,7 mL), tim redosledom. Heterogena smeša je produvavana azotom 3 minuta. Zatim je pod azotom dodato Pd2(dba)3 (4 mg, 0,004368 mmol) i smeša je produvavana azotom tokom dodatna 2 minuta nakon čega je poklopljena pod azotom. Smeša je mešana na 108 °C tokom 15 sati. Smeša je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu i neutralizovana je glacijalnom acetatnom kiselinom (20 uL, 0,3517 mmol). Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (1,5 mL) i filtriran kroz Whatman 0,45um PTFE špric filter disk. Uzorak je prečišćen korišćenjem preparativne reverzno fazne HPLC-MS (30% - 99% acetonitrila u vodi (hlorovodonična kiselina kao modifikator) čime je dobijen (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{[4-(trifluorometil)cikloheksil]metillimidazolidin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 239) (9 mg, 31%) kao žućkasta čvrsta supstanca. Ovo jedinjenje je pojedinačni izomer nepoznate cis ili trans orijentacije na prstenu cikloheksana.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,26 (s, 1H), 7,59 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,58 - 7,53 (m, 1H), 7,40 (dd, J = 8,6, 2,7 Hz, 1H), 7,06 - 7,01 (m, 1H), 6,94 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,70 (dd, J = 8,5, 0,8 Hz, 1H), 4,01 - 3,83 (m, 3H), 3,51 - 3,41 (m, 3H), 3,31 - 3,28 (m, 1H), 3,11 - 3,04 (m, 2H), 2,94 (d, J = 13,4 Hz, 1H), 2,70 (t, J = 0,8 Hz, 1H), 2,18 (t, J = 8,1 Hz, 1H), 2,13 - 2,01 (m, 1H), 1,95 - 1,80 (m, 4H), 1,79 - 1,74 (m, 2H), 1,58 (s, 3H), 1,57 - 1,48 (m, 3H), 1,47 (s, 3H), 1,34 - 1,14 (m, 3H), 1,00 (q, J = 12,6 Hz, 2H).<19>F NMR (376 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ -72,24 (d, J = 8,9 Hz). ESI-MS m/z izračunato 663,28143, pronađeno 664,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,0 minuta (LC metoda B).
Primer 184: Pripremanje 11-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-7,7-dimetil-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(22),9,11,13,18,20-heksaen-15,17,17-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 250)
[1983]
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etil]pirolidin-1-karboksilat (enantiomer 2)
[1984]
[1985] Racemski terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etil] pirolidin-1-karboksilat (1,475 g, 3,701 mmol) je razdvojen hiralnom SFC korišćenjem ChiralPak IG (250 X 21,2 mm kolone, 5um veličina čestice) sa 32%
metanola (bez modifikatora))/68% ugljen dioksid mobilna faza pri 70 mL/min dajući kao drugi enantiomer za eluiranje, tercbutil 2,2-dimetil-4-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etil]pirolidin-1-karboksilat (enantiomer 2) (617 mg, 84%) kao penu bele boje. ESI-MS m/z izračunato 398,19876, pronađeno 399,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,59 minuta (LC metoda B).
Korak 2: terc-Butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (enantiomer 2)
[1986]
[1987] U bocu su dodati 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (147,7 mg, 0,4082 mmol), rekristalizovan karbonil diimidazol (66,2 mg, 0,4083 mmol) i tetrahidrofuran (4 mL). Reakcija je mešana na 40 °C tokom 90 minuta. Nakon toga je dodat terc-Butil 2,2-dimetil-4-[2-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]etil] pirolidin-1-karboksilat (enantiomer 2) (130 mg, 0,3262 mmol) a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (150 uL, 1,003 mmol). Reakcija je mešana tokom noći. Reakcija je filtrirana i prečišćena sa HPLC (30% - 99% acetonitrila u vodi sa 0,1% modifikatora hlorovodonične kiseline) kako bi se dobio terc-butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil] sulfamoil] -2-piridil] amino] etil] -2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (enantiomer 2) (64 mg, 26%) kao pena bele boje. ESI-MS m/z izračunato 741,30756, pronađeno 742,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,19 minuta (LC metoda G).
Korak 3: 2-Hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-[[6-[2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (enantiomer 2)
[1988]
[1989] U bocu su dodati terc-butil 4-[2-[[6-[[2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino] etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (enantiomer 2) (64 mg, 0,08622 mmol), dihlorometan (5 mL) i trifluoroacetatna kiselina (250 uL, 3,245 mmol). Reakcija je mešana 30 minuta. Reakcija je uparena do suvog stanja i neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom. Reakcija je ekstraktovana etil acetatom, osušena nad natrijum sulfatom, filtrirana i uparena kako bi se dobio 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi) pirazol-1-il]-N-[[6-[2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etilamino]-2-piridil]sulfonil] piridin-3-karboksamid (enantiomer 2) (51 mg, 92%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 641,2551, pronađeno 642,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,11 minuta (LC metoda G).
Korak 4: 11-[3-(3,3-Diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-7,7-dimetil-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(22),9,11,13,18,20-heksaen-15,17,17-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 250)
[1990]
[1991] U bočicu su dodati kalijum karbonat (59 mg, 0,4269 mmol), cezijum fluorid (25 mg, 0,1646 mmol), 3 Å molekularna sita i rastvor 2-hloro-6-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)pirazol-1-il]-N-[[6-[2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (enantiomer 2) (51 mg, 0,07941 mmol) u dimetil sulfoksidu (3,5 mL). Reakcija je stavljena u prethodno zagrejanu na 150 °C uljanu kadu i ostavljena da se meša tokom noći. Reakcija je ohlađena na sobnu temperaturu, filtrirana i prečišćena sa HPLC (10% - 99% acetonitrila u vodi sa 0,1% modifikatora hlorovodonične kiseline) čime je dobijen 11-[3-(3,3-diciklopropilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-7,7-dimetil-17λ<6>-tia-2,8,10,16,22-pentaazatetraciklo[16.3.1.15,8.09,14]trikoza-1(22),9,11,13,18,20-heksaen-15,17,17-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 250) (14,1 mg, 29%). ESI-MS m/z izračunato 605,27844, pronađeno 606,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,9 minuta (LC metoda G).
Primer 185: Pripremanje (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-2-oksoetoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 258)
Korak 1: 1-Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-(1H-pirazol-3-iloksi)etanon
[1993]
terc-Butil 3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-okso-etoksi)pirazol-1-karboksilat (350 mg, 0,7256 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (2,31 mL) sa trifluoroacetatnom kiselinom (1,241 g, 10,88 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 60 minuta. Reakcija je uparena i dobijeno ulje je podeljeno između etil acetata i rastvora zasićenog natrijum bikarbonata. Vodeni deo je ekstraktovan dva dodatna puta etil acetatom, nakon čega su organske materije spojene, isprane slanim rastvorom, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene kako bi se dobilo ulje 1-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-(1H-pirazol-3-iloksi)etanon (223,7 mg, 93%). ESI-MS m/z izračunato 218,10553, pronađeno 219,0 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,43 minuta (LC metoda A).
Korak 2: terc-Butil 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-okso-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat
terc-Butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (134,3 mg, 0,5413 mmol), 1-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-(1H-pirazol-3-iloksi)etanon (179,1 mg, 0,5416 mmol) i kalijum karbonat (89,88 mg, 0,6503 mmol) su spojeni u anhidrovanom dimetil sulfoksidu (2,362 mL). Dodat je 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (12,16 mg, 0,1084 mmol) i heterogena smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod azotom 16 sati. Reakciona smeša je razblažena vodom (4,542 mL) i mešana 15 minuta. Dobijena čvrsta supstanca bele boje je prikupljena i isprana vodom. Čvrsta supstanca je rastvorena u dihlorometanu i osušena nad magnezijum sulfatom. Smeša je filtrirana i uparena kako bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-okso-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (148,7 mg, 64%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 429,14554, pronađeno 430,0 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,83 minuta (LC metoda A).
Korak 3: 2-Hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-okso-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina
[1995]
terc-Butil2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-okso-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilat (145,7 mg, 0,3389 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (1,457 mL) sa trifluoroacetatnom kiselinom (391,7 uL, 5,084 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom 2 i po sata. Isparljive materije su uklonjene rotirajućim uparavanjem (bez zagrevanja) a zatim sušenjem pod vakuumom tokom 30 minuta. Sirov materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitkog gradijenta od 100% dihlorometana do 20% metanola u dihlorometanu čime je dobijen 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-oksoetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (89,6 mg, 71%) kao čvrsta supstanca braon boje kontaminirana malom količinom polaznog materijala koja je uzeta direktno za sledeći korak. ESI-MS m/z izračunato 373,08295, pronađeno 374,0 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,61 minuta (LC metoda A).
Korak 4: terc-Butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-okso-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[1996]
[1997] 2-Hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-okso-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (89,6 mg, 0,2397 mmol) i karbonil diimidazol (48,63 mg, 0,2999 mmol) (sveže rekristalizovan iz tetrahidrofurana) su spojeni u tetrahidrofuranu (1,165 mL) i mešani 45 minuta na sobnoj temperaturi. Nakon toga je dodat terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (98,89 mg, 0,2397 mmol) u tetrahidrofuranu (448 uL) a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (179,3 uL, 1,199 mmol) i reakcija je mešana na sobnoj temperaturi 16 sati. Tetrahidrofuran je uklonjen rotirajućim uparavanjem nakon čega je rastvoreno u etil acetatu i isprano 1N hlorovodoničnom kiselinom (jednom) i slanim rastvorom (jednom), osušeno (magnezijum sulfat), filtrirano i koncentrovano u svetlo braon ulje koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitkog gradijenta od 100% dihlorometana do 20% metanola u dihlorometanu dajući slabu separaciju proizvoda od dva polazna materijala. Materijal je nakon toga filtriran i prečišćen korišćenjem metoda reverzne faze HPLC-MS (Luna C18(2) kolona (75 x 30 mm, 5 um veličina čestice) kupljeno od Phenomenex (pn: 00 °C-4252-U0-AX), i dualnog gradijenta od 1% - 99% mobilne faze B tokom 15,0 minuta (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 uL i temperatura kolone = 25 °C)) čime je dobijen terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-oksoetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (49,5 mg, 27%). ESI-MS m/z izračunato 767,2868, pronađeno 768,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,83 minuta (LC metoda A).
Korak 5: 2-Hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-okso-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so)
[1998]
terc-Butil(4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-okso-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3--karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (49,5 mg, 0,06443 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (1,5 mL) i ohlađen do 0 °C, i smeši je ukapavanjem dodata trifluoroacetatna kiselina (49,64 uL, 0,6443 mmol) i smeša je mešana na 0 °C tokom 60 minuta. Ukapavanjem je dodata trifluoroacetatna kiselina (49,64 uL, 0,6443 mmol) na 0 °C nakon čega je zagrejana na sobnu temperaturu i mešana 30 minuta, ponovo ohlađena do 0 °C, dodata je trifluoroacetatna kiselina (49,64 uL, 0,6443 mmol), zagrejana na sobnu temperaturu i mešana 20 minuta nakon čega je ukapavanjem dodata trifluoroacetatna kiselina (49,64 uL, 0,6443 mmol) na sobnoj temperaturi i mešanje je nastavljeno na sobnoj temperaturi sat vremena. Smeša je koncentrovana do suvog stanja rotirajućim uparavanjem bez zagrejavanja. Zajedno upareno sa etrom (5 puta), zatim postavljeno pod vakuum tokom sat vremena čime je dobijen 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-oksoetoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (50,4 mg, 100%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 667,2344, pronađeno 668,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,55 minuta (LC metoda A).
Korak 6: (14S)-8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-2-oksoetoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,101 tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 258)
[1999]
[2000] U bočici su spojeni 2-hloro-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il-2-okso-etoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (trifluoroacetatna so) (50,4 mg, 0,06443 mmol), kalijum karbonat (53,43 mg, 0,3866 mmol), 3 Å molekularna sita i dimetil sulfoksid (3,057 mL), produvani azotom, poklopljeni, zagrevani do 155 °C mešani 18 sati. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu, filtrirana, razblažena etil acetatom i 1N hlorovodoničnom kiselinom i slojevi su razdvojeni. Vodeni sloj je ispran još jednom etil acetatom i organski slojevi su spojeni, isprani slanim rastvorom (jednom), osušeni (magnezijum sulfat), filtrirani i koncentrovani u čvrstu supstancu braon boje koja je prečišćena hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata čime je dobijen (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-2-oksoetoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (11 mg) koji je i dalje bio kontaminiran nečistoćama. Za reakciju koja je usledila, ovaj materijal je rastvoren u metanolu (110 uL) na sobnoj temperaturi i dodat je NaBH4(1,646 mg, 0,04351 mmol) (zabeleženo snažno žuborenje), i dobijen rastvor je mešan 10 minuta nakon čega je koncentrovan rotirajućim uparavanjem. Ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu, filtriran i prečišćen korišćenjem metoda reverzne faze HPLC-MS upotrebom Luna C18(2) kolone (75 x 30 mm, 5 um veličina čestice) kupljeno od Phenomenex (pn: 00 °C-4252-U0-AX), i dualnog gradijenta od 30% - 99% mobilne faze B tokom 15,0 minuta (mobilna faza A = voda (5 mM hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril, brzina protoka = 50 mL/min, zapremina ubrizgavanja = 950 uL i temperatura kolone = 25 °C)) dajući kao obnovljeni polazni materijal u redukciji, (14S)-8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}-2-oksoetoksi)-1H-pirazol-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 258) (2,20 mg, 20%) kao čvrstu supstancu bele boje. ESI-MS m/z izračunato 631,2577, pronađeno 632,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,99 minuta (LC metoda B).
Primer 186: Pripremanje (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi}-1,2-dihidropiridin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaaza tetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 268)
[2001]
Korak 1: 3-[terc-Butil(dimetil)silil]oksi-1H-piridin-2-on
[2002]
[2003] 3-Hidroksi-1H-piridin-2-on (1 g, 9,001 mmol) i imidazol (1,6 g, 23,50 mmol) su suspendovani u N,Ndimetilformamidu (10 mL) pod inertnom atmosferom. Ukapavanjem na sobnoj temperaturi tokom 30 minuta je dodavan rastvor terc-butil-hlorodimetil-silan (1,5 g, 9,952 mmol) u N,N-dimetilformamidu (10 mL). Reakcija je nakon toga ostavljena da se meša tokom noći. Dobijen rastvor je zatim sipan u vodu i smeša je ekstraktovana terc-butil metil etrom (3 x 50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom, slanim rastvorom nakon čega su osušeni nad natrijum sulfatom. Nakon filtracije, rastvarač je uklonjen pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio 3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-1H-piridin-2-on (1,8 g, 89%) kao svetlo braon čvrsta supstanca koja je korišćena direktno u sledećoj reakciji.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 6,97 (ddd, J = 6,4, 1,8, 0,8 Hz, 1H), 6,89 (dd, J = 7,2, 1,8 Hz, 1H), 6,14 (dd, J = 7,2, 6,5 Hz, 1H), 1,00 (d, J = 1,3 Hz, 9H), 0,26 (s, 6H).
Korak 2: terc-Butil 2-hloro-6-(3-hidroksi-2-okso-1-piridil)piridin-3-karboksilat
[2004]
[2005] Smeša terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilat (1 g, 4,031 mmol), 3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-1H-piridin-2-on (910 mg, 4,038 mmol), kalijum karbonat (1,32 g, 9,551 mmol) i 1,4-diazabiciklo[2.2.2]oktan (112 mg, 0,9985 mmol) u dimetil sulfoksidu (10 mL) je mešana na sobnoj temperaturi 15 sati. Reakciona smeša je sipana na mrvljeni led i dobijen precipitat je sakupljen filtracijom i osušen kako bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-(3-hidroksi-2-okso-1-piridil)piridin-3-karboksilat (0,82 g, 63%) kao svetlo braon čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 12,57 (s, 1H), 8,15 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,36 (dd, J = 7,2, 1,8 Hz, 1H), 7,23 (dd, J = 6,6, 1,8 Hz, 1H), 6,95 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,29 (t, J = 6,9 Hz, 1H), 1,59 (s, 9H). ESI-MS m/z izračunato 322,07202, pronađeno 323,14 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,55 minuta (LC metoda G).
Korak 3: 2-Hloro-6-[2-okso-3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]-1-piridil]piridin-3-karboksilna kiselina
[2006]
[2007] Smeša 2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etil metansulfonat (362 mg, 1,559 mmol), terc-butil 2-hloro-6-(3-hidroksi-2-okso-1-piridil)piridin-3-karboksilat (500 mg, 1,549 mmol), cezijum karbonat (1,1 g, 3,376 mmol) u dimetil sulfoksidu (10 mL) je mešana na sobnoj temperaturi 15 sati. Reakcija je razblažena vodom i ekstraktovana etil acetatom. Spojeni ekstrakti su isprani slanim rastvorom i vodom, osušeni nad natrijum sulfatom, filtrirani i upareni. Ostatak je prečišćen kolonskom hromatografijom na silika gelu (0% - 80% etil acetata u heksanima) i drugi regioizomer za eluiranje je izolovan i ovom materijalu su dodati trifluoroacetatna kiselina (1,5 mL, 19,47 mmol) i dihlorometan (5 mL) na sobnoj temperaturi uz mešanje tokom 2 sata praćeno evaporacijom isparljivih materija kako bi se dobila 2-hloro-6-[2-okso-3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]-1-piridil]piridin-3-karboksilna kiselina (120 mg, 19%).<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 8,14 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,28 (td, J = 7,2, 1,9 Hz, 2H), 6,95 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,22 (t, J = 7,1 Hz, 1H), 4,13 (t, J = 7,3 Hz, 2H), 2,01 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 1,58 (s, 9H), 1,01 - 0,87 (m, 2H), 0,69 - 0,57 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 402,05942, pronađeno 403,13 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,56 minuta (LC metoda A).
Korak 4: terc-Butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[2-okso-3-[2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi]-1-piridil]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[2008]
[2009] U bočici zapremine 20 mL su spojeni terc-butil 2-hloro-6-[2-okso-3-[2-[1-(trifluorometil)ciklo propil]etoksi]-1-piridil]piridin-3-karboksilat (100 mg, 0,2483 mmol) i karbonil diimidazol (47 mg, 0,2899 mmol) u tetrahidrofuranu (2 mL) i mešani su na sobnoj temperaturi 2 sata. Nakon toga je dodat terc-butil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (114 mg, 0,2763 mmol) a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (50 uL, 0,3343 mmol) i reakcija je mešana 16 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana malom količinom 1:1 zasićen vodeni amonijum hlorid/slani rastvor. Organske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene. Dobijen ostatak braon boje je prečišćen hromatografijom na silika gelu korišćenjem plitkog gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata kako bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[2-okso-3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]-1-piridil]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (48 mg, 24%). ESI-MS m/z izračunato 796,2633, pronađeno 797,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,81 minuta (LC metoda A).
Korak 5: (14S)-12,12-Dimetil-8-(2-okso-3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksil-1,2-dihidropiridin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 268)
[2010]
[2011] Rastvor terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[2-okso-3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]-1-piridil]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (48 mg, 0,06020 mmol) u dihlorometanu (400 uL) i trifluoroacetatnoj kiselini (100 uL, 1,307 mmol) je mešan na sobnoj temperaturi 4 sata. Rastvarači su uklonjeni evaporacijom i rastvoreni u etil acetatu. Rastvor je ispran sa rastvorom zasićenog natrijum bikarbonata (2 mL) i organski sloj je sakupljen i rastvarač uklonjen evaporacijom nakon čega je osušen pod vakuumom. Dobijen ostatak je rastvoren u dimetil sulfoksidu (5 mL) i dodata su 3 Å molekularna sita i reakciona smeša je mešana 10 minuta. Zatim su dodati cezijum fluorid (36 mg, 0,2370 mmol) i kalijum karbonat (31 mg, 0,2243 mmol) i reakciona smeša je zagrevana na 150 °C tokom 16 sati. Reakciona smeša je filtrirana kroz Whatman filter disk (puradisc 25 TF) i filtrat je prečišćen metodom reverzne faze HPLC-MS korišćenjem dualnog gradijenta od 30% - 99% mobilne faze B tokom 15,0 minuta (mobilna faza A = voda (0,05% hlorovodonična kiselina), mobilna faza B = acetonitril) kako bi se dobio (14S)-12,12-dimetil-8-(2-okso-3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1,2-dihidropiridin-1-il)-2λ<6>-tia-3,9,11, 18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 268) (19,5 mg, 49%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 7,96 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,59 (s, 1H), 7,46 (d, J = 6,7 Hz, 1H), 7,21 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 6,72 (s, 1H), 6,43 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,21 (t, J = 7,0 Hz, 1H), 4,06 (s, 2H), 3,86 (brs, 1H), 3,29 - 3,13 (m, 2H), 2,89 (brs, 1H), 2,36 (brs, 1H), 1,95 (t, J = 7,8 Hz, 2H), 1,85 (brs, 1H), 1,67 - 1,54 (m, 3H), 1,46 (t, J = 11,4 Hz, 2H), 1,18 (s, 3H), 1,14 (s, 3H), 0,99 (s, 2H), 0,67 (s, 2H). ESI-MS m/z izračunato 660,2342, pronađeno 661,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,83 minuta (LC metoda B).
Primer 187: Pripremanje 19,19-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,21-pentaazatetraciklo [15.2.1.111,14.02,7]henikoza-2,4,6,11(21),12-pentaen-8,10,10-triona (Jedinjenje 273)
[2012]
Korak 1: terc-Butil 2,2-dimetil-4-(2-metilsulfoniloksietil)pirolidin-1-karboksilat
