RS64189B1

RS64189B1 - Antiproliferativna jedinjenja i bispecifična antitela protiv bcma i cd3 za kombinovanu upotrebu

Info

Publication number: RS64189B1
Application number: RS20230351A
Authority: RS
Inventors: Daniel W Pierce; Lilly L Wong
Original assignee: Celgene Corp
Priority date: 2018-05-23
Filing date: 2019-05-22
Publication date: 2023-06-30
Also published as: CN112399848A; CN113713095A; PT3796912T; US20230181575A1; MX2020012485A; HRP20230449T1; MX420366B; CY1126060T1; FI3796912T3; LT3796912T; DK3796912T5; IL278853B1; PL3796912T3; EP3796912A1; JP7293256B2; WO2019226761A1; EP3796912B1; EP4218762A3; BR112020023704A2; US20190381035A1

Description

Opis

1. POLJE PRIMENE

[0001] Ovde je predstavljen 4-(4-(4-(((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-il)oksi)metil)benzil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitril, ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za primenu u kombinaciji sa bispecifičnim antitelom koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), za lečenje, prevenciju ili upravljanje multiplim mijelomom.

2. POZADINA PRONALASKA

[0002] Multipli mijelom (MM) je karcinom plazma ćelija u koštanoj srži. U normalnim okolnostima, ćelije plazme proizvode antitela i igraju ključnu ulogu u imunološkoj funkciji. Međutim, nekontrolisani rast ovih ćelija dovodi do bolova u kostima i fraktura, anemije, infekcija i drugih komplikacija. Multipli mijelom je drugi najčešći hematološki malignitet, iako tačni uzroci multiplog mijeloma ostaju nepoznati. Multipli mijelom uzrokuje visok nivo proteina u krvi, urinu i organima, uključujući, bez ograničenja, M-protein i druge imunoglobuline (antitela), albumin i beta-2-mikroglobulin, osim kod nekih pacijenata (prema procenama od 1% do 5%) čije ćelije mijeloma ne luče ove proteine (nazvane ne-sekretorni mijelom). M-protein, skraćeno od monoklonalni protein, takođe poznat kao paraprotein, predstavlja posebno abnormalan protein koji proizvode ćelije plazme mijeloma i koji se može naći u krvi ili urinu gotovo svih pacijenata obolelih od multiplog mijeloma, osim pacijenata obolelih od ne-sekretornog mijeloma ili čije ćelije mijeloma proizvode imunoglobuline lakog lanca sa teškim lancem.

[0003] Skeletni simptomi, uključujući bol u kostima, predstavljaju klinički najznačajnije simptome multiplog mijeloma. Maligne ćelije plazme oslobađaju faktore koji stimulišu osteoklaste (uključujući IL-1, IL-6 i TNF) koji dovode do izlučivanja kalcijuma iz kostiju uzrokujući litičke lezije; hiperkalcemija je još jedan simptom. Faktori koji stimulišu osteoklaste, koji se nazivaju i citokini, mogu sprečiti apoptozu ili smrt ćelija mijeloma.

Pedeset procenata pacijenata ima radiološki detektabilne skeletne lezije povezane sa mijelomom prilikom dijagnoze. Drugi uobičajeni klinički simptomi multiplog mijeloma uključuju polineuropatiju, anemiju, hiperviskoznost, infekcije i bubrežnu insuficijenciju.

[0004] Trenutna terapija multiplog mijeloma može uključivati jednu ili više operacija, transplantaciju matičnih ćelija, hemoterapiju, imunološku terapiju i/ili tretman zračenjem kako bi se iskorenile ćelije multiplog mijeloma kod pacijenta. Svi trenutni terapijski pristupi odlikuju se značajnim lošim stranama kada je u pitanju pacijent.

[0005] Tokom poslednje decenije, novi terapijski agensi, posebno imunomodulatorni lekovi kao što su lenalidomid i pomalidomid, u značajnoj meri su povećali stopu odgovora i produžili preživljavanje bez progresije (PFS) i ukupno preživljavanje (OS) kod pacijenata sa multiplim mijelomom. Međutim, perzistentni nivoi rezidualne bolesti koji su ispod osetljivosti morfologije koštane srži (BM), proteinske elektroforeze sa imunofiksacijom i kvantitacije lakog lanca postoje kod mnogih pacijenata sa multiplim mijelomom, čak i nakon što ovi pacijenti postignu potpuni odgovor (CR), i u ultimativnom ishodu uzrokuju recidiv bolesti. Minimalna rezidualna bolest (MRD) kod mijeloma je nezavisan prediktor preživljavanja bez progresije (PFS) i razmatra se kao surogatni parametar praćenja ispitivanja kako bi se poboljšala identifikacija efikasnih tretmana, posebno za ispitivanja na prvoj liniji, koja trenutno zahtevaju 5 do 10 godina praćenja kako bi se identifikovale razlike u preživljavanju. Praćenje minimalne rezidualne bolesti (MRD) kod pacijenata sa multiplim mijelomom stoga pruža prognostičku vrednost u predviđanju PFS-a i OS-a i donošenju odluka o lečenju. Detekcija minimalne rezidualne bolesti (MRD) kod mijeloma može koristiti prag od 0,01% (10-4) nakon tretmana, odnosno 10-4 ili manje ćelija multiplog mijeloma u udelu ukupnih mononuklearnih ćelija koštane srži smatra se MRD negativnim rezultatom, a 10-4 ćelija ili više MRD pozitivnim rezultatom. Prag od 10<-4>MRD je prvobitno bio zasnovan na tehničkim mogućnostima, ali kvantitativna detekcija MRD je sada moguća na nivou 10<-5>uz pomoć protočne citometrije i 10<-6>uz pomoć sekvenciranja visoke propusnosti. (Rawstron et al., Blood 2015;125(12): 1932-1935). Metode za merenje MRD uključuju DNK sekvenciranje VDJ, lančanu reakciju polimeraze (PCR) (uključujući alel specifičnu PCR, ASO PCR) i multiparametarsku protočnu citometriju (MPF). Testovi za MRD, npr. zasnovani na merenju profila klonotipa takođe su opisani u Patentu SAD br.8,628,927, Faham et al.

[0006] Postoji značajna potreba za sigurnim i efikasnim jedinjenjima i metodama za lečenje, prevenciju i upravljanje multiplim mijelomom, uključujući kod pacijenata kod kojih je multipli mijelom novodijagnostikovan ili refraktoran na standardne tretmane, uz istovremeno smanjenje ili izbegavanje toksičnosti i/ili neželjenih efekata koji se dovode u vezu sa konvencionalnim terapijama. WO 2018/083204 A1 i WO 2017/021450 A1 otkrivaju bispecifična antitela koja se sastoje od prvog vezujućeg dela koji se vezuje za BCMA i drugog vezujućeg dela koji se vezuje za CD3.

[0007] Citat ili navođenje bilo kakve reference u 2. odeljku ovog patentnog zahteva ne treba tumačiti kao priznanje da referenca predstavlja prethodnu upotrebu u odnosu na ovaj patentni zahtev.

[0008] U načelu, tehnička izvedba jednog otelotvorenja koja je ovde predstavljena može se kombinovati sa izvedbama obelodanjenim u svim drugim ovde predstavljenim otelotvorenjima.

3. REZIME

[0009] Ovde je predstavljen (4-(4-(((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-il)oksi)metil)benzil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitril, ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, za primenu u kombinaciji sa bispecifičnim antitelom koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), za lečenje, prevenciju ili upravljanje multiplim mijelomom.

[0010] U jednom takvom otelotvorenju, jedinjenje koje se koristi u ovde navedenim sastavima i metodama je 4-(4-(4-(((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-il)oksi)metil)benzil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitril (Jedinjenje 1):

ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili njegova farmaceutski prihvatljiva so.

[0011] U drugom otelotvorenju, jedinjenje koje se koristi u ovde navedenim sastavima i metodama je (S)-4-(4-(4-(((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-il)oksi)metil)benzil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitril (Jedinjenje 2):

[0012] Pronalazak obezbeđuje jedinjenje za primenu u metodi lečenja multiplog mijeloma, pri čemu je jedinjenje – jedinjenje formule 1

ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili njegova farmaceutski prihvatljiva so;

pri čemu se metoda sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno terapijski efikasne količine jedinjenja formule 1, ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u kombinaciji sa bispecifičnim antitelom koje se sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisan time što navedeni prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0013] Pronalazak dalje predstavlja jedinjenje za primenu u metodi lečenja multiplog mijeloma, pri čemu je jedinjenje – jedinjenje formule 2

ili njegov tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so;

pri čemu se metoda sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno terapijski efikasne količine jedinjenja formule 2, ili tautomera, izotopologa, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u kombinaciji sa bispecifičnim antitelom koje se sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisan time što navedeni prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

ili njihovih tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljivih soli.

[0014] U još jednom otelotvorenju, jedinjenje koje se koristi u ovde navedenim sastavima i metodama je (R)-4-(4-(4-(((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-il)oksi)metil)benzil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitril (Jedinjenje 3):

ili njegovi tautomeri, izotopolozi ili farmaceutski prihvatljive soli.

[0015] Prema pronalasku, bispecifično antitelo sadrži prvi vezni deo koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugi vezni deo koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisan time što se navedeni prvi vezni deo sastoji od regiona VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0016] Takođe predviđeni za primenu u ovde opisanim metodama su farmaceutski sastavi formulisani za primenu odgovarajućim putem i sredstvima koja sadrže efikasne koncentracije ovde datih jedinjenja, na primer Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, ili enantiomera, smeša enantiomera, tautomera, izotopologa, ili farmaceutski prihvatljivih soli jedinjenja, i koji opciono sadrže najmanje jedan farmaceutski nosač. Takođe predviđeni za primenu u ovde opisanim metodama su farmaceutski sastavi formulisani za primenu odgovarajućim putem i sredstvima koja sadrže efikasne koncentracije antitela predviđenih ovde, bispecifičnog antitela koje sadrži prvi vezni deo koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugi vezni deo koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisan time što se navedeni prvi vezni deo sastoji od regiona VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0017] U jednom otelotvorenju, farmaceutski sastavi isporučuju količine efikasne za lečenje multiplog mijeloma. U jednom otelotvorenju, farmaceutski sastavi isporučuju količine efikasne za prevenciju multiplog mijeloma. U jednom otelotvorenju, farmaceutski sastavi isporučuju količine efikasne za ublažavanje multiplog mijeloma.

[0018] Ovde su takođe predstavljene kombinovane terapije koje koriste ovde navedena jedinjenja ili sastave, ili njihove enantiomere, smeše enantiomera, tautomere, izotopologe ili farmaceutski prihvatljive soli, i bispecifično antitelo koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) koji su ovde navedeni, u kombinaciji sa drugom terapijom, npr. drugim farmaceutskim agensom sa aktivnošću protiv multiplog mijeloma ili njegovih simptoma. Primeri terapija u okviru metoda uključuju, bez ograničenja, hirurgiju, hemoterapiju, radioterapiju, biološku terapiju, transplantaciju matičnih ćelija, ćelijsku terapiju i njihove kombinacije.

[0019] Ovde navedena jedinjenja ili sastavi, ili njihovi farmaceutski prihvatljivi derivati, mogu se primenjivati istovremeno, pre ili posle zajedničke primene jedne ili više gore navedenih terapija. Takođe su predstavljeni farmaceutski sastavi koji sadrže jedinjenje predviđeno ovim dokumentom i jednu ili više gore navedenih terapija.

[0020] U praksi metoda, efikasne količine jedinjenja ili sastava koji sadrže terapijski efikasne koncentracije jedinjenja daju se pojedincu koji pokazuje simptome multiplog mijeloma koji zahtevaju lečenje. Količine su efikasne za ublažavanje ili eliminisanje jednog ili više simptoma multiplog mijeloma.

[0021] Farmaceutsko pakovanje ili komplet mogu se sastojati od jedne ili više posuda napunjenih sa jednim ili više sastojaka farmaceutskih sastava. Opciono povezano sa takvim posudama može biti obaveštenje u obliku propisanom od strane vladine agencije koja reguliše proizvodnju, upotrebu ili prodaju farmaceutskih ili bioloških proizvoda, koje sadrži odobrenje agencije za proizvodnju, upotrebu ili prodaju za primenu kod ljudi. Paket ili komplet mogu biti obeleženi informacijama o načinu primene, redosledu primene leka (npr. odvojeno, sekvencijalno ili istovremeno) ili slično.

[0022] Ovi i drugi aspekti ovde opisanog predmeta postaće očigledni nakon pozivanja na sledeći detaljan opis.

4. DETALJAN OPIS PRONALASKA

A. Definicije

[0023] Ukoliko nije drugačije definisano, svi tehnički i naučni termini koji se ovde koriste imaju isto značenje kao što se obično podrazumeva od strane stručnjaka u oblasti. U slučaju većeg broja definicija za određeni termin iz ovog odeljka, ovde navedene definicije će prevladati, osim ako nije drugačije navedeno.

[0024] Upotreba člana „a“ ili „an“ (u verziji na engleskom jeziku, odnosno jednine u verziji na srpskom jeziku), kada se koristi u vezi sa terminom „sadrži“ u patentnim zahtevima i/ili opisu može značiti „jedan“, ali je takođe u skladu sa značenjem „jedan ili više“, „najmanje jedan“ i „jedan ili više od jednog“.

[0025] Na način na koji se koriste u okviru ovog dokumenta, termini „sadrži“ i „uključuje“ mogu se koristiti naizmenično. Termine „sadrži“ i „uključuje“ treba tumačiti tako da preciziraju prisustvo navedenih karakteristika ili komponenti koje se pominju, ali ne isključuju prisustvo ili dodatak jedne ili više karakteristika, komponenti ili njihovih grupa. Pored toga, termini „sadrži“ i „uključuje“ imaju za cilj da obuhvate primere obuhvaćene terminom „koji se sastoji od“. Shodno tome, termin „koji se sastoji od“ može se koristiti umesto termina „sadrži“ i „uključuje“ kako bi se osiguralo konkretnije predstavljanje otelotvorenja pronalaska.

[0026] Termin „koji se sastoji od“ znači da predmet ima najmanje 90%, 95%, 97%, 98% ili 99% navedenih karakteristika ili komponenti od kojih se sastoji. U

[0027] Pronalazak obezbeđuje jedinjenje za primenu u metodi lečenja multiplog mijeloma, pri čemu je jedinjenje – jedinjenje formule 1

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0028] Pronalazak dalje predstavlja jedinjenje za primenu u metodi lečenja multiplog mijeloma, pri čemu je jedinjenje – jedinjenje formule 2

ili njegov tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so;

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0029] U drugom otelotvorenju, termin „koji se sastoji od“ isključuje iz obima bilo koje naredne recitacije bilo koje druge karakteristike ili komponente, osim onih koje nisu od suštinskog značaja za tehnički efekat koji treba postići.

1

[0030] Na način na koji se koristi ovde, termin „ili“ treba tumačiti kao inkluzivno „ili“ – odnosno bilo koji ili bilo koja kombinacija. Stoga, „A, B ili C“ označava bilo šta od sledećeg: „A; B; C; A i B; A i C; B i C; A, B i C“. Izuzetak od ove definicije će postojati samo kada je kombinacija elemenata, funkcija, koraka ili radnji na neki način međusobno isključiva.

[0031] se odnosi na količinu, koncentraciju ili dozu određenog testnog jedinjenja koje postiže 50%-tnu inhibiciju maksimalnog odgovora, kao što su vezivanje receptora, aktivnost receptora, rast ćelija ili proliferacija, mereno bilo kojim od ovde opisanih in vitro ili ćelijskih analiza.

[0032] Farmaceutski prihvatljive soli uključuju, bez ograničenja, soli amina, kao što su, bez ograničenja, N,N'-dibenziletilendiamin, hloroprokain, holin, amonijak, dietanolamin i drugi hidroksialkilamini, etilendiamin, A-metilglukamin, prokain, N-benzilfenetilamin, 1-parahlorobenzil-2-pirolidin-1'-ilmetil-benzimidazol, dietilamin i drugi alkilamini, piperazin i tris(hidroksimetil)aminometan; soli alkalnih metala, kao što su, bez ograničenja, litijum, kalijum i natrijum; soli zemnoalkalnih metala, kao što su, bez ograničenja, barijum, kalcijum i magnezijum; soli prelaznih metala, kao što je, bez ograničenja, cink; i druge soli metala, kao što su, bez ograničenja, natrijum hidrogen fosfat i dinatrijum fosfat; i takođe uključujući, bez ograničenja, soli mineralnih kiselina, kao što su, bez ograničenja, hidrohloridi i sulfati; i soli organskih kiselina, kao što su, bez ograničenja, acetati, laktati, malati, tartrati, citrati, askorbati, sukcinati, butirati, valerati, fumarati i organski sulfonati.

[0033] Osim ako nije izričito navedeno drugačije, u situacijama u kojima jedinjenje može da preuzme alternativne tautomerne, regioizomerne i/ili stereoizomerne oblike, svi alternativni izomeri smatraju se obuhvaćeni obimom pronalaska za koji se podnosi patentna prijava. Na primer, u situacijama u kojima jedinjenje može imati jedan od dva tautomerna oblika, oba tautomera će biti obuhvaćena ovim zahtevom.

[0034] Dakle, ovde navedena jedinjenja mogu biti enantiomerno čista, ili stereoizomerne ili dijastereomerne smeše. Na način na koji se koristi ovde i ako nije drugačije naznačeno, termin „stereomerno čist“ označava sastav koji se sastoji od jednog stereoizomera jedinjenja i u suštini je bez drugih stereoizomera tog jedinjenja. Na primer, stereomerno čisti sastav jedinjenja koje ima jedan hiralni centar biće suštinski bez suprotnog enantiomera jedinjenja.

Stereomerno čist sastav jedinjenja koje ima dva hiralna centra će biti suštinski bez drugih dijastereomera jedinjenja. Tipično stereomerno čisto jedinjenje sadrži više od oko 80% težinskih procenata jednog stereoizomera jedinjenja i manje od oko 20% težinskih procenata drugih stereoizomera jedinjenja u jednom otelotvorenju, više od oko 90% težinskih procenata jednog stereoizomera jedinjenja i manje od oko 10% težinskih procenata drugih stereoizomera jedinjenja u jednom otelotvorenju, više od oko 95% težinskih procenata jednog stereoizomera jedinjenja i manje od oko 5% težinskih procenata drugih stereoizomera jedinjenja u jednom otelotvorenju i više od oko 97% težinskih procenata jednog stereoizomera jedinjenja i manje od oko 3% težinskih procenata drugih stereoizomera jedinjenja u jednom otelotvorenju. Stereomerno čisto jedinjenje koje se ovde koristi sadrži više od oko 80% težinskih procenata jednog stereoizomera jedinjenja u jednom otelotvorenju, više od oko 90% težinskih procenata jednog stereoizomera jedinjenja u jednom otelotvorenju, više od oko 95% težinskih procenata jednog stereoizomera jedinjenja u jednom otelotvorenju i više od oko 97% težinskih procenata jednog stereoizomera jedinjenja u jednom otelotvorenju. Na način na koji se koristi ovde i ako nije drugačije naznačeno, termin „stereomerno obogaćen“ označava sastav koji se sadrži više od oko 60% težinskih procenata jednog stereoizomera jedinjenja u jednom otelotvorenju, više od oko 70% težinskih procenata u jednom otelotvorenju i više od oko 80% težinskih procenata jednog stereoizomera jedinjenja u jednom otelotvorenju. Na način na koji se koristi ovde i ako nije drugačije naznačeno, termin „enantiomerno čist“ označava stereomerno čisti sastav jedinjenja koje ima jedan hiralni centar. Slično tome, termin „stereomerno obogaćen“ označava stereomerno obogaćeni sastav jedinjenja koje ima jedan hiralni centar. Na način na koji se koristi ovde, termini „stereoizomerne“ ili „dijastereomerne smeše“ označavaju sastav koji sadrži više od jednog stereoizomera jedinjenja. Tipična stereoizomerna smeša jedinjenja sadrži oko 50% težinskih procenata jednog stereoizomera jedinjenja i oko 50% težinskih procenata drugih stereoizomera jedinjenja, ili sadrži više od oko 50% težinskih procenata jednog stereoizomera jedinjenja i manje od oko 50% težinskih procenata drugih stereoizomera jedinjenja, ili sadrži više od oko 45% težinskih procenata jednog stereoizomera jedinjenja i manje od oko 55% težinskih procenata drugih stereoizomera jedinjenja, ili sadrži više od oko 40% težinskih procenata jednog stereoizomera jedinjenja i manje od oko 60% težinskih procenata drugih stereoizomera jedinjenja, ili sadrži više od oko 35% težinskih procenata jednog stereoizomera jedinjenja i manje od oko 65% težinskih procenata drugih stereoizomera jedinjenja.

[0035] Podrazumeva se da ovde navedena jedinjenja mogu sadržati hiralne centre. Takvi hiralni centri mogu biti ili (R) ili (S) konfiguracije, ili mogu biti njihova mešavina.

Podrazumeva se da hiralni centri jedinjenja predviđenih u ovom dokumentu mogu biti podvrgnuti epimerizaciji in vivo. To znači da će stručnjak u oblasti prepoznati da je primena jedinjenja u njegovom (R) obliku ekvivalentna, u slučaju jedinjenja podvrgnutih epimerizaciji in vivo, primeni jedinjenja u njegovom (S) obliku.

[0036] Optički aktivni (+) i (-), (R)- i (S)-, ili (D)- i (L)-izomeri mogu biti pripremljeni korišćenjem hiralnih sintona ili hiralnih reagenasa, ili razdvojeni korišćenjem konvencionalnih tehnika, kao što je hromatografija na hiralnoj stacionarnoj fazi.

[0037] Na način na koji se koristi ovde, „izotopolog“ je izotopski obogaćeno jedinjenje. Termin „izotopski obogaćen“ se odnosi na atom koji ima izotopski sastav različit od prirodnog izotopskog sastava tog atoma. Termin „izotopski obogaćen“ se takođe može odnositi na jedinjenje koje sadrži najmanje jedan atom koji ima izotopski sastav različit od prirodnog izotopskog sastava tog atoma. Termin „izotopski sastav“ se odnosi na količinu svakog izotopa prisutnog za dati atom. Radioaktivno obeležena i izotopski obogaćena jedinjenja su korisna kao terapijski agensi, npr. terapijski agensi za multipli mijelom, reagensi za istraživanje, npr. reagensi za test vezivanja, i dijagnostički agensi, npr. in vivo agensi za dijagnostičko snimanje. Sve izotopske varijacije jedinjenja koje su ovde opisane, bilo da su radioaktivne ili ne, predviđene su da budu obuhvaćene obimom otelotvorenja datih ovde. U nekim otelotvorenjima, dati su izotopolozi jedinjenja, na primer, izotopolozi Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 su deuterijum, ugljenik-13 ili jedinjenja obogaćena azotom-15. U nekim otelotvorenjima, ovde navedeni izotopolozi su jedinjenja obogaćena deuterijumom. U nekim otelotvorenjima, ovde navedeni izotopolozi su jedinjenja obogaćena deuterijumom, sa deuteracijom na hiralnom centru.

[0038] U opisu datom ovde, ako postoji bilo kakva neusklađenost između hemijskog imena i hemijske strukture, struktura će imati primat u tumačenju.

[0039] Na način na koji se koristi ovde, termin „multipli mijelom“ se odnosi na hematološka stanja koja karakterišu maligne plazma ćelije i obuhvata sledeće poremećaje: monoklonsku gamopatiju neodređenog značaja (MGUS); relapsirajući, refraktorni ili rezistentni multipli mijelom; multipli mijelom niskog, srednjeg i visokog rizika; novodijagnostikovani multipli

1

mijelom (uključujući novodijagnostikovani multipli mijelom niskog, srednjeg i visokog rizika); multipli mijelom pogodan za transplantaciju i multipli mijelom nepogodan za transplantaciju; tinjajući (indolentni) multipli mijelom (uključujući tinjajući multipli mijelom niskog, srednjeg i visokog rizika); aktivni multipli mijelom; solitarni plazmacitom; ekstramedularni plazmacitom; leukemiju plazma ćelija; multipli mijelom centralnog nervnog sistema; mijelom lakog lanca; ne-sekretorni mijelom; imunoglobulin D mijelom; i imunoglobulin E mijelom; i multipli mijelom koji karakterišu genetske abnormalnosti, kao što su Ciklin D translokacije (na primer, t(11;14)(q13;q32); t(6;14)(p21;32); t(12;14)(p13;q32); ili t(6;20);); MMSET translokacije (na primer, t(4;14)(p16;q32)); MAF translokacije (na primer, t(14;16)(q32;q32); t(20;22); t(16; 22)(q11;q13); ili t(14;20)(q32;q1 1)); ili drugi faktori hromozoma (na primer, delecija 17p13 ili hromozoma 13; del(17/17p), non-hiperdiploidija i višak(1q)).

[0040] Na način na koji se koristi ovde i ako nije drugačije naznačeno, termini „lečenje“, „lečiti“, „tretman“ i „tretirati“ odnose se na ublažavanje ili redukciju težine simptoma povezanog sa bolešću ili stanjem koje se leči, na primer, sa multiplim mijelomom.

[0041] Termin „prevencija“ uključuje inhibiciju simptoma određene bolesti ili poremećaja, na primer multiplog mijeloma. U nekim otelotvorenjima, pacijenti sa porodičnom istorijom multiplog mijeloma su kandidati za preventivne režime. Generalno, termin „prevencija“ se odnosi na primenu leka pre pojave simptoma, posebno kod pacijenata pod rizikom od multiplog mijeloma.

[0042] Na način na koji se koristi ovde i ako nije drugačije naznačeno, termin „upravljanje“ obuhvata sprečavanje ponavljanja određene bolesti ili poremećaja, kao što je multipli mijelom, kod pacijenta koji je patio od njega, produžavajući vreme tokom kog pacijent koji je patio od bolesti ili poremećaja ostaje u remisiji, smanjujući stope smrtnosti pacijenata i/ili održavajući smanjenje težine ili izbegavanje simptoma povezanih sa bolešću ili stanjem kojim se upravlja.

[0043] Na način na koji se koristi ovde, „subjekt“ ili „pacijent“ je životinja, obično sisar, uključujući i čoveka, kao što je ljudski pacijent.

[0044] Termin „recidiv“ odnosi se na situaciju u kojoj kod pacijenata koji su prošli kroz remisiju multiplog mijeloma nakon terapije dolazi do povratka ćelija mijeloma i/ili smanjena broja normalnih ćelija u koštanoj srži.

[0045] Termin „refraktorni ili rezistentni“ odnosi se na okolnosti u kojima pacijenti, čak i nakon intenzivnog tretmana, imaju rezidualne ćelije mijeloma i/ili smanjen broj normalnih ćelija u koštanoj srži.

[0046] Na način na koji se koristi ovde, termin „indukciona terapija“ odnosi se na prvi tretman koji se primenjuje za lečenje bolesti, ili prvi tretman koji se daje sa namerom da izazove potpunu remisiju bolesti, kao što je karcinom. Kada se koristi samostalno, indukciona terapija je ona koja je prihvaćena kao najbolji dostupni tretman. Ukoliko se detektuje rezidualni karcinom, pacijenti se leče drugom terapijom, koja se naziva reindukcijom. Ako je pacijent u potpunoj remisiji nakon indukcione terapije, daje se dodatna konsolidacija i/ili terapija održavanja kako bi se produžila remisija ili potencijalno izlečio pacijent.

[0047] Na način na koji se koristi ovde, „konsolidaciona terapija“ se odnosi na tretman koji se daje za bolest nakon što se pre toga postigne remisija. Na primer, konsolidaciona terapija za karcinom je tretman koji se daje nakon što je karcinom nestao nakon početne terapije. Konsolidaciona terapija može uključivati terapiju zračenjem, transplantaciju matičnih ćelija ili lečenje medikamentima protiv karcinoma. Konsolidaciona terapija se takođe naziva intenzifikaciona terapija i post-remisiona terapija.

[0048] Na način na koji se koristi „terapija održavanja“ se odnosi na tretman koji se primenjuje za bolest nakon remisije ili postizanja najboljeg odgovora, kako bi se sprečio ili odložio recidiv. Terapija održavanja može uključivati hemoterapiju, hormonsku terapiju ili ciljanu terapiju.

[0049] Na način na koji se koristi ovde, i ako nije drugačije definisano, termini „terapijski efikasna količina“ i „efikasna količina“ jedinjenja odnose se na količinu dovoljnu da pruži terapijsku korist u lečenju, prevenciji i/ili upravljanju bolešću, na primer multiplim mijelomom, ili da odloži ili minimizira jedan ili više simptoma povezanih sa bolešću ili poremećajem koji se leči. Termini „terapijski efikasna količina“ i „efikasna količina“ mogu

1

obuhvatiti količinu koja poboljšava dejstvo ukupne terapije, smanjuje ili izbegava simptome ili uzroke bolesti ili poremećaja, ili povećava terapijsku efikasnost drugog terapijskog agensa.

[0050] Termini „istovremena primena“ i „u kombinaciji sa“ uključuju primenu jednog ili više terapijskih agenasa (na primer, jedinjenje koje je ovde predviđeno i drugi agens protiv multiplog mijeloma, agens protiv karcinoma ili agens za potpornu terapiju) ili istovremeno, zajedno ili sekvencijalno bez određenih vremenskih ograničenja. U jednom otelotvorenju, agensi su istovremeno prisutni u ćeliji ili u telu pacijenta ili istovremeno vrše svoj biološki ili terapijski efekat. U jednom otelotvorenju, terapijski agensi su u istom sastavu ili obliku jedinične doze. U drugom otelotvorenju, terapijski agensi su u odvojenim sastavima ili jediničnim doznim oblicima.

[0051] Termin „agens za potpornu terapiju“ odnosi se na bilo koju supstancu kojom se leče, sprečavaju ili kojom se upravlja neželjenim efektima tretmana sa Jedinjenjem 1, Jedinjenjem 2 ili Jedinjenjem 3, ili enantiomerom ili smešom enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljivih soli ovih jedinjenja.

[0052] Termin „biološka terapija“ odnosi se na primenu bioloških terapija kao što su krv iz pupčane vrpce, matične ćelije, faktori rasta i slično.

[0053] U kontekstu karcinoma, inhibicija se može proceniti inhibicijom progresije bolesti, inhibicijom rasta tumora, smanjenjem primarnog tumora, olakšanjem simptoma povezanih sa tumorom, inhibicijom faktora izlučenih iz tumora, odloženim pojavljivanjem primarnih ili sekundarnih tumora, usporenim razvojem primarnih ili sekundarnih tumora, smanjenom pojavom primarnih ili sekundarnih tumora, usporenim sekundarnim efektima bolesti ili njihovom smanjenom ozbiljnošću, zaustavljenim rastom tumora i regresijom tumora, povećanim vremenom do progresije (TTP), povećanim preživljavanjem bez progresije (PFS), povećanim ukupnim preživljavanjem (OS), između ostalog. Skraćenica „OS“ na način na koji se koristi ovde označava vreme od početka lečenja do smrti iz bilo kog uzroka. Skraćenica „TTP“ na način na koji se koristi ovde označava vreme od početka lečenja do progresije tumora; TTP ne uključuje smrtne slučajeve. U jednom otelotvorenju, skraćenica

„PFS“ označava vreme od početka lečenja do progresije tumora ili smrti. U jednom otelotvorenju, skraćenica „PFS“ označava vreme od prve doze jedinjenja do prve pojave progresije bolesti ili smrti iz bilo kog uzroka. U jednom otelotvorenju, stope PFS će biti

1

izračunate korišćenjem Kaplan-Meier procena. Preživljavanje bez događaja (EFS) označava vreme od početka lečenja do bilo kakvog neuspeha lečenja, uključujući progresiju bolesti, prekid lečenja iz bilo kog razloga ili smrt. U jednom otelotvorenju, ukupna stopa odgovora (ORR) označava procenat pacijenata koji postignu odgovor. U jednom otelotvorenju, skraćenica „ORR“ označava zbir procenata pacijenata koji postižu potpune i delimične odgovore. U jednom otelotvorenju, skraćenica „ORR“ označava procenat pacijenata čiji je najbolji odgovor ≥ delimični odgovor (PR), prema Jedinstvenim kriterijuma odgovora IMWG. U jednom otelotvorenju, trajanje odgovora (DoR) označava vreme od postizanja odgovora do recidiva ili progresije bolesti. U jednom otelotvorenju, skraćenica „DoR“ označava vreme od postizanja odgovora ≥ delimičnog odgovora (PR) do recidiva ili progresije bolesti. U jednom otelotvorenju, skraćenica „DoR“ označava vreme od prve dokumentacije odgovora do prve dokumentacije progresivne bolesti ili smrti. U jednom otelotvorenju, skraćenica

„DoR“ označava vreme od prve dokumentacije odgovora ≥ delimičnog odgovora (PR) do prve dokumentacije progresivne bolesti ili smrti. U jednom otelotvorenju, vreme do odgovora (TTR) označava vreme od prve doze jedinjenja do prve dokumentacije odgovora. U jednom otelotvorenju, skraćenica „TTR“ označava vreme od prve doze jedinjenja do prve dokumentacije odgovora ≥ delimičnog odgovora (PR). U krajnosti, potpuna inhibicija se ovde naziva prevencijom ili hemoprevencijom. U ovom kontekstu, termin

„prevencija“ uključuje ili sprečavanje pojave klinički očiglednog karcinoma u potpunosti ili sprečavanje pojave pretklinički očigledne faze karcinoma. Takođe, ova definicija obuhvata i prevenciju transformacije u maligne ćelije ili zaustavljanje ili preokretanje progresije premalignih ćelija u maligne ćelije. To uključuje profilaktičko lečenje osoba koje su izložene riziku od razvoja karcinoma.

[0054] U kontekstu multiplog mijeloma, odgovor se može proceniti korišćenjem kriterijuma konsenzusa Međunarodne radne grupe za mijelom (IMWG) za odgovor i minimalnu procenu rezidualne bolesti (Rajkumar et al., Blood, 2011, 117(18):4691-5; Kumar et al., Lancet Oncol., 2016,17(8):e328-e346). Kriterijumi se mogu sumirati na sledeći način (sa dodatnim detaljima dostupnim u Lancet Oncol., 2016,17(8):e328-e346).

1

2

[0057] Termin „oko“, na način na koji se koristi ovde, osim ako nije drugačije naznačeno, kada se koristi u sprezi sa numeričkom vrednošću ili rasponom vrednosti, ukazuje na to da vrednost ili raspon vrednosti mogu odstupati u meri koja se smatra razumnom osobi koja je stručna u oblasti. U jednom otelotvorenju, termin „oko“ označava da numerička vrednost ili raspon vrednosti može varirati unutar 25%, 20%, 15%, 10%, 9%, 8%, 7%, 6%, 5%, 4%, 3%, 2%, 1,5%, 1%, 0,5% ili 0,25%, od navedene vrednosti ili raspona vrednosti. U jednom otelotvorenju, termin „oko“ se odnosi na vrednost koja nije više od 10% iznad ili ispod vrednosti koja se modifikuje terminom. Na primer, termin „oko 10 mg/m<2>“ označava raspon od 9 mg/m2 do 11 mg/m2.

[0058] Termin „BCMA, ciljna BCMA, humana BCMA“, na način na koji se koristi ovde, odnosi se na humani antigen maturacije B ćelija, takođe poznat kao BCMA; TR17_HUMAN, TNFRSF17 (UniProt Q02223), koji je član super familije receptora tumorske nekroze koja se prvenstveno eksprimira u diferenciranim plazma ćelijama. Ekstracelularni domen BCMA se, prema UniProt-u, sastoji od aminokiselina 1-54 (ili 5-51). Termin „antitelo protiv BCMA, anti-BCMA“, na način na koji se koristi ovde, odnosi se na antitelo koje se specifično vezuje za vanćelijski domen BCMA.

[0059] „Specifično vezivanje za BCMA ili vezivanje za BCMA“ odnosi se na antitelo koje je sposobno da se veže za ciljnu BCMA sa dovoljnim afinitetom tako da antitelo postaje korisno kao terapijsko sredstvo u ciljanju BCMA. U nekim otelotvorenjima, stepen vezivanja anti-BCMA antitela za nepovezani, ne-BCMA protein je oko 10 puta, poželjno >100 puta manji

2

od vezivanja antitela za BCMA mereno, npr. površinskom plazmonskom rezonancom (SPR), npr. Biacore<®>, enzimskim imunosorbentnim testom (ELISA) ili protočnom citometrijom (FACS). U jednom otelotvorenju antitelo koje se vezuje za BCMA ima disocijacionu konstantu (Kd) od 10-8 M ili manje, u jednom otelotvorenju od 10-8 M do 10-13 M, ili manje, u jednom otelotvorenju od 10-9 M do 10-13 M. U jednom otelotvorenju anti-BCMA antitelo se vezuje za epitop BCMA koji je konzerviran među BCMA različitih vrsta, u jednom otelotvorenju kod ljudi i cinomolgusa, a u dodatnom otelotvorenju kod miševa i pacova.

„Bispecifično antitelo koje se specifično vezuje za CD3 i BCMA, bispecifično antitelo protiv CD3 i BCMA“ odnosi se na odgovarajuću definiciju za vezivanje za oba cilja. Antitelo koje se specifično vezuje za BCMA (ili BCMA i CD3) se ne vezuje za druge humane antigene. Prema tome, u ELISA testu, OD vrednosti za takve nepovezane mete biće jednake ili niže od granice detekcije specifičnog testa, u jednom otelotvorenju > 0,3 ng/mL, ili jednake ili niže vrednostima OD kontrolnih uzoraka bez BCMA vezanog za ploču ili sa netransfektovanim HEK293 ćelijama.

[0060] Termin „APRIL“, na način na koji se koristi ovde odnosi se na rekombinantni, skraćeni mišji APRIL (aminokiseline 106-241; NP_076006). APRIL se može proizvesti kao što je opisano kod Ryan, 2007 (Mol Cancer Ther; 6 (11): 3009-18).

[0061] Termin „BAFF“, na način na koji se koristi ovde, odnosi se na rekombinantni, skraćeni humani BAFF (UniProt Q9Y275 (TN13B_HUMAN) koji se može proizvesti kao što je opisano kod Gordon, 2003 (Biochemistry; 42 (20): 5977-5983). U jednom otelotvorenju His-označen BAFF se koristi prema pronalasku. U jednom otelotvorenju, His-označeni BAFF se proizvodi kloniranjem fragmenta DNK koji kodira BAFF ostatke 82-285 u ekspresioni vektor, kreirajući fuziju sa N-terminalnom His-oznakom praćenom mestom cepanja trombina, ekspresijom navedenog vektora i cepanjem oporavljenog proteina sa trombinom.

[0062] Termin „antitelo protiv CD3, anti CD3 antitela“ odnosi se na antitelo koje se specifično vezuje za CD3. U jednom otelotvorenju, antitelo se specifično vezuje za CD3ε. Termin „CD3ε ili CD3“, na način na koji se koristi ovde, odnosi se na humani CD3ε opisan pod UniProt P07766 (CD3ε_HUMAN).

[0063] Termin „antitelo“, na način na koji se koristi ovde, odnosi se na monoklonsko antitelo. Antitelo se sastoji od dva para „lakog lanca“ (LC) i „teškog lanca“ (HC) (takvi parovi lakog

2

lanca (LC) /teškog lanca ovde su skraćeni kao LC/HC). Laki lanci i teški lanci takvih antitela su polipeptidi koji se sastoje od nekoliko domena. Svaki teški lanac se sastoji od varijabilnog regiona teškog lanca (skraćeno ovde kao HCVR ili VH) i konstantnog regiona teškog lanca. Konstantni region teškog lanca sadrži konstantne domene teškog lanca CH1, CH2 i CH3 (klase antitela IgA, IgD i IgG) i opciono konstantni domen teškog lanca CH4 (klase antitela IgE i IgM). Svaki laki lanac se sastoji od varijabilnog domena lakog lanca VL i konstantnog domena lakog lanca CL. Varijabilni domeni VH i VL mogu se dalje podeliti na regione hipervarijabilnosti, nazvane regioni koji definišu komplementarnost (CDR), ispresecani regionima koji su više konzervirani, nazvani okvirnim regionima (FR). Svaki VH i VL region se sastoji od tri CDR-a i četiri FR-a, raspoređena od amino terminusa do karboksi-terminusa u sledećem redosledu: FR1, CDR1, FR2, CDR2, FR3, CDR3, FR4. „Konstantni domeni“ teškog lanca i lakog lanca nisu direktno uključeni u vezivanje antitela za metu, već pokazuju različite efektorske funkcije. Termin „antitelo“, na način na koji se koristi ovde, takođe sadrži deo antitela koji je potreban barem za specifično vezivanje za antigen CD3 resp. BCMA. Takvo antitelo (ili deo antitela) može biti u jednom otelotvorenju Fab fragment, ako je navedeni deo antitela sadržan u bispecifičnom antitelu prema pronalasku. Antitelo prema pronalasku takođe može biti Fab', F(ab')2, scFv, di-scFv, ili bispecifični aktivator T-ćelija (BiTE®).

[0064] Termin „antitela“ uključuje npr. mišja antitela, humana antitela, himerna antitela, humanizovana antitela i genetski modifikovana antitela (varijantna ili mutirana antitela) sve dok se zadržavaju njihova karakteristična svojstva. U jednom otelotvorenju, antitela su humana ili humanizovana antitela, posebno kao rekombinantna humana ili humanizovana antitela. Dalja otelotvorenja su heterospecifična antitela (bispecifična, trispecifična, itd.) i drugi konjugati, npr. sa citotoksičnim malim molekulima.

[0065] Bispecifični formati antitela su dobro poznati u struci i opisani su npr. i u Kontermann RE, mAbs 4:21-16 (2012); Holliger P., Hudson PJ, Nature Biotech.23 (2005) 1126- 1136 i Chan AC, Carter PJ Nature Reviews Immunology 10, 301-316 (2010) i Cuesta AM et al., Trends Biotech 28 (2011) 355-362. Termin „bispecifično antitelo“, na način na koji se koristi ovde, odnosi se u jednom otelotvorenju na antitelo u kojem se jedan od dva para teških i lakih lanaca (HC/LC) posebno vezuje za CD3, a drugi se posebno vezuje za BCMA. Termin se takođe odnosi na druge formate bispecifičnih antitela prema saznanjima iz struke. U jednom otelotvorenju, termin „bispecifično antitelo“ uključuje bispecifična jednolančana antitela, kao

2

što su antitela u BiTE<®>formatu, DART antitela, dijatela, tandem scFvs i mimetici antitela, kao što su DARPini. U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) jedno je od onih opisanih u publikaciji međunarodne prijave br. WO 2018/083204.

[0066] Termin „TCB“, na način na koji se koristi ovde, odnosi se na bispecifično antitelo koje se specifično vezuje za BCMA i CD3. Termin „83A10-TCBcv“, na način na koji se koristi ovde, odnosi se na bispecifično antitelo koje se specifično vezuje za BCMA i CD3, kako je određeno njegovom kombinacijom teških i lakih lanaca SEQ ID NO:45, SEQ ID NO:46, SEQ ID NO:47 (2x) i SEQ ID NO:48, i kao što je prikazano na Slici 2A i opisano u EP14179705. Termini „21-TCBcv, 22-TCBcv, 42-TCBcv“, na način na koji se koriste ovde, odnose se na odgovarajuća bispecifična antitela Mab21, kako je određeno u njegovim kombinacijama teških i lakih lanaca SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50 i SEQ ID NO:51 (2x), Mab 22, kako je određeno u njegovim kombinacijama teških i lakih lanaca SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:52, SEQ ID NO:53 i SEQ ID NO:54 (2x) i Mab42, kako je određeno u njegovim kombinacijama teških i lakih lanaca SEQ ID NO:48 od SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:56 i SEQ ID NO: 57-(2x).

B. Kratak opis slika

[0067]

Slika 1A i Slika 1B. Bispecifična bivalentna antitela koja se sastoje samo od Fab fragmenata (specifičnih za CD3 i BCMA) i Fc dela kako je navedeno: (Slika 1A) Fab BCMA(RK/EE)-Fc-Fab CD3; (Slike 1B) Fab BCMA-Fc-Fab CD3(RK/EE).

Supstitucije aminokiselina za RK/EE uvedene u CL-CH1 kako bi se smanjilo LC neuparivanje/sporedni proizvodi u proizvodnji. Fab CD3 uključuje VL-VH ukrštanje kako bi se smanjilo LC neuparivanje i sporedni proizvodi.

Slika 2A, Slika 2B, Slika 2C i Slika 2D. Preferirana bispecifična trovalentna antitela koja se sastoje samo od Fab fragmenata (specifičnih za CD3 i BCMA) i Fc dela kako je navedeno: (Slika 2A) Fab BCMA(RK/EE)-Fc-Fab CD3-Fab BCMA(RK/EE); (Slika 2B) Fab BCMA-Fc-Fab CD3(RK/EE)-Fab BCMA; (Slika 2C) Fab BCMA(RK/EE)-Fc-Fab BCMA(RK/EE)-Fab CD3; (Slika 2D) Fab BCMA-Fc-Fab BCMA-Fab CD3(RK/EE). Supstitucije aminokiselina za RK/EE uvedene u CL-CH1 kako bi se smanjilo LC neuparivanje/sporedni proizvodi u proizvodnji. Poželjno, Fab

2

CD3 uključuje VL-VH ukrštanje kako bi se smanjilo neuparivanje LC i sporedni proizvodi. Poželjno su Fab CD3 i Fab BCMA međusobno povezani fleksibilnim poveznicama.

Slika 3A, Slika 3B, Slika 3C i Slika 3D. Bispecifična bivalentna antitela koja se sastoje samo od Fab fragmenata (specifičnih za CD3 i BCMA) i Fc dela kako je navedeno: (Slika 3A) Fc-Fab CD3-Fab BCMA(RK/EE); (Slika 3B) Fc-Fab CD3(RK/EE)-Fab BCMA; (Slika 3C) Fc-Fab BCMA(RK/EE)-Fab CD3; (Slika 3D) Fc-Fab BCMA-Fab CD3(RK/EE). Poželjno, Fab CD3 uključuju VL-VH ukrštanje kako bi se smanjilo neuparivanje LC i sporedni proizvodi. Fab CD3 i Fab BCMA su međusobno povezani fleksibilnim poveznicama.

Slika 4A, Slika 4B i Slika 4C ilustruju da predtretman efektorskih T-ćelija ili multiplog mijeloma (MM) ili PCL ciljnih ćelija Jedinjenjem 2 povećava potentnost i u nekim ćelijskim linijama takođe povećava maksimalno ubijanje ciljnih ćelija, što se postiže bispecifičnim antitelom koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) i koje je dato ovde. Efektorske T-ćelije (CD3+) su prethodno tretirane sa DMSO (kontrola) ili Jedinjenjem 2 (1 nM) tokom 16 sati, isprane i korišćene za ko-kulture. Ciljne ćelijske linije H929 (Slika 4A), L363 (Slika 4B) i OPM-2 (Slika 4C) su prethodno tretirane sa DMSO (kontrola) ili Jedinjenjem 2 (1 nM) tokom 72 sata, zatim isprane i korišćene za ko-kulture u odnosim efektorskih T-ćelija (E) i ciljnih ćelija (T) od 1:3, 1:1 i 1:5, respektivno.

Linije „DMSO-DMSO“: i ciljne i efektorske ćelije prethodno tretirane sa DMSO (kontrola). Linije „Jedinjenje 2-DMSO“: ciljne ćelije prethodno tretirane sa Jedinjenjem 2, efektorske ćelije prethodno tretirane sa DMSO (kontrola). Linije „DMSO-Jedinjenje 2“: ciljne ćelije prethodno tretirane sa DMSO (kontrola), efektorske ćelije prethodno tretirane sa Jedinjenjem 2. Linije „Jedinjenje 2-Jedinjenje 2“: i ciljne i efektorske ćelije prethodno tretirane sa Jedinjenjem 2. Y-osa predstavlja procenat živih ćelija tumora normalizovanih za broj živih ćelija u odsustvu bispecifičnog antitela; X-osa pokazuje log[koncentraciju] bispecifičnog antitela u pM.

Slika 5 ilustruje da Jedinjenje 2 povećava potenciju i maksimalno ubijanje ciljnih ćelija postignuto bispecifičnim antitelima koja se specifično vezuju za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), koji su ovde navedeni.

Efektorske T-ćelije (CD3+) od tri različita donatora su zajedno kultivisane sa MM ciljnom ćelijskom linijom H929 u fiksnom odnosu efektorskih T-ćelija (E) prema ciljnim ćelijama (T) od 1:3, u prisustvu DMSO (kontrola) ili Jedinjenja 2 (1 nM)

2

tokom 72 sata. Y-osa predstavlja procenat živih ćelija tumora normalizovanih za broj živih ćelija u odsustvu bispecifičnog antitela; X-osa pokazuje log[koncentraciju] bispecifičnog antitela u pM.

Slika 6 ilustruje da predtretman ćelija multiplog mijeloma rezistentnih na lenalidomid Jedinjenjem 2, ali ne i pomalidomidom, poboljšava potentnost i maksimalno ubijanje ciljnih ćelija koje se postiže bispecifičnim antitelom koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), koji su ovde navedeni. Ciljna ćelijska linija H929-1051 je prethodno tretirana sa DMSO (kontrola), pomalidomidom (100 nM) ili Jedinjenjem 2 (1 nM) tokom 72 sata, zatim isprana i korišćena za ko-kulture u odnosu efektorskih T-ćelija (E) i ciljnih ćelija (T) od 1:3. Y-osa predstavlja procenat živih ćelija tumora normalizovanih za broj živih ćelija u odsustvu bispecifičnog antitela; X-osa pokazuje log[koncentraciju] bispecifičnog antitela u pM.

C. Jedinjenja

[0068] Predviđeno za primenu u ovim metodama je jedinjenje 4-(4-(4-(((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-il)oksi)metil)benzil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitril, nazvano „Jedinjenje 1“:

ili njegov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so.

[0069] Za primenu u ovim metodama takođe je predviđeno jedinjenje (S)-4-(4-(4-(((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-il)oksi)metil)benzil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitril, nazvano „Jedinjenje 2“:

ili njegov tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so.

[0070] Za primenu u ovim metodama takođe je predviđeno jedinjenje (R)-4-(4-(4-(((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-il)oksi)metil)benzil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitril, nazvano „Jedinjenje 3“:

ili njegov tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so.

D. Priprema Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 i Jedinjenja 3

[0071] Jedinjenja za primenu u metodama lečenja multiplog mijeloma mogu se pripremiti metodama koje su poznate u struci i prateći postupke slične onima koji su opisani u odeljku „Primeri“ u ovom dokumentu ili njihove rutinske modifikacije. Primer šeme reakcije za pripremu jedinjenja prikazan je ispod u Šemi 1 za Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 i Jedinjenje 3, i u Šemi 2 za Jedinjenje 2.

[0072] Kao što je prikazano u Šemi 1, zaštita 3-hidroksi-2-metilbenzojeve kiseline (na primer, formiranjem metil estra i terc-butil(dimetil)sililetra) praćena je brominacijom, na primer korišćenjem N-bromosukcinimida i azobisizobutironitrila. Reakcija sa metil-4,5-diamino-5-okso-pentanoatom, u prisustvu baze (kao što je DIEA), rezultirala je formiranjem derivatizovanog izoindolina, nakon čega je usledila deprotekcija TBS upotrebom baze, kao što je kalijum karbonat. Reakcija derivatizovanog izoindolina sa 1,4-bis(bromometil)benzenom u prisustvu baze (kao što je kalijum karbonat), praćena je formiranjem glutarimida u prisustvu kalijum terc-butoksida. Konačno, reakcija sa 3-fluoro-4-

1

(piperazin-1-il)benzonitrilom dala je ciljno Jedinjenje 1. Hiralna separacija je zatim dala Jedinjenje 2 i Jedinjenje 3.

[0073] Alternativno, kao što je prikazano u Šemi 2, reakcija intermedijera metil 2-(bromometil)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-benzoata sa hiralnim terc-butil (4S)-4,5-diamino-5-okso-pentanoatom, u prisustvu baze (kao što je DIEA), rezultovala je formiranjem derivatizovanog izoindolina, nakon čega je usledila deprotekcija TBS korišćenjem tetrabutilamonijum fluorida. Reakcija derivatizovanog izoindolina sa 4-(4-(4-(hlorometil)benzil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitrilom u prisustvu baze (kao što je kalijum karbonat), praćena deprotekcijom i formiranjem glutarimida dala je ciljno Jedinjenje 2.

2

[0074] Stručnjak u oblasti bi znao kako da modifikuje postupke navedene u ilustrativnim šemama i primerima kako bi dobio željene proizvode.

E. Bispecifično antitelo koje se specifično vezuje za BCMA i CD3

[0075] Predviđeno za primenu u metodama lečenja multiplog mijeloma je bispecifično antitelo koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3).

[0076] Prema pronalasku, bispecifično antitelo sadrži prvi vezni deo koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugi vezni deo koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisan time što se navedeni prvi vezni deo sastoji od regiona VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0077] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo sadrži prvi vezni deo koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugi vezni deo koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisan time što se navedeni prvi vezni deo sastoji od regiona VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

a) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

b) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0078] U jednom otelotvorenju, prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i regiona VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20, regiona CDR1L sa SEQ ID NO:23 i regiona CDR2L sa SEQ ID NO:24.

[0079] U jednom otelotvorenju, prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i regiona VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20, regiona CDR1L sa SEQ ID NO:25 i regiona CDR2L sa SEQ ID NO:26.

[0080] U jednom otelotvorenju, prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i regiona VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20, regiona CDR1L sa SEQ ID NO:27 i regiona CDR2L sa SEQ ID NO:28.

[0081] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo sadrži prvi vezni deo koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugi vezni deo koji se specifično vezuje za ljudski CD3ε (CD3), okarakterisan time što prvi vezni deo sadrži region VH sa SEQ ID NO: 10 i region VL sa SEQ ID NO: 12, region VH sa SEQ ID NO: 10 i region VL sa SEQ ID NO: 13, ili region VH sa SEQ ID NO: 10 i region VL sa SEQ ID NO:14.

[0082] U jednom otelotvorenju, prvi vezni deo sadrži region VH sa SEQ ID NO: 10 i region VL sa SEQ ID NO: 12.

4

[0083] U jednom otelotvorenju, prvi vezni deo sadrži region VH sa SEQ ID NO:10 i region VL sa SEQ ID NO: 13.

[0084] U jednom otelotvorenju, prvi vezni deo sadrži region VH sa SEQ ID NO: 10 i region VL sa SEQ ID NO: 14.

[0085] U jednom otelotvorenju, prvi vezni deo okarakterisan je time što sadrži region VL izabran iz grupe koja se sastoji od regiona VL sa SEQ ID NO: 12, 13 i 14, pri čemu je aminokiselina 49 izabrana iz grupe aminokiselina tirozin (Y), glutaminska kiselina (E), serin (S) i histidin (H). U jednom otelotvorenju aminokiselina 49 je E u okviru SEQ ID NO: 12, S u okviru SEQ ID NO: 13 ili H u okviru SEQ ID NO: 14.

[0086] U jednom otelotvorenju, prvi vezni deo okarakterisan je time što sadrži region VL izabran iz grupe koja se sastoji od regiona VL sa SEQ ID NO: 12, 13 i 14, pri čemu je aminokiselina 74 treonin (T) ili alanin (A). U jednom otelotvorenju, aminokiselina 74 je A u okviru SEQ ID NO: 14.

[0087] U jednom otelotvorenju, prvi vezni deo okarakterisan je time što sadrži kao BCMA VH region VH sa SEQ ID NO: 10.

[0088] U jednom otelotvorenju, prvi vezni deo okarakterisan je time što sadrži region VL izabran iz grupe koja se sastoji od regiona VL sa SEQ ID NO: 12, 13 i 14, pri čemu je aminokiselina 49 izabrana iz grupe aminokiselina tirozin (Y), glutaminska kiselina (E), serin (S) i histidin (H). U jednom otelotvorenju aminokiselina 49 je E (SEQ ID NO: 12, S (SEQ ID NO: 13) ili H (SEQ ID NO: 14). U jednom otelotvorenju pronalaska, prvi vezni deo okarakterisan je time što sadrži region VL izabran iz grupe koja se sastoji od regiona VL sa SEQ ID NO: 12, 13 i 14, pri čemu je aminokiselina 74 treonin (T) ili alanin (A). U jednom otelotvorenju, aminokiselina 74 je A u okviru SEQ ID NO: 14.

[0089] U jednom otelotvorenju, prvi vezni deo okarakterisan je time što se sastoji od regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i regiona CDR1H, CDR2H, CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe a) regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21 i regiona CDR2H sa SEQ ID NO: 22, regiona CDR1L sa SEQ ID NO:23 i regiona CDR2L sa SEQ ID NO:24, b) regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21 i regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22, regiona CDR1L sa SEQ ID NO:25 i regiona CDR2L sa SEQ ID NO:26, c) regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21 i regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22, regiona CDR1L sa SEQ ID NO:27 i regiona CDR2L sa SEQ ID NO:28. Prvi vezni deo može sadržati: g) region CDR1H sa SEQ ID NO:29 i region CDR2H sa SEQ ID NO:30, region CDR1L sa SEQ ID NO:31 i region CDR2L sa SEQ ID NO:32, e) region CDR1H sa SEQ ID NO:34 i region CDR2H sa SEQ ID NO:35, region CDR1L sa SEQ ID NO:31 i region CDR2L sa SEQ ID NO:32 i f) region CDR1H sa SEQ ID NO:36 i region CDR2H sa SEQ ID NO:37, region CDR1L sa SEQ ID NO:31 i region CDR2L sa SEQ ID NO:32.

[0090] Prvi vezni deo se može okarakterisati tako što kao region VH sadrži region VH izabran iz grupe koja se sastoji od SEQ ID NO:38, 39 i 40. Prvi vezni deo se može okarakterisati tako što kao region VH sadrži region VH sa SEQ ID NO:38, a kao region VL region sa SEQ ID NO:12. Prvi vezni deo se može okarakterisati tako što kao region VH sadrži region VH sa SEQ ID NO:39, a kao region VL region sa SEQ ID NO:12. Prvi vezni deo se može okarakterisati tako što kao region VH sadrži region VH sa SEQ ID NO:40, a kao region VL region sa SEQ ID NO:12.12.

[0091] Prvi vezni deo može se okarakterisati tako što sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO: 15, region CDR2H sa SEQ ID NO: 16, region CDR3H sa SEQ ID NO: 17, region CDR1L sa SEQ ID NO: 18, region CDR2L sa SEQ ID NO: 19 i region CDR3L sa SEQ ID NO: 20.

[0092] Prvi vezni deo može sadržati kao regione CDR3H i CDR3L iste regione CDR kao i antitelo 83A10 (za antitelo 83A10 videti Tabelu 1A i B kasnije u tekstu).