[2014] U bocu su dodati terc-butil 4-(2-hidroksietil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (751 mg, 3,086 mmol), dihlorometan (10 mL) i trietilamin (1,75 mL, 12,56 mmol). Reakciona boca je ohlađena do 0 °C nakon čega je ukapavanjem dodat metansulfonil hlorid (290 uL, 3,747 mmol) i reakcija je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i mešana 45 minuta. Reakcija je ugašena ledenom vodom. Reakcija je ekstraktovana dihlorometanom dva puta, osušena nad natrijum sulfatom, filtrirana i uparena kako bi se dobio terc-butil 2,2-dimetil-4-(2-metilsulfoniloksietil)pirolidin-1-karboksilat (980 mg, 99%) kao gusto žuto ulje. ESI-MS m/z izračunato 321,16098, pronađeno 322,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,22 minuta (LC metoda B).
Korak 2: terc-Butil 2,2-dimetil-4-[2-(3-sulfamoilpirazol-1-il)etil]pirolidin-1-karboksilat
[2015]
[2016] U bočicu zapremine 20 mL su dodati kalijum karbonat (1,264 g, 9,146 mmol), 1H-pirazol-3-sulfonamid (449 mg, 3,051 mmol) i rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-(2-metilsulfoniloksietil)pirolidin-1-karboksilat (980 mg, 3,049 mmol) u N,N-dimetilformamidu (12 mL). Reakcija je poklopljena i postavljena u uljanu kadu od 75 °C i ostavljena da se meša 18 sati. Reakcija je ugašena slanim rastvorom i ekstraktovana etil acetatom 3 puta. Organski slojevi su spojeni, osušeni nad natrijum sulfatom, filtrirani i upareni. Reakcija je prečišćena kolonskom hromatografijom (0% - 30% metanola u gradijentu dihlorometana) čime je dobijen terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-(3-sulfamoilpirazol-1-il)etil]pirolidin-1-karboksilat (259,0 mg, 23%) kao čvrsta supstanca bele boje zajedno sa manjom količinom regioizomernog nusproizvoda. ESI-MS m/z izračunato 372,18314, pronađeno 373,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,39 minuta (LC metoda B).
Korak 3: terc-Butil 4-[2-[3-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[2017]
[2018] U bocu su dodati 2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (271 mg, 0,6953 mmol), karbonil diimidazol (136 mg, 0,8387 mmol) i tetrahidrofuran (3 mL). Reakcija je postavljena u prethodno zagrejanu na 35 °C uljanu kadu i ostavljena da se meša 2 sata. Reakcija je nakon toga uklonjena iz uljane kade i dodat je čvrst terc-butil 2,2-dimetil-4-[2-(3-sulfamoilpirazol-1-il)etil]pirolidin-1-karboksilat (259 mg, 0,6953 mmol) iz boce koja je isprana tetrahidrofuranom (2 mL) u reakcionu smešu. Dodat je 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (350 uL, 2,340 mmol) i reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi tokom noći. Reakcija je ugašena slanim rastvorom i ekstraktovana etil acetatom. Organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i uparen kako bi se dobila pena. Penasti ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0% - 20% metanola u gradijentu dihlorometana) čime je dobijen terc-butil 4-[2-[3-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-
karboksilat (336 mg, 65%) kao pena bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,35 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,79 (s, 1H), 7,62 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,59 (s, 1H), 6,13 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,22 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 4,13 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,54 (dt, J = 23,2, 9,6 Hz, 1H), 2,82 (t, J = 10,5 Hz, 1H), 2,00 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 1,91 - 1,78 (m, 5H), 1,77 - 1,68 (m, 2H), 1,35 (dd, J = 18,7, 10,1 Hz, 13H), 1,18 (d, J = 1,7 Hz, 3H), 0,95 - 0,88 (m, 2H), 0,79 - 0,72 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 743,248, pronađeno 744,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,81 minuta (LC metoda G).
Korak 4: 2-Hloro-N-({1-[2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etil]-1H-pirazol-3-il}sulfonil)-6-(3-{3-[1-(trifluorometil) ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)piridin-3-karboksamid
[2019]
[2020] U bocu su dodati terc-butil 4-[2-[3-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]etil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (330 mg, 0,4434 mmol) i dihlorometan (6 mL). Dodata je trifluoroacetatna kiselina (1,5 mL, 19,47 mmol) i reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi sat vremena. Reakcija je uparena do suvog stanja, neutralizovana zasićenim natrijum bikarbonatom i ekstraktovana etil acetatom (loša rastvorljivost u etil acetatu). Organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom i filtriran. Većina željenog materijala je i dalje bila na filter kolaču tako da je filter kolač (primarno natrijum sulfat) rastvoren u vodi i ispran sa još etil acetata. Organska faza je razdvojena i uparena bez sušenja nad natrijum sulfatom. Proizvod je osušen pod vakuumom kako bi se uklonila rezidualna voda pre nego što je dobijen 2-hloro-N-([1-[2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etil]-1H-pirazol-3-il}sulfonil)-6-(3-{3-[1-(trifluorometil) ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)piridin-3-karboksamid (246 mg, 86%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 643,19556, pronađeno 644,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,52 minuta (LC metoda B).
Korak 5: 19,19-Dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,21-pentaazatetraciklo[15.2.1.111,14.02,7] henikoza-2,4,6,11(21),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 273)
[2022] U bočicu zapremine 20 mL su dodata 3 Å molekularna sita, kalijum karbonat (264 mg, 1,910 mmol), cezijum fluorid (116 mg, 0,7636 mmol) i rastvor 2-hloro-N-({1-[2-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)etil]-1H-pirazol-3-il}sulfonil)-6-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)piridin-3-karboksamid (246 mg, 0,3819 mmol) u dimetil sulfoksidu (15 mL). Reakcija je poklopljena i postavljena u prethodno zagrejanu na 150 °C uljanu kadu i ostavljena da se meša tokom noći. Reakcija je ostavljena da se ohladi na sobnu temperaturu, filtrirana i prečišćena reverznom fazom HPLC (10% - 99% acetonitrila u vodi sa 0,1% modifikatora hlorovodonične kiseline) čime je dobijen 19,19-dimetil-4-(3-13-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,21-pentaazatetraciklo [15.2.1.111,14.02,7]henikoza-2,4,6,11(21),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 273) (25,5 mg, 11%). ESI-MS m/z izračunato 607,2189, pronađeno 608,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,08 minuta (LC metoda B).
Primer 188: Pripremanje 21,21-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo [17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-triona (Jedinjenje 275)
[2023]
Korak 1: terc-Butil 4-[4-[3-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1
[2025] U bocu su dodati 2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi] pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (280 mg, 0,7184 mmol), karbonil diimidazol (140 mg, 0,8634 mmol) i tetrahidrofuran (3 mL). Reakcija je zagrevana na 35 °C tokom 90 minuta. Reakcija je izvađena iz uljane kade i dodat je rastvor terc-butil 2,2-dimetil-4-[4-(3-sulfamoilpirazol-1-il)butil]pirolidin-1-karboksilat (288 mg, 0,7190 mmol) u tetrahidrofuranu (3 mL) a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (350 uL, 2,340 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša 18 sati nakon čega je ugašena slanim rastvorom i ekstraktovana etil acetatom. Organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i uparen kako bi se dobila pena. Rezidualna pena je prečišćena hromatografijom na silika gelu (0% - 20% metanola u dihlorometanu) čime je dobijen terc-butil 4-[4-[3-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (159,1 mg, 29%) kao pena bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,88 (s, 1H), 8,39 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,08 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 8,00 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,86 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 6,19 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,23 (t, J = 6,3 Hz, 4H), 3,49 (q, J = 10,1 Hz, 1H), 2,73 (q, J = 10,0 Hz, 1H), 2,07 - 1,94 (m, 1H), 1,82 (ddt, J = 27,6, 14,2, 7,0 Hz, 5H), 1,74 - 1,69 (m, 2H), 1,36 (d, J = 10,9 Hz, 10H), 1,30 (d, J = 11,7 Hz, 5H), 1,18 (s, 4H), 0,95 - 0,87 (m, 2H), 0,80 - 0,70 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 771,27924, pronađeno 772,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,99 minuta (LC metoda G).
Korak 2: 2-Hloro-N-({1-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butil]-1H-pirazol-3-il}sulfonil)-6-(3-{3-[1-(trifluorometil) ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)piridin-3-karboksamid
[2026]
[2027] U bocu koja sadrži terc-butil 4-[4-[3-[[2-hloro-6-[3-[3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]pirazol-1-il]butil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (156 mg, 0,2020 mmol) su dodati dihlorometan (6 mL) i trifluoroacetatna kiselina (600 uL, 7,788 mmol). Reakcija je ostavljena da se meša na sobnoj temperaturi sat vremena. Reakcija je uparena do suvog stanja i zasićeni rastvor natrijum bikarbonata je dodavan dok reakciona smeša nije došla do pH = 7. Dodat je etil acetat i smeša je mešana 3 minuta. Smeša je razdvojena i organski sloj (ne potpuno rastvoren) je uparen do suvog stanja i osušen pod vakuumom tokom noći čime je dobijen 2-hloro-N-({1-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butil]-1H-pirazol-3-il}sulfonil)-6-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)piridin-3 -karboksamid (133 mg, 98%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 671,2268, pronađeno 672,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,56 minuta (LC metoda G).
Korak 3: 21,21-Dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02, 7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 275)
[2028]
[2029] U bočicu su dodati kalijum karbonat (137 mg, 0,9913 mmol), cezijum fluorid (62 mg, 0,4082 mmol), 3 Å molekularna sita i rastvor 2-hloro-N-({1-[4-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)butil]-1H-pirazol-3-il}sulfonil)-6-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)piridin-3 -karboksamid (133 mg, 0,1979 mmol) u dimetil sulfoksidu (8 mL). Reakcija je stavljena u prethodno zagrejanu na 150 °C uljanu kadu i ostavljena da se meša 18 sati. Reakcija je filtrirana i prečišćena reverznom fazom HPLC (30% - 99% acetonitrila u vodi sa 0,1% modifikatora hlorovodonične kiseline) čime je dobijen 21,21-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (Jedinjenje 275) (58,6 mg, 47%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 635,2502, pronađeno 636,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,22 minuta (LC metoda B).
Primer 189: Pripremanje 21,21-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo [17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-triona
(enantiomer 1) (Jedinjenje 276) i 21,21-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo [17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 277)
Korak 1: 21,21-Dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 276) i 21,21-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 277)
[2031]
[2032] Racemski 21,21-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (53 mg, 0,08337 mmol) je razdvojen hiralnom SFC korišćenjem ChiralPak AS-H (250 x 21,2 mm kolona, 5um veličina čestice) sa 25% acetonitril:metanol (90:10; 20mM NH3))/75% ugljen dioksid mobilna faza pri 10 mL/min dajući kao prvi enantiomer za eluiranje,21,21-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 276) (19,6 mg, 74%);<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,57 (s, 1H), 8,20 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,98 (s, 1H), 7,75 (s, 1H), 6,89 (d, J = 9,1 Hz, 2H), 6,11 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,27 (s, 2H), 4,20 (t, J = 6,2 Hz, 2H), 2,72 (d, J = 9,3 Hz, 2H), 2,54 (s, 6H), 1,85 (dd, J = 10,3, 5,4 Hz, 3H), 1,75 - 1,69 (m, 2H), 1,61 (s, 4H), 1,52 (s, 4H), 0,93 - 0,89 (m, 2H), 0,77 - 0,73 (m, 2H), ESI-MS m/z izračunato 635,2502, pronađeno 636,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,24 minuta (LC metoda B). Drugi enantiomer za eluiranje je bio 21,21-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,23-pentaazatetraciklo[17.2.1.111,14.02,7]trikoza-2,4,6,11(23),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 277) (16,6 mg, 63%). ESI-MS m/z izračunato 635,2502, pronađeno 636,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,22 minuta (LC metoda B).
Primer 190: Pripremanje 20,20,22-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (atropizomer 2, enantiomer 1) (Jedinjenje 285) i 20,20,22-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (atropizomer 2, enantiomer 2) (Jedinjenje 286)
[2033]
Korak 1: 20,20,22-Trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (atropizomer 2, enantiomer 1) (Jedinjenje 285) i 20,20,22-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (atropizomer 2, enantiomer 2) (Jedinjenje 286)
[2034]
[2035] 20,20,22-Trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (17 mg, 0,02788 mmol) (racemski atropizomer 2) je razdvojen hiralnom SFC korišćenjem ChiralPak AS-H (250 x 10 mm kolona, 5um veličina čestice) sa 24% acetonitril:metanol (90:10; 20 mM NH3))/76% ugljen dioksid mobilna faza pri 10 mL/min dajući kao prvi enantiomer za eluiranje, 20,20,22-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (atropizomer 2, enantiomer 1) (Jedinjenje 285) (5,4 mg, 64%) kao čvrstu supstancu žute boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,16 (bs, 1H), 8,19 (d, J=2,8 HZ, 1H), 7,81 (d, J=7,9 Hz, 1H), 7,71 (s, 1H), 6,92 (d, J=7,9 HZ, 1H), 6,10 (d, J=2,8 Hz, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,22 (bs, 2H), 4,02 (m, 1H), 2,66 (s, 3H), 2,39 (m, 1H), 2,02 (m, 3H), 1,83 (m, 2H), 1,65 (dd, J=12,1 Hz, 5,6 Hz, 1H), 1,50 (q, J=15,6 Hz, 12,4 Hz, 2 H), 1,50 (m, 8H), 1,36 (q, J=15,6 Hz, 12,4 Hz, 2H), 1,22 (s, 6H), 1,12 (m, 1H). ESI-MS m/z izračunato 609,2345, pronađeno 610,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,14 minuta (LC metoda D). Drugi enantiomer za eluiranje je bio 20,20,22-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (atropizomer 2, enantiomer 2) (Jedinjenje 286) (6,5 mg, 76%), izolovan kao pena žute boje. ESI-MS m/z izračunato 609,2345, pronađeno 610,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,14 minuta (LC metoda D).
Primer 191: Pripremanje 12,20,20-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo [16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 290) i 12,20,20-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7] dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 291)
[2036]
Korak 1: 12,20,20-Trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 290) i 12,20,20-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 291)
[2037]
[2038] Racemski 12,20,20-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (73 mg, 0,1197 mmol) je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji korišćenjem ChiralPak AS-H (250 x 21,2 mm kolone, 5um veličina čestice) sa 20% acetonitril:metanol (90:10, 20mM NH3))/80% ugljen dioksid mobilna faza pri 70 mL/min dajući kao prvi enantiomer za eluiranje,12,20,20-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111,14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 290) (35,1 mg, 92%). ESI-MS m/z izračunato 609,2345, pronađeno 610,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,07 minuta (LC metoda D). Drugi enantiomer za eluiranje je bio 12,20,20-trimetil-4-[3-(3,3,3-trifluoro-2,2-dimetilpropoksi)-1H-pirazol-1-il]-10λ<6>-tia-1,3,9,13,14-pentaazatetraciklo[16.2.1.111, 14.02,7]dokoza-2,4,6,11(22),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 291) (28,5 mg, 78%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,16 (bs, 1H), 8,38 (s, 1H), 8,19 (d, J=2,8 Hz, 1H), 7,81 (d, J=7,9 Hz, 1H), 6,92 (d, J= 7,9 Hz, 1H), 6,10 (d, J= 2,8 Hz, 1H), 4,35 (m, 1H), 4,22 (bs, 2H), 4,02 (m, 1H), 2,38 (s, 3H), 2,02 (m, 3H), 1,83 (m, 2H), 1,75 (dd, J= 12,1 Hz, 5,6 Hz, 1H), 1,54 (s, 3H), 1,47 (s, 3H), 1,36 (q, J=15,6 HZ, 12,4 Hz, 2H), 1,22 (s, 6H), 1,12 (m, 1H). ESI-MS m/z izračunato 609,2345, pronađeno 610,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,07 minuta (LC metoda D).
Primer 192: Pripremanje 5,5-dimetil-9-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil] etoksi}-1H-pirazol-1-il)-15λ<6>-tia-2,6,8,14,20-pentaazatetraciklo [14.3.1.13,6.07,12]henikoza-1(20),7,9,11,16,18-heksaen-13,15,15-triona (Jedinjenje 31)
Korak 1: 1-Benzil-5,5-dimetil-pirolidin-3-on
[2040]
[2041] Mešanom rastvoru 5,5-dimetilpirolidin-3-on (1,020 g, 9,014 mmol) u anhidrovanom acetonitrilu (30 mL) je pod azotom dodat anhidrovani kalijum karbonat (5,00 g, 36,18 mmol) na temperaturi okruženja. Nakon mešanja tokom 15 minuta, dodat je benzil bromid (1,2 mL, 10,09 mmol). Nakon 7 sati, reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan in vacuo kako bi se dobio sirov proizvod koji je ekstraktovan iz vode (20 mL) i etil acetata (3 x 30 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani vodom i osušeni nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani nad jastučetom silika gela i koncentrovani in vacuo kako bi se dobio sirov proizvod 1-benzil-5,5-dimetil-pirolidin-3-on (1,67 g, 91%) kao viskozni materijal narandžaste boje koji je korišćen u sledećoj reakciji bez dodatnog prečišćavanja. ESI-MS m/z izračunato 203,13101, pronađeno 204,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,81 minuta (LC metoda B).
Korak 2: (E)-N-(1-benzil-5,5-dimetilpirolidin-3-iliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid
[2043] Mešanom rastvoru 1-benzil-5,5-dimetil-pirolidin-3-on (1,762 g, 8,668 mmol) i 2-metilpropan-2-sulfinamid (1,157 g, 9,546 mmol) u anhidrovanom tetrahidrofuranu (70 mL) je pod azotom dotat titanijum(IV) etoksid (7,3 mL, 34,82 mmol) na temperaturi okruženja. Reakciona smeša je ostavljena da se meša na 80 °C tokom 13 sati nakon čega je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja. Reakcija je polako gašena zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom dok se nije formiralo nešto precipitata (iako su soli titanijuma bele boje, usled boje proizvoda, so je izgledala braonkasto) (približno 40 mL natrijum bikarbonata je korišćeno). Neorganska suspenzija je filtrirana preko jastučeta celita i filter kolač je ispran etil acetatom (100 mL). Nakon što su slojevi razdvojeni od filtrata, vodeni deo je ekstraktovan etil acetatom (2 x 50 mL). Spojeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom, osušeni nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtrirani i koncentrovani pod redukovanim pritiskom kako bi se dobio (E)-N-(1-benzil-5,5-dimetilpirolidin-3-iliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid (2,602 g, 98%) kao braonkasta čvrsta supstanca koja je korišćena u sledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja. ESI-MS m/z izračunato 306,17657, pronađeno 307,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,8 minuta (LC metoda B).
Korak 3: N-(1-Benzil-5,5-dimetil-pirolidin-3-il)-2-metil-propan-2-sulfinamid
[2044]
[2045] Mešanom rastvoru (E)-N-(1-benzil-5,5-dimetilpirolidin-3-iliden)-2-metilpropan-2-sulfinamid (770 mg, 2,51 mmol) u anhidrovanom metanolu (3 mL) i tetrahidrofuranu (10 mL) na -10 °C je pod azotom u tri porcije dodat natrijum borohidrid (290 mg, 7,665 mmol). Reakciji je omogućeno da se zagreje do 0 °C i mešana je na toj temperaturi 2 sata. Reakcija je ugašena vodenim NH4Cl (5 mL), a zatim zasićenim vodenim natrijum bikarbonatom (20 mL). Isparljive materije su uklonjene i preostali vodeni deo je ekstraktovan etil acetatom (25 mL). Vodeni sloj je ekstraktovan dalje etil acetatom (2 x 15 mL). Spojeni organski slojevi su osušeni (magnezijum sulfat), filtrirani i koncentrovani kako bi se dobio sirov N-(1-benzil-5,5-dimetil-pirolidin-3-il)-2-metilpropan-2-sulfinamid (650 mg, 84%) kao braonkasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 308,19223, pronađeno 309,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,63 minuta (LC metoda B).
Korak 4: 1-Benzil-5,5-dimetil-pirolidin-3-amin (so dihidrohlorida)
[2047] Sirov N-(1-benzil-5,5-dimetil-pirolidin-3-il)-2-metil-propan-2-sulfinamid (650 mg, 2,107 mmol) je rastvoren u metanolu (10 mL) i ukapavanjem je dodat hlorovodonik (2,2 mL 4.0 M u dioksanu, 8,800 mmol) na 0 °C, i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi sat vremena. Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom. Pokušana je trituracija sa etrom, međutim, sirovina je napravila gumeni materijal, stoga je etar uklonjen pod redukovanim pritiskom i dobijen materijal je osušen pod vakuumom kako bi se dobio 1-benzil-5,5-dimetil-pirolidin-3-amin (so dihidrohlorida) (580 mg, 99%) kao braonkasta guma. Korišćena je u sledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja. ESI-MS m/z izračunato 204,16264, pronađeno 205,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,3 minuta (LC metoda B).
Korak 5: 6-[(1-Benzil-5,5-dimetil-pirolidin-3-il)amino]piridin-2-sulfonamid
[2048]
[2049] Bočica zapremine 20 mL je napunjena sa 6-fluoropiridin-2-sulfonamidom (0,351 g, 1,992 mmol) i anhidrovanim dimetil sulfoksidom (5 mL), nakon čega su dodati anhidrovani kalijum karbonat (1,377 g, 9,963 mmol) i 1-benzil-5,5-dimetil-pirolidin-3-amin (so dihidrohlorida) (0,580 g, 2,092 mmol), tim redosledom. Bočica je poklopljena pod azotom i mešana do 70 °C u uljanoj kadi tokom 13 sati, a zatim na 90 °C tokom 8 sati, praćeno sa kratkim zagrevanjem na 100 °C približno 30 minuta. Reakciona smeša je filtrirana preko jastučića celita nakon čega je rastvorena etil acetatom (30 mL) i neutralizovana glacijalnim AcOH na pH ~ 7. Isprana je vodom (15 mL), a zatim slanim rastvorom (15 mL). Organske materije su osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane i uparene pod redukovanim pritiskom. Sirov materijal je prečišćen hromatografijom na silika gelu. Inicijalno, korišćenje gradijenta od 20% - 100% etil acetata u heksanima nije pružilo čist proizvod. Prečišćavanje drugom hromatografijom na silika gelu (0% - 15% metanola u dihlorometanu) je dalo željeno jedinjenje, 6-[(1-benzil-5,5-dimetilpirolidin-3-il)amino]piridin-2-sulfonamid (125 mg, 17%) kao svetlo braon čvrstu supstancu. ESI-MS m/z izračunato 360,162, pronađeno 361,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,59 minuta (LC metoda B).
Korak 6: 6-[(5,5-Dimetilpirolidin-3-il)amino]piridin-2-sulfonamid
[2050]
[2051] Mešan rastvor 6-[(1-benzil-5,5-dimetil-pirolidin-3-il)amino]piridin-2-sulfonamid (125 mg, 0,3468 mmol) u anhidrovanom metanolu (8 mL) je tretiran paladijumom na ugljeniku (40 mg, 0,03759 mmol) pod azotom. Reakcija je mešana na 52 °C pod vodonikom (balon) tokom 10 sati. Reakciji je omogućeno da se ohladi na temperaturu okruženja i boca je evakuisana, napunjena azotom nakon čega je dodat paladijum hidroksid (25 mg, 0,03560 mmol). Ponovo, reakciona smeša je mešana na 52 °C pod vodonikom (balon) tokom 7 sati nakon čega je ostavljena da se ohladi na temperaturu okruženja. Katalizator je isfiltriran preko uloška celita i filtrat je koncentrovan pod redukovanim pritiskom i osušen in vacuo kako bi se dobio 6-[(5,5-dimetilpirolidin-3-il)amino]piridin-2-sulfonamid (61 mg, 65%) kao svetlo braon čvrsta supstanca koja je korišćena u sledećoj reakciji bez daljeg prečišćavanja. ESI-MS m/z izračunato 270,11505, pronađeno 271,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,53 minuta (LC metoda B).
Korak 7: 2-Hloro-N-[[6-[(5,5-dimetilpirolidin-3-il)amino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil) ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (so dihidrohlorida)