[0093] Prvi vezni deo se može okarakterisati tako što kao region VH sadrži region VH sa SEQ ID NO:9, a kao region VL region sa SEQ ID NO:11.

[0094] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo se sastoji od ne više od jednog Fab fragmenta dela anti-CD3 antitela, ne više od dva Fab fragmenta dela anti-BCMA antitela i ne više od jednog Fc dela, u jednom otelotvorenju, humanog Fc dela. U jednom otelotvorenju, ne više od jednog Fab fragmenta dela anti-CD3 antitela i ne više od jednog Fab fragmenta dela anti-BCMA antitela povezani su sa Fc delom i povezivanje se vrši preko C-terminalnog vezivanja Fab fragmenta na zglobni region. U jednom otelotvorenju, drugi Fab fragment dela anti-BCMA antitela je povezan preko svog C-terminusa ili sa N-terminusom Fab fragmenta dela anti-CD3 antitela ili sa zglobnim regionom Fc dela i stoga između Fc dela i dela anti-CD3 antitela. Poželjna bispecifična antitela prikazana su na Slikama 1A, 1B, 2A do 2D i 3A do 3D.

[0095] Posebno su poželjna bispecifična antitela koja se sastoje samo od Fab fragmenata i Fc dela kako je navedeno, sa ili „supstitucije aminokiselina“: Fab BCMA-Fc-Fab CD3 (bispecifični format Slika 1A ili Slika 1B), Fab BCMA-Fc-Fab CD3-Fab BCMA (bispecifični format Slika 2A ili Slika 2B), Fab BCMA-Fc-Fab BCMA-Fab CD3 (bispecifični format Slika 2C ili Slika 2D), Fc-Fab CD3-Fab BCMA (bispecifični format Slika 3A ili Slika 3B), Fc-Fab BCMA-Fab CD3 (bispecifični format Slika 3C ili Slika 3D).

[0096] Kao što je prikazano na Slikama 1A, 1B, 2A do 2D i 3A do 3D „Fab BCMA-Fc“, „Fab BCMA-Fc-Fab CD3“ i „Fab BCMA-Fc-Fab CD3“ znači da su Fab fragmenti vezani preko svog (njihovog) C-terminusa za N-terminus Fc fragmenta. „Fab CD3-Fab BCMA“ znači da je Fab CD3 fragment vezan svojim N-terminusom za C-terminus Fab BCMA fragmenta. „Fab BCMA - Fab CD3“ znači da je fragment Fab BCMA vezan svojim N-terminusom za C-terminus fragmenta Fab CD3.

[0097] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo se sastoji od drugog Fab fragmenta navedenog anti-BCMA antitela povezanog sa njegovim C-terminusom sa N-terminusom dela CD3 antitela navedenog bispecifičnog antitela. U jednom otelotvorenju, VL domen navedenog prvog dela anti-CD3 antitela povezan je sa CH1 ili CL domenom navedenog drugog dela anti-BCMA antitela.

[0098] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo se sastoji od drugog Fab fragmenta navedenog anti-BCMA antitela povezanog sa njegovim C-terminusom sa Fc delom (poput prvog Fab fragmenta navedenog anti-BCMA antitela) i povezanog njegovim N-terminusom sa C-terminusom dela CD3 antitela. U jednom otelotvorenju, CH1 domen navedenog dela anti-CD3 antitela je povezan sa VH domenom navedenog drugog dela anti-BCMA antitela.

[0099] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo se sastoji od Fc dela povezanog svojim N-terminusom sa C-terminusom navedenog Fab fragmenta CD3 antitela. U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo se sastoji od Fc dela povezanog njegovim prvim Nterminusom sa C-terminusom navedenog Fab fragmenta CD3 antitela i drugog Fab fragmenta navedenog anti-BCMA antitela povezanog njegovim C-terminusom sa drugim N-terminusom Fc dela. U jednom otelotvorenju, CL domen Fab fragmenta CD3 antitela je povezan sa zglobnim regionom Fc dela. U jednom otelotvorenju, CH1 domen BCMA fragmenta Fab antitela je povezan sa zglobnim regionom Fc dela.

[0100] Fab fragmenti su povezani korišćenjem odgovarajućeg linkera u skladu sa najnovijim dostignućima. U jednom otelotvorenju, koristi se (Gly4-Ser1)3 linker (Desplancq DK et al., Protein Eng.1994 Aug;7(8): 1027-33 i Mack M. et al., PNAS July 18, 1995 vol.92 no.15 7021-7025). Pošto je linker peptidni linker, takvo kovalentno vezivanje se obično vrši biohemijskim rekombinantnim sredstvima, koristeći nukleinsku kiselinu koja kodira VL i/ili VH domene odgovarajućih Fab fragmenata, linker i, po potrebi, lanac Fc dela.

[0101] U jednom otelotvorenju, anti-CD3ε antitelo sadrži varijabilni domen VH, koji sadrži CDR-ove teškog lanca, SEQ ID NO: 1, 2 i 3, kao CDR1H, CDR2H i CDR3H teški lanac, respektivno, i varijabilni domen VL, koji sadrži CDR-ove lakog lanca, SEQ ID NO: 4, 5 i 6 kao laki lanac CDR1L, CDR2L i CDR3L, respektivno. U jednom otelotvorenju, antitelo se sastoji od varijabilnih domena SEQ ID NO:7 (VH) i SEQ ID NO:8 (VL).

[0102] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo se karakteriše time što su varijabilni domeni dela anti CD3 antitela SEQ ID NO:7 i 8.

[0103] U jednom otelotvorenju pronalaska, bispecifično antitelo se karakteriše time što je deo anti-CD3 antitela (drugi vezni deo bispecifičnog antitela) povezan u svom N-terminusu sa C-terminusom dela anti-BCMA antitela (prvi vezni deo bispecifičnog antitela) i varijabilni domeni VL i VH dela anti-CD3 antitela ili konstantni domeni CL i CH1 se međusobno zamenjuju.

[0104] U jednom otelotvorenju, VH domen navedenog dela anti-CD3 antitela povezan je sa CH1 ili CL domenom navedenog dela anti-BCMA antitela. U jednom otelotvorenju, VL domen navedenog dela anti-CD3 antitela povezan je sa CH1 ili CL domenom navedenog dela anti-BCMA antitela.

[0105] Takav deo antitela je u jednom otelotvorenju Fab fragment odgovarajućeg antitela.

[0106] Bispecifično antitelo protiv BCMA i CD3 karakteriše se, u jednom otelotvorenju, time što sadrži

a) laki lanac i teški lanac antitela koje se specifično vezuje za jedan od navedenih ciljeva CD3 i BCMA; i

b) laki lanac i teški lanac antitela koje se specifično vezuje za drugi od navedenih ciljeva, pri čemu se varijabilni domeni VL i VH ili konstantni domeni CL i CH1 međusobno zamenjuju.

[0107] U jednom otelotvorenju, VH domen navedenog dela anti-CD3 antitela povezan je sa CH1 ili CL domenom navedenog dela anti-BCMA antitela. U jednom otelotvorenju, VL domen navedenog dela anti-CD3 antitela povezan je sa CH1 ili CL domenom navedenog dela anti-BCMA antitela.

[0108] U daljem otelotvorenju, bispecifično antitelo pri čemu su varijabilni domeni VL i VH u lakom lancu i odgovarajućem teškom lancu dela anti-CD3 antitela ili dela anti-BCMA antitela zamenjeni jedni drugima, karakteriše se time što se sastoji od konstantnog domena CL dela anti-CD3 antitela ili dela anti-BCMA antitela pri čemu je aminokiselina na poziciji 124 nezavisno supstituisana lizinom (K), argininom (R) ili histidinom (H) (numerisanje prema Kabatu), a u odgovarajućem konstantnom domenu CH1 aminokiselina na poziciji 147 i aminokiselina na poziciji 213 su nezavisno supstituisane glutaminskom kiselinom (E) ili asparaginskom kiselinom (D). U jednom otelotvorenju, antitelo je monovalentno za vezivanje CD3. U jednom otelotvorenju, pored zamene aminokiselina na poziciji 124 u konstantnom domenu CL, aminokiselina na poziciji 123 je nezavisno supstituisana lizinom (K), argininom (R) ili histidinom (H) (što je dalje nazvano „razmena varijanti naelektrisanja“). U jednom otelotvorenju, antitelo je monovalentno za vezivanje CD3 i aminokiselina 124 je K, aminokiselina 147 je E, aminokiselina 213 je E, a aminokiselina 123 je R. U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo se dodatno sastoji od istog vezujućeg dela anti-BCMA (u jednom otelotvorenju Fab fragment). To takođe znači da ako prvi anti-BCMA vezni deo sadrži razmenu varijante naelektrisanja, onda drugi anti-BCMA vezni deo sadrži istu razmenu varijante naelektrisanja. (Svi brojevi aminokiselina su prema Kabatu).

[0109] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo se karakteriše time što se sastoji od a) prvog lakog lanca i prvog teškog lanca prvog antitela koje se specifično vezuje za BCMA; i

b) drugog lakog lanca i drugog teškog lanca drugog antitela koje se specifično vezuje za CD3, i pri čemu se varijabilni domeni VL i VH u drugom lakom lancu i drugi teški lanac drugog antitela međusobno zamenjuju; i

c) gde je u konstantnom domenu CL prvog lakog lanca pod a) aminokiselina na poziciji 124 nezavisno supstituisana lizinom (K), argininom (R) ili histidinom (H) (numerisanje prema Kabatu), i gde je u konstantnom domenu CH1 prvog teškog lanca pod a) aminokiselina na poziciji 147 i aminokiselina na poziciji 213 nezavisno supstituisana glutaminskom kiselinom (E), ili asparaginskom kiselinom (D) (numerisanje prema Kabatu) (videti npr. Slike 1A, 2A, 2C, 3A, 3C).

[0110] U jednom otelotvorenju, navedeno bispecifično antitelo opisano u poslednjem prethodnom pasusu, dalje se karakteriše time što navedeno bispecifično antitelo pored toga sadrži Fab fragment navedenog prvog antitela (dalje nazvan „BCMA-Fab“) i u konstantnom domenu CL pomenuta BCMA-Fab aminokiselina na poziciji 124 je nezavisno supstituisana lizinom (K), argininom (R) ili histidinom (H) (numerisanje prema Kabatu), pri čemu je u konstantnom domenu CH1 pomenutog BCMA-Fab aminokiselina na pozicijama 147 i aminokiselina na poziciji 213 nezavisno supstituisana glutaminskom kiselinom (E) ili asparaginskom kiselinom (D) (numerisanje prema Kabatu) (vidi npr. Slike 2A, 2C).

[0111] U jednom otelotvorenju pronalaska, bispecifično antitelo se sastoji od jednog CD3-Fab i jednog BCMA-Fab i Fc dela, pri čemu su CD3-Fab i BCMA-Fab povezani preko svojih C-terminusa za zglobni region pomenutog Fc dela, i drugog BCMA-Fab, koji je svojim C-terminusom povezan sa N-terminusom CD3-Fab. CD3-Fab sadrži ukrštanje, dok ili CD3-Fab ili oba BCMA-Faba sadrže supstituciju aminokiselina (Slike 2A i 2B). Posebno se preferira bispecifično antitelo koje se sastoji od BCMA-Fab-Fc-CD3-Fab-BCMA-Fab, pri čemu oba BCMA-Faba sadrže supstituciju aminokiselina, a CD3-Fab sadrži VL/VH ukrštanje (Slika 2A). Posebno poželjno je bispecifično antitelo koje se sastoji od BCMA-Fab-Fc-CD3-Fab-BCMA-Fab, pri čemu oba BCMA-Faba sadrže supstituciju aminokiselina Q124K, E123R, K147E i K213E i CD3-Fab sadrži VL/VH ukrštanje. Posebno je poželjno da oba BCMA-Faba sadrže CDR antitela 21, 22, ili 42, ili VH/VL antitela 21, 22, ili 42 (za antitela 21, 22 i 42 videti Tabelu 1A i B kasnije u tekstu).

4

[0112] Prvi i drugi Fab fragment antitela koji se specifično vezuje za BCMA su u jednom otelotvorenju izvedeni iz istog antitela i u jednom otelotvorenju identični u CDR sekvencama, sekvencama varijabilnog domena VH i VL i/ili sekvencama konstantnog domena CH1 i CL. U jednom otelotvorenju sekvence aminokiselina prvog i drugog Fab fragmenta antitela koje se specifično vezuje za BCMA su identične. U jednom otelotvorenju BCMA antitelo je antitelo koje se sastoji od CDR sekvenci antitela 21, 22 ili 42, antitelo koje se sastoji od VH i VL sekvenci antitela 21, 22 ili 42, ili antitelo koje se sastoji od VH, VL, CH1 i CL sekvenci antitela 21, 22 ili 42.

[0113] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo se karakteriše time što se sastoji od a) prvog lakog lanca i prvog teškog lanca prvog antitela koje se specifično vezuje za BCMA; i

c) u konstantnom domenu CL drugog lakog lanca pod b) aminokiselina na poziciji 124 je nezavisno supstituisana lizinom (K), argininom (R) ili histidinom (H) (numerisanje prema Kabatu), pri čemu je u konstantnom domenu CH1 drugog teškog lanca pod b) aminokiselina na pozicijama 147 i aminokiselina na poziciji 213 nezavisno supstituisana glutaminskom kiselinom (E) ili asparaginskom kiselinom (D) (numerisanje prema Kabatu).

[0114] U jednom otelotvorenju, pored zamene amino kiseline na poziciji 124 u konstantnom domenu CL prvog ili drugog lakog lanca, amino kiselina na poziciji 123 je nezavisno supstituisana lizinom (K), argininom (R) ili histidinom (H).

[0115] U jednom otelotvorenju u konstantnom domenu CL amino kiselina na poziciji 124 je supstituisana lizinom (K), u konstantnom domenu CH1 amino kiselina na poziciji 147 i amino kiselina na poziciji 213 su supstituisane glutaminskom kiselinom (E). U jednom otelotvorenju je, pored toga, u konstantnom domenu CL, amino kiselina na poziciji 123 supstituisana argininom (R).

[0116] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo se sastoji od dva BCMA-Fab i Fc dela, pri čemu su jedan BCMA-Fab i CD3 Fab povezani preko svojih C-terminusa za zglobni region navedenog Fc dela, a drugi BCMA-Fab je povezan sa svojim C-terminusom na N-terminus CD3-Faba. CD3-Fab sadrži ukrštanje, dok ili CD3-Fab ili oba BCMA-Faba sadrže supstituciju aminokiselina (Slike 2A i 2B).

[0117] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo se karakteriše time što se CH3 domen jednog teškog lanca i CH3 domen drugog teškog lanca sastaju na interfejsu koji se sastoji od originalnog interfejsa između CH3 domena antitela; pri čemu se navedeni interfejs menja kako bi se promovisalo formiranje bispecifičnog antitela, pri čemu se promena karakteriše na sledeći način:

a) CH3 domen jednog teškog lanca je izmenjen, tako da unutar originalnog interfejsa CH3 domen jednog teškog lanca koji zadovoljava originalni interfejs CH3 domena drugog teškog lanca unutar bispecifičnog antitela, aminokiselinski ostatak se zamenjuje sa aminokiselinskim ostatkom koji ima veću zapreminu bočnog lanca, čime se generiše ispupčenje unutar interfejsa CH3 domena jednog teškog lanca koji je pozicioniran u šupljini unutar interfejsa CH3 domena drugog teškog lanca i b) CH3 domen drugog teškog lanca je izmenjen, tako da se unutar originalnog interfejsa drugog CH3 domena koji zadovoljava originalni interfejs prvog CH3 domena unutar bispecifičnog antitela aminokiselinski ostatak zamenjuje aminokiselinskim ostatkom koji ima manju zapreminu bočnog lanca, čime se stvara udubljenje unutar interfejsa drugog CH3 domena unutar koje se može pozicionirati ispupčenje unutar interfejsa prvog CH3 domena.

[0118] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo se karakteriše time što se navedeni aminokiselinski ostatak koji ima veću zapreminu bočnog lanca bira iz grupe koja se sastoji od arginina (R), fenilalanina (F), tirozina (Y), triptofana (W).

[0119] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo se karakteriše time što se navedeni aminokiselinski ostatak koji ima manju zapreminu bočnog lanca bira iz grupe koja se sastoji od alanina (A), serina (S), treonina (T), valina (V).

[0120] U jednom otelotvorenju takvo bispecifično antitelo se karakteriše time što se oba CH3 domena dodatno menjaju uvođenjem cisteina (C) kao aminokiseline u odgovarajuće položaje svakog CH3 domena.

[0121] U jednom otelotvorenju takvo bispecifično antitelo se karakteriše time što je jedan od konstantnih domena teškog lanca CH3 oba teška lanca zamenjen konstantnim domenom teškog lanca CH1; a drugi konstantni domen teškog lanca CH3 je zamenjen konstantnim domenom lakog lanca CL.

[0122] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo sadrži modifikovani deo Fc koji indukuje ćelijsku smrt 20% ili više ćelija preparata ćelija koje eksprimiraju BCMA posle 24 sata pri koncentraciji pomenutog antitela od 100 nM pomoću ADCC-a u odnosu na kontrolu, pod identičnim uslovima koristeći isto antitelo sa roditeljskim Fc delom kao kontrolu. Takvo antitelo je u jednom otelotvorenju golo antitelo.

[0123] U jednom otelotvorenju bispecifično antitelo je antitelo sa količinom fukoze od 60% ili manje od ukupne količine oligosaharida (šećera) na Asn297 (vidi npr. US20120315268)

[0124] U jednom otelotvorenju Fc deo sadrži supstitucije aminokiselina koje se uvode u humani Fc deo i otkrivaju pod SEQ ID NO:55 i 56.

[0125] Anti-BCMA antitelo može biti Mab21, Mab22, Mab42, Mab27, Mab33 i Mab39 (za antitela Mab 21, 22, 42, 27, 33, 39 videti Tabele 1A i B kasnije u tekstu) kako je ovde opisano njihovim CDR sekvencama i/ili VH/VL sekvencama zajedno sa opisanim CL i CH1 sekvencama. U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo sadrži Fc deo ili ne, posebno format 2+1, a teški i laki lanci bispecifičnog antitela su posebno opisani u Tabeli 1A.

[0126] Anti-BCMA antitelo iscrpljuje, u bispecifičnom formatu, posebno u formatu 2+1, humane maligne plazma ćelije u aspiratima MM koštane srži do najmanje 80% nakon 48-satnog tretmana u koncentraciji između 10 nM i 1 fM. Anti-BCMA antitela su okarakterisana panovanjem fag-displej biblioteke varijabilnog teškog lanca (VH) i varijabilnog lakog lanca (VL) antitela 83A10 (VH biblioteka, VL biblioteka) sa 1 - 50 nM cino BCMA u 1-3 runde i odabirom varijabilnog lakog lanca i varijabilnog teškog lanca koji imaju svojstva kao vezivo takvih bispecifičnih T ćelija. Poželjno je da se panovanje vrši u 3 runde, koristeći 50 nM cynoBCMA za rundu 1, 25 nM cyBCMA za rundu 2 i 10 nM cyBCMA za rundu 3. Poželjno je da su biblioteke randomizovane ili u lakom lancu CDR1 i CDR2 ili u teškom lancu CDR1 i CDR2. Poželjno je da se identifikuju laki i teški lanac koji se svaki vezuje kao Fab fragment, koji pored toga sadrži odgovarajući VH ili VL antitela 83A10, na huBCMA sa Kd od 50 pM

4

do 5 nM i na cyno BCMA sa Kd od 0,1 nM do 20 nM. Poželjno je da bispecifični format bude format Slike 2A, koji se sastoji od odgovarajućih konstantnih domena VL i VH CD3 Fab zamene međusobno i unutar obe BCMA Fabs razmene aminokiselina K213E i K147E u CH1 domenu i razmene aminokiselina E123R i Q124K u CL domenu.

[0127] Bispecifično antitelo, kao što je ovde navedeno, može se pripremiti koracima transformacije ćelije domaćina sa vektorima koji se sastoje od molekula nukleinske kiseline koji kodiraju laki lanac i teški lanac navedenog molekula antitela, kultivisanjem ćelije domaćina pod uslovima koji omogućavaju sintezu navedenog molekula antitela; i izdvajanje navedenog molekula antitela iz navedene kulture.

[0128] Bispecifično antitelo, kao što je ovde navedeno, može se pripremiti koracima transformacije ćelije domaćina sa vektorima koji se sastoje od molekula nukleinske kiseline koji kodiraju laki lanac i teški lanac antitela koji se specifično vezuju za prve ciljne vektore koji se sastoje od molekula nukleinske kiseline koji kodiraju laki lanac i teški lanac antitela koji se specifično vezuju za drugi cilj, pri čemu se varijabilni domeni VL i VH ili konstantni domeni CL i CH1 međusobno zamenjuju; kultivisanjem ćelije domaćina pod uslovima koji omogućavaju sintezu navedenog molekula antitela; i izdvajanje navedenog molekula antitela iz navedene kulture.

[0129] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo se specifično vezuje za vanćelijski domen humanog BCMA i humanog CD3ε, okarakterisano time što sadrži skup teških i lakih lanaca izabran iz grupe koja se sastoji od polipeptida

i) SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50 i SEQ ID NO:51(2x) (skup 1 TCB of antitela 21),

ii) SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:52, SEQ ID NO:53 i SEQ ID NO:54 (2x) (skup 2 TCB antitela 22), i

iii) SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:56 i SEQ ID NO:57(2x) (skup 3 TCB antitela 42).

[0130] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo se specifično vezuje za vanćelijski domen humanog BCMA i humani CD3ε, okarakterisano time što sadrži skup teških i lakih lanaca izabran iz grupe koja se sastoji od polipeptida SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:49, SEQ ID NO:50 i SEQ ID NO:51(2x) (skup 1 TCB antitela 21).

[0131] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo se specifično vezuje za vanćelijski domen humanog BCMA i humani CD3ε, okarakterisano time što sadrži skup teških i lakih lanaca izabran iz grupe koja se sastoji od polipeptida SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:52, SEQ ID NO:53 i SEQ ID NO:54 (2x) (skup 2 TCB antitela 22).

[0132] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo se specifično vezuje za vanćelijski domen humanog BCMA i humani CD3ε, okarakterisano time što sadrži skup teških i lakih lanaca izabran iz grupe koja se sastoji od polipeptida SEQ ID NO:48, SEQ ID NO:55, SEQ ID NO:56 i SEQ ID NO:57(2x) (skup 3 TCB antitela 42).

Tabela 1A: Sekvence antitela

4

SEQ ID Ime(na) Sekvence aminokiselina

4

4 SEQ ID Ime(na) Sekvence aminokiselina

SEQ ID Ime(na) Sekvence aminokiselina

1

SEQ ID Ime(na) Sekvence aminokiselina

2

SEQ ID Ime(na) Sekvence aminokiselina

4

SEQ ID Ime(na) Sekvence aminokiselina

Tabela 2B: Dodatni konstrukti

[0133] Da bi se napravili sledeći (2+1) anti-BCMA/anti-CD3 TCB-ovi koji sadrže Fc, korišćeni su odgovarajući konstrukti/ID-jevi sekvence kao što je navedeno u Tabeli 2B iznad:

83A10-TCBcv: 45, 46, 47 (x2), 48 (Slika 2A)

21-TCBcv: 48, 49, 50, 51 (x2) (Slika 2A)

22-TCBcv: 48, 52, 53, 54 (x2) (Slika 2A)

42-TCBcv: 48, 55, 56, 57 (x2) (Slika 2A)

F. Metode lečenja i prevencije i jedinjenja za primenu u takvim metodama

[0134] Jedinjenja 1, 2 i 3 i njihovi enantiomeri, smeše enantiomera, tautomeri, izotopolozi ili farmaceutski prihvatljive soli predviđene ovde, u kombinaciji sa bispecifičnim antitelima koja se specifično vezuju za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) koji su ovde predstavljeni, mogu se koristiti u svim metodama lečenja koje su ovde predviđene.

[0135] Metoda lečenja multiplog mijeloma podrazumeva primenu kod pacijenta, Jedinjenja 1 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa, ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) koji su ovde prikazani, pri čemu bispecifično antitelo sadrži prvi vezni deo koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugi vezni deo koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisani time što navedeni prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0136] Ovde je predstavljeno jedinjenje za primenu u metodi lečenja multiplog mijeloma, pri čemu je jedinjenje – Jedinjenje 1 ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog, ili farmaceutski prihvatljiva so, a metoda se sastoji od primene, kod pacijenta, Jedinjenja 1 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) koji su ovde prikazani, pri čemu bispecifično antitelo sadrži prvi vezni deo koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugi vezni deo koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisani time što navedeni prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0137] Dalje, metoda lečenja multiplog mijeloma obuhvata primenu, kod pacijenta, Jedinjenja 2 ili tautomera, izotopologa, ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) koji su ovde prikazani, pri čemu bispecifično antitelo sadrži prvi vezni deo koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugi vezni deo koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisan time što navedeni prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0138] Ovde je predstavljeno jedinjenje za primenu u metodi lečenja multiplog mijeloma, pri čemu je jedinjenje – Jedinjenje 2 ili tautomer, izotopolog, ili farmaceutski prihvatljiva so, a metoda se sastoji od primene, kod pacijenta, Jedinjenja 2 ili tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) koji su ovde prikazani, pri čemu bispecifično antitelo sadrži prvi vezni deo koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugi vezni deo koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisani time što navedeni prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0139] Dalje, metoda lečenja multiplog mijeloma obuhvata primenu, kod pacijenta, Jedinjenja 3 ili tautomera, izotopologa, ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) koji su ovde prikazani, pri čemu bispecifično antitelo sadrži prvi vezni deo koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugi vezni deo koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisan time što navedeni prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0140] Ovde je predstavljeno jedinjenje za primenu u metodi lečenja multiplog mijeloma, pri čemu je jedinjenje – Jedinjenje 3 ili tautomer, izotopolog, ili farmaceutski prihvatljiva so, a metoda se sastoji od primene, kod pacijenta, Jedinjenja 3 ili tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) koji su ovde prikazani, pri čemu bispecifično antitelo sadrži prvi vezni deo koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugi vezni deo koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisani time što navedeni prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0141] Dalje, metoda prevencije multiplog mijeloma, koja podrazumeva primenu, kod pacijenta, ovde datog jedinjenja, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje sadrži prvi vezni deo koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugi vezni deo koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), a koje je dato ovde, okarakterisano time što navedeni prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0142] Ovde je predstavljeno jedinjenje za primenu u metodi prevencije multiplog mijeloma, pri čemu je jedinjenje – jedinjenje koje je dato ovde, odnosno Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3, ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog, ili farmaceutski prihvatljiva so, a metoda se sastoji od primene, kod pacijenta, ovde datog jedinjenja, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje sadrži prvi vezni

1

deo koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugi vezni deo koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), a koje je dato ovde, okarakterisano time što navedeni prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0143] Metoda upravljanja multiplim mijelomom podrazumeva primenu, kod pacijenta, ovde datog jedinjenja, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje sadrži prvi vezni deo koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugi vezni deo koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), a koje je dato ovde, okarakterisano time što navedeni prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0144] Ovde je predstavljeno jedinjenje za primenu u metodi upravljanja multiplim mijelomom, pri čemu je jedinjenje – jedinjenje koje je dato ovde, odnosno Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog, ili farmaceutski prihvatljiva so, a metoda se sastoji od primene, kod pacijenta, ovde datog jedinjenja, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje sadrži prvi vezni deo koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugi vezni deo koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), a koje je dato ovde, okarakterisano time što navedeni prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa

2

SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0145] Metode za indukciju terapijskog odgovora procenjenog na osnovu Međunarodnih jedinstvenih kriterijuma remisije za multipli mijelom (IURC) (videti Durie BGM, Harousseau J-L, Miguel JS, et al. International uniform response criteria for multiple myeloma. Leukemia, 2006; (10) 10: 1-7) kod pacijenta, podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja koje je ovde opisano, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0146] Metode za indukciju terapijskog odgovora procenjenog pomoću kriterijuma konsenzusa o terapijskom odgovoru Međunarodne radne grupe za mijelom (IMWG) i procene minimalne rezidualne bolesti (Rajkumar et al., Blood, 2011, 117(18):4691-5; Kumar et al., Lancet Oncol., 2016,17(8):e328-e346) kod pacijenta, podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja koje je ovde opisano, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, opciono, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0147] Ovde je dato jedinjenje za primenu u metodama za indukciju terapijskog odgovora procenjenog na osnovu Međunarodnih jedinstvenih kriterijuma odgovora za multipli mijelom (IURC) (videti Durie BGM, Harousseau J-L, Miguel JS, et al. International uniform response criteria for multiple myeloma. Leukemia, 2006; (10) 10: 1-7) kod pacijenta, pri čemu je jedinjenje ovde dato jedinjenje, odnosno Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3, ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu metode podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja koje je ovde opisano, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0148] Ovde je predviđeno jedinjenje za primenu u metodama za indukciju terapijskog odgovora procenjenih pomoću kriterijuma konsenzusa o terapijskom odgovoru Međunarodne radne grupe za mijelom (IMWG) i procene minimalne rezidualne bolesti (Rajkumar et al., Blood, 2011, 117(18):4691-5; Kumar et al., Lancet Oncol., 2016,17(8):e328-e346) kod pacijenta, pri čemu je jedinjenje ovde dato jedinjenje, odnosno Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili

4

Jedinjenje 3, ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu metode podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja koje je ovde opisano, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO:17 i region VL koji sadrži region CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinaciju regiona CDR1L i CDR2L izabranu iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0149] Metode za postizanje čvrste kompletne remisije, kompletne remisije ili vrlo dobrog parcijalnog odgovora, kako je utvrđeno Međunarodnim jedinstvenim kriterijumima odgovora za multipli mijelom (IURC), kod pacijenta, podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja opisanog ovde, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa, ili farmaceutski prihvatljivih soli, i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, opciono, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0150] Metode za postizanje trajne MRD-negativnosti, MRD-negativnosti pri protoku, MRD-negativnosti pri sekvenciranju, negativnih rezultata snimanja uz MRD-negativnost, čvrste kompletne remisije, kompletne remisije ili vrlo dobre parcijalne remisije, kao što je određeno kriterijumima konsenzusa o terapijskom odgovoru Međunarodne radne grupe za mijelom (IMWG) i procenom minimalne rezidualne bolesti kod pacijenta, podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja koje je ovde opisano, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, opciono, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0151] Ovde je dato jedinjenje za primenu u metodama za postizanje čvrste kompletne remisije, kompletne remisije ili vrlo dobre parcijalne remisije kod pacijenta, kao što je određeno prema Međunarodnim jedinstvenim kriterijumima odgovora za multipli mijelom (IURC), pri čemu je jedinjenje ovde dato jedinjenje, odnosno Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3, ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu metode podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja koje je ovde opisano, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0152] Ovde je dato jedinjenje koje se koristi u metodama za postizanje trajne MRD-negativnosti, MRD-negativnosti pri protoku, MRD-negativnosti pri sekvenciranju, negativnih rezultata snimanja uz MRD-negativnost, čvrste kompletne remisije, kompletne remisije ili vrlo dobre parcijalne remisije, kao što je određeno kriterijumima konsenzusa o terapijskog odgovoru Međunarodne radne grupe za mijelom (IMWG) i procenom minimalne rezidualne bolesti kod pacijenta, pri čemu je jedinjenje ovde dato jedinjenje, odnosno Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3, ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu metode podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja koje je ovde opisano, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0153] Metode za postizanje produženja perioda sveukupnog preživljavanja, preživljavanja bez progresije bolesti, preživljavanja bez pogoršanja, vremena do progresije ili preživljavanja bez bolesti kod pacijenta podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja opisanog ovde, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljivih soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, opciono, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0154] U drugom aspektu, ovde je dato jedinjenje za primenu u metodama za postizanje produženja sveukupnog preživljavanja, preživljavanja bez progresije, preživljavanja bez pogoršanja, vremena do progresije ili preživljavanja bez bolesti kod pacijenta, pri čemu je jedinjenje ovde dato jedinjenje, odnosno Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3, ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu metode podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja koje je ovde opisano, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0155] Metode za postizanje produženja perioda sveukupnog preživljavanja kod pacijenta podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja opisanog ovde, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa, ili farmaceutski prihvatljivih soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, opciono, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0156] U drugom aspektu, ovde je dato jedinjenje za primenu u metodama za postizanje produženja vremena sveukupnog preživljavanja kod pacijenta, pri čemu je jedinjenje ovde dato jedinjenje, odnosno Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3, ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu metode podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja koje je ovde opisano, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0157] Metode za postizanje produženja perioda preživljavanja bez progresije kod pacijenta podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja opisanog ovde, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa, ili farmaceutski prihvatljivih soli, i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, opciono, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0158] U drugom aspektu, ovde je dato jedinjenje za primenu u metodama za postizanje produženja perioda preživljavanja bez progresije kod pacijenta, pri čemu je jedinjenje ovde dato jedinjenje, odnosno Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3, ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu metode podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja koje je ovde opisano, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0159] Metode za postizanje produženja perioda preživljavanja bez pogoršanja kod pacijenta podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja opisanog ovde, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa, ili farmaceutski prihvatljivih soli, i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, opciono, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0160] U drugom aspektu, ovde je dato jedinjenje za primenu u metodama za postizanje produženje perioda preživljavanja bez pogoršanja kod pacijenta, pri čemu je jedinjenje ovde dato jedinjenje, odnosno Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3, ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu metode podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja koje je ovde opisano, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

1

[0161] Metode za postizanje produženja vremena do progresije kod pacijenta podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja opisanog ovde, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa, ili farmaceutski prihvatljivih soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, opciono, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0162] U drugom aspektu, ovde je dato jedinjenje za primenu u metodama za postizanje produženja vremena do progresije kod pacijenta, pri čemu je jedinjenje ovde dato jedinjenje, odnosno Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3, ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu metode podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja koje je ovde opisano, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

2

[0163] Metode za postizanje produženja perioda preživljavanja bez bolesti kod pacijenta podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja opisanog ovde, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa, ili farmaceutski prihvatljivih soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, opciono, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0164] U drugom aspektu, ovde je dato jedinjenje za primenu u metodama za postizanje produženja perioda preživljavanja bez bolesti kod pacijenta, pri čemu je jedinjenje ovde dato jedinjenje, odnosno Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3, ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu metode podrazumevaju primenu efikasne količine jedinjenja koje je ovde opisano, odnosno Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu obolelom od multiplog mijeloma, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0165] U nekim otelotvorenjima, pacijenti su prethodno lečeni od multiplog mijeloma, ali nisu reagovali na standardne terapije, ili nisu prethodno lečeni. U nekim otelotvorenjima, pacijenti su podvrgnuti operaciji u pokušaju lečenja multiplog mijeloma, ili nisu. U nekim otelotvorenjima, pacijenti su prethodno bili podvrgnuti transplantacijskoj terapiji, ili nisu. Ovde je takođe predviđeno jedinjenje za primenu u metodama lečenja pacijenata koji su prethodno lečeni od multiplog mijeloma, ali nisu odreagovali na standardne terapije, kao i pacijenata koji prethodno nisu lečeni. Dalje je obuhvaćeno jedinjenje za primenu u metodama lečenja pacijenata koji su se podvrgli operativnom zahvatu u pokušaju lečenja multiplog mijeloma, kao i onih koji nisu. Takođe je ovde predviđeno jedinjenje za primenu u metodama lečenja pacijenata koji su prethodno bili podvrgnuti transplantacionoj terapiji, kao i onih koji nisu.

[0166] Metode uključuju lečenje multiplog mijeloma koji je relapsirajući, refraktoran ili rezistentan. Metode uključuju prevenciju multiplog mijeloma koji je relapsirajući, refraktoran ili rezistentan. Metode uključuju upravljanje multiplim mijelomom koji je relapsirajući, refraktoran ili rezistentan. U nekim takvim otelotvorenjima, mijelom je primarni, sekundarni, tercijarni, četvorostruko ili petostruko relapsirajućii multipli mijelom. Metode uključuju lečenje multiplog mijeloma koji je novodijagnostikovan multipli mijelom (uključujući novodijagnostikovani multipli mijelom niskog, srednjeg i visokog rizika). Metode uključuju prevenciju multiplog mijeloma koji je novodijagnostikovan multipli mijelom (uključujući novodijagnostikovani multipli mijelom niskog, srednjeg i visokog rizika). Metode uključuju upravljanje multiplim mijelomom koji je novodijagnostikovan multipli mijelom (uključujući novodijagnostikovani multipli mijelom niskog, srednjeg i visokog rizika). U jednom otelotvorenju, metode redukuju, održavaju ili eliminišu minimalnu rezidualnu bolest (MRD). U jednom otelotvorenju, metode obuhvataju lečenje, prevenciju ili upravljanje različitim tipovima multiplog mijeloma, kao što su monoklonska gamopatija neodređenog značaja (MGUS), multipli mijelom niskog, srednjeg i visokog rizika, multipli mijelom koji je pogodan i multipli mijelom koji je nepogodan za transplantaciju, tinjajući (indolentni) multipli mijelom (uključujući tinjajući multipli mijelom niskog, srednjeg i visokog rizika), aktivni multipli mijelom, usamljeni plazmacitom, ekstramedularni plazmacitom, leukemiju plazma ćelija, multipli mijelom centralnog nervnog sistema, mijelom lakog lanca, nesekretorni mijelom, imunoglobulin D mijelom i imunoglobulin E mijelom, primenom

4

terapijski efikasne količine ovde opisanog jedinjenja. U jednom otelotvorenju, multipli mijelom je leukemija plazma ćelija. U drugom otelotvorenju, metode obuhvataju lečenje, prevenciju ili upravljanje multiplim mijelomom koji se karakteriše genetskim abnormalnostima, kao što su Ciklin D translokacije (na primer, t(11;14)(q13;q32); t(6;14)(p21;32); t(12;14)(p13;q32); ili t(6;20);); MMSET translokacije (na primer, t(4;14)(p16;q32)); MAF translokacije (na primer, t(14;16)(q32;q32); t(20;22); t(16;

22)(q11;q13); ili t(14;20)(q32;q11)); ili drugi hromozomski faktori (na primer, delecija 17p13, ili hromozoma 13; del(17/17p), non-hiperdiploidiju i višak(1q)), primenom terapijski efikasne količine ovde opisanog jedinjenja. U jednom aspektu, metode podrazumevaju primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa, ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) koje je ovde predviđeno, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO:17 i region VL koji sadrži region CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinaciju regiona CDR1L i CDR2L izabranu iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0167] U drugom aspektu, metode podrazumevaju primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 2 ili tautomera, izotopologa, ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) koji su ovde prikazani, pri čemu bispecifično antitelo sadrži prvi vezni deo koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugi vezni deo koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisan time što navedeni prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO:17 i regiona VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe koju čine

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0168] U drugom aspektu, metode podrazumevaju primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 3 ili tautomera, izotopologa, ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) koji su ovde prikazani, pri čemu bispecifično antitelo sadrži prvi vezni deo koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugi vezni deo koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisan time što navedeni prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO:17 i regiona VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe koju čine

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0169] U jednom otelotvorenju, multipli mijelom visokog rizika je multipli mijelom sa relapsom u roku od 12 meseci od prvog tretmana. U još jednom otelotvorenju, multipli mijelom visokog rizika je multipli mijelom koji karakterišu genetske abnormalnosti, na primer, jedna ili više del(17/17p i t(14;16)(q32;q32).

[0170] U nekim takvim otelotvorenjima, multipli mijelom je novodijagnostikovani multipli mijelom pogodan za transplantaciju. U drugom otelotvorenju, multipli mijelom je transplantacijski neprihvatljiv novodijagnostikovani multipli mijelom. U drugim otelotvorenjima, multipli mijelom se karakteriše ranom progresijom (na primer manje od 12 meseci) nakon inicijalnog lečenja. U drugim otelotvorenjima, multipli mijelom se karakteriše ranom progresijom (na primer, manje od 12 meseci) nakon autologne transplantacije matičnih ćelija. U drugom otelotvorenju, multipli mijelom je refraktoran ili rezistentan na lenalidomid. U drugom otelotvorenju, multipli mijelom je refraktoran na lenalidomid. U drugom otelotvorenju, multipli mijelom je rezistentan na lenalidomid. U drugom otelotvorenju, multipli mijelom je refraktoran ili rezistentan na pomalidomid. U drugom otelotvorenju, multipli mijelom je refraktoran na pomalidomid. U drugom otelotvorenju, multipli mijelom je rezistentan na pomalidomid. U nekim takvim otelotvorenjima, predviđa se da će multipli mijelom biti refraktoran na pomalidomid (na primer, molekularnom karakterizacijom). U drugom otelotvorenju, multipli mijelom je relapsirajući ili refraktoran na 3 ili više tretmana i bio je izložen inhibitoru proteazoma (na primer, bortezomib, karfilzomib, iksazomib, oprozomib ili marizomib) i imunomodulatornom jedinjenju (na primer talidomid, lenalidomid, pomalidomid, CC122 ili CC220), ili je dvostruko refraktoran na inhibitor proteazoma i imunomodulatorno jedinjenje. U još nekim otelotvorenjima, multipli mijelom je relapsirajući ili refraktoran na 3 ili više prethodnih terapija, uključujući na primer, CD38 monoklonsko antitelo (CD38 mAb, na primer, daratumumab ili izatuksimab), inhibitor proteazoma (na primer, bortezomib, karfilzomib, iksazomib ili marizomib) i imunomodulatorno jedinjenje (na primer talidomid, lenalidomid, pomalidomid, CC122 ili CC220) ili je dvostruko refraktoran na inhibitor proteazoma ili imunomodulatorno jedinjenje i CD38 mAb. U još nekim otelotvorenjima, multipli mijelom je trostruko refraktoran, na primer, multipli mijelom je refraktoran na inhibitor proteazoma (na primer, bortezomib, karfilzomib, iksazomib, oprozomib ili marizomib), imunomodulatorno jedinjenje (na primer talidomid, lenalidomid, pomalidomid, CC122 ili CC220) i još jedno aktivno sredstvo, kao što je ovde opisano.

[0171] Metode lečenja, prevencije i/ili upravljanja multiplim mijelomom, uključujući relapsirajući/refraktorni multipli mijelom kod pacijenata sa oslabljenom funkcijom bubrega ili njegovih simptoma, podrazumevaju primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili njihovih enantiomera, smeša enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljivih soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu sa relapsirajućim/refraktornim multiplim mijelomom sa oslabljenom funkcijom bubrega, opciono, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0172] U određenim aspektima, ovde je dato jedinjenje za primenu u metodama lečenja, prevencije i/ili upravljanja multiplim mijelomom, uključujući relapsirajući/refraktorni multipli mijelom kod pacijenata sa oslabljenom funkcijom bubrega ili njegove simptome, pri čemu je jedinjenje ovde dato jedinjenje, odnosno Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu metode podrazumevaju primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili njihovih enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu sa relapsirajućim/refraktornim multiplim mijelomom sa oslabljenom funkcijom bubrega, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0173] Metode lečenja, prevencije i/ili upravljanja multiplim mijelomom, uključujući relapsirajući ili refraktorni multipli mijelom kod pacijenata oslabljenog stanja ili njegovih simptoma, podrazumevaju davanje terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili njihovih enantiomera, smeša enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljivih soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu oslabljenog stanja obolelom od multiplog mijeloma, opciono, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0174] U određenim aspektima, ovde je dato jedinjenje za primenu u metodama lečenja, prevencije i/ili upravljanja multiplim mijelomom, uključujući relapsirajući ili refraktorni multipli mijelom kod slabih pacijenata ili njegove simptome, pri čemu je jedinjenje ovde dato jedinjenje, odnosno Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu metode obuhvataju primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili njihovih enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), ovde datih pacijentu oslabljenog stanja obolelom od multiplog mijeloma, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisano time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.

[0175] U nekim takvim otelotvorenjima, pacijenta oslabljenog stanja karakteriše nepodobnost za indukcionu terapiju ili netolerancija na lečenje deksametazonom. U nekim takvim otelotvorenjima, pacijent oslabljenog stanja je stariji, na primer, stariji od 65 godina.

[0176] U određenim otelotvorenjima, pacijent koji se leči nije lečen terapijom za multipli mijelom pre primene Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, navedenih ovde, ili njihovih enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljivih soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), takođe predviđen ovde. U određenim otelotvorenjima, pacijent koji se leči je primio terapiju protiv multiplog mijeloma pre primene Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, navedenih ovde, ili njihovih enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljivih soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), takođe predviđen ovde.

[0177] U određenim otelotvorenjima, pacijent koji se leči razvio je rezistentnost na lekove koji se daju u terapiji multiplog mijeloma. U nekim takvim otelotvorenjima, pacijent je razvio rezistentnost na jednu, dve, tri, četiri, pet ili više vrsta terapija protiv multiplog mijeloma. U jednom otelotvorenju, terapije se biraju između CD38 monoklonskog antitela (CD38 mAb, na primer, daratumumab ili izatuksimab), inhibitora proteazoma (na primer, bortezomib, karfilzomib, iksazomib ili marizomib) i imunomodulatornog jedinjenja (na primer talidomid, lenalidomid, pomalidomid, CC122 ili CC220). U jednom otelotvorenju, terapije obuhvataju jedno ili više CD38 monoklonalnih antitela (CD38 mAb, na primer, daratumumab ili izatuksimab), inhibitor proteazoma (na primer, bortezomib, karfilzomib, iksazomib ili marizomib) i imunomodulatorno jedinjenje (na primer talidomid, lenalidomid, pomalidomid, CC122 ili CC220). U jednom otelotvorenju, terapije obuhvataju jedno ili više alkilirajućih sredstava (npr. melfalan, ciklofosfamid, bendamustin), inhibitore histonske deacetilaze (npr. panobinostat), druga monoklonska antitela (npr. anti-SLAMF7 antitela, npr. elotuzumab), glukokortikoide (npr. deksametazon, prednizon), druge terapije protiv multiplog mijeloma (npr. cisplatin, eotoposid, doksorubicin) i ćelijske terapije (npr. CAR-T).

[0178] Metode obuhvataju lečenje pacijenta bez obzira na starost. U nekim otelotvorenjima, pacijent ima 18 godina ili više. U drugim otelotvorenjima, pacijent je stariji od 18, 25, 35, 40, 45, 50, 55, 60, 65 ili 70 godina. U drugim otelotvorenjima, pacijent je mlađi od 65 godina. U drugim otelotvorenjima, pacijent je stariji od 65 godina. U jednom otelotvorenju, pacijent je starija osoba obolela od multiplog mijeloma, na primer, pacijent stariji od 65 godina. U jednom otelotvorenju, pacijent je starija osoba obolela od multiplog mijeloma, na primer, pacijent stariji od 75 godina.

G. Doziranje Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3

[0179] U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,01 do oko 25 mg dnevno, od oko 0,01 do oko 10 mg dnevno, od oko 0,01 do oko 5 mg dnevno, od oko 0,01 do oko 2 mg na dan, od oko 0,01 do oko 1 mg dnevno, od oko 0,01 do oko 0,5 mg dnevno, od oko 0,01 do oko 0,25 mg dnevno, od oko 0,1 do oko 25 mg dnevno, od oko 0,1 do oko 10 mg dnevno, od oko 0,1 do oko 5 mg dnevno, od oko 0,1 do oko 2 mg dnevno, od oko 0,1 do oko 1 mg dnevno, od oko 0,1 do oko 0,5 mg dnevno, od oko 0,1 do oko 0,25 mg dnevno, od oko 0,5 do oko 25 mg dnevno, od oko 0,5 do oko 10 mg dnevno, od oko 0,5 do oko 5 mg dnevno, od oko 0,5 do oko 2 mg dnevno, od oko 0,5 do oko 1 mg dnevno, od oko 1 do oko 25 mg dnevno, od oko 1 do oko 10 mg dnevno, od oko 1 do oko 5 mg dnevno, od oko 1 do oko 2,5 mg dnevno, ili od oko 1 do oko 2 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,01 do oko 25 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,01 do oko 10 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,01 do oko 5 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,01 do oko 2 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,01 do oko 1 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,01 do oko 0,5 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,01 do oko 0,25 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,1 do oko 25 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,1 do oko 10 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,1 do oko 5 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,1 do oko 2 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,1 do oko 1 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,1 do oko 0,5 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,1 do oko 0,25 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,5 do oko 25 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,5 do oko 10 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,5 do oko 5 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,5 do oko 2 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 0,5 do oko 1 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 1 do oko 25 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 1 do oko 10 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 1 do oko 5 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 1 do oko 2,5 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina jedinjenja je od oko 1 do oko 2 mg

1

dnevno. U jednom otelotvorenju, terapijski ili profilaktički efikasna količina Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 je od oko 0,1 mg dnevno do oko 0,4 mg dnevno.

[0180] U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 0,1, oko 0,2, oko 0,3, oko 0,4, oko 0,5, oko 0,6, oko 0,7, oko 0,8, oko 0,9, oko 1, oko 2, oko 3, oko 4, oko 5, oko 6, oko 7, oko 8, oko 9, oko 10, oko 15, oko 20 ili oko 25 mg dnevno. U nekim takvim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 0,1, oko 0,2, oko 0,3, oko 0,4, oko 0,5, oko 0,6 ili oko 0,7 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 0,1 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 0,2 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 0,3 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 0,4 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 0,5 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 0,6 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 0,7 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 0,8 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 0,9 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 1 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 2 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 3 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 4 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 5 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 6 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 7 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 8 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 9 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 10 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 15 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 20 mg dnevno. U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je oko 25 mg dnevno.

2

[0181] U jednom otelotvorenju, preporučeni raspon dnevnih doza Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, ili enantiomera, smeša enantiomera, tautomera, izotopologa ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli, za uslove opisane ovde, leži u rasponu od oko 0,1 mg do oko 25 mg dnevno, u jednom otelotvorenju primenjeno u vidu pojedinačne doze jednom dnevno, ili u podeljenim dozama tokom dana. U drugim otelotvorenjima, raspon doziranja je od oko 0,1 do oko 10 mg dnevno. Posebne dnevne doze uključuju 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 1; 2; 3; 4; 5; 6; 7; 8; 9; 10; 11; 12; 13; 14; 15; 16; 17; 18; 19; 20; 21; 22; 23; 24 ili 25 mg dnevno.

Konkretnije izdeljene dnevne doze uključuju 0,1, 0,2, 0,3, 0,4 ili 0,5 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 0,1 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 0,2 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 0,3 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 0,4 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 0,5 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 1 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 2 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 3 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 4 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 5 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 6 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 7 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 8 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 9 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 10 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 11 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 12 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 13 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 14 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 15 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 16 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 17 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 18 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 19 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 20 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 21 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 22 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 23 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 24 mg dnevno. U jednom otelotvorenju, specifična dnevna doza je 25 mg dnevno.

[0182] U konkretnom otelotvorenju, preporučena početna doza može biti 0,1; 0,2; 0,3; 0,4; 0,5; 1; 2; 3; 4; 5; 10; 15; 20 ili 25 mg dnevno. U drugom otelotvorenju, preporučena početna doza može biti 0,1; 0,2; 0,3; 0,4 ili 0,5 mg dnevno. Doza se može povećati na 1, 2, 3, 4 ili 5 mg dnevno.

[0183] U određenim otelotvorenjima, terapijski ili profilaktički efikasna količina je od oko 0,001 do oko 5 mg/kg/dan, od oko 0,001 do oko 4 mg/kg/dan, od oko 0,001 do oko 3 mg/kg/dan, od oko 0,001 do oko 2 mg/kg/dan, od oko 0,001 do oko 1 mg/kg/dan, od oko 0,001 do oko 0,05 mg/kg/dan, od oko 0,001 do oko 0,04 mg/kg/dan, od oko 0,001 do oko 0,03 mg/kg/dan, od oko 0,001 do oko 0,02 mg/kg/dan, od oko 0,001 do oko 0,01 mg/kg/dan, ili od oko 0,001 do oko 0,005 mg/kg/dan.

[0184] Primenjena doza se takođe može izraziti u jedinicama koje nisu mg/kg/dan. Na primer, doze za parenteralnu primenu mogu se izraziti kao mg/m<2>/dan. Stručnjak u oblasti bi lako morao da zna da konvertuje doze iz jedinice mg/kg/dan u mg/m<2>/dan imajući u vidu bilo visinu ili težinu subjekta ili oba (videti, www.fda.gov/cder/cancer/animalframe.htm). Na primer, doza od 1 mg/kg/dan za čoveka teškog 65 kg je otprilike jednaka dozi od 38 mg/m2/dan.

[0185] U zavisnosti od stanja bolesti koja se leči i stanja subjekta, Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3, ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, mogu se primeniti oralno, parenteralno (odnosno intramuskularno, intraperitonealno, intravenozno, putem CIV, intracistemalnom injekcijom ili infuzijom, supkutanom injekcijom ili implantom), inhalacijom, nazalno, vaginalno, rektalno, sublingvalno ili topikalno (npr. transdermalno ili lokalno). Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3, ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog, ili njihove farmaceutski prihvatljive soli, mogu biti formulisani, pojedinačno ili zajedno, u odgovarajućoj jedinici doziranja sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijensima, nosačima, adjuvansima i vehikulumima, na odgovarajući način za sve vrste primene.

[0186] U jednom otelotvorenju, Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, primenjuju se oralnim putem. U drugom otelotvorenju, Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, primenjuju se parenteralnim putem. U još jednom otelotvorenju, Jedinjenje 1,

4

Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, primenjuju se intravenskim putem.

[0187] Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3, dati ovde, ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili njegova farmaceutski prihvatljiva so, mogu se dati u vidu pojedinačne doze u vidu, npr. jedna injekcija sa bolusom ili tableta ili kapsula za oralnu primenu; ili tokom određenog perioda vremena u vidu, npr. kontinuirane infuzije tokom vremenskog perioda ili podeljenog bolusa. Jedinjenja koja su ovde opisana mogu se davati više puta ako je potrebno, na primer, sve dok pacijent ne postigne stanje stabilne bolesti ili regresije, ili dok pacijent ne postigne progresiju bolesti ili neprihvatljive nivoe toksičnosti. Stabilna bolest ili njen izostanak se određuju metodama koje su poznate u struci, kao što su procena simptoma pacijenata, fizički pregled, laboratorijske procene, vizuelizacija tumora koji je snimljen rendgenskim snimkom, CAT, PET ili MRI snimanjem i drugim opšteprihvaćenim modalitetima evaluacije.

[0188] U jednom otelotvorenju, Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljive soli, daju se pre bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3). U jednom otelotvorenju, Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljive soli, daju se pre bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3). U jednom otelotvorenju, Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljive soli, daju se nakon bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3).

[0189] Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljive soli, mogu da se daju jednom dnevno (QD), ili podeljene u više dnevnih doza, na primer, dva puta dnevno (BID), tri puta dnevno (TID) i četiri puta dnevno (QID). Pored toga, primena može biti kontinuirana (npr. dnevno tokom uzastopnih dana ili svakodnevno), povremeno, npr. u ciklusima (npr. uključujući dane, nedelje ili mesece pauze u primeni leka). Na način na koji se koristi ovde, termin „dnevno“ označava da se terapijsko jedinjenje, kao što su Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, primenjuje jednom ili više puta dnevno, na primer, tokom određenog perioda vremena. Termin „kontinuirano“ označava da se terapijsko jedinjenje, kao što su Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog, ili njihova farmaceutski prihvatljiva so, primenjuje svakodnevno tokom kontinuiranog perioda od najmanje 7 dana do 52 nedelje. Termin „povremeno“ ili „intermitentno“, na način na koji se koristi ovde, označava prekid i počinjanje primene bilo u redovnim ili u neredovnim intervalima. Na primer, povremena primena Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili njihovih enantiomera, smeša enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljivih soli je primena tokom jednog do šest dana nedeljno, primena u ciklusima (npr. dnevna primena dve do osam uzastopnih nedelja, praćeno periodom odmora bez primene do jedne nedelje), ili primena naizmeničnim danima. Termin „cikliranje“, na način na koji se koristi ovde, označava da se terapijsko jedinjenje, kao što su Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, primenjuje svakodnevno ili u kontinuitetu ali sa periodom pauze. U nekim takvim otelotvorenjima, agens se primenjuje jednom dnevno tokom dva do šest dana, praćeno periodom paze bez primene agensa tokom pet do sedam dana.

[0190] U nekim otelotvorenjima, učestalost primene je u rasponu. U određenim otelotvorenjima, primena je jednom dnevno, dva puta dnevno, tri puta dnevno, četiri puta dnevno, jednom svakog drugog dana, dva puta nedeljno, jednom svake nedelje, jednom svake dve nedelje, jednom svake tri nedelje ili jednom svake četiri nedelje. U jednom otelotvorenju, Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, primenjuju se jednom dnevno. U drugom otelotvorenju, Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, primenjuju se dva puta dnevno. U još jednom otelotvorenju, Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, primenjuju se tri puta dnevno. U još jednom otelotvorenju, Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, primenjuju se četiri puta dnevno.

[0191] U jednom otelotvorenju, terapijski efikasna količina Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 primenjuje se u ciklusu tretmana koji podrazumeva period primene do 20 dana nakon čega sledi period pauze. U jednom otelotvorenju, terapijski efikasna količina Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 primenjuje se u ciklusu tretmana koji podrazumeva period primene do 15 dana nakon čega sledi period pauze. U jednom otelotvorenju, terapijski efikasna količina Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 primenjuje se u ciklusu tretmana koji podrazumeva period primene do 10 dana nakon čega sledi period pauze. U jednom otelotvorenju, terapijski efikasna količina Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 primenjuje se u ciklusu tretmana koji podrazumeva period primene do 7 dana nakon čega sledi period pauze. U jednom otelotvorenju, terapijski efikasna količina Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 primenjuje se u ciklusu tretmana koji podrazumeva period primene do 5 dana nakon čega sledi period pauze. U jednom otelotvorenju, terapijski efikasna količina Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 primenjuje se u ciklusu tretmana koji podrazumeva period primene do 4 dana nakon čega sledi period pauze. U jednom otelotvorenju, terapijski efikasna količina Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 primenjuje se u ciklusu tretmana koji podrazumeva period primene do 3 dana nakon čega sledi period pauze.

[0192] U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 14 dana nakon čega sledi period pauze. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 10 dana nakon čega sledi period pauze. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 7 dana nakon čega sledi period pauze. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 5 dana nakon čega sledi period pauze. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 4 dana nakon čega sledi period pauze. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 3 dana nakon čega sledi period pauze.