[2052]
[2053] 6-[(5,5-Dimetilpirolidin-3-il)amino]piridin-2-sulfonamid (43 mg, 0,1591 mmol) i karbonil diimidazol (29 mg, 0,1788 mmol) su spojeni u suvom tetrahidrofuranu (3 mL) i mešani pod azotom na 48 °C tokom sat vremena. Nakon toga je dodat rastvor 2-hloro-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksilna kiselina (60 mg, 0,1597 mmol) u suvom tetrahidrofuranu (1 mL) a zatim 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (30 uL, 0,2006 mmol). Reakcija je uklonjena sa vreline i mešana na temperaturi okruženja 12 sati. Isparljive materije su uklonjene pod redukovanim pritiskom i ostatak je stavljen u dimetil sulfoksid (1,5 mL), filtriran kroz Whatman 0,45um PTFE špric filter disk i prečišćen preparativnom reverzno faznom HPLC (1% - 99% acetonitrila u vodi, hlorovodonična kiselina kao modifikator) kako bi se dobio 2-hloro-N-[[6-[(5,5-dimetilpirolidin-3-il)amino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (so dihidrohlorida) (13 mg, 12%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 9,09 (s, 2H), 8,40 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 8,13 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,77 - 7,63 (m, 3H), 7,23 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,18 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,45 - 4,36 (m, 1H), 4,34 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 3,72 - 3,62 (m, 1H), 3,26 - 3,14 (m, 1H), 2,24 (dd, J = 13,4, 8,3 Hz, 1H), 2,08 (t, J = 7,1 Hz, 2H), 1,89 (dd, J = 14,4,0 Hz, 1H), 1,48 (s, 3H), 1,28 (s, 3H), 1,00 - 0,92 (m, 2H), 0,94 - 0,85 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 627,16425, pronađeno 628,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,55 minuta (LC metoda B).
Korak 8: 5,5-Dimetil-9-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-15λ<6>-tia-2,6,8,14,20-pentaazatetraciklo[14.3.1.13,6.07,12]henikoza-1(20),7,9,11,16,18-heksaen-13,15,15-trion (Jedinjenje 31)
[2054]
[2055] Rastvoru 2-hloro-N-[[6-[(5,5-dimetilpirolidin-3-il)amino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-[2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi]pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (so dihidrohlorida) (11 mg, 0,01569 mmol) u anhidrovanom dimetil sulfoksidu (1,5 mL) su dodati cezijum fluorid (3 mg, 0,01975 mmol), kalijum karbonat (12 mg, 0,08683 mmol) (napravljen prah mortarom & tučkom) i mala količina granularnih 4 Å molekularnih sita (približno 500 mg, zagrevana toplotnim pištoljem 5 minuta pod vakuumom radi suvoće). Dobijena smeša je poklopljena pod azotom i zagrevana na 150°C tokom 17 sati nakon čega je omogućeno da se ohladi na temperaturu okruženja ostavljajući čvrstu supstancu da se primiri na dnu.
Supernatant je filtriran kroz Whatman 0,45um PTFE špric filter disk. Filtrat je koncentrovan i prečišćen korišćenjem metoda reverzne faze HPLC-MS upotrebom Luna C18(2) kolone i dualnog gradijenta od 1% - 99 % acetonitrila u vodi (bez modifikatora) dajući 5,5-dimetil-9-(3-{2-[1-(trifluorometil)ciklopropil]etoksi}-1H-pirazol-1-il)-15λ<6>-tia-2,6,8,14,20-pentaazatetraciklo[14.3.1.13,6.07,12]henikoza-1(20),7,9,11,16,18-heksaen-13,15,15-trion (Jedinjenje 31) (3,5 mg, 37%). ESI-MS m/z izračunato 591,18756, pronađeno 592,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,6 minuta (LC metoda B).
Primer 193: Pripremanje (14S)-12,12-dimetil-8-{3-okso-oktahidroimidazo[1,5-a]piridin-2-il}-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 213)
[2056]
Korak 1: (14S)-12,12-Dimetil-8-13-okso-oktahidroimidazo[1,5-a]piridin-2-il}-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 213)
[2057]
[2058] Bočica zapremine 5 mL je napunjena sa (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trionom (100 mg, 0,2222 mmol), 2,5,6,7,8,8a-heksahidro-1H-imidazo[1,5-a]piridin-3-onom (45 mg, 0,3210 mmol), Pd2(dba)3(54 mg, 0,05897 mmol), ksantfosom (33 mg, 0,05703 mmol), cezijum karbonatom (375 mg, 1,151 mmol) i anhidrovanim dioksanom (1,6 mL). Smeša je produvavana azotom 1 - 2 minuta, poklopljena i mešana na 120 °C tokom 20 sati nakon čega je ohlađena na sobnu temperaturu. Rastvarač je uparen i reakcija je razblažena dimetil sulfoksidom (900 uL), mikrofiltrirana i prečišćena reverznom fazom preparativne hromatografije korišćenjem C18kolone (10% - 99% acetonitrila u vodi 5 mM hlorovodonične kiseline). Frakcije proizvoda su spojene, dodat je slani rastvor i organski rastvarači su upareni. Proizvod je ekstraktovan dihlorometanom, organska faza je osušena nad natrijum sulfatom, filtrirana i evaporacijom rastvarača je dobijena čvrsta supstanca. Dobijena čvrsta supstanca je prečišćena hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% dihlorometana do 5% metanola u dihlorometanu dajući (14S)-12,12-dimetil-8-{3-okso-oktahidroimidazo[1,5-a]piridin-2-il}-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5(10),6,8,19,21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 213) (58,6 mg, 47%).
<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 10,77 (s, 1H), 8,01 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,90 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 7,61 - 7,49 (m, 2H), 6,54 (p, J = 3,7 Hz, 1H), 4,79 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 4,21 - 4,07 (m, 1H), 4,02 (dd, J = 12,5, 3,6 Hz, 1H), 3,83 (s, 1H), 3,64 - 3,48 (m, 2H), 3,32 (t, J = 8,9 Hz, 1H), 3,15 (d, J = 14,0 Hz, 1H), 3,04 (t, J = 9,4 Hz, 1H), 2,83 - 2,74 (m, 1H), 2,11 (dd, J = 12,4, 8,6 Hz, 1H), 2,00 - 1,85 (m, 2H), 1,71 (d, J = 9,8 Hz, 2H), 1,57 (d, J = 2,0 Hz, 6H), 1,55 (d, J = 1,2 Hz, 3H), 1,51 - 1,43 (m, 3H), 1,37 (t, J = 12,8 Hz, 2H). ESI-MS m/z izračunato 553,24713, pronađeno 554,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,62 minuta (LC metoda E).
Primer 194: Pripremanje (14S)-12,12-dimetil-8-{1-okso-2-azaspiro[4.5]dekan-2-il}-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 222)
[2059]
Korak 1: (14S)-12,12-Dimetil-8-{1-okso-2-azaspiro[4.5]dekan-2-il}-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 222)
[2060]
[2061] Bočica zapremine 5 mL je napunjena sa (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trionom (50 mg, 0,1111 mmol), 2-azaspiro[4.5]dekan-1-onom (24 mg, 0,1566 mmol), Pd2(dba)3(26 mg, 0,02839 mmol), ksantfosom (16 mg, 0,02765 mmol), cezijum karbonatom (180 mg, 0,5525 mmol) i anhidrovanim dioksanom (800 uL). Smeša je produvavana azotom 1 - 2 minuta, poklopljena i mešana na 120 °C tokom 20 sati nakon čega je ohlađena na sobnu temperaturu. Rastvarač je uparen, reakcija je razblažena dimetil sulfoksidom (900 uL), mikrofiltrirana i prečišćena reverznom fazom preparativne hromatografije upotrebom C18kolone (10% -99% acetonitrila u vodi 5 mM hlorovodonična kiselina). Frakcije proizvoda su spojene, dodat je slani rastvor i organski rastvarači su upareni. Proizvod je ekstraktovan dihlorometanom, organska faza je osušena nad natrijum sulfatom, filtrirana i evaporacijom rastvarača je dobijena čvrsta supstanca. Dobijena čvrsta supstanca je prečišćena hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% dihlorometana do 5% metanola u dihlorometanu. Čiste frakcije su sakupljene i rastvarači upareni kako bi se dobio (14S)-12,12-dimetil-8-{1-okso-2-azaspiro[4.5]dekan-2-il}-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 222) (13,01 mg, 20%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, hloroform-d) δ 10,41 (s, 1H), 8,10 - 7,95 (m, 2H), 7,62 - 7,49 (m, 2H), 6,55 (dd, J = 6,8, 2,4 Hz, 1H), 4,74 (s, 1H), 3,93 (t, J = 7,2 Hz, 2H), 3,90 - 3,79 (m, 1H), 3,32 (dd, J = 10,0, 7,7 Hz, 1H), 3,16 (d, J = 14,3 Hz, 1H), 3,07 (s, 1H), 2,68 (dd, J = 11,9, 6,4 Hz, 1H), 2,11 (dd, J = 12,4, 8,4 Hz, 1H), 2,03 (dd, J = 8,0, 6,3 Hz, 2H), 1,78 -1,72 (m, 3H), 1,70 - 1,62 (m, 3H), 1,57 (d, J = 5,4 Hz, 8H), 1,38 (q, J = 11,0, 9,2 Hz, 4H), 1,24 - 1,17 (m, 1H), 0,91 - 0,79 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 566,2675, pronađeno 567,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,01 minuta (LC metoda E).
Primer 195: Pripremanje 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15] tetrakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 232)
[2062]
Korak 1: 2,6-Dihloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (so hidrohlorida)
[2063]
[2064] Boca zapremine 50 mL napunjena sa 2,6-dihloropiridin-3-karboksilnom kiselinom (733 mg, 3,818 mmol) i karbonil diimidazolom (620 mg, 3,824 mmol) je evakuisana/ponovo napunjena azotom. Dodat je tetrahidrofuran (15 mL) i smeša je mešana na 50 °C sat vremena. Dodati su rastvor terc-butil 2,2-dimetil-5-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino] propil]pirolidin-1-karboksilat (1,5 g, 3,636 mmol) i 1,8-diazabiciklo[5.4.0]undek-7-en (1385 mg, 9,098 mmol) u tetrahidrofuranu (10 mL) i smeša je mešana tokom noći na 50 °C. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana vodom. Organska faza je osušena nad natrijum sulfatom, filtrirana i uparena in vacuo nakon čega je prečišćena reverznom fazom preparativne hromatografije korišćenjem C18kolone (5% - 95% acetonitrila u vodi) kako bi se dobio acilsulfonamid intermedijer. Rastvor ovog intermedijera u dioksanu (5 mL) je tretiran hlorovodoničnom kiselinom (6 mL 6 M u dioksanu, 36,00 mmol) i mešan na sobnoj temperaturi 3 sata. Smeša je uparena in vacuo kako bi se dobio 2,6-dihloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (so hidrohlorida) (0,9 g, 47%). ESI-MS m/z izračunato 485,10553, pronađeno 486,15 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,42 minuta (LC metoda A).
Korak 2: 8-Hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo [18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion
[2065]
[2066] U bočici zapremine 5 mL, poklopljeni su kalijum karbonat (133 mg, 0,9623 mmol), cezijum fluorid (60 mg, 0,3950 mmol) i 4 Å molekularna sita (300 mg) i pročišćeni azotom. Dodat je rastvor 2,6-dihloro-N-[[6-[3-(5,5-dimetilpirolidin-2-il)propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (so hidrohlorida) (100 mg, 0,1912 mmol) u dimetil sulfoksidu (3 mL) i smeša je mešana na 150 °C tokom noći. Smeša je filtrirana i prečišćena reverznom fazom preparativne HPLC (C18kolona, 1% -99% acetonitrila u vodi sa modifikatorom hlorovodonične kiseline) kako bi se dobio 8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo [18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (20,8 mg, 24%). ESI-MS m/z izračunato 449,12885, pronađeno 450,18 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,46 minuta (LC metoda B).
Korak 3: 8-[3-(3,3-Dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 232)
[2067]
[2068] Rastvor 8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (200 mg, 0,4445 mmol), 1-(3,3-dimetilbutil)imidazolidin-2-on (114 mg,
0,6696 mmol), ksantfos (65 mg, 0,1123 mmol), Pd2(dba)3(102 mg, 0,1114 mmol) i cezijum karbonat (724 mg, 2,222 mmol) u dioksanu (4 mL) su degazirani produvavanjem azotom tokom 2 minuta. Smeša je mešana na 120 °C tokom noći. Reakciona smeša je filtrirana i prečišćena reverznom fazom preparativne HPLC (C18kolona, 1% - 99% acetonitrila u vodi sa modifikatorom hlorovodonične kiseline) kako bi se dobio 8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,19,24-pentaazatetraciklo[18.3.1.05,10.011,15]tetrakoza-1(23),5,7,9,20(24),21-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 232) (9 mg, 3%). ESI-MS m/z izračunato 583,29407, pronađeno 584,39 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,71 minuta (LC metoda B).
Primer 196: Pripremanje 19,19-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil] propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,21-pentaazatetraciklo [15.2.1.111,14.02,7]henikoza-2,4,6,11(21),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 279) i 19,19-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,21-pentaazatetraciklo [15.2.1.111,14.02,7]henikoza-2,4,6,11(21),12-pentaen-8,10,10-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 278)
[2069]
Korak 1: 19,19-Dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,21-pentaazatetraciklo[15.2.1.111,14.02,7]henikoza-2,4,6,11(21),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 279) i 19,19-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,21-pentaazatetraciklo[15.2.1.111,14.02,7]henikoza-2,4,6,11(21),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 278)
[2070]
[2071] Racemski 19,19-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi} - 1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,21-pentaazatetraciklo[15.2.1.111,14.02,7]henikoza-2,4,6,11(21),12-pentaen-8,10,10-trion (21 mg, 0,03456 mmol) je podvrgnut hiralnoj SFC hromatografiji korišćenjem ChiralPak AS-H (250 x 21,2 mm kolona, 5um veličina čestice) sa 25% acetonitril:metanol (90:10, 20mM NH3))/75% ugljen dioksid mobilna faza pri 10 mL/min dajući kao prvi enantiomer za eluiranje,19,19-dimetil-4-(3-{3-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,21-pentaazatetraciklo[15.2.1.111,14.02,7]henikoza-2,4,6,11(21),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 279) (7,3 mg, 70%).<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,61 (s, 1H), 8,18 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 8,01 (s, 1H), 7,65 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,93 (s, 1H), 6,85 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,09 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,59 (d, J = 13,9 Hz, 1H), 4,23 - 4,08 (m, 3H), 3,06 (s, 1H), 2,17 (d, J = 14,9 Hz, 1H), 1,94 (dd, J = 11,9, 5,7 Hz, 1H), 1,85 (dq, J = 10,7, 6,3 Hz, 2H), 1,77 - 1,65 (m, 3H), 1,56 (s, 3H), 1,49 (s, 4H), 0,95 - 0,88 (m, 2H), 0,79 - 0,70 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 607,2189, pronađeno 608,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,08 minuta (LC metoda B). Drugi enantiomer za eluiranje je bio 19,19-dimetil-4-(3-13-[1-(trifluorometil)ciklopropil]propoksi}-1H-pirazol-1-il)-10λ<6>-tia-1,3,9,14,21-pentaazatetraciklo[15.2.1.111,14.02,7]henikoza-2,4,6,11(21),12-pentaen-8,10,10-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 278) (7,8 mg, 70%). ESI-MS m/z izračunato 607,2189, pronađeno 608,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,08 minuta (LC metoda B).
Primer 197: Pripremanje (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 128)
[2072]
Korak 1: (14S)-8-[3-(3,3-Dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 128)
[2073]
[2074] Bočica je napunjena sa (14S)-8-hloro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(23),5,7,9,19,21-heksaen-2,2,4-trionom (25 mg, 0,05373 mmol), 1-(3,3-dimetilbutil)imidazolidin-2-onom (13 mg, 0,07636 mmol), Pd2(dba)3(13 mg, 0,01420 mmol), ksantfosom (8 mg, 0,01383 mmol), cezijum karbonatom (88 mg, 0,2701 mmol) i anhidrovanim dioksanom (400 uL). Smeša je produvavana azotom tokom 1 - 2 minuta, poklopljena i mešana na 120 °C 5 do 14 sati (zagrevanje nije bilo uspešno tokom perioda od 14 sati u nepoznato vreme). Rastvarač je uparen, reakcija rablažena dimetil sulfoksidom (900 uL), mikrofiltrirana i podvrgnuta reverznoj fazi preparativne HPLC (C18) korišćenjem gradijenta acetonitrila u vodi (1% do 99%) i hlorovodonične kiseline kao modifikatora. LCMS preparatorne HPLC je pokazalo delimičnu konverziju u očekivani proizvod (približno 20%) koji je prikupljen i spojen sa proizvodom iz druge reakcije opisane u nastavku.
[2075] Druga reakcija je pokrenuta ponovo korišćenjem istih kvantiteta reagenasa i mešana je na 120 °C tokom 19 sati. Rastvarač je uparen, dodat je dimetil sulfoksid (1 mL) i smeša je prečišćena reverznom fazom preparativne HPLC (C18) korišćenjem gradijenta acetonitrila u vodi (1% do 99%) i hlorovodonične kiseline kao modifikatora. Čiste frakcije su spojene sa onima iz prvog eksperimenta, dodato je malo slanog rastvora i organski rastvarači su upareni. Proizvod je ekstraktovan dihlorometanom i organska faza je osušena nad natrijum sulfatom. Filtracijom a zatim evaporacijom rastvarača je dobijena čvrsta supstanca. Čvrst ostatak je prečišćen fleš hromatografijom na siliki korišćenjem gradijenta metanola (0% do 5%) u dihlorometanu čime je dobijen (14S)-8-[3-(3,3-dimetilbutil)-2-oksoimidazolidin-1-il]-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 128) (17 mg, 27%) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,29 (s, 1H), 7,62 - 7,52 (m, 2H), 7,41 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,95 (broad d, J = 9,0 Hz, 1H), 6,69 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,01 - 3,80 (m, 3H), 3,53 - 3,40 (m, 2H), 3,21 (dd, J = 10,1, 6,1 Hz, 2H), 3,12 - 3,03 (m, 1H), 2,93 (d, J = 13,4 Hz, 1H), 2,76 - 2,62 (m, 1H), 2,08 (br s, 1H), 1,85 - 1,68 (m, 2H), 1,64 - 1,34 (m, 11H), 1,36 - 1,25 (m, 1H), 0,92 (s, 9H). ESI-MS m/z izračunato 583,29407, pronađeno 584,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,88 minuta (LC metoda B).
Primer 198: Pripremanje (14S)-8-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (Jedinjenje 303)
[2076]
Korak 1: terc-Butil 2-hloro-6-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)piridin-3-karboksilat
[2077]
[2078] Boca zapremine 50 mL sa okruglim dnom opremljena magnetnom mešalicom je napunjena sa terc-butil 2,6-dihloropiridin-3-karboksilatom (10,09 g, 40,668 mmol), 2-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)-4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioksaborolanom (10,55 g, 49,215 mmol) i Pd(PPh3)2Cl2(1,42 g, 2,0231 mmol) u EtOH (10 mL), toluenu (10 mL) i vodi (2 mL). Smeša je refluksovana na 95 °C tokom noći u uljanoj kadi. Ohlađena reakcija je koncentrovana a zatim stavljena u etil acetat i isprana vodenim slanim rastvorom. Organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i uparen kako bi se dobilo sirovo ulje koje je prečišćeno hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 5% etil acetata u heksanu kako bi se dobio terc-butil 2-hloro-6-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)piridin-3-karboksilat (9,2 g, 76%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (250 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 8,17 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,19 - 6,04 (m, 1H), 4,27 - 4,06 (m, 2H), 2,23 (q, J = 6,1, 4,4 Hz, 2H), 1,96 - 1,78 (m, 2H), 1,55 (s, 9H). ESI-MS m/z izračunato 295,09753, pronađeno 296,0 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 6,52 minuta (LC metoda Q).
Korak 2: 2-Hloro-6-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)piridin-3-karboksilna kiselina
[2079]
[2080] Litijum hidroksid monohidrat (468 mg, 11,153 mmol) je dodat rastvoru terc-butil 2-hloro-6-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)piridin-3-karboksilat (320 mg, 1,0711 mmol) u metanolu (5 mL), tetrahidrofuranu (20 mL) i vodi (10 mL). Smeša je mešana na 40 °C tokom 16 sati i ohlađena na sobnu temperaturu. Smeša je zakiseljena sa 5% HCl i ekstraktovana sa EtOAc (2 x 20 mL). Spojeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom i osušeni nad Na2SO4, filtrirani i upareni kako bi se dobila 2-hloro-6-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)piridin-3-karboksilna kiselina (248 mg, 94%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6) δ 8,25 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,55 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,13 (t, J = 4,2 Hz, 1H), 4,21 - 4,12 (m, 2H), 2,24 (q, J = 6,3, 5,8 Hz, 2H), 1,86 (p, J = 5,9 Hz, 2H). ESI-MS m/z izračunato 239,0349, pronađeno 240,0 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,95 minuta (LC metoda Q).
Korak 3: terc-Butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[2081]
[2082] Rastvoru 2-hloro-6-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)piridin-3-karboksilna kiselina (349 mg, 1,456 mmol) u THF (8,0 mL) je dodat karbonil diimidazol (252 mg, 1,554 mmol) i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 20 sati. Nakon toga je dodat tercbutil (4S)-2,2-dimetil-4-[3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]pirolidin-1-karboksilat (400 mg, 0,9696 mmol) a zatim DBU (475 uL, 3,176 mmol) i dobijena smeša je mešana 3 sata na sobnoj temperaturi. Reakcija je razblažena etil acetatom i isprana zasićenim rastvorom vodenog natrijum bikarbonata. Organski sloj je dodatno ispran sa rastvorom 10% vodene limunske kiseline a zatim slanim rastvorom. Orgnaske materije su razdvojene, osušene nad natrijum sulfatom, filtrirane, uparene a nakon toga prečišćene hromatografijom na silika gelu korišćenjem gradijenta od 100% heksana do 100% etil acetata. Dobijen ostatak je dodatno prečišćen reverznom fazom preparativne HPLC (C18kolona, 30% - 99% acetonitrila u vodi sa modifikatorom hlorovodonične kiseline) kako bi se dobio terc-butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (140 mg, 23%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 633,2388, pronađeno 634,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,11 minuta (LC metoda B).
Korak 4: 2-Hloro-6-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (so trifluoroacetata)
[2083]
terc-Butil (4S)-4-[3-[[6-[[2-hloro-6-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]propil]-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (140 mg, 0,2208 mmol) je rastvoren u dihlorometanu (610,8 uL) i smeši je dodata trifluoroacetatna kiselina (681,1 uL, 8,841 mmol), i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 2 sata. Smeša je koncentrovana do suvog stanja pod redukovanim pritiskom, dodato je 1 mL toluena i uklonjeno rotirajućim uparavanjem (45 °C vodena kada). Ponovo je dodato 1 mL toluena i uklonjeno rotirajućim uparavanjem (45 °C vodena kada) nakon čega je osušeno pod vakuumom kako bi se dobio 2-hloro-6-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (so trifluoroacetata) (162,3 mg, 100%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 533,18634, pronađeno 534,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 0,52 minuta (LC metoda A).
Korak 5: (14S)-8-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (Jedinjenje 303)
[2084]
[2085] Rastvoru 2-hloro-6-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)-N-[[6-[3-[(3S)-5,5-dimetilpirolidin-3-il]propilamino]-2-piridil]sulfonil]piridin-3-karboksamid (so trifluoroacetata) (162,3 mg, 0,2204 mmol) u NMP (8,591 mL) je dodat kalijum karbonat (213,8 mg, 1,547 mmol). Smeša je produvavana azotom 5 minuta nakon čega je zagrevana do 180 °C i mešana tokom noći. Ohlađena je na sobnu temperaturu, razblažena sa EtOAc, isprana sa 1N HCl, osušena (natrijum sulfat), filtrirana i koncentrovana u ulje braon boje koje je filtrirano i prečišćeno reverznom fazom HPLC (C18kolona, 1% - 99% acetonitrila u vodi (5 mM HCl)) kako bi se dobio (14S)-8-(3,4-dihidro-2H-piran-6-il)-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (3,31 mg, 3%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (400 MHz, dimetil sulfoksid-d6) δ 12,50 (s, 1H), 7,66 (d, J = 7,9 Hz, 1H), 7,57 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,04 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,98 (s, 1H), 6,76 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,94 (s, 1H), 4,11 (s, 2H), 3,92 (d, J = 11,8 Hz, 1H), 3,11 (s, 1H), 2,93 (d, J = 13,1 Hz, 1H), 2,66 (s, 1H), 2,20 (d, J = 5,3 Hz, 2H), 2,09 (s, 1H), 1,83 (d, J = 5,9 Hz, 3H), 1,73 (s, 1H), 1,61 (s, 1H), 1,57 (s, 3H), 1,52 (s, 1H), 1,49 (s, 3H), 1,29 (d, J = 12,2 Hz, 1H), 1,24 (s, 1H). ESI-MS m/z izračunato 497,2097, pronađeno 498,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,98 minuta (LC metoda B).
Primer 199: Pripremanje 8-[3-(2-[Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il]etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16,16-difluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetra ciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 305, SFC pik 1) i 8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16,16-difluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 304, SFC pik 2)
[2086]
Ċ
Korak 1: 1-[(4-Metoksifenil)metil]-5,5-dimetil-pirolidin-2-on [2087]
[2088] Reakcija je sprovedena iz dve serije.
[2089] Prva serija: Rastvor 5,5-dimetilpirolidin-2-on (121 g, 1,0693 mol) u DMF (1,8 L) je ohlađen do 3 °C u kadi sa ledenom vodom, nakon čega je u porcijama tokom približno 30 minuta dodato 60% NaH u mineralnom ulju (64,150 g, 1,6039 mol). Smeša je mešana u kadi sa ledenom vodom još dodatnih 30 minuta a zatim na sobnoj temperaturi još sat i po vremena. Dobijena beličasta kaša je ponovo ohlađena na 3 °C u kadi sa ledenom vodom nakon čega je dodat 1-(hlorometil)-4-metoksi-benzen (251,19 g, 1,6039 mol). Kada sa ledenom vodom je uklonjena nakon dodavanja i smeša je mešana tokom noći. Reakciona smeša je pažljivo ugašena vodom (100 mL) i skladištena u frižider tokom noći. Smeša je spojena sa drugom serijom materijala pre obrade i prečišćavanja.
[2090] Druga serija: Rastvor 5,5-dimetilpirolidin-2-on (484 g, 4,2772 mol) u DMF (7,2 L) je ohlađen na 3 °C u reaktoru sa omotačem zapremine 20 L, nakon čega je u porcijama tokom perioda od 4 sata dodato 60 % NaH u mineralnom ulju (256,61 g, 6,4158 mol). Dobijena smeša je mešana na 3 °C još dodatnih sat vremena a zatim na sobnoj temperaturi 2 sata. Dobijen talog je ponovo ohlađen na 3 °C nakon čega je dodat 1-(hlorometil)-4-metoksibenzen (1,0048 kg, 6,4158 mol). Sistem hlađenja je deaktiviran nakon što je dodavanje kompletirano i dobijena kaša je mešana tokom noći dok se zagrevala na sobnu temperaturu. Reakciona smeša je pažljivo ugašena vodom (500 mL), spojena sa reakcionom smešom prve serije i podeljena na dva jednaka dela. Svaki deo je procesuiran kao što sledi: Razblažena je zasićenim amonijum hloridom (10 L), ekstraktovana etil acetatom (4 x 2 L). Vodena faza je odbačena a zatim su spojene organske faze razblažene heksanom (2 L) i ekstraktovane zasićenim amonijum hloridom (2 x 2 L) pa sa vodom (2 L). Vodene faze su odbačene i organska faza je osušena nad natrijum sulfatom. Spojene organske faze iz obe obrade su koncentrovane in vacuo kako bi se dobio sirov 1-[(4-metoksifenil)metil]-5,5-dimetilpirolidin-2-on kao ulje braon boje (1,5 kg). Jedan kilogram sirovog proizvoda je prečišćen hromatografijom na silika gelu (0 -100% etil acetat:heksan) kako bi se dobio čist 1-[(4-metoksifenil)metil]-5,5-dimetilpirolidin-2-on (608 g, 58%) kao ulje žute boje. ESI-MS m/z izračunato 233,1416, pronađeno 234,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,97 minuta (LC metoda Q).
Korak 2: 3-Dietoksifosforil-1-[(4-metoksifenil)metil]-5,5-dimetil-pirolidin-2-on
[2091]
[2092] Rastvor diizopropilamin (529,14 g, 732,88 mL, 5,2292 mol) u tetrahidrofuranu (3,5 L) je ohlađen do -75 °C u kadi suvog leda-acetona, zatim je laganim mlazom dodat N-butillitijum (2,092 L 2.5 M, 5,2292 mol). Temperatura je držana održavana ispod -70 °C tokom dodavanja. Dobijen rastvor žute boje je mešan 30 minuta nakon čega je laganim mlazom dodat rastvor 1-[(4-metoksifenil) metil]-5,5-dimetil-pirolidin-2-on (488 g, 2,0917 mol) u tetrahidrofuranu (1,5 L) a zatim je mešan još dodatnih sat vremena. Temperaturi nije dozvoljeno da pređe -70 °C tokom dodavanja. Reakcionoj smeši je ukapavanjem dodat 1-[hloro (etoksi)fosforil]oksietan (541,38 g, 451,15 mL, 3,1376 mol) osiguravajući da temperatura ostane ispod -70 °C tokom dodavanja. Dobijena smeša je mešana 16 sati dok je omogućeno da se odmrzne na sobnu temperaturu. Reakcija je zatim ugašena sa 1M hlorovodonične kiseline (3 L) i ekstraktovana etil acetatom (2 x 2,4 L), Vodena faza je odbačena i spojene organske faze su ekstraktovane vodom (3 x 2,4 L). Vodene faze su odbačene i organska faza je osušena nad natrijum sulfatom i prečišćena hromatografijom na silika gelu (0 - 100% etil acetat/heksan) a zatim koncentrovana in vacuo kako bi se dobio 3-dietoksifosforil-1-[(4-metoksifenil)metil]-5,5-dimetil-pirolidin-2-on (677 g, 81%). ESI-MS m/z izračunato 369,1705, pronađeno 370,1 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 4,2 minuta (LC metoda Q).
Korak 3: N-(Benzotriazol-1-ilmetil)-N-benzil-1-fenil-metanamin
[2094] Rastvoru benzotriazol-1-ilmetanol (30 g, 201,14 mmol) u EtOH (600 mL) je dodat N-benzil-1-fenil-metanamin (39,680 g, 38,674 mL, 201,14 mmol) na sobnoj temperaturi. Rastvor je mešan na sobnoj temperaturi sat vremena pre nego što je koncentrovan in vacuo. Ostatak je ispran dietil etrom (3 x 400 mL) kako bi se dobio N-(benzotriazol-1-ilmetil)-N-benzil-1-fenilmetanamin (59,83 g, 91%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 7,67 - 7,23 (m, 14H), 5,47 (s, 2H), 3,79 (s, 4H).
Korak 4: Etil 3-(dibenzilamino)-2,2-difluoro-propanoat
[2095]
[2096] Suspenziji Zn (17,3 g, 2,4253 mL, 264,57 mmol) u THF (175 mL) je dodato TMS-Cl (28,691 g, 33,4 mL, 264,09 mmol) a zatim etil 2-bromo-2,2-difluoro-acetat (11,850 g, 7,5 mL, 58,380 mmol), na sobnoj temperaturi. Rastvor je mešan 15 minuta nakon čega je reakciji ukapavanjem dodat N-(benzotriazol-1-ilmetil)-N-benzil-1-fenil-metanamin (17,344 g, 52,812 mmol) u THF (100 mL). Spojen rastvor je mešan 2 sata nakon čega je ugašen natrijum bikarbonatom (350 mL) i ekstraktovan etil acetatom (3 x 500 mL). Spojeni organski slojevi su isprani vodom (750 mL), i osušeni nad natrijum sulfatom nakon čega su koncentrovani in vacuo. Organski ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem 0 - 15% dietil etra u heksanu kako bi se dobio etil 3-(dibenzilamino)-2,2-difluoro-propanoat (8,98 g, 49%) kao bistra tečnost.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,37 - 7,29 (m, 4H), 7,29 - 7,22 (m, 6H), 4,13 (q, J = 7,1 Hz, 2H), 3,61 (s, 4H), 3,15 (t, J = 13,5 Hz, 2H), 1,13 (t, J = 7,1 Hz, 3H). ESI-MS m/z izračunato 333,154, pronađeno 334,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,18 minuta (LC metoda P).
Korak 5: 3-(Dibenzilamino)-2,2-difluoro-propanal
[2098] Rastvoru etil 3-(dibenzilamino)-2,2-difluoro-propanoat (9,01 g, 27,027 mmol) u anhidrovanom DCM (125 mL) je ukapavanjem dodat diizobutilaluminijum hidrid (37,8 mL 1 M, 37,800 mmol) na -78 °C. Reakcija je mešana 40 minuta nakon čega je ugašena limunskom kiselinom (100 mL) na -78 °C. Rastvor je ekstraktovan dietil etrom (3 x 200 mL), ispran slanim rastvorom (200 mL) i osušen nad natrijum sulfatom nakon čega je koncentrovan in vacuo kako bi se dobio 3-(dibenzilamino)-2,2-difluoro-propanal (9,54 g, 93%). ESI-MS m/z izračunato 289,1278, pronađeno 290,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,39 minuta (LC metoda P).
Korak 6: 3-[3-(Dibenzilamino)-2,2-difluoro-propiliden]-1-[(4-metoksifenil)metil]-5,5-dimetil-pirolidin-2-on
[2099]
[2100] Rastvoru 3-dietoksifosforil-1-[(4-metoksifenil)metil]-5,5-dimetil-pirolidin-2-on (11,3 g, 33,105 mmol) u ACN (145 mL) su dodati DIEA (5,1 g, 6,8733 mL, 39,461 mmol) i LiCl (1,7 g, 40,100 mmol) na 0 °C. Rastvor je mešan na ovoj temperaturi 30 minuta nakon čega je dodat 3-(dibenzilamino)-2,2-difluoro-propanal (9,544 g, 32,988 mmol) u ACN (50 ml) na 0 °C. Smeša je zagrejana na sobnu temperaturu dok je mešana tokom noći. Rastvor je ugašen rastvorom zasićenog amonijum hlorida (150 mL) nakon čega je ekstraktovan dietil etrom (3 x 200 mL) i ispran slanim rastvorom (300 mL) a zatim je osušen nad natrijum sulfatom i koncentrovan. Ostatak je prečišćen hromatografijom na silika gelu eluiranjem 0 - 25% etil acetata u heksanu kako bi se dobio 3-[3-(dibenzilamino)-2,2-difluoro-propiliden]-1-[(4-metoksifenil)metil]-5,5-dimetil-pirolidin-2-on (E/Z smeša izomera) (8,03 g, 48%).<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 7,36 - 7,22 (m, 10H), 7,21 - 7,15 (m, 2H), 6,89 - 6,72 (m, 2H), 6,67 - 5,75 (m, 1H), 4,54 - 4,16 (m, 2H), 3,85 - 3,60 (m, 7H), 3,60 - 3,45 (m, 1H), 3,19 - 2,79 (m, 1H), 2,57 - 2,33 (m, 2H), 1,22 - 0,98 (m, 6H). ESI-MS m/z izračunato 504,2588, pronađeno 505,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,02 minuta, 3,51 minuta (LC metoda P).
Korak 7: 3-[3-(Dibenzilamino)-2,2-difluoro-propil]-1-[(4-metoksifenil)metil]-5,5-dimetil-pirolidin-2-on
[2101]
[2102] Rastvoru 3-[3-(dibenzilamino)-2,2-difluoro-propiliden]-1-[(4-metoksifenil)metil]-5,5-dimetil-pirolidin-2-on (8 g, 15,854 mmol) u etanolu (400 mL) je dodat Raney-Nikl (8 g, 136,30 mmol). Dobijen rastvor je hidrogenizovan u Parr-Shaker pri 65 PSI tokom 24 sata, zatim filtriran kroz celit i ispran etanolom kako bi se obezbedio sirov proizvod. Sirov proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (napunjeno u CH2Cl2) (220g SiO2, eluiranje 0 do 20% acetona u heksanu) kako bi se dobio 3-[3-(dibenzilamino)-2,2-difluoro-propil]-1-[(4-metoksifenil)metil]-5,5-dimetil-pirolidin-2-on (4,97 g, 56%) kao bledo žuta tečnost.
<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 7,43 - 7,29 (m, 10H), 7,22 (d J = 8,6 Hz, 2H), 6,84 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 4,38 (s, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,78 - 3,50 (m, 6H), 2,97 - 2,74 (m, 3H), 2,61 - 2,44 (m, 1H), 2,21 - 2,01 (m, 1H),1,16 (s, 3H), 0,93 (s, 3H). ESI-MS m/z izračunato 506,2745, pronađeno 507,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 5,75 minuta (LC metoda Q).
Korak 8: 3-[3-(Dibenzilamino)-2,2-difluoro-propil]-5,5-dimetil-pirolidin-2-on
[2103]
[2104] U 3-[3-(dibenzilamino)-2,2-difluoro-propil]-1-[(4-metoksifenil)metil]-5,5-dimetil-pirolidin-2-on (4,97 g, 8,9271 mmol) u sudu je dodato TFA (100 mL), nakon čega je sud poklopljen i zagrevan na 100 °C tokom 11 dana. Svi rastvarači su uklonjeni pod redukovanim pritiskom. Ostatak je rastvoren u dihlorometanu (300 mL), ispran vodenim rastvorom zasićenog natrijum bikarbonata (3 x 100 mL), osušen nad anhidrovanim natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan pod redukovanim pritiskom. Sirov proizvod je prečišćen fleš hromatografijom (napunjeno u CH2Cl2) (120g SiO2, eluiranje 0 do 45% etil acetata u heksanu) kako bi se dobio 3-[3-(dibenzilamino)-2,2-difluoro-propil]-5,5-dimetilpirolidin-2-on (2,28 g, 66%) kao bledo žuta tečnost. ESI-MS m/z izračunato 386,217, pronađeno 387,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,29 minuta (LC metoda Q).
Korak 9: N,N-Dibenzil-3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)-2,2-difluoro-propan-1-amin
[2105]
[2106] Mešajućem rastvoru 3-[3-(dibenzilamino)-2,2-difluoro-propil]-5,5-dimetil-pirolidin-2-on (2,23 g, 5,7701 mmol) u anhidrovanom THF (100 mL) na 0 °C pod azotom je polako dodat rastvor BH3Me2S (40 mL 2 M, 80,000 mmol) u THF. Nakon što je dodavanje kompletirano, reakciona smeša je zagrevana do 65 °C tokom 24 sata. Reakciona smeša je ohlađena do 0 °C i polako gašena sa 6 M vodenim HCl (50 mL). Dodat je metanol (50 mL) i reakciona smeša je zagrevana do 65 °C tokom sat vremena. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reakciona smeša je bazifikovana zasićenim vodenim NaHCO3(300 mL) i isparljive materije su uklonjene pod vakuumom. Proizvod je ekstraktovan etil acetatom (3 x 150 mL). Spojeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom (80 mL), osušeni nad anhidrovanim natrijum sulfatom i koncentrovani kako bi se dobio N,N-dibenzil-3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)-2,2-difluoro-propan-1-amin (2,46 g, kvant.) kao ulje žute boje. Proizvod je prenešen u sledeći korak bez dodatnog prečišćavanja. ESI-MS m/z izračunato 372,2377, pronađeno 373,4 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,87 minuta (LC metoda Q).
Korak 10: terc-Butil 4-[3-(dibenzilamino)-2,2-difluoro-propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[2107]
[2108] Mešajućem rastvoru N,N-dibenzil-3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)-2,2-difluoro-propan-1-amin (2,46 g, 5,9437 mmol) u DCM (80 mL) na 0 °C su dodati trietilamin (1,0164 g, 1,4 mL, 10,044 mmol) a zatim Boc2O (1,96 g, 8,9807 mmol). Reakciona smeša je mešana na ovoj temperaturi sat vremena. Reakcija je hladno ugašena slanim rastvorom (100 mL) a zatim zagrejana na sobnu temperaturu. Dva sloja su razdvojena i vodeni sloj je ekstraktovan sa DCM (2 x 50 mL). Spojeni organski slojevi su osušeni nad anhidrovanim natrijum sulfatom i koncentrovani. Sirova supstanca je prečišćena hromatografijom na silika gelu korišćenjem 0 -15% etil acetat gradijenta u heksanima kako bi se dobio terc-butil 4-[3-(dibenzilamino)-2,2-difluoro-propil]-2,2-dimetilpirolidin-1-karboksilat (2,79 g, 94%) kao bezbojno ulje. ESI-MS m/z izračunato 472,2901, pronađeno 473,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 7,45 minuta (LC metoda Q).
Korak 11: terc-Butil 4-(3-amino-2,2-difluoro-propil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[2110] Mešajućem rastvoru terc-butil 4-[3-(dibenzilamino)-2,2-difluoro-propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (2,68 g, 5,6706 mmol) u anhidrovanom metanolu (60 mL) na sobnoj temperaturi pod azotom je dodat paladijum na ugljeniku (2,1 g, 10 %w/w, 1,9733 mmol) a zatim ammonijum format (3,6 g, 57,092 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do 65 °C tokom 6 sati. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reakciona smeša je filtrirana kroz uložak celita. Filter kolač je ispran metanolom (2 x 30 mL), i spojen filtrat je koncentrovan pod vakuumom. Sirova supstanca je prečišćena hromatografijom na silika gelu korišćenjem 0 - 10% metanol gradijenta u dihlorometanu kako bi se dobio terc-butil 4-(3-amino-2,2-difluoro-propil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1,34 g, 77%) kao ulje žute boje.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 3,87 - 3,66 (m, 1H), 3,32 (s, 3H), 3,13 - 2,86 (m, 3H), 2,52 - 2,32 (m, 1H), 2,08 - 1,79 (m, 3H), 1,57 - 1,24 (m, 15H). ESI-MS m/z izračunato 292,1962, pronađeno 293,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,55 minuta (LC metoda Q).
Korak 12: terc-Butil 4-[2,2-difluoro-3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[2111]
[2112] Mešajućem rastvoru terc-butil 4-(3-amino-2,2-difluoro-propil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1,24 g, 4,2413 mmol) i 6-fluoropiridin-2-sulfonamid (1,12 g, 6,3934 mmol) u anhidrovanom DMSO (7 mL) na sobnoj temperaturi pod azotom je dodato DIEA (1,7020 g, 2,3 mL, 13,169 mmol). Reakciona smeša je zagrevana do 120 °C tokom 30 sati. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, reakciona smeša je razblažena vodom (50 mL) i slanim rastvorom (150 mL), i proizvod je ekstraktovan etil acetatom (3 x 100 mL). Spojeni organski slojevi su isprani slanim rastvorom (50 mL), osušeni nad anhidrovanim natrijum sulfatom i koncentrovani. Sirova materija je prečišćena reverznom fazom HPLC korišćenjem metode voda-acetonitril gradijenta (C18Varian kolona, 50 - 90% acetonitril, 60 mL/min) kako bi se dobio terc-butil 4-[2,2-difluoro-3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (574 mg, 29%) kao pena bele boje.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 7,58 (dd, J = 8,4, 7,2 Hz, 1H), 7,37 (t, J = 6,4 Hz, 1H), 7,16 (s, 2H), 7,06 - 7,00 (m, 1H), 6,75 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 3,96 - 3,81 (m, 2H), 3,64 - 3,51 (m, 1H), 2,83 (q, J = 10,4 Hz, 1H), 2,42 - 2,29 (m, 1H), 2,10 - 1,82 (m, 3H), 1,54 - 1,42 (m, 1H), 1,41 - 1,30 (m, 12H), 1,23 (s, 3H). ESI-MS m/z izračunato 448,1956, pronađeno 449,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,38 minuta (LC metoda P).
Korak 13: terc-Butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]-2,2-difluoro-propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[2114] Boca sa okruglim dnom zapremine 100 mL je pod azotom napunjena sa 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilnom kiselinom (457 mg, 1,270 mmol) i anhidrovanim THF (8 mL). Dodato je CDI (355 mg, 2,189 mmol) i smeša je mešana pod azotom na sobnoj temperaturi 15 sati. U odvojenoj boci zapremine 20 mL je pod atmosferom azota pripreman rastvor terc-butil 4-[2,2-difluoro-3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (570 mg, 1,271 mmol) u anhidrovanom THF (4 mL), i naknadno je dodat špricom u aktivirani estarski rastvor. Špricem je dodato DBU (0,78 mL, 5,216 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod atmosferom azota 5 sati. Rastvarači su uklonjeni pod redukovanim pritiskom i dobijeno gusto ulje je tretirano etil acetatom (35 mL) i vodom (35 mL). Polako je dodat HCl (1,5 mL 6 M, 9,000 mmol) (konačna pH = 5) i dve faze su razdvojene. Vodena faza je ekstraktovana sa EtOAc (30 mL). Spojeni ekstrakti su isprani slanim rastvorom (30 mL) i osušeni nad natrijum sulfatom. Nakon evaporacije rastvarača, ostatak je rastvoren u DCM i prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (80 g zlatna kolona) korišćenjem gradijenta etil acetata (0 do 100% tokom 30 minuta) u heksanima. Proizvod je eluirao na 45-65% EtOAc. Čiste frakcije su spojene i rastvarači upareni kako bi se dobio terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoyl] -2-piridil] amino] -2,2-difluoro-propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (667 mg, 66%) kao bezbojna smola. ESI-MS m/z izračunato 789,2887, pronađeno 790,54 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,51 minuta (LC metoda B).
Korak 14: 2-Hloro-N-[[6-[[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)-2,2-difluoro-propil]amino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (so dihidrohlorida)
[2115]
[2116] 100 mL je napunjeno sa terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil] amino]-2,2-difluoro-propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatom (667 mg, 0,8440 mmol), DCM (8 mL) i HCl (1,25 mL 4M u dioksanu, 5,000 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi tokom sat i po vremena. Isparljive materije su uklonjene evaporacijom pod vakuumom. Ostatak je trituriran sa DCM/heksanima i rastvarači su upareni. Operacija je ponavljana dok nije dobijena lepa bela čvrsta supstanca. Sušenjem pod vakuumom je dobijen 2-hloro-N-[[6-[[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)-2,2-difluoro-propil]amino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (so dihidrohlorida) (570 mg, 89%) kao čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 689,23627, pronađeno 690,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,77 minuta (LC metoda B).
Korak 15: 8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16,16-difluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 305, SFC pik 1) i 8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16,16-difluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo [17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 304, SFC pik 2)
[2117]
[2118] Boca sa okruglim dnom zapremine 100 mL opremljena magnetnom mešalicom je pod azotom napunjena sa 2-hloro-N-[[6-[[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)-2,2-difluoro-propil]amino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamidom (so dihidrohlorida) (570 mg, 0,7469 mmol), anhidrovanim NMP (24 mL) i K2CO3(766 mg, 5,542 mmol) (325 meš). Smeša je energično mešana u suvoj kadi na 150 °C pod azotom tokom 18 sati. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, smeša je sipana u ohlađenu vodu (200 mL) i zakiseljena dodavanjem HCl (2 mL 6 M, 12,00 mmol) (blago penjenje). Dobijena čvrsta supstanca je filtrirana na Bihnerovom levku i kratko sušena vazduhom. Čvrsta supstanca je rastvorena u DCM i malo metanola, i dobijen mutni rastvor je uparen. Proizvod je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (zlato 40 g kolona) korišćenjem gradijenta metanola (0 do 5% tokom 30 minuta) u dihlorometanu. Proizvod je eluirao približno 1% metanola. Evaporacijom rastvarača, a zatim trituracijom u DCM/heksanima i evaporacijom rastvarača je dobijen racemski 8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16,16-difluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (404 mg, 83%) kao beličasta čvrsta supstanca. ESI-MS m/z izračunato 653,2596, pronađeno 654,33 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,34 minuta (LC metoda B).
[2119] Dva enantiomera su razdvojena hiralnom SFC korišćenjem ChiralPak AS-3 (250 x 21,2 mm), 5 uM kolona na 40 °C, mobilna faza 24% MeOH (bez modifikatora), 76% CO2, protok: 70 mL/min, koncentracija: 31 mg/mL u MeOH, zapremina ubrizgavanja: 500 uL, pritisak: 156 bara, talasna dužina: 280 nm. Nakon evaporacije rastvarača, svaki od enantiomera je prečišćen drugi put fleš hromatografijom na silika gelu (24g kolona) korišćenjem gradijenta metanola (0 do 5% tokom 30 minuta) u dihlorometanu. Nakon evaporacije rastvarača, jedinjenja su triturirana u DCM/heksanima. Evaporacijom rastvarača su dobijena dva enantiomera kao čvrste supstance bele boje.
[2120] Jedinjenje 305, SFC pik 1. ee>98% . 8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16,16-difluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (174 mg, 70%).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,54 (s, 1H), 8,22 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,71 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 10,2 Hz, 1H), 7,22 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,10 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,48 (dt, J = 37,1, 12,7 Hz, 1H), 4,22 (t, J = 6,8 Hz, 2H), 3,30 (široko s, 1H), 3,12 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 2,77 (t, J = 10,6 Hz, 1H), 2,39 (br s, 1H), 2,27 - 2,03 (m, 2H), 1,93 (dd, J = 11,7, 5,2 Hz, 1H), 1,82 (q, J = 6,6 Hz, 2H), 1,72 (t, J = 12,4 Hz, 1H), 1,63 (s, 3H), 1,54 (s, 3H), 1,48 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 0,90 - 0,75 (m, 4H), 0,69 - 0,60 (m, 2H), 0,55 - 0,39 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 653,2596, pronađeno 654,33 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,34 minuta (LC metoda B).
[2121] Jedinjenje 304, SFC pik 2. ee>98% . 8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16,16-difluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (178 mg, 71%).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,53 (s, 1H), 8,22 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,87 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,71 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,52 (d, J = 10,1 Hz, 1H), 7,21 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,10 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,48 (dt, J = 37,3, 12,4 Hz, 1H), 4,22 (t, J = 6,7 Hz, 2H), 3,30 (široko s, 1H), 3,12 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 2,77 (t, J = 10,6 Hz, 1H), 2,39 (br s, 1H), 2,26 - 2,05 (m, 2H), 1,93 (dd, J = 12,0, 5,2 Hz, 1H), 1,82 (q, J = 6,6 Hz, 2H), 1,72 (t, J = 12,4 Hz, 1H), 1,64 (s, 3H), 1,54 (s, 3H), 1,48 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 0,90 - 0,77 (m, 4H), 0,72 - 0,60 (m, 2H), 0,56 - 0,45 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 653,2596, pronađeno 654,33 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,34 minuta (LC metoda B).