[0193] U jednom otelotvorenju, period pauze traje oko 2 dana do oko 11 dana. U jednom otelotvorenju, period pauze traje oko 2 dana do oko 10 dana. U jednom otelotvorenju, period pauze traje oko 2 dana. U jednom otelotvorenju, period pauze traje oko 3 dana. U jednom otelotvorenju, period pauze traje oko 4 dana. U jednom otelotvorenju, period pauze traje oko 5 dana. U jednom otelotvorenju, period pauze traje oko 6 dana. U drugom otelotvorenju, period pauze traje oko 7 dana. U drugom otelotvorenju, period pauze traje oko 8 dana. U drugom otelotvorenju, period pauze traje oko 9 dana. U drugom otelotvorenju, period pauze traje oko 10 dana. U drugom otelotvorenju, period pauze traje oko 11 dana.

[0194] U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 15 dana nakon čega sledi period pauze od oko 2 dana do oko 10 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 10 dana nakon čega sledi period pauze od oko 2 dana do oko 10 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 7 dana nakon čega sledi period pauze od oko 2 dana do oko 10 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 5 dana nakon čega sledi period pauze od oko 2 dana do oko 10 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 3 dana nakon čega sledi period pauze od oko 10 dana do oko 15 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 3 dana nakon čega sledi period pauze od oko 3 dana do oko 15 dana.

[0195] U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 15 dana nakon čega sledi period pauze od 7 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 10 dana nakon čega sledi period pauze od 5 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 10 dana nakon čega sledi period pauze od 4 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 10 dana nakon čega sledi period pauze od 3 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 10 dana nakon čega sledi period pauze od 2 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 7 dana nakon čega sledi period pauze od 7 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 5 dana nakon čega sledi period pauze od 5 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 3 dana nakon čega sledi period pauze od 11 dana. U drugom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 5 dana nakon čega sledi period pauze od 9 dana. U drugom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 5 dana nakon čega sledi period pauze od 2 dana. U drugom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva period primene do 3 dana nakon čega sledi period pauze od 4 dana.

[0196] U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 5. dana ciklusa od 28 dana. U drugom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 10. dana ciklusa od 28 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 21. dana ciklusa od 28 dana. U drugom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 5.

dana ciklusa od 7 dana. U drugom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 7. dana ciklusa od 7 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 10. dana i od 15. do 24. dana ciklusa od 28 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 3. dana i od 15. do 18. dana ciklusa od 28 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 7. dana i od 15. do 21. dana ciklusa od 28 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 5. dana i od 15. do 19. dana ciklusa od 28 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 3. dana i od 15. do 17. dana ciklusa od 28 dana.

[0197] U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 14. dana ciklusa od 21 dana. U drugom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 4. dana i od 8. do 11. dana ciklusa od 21 dana. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 5. dana i od 8. do 12. dana ciklusa od 21 dana. U drugom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 5. dana i od 11. do 15. dana ciklusa od 21 dana. U drugom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 5. dana, od 8. do 12. dana i od 15. do 19. dana ciklusa od 21 dana. U drugom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 4. dana, od 8. do 11. dana i od 15. do 18. dana ciklusa od 21 dana. U drugom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 4. dana, od 8. do 10. dana i od 15. do 17. dana ciklusa od 21 dana. U drugom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 3. dana i od 8. do 11. dana ciklusa od 21 dana. U drugom otelotvorenju, ciklus tretmana podrazumeva primenu terapijski efikasne količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3, od 1. do 3. dana i od 11. do 13. dana ciklusa od 21 dana.

[0198] Bilo koji ciklus lečenja opisan ovde može se ponoviti u najmanje 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8 ili više ciklusa. U određenim slučajevima, ciklus tretmana opisan ovde uključuje od 1 do oko 24 ciklusa, od oko 2 do oko 16 ciklusa, ili od oko 2 do oko 4 ciklusa. U određenim slučajevima ciklus tretmana opisan ovde uključuje od 1 do oko 4 ciklusa. U određenim otelotvorenjima, ciklusi 1 do 4 su svi ciklusi od 28 dana. U nekim otelotvorenjima, terapijski efikasna količina Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 se primenjuje tokom 1 do 13 ciklusa od 28 dana (npr. oko 1 godine). U određenim slučajevima, ciklusna terapija nije ograničena na broj ciklusa i terapija se nastavlja do progresije bolesti. Ciklusi mogu u određenim slučajevima da uključuju variranje trajanja perioda primene i/ili perioda pauza koji su ovde opisani.

[0199] U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana uključuje primenu Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 u dozi od oko 0,1 mg/dan, 0,2 mg/dan, 0,3 mg/dan, 0,4 mg/dan, 0,5 mg/dan, 0,6 mg/ dan, 0,7 mg/dan, 0,8 mg/dan, 0,9 mg/dan, 1,0 mg/dan, 5,0 mg/dan ili 10 mg/dan, primenjeno jednom dnevno. U jednom otelotvorenju, ciklus tretmana uključuje primenu Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 u dozi od oko 0,1 mg/dan, 0,2 mg/dan, 0,3 mg/dan, 0,4 mg/dan, 0,5 mg/dan, 0,6 mg/ dnevno, 0,7 mg/dan ili 0,8 mg/dan, primenjeno jednom dnevno. U nekim takvim otelotvorenjima, ciklus tretmana uključuje primenu Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 jednom dnevno u dozi od oko 0,1 mg, 0,2 mg, 0,3 mg, 0,4 mg ili 0,5 mg od 1. do 10. dana ciklusa od 28 dana. U nekim takvim otelotvorenima, ciklus tretmana uključuje primenu Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 jednom dnevno u dozi od oko 0,1 mg, 0,2 mg, 0,3 mg, 0,4 mg ili 0,5 mg od 1. do 10. i od 15. do 24. dana ciklusa od 28 dana. U nekim takvim otelotvorenjima, ciklus tretmana uključuje primenu Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 jednom dnevno u dozi od oko 0,1 mg od 1. do 10. dana i od 15. do 24. dana ciklusa od 28 dana. U drugim otelotvorenjima, ciklus tretmana uključuje primenu Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 dva puta dnevno u dozi od oko 0,1 mg, 0,2 mg, 0,3 mg, 0,4 mg ili 0,5 mg od 1. do 3. dana ciklusa od 28 dana. U drugim otelotvorenjima, ciklus tretmana uključuje primenu Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 dva puta dnevno u dozi od oko

[0200] 0,1 mg, 0,2 mg, 0,3 mg, 0,4 mg ili 0,5 mg od 1. do 3. dana i od 15. do 19. dana ciklusa od 28 dana. U drugim otelotvorenjima, ciklus tretmana uključuje primenu Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 dva puta dnevno u dozi od oko 0,1 mg, 0,2 mg, 0,3 mg, 0,4 mg ili 0,5 mg od 1. do 3. dana i od 15. do 17. dana ciklusa od 28 dana. U drugim otelotvorenjima, ciklus tretmana uključuje primenu Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 dva puta dnevno u dozi od oko 0,2 mg od 1. do 3. dana i od 15. do 17. dana ciklusa od 28 dana. U jednom takvom otelotvorenju, jedinjenje se primenjuje od 1. do 3. dana (ujutru i uveče), 14. dana (samo uveče), 15. i 16. dana (ujutru i uveče) i 17. dana (samo ujutru) u ciklusu 1.

H. Doziranje bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za BCMA i CD3

[0201] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo se primenjuje jednom ili dva puta nedeljno, u jednom otelotvorenju putem supkutane primene (npr. u jednom otelotvorenju u rasponu doza od 0,1 do 25, u jednom otelotvorenju do 25 mg/m2/nedeljno, u jednom otelotvorenju do 250 mg/m<2>/nedeljno). Usled superiornih citotoksičnih aktivnosti bispecifičnog antitela ona se mogu primenjivati najmanje pri istoj magnitudi raspona kliničke doze (ili čak u nižoj dozi) u poređenju sa konvencionalnim monospecifičnim antitelima ili konvencionalnim bispecifičnim antitelima koja nisu bispecifična antitela T ćelija (tj. ne vezuju se za CD3 na jednom kraku). Predviđeno je da je za bispecifično antitelo poželjna supkutana primena u kliničkim uslovima (npr. u rasponu doza od 0,1 - 250 mg/m<2>/nedeljno). Pored toga, kod pacijenata sa visokim nivoima APRIL i BAFF u serumu (npr. pacijenti oboleli od multiplog mijeloma) možda neće biti potrebno povećati dozu bispecifičnog antitela jer na njega možda neće uticati kompeticija liganda. Nasuprot tome, doze za druga anti-BCMA antitela koja blokiraju ligand/kompetitivna antitela možda će morati da se povećaju kod tih pacijenata. Još jedna prednost bispecifičnog antitela je poluvreme eliminacije od oko 4 do 12 dana, što omogućava primenu najmanje jednom ili dva puta nedeljno.

[0202] U jednom otelotvorenju, bispecifično antitelo je antitelo sa svojstvima koja omogućavaju intravensku primenu jednom/dva puta nedeljno, ali u jednom otelotvorenju i supkutanu primenu (npr. doza u rasponu od 200-2000 mg/m2/nedeljno tokom 4 nedelje).

Predviđeno je da za bispecifično antitelo bude moguća supkutana primena i ona je poželjna u kliničkim uslovima (npr. u rasponu doza od 200-2000 mg/m<2>/nedeljno, u zavisnosti od indikacija bolesti). Pored toga, kod pacijenata sa visokim nivoima APRIL i BAFF u serumu (npr. pacijenti oboleli od multiplog mijeloma) možda neće biti potrebno povećati dozu bispecifičnog antitela (npr. antitelo koje ne blokira ligand/kompetitivno antitelo) jer na njega možda neće uticati kompeticija liganda. Nasuprot tome, doze za druga anti-BCMA antitela koja blokiraju ligand/kompetitivna antitela možda će morati da se povećaju kod tih pacijenata, što supkutanu primenu čini tehnički zahtevnijom (npr. u smislu farmaceutske pripreme). Još jedna prednost bispecifičnog antitela zasniva se na uključivanju Fc dela, koji se dovodi u

1

vezu sa poluživotom eliminacije od 4 do 12 dana i omogućava primenu najmanje jednom ili dva puta nedeljno.

I. Kombinovana terapija sa dodatnim aktivnim agensom

[0203] Tretman sa Jedinjenjem 1, Jedinjenjem 2 ili Jedinjenjem 3, ili enantiomerom, smešom enantiomera, tautomerom, izotopologom ili farmaceutski prihvatljivim solima i bispecifičnim antitelom koje se specifično vezujuće za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), takođe se mogu kombinovati ili koristiti zajedno sa konvencionalnom terapijom (odnosno pre, tokom ili nakon), uključujući, bez ograničenja, hirurgiju, biološku terapiju (uključujući imunoterapiju, na primer sa inhibitorima kontrolne tačke), terapiju zračenjem, hemoterapiju, transplantaciju matičnih ćelija, ćelijsku terapiju ili drugu terapiju koja nije zasnovana na medikamentima, koja se trenutno koristi za lečenje, prevenciju ili upravljanje multiplim mijelomom. Kombinovana primena jedinjenja i konvencionalne terapije može dati jedinstveni režim lečenja koji je neočekivano efikasan kod određenih pacijenata. Ne ograničavajući se teorijom, veruje se da tretman sa Jedinjenjem 1, Jedinjenjem 2 ili Jedinjenjem 3 i bispecifičnim antitelima koja se specifično vezuju za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) može proizvesti dodatne ili sinergističke efekte kada se primenjuje istovremeno sa konvencionalnom terapijom.

[0204] Kao što je navedeno na drugom mestu, ovde je predviđen metod redukcije, lečenja i/ili prevencije neželjenih efekata ili nuspojava koje se dovode u vezu sa konvencionalnom terapijom, uključujući, bez ograničenja, hirurgiju, hemoterapiju, radioterapiju, biološku terapiju i imunoterapiju. Jedinjenje, npr. Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifično antitelo koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), i dodatni aktivni sastojak, mogu se davati pacijentu pre, tokom ili nakon pojave neželjenog efekta koji se dovodi u vezu sa konvencionalnom terapijom.

[0205] Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifično antitelo koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), takođe se mogu kombinovati ili koristiti u kombinaciji sa dodatnim terapijskim agensima korisnim u lečenju i/ili prevenciji multiplog mijeloma opisanog u ovom dokumentu.

2

[0206] U jednom otelotvorenju, metoda lečenja multiplog mijeloma podrazumeva primenu, kod pacijenta, Jedinjenja 1 ili njegovog enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), u kombinaciji sa dodatnim aktivnim agensom. U jednom otelotvorenju, metoda prevencije multiplog mijeloma podrazumeva primenu, kod pacijenta, Jedinjenja 1 ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), u kombinaciji sa dodatnim aktivnim agensom. U jednom otelotvorenju, metoda upravljanja multiplim mijelomom podrazumeva primenu, kod pacijenta, Jedinjenja 1 ili njegovog enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), u kombinaciji sa dodatnim aktivnim agensom. U jednom otelotvorenju, metoda lečenja multiplog mijeloma podrazumeva primenu, kod pacijenta, Jedinjenja 2 ili tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), u kombinaciji sa dodatnim aktivnim agensom. U jednom otelotvorenju, metoda prevencije multiplog mijeloma podrazumeva primenu, kod pacijenta, Jedinjenja 2 ili tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), u kombinaciji sa dodatnim aktivnim agensom. U jednom otelotvorenju, metoda upravljanja multiplim mijelomom podrazumeva primenu, kod pacijenta, Jedinjenja 2 ili tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), u kombinaciji sa dodatnim aktivnim agensom. U jednom otelotvorenju, metoda lečenja multiplog mijeloma podrazumeva primenu, kod pacijenta, Jedinjenja 3 ili tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), u kombinaciji sa dodatnim aktivnim agensom. U jednom otelotvorenju, metoda prevencije multiplog mijeloma podrazumeva primenu, kod pacijenta, Jedinjenja 3 ili tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), u kombinaciji sa dodatnim aktivnim agensom. U jednom otelotvorenju, metoda upravljanja multiplim mijelomom podrazumeva primenu, kod pacijenta, Jedinjenja 3 ili tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), u kombinaciji sa dodatnim aktivnim agensom.

[0207] U jednom otelotvorenju, metod lečenja, prevencije ili upravljanja multiplim mijelomom, podrazumeva primenu, kod pacijenta, Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili njihovog enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), u kombinaciji sa jednim ili više dodatnih aktivnih agenasa, i opciono u kombinaciji sa radijacionom terapijom, transfuzijom krvi ili operacijom.

[0208] Na način na koji se koristi ovde, termin „u kombinaciji“ uključuje primenu više od jedne terapije (npr. jednog ili više profilaktičkih i/ili terapijskih agenasa). Međutim, upotreba termina „u kombinaciji“ ne ograničava redosled kojim se terapije (npr. profilaktička i/ili terapijska sredstva) daju pacijentu sa bolešću ili poremećajem. Prva terapija (npr. profilaktičko ili terapijsko sredstvo kao što je jedinjenje koje je ovde predviđeno, odnosno Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so i bispecifično antitelo koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3)) može se primeniti pre (npr. 5 minuta, 15 minuta, 30 minuta, 45 minuta, 1 sat, 2 sata, 4 sata, 6 sati, 12 sati, 24 sata, 48 sati, 72 sata, 96 sati, 1 nedelju, 2 nedelje, 3 nedelje, 4 nedelje, 5 nedelja, 6 nedelja, 8 nedelja ili 12 nedelja pre), istovremeno ili naknadno (npr. 5 minuta, 15 minuta, 30 minuta, 45 minuta, 1 sat, 2 sata, 4 sata, 6 sati, 12 sati, 24 sata, 48 sati, 72 sata, 96 sati, 1 nedelju, 2 nedelje, 3 nedelje, 4 nedelje, 5 nedelja, 6 nedelja, 8 nedelja ili 12 nedelja posle) primene dodatne terapije (npr. profilaktičkog ili terapijskog agensa) kod subjekta. Četvorostruka terapija se takođe razmatra u ovoj patentnoj prijavi, kao i petostruka terapija. U jednom otelotvorenju, treća terapija je deksametazon.

[0209] Primena Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili njihovih enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljivih soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), i jednog ili više dodatnih aktivnih sredstava kod pacijenta može biti istovremena ili sekvencijalna, administrirana istim ili različitim putevima primene. Pogodnost određenog

4

načina primene koji se koristi za određeno aktivno sredstvo zavisiće od samog aktivnog sredstva (npr. da li se može primeniti oralno bez raspadanja pre ulaska u krvotok).

[0210] Put primene Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili njihovih enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljivih soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), nezavisan je od puta primene dodatne terapije. U jednom otelotvorenju, Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, primenjuju se oralno, dok se bispecifično antitelo koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) primenjuje intravenoznim putem, dok se u jednom otelotvorenju primenjuje supkutano. U drugom otelotvorenju, Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 se primenjuje intravenozno, a bispecifično antitelo koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) se primenjuje takođe intravenozno, dok se u jednom otelotvorenju primenjuje supkutano. Tako se, u skladu sa ovim otelotvorenjima, Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so primenjuju oralno ili intravenozno, dok se bispecifično antitelo koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) primenjuje intravenozno, dok se u drugom otelotvorenju primenjuje supkutano, a dodatna terapija se može primenjivati oralno, parenteralno, intraperitonealno, intravenozno, intraarterijski, transdermalno, sublingvalno, intramuskularno, rektalno, transbukalno, intranazalno, lipozomno, putem inhalacije, vaginalno, intraokularno, putem lokalne isporuke kateterom ili stentom, subkutano, intravenozno, intraartikularno, intratekalno ili u obliku doze sa sporim oslobađanjem. U jednom otelotvorenju, Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, i dodatna terapija primenjuju istim putem primene, oralno ili intravenski, dok se bispecifično antitelo koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) primenjuje intravenoznim putem, dok se u jednom otelotvorenju primenjuje supkutano. U drugom otelotvorenju, Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, primenjuju se jednim načinom primene, npr. intravenozno, dok se dodatno sredstvo (sredstvo protiv multiplog mijeloma) primenjuje drugim načinom primene, npr. oralno, dok se bispecifično antitelo koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) primenjuju intravenskim putem, dok se u jednom otelotvorenju primenjuje supkutano.

[0211] U jednom otelotvorenju, dodatni aktivni agens se daje intravenski ili supkutano i jednom ili dva puta dnevno u količini od oko 1 do oko 1000 mg, od oko 5 do oko 500 mg, od oko 10 do oko 350 mg, ili od oko 50 do oko 200 mg. Konkretna količina dodatnog aktivnog sredstva zavisiće od specifičnog sredstva koje se koristi, tipa multiplog mijeloma koji se leči ili kojim se upravlja, težine i stadijuma bolesti i količine Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili njihovih enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljivih soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), i bilo kojih opcionih dodatnih aktivnih sredstava koja se istovremeno primenjuju kod pacijenta.

[0212] Jedan ili više dodatnih aktivnih sastojaka ili agenasa može se koristiti zajedno sa Jedinjenjem 1, Jedinjenjem 2 ili Jedinjenjem 3 i bispecifičnim antitelima koja se specifično vezuju za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) u metodama i sastavima. Dodatni aktivni agensi mogu biti veliki molekuli (npr. proteini), mali molekuli (npr. sintetički neorganski, organometalni ili organski molekuli) ili ćelijske terapije (npr. CAR ćelije).

[0213] Primeri dodatnih aktivnih agenasa koji se mogu koristiti u metodama i sastavima opisanim ovde uključuju jedan ili više od melfalana, vinkristina, ciklofosfamida, etopozida, doksorubicina, bendamustina, inhibitora proteazoma (na primer, bortezomib, karfilzomib, iksazomib, marizomizomib), inhibitor histon deacetilaze (na primer, panobinostat, ACY241), BET inhibitor (na primer, GSK525762A, OTX015, BMS-986158, TEN-010, CPI-0610 , INCB54329, BAY1238097, FT-1101, C90010, ABBV-075, BI 894999, GS-5829, GSK1210151A (I-BET-151), CPI-203, RVX-208, XD46, MS436, PFI-1, RVX2135, ZEN3365, XD14, ARV-771, MZ-1, PLX5117, EP11313 i EP11336), inhibitor BCL2 (na primer, venetoklaks ili navitoklaks), MCL-1 inhibitor (na primer, AZD5991, AMG176, MIK665, S64315 ili S63845), kortikosteroid (na primer, prednizon), deksametazon; antitelo (na primer, CS1 antitelo, kao što je elotuzumab; CD38 antitelo, kao što je daratumumab isatuksimab; ili BCMA antitelo ili konjugat antitela, kao što je GSK2857916 ili BI 836909), inhibitor kontrolne tačke (kao što je ovde opisano), ili CAR ćelije (kao što je ovde opisano).

[0214] U jednom otelotvorenju, dodatno aktivno sredstvo koje se koristi zajedno sa Jedinjenjem 1, Jedinjenjem 2 ili Jedinjenjem 3 ili njihovim enantiomerom, smešom enantiomera, tautomerom, izotopologom ili farmaceutski prihvatljivom solju i bispecifičnim antitelima koja se specifično vezuju za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), u ovde opisanim metodama i sastavima je deksametazon.

[0215] U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 4 mg 1. i 8. dana ciklusa od 21 dana. U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 4 mg 1, 4, 8. i 11. dana ciklusa od 21 dana. U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 4 mg 1, 8. i 15. dana ciklusa od 28 dana. U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 4 mg 1, 4, 8, 11, 15 i 18 dana ciklusa od 28 dana. U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 4 mg 1, 8, 15. i 22. dana ciklusa od 28 dana. U jednom takvom otelotvorenju, deksametazon se primenjuje u dozi od 4 mg 1, 10, 15. i 22. dana 1. ciklusa. U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 4 mg 1, 3, 15. i 17. dana ciklusa od 28 dana. U jednom takvom otelotvorenju, deksametazon se primenjuje u dozi od 4 mg 1, 3, 14. i 17. dana 1. ciklusa. U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 4 mg 1, 2, 4, 5, 8, 9, 11. i 12. dana ciklusa od 21 dana (u jednom otelotvorenju, od 1. do 8. ciklusa). U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 4 mg 1, 2, 8. i 9. dana ciklusa od 21 dana (u jednom otelotvorenju, ciklusi ≥ 9). U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 4 mg 1, 2, 8, 9, 15, 16, 22. i 23. dana ciklusa od 28 dana.

[0216] U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 8 mg 1. i 8. dana ciklusa od 21 dana. U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 8 mg 1, 4, 8. i 11. dana ciklusa od 21 dana. U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 8 mg 1, 8. i 15. dana ciklusa od 28 dana. U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 8 mg 1, 4, 8, 11, 15. i 18. dana ciklusa od 28 dana. U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 8 mg 1, 8, 15. i 22. dana ciklusa od 28 dana. U jednom takvom otelotvorenju, deksametazon se primenjuje u dozi od 8 mg 1, 10, 15. i 22. dana 1. ciklusa. U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 8 mg 1, 3, 15. i 17. dana ciklusa od 28 dana. U jednom takvom otelotvorenju, deksametazon se primenjuje u dozi od 8 mg 1, 3, 14. i 17. dana 1. ciklusa. U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 8 mg 1, 2, 4, 5, 8, 9, 11. i 12. dana ciklusa od 21 dana (u jednom otelotvorenju, od 1. do 8. ciklusa). U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 8 mg 1, 2, 8. i 9. dana ciklusa od 21 dana (u jednom otelotvorenju, ciklusi ≥ 9). U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 8 mg 1, 2, 8, 9, 15, 16, 22. i 23. dana ciklusa od 28 dana.

[0217] U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 10 mg 1. i 8. dana ciklusa od 21 dana. U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 10 mg 1, 4, 8. i 11. dana ciklusa od 21 dana. U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 10 mg 1, 8. i 15. dana ciklusa od 28 dana. U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 10 mg 1, 4, 8, 11, 15 i 18 dana ciklusa od 28 dana. U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 10 mg 1, 8, 15. i 22. dana ciklusa od 28 dana. U jednom takvom otelotvorenju, deksametazon se primenjuje u dozi od 10 mg 1, 10, 15. i 22. dana 1. ciklusa. U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 10 mg 1, 3, 15. i 17. dana ciklusa od 28 dana. U jednom takvom otelotvorenju, deksametazon se primenjuje u dozi od 10 mg 1, 3, 14. i 17. dana 1. ciklusa. U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 10 mg 1, 2, 4, 5, 8, 9, 11. i 12. dana ciklusa od 21 dana (u jednom otelotvorenju, od 1. do 8. ciklusa). U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 10 mg 1, 2, 8. i 9. dana ciklusa od 21 dana (u jednom otelotvorenju, ciklusi ≥ 9). U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 10 mg 1, 2, 8, 9, 15, 16, 22. i 23. dana ciklusa od 28 dana.

[0218] U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 20 mg 1. i 8. dana ciklusa od 21 dana. U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 20 mg 1, 4, 8. i 11. dana ciklusa od 21 dana. U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 20 mg 1, 8. i 15. dana ciklusa od 28 dana. U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 20 mg 1, 4, 8, 11, 15 i 18 dana ciklusa od 28 dana. U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 20 mg 1, 8, 15. i 22. dana ciklusa od 28 dana. U jednom takvom otelotvorenju, deksametazon se primenjuje u dozi od 20 mg 1, 10, 15. i 22. dana 1. ciklusa. U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 20 mg 1, 3, 15. i 17. dana ciklusa od 28 dana. U jednom takvom otelotvorenju, deksametazon se primenjuje u dozi od 20 mg 1, 3, 14. i 17. dana 1. ciklusa. U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 20 mg 1, 2, 4, 5, 8, 9, 11. i 12. dana ciklusa od 21 dana (u jednom otelotvorenju, od 1. do 8.

ciklusa). U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 20 mg 1, 2, 8. i 9. dana ciklusa od 21 dana (u jednom otelotvorenju, ciklusi ≥ 9). U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 20 mg 1, 2, 8, 9, 15, 16, 22. i 23. dana ciklusa od 28 dana.

[0219] U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 40 mg 1. i 8. dana ciklusa od 21 dana. U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 40 mg 1, 4, 8. i 11. dana ciklusa od 21 dana. U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 40 mg 1, 8. i 15. dana ciklusa od 28 dana. U jednom takvom otelotvorenju, deksametazon se primenjuje u dozi od 40 mg 1, 10, 15. i 22. dana 1. ciklusa. U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 40 mg 1, 4, 8, 11, 15 i 18 dana ciklusa od 28 dana. U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 40 mg 1, 8, 15. i 22. dana ciklusa od 28 dana. U nekim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 40 mg 1, 3, 15. i 17. dana ciklusa od 28 dana. U jednom takvom otelotvorenju, deksametazon se primenjuje u dozi od 40 mg 1, 3, 14. i 17. dana 1. ciklusa. U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 40 mg 1, 2, 4, 5, 8, 9, 11. i 12. dana ciklusa od 21 dana (u jednom otelotvorenju, od 1. do 8. ciklusa). U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 40 mg 1, 2, 8. i 9. dana ciklusa od 21 dana (u jednom otelotvorenju, ciklusi ≥ 9). U nekim drugim otelotvorenjima, deksametazon se primenjuje u dozi od 40 mg 1, 2, 8, 9, 15, 16, 22. i 23. dana ciklusa od 28 dana.

[0220] U drugom otelotvorenju, dodatno aktivno sredstvo koje se koristi zajedno sa Jedinjenjem 1, Jedinjenjem 2 ili Jedinjenjem 3 ili njihovim enantiomerom, smešom enantiomera, tautomerom, izotopologom ili farmaceutski prihvatljivom solju i bispecifičnim antitelima koja se specifično vezuju za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), u ovde opisanim metodama i sastavima je bortezomib. U drugom otelotvorenju, dodatno aktivno sredstvo koje se koristi zajedno sa Jedinjenjem 1, Jedinjenjem 2 ili Jedinjenjem 3 ili njihovim enantiomerom, smešom enantiomera, tautomerom, izotopologom ili farmaceutski prihvatljivom solju i bispecifičnim antitelima koja se specifično vezuju za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), u ovde opisanim metodama i sastavima je daratumumab. U nekim takvim otelotvorenjima, metode dodatno obuhvataju primenu deksametazona. U nekim otelotvorenjima, metode podrazumevaju primenu Jedinjenja 1, Jedinjenja 2 ili Jedinjenja 3 ili njihovih enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3), sa inhibitorom proteazoma kao što je ovde opisano, CD38 antitela kao što je ovde opisano i kortikosteroida kao što je ovde opisano.

[0221] U određenim otelotvorenjima, Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljive soli i bispecifično antitelo koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) primenjuju se u kombinaciji sa inhibitorima kontrolne tačke. U jednom otelotvorenju, jedan inhibitor kontrolne tačke se koristi u kombinaciji sa Jedinjenjem 1, Jedinjenjem 2 ili Jedinjenjem 3 ili njihovim enantiomerom, smešom enantiomera, tautomerom, izotopologom ili farmaceutski prihvatljivom solju i bispecifičnim antitelima koja se specifično vezuju za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3). U drugom otelotvorenju, dva inhibitora kontrolne tačke koriste se u kombinaciji sa Jedinjenjem 1, Jedinjenjem 2 ili Jedinjenjem 3 ili njihovim enantiomerom, smešom enantiomera, tautomerom, izotopologom ili farmaceutski prihvatljivom solju i bispecifičnim antitelom koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3). U drugo otelotvorenju, tri ili više inhibitora kontrolne tačke se koriste u kombinaciji sa Jedinjenjem 1, Jedinjenjem 2 ili Jedinjenjem 3 ili njihovim enantiomerom, smešom enantiomera, tautomerom, izotopologom ili farmaceutski prihvatljivom solju i bispecifičnim antitelima koja se specifično vezuju za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3).