Primer 200: Pripremanje 8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16-fluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 1) (Jedinjenje 309, SFC pik 1), 8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16-fluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 2) (Jedinjenje 308, SFC pik 2), 8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16-fluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 3) (Jedinjenje 307, SFC pik 3) i 8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16-fluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-triona (enantiomer 4) (Jedinjenje 306, SFC pik 4)
[2122]
Korak 1: 3-Alil-1-[(4-metoksifenil)metil]-5,5-dimetil-pirolidin-2-on
[2123]
[2124] Rastvor diizopropilamin (4,3372 g, 6,0 mL, 42,862 mmol) u tetrahidrofuranu (100 mL) je ohlađen na -78 °C i ukapavanjem je dodat N-butillitijum (17,1 mL 2.5 M, 42,862 mmol). Rastvor je mešan 30 minuta nakon čega je ukapavanjem dodat rastvor 1-[(4-metoksifenil)metil]-5,5-dimetil-pirolidin-2-on (10 g, 42,862 mmol) u THF (10 mL), a zatim su mešani sat vremena. Reakcionoj smeši je ukapavanjem dodat 3-bromoprop-1-en (5,1853 g, 3,71 mL, 42,862 mmol), mešana je sat vremena na -78 °C nakon čega je omogućeno da se zagreje do 0 °C tokom 30 minuta. Reakcija je zatim ugašena zasićenim amonijum hloridom (100 mL) i ekstraktovana etil acetatom (3 x 50 mL). Spojene organske faze su osušene nad natrijum sulfatom i prečišćene hromatografijom na silika gelu (0 - 20% etil acetat/heksan) kako bi se dobio 3-alil-1-[(4-metoksifenil)metil]-5,5-dimetil-pirolidin-2-on (8,75 g, 71%). ESI-MS m/z izračunato 273,1729, pronađeno 274,0 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,97 minuta (LC metoda P).
Korak 2: 3-Alil-5,5-dimetil-pirolidin-2-on
[2125]
[2126] 3-Alil-1-[(4-metoksifenil)metil]-5,5-dimetil-pirolidin-2-on (7,75 g, 28,350 mmol) je rastvoren u acetonitrilu (140 mL) i vodi (16 mL) nakon čega je u porcijama dodat cerni amonijum nitrat (64.559 g, 113.40 mmol) na sobnoj temperaturi, i reakcija je mešana 3 sata. Nakon toga je ugašena slanim rastvorom (300 mL) i ekstraktovana sa EtOAc (3 x 150 mL). Organske frakcije su spojene, osušene nad natrijum sulfatom i uparene, ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem 0 -100% heksani-etil acetat kako bi se dobio 3-alil-5,5-dimetilpirolidin-2-on (3,77 g, 76%). ESI-MS m/z izračunato 153,1154, pronađeno 154,2 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,61 minuta (LC metoda P).
Korak 3: terc-Butil 4-alil-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[2128] Rastvor 3-alil-5,5-dimetil-pirolidin-2-on (3,77 g, 24,605 mmol) u THF (25 mL) je ukapavanjem dodat suspenziji LiAlH4(2,8016 g, 3,05 mL, 73,815 mmol) u THF (50 mL) na refluksu. Smeša je refluksovana 3 sata, ohlađena do 0 °C, nakon čega je veoma polako dodata voda (2,8 mL) a zatim 15% w/w natrijum hidroksid (2,8 mL) i voda (8,4 mL). Smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i dodato je Boc2O (6,4440 g, 6,7832 mL, 29,526 mmol). Smeša je mešana 16 sati, filtrirana i filter kolač je trituriran sa THF. Organske frakcije su spojene i uparene, ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem 0 - 5% etil acetata u heksanu kako bi se dobio terc-butil 4-alil-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (5,06 g, 77%).
<1>H NMR (250 MHz, hloroform-d) δ 5,93 - 5,58 (m, 1H), 5,15 - 4,89 (m, 2H), 3,82 - 3,48 (m, 1H), 2,90 (q, J = 10,9 Hz, 1H), 2,32 -1,97 (m, 3H), 1,94 - 1,75 (m, 1H), 1,50 - 1,25 (m, 16H). ESI-MS m/z izračunato 239,1885, pronađeno 240,3 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,53 minuta (LC metoda P).
Korak 4: terc-Butil 4-(3-bromo-2-fluoro-propil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[2129]
[2130] Rastvor terc-butil 4-alil-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (500 mg, 1,8801 mmol) i trietilamin trihidrofluorid (710 mg, 1,6296 mmol) u DCM (10 mL) je ohlađen do 0 °C i dodato je NBS (500 mg, 2,8092 mmol). Smeša je ostavljena da se zagreje na sobnu temperaturu i mešana je 4 sata. Smeša je ugašena zasićenim natrijum bikarbonatom (50 mL), vodena faza je razdvojena i ekstraktovana sa DCM (100 mL). Organske frakcije su spojene, osušene nad natrijum sulfatom i uparene. Ostatak je prečišćen hromatografijom na koloni silika gela korišćenjem 0 - 10% etil acetata u heksanu kako bi se dobio terc-butil 4-(3-bromo-2-fluoro-propil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (420 mg, 65%) kao bezbojno ulje.<1>H NMR (250 MHz, CDCl3) δ 4,87 - 4,42 (m, 1H), 3,86 - 3,54 (m, 1H), 3,55 - 3,22 (m, 2H), 3,07 - 2,75 (m, 1H), 2,56 - 2,18 (m, 1H), 2,12 - 1,71 (m, 3H), 1,71 - 1,57 (m, 1H), 1,51- 1,38 (m, 12H), 1,35 - 1,24 (m, 3H). ESI-MS m/z izračunato 337,1053, pronađeno 338,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,59 minuta (LC metoda P).
Korak 5: terc-Butil 4-(3-amino-2-fluoro-propil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[2131]
[2132] Rastvoru terc-butil 4-(3-bromo-2-fluoro-propil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (2,26 g, 6,5477 mmol) u DMF (28 mL) je dodato NaN3 (0,6 g, 9,1832 mmol) i smeša je mešana na 45 °C tokom 18 sati. Smeša je razblažena vodom (150 mL) a zatim zasićenim natrijum bikarbonatom (150 mL) i smeša je ekstraktovana etil acetatom (2 x 200 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom (300 mL), osušen nad natrijum sulfatom, filtriran i koncentrovan kako bi se dobio intermedijerni azid kao ulje braon boje. Rastvoru ovog ulja azid intermedijera u etil acetatu (30 mL) je dodat platina oksid monohidrat (0,5 g, 2,2018 mmol). Smeša je hidrogenizovana u Parr tresaču pri 40 psi tokom sat vremena. Reakciona smeša je filtrirana kroz jastuče celita. Filtrat je koncentrovan kako bi se dobio terc-butil 4-(3-amino-2-fluoro-propil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1,59 g, 87%) kao tamno ulje. ESI-MS m/z izračunato 274,2057, pronađeno 275,6 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 3,51 minuta (LC metoda Q).
Korak 6: terc-Butil 4-[2-fluoro-3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[2133]
[2134] Smeši terc-butil 4-(3-amino-2-fluoro-propil)-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1,59 g, 5,6791 mmol) i 6-fluoropiridin-2-sulfonamid (1,3 g, 7,0103 mmol) u DMSO (10 mL) je dodato DIEA (2,2260 g, 3 mL, 17,223 mmol). Smeša je mešana na 110 °C tokom 16 sati. Smeša je ohlađena na sobnu temperaturu i tretirana vodom/slanim rastvorom (100/100 mL) i etil acetatom (150 mL). Organski sloj je osušen nad natrijum sulfatom, filtriran kroz jastuče celita i koncentrovan. Ostatak (2,1 g, je spojeno sa 0,56 g proizvoda iz prethodne reakcije) je rastvoren u DMSO (10 mL) i postavljen na kolonu preparativne HPLC (Varian C1810 um 5 x 30cm; brzina protoka: 60 mL/min.; mobilna faza A: voda; mobilna faza B: acetonitril ; metoda: 40 - 90% B tokom 45 minuta). Čiste frakcije su spojene i koncentrovane da bi se uklonio acetonitril. Dobijena vodena faza je ekstraktovana etil acetatom (2 x 100 mL). Organski sloj je ispran slanim rastvorom (200 mL), osušen nad natrijum sulfatom i koncentrovan kako bi se dobio terc-butil 4-[2-fluoro-3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (1,5 g, 58%) kao čvrsta supstanca bele boje.<1>H NMR (250 MHz, DMSO-d6) δ 7,56 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,27 (t, J = 5,8 Hz, 1H), 7,12 (s, 2H), 7,00 (d, J = 7,1 Hz, 1H), 6,71 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,95 - 4,46 (m, 1H), 3,77 - 3,40 (m, 3H), 2,95 - 2,73 (m, 1H), 2,40 - 2,15 (m, 1H), 2,02 -1,85 (m, 1H), 1,83 - 1,57 (m, 3H), 1,54 - 1,29 (m, 12H), 1,25 (s, 3H). ESI-MS m/z izračunato 430,205, pronađeno 431,5 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,35 minuta (LC metoda R).
Korak 7: terc-Butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]-2-fluoro-propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat
[2135]
[2136] Boca sa okruglim dnom zapremine 100 mL je pod azotom napunjena sa 2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksilnom kiselinom (573 mg, 1,593 mmol) i anhidrovanim THF (10 mL). Dodato je CDI (315 mg, 1,943 mmol) i smeša je mešana pod azotom na sobnoj temperaturi 2 sata. Dodato je još 150 mg CDI i smeša je mešana na sobnoj temperaturi 15 sati kako bi se postigla kompletna konverzija. U odvojenoj boci zapremine 20 mL, pod atmosferom azota je pripreman rastvor terc-butil 4-[2-fluoro-3-[(6-sulfamoil-2-piridil)amino]propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (693 mg, 1,610 mmol) u anhidrovanom THF (5 mL), i naknadno je dodat špricom u aktivirani estarski rastvor. Špricom je dodato DBU (0,96 mL, 6,419 mmol) i reakciona smeša je mešana na sobnoj temperaturi pod atmosferom azota 5 sati. Rastvarači su uklonjeni pod redukovanim pritiskom i dobijeno gusto ulje je tretirano etil acetatom (40 mL) i vodom (40 mL). Polako je dodat HCl (1,8 mL 6 M, 10,80 mmol) (konačna pH = 5) i dve faze su razdvojene. Vodena faza je ekstraktovana sa EtOAc (30 mL). Spojeni organski ekstrakti su isprani slanim rastvorom (30 mL) i osušeni nad natrijum sulfatom. Nakon evaporacije rastvarača, ostatak (1,34 g) je rastvoren u DCM i prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (80 g zlata kolona) korišćenjem gradijenta etil acetata (0 do 100% tokom 30 minuta) u heksanima. Proizvod je eluirao na 45 - 65% EtOAc. Čiste frakcije su spojene i rastvarači upareni kako bi se dobio terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]-2-fluoropropil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilat (804 mg, 65%) kao penasta čvrsta supstanca bele boje. ESI-MS m/z izračunato 771,2981, pronađeno 772,39 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2 dijastereomera vidljiva, 1:1, Rt = 2,51 i Rt = 2,52 minuta (LC metoda B). Proizvod je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.
Korak 8: 2-Hloro-N-[[6-[[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)-2-fluoro-propil]amino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (so dihidrohlorida)
[2137]
[2138] Boca zapremine 100 mL je napunjena sa terc-butil 4-[3-[[6-[[2-hloro-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karbonil]sulfamoil]-2-piridil]amino]-2-fluoro-propil]-2,2-dimetil-pirolidin-1-karboksilatom (782 mg, 1,013 mmol), DCM (9 mL) i HCl (1,5 mL 4M u dioksanu, 6,000 mmol). Reakcija je mešana na sobnoj temperaturi gotovo 5 sati. Isparljive materije su uklonjene evaporacijom pod vakuumom. Ostatak je trituriran sa DCM/heksanima i rastvarači su upareni. Operacija je ponavljana dok nije dobijena lepa bela čvrsta supstanca. Sušenjem pod vakuumom je dobijen 2-hloro-N-[[6-[[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)-2-fluoropropil]amino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamid (so dihidrohlorida) (731 mg, 97%) kao čvrsta supstanca bele boje. Proizvod je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja. ESI-MS m/z izračunato 671,24567, pronađeno 672,44 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 1,75 minuta (LC metoda B).
Korak 9: 8-[3-(2-{Dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16-fluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (Jedinjenje 309, SFC pik 1), 8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16-fluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (Jedinjenje 308, SFC pik 2), 8-[3-(2-[dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il]etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16-fluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10] tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 3) (Jedinjenje 307, SFC pik 3) i 8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16-fluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 4) (Jedinjenje 306, SFC pik 4)
[2139]
[2140] Boca sa okruglim dnom zapremine 100 mL opremljena magnetnom mešalicom je pod azotom napunjena sa 2-hloro-N-[[6-[[3-(5,5-dimetilpirolidin-3-il)-2-fluoro-propil]amino]-2-piridil]sulfonil]-6-[3-(2-dispiro[2.0.2.1]heptan-7-iletoksi)pirazol-1-il]piridin-3-karboksamidom (so dihidrohlorida) (723 mg, 0,9703 mmol), anhidrovanim NMP (30 mL) i K2CO3(996 mg, 7,207 mmol) (325 meš). Smeša je energično mešana u suvoj kadi na 150 °C pod azotom tokom 18 sati. Nakon hlađenja na sobnu temperaturu, smeša je sipana u ohlađenu vodu (300 mL) i zakiseljena dodavanjem HCl (2,5 mL 6 M, 15,00 mmol) (blago penjenje). Dobijena čvrsta supstanca je filtrirana na Bihnerovom levku i kratko osušena vazduhom. Čvrsta materija je rastvorena u DCM i malo metanola, i dobijen mutni rastvor je osušen nad natrijum sulfatom. Nakon koncentracije (910 mg sirove čvrste supstance), rastvor je prečišćen fleš hromatografijom na silika gelu (zlato 80 g kolona) korišćenjem gradijenta metanola (0 do 5% tokom 30 minuta) u dihlorometanu. Proizvod je eluirao približno 2-3% metanola. Evaporacijom rastvarača, a zatim trituracijom u DCM/heksanima i evaporacijom rastvarača je dobijen 8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16-fluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (467 mg, 76%) (smeša 4 izomera) kao beličasta čvrsta supstanca.<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) nekoliko dijastereomera uočenih δ 12,57 i 12,50 (dva s, ukupno 1H), 8,25 - 8,19 (m, 1H), 7,83 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,65 (q, J = 8,0 Hz, 1H), 7,37 - 7,11 (m, 2H), 6,98 - 6,74 (m, 2H), 6,10 (dd, J = 4,6, 2,7 Hz, 1H), 4,87 (d, J = 43,7 Hz, 1H), 4,32 -4,04 (m, 3H), 3,29 - 2,97 (m, 2H), 2,92 - 2,60 (m, 1H), 2,47 - 2,23 (m, 1H), 2,18 - 1,76 (m, 5H), 1,75 - 1,44 (m, 8H), 0,87 - 0,77 (m, 4H), 0,70 - 0,56 (m, 2H), 0,56 - 0,43 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 635,269, pronađeno 636,37 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: dva pika vidljiva, Rt = 2,32 i Rt = 2,34 minuta (LC metoda B).
[2141] Četiri stereoizomera su razdvojena hiralnom SFC u dve faze. Uzorak je prvo prečišćen korišćenjem metode normalne faze SFC-MS korišćenjem LUX-4 kolone (250 x 21,2 mm, 5 um veličina čestice) kupljeno od Phenomenex (pn: 00G-4491-P0-AX). Mobilna faza 41% MeOH (bez modifikatora), 59% CO2, 70 mL/min, 31 mg/mL u MeOH, zapremina ubrizgavanja = 500 uL, temperatura kolone = 40 °C, pritisak 178 bara, talasna dužina 280 nM. Ovo je razdvojilo pik 1 i pik 2 od pikova 3 i 4 koji su eluirali zajedno. Nakon evaporacije rastvarača, pik 3 i 4 (216 mg čvrste materije) su razdvojeni korišćenjem chiralPak AS-3 kolone (250 x 21,2 mm), 5 uM, mobilna faza 28% MeOH (bez modifikatora), 72% CO2, 70 mL/min, 31 mg/mL u MeOH, 500 uL zapremina ubrizgavanja, pritisak 156 bara, talasna dužina 280 mm. Nakon evaporacije rastvarača, svako jedinjenje je prečišćeno fleš hromatografijom na silika gelu (12 g kolona) korišćenjem gradijenta metanola (0 do 5% tokom 15 minuta) u dihlorometanu. Za svaki razdvojeni izomer, rastvarači su upareni i ostatak je trituriran u DCM/heksanima. Evaporacijom rastvarača su dobijeni proizvodi kao beličaste čvrste supstance. Na osnovu LC vremena zadržavanja, pik 1/2 i pik 3/4 formiraju enantiomerne parove. Ovo je potvrđeno mešanjem QC rastvora iz pika 2 sa pikom 3, što je za rezultat imalo dva odvojena pika.
<1>H NMR preklapanje 4 izomera potvrđuje opservaciju. pik 1 i 2 imaju isti<1>H NMR spektrum, dok je<1>HNMR spektrum pika 3 identičan piku 4.
[2142] Jedinjenje 309, SFC pik 1. ee>98%.8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16-fluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 1) (98 mg, 61%).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,50 (široko s, 1H), 8,22 (s, 1H), 7,82 (br s, 1H), 7,66 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,24 (br s, 1H), 7,19 - 7,13 (br m, 1H), 6,95 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,78 (br s, 1H), 6,10 (d, J = 2,9 Hz, 1H), 4,83 (br d, 1H), 4,22 (br s, 2H), 4,12 (br s, 1H), 3,26 - 3,02 (br m, 2H), 2,82 (br s, 1H), 2,44 (br s, 1H), 2,08 (br s, 1H), 1,98 - 1,44 (m, 12H), 0,89 - 0,75 (m, 4H), 0,72 - 0,60 (m, 2H), 0,55 - 0,43 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 635,269, pronađeno 636,37 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,33 minuta (LC metoda B).
[2143] Jedinjenje 308, SFC pik 2. ee>98%.8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16-fluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 2) (98 mg, 61%).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,50 (s, 1H), 8,23 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,84 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 7,66 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,24 (široko s, 1H), 7,17 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,96 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 6,78 (br s, 1H), 6,10 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,83 (br d, J = 44,5 Hz, 1H), 4,23 (tt, J = 6,8, 2,7 Hz, 2H), 4,13 (br s, 1H), 3,15 (br s, 2H), 2,82 (br s, 1H), 2,44 (br s, 1H), 2,08 (br s, 1H), 1,97 - 1,42 (m, 12H), 0,90 - 0,76 (m, 4H), 0,73 - 0,57 (m, 2H), 0,56 - 0,41 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 635,269, pronađeno 636,33 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,33 minuta (LC metoda B).
[2144] Jedinjenje 307, SFC pik 3. ee>98%.8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16-fluoro12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 3) (90 mg, 56%).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,57 (s, 1H), 8,21 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,64 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,33 (broad d, J = 9,8 Hz, 1H), 7,14 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,94 (t, J = 9,2 Hz, 2H), 6,09 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 4,88 (d, J = 42,8 Hz, 1H), 4,30 - 4,09 (m, 3H), 3,36 (m, 1H preklapanje sa vodom), 3,01 (t, J = 8,9 Hz, 1H), 2,64 (t, J = 10,7 Hz, 1H), 2,31 (široko s, 1H), 1,94 - 1,75 (m, 5H), 1,69 - 1,57 (m, 4H), 1,52 (s, 3H), 1,48 (t, J = 6,5 Hz, 1H), 0,90 - 0,78 (m, 4H), 0,68 - 0,59 (m, 2H), 0,55 - 0,41 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 635,269, pronađeno 636,37 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,3 minuta (LC metoda B).
[2145] Jedinjenje 306, SFC pik 4. ee>98%.8-[3-(2-{dispiro[2.0.2.1]heptan-7-il}etoksi)-1H-pirazol-1-il]-16-fluoro-12,12-dimetil-2λ<6>-tia-3,9,11,18,23-pentaazatetraciklo[17.3.1.111,14.05,10]tetrakoza-1(22),5,7,9,19(23),20-heksaen-2,2,4-trion (enantiomer 4) (74 mg, 46%).<1>H NMR (500 MHz, DMSO-d6) δ 12,57 (s, 1H), 8,21 (d, J = 2,8 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,64 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 7,33 (široko d, J = 9,7 Hz, 1H), 7,13 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,94 (dd, J = 10,6, 8,4 Hz, 2H), 6,10 (d, J = 2,7 Hz, 1H), 4,88 (d, J = 43,5 Hz, 1H), 4,28 - 4,08 (m, 3H), 3,35 - 3,24 (m, 1H preklapanje sa vodom), 3,04 - 2,92 (m, 1H), 2,63 (t, J = 10,9 Hz, 1H), 2,31 (br s, 1H), 1,97 - 1,75 (m, 5H), 1,67 - 1,59 (m, 4H), 1,52 (s, 3H), 1,48 (t, J = 6,6 Hz, 1H), 0,91 - 0,76 (m, 4H), 0,67 - 0,60 (m, 2H), 0,54 - 0,41 (m, 2H). ESI-MS m/z izračunato 635,269, pronađeno 636,33 (M+1)<+>; Vreme zadržavanja: 2,3 minuta (LC metoda B).
Testovi bioaktivnosti
Rastvori
[2146] Bazni medijum (ADF+++) se sastojao od Advanced DMEM/Ham’s F12, 2 mM Glutamax, 10 mM HEPES, 1u/ml penicilin/streptomicin.
[2147] Intestinalni enteroidni medijum za održavanje (IEMM) se sastojao od ADF+++, 1x B27 suplement, 1x N2 suplement, 1,25 mM N-acetil cistein, 10 mM nikotinamid, 50 ng/mL hEGF, 10 nM Gastrin, 1 ug/mL hR-spondin-1, 100 ng/mL hNoggin, TGF-b tip 1 inhibitor A-83-01, 100 ug/mL primocin, 10 uM P38 MAPK inhibitor SB202190.
[2148] Kada 1 pufer se sastojao od 1 mM MgCl2, 160 mM NaCl, 4,5 mM KCl, 10 mM HEPES, 10 mM glukoza, 2 mM CaCl2.
[2149] Pufer bez hlorida se sastojao od 1 mM magnezijum glukonata, 2 mM kalcijum glukonata, 4,5 mM kalijum glukonata, 160 mM natrijum glukonata, 10 mM HEPES, 10 mM glukoze.
[2150] Kada 1 rastvor boje se sastojao od kada 1 pufera, 0,04% pluronik F127, 20 uM metil oksonola, 30 uM CaCCinh-A01, 30 uM Chicago Sky Blue.
[2151] Rastvor boje bez hlorida se sastojao od pufera bez hlorida, 0,04% pluronik F127, 20 uM metil oksonola, 30
uM CaCCinh-A01, 30 uM Chicago Sky Blue.
[2152] Rastvor za stimulaciju boje bez hlorida se sastojao od rastvora boje bez hlorida, 10 uM forskolina, 100 uM
IBMX i 300 nM jedinjenja III.
Ćelijska kultura
[2153] Humane intestinalne epitelne enteroidne ćelije su dobijene od Hubrecht instituta za razvojnu biologiju i istraživanje matičnih ćelija, Utrecht, The Netherlands i proširene u T-flask kao što je prethodno opisano (Dekkers JF, Wiegerinck CL, de Jonge HR, Bronsveld I, Janssens HM, de Winter-de Groot KM, Brandsma AM, de Jong NWM, Bijvelds MJC, Scholte BJ, Nieuwenhuis EES, van den Brink S, Clevers H, van der Ent CK, Middendorp S and M Beekman JM. Funkcionalni CFTR test koji koristi intestinalne organoide primarne cistične fibroze. Nat Med.2013 Jul;19(7):939-45.).
Sakupljanje i sejanje enteroidnih ćelija
[2154] Ćelije su dobijene u rastvoru za obnavljanje ćelija, sakupljene centrifugiranjem na 650 rpm tokom 5 minuta na 4°C, resuspendovane u TryPLE i inkubirane 5 minuta na 37°C. Ćelije su zatim sakupljene centrifugiranjem pri 650 rpm tokom 5 minuta na 4°C i resuspendovane u IEMM koji sadrži 10 uM ROCK inhibitor (RI) (trans-4-[(1R)-1-aminoetil]-N-4-piridinilcikloheksankarboksamid). Ćelijska suspenzija je propuštena kroz 40 um ćelijsku cediljku i resuspendovana na 1x106 ćelija/mL u IEMM koje sadrži 10 uM RI. Ćelije su posejane u 5000 ćelija/otvor na pločama sa višestrukim otvorima i inkubirane tokom noći na 37°C, 95% vlažnosti i 5% CO2pre testa.
Test membranskog potencijala bojenja
[2155] Enteroidne ćelije su inkubirane sa testnim jedinjenjem u IEMM tokom 18-24 sata na 37°C, 95% vlažnosti i 5% CO2. Nakon inkubacija jedinjenja, korišćen je test membranskog potencijala bojenja upotrebom FLIPR Tetra da direktno meri snagu i efikasnost test jedinjenja na transportu hlorida posredovanom CFTR praćeno akutnim dodavanjem 10 uM forskolina i 300 nM Jedinjenja III. Ukratko, ćelije su isprane 5 puta u kada 1 puferu. Kada 1 rastvor bojenja je dodat i ćelije su inkubirane 25 minuta na sobnoj temperaturi. Nakon inkubacije boje, ćelije su isprane 3 puta u rastvoru boje bez hlorida. Transport hlorida je iniciran dodavanjem rastvora stimulacije bojenja bez hlorida i signal fluorescencije je očitavan 15 minuta. Transport hlorida posredovan sa CFTR za svako stanje je određen iz AUC odgovora fluorescencije na akutni forskolin i stimulacije 300 nM Jedinjenja III. Transport hlorida je nakon toga izražen kao procenat transporta hlorida nakon tretmana sa 3 uM Jedinjenja A, 3 uM Jedinjenja II i 300 nM akutnog Jedinjenja III trostruke kombinacione kontrole (% aktivnosti). Jedinjenje A je:
[2156] Tabela 5 odražava rezultate testova bioaktivnosti za primerna jedinjenja pronalaska (maksimalna aktivnost: ++ je >60%; + je 30-60%; je <30%. EC50: ++ je <1 uM; + je 1-3 uM; je >3 uM; i ND znači "nije utvrđeno").
Tabela 5:
Ostala izvođenja
[2157] Prethodna razmatranja otkriva i opisuje samo primere realizacije ovog pronalaska. Stručnjak u ovoj oblasti lako ć e iz toga i iz prateć ih crteža i patentnih zahteva prepoznati da se u njima mogu napraviti različite promene, modifikacije i varijacije bez odstupanja od pronalaska kako je definisano u sledećim patentnim zahtevima.

Claims (45)

  1. Patentni zahtevi 1. Jedinjenje formule (III-A) ili (III-B):
  2. ili
  3. njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu: - ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju; - prsten A je fenil, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten; - prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten; - svaki R<1>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - m je 0, 1, 2, 3 ili 4; - svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - n je 0, 1 ili 2; - svaki R<3>je metil; - svaki R<4>je nezavisno izabran između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupe ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5 -6-člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupe, haloalkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe, pri čemu: - k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; - svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupe, -O- i -NR<a>-grupe, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu: - svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso; - svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i - svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe; i - R<7>je izabran između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupe opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe i halogena; - q je 1 ili 2; - Z je dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu: - r je 3, 4 ili 5; - svaki L je nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupe, -O- i -NR<b>-grupe, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu: - svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupe, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i - svaki R<b>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe. 2. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je jedinjenje formule (III-A) jedinjenje formule IV-A:
  4. njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu: - ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju; - prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroarilni prsten; - svaki R<1>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - m je 0, 1, 2, 3 ili 4; - svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - n je 0, 1 ili 2; - svaki R<3>je metil; - svaki R<4>je nezavisno izabran između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupe, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupe, haloalkil grupe, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe, pri čemu : - k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; - svaki Y je nezavisno izabran od C(R<5>)(R<6>) grupe, -O- i -NR<a>-grupe, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu: - svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso; - svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i - svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe; i - R<7>je izabran između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupe opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe i halogena; - q je 1 ili 2; - Z je dvovalentni linker formule (L)r,pri čemu: - r je 3, 4 ili 5; - svaki L je nezavisno izabran između C(R<8>)(R<9>) grupe, -O- i -NR<b>- grupe, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu: - svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupe, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i - svaki R<b>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe. 3. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je jedinjenje formule (III-A) jedinjenje formule IV-B:
  5. njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu: - ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju; - prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten; - svaki R<1>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - m je 0, 1, 2, 3 ili 4; - svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - n je 0, 1 ili 2; - svaki R<3>je metil; - svaki R<4>je nezavisno izabran između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupe, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupe, haloalkil grupe, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe, pri čemu: - k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; - svaki Y je nezavisno izabran između C(R<5>)(R<6>) grupe, -O- i -NR<a>- grupe, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu: - svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso; - svaki od R<5>i R6 je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i - svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe; i - R<7>je izabran između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupe opciono supstituisanih sa jednom ili više grupe izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe i halogena; - q je 1 ili 2; - r je 3 ili 4; - svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupe, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i - svaki R<b>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe. 4. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je jedinjenje formule (III-A) jedinjenje formule IV-C:
  6. njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu: - ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju; - svaki R<1>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - m je 0, 1, 2, 3 ili 4; - svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - n je 0, 1 ili 2; - svaki R<3>je metil; - svaki R<4>je nezavisno izabran između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupe, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupe, haloalkil grupe, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe, pri čemu : - k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; - svaki Y je nezavisno izabran između C(R<5>)(R<6>) grupe, -O- i -NR<a>- grupe, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k- R<7>, pri čemu: - svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso; - svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i - svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe; i - R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupe opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe i halogena; - q je 1 ili 2; - r je 3 ili 4; - svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupe, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i - svaki R<b>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe. 5. Jedinjenje prema zahtevu 1, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu je jedinjenje formule (III-A) jedinjenje formule V-A:
  7. njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, pri čemu: - ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju; - prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroarilni prsten; - svaki R<1>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - m je 0, 1, 2, 3 ili 4; - svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - n je 0, 1 ili 2; - svaki R<3>je metil; - svaki R<4>je nezavisno izabran između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupe, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupe, haloalkil grupe, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe, pri čemu : - k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; - svaki Y je nezavisno izabran između C(R<5>)(R<6>) grupe, -O- i -NR<a>- grupe, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu: - svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso; - svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupe izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i - svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe; i - R<7>je izabran između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupe opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe i halogena; - q je 1 ili 2; - Z je dvovalentni linker formule (L)r,pri čemu: - r je 3, 4 ili 5; - svaki L je nezavisno izabran između C(R<8>)(R<9>) grupe, -O- i -NR<b>- grupe, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu: - svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupe, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i - svaki R<b>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe. 6. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je jedinjenje formule (III-A) jedinjenje formule V-B:
  8. njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu: - ugljenik označen sa * ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju; - prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroarilni prsten; - svaki R<1>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - m je 0, 1, 2, 3 ili 4; - svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - n je 0, 1 ili 2; - svaki R<3>je metil; - svaki R<4>je nezavisno izabran između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupe, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupe, haloalkil grupe, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe, pri čemu : - k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; - svaki Y je nezavisno izabran između C(R<5>)(R<6>) grupe, -O- i -NR<a>- grupe, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu: - svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso; - svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupe izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i - svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe; i - R<7>je izabran između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupe opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe i halogena; - q je 1 ili 2; - r je 3, 4 ili 5; i - svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupe, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe. 7. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je jedinjenje formule (III-A) jedinjenje formule VI-A ili VI-B:
  9. ili
  10. njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu: - ugljenik označen sa∗ ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju; - prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroarilni prsten; - svaki R<1>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - m je 0, 1, 2, 3 ili 4; - svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - n je 0, 1 ili 2; - svaki R<3>je metil; - svaki R<4>je nezavisno izabran između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupe, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupe, haloalkil grupe, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe, pri čemu: - k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; - svaki Y je nezavisno izabran između C(R<5>)(R<6>) grupe, -O- i -NR<a>- grupe, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu: - svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso; - svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i - svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe; i - R<7>je izabran između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupe opciono supstituisanih sa jednom ili više grupe izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe i halogena; - q je 1 ili 2; - Z je dvovalentni linker formule (L)r,gde: - r je 3, 4 ili 5; - svaki L je nezavisno izabran između C(R<8>)(R<9>) grupe, -O- i -NR<b>- grupe, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu: - svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupe, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i - svaki R<b>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe. 8. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je jedinjenje formule (III-A) jedinjenje formule VI-C ili VI-D:
  11. ili
  12. njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu: - ugljenik označen sa∗ ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju; - prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroarilni prsten; - svaki R<1>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - m je 0, 1, 2, 3 ili 4; - svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupe, C1-C2alkoksil grupe, C1-C2haloalkil grupe, C1-C2haloalkoksil grupe, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - n je 0, 1 ili 2; - svaki R<3>je metil; - svaki R<4>je nezavisno izabran između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupe, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupe, haloalkil grupe, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe, pri čemu : - k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; - svaki Y je nezavisno izabran između C(R<5>)(R<6>) grupe, -O- i -NR<a>- grupe, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu: - svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso; - svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i - svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe; i - R<7>je izabran između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupe opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe i halogena; - q je 1 ili 2; - r je 3 ili 4; i - svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupe, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe. 9. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je prsten A fenil prsten, piridil prsten ili pirazolil prsten, pri čemu je prsten A opciono supstituisan sa (R<1>)m. 10. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-9, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu: (a) svaki R<1>je nezavisno izabran između deuterijuma, C1-C2alkil grupe i hidroksilne grupe, a m je 0 ili 1; ili (b) n je 0. 11. Jedinjenje prema nekom od patentnih zahteva 1-3 i 5-8, njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je prsten D 5-člani heteroaril prsten supstituisan sa (R<4>)q. 12. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu: (a) prsten D je fenil prsten, piridinil prsten, pirazolil prsten, imidazolidinonski prsten, pirolidinonski prsten ili piridinonski prsten, pri čemu je prsten D supstituisan sa (R<4>)q; ili (b) prsten D je pirazolil prsten, ili piridinonski prsten, pri čemu je prsten D supstituisan sa R<4>. 13. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-3 i 5-8, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterisani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu: (a) prsten D je pirazolil prsten, pri čemu je prsten D supstituisan sa (R<4>)q; ili (b) prsten D je:
  13. pri čemu
  14. označava tačku pričvršć ivanja prstena D na prsten B; opciono pri čemu je prsten D:
  15. pri čemu:
  16. označava tačku vezivanja prstena D za prsten B. 14. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-13, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu: (a) svaki R<4>je nezavisno izabran iz okso grupe ili -(Y)k-R7 grupe, pri čemu: - k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; - svaki Y je nezavisno izabran između C(R<5>)(R<6>) grupe, -O- i -NR<a>- grupe, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, i pri čemu: - svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran između vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso; - svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i - svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe; i - R<7>je izabran između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe i halogena, opciono pri čemu su svaki R<5>i R<6>nezavisno izabrani između vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu; ili (b) svaki R<4>je nezavisno izabran iz okso grupe ili -O-(Y)k-R7 grupe, pri čemu: - k je 0, 1, 2, 3, 4 ili 5; - svaki Y je nezavisno izabran između C(R<5>)(R<6>) grupe, -O- i -NR<a>- grupe, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, i pri čemu: - svaki R<5>i R<6>su nezavisno izabrani između vodonika, deuterijuma, halogena, hidroksilne grupe, C1-C2alkil grupe i C3-5cikloalkil grupe, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso; - svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i - svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe; i - R<7>je izabran između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupe opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe i halogena; i/ili (c) svaki R<4>je nezavisno izabran između:
  17. pri čemu:
  18. označava tačku vezivanja R4 za prsten D. 15. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-14, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu: (a) k je 3, 4, 5 ili 6; i/ili (b) q je 1. 16. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-15, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je Z dvovalentni linker formule (L)r,pri čemu: (a) - r je 3 ili 4; - svaki L je nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupe, -O- i -NR<b>- grupe, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, i gde: - svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran između vodonika i deuterijuma; i - svaki R<b>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe; (b) - r je 3 ili 4; - svaki L je nezavisno izabran između C(R<8>)(R<9>) grupe i -NR<b>- grupe, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, i: - svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran između vodonika i deuterijuma; i - svaki R<b>je nezavisno izabran između vodonika i metila; (c) - r je 3 ili 4; - svaki L je nezavisno izabran između C(R<8>)(R<9>) grupe i -NR<b>- grupe, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, i pri čemu: - svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran između vodonika i deuterijuma; i - svaki R<b>je vodonik; ili (d) - r je 3 ili 4; - svaki L je nezavisno izabran između C(R<8>)(R<9>) grupe i -NR<b>- grupe, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu: - svaki R<8>i R<9>je vodonik; i - svaki R<b>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe. 17. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-16, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je svaki R<3>nezavisno CD3. 18. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 3 ili patentnom zahtevu 4, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu: (a) r je 3 ili 4; svaki R<8>i R<9>je nezavisno između vodonika i deuterijuma; i svaki R<b>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe; (b) r je 3 ili 4; svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran između vodonika i deuterijuma; i svaki R<b>je nezavisno izabran između vodonika i metila; (c) r je 3 ili 4; svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran između vodonika i deuterijuma; i svaki R<b>je vodonik; ili (d) r je 3 ili 4; svaki R<8>i R<9>je vodonik; i svaki R<b>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupe. 19. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 6 ili patentnom zahtevu 8, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu: (a) r je 3 ili 4; i svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran između vodonika i deuterijuma; (b) r je 3 ili 4; i svaki R<8>i R<9>je vodonik; ili (c) r je 3 ili 4; i svaki R<8>i R<9>je deuterijum. 20. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, njegova farmaceutski prihvatljiva so ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je jedinjenje formule (III-A) ili (III-B) izabrano između:
  19. ili njihov deuterovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so bilo kojeg od tih jedinjenja ili deuterovanih derivata. 21. Farmaceutska kompozicija koja sadrži najmanje jedno jedinjenje izabrano između jedinjenja prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-20, njegovu farmaceutski prihvatljivu so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, i opciono jednog ili više od: (a) Jedinjenje II:
  20. njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih; (b) Jedinjenje III ili Jedinjenje III-d:
  21. njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih; i (c) farmaceutski prihvatljiv nosač. 22. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-20 ili farmaceutska kompozicija prema patentnom zahtevu 21 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze koji se sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno jedinjenja prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-20 ili farmaceutske kompozicije prema patentnom zahtevu 21. 23. Najmanje jedno jedinjenje izabrano između jedinjenja prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-20, njegovog deuterovanog derivata ili farmaceutski prihvatljive soli bilo kojeg od prethodno navedenih, i opciono jednog ili više od: (a) Jedinjenje II:
  22. njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih; (b) Jedinjenje III ili Jedinjenje III-d:
  23. njegov deuterovani derivat ili farmaceutski prihvatljiva so bilo kojeg od prethodno navedenih; za upotrebu u lečenju cistične fibroze. 24. Jedinjenje formule (X):
  24. njegov deuterovani derivat ili so bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu: - X je halogen; - prsten A je fenil, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten; - prsten B je piridinilni prsten; - X je O, NH ili N(C1-C4alkil) - svaki R<1>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - m je 0, 1, 2, 3 ili 4; - svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - n je 0, 1 ili 2; - svaki R<3>je metil; - Z je dvovalentni linker formule (L)r,pri čemu: - r je 1, 2, 3, 4, 5 ili 6 - svaki L je nezavisno izabran između C(R<8>)(R<9>) grupa, -O- i -NR<b>- grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu: - svaki R<8>i R<9>se nezavisno bira između vodonika, halogena, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2alkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i - svaki R<b>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa. 25. Jedinjenje Formule (Y):
  25. njegova so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu: - Q<b>je halogen; - R<10>je vodonik ili zaštitna grupa; - prsten A je fenil, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten; - prsten B je piridinilni prsten; - prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroarilni prsten; - X je O, NH, ili N(C1-C4alkil); - svaki R<1>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - m je 0, 1, 2, 3 ili 4; - svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - n je 0, 1 ili 2; - svaki R<3>je metil; - svaki R<4>je nezavisno izabran između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupa, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupa, haloalkil grupa, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; u čemu: - k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; - svaki Y je nezavisno izabran između C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>- grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu: - svaki R<5>i R<6>se nezavisno bira između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso; - svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa koje se biraju između C1-C2alkil grupe, C1-C2haloalkil grupe, halogena, hidroksilnih grupa, C1-C2alkoksi grupe i C1-C2haloalkoksil grupe; i - svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa; i - R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10 cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena; - q je 1, 2, 3 ili 4; i - Z je dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu: - r je 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; - svaki L je nezavisno izabran između C(R<8>)(R<9>) grupa, -O- i -NR<b>- grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu: - svaki R<8>i R<9>se nezavisno bira između vodonika, halogena, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2alkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i - svaki R<b>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa. 26. Postupak za dobijanje jedinjenja Formule (I):
  26. njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kog od prethodno navedenih, koji obuhvata spajanje NH grupe prstena C i Q<b>grupe prstena B jedinjenja formule (Y-I):
  27. njegova so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu: - Q<b>je halogen; - prsten A je fenil, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten; - prsten B je piridinilni prsten; - prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten; - X je O, NH, ili N(C1-C4alkil); - svaki R<1>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - m je 0, 1, 2, 3 ili 4; - svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - n je 0, 1 ili 2; - svaki R<3>je metil; - svaki R<4>je nezavisno izabran između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupa, ili opciono dva R4, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupa, haloalkil grupa, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; pri čemu: - k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; - svaki Y je nezavisno izabran između C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>- grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu: - svaki R<5>i R<6>se nezavisno bira između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso; - svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i - svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa; i - R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena; - q je 1, 2, 3 ili 4; i - Z je dvovalentni linker formule (L)r,pri čemu: - r je 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; - svaki L je nezavisno izabran između C(R<8>)(R<9>) grupa, -O- i -NR<b>- grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu: - svaki R<8>i R<9>se nezavisno bira između vodonika, halogena, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2alkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i - svaki R<b>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa; da bi se formiralo jedinjenje Formule (I), njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih. 27. Postupak prema patentnom zahtevu 26, pri čemu se navedeno spajanje izvodi u prisustvu baze. 28. Postupak za dobijanje jedinjenja formule (Y)
  28. njegove soli, ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih, koji sadrži reagovanje jedinjenja Formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih, sa jedinjenjem Formule (B), njegovom solju ili deuterisanim derivatom bilo kojeg od prethodno navedenih, da bi se formiralo navedeno jedinjenje Formule (Y), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih:
  29. opciono uklanjanje zaštite sa N-zaštitne grupe prstena C formule (Y), pri čemu je Q<b>halogen; R<10>formule (Y) je vodonik ili N-zaštitna grupa; R<10>Formule (B) je N-zaštitna grupa, i prsten A, prsten B, prsten D, X, R<1>, m, R<2>, n, R<3>, R<4>, q, Z, R<10>i varijable u njima su kao što je navedeno u patentnom zahtevu 1. 29. Postupak prema patentnom zahtevu 28, pri čemu: (a) navedeno reagovanje jedinjenja Formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih, sa jedinjenjem Formule (B), njegovom solju ili deuterisanim derivatom bilo kog od prethodno navedenih, vrši se u prisustvu baze; ili (b) navedeno jedinjenje Formule (A), njegova so ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, sa jedinjenjem Formule (B), njegovom soli ili deuterisanim derivatom bilo kojeg od prethodno navedenih, obuhvata reakciju jedinjenja Formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih, sa reagensom za kuplovanje a zatim sa jedinjenjem Formule (B), njegovom solju ili deuterisanim derivatom bilo kojeg od prethodno navedenih, u prisustvu baze. 30. Postupak za dobijanje jedinjenja formule (Y-2):
  30. njegova so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu: - Q<b>je halogen; - prsten A je fenil, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten; - prsten B je piridinilni prsten; - prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroarilni prsten; - X je O, NH ili N(C1-C4alkil); - svaki R<1>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - m je 0, 1, 2, 3 ili 4; - svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - n je 0, 1 ili 2; - svaki R<3>je metil; - svaki R<4>se nezavisno bira između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupa, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupa, haloalkil grupa, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; pri čemu: - k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; - svaki Y je nezavisno izabran između C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>- grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu: - svaki R<5>i R<6>se nezavisno bira između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso; - svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i - svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa; i - R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena; - q je 1, 2, 3 ili 4; - r je 1, 2, 3, 4 ili 5; - svaki R<8>i R<9>se nezavisno bira između vodonika, halogena, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2alkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i - R<10>je vodonik ili zaštitna grupa; koji obuhvata reakciju jedinjenja formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih, sa jedinjenjem formule (B-2), njegovom solju ili deuterisanim derivatom bilo kog od prethodno navedenih, da se formira navedeno jedinjenje formule (Y-2), njegova so ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih:
  31. 31. Postupak prema patentnom zahtevu 30, pri čemu: (a) navedeno reagovanje jedinjenja Formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih, sa jedinjenjem Formule (B-2), njegovom soli ili deuterisanim derivatom bilo kojeg od prethodno navedenih, izvodi se u prisustvu baze; ili (b) navedeno reagovanje jedinjenja formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih, sa jedinjenjem Formule (B-2), njegovom soli ili deuterisanim derivatom bilo kojeg od ovih prethodno navedenih, obuhvata reakciju jedinjenja Formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih, sa reagensom za kuplovanje i zatim sa jedinjenjem Formule (B-2), njegovom soli ili deuterisanim derivatom bilo kojeg od prethodno navedenih, u prisustvu baze; opciono pri čemu postupak dalje obuhvata reakciju jedinjenja Formule (D), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih, sa jedinjenjem Formule (E-2), njegovom soli ili deuterisanim derivatom bilo kojeg od prethodnog, da bi se formiralo navedeno jedinjenje Formule (B-2), njegova so ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih:
    pri čemu je R<d>halogen.
  32. 32. Postupak za dobijanje jedinjenja Formule (Y-3):
    njegove soli, ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih, koji sadrži reagovanje jedinjenja Formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih, sa jedinjenjem Formule (B-3), njegovom soli ili deuterisanim derivatom bilo kojeg od prethodno navedenih, da se formira navedeno jedinjenje Formule (Y-3), njegova so ili deuterovani derivat bilo kojeg od napred navedenih:
  33. 33. Postupak prema patentnom zahtevu 32, pri čemu: (a) navedeno reagovanje jedinjenja Formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih, sa jedinjenjem Formule (B-3), njegovom soli ili deuterisanim derivatom bilo kojeg od ovih napred navedenih, izvodi se u prisustvu baze; ili (b) navedeno reagovanje jedinjenja Formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih, sa jedinjenjem Formule (B-3), njegovom soli ili deuterisanim derivatom bilo kojeg od prethodno navedenih, obuhvata reakciju jedinjenja Formule (A), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih, sa reagensom za kuplovanje i zatim sa jedinjenjem Formule (B-3), njegovom soli ili deuterisanim derivatom bilo kojeg od prethodno navedenih, u prisustvu baze; opciono pri čemu postupak dalje obuhvata reakciju jedinjenja Formule (D), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih, sa jedinjenjem Formule (E-3), njegovom soli ili deuterisanim derivatom bilo kojeg od prethodno navedenih, da bi se formiralo navedeno jedinjenje Formule (B-3), njegova so ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih:
    gde je R<d>halogen.
  34. 34. Postupak za dobijanje jedinjenja Formule (I)
    njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je prsten D
    koji obuhvata reagovanje jedinjenja Formule (X), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih, sa jedinjenjem formule (Z-1), njegovom soli ili deuterisanim derivatom bilo kojeg od prethodno navedenih:
    pri čemu: - Q<a>je halogen; - prsten A je fenil, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroaril prsten; - prsten B je piridinilni prsten; - prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroarilni prsten; - X je O, NH ili N(C1-C4alkil); - svaki R<1>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - m je 0, 1, 2, 3 ili 4; - svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - n je 0, 1 ili 2; - svaki R<3>je metil; - svaki R<4>se nezavisno bira između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupa, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupa, haloalkil grupa, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; pri čemu: - k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; - svaki Y je nezavisno izabran između C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>- grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu: - svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso; - svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i - svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa; i - R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena; - q je 1, 2, 3 ili 4; i - Z je dvovalentni linker formule (L)r, pri čemu: - r je 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; - svaki L je nezavisno izabran od C(R<8>)(R<9>) grupa, -O- i -NR<b>- grupa, pri čemu heteroatom u Z nije vezan za drugi heteroatom u Z, pri čemu: - svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2alkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i - svaki R<b>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa.
  35. 35. Postupak za dobijanje jedinjenja Formule (IV-C):
    njegove farmaceutski prihvatljive soli, ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih koji sadrži reagovanje jedinjenja Formule (X-1), njegove soli ili deuterovanog derivata bilo kojeg od prethodno navedenih sa jedinjenjem Formule (Z-1), njegovom soli ili deuterisanim derivatom bilo kojeg od prethodno navedenih
    pri čemu: - Q<a>je halogen; - ugljenik označen sa∗ ima S-stereohemiju ili R-stereohemiju; - prsten D je fenil prsten, 5-člani heterociklil prsten, 6-člani heterociklil prsten, 5-člani heteroaril prsten ili 6-člani heteroarilni prsten; - svaki R<1>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - m je 0, 1, 2, 3 ili 4; - svaki R<2>je nezavisno izabran između C1-C2alkil grupa, C1-C2alkoksil grupa, C1-C2haloalkil grupa, C1-C2haloalkoksil grupa, halogena, cijano grupe i hidroksilne grupe; - n je 0, 1 ili 2; - svaki R<3>je metil; - svaki R<4>je nezavisno izabran između halogena, okso grupe, hidroksilne grupe, cijano grupe i -(Y)k-R<7>grupa, ili opciono dva R<4>, zajedno sa atomom(ima) za koje su vezani, formiraju 5-6 člani cikloalkil ili heterociklil prsten koji je opciono i nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između halogena, C1-C2alkil grupa, haloalkil grupa, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa, pri čemu : - k je 0, 1, 2, 3, 4, 5 ili 6; - svaki Y je nezavisno izabran između C(R<5>)(R<6>) grupa, -O- i -NR<a>- grupa, pri čemu heteroatom u -(Y)k-R<7>nije vezan za drugi heteroatom u -(Y)k-R<7>, pri čemu: - svaki R<5>i R<6>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, hidroksilne grupe, C1-C4alkil grupa i C3-5cikloalkil grupa, ili R<5>i R<6>na istom ugljeniku zajedno formiraju C3-5cikloalkil grupu ili okso; - svaki od R<5>i R<6>je opciono nezavisno supstituisan sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa, halogena, hidroksil grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i - svaki R<a>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa; i - R<7>se bira između vodonika, halogena, cijano grupe i C3-C10cikloalkil grupa opciono supstituisanih sa jednom ili više grupa izabranih između C1-C2alkil grupa, C1-C2haloalkil grupa i halogena; - q je 1 ili 2; - r je 3 ili 4; - svaki R<8>i R<9>je nezavisno izabran između vodonika, halogena, C1-C2alkil grupa, hidroksilne grupe, C1-C2alkoksil grupa i C1-C2haloalkoksil grupa; i - svaki R<b>je nezavisno izabran između vodonika i C1-C2alkil grupa.
  36. 36. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 1, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je jedinjenje formule (III-A) ili (III-B) izabrano između:
    njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterovani derivati bilo kojeg od prethodno navedenih.
  37. 37. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-20 ili 36, pri čemu je jedinjenje u obliku farmaceutski prihvatljive soli; opciono pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so natrijumova so, kalcijumova so ili kalijumova so; opciono pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so kalcijumova so.
  38. 38. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 36, njegova farmaceutski prihvatljiva so, ili deuterovani derivat bilo kojeg od prethodno navedenih, pri čemu je jedinjenje formule (III-A) ili (III-B) izabrano između:
    njihove farmaceutski prihvatljive soli i deuterovani derivati bilo kojeg od prethodno navedenih.
  39. 39. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 38, pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so natrijumova so, kalcijumova so ili kalijumova so.
  40. 40. Jedinjenje prema patentnom zahtevu 38 ili patentnom zahtevu 39, pri čemu:
    je u obliku kalcijumove soli.
  41. 41. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-20 ili 36-40 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze koji se sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno jedinjenja prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-20 ili 36-40, pri čemu se jedinjenje primenjuje u kombinaciji sa jedinjenjem III ili jedinjenjem III-d.
  42. 42. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-20 ili 36-40 za upotrebu u postupku lečenja cistične fibroze koji se sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno jedinjenja prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-20 ili 36-40, pri čemu se jedinjenje primenjuje u kombinaciji sa (a) jedinjenjem II i (b) jedinjenjem III ili jedinjenjem III-d.
  43. 43. Jedinjenje prema bilo kojem od patentnih zahteva 1-20 ili 36-40 za upotrebu u lečenju cistične fibroze.
  44. 44. Jedinjenje za upotrebu prema bilo kojem od patentnih zahteva 22 ili 41-43, pri čemu je jedinjenje u obliku farmaceutske prihvatljive soli, opciono pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so natrijumova so, kalcijumova so ili kalijumova so, opciono pri čemu je farmaceutski prihvatljiva so kalcijumova so.
  45. 45. Jedinjenje za upotrebu prema patentnom zahtevu 43 ili patentnom zahtevu 44, pri čemu što lečenje dalje obuhvata: (a) davanje jedinjenja III; (b) davanje jedinjenja III-d; (c) davanje jedinjenja II i jedinjenja III; ili (d) davanje jedinjenja II i jedinjenja III-d.
RS20230079A 2018-02-15 2019-02-14 Makrocikli kao modulatori transmembranskog regulatora provodnosti cistične fibroze, njihove farmaceutske kompozicije, njihova upotreba u lečenju cistične fibroze i proces njihove izrade RS64018B1 (sr)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862631453P 2018-02-15 2018-02-15
PCT/US2019/018042 WO2019161078A1 (en) 2018-02-15 2019-02-14 Macrocycles as modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions thereof, their use in the treatment of cycstic fibrosis, and process for making them
EP19707648.2A EP3752510B1 (en) 2018-02-15 2019-02-14 Macrocycles as modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions thereof, their use in the treatment of cycstic fibrosis, and process for making them