[0222] Na način na koji se koristi ovde, termin „inhibitor imunološke kontrolne tačke“ ili „inhibitor kontrolne tačke“ odnosi se na molekule koji potpuno ili delimično smanjuju, inhibiraju, ometaju ili moduliraju jedan ili više proteina kontrolne tačke. Bez ograničenja određenom teorijom, proteini kontrolne tačke regulišu aktivaciju ili funkciju T-ćelija. Poznati su brojni proteini kontrolne tačke, kao što su CTLA-4 i njegovi ligandi CD80 i CD86; i PD-1 sa svojim ligandima PD-L1 i PD-L2 (Pardoll, Nature Reviews Cancer, 2012, 12, 252-264). Ovi proteini su odgovorni za ko-stimulacione ili inhibitorne interakcije odgovora T-ćelija. Čini se da proteini imunološke kontrolne tačke regulišu i održavaju samo-toleranciju i trajanje i amplitudu fizioloških imunoloških odgovora. Imunološki inhibitori kontrolne tačke uključuju antitela ili su izvedeni iz antitela.

1

[0223] U jednom otelotvorenju, inhibitor kontrolne tačke je CTLA-4 inhibitor. U jednom otelotvorenju, CTLA-4 inhibitor je anti-CTLA-4 antitelo. Primeri anti-CTLA-4 antitela uključuju, bez ograničenja, one opisane u američkim patentima br.5,811,097; 5,811,097; 5,855,887; 6,051,227; 6,207,157; 6,682,736; 6,984,720; i 7,605,238. U jednom otelotvorenju, anti-CTLA-4 antitelo je tremelimumab (takođe poznat kao ticilimumab ili CP-675,206). U drugom otelotvorenju, anti-CTLA-4 antitelo je ipilimumab (takođe poznat kao MDX-010 ili MDX-101). Ipilimumab je potpuno humano monoklonsko IgG antitelo koje se vezuje za CTLA-4. Ipilimumab se prodaje pod trgovačkim imenom Yervoy<™>.

[0224] U jednom otelotvorenju, inhibitor kontrolne tačke je PD-1/PD-L1 inhibitor. Primeri PD-1/PD-L1 inhibitora uključuju, bez ograničenja, one opisane u američkim patentima br. 7,488,802; 7,943,743; 8,008,449; 8,168,757; 8,217,149, i PCT publikacijama patentnih prijava br. WO2003042402, WO2008156712, WO2010089411, WO2010036959, WO2011066342, WO2011159877, WO2011082400, i WO201116169.

[0225] U jednom otelotvorenju, inhibitor kontrolne tačke je PD-1 inhibitor. U jednom otelotvorenju, PD-1 inhibitor je anti-PD-1 antitelo. U jednom otelotvorenju, anti-PD-1 antitelo je BGB-A317, nivolumab (takođe poznat kao ONO-4538, BMS-936558 ili MDX1106) ili pembrolizumab (takođe poznat kao MK-3475, SCH 900475 ili lambrolizumab). U jednom otelotvorenju, anti-PD-1 antitelo je nivolumab. Nivolumab je humani IgG4 anti-PD-1 monoklonsko antitelo i prodaje se pod trgovačkim imenom Opdivo<™>. U drugom otelotvorenju, anti-PD-1 antitelo je pembrolizumab. Pembrolizumab je humanizovano monoklonsko IgG4 antitelo i prodaje se pod trgovačkim imenom Keytruda<™>. U još jednom otelotvorenju, anti-PD-1 antitelo je CT-011, humanizovano antitelo. CT-011, kada se primenjuj samostalno, nije pokazao odgovor u lečenju akutne mijeloične leukemije (AML) pri relapsu. U još jednom otelotvorenju, anti-PD-1 antitelo je AMP-224, fuzijski protein. U drugom otelotvorenju, PD-1 antitelo je BGB-A317. BGB-A317 je monoklonsko antitelo u kojem je sposobnost vezivanja Fc gama receptora I posebno izbačena projektovanjem, i koji ima jedinstveni vezni potpis za PD-1 sa visokim afinitetom i superiornom specifičnošću cilja.

[0226] U jednom otelotvorenju, inhibitor kontrolne tačke je PD-L1 inhibitor. U jednom otelotvorenju, PD-L1 inhibitor je anti-PD-L1 antitelo. U jednom otelotvorenju, anti-PD-L1 antitelo je MEDI4736 (durvalumab). U drugom otelotvorenju, anti-PD-L1 antitelo je BMS-

1 1

936559 (takođe poznato kao MDX-1105-01). U još jednom otelotvorenju, PD-L1 inhibitor je atezolizumab (takođe poznat kao MPDL3280A i Tecentriq<®>).

[0227] U jednom otelotvorenju, inhibitor kontrolne tačke je PD-L2 inhibitor. U jednom otelotvorenju, PD-L2 inhibitor je anti-PD-L2 antitelo. U jednom otelotvorenju, anti-PD-L2 antitelo je rHIgM12B7A.

[0228] U jednom otelotvorenju, inhibitor kontrolne tačke je inhibitor limfocitnog aktivacionog gena 3 (LAG-3). U jednom otelotvorenju, LAG-3 inhibitor je IMP321, rastvorljivi Ig fuzijski protein (Brignone et al., J. Immunol., 2007, 179, 4202-4211). U drugom otelotvorenju, LAG-3 inhibitor je BMS-986016.

[0229] U jednom otelotvorenju, inhibitor kontrolne tačke je inhibitor B7. U jednom otelotvorenju, B7 inhibitor je B7-H3 inhibitor ili B7-H4 inhibitor. U jednom otelotvorenju, inhibitor B7-H3 je MGA271, anti-B7-H3 antitelo (Loo et al., Clin. Cancer Res., 2012, 3834).

[0230] U jednom otelotvorenju, inhibitor kontrolne tačke je inhibitor TIM3 (domen imunoglobulina T-ćelije i domen mucina 3) (Fourcade et al., J. Exp. Med., 2010, 207, 2175-86; Sakuishi et al., J. Exp. Med., 2010, 207, 2187-94).

[0231] U jednom otelotvorenju, inhibitor kontrolne tačke je agonist OX40 (CD134). U jednom otelotvorenju, inhibitor kontrolne tačke je anti-OX40 antitelo. U jednom otelotvorenju, anti-OX40 antitelo je anti-OX-40. U drugom otelotvorenju, anti-OX40 antitelo je MEDI6469.

[0232] U jednom otelotvorenju, inhibitor kontrolne tačke je GITR agonist. U jednom otelotvorenju, inhibitor kontrolne tačke je anti-GITR antitelo. U jednom otelotvorenju, anti-GITR antitelo je TRX518.

[0233] U jednom otelotvorenju, inhibitor kontrolne tačke je agonist CD137. U jednom otelotvorenju, inhibitor kontrolne tačke je anti-CD137 antitelo. U jednom otelotvorenju, anti-CD137 antitelo je urelumab. U drugom otelotvorenju, anti-CD137 antitelo je PF-05082566.

1 2

[0234] U jednom otelotvorenju, inhibitor kontrolne tačke je agonist CD40. U jednom otelotvorenju, inhibitor kontrolne tačke je anti-CD40 antitelo. U jednom otelotvorenju, anti-CD40 antitelo je CF-870,893.

[0235] U jednom otelotvorenju, inhibitor kontrolne tačke je rekombinantni humani interleukin-15 (rhIL-15).

[0236] U jednom otelotvorenju, inhibitor kontrolne tačke je IDO inhibitor. U jednom otelotvorenju, IDO inhibitor je INCB024360. U drugom otelotvorenju, IDO inhibitor je indoksimod.

[0237] U određenim otelotvorenjima, kombinovane terapije uključuju dva ili više ovde opisanih inhibitora kontrolne tačke (uključujući inhibitore kontrolne tačke iste ili različite klase). Štaviše, kombinovane terapije opisane u ovom dokumentu mogu se koristiti u kombinaciji sa jednim ili više drugih aktivnih sredstava kao što je opisano u ovom dokumentu, gde je to prikladno za lečenje bolesti opisanih u ovom dokumentu prihvaćeno u struci.

[0238] U određenim otelotvorenjima, Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 i bispecifično antitelo koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) mogu se koristiti u kombinaciji sa jednom ili više imunoloških ćelija koje eksprimiraju jedan ili više himernih antigenskih receptora (CAR) na njihovoj površini (npr. modifikovana imunološka ćelija). Generalno, CAR se sastoji od ekstracelularnog domena iz prvog proteina (npr. antigen-vezujućeg proteina), transmembranskog domena i intracelularnog signalnog domena. U određenim otelotvorenjima, kada se ekstracelularni domen veže za ciljni protein kao što je antigen povezan sa tumorom (TAA) ili tumorspecifični antigen (TSA), signal se generiše preko intracelularnog signalnog domena koji aktivira imunološku ćeliju, npr. ciljaju i ubijaju ćeliju koja eksprimira ciljni protein.

[0239] Ekstracelularni domeni: Ekstracelularni domeni CAR receptora se vezuju za antigen od interesa. U određenim otelotvorenjima, ekstracelularni domen CAR sadrži receptor, ili deo receptora, koji se vezuje za pomenuti antigen. U određenim otelotvorenjima, ekstracelularni domen sadrži, ili jeste, antitelo ili njegov deo koji se vezuje za antigen. U specifičnim otelotvorenjima, ekstracelularni domen obuhvata, ili jeste, jednolančani Fv (scFv) domen.

1

Jednolančani Fv domen može da obuhvati, na primer, VLpovezan sa VHpomoću fleksibilnog linkera, pri čemu su navedeni VLi VHiz antitela koje vezuje pomenuti antigen.

[0240] U određenim otelotvorenjima, antigen prepoznat preko ekstracelularnog domena polipeptida koji je ovde opisan je antigen povezan sa tumorom (TAA) ili tumor-specifičan antigen (TSA). U različitim konkretnim otelotvorenjima, antigen povezan sa tumorom ili tumor-specifični antigen je, bez ograničenja, Her2, antigen matičnih ćelija prostate (PSCA), alfa-fetoprotein (AFP), karcinoembrionalni antigen (CEA), antigen karcinoma-125 (CA- 125), CA19-9, kalretinin, MUC-1, antigen sazrevanja B ćelija (BCMA), protein epitelne membrane (EMA), antigen epitelnog tumora (ETA), tirozinaza, antigen povezan sa melanomom-24 (MAGE), CD19, CD22, CD27, CD30, CD34, CD45, CD70, CD99, CD117, EGFRvIII (epidermalni faktor rasta varijanta III), mezotelin, PAP (prostatična kisela fosfataza), prostein, TARP (protein alternativnog okvira za čitanje T ćelija receptora), Trp-p8, STEAPI (šesttransmembranski epitelni antigen prostate 1), hromogranin, citokeratin, desmin, glijski vlaknasti kiseli protein (GFAP), grubi protein tečnosti cistične bolesti (GCDFP-15), HMB-45 antigen, protein melan-A (antigen melanoma koji prepoznaju T limfociti; MART-I), mio-D1, aktin specifičan za mišiće (MSA), neurofilament, enolaza specifična za neurone (NSE), placentalna alkalna fosfataza, sinaptofiza, tireoglobulin, faktor transkripcije štitne žlezde-1, dimerni oblik izoenzima piruvat kinaze tipa M2 (tumor M2-PK), abnormalni ras protein ili abnormalni protein p53. U nekim drugim otelotvorenjima, TAA ili TSA koje prepoznaje ekstracelularni domen CAR je integrin αvβ3 (CD61), galaktin ili Ral-B.

[0241] U određenim otelotvorenjima, TAA ili TSA koje prepoznaje ekstracelularni domen CAR je antigen karcinoma/testisa (CT), npr. BAGE, CAGE, CTAGE, FATE, GAGE, HCA661, HOM-TES-85, MAGEA, MAGEB, MAGEC, NA88, NY-ES0-1, NY-SAR-35, OY-TES-1, SPANXBI, SPA17, SSX, SYCPI ili TPTE.

[0242] U određenim drugim otelotvorenjima, TAA ili TSA prepoznata od strane ekstracelularnog domena CAR je ugljeni hidrat ili gangliozid, npr. fuc-GMI, GM2 (onkofetalni antigen-imunogeni-1; OFA-I-1); GD2 (OFA-I-2), GM3, GD3 i slično.

[0243] U određenim drugim otelotvorenjima, TAA ili TSA koje prepoznaje ekstracelularni domen CAR je alfa-aktinin-4, Bage-1, BCR-ABL, Bcr-Abl fuzijski protein, beta-katenin, CA 125, CA 15-3 (CA 27.29\BCAA), CA 195, CA 242, CA-50, CAM43, Casp-8, cdc27, cdk4,

1 4

cdkn2a, CEA, coa-1, dek-can fuzijski protein, EBNA, EF2, antigeni virusa Epstein Barr, ETV6 -AMI,1 fuzijski protein, HLA-A2, HLA-All, hsp70-2, KIAA0205, Mart2, Mum-1, 2 i 3, neo-PAP, miozin klase I, OS-9, pml-RARα fuzijski protein, PTPRK, K-ras, N-ras, triozafosfat izomeraza, Gage 3,4,5,6,7, GnTV, Herv-K-mel, Lage-1, NA-88, NY-Eso-1/Lage-2, SP17, SSX-2, TRP2-Int2, gp100 (Pmel17), tirozinaza, TRP-1, TRP-2, MAGE-1, MAGE-3, RAGE, GAGE-1, GAGE-2, p15(58), RAGE, SCP-1, Hom/Mel-40, PRAME, p53, HRas, HER-2/neu, E2A-PRL, H4-RET, IGH-IGK, MYL-RAR, antigeni humanog papiloma virusa (HPV) E6 i E7, TSP-180, MAGE-4, MAGE-5, MAGE-6, p185erbB2, p180erbB-3, c-met, nm-23H1, PSA, TAG-72-4, CA 19-9, CA 72-4, CAM 17.1, NuMa, K-ras, 13-katenin, Mum-1, p16, TAGE, PSMA, CT7, telomeraza, 43-9F, 5T4, 791Tgp72, 13HCG, BCA225, BTAA, CD68\KP1, C0-029, FGF-5, G250, Ga733 (EpCAM), HTgp-175, M344, MA-50, MG7-Ag, MOV18, NB\70K, NY-C0-1, RCAS1, SDCCAG16, TA-90, TAAL6, TAG72, TLP ili TPS.

[0244] U različitim specifičnim otelotvorenjima, antigen povezan sa tumorom ili antigen specifičan za tumor je tumorski antigen povezan sa AML, kao što je opisano kod S. Anguille et al., Leukemia (2012), 26, 2186-2196.

[0245] Drugi antigeni povezani sa tumorom i tumor-specifični antigeni su poznati stručnjacima u oblasti.

[0246] Receptori, antitela i scFvs koji se vezuju za TSA i TAA, korisni u izgradnji himernih antigenskih receptora, poznati su u struci, a isti je slučaj i sa nukleotidnim sekvencama koje ih kodiraju.

[0247] U određenim konkretnim otelotvorenjima, antigen prepoznat od strane ekstracelularnog domena himernog receptora antigena je antigen koji se generalno ne smatra TSA ili TAA, ali koji je ipak povezan sa tumorskim ćelijama ili oštećenjem uzrokovanim tumorom. U određenim otelotvorenjima, na primer, antigen je, npr. faktor rasta, citokin ili interleukin, npr. faktor rasta, citokin ili interleukin povezan sa angiogenezom ili vaskulogenezom. Takvi faktori rasta, citokini ili interleukini mogu uključivati, npr. vaskularni endotelni faktor rasta (VEGF), osnovni faktor rasta fibroblasta (bFGF), faktor rasta izveden iz trombocita (PDGF), faktor rasta hepatocita (HGF), faktor rasta sličan insulinu (IGF) ili interleukin-8 (IL-8). Tumori takođe mogu stvoriti hipoksično okruženje lokalno u odnosu na tumor. Kao takav, u drugim konkretnim otelotvorenjima, antigen je

1

faktor povezan sa hipoksijom, npr. HIF-1α, HIF-1β, HIF-2α, HIF-2β, HIF-3α ili HIF-3β. Tumori takođe mogu izazvati lokalizovano oštećenje normalnog tkiva, izazivajući oslobađanje molekula poznatih kao molekuli molekulskog uzorka povezanih sa oštećenjem (DAMP; takođe poznati kao alarmini). Prema tome, u određenim drugim konkretnim otelotvorenjima, antigen je DAMP, na primer, protein toplotnog šoka, protein povezan sa hromatinom 1 grupe visoke mobilnosti (HMGB 1), S100A8 (MRP8, kalgranulin A), S100A9 (MRP14, kalgranulin B), serumski amiloid A (SAA), ili može biti dezoksiribonukleinska kiselina, adenozin trifosfat, mokraćna kiselina ili heparin sulfat.

[0248] Transmembranski domen: U određenim otelotvorenjima, ekstracelularni domen CAR je spojen sa transmembranskim domenom polipeptida pomoću sekvence linkera, spejsera ili zglobnog polipeptida, npr. sekvence iz CD28 ili sekvence iz CTLA4. Transmembranski domen se može dobiti ili izvesti iz transmembranskog domena bilo kog transmembranskog proteina, i može uključivati ceo ili deo takvog transmembranskog domena. U konkretnim otelotvorenjima, transmembranski domen se može dobiti ili izvesti iz, npr. CD8, CD16, citokinskog receptora i interleukinskog receptora, ili receptora faktora rasta, ili slično.

[0249] Intracelularni signalni domeni: U određenim otelotvorenjima, intracelularni domen CAR jeste ili podrazumeva intracelularni domen ili motiv proteina koji je eksprimiran na površini T ćelija i pokreće aktivaciju i/ili proliferaciju navedenih T ćelija. Takav domen ili motiv je u stanju da transmituje primarni signal vezivanja antigena koji je neophodan za aktivaciju T limfocita u odgovoru na vezivanje antigena za vanćelijski (ekstracelularni) deo CAR. Uobičajeno, ovaj domen ili motiv sadrži, ili jeste, ITAM (motiv aktivacije imunoreceptora na bazi tirozina). Polipeptidi koji sadrže ITAM pogodni za CAR uključuju, na primer, zeta CD3 lanac (CD3ζ) ili njegove delove koji sadrže ITAM. U određenom otelotvorenju, intracelularni domen je CD3ζ intracelularni signalni domen. U drugim konkretnim otelotvorenjima, intracelularni domen je iz lanca receptora limfocita, proteina kompleksa TCR/CD3, podjedinice Fe receptora ili podjedinice IL-2 receptora. U određenim otelotvorenjima, CAR dodatno sadrži jedan ili više ko-stimulativnih domena ili motiva, na primer, kao deo intracelularnog domena polipeptida. Jedan ili više kostimulativnih domena ili motiva mogu biti, ili mogu sadržati, jedan ili više kostimulativnih CD27 polipeptidnih sekvenci, kostimulativnih CD28 polipeptidnih sekvenci, kostimulativnih OX40 (CD134) polipeptidnih sekvenci, kostimulativnu 4-1BB (CD137) polipeptidnu sekvencu, ili

1

inducibilnu kostimulativnu polipeptidnu sekvencu T-ćelija (ICOS), ili drugi kostimulativni domen ili motiv, ili bilo koju njihovu kombinaciju.

[0250] CAR može takođe sadržati motiv preživljavanja T ćelija. Motiv preživljavanja T ćelija može biti bilo koja polipeptidna sekvenca ili motiv koji olakšava preživljavanje T limfocita nakon stimulacije antigenom. U određenim otelotvorenjima, motiv preživljavanja T ćelija jeste, ili je izveden iz CD3, CD28, intracelularnog signalnog domena receptora IL-7 (IL-7R), intracelularnog signalnog domena receptora IL-12, intracelularnog signalnog domena receptora IL-15, intracelularnog signalnog domena receptora IL-21 ili intracelularnog signalnog domena transformišućeg faktora rasta receptora β (TGFβ).

[0251] Modifikovane imunološke ćelije koje eksprimiraju CAR mogu biti, npr. T limfociti (T ćelije, npr. CD4+ T ćelije ili CD8+ T ćelije), citotoksični limfociti (CTL) ili prirodne ćelije ubice (NK). T limfociti koji se koriste u ovde navedenim sastavima i metodama mogu biti naivni T limfociti ili T limfociti ograničeni MHC-om. U određenim otelotvorenjima, T limfociti su tumorski infiltrirajući limfociti (TIL). U određenim otelotvorenjima, T limfociti su izolovani iz biopsije tumora, ili su eskpandirani iz T limfocita izolovanih iz biopsije tumora. U određenim drugim otelotvorenjima, T ćelije su izolovane ili su ekspandirane iz T limfocita izolovanih iz periferne krvi, krvi pupčane vrpce ili limfe. Imunološke ćelije koje će se koristiti za generisanje modifikovanih imunoloških ćelija koje eksprimiraju CAR mogu se izolovati korišćenjem metoda koje su uobičajene u praksi, rutinskih metoda, npr. prikupljanje krvi praćeno aferezom i opciono izolacijom ili sortiranjem ćelija posredovanim antitelima.

[0252] Modifikovane imunološke ćelije su poželjno autologne pojedincu kome će biti administrirane. U određenim drugim otelotvorenjima, modifikovane imunološke ćelije su alogene za pojedinca kome će biti administrirane. Tamo gde se alogeni T limfociti ili NK ćelije koriste za pripremu modifikovanih T limfocita, poželjno je odabrati T limfocite ili NK ćelije koje će smanjiti mogućnost bolesti grafta protiv domaćina (GVHD) kod pojedinca. Na primer, u određenim otelotvorenjima, T limfociti specifični za virus biraju se za pripremu modifikovanih T limfocita; od takvih limfocita će se očekivati da imaju znatno smanjenu prirodnu sposobnost vezivanja za bilo koji antigen primaoca i stoga i aktivaciju njime. U određenim otelotvorenjima, odbijanje alogenih T limfocita posredovano od strane primaoca može se smanjiti istovremenom primenom jednog ili više imunosupresivnih agenasa, npr. ciklosporina, takrolimusa, sirolimusa, ciklofosfamida ili slično.

1

[0253] T limfociti, npr. nemodifikovani T limfociti ili T limfociti koji eksprimiraju CD3 i CD28, ili koji sadrže polipeptid koji se sastoji od domena signalizacije CD3ζ i kostimulacionog domena CD28, mogu se proširiti pomoću antitela na CD3 i CD28, npr. antitela vezana za perle; vidi, npr. SAD Patent br.5,948,893; 6,534,055; 6,352,694; 6,692,964;

6,887,466; i 6,905,681.

[0254] Modifikovane imunološke ćelije, npr. modifikovani T limfociti, mogu opciono da sadrže „samoubilački gen“ ili „sigurnosni prekidač“ koji omogućava ubijanje suštinski svih modifikovanih imunoloških ćelija po želji. Na primer, modifikovani T limfociti, u određenim otelotvorenjima, mogu da sadrže gen HSV timidin kinaze (HSV-TK), koji uzrokuje smrt modifikovanih T limfocita prilikom kontakta sa ganciklovirom. U drugom otelotvorenju, modifikovani T limfociti sadrže induktivnu kaspazu, npr. induktivnu kaspazu 9 (icaspase9), odnosno fuzijski protein između kaspaze 9 i humanog vezivnog proteina FK506 koji omogućava dimerizaciju pomoću specifičnog farmaceutskog sredstva malog molekula. Vidi Straathof et al., Blood 105(11 ):4247-4254 (2005).

J. Farmaceutski sastavi

[0255] Ovde navedeni farmaceutski sastavi sadrže terapijski efikasne količine jednog ili više ovde navedenih jedinjenja i opciono farmaceutski prihvatljiv nosač, razblaživač ili ekscipijens.

[0256] U daljem otelotvorenju, ovde je dat farmaceutski sastav koji sadrži jedinjenje koje je ovde opisano i bispecifično antitelo koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε f(CD3), zajedno sa farmaceutski prihvatljivim ekscipijensom, pri čemu se bispecifično antitelo sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), okarakterisan time što pomenuti prvi vezni deo sadrži region VH koji sadrži region CDR1H sa SEQ ID NO:21, region CDR2H sa SEQ ID NO:22 i region CDR3H sa SEQ ID NO:17 i region VL koji sadrži region CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinaciju regiona CDR1L i CDR2L izabranu iz grupe

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

1

iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28. Prema pronalasku, sastav je namenjen za kombinovanu primenu u lečenju multiplog mijeloma.

[0257] U daljem otelotvorenju, ovde je dat farmaceutski sastav koji sadrži Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3 ili njihov enantiomere, smešu enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljivu so i bispecifično antitelo koje sadrži prvi vezni deo koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugi vezni deo koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), takođe dato ovde, okarakterisano time što navedeni prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i regiona VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe koju čine

i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24,

ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili

iii) CDR1L region sa SEQ ID NO:27 i CDR2L region sa SEQ ID NO:28 i farmaceutski prihvatljiv ekscipijens. Prema pronalasku, sastav je namenjen za kombinovanu primenu u lečenju multiplog mijeloma.

[0258] Jedinjenja se mogu formulisati u odgovarajuće farmaceutske preparate kao što su rastvori, suspenzije, tablete, disperzibilne tablete, pilule, kapsule, praškovi, formulacije sa produženim oslobađanjem ili eliksiri, za oralnu primenu ili u sterilnim rastvorima ili suspenzijama za oftalmološku ili parenteralnu primenu, kao i za pripremu transdermalnih flastera i inhalatora suvog praha. Uobičajeno, gore opisana jedinjenja su formulisana u farmaceutske sastave koristeći tehnike i procedure dobro poznate u struci (videti, npr. Ansel Introduction to Pharmaceutical Dosage Forms, Seventh Edition 1999).

[0259] U sastavima, efikasne koncentracije jednog ili više jedinjenja ili farmaceutski prihvatljivih soli se mešaju sa odgovarajućim farmaceutskim nosačem ili vehikulumom. U određenim otelotvorenjima, koncentracije jedinjenja u sastavima su efikasne za isporuku odgovarajuće količine koja tretira, sprečava ili ublažava jedan ili više simptoma i/ili progresiju multiplog mijeloma.

[0260] Sastavi su uobičajeno formulisani za jednokratnu dozu. Da bi se formulisao sastav, maseni udeo jedinjenja se rastvara, suspenduje, disperguje ili na drugi način meša u

1

izabranom vehikulumu u efikasnoj koncentraciji kako bi bilo moguće ublažavanje ili olakšavanje lečenog stanja. Farmaceutski nosači ili vehikulumi pogodni za primenu jedinjenja predviđenih ovim dokumentom uključuju sve takve nosače koji su poznati u struci kao pogodni za određeni metod primene.

[0261] Pored toga, jedinjenja se mogu formulisati kao jedini farmaceutski aktivni sastojak u sastavu ili se mogu kombinovati sa drugim aktivnim sastojcima. Lipozomske suspenzije, uključujući lipozome ciljane na tkivo, kao što su tumorski ciljani lipozomi, takođe mogu biti pogodne kao farmaceutski prihvatljivi nosači. Oni se mogu pripremiti u skladu sa metodama koje su dobro poznate u struci. Na primer, lipozomske formulacije se mogu pripremiti na način koji je poznat u struci. Ukratko, lipozomi kao što su multilamelarne vezikule (MLV) mogu se formirati sušenjem jajnog fosfatidil holina i moždanog fosfatidil serina (molarni odnos 7:3) na unutrašnjoj strani bočice. Dodaje se rastvor jedinjenja u fiziološkom rastvoru puferovanom fosfatom bez dvovalentnih katjona (PBS) i balon se mućka dok se lipidni film ne disperguje. Dobijeni vezikuli se ispiraju da bi se uklonilo nekapsulirano jedinjenje, peletiraju centrifugiranjem, a zatim resuspenduju u PBS.

[0262] Aktivno jedinjenje je uključeno u farmaceutski prihvatljiv nosač u količini koja je dovoljna da bi se ostvario terapijski koristan efekat u odsustvu neželjenih nuspojava kod lečenog pacijenta. Terapijski efikasna koncentracija može se odrediti empirijski testiranjem jedinjenja u in vitro i in vivo sistemima opisanim u ovom dokumentu, a zatim ekstrapolacijom u doze koje su odgovarajuće za ljude.

[0263] Koncentracija aktivnog jedinjenja u farmaceutskom sastavu zavisiće od apsorpcije, distribucije tkiva, inaktivacije, metabolizma i brzine izlučivanja aktivnog jedinjenja, fizičkohemijskih karakteristika jedinjenja, rasporeda doziranja i primenjene količine, kao i drugih faktora koji su dobro poznati u struci. Na primer, količina koja se isporučuje dovoljna je za ublažavanje jednog ili više simptoma karcinoma, uključujući solidne tumore i tumore koji se prenose krvlju.

[0264] Rastvori ili suspenzije koji se koriste za parenteralnu, intradermalnu, supkutanu ili topikalnu primenu mogu uključivati bilo koju od sledećih komponenti: sterilni razblaživač, kao što je voda za injekcije, fiziološki rastvor, fiksno ulje, polietilen glikol, glicerin, propilen glikol, dimetil acetamid ili drugi sintetički rastvarač; antimikrobna sredstva, kao što su benzil

11

alkohol i metil parabeni; antioksidansi, kao što su askorbinska kiselina i natrijum bisulfit; helatna sredstva, kao što je etilendiamintetrasirćetna kiselina (EDTA); puferi, kao što su acetati, citrati i fosfati; i sredstva za prilagođavanje toniciteta kao što su natrijum hlorid ili dekstroza. Parenteralni preparati mogu biti u ampulama, olovkama, špricevima za jednokratnu upotrebu ili jednokratnim ili višestrukim doznim bočicama od stakla, plastike ili drugog odgovarajućeg materijala.