Publications (1)

Publication Number Publication Date
RS64018B1 true RS64018B1 (sr) 2023-03-31

Family

ID=65529899

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
RS20230079A RS64018B1 (sr) 2018-02-15 2019-02-14 Makrocikli kao modulatori transmembranskog regulatora provodnosti cistične fibroze, njihove farmaceutske kompozicije, njihova upotreba u lečenju cistične fibroze i proces njihove izrade

Country Status (42)

Country Link
US (3) US11066417B2 (sr)
EP (2) EP3752510B1 (sr)
JP (3) JP7214743B2 (sr)
KR (1) KR102482271B1 (sr)
CN (2) CN112004817B (sr)
AR (1) AR114254A1 (sr)
AU (2) AU2019222758B2 (sr)
BR (1) BR112020015509A2 (sr)
CA (1) CA3088577A1 (sr)
CL (1) CL2020002055A1 (sr)
CR (1) CR20200403A (sr)
DK (1) DK3752510T3 (sr)
DO (1) DOP2023000016A (sr)
EA (1) EA202091930A1 (sr)
EC (1) ECSP20053845A (sr)
ES (1) ES2939775T3 (sr)
FI (2) FI3752510T3 (sr)
FR (1) FR25C1048I1 (sr)
GE (2) GEP20237571B (sr)
HR (1) HRP20230030T1 (sr)
HU (2) HUE061046T2 (sr)
IL (2) IL276662B (sr)
JO (1) JOP20200178A1 (sr)
LT (2) LT3752510T (sr)
MA (1) MA51828B1 (sr)
MD (1) MD3752510T2 (sr)
MX (1) MX2020008268A (sr)
NL (1) NL301356I2 (sr)
NO (1) NO2025051I1 (sr)
PE (1) PE20210454A1 (sr)
PL (1) PL3752510T3 (sr)
PT (1) PT3752510T (sr)
RS (1) RS64018B1 (sr)
SA (1) SA520412634B1 (sr)
SG (1) SG11202006614VA (sr)
SI (1) SI3752510T1 (sr)
SM (1) SMT202300043T1 (sr)
TW (2) TWI828358B (sr)
UA (1) UA126304C2 (sr)
UY (1) UY38093A (sr)
WO (1) WO2019161078A1 (sr)
ZA (2) ZA202004357B (sr)

Families Citing this family (42)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP3752510B1 (en) * 2018-02-15 2022-12-07 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Macrocycles as modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions thereof, their use in the treatment of cycstic fibrosis, and process for making them
AU2019381750B2 (en) * 2018-11-14 2025-08-07 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods of treatment for cystic fibrosis
EP3898621A1 (en) * 2018-12-21 2021-10-27 Novartis AG Macrocyclic compounds and their use in the treatment of disease
TWI848092B (zh) 2019-04-03 2024-07-11 美商維泰克斯製藥公司 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白調節劑
TWI867024B (zh) 2019-08-14 2024-12-21 美商維泰克斯製藥公司 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑
MX2022001827A (es) * 2019-08-14 2022-06-09 Vertex Pharma Moduladores del regulador de conductancia transmembrana de la fibrosis quistica.
KR20220064366A (ko) 2019-08-14 2022-05-18 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 Cftr 조절제의 결정질 형태
TWI899097B (zh) 2019-08-14 2025-10-01 美商維泰克斯製藥公司 製備cftr調節劑之方法
CN110551077B (zh) * 2019-09-24 2023-01-31 新乡市润宇新材料科技有限公司 一种光催化分子氧氧化制备n-叔丁基-2-苯并噻唑亚磺酰胺的方法
CA3157798A1 (en) 2019-11-12 2021-05-20 Zhongli Gao 6-membered heteroarylaminosulfonamides for treating diseases and conditions mediated by deficient cftr activity
WO2021113809A1 (en) 2019-12-05 2021-06-10 Genzyme Corporation Arylamides and methods of use thereof
WO2021113806A1 (en) 2019-12-05 2021-06-10 Genzyme Corporation Arylamides and methods of use thereof
WO2022194399A1 (en) * 2020-07-13 2022-09-22 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Macrocycles as cftr modulators
CR20230120A (es) 2020-08-07 2023-09-01 Vertex Pharma Moduladores del regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística
CA3188787A1 (en) 2020-08-13 2022-02-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crystalline forms of cftr modulators
US20230374038A1 (en) * 2020-10-07 2023-11-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
US20230382924A1 (en) * 2020-10-07 2023-11-30 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
TW202233635A (zh) * 2020-10-07 2022-09-01 美商維泰克斯製藥公司 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑
WO2022076618A1 (en) * 2020-10-07 2022-04-14 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
WO2022076626A1 (en) * 2020-10-07 2022-04-14 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
CR20230198A (es) * 2020-10-07 2023-07-03 Vertex Pharma Moduladores del regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística
CN116670143A (zh) * 2020-10-07 2023-08-29 弗特克斯药品有限公司 囊性纤维化跨膜传导调控因子的调节剂
US12324802B2 (en) 2020-11-18 2025-06-10 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
JP2023549547A (ja) * 2020-11-18 2023-11-27 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子のモジュレーターとして使用するための１，３，４－オキサジアゾール環を含有する大環状化合物
CA3204725A1 (en) 2020-12-10 2022-06-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods of treatment for cystic fibrosis
CN116981672A (zh) * 2021-03-16 2023-10-31 爱杜西亚药品有限公司 作为cftr调节剂的巨环
JP2025506382A (ja) 2022-02-03 2025-03-11 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド 嚢胞性線維症の治療方法
KR20240155228A (ko) 2022-02-03 2024-10-28 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 (6a,12a)-17-아미노-12-메틸-6,15-비스(트리플루오로메틸)-13,19-디옥사-3,4,18-트리아자트리시클로[12.3.1.12,5]노나데카-1(18),2,4,14,16-펜타엔-6-올의 결정질 형태를 제조하는 방법
AU2023218262A1 (en) 2022-02-08 2024-08-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
KR20250008540A (ko) * 2022-04-06 2025-01-14 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 낭성 섬유증 막관통 전도도 조절자의 조절제
CA3253026A1 (en) 2022-05-16 2023-11-23 Vertex Pharmaceuticals Incorporated TREATMENT METHODS FOR CYSTIC FIBROSIS
US20250340568A1 (en) 2022-05-16 2025-11-06 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Solid forms of a macrocyclic compounds as cftr modulators and their preparation
WO2024054845A1 (en) * 2022-09-07 2024-03-14 Sionna Therapeutics Macrocycic compounds, compositions, and methods of using thereof
KR20250091331A (ko) * 2022-09-07 2025-06-20 시오나 테라퓨틱스 인크. 거대환식 화합물, 조성물, 및 이의 사용 방법
CN119894906A (zh) 2022-09-15 2025-04-25 爱杜西亚药品有限公司 大环cftr调节剂
JP2025529476A (ja) 2022-09-15 2025-09-04 イドルシア・ファーマシューティカルズ・リミテッド （３Ｓ，７Ｓ，１０Ｒ，１３Ｒ）－１３－ベンジル－２０－フルオロ－７－イソブチル－Ｎ－（２－（３－メトキシ－１，２，４－オキサジアゾール－５－イル）エチル）－６，９－ジメチル－１，５，８，１１－テトラオキソ－１０－（２，２，２－トリフルオロエチル）－１，２，３，４，５，６，７，８，９，１０，１１，１２，１３，１４－テトラデカヒドロ－［１］オキサ［４，７，１０，１４］テトラアザシクロヘプタデシノ［１６，１７－ｆ］キノリン－３－カルボキサミドの結晶形
WO2024056791A1 (en) 2022-09-15 2024-03-21 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Combination of macrocyclic cftr modulators with cftr correctors and / or cftr potentiators
CN115536493A (zh) * 2022-10-20 2022-12-30 海门瑞一医药科技有限公司 一种制取3,3,3-三氟甲基-2,2-二甲基丙烷醇的简单方法
WO2025129104A1 (en) * 2023-12-15 2025-06-19 Sionna Therapeutics Inc. Compounds, compositions, and methods of using thereof
WO2025166342A1 (en) 2024-02-04 2025-08-07 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Combination of vanzacaftor, tezacaftor, deutivacaftor for use in treating cystic fibrosis
EP4648753B1 (en) 2024-02-07 2026-02-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compositions for the treatment of cftr-mediated diseases
WO2025186214A1 (en) 2024-03-05 2025-09-12 Idorsia Pharmaceuticals Ltd Macrocyclic cftr modulators