[0265] U slučajevima kada jedinjenja pokazuju nedovoljnu rastvorljivost, mogu se koristiti metode za rastvaranje jedinjenja. Takvi postupci su poznati stručnjacima u ovoj oblasti i uključuju, bez ograničenja, korišćenje korastvarača, kao što je dimetilsulfoksid (DMSO), korišćenje surfaktanata, kao što je TWEEN<®>, ili rastvaranje u vodenom rastvoru natrijum bikarbonata.

[0266] Nakon mešanja ili dodavanja jedinjenja, dobijena smeša može biti rastvor, suspenzija, emulzija ili slično. Oblik dobijene smeše zavisi od niza faktora, uključujući predviđeni način primene i rastvorljivost jedinjenja u izabranom nosaču ili vehikulumu. Efikasna koncentracija je dovoljna za ublažavanje simptoma bolesti, poremećaja ili stanja koji se leče i može se empirijski odrediti.

[0267] Farmaceutski sastavi su predviđeni za primenu kod ljudi i životinja u jediničnim doznim oblicima, kao što su tablete, kapsule, pilule, praškovi, granule, sterilni parenteralni rastvori ili suspenzije, oralni rastvori ili suspenzije i emulzije ulja i vode koje sadrže odgovarajuće količine jedinjenja ili njihovih farmaceutski prihvatljivih soli. Farmaceutski terapijski aktivna jedinjenja i njihove soli se formulišu i primenjuju u jediničnim doznim oblicima ili višestrukim doznim oblicima. Jedinični dozni oblici, na način na koji se koriste ovde, odnose se na fizički diskretne jedinice pogodne za primenu kod ljudi i životinja, pojedinačno upakovane na način koji je uobičajen u struci. Svaka jedinična doza sadrži unapred određenu količinu terapijski aktivnog jedinjenja dovoljnu da proizvede željeni terapijski efekat, zajedno sa potrebnim farmaceutskim nosačem, vehikulumom ili razblaživačem. Primeri jediničnih doznih oblika uključuju ampule i špriceve i pojedinačno upakovane tablete ili kapsule. Jedinični dozni oblici mogu se primenjivati u frakcijama ili u većem broju. Višestruki dozni oblik je mnoštvo identičnih jediničnih doznih oblika upakovanih u jedno pakovanje i primenjuje se u izdvojenom obliku jedinične doze. Primeri višestrukih doznih oblika uključuju bočice, bočice sa tabletama ili kapsulama ili bočice sa tečnošću. Stoga, višestruki dozni oblik predstavlja višestruke jedinične doze koje nisu odvojene u pakovanju.

[0268] Mogu se pripremiti oblici doziranja ili sastavi koji sadrže aktivni sastojak u rasponu od 0,005% do 100% uravnoteženim pomoću neotrovnog nosača. Za oralnu primenu, farmaceutski prihvatljiv neotrovni sastav se formira ugradnjom bilo kog od uobičajeno korišćenih ekscipijenasa, kao što su, na primer, manitol, laktoza, skrob, magnezijum stearat, talk, derivati celuloze, natrijum kroskarmeloza, glukoza, saharoza, magnezijum karbonat ili natrijum saharin. Takvi sastavi uključuju rastvore, suspenzije, tablete, kapsule, praškove i formulacije sa produženim oslobađanjem, kao što su, bez ograničenja, implantati i mikroenkapsulirani sistemi isporuke, i biorazgradive, biokompatibilne polimere, kao što su kolagen, etilen vinil acetat, polianhidridi, poliglikolna kiselina, poliortoestri, polilaktična kiselina i drugi. Metode za pripremu ovih sastava su poznate u struci.

[0269] Aktivna jedinjenja ili njihove farmaceutski prihvatljive soli mogu se pripremiti sa nosačima koji štite jedinjenje od brze eliminacije iz tela, kao što su formulacije ili premazi sa produženim oslobađanjem.

[0270] Sastavi mogu uključivati druga aktivna jedinjenja kako bi se dobile željene kombinacije svojstava. Ovde navedena jedinjenja ili njihove farmaceutski prihvatljive soli takođe se mogu primenjivati u terapijske ili profilaktičke svrhe zajedno sa drugim farmakološkim agensom za koji je poznato da ima vrednost u lečenju jedne ili više ovde navedenih bolesti ili medicinskih stanja, kao što su oboljenja povezana sa oksidativnim stresom. Podrazumeva se da takva kombinovana terapija predstavlja dalji aspekt sastava i metoda lečenja

K. Evaluacija aktivnosti i svojstava kombinacije

[0271] Standardne fiziološke, farmakološke i biohemijske procedure su dostupne za testiranje jedinjenja kako bi se identifikovala jedinjenja koja poseduju željena svojstva, uključujući proliferativnu aktivnost protiv multiplog mijeloma i adekvatan bezbednosni profil. Takvi testovi uključuju, na primer, biohemijske testove kao što su testovi vezivanja, testovi inkorporacije radioaktivnosti, kao i razne testove na ćelijama.

5. PRIMERI

[0272] Određena otelotvorenja pronalaska ilustrovana su sledećim primerima, bez ograničenja.

Skraćenice:

[0273]

AIBN: Azobisizobutironitril

Boc terc-butiloksikarbonil

Boc2O di-terc-butil dikarbonat

tBuOK Kalijum terc-butoksid

DIEA Diizopropiletilamin

DMF N,N'-dimetilformamid

EtOAc Etil acetat

MeOH Metanol

MM Multipli mijelom

NBS: N-bromosukcinimid,

NMR Nuklearna magnetna rezonanca

i-PrOAc: Izopropil acetat

TBSCI terc-butil dimetilsililhlorid

THF Tetrahidrofuran

TLC Tankoslojna hromatografija

TMSCl Trimetilsilil hlorid

Primer 1: Sinteza 4-(4-(4-(((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-il)oksi)metil)benzil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitrila (Jedinjenje 1).

[0274]

11

[0275] 2-amino-5-metoksi-5-oksopentanska kiselina. U suspenziju 2-aminopentandiojeve kiseline (250 g; 1,70 mol) u suvom metanolu (2,5 l) pod azotom dodavan je trimetilsilil hlorid (277 g; 2,55 mol) tokom 30 minuta. Rezultujući bistri rastvor je mešan na sobnoj temperaturi (20°C) tokom 30 minuta.<1>H NMR je pokazao da je polazni materijal u potpunosti potrošen. Reakciona smeša je korišćena u sledećem koraku bez dalje obrade.<1>H NMR: 400 MHz CD3OD δ: 4,17-4,15 (m, 1H), 3,71 (s, 3H), 2,70-2,60 (m, 2H), 2,33-2,25 (m, 2H).

[0276] 2-((terc-butoksikarbonil)amino)-5-metoksi-5-oksopentanska kiselina. Gore navedenom rastvoru je dodat trietilamin (275 g; 2,72 mol) i di-terc-butil dikarbonat (447,35 g; 2,05 mol). Reakciona smeša je mešana na 25°C 2 sata. Rastvor je koncentrovan do suvoće, zatim je dodata voda (2,5 l) da bi se rastvorio ostatak. Dobijena vodena faza je isprana etil acetatom (200 ml), zatim zakiseljena na pH = 3 pomoću HCl (1 N) i ekstrahovana etil acetatom (1 l × 3). Kombinovani organski slojevi su isprani slanom vodom (800 ml), osušeni preko natrijum sulfata, filtrirani i koncentrovani da bi se dobila 2-(tercbutoksikarbonilamino)-5-metoksi-5-okso-pentanska kiselina (250 g; 56% prinosa; dva koraka) u vidu čvrste supstance bele boje.<1>H NMR: 400 MHz CD3OD δ: 4,18-4,11 (m, 1H), 3,69 (s, 3H), 2,48-2,43 (m, 2H), 2,21-2,15 (m, 1H), 1,95-1,91 (m, 1H), 1,46 (s, 9H).

[0277] Metil 5-amino-4-(terc-butoksikarbonil amino)-5-okso-pentanoat. U rastvor 2-(terc-butoksikarbonilamino)-5-metoksi-5-okso-pentanske kiseline (200 g; 765 mmol) u 1,4-dioksanu (1,5 l) dodati su di-terc-butil dikarbonat (267 g; 1,22 mol) i piridin (121 g; 1,53 mol). Nakon mešanja reakcione smeše na 25°C u trajanju od 30 min, u smešu je dodat amonijum karbonat (182 g; 2,30 mol) i mešano je dodatnih 16 h na 25°C. Organski rastvarač je uklonjen rotacionim isparavanjem, ostatak je zakiseljen pomoću HCl (6 M) do pH = 3, a zatim ekstrahovan etil acetatom (800 ml × 3). Kombinovana organska faza je isprana slanom vodom (800 ml), osušena preko natrijum sulfata i filtrirana. Isparljive organske materije su uklonjene pod smanjenim pritiskom da bi se dobio metil 5-amino-4-(terc-butoksikarbonil amino)-5-okso-pentanoat (180 g; 90% prinosa) u vidu čvrste supstance bele boje.<1>H NMR: 400 MHz CDCl3δ: 6,51 (s, 1H), 5,94 (s, 1H), 5,43 (s, 1H), 4,21 (s, 1H), 3,63 (s, 3H), 2,59-2,40 (m, 2H), 2,15-2,11 (m, 1H), 1,94-1,90 (m, 1H), 1,42 (s, 9H).

[0278] Metil 4,5-diamino-5-okso-pentanoat hidrohlorid. Smeša metil 5-amino-4-(tercbutoksikarbonilamino)-5-okso-pentanoata (180 g; 692 mmol) i HCl/etil acetata (300 ml; 4 M) je mešana na 25°C tokom 12 sati. Istaložena čvrsta supstanca je sakupljena vakuumskom filtracijom i isprana etil acetatom (500 ml) da bi se dobio metil 4,5-diamino-5-okso-pentanoat hidrohlorid (130 g; 95% prinosa) u vidu čvrste supstance bele boje.<1>H NMR: 400 MHz CD3OD δ: 4,00-3,96 (m, 1H), 3,70 (s, 3H), 2,59-2,52 (m, 2H), 2,22-2,13 (m, 2H).

[0279] Metil 3-hidroksi-2-metil-benzoat. Paralelno su sprovedene četiri serije (po 200 g). U rastvor 3-hidroksi-2-metil-benzojske kiseline (200 g; 1,31 mol) u metanolu (4,0 l) dodata je koncentrovana sumporna kiselina (47,7 g; 486 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 17 sati. Reakciona smeša je koncentrovana na 800 ml. Rezultujuća smeša je ohlađena na 20°C i polako sipana u vodu (400 ml) tokom 30 minuta. Voda (1200 ml) je dodata na 20°C tokom 3 sata i dobijena smeša je mešana na 20°C tokom 1 sata. Istaložena čvrsta materija je sakupljena vakuum filtracijom (četiri serije zajedno) i isprana je tri puta vodom/metanolom (1000 ml, 9:1) do pH > 3. Čvrsta supstanca je osušena pod vakuumom na 45°C kako bi se dobilo metil 3-hidroksi-2-metilbenzoat (700 g; prinos 80,4%) u vidu čvrste supstance sive boje.1H NMR: 400 MHz DMSO-d6δ: 9,70 (s, 1H), 7,18 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 7,09 (t, J= 7,6 Hz, 1H), 7,00 (t, J= 6,8 Hz, 1H), 3,81 (s, 3H), 2,29 (s, 3H).

[0280] Metil 3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-2-metil-benzoat. Paralelno su izvršene dve serije (240 g svaka). U rastvor metil 3-hidroksi-2-metilbenzoata (240 g; 1,44 mol) u N,N-dimetilformamid (1,40 l) dodati su imidazol (246 g; 3,61 mol) i terc-butil dimetilsilil hlorid (238 g; 1,58 mol) na 5°C. Nakon dodavanja, smeša je zagrevana do 20°C i mešana 6 sati. Dodat je izopropil acetat (1700 ml), a zatim je polako dodavana voda (2000 ml) dok je temperatura održavana ispod 30°C. Rezultujuća smeša je promešana i organska faza je odvojena. Kombinovane organske faze (dve kombinovane serije) su isprane vodom (1700 ml × 3) i koncentrovane na -1500 ml (KF<0,05%). Proizvod je skladišten kao izopropil acetatni rastvor koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

[0281] Metil 2-(bromometil)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-benzoat. Paralelno su izvršene dve serije (~375 g svaka). U izopropil acetatni rastvor metil 3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-2-metil-benzoata (∼375 g; 1,34 mol) dodat je N-bromosukcinimid (274 g; 1,54 mol) i azobisizobutironitril (4,40 g; 26,8 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 70°C tokom najmanje 1 sata i mešana na 70°C tokom 4 sata. Reakciona smeša je ohlađena na 20°C i držana na 20°C najmanje 1 sat. Dve serije čvrstog (sukcinimida) su uklonjene filtracijom i isprane izopropil acetatom (700 ml). Filtrat je ispran rastvorom natrijum sulfita (700 g) u vodi (6000 ml), praćeno vodom (1500 ml). Organski sloj je destilovan pod vakuumom na 45°C do

11

suvoće kako bi se dobio metil 2-(bromometil)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-benzoat (920 g; prinos 95,5%) u vidu ulja tamno narandžaste boje.<1>H NMR: 400 MHz DMSO-d6δ: 7,45 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,36 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,13 (t, J= 7,2 Hz, 1H), 4,95 (s, 2H), 1,02 (s, 9H), 0,29 (s, 6H).

[0282] Metil 5-amino-4-[4-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-1-okso-izoindolin-2-il]-5-oksopentanoat. Mešanom rastvoru metil 4,5-diamino-5-okso-pentanoat hidrohlorida (74,5 g; 379 mmol) u acetonitrilu (2,50 l) dodat je metil 2-(bromometil)-3-[terc-butil(dimetil)silil] oksibenzoat (125 g; 348 mmol). Suspenziji je dodat diizopropiletilamin (89,9 g; 696 mmol) kroz adicioni levak tokom 10 minuta, a zatim je smeša mešana na 60°C tokom 16 sati. Reakciona smeša je razblažena sa etil acetatom (1,0 l), isprana sa HCl (1N; 1,0 l), natrijum bikarbonatom (zasić.1,0 l) i slanom vodom (1,0 l), sukcesivno. Organski sloj je koncentrovan tako da je dobijen sirovi metil 5-amino-4-[4-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-1-okso-izoindolin-2-il]-5-okso-pentanoat (108 g; sirovi) u vidu čvrste supstance svetlo žute boje. LCMS: m/z 407,3 [M+1]+ .

[0283] Metil S-amino-4-(4-hidroksi-1-okso-izoindolin-2-il)-5-okso-pentanoat. U mešani hladni rastvor metil 5-amino-4-[4-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-1-okso-izoindolin-2-il]-5-okso-pentanoata (108 g; 266 mmol) u N,N-dimetilformamidu (350 ml) dodat je kalijum karbonat (14,7 g; 106 mmol) u vodi (40 ml) u porcijama tokom 5 minuta. Dobijena reakciona smeša je mešana na 15°C tokom 15 sati. Reakciona smeša je ohlađena u ledenom kupatilu, a HCl (12 M; 15 ml) je polako dodavana na 0-5°C. Acetonitril (200 ml) je dodat u smešu i formiran je čvrsti talog. Suspenzija je mešana na sobnoj temperaturi 10 minuta i filtrirana. Filtarski kolač je ispran etil acetatom (200 ml × 5) da bi se dobio proizvod (55 g). Filtrat je koncentrovan pod visokim vakuumom da bi se dobio sirovi proizvod (100 g) koji je rastvoren u dihlormetanu (1,0 l) i ostavljen da stoji na 15°C tokom 16 sati. Formirana je bela čvrsta materija koja je filtrirana da bi se dobilo 5 g proizvoda. Čvrste materije su kombinovane tako da daju metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-okso-izoindolin-2-il)-5-okso-pentanoat (60 g; 77% prinosa) u vidu čvrste supstance bele boje.<1>H NMR: 400 MHz DMSO-d6δ: 7,58 (s, 1H), 7,31 (t, J= 8,0 Hz, 1H), 7,19-7,14 (m, 2H), 7,01 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,75-4,71 (m, 1H), 4,50 (d, J= 17,6 Hz, 1H), 4,32 (d, J= 17,6 Hz, 1H), 3,51 (s, 3H), 2,29-2,18 (m, 3H), 2,09-1,99 (m, 1H).

11

[0284] Metil 5-amino-4-[4-[[4-(bromometil)fenil]metoksi]-1-okso-izoindolin-2-il]-5-oksopentanoat. Paralelno su izvedene dve reakcije (25 g; 85,5 mmol). Smeša 1,4-bis(bromometil)benzena (67,7g; 257 mmol), kalijum karbonata (11,8g; 85,5 mmol) i metil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-okso-izoindolin-2-il)-5-oksopentanoata (25g; 85,5 mmol) u acetonitrilu (1 l) mešana je na 60°C tokom 16 sati. Dve serije su kombinovane i smeša je ohlađena na 15°C i filtrirana. Filtrat je koncentrovan i prečišćen hromatografijom na koloni silikagela (eluiran sa 50% naftnog etra u etil acetatu do 100% etil acetata) kako bi se dobio metil 5-amino-4-[4-[[4-(bromometil)fenil]metoksi]-1-okso-izoindolin-2-il]-5-okso-pentanoat (52 g; 63% prinos) u vidu čvrste supstance bele boje.<1>H NMR: 400 MHz DMSO-d6δ: 7,59 (s, 1H), 7,50-7,44 (m, 5H), 7,32-7,28 (m, 2H), 7,19 (s, 1H), 5,26 (s, 2H), 4,79-4,71 (m, 3H), 4,55 (d, J= 17,6 Hz, 1H), 4,43 (d, J= 17,6 Hz, 1H), 3,52 (s, 3H), 2,30-2,19 (m, 3H), 2,10-2,08 (m, 1H).

[0285] 3-[4-[[4-(bromometil)fenil]metoksi]-1-okso-izoindolin-2-il]piperidin-2,6-dion. Paralelno su izvedene dve reakcije (28,5 g; 60,0 mmol). Metil 5-amino-4-[4-[[4-(bromometil)fenil]metoksi]-1-okso-izoindolin-2-il]-5-oksopentanoat (28,5; 60,0 mmol) je rastvoren u tetrahidrofuranu (720 ml) i rastvor je ohlađen u suvom ledu/acetonskom kupatilu na -70°C. Dok je mešan, kalijum terc-butoksid (7,4 g; 66,0 mmol) je dodavan u jednoj porciji u bistri rastvor. Reakciona smeša je promenila boju u bledo žutu i mešanje je nastavljeno tokom dodatna 2 sata na -70°C. Ohlađeni rastvor HCl (1N; 260 ml) je brzo prebačen u reakcionu smešu uz održavanje temperature na -70°C. Smeša je odmah postala mlečno bela i uklonjeno je suvo ledeno/acetonsko kupatilo. Smeša je koncentrovana da bi se uklonio najveći deo tetrahidrofurana. Nakon koncentrovanja reakcione smeše, istaložena je čvrsta materija bele boje. Bela kaša je razblažena vodom (500 ml) i zatim filtrirana. Filterski kolač je ispran vodom (500 ml) i osušen u vakuumskoj rerni na 40°C tokom 12 sati, a zatim ispran etil acetatom (500 ml). Serije su kombinovane da bi dale 3-[4-[[4-(bromometil)fenil]metoksi]-1-okso-izoindolin-2-il] piperidin-2,6-dion (49,85 g; 93%) u vidu čvrste supstance svetlo žute boje.<1>H NMR: 400 MHz DMSO-d6δ: 10,95 (s, 1H), 7,51-7,41 (m, 5H), 7,35-7,28 (m, 2H), 5,23 (s, 2H), 5,12-5,07 (m, 1H), 4,70 (s, 2H), 4,41 (d, J= 17,6 Hz, 1H), 4,25 (d, J= 17,6 Hz, 1H), 2,90-2,84 (m, 1H), 2,58-2,53 (m, 1H), 2,44-2,41 (m, 1H), 1,98-1,95 (m, 1H).

[0286] 4-(4-(4-(((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-il)oksi)metil)benzil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitril. 3-(4-((4-(bromometil)benzil)oksi)-

11

1-oksoizoindolin-2-il)piperidin-2,6-dion (5,0 g; 11,28 mmol) je stavljen u bocu sa 3-fluoro-4-(piperazin-1-il)benzonitrilom (2,315 g; 11,28 mmol), diizopropiletilaminom (5,91 ml; 33,8 mmol) i acetonitrilom (100 ml). Reakciona smeša je mešana na 40°C tokom 18 sati.

Isparljive organske materije su uklonjene pod smanjenim pritiskom i prečišćavanje standardnim metodama dalo je 4-(4-(4-(((2-(2,6-diokopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-il)oksi)metil)benzil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitril. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ 10,97 (s, 1H), 7,68 (dd, J=1,96, 13,45 Hz, 1H), 7,56 (dd, J=1,77, 8,38 Hz, 1H), 7,43-7,52 (m, 3H), 7,30-7,38 (m, 4H), 7,11 (t, J=8,80 Hz, 1H), 5,24 (s, 2H), 5,11 (dd, J=5,14, 13,33 Hz, 1H), 4,37-4,46 (m, 1H), 4,22-4,30 (m, 1H), 3,54 (s, 2H), 3,12-3,23 (m, 4H), 2,84-2,98 (m, 1H), 2,52-2,62 (m, 5H), 2,36-2,48 (m, 1H), 1,92-2,04 (m, 1H). MS (ESI) m/z 568,2 [M+1]+ . Anal. izrač za C32H30FN5O4: C, 67,71; H, 5,33; N, 12,34. Pronađeno: C, 67,50; H, 5,44; N 12,34.

Primer 2: Sinteza (S)-4-(4-(4-(((2-(2,6-dioksopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-il)oksi)metil)benzil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitrila (Jedinjenje 2)

[0287]

[0288] terc-butil (4S)-5-amino-4-(benziloksikarbonilamino)-5-oksopentanoat. U rastvor (2S)-2-(benziloksikarbonilamino)-5-terc-butoksi-5-okso-pentanske kiseline (150 g; 445 mmol) u 1,4-dioksanu (1,50 l) dodat je di-terc-butil dikarbonat (155 g; 711 mmol), piridin (70,3 g; 889 mmol) i amonijum bikarbonat (105 g; 1,33 mol). Reakciona smeša je mešana na 18°C tokom 16 h i zatim koncentrovana. Ostatak je rastvoren u etil acetatu (5,0 l) i vodi (5,0 l), organski sloj je odvojen i ispran sa HCl (3,0 ml; 1 N), zasićenim natrijum bikarbonatom (3,0 l), slanom vodom (3,0 l), osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan tako da se dobije sirovi terc-butil (4S)-5-amino-4-(benziloksikarbonilamino)-5-oksopentanoat (450 g; sirovi) u vidu čvrste supstance bele boje, koja je korišćena u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.<1>H NMR 400 MHz DMSO-d6δ: 7,35-7,30 (m, 5H), 7,02 (s, 1H), 5,01 (d, J = 3,2 Hz, 1H), 3,93-3,90 (m, 1H), 220 (t, J= 8,0 Hz, 2H), 1,88-1,84 (m, 1H), 1,72-1,69 (m, 1H), 1,35 (s, 9H).

11

[0289] terc-butil (4S)-4,5-diamino-5-okso-pentanoat. U rastvor terc-butil (4S)-5-amino-4-(benziloksikarbonilamino)-5-okso-pentanoata (112 g; 333 mmol) u metanolu (1,0 l) dodato je 10 % paladijuma na ugljeniku (15 g) pod azotom. Suspenzija je otplinjavana pod vakuumom i nekoliko puta pročišćena vodonikom. Smeša je mešana pod vodoničnim gasom (40 psi) na 30°C tokom 16 sati. Reakciona smeša je filtrirana i filtrat je koncentrovan da bi se dobio sirovi terc-butil (4S)-4,5-diamino-5-okso-pentanoat u vidu bezbojnog ulja.1H NMR 400 MHz DMSO-d6δ: 7,30 (s, 1H), 6,95 (s, 1H), 3,10-3,07 (m, 1H), 2,27-2,23 (m, 2H), 1,69-1,78 (m, 1H), 1,59-1,55 (m, 1H), 1,38 (s, 9H).

[0290] Metil 3-hidroksi-2-metil-benzoat. Paralelno su sprovedene četiri serije (po 200 g). U rastvor 3-hidroksi-2-metil-benzojske kiseline (200 g; 1,31 mol) u metanolu (4,0 l) dodata je koncentrovana sumporna kiselina (47,7 g; 486 mmol). Reakciona smeša je mešana na 60°C tokom 17 sati. Reakciona smeša je koncentrovana na 800 ml. Rezultujuća smeša je ohlađena na 20°C i polako sipana u vodu (400 ml) tokom 30 minuta. Voda (1200 ml) je dodata na 20°C tokom 3 sata i dobijena smeša je mešana na 20°C tokom 1 sata. Istaložena čvrsta materija je sakupljena vakuum filtracijom (četiri serije zajedno) i isprana je tri puta vodom/metanolom (1000 ml, 9:1) do pH > 3. Čvrsta supstanca je osušena pod vakuumom na 45°C kako bi se dobilo metil 3-hidroksi-2-metilbenzoat (700 g; prinos 80,4%) u vidu čvrste supstance sive boje.1H NMR: 400 MHz DMSO-d6δ: 9,70 (s, 1H), 7,18 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 7,09 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,00 (t, J = 6,8 Hz, 1H), 3,81 (s, 3H), 2,29 (s, 3H).

[0291] Metil 3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-2-metil-benzoat. Paralelno su izvršene dve serije (240 g svaka). U rastvor metil 3-hidroksi-2-metilbenzoata (240 g; 1,44 mol) u N,N-dimetilformamid (1,40 l) dodati su imidazol (246 g; 3,61 mol) i terc-butil dimetilsilil hlorid (238 g; 1,58 mol) na 5°C. Nakon dodavanja, smeša je zagrevana do 20°C i mešana 6 sati. Dodat je izopropil acetat (1700 ml), a zatim je polako dodavana voda (2000 ml) dok je temperatura održavana ispod 30°C. Rezultujuća smeša je promešana nakon čega je usledilo odvajanje organske faze. Kombinovane organske materije (dve kombinovane serije) su isprane vodom (1700 ml × 3) i koncentrovane na -1500 ml (KF<0,05%). Proizvod je skladišten kao izopropil acetatni rastvor koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

11

[0292] Metil 2-(bromometil)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-benzoat. Paralelno su izvršene dve serije (~375 g svaka). U izopropil acetatni rastvor metil 3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-2-metil-benzoata (∼375 g; 1,34 mol) dodat je N-bromosukcinimid (274 g; 1,54 mol) i azobisizobutironitril (4,40 g; 26,8 mmol). Reakciona smeša je zagrevana na 70°C tokom najmanje 1 sata i mešana na 70°C tokom 4 sata. Reakciona smeša je ohlađena na 20°C i držana na 20°C najmanje 1 sat. Dve serije čvrstog (sukcinimida) su uklonjene filtracijom i isprane izopropil acetatom (700 ml). Filtrat je ispran rastvorom natrijum sulfita (700 g) u vodi (6000 ml), praćeno vodom (1500 ml). Organski sloj je destilovan pod vakuumom na 45°C do suvoće kako bi se dobio metil 2-(bromometil)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-benzoat (920 g; prinos 95,5%) u vidu ulja tamno narandžaste boje.<1>H NMR: 400 MHz DMSO-d6δ: 7,45 (d, J = 6,8 Hz, 1H), 7,36 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 7,13 (t, J= 7,2 Hz, 1H), 4,95 (s, 2H), 1,02 (s, 9H), 0,29 (s, 6H).

[0293] terc-butil (4S)-5-amino-4-[4-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-1-okso-izoindolin-2-il]-5-okso-pentanoat. U rastvor terc-butil (4S)-4,5-diamino-5-oksopentanoata (130 g; 643 mmol) u acetonitrilu (4,0 l) dodat je metil 2-(bromometil)-3-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-benzoat (210 g; 584 mmol) i diizopropiletilamin (113 g; 877 mmol). Reakciona smeša je mešana na 50°C tokom 16 sati. Reakciona smeša je koncentrovana da bi se uklonio veći deo acetonitrila, ostatak je rastvoren u metil terc-butil etru (2,0 l) i vodi (1,5 l), organski sloj je ispran zasićenim monokalijum fosfatom (1,0 l × 2), slanom vodom (1,0 l), osušen preko bezvodnog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan da bi se dobio sirovi terc-butil (4S)-5-amino-4-[4-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-1-okso-izoindolin-2-il]-5-okso-pentanoat (524 g), koji je korišćen u sledećem koraku bez daljeg prečišćavanja.