Family Cites Families (114)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2677682A (en) 1951-08-24 1954-05-04 American Cyanamid Co Sulfonamido pteridines
ID18983A (id) 1996-12-04 1998-05-28 Lilly Co Eli Pirazola sebagai inhibitor sekresi fosfolipase a2 non-pankreas pada manusia
SE0001899D0 (sv) 2000-05-22 2000-05-22 Pharmacia & Upjohn Ab New compounds
MXPA04004657A (es) 2001-11-14 2004-08-13 Teva Pharma Formas amorfas y cristalinas de potasio de losartan y proceso para su preparacion.
EP1682127B1 (en) 2003-11-14 2009-07-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Thiazoles and oxazoles useful as modulators of atp-binding cassette transporters
JP4960708B2 (ja) 2004-01-30 2012-06-27 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド Ａｔｐ結合カセットトランスポーターのモジュレーター
MX341797B (es) 2004-06-24 2016-09-02 Vertex Pharmaceuticals Incorporated * Moduladores de transportadores con casete de union con atp.
US8354427B2 (en) 2004-06-24 2013-01-15 Vertex Pharmaceutical Incorporated Modulators of ATP-binding cassette transporters
MX2008002019A (es) 2005-08-11 2008-04-16 Vertex Pharma Moduladores del regulador de conductancia transmembrana de fibrosis quistica.
WO2007053641A2 (en) 2005-11-01 2007-05-10 Mars, Incorporated A-type procyanidins and inflammation
EP1974212A1 (en) 2005-12-27 2008-10-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compounds useful in cftr assays and methods therewith
AU2006336504C9 (en) 2005-12-28 2015-05-14 Vertex Pharmaceuticals Incorporated 1-(benzo [D] [1,3] dioxol-5-yl) -N- (phenyl) cyclopropane- carboxamide derivatives and related compounds as modulators of ATP-Binding Cassette transporters for the treatment of Cystic Fibrosis
LT1993360T (lt) 2005-12-28 2017-06-12 Vertex Pharmaceuticals Incorporated N-[2,4-bis(1,1-dimetiletil)-5-hidroksifenil]-1,4-dihidro-4-oksochinolin-3-karboksamido kieta forma
US7671221B2 (en) 2005-12-28 2010-03-02 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of ATP-Binding Cassette transporters
NZ596889A (en) 2006-04-07 2013-06-28 Vertex Pharma Use of amide indole derivatives as modulators of ATP-binding cassette transporters
ES2377840T3 (es) 2006-05-12 2012-04-02 Vertex Pharmaceuticals, Inc. Composiciones de N-[2,4-bis(1,1-dimetiletil)-5-hidroxifenil]-1,4-dihidro-4-oxoquinolina-3-carboxamida
HUE034579T2 (en) 2006-11-03 2018-02-28 Vertex Pharma Azaindole derivatives as CFTR modulators
SG182187A1 (en) 2007-06-08 2012-07-30 Abbott Gmbh & Co Kg 5-heteroaryl substituted indazoles as kinase inhibitors
RU2010114732A (ru) 2007-09-14 2011-10-20 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед (Us) Твердые формы n-[2,4-бис(1,1-диметилэтил)-5-гидроксифенил]-1,4-дигидро-4-оксохинолин-3-карбоксамида
KR20150063170A (ko) 2007-12-07 2015-06-08 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 3-(6-(1-(2,2-디플루오로벤조[ｄ][1,3]디옥솔-5-일)사이클로프로판카복스아미도)-3-메틸피리딘-2-일)벤조산의 고체 형태
WO2009076142A2 (en) 2007-12-07 2009-06-18 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Processes for producing cycloalkylcarboxiamido-pyridine benzoic acids
CN106432213A (zh) 2008-02-28 2017-02-22 沃泰克斯药物股份有限公司 作为cftr调节剂的杂芳基衍生物
LT3345625T (lt) 2008-08-13 2021-02-10 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Farmacinė kompozicija ir jos vartojimas
US20100074949A1 (en) 2008-08-13 2010-03-25 William Rowe Pharmaceutical composition and administration thereof
AU2009296271A1 (en) 2008-09-29 2010-04-01 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Dosage units of 3-(6-(1-(2,2-difluorobenzo [d] [1,3] dioxol-5-yl) cyclopropanecarboxamido)-3-methylpyridin-2-yl)benzoic acid
NZ592685A (en) * 2008-10-23 2013-04-26 Vertex Pharma Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
UA104876C2 (uk) 2008-11-06 2014-03-25 Вертекс Фармасьютікалз Інкорпорейтед Модулятори atф-зв'язувальних касетних транспортерів
HRP20150288T1 (hr) 2008-11-06 2015-04-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulatori atp-vezujuä†ih kasetnih transportera
MX384179B (es) 2009-03-20 2025-03-14 Vertex Pharma Proceso para producir moduladores del regulador de conductancia transmembrana de fibrosis quística.
EP2813227A1 (en) 2009-10-22 2014-12-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compositions for treatment of cystic fibrosis and other chronic diseases
CN103180298A (zh) 2010-03-19 2013-06-26 沃泰克斯药物股份有限公司 N-[2,4-双(1,1-二甲基乙基)-5-羟基苯基]-1,4-二氢-4-氧代喹啉-3-甲酰胺的固体形式
SMT202100051T1 (it) 2010-03-25 2021-03-15 Vertex Pharma Dispersione solida di una forma amorfa di (r)-1-(2,2-difluorobenzo[d][1,3]diossol-5-il)-n-(1-(2,3-diidrossipropil)-6-fluoro-2-(1-idrossi-2-metilpropan-2-il)-1h-indol-5-il)ciclopropan-carbossamide
BR112012026255A2 (pt) 2010-04-07 2017-03-14 Vertex Pharma composições farmacêuticas de ácido 3-(6-(1-(2-,2-difluorbenzo[d][1,3]dioxol-5-il)ciclopropanocarboxamido)-3-metilpiridin-2-il)benzóico e administração das mesmas
CN102933206A (zh) 2010-04-07 2013-02-13 弗特克斯药品有限公司 3-(6-(1-(2，2-二氟苯并[d][1，3]二氧杂环戊烯-5-基)环丙烷甲酰胺基)-3-甲基吡啶-2-基)苯甲酸的固体形式
RU2745977C2 (ru) 2010-04-22 2021-04-05 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед Способ получения циклоалкилкарбоксамидо-индольных соединений
AU2011242452A1 (en) 2010-04-22 2012-11-08 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical compositions and administrations thereof
US8563593B2 (en) 2010-06-08 2013-10-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Formulations of (R)-1-(2,2-difluorobenzo[D] [1,3] dioxol-5-yl)-N-(1-(2,3-dihydroxypropyl)-6-fluoro-2-(1-hydroxy-2-methylpropan-2-yl)-1H-indol-5-yl)cyclopropanecarboxamide
JP2013536231A (ja) 2010-08-23 2013-09-19 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド （ｒ）−１−（２，２−ジフルオロベンゾ［ｄ］［１，３］ジオキソール−５−イル）−ｎ−（１−（２，３−ジヒドロキシプロピル）−６−フルオロ−２−（１−ヒドロキシ−２−メチルプロパン−２−イル）−１ｈ−インドール−５−イル）シクロプロパンカルボキサミドを含む医薬組成物およびその投与
CA2809263A1 (en) 2010-08-27 2012-03-01 Eleni Dokou Pharmaceutical composition and administrations thereof
HUE047354T2 (hu) 2011-05-18 2020-04-28 Vertex Pharmaceuticals Europe Ltd Ivacaftor deuterizált származékai
ES2558457T3 (es) 2011-09-16 2016-02-04 Novartis Ag Compuestos heterocíclicos para el tratamiento de fibrosis quística
EP2773641B1 (en) 2011-10-31 2017-09-27 Xenon Pharmaceuticals Inc. Biaryl ether sulfonamides and their use as therapeutic agents
KR101985044B1 (ko) 2011-11-08 2019-05-31 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 Atp-결합 카세트 수송체의 조절제
DK2806859T3 (da) 2012-01-25 2019-08-05 Vertex Pharma Formuleringer af 3-(6-(1-(2.2-difluorbenzo[d][1,3]dioxol-5-yl) cyclopropancarboxamido)-3-methylpyridin-2-yl)benzoesyre
JP2015511583A (ja) 2012-02-27 2015-04-20 バーテックス ファーマシューティカルズ インコーポレイテッドＶｅｒｔｅｘ Ｐｈａｒｍａｃｅｕｔｉｃａｌｓ Ｉｎｃｏｒｐｏｒａｔｅｄ 薬学的組成物およびその投与
WO2013158121A1 (en) 2012-04-20 2013-10-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Solid forms of n-[2,4-bis(1,1-dimethylethyl)-5-hydroxyphenyl]-1,4-dihydro-4-oxoquinoline-3-carboxamide
GB201207406D0 (en) 2012-04-27 2012-06-13 Glaxo Group Ltd Novel compounds
SG11201408284VA (en) 2012-05-22 2015-02-27 Xenon Pharmaceuticals Inc N-substituted benzamides and their use in the treatment of pain
EP2858645A1 (en) 2012-06-08 2015-04-15 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceuticl compositions for the treatment of cftr -mediated disorders
AU2013290444B2 (en) 2012-07-16 2018-04-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Pharmaceutical compositions of (R)-1-(2,2-diflurorbenzo[d][1,3]dioxol-5-yl)-N-(1-(2,3-dihydroxypropyl)-6-fluoro-2-(1-hydroxy-2-methylpropan-2-yl)-1H-indol-5-yl) cyclopropanecarboxamide and administration thereof
CN103571906B (zh) 2012-07-27 2018-12-11 上海泽元海洋生物技术有限公司 一种利用微藻高效生产虾青素的新方法
SMT202500078T1 (it) 2012-11-02 2025-03-12 Vertex Pharma Composizioni farmaceutiche per il trattamento di malattie mediate da cftr
WO2014078842A1 (en) 2012-11-19 2014-05-22 Concert Pharmaceuticals, Inc. Deuterated cftr potentiators
WO2015051043A1 (en) 2013-10-01 2015-04-09 Amgen Inc. Biaryl acyl-sulfonamide compounds as sodium channel inhibitors
DK3068392T5 (da) 2013-11-12 2021-09-20 Vertex Pharma Fremgangsmåde til fremstilling af farmaceutiske sammensætninger til behandlingen af cftr-medierede sygdomme
SG10201913575VA (en) 2014-04-15 2020-02-27 Vertex Pharma Pharmaceutical compositions for the treatment of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator mediated diseases
EP3798214B1 (en) 2014-10-06 2022-09-14 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
EP3204358B1 (en) 2014-10-07 2018-09-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Co-crystals of modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
WO2016081556A1 (en) 2014-11-18 2016-05-26 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Process of conducting high throughput testing high performance liquid chromatography
WO2016160945A1 (en) 2015-03-31 2016-10-06 Concert Pharmaceuticals, Inc. Deuterated vx-661
US20180353500A1 (en) 2015-09-21 2018-12-13 Vertex Pharmaceuticals (Europe) Limited Administration of deuterated cftr potentiators
WO2017172802A1 (en) 2016-03-30 2017-10-05 Genentech, Inc. Substituted benzamides and methods of use thereof
EP3436446B1 (en) * 2016-03-31 2023-06-07 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
BR112018070747B1 (pt) 2016-04-07 2024-01-09 Proteostasis Therapeutics, Inc Átomos de silicone contendo análogos de ivacaftor, composições farmacêuticas e usos terapêuticos
EP3448842A1 (en) 2016-04-26 2019-03-06 AbbVie S.À.R.L. Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator protein
US10138227B2 (en) 2016-06-03 2018-11-27 Abbvie S.Á.R.L. Heteroaryl substituted pyridines and methods of use
EP3472156B1 (en) 2016-06-21 2023-06-07 Proteostasis Therapeutics, Inc. Compounds, compositions, and methods for increasing cftr activity
SG10201913595YA (en) 2016-09-30 2020-02-27 Vertex Pharma Modulator of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator
US10399940B2 (en) 2016-10-07 2019-09-03 Abbvie S.Á.R.L. Substituted pyrrolidines and methods of use
US9981910B2 (en) 2016-10-07 2018-05-29 Abbvie S.Á.R.L. Substituted pyrrolidines and methods of use
WO2018081378A1 (en) 2016-10-26 2018-05-03 Proteostasis Therapeutics, Inc. Compounds, compositions, and methods for modulating cftr
CA3041675A1 (en) 2016-10-26 2018-05-03 Proteostasis Therapeutics, Inc. N-phenyl-2-(3-phenyl-6-oxo-1,6-dihydropyridazin-1-yl)acetamide derivatives for treating cystic fibrosis
AU2017348186A1 (en) 2016-10-26 2019-05-16 Proteostasis Therapeutics, Inc Pyridazine derivatives, compositions and methods for modulating CFTR
WO2018080591A1 (en) 2016-10-27 2018-05-03 Vertex Pharmaceuticals (Europe) Limited Methods of treatment with deuterated cftr potentiators
UA125400C2 (uk) 2016-11-18 2022-03-02 Цистік Фіброзис Фаундейшн Піролопіримідин як потенціатор трансмембранної провідності при муковісцидозі (cftr)
MA49235B1 (fr) * 2016-12-09 2021-02-26 Vertex Pharma Modulateur de régulateur de conductance transmembranaire de fibrose kystique, compositions pharmaceutiques, procédés de traitement et procédé de fabrication du modulateur
AU2017378324B2 (en) 2016-12-16 2021-09-02 Cystic Fibrosis Foundation Bycyclic heteroaryl derivatives as CFTR potentiators
EP3558982A1 (en) 2016-12-20 2019-10-30 AbbVie S.À.R.L. Deuterated cftr modulators and methods of use
EP3565815B1 (en) 2017-01-07 2024-03-13 Fochon Pharmaceuticals, Ltd. Compounds as bcl-2-selective apoptosis-inducing agents
TW201831471A (zh) 2017-02-24 2018-09-01 盧森堡商艾伯維公司 囊腫纖化症跨膜傳導調節蛋白的調節劑及其使用方法
WO2018183367A1 (en) 2017-03-28 2018-10-04 Van Goor Fredrick F Methods of treating cystic fibrosis in patients with residual function mutations
MX2019010302A (es) 2017-03-30 2019-11-21 Hoffmann La Roche Isoquinolinas como inhibidores de hpk1.
MA49061A (fr) 2017-04-28 2021-04-21 Proteostasis Therapeutics Inc Dérivés 4-sulfonylaminocarbonylquinoline pour augmenter l'activité cftr
EP3634402B1 (en) 2017-06-08 2026-01-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods of treatment for cystic fibrosis
WO2019010092A1 (en) 2017-07-01 2019-01-10 Vertex Pharmaceuticals Incorporated COMPOSITIONS AND METHODS FOR TREATING CYSTIC FIBROSIS
CA3069720A1 (en) 2017-07-11 2019-01-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Carboxamides as modulators of sodium channels
WO2019018353A1 (en) 2017-07-17 2019-01-24 Vertex Pharmaceuticals Incorporated METHODS OF TREATING CYSTIC FIBROSIS
BR112020000941A2 (pt) 2017-07-17 2020-07-21 Vertex Pharmaceuticals Incorporated métodos de tratamento para fibrose cística
WO2019026075A1 (en) 2017-07-31 2019-02-07 Technion Research & Development Foundation Limited METHODS OF DETECTING MODIFIED AND UN-MODIFIED DNA
TWI799435B (zh) 2017-08-02 2023-04-21 美商維泰克斯製藥公司 製備化合物之製程
US10988454B2 (en) 2017-09-14 2021-04-27 Abbvie Overseas S.À.R.L. Modulators of the cystic fibrosis transmembrane conductance regulator protein and methods of use
US20210369749A1 (en) 2017-10-06 2021-12-02 Proteostasis Therapeutics, Inc. Compounds, compositions, and methods for increasing cftr activity
IL273831B2 (en) 2017-10-19 2024-10-01 Vertex Pharma Crystalline forms and compositions of cftr modulators
US20210228489A1 (en) 2017-12-04 2021-07-29 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Compositions for treating cystic fibrosis
CN111757874B (zh) 2017-12-08 2024-03-08 弗特克斯药品有限公司 用于制备囊性纤维化跨膜传导调节因子的调节剂的方法
TWI810243B (zh) 2018-02-05 2023-08-01 美商維泰克斯製藥公司 用於治療囊腫纖化症之醫藥組合物
EP3752510B1 (en) * 2018-02-15 2022-12-07 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Macrocycles as modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions thereof, their use in the treatment of cycstic fibrosis, and process for making them
WO2019191620A1 (en) 2018-03-30 2019-10-03 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crystalline forms of modulators of cftr
US11414439B2 (en) 2018-04-13 2022-08-16 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulator
AU2019381750B2 (en) 2018-11-14 2025-08-07 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods of treatment for cystic fibrosis
EP3898621A1 (en) 2018-12-21 2021-10-27 Novartis AG Macrocyclic compounds and their use in the treatment of disease
JP2022519301A (ja) 2019-02-06 2022-03-22 ノバルティス アーゲー Ｎ－（ピリジン－２－イル）ピリジン－スルホンアミド誘導体及び疾患の処置におけるそれらの使用
US20220160705A1 (en) 2019-03-20 2022-05-26 Cornell University Methods for controlling prostaglandin-mediated biological processes
TWI848092B (zh) 2019-04-03 2024-07-11 美商維泰克斯製藥公司 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白調節劑
WO2020214921A1 (en) 2019-04-17 2020-10-22 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Solid forms of modulators of cftr
WO2020242935A1 (en) 2019-05-29 2020-12-03 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Methods of treatment for cystic fibrosis
TWI867024B (zh) 2019-08-14 2024-12-21 美商維泰克斯製藥公司 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑
TWI899097B (zh) 2019-08-14 2025-10-01 美商維泰克斯製藥公司 製備cftr調節劑之方法
MX2022001827A (es) 2019-08-14 2022-06-09 Vertex Pharma Moduladores del regulador de conductancia transmembrana de la fibrosis quistica.
KR20220064366A (ko) 2019-08-14 2022-05-18 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 Cftr 조절제의 결정질 형태
PE20221461A1 (es) 2019-11-12 2022-09-21 Genzyme Corp Heteroarilaminosulfonamidas de 5 miembros para tratar afecciones mediadas por una actividad deficiente de cftr
CA3157798A1 (en) 2019-11-12 2021-05-20 Zhongli Gao 6-membered heteroarylaminosulfonamides for treating diseases and conditions mediated by deficient cftr activity
CR20230120A (es) 2020-08-07 2023-09-01 Vertex Pharma Moduladores del regulador de la conductancia transmembrana de la fibrosis quística
CA3188787A1 (en) 2020-08-13 2022-02-17 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Crystalline forms of cftr modulators

Also Published As

Publication number Publication date
IL294042B1 (en) 2025-09-01
HUE061046T2 (hu) 2023-05-28
TW201938566A (zh) 2019-10-01
AU2022231721A1 (en) 2022-10-06
MA51828B1 (fr) 2022-11-30
PE20210454A1 (es) 2021-03-08
SA520412634B1 (ar) 2024-10-13
ZA202004357B (en) 2023-12-20
IL276662B (en) 2022-08-01
US20220106331A1 (en) 2022-04-07
CR20200403A (es) 2020-10-26
GEP20237571B (en) 2023-11-27
SG11202006614VA (en) 2020-08-28
UA126304C2 (uk) 2022-09-14
JP7214743B2 (ja) 2023-01-30
UY38093A (es) 2019-10-01
AU2019222758A1 (en) 2020-08-13
NL301356I2 (nl) 2026-02-05
US11866450B2 (en) 2024-01-09
LTPA2025542I1 (sr) 2026-01-12
EP3752510B1 (en) 2022-12-07
US20240368189A1 (en) 2024-11-07
FR25C1048I1 (fr) 2026-01-16
DOP2023000016A (es) 2023-02-28
WO2019161078A1 (en) 2019-08-22
BR112020015509A2 (pt) 2021-01-26
JOP20200178A1 (ar) 2022-10-30
IL294042A (en) 2022-08-01
FIC20253011I1 (fi) 2025-12-04
HRP20230030T1 (hr) 2023-03-03
IL294042B2 (en) 2026-01-01
CN117285547A (zh) 2023-12-26
TWI828358B (zh) 2024-01-01
ECSP20053845A (es) 2020-12-31
US20190248809A1 (en) 2019-08-15
TWI780304B (zh) 2022-10-11
ZA202307129B (en) 2025-10-29
EP4198037A1 (en) 2023-06-21
CL2020002055A1 (es) 2021-03-19
IL276662A (en) 2020-09-30
CA3088577A1 (en) 2019-08-22
DK3752510T3 (da) 2023-01-16
SI3752510T1 (sl) 2023-03-31
EA202091930A1 (ru) 2021-03-12
AU2019222758B2 (en) 2022-07-07
JP2021513967A (ja) 2021-06-03
LT3752510T (lt) 2023-04-11
PL3752510T3 (pl) 2023-05-08
CN112004817B (zh) 2023-06-23
CN112004817A (zh) 2020-11-27
JP2024050811A (ja) 2024-04-10
ES2939775T3 (es) 2023-04-26
US11066417B2 (en) 2021-07-20
EP3752510A1 (en) 2020-12-23
PT3752510T (pt) 2023-03-15
MA51828A (fr) 2020-12-23
SMT202300043T1 (it) 2023-03-17
FI3752510T3 (fi) 2023-03-14
JP2022126802A (ja) 2022-08-30
KR20200131240A (ko) 2020-11-23
GEAP202315439A (en) 2023-06-12
KR102482271B1 (ko) 2022-12-27
TW202304937A (zh) 2023-02-01
HUS2500047I1 (hu) 2025-12-28
AR114254A1 (es) 2020-08-12
AU2022231721B2 (en) 2024-09-19
NO2025051I1 (no) 2025-12-04
MD3752510T2 (ro) 2023-06-30
MX2020008268A (es) 2020-09-21

Similar Documents

Publication Publication Date Title
US11866450B2 (en) Modulators of Cystic Fibrosis Transmembrane Conductance regulator, pharmaceutical compositions, methods of treatment, and process for making the modulators
TW202233635A (zh) 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑
JP2022545633A (ja) 嚢胞性線維症膜貫通コンダクタンス制御因子のモジュレーター
EP4225447A1 (en) Modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator
JP2022545359A (ja) 嚢胞性線維症膜コンダクタンス制御因子モジュレーター
TW202206431A (zh) 肽基精胺酸脫亞胺酶抑制劑
TW202222306A (zh) 囊腫纖維化跨膜傳導調節蛋白之調節劑
HK40093191A (en) Macrocycles as modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions thereof and their use in the treatment of cycstic fibrosis
EA044967B1 (ru) Макроциклы в качестве модуляторов муковисцидозного трансмембранного регулятора проводимости, их фармацевтические композиции, применение их для лечения муковисцидоза и способ их изготовления
HK40042698B (en) Macrocycles as modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions thereof, their use in the treatment of cycstic fibrosis, and process for making them
HK40042698A (en) Macrocycles as modulators of cystic fibrosis transmembrane conductance regulator, pharmaceutical compositions thereof, their use in the treatment of cycstic fibrosis, and process for making them