[0294] terc-butil (4S)-5-amino-4-(4-hidroksi-1-okso-izoindolin-2-il)-5-oksopentanoat. U rastvor terc-butil (4S)-5-amino-4-[4-[terc-butil(dimetil)silil]oksi-1-okso-izoindolin-2-il]-5-okso-pentanoata (275 g; 613 mmol) u metanolu (2,0 l) dodat je tetrabutilamonijum fluorid trihidrat (38,7 g; 123 mmol). Smeša je mešana na 18 °C tokom 16 sati. Reakciona smeša je koncentrovana da bi se uklonio najveći deo metanola, ostatak je rastvoren u dihlormetanu/vodi (3 l/2 l), organski sloj je ispran slanom vodom (1,0 l), osušen preko anhidrovanog natrijum sulfata, filtriran i koncentrovan da bi se dobio sirovi proizvod koji je prečišćen kolonom od silikagela da bi se dobio proizvod (260 g). Proizvod je dodat u acetonitril (750 ml) i smeša je mešana na 60 °C tokom 2 sata, ohlađena na 18 °C i mešana još 2 sata. Čvrsta supstanca je filtrirana i kolač je osušen da bi se dobio terc-butil (4S)-5-amino-

12

4-(4-hidroksi-1-okso-izoindolin-2-il)-5-okso-pentanoat (248 g, prinos 60,5%) u vidu čvrste supstance sive boje.1H NMR 400 MHz DMSO-d6δ: 10,00 (s, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,29 (t, J= 7,6 Hz, 1H), 7,14 (d, J= 4,8 Hz, 2H), 4,72 - 4,68 (m, 1H), 4,49-4,28 (m, 2H), 2,17-1,97 (m, 4H), 1,31 (s, 9H).

[0295] 4-(4-(4-(hlorometil)benzil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitril. 1,4-bis(hlorometil)benzen (51,2 g; 292 mmol) je stavljen u bocu sa acetonitrilom (195 ml) i N,N-dimetilformamidom (195 ml). Reakciona smeša je mešana na temperaturi okoline dok se sve čvrste materije nisu rastvorile. Zatim je dodat diizopropilamin (51,1 ml; 292 mmol) zajedno sa 3-fluoro-4-(piperazin-1-il)benzonitrilom (20 g; 97 mmol). Reakcija je zagrevana na 60 °C tokom 1 sata. Acetonitril je uklonjen pod smanjenim pritiskom. Preostala smeša je podeljena između etil acetata (1,0 l), vode (700 ml) i slane vode (300 ml). Organski sloj je izdvojen i vodeni sloj je ekstrahovan sa etil acetatom dva puta. Isparljive organske materije su kombinovane i uklonjene pod sniženim pritiskom. Čvrsta supstanca je rastvorena u minimalnoj količini dihlormetana i prečišćena na koloni silikagela (0-100% etil acetata u heksanima preko 3 l). Kombinovane su frakcije koje sadrže željeni proizvod i uklonjeni su isparljivi organski proizvodi pod smanjenim pritiskom. Ostatak je rastvoren u minimalnoj količini dihlormetana i drugi put prečišćen na koloni silikagela (10% izokratičnog etil acetata u heksanima preko 800 ml praćeno sa 20-80% etil acetata u heksanima preko 4 l). Frakcije koje sadrže željeni proizvod su kombinovane i isparljivi organski proizvodi su uklonjeni pod smanjenim pritiskom kako bi se dobio 4-(4-(4-(hlorometil)benzil) piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitril (22,7 g; 66,0 mmol; 67,7% prinosa) u vidu čvrste supstance sivkasto bele boje. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7,33 - 7,39 (m, 5 H) 7,29 (d, J=1,96 Hz, 1 H) 7,25 (d, J=1,96 Hz, 1 H) 6,91 (t, J=8,56 Hz, 1 H) 4,60 (s, 2 H) 3,58 (s, 2 H) 3,19 - 3,27 (m, 4 H) 2,58 - 2,66 (m, 4 H). MS (ESI) m/z 344,2 [M+1]+ .

[0296] (S)-terc-butil 5-amino-4-(4-((4-((4-(4-cijano-2-fluorofenil)piperazin-1-il)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat. (S)-terc-butil 5-amino-4-(4-hidroksi-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (22,05 g; 65,9 mmol) je stavljen u tikvicu sa 4-(4-(4-(hlorometil)benzil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitrilom (22,67 g; 65,9 mmol), kalijum karbonatom (18,23 g; 132 mmol) i N,N-dimetilformamidom (330 ml). Reakciona smeša je zagrevana na 45°C tokom 16 sati. Reakcija je razblažena etil acetatom (50 ml) i filtrirana. Filtrat je podeljen sa etil acetatom (900 ml) i vodom (600 ml) i slanom vodom (200 ml). Organski sloj je izolovan i podeljen vodom (600 ml). Organski sloj je izolovan i svi organski slojevi su kombinovani, osušeni preko natrijum sulfata, a isparljive materije su uklonjene pod smanjenim pritiskom. Ostatak je tretiran sa 20% etil acetata u heksanima, a isparljive materije su uklonjene pod smanjenim pritiskom da bi se dobio (S)-terc-butil 5-amino-4-(4-((4-((4-(4-cijano-2-fluorofenil)piperazin-1-il)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin-2-il)-5-oksopentanoat (44,02 g; 68,6 mmol; 104% prinos) u vidu čvrste supstance sivkasto bele boje. Prinos je bio malo veći od kvantitativnog, jer je ostalo nešto N,N-dimetilformamida. 1H NMR (400 MHz, CDCl3) δ ppm 7,43 - 7,49 (m, 2 H) 7,40 (s, 4 H) 7,36 (dd, J=8,38, 1,28 Hz, 1 H) 7,29 (d, J=1,96 Hz, 1 H) 7,26 (d, J=1,83 Hz, 1 H) 7,11 (dd, J=7,64, 1.16 Hz, 1 H) 6,92 (t, J=8,50 Hz, 1 H) 6,23 (br s, 1 H) 5,24 - 5,32 (m, 1 H) 5,15 (s, 2 H) 4,86 - 4,94 (m, 1 H) 4,38 - 4,55 (m, 2 H) 3,61 (s, 2 H) 3,18 - 3,32 (m, 4 H) 2,58 - 2,70 (m, 4 H) 2,09 - 2,47 (m, 4 H) 1,43 (s, 8 H). MS (ESI) m/z 642,4 [M+1]+ .

[0297] (S)-4-(4-(4-(((2-(2,6-diokopiperidin-3-il)-1-oksoizoindolin-4-il)oksi)metil)benzil)piperazin-1-il)-3-fluorobenzonitril. (S)-terc-butil 5-amino-4-(4-((4-((4-(4-cijano-2-fluorofenil)piperazin-1-il)metil)benzil)oksi)-1-oksoizoindolin- 2-il)-5-okspentanoat (12,1 g; 18,86 mmol) je stavljen u bočicu sa acetonitrilom (189 ml) i benzensulfonskom kiselinom (3,96 g; 24,51 mmol). Reakciona smeša je stavljena pod vakuum i pročišćena azotom. Ovo je ponovljeno još jednom i smeša je zatim zagrejana na 85°C preko noći u atmosferi azota. Reakciona smeša je sipana topla direktno u 2 separatorna toka koji su sadržali dihlormetan (1000 ml) i etil acetat (300 ml). Ovoj smeši je dodat zasićeni rastvor natrijum bikarbonata (900 ml), vode (100 ml) i slane vode (450 ml).

Organski sloj je izolovan i vodeni sloj je ekstrahovan sa dihlormetanom (800 ml) i etil acetatom (200 ml). Kombinovani organski slojevi su osušeni preko bezvodnog magnezijum sulfata i koncentrovani. Prečišćavanje standardnim metodama obezbedilo je naslovno jedinjenje. 1H NMR (400 MHz, DMSO-d6) δ ppm 10,96 (s, 1 H) 7,68 (dd, J=13,45, 1,83 Hz, 1 H) 7,56 (dd, J=8,44, 1,83 Hz, 1 H) 7,43 - 7,52 (m, 3 H) 7,29 - 7,39 (m, 4 H) 7,11 (t, J=8,80 Hz, 1 H) 5,24 (s, 2 H) 5,11 (dd, J=13,20, 5,14 Hz, 1 H) 4,22 - 4,46 (m, 2 H) 3,54 (s, 2 H) 3,12 - 3,22 (m, 4 H) 2,85 - 2,97 (m, 1 H) 2,53 - 2,62 (m, 2 H) 2,38 - 2,48 (m, 2 H) 1,93 - 2,03 (m, 1 H). MS (ESI) m/z 568,2 [M+1]+ ,

Primer 3: Anti-CD3 antitela

[0298] Poželjno je da anti-CD3 antitelo sadrži varijabilni domen VH koji se sastoji od CDR-ova teškog lanca SEQ ID NO: 1, 2 i 3, kao CDR1, CDR2 i CDR3 teški lanac, respektivno, i varijabilni domen VL, koji sadrži CDR-ove lakog lanca, SEQ ID NO: 4, 5 i 6 kao laki lanac CDR1, CDR2 i CDR3, respektivno. Antitelo se poželjno sastoji od varijabilnih domena SEQ ID NO:7 (VH) i SEQ ID NO:8 (VL). Anti-CD3 antitela kao što je gore opisano korišćena su za generisanje T ćelija bispecifičnih antitela u skladu sa sledećim primerom.

Primer 4: Generisanje anti-BCMA/anti-CD3 T ćelijskih bispecifičnih antitela formata 2+1 koji sadrži Fc

[0299] cDNK koje kodiraju pune teške i lake lance odgovarajućih anti-BCMA IgG1 antitela, kao i anti-CD3 VH i VL cDNK korišćeni su kao početni materijali. Za svako bispecifično antitelo uključena su četiri lanca proteina koji se sastoje od teških i lakih lanaca odgovarajućeg anti-BCMA antitela i teških i lakih lanaca gore opisanog anti-CD3 antitela, respektivno. Da bi se minimiziralo formiranje nusproizvoda sa pogrešno uparenim teškim lancima, na primer sa dva teška lanca anti-CD3 antitela, korišćen je mutirani heterodimerni Fc region koji nosi „mutacije ispupčenje u udubljenju“ i projektovanu disulfidnu vezu, kao što je opisano u WO2009080251 i u WO2009080252. Da bi se minimiziralo stvaranje sporednih proizvoda sa pogrešno uparenim lakim lancima, na primer sa dva laka lanca anti-BCMA antitela, CH1 k konstantna kapa ukrštanja su primenjena na teške i lake lance anti-CD3 antitela koristeći metodologiju opisanu u WO2009080251 i WO2009080252.

a) Anti-BCMA/anti-CD3 T ćelijsko bispecifično antitelo sa 2+1 formatom, tj.

bispecifično (Fab)2× (Fab) antitelo koje je bivalentno za BCMA i monovalentno za CD3 imalo bi prednosti u pogledu potentnosti, predvidljivosti u smislu efikasnosti i bezbednosti jer bi se preferencijalno vezalo za ciljni tumor BCMA i izbeglo pad CD3 antitela, tako da je veća verovatnoća za izloženost tumora leku.

[0300] Anti-BCMA/anti-CD3 T ćelijsko bispecifično antitelo formata 2+1 (tj. bispecifično (Fab)2× (Fab) antitelo bivalentno za BCMA i monovalentno za CD3 sa Fc proizvedeno je za humana BCMA antitela koja su prethodno odabrana. cDNK koje kodiraju pune Fab (teški lanac VH i CH1 domena plus VL i CL domeni lakog lanca) odgovarajućih anti-BCMA IgG1 antitela, kao i anti-CD3 VH i VL cDNK, korišćeni su kao polazni materijali. Za svako bispecifično antitelo uključena su četiri lanca proteina koji se sastoje od teških i lakih lanaca odgovarajućeg anti-BCMA antitela i teških i lakih lanaca gore opisanog anti-CD3 antitela, respektivno, sa Fc regionima.

12

[0301] Ukratko, svako bispecifično antitelo se proizvodi istovremenom kotransfekcijom četiri ekspresiona vektora sisara koji kodiraju, respektivno: a) punu cDNK lakog lanca odgovarajućeg BCMA antitela, b) fuzionu cDNK generisanu standardnim metodama molekularne biologije, kao što je PCR splajs-preklapanje-ekstenzija, koji kodira fuzioni protein napravljen od (u redosledu od N- do C-terminusa) sekretorne vodeće sekvence, Fab (VH praćen CH1 domenima) odgovarajućeg anti-BCMA antitela opisanog iznad, fleksibilnog glicin(Gli)-serin(Ser) linkera sa sekvencom Gly-Gly- Gly- Gly-Ser-Gly-Gly- Gly- Gly-Ser, Fab (VH praćen CH1 domenima) odgovarajućeg anti-BCMA antitela opisanog iznad, fleksibilnog glicin(Gli)-serin(Ser) linkera sa sekvencom Gly-Gly- Gly- Gly-Ser-Gly-Gly-Gly- Gly-Ser, VH anti-CD3 antitela opisanog gore i konstantnog kapa domena cDNK humanog lakog lanca, c) fuzionu cDNK generisanu standardnim metodama molekularne biologije, kao što je PC sa spajanjem-preklapanjem, koji kodira fuzioni protein napravljen od (u redosledu od N- do C-terminusa) sekretorna vodeća sekvenca, VL anti-CD3 antitela opisanog gore, konstantni CH1 domen humane IgG1 cDNK. Ko-transfekcija ćelija sisara i proizvodnja antitela i prečišćavanje korišćenjem metoda opisanih iznad za proizvodnju humanih ili humanizovanih IgG1 antitela, sa jednom modifikacijom: za prečišćavanje antitela, prvi korak hvatanja se ne vrši korišćenjem ProteinA, već pomoću kolona za afinitetnu hromatografiju napakovanu smolom koja se vezuje za konstantni region humanog lakog lanca kapa, kao što je KappaSelect (GE Healthcare Life Sciences). Pored toga, može se uključiti disulfid da bi se povećali stabilnost i prinosi, kao i dodatni ostaci koji formiraju jonske mostove i povećavaju prinose heterodimerizacije (EP 1870459A1).

[0302] Za generisanje vektora bispecifičnih antitela BCMAxCD3, bispecifični molekuli izvedeni iz IgG1 sastoje se od najmanje dva dela koja se vezuju za antigen, sposobna da se specifično vezuju za dve različite antigene determinante CD3 i BCMA. Delovi koji se vezuju za antigen bili su Fab fragmenti sastavljeni od teškog i lakog lanca, od kojih svaki sadrži varijabilni i konstantni region. Najmanje jedan od Fab fragmenata je „Crossfab“ fragment, pri čemu su razmenjeni konstantni domeni Fab teškog i lakog lanca. Razmena konstantnih domena teških i lakih lanaca unutar Fab fragmenta obezbeđuje da Fab fragmenti različitih specifičnosti nemaju identične aranžmane domena i shodno tome ne razmenjuju lake lance. Dizajn bispecifičnog molekula bio je monovalentan za CD3 i bivalentan za BCMA gde je jedan Fab fragment fuzionisan sa N-terminusom unutrašnjeg CrossFab-a (2+1). Bispecifični molekul je sadržao Fc deo da bi imao duži poluživot. Šematski prikaz konstrukcija dat je na Slikama 1A, 1B, 2A do 2D i 3A do 3D; sekvence poželjnih konstrukcija prikazane su u Tabeli 2A. Molekuli su proizvedeni ko-transfekcijom HEK293 EBNA ćelija koje rastu u suspenziji sa vektorima ekspresije sisara koristeći rastvor na bazi polimera. Za pripremu 2+1 CrossFab-IgG konstrukata, ćelije su transfektirane odgovarajućim ekspresijskim vektorima u odnosu 1:2:1:1 („vektor Fc(ispupčenje)“ : „vektorski laki lanac“ : „vektorski laki lanac CrossFab“ : „vektorski teški lanac-CrossFab“).

Primer 5: Kombinovana primena anti-BCMA/anti-CD3 T ćelijskog bispecifičnog antitela sa jedinjenjem

[0303] Aktivacija T ćelija i oslobađanje citokina. Prečišćene T ćelije se odmrzavaju u medijumu RPMI 1640 koji sadrži 10% FBS i 1 ng/mL humanog IL-7. ćelije su izbrojane u brojaču ćelija Vi-CELL i razblažene ćelijskim medijumom do 2×10<6>ćelija/mL. T ćelije su ostavljene da se oporave u inkubatoru na 37°C, 5% CO2preko noći. T ćelije su tretirane bispecifičnim antitelom koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) koji je ovde dat, ili Jedinjenje 1, Jedinjenje 2 ili Jedinjenje 3, kao pojedinačnim agensom ili u kombinaciji tokom 24, 48, i 72 sata. Ćelije su sakupljene u svakoj vremenskoj tački i profilisane FACS analizom za markere aktivacije T ćelija (CD25, CD69 i HLA-DR) na CD3+CD4+ i CD3+CD8+ podskupovima. Medijum kulture je takođe sakupljen u svakoj vremenskoj tački i analiziran na citokine pomoću platformi MesoScale Discovery ili Luminex.

[0304] Ko-kulture efektorskih T ćelija (E) i tumorskih ćelija (T). T ćelije i/ili tumorske ćelije prethodno tretirane bispecifičnim antitelom koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) navedenim ovde ili Jedinjenjem 1, Jedinjenjem 2 ili Jedinjenjem 3, kao pojedinačnim agensom ili kombinacijom, kultivisane su zajedno uz različite odnose E:T na 37 °C, 5% CO2i procenjivane su na 24, 48 ili 72 sata na ubijanje tumora izazvano T ćelijama pomoću FACS analiza. Tumorske ćelije su obeležene sa CFSE (5(6)-karboksifluorescein N-hidroksisukcinimidil estar) u skladu sa uputstvima proizvođača neposredno pre početka testa ko-kultivisanja. Pored toga, markeri aktivacije T-ćelija (CD25, CD69, HLA-DR) su praćeni pomoću FACS-a na CD3+CD4+ i CD3+CD8+ podskupovima.

[0305] U jednom otelotvorenju, kombinovani tretman će pokazati povećanu dubinu odgovora u ćelijama rezistentnim na lenalidomid i/ili pomalidomid u poređenju sa pojedinačnom

12

primenom agensa. U drugom otelotvorenju, kombinovani tretman će pokazati sinergističku i/ili aditivnu aktivnost ubijanja ćelija u ćelijama mijeloma sa niskom ili nikakvom ekspresijom BCMA. Pored toga, kombinovani tretman će pokazati povećanje aktivacije T-ćelija i proizvodnje citokina (kao što su IL-2, IFN-gama i TNF-alfa) u poređenju sa bilo kojim pojedinačnim agensom.

Primer 6: Kombinovana primena anti-BCMA/anti-CD3 T ćelijskog bispecifičnog antitela sa jedinjenjem

[0306] Ko-kulture efektorskih T ćelija (E) i ciljnih ćelija (T) nakon predtretmana sa jedinjenjima. CD3+ T-ćelije su izolovane iz mononuklearnih ćelijskih frakcija periferne krvi od zdravih donatora pomoću magnetno aktiviranog sortiranja ćelija. Ćelije su odmrznute u RPMI 1640 medijumu kulture dopunjenom sa 10% (v/v) fetalnog goveđeg seruma (FBS), neesencijalnih aminokiselina i natrijum piruvata. Sve ćelijske kulture i tretmani ćelija su izvedeni u inkubatoru na 37 °C, 5% CO2tokom naznačenih vremenskih perioda. T-ćelije su zatim obeležene sa CFSE (karboksifluorescein sukcinimidil estar) u skladu sa uputstvima proizvođača i ostavljene da se oporave preko noći u prisustvu 1 ng/mL humanog IL-7. T-ćelije su tretirane sa DMSO (kontrola) ili Jedinjenjem 2 kao pojedinačnim agensom tokom 16 sati pre ko-kulture. Ćelijske linije multiplog mijeloma H929 i OPM-2 ili ćelijska linija leukemije plazma ćelija (PCL) L363 obeležene su sa CellTrace<™>Violet, zatim prethodno tretirane sa DMSO (kontrola) ili Jedinjenjem 2 kao pojedinačnim agensom tokom 72 sata. T-ćelije i ciljne ćelije su zatim isprane da bi se uklonila jedinjenja i zajedno kultivisane u prisustvu rastućih koncentracija bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) kako je ovde dato, tokom 72 sata, pri različitim odnosima efektorskih T-ćelija (E) i ciljnih ćelija (T). Ćelije su sakupljene na kraju ko-kulture za analizu apoptoze i nekroze ciljnih ćelija protočnom citometrijom koristeći APC Annexin V komplet za detekciju apoptoze sa 7-AAD, pridržavajući se uputstava proizvođača (BioLegend). Rezultati su pokazali da predtretman ciljnih ćelija Jedinjenjem 2 značajno povećava potentnost bispecifičnog antitela (i za ćelije H929 i za L363), kao i maksimalno ubijanje ciljnih ćelija (za ćelije H929) indukovano bispecifičnim antitelom kao što je testirano (Slike 4A i 4B). U testovima citotoksičnosti sa OPM-2 ćelijama, rezultati su pokazali da tretman ili efektorskih T-ćelija ili samo ciljnih ćelija Jedinjenjem 2 povećava potentnost i efikasnost ubijanja ciljnih ćelija bispecifičnim antitelom kao što je testirano (Slika 4C). Za testove citotoksičnosti OPM-2, kombinacija predtretmana efektorskih T-ćelija

12

i predtretmana ciljnih ćelija Jedinjenjem 2 rezultirala je najvećim pojačavanjem dejstva i povećanjem efikasnosti bispecifičnog antitela kao što je testirano (Slika 4C).

[0307] Ko-kulture efektorskih T ćelija (E) i ciljnih ćelija (T) uz istovremene tretmane jedinjenjem. CD3+ T-ćelije su izolovane iz frakcija mononuklearnih ćelija periferne krvi od tri različita zdrava donatora (donatori A, B i C) korišćenjem magnetno aktiviranog sortiranja ćelija. Ćelije su odmrznute u medijumu kulture RPMI 1640 sa dodatkom 10% (v/v) FBS, neesencijalnih aminokiselina, natrijum piruvata i penicilina/streptomicina. Sve ćelijske kulture i tretmani su izvedeni u inkubatoru na 37°C, 5% CO2tokom naznačenih vremenskih perioda. T-ćelije su zatim obeležene sa CFSE (karboksifluorescein sukcinimidil estar) u skladu sa uputstvima proizvođača i ostavljene da se oporave preko noći u prisustvu 1 ng/mL humanog IL-7. Ćelijska linija multiplog mijeloma H929 je označena sa CellTrace<™>Violet i ostavljena da se oporavi preko noći. T-ćelije i ciljne ćelije su zatim isprane i zajedno kultivisane u prisustvu rastućih koncentracija bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) dat ovde, tokom 72 sata, pri fiksnom odnosu efektorskih T-ćelija (E) i ciljnih ćelija (T) od 1:3. Ko-kulture u prisustvu bispecifičnih antitela izvedene su u prisustvu DMSO (kontrola) ili Jedinjenja 2. Ćelije su prikupljene na kraju ko-kulture za analizu apoptoze i nekroze ciljnih ćelija protočnom citometrijom koristeći APC Annexin V komplet za detekciju apoptoze sa 7-AAD. Rezultati su pokazali da je za sve testirane donatore istovremena izloženost ćelija Jedinjenju 2 značajno povećala potentnost bispecifičnog antitela kao što je testirano, a takođe je poboljšala maksimalnu efikasnost ubijanja ciljnih ćelija posredstvom bispecifičnog antitela (Slika 5).

Primer 7: Kombinovana primena anti-BCMA/anti-CD3 T ćelijskog bispecifičnog antitela sa jedinjenjem kod multiplog mijeloma rezistentnog na lenalidomid

[0308] Ko-kulture efektorskih T ćelija (E) i ciljnih ćelija multiplog mijeloma rezistentnih na lenalidomid (T) nakon prethodnog tretmana jedinjenjima. CD3+ T-ćelije su izolovane iz frakcija mononuklearnih ćelija periferne krvi od tri različita zdrava donatora (donatori D, E i F) korišćenjem magnetno aktiviranog sortiranja ćelija. Ćelije su odmrznute u medijumu kulture RPMI 1640 sa dodatkom 10% (v/v) fetalnog goveđeg seruma (FBS), neesencijalnih aminokiselina, natrijum piruvata i penicilina/streptomicina. Sve ćelijske kulture i tretmani ćelija su izvedeni u inkubatoru na 37 °C, 5% CO2tokom naznačenih vremenskih perioda. T-

12

ćelije su zatim obeležene sa CFSE (karboksifluorescein sukcinimidil estar) u skladu sa uputstvima proizvođača i ostavljene da se oporave preko noći u prisustvu 1 ng/mL humanog IL-7. Ćelijska linija multiplog mijeloma H929-1051 rezistentna na lenalidomid je generisana dugotrajnom kulturom u prisustvu rastućih koncentracija lenalidomida, kao što je prethodno opisano (Ghandi et al. Br. J. Haematol.2014 Jan; 164(2):233-44) primenom opisanih metoda (Lopez-Girona et al. Leukemia. 2012 Nov;26(11):2326-35). Ćelije H929-1051 su obeležene sa CellTrace™ Violet, zatim prethodno tretirane sa DMSO (kontrola), pomalidomidom ili Jedinjenjem 2 kao pojedinačnim agensom tokom 72 sata. T-ćelije i ciljne ćelije su zatim isprane da bi se uklonila jedinjenja i zajedno kultivisane u prisustvu rastućih koncentracija bispecifičnog antitela koje se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i humani CD3ε (CD3) dat ovde, tokom 72 sata, pri fiksnom odnosu efektorskih T-ćelija (E) i ciljnih ćelija (T) od 1:3. Ćelije su sakupljene na kraju ko-kulture za analizu apoptoze i nekroze ciljnih ćelija protočnom citometrijom koristeći APC Annexin V komplet za detekciju apoptoze sa 7-AAD, pridržavajući se uputstava proizvođača (BioLegend).

Rezultati su pokazali da predtretman ciljnih ćelija H929-1051 rezistentnih na lenalidomid Jedinjenjem 2, ali ne i predtretman pomalidomidom, povećavaju potenciju i maksimalno ubijanje ciljnih ćelija indukovano bispecifičnim antitelom kao što je testirano (Slika 6). Podaci ukazuju da je ćelijska linija takođe rezistentna na pomalidomid.

12

1

11

12

1

14

1

14

1

11

12

1

14

1

11

12

1

14

1

11

12

1

14

1

11

12

1

14

1

11

12

Claims

Patentni zahtevi 1. Jedinjenje za primenu u metodi lečenja multiplog mijeloma, pri čemu je opisano jedinjenje – jedinjenje formule 1

ili njegov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu se metoda sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno terapijski efikasne količine jedinjenja formule 1, ili enantiomera, smeše enantiomera, tautomera, izotopologa, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u kombinaciji sa bispecifičnim antitelom koje se sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za human CD3ε (CD3), naznačen time što navedeni prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24, ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.
2. Jedinjenje za primenu u metodi lečenja multiplog mijeloma, pri čemu je opisano jedinjenje – jedinjenje formule 2

ili njegov enantiomer, smeša enantiomera, tautomer, izotopolog ili farmaceutski prihvatljiva so, pri čemu se metoda sastoji od davanja pacijentu kome je to potrebno terapijski efikasne količine jedinjenja formule 2, ili tautomera, izotopologa, ili njegove farmaceutski prihvatljive soli, u kombinaciji sa bispecifičnim antitelom koje se sastoji od prvog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani antigen maturacije B ćelija (BCMA) i drugog vezujućeg dela koji se specifično vezuje za humani CD3ε (CD3), naznačen time što navedeni prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO: 17 i region VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20 i kombinacije regiona CDR1L i CDR2L izabranih iz grupe i) CDR1L region SEQ ID NO:23 i CDR2L region SEQ ID NO:24, ii) CDR1L region SEQ ID NO:25 i CDR2L region SEQ ID NO:26, ili iii) CDR1L region SEQ ID NO:27 i CDR2L region SEQ ID NO:28.
3. Jedinjenje za primenu iz patentnog zahteva 1 ili 2, pri čemu je multipli mijelom relapsirajući, refraktoran ili rezistentan.
4. Jedinjenje za primenu iz patentnog zahteva 3, pri čemu je multipli mijelom refraktoran ili rezistentan na lenalidomid.
5. Jedinjenje za primenu iz patentnog zahteva 3, pri čemu je multipli mijelom refraktoran ili rezistentan na pomalidomid.
6. Jedinjenje za primenu iz patentnog zahteva 1 ili 2, pri čemu je multipli mijelom novo dijagnostikovani multipli mijelom.
7. Jedinjenje za primenu iz patentnog zahteva 1 ili 2, pri čemu je multipli mijelom leukemija plazma ćelija.
8. Jedinjenje za primenu iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 7, pri čemu se jedinjenje primenjuje pre bispecifičnog antitela.
9. Jedinjenje za primenu iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 7, pri čemu se jedinjenje primenjuje istovremeno sa bispecifičnim antitelima. 1 4
10. Jedinjenje za primenu iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 7, pri čemu se jedinjenje primenjuje nakon bispecifičnog antitela.
11. Jedinjenje za primenu iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 10, pri čemu metoda dodatno podrazumeva i primenu dodatnog aktivnog agensa.
12. Jedinjenje za primenu iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 11, pri čemu prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO:17 i regiona VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20, regiona CDR1L sa SEQ ID NO:23 i regiona CDR2L sa SEQ ID NO:24.
13. Jedinjenje za primenu iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 11, pri čemu prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO:17 i regiona VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20, regiona CDR1L sa SEQ ID NO:25 i regiona CDR2L sa SEQ ID NO:26.
14. Jedinjenje za primenu iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 11, pri čemu prvi vezni deo sadrži region VH koji se sastoji od regiona CDR1H sa SEQ ID NO:21, regiona CDR2H sa SEQ ID NO:22 i regiona CDR3H sa SEQ ID NO:17 i regiona VL koji se sastoji od regiona CDR3L sa SEQ ID NO:20, regiona CDR1L sa SEQ ID NO:27 i regiona CDR2L sa SEQ ID NO:28.
15. Jedinjenje za primenu iz bilo kog od patentnih zahteva 1 do 14, pri čemu je opisano jedinjenje – jedinjenje formule 2

